配列番号1に記載のアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を有し、野生型Oホスホセリンスルフヒドリラーゼアミノ酸配列のC末端の3~7個のアミノ酸残基が欠失している、マイコバクテリウムスメグマチス由来Oホスホセリンスルフヒドリラーゼ変異体。C末端の5個のアミノ酸残基が欠失している、請求項1に記載のマイコバクテリウムスメグマチス由来OPSS変異体。配列番号2に記載のアミノ酸配列を有する、請求項2に記載のマイコバクテリウムスメグマチス由来OPSS変異体。77番目のプロリン残基が、セリン残基に置換されている、請求項1に記載のマイコバクテリウムスメグマチス由来OPSS変異体。配列番号3に記載のアミノ酸配列を有する、請求項4に記載のマイコバクテリウムスメグマチス由来OPSS変異体。131番目のトレオニン残基がアラニン残基がアスパラギン残基に、および238番目のトレオニン残基がセリン残基にそれぞれ置換されている、請求項1に記載のマイコバクテリウムスメグマチス由来OPSS変異体。配列番号4に記載のアミノ酸配列を有する、請求項6に記載のマイコバクテリウムスメグマチス由来OPSS変異体。i補助因子としての約0001~約2mMのPLP又は約0001~約100mMのDTTの添加、ii25~60°Cの反応温度範囲、及びiii60~100のpH範囲を含む条件下で最適活性を示す、請求項1に記載のマイコバクテリウムスメグマチス由来OPSS変異体。請求項1~8のいずれか一項に記載のOPSS変異体をコードする、核酸分子。請求項1~8のいずれか一項に記載のOPSS変異体をコードする核酸分子を保有する、発現ベクター。請求項10に記載の発現ベクターによって形質転換された、形質転換体。OホスホLセリンと硫化物とを、請求項1~8のいずれか一項に記載のOPSS変異体の存在下で反応させる段階を含む、システイン生成方法。前記OPSが、精製された形態であるか、又はOPSを含有する発酵培養液の形態である、請求項12に記載のシステイン生成方法。気体又は液体状態であるNa2S、NaSH、2SH、H2S、及びS2O3からなる群から選択される硫化物を含む、請求項12に記載のシステイン生成方法。前記硫化物が、OPSのモル濃度の01~3倍の量で使用される、請求項12に記載のシステイン生成方法。請求項1~8のいずれか一項に記載のOPSS変異体の、OPSからのシステインの生合成における使用。本発明者らは、当該技術分野のこのような課題を克服し、高収率のLシステインを生成する方法を開発するために様々な方法を模索する中で、アエロピュルムペルニクス、マイコバクテリウムツベルクローシス、及びトリコモナスバギナリスにおいて、OAS特異的経路とは異なるOホスホLセリン経路を用いてLシステインを合成するOホスホセリンスルフヒドリラーゼが存在することを発見し、さらに、追加的な酵素であるmec及びcysOとともにOPSからシステインへの変換を触媒するMツベルクローシスのOPSSは、C末端の5個のアミノ酸残基を除去した場合、追加的な酵素の非存在下でさえも、硫化供与体としてNa2Sを用いてOPSをシステインに転換することができるという事実を発見したことにより、本発明を完成するに至った。本発明は、配列番号1に記載のアミノ酸配列に対応し、C末端の3~7個のアミノ酸残基が欠失しているマイコバクテリウムスメグマチス由来のアミノ酸配列を有するOホスホセリンスルフヒドリラーゼ変異体を提供することを目的とする。本発明は、前記OPSS変異体をコードする核酸分子を提供することを別の目的とする。本発明は、前記核酸分子を保有する発現ベクターを提供することをさらなる目的とする。さらに、本発明は、前記発現ベクターによって形質転換された形質転換体を提供することをさらなる目的とする。本発明は、OPSS変異体の存在下、硫化物を用いて、OホスホLセリンをシステインに変換するための方法を提供することをさらなる別の目的とする。前述のように、OホスホセリンをLシステインに酵素変換するために必須である、酵素活性が改善されたOPSS変異体を用いて、単純な方法で、しかも高収率でOPSからLシステインを大量に生成することができる。上記目的を達成するための一つの態様として、本発明は、野生型Oホスホセリンスルフヒドリラーゼのアミノ酸配列のC末端の3~7個のアミノ酸残基が欠失している以外は配列番号1に記載のアミノ酸配列と同じであるアミノ酸配列を有するマイコバクテリウムスメグマチス由来のOPSS変異体を提供する。本発明の一実施形態によれば、本発明のOPSS変異体は、配列番号2、3及び4に記載のアミノ酸配列のうちの一つを有することができる。配列番号2に記載のアミノ酸配列を有するOPSS変異体は、77番目のプロリン残基からセリン残基への置換を有するよう、さらに改変され得る。また、配列番号2に記載のアミノ酸配列を有するOPSS変異体は、131番目のトレオニン残基からアラニン残基への、137番目のリジン残基からアスパラギン残基への、および238番目のトレオニン残基からセリン残基への置換を有するよう、さらに改変されてもよい。また、上記の変異体と少なくとも50の相同性を有する、好ましくは60、70、75、及び80、さらに好ましくは85、90、及び95、最も好ましくは97~99の相同性を有するアミノ酸配列は、本発明の範囲内である。本明細書において使用される用語、マイコバクテリウムスメグマチスとは、放線菌門に属するものであり、細くて直線状であるか、又はわずかに湾曲した桿菌で不規則な分枝を有し、塩基性試薬であるアニリンで染色が可能な菌株である。本発明では、この菌株に由来するO-ホスホセリンスルフヒドリラーゼが、そのアミノ酸を改変した場合にLシステインの生合成を高効率で触媒し得ることを見出した。本明細書において使用される用語、O-ホスホセリンスルフヒドリラーゼとは、OPSからシステインへの合成を触媒する酵素のこという。この酵素はアエロピュルムペルニクスから初めて見出され、命名されたものである。OPSSを得るためには、公知の様々な方法が使用され得る。その方法の典型的な例としては、これらに限定されるものではないが、関心対象の酵素を高効率に得られるようにするコドン最適化に基づく遺伝子合成技術、そして、微生物の遺伝子情報の大量な蓄積に基づくバイオインフォマティクスによる有用な酵素資源のスクリーニング方法が挙げられる。本発明の一実施形態では、システインを合成するためにOPSを基質として利用するOPSS酵素を、様々な微生物から選択した。これに関し、当該技術分野で公知の適当な培地及び培養条件を用いて得た細胞ペレットは、次に、OPSS酵素を含む上清を精製して、OPSS酵素を得た。本明細書において使用される用語、変異体とは、遺伝的又は非遺伝的に一つの安定した表現型変化を示す培養物や個体を意味する。用語変異体は、OPSSに関連して使用される場合は、その活性が野生型と比較して効率的に向上し得るように遺伝的に変化したOPSS酵素を意味する。本発明者らは、C末端の5個のアミノ酸残基が欠失しているマイコバクテリウムツベルクローシスH37Rv由来OPSS変異体が、追加的な酵素の非存在下でさえ、S2基を含有する硫黄供給源に対する増加した親和性を示すという結果に基づいて、マイコバクテリウムスメグマチスのOPSSからC末端の5個のアミノ酸残基を欠失させることによりOPSS変異体を調製した。本発明によるOPSS変異体は、配列番号1に記載のアミノ酸配列に対応し、C末端の3~7個のアミノ酸残基、好ましくは5個のアミノ酸残基が欠失しているマイコバクテリウムスメグマチス由来のアミノ酸配列を有する。本発明の一実施形態では、配列番号2に記載のアミノ酸配列を有する変異体は、OPSからシステインへの変換に適用した後1時間以内で100の変換率を示すことが観察された表5。アミノ酸の置換により、本発明のOPSS変異体の酵素活性をさらに増加させることができる。当該技術分野で公知の方法であれば、酵素を改善するために如何なる方法を用いてもよい。好ましくは、本発明では、酵素活性が改善されたOPSS変異体を得るために、ランダム変異誘発を使用した。具体的には、OPSSにランダム変異誘発を起こすようにした後、発明者らはHTSに基づいて開発したスクリーニングシステムを利用して、酵素活性が改善された変異体を選択した。これにより、酵素活性が改善されたOPSS変異体MsmTHA2及びMsmTEP3を、MsmT遺伝子についてのHTSスクリーニングを行うことにより得た。MsmTHA2は、77番目のプロリン残基をセリン残基に置換した以外は配列番号2に記載のアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を有するOPSS変異体である。MsmTEP3は、131番目のトレオニン残基からアラニン残基への、137番目のリジン残基からアスパラギン残基への、238番目のトレオニン残基からセリン残基への置換変異が起きている以外は配列番号2に記載のアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を有するOPSS変異体である。好ましくは、OPSS変異体MsmTHA2及びMsmTEP3はそれぞれ、配列番号3及び配列番号4に記載のアミノ酸配列を有する。本発明の一実施形態では、MsmTHA2及びMsmTEP3はいずれも、配列番号2に記載のアミノ酸残基を有するMsmTよりも高い酵素活性を示すことが見出された。具体的には、OPSS変異体MsmTHA2及びMsmTEP3は、変換反応の初期に、対照MsmTと比べてそれぞれ5倍及び12倍増加した変換率を示すことが測定された。また、MsmT酵素と比べてシステイン合成活性が4倍高いMsmTHA2変異体は、MsmTの40に対応する量で使用した場合でさえ、最終的なシステイン変換率はほぼ同等であった。本明細書において使用される用語、相同性とは、二つのポリペプチド間の同一性の割合を意味する。一配列と別の一配列との配列間の相関性は当該技術分野で公知の技術により決定され得る。例えば、配列情報を整列させて容易に入手可能なコンピュータプログラムを利用し、2つのポリペプチド分子間の配列情報を直接比較することによって相同性を決定することができる。または、相同性は相同領域間の安定した二重鎖を構成する条件下において、ポリヌクレオチドをハイブリダイゼーションした後、一本鎖特異的ヌクレアーゼで分解させ、分解した断片の大きさを決めることにより決定できる。本明細書において使用される用語、相同とは、あらゆる文法的形態又はスペリングのバリエーションにおいて、スーパーファミリー由来タンパク質及び他の種由来の相同タンパク質は、配列類似性によって反映される配列相同性を有する。しかし、一般的に使用される場合と、本発明における場合とで相同との用語は、非常に高いのように修飾された場合には、配列の類似性を意味するものであり、共通の進化的起源を意味するものではない。本明細書において使用される用語、配列類似性とは、あらゆる文法的形態において、共通の進化的起源を共有していても又は共有していなくてもよい核酸配列間又はアミノ酸配列間のタンパク質の同一性又は相関性の程度を意味する。一つの具体例では、2個のアミノ酸配列が、アミノ酸配列の所定の長さに対して少なくとも21好ましくは少なくとも約50、最も好ましくは約75、90、95、96、97、又は99のアミノ酸が一致する場合、実質的に相同又は実質的に類似である。実質的に相同である配列は、配列データバンクで利用可能な標準のソフトウェアを使用して配列を比較することによって、又は例えば特定のシステムのために定義された厳密な条件の下でのサザンハイブリダイゼーション実験において、同定することができる。定義されるハイブリダイゼーション条件は、当該技術分野の範囲内のものである例、Sambrooketal、1989、infraを参照。本発明のOPSS変異体は、OPSへの硫化物のチオール基の転移を触媒して、システインを生成することができる。好ましくは、本発明のOPSS変異体が、最適な活性を示すことができる条件は、i補助因子としての0~2mMのPLP又は0~100mMのDTTの存在、ii25~60°Cの反応温度、およびiii60~100のpHである。OPS基質へとチオール基を転移させることによるシステイン合成を触媒するOPSS酵素活性のアッセイは、ApeOPSSが命名されるとともに明らかになった。特に、ApeOPSSは、チオール基の転移によりOASをシステインに変換する活性を有しているため、アッセイは、大腸菌システイン合成酵素の活性測定方法に基づいている。本発明の一実施形態によるアッセイでは、OAS又はOPSにチオール基を提供してシステイン変換反応時にOASS又はOPSSの補助因子として作用するPLPを、02mMの濃度で添加する。また、空気中に露出してシステインがシスチンに酸化することを防止し、かつ既に酸化されたシステインの量を定量するために、DTTを添加し、還元力を付与した。好ましくは、25mMのDTT又は02mMのPLPが添加された場合、システインの変換率が23倍増加した。即ち、PLP及びDTTは、OPSからシステインへの変換に対して正の影響を有する。ApeOPSS、MtbOPSS、及びMtbT酵素の最適反応温度は、60°C若しくは37°Cであり、最適pHが74であることは以前に報告されている。上記文献の報告に基づき、酵素活性が改善されたOPSS変異体のための変換反応条件を最適化することができる。本発明の一実施形態では、OPSS変異体は、37°C~80°Cの温度で変換を触媒することができる。具体的には、高温でも増殖が可能な古細菌菌種に属するApeOPSS酵素は、37°Cに比べて60°Cの温度でより高い酵素活性を示す。また、酵素自体の熱安定性も優れているため、最適な酵素反応の温度は60°Cである。一方、MsmTは、37°Cの温度で最適酵素活性を示し、60°Cの熱処理に脆弱である。OPSS酵素は、pH60~100の範囲で変換活性を維持することが分かった。ApeOPSSはpH74で最適酵素活性が検出され、MsmTはpH80~90で最適酵素活性が検出された。したがって、MsmTはApeOPSSと比べて、より広い範囲のpHで安定である。また、別の態様として、本発明はOPSS変異体をコードする核酸分子を提供する。本明細書において使用される用語、核酸分子とは、DNA及びRNA分子を包括的に含むことを意味する。核酸分子の基本的な構成単位であるヌクレオチドは、天然のヌクレオチドだけでなく、糖又は塩基部位が修飾された類似体も含む。また、別の態様として、本発明は上記の核酸分子を保有する発現ベクターを提供する。ベクターとは、宿主細胞への、核酸のクローニング及び又は転移のための任意の媒介物を意味する。ベクターは、別のDNAセグメントが結合して、結合したセグメントの複製をもたらすことができる複製単位であってもよい。複製単位とは、インビボでDNA複製の自律的単位として機能する、即ち、自らの調整によって複製可能な、任意の遺伝的エレメントを意味する。上記の用語ベクターは、宿主細胞にインビトロ、エクスビボ、又はインビボで核酸を導入するためのウイルス性及び非ウイルス性のいずれの媒介物も含む。用語ベクターは、ミニサークルDNAを含んでもよい。例えば、上記ベクターは、細菌DNA配列を持たないプラスミドであってもよい。CpG領域において豊富な細菌DNA配列の除去は、導入遺伝子の発現のサイレンシングを減少させ、それによってプラスミドDNAベクターから、より持続的な発現が得られることが示されている用語ベクターは、眠れる森の美女のようなトランスポゾン、または人工染色体を含むことができる。ベクターとしては、T7プロモーターを利用するpETシステムが当該技術分野でよく知られている。本発明では、当該技術分野で公知の様々な発現システムを使用することができ、これに限定されない。本発明の一実施形態では、CJ1プロモーターを利用する、本発明者らが開発した外因性遺伝子発現システムを使用した。本発明の一実施形態では、T7プロモーターを使用するpETシステムと、CJ1プロモーターを使用するCJ1発現システムとの間で、同様の条件の下でOPSSの発現レベルを比較した。その結果、pETシステムに比べてCJ1システムは、より高いOPSS発現レベルを示した。さらに、OPSSの過剰発現のためには、pETシステムでは低温で長時間必要としたのに対し、CJ1システムでは、高温で短時間であった。したがって、CJ1プロモーターを利用してOPSSを効率的に得ることが好ましいが、本発明はそれに限定されない。さらに別の一態様として、本発明は、上記発現ベクターで形質転換された形質転換体を提供する。本明細書において使用される用語、形質転換とは、あらゆる文法的形態又はスペリングのバリエーションにおいて、導入された遺伝子が自己複製するかまたは因子として染色体に組み入れられるような、外来遺伝子の宿主細胞への導入から得られる細胞の人工的遺伝的変化を意味する。本発明のベクターは、当該技術分野で公知の適切な標準的な技術により宿主細胞内に導入することができる。この例としては、エレクトロポレーション、リン酸カルシウム共沈殿法、レトロウイルス感染、微量注入法、DEAEデキストラン、陽イオンリポソームカルシウム法などがあるが、これに限定されない。本明細書において使用される用語、組換えベクターによって形質転換された宿主細胞は、関心対象の遺伝子を保有する組換えベクターをもつ宿主細胞を意味する。本発明での使用に適切な宿主細胞は、原核細胞であっても又は真核細胞であってもよい。例には、腸内細菌及びコリネ型細菌が含まれ、エシェリキア属の菌種、セラチア属の菌種が好ましく、大腸菌が最も好ましい。さらに、別の態様として、本発明は、本発明のOPSS変異体の存在下、硫化物とともにOPSを変換する段階を含む、システインの生成方法を提供する。本発明の変異体を用いてシステインを大量に生成することができる。変異体を発現する形質転換体を用いる場合、当該技術分野で公知の最適化された培養条件において、システインの大量生成が達成され得る。したがって、システインを大量に生成する方法は、形質変換体を、当該技術分野で公知の最適化された条件で培養する段階を含む。基質として使用するために、OPSは、純粋な形態であっても、又はOPSを含有する発酵培養液の形態であってもよい。純粋なOPSは、SigmaAldrich社の製品番号P0878又はWako社の製品番号CAS407410を購入し用いることができる。しかし、一般的に、微生物発酵から得たOPS含有培養液のほうが、市販の純粋なOPSに比べて、OPS含有培養液がさらなる精製なしに使用できる点および変換に必要な補助因子であるPLPが発酵培養液から得ることができる点で、経済的に有利である。本発明では、チオール基へと変換することができる限り、いかなる硫化化合物も利用可能である。好ましくは、Na2S、H2S、又はS2O3を液体又は気体のいずれかの形態で用いることができる。本発明の一実施形態では、Na2Sを硫黄供給源として使用した。Na2Sは、酵素変換に用いられるOPSのモル濃度の01~3倍のモル濃度で添加することができる。具体的には、MsmTと同等の80のシステイン変換率を有するMsmTHA2は、50mMのOPS発酵ブロス若しくは60mMの精製OPS発酵ブロス、100mMのNa2S又は120mMのNa2S、及び02mMのPLPを含む反応条件において、50μgmL濃度で用いられる。また、当業者であれば、高い酵素活性により、酵素変換プロセスを最適化し、スケールアップすることができることは自明のことで容易に理解するであろう。本発明の一実施形態では、19317gLのOPS発酵ブロスを、50mgのMsmTHA2の存在下インキュベートした場合、最大9075gLの濃度でシステインが生成された。1Lのジャーでは、変異体の存在下、OPSはシステインに7183の率で変換された。略語と技術用語本発明のより詳しい説明と、当業者らが本発明を実施するにあったての案内として、下記の技術用語および方法などについての解説を提供する。明細書および特許請求の範囲において、別途に規定しない限り、含む又は一つ又はそのは、別途に規定しない限り複数への言及を含む。例えば、一つの細胞を含んでいるは、そのような細胞の1つ又は複数を含むが、これに限定されないことを意味する。二つ以上の要素のリストに関連して使用される単語のまたはは、下記の単語の解釈の全て、すなわちリストにおける要素のいずれか一方、リストにおける要素の全て、及びリストにおける任意の要素の組み合わせを含む。別途の説明がなければ、本発明に使用されるすべての技術用語及び科学用語は、本発明の技術が属する当業者に一般的に理解される意味と同様の意味を持つ。適切な方法及び材料が下記に開示されるが、類似又は同等の方法、及び材料が本発明の実施又は試験に用いられる。また、下記に記述される材料、方法及び実施例は本発明を限定するためのものではなく単に説明のために示されたものであり、また本発明の特徴及び利点は下記の詳細な説明及び添付の特許請求範囲において明らかになるであろう。欠失:核酸分子から一個以上のヌクレオチドが除去される、又はタンパク質からの一個以上のアミノ酸が除去される変異を意味する。発明の形態以下、本発明を下記の実施例によってさらに詳しく説明する。しかし、これらの実施例は本発明を例示的に説明するためのもので、本発明の範囲がこれらの実施例によって限定されるものではない。実施例1:OPSS酵素の開発アエロピュルムペルニクス、マイコバクテリウムツベルクローシス、トリコモナスバギナリスは、システイン合成の基質として、大腸菌におけるOASとは異なりOPSを用いる酵素であるOPSSを有すると報告されている。上記文献の報告をもとに、本発明者らは、OPSをシステインに変換する2種のOPSS酵素をアエロピュルムペルニクス、マイコバクテリウムツベルクローシスH37Rvから見出した。上記の2種の酵素のうち、マイコバクテリウムツベルクローシスH37Rv由来OPSS酵素をアミノ酸相同性検索に用いた。その結果、マイコバクテリウムスメグマチスMC2155株、ロドコッカスジョスティRHA1、及びノカルジアファルシニカIFM10152からそれぞれ、3種のOPSS変異体、MsmOPSS、RjoOPSS、及びNfaOPSSを確保した。各々の菌株からOPSSを得るために、通常酵素発現のために使用されるpET28aベクターシステムを構築した。5種の異なるOPSスルフヒドリラーゼ酵素のクローニングに使用した各々の鋳型及びプライマーならびに得られた組換えプラスミドは、下記の表1にまとめている。表1に提示した鋳型とプライマーの適切な組合せは、PCR法により各々のOPSS遺伝子を増幅するために用いた。PCR産物およびpET28aベクターをNdeI及びHindIIIで消化したに各々の遺伝子の断片をライゲーションした。各々のOPSS酵素を保有する発現ベクターの構築は、塩基のシーケンシングにより確認した。構築された上記酵素発現ベクターを大腸菌DE3に導入し、5種のOPSS酵素を発現することができる菌株を作製した。酵素名は下記の表1に提示している。表1酵素の発現は、pETシステム製造者の指示書に従って行った。平板LB培地からの各々の菌株の単一コロニーを、5mLのLBブロスに接種し、200rpmで振盪しながら37°Cで16時間培養した。この培養物を新しい25mLのLBブロスに移して、OD600が05~06となるまで同様の条件で培養し、その直後に1mMのIPTGを培地に添加して120rpmで振盪しながら18°Cで18時間培養する間に酵素の発現を誘導した。酵素は、HisSpinTrapを用いてHistagについてNiNTAカラムで精製した。単離した5種のOPSS酵素は、14のSDSPAGE電気泳動で分析したところ、1種は封入体であり、4種は可溶性の形態で見出された。実施例2:OPSSのシステイン合成活性アッセイOPSからシステインへの変換を触媒する能力について、様々な微生物株から得られた4種のOPSSの酵素活性をアッセイした。アッセイ条件および方法については、以前の文献報告を測定することにより定量した。4種の異なるOPSスルフヒドリラーゼ酵素のシステイン合成活性を下記の表3にまとめている。OPSS酵素のシステイン合成力価を、反応時間でのシステイン変換率として表す。表3表3に示されるように、アエロピュルムペルニクス及びマイコバクテリウムツベルクローシスH37Rv由来のOPSS酵素が、OPSを基質として用いてシステインを合成する活性を有することを確認した。MtbOPSS酵素を用いてアミノ酸相同性検索により取得した新規マイコバクテリウムスメグマチスMC2155株由来OPSSのシステイン合成活性を初めて見出した。一方、相同性検索により得た新規ノカルジアファルシニカIFM10152由来OPSSは、Oホスホセリンをシステインに変換する活性は不十分であった。表3のデータに示されるように、ApeOPSS酵素の、OPSからシステインへの変換率は、1時間で100近くまで達した。また、既存の文献で報告されているマイコバクテリウムツベルクローシスH37Rv由来OPSSに基づく酵素スクリーニング法によって新たに選択されたMsmOPSS酵素の最終的な変換率は、MtbOPSSと比べて43倍高い437であった。実施例3:MtbOPSS及びMsmOPSSのC末端の5個のアミノ酸を欠失させたMtbT及びMsmT変異体の調製マイコバクテリウムツベルクローシスH37Rv由来OPSSは、追加的な酵素であるmec及びcysOの助けを借りてOPSからシステインへの変換を触媒するが、C末端の5個のアミノ酸残基が除去されている場合、このような追加的な酵素の非存在下でさえも、S2を含有する硫黄供給源を用いてOPSをシステインに変換させることができる。この事実に基づいて、硫黄供給源としてのS2存在下、OPSを迅速に変換するMtbTを得た。また、MtbOPSSとの高いアミノ酸相同性を共有するMsmOPSSからは、C末端の5個のアミノ酸残基を欠失させることによりMsmTを得た。2種の酵素変異体を保有する発現ベクターを構築した。これについては、マイコバクテリウムツベルクローシスH37Rv及びマイコバクテリウムスメグマチスMC2155株のゲノムDNAにおいて、配列番号17と18及び配列番号19と20の各々のプライマー対の存在下、pfuPCRを行った。得られたOPSS遺伝子断片は、NdeI及びHindIIIで処理し、同じ制限酵素で消化したpET28aベクターにクローニングして、pET28aMtbT及びpET28aMsmTと称する組換え発現ベクターを構築した。この組換え発現ベクターを大腸菌に導入した。上記実施例1と同じ条件で得られた2種のOPSS変異体の発現は、14SDSPAGEにより確認した。その結果、MtbT及びMsmTを得た。実施例4:MtbT及びMsmTのシステイン合成活性アッセイ上記で得られたMtbT及びMsmTは、最終的なシステイン変換率を測定することにより酵素活性について評価した。実施例2と同様の方法で酵素活性をアッセイした。変換されたシステインはGaitondeの方法を用いて定量した。結果を下記の表4にまとめている。表4表4に示されるように、MsmT変異体は、1時間で100の変換率で、基質からシステインへの変換を可能にした。実施例5:MsmT由来の変異体MsmTHA2及びMsmTEP3のシステイン合成活性アッセイ100の変換率OPSをシステインに変換することができるMsmTに基づいて、MsmTHA2及びMsmTEP3と称する、活性が改善された2種の酵素変異体を酵素進化法により得た。ヒドロキシアミン処理及びエラープローンPCRキットを用いてランダム変異誘発をMsmTに導入し、MsmT変異体のライブラリを構築し、これをスクリーニングして、酵素活性が改善されたOPSS変異体を選択した。MsmT遺伝子におけるHTSスクリーニングにより取得したMsmTHA2及びMsmTEP3のOPSS変異体は、塩基のシーケンシングにより分析すると、各々、配列番号3に記載のアミノ酸配列及び配列番号4に記載のアミノ酸配列を有することが見出された。MsmTHA2及びMsmTEP3変異体と対照MsmTとを、酵素活性についてアッセイした。結果を表5及び6にまとめている。酵素活性アッセイは実施例2と同様の方法で行った。表5表6表5及び6に示されるように、酵素進化法で得られたOPSS変異体MsmTHA2及びMsmTEP3はそれぞれ、反応開始10分後に、対照MsmTと比べて5倍及び12倍の変換率の増加を示すことが測定された。また、酵素の活性を決定する際に広く用いられる比活性に関して比較した。MsmHA2の比活性は、対照MsmTと比べて3倍増加していた。これは、OPSS変異体が、酵素活性が改善され、時間あたり、単位酵素量あたり、システインをより高い量で合成することができることを示す。実施例6:OPSS活性のための補助因子の要求性OPSSのシステイン変換に対する補助因子の効果を調べるために、PLP及びDTTの存在下または非存在下においてMsmTのシステイン変換率を測定した。ここでは、50mMOPSブロス及び100mMNa2Sを基質として、25mMDTT又は02mMPLPの存在下において、37°Cで30分間反応させた。生成されたシステインはGaitondeの方法を用いて定量した。結果を下記の表7にまとめている。表7表7に示されるように、PLP及びDTTがいずれも存在しない場合と比べて、PLP及びDTTがいずれも存在する場合は、システイン変換率が23倍高かった。つまり、PLP及びDTTの両方が、変換に対して正の影響を有することが観察された。実施例7:温度によるOPSS活性ApeOPSS及びMsmTの、温度によるシステイン変換率を調べた。37°C及び60°Cにおける酵素活性を、反応から2分、5分、10分、30分、及び60分後に測定した。反応は100mMHEPES、5mMOPS、10mMNa2S、02mMPLP、50μgmLCysMの条件で行った。生成されたシステインの量はGaitondeの方法を用いて決定した。結果を図1に示す。バッファーのこの条件では、図1に示されるように、37°CでのApeOPSSが、最も速い初期酵素反応速度を示しただけでなく、60°CでのMsmTよりも高い反応性を示した。実施例8:OPSSの熱安定性ApeOPSS及びMsmTの熱安定性を分析した。これらの酵素をそれぞれ、OPSブロスで2mgmLの濃度に希釈し、37°C及び60°Cで10分、30分、60分、120分、及び240分間熱処理した。その後、5mMのOPS、10mMのNa2S、02mMのPLP、及び100mMのHEPESの条件下、37°Cで30分間反応させた。この反応では、10μgmLApeOPSS及び50μgmLMsmTを使用した。生成されたシステインの量はGaitondeの方法を用いて測定した。これを下記の表8にまとめている。表8表8に示されるように、ApeOPSSは、60°Cで4時間熱処理したにもかかわらず、活性をそのまま保持していることが確認された。その反面、MsmTの活性は、37°Cでは保持されたが、60°Cで30分間熱処理した場合は50減少した。また、OPSブロス中の実際の濃度である50μgmLでMsmTを使用した場合の、37°Cで保持される酵素活性について調べた。Na2Sの非存在下で、50mMのOPSブロス及び02mMのPLPとともに50μgmLのMsmTを、37°Cで30分、1時間、2時間、4時間、及び6時間処理した後、Na2Sを加えて酵素反応を誘導した。30分間の反応ののち、MsmTの活性を測定した。生成されたシステインの量はGaitondeの方法を用いて決定した。これを下記の表9に示す。表9表9に示されるように、OPSブロスにおいて、MsmTの活性が、37°Cで反応2時間後には50を下回るまで減少した。実施例9:OPSS酵素のpH感受性ApeOPSS及びMsmTの、pHによるシステイン変換率を測定した。100mMのバッファーにおいて、それぞれ50μgmLの濃度を有するApeOPSS及びMsmTを、37°Cで10分間反応に供した。これに関し、pH64707480のリン酸カリウムバッファー、pH7074808588のTrisHClバッファー、及びpH808590100の炭酸ナトリウムバッファーを使用した。生成されたシステインの定量分析はGaitondeの方法を用いて行った。その結果を図2にまとめている。図2に示されるように、MsmTは、バッファーに関係なく、pH80~90の範囲で最も高い活性を示した。また、ApeOPSSの場合、最も高い活性は、リン酸カリウムバッファーで検出され、バッファーごとに最適なpHは異なっていた。実施例10:OPSS活性に対するイオンの影響OPSS酵素活性に対するイオンの影響を以下の通りに調べた。5mMのOPS、10mMのNa2S、02mMのPLP、及び100mMのHEPESを含有する反応混合液において、2SO41g、3g、5g、10g、20gL、KH2PO405g、1g、2g、4g、8gL、又はNH4Cl02g、05g、1g、2gLの存在下、酵素を37°Cで30分間反応に供した。ApeOPSS及びMsmTをそれぞれ10μgmLおよび50μgmLの濃度で使用した。生成されたシステインの量はGaitondeの方法を用いて決定した。これを下記の表10に示まとめている。表10反応混合液に2SO4又はKH2PO4を加えた時のシステイン変換率に変化はなかった。一方、表10に示されるように、NH4Clの濃度が増すにつれてシステインの変換率は減少した。特に、2gLのNH4が添加された場合、最大酵素活性は70超減少した。つまり、NH4Cl及びNH4は、OPSSの変換活性に対して負の影響を有することが観察された。実施例11:OPSSのシステイン合成活性に対する硫黄供給源の影響各酵素のシステイン合成活性に対する硫黄供給源の影響を調べるために実験を行った。5mMのOPS、02mMのPLP、及び100mMのHEPESを含有する反応混合液において、各酵素を、10mMのNa2S、NaSH、又はNa2S2O3の存在下で37°Cで1時間反応に供した。生成されたシステインの量はGaitondeの方法を用いて測定した。ApeOPSSは、硫黄供給源としてNa2S2O3を選び、MsmTはNa2Sを選ぶことが観察された。その結果を下記の表11にまとめている。表11実施例12:OPSSを保有する発現ベクターの構築および酵素の発現pET28aMsmTベクターを鋳型とし、配列番号21及び配列番号22のプライマーを用いてPCRを行った。得られたPCR産物をEcoRV及びHindIIIで処理し、クローニングして、pCLPMsmTと称するベクターを構築した。pETシステムとpCLPcj1システムのMsmtc発現レベルの差を調べるために、酵素発現用の菌株を調製した。pETシステムは、Rosettaに導入し、pCLPcj1システムは、K12G菌株を使用した。平板LB培地からの単一コロニーを、5mLのLBブロスに接種し、200rpmで振盪しながら37°Cにて16時間培養した。これらの培養物を、カナマイシンまたはスペクチノマイシンと02グルコースとを含有する新しい25mLのLBブロスに移して、OD600が05~06になるまで培養した。その後直ちに1mMのIPTGを培地に添加して酵素の発現を誘導した。37°Cでの培養中、200rpmで振盪しながら、様々な培養時間で酵素の発現レベルを測定した。二つのシステムの酵素の発現レベルは、14SDSPAGEで分析した。これを図3に示す。図3に示されるように、同じ培養条件では、pETシステムに比べてpCLPcj1システムは、より高い酵素発現レベルを確実にする。加えて、このシステムは、37°Cもの高い温度で、かつ01mMもの低いIPTG濃度で、酵素発現が可能であるため、培養条件が改善されている。つまり、pCLPcj1システムは、pETシステムの代わりに十分に機能し得る。実施例13:精製OPS発酵ブロスを基質として用いたOPSSのシステイン合成MsmT及びApeOPSSの、精製OPSからのシステイン変換率を調べた。75μgmLの各酵素及び02mMのPLPの存在下、OPS発酵ブロスから精製した60mMのOPSを、120mMのNa2Sとともに、37°C又は70°Cで30分、60分、90分、及び120分間反応に供した。反応は、MsmTに対しては37°Cでのみ行い、ApeOPSSに対しては37°C及び70°Cの両方で行った。生成されたシステインの量をGaitondeの方法を用いて測定した。結果を図4に示す。図4に示されるように、精製OPS発酵ブロスは、システインへの酵素変換のための基質として十分に役に立った。特にApeOPSSのシステインの変換率は、70°Cでさえ、精製OPS発酵ブロスを使用した時に増加した。実施例14:OPS発酵ブロスを基質として用いたOPSSのシステイン合成OPS発酵ブロスを基質として用いた場合の、酵素の濃度によるMsmT及びApeOPSSのシステイン変換率を測定した。5μgmL又は50μgmLの各MsmT及びApeOPSSならびに02mMのPLPの存在下、50MmのOPS発酵ブロスを、100mMのNa2Sとともに、37°Cで反応させた。生成されたシステインの量をGaitondeの方法を用いて測定した。結果を図5に示す。図5に示されるように、50μgmLのMsmTにおいて、最も高い変換率が検出された。加えて、OPS発酵ブロスを基質として使用した時には、MsmTの活性がApeOPSSの活性よりも高かった。実施例15:OPSS濃度によるシステイン変換率OPSを976gLの濃度で含有するOPSブロスに、Na2SをOPSモル数の2倍量添加し、37°Cで5分間インキュベートした。その後、精製されたMsmT50mgを添加し、一方で、精製されたMsmTHA2を5μg、10μg、20μg、及び50μg添加した。37°Cでインキュベートする間、所定の時間で酵素反応混合液100mLを取り出し、332TCA100mLと混合して酵素反応を停止させた。酵素反応液中のシステインの濃度は、Gaitondeの方法に従って吸光度を測定することにより定量した。酵素濃度によるOPSS酵素のシステイン合成活性を、下記の表12にまとめている。表12システイン変換率表12に示されるように、システイン合成活性が改善されたMsmTHA2変異体を、MsmTの量の40に対応する量で使用した場合でさえも、最終的なシステイン変換率はほぼ同等であった。加えて、同一量で用いた場合、MsmTHA2変異体は、MsmTと比べてより速い初期反応活性を示した。実施例16:OPS濃度によるシステイン変換率MsmT及びMsmTHA2の変換率に対するOPS濃度の影響を調べるために、OPS発酵ブロスに既定量の精製OPSを添加して、変換反応を誘導した。酵素は、MsmTの場合は50μg、及びMsmTHA2の場合は20μgの量を使用した。反応液中のシステインの濃度をGaitondeの方法を用いて測定した。その結果を表13~15にまとめている。表13システイン変換率測定されたOPS1065gl表14システイン変換率測定されたOPS3609gl表15システイン変換率測定されたOPS556gl上記表13~15に示されるように、OPSの濃度が約30gLの場合、最も高い変換率は、MsmTで100、及びMsmTHA2で80であった。OPSの濃度が50gLを超えると変換速度と変換率の両方が減少することが見出された。高濃度のOPSを用いた変換プロセスにとっての、OPSとMsmTHA2の最適濃度比を選択し、MsmTと比べてMsmTHA2の反応時間を短縮するために、表13~15のデータを使用した。実施例17:Na2S濃度によるシステイン変換率システイン変換率に対する、硫黄供給源として使用されるNa2Sの量の影響を調べるために、20μgのMsmTHA2の存在下、Na2SをOPSのモル数の1倍、2倍、3倍量にそれぞれ対応する160mM、320mM、及び480mMの濃度で用いてOPS変換反応を行った。得られたシステイン変換率を下記の表16にまとめている。表16システイン変換率OPS2976gl表16に示されるように、システイン変換率は、Na2Sのモル数がOPSのモル数の2倍量で使用された時に最も高かった。この結果から、OPSに対してNa2Sのモル比が2である時に最適条件となることが分かる。実施例18:pHによるシステイン変換率OPSからシステインへの酵素変換に対するpHの影響を調べるために、20μgのMsmTHA2の存在下、様々なpHで変換反応を行った。その結果を下記の表17にまとめている。表17システイン変換率示されるように、変換反応に対する最適pHは、85~95であると測定された。実施例19:1Lのジャースケールでのシステイン変換反応プロセスOPSブロスをシステインに変換する反応プロセスを、1Lのジャーまでスケールアップした。1mLチューブ条件下でのOPSSの特性及び変換反応のデータセットをもとに、MsmTHA2について、変換反応プロセスを確立した。1Lのジャースケールでの変換プロセスに先立って、1Lのジャーで得たOPS発酵ブロスの遠心分離を行い、上清を膜に通して細胞を除去した。濾過したOPSブロスに72gのNa2Sを添加し、沈殿物はワットマン濾紙を通して除去した。10mMのPLPを添加した後、反応混合液を200rpmで振盪しながら37°Cで5分間プレインキュベートした。最終的に、50mgのMsmTHA2の存在下、1Lのジャースケールで変換反応を行った。37°Cでインキュベートする間、0分、10分、30分、60分、120分、及び180分の時点で酵素反応液100μLを取り出し、332TCA100μLと混合して反応を停止させた。上記のサンプルは、01NHClで希釈し、LCを用いて、システイン及びシスチン含量を分析した。また、Gaitonde方法を介してシステインを定量した。変換反応プロセスで用いた基質及び酵素の濃度は、下記の表18にまとめている。用いた基質の量はmL単位で表す。表18表18の条件で行った変換反応後に得た反応混合液中のシステイン濃度はGaitondeの方法及びLCにより定量した。結果を図6に示す。図6に示されるように、19317gLのOPSブロスを、50mgのMsmTHA2の存在下で2時間インキュベートした場合、生成されたシステイン又はシスチンの量は9075gLが最も多い量であった。これは、1Lのジャースケールでの酵素変換プロセスによってOPSから7183の変換率でシステインとシスチンが生成可能であることを示す。表19システインシスチン変換率表20システインシスチンgL