"単離されるかまたは組換えの抗体であって、インターロイキンIL-3Rα鎖に特異的に結合し得:iそれぞれ、配列番号2、3および4に示されるCDR1、2および3を含む、軽鎖可変領域VL;iiそれぞれ、配列番号5、6および7に示されるCDR1、2および3を含む、重鎖可変領域VH;ならびにiiiKabatのEUナンバリングシステムによるアミノ酸置換S239DおよびI332Eを含む重鎖定常領域、を含む、抗体。単離されるかまたは組換えのヒト化抗体であって、インターロイキンIL-3Rα鎖に特異的に結合し得、かつ:i配列番号8によるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域VL、および配列番号9によるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域VH;およびiiKabatのEUナンバリングシステムによるアミノ酸置換S239DおよびI332Eを含む重鎖定常領域、を含む、抗体。前記重鎖定常領域定常領域が、配列番号11の残基121~450inclusiveその前後値も包含するの間に示される配列を含む、請求項1または2に記載の抗体。単離されるかまたは組換えのヒト化抗体であって、前記抗体は、IL-3Rα鎖に特異的に結合し得、かつ配列番号13に示される配列を含む軽鎖、および配列番号11に示される配列を含む重鎖を含む、抗体。裸のnaked抗体である、請求項1~4のいずれか1項に記載の抗体。請求項1~5のいずれか1項に記載の抗体、および薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含む、医薬組成物。請求項1~5のいずれか1項に記載のヒト化抗体、またはその重鎖もしくは軽鎖をコードする核酸。プロモーターに対して作動可能に連結された請求項1~5のいずれか1項に記載の抗体の重鎖をコードする核酸と、プロモーターに対して作動可能に連結された請求項1~5のいずれか1項に記載の抗体の軽鎖をコードする核酸とを含む、遺伝子構築物。請求項1~5のいずれか1項に記載のヒト化抗体を発現する単離された細胞、または請求項1~5のいずれか1項に記載のヒト化抗体を発現するように遺伝子操作された細胞。請求項7に記載の核酸または請求項8に記載の遺伝子構築物を含む、請求項9に記載の細胞。請求項1~5のいずれか1項に記載の抗体、または請求項6に記載の組成物をそれを必要とする哺乳動物に対して投与することを包含する、哺乳動物における疾患または状態を処置するための方法。請求項1~5のいずれか1項に記載の抗体、または請求項6の組成物の医薬における使用。哺乳動物における疾患または状態の処置のための薬剤の製造における、請求項1~5のいずれか1項に記載の抗体の使用。哺乳動物における疾患または状態の処置における使用のための、請求項1~5のいずれか1項に記載の抗体、または請求項6に記載の組成物。前記疾患または状態がIL-3Rα-媒介性疾患または状態である、請求項11に記載の方法、または請求項12もしくは13に記載の使用、または請求項14に記載の抗体もしくは組成物。前記疾患または状態が癌または自己免疫状態または炎症性状態である、請求項15に記載の方法、使用、抗体または組成物。詳細な説明配列表のキー配列番号1-IL-3Rα鎖のアミノ酸配列配列番号2-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362のLCDR1およびその修飾型のアミノ酸配列配列番号3-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362のLCDR2およびその修飾型のアミノ酸配列配列番号4-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362のLCDR3およびその修飾型のアミノ酸配列配列番号5-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362のHCDR1およびその修飾型のアミノ酸配列配列番号6-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362のHCDR2およびその修飾型のアミノ酸配列配列番号7-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362のHCDR3およびその修飾型のアミノ酸配列配列番号8-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362の軽鎖可変領域およびその修飾型のアミノ酸配列配列番号9-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362の重鎖可変領域およびその修飾型のアミノ酸配列配列番号10-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362およびCSL362Bの重鎖のアミノ酸配列配列番号11-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362X1の重鎖のアミノ酸配列配列番号12-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362X2の重鎖のアミノ酸配列配列番号13-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362の軽鎖およびその修飾型のアミノ酸配列配列番号14-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362のLCDR1およびその修飾型をコードするヌクレオチド配列配列番号15-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362のLCDR2およびその修飾型をコードするヌクレオチド配列配列番号16-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362のLCDR3およびその修飾型をコードするヌクレオチド配列配列番号17-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362のHCDR1およびその修飾型をコードするヌクレオチド配列配列番号18-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362のHCDR2およびその修飾型をコードするヌクレオチド配列配列番号19-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362のHCDR3およびその修飾型をコードするヌクレオチド配列配列番号20-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362の軽鎖可変領域およびその修飾型をコードするヌクレオチド配列配列番号21-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362の重鎖可変領域およびその修飾型をコードするヌクレオチド配列配列番号22-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362およびCSL362Bの重鎖をコードするヌクレオチド配列配列番号23-ヒト化抗-IL-3Rα鎖抗体CSL362の軽鎖およびその修飾型をコードするヌクレオチド配列概要本明細書全体にわたって、別段言及しないか、または文脈上他が必要とされない限り、単一の工程、物質組成、工程の群、または物質の組成の群に対する言及は、1つおよび複数のすなわち、1つ以上のこれらの工程、物質組成、工程の群、または物質の組成の群を包含するものととるべきである。当業者は、本開示が、具体的に記載されるもの以外のバリエーションおよび改変を受けやすいことを理解する。この開示は、全てのこのようなバリエーションおよび改変を包含することが理解されるべきである。本開示はまた、本明細書において言及されるかまたは示される全ての工程、特徴、組成物および化合物を、個々にまたは集合的に、ならびに任意のかつ全ての組み合わせ、または任意の2つ以上のこのような工程または特徴を包含する。本開示は、例示の目的にしか過ぎない、本明細書に記載の特定の実施例による範囲に限定されるべきではない。機能的に等価な生成物、組成物および方法は、明らかに本開示の範囲内である。本明細書の本開示の任意の実施例は、別段特に言及しない限り、本開示の任意の他の実施例に対して必要な変更を加えるものととられるべきである。別段特に規定しない限り、本明細書において用いられる全ての技術的および科学的な用語は、当業者例えば、細胞培養、分子遺伝学、免疫学、免疫組織化学、タンパク質化学、および生化学によって通常理解されるのと同じ意味を有するものととられるべきである。別段示さない限り、本開示で利用される、組換えのタンパク質、細胞培養物、および免疫学的技術は、当業者に周知である、標準的な手順である。このような技術は、J.Perbal,APracticalGuidetoMolecularCloning,JohnWileyandSons1984,J.Sambrookら、MolecularCloning:ALaboratoryManual,ColdSpringHarbourLaboratoryPress1989,T.A.Brown編集,EssentialMolecularBiology:APracticalApproach,第1巻および第2巻,IRLPress1991,D.M.GloverおよびB.D.Hames編集,DNACloning:APracticalApproach,第1~4巻,IRLPress1995および1996,ならびにF.M.Ausubelら編集,CurrentProtocolsinMolecularBiology,GreenePub.AssociatesandWiley-Interscience1988,現在までの全ての更新を含んでいる、EdHarlowandDavidLane編集Antibodies:ALaboratoryManual,ColdSpringHarbourLaboratory,1988、ならびにJ.E.Coliganら編集CurrentProtocolsinImmunology,JohnWileySons現在までの全ての更新を含んでいるのような出典で文献全体にわたって記載されかつ説明される。本明細書の可変領域およびその一部、免疫グロブリン、抗体およびそのフラグメントの説明および定義は、KabatSequencesofProteinsofImmunologicalInterest,NationalInstitutesofHealth,Bethesda,Md.,1987and1991の考察によってさらに明確にされ得る。および/またはという用語、例えば、Xおよび/またはYとは、XおよびYまたはXまたはYのいずれかを意味することが理解されるべきであり、そして両方の意味について、またはいずれかの意味について、明確な支持をもたらすものととられるべきである。本明細書全体にわたって、含む、包含するcomprise、または変形、例えば含む、包含するcomprisesまたは含んでいる、包含しているcomprisingという用語は、言及された要素、整数もしくは工程、または要素、整数もしくは工程の群を包含するが、他の任意の要素、整数もしくは工程、または要素、整数もしくは工程の群を排除することを意味するものではないと理解される。本明細書において用いる場合、由来するという用語は、特定の整数が、特定の起源からその起源に直接由来する必要はないのだが得ることができるということを示すととられるべきである。選択される定義本明細書において用いる場合、免疫グロブリンという用語は、免疫グロブリンアイソタイプIgA、IgD、IgM、IgG、およびIgEならびにその抗原結合フラグメントを含めて、免疫グロブリン遺伝子複合体の任意の抗原結合タンパク質生成物を包含する。例示的な免疫グロブリンは抗体である。例示的な免疫グロブリンは、モノクローナルである。免疫グロブリンという用語に含まれるのは、適切に脱免疫され、それによって哺乳動物に投与された免疫グロブリンに対するその哺乳動物による免疫応答を減少または排除する任意の免疫グロブリンである。ヒトの処置の場合、適切な免疫グロブリンとしては、キメラ、ヒト化またはヒトの免疫グロブリンが挙げられる。また、免疫グロブリンという用語内に含まれるのは、改変、突然変異された、キメラのおよび/またはヒト化の免疫グロブリンであって、これは、天然に存在するか、またはヒト介入によって産生されるか例えば、組換えDNA技術によるにかかわらず、変更されたまたは改変体のアミノ酸残基、配列またはグリコシル化を含む。例示的なタンパク質は、Fcレセプター結合部分を含む。例えば、免疫グロブリンという用語によって包含されるタンパク質としては、ドメイン抗体、ラクダ科camelid抗体および軟骨魚類由来の抗体が挙げられるすなわち、免疫グロブリン新抗原レセプターIgNAR。一般には、ラクダ科の抗体およびIgNARはVHを含むが、VLは欠き、重鎖免疫グロブリンと呼ばれる場合が多い。他の免疫グロブリンとしては、T細胞レセプターおよび他の免疫グロブリン様ドメイン含有タンパク質例えば、可変領域を含む抗原結合部位のおかげで抗原に結合し得るが挙げられる。当業者は、抗体とは一般に、複数のポリペプチド鎖例えば、VLを含むポリペプチド、およびVHを含むポリペプチドからできている可変領域を含むタンパク質であるとみなされるということを認識する。抗体はまた一般には、定常ドメインを含み、そのいくつかは、定常領域、または定常フラグメントまたは結晶形成フラグメントFcに配列され得る。VHおよびVLは相互作用して、1または2~3の密接に関連する抗原に対して特異的に結合し得る抗原結合領域を含んでいるFvを形成する。一般には、哺乳動物由来の軽鎖は、κ軽鎖またはλ軽鎖のいずれかであり、かつ哺乳動物由来の重鎖は、α、δ、ε、γ、またはμである。抗体は、任意の種類例えば、IgG、IgE、IgM、IgD、IgA、およびIgY、任意のクラス例えば、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1およびIgA2またはサブクラスであってもよい。抗体という用語は、ヒト化抗体を包含する。ヒト化抗体という用語は、ヒト抗体由来のFRにグラフトされるか、またはその中に挿入された非ヒト種例えば、マウス由来の抗体由来のCDRを含めてヒト様の可変領域を含んでいる抗体を指すことが理解されようこの種の抗体はまた、CDR-グラフト抗体とも呼ばれる。ヒト化抗体としてはまた、ヒト抗体の1つ以上の残基が、1つ以上のアミノ酸置換によって改変されるか、および/またはヒトタンパク質の1つ以上のFR残基が対応する非ヒト残基で置き換えられている、抗体も包含する。本明細書において例示されるように、ヒト化抗体はまた、ヒト抗体でも、非ヒト抗体でも見出されない残基を含んでもよい。抗体の任意の追加の領域例えば、Fc領域は一般にヒトである。ヒト化は、当該分野で公知の方法、例えば、米国特許第5225539号、米国特許第6054297号、米国特許第7566771号または米国特許第5585089号を用いて行われてもよい。ヒト化抗体という用語はまた、例えば、米国特許第7732578号に記載のような、スーパーヒト化超ヒト化タンパク質も包含する。全長抗体、インタクトな抗体または全抗体という用語は、抗体の抗原結合フラグメントとは対照的に、抗体をその実質的にインタクトな形態で指すために交換可能に用いられる。具体的には、全抗体としては、重鎖および軽鎖Fc領域を含むを有する抗体が挙げられる。定常ドメインは、野性型配列定常ドメイン例えば、ヒト野性型配列定常ドメインまたはそのアミノ酸配列改変体であってもよい。ある場合には、インタクトな抗体は、1つ以上のエフェクター機能を誘導し得る場合がある。裸の抗体という用語は、別の化合物、例えば、毒性化合物または放射性標識化合物にコンジュゲートされていない抗体を指す。抗体の抗原結合フラグメントは、インタクトな抗体の抗原結合ドメインおよび/または可変領域を含む。抗体フラグメントの例としては、Fab、Fab’、Fab’2およびFvフラグメント;二重特異性抗体;直鎖状抗体;単鎖抗体分子および抗体フラグメントから形成された多特異性抗体が挙げられる。本開示の文脈では、エフェクター機能とは、細胞の殺傷を生じる抗体のFc領域天然配列Fc領域またはアミノ酸配列改変体Fc領域に結合する細胞またはタンパク質によって媒介される生物学的活性を指す。抗体または免疫グロブリンによって誘発されるエフェクター機能の例としては以下が挙げられる:補体依存性細胞毒性;抗体依存性細胞媒介性細胞毒性ADCC;抗体依存性細胞食作用ADCP;およびB細胞活性化。本開示の状況では、この用語または抗体によって誘発されるエフェクター機能などの用語は、免疫グロブリンのエフェクター機能または抗体のエフェクター機能などの用語と交換可能に用いられ、各々が他に対して文字上の支持となる。抗体依存性細胞媒介性細胞毒性またはADCCとは、細胞毒性の形態であって、特定の細胞毒性細胞例えば、ナチュラルキラーNK細胞、好中球およびマクロファージ上に存在するFcレセプターFcRs上に結合された分泌Igが、これらの細胞毒性エフェクター細胞を、抗原保有標的細胞に対して特異的に結合し、引き続き細胞毒素によって標的細胞を殺傷できる、細胞毒性の形態を指す。目的の分子のADCC活性を評価するために、インビトロのADCCアッセイを行ってもよい。このようなアッセイに有用なエフェクター細胞としては、末梢血単核球PBMCおよびNK細胞が挙げられる。本明細書において用いる場合、可変領域とは、抗原に特異的に結合し得、かつ例えば、CDRのアミノ酸配列;すなわち、CDR1、CDR2およびCDR3、ならびにフレームワーク領域FRを含む、本明細書で規定の抗体の軽鎖および/または重鎖の一部を指す。例えば、可変領域は、3つまたは4つのFR例えば、FR1、FR2、FR3および必要に応じてFR4と3つのCDRを一緒に含む。VHは、重鎖の可変領域を指す。VLは軽鎖の可変領域を指す。本明細書において用いる場合、相補性決定領域同義語はCDR類;すなわち、CDR1、CDR2、およびCDR3という用語は、その存在が特定の抗原結合に対する主要な寄与因子である、抗体可変領域のアミノ酸残基を指す。各々の可変領域は典型的には、CDR1、CDR2およびCDR3として特定された3つのCDR領域を有する。一実施例では、CDRおよびFRに割り当てられたアミノ酸位置は、KabatSequencesofProteinsofImmunologicalInterest,NationalInstitutesofHealth,Bethesda,Md.,1987および1991本明細書においてはKabatナンバリングシステムとも呼ばれるによって規定される。Kabatのナンバリングシステムによれば、VHFRおよびCDRは、以下のように位置決めされる:残基1~30FR1、31-35CDR1、36~49FR2、50~65CDR2、66~94FR3、95~102CDR3および103~113FR4。Kabatのナンバリングシステムによれば、VLのFRおよびCDRは、以下のように位置決めされる:残基1-23FR1、24-34CDR1、35-49FR2、50-56CDR2、57-88FR3、89-97CDR3および98-107FR4。フレームワーク領域本明細書において以降ではFRは、CDR残基以外の可変ドメイン残基である。定常領域という用語は、本明細書において用いる場合、可変領域以外の抗体の重鎖または軽鎖の一部を指す。重鎖では、定常領域は一般には、複数の定常ドメインおよびヒンジ領域を含み、例えば、IgG定常領域は、以下のリンクされた構成要素、すなわち定常重CH1、リンカー、CH2およびCH3を含む。重鎖では、定常領域は、Fcを含む。軽鎖では、定常領域は一般に、1つの定常ドメインCL1を含む。結晶形成フラグメントまたはFcもしくはFc領域もしくはFc部分本明細書において交換可能に用いられ得るという用語は、少なくとも1つの定常ドメインを含んでおり、一般には必然ではないがグリコシル化されており、1つ以上のFcレセプターおよび/または補体カスケードの成分に結合し得る、抗体のある領域を指す。重鎖定常領域は、任意の5つのアイソタイプから選択され得る:α、δ、ε、γ、またはμ。さらに、種々のサブクラスの重鎖例えば、重鎖のIgGサブクラスは、異なるエフェクター機能を担い、従って、所望の重鎖定常領域を選択することによって、所望のエフェクター機能を有するタンパク質が生成され得る。例示的な重鎖定常領域は、γ1IgG1、γ2IgG2およびγ3IgG3、またはそれらのハイブリッドである。定常ドメインとは、抗体中のドメインであって、その配列が同種の抗体、例えば、IgGまたはIgMまたはIgE中で極めて類似している、ドメインである。抗体の定常領域は概して、複数の定常ドメインを含み、例えば、γ、αまたはδ重鎖の定常領域は、2つの定常ドメインを含む。本明細書において用いる場合、特異的に結合するという用語は、ある免疫グロブリンまたは抗体とIL-3Rα鎖との間の結合相互作用が、その免疫グロブリンまたは抗体によって結合されるIL-3Rα鎖の抗原決定基またはエピトープの存在に依存することを意味する、免疫グロブリンまたは抗体を意味するものととられる。従って、この免疫グロブリンまたは抗体は、IL-3Rα鎖抗原決定基またはエピトープを、他の分子の混合物または生物体中に存在する場合でさえ、優先的に結合するかまたは認識する。一実施例では、この免疫グロブリンまたは抗体は、IL-3Rαまたはこれを発現する細胞と、別の抗原または細胞が反応するかまたは会合するよりも、より高頻度に、より迅速に、より長時間および/またはより大きい親和性で、反応するかまたは会合する。この定義を読めば、例えば、免疫グロブリンまたは抗体は特異的にIL-3Rαに結合し、第二の抗原には特異的に結合することもあるし、しないこともあることが理解される。そのようなものとして、特異的な結合は、必ずしも、別の抗原の排他的な結合も検出不能な結合も必要としない。特異的に結合するという用語は、本明細書において、選択的に結合すると交換可能に用いられる。一般には、結合のついての本明細書の言及は、特異的な結合を意味し、各々の用語は、他の用語について明確な支持を提供すると理解されるものとする。一実施例では、IL-3Rαまたはこれを発現する細胞との特異的な結合とは、IL-3Rαまたはこれを発現する細胞に対して、免疫グロブリンまたは抗体が、100nM以下、例えば、50nM以下、例えば、20nM以下、例えば、1nM以下、例えば、0.8nM以下という平衡定数KDで結合することを意味する。KabatのEUナンバリングシステムという用語は、抗体重鎖のナンバリングが、Kabatら、1991,SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版、UnitedStatesPublicHealthService,NationalInstitutesofHealth,Bethesda.に教示のようなEUインデックスによるものであることを意味することが理解される。EUインデックスはヒトIgG1Eu抗体の残基ナンバリングに基づく。本明細書において用いる場合、IL-3Rα-媒介性状態という用語は、哺乳動物における過剰なIL-3Rα発現および/またはIL-3Rα発現細胞例えば癌細胞例えば、白血病細胞および/または免疫細胞例えば、形質細胞様樹状細胞の過剰な数と関連するか、またはそれによって生じる状態を意味することが理解される。本明細書において用いる場合、骨髄異形成症候群またはMDSという用語は、血球の骨髄クラスの産生不全または形成不全を包含する血液学的医学的状態の多様な収集を指すことが理解される。MDSを有する被験体は、重度の貧血を発症する場合が多く、頻繁な輸血を要する場合がある。多くの場合、MDSが進行すると、進行性の骨髄不全に起因して被験体に血球減少症低い血球数を発症する。MDSの患者のほぼ三分の一では、この疾患は、急性骨髄性白血病AMLに変化する。MDSは、種々のシステムで診断または分類され得、このシステムとしては、French-American-BritishClassificationSystemBennettら、Br.J.Haematol.33:451-458,1976、TheInternationalPrognosticScoringSystemGreenbergら、Blood89:2079-88,1997または世界保健機関が公表したシステムが挙げられる。本明細書において用いる場合、処置、治療treatmentとは、臨床の病理学の経過の間に処置されている個体または細胞の自然な経過を変更するように設計された臨床的介入を指す。処置の望ましい効果としては、疾患進行の速度の低下、疾病状態の改善または緩和、および寛解または予後改善が挙げられる。個体は、例えば、疾患に関連する1つ以上の症状が軽減または排除される場合、首尾よく処置される。本明細書において用いる場合、予防という用語は、個体における疾患の発症または再発に対する予防をもたらすことを包含する。個体は、疾患または疾患再発を受けやすいか、または発症するリスクがある場合があるが、その疾患または再発とはまだ診断されていない。本明細書において用いる場合、疾患もしくは状態またはその再発を発症するか、または再発するというリスクのある哺乳動物は、検出可能な疾患または疾患の症状を有しても、有さなくてもよく、そして本開示による処置の前に、検出可能な疾患または疾患の症状を呈することはあってもよいし、なくてもよい。リスクがあるとは、ある哺乳動物が、当該分野において公知であるか、および/または本明細書に記載されるような、疾患または状態の発生に関連する測定可能なパラメーターである、1つ以上の危険因子を有することを意味する。有効量とは、所望の治療的な結果または予防的な結果を得るために、必要な用量および期間で、有効な少なくともある量を指す。有効量は、1つ以上の投与中で提供されてもよい。本開示のいくつかの実施例では、有効量という用語は、本明細書において前記されるような疾患または状態の処置に効果を発揮するのに必要な量を意味する。この有効量は、処置されるべき疾患または状態に応じて、ならびにまた、処置されている哺乳動物に関する体重、年齢、人種的背景、性別、健康および/または身体的条件および他の要因に応じて変化し得る。一般には、有効量は、医療従事者による慣用的なトライアルおよび実験を通じて決定され得る、比較的広範な範囲例えば、投薬量範囲内におさまる。有効量は、単一用量で、または反復用量で、処置期間にわたって1回投与されてもまたは数回投与されてもよい。治療上有効な量とは、特定の障害例えば、SLEの測定可能な改善を果たすために必要な少なくとも最小濃度である。本明細書における治療上有効な量とは、患者の疾患状態、年齢、性別および体重、ならびにこの免疫グロブリンまたは抗体が個体において所望の応答を誘発する能力などの要因に応じて変化してもよい。治療上有効な量とはまた、この免疫グロブリンまたは抗体の任意の毒性または有害な効果を、治療上有効な効果が上回る量である。予防上有効な量とは、所望の予防的な結果を達成するために必要な用量および期間で、有効な量を指す。一般には、ただし必須ではないが、予防的な用量は、疾患の初期段階より前または初期段階に哺乳動物に用いられるので、予防上有効な量は、治療上有効な量よりも少ない場合があり得る。哺乳動物におけるNK細胞数という本明細書における言及は、哺乳動物由来のサンプル中のNK細胞数を包含し、哺乳動物におけるNK細胞の総数を決定する必要はないことが理解される。この数は、例えば、1mLもしくは1dLあたりの細胞として表現されてもよいし、あるいは、哺乳動物から異なる時点で採取されたサンプル由来の細胞数の割合として表現されてもよい。命名の目的に過ぎず、限定ではないが、IL-3Rα鎖のアミノ酸配列は、GeneIDアクセッション番号3563および/または配列番号1に教示される。本開示によって処置される哺乳動物は、非ヒト霊長類、またはヒトのような哺乳動物であってもよい。一実施例では、この哺乳動物はヒトである。配列同一性という用語は、本明細書において、その広義の意味で用いられ、配列が比較のウインドウにまたがって同一である程度を考慮して、標準的なアルゴリズムを用いて、適切なアラインメントを考慮している正確なヌクレオチドまたはアミノ酸のマッチの数を包含する。配列同一性は、アルゴリズムのコンピューターによる実施を用いる比較の配列のアラインメントによってIntelligeneticsによるGeneworksプログラム;GAP、BESTFIT、FASTA、およびTFASTA、theWisconsinGeneticsSoftwarePackageRelease7.0,GeneticsComputerGroup,575ScienceDriveMadison,WI,USA参照によって本明細書に援用されるまたは選択される任意の種々の方法によって生成される検査および最適アラインメントすなわち、比較ウインドウにまたがって最高の割合の相同性を生じるによって決定され得る。参照はまた、例えば、Altschulら、1997,Nucl.AcidsRes.253389によって開示されるようなプログラムのBLASTファミリーに対してなされてもよい。配列分析の詳細な考察は、CURRENTPROTOCOLSINMOLECULARBIOLOGY、編集.Ausubelら、JohnWileySonsIncNY,1995-1999の単元19.3に見ることができる。この開示はまた、本開示の抗-IL-3Rα免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントの誘導体を提供する。本明細書において用いる場合、誘導体のタンパク質は、例えば、翻訳後の修飾例えば、リン酸化、アセチル化など、グリコシル化の修飾例えば、グリコシル化の付加、除去または変更および/または追加のアミノ酸配列の包含当該分野で理解されるようなによって変更された。本明細書において用いられる場合、核酸という用語は、本開示の免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントまたはそれらのポリペプチド成分をコードし得る一本鎖または二本鎖のDNAおよびRNAを指す。DNAとしては、ゲノムDNAおよびcDNAが挙げられる。RNAとしては、mRNAおよびcRNAが挙げられる。核酸はまた、DNA-RNAハイブリッドであってもよい。核酸は、ヌクレオチド配列を含み、これは、A、G、C、TまたはUの塩基を含む、ヌクレオチドを一般には含む。しかし、ヌクレオチド配列は、他の塩基、例えば、イノシン、メチルシトシン、メチルイノシン、メチルアデノシンおよび/またはチオウリジンただしこれれに限定されないを含んでもよい。ハイブリダイズするおよびハイブリダイゼーションとは、本明細書において、DNA-DNA、RNA-RNAまたはDNA-RNAのハイブリッドを産生するために少なくとも部分的に相補的なヌクレオチド配列の対合を意味して用いられる。相補的なヌクレオチド配列を含むハイブリッド配列は、当該分野で周知であるように、相補的なプリンとピリミジンとの間の塩基対合を通じて生じる。この関連で、修飾プリン例えば、イノシン、メチルイノシンおよびメチルアデノシンおよび修飾ピリミジンチオウリジンおよびメチルシトシンはまた、塩基対中で係合し得ることが理解される。ストリンジェンシーとは本明細書において用いる場合、ハイブリダイゼーションの間の、温度、およびイオン強度の条件、ならびに特定の有機溶媒および/または界面活性剤の有無を指す。ストリンジェンシーが高いほど、ハイブリダイズするヌクレオチド配列の間で必要な相補性のレベルが高くなる。高ストリンジェンシー状態とは、高頻度の相補性塩基を有する核酸のみがハイブリダイズする条件を指す。高ストリンジェンシー条件に対する本明細書の言及は、以下を包含し、かつ網羅している:i42°Cでのハイブリダイゼーションに関して、少なくとも約31v/v~少なくとも約50v/vのホルムアミドおよび少なくとも約0.01M~少なくとも約0.15Mの塩、ならびに42°Cでの洗浄に関して、少なくとも約0.01M~少なくとも約0.15Mの塩;ii65°Cでのハイブリダイゼーションに関して、1のBSA、1mMのEDTA、0.5MのNaHPO4pH7.2、7のSDS、および約1時間の65°Cを超える温度での洗浄に関して、a0.1×SSC、0.1のSDS;またはb0.5のBSA、1mMのEDTA、40mMのNaHPO4pH7.2、1のSDS;ならびにiii約20分間、68°C以上の洗浄に関して、0.2×SSC、0.1のSDS。一般には、洗浄は、Tm=69.30.41GCの-12°Cで行われる。一般には、二本鎖DNAのTmは、ミスマッチの塩基数が1増大するごとに約1°Cずつ低下する。上記にかかわらず、ストリンジェントな条件は、Ausubelら、CURRENTPROTOCOLSINMOLECULARBIOLOGYJohnWileySons,Inc.1995-2009の第2.9章および第2.10章に記載のように、当該分野で公知である。発現ベクターは、プラスミドのような自己複製の染色体外ベクターであっても、または宿主ゲノム中に組み込むベクターであってもいずれでもよい。免疫グロブリン適切には、本開示の免疫グロブリンまたは抗体は、選択的にIL-3Rα鎖に結合し、このことは、この免疫グロブリンまたは抗体とIL-3Rα鎖との間の結合相互作用が、免疫グロブリンによって結合されるIL-3Rα鎖の抗原決定基またはエピトープの存在に依存することを意味する。従って、この免疫グロブリンまたは抗体は、IL-3Rα鎖の抗原決定基またはエピトープに対して、他の分子の混合物または生物体中に存在する場合でさえ、優先的に結合するかまたは認識する。抗体一実施例では、任意の実施例による、本明細書に記載の免疫グロブリンは、例えば、本明細書に記載のCDRおよび/または1つ以上の可変領域を含んでいる、抗体である。適切には、この免疫グロブリンは、それぞれ、配列番号2~7による、軽鎖および重鎖のCDR1、2および3のアミノ酸配列を含むヒト化された、キメラまたはヒトの抗体である。一実施例では、この抗体は、配列番号9による重鎖可変領域のアミノ酸配列および配列番号8による軽鎖可変領域アミノ酸配列を含む。一実施例では、この抗体は、配列番号10、配列番号11または配列番号12による重鎖アミノ酸配列と、配列番号13による軽鎖アミノ酸配列とを含む。一実施例では、この抗体は、組換え抗体である。本明細書に記載のCDRおよび/または可変領域を含んでいる抗体を産生するための方法は、本明細書の開示および/または本明細書に対して引用される文書に基づいて、当業者に明白である。一実施例では、本開示の抗体は、VHおよび/またはVLを含み、これは本明細書に示されるCDR類およびヒト抗体由来のFR類を含んでいる。必要に応じて、FR類は、1つ以上のアミノ酸置換、例えば、2以上または3以上または4以上または5以上または10以上または15以上のアミノ酸置換を含む。一実施例では、FR類は、ヒトFR類に比較して、30以下のアミノ酸置換、例えば、20以下のアミノ酸置換を含む。一実施例では、本開示の抗体は、VHおよび/またはVLを含み、これは本明細書に示されるCDR類および非ヒト霊長類抗体由来のFR類を含んでおり、すなわち、この抗体は、例えば、WO2007/019620に記載のように、シンヒューマナイズドSynhumanizedされている。一実施例では、本開示の抗体は、例えば、WO2006/082406に記載されるような、複合抗体である。本開示の一つの例示的な抗体は、例えば、本明細書に定義されるような、ヒト化抗体である。例示的なヒト化抗体は、本明細書に記載されている。一実施例では、このヒト化抗体は、親和性成熟されている。一実施例では、このヒト化抗体は以下を含む:iVLであって:a配列番号2に示される配列を含んでいるまたは配列番号14に示される配列によってコードされるCDR1;b配列番号3に示される配列を含んでいるまたは配列番号15に示される配列によってコードされるCDR2;およびc配列番号4に示される配列を含んでいるまたは配列番号16に示される配列によってコードされるCDR3;を含むVLと;iiVHであって:d配列番号5に示される配列を含んでいるまたは配列番号17に示される配列によってコードされるCDR1;e配列番号6に示される配列を含んでいるまたは配列番号18に示される配列によってコードされるCDR2;およびf配列番号7に示される配列を含んでいるまたは配列番号19に示される配列によってコードされるCDR3、を含むVH。当業者は、本開示の免疫グロブリンまたは抗体が、例えば、親和性またはエフェクター機能を増大するために、ヒトで天然には見出されない配列を導入する、修飾を含んでもよいことを理解する。本開示はまた、本開示の免疫グロブリンまたは抗体の改変体を提供する。適切には、改変体は、配列番号2~13に示される任意のアミノ酸配列のいずれかと少なくとも80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98または99の配列同一性を有する。例えば、当該分野では、いくつかのアミノ酸は、免疫グロブリンまたは抗体のIL-3Rα特異性および/またはエフェクター機能に対して有害にも有意にも影響することなく、置換または欠失され得る例えば、保存的置換ことが理解される。本開示によって考慮される抗体または免疫グロブリンの誘導体としては、限定するものではないが、アミノ酸側鎖に対する修飾、天然でないアミノ酸および/またはそれらの誘導体の組み込みペプチドまたはポリペプチドの合成および架橋剤の使用の間が挙げられる。本開示の例示的な抗体およびその抗原結合フラグメントは、表1に記載される。抗体フラグメント単一ドメイン抗体いくつかの実施例では、本開示の抗体の抗原結合フラグメントは、単一ドメイン抗体これはドメイン抗体またはdAbという用語と相互交換可能に用いられるであるか、またはそれを含む。単一ドメイン抗体とは、抗体の重鎖可変ドメインの全てまたは一部を含んでいる単一のポリペプチド鎖である。二重特異性抗体、三重特異性抗体、四重特異性抗体いくつかの実施例では、本開示の抗原結合フラグメントは、WO98/044001および/またはWO94/007921に記載されるもののような、二重特異性抗体、三重特異性抗体、四重特異性抗体またはより高次のタンパク質複合体であるか、またはそれらを含む。例えば、二重特異性抗体は、2つの関連するポリペプチド鎖を含むタンパク質であって、この各々のポリペプチド鎖は、構造VL-X-VHまたはVH-X-VLを含んでおり、ここでXは、単一ポリペプチド鎖中のVHおよびVLが、会合するまたはFvを形成することを可能にするために十分な残基を含んでいないリンカーであるか、または存在せず、ここで、1つのポリペプチド鎖のVHは、他のポリペプチド鎖のVLに結合して、抗原結合部位を形成し、すなわち、1つ以上の抗原に対して特異的に結合し得るFv分子を形成する。VLおよびVHは、各々のポリペプチド鎖において同じであってもよいし、またはVLおよびVHは、各々のポリペプチド鎖において異なり、それによって二重に特異的な二重特異性抗体すなわち、異なる特異性を有する2つのFvを含んでいるが形成されてもよい。エフェクター活性を誘発し得る二重特異性抗体、三重特異性抗体、四重特異性抗体などは、IL-3Rαに結合し得る抗原結合ドメイン、および免疫細胞、例えば、T細胞例えば、CD3上の細胞表面分子に対して結合し得る抗原結合ドメインを用いて産生され得る。単鎖FvscFvフラグメント当業者は、scFvsが、単一ポリペプチド鎖中にVHおよびVL領域、ならびにVHとVLとの間のポリペプチドリンカーを含み、これによって、scFvが抗原結合のための所望の構造を形成することが可能になるすなわち、Fvを形成するようにお互いと会合する単一ポリペプチド鎖のVHおよびVLについてことを承知する。例えば、このリンカーは、12を超えるアミノ酸残基を含み、ここでGly4Ser3はscFvについてさらに好ましいリンカーの1つである。本開示はまた、ジスルフィド安定化FvまたはdiFvまたはdsFvを考慮するが、ここでは、単一のシステイン残基は、VHのFRおよびVLのFR中に導入され、そしてシステイン残基が、ジスルフィド結合によって連結されて、安定なFvが生じる。あるいは、またはさらに、本開示は、二量体のscFv、すなわち、非共有結合または共有結合によって、例えば、ロイシンジッパードメイン例えば、FosまたはJun由来によって連結された2つのscFv分子を含むタンパク質を包含する。あるいは、2つのscFvは、例えば、米国特許出願公開第20060263367号に記載のように、両方のscFvが抗原を形成して抗原に結合することを可能にするのに十分な長さのペプチドリンカーによって連結される。本開示はまた、エフェクター活性を誘発し得る二量体のscFvを考慮する。例えば、1つのscFvは、IL-3Rαに結合し、かつ本明細書に記載されるCDRおよび/または可変領域を含み、そして別のscFvが、免疫細胞、例えば、T細胞例えば、CD3またはCD19の上で細胞表面分子に結合する。一実施例では、二量体のタンパク質は、dAbおよびscFvの組み合わせである。エフェクター機能を誘発し得る二重に特異的な抗体フラグメントの例は、例えば、米国特許第7235641号に記載される。他の抗体および抗体フラグメント本開示はまた、以下のような他の抗体および抗体フラグメントも考慮する:i米国特許第5,731,168号に記載のキーアンドホールカギと鍵穴keyandhole二重に特異的なタンパク質;ii例えば、米国特許第4,676,980号に記載のようなヘテロコンジュゲートタンパク質;iii例えば、米国特許第4,676,980号に記載のような化学的架橋を用いて産生されたヘテロコンジュゲートタンパク質;およびivFab3例えば、欧州特許第19930302894号に記載のような。定常領域本開示は、抗体の定常領域および/または抗体のFc領域を含んでいる、免疫グロブリンおよび抗体および抗原結合フラグメントを包含する。本発明の開示の免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントを産生するために有用な定常領域および/またはFc領域の配列は、多数の異なる供給源から得てもよい。いくつかの実施例では、この免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントの定常領域、Fcまたはその一部は、ヒト抗体由来である。定常領域、Fcまたはその一部は、任意の抗体クラス、例としては、IgA、IgM、IgG、IgD、IgAおよびIgE、ならびに任意の抗体アイソタイプ、例としてはIgG1、IgG2、IgG3およびIgG4由来であり得る。一実施例では、定常領域またはFcは、ヒトアイソタイプIgG1、またはヒトアイソタイプIgG2またはヒトアイソタイプIgG3または前述のいずれかのハイブリッドである。一実施例では、定常領域またはFc領域は、エフェクター機能を誘導し得る。例えば、定常領域またはFc領域は、ヒトIgG1またはIgG3のFc領域である。別の実施例では、この定常領域またはFc領域は、IgG1およびIgG2の定常領域もしくはFc領域のハイブリッド、またはIgG1およびIgG3定常領域もしくはFc領域のハイブリッド、またはIgG2およびIgG3定常領域もしくはFc領域のハイブリッドである。ヒトIgG1およびIgG2定常領域またはFc領域の例示的なハイブリッドは、Chappelら、Proc.NatlAcad.Sci.USA,88:9036~9040,1991に記載される。Fc領域がエフェクター機能を誘発し得るか否かを決定するための方法は、当業者に明白であるか、および/または本明細書に記載される。エフェクター機能適切には、本開示の抗-IL-3Rα免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントは、IL-3Rα細胞の少なくとも部分的な欠失、実質的な欠失または排除を容易にするかまたは可能にするエフェクター機能を有するかまたは示す。このようなエフェクター機能は、Fcレセプターに対する結合親和性、抗体依存性細胞媒介性細胞毒性ADCC、抗体依存性細胞媒介性食作用ADCPおよび/または補体依存性細胞毒性CDCを増強し得る。本明細書の説明に基づいて当業者に明らかとなるように、本開示のいくつかの実施例は、エフェクター機能を誘発し得る免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントを包含する。IgGクラスの抗体に関して、これらのエフェクター機能は、種々の免疫細胞上で、および/または補体、例えば、C1qで発現される、FcγレセプターFcγRと呼ばれるレセプターのファミリーとのFc領域の係合によって支配される。Fc/FcγR複合体の形成は、これらの細胞を結合した抗原の部位に補充し、典型的には、シグナル伝達およびその後の免疫応答を生じる。エフェクター機能を増強するため、特に、親Fc領域に対するADCCおよび/またはCDC活性を変更するための、抗体Fc領域に対するFcγRの結合親和性を最適化するための方法は、当業者に公知である。これらの方法は、抗体のFc領域の修飾であって、その関連のFcレセプターとの相互作用を増強し、それがADCCおよびADCPを促進するための能力を増大するための修飾を包含し得る。ADCC活性における増強はまた、Fc領域における保存されたAsn297でIgG1抗体に対して共有結合されたオリゴサッカライドの修飾後に記述された。この関連で、いくつかの非限定的な実施例では、ADCCのようなエフェクター機能の増強は、正常にはグリコシル化された野性型定常ドメインを有する免疫グロブリンまたは抗体の修飾、例としてはグリコシル化の変更もしくは除去例えば、WO00/61739を参照のことおよび/またはアミノ酸配列変異例えば、WO2008036688を参照のことによって達成され得る。一実施例では、この免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントは、ADCCのようなエフェクター機能を誘導し得るような方式で、IL-3Rαに対して結合する。一実施例では、この免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントは、IL-3Rα内のエピトープに対して結合し、これはエフェクター機能、例えば、ADCCを誘発できる。別の実施例では、この免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントは、哺乳動物における細胞上でIL-3Rαに対して結合し得、それによって、ADCCのようなエフェクター機能を誘導する。例えば、この免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントは、ADCCのようなエフェクター機能を誘導するのに十分な時間、細胞の表面上でIL-3Rαに結合したままである。例えば、この免疫グロブリンまたは抗体は、ADCCが誘導されることを可能にするように、内部移行が迅速すぎることはない。あるいは、またはさらに、この免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントは、哺乳動物における細胞の表面上でIL-3Rαに結合されて、免疫エフェクター細胞が免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントの定常領域またはFc領域に結合することを可能にし、そしてADCCのようなエフェクター機能を誘導する。例えば、免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントのFc領域は、この免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントが、免疫エフェクター細胞上のFcレセプター例えば、FcγRと相互作用し得るIL-3Rαに結合されるときのような方式で露出される。本開示の文脈では、免疫エフェクター細胞という用語は、Fcレセプターを発現し、それが結合される細胞をADCCまたはADCPによって殺傷し得る任意の細胞を意味することが理解されるものとする。一実施例では、免疫エフェクター細胞は、NK細胞である。免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントのエフェクター機能に関する上記のそれぞれの段落は、必要な変更を加えればCDCの誘導にあてはまるととられるものとする。例えば、この免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントは、この免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントにおける定常領域またはFc領域に対して補体成分C1qが結合することを可能にする方式で、細胞の表面上のIL-3Rαに結合されてCDCを誘導する。一実施例では、この免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントは、上昇したレベルのエフェクター機能を誘導し得る。一実施例では、定常領域またはFc領域によって誘導されるエフェクター機能のレベルは、IgG1抗体の野性型の定常領域もしくはFc領域またはIgG3抗体の野性型の定常領域もしくはFc領域に対して増強される。別の実施例では、定常領域またはFc領域は、改変のない定常領域またはFc領域に比較して、それが誘導し得るエフェクター機能のレベルを増大するように改変される。このような改変は、この定常領域またはFc領域のアミノ酸レベルおよび/もしくは二次構造のレベルおよび/もしくは三次構造のレベルで、ならびに/またはそのグリコシル化に対してであってもよい。当業者は、より大きいエフェクター機能が、任意の多数の方法で、例えば、より大きいレベルの効果、より持続的な効果またはより高速の効果として顕在化され得ると理解する。例えば、抗-IL-3Rα免疫グロブリン、抗体または抗原結合フラグメントは、抗体依存性の細胞媒介性の細胞毒性ADCCを誘導するエフェクター機能を有するかまたは提示する。一実施例では、定常領域またはFc領域は、1つ以上のアミノ酸の改変であって、それが増強されたエフェクター機能を誘導する能力を増大する改変を含む。一実施例では、この定常領域またはFc領域は、1つ以上のFcγRに対してより大きい親和性で結合する。一実施例では、定常領域またはFc領域が有するFcγRに対する親和性は、野性型の定常領域もしくはFc領域のものよりも1倍を上回って大きいか、または野性型の定常領域もしくはFc領域のものよりも5倍を上回って大きいか、または野性型の定常領域もしくはFc領域のものよりも5倍~300倍大きい。一実施例では、この定常領域またはFc領域は、以下からなる群より選択されるある位置で少なくとも1つのアミノ酸置換を含む:230、233、234、235、239、240、243、264、266、272、274、275、276、278、302、318、324、325、326、328、330、332、および335KabatのEUインデックスに従ってナンバリングした。一実施例では、この定常領域またはFc領域は、以下からなる群より選択される少なくとも1つのアミノ酸置換を含む:P230A、E233D、L234E、L234Y、L234I、L235D、L235S、L235Y、L235I、S239D、S239E、S239N、S239Q、S239T、V240I、V240M、F243L、V264I、V264T、V264Y、V266I、E272Y、K274T、K274E、K274R、K274L、K274Y、F275W、N276L、Y278T、V302I、E318R、S324D、S324I、S324V、N325T、K326I、K326T、L328M、L328I、L328Q、L328D、L328V、L328T、A330Y、A330L、A330I、I332D、I332E、I332N、I332Q、T335D、T335R、およびT335Y、KabatのEUインデックスに従ってナンバリングした。一実施例では、この定常領域またはFc領域は、以下からなる群より選択されるアミノ酸置換を含む:V264I、F243L/V264I、L328M、I332E、L328M/I332E、V264I/I332E、S298A/I332E、S239E/I332E、S239Q/I332E、S239E、A330Y、I332D、L328I/I332E、L328Q/I332E、V264T、V240I、V266I、S239D、S239D/I332D、S239D/I332E、S239D/I332N、S239D/I332Q、S239E/I332D、S239E/I332N、S239E/I332Q、S239N/I332D、S239N/I332E、S239Q/I332D、A330Y/I332E、V264I/A330Y/I332E、A330L/I332E、V264I/A330L/I332E、L234E、L234Y、L234I、L235D、L235S、L235Y、L235I、S239T、V240M、V264Y、A330I、N325T、L328D/I332E、L328V/I332E、L328T/I332E、L328I/I332E、S239E/V264I/I332E、S239Q/V264I/I332E、S239E/V264I/A330Y/I332E、S239D/A330Y/I332E、S239N/A330Y/I332E、S239D/A330L/I332E、S239N/A330L/I332E、V264I/S298A/I332E、S239D/S298A/I332E、S239N/S298A/I332E、S239D/V264I/I332E、S239D/V264I/S298A/I332E、S239D/V264I/A330L/I332E、S239D/I332E/A330I、P230A、P230A/E233D/I332E、E272Y、K274T、K274E、K274R、K274L、K274Y、F275W、N276L、Y278T、V302I、E318R、S324D、S324I、S324V、K326I、K326T、T335D、T335R、T335Y、V240I/V266I、S239D/A330Y/I332E/L234I、S239D/A330Y/I332E/L235D、S239D/A330Y/I332E/V240I、S239D/A330Y/I332E/V264T、S239D/A330Y/I332E/K326E、およびS239D/A330Y/I332E/K326T、KabatのEUインデックスに従ってナンバリングした。別の実施例では、この定常領域またはFc領域は、FcγRIIbに対してよりも効率的にFcγRIIIaに結合する。例えば、この定常領域またはFc領域は、以下からなる群より選択される位置で少なくとも1つのアミノ酸置換を含む:234、235、239、240、264、296、330、およびI332KabatのEUインデックスに従ってナンバリングした。一実施例では、この定常領域またはFc領域は、以下からなる群より選択される少なくとも1つのアミノ酸置換を含む:L234Y、L234I、L235I、S239D、S239E、S239N、S239Q、V240A、V240M、V264I、V264Y、Y296Q、A330L、A330Y、A330I、I332D、およびI332E、KabatのEUインデックスに従ってナンバリングした。例えば、この定常領域またはFc領域は、以下からなる群より選択されるアミノ酸置換を含む:I332E、V264I/I332E、S239E/I332E、S239Q/I332E、Y296Q、A330L、A330Y、I332D、S239D、S239D/I332E、A330Y/I332E、V264I/A330Y/I332E、A330L/I332E、V264I/A330L/I332E、L234Y、L234I、L235I、V240A、V240M、V264Y、A330I、S239D/A330L/I332E、S239D/S298A/I332E、S239N/S298A/I332E、S239D/V264I/I332E、S239D/V264I/S298A/I332E、およびS239D/V264I/A330L/I332E、KabatのEUインデックスに従ってナンバリングした。さらなる実施例では、この定常領域またはFc領域は、野性型の定常領域またはFc領域によって媒介されるより大きいレベルでADCCを誘発する。例えば、この定常領域またはFc領域は、野性型の定常領域またはFc領域によって誘発されるよりも5倍より大きいかまたは5倍~1000倍大きいレベルでADCCを誘発する。一実施例では、この定常領域またはFc領域は、以下からなる群より選択される位置で少なくとも1つのアミノ酸置換を含む:230、233、234、235、239、240、243、264、266、272、274、275、276、278、302、318、324、325、326、328、330、332、および335、KabatのEUインデックスに従ってナンバリングした。一実施例では、この定常領域またはFc領域は、以下からなる群より選択される少なくとも1つのアミノ酸置換を含む:P230A、E233D、L234E、L234Y、L234I、L235D、L235S、L235Y、L235I、S239D、S239E、S239N、S239Q、S239T、V240I、V240M、F243L、V264I、V264T、V264Y、V266I、E272Y、K274T、K274E、K274R、K274L、K274Y、F275W、N276L、Y278T、V302I、E318R、S324D、S324I、S324V、N325T、K326I、K326T、L328M、L328I、L328Q、L328D、L328V、L328T、A330Y、A330L、A330I、I332D、I332E、I332N、I332Q、T335D、T335R、およびT335Y、KabatのEUインデックスに従ってナンバリングした。一実施例では、この定常領域またはFc領域は、以下からなる群より選択されるアミノ酸置換を含む:V264I、F243L/V264I、L328M、I332E、L328M/I332E、V264I/I332E、S298A/I332E、S239E/I332E、S239Q/I332E、S239E、A330Y、I332D、L328I/I332E、L328Q/I332E、V264T、V240I、V266I、S239D、S239D/I332D、S239D/I332E、S239D/I332N、S239D/I332Q、S239E/I332D、S239E/I332N、S239E/I332Q、S239N/I332D、S239N/I332E、S239Q/I332D、A330Y/I332E、V264I/A330Y/I332E、A330L/I332E、V264I/A330L/I332E、L234E、L234Y、L234I、L235D、L235S、L235Y、L235I、S239T、V240M、V264Y、A330I、N325T、L328D/I332E、L328V/I332E、L328T/I332E、L328I/I332E、S239E/V264I/I332E、S239Q/V264I/I332E、S239E/V264I/A330Y/I332E、S239D/A330Y/I332E、S239N/A330Y/I332E、S239D/A330L/I332E、S239N/A330L/I332E、V264I/S298A/I332E、S239D/S298A/I332E、S239N/S298A/I332E、S239D/V264I/I332E、S239D/V264I/S298A/I332E、S239D/V264I/A330L/I332E、S239D/I332E/A330I、P230A、P230A/E233D/I332E、E272Y、K274T、K274E、K274R、K274L、K274Y、F275W、N276L、Y278T、V302I、E318R、S324D、S324I、S324V、K326I、K326T、T335D、T335R、T335Y、V240I/V266I、S239D/A330Y/I332E/L234I、S239D/A330Y/I332E/L235D、S239D/A330Y/I332E/V240I、S239D/A330Y/I332E/V264T、S239D/A330Y/I332E/K326E、およびS239D/A330Y/I332E/K326T、KabatのEUインデックスに従ってナンバリングした。一実施例では、この定常領域またはFc領域は、KabatのEUインデックスに従ってナンバリングした、以下のアミノ酸置換S239D/I332Eを含む。この定常領域またはFc領域は、野性型の定常領域またはFc領域に比較してFcγRIIIaに対する親和性の約14倍の増大、および野性型の定常領域またはFc領域に比較して約3.3倍増大されたADCCの誘発能力を有する。一実施例では、この定常領域は、配列番号11の残基121~450その前後値も包含するに示される配列を含む。一実施例では、Fc領域は、配列番号11の残基234~450に示される配列を含む。一実施例では、この定常領域またはFc領域は、KabatのEUインデックスに従ってナンバリングした、以下のアミノ酸置換S239D/A330L/I332Eを含む。この定常領域またはFc領域は、野性型の定常領域またはFc領域に比較してFcγRIIIaに対して親和性の約138倍の増大、および野性型の定常領域またはFc領域に比較してADCCを誘発する能力の約323倍の増大を有する。一実施例では、この定常領域は、配列番号12の残基121~450その前後値も包含するの間で示される配列を含む。一実施例では、Fc領域は、配列番号12の残基234~450の間に示される配列を含む。Fc領域がエフェクター機能を誘導する能力を増大するさらなるアミノ酸置換は、当該分野で公知であるか、および/または例えば、米国特許第6737056号または米国特許第7317091号に記載される。一実施例では、この定常領域またはFc領域のグリコシル化は、それが増強されたエフェクター機能を誘導する能力を増大するように変更される。この関連で、哺乳動物細胞によって産生される天然の抗体は典型的には、この定常領域またはFc領域のCH2ドメインのAsn297に対するN連結によって一般に結合される、分岐した、二分岐のオリゴサッカライドを含む。このオリゴサッカライドは、種々の炭水化物、例えば、マンノース、N-アセチルグルコサミンGlcNAc、ガラクトース、およびシアル酸、ならびに二分岐のオリゴサッカライド構造の幹においてGlcNAcに結合されたフコースを含んでもよい。いくつかの実施例では、本開示による定常領域またはFc領域は、Fc領域に対して直接または間接的に結合されたフコースを欠く、炭水化物構造を含み、すなわち、Fc領域は、アフコシル化される。このような改変体は、ADCCを誘導する能力が改善されている場合がある。アフコシル化抗体を産生するための方法は、α-1,6-フコシルトランスフェラーゼFUT8を発現できない細胞株で免疫グロブリンまたは抗体を発現すること例えば、Yumane-Ohnukiら、Biotechnol.Bioengineer.,87:614-622,2004に記載のとおり、FUT8に対する低分子干渉性RNAを発現する細胞においてこの免疫グロブリンまたは抗体を発現すること例えば、Moriら、Biotechnol.Bioengineer.,88:901~908,2004に記載のように、グアノシンジホスフェートGDP-マンノース4,6-デヒドラターゼGMDを発現できない細胞中でこの免疫グロブリンまたは抗体を発現すること例えば、Kandaら、J.Biotechnol.,130:300-310,2007に記載のようにを包含する。本開示はまた、例えば、β1,4-N-アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼIIIGnT-III例えば、Umanaら、Nat.Biotechnol.,17:176-180,1999に記載されるようなを発現するように改変された細胞株を用いて産生される、フコシル化のレベルが低下している免疫グロブリンの使用も考慮する。一実施例では、本開示による免疫グロブリンまたは抗体は、アフコシル化される。例えば、この免疫グロブリンまたは抗体は、FUT8を発現しない細胞例えば、哺乳動物細胞、例えば、CHO細胞中で産生される。他の方法としては、増強されたFc媒介性エフェクター機能を誘導し得る抗体を本質的に産生する細胞株例えば、ウイルスワクチンの産生のためのダックの胚由来の幹細胞、WO2008/129058;トリのEBX登録商標細胞での組換えタンパク質産生、WO2008/142124の使用が挙げられる。本開示の方法において有用な免疫グロブリンとしてはまた、両端切断のオリゴサッカライドを有する免疫グロブリン例えば、ここでは、定常領域またはFc領域に対して結合された二分岐のオリゴサッカライドがGlcNAcによって両端切断されるが挙げられる。このような免疫グロブリンは、フコシル化が低下していてもよいし、および/またはADCC機能が改善されていてもよい。このような免疫グロブリンの例は、例えば、米国特許第6602684号および米国特許出願公開第20050123546号に記載される。この定常領域またはFc領域に結合されたオリゴサッカライドにおける少なくとも1つのガラクトース残基を有する免疫グロブリンもまた考慮される。このような免疫グロブリンは、CDC機能が改善されている場合もある。このような免疫グロブリンは、例えば、WO1997/30087およびWO1999/22764に記載される。ADCC活性のレベルの増強を誘導する免疫グロブリンの非限定的な例としては以下が挙げられる:i配列番号11に示される配列を含む重鎖と配列番号13に示される配列を含む軽鎖とを含む抗体;ii配列番号12に示される配列を含む重鎖と配列番号13に示される配列を含む軽鎖とを含む抗体;およびiii配列番号10に示される配列を含む重鎖と配列番号13に示される配列を含む軽鎖とを含み、ここでこの重鎖定常領域がアフコシル化されている抗体。増強したレベルのADCC活性を誘導する、開示の有利な抗体は、配列番号11に示される配列を含む重鎖と配列番号13に示される配列を含む軽鎖とを含む。本明細書において考察されるとおり、哺乳動物に対してこの抗体を投与した後例えば、投与の少なくとも7または8または11または17または22または29日後哺乳動物におけるNK細胞数は、以下の1つ以上に比べて増大される:iこの抗体の先行技術の投与の哺乳動物におけるNK細胞数;ii配列番号10に示される配列を含む重鎖と配列番号13に示される配列を含む軽鎖とを含む抗体であって、ここでこの重鎖定常領域がアフコシル化されている抗体を投与された哺乳動物におけるNK細胞数例えば、投与後同じ日に評価した;およびiiiIL-3Rα鎖に特異的に結合し、かつヒトIgG1定常領域を有する抗体を投与された哺乳動物におけるNK細胞数例えば、投与後同じ日に評価した。免疫グロブリンまたは抗体がエフェクター機能を誘導する能力を決定するための方法であって、当該分野で公知であるか、および/または本明細書にさらに詳細に記載される方法。追加の改変本開示はまた、免疫グロブリンに対するさらなる改変を考慮する。例えば、この免疫グロブリンまたは抗体は、免疫グロブリンの半減期を延長する1つ以上のアミノ酸置換を含む。例えば、この免疫グロブリンまたは抗体は、定常領域またはFc領域を含み、これは、新生児のFc領域FcRnについてのこの定常領域またはFc領域の親和性を増大する1つ以上のアミノ酸置換を含んでいる。例えば、この定常領域またはFc領域は、低pH、例えば、およそpH6.0でのFcRnに対する親和性の増大を有し、エンドソームにおけるFc/FcRnの結合を容易にする。一実施例では、この定常領域またはFc領域は、およそpH7.4でのその親和性に比較しておよそpH6でFcRnに対して親和性の増大を有し、これによって、定常領域またはFcを細胞再循環後の血液に再放出することが容易になる。これらのアミノ酸置換は、血液からのクリアランスを低下させることによって、免疫グロブリンの半減期を延長するために有用である。例示的なアミノ酸置換としては、KabatのEUナンバリングシステムによる、T250Qおよび/またはM428Lが挙げられる。追加のまたは代替的なアミノ酸置換は、例えば、米国特許出願公開第20070135620号に記載される。核酸本開示の別の実施例では、本開示の免疫グロブリンまたは抗体この免疫グロブリンまたは抗体のフラグメント、改変体および誘導体を含むをコードする単離された核酸を提供する。核酸の特定の実施例は、本開示の免疫グロブリンまたは抗体のCDR1~6をそれぞれコードする、配列番号14~19のうちの1つ以上に示されるヌクレオチド配列を含む。核酸の他の実施例は、配列番号20~23のうちの1つ以上に示されるヌクレオチド配列を含む。本開示はまた、本明細書において以前に記載されるような、本開示の免疫グロブリンまたは抗体の改変体をコードする核酸ホモログを考慮する。例示的な、核酸ホモログは、配列番号2~13のいずれか1つをコードする単離された核酸と少なくとも80または85、例えば少なくとも90または95または99のヌクレオチド配列同一性を共有する。適切には、この核酸ホモログは、IL-3Rαに特異的に結合し得るマウス可変領域を含むタンパク質をコードしない。核酸ホモログは、高ストリンジェンシー条件下で、本開示の単離された核酸に対してハイブリダイズしてもよい。タンパク質産生組換え発現一実施例では、任意の実施例による本明細書に記載の免疫グロブリンまたは抗体は組換え体である。単なる例として、本開示の組換えの免疫グロブリンまたは抗体は、以下の工程を含んでいる方法によって産生されてもよい:i1つ以上の調節性ヌクレオチド配列例えば、プロモーターに対して作動可能に連結された、開示の単離された核酸を含む発現構築物を調整すること;ii適切な宿主細胞を、発現構築物を用いてトランスフェクトまたは形質転換すること;iiiこの宿主細胞において組換えの免疫グロブリンまたは抗体を発現すること;およびivこの宿主細胞から組換えの免疫グロブリンまたは抗体を単離すること。組換えの免疫グロブリンの場合、これをコードする核酸は、発現ベクター中にクローニングされ得、次いでこれがトランスフェクトされなければ免疫グロブリンまたは抗体タンパク質を産生しない宿主細胞、例えば、大腸菌細胞、酵母細胞、昆虫細胞または哺乳動物細胞、例えば、サルCOS細胞、チャイニーズハムスター卵巣CHO細胞、ヒト胎児腎臓HEK細胞、または骨髄腫細胞中にトランスフェクトされる。免疫グロブリンまたは抗体を発現するために用いられる例示的な細胞は、CHO細胞、骨髄腫細胞またはHEK細胞である。この細胞はさらに、改変された免疫グロブリンまたは抗体の発現を容易にする1つ以上の遺伝的変異および/または欠失を含んでもよい。1つの非限定的な例は、発現された免疫グロブリンまたは抗体のフコシル化に必要な酵素をコードする遺伝子の欠失である。例えば、欠失された遺伝子は、FUT8をコードする。FUT8欠失CHO細胞の市販の供給源は、BiowaPotelligent商標細胞である。例えば、アフコシル化された免疫グロブリンまたは抗体の発現のために用いられる細胞は、FUT8-欠失CHO細胞、例えば、BiowaのPotelligent商標細胞である。これらの目標を達成するための分子クローニング技術は、当該分野で公知であり、例えば、Ausubelら、編集,CurrentProtocolsinMolecularBiology,GreenePub.AssociatesandWiley-Interscience1988,現在までの全ての更新を含んでいる、またはSambrookら、MolecularCloning:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratoryPress1989に記載されている。広範な種々のクローニングおよびインビトロの増幅方法は、組換え核酸の構築のために適切である。組換えの抗体を産生する方法も当該分野で公知である。米国特許第4816567号または米国特許第5530101号を参照のこと。単離後、核酸を、無細胞系で、または細胞中でのさらなるクローニングDNAの増幅のため、または発現のために、遺伝子構築物または発現ベクター中でプロモーターに作動可能に連結して挿入する。従って、本開示の別の実施例では、本開示の単離された核酸および1つ以上の追加のヌクレオチド配列を含む、遺伝子構築物を提供する。適切には、この遺伝子構築物は、当該分野でよく理解されるとおり、プラスミド、バクテリオファージ、コスミド、酵母または細菌人工染色体の形態であるか、またはその遺伝子成分を含む。遺伝子構築物は、組換えDNA技術による操作のため、および/または本開示の核酸もしくはコードされる免疫グロブリンもしくは抗体の発現のための、細菌または他の宿主細胞における単離された核酸の維持および増殖に適切であり得る。宿主細胞発現の目的のため、遺伝子構築物は、発現構築物である。適切には、発現構築物は、プロモーターまたは調節性配列のような発現ベクター中の、1つ以上の追加の配列に対しして作動可能に連結される本開示の核酸を含む。典型的には、調節性のヌクレオチド配列としては、限定するものではないが、プロモーター配列、リーダーまたはシグナル配列、リボソーム結合部位、転写開始および終止配列、翻訳開始および終止配列、ならびにエンハンサーまたはアクチベーター配列を挙げることができる。本明細書において用いる場合、プロモーターという用語は、そのもっとも広義の文脈でとるべきであり、これには、ゲノム遺伝子の転写調節性配列を包含し、この配列には、例えば、発育および/もしくは外部刺激に対する応答において、または組織特異的な方式において、核酸の発現を変更する追加の調節性エレメント例えば、上流の活性化配列、転写因子結合部位、エンハンサーおよびサイレンサーの有無において、正確な転写開始に必要である、TATAボックスまたは開始エレメントを含む。本発明の文脈では、プロモーターという用語はまた、これが作動可能に連結される、組換え、合成、もしくは融合の核酸、または核酸の発現を付与するか、活性化するかもしくは増強する誘導体を記述するためにも用いられる。例示的なプロモーターは、このような核酸の発現をさらに増強するか、および/または空間的な発現および/または一時的な発現を変更するために、1つ以上の特異的な調節性エレメントの追加のコピーを含んでもよい。本明細書において用いる場合、作動可能に連結されるという用語は、核酸の発現がプロモーターによって制御されるように、その核酸に対してプロモーターを位置決めすることを意味する。細胞中での発現のために多くのベクターが利用可能である。このベクター成分は一般には、限定するものではないが、以下のうちの1つ以上を包含する:シグナル配列、免疫グロブリンまたは抗体をコードする配列例えば、本明細書に提供される情報に由来、エンハンサーエレメント、プロモーター、および転写終止配列。当業者は、免疫グロブリンの発現のために適切な配列を承知している。例示的なシグナル配列としては、原核生物分泌シグナル例えば、pelB、アルカリホスファターゼ、ペニシリナーゼ、Ipp、または熱安定エンテロトキシンII、酵母分泌シグナル例えば、インベルターゼリーダー、α因子リーダー、または酸ホスファターゼリーダーまたは哺乳動物分泌シグナル例えば、単純ヘルペスgDシグナルが挙げられる。哺乳動物細胞において活性な例示的なプロモーターとしては、サイトメガロウイルス早初期プロモーターCMV-IE、ヒト伸長因子1-αプロモーターEF1、低分子核内RNAプロモーターU1aおよびU1b、α-ミオシン重鎖プロモーター、シミアンウイルス40プロモーターSV40、ラウス肉腫ウイルスプロモーターRSV、アデノウイルス主要後期プロモーター、β-アクチンプロモーター;CMVエンハンサー/β-アクチンプロモーターを含むハイブリッドの調節性エレメント、または免疫グロブリンもしくは抗体プロモーターまたはそれらの活性なフラグメントが挙げられる。有用な哺乳動物宿主細胞株の例は、SV40で形質転換されたサル腎臓CV1株COS-7、ATCCCRL1651;ヒト胎児腎臓株懸濁培養物中での増殖のためにサブクローニングされた293または293細胞;ベビーハムスター腎臓細胞BHK,ATCCCCL10;またはチャイニーズハムスター卵巣細胞CHOである。例えば、Pichiapastoris、SaccharomycescerevisiaeおよびS.pombeを含む群より選択される酵母細胞のような、酵母細胞での発現のために適切な代表的なプロモーターとしては、限定するものではないが、ADH1プロモーター、GAL1プロモーター、GAL4プロモーター、CUP1プロモーター、PHO5プロモーター、nmtプロモーター、RPR1プロモーター、またはTEF1プロモーターが挙げられる。単離された核酸またはこれを含んでいる発現構築物を発現のための細胞中に導入するための手段は、当業者に公知である。所定の細胞に用いられる技術は、公知の首尾よい技術に依存する。組換えDNAを細胞に導入するための手段としては、マイクロインジェクション、DEAE-デキストランによって媒介されるトランスフェクション、リポフェクタミンGibco,MD,USAおよび/またはセルフェクチンGibco,MD,USAを用いることによるなどのリポソームによって媒介されるトランスフェクション、PEG-媒介性のDNA取り込み、エレクトロポレーションおよび微小粒子銃microparticlebombardment例えば、DNA-コーティングタングステンまたは金粒子AgracetusInc.,WI,USAを用いるものなどがとりわけ挙げられる。この免疫グロブリンまたは抗体を産生するために用いられる宿主細胞は、用いられる細胞種次第で、種々の媒体中で培養され得る。市販の媒体、例えば、Ham’sF10Sigma、MinimalEssentialMediumMEM、Sigma、RPM1-1640Sigma、およびダルベッコの改変イーグル培地DMEM,Sigmaは、哺乳動物細胞を培養するために適切である。本明細書に開示される他の細胞種類を培養するための媒体は、当該分野で公知である。タンパク質の単離免疫グロブリンまたは抗体を精製するための方法は、当該分野で公知であるか、および/または本明細書に記載される。免疫グロブリンまたは抗体が、培地中に分泌される場合、このような発現系由来の上清は、市販のタンパク質濃縮フィルター、例えば、AmiconまたはMilliporePellicon限外濾過ユニットを用いて最初に濃縮され得る。プロテアーゼインヒビター、例えば、PMSFが、タンパク質分解を阻害するために、前述のいずれかの工程に含まれてもよく、そして抗生物質が、外来性の汚染物質の増殖を妨げるために含まれてもよい。細胞から調製される免疫グロブリンまたは抗体は、例えば、イオン交換、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、アフィニティクロマトグラフィー例えば、プロテインAアフィニティクロマトグラフィー、またはプロテインGクロマトグラフィー、または前述の任意の組み合わせを用いて精製され得る。これらの方法は当該分野で公知であり、かつ例えば、WO99/57134またはEdHarlowおよびDavidLane編集Antibodies:ALaboratoryManual,ColdSpringHarbourLaboratory,1988に記載されている。当業者はまた、免疫グロブリンまたは抗体が、タグを含んで、精製または検出を容易にするように改変されてもよいことも承知する例えば、ポリ-ヒスチジンタグ、例えば、ヘキサ-ヒスチジンタグ、またはインフルエンザウイルス血球凝集素HAタグ、またはシミアンウイルス5V5タグ、またはFLAGタグ、またはグルタチオンS-トランスフェラーゼGSTタグ。次いで、アフィニティ精製のような、当該分野で公知の方法を用いて、得られた免疫グロブリンまたは抗体を精製する。例えば、ヘキサ-ヒスチジンタグを含んでいる免疫グロブリンまたは抗体は、この免疫グロブリンまたは抗体を含むサンプルと、固体または半固体支持体上に固定されたヘキサ-ヒスチジンタグに特異的に結合するニッケル-ニトリロ三酢酸Ni-NTAとを接触させること、このサンプルを洗浄して、未結合の免疫グロブリンを除去すること、および引き続き、結合した免疫グロブリンを溶出することによって精製される。あるいは、またはさらに、タグに結合するリガンドまたは抗体は、アフィニティ精製方法で用いられる。一実施例では、この免疫グロブリンまたは抗体はまた、第Xa因子またはトロンビンについてのようなプロテアーゼ切断部位を有し、これによって、関連のプロテアーゼがこの免疫グロブリンまたは抗体を部分的に消化し、それによってこの免疫グロブリンまたは抗体をこのタグから遊離することが可能になる。次いで、この遊離された抗体または免疫グロブリンは、続くクロマトグラフィー分離によって融合パートナーから単離され得る。免疫グロブリンのアッセイ活性本開示の免疫グロブリンまたは抗体は、例えば、下に記載されるように、生物学的活性について容易にスクリーニングされる。結合アッセイこのようなアッセイの1形態は、例えば、Scopesに記載されるような抗原結合アッセイであるProteinpurification:principlesandpractice,第三版,SpringerVerlag,1994。このような方法は一般には、免疫グロブリンまたは抗体を標識すること、およびこれを固定された抗原と接触させることを包含する。非特異的な結合タンパク質を除去するための洗浄後、標識の量、および結果として、結合されたタンパク質が検出される。当然ながら、この免疫グロブリンまたは抗体は固定されて、抗原が標識され得る。パニング型のアッセイ、例えば、本明細書に記載または例示されるアッセイもまた用いられてもよい。中和の決定本開示のいくつかの実施例では、免疫グロブリンまたは抗体は、IL-3シグナル伝達を中和できる。免疫グロブリンがレセプターを通じたリガンドのシグナル伝達を中和する能力をアッセイするためには種々のアッセイが当該分野で公知である。一実施例では、この免疫グロブリンまたは抗体は、IL-3が3Rα鎖ならびに/またはIL-3Rα鎖およびIL-3Rβ鎖のヘテロ二量体に結合することを軽減するかまたは予防する。これらのアッセイは、標識されたIL-3および/または標識された免疫グロブリンを用いる競合的な結合アッセイとして行われ得る。例えば、標識されたIL-3Rαもしくはその細胞外領域抗体のFc領域に融合されたまたはIL-3R固定されてIL-3を標識されるを発現する細胞を次に、固定されたレセプターまたは細胞に対して、試験の免疫グロブリンまたは抗体の有無において接触して、結合された標識の量を検出する。タンパク質の非存在下においてと比較して抗体または免疫グロブリンの存在下における結合された標識の量の減少によって、IL-3のIL-3Rに対する結合を、この免疫グロブリンまたは抗体が減少または防止することが示される。複数の濃度の免疫グロブリンまたは抗体を試験することによって、IC50すなわち、IL-3Rに結合するIL-3の量を減らすタンパク質の濃度を決定するか、またはEC50すなわち、免疫グロブリンまたは抗体によって達成される、IL-3Rに結合するIL-3の結合の最大阻害の50を達成するタンパク質の濃度を決定する。別の実施例では、この免疫グロブリンまたは抗体は、好塩基球からのIL-3-媒介性ヒスタミン放出を軽減または予防する。例えば、好塩基球を含む低密度の白血球を、IgE、IL-3および種々の濃度の免疫グロブリンまたは抗体とインキュベートする。コントロールの細胞は、免疫グロブリン陽性コントロールもIL-3陰性コントロールも含まない。次いで、放出されたヒスタミンのレベルは、標準的な技術、例えば、RIAを用いて評価される。ヒスタミン放出のレベルを陽性コントロールよりも少ないレベルまで減少する免疫グロブリンまたは抗体は、IL-3シグナル伝達を中和するとみなされる。一実施例では、減少のレベルは、免疫グロブリンまたは抗体の濃度と関連している。IL-3-媒介性ヒスタミン放出を評価するための例示的な方法は、例えば、Lopezら、J.Cell.Physiol.,145:69,1990に記載される。さらなる実施例では、この免疫グロブリンまたは抗体は、白血病細胞株TF-1のIL-3-媒介性増殖を減少または防止する。例えば、TF-1細胞は、IL-3またはGM-CSFなしに、増殖を停止するためにそれらについて十分な時間例えば、24~48時間培養される。次いで、細胞をIL-3および種々の濃度の免疫グロブリンまたは抗体の存在下で培養する。コントロールの細胞は、この免疫グロブリンまたは抗体陽性コントロールまたはIL-3陰性コントロールとは接触されない。次いで、細胞増殖を、標準的な技術、例えば、3H-チミジン取り込みを用いて評価する。IL-3の存在下で陽性コントロール未満のレベルまで細胞増殖を軽減または防止する免疫グロブリンまたは抗体は、IL-3シグナル伝達を中和するとみなされる。IL-3シグナル伝達中和を評価するための別のアッセイは、この免疫グロブリンまたは抗体が内皮細胞に対するIL-3-媒介性の効果を減少または防止するか否かを決定することを包含する。例えば、ヒト臍帯静脈内皮細胞HUVECを、IL-3必要に応じてIFN-γとともにおよび種々の濃度の免疫グロブリンまたは抗体の存在下で培養する。次いで、分泌されたIL-6の量を、例えば、酵素連結免疫吸着アッセイELISAを用いて評価する。コントロール培養物は、免疫グロブリンもしくは抗体陽性コントロールも、IL-3陰性コントロールも含まない。IL-3の存在下においてIL-6産生を陽性コントロール未満のレベルまで減少または予防する免疫グロブリンまたは抗体は、IL-3シグナル伝達を中和するとみなされる。IL-3シグナル伝達の中和を評価するための他の方法が、本開示によって考慮される。エフェクター機能の決定ADCC活性を評価するための方法は、当該分野で公知である。一実施例では、ADCC活性のレベルは、51Cr放出アッセイ、ユーロピウム放出アッセイ、または35S放出アッセイを用いて評価される。これらのアッセイの各々では、IL-3Rαを発現する細胞を、1つ以上の言及した化合物とともに、この化合物が細胞によって取り込まれるのに十分な時間および条件下で培養する。35S放出アッセイの場合、IL-3Rαを発現する細胞を、35S-標識されたメチオニンおよび/またはシステインとともに、標識されたアミノ酸が、新規に合成されたタンパク質に組み込まれるのに十分な時間培養されてもよい。次いで、細胞を、この免疫グロブリンまたは抗体の有無において、および免疫エフェクター細胞、例えば、末梢血単核球PBMCおよび/またはNK細胞の存在下で培養する。次に、細胞培養培地中の51Cr、ユーロピウムおよび/または35Sの量を検出し、免疫グロブリンの非存在下における量と比較した免疫グロブリンまたは抗体の存在下における増大によって、この免疫グロブリンがエフェクター機能を有することが示される。免疫グロブリンによって誘導されるADCCのレベルを評価するためのアッセイを開示する例示的な刊行物としては、Hellstrom,ら、Proc.NatlAcad.Sci.USA83:7059-7063,1986、およびBruggemann,ら、J.Exp.Med.166:1351-1361,1987が挙げられる。免疫グロブリンまたは抗体によって誘発されるADCCのレベルを評価するための他のアッセイとしては、フローサイトメトリーのためのACTI商標非放射性細胞毒性アッセイCellTechnology,Inc.CA,USAまたはCytoTox96登録商標非放射性細胞毒性アッセイPromega,WI,USAが挙げられる。あるいは、またはさらに、免疫グロブリンまたは抗体のエフェクター機能を、例えば、米国特許第7317091号に記載のように、1つ以上のFcγRについてその親和性を決定することによって評価する。C1q結合アッセイはまた、この免疫グロブリンまたは抗体が、C1qに結合し得、かつCDCを誘発し得ることを確認するためにも行ってもよい。補体活性化を評価するため、CDCアッセイを行ってもよい例えば、Gazzano-Santoroら、J.Immunol.Methods202:163,1996を参照のこと。NK細胞数の決定本明細書において考察されるように、本開示の免疫グロブリンおよび/または抗体は、哺乳動物におけるNK細胞数に影響し得る。哺乳動物におけるNK細胞数を評価するための方法は、当業者には明らかである。一実施例では、哺乳動物例えば、非ヒト哺乳動物、例えば、非ヒト霊長類、例えば、カニクイザルに対する本開示の免疫グロブリンまたは抗体の投与後、血液または血清のサンプルを得て、NK細胞数を、蛍光活性化細胞選別FACSを用いて評価した。NK細胞は、CD16および/もしくはCD56の発現、ならびに/またはCD20および/またはCD3の発現の欠失または低レベルの発現に基づいて検出され得る。NK細胞数の変化割合は、抗体または免疫グロブリンの初期の投与例えば、投与前に得られたサンプルにおけるNK細胞の数に比較することによって決定され得る。親和性の決定必要に応じて、IL-3Rαまたはそのエピトープに対するタンパク質の解離定数Kdまたは会合定数Kaまたは平衡定数KDを決定する。免疫グロブリンまたは抗体についてのこれらの定数は、一実施例では、放射性標識されるか、または蛍光標識されたIL-3Rα-結合アッセイによって測定される。このアッセイは、このタンパク質を、標識されたIL-3Rαまたはその可溶型、例えば、Fc領域に融合されたIL-3Rαの細胞外領域を含んでいるの最小濃度と、未標識のIL-3Rαの一連の滴定の存在下で、平衡にする。未結合のIL-3Rαを除去するための洗浄後、標識の量を決定する。アフィニティ測定は、抗体反応についての標準的な方法論、例えば、イムノアッセイ、表面プラズモン共鳴SPRRichおよびMyszkaCurr.Opin.Biotechnol11::54,2000;EnglebienneAnalyst.123:1599,1998、等温滴定熱量測定ITCまたは当該分野で公知の他の動力学的相互作用アッセイによって決定され得る。一実施例では、定数は、表面プラズモン共鳴アッセイを用いて、例えば、固定されたIL-3Rαまたはその領域を用いるBIAcore表面プラズモン共鳴BIAcore,Inc.,Piscataway,NJを用いることによって、測定される。例示的なSPR方法は、米国特許第7229619号に記載される。治療有効性の評価インビトロアッセイ本明細書に記載の疾患または状態を処置する免疫グロブリンまたは抗体の能力を評価するには、種々のインビトロのアッセイが利用可能である。例えば、免疫グロブリンまたは抗体を、それが細胞、例えば、癌細胞、例えば、白血病細胞を殺傷できる能力について、本明細書に記載の方法を用いて評価する。別の実施例では、免疫細胞、例えば、pDCおよび/または好塩基球またはこれを含む細胞集団例えば、PBMC培養物を、免疫グロブリンまたは抗体およびその細胞のある疾患または状態を生じる誘導因子の有無において培養する例えば、CpGオリゴヌクレオチドおよび/または免疫複合体。次いで、この疾患または状態を処置するのにおけるこの免疫グロブリンまたは抗体の有効性を、例えば、ELISAを用いて細胞培養培地中に分泌されるIFNαのレベルを決定することによって評価する。あるいは、またはさらに、ヒスタミン分泌またはIL-4、IL-6および/もしくはIL-13分泌のレベルを評価する。免疫グロブリンまたは抗体の非存在下においてまたはアイソタイプのコントロールの免疫グロブリンまたは抗体の存在下においてと比較した、任意のこれらのサイトカインのレベルの減少は、この免疫グロブリンまたは抗体が、この疾患または状態を処置するために適切であることを示す。あるいは、またはさらに、細胞死のレベルを評価する。細胞死の増大は、この疾患または状態を処置するために適切な免疫グロブリンまたは抗体の指標である。インビボのアッセイ一実施例では、ある疾患または状態を処置するための免疫グロブリンの有効性を、インビボアッセイを用いて評価する。一実施例では、癌の異種移植モデルを用いて、治療有効性を評価する。例えば、NOD/SCIDマウスを照射して、必要に応じて、抗-CD122抗体で処理して、NK細胞を枯渇させる。ヒト白血病細胞例えば、急性骨髄性白血病細胞およびマウスまたはヒトの骨髄幹細胞を、マウスに投与する。細胞の生着後、試験の免疫グロブリンまたは抗体をマウスに投与して、循環および/または骨髄および/またはリンパ節における白血病細胞のレベルを評価する。この抗体または免疫グロブリンの非存在下においてと比較した、抗体または免疫グロブリンの存在下における循環および/または骨髄および/またはリンパ節における白血病細胞の数の減少は、治療有効性を示す。別の実施例では、この免疫グロブリンまたは抗体は、非ヒト動物例えば、非ヒト霊長類に投与され、免疫細胞の数/レベル、例えば、pDCおよび/または好塩基球循環中が評価される。免疫細胞、例えば、pDC類および/または好塩基球の数/レベルを、投与前に比べて、および/または免疫グロブリンまたは抗体が投与されなかったコントロールの哺乳動物において減少する免疫グロブリンまたは抗体は、この疾患または状態を処置するために適切であるとみなされる。別の実施例では、IFNαのようなサイトカインのレベルは、例えば、ELISAを用いて、哺乳動物の循環中で検出される。サイトカインのレベルを、投与前のレベルに比べて、および/または免疫グロブリンまたは抗体が投与されなかったコントロールの哺乳動物において減少する免疫グロブリンまたは抗体は、この疾患または状態を処置するために適切であるとみなされる。IFNαのようなサイトカインは、いくつかの疾患/状態、例えば、紅斑性狼瘡においてある役割を果たすとみなされるので、IFNαの産生を減少する免疫グロブリンまたは抗体は、このような状態を処置するために適切であるとみなされる。組成物適切には、哺乳動物に対する抗-IL-3Rα免疫グロブリンまたは抗体の投与のための組成物または方法において、この免疫グロブリンまたは抗体は、当該分野で理解されるように、薬学的に許容される担体、希釈剤および/または賦形剤と組み合わせられる。従って、本開示の一実施例は、薬学的に許容される担体、希釈剤および/または賦形剤と組み合わせて、本開示の免疫グロブリンまたは抗体を含んでいる医薬組成物を提供する。別の実施例では、本開示は、哺乳動物に対する投与前に免疫グロブリンまたは抗体と組み合わせるかまたは混合するために適切な、薬学的に許容される担体、希釈剤および/または賦形剤を備えるキットを提供する。本実施例では、このキットはさらに、使用説明書を備えてもよい。一般的な用語では、担体、希釈剤または賦形剤とは、固体または液体充填材、結合剤、希釈剤、カプセル化物質、乳化剤、湿潤剤、溶媒、懸濁剤、コーティングまたは潤滑剤任意の哺乳動物、例えば、ヒトに安全に投与され得るを意味する。特定の投与経路次第で、当該分野で公知の種々の許容される担体、希釈剤または賦形剤が、例えば、Remington’sPharmaceuticalSciencesMackPublishingCo.N.J.USA,1991に記載のように用いられ得る。例示に過ぎないが、担体、希釈剤または賦形剤は、糖例えば、スクロース、マルトース、トレハロース、グルコース、デンプン、セルロースおよびその誘導体、モルト、ゼラチン、滑石、硫酸カルシウム、オイル例としては、植物油、合成油および合成のモノグリセリド、またはジグリセリド、低アルコール、ポリオール、アルギン酸、リン酸緩衝化溶液、潤滑剤、例えば、ステアリン酸ナトリウムまたはステアリン酸マグネシウム、等張性生理食塩水およびパイロジェンフリー水を含む群から選択され得る。例えば、担体、希釈剤、または賦形剤は、非経口投与と適合するかまたは適切である。非経口投与は、消化管を通じない任意の投与経路を包含する。非経口投与の非限定的な例としては、注射、注入などが挙げられる。例として、注射による投与には、静脈内注射、動脈内注射、筋肉内注射および皮下注射が挙げられる。例えば、皮内、筋肉内および皮下で送達され得るデポまたは徐放性の処方物による送達もまた考慮される。併用療法一実施例では、本開示の免疫グロブリンまたは抗体は、ある疾患または状態を処置するために有用な別の化合物または治療的な処置と組み合わせて投与される。一実施例では、この免疫グロブリンまたは抗体は、例えば、白血病のような血液癌などの癌の処置のために、放射線療法の前に、例えば、1カ月または2週間または1週間前に投与される。一実施例では、他の化合物は、化学療法化合物、例えば、カボプラチン、シスプラチン、シクロホスファミド、ドセタキセル、ドキソルビシン、エルロチニブ、エトポシド、フルオロウラシル、イリノテカン、メトトレキサート、パクリタキセル、トポテカン、ビンクリスチンまたはビンブラスチンである。一実施例では、化学療法化合物は、メトトレキサート、1-アスパラギナーゼ、ビンクリスチン、ドキソルビシン、ダノルビシン、シタラビン、イダルビシン、ミトキサントロン、シクロホスファミド、フルダラビン、クロラムブシル、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される。一実施例では、他の化合物は、メトトレキサート、1-アスパラギナーゼ、ビンクリスチン、ドキソルビシン、ダノルビシン、シタラビン、イダルビシン、ミトキサントロンおよびそれらの組み合わせからなる群より選択される化合物などの、急性白血病の処置に用いられる化学療法化合物である。一実施例では、他の化合物は、メトトレキサート、1-アスパラギナーゼ、ビンクリスチン、ドキソルビシン、ダノルビシンおよびそれらの組み合わせからなる群より選択される化合物などの、急性リンパ芽球性白血病の処置に用いられる化学療法化合物である。さらなる実施例では、他の化合物は、アザシチジンのような化学療法化合物である。一実施例では、他の化合物とは、癌を処置するために有用な生物製剤、例えば、リツキシマブ、トラスツズマブ、ベバシズマブ、アレムツズマブ、パニツムマブ、またはセツキシマブである。一実施例では、他の化合物とは、抗炎症性化合物である。あるいは、またはさらに、この他の化合物とは、免疫抑制剤である。あるいは、またはさらに、この他の化合物とは、コルチコステロイド、例えばプレドニゾンおよび/またはプレドニゾロンである。あるいは、またはさらに、この他の化合物は、抗マラリア化合物、例えばヒドロキシクロロキンまたはクロロキニンである。あるいは、またはさらに、この他の化合物とは、メトトレキサートである。あるいは、またはさらに、この他の化合物とは、アザチオプリンである。あるいは、またはさらに、この他の化合物とは、シクロホスファミドである。あるいは、またはさらに、この他の化合物とは、ミコフェノレートモフェチルである。あるいは、またはさらに、この他の化合物とは、抗-CD20抗体例えば、リツキシマブまたはオファツムマブである。あるいは、またはさらに、この他の化合物とは、抗-CD22抗体例えば、エプラツズマブである。あるいは、またはさらに、この他の化合物とは、抗-TNF抗体例えば、インフリキシマブまたはアダリムマブまたはゴリムマブである。あるいは、またはさらに、この他の化合物とは、CTLA-4アンタゴニスト例えば、アバタセプト、CTLA4-Igである。あるいは、またはさらに、この他の化合物とは、抗-IL-6抗体である。あるいは、またはさらに、この他の化合物とは、BLysアンタゴニスト、例えば、抗-BLys抗体例えば、ベリムマブである。投与の用量およびタイミング疾患もしくは状態またはその再発の予防または処置のために、適切な用量の活性剤すなわち、本開示の免疫グロブリンまたは抗体は、処置されるべき疾患の種類、その疾患の重篤度および経過その免疫グロブリンまたは抗体が予防的な目的で投与されるかまたは治療的な目的で投与されるかにかかわらず、事前の処置、患者の臨床的な病歴および免疫グロブリンに対する応答、ならびに担当医の裁量に依存する。特定の投薬計画、すなわち、用量、タイミングおよび反復は、特定の個体、および医師が評価するその個体の病歴に依存する。典型的には臨床医は、所望の結果を達成する投薬量が達成されるまで免疫グロブリンを投与する。本開示の方法は、哺乳動物における疾患または状態の症状を処置、緩和もしくは予防するために、または哺乳動物の予後診断を改善するために有用である。本開示の方法はまた、全身性紅斑性狼瘡を発症するかまたはその再発のリスクがある個体において、発症を遅らせるため、または全身性紅斑性狼瘡を予防するために有用である。本明細書に記載される免疫グロブリンまたは抗体の投与のために、正常な投薬量は、1日あたり個体の体重あたり約10ng/kgから最大約100mg/kg以上まで変化し得る。その例示的な投薬量および範囲は本明細書に記載される。数日間以上にわたる反復投与のために、処置されるべき疾患または障害の重篤度に応じて、処置は、症状の所望の抑制が達成されるまで持続され得る。いくつかの実施例では、この免疫グロブリンまたは抗体は、約1mg/kg~約30mg/kg、例えば約1mg/kg~約10mg/kg、または約2mg/kgまたは約3mg/kgまたは4mg/kgまたは5mg/kgという初回または負荷用量で投与される。この免疫グロブリンまたは抗体は、次に、約0.0001mg/kg~約1mg/kg、例えば約0.0005mg/kg~約1mg/kg、例えば、約0.001mg/kg~約1mg/kg、例えば約0.01mg/kg~約1mg/kg、例えば約0.01mg/kg~約0.1mg/kg、例えば約0.02mg/kgまたは0.03mg/kgまたは0.04mg/kgまたは0.05mg/kgという維持用量で投与され得る。この維持用量は、7~30日ごとに、例えば、10~15日ごとに、例えば、10または11または12または13または14または15日ごとに投与され得る。いくつかの実施例では、この免疫グロブリンまたは抗体は、約0.0001mg/kg~約50mg/kg、例えば約0.0005mg/kg~約50mg/kg、例えば、約0.001mg/kg~約40mg/kg、例えば、約0.005mg/kg~約30mg/kg、例えば約0.01mg/kg~約20mg/kgという用量で投与される。例えば、この免疫グロブリンは、約0.01mg/kg~約10mg/kg、例えば、約0.01mg/kg~約1mg/kg、例えば約0.02mg/kgまたは0.03mg/kgまたは0.04mg/kgまたは0.05mg/kgまたは0.06mg/kgまたは0.07mg/kgまたは0.08mg/kgまたは0.09mg/kgまたは0.1mg/kgまたは0.2mg/kgまたは0.3mg/kgまたは0.4mg/kgまたは0.5mg/kgまたは0.6mg/kgまたは0.7mg/kgまたは0.8mg/kgまたは0.9mg/kg例えば、より高用量の負荷用量なしという用量で投与される。いくつかの実施例では、多数の用量が、例えば、7~30日ごと、例えば、10~22日ごと、例えば、10~15日ごと、例えば、10または11または12または13または14または15または16または17または18または19または20または21または22日ごとに投与される。例えば、この免疫グロブリンまたは抗体は、7日ごと、または14日ごと、または21日ごとに投与される。いくつかの実施例では、この免疫グロブリンまたは抗体は、約1mg/kg~約30mg/kg、例えば、約1mg/kg~約10mg/kg、または約2mg/kgまたは約3mg/kgまたは4mg/kgまたは5mg/kg、または例えば、約10mg/kg~30mg/kg、例えば約10mg/kgまたは15mg/kgまたは20mg/kgまたは25mg/kg例えば、より低い維持用量なしでという用量で投与される。いくつかの実施例では、多数の用量が、例えば、10~70日ごとに、例えば、14~70日ごとに、例えば、14~60日ごとに、例えば、14~50日ごとに、例えば、14~40日ごとに、または14~30日ごとに投与される。例えば、この用量は、14または21または25または28または35または40または42または49または50または55または57または63または70日ごとに投与される。例えば、この免疫グロブリンまたは抗体は、21日ごと、または28日ごと、または35日ごと、または42日ごと、または49日ごと、または56日ごとに投与される。いくつかの実施例では、この免疫グロブリンまたは抗体は、例えば、投与の約6時間内に、投与後の哺乳動物におけるNK細胞の減少を生じるか、または減少に関連する。いくつかの実施例では、哺乳動物におけるNK細胞数が、投与前の哺乳動物におけるNK細胞数の20または10または5または1内に戻るとき、さらなる用量の免疫グロブリンまたは抗体が投与される。いくつかの実施例では、哺乳動物におけるNK細胞数が、投与前の哺乳動物におけるNK細胞数を少なくとも約5または10または20または30または40または50または60または70または80超えるとき、さらなる用量の免疫グロブリンまたは抗体が投与される。NK細胞数は、免疫グロブリンまたは抗体のさらなる用量を投与するとき、哺乳動物において、評価され得る。あるいは、この免疫グロブリンまたは抗体のさらなる用量を投与する時点は、ある集団またはあるモデルの生物体例えば、非ヒト霊長類、例えば、カニクイザルの事前の分析によって決定される。例えば、この免疫グロブリンのさらなる用量は、前の投与後、約7日または8日または14日または17日または21日または22日または28日または29日で投与される。いくつかの実施例では、治療開始の時点で、哺乳動物は、免疫グロブリンまたは抗体を7連続日または6連続日または5連続日または4連続日以下、投与される。処置に対して十分に応答していない哺乳動物の場合、1週に複数回用量を投与してもよい。あるいは、またはさらに、漸増用量を投与してもよい。別の実施例では、有害反応を経験している哺乳動物については、初期または負荷用量は、1週に何日にもわたって、または連続して何日にもわたって分割されてもよい。特定の免疫グロブリンまたは抗体についての投薬量は、免疫グロブリンの1回以上の投与を与えられた哺乳動物で経験的に決定され得る。免疫グロブリンの有効性を評価するために、疾患または状態の臨床症状をモニターしてもよい。本開示の方法による免疫グロブリンの投与は、その投与の目的が治療的であるかまたは予防的であるかにかかわらず、例えば、レシピエントの生理学的条件、および当業者に公知の他の要因に依存して、連続であっても、間欠的であってもよい。免疫グロブリンまたは抗体の投与は本質的に、事前に選択された期間にわたって連続的であってもよく、またはある条件の発達の間、または後のいずれかで、一連の間隔の空いた用量であってもよい。本開示は、以下の非限定的な実施例を包含する。非限定的な実施例実施例1:ヒト化抗体IL-3活性のアンタゴニストとして作用するヒトIL-3Rα鎖に対して特異的に結合するヒト化抗体を産生した。このヒト化抗体は、Tanら、JImmunol.169,1119-1125,2002の手順に従って、ドナーおよびアクセプターCDRの標準的構造に基づいて選択されるヒト可変フレームワーク生殖細胞系列配列に対してアンタゴニストのマウス抗体7G3のCDR配列をグラフトすることによって産生された;時には超ヒト化スーパーヒト化superhumanizationと呼ばれる。この作業は、scFv形式の抗体を用いて行った。次いで、このアプローチは、ドナー抗体のCDR残基と、可変のフレームワークの生殖細胞系列のアクセプター配列の残基とを比較して、CDR残基の最高の相関を有する残基をアクセプター配列として選択する。しかし、本発明の場合、CDRとの相関のレベルがより低い重鎖アクセプター配列を選択した。ヒト化プロセスの結果として全体的なヒト可変フレームワーク配列を含んだ、得られたヒト抗体はしかし、IL-3Rαに対する親和性が、親のマウス抗体と比較して低下していた。親和性最適化affinityoptimizationは、ヒト化抗体の結合親和性を増大するための労力において、抗体をscFv形式で用いて行ったリボソームディスプレイベースの突然変異生成プロセスKopsidasら、BMCBiotechnol.7,18,2007を用いて使用した。IgG1形式に変換された場合、親のマウスモノクローナル抗体の結合親和性に対して、わずかに改善されたIL-3Rα結合親和性を示す、親和性最適化したscFvが産生された。予期せぬことに、親和性最適化プロセスは、VHおよびVLのフレームワークにおいて、ならびに軽鎖のCDR1において、変異を生じた。そのため、ヒト化された親和性最適化抗体のCDR配列のセットは、親のマウスモノクローナル抗体のものとは異なる。これらの親和性最適化された抗体は、本明細書においてCSL362と呼ばれる。ヒト化された、親和性最適化された抗体のFc遺伝子操作誘導体であって、抗体の軽鎖および重鎖の可変領域、ならびに3つのアミノ酸置換S239D/A330L/I332E本明細書においてはCSL362X2と呼ばれるを有するか、または2つのアミノ酸置換S239D/I332E本明細書においてはCSL362X1と呼ばれるを有するハイブリッドのIgG1/IgG2定常ドメインを含むものを、CHO-S細胞中での適切なベクターの発現によって産生した;特定された変異の位置は、EUナンバリングシステムに基づく。ヒトIgG1定常ドメインを有するヒト化された親和性最適化された抗体のアフコシル化バージョンを、BiowaのFUT8-ノックアウトCHO細胞Potelligent登録商標Cells本明細書においてはCSL362Bと呼ぶ中で適切なベクターの発現によって生成した。実施例2:結合親和性決定全長mAbの反応速度論:全長抗体を分析するために、表面プラズモン共鳴Biacoreアッセイを、捕獲形式で行い、ここでは、化学的に固定された抗ヒトまたは抗マウスのFc特異的な抗体抗ヒトヤギ抗ヒトIgGγマウス吸着Invitrogen,CatNo.H10500または抗マウスFc特異的な抗体JacksonImmunoResearchLabsinc.CatNo.515-005-071を、標準的なアミンカップリング化学を用いてCM-5センサー表面上に化学的に固定し、溶液からmAbを捕獲するために用いた。次いで、可溶性のヒトIL-3Rαを、捕獲された抗体の上に種々の濃度で注入した。応答は、抗体が捕獲されないが、そうでなければ同一に処理された、参照フローセル由来の応答から差引きした。次いで、参照の差引きされた応答を、ブランク注入由来の応答から差引きした。最終の較正された応答を、非線形回帰を用いて、大量輸送限界についての項目を含む、1:1の反応速度論を記述するモデルにフィットさせた。捕獲される抗体のレベルにおけるわずかな偏差について説明するために、Rmax値を、局所的にフィットさせた。会合速度ka、解離速度kdおよび平衡解離定数KDを決定した。抗体を、0.3μg/mlで180秒間捕獲した。可溶性のIL-3Rαを、10分間注入して、解離を30分間モニターした。可溶性のIL-3Rαは、0、0.62、1.25、2.5、5、10、20および40nMで注入し、ここで2.5nMおよび5nMは二重にした。再生は、各々のサイクルの後に、100mMのH3PO4の90秒の注入で行った。このアッセイは、25°Cで行った。scFvの反応速度論:scFvを分析するため、可溶性のヒトIL-3Rαを、標準的なアミンカップリング化学を用いてCM-5センサー上に化学的に固定して、scFvを種々の濃度で注入した。応答は、IL-3Rαが固定されないが、それ以外は同一に処理された、参照フローセル由来の応答から差引きした。次いで、参照の差引きされた応答を、ブランク注入由来の応答から差引きした。最終の較正された応答を、非線形回帰を用いて、大量輸送限界についての項目を含む、1:1の反応速度論を記述するモデルにフィットさせた。Rmax値を、全体的にフィットさせて、会合速度ka、解離速度kdおよび平衡解離定数KDを決定した。scFvを、10分間注入して、解離を20分間モニターした。scFvを、0、0.62、1.25、2.5、5、10、20および40nMで注入し、ここで10nMは二重にした。再生は、各々のサイクルの後に、100mMのH3PO4の30秒の注入、1MのNaClおよび15秒の50mMのNaOHの注入で行った。このアッセイは、25°Cで行った。抗体およびscFvの親和性を、下の表2に作表する。実施例3:ヒト化またはキメラ抗体の投与後のNK細胞レベルナイーブなサル非ヒト霊長類;NHPに、静脈内注入によって単回用量のCSL362BまたはCSL362X1を投与した。別の研究では、ナイーブなサルに、ヒト化抗体7G3を産生するために用いたマウス抗体の可変領域と、ヒトIgG1定常領域とを含んでいるキメラ抗体の反復用量毎週×4を投与した。末梢血を種々の時点で収集して、NHPNK細胞の分析をフローサイトメトリーによって行った。図1Aに示されるとおり、CSL362X1の投与は、NK細胞の初期の枯渇例えば、投与の約6時間後を生じた。0.01mg/kg~0.1mg/kgの投与量では、このレベルは、投与後約8日まで投与前に観察されたレベルを超え、投与後少なくとも22日または29日までは上昇したまま保たれた。NK細胞数の増大はまた、1mg/kgの投薬量でも観察された。前の段落で記載した結果とは対照的に、CSL362Bの投与は、NK細胞の枯渇を生じたが、NK細胞数は、投与前の数をその後超えなかった図1B。キメラ抗体の反復投与は、循環中で検出されたNK細胞数を実質的に変化しなかった図1C。実施例4:NK細胞の存在下におけるヒト化抗体のADCCの増強ヒトPBMCまたはNK細胞を、単離して、種々の濃度のCSL362X1の存在下でTF-1細胞とともにインキュベートした。エフェクター細胞E;PBMCおよび標的細胞T;TF-1細胞を、組み合わせて、50:1という比E:Tの比を得るか、またはエフェクターとして精製されたNK細胞を用いる場合は、この比は20:1であった。細胞溶解は、LDHCytoTox96Non-RadioactiveCytotoxicityキットPromegaを用いて測定した。特異的溶解は、以下の計算で決定した:特異的溶解=[サンプル溶解-自然な溶解]/[最大溶解-自然な溶解]×100。最大溶解は、0.75v/vという最終濃度に対するExtran商標の添加によって評価した。自然な溶解とは、細胞単独Abなしでウェル中で生じた溶解であった。しかし、図2Aに示されるとおり、PBMCの存在下で、およびNK細胞の存在下で生じるTF-1細胞の溶解は、NK細胞が除かれたPBMCでは実質的に減少された。別の実験では、2つの異なるAML患者由来の白血病細胞を、標的細胞として用いた。このアッセイでは、単一濃度の抗体10μg/mLを用いて、精製されたNK細胞を添加して種々のE:T比を生成した。図2Bは、標的細胞2つの異なるAML患者由来の末梢血芽球に対するNK細胞数すなわち、E:T比が高いほど、ヒト化抗体による標的細胞の特異的溶解が大きくなることを示す。"