生物学的試料中のGNA11遺伝子またはGNAQ遺伝子におけるエキソン4活性化変異の存在または非存在を検出する工程であって、それにより、活性化変異が存在する場合に、生物学的試料中のメラニン形成細胞性新生物細胞の存在を検出する、工程を含む、患者由来の生物学的試料中のメラニン形成細胞性新生物細胞を検出する方法。メラニン形成細胞性新生物細胞がブドウ膜黒色腫細胞である、請求項1記載の方法。メラニン形成細胞性新生物細胞が青色母斑細胞である、請求項1記載の方法。配列変異が、GNAQのR183をコードするコドンまたはGNA11のR183をコードするコドンにある、請求項1記載の方法。変異がR183Q置換またはR183C置換である、請求項4記載の方法。変異が、V182をコードするコドンにある、請求項1記載の方法。T175をコードするコドンにおける変異の存在を検出する工程をさらに含む、請求項6記載の方法。検出する工程が、生物学的試料由来の核酸試料における変異の存在または非存在を検出することを含む、請求項1記載の方法。検出する工程が、GNAQ遺伝子またはGNA11遺伝子に選択的にハイブリダイズするプローブと核酸試料とを接触させることと、ハイブリダイズしたプローブの存在を検出し、それにより、配列変異を検出することとを含む、請求項8記載の方法。検出する工程が増幅反応を含む、請求項8記載の方法。GNAQ遺伝子またはGNA11遺伝子のエキソン4標的領域の配列を決定する工程をさらに含む、請求項10記載の方法。検出する工程が、前記遺伝子によりコードされるタンパク質における変異を検出することを含む、請求項1記載の方法。生物学的試料が眼試料または皮膚試料である、請求項1記載の方法。生物学的試料がリンパ節、肺、肝臓、副腎、軟部組織、または骨に由来する、請求項1記載の方法。生物学的試料が、黒色腫を有する患者に由来する、請求項1記載の方法。黒色腫がブドウ膜から発生したものである、請求項15記載の方法。黒色腫が青色母斑から発生したものである、請求項15記載の方法。GNAQ遺伝子またはGNA11遺伝子の209位における活性化変異の存在または非存在を検出する工程をさらに含む、請求項1記載の方法。患者由来の生物学的試料中のGNAQ遺伝子またはGNA11遺伝子のエキソン4における活性化変異を有する細胞の数の変化を検出する工程であって、該活性化変異を有する細胞の数の変化が、治療に対する患者の応答を示す、工程を含む、治療に供された患者における黒色腫の進行をモニタリングする方法。生物学的試料が眼または皮膚に由来する、請求項19記載の方法。生物学的試料が血液、リンパ節、肝臓、肺、副腎、または骨に由来する、請求項19記載の方法。黒色腫がブドウ膜黒色腫である、請求項19記載の方法。黒色腫が悪性青色母斑である、請求項19記載の方法。GNAQアンタゴニストまたはGNA11アンタゴニストと、活性化変異を有する黒色腫細胞とを接触させる工程を含む、GNAQ遺伝子またはGNA11遺伝子のエキソン4における活性化変異を有する黒色腫細胞の増殖を阻害する方法。アンタゴニストが低分子である、請求項24記載の方法。アンタゴニストがプロテインキナーゼC阻害剤である、請求項24記載の方法。アンタゴニストがホスホリパーゼCβの阻害剤である、請求項24記載の方法。アンタゴニストが抗体である、請求項24記載の方法。アンタゴニストがsiRNAである、請求項24記載の方法。黒色腫細胞がブドウ膜黒色腫に由来する、請求項24記載の方法。黒色腫細胞が青色母斑から発生したものである、請求項24記載の方法。エキソン4活性化変異が、R183をコードするコドンにある、請求項24記載の方法。患者に存在する黒色腫に由来する生物学的試料中のGNAQ遺伝子またはGNA11遺伝子のエキソン4における活性化変異の存在または非存在を検出する工程であって、該変異の存在が、阻害剤による処置の候補である黒色腫患者を示す、工程を含む、GNAQ阻害剤またはGNA11阻害剤による処置の候補である黒色腫患者を同定する方法。変異が、R183をコードするコドンにある、請求項33記載の方法。黒色腫がブドウ膜黒色腫である、請求項33記載の方法。黒色腫が悪性青色母斑である、請求項33記載の方法。検出する工程が、前記遺伝子によりコードされるタンパク質における変異を検出することを含む、請求項33記載の方法。GNAQ阻害剤またはGNA11阻害剤を患者に投与する工程をさらに含む、請求項33記載の方法。母斑由来の生物学的試料中のGNAQ遺伝子またはGNA11遺伝子のエキソン4における活性化変異の存在または非存在を検出する工程であって、該変異の存在が、母斑が黒色腫へと進行するリスクの増加を示す、工程を含む、母斑が黒色腫へと進行するリスクを決定する方法。変異が、R183をコードするコドンである、請求項39記載の方法。母斑が青色母斑である、請求項39記載の方法。検出する工程が、前記遺伝子によりコードされるタンパク質における変異を検出することを含む、請求項39記載の方法。黒色腫を有する患者に由来する生物学的試料中のGNAQ遺伝子またはGNA11遺伝子のエキソン4における活性化変異の存在または非存在を検出する工程であって、該変異の存在が、黒色腫が転移するリスクの増加を示す、工程を含む、黒色腫が転移するリスクを決定する方法。黒色腫がブドウ膜黒色腫である、請求項43記載の方法。黒色腫が悪性青色母斑である、請求項43記載の方法。変異が、R183をコードするコドンにある、請求項43記載の方法。発明の詳細な説明序論本発明は、診断および予後予測に使用するための黒色腫細胞および母斑細胞の検出、ならびに黒色腫および母斑の処置のための方法、試薬、およびキットを提供する。本発明は、黒色腫および母斑が、GNAQまたはGNA11における活性化エキソン4変異、即ち、GαサブユニットのGTP加水分解活性の損失または減少をもたらす変異を有するという発見に、一部分、基づく。Gαは、脊椎動物において二つのサブグループ、GnaqおよびGna11を含む広範に発現されているGαqファミリー、ならびにより制限された発現を示すGna14およびGna15のファミリーを形成するヘテロ三量体GTP結合タンパク質のうちの一つのαサブユニットである。Gαqファミリーは、ビスホスホイノシチドbisphosphoinositidePIP2のイノシチド三リン酸IP3およびジアシルグリセロールDAGへの加水分解をもたらすホスホリパーゼCβの刺激を媒介する。IP3は、下流のカルシウム依存性シグナル伝達に通じる、小胞体ERにおける細胞内貯蔵庫からのカルシウムの放出を刺激することができる。それと平行して、DAGは、プロテインキナーゼCPKCを活性化することができ、次いで、両方の経路は、マイトジェン活性化プロテインキナーゼMAPKカスケードに流れ込むことができる。CorbitKCetalMolCellBiol2053925403;SatoMetalAnnRevPharmToxicol46151187を参照のこと。本発明者らは、GNAQまたはGNA11のエキソン4における活性化変異、例えば、GNAQまたはGNA11のR183またはV182のヘテロ接合性の体細胞置換変異が、青色母斑のような母斑およびブドウ膜黒色腫のような黒色腫を含む、いくつかの型のメラニン形成細胞性新生物に存在することを発見した。さらに、いくつかの態様において、GNAQまたはGNA11のエキソン4における2つの活性化変異、例えばV182およびT175におけるものは、ブドウ膜黒色腫などのメラニン形成細胞性新生物に存在し得る。本発明の一つの局面において、GNAQまたはGNA11におけるそのタンパク質を活性化するエキソン4体細胞変異の検出により、母斑細胞および/または黒色腫細胞を検出する能力は、多数の適用のうちの任意のものに有用である。例えば、エキソン4変異検出は、患者における黒色腫またはある型の黒色腫、例えばブドウ膜黒色腫を診断するために、単独で、または他の診断法と組み合わせて使用され得る。それは、Gタンパク質もしくはホスホリパーゼCβ、またはGnaqまたはGna11により調節される経路のその他の下流の成分を標的とする治療薬のような治療薬に対して感受性の特定の黒色腫を同定するためにも使用され得る。いくつかの態様において、エキソン4活性化GNAQまたはGNA11変異の検出は、エキソン4変異を有しない黒色腫よりも転移へ通じる可能性が高い、より侵襲性の黒色腫の予後予測指標として利用され得る。GNAQまたはGNA11におけるエキソン4活性化体細胞変異の検出は、黒色腫処置の効力をモニタリングするためにも使用され得る。例えば、抗黒色腫処置後の、エキソン4変異陽性黒色腫におけるGnaq活性またはGna11活性、例えば、Gα活性、もしくはGα活性に依存性のホスホリパーゼCβなどの活性のレベル、またはエキソン4における配列変異を有するメラニン形成細胞の数を、処置前のレベルと比較することができる。処置後のタンパク質活性、例えば、ホスホリパーゼCβ活性のレベルの減少、または変異型エキソン4を有する黒色腫細胞の数の低下は、処置が有効であることを示す。エキソン4変異について陽性である黒色腫におけるGnaqタンパク質またはGna11タンパク質の活性のレベルおよび/またはエキソン4の体細胞変異を有する細胞の数の変化を、特定の抗黒色腫治療の効力、または観察された予後的成果と統計的に相関させ、それにより、特定のレベル活性またはエキソン4変異の診断的存在を考慮して、統計に基づく予後予測または最も有効な処置の選択を行うことができるような、データベースの開発を可能にすることもできる。GNAQまたはGNA11におけるエキソン4活性化変異を有する細胞の検出は、例えば、経時的に癌の進行をモニタリングするため、患者における黒色腫細胞の数または位置をモニタリングするために有用であり得る。GNAQまたはGNA11におけるエキソン4活性化変異の存在は、GNAQタンパク質および/またはGNA11タンパク質を標的とする治療剤に対して応答性である可能性の高い黒色腫を示すこともできる。従って、本発明は、Gαアンタゴニスト、例えば、抗体、ペプチド、LトレオジヒドロスフィンゴシンPKC特異的阻害剤またはその他の低分子阻害剤のような低分子阻害剤、およびGNAQもしくはGNA11の核酸阻害剤、例えば、GNA11siRNA阻害剤もしくはGNA11GNAQsiRNA阻害剤、またはホスホリパーゼCβの阻害剤またはGnaqもしくはGna11により調節される下流経路の阻害剤を投与することにより、GNAQまたはGNA11のエキソン4における活性化変異を有するメラニン形成細胞性新生物、例えば、ブドウ膜黒色腫または青色母斑を処置する方法も提供する。そのようなメラニン形成細胞性新生物は、本明細書に記載された方法を使用して、GNAQまたはGNA11におけるエキソン4活性化変異の存在について分析することにより同定され得る。母斑におけるエキソン4活性化変異の存在は、しばしば、黒色腫への進行のリスクを有する母斑、例えば、通常の型の青色母斑および太田母斑を示す。従って、患者由来の母斑を、本明細書に記載された方法を使用して、活性化変異の存在について評価することができる。定義GNAQまたはGnaqという用語は、グアニンヌクレオチド結合タンパク質Gタンパク質のアルファサブユニットをさす。その用語には、Gnaqの核酸およびポリペプチドの多形性異型、対立遺伝子、変異体、および断片が包含される。Gnaq配列は、当技術分野において周知である。ヒトGnaq配列の例は、NCBIヌクレオチドデータベースのリファレンスシーケンスreferencesequencesNM002072ヌクレオチド配列およびアクセッション番号NP0020632ポリペプチド配列の下で入手可能である。配列NM002072は、例示的なヌクレオチド配列としてSEQIDNO1として提供される。例示的なポリペプチド配列は、SEQIDNO2に示される。当技術分野において理解されるように、GNAQまたはgnaqという用語には、多形性異型のような異型が含まれる。例えば、SNPデータベースは、GNAQ遺伝子において多くの一塩基多形が同定されていることを示している。ヒトGNAQは9q21に局在している。ヒトGNAQ遺伝子多形性異型は、9q21に局在しており、典型的には、97、98、または99より高いSEQIDNO2との同一性を有するタンパク質をコードする。GNA11またはGna11という用語は、グアニンヌクレオチド結合タンパク質Gタンパク質のアルファサブユニットをさす。その用語には、GNA11の核酸およびポリペプチドの多形性異型、対立遺伝子、変異体、および断片が包含される。GNA11配列は、当技術分野において周知である。例示的なヒトGNA11配列は、NCBIヌクレオチドデータベースのリファレンスシーケンスNM002067ヌクレオチド配列およびアクセッション番号NP002068ポリペプチド配列の下で入手可能である。配列NM002067は、例示的なヌクレオチド配列としてSEQIDNO3として提供される。ポリペプチド配列の例は、SEQIDNO4に示される。当技術分野において理解されるように、GNA11またはgna11という用語には、異型が含まれる。例えば、SNPデータベースは、GNA11遺伝子において多くの一塩基多形が同定されていることを示している。ヒトGNA11は、染色体領域19p133に局在している。ヒトGNA11遺伝子異型は、染色体領域19p133に局在しており、典型的には、97、98、または99より高いSEQIDNO4との同一性を有するタンパク質をコードする。エキソン4変異とは、本明細書において使用されるように、GNAQ遺伝子またはGNA11遺伝子のエキソン4内の変異をさす。いくつかの態様において、変異は、Gnaqタンパク質またはGna11タンパク質の配列の182位のバリンをコードするコドンまたは183位のアルギニンをコードするコドンにあり、それらの位置におけるタンパク質配列の変異をもたらす。いくつかの態様において、エキソン4内の変異は、Gnaqタンパク質またはGna11タンパク質の配列の175位をコードするコドンにある。変異の位置は、開始メチオニンを含むGnaqタンパク質およびGna11タンパク質の配列に関して示される。GNAQのエキソン4は、SEQIDNO1のヌクレオチド518~646に相当し、SEQIDNO2に示されるタンパク質の、およそアミノ酸159からおよそアミノ酸202までの領域をコードする。エキソン5は、SEQIDNO2に示されるタンパク質配列の、およそアミノ酸202からおよそアミノ酸245までの領域をコードする、SEQIDNO1のヌクレオチド647~776に相当する。GNA11のエキソン4は、SEQIDNO3のヌクレオチド719~847に相当し、SEQIDNO4に示されるタンパク質の、およそアミノ酸159からおよそアミノ酸202までの領域をコードする。エキソン5は、SEQIDNO4に示されるタンパク質配列の、およそアミノ酸202からおよそアミノ酸245までの領域をコードする、SEQIDNO3のヌクレオチド848~977に相当する。Gnaq依存性黒色腫とは、本願に関して使用されるように、Gnaqを活性化し、変異を有していないメラニン形成細胞と比較して、変異GαサブユニットのGTP加水分解活性の損失または減少に通じるGnaqの変異、即ち、活性化変異を有する黒色腫細胞を含むメラニン形成細胞性新生物をさす。Gnaqの欠陥には、タンパク質の構成的な活性をもたらす変異、例えば、置換変異が含まれ得る。Gnaq依存性黒色腫細胞は、そのような変異のうちの一つまたは複数を有し得、例えば、細胞は、R183に関わる体細胞置換変異、およびその他の変異を有し得る。本発明のGnaq依存性黒色腫は、例えば、日光に曝された皮膚部位、母斑例えば、青色母斑、または眼例えば、ブドウ膜から発生し得る。Gnaq依存性黒色腫は、Gnaq以外の遺伝子の変異を有していてもよい。Gna11依存性黒色腫とは、本願に関して使用されるように、GNA11を活性化し、変異を有していないメラニン形成細胞と比較して、変異GαサブユニットのGTP加水分解活性の損失または減少に通じるGna11の変異、即ち、活性化変異を有する黒色腫細胞を含むメラニン形成細胞性新生物をさす。GNA11の欠陥には、タンパク質の構成的な活性をもたらす変異、例えば、置換変異が含まれ得る。GNA11依存性黒色腫細胞は、そのような変異のうちの一つまたは複数を有し得、例えば、細胞は、エキソン4に関わる体細胞置換変異、例えば、R183の変異、およびその他の変異を有し得る。本発明のGNA11依存性黒色腫は、例えば、母斑例えば、青色母斑または眼例えば、ブドウ膜から発生し得る。GNA11依存性黒色腫は、GNA11以外の遺伝子の変異を有していてもよい。粘膜黒色腫は、粘膜に発生する腫瘍を指す;本明細書に用いられる場合の眼黒色腫は眼から発生する黒色腫である。眼黒色腫は、ブドウ膜および結膜の黒色腫を含む。結膜黒色腫は、結膜に発生する黒色腫を指し、一方、ブドウ膜黒色腫は、眼の色素領域の黒色腫を指す。本明細書に用いられる場合のCSD黒色腫は、慢性日光誘発性損傷を有する皮膚から発生する黒色腫を指す;本明細書に用いられる場合のNCSD黒色腫は、慢性日光誘発性損傷をもたない皮膚から発生する黒色腫を指す。本出願におけるCSD群とNCSD群との区別は、黒色腫を囲む真皮における著しい日光弾性線維症の有無の顕微鏡による決定に基づく。2、3例を除くすべての症例において、慢性日光誘発性損傷に関連した黒色腫は、顔、ならびに前腕、手背部、脛、およびふくらはぎなどの四肢遠位部に発生する。これらの黒色腫は、典型的には、50歳より老齢の個体に発生し、微視的には、メラニン細胞が巣ではなく孤立した単位として配置されている表皮内構成要素を有する。さらに、これらの黒色腫は、乳頭間隆起の消失のある萎縮性表皮を有する傾向にある。CSD黒色腫のサブセットは、悪性の黒子性黒色腫である。一方、慢性日光誘発性損傷に関連していない黒色腫は、躯幹ならびに大腿部および上腕のような近位端に発生する。NCSD黒色腫は、典型的には、メラニン細胞が孤立した単位ではなく巣として配置されている表皮内構成要素を示し、多量の上方散乱を示す。NCSD黒色腫の多くは、表在性広範黒色腫である。慢性日光誘発性損傷は、CSD2より大きいCSDスコアをもつと定義される。スコアは、以下の系を用いて100~200x倍率での黒色腫を囲む正常皮膚のヘマトキシリンとエオシン染色切片上の日光弾性線維症の程度を決定することにより得られ、その例はLandietalに提供されている:CSD0:弾性線維の非存在;CSD0:200x倍率においてのみ識別できる極めて少ない弾性線維;CSD1:膠原線維束の間に、ブッシェルとしてではなく、個々の単位として存在する散乱した弾性線維;または分類辞は、弾性線維がほとんど散乱していないか、または密に散乱しているかを示すために用いられた。CSD2:個々の単位ではなくブッシェルとして主に分布している密に散乱した弾性線維;分類辞は、ブッシェルが存在しているが、弾性線維は個々の単位が優勢であるように分布していることを示すために用いた;分類辞は、ブッシェルのより大きな凝集体が形成されるが、不定形の沈着物を形成する代わりに個々のブッシェルの輪郭を保つ場合に用いた;CSD3:線維質感を喪失した、青灰色物質の不定形沈着物;不定性沈着物の限局的な形成のみ;広汎性の好塩基性物質の非常に大きな塊。本明細書に用いられる場合、ある部位、例えば、ブドウ膜、粘膜、結膜、末端皮膚、慢性日光誘発性損傷を有する皮膚、または慢性日光誘発性損傷を有しない皮膚から黒色腫が発生したことを決定することという用語は、黒色腫の起源の部位を同定することを指す。そのような決定は、患者の目視検査により、または黒色腫の病理評価により行われ得る。動物における腫瘍または癌という用語は、無制限増殖、不死性、転移能、急速な成長および増殖速度、ならびにある特定の特徴的な形態学的特性を含む、非定型の成長または形態のような特徴を有する細胞の存在を指す。多くの場合、癌細胞は、腫瘍の形をとるが、そのような細胞は動物内に単独で存在し得る。腫瘍は、良性および悪性新生物の両方を含む。新生物性という用語は、良性および悪性の両方の非定型成長を指す。メラニン形成細胞性新生物という用語は、本明細書において使用されるように、周辺組織に比べて色素沈着過剰の区域を指す。メラニン形成細胞性新生物には、母斑および原発性黒色腫の両方が含まれ、体内の任意の場所に転移した黒色腫も含まれる。したがって、本明細書において使用されるメラニン形成細胞性新生物には良性新生物が含まれる。同様に、メラニン形成細胞という用語は、新生物性メラニン形成細胞および正常メラニン形成細胞の両方を指す。典型的には、メラニン形成細胞性新生物は、皮膚、粘膜、および眼に起こる。非限定的なメラニン形成細胞性新生物には、黒色腫、例えば、末端部黒子黒色腫、CSD黒色腫、NCSD黒色腫、悪性黒子黒色腫、粘膜黒色腫、結節性黒色腫、表在拡大型黒色腫、線維形成性黒色腫、ブドウ膜黒色腫、結膜黒色腫、再発性細胞増殖型青色母斑、先天性母斑において発生する黒色腫、悪性青色母斑、および転移が含まれる。メラニン形成細胞性新生物には、本明細書において使用されるように、母斑も含まれる。例えば、本明細書において使用される母斑メラニン形成細胞性新生物の非限定的な例には、先天性母斑、結節を伴う先天性母斑、線維形成反応を伴う先天性母斑、非定型性を伴う巨大先天性母斑、結節を伴う巨大先天性母斑、特定の診断のない先天性母斑、青色母斑、非定型青色母斑、非定型細胞増殖型青色母斑、ニューロクリスティック過誤腫を伴う青色母斑、特定の診断のない青色母斑、および特定の診断のない深部浸透母斑が含まれ得る。青色母斑という用語は、本明細書において使用されるように、典型的に青みがかった色を有する、真皮内の、即ち、皮膚の真皮層内の、増加した色素沈着を示すメラニン形成細胞増殖を指す。先天性または後天性であり得る青色母斑は、不連続の青みがかった黒子から、結膜および眼窩周囲の皮膚、肩部、ならびに腰部に影響を与える大きな青色~灰色の斑にまでわたる多様な方式で現れ得る。いくつかの態様において、青色母斑は、悪性青色母斑、すなわち青色母斑内に発生した黒色腫または特定の部分が組織病理学的に青色母斑に似ている黒色腫であり得る。本明細書に用いられる場合の生体試料は、黒色腫を有するのではないかと疑われる、または有する患者から得られる試料を指す。いくつかの態様において、試料は、針生検、細針生検、外科生検などのような任意の型の生検を指す組織生検であり得る。試料は、典型的には、組織試料、例えばメラニン形成細胞性新生物またはメラニン形成細胞性新生物であると疑われるメラニン形成細胞を含む皮膚または眼由来の組織試料を含むが、生体試料はまた、別の部位、例えば、黒色腫が転移する可能性がある部位由来、または血液由来であり得る。場合によっては、生体試料はまた、メラニン形成細胞性新生物またはメラニン形成細胞性新生物と疑われる部位に隣接した領域由来であり得る。生体試料を供給することとは、本発明に記載された方法に用いる生体試料を得ることを意味する。ほとんどの場合、これは、患者から細胞の試料を取り出すことにより行われるが、以前に単離された細胞を用いることによって、または本発明の方法をインビボで実施することによっても、達成され得る。処置または転帰履歴を有するアーカイブ組織もまた用いられ得る。単離された、精製された、または生物学的に純粋なという用語は、その天然状態で見出されるように通常はそれに伴う構成要素を、実質的にまたは本質的に含まない物質を指す。純度および均一性は、典型的には、ポリアクリルアミドゲル電気泳動または高速液体クロマトグラフィーのような分析化学技術を用いて決定される。調製物に存在する支配的な種であるタンパク質または核酸は実質的に精製されている。特に、単離された核酸は、天然でその遺伝子に隣接し、かつその遺伝子がコードするタンパク質以外のタンパク質をコードするいくつかのオープンリーディングフレームから分離されている。いくつかの態様における精製されたという用語は、核酸またはタンパク質が電気泳動ゲルにおいて本質的に1つのバンドを生じることを表す。好ましくは、それは、核酸またはタンパク質が少なくとも85純粋、より好ましくは少なくとも95純粋、および最も好ましくは少なくとも99純粋であることを意味する。他の態様における精製するまたは精製は、精製されるべき組成物から少なくとも1つの夾雑物を除去することを意味する。この意味において、精製は、精製された化合物が均質、例えば、100純粋、である必要はない。ポリペプチド、ペプチド、およびタンパク質という用語は、アミノ酸残基の重合体を指すのに本明細書では互換的に用いられる。その用語は、天然のアミノ酸重合体、修飾残基を含むもの、および非天然のアミノ酸重合体だけでなく、1つまたは複数のアミノ酸残基が対応する天然のアミノ酸の人工の化学的模倣体であるアミノ酸重合体にも適用される。アミノ酸という用語は、天然および合成のアミノ酸、加えて、天然のアミノ酸と類似して機能するアミノ酸類似体およびアミノ酸模倣体を指す。天然アミノ酸は、遺伝暗号がコードするもの、加えて、後で修飾されるそれらのアミノ酸、例えば、ヒドロキシプロリン、γカルボキシグルタミン酸、およびOホスホセリンである。アミノ酸類似体は、天然アミノ酸と同じ基本的化学構造、例えば、水素、カルボキシル基、アミノ基、およびR基に結合しているα炭素を有する化合物、例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウムを指す。そのような類似体は、改変R基または改変ペプチドバックボーンを有し得るが、天然アミノ酸と同じ基本的化学構造を保持する。アミノ酸模倣体は、アミノ酸の一般的な化学構造と異なる構造を有するが、天然アミノ酸と類似して機能する化学化合物を指す。アミノ酸は、それらの一般的に知られた三文字表記によって、またはIUPACIUBBiochemicalNomenclatureCommissionにより推奨されている一文字表記によって、本明細書に示され得る。同様に、ヌクレオチドはそれらの一般的に認められている一文字表記により示され得る。保存的に改変された変種は、アミノ酸および核酸配列の両方に適用される。特定の核酸配列に関して、保存的に改変された変種は、同一もしくは本質的に同一のアミノ酸配列をコードするそれらの核酸、または核酸がアミノ酸配列をコードしない場合、本質的に同一のもしくは関連した、例えば、天然で近接する、配列を指す。遺伝暗号の縮重のため、多数の機能的に同一の核酸が、大部分のタンパク質をコードする。例えば、コドンGCA、GCC、GCG、およびGCUのすべてが、アミノ酸アラニンをコードする。従って、アラニンがコドンにより特定されるあらゆる位置において、コドンは、コードするポリペプチドを変化させることなく、説明された対応するコドンのうちの別なものへ変化し得る。そのような核酸変異は、サイレント変異であり、保存的に改変された変異の一種である。ポリペプチドをコードする本明細書におけるあらゆる核酸配列はまた、核酸のサイレント変異を説明する。当業者は、ある特定の状況において、核酸における各コドンは、機能的に同一の分子を生じるように改変され得ることを認識していると思われる。従って、多くの場合、ポリペプチドをコードする核酸のサイレント変異は、発現産物に関しては説明された配列に内在するが、実際のプローブ配列に関してはそうではない。アミノ酸に関して、コードされた配列において単一のアミノ酸またはわずかなパーセンテージのアミノ酸を変化させる、付加する、または欠失させる、核酸、ペプチド、ポリペプチド、もしくはタンパク質の配列への個々の置換、欠失、または付加は、その変化が結果として、アミノ酸の、化学的に類似したアミノ酸との置換を生じる保存的に改変された変種であると当業者は理解すると考えられる。機能的に類似したアミノ酸を提供する保存的置換表は、当技術分野において周知である。そのような保存的に改変された変種は、本発明の多型変種、種間相同体、および対立遺伝子に加えてであり、それらを排除しない。典型的な、お互いに保存的な置換:1アラニン、グリシン;2アスパラギン酸、グルタミン酸;3アスパラギン、グルタミン;4アルギニン、リシン;5イソロイシン、ロイシン、メチオニン、バリン:6フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン;7セリン、トレオニン;および8システイン、メチオニン参照。本明細書に用いられる核酸またはオリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドまたは文法的相当語句は、共に共有結合された少なくとも2個のヌクレオチドを意味する。オリゴヌクレオチドは、典型的には、長さが約5、6、7、8、9、10、12、15、25、30、40、50ヌクレオチド、またはそれ以上から、最高約100ヌクレオチド長までである。核酸およびポリヌクレオチドは、より長い長さ、例えば、200個、300個、500個、1000個、2000個、3000個、5000個、7000個、10000個などを含む任意の長さの重合体である。本発明の核酸は、一般的に、ホスホジエステル結合を含むが、場合によっては、例えば、ホスホロアミデート、ホスホロチオネート、ホスホロジチオネート、またはOメチルホスホロアミダイト結合;ならびにペプチド核酸バックボーンおよび結合を含む代替バックボーンを有し得る核酸類似体が含まれる。他の類似体核酸は、米国特許第5235033号および第5034506号ならびにChapters6and7ASCSymposiumSeries580CarbohydrateModificationsinAntisenseResearchSanghuiCookedsを含む、正のバックボーン;非イオン性バックボーン、および非リボースバックボーンを有するものを含む。1つまたは複数の炭素環糖を含む核酸もまた、核酸の一つの定義内に含まれる。リボースリン酸バックボーンの改変は、様々な理由で、例えば、生理学的環境下において、またはバイオチップ上のプローブとして、そのような分子の安定性および半減期を増加させるために、行われ得る。天然核酸および類似体の混合物が作製され得る;あるいは、異なる核酸類似体の混合物、ならびに天然核酸および類似体の混合物が作製され得る。様々な参照文献は、例えば、ホスホロアミデート1925およびその中の参照文献LetsingerJOrgChem353800SprinzletalEurJBiochem81579LetsingeretalNuclAcidsRes143487SawaietalChemLett805LetsingeretalJAmChemSoc1104470およびPauwelsetalChemicaScripta2614191986、ホスホロチオネートおよび米国特許第5644048号、ホスホロジチオネート、Oメチルホスホロアミダイト結合、ならびにペプチド核酸バックボーンおよび結合MeieretalChemIntEdEngl311008NielsenNature365566CarlssonetalNature380207参照、それらのすべては参照により組み入れられているを含むそのような核酸類似体を開示する。他の類似体核酸は、米国特許第5235033号および第5034506号ならびにChapters6and7ASCSymposiumSeries580CarbohydrateModificationsinAntisenseResearchEdYSSanghuiandPDanCookを含む、正バックボーン;非イオン性バックボーンLetsingeretalJAmChemSoc1104470LetsingeretalNucleosideNucleotide131597Chapters2and3ASCSymposiumSeries580CarbohydrateModificationsinAntisenseResearchEdYSSanghuiandPDanCookMesmaekeretalBioorganicMedicinalChemLett4395JeffsetalJBiomolecularNMR3417TetrahedronLett37743、および非リボースバックボーンを有するものを含む。1つまたは複数の炭素環糖を含む核酸もまた、核酸の一つの定義内に含まれるpp169176参照。いくつかの核酸類似体は、RawlsCENewsJune21997page35に記載されている。これらの参照文献のすべては、参照により本明細書によって明白に組み入れられている。他の類似体には、ペプチド核酸類似体であるペプチド核酸を含む。これらのバックボーンは、天然核酸の高荷電したホスホジエステルバックボーンと対照的に、天然条件下において実質的に非イオン性である。これは結果として2つの利点を生じる。第一に、PNAバックボーンは、向上したハイブリダイゼーション動力学を示す。PNAは、ミスマッチした塩基対対完全にマッチした塩基対についての融解温度においてより大きな変化を有する。DNAおよびRNAは、典型的には、内部ミスマッチについてのTmにおいて2~4°C降下を示す。非イオン性PNAバックボーンに関して、降下はほぼ7~9°Cである。同様に、それらの非イオン性の性質のために、これらのバックボーンに付着した塩基のハイブリダイゼーションは塩濃度に対して比較的非感受性である。加えて、PNAは細胞酵素により分解されず、従って、より安定であり得る。核酸は、特定されているように、一本鎖もしくは二本鎖であり得る、または二本鎖もしくは一本鎖配列の両方の部分を含む。当業者により認識されているように、一本鎖の描写はまた相補鎖の配列を定義する;従って、本明細書に記載された配列はまた配列の相補体も提供する。他に規定がない限り、特定の核酸配列はまた、明確に示された配列だけでなく、それらの保存的に改変された変種および相補配列も暗黙的に含む。核酸は、ゲノムおよびcDNAの両方のDNA、RNA、またはハイブリッドであり得、核酸は、デオキシリボヌクレオチド、およびリボヌクレオチドの組み合わせ、ならびにウラシル、アデニン、チミン、シトシン、グアニン、イノシン、キサンチン、ヒポキサンチン、イソシトシン、イソグアニンなどを含む塩基の組み合わせを含み得る。転写産物は、典型的には、天然のRNA、例えば、プレmRNA、hnRNA、またはmRNAを指す。本明細書に用いられる場合、ヌクレオシドという用語は、ヌクレオチドおよびヌクレオシドおよびヌクレオチド類似体、ならびにアミノ修飾ヌクレオシドのような修飾ヌクレオシドを含む。加えて、ヌクレオシドは、非天然の類似体構造を含む。従って、例えば、それぞれが塩基を含むペプチド核酸の個々の単位は、本明細書でヌクレオシドと呼ばれる。標識または検出可能な部分は、分光学的、光化学的、生化学的、免疫化学的、化学的、または他の物理的手段により検出可能な組成物である。例えば、有用な標識には、32P、蛍光色素、電子密度の高い試薬、酵素、ビオチン、ジゴキシゲニン、またはハプテンおよびタンパク質、または、例えば、放射性標識をペプチドへ組み入れることにより検出可能にされ得る、もしくはペプチドに特異的反応性である抗体を検出するために用いられ得る他の実体が挙げられる。標識は、KIT核酸、タンパク質、および抗体へ任意の位置に組み入れられ得る。抗体を標識へ結合させるための当技術分野における公知の任意の方法が用いられることができ、例えば、HermansonBioconjugateTechniques1996AcademicPressIncSanDiegoに記載された方法を用いる。標識された核酸プローブまたはオリゴヌクレオチドは、リンカーもしくは化学結合を通して共有結合性にか、またはプローブに結合した標識の存在を検出することによりプローブの存在が検出され得るように、標識へのイオン結合、ファンデルワールス結合、静電気結合、もしくは水素結合を通して非共有結合性にかのいずれかで、結合しているものである。あるいは、結合パートナーのペアの一方が、他方、例えば、ビオチン、ストレプトアビジン、に結合する高親和性相互作用を用いる方法は、同じ結果に達し得る。本明細書に用いられる場合、核酸プローブまたはオリゴヌクレオチドは、1つまたは複数の型の化学結合を通して、通常には相補的塩基対形成を通して、通常には水素結合形成を通して、相補配列の標的核酸へ結合する能力がある核酸として定義される。本明細書に用いられる場合、プローブは天然または修飾された塩基を含み得る。加えて、プローブにおける塩基は、ハイブリダイゼーションに機能的に干渉しない限り、ホスホジエステル結合以外の結合により連結され得る。従って、例えば、プローブは、成分塩基がホスホジエステル結合よりむしろペプチド結合により連結されるペプチド核酸であり得る。プローブが、ハイブリダイゼーション条件のストリンジェンシーに依存してプローブ配列との完全な相補性を欠く標的配列を結合し得ることは当業者によって理解されていると思われる。プローブは、好ましくは、同位元素、発色団、発光団、色素原と同様に、直接的に標識される、またはストレプトアビジン複合体が後で結合し得るビオチンと同様に、間接的に標識される。プローブの有無についてアッセイすることにより、選択配列もしくは部分配列の有無を検出できる。診断または予後予測は、ゲノムレベルで、またはRNAもしくはタンパク質発現のレベルに基づき得る。例えば、細胞、または核酸、タンパク質、またはベクターに関連して用いられる場合の組換えという用語は、細胞、核酸、タンパク質、またはベクターが、異種性核酸もしくはタンパク質の導入、または天然の核酸もしくはタンパク質の変化により改変されていること、または細胞がそのように改変された細胞由来であることを示す。従って、例えば、組換え細胞は、その細胞の天然型の内に見出されない遺伝子を発現する、または、別な具合で異常に発現するか、十分に発現しないか、もしくは全く発現しない天然遺伝子を発現する。本明細書での組換え核酸という用語は、通常には天然で見出されない形で、一般的には、例えば、ポリメラーゼおよびエンドヌクレアーゼを用いる核酸の操作により、最初にインビトロで形成される核酸を意味する。同様に、組換えタンパク質は、組換え技術を用いて、すなわち、上記のように組換え核酸の発現を通して、生成されたタンパク質である。選択的にハイブリダイズするという句は、配列が混合物中に存在する場合、特定のヌクレオチド配列に対する分子の結合が混合物中のヌクレオチド配列の存在を決定するように、ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で、分子が、特定のヌクレオチド配列へ結合、二重鎖形成、またはハイブリダイズすることを指す。ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件という句は、典型的には核酸の複雑な混合物において、その標的部分配列にハイブリダイズするが、他の配列にはハイブリダイズしない条件を指す。ストリンジェントな条件は、配列依存性であり、異なる環境において異なる。より長い配列はより高い温度で特異的にハイブリダイズする。核酸のハイブリダイゼーションの広範な手引きは、TijssenTechniquesinBiochemistryandMolecularBiologyHybridizationwithNucleicProbesOverviewofprinciplesofhybridizationandthestrategyofnucleicacidassaysに見出される。一般的に、ストリンジェントな条件は、規定されたイオン強度、pHにおいて特定の配列についての熱融解点より約5~10°C低いように選択される。Tmは、標的に相補的なプローブの50が平衡状態で標的配列にハイブリダイズする温度である。ストリンジェントな条件は、塩濃度がpH70~83において約10M未満ナトリウムイオン、典型的には約001~10Mナトリウムイオン濃度であり、かつ温度が、短いプローブについて少なくとも約30°C、および長いプローブについて少なくとも約60°Cであるものである。ストリンジェントな条件はまた、ホルムアミドのような不安定化剤の添加で達成され得る。選択的または特異的ハイブリダイゼーションについて、陽性シグナルはバックグラウンドハイブリダイゼーションの少なくとも2倍、好ましくはバックグラウンドハイブリダイゼーションの10倍である。例証となるストリンジェントなハイブリダイゼーション条件は以下の通りであり得る:65°Cでの02xSSCおよび01SDSにおける洗浄と共に、50ホルムアミド、5xSSC、および1SDS、42°Cでのインキュベーション、または5xSSC、1SDS、65°Cでのインキュベーション。PCRについて、約36°Cの温度は低ストリンジェンシー増幅について典型であるが、アニーリング温度は、プライマーの長さに依存して約32°Cと48°Cの間で変動し得る。高ストリンジェンシーPCR増幅について、約62°Cの温度が典型であるが、高ストリンジェンシーアニーリング温度は、プライマーの長さおよび特異性に依存して約50°Cから約65°Cまでの範囲であり得る。高いおよび低いストリンジェンシー増幅の両方についての典型的なサイクル条件は、30秒~2分間の90°C~95°Cの変性相、30秒~2分間続くアニーリング相、および1~2分間の約72°Cの伸長相を含む。低いおよび高いストリンジェンシー増幅反応についてのプロトコールおよびガイドラインは、例えば、InnisetalPCRProtocolsAGuidetoMethodsandApplicationsAcademicPressIncNYに提供されている。ストリンジェントな条件下でお互いにハイブリダイズしない核酸は、それらがコードするポリペプチドが実質的に同一である場合には、まだなお実質的に同一である。これは、例えば、核酸のコピーが遺伝暗号により許容される最大コドン縮重を用いて生成される場合に起こる。そのような場合、核酸は、典型的には、中程度にストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下でハイブリダイズする。例証となる中程度にストリンジェントなハイブリダイゼーション条件は、37°Cで40ホルムアミド、1MNaCl、1SDSの緩衝液におけるハイブリダイゼーション、および45°Cで1XSSCにおける洗浄を含む。陽性ハイブリダイゼーションはバックグラウンドの少なくとも2倍である。当業者は、代替のハイブリダイゼーションおよび洗浄条件が類似したストリンジェンシーの条件を提供するために利用され得ることを容易に認識すると思われる。ハイブリダイゼーションパラメーターを決定するためのさらなるガイドラインは、多数の参照文献、例えば、CurrentProtocolsinMolecularBiologyedAusubeletalに提供されている。当技術分野において周知の方法、例えばデフォルトのパラメーターに設定されたBLASTアルゴリズムを用いて同一性を決定することができる。2つの核酸配列またはポリペプチドが実質的に同一であるという現れは、下記のように、第一核酸がコードするポリペプチドが、第二核酸がコードするポリペプチドに対して産生された抗体と、免疫学的に交差反応性であることである。従って、ポリペプチドは、典型的には、例えば、2つのペプチドが保存的置換によってのみ異なる場合、第二ポリペプチドと実質的に同一である。2つの核酸配列が実質的に同一であるという別の現れは、下記のように、2つの分子またはそれらの相補体がストリンジェントな条件下でお互いにハイブリダイズすることである。2つの核酸配列が実質的に同一であるというさらに別の現れは、同じプライマーが配列を増幅するために用いられ得ることである。Gnaqタンパク質またはGna11タンパク質の活性を阻害する化合物を試験するためのアッセイに関連した機能的効果という語句には、間接的にまたは直接的に、GNAQまたはGNA11のタンパク質または核酸の影響下にあるパラメーター、例えば、腫瘍形成を減少させるかまたはGTP加水分解酵素活性を改変する能力のような機能的、物理的、または化学的な効果の決定が含まれる。GNAQまたはGNA11の活性または機能的効果には、タンパク質間相互作用活性、例えば、抗体またはGNAQもしくはGNA11が相互作用するその他のタンパク質との、GNAQまたはGNA11の結合能;GTP加水分解酵素活性、GTPおよびまたはGDPとのGNAQまたはGNA11の結合能;成長の接触阻害および密度制限;細胞増殖;細胞形質転換;色素沈着の変化;増殖因子または血清に対する依存性;腫瘍特異マーカーレベル;マトリゲルへの侵襲性;モデル系における腫瘍成長および腫瘍取り込みの測定を含む、インビボの腫瘍の成長および転移;転移中の細胞を含む細胞におけるmRNAおよびタンパク質の発現、ならびに癌細胞のその他の特徴が含まれ得る。機能的効果には、インビトロ、インビボ、およびエクスビボの活性が含まれる。本明細書において使用されるように、GNAQまたはGNA11の阻害剤またはアンタゴニストとは、GNAQタンパク質もしくはGNA11タンパク質、ホスホリパーゼCβ、またはGNAQもしくはGNA11により調節される下流の分子、例えば、プロテインキナーゼCに、例えば、結合するか、それらの活性を部分的にもしくは完全に阻止するか、それらを減少させるか、それらを防止するか、それらの活性化を遅延させるか、それらを不活化するか、それらを脱感作するか、またはそれらの活性もしくは発現をダウンレギュレートする、調整性の分子または化合物を指す。阻害剤には、siRNAまたはアンチセンスRNA、例えば、GNAQ核酸もしくはGNA11核酸を標的とするsiRNAまたはアンチセンスRNA、またはGNAQ核酸およびGNA11核酸の両方を標的とするsiRNAまたはアンチセンスRNA;遺伝学的に改変されたGNAQまたはGNA11タンパク質のバージョン、例えば、改変された活性を有するバージョンが含まれ、天然に存在する、および合成のGNAQまたはGNA11アンタゴニスト、抗体、小さな化学分子等も含まれる。本発明において使用するためのGNAQ阻害剤またはGNA11阻害剤は、当技術分野において公知である。例えば、本発明において使用するのに適している阻害剤の非限定的な例には、PKCの阻害剤、例えば、比較的非特異的なPKC阻害剤スタウロスポリン、スタウロスポリンstaurosporieアナログCPG41251、ブリオスタチン1、KAI9803、7ヒドロキシスタウロスポリン、Lトレオジヒドロスフィンゴシン、AHT956およびAEB071、非選択的PKC阻害剤、イルモホシン、PKCμを含む古典的PKCアイソフォームのより特異的な阻害剤であるインドールカルバゾールGo6796、PKCαアンチセンス阻害剤LY900003、およびPKCβ阻害剤LY333531、LY317615が含まれ得る。PKCαmRNAの枯渇において使用するのに適しているアンチセンス分子の例は、である。ホスホリパーゼCβの非限定的な例証となる阻害剤には、エデルホシンおよびフルビルシンB2が含まれ得る。その他の阻害剤を同定するためのアッセイは、試験阻害剤化合物を適用し、次いで、活性に対する機能的効果を決定することにより、インビトロまたはインビボで、例えば、細胞または細胞膜において実施され得る。いくつかの態様において、可能性のある阻害剤により処置されるGNAQタンパク質またはGNA11タンパク質を含む試料またはアッセイが、活性に対する効果を調査するために、阻害剤を含まない対照試料と比較される。典型的には、GNAQ活性化変異またはGNA11活性化変異を有しており、かつ阻害剤により処理されていない対照試料、例えば、黒色腫細胞に、100という相対タンパク質活性値が割り当てられる。対照に比べて活性値が少なくとも20、好ましくは50、より好ましくは75~100、またはそれ以上、変化した場合、GNAQまたはGNA11の阻害が達成されている。いくつかの態様において、阻害剤は、GTP加水分解のような特定の活性を活性化すると考えられるが、正味の効果は、例えば、活性化されたGNAQまたはGNA11を有する対照と比較した、GNAQまたはGNA11の活性の減少であると考えられる。細胞成長における変化という句は、病巣の形成、足場非依存性、半固体もしくは軟寒天成長、成長の接触阻止および密度制限における変化、成長因子もしくは血清要求性の喪失、細胞形態における変化、不死化の獲得もしくは喪失、腫瘍特異的マーカーの獲得もしくは喪失、適切な動物宿主へ注入された場合の腫瘍を形成もしくは抑制する能力、ならびにまたは細胞の不死化のような、インビトロまたはインビボでの細胞成長および増殖特性における任意の変化を指す。例えば、FreshneyCultureofAnimalCellsaManualofBasicTechniquepp231241参照。本明細書に用いられる場合、抗体は、特定の抗原と免疫学的反応性である免疫グロブリン分子への言及を含み、ポリクローナルおよびモノクローナル抗体の両方を含む。その用語はまた、キメラ抗体およびヘテロ結合抗体のような遺伝子操作型を含む。抗体という用語はまた、抗原結合性能力を有する断片を含む、抗体の抗原結合型を含む2、Fab、Fv、およびrIgG。PierceCatalogandHandbook19941995。例えば、KubyJImmunology3rdEdWHFreemanCoNewYorkも参照。その用語はまた、組換え一本鎖Fv断片を指す。抗体という用語はまた、二価または二重特異性分子、ダイアボディ、トリアボディ、およびテトラボディを含む。二価および二重特異性分子は、例えば、KostelnyetalJImmunol1481547PackandPluckthunBiochemistry311579Hollingeretal1993前記GruberetalJImmunol5368ZhuetalProteinSci6781HuetalCancerRes563055AdamsetalCancerRes534026、およびMcCartneyetalProteinEng8301に記載されている。特定の抗原と免疫学的反応性である抗体は、ファージまたは類似したベクターにおける組換え抗体のライブラリーの選択のような組換え方法によりWardetalNature341544546およびVaughanetalNatureBiotech14309314参照、または抗原、もしくは抗原をコードするDNAで動物を免疫することにより、作製され得る。典型的には、免疫グロブリンは重鎖および軽鎖を有する。各重鎖および軽鎖は、定常領域および可変領域を含む。軽鎖および重鎖可変領域は、相補性決定領域とも呼ばれる3つの超可変領域により中断される4つのフレームワーク領域を含む。VHまたはVHへの言及は、Fv、scFv、またはFabの重鎖を含む、抗体の免疫グロブリン重鎖の可変領域を指す。VLまたはVLへの言及は、Fv、scFv、dsFv、またはFabの軽鎖を含む、免疫グロブリン軽鎖の可変領域を指す。キメラ抗体は、定常領域またはその部分が、抗原結合部位が異なるもしくは変化したクラス、エフェクター機能、およびもしくは種の定常領域、または新しい性質をキメラ抗体に与える全く異なる分子、例えば、酵素、毒素、ホルモン、成長因子、薬物など、に連結されるように、変化している、置換されている、または交換されている;または可変領域またはその部分が、異なるもしくは変化した抗原特異性を有する可変領域で変化している、置換されている、または交換されている、免疫グロブリン分子である。ヒト化抗体は、非ヒト免疫グロブリン由来の最小配列を含む免疫グロブリン分子である。ヒト化抗体は、レシピエントの相補性決定領域由来の残基が、所望の特異性、親和性、および能力を有するマウス、ラット、またはウサギのような非ヒト種のCDR由来の残基により置換されているヒト免疫グロブリンを含む。場合によっては、ヒト免疫グロブリンのFvフレームワーク残基が、対応する非ヒト残基により置換されている。ヒト化抗体はまた、レシピエント抗体にも移入されたCDRまたはフレームワーク配列にも見出されない残基を含み得る。一般的に、ヒト化抗体は、CDR領域の全部または実質的に全部が非ヒト免疫グロブリンのそれらに対応し、かつフレームワーク領域の全部または実質的に全部がヒト免疫グロブリン定常配列のそれらである、少なくとも1つの、典型的には2つの、可変ドメインの実質的に全部を含む。ヒト化抗体はまた、最適には、免疫グロブリン定常領域、典型的にはヒト免疫グロブリンのそれ、の少なくとも一部を含むRiechmannetalNature332323329およびPrestaCurrOpStructBiol2593596。ヒト化は、本質的には、Winterおよび共同研究者らの方法に従ってRiechmannetalNature332323327VerhoeyenetalScience23915341536、齧歯類CDR配列をヒト抗体の対応する配列に代わって用いることにより、行われ得る。従って、そのようなヒト化抗体はキメラ抗体であり、無傷ヒト可変ドメインより実質的に少ない部分が、非ヒト種由来の対応する配列により置換されている。完全なヒト抗体という用語は、ヒトフレームワークおよび定常領域に加えてヒト超可変領域を含む免疫グロブリンを指す。そのような抗体は、当技術分野において公知の様々な技術を用いて作製され得る。例えば、インビトロ方法は、バクテリオファージおよびMarksetalJMolBiol222581、酵母細胞、またはリボソーム上にディスプレイされるヒト抗体断片の組換えライブラリーの使用を含む。同様に、ヒト抗体は、トランスジェニック動物、例えば、内因性免疫グロブリン遺伝子が部分的または完全に不活性化されているマウスへの、ヒト免疫グロブリン座の導入により作製され得る。攻撃によって、遺伝子再編成、組み立て、および抗体レパートリーを含むすべての点でヒトにおいて見られるものによく似ているヒト抗体産生が観察される。このアプローチは、例えば、米国特許第6150584号;第5545807号;第5545806号;第5569825号;第5625126号;第5633425号;第5661016号に、および以下の科学刊行物に記載されている:例えば、JakobavitsAdvDrugDelivRev313342MarksetalBioTechnology10779783LonbergetalNature368856859MorrisonNature36881213FishwildetalNatureBiotechnology1484551NeubergerNatureBiotechnology14826LonbergHuszarInternRevImmunol136593。一般的な組換え法本発明は、例えば、GNAQまたはGNA11の変異検出において使用される方法のため、またはGNAQまたはGNA11のポリペプチドおよび核酸の調製のため、組換え遺伝学の領域のルーチンの技術に、一部分、頼る。本発明において有用な一般的な方法を開示している基本的な教科書には、SambrookRussellMolecularCloningALaboratoryManual;およびCurrentProtocolsinMolecularBiologyAusubel19941999が含まれる。患者由来の試料におけるGNAQ配列変異またはGNA11配列変異の同定本発明の一つの局面において、GNAQまたはGNA11のポリヌクレオチド、例えば、mRNAもしくはゲノムDNAのエキソン4における活性化変異の存在、および/またはGnaqまたはGna11タンパク質におけるエキソン4配列変異の存在が、青色母斑のような母斑および/または黒色腫、例えば、ブドウ膜黒色腫もしくは悪性青色母斑の細胞を含むと推測される生物学的試料において決定される。典型的な態様において、ブドウ膜黒色腫のような悪性新生物を有するかまたは有すると推測される生物学的試料に由来する核酸が、GNAQまたはGNA11のエキソン4変異の存在について分析され得る。GNAQ核酸またはGNA11核酸の配列は周知である。従って、エキソン4変異の存在は容易に決定可能である。配列変異とは、本願において使用されるように、タンパク質活性の変化をもたらすポリヌクレオチド配列の変化をさす。変異は、一塩基置換のような塩基置換、挿入、または欠失であり得る。いくつかの態様において、本発明に係るメラニン形成細胞性新生物におけるGNAQまたはGNA11のエキソン4変異は、GNAQまたはGNA11の活性の構成的な活性化に通じる、182位または183位のアミノ酸における活性化変異である。いくつかの態様において、エキソン4変異は175位に起こる。いくつかの態様において、メラニン形成細胞性新生物は、GNAQのエキソン4内の2ヶ所、例えば、175位および182位に変異を有し得る。本発明において、エキソン4配列変異が、メラニン形成細胞性新生物の診断のためにまたは予後予測指標のために、例えば、ブドウ膜黒色腫のような黒色腫および青色母斑のような母斑のサブタイプの診断のために、検出される。従って、メラニン形成細胞性新生物を有するかまたは有すると推測される患者から入手された生物学的試料が、GNAQまたはGNA11のmRNA、ゲノムDNA、またはタンパク質のエキソン4の配列における変異について分析され得る。いくつかの態様において、本発明の方法は、生物学的試料由来の核酸におけるGNAQまたはGNA11のエキソン5における活性化変異の存在または非存在について、患者由来の生物学的試料を評価すること、例えば、GNAQまたはGNA11のGln209をコードするコドンにおける変異について生物学的試料を評価することを、さらに含み得る。いくつかの態様において、生物学的試料は、ブドウ膜黒色腫または悪性青色母斑を有する患者に由来する。いくつかの態様において、患者は、青色母斑であるメラニン形成細胞性新生物を有する。GNAQのエキソン5における活性化変異を検出する方法は公知であるWO2008098208を参照のこと。類似の方法論が、GNA11のエキソン5内の活性化変異を検出するために利用される。GNAQまたはGNA11のエキソン4変異は、典型的には、Gln209変異のようなエキソン5変異を有しないメラニン形成細胞性新生物、例えば、ブドウ膜黒色腫に存在し、その逆も同様である。同様に、GNAQのエキソン4変異は、典型的には、GNA11の変異を有しないメラニン形成細胞性新生物、例えば、ブドウ膜黒色腫に存在し、その逆も同様である。GNAQまたはGNA11の配列変異の検出一つの態様において、GNAQまたはGNA11の配列変異の診断的および予後予測的な検出は、GNAQまたはGNA11のエキソン4配列変異の存在を決定するため、核酸を評価することにより実施される。特定の遺伝子の配列を評価する方法は、当業者に周知であり、とりわけ、ハイブリダイゼーションおよび増幅に基づくアッセイを含む。いくつかの態様において、本発明におけるGNA11のエキソン4配列変異は、変異配列に選択的にハイブリダイズするプローブを使用して決定され得る。いくつかの態様において、エキソン4変異GNAQまたはGNA11対立遺伝子の存在は、DNA配列決定、例えば、ダイデオキシシーケンスを含む合成による配列決定sequencingbysynthesis法、ピロシーケンス、および切断による配列決定法、またはその他の公知の配列決定技術を使用して便利に決定され得る。その他の検出法には、一本鎖高次構造多型または制限断片長多型の検出法、および変性勾配ゲル電気泳動分析が含まれる。いくつかの態様において、生物学的試料中のエキソン4配列変異は、試料DNAまたは試料RNAの、GNAQ配列またはGNA11配列に特異的にハイブリダイズするプローブへのハイブリダイゼーションにより決定される。そのような適用において使用されるプローブは、変異を保有しているGNAQ配列またはGNA11配列の領域に特異的にハイブリダイズする。好ましいプローブは、ストリンジェントな条件の下で標的核酸に特異的にハイブリダイズするために十分に長く、例えば、約10、15、または20ヌクレオチド~約50ヌクレオチドまたはそれ以上である。いくつかの態様において、GNA11またはGNAQの183位をコードするGNA11核酸またはGNAQ核酸の領域にハイブリダイズするようにプローブを用いることができる。多数のハイブリダイゼーションに基づくアッセイのうちの任意のものが、生物学的試料の細胞におけるGNAQまたはGNA11の配列変異を検出するために使用され得る。例えば、ドットブロット、アレイに基づくアッセイ等が、GNAQ配列変異またはGNA11配列変異を決定するために使用され得る。いくつかの態様において、増幅に基づくアッセイが、GNAQまたはGNA11の配列変異を検出するために使用される。そのようなアッセイにおいては、標的GNAQおよび/またはGNA11核酸配列が、増幅反応例えば、ポリメラーゼ連鎖反応またはPCRにおいて特異的に増幅される。増幅に基づくアッセイの例には、当業者に周知のRTPCR法が含まれる例えば、Ausubeletal前記を参照のこと。定量的増幅法を含む、DNAおよびRNAのPCRのための詳細なプロトコールは公知である例えば、InnisetalPCRProtocolsAGuidetoMethodsandApplicationsAcademicPressIncNY;およびAusubelandRussellSambrookいずれも前記を参照のこと。GNAQ例えば、SEQIDNO1およびGNA11例えば、SEQIDNO3の公知の核酸配列は、所望の領域を特異的に増幅するためのプライマーを、当業者がルーチンに選択することを可能にするのに十分である。特定の配列の増幅のために適しているプライマーは、当技術分野において周知の原理を使用して設計され得る例えば、DieffenfachDvekslerPCRPrimerALaboratoryManualを参照のこと。その他の適当な増幅法には、リガーゼ連鎖反応LCRWuandWallaceGenomics4560、LandegrenetalScience2411077、およびBarringeretalGene89117を参照のこと、転写増幅KwohetalProcNatlAcadSciUSA861173、自家持続配列複製GuatellietalProcNatAcadSciUSA871874、ドットPCR、およびリンカーアダプターPCR等が含まれるが、これらに限定されない。GNAQまたはGNA11のDNAまたはRNAにおける変異の存在は、変異核酸配列または正常核酸配列に特異的にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを使用した、変異核酸配列と正常核酸配列との識別に頼る、対立遺伝子特異的オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションのような、公知の技術を使用して決定されてもよい。この方法は、典型的には、正常対立遺伝子またはエキソン4変異対立遺伝子に差次的にハイブリダイズするよう設計された、短いオリゴヌクレオチド、例えば、15~20ヌクレオチド長のオリゴヌクレオチドを利用する。そのようなプローブを設計するための案内は、当技術分野において入手可能である。変異対立遺伝子の存在は、試料にハイブリダイズする対立遺伝子特異的オリゴヌクレオチドの量を測定することにより決定される。その他の態様において、正常GNAQもしくはGNA11核酸または変異エキソン4GNAQもしくはGNA11核酸の存在は、対立遺伝子特異的増幅またはプライマー伸長法を使用して検出され得る。これらの反応は、典型的には、プライマーの3末端にあるミスマッチを介して、正常対立遺伝子または変異体対立遺伝子を特異的に標的とするよう設計されたプライマーの使用を含む。ミスマッチの存在は、ポリメラーゼがエラー補正活性を欠く場合にポリメラーゼがプライマーを伸長する能力を達成する。増幅された産物の量は、プローブを使用して、または反応中に存在するDNAの量を直接測定することにより、決定され得る。GNAQ核酸もしくはGNA11核酸のレベル、例えば、正常GNA11ポリヌクレオチドもしくはエキソン4変異GNA11ポリヌクレオチドのレベル、またはエキソン5GNAQもしくはGNA11変異の存在の検出は、例えば、米国特許第5210015号;第5487972号;および第5804375号;ならびにHollandetal1988ProcNatlAcadSciUSA88:72767280に記載されたような、アッセイとも呼ばれる5ヌクレアーゼ活性のような定量アッセイを使用しても実施され得る。そのようなアッセイにおいては、増幅される領域の内部にハイブリダイズする標識された検出プローブが、増幅反応の間に添加される。いくつかの態様において、ハイブリダイゼーションプローブは、正常対立遺伝子または変異体対立遺伝子を識別する対立遺伝子特異的なプローブであり得る。または、方法は、対立遺伝子特異的プライマーおよび増幅された産物に結合する標識されたプローブを使用して実施され得る。GNA11遺伝子またはGNAq遺伝子のエキソン4変異の存在を検出するための別の方法は、質量分析に基づく。質量分析は、DNAの4種のヌクレオチドの各々の特有の質量を活用する。質量分析によって、GNAQまたはGNA11のオルタナティブな対立遺伝子を有する核酸の質量の違いを測定することにより、対立遺伝子は、明確に遺伝子型決定され得る。MALDITOFマトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間型質量分析テクノロジーは、一塩基変異のような、極めて正確な分子量の決定のため好ましい。一塩基変異アッセイの質量分析に基づく好ましい方法には、伝統的なゲルに基づくフォーマットおよびマイクロアレイのような他のアプローチと組み合わせて利用されてもよい、プライマー伸長アッセイが含まれる。GNAQポリペプチド配列またはGNA11ポリペプチド配列の検出GNAQまたはGNA11におけるエキソン4変異は、変異タンパク質を検出することによっても検出され得る。例えば、エキソン4変異を有するGNAQまたはGNA11タンパク質の存在の検出は、診断的な目的のため、またはスクリーニングアッセイにおいて使用され得る。いくつかの態様において、試料中の正常または変異GNAQまたはGNA11ポリペプチドの存在は、エキソン4変異を特異的に検出する抗体などの試薬を用いた免疫学的アッセイを使用して便利に決定される。以下のセクションは、GNAQまたはGNA11の免疫学的検出について記述する。このセクションは、例えば、治療的用途において使用され得る、抗体の製造および操作にも関する。GNAQまたはGNA11の免疫学的検出抗体は、GNAQもしくはGNA11を検出するために使用され得、またはGNAQもしくはGNA11を阻害する能力について本発明の方法において査定され得る。GNAQまたはGNA11の検出およびまたは定量化は、多数のよく認識されている免疫学的結合アッセイを使用して達成され得る。適用可能な技術の一般的な概要は、HarlowLaneAntibodiesALaboratoryManualおよびHarlowLaneUsingAntibodiesに見出され得る。MethodsinCellBiologyAntibodiesinCellBiologyvolume37;BasicandClinicalImmunology、およびCurrentProtocolsinImmunologyを含むその他の情報源も参照のこと。免疫学的結合アッセイは、ポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体のいずれかを使用し得る。いくつかの態様において、変異GNAQ分子または変異GNA11分子を特異的に検出する抗体が利用され得る。一般的に用いられるアッセイには、非競合的アッセイおよび競合的アッセイが挙げられる。一般的に用いられるアッセイ形式には、試料においてタンパク質の存在を検出および定量化するために用いられる、イムノブロットが挙げられる。他のアッセイ形式には、リポソームイムノアッセイが挙げられ、それは、特定の分子に結合し、封入されていた試薬またはマーカーを放出するように設計されたリポソームを用い、その試薬またはマーカーがその後、標準技術により検出される参照。GNAQおよびGNA11に対する抗体は市販されている。いくつかの態様において、GNA11またはGNAQに対する変異は、変異型に特異的に結合する抗体を使用して検出され得、従って、変異GNAQタンパク質または変異GNA11タンパク質を検出するため、イムノアッセイも使用され得る。当技術分野において公知の技術を使用して、GNAQまたはGNA11またはその断片、例えば、配列変異を高頻度に含有しているペプチドの部分が、GNAQまたはGNA11と特異的に反応性の抗体を作製するために使用され得る例えば、Coligan;HarlowLaneいずれも前記を参照のこと。そのような技術には、ファージまたは類似のベクターにおける組換え抗体のライブラリーからの抗体の選択による抗体調製が含まれ、ウサギまたはマウスの免疫感作によるポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体の調製も含まれる例えば、HuseetalScience24612751281;WardetalNature341544546を参照のこと。そのような抗体は、診断的または予後予測的な適用のために、例えば、GNA11の発現または活性の増加を示す黒色腫またはその他の癌の検出において、使用され得る。典型的には、104以上の力価を有するポリクローナル抗血清が選択され、競合結合イムノアッセイを使用して、非GNAQタンパク質または非GNA11タンパク質または他の生物に由来する他の関連タンパク質との交差反応性について試験される。特異的なポリクローナル抗血清およびモノクローナル抗体は、通常、少なくとも約01mM、より通常では少なくとも約1μM、任意で、少なくとも約01μM以下、および任意で、001μM以下のKdで結合すると考えられる。いくつかの態様において、GNAq抗体またはGNA11抗体は治療的用途のために使用され得る。例えば、いくつかの態様において、エキソン4変異を有するGNAQまたはGNA11の生物学的機能を低下させるかまたは排除するために使用され得るそのような抗体を、以下に記載する。即ち、メラニン形成細胞性新生物への抗GNAQ抗体または抗GNA11抗体の添加は、新生物を低下させるかまたは排除し得る。一般に、活性、成長、サイズ等の少なくとも25の減少が好ましく、少なくとも約50が特に好ましく、約95~100の減少が特に好ましい。しばしば、治療的用途のためのGNAQタンパク質またはGNA11タンパク質に対する抗体は、ヒト化抗体である。ファージディスプレイライブラリー;MarksetalJMolBiol222:581を含む、当技術分野において公知の様々な技術を使用して、ヒト抗体が作製されてもよい。ColeらおよびBoernerらの技術も、ヒトモノクローナル抗体の調製のために利用可能であるおよびBoerneretalJImmunol1478695。同様に、ヒト抗体は、内因性免疫グロブリン遺伝子が部分的にまたは完全に不活化されているトランスジェニック動物、例えば、トランスジェニックマウスに、ヒト免疫グロブリン遺伝子座を導入することにより作成され得る。抗原投与により、遺伝子の転位、組み立て、および抗体レパートリーを含むすべての点においてヒトにおいて見られるものに精密に類似しているヒト抗体産生が観察される。このアプローチは、例えば、米国特許第5545807号;5545806号;第5569825号;第5625126号;第5633425号;第5661016号、および以下の科学的刊行物に記載されている:MarksetalBioTechnology10779783;LonbergetalNature368856859;MorrisonNature36881213;FishwildetalNatureBiotechnology1484551;NeubergerNatureBiotechnology14826;LonbergHuszarInternRevImmunol136593。活性の検出当業者により認識されるように、GNAQ活性またはGNA11活性は、発現レベルを評価するため、または活性の阻害剤を同定するために検出され得る。活性は、GTPおよびGDPとの結合活性、GTP加水分解酵素活性、またはホスホリパーゼCβの測定を含む、多様なインビトロおよびインビボのアッセイを使用して査定され得る。いくつかの態様において、GNAQ活性またはGNA11活性は、形質転換または色素沈着に関連したもののようなさらなる終点を使用して評価され得る。そのようなアッセイは、実施例およびさらなるGNAQ阻害剤またはGNA11阻害剤の同定の方法を詳述するセクションにおいて、より詳しく記載される。典型的には、GNAQ活性またはGNA11活性は、GNAQまたはGNA11が相互作用するタンパク質、例えば、抗体、リガンド、またはシグナル伝達分子のようなその他のタンパク質に結合する能力を測定することにより決定される。疾患診断/予後予測GNAQまたはGNA11の核酸配列およびポリペプチド配列は、患者におけるメラニン形成細胞性新生物、例えば、青色母斑、ブドウ膜黒色腫、または悪性青色母斑の診断または予後予測のために使用され得る。例えば、上記のように、患者由来のメラニン形成細胞性新生物試料中のGNAQまたはGNA11の配列を決定し、ここで、GnaqまたはGna11の、例えば182位における、183位における、または175位と182位の両方における、エキソン4活性化変異は、メラニン形成細胞性新生物の存在またはその可能性を示し得る。本発明の方法は、癌を有する患者における最適の処置コースを決定するために使用され得る。例えば、GNAQまたはGNA11におけるエキソン4活性化変異の存在は、GNAQまたはGNA11、ホスホリパーゼCβ、またはGNAQもしくはGNA11により調節される下流経路を標的とする治療薬などのある種の治療薬が、それらの患者にとって有益であろうことを示し得る。さらに、GNAQまたはGNA11におけるエキソン4変異を有するメラニン形成細胞性新生物細胞の数と、何らかの抗黒色腫剤の相対効力との間の相関が、容易に確立され得る。そのような分析は、例えば、後向きに達成され得る。即ち、患者から以前に採取された試料において活性化変異について分析し患者は、その後、一つまたは複数の型の抗癌治療、例えば、Gタンパク質またはホスホリパーゼCβまたはGNAQもしくはGNA11により調節されるその他の下流経路を標的とする治療を受ける、変異を有するメラニン形成細胞性新生物細胞の数を、処置の既知の効力と相関させることにより達成され得る。しばしば、そのような方法は、さらなる診断法、例えば、他の黒色腫の指標の検出、例えば、細胞形態等の検出と共に使用されると考えられる。他の態様において、癌についての情報、例えば、GNAQもしくはGNA11を標的とするまたはGNA11により調節される下流経路を標的とする治療薬のようなある種の処置の効力を決定するため、黒色腫細胞を含有していることが既知の組織試料、例えば、腫瘍由来の組織試料が、GNAQまたはGNA11のエキソン4活性化変異について分析されると考えられる。いくつかの態様において、黒色腫、例えば、ブドウ膜黒色腫もしくは悪性青色母斑を有する患者の予後を決定するために、または疾患の進行を決定するために、GNAQまたはGNA11のエキソン4活性化変異の存在についての黒色腫細胞の分析が使用され得る。診断的存在とは、GNAQまたはGNA11における1つまたは複数のエキソン4活性化配列変異の存在を指す。黒色腫細胞を含有していると推測される任意の生物学的試料が、進行を決定するために評価され得る。例えば、皮膚または眼などの組織と同様に、肝臓または肺のような内臓器官、血液、リンパ節、骨等に由来する組織が、エキソン4GNAQまたはGNA11配列変異の存在について分析され得る。いくつかの態様において、本発明の方法は、GNAQまたはGNA11のエキソン4活性化変異の存在または非存在を記録することを含む。この情報は、コンピュータにより読み取り可能な形式で保管され得る。そのようなコンピュータシステムは、典型的には、中央処理装置、システムメモリ典型的には、RAM、入出力IO制御装置、ディスプレイアダプタを介したディスプレイスクリーンのような外部装置、シリアルポート、キーボード、ストレージインターフェースを介した固定ディスクドライブ等のような主要なサブシステムを含む。シリアルポートを介して接続されるネットワークインターフェースのような、その他の多くの装置が、接続されていてもよい。少なくとも一つのネットワークデバイス例えば、コンピュータ、ディスクアレイ等が、本発明のアッセイから取得されたデータを符号化したビットパターンを構成する磁気ドメイン例えば、磁気ディスクおよび/またはチャージドメイン例えば、DRAMセルのアレイのパターンを含むよう、コンピュータシステムは、イーサネットケーブル同軸ケーブルもしくは10BaseT、電話回線、ISDN回線、無線ネットワーク、光ファイバー、またはその他の適当な信号伝送媒体のようなデータリンクを介して連係された多数のコンピューティングデバイスを含む、ネットワークに連係されていてもよい。GNAQまたはGNA11の阻害剤またはモジュレーター別の局面において、本発明は、GNAQまたはGNA11におけるエキソン4活性化変異を有する黒色腫細胞の増殖を阻害する方法であって、阻害剤またはGnaqアンタゴニストまたはGna11アンタゴニストをそのような黒色腫、例えばブドウ膜黒色腫を有する患者に投与することを含む方法を含む。阻害剤およびGNAQアンタゴニストまたはGNA11アンタゴニストは公知である。例えば、本発明による使用に適している非限定的な阻害剤の例には、PKC、ならびにPKCμおよびPKCεを含む様々なPKCアイソフォームの特異的阻害剤および非特異的阻害剤が含まれ得る。本発明による使用に適している他の阻害剤の例には、スタウロスポリン、スタウロスポリンアナログCPG41251、ブリオスタチン1、KAI9803、7ヒドロキシスタウロスポリン、Lトレオジヒドロスフィンゴシンサフィンゴール、非選択的PKC阻害剤PKC412、イルモホシンBM41440、PCKμを含むPKCの古典的アイソフォームをより特異的に阻害するインドールカルバゾールであるGo6976、PKCαアンチセンス阻害剤LY900003、およびPKCβ阻害剤LY333531、LY317615エンザスタウリンが含まれる。ホスホリパーゼCβの非限定的な阻害剤の例には、エデルホシンおよびフルビルシンB2が含まれ得、これらも本発明における使用に適している。その他の阻害剤には、抗体、ペプチド、核酸、例えば、siRNA等のような阻害剤が含まれる。本明細書において使用されるように、Gnaq阻害剤とは、Gnaq核酸発現および/もしくはGnaqタンパク質活性、または、いくつかの態様において、Gnaqにより調節される下流経路をモジュレートする分子であり得る。同様に、Gna11阻害剤とは、Gna11核酸発現および/もしくはGna11タンパク質活性、または、いくつかの態様において、Gna11により調節される下流経路をモジュレートする分子であり得る。いくつかの態様において、GNA11阻害剤またはGNAQ阻害剤は、GNA11核酸配列またはGNAQ核酸配列を標的とする阻害性RNA分子である。いくつかの態様において、阻害性RNA分子は、GNA11核酸配列とGNAQ核酸配列の両方を標的とし得る。GnaqまたはGna11を阻害する能力は、適切なアッセイを使用して、例えば、活性、例えば、GTP結合活性またはGTP加水分解酵素活性をアッセイし、活性の量を、阻害剤により処置されていない対照と比較することにより同定され得る。別の態様において、Gnaq発現レベルまたはGna11発現レベルに対する試験化合物の効果を査定するため、mRNAおよび/またはタンパク質の発現レベルを測定することができる。GnaqまたはGna11を発現している宿主細胞を、相互作用をもたらすために十分な時間、試験化合物と接触させ、次いで、mRNAまたはタンパク質のレベルを測定する。そのような相互作用をもたらすための時間の量は、経験的に決定され得、例えば、時間経過を追い、時間の関数として発現のレベルを測定することにより、決定され得る。発現の量は、適当であることが当業者に公知の任意の方法を使用することにより測定され得る。次いで、発現の量を、試験化合物の非存在下での発現の量と比較する。実質的に同一の細胞は、組換え細胞が調製されたのと同一であるが、異種DNAの導入により改変されていない細胞に由来し得る。発現の量の違いは、試験化合物が何らかの様式でGnaqレベルまたはGna11レベルを改変したことを示す。Gnaq阻害剤またはGna11阻害剤を同定するためのいくつかのアッセイにおいて、可能性のある阻害剤により処理された試料は、モジュレーションの程度を決定するため、対照試料と比較される。変異を有しておらず、候補阻害剤により処置されていない対照試料に、100という相対活性値を割り当てる。対照に対する相対活性値が約80、任意で50、任意で25~0である時、GNA11の阻害が達成されている。Gnaq阻害剤またはGna11阻害剤は、任意の小さな化学的化合物、または生物学的実体、例えば、タンパク質、糖、核酸、もしくは脂質のような高分子であり得る。いくつかの態様において、GNAQ阻害剤またはGNA11阻害剤は、1500ダルトン未満、およびいくつかの場合において、1000、800、600、500、または400ダルトン未満の分子量を有する低分子である。より小さな分子は、より高い分子量を有する薬剤より、経口吸収を含む良好な薬物動態学的特徴と適合性の生理化学的特性を有する可能性が高いため、薬剤の比較的小さいサイズが望ましい場合がある。例えば、透過性および可溶性に基づき、薬物として成功する可能性がより低い薬剤は、Lipinskiらにより以下のように記載された:5個より多いH結合ドナーOHおよびNHの合計として表されるを有する;500を超える分子量を有する;5を超えるLogPまたは415を超えるMLogPを有する;かつ/または10個より多いH結合アクセプターNおよびOの合計として表されるを有する。例えば、LipinskietalAdvDrugDeliveryRes23325を参照のこと。生物学的トランスポーターの基質である化合物クラスは、典型的には、法則の例外である。発現の阻害上述のように、核酸阻害剤も、GNAQまたはGNA11を阻害するために使用され得る。従って、転写または翻訳のレベルでGNAQまたはGNA11の発現に特異的に干渉するヌクレオチド配列が、黒色腫または母斑を処置するために使用され得る。いくつかの態様において、そのような核酸阻害剤は、GNA11およびGNAQの両方の発現に干渉するために十分に同一であるGNA11ヌクレオチド配列およびGNAQヌクレオチド配列を標的としてもよい。阻害性核酸アプローチは、例えば、siRNAによるmRNAの分解を誘導するか、またはアンチセンス核酸によりmRNAを遮蔽することにより、GNAQまたはGNA11のまたは両方のmRNAの転写または翻訳を阻止するため、siRNAおよび/またはアンチセンスオリゴヌクレオチドを利用し得る。siRNAまたはRNAiとは、siRNAが遺伝子または標的遺伝子と同一の細胞において発現された時に、遺伝子または標的遺伝子の発現を低下させるかまたは阻害する能力を有する二本鎖RNAを形成する核酸を指す。従って、siRNAとは、相補鎖により形成された二本鎖RNAを指す。二本鎖分子を形成するためにハイブリダイズするsiRNAの相補的な部分は、典型的には、実質的なまたは完全な同一性を有する。一つの態様において、siRNAとは、標的遺伝子との実質的なまたは完全な同一性を有し、二本鎖siRNAを形成する核酸を指す。siRNAの配列は、全長標的遺伝子に対応してもよいし、またはその部分配列に対応してもよい。典型的には、siRNAは、少なくとも約15~50ヌクレオチド長である例えば、二本鎖siRNAの相補的な配列は、各々、15~50ヌクレオチド長であり、二本鎖siRNAは、約15~50塩基対長、好ましくは、約20~30塩基ヌクレオチド長、好ましくは、約20~25ヌクレオチド長、例えば、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、または30ヌクレオチド長である。サイレンシングまたはダウンレギュレーションとは、干渉RNAまたはその他の核酸配列の非存在下で検出される正常なレベルと比較した、標的配列、即ち、siRNAにより標的とされた配列の転写および/もしくは翻訳の検出可能な減少、または標的配列もしくは標的タンパク質の量もしくは活性の減少を指す。検出可能な減少は、5もしくは10と小さくてもよいし、または80、90、もしくは100と大きくてもよい。より典型的には、検出可能な減少は、20、30、40、50、60、または70からの範囲である。例えば、ヘアピン二重鎖としてdsRNAまたはsiRNAを転写するDNA分子も、RNAiを提供する。例えば、SEQIDNO1またはSEQIDNO3のようなGNAQ核酸配列またはGNA11核酸配列に特異的にハイブリダイズするdsRNAオリゴヌクレオチドが、本発明の方法において使用され得る。GNAQ核酸配列またはGNA11核酸配列に特異的にハイブリダイズするアンチセンスオリゴヌクレオチドも、GNAQまたはGNA11の転写および/または翻訳をサイレンシングし、従って、黒色腫、例えば、ブドウ膜黒色腫、または青色母斑のような母斑を処置するために使用され得る。アンチセンス核酸DNA分子またはRNA分子のいずれかを設計する方法は、当技術分野において周知である。アンチセンス核酸は、天然に存在するヌクレオチド、または、修飾ヌクレオチド、例えば、ホスホロチオエート、メチルホスホネート、およびアノマー糖リン酸、骨格修飾ヌクレオチドを含み得る。GNAQまたはGNA11の発現をモジュレートする阻害剤の能力は、公知の方法を使用して評価され得る。そのような方法は、一般に、GNAQまたはGNA11を発現している一つまたは複数の細胞と試験化合物とを接触させる、細胞に基づくアッセイを実行し、次いで、発現転写物または翻訳産物のいずれかの減少を検出することを含む。黒色腫処置および薬学的組成物の投与GNAQまたはGNA11の阻害剤は、GNAQまたはGNA11のエキソン4活性化配列変異を有するメラニン形成細胞性新生物の処置のため、患者に投与され得る。以下に詳細に記載されるように、阻害剤は、任意で、薬学的に許容される担体を用いて、任意の適当な様式で投与される。いくつかの態様において、PKCまたはホスホリパーゼCβの阻害剤が投与される。阻害剤の投与のためのプロトコールは公知であり、薬理学分野において公知の原理に基づき、黒色腫患者のためにさらに最適化され得る例えば、RemingtonTheScienceandPracticeofPharmacy21stEditionPhiladelphiaPALippincottWilliamsWilkins2005を参照のこと。阻害剤は、メラニン形成細胞性新生物を予防する、処置する、または制御するために治療的有効量で患者へ投与され得る。この化合物は、患者において効果的な防御または治療応答を誘発するのに十分な量で患者へ投与される。効果的な治療応答は、疾患の症状もしくは合併症を少なくとも部分的に停止するまたは遅らせる応答である。これを達成するのに適切な量は、治療的有効量と定義される。その用量は、用いられる特定のGNAQまたはGNA11阻害剤の効力、および被験体の状態、加えて体重または処置される領域の表面積により決定される。用量のサイズはまた、特定の被験体における特定の化合物の投与に伴う任意の有害効果の存在、性質、および程度により決定される。そのような化合物の毒性または治療効力は、細胞培養または実験動物における標準的な薬学的手順、例えば、LD50およびED50を測定することにより、決定され得る。毒性効果と治療効果の間の用量比は治療指数であり、比、LD50ED50として表され得る。治療指数の大きい化合物が好ましい。毒性副作用を示す化合物も用いられ得るが、正常細胞への潜在的な損傷を最小限にし、それにより副作用を低減するように罹患組織の部位へそのような化合物を標的化する送達系を設計するという配慮がなされるべきである。細胞培養アッセイおよび動物実験から得られたデータは、ヒトに用いる用量範囲を策定するために用いられ得る。そのような化合物の用量は、好ましくは、有るか無しかの毒性でED50を含む循環濃度の範囲内にある。用量は、用いられる剤形および投与経路に依存してこの範囲内で変動し得る。本発明の方法に用いられる任意の化合物について、治療的有効量は、最初に、細胞培養アッセイから推定され得る。細胞培養において測定されたようなIC50を含む循環血漿濃度範囲を達成するように動物モデルにおいて用量が策定され得る。そのような情報は、ヒトにおける有用な用量をより正確に決定するために用いられ得る。血漿におけるレベルは、例えば、高速液体クロマトグラフィーにより、決定され得る。一般的に、モジュレーターの用量当量は、典型的な被験体について約1ngkgから10mgkgまでである。siRNAは、siRNAの注射、吸入、または経口摂取を含む、当技術分野において公知の任意の手段を使用して、対象に送達され得る。siRNAのための別の適当な送達系は、例えば、高分子複合体、ナノカプセル、マイクロスフェア、ビーズ、ならびに水中油型エマルション、ミセル、混合ミセル、およびリポソームを含む、脂質に基づく系のような、コロイド分散系である。本発明の好ましいコロイド系はリポソームである。リポソームとは、インビトロおよびインビボで送達媒体として有用な人工膜小胞である。リポソーム内のRNAおよびDNAを含む核酸は、生物学的に活性な型で細胞に送達され得るFraleyetalTrendsBiochemSci6771981。リポソームは、当技術分野において公知の任意の手段を使用して、特定の細胞型または組織にターゲティングされ得る。GNAQまたはGNA11に特異的なアンチセンスポリヌクレオチドの送達も、例えば、ポリヌクレオチドの直接注射、吸入、または摂取を含む、当技術分野において公知の任意の手段を使用して達成され得る。さらに、アンチセンスポリヌクレオチドは、組換え発現ベクター例えば、アデノウイルス、ヘルペスウイルス、ワクシニアウイルス、もしくはレトロウイルスに基づくウイルスベクターまたはコロイド分散系例えば、リポソームを使用して送達されてもよい。GNAQまたはGNA11を標的とする処置は、別の黒色腫治療剤と同時に、または別の黒色腫治療剤の前もしくは後に、他の黒色腫治療薬と共に投与されてもよい。本発明に用いる薬学的組成物は、1つもしくは複数の生理学的に許容される担体または賦形剤を用いて標準技術により製剤化され得る。化合物ならびにそれらの生理学的に許容される塩および溶媒和物は、吸入を介して、局所に、経鼻で、経口で、非経口で、または直腸にを含む任意の適切な経路による投与のために製剤化され得る。経口投与について、薬学的組成物は、例えば、結合剤、例えば、α化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドン、もしくはヒドロキシプロピルメチルセルロース;増量剤、例えば、ラクトース、微結晶性セルロース、もしくはリン酸水素カルシウム;潤滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、もしくはシリカ;崩壊剤、例えば、ジャガイモデンプンもしくはデンプングリコール酸ナトリウム;または湿潤剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウムを含む、薬学的に許容される賦形剤と共に通常の手段により調製される錠剤またはカプセルの形をとり得る。錠剤は、当技術分野において周知の方法によりコーティングされ得る。経口投与のための液体調製物は、例えば、溶液、シロップ、もしくは懸濁液の形をとり得る、またはそれらは、使用前の水もしくは他の適した媒体との構成のための乾燥製品として提供され得る。そのような液体調製物は、薬学的に許容される添加剤、例えば、沈殿防止剤、例えば、ソルビトールシロップ、セルロース誘導体、または水素化食用脂;乳化剤、例えば、レシチンまたはアラビアゴム;非水性媒体、例えば、アーモンドオイル、油性エステル、エチルアルコール、または分留化植物油;および保存剤、例えば、pヒドロキシ安息香酸メチルもしくはプロピル、またはソルビン酸、と共に通常の手段により調製され得る。調製物はまた、必要に応じて、緩衝塩、香味剤、着色剤、およびまたは甘味剤を含み得る。必要なら、経口投与のための調製物は、活性化合物の徐放性を与えるように適切に製剤化され得る。吸入による投与について、化合物は、好都合なことに、適切な噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、または他の適切なガス、を用いて、加圧パックまたは噴霧器からのエアゾールスプレー供与の形で送達され得る。加圧エアゾールの場合、用量単位は、定量を送達するためのバルブを提供することにより決定され得る。ゼラチンなどの、吸入器または注入器に用いるカプセルおよびカートリッジは、ラクトースまたはデンプンなどの、化合物および適した粉末基剤の粉末混合物を含んで製剤化され得る。化合物は、注入、例えば、ボーラス注入または持続注入による非経口投与のために製剤化され得る。注入のための製剤化は、加えられた保存剤と共に、単位用量形で、例えば、アンプル中または複数回用量容器中で、提供され得る。組成物は、油性または水性媒体中の懸濁液、溶液、または乳濁液などの形をとることができ、製剤化剤、例えば、懸濁剤、安定剤、およびまたは分散剤を含み得る。あるいは、活性成分は、使用前の適切な媒体、例えば、滅菌した発熱物質を含まない水、との構成のための粉末形であり得る。化合物はまた、直腸作用性組成物、例えば、カカオバターまたは他のグリセリドのような通常の坐剤基剤を含む坐剤または保持浣腸剤に製剤化され得る。さらに、化合物はデポ製剤として製剤化され得る。そのような長時間作用性製剤は、埋め込みにより、または筋肉内注射により投与され得る。従って、例えば、化合物は、適切な高分子もしくは疎水性材料で、もしくはイオン交換樹脂で、または難溶性塩のような難溶性誘導体として、製剤化され得る。組成物は、必要に応じて、活性成分を含む1つまたは複数の単位用量形を含み得るパックまたはディスペンサー装置で提供され得る。パックは、例えば、金属またはプラスチックホイルからなる、例えば、ブリスターパックであり得る。パックまたはディスペンサー装置は、投与についての使用説明書を添付し得る。診断的および/または予後予測的な適用において使用するためのキット本発明は、診断的または治療的な適用のためのキットも提供する。診断的/予後予測的な適用のために、そのようなキットは、以下のうちのいずれかまたは全てを含み得る:アッセイ試薬、緩衝液、エキソン4活性化変異の存在を同定するために使用され得る、GNAQおよび/またはGNA11についてのプローブ、プライマー、抗体等。いくつかの態様において、GNA11および/またはGNAQのエキソン4についての診断試薬を含むキットは、GNAQおよび/またはGNA11のエキソン5内の変異、例えば、209位の変異を検出するための診断試薬も含んでいてよい。そのようなキットは、例えば、GNA11、または単独でもしくはエキソン5と共にエキソン4をコードする核酸配列を含む部分領域を特異的に増幅するためのプライマーセット、およびGNAQ、または単独でもしくはエキソン5と共にエキソン4をコードする核酸配列を含む部分領域を特異的に増幅するためのプライマーセットを含み得る。さらに、キットは、GNAQまたはGNA11の182位または183位における変異のようなエキソン4変異を検出するプローブを含んでいてもよく、任意で、GNA11および/またはGNAQの209位をコードするコドンを検出するための1個または複数個のプローブを含んでいてもよい。いくつかの態様において、キットは、GNA11に特異的なプローブ、およびGNAQに特異的なプローブのみならず、変異対立遺伝子と野生型対立遺伝子とを識別するプローブを含んでいてもよい。任意で、キットは、GNA11およびGNAQのための増幅プライマーをさらに含んでいてもよい。さらに、キットは、本発明の方法の実施のための指示即ち、プロトコールを含有している説明材料を含み得る。説明材料には、典型的には、書面または印刷物が含まれるが、そのようなものに限定されない。そのような説明を記憶し、エンドユーザにそれを伝えることができる任意の媒体が、本発明により企図される。そのような媒体には、電子記憶媒体例えば、磁気ディスク、テープ、カートリッジ、チップ、光学媒体例えば、CDROM等が含まれるが、これらに限定されない。そのような媒体には、そのような説明材料を提供するインターネットサイトへのアドレスも含まれ得る。実施例1GNAQおよびGNA11のエキソン4配列変異の存在についての黒色腫試料および母斑試料の調査GNAQおよび/またはGNA11のエキソン4における特定の変異がヒトメラニン形成細胞性新生物において役割を果たしているか否かをさらに決定するため、ブドウ膜黒色腫および青色母斑において、GNAQおよびGNA11のコード領域を配列決定した。選択された生検材料に由来する正常周辺組織においても、GNAQコード領域およびGNA11コード領域を配列決定した。方法論組織アーカイブされたパラフィン包埋生検材料を使用した。各試料について、厚さ5~20μmの切片からDNAを抽出し、腫瘍を保持している組織を手動でマイクロダイセクトした。配列決定試料DNAをPCRを使用して増幅した。反応条件は、025mM各dNTP、04×BSANewEnglandBiolabs、1UHotstarTaqQiagen、1×HotstarTaq緩衝液Qiagen、および05μMの順方向プライマーおよび逆方向プライマーであった。PCR反応物をカラムを使用して精製し、次いで、BigDyeABIを使用した配列決定反応の鋳型として使用した。両方向に配列決定を達成した。両方の配列決定方向で変異を有すると同定された試料については、少なくとも2回反復した。変異を有する試料について、変異が体細胞性に獲得されたか否かを決定するため、隣接正常組織からのDNAを配列決定した。結果結果は表1に要約される。本発明者らは、ブドウ膜黒色腫におけるGNAQおよびGNA11の変異ホットスポットを同定した。本発明者らは、123のブドウ膜黒色腫原発性または転移性におけるGNAQおよびGNA11のエキソン4および5を配列決定し、GNAQのエキソン4内のR183に変異を有する5つの黒色腫試料、およびV182に変異を有する1つの黒色腫試料=5、ならびにGNA11のR183に変異を有する3つの黒色腫試料=2を発見した。GNAQのエキソン4のV182に変異を有する黒色腫は、T175にも変異を有していた。R183にもV182にも変異を有しないブドウ膜黒色腫は、4912340の場合でGNAQQ209に変異を有し、4212334の場合でGNA11Q209に変異を有していた。全ての変異が相互に排他的であることが見出された。即ち、V182およびT175にエキソン4変異を有していた黒色腫試料を例外として、これらの変異を複数保有しているブドウ膜黒色腫はなかった。本発明者らは、青色母斑試料においてもGNA11のエキソン4変異を同定した。同定された変異型アルギニン残基は、Gアルファタンパク質のファミリー全体で高度に保存されている。GアルファSおよびGアルファIの対応するアルギニンにおける変異は、様々なヒト内分泌腫瘍下垂体、甲状腺、卵巣、および副腎において発見され、gsp癌遺伝子およびgip2癌遺伝子と命名された例えば、LandisetalNature340692696;LyonsetalScience249655659。変異型オンコプロテインは、GTP結合状態において構成的に活性化されるGTPアーゼ活性を失っていることが証明された例えば、ConklinetalJBiolChem2673134;KalinecetalMolCellBiol1246874693。R183変異を保持しているヒト新生物は、以前に記載されていない。様々なインビトロ研究が、Q209変異がR183変異より強力であることを示している。グルタミン209に変異を有するタンパク質は、100GTPと結合しているが、アルギニン183変異体は、50しかGTPと結合しておらず、野生型タンパク質は、事実上排他的にGDPと結合しているKleussetalProcNatlAcadSciUSA9198289831。相応して、GNAQQ209変異体は、R183変異体より高いホスホリパーゼcベータ1結合、イノシトールリン酸誘導、および血清応答因子により媒介される遺伝子転写を示すOrthetalProcNatlAcadSciUSA10671797184;EvankoetalCellSignal1712181228;TakasakietalJofBiolChem2794743847445。GNAQの阻害剤YM254890および活性化剤PMTパスツレラマルトシダPasteurellamulticida毒素は、R183変異の機能をそれぞれ妨害するかまたは強化するが、Q209L変異体に対しては影響を及ぼさないOrthetalおよびTakasakietal前記。理論によって拘束はされないが、R183変異のより弱い性質は、この変異を保有しているブドウ膜黒色腫が、異なって挙動する可能性があることを示唆し、例えば、さらなる遺伝子改変によって、それらがQ209変異と同等の活性を有するようになる可能性があることを示唆する。R183変異の活性化状態を、例えば、低分子により、改変する能力は、Q209変異腫瘍のものと根本的に異なる処置オプションの開発を可能にし得る。さらに、T175における変異と共に起こったV182における変異は、おそらく相加的である。実施例2GNAQ変異、GNA11変異を検出するさらなる分析参加機関における機関審査委員会の承認を得た後、標本アーカイブからパラフィン包埋生検標本を回収した。DNAを抽出し、GNAQおよびGNA11を配列決定し、症例のサブセットに対してアレイ比較ゲノムハイブリダイゼーションCGHを実施するために使用した。野生型もしくは構成的活性型のGNA11もしくはGNAQの発現構築物、またはβガラクトシダーゼ対照ベクターにより形質導入されたmelana細胞不死化非腫瘍形成マウスメラニン形成細胞を使用して、NODSCIDインターロイキン2受容体γヌルマウスにおいて、腫瘍原性実験を実施した。配列決定の結果本発明者らは、GNAQについて以前に記載された例えば、VanRaamsdonketalNatur4575996022009を参照のこと、メラニン形成細胞性腫瘍の同一の特定のサブセットにおいて、GNA11のQ209に影響を与える変異を見出した表2および3。Q209をコードするコドンにおけるGNA11の変異頻度は、青色母斑7、原発性ブドウ膜黒色腫32、ブドウ膜黒色腫転移57の順に増加し、そのパターンは、青色母斑において最も多く55、ブドウ膜黒色腫転移において最も少ない22GNAQQ209変異の分布と逆であったp0001表2。GNA11のコドン209に影響を与える変異は、CAG→CTG945、CAG→CCG27、CAG→CTA14、およびCAG→CTT14であった。これらの変異は、分析された試料の973におけるロイシン置換、これらの試料の27におけるプロリン置換を示す。本発明者らは、それぞれ、GNASおよびGNAI2のR201およびR179に類似している、エキソン4内のアルギニン183におけるGNAQおよびGNA11の変異を同定した表3LyonsetalScience24965591990。GNAQまたはGNA11のいずれかのR183に影響を与える変異は、青色母斑の2およびブドウ膜黒色腫の6に存在した。GNA11のR183に影響を与える大部分の変異は、単一CGC→TGCまたは二重GTCCGC→GTTTGCのシトシン→チミントランジションのいずれかにより引き起こされた、システインへの置換をもたらした。この二重変異は、コドン182におけるサイレント変異をもたらす。単一の青色母斑は、ヒスチジン置換を予測する、グアニン→アデニントランジションCGC→CACをコドン183に有していた。この腫瘍は、GNA11Q209L変異も同時に保有しており、本発明者らが分析した腫瘍の中で、コドン183および209の両方に変異を保有していた唯一の腫瘍であった。他の全ての試料において、コドン183および209の変異は相互に排他的であり;実際、GNAQ変異およびGNA11変異を同時に有するものはなかったp<00001。GNAQにおいて、コドン183における変異は、全て、グルタミン置換を示す、CGA→CAAトランジションであった。単一のブドウ膜黒色腫は、コドン175ACG→AGGおよび182GTT→ATTに変異を有していた。R183における変異を有する11の腫瘍は、全て、順方向鎖または逆方向鎖のいずれかにシトシン→チミントランジションを示した。逆方向鎖上のシトシン→チミントランジションは、順方向鎖上ではグアニン→アデニントランジションとして出現する。さらに、3つの腫瘍はCC→TTトランジションを保有していた。これらの改変は、紫外光により誘導される特徴的な変異パターンでありHockerTsaoHumMutat200728578882007;PfeiferYouMutatRes57119312005、日光に曝された皮膚に発生した皮膚黒色腫において、著しく増加した頻度で見出されるPleasanceetalNature201046319162010。コドンQ209において、優勢な変異は、GNAQにおいてもGNA11においても、アデニン→チミンA→Tトランスバージョンである。興味深いことに、順方向鎖のQ209における単一C→TトランジションGNAQおよびGNA11について、それぞれ、CAA→TAAおよびCAG→TAGは、活性化変異ではなく、終止コドンをもたらすであろう。同様に、GNA11の逆方向鎖の209位におけるC→Tトランジションは、サイレント変異CAG→CAAを生ずるであろう。従って、Q209は、公知のUVサインsignatureを明らかにするであろう塩基対組成を有していない。しかしながら、本発明者らは、C→Tトランジションを含む、Q209におけるタンデム塩基変異を、2例、見出したGNAQおよびGNA11について、それぞれ、CAA→TTAおよびCAG→CTA。GNAQまたはGNA11の変異により影響を受けた青色母斑の型を組み合わせたものの全画分は、63であった表2および表3。分節性メラノサイトーシスmelanocytosesである伊藤母斑および太田母斑は、細胞密度が低いため26、いくつかの試料においては変異が見落とされた可能性がある。伊藤母斑および太田母斑を除外すると、青色母斑の75が、GNAQまたはGNA11の変異を有する。合計すると、本発明者らが調査した全ブドウ膜黒色腫の83が、GNAQまたはGNA11の発癌性変異を有していた。予後予測指標および生存期間との相関原発性腫瘍の位置を決定することが可能であったブドウ膜黒色腫の118症例について、毛様体脈絡膜領域で発生した病変は、GNA11変異のより高い頻度を有していた図1。GNAQおよびGNA11の変異は、紡錘細胞のみから構成される試料と比較した時、類上皮細胞または類上皮細胞と紡錘細胞との混合物を有する原発性腫瘍において、より多く見出されたが、これは統計的に有意ではなかった。比較ゲノムハイブリダイゼーションCGHを使用して、本発明者らは、予後予測的に関連する染色体異常例えば、WhiteetalCancer833543591998が36の原発性ブドウ膜黒色腫に存在するか否かを決定することを試みたが、それらの存在とGNAQおよびGNA11の変異状態との間の関連は観察されなかった。しかしながら、35の試料は、いずれも、比較のための変異を有していなかったため、この分析は極めて限定されていた。本発明者らが必要なデータを有していた81症例についての全生存期間および無病生存期間の調査は、GNAQ変異を保持している腫瘍を有する者と、GNA11変異を保持している腫瘍を有する者との間の有意差を明らかにしなかった。しかしながら、GNAQ変異を保持している腫瘍、またはGNAQ変異もGNA11変異も保持していない腫瘍と比較して、GNA11変異を保持している腫瘍においては、より長い生存期間の傾向が観察された。GNA11R183Cの機能的バリデーション癌遺伝子としてのGNA11R183CおよびGNA11Q209Lをバリデートするため、本発明者らは、不死化マウスメラニン形成細胞melana細胞を、これらの変異遺伝子のうちの一方により形質導入し、形質導入細胞を免疫低下マウスへ注射し、腫瘍の形成についてマウスをモニタリングした。非変異型GNA11、またはβガラクトシダーゼをコードするlacZにより形質導入されたメラニン形成細胞を注射されたマウスを、陰性対照とした図2A~F。GNA11Q209Lメラニン形成細胞についての6つの注射部位の各々において、急速に成長する腫瘍が発達した。より低い効力の報告と一致してConklinetalJBiolChem19922673141992、GNA11R183C変異体による形質導入は、観察期間中、8つの注射部位のうちの3つにおいて、GNA11Q209L形質導入メラニン形成細胞から発生した腫瘍と比較して増加した潜伏期間を有する腫瘍をもたらした。本発明者らは、対照群の注射部位βガラクトシダーゼ:n=6;GNA11wt:n=10には、腫瘍を観察しなかった。GNA11Q209L形質導入melana細胞を注射されたマウスは、3匹ともすべてが、転移を発症し;3匹が肺に転移を発症し、1匹が肝臓に転移を発症した。GNA11Q209L形質導入メラニン形成細胞のウェスタンブロット分析は、MAPキナーゼ活性化を明らかにした図2G。インビトロで、GαqR183変異体の活性化のレベルは、GαqQ209変異体のものより低いため、R183変異を有するオンコプロテインはより低い効力を有する可能性があるConklinetal前記。腫瘍原性アッセイにおける増加した潜伏期間およびより低い浸透率の所見は、この概念と一致している。GαqR183は、クロモバクテリウムChromobacteriumに由来する天然に存在する毒素YM254890により阻害され得るが、GαqQ209は阻害され得ないことが観察されていることが注目されるTakasakietalJBiolChem27947438452004。本明細書に引用された全ての刊行物、特許、アクセッション番号、および特許出願が、あたかも個々の刊行物または特許出願が各々参照により組み入れられると具体的に個々に示されたかのごとく、参照により本明細書に組み入れられる。上記の発明は、理解の明瞭の目的のため、例示および実施例によってある程度詳細に記載されたが、本発明の教示を考慮すれば、添付の特許請求の範囲の本旨または範囲を逸脱することなく、ある種の変更および改変がなされ得ることは、当業者には容易に明白であろう。表1GNAQおよびGNA11のエキソン4および5が配列決定された症例の概要全ての変異が相互に排他的であった表2メラニン形成細胞性新生物におけるGNAQおよびGNA11のエキソン5内のQ209の変異頻度CSD、慢性日光傷害を受けた皮膚に位置する黒色腫;非CSD、慢性日光誘発傷害の微視的兆候のない皮膚における黒色腫。表3メラニン形成細胞性新生物におけるGNAQおよびGNA11のエキソン4内のR183の変異頻度1つの原発性ブドウ膜黒色腫試料は、機能的意義が不明のGNAQのT175R変異、V182I変異を同時に有しており、この表に含まれない。CSD、慢性日光傷害を受けた皮膚に位置する黒色腫;非CSD、慢性日光誘発傷害の微視的兆候のない皮膚における黒色腫。例示的なGNAQ配列:SEQIDNO1アクセッション番号NM002072ヒトグアニンヌクレオチド結合タンパク質Gタンパク質qGNAQ、mRNASEQIDNO2アクセッション番号NP0020632グアニンヌクレオチド結合タンパク質Gタンパク質qポリペプチド[ヒトHomosapiens]黒色腫において起こるエキソン4変異の位置は、太字の拡大されたフォントで示される。例示的なGNA11のcDNAおよびタンパク質の配列:SEQIDNO3アクセッション番号NM002067GNA11、mRNA、CDS2431322SEQIDNO4GNA11タンパク質配列アクセッション番号:UniProtKBP299921;NP002058黒色腫において起こるエキソン4変異の位置は、太字の拡大されたフォントで示される。