"癌幹細胞成長抑制活性を有するフィブリン-3タンパク質。配列番号1で表されるアミノ酸配列を有することを特徴とする、請求項1記載のフィブリン-3タンパク質。前記癌が、肺癌または乳癌であることを特徴とする、請求項1記載のフィブリン-3タンパク質。1フィブリン-3タンパク質をコードするベクターを構築する工程、2工程1のベクターで細胞を形質転換する工程、及び3工程2の細胞の培養液からフィブリン-3タンパク質を精製する工程を含む、癌幹細胞成長抑制活性を有するフィブリン-3タンパク質の製造方法。前記癌が、肺癌または乳癌であることを特徴とする、請求項4記載のフィブリン-3タンパク質の製造方法。フィブリン-3タンパク質を有効成分として含む、癌幹細胞成長抑制用薬学的組成物。前記フィブリン-3タンパク質が、配列番号1で表されるアミノ酸配列を有することを特徴とする、請求項6記載の薬学的組成物。フィブリン-3遺伝子を形質転換させて製造したフィブリン-3過剰発現細胞株またはその培養液を有効成分として含む癌幹細胞成長抑制用薬学的組成物。前記癌幹細胞が、癌幹細胞マーカーであるCD133prominin1AC133、CD44ヒアルロン酸受容体Pglycoprotein1及びALDH1Aldehydedehydrogenase1からなる群から選択されるいずれか一つのマーカーによって選別されたものであることを特徴とする、請求項6記載の薬学的組成物。前記癌が、肺癌または乳癌であることを特徴とする、請求項6記載の薬学的組成物。癌幹細胞を、有効量のフィブリン-3タンパク質、フィブリン-3遺伝子を形質転換させて製造したフィブリン-3過剰発現細胞株及びその培養液からなる群から選択されるいずれか一つで処理する工程を含む、癌幹細胞の成長抑制方法。前記癌が、肺癌または乳癌であることを特徴とする、請求項11記載の癌幹細胞の成長抑制方法。薬学的に有効な量のフィブリン-3タンパク質を、癌幹細胞を有する個体に投与する工程を含む、癌幹細胞成長抑制方法。薬学的に有効な量の、フィブリン-3遺伝子を形質転換させて製造したフィブリン-3過剰発現細胞株またはその培養液を、癌幹細胞を有する個体に投与する工程を含む、癌幹細胞成長抑制方法。前記フィブリン-3タンパク質が、配列番号1で表されるアミノ酸配列を有することを特徴とする、請求項13記載の方法。前記癌が、肺癌または乳癌であることを特徴とする、請求項13記載の方法。癌幹細胞成長抑制用薬学的組成物の製造に用いるための、フィブリン-3タンパク質の使用。癌幹細胞成長抑制用薬学的組成物の製造に用いるための、フィブリン-3遺伝子を形質転換させて製造したフィブリン-3過剰発現細胞株またはその培養液の使用。前記フィブリン-3タンパク質が、配列番号1で表されるアミノ酸配列を有することを特徴とする、請求項17記載の使用。前記癌が、肺癌または乳癌であることを特徴とする、請求項17記載の使用。本発明の目的は、癌幹細胞成長抑制活性を有するフィブリン-3タンパク質を提供することである。また、本発明の目的はフィブリン-3タンパク質の製造方法を提供することである。また、本発明の目的は、フィブリン-3タンパク質またはフィブリン-3遺伝子を形質転換させて製造したフィブリン-3過剰発現細胞株もしくはその培養液を有効成分として含む癌幹細胞成長抑制用薬学的組成物を提供することである。さらに、本発明の別の目的は、癌幹細胞を、有効な量の、フィブリン-3タンパク質またはフィブリン-3遺伝子を形質転換させて製造したフィブリン-3過剰発現細胞株もしくはその培養液で処理する工程を含む、癌幹細胞の成長抑制方法を提供することである。さらに、本発明の別の目的は、薬学的に有効な量のフィブリン-3タンパク質を、癌幹細胞を有する個体に投与する工程を含む、癌幹細胞成長抑制方法を提供することである。さらに、本発明の別の目的は、薬学的に有効な量の、フィブリン-3遺伝子を形質転換させて製造したフィブリン-3過剰発現細胞株またはその培養液を、癌幹細胞を有する個体に投与する工程を含む、癌幹細胞成長抑制方法を提供することである。さらに、本発明の別の目的は、癌幹細胞成長抑制用薬学的組成物の製造に用いるための、フィブリン-3タンパク質の使用を提供することである。同時に、本発明の別の目的は、癌幹細胞成長抑制用薬学的組成物の製造に用いるための、フィブリン-3遺伝子を形質転換させて製造したフィブリン-3過剰発現細胞株またはその培養液の使用を提供することである。前記目的を達成するために、本発明は、癌幹細胞成長抑制活性を有するフィブリン-3タンパク質を提供する。また、本発明は、1フィブリン-3タンパク質をコードするベクターを構築する工程、2工程1のベクターで細胞を形質転換する工程、及び3工程2の細胞の培養液からフィブリン-3タンパク質を精製する工程を含む、肺癌成長抑制活性を有するフィブリン-3タンパク質の製造方法を提供する。また、本発明は、癌幹細胞成長抑制活性を有するフィブリン-3タンパク質を有効成分として含む癌幹細胞成長抑制用薬学的組成物を提供する。また、本発明は、癌幹細胞を有効な量のフィブリン-3で処理する工程を含む、癌幹細胞の成長抑制方法を提供する。また、本発明は、フィブリン-3遺伝子を形質転換させて製造したフィブリン-3過剰発現細胞株またはその培養液を有効成分として含む癌幹細胞成長抑制用薬学的組成物を提供する。また、本発明は、フィブリン-3遺伝子を形質転換させて製造したフィブリン-3過剰発現細胞株またはその培養液で処理する工程を含む、癌幹細胞の成長抑制方法を提供する。また、本発明は、薬学的に有効な量のフィブリン-3タンパク質を、癌幹細胞を有する個体に投与する工程を含む、癌幹細胞成長抑制方法を提供する。また、本発明は、薬学的に有効な量の、フィブリン-3遺伝子を形質転換させて製造したフィブリン-3過剰発現細胞株またはその培養液を、癌幹細胞を有する個体に投与する工程を含む、癌幹細胞成長抑制方法を提供する。また、本発明は、癌幹細胞成長抑制用薬学的組成物の製造に用いるための、フィブリン-3タンパク質の使用を提供する。同時に、本発明は、癌幹細胞成長抑制用薬学的組成物の製造に用いるための、フィブリン-3遺伝子を形質転換させて製造したフィブリン-3過剰発現細胞株またはその培養液の使用を提供する。本発明のフィブリン-3タンパク質は、非小細胞肺癌細胞からALDH1活性を用いて分離した癌幹細胞において、癌幹細胞の特徴を与えるベータカテニンと浸透関連因子MMP-2及びMMP-7を阻害することで、癌幹細胞の細胞成長を抑制することができる。さらに本発明のフィブリン-3タンパク質は、非小細胞肺癌細胞、乳癌細胞及び癌幹細胞の成長を抑制することができ、したがって、癌幹細胞成長抑制用薬学的組成物の製造用に効果的に用いることができる。以下、本発明を詳しく説明する。本発明は、癌幹細胞成長抑制活性を有するフィブリン-3タンパク質を提供する。前記フィブリン-3タンパク質は、下記1~3のアミノ酸配列から選択されるいずれか一つのアミノ酸配列を有することが好ましいがこれに限定されない:1配列番号1で表されるアミノ酸配列;2配列番号1の一部分で表わされるアミノ酸配列;及び3配列番号1と80以上の相同性を示すアミノ酸配列。前記癌は、肺癌または乳癌であることが好ましく、前記肺癌は非小細胞肺癌であることがさらに好ましい。また本発明は、1フィブリン-3タンパク質をコードするベクターを構築する工程;2工程1のベクターで細胞を形質転換する工程;及び3工程2の細胞の培養液からフィブリン-3タンパク質を精製する工程を含む、癌幹細胞成長抑制活性を有するフィブリン-3タンパク質の製造方法を提供する。前記癌は、肺癌または乳癌であることが好ましく、前記肺癌は非小細胞肺癌であることがさらに好ましい。本発明の具体的な実施例で、本発明者らはタンパク質精製のためのc末端部位にヒスチジンタンパク質が付着したフィブリン-3ベクターを構築し図1参照、前記ベクターの発現を確認するために、CHO-K1細胞生命工学研究院、大田及び293T細胞漢陽大学校、ソウルにそれぞれ形質導入して重合酵素連鎖反応及びウエスタンブロットを通じてフィブリン-3タンパク質の過剰発現を確認した図3参照。また、前記形質転換した細胞を培養した培地で非小細胞肺癌であるA549細胞及び癌幹細胞であるALDH1活性細胞を処理した結果、非小細胞肺癌であるA549細胞及び癌幹細胞であるALDH1活性細胞の細胞成長が共に阻害されることを確認した図11及び図16参照。同時に、前記形質導入した細胞株を用いてフィブリン-3タンパク質を精製して、精製されたフィブリン-3タンパク質による癌細胞の成長抑制効果を確認した。その結果、非小細胞肺癌細胞であるA549細胞、癌幹細胞であるALDH1活性細胞及び乳癌細胞であるMDA-MB231細胞で細胞成長抑制効果があることを確認した図12、図17及び図13参照。したがって、フィブリン-3タンパク質を癌細胞及び癌幹細胞の成長抑制に効果的に用いることができる。また、本発明は、本発明によるフィブリン-3タンパク質を有効成分として含む癌幹細胞成長抑制用薬学的組成物を提供する。前記フィブリン-3タンパク質は、下記1~3のアミノ酸配列から選択されるいずれか一つのアミノ酸配列を有することが好ましいが、これに限定されない:1配列番号1で表されるアミノ酸配列;2配列番号1の一部分で表わされるアミノ酸配列;及び3配列番号1と80以上の相同性を示すアミノ酸配列。前記癌は、肺癌または乳癌であることが好ましく、前記肺癌は非小細胞肺癌であることがさらに好ましい。前記癌幹細胞は、癌幹細胞のマーカーであるCD133、CD44及びALDH1からなる群から選択されるいずれか一つのマーカーによって選別されたものが好ましく、ALDH1によって選別されたものがさらに好ましいが、これに限定されない。本発明の具体的な実施例で、本発明者らは非小細胞肺癌細胞であるA549細胞から、ALDH1活性に基づいてALDEFLUOR製品を用いることで、癌幹細胞を区別及び選別した図2参照。また、本発明者らは非小細胞肺癌と癌幹細胞の差を確認するために、コロニー形成実験で分離したALDH1活性細胞及びALDH1非活性細胞の成長程度を分析した。その結果、A549細胞よりALDH1活性細胞が成長していた一方、ALDH1非活性細胞はA549細胞対照群より成長できなかったことを確認することによって、ALDH1活性を有する癌幹細胞が非小細胞肺癌成長の原動力であることが分かった図4参照。同時に、本発明者らはALDH1活性細胞と非活性細胞でのALDH1、フィブリン-3及びベータカテニンの発現量を確認するため逆転写重合酵素連鎖反応RT-PCRとウエスタンブロットを行なった。その結果、ALDH1非活性細胞と反対にALDH1活性細胞ではALDH1と腫瘍発生及び増殖に重要なベータカテニンの発現量が増加したが、フィブリン-3は発現量が減少することを確認した図5参照。したがって、癌細胞成長の原動力である癌幹細胞で癌幹細胞の成長に重要であると知られたベータカテニンは増加しているが、フィブリン-3は減少していることを確認することによって、フィブリン-3を癌幹細胞の抑制に効果的に使用できることが分かった。さらに、本発明の別の具体的な実施例で、本発明者らはフィブリン-3によるベータカテニンの発現量を確認するため、ベータカテニンの発現量が多いA549細胞にフィブリン-3過剰発現ベクターを形質導入した。ベータカテニンの発現量が少ないH460細胞において、フィブリン-3抑制用siRNAでフィブリン-3の発現を抑制した。その結果、フィブリン-3が過剰発現されたA549細胞でベータカテニンの発現が減少し、その反対にフィブリン-3が抑制されたH460細胞ではベータカテニンの発現が増加することが分かった図6及び7参照。したがって、過剰発現したフィブリン-3が癌幹細胞の成長に重要なベータカテニンを阻害することを確認し、これを通じてフィブリン-3を癌幹細胞の成長抑制に効果的に用いることができることが分かった。さらに、本発明の別の具体的な実施例で、本発明者らは非小細胞肺癌細胞であるA549でフィブリン-3による腫瘍発生及び増殖に重要なベータカテニンと浸透因子であるMMP-2、MMP-7発現の抑制を確認するために、フィブリン-3を過剰発現させたA549細胞の培養培地と、フィブリン-3の発現が多いH460細胞の培養培地とでA549細胞を処理した。その結果、前記培地で処理された細胞は死滅が進行することを顕微鏡で確認し、ベータカテニン、MMP-2、およびMMP-7の発現が対照群に比べて減少することを確認した図8及び9参照。また、フィブリン-3抗体を用いて前記結果がフィブリン-3によるものであることをもう一度確認した。このような結果を通じて、フィブリン-3がベータカテニン、MMP-2、およびMMP-7の発現を直接的に抑制することが分かった。さらに、本発明の別の具体的な実施例で、本発明者らは癌幹細胞でのフィブリン-3によるベータカテニン、MMP-2、およびMMP-7の発現を確認するために、フィブリン-3が過剰発現したALDH1活性細胞の培養培地と、フィブリン-3の発現が多いH460細胞の培養培地とでALDH1活性細胞を処理してウエスタンブロットを行なった。その結果、前記二つの培地で処理した群でベータカテニン、MMP-2、およびMMP-7の発現が減少したことを確認した。また、フィブリン-3抗体を用いて前記結果がフィブリン-3によるものであることをもう一度確認した図14参照。このような結果を通じて、フィブリン-3が癌幹細胞でベータカテニン、MMP-2、およびMMP-7の発現を直接的に抑制することが分かる。また、本発明者らはフィブリン-3によって非小細胞肺癌細胞の成長が抑制されるかどうかを確認するために、コロニー形成実験を行なった。その結果、フィブリン-3を過剰発現させたA549細胞の培養培地、及び、フィブリン-3の発現が多いH460細胞の培養培地を混合した過剰発現培地の両方で培地濃度依存的にA549細胞の成長が阻害されることを確認した図10参照。また、本発明者らはフィブリン-3によって癌幹細胞の成長が抑制されるかどうかを確認するためにコロニー形成実験を行ない、その結果、前記フィブリン-3過剰発現培地と混合した両方で培地濃度依存的にALDH1活性細胞の成長が阻害されることを確認した図10参照。また、本発明者らはフィブリン-3タンパク質発現用his-フィブリン-3ベクターをタンパク質精製が容易なCHO-K1細胞及び293T細胞にそれぞれ過剰発現させた後、48時間培養した培養培地で、非小細胞肺癌細胞であるA549細胞と癌幹細胞であるALDH1活性細胞を処理した。その結果、前記培地で処理された細胞は、対照群に比べて細胞成長が阻害されることを確認した図11及び16参照。同時に、本発明者らは精製されたフィブリン-3タンパク質による癌細胞及び癌幹細胞の細胞成長が抑制されるかどうかを確認するために、非小細胞肺癌細胞であるA549細胞、乳癌細胞であるMDA-MB231細胞及び癌幹細胞であるALDH1活性細胞を、CHO-K1細胞または293T細胞をフィブリン-3タンパク質発現用his-フィブリン-3ベクターで形質転換して得たフィブリン-3精製タンパク質で処理した後、コロニー形成実験を行なった。その結果、精製されたフィブリン-3タンパク質が非小細胞肺癌細胞であるA549細胞、乳癌細胞であるMDA-MB231細胞及び癌幹細胞であるALDH1活性細胞で、細胞成長を抑制することを確認した図12、図13及び図17参照。したがって、癌幹細胞の成長抑制においてフィブリン-3タンパク質が癌幹細胞の細胞成長及び浸透因子を抑制することができるので、フィブリン-3タンパク質を癌幹細胞の成長抑制用薬学的組成物の有効成分として効果的に用いることができる。治療的に有効な本発明の組成物の量は、多くの要素、例えば投与方法、目的部位、患者の状態などによって変わり得る。したがって、人体に使用時の投与量は安全性及び有効性をともに考慮して適正量に決定しなければならない。動物実験を通じて決定された有効量から人間に使用し得る量を推定することも可能である。有効な量の決定時に考慮するこのような事項は、例えば、HardmanandLimbirdedsGoodmanandGilmansThePharmacologicalBasisofTherapeutics10thedPergamonPress及びEWMartinedRemingtonsPharmaceuticalSciences18thedMackPublishingCoに記述されている。本発明の組成物はまた、生物学的製剤に一般的に使用される担体、希釈剤、賦形剤またはふたつ以上のこれらの組み合わせを含むことができる。薬学的に許容可能な担体は、組成物の生体内送達に相応しいものなら特別に制限されず、例えば、MerckIndex13thedMerckCoIncに記載された化合物、食塩水、滅菌水、リンゲル液、緩衝食塩水、デキストロース溶液、マルトデキストリン溶液、グリセロール、エチルアルコール及びこれら成分の中から1成分以上を混合して用いることができ、必要に応じて抗酸化剤、緩衝液、静菌剤など他の通常の添加剤を添加することができる。また、希釈剤、分散剤、界面活性剤、結合剤及び滑剤を付加的に添加して水溶液、懸濁液、乳濁液などの注射用剤形、丸薬、カプセル、顆粒または錠剤に製剤化することができる。さらに当分野の適正な方法でまたはRemingtonsPharmaceuticalScienceからHighPureRNAIsolationKitRoche、ドイツを用いて全RNAを抽出した後、TranscriptorFirstStrandcDNASynthesisKitRoche、ドイツを用いて全RNA1μgに対して逆転写重合酵素連鎖反応RT-PCRを行なった。cDNAを合成するために、PCR条件を55°Cで30分、及び85°Cで5分間にした。前記cDNAを鋳型にして、5端にHindIII制限酵素認識配列と3端にXhoI制限酵素認識配列を含むように構築された正方向プライマー配列番号2及び逆方向プライマー配列番号3のプライマー対を用いて94°Cで5分間前変性させた後、94°Cで1分間変性、56°Cで1分間アニール、72°Cで1分30秒間伸長を行う条件を30回繰り返した後、72°Cで5分間後伸長を行なった。このような条件でPCRを遂行することにより、1,482bpのフィブリン-3遺伝子を得た。前記で得たPCR産物及びpcDNA3.1invitrogen,米国ベクターをそれぞれ制限酵素で処理した後、混合してリガーゼで連結させてフィブリン-3過剰発現用pcDNA3.1/フィブリン-3ベクターを構築した。<1-2>フィブリン-3タンパク質精製用his-フィブリン-3ベクターの構築本発明者らは、タンパク質精製をするためにc末端部位にヒスチジンタンパク質が付着したフィブリン-3クローンを構築した。具体的には、前記<実施例1-1>の過剰発現用フィブリン-3クローンのDNA0.1μgを鋳型にして、ヒスチジンタンパク質がフィブリン-3の後方で発現するようにプライマーを構築してPCRを行なった。5端にEcoRI制限酵素認識配列と3端にXhoI制限酵素認識配列とともにヒスチジンタンパク質塩基配列を付着させて構築された正方向プライマー配列番号14及び逆方向プライマー配列番号15のプライマー対を用いて94°Cで5分間前変性させた後、94°Cで1分間変性、60°Cで1分間アニール、72°Cで1分30秒間伸長を遂行する条件を30回繰り返した後、72°Cで5分間後伸長を行うことによりPCRを実施し、hisタンパク質塩基配列が付着したフィブリン-3遺伝子を得た。前記で得たPCR産物及びpcDNA3.1invitrogen、米国ベクターをそれぞれ制限酵素で処理した後、混合してリガーゼで連結させてhisタンパク質が付着したフィブリン-3タンパク質精製用pcDNA3.1/his-フィブリン-3ベクターを構築した図1。<実施例2>フィブリン-3タンパク質過剰発現培地の製造及び精製<2-1>フィブリン-3遺伝子過剰発現培地の製造本発明者らは前記<実施例1-1>のフィブリン-3過剰発現ベクターによりフィブリン-3を過剰発現させた細胞を培養した培地を製造した。具体的には、リポフェクタミン2000を用いてペニシリン-ストレプトマイシンHycloneが添加されていない培地で5×105細胞/mlのA549細胞に前記<実施例1-1>のフィブリン-3過剰発現ベクター2μgを形質導入した。4~6時間反応させた後、100ユニット/mlのペニシリン-ストレプトマイシンを添加した培地に入れ替えて48時間培養し、その培地を得た。<2-2>精製用フィブリン-3タンパク質過剰発現培地の製造本発明者らは前記<実施例1-2>の精製用フィブリン-3タンパク質ベクターで形質転換した細胞を培養した培地を製造した。具体的には、タンパク質の精製が容易な細胞であるCHO-K1細胞生命工学研究院、大田及び293T細胞漢陽大学校、ソウルをそれぞれ60mmのプレートにそれぞれ細胞5×105個を播種した後、リポフェクタミン2000を用いてペニシリン-ストレプトマイシンが添加されていないDMEM:F12Gibco培地及びDMEM培地でhis-フィブリン-3ベクター4μgを形質導入した。12時間反応させた後、100ユニット/mlのペニシリン-ストレプトマイシンを添加した培地に入れ替えて48時間培養し、それぞれその培地を得た。<2-3>his-フィブリン-3タンパク質の精製本発明者らは前記<実施例2-2>のフィブリン-3タンパク質精製用培地でhis-フィブリン-3タンパク質を精製した。具体的には、his-フィブリン-3タンパク質の精製のためにCHO-K1細胞と293T細胞にhis-フィブリン-3ベクターを過剰発現させた後、タンパク質溶解溶液を入れてピペッティングし、4°Cで15~20分反応させ、13000RPMの4°C遠心分離機でペレットと上清を分離した。前記の上清に、PBS溶液で2回洗浄したhisビーズQiagenを入れて4°Cで2時間ビーズとhis-フィブリン-3タンパク質を結合させる。その後、4°C、3000RPMで遠心分離後、ビーズのみ収集し、PBS溶液で3回洗浄する。ビーズからPBS溶液を完全に除去し、溶出液250mMイミダゾールを入れて常温で5分反応させた後、遠心分離機を用いてhis-フィブリン-3タンパク質を精製し、使用のために新しいチューブに移した。ブラッドフォード方法でタンパク質定量キットを用いて595nm波長でタンパク質量を測定して4°Cで保管した。<実施例3>A549細胞からのALDH1活性細胞と非活性細胞の分離本発明者らは、アルデヒドデヒドロゲナーゼALDH活性に基づいたステムセル社のALDEFLUOR製品を用いて非小細胞肺癌細胞であるA549細胞から癌幹細胞を区別及び選別した。具体的には、乾燥したALDEFLUOR試薬を25μlのDMSOジメチルスルホキシドを入れて1分間常温で反応させ、試薬を赤橙色から明淡黄色になるように活性化した。活性化した試薬に2Mの塩酸を25μl入れて15分間常温で反応させた後、360μlのALDEFLUORアッセイバッファーを入れて冷蔵保管してALDEFLUOR基質を作った。以後、1×106個のA549細胞を遠心分離して上清を分離した。上清は捨ててALDEFLUORアッセイバッファー1mlを混ぜる。空のチューブを二本準備して前記の細胞とALDEFLUORアッセイバッファーが混じった試料をそれぞれ500μl入れて、一方のチューブには活性化したALDEFLUOR基質を5μl入れて、他方のチューブの対照群にはDEABジエチルアミノベンズアルデヒド溶液を5μl入れて混合した。二本のチューブを37°Cで反応させた後、遠心分離機を用いて上清を除去して、細胞に500μlのALDEFLUORアッセイバッファーを入れて4°Cで24時間反応させた。負電荷を有するALDH基質であるBAAAは受動的な拡散を通じて生きている細胞内に浸透すると、細胞内のALDHによってBAA-に転換しながら蛍光を発光するので、FACSソーターBDbioscience、米国で蛍光を発光する細胞を活性細胞として、蛍光がない細胞を非活性細胞として識別した図2。<実験例1>his-フィブリン-3ベクターによるフィブリン-3タンパク質過剰発現確認本発明者らは、タンパク質精製用his-フィブリン-3ベクターによってフィブリン-3タンパク質が過剰発現されるかどうか確認するために前記ベクターを過剰発現させた後、重合酵素連鎖反応及びウエスタンブロットを行なった。具体的には、タンパク質精製が容易な細胞であるCHO-K1細胞生命工学研究院、大田と293T細胞漢陽大学校、ソウルを60mmのプレートにそれぞれ細胞5×105個を分注した後、リポフェクタミン2000を用いてペニシリン-ストレプトマイシンが添加されていない培地でhis-フィブリン-3ベクター4μgを形質導入した。12時間後、100ユニット/mlのペニシリン-ストレプトマイシンを添加した培地に入れ替えて48時間培養し、his-フィブリン-3ベクターが導入されたCHO-K1細胞を集めてフィブリン遺伝子の発現を確認した。まず、RNAを抽出するために各細胞をトリゾール1mlと5分間混合した後、200μlのクロロホルム試薬を入れて再び5分間混合し、4°Cの遠心分離機で10分間遠心分離して200μlの上清を得、新しいチューブに移した。前記で得られた上清に500μlのイソプロパノールを混合し、常温で10分間反応させて4°Cで遠心分離して上清を除去した後、沈殿物を75のエチルアルコールが入ったDEPC溶液で洗浄し、再び遠心分離して上清を除去する。遠心分離して得られた沈殿物をDEPC溶液で溶解してRNAを得、これを定量した後、Intron社のオリゴdTcDNAキットを用いてRNA1μgを増幅器Takara、日本において45°Cで1時間、95°Cで5分、cDNAを合成した。以後、下記<表1>のプライマーおよびI-taq重合酵素を用いて94°Cで5分前変性、94°Cで30秒変性;56°Cで30秒アニール;72°Cで30秒伸長工程を30回繰り返し、72°Cで10分間後伸長した後、得られた生成物を1アガロースゲルにローディングして確認した。また、his-フィブリン-3タンパク質発現を確認するためにベクターが導入されたCHO-K1細胞を集めて、各細胞に溶解溶液をそれぞれ50μlずつ入れて4°Cで30分間反応させた後、4°Cで遠心分離機を用いて遠心分離して上清を得、その次にタンパク質定量キットを用いてそれぞれのタンパク質40μgずつをSDS-ゲルにローディングした。SDS-ゲルにローディングしたタンパク質をニトロセルロース膜に移動させた後、BSAバッファーと30分間常温で反応させて他の抗体が結合できないようにした後、一次抗体である抗ベータカテニン抗体と抗ベータアクチン抗体を1:1000で希釈したPBS緩衝液で4時間反応させた後、再び二次抗体である抗マウスを1:10000に希釈したPBS緩衝液で1時間反応させた。その後、PBSでニトロセルロース膜を5回洗浄後、検出溶液でフィルムに感光させた。その結果、his-フィブリン-3ベクターが導入されたCHO-K1細胞でフィブリン-3タンパク質が過剰発現することを確認した図3。<実験例2>ALDH1活性細胞及びALDH1非活性細胞の特徴確認<2-1>ALDH1活性細胞及びALDH1非活性細胞の成長確認本発明者らは、A549細胞とそれから分離したALDH1活性細胞及びALDH1非活性細胞の成長程度を比較するために、A549細胞、それから分離したALDH1活性細胞及びALDH1非活性細胞でコロニー形成の分析を行なった。具体的には、A549細胞、分離したALDH1活性細胞及びALDH1非活性細胞を1×103細胞/mlで分注して、35mmプレートに播種して37°C二酸化炭素インキュベーターで8日間培養した。コロニーを形成した細胞を0.5クリスタルバイオレット試薬で10分間染色した後、数回PBSで洗浄して顕微鏡で観察した。その結果、A549細胞よりそれから分離したALDH1活性細胞の方がより成長する一方、ALDH1非活性細胞はほとんど成長しないことを確認した図4。<2-2>ALDH1活性細胞及びALDH1非活性細胞でのALDH1、フィブリン-3及びベータカテニンの発現確認本発明者らは、A549細胞を対照群にして、それから分離したALDH1活性細胞及び非活性細胞でのフィブリン-3及びベータカテニンの発現量を確認した。具体的には、A549細胞及びそれから分離したALDH1活性細胞及び非活性細胞からRNAを抽出するために、まず、各細胞をトリゾール1mlと5分間混合した後、200μlのクロロホルム試薬を入れて再び5分間混合し、4°Cの遠心分離機で10分間遠心分離して200μlの上清を得、新しいチューブに移した。前記得られた上清に、500μlのイソプロパノールを混合し、常温で10分間反応させて4°Cで遠心分離して上清を除去し、沈殿物を75エチルアルコールが入ったDEPC溶液で洗浄後、再び遠心分離機を用いて上清を除去した。遠心分離して得られた沈殿物をDEPC溶液で溶解してRNAを得、これを定量した後、Intron社のオリゴdTcDNAキットを用いてRNA1μgを増幅器Takara、日本において45°Cで1時間、95°Cで5分間、cDNAを合成した。以後、下記<表1>のプライマーおよびI-taq重合酵素を用いて94°Cで5分前変性、94°Cで30秒変性;56°Cで30秒アニール;72°Cで30秒伸長工程を30回繰り返した後、72°Cで10分間、後伸長した後に得られた生成物を1アガロースゲルにローディングして確認した。その結果、ALDH1とベータカテニンはALDH1活性細胞で非活性細胞より発現量が多いことを確認し、反対にフィブリン-3は非活性細胞で活性細胞より発現量が多いことを確認した図5。<実験例3>フィブリン-3によるベータカテニン発現抑制効果の確認<3-1>非小細胞肺癌細胞でベータカテニンの発現確認本発明者らは、非小細胞肺癌細胞であるA549細胞とH460細胞でのベータカテニンの核酸及びタンパク質発現量を確認した。具体的には、A549細胞とH460細胞からRNAを抽出するために、まず、各細胞をトリゾール1mlと5分間混合した後、200μlのクロロホルム試薬を入れて再び5分間混合し、4°Cの遠心分離機で10分間遠心分離して200μlの上清を得、新しいチューブに移した。500μlのイソプロパノールを混合し、常温で10分間反応させて4°Cで遠心分離して上清を除去した後、沈殿物を75エチルアルコールが入ったDEPC溶液で洗浄し、再び遠心分離して上清を除去した。遠心分離して得られた沈殿物をDEPC溶液に溶解してRNAを得、これを定量した。抽出したRNA各1μgをcDNASynthesisKitを用いる逆転写重合酵素連鎖反応に供してcDNAを合成した。合成したcDNAを鋳型に前記<表1>のベータカテニンプライマーおよびI-taq重合酵素を用いて94°Cで5分前変性、94°Cで30秒変性;56°Cで30秒アニール;72°Cで30秒伸長工程を30回繰り返してPCRを行なった後、72°Cで10分間、後伸長した後に得られた生成物を1アガロースゲルにローディングした後、結果を確認した。ウエスタンブロットは、まず、各細胞に溶解溶液を各々50μlずつ入れて4°Cで30分間反応させた後、4°Cの遠心分離機を用いて遠心分離して、上清を得、その次にタンパク質定量キットを用いてそれぞれのタンパク質40μgずつをSDS-ゲルにローディングした。SDS-ゲルにローディングしたタンパク質をニトロセルロース膜に移動させた後、BSAバッファーと30分間常温で反応させて他の抗体が結合できないようにした後、一次抗体である抗ベータカテニン抗体と抗ベータアクチン抗体を1:1000で希釈したPBS緩衝液で4時間反応させた後、再び二次抗体である抗マウスを1:10000に希釈したPBS緩衝液で1時間反応させた。その後、PBSでニトロセルロース膜を5回洗浄した後、検出溶液でフィルムに感光させた。その結果、ベータカテニンの核酸及びタンパク質の発現がH460細胞よりA549細胞でより多いことを確認した図6。<3-2>非小細胞肺癌細胞でのフィブリン-3によるベータカテニン発現抑制効果本発明者らは、非小細胞肺癌細胞でフィブリン-3がベータカテニンの核酸及びタンパク質の発現量に影響を与えるのかどうか確認した。具体的には、ベータカテニン発現が多いA549細胞に前記<実施例1-1>で構築されたフィブリン-3遺伝子過剰発現クローンを形質導入した。また、ベータカテニンの発現が少ないH460細胞でフィブリン-3の発現を抑制するためにフィブリン-3遺伝子に対するそれぞれ25マーの正方向プライマー配列番号12と逆方向プライマー配列番号13であるフィブリン-3stealthRNAiをInvitrogen社に注文した。前記siRNAの細胞内導入は、H460細胞2×105個当たりのRNAi100nMずつによりリポフェクタミンRNAiMAXを用いて実施し、ScrambledStealthRNA分子を導入した細胞陰性対照群;siControlは、ScrambledStealthRNA分子100nMによりリポフェクタミンRNAiMAXを用いてペニシリン-ストレプトマイシンが添加されない培地で細胞に形質導入した。形質導入をして4~6時間後、100ユニット/mlペニシリン-ストレプトマイシンを添加した培地に入れ替えて72時間培養した。前記細胞を<実験例2-1>の方法でフィブリン-3プライマーを用いた重合酵素連鎖反応とフィブリン-3抗体ab14926Abcam,英国を用いたウエスタンブロットを行ない、ベータカテニンプライマーを用いた重合酵素連鎖反応とベータカテニン抗体を用いたウエスタンブロットを行なった。その結果、A549細胞ではフィブリン-3遺伝子過剰発現クローンによってフィブリン-3が過剰発現され、H460細胞ではフィブリン-3siRNAによってフィブリン-3が阻害されたことを確認した。フィブリン-3が過剰発現されたA549細胞ではベータカテニンの発現が減少して、フィブリン-3の発現が阻害されたH460細胞ではベータカテニンの発現が増加することを確認した図7。したがって、非小細胞肺癌細胞株でフィブリン-3によってベータカテニンの発現が阻害されることを確認した。<実験例4>癌細胞でのフィブリン-3タンパク質の効果の確認<4-1>非小細胞肺癌細胞でのフィブリン-3のベータカテニン発現抑制効果の確認本発明者らは、非小細胞肺癌細胞株であるA549細胞でのフィブリン-3によるベータカテニン発現の抑制効果を確認した。具体的には、<実施例2-1>で製造したフィブリン-3過剰発現培地とA549細胞培地を1:4の比率で混合した培地、及びH460細胞培養培地とA549細胞培地を1:4の比率で混合した培地を調製し、該培地でそれぞれ2×105細胞/mlのA549細胞を処理した。その後、顕微鏡で細胞の状態を確認し、前記<実験例3-1>のウエスタンブロット方法でベータカテニンのタンパク質発現量を確認した。その結果、H460細胞培養培地とA549細胞培地を1:4の比率で混合した培地、及びフィブリン-3過剰発現培地とA549細胞培地を1:4の比率で混合した培地それぞれで処理した細胞すべてで、非処理A549細胞に比べてベータカテニンの発現が抑制されることを確認した図8。<4-2>非小細胞肺癌細胞でのフィブリン-3のMMP-2、MMP-7発現の抑制の確認本発明者らは、肺癌細胞株であるA549細胞でのフィブリン-3によるMMP-2、MMP-7発現の抑制効果を確認した。具体的には、<実施例2-1>で製造したフィブリン-3過剰発現培地とA549細胞培地を1:4の比率で混合した培地、及びフィブリン-3の発現がA549細胞に比べて多いH460細胞5×105個を48時間培養したH460細胞培養培地とA549細胞培地を1:4の比率で混合した培地を調製し、該培地でそれぞれ2×105細胞/mlのA549細胞を処理した。48時間後、抗MMP-2および抗MMP-7抗体を1:1000の比率で用いて前記<実験例3-1>のウエスタンブロット方法でタンパク質発現を確認した。また、フィブリン-3の直接的な作用であることを確認するために、前記二つの培地にフィブリン-3抗体の500:1希釈物を加えてフィブリン-3の活性を阻害した後、A549細胞を処理し、48時間後、抗MMP-2抗体、抗MMP-7抗体、および抗ベータカテニン抗体を用いたウエスタンブロットでそれぞれの培地でタンパク質発現を確認した。その結果、ベータカテニンタンパク質と同様に、A549細胞対照群に比べて、H460細胞培養培地とA549細胞培地を1:4の比率で混合した培地、及びフィブリン-3過剰発現培地とA549細胞培地を1:4の比率で混合した培地で処理した細胞で、MMP-2とMMP-7タンパク質が減少することを確認した。しかし、前記培地にフィブリン-3抗体の500:1希釈物を加えてA549細胞を処理したウエスタンブロット結果では、MMP-2、MMP-7、およびベータカテニンのタンパク質発現が対照群に比べて差がないことを確認し、これを通じてMMP-2、MMP-7及びベータカテニン発現の抑制効果がフィブリン-3タンパク質によるものであることを確認した図9。<4-3>フィブリン-3の非小細胞肺癌細胞成長抑制効果の確認本発明者らは、フィブリン-3による、非小細胞肺癌細胞であるA549細胞の成長抑制効果を確認した。具体的には、<実施例2-1>で製造したフィブリン-3過剰発現培地とA549細胞培地を1:4の比率で混合した培地、及びフィブリン-3の発現がA549細胞に比べて多いH460細胞5×105個を48時間培養したH460細胞培養培地とA549細胞培地を1:4の比率で混合した培地で、A549細胞を処理した。まず、A549細胞1×103個を35mmのプレートに播種して24時間後、フィブリン-3を過剰発現した培地とA549細胞培地を1:1の比率50で混合した培地、フィブリン-3過剰発現培地とA549細胞培地を5:4の比率80で混合した培地、及び、フィブリン-3過剰発現培地100でそれぞれ処理した。また、H460細胞5×105個を48時間培養したH460細胞培養培地とA549細胞培地を1:1の比率50で混合した培地、H460細胞培養培地とA549細胞培地を5:4の比率80で混合した培地、及びH460細胞培養培地100でそれぞれ処理した。前記組み合わせの培地で処理した後、37°Cの二酸化炭素インキュベーターで8日間培養し、クリスタルバイオレット0.5試薬で10分間染色をしてPBSで数回洗浄して確認した。その結果、フィブリン-3過剰発現培地またはH460細胞5×105個を48時間培養したH460細胞培養培地の混合の比率が高い培地で処理したA549細胞の成長が、A549細胞対照群に比べて阻害されることを確認した図10。同時に、本発明者らは<実施例2-2>のタンパク質精製用his-フィブリン-3ベクターで形質転換して得たhis-フィブリン-3過剰発現培地でA549細胞を処理して、細胞成長抑制効果をコロニー形成実験で確認した。具体的には、<実施例2-2>でCHO-K1細胞または293T細胞をそれぞれ用いて調製したhis-フィブリン-3過剰発現培地を1:1の比率で混合して、1×103個のA549細胞を処理した後、37°Cの二酸化炭素インキュベーターで7日間培養した。その後、クリスタルバイオレット0.5試薬で10分間染色をしてPBSで数回洗浄して確認した。その結果、his-フィブリン-3過剰発現培地で処理したA549細胞は、対照群に比べて細胞成長が阻害されることを確認した図11。<4-4>精製したフィブリン-3タンパク質の癌細胞成長抑制効果の確認本発明者らは、精製されたフィブリン-3タンパク質による癌細胞成長抑制効果を確認した。具体的には、1×103個の非小細胞肺癌細胞であるA549細胞及び乳癌細胞であるMDA-MB231細胞を35mmのプレートに播種して24時間後、<実施例2-3>のhis-フィブリン-3精製タンパク質それぞれ1μgで肺癌細胞及び乳癌細胞を一度または二度一度処理したところに再び24時間後もう一度処理処理した。その後、細胞を37°Cのインキュベーターで7日間培養した後、クリスタルバイオレット0.5試薬で10分間染色した後、PBSで数回洗浄した。その結果、肺癌細胞であるA549細胞及び乳癌細胞であるMDA-MB231細胞の両方で細胞成長が抑制されることを確認した図12及び図13。<実験例5>癌幹細胞でのフィブリン-3の効果の確認<5-1>癌幹細胞でのフィブリン-3によるMMP-2、MMP-7、およびベータカテニン発現抑制効果の確認本発明者らは、癌幹細胞であるALDH1活性細胞でのフィブリン-3によるMMP-2、MMP-7及びベータカテニン発現の抑制効果を確認した。具体的には、<実施例2-1>で製造したフィブリン-3過剰発現培地とALDH1活性細胞培地を1:4の比率で混合した培地、及びフィブリン-3の発現がA549細胞に比べて多いH460細胞5×105個を48時間培養したH460細胞培養培地とALDH1活性細胞培地を1:4の比率で混合した培地を調製して、該培地でそれぞれ2×105細胞/mlのALDH1活性細胞を処理した。48時間後、MMP-2、MMP-7、ベータカテニン抗体を用いて前記<実験例2-1>のウエスタンブロット方法でタンパク質発現を確認した。また、フィブリン-3の直接的な作用であることを確認するため、前記で混合した二つの培地にフィブリン-3抗体の500:1希釈物を加えてALDH1活性細胞を処理した48時間後、MMP-2抗体、MMP-7抗体、およびベータカテニン抗体を用いたウエスタンブロットでタンパク質発現を確認した。その結果、ベータカテニンタンパク質と同様に、ALDH1活性細胞対照群に比べて、H460細胞培養培地とALDH1活性細胞培地を1:4の比率で混合した培地、及びフィブリン-3過剰発現培地とALDH1活性細胞培地を1:4の比率で混合した培地で処理した細胞において、MMP-2、MMP-7及びベータカテニンのタンパク質発現が減少することを確認した。また前記培地にフィブリン-3抗体の500:1希釈物を加えてALDH1活性細胞を処理したウエスタンブロット結果で、MMP-2、MMP-7及びベータカテニンのタンパク質発現が対照群に比べて差がないことを確認し、MMP-2、MMP-7及びベータカテニン発現の抑制効果がフィブリン-3タンパク質によるものであることを確認した図14。<5-2>フィブリン-3の癌幹細胞成長抑制効果の確認本発明者らは、フィブリン-3による、癌幹細胞であるALDH1活性細胞の成長抑制効果を確認した。具体的には、<実施例2-1>で製造したフィブリン-3過剰発現培地とALDH1活性細胞培地を1:4の比率で混合した培地、及びフィブリン-3の発現がA549細胞に比べて多いH460細胞5×105個を48時間培養したH460細胞培養培地とALDH1活性細胞培地を1:4の比率で混合した培地でALDH1活性細胞を処理した。まず、ALDH1活性細胞1×103個を35mmのプレートに播種して24時間後、フィブリン-3を過剰発現した培地とALDH1活性細胞培地を1:1の比率50で混合した培地、フィブリン-3過剰発現培地とALDH1活性細胞培地を5:4の比率80で混合した培地、及びフィブリン-3過剰発現培地100でそれぞれ処理した。また、H460細胞5×105個を48時間培養したH460細胞培養培地とALDH1活性細胞培地を1:1の比率50で混合した培地、H460細胞5×105個を48時間培養したH460細胞培養培地とALDH1活性細胞培地を5:4の比率80で混合した培地、及びH460細胞5×105個を48時間培養したH460細胞培養培地100でそれぞれ処理した。前記培地で処理後、37°Cの二酸化炭素インキュベーターで8日間培養し、クリスタルバイオレット0.5試薬で10分間染色後、PBSで数回洗浄して確認した。その結果、ALDH1活性細胞対照群より、フィブリン-3過剰発現培地、またはH460細胞培養培地の比率が高い培地で処理したALDH1活性細胞でその成長が阻害されることを確認した図15。同時に、本発明者らは<実施例2-2>で製造したhis-フィブリン-3過剰発現培地による、癌幹細胞であるALDH1活性細胞の成長抑制効果を確認した。具体的には、<実施例2-2>でCHO-K1細胞または293T細胞をそれぞれ用いて調製したhis-フィブリン-3過剰発現培地を1:1の比率で混合して、1×103個のALDH1活性細胞を処理した後、37°Cの二酸化炭素インキュベーターで7日間培養し、クリスタルバイオレット0.5試薬で10分間染色をしてPBSで数回洗浄してコロニー形成実験をした。その結果、his-フィブリン-3過剰発現培地で処理したALDH1活性細胞が、対照群に比べて細胞成長が阻害されることを確認した図16。<5-3>精製したフィブリン-3タンパク質の癌幹細胞成長抑制効果の確認本発明者らは、精製されたフィブリン-3タンパク質による癌幹細胞成長抑制効果を確認した。具体的には、1×103個の癌幹細胞であるALDH1活性細胞を35mmのプレートに播種して24時間後、<実施例2-3>のhis-フィブリン-3精製タンパク質それぞれ1μgでALDH1活性細胞を一度または二度一度処理したところに再び24時間後にもう一度処理処理した。その後、細胞を37°Cのインキュベーターで7日間培養した後、クリスタルバイオレット0.5試薬で10分間染色した後、PBSで数回洗浄した。その結果、癌幹細胞であるALDH1活性細胞の細胞成長が抑制されることを確認した図17。<製造例1>薬学的製剤の製造<1-1>散剤の製造フィブリン-3タンパク質2g乳糖1g前記の成分を混合して気密包に充填して散剤を製造した。<1-2>錠剤の製造フィブリン-3タンパク質100mgとうもろこし澱粉100mg乳糖100mgステアリン酸マグネシウム2mg前記の成分を混合した後、通常の錠剤の製造方法にしたがって打錠して錠剤を製造した。<1-3>カプセル剤の製造フィブリン-3タンパク質100mgとうもろこし澱粉100mg乳糖100mgステアリン酸マグネシウム2mg前記の成分を混合した後、通常のカプセル剤の製造方法にしたがってゼラチンカプセルに充填してカプセル剤を製造した。<1-4>丸薬の製造フィブリン-3タンパク質1g乳糖1.5gグリセリン1gキシリトール0.5g前記の成分を混合した後、通常の方法によって1丸当たり4gになるように製造した。<1-5>顆粒の製造フィブリン-3タンパク質150mg大豆抽出物50mgブドウ糖200mg澱粉600mg前記の成分を混合した後、30エチルアルコール100mgを添加して60°Cで乾燥して顆粒を形成した後、分包に充填した。"