皮膚の加齢を治療する方法であって、前記方法が以下の構造Iによって表されるオレアノール酸と結合した配列番号1のペプチドを含む組成物で皮膚を治療する工程を含む、前記治療方法。構造I組成物が場合によって、コナッツ液状内乳、アムラ抽出物、スチルベンまたはその誘導体、テトラヒドロクルクミノイドまたはその誘導体、カンゾウ抽出物およびそれらの組合せを含む群から選択される成分または植物抽出物を含む、請求項1に記載の方法。スチルベンが、オキシレスベラトロール、プテロスチルベン、レスベラトロール、3ヒドロキシプテロスチルベンおよびそれらの組合せから選択される、請求項2に記載の方法。組成物が局所的に適用され、さらにクリーム、ローション、ゲル、乳液、パッチおよびリキッドを含む群から選択される形態で存在する、請求項1に記載の方法。下記の構造Iによって表されるオレアノール酸と結合した配列番号1のペプチド並びに皮膚科学的に許容できる賦形剤中で処方される、日光遮蔽物、スキンライトニング剤、スキンタンニング剤、抗酸化剤、香料、乳濁化剤、保存料、着色剤、乳化剤、膨張剤および緩衝剤を含む群から選択されるさらに別の1つまたは2つ以上の付加物を含む組成物。構造I組成物が場合によって、コナッツ液状内乳、アムラ抽出物、スチルベンまたはその誘導体、テトラヒドロクルクミノイドまたはその誘導体、カンゾウ抽出物およびそれらの組合せを含む群から選択される成分または植物抽出物を含む、請求項5に記載の組成物。スチルベンが、オキシレスベラトロール、プテロスチルベン、レスベラトロール、3ヒドロキシプテロスチルベンおよびそれらの組合せから選択される、請求項6に記載の組成物。組成物が局所適用のために処方され、さらにクリーム、ローション、ゲル、乳液、パッチおよびリキッドを含む群からから選択される形態で存在する、請求項5に記載の組成物。以下の構造Iで表されるオレアノール酸と結合した配列番号1のペプチド。構造I脱水反応による配列番号1のペプチドとオレアノール酸とのカップリングによって合成される、請求項9に記載のオレアノール酸と結合した配列番号1のペプチド。発明の詳細な説明本発明は、皮膚の加齢を治療する方法に関し、前記方法は、以下の構造Iによって表されるオレアノール酸と結合した配列番号1のペプチドを含む組成物で皮膚を治療する工程を含む:構造I本発明の別の実施態様では、前記組成物は、場合によってコナッツ液状内乳、アムラ抽出物、スチルベンまたはその誘導体、テトラヒドロクルクミノイドまたはその誘導体、カンゾウ抽出物およびそれらの組合せを含む群から選択される成分または植物抽出物を含む。本発明のさらに別の実施態様では、スチルベンは、オキシレスベラトロール、プテロスチルベン、レスベラトロール、3ヒドロキシプテロスチルベンおよびそれらの組合せを含む群から選択される。本発明のさらに別の実施態様では、前記組成物は局所的に適用され、さらにクリーム、ローション、ゲル、乳液、パッチおよびリキッドを含む群から選択される形態で存在する。本発明は、下記の構造Iによって表されるオレアノール酸と結合した配列番号1のペプチド並びに皮膚科学的に許容できる賦形剤中で処方される、日光遮蔽物、スキンライトニング剤、スキンタンニング剤、抗酸化剤、香料、乳濁化剤、保存料、着色剤、乳化剤、膨張剤および緩衝剤を含む群から選択されるさらに別の1つまたは2つ以上の付加物を含む組成物に関する:構造I本発明の別の実施態様では、前記組成物は、場合によってコナッツ液状内乳、アムラ抽出物、スチルベンまたはその誘導体、テトラヒドロクルクミノイドまたはその誘導体、カンゾウ抽出物およびそれらの組合せを含む群から選択される成分または植物抽出物を含む。本発明の別の実施態様では、前記スチルベンは、オキシレスベラトロール、プテロスチルベン、レスベラトロール、3ヒドロキシプテロスチルベンおよびそれらの組合せを含む群から選択される。本発明の別の実施態様では、前記組成物は局所的に適用され、さらにクリーム、ローション、ゲル、乳液、パッチおよびリキッドを含む群から選択される形態で存在する。本発明は、下記の構造Iで表されるオレアノール酸と結合した配列番号1のペプチドに関する。オレアノール酸は配列番号1のペプチドの末端のリジンと結合する。構造I本発明の別の実施態様では、オレアノール酸と結合した配列番号1のペプチドは、脱水反応による配列番号1のペプチドとオレアノール酸とのカップリングによって合成される。定義本明細書で用いられる局所適用という用語は、本発明の組成物を皮膚の表面に塗布または広げることを意味する。本明細書で用いられる皮膚科学的に許容できるという用語は、そのように記述された組成物またはその成分が、甚だしい毒性、不適合性、不安定性、アレルギー反応などを生じることなく人間の皮膚に接触させて用いるために適切であることを意味する。本明細書で用いられる安全で有効な量という用語は、プラスの効果、好ましくはプラスの皮膚の外観または感覚的利点本明細書に開示した利点をそれぞれ別個に含むの顕著な誘発に十分であるが、ただし重大な副作用を回避するためには十分に低い、すなわち当業者の慎重な判断の範囲内のリスク比で合理的な利点を提供する、化合物または組成物の量を意味する。本明細書で用いられる皮膚の適合性という用語は、局所用組成物の長期の適用に対し皮膚への最小限の害反応例えばチクチクする感じ、ひりひりする感じ、皮膚の赤み、かゆみおよび毛包炎で耐え得る皮膚の能力を意味する。同時投与という用語は、前記組成物を第二の医薬典型的には異なる作用メカニズムを有するを、所望の結果を促進する投与スケジュールで投与することを指す。この用語は、同時投与、同じ日のそれぞれ別個の時間における投与、または別の日における投与をも指すことができる。組成物は別々に投与するか、またはただ1つの処方物にまとめてもよい。本発明は、オレアノール酸と結合した配列番号1のペプチドを含む組成物および皮膚の加齢を治療する方法を提供する。オレアノール酸と結合した配列番号1のペプチド化合物は、本明細書を通して以後オレアノイルペプチドと称する。前記化合物中のオレアノール酸をその誘導体と置き換え、本発明で用いることができる。前記化合物のオレアノール酸部分をさらに改変し、3アシルオキシ基にアルカノイルオキシ、アルケノイルオキシ、アリールカルボキシロイルオキシ、ヘテロアリールカルボキシロイルオキシ基などから選択される置換基を含むことができる。本発明で用いられるオレアノイルペプチドは、皮膚の弾性、コラーゲンの変形、炎症、遊離ラジカル誘発皮膚損傷などによって引き起こされる皮膚の加齢を予防し、遅らせおよび/または逆戻りさせる際に多数のメカニズムによって機能する。前記組成物は、オレアノールペプチドをそれぞれ別個にまたは成分もしくは植物抽出物と一緒に含む。本発明で開示したオレアノイルペプチドおよび成分または植物抽出物を含む組成物は、皮膚加齢の個々の特徴の治療で相乗効果を示す。前記成分または植物抽出物は、ココナッツ液状内乳、アムラ抽出物、スチルベンまたはその誘導体、テトラヒドロクルクミノイドまたはその誘導体、カンゾウ抽出物およびそれらの組合せを含む群から選択される。前記スチルベンは、オキシレスベラトロール、プテロスチルベン、レスベラトロール、3ヒドロキシプテロスチルベンおよびそれらの組合せから選択される。本発明で用いられるオレアノイルペプチドの濃度は約00001から約10の範囲である。組成物で用いられる成分または植物抽出物の濃度は約00001から約10の範囲である。ある実施態様では、オレアノイルペプチドおよびココナッツ液状内乳を含む組成物は、細胞若返りの強化を提供する。別の実施態様では、オレアノイルペプチドおよびアムラ抽出物を含む組成物は、UV誘発損傷に対し防御強化を提供する。さらに別の実施態様では、オレアノイルペプチドおよびスチルベンまたはその誘導体/カンゾウ抽出物/テトラヒドロクルクミノイドまたはその誘導体を含む組成物は、皮膚の明るさの向上の強化を提供する。以下の記載では前記天然の成分は活性成分と称される。本発明のアンチエージングスキンケア組成物はまた、皮膚科学的に許容できる賦形剤を含む。前記物質は、前記活性成分の希釈剤、分散剤または担体として機能し得る。前記賦形剤は、スキンケア製品で通常的に用いられる物質を含むことができ、前記には水、緩衝性水溶液、液体もしくは固体の皮膚軟化剤、シリコーンオイル、乳化剤、溶媒、湿潤剤、膨張剤、散剤、発射薬などが含まれるが、ただしこれらに限定されない。アンチエージングスキンケア組成物の粉末成分は適切な賦形剤に溶解させ、強度したがって製品の効能を増減させることができる。強度および効能におけるそのような多様性は、皮膚のタイプおよび条件が大きく変動する個体で構成される大いに不均質な集団を治療する場合、アンチエージングスキンケア組成物の有効性の維持に強く所望され得る。前記活性成分の他に、本発明の組成物は場合によって多様な化粧品付加物または製造付加物を含むことができる。例えば、日光遮蔽物、スキンライトニング剤もまた含むことができる。賦形剤はまた、抗酸化剤、香料、乳濁化剤、保存料、着色剤、乳化剤および緩衝剤のような付加物を、当該アンチエージングスキンケア組成物の有効性、保存、有用性または市場性の強化のために要望または所望に応じて含むことができる。好ましい実施態様では、スキンケア組成物への香料または他の隠蔽剤の添加は、活性成分の存在に付随する臭いの緩和または遮断のために所望されまたは必要である。本発明のアンチエージングスキンケア組成物の調製のために、多様な技術を利用することができる。例えば、活性成分は、一般的にはスキンケア製品の製造に通常的な態様で皮膚科学的に許容できる賦形剤に取り込むことができる。したがって、活性成分は、第一に、皮膚科学的許容できる賦形剤に取り込まれるべき水または別の溶媒もしくは液体の一部分に溶解または分散することができる。この製造アプローチで使用される好ましい組成物は、水中油、油中水、または水中油中水エマルジョンである。しかしながら、好ましい実施態様では、活性成分は上記の付加物を含むかまたは含まない、皮膚科学的に許容される担体とは分離させた状態で、例えば乾燥粉末として維持される。得られたアンチエージングスキンケア組成物は続いて顔面、手、腕、足、首または他の領域の皮膚に適用され、この場合、治療領域の完全で均一な被覆を担保するために手で塗布することが所望される。本発明のアンチエージングスキンケア組成物は、水溶液、クリーム、ゲル、ローション、スプレー、軟膏、ペースト、ムース、化粧品などを含むただし前記に限定されない、通常的な放置用スキンケア製品の形態であり得る。アンチエージングスキンケア組成物はまた洗い流し用製品の形態であってもよい。前記製品には浴用またはシャワー用ゲルが含まれただし前記に限定されない、前記は、洗浄時に皮膚への吸着または付着を促進するために活性成分のためのデリバリー系をおそらく含む。もっとも好ましくは、前記製品は放置用製品であるすなわち、その皮膚への適用の後で時間を置かずに意図的に洗浄される工程を与えられることなく皮膚に適用される製品。本発明のアンチエージングスキンケア組成物は、任意の適切な態様のパッケージ通常的な態様にある広口瓶、瓶、チューブ、スティック、ローラーボールアプリケーター、エーロゾルスプレー装置などを含むが、ただしこれらに限定されないであり得る。本発明はさらに以下のような肌の手入れによる利点を提供する:しわの形成を遅らせるかまたは予防する;皮膚のたるみを遅らせるかまたは予防する;光による皮膚の損傷を遅らせるかまたは予防する;若々しい外観を皮膚に付与する;皮膚へのコラーゲンの蓄積を強化する;組織の修復および細胞増殖を強化する;および皮膚の手触り、滑らかさまたは堅実性を改善する。好ましい実施態様では、本発明の方法は、治療を必要とする皮膚に対して1日1回または2回以上実施することができる。この方法では、アンチエージングスキンケア組成物の小体積、例えば01から5mLを適切な容器またはアプリケーターから皮膚に適用し、さらに手もしくは指または適切な装置を用いて皮膚上に広げるかおよび/または皮膚に擦り込む。当該組成物が放置用または洗い流し用製品として処方されたかどうかにしたがい、場合によって洗い流し工程がその後に続き得る。皮膚外観における改善は、皮膚のコンディション並びにアンチエージングスキンケア組成物が用いられた濃度、量および頻度にしたがって1日以内または2日以上の使用で明らかになるであろう。本明細書に記載した本発明の組成物、方法および使用は、しわの形成の予防、低下または遅延、および皮膚の張りの低下の予防、低下または遅延をもたらす。本明細書に記載した組成物、方法および使用はまた、シミ、肌触り、滑らかさまたは堅実性を改善し、さらに弾力性が改善された滑らかでしなやかな皮膚をもたらす。外観、手触りおよびコンディション具体的には明るさ、鮮明さに関するにおける全般的な改善、および皮膚の全般的な若々しい外観が達成される。本発明はしたがって、オレアノイルペプチドによって提供されるアンチエージング効果と包括的に記載される幅広い結果を提供する。本明細書に記載した本発明の組成物、方法および使用は、局所適用のためにおよび皮膚のコンディションの調整にさらに有用である。前記皮膚のコンディションには目に見えるかおよび/または触知される皮膚特に皮膚の表面の不連続性が含まれるそのような不連続性は一般的には好ましくない。そのような不連続性は、内部および/または外部要因によって誘発または引き起こされ、本明細書に記載した皮膚の加齢の徴候を含むことができる。皮膚の加齢の徴候には、視覚的および触覚的に認知し得る全ての外面の所見および任意の加齢による他の巨視的または顕微鏡的作用が含まれるが、ただしこれらに限定されない。そのような徴候は、本質的または非本質的要因、例えば年齢による加齢および/または環境的損傷によって誘発または引き起こされ得る。これらの徴候は以下を含むプロセスただしこれらに限定されないから生じ得る:手触りの不連続性例えばしわ表面近くの小じわおよび粗く深いしわを含む、皮膚のすじ、割れ目、へこみ、大きな孔例えば付属の構造物例えば汗腺管、皮脂線または毛包に付随するの発生;落屑、剥離および/または皮膚の非平坦性および粗雑性の他の形態;皮膚の弾力性の低下機能的な皮膚エラスチンの低下および/または不活化、たるみ眼の一帯および顎のふくらみを含む、皮膚の堅実性の低下、皮膚のち密性の低下、変形からの皮膚の戻りの低下、赤みまたは変色眼の下のくまを含む、シミ形成、土色化、過剰に色素沈着した皮膚領域例えば加齢斑およびシミ、角化症、異常分化、過剰角質形成、弾力線維症、コラーゲン減成、並びに以下における他の組織学的変化:角質層、真皮、表皮、皮膚血管系例えば末梢血管拡張症またはクモの巣状血管および下部組織、特に皮膚直近組織。本発明は、上記に記載した皮膚の加齢に関連するメカニズムにより生じる皮膚の加齢の徴候の予防、緩和または遅延に限定されず、発生のメカニズムに無関係に前記徴候の予防、緩和または遅延も含もうとすることは理解されるべきである。実施例本発明の上記の特徴および他の利点は、実施例と併せて下記の詳細な説明からより明瞭に理解されよう。オレアエウロパエアOleaeuropaea抽出物:前記は、90を越える純度で活性成分トリテルペノイドオレアノール酸を含む乳脂色の粉末である。供給源はオレアエウロパエアオリーブの葉である。ペンタペプチド、リシルスレオニルスレオニルリシルセリン配列番号1:前記は、コラーゲン減成産物である、一般式リシルスレオニルスレオニルリシルセリンのペプチドであるKKatayamaJABorundaRRaghowAHKangJMSayerJBiolChem26899411993。実施例1トリテルペノイドのオレアノール酸と結合した配列番号1のペンタペプチドオレアノール酸は配列番号1のペプチドの末端のリジンと結合するは、皮膚の真皮マトリックスにおけるコラーゲン合成とコラーゲン減成との間の健康的なバランスを維持することによって、加齢の症状を相乗的に緩和または遅延させる。したがって、オレアノイルペプチドは、全てのアンチエージング作用様式例えばセリンプロテアーゼ阻害活性、抗炎症活性、抗酸化活性、コラーゲン補充活性などを賦与されている。オレアノイルペプチドをそれぞれ別個にまたは成分もしくは植物抽出物と一緒に含む本発明の局所用化粧組成物は、基剤成分、アジュバントおよび化粧品分野で通常的に用いられる添加物を混合することによって液体または半固体形で調製される。液体または半固体形の化粧品には皮膚ローション、クリームおよびゲルが含まれるが、ただしこれらに限定されない。局所適用用組成物はまた、全身ローション、ピールオフおよびフェースマスク化粧組成物でも用いることができる。本発明の好ましい実施態様を例示のために開示してきたが、当業者は、添付の特許請求の範囲において開示した本発明の範囲から逸脱することなく多様な改変、付加および置換が可能であることを認識していよう。オレアノイルペプチドの化学的合成アセチルオレアノイルLysThrThrLysSerOBzlアセチルオレアノール酸5gm、10mmoleを50mLのクロロホルムに溶解し0°Cに冷却する。前記反応混合物に新しく蒸留した塩化チオニルを一滴ずつ加える。前記混合物を低温で30分、続いて室温で2時間攪拌した。その後溶媒をinvacuoで完全に除去し、残留物を乾燥させる。TFALysThrThrLysSerOBzl93GM、714mmoleを100mLのクロロホルムと一緒に取り、0°Cに冷却する。攪拌しながら、5mLのトリエチルアミンを加え、この溶液のpHを8-9に調整する。前記ペンタペプチド溶液を10°Cに冷却し、攪拌しながら、上記で調製したクロロホルム25mL中の塩化アセチルオレアノイル溶液をゆっくりと加える。前記混合物を低温で15分さらに反応の完了まで室温で攪拌する。続いて前記反応混合物を、10のKHSO4溶液3回、水、飽和NaHCO3溶液3回、水および飽和NaCl溶液で洗浄する。前記を最後にNa2SO4無水物上で乾燥させ、invacuoで濃縮する。残留物を酢酸エチル石油エーテル7:3を用いて沈殿させる。続いて沈殿物をろ過し、invacuoで乾燥させる。収量134g80。質量スペクトルは1763で所望のmeピークを示し、高解析NMRにより所望の構造が確認された。アセチルオレアノイルLysThrThrLysSerOHアセチルオレアノイルLysThrThrLysSerOBzl10GM、6mmoleをメタノール中の5酢酸100mLと混合し、水素添加装置に移す。2gの10PdCを前記反応混合物に添加する。水素添加は5kgの水素圧を用い60°Cの温度で実施される。反応完了後に、触媒をフィルターで除去し、反応混合物をinvacuoで濃縮した。残留物をアセトニトリルの添加により沈殿させた。固形物をろ過し、乾燥させた。収量56g90。質量スペクトルは1045で分子イオンピークを示した。オレアノイルLysThrThrLysSerOHオレアノイルペプチド上記で得たアセチルオレアノイルLysThrThrLysSerOH5gm、48mmoleを25mLのメタノールに取り、攪拌した。この混合物に2MのLiOH溶液25mLを加え2時間攪拌した。前記反応混合物からメタノールを除去した。前記水溶液を酢酸エチルで洗浄し、1NのHCl溶液でpH7-8に酸性化させた。続いて前記水溶液を蒸発により乾燥させた。前記残留物にメタノールを添加し、不溶性塩をフィルターで除いた。溶液を濃縮し、乾燥ジエチルエーテルを用いて沈殿させた。続いて固体オレアノイルペプチドをろ過し乾燥させた。収量41g85。ESMSスペクトルはme1001MHで分子イオンピークを示した。オレアノール酸と配列番号1リシルスレオニルスレオニルリシルセリンのペンタペプチド図1との結合は、ペンタペプチドのアンチエージング潜在能力を多数の作用様式で顕著に強化する。したがって、本発明のオレアノイルペプチドは、皮膚のコンディションを治療するためにより良好で新規な分子として機能する。オレアノイルペプチドのアンチエージング潜在能力invitro実験:コラゲナーゼ阻害の潜在能力:オレアノイルペプチドのコラゲナーゼ阻害潜在能力は、高処理様式で阻害性物質をスクリーニングするために要求される高い感受性を提供する、モリキュラープローブズMolecularProbesEnzChekコラゲナーゼアッセイキットを用いることによって測定した。EnzChekキットは、DQゼラチンフルオレセイン結合ゼラチンを含む。この基質は大半のゲラチナーゼおよびコラゲナーゼによって効率的に消化されて高蛍光性のペプチドを生成する。蛍光の増加はタンパク分解活性に比例し、蛍光マイクロプレートリーダーによりモニターできる。蛍光の減少はサンプルのコラゲナーゼ阻害活性に正比例する。アッセイに用いられるコラゲナーゼはクロストリジウムヒストリチクムClostridiumhistolyticumから精製される。100μgmLのDQゼラチンおよび30分のインキュベーション時間を用いれば、本アッセイによって最終濃度2x103UmL7ngタンパク質mLまで本酵素活性を検出できる1ユニットは、37°C、pH5、5時間でコラーゲンから1μmoleのLロイシン等価物を遊離させるために必要な酵素量と規定される。適切な賦形剤蛍光の強さに影響を与えないPBSまたは2のDMSO中の種々の濃度のオレアノイルペプチドを125μgmLの基質、DQゼラチンブタ皮膚由来、フルオレセイン結合物と10分間予備インキュベートし、続いてクロストリジウムヒストリチクム酵素由来コラゲナーゼIV型酵素の02UmLを添加した。蛍光強度をマイクロプレートリーダーで30分後に測定したEm:485nmおよびEx:520nm。オレアノイルペプチドの用量依存阻害活性を計算し、結果はグラフパッドGraphpadプリズムソフトを用いてIC50として表される。コラゲナーゼの阻害パーセンテージは以下のように算出される:阻害=/Cx100式中、C=阻害物質非存在下におけるコラゲナーゼ活性による吸収;T=阻害物質存在下におけるコラゲナーゼ活性による吸収。IC50値はコラゲナーゼ活性の50阻害に必要な濃度であり、したがってIC50値が低ければ低いほど、より良好なコラゲナーゼ阻害潜在能力を示す。表1で、オレアノイルペプチドは、それぞれオレアノール酸、配列番号1のペプチドおよびPalLysThrThrLysSerパルミトイル基が配列番号1に結合と比較したとき顕著なコラゲナーゼ阻害活性を示す。図2はオレアノイルペプチドの種々の濃度におけるコラゲナーゼ阻害を示す。エラスターゼ阻害の潜在能力:オレアノイルペプチドのエラスターゼ阻害潜在能力は、高処理様式で阻害性物質をスクリーニングするために要求される高い感受性を提供する、モリキュラープローブズMolecularProbesEnzChekエラスターゼアッセイキットを用いることによって測定した。EnzChekキットは、DQエラスチンフルオレセイン結合可溶性ウシ頸部靭帯エラスチンを含む。この基質はエラスターゼによって効率的に消化されて高蛍光性のペプチドを生成する。蛍光の増加はタンパク分解活性に比例し、蛍光マイクロプレートリーダーによりモニターできる。蛍光の減少はサンプルのエラスターゼ阻害活性に正比例する。アッセイに用いられるエラスターゼはブタ膵臓から精製される。適切な賦形剤蛍光の強さに影響を与えないPBSまたは2のDMSO中の種々の濃度のオレアノイルペプチドを基質、25μgmLのDQエラスチンウシ頸部靭帯由来フルオレセイン結合物と10分間予備インキュベートし、さらに01UmLのブタ膵臓エラスターゼ酵素を添加した。蛍光強度をマイクロプレートリーダーで30分後に測定したEm:485nmおよびEx:520nm。サンプルの用量依存阻害活性を計算し、結果はグラフパッドGraphpadプリズムソフトを用いてIC50として表される。エラスターゼの阻害パーセンテージは以下のように算出される:阻害=/Cx100式中、C=阻害物質非存在下におけるエラスターゼ活性による吸収;T=阻害物質存在下におけるエラスターゼ活性による吸収。IC50値はエラスターゼ活性の50阻害に必要な濃度であり、したがってIC50値が低ければ低いほど、より良好なエラスターゼ阻害潜在能力を示す。表1で、オレアノイルペプチドのIC50値表1は、前記がPalLysThrThrLysSerパルミトイル基が配列番号1に結合よりも良好なエラスターゼ阻害潜在能力を有することを明瞭に示している。オレアノール酸および配列番号1のペプチドはそれぞれエラスターゼ阻害を示さなかった。図3はオレアノイルペプチドの種々の濃度におけるエラスターゼの阻害を示す。コラーゲンの強化:コラーゲンの強化は多様なストレス条件による皮膚の損傷の修復を促進する。コラーゲンの強化は、細胞外マトリックスのコラーゲンI型およびコラーゲンIII型とより強い特異性で結合するシリウスレッドSiriusRed染料を用いることによって測定した。コラーゲンと結合する染料を溶解し、光学密度ODをフルオスターFluostarオプチママイクロタイタープレートリーダーを用いて544nmで分光光度法により測定する。コラーゲンと結合した染料のODは細胞内のコラーゲン含有量と正比例する。ヒトの骨に由来するヒト骨肉腫細胞をコラーゲン強化実験に用いた。前記細胞を24ウェルプレートに10000細胞ウェルの密度で播種した。まず初めにコンフルエントな一層の細胞を、培養液中の種々の非毒性濃度のオレアノイルペプチドおよび賦形剤コントロールで処理した。各濃度について、4組ずつ維持し、‘n’値が8となるように解析を2回実施した。サンプルの処理後、細胞をCO2インキュベーターで48時間インキュベートした。続いて前記細胞をシリウスレッド染色技術でデベロップし、コラーゲン強化を解析した。細胞をPBSで十二分に洗浄した。各ウェルにつき1mLのブアンBouin’s液13ピクリン酸、35ホルムアルデヒドおよび氷酢酸を15:5:1の割合で含むを用いRTで1時間インキュベートすることによって、前記細胞をブアン液で固定した。続いて前記固定液をマイクロピペットで吸引することにより除去し、細胞を流水で15分間洗浄した。培養プレートを風乾した後、13のピクリン酸中の01シリウスレッド染料を用いて細胞を染色した。ウェル当たり1mLのシリウスレッド染料を添加し、オービテックOrbitekシェーカーにて70RPMでおだやかに振盪しながらRTで1時間インキュベートした。続いて染料を吸引によって除去し、さらに細胞を001NのHClで十二分に洗浄して未結合色素を除去した。続いて、コラーゲンと結合した色素を、オービテックシェーカーにて70RPMでおだやかに振盪しながらウェルにつき02mLのNaOH01Nに30分間RTで溶解させた。続いて色素を96ウェルのマイクロプレートに移し、フルオスターオプチママイクロプレートリーダーを用いODを544nmで読み取った。非処理細胞に対するコラーゲンのパーセンテージ強化は、非処理細胞のODを正常条件下での最適値として以下のように算出される:細胞増殖の強化=xT-100式中、C=非処理細胞におけるコラーゲンによる吸収;T=サンプル処理細胞におけるコラーゲンによる吸収。以下が観察された:オレアノイルペプチドは125ppmで17のコラーゲン強化を示し、PalLysThrThrLysSerパルミトイル基が配列番号1に結合は125ppmで11のコラーゲン強化を示し、配列番号1のペプチドは125ppmで5のコラーゲン強化を示し、一方、オレアノール酸は強化を全く示さなかった。オレアノイルペプチドが他のものと比較してより良好なコラーゲン強化を示すことは明白である。抗酸化潜在能力:DPPH11ジフェニル2ピクリルヒドラジルスカベンジングアッセイ:DPPHアッセイは、遊離ラジカルを除去する抗酸化剤の能力を判定するためにしばしば用いられる遊離ラジカルは、酸化ストレスによって引き起こされる生物学的損傷の主要要因であることが判明している。本アッセイは、被検化合物の抗酸化能力に関して信頼できる情報を提供することが知られている。本アッセイは、安定な遊離ラジカルDPPHが抗酸化剤によってクェンチングされる際の前記ラジカルの紫から黄色への色の変化を基準にする。15mLのDPPHメタノール溶液01mMおよび合計体積3mLの種々の濃度のサンプルを含むアッセイ混合物のチューブを37°Cの振盪水浴中で30分間インキュベートした。吸収の減少ラジカルの除去と正比例するを517nmで分光光度法により測定する。サンプルの用量依存遊離ラジカルスカベンジング活性を計算し、結果はグラフパッドプリズムソフトを用いてSC50値として表される。スカベンジングのパーセンテージは以下のように算出される:スカベンジング=/Cx100式中、C=阻害物質非存在下における吸収;T=阻害物質存在下における吸収。SC50値は、遊離ラジカルの50スカベンジングに必要な濃度で、したがってSC50値が低ければ低いほど抗酸化潜在能力が高いことを示す。表1から、オレアノイルペプチドのみがDPPHスカベンジング活性を示すことは明白である。抗炎症性潜在能力:TNFα阻害潜在能力:TNFα阻害実験のために、ヒトの全血が用いられる。全血アッセイでは、単球がリポ多糖類LPS刺激によるTNFαの主要供給源であるようである。単球およびマクロファージは、好酸球、マスト細胞、末梢リンパ球および顆粒球のような他の細胞タイプに加えてTNFαの主要な供給源である。炎症性細胞の活性化は、cAMPの細胞内レベルによって影響を受けるcAMPはホスホジエステラーゼイソ酵素によって調節される。LPSはヒト血液におけるTNFα生成のもっとも強力な刺激である。刺激後、本アッセイは定量的サンドイッチ酵素免疫アッセイ技術を利用する。TNFα特異的モノクローナル抗体でマイクロプレートは事前に被覆される。サンプルに存在するTNFαは前記固定抗体と結合する。一切の未結合物質を洗い流した後、TNFαに特異的な酵素結合ポリクローナル抗体を添加する。一切の未結合抗体酵素試薬を除去するために洗浄した後で、基質溶液をウェルに添加する。最初の工程で結合したTNFαの量に比例して発色が生じる。発色を停止させ、色の強度はTNFα含有量と正比例する。健康なドナー由来のヘパリン化血液を10のFBSを含むRPMI1640培養液で1:3に希釈した。適切な賦形剤PBSまたは01のDMSO中の種々の濃度のオレアノイルペプチドとともに希釈血液サンプルを37°Cで1時間、5CO2を含むインキュベーターで予備インキュベートした。01DMSOは水に不溶なサンプルのための賦形剤として用いられた。予備インキュベーションの後で、マクロファージからTNFαを遊離させるために1ngmLのLPSでこの全血細胞を37°Cで5時間5CO2を含むインキュベーターでインキュベートすることによって刺激した。続いて、サンプルを3分間4°Cで3000gにて遠心し、上清をTNFαELISAキットの使用によりTNFα含有量についてアッセイした。全チューブから200μLの上清をマイクロタイタープレートの対応するウェルマウスモノクローナル抗体で予め被覆したマイクロプレートに移し、続いて全ウェルに50μLのアッセイ希釈液を加えた。室温で2時間インキュベートした後、提供された洗浄緩衝液でウェルを完全に洗浄し、続いて200μLのコンジュゲートを各ウェルに添加した。このプレートを室温で2時間インキュベートした。再度洗浄した後、200μLの基質溶液を各ウェルに添加し、さらに室温で20分インキュベートした。50μLの停止溶液を各ウェルに添加した前記停止溶液は青から黄色への色の変化をウェルで引き起こすであろう。光学密度を450nmで読み取り前記光学密度はTNFα含有量に正比例する、サンプル処理によるTNFα含有量の抑制パーセンテージを非処理細胞のそれに対して計算した。サンプルの用量依存阻害活性を計算し、結果はグラフパッドプリズムソフトを用いてIC50値として表した。エラスターゼの阻害パーセンテージは以下のように算出される:阻害=/Cx100式中、C=阻害物質非存在下におけるTNFαによる吸収;T=阻害物質存在下におけるTNFαによる吸収。IC50値はTNFαの50阻害に必要な濃度であり、したがってIC50値が低ければ低いほど、より良好TNFα阻害潜在能力を示す。上記の手順はまた、オレアノイルペプチドによるLTB4阻害の決定にも踏襲される。表1の結果から、オレアノイルペプチドは良好なTNFαおよびLTB4阻害物質であることは明白である。図4はオレアノイルペプチドの種々の濃度におけるTNFα阻害を示す。表1:オレアノイルペプチドのアンチエージング潜在能力に関するinvitro実験オレアノイルペプチドはまたIL1β発現の阻害を示した。表示された最大阻害は、1μgmLの濃度でIL1β発現の3178阻害であった表2、図5。LPSでチャレンジしたヒトの好中球で観察実験を実施した。細胞培養上清の測定によって、4μgmLで2803という顕著なIL6発現の低下が明らかになった表3、図6。100μgmLの用量レベルのロリプラムを実験設計の信頼性および再現性の確認のために標準薬剤として用いた。オレアノイルペプチドをNOおよびPGE2発現についてもまたスクリーニングした。前記は、2μgmLの濃度で最大3185および5000のNOおよびPGE2発現阻害を示した表4、図7;表5、図8。TNFα、IL1β、IL6、LTB4、NOおよびPGE2のような炎症マーカーを抑制するオレアノイルペプチドの能力は、炎症に起因する皮膚加齢の治療におけるその役割の指標となる。表2:ヒト好中球の細胞外インターロイキン1ベータIL1β発現に対する段階的用量のオレアノイルペプチドのOPの影響観察数-3;LPSコントロール:リポ多糖類コントロール;↓:IL1β発現の阻害;P値:<001、<0001表3:ヒト好中球の細胞外インターロイキン6IL6発現に対する段階的用量のオレアノイルペプチドのOPの影響観察数-3;LPSコントロール:リポ多糖類コントロール;↓:IL6発現の阻害;P値:<001、<0001表4:ヒト好中球の細胞外プロスタグランジンE2PGE2発現に対する段階的用量のオレアノイルペプチドのOPの影響観察数-3;LPSコントロール:リポ多糖類コントロール;↓:NO発現の阻害;P値:<001、<0001表5:ヒト好中球の細胞外酸化窒素発現に対する段階的用量のオレアノイルペプチドのOPの影響観察数-3;LPSコントロール:リポ多糖類コントロール;↓:NO発現の阻害;P値:<001、<0001ヒトに対するオレアノイルペプチドの影響に関する実験ヒトの皮膚に対するオレアノイルペプチドの潜在的な影響を調べるために、中等度から重度の加齢徴候を有する約30歳から60歳の年齢範囲の候補者を院内で選別した。オレアノイルペプチド001を含む局所組成物が皮膚塗布用クリームとして調製された。このオレアノイルペプチド含有クリームを前記候補者の顔面皮膚の罹患領域に1日2回、3週間の間連続して塗布した。前記候補者の写真をクリーム適用前および3週間後に撮影した。図9aおよび9bは、オレアノイルペプチドの適用前および適用後に撮影した候補者の写真である。オレアノイルペプチドの適用後にしわが軟化したことは明白である。図10aおよび10bは、オレアノイルペプチドの適用前および適用後に撮影した候補者の写真である。オレアノイルペプチドの適用後に皮膚の厚さが改善されたことは明白である。図11aおよび11bは、オレアノイルペプチドの適用前および適用後に撮影した候補者の写真である。オレアノイルペプチドの適用後に過剰な色素沈着が減少したことは明白である。図12aおよび12bは、オレアノイルペプチドの適用前および適用後に撮影した候補者の写真である。オレアノイルペプチドの適用後に眼の下のくまが減少したことは明白である。これらいずれの証拠も、オレアノイルペプチドの多機能性アンチエージング潜在能力を明白に示している。オレアノイルペプチドおよび成分または植物抽出物を含む組成物の調製本発明のある実施態様では、多様な成分および植物抽出物がオレアノイルペプチドと組み合わせて用いられる。個々の成分は、コナッツ液状内乳、アムラ抽出物、スチルベンまたはその誘導体、カンゾウ抽出物およびテトラヒドロクルクミノイドまたはその誘導体を含む群から選択される。これらの成分は、それぞれ別個にまたは組み合わせてオレアノイルペプチドとともに用いられる。前記成分の乾燥粉末およびオレアノイルペプチドの乾燥粉末を既定の比率で混合し、水または任意の他の溶媒に溶解して組成を完成させる。オレアノイルペプチドとともに用いられる各成分は、皮膚の加齢の具体的な徴候を治療する顕著な活性を示す。皮膚若返りを強化するオレアノイルペプチドおよびココナッツ液状内乳を含む組成物Swiss3T3マウス線維芽細胞を細胞増殖実験に用いた。細胞を96ウェルプレートの各ウェルにつき3000細胞の播種密度でDMEM培養液中に播種した。コンフルエントな一層のSwiss3T3線維芽細胞を、FBSを含まない培養液中の種々の非毒性濃度のサンプルオレアノイルペプチドおよびココナッツ液状内乳を含む組成物および賦形剤コントロールで処理した。各濃度について、6組ずつ維持し、‘n’値が12となるように解析を2回実施した。サンプルの処理後、細胞をCO2インキュベーターで72時間インキュベートした。続いて前記細胞をNRU染色技術でデベロップし、細胞の生存活性を解析した。予め温めたDMEM培養液で調製した中性赤の0003溶液とともに細胞を37°Cで3時間CO2インキュベーターにてインキュベートした。過剰な色素をリン酸緩衝食塩水PBSで洗い流した。リソソームの色素を、25mLの水、245mLのエタノールおよび05mLの氷酢酸から成るデベロッパー溶液100μLでRTにて20分抽出した。フルオスターオプチママイクロプレートリーダーを用い光学密度ODを492nmで読み取った。非処理細胞に対する細胞増殖強化パーセンテージは、非処理細胞のODを正常条件下での最適値として以下のように算出される:細胞増殖の強化=xT-100式中、C=非処理細胞における細胞増殖による吸収;T=サンプル処理細胞における細胞増殖による吸収。表6および図13に表した結果は、細胞増殖がオレアノイルペプチドおよびココナッツ液状内乳を含む組成物で処理された細胞で顕著に強化されることを示し、したがって組成物が皮膚の若返りに有用であることを表示している。表6UVB防御有効性強化のためのオレアノイルペプチドおよびアムラ抽出物を含む組成物Swiss3T3マウス線維芽細胞をUV防御実験に用いた。細胞を96ウェルプレートの各ウェルにつき3000細胞の播種密度で播種した。まず初めに、コンフルエントな一層のSwiss3T3線維芽細胞を、培養液中の種々の濃度のサンプルオレアノイルペプチドおよびアムラ抽出物を含む組成物および賦形剤コントロールで処理し、さらに0036Jcm2のUVB照射に曝露して、サンプルが最大のUV防御を提供する最大非細胞傷害濃度を決定した。0036Jcm2を、防御が存在しない細胞培養に対して約50の細胞死を引き起こすために必要なUV線量として標準化した。サンプルの細胞傷害性潜在能力の観察にのみ供され得るコントロールプレートもまた、UV照射を実施しないで同様な条件下で維持した。各濃度について、6組ずつ維持し、‘n’値が12となるように解析を2回実施した。UV照射後、サンプルを含まない新しい培養液に交換し、前記細胞をCO2インキュベーターで48時間インキュベートした。続いて前記細胞をNRU染色技術でデベロップし、細胞の生存活性を解析した。予め温めたDMEM培養液で調製した中性赤の0003溶液とともに細胞を37°Cで3時間CO2インキュベーターにてインキュベートした。過剰な色素をリン酸緩衝食塩水PBSで洗い流した。リソソームの色素を、25mLの水、245mLのエタノールおよび05mLの氷酢酸から成るデベロッパー溶液100μLでRTにて20分抽出した。マイクロプレートリーダーを用い光学密度ODを492nmで読み取った。UV誘発細胞傷害性パーセンテージの低下、すなわちUV防御のパーセンテージは、サンプルの存在下および非存在下における非照射細胞の細胞傷害性と比較して照射細胞の細胞傷害性に関して算出した。サンプル非処理細胞におけるUV誘発細胞傷害性U1=/C1X100式中、C1=非照射細胞における細胞生存活性による吸収;T1=UV照射細胞における細胞生存活性による吸収。サンプル処理細胞におけるUV誘発細胞傷害性U2=/C2X100式中、C2=非照射サンプル処理細胞における細胞生存活性による吸収;T2=UV照射サンプル処理細胞における細胞生存活性による吸収。UV防御=/U1X100式中、U1=サンプル非処理細胞におけるUV誘発細胞傷害性;U2=サンプル処理細胞におけるUV誘発細胞傷害性。表7および図14に表した結果は、オレアノイルペプチドおよびアムラ抽出物を含む組成物はUV防御を提供することを示し、したがって組成物がUV損傷から皮膚を防御する際に有用であることを示している。表7メラニン阻害強化のためのオレアノイルペプチドおよびスチルベン/カンゾウ抽出物/テトラヒドロクルクミノイドTHCを含む組成物B16F1マウスメラノーマ細胞を6ウェルマイクロタイタープレートの各ウェルにつき2mLのDMEM培養液にて5000細胞ウェルの播種密度で播種した。CO2インキュベーターで24時間インキュベートした後、培養液を∝MSH含有培養液で交換することによりメラニンを01nMの∝MSHで誘発する。続いて、9日間にわたって∝MSH含有培養液およびサンプルを規則的に3日間隔で補充しながら、種々の濃度のサンプルオレアノイルペプチドおよびスチルベン/カンゾウ抽出物/THCを含む組成物で前記細胞を処理した。コントロールウェルは、サンプル調製のために用いた賦形剤だけを用いサンプルで処理しないで維持した。インキュベーション時間の後で、培養液を除去し、細胞をはぎ取り、PBSで洗浄した。その後、メラニンを沸騰水浴中で5分間1NNaOHにより抽出した。メラニン抽出物の吸収はマイクロプレートリーダーにおいて405nmで読み取った。サンプルの阻害作用はメラニン形成の低下を基準に算出した。サンプルの用量依存阻害活性を計算し、結果はグラフパッドプリズムソフトを用いIC50値として表す。メラニン阻害のパーセンテージは以下のように算出される:阻害=/CX100式中、C=阻害物質非存在下でのメラニンによる吸収;T=阻害物質存在下でのメラニンによる吸収。IC50値は、メラニン形成の50阻害に必要な濃度であり、したがってIC50値が低ければ低いほど、より良好なメラニン阻害潜在能力を示す。表8および図15から、オレアノイルペプチドおよびスチルベン/カンゾウ抽出物/THCを含む組成物のIC50値は、個々の作用物質のIC50値よりも顕著に低く、したがって活性の強化を提供することは明白である。表8ペプチドの配列表は添付の付属物1に含まれ、前記はまたファイル名sequencelistciptxtとしてEFSウェブにより提出される。