"真菌胞子を包装するための方法であって、以下のステップ:i前記胞子の最初の水分活性を0.3未満に減らし;ii一つの酸素吸収剤及び一つの湿気吸収剤を含むガス及び水蒸気不透過性包装内に前記胞子を設置し;iii15~25°Cの間の温度で少なくとも2日間、包装中で前記胞子を保持することを含むことにより特徴付けられる、方法。前記湿気吸収剤が、硫酸カルシウム又はシリカゲルから選択されることを特徴とする、請求項1に記載の方法。前記剤が、前記胞子に対して非毒性である一つ以上の小袋の形態であることを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。前記ガス及び水蒸気不透過性包装が、ガラス、アルミニウム又はセラミックを含むラミネート材料からなる群から選択されるという事実によって特徴付けられる、請求項1に記載の方法。前記ステップii後、最終水分活性値が、0.1未満、好ましくは0.02~0.03の間であるという事実によって特徴付けられる、請求項1に記載の方法。前記胞子が、メタリジウムMetarhizium属、ビューベリアBeauveria属、イサリアIsaria属、レカニシリウムLecanicillium属、ノムラエアNomuraea属、及びトルコデルマTrichoderma属の群から選択されるという事実によって特徴付けられる、請求項1に記載の方法。請求項1~6のいずれか一項に記載の方法により増加された保存可能期間を有することにより特徴付けられる真菌胞子。前記真菌胞子が、メタリジウムMetarhizium属、ビューベリアBeauveria属、イサリアIsaria属、レカニシリウムLecanicillium属、ノムラエアNomuraea属、及びトルコデルマTrichoderma属から選択されるという事実によって特徴付けられる、請求項7に記載の真菌胞子。真菌を貯蔵するための密封包装であって、ガス及び蒸気不透過性であり、及びその内部に以下:i生存能力がある真菌胞子;ii前記胞子を前記包装内に設置した後、前記胞子の前記水分活性が、15~25°Cの間の温度で少なくとも2日後、0.1未満となるように、相対湿度を減らす内部環境;iii一つの酸素吸収剤及び一つの湿気吸収剤を含むことにより特徴付けられる、包装。前記湿気吸収剤が、硫酸カルシウム又はシリカゲルから選択されることを特徴とする、請求項9に記載の包装。前記剤が、前記胞子に対して非毒性である一つ以上の小袋の形態であることを特徴とする、請求項9又は10に記載の包装。前記密封包装が、ガラス、アルミニウム又はセラミックを含むラミネート材料からなる群から選択されることを特徴とする、請求項9に記載の包装。前記水分活性の最終値が、0.02~0.03の間であるという事実によって特徴付けられる、請求項9に記載の包装。前記胞子が、メタリジウムMetarhizium属、ビューベリアBeauveria属、イサリアIsaria属、レカニシリウムLecanicillium属、ノムラエアNomuraea属、及びトルコデルマTrichoderma属の群から選択されるという事実によって特徴付けられる、請求項9に記載の包装。本発明は、真菌の保存可能期間を増加することを目的として真菌胞子を包装するための方法を提供する。本方法は以下のステップ:i生物organismが生存可能な水分活性範囲に胞子の最初の水分含量を減らし;ii少なくとも一つの水分及び酸素吸収剤を有する、ガス及び水蒸気不透過性包装内に胞子を設置し;iii胞子を、高温へのそれらの暴露の前に、15~25°Cの間、好ましくは25°Cで、又は生物にとって適切な他の温度で、最低限2日間、包装中で保持することを含む。本発明の第二態様は、増加した保存可能期間を有するビューベリアBeauveria属、イサリアIsaria属、レカニシリウムLecanicillium属、ノムラエアNomuraea属、メタリジウムMetarhizium属、及びトルコデルマTrichoderma属の胞子を提供することにある。他の実施態様において、i生存能力のある真菌の胞子;及びii小袋の使用によって減少させた水分含量及び酸素を有し、並びにガス及び水蒸気不透過性包装において適切な温度でのインキュベーション期間を有する環境を内部に含む密封包装が、得られる。本発明は、非冷凍条件下、特に37°C以上の温度で真菌の保存可能期間を増加するための保存方法に関する。本方法論によって、胞子は、高い周囲温度に供された場合でさえ、生存能力を維持する。以下の説明において、特定の用語が広く使用される。そして以下の定義が、本発明の理解を容易にするために提供される。用語調整雰囲気包装modifiedatmospherepackagingは、本明細書において、前記包装内部の包装材料が、大気と異なる組成を有するガスに暴露され、そして包装内部への特定のガス若しくはガスの混合物の注入、又は包装の構成要素と反応する構成要素の成分の使用などの技術を含んでもよいプロセスとして定義される。これらの成分は、限定されないが、吸収剤小袋、ガス放出剤gasemitter、又は水蒸気吸収剤でもよい。用語生存能力viabilityは、微生物農薬の分生子品質の評価のためのより適切なプロトコールを考慮した急速な再水和を使用する手段によって測定された胞子の発芽パーセンテージを意味する。生物の生存可能な温度viabletemperaturetotheorganismとは、特定の種の分生子の死又は衰弱を引き起こさない温度と考えられる。本発明において、生存可能な温度は、好ましくは25°C付近である。水分活性wateractivityawは、同じ温度での、材料の水蒸気圧と純水の蒸気圧の比率として定義される。化学及び生体反応に使用可能である材料中に含まれる水の測定であり、従って、微生物を対象にした研究において重要なパラメータである。本発明の目的のために、プレインキュベーション期間pre‐incubationperiod又は平衡期間equilibrationperiodは、高温に暴露する前に、胞子を不透過性包装中に保持する時間であり、この時間は、0.1未満、好ましくは0.02~0.03の値に水分活性を減らすために必要である。用語保存可能期間shelf‐lifeは、微生物農薬を、その有効性に関する特性の著しい喪失なしに、特定の温度条件において貯蔵できる期間として定義される。非密封包装中に包装された微生物農薬のために、貯蔵相対湿度は、また考慮されるべきである。本発明の目的のために、40°C付近で貯蔵された生物殺虫剤に対する最低限の望ましい保存可能期間は、2~6月間と考えられる。生存能力は、分生子の品質を言及するために病理学者によって最も一般的に使用される特性であり、そして好ましくは、80超であるべきである。従って、決定された温度で、生存能力を80に減少させるために必要な時間を、微生物殺虫剤の保存可能期間として設定した。昆虫病原糸状菌の胞子の保存可能期間を延長するための方法は、以下のステップ:i生物が生存可能である水分活性の非常に低いレベルまで胞子の最初の水分含量を減らし;ii一つの酸素吸収剤及び一つの湿気吸収剤を有するガス及び水蒸気不透過性包装内に胞子を設置し、そしてこれらの剤は、好ましくは小袋の形態であり、任意により酸素及び湿気の両方を吸収することができる単一の小袋を使用してもよく;iii胞子を、高温への暴露の前に、穏やかな温度で少なくとも日、包装中で保持することからなる。水和した胞子の最初の水分含量の減少は、胞子の採取のステップの間に乾燥することにより達成できる。真菌の産生は、米飯などの固形基質において通常は起こる。真菌産生のプロセス後すぐに、コロニー化した基質を低い相対湿度を有する部屋で調節してもよく、結果として分生子の乾燥を生じ、又は低値への水分活性の減少が起きるまで、乾燥剤を含むチャンバーを使用してもよい。充填前のそのような低い水分活性は、好ましくは0.1未満である。この材料は、限定されないが、硫酸カルシウム及びシリカゲルの群から選択される。乾燥チャンバーにおいて水分含量の減少を生じるために、低温、好ましくは15~25°Cの間、より好ましくは25°C、又は胞子の生存能力に影響を与えない他の温度で、2日間以上待つことか必要であり、ここで、真菌の脱水が、真菌の構造を弱らせることなく発生することができる。生物の水分活性は、充填後有意に減少され、そして従って、ガス及び水蒸気不透過性包装の使用を介して維持される。胞子の包装プロセスにおいて、それらの保存のための適切な雰囲気を提供するための手段として、好ましくは、湿気及び酸素吸収剤を含む小袋が使用される。これらの小袋は、それらが個別に酸素吸収剤若しくは湿気吸収剤であるただ一つの機能を有してもよく、又は単一の小袋が酸素及び湿気吸収剤として働く場合、両方の機能を有してもよい。小袋は、胞子に対して非毒性の雰囲気を発生すべきである。湿気吸収剤として、硫酸カルシウム又はシリカゲルが使用できる。本発明のために有用な小袋は、限定されないが、RP‐3A酸素及び湿気吸収剤、Ageless登録商標ZPT1000酸素吸収剤、OxyFree商標504A酸素及び二酸化炭素吸収剤、OxyFree商標504E酸素吸収及び二酸化炭素発生剤、又は無水硫酸カルシウム湿気吸収剤から選択されてもよい。本発明の方法で使用される不透過性包装は、限定されないがアルミめっきを施された包装及びガラスであってもよい。包装のための小袋の使用の結果は、胞子の最初の水分活性に依拠して異なる。酸素吸収剤小袋のみ使用する場合、胞子の高い湿度は同じ保存に影響を与え、高温への暴露の後、生存能力を減少する。Drierite商標、無水硫酸カルシウム化合物などの、高温に暴露した場合、水蒸気を放出しない湿気吸収剤を使用すべきであり、そしてそれらは、177°C超の温度への暴露後のみ、水蒸気を放出する。最終的な微生物農薬及び包装内部の大気組成の水分活性は、使用までの胞子の生存能力を維持するための必須因子である。高温への暴露前に、胞子が不透過性包装中に保持される時間は、プレインキュベーション又は平衡期間と呼ばれ、この期間は、0.1未満の値、好ましくは0.02~0.03の間の値に水分活性を減らすために必要である。真菌のビューベリアバシアナBeauveriabassianaに関して、包装のサイズ、製剤formulationの種類、微生物農薬の量、並びに使用される吸収剤小袋の量及び効率などの因子に依拠して、例えば、平衡期間は通常、少量の胞子に対して2日以上である。本発明に従って包装され及び再活性化される真菌は、限定されないが、ビューベリアBeauveria属、イサリアIsaria属、レカニシリウムLecanicillium属、ノムラエアNomuraea属、メタリジウムMetarhizium属、及びトルコデルマTrichoderma属のものが挙げられる。本発明に係る真菌胞子が包装される不透過性包装は、限定されないが、ガラス、アルミニウム若しくはセラミックを含むラミネート材料、又は他のガス及び水蒸気不透過性材料であってもよい。以下の実施例は、本発明を例示し、さらに説明する目的を有し、本発明を制限するための形態として見なされるべきではない。実施例1:ガラス包装における異なるガスの注入ビューベリアバシアナBeauveriabassianaのサンプル0.6gを、ゴム隔膜を含む金属キャップで密封された125mlの密封ガラスバイアルBall登録商標,JardenCropMuncieINUSA中に保持した。それぞれのガラスバイアルに、純粋な二酸化炭素、窒素、ヘリウム又は水素、及び100又はN2で平衡化した21の酸素AirgasEastIncSalemNHUSAを40ml/分の流速で、40分間注入した。O2を注入しなかったバイアルについて、このガスの濃度を注入後測定し、本環境がO2の検出できる濃度を含まないことを確実にした。ガスサンプル500μLを、密封されたシリンジモデル1750,HamiltonCompanyRenoNVUSAで、それぞれのバイアルから採取し、そして熱伝導度検出器を備えたガスクロマトグラフィーVarianAerographWalnutCreekCAUSA内に注入した。ピークの高さを、N2で平衡化させた6.96のO2及び4.91のCO2を含む標準品と比較した。ガス暴露からなるそれぞれの処理を、3~4回繰り返した。貯蔵の間のガス交換O2を最小化するために、125mlのガラスバイアルを、同じガス混合物を含むより大きいBall登録商標密封ジャー容器0.95Lに保持した。この方法を使用して、ガラスバイアルを50°Cで60日間インキュベートした。温度を、インキュベーターごとに2つのデジタル式データロガーHobo登録商標,OnsetComputerCorpBourneMAUSAで連続的に監視した。本貯蔵の後、それぞれのバイアルにおけるO2濃度を、システムの気密性の指標として再度測定した。胞子の水分活性は、25°Cにおいて水分活性メーターLabMaster‐awNovasinaPfaffikonSwitzerlandで測定し、そして発芽を測定した。生存能力を、水‐界面活性剤溶液中に粉末分生子を懸濁し、そして酵母抽出物アガー‐ベノミル抽出物培地yeastextractagar‐benomylmediumextract酵母抽出物アガー/ベノミル培地‐YEA上にこの材料を配置することにより直接測定した。この溶液水‐界面活性剤を、周囲雰囲気で平衡化した。それぞれの再水和プロトコールを行った後、植菌されたアガーブロックガラススライド上を25°Cで暗所においてパラフィン処理したペトリ皿中でインキュベートし、発芽数の計算を植菌24時間後、行ったpi。分生子を、任意のサイズの発芽管が、400倍の倍率で、位相差照明で見える場合、発芽と見なした。少なくとも200の分生子を、それぞれの実験の処理を反復したそれぞれの懸濁液に関するいくつかの顕微鏡視野で観察した。実験を、21のO2での処理をせずに、異なる日付で繰り返した。多量のガス交換を引き起こすO2を除くガスを注入したバイアルO2の最終濃度f>3.5を、廃棄した。データを、アークサインの平方根に変換し、そして一つの因子の分散分析を使用して分析した。平均値をチューキークレーマーTukey‐KramerHSD又はt検定により比較し、そして5の有意水準で、統計的に相違すると見なした。データをJMP統計ソフトウェアパッケージSASInstituteIncCaryNCUSAを使用して分析した。図1は、最初のアッセイにおける胞子に関する最終水分活性がガス処理で変化しなかったことを示しP=0.4150,F513=1.1;全体的な平均水分活性は、0.099±0.0248であった。発芽における有意差を、50°Cで60日後観察しP<0.0001,F513=122.0、そしてN2、CO2、H2及びHeへの暴露は、40~51の範囲に相当する生存能力を生み出す一方で、21及び100のO2では、発芽率が非常に低い又は生存能力のある胞子の非存在すらそれぞれで記録した。最初の実験のように、本処理では、胞子の最終水分活性において有意差を生じずP=0.29,F=311=1.4、処理の間で、0.119±0.0021の平均水分活性であった。100のO2の注入は、再度、生存菌を生じなかった21のO2は試験しなかった。すべての他のガスの貯蔵は、O2での処理よりも優れた生存能力を生じたが、同等に低かった10~13の範囲図1B。最初の実験における胞子のより低い水分活性に起因して、これらの発芽率は、最初の試験で観察された49~51の範囲よりも著しく低い。O2を注入したバイアルを除いて、残存O2濃度1.6~1.9は、ガスを注入したバイアル間では異ならなかったP=0.73,F28=0.3。実施例2:異なる温度での胞子の貯蔵のためのN2及びCO2注入上記と同じ方法を使用して、胞子のサンプルに20CO2及び80N2を注入した。4つのサンプルを、残存O2及び40°Cで45、91、180及び240日間貯蔵後の最終水分活性に関してそれぞれの処理について試験した。試験を、異なる日付で繰り返した。さらに、試験を、25°C46、120、180、365及び400日貯蔵後に評価、及び50°C15、30、47、75及び90日貯蔵後に評価で貯蔵の影響を研究するために行った。すべての場合において、生存能力は、異なる温度でインキュベーター中に貯蔵する直前である0日目dayzeroにおいてまた測定した。異なるバイアルを、評価の日にただ一回サンプリングし、従って本試験は、反復測定設計を使用していない。データを、アークサインの平方根に変換し、そして一つの因子の分散分析を使用して分析した。平均値をチューキークレーマーHSD又はt検定により比較し、そして5の有意水準で、統計的に相違すると見なした。データをJMP統計ソフトウェアパッケージSASInstituteIncCaryNCUSAを使用して分析した。25°Cでの貯蔵試験において、生存能力について有意な減少を観察したがP=0.0002、F518=8.8、本減少は、緩やかで小さく、そして生存能力は、図2に示すように、貯蔵後365日で90超、及び貯蔵後480日で87であった。胞子の水分活性は、貯蔵後46日で0.104~試験の終了時点で0.204まで増加しP<0.0001、F415=36.3、そして残存O2の平均濃度は、0.5~12.4まで増加したP<0.0001、F415=38.0。40°Cでの実験において、貯蔵の最初の3月の間、生存能力の統計的に有意な喪失があったが、減少は、6のみであった93~87まで。これはその後に、貯蔵後240日で4までの生存能力の急速な減少があったANOVAP<0.0001、F434=361.7。45日~240日の区間の間に、残存O2の平均濃度は、1.2~6.6まで増加しP=0.0002、F328=9.4、そして水分活性は、0.104~0.145まで増加したP<0.0001、F327=35.4。50°Cで、最初の生存能力は、最初の15日間で96~81まで急速に減少し、そして貯蔵後90日で、約10に減少したP<0.0001、F621=129.1。残存O2は、貯蔵15日後で0.8~貯蔵後90日後で3.2まで増加した一方でP=0.0074、F518=4.5、胞子の水分活性は、本期間の間に有意に変化しなかった貯蔵15日後で0.104~貯蔵90日後で0.098まで:P=0.3448、F518=1.2。実施例3:ガス注入及びアクティブ包装activepackagingAPの使用ビューベリアバシアナBeauveriabassiana胞子を、25°Cで1日間、125mLのガラスバイアルにおいて、NaOHで脱水し、0.083±0.001の水分活性を生じた。いくつかの無作為のサンプルを、ガラスバイアルに移し、そしてN2を注入した。O2の喪失を、ガラス容器を含む二重充填システムを使用して減らした。残存サンプル0.6gを、以下の3つのAP処置:iO2及びRP-3A湿気吸収剤を有するアルミニウムバッグ8×8.5cm;iiO2吸収剤フィルムコードM‐0034,ロット19208A,88.9×63.5×0.3mmCSPTechnologies,Auburn,AL,USA湿気吸収フィルムCSPTechnologies,コードM‐0026,ロット02208A,63.5×38.1×0.6mm、又は;iiiO2及び湿気吸収剤として二重作用を有するフィルムCSPTechnologies,コードM‐0033,ロット10808A,76.2×76.2×0.6mmの一つに供した。対照用に胞子を、RP‐3A小袋を有する30mmの厚いポリエチレンバッグコードP827‐2.1.2;EmpacAgroindustrialLtdaPlastics,Brasilia,Brazil中で保持した。調製後、胞子を有するすべての包装を、5日間25°Cでプレインキュベートし、そしてその後、50°Cに移した。N2を注入したガラスバイアルの残存O2を、高温でインキュベートする前に迅速に検査した。すべての処理に関して、50°Cに移す前に、3つの容器を、胞子の水分活性及び生存能力の破壊測定のためにすぐに使用した。胞子を50°Cで56日間又は129日間インキュベートした。貯蔵後、水分活性を測定し、そして分生子生存能力を評価した。それぞれの処理及び日付に関して、独立して調製した4つの包装を、破壊的に評価し、そして従って反復測定設計を採用しなかった。実施例4:調整雰囲気のための小袋ビューベリアバシアナBeauveriabassiana胞子のサンプルを、25°Cで2日間、硫酸カルシウム乾燥剤Drierite商標8‐メッシュインジケーター,W.A.HammondDrieriteCo.,Xenia,OH,USAを有する125mLのガラスバイアル中で貯蔵した。充填前、胞子の水分活性は、0.019±0.0005であった。他の処理では、胞子を、25°Cで2日間、飽和NaCl溶液上に保持し、そしてそれは、充填前に0.738±0.0007の水分活性を生じた。サンプルをその後、以下の雰囲気調整のための小袋:O2及び湿気吸収剤RP‐SA、O2吸収剤Ageless登録商標ZPT1000MitsubishiGasChemicalCo.,Japan、O2及びCO2吸収剤OxyFree商標504ATianhuaTech,China、O2吸収剤及びCO2発生剤OxyFree商標504ETianhuaTech,China、又はDrierite商標に基づく湿気吸収剤の一つを含むラミネートバッグ10×12cm中に移した。対照として、小袋を含まないラミネートバッグを使用した。バッグを、プレインキュベーション期間なしで、50°Cでインキュベーションし、45日後、胞子の水分活性を定量し、そして発芽数を計算した。それぞれの処理小袋の種類対最初の水分活性を、4回繰り返した。表1.吸収剤小袋及び/又は、ガス及び水蒸気発生剤を含むバッグにおいて、50°Cで45日間貯蔵後の、ビューベリアバシアナBeauveriabassiana胞子の発芽の測定いくつかの調整雰囲気小袋の使用は、低い最初の水分活性P<0.0001、F512=1631.4及び高い最初の水分活性P<0.0001、F512=522.4の両方に対して、胞子の生存能力について非常に有意な差が生じた表1。予想通り、異なる小袋の吸収能力を考慮すれば、低い又は高い最初の水分活性での処理における胞子の最終水分活性は、また顕著に異なった。O2及び湿気を吸収する二重作用吸収剤RP‐3Aの使用と比較した場合、貯蔵の間に湿気を放出するAgeless、504A及び504E小袋、又は湿気を吸収するがO2を吸収しないDrierite商標小袋の使用は、より低い生存能力を生じた。実施例5:保存可能期間の延長のための調整雰囲気小袋の組み合わせビューベリアバシアナBeauveriabassiana胞子のサンプルを、25°Cで2日間、Drierite商標で乾燥し0.020±0.0008の水分活性を生じた、そしてその後、以下の異なる小袋:O2及び湿気を吸収するRP‐5ARP‐3Aと同じ組成であるが、大型包装に適している、O2を吸収してCO2を発生する504E、又は504E小袋Drierite商標小袋56.7gを有する16×20cmのラミネートバッグに移した。それぞれの処理を、3回繰り返し、そして胞子の水分活性を測定し、及び40°Cで貯蔵148日後及び180日後の発芽を測定した。O2を吸収するが湿気を放出する小袋504Eは、乾燥剤Drierite商標と併せて試験した場合、効果的であったが、504E小袋の単独使用は、生存能力の完全な喪失を生じた図2。小袋の使用を組み合わせる方策は、40°Cで貯蔵148日後P<0.0001、F26=309.0、及び178日後P<0.0001、F26=2.035の両方で、二重作用小袋RP‐5Aの使用と同じくらい良かった。表2.40°Cで5~6月間保存したビューベリアバシアナBeauveriabassiana胞子の水分活性及び生存能力に対する、乾燥剤小袋を有する又は有しないO2吸収剤及びCO2発生剤の影響実施例6:保存可能期間に対する平衡期間の影響ビューベリアバシアナBeauveriabassianaの純粋な胞子は、高温処方regimenに暴露される前に、包装内部に平衡化されたそれらの水分活性を有した。ビューベリアバシアナBeauveriabassianaのサンプルを、25°Cで2日間、Drierite商標又はNaClにおいて保持し、それぞれ0.020±0.0008及び0.740±0.0018の水分活性を生じた。その後胞子を、RP‐3AO2及び湿気吸収剤の小袋をそれぞれ含むラミネートバッグに移し、そして目的温度25、40及び50°Cで貯蔵する前に、25°Cでさらに5日間、プレインキュベートした。あるいは、25°Cで7日間、サンプルをDrierite商標又はNaClにおいて保持し、RP‐3A小袋を含むラミネートバッグに移し、そして25°Cで5日の平衡期間なしで、目的温度ですぐに貯蔵した。それぞれの処理を、4回繰り返し、そして水分活性及び生存能力の測定を、50°Cで60日後、及び25°C又は40°Cで180日後に行った。胞子の最終水分活性は、それぞれの貯蔵温度で、処理間において変化しなかった表3。25°Cで180日後の発芽パーセンテージは、高い最初の水分含量及び平衡期間なしでの処理、ここで生存能力は88に減少したが、を除いて、すべての処理に関して高かった91~94。40°Cで180日後、生存能力は、大部分の処理に関して87~89であったが、高い最初の水分含量及び平衡期間なしでの処理において、有意に低かった75P=0.0068、F38=8.7。最終的に、50°Cで60日後、同様の傾向を、高い最初の水分活性及び平衡期間なしでの処理、ここで生存能力は60に有意に減少したがP<0.0001、F38=37.8、を除いて、ほぼ全部の処理に関して、83~86の範囲の生存能力を観察した。本研究で観察される保存可能期間は、以前得たものよりもかなり高い。O2以外のガスCO2、N2、H2及びHeの注入後、調整された雰囲気は、50°Cで2月の貯蔵後、同等な生存能力を生じた。バイアルにおいて20のCO280のN2の雰囲気を試験した場合、80に胞子の生存能力が低下する時間は、40°Cと50°Cの温度でそれぞれ、91日及び15日以上であった。これらの時間は、胞子が5以下の湿度で脱水され、及び密封容器において大気で貯蔵され、40°Cと50°Cでそれぞれ80日間及び17日間、80生存能力を保持したことを示唆したHongら2001HongTDら、TheeffectofstorageenvironmentonthelongevityofconidiaofBeauveriabassianaMycologicalResearchv105p5976022001によって発行されたデータから得られた推定に類似している。これらはそれまで、高温における真菌のこの種に対する、これまでに記録された最も長い保存可能期間であった。しかしながら、アクティブ包装密封包装においてO2及び湿気を吸収する小袋を有するを使用し、そして平衡期間を導入した場合、生存能力が、今までに例のない、40°Cで6月後又は50°Cで2月後、80~90の範囲の値に達した。表3.湿気及びO2吸収剤小袋を含むラミネートバッグ中で貯蔵されたビューベリアバシアナBeauveriabassianaの胞子の発芽に対する最初の水分活性及び平衡期間プレインキュベーションの効果実施例7:保存可能期間に対する脱水ステップ包装前の効果25°Cで7日の平衡期間をすべての処理に対して採用したことが、表4から立証できる。しかしながら、一つの実験において、RP‐3A包装内部の水蒸気及び酸素を吸収する小袋の単なる使用は、高いレベルの発芽を保証するために十分ではないことを見出した。水和RP‐3A処理では、包装前のサンプルの予備乾燥のステップを採用せず、そして平衡期間の終わりに0.050までの水分活性の減少を有し及び16月の貯蔵の終わりで0.020、最終結果は、以前の処理についてよりも低く、ここで水分活性は、平衡期間の終わりで及び40°Cでの貯蔵期間の全体を通じて0.1未満、及び0.02~0.03の理想的な範囲を維持した。実験2において、2つの処理は、推奨するステップ予備乾燥し、湿気及び酸素の吸収のための小袋複数を採用し、高温に暴露する前の酸素除去及び0.03付近のレベルへの水分活性の減少のための平衡期間を順守することを行い、従って結果は満足のいくものであった。一回目の実験の処理2において、二重作用湿気及び酸素吸収小袋を使用し、一方で二回目の実験の処理2において、それぞれの機能に関する小袋を採用した。公知のプロセス及び方法では、40°Cでの分生子の貯蔵16月後、ほぼ70程度の真菌ビューベリアバシアナBeauveriabassianaの生存能力発芽パーセンテージを、今まで提供できなかったことを強調することが重要である。表4:40°Cで18月間貯蔵されたビューベリアバシアナBeauveriabassiana分生子の生存能力に対する水分活性awの影響実施例8:40°Cでの真菌メタリジウムアニソプリエMetarhiziumanisopliaeの保存可能期間についてのアクティブ包装の効果平衡期間25°Cで8日間をメタリジウムアニソプリエMetarhiziumanisopliaeの胞子に対して順守した実験表5において、RP‐3K酸素吸収剤であるが、水蒸気を放出する小袋の使用は、満足のいく結果を提供するために十分ではなかった。単独の使用では、水蒸気の放出が、非常に高い値に胞子の水分活性を増加し、そしてその結果として、保存可能期間を著しく減少する。他方では、RP‐3A小袋での処理、そしてそれは、酸素の吸収に加えて、包装内部の水蒸気も吸収し、最適な値内に胞子の水分活性を維持し、従って40°Cで2週間の貯蔵後の上昇した発芽パーセンテージに寄与した。表6のテータは、本発明の方法が、40°Cで5月超の貯蔵後の真菌メタリジウムアニソプリエMetarhiziumanisopliaeに対してほぼ70程度の生存能力発芽パーセンテージの実現を可能にすることを示し、そしてそれは、この種に対して従来の公知の方法によっては実現したことがなかった。一般的に、市販品微生物農薬に関して最低限許容できる生存能力は、ほぼ80程度である。上で得られたデータの外挿に基づいて、このパーセンテージを、本発明の方法を介して、40°Cでの4月貯蔵後で実現した。これらの値は、Jinら1999による米国特許第5,989,893号で報告された約80の生存能力を37°Cで2月貯蔵後に観察した例よりも有意に高かった。表5:40°Cで2週間貯蔵されたメタリジウムアニソプリエMetarhiziumanisopliaeの胞子の生存能力に対する平衡期間の終わりの水分活性awの影響表6:40°Cで5.4月貯蔵後のメタリジウムアニソプリエMetarhiziumanisopliaeの胞子の発芽パーセンテージ大気をCO2及びN2により置換した雰囲気が、ビューベリアバシアナBeauveriabassiana胞子の寿命を増加したことは、本明細書で報告した先行技術の研究において観察された。メタリジウムアニソプリエMetarhiziumanisopliaeの短期の保存可能期間の間のO2除去又はCO2濃度の増加の有益な効果が、Clerk及びMadelin1965ClerkCGMadelinMFThelongevityofconidiaofthreeinsectparasitizinghyphomycetesTransactionsoftheBritishMycologicalSociety481932091965によって、数十年間、示されてきたが、この種の保存可能期間を延長するための以前の試みは、空気の存在下、実施された。米国特許第5,989,898号は、Drierite商標で脱水され及び湿気若しくはガス不透過性のバッグ中に挿入されたAgeless小袋の使用で得られた推定ではO2を有しない雰囲気で貯蔵されたメタリジウムMetarhiziumの胞子が、37°Cで2月後、74の生存能力を示し、仮にO2吸収剤を有しない又は40~100の範囲の高い相対湿度を有するバッグ中に維持された場合、生存能力を示さないことを開示する。Leiteら2002LeiteLGら、PreservacaodemiceliodeBatkoaspeFuriaspemcombinacaocomdessecanteseredutoresdeoxigenio乾燥剤及び酸素低減剤と組み合わせて、バトコアBatkoa種及びフリアFuria種の菌糸体の貯蔵ArquivosdoInstitutoBiologico691171222002では、23°CでAgeless登録商標及びシリカゲルを使用する3月間のバトコアBatkoa種及びフリアFuria種の乾燥菌糸体の貯蔵を開示するが、調整雰囲気における昆虫病原糸状菌包装に関するさらなる研究は、知られていない。非密封包装における胞子に対する空気の可用性は、重要でありHongTOら、SaturatedsaltsolutionsforhumiditycontrolandthesurvivalofdrypowderformulationsandorofBeauveriabassianaconidiaJournalofInvertebratePathologyv89p1361432005、そして従って、胞子の寿命に関して観察された結果は、落胆させるものであった。本発明は、O2及び湿気に高い透過性を有するプラスチックポリマーの採用が、たとえアクティブ包装のために効果的な小袋と組み合わせたとしても、全体的に微生物農薬包装のために望ましくないことを示した。ガラス容器へのガス注入40分間は、非密封包装の使用よりはるかに効果的なことを証明したが、ガス注入後の望ましい水分活性よりも大きい水分活性の存在、外部環境との空気の交換、及び包装中に存在するO2のより多くの除去を可能にするために使用されるガス注入プロトコールの無能に起因して、現在の技術では、ビューベリアバシアナBeauveriabassiana胞子の保存可能期間を延長するためにはラミネートアクティブ包装の小袋の使用よりも効果的ではない。Teshlerら2007の研究TeshlerMPら、IncreasedshelflifeofthebioherbicidethroughcombiningmodifiedatmospherepackagingandlowtemperaturesBiocontrolScienceandTechnology173874002007では、残存O2濃度が、ラミネート包装におけるガス注入後、0.26であったことを開示した。水分活性は、アルミニウムで密封充填し、そして効果的なO2及び湿気吸収剤の使用後、低い一定レベルを維持した。無水性生物anhydrobioticorganismにおいて、フリーラジカル生成物をもたらす分離された酵素反応が、生じるかもしれず、そしてこれらのフリーラジカルによって、非酵素的反応が仲介される。例えば、リン脂質の分解反応が、膜において副産物脂肪酸の蓄積で生じるかもしれないMcKersieBDら、SenaratnaTWalkerMAKendallEJHetheringtonPRDeteriorationofmembranesduringaginginplantsEvidenceforfreeradicalmediationInLDNoodenLDLeopoldACSenescenceandAginginPlantsSanDiegoAcademicPressp4424641088。しかしながら、O2が存在せずそして極度に乾燥した大気条件下での老化は、非密封条件下よりも大幅に遅い。試験した食品産業で使用される大部分のアクティブ包装の小袋は、胞子の水分活性レベルが望ましくないレベルに増加したためか、それともO2が低いレベルに減少しなかったために、ビューベリアバシアナBeauveriabassiana胞子の生存能力を延長するために効果的ではなかった。O2及び湿気を吸収することができる二重作用を有する小袋は、一つのみの特性を有する小袋よりもより効果的であった。CO2は、生育においていくつかの真菌の静真菌活性を有することが知られているがTabak及びCooke1968Abellanaら、2000、有害な影響を、貯蔵した昆虫病原糸状菌の胞子に対して観察せず、そしてそれは、O2吸収剤及びCO2放出剤の小袋を使用することによるアクティブ包装の使用の可能性を示唆する。約1年の保存可能期間を、相対的に耐熱性のメタリジウムアクリダムMacridumに対して、27~32°Cで6.2の湿度7.0の水分含量を有する胞子に関しは同じ結果を達成できなかったがで、真空下で貯蔵して記録しHongら、1999、同様に25°Cで、ビューベリアバシアナBeauveriabassianaの油性製剤でも記録したWraightら、2001。本発明は、アクティブ包装中で包装された2.1~2.4の湿度を有する胞子に対して8カ月の保存可能期間を実現し、そしてそれは、平均温度40°C付近の地域における流通のために十分な時間である。実験を50°Cでも行った。同じような又はより高温を、一定の地域において実現できHongTDEllisRHMooreDDevelopmentofamodeltopredicttheeffectoftemperatureandmoistureonfungalsporelongevityAnnalsofbotanyv79p1211281997、又は輸送中に実現できるOstrem及びGodshall、1979。貯蔵に本質的に関連する因子に加えて、真菌の珠芽の元の品質などの貯蔵前pre‐storage因子は、そしてそれは同じく培地条件AgosinEら、EffectofcultureconditionsonsporeshelflifeofthebiocontrolagentTrichodermaharzianumWorldJournalofMicrobiologyandBiotechnologyv13p2252321997FreySMaganNProductionofthefungalbiocontrolagentUlocladiumatrumbysubmergedfermentationaccumulationofendogenousreservesandshelflifestudiesAppliedMicrobiologyandBiotechnologyv56p3723772001Taroccoら、OptimizationoferythritolandglycerolaccumulationinconidiaofBeauveriabassianabysolidstatefermentationusingresponsesurfacemethodologyAppliedMicrobiologyandBiotechnologyv68p4814882005、乾燥及び採取プロセスSandovalCoronadoCFら、DryingandformulationofblastosporesofPaecilomycesfumosoroseusproducedintwodifferentliquidmediaWorldJournalofMicrobiologyandBiotechnologyv17p4234282001BatemanRConstraintsandenablingtechnologiesformycopesticidedevelopmentOutlooksonPestManagementAprilp64692004JacksonMAPayneAREvaluationofthedesiccationtoleranceofblastosporesofPaecilomycesfumosoroseususingaIabscaleairdryingchamberwithcontrolledrelativehumidityBiocontrolScienceandTechnologyv17p7097192007、並びに製剤SandovalCoronadoCFLunaOlveraHAArevaloNinoKJacksonMAPoprawskiTJGalanWongLJDryingandformulationofblastosporesofPaecilomycesfumosoroseusproducedintwodifferentliquidmediaWorldJournalofMicrobiologyandBiotechnologyv17p4234282001BattaYAProductionandtestingofnovelformulationsoftheentomopathogenicfungusMetarhiziumanisopliaeSorokinCropProtectionv22p4154222003FriesenTJら、EffectofconditionsandprotectantsonthesurvivalofPenicilliumbilaiaeduringstoraeBiocontrolScienceandTechnologyv16p80082006によっても影響を及ぼされるが、寿命に対する深い影響を有する。本発明は、高い最初の水分活性が所望するレベルに達するために、高温に暴露する前に、包装されそして穏やかな条件に供された胞子を乾燥する必要があり、こうして、胞子の早死に又は衰弱を回避する。発芽プロトコールなどの貯蔵後Post‐storage因子は、保存可能期間に直接は関係しないが、仮に適切に行わなければ、間違った生存能力を生じる可能性がある。実施例において示した保存可能期間を、急速な再水和プロトコール湿度の高いチャンバー内部で24時間、穏やかな再水和処方への胞子の事前の暴露なしに重点を置いて評価した。Drierite商標又はO2及び湿気吸収剤を有する密封バッグにおいて保持された予備脱水された胞子の水分活性は、一貫して0.010~0.0301.9~3.0の平衡相対湿度の範囲であった。この小さな変動を、冬実験用空気冷却器及び乾燥機に取得した測定値とより高い温度及び相対湿度を伴う季節との間で観察した。保存可能期間を延長するために空中真菌胞子を脱水する重要性は、以前に示されているClerkCGMadelinMFThelongevityofconidiaofthreeinsectparasitizinghyphomycetesTransactionsoftheBritishMycologicalSociety481932091965FengMGPoprawskiTJKhachatouriansGGProductionformulationandapplicationoftheentomopathogenicfungusBeauveriabassianaforinsectcontrolcurrentstatusBiocontrolScienceandTechnologyv4p3341994ShimizuSMitaniTEffectsoftemperatureonviabilityofconidiafromBeauveriabassianainoilformulationsJapaneseJournalofAppliedEntomologyandZoologyv44p51532000。空気を包装から除去しなかった密封貯蔵を使用した研究HongTDら、GunnJTheeffectofstorageenvironmentonthelongevityofconidiaofBeauveriabassianaMycologicalResearch1055976022001において、ビューベリアバシアナBeauveriabassianaの2つの分離株の寿命は、貯蔵における水分含量が4.6~5.2の範囲未満の値20°Cで11~14の相対湿度と平衡にあるに減少した場合、有意に増加しなかったことが報告された。本研究において、胞子の最良の水分活性は、一貫してDrierite商標と関連し、そしてそれは、5よりもかなり低い水分含量を有した。本発明で得られた結果は、事実上の嫌気性条件<0.03のO2下では、貯蔵のための最適な水分活性は、好気性雰囲気下よりもより低くなることを示唆した。"