ガレクチン-1、ガレクチン-3及びα-エノラーゼからなる群から選ばれる、腎がん血中マーカー。画像診断前検査用の腎がん血中マーカーとしてのガレクチン-1。画像診断前検査用の腎がん血中マーカーとしてのガレクチン-3。画像診断前検査用の腎がん血中マーカーとしての組み合わせられたガレクチン-1及びガレクチン-3。画像診断前検査用の腎がん血中マーカーとしてのα-エノラーゼ。腎がん処置中及び/又は処理後におけるモニター用の腎がん血中マーカーとしてのα-エノラーゼ。酵素標識されたα-エノラーゼ抗体を含む、腎がんマーカー検出キット。個体由来の採血試料中の、ガレクチン-1、ガレクチン-3及びα-エノラーゼからなる群から選ばれる腎がんマーカーレベルを取得し、前記腎がんマーカーの基準レベルに基づき、前記取得されたマーカーレベルの高低に関する評価を行う工程を含む、採血試料中の腎がんマーカーの分析方法。血液検査は簡便かつ比較的安価で侵襲度も低い検出法であるが、腎がんに対する血液マーカーとして臨床応用されているものはなく、その開発が求められている。また、腎がんに対する外科的手術後の再発率の高さに鑑みると、術後の再発を迅速に発見することも重要である。そこで本発明の目的は、腎がんの血中マーカーを提供することにある。より具体的には、腎がんの臨床診断、つまりはがんの検出に実用可能な血中マーカーを提供することにある。さらに、奏功率は低いものの、免疫療法が有効であり、近年では分子標的薬の適用も始まったことを考えると、これら免疫療法や化学療法の効果をモニターすることも重要である。また、上記の通り、術後の経過観察も重要である。そこで本発明の更なる目的は、腎がん処置中および処置後の経過観察に実用可能な血中マーカーを提供することにある。本発明者らは、鋭意検討の結果、ガレクチン-1、ガレクチン-3及びα-エノラーゼからなる群から選ばれるタンパク質が上記本発明の目的を達成することを見出し、本発明を完成するに至った。本発明は、以下の発明を含む。1ガレクチン-1、ガレクチン-3及びα-エノラーゼからなる群から選ばれる、腎がん血中マーカー。2画像診断前検査用の腎がん血中マーカーとしてのガレクチン-1。3画像診断前検査用の腎がん血中マーカーとしてのガレクチン-3。4画像診断前検査用の腎がん血中マーカーとしての組み合わせられたガレクチン-1及びガレクチン-3。5画像診断前検査用の腎がん血中マーカーとしてのα―エノラーゼ。6腎がん処置中及び/又は処置後におけるモニター用の腎がん血中マーカーとしてのα-エノラーゼ。7酵素標識されたα-エノラーゼ抗体を含む、腎がんマーカー検出キット。8個体由来の採血試料中の、ガレクチン-1、ガレクチン-3及びα-エノラーゼからなる群から選ばれる腎がんマーカーレベルを取得し、前記腎がんマーカーの基準レベルに基づき、前記取得されたマーカーレベルの高低に関する評価を行う工程を含む、採血試料中の腎がんマーカーの分析方法。上記8において、マーカーのレベルとは、基本的には濃度を意味するが、当業者が濃度に準じて用いる他の単位でもよい。本発明により、腎がんの血中マーカーが提供される。これにより、血液検査という簡便かつ比較的安価な方法で、腎がんの早期発見率を向上させることができる。また、本発明により、腎がんを簡便に発見できる方法、及び腎がん処置中、及び処置後の効果をモニターする方法が可能になる。すなわち、がんの外科的手術後の再発のモニター、及び免疫療法や薬物療法等の非外科的手術による治療効果のモニターを、血液検査という簡便な方法で行うことが可能になる。[1.腎がんマーカー]本発明は、腎がんマーカーとしてガレクチン-1、ガレクチン-3及びα-エノラーゼを提供する。これらは、腎がん患者グループと健常者グループとの間で、採血試料中における有意な濃度差を示すタンパク質である。本発明のタンパク質は、その発見のために調査された腎がん患者グループと健常者グループとの男女比及び年齢が互いに同等である点で、マーカーとしての信頼性が高い。これらのタンパク質は、腎がん患者の採血試料中において有意に高濃度を示す。本発明のマーカーは、いずれも血液検査で使用できるものである。血液検査は、画像診断により診断を確定する前段階に行われる簡易な検査予備診断若しくは一次診断、又は健康診断や人間ドックにおける検査項目の一つとして行われることが好ましい。このような画像診断前検査の用途においては、本発明のマーカーのうち、ガレクチン-1及びガレクチン-3が特に有用である。さらに、画像診断前検査の用途においては、ガレクチン-1及びガレクチン-3を組み合わせて使用することがより好ましい。ガレクチン-1及びガレクチン-3の組み合わせは、マーカーの組み合わせ積集合による必然的な感度の低下幅が小さく、且つ高い特異度を有する。一方、α-エノラーゼは、特に腎がん処置後のモニター用途において有用である。[2.採血試料]本発明の腎がんマーカーは、採血試料中において検出及び分析可能である。従って、本発明の方法においては、採血試料中の腎がんマーカーレベルが分析される。採血試料は、腎がんマーカーレベルの取得工程に直接供される試料であり、全血、血漿及び血清などが含まれる。採血試料は、個体から採取された全血を、適宜処理することによって調製することができる。採取された全血から採血試料の調製を行う場合に行われる処理としては特に限定されず、臨床学的に許容されるいかなる処理が行われてよい。例えば遠心分離などが行われうる。また、測定工程に供される採血試料は、その調製工程の中途段階又は調製工程の後段階において、適宜冷凍など低温下での保存が行われたものであってよい。なお、本発明において採血試料は、由来元の個体に戻すことなく破棄される。採血試料の由来元となる個体には、健康診断や人間ドックの患者、血尿や腰背部痛その他の自覚症状を主訴とする患者、腎がんに対する処置が行われた腎がん患者であってモニタリングを必要とする者等が含まれる。腎がんに対する処置としては、外科的手術及び非外科的治療が含まれる。非外科的治療には、免疫療法や薬物療法が含まれる。[3.採血試料中の腎がんマーカーレベルの分析]本発明による採血試料中の腎がんマーカーレベルの分析は、測定レベルと基準レベルとの比較によって行われる。より正確な分析のため、比較される測定レベルと基準レベルとはいずれも、同じ条件前処理条件や保存条件などで用意された採血試料に基づくものであることが好ましい。本発明の方法においては、血液に由来する採血試料中の腎がんマーカーレベルを測定し、腎がんマーカーの測定レベルを得て、腎がんマーカーの測定レベルとその腎がんマーカーの基準レベルとを比較する工程を含む。[3-1.基準レベル]基準レベルは、腎がんの病態の判断基準となるレベルである。前述のように、本発明の腎がんマーカーは、腎がん患者グループと健常者グループとの間で、採血試料中における有意な濃度差を示す。従って、適切な基準レベルを設定することで、それらグループを有効に識別することができる。基準レベルの具体例は、通常、個々の腎がんマーカー特有の閾値である。本発明における閾値は、腎がんマーカータンパク質の種類ごとに、人種及び年齢などに応じて予め設定することができる。閾値は、後述の測定方法により、健常者グループに属する個人及び腎がん患者グループに属する個人に由来する採血試料中の腎がんマーカーの存在量を測定し、各々のグループにおける測定レベルを参照することによって設定することができる。閾値カットオフ値は、高い正診率を示す値が選択されうる。マーカータンパク質の種類によって異なりうるが、例えば、特異度が60以上、好ましくは80以上、さらに好ましくは90以上であって、感度が30以上、好ましくは50以上、さらに好ましくは60以上であるカットオフ値の中から当業者が適宜決定する事ができる。閾値を設定する手法は、当業者によって適宜選択されるものである。一例として、ROC曲線受信者動作特性曲線;ReceiverOperatingCharacteristicCurve分析などが挙げられる。基準レベルの他の具体例としては、同一個体由来で事前に採血されていた採血試料における測定レベルも許容する。[3-2.画像診断前検査用マーカーの使用]画像診断前検査用マーカーとして本発明のタンパク質特に好ましくはガレクチン-1及び/又はガレクチン-3を用いる場合、その基準レベルは、腎がん患者由来の採血試料と健常者由来の採血試料との区別を行うための判断基準となるものである。具体的には、画像診断前検査用マーカーの基準レベルはその画像診断前検査用マーカーの閾値である。測定レベルが基準レベルより大きければ、採血試料が由来する個人が腎がんである可能性が高くすなわち腎がんの疑いが高い、測定レベルが基準レベルより小さければ、採血試料が由来する個人が健常者である可能性が高いすなわち腎がんの疑いが低いと判断することができる。前者の場合、さらに画像診断によって腎がんであることの確認を行うことができる。[3-3.腎がん処置中、及び処置後モニター用マーカーの使用]腎がん処置中、及び/又は処置後モニター用マーカーとして本発明のタンパク質具体的にはα-エノラーゼを用いる場合、その基準レベルは、腎がん患者由来の採血試料と、腎がんに対する処置が効果的に行われた患者由来の採血試料との区別を行うための判断基準となるものである。具体的には、上述の画像診断前検査用マーカー場合と同様に、基準レベルとして閾値が採用される。腎がん処置中、及び/又は処置後モニター用として本発明のマーカーが用いられる対象となる個体は、処置前において、血中のマーカーレベルが基準レベルを越えていたものである。腎がんの処置とは、具体的には外科的手術や投薬が挙げられる。本発明のマーカーの用途が処置中におけるモニタリングである場合、当該処置は非外科的治療、具体的には投薬であることが好ましい。本発明のマーカーの用途が処置後におけるモニタリングである場合、当該処置は外科的治療、具体的には手術であることが好ましい。腎がん処置中又は処置中のある時期において、採血試料をα-エノラーゼ測定に供し、測定レベルを取得する。測定レベルが基準レベルより小さければ、その時期において、採血試料が由来する個体でのがんに対する処理の効果が十分であった或いはがんが消失したと判断することができる。反対に、測定レベルが基準レベルより大きければ、その時期において、採血試料が由来する個体でのがんに対する処置の効果が十分でない或いはがんが消失していないと判断することができる。外科手術後の検査として本発明の方法が行われることによって、腎がんの再発のフォローアップを行うことが可能になる。なお、外科手術後における腎がんの再発のフォローアップにおいては、上記の特別処置を施さない経過観察のみが行われてもよいし、非外科的治療が併用されてもよい。また、非外科的治療中の検査として本発明の方法が行われることによって、腎がんの治療効果のフォローアップを行うことが可能になる。非外科的治療中における腎がんの治療効果のフォローアップにおいては、治療継続の要否に関する判断を行うことも可能である。例えば、治療中のある時期において、採血試料のα-エノラーゼ測定レベルが閾値を下回った場合は、治療を終了することができ、当該時期において採血試料のα-エノラーゼ測定レベルが依然として閾値を上回った場合は、さらに非外科的治療を繰り返すことができる。なお、治療後のある時期においてα-エノラーゼの測定レベルが閾値を下回っていた場合であっても、さらにその後の検査においてα-エノラーゼの測定レベルが閾値を上回った場合には、腎がんの再発転移の疑いがあると判断することもできる。本発明の方法は血液検査により簡易に行うことができるため、治療終了後も繰り返しα-エノラーゼ値の検査を行うことが可能であり、これによって、がんの再発転移の早期発見に資することができる。[3-4.測定方法]本発明の腎がんマーカーの測定は、好ましくは、生体特異的親和性に基づく検査によって行われる。生体特異的親和性に基づく検査は、当業者によく知られた方法であり、特に限定されないが、イムノアッセイが好ましい。具体的には、ウェスタンブロット、ラジオイムノアッセイ、ELISAEnzymeLinkedImmunoSorbentAssayサンドイッチイムノ法、競合法、及び直接吸着法を含む、免疫沈降法、沈降反応、免疫拡散法、免疫凝集測定、補体結合反応分析、免疫放射定量法、蛍光イムノアッセイ、プロテインAイムノアッセイなどの、競合及び非競合アッセイ系を含むイムノアッセイが含まれる。イムノアッセイにおいては、採血試料中の腎がんマーカーに結合する抗体を検出する。腎がんマーカーに結合する抗体は、当業者が適宜決定することができる。例えば、腎がんマーカータンパク質抗体モノクローナル抗体及びポリクローナル抗体、又はその標識体を用いる。マーカータンパク質抗体の標識体における標識は、蛍光化合物及び/又は酵素タンパク質による標識でありうる。蛍光化合物及び酵素タンパク質としては、抗体を用いた測定系において許容されるものが当業者によって適宜選択される。例えば酵素タンパク質は、ペルオキシダーゼ、アルカリフォスファターゼ、及びβ-ガラクトシダーゼからなる群から選ばれうる。腎がんマーカータンパク質の抗体の調製及び標識の具体的なプロトコルは、当業者であれば容易に選択することができるものである。腎がんマーカー測定においては、測定すべき腎がんマーカータンパク質と当該腎がんマーカータンパク質の抗体とが免疫複合体を形成しうる条件のもと、採血試料を抗体に接触させることによって行われる。イムノアッセイのより具体的なプロトコルは、当業者であれば容易に選択することができるものである。プロトコルの一例を挙げると、以下の通りである。基板上又はウェル内壁に、キャプチャー抗体を吸着などにより固相化する。キャプチャー抗体としては、マーカータンパク質において、上記のマーカータンパク質抗体、又はその標識体とは異なるエピトープを認識する、マーカータンパク質のポリクローナル抗体又はモノクローナル抗体が好ましく用いられる。固相化に用いるキャプチャー抗体溶液の濃度は使用する当業者が適宜決定するものとする。例えば、0.1~20μg/mL、好ましくは1~10μg/mLの範囲で決定することができる。一例として、5μg/mLとすることができる。固相化されたキャプチャー抗体に採血試料を加え、キャプチャー抗体と採血試料中のマーカータンパク質とが免疫複合体を形成しうる条件に供する。採血試料は、必要に応じて適宜希釈しておくとよい。採血試料の希釈倍率は使用する当業者が適宜決定するものとする。この希釈倍率の上限は特に限定されないが、例えば、1倍~100倍程度の範囲で決定することができる。一例として、10倍とすることができる。基板又はウェルを洗浄し、その後、上記の標識マーカータンパク質抗体を加え、キャプチャー抗体に結合した採血試料由来のマーカータンパク質と、標識マーカータンパク質抗体とが免疫複合体を形成しうる条件に供する。加えられる標識マーカータンパク質抗体の濃度は、当業者が適宜決定するものとする。例えば、0.05~5μg/mL、好ましくは0.1~2μg/mLの範囲で決定することができる。一例として、0.5μg/mLとすることができる。さらに基板又はウェルを洗浄し、マーカータンパク質に結合した標識マーカータンパク質抗体に由来するシグナルを検出する。例えば、抗体が蛍光化合物で標識されている場合は、その標識に由来する蛍光の量を測定することができる。また、抗体が酵素タンパク質で標識されている場合には、酵素タンパク質に対する基質を転化し分解された化合物の化学発色に由来するシグナルを検出することによって測定することができる。あるいは、基板又はウェルを洗浄した後に非標識マーカータンパク質抗体を加え、その後さらに標識された二次抗体を加え、同様にシグナルを検出してもよい。この場合、標識二次抗体によって非標識マーカータンパク質抗体が特異的に認識されることで、間接的にマーカータンパク質を特異的に検出することができる。[4.採血試料中腎がんマーカー検出キット]本発明は、標識されたα-エノラーゼ抗体を含む腎がんマーカー検出キットを提供する。標識されたα-エノラーゼ抗体は、蛍光化合物及び酵素からなる群から選ばれる物質によってα-エノラーゼ抗体が標識されたものである。酵素としては、例えば、ペルオキシダーゼ、アルカリフォスファターゼ及びβ-ガラクトシダーゼ等が挙げられる。本発明の腎がんマーカー検出キットは、上述の腎がんマーカー分析を行うために用いることができる。標識されたα-エノラーゼ抗体は、上述の濃度で調製された溶液として提供されてよい。腎がんマーカー検出キットには、更なるアイテムとして、上述のポリクローナル抗α-エノラーゼ抗体及びモノクローナル抗α-エノラーゼ抗体からなる群から選ばれるキャプチャー抗体が含まれてよい。キャプチャー抗体は、上述の濃度で調製された溶液として提供されてもよいし、基板表面又はウェル内壁に固相化された状態で提供されてよい。以下に実施例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の実施例に制限されるものではない。[実施例1:ELISA系の構築]まず、腎がん組織での濃度が増加していることが分かっている8種の蛋白質、カルネキシン、CNDPジペプチダーゼ2、ガレクチン-1、ガレクチン-3、レクチンマンノース-バインディング2、トリオースリン酸イソメラーゼ、及びMHCクラスI抗原Aについて、ELISA測定系を準備した。このうち、ガレクチン-1、ガレクチン-3については、表1に記載のキャプチャー抗体、検出抗体、及び検出試薬を用いて、測定系の構築を行った。検出抗体は、表中の標識タンパク質標識用タンパク質によって標識して用いた。96ウェルプレートMaxisorp社製の各ウェルにキャプチャー抗体溶液5μgmlを添加して抗体を固相化した。キャプチャー抗体の固相化にはIMMUNOTEKELISAConstructionSystemZeptoMetrixBuffaloNYを用いた。その他の蛋白質については、表2に示すリコンビナント蛋白質、キャプチャー抗体、検出用抗体、及び酵素標識二次抗体を用いて、測定系の構築を行った。なお、α-エノラーゼに関しては、検出用抗体はペルオキシダーゼ酵素を標識して用いた。構築したそれぞれのELISA測定系の検量線測定範囲、検出限界、測定時の試料希釈率、及び添加回収実験における回収率を表3に示した。回収率が±20以内となっていることから、正しく測定が行われていることが示された。[実施例2]健常者51人と腎がん患者15人とから提供された血漿を用いて、血中濃度の測定、及び、健常者腎がん患者間での血中濃度比較を行った。健常者及び腎がん患者の男女比、平均年齢、年齢範囲、腎がんのpT分類や遠隔転移の有無、及び腫瘍位置右腎又は左腎について、表4に示す。図1Aにガレクチン-1、図1Bにガレクチン-3、図1Cにα-エノラーゼ、図1Dにカルネキシン、図2EにCNDPジペプチダーゼ2、図2Fにレクチンマンノース-バインディング2、図2Gにトリオースリン酸イソメラーゼ、図2HMHCクラスI抗原Aについて、それぞれ血中濃度を健常者と腎がん患者との間で比較したグラフを示す。各群Control及びRCCにおいて、箱で示された範囲は、全検体のうち濃度順位が25~75に当たる検体の濃度分布範囲四分位範囲を表し、箱の上下に示す横線は、箱の上端及び下端から四分位範囲の1.5倍までの範囲内にあるサンプルのそれぞれ最大値及び最小値を表し、箱中の横棒は濃度の中央値を表す。上記8種類の蛋白質について、健常者と腎がん患者との血中濃度をMannWhitneytestにより統計学的に比較した。結果、ガレクチン-1、ガレクチン-3、α-エノラーゼ、カルネキシン、及びレクチンマンノース-バインディング2においてP値が005以下となり、健常者と腎がん患者との間で血中濃度に有意な差があることがわかった。しかし、カルネキシン及びレクチンマンノースバインディング2は、腎がん患者の第3四分位点よりも高い濃度の健常者が多数存在することから分かるように、特異度が低く偽陽性を多く検出するものである。そのため、カルネキシン及びレクチンマンノースバインディング2は、マーカーとしての有用性は低いと考えられる。また、CNDPジペプチダーゼ2、トリオースリン酸イソメラーゼ、及びMHCクラスI抗原Aについては、健常者と腎がん患者との間で血中濃度に有意な差は無かった。また、ガレクチン-1、ガレクチン-3及びα-エノラーゼのマーカーとしての有用性を調べるために、上記測定データを用いてROC曲線を作成した図3。表5に、ガレクチン-1、ガレクチン-3、及びα-エノラーゼに関する血中濃度の中央値、四分位範囲、及びAUC等の値を示す。いずれの蛋白質についても良好なROC曲線が作成された。ガレクチン-1及びガレクチン-3に関しては、いずれもAUCROC曲線下面積が07を越え、マーカーとしての性能が特に良いことが分かった。特に、ガレクチン-3は、図3に示されるように特異度Specificityが80以上の条件下で検出率感度:Sensitivityが60を超えている。つまり、偽陽性が少ない条件下で優れた検出感度を達成している。このため、本発明のマーカー蛋白質の中でもガレクチン-3は早期発見のためのマーカーとして最も有用である。また、ガレクチン-1及びα-エノラーゼについても、特異度80の条件下で検出感度が50前後を示していることから、早期発見のためのマーカーとして有用である。なお、エノラーゼについてはファミリー蛋白質として、β-エノラーゼ及びγ-エノラーゼの存在が知られているため、それぞれのファミリータンパク質について、α-エノラーゼELISA測定系を用いた交差性試験を行った。その結果、β-エノラーゼ及びγ-エノラーゼそれぞれとの交差性は000及び141であった。従って、他のファミリー蛋白質がα-エノラーゼの測定結果に与える影響はほとんどないことが確認された。[実施例2]蛋白質を正確性Accuracyの高いマーカーとして用いるためには、感度特異度ともに高い値を示す閾値を設定する必要がある。そこで、実施例1のROC曲線を用いてYoudenIndexの値が最大となる濃度を求めた。結果、ガレクチン-1で484ngmL、ガレクチン-3で184ngmL、α-エノラーゼで122ngmLの濃度が導出された。これら濃度においては、ガレクチン-1の感度は533、特異度は824であり、ガレクチン-3の感度は600、特異度は922であり、α-エノラーゼの感度は467、特異度は882であった。図4A~Cに、これらの3種の蛋白質の中から任意に2種を組み合わせた場合の、腎がん患者RCC及び健常者Controlそれぞれにおける蛋白質濃度の散布図を描画した。図中、上記で設定した閾値を破線で示した。2種共に設定した閾値を上回る症例を陽性とすると、ガレクチン-1とガレクチン-3とを組み合わせた場合の特異度が980、感度が467であり図4A、ガレクチン-1とα-エノラーゼとを組み合わせた場合の特異度が961、感度が400であり図4B、ガレクチン-3とα-エノラーゼとを組み合わせた場合の特異度が980、感度が400であった図4C。このようにマーカーを組み合わせて用いた場合、単独で用いた場合に比べて特異度が向上するすなわち偽陽性が少なくなることが分かった。なお、マーカーを積集合で組み合わせる場合、必然的に感度は低下するものであるが、ガレクチン-1とガレクチン-3とを組み合わせた場合は、感度の低下が他の場合に比べて小さく抑えられている点で特に好ましい。[実施例3]腎がん患者から、術前、術後4週、及び術後12週にそれぞれ採取した血液から調製された血漿サンプルを用いて、3種の蛋白質ガレクチン-1、ガレクチン-3及びα-エノラーゼの手術前後における血中濃度の変化を調べた。その結果、α-エノラーゼについては、術前に高い血中濃度を示していた患者の多くで、術後に血中濃度が低下していることが分かった。手術前後におけるα-エノラーゼの血中濃度変化を図5に示す。実施例1の閾値を用いた場合に術前で陽性であった患者7例中、5例の患者が術後4週にα-エノラーゼの血中濃度が陰性値にまで下がっていた。1例は術後4週のサンプルがないため除外した。残りの1例についても、閾値以下ではないものの、ほとんど陰性値に近い値まで下がっていることがわかった。以上より、血中α-エノラーゼ濃度が体内のがんの存在量の指標となることが分かった。従って、α-エノラーゼは、腎がんの治療後における再発の指標、又は治療中における治療効果の評価の指標として利用可能なマーカーであると考えられる。