高分子を含有する流体中の高分子モノマーの凝集体を決定する方法であって、上記流体の試料を、高分子と特異的結合相互作用することのできる相互作用解析センサーの検知表面と接触させる段階と、前記検知表面との前記流体試料の相互作用について1以上の速度論的パラメーターを決定する段階と、前記決定した1以上の速度論的パラメーターを、高分子の凝集体を1以上の既知の分率で含む1以上の流体試料で決定した1以上の速度論的パラメーターと比較する段階と、それから、1以上の凝集体の形態にある試料中の高分子の分率を決定する段階とを含む方法。前記検知表面への高分子の会合及び解離の1以上を監視する段階を含む、請求項1記載の方法。前記決定した1以上の速度論的パラメーターを、前記高分子の凝集体を異なる分率で含有する複数の試料で決定した対応する1以上の速度論的パラメーターと比較する、請求項1又は請求項2記載の方法。前記1以上の速度論的パラメーターが、前記センサー表面からの結合高分子の会合に関する速度論的パラメーターを含む、請求項1乃至請求項3のいずれか1項記載の方法。前記1以上の速度論的パラメーターが、前記センサー表面からの結合高分子の解離に関する速度論的パラメーターを含む、請求項1乃至請求項3のいずれか1項記載の方法。前記1以上の速度論的パラメーターが、オン速度及びオフ速度の少なくとも一方又はそれらの関連パラメーターを含む、請求項1乃至請求項5のいずれか1項記載の方法。前記オン速度が初期オン速度である、請求項6記載の方法。前記速度論的パラメーターがオフ速度である、請求項6記載の方法。前記オフ速度が、結合高分子の解離が始まった後の所定時間における前記表面での残留結合レベルによって表される、請求項8記載の方法。前記流体を前記検知表面と接触させる前記段階は、物質移動制限の下で行われる、請求項1乃至請求項9のいずれか1項記載の方法。前記高分子が検知表面に特異的に結合する能力が、高分子の凝集によって少なくとも実質的に影響を受けない、請求項1乃至請求項10のいずれか1項記載の方法。前記高分子がタンパク又はポリペプチド、好ましくは抗体である、請求項1乃至請求項11のいずれか1項記載の方法。前記相互作用解析センサーがバイオセンサーである、請求項1乃至請求項12のいずれか1項記載の方法。前記バイオセンサーが、質量検知バイオセンサー、好ましくはエバネセント波検知、特に表面プラズモン共鳴SPRに基づくバイオセンサーである、請求項13記載の方法。前記検知表面が、抗体に結合できるリガンドを担持する、請求項1乃至請求項14のいずれか1項記載の方法。前記リガンドは、抗体のFc部分に特異的に結合する、請求項15記載の方法。前記リガンドがプロテインA又はその誘導体である、請求項16記載の方法。高分子、好ましくは抗体などのタンパクの精製における請求項1乃至請求項17のいずれか1項記載の方法の使用。高分子の精製を最適化するための、請求項18記載の使用。特に抗体調製において、高分子を含有する流体中の凝集体の含有量を評価するための改善され、簡略化された方法を提供することが、本発明の目的である。本発明は、抗体などの高分子のモノマー及び凝集体が、その上に固定化される高分子への結合相手を有するセンサー表面に結合するとき、結合における挙動が、モノマーと凝集体との間で異なる反応速度論を反映することを見いだしたことに基づいている。既知の分率の凝集体を含む試料についての反応速度論とともに高分子を含有する試料の相互作用についての反応速度論を調べる又は監視することによって、試料中の凝集体の含有量又は分率を評価でき又は決定できる。一態様では、本発明は、高分子を含有する流体中の高分子モノマーの凝集体を決定する方法であって、i流体試料を、高分子と特異的結合相互作用することのできる相互作用解析センサーの検知表面と接触させる段階段階と、ii検知表面との流体試料の相互作用について1以上の速度論的パラメーター又は特性を決定する段階と、iii決定した1以上の速度論的パラメーターを、高分子の凝集体を1以上の既知の分率で含む1以上の流体試料で決定した1以上の速度論的パラメーターと比較する段階と、ivそれから、1以上の凝集体の形態にある試料中の高分子の分率を決定する段階とを含む方法を提供する。速度論的パラメーター又は特性は、好ましくはオン速度及びオフ速度の一方又は適宜両方或いはそれらの関連変数である。オン速度は、好ましくは初期オン速度である。凝集体を1以上の既知の分率で含む流体試料は、例えばモノマー形の高分子だけを含有する流体試料、又は凝集体を様々な分率で含む2以上の流体試料であってもよい。好ましくは、凝集体の分率を速度論的挙動に関係づける較正曲線などが提供される。高分子は、好ましくはタンパク又はポリペプチド、特に抗体である。現在好ましい実施形態では、1以上の速度論的パラメーターは、センサー表面からの結合高分子の解離に関するものである。相互作用解析センサーは、好ましくはバイオセンサー、特に質量検知バイオセンサーである。一実施形態では、本方法は、物質移動制限なしに行われる。別の実施形態では、本方法は、物質移動制限がある状態で行われる。本発明のこの態様のさらに好ましい実施形態は、添付の特許請求の範囲で説明される。別の態様では、本発明は、高分子の精製を最適化する際に本発明の使用を提供する。本発明並びにその追加の特徴及び利点のより完全な理解は、次の詳細な説明及び付随する図を参照して得られることになる。他に定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術的及び科学的術語は、この発明に関する当業者が一般に理解するのと同じ意味を有する。また、単数形で記載したものであっても、別途記載しない限り、複数の場合も含む。上で述べたように、本発明は、流体試料中の高分子、典型的には抗体などのタンパクのマルチマー形即ち凝集体の検出及び解析に関する。つまり、本方法は、生体分子相互作用解析センサーの検知表面に固定化した特異的結合相手リガンドとのそれらの結合相互作用における高分子のモノマーと凝集体との間の反応速度論の差を利用することに基づいている。相互作用解析センサーは、典型的にはバイオセンサーである。周知の通り、バイオセンサーは典型的には、固定化層の質量、屈折率又は厚さなどのセンサー表面の性質の変化を検出する、無標識の技術に基づいている。本発明の目的のための典型的なバイオセンサーは、センサー表面での質量検出に基づいており、特に光学的方法及び圧電又は音響波方法を含む。光学的検出方法に基づく代表的なセンサーは、例えば表面プラズモン共鳴SPRセンサーなどのエバネセント波に基づくセンサーを含む、反射光学的方法に基づくセンサー、漏れ全反射FTRセンサー、及び例えば反射干渉分光法RIfSセンサーを含む導波路センサーなどの、質量表面濃度を検出するそれらを含む。圧電及び音響波センサーは、表面音響波SAW及び水晶微量でんびんQCMセンサーを含む。SPR及び他の検出技術に基づくバイオセンサーシステムは、現在市販されている。例となるそのようなSPRバイオセンサーは、試料中の分子と検知表面に固定化した分子構造体リガンド又は捕獲分子との間の相互作用を検出するために表面プラズモン共鳴を使用する、フロースルーセルに基づくBiacore登録商標システムGEHealthcareBio-SciencesAB、Uppsala、Sweden及びProteOn商標XPRシステムBio-RadLaboratories、Hercules、CA、USAを含む。試料が、センサー表面の上に送られると、結合の進行は、相互作用が生じる速度を直接反映する。試料の注入の後には通常バッファー流が続き、その間に検出器応答は、表面での錯体の解離速度を反映する。システムからの典型的な出力は、解離フェーズ部分及び会合フェーズ部分を含む、時間の経過に伴う分子相互作用の進行を記述するグラフ又は曲線である。通常コンピュータ画面上に表示される、この結合曲線は、しばしばセンサーグラムと呼ばれる。Biacore登録商標システムを使うと、標識化技術を使用することなく、しばしば含まれる基板を浄化することなく、試料中の特定の分子即ち検体の存在及び濃度だけでなく、分子相互作用における会合結合及び解離についての速度論的速度定数並びに表面相互作用についての親和性を含む、追加の相互作用パラメーターもまた、実時間で決定することが可能である。下記では、本発明は、Biacore登録商標システム型のSPRセンサーに関して、大体において例示だけのために且つ制限なく述べられることになる。今から本発明に再び向かうと、上述の異なる速度論的挙動は、いくつかの要因に起因することもある。2つの主要なものは、iモノマーと比較して凝集体のより大きな質量/体積、及びiiモノマーへの結合相手又はモノマーのためのリガンド若しくは捕獲分子のための凝集体の多重結合部位結合活性に存在し、可逆的表面結合相互作用の会合フェーズ並びに解離フェーズで現れる。会合フェーズに関しては、モノマー及び凝集体は、センサー表面上の固定化結合相手への異なる結合速度、即ちオン速度を示す。オン速度は、結合曲線の初期傾きによって表される初期結合速度として決定されてもよい。傾きは、典型的には会合が始まったすぐ数秒後の小さな時間窓の間に決定され、通常は1秒当たりの応答単位RU/sとして表される。検知表面での反応律速相互作用の場合には即ちどんな物質移動制限もない場合には、凝集体は、質量検知表面においてモノマーよりも大きな応答、即ちより速いオン速度を与えることになる。モノマー/凝集体試料中の凝集体の割合が大きいほど、初期傾きは、より大きいことになり、初期傾きは、モノマーだけを含有する試料について決定したそれとはより大きく異なることになる。もしオン速度が、凝集体を様々な分率で含む多数の試料についてこのようにして決定すれば、未知の試料中の凝集体の分率を決定できる。他方で拡散律速表面相互作用の場合には、凝集体は、物質移動制限によってモノマーよりも大きく影響を受けて、より遅いオン速度をもたらす。従って、モノマー/凝集体試料中の凝集体の割合が大きいほど、初期傾きは、より小さいことになり、初期傾きは、モノマーだけを含有する試料について決定したそれとはより大きく異なることになるが、しかしながら今度は減少するように異なる。解離フェーズでは即ち表面が、もはや試料にさらされず、表面からの解離が、生じてもよいときは、より多くの結合部位を有する凝集体結合活性効果に起因する、モノマーと比較して表面への凝集体の上述のより強い結合は、凝集体についてより遅いオフ速度を引き起こす。もちろん、これは、凝集体形成が少なくとも実質的に固定化結合相手のための結合部位を遮断しないならばである。従って、モノマー/凝集体試料中の凝集体の割合が大きいほど、オフ速度は、より遅く、オフ速度は、モノマーだけを含有する試料について決定したそれとはより大きく異なることになる。オフ速度は、例えば解離が始まった後の所定時間における残留結合レベル応答によって表されてもよい。上記の初期傾きと同じように、オフ速度が、凝集体を様々な分率で含む多数の試料について決定すれば、未知の試料中の凝集体の分率を決定できる。上で述べたように、二量化などの凝集体形成がより遅いオフ速度を引き起こすためには、凝集体は、未変化の検知表面上の結合相手即ちリガンドのために結合部位を残さなければならない、即ち結合活性効果は、完全に明白でなければならない。しかしながら、これは好ましいが、反対の状況を使用すること、即ち高分子上の表面結合部位が凝集によって遮断されることもまた、本発明の範囲内である。これは対照的に、モノマーよりも速い解離オフ速度、及びモノマーよりも遅い会合オン速度を有する凝集体をもたらすことになる。凝集機構及び表面上の結合リガンドの適切な選択についての知識を使うと、高分子上の影響を受けない結合活性結合部位が得られることになるか又は遮断された結合部位が得られることになるかを制御することができる。試料中の凝集体複数可の存在を定性的に決定するためには、もちろん決定した速度論的パラメーターを100モノマーを持つ試料のそれと比較することで十分である。本明細書で関係する測定の種類については、一般に検知表面での低飽和レベルは、高い試料処理能力を可能にすることになり、一方より高いレベルは、試料中の低い割合の凝集体の検出を容易にすることになると理解される。高分子の調製においてその凝集体の存在が本発明の方法によって決定できる高分子は、典型的にはタンパク又はポリペプチド、特に抗体などの治療用タンパク又はポリペプチドであるが、しかしまた例えば核酸であってもよい。本明細書で使用するような抗体は、天然であってもよく又は部分的に若しくは完全に合成によって生成されてもよい免疫グロブリンIgGを意味し、またFab抗原結合性フラグメント、一価フラグメント及び二価フラグメントを含む、活性フラグメントも含む。その術語はまた、免疫グロブリン結合領域と同種の結合領域を有する任意のタンパクにも及ぶ。そのようなタンパクは、天然源から誘導できる、又は部分的に若しくは完全に合成によって生成できる。例となる抗体は、免疫グロブリンアイソタイプ並びにFab、Fab’、Fab’2、scFv、Fv、dAb、及びFdフラグメントである。例えば治療用抗体調製において凝集体の割合を決定する又は評価するための本発明の方法は、高品質最終生成物を達成するための手順を最適化するために、プロセス開発の間に凝集体形成を監視するために使用されてもよい。上で述べたように、治療用抗体調製での凝集体の存在は一般に、患者の安全性に悪影響を有し、プロセス製造の間に効果的に制御しなければならない。次の実施例では、異なる割合の抗体モノマー及びその凝集体を含有する100モノマー及び100凝集体をそれぞれ含む試料の速度論的挙動を実証する実験が、述べられる。機器Biacore登録商標T100機器GEHealthcareBio-SciencesAB、Uppsala、Swedenが、使用された。この機器では、微小流体システムが、4つの個別に検出されるフローセルを1つずつ又は順番に通って試料及び泳動バッファーを送る。センサーチップとして、共有結合的にカルボキシメチル修飾されたデキストランポリマーヒドロゲルを持つ金被覆表面を有するSeriesSセンサーチップCM5GEHealthcareBio-SciencesABが、使用された。計算のために、BIAevaluationソフトウェアGEHealthcareBio-SciencesAB、Uppsala、Sweden専用の機器が、使用された。機器からの出力は、時間の関数としての検出器応答共鳴単位、RUで測定されるのプロットであるセンサーグラムである。1000RUの増加は、約1ng/mm2のセンサー表面での質量の増加に対応する。抗体抗体は、モノマー及びある割合の凝集体顕著にはダイマーを含有する治療用IgG抗体社内源から得られたであった。試料の調製抗体のモノマー及び凝集体は、Superdex商標100ゲルGEHealthcareBio-SciencesABを使用するゲルろ過によって分離された。100モノマー又は100凝集体をそれぞれHBS-EPバッファー、pH7.4GEHealthcareBio-SciencesAB中に200μg/mlで含有する第1の組の試料が、調製された。600μg/mlの100、80、70、60、50、40、30、20、10及び0モノマーをそれぞれ含有する第2の組の試料が、次いで調製された。センサーチップ上へのプロテインAの固定化プロテインAGEHealthcareBio-SciencesABが、10mM酢酸ナトリウム、pH4.5中のプロテインAの溶液をBiacore登録商標T100に注入することによってCM5センサーチップ上に固定化された。実験実験1抗体の100のモノマーか又は凝集体を200μg/mlで含有する試料が、プロテインAが固定化されたセンサーチップの上に30μl/minの流量で4分間注入された。注入時間は、解離が泳動バッファーの注入によって始まったときは、約310秒会合フェーズであった。得られたセンサーグラム結合曲線は、図1重ね合わせプロットで示され、曲線Aは、100凝集体であり、曲線Bは、100モノマーである。会合及び解離フェーズは、センサーグラムではっきりと見える。センサーグラムから明らかなように、モノマーと凝集体との間には結合挙動の明瞭な差があり、それは、異なる反応速度論を反映する。凝集体は、物質移動制限ここでは選択された抗体濃度に起因するによってより大きく影響を受け、結合曲線の会合フェーズの最初の部分において結合曲線のより緩やかな傾きによって反映されるより遅いオン速度を有する。凝集体はまた、凝集抗体分子によるプロテインAへのいくつかの結合部位によって得られる結合活性効果に起因してプロテインA表面により強く結合もする。これは、凝集体についてより緩やかな傾きの解離フェーズによってセンサーグラムで反映される。凝集体の結合レベルは、凝集分子のより大きな質量に起因してモノマーよりも高いと予想されるが、しかしそれは、この実験でははっきりと実証されず、凝集体注入は、センサーチップ上の固定化プロテインAを飽和させることからは程遠い。実験20から100の範囲の異なる割合の凝集分子を600μg/mlで含有する試料が、プロテインA結合センサーチップの上に注入された。注入時間は、4分間であり、流量は、30μl/minであった。得られたセンサーグラムは、図2重ね合わせプロットで示される。最上部の曲線Aは、0モノマーであり、最下部の曲線Bは100モノマーであり、中間の曲線は、下から上への順番で80、70、60、50、40、30、20、及び10モノマーである。センサーグラムから明らかなように、モノマー100モノマー試料についての約2400RUでのモノマーの飽和レベルを凝集体0モノマー試料についての約3500RUと比較して、試料間には明瞭な差がある。異なる割合のモノマーを含有する試料間の差は、図3で棒グラフの形で実証され、その棒は、増加する高さ結合レベルの順番で10、20、30、40、50、60、70、80及び100凝集体ダイマーを表している。抗体モノマー及び凝集体の異なる混合物を持つ試料間の会合及び解離フェーズでの速度論的挙動の差をさらに例示するために、上記のセンサーグラムからの値は、i解離が始まった後の所定時間94秒における解離フェーズでのオフ速度、及び会合フェーズでのオン速度又は初期傾きを決定するために使用された。オフ速度は、所定時間94秒における異なる試料についての残留レベル値によって表され、オン速度は、初期傾き又は初期結合速度によって表され、それは次にここでは、注入が始まった数秒後に測定される応答レベルによって表される。それぞれの値は、以下の表1で提示される。モノマー対残留レベルの変化は、図4で図表の形で示され、モノマー対初期傾きの変化は、図5で図表の形で示される。それらから明らかなように、一方ではモノマーとオフ速度との間、及び他方ではモノマーとオン速度との間には実質的に直線関係がある。実証された凝集体の割合の増加に伴うオフ速度の減少は、上記の実験1での結果と一致しており、ダイマーがプロテインAのための多重結合部位を有し、モノマーよりもより強くセンサーチップに結合するという事実に起因している。他方ではオン速度は、実験1での場合と対照的に、凝集体の割合の増加とともに増加する。これは、抗体濃度の増加とともに、表面相互作用が、もはや物質移動制限されず、その結果モノマーと比較してより大きな凝集体が、より高い応答を与えるという事実に起因している。プロテインA以外の、より低い親和性を持つ捕獲分子がセンサーチップ上に固定化される場合は、速度論的パラメーターの解析に基づく上述の評価は、改善されることになると理解される。要約すると、上記の実験1及び2で実証されたように、抗体含有試料中の凝集体の割合は、センサーチップ表面との試料の相互作用について反応速度論を決定することによって評価できる。具体的には、センサーグラムの会合フェーズから決定されるようなオン速度は、表面相互作用が反応律速であるときは凝集体の分率に比例し、表面相互作用が拡散律速である、即ち物質移動制限にあるときは凝集体の分率に逆比例する。他方では、センサーグラムの解離フェーズから決定されるようなオフ速度は、試料中の凝集体の割合に逆比例する。本発明は、上述の好ましい実施形態に限定されない。様々な代替形態、変更形態及び等価形態が、使用されてもよい。従って、上記の実施形態は、本発明の範囲を限定すると受け取るべきではなく、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によって規定される。