サッカロマイセス属に属する酵母のゲノムに、ピルビン酸デカルボキシラーゼ1PDC1遺伝子のプロモーターの制御下に乳酸脱水素酵素をコードする遺伝子を導入し、ゲノム上のPDC1遺伝子を破壊した酵母を用いて糖化原料を発酵させ、得られる発酵液から乳酸及びエタノールを採取することを特徴とする乳酸及びエタノールの製造方法。発酵が、中和剤で処理することなく行われるものである請求項1記載の製造方法。本発明は、原料に対する収率が高くかつCO2排出量が少ない有機酸及びアルコールの製造方法を提供することを目的とする。本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意検討した結果、酵母サッカロマイセスセレビシエにおいてPDC1ピルビン酸デカルボキシラーゼ1プロモーターの制御下に乳酸脱水素酵素ラクテートデヒドロゲナーゼ遺伝子を含有する形質転換株を作製し、この形質転換株を用いて糖化原料を発酵させることにより、中和剤を使用することなく乳酸を製造し、かつCO2排出量を低減させたエタノール製造を行いうることを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は、アルコール生成微生物に有機酸生成酵素をコードする遺伝子を組み込んだことを特徴とする微生物である。アルコール生成微生物としては、耐酸性のもの例えば酵母が挙げられる。ここで、酵母としてサッカロマイセス属に属するものを例示することができる。本発明の微生物は、上記有機酸生成酵素をコードする酵素とともに、さらにPDC1プロモーターが組み込まれたものであることが好ましい。有機酸としては、L乳酸が挙げられる。さらに、本発明は、有機酸生成酵素をコードする遺伝子を含む組換えベクターを用いてアルコール生成微生物を形質転換することを特徴とする、アルコール及び有機酸を生成する微生物の作出方法である。さらに、本発明は、前記微生物を用いて糖化原料を発酵させ、得られる発酵液から有機酸及びアルコールを回収することを特徴とするアルコール及び有機酸の製造方法である。この場合、発酵は中和剤で処理することなく行うことができる。また、有機酸としてはL乳酸が挙げられる。本発明により、耐酸性微生物を用いた有機酸及びアルコールの製造方法が提供される。本発明の方法は、原料に対する収率が高くかつCO2排出量が少ないため有用である。また本発明の方法は中和剤の使用を必要としないため有用である。以下、本発明を詳細に説明する。本発明は、アルコール生成微生物に有機酸生成酵素をコードする遺伝子有機酸生成酵素遺伝子というを組み込むことにより、同一宿主細胞からアルコールと有機酸とを同時に生産することができるように改変した微生物である。また、本発明の有機酸及びアルコールの製造方法は、有機酸生成酵素遺伝子を含む組換えベクターを含有するアルコール生成微生物を用いて糖化原料を発酵させ、得られる発酵液から有機酸及びアルコールを採取することを特徴とする。本発明に係る方法の概要は以下の通りである。1.有機酸生成酵素遺伝子の単離まず、有機酸生成酵素遺伝子を宿主であるアルコール生成微生物に組み込むに際し、有機酸生成酵素遺伝子を含む組換えベクターを構築する。有機酸には、当業者に理解されうるあらゆる有機酸が含まれるが、例えば、乳酸、コハク酸、酢酸、クエン酸、グルコン酸などが挙げられる。有機酸生成酵素とは、上記有機酸が生成する過程において作用する酵素を意味し、例えば、ピルビン酸から乳酸を生成する乳酸脱水素酵素、コハク酸からフマル酸を生成するコハク酸脱水素酵素などの脱水素酵素や、オキザロ酢酸からクエン酸を生成するクエン酸シンターゼなどが挙げられる。本発明において使用する有機酸生成酵素遺伝子は、上述のような有機酸生成酵素をコードする遺伝子であればどのようなものでもよく、また、宿主生物に導入する目的遺伝子は、宿主と同種の生物由来の遺伝子でもよく異種生物由来の遺伝子でもよい。例えば、ピルビン酸から乳酸を生成する乳酸脱水素酵素をコードする遺伝子LDH遺伝子などが挙げられる。LDH遺伝子は、ストレプトコッカス属に属する微生物、リゾプス属に属する微生物、ビフィドバクテリウム属に属する微生物などから単離することが可能である。但し、目的遺伝子である有機酸生成酵素遺伝子はLDH遺伝子に限定されるものではなく、その他酢酸生成遺伝子、クエン酸生成遺伝子が挙げられる。目的遺伝子の調製は、当技術分野で周知の任意の手法を採用することができる。例えば、目的遺伝子を供与源から単離する場合には、グアニジンイソチオシアネート法により調製されたRNAからcDNAを合成する方法により調製する。また、上記有機酸生成酵素遺伝子は、該遺伝子の配列が公知である場合、その配列に基づいてプライマーを作製し、ポリメラーゼ連鎖反応PCRを利用して、別途調製することができる。あるいは、市販の生物細胞又は組織由来のcDNAライブラリー又はゲノムライブラリーから上記遺伝子を増幅し、精製することによって得ることもできる。上記遺伝子の配列が既知ではない場合には、先ず対応するタンパク質を精製してその部分配列を決定し、その配列に基づいて放射性標識プローブを作製し、これを用いてcDNAライブラリー又ははゲノムライブラリーから上記遺伝子を含むクローンをスクリーニングし、必要に応じて再クローン化することによって上記遺伝子を得ることができる。遺伝子クローニング及びスクリーニングの手法については、例えば、SambrookJFritschEF及びManiatisT1989MolecularCloningALaboratoryManual2ndColdSpringHarborLaboratoryPressColdSpringHarborNYに記載される方法を使用することができる。2.有機酸生成酵素遺伝子を含む組換えベクターの構築上記単離された有機酸生成酵素遺伝子をアルコール生成微生物に導入するために、有機酸生成酵素遺伝子を含む組換えベクターを構築する。組換えベクターは、適当なベクターに有機酸生成酵素遺伝子を連結することにより得ることができる。有機酸生成酵素遺伝子を挿入するためのベクターは、宿主中で複製可能なものであれば特に限定されず、例えば、プラスミドDNA、ファージDNA等が挙げられる。プラスミドDNAとしては、例えばpRS403、pRS404、pRS405、pRS406、pAUR101又はpAUR135などのYIp型大腸菌酵母シャトルベクター、大腸菌由来のプラスミドpBR322、pBR325、pUC18、pUC19、pUC118、pUC119、pTV118N、pTV119N、pBluescript、pHSG298、pHSG396又はpTrc99AなどのColE系プラスミド、pACYC177又はpACYC184などのp15A系プラスミド、pMW118、pMW119、pMW218又はpMW219などのpSC101系プラスミド等、枯草菌由来のプラスミド例えばpUB110、pTP5等などが挙げられ、ファージDNAとしてはλファージCharon4A、Charon21A、EMBL3、EMBL4、λgt10、λgt11、λZAP、φX174、M13mp18又はM13mp19などが挙げられる。レトロトランスポゾンとしては、Ty因子などが挙げられる。YAC用ベクターとしてはpYACC2などが挙げられる。ベクターに有機酸生成酵素遺伝子を挿入するには、まず、精製されたDNAを適当な制限酵素で切断し、適当なベクターDNAの制限酵素部位又はマルチクローニングサイトに挿入してベクターに連結する方法などが採用される。有機酸生成酵素遺伝子は、その遺伝子の機能が発揮されるようにベクターに組み込まれることが必要である。そこで、組換えベクターには、プロモーターに有機酸生成酵素遺伝子を連結して発現カセットを作製し、これに、所望によりエンハンサーなどのシスエレメント、スプライシングシグナル、ポリA付加シグナル、選択マーカー、リボソーム結合配列SD配列などを連結することができる。なお、選択マーカーとしては、例えばジヒドロ葉酸還元酵素遺伝子、トリプトファン合成遺伝子Trp1遺伝子、栄養要求性能を持つUra3遺伝子、Ade2遺伝子、His3遺伝子、又は薬剤耐性能を持つG418耐性遺伝子、アンピシリン耐性遺伝子、ネオマイシン耐性遺伝子などが利用可能である。本発明においては、発現カセットのターミネーター配列としてグリセルアルデヒド3リン酸デヒドロゲナーゼ遺伝子GAPDHのターミネーター遺伝子を使用しているが、本発明はこれに限定されるものではなく、使用可能なターミネーター配列であればいかなるものを使用してもよい。3.組換えベクターによるアルコール生成微生物の形質転換次に、上記組換えベクターを用いてアルコール生成微生物宿主この宿主は対酸性微生物であるを形質転換し、有機酸生成遺伝子を含む組換えベクターを含有する微生物を得る。本発明に使用する微生物は、耐酸性を有し、かつアルコール発酵を行うことができる限り特に限定されるものではなく、天然から採取されたものも含まれる。耐酸性微生物とは、酸性条件、好ましくはpHが6以下、さらに好ましくはpH2~5でアルコール発酵を行うことができる微生物を意味する。本発明では、例えば乳酸脱水素遺伝子を組み込んだ組換えベクターを上記耐酸性微生物に導入して形質転換体を得、乳酸脱水素遺伝子が機能するように操作することにより、アルコールを生成するとともに、乳酸も生成することができるようになる。乳酸脱水素遺伝子が機能するとは、該遺伝子が組み込まれたベクターを導入した宿主微生物を培養して乳酸を生成させたときに、乳酸の蓄積により培地のpHが酸性になっても特に、pH6以下に下がっても当該発現が維持されて乳酸を生成し得るように発現することを意味する。本発明において宿主として使用される耐酸性のアルコール生成微生物は、例えば、サッカロマイセス属等の酵母、あるいはリゾプス属に属するカビなどが挙げられるが、これらの微生物に限定されるものではない。酵母菌サッカロマイセス属:サッカロマイセスセレビシエ、サッカロマイセスクルーベリ、サッカロマイセスパラドキサス、サッカロマイセスパストリアヌスクルーベルマイセス属:クルーベルマイセスラクティス、クルーベルマイセスマルキシアヌスピキア属:ピキアパストリスカビリゾプス属:リゾプスデレマーアスペルギルス属:アスペルギルスニガー、アスペルギルスオリザムコール属:ムコールロウキシMucorrouxiiザイモモナス属:ザイモモナスモビリスZymomonasmobilis酵母を宿主とする場合は、前記プロモーターとしては酵母中で発現できるものであれば特に限定されず、例えばピルビン酸デカルボキシラーゼ1プロモーターPDC1プロモーター、gal1プロモーター、gal10プロモーター、ヒートショックタンパク質プロモーター、MFα1プロモーター、PHO5プロモーター、PGKプロモーター、GAPプロモーター、ADHプロモーター、AOX1プロモーター等が挙げられる。サッカロマイセス属に属する酵母を宿主として使用する場合には、PDC1プロモーターを用いることが好ましく、また、このプロモーターは染色体導入型ベクターと組み合わせて使用することが好ましい。PDC1プロモーターは強力なプロモーターであり、このプロモーターの制御下において有機酸生成酵素遺伝子は高発現される。また、PDC1プロモーターと共に有機酸生成酵素遺伝子を宿主の染色体上に導入することによってPDC1プロモーターが元来制御する遺伝子PDC1が失われても、宿主は生育及び代謝を継続することができるためこれをオートレギュレーションという、このプロモーターの使用には利点がある。酵母への組換えベクターの導入方法としては、酵母にDNAを導入する方法であれば特に限定されず、例えばエレクトロポレーション法MethodsEnzymol194182187、スフェロプラスト法ProcNatlAcadSciUSA7519291933、酢酸リチウム法JBacteriol153163168等が挙げられる。細菌を宿主とする場合は、組換えベクターが該細菌中で自律複製可能であると同時に、プロモーター、リボゾーム結合配列、有機酸生成酵素遺伝子、転写終結配列により構成されていることが好ましい。また、プロモーターを制御する遺伝子が含まれていてもよい。細菌への組換えベクターの導入方法としては、細菌にDNAを導入する方法であれば特に限定されるものではない。例えばカルシウムイオンを用いる方法ProcNatlAcadSciUSA6921102114、エレクトロポレーション法等が挙げられる。上述のようにして、アルコール生成微生物に有機酸生成酵素遺伝子を含む組換えベクターを導入することにより、形質転換された耐酸性微生物を得ることができる。なお、形質転換体は、導入した組換えベクター中に構成されるマーカー遺伝子の性質を利用して選択される。例えば、アンピシリン耐性遺伝子を選択マーカーとして使用した場合には、アンピシリンを含有する培地中で培養することにより形質転換体を選択する。4.耐酸性アルコール生成微生物を用いた発酵酵母菌等の耐酸性のアルコール生成微生物を宿主として得られた形質転換体を培養する培地としては、微生物が資化し得る炭素源、窒素源、無機塩類等を含有し、形質転換体の培養を効率的に行うことができる培地であれば、天然培地、合成培地のいずれを用いてもよい。炭素源としては、グルコース、フラクトース、スクロース、デンプン等の炭水化物が用いられる。窒素源としては、アンモニア、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、酢酸アンモニウム、リン酸アンモニウム等の無機酸若しくは有機酸のアンモニウム塩又はその他の含窒素化合物のほか、ペプトン、肉エキス、コーンスティープリカー等が用いられる。無機物としては、リン酸第一カリウム、リン酸第二カリウム、リン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウム、硫酸第一鉄、硫酸マンガン、硫酸銅、炭酸カルシウム等が用いられる。培養は、通常、振盪培養又は通気攪拌培養などの好気的条件下、30°Cで6~24時間行う。プロモーターとして誘導性のプロモーターを用いた発現ベクターで形質転換した微生物を培養する場合は、必要に応じてインデューサーを培地に添加してもよい。例えば、LacZプロモーターを用いた発現ベクターで形質転換した微生物を培養するときにはイソプロピルβDチオガラクトピラノシド等を、trpプロモーターを用いた発現ベクターで形質転換した微生物を培養するときにはインドールアクリル酸等を培地に添加してもよい。上述のようにして培養した耐酸性微生物は、集菌して、さらに糖化原料を添加した発酵条件下にて培養する。集菌は、培養菌体が対数増殖期初期から定常期までのいずれの状態にある時に行ってもよいが、対数増殖期中期から後期の状態にある時に行うのが好ましい。また、集菌は、遠心分離の他、濾過、沈降分離等のいかなる方法で行ってもよい。菌体の洗浄には、生理食塩水、リン酸緩衝液、トリス緩衝液等のいかなる緩衝液を使用してもよく、また、水を用いて菌体を洗浄することもできる。集菌した微生物を発酵条件下にて培養するための培地としては、通常は糖類、ペプトン、酵母エキスを含む。好ましくは、01~10グルコース、01~10ペプトン及び01~10酵母エキスを含み、さらに好ましくは約2のグルコース、約2のペプトン及び約1の酵母エキスを含む培地が使用される。また、培地として予め濾過除菌したものを用いることができ、特に酵母用培地としてYPD液体培地が挙げられる。培地には、発酵される糖化原料の他、コーンスティープリカー、サツマイモ糖化液等を含有させてもよい。ここで、発酵とは、本発明の耐酸性アルコール生成微生物が糖化原料を分解し、新たな生成物を生成する現象を指し、例えば、アルコール発酵、乳酸発酵、プロピオン酸発酵などが挙げられる。糖化原料としては、さつまいも、ジャガイモ、トウモロコシ等が挙げられる。これらの原料を洗浄及び破砕した後、液化糖化槽に入れ、90~120°C、好ましくは120°Cの蒸気で5~30分、好ましくは15分処理する。原料に対し05~25倍の水を加えた後、αアミラーゼ、グルコアミラーゼなどの市販の酵素例えばターマミルノボザイムジャパン社及びスミチーム新日本化学社を原料重量に対して05~1添加する。温度50~95°C、好ましくは60°Cで15~20時間保持すれば原料の液化、糖化が完了する。上記のようにして得られた液を遠心分離にかけ、固形分リグニン等を分離し、原液とする。発酵条件は以下の通りである。温度:25~33°C、好ましくは30°C菌体密度:10~30、好ましくは25湿重量ベース基質濃度:5~20、好ましくは10バッチ発酵の初期濃度発酵時間:10~30時間、好ましくは20~24時間発酵培養後、有機酸及びアルコールはその発酵液から回収することにより得ることができる。発酵液とは、培養上清のほか、培養細胞若しくは培養菌体又は細胞若しくは菌体の破砕物のいずれをも意味するものである。有機酸及びアルコールが菌体内又は細胞内に生産される場合には、菌体又は細胞を破砕することにより抽出する。また、有機酸及びアルコールが菌体外又は細胞外に生産される場合には、培養液をそのまま使用するか、遠心分離等により菌体又は細胞を除去する。その後、有機酸及びアルコールの単離精製に用いられる一般的な生化学的方法を単独で又は適宜組み合わせて用いることにより、前記培養物中から有機酸及びアルコールを単離精製することができる。乳酸を単離精製する場合は、発酵液を遠心分離装置又はフィルターにかけて菌体と液分とを分離し、乳酸の液分の採取精製濃縮を行う。液分の精製濃縮は、一般に海水や食品の脱塩に広く採用されているイオン交換膜を利用した電気透析装置例えばアシライザー旭化成社により行うことができる。なお、電気透析時の各種液の温度は、通常、20~45°C、好ましくは35~40°Cの範囲である。電気透析を行うと、イオン性物質と非イオン性物質を分離すると同時に乳酸を濃縮することが可能である。一方、アルコールを分離精製する場合は、発酵液を遠心分離装置又はフィルターにかけて菌体と液分とを分離し、エタノールの液分の採取を行う。液分の精製濃縮は蒸留法により行うことができる。電気透析で除去できなかったアミノ酸、無機イオンKCaMg等等は、クロマト分離装置、イオン交換装置により除去することができる。クロマト分離装置としては、例えば固定層式、移動層式、類似的移動層式等が挙げられる。ところで、本発明に従って、エタノールを生産する酵母にL乳酸脱水素酵素遺伝子の導入を行い、エタノール発酵を行うと同時に乳酸発酵を行う酵母を作出すると、当該酵母において以下の2つの反応が行われる。1C6H12O6→2C2H5OH2CO2エタノール発酵2C6H12O6→2CH3CHCOOH乳酸発酵乳酸発酵の反応ではCO2は排出されないため、エタノール発酵と同時に乳酸発酵を行うことで、エタノール発酵の際に排出されるCO2量を低減できる。さらにまた、この酵母を用いることにより糖化原料に対する生産物の収率を向上することができる。また本発明に従って作出した上記酵母を用いた乳酸発酵は、上記酵母が耐酸性であるため、培地が酸性になっても生育し、発酵を維持することができる。従って、上記発酵の際に炭酸カルシウム、水酸化ナトリウム、アンモニアなどの中和剤を添加する必要はなく、中和反応に伴う副産物廃棄物が排出されないため、コスト低減を図ることができる。以下に実施例を掲げて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。実施例1ベクターの構築本実施例のために新たに構築した染色体導入型ベクターをpBTrpPDC1LDHと名付け、以下に本ベクター構築例の詳細を記す。なお本実施例の概要を図1に示す。ベクター構築の手順はこれに限定されるものではない。本実施例において、サッカロマイセスセレビシエ由来のピルビン酸デカルボキシラーゼ1遺伝子PDC1遺伝子プロモーター配列の制御下で、異種遺伝子としてビフィドバクテリウムロンガムBifidobacteriumlongum由来のラクテートデヒドロゲナーゼ遺伝子LDH遺伝子を使用した。ベクターの構築にあたって、必要な遺伝子断片であるPDC1遺伝子のプロモーター断片PDC1P971bpと、PDC1遺伝子下流領域断片PDC1D518bpは、サッカロマイセスセレビシエYPH株Stratagene社のゲノムDNAを鋳型として使用したPCR増幅法によって単離を行った。サッカロマイセスセレビシエYPH株のゲノムDNAは、ゲノム調製キット、FastDNAKitBio101社を用い、詳細は付属のプロトコールに従い、調製した。DNA濃度は分光光度計Ultrospec3000AmershamPharmaciaBiotech社にて測定した。PCR反応には、増幅酵素として、増幅断片の正確性が高いとされるPyrobestDNApolymerase宝酒造社を使用した。上記手法にて調製したサッカロマイセスセレビシエYPH株のゲノムDNA50ngサンプル、プライマーDNA50pmolサンプル、及びPyrobestDNApolymerase02ユニットサンプルを合計で50μlの反応系に調製した。反応溶液を、PCR増幅装置GeneAmpPCRsystem9700PEAppliedBiosystems社によってDNA増幅を行った。PCR増幅装置の反応条件は、96°C2分の後、96°C30秒→55°C30秒→72°C90秒を25サイクル行い、その後4°Cとした。PDC1P増幅断片とPDC1D増幅断片を1TBEアガロースゲル電気泳動にて遺伝子増幅断片の確認を行った。なお反応に使用したプライマーDNAは、合成DNAサワデーテクノロジー社を用い、このプライマーのDNA配列は以下の通りである。PDC1P断片の増幅PDC1PLDHU31merTm値583°C末端に制限酵素BamHIサイトを付加:ATATATGGATCCGCGTTTATTTACCTATCTC配列番号1PDC1PLDHD31mer、Tm値544°C末端に制限酵素EcoRIサイトを付加:ATATATGAATTCTTTGATTGATTTGACTGTG配列番号2PDC1D断片の増幅PDC1DLDHU31mer、Tm値553°C末端に制限酵素XhoIサイトを付加:ATATATCTCGAGGCCAGCTAACTTCTTGGTCGAC配列番号3PDC1DLDHD31mer、Tm値544°C末端に制限酵素ApaIサイトを付加:ATATATGAATTCTTTGATTGATTTGACTGTG配列番号4。上記反応にて取得したPDC1P及びPDC1D各遺伝子増幅断片をそれぞれ、エタノール沈殿処理によって精製した後、PDC1P増幅断片を制限酵素BamHIEcoRI、及びPDC1D増幅断片を制限酵素XhoIApaIにて制限酵素反応処理を行った。なお以下に用いた酵素類はすべて宝酒造社製のものを用いた。また、エタノール沈殿処理、制限酵素処理の一連操作の詳細なマニュアルはMolecularCloningALaboratoryManualsecondeditionManiatisetalColdSpringHarborLaboratorypress1989に従った。ベクターの構築における一連の反応操作は、一般的なDNAサブクローニング法に準じて行った。すなわち、制限酵素BamHIEcoRI宝酒造社及び脱リン酸化酵素AlkalinePhosphataseBAP、宝酒造社を施したpBluescriptIISKベクター東洋紡社に、上記PCR法にて増幅し、制限酵素処理を施したPDC1P断片をT4DNALigase反応によって連結させた図1A。T4DNALigase反応には、LigaFastRapidDNALigationSystemプロメガ社を用い、詳細は付属のプロトコールに従った。次にLigation反応を行った溶液を、コンピテント細胞へ形質転換を行った。コンピテント細胞は大腸菌JM109株東洋紡社を用い、詳細は付属のプロトコールに従って行った。得られた培養液は抗生物質アンピシリン100μgmlを含有したLBプレートにまいて一晩培養した。生育したコロニーを、インサート断片のプライマーDNAを用いたコロニーPCR法による確認、及びミニプレップによるプラスミドDNA調製溶液を、制限酵素処理による確認を行い、目的とするベクターpBPDC1Pベクターを単離した図1B。ついでトヨタ自動車株によって構築されたpYLD1ベクターを制限酵素EcoRIAatII処理及び末端修飾酵素T4DNApolymerase処理することで得られるLDH遺伝子断片を、同じく制限酵素EcoRI処理、末端修飾酵素T4DNApolymerase処理を行ったpBPDC1Pベクター中に、上述と同様の操作でサブクローニングを行い、pBPDC1PLDHIベクターを作製した図1C。なお、上記のpYLD1ベクターは大腸菌に導入され名称:EcolipYLD1、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター茨城県つくば市東1丁目1番地1に、受託番号FERMBP7423としてブダペスト条約に基づき国際寄託されている原寄託日:平成111999年10月26日。続いてこのベクターをXhoIApaI処理し、増幅したPDC1D断片を連結させてpBPDC1PLDHIIベクターを作製した図2A。最後にpBPDC1PLDHIIベクターをEcoRV処理したものに、pRS404ベクターをAatIISspI処理、T4DNApolymerase処理して得られたTrp1マーカー断片を連結させて、最終コンストラクトである染色体導入型pBTrpPDC1LDHベクターを構築した図2B。構築した染色体導入型pBTrpPDC1LDHベクターの確認の為に塩基配列決定を行った。塩基配列解析装置としてはABIPRISM310GeneticAnalyzerPEAppliedBiosystems社を使用し、試料の調製法、及び機器の使用方法などの詳細は本装置付属のマニュアルに従った。試料となるベクターDNAはアルカリ抽出法により調製したものを用い、これをGFXDNAPurificationkitAmershamPharmaciaBiotech社にてカラム精製した後、分光光度計Ultrospec3000AmershamPharmaciaBiotech社にてDNA濃度を測定したものを用いた。実施例2組換えベクターの宿主への導入宿主である酵母IFO2260株社団法人発酵研究所に登録されている菌株のトリプトファン要求株は、10mlYPD培地にて30°Cで対数増殖期まで培養を行い、集菌及びTEバッファーによる洗浄を行った後、05mlTEバッファーと05ml、02M酢酸リチウムを加え、30°Cにて1時間振盪培養を行った。その後、制限酵素Apa1及びSpe1で処理したpBTRPPDC1LDHを加えた。このプラスミドの菌懸濁液を30°Cで30分間振盪培養後、70ポリエチレングリコール4000を150ml加え、よく撹絆した。30°Cにて1時間振盪培養した後、42°Cにて5分間ヒートショックを与えた。菌体を洗浄した後、200mlの水に懸だくしたものを選択培地に塗株した。得られたコロニーを選択培地で単離を行い、コロニーを得た後、PCRにてPDC1プロモーターの下流にLDHが導入されている株を取得した。更に、胞子形成培地で胞子形成を行い、2倍体である染色体両方に上記ベクターが導入されている株を取得した。酵母サッカロマイセスセレビシエが図2に示したpBTRPPDC1LDHで形質転換され、ゲノム上に導入されたことをPCRで確認した。上記ベクターのゲノム上の構造を図3に示す。実施例3発酵試験YPD液体培地を用いて、上記形質転換株と非形質転換株に対して発酵テストを行った。乳酸及びエタノールは、それぞれ、王子計測機器株式会社製バイオセンサBF4により測定した。収率は、生産物量を発酵前の糖含量で割ることにより計算した。更にCO2発生率について見積りを行った。CO2発生率は、100から、生産物の収率を引くことにより計算した。この結果を表1に示す。表1に示す結果によれば、乳酸脱水素酵素遺伝子LDHを含有する形質転換株は、エタノール製造に伴うCO2排出量を20低減できるとともに、エタノールと乳酸をあわせた生産物の量についても約15増加している。従って、本発明の方法は、エタノール及び乳酸の製造に有効な手段であるといえる。