"キメラインターロイキン-1IL-1ファミリーサイトカインドメインを含む単離タンパク質であって、前記ドメインの少なくとも第1のセグメントは、少なくとも20アミノ酸長であり、第1のIL-1ファミリーサイトカインの対応するセグメントに対し少なくとも80アミノ酸同一性を有し、前記ドメインの少なくとも第2のセグメントは、少なくとも20アミノ酸長であり、第2のIL-1ファミリーサイトカインの対応するセグメントに対し少なくとも80アミノ酸同一性を有する、単離タンパク質。前記第1および第2のIL-1ファミリーサイトカインは、IL-1β、IL-1α、およびIL-1Raからなる群より選択される、請求項1に記載のタンパク質。前記第1のIL-1ファミリーサイトカインはIL-1βであり、前記第2のIL-1ファミリーサイトカインはIL-1Raである、請求項2に記載のタンパク質。前記タンパク質はIL-1受容体Iに結合し、IL-1受容体I活性を阻害する、請求項2に記載のタンパク質。前記サイトカインドメインの第1のセグメントは少なくとも20または30アミノ酸長を有し、IL-1βの対応するセグメントに同一である、請求項2に記載のタンパク質。前記サイトカインドメインは、IL-1Raにおける対応する残基に少なくとも80同一であるサイトA残基およびIL-1βにおける対応する残基に少なくとも80同一であるサイトB残基を含む、請求項2に記載のタンパク質。前記サイトカインドメインは、a下記位置:ARG11、SER13、GLN14、GLN15、GLU25、LYS27、LEU29、HIS30、LEU31、GLN32、GLY33、GLN34、ASP35、MET36、GLN38、GLN39、ALA127、GLU128、ASN129、MET130、およびGLN141IL-1βのナンバリングによる、でIL-1Raに同一なアミノ酸、およびb下記位置:ALA1、PRO2、VAL3、ARG4、LEU6、PHE46、GLN48、GLU51、SER52、ASN53、LYS55、ILE56、PRO57、LYS92、LYS93、LYS94、LYS103、GLU105、ASN108、GLN149、PHE150、およびSER152IL-1βのナンバリングによる、でIL-1βに同一なアミノ酸、を含む、請求項3に記載のタンパク質。前記サイトカインドメインは、IL-1Raのβストランドβ2、β3、β10およびβ11に同一である配列およびIL-1βのβストランドβ4、β6、β7、およびβ8に同一である配列を含む、請求項2に記載のタンパク質。β1β2、β2β3、β8β9、β10β11、およびβ11β12ループの1つ以上が、IL-1Ra由来の対応するループに少なくとも90同一である、請求項2に記載のタンパク質。前記サイトカインドメインは、少なくとも20アミノ酸長であり、IL-1β由来の個々の対応するセグメントに少なくとも90同一である少なくとも2つの不連続セグメントを含む、請求項2に記載のタンパク質。前記2つの不連続セグメントは、IL-1β由来の個々の対応するセグメントに同一である、請求項10に記載のタンパク質。前記2つの不連続セグメントは25-40アミノ酸長である、請求項10に記載のタンパク質。前記2つの不連続セグメント内にないアミノ酸は、IL-1Raに少なくとも90同一である、請求項10、11、または12に記載のタンパク質。前記タンパク質は、150-160アミノ酸長である単一ポリペプチド鎖から構成される、請求項2に記載のタンパク質。前記サイトカインドメインは、第1のIL-1ファミリーサイトカインに少なくとも50の位置で同一であり、第2のIL-1ファミリーサイトカインに少なくとも50の位置で同一である、請求項2に記載のタンパク質。少なくとも残基11-41および120-147IL-1βナンバリングによるは、IL-1Raにおける対応する残基に、合わせて少なくとも90同一である、請求項2に記載のタンパク質。少なくとも残基1-6、45-61および148-153IL-1βナンバリングによるは、IL-1βにおける対応する残基に、合わせて少なくとも90同一である、請求項3に記載のタンパク質。少なくとも残基1-8、42-120、および148-153IL-1βナンバリングによるは、IL-1βにおける対応する残基に、合わせて少なくとも90同一である、請求項3に記載のタンパク質。前記サイトカインドメインは、P01、P02、P03、P04、またはP05に少なくとも80同一である、請求項3に記載のタンパク質。前記サイトカインドメインはP01、P02、P03、P04、またはP05に少なくとも90同一である、請求項19に記載のタンパク質。前記サイトカインドメインは、P01、P02、P03、P04、またはP05に少なくとも95同一である、請求項20に記載のタンパク質。前記サイトカインドメインは、P01、P02、またはP03に同一である、請求項21に記載のタンパク質。前記サイトカインドメインはP04に同一である、請求項21に記載のタンパク質。前記サイトカインドメインはP05に同一である、請求項21に記載のタンパク質。前記サイトカインドメインは、IL-1βおよびIL-1Raよりも大きな熱安定性を有する、請求項2に記載のタンパク質。前記サイトカインドメインは、IL-1βおよびIL-1Raよりも少なくとも2度高いTmを有する、請求項2に記載のタンパク質。前記タンパク質は、細胞シグナル伝達アッセイにおいて、IL-1β0.1ng/mlの阻害に対し10ng/ml未満のIC50を有する、請求項3に記載のタンパク質。前記タンパク質はヒトIL-1Raよりも高い親和性KD、遅い解離速度、および/または早い結合速度でIL-1RIに結合する、請求項3に記載のタンパク質。前記サイトカインドメインは下記の1つ以上を含む、請求項3に記載のタンパク質:aサイトA:i.第1の親サイトカインドメインにおける対応する残基に少なくとも80同一であるサイトA残基;ii.第1の親サイトカインドメインにおける対応する残基に少なくとも80同一である拡張サイトA残基;iii.第1の親サイトカインドメインの対応するセグメントに少なくとも80同一であるサイトAセグメントA1およびA2;またはiv.第1の親サイトカインドメインの対応する領域に少なくとも80同一であるサイトA領域;bサイトB:i.第2の親サイトカインドメインにおける対応する残基に少なくとも80同一であるサイトB残基;ii.第2の親サイトカインドメインにおける対応する残基に少なくとも80同一である拡張サイトB残基;iii.第2の親サイトカインドメインの対応するセグメントに少なくとも80同一であるサイトBセグメントB1、B2、およびB3;またはiv.第2の親サイトカインドメインの対応する領域に少なくとも80同一であるサイトB領域。IL-1RIに結合し、下記:iIL-1Raにおける対応する残基に少なくとも70同一であるC1セグメント、およびiiIL-1β、IL-1α、またはIL-1Raにおける対応する残基に少なくとも80同一であるサイトAまたはサイトB残基、を含むIL-1ファミリーサイトカインドメインを含む単離されたIL-1阻害剤であって、ここで、前記ドメインは、IL-1Raに40-90同一である、IL-1阻害剤。前記C1セグメントは、IL-1Raにおける対応する残基に少なくとも80同一である、請求項30に記載のIL-1阻害剤。前記C1セグメントは、IL-1Raにおける対応する残基に同一である、請求項30に記載のIL-1阻害剤。前記D2セグメントは、IL-1Raにおける対応する残基に少なくとも80同一である、請求項30に記載のIL-1阻害剤。前記A1およびA2セグメントは、IL-1Raにおける対応する残基に合わせて少なくとも80同一である、請求項30に記載のIL-1阻害剤。前記B1、B2、およびB3セグメントは、IL-1βにおける対応する残基に少なくとも80同一である、請求項30に記載のIL-1阻害剤。IL-1βによるシグナル伝達を阻害する、請求項30に記載のIL-1阻害剤。1nM未満の親和性でIL-1RIに結合する、請求項30に記載のIL-1阻害剤。下記を含む、単離された受容体結合タンパク質:a下記位置:ARG11、SER13、GLN14、GLN15、GLU25、LYS27、LEU29、HIS30、LEU31、GLN32、GLY33、GLN34、ASP35、MET36、GLN38、GLN39、ALA127、GLU128、ASN129、MET130、およびGLN141IL-1βのナンバリングによる、でIL-1Raに同一なアミノ酸、ならびにb下記位置:ALA1、PRO2、VAL3、ARG4、LEU6、PHE46、GLN48、GLU51、SER52、ASN53、LYS55、ILE56、PRO57、LYS92、LYS93、LYS94、LYS103、GLU105、ASN108、GLN149、PHE150、およびSER152IL-1βのナンバリングによる、でIL-1βに同一なアミノ酸。IL-1βおよびIL-1Raのキメラである、請求項38に記載のタンパク質。IL-1βのGln48-Asn53を含む、請求項38に記載のタンパク質。IL-1β以外のサイトカインに少なくとも50同一である、請求項38に記載のタンパク質。Ala1、Pro2、Val3、Arg4およびLeu6に対応する位置でIL-1βに同一な残基を含む、請求項38に記載のタンパク質。IL-1βSEQIDNO:1の45-61に対応する位置でIL-1βに同一である少なくとも15の残基を含む、請求項38に記載のタンパク質。IL-1βSEQIDNO:1の86-95に対応する位置でIL-1βに同一である少なくとも8つの残基を含む、請求項38に記載のタンパク質。IL-1βSEQIDNO:1の148-153に対応する位置でIL-1βに同一である少なくとも5つの残基を含む、請求項38に記載のタンパク質。残基11-36および126-130SEQIDNO:1によるに対応するアミノ酸位置は優先的にIL-1Raに同一である、請求項38に記載のタンパク質。残基9-41および121-140SEQIDNO:1によるに対応するアミノ酸位置は優先的にIL-1Raに同一である、請求項38に記載のタンパク質。請求項1-47のいずれかに記載のタンパク質を含む医薬組成物。請求項1-47のいずれかに記載のタンパク質を含む局所用医薬組成物。請求項1-47のいずれかに記載のタンパク質を含む眼用医薬組成物。水性であり、0.001-5の濃度でタンパク質を含む、請求項48に記載の医薬組成物。被験体において免疫または炎症反応を調節するための、被験体への請求項48に記載の組成物の使用。全身性自己免疫障害を有するまたはそのリスクがある被験体を処置するための、請求項48に記載の組成物の使用。関節リウマチを有するまたはそのリスクがある被験体を処置するための、請求項48に記載の組成物の使用。ドライアイ疾患またはアレルギー性結膜炎を有するまたはそのリスクがある被験体を処置するための、請求項48に記載の組成物の使用。請求項1~47のいずれかに記載のタンパク質をコードする配列を含む単離核酸。請求項1~47のいずれかに記載のタンパク質をコードする配列を含む単離核酸ベクターであって、前記配列は、転写制御配列に動作可能に結合される、単離核酸ベクター。請求項1~47のいずれかに記載のタンパク質をコードする組換え核酸を含む、組換え宿主細胞。大腸菌宿主細胞である、請求項58に記載の宿主細胞。組換えタンパク質を調製する方法であって、請求項58に記載の宿主細胞を、組換えタンパク質の発現を可能にする条件下で培養すること;前記組換えタンパク質を細胞ライセートまたは細胞培地から精製すること;および被験体への投与のために、前記組換えタンパク質を製剤化することを含む方法。少なくとも6アミノ酸長であり、第1のIL-1ファミリーサイトカインの対応するセグメントに対し少なくとも80同一性を有する少なくとも2つの不連続セグメントを含み、および残りの位置で優先的に第2のIL-1ファミリーサイトカイン由来のアミノ酸を含むキメラIL-1ファミリーサイトカインドメインを含む単離タンパク質。前記不連続セグメントは、IL-1βにおけるそのような位置のナンバリングに従い、残基1-6および45-61、1-6および86-95、45-61および86-95、1-6および148-153、45-61および148-153、または86-95および148-153を含む、請求項61に記載のタンパク質。前記タンパク質は、第1のIL1ファミリーサイトカインの対応するセグメントにおけるものと同一のアミノ酸を有する3つの不連続セグメントを含み、それらのセグメントは残基1-8、42-120、および141-153を含む、請求項61に記載のタンパク質。前記タンパク質は第1のIL1ファミリーサイトカインの対応するセグメントにおけるものと同一のアミノ酸を有する4つの不連続セグメントを含み、それらのセグメントは残基1-6、45-61、86-95、および148-153を含む、請求項61に記載のタンパク質。前記タンパク質は第1のIL1ファミリーサイトカインの対応するセグメントにおけるものと同一のアミノ酸を有する3つの不連続セグメントを含み、それらのセグメントは残基1-10、37-125、および131-153を含む、請求項61に記載のタンパク質。前記タンパク質は、残りの位置で、第2のIL-1ファミリーサイトカインに同一である、請求項61に記載のタンパク質。前記不連続セグメントの境界の1つ以上は、第1および第2のIL-1ファミリーサイトカインが同じアミノ酸を有する位置に配置される、請求項61に記載のタンパク質。前記タンパク質は第1のIL-1ファミリーサイトカインに、少なくとも50の位置で同一であり、第2のIL-1ファミリーサイトカインに少なくとも50の位置で同一である、請求項61に記載のタンパク質。前記第1および第2のIL-1ファミリーサイトカインは、IL-1β、IL-1αおよびIL-1Raからなる群より選択される、請求項61に記載のタンパク質。第1のIL-1ファミリーサイトカインはIL-1βであり、第2のIL-1ファミリーサイトカインはIL-1Raである、請求項69に記載のタンパク質。サイトカインのIL-1ファミリーはいくつかのメンバーを含み、全てが別の6つのβ-ストランドによりキャップされたβ-バレルを形成する6つのβ-ストランドから構成される共通のβ-トレフォイル折り畳みを有する。これらのサイトカインのヒトおよび他の哺乳類形態の一次構造は知られている。いくつかのヒトIL-1ファミリーメンバーの例示的な構造アライメントは図1に示される。とりわけ、IL-1折り畳みは非常に柔軟であるということを我々は発見した。特に、異なるメンバー由来の要素を組み合わせて、サイトカインシグナル伝達を刺激するまたは拮抗するタンパク質を提供することができる。これらのタンパク質の例としては、キメラサイトカインドメインが挙げられ、これらは、例えば1つのサイトカイン由来の2つ以上のセグメントまたは表面残基を、別のサイトカインまたはサイトカインコンセンサス配列との関連で含み、よって、異なるIL-1ファミリーサイトカイン由来の受容体相互作用部位の非自然発生的な組み合わせが生成される。IL-1ファミリーサイトカインは、少なくとも2つの一次受容体相互作用部位を含むことができ、サイトAおよびサイトBと呼ばれる。サイトAおよびBは、一次サイトカイン受容体例えば、IL-1RIへの接触に関与する。IL-1RaおよびIL-1βの場合、例えば、2つのタンパク質は、サイトAおよびBに関して実質的に異なり、そのため、IL-1Raは、サイトAよりもサイトBでは、より少ない受容体接触を形成する。我々は1つのサイトカイン由来のサイトAおよび別のサイトカイン由来のサイトBを含む機能的キメラサイトカインドメインを構築することが可能であることを見いだした。IL-1折り畳みの柔軟性により、IL-1シグナル伝達に拮抗する様々なキメラサイトカインドメインの構築が可能である。さらに、IL-1ファミリーサイトカインは、2つの二次受容体相互作用部位を含むことができ、サイトCおよびサイトDと呼ばれ、これらは、アゴニズムおよび/または拮抗作用に関与し、サイトカインのその二次サイトカイン受容体例えば、IL-1RAcPと相互作用する能力を決定することができる。天然受容体アンタゴニスト例えばIL-1Ra由来のサイトCおよび/またはサイトD残基を含むと、アンタゴニスト特性を付与することができる。1つ以上のIL-1アゴニスト例えばIL-1βおよびIL-1αおよび/またはIL-1受容体アンタゴニスト例えばIL-1Ra由来のサイトAおよびBの1つまたは両方ならびにIL-1受容体アンタゴニスト例えばIL-1Ra由来の部位CおよびDの1つまたは両方を含むキメラサイトカインドメインを構築することができる。したがって、シグナル伝達に拮抗し、IL-1アゴニスト由来のサイトB残基を含むキメラサイトカインドメインを生成させることができる。例示的な組み合わせはまた、下記表2で提供される:起源配列は、同定されたサイトカインドメインに対するヒト配列に同一とすることができ、またはヒト配列に対し変異を含むことができ、例えば、そのため、それらは、各それぞれの領域において、ヒト配列に少なくとも70、75、80、85、90、95以上同一であり、例えば、それらは各領域由来の1つ以上のセグメントを含むことができる。サイトA残基およびサイトB残基のための起源は、一次受容体への親和性を最大とするように選択することができる。例えば、IL-1RIに結合するために、サイトA残基は、IL-1Ra由来とすることができ、サイトB残基はIL-1β由来とすることができる。キメラサイトカインドメインは、IL-1ファミリー受容体、例えば、ヒトIL-1RIに結合する能力を有することができ、KDは10-8、10-9、または10-10未満であり、例えば、KDは、同じ条件下で天然受容体リガンド例えば、IL-1β、IL-1α、またはIL-1Raの10または100倍以内であり、または同じ条件下で天然リガンド例えば、IL-1β、IL-1α、またはIL-1Raのそれ未満である。さらに、ある実施形態では、キメラサイトカインドメインは、その親サイトカインドメインの少なくとも1つより低いKD、速いKon、または遅いKoffで結合する。IL-1ファミリー受容体に結合し、受容体シグナル伝達に拮抗するキメラサイトカインドメインは、受容体結合剤として、例えば、下記で記載されるIL-1ファミリーサイトカインシグナル伝達により媒介される障害を治療するために使用することができる。例えば、いくつかの実施形態では、キメラサイトカインドメインはIL-1RIに結合し、IL-1シグナル伝達に拮抗する。例えば、100、10、1、0.6、または0.3nM未満のIC50を有する。ある実施形態では、サイトカインドメインは、第1のIL-1ファミリーサイトカインドメインに少なくとも40、45、または50同一であるが、完全に同一未満であり、例えば95、90、85、または80同一とすることができる。同時に、サイトカインドメインはまた、第2のIL-1ファミリーサイトカインドメインに少なくとも40、45、または50同一であるが、完全に同一未満であり、例えば、95、90、85、または80未満同一とすることができる。第1および第2のIL-1ファミリーサイトカインドメインは、互いに50未満同一とすることができる。例えば、第1のIL-1ファミリーサイトカインドメインはアゴニストすることができ例えば、IL-1βまたはIL-1α、一方、第2のIL-1ファミリーサイトカインドメインは受容体アンタゴニストとすることができる例えば、IL-1Ra。いくつかの実施形態では、サイトカインドメイン内の少なくとも80、85、90、92、94、95、97、98、99、または100の位置が、そのような各位置で、存在するアミノ酸が第1のIL-1ファミリーサイトカインドメインまたは第2のIL-1ファミリーサイトカインドメインのいずれかまたは第1および第2のIL-1ファミリーサイトカインが、特定の位置で同一である場合両方に同一であるという特性を有する。サイトカインドメイン内のアミノ酸位置の100がこの特性を有する場合、ドメインは、2つのサイトカインの完全キメラである。キメラサイトカインドメインはまた、2を超えるサイトカインから生成させることができ、その親サイトカインに対し変異例えば、存在するアミノ酸がその親サイトカインの各々における対応するアミノ酸とは異なる場合の、1つ以上の特定の位置を有することができる。サイトカインドメインは、異なるIL-1サイトカインドメイン由来のサイトA、B、C、およびD残基を有することができ、同様に、異なるIL-1サイトカインドメイン由来のサイトA、B、C、およびD領域を有することができる。サイトA.例えば、ある実施形態では、サイトカインドメインは、上記で同定されるサイトA残基の少なくとも5、10、12、15、16、17、18で、または、上記で同定される拡張サイトAの残基の少なくとも5、10、12、15、16、17、18、19、または20で受容体アンタゴニスト例えば、IL-1Raまたはアゴニスト由来の残基を含み、または、そのような残基の保存的置換、またはそのような残基の少なくとも50、65、75、80、90、95、または100を含む。いくつかの実施形態では、サイトカインドメインは受容体アンタゴニスト例えば、IL-1Raまたはアゴニスト例えば、IL-1βまたはIL-1αにおけるセグメントA1、A2、またはA1A2に少なくとも70、75、80、85、88、90、92、95、または100同一である残基を含む。ある実施形態では、サイトカインドメインは、本明細書で同定されるサイトA残基の少なくとも5、10、12、15、16、17、または18で、または上記で同定される拡張サイトA残基の少なくとも5、10、12、15、16、17、または18でIL-1アゴニスト例えば、IL-1β残基に同一な残基、またはそのような残基の保存的置換、またはそのような残基の少なくとも50、65、75、80、90、95、または100を含む。サイトB.ある実施形態では、サイトカインドメインは、本明細書で同定されるサイトB残基の少なくとも2、3、5、8、9、10、11、12、13、14、または15でIL-1アゴニスト例えば、IL-1βまたはIL-1α残基に同一な残基、またはそのような残基の保存的置換、またはそのような残基の少なくとも50、65、75、80、90、95、または100を含む。いくつかの実施形態では、サイトカインドメインは、IL-1サイトカインアゴニスト例えば、IL-1βまたはIL-1αにおけるセグメントB1、B2、B3、B1B2、B1B3、B2B3、またはB1B2B3に少なくとも70、75、80、85、88、90、92、95、または100同一である残基を含む。サイトC.ある実施形態では、サイトカインドメインは、本明細書で同定されるサイトC残基の少なくとも2、3、4、5、6、7、8、9、10、11または12で受容体アンタゴニスト例えば、IL-1Ra残基に同一な残基、またはそのような残基の保存的置換、またはそのような残基の少なくとも50、65、75、80、90、または100を含む。いくつかの実施形態では、サイトカインドメインは、受容体アンタゴニスト例えば、IL-1RaにおけるセグメントC1に少なくとも50、65、75、80、90、または100同一である残基を含む。ある実施形態では、サイトカインドメインは、例えば、下記の1つ以上を含むことができる:SEQIDNO:1のTHR137に対応する位置の疎水性アミノ酸例えば、MetまたはIle、またはSEQIDNO:1のGLN141に対応する位置の疎水性、例えば、脂肪族アミノ酸例えば、ValまたはIle、およびSEQIDNO:1のASP145に対応する位置の非酸性アミノ酸、例えば塩基性アミノ酸例えば、LysまたはArg、および他のIL-1サイトカインにおけるそれらに対応する位置のそのような残基。証拠により、Asp145が、IL-1RAcPのリクルートメントには重要であることが示され、したがって非酸性残基への変異はアゴニスト活性を妨害し、アンタゴニスト特性を付与するために使用することができる。したがって、ある実施形態では、非酸性アミノ酸、例えば塩基性アミノ酸例えば、LysまたはArgまたは疎水性アミノ酸が、SEQIDNO:1のASP145に対応する位置に配置される。サイトD.ある実施形態では、サイトカインドメインは本明細書で同定されるサイトD残基の少なくとも1、2、3、4、5、または6つで受容体アンタゴニスト例えば、IL-1Ra残基に同一な残基、またはそのような残基の保存的置換、またはそのような残基の少なくとも50、65、75、80、90、95、または100を含む。いくつかの実施形態では、サイトカインドメインは、受容体アンタゴニスト例えば、IL-1RaにおけるセグメントD1、D2、D3、D4、D5、D1D2、D1D2D3、およびそれらの組み合わせに少なくとも50、65、75、80、90、95、または100同一である残基を含む。IL-1βにおけるいくつかの残基はIL-1RIと接触し、近接し、例えば下記である:ALA1、PRO2、VAL3、ARG4、LEU6、ARG11、SER13、GLN14、GLN15、GLU25、LYS27、LEU29、HIS30、LEU31、GLN32、GLY33、GLN34、ASP35、MET36、GLN38、GLN39、PHE46、GLN48、GLU51、SER52、ASN53、LYS55、ILE56、PRO57、LYS92、LYS93、LYS94、LYS103、GLU105、ASN108、ALA127、GLU128、ASN129、MET130、GLN141、GLN149、PHE150、およびSER152。上記で記載される部位への指定に加えて、これらの残基は2つの組に分類することができる:セット1およびセット2。IL-1βにおける例示的なセット1残基としては下記が挙げられる:ARG11、SER13、GLN14、GLN15、GLU25、LYS27、LEU29、HIS30、LEU31、GLN32、GLY33、GLN34、ASP35、MET36、GLN38、GLN39、ALA127、GLU128、ASN129、MET130、およびGLN141ならびに他のIL-1サイトカインファミリーメンバーにおける対応する残基。拡張セット1残基としては、相互作用セット1残基および1ITB構造中の前記の4オングストローム内の残基が挙げられる。IL-1βにおける例示的なセット2残基としては下記が挙げられる:ALA1、PRO2、VAL3、ARG4、LEU6、PHE46、GLN48、GLU51、SER52、ASN53、LYS55、ILE56、PRO57、LYS92、LYS93、LYS94、LYS103、GLU105、ASN108、GLN149、PHE150、およびSER152ならびに他のIL-1サイトカインファミリーメンバーにおける対応する残基。拡張セット2残基としては、相互作用セット2残基および1ITB構造中の前記の4オングストローム内の残基が挙げられる。ある実施形態では、サイトカインドメインは、上記で同定されるセット1残基の少なくとも15、16、17、18、19、20、または21でIL-1β残基を含む。ある実施形態では、サイトカインドメインは、上記で同定されるセット2残基の少なくとも15、16、17、18、19、20、21、または22でIL-1β残基を含む。いくつかの実施形態では、サイトカインドメインは、拡張セット1残基の少なくとも15、16、17、18、19、20、または21でIL-1β残基を含む。いくつかの実施形態では、サイトカインドメインは、拡張セット2残基の少なくとも15、16、17、18、19、20、または21のIL-1β残基を含む。受容体結合剤として使用することができる他の変異体としては、2つ以上のIL-1サイトカインファミリーメンバー由来の配列を有するタンパク質が挙げられる。そのような変異体の例としては、IL-1βおよびIL-1Raに基づくキメラドメインが挙げられる。例えば、変異体はIL-1Raのセット1由来の1つ以上のアミノ酸残基例えば、IL-1Ra由来の全てのセット1残基およびIL-1βのセット2由来の1つ以上のアミノ酸残基例えば、IL-1β由来の全てのセット2残基を含むことができる。例示的なキメラタンパク質は、IL-1βに下記アミノ酸位置ですなわち、IL-1βにおけるこれらの位置への対応に基づき主に例えば、少なくとも50、60、70、75、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、97、98、99、または100同一である:SEQIDNO:1の残基1-8、42-120、および141-153;SEQIDNO:1の残基1-6、45-61、86-95、および148-153;およびSEQIDNO:1の残基1-10、37-125、および131-153。残りの残基はIL-1Raに主に例えば、少なくとも50、60、70、75、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、97、98、99、または100同一である。例えば、下記アミノ酸位置はIL-1Raに主に同一であり得る:SEQIDNO:1の残基9-41および121-140;SEQIDNO:1の残基7-44、62-85、および96-147;およびSEQIDNO:1の残基11-36および126-130。ある実施形態では、サイトカインドメインは、IL-1βのアミノ酸位置Gln48-Asn53に加えて少なくとも2、4、5、10、または20位置でIL-1βに同一であり、例えば、サイトカインドメインはIL-1β以外のサイトカインに主に、例えば、少なくとも50、60、70、75、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、97、98、99、または100同一である。ある実施形態では、サイトカインドメインは、SEQIDNO:1の1-8に対応する位置で、IL-1βに同一な少なくとも3、4、5、6、7、または8つの残基を含む。例えば、下記の3、4、または5つ全てに対応する位置でIL-1βに同一な残基を含む:ALA1、PRO2、VAL3、ARG4、およびLEU6。ある実施形態では、サイトカインドメインはSEQIDNO:1の45-61に対応する位置でIL-1βに同一な少なくとも8、9、10、11、12、13、14、15、16、または17の残基を含む。例えば、下記の3、4、5、6、7または8に対応する位置でIL-1βに同一な残基を含む:PHE46、GLN48、GLU51、SER52、ASN53、LYS55、ILE56、およびPRO57。ある実施形態では、サイトカインドメインはSEQIDNO:1の86-95に対応する位置でIL-1βに同一な少なくとも5、6、7、8、9、または10の残基を含む。例えば、LYS92、LYS93、およびLYS94の1、2、または3つ全てに対応する位置でIL-1βに同一な残基を含む。ある実施形態では、サイトカインドメインはSEQIDNO:1の148-153に対応する位置でIL-1βに同一な少なくとも3、4、5、または6つの残基を含む。例えば、GLN149、PHE150、およびSER152の1、2、または3つ全てに対応する位置でIL-1βに同一な残基を含む。ある実施形態では、サイトカインドメインはIL-1βにおけるTHR147に対応する位置のスレオニンを含まない。例えば、この位置は芳香族、例えばチロシンとすることができる。IL-1βにおけるTHR147に対応する位置の芳香族は、いくつかの実施形態では位置11IL-1βナンバリングによるに存在する別の芳香族例えば、トリプトファンに対して詰めることができる。ある実施形態では、サイトカインドメインはIL-1βにおけるCYS8に対応する位置で芳香族を含まない。例えば、この位置はフェニルアラニン以外、または芳香族以外のアミノ酸とすることができる。例えば、システイン、バリン、セリン、スレオニンまたはアラニンとすることができる。この位置は他の嵩高い残基、特にMET44およびMET148IL-1βナンバリングによる近くに位置する。好ましくは、3つの位置8、43、および148すべてが嵩高い残基ではない。ある実施形態では、サイトカインドメインは、SEQIDNO:1の30-36に対応する位置でIL-1Raに同一な少なくとも5、6、または7つの残基、例えば、YLQGPNVSEQIDNO:43に同一な少なくとも5、6、または7つの残基を含む。例えば、サイトカインドメインは、SEQIDNO:1の11-36に対応する位置でIL-1Raに同一な少なくとも10、12、14、16、18、19、20、21、22、23、24、25、または26の残基を含む。サイトカインドメインはまた、SEQIDNO:1の145に対応する位置で塩基性残基を含むことができる。ある実施形態では、サイトカインドメインは下記を含む:aIL-1βのVal40に対応する位置のグルタミン酸およびIL-1βのLys65に対応する位置のリシン;bIL-1βのThr9に対応する位置のアルギニンおよびIL-1βのGln149に対応する位置のグルタミン;および/またはcIL-1βのV41に対応する位置のリシンおよびIL-1βのSer152に対応する位置のセリン。サイトカインドメインはまた、126-132に対応する位置でIL-1Raに同一な少なくとも4、5、6、または7つの残基、例えば、MEADQPVSSEQIDNO:44に同一な少なくとも4、5、6、または7つの残基を含むことができる。ある実施形態では、サイトカインドメインは、SEQIDNO:1の62-85に対応する位置でIL-1βに同一な少なくとも10、12、14、16、18、19、20、21、22、23、または24の残基を含む。いくつかの実施形態では、サイトカインドメインは下記アミノ酸配列の1つ以上例えば、4つ全て:RSLAFRSEQIDNO:45、IDVSFVSEQIDNO:46、KKMDKRSEQIDNO:47、およびKFYMQFSEQIDNO:48の1つ以上例えば、4つ全て;下記RSLAFRSEQIDNO:45、IDVSFVSEQIDNO:46、NKLSFESEQIDNO:49、およびKFYMQFSEQIDNO:48の1つ以上例えば、4つ全て;下記RSLAFRSEQIDNO:45、EEKFSMSEQIDNO:50、RFVFIRSEQIDNO:51、およびVTKFTMSEQIDNO:52の1つ以上例えば、4つ全て;下記RSLAFRSEQIDNO:45、EEKFSMSEQIDNO:50、FESAACSEQIDNO:53、およびVTKFTMSEQIDNO:54の1つ以上例えば、4つ全て;または下記LNCRIWSEQIDNO:55、EEKFSMSEQIDNO:50、PNWFLCSEQIDNO:56、およびKFYMQFSEQIDNO:48の1つ以上例えば、4つ全てを含む。キメラタンパク質は様々な目的のために使用することができる。例えば、それらは、受容体シグナル伝達活性を増加または減少させるため、受容体を発現する細胞を検出するため、またはそれらが結合する細胞またはタンパク質を精製するために、使用することができる。IL-1βおよびIL-Raに基づくキメラサイトカインドメインの具体例は、下記実施例1で提供され、IL-1シグナル伝達に拮抗する下記例示的なサイトカインドメインを含む:P01.P01ドメインは、SEQIDNO:3のアミノ酸Ala12-Val48、Ile60-Val83、およびAsp95-Tyr147に対応するIL-1Ra由来の3つのセグメントおよびIL-1β由来の残りの4つのセグメントを含む。全体で、P01ドメインは、IL-1β由来の153のアミノ酸の74を約48同一性およびIL-1Ra由来の119のアミノ酸約77同一性有する。これらのパーセンテージは加算すると100を超えるが、これは、P01および本明細書で開示される他の例示的なタンパク質中のアミノ酸の多くが、IL-1βおよびIL-1Raの間で保存されるアミノ酸であり、したがってIL-1βおよびIL-1Raの両方に対するパーセンテージ同一性に寄与するからである。P02.P02ドメインは、SEQIDNO:3のアミノ酸Ala12-Val48、Ile60-Val83、およびSer110-Tyr147に対応するIL-1Ra由来の3つのセグメント、およびIL-1β由来の残りの4つのセグメントを含む。全体で、P02ドメイは、IL-1β由来の153のアミノ酸の85約55同一性およびIL-1Ra由来の108のアミノ酸約70同一性を有する。P03.P03ドメインはSEQIDNO:3のアミノ酸Ala12-Lys45およびPhe100-Lys145に対応するIL-1Ra由来の2つのセグメント、およびIL-1β由来の残りの3つを含む。全体で、P03ドメインは、IL-1β由来の153のアミノ酸の94約61同一性およびIL-1Ra由来の91のアミノ酸約64同一性を有する。P04.P04ドメインは、SEQIDNO:3のアミノ酸Ala12-Lys45およびAla114-Lys145に対応するIL-1Ra由来の2つのセグメント、およびIL-1β由来の残りの3つのセグメントを含む。全体で、P04ドメインは、IL-1β由来の153のアミノ酸の104約68同一性およびIL-1Ra由来の89のアミノ酸約58同一性を有する。P05.P05ドメインは、SEQIDNO:3のアミノ酸Arg14-Lys45およびPhe120-Tyr147に対応するIL-1Ra由来の2つのセグメント、およびIL-1β由来の残りの3つのセグメントを含む。全体で、P05ドメインは、IL-1β由来の153のアミノ酸の108約70同一性およびIL-1Ra由来の85のアミノ酸約55同一性を有する。他のキメラタンパク質は同様に構築することができる。例えば、キメラタンパク質は、IL-1αおよびIL-1Ra間で作製することができ、例えば、特定的にIL-1Raの同定されたセグメントを、上記例の各々に対し、IL-1βではなくIL-1α由来の対応する残基と組み合わせて含むドメインとすることができる。タンパク質修飾および置換タンパク質配列、例えば本明細書で記載されるものは、例えば、1つ以上の保存的置換を生成させることにより変化させることができる。機能を保持する、機能をわずかに変化させるように保存的置換を生成させることができる。例示的な保存的置換は下記表で記載される置換は、a置換付近のバックボーン構造、例えば、シートまたはヘリカル構造、b標的部位での分子の電荷または疎水性、またはc側鎖のボリュームおよび分枝へのそれらの潜在的な効果に基づき選択することができる。アミノ酸残基は、側鎖の特性に基づき分類することができる:1疎水性:ノルロイシン、met、ala、val、leu、ile;2中性親水性:cys、ser、thr;asn;gln;3酸性:asp、glu;4塩基性:his、lys、arg;5バックボーン構造に影響する残基:gly、pro;および6芳香族:trp、tyr、phe。非保存的置換は、これらのクラスの1つのメンバーを別のクラスのメンバーと置換することを含むことができる。保存的置換は、これらのクラスの1つのメンバーを同じクラスの別のメンバーと置換することを含むことができる。特定の残基の重要性はまた、アミノ酸に対するヒドロパシー指標との関連で評価することができる。各アミノ酸には、その疎水性および電荷特性に基づきヒドロパシー指標が割り当てられている:イソロイシン4.5;バリン4.2;ロイシン3.8;フェニルアラニン2.8;システイン2.5;メチオニン1.9;アラニン1.8;グリシン-0.4;スレオニン-0.7;セリン-0.8;トリプトファン-0.9;チロシン-1.3;プロリン-1.6;ヒスチジン-3.2;グルタミン酸-3.5;グルタミン-3.5;アスパラギン酸-3.5;アスパラギン-3.5;リシン-3.9;およびアルギニン-4.5。ヒドロパシーアミノ酸指標およびその重要性の考察については、例えばKyteetal1982JMolBiol157105131を参照されたい。タンパク質の配列は任意の方法により変化させることができ、オリゴヌクレオチド媒介部位特異的変異誘発、、カセット変異誘発、選択制限変異誘発、およびPCR変異誘発が挙げられる。InVitroMutagenesisProtocolsThirdEditionBramanHumanaPressISBN1607616513andPCRCloningProtocolsFromMolecularCloningtoGeneticEngineeringChenandJanesHumanaPressISBN0896039730も参照されたい。走査アミノ酸分析を使用して、近接配列に沿って1つ以上のアミノ酸を評価することができる。方法は、ある領域の各またはほとんど各アミノ酸を特定のアミノ酸、例えば、比較的小さい、中性アミノ酸、例えばアラニン、セリン、またはバリンに変異させることを含む。アラニンが典型的には選択され、というのも、それはβ-炭素を超える側鎖を排除し、変異体の主鎖構造を変化させる可能性が低いからである。それはまた、最も一般的なアミノ酸であり、しばしば、埋もれたおよび露出した位置の両方で見いだされるChothiaJMolBiol15011976。走査過程はまた、より顕著な変化を生成させるように適合させることができ、例えば、荷電残基は反対の電荷の残基に変化させることができ、短い側鎖を有する残基は嵩高い側鎖を有するものと置換することができる。例えば、アルギニン走査は、アラニン走査の代わりに、またはそれに加えて使用することができるアプローチである。走査は、領域内の各残基に、または特定の特性の残基、例えば、タンパク質の表面または表面近くの、あるいはタンパク質の表面または表面近くにある可能性のある残基に適用することができる。タンパク質、そのドメインの1つ、またはタンパク質を含む複合体の構造は、例えば、相同性ベースモデリング、エネルギー極小化および/または知られている解決された構造を使用する他のモデリングを実施することによりモデル化することができる。そのような方法としては下記が挙げられるAccelrysSoftwareIncDiscoveryStudio登録商標Release30、SanDiegoAccelrysSoftwareInc2010AMBER商標モデリングソフトウエアJComputatChem2616681688およびCaseetalAMBER11UniversityofCaliforniaSanFranciscoCAUSAおよびCHARMM商標モデリングソフトウエア。一般にBakerandSaliScience2949362001もまた参照されたい。構造はまた、直接、例えば、X線結晶解析および/またはNMR分光法を使用して決定することができる。IL-1ファミリーサイトカインの構造を説明する例示的なPDB構造としては下記が挙げられる:1I1B、1ILR、1IRA、1ITB、2I1B、2ILA、2KLL、4I1B、5I1B、6I1B、7I1B、8I1B、9ILB、および1MD6からのwwwpdborgからのhttpにより入手可能。例えば、単独および受容体IL-1RIと複合したIL-1βの構造が解析されている。例えば、FinzeletalJMolBiol209779791PDB1ITBおよびVigersetalNature386190194を参照されたい。IL-1RIとのIL-1Raの構造も解析されている。例えば、PDB1IRAおよびSchreuderetalNature386194200を参照されたい。相同性モデリングは、配列のアライメントにより、例えば、コンピュータソフトウェア、例えばBasicLocalAlignmentSearchToolBLAST、PSI-BLAST、PHI-BLAST、WU-BLAST-2、および/またはMEGABLASTを使用して支援され得る。Altschuletal1990JMolBiol215403410Altschuletal1996MethodsinEnzymology266460480およびKarlinetal1993PNASUSA9058735787を参照されたい。巨大分子を整列させるための追加のアルゴリズムとしてはFASTA、ClustalW、DbClustal、およびMolecularOperatingEnvironmentが挙げられる。さらに、GCG配列アライメントソフトウェアパッケージのALIGNプログラムバージョン2.0に組み込まれているMyersおよびMillerのアルゴリズムが使用され得る。IL-1βおよびIL-1Raに対するコンセンサス配列は、2つの配列を比較し、同一である、または高度に保存されている残基を同定することにより得ることができる。本明細書で記載されるキメラサイトカインドメインは、少なくとも60、70、80、90、95、または100のそのような同一残基または高度に保存された残基を有することができる。例示的なコンセンサス配列は下記でありDXXQKX{8-9}L-AXXLQGX{18-28}LGX{7}LSCVXXXDXXXLQLEXVX{8-9}KXXKRFXFX{10}FESAXXPXWXXXTXXXXXXPVXLX{5-6}GXXXTXFXXQSEQIDNO:57、ここでXは独立して任意のアミノ酸であり、下付き数字または範囲は、出現数である。本明細書で記載されるキメラサイトカインドメインは、コンセンサス配列に少なくとも60、70、80、90、95、または100同一性を有することができるここで、X残基は同一性に対しカウントされない。他のコンセンサス配列は、同様に同定することができる。IL-1サイトカインファミリーメンバーのさらなる変異体は、ディスプレイベースシステムまたは他のライブラリベーススクリーニングを用いて、製造、評価することができる。例えば、タンパク質変異体は、表示および発現させ、IL-1サイトカインファミリーメンバーのための受容体に結合する能力に対し、評価することができる。例えば、IL-1β、IL-1Ra、または本明細書で記載されるサイトカインドメインの変異体は、IL-1RIの可溶性細胞外ドメインへ結合する能力に対し評価することができる。ディスプレイベースシステムの一般的な説明としては下記が挙げられる:細胞ディスプレイでは、ChaoetalNatProtoc2006175568ColbyetalMethodsEnzymol200438834858BoderetalMethodsEnzymol200032843044、ファージディスプレイではScience22813151317、およびリボソームディスプレイではProcNatlAcadSciUSA919022andHanesetalNatBiotechnol18128792HanesetalMethodsEnzymol32840430およびSchaffitzeletalJImmunolMethods2311193。本明細書における多くの実施形態が、ヒトIL-1サイトカイン配列を親ドメインとして使用して例示されているが、他の配列を使用することができる。多くの他のIL-1サイトカイン、例えば、他の種由来が知られており、入手可能であり、公開データベース、例えばEntrezおよびEBI-EMBLにおいて見いだすことができる。UNIPROTデータベース由来のそのような配列の例UniProtorgで入手可能、TheUniProtConsortiumNucleicAcidsResD142D148を参照されたいは下記を含む本明細書で記載されるサイトカインドメインはまた、IL-1RIに結合することができる変異サイトカインドメイン中に存在する置換を含むことができる。例えば、SEQIDNO:1の位置15SEQIDNO:3の位置20に対応するはMetまたはAsnとすることができる。SEQIDNO:1の位置30SEQIDNO:3の位置34に対応するはGly、His、Trp、またはMetとすることができる。IL-1βおよびIL-1Raの追加の例示的な変異体としては、BoraschietalFrontiersinBioscienceAJournalandVirtualLibrary1、d270308、Evansetal、JBiolChem、27011477およびGreenfederetal、JBiolChem、27022460に記載されるものが挙げられる。例えば、IL-1βの変異体としてはR11G、R11A、Q15H、E105G、およびT147Gが挙げられる。例えば、Evansetalを参照されたい。IL-1Raの変異体としては、W16Y、Q20M、Q20N、Y34G、Y34H、Y34W、Y34M、Y147G、Y147H、Y147M、K145D、H54P、V18S、T108K、C116F、C122S、C122A、Y147G、H54P、H54I、およびEvansetalandGreenfederetal、JBiolChem、27022460における他のものが挙げられる。サイトカインドメインはまた、IL-1Raに前記位置の1つで同一な残基を含むことができる。サイトカインドメインはまた、前記変異の1つと、対応する位置で異なる残基を含むことができる。さらに、IL-1ファミリーサイトカインは、1つ以上の不対システイン残基を含むことができる。1つ以上の、例えば、2、3または全てのそのような不対システイン残基は、別のアミノ酸、例えば、無電荷アミノ酸、例えばアラニンまたはセリンに変異させることができる。例えば、P01は、SEQIDNO:17の位置67、70、116、および122にシステインを含む。1、2、3、または4つ全てのそのようなシステインは、別のアミノ酸、例えば無電荷アミノ酸、例えばアラニンまたはセリンで置換することができる。P02は、SEQIDNO:18の位置67、70、116、および122にシステインを含む。1、2、3、または4つ全てのそのようなシステインは、別のアミノ酸、例えば無電荷アミノ酸、例えばアラニンまたはセリンで置換することができる。P03はSEQIDNO:19の位置70、116、および122にシステインを含む。1、2、または3つ全てのそのようなシステインは、別のアミノ酸、例えば無電荷アミノ酸、例えばアラニンまたはセリンで置換することができる。P04は、SEQIDNO:20の位置70、116、および122にシステインを含む。1、2、または3つ全てのそのようなシステインは、別のアミノ酸、例えば無電荷アミノ酸、例えばアラニンまたはセリンで置換することができる。P05は、SEQIDNO:21の位置8、70、および122にシステインを含む。1、2、または3つ全てのそのようなシステインは、別のアミノ酸、例えば無電荷アミノ酸、例えばアラニンまたはセリンで置換することができる。IL-1ファミリーサイトカインドメイン本明細書で記載されるキメラサイトカインドメインを含むはまた、循環置換することができる。例えば、ドメイン由来のC末端セグメントを、再配置することができ、オリジナルN-末端に対するN末端およびN末端セグメント一般に、C末端セグメントの切除後オリジナルタンパク質の残りを含むとなる。2つの再配置セグメントは、リンカー例えば、約3~10のアミノ酸により分離することができる。一般に、置換え前のドメイン内のアミノ酸は全て、順序の変化以外は保持される。いくつかの実施形態では、置換えのためのカットポイントは、可動性領域、例えば、可動性ループ、例えばβ6-β7例えば、SEQIDNO:3の71-80に対応するアミノ酸またはβ7-β8ループ例えば、SEQIDNO:3の84-99に対応するアミノ酸内に存在し得る。いくつかの実施形態では、本明細書で記載される受容体結合剤、例えば、IL-1ファミリーサイトカインドメインを含む受容体結合剤は、30、25、22、20、19、18、または約17kDa未満の分子量を有する。いくつかの実施形態では、受容体結合剤は、18、19、20、22、25、30、40、45、または50kDa超の分子量を有する。例えば、受容体結合剤は、他のポリペプチド、ポリマまたは非ポリマ構成成分、例えば、薬物動態、安定性、免疫原性、および/または分子量を修飾する構成成分を含むことができる。タンパク質は他の修飾、例えば、翻訳後または合成修飾を含んでもよい。ある実施形態では、受容体結合剤はグリコシル化されない。他の実施形態では、受容体結合剤は少なくとも1つのグリコシル化を含む。例えば、本明細書で記載される受容体結合剤は、追加のドメインおよび特徴を含むことができる。例えば、受容体結合剤は、直接または間接的に、抗体タンパク質のドメイン、例えば、Fcドメインまたは1つ以上の定常ドメイン例えば、CH1、CH2、またはCH3に融合させることができる。例えば、ドメインはヒトドメインまたはヒトドメインの変異体とすることができる。Fcドメインまたは1つ以上の定常ドメインは、受容体結合剤のN末端またはC末端に配置され得る。Fcドメインは、任意の好適な免疫グロブリンから、例えば、ヒト抗体、例えば、例としてIgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4サブタイプの抗体、IgA、IgE、IgDまたはIgMから得ることができる。一例では、Fcドメインは、Fcドメインのカルボキシル末端に対し、約位置Cys226のアミノ酸残基由来、または約位置Pro230由来の配列を含む。Fcドメインは一般に2つの定常ドメイン、CH2ドメインおよびCH3ドメインを含み、ならびに任意でCH4ドメインを含む。そのFc領域内の置換および増加した血清半減期を有する抗体もまた、WO00/42072、WO02/060919;ShieldsetalJBiolChem27665916604HintonJBiolChem27962136216に記載される。IgG重鎖中の残基のナンバリングは、KabatetalSequencesofProteinsofImmunologicalInterest5thEdPublicHealthServiceNH1MDにおけるEU指標のものであり、その中のヒトIgG1EU抗体のナンバリングを参照する。1つの実施形態では、受容体結合剤は、例えば、米国特許第5,739,277号およびGhetieetal、AnnRevImmunol18739766で記載されるように、インビボ血清半減期を増加させるサルベージ受容体結合エピトープを含む。いくつかの実施形態では、エピトープは、受容体結合剤に融合されるFc領域に含まれる。1つの実施形態では、受容体結合剤は、血清アルブミン配列、またはFcRn受容体に結合するそのような配列の一部、または血清アルブミン、例えば、ヒト血清アルブミンに結合する配列を含む。例えば、血清アルブミンと結合する特定のペプチドは受容体結合剤、例えば、配列DICLPRWGCLWSEQIDNO:22と関連し得る。また、DennisetalJBiolChem2773503535043を参照されたい。受容体結合剤は、修飾され、その薬剤のサイズおよび安定性を増加させる配列、例えば、WO2008/155134またはWO2009/023270に記載される配列を含むことができる。そのような配列は、一般に生物学的に不活性とすることができ、例えば、IL-1サイトカインファミリーメンバーにより媒介されるシグナル伝達を調節しない。様々な安定化ポリペプチド配列を使用することができ、例えば、グリシンおよび/またはセリン、ならびに他のアミノ酸、例えばグルタミン酸、アスパラギン酸、アラニンまたはプロリンに富む配列である。例えば、配列は、少なくとも30、40、50、60、70、80、90または100のグリシンおよび/またはセリン残基を有するように設計することができる。いくつかの実施形態では、タンパク質に結合された安定化ポリペプチド配列の合わされた長さは、少なくとも20、25、35、50、60、70、80、90、100、120、140、160、180、200、250、300、350、400、500、600、700、800、900または1000もしくは2000超のアミノ酸とすることができる。安定化配列は、例えば、生物学的に活性なポリペプチド、例えば受容体結合剤のNまたはC末端に融合させることができる。安定化配列の融合により、非修飾タンパク質に比べ融合タンパク質の流体力学半径が著しく増加することになり得る例えば、超遠心分離法、サイズ排除クロマトグラフィー、または光散乱により検出できる。いくつかの実施形態では、安定化配列は下記アミノ酸をほとんどまたは全く含まない:システインジスルフィド形成および酸化を避けるため、メチオニン酸化を避けるため、アスパラギンおよびグルタミン脱アミドを避けるためおよびアスパラギン酸。安定化配列はタンパク質分解に対する感度を減少させる傾向があるプロリン残基を含むように設計することができる。結合アッセイ受容体結合剤およびその標的の相互作用は任意の好適なアプローチ例えばラジオイムノアッセイ、細胞結合アッセイ、および表面プラズモン共鳴SPRを含むを用いて分析することができる。放射性ヨウ素標識タンパク質競合を使用する例示的な細胞結合アッセイがBoraschi、JImmunol、155471925で記載される。SPRまたは生体分子相互作用分析BIAは実時間で相互作用物のいずれも標識せずに、生体分子特異的相互作用を検出することができる。BIAチップの結合表面での質量変化結合事象を示すは、表面付近での光の屈折率の変化となる表面プラズモン共鳴SPRの光学事象。屈折率の変化は検出可能なシグナルを発生させ、これは、生体分子間の実時間反応の指標として測定される。SPRを使用する方法は、例えば、Raether、1988、SurfacePlasmonsSpringerVerlagSjolanderandUrbaniczky、1991、AnalChem6323382345Szaboetal、1995、CurrOpinStructBiol5699705およびBIAcoreInternationalABにより提供されるオンライン資源において記載される。BIACORE登録商標システムまたはReichertSR7000DCDualChannelSPRを使用して、動力学、親和性または特異性の観点で、標識を使用せずに、実時間で相互作用を比較し、ランク付けすることができる。サイトカイン受容体細胞外ドメイン例えば、IL-1RIの細胞外ドメインに対する受容体結合剤の結合親和性は、SPRを用いておよそ生理的条件、例えば、10mMHEPESpH7.4、150mMNaCl、3mMEDTA、0.005Tween-20下で測定することができる。例えば、結合および親和性を測定するために、SPRに頼らない他の方法もまた使用することができる。結合アッセイからの情報を使用して、受容体結合剤の標的への結合に対する平衡解離定数KD、および動力学パラメータ例えば、KonおよびKoffの正確なおよび定量的測定値を提供することができる。そのようなデータを使用して、異なるタンパク質、標的、および条件を比較することができる。この情報を使用して、構造-活性関係SARを発生させることもできる。例えば、変異タンパク質の動力学および平衡結合パラメータを、参照または親タンパク質のパラメータと比較することができる。特定の結合パラメータ、例えば、高親和性および遅いKoffと相関する一定の位置の変異アミノ酸は同定することができる。この情報は構造モデリング例えば、相同性モデリング、エネルギー極小化、またはX線結晶解析またはNMRによる構造決定を用いると組み合わせることができる。親和性を評価するために使用されるタンパク質は、組換え型で生成させることができ、精製または固定に好適なタグ、例えば、FLAGタグ、mycタグ、ヘマグルチニンタグ、Hisタグ、またはFcドメイン融合を含むことができる。受容体タンパク質例えばIL-1RI、およびIL-1RAcPの細胞外ドメインは、例えば、細菌または昆虫細胞において発現させることにより、例えば、Sf9細胞におけるバキュロウイルス発現を用いて、組換え型で生成させることができる。可溶性受容体タンパク質は、BIAcoreシステムにおいて、例えば、それらのタグに結合する試薬を含むチップ、例えば、Fcドメインまたは他のタグに特異的なIgGでコートされたチップを用いて固定することができる。細胞活性アッセイ受容体結合剤の受容体アンタゴニストとして機能する能力は、例えば、細胞ベースアッセイにおいて評価することができる。例えば、受容体結合剤によるIL-1RI阻害を評価することができる。IL-1活性のためのいくつかの例示的なアッセイがBoraschietalにおいて記載されており、T細胞増殖アッセイ、IL-6およびIL-8生成アッセイ、およびカルシウム流入の阻害が挙げられる。1つの例示的なアッセイでは、受容体結合剤の能力がヒト線維芽細胞からのIL-6のIL-1β刺激放出を阻害する能力に対し評価される。MRC5細胞におけるIL-1β刺激サイトカイン放出の阻害は、薬剤の、IL-1媒介活性をインビボで阻害する能力と相関する。アッセイの詳細は、DinarelloetalCurrentProtocolsinImmunologyCh621627JohnWileyandSonsInc2000に記載される。簡単に言うと、ヒトMRC5ヒト線維芽細胞ATCCCCL-171、ManassasVA、USAをマルチウェルプレートにおいて培養密度まで増殖させる。細胞を滴定された用量の受容体結合剤および対照で処理する。細胞をその後、100pg/mlのIL-1βと、滴定された薬剤および/または対照の存在下で接触させる。陰性対照細胞は、IL-1βで刺激しない。処理細胞の各群において放出されたIL-6の量を、IL-6ELISAキットを用いて測定する。使用することができる対照としては、緩衝剤のみ、IL-1Ra、およびIL-1βに対する抗体が挙げられる。受容体結合剤の有効性はまた、インビボで評価することができる。例示的なアッセイは、EconomidesetalNatureMed94752に記載される。簡単に言うと、マウスに、滴定された用量の受容体結合剤および対照を腹腔内に注射する。注射24時間後、マウスに組換えヒトIL-1βを、1μg/kgの用量で皮下に注射した。IL-1βピークIL-6応答時間の注射2時間後、マウスを屠殺し、血液を収集し、血清に対し処理する。血清IL-6レベルをELISAによりアッセイする。パーセント阻害は、実験動物血清において検出されたIL-6の対照において検出されたIL-6に対する比に基づき計算することができる。インビボでのIL-1活性に対する他の例示的なアッセイは、Boraschietalにおいて記載されており、食欲不振、低血糖、および好中球増加症アッセイが挙げられる。生成受容体結合剤は組換え宿主細胞での発現により生成させることができるが、他の方法、例えばインビトロ転写および翻訳ならびに化学合成によっても生成させることができる。細胞発現では、受容体結合剤をコードする1つ以上の核酸例えば、cDNAまたはゲノムDNAがクローニングまたは発現のために複製可能なベクターに挿入され得る。様々なベクターが公的に入手可能である。ベクターは、例えば、プラスミド、コスミド、ウイルスゲノム、ファージミド、ファージゲノム、または他の自己複製配列とすることができる。適切なコード核酸配列は、ベクター中に、様々な手順により挿入され得る。例えば、適切な制限エンドヌクレアーゼ部位を操作することができる例えば、PCRを使用して。その後、制限消化およびライゲーションを使用してコード核酸配列を適切な場所に挿入することができる。ベクター構成成分は一般に複製開始点、1つ以上のマーカー遺伝子、エンハンサーエレメント、プロモーター、および転写終止配列の1つ以上を含む。受容体結合剤は、単離において組換えにより生成され得るが、また、1つ以上の他の構成成分、例えばシグナル配列、エピトープまたは精製部分、および標識への融合によっても生成される。受容体結合剤は、インターロイキン-1ファミリーメンバーのプロドメインを含むことができ、例えば、これはその後、タンパク質分解プロセシングにより除去することができる。細菌発現では、受容体結合剤はシグナル配列あり、またはなしで生成させることができる。例えば、細胞内で生成させることができ、そのため、封入体中、または可溶性画分中に蓄積する。例えば、原核生物シグナル配列、例えば、適切なリーダー配列、例えばアルカリホスファターゼ、ペニシリナーゼ、または熱安定性エンテロトキシンII由来のものを追加することにより、分泌させることもできる。発現のための例示的な細菌宿主細胞としては、任意の形質転換性大腸菌K-12株例えば大腸菌BL21、C600、ATCC23724;大腸菌HB101NRRLB-11371、ATCC-33694;大腸菌MM294ATCC-33625;大腸菌W3110ATCC-27325、枯草菌株、シュードモナス、および他の桿菌が挙げられる。細菌系で生成されるタンパク質は典型的にはグリコシル化を欠く。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書で記載される受容体結合剤は、実質的にグリコシル化がなく、例えば、哺乳類または他の真核細胞のグリコシル化修飾がない。受容体結合剤は酵母宿主細胞、例えば、サッカロマイセスセレビシエSaccharomycescerevisiae、シゾサッカロミセスボンベSchizosaccharomycespombe、ハンゼヌラHanseula、またはピキアパストリスPichiapastorisにおいて発現させることができる。酵母発現では、受容体結合剤はまた、細胞内でまたは分泌により、例えば、酵母インベルターゼリーダーまたはα因子リーダーサッカロマイセスおよびクリベロマイセス型を含む、または酸ホスファターゼリーダー、またはC.アルビカンスCalbicansグルコアミラーゼリーダー1990年4月4日に公開されたEP362,179を用いて生成させることができる。哺乳類細胞発現では、哺乳類シグナル配列、例えば同じまたは関連種の分泌されたポリペプチド由来のシグナル配列、ならびにウイルス分泌リーダーを使用してタンパク質の分泌を誘導することができる。また、受容体結合剤は、インターロイキン-1ファミリーメンバーのプロドメイン、例えば、IL-1αまたはIL-1βプロドメインを用いて生成させることができる。発現およびクローニングベクターはどちらもベクターが1つ以上の選択された宿主細胞で複製することを可能にする核酸配列を含む。そのような配列は様々な細菌、酵母、およびウイルスに対してよく知られている。プラスミドpBR322由来の複製開始点がほとんどのグラム陰性細菌で好適であり;2μプラスミド開始点は酵母で好適であり;様々なウイルス開始点SV40、ポリオーマ、アデノウイルス、VSVまたはBPVは、哺乳類細胞におけるクローニングベクターで有用である。発現およびクローニングベクターは典型的には選択遺伝子またはマーカーを含む。典型的な選択遺伝子は、a抗生物質または他の毒素、例えば、アンピシリン、ネオマイシン、メトトレキサート、またはテトラサイクリンに対する抵抗性を付与する、b栄養要求性欠乏を補う例えば、サッカロマイセスにおけるURA3マーカー、またはc複合培地から得ることができない重大な栄養分を供給するタンパク質をコードし、例えば、桿菌ではD-アラニンラセマーゼをコードする遺伝子である。様々なマーカーがまた、哺乳類細胞に使用でき、例えば、DHFRまたはチミジンキナーゼである。DHFRは、UrlaubetalProcNatlAcadSciUSA774216により記載されるように調製および増殖された、DHFR活性を欠く細胞系例えばCHO細胞系と共に使用することができる。発現およびクローニングベクターは通常、mRNA合成を駆動するために、受容体結合剤をコードする核酸配列に動作可能に結合されたプロモーターを含む。原核生物宿主と共に使用するのに好適な例示的なプロモーターとしては、β-ラクタマーゼおよびラクトースプロモーター系GoeddeletalNature281544、アルカリホスファターゼ、トリプトファンtrpプロモーター系EP36776、およびハイブリッドプロモーター、例えばtacプロモーターが挙げられる。細菌系において使用するためのプロモーターはまた、適切に配置されたShine-Dalgarno配列を含むことができる。T7ポリメラーゼ系もまた、T7プロモーターの制御下に配置された核酸コード配列の発現を駆動するために、使用することができる。例えば、pETベクターおよび例えば、EMDChemicalsから入手可能なNovagenUserProtocolTB053およびUS5,693,489に記載される宿主細胞を参照されたい。例えば、そのようなベクターをBL21DE3細胞およびBL21DE3pLysS細胞と組み合わせて使用し、タンパク質、例えば、少なくとも0.05、0.1、または0.3mg/mlの細胞培養物を生成させることができる。使用することができる他の細胞系としては、B834、BLR、HMS174、NovaBlueのDE3溶源菌、例えばpLysSプラスミドを有する細胞が挙げられる。酵母細胞と共に使用するための例示的なプロモーターとしては、3-ホスホグリセリン酸キナーゼまたは他の糖分解酵素HollandBiochemistry174900、例えばエノラーゼ、グリセロアルデヒド3-リン酸デヒドロゲナーゼ、ヘキソキナーゼ、ピルビン酸デカルボキシラーゼ、ホスホフルクトキナーゼ、グルコース-6-リン酸イソメラーゼ、およびピルビン酸キナーゼのためのプロモーターが挙げられる。他の例示的な酵母プロモーターが誘導性であり、増殖条件により制御される転写の追加の利点を有する。誘導性プロモーターの例としては、アルコールデヒドロゲナーゼ2、イソチトクロムC、酸ホスファターゼ、メタロチオネイン、およびマルトースおよびガラクトース利用に関与する酵素のためのプロモーター領域が挙げられる。哺乳類宿主細胞におけるベクターからの受容体結合剤をコードするmRNAの発現は例えば、ウイルス、例えばポリオーマウイルス、アデノウイルス例えばアデノウイルス2、ウシパピローマウイルス、トリ肉腫ウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、B型肝炎ウイルスおよびサルウイルス40SV40のゲノムから得られるプロモーター、異種哺乳類プロモーター、例えば、アクチンプロモーターまたは免疫グロブリンプロモーター、および熱ショックプロモーターにより制御することができる。異種プロモーター系、例えば、テトラサイクリン応答性プロモーターもまた使用することができる。UrlingerSetalProcNatlAcadSciUSA977963‐7968を参照されたい。転写はまた、シスまたはトランスで配置されたエンハンサー配列により駆動させることができる。例示的な哺乳類ンハンサー配列としては、グロブリン、エラスターゼ、アルブミン、α-フェトプロテイン、およびインスリンに対するものが挙げられる。追加の例としては、複製開始点の後側のSV40エンハンサーbp100-270、サイトメガロウイルス初期プロモーターエンハンサー、複製開始点の後側のポリオーマエンハンサー、およびアデノウイルスエンハンサーが挙げられる。エンハンサーは受容体結合剤のためのコード配列に対し5’または3’位でベクター中にスプライスされてもよいが、好ましくはプロモーターから5’部位に配置される。真核生物宿主細胞酵母、真菌、昆虫、植物、動物、ヒト、または他の多細胞生物由来の有核細胞において使用される発現ベクターはまた、転写の終止およびmRNAの安定化ために必要な配列を含むことができる。そのような配列は通常、真核生物またはウイルスDNAまたはcDNAの5’および、時々3’、非翻訳領域から得ることができる。これらの領域は、受容体結合剤をコードするmRNAの非翻訳部分におけるポリアデニル化フラグメントとして転写されるヌクレオチドセグメントを含む。発現ベクターはまた、1つ以上のイントロン配列を含み得る。受容体結合剤はまた、昆虫細胞、例えば、Sf9またはSF21細胞において、例えば、pFAST-BAC商標系を用いて発現させることができる。追加の例示的なバキュロウイルス発現ベクターは、Invitrogen,LifeTechnologies,CarlsbadCA,USAから入手可能である。受容体結合剤はまた、哺乳類細胞において発現させることができる。例えば、哺乳類起源の細胞系もまた使用され得る。哺乳類宿主細胞系の例としては、サル腎細胞のCOS-7系ATCCCRL1651、L細胞、C127細胞、3T3細胞ATCCCCL163、チャイニーズハムスター卵巣CHO細胞、HeLa細胞、およびBHKATCCCRL10細胞系、およびアフリカミドリザル腎細胞系CV1由来のCV1/EBNA細胞系ATCCCCL70McMahanetalにより記載が挙げられる。DNAを哺乳類細胞に導入するための確立された方法は記載されている。組換え細胞における受容体結合剤の合成に対する適応に好適なさらに他の方法、ベクター、および宿主細胞はMolecularCloningALaboratoryManualThirdEdSambrooketalColdSpringHarborPressに記載される。細胞中で発現されるとすぐに、受容体結合剤は、培地、封入体、細胞ライセートから回収することができる。細胞は、様々な物理的および化学的手段、例えば凍結融解サイクリング、超音波処理、機械的破壊、または細胞溶解剤例えば、洗剤により破壊することができる。受容体結合剤は、細胞ライセートまたは細胞培地中で見いだされ得る他の細胞タンパク質またはポリペプチドから精製することができる。様々なタンパク質精製方法を使用することができ、そのような方法は当技術分野において知られており、例えばDeutscherMethodsinEnzymology182およびScopesProteinPurificationPrinciplesandPracticeSpringerVerlagNewYorkにおいて記載される。例示的な精製手順としては下記が挙げられる:イオン交換カラム上での分画;エタノール沈殿;逆相HPLC;シリカまたはカチオン交換樹脂、例えばDEAE上でのクロマトグラフィー;クロマトフォーカシング;SDS-PAGE;硫酸アンモニウム沈殿;例えば、セファデックスG-75を使用するゲル濾過;IgGなどの汚染物質を除去するためのプロテインAセファロースカラム;および親和性カラム例えば、タンパク質のエピトープ-タグ形態に結合する金属キレート化カラムおよび受容体結合剤と関連する任意の精製部分に結合する様々なリガンドを有するカラム。精製方法は、2つの異なるイオン交換クロマトグラフィーステップの組み合わせ、例えば、カチオン交換クロマトグラフ、続くアニオン交換クロマトグラフィー、またはその逆を含むことができる。受容体結合剤は、様々な方法によりイオン交換樹脂から溶離させることができ、塩および/またはpH勾配またはステップが含まれる。いくつかの実施形態では、受容体結合剤は精製部分例えば、エピトープタグおよび親和性ハンドルを含む。そのような部分は、親和性クロマトグラフィーのために使用することができ、任意でタンパク質分解切断により除去することができる。イオン交換クロマトグラフィーはまた、イオン交換分離技術として使用され得る。イオン交換クロマトグラフィーは、分子の全体電荷間の違いに基づき分子を分離し、受容体結合剤の無傷な形態を、そのようなタンパク質の他の形態から分離するために使用することができる。アニオンまたはカチオン置換基は、クロマトグラフィーのためのアニオンまたはカチオンサポートを形成するためにマトリクスに結合させることができる。アニオン交換置換基としては、ジエチルアミノエチルDEAE、第4級アミノエチルQAEおよび第4級アミンQ基が挙げられる。カチオン置換基としては、カルボキシメチルCM、スルホエチルSE、スルホプロピルSP、リン酸Pおよびスルホン酸Sが挙げられる。セルロースイオン交換樹脂、例えばDE23、DE32、DE52、CM-23、CM-32およびCM-52がWhatmanLtd.Maidstone、Kent、U.Kから入手可能である。セファデックス商標および他の架橋イオン交換体も知られている。例えば、DEAE-、QAE-、CM-、およびSP-セファデックス商標ならびにDEAE-、Q-、CM-およびS-セファロース商標およびセファロース商標FastFlowがPharmaciaABから入手可能である。DEAEおよびCM誘導体化エチレングリコール-メタクリレートコポリマ、例えばTOYOPEARLDEAE-650SまたはMおよびTOYOPEARLCM-650SまたはMがTosoHaasCo.Philadelphia、PA、USAから入手可能である。カチオン交換表面は、共有結合された負に帯電したリガンドを有するイオン交換表面であり、よって、表面と接触する溶液中のカチオンとの交換のために遊離カチオンを有する。例示的な表面としてはカチオン交換樹脂、例えば共有結合された基がカルボン酸またはスルホン酸であるものが挙げられる。市販のカチオン交換樹脂としてはCMC-セルロース、SP-セファデックス商標およびFastS-セファロース商標Pharmaciaが挙げられる。イオン交換表面は、共有結合された正に帯電した基、例えば第4級アミノ基を有するイオン交換表面である。例示的なアニオン交換表面は、アニオン交換樹脂、例えばDEAEセルロース、TMAE、QAEセファデックス商標およびFastQセファロース商標Pharmaciaである。受容体結合剤のための例示的な精製スキームは、溶解緩衝剤中に大腸菌細胞を溶解すること、続いて、深層濾過を含む。材料はその後、カチオン交換クロマトグラフィーCEXに供せられる。CEX溶出液はその後、アニオン交換クロマトグラフィーAEXステップにおいてアニオン交換媒質上に流される。AEXFTは、研磨ステップに供せられる。材料はその後、限外濾過/ダイアフィルトレーションにより処理することができ、例えば、材料が濃縮または脱塩される。限外濾過/ダイアフィルトレーション膜は、名目分画分子量NMWCOに基づき選択されてもよく、よって、残余分中にタンパク質が保持され、低分子量材料、例えば塩が濾液に移行することができる。任意の緩衝溶液または滅菌水が、例えば、生成物の所望の最終pHおよび伝導率によって、最終緩衝剤交換ステップ中に使用され得る。受容体結合剤は、様々な溶液、例えば水、PBS、および緩衝溶液中で貯蔵することができる。例示的な緩衝溶液としては酢酸ナトリウムpH4.5、酢酸ナトリウムpH4.7、酢酸ナトリウムpH4.9、酢酸ナトリウムpH5.1、酢酸ナトリウムpH5.3、酢酸ナトリウムpH5.5、コハク酸pH5.2、コハク酸pH5.4、コハク酸pH5.6、コハク酸pH5.8、ヒスチジンpH5.7、ヒスチジンpH6.0、ヒスチジンpH6.3、ヒスチジン6.6、リン酸ナトリウムpH6.5、リン酸ナトリウムpH6.7、リン酸ナトリウム7.0、リン酸ナトリウムpH7.3、リン酸ナトリウムpH7.7、イミダゾールpH6.5、イミダゾールpH6.8、イミダゾールpH7.2、TrispH7.0、TrispH7.5、TrispH7.7が挙げられる。緩衝剤は、例えば、約1-100mM、5-50mM、10-50mM、または5-25mMの濃度で存在することができる。溶液はさらに、塩、例えばNaCl例えば、50mM、150mM、または250mM、およびそれらの間の範囲、アルギニン例えば、約1、2、3、4、5、7.5、およびそれらの間の範囲、スクロース例えば、約1、2、3、4、5、7.5、8.5、10、15、およびそれらの間の範囲、および/またはグリセロール例えば、約0.5、1、2、3、4、5、7.5、8.5、10、15、およびそれらの間の範囲を含むことができる。受容体結合剤は組成物中に、少なくとも50mg、100mg、500mg、1g、5g、10g以上の量で存在することができる。分析方法宿主細胞タンパク質HCPは、受容体結合剤とは異なる調製物中のタンパク質を示し、例えば、受容体結合剤が調製された宿主細胞の内在性タンパク質、典型的には大腸菌タンパク質である。好ましくは、宿主細胞タンパク質は、10000、1000、900、800、または700ppm百万分率より少ない量で存在する。HCPは、例えば、ELISAまたは他の検出方法により検出することができる。例えば、ELISAは、HCPに対するポリクローナル抗体を使用することができる。例示的なキットは、CygnusTechnologiesCNF410;SouthportNCUSAから入手可能である。別の例示的なキットはAlphaScreen技術を使用するAlphaLisa登録商標大腸菌HCPキット、製品番号AL261C/F、PerkinElmer、WalthamMAUSA。受容体結合剤を含むまたは潜在的に含む材料は、例えば、高圧液体クロマトグラフィーを使用して評価することができる。例示的な分析技術としては、弱カチオン交換高速液体クロマトグラフィーwCEX-HPLC、サイズ排除高速液体クロマトグラフィーSE-HPLC、逆相液体クロマトグラフィー、ESI-MS、ターボスプレーイオン化質量分析、ナノスプレーイオン化質量分析、熱スプレーイオン化質量分析、音波スプレーイオン化質量分析、SELDI-MSおよびMALDI-MSが挙げられる。いくつかの実施形態では、受容体結合剤のN末端領域は、IL-1βのN末端領域由来のペプチド、例えば、ペプチドAPVRSSEQIDNO:58に同一な配列を含む。そのようなタンパク質を発現する組換え細胞特に大腸菌細胞は、無傷なタンパク質ならびに他のアイソフォーム、例えばdes-Alaアイソフォームおよび追加のメチオニン例えば、Ala1へのN末端を有するアイソフォームを生成することができる。アミノ酸位置2ここでは、N末端残基が位置1であるにプロリンを含む受容体結合剤は、大腸菌プロテアーゼ、例えばX-PROに対し切断特異性を有するアミノペプチダーゼPによる切断を受けやすい。この切断は、N末端アミノ酸を除去することができる。例えば、P03、P04、およびP05は位置2にプロリンを有する。P03、P04、およびP05の無傷な形態は、153アミノ酸長であり、アラニンから始まり、des-Ala種は152アミノ酸長であり、プロリンから始まる。上記のものなどの分析技術を使用して、無傷な形態と他の形態、例えば、des-Ala種の間で区別することができる。例示的な分析技術はwCEX-HPLCである。例えば、P05は、下記実施例9で記載されるようにDionexProPac登録商標WCX-104x250mmカラム製品番号054993を用いて評価することができる。WCX-HPLCピークは質量分析とオンラインのC4逆相RP-HPLCにより評価することができる。無傷なP05は、理論的質量:17700.4Daを有し、17700.4Daとして検出できる。des-Ala種は、17629.4Daとして検出でき、これは無傷なP05の質量よりも71Da少ない。71Daの質量の減少は、単一のアラニン残基の除去に対応する。医薬組成物受容体結合剤は医薬組成物として製剤化することができる。典型的には、組成物は無菌であり、1つ以上の緩衝剤、薬学的に許容される塩、および賦形剤または安定剤を含む。例えば、組成物は水性組成物とすることができる。本明細書で記載される受容体結合剤は、生物製剤のための標準方法に従い、製剤化することができる。例えば、GennaroRemingtonTheScienceandPracticeofPharmacy20thedLippincottWilliamsWilkinsAnseletalPharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverySystems7thEdLippincottWilliamsWilkinsPublishersKibbeHandbookofPharmaceuticalExcipients3rdedProteinformulationanddeliveryMcNallyandHastedtInformaHealthCareを参照されたい。医薬組成物のための受容体結合剤は、典型的には少なくとも10、20、50、70、80、90、95、98、99、または99.99純粋であり、典型的にはヒトタンパク質を含まない。組成物中の唯一のタンパク質または組成物中の唯一の活性タンパク質とすることができる。また、1つ以上の他の活性タンパク質、例えば、1つ以上の他の精製活性タンパク質、例えば、関連または非関連タンパク質と組み合わせることができる。いくつかの実施形態では、組成物は、受容体結合剤を、約0.001-10、例えば、0.001-0.1、0.01-1、または0.1-10の濃度で含むことができる。したがって、本明細書では、本明細書で記載される薬剤の精製および単離形態もまた特徴とする。単離という用語は、そのオリジナル環境例えば、受容体結合剤が生成される細胞または材料から取り出された材料を示す。医薬組成物は、実質的に発熱性材料を含まず、実質的に核酸を含まず、および/または実質的に細胞酵素および構成成分、例えばポリメラーゼ、リボソームタンパク質、およびシャペロンタンパク質を含まない。医薬組成物は薬学的に許容される担体を含むことができる。本明細書では、薬学的に許容される担体は任意のおよび全ての溶媒、分散媒、コーティング、抗菌および抗真菌剤、等張および吸収遅延剤、および生理的に適合可能な同様なものを含む。薬学的に許容される塩は、親化合物の所望の生物活性を保持し、望ましくない毒性効果を与えない塩例えば、BergeSMetalJPharmSci66119を参照されたい、例えば、酸付加塩および塩基付加塩を示す。1つの実施形態では、受容体結合剤は、1つ以上の賦形剤、例えば塩化ナトリウム、およびリン酸緩衝剤例えば、リン酸水素ナトリウム七水和物、リン酸二水素ナトリウム、およびポリソルベートと共に製剤化される。例えば、緩衝溶液中、例えば、約5-100、5-30、30-50、または50-100mg/mlの濃度で提供することができ、2-8°Cで貯蔵することができる。医薬組成物はまた、様々な他の形態とすることができる。これらとしては、例えば、液体、半固体および固体剤形、例えば液体溶液例えば、注射可能および注入可能な溶液、分散物または懸濁液、およびリポソームが挙げられる。好ましい形態は、対象の投与方法および治療適用に依存し得る。本明細書で記載される薬剤のための組成物は、典型的には注射可能または注入可能な溶液の形態であり、または局所または眼送達用である下記を参照されたい。医薬組成物は典型的には製造および貯蔵条件下で無菌および安定である。医薬組成物はまた、投与のための規制および業界標準を満たすことを保証するために試験することができる。組成物は、溶液、マイクロエマルジョン、分散物、リポソーム、または他の高い薬物濃度に好適な秩序構造として製剤化することができる。無菌注射用溶液は、本明細書で記載される薬剤を、必要量で適切な溶媒中に、要求に応じて、上記で列挙された成分の1つまたは組み合わせと共に組み込み、続いて、濾過滅菌することにより調製することができる。一般に、分散物は、本明細書で記載される薬剤を、塩基性分散媒および上記で列挙されたものから要求される他の成分を含む無菌ビヒクル中に組み込むことにより調製される。無菌注射用溶液の調製のための無菌粉末の場合、好ましい調製方法は真空乾燥および凍結乾燥であり、これにより、本明細書で記載される薬剤追加の所望の成分の粉末が前に無菌濾過されたその溶液から得られる。溶液の適当な流動性は、例えば、コーティング、例えばレシチンを使用することにより、分散物の場合要求される粒子サイズを維持することにより、および界面活性剤の使用により維持することができる。注射用組成物の持続的吸収は、吸収を遅らせる薬剤、例えば、モノステアリン酸塩およびゼラチンの含有により操作することができる。例えば、受容体結合剤は、ポリマ、例えば、実質的に非抗原性ポリマ、例えばポリアルキレンオキシドまたはポリエチレンオキシドと関連させることができる。いくつかの実施形態では、ポリマは受容体結合剤に、例えば、直接または間接的に共有結合される。好適なポリマは、実質的に重量変動する。約200~約35,000ダルトンまたは約1,000~約15,000、および2,000~約12,500の範囲の数平均分子量を有するポリマが使用され得る。例えば、受容体結合剤は、水溶性ポリマ、例えば、親水性ポリビニルポリマ、例えば、ポリビニルアルコールまたはポリビニルピロリドンにコンジュゲートさせることができる。そのようなポリマの非制限的リストとしては、ポリアルキレンオキシドホモポリマ、例えばポリエチレングリコールPEGまたはポリプロピレングリコール、ポリオキシエチレン化ポリオール、そのコポリマおよびそのブロックコポリマが挙げられ、ただし、ブロックコポリマの水溶性が維持されることを条件とする。追加の有用なポリマとしては、ポリオキシアルキレン、例えばポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン、およびポリオキシエチレンおよびポリオキシプロピレンのブロックコポリマプルロニック;ポリメタクリレート;カルボマー;サッカライドモノマD-マンノース、D-およびL-ガラクトース、フコース、フルクトース、D-キシロース、L-アラビノース、D-グルクロン酸、シアル酸、D-ガラクツロン酸、D-マンヌロン酸例えば、ポリマンヌロン酸、またはアルギン酸、D-グルコサミン、D-ガラクトサミン、D-グルコースおよびノイラミン酸を含む分枝または非分枝多糖、例えばホモ多糖およびヘテロ多糖、例としてラクトース、アミロペクチン、デンプン、ヒドロキシエチルデンプン、アミロース、デキストラン硫酸、デキストラン、デキストリン、グリコーゲン、または酸ムコ多糖の多糖サブユニット、例えば、ヒアルロン酸;糖アルコールのポリマ、例えばポリソルビトールおよびポリマンニトール;ヘパリンまたはヘパランが挙げられる。ある実施形態では、受容体結合剤は、急速放出に対し化合物を保護する担体と共に調製され得る。放出制御製剤として、インプラントまたはマイクロカプセル化送達システムにより送達させることができる。生分解性、生体適合性ポリマ、例えばエチレン酢酸ビニル、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルソエステル、およびポリ乳酸が使用され得る。一般に、例えば、SustainedandControlledReleaseDrugDeliverySystemsJRRobinsonedMarcelDekkerIncNewYork1978を参照されたい。投与受容体結合剤は、被験体、例えば、ヒト被験体に、様々な方法、例えば、ボーラスとしてまたは一定期間にわたる持続注入による静脈内投与により、筋内、筋内、動脈内、くも膜下腔内、関節内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、滑膜内、経気管、皮下、表皮下、関節腔内、嚢下、くも膜下、脊髄内、硬膜外注射、胸骨内注射および注入により投与することができる。さらに他の投与方法としては、局所例えば、皮膚または粘膜あるいは吸入例えば、鼻内または肺内経路が挙げられる。多くの適用に対し、投与経路は、静脈内注射または注入、皮下注射、または筋内注射の1つである。受容体結合剤は、一定用量またはmg/kg用量で投与することができる。静脈内IVまたは皮下SC投与することができる。受容体結合剤は、例えば、毎日、1日おき、2、3もしくは4日おき、毎週、3~5週に一回、例えば、4週おき、または毎月投与することができる。医薬組成物は、治療的有効量の本明細書で記載される薬剤を含み得る。薬剤の治療的有効量は、因子、例えば個体の病態、年齢、性別、および体重、および化合物の個体における所望の応答を引き起こす能力、例えば、少なくとも1つの障害パラメータの寛解、または少なくとも1つの障害の症状の寛解および任意で投与される任意の追加の薬剤の効果に従い変動し得る。治療的有効量はまた、組成物の毒性または有害効果より、治療的に有益な効果が上回るものである。受容体結合剤は、典型的には治療的有効量で投与される。医薬組成物は、医療装置、例えば、インプラント、注入ポンプ、皮下針、無針皮下注射装置を使用して投与することができる。装置は、例えば、医薬組成物を貯蔵するための1つ以上のハウジングを含むことができ、単位用量の受容体結合剤、および任意で第2の薬剤を送達するように構成することができる。用量は一定用量、すなわち、治療される被験体のための単位用量として適合された物理的に別々の単位とすることができ;各単位は、医薬担体と共に、任意で別の薬剤と共に所望の治療効果を生成させるように計算された、予め決められた量の受容体結合剤を含むことができる。いくつかの実施形態では、本明細書で記載される障害を治療するために、受容体結合剤を、障害を有する被験体に、障害の重症度を反映する少なくとも1つの指標において持続する改善を誘導するのに十分な量および時間で投与することができる。改善は、被験体が1~4週だけ離れた少なくとも2つの場合において改善を示した場合、持続すると考えられる。改善度は、徴候または症状に基づいて決定することができ、被験体に与えられる質問票、例えば、生活の質に関する質問票を採用することもできる。治療の量および時間が十分かどうかを決定するために疾病の程度を反映する様々な指標を評価することができる。選択した1つまたは複数の指標のためのベースライン値は、第1の用量の受容体結合剤の投与前の被験体の検査により確立される。好ましくは、ベースライン検査は第1の用量を投与する約60日以内に実施される。改善は、被験体が選択された1つまたは複数の指標に対するベースラインを超える改善を明示するまで、ある用量の受容体結合剤を繰り返し投与することにより誘導することができる。慢性病状を治療する際には、改善度は、少なくとも1ヶ月以上、例えば、1、2、または3ヶ月以上の期間にわたり、あるいは無限に繰り返し投与することにより得られ得る。急性病状を治療する際には、薬剤は、1~6週の期間、または単回投与で投与することができる。1つ以上の指標により、治療後の疾病の程度は改善されたように見えるが、治療は無限に同じレベルで、または低減された用量または頻度で、続けられることがある。治療はまた、例えば、症状の改善または消失時に、中断され得る。いったん治療が低減され、または中断されると、症状が再出現した場合に再開され得る。治療受容体結合剤、例えば、IL-1RIに結合し、IL-1シグナル伝達に拮抗するものは、IL-1媒介障害を治療するために使用することができ、その障害としてはi少なくとも一部はIL-1アゴニズムにより引き起こされ、iiIL-1シグナル伝達構成成分例えば、IL-1α、IL-1β、またはIL-1RIの活性のレベルの上昇またはIL-1シグナル伝達の上昇と関連し、および/またはiiiIL-1活性を減少させることにより寛解される任意の疾患または病状が挙げられる。IL-1媒介障害は急性および慢性障害を含み、自己免疫障害および炎症性障害が挙げられる。IL-1媒介障害は、全身性および非全身性障害を含む。IL-1αおよびIL-1βは感染性応答ならびに炎症性疾患、例えば関節リウマチに関与する強力な炎症促進性サイトカインであることが確立している。IL-1生成の増加がいくつかの自己免疫障害、虚血、および様々な癌を有する患者において観察されており、よって、これらのおよび関連疾患にIL-1が関与する。一般にSimsandSmithTheIL1familyregulatorsofimmunityNatureReviewsImmunologydoi101038nri2691もまた、参照されたい。治療するという用語は、本明細書で記載される薬剤の被験体、例えば患者への、統計学的に有意な程度または当業者に検出可能な程度のいずれかまでの、障害、例えば、本明細書で記載される障害と関連する病状、症状、またはパラメータを改善する、または障害の進行を防止するのに有効な量、様式および/または方法での投与を示す。治療は、障害、障害の症状または障害への素因を治す、治癒する、緩和する、軽減する、変化させる、是正する、寛解する、和らげる、改善するまたは影響することを意図することができる。有効量、様式、または方法は被験体によって変動し、被験体に合わせてもよい。例示的な被験体としては、ヒト、霊長類、および他の非ヒト哺乳類が挙げられる。受容体結合剤はまた、障害またはその症状の出現のリスクを減少させるために予防的に与えることもできる。IL-1媒介障害は自己免疫障害であり得る。IL-1媒介自己免疫障害の例としては下記が挙げられる:関節リウマチ、強直性脊椎炎、ベーチェット症候群、炎症性腸疾患クローン病および潰瘍性大腸炎を含む、喘息、乾癬、I型糖尿病、および本明細書で同定される他の障害。本明細書で記載される受容体結合剤は、そのようなIL-1媒介自己免疫障害を有するまたはそのリスクがある被験体に投与することができる。IL-1媒介障害は、炎症性障害、例えば下記で記載されるものとすることができる。本明細書で記載される受容体結合剤は、IL-1媒介炎症性障害を有するまたはそのリスクがある被験体に投与することができる。例示的なIL-1媒介障害としては下記が挙げられる:関節リウマチおよび関連関節炎.受容体結合剤は、関節リウマチを有するまたはそのリスクがある被験体を治療するために使用することができる。関節リウマチRAは、関節内の滑膜に影響し、関節軟骨を損傷する慢性全身性自己免疫性炎症性疾患である。RAの病因は、Tリンパ球依存性であり、リウマチ因子として知られている自己抗体の生成を含み得る。リウマチ因子および抗原の複合体が形成し、関節液および血液中に蓄積する可能性があり、リンパ球、好中球、および単球の滑膜への浸潤を誘導する。関節は典型的には対称的なパターンで影響されるが、関節外疾患もまた起こることがあり、例えば、肺線維症、血管炎、および皮膚潰瘍、またはFelty症候群好中球減少症、血小板減少症および脾腫として現れ得るが引き起こされる。患者はまた罹患した関節の領域内のリウマトイド結節、心膜炎、胸膜炎、冠動脈炎、および肺線維症を伴う間質性肺炎を示し得る。IL-1Raの型が中程度~重度に活動性RAで示される。例えば、CohenSetalArthritisRheumatism4661424FleischmannRMetalArthritisRheumatism4892734NukiGetalArthritisRheumatism46283846SchiffMHetalArthritisRheumatism50175260を参照されたい。活動性RAの症状としては疲労、食欲欠如、微熱、筋肉および関節痛、およびこわばりが挙げられる。筋肉および関節のこわばりは通常、午前中、不活性期間後に最も顕著である。フレア中、関節は、一般に滑膜炎の結果として、しばしば赤くなり、腫脹し、痛くなり、および圧痛がある。RAおよびRAの症状を評価するために有用なスケールとしては、関節リウマチ重症度スケールRheumatology413845、SF-36関節炎特異的健康指標ArthritisSpecificHealthIndexMedCare37MS4050、関節炎衝撃測定スケールまたは関節炎衝撃測定スケール2ArthritisImpactMeasurementScalesorArthritisImpactMeasurementScales2ArthritisRheum35110Stanford健康評価質問票HAQ、HAQII、または改良HAQArthritisRheum26134653を参照されたいが挙げられる。本明細書で記載される受容体結合剤は、RAを有するまたはそのリスクがある被験体に、発症を遅らせるおよび/または前記徴候および症状の1つ以上を寛解させるために投与することができる。被験体は、中程度~重度の活動性RAを有し得る。被験体は、TNF阻害剤療法例えば、ENBREL登録商標エタネルセプト、HUMIRA登録商標アダリムマブ、またはREMICADE登録商標インフリキシマブを用いた療法に対するノンレスポンダーである可能性があり;被験体は前に、TNF阻害剤を投与されたことがある可能性があり;または被験体はTNF阻害剤を摂取し続けている可能性がある応答性がある、および応答性がない。被験体はまた、メトトレキサートが投与され得る。被験体は、1つ以上の他のDMARDS疾患修飾性抗リウマチ薬、コルチコステロイド、および/または非ステロイド性炎症薬が投与され得る。受容体結合剤と同時投与することができるさらに他の薬物としては、CD28の阻害剤例えば、CTLA4-Ig、RANKL、IFNγ、IL-6、IL-8、およびIL-17の阻害剤が挙げられる。阻害剤としては、そのようなメディエーターに対する抗体、そのようなメディエーターに特異的な可溶性受容体、および/またはそのようなメディエーターのための受容体に対する抗体が挙げられる。若年性関節リウマチ.受容体結合剤は、例えば、21、18、17、16、15、または14歳未満の被験体において、若年性関節リウマチを治療するために使用することができる。若年性関節リウマチはいくつかの点でRAに類似する。被験体はリウマチ因子陽性であり得る。被験体は、その疾患の小関節、多関節、または全身型を有し得る。関節炎は、関節強直および発育遅延を引き起こす可能性があり、また、慢性前部ブドウ膜炎および全身性アミロイドーシスに至る場合もある。受容体結合剤は、そのような症状の1つ以上の発症を遅らせる、または寛解させるために使用することができる。受容体結合剤は、若年性特発性関節炎、例えば全身型若年性特発性関節炎SO-JIAを治療するために使用することができる。被験体は前のコルチコステロイド治療に失敗し、または0.3mg/kg以上の一日量でのコルチコステロイド治療を要求した可能性がある。例えば、QuartieretalAnnRheumDis7074754を参照されたい。他のリウマチ性障害.本明細書で記載される受容体結合剤はまた、他のリウマチ性障害、例えば強皮症、全身性エリテマトーデス、痛風、骨関節炎、リウマチ性多発筋痛症、乾癬性関節炎および慢性ライム関節炎、随意筋および他の筋肉の炎症、例えば皮膚筋炎、封入体筋炎、多発性筋炎、およびリンパ脈管筋腫症、発熱性関節炎症候群、小児肉芽腫性関節炎PGA/Blau症候群、および本明細書で記載される他のリウマチ性障害を治療するために使用することができる。受容体結合剤は、代謝性リウマチ性障害、例えば、高尿酸血症と関連する障害、例えば、慢性急性痛風を含む痛風、および他の結晶媒介関節症を治療するために使用することができる。薬剤は、痛風に関連する薬剤性フレア、例えば、例としてキサンチンオキシダーゼ阻害剤、尿酸オキシダーゼ、または尿酸排泄促進薬により誘発されるフレアを治療するために使用することができる。痛風では、尿酸の結晶がインフラマソームを活性化し、IL-1βの放出を引き起こし得る。脊椎関節症.受容体結合剤は、脊椎関節症障害、例えば強直性脊椎炎、Reiter症候群、炎症性腸疾患と関連する関節炎、乾癬と関連する脊椎炎、若年発症型脊椎関節症および未分化脊椎関節症を含むを治療するために使用することができる。脊椎関節症はしばしばHLA-B27遺伝子と関連する。被験体は、リウマチ因子を欠く可能性があり、脊椎炎および炎症性非対称性関節炎を有するまたは有しない仙腸関節炎を示す可能性がある。被験体はまたは眼炎症を有する可能性がある下記を参照されたい。強皮症.受容体結合剤は、強皮症または全身性硬化症を治療するために使用することができる。強皮症は、局所性または全身性であり得る皮膚の硬結により特徴づけられる。血管病変および微小血管系における内皮細胞損傷もまた存在し得る。被験体は、皮膚病変における単核細胞浸潤を示し、抗核抗体を有し得る。病因を示す他の器官としては、下記が挙げられる:胃腸管平滑筋肉萎縮および線維症を有し、異常蠕動/運動となることがある;腎臓小さな弓状および小葉間動脈に影響する同心円状内皮下内膜増殖を有し、その結果、腎皮質血流が減少する可能性があり、および、タンパク質尿、高窒素血症および高血圧を引き起こし得る;骨格筋萎縮、間質性線維症、炎症、肺、間質性肺炎および間質性線維症を引き起こし得る;心臓例えば、収縮帯壊死および瘢痕/線維症を示す可能性がある。本明細書で記載される受容体結合剤は、強皮症を有するまたはそのリスクがある被験体に、前記徴候および症状の1つ以上を寛解させるために投与することができる。シェーグレン症候群.受容体結合剤はシェーグレン症候群を治療するために使用することができる。シェーグレン症候群は、免疫媒介炎症およびその後の涙腺および唾液腺の機能破壊により特徴づけられる。疾患は、炎症性結合組織疾患と関連する、またはこれを伴う可能性がある。疾患はRoおよびLa抗原どちらも、低分子RNA-タンパク質複合体であるに対する自己抗体産生と関連する。病変は乾性角結膜炎、口内乾燥となる可能性があり、他の徴候または関連、例えば、胆汁性肝硬変、末梢性または感覚性ニューロパチー、および触知可能紫斑病を有する。シェーグレンに関連する眼障害の治療はまた、下記で記載される。甲状腺障害.受容体結合剤は、甲状腺障害を治療するために使用することができる。例示的な甲状腺障害としては、Graves病、橋本甲状腺炎、若年性リンパ性甲状腺炎、および萎縮性甲状腺炎が挙げられ、甲状腺抗原に対する自己免疫応答の結果であり、甲状腺に存在し、しばしばこれに特異的なタンパク質と反応する抗体が産生する。自然モデルを含む実験モデルが入手可能である:ラットBUFおよびBBラットおよびニワトリ肥満ニワトリ株およびサイログロブリン、甲状腺ミクロソーム抗原甲状腺ペルオキシダーゼのいずれかによる動物の免疫化により作製された誘導モデル。糖尿病代謝性障害.受容体結合剤は、糖尿病障害、例えば若年発症型糖尿病自己免疫糖尿病およびインスリン-依存性糖尿病を含むおよび成人発症型糖尿病インスリン非依存性および肥満媒介糖尿病、I型糖尿病およびII型糖尿病を治療するために使用することができる。例えば、I型糖尿病またはインスリン依存性糖尿病は、自己抗体および自己反応性T細胞により引き起こされる膵島細胞の自己免疫破壊と関連する。さらに、IL-1β活性の減少は、グルコース制御およびβ細胞機能を改善することができ、II型糖尿病を治療するために使用することができる。例えば、OwyangetalEndocrinology2010151251527を参照されたい。例えば、いくつかの実施形態では、本明細書で記載される受容体結合剤を、インスリンが投与されていない被験体、例えば、インスリン依存性でない被験体に投与することができる。例えば、被験体は前糖尿病である可能性がある。被験体は、耐糖能障害または空腹時高血糖のいずれかを有し得る。被験体は肥満である、または23、25、30、35、または40kg/m2超の肥満度指数を有する可能性がある。被験体は、インスリン抵抗性であり、および/または高血糖または高インスリン血症により特徴づけられる可能性がある。被験体は、II型糖尿病へ進行するリスクがあり得る。LarsenetalNEJM356151726およびLarsenetalDiabetesCare3216638もまた、参照されたい。いくつかの実施形態では、被験体は、6.1、6.5、7、または8mmol/Lを超える空腹時血糖値を有する。いくつかの実施形態では、被験体は、5.5、5.7、6、6.4、7、7.5、または8を超えるA1Cレベルを有する。いくつかの実施形態では、被験体はまた、インスリン分泌促進物質、例えば、例としてスルホニル尿素例えば、クロルプロパミド、トラザミド、アセトヘキサミド、トルブタミド、グリブリド、グリメピリド、グリピジドおよび/またはメグリチニド例えば、レパグリニド、ナテグリニドインスリン分泌を促進するが投与される。被験体はまた、ビグアナイド例えば、メトホルミンが投与され得る。受容体結合剤は、膵臓β細胞の損失および/またはそれへの損傷を減少させるために投与することができる。いくつかの実施形態では、被験体は遺伝子IL1RNの5’付近に位置するrs4251961のCアレルにヘテロ接合性またはホモ接合性である。受容体結合剤による治療は、糖尿病に関連する二次的疾患、例えば糖尿病網膜症、糖尿病患者における腎臓移植片拒絶、肥満媒介インスリン抵抗性、および腎不全それ自体、タンパク質尿および高血圧と関連し得るの悪化を寛解または防止することを含む。胃腸障害.本明細書で記載される受容体結合剤は、炎症性胃腸障害、例えば、例としてセリアック病、クローン病、潰瘍性大腸炎、特発性胃不全麻痺膵炎、例えば慢性膵炎、急性膵炎、炎症性腸疾患および潰瘍、例えば胃および十二指腸潰瘍を治療するために使用することができる。肺障害.受容体結合剤は、IL-1により媒介される肺疾患を治療するために使用することができる。治療することができる例示的な肺疾患としては、慢性閉塞性肺疾患例えば、肺気腫および慢性気管支炎、肺胞蛋白症、ブレオマイシン誘導肺疾患および線維症、肺線維症、例えば特発性肺線維症および放射線誘導肺線維症、肺サルコイドーシス、嚢胞性線維症、肺内でのコラーゲン蓄積、ARDS、気管支肺異形性症BPD、慢性閉塞性肺疾患、および未熟児の慢性線維性肺疾患が挙げられる。さらに、本明細書で記載される受容体結合剤は、職業性肺疾患、例えば石綿肺、炭坑夫塵肺、珪肺症または微小粒子への長期暴露と関連する同様の病状を治療するために使用することができる。好酸球性肺炎、特発性肺線維症、および過敏性肺炎を含む炎症性および線維性肺疾患は、間違って制御された免疫-炎症反応を含む場合があり、これは受容体結合剤を使用して治療することができる。サルコイドーシスは、身体内のほぼ任意の組織中の類上皮細胞肉芽腫の存在により特徴付けられ;肺の関与が最も一般的である、病因がわかっていない病状である。病因は、疾患部位での活性化マクロファージおよびリンパ球細胞の持続が関与し、これらの細胞型により放出された局所的および全身的に活性な活性生成物の放出に起因するその後の慢性続発症が存在する。心血管障害.本明細書で記載される受容体結合剤は、心血管障害または損傷、例えば大動脈瘤、急性冠動脈症候群、動脈炎、血管閉塞、例えば大脳動脈閉塞、冠動脈バイパス術の合併症、虚血/再灌流障害、心疾患、例えばアテローム硬化性心疾患、心筋炎、例えば慢性自己免疫性心筋炎およびウイルス性心筋炎、心不全、例えば慢性心不全、うっ血性心不全、心筋梗塞、心臓手術後または頸動脈バルーン血管形成手順後の再狭窄および/またはアテローム性動脈硬化、無症候性心筋虚血、左心室ポンプ機能不全、左心室補助装置の移植後合併症、Raynaud現象、血栓性静脈炎、血管炎、例えばKawasaki血管炎、静脈閉塞症、巨細胞動脈炎、Wegener肉芽腫症、およびSchoenlein-Henoch紫斑病を治療するために使用することができる。受容体結合剤はまた、予防的に、例えば、そのような心血管障害のリスクを減少させるために提供することができる。いくつかの実施形態では、受容体結合剤は、アテローム性動脈硬化を治療するために、またはそのリスクを減少させるために患者に投与される。IL-1媒介シグナル伝達は、急性心筋梗塞により活性化され梗塞周囲心筋細胞におけるアポトーシス細胞死を開始し、梗塞ゾーンのサイズを拡張することができる。本明細書で記載される受容体結合剤は、心筋梗塞により引き起こされる損傷を減少させるために投与することができる。例えば、受容体結合剤は、心筋梗塞のリスクがある被験体、または心筋梗塞、特に急性心筋梗塞を、例えば、この2、4、6、12、24、または48時間以内に経験した被験体に投与することができる。薬剤は、他の薬剤、例えば、ヘパリンおよびアスピリンと組み合わせて投与することができる。受容体結合剤はまた、脳卒中、くも膜下出血、頭部外傷または脳損傷、および/または心血管障害と関連する炎症を治療するために使用することができる。例えば、IL-1βのレベルの上昇は、脳卒中および脳損傷と関連する神経炎症を示す6186252000。受容体結合剤は、そのような炎症および虚血および/または低酸素と関連する他の炎症を減少させるために投与することができる。さらに、受容体結合剤はまた、例えば、そのような障害および/またはそのような障害と関連する炎症のリスクを減少させるために、予防的に提供することができる。例えば、受容体結合剤は、脳卒中、虚血事象、他の心血管事象、または出血事象例えばくも膜下出血のリスクがある被験体、または脳卒中、虚血事象、他の心血管事象、または出血事象例えば、くも膜下出血を、例えば、この2、4、6、12、24、または48時間以内に経験した被験体に投与することができる。尿生殖器および腎障害.尿生殖器系の障害もまた、本明細書で記載される受容体結合剤で治療することができる。そのような障害としては、糸球体腎炎、例えば自己免疫性糸球体腎炎、毒素への暴露による糸球体腎炎または溶血性連鎖球菌または他の感染病原体による感染に続発する糸球体腎炎が挙げられる。免疫媒介腎疾患、例えば糸球体腎炎および尿細管間質性腎炎は、腎抗原に対する自己反応性抗体またはT細胞の産生の結果として直接的に、または他の非腎抗原に対して反応性である抗体および/または免疫複合体の腎臓中での堆積の結果として間接的に、腎組織への抗体またはTリンパ球媒介損傷の結果である。よって、免疫複合体の形成となる他の免疫媒介疾患はまた、間接的続発症として免疫媒介腎疾患を誘導することができる。直接および間接免疫メカニズムはどちらも、腎組織中での病変発症を生成/誘導する炎症反応となり、結果的に臓器機能障害となり、場合によっては腎不全へと進行する。体液性および細胞免疫メカニズムはどちらも病変の病因に関与し得る。受容体結合剤はまた、尿毒症症候群およびその臨床的合併症例えば、腎不全、貧血、および肥大型心筋症、例えば環境毒素、薬物または他の原因への暴露と関連する尿毒症症候群を治療するために使用することができる。胆嚢壁の炎症から生じ、吸収機能に変化をもたらす合併症もまた、治療することができる。そのような合併症には、胆石症胆石および総胆管結石症胆管結石ならびに胆石症および総胆管結石症の再発が含まれる。治療することができるさらなる病状は、血液透析の合併症;前立腺病状、例えば良性前立腺肥大、非細菌性前立腺炎および慢性前立腺炎;および血液透析の合併症である。受容体結合剤はまた、慢性疼痛状態、例えば慢性骨盤痛、例えば慢性前立腺炎/骨盤痛症候群、およびヘルペス後疼痛を治療するために使用することができる。血液および腫瘍障害.本明細書で記載される受容体結合剤は、様々な形態の癌、例えば急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、Epstein-Barrウイルス-陽性上咽頭癌、グリオーマ、結腸、胃、前立腺、腎細胞、頸部および卵巣癌、肺癌SCLCおよびNSCLC、例えば癌関連悪液質、疲労、無力症、悪液質の傍腫瘍性症候群および高カルシウム血症を治療するために使用することができる。例えば、VoronovetalPNAS10026452650を参照されたい。固形腫瘍、例えば肉腫、骨肉腫、および癌腫、例えば腺癌例えば、乳癌および扁平上皮癌もまた治療可能である。一定の腫瘍におけるIL-1βの役割に関しては、例えば、KrelinetalCancerRes6710621071を参照されたい。追加の癌としては、食道癌、胃癌、胆嚢癌腫、白血病、例えば急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄性白血病、慢性または急性リンパ芽球性白血病およびヘアリー細胞白血病が挙げられる。浸潤性転移性能力を有する他の悪性腫瘍、例えば多発性骨髄腫は、受容体結合剤により治療することができる。例えば、LustetalMayoClinProc84114122を参照されたい。受容体結合剤はまた、貧血および血液障害、例えば慢性特発性好中球減少症、慢性疾患の貧血、再生不良性貧血、例えばFanconi再生不良性貧血;特発性血小板減少性紫斑病ITP;血栓性血小板減少性紫斑病、骨髄異形成症候群不応性貧血、環状鉄芽球を伴う不応性貧血、過剰芽球を伴う不応性貧血、過剰芽球変化を伴う不応性貧血を含む;骨髄線維症/骨髄化生;および鎌状赤血球血管閉塞性発作を治療するために使用することができる。自己免疫溶血性貧血、免疫汎血球減少症、および発作性夜間血色素尿症は、赤血球および場合によっては、他の血液細胞、例えば血小板の表面で発現された抗原と反応する抗体の生成に起因する可能性があり、補体媒介溶解および/またはADCC/Fc-受容体媒介メカニズムを介するそれらの抗体コート細胞の除去の結果である。自己免疫血小板減少症、例えば血小板減少性紫斑病、および他の臨床的設定では免疫媒介血小板減少症では、血小板破壊/除去は、血小板への抗体または補体のいずれかの結合およびその後の補体溶解、ADCCまたはFC-受容体媒介メカニズムによる除去の結果として起こる。受容体結合剤はまた、様々なリンパ球増殖性障害、例えば自己免疫リンパ球増殖性症候群ALPS、慢性リンパ芽球性白血病、ヘアリー細胞白血病、慢性リンパ性白血病、末梢性T細胞リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、Burkittリンパ腫、Epstein-Barrウイルス-陽性T細胞リンパ腫、組織球性リンパ腫、Hodgkin病、びまん性侵攻性リンパ腫、急性リンパ性白血病、Tγリンパ球増殖性疾患、皮膚B細胞リンパ腫、皮膚T細胞リンパ腫すなわち、菌状息肉腫およびSezary症候群を有するまたはそのリスクがある被験体に投与することができる。肝障害.本明細書で開示される受容体結合剤はまた、肝臓の病状、例えば肝炎、例として急性アルコール肝炎、急性薬剤性またはウイルス肝炎、A、BおよびC型肝炎、硬化性胆管炎、肝類洞上皮、および未知の原因による肝臓の炎症を治療するのに有用である。聴覚障害.受容体結合剤はまた難聴を伴う、および異常IL-1発現と関連する障害を治療するために使用することができる。そのような障害としては、自己免疫過程に起因すると考えられる蝸牛神経関連難聴、例えば、自己免疫難聴、メニエール症候群および真珠腫、しばしば難聴と関連する中耳障害が挙げられる。骨障害.本明細書で記載される受容体結合剤で治療可能な骨および関節の非関節炎障害。これは、骨または関節の炎症性障害、骨減少に至る破骨細胞障害、例えば限定はされないが骨粗鬆症、例えば閉経後骨粗鬆症、骨関節炎歯の緩みまたは損失に至る歯周炎、および関節置換後の人工関節の緩み一般に摩耗デブリに対する炎症反応と関連する、例えば、整形外科的インプラント骨溶解を含む。アミロイド障害.さらに、本明細書で記載される受容体結合剤は、原発性アミロイドーシスおよび様々な病状を特徴とする続発性アミロイドーシス、例えばアルツハイマー病、続発性反応性アミロイドーシス;Down症候群;および透析関連アミロイドーシスを治療するために使用することができる。さらに、受容体結合剤は、筋萎縮性側索硬化症ALS、ハンチントン病、およびパーキンソン病を治療するために使用することができる。これらの疾患はまた、凝集物およびアミロイドの形成を伴うことがあり、これが炎症反応を誘発する可能性がある。神経障害.受容体結合剤はまた、中枢および末梢神経系の神経炎症および脱髄疾患、例えば多発性硬化症;特発性脱髄多発ニューロパチーまたはGuillain-Barre症候群;および慢性炎症性脱髄多発ニューロパチーを治療するために使用することができる。これらの障害は、自己免疫基礎を有し、オリゴデンドロサイトまたはミエリンに直接引き起こされる損傷の結果として神経脱髄となると考えられる。多発性硬化症疾患誘導では、Tリンパ球が関与する。多発性硬化症は、再発寛解過程または慢性進行性過程のいずれかを有する。病変は、主にTリンパ球媒介、ミクログリア細胞の浸潤および浸潤性マクロファージを含み;CD4Tリンパ球は、病変での主な細胞型である。オリゴデンドロサイト細胞死およびその後の脱髄のメカニズムはわかっていないが、Tリンパ球駆動のようである。ミオパチー.受容体結合剤は炎症および自己免疫と関連するミオパチーを治療するために使用することができる。特発性炎症性ミオパチー、例えば皮膚筋炎、多発性筋炎などは、筋力低下に至る病因のわからない慢性筋炎の障害である。筋肉損傷/炎症はしばしば、対称的で進行性である。自己抗体はほとんどの形態と関連する。これらの筋炎特異的自己抗体は、タンパク質合成に関与する構成成分、タンパク質およびRNAに対して作られ、その機能を阻害する。血管炎障害.本明細書で記載される受容体結合剤は、血管炎障害、例えば、全身性血管炎を治療するために使用することができる。全身性血管炎は、原発病変が炎症であり、その後血管への損傷がおこり、これにより影響を受けた血管により供給される組織への虚血/壊死/変性が起こり、場合によっては最終的には末端器官機能不全となる、疾患を含む。血管炎はまた、特に免疫複合体の形成とも関連する疾患において、他の免疫-炎症性媒介疾患、例えば関節リウマチ、全身性硬化症、などに対する二次病変または続発症として起こり得る。原発性全身性血管炎群における疾患としては下記が挙げられる:全身性壊死性血管炎:結節性多発動脈炎、アレルギー性血管炎および肉芽腫症、多発性血管炎;Wegener肉芽腫症;リンパ腫様肉芽腫症;および巨細胞動脈炎。様々な血管炎としては下記が挙げられる:皮膚粘膜リンパ節症候群MLNSまたはKawasaki病、単離CNS血管炎、Behcet病、閉塞性血栓血管炎Buerger病および皮膚壊死性細静脈炎。これらの血管炎障害の発症メカニズムは、主に、免疫グロブリン複合体の血管壁中での堆積およびその後の、ADCC、補体活性化、または両方のいずれかを介する炎症反応の誘導によると考えられている。CAPS.受容体結合剤は、CAPS障害、すなわち、CIAS1関連周期性症候群を治療するために使用することができる。CAPSは3つの遺伝的症候群を含む:新生児期発症多臓器性炎症性疾患NOMID、Muckle-Wells症候群MWS、および家族性感冒自己炎症性症候群FCAS。。CAPSは、常染色体優性様式で孤発性または家族性パターンで遺伝する。CIAS1はNALP3、インフラマソーム、細胞内酵素複合体カスパーゼ1の活性を制御するのタンパク質構成成分をコードする。CIAS1の変異により、IL-1の生成および多くの病的結果が増加する。IL-1は、肝臓中の急性相反応物、例えばC-反応性タンパク質CRPおよび血清アミロイドASAAの生成を強く誘導する。CAPS障害は共通の臨床的特徴を共有し、様々な臨床的重症度として現れる。NOMIDは最も重篤な障害であり、MWSは幾分重篤ではなく、FCASが最も重篤ではない。CAPS障害は、いくつかの重なる特徴を有し、個体は徴候および症状の独特な群を有し得る。これらの病状全てに共通な特徴としては、発熱、蕁麻疹様皮疹、関節炎または関節痛、筋肉痛、倦怠感、および結膜炎が挙げられる。NOMIDでは、慢性無菌性髄膜炎は精神遅滞に至る可能性あり、これらの患者はまた、骨端および膝蓋骨での酷いおよび障害を引き起こす骨過成長を患う可能性がある。これらの患者はまた、頭蓋内圧の増加に起因する視神経萎縮による失明を患うこともある。MWSおよびNOMIDは、通常、聴覚系、髄膜、および関節を含み得る重篤な炎症と関連する。これらの患者は、毎日、高いスパイク熱および分布および強度がしばしば変わる慢性皮疹を患う。患者は、難聴または聴覚消失を患う可能性がある。結膜炎およびうっ血乳頭がしばしば観察される。アミロイドーシスが発症し、慢性炎症および急性相反応物特にSMの過剰産生による腎不全に至ることもある。受容体結合剤は、NOMID、MWS、またはFCASを有する、またはNOMID、MWS、またはFCASと関連する遺伝子型を有すると診断された被験体に投与することができる。さらに、受容体結合剤は、TRAPSTNF受容体関連周期性症候群を有する被験体に投与することができる。皮膚障害.受容体結合剤は、皮膚障害、例えば炎症性皮膚障害または自己免疫もしくは免疫媒介皮膚疾患を治療するために使用することができる。例示的な障害は乾癬である。追加の自己免疫または免疫媒介皮膚疾患、例えば水疱性皮膚疾患、多形成紅斑、および接触皮膚炎は自己抗体により媒介され、その起源はTリンパ球依存性である。乾癬はTリンパ球媒介炎症性疾患である。病変は、Tリンパ球、マクロファージおよび抗原処理細胞、およびいくつかの好中球の浸潤を含む。治療することができる皮膚または粘膜の追加の障害としては、棘融解疾患、例えばDarier病、毛包性角化症および尋常性天疱瘡が挙げられる。さらなる追加の障害としては下記が挙げられる:ざ瘡、酒さ性ざ瘡、円形脱毛症、アフタ性口内炎、水疱性類天疱瘡、火傷、湿疹、紅斑、例えば多形成紅斑および多形水疱性紅斑Stevens-Johnson症候群、炎症性皮膚疾患、扁平苔癬、リニアIgA水疱性疾患小児慢性水疱性皮膚症、皮膚弾力の喪失、粘膜表面潰瘍、例えば胃潰瘍、好中球皮膚炎Sweet症候群、皮膚筋炎、毛孔性紅色粃糠疹、乾癬、壊疽性膿皮症、多中心性細網組織球症、および中毒性表皮剥離症。受容体結合剤により治療可能な他の皮膚関連病状としては、疱疹状皮膚炎Duhring病、アトピー性皮膚炎、接触皮膚炎、および蕁麻疹慢性特発性蕁麻疹を含むが挙げられる。アレルギー性障害.受容体結合剤は、アレルギー性障害、例えば喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症、アレルギー性結膜炎下記を参照されたいおよび蕁麻疹を治療するために使用することができる。これらの疾患はしばしば、Tリンパ球誘導炎症、IgE媒介-炎症、または両方により媒介される。喘息は、呼吸器系が関与する慢性病状であり、しばしば1つ以上のトリガーに応答して、気道が時々狭窄し、炎症し、過剰量の粘液で覆われる。エピソードは、環境刺激物質またはアレルゲン例えば、冷気、暖気、湿り空気、運動または労作、情緒的ストレス、およびウイルス疾病への暴露などのことによりトリガされ得る。気道狭窄は、症状、例えば喘鳴、息切れ、胸部絞扼感、および咳を引き起こす。受容体結合剤は、喘息を治療するために使用することができ、そのような治療薬の局所または肺送達のために製剤化することができる、または非経口的に送達することができる。移植.受容体結合剤は、移植を受ける予定である、受けている、またはそれから回復している被験体に投与することができる。移植関連疾患、例えば移植片拒絶および移植片対宿主病GVHDはTリンパ球依存性であり;Tリンパ球機能の阻害は寛解性である。角膜移植は、血管新生と関連する可能性があり、これは、受容体結合剤による治療によって寛解され得る。受容体結合剤はまた、実質臓器移植、例えば心臓、肝臓、皮膚、腎臓、肺肺移植片気道閉塞または他の移植片、例えば骨髄移植片に起因する合併症を治療するために使用することができる。感染疾患.本明細書で記載される受容体結合剤は、原生動物疾患、例えばマラリアおよび住血吸虫症を治療する、およびらい性結節性紅斑;細菌またはウイルス髄膜炎;結核、例えば肺結核;および細菌またはウイルス感染、例えばインフルエンザ感染および感染性単核球症に続発する間質性肺炎を治療するのに有用である。遺伝的周期熱症候群、例えば家族性地中海熱、高グロブリンD血症および周期熱症候群およびTNF-受容体関連周期性症候群TRAPS、および成人発症Still病、Schnitzler症候群、および線維性肺胞炎もまた、受容体結合剤により治療可能である。いくつかの実施形態では、受容体結合剤は、被験体におけるIL-6の活性または発現を減少させるために、被験体に投与される。例えば、被験体は、少なくとも一部はIL-6に関連するまたはこれに媒介される障害を有し得る。眼障害および眼送達本明細書で記載される受容体結合剤は、眼障害、例えば眼の表面に影響する眼障害、炎症性眼障害、および少なくとも一部は自己免疫反応により媒介される眼障害を治療するために使用することができる。いくつかの実施形態では、眼障害は、眼の表面に影響するドライアイ障害である。障害は、乾性角結膜炎、乾性角膜炎、乾燥症候群、眼球乾燥症、涙膜障害、涙液産生減少、水性涙液欠乏、およびマイボーム腺機能不全とも呼ばれる病状を含む。ドライアイは、シェーグレン症候群SSと関連する形態、例えば、シェーグレン症候群関連乾性角結膜炎を含み得るが、関連しない形態、例えば、非シェーグレン症候群関連乾性角結膜炎も含み得る。患者は、全身性自己免疫障害の他の徴候を有する場合もあり、有さない場合もある。IL-1は、ドライアイ障害の病因に関与している。例えば、EnriquezdeSalamancaetalMolVis16862873を参照されたい。ドライアイ症候群を有する被験体は、眼の乾燥の炎症を示すことがあり、ひりひり、刺すような、かゆい、焼けるまたは圧力感覚、刺激、疼痛、および発赤を経験することがある。ドライアイは、過剰な流涙および逆に不十分な涙液産生の両方と関連し得る。受容体結合剤は、1つ以上のそのような症状の発症または悪化を寛解または防止するために、そのような被験体に投与することができる。受容体結合剤はまた、疼痛、例えば、眼疼痛例えば神経炎症によるを、そのような疼痛を経験している被験体において緩和するために使用することができる。いくつかの実施形態では、眼障害は、全身性自己免疫障害例えばシェーグレン症候群および関節リウマチまたはIL-1もしくは別のIL-1サイトカインファミリーメンバーと関連する障害と関連する眼障害である。患者は、全身性自己免疫障害または全身性自己免疫障害の他の徴候を有しても、有さなくてもよい。受容体結合剤はまた、眼の表面、例えば角膜に影響する他の障害を治療するために使用することができる。そのような障害としては、角膜眼表面炎症性状態、角膜血管新生、角膜炎、例えば末梢性潰瘍性角膜炎および細菌性角膜炎が挙げられる。受容体結合剤は、角膜創傷治癒を受けている被験体例えば、角膜創傷を有する被験体を治療するために使用することができる。受容体結合剤は、眼に関係する手順、例えば、角膜移植/角膜形成、人工角膜移植手術、表層移植、選択的内皮移植を受ける予定である、受けている、またはそれから回復している被験体に投与することができる。例えば、DanaTransAmOphthalmolSoc10533043DekarisetalCurrEyeRes194569およびDanaetalTransplantation6315017を参照されたい。受容体結合剤は、結膜に影響する障害、例えば結膜瘢痕障害および結膜炎を治療するために使用することができる。受容体結合剤は、さらに他の障害、例えば類天疱瘡症候群およびStevens-Johnson症候群を治療するために使用することができる。本明細書で記載される受容体結合剤は、眼内またはその周りの血管新生を調節するために、被験体に投与することができる。例えば、DanaTransAmOphthalmolSoc10533043を参照されたい。受容体結合剤は、眼に影響するアレルギー性反応を有する被験体、例えば、重篤なアレルギー性アトピー性眼疾患、例えばアレルギー性結膜炎を経験している被験体に投与することができる。例えば、受容体結合剤は、局所的に投与することができる。例えば、KeaneMyersAMetalInvestOphthalmolVisSci4030416も参照されたい。受容体結合剤は、眼に影響する自己免疫障害を有する被験体に投与することができる。例示的な自己免疫眼障害としては、交感性眼炎、Vogt-KoyanagiHaradaVKH症候群、バードショット脈絡網膜炎、眼瘢痕性類天疱瘡、Fuchs異時性虹彩毛様体炎、および様々な形態のブドウ膜炎が挙げられる。受容体結合剤は、前記障害のいずれかを治療するために被験体に投与することができる。受容体結合剤は、糖尿病網膜症を有するまたはそのリスクがある被験体に投与することができる。例えば、DemircanetalEye2013661369andDoganayetalEye16163170を参照されたい。ブドウ膜炎は急性および慢性形態を含み、虹彩、毛様体、および脈絡膜の1つ以上の炎症を含む。慢性形態は、全身性自己免疫疾患、例えば、ベーチェット症候群、強直性脊椎炎、若年性関節リウマチ、Reiter症候群、および炎症性腸疾患と関連する場合がある。別のブドウ膜炎では、炎症は主に虹彩においてである虹彩炎もまた。前部ブドウ膜炎は、全身性自己免疫疾患を有する被験体に影響する可能性があるが、全身性自己免疫疾患を有しない被験体にもそうである。中間ブドウ膜炎は、前部硝子体、末梢性網膜、および毛様体の炎症を伴い、しばしば、前部または脈絡網膜炎症はほとんどない。毛様体扁平部炎は、虹彩と脈絡膜の間の毛様体扁平部の炎症に起因する。後部ブドウ膜炎は、ブドウ膜および主に脈絡膜を含み、脈絡膜炎とも呼ばれる。後部ブドウ膜炎は、全身性感染または自己免疫疾患と関連する可能性がある。何ヶ月も、何年も持続する可能性がある。受容体結合剤は、ブドウ膜炎の前記形態のいずれかを治療するために、被験体に投与することができる。例えば、TsaietalMolVis1515421552andTrittibachPetalGeneTher15147888も参照されたい。いくつかの実施形態では、受容体結合剤は、加齢黄斑変性AMDを有するまたはそのリスクがある被験体を治療するために使用される。受容体結合剤は、局所的に眼に適用され、注射され例えば、硝子体内または全身的に提供され得る。例えば、OlsonetalOculImmunolInflamm17195200を参照されたい。本明細書で記載される受容体結合剤は、眼疾患を治療するために任意の方法により投与することができる。薬剤は、非経口方法により送達させることができる。または、もしくはさらに、薬剤は眼に直接、または眼の付近に送達させることができる。例えば、タンパク質は、例えば、下記で記載されるように局所または眼内投与することができる。眼送達のための製剤および方法受容体結合剤を含む眼用製剤は、局所投与のために、例えば、液滴または軟膏としての投与のため、例えば、眼の前房または結膜嚢内への移植のために送達させることができる。液滴は、点眼器を用いて送達させることができる。眼送達のために製剤化される場合、受容体結合剤は、0.0001-0.1、0.001-5、例えば、0.005-0.5、0.05-0.5、0.01-5、0.1-2または1-5濃度で存在することができる。しばしば、眼用製剤は直接、眼に適用され、まぶたへの局所適用または眼球とまぶたの間の空間結膜嚢への滴下が含まれる。眼用製剤は、涙液と容易に混合し、角膜および結膜の表面にわたって広がるように設計され得る。通常の投与技術を用いると、薬物の大部分は下円蓋部中に堆積される。毛管現象、拡散力、およびまばたき反射は、薬物の前角膜への組み込みを駆動し、ここから、角膜中におよびこれを通って浸透する。眼用製剤はまた、1つ以上の他の薬剤、例えば、抗炎症性ステロイド、例えばリメキソロン、ロテプレドノール、メドリゾンおよびヒドロコルチゾン、または非ステロイド性炎症薬を含むことができる。例えば、ステロイドは、0.001~1の濃度で存在することができる。いくつかの実施形態では、ステロイドは存在しない。例えば、受容体結合剤は製剤中、唯一の活性剤である。製剤はまた、下記構成成分の1つ以上を含むことができる:界面活性剤、等張化剤、緩衝剤、保存剤、共溶媒および粘性構築剤。等張化剤は、組成物の浸透圧を、例えば、天然涙に調整するために使用することができる。例えば、塩化カルシウム、塩化ナトリウム、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、デキストロースおよび/またはマンニトールを添加して、適切な浸透圧、例えば、生理的浸透圧を達成してもよい。等張化剤は、約150-450mOsmまたは250-350mOsmの浸透圧を提供するのに十分な量で添加することができる。製剤はまた、眼用送達に好適な緩衝剤を含むことができる。緩衝剤は、とりわけ貯蔵条件下でのpH変化に対し、1つ以上の緩衝構成成分例えば、リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウムまたはホウ酸を含むことができる。例えば、緩衝剤は、pH6.0-7.5の範囲内の標的pH、例えば、6.5-7.5を提供するように選択することができる。製剤は、水性またはリン脂質担体を含むことができる。特にドライアイ障害の治療では、製剤は、短期緩和を提供する薬剤、例えば、眼を潤滑化し、涙液形成を支援する化合物を含むことができる。例えば、リン脂質担体1つ以上のリン脂質を含むを使用して、短期緩和を提供することができる。人工涙液担体として有用な人工涙液組成物の例としては、TearsNaturale商標AlconLabs、Inc.、TXUSAなどの商品が挙げられる。例えば、1mlあたり、製剤は下記を含むことができる:1mgのデキストラン、70および3mgのヒドロキシプロピルメチルセルロース、および任意で、保存剤、例えばPOLYQUAD登録商標ポリクオタニウム-10.001m/v。リン脂質担体製剤の例としては、US4,804,539号、US4,883,658号、US5,075,104号、US5,278,151号、およびUS5,578,586号において開示されているものが挙げられる。製剤はまた、潤滑剤または湿潤剤として機能する他の化合物を含むことができる。これらとしては、下記などの粘性剤が挙げられる:モノマポリオール、例えば、グリセロール、ポリプロピレングリコール、エチレングリコール;ポリマポリオール、例えばポリエチレングリコール、セルロースファミリーの様々なポリマ:ヒドロキシプロピルメチルセルロースHPMC、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロースHPC、デキストラン、例えばデキストラン70;水溶性タンパク質、例えばゼラチン;およびビニルポリマ、例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポビドンおよびカルボマー、例えばカルボマー934P、カルボマー941;カルボマー940、カルボマー974P。さらに追加の例としては、多糖、例えばヒアルロン酸およびその塩ならびにコンドロイチン硫酸およびその塩、ならびにアクリル酸ポリマが挙げられる。ある実施形態では、製剤は1~400cPの粘度を有する。製剤は、単回または複数回投与用途のために例えば、1つの瓶中に関連する点眼器と共に、または、一組の使い捨て点眼器として、パッケージすることができる。製剤は、例えば、使用中の微生物および真菌汚染を防止するために1つ以上の保存剤を含むことができる。例示的な保存剤としては下記が挙げられ:塩化ベンザルコニウム、クロロブタノール、ベンゾドデシニウムブロミド、メチルパラベン、プロピルパラベン、フェニルエチルアルコール、エデト酸二ナトリウム、ソルビン酸、およびポリクオタニウム-1、0.001~1.0w/vの濃度で含まれ得る。無菌であり、その上保存剤を含まない、受容体結合剤を含む製剤を提供することも可能である。製剤は、使い捨て用途のために調製することができる。眼用パックは、眼用製剤と眼との長期接触を与えるために使用され得る。綿球を、製剤で飽和させ、その後、上または下円蓋に挿入させる。受容体結合剤はまた、イオン泳動により投与され得る。この手順は、溶液を、電極を有する眼杯中で角膜と接触させたままとする。薬物の拡散は、電位差により引き起こされる。受容体結合剤はまた、注射、例えば、結膜下注射により送達され得る。製剤は、結膜下で注射することができ、単純拡散による眼内への強膜の通過が促進される。製剤はまた、結膜およびその下の、眼のより後部の部分にあるTenon嚢下で注射することができ、毛様体、脈絡膜、および網膜に薬剤を送達させることができる。製剤はまた、眼球後注射により投与され得る。ドライアイおよび他の表面障害に関して、被験体は、下記の1つ以上のアプローチを使用して評価することができる:眼表面疾患指標OSDI、角膜および結膜染色、およびSchirmerテスト。眼表面疾患指標OSDIは、眼表面炎症性障害、例えばDESと一致する眼刺激の症状、およびそれらの視覚関連機能への影響の迅速評価を提供する12項目質問票である。例えば、OculImmunolInflamm2007SepOct1538993を参照されたい。OSDI質問票の12項目は、0~4のスケールでランク付けされる。スコアは応答に基づき誘導され、0~100のスケールでOSDIスコアを提供し、スコアが高いほど、大きな障害を表す。ベースラインからの負の変化は、視覚関連機能および眼炎症性障害の改善を示す。角膜および結膜染色:角膜染色は、典型的には眼表面炎症性障害、例えばドライアイで見られる、上皮疾患、または眼表面の上皮バリアの破壊の尺度である。重篤な眼瞼疾患、例えば後部眼瞼炎が存在する場合、臨床的に明らかなドライアイがなくても角膜染色が存在し得る。角膜染色は、多くの、全てではない患者において、眼不快と高度に相関する;一般に角膜染色は、上記で記載されるOSDIの高いスコアと関連する。角膜フルオレセイン染色では、生理食塩水で湿らせたフルオレセインストリップまたは1ナトリウムフルオレセイン溶液を使用して、涙膜を染色する。角膜全体をその後、イエローバリアフィルタ12Wrattenおよびコバルトブルー照明を備えた細隙灯評価を用いて検査する。染色は、OxfordSchemaに従いランク付けする。結膜染色は同様に、上皮疾患、または眼表面の上皮バリアの破壊の尺度である。結膜染色は、細隙灯下、リサミングリーンを用いて実施する。生理食塩水で湿らせたストリップまたは1リサミングリーン溶液を使用して、涙膜を染色し、眼瞼間結膜染色を、30秒を超えるが2分未満の後、評価する。中程度の強度の白色光を用いて、鼻および一時的な結膜染色の眼瞼間領域のみをOxfordSchemaを用いてランク付けする。Schirmerテスト:Schirmerテストは、麻酔ありおよびなしで、狭い濾紙ストリップWhatman41濾紙の5x35mmストリップを下結膜嚢内に置くことにより実施される。このテストは薄暗い部屋で実施される。患者は、5分経過するまで彼の/彼女の眼を優しく閉じ、ストリップが除去される。涙の端は、眼から除去された後数mm進み続けるので、涙の端を正確に5分でボールペンによりマーキングする。水性涙産生は、ストリップが5分間に濡れたmmの長さにより測定される。麻酔なしのSchirmerテストの10mm未満および麻酔ありのSchirmerテストの5mm未満の結果は、異常と考えられる。ベースラインからの正の変化は、本明細書で記載される眼炎症性障害の1つ以上の症状の改善を示す。肺送達のための製剤および方法受容体結合剤は吸入または他の肺送達様式のため、例えば、薬剤を気道、例えば、上および下気道の組織へ投与するために製剤化することができる。薬剤を肺気道へ局所的に送達するのに使用することができる3つの普通の系としては、乾燥粉末吸入器DPI、定量噴霧式吸入器MDIおよびネブライザーが挙げられる。MDIは、受容体結合剤を可溶化形態で、または分散物として送達するために使用され得る。典型的にはMDIは、フレオンまたは他の比較的高い蒸気圧噴霧剤を含み、これが、装置活性化時にエアロゾル化された薬物を気道に押し入れる。対照的にDPIは一般に、乾燥粉末形態の薬物を肺に導入するために、患者の吸気効果に依存する。ネブライザーは、液体溶液にエネルギーを付与することにより吸入される薬物エアロゾルを形成させる。薬剤は、凍結乾燥形態例えば、室温で貯蔵され、吸入前に溶液中で再構築され得る。フルオロケミカル媒質を用いる液体換気または肺洗浄中の薬物の直接肺送達もまた、可能な送達方法である。これらのおよび他の方法を使用して、受容体結合剤を送達することができる。例えば、薬剤は少なくとも約0.02、0.1、0.5、1、1.5、2、5、10、20、40、または50mg/パフ以上の投与単位形態で送達される。受容体結合剤は、加圧パックまたはネブライザーからのエアロゾル噴霧提示形態で、好適な噴霧剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジエリロロテトラフルオロクトリアン、二酸化炭素または他の好適なガスの使用により、都合良く送達され得る。加圧エアロゾルの場合、投与単位は、計量された量を送達するためにバルブを提供することにより、決定され得る。吸入器または吸入具において使用するためのカプセルおよびカートリッジは、粒子が製剤化粒子である場合、受容体結合剤および好適な粉末ベース、例えばラクトースまたはデンプンの粉末混合物を含むように製剤化され得る。製剤化された、または製剤化されていない受容体結合剤に加えて、他の材料、例えば100DPPCまたは他の界面活性剤を共に混合し、製剤化された、または製剤化されていない受容体結合剤の送達および分散を促進することができる。粒子サイズはまた、送達が下または上気道へのものかを制御するために変動され得る。例えば、1-5μmまたは10-50μmのサイズ範囲の粒子がそれぞれ、下および上気道のために使用され得る。送達エンハンサー、例えば界面活性剤が、肺送達をさらに増強するために使用され得る。界面活性剤は、一般に親水性および親油性部分を有する化合物であり、これは、2つの非混和性相の間の界面と相互作用することにより、薬物の吸収を促進する。界面活性剤は、いくつかの理由、例えば、粒子凝集の減少およびマクロファージ食作用の減少のために乾燥粒子において有用である。界面活性剤は当技術分野においてよく知られており、ホスホグリセリド、例えば、ホスファチジルコリン、L-α-ホスファチジルコリンジパルミトイルDPPCおよびジホスファチジルグリセロールDPPG;ヘキサデカノール;脂肪酸;ポリエチレングリコールPEG;ポリオキシエチレン-9-;アウリルエーテル;パルミチン酸;オレイン酸;ソルビタントリオレアートSpan85;グリココール酸;スルファクチン;ポロキサマー;ソルビタン脂肪酸エステル;ソルビタントリオレアート;チロキサポール;およびリン脂質を含む。本明細書では、特異的に本明細書で記載されるキメラサイトカインドメインを認識する抗体もまた特徴とする。例えば、そのような抗体は任意の親サイトカインドメインに対し優先的にキメラドメインに結合する。例えば、特異抗体は第1の親サイトカインおよび第2の親サイトカイン由来のセグメント間の接合部を含むエピトープに結合することができる。核酸送達受容体結合剤は、受容体結合剤をコードし、発現することができる核酸を送達することにより、被験体に提供することができる。例えば、受容体結合剤をコードする核酸配列を、転写制御配列の制御下に置き、遺伝子送達のための核酸ベクター、例えば、ウイルスベクター中に配置することができる。例示的なウイルスベクターとしては、アデノウイルス、レトロウイルス、またはアデノ関連ウイルスベクターが挙げられる。ベクターは、プラスミドまたは線形分子、例えば、線形二本鎖DNAの形態をとることができる。送達された核酸は、標的細胞のゲノムに組み込まれるように、例えば、標的細胞のゲノムに一体化するように設計され得る。また、送達された核酸は、送達後、細胞内に自律的に存在するように設計され得る。転写制御配列は一過性または恒常的発現を提供するように操作することができる。一過性制御は、例えば、外因性の要因例えば、ステロイドホルモンまたはFK506または環境シグナルに応答する転写因子に対する転写応答要素を使用することにより、外因性の要因により調節される制御を含むことができる。送達された核酸上で提供される遺伝子の発現は、例えば、遺伝子によりコードされたタンパク質の検出例えば、抗体を使用するにより、またはmRNAの検出例えば、PCRまたはNorthernハイブリダイぜーションを使用するにより評価することができる。送達された核酸は、転写および翻訳制御DNAが受容体結合剤のためのコード配列に対し適切に配置され、よって転写が開始され、タンパク質が得られたメッセージから翻訳されるように、一般に操作される。核酸は、哺乳類細胞、特にヒト由来の転写および翻訳制御核酸配列を含むことができる。そのような配列としては、例えば、プロモーター配列、リボソーム結合部位、転写開始および終止配列、翻訳開始および終止配列、およびエンハンサーまたはアクチベータ配列が挙げられる。さらに、発現ベクターは追加の要素を含み得る。例えば、発現ベクターを組み込むために、発現ベクターは、宿主細胞ゲノムに相同な少なくとも1つのまたは2つの配列例えば、発現コンストラクト隣接するを含むことができる。組み込みベクターは、ベクターに包含させるための適切な相同配列を選択することにより、宿主細胞内の特定座位に誘導され得る。ベクターを組み込むためのコンストラクトは、当技術分野においてよく知られている。例示的なアデノウイルスベクターは、ヒトアデノウイルスの修飾バージョン、例えばAd2またはAd5を含み、この場合、ウイルスがインビボで複製するのに必要な遺伝的要素が除去されている。例えば、E1領域を除去することができ、ゲノムは、受容体結合剤をコードする発現カセットを受容するようにさらに修飾することができる。例示的なレトロウイルスベクターとしては、LNL6、LXSN、LNCX、およびレンチウイルスベクターが挙げられる。特定のレンチウイルスベクターはPawliuketalScience2942368andImrenetalPNAS9914380により記載されており、ヒト免疫不全ウイルス例えば、HIV-1、HIV-2、ネコ免疫不全ウイルスFIV、サル免疫不全ウイルスSIV、ウシ免疫不全ウイルスBIV、およびウマ伝染性貧血ウイルスEIAVに限定して含む。これらのベクターは、例えば、必須遺伝子例えば、gagおよびpolを別々のベクター上に分離し、レトロウイルス複製を欠損にすることにより、安全であるように構築し、操作することができる。複製欠損レトロウイルスはその後、ヘルパーウイルスまたはパッケージング細胞系の使用を介して、標準技術によりビリオン中にパッケージされる。組換えレトロウイルスを生成するため、および細胞をインビトロまたはインビボでそのようなウイルスに感染させるためのプロトコルは、CurrentProtocolsinMolecularBiologyAusubelFMetalGreenePublishingAssociatesSections910914および他の標準研究室マニュアルにおいて見いだすことができる。レトロウイルスベクターは、受容体結合剤を発現するための配列の他に、左5’レトロウイルスLTR;レトロウイルス排出要素、任意で逆応答要素RRE;プロモーター、および遺伝子座調節領域LCRまたは他の転写インスレーター配列および右3’レトロウイルスLTRを含むことができる。レトロウイルスベクターはさらにウイルス価および導入効率を増加させるために一定のポリプリントラクトcPPTまたはDNAフラップを含み得る。受容体結合剤をコードする配列を含む核酸は、適切な標的細胞へ、例えば、エクスビボインビボで送達させることができる。例示的な標的細胞としては、滑膜細胞、造血細胞、皮膚細胞、などが挙げられる。核酸は、眼と関連する標的細胞、例えば、角膜上皮細胞に送達させることができる。送達は、上皮の基底層を露出させるために、デブリードマン、または角膜上皮の擦過を含み得る。送達のための核酸はその後添加される。別の実施形態では、核酸は、角膜内皮細胞、角膜周囲の真下の線維柱帯網の細胞、眼の脈絡膜層の細胞、網膜、強膜または毛様体の細胞、網膜または眼脈管構造の細胞、または硝子体の細胞またはレンズの細胞、例えばレンズ上皮に送達される。送達方法としては、例えば、レトロウイルス感染、アデノウイルス感染、プラスミドによる形質転換、外因性核酸を含むリポソームによる形質転換、微粒子銃核酸送達例えば、核酸を金または他の金属粒子上にロードし、細胞中に撃ち込むまたは注射する、アデノ関連ウイルス感染およびEpstein-Barrウイルス感染が挙げられる。送達は、細胞または組織中に、任意の方法、例えば針注射、皮下注射器、電子穿孔、または遺伝子銃により実施することができる。遺伝子送達のための他の方法は、例えば、KayMAChest111138S142SFerryNandHeardJMHumGeneTher9197581ShiratoryYetalLiver1926574OkaKetalCurrOpinLipidol1117986ThulePMandLiuJMGeneTher7174452YangNSCritRevBiotechnol1233556AltMJHepatol2374658BrodySLandCrystalRGAnnNYAcadSci71690101StrayerDSExpertOpinInvestigDrugs821592172SmithAricaJRandBartlettJSCurrCardiolRep34349andLeeHCetalNature4084838において見いだすことができる。例示的な第2の薬剤本明細書で記載される受容体結合剤は、第2の薬剤と共に投与することができる。2つの薬剤は、同時投与することができ、または、例えば異なるレジームを用いて別々に投与することができる。例示的な第2の薬剤としては、抗炎症薬が挙げられる。1つの実施形態では、第2の薬剤はIL-17アンタゴニスト全てのIL-17ファミリーメンバーのアンタゴニストを含む、例えば、IL-17A、IL-17F、IL-17B、IL-17C、IL-17D、およびIL-17Eのアンタゴニストである。例示的なIL-17アンタゴニストとしては下記が挙げられる:IL-17IL-17A、IL-17F、IL-17B、IL-17C、IL-17D、およびIL-17Eに結合し、IL-17媒介シグナル伝達に拮抗する薬剤例えば、抗体および他の結合タンパク質;IL-17のための1つ以上の受容体、例えばIL-17RAおよびIL-17RCに結合し、IL-17媒介シグナル伝達に拮抗する薬剤例えば、抗体および他の結合タンパク質;IL-17および少なくとも1つの受容体サブユニットを含む複合体、例えば、IL-17およびIl-17RA、またはIL-17、IL-17RA、およびIL-17RCに結合し、IL-17媒介シグナル伝達に拮抗する薬剤例えば抗体および他の結合タンパク質;およびIL-17RAおよびIL-17RCの1つ以上の可溶性細胞外ドメインを含み、IL-17媒介シグナル伝達に拮抗する薬剤、例えば可溶性受容体。別の実施形態では、第2の薬剤はIL-12アンタゴニストである。例示的なIL-12アンタゴニストとしては下記が挙げられる:IL-12p35およびp40を含むに結合し、IL-12媒介シグナル伝達に拮抗する薬剤例えば抗体および他の結合タンパク質;IL-12に対する1つ以上の受容体、例えばIL-12Rβ1またはIL-12Rβ2に結合し、IL-12媒介シグナル伝達に拮抗する薬剤例えば抗体および他の結合タンパク質;p35、p40および少なくとも1つの受容体サブユニット、例えば、IL-12Rβ1またはIL-12Rβ2を含む複合体に結合し、IL-12媒介シグナル伝達に拮抗する薬剤例えば抗体および他の結合タンパク質;およびIL-12Rβ1またはIL-12Rβ2の1つ以上の可溶性細胞外ドメインを含み、IL-12媒介シグナル伝達に拮抗する薬剤、例えば可溶性受容体。別の実施形態では、第2の薬剤はIL-23アンタゴニストである。例示的なIL-23アンタゴニストとしては下記が挙げられる:IL-23p19およびp40を含むに結合し、IL-23媒介シグナル伝達に拮抗する薬剤例えば抗体および他の結合タンパク質;IL-23のための1つ以上の受容体、例えばIL-12Rβ1またはIL-23Rに結合し、IL-23媒介シグナル伝達に拮抗する薬剤例えば抗体および他の結合タンパク質;p19、p40および少なくとも1つの受容体サブユニット、例えば、IL-12Rβ1またはIL-23Rを含む複合体に結合し、IL-23媒介シグナル伝達に拮抗する薬剤例えば抗体および他の結合タンパク質;およびIL-12Rβ1またはIL-23Rの1つ以上の可溶性細胞外ドメインを含み、IL-23媒介シグナル伝達に拮抗する薬剤、例えば可溶性受容体。IL-23に対する例示的な抗体は記載されている。例えば、BeyeretalJMolBioldoi101016jjmb200808001を参照されたい。動物モデル受容体結合剤は、動物モデルにおいて、ヒト疾患、例えば、ヒト自己免疫および/またはヒト炎症性疾患に対し評価することができる。薬剤は、動物体内の対応する標的タンパク質に対し特異性を有し得る。関節リウマチモデル.受容体結合剤は、関節リウマチの動物モデル、例えば、コラーゲン誘発関節炎CIAモデルにおいて評価することができる。例えば、McIndoeetal1999ProcNatlAcadSciUSA9622102214IssekutzACetalImmunology88569およびCurrentProtocolsinImmunologyUnit155ColiganetalJohnWileySonsIncを参照されたい。モデルは、ラット/マウスの感受性株の天然II型コラーゲンによる免疫化により生成される。コラーゲンは、フロイント完全アジュバントCFA中で乳化させ、尾基部に皮内注射する100μgコラーゲン:100μgCFA/マウス。対照マウスには、0.05mlの蒸留水/CFAエマルジョンを皮内注射する。完全アジュバント中のコラーゲンのブースター注射を、最初の免疫化後21日に与える。疾患は、コラーゲンによる免疫化で誘導された自己免疫応答による。関節は、関節炎、炎症、パンヌス、軟骨障害および骨吸収に対し、規定されたスケールを用いてスコア化することができる。例えば、関節炎の重症度は下記の通りスコア化することができる:0=関節炎の目に見える効果なし;1=1つの指または関節の浮腫および紅斑;2=2つの関節の浮腫および紅斑;3=2を超える関節の浮腫および紅斑;4=全ての足および指の重篤な関節炎、足首の強直および肢の変形を伴う。各肢に対するスコアを合計し、各個々の動物に対する関節炎指標AIとして記録する。他のスコア化スキームもまた、これらのおよび他の基準に対し使用することができる。多発性硬化症.実験的アレルギー性脳脊髄炎EAEは、多発性硬化症に対する有用なマウスモデルである。受容体結合剤は、EAEモデルにおいて評価することができる。EAEは、T細胞および単核細胞炎症ならびにその後の、中枢神経系における軸索の脱髄により特徴づけられるT細胞媒介自己免疫障害である例えば、BoltonC1995MultipleSclerosis143を参照されたい。例示的なプロトコルは、CurrentProtocolsinImmunologyUnit151and152ColiganetalJohnWileySonsIncにおいて見いだすことができる。モデルはまた、ミエリン疾患に有効であり、この場合、例えば、Duncanetal1997MolecMedToday554561で記載されるように、オリゴデンドロサイトまたはSchwann細胞が中枢神経系中にグラフトされる。同種移植片.受容体結合剤は、動物モデルにおいて皮膚同種移植片拒絶に対し、例えば、マウス尾部-皮膚グラフトを用いて評価することができる。皮膚同種移植片拒絶はT細胞、ヘルパーT細胞およびキラー-エフェクターT細胞により媒介される。例えば、CurrentProtocolsinImmunologyUnit44Coliganetal1995JohnWileySonsIncを参照されたい。他の移植片拒絶モデルもまた使用することができる。例えば、Tinubuetal1994JImmunol43304338を参照されたい。IBDおよび大腸炎モデル.炎症性腸疾患に対する例示的なモデルは、SCIDマウスに移植されたCD4CD45Rb-高細胞の使用である。例えば、HiranoetalJPharmacolSci2009Jun11016981を参照されたい。および、トランスジェニックIL-10欠損マウスの使用である。例えば、InabaetalInflammBowelDisDOI101002ibd21253を参照されたい。さらに別の例示的な大腸炎モデルはデキストラン硫酸ナトリウムDSSを使用して、急性大腸炎を誘発する。例えば、大腸炎はマウスにおいて、5wt/volのDSS分子量30-40kDa;ICNBiomedicals,Aurora,OHを含む飲料水を自由に投与することにより誘発することができる。この処置に起因する症状は、血性下痢、体重減少、結腸短縮および好中球浸潤による粘膜潰瘍である。DSS誘発大腸炎は、炎症性細胞の固有層への浸潤リンパ球過形成、限局性陰窩損傷、および上皮潰瘍を伴うにより組織学的に特徴付けられる。これらの変化は、DSSの上皮への毒性効果により、および固有層細胞の食作用ならびにTNF-αおよびIFN-γの産生により現れると考えられる。例えば、HassanetalPLoSOne2010Jan255e8868を参照されたい。ドライアイ疾患モデル.受容体結合剤は、ドライアイ疾患に対するマウスモデルで評価することができる。ドライアイはマウスにおいて、スコポラミンを皮下注射し、その後、マウスを環境制御チャンバに入れることにより誘発することができる。具体例として、正常で健康な6~10週齢の雌C57BL/6マウスを、環境制御チャンバ内で乾燥環境に連続して暴露させることにより、ドライアイを有するように誘発することができる。チャンバは、30未満一般に約19の低い相対湿度、高い空気流15リットル/分および一定温度約22°Cを有する。チャンバ内に置かれたマウスはまた、スコポラミンで処置され、涙分泌が阻害される。持続放出経皮スコポラミンパッチはNovartisSummit、N.J.から入手可能である。パッチの4分の1が脱毛されたマウスの中尾部に48時間毎に適用される。環境制御チャンバおよびスコポラミンの組み合わせにより重篤なドライアイが比較的短い期間約2-4日で生じる。環境制御チャンバは、BarbinoetalInvestOphthalVisSci4627662711に記載されるように準備することができ、空気流、湿度、および温度の制御が可能である。マウスは、ドライアイの徴候について、例えば、下記を実行することにモニタすることができる:a涙液産生を測定するためのコットンスレッドテストこれは、一般にドライアイ患者では減少する;b角膜フルオレセイン染色これは角膜表面損傷のマーカーである;および一般的な眼検査。コットンスレッドテスト:涙液産生は、フェノールレッドが含浸されたコットンスレッドテストにより測定することができるZone-Quick、Lacrimedics、Eastsound、Wash。拡大蛍光ランプの下、糸を宝石ピンセットで保持し、30または60秒間右眼の結膜円蓋の側方の眼角内に入れる。涙の距離を顕微鏡下、血球計のスケールを使用してmmで読み取る。角膜フルオレセイン染色:角膜フルオレセイン染色は、マイクロピペットにより眼の下結膜嚢中に、1.0μlの5フルオレセインを適用することにより評価することができる。角膜は、細隙灯生物顕微鏡により、フルオレセイン滴下後3分でコバルトブルー光を用い検査される。点状染色を、角膜表面が分割された5つの領域の各々に対し、0-3の標準化NationalEyeInstituteNEIグレーディングシステムを使用してマスキング様式で記録する。診断および他の用途本明細書で記載される受容体結合剤は、試料中のIL-1R1、またはそのような受容体を発現する細胞を検出するために使用することができる。例えば、薬剤は、標識である、またはシグナルを生成する部分、例えば酵素、放射標識、エピトープ、または蛍光タンパク質例えば、緑色蛍光タンパク質で直接または間接的に標識することができる。薬剤は、試料または細胞と接触させることができ、例えば、標準免疫ブロット、免疫蛍光、酵素免疫測定EIA、ラジオイムノアッセイRIA、蛍光エネルギー移動、Westernブロット、および他の診断および検出技術を用いて、受容体が試料中または細胞上に存在するかが決定される。受容体結合剤はまた、インビボ検出のために標識し、被験体に投与することができる。被験体は、例えば、NMRまたは他の断層撮影手段により画像化することができる。例えば、結合剤は、放射標識、例えば131I、111In、123I、99mTc、32P、125I、3H、14C、および188Rh、蛍光標識、例えばフルオレセインおよびローダミン、核磁気共鳴活性標識、ポジトロン放出断層撮影PETスキャナにより検出することができるポジトロン放出同位体、ケミルミネサー例えばルシフェリン、および酵素マーカー、例えばペルオキシダーゼまたはホスファターゼで標識することができる。薬剤は、コントラスト剤、例えば常磁性剤および強磁性または超常磁性これらは主にT2応答を変化させるで標識することができる。受容体結合剤はまた、結合する受容体を発現する細胞を精製するために使用することができる。例えば、受容体結合剤は、固定されたサポート例えば、磁性ビーズまたはカラムマトリクスに結合され、受容体を発現し得る細胞に接触され得る。サポートは例えば、生理的緩衝液で洗浄することができ、細胞はサポートから回収することができる。受容体結合剤はまた、それが結合する受容体の可溶性形態を精製するために使用することができる。例えば、可溶性受容体を含む試料は、固定された受容体結合剤に接触させられ、その後、例えば、洗浄後、固定された薬剤から回収することができる。下記非制限的実施例は、本明細書で記載される本発明の実施形態をさらに説明する。実施例1表4下記に列挙されるアミノ酸配列を有するタンパク質をコードする核酸を、T7プロモーターおよびアンピシリンpET31シリーズまたはカナマイシン抵抗性遺伝子pET28シリーズを含むpETベクターにおいて構築しEMDChemicals,GibbstownNJ,USA、発現させた。発現のために使用することができるコード配列の例を表5で提供する。上記タンパク質をコードする例示的な核酸配列は表5に列挙される。いくつかの実施形態では、核酸配列はさらに、下記で列挙される第1のヌクレオチドの前にATGを含む。いくつかの実施形態では、核酸配列はさらに、下記で列挙される最後のヌクレオチドの後に終止コドン例えばTAA、TAG、またはTGAを含む。タンパク質は、下記で示されるようにIL-1βおよびIL-1Ra由来の異なる残基の範囲を含むことができる。例P01、P02、P03、P04、およびP05の間で、サイトカインドメインは、IL-1β由来の48-70残基およびIL-1Ra由来の55-78残基を有することができる。多くのアミノ酸残基が2つのタンパク質間で保存されているので、IL-1βおよびIL-1Raに対するパーセンテージ同一性の和は、100を超える可能性がある。実施例2ヘキサヒスチジンタグを含むタンパク質を、大腸菌細胞BL21DES株中で、1mMIPTGを用いて37°Cで3時間、LBブロス培地において誘導することにより、発現させた。細胞を、20-50mMTris、0.5MNaCl、2.5mMEDTA、0.1TritonX-100、pH8.0中で溶解させた。ライセートをHiTrap登録商標プレパックドカラムGEHealthcare、PiscatawayNJ、USAを用いるIMACクロマトグラフィーに供した。タンパク質を20mMリン酸ナトリウム、0.5MNaCl10mMイミダゾール、pH7.4緩衝剤中にロードした。200mMイミダゾール、20mMリン酸ナトリウム、0.5MNaClpH7.4緩衝剤を用いて溶離させた。溶離させたタンパク質を、PBS、0.1ポリソルベート80、pH7.4に対して広く透析し、AmiconUltra登録商標10Kフィルタを用いて濃縮し、4°または-80°Cで貯蔵した。ヘキサヒスチジンタグを欠くタンパク質を、イオン交換クロマトグラフィーにより精製した。P05タンパク質を、イオン交換クロマトグラフィーにより精製した。発現細胞由来のライセートをGigaCapS商標カラムTosohBioscienceLLC、KingofPrussia、PA、USAに、低pHおよそpH5.5で、塩なしで伝導率およそ1mS/cm適用した。カラムをその後、pH勾配緩衝剤A=10mM酢酸、pH5.5;緩衝剤B=20mMTrispH8により溶離した。溶離タンパク質を含む5ml画分をその後、5mlのH2Oおよび5mlの20mMTrispH8で希釈し、その後、CaptoQ商標樹脂GEHealthcare、PiscatawayNJ、USAに適用し、0mM~250mMのNaCl勾配を含む20mMTrispH8.0で溶離した。溶離タンパク質を、1.25XPBS0.1TWEEN登録商標80または1.25XPBSがないTWEEN登録商標に対して広く透析し、貯蔵した。図6を参照されたい。P03およびP04タンパク質を、同様の方法を用いて精製した。P05を発現する細胞もまた、10g/Lグルコース、10mMMgSO4、微量要素1mg/mlTEKNOVA商標1000X微量要素、T1001、Sartorius2LBIOSTAT商標A中の抗生物質が補充された、動物質を含まないソイトーンT7660を有するTEKNOVA商標TerrificBroth中で増殖させ、OD35-40で、1mMIPTGと共に約6時間誘導した。細胞を37°Cで、30溶解酸素と共に、pH7.0で増殖させ、200-800rpmで撹拌させ、2L/分で酸素散布した。pH増加により検出されるようにグルコースが欠乏した場合、細胞に9gグルコース/L/hrを供給する。pHが減少した場合誘導後約2.5時間、供給を6gグルコース/L/hrに減少させる。細胞を収集し、溶解緩衝剤20mMTris、10mMEDTA、0.1Triton、pH8.0;20mMTris、10mMEDTA、0.1Triton、pH7.0;50mMMOPS、10mMEDTA、0.1Triton、pH6.5;または50mMMOPS、10mMEDTA、0.1Triton、pH6.0中に溶解した。ライセートをPorosXS登録商標カチオンイオン交換培地LifeTechnologiesCorp.、CarlsbadCAUSA上に、pH5.3で、3mS/cm35mg生成物/mlカラム樹脂でロードする。例示的な手順では、P05タンパク質は、100mMMOPS25mMNaClpH7.0を含む緩衝剤を使用して、pH7.0まで1ステップにより溶離する。第1の溶離ピークを廃棄し、第2の溶離ピークをプールに収集し、これはP05タンパク質を含んだ。初期プールは、des-Ala種に対し、無傷なP05タンパク質に富む。この溶離された材料をその後、CaptoQ商標アニオン交換樹脂上に流す。無傷なP05タンパク質を含むフロースルーを収集する。別の例示的な手順では、培地を、100mMMOPS20mMNaClpH6.0で洗浄する。P05タンパク質を100mMMOPS50-58mMNaClpH6.0を含む緩衝剤を使用してpH6.0まで1ステップにより溶離する。第1溶離ピークをその後のピークから分離し、無傷なP05タンパク質を含んだ。この溶離された材料をその後、CaptoQ商標アニオン交換樹脂上に流す。無傷なP05タンパク質を含むフロースルーを収集する。実施例3タンパク質またはタンパク質を含む上清を細胞ベースアッセイにおいてIL-1活性に対し評価した。HEK-Blue商標IL-1β応答性細胞を使用して、IL-1β活性をモニタしたInvivoGenInc.,SanDiegoCA,USAから入手可能。これらの細胞は、5つのNF-κBおよび5つのAP-1結合部位に融合されたIFN-βミニマルプロモーターの制御下、SEAPレポーター遺伝子を含む。細胞表面上のIL-1受容体のIL-1β結合は、NF-κB活性化およびSEAP生成を引き起こす。SEAPレポートは、例えば、QUANTI-Blue商標InvivoGenInc.、SanDiegoCA、USAおよび分光光度分析を用いて検出することができる。HEK-BlueIL-1β細胞懸濁液を、70-80コンフルエンスまで培養した細胞から調製した。再懸濁させた細胞を、新鮮な増殖培地DMEM、4.5g/lグルコース、2mML-グルタミン、10v/v熱不活性化胎仔ウシ血清56°Cで30分、50U/mlペニシリン、50μg/mlストレプトマイシン、100μg/mlNormocinT中、約330,000細胞/mlに調節した。下記試薬を平底96ウェル細胞培養プレートのウェルに50μlの最終体積まで添加した:10μlのIL-1β20ng/ml、1μlの対象の薬剤および30μlの細胞培地。陽性および陰性対照試料を、同時に調製した。その後、150μlのHEK-BlueIL-1β細胞懸濁液約50,000細胞を各ウェルに添加し、プレートを一晩中37°Cで、5CO2組織培養インキュベーターにおいて培養した。一般に、最終IL-1β濃度200μl最終体積中は0.1ng/mlであった。IL-1β活性を次の日評価した12-15時間後。定量化前、QUANTI-Blue商標試薬を、製造者の指示に従い調製した。平底96-ウェルアッセイプレートを調製した。この場合、150μlのQUANTI-Blue商標溶液を各ウェルに添加した。96ウェル組織培養プレートのウェルからの50μlの馴化培地を、アッセイプレートの各ウェルに添加した。プレートを、37°Cでおよそ15-20分間インキュベートした。SEAPレベルをその後、分光光度計を用いて620-655nmで測定した。結果.図7Aに示されるように、このアッセイでは、P06タンパク質はIL-1RIアゴニストとして挙動し、P07タンパク質は、部分アゴニストとして挙動し、P01タンパク質は、刺激することができなかった。実際、P01タンパク質は、IL-1βの存在下でアッセイすると、アンタゴニストとして挙動した。図7Bはある範囲のIL-1βタンパク質濃度での、上記HEKBlue商標細胞アッセイを使用した、P01によるIL-1β活性の拮抗作用を示す。拮抗作用は、P01量の増加に伴い増加したx軸は、P01を含む上清のマイクロリットルを反映する。タンパク質P01、P02、P03、P04、およびP05はそれぞれ、IL-1β活性に拮抗した。例えば、8Aおよび8Bを参照されたい。P05のIC50は、約5ng/ml未満であった。P05はこのアッセイにおいてIL-1RIを刺激する能力に対し試験したが、試験した最高濃度、1mg/mlでも、検出可能なアゴニスト活性を有することは観察されなかった。P01、P02、P03、P04、およびP05はまた、MG-63細胞、IL-1βに応答するヒト骨肉腫細胞系において、IL-1β誘導IL-6発現を阻害した。ドライアイ疾患のマウスモデルでは、ヘキサヒスチジンタグが付けられたP05は、生物活性を有することが観察された。タグが付けられていないP05については、下記実施例8も参照されたい。実施例4可溶性組換えヒトIL-1RIに対するタンパク質の結合特性IL-1RIの細胞外ドメインに対応するを、表面プラズモン共鳴を用い、ReichertSR7000DCDualChannelSPRシステムにより評価した。結合は、0.005Tween20を有するリン酸緩衝生理食塩水中で評価した。IL-1βは、8-9nMのKDおよび2-3×10-3s-1の解離定数Kdを有することが観察され、別の実験では、約2nMのKD、1.3-1.5×106M-1s-1の会合定数および約2.9-3.0×10-3s-1の解離定数Kdであった。図9Aを参照されたい。P01タンパク質は、IL-1βと同様の結合動力学で結合したが、結合実験の解離相中解離しなかった約180秒。よって、P01タンパク質はIL-1RIに、同様の条件下では、IL-1βよりも大きな親和性で結合した。IL-1Raの結合は、約0.33nMのKD、約2×105M-1s-1の会合定数Ka、および約6.6×10-5s-1の解離定数Kdを有することが観察された。図9Bを参照されたい。キメラサイトカインドメインP01、P02、P03、P04、およびP05は、約12-1700pMの範囲のKD、約3×104M-1s-1~3×106M-1s-1の範囲の会合定数Kaおよび約2×10-5~1×10-3s-1の範囲の解離定数Kdを有することが観察された。例えば図9Cおよび9Dならびに下記表7を参照されたい。実施例5追加の例示的なキメラIL-1ファミリータンパク質はまた、下記を含む:下記ポリペプチドは、IL-1α由来の少なくとも2つのセグメントおよびIL-1Ra由来の少なくとも2つのセグメントを含むキメラドメインである。実施例6循環置換IL-1キメラドメインは、分子のN-末端をC末端に、リンカー配列を用いて結合させ、末端の各々に対し新しい場所を選択することにより構築することができる。IL-1β由来の末端を有するタンパク質では、リンカー長は、5~10、例えば、約7アミノ酸とすることができる。新規末端の好ましい場所は、受容体から外方にあるループ、例えばβ6-β7ループ例えば、SEQIDNO:1の71-80に対応するアミノ酸またはβ7-β8ループ例えば、SEQIDNO:1の84-99に対応するアミノ酸内にある。そのような循環置換されたIL-1キメラドメインの例としては下記が挙げられるDKPTLQLESVDPKNYPKKKMEKRFVFNKIEINNKLEFESAQFPNWFLCTAMEADQPVSLTNMPDEGVMVTKFYMQFVSSGGSGGGSAPVRSLNCRIWDVNQKTFYLRNNQLVAGYLQGPNVNLEEKFSMSFVQGEESNDKIPVALGLKEKNLYLSCVLKDおよびNYPKKKMEKRFVFNKIEINNKLEFESAQFPNWFLCTAMEADQPVSLTNMPDEGVMVTKFYMQFVSSGGSGGGSAPVRSLNCRIWDVNQKTFYLRNNQLVAGYLQGPNVNLEEKFSMSFVQGEESNDKIPVALGLKEKNLYLSCVLKDDKPTLQLESVDPK。実施例7タンパク質P03、P04、P05、mIL-1RaメチオニルIL-1Ra、およびIL-1βをリン酸緩衝生理食塩水PBS、pH7.4中、0.5mg/mlで調製した。タンパク質をSYPROオレンジ染料Invitrogen、CAと、ストック濃度の1:500希釈で合わせ、示差走査蛍光定量に供した。例えば、HeetalJPharmSciences9917071720を参照されたい。蛍光測定値をAgilentMx3005QPCR機器を用いてモニタしながら、温度を25°Cから95°Cまで、1°C/分で増加させた。融解温度Tm値を、蛍光遷移の一次導関数の最大値から誘導した。タンパク質P03、P04、およびP05は、50°C超の、および59°Cもの高さのアンフォールディングの開始、ならびに59、60、62、および64°C超のTmを有することが観察された。結果を下記表8および図10A10Bに示す:P04は、mIL-1RaおよびIL-1βよりも約4度高いTmを有し、mIL-1Raよりも約3度高いおよびtIL-1βよりも約10度高いアンフォールディングの開始を示す。P03およびP05は、mIL-1RaおよびIL-1βよりも約9度高いTmを有し、mIL-1Raよりも約11度高いおよびIL-1βよりも約18度高いアンフォールディングの開始を示す。実施例8精製P05ヘキサヒスチジンタグを欠くを1.25xPBS中で調製し、ドライアイ疾患のマウスモデルで試験した。このモデルでは、JacksonLaboratoriesからの6~10週齢雌C57BL/6マウス≧30相対湿度、ヒドロゲル栄養補助食品、および乾燥envirodry環境強化を有する動物保持室中で1~2週間順化させたを、フルオレセイン染色に対し0日にプレスクリーニングした。フルオレセイン染色では、WFIH2O中、10mg/mLで希釈した、新たに作製したフルオレセインを0.4μLで各眼に投与した。投与のおよそ8-13分後、眼をOlympus蛍光手術用顕微鏡を用いてスコア化した。点状染色を0-3の標準化NationalEyeInstituteNEIグレーディングシステムを用いて、角膜表面が分割された5つの領域の各々に対して記録したスコア範囲0-15/眼。ティーチングブリッジを使用して、二人のマスキングされた得点係が、マウスを同時に評価し、各眼に対し単一の集団スコアを与えた。各眼に対しスコア≦715の最大スコアからを有するマウスをドライアイチャンバ20±2湿度および一定空気流約21L/min/ケージに1日に置き、このチャンバ内で実験の過程中検査を除き維持した。3日に、マウスを再びスコア化し、ランダムに8~10マウス/群の治療群とした。マウスは、4~5マウスの各ケージが大体同じ平均疾患スコアを有するようにランダム化した。3日に開始し、ランダム化後、マウスに、P05またはビヒクル1.25XPBSを点眼薬において3μL/眼BID頻度で局所投与した。マウスを7、9、および11日に、角膜フルオレセイン染色に対し、上記で記載したように検査し、スコア化した。得点係は実験の過程中、治療群について知らされなかった。図11Aは下記bid治療下の2つの同一実験のマウスに対する0、3、7、9、および11日での平均角膜染色スコア±SEMの棒グラフである:処置なし、ビヒクル1.25XPBS、および10mg/ml1P05。10mg/mlP05は実験の7、9、および11日に著しく角膜染色を減少させた。角膜染色の減少により評価される有効性はまた、0.1mg/mlP05という少ない用量でも観察された。大腸菌中で生成される組換えIL-1Raもまた、動物モデルにおいて角膜染色を中程度に減少させた。図11Bに示されるように、10mg/mlP05の効果は、同じビヒクル中の10mg/mlマウス血清アルブミンとの比較に基づき特異的であった。ビヒクルに対し、10mg/mlマウス血清アルブミンMSAでは、効果は見られず、10mg/mlP05の効果は、10mg/mlマウス血清アルブミンに対し統計学的に有意であった。図11Cに示されるように、10mg/mlP05をまた、眼用エマルジョン中の0.05シクロスポリンRestasis登録商標と比較した。約1週間のbid投与後では、P05は角膜染色を減少させたが、0.05シクロスポリン眼用エマルジョンでは効果は観察されなかった。実施例9捕獲ステップが、BLRDE3大腸菌細胞における発酵により生成されたP05の精製のために開発されている。溶離条件は、1mLカラム上での実験アプローチDOEの統計学的設計により規定した。最適条件を、中間規模10mLカラムで実施した。生成物を、10mMEDTAが添加された20mMTris、pH7.0からなる溶解緩衝剤中でのマイクロフルイダイゼーションにより抽出させる。澄んだライセートを、pH5.3および3mS/cmの伝導率に調整する。調整済みライセートを、PorosXS強カチオン交換樹脂に、2分の滞留時間で、25-30mgP05/mLカラムの容量まで、ロードする。カラムを平衡緩衝剤で洗浄し、未結合種を除去する。pH6.0および3mS/cmでの第2の洗浄を実施し、不純物集団を除去する。生成物を、pH6.0および6.6mS/cmで溶離する。生成物関連種を、pH6.0および12.4mS/cmで溶離する。カラムを高塩濃度緩衝剤およびNaOHで清浄にする。P05は17kDaタンパク質であり、pIは6.58.である。des-ALA種のpIは6.8であり、分析用弱カチオン交換クロマトグラフィーにより容易に分離される。この種は、大腸菌内で見いだされるアミノペプチダーゼP活性の生成物である可能性がある。種は質量分析、ペプチドマッピング、およびHPLC方法により同定することができる。クロマトグラフィー材料.PorosXSは、公称50μm粒子サイズを有する架橋ポリスチレン-ジビニルベンゼンビーズに基づく。クロマトグラフィーマトリクスは、スルホプロピル表面化学を有し、結合中の塩の上昇レベルを許容するように設計された。PorosXSCN4404339、LifeTechnologies材料を、バルクスラリーとして獲得し、5×50mmTricornカラムCN28-4064-09、GEHealthcareに充填し、最終カラム体積は1mL5cm床高さとし、または10×150mmTricornカラムCN28-4064-16、GEHealthcareに充填し、最終体積10.5mL13.4cm床高さとした。緩衝剤.全ての緩衝剤を、容量的にMilliQ水を用いて調製した。所望のpHを達成するために、10NHClまたは1MNaOH10mNaOHのストック溶液から生成を添加して、緩衝剤を滴定した。沈殿後、全ての緩衝剤を0.2μmPESボトルトップフィルタを通して濾過した。全てのpHおよび伝導率測定は、室温約20-25°Cで実施した。PorosXS緩衝剤:CEX平衡緩衝剤-1Lの緩衝剤あたり、0.57mLの氷酢酸および2.44gのNaClを添加することにより作製した21mMNaClを有する10mM酢酸HoAC。最終pHは5.3であり、最終伝導率は3mS/cmであった。CEX洗浄緩衝剤-1Lの緩衝剤あたり、19.5gのMOPS遊離酸、1.5gのMOPSナトリウム塩、および1.28gのNaClを添加することにより作製した、22mMNaClを有する100mMMOPS。最終pHは5.7-6.6要望通りであり、最終伝導率は3mS/cmであった。CEX溶離緩衝剤-1Lの緩衝剤あたり、19.5gのMOPS遊離酸、1.5gのMOPSナトリウム塩、および6.93gのNaClを添加することにより作製した、118mMのNaClを有する100mMMOPS。最終pHは5.7-6.6要望通りであり、最終伝導率は12.4mS/cmであった。CEXストリップ緩衝剤-1Lの緩衝剤あたり、0.57mLの氷酢酸および175gのNaClを添加することにより作製された、3MNaClを有する10mM酢酸。最終pHは5.3であり、最終伝導率は188mS/cmであった。ライセート調製.ライセートのpHを、1Lの緩衝剤あたり11.5mLの氷酢酸を混合することにより作製した、pH4.5の200mM酢酸を使用して調整した。1MNaOHを使用して溶液を滴定して、4.5の最終pHとした。この溶液を、濃または強酸の低pHによる局所沈殿を回避するために使用した。これらの実験のためのロード材料は、2L流加バイオリアクター運転からの抽出物とした。細胞ペレットからの生成物の抽出は、20mMTris、pH7.010mMEDTAが添加されているを用いて実施した。新しい抽出物をMilliQ水典型的には1:1-1.5希釈で希釈し、3mS/cmの伝導率とした。希釈された抽出物を、-20°Cで41mLアリコート中凍結させた。ロードを調製するために、アリコートを室温で解凍し、pH5.3まで、pH4.5の200mMの酢酸を用いて滴定した。滴定後、必要に応じてMilliQ水の添加により、小さな伝導率の調節を実施した。最終的に、CEX平衡緩衝剤を使用してロードを2.5×希釈し、約1.7g/Lの濃度とした。ロードを、0.8/0.2μmフィルタを通して無菌濾過した。調整したロードを、調製した同じ日に使用した。宿主細胞タンパク質決定.宿主細胞タンパク質HCPレベルを、大腸菌発現系に特異的な酵素結合免疫吸着測定法ELISAキットCNF410、CygnusTechnologiesにより決定した。キットと共に供給されたプロトコルに正確に従った。HCPレベルに対してアッセイされる試料を、試料希釈剤CNI028、CygnusTechnologiesを用いて10×の最小希釈で希釈した。試料は典型的には2回希釈で実施し、各希釈に対し2組でプレーティングする。HCPレベルは、百万分率ppmまたはng-HCP/mg-生成物の観点で表される。SDS-PAGE分析.ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動SDS-PAGEによる純度分析では、1mm×10ウェルまたは1mm×15ウェルNuPAGE4-12BisTrisゲルそれぞれ、CNNP0322BoxおよびNP0323Box、Invitrogenのいずれかを使用する。泳動用緩衝剤は20×濃度から調製した1×MESSDS泳動用緩衝剤であるCNNP0002、Invitrogen。Novex鋭着色タンパク質標準CN57318、Invitrogenを分子量指標として使用する。分析のための試料を、MilliQ水による希釈により調製し、最終体積30μLとし、10μLの4×ドデシル硫酸リチウムLDSCNNP0008、Invitrogenを添加し、1×の最終濃度とした。試料をボルテックスにより5秒間混合した。A280/A320測定から得られた計算タンパク質濃度を基に、3μg/ウェルの標的をロードした。wCEX.P05を弱カチオン交換クロマトグラフィーwCEXにより、DionexProPac登録商標WCX-104x250mmカラム製品番号054993を用いて、1.2mL/minの流速で、10mM酢酸ナトリウムpH5.5緩衝剤Aおよび10mM酢酸ナトリウムpH5.5、250mMNaCl緩衝剤Bの移動相溶液を用いて評価した。勾配は20分にわたる10B~25Bである。無傷なP05は、des-Ala種の前およそ1.5~2.5分に、勾配の後期で溶離する。カチオン交換捕獲クロマトグラフィー.クロマトグラフィーを、AKTAExplorer100クロマトグラフィーシステム上で実施した。10mLのPorosXSカラムを充填した。材料を、40mgのP05/mlでロードし、または25-30mgのP05/mlでロードすることができる。クロマトグラフィー方法を表9でまとめて示す。滞留時間をローディングおよび溶離ステップ中2分で一定に維持した。ニセの溶離プールを作製し、生成物回収、HCPレベル、および無傷なタンパク質に対しアッセイした。合計2回の実行を10mLカラム上、30および35のB、pH6.0を用いて完了した。洗浄2は、主に不純物からなるピークとなる。30および35Bによる溶離1は、SDS-PAGE分析により>95純粋生成物となる。洗浄2の塩濃度は、少量だけ増加させることができ、溶離ピーク上の肩が除去される。実施例10P04を精製し、回折品質結晶を25PEG1500、0.1MPCBpH4.0中、20°Cで成長させた。タンパク質は、空間群P212121で結晶化し、典型的な単位セル寸法は、a=44.5、b=46.4、c=64.8であった。結晶は高分解能まで回折し、1.47Åまで拡張するデータベースをAdvancedPhotonSource、ビームラインLS-CAT21ID-FChicagoIL、USAで収集した。P04のX線構造を、分子置換によりPDB構造1ITBおよび1IRA由来の知られているIL-1βおよびIL-1Ra構造の関連部分を組み込むモデルを使用して解明したNature386190194andSchreuderetalNature386194200。最終モデルを17.6/20.4のRwork/Rfreeに精密化し、これは1のP04分子140残基および98の水分子を含む表10。P04残基1-2、48-49および85-93は、電子密度では見えず、最終モデルでは欠けている。P04結晶構造は、モデリングにより予測されるものと同様の折り畳みを有する。この構造の図を図1に示す。2つの構造のオーバーレイを図12Aに示す。バックボーン炭素に対するRMSDは、それぞれの親分子上の同じ残基と対比して、IL-1βおよびIL-1Raセグメントでは1.41Åおよび1.09Åであった。P04は、IL-1β由来の残基とIL-1Ra由来の対応物の間の相互作用に関与する少なくとも1つの独特な塩橋および2つの独特な水素結合を有する:iGlu39-Lys64IL-1RA由来のGlu39;IL-1β由来のLys64図12Bに示される、iiArg9-Gln149IL-1RA由来のArg9;IL-1β由来のGln149図12Cに示される、およびiiiSer152-Lys40IL-1RA由来のSer152;IL-1β由来のLys50図12Cに示される。これらの独特な相互作用は、P04の増加した熱安定性を説明することができる、というのも、これらの相互作用はIL-1βおよびIL-1Ra構造には存在しないからである。これらの相互作用に関与する残基はまた、P03およびP05、同様に増加した熱安定性を有するタンパク質においても存在する。他の実施形態は下記特許請求の範囲内にある。"