"ウミホタルルシフェリンとアスコルビン酸またはその塩、エリソルビン酸またはその塩、亜硫酸水素塩、亜硫酸塩からなる群から選ばれる1種又は2種以上を含む、ウミホタルルシフェラーゼとウミホタルルシフェリンを用いた生物発光系に使用するためのウミホタルルシフェリン安定化組成物。ウミホタルルシフェリンをアスコルビン酸またはその塩、エリソルビン酸またはその塩、亜硫酸水素塩、亜硫酸塩からなる群から選ばれる1種又は2種以上の存在下に保存することを特徴とする、ウミホタルルシフェラーゼとウミホタルルシフェリンを用いた生物発光系に使用されるウミホタルルシフェリンの保存方法。ウミホタル生物発光系に使用するためのキットであって、ウミホタルルシフェリンと、アスコルビン酸またはその塩、エリソルビン酸またはその塩、亜硫酸水素塩、亜硫酸塩からなる群から選ばれる1種又は2種以上を含むキットであって、ウミホタル生物発光系はウミホタルルシフェラーゼとウミホタルルシフェリンを用いた生物発光系である、キット。アスコルビン酸またはその塩、エリソルビン酸またはその塩、亜硫酸水素塩、亜硫酸塩からなる群から選ばれる1種又は2種以上の酸化防止剤のウミホタル生物発光系のバックグラウンドを低減するための使用であって、ウミホタル生物発光系はウミホタルルシフェラーゼとウミホタルルシフェリンを用いた生物発光系である、使用。ウミホタルルシフェラーゼとウミホタルルシフェリンの生物発光測定系においてアススコルビン酸またはその塩、エリソルビン酸またはその塩、亜硫酸水素塩、亜硫酸塩からなる群から選ばれる1種又は2種以上の存在下に生物発光を測定することを特徴とする、ウミホタル系生物発光の測定方法。本発明の目的は、従来の光学活性なルシフェリンの製造法における工程の多さと低収率の問題を解決すると共に、発光波長の異なるルシフェリンやルシフェリンの供給を確立することである。本発明は,以下のウミホタルルシフェラーゼと反応する新規なルシフェリン発光基質およびその製造法を提供するものである。1.一般式1で表される化合物をジアゾメタン化合物と反応させ、次いで酸化剤とアルコール類及びグリコール類からなる群から選ばれる少なくとも1種を反応させることを特徴とする、一般式2で表される化合物の製造法:式中、XはCl又はBrを示す。R1とR2は、同一又は異なって、低級アルコキシ基、置換されていてもよいアラルキルオキシ基を表すか、R1とR2はそれらが結合している炭素原子と一緒になってカルボニル基、R1とR2が一緒になってアルキレンジオキシ基を表す。2.一般式2で表される化合物:式中、R1とR2は、同一又は異なって、低級アルコキシ基、置換されていてもよいアラルキルオキシ基を表すか、R1とR2はそれらが結合している炭素原子と一緒になってカルボニル基、R1とR2が一緒になってアルキレンジオキシ基を表す。3.一般式2で表される化合物と一般式3で表される化合物を反応させることを特徴とする、一般式4で表されるウミホタルルシフェリン又はその誘導体の製造法:式中、R1とR2は、同一又は異なって、低級アルコキシ基、置換されていてもよいアラルキルオキシ基を表すか、R1とR2はそれらが結合している炭素原子と一緒になってカルボニル基、R1とR2が一緒になってアルキレンジオキシ基を表す。R3は、置換されていてもよいアリール基、あるいは置換されていてもよい複素環基を表す。Y1は、置換されていてもよい低級アルキレン基または低級アルケニレン基を示す。Z1は、アミノ基、モノ低級アルキルアミノ基、ジ低級アルキルアミノ基、グアニジノ基またはアミジノ基または保護基で保護されたアミノ基、グアニジノ基またはアミジノ基を表す。4.一般式5で表される化合物と一般式6で表される化合物を反応させることを特徴とする、一般式7で表すウミホタルルシフェリンアナログの製造法。式中、R1とR2は、同一又は異なって、低級アルコキシ基、置換されていてもよいアラルキルオキシ基を表すか、R1とR2はそれらが結合している炭素原子と一緒になってカルボニル基、R1とR2が一緒になってアルキレンジオキシ基を表す。R3は、置換されていてもよいアリール基あるいは置換されていてもよい複素環基を表す。R5は、フッ素原子で置換されていてもよい低級アルキル基、フッ素原子で置換されていてもよいシクロアルキル基、5員または6員の芳香環基または複素環基、アラルキル基を示す。Z1は、アミノ基、モノ低級アルキルアミノ基、ジ低級アルキルアミノ基、グアニジノ基またはアミジノ基または保護基で保護されたアミノ基、グアニジノ基またはアミジノ基を表す。5.一般式7で表される化合物:式中、R3は、置換されていてもよいアリール基あるいは置換されていてもよい複素環基を表す。R5は、フッ素原子で置換されていてもよい低級アルキル基、フッ素原子で置換されていてもよいシクロアルキル基、5員または6員の芳香環基または複素環基、アラルキル基を示す。Z1は、アミノ基、モノ低級アルキルアミノ基、ジ低級アルキルアミノ基、グアニジノ基またはアミジノ基または保護基で保護されたアミノ基、グアニジノ基またはアミジノ基を表す。6.一般式3で表される化合物と一般式6で表される化合物を反応させることを特徴とする一般式8で表されるウミホタルルシフェリン誘導体の製造法:式中、R1とR2は、同一又は異なって、低級アルコキシ基、置換されていてもよいアラルキルオキシ基を表すか、R1とR2はそれらが結合している炭素原子と一緒になってカルボニル基、R1とR2が一緒になってアルキレンジオキシ基を表す。R3は、置換されていてもよいアリール基あるいは置換されていてもよい複素環基を表す。R5は、フッ素原子で置換されていてもよい低級アルキル基、フッ素原子で置換されていてもよいシクロアルキル基、5員または6員の芳香環基または複素環基、アラルキル基を示す。Y1は、置換されていてもよい低級アルキレン基または低級アルケニレン基を示す。Z1は、アミノ基、モノ低級アルキルアミノ基、ジ低級アルキルアミノ基、グアニジノ基またはアミジノ基または保護基で保護されたアミノ基、グアニジノ基またはアミジノ基を表す。7.一般式8で表される化合物又はその塩式中、R3は、置換されていてもよいアリール基あるいは置換されていてもよい複素環基を表す。R5は、フッ素原子で置換されていてもよい低級アルキル基、フッ素原子で置換されていてもよいシクロアルキル基、5員または6員の芳香環基または複素環基、アラルキル基を示す。Y1は、置換されていてもよい低級アルキレン基または低級アルケニレン基を示す。Z1は、アミノ基、モノ低級アルキルアミノ基、ジ低級アルキルアミノ基、グアニジノ基またはアミジノ基または保護基で保護されたアミノ基、グアニジノ基またはアミジノ基を表す。但し、R3がインドリル基又はフェニル基、Y1がプロピレン基、Z1がグアニジノ基の場合、R5はsecブチル基ではない。8.天然ウミホタルルシフェリンよりも低いバックグラントの特性を有する項5または7に記載の化合物又はその塩。9.ウミホタルルシフェラーゼと反応させたときの最大発光波長が天然型ウミホタルルシフェリンと異なることを特徴とする、項5または7に記載の化合物又はその塩。10.下記式で表される化合物又はその塩:11.下記式で表される化合物又はその塩:12.下記式で表される化合物又はその塩:13.下記式で表される化合物又はその塩:14.下記式で表される化合物又はその塩:15.ウミホタルルシフェリン又はそのアナログと酸化防止剤を含むウミホタルルシフェリン安定化組成物。16.ウミホタルルシフェリン又はそのアナログを酸化防止剤の存在下に保存することを特徴とする、ウミホタルルシフェリンまたはそのアナログの保存方法。17.ウミホタル生物発光系に使用するためのキットであって、ウミホタルルシフェリン又はそのアナログと酸化防止剤を含むキット。18.少なくとも1種の酸化防止剤のウミホタル生物発光系のバックグラウンドを低減するための使用。19.ウミホタルルシフェラーゼとウミホタルルシフェリン又はそのアナログの生物発光測定系において酸化防止剤の存在下に生物発光を測定することを特徴とする、ウミホタル系生物発光の測定方法。20.酸化防止剤が、アスコルビン酸またはその塩、エリソルビン酸またはその塩、亜ジチオン酸又はその塩、亜硫酸水素塩、亜硫酸塩、ピロ亜硫酸塩、メタ重亜硫酸塩、システイン、チオグリセロール、ブチルヒドロキシアニソール、ポリフェノール類、チオ硫酸又はその塩、水素化ホウ素アルカリ金属からなる群から選ばれる、項15~20に記載の方法、組成物又はキット。本発明によれば、光学活性なウミホタルルシフェリンを簡便な方法で製造できるようになった。これは一般式2の化合物を一般式3の化合物と縮合させることで、1段階の反応で目的とする一般式4の光学活性体が高収率で得られるようになったためである。本発明の一般式7、8の化合物は、ウミホタルルシフェラーゼによる発光波長をシフトさせることができた。例えば、本発明の化合物36は、最大発光波長が390nmまでシフトしており、紫外域の光を発光することができる。化合物36のアナログを作製することにより、最大発光波長が380~400nm程度のアナログを容易に合成できる。このような波長域の光は種々の化合物によって吸収され、種々の化学物質を活性化することが可能になる。さらに酸化防止剤、特にアスコルビン酸またはその塩、エリソルビン酸またはその塩をルシフェリン又はその誘導体の存在下にウミホタル系生物発光測定を行うと、バックグラウンドが低下し、S/N比が改善される。ウミホタルルシフェラーゼ、あるいはウミホタルルシフェラーゼ遺伝子を細胞内に含む発現系には、ルシフェラーゼの安定化のためにBSAなどのアルブミンを配合することが多いが、アスコルビン酸、亜硫酸塩などの酸化防止剤は、アルブミンによるバックグラウンドの上昇を抑制することが可能である。本明細書において、アルキレンジオキシ基としては、エチレンジオキシ、プロピレンジオキシ、ブチレンジオキシ、ペンチレンジオキシ、ヘキシレンジオキシなどの炭素数2~6、好ましくは炭素数2~4のアルキレンジオキシ基が挙げられる。ジアゾメタン化合物としては、ジアゾメタン、トリメチルシリルジアゾメタン、などが挙げられる。低級アルキル基としては、メチル、エチル、nプロピル、イソプロピル、nブチル、イソブチル、secブチルR5の場合、光学活性なsecブチル基が好ましい、tブチル、ペンチル、ヘキシルなどの炭素数1~6、好ましくは炭素数1~4の直鎖または分枝を有するアルキル基が挙げられる。フッ素原子で置換された低級アルキル基としては、フッ素原子と水素原子と炭素原子からなるフルオロ低級アルキル基、及び、フッ素原子と炭素原子からなるパーフルオロ低級アルキル基が挙げられる、フルオロ低級アルキル基としては、上記低級アルキル基のうち、1個以上全てではないの水素原子がフッ素原子で置換された低級アルキル基が挙げられる。パーフルオロ低級アルキル基としては、上記低級アルキル基のうち、全ての水素原子がフッ素原子で置換された低級アルキル基が挙げられる。R5で表されるパーフルオロ低級アルキルとして、CF3、CF2CF3、CF2CF2CF3、CF2、CF2CF2CF2CF3、CF2CF2、CFCF2CF3、C3、CF2CF2CF2CF2CF3、CF2CFCF2CF3、CF2、C2CF2CF3CF2CF2CF2CF2CF2CF3、CF2CFCF2CF2CF3、CF、C2CF2CF2CF3、C2などの炭素数1~6の直鎖又は分枝を有するパーフルオロアルキル基が挙げられ、好ましくは炭素数3~6の分枝を有するパーフルオロアルキル基が挙げられる。フルオロアルキル基は、上記パーフルオロ低級アルキル基のうち、1個以上全てではないの水素原子がフッ素原子で置換された炭素数1~6の直鎖又は分枝を有するフルオロアルキル基が挙げられ、好ましくは炭素数3~6の分枝を有するフルオロアルキル基が挙げられる。シクロアルキル基としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基などの炭素数3~8,好ましくは炭素数5~6のシクロアルキル基が挙げられる。フッ素原子で置換されたシクロアルキル基としては、フッ素原子と水素原子と炭素原子からなるフルオロシクロアルキル基、及び、フッ素原子と炭素原子からなるパーフルオロシクロアルキル基が挙げられる、フルオロシクロアルキル基としては、上記シクロアルキル基のうち、1個以上全てではないの水素原子がフッ素原子で置換されたシクロアルキル基が挙げられる。パーフルオロシクロアルキル基としては、上記シクロアルキル基のうち、全ての水素原子がフッ素原子で置換されたシクロアルキル基が挙げられる。R5で表される5員または6員の芳香環又は複素環基としては、フェニル基、ピリジル基、ピロリル基、イミダゾリル基、チアゾリル基、イソチアゾリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、ピリミジニル基、ピラジニル基、チエニル基、フリル基、ピリダジニル基が挙げられる。低級アルコキシ基としては、メトキシ、エトキシ、nプロポキシ、イソプロポキシ、nブトキシ、イソブトキシ、secブトキシ、tブトキシ、ペントキシ、ヘキシルオキシなどの炭素数1~6、好ましくは炭素数1~4の直鎖または分枝を有するアルコキシ基が挙げられる。モノ低級アルキルアミノ基としては、メチルアミノ、エチルアミノ、nプロピルアミノ、イソプロピルアミノ、nブチルアミノ、イソブチルアミノ、secブチルアミノ、tertブチルアミノ、ペンチルアミノ、ヘキシルアミノなどの炭素数1~6、好ましくは炭素数1~4の直鎖または分枝を有するアルキル基でモノ置換されたアミノ基が挙げられる。ジ低級アルキルアミノ基としては、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジnプロピルアミノ、ジイソプロピルアミノ、ジnブチルアミノ、ジイソブチルアミノ、ジsecブチルアミノ、ジtertブチルアミノ、ジペンチルアミノ、ジヘキシルアミノなどの炭素数1~6、好ましくは炭素数1~4の直鎖または分枝を有するアルキル基でジ置換されたアミノ基が挙げられる。R3で表される複素環基としては、3-インドリル、1-イソインドリル、3H-インドール-2-イル、1H-インダゾール-3-イル、3-イソキノリニル、1-イソキノリニル、2-、3-または4-キノリニル、1-フタラジニル、2-ナフチリジル、2-キナゾリル、2-ベンゾイミダゾリル、2-または3-ベンゾフラン、1-イソベンゾフラン、2-または3-ベンゾチオフェン、1-イソベンゾチオフェン、1つの6員の芳香環ヘテロ環であってもよいと1つの5員または6員の環の縮合した複素環基が挙げられる。複素環基、アラルキル基、アラルキルオキシ基、アリール基の置換基としては、ハロゲン原子特に塩素原子またはフッ素原子、メチル基、エチル基、アセチル基、メトキシ基、OH、SH、COOH,アミノ基、メチルアミノ基、ジメチルアミノ基、ニトロ基、シアノ基、トリフルオロメチル基などが挙げられ、1~3個のこれらの置換基で置換されていても良い。R3で表されるアリール基としては、ナフチル基、フェニル基、ビフェニル基、アントラニル基、フェナントリル基、フルオレニル基、インデニル基、フェナレニル基、アセナフチレニル基、ピレニル基などが挙げられる。アラルキル基としては、ベンジル、1-フェネチル、2-フェネチル、1フェニルプロピル、2フェニルプロピル、3-フェニルプロピル、ナフチルメチルなどの炭素数7~12のアラルキル基が挙げられる。アラルキルオキシ基としては、ベンジルオキシ、1-フェネチルオキシ、2-フェネチルオキシ、1フェニルプロピルオキシ、2フェニルプロピルオキシ、3-フェニルプロピルオキシ、ナフチルメチルオキシなどの炭素数7~12のアラルキルオキシ基が挙げられる。Z1で表されるアミノ基、グアニジノ基またはアミジノ基の保護基としては、tertブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、Fmoc基等の通常の保護基が広く例示できる。Y1で表される低級アルキレン基としては、CH2,CH,CH2CH2,CH2CH,CHCH2、CH2CH2CH2,CH2CHCH2,CH2CH2CH2CH2などの炭素数1~6,好ましくは炭素数1~4のアルキレン基が挙げられ、低級アルケニレン基としては、CHCH,CHC,CCH、CHCHCH2,CHCCH2,CH2CHCH,CHCHCH2CH2などの炭素数1~6,好ましくは炭素数1~4のアルケニレン基が挙げられる。次に、スキーム1で示している化合物2の製造法について説明する。<スキーム1>式中、R1及びR2は、前記に定義される通りである。本製造法はArndtEistert反応を鍵反応とする三工程である。まず、-2-メチル酪酸1Aの1モルに対し、1モル程度から過剰量の塩化チオニルを使用し、室温で1~24時間反応させることで酸クロライドが得られる。次に、得られた酸クロライドを2当量のトリメチルシリルジアゾメタンまたはジアゾメタンを使用し、0~4°Cで1~4時間を反応させると、ジアゾケトン化合物が得られる。得られたジアゾケトン化合物は1当量程度の酸化剤特にtertbutylhypochloriteを使用し、当量又は過剰のアルコールまたはグリコールの存在下に0~4°Cで1~2時間反応させることで、新規の光学活性な化合物2を得ることができる。また、R1とR2はベンジルオキシ基である場合、触媒量の酸化白金の存在下に、加水素分解で一般式2の化合物アルデヒド体を得ることができる。酸化剤としては、tertbutylhypochloriteなどが挙げられる。R1とR2は、酸化剤と併用させるアルコールメタノール、エタノール、nプロパノール、イソプロパノール、nブタノール、イソブタノール、secブタノール、tertブタノールなどの炭素数1~6の直鎖又は分枝を有する低級アルコール、或いは、ベンジルアルコールなどの置換基を有してもよいアラルキルアルコール又はグリコールエチレングリコール、12プロピレングリコール、13プロピレングリコール、12ブチレングリコール、13ブチレングリコール、13ブチレングリコール、14ブチレングリコール、23ブチレングリコールなどの炭素数2~6のグリコールに従い導入され、例えばメタノールを使用した場合には、R1とR2はともにメトキシ基であり、ベンジルアルコールを使用した場合には、R1とR2はともにベンジルオキシ基である。また、メタノールとエタノールを併用すれば、R1とR2が各々メトキシとエトキシである化合物が得られる。本発明の1つの実施形態において、置換基を有するアラルキルオキシ基としては、例えば、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、モノ低級アルキルアミノ基、ジ低級アルキルアミノ基、ハロゲン原子、低級アルキル基、SHアルキルチオ基S低級アルキル基、エチレンジオキシ基等の置換基で、1~3置換されたアラルキルオキシ基が挙げられる。<スキーム2>式中、R1、R2、R3、Y1及びZ1は、前記に定義される通りである。反応は、一般式3の化合物1モルに対して、一般式2の化合物を1~4モル程度使用し、酸の存在下または非存在下に65~100°C程度の温度で1~2時間反応させることで有利に進行する。一般式3の化合物の製造法は次のスキーム3で説明する。<スキーム3>式中、R3及びZ1は、前記に定義される通りである。Y1aはCH2CH2CH2を示す。R4は、ハロゲン原子、特にBrまたはClを表す。スキーム3で示している一般式5または一般式3の化合物の製造法について説明する。Z1は、アミノ基、モノ低級アルキルアミノ基、ジ低級アルキルアミノ基、グアニジノ基またはアミジノ基または保護基で保護されたアミノ基、グアニジノ基またはアミジノ基を表し、上記の中間体の製造法においては、好ましくは保護されたアミノ基、グアニジノ基またはアミジノ基である。一般式5または一般式3の製造法は鈴木カップリング反応を鍵反応とするものである。公知の2-アミノ-3,5-ジハロゲン化アミノピラジンの1モルに対して、1モルのvinylboronicacid試薬9B1モルを使用し、パラジウム触媒と塩基の存在下に、1~2時間反応させるとオレフィン化合物一般式9が得られる。得られる一般式9の化合物からR3BOH2を使用した鈴木カップリング反応で一般式5の化合物を得ることができる。一方、オレフィン化合物9の1モル対して、10モルの酸化白金の存在下に水素添加でオレフィンを還元した後、同様にR3BOH2を使用した鈴木カップリング反応で一般式3aの化合物を得ることができる。下記スキーム4で一般式7の化合物の製造法について説明する。<スキーム4>式中、R1、R2、R3、R5及びZ1は前記に定義される通りである。一般式5の化合物1モルに対して、一般式6の化合物を1~4モル程度使用し、酸の存在下または非存在下に65~100°Cの温度で1~2時間反応させることで一般式7の化合物が得られる。<スキーム5>式中、R1、R2、R3、R5、Y1及びZ1は、前記に定義される通りである。一般式3の化合物1モルに対して、一般式6の化合物を1~4モル程度使用し、酸の存在下または非存在下に65~100°Cの温度で1~2時間反応させることで一般式8の化合物が得られる。本発明の化合物は、ウミホタルルシフェリンとして有用である。1つの好ましい実施形態において、本発明の化合物は、ウミホタルルシフェラーゼと反応させたときの最大発光波長が天然型ウミホタルルシフェリンと、15nm以上、長波長側または短波長側にシフトするため、ウミシイタケルシフェリンと区別して測定可能である。さらに、1つの好ましい実施形態において、本発明の化合物は、安定な化合物であり、低いバックグラントの特性を有するものである。本発明の化合物は、具体的には天然型ルシフェリンと比較して、約5以上バックグラウンドが減少している。本発明において、ウミホタルルシフェリン又はそのアナログと酸化防止剤を併用することで、ウミホタルルシフェリン又はそのアナログを安定化することができる。さらにウミホタルルシフェラーゼとウミホタルルシフェリン又はそのアナログを含むウミホタル系生物発光の測定を酸化防止剤の存在下に行うことで、発光シグナルを増強し、発光バックグラウンドを低減することができ、SN比を大幅に改善することができる。酸化防止剤としては、アスコルビン酸またはその塩、エリソルビン酸またはその塩、亜ジチオン酸又はその塩、亜硫酸水素塩、亜硫酸塩、ピロ亜硫酸塩、メタ重亜硫酸塩、システイン、チオグリセロール、ブチルヒドロキシアニソール、ポリフェノール類、チオ硫酸又はその塩、水素化ホウ素アルカリ金属などが挙げられ、これらを1種又は2種以上組み合わせて使用できる。好ましくはアスコルビン酸、エリソルビン酸又はその塩が挙げられる。2種以上の酸化防止剤を組み合わせる場合には、アスコルビン酸と少なくとも1種の他の酸化防止剤を組み合わせるのが好ましい。アスコルビン酸塩、エリソルビン酸塩、亜硫酸水素塩、亜硫酸塩、ピロ亜硫酸塩、メタ重亜硫酸塩、チオ硫酸塩としては、ナトリウム、カリウム、リチウム、セシウムなどのアルカリ金属塩、アンモニウム塩、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属塩などが挙げられる。また、水素化ホウ素アルカリ金属としては、水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素カリウム、水素化ホウ素リチウム、水素化ホウ素セシウムなどが挙げられる。アスコルビン酸をウミホタル生物発光系に添加する場合、005~1M程度の濃度で添加するのが好ましい。ウミホタルルシフェリン又はそのアナログと酸化防止剤を含む組成物は、ウミホタルルシフェリン又はそのアナログを安定化するのに好適である。該組成物において、ウミホタルルシフェリン又はそのアナログ1重量部あたり、酸化防止剤を40000~800000重量部程度配合する。本発明のウミホタルルシフェリン又はそのアナログは、ウミホタルルシフェリンを含む系に添加されるが、このような系では、0.1~1程度のアルブミンの存在下にルシフェラーゼアッセイを行うことが多い。このアルブミンは、測定系におけるバックグラウンドを顕著に上昇させるが、この測定系にアスコルビン酸、亜硫酸ナトリウムなどの還元剤を存在させると、アルブミンによるバックグラウンドの上昇を顕著に抑制することができる。従って、ウミホタルルシフェリン又はそのアナログと酸化防止剤を含む組成物は、ウミホタルルシフェリン又はそのアナログの室温での保存安定性のみならず、測定時のアルブミンによるバックグラウンドの上昇を抑制できるため、特に好ましい。以下、本発明を実施例に基づきより詳細に説明する。実施例1:一般式2Aの化合物光学活性な11Diethoxy3methylpentan2oneの製造光学活性なS2methylbutyricacid1gのCH2Cl2溶液にThionylchloride12mlを滴下した。そのまま室温で24時間攪拌した。反応液を濃縮し、酸クロライドが得られた。酸クロライドを11THFAcetonitrileで溶かし、0°Cで2MTMSCHN210mlを加え、一時間後溶液を濃縮した。その溶液をエタノール10mlで溶かし、0°CでtertBuOCl1mlを滴下した。反応液を0°Cで1時間攪拌した。反応液を濃縮し、シリカゲルカラムにて精製した06g39S11Diethoxy3methylpentan2one:1HNMR086108124131173293351371463IR2955287117271486136711201063cm1αD2422実施例2:一般式2Aと一般式10の化合物を用いた、一般式11の化合物光学活性なウミホタルルシフェリンの製造ナスフラスコ5mLの中に化合物10mg、水01ml、11Diethoxy3methylpentan2one002ml、エタノール01ml、80°Cで30分間加熱した。48HBr002mlを加え、さらに10分間加熱したのち、減圧濃縮した。残渣をエタノールで溶かし、LH20カラムにて精製し、化合物がで得られた。1HNMR096145181199233317341344718721750801807844αD2422得られた化合物は天然ルシフェリンと同等の活性を示した試験例1。実施例3:一般式12と一般式10の化合物による一般式11の化合物光学活性なウミホタルルシフェリンの製造ナスフラスコ5mlの中に化合物1011mg、水02ml、secButylglyoxal001ml、メタノール01mlを加え、1時間65°Cで加熱した。反応液を室温に戻したのち、48のHBrを一滴加え、減圧濃縮した。残渣をエタノールで溶かし、LH20カラムにて精製し、4mgの化合物が得られた。1HNMR096145181199233317341344718721750801807844実施例4:一般式13~の化合物の製造化合物13の合成。2-アミノ-3,5-ジブロモアミノピラジン1g、4mmolおよびvinylboronicacid試薬のジオキサン72ml-飽和Na2CO324ml溶液にPd4を加えた。混合物を1時間80°Cで加熱した。冷却後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、食塩水で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過後、濃縮して粗抽出物が得られた。粗抽出物はクロマトグラフィーで精製されて所望の生成物を得た。1HNMR144396469482640687795化合物の合成化合物04g1mmolおよび13indoleboronicacidのジオキサン50ml飽和Na2CO324ml溶液にPd4を加えた。混合物を1時間80°Cで加熱した。冷却後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、食塩水で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過後、濃縮して粗抽出物が得られた。粗抽出物はクロマトグラフィーにて精製されて所望の生成物を得た。所望の生成物を8mlMethanolDioxane溶液で溶かし、5N水酸化ナトリウム2mlを加えた。室温で一晩攪拌した。後処理した後、混合物をクロマトグラフィーにて精製し、化合物が得られた。1HNMR145404455480661694721-7272Hm741766841835化合物の合成。化合物をTFAトリフルオロ酢酸溶液で溶かし、1時間で攪拌して濃縮した。濃縮得られた混合液をクロマトグラフィーにて精製し、化合物170mgが得られた1HNMR3856987174Hm741777828834化合物150mg06mmol、Pyrazole1carboxamidineDIEAのDMF溶液を室温で1晩攪拌した。エーテルを加え、沈殿が得られた。沈殿をメタノールで溶かし、再結晶にて化合物95mg53が得られた。1HNMR4207057174Hm743787812808実施例5:一般式16と一般式12の化合物を反応させる、一般式17の化合物の製造化合物17の合成。ナスフラスコの中に化合物167mg22mmol、水01ml、化合物12002ml、エタノール005ml、100°Cで30分間加熱した。48HBr002mlを加え、さらに10分間加熱したのち、減圧濃縮した。残渣をエタノールで溶かし、LH20カラムにて精製し、化合物がで得られた。1HNMR096144181199420718721742794807811実施例6:一般式10の化合物の合成化合物18の合成。化合物13をエタノールに溶かし、この中に酸化白金を加えた。水素雰囲気下で24時間激しく攪拌した。反応液をセライトで敷いたガラスフィルターで吸引ろ過した。ろ過液を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにて精製し、化合物が得られた。800mg79化合物18の物性:1HNMR144203280328795化合物10は実施例4で示した化合物16の製造法と同じ方法で製造された。化合物10の物性:1HNMR203280328708716741790830実施例7:一般式10の化合物と、一般式6に含まれる化合物19、20、21、22、23を反応させ、化合物、、、,を各々合成した。化合物の合成:ナスフラスコの中に化合物30mg、水04ml、190030ml、エタノール02ml、49HBr003ml1時間100°Cで加熱した。反応液を室温に戻したのち、減圧濃縮した。残渣をエタノールで溶かし、LH20カラムにて精製し、化合物24が得られた。1HNMR233254331343717722747798801831IR33763175166115501454cm1化合物は化合物の製造方法と同じ方法で得られた。化合物の物性1HNMR141233295335343716722747799802835IR33763175166115501454cm1化合物は化合物の製造方法と同じ方法で得られた。化合物の物性1HNMR150229332337343711714740796794822IR33763175165515481452cm1化合物は化合物の製造方法と同じ方法で得られた。化合物の物性1HNMR103218233278335343716722747799804836IR33763175166115501454cm1化合物は化合物の製造方法と同じ方法で得られた。化合物の物性:1HNMR227299341714722743787802806実施例8化合物の合成:ナスフラスコの中に化合物10mg、水01ml、290020ml、エタノール01ml、49HBr001ml1時間100°Cで加熱した。反応液を室温に戻したのち、減圧濃縮した。残渣をエタノールで溶かし、LH20カラムにて精製し、化合物30が得られた。1HNMR224325339427710724730745793796827化合物の合成:ナスフラスコの中に化合物10mg、水01ml、310020ml、エタノール01ml、49HBr001ml1時間100°Cで加熱した。反応液を室温に戻したのち、減圧濃縮した。残渣をエタノールで溶かし、LH20カラムにて精製し、化合物32が得られた。1HNMR184229338342460716724732740743797798827化合物の合成:ナスフラスコの中に化合物10mg、水01ml、330020ml、エタノール01ml、49HBr001ml1時間100°Cで加熱した。反応液を室温に戻したのち、減圧濃縮した。残渣をエタノールで溶かし、LH20カラムにて精製し、化合物32が得られた。1HNMR099184232341344429716723730744747795797834化合物の合成:化合物02g06mmolおよび2Naphthylboronicacidのジオキサン50ml飽和Na2CO324ml溶液にPd4を加えた。混合物を1時間80°Cで加熱した。冷却後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、食塩水で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過後、濃縮して粗抽出物が得られた。粗抽出物はクロマトグラフィーにて精製されて所望の生成物を得た。得られた化合物を1mlのTFAトリフルオロ酢酸溶液で溶かし、1時間攪拌して濃縮した。さらにトリフルオロ酢酸塩化合物を35mlのDMFで溶かし、Pyrazole1carboxamidineDIEAを加え、室温で1晩攪拌した。エーテルを加え、沈殿が得られた。沈殿をメタノールで溶かし、再結晶にて化合物135mg70が得られた。1HNMR221290337746786801830837化合物の合成ナスフラスコの中に化合物10mg、水01ml、化合物0020ml、エタノール01ml、49HBr001ml1時間100°Cで加熱した。反応液を室温に戻したのち、減圧濃縮した。残渣をエタノールで溶かし、LH20カラムにて精製し、化合物36が得られた。1HNMR096,147186235319,343348,7552HdJ7Hz790801814860878化合物の合成:ナスフラスコの中に化合物10mg、水01ml、化合物330020ml、エタノール01ml、49HBr001ml1時間100°Cで加熱した。反応液を室温に戻したのち、減圧濃縮した。残渣をエタノールで溶かし、LH20カラムにて精製し、化合物37が得られた。1HNMR183420460718732742794807811試験例1:ウミホタルルシフェリン類の発光スペクトル性測定01mlの50mMTrisHCl緩衝液pH75の中に、ウミホタルルシフェラ-ゼ終濃度100ngmlとウミホタルルシフェリンまたはオレフィン基を有する新規ウミホタルルシフェリンアナログ化合物17を混合し、30秒間積算した発光スペクトルを計測した結果、化合物の発光最大波長は天然ルシフェリンに比べて、約15nmほど長波長側へシフトした。試験例2:ウミホタルルシフェリン類の発光スペクトルの測定01mlの50mMTrisHCl緩衝液pH75の中に、ウミホタルルシフェラ-ゼ終濃度100ngmlと新規ウミホタルルシフェリンアナログを混合し、発光スペクトルを計測した図2。その結果、ウミホタルルシフェリンの2位にベンジル基を持つ化合物と2位に2級ブチル基と6位にナフタレンを有する化合物場合、生物発光波長が天然ルシフェリンより短波長へシフトし、2位に枝分かれのベンジル基を含んだ化合物は、天然ルシフェリンより長波長へシフトすることがわかった。従来できていなかったウミホタルルシフェラーゼの発光波長の制御が可能となった。特に、化合物の発光極大波長は顕著に紫外線領域へ390nmシフトし、従来の発光系と異なる発光色を示すことができる。その発光極大波長390nmにおいて、ウミシイタケルシフェラーゼ青やホタルルシフェラーゼ黄緑から赤までによる発光の光干渉は殆ど受けないので、光フィルターを使用することなく、発光を計測できる。また、この化合物の発光極大波長は緑色蛍光タンパク、黄色蛍光タンパク質の蛍光極大波長との差stokesshiftが大きいので、この基質を利用すれば、ウミホタルルシフェラーゼの発光による蛍光タンパクの蛍光極大波長への光干渉が低減するので、ウミホタルルシフェラーゼ蛍光タンパク質の融合体による蛋白質からの活性ペプチドのプロセッシングの定量化に適している。実施例903Mアスコルビン酸ナトリウムを含むまたは含まない01mlの100mMTrisHCl緩衝液pH75または01mlの100mMTrisHCl緩衝液pH7503MNaClの中に、ウミホタルルシフェリン終濃度1μMを混合し、10秒間の発光値バックグランドを測定したのちに、ウミホタルルシフェラ-ゼ終濃度5ngmlを加え、10秒間のルシフェラーゼによる発光値を測定した。結果を表1に示す。さらに、室温で24時間後のルシフェリンの活性を測定した。結果を表2に示す。表1に示されるように、アスコルビン酸ナトリウム塩を含んだバッファ系はSNが少なくとも16倍以上改善された。また、表2に示されるように、ルシフェリンは03Mアスコルビン酸ナトリウム塩を含む01mlの100mMTrisHCl緩衝液pH75において室温でも安定であることがわかった。実施例10:24時間を越える室温でのウミホタルルシフェリンの保存03Mアスコルビン酸ナトリウムと002M亜硫酸ナトリウムを含む100mMTrisHCl緩衝液pH75の中に、ウミホタルルシフェリン終濃度1μMとウミホタルルシフェラ-ゼ終濃度5ngmlを混合し、10秒間のルシフェラーゼによる発光値を測定した。さらに、室温で放置したルシフェリンの24時間後の生物発光活性を測定した。結果を表3に示す。表3に示されるように、ルシフェリンと03Mアスコルビン酸ナトリウム塩と002MNa2SO3を含む01mlの100mMTrisHCl緩衝液pH75は03Mアスコルビン酸ナトリウム塩の単独実施例9の24時間後、表2に比べて、室温での安定性がさらに向上することがわかった。実施例11:酸化防止剤であるアスコルビン酸ナトリウムと亜硫酸ナトリウムによるBSAのバックグランドの低減酸化防止剤が無い条件、03Mアスコルビン酸ナトリウム、03Mアスコルビン酸ナトリウムと002MNa2SO3を含む100mMTrisHCl緩衝液1BSApH75の中に、ウミホタルルシフェリン終濃度1μMを混合し、10秒間の発光値バックグランドを測定したのちに、ウミホタルルシフェラ-ゼ終濃度5ngmlを加え、10秒間のルシフェラーゼによる発光値を測定した。結果を表4に示す。表4に示されるように、ルシフェリンと03Mアスコルビン酸ナトリウム塩と002MNa2SO3を含む01mlの100mMTrisHCl緩衝液pH75はBSAによる発光バックグランドが凡そ10倍低下し、SNの比が14倍ぐらい改善されることがわかった。"