"明細書中に記載の発明。発明の要旨本発明の組成物および方法は、オリゴヌクレオチドおよび少なくとも1つの共有結合した脂質基を含む、テロメラーゼ阻害化合物に関する。本発明の化合物は、非改変オリゴヌクレオチドと比較して、優れた細胞取り込み特性を有する。これは、上記非改変形態と比較して、より少ない量の結合オリゴヌクレオチドの使用で、同等の生物学的効果を獲得し得ることを意味する。ヒトの治療用の設定に適用される場合、このことは毒性危険性の低減、および費用節約に言い換えられ得る。本発明の化合物は、細胞癌細胞を含むにおいてテロメラーゼを阻害し、それによる効果は、上記細胞の増殖を阻害することである。したがって、本発明の化合物の第一の適用は、癌治療としての適用であり、そして本発明は、このように利用し得る上記化合物の薬学的な処方を提供する。本発明は例えば、以下の項目を提供する。項目1以下の構造:O-x-Lnを含む化合物であって、Oは、ヒトテロメラーゼRNA配列配列番号1に対して相補的な、少なくとも5塩基を含む、オリゴヌクレオチドであり;xは、任意のリンカーであり;Lは、脂質部分であり;そしてnは、1~5の整数であり、n>1である場合、各々のx-L成分は独立して選択される、化合物。項目2項目1に記載の化合物であって、Oは、ヒトテロメラーゼRNA配列配列番号1に対して相補的な、少なくとも10塩基を含む、化合物。項目3項目2に記載の化合物であって、Lは、置換脂肪酸、非置換脂肪酸およびステロールからなる群より選択される脂質を含む、化合物。項目4項目3に記載の化合物であって、Lは、フッ素で置換された脂肪酸である、化合物。項目5項目2に記載の化合物であって、Lは、置換炭化水素もしくは非置換炭化水素である、化合物。項目6項目5に記載の化合物であって、Lは、フッ素で置換された炭化水素である、化合物。項目7項目1に記載の化合物であって、n=1であり、そして前記x-L成分は、前記オリゴヌクレオチドOの5’末端に対して共有結合する、化合物。項目8項目1に記載の化合物であって、n=1であり、そして前記x-L成分は、前記オリゴヌクレオチドOの3’末端に対して共有結合する、化合物。項目9項目1に記載の化合物であって、n=2であり、1つの独立して選択されたx-L成分は前記5’末端に共有結合し、そして1つの独立して選択されたx-L成分は前記3’末端に共有結合する、化合物。項目10項目1に記載の化合物であって、n=1であり、そして前記x-L成分は前記オリゴヌクレオチドOの核酸塩基に共有結合する、化合物。項目11項目1に記載の化合物であって、前記オリゴヌクレオチドOのヌクレオシド間の結合は、N3’→P5’ホスホラミデート結合である、化合物。項目12項目1に記載の化合物であって、前記オリゴヌクレオチドOのヌクレオシド間の結合は、N3’→P5’チオホスホラミデート結合である、化合物。項目13項目1に記載の化合物であって、オリゴヌクレオチドOは、ヒトテロメラーゼRNA配列配列番号1に対して相補的な、少なくとも10塩基を含む、化合物。項目14項目1に記載の化合物であって:前記オリゴヌクレオチドOのヌクレオシド間の結合は、N3’→P5’チオホスホラミデート結合であり;Oの配列は、ヒトテロメラーゼRNA配列配列番号1に対して相補的な、少なくとも12塩基を含み;n=1であり;x-Lは、Oの5’末端もしくは3’末端に共有結合し;そして、Lは、脂肪酸である、化合物。項目15項目14に記載の化合物であって、xは、グリセロールリンカーもしくはアミノグリセロールリンカーである、化合物。項目16項目15に記載の化合物であって、該化合物の構造は、以下:である、化合物。項目17項目14に記載の化合物であって、Lは、アミド結合を通じて前記オリゴヌクレオチドLの3’末端に直接的に結合する、化合物。項目18項目17に記載の化合物であって、該化合物の構造は、以下:である、化合物。項目19テロメラーゼ酵素の活性を阻害する方法であって、該方法は、該テロメラーゼ酵素と項目1に記載の化合物とを接触させる工程を包含する、方法。項目20細胞内においてテロメラーゼ酵素の活性を阻害する方法であって、該方法は、該細胞と項目1に記載の化合物とを接触させる工程を包含する、方法。項目21項目20に記載の方法であって、前記細胞は、癌細胞である、方法。項目22癌細胞の増殖を阻害する方法であって、該方法は、該細胞と項目1に記載の化合物とを接触させる工程を包含する、方法。項目23薬学的に受容可能な賦形剤で処方される、項目1に記載の化合物を含む、薬学的組成物。項目24医療における、項目1に記載の化合物の使用。項目25癌を処置するための、項目1に記載の化合物の使用。本発明の化合物は、以下の式:O-x-Lnにより表され得、Oはオリゴヌクレオチドを表し、xは任意のリンカー基であり、Lは脂質部分を表し、そしてnは1~5の整数である。代表的には、n=1もしくはn=2であるが、n>1である場合、それぞれの脂質部分Lは独立して選択される。上記脂質部分は、代表的には、3’末端および5’末端のうちの1つもしくはn=2の場合、それぞれにおいてオリゴヌクレオチドに共有結合するが、他の部位1つもしくはそれ以上の塩基を含むにも結合し得る。上記脂質基Lは、代表的には、脂肪族炭化水素もしくは脂肪酸炭化水素および脂肪酸の誘導体を含むであり、例えば、14個~20個の炭素を有する飽和直鎖化合物例えば、ミリスチン酸C14、テトラデカン酸としても公知、パルミチン酸C16、ヘキサデカン酸として公知、およびステアリン酸C18、オクタデカン酸として公知であり、およびそれらの脂肪族炭化水素形態の相当物、テトラデカン、ヘキサデカンおよびオクタデカンに加えて、誘導体アミンおよびアミド誘導体である。使用され得る他の適切な脂質基の例は、ステロール例えば、コレステロール、および置換脂肪酸および置換炭化水素であり、特に、これらの基のポリフッ化形態である。オリゴヌクレオチド成分Oは、リボ核酸またはデオキシリボ核酸、あるいはそれらの改変形態であり、そして核酸塩基を連結する結合は、任意の適合する化学的作用例えば、以下のものが挙げられるが、これらに限定されない:ホスホジエステル結合;ホスホトリエステル結合;メチルホスホネート結合;P3’→N5’ホスホラミデート結合;N3’→P5’ホスホラミデート結合;N3’→P5’チオホスホラミデート結合;およびホスホロチオエート結合によりなされ得る。N3’→P5’ホスホラミデート化学およびN3’→P5’チオホスホラミデート化学が、好ましい。上記オリゴヌクレオチド成分Oの配列は、テロメラーゼRNA成分の配列の選択された標的領域に対して相補的好ましくは、正確に相補的である、少なくとも1つの配列領域を含む。特定の実施形態において、上記オリゴヌクレオチド成分Oの配列は、ヒトテロメラーゼRNA成分の以下の領域:hTRこの配列は、配列番号1において提供される46~56、137~196、290~319、および350~380の、1つの領域内の配列に相補的である、配列領域を含む。hTRのある領域に対して正確に相補的であるO成分内の配列の長さは、好ましくは少なくとも5塩基であり、より好ましくは少なくとも8塩基であり、さらにより好ましくは少なくとも10塩基である。さらなる配列領域が、hTRに対して必ずしも相補的ではないO成分に付加され得るが、これらはさらなる有利な機能を提供し得る。本発明の例示的な化合物としては、以下の構造で示される化合物が挙げられ、O成分はN3’→P5’チオホスホラミデートのヌクレオシド間結合を有し、そしてhTR配列番号1の第42塩基~第54塩基と正確に相補的である。第1の例示的な構造:において、脂質部分であるLは、パルミトイルアミドパルミチン酸に由来するであり、アミノグリセロールリンカーを通じて、オリゴヌクレオチドOの5’チオリン酸基に結合する。第2の例示的な構造:において、Lは、オリゴヌクレオチドの3’アミノ基を通じて、パルミトイルアミドに結合する。本発明の化合物これらの例示的な化合物を含むは、対応する非改変オリゴヌクレオチドと比較して、優れた細胞取り込み特性を有し、それゆえ、細胞のテロメラーゼ活性のより効果的なインヒビターであることが示される。これらの特性の結果として、本発明の化合物は、癌細胞増殖の極めて効果的なインヒビターである。本発明の化合物は、テロメラーゼ酵素の活性を阻害するための方法において使用され得る。このような方法は、テロメラーゼ酵素と本発明の化合物とを接触させる工程を包含する。本発明の化合物は、テロメラーゼを発現する細胞においてテロメラーゼを阻害し、それにより、そのような細胞の増殖を阻害するためにも使用され得る。このような方法は、テロメラーゼ活性を有する細胞と本発明の化合物とを接触させる工程を包含する。このように処理された細胞は、インビトロでの細胞であってもインビボでの細胞であっても、一般にテロメラーゼ短縮を起こし、そして増殖を中止する。癌細胞は長期間の増殖のためにテロメラーゼ活性を必要とするので、本発明の化合物は、癌細胞の増殖を阻害するのに特に有用であり、そして癌を処置するための治療用適用で使用され得る。したがって、本発明の局面は、医療での使用のためそして特に癌の処置における使用のために本明細書中に記載されるような化合物を含む。本明細書中ではまた、薬学的組成物を提供し、それは、薬学的に受容可能な賦形剤で処方される本発明によるオリゴヌクレオチド結合体を含む。配列表添付の配列表の配列番号1は、ヒトテロメラーゼRNA成分hTRFengら、Science2695228:1236-1241、1995、およびGenBank、登録番号U86046、もまた参照のことを提供する。種々のオリゴヌクレオチドそれらの配列は、配列番号1の中に含まれる領域に相補的であるは、それらが相補的である配列番号1の中の配列の位置を参照することにより、本開示全体にわたって参照される。詳細な説明A.定義アルキル基とは、1個~20個の炭素原子を有するアルキル基もしくは置換アルキル基例えば、メチル、エチル、プロピルなどをいう。低級アルキルとは、代表的にはC1~C5をいう。中級アルキルintermediatealkylは、代表的にはC6~C10をいう。アシル基とは、RCOの構造を有する基をいい、ここでRはアルキルである。低級アシルは、Rが低級アルキルである、アシルである。アルキルアミン基とは、窒素の結合したアルキル基例えば、1-メチル1-ブチルアミンCH3CHNH2CH2CH2CH3をいう。アリール基とは、5個~20個の炭素原子を有する芳香族環基例えば、フェニル、ナフチル、アンスリルanthrylをいう。または置換アリール基例えば、トリル、エチルフェニル、ビフェニリル、などのようなアルキル置換体もしくはアリール置換体基である。環の中に1個以上の窒素原子、酸素原子、もしくは硫黄原子を有する複素環式芳香環基もまた、含まれる。オリゴヌクレオチドとは、約2個と約200個との間の連続したサブユニットを有する、リボースおよび/またはデオキシリボースヌクレオシドサブユニットポリマーをいう。上記ヌクレオシドサブユニットは、種々のサブユニット間結合例えば、ホスホジエステル結合、ホスホトリエステル結合、メチルホスホネート結合、P3’→N5’ホスホラミデート結合、N3’→P5’ホスホラミデート結合、N3’→P5’チオホスホラミデート結合、およびホスホロチオエート結合が挙げられるが、これらに限定されないによって結合され得る。さらに、オリゴヌクレオチドは、当業者に公知である、糖への改変例えば、2’置換、塩基への改変以下のヌクレオシドの定義を参照のこと、ならびに3’末端および5’末端への改変を含む。オリゴヌクレオチド部分が複数のサブユニット間結合を含むオリゴヌクレオチド部分における実施形態では、各々の結合が同じ化学を用いて形成され得るか、または混合された結合化学が用いられ得る。本明細書中で用いられる場合、用語ポリヌクレオチドはは、オリゴヌクレオチドと同様の意味を有し、そしてオリゴヌクレオチドと交換可能に使用される。オリゴヌクレオチドが文字の配列例えば、ATGUCCTGによって表される場合は常に、ヌクレオチドが左から右に5’→3’の順であると理解される。このようなオリゴヌクレオチドの塩基配列の表現は、オリゴヌクレオチドにおけるヌクレオシド間サブユニットのいかなる特定の型の使用も示さない。本明細書で使用される場合、ヌクレオシドは、天然のヌクレオシド2’-デオキシ形態および2’-ヒドロキシル形態例えば、KombergおよびBaker、DNAReplication、第2版Freeman、SanFrancisco、1992に記載が挙げられる、および類似体を含む。ヌクレオシドに関して、類似体は、改変された核酸塩基部分以下の核酸塩基の定義を参照のことを有する合成ヌクレオシド、および/または改変された糖部分を有するヌクレオシド例えば、Scheit、NucleotideAnalogsJohnWiley、NewYork、1980によりおおむね記載されるを含む。このような類似体は、結合特性例えば、安定性、特異性、または同様のもの例えば、UhlmannおよびPeymanChemicalReviews、90:543-584、1990によって開示されるものを増強するように設計された合成ヌクレオシドを含む。用語脂質は、有機溶媒に可溶であるが、仮にそうであるとしても水にはわずかに溶ける物質を包含するように、本明細書中で広く使用される。用語脂質としては、炭化水素、油、脂肪例えば、脂肪酸、グリセリド、ステロール、ステロイド、およびこれらの化合物の誘導体の形態が挙げられるが、それらに限定されない。好ましい脂質は、脂肪酸およびそれらの誘導体、炭化水素およびそれらの誘導体、ならびにステロール例えば、コレステロールである。本明細書中で使用される場合、用語脂質はまた、脂質部分および親水性部分の両方を持つ、両親媒性化合物を含む。脂肪酸は、通常、直鎖に偶数個の炭素原子を含み一般に、12個~24個の炭素、そして飽和でも不飽和でもあり得、種々の置換基を含み得るか、または置換基を含むように改変される。単純にするために、用語脂肪酸はまた、脂肪酸の誘導体例えば、図2A例えば、図1A~図1Eに示される化合物を参照のことで示される合成スキームにより生成される脂肪族アミドを包含する。本明細書中で使用される場合、用語炭化水素は、共有結合で結びついた水素および炭素のみから成る化合物を包含する。用語炭化水素は、鎖式脂肪族炭化水素直鎖炭化水素および分枝鎖炭化水素を含む、および飽和炭化水素ならびにモノ不飽和炭化水素およびポリ不飽和炭化水素を包含する。この用語はまた、1個以上の芳香環を含む炭化水素も、包含する。用語置換置換されたとは、1つの原子が別の原子と交換されることによって改変されている化合物をいう。特に、この用語置換は、とりわけ1個以上の水素原子がフッ素で置換されるハロゲン化炭化水素およびハロゲン化脂肪酸に関連して用いられる。本明細書中で使用される場合、核酸塩基は、i代表的なDNAおよびRNA核酸塩基ウラシル、チミン、アデニン、グアニン、およびシトシン、ii改変された核酸塩基または核酸塩基類似体例えば、5-メチル-シトシン、5-ブロモウラシル、またはイノシン、およびiii核酸塩基類似体を含む。核酸塩基類似体は化学物質であり、その分子構造は、代表的なDNA塩基またはRNA塩基の分子構造を模倣している。本明細書中で使用される場合、ピリミジンは、天然のヌクレオシド中に存在するピリミジンシトシン、チミン、およびウラシルを含む、およびそれらの類似体例えば、オキシ、メチル、プロピニル、メトキシ、ヒドロキシル、アミノ、チオ、ハロ、および置換基を含むものを意味する。本明細書中で使用される場合、この用語は、保護基と結合したピリミジン例えば、N4-ベンゾイルシトシンを、さらに含む。さらなるピリミジン保護基は、BeaucageおよびIyerTetrahedron48:223-2311、1992によって開示される。本明細書中で使用される場合、プリンは、天然のヌクレオシド中に存在するプリンアデニン、グアニン、およびヒポキサンチンが挙げられる、およびそれらの類似体例えば、オキシ、メチル、プロピニル、メトキシ、ヒドロキシル、アミノ、チオ、ハロ、および置換基を含むものを意味する。本明細書中で使用される場合、この用語は保護基と結合したプリン例えば、N2-ベンゾイルグアニン、N2-イソブチリルグアニン、N6-ベンゾイルアデニンなどを、さらに含む。さらなるプリン保護基は、BeaucageおよびIyerによって開示されている上で引用。本明細書中で使用される場合、化学名の成分としての用語保護とは、化合物の特定の部分として技術的に認識art-recognizedされる保護基をいい、例えば、ヌクレオシドに関連して5’-保護-ヒドロキシルとしては、トリフェニルメチルすなわち、トリチル、p-アニシルジフェニルメチルすなわち、モノメトキシトリチルもしくはMMT、ジ-p-アニシルフェニルメチルすなわち、ジメトキシトリチルもしくはDMT、などが挙げられる。技術的に認識される保護基としては、以下の参考文献において記載されるものが挙げられる:Gait編、OligonucleotideSynthesis:APracticalApproachIRLPress、Oxford、1984;AmarnathおよびBroom、ChemicalReviews、77:183-217、1977;Ponら、Biotechniques、6:768-775、1988;Ohtsukaら、NucleicAcidsResearch、10:6553-6570、1982;Eckstein編、OligonucleotidesandAnalogues:APracticalApproachIRLPress、Oxford、1991;GreeneおよびWuts、ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis、第2版、JohnWileySons、NewYork、1991;Narang編、SynthesisandApplicationsofDNAandRNAAcademicPress、NewYork、1987;BeaucageおよびIyer上で引用、などの参考文献。用語ハロゲンまたはハロは、その慣用的な意味において、クロロ置換基、ブロモ置換基、フルオロ置換基、またはヨード置換基をいうように使用される。本明細書中で記載および特許請求される化合物において、ハロゲン置換基は、一般に、フルオロ、ブロモ、またはクロロであり、好ましくは、フルオロまたはクロロである。B.発明化合物の設計本発明の化合物は、以下の式:O-x-Lnにより表され得、Oはオリゴヌクレオチドを表し、xは任意のリンカー基であり、Lは脂質部分を表し、そしてnは1~5の整数である。したがって、上記化合物の設計は、2つの実体、OおよびLの選択、そしてそれらの実体の間の構造的結合の決定を必要とし、それらは任意のリンカー基xに関わり得る。Oの選択オリゴヌクレオチド成分Oは、テロメラーゼのRNA成分に結合することによりテロメラーゼ酵素の阻害に影響するものがこの成分である、という点で、化合物のエフェクター成分として考えられ得る。したがって、Oの配列は、テロメラーゼRNAの配列これは、配列番号1に示されるに対して相補的である領域を含むように選択される。テロメラーゼRNA成分に対して相補的な領域は、理論上は上記テロメラーゼRNAの任意の部分を標的とし得るが、上記テロメラーゼRNAの特定の領域が、阻害性オリゴヌクレオチドのための好ましい標的である。1つの好ましい標的領域は、配列番号1のヌクレオチド30~67にわたる領域であり、これはテンプレート領域配列番号1のヌクレオチド46~56にわたる配列5’-CUAACCCUAAC-3’の11ヌクレオチド領域を含む。上記テンプレート領域は、テロメラーゼが染色体末端へ付加するテロメア反復配列を特定するように機能し、テロメラーゼ酵素の活性に不可欠である作用をするChenら、Cell、100:503-514、2000;Kimら、Proc.Natl.Acad.Sci.、USA9814:7982-7987、2001を参照のこと。したがって、上記テンプレート領域の全てまたは一部に対して相補的な配列を含むオリゴヌクレオチド部分を含む本発明の化合物が、特に好ましい。別の好ましい標的領域は、hTRPruzanら、Nucl.AcidsResearch、30:559-568、2002を参照のことのヌクレオチド137~179にわたる領域である。この領域内では、141~153にわたる配列が、好ましい標的である。PCT公開WO98/28442において、テロメラーゼを阻害するための、長さが少なくとも7ヌクレオチドのオリゴヌクレオチドの使用が記載されており、そのオリゴヌクレオチドは、テンプレート領域の外側のhTR配列のアクセス可能な部分hTRのヌクレオチド137~196、290~319、および350~380が挙げられるに対して相補的であるように設計される。hTR配列を標的とするOの領域は、好ましくは対応するhTR配列に対して正確に相補的である。特定の事例ではミスマッチが許容され得るが、ミスマッチは結果として生じるオリゴヌクレオチド結合体の、特異性および活性を減少させると予期される。したがって、特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドOの塩基配列は、テロメラーゼRNAに対して正確に相補的である少なくとも5ヌクレオチドの配列を含むように選択され、そして、テロメラーゼRNAに対して正確に相補的な、少なくとも8ヌクレオチド、少なくとも10ヌクレオチド、少なくとも12ヌクレオチド、少なくとも13ヌクレオチド、または少なくとも15ヌクレオチドのような、増加した長さの相補配列使用される場合、増強されたテロメラーゼ阻害が得られ得る。他の実施形態において、オリゴヌクレオチドの配列は、テロメラーゼRNA配列に対して正確に相補的な、少なくとも5~20ヌクレオチド、少なくとも8~20ヌクレオチド、少なくとも10~20ヌクレオチド、または少なくとも10~15ヌクレオチドを含む。最適なテロメラーゼ阻害活性は、オリゴヌクレオチドOの全長がテロメラーゼRNAに対して相補的であるように選択された場合に、得られ得る。しかしながら、オリゴヌクレオチド成分の全長が標的領域に対して必ずしも正確である必要はなく、そしてオリゴヌクレオチド配列は標的領域に対して相補的でない配列を含み得る。このような領域は、例えば、化合物に他の特性を付与するために付加され得る;例えば、精製を容易にする配列である。オリゴヌクレオチド成分Oが標的領域に対して相補的でない配列を含む場合、このような領域は、代表的には、5’末端または3’末端の一方もしくは両方に位置づけられる。例えば、正確な相補性の領域がテンプレート領域を標的する事例では、テロメラーゼ様Gに富む配列がその5’末端に結合される、正確に相補的な短い5~8ヌクレオチド領域で、効果的なテロメラーゼ阻害が達成され得る。ヒトテロメラーゼRNAに対して相補的であり、その配列がオリゴヌクレオチド成分Oの一部として含まれ得るか、またはオリゴヌクレオチド成分O全体として使用され得る例示的な配列は、以下が挙げられる:。上記O成分の合成で使用されるヌクレオシド間結合の型の選択は、利用可能な化学例えば、以下のものが挙げられるが、これらに限定されない:ホスホジエステル結合;ホスホトリエステル結合;メチルホスホネート結合;P3’→N5’ホスホラミデート結合;N3’→P5’ホスホラミデート結合;N3’→P5’チオホスホラミデート結合;およびホスホロチオエート結合のうちのいずれかからなされる。好ましい実施形態では、上記オリゴヌクレオチド成分Oは、少なくとも1つのN3’→P5’ホスホラミデート結合またはN3’→P5’チオホスホラミデート結合を有し、これらの結合は、以下の構造:3’-[-NH-P=O-XR-O-]-5’およびそれらの薬学的に受容可能な塩により表され得、ここでXは、OまたはSであり、Rは、水素、アルキル、およびアリールからなる群より選択される。一般的に、しかし必然的ではなく、オリゴヌクレオチドO内のすべてのヌクレオシド間結合は同様の型となり得るが、オリゴヌクレオチド成分は、異なる結合の混合を使用して合成され得る。脂質部分が上記オリゴヌクレオチドの3’末端に結合される場合、その結合の合成は、オリゴヌクレオチド上の3’アミノ基により、大いに促進される。それゆえ、たとえ好ましい化学のうちの1つが選択されない場合でも、3’アミノ基の付加は有利である。Lの選択本発明の化合物は、脂質成分と結合していない対応するオリゴヌクレオチドよりも、細胞内でテロメラーゼ阻害を生じるのに有効である。脂質成分Lは、とりわけ細胞膜を通じる通過を促進することにおいて、化合物の細胞取り込みを増強するように機能すると考えられる。このことが生じる機構は、完全には解明されていないが、1つの可能性は、脂質成分が、単分子形態もしくは凝集ミセル形態のいずれかとしてその後の内在化を使って、化合物が細胞膜に結合するのを容易にさせ得る。しかしながら、正確な機構の理解は、本発明が使用されるのには必要とされない。脂質成分は、非改変オリゴヌクレオチドと比較して、増強された細胞取り込みを提供する任意の脂質または脂質誘導体であり得る。好ましい脂質は、炭化水素、脂肪例えば、グリセリド、脂肪酸、および脂肪酸誘導体例えば、脂肪アミド、ならびにステロールである。脂質成分が炭化水素である場合、L成分は、置換もしくは非置換の環状炭化水素または脂肪族直鎖もしくは分枝炭化水素であり、これらは飽和もしくは不飽和であり得る。好ましい例は、直鎖非分枝炭化水素であり、それは完全に飽和もしくはポリ不飽和である。炭化水素鎖の長さは、C2~C30で変わり得るが、炭素鎖がC8~C22で、最適なテロメラーゼ阻害が得られ得る。飽和炭化水素アルカンの好ましい例は、以下:に列挙される。炭化水素のモノ不飽和形態およびポリ不飽和形態アルケンおよびポリエン例えば、アルカジエンおよびアルカトリエンもまた選択され、1個~3個の二重結合を有する化合物が好ましいが、より多くの二重結合を有する化合物も用いられ得る。アルキン1個以上の三重結合を含むものおよびアルケニン三重結合および二重結合もまた、利用され得る。利用され得る一般的なモノ不飽和炭化水素およびポリ不飽和炭化水素の例としては、図1M、図1Lおよび図1Oで示されるものが挙げられる。炭化水素の置換形態が、本発明の化合物で用いられ得、インビボおよびインビトロで不活性な置換基を伴うことが、好ましい。特に好ましい置換基は、フッ素である。ポリフッ素化炭化水素の例示的な一般構造としては、以下:CF3CF2n-CH2m-ここで、mは少なくとも1、好ましくは少なくとも2であり、そしてn=1~30例えば、フロオロトリデカン:CF3CF29CH23;およびCH3CH2aCF2bCH2c-ここで、a、b、およびcは、独立して1~30であるが挙げられる。図1Wは、オリゴヌクレオチドの5’末端に結合した、ポリフッ素化炭化水素の例を示す。他の適切な脂質成分としては、脂肪酸および脂肪酸誘導体、グリセリドならびにステロール例えば、コレステロールのような、より複雑な脂質が挙げられる。脂肪酸およびそれらの誘導体は、完全に飽和しているか、もしくはモノ不飽和またはポリ不飽和であり得る。炭素鎖の長さは、C2~C30で変わり得るが、C8~C22の炭素鎖で、最適なテロメラーゼ阻害が得られ得る。飽和脂肪酸の好ましい例は、以下:に、列挙される。脂肪酸のモノ不飽和形態もしくはポリ不飽和形態もまた用いられ得、1個~3個の二重結合を有する化合物が好ましいが、より多くの二重結合を有する化合物も用いられ得る。利用され得る一般的なモノ不飽和脂肪酸およびポリ不飽和脂肪酸の例としては、以下:が、挙げられる。炭素鎖内に1個以上の三重結合のある脂肪酸および分枝した脂肪酸も同様もまた、本発明の化合物において用いられ得る。脂肪酸の置換形態が、本発明の化合物で用いられ得る。炭化水素基と同様に、インビボおよびインビトロで不活性な置換基が好ましく、フッ素は特に好ましい。ポリフッ素化誘導体の例示的な一般構造は、以下:CF3CF2n-CH2mCO-;およびCH3CH2aCF2bCH2cCO-が挙げられ、ここで、mは少なくとも1、好ましくは少なくとも2であり、そしてn=1~30であり、a、b、およびcは、独立して、1~30である。脂肪酸のポリフッ素化誘導体を有する本発明の化合物の例は、図1Uおよび図1Vに示される。代表的に、1~5の間のL成分n=1~5は、必要に応じてリンカーを介してO成分に共有結合する。より一般的には、1つまたは2つのL成分が、利用されるn=1または2。1つより多いL成分がO成分に結合する場合、各々のL成分は独立して選択される。L部分として特定の炭化水素を有すると記載される本発明の化合物と、特定の脂肪酸特定の炭化水素と同じ数の炭素原子を含むを有すると記載される化合物とは、密接に関係し、そして構造においてL部分がオリゴヌクレオチドに結合する結合の性質のみが異なるこれは、言い換えると、その化合物を生成するために使用する合成手順であると理解される。例えば、以下により詳細に記載されるように、オリゴヌクレオチドホスホラミデートもしくはチオホスホラミデートのヌクレオシド間結合を有するの3’アミノ末端に結合するL部分を有する化合物が合成される場合、出発物質としての脂肪酸のアルデヒド形態脂肪アルデヒドの使用は、脂質鎖とオリゴヌクレオチドの間でアミン結合の形成を生じ、その結果、脂質基は炭化水素として現れる。対照的に、同様の脂肪酸のカルボン酸形態、酸無水物形態もしくは酸塩化物形態の使用は、アミド結合の形成を生じ、その結果、脂質基は脂肪酸誘導体、特にこの例においては脂肪アミド上述の定義の節に記載されるように、簡略化のために、用語脂肪酸は、結合したL基を記載する場合、脂肪アミドを含む脂肪酸誘導体を含むように、本明細書中で広く使用されるとして現れる。これは、以下の図式および図2Aならびに図2C:で図示され、これはC14脂質成分に結合するホスホラミデートオリゴヌクレオチドの3’アミノ末端を示す。図式Aにおいて、Lはテトラデカン酸ミリスチン酸であり、L基とO基との間の結合は、アミドである。図式Bにおいて、Lはテトラデカンであり、そしてL基とO基との間の結合は、アミンである。O成分とL成分との結合O成分とL成分との間の結合は、直接的な結合であるか、または任意のリンカー部分xを介した結合であり得る。リンカー基は、化合物の化学合成を容易にするのに役立ち得る以下の合成の節で議論される。リンカー基がO成分とL成分との結合を仲介しなくても、オリゴヌクレオチド成分O上に、L成分が共有結合し得る複数の部位がある。適切な結合点としては、5’末端および3’末端、1個以上の糖環sugarring、ヌクレオシド骨格、およびオリゴヌクレオチドの核酸塩基が挙げられる。代表的には、L部分はオリゴヌクレオチドの3’末端または5’末端に結合する。L成分が3’末端に結合する場合、その結合は、3’置換基に対して直接的であり得、この3’置換基は好ましいホスホラミデートおよびチオホスホラミデートオリゴヌクレオチドの場合では、3’アミノ基例は、図1A~図1Cに示されるであり、そして他の場合例は、従来のホスホジエステルオリゴヌクレオチドでは、3-ヒドロキシ基である。あるいは、L部分は3’結合リン酸基を介して結合し得る例は、図1Zに示され、その例では、ヘキサデカン炭化水素は、O-アルキルリンカーを通じて、チオホスホラミデートオリゴヌクレオチドの3’リン酸に結合する。L部分が5’末端に結合する場合、L部分は、代表的には5’結合リン酸基を通じて結合する図1Fアミノグリセロールリンカーの使用を示す、および図1Gビス-アミノグリセロールリンカーの使用を示すを参照のこと。O部分の塩基への結合は、任意の適切な原子例えば、グアノシンのN2アミノ基図1Q~図1Rを参照のことを通してであり得る。n>1のとき、複数の脂質部分がO成分に結合し、独立して選択されるL成分が、任意の適切な部位に結合し得る。例えば、1つのL基が各末端に結合しても、種々のL基が塩基に結合しても、2つ以上のL基が一方の末端で結合してもよい図1E、図1J、図1Kを参照のこと。任意のリンカー成分xは、化合物のO成分とL成分とを結合させるために、使用され得る。リンカーが用いられる場合、それは図2に対する説明文に記載されるように、合成手順に組み込まれる。適切なリンカー基の例としては、アミノグリセロール型リンカーおよびO-アルキルグリセロール型リンカーが挙げられ、これらは、それぞれ、以下の一般式:によって、示され得る:ここで、R’=H、OH、NH2またはSHであり;Y=O、SまたはNRであり;R=Hまたはアルキルであり;そしてnおよびmは1~18の間の独立した整数である。適切なリンカーの具体的な例は、アミノグリセロールリンカー、ビス-アミノグリセロールリンカー、およびO-アルキルグリセロールリンカーであり、アミノグリセロールリンカーについては、R’=OHであり、Y=Oであり、そしてmおよびnは、それぞれ1であり:ビス-アミノグリセロールリンカーについては、R’=OHであり、Y=NHであり、そしてmおよびnはそれぞれ1であり:O-アルキルグリセロールリンカーについては、R=Hである:C.本発明の化合物の例本発明の化合物の例は、図1に示される。簡単にするために、オリゴヌクレオチドOの1塩基のみ示され、それとともに一般的な塩基Bで示され、そしてRはオリゴヌクレオチドの残りの部分に対する結合点を示す。3’末端に結合する化合物は、3’窒素とともに示され、この3’窒素は、好ましいチオホスホラミデートおよびホスホラミデート化学と一致する。図1A~図1Lは、5’末端もしくは3’末端に結合した飽和脂質基を有する化合物を示す。図1M~図1Pは、モノ不飽和脂質基またはポリ不飽和脂質基を有する化合物を示す。図1Q~図1Rは、塩基を通じてオリゴヌクレオチドこの場合、グアノシンと結合した脂質基を有する化合物を示す。図1Sおよび図1CCは、それぞれ、3’結合コレステロール脂質部分および5’結合コレステロール脂質部分を示す。図1Uおよび図1Vは、5’結合ポリフッ素化置換脂肪酸誘導体を示し、そして図1Wは、5’結合ポリフッ素化炭化水素を示す。図1X~図1Zは、酸素を含む、5’脂質部分を示す。示される脂質基の各々について、本明細書で使用される命名法は、以下:図1A:3’-ミリストイルアミド図1B:3’-パルミトイルアミド図1C:3’-ステアロイルアミド図1D:3’-パルミトイルアミド-プロピル-チオホスフェート図1E:3’-リシル-ビス-ステアロイルアミド図1F:5’-パルミトイルアミド-アミノグリセロール-チオホスフェート図1G:5’-パルミトイルアミド-ビス-アミノグリセロール-チオホスフェート図1H:5’-ステアロイルアミド-アミノグリセロール-チオホスフェート図1I:3’-ドデシル図1J:3’-ビス-ドデシル図1K:3’-ビス-デシル図1L:3’-エイコサノイルアミド図1M:3’-オレイニルアミド図1N:3’-リノレニルアミド図1O:3’-リノレイルアミド図1P:3’-トリチル図1Q:N2-テトラデシルグアノシン図1R:N2-オクタデシルグアノシン図1S:3’-コレステリルアミド-アミノグリセロール-チオホスフェート図1T:5’-12-OH-ステアロイル-チオホスフェート図1U:5’-C11-テフロン登録商標-チオホスフェート図1V:5’-C13-テフロン登録商標-チオホスフェート図1W:5’-OH-C10-テフロン登録商標-チオホスフェート図1X:5’-OH-パルミチル-チオホスフェート図1Y:5’-バチル-チオホスフェート図1Z:3’-バチル-チオホスフェート図1AA:3’-パルミトイルアミド-アミノグリセロール-チオホスフェート図1BB:3’-チオクチルアミド図1CC:5’-コレステリルアミド-アミノグリセロール-チオホスフェート図1DD:5’-2-OH-ヘキサデカノール-チオホスフェートである。D.本発明の化合物の合成本発明の化合物のオリゴヌクレオチド成分は、選択される化学の型についての標準的なプロトコルを使用して、合成され得る。好ましいN3’→P5’ホスホラミデート化学およびN3’→P5’チオホスホラミデート化学を有するオリゴヌクレオチドの合成法は、それぞれ、McCurdyら、1997TetrahedronLetters、38:207-210、およびPongraczGryaznov、1999TetrahedronLetters、49:7661-7664に記載される。種々の合成アプローチが、選択される結合の性質に依存して脂質部分Lをオリゴヌクレオチドに結合させるように使用され得る。そのアプローチとしては、Mishraら、1995BiochemicaetBiophysicaActa、1264:229-237、Sheaら、1990NucleicAcidsRes.18:3777-3783、およびRumpら、1998Bioconj.Chem.9:341-349に記載されるアプローチが挙げられる。本発明の化合物の合成脂質部分がオリゴヌクレオチドの5’末端もしくは3’末端に結合するは、適切な末端もっとも代表的にはアミノ基において適切な官能基の使用を通じて達成され得、その官能基はカルボン酸、酸塩化物、酸無水物、および活性エステルと反応され得る。チオール基もまた、官能基として適切であるKupiharら、2001BioorganicandMedicinalChemistry9:1241-1247を参照のこと。異なる鎖長のアミノ改変物質およびチオール改変物質の両方が、オリゴヌクレオチドの合成のために市販されている。N3’→P5’ホスホラミデート結合およびN3’→P5’チオホスホラミデート結合を有するオリゴヌクレオチドは、もっとも慣用的なオリゴヌクレオチド化学で見出される3’ヒドロキシ基ではなく3’アミン基を含み、そしてそれゆえ、これらのオリゴヌクレオチドは、上記オリゴヌクレオチドの3’末端へ脂質基を結合するための、独特の機会を提供する。脂質基を、好ましいN3’→P5’ホスホラミデート化学およびN3’→P5’チオホスホラミデート化学を用いてオリゴヌクレオチドの末端に結合させるために、種々のアプローチが使用され得る。本発明の結合化合物を生成するための合成スキームの例は、図2に示される。3’末端への結合のために、結合化合物は、完全に保護された固体支持体に結合されたオリゴヌクレオチドの遊離の3’アミノ基と、対応する酸無水物とを反応させ、その後アンモニアで脱保護し、精製することによって合成され得る。あるいは、支持体固定されたオリゴヌクレオチドの遊離の3’アミノ基への、カップリング剤例えば、カルボジイミド、HBTUまたはヨウ化2-クロロ-1-メチルピリジニウムを使用した脂質のカルボン酸のカップリングが、脂質基を結合させるために、使用され得る。これらの2つの方法により、脂質とオリゴヌクレオチドとの間にアミド結合が形成される。脂質はまた、鎖伸長の間にオリゴヌクレオチドに結合した脂質のホスホラミダイト誘導体を使用して、オリゴヌクレオチド鎖へ結合され得る。このアプローチは、脂質とオリゴヌクレオチドとを接続する、ホスホラミデート結合もしくはチオホスホラミデート結合を生じるプロピル-パルミトイル化合物および2-ヒドロキシ-プロピル-パルミトイル化合物により例証される。さらに別のアプローチは、完全に保護された支持体に結合されたオリゴヌクレオチドの遊離の3’アミノ基と、適切な脂質アルデヒドとの反応に、続いてアミン結合を生成する水酸化シアノホウ素ナトリウムによる還元を含む。5’末端への結合のために、オリゴヌクレオチドは改変された脂質を含む固体支持体を使用して合成され得、続いて5から3’方向でオリゴヌクレオチドが合成されるPongraczGryaznov1999に記載される。上記改変された支持体の例は、以下の図式C:において提供される。この例において、n=14の場合、脂肪酸はパルミチン酸である:3-アミノ-1,2-プロパンジオールと塩化パルミトイルとの反応に続いて、ジメトキシトリチル化およびスクシニル化により、固体支持体に結合するために使用される中間体が提供される。Rは、長鎖アルキルアミン微細孔性ガラスである。E.テロメラーゼ阻害アッセイ本発明の結合体は、テロメラーゼ酵素活性および/またはテロメラーゼ活性を有する細胞の増殖を、阻害もしくは低下せるために使用され得る。これらに関連して、酵素活性もしくは細胞増殖の阻害または低下とは、酵素または細胞が結合体で処理されていない対照実験と比較して、測定された活性がより低いレベルであることをいう。特定の実施形態において、測定された活性の阻害もしくは低下は、少なくとも10の低下もしくは阻害である。当業者は、少なくとも20、50、75、90または100の測定された活性の低下または阻害が、特定の適用に対して好ましくあり得ることを理解する。本発明の化合物のテロメラーゼを阻害する能力は、無細胞アッセイ生化学的アッセイとして言及されるおよび細胞中で決定し得る。テロメラーゼ活性を測定するための方法、および化合物のテロメラーゼを阻害する活性を決定するためのこのような方法の使用は、周知である。例えば、TRAPアッセイは、細胞抽出物系においてテロメラーゼ活性を測定するための標準的なアッセイ方法であり、そしてそれは、テロメラーゼを阻害する化合物の探索において広く用いられているKimら、Science266:2011、1997;Weinrichら、NatureGenetics17:498、1977。TRAPアッセイは、テロメラーゼ基質またはプライマーへのヌクレオチド付加によって形成される伸長産物ポリヌクレオチドへ取り込まれた、放射活性ヌクレオチドの量を測定する。取り込まれた放射能は、放射活性産物が分離されるゲルに曝した検出スクリーン例えば、ホスホリマガーPhosphorimagerスクリーンにおけるバンドの強度として、測定され得る。TRAPアッセイは、米国特許第5,629,154号、同第5,837,453号、および同第5,863,726号においても詳細に記載されており、そしてテロメラーゼ阻害化合物の活性の試験における使用は、WO01/18015を含む種々の刊行物に記載されている。加えて、以下のキットは、テロメラーゼ活性を測定するための研究目的用に市販されている:TRAPeze登録商標XKTelomeraseDetectionKitカタログs7707;IntergenCo.、PurchaseNY;およびTeloTAGGGTelomerasePCRELISAplusカタログ2,013,89;RocheDiagnostics、IndianapolisIN。生化学的アッセイにおいて、化合物がテロメラーゼを阻害する能力を測定するために好ましいプロトコルは、フラッシュプレートアッセイFlashplateassayと称される、直接的な非PCRベースの無細胞テロメラーゼアッセイであり、Asaiら、CancerResearch、63:3931-39392003に記載される。本発明の化合物が細胞中でテロメラーゼを阻害する能力は、限定された時間の間、上記化合物をテロメラーゼを発現する細胞とともにインキュベートし、次いで細胞質抽出物におけるテロメラーゼ活性を決定することにより決定され得る。細胞ベースのアッセイのために好ましいプロトコルは、Asaiら2003において記載される、細胞ベースのテロメラーゼアッセイである。このようなアッセイに適切な、テロメラーゼを発現する腫瘍細胞株としては、HME50-5Eヒト乳房上皮細胞Dr.JerryShayUniversityofTexasSouthwesternMedicalCenterにより提供される、卵巣腫瘍細胞株OVCAR-5MIISB、MilanならびにSK-OV-3AmericanTypeCultureCollection、ATCC、ヒト腎臓癌Caki-1細胞JapaneseCollectionofResearchBiosources、JCRB、ヒト肺癌1549細胞ATCC、ヒト類表皮癌A431細胞JCRB、およびヒト前立腺癌DU145細胞ATCCが挙げられる。F.細胞増殖アッセイ本発明の化合物の重要な治療用適用は、テロメラーゼを発現する細胞、特に腫瘍細胞の増殖の阻害である。細胞内でテロメラーゼ活性を阻害する本発明の化合物は、他の公知のテロメラーゼ阻害化合物のようにテロメラーゼ陽性細胞株の危機を誘発し、細胞増殖の中止および死をもたらす。しかしながら、重要であるのは、テロメラーゼを発現しない正常なヒト細胞例えば、繊維芽細胞起源のBJ細胞において、本発明の化合物で処理することにより、危機も他の毒性も誘発されないことである。化合物が腫瘍細胞の増殖を特異的に阻害する能力は、インビトロで腫瘍細胞株を使用してか、またはインビボでの異種移植動物モデルにおいて、アッセイされ得る。このような増殖曲線アッセイのために好ましいプロトコルは、Asaiら2003に記載される、短期間の細胞生存性アッセイcellviabilityassayである。治療用適用のために本発明の化合物を選択することにおいて、化合物がテロメラーゼを発現しない正常な細胞において、約10μM未満の濃度で有意な細胞毒性効果を生じないことが好ましい。本発明の化合物がインビボで腫瘍細胞の増殖を阻害する能力は、確立されたヒト腫瘍の異種移植モデルを使用して確認され得、このモデルでは、その試験化合物が腫瘍部位へ直接投与されるかまたは全身投与され、そしてその後、腫瘍の増殖が、続いて物理的に測定される。本発明の化合物で処置した動物は、平均して、腫瘍塊が最初の投薬後の一定期間の間増大し得るが、処置を続けるとともに、塊が縮小し始めることが予期される。対照的に、処置されない対照マウスは、腫瘍塊が増殖し続けることが予期される。適切なインビボ腫瘍異種移植アッセイの好ましい例は、Asaiら2003に記載される。他の例は、Scorskiら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA、94:3966-39711997およびDammら、EMBOJ.、20:6958-69682001に記載される。G.本発明の化合物の処方本発明は、テロメラーゼ活性を特異的および強力に阻害する化合物を提供し、それゆえ、それはテロメラーゼ陽性細胞例えば、腫瘍細胞の増殖を阻害するために使用され得る。極めて多種多様な癌細胞皮膚、結合組織、脂肪、乳房、肺、胃、膵臓、卵巣、子宮頚部、子宮、腎臓、膀胱、結腸、前立腺、中枢神経系CNS、網膜および血液原生腫瘍例えば、骨髄腫、白血病およびリンパ腫の癌由来の細胞が挙げられるが、テロメラーゼ陽性であることが示されている。したがって、本明細書で提供される化合物は、広範囲の悪性腫瘍を処置するのに広く有用である。さらに重要なことに、本発明の化合物は、悪性腫瘍と正常な細胞とを高度に区別し、分裂細胞を無差別に殺す薬剤に頼るもっとも最近の化学療法レジメンに伴って存在する、多くの有害な副作用を回避する、処置提供するのに有効であり得る。さらに、本発明の化合物は、同等のしていないオリゴヌクレオチドよりもより強力であり、それは本発明の化合物がより低い用量で投与され得、高められた安全性および処置の費用における有意な減少を提供することを意味する。したがって、本発明の1つの局面は、患者における癌の処置方法であり、上記患者に治療有効量の本発明の化合物を投与する工程を包含する。テロメラーゼインヒビター本発明の化合物を含むは、他の癌の処置のアプローチ原発腫瘍の外科的切除、化学療法剤および放射線処置を含むと併用して用いられ得る。治療用適用のために、本発明の化合物は、薬学的に受容可能なキャリアを用いて治療有効量で処方される。1つ以上の本発明の化合物例えば、異なるL成分もしくはO成分を有するが、任意の所定の処方物に含まれ得る。薬学的なキャリアは、固形もしくは液状であり得る。液状キャリアは、液剤、乳剤、懸濁剤および加圧組成物の調製物において使用され得る。上記化合物は、薬学的に受容可能な液状の賦形剤中に、溶解もしくは懸濁される。オリゴヌクレオチド調製物の非経口投与のための液状キャリアの適切な例としては、水これは添加物例えば、セルロース誘導体、好ましくはカルボキシメチルナトリウムセルロース溶液を含み得る、リン酸緩衝化生理食塩水PBS、アルコール一価アルコールおよび多価アルコール例えば、グリコールならびにそれらの誘導体、および油状物例えば、分画したヤシ油およびラッカセイ油が挙げられる。上記液状キャリアは、以下に挙げられる他の適切な薬学的添加物を含み得るが、これらに限定されない:可溶化剤、懸濁化剤、乳化剤、緩衝剤、増粘剤、顔料、粘性調節因子、防腐剤、安定剤、および浸透圧調節因子。化合物の非経口投与のために、上記キャリアはまた、油状のエステル例えば、オレイン酸エチルおよびイソプロピルミリステートであり得る。滅菌したキャリアは、非経口投与用の滅菌した液状形態組成物において有用である。滅菌した液状の薬学的な組成物、溶液もしくは懸濁液は、例えば、腹腔内注射、皮下注射、静脈内注射、もしくは局所注射によって利用され得る。オリゴヌクレオチドもまた、脈管内に、もしくは脈管ステントを介して、投与され得る。加圧組成物のための液状キャリアは、ハロゲン化炭化水素もしくは他の薬学的に受容可能な噴霧剤であり得る。このような加圧組成物は、吸入による送達のために脂質被包性であり得る。鼻腔内もしくは気管支内への吸入またはガス注入による投与のために、オリゴヌクレオチドは、水溶液もしくは部分的に水溶性の溶液に配合され、それは結果としてエーロゾルの形態で利用され得る。化合物は、活性化合物を含む薬学的に受容可能なビヒクルを用いて配合することにより、液剤、クリーム、またはローション剤として局所投与され得る。本発明の薬学的組成物は、任意の受容可能な用量カプセル剤、錠剤、粉剤、もしくは顆粒剤中の処方物、および水または非水性媒体中の懸濁剤もしくは液剤が挙げられるが、これらに限定されないで経口投与され得る。本発明のオリゴヌクレオチドを含む、薬学的組成物および/または処方物は、キャリア、潤滑剤、希釈剤、増粘剤、香料添加剤、乳化剤、分散剤または結合剤を含み得る。経口使用のための錠剤の場合は、一般に使用されるキャリアはラクトースおよびコーンスターチを含む。潤滑剤例えば、ステアリン酸マグネシウムもまた、一般に添加される。カプセル形態での経口投与について、有用な賦形剤としては、ラクトースおよび乾燥させたコーンスターチが挙げられる。経口の使用のために水性懸濁液が必要とされる場合、活性成分は、乳化剤および懸濁剤と組み合わされる。望ましい場合、特定の甘味剤、香料添加剤、または着色剤もまた、添加され得る。本発明の化合物は細胞浸透および組織浸透について優れた特性を有するが、それらはさらに大きな利益を提供するように例えば、リポソームキャリアにおいて処方され得る。細胞取り込みを促進させるためのリポソームの使用は、例えば、米国特許第4,897,355号および同第4,394,448号に記載される。多数の刊行物において、リポソームの処方物および調製物が記載されている。化合物はまた、付加的な浸透エンハンサー例えば、上述の脂質部分の非結合形態、脂肪酸およびそれらの誘導体を含むと混合されることにより、処方され得る。例としては、オレイン酸、ラウリン酸、カプリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、リノレン酸、ジカプリン酸塩、トリカプリン酸塩、レチノール酸塩recinleate、モノオレイン別称1-モノオレオイル-rac-グリセロール、ジラウリン、カプリル酸、アリキドン酸arichidonicacid、グリセリル1-モノカプリン酸塩、1-ドデシルアザシクロヘプタン-2-オン、アシルカルニチン、アシルコリン、モノグリセリド、ジグリセリドおよびそれらの生理学的に受容可能な塩例えば、オレイン酸塩、ラウリン酸塩、カプリン酸塩、ミリスチン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、リノレン酸塩、などが挙げられる。1つ以上の浸透増強剤を含む複合処方物が、使用され得る。例えば、胆汁酸塩は、複合処方物をなすために脂肪酸と組み合わせて使用され得る。例示的な組み合わせとしては、ケノデオキシコール酸CDCA一般的には、約0.5~2の濃度で使用されると、カプリン酸ナトリウムもしくはラウリル酸ナトリウム、一般的に、約0.5~5の濃度で使用されるとの組み合わせが挙げられる。本発明のオリゴヌクレオチドを含む薬学的組成物および/または処方物はまた、キレート剤、界面活性剤および非界面活性剤を含み得る。キレート剤としては、以下のものが挙げられるが、これらに限定されない:エチレンジアミン四酢酸EDTA二ナトリウム、クエン酸、サリチル酸塩例えば、サリチル酸ナトリウム、5-メトキシサリチル酸塩およびホモバニリン酸塩、コラーゲンのN-アシル誘導体、ラウレス-9laureth-9およびβ-ジケトンのN-アミノアシル誘導体エナミン。界面活性剤としては、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレン-9-ラウリルエーテルおよびポリオキシエチレン-20-セチルエーテル;および過フルオロ化合物の乳剤例えば、FC-43が挙げられる。非界面活性剤としては、例えば、不飽和環状尿素、1-アルキルアザシクロ-アルカノン誘導体、1-アルケニルアザシクロ-アルカノン誘導体、および非ステロイド系抗炎症剤例えば、ジクロフェナクナトリウム、インドメタシンおよびフェニルブタゾンが挙げられる。したがって、本発明の別の局面において、薬学的組成物を処方する方法が提供され、その方法は、本明細書中に記載されるような化合物を提供する工程、およびその化合物と薬学的に受容可能な賦形剤とを組み合わせる工程を包含する。好ましくは、化合物は、以下に定義されるように、薬学的純度で提供される。上記方法は、さらに、上記化合物に賦形剤の添加前もしくは添加後のいずれかに、浸透増強剤を添加する工程を包含する。上記薬学的組成物は、一般的に薬学的純度の基準に従う。薬学的調製物における活性成分として使用するために、本発明の化合物は、一般的に、それらが調製される混合物中に存在する他の反応性または潜在性の免疫原性成分と分けて精製される。代表的に、核酸ベースの化合物が活性成分である場合に薬学的純度を達成するために、その活性成分は、機能アッセイ、クロマトグラフィ、またはゲル電気泳動により決定されるように、少なくとも約50の同質性で提供され、そしてより好ましくは、60、70、80または90の同質性で提供される。次いで、上記活性成分は薬学的調製物の調製のために一般に認められた手順に従ってで、医薬中に配合される。したがって、本発明において、化合物を薬学的純度で提供する工程は、その化合物が少なくとも約50の同質性、より好ましくは少なくとも80もしくは90の同質性で提供されることを必要とする。上記薬学的組成物はまた、代表的には一定量に分けられ、そして単回用量もしくは複数回用量のいずれかで包装される。オリゴヌクレオチド化合物で処置するための投薬用件は、使用される特定の組成物、投与の経路、示される症状の重篤度、化合物の形態および処置される特定の被験体によって変化する。本発明の薬学的組成物は、処方物で、臨床的に望ましい結果を達成するのに有効な量で、被験体に投与され得る。癌の処置について、望ましい結果としては、腫瘍塊の縮小触診法または画像化法;例えば、X線撮影法、放射性ヌクレオチドスキャン、CATスキャン、またはMRIにより決定されるもの、腫瘍増殖の速度の低下、転移形成の速度の低下例えば、生検標本の組織学的解析によって決定される、生化学的マーカーの減少一般的なマーカー例えば、ESRを含む、および腫瘍特異的マーカー例えば、血清PSAを含む、ならびに生活の質の改善臨床的評価例えば、Kamofskyスコアによって決定される、進行に要する時間の増加、疾患のない生存、および全体的な生存が挙げられる。このような効果を達成するために必要とされる、一用量あたりの化合物の量および投与回数は、多くの因子疾患の適応、処置されている患者の特徴、および投与の様式が挙げられるに依存して変化する。代表的には、処方物および投与の経路は、疾患部位において、1μMと1nMとの間の化合物の局所濃度を提供する。通常、化合物は、任意の有害なharmfulまたは有害なdeleterious副作用を引き起こさずに、有効な結果を与える濃度で投与される。このような濃度は、単一用量での投与か、または1日を通じて適切な間隔において都合よいサブユニットに分割した用量の投与のいずれかによって、達成され得る。実施例以下の実施例は、本発明の化合物の合成および活性を示し、オリゴヌクレオチド成分Oが好ましいチオホスホラミデート化学もしくはホスホラミデート化学を使用して合成される。特定の実施例において、脂質部分は、リンカーとともにかまたはリンカーを伴わないかのいずれかで、3’末端もしくは5’末端または両方に結合する。これらの化合物の一般構造は、以下:のように表され得、ここで、R1およびR2は独立してHまたは脂質部分Lのいずれかであり、YはOホスホラミデートオリゴヌクレオチドまたはSチオホスホラミデートオリゴヌクレオチドであり、nは代表的には4と49との間の整数であり、そしてBは塩基それぞれのヌクレオシドサブユニットに対して独立して選択されるを表す。任意のリンカーは、本構造においては示されない。実施例1化合物の合成A.一般的な方法オリゴヌクレオチドN3’→P5’ホスホラミデートNPおよびチオホスホラミデートNPSを、ABI394合成機でアミダイト転移反応amiditetransferreactionを使用し、それぞれ、McCurdyら、1997TetrahedronLetters、38:207-210およびPongraczGryaznov、1999TetrahedronLetters49:7661-7664に記載される手順に従って、1μモルのスケールで合成した。完全に保護された単量体構成単位は、3’-アミノトリチル-ヌクレオシド-5’-2-シアノエチル-N,N-ジイソプロピルアミノヌクレオシドホスホラミダイト、具体的には、3’-デオキシ-チミジン、2’,3’-ジデオキシ-N2-イソブチリル-グアノシン、2’,3’-ジデオキシ-N6-ベンゾイル-アデノシン、および2’,3’-ジデオキシ-N4-ベンゾイル-シチジンであり、Transgenomic,Inc.Omaha、Nebraskaより購入した。3’-アミノトリチル-5’-スクシニル-ヌクレオシドを、長鎖微細孔性ガラスLCAA-CPGを含むアミノ基と結合させ、そして固体支持体として使用した。合成は、5’から3’の方向で実施した。NP骨格を有するオリゴヌクレオチドを、ヨウ素/H2O酸化段階を含む、標準的な1μMABIPerkinElmer手順を使用して合成し、NPS骨格を有するオリゴヌクレオチドを、アセトニトリル:2,6-ルチジンの1:1混合物中の二硫化フェニルアセチルPADSの0.1M溶液を硫化剤として使用する、硫黄プロトコルを使用して調製した。結合時間は、両方の型の骨格の調製に対して25秒であった。THF:イソ酪酸無水物:2,6-ルチジンの18:1:1の混合物を、キャップ形成剤として使用した。3つの方法を使用して、脂質部分をオリゴヌクレオチドに結合させた:方法i3’末端に脂質部分を導入するために、合成機でホスホラミダイト試薬を使用する結合;方法ii5’結合の生成のための伸長合成の開始前に脂質基を結合させる、改変された固体支持体前述の図式Cにおいて例示されるの使用;および方法iii固体支持体上にある状態での遊離の3’アミノ基の反応、その後の脱保護。これらの方法のさらなる詳細を、以下に提供する。オリゴヌクレオチドを、3’末端または核酸塩基に結合した脂質基に対しては濃アンモニアで、または5’末端に結合した脂質基に対しては、エタノール:濃アンモニアの1:1の混合物で、55°Cにて6時間~8時間脱保護した。この粗生成物を、PharmasiaNAP-25ゲル濾過カラムで脱塩するか、またはエタノールで1M塩化ナトリウムから沈殿させ、次いで真空中で凍結乾燥した。上記オリゴヌクレオチド生成物を、引き続いてBeckmanUltrasphereC185μ250×10mmカラムを使用して逆相HPLCによって精製した。その生成物を、2ml/分の流速で50mMの酢酸トリエチルアンモニウム中のアセトニトリルの線形勾配で溶出し、1M塩化ナトリウムからニートneatな冷エタノールでの沈殿状態でナトリウム塩へ変換した。その化合物の純度を、前述の溶媒系を使用する分析用RPHPLCおよびPAGEにより評価した。1Hおよび31PNMRスペクトルを、VARIANUnityPlus400MHz装置で記録し、そしてエレクトロスプレーイオン化質量スペクトルESIMSを、WATERSMicromassZMD質量分析計を使用して得た。B.脂質基のオリゴヌクレオチドへの結合上で述べたように、脂質基をオリゴヌクレオチドへ結合させるために、種々の方法が用いられ得る。特定の方法の詳細は、以下のとおりである:方法iこの方法では、結合した脂質基を含むホスホラミダイト試薬を、オリゴヌクレオチド合成プロセスの間に3’ヌクレオシドとして付加し、結果として脂質基がそのオリゴヌクレオチドの3’末端に結合させる。2つの脂肪酸を含むホスホラミダイトの合成およびそれに続く結合は、このアプローチを例示する。i/a3-パルミトイルアミノ-プロパン-1-O-2-シアノエチル-N,N-ジイソプロピルホスホラミダイトの合成および結合アセトニトリル-塩化メチレンの1:4混合物400mlに溶解させた1.0g13.3ミリモルの3-アミノ-プロパノールに、10mlのジイソプロピルエチルアミンおよび4.06ml13.3ミリモルの塩化パルミトイルを加えた。その反応物を一晩攪拌した後、追加の塩化メチレンを加え、そして反応物を次に、飽和炭酸水素ナトリウム、ブライン、および水で順に洗浄した。その有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、そしてエバポレートして乾燥させた。得られた500mg1.6ミリモルの白色固体を、乾燥アセトニトリルで共蒸発coevaporationさせることにより共沸させ、50mlの塩化メチレンに溶解させた。1.1mlのジイソプロピルエチルアミン4当量を加えた後、390μl1.7ミリモルの2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホラミダイトを滴下した。その反応混合物を1時間攪拌して、透明な溶液を得た。その反応混合物を、飽和炭酸水素ナトリウムおよびブラインで順に洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、そしてエバポレートして乾燥させた。その生成物を、酢酸エチル:塩化メチレン:トリエチルアミンの45:45:10v/v溶媒系を使用して、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。0.7g90のワックス様の固形物を、DNA合成機で使用する前に、P2O5でデシケーター中で乾燥させた。31PNMRCDCl3148.45ppm、ESMSMH514。DNA合成機において結合させるために、無水アセトニトリル-塩化メチレンの9:1混合物中で、0.1M溶液を調製した。この合成により、図1Dに示される結合オリゴヌクレオチドの生成のために使用した試薬が得られる。i/b3-パルミトイルアミノ-1-ヒドロキシ-プロパン-2-O-2-シアノエチル-N,N-ジイソプロピルホスホラミダイトの合成および結合1g10.97ミリモルの3-アミノ-プロパンジオールを10mlのピリジン中に懸濁し、2mlのDMF中の3.017g10.97ミリモルの塩化パルミトイルを、激しく攪拌しながら滴下した。15分間の攪拌の後、そのゲルを濾過し、風乾させた。その固体を温エタノールおよび温2-プロパノールで、白色粉末物として再結晶させた。その白色固形物をピリジンで共蒸発させ、次いで30mlの乾燥ピリジンに溶解した。2.89g8.55ミリモルの塩化DMTを加え、そしてその反応混合物を、反応をTLCで追跡しながら30分間攪拌した。メタノールでクエンチした後、ピリジンはエバポレートし、そしてその反応を炭酸水素ナトリウムで飽和した塩化メチレンからワークアップした。得られた油状物を、溶解液として4:1のヘキサン/酢酸エチルを使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した。得られた2.4g3.64ミリモルの黄色油状物をピリジンで共沸し、100mlの塩化メチレンおよび4当量のジイソプロピルエチルアミン2.5mlに溶解した。攪拌したその溶液に、920μl4ミリモルの2-シアノエチルジイソプロピルクロロホスホラミダイトを滴下した。その反応をTLCで追跡し、そして2時間後に完了したことを見出し、上記のようにワークアップした。その生成物を、酢酸エチル:塩化メチレン:トリエチルアミンの45:45:10溶媒系を使用して、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。得られた固体を、DNA合成機で使用するアセトニトリル中の0.1M溶液前に、デシケーターの中で乾燥させた。31PNMRCDCl3149.9、150.2ppm、ESMSMNa854.57。この合成物により、図1AAに示される結合オリゴヌクレオチドの生成のために使用した試薬が得られる。方法iiこの方法では、脂質部分に結合した改変された固体支持体をオリゴヌクレオチドの5’から3’への合成のための開始点として使用し、5’結合を得る。2つの改変された固体支持体の合成および使用は、このアプローチを例示する。ii/a3-パルミトイルアミノ-1-ジメトキシトリチルオキシ-2-スクシニルオキシ-プロパンの合成1g10.97ミリモルの3-アミノ-1,2-プロパンジオールを10mlのピリジンに懸濁した。2mlのDMF中の3.017g10.97ミリモルの塩化パルミトイルを、激しく攪拌しながら滴下した。15分間の攪拌の後、そのゲルを濾過し、風乾させた。その固体を温エタノールおよび温2-プロパノールで、白色粉末物として再結晶させた。その白色固形物をピリジンで共蒸発させ、次いで30mlの乾燥ピリジンに溶解した。3.2g9.46ミリモルの塩化DMTを加え、そしてその反応混合物を、反応をTLCで追跡しながら30分間攪拌した。メタノールでクエンチした後、ピリジンをエバポレートし、そしてその反応を炭酸水素ナトリウムで飽和した塩化メチレンからワークアップした。得られた油状物を、4:1のヘキサン/酢酸エチルを使用したシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。得られた2.5g3.95ミリモルの黄色油状物を30mlの塩化メチレンに溶解し、そして次いで475mgの無水コハク酸および483mgのジメチルアミノピリジンを加え、そしてその反応混合物を1時間攪拌した。その反応をTCLによりモニタリングし、そして必要な場合にはさらに無水コハク酸を加えた。その塩化メチレン溶液を冷クエン酸ナトリウム緩衝液pH=4で洗浄し、そしてその有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、次いでエバポレートして乾燥させた。得られた最終生成物は、2.0g24.9であった。ii/b3-ステアロイルアミノ-1-ジメトキシトリチルオキシ-2-スクシニルオキシ-プロパンの合成1g10.97ミリモルの3-アミノ-プロパンジオールを、10mlのピリジンに懸濁した。10mlのDMF中の3.32g10.97ミリモルの塩化ステアロイルを、激しく懸濁しながら滴下した。15分間の攪拌の後、そのゲルを濾過し、風乾させた。その固形物を温エタノールおよび温2-プロパノールで、白色粉末として再結晶させた。その白色固体をピリジンで共蒸発させ、次いで30mlの乾燥ピリジンに溶解した。2.89g8.55ミリモルの塩化DMTを加え、そしてその反応混合物を、反応をTLCで追跡しながら30分間攪拌した。メタノールでクエンチした後、ピリジンをエバポレートさせ、そしてその反応を炭酸水素ナトリウムで飽和した塩化メチレンでワークアップした。得られた油状物を、溶解液として4:1のヘキサン/酢酸エチルを使用してシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。得られた2.4g3.64ミリモルの黄色油状物を30mlの塩化メチレンに溶解し、そして次いで437mgの無水コハク酸および444mgのジメチルアミノピリジンを加え、そしてその反応混合物を1時間攪拌した。その反応物をTLCによりモニタリングし、そして必要な場合にはさらに無水コハク酸を加えた。その塩化メチレン溶液を冷クエン酸ナトリウム緩衝液pH=4で洗浄し、そしてその有機相を硫酸ナトリウム乾燥させで、次いでエバポレートさせ乾燥させた。得られた最終生成物は、1.2g14.4であった。ii/aおよびii/bにおいて合成された生成物を、次いで、以下のように、長鎖アミノ微細孔ガラスLCAA-CPGに結合させて、改変された固体支持体を生成した:100mlのペプチド合成容器において、20gのLCAA-CPGTransgenomic,Inc.、約200ミリモル/g-NH2ローディングを乾燥ジメチルホルムアミドで洗浄した。別々のフラスコ中で、5.55ミリモルの前述の上記ii/aまたはii/bで記載した生成物を、40mlのクロロホルムに溶解し、3mlのジイソプロピルエチルアミンおよび2.13g8.3ミリモルのヨウ化2-クロロ-1-メチルピリジニウムを加えた。この懸濁液をペプチド合成容器栓を開いた状態の中の乾燥CPGへ、その溶液がそのCPGを通って約半分浸漬するまで注いだ。次いで、栓と上蓋を閉じ、そして上記溶液が上記CPGを完全に覆うまで、振盪した。必要な場合は、さらにクロロホルムが加えられ得るが、その体積は最小限にとどめるようにすべきである。この容器を次いで、振盪器に配置し、そして反応を室温で一晩進行させた。CPGを濾過し、そして次いで塩化メチレン、メタノール、およびアセトニトリルで洗浄した。未反応のアミノ基を、THF-2,6-ルチジン-イソ酪酸無水物の18:1:1およびCapBN-メチルイミダゾール/THFの1:1の溶液を使用して振盪器で室温にて1時間、キャップした。さらなる濾過の後、そのビーズをメタノール、塩化メチレンおよびアセトニトリルで洗浄した。そのローディングを、メタノール過塩素酸を使用して非ブロック化したサンプルの、498nmでのジメトキシトリチルカチオンの吸光度を、標準的な方法によって決定し、そしてそれが50~60μモル/gであると見出した。一旦改変された固体支持体が生成されると、前述したようなオリゴヌクレオチド合成において、それらが使用される。このように生成されたオリゴヌクレオチド結合の例は、図1F、図1Gおよび図1Hに示される。方法iiiこの方法では、オリゴヌクレオチドの合成が完了し、そしてそれが完全に保護され、かつ固体支持体に結合したままで、その3’末端を、以下のように、脂質基の無水物iii/a、無水物iii/b、酸iii/cまたはアルデヒドiii/d形態と反応させる。iii/a遊離の3’アミノ基4μモルを含む完全に保護されたオリゴヌクレオチドに結合した固体支持体を真空中で乾燥させ、そして3mlの無水クロロホルムに懸濁した。140μl0.8ミリモルのジイソプロピルエチルアミンおよび0.4ミリモルの適切な酸塩化物例えば、122μlの塩化パルミトイルを加えた後、その混合物を2分間振盪し、そして素早く濾過し、次いでクロロホルム、メタノールおよびアセトニトリルで洗浄した。その乾燥ビーズを1ml~2mlの濃水酸化アンモニウムに懸濁し、55°Cで5時間加熱した。冷却した水酸化アンモニウム溶液濾過し、そしてエバポレートした。脂質結合生成物を、HPLCによって単離した。前述の条件を使用して、生成物をおよそ40分間溶出した。エバポレート後、この生成物を、1Mの塩化ナトリウムおよびエタノールから沈殿させて、ナトリウム塩を得た。iii/b完全に保護されたオリゴヌクレオチド1μモルに結合した乾燥固体支持体に、0.1ミリモルの適切な無水物および2mlのクロロホルム中に溶解した170μlのジイソプロピルエチルアミンを加え、その混合物を含むバイアルを一晩振盪器に置いた。濾過後、そのビーズをクロロホルム、メタノールおよびアセトニトリルで洗浄し、そして前述のように結合オリゴヌクレオチドを非ブロック化および精製した。iii/c1μモルの完全に保護されたオリゴヌクレオチドに結合した固体支持体を、2mlのクロロホルム中の、0.1ミリモルの適切な酸、25mgのヨウ化2-クロロ-1-メチルピリジニウム0.1ミリモル、および170μlのジイソプロピルエチルアミンdisopropylethylamineの溶液とともに振盪器で一晩反応させた。上記のように、洗浄、非ブロック化および精製を実施した。iii/d2mlのテトラヒドロフラン中の、0.3ミリモルの望ましいアルデヒド溶液、31.5mgのシアノホウ化水素ナトリウム、および100μlの0.5M酢酸ナトリウムを、1μモルの完全に保護されたオリゴヌクレオチドに結合した固体支持体に加え、30分間振盪器に置いた。上記のように、洗浄、非ブロック化および精製を実施した。方法ivこの方法では、脂質基を、オリゴヌクレオチドの末端ではなく、鎖上の核酸塩基例えば、グアノシンに結合させる。これらの化合物は、上記のように、従来のオリゴヌクレオチド鎖伸長プロトコルを使用して合成されるが、共有結合した脂質基で改変された塩基例えば、図2Eに示されるの組み込みも使用した。このような脂質基が核酸塩基に結合した化合物の例は、図1Qおよび図1Rに示される。実施例2生化学アッセイおよび細胞ベースアッセイにおける化合物の活性本明細書中で記載されるように結合オリゴヌクレオチドを、上記およびAsaiら2003に記載されるように、生化学的Flashplateアッセイおよび細胞ベースアッセイにおいて、それらのテロメラーゼを阻害する能力について試験した。その結果を、以下の表に示す。この表において、以下の略語を使用する:オリゴヌクレオチド配列:1=TAGGGTTAGACAA、hTR配列番号1の42~54塩基に対して相補的2=CAGTTAGGGTTAG、hTR配列番号1の38~50塩基に対して相補的化学:NPは、オリゴヌクレオチドがホスホラミデートのヌクレオシド間結合を有することを示すNPSは、オリゴヌクレオチドがチオホスホラミデートのヌクレオシド間結合を有することを示す結合:5’は、脂質部分がオリゴヌクレオチドの5’末端に結合することを示す3’は、脂質部分がオリゴヌクレオチドの3’末端に結合することを示すヒト癌細胞型すべてATCCより入手可能:HT-3およびA431:子宮頚部癌U-251:多形性グリア芽腫DU145およびLNCaP:前立腺癌Caki:腎臓明細胞癌NCIH522:肺腺癌Ovcar-5:卵巣癌Hep3B:肝細胞癌。。実施例3比較効力およびバイオアベイラビリティー研究非結合オリゴヌクレオチドとともに本発明の2系統の化合物を、個々の詳細な研究のために選択した。選択した化合物図9に示されるは、以下のとおりであった:化合物A非結合:配列TAGGGTTAGACAAこの配列は、hTR配列番号1の42~54塩基に対して相補的であるのチオホスホラミデートオリゴヌクレオチド図9A化合物B:3’パルミトイルアミドに結合した化合物Aのオリゴヌクレオチド図9B化合物C:5’-パルミトイルアミド-グリセロール-チオホスフェートに結合した化合物Aのオリゴヌクレオチド図9C。これらの化合物の研究を、本実施例および以下の実施例で報告する。以下の表は、マッチするRNAと結合した場合の、これら3つの化合物それぞれの融解温度標準的な方法を使用して決定した、生化学的アッセイを使用して決定したテロメラーゼ阻害のIC50値、そして前述のHT-3細胞を用いる細胞ベースアッセイを使用して決定したテロメラーゼ阻害のIC50値を示す。上記表で示されるように、上記非結合オリゴヌクレオチドAは、その標的に対して、70°Cの融解温度、および生化学アッセイにおける0.15nMのテロメラーゼ阻害のIC50値ここでは、細胞取り込みは問題ではないを伴って、非常に高い親和性結合を示した。化合物Aは、複数の異なる腫瘍細胞株においてテロメラーゼ阻害に対する低いマイクロモルのIC50を伴って本実験では、HT-3細胞において1.6μM、無傷細胞への良好な取り込み性を有するが、これは生化学的な効力と比較して、無傷細胞において約10,000倍の効力の損失を示す。オリゴヌクレオチドそれぞれ、化合物Cおよび化合物Bの5’末端または3’末端のいずれかへの脂質基の付加は、Tmを緩やかに低下させ依然として、65.5°C~66.5°Cで、非常に高いままである、そして上記非結合化合物Aと比較して生化学的効力を6分の1~11分の1低下させた。しかしながら、非常に重要なことは、無傷細胞における脂質結合化合物Bおよび脂質結合化合物Cの効力は、これら化合物の生化学的効力と比較して、わずか約100分の1しか低下していないことである。より多くの細胞取り込みの結果として、化合物Bおよび化合物Cは、HT-3細胞において、上記非結合オリゴヌクレオチド化合物Aと比較して、少なくとも10倍高い効力を示した。同様の結果が、ヒト癌細胞の他の型を用いて観察された。図3および図4は、それぞれ、無傷のU251ヒト多形性グリア芽腫細胞およびDU145ヒト前立腺癌細胞における化合物A、化合物Bおよび化合物Cで得られたデータを示した。化合物C5’脂質化lipidated形態のIC50値は、U251細胞における化合物AのIC50値よりも約10分の1低く、DU145細胞においては約38分の1低く、化合物Cでの処置の増大した効力が確認された。実施例4動物モデルにおけるヒト腫瘍中のテロメラーゼ活性の阻害非結合オリゴヌクレオチド化合物Aおよび脂質結合オリゴヌクレオチド化合物Cの、動物中において増殖する腫瘍中のテロメラーゼを阻害する能力を、以下の実験において比較した。DU-145腫瘍細胞を、胸腺欠損nu/nuマウスの両方の側腹部に接種した。その腫瘍2腫瘍/マウスが50mm3~100mm3の大きさに達したとき、このマウスにPBS、FITC標識した化合物A、またはFITC標識した化合物C両方の化合物を、40mg/kgで投与したの単回尾静脈注射した。静脈注射の24時間後、マウスを屠殺し;一方の腫瘍を蛍光画像化用に収集し、他方の腫瘍をTRAPアッセイによるテロメラーゼ活性用に分析した。蛍光のレベルを、両方の処理群において比較した。しかしながら、図5に示されるように、化合物Cは、化合物Aで行ったものより、結果としてより大きなテロメラーゼ活性の阻害を生じた。0.75gの腫瘍溶解産物に相当するレーン中の垂直の矢印は、これらのサンプルが比較可能なレベルの内部標準水平の矢印により示されるを含むことを示す。血液は、ゲルの左のレーンにおいて内部標準の損失により示されるように、ヘモグロビンおよび他の非特異的taqポリメラーゼインヒビターテロメラーゼ生成物のPCR増幅において使用されるを含む。しかしながら、これらの非特異的なインヒビターは、連続希釈により完全に希釈された反応混合物中の腫瘍溶解物の量が減少する。もっとも低い濃度の腫瘍溶解物右側の3レーンにおいて、内部標準は全ての3つの処置条件で比較でき、化合物Cg、比較可能な用量の化合物Aで処置したものよりもテロメラーゼ活性をより大きく阻害することが明らかである。。実施例5動物モデルにおける骨髄腫タンパク質レベルの減少骨髄腫を有する患者の血漿は、癌細胞によって産生される、特徴的な高いレベル骨髄腫スパイクまたはMタンパク質として検出されるの抗体を含む。Mタンパク質レベルの減少は、疾患の寛解と相関する。本実験では、非結合オリゴヌクレオチド化合物Aおよび脂質結合オリゴヌクレオチド化合物Cの、骨髄腫細胞を注入した動物におけるMタンパク質のレベルを減少させる能力を比較した。照射NOD/SCIDマウスに106個のCAG骨髄腫細胞を注入し、そして次いで、PBS、PBS中の化合物A、またはPBS中の化合物Cの腹腔内IP注射で処置した。化合物Aを、25mg/kg/日175mg/kg/週×5週間で投与し;化合物Cを、最初の2週間は25mg/kg/日で投与し、3週目はそのままでおき、そして次いで最後の2週間は1週間に3日間25mg/kg/日で投与した5週間にわたって100mg/kg/週の平均投与量。処置の終了時接種の35日後、そのマウスを屠殺し、そして骨髄腫タンパク質の決定のため、各々の群4~5匹のマウス/群内で血漿をプールした。図6に示されるように、化合物Cの40低い投与量にもかかわらず、化合物C群は低いレベルの骨髄腫タンパク質を示したマウス1匹あたりに正規化した値。実施例6動物モデルにおけるヒト腫瘍増殖の阻害以下の実験では、非結合オリゴヌクレオチド化合物Aおよび脂質結合オリゴヌクレオチド化合物Cの、動物におけるヒト腫瘍の増殖を阻害する能力を比較した。NOD/SCIDマウスにCAG骨髄腫細胞を皮下接種し、そして腫瘍増殖の14日後、PBS、化合物A25mg/kg/日M-F、または125mg/kg/週、または化合物C25mg/kgMWF、または75mg/kg/週のIP注射で処置した。図7に示されるように、40低い投与量にもかかわらず、化合物Cは化合物Aよりもより大きな抗腫瘍効力を示した。この研究において、化合物Aを、このモデルにおいて抗腫瘍効力に関連する以前の投与量175mg/kg/週よりも30低い投与量で投与した。本研究の一部として、側腹部のCAG骨髄腫腫瘍を屠殺後に切除し、そしてテロメラーゼ活性TRAPアッセイによるおよびサザンブロットによるTRFの長さを分析した。図8に示されるように、40低い用量で投与したにもかかわらず、化合物Cは、実質的により大きなテロメラーゼ活性の阻害83の減少、および腫瘍細胞におけるテロメラーゼ短縮の誘導平均値TRF2.85Kbを示した。より高い用量の化合物Aは、より小さなテロメラーゼ阻害41を生じ、そして本研究の時間経過にわたり、有意なテロメラーゼ短縮を生じなかった。本開示で提供される内容は、本発明の精神、または添付の特許請求の範囲の範囲から逸脱することなく、日常的な最適化の問題として改変され得る。[配列表]"