PDEをコードする核酸配列の少なくとも部分に対するアンチセンスオリゴヌクレオチド化合物であって、前記化合物が前記PDEの発現を阻害するために有効である、前記アンチセンスオリゴヌクレオチド化合物。SeqIDNo3;SeqIDNo4;SeqIDNo7;SeqIDNo15;SeqIDNo17;SeqIDNo19;SeqIDNo20;SeqIDNo25;SeqIDNo27;SeqIDNo35;SeqIDNo36;SeqIDNo37;SeqIDNo41;SeqIDNo42;SeqIDNo43;SeqIDNo45;SeqIDNo51;SeqIDNo55;SeqIDNo58;SeqIDNo64;SeqIDNo72;SeqIDNo73;SeqIDNo74;SeqIDNo81;SeqIDNo86;SeqIDNo131;SeqIDNo132;SeqIDNo139;SeqIDNo140;SeqIDNo145;SeqIDNo150;SeqIDNo152;SeqIDNo153;SeqIDNo154;SeqIDNo155;およびSeqIDNo156からなる群から選択される、請求項1に記載の化合物。cAMPの減少と関連する疾患を有する被検体を治療するための、請求項1に記載のオリゴヌクレオチド化合物を薬学的に許容可能なキャリアと共に含む組成物。PDE関連疾患を治療するための、請求項3に記載の組成物。炎症性疾患を治療するための、請求項4に記載の組成物。炎症性呼吸器疾患を治療するための、請求項5に記載の組成物。PDEアイソタイプ;サイトカイン;ケモカイン;炎症性メディエーター;インターロイキン;TNFα;およびマトリクスメタロプロテイナーゼからなる群から選択される異なる炎症性タンパク質をコードする少なくとも1つの遺伝子の阻害をさらに示す、請求項3に記載の組成物。治療的有効量の請求項3に記載の組成物をcAMPの減少と関連した疾患を有する被検体に投与することを含む、前記被検体を治療する方法。疾患がPDE関連疾患である、請求項8に記載の方法。薬学的に許容可能なキャリアおよびそれぞれが標的PDEの発現を阻害することができる少なくとも2種類のアンチセンスオリゴヌクレオチド化合物を含む、cAMPレベルの減少と関連した疾患を治療するための医薬組成物であって、各オリゴヌクレオチドは、異なる標的PDEをコードする核酸配列の少なくとも部分に対するものであり、その標的PDEの20未満の阻害を示す濃度で存在し、そして組み合わせることにより20以上の、そして少なくとも一方の標的PDE阻害の少なくとも2倍の阻害を示す、前記医薬組成物。組み合わせにより、1以上の標的PDEの阻害が示される、請求項10に記載の組成物。組み合わせにより、その他のPDEアイソタイプ;サイトカイン;ケモカイン;炎症性メディエーター;インターロイキン;TNFα;およびマトリクスメタロプロテイナーゼからなる群から選択されるその他の炎症性遺伝子の阻害が示される、請求項10に記載の組成物。オリゴヌクレオチド化合物が、PDE3A、PDE3B、PDE4A、PDE4B、PDE4D、PDE7AおよびPDE7Bからなる群から選択されるPDEをコードする核酸に対するものである、請求項10に記載の医薬組成物。PDE7Aをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物およびPDE3Aをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物を含む、請求項10に記載の医薬組成物。PDE7Aオリゴヌクレオチド化合物が、SeqIDNo3;SeqIDNo4;SeqIDNo7;SeqIDNo15;SeqIDNo17;SeqIDNo19;SeqIDNo20;SeqIDNo25;SeqIDNo27からなる群から選択され、そしてPDE3Aオリゴヌクレオチド化合物が、SeqIDNo35;SeqIDNo36;SeqIDNo37;SeqIDNo41;SeqIDNo42;SeqIDNo43;SeqIDNo45からなる群から選択される、請求項14に記載の医薬組成物。SeqIDNo3;SeqIDNo4;SeqIDNo7;SeqIDNo15;SeqIDNo17;SeqIDNo19;SeqIDNo20;SeqIDNo25;SeqIDNo27からなる群から選択されるPDE7Aをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物、およびSeqIDNo51;SeqIDNo55;SeqIDNo58からなる群から選択されるPDE3Bをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物を含む、請求項10に記載の医薬組成物。SeqIDNo3;SeqIDNo4;SeqIDNo7;SeqIDNo15;SeqIDNo17;SeqIDNo19;SeqIDNo20;SeqIDNo25;SeqIDNo27からなる群から選択されるPDE7Aをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物、およびSeqIDNo64;SeqIDNo72;SeqIDNo73;SeqIDNo74;SeqIDNo145;SeqIDNo150;SeqIDNo152からなる群から選択されるPDE4Aをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物を含む、請求項10に記載の医薬組成物。SeqIDNo3;SeqIDNo4;SeqIDNo7;SeqIDNo15;SeqIDNo17;SeqIDNo19;SeqIDNo20;SeqIDNo25;SeqIDNo27からなる群から選択されるPDE7Aをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物、およびSeqIDNo81;SeqIDNo86;SeqIDNo153;SeqIDNo154;SeqIDNo155;およびSeqIDNo156からなる群から選択されるPDE4Bをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物を含む、請求項10に記載の医薬組成物。SeqIDNo3;SeqIDNo4;SeqIDNo7;SeqIDNo15;SeqIDNo17;SeqIDNo19;SeqIDNo20;SeqIDNo25;SeqIDNo27からなる群から選択されるPDE7Aをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物、およびSeqIDNo131;SeqIDNo132;SeqIDNo139;SeqIDNo140からなる群から選択されるPDE4Dをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物を含む、請求項10に記載の医薬組成物。SeqIDNo35;SeqIDNo36;SeqIDNo37;SeqIDNo41;SeqIDNo42;SeqIDNo43;SeqIDNo45からなる群から選択されるPDE3Aをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物、およびSeqIDNo51;SeqIDNo55;SeqIDNo58からなる群から選択されるPDE3Bをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物を含む、請求項10に記載の医薬組成物。SeqIDNo35;SeqIDNo36;SeqIDNo37;SeqIDNo41;SeqIDNo42;SeqIDNo43;SeqIDNo45からなる群から選択されるPDE3Aをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物、およびSeqIDNo64;SeqIDNo72;SeqIDNo73;SeqIDNo74;SeqIDNo145;SeqIDNo150;SeqIDNo152からなる群から選択されるPDE4Aをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物を含む、請求項10に記載の医薬組成物。SeqIDNo35;SeqIDNo36;SeqIDNo37;SeqIDNo41;SeqIDNo42;SeqIDNo43;SeqIDNo45からなる群から選択されるPDE3Aをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物、およびSeqIDNo81;SeqIDNo86;SeqIDNo153;SeqIDNo154;SeqIDNo155;およびSeqIDNo156からなる群から選択されるPDE4Bをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物を含む、請求項10に記載の医薬組成物。SeqIDNo35;SeqIDNo36;SeqIDNo37;SeqIDNo41;SeqIDNo42;SeqIDNo43;SeqIDNo45からなる群から選択されるPDE3Aをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物、およびSeqIDNo131;SeqIDNo132;SeqIDNo139;SeqIDNo140からなる群から選択されるPDE4Dをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物を含む、請求項10に記載の医薬組成物。SeqIDNo51;SeqIDNo55;SeqIDNo58からなる群から選択されるPDE3Bをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物、およびSeqIDNo64;SeqIDNo72;SeqIDNo73;SeqIDNo74;SeqIDNo145;SeqIDNo150;SeqIDNo152からなる群から選択されるPDE4Aをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物を含む、請求項10に記載の医薬組成物。SeqIDNo51;SeqIDNo55;SeqIDNo58からなる群から選択されるPDE3Bをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物、およびSeqIDNo81;SeqIDNo86;SeqIDNo153;SeqIDNo154;SeqIDNo155;およびSeqIDNo156からなる群から選択されるPDE4Bをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物を含む、請求項10に記載の医薬組成物。SeqIDNo51;SeqIDNo55;SeqIDNo58からなる群から選択されるPDE3Bをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物、およびSeqIDNo131;SeqIDNo132;SeqIDNo139;SeqIDNo140からなる群から選択されるPDE4Dをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物を含む、請求項10に記載の医薬組成物。SeqIDNo64;SeqIDNo72;SeqIDNo73;SeqIDNo74;SeqIDNo145;SeqIDNo150;SeqIDNo152からなる群から選択されるPDE4Aをコードする核酸配列に対するオリゴヌクレオチド化合物、およびSeqIDNo81;SeqIDNo86;SeqIDNo153;SeqIDNo154;SeqIDNo155;およびSeqIDNo156からなる群から選択されるPDE4Bをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物を含む、請求項10に記載の医薬組成物。SeqIDNo64;SeqIDNo72;SeqIDNo73;SeqIDNo74;SeqIDNo145;SeqIDNo150;SeqIDNo152からなる群から選択されるPDE4Aをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物、およびSeqIDNo131;SeqIDNo132;SeqIDNo139;SeqIDNo140からなる群から選択されるPDE4Dをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物を含む、請求項10に記載の医薬組成物。SeqIDNo81;SeqIDNo86;SeqIDNo153;SeqIDNo154;SeqIDNo155;およびSeqIDNo156からなる群から選択されるPDE4Bをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物、およびSeqIDNo131;SeqIDNo132;SeqIDNo139;SeqIDNo140からなる群から選択されるPDE4Dをコードする核酸に対するオリゴヌクレオチド化合物を含む、請求項10に記載の医薬組成物。オリゴヌクレオチド化合物それぞれがSeqIDNo3;SeqIDNo4;SeqIDNo7;SeqIDNo15;SeqIDNo17;SeqIDNo19;SeqIDNo20;SeqIDNo25;SeqIDNo27;SeqIDNo35;SeqIDNo36;SeqIDNo37;SeqIDNo41;SeqIDNo42;SeqIDNo43;SeqIDNo45;SeqIDNo51;SeqIDNo55;SeqIDNo58;SeqIDNo64;SeqIDNo72;SeqIDNo73;SeqIDNo74;SeqIDNo81;SeqIDNo86;SeqIDNo131;SeqIDNo132;SeqIDNo139;SeqIDNo140;SeqIDNo145;SeqIDNo150;SeqIDNo152;SeqIDNo153;SeqIDNo154;SeqIDNo155;およびSeqIDNo156からなる群から選択される配列を有する、請求項10に記載の医薬組成物。被検体に対して少なくとも2種のアンチセンスオリゴヌクレオチド化合物を投与することを含む、cAMPの減少と関連する疾患を治療する方法であって、各オリゴヌクレオチドは、異なる標的PDEをコードする核酸配列の少なくとも部分に対するものであり、標的PDEの発現を阻害することができ、その標的PDEの20未満の阻害を示す濃度で存在し、そして組み合わせることにより20以上の、そして少なくとも一方の標的PDE阻害の少なくとも2倍の阻害を示す、前記方法。疾患がPDE関連疾患である、請求項31に記載の方法。請求項10に記載の医薬組成物の、炎症性呼吸器疾患の治療および/または予防のための医薬の製造のための使用。請求項10に記載の組成物を含む、全身用製剤および局所用製剤からなる群から選択される製剤。経口製剤、口内製剤、肺内製剤、直腸製剤、子宮内製剤、腫瘍内製剤、頭蓋内製剤、鼻内製剤、筋肉内製剤、皮下製剤、血管内製剤、クモ膜下製剤、吸入可能用製剤、経皮製剤、皮内製剤、腔内製剤、植え込み用製剤、イオン泳動製剤、眼用製剤、膣製剤、関節内製剤、耳内製剤、静脈内製剤、筋肉内製剤、腺内製剤、器官内製剤、リンパ管内製剤、植え込み用製剤、徐放性製剤、および腸溶性コーティング製剤からなる群から選択される、請求項34に記載の製剤。キャリアが固体キャリアおよび液体キャリアからなる群から選択され、経口製剤である、請求項35に記載の製剤。一定量のキャリアおよび標的PDE核酸に対して組成物を到達させることができるオリゴヌクレオチド化合物を含む請求項10に記載の組成物を被検体に投与することを含む、標的ポリヌクレオチドに対して医薬組成物を送達するためのinvivo方法。オリゴヌクレオチド化合物が、アンチセンスオリゴヌクレオチド、修飾アンチセンスオリゴヌクレオチド、siRNAおよびリボザイムから選択される、請求項10に記載の組成物。局所投与用である、請求項34に記載の製剤。被検体におけるcAMPの減少と関連する疾患を治療するために有効なアンチセンスオリゴヌクレオチド組成物を内部に含有するパッケージ材料を含む製品であって、前記組成物は薬学的に許容可能なキャリアおよびPDE遺伝子を阻害するために有効なアンチセンスオリゴヌクレオチド化合物を含み、前記オリゴヌクレオチド化合物はその遺伝子に対して少なくとも50相補的であり、前記パッケージ材料は組成物が前記疾患を治療するために有用であることを示唆する標識を含む、前記製品。被検体におけるcAMPの減少と関連する疾患を治療するために有効なアンチセンスオリゴヌクレオチド組成物を内部に含有するパッケージ材料を含む製品であって、前記組成物が薬学的に許容可能なキャリアおよび少なくとも2種のアンチセンスオリゴヌクレオチド化合物の組み合わせを含み、各アンチセンスオリゴヌクレオチド化合物は、異なるPDE標的遺伝子を下方制御することができ、アンチセンスオリゴヌクレオチド化合物がその標的遺伝子の20未満の阻害を示す濃度で存在し、そして組み合わせることにより少なくとも1つの標的遺伝子の阻害の2倍有効であり、製品のパッケージ材料は組成物を使用して前記疾患を治療することができることを示唆する標識を含む、前記製品。前記標識が、組成物を使用してPDE関連疾患を治療することを示唆する、請求項40に記載の製品。前記標識が、組成物を使用してPDE関連疾患を治療することを示唆する、請求項41に記載の製品。前記化合物の少なくとも部分が、RNAとハイブリダイズして、オリゴヌクレオチドRNA二重鎖を形成する、請求項1に記載の化合物。オリゴヌクレオチド、アンチセンスオリゴヌクレオチド、DNAオリゴヌクレオチド、RNAオリゴヌクレオチド、RNAにハイブリダイズしてオリゴヌクレオチドRNA二重鎖を形成することができる前記RNAオリゴヌクレオチドの少なくとも部分を有するRNAオリゴヌクレオチド、またはキメラオリゴヌクレオチドである、請求項1に記載の化合物。実施例1本実施例は、PDEアイソタイプの細胞分布および組織分布に関する。炎症性呼吸器疾患は、炎症性細胞マクロファージ、リンパ球、好中球および好酸球および組織細胞ほとんどが上皮細胞および平滑筋細胞のあいだでの相互作用を特徴としている。PDE3のアイソタイプPDE3AおよびB、PDE7のアイソタイプPDE7AおよびBおよびPDE4のアイソタイプPDE4A、B、C、およびDの異なる細胞および組織でのmRNA発現を評価した。すべてのPDEアイソタイプ用に使用したプライマーの概要は、表2aに見出すことができる。選択された細胞は、A549肺のアデノカルシノーマ由来の上皮細胞、およびNCIH292粘膜表皮肺ガンであった。初代ヒト細胞における発現は、BSMCヒト気管支平滑筋細胞およびPBMC末梢血単核細胞において評価された。正常ヒト肺を、PDEの発現を特徴付けるためにも使用した。最終的に、正常ヒト脳は対照として含まれた。というのもほとんどのPDEがこの組織内で発現されるからである。図1においても示されるように、異なる細胞および組織は、上述した条件下で評価したすべての細胞および組織において発現されたPDE7AおよびPDE4B以外のPDEの異なるアイソタイプを発現する。PDE4CmRNAは、これらの実験において使用された細胞および組織においては、あまり豊富ではないことが見出された。PDE4Aは、肺および脳において見出されたが、一方PDE4Dは、肺細胞および気道細胞A549およびNCIH292で確認された。PDE7Aは、試験したすべての細胞において存在しており、そしてリンパ球により媒介される疾患において重要であることが最近示唆されたため、われわれは、PDE7Aのサブアイソタイプも評価した。図2においても示されるように、PDE7A1は、試験したすべての細胞においてもっとも発現されているアイソタイプであるようである。PCRは、数回繰り返し、そして各細胞株、初代細胞または組織におけるPDE酵素のアイソタイプの発現の有無を表3aおよびbに示す。PDE3Aが、PBMCおよびA549以外のいくつかの細胞株においては見出されなかったことに注目すべきである。さらに、PDE7BおよびPDE4Cに対応するメッセンジャーが、ここで使用される細胞および組織においてはまれに検出された。実施例2本実施例は、PDE7Aに対する効果的なアンチセンスオリゴヌクレオチドに関するものである。PDE7AmRNAに対するいくつかのアンチセンスオリゴヌクレオチドを設計し、そしてPDE7Aを発現する細胞におけるそれらの効率について評価した。表1aには、使用された配列のリストが含まれる。すべての実験は、オリゴヌクレオチド濃度を徐々に増加させて行い、そして効率を処置細胞におけるGAPDH密度に対するPDE7AmRNA密度の比を、非処置細胞におけるものと比較することにより、評価した。Top1702SeqIDNo3、Top1706SeqIDNo7、Top1703SeqIDNo4、Top1701SeqIDNo2、およびTop1707SeqIDNo8が、Eol1細胞におけるPDE7AmRNAの発現を阻害する際に有効であることが見出されたことは、図3において注目されるべきである。。さらに、Top1702SeqIDNo3、Top1703SeqIDNo4、Top1706SeqIDNo7、およびTop1707SeqIDNo8は、U937細胞においてPDE7AmRNAを阻害した。図4において、いくつかのPDE7Aアンチセンスオリゴヌクレオチドは、Jurkat細胞において、10~20μモルの濃度でPDE7AmRNAを60以上阻害することを示したTop1702SeqIDNo3、Top1703SeqIDNo4、およびTop1706SeqIDNo7。オリゴヌクレオチドTop1707SeqIDNo8およびTop1726SeqIDNo23は、研究した条件下では、実際には有効ではなかった。Hut78細胞においては、オリゴヌクレオチドTop1703SeqIDNo4は、10μモルの濃度でその有効性を維持していたが、一方Top1706SeqIDNo7はそれほど有効ではなく、そしてTop1702SeqIDNo3は有効なものではなかった。BSMCおよびA549細胞においては、Top1702SeqIDNo3、Top1703SeqIDNo4、およびTop1706BSMCのみが示される、SeqIDNo7は、図5に示されるようにPDE7AのmRNA発現を下方制御する際に、すべて有効である。さらに、これらのPDE7Aアンチセンスを、ヒトPBMCにおいて評価した。結果から、アンチセンスのなかでも、Top1706SeqIDNo7は、その特異的なメッセンジャーを40阻害する際に有効であることが示された表4a。報告された結果は、標的とアンチセンスオリゴヌクレオチドの一次配列特異的であり、そして間接的または非特異的作用のためにはそうではなかった。全体的な結果から、本発明のPDE7Aに対するアンチセンスストラテジーが、標的化mRNAの顕著な阻害をもたらすことに成功することが示された。設計されたオリゴの中でも、Top1703SeqIDNo4、Top1706SeqIDNo7、およびTop1702SeqIDNo3は、研究されたすべての細胞株および初代細胞において、PDE7Aに関するmRNA発現を阻害するためにもっとも有効であるようである。これらの結果から、これらのアンチセンスオリゴヌクレオチドを本発明の治療ベースの戦略において使用することができることが示唆される。実施例3本実施例は、PDE3AおよびPDE3Bに対する効果的なアンチセンスオリゴヌクレオチドに関する。1セットのアンチセンスオリゴヌクレオチドを設計し、そしていくつかの細胞型においてmRNAを減少させる能力について試験した。表1b~cには、使用された配列のリストが含まれる。いくつかのアンチセンスオリゴヌクレオチドは、A549細胞においておよび/またはU937細胞において、PDE3AmRNAレベルを減少させる際に有効なものであることが見いだされた。これらのアンチセンスオリゴヌクレオチドには、図6、表4a上および4b下において示される様に、Top1301SeqIDNo35、Top1302SeqIDNo36、Top1303SeqIDNo37、Top1307SeqIDNo41、Top1308SeqIDNo42、TOP1309SeqIDNo43、Top1311SeqIDNo45、およびTop1312SeqIDNo46、あまり効果的ではないがが含まれる。初代気管支平滑筋細胞において、同一のアンチセンスオリゴヌクレオチドもまた、図7において示される様に、PDE3AmRNA発現を減少させる際に有効であった。PBMCを用いてPDE3Bを使用して行われた実験で、いくつかのアンチセンスが、PDE3BmRNAを特異的にブロックする際に有効であることが示された。表4aに示される様に、これらのアンチセンス中でも、Top1357SeqIDNo55は、75の阻害を示したが、一方Top1351SeqIDNo49は4しか示さなかった。あわせると、これらの結果から、PDE3A阻害および/またはPDE3B阻害に対する本発明のアンチセンスストラテジーは有効であることが示唆される。いくつかのその他のアンチセンスオリゴヌクレオチド、Top1304SeqIDNo38、Top1305SeqIDNo39、Top1313SeqIDNo47、Top1351SeqIDNo49は、顕著なmRNA阻害を示さなかった。このことから、ここで報告されたアンチセンスブロック効率は、標的およいbアンチセンスオリゴヌクレオチド一次配列特異的なものであるが、間接的アンチセンス作用のためではないことが示唆される。実施例4本実施例は、PDE4に対する有効なアンチセンスオリゴヌクレオチドに関する。PDE4mRNAに対するいくつかのアンチセンスオリゴヌクレオチドを設計し、そしてPDE4を発現する細胞内でのそれらの有効性について評価した。表1d~fには、利用された配列のリストが含まれる。全ての実験を、オリゴヌクレオチドの濃度を徐々に増加させて行い、そして効率を処置細胞におけるHPRTヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ、内部対照としての密度に対するPDE4A、PDE4B、PDE4DのmRNA密度の比を、非処置細胞のものと比較するリアルタイムPCRによりにより評価した表2cおよびd。いくつかのアンチセンスオリゴヌクレオチドは、PBMC中でPDE4mRNAレベルを減少させる際に有効であることが見いだされた。これらのアンチセンスオリゴヌクレオチドには、Top1411PDE4A、SeqIDNo72、Top1437PDE4B、SeqIDNo86、およびTop1498PDE4D、SeqIDNo140が含まれ、それぞれ43、53、および56であった表4a。あわせると、これらの結果から、PDE4阻害に対する本発明のアンチセンスストラテジーは有効であることが示唆される。いくつかのその他のアンチセンスオリゴヌクレオチド、Top1406PDE4A、SeqIDNo67、Top1430PDE4B、SeqIDNo79、Top1495PDE4D、SeqIDNo137は、顕著なmRNA阻害を示さなかった。このことから、本明細書中で報告されたアンチセンスブロック効率が標的およびアンチセンスオリゴヌクレオチド一次配列特異的なものであり、間接なアンチセンス作用のためではないことが示唆される。実施例5本実施例は、単一のPDEアイソタイプの阻害の、異なるPDEのmRNA産生に対する作用に関する。この実験は、A549細胞においてそしてPBMCにおいて行われた。表4bに示される様に、いくつかのアンチセンスが、それらの特異的標的を阻害することが見いだされただけでなく、その他のPDEに対応するmRNAを下方制御することができた。PDE3AアンチセンスTop1308SeqIDNo42は、A549細胞株中でその特異的mRNAの阻害60を示しただけでなく、PDE3B53、PDE4Aの発現63、PDE4Dの発現26、およびPDE7Aの発現44を下方制御した。同一の実験をPBMCにおいて行い、そしてその結果から、PDE3BアンチセンスTop1357SeqIDNo55が、その標的を特異的に阻害する能力を有し62、PDE4A、PDE4B、PDE4Dおよび、PDE7Aに対応するメッセンジャーを、それぞれ76、43、65、および38下方制御することができたことが示された表4b。この複数遺伝子ノックダウンプロセスは、PBMC中で使用されたPDE4Aに対するアンチセンスTop1413SeqIDNo74、PDE4Bに対するアンチセンスTop1437SeqIDNo86、PDE4Dに対するアンチセンスTop1490SeqIDNo132、PDE7Aに対するアンチセンスTop1706SeqIDNo7により見いだされた表4b。観察された阻害は、以下の理由により特異的であった:本研究において使用された全てのTopアンチセンスオリゴヌクレオチドは、研究された他のPDEヌクレオチド配列と、何もホモロジーを有さなかった。さらに、本明細書中で使用した効果的なアンチセンスは、研究された全てのPDEに影響を与えた訳ではなかった。例えば、PDE3B、PDE4AおよびPDE7Aに対して強力であるTop1308SeqIDNo42は、PDE4Dに対してほとんど有効ではなく、PDE4Bに対しては何も作用を有さなかった。さらに、本研究において使用されたいくつかのその他のアンチセンスは、それらの特異的標的に対して活性であることが見いだされたわけでも、その他のPDEに対して活性であることが見いだされたわけでもないTop1312、SeqIDNo46、Top1404、SeqIDNo65表4b。これらの結果から、PDEアイソタイプmRNAをアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いて阻害することは、その他のPDEの産生に影響を与え、本明細書中で記載される単一オリゴヌクレオチド誘導性複数遺伝子ノックダウンプロセスの原因となることが示される。実施例6本実施例は、単一のPDEのアイソタイプの阻害の、サイトカインおよび酵素mRNAの産生に対する作用に関する。サイトカインおよびケモカインは、細胞活性および導入において重要なメディエーターである。炎症性呼吸器疾患の病態生理において増加しおよび/または役割を果たしていることが示されたメディエーターの中では、インターロイキンIL6、IL7、IL8、IL15およびTNFαである。いくつかの酵素は、組織破壊および/または修復に直接的または間接的に関与している。中でも、これらの酵素は、マトリクスメタロプロテイナーゼ、MMP類MMP1、MMP2、MMP3、MMP12、MMPの組織特異的阻害剤1TIMP1およびシクロオキシゲナーゼcox1である。いくつかの炎症性呼吸器疾患において、MMPのそれらの阻害剤またはTIMPに対する比が増加することが示された。PDE3AまたはPDE7AmRNAの阻害の、ヒト初代平滑筋気管支細胞によるメディエータおよび酵素mRNA産生に対する作用を、評価した。図8に示される様に、PDE3AmRNA産生を減少させる際に有効であったアンチセンスオリゴヌクレオチドTop1301SeqIDNo35、Top1303SeqIDNo37、Top1308SeqIDNo42、Top1311SeqIDNo45またはPDE7AmRNA産生を減少させる際に有効であったアンチセンスオリゴヌクレオチドTop1702SeqIDNo3、Top1703SeqIDNo4、Top1706SeqIDNo7はまた、IL6、IL7、IL15、TNFαについてのmRNAを減少させ、そしてIL8についてのmRNAを低い程度で減少させた。アンチセンスオリゴヌクレオチドはまた、MMP12についてのmRNAに対して阻害作用を有したが、同じ濃度では、MMP1、MMP2、MMP3、TIMP1、およびcox1mRNAに対する作用を何も有さなかった。単一のPDE特異的アンチセンスの、その他のPDEに対する作用は、表4b中に示される。いくつかの特異的PDEアンチセンスTop1308SeqIDNo42;Top1357SeqIDNo55;Top1413SeqIDNo74;Top1437SeqIDNo86;Top1490SeqIDNo132;Top1706SeqIDNo7は、それらの特異的標的を下方制御する際に有効性を有していただけでなく、その他のホスホジエステラーゼに対しても阻害性作用を有している。繰り返すと、観察された阻害は、本研究において使用された全てのTopアンチセンスオリゴヌクレオチドが、研究されたサイトカインまたは酵素のヌクレオチド配列と何ら類似性を有していなかったため、特異的であった。さらに、mRNA産生におけるTopアンチセンスレベルの減少は、配列特異的でありそしてサイトカイン特異的であった。これらの結果から、アンチセンスオリゴヌクレオチドを用いたPDEアイソタイプmRNAの阻害は、メディエータおよび酵素の産生に影響を与えることが示される。実施例7本実施例は、アイソタイプ特異的アンチセンスオリゴヌクレオチドの組み合わせの、PDE3A遺伝子発現およびPDE7A遺伝子発現に対する作用に関する。オリゴヌクレオチドを組み合わせることの、両アイソタイプのPDEともを発現するU937細胞におけるPDE3AmRNA発現およびPDE7AmRNA発現に対する作用を、評価した。これに関して、研究した条件下で、この細胞株において実質的に有効ではなかった濃度で、各オリゴヌクレオチドは別個に使用された10μモル、図9において示される。PDE3AおよびPDE7Aのアンチセンスオリゴヌクレオチドの特定の組み合わせは、いずれか一方のアンチセンスオリゴヌクレオチドのみと比較して、PDE3AmRNA発現およびPDE7AmRNA発現の両方を減少させる際に、顕著に非常に効果的であった。Top1703SeqIDNo4とTop1301SeqIDNo35との組み合わせ、またはTop1706SeqIDNo7とTop1303SeqIDNo37との組み合わせは、PDE3AmRNAおよびPDE7AmRNAの両方の強力な相乗的阻害を示す。さらに、ここで報告された作用は、標的およびアンチセンス一次配列特異的である。というのも、いくつかのその他のTOP1700およびTOP1300オリゴヌクレオチドの組み合わせは、顕著なmRNA阻害作用を有さなかったからである。本発明の組み合わせにおいて使用するための効果的なPDEオリゴヌクレオチドアンチセンス化合物は、標的PDE遺伝子の発現を阻害する能力を有するものとして本明細書中に記載されており、これは、別のオリゴヌクレオチド化合物と両方ともがそれらの標的PDE遺伝子の20未満の阻害を示す濃度で組み合わせた場合、少なくとも一つの標的PDE遺伝子についての20以上の阻害を引き起こし、そして一つのオリゴヌクレオチド化合物のみにより示される阻害の程度の少なくとも二倍の阻害を引き起こす。この組み合わせは、PDE核酸標的並びにその他のPDEおよび炎症性メディエーターをコードする核酸の両方の阻害を示すことができる。これらの結果から、2種類の異なる標的遺伝子、例えばPDE7AとPDE3A、のヌクレオチド配列に由来する、2種類のアンチセンスオリゴヌクレオチドを組み合わせる特異的複数遺伝子ノックダウン作用が示される。オリゴヌクレオチドは、単独で使用された場合にはそれらの標的遺伝子に対して何ら作用を有さない濃度で投与されたが、この組み合わせは、標的遺伝子に対する顕著な阻害を誘導した。実施例8本実施例は、PDE3AアンチセンスオリゴヌクレオチドおよびPDE7Aアンチセンスオリゴヌクレオチドの組み合わせの、メディエータおよび酵素のmRNA発現に対する作用に関する。複数遺伝子ノックダウンの、サイトカイン、ケモカインおよび酵素遺伝子についてのmRNAの発現に対する作用の例は、図10に示される。結果は、U937単球細胞株において観察された。研究された濃度では、各アンチセンスオリゴヌクレオチドのみでは、IL10mRNA発現およびMMP8mRNA発現に対して、わずかな阻害作用しか有さないことは注目すべきである。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、単独で使用される場合、PDE4B、MMP1、MMP2、およびTIMP1のmRNA発現に対しては何ら阻害作用を有さない。2種類のアンチセンスオリゴヌクレオチドの組み合わせTop1311SeqIDNo45Top1703SeqIDNo4またはTop1307SeqIDNo41Top1703SeqIDNo4は、単独で利用された各アンチセンスオリゴヌクレオチドの場合と同様の作用を有するIL10mRNAおよびMMP8mRNAに対して穏やかな阻害作用を有し、PDE4B、MMP1、MMP2、およびTIMP1のmRNA発現に対しては何ら作用を有さない。しかしながら、2種類のアンチセンスオリゴヌクレオチドの組み合わせTop1301SeqIDNo35Top1703SeqIDNo4またはTop1303SeqIDNo37Top1706SeqIDNo7は、TIMP1mRNA発現には影響を与えることなく、IL10およびMMP8mRNA発現だけでなく、PDE4B、MMP1およびMMP2mRNA発現も顕著に減少させることにより示される、相乗的な阻害作用を有した。アンチセンスオリゴヌクレオチドの最後の2種類の組み合わせを使用することにより見いだされた複数遺伝子ノックダウンは、いくつかのMMPの酵素活性を阻害する遺伝子であるTIMP1が、影響を受けなかったために選択的であり、そしてハウスキーピング遺伝子GAPDHがこの組み合わせにより影響を受けなかったために特異的である。これらの結果は、実施例5に示される結果と一致しており、そして複数遺伝子ノックダウンがより幅広い抗炎症性作用を有するために強力であることを示す。実施例9本実施例は、機能的アッセイすなわち、TNFα産生の阻害を利用し、ヒトPBMCにおけるPDEアイソタイプに対する2種類の選択したオリゴヌクレオチドを組み合わせることの複数遺伝子ノックダウン作用を示す。サイトカインは、喘息およびCOPDを含む全ての疾患における慢性炎症の組織化において重要な役割を果たしている。TNFαは、いくつかの炎症性疾患において発現される最も重要な前炎症性サイトカインの一つである。TNFαレベルは、COPDを有する患者の誘発唾液中で顕著に増加するKeatingsetalAmJRespirCritCareMed1996153530534。さらに、体重減少を伴うCOPD患者は、循環性細胞からのTNFαの放出の増加を示し、そしてTNFαは、骨格筋細胞のアポトーシスを誘導する可能性があり、その結果として、重症COPDを有する何例かの患者において見られる、特徴的な筋肉疲労消耗および悪液質を引き起こすDeGodoyetalAmJRespirCritCareMed1996153633637。PDE4阻害剤は、細胞内のサイクリックAMPの上昇を介して、炎症性細胞からのサイトカインおよびケモカインの放出の減少を引き起こしたTorphyAmJRespirCritCareMed1998157351370。コルチコステロイドとは対照的に、PDE4阻害剤は、好中球に対して強力な阻害作用を有するAuetalBrJPharmacol199812312601266。このことは、それらがCOPDのための有用な抗炎症性処置である可能性があることを示唆している。PDE4阻害剤Cilomilastが、肺機能を向上させ、そしてCOPDを有する患者における症候を改善するという、予備的な証拠が存在し、そしてこのことは、サイトカイン阻害によるものである可能性があるComptonetalLancet2001358265270。ここで、いくつかの選択されたアンチセンスオリゴヌクレオチドの組み合わせは、それらの特異的PDE標的を阻害するだけではなく、前炎症性サイトカインTNFαの産生の減少を含む、複数遺伝子ノックダウンを引き起したことが、示された。図11は、アンチセンスオリゴヌクレオチドTop1360PDE3B、SeqIDNo58;Top1413PDE4A、SeqIDNo74;Top1437PDE4B、SeqIDNo86;Top1498PDE4D、SeqIDNo140を個別に使用した場合、それらは試験した濃度では、PHA活性化PBMCからのTNFα放出に対して、わずかな最小の作用しか有さないことを示す。しかしながら、組み合わせを調べると、それらはPBMCからのTNFα放出に対して、付加的以上の作用を示す。ミスマッチアンチセンスを個別に使用するか、またはその他のアンチセンスと組み合わせて使用しても、刺激PBMCからのTNFα放出に対して何ら作用を有さなかったため、TNFα放出に対する観察された作用は、特異的であった。TNFαは炎症性疾患および慢性呼吸器疾患における共通の特徴と考えられているため、本発明は、いくつかの炎症性疾患を治療するための幅広い治療用途を提供する。実施例10本実施例は、PDEアイソタイプに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドをinvivoで投与することにより、PDE4A、PDE4B、およびPDE7AについてのmRNAの発現を減少させることができることを示す。本実験において、各アンチセンスオリゴヌクレオチド表5は、点鼻50mgにより投与され、そして肺は16時間後に回収された。標的mRNAの発現は、肺全体から調整されたcDNAに対するリアルタイムPCRにより、調べられた。表5は、各マウス標的mRNAに対して特異的ないくつかのアンチセンスオリゴヌクレオチドを列挙し、それについての測定された阻害活性は、25よりも大きかった。各実験に含まれる対照アンチセンスオリゴヌクレオチドは、異なるmRNA標的の阻害活性を何も示さなかった。このことから、観察されたアンチセンス活性が、標的およびアンチセンスオリゴヌクレオチド配列特異的であることが示唆された。従って、いくつかのPDEmRNAの発現の阻害は、活性なアンチセンスオリゴヌクレオチドの単純な点鼻により、マウスの肺において達成することができた。実施例11本実施例は、2種類のアンチセンスオリゴヌクレオチドの組み合わせを、複数遺伝子ノックダウンをinvivoで誘導するために利用することができることを示す。図12Aは、TOP2437を測定する時点で、PDE4Bに対するマウスアンチセンスオリゴヌクレオチドが、低濃度50mgマウスで使用された場合、PDE4BmRNA発現それ自体に対しては何ら顕著な阻害作用を有さないことを示す。しかしながら、Top2437PDE4Bに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドをTop2713PDE7Aに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドと組み合わせることにより、マウス肺において、40以上のPDE4Bの阻害が引き起こされる。図12Bは、TOP2437およびTOP2713単独は、低濃度で使用される場合に、PDE7AmRNA発現に対してほとんど阻害作用を有さなかったが、両アンチセンスオリゴヌクレオチドの組み合わせは、PDE7AmRNA発現を83阻害したことが示される。結果から、2種類の異なるPDEアイソザイムを標的とする2種類のアンチセンスを組み合わせると、単一のアンチセンス処置の場合と比較して、結果として各標的遺伝子についてより高い阻害、例えば、付加的レベル以上の阻害、が得られることが示される。図12Cは、PDE4BおよびPDE7Aに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドの組み合わせもまた、マウス肺において、PDE4AmRNA発現を減少させることを示す。結果から、各アンチセンスオリゴヌクレオチドがそれ自体何も作用を有さないとしても、組み合わせ処置の後、PDE4AmRNA発現の高い相乗的レベルの阻害が得られたことが示された。これらの結果は、標的PDEアイソタイプの付加的以上の阻害を、これらのアイソタイプに対する2種のアンチセンスオリゴヌクレオチドを組み合わせることにより得ることができるだけでなく、その他のPDEアイソタイプの付加的な阻害もまた、所定のアイソタイプには対していない2種のアンチセンスの組み合わせを用いて処置することにより得ることができることを示す。実施例12本実施例は、特異的PDEアイソタイプに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドが、マウスにおいてLPSにより引き起こされた急性肺炎を部分的に阻害することができることを示す図13。本実施例において、PDE4Bが標的とされた。というのも、以前に、LPS誘導性炎症においてそれが重要であることが示されたためであるMaetalMolPharmacol1999555057;WangetalMolecPharmacol199956170174。さらに、我々の以前の結果により、PDE4B発現がマウスにおけるLPS処置により亢進制御されることが確認されたデータは示さず。標的mRNAの発現が、LPS曝露マウスにおいて阻害されうるかを調べるため、マウスを200mgのTOP2430PDE4Bに特異的または対照アンチセンスオリゴヌクレオチドの点鼻により事前処理し、12時間後にLPS曝露した。図13Aにおいて示される様に、PDE4B発現は、TOP2430の事前処理の後、86減少された。図13Aはまた、肺PDE4A、PDE4DおよびPDE7AmRNA発現もまた、PDE4Bに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドを利用することにより、部分的に阻害されたことを示す。対照的に、PDE3B発現は、PDE4Bの阻害の後、117まで活性化された。本実施例は、別の方法で、invivoでの複数遺伝子ノックダウンの概念をしめす。図13Bは、PDE4B阻害のLPS誘導性急性肺炎に対する作用を示す。結果から、対照マウスと比較した場合、TOP2430によるPDE4Bの阻害により、LPSに曝露されたマウスの肺への細胞の流入が顕著に減少した40の減少、p0013ことが示される。処置マウスにおいては、全細胞の減少が、肺洗浄中に存在する好中球の顕著な減少40の減少、p0016およびマクロファージの顕著な減少50の減少、p0002と関連した。さらに、TOP2430での前処理により、肺洗浄液中のLPS誘導TNFα濃度の顕著な減少26が引き起こされた図13C。結果から、標的PDEmRNAの特異的な阻害は、マウスにおいて、アンチセンスオリゴヌクレオチドの局所的送達により達成することができることが示される。さらに、LPS曝露マウスにおけるPDE4Bの発現の阻害は、細胞の流入の減少を伴う炎症性反応、肺への好中球およびマクロファージの遊走およびTNFα放出の減少に対して、顕著な作用を有している。この作用のメカニズムは、PDE4Bに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドが、結果としていくつかのその他のPDEの下方制御をももたらす場合に生じる複数遺伝子ノックダウンと関連している可能性がある。実施例13本実施例は、タバコの煙に曝露することにより誘導される急性肺炎を阻害するために、特異的PDEB4mRNAを標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドの効率に関するものである図14。図14は、AKRJマウスをタバコの煙の中で呼吸させることの作用を示す。喫煙は、曝露後24時間後まで気管支肺胞洗浄細胞好中球およびマクロファージの顕著な増加を生じ、それは少なくとも48時間持続した図14A。炎症性細胞の流入と同時に、煙への曝露は、肺組織内でのTNFαの発現の増加を誘導した35倍の増加、図14B。マクロファージ、好中球およびTNFαが、喫煙誘導性肺炎およびそれに引き続いて起こる肺気腫の進行において、重要な役割を果たしていることが示されたChurgetalAmJRespirCritCareMed2002166849854;AmJRespirCellMolBiol200227368374。図14Cは、PDE4B阻害のTNFαmRNA発現の喫煙誘導性増加に対する作用を示す。結果から、対照アンチセンスオリゴヌクレオチドにより事前処置したマウスと比較して、TOP2430による20のPDE4Bの阻害により、TNFαの発現が肺組織において21減少することが示された。全体から見て、これらの結果は、PDE4BmRNA発現の特異的阻害を、煙に曝露されたマウスにおいて得ることができ、そしてそれが全肺組織におけるTNFαmRNA発現に対する匹敵する作用を有することを示す。