"抗体またはその抗原結合性フラグメントであって、10-7M未満のKDでIL-13と結合し、以下の特性、すなわちa重鎖免疫グロブリン可変領域が、mAb13.2の重鎖CDR3配列番号24またはmAb13.2の対応する重鎖CDR3と3つ未満のアミノ酸置換が異なる重鎖CDR3を含むこと、b軽鎖免疫グロブリン可変領域が、mAb13.2の軽鎖CDR1配列番号19またはmAb13.2の対応する軽鎖CDR1と3つ未満のアミノ酸置換が異なる軽鎖CDR1を含むこと、c重鎖免疫グロブリン可変領域が、h13.2の重鎖可変ドメイン配列番号15、16または36をコードする核酸の相補体と高い厳密性の条件下でハイブリダイズする核酸によりコードされる配列を含むこと、d軽鎖免疫グロブリン可変領域が、h13.2の軽鎖可変ドメイン配列番号11、12または35をコードする核酸の相補体と高い厳密性の条件下でハイブリダイズする核酸によりコードされる配列を含むこと、e重鎖免疫グロブリン可変領域が、h13.2の重鎖可変ドメイン配列番号15、16または36と少なくとも90一致していること、f軽鎖免疫グロブリン可変領域が、h13.2の軽鎖可変ドメイン配列番号11、12または35と少なくとも90一致していること、g抗体またはその抗原結合性フラグメントが、ヒトIL-13との結合についてmAb13.2と競合すること、h抗体またはその抗原結合性フラグメントが、配列番号31の残基68、72、88、91、92、93および105からなる群から選択されるIL-13由来の1つまたはそれ以上のアミノ酸残基と接触すること、i重鎖可変領域が、mAb13.2と同一のカノニカル構造を有すること、j軽鎖可変領域が、mAb13.2と同一のカノニカル構造を有すること、k重鎖可変領域および/または軽鎖可変領域が、それぞれ生殖系列遺伝子DP-54およびDPK-9によりコードされるVHセグメント由来のFR1、FR2およびFR3フレームワーク領域または生殖系列遺伝子DP-54およびDPK-9によりコードされるVHセグメントと少なくとも95一致する配列を有すること、l注入の少なくとも6週後にヒツジモデルにおいて回虫Ascaris抗原への暴露に対する注入後防御効果を付与すること;の1つまたはそれ以上を有する抗体またはその抗原結合性フラグメント。精製された請求項1に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。組換え完全長IgGである、請求項1に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。FabまたはscFvである、請求項1に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。ヒト生殖系列フレームワーク領域と少なくとも90一致するフレームワーク領域を含む、請求項1に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。ヒトフレームワーク領域、ヒトFc領域または両方を含む、請求項1に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。重鎖可変領域が、mAb13.2と同一のカノニカル構造を有しiのように、重鎖可変ドメインが、mAb13の少なくとも4つのIL-13と接触するアミノ酸残基を含む、請求項1に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。90~120pMのKDでヒトIL-13と結合する、請求項1に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。1×10-4s-1未満のKoffでヒトIL-13と結合する、請求項1に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。5×104~8×105M-1s-1のKonでヒトIL-13と結合する、請求項1に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。IL-4Rαと結合するIL-13の能力を低減する、請求項1に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。IL-13Rα1とのインビトロ複合体中にあるIL-13と結合する、請求項1に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。2つの免疫グロブリン鎖、すなわち、配列番号9、10、11、12または35を含む軽鎖および配列番号13、14、15、16または36を含む重鎖を含む単離された組換えIgG抗体。重鎖が配列番号17をさらに含み、軽鎖が配列番号18をさらに含む、請求項13に記載の単離された組換えIgG抗体。抗体またはその抗原結合性フラグメントであって、以下の特性、すなわちaヒトIL-13配列番号31の残基81~93もしくは114~132またはそれらの保存的に置換された形態を含むエピトープと特異的に結合すること、b以下のアミノ酸残基、すなわち、配列番号32の49位のグルタミン酸、53位のアスパラギン、69位のグリシン、72位のプロリン、73位のヒスチジン、74位のリジンおよび86位のアルギニンのうちの1つまたはそれ以上またはそれらの保存的アミノ酸置換を含むヒトIL-13のエピトープと特異的に結合すること、cIL-13とIL13Rαの複合体と結合すること、dIL-13とIL-4Rαの間の結合相互作用を妨害すること、eIL-13/IL-13Rα1とIL-4Rαの間の結合相互作用を妨害すること、およびfヒトIL-13と特異的に結合し、前記ヒトとの二次抗体の結合を競合的に阻害するここに、前記二次抗体は、mAb13.2、ch13.2、h13.2v1、h13.2v2またはh13.2v3から選択されること;の1つまたはそれ以上を有する抗体またはその抗原結合性フラグメント。Fc受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基数、エフェクター細胞機能または補体機能のうちの1つまたはそれ以上を減少させるために変異された定常領域を有する、請求項15に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。配列番号17の1つまたはそれ以上の残基116および119において変異されたヒトIgG1定常領域をさらに含む、請求項15に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。ヒトκ軽鎖をさらに含む、請求項15に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。配列番号19のアミノ酸配列、配列番号20のアミノ酸配列、配列番号21のアミノ酸配列、配列番号22のアミノ酸配列、配列番号23のアミノ酸配列、配列番号24のアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも1つの相補性決定領域をさらに含む、請求項15に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。フラグメントが、scFv、FabまたはFab’2フラグメントである、請求項15に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。ヒトκ定常領域を含む軽鎖またはその活性フラグメントおよびヒトIgG定常領域を含む重鎖またはその活性フラグメントをさらに含む、請求項15に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。前記軽鎖のヒトκ定常領域が、配列番号18のアミノ酸配列またはその活性フラグメントを含む、請求項21に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。前記重鎖のヒトIgG定常領域が、FcRおよび補体結合を低減するために変異される、請求項21に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。前記重鎖の変異したヒトIgG定常領域が、配列番号17のアミノ酸配列またはその活性フラグメントを含む、請求項23に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。請求項1または15に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメントおよび薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物。皮下、吸入または局所投与に適合している、請求項25に記載の医薬組成物。i重鎖免疫グロブリン可変領域であって、amAb13.2の重鎖CDR3配列番号24またはmAb13.2の対応するCDR3と3つ未満のアミノ酸置換が異なるCDR3を含むか、あるいはbh13.2の重鎖可変ドメイン配列番号15、16または36と少なくとも90一致する、重鎖免疫グロブリン可変領域を含む、ポリペプチドをコードするか、あるいはiih13.2の重鎖可変ドメイン配列番号15、16または36をコードする核酸の相補体と高い厳密性の条件下でハイブリダイズする配列を含む核酸。i軽鎖免疫グロブリン可変領域であって、amAb13.2の軽鎖CDR1配列番号19またはmAb13.2の対応するCDR1と3つ未満のアミノ酸置換が異なるCDR1を含むか、あるいはbh13.2の軽鎖可変ドメイン配列番号11、12または35と少なくとも90一致する、軽鎖免疫グロブリン可変領域を含む、ポリペプチドをコードするか、あるいはiih13.2の軽鎖可変ドメイン配列番号11、12または35をコードする核酸の相補体と高い厳密性の条件下でハイブリダイズする配列を含む核酸。請求項1または15に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメントをコードする核酸配列を含む宿主細胞。組換え抗体を提供する方法であって、抗体またはその抗原結合性フラグメントをコードする核酸配列を宿主細胞に提供すること、および抗体またはその抗原結合性フラグメントが発現される条件下に細胞を維持することを含む方法。宿主細胞または宿主細胞が維持される培地からタンパク質を単離することをさらに含む請求項30に記載の方法。単離されたタンパク質を医薬組成物として調剤することをさらに含む請求項31に記載の方法。有効成分として請求項1に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメントを含む、IL-13関連障害の治療用医薬組成物。IL-13関連障害が、喘息性障害、アトピー性障害、慢性閉塞性肺疾患COPD、気道炎症、好酸球増加症、線維症および過剰な粘液産生を含む状態、炎症性状態、自己免疫性状態、腫瘍または癌、ウイルス感染および防御性1型免疫応答の発現の抑制からなる群から選択される請求項33に記載の医薬組成物。障害が喘息性障害またはアレルギー性鼻炎である、請求項33に記載の医薬組成物。障害が炎症性腸疾患である、請求項33に記載の医薬組成物。障害が慢性閉塞性肺疾患COPDである、請求項33に記載の医薬組成物。障害がアトピー性障害である、請求項33に記載の医薬組成物。皮下投与、吸入による投与、または局所投与用の、請求項33に記載の医薬組成物。有効成分として、IL-13と結合する抗体を含む、IL-13関連障害の治療用医薬組成物であって、下記:i注入の少なくとも6週後にヒツジモデルにおいて回虫Ascaris抗原への暴露に対する注入後防御効果を付与すること、あるいはiiIL-13のIL-4Rαとの結合を妨害するが、IL-13のIL-13Rα1との結合を妨害しないことで示される特性のうちの1つまたはそれ以上を有する医薬組成物。サンプルにおけるIL-13の存在を検出する方法であって、iサンプルを、抗IL-13抗体またはそのフラグメントと接触させること、およびii抗IL-13抗体またはそのフラグメントとサンプルの間の複合体の形成を検出することサンプルにおける複合体の形成は、サンプルにおけるIL-13の存在を示すを含む方法。サンプルが対象由来である、請求項41に記載の方法。喘鳴、息切れ、気管支収縮、気道過反応性、肺気量減少、線維症、気道炎症および粘液産生からなる群から選択される喘息の症状を示す対象を治療するための医薬組成物であって、請求項1または15に記載の抗体を含み、抗体がIL-13と結合し、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を妨害する、医薬組成物。有効成分として、10-7M未満のKDでIL-13と結合する重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列および軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントと1つまたはそれ以上のさらなる治療剤を含む、IL-13関連障害の治療用医薬組成物であって、1つまたはそれ以上のさらなる治療剤が、吸入ステロイド;βアゴニスト;ロイコトリエンアンタゴニストまたはロイコトリエン受容体アンタゴニスト;IgE阻害剤;ホスホジエステラーゼ阻害剤;キサンチン;抗コリン薬;肥満細胞安定化薬;IL-4阻害剤;IL-5阻害剤;エオタキシン/CCR3阻害剤;抗ヒスタミン薬;TNFアンタゴニスト;TNF酵素アンタゴニスト;TGF-βアンタゴニスト;インターフェロンガンマ;ペルフェニドンperfenidone;化学療法剤;NSAID;免疫調節薬;p38阻害剤およびNFκB阻害剤からなる群から選択されるものである、医薬組成物。IL-13と同族のIL-13結合性タンパク質との間の結合相互作用を変調させる方法であって、IL-13を、10-7M未満のKDでIL-13と結合する重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列および軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントと接触させることを含む、方法。インビボにおけるIL-13の存在を検出する方法であって、i抗体またはその抗原結合性フラグメントのIL-13への結合を可能にする条件下で、対象に10-7M未満のKDでIL-13と結合する重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列および軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントを投与すること、およびii抗体またはそのフラグメントとIL-13の間の複合体の形成を検出することを含み、コントロールと比較した場合の対象における複合体の形成の変化がIL-13の存在を示す、方法。喘息またはアトピー性障害の進行を測定もしくはモニターする方法であって、iサンプルを提供すること;iiサンプルを、10-7M未満のKDでIL-13と結合する重鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列および軽鎖免疫グロブリン可変ドメイン配列を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントと接触させること;およびiiiサンプルにおけるIL-13のレベルの変化を検出することを含む、方法。二重特異性抗体またはの抗原結合性フラグメントである、請求項1または15に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。IL-13結合性物質、例えば、抗IL-13抗体およびそれらの抗原結合性フラグメント、その医薬組成物、前記抗体をコードする核酸、ならびに前記核酸配列を含むベクターおよび宿主細胞を開示する。また、前記抗体を作成する方法、ならびにIL-13、例えば、ヒトIL-13と結合する抗体を用いて1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を変調し、IL-13がその受容体と結合するのを低減または妨害するための方法を開示する。抗IL-13抗体を、IL-13仲介性障害を緩和するため、例えば、呼吸器障害例えば、喘息;アトピー性障害例えば、アレルギー性鼻炎;皮膚例えば、アトピー性皮膚炎、胃腸器官例えば、炎症性腸疾患IBDの炎症性および/または自己免疫性状態、ならびに線維性および癌性障害を治療するために使用することができる。抗IL-13抗体は、単独で用いるか、あるいは他の療法と組み合わせて用い、それらの疾患または別の疾患、例えば、アレルギー性反応を治療することができる。とりわけ、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を妨害する本明細書に記載されている抗体を用いることによるIL-13活性の低下は、ブタ回虫Ascarissuumに対して生まれつきアレルギーのあるカニクイザルにおける気道炎症を低減することが見い出された以下の実施例1.4および3.5。さらに、本明細書に記載されている抗ヒトIL-13抗体は、ブタ回虫Ascarissuumに対して生まれつきアレルギーのあるヒツジにおける遅発相気管支収縮を予防し、ヒツジにおけるカルバコール誘発性気道過敏反応性を予防する以下の実施例3.5。したがって、1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を中和する抗IL-13抗体を用い、インビボで1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を低減し、例えば、IL-13仲介性障害例えば、喘息、気道炎症、好酸球増加症、線維症および過剰な粘液産生を治療または予防することができる。抗ヒトIL-13抗体結合して1つまたはそれ以上のIL-13関連活性、特にIL-13のシグナル伝達活性を中和および/または阻害することができる抗体は、アレルギー性喘息、非アレルギー性喘息などのIL-13仲介性疾患、ならびに線維症、好酸球増加症および粘液産生などの喘息関連病変を治療するのに有用である。一実施形態において、本明細書に開示されている抗IL-13抗体は、単離または精製される。単離または精製ポリペプチドまたはタンパク質、例えば、単離抗体は、それが天然に存在する状態を越える状態まで精製される。例えば、単離または精製ポリペプチドまたはタンパク質、例えば、単離抗体は、タンパク質が由来する細胞もしくは組織源由来の細胞材料または他の夾雑汚染タンパク質のうちの少なくとも1つの成分から分離されるか、あるいは化学的に合成される場合の化学的前駆体もしくは他の化学物質のうちの少なくとも1つの成分から分離されるタンパク質を指す。例えば、単離タンパク質は、他のタンパク質、他の細胞材料または化学的前駆体を実質的に含まないことがある。一部の実施形態において、約50未満の非抗体タンパク質本明細書において夾雑タンパク質とも呼ばれるまたは化学的前駆体を有する抗体タンパク質の調製は、実質的に含まれないと見なされる。他の実施形態において、40、30、20、10、より好ましくは5乾燥重量での非抗体タンパク質または化学的前駆体は、実質的に含まれないと見なされる。抗体タンパク質またはその生物学的活性部分が組換え産生される場合、培養培地が実質的に含まれないことも好ましく、例えば、培養培地は、タンパク質調製物の容量または質量の約30未満、20未満、より好ましくは約10未満、最も好ましくは約5未満に相当する。本明細書において組換え体と呼ばれるタンパク質またはポリペプチドは、組換え体核酸の発現によって産生されるタンパク質またはポリペプチドである。タンパク質は、標準的方法例えば、イオン交換および親和性クロマトグラフィーが含まれるにより精製され、特定のタンパク質が、他のタンパク質に対して、または他の生物学的活性成分に対して少なくとも5、10、20、25、50、75、80、90、95、98、99の純度である調製物を提供することができる。本明細書で使用する用語抗体には、インタクト抗体、抗体のフラグメント、例えば、Fab、Fab’2、Fd、dAbおよびscFvフラグメント、ならびにそれらの定常領域および/または可変領域において変異した例えば、キメラ、部分ヒト化または完全ヒト化抗体を作成するため、ならびに望ましい特色、例えば、IL-13結合性増強および/またはFcR結合低下のある抗体を作成するための変異インタクト抗体およびフラグメントが含まれる。例示的抗体は、IL-13と特異的に結合し、例えば、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を妨害し、かつ/または1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を中和または阻害することがある。本明細書に記載されている抗体は、効率的にヒトであってよい。効率的ヒト抗体は、抗体が、正常なヒトにおいて免疫原性応答を引き起こさないように十分な数のヒトアミノ酸位置が含まれる抗体である。タンパク質は、中和抗体応答、例えば、ヒト抗マウス抗体HAMA応答を誘起しないことが好ましい。HAMAは、多くの環境、例えば、抗体を、例えば、慢性または再発疾患状態の治療において反復投与することが望ましい場合には問題のあることがある。HAMA応答は、血清からの抗体クリアランス増加のため例えば、Saleh他、CancerImmunol.Immunother.、32:180-1901990を参照および潜在的なアレルギー反応のため例えば、LoBuglio他、Hybridoma、5:5117-51231986を参照反復抗体投与を潜在的に無効にすることがある。通常、保存的置換には、類似の特徴を持つ別のアミノ酸によるあるアミノ酸の置換、例えば、以下の群、すなわちバリン、グリシン、;グリシン、アラニン;バリン、イソロイシン、ロイシン;アスパラギン酸、グルタミン酸;アスパラギン、グルタミン;セリン、スレオニン;リジン、アルギニン;およびフェニルアラニン、チロシン内の置換が含まれる。免疫グロブリンとしても知られる抗体は、通常、各々約25kDaの2本の軽L鎖および各々約50kDaの2本の重H鎖からなる四量体グリコシル化タンパク質である。λおよびκと名付けられた2タイプの軽鎖が抗体に見い出されることがある。重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンを、5個の主要なクラス、すなわち、A、D、E,GおよびMに割り当てることができ、それらのいくつかは、サブクラスアイソタイプ、例えば、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1およびIgA2にさらに分けることができる。各軽鎖には、N末端可変VドメインVLおよび定常CドメインCLが含まれる。各重鎖には、N末端VドメインVH、3または4個のCドメインCHおよびヒンジ領域が含まれる。VHに最も近いCHドメインは、CH1と表される。VHおよびVLドメインは、フレームワーク領域と呼ばれ、超可変配列の3つの領域相補性決定領域、CDRの骨格を形成する比較的保存された配列の4領域FR1、FR2、FR3およびFR4からなる。CDRは、抗体と抗原の特異的相互作用を担う大部分の残基を含む。CDRは、CDR1、CDR2およびCDR3と呼ばれる。したがって、重鎖上のCDR構成要素は、H1、H2およびH3と呼ばれ、一方、軽鎖上のCDR構成要素は、L1、L2およびL3と呼ばれる。通常、CDR3は、抗体結合部位の範囲内で最も大きな分子多様性源である。例えば、H3は、2個のアミノ酸残基ほどの短さか、あるいは26個を超えるアミノ酸であってよい。異なるクラスの免疫グロブリンについてのサブユニット構造および三次元立体配置は、当技術分野においてよく知られている。抗体構造の総説については、Antibodies:ALaboratoryManual、ColdSpringHarborLaboratory、Harlow他編、1988を参照されたい。当業者は、各サブユニット構造、例えば、CH、VH、CL、VL、CDR、FR構造が、活性フラグメント、例えば、抗原と結合するVH、VLまたはCDRサブユニットの部分、すなわち、抗原結合性フラグメント、または、例えば、Fc受容体および/または補体と結合しかつ/またはそれらを活性化するCHサブユニットの部分を含むことを認識しているはずである。通常、CDRは、SequencesofProteinsofImmunologicalInterest、USDepartmentofHealthandHumanServices1991、Kabat他編に記載されているように、KabatCDRを指す。抗原結合部位を特徴付けるための別の基準は、Chothiaにより記載されているような超可変ループを参照することである。例えば、Chothia,D.他1992J.Mol.Biol.227:799-817;およびTomlinson他1995EMBOJ.14:4628-4638を参照されたい。さらに別の基準は、OxfordMolecular′sAbM抗体モデリングソフトウエアにより使用されるAbM定義である。一般的には、例えば、ProteinSequenceandStructureAnalysisofAntibodyVaribleDomains.AntibodyEngineeringLabManualDuebel,S.およびKontermann,R編、Springer-Verlag、Heidelbergを参照されたい。あるいは、KabatCDRに関して記載されている実施形態は、Chothia超可変ループまたはAbM定義ループに関して同様に記載されている関係を用いて実施することができる。抗体の用語抗原結合性フラグメント内に包含される結合性フラグメントの例には、iFabフラグメント、VL、VH、CLおよびCH1ドメインからなる一価フラグメント;iiFab’2フラグメント、ヒンジ領域においてジスルフィド架橋により連結されている2つのFabフラグメントを含む二価フラグメント;iiiVHおよびCH1ドメインからなるFdフラグメント;iv抗体の単腕のVLおよびVHドメインからなるFvフラグメント、vVHドメインからなるdAbフラグメントWard他1989Nature341:544-46;およびvi単離相補性決定領域CDRが含まれる。ラクダ抗体およびラクダ化抗体も使用することができる。そのような抗体には、例えば、本明細書に記載されているたった1個の可変ドメイン由来のCDRが含まれてよい。さらに、Fvフラグメントの2つのドメイン、VLおよびVHは、別々の遺伝子によりコードされるが、組換え方法を用い、それらを、VLおよびVH領域がペアを組んで一価分子を形成する単一タンパク質鎖単鎖FvscFvとして知られる;例えば、Bird他1988Science242:423-26;Huston他1988Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.85:5879―83を参照とすることができる合成リンカーによりVLおよびVHをつなげることができる。また、そのような単鎖抗体は、抗体の用語抗原結合性フラグメントに包含されることが意図されている。これらの抗体フラグメントは、当業者に知られている従来の技法を用いて得られ、フラグメントは、インタクト抗体と同様にして機能が評価される。自然系における抗体多様性は、可変領域をコードする複数の生殖系列遺伝子および様々な体細胞イベントの使用により作り出される。体細胞イベントには、完全VH領域を作るための多様性Dを持つ可変遺伝子セグメントおよび結合J遺伝子セグメントの組換え、ならびに完全VL領域を作るための可変および結合遺伝子セグメントの組換えが含まれる。組換えプロセス自体は、不正確であってよく、VDJ結合部においてアミノ酸の喪失または付加をもたらす。これらの多様性機構は、抗原暴露前の発現中のB細胞で起きる。抗原刺激後、B細胞内で発現した抗体遺伝子は、体細胞変異を受ける。生殖系列遺伝子セグメントの推定数に基づき、1.6×107個までの異なる抗体にこれらのセグメントのランダム組換えおよびランダムVH-VL対合が生成する可能性があるFundamentalImmunology、第3版1993Paul編、RavenPress、NewYork、NY。抗体多様性の一因となる他のプロセス体細胞変異などを考慮に入れる場合、1010個以上の異なる抗体が生成すると考えられるImmunoglobulinGenes、第2版1995、Jonio他編、AcademicPress、SanDiego、CA。抗体多様性の生成に関与する多くのプロセスのため、同一の抗原特異性を持つ独立して誘導されるモノクローナル抗体が、同一のアミノ酸配列を有することはあり得ない。したがって、本開示は、とりわけ、IL-13と結合し、例えば、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を妨害する抗体およびそれらの抗原結合性フラグメントを提供する。一般に、本明細書に記載されている抗原結合性フラグメント、例えば、CDRを含む構造は、抗体重鎖もしくは軽鎖配列またはその活性フラグメントであり、CDRは、天然に存在するVHおよびVLのCDRに対応する位置に置かれるものとする。免疫グロブリン可変ドメインの構造および位置は、SequencesofProteinsofImmunologicalInterest、U.S.DepartmentofHealthandHumanServices1991、Kabat他編に記載されているように決定することができる。本明細書に開示されている抗体分子抗原結合性フラグメントが含まれる、すなわち、IL-13と結合し、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を妨害する抗体分子には、マウスモノクローナル抗体、mAb13.2およびその変異体、具体的には、キメラ変異体ch13.2、部分ヒト化変異体h13.2v1および完全ヒト化変異体h13.2v2およびh13.2v3が含まれるが、これらに限定されるものではない。これらの抗体分子は、喘息アレルギー性と非アレルギー性の両方、ならびに喘息関連病変を予防または治療するのに有用である。mAb13.2、ch13.2、h13.2v1、h13.2v2およびh13.2v3の軽鎖可変領域のアミノ酸配列を、それぞれ配列番号9、10、11、12および35に示す。mAb13.2、ch13.2、h13.2v1、h13.2v2およびh13.2v3の重鎖可変領域のアミノ酸配列を、それぞれ配列番号13、14、15、16および36に示す。mAb13.2、ch13.2、h13.2v1、h13.2v2およびh13.2v3の可変軽鎖内の3つの相補性決定領域CDRのアミノ酸配列を、配列番号19、20および21に示す。mAb13.2、ch13.2、h13.2v1、h13.2v2およびh13.2v3の可変重鎖内の3つのCDRのアミノ酸配列を、配列番号22、23および24に示す。上記に記載されているように、CDRは、抗原との特異的相互作用を担う大部分の残基を含み、VHおよびVLドメイン、すなわち、それぞれ重鎖可変領域および軽鎖可変領域内に含まれる。例示的抗体には、配列番号19~24に示されるアミノ酸配列から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも1つのCDRまたは選択された残基、特にそのようなCDR由来のIL-13接触残基が含まれる。また、そのような抗体は、IL-13と結合し、例えば、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を妨害することができる。本明細書に記載されているCDRの活性フラグメントのアミノ酸配列、すなわち、最小コアCDR配列を、配列番号25~30に示し、表1に開示する。抗体には、配列番号19~21または配列番号25~27に示されるようなVL鎖のうちの1つまたはそれ以上のCDRが含まれてよい。抗体には、配列番号22~24または配列番号28~30に示されるようなVH鎖のうちの1つまたはそれ以上のCDRが含まれてよい。さらに、抗体には、配列番号19~30に示されるアミノ酸配列から選択されるアミノ酸配列を有するVLおよびVH鎖のうちの1つまたはそれ以上のCDRが含まれてよい。示されるように、Xは、任意のアミノ酸、例えば、非システインアミノ酸または表1の左欄内の対応する位置におけるアミノ酸と類似した電荷、疎水性および/または側鎖長を有するアミノ酸であってよい。表1.例示的CDR上記に記載されているように、抗原結合性フラグメントは、Fvフラグメントであってよく、VHおよびVLドメインが含まれる。したがって、mAb13.3、ch13.2、h13.2v1、h13.2v2またはh13.2v3のFvフラグメントは、本明細書に記載されている抗体を構成することがある。それは、IL-13と結合し、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を妨害する。他のフラグメントには、Fvフラグメント、例えば、mAb13.3、ch13.2、h13.2v1、h13.2v2またはh13.2v3抗体または配列番号19~30に示されるアミノ酸配列から選択されるアミノ酸配列を有する1つまたはそれ以上のCDRが含まれる抗体のscFvフラグメント、FabフラグメントおよびFab’2フラグメントが含まれる。そのような抗体分子は、当業者に知られている方法により作成することができる。例えば、モノクローナル抗体は、知られている方法に従い、ハイブリドーマの作成により産生することができる。次いで、このように形成されるハイブリドーマを、酵素結合免疫吸着アッセイELISAおよび表面プラズモン共鳴Biacore商標分析などの標準的方法を用いてスクリーニングし、IL-13と結合し、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を妨害し、1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を中和する抗体を産生する1つまたはそれ以上のハイブリドーマを同定する。組換えIL-13、天然に存在するIL-13すなわち、プロセシングを受けた成熟形態のIL-13、その任意の変異体およびIL-13の抗原ペプチドフラグメントを、免疫原として使用することができる。IL-13の抗原ペプチドフラグメントは、少なくとも7個の連続するアミノ酸残基を含み、ペプチドに対して産生される抗体が、IL-13との特異的免疫複合体を形成するように、エピトープを包含することができる。抗原ペプチドは、少なくとも10個のアミノ酸残基、より好ましくは少なくとも15個のアミノ酸残基、より好ましくは少なくとも20個のアミノ酸残基、最も好ましくは少なくとも30個のアミノ酸残基を含むことが好ましい。さらに、IL-13の抗原ペプチドフラグメントは、IL-13受容体結合部位またはIL-4受容体結合部位を含むことが好ましい。モノクローナル抗体分泌性ハイブリドーマを調製することの代替案として、モノクローナル抗体を、変異体および/またはそれらの部分が含まれるIL-13により組換えコンビナトリアル免疫グロブリンライブラリー例えば、抗体ファージディスプレーライブラリーをスクリーニングすることにより同定および単離し、それにより、IL-13と結合する免疫グロブリンライブラリーメンバーを単離することができる。ファージディスプレーライブラリーを作成およびスクリーニングするための技法および市販キットは、当業者に知られている。さらに、抗体ディスプレーを作成およびスクリーニングする際に使用するのに特に適している方法および試薬の例には、米国特許第5,658,727号、米国特許第5,667,988号および米国特許第5,885,793号に記載されている方法および試薬が含まれる。本明細書に記載されているポリクローナル血清および抗体は、IL-13、その変異体および/またはそれらの部分により適当な対象を免疫化することにより作成することができる。免疫化された対象における抗体価は、固定化されたIL-13または他のマーカータンパク質例えば、FLAGを用い、酵素結合免疫吸着アッセイELISAなどの標準的技法により経時的にモニターすることができる。抗体は、動物または培養培地から単離することができる。IgG分画を得るためのタンパク質Aクロマトグラフィーの使用などのよく知られている技法が含まれる様々な方法を用いて抗体を精製することができる。特定の実施形態は、mAb13.2、ch13.2、h13.2v1、h13.2v2またはh13.2v3のFvフラグメントのVHおよび/またはVLドメインを含む。抗体のフラグメント、例えば、Fab、Fab’2、FdおよびdAbフラグメントは、抗体の切断により、または組換え操作により作成することができる。例えば、免疫学的に活性なFabおよびFab’2フラグメントは、ペプシンなどの酵素で抗体を処理することにより作成することができる。他の実施形態は、配列番号19~30に示されるように、これらのVHおよびVLドメインのいずれかのうちの1つまたはそれ以上の相補性決定領域CDRを含む。一実施形態は、mAb13.2、ch13.2、h13.2v1、h13.2v2またはh13.2v3のVHドメインのH3フラグメントを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載されているVHおよびVLドメインを生殖系列化することができ、すなわち、これらのドメインのフレームワーク領域FRを、1つまたはそれ以上の位置において、従来の分子生物学技法を用いて変化させ、ヒト生殖系列遺伝子またはヒト生殖系列遺伝子産物のコンセンサスアミノ酸配列と一致させることができる例えば、フレームワーク位置のうちの少なくとも70、80、85、90、95、97、98または99で。他の実施形態において、フレームワーク配列は、生殖系列と異なったたままである。ヒト生殖系列配列は、例えば、Tomlinson,I.A.他1992J.Mol.Biol.227:776-798;Cook,G.P.他1995Immunol.TodayVol.165:237-242;Chothia,D.他1992J.Mol.Biol.227:799-817;およびTomlinson他1995EMBOJ.14:4628-4638に開示されている。VBASEディレクトリーは、ヒト免疫グロブリン可変領域配列の総括的ディレクトリーを提供するTomlinson,I.A.他MRCCentreforProteinEngineering、Cambridge、UKにより収集された。これらの配列は、ヒト配列源として、例えば、フレームワーク領域およびCDRのために使用することができる。例えば、米国特許第6,300,064号に記載されているように、コンセンサスヒトフレームワーク領域も使用することができる。さらに、ヒト部分と非ヒト部分の両方を含む本明細書に記載されているキメラ、ヒト化および単鎖抗体は、実施例により詳細に記載されているように、標準的組換えDNA技法を用いて作成することができる。ヒト化抗体は、ヒト重鎖および軽鎖遺伝子を発現するが、内因性マウス免疫グロブリン重鎖および軽鎖遺伝子を発現することができないトランスジェニックマウスを用いて作成することもできる。さらに、本明細書に記載されている抗体には、IL-13と結合し、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を妨害し、重鎖および軽鎖の定常領域に変異を有する抗体も含まれる。定常領域の特定のフラグメントを変異させ不活性化することが望ましいことがある。例えば、重定常領域における変異を行い、Fc受容体FcRおよび/または補体との結合性が低下した抗体を作成することができ、そのような変異は、当技術分野においてよく知られている。IgGの重鎖の定常領域のアミノ配列へのそのような変異の例を配列番号17に示す。CLおよびCHサブユニット例えば、CH1の特定の活性フラグメントをお互いと共有結合させる。他の態様は、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を助けるIL-13のドメインに特異的な抗体抗原結合性ドメインを得るための方法を提供する。例示的抗体には、配列番号9、10、11、12または35に示されるようなVL鎖および/または配列番号13、14、15、16または36に示されるようなVH鎖の配列が含まれてよいが、抗原結合性能力を保持するこれらの配列の変異体も含まれてよい。そのような変異体は、当技術分野において知られている技法を用い、提供された配列から誘導することができる。アミノ酸置換、欠失または付加は、FRかCDRのどちらかにおいて行うことができる。フレームワーク領域における変化は、通常、抗体の安定性を改善し抗体の免疫原性を低減するように設計されるが、CDRにおける変化は、通常、その標的に対する抗体の親和性を高めるように設計される。そのような親和性を高める変化は、通常、CDR領域を改変し抗体を試験することにより経験的に決定される。そのような改変は、AntibodyEngineering、第2版1995Borrebaeck編、OxfordUniversityPressに記載されている方法に従って行うことができる。本明細書に記載されているVHドメインのアミノ酸配列変異体であるVHドメインを作成するための例示的方法は、本明細書に開示されているVHドメインのアミノ酸配列において1つまたはそれ以上のアミノ酸を付加、欠失、置換または挿入し、所望により、そのようにして提供されたVHドメインを1つまたはそれ以上のVLドメインと組み合わせ、IL-13との特異的結合についてVHドメインまたは1つまたはそれ以上のVH/VL組合せを試験し、好ましくは1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を変調するそのような抗原結合性ドメインの能力を試験する工程を含む。VLドメインは、実質的に本明細書に記載されているようなアミノ酸配列を有することができる。本明細書に開示されているVLドメインのうちの1つまたはそれ以上の配列変異体を1つまたはそれ以上のVHドメインと組み合わせる類似の方法を用いることができる。本発明の他の態様は、IL-13と特異的に結合する抗原結合性フラグメントを調製する方法を提供する。この方法は、a置換されるCDR3が含まれるか、CDR3コード化領域を欠くVHドメインをコードする核酸の出発レパートリーを提供すること;bそのレパートリーを、配列番号24の活性フラグメントを含むドナーCDRをコードするドナー核酸、例えば、配列番号30に示されるアミノ酸配列をコードするドナー核酸と、VHドメインをコードする核酸の生成物レパートリーを提供するため、ドナー核酸がレパートリー内のCDR3領域内に挿入されるように組み合わせること;c生成物レパートリーの核酸を発現させること;dIL-13に特異的な特異抗体または抗原結合性フラグメントを選択すること;およびe特異抗体もしくは抗原結合性フラグメントまたはそれをコードする核酸を回収することを含む。別の実施形態において、本明細書に記載されているVLCDR3すなわち、L3を、置換されるCDR3が含まれるか、CDR3コード化領域を欠くVLドメインをコードする核酸のレパートリーと組み合わせる類似方法を用いることができる。本明細書に記載されているCDR例えば、CDR3のコーディング配列は、組換えDNA技術を用い、CDR例えば、CDR3を欠く可変ドメインのレパートリー中に導入することができる。例えば、Marks他Bio/Technology199210;779-83は、可変ドメイン領域の5’末端に向いているか、あるいはそれに隣接するコンセンサスプライマーを、ヒトVH遺伝子の第三のフレームワーク領域に対するコンセンサスプライマーと併せて使用し、CDR3を欠くVH可変ドメインのレパートリーを提供する、抗体可変ドメインのレパートリーを作成する方法について記載している。レパートリーは、特定の抗体のCDR3と組み合わせることができる。類似技法を用い、CDR3由来の配列を、CDR3を欠くVHまたはVLドメインのレパートリーと入れ換え、混合した完全VHまたはVLドメインを同族のVLまたはVHドメインと組み合わせ、特異抗原結合性フラグメントを提供することができる。次いで、レパートリーを、WO92/01047のファージディスプレーシステムなどの適当な宿主系において提示させ、適当な抗原結合性フラグメントを選択することができる。類似のシャフリングまたはコンビナトリアル技法は、StemmerNature1994370:389-91によっても開示されている。他の代替案は、1つまたはそれ以上の選択されたVHおよび/またはVL遺伝子のランダム変異誘発を用い、改変されたVHまたはVL領域を作成し、全可変ドメイン内の変異を作成することである。例えば、Gram他Proc.Nat.Acad.Sci.U.S.A.199289:3576-80を参照されたい。使用することができる別の方法は、VHまたはVL遺伝子のCDR領域に変異誘発を向けることである。そのような技法は、例えば、Barbas他Proc.Nat.Acad.Sci.U.S.A.199491:3809-13およびSchier他J.Mol.Biol.1996263:551-67により開示されている。同様に、1つまたはそれ以上、または3つのCDRすべてを、VHもしくはVLドメイン、または他の骨格フィブロネクチンドメインなどのレパートリー中に移植することができる。得られるタンパク質を、IL-13と結合する能力について評価する。一実施形態において、標的と結合する結合性タンパク質を、例えば、変異誘発により修飾し、修飾された結合性タンパク質のプールを提供する。次いで、修飾された結合性タンパク質を評価し、改変された機能特性例えば、結合性の改善、安定性の改善、インビボでの長期安定性を有する1つまたはそれ以上の改変された結合性タンパク質を同定する。一実施において、ディスプレーライブラリー技術を用い、修飾された結合性タンパク質のプールを選択またはスクリーニングする。次いで、第二のライブラリーから、例えば、より高い厳密性またはより競合性の結合および洗浄条件を用いることにより、より高い親和性の結合性タンパク質を同定する。他のスクリーニング技法も使用することができる。一部の実施形態において、変異誘発は、結合界面にあることが知られているか、あるいはその可能性のある領域を標的とする。例えば、同定された結合性タンパク質が抗体である場合、変異誘発を、本明細書に記載されているような重鎖または軽鎖のCDR領域に向けることができる。さらに、変異誘発を、CDRに近いか、あるいは隣接するフレームワーク領域、例えば、CDR接合部の10、5または3アミノ酸内のフレームワーク領域に向けることができる。抗体の場合、変異誘発を1個または数個のCDRに限定し、例えば、段階的改善を行うことができる。一実施形態において、変異誘発を用い、1つまたはそれ以上の生殖系列配列とより類似した抗体を作成する。1つの例示的生殖系列化方法には、単離抗体の配列と類似した例えば、特定のデータベースにおいて最も類似した1つまたはそれ以上の生殖系列配列を同定することが含まれてよい。次いで、変異アミノ酸レベルでを、増加的に、組み合わせて、または両方で、単離抗体において行うことができる。例えば、一部のまたはすべての可能な生殖系列変異をコードする配列が含まれる核酸ライブラリーを作成する。次いで、変異抗体を評価し、例えば、単離抗体に比べ、1つまたはそれ以上の追加生殖系列残基を有し、依然として有用である例えば、機能活性を有する抗体を同定する。一実施形態において、可能な限り多くの生殖系列残基が単離抗体中に導入される。一実施形態において、変異誘発を用い、CDR領域中に1つまたはそれ以上の生殖系列残基を置換または挿入する。例えば、生殖系列CDR残基は、修飾されている可変領域と類似した例えば、最も類似した生殖系列配列由来であってよい。変異誘発後、抗体の活性例えば、結合または他の機能活性を評価し、1つまたはそれ以上の生殖系列残基が耐容性であるかどうかを決定する。類似の変異誘発を、フレームワーク領域において行うことができる。生殖系列配列を選択することは、様々な方法で行うことができる。例えば、生殖系列配列を、それが、選択性または類似性についての所定の基準、例えば、少なくとも特定の同一性百分率、例えば、少なくとも、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99または99.5の同一性を満たせば選択することができる。選択は、少なくとも2、3、5または10個の生殖系列配列を用いて行うことができる。CDR1およびCDR2の場合、類似生殖系列配列を同定することには、1個のそのような配列を選択することが含まれてよい。CDR3の場合、類似生殖系列配列を同定することには、1個のそのような配列を選択することが含まれてよいが、アミノ末端部分およびカルボキシ末端部分に対し別々に寄与する2つの生殖系列配列を用いることが含まれてよい。他の実施において、2つを超えるまたは2つの生殖系列配列を用い、例えば、コンセンサス配列を形成する。一実施形態において、抗体またはそのフラグメントは、本明細書に記載されている抗体のCDR配列と実質的にではなく異なるCDR配列を有する。実質的でない差には、CDR、例えば、ChothiaまたはKabatCDRの配列における通常は5~7個のアミノ酸のいずれかのうちの1または2個の置換などのわずかなアミノ酸変化が含まれる。通常、アミノ酸は、類似の電荷、疎水的または立体化学的特徴を有する関連アミノ酸により置換される。そのような置換は、当業者の範囲内にあるであろう。CDRと異なり、構造フレームワーク領域FRにおけるより実質的な変化は、抗体の結合特性に悪影響を及ぼすことなく行うことができる。FRへの変化には、非ヒト由来のフレームワークをヒト化すること、または抗原接触にとって、または結合部位を安定化するのに重要である特定のフレームワーク残基を操作すること、例えば、定常領域のクラスまたはサブクラスを変えること、Fc受容体結合などのエフェクター機能を改変するかもしれない特定のアミノ酸残基を変えることLund他1991J.Immunol.147:2657-62;Morgan他1995Immunology86:319-24または定常領域の由来する種を変えることが含まれるが、これらに限定されるものではない。抗体は、エフェクター機能、例えば、Fc受容体結合および補体活性化を低減または改変する重鎖のCH2領域に変異を有することができる。例えば、抗体は、米国特許第5,624,821号および第5,648,260号に記載されている変異などの変異を有することができる。例えば、IgG1またはIgG2重鎖において、そのような変異を行い、配列番号17に示されるアミノ酸配列に似せることができる。また、抗体は、当技術分野において開示されているように、IgG4のヒンジ領域における変異などの、免疫グロブリンの2つの重鎖間をジスルフィド結合で安定化する変異を有することができる例えば、Angal他1993Mol.Immunol.30:105-08。IL-13結合性タンパク質は、インタクト抗体、抗体のフラグメント、例えば、Fab、Fab’2、Fd、dAbおよびscFvフラグメント、ならびにそれらの定常領域および/または可変領域において変異した例えば、キメラ、部分ヒト化または完全ヒト化抗体を作成するため、ならびに望ましい特色、例えば、IL-13結合性増強および/またはFcR結合性低下のある抗体を作成するための変異インタクト抗体およびフラグメントの形態であってよい。一部の実施形態において、免疫グロブリン可変ドメインの実質的部分は、CDR領域のうちの少なくとも1つ、および所望により、本明細書に記載されているような可変領域由来のそれらの介在性フレームワーク領域を含むことができる。その部分には、FR1かFR4のどちらか、またはFR1とFR4の両方のうちの少なくとも約50、60、70、80、85、87、88、90、92、94、95、96、97、98が含まれることとする。例えば、連続または不連続であってよい部分には、FR1のC末端50およびFR4のN末端50が含まれてよい。可変ドメインの実質的部分のN末端またはC末端における追加残基は、天然に存在する可変ドメイン領域と通常は関係のない残基であってよい。例えば、組換えDNA技法により作成される特異抗原結合性フラグメントの構築は、クローニングまたは他の操作工程を容易にするために導入されるリンカーによりコードされるNまたはC末端残基の導入をもたらすことがある。他の操作工程には、以下でより詳細に議論するように、本明細書に記載されている可変ドメインを、免疫グロブリン重鎖、他の可変ドメイン例えば、ダイアボディの作成においてが含まれる他のタンパク質配列またはタンパク質標識に結合するためのリンカーの導入が含まれる。実施例に例示されている実施形態は、VHドメインとVLドメインのマッチングペアを含むが、本発明は、VHドメイン配列かVLドメイン配列のどちらか、特にVHドメインに由来する単一の可変ドメインを含む結合性フラグメントも包含する。単鎖特異結合性ドメインのどちらかの場合、これらのドメインを用い、IL-13と結合することができる2ドメイン特異抗原結合性ドメインを形成することができる相補ドメインをスクリーニングすることができる。これは、いわゆる階層的デュアルコンビナトリアルアプローチ例えば、WO92/01047に開示されているようなを用いるファージディスプレースクリーニング方法により行うことができ、H鎖クローンかL鎖クローンのどちらかを含む個々のコロニーを用い、他の鎖LまたはHをコードするクローンの完全ライブラリーに感染させ、参考文献に記載されている技法などのファージディスプレー技法に従い、得られる2重鎖特異抗原結合性ドメインを選択する。この技法は、Marks他、前掲書にも開示されている。抗体は、放射性核種、薬物、巨大分子または他の物質と化学的方法によりコンジュゲートすることができ、または本明細書に記載されている1つまたはそれ以上のCDRを含む融合タンパク質として作成することができる。抗体融合タンパク質は、VH-VLペアを含有し、これらの鎖通常VHのうちの1つおよび別のタンパク質は、単一ポリペプチド鎖として合成される。これらのタイプの生成物は、それらが、一般的に、追加の機能要素、例えば、小分子の活性部分またはコンジュゲートされた、あるいは縮合された巨大分子の主要な分子構造的特徴を有する点で抗体と異なる。上記で概略が説明されたアミノ酸配列への変化の他に、抗体を、グリコシル化、ペグ化するか、あるいはアルブミンまたは非タンパク質ポリマーに連結することができる。例えば、本明細書に開示されている抗体を、米国特許第4,640,835号;第4,496,689号;第4,301,144号;第4,670,417号;第4,791,192号;または第4,179,337号に示されるように、様々な非タンパク質ポリマー、例えば、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールまたはポリオキシアルキレンのうちの1つと連結することができる。抗体は、ポリマーとの共有結合コンジュゲーションにより化学的に修飾され、例えば、それらの循環半減期を増加させる。例示的ポリマーおよびそれらをペプチドに接続する方法は、米国特許第4,766,106号;第4,179,337号;第4,495,285号;および第4,609,546号にも示されている。他の実施形態において、抗体を、改変されたグリコシル化パターンを有する例えば、本来の、すなわち天然グリコシル化パターンから改変されたように修飾することができる。この文脈で使用する改変されたは、除去される1つまたはそれ以上の炭水化物部分を有することおよび/または本来の抗体に追加された1つまたはそれ以上のグリコシル化部位を有することを意味する。本明細書に開示されている抗体へのグリコシル化部位の追加は、グリコシル化部位コンセンサス配列を含むようにアミノ酸配列を改変することにより行うことができ、そのような技法は、当技術分野においてよく知られている。抗体上の炭水化物部分の数を増加させる別の手段は、抗体のアミノ酸残基へのグリコシドの化学的または酵素的カップリングによる。これらの方法は、例えば、WO87/05330およびAplinおよびWriston1981CRCCrit.Rev.Biochem.22:259-306に記載されている。抗体上に存在する任意の炭水化物部分の除去は、当技術分野において記載されているように、化学的または酵素的に行うことができるHakimuddin他1987Arch.Biochem.Biophys.259:52;Edge他1981Anal.Biochem.118:131;およびThotakura他1987Meth.Enzymol.138:350。例えば、サルベージ受容体結合性エピトープを提供することによりインビボ半減期を増加させる修飾についての米国特許第5,869,046号を参照されたい。本明細書に記載されている抗体は、検出可能な、または機能性標識でタグ付けすることもできる。検出可能な標識には、131Iまたは99Tcなどの放射性標識が含まれ、これらは、当技術分野において知られている従来の化学反応を用い、本明細書に記載されている抗体に接続することができる。標識には、西洋ワサビペルオキシダーゼまたはアルカリホスファターゼなどの酵素標識も含まれる。標識には、ビオチンなどの化学的部分がさらに含まれ、これは、特異的同族の検出可能な部分、例えば、標識アビジンとの結合を介して検出することができる。本明細書に開示されている抗体の結合特性は、以下の方法、すなわち、以下の実施例に記載されているようなBiacore分析、酵素結合免疫吸着アッセイELISA、X線結晶学、配列分析および走査変異誘発、ならびに当技術分野においてよく知られている他の方法が含まれる任意の適当な方法により測定することができる。1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を中和および/または阻害する本明細書に記載されている抗体の能力は、以下の方法、すなわち、以下の実施例に記載されているように、IL-13依存性細胞系、例えば、TFIの増殖を測定するためのアッセイ;IL-13仲介性ポリペプチドの発現を測定するためのアッセイ、例えば、CD23の発現のフローサイトメトリー分析;下流シグナル伝達分子、例えば、STAT6の活性を測定するアッセイ;関連動物モデル、例えば、カニクイザルにおいて喘息を予防する本明細書に記載されている抗体の効率を試験するアッセイ、ならびに当技術分野においてよく知られている他のアッセイにより測定することができる。関心のあるタンパク質と標的例えば、IL-13の結合相互作用は、SPRを用いて分析することができる。SPRまたは生体分子相互作用解析BIAは、相互作用物のいずれにも標識することなく、リアルタイムに生体特異性相互作用を検出する。BIAチップの結合表面における質量の変化結合事象を示すは、表面近くで光の屈折率の変化をもたらす表面プラズモン共鳴SPRの光学現象。屈折度の変化は、検出可能なシグナルを生じ、生物学的分子間のリアルタイム反応の徴候として測定される。SPRを用いるための方法については、例えば、米国特許第5,641,640号;Raether1988SurfacePlasmonsSpringerVerlag;SjolanderおよびUrbaniczky1991Anal.Chem.63:2338-2345;Szabo他1995Curr.Opin.Struct.Biol.5:699-705およびBIAcoreInternationalABUppsala、Swedenにより提供されるオンラインリソースに記載されている。SPRからの情報を用い、生体分子の標的との結合について、平衡解離定数Kd、ならびにKonおよびKoffが含まれる速度パラメーターの正確かつ定量的測度を提供することができる。そのようなデータを用い、様々な生体分子を比較することができる。例えば、多様な鎖のライブラリーから選択される核酸によりコードされるタンパク質を比較し、標的に対して高い親和性を有するか、あるいは遅いKoffを有する個々のタンパク質を同定することができる。また、この情報を用い、構造活性相関SARを展開することができる。例えば、親タンパク質の成熟したバージョンの速度パラメーターおよび平衡結合パラメーターを、親タンパク質のパラメーターと比較することができる。特定の結合パラメーター、例えば、高い親和性および遅いKoffと相関関係がある所与の位置における変異アミノ酸を同定することができる。この情報を、構造モデリングと組み合わせることができる例えば、ホモロジーモデリング、エネルギー最小化またはX線結晶学またはNMRによる構造決定。結果として、タンパク質とその標的との間の物理的相互作用に対する理解を定式化し、他の設計プロセスを導くために使用することができる。他の態様において、本開示は、IL-13と結合することができる抗体を選択し、1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を中和および/または阻害する方法を提供する。この方法は、a複数の抗体または抗原結合性フラグメントをIL-13と接触させること;bIL-13と結合する抗体または抗原結合性フラグメントを選択すること;cIL-13がIL-13受容体と結合するのを妨げる選択した抗体または抗原結合性フラグメントの能力を試験すること;およびdIL-13がその受容体と結合するのを妨げることができる1つまたはそれ以上の抗体または抗原結合性フラグメントを選択することを含む。望ましい場合、1つまたはそれ以上の抗体をさらに修飾することができる。1つまたはそれ以上のそのような抗体を、例えば、医薬組成物として調剤することができる。本明細書に開示されている抗IL-13抗体は、上清、細胞ライセート中で、または細胞表面上でIL-13を単離、精製および/または検出するのにも有用である。本明細書に開示されている抗体を診断的に使用し、臨床試験手順の一部としてIL-13タンパク質レベルをモニターすることができる。さらに、本明細書に開示されている抗体を、1つまたはそれ以上のIL-13関連活性の中和および/または阻害を必要とする治療、例えば、アレルギー性または非アレルギー性喘息および関連病変において使用することができる。また、本開示は、ヒトIL-13を対象とする新規な抗体に関連する新規な単離および精製ポリヌクレオチドおよびポリペプチドを提供する。本明細書に開示されている遺伝子、ポリヌクレオチド、タンパク質およびポリペプチドには、IL-13に対するマウス抗体mAb13.2およびその変異体が含まれるが、これらに限定されるものではない。抗IL-13抗体ポリヌクレオチドおよびポリペプチド例えば、本開示は、1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を変調する例えば、IL-13生物活性を中和する、IL-13に対するマウス抗体mAb13.2、mAb13.2のキメラバージョンch13.2、mAb13.2の部分ヒト化バージョンh13.2v1およびmAb13.2の2つの完全ヒト化バージョンh13.2v2およびh13.2v3の可変領域をコードする精製および単離ポリヌクレオチドを提供する。ヌクレオチド配列には、mAb13.2、ch13.2、h13.2v1、h13.2v2およびh13.2v3の軽鎖可変領域をコードし、それぞれ配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4および配列番号33に示される配列が含まれてよい。また、ヌクレオチド配列には、mAb13.2、ch13.2、h13.2v1、h13.2v2およびh13.3v3の重鎖可変領域をコードし、それぞれ配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8および配列番号34に示される配列が含まれてよい。また、ポリヌクレオチドには、配列番号1~8、33および34に示される配列のいずれか、またはそれらの相補体と厳密な条件下でハイブリダイズし、かつ/またはこれらの配列によりコードされる可変領域の実質的生物学的活性を保持するポリペプチドすなわち、活性フラグメントをコードするポリヌクレオチドが含まれてよい。また、ポリヌクレオチドには、少なくとも21個の連続したヌクレオチドを含む配列番号1~8、33および34に示される配列のいずれかのうちの連続部分が含まれてよい。表2は、いくつかの例示的ポリヌクレオチドのヌクレオチド配列についての配列番号を要約している。表2:本発明のポリヌクレオチドの配列同定番号配列番号mAb13.2、ch13.2、h13.2v1、h13.2v2およびh13.2v3の軽鎖可変領域のアミノ酸配列を、それぞれ配列番号、9、10、11、12および35に示す。mAb13.2、ch13.2、h13.2v1、h13.2v2およびh13.2v3の重鎖可変領域のアミノ酸配列を、それぞれ配列番号、13、14、15、16および36に示す。本明細書に開示されているポリペプチドには、少なくとも4個の連続するアミノ酸を含み、これらの可変領域の実質的な生物学的活性を保持するすなわち、活性フラグメント配列番号9~16、35および36に示される配列のいずれかのうちの連続部分も含まれる。本出願のポリペプチドには、5~7個のアミノ酸を含む配列番号9~16、35および36に示される配列のいずれかのうちの連続部分が含まれることが好ましい。本出願のより好ましいポリペプチドには、それぞれmAb13.2、ch13.2、h13.2v1、h13.2v2およびh13.2v3の実質的な生物学的活性を保持する配列番号9および13、配列番号10および14、配列番号11および15、配列番号12および16、ならびに配列番号35および36に示される配列のいずれかのうちの任意の連続部分が含まれる。本明細書に開示されているポリヌクレオチドには、上記に記載されているポリヌクレオチドの他に、配列番号9~16、35および36に示されるアミノ酸配列のいずれか、またはそれらの連続部分をコードし、遺伝コードのよく知られている縮重のためだけで上記に記載されているポリヌクレオチドと異なるポリヌクレオチドも含まれる。表3は、本明細書に開示されているポリペプチドのいくつかのアミノ酸配列についての配列番号を要約している。例えば、表3は、抗体mAb13.2、ch13.2、h13.2v1、h13.2v2およびh13.2v3の可変軽鎖VL、可変重鎖VH、定常重鎖CH、定常軽鎖CL、可変軽鎖のCDR1L1、可変軽鎖のCDR2L2、可変軽鎖のCDR3L3、可変重鎖のCDR1H1、可変重鎖のCDR2H2および可変重鎖のCDR3H3のアミノ酸配列についての配列番号を要約している。表3:例示的ポリペプチドの配列ID番号配列番号本明細書に開示されている単離ポリヌクレオチドは、開示されているポリヌクレオチドをコードする配列と一致するか、あるいは類似した配列を有する核酸を同定および単離するためのハイブリダイゼーションプローブおよびプライマーとして使用することができる。核酸を同定および単離するためのハイブリダイゼーション方法には、ポリメラーゼ連鎖反応PCR、サザンハイブリダイゼーション、insituハイブリダイゼーションおよびノーザンハイブリダイゼーションが含まれ、当業者にはよく知られている。ハイブリダイゼーション反応は、異なる厳密性の条件下で行うことができる。ハイブリダイゼーション反応の厳密性には、任意の2つの核酸分子がお互いとハイブリダイズする困難さが含まれる。各々のハイブリダイズするポリヌクレオチドは、厳密性の低い条件、より好ましくは厳密な条件、最も好ましくは極めて厳密な条件下で、その対応するポリヌクレオチドとハイブリダイズすることが好ましい。厳密性条件の例を以下の図4に示す。極めて厳密な条件は、少なくとも、例えば、条件A~Fのように厳密であり、厳密な条件は、少なくとも、例えば、条件G~Lのように厳密であり、厳密性の低い条件は、少なくとも、例えば、条件M~Rのように厳密である。表41ハイブリッド長は、ハイブリダイズするポリヌクレオチドの1つまたはそれ以上のハイブリダイズした領域について予想される長さである。あるポリヌクレオチドを未知の配列の標的ポリヌクレオチドとハイブリダイズする場合、ハイブリッド長は、ハイブリダイズするポリヌクレオチドの長さであると考えられる。既知の配列のポリヌクレオチドがハイブリダイズされる場合、ハイブリッド長は、ポリヌクレオチドの配列をアラインメントし、最適な配列相補性の1つまたはそれ以上の領域を同定することにより決定することができる。2SSPE1×SSPEは、0.15MNaCl、10mMNaH2PO4および1.25mMEDTA、pH7.4であるは、ハイブリダイゼーション緩衝液および洗浄緩衝液においてSSC1×SSCは、0.15MNaClおよび15mMクエン酸ナトリウムであるの代用にすることができる;洗浄は、ハイブリダイゼーション終了後15分間行われる。TB-TR:長さが50塩基対未満であると予想されるハイブリッドについてのハイブリダイゼーション温度は、ハイブリッドの融解温度Tmよりも5~10°C低くなければならず、Tmは、下式に従って決定される。長さが18塩基対未満のハイブリッドについては、Tm°C=2AT塩基の数4GC塩基の数。長さが18~49塩基対のハイブリッドについては、Tm°C=81.516.6log10Na0.41GC-600/Nであり、ここで、Nは、ハイブリッド中の塩基数であり、Naは、ハイブリダイゼーション緩衝液中のナトリウムイオンの濃度である1×SSCのNa=0.165M。ポリヌクレオチドハイブリダイゼーションについての厳密性条件の追加例は、参照により本明細書に組み込まれているSambrook他、MolecularCloning:ALaboratoryManual、Chs.911、ColdSpringHarborLaboratoryPress、ColdSpringHarbor、NY1989およびAusubel他、編、CurrentProtocolsinMolecularBiology、Sects.2.106.3-6.4、JohnWileySons,Inc.1995に提供されている。本明細書に開示されている単離ポリヌクレオチドは、開示されているポリヌクレオチドの対立遺伝子変異体をコードする配列を有するDNAを同定および単離するためのハイブリダイゼーションプローブおよびプライマーとして使用することができる。対立遺伝子変異体は、開示されているポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドと一致するか、あるいは有意な類似性を有するポリペプチドをコードする、開示されているポリヌクレオチドの天然に存在する代替形態である。対立遺伝子変異体は、開示されているポリヌクレオチドと少なくとも90の配列同一性より好ましくは、少なくとも95の同一性;最も好ましくは、少なくとも99の同一性を有することが好ましい。また、本明細書に開示されている単離ポリヌクレオチドは、開示されているポリヌクレオチドと相同なポリペプチドをコードする配列を有するDNAを同定および単離するためのハイブリダイゼーションプローブおよびプライマーとして使用することができる。これらの相同体は、開示されているポリペプチドおよびポリヌクレオチドの種とは異なる種から、または同じ種内から単離されるが、開示されているポリヌクレオチドおよびポリペプチドと有意な配列類似性を持つポリヌクレオチドおよびポリペプチドである。ポリヌクレオチド相同体は、開示されているポリヌクレオチドの少なくとも50、70、75、80、85、87、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98または99配列を有することが好ましい。また、本明細書に開示されている単離ポリヌクレオチドは、抗体を発現する細胞および組織ならびに抗体が発現される条件を同定するためのハイブリダイゼーションプローブおよびプライマーとして使用することができる。本明細書に開示されている単離ポリヌクレオチドは、本明細書に記載されているポリペプチドの組換え産生のための発現制御配列と動作可能に連結することができる。ポリヌクレオチドは、定常領域、例えば、様々な抗体アイソタイプのうちの1つの定常領域をコードするヌクレオチド配列と動作可能に連結することができる。例えば、本明細書に開示されている軽鎖可変領域をコードするポリヌクレオチド例えば、配列番号1~4および33に示されるポリヌクレオチドのうちのいずれか1個を、κ軽鎖例えば、配列番号18に示されるようなかλ軽鎖のどちらかの定常領域をコードするヌクレオチド配列またはその誘導体と、連結されたヌクレオチドの発現が、IL-13と特異的に結合し、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を妨害し、1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を中和するように動作可能に連結することができる。同様に、本明細書に開示されている重鎖可変領域をコードするポリヌクレオチド例えば、配列番号5~8および34に示されるポリヌクレオチドのうちのいずれかを、重鎖アイソタイプ、例えば、IgM、IgD、IgE、IgGおよびIgAの定常領域をコードするヌクレオチド配列またはその誘導体と動作可能に連結することができる。組換えタンパク質を発現する一般的方法は、当技術分野においてよく知られている。そのような組換えタンパク質は、IL-13仲介性シグナル伝達に起因する障害例えば、アレルギー性または非アレルギー性喘息の治療において使用するために可溶形態で発現することができる。本明細書に開示されている組換え発現ベクターは、宿主細胞においてベクターの複製を調節する配列例えば、複製起点および選択可能なマーカー遺伝子などの追加配列を運ぶことができる。選択可能なマーカー遺伝子は、ベクターが導入された宿主細胞の選択を容易にする例えば、米国特許第4,399,216号、第4,634,665号および第5,179,017号を参照。例えば、通常、選択可能なマーカー遺伝子は、ベクターが導入された宿主細胞上で、G418、ハイグロマイシンまたはメトトレキセートなどの薬物に対する耐性を付与する。好ましい選択可能なマーカー遺伝子には、ジヒドロ葉酸レダクターゼDHFR遺伝子メトトレキセート選択/増幅によりdhfr-宿主細胞において使用するためおよびneo遺伝子G418選択のためが含まれる。多くの細胞系は、組換え体発現に適している宿主細胞である。哺乳類宿主細胞系には、例えば、COS細胞、CHO細胞、293T細胞、A431細胞、3T3細胞、CV-1細胞、HeLa細胞、L細胞、BHK21細胞、HL-60細胞、U937細胞、HaK細胞、ジャーカット細胞、ならびに一次組織および初代移植片のインビトロ培養液に由来する細胞株が含まれる。あるいは、酵母などの下等真核生物例えば、サッカロミセスSaccharomyces、ピキアPichia、クルイベロミセスKluyveromyces菌株およびカンジダCandida菌株または原核生物例えば、大腸菌Escherichiacoli、枯草菌Bacillussubtilisおよびサルモネラ菌Salmonellatyphimuriumにおいてポリペプチドを組換え的に産生することが可能なことがある。酵母または細菌で作られたポリペプチドを修飾することができる。例えば、適切な部位のグリコシル化。また、ポリペプチドを、動物細胞、例えば、昆虫または哺乳類細胞において製造することができる。例えば、ポリペプチドをコードする配列を、バキュロウイルスベクターなどの昆虫発現ベクター中に挿入し、昆虫細胞発現系例えば、MAXBAC登録商標キット、Invitrogen、Carlsbad、CAにおいて使用することができる。次いで、本明細書に開示されているポリペプチドを、ゲル濾過およびイオン交換クロマトグラフィーなどの知られている精製プロセスを用いて培養培地または細胞抽出物から精製することができる。また、精製には、本明細書に開示されているポリペプチドと結合することが知られている物質による親和性クロマトグラフィーが含まれてよい。あるいは、本明細書に開示されているポリペプチドを、精製を容易にする形態で組換え的に発現させることができる。例えば、ポリペプチドを、マルトース結合性タンパク質MBP、グルタチオン-S-トランスフェラーゼGST、もしくはチオレドキシンTRXなどのタンパク質との融合物として、またはヘキサ-ヒスチジン、ペンタ-ヒスチジン、または小さなエピトープタグ、例えば、FLAGエピトープとの融合物として発現させることができる。また、本明細書に開示されているポリペプチドは、開示されているポリペプチドと構造的に異なるが例えば、わずかに改変された配列を有する、開示されているポリペプチドと実質的に同一の生化学的特性を有する例えば、機能的に非必須なアミノ酸残基においてのみ改変されている分子を包含する。そのような分子には、改変、置換、置き換え、挿入または欠失を含む天然に存在する対立遺伝子変異体および意図的に操作された変異体が含まれる。そのような改変、置換、交換、挿入または欠失のための技法は、当業者によく知られている。IL-13結合性物質抗体およびそれらのフラグメントである結合性物質以外の、IL-13と結合する結合性物質、特に、IL-13との結合についてmAb13.2および本明細書に記載されている他の抗体と競合する結合性物質も提供される。例えば、それらの結合性物質は、IL-13上でmAb13.2と同一のエピトープまたは重複するエピトープと結合することができる。結合性物質は、IL-13活性を阻害または中和することが好ましい。例えば、結合性物質は、IL-13のIL-4Rαとの結合を阻害し、例えば、IL-13のIL-13Rα1との結合を妨げない。そのような結合性物質は、本明細書に記載されている方法、例えば、障害を治療および予防する方法において使用することができる。本明細書に記載されているすべての実施形態は、IL-13結合性物質との使用に適合させることができる。結合性物質は、本明細書に記載されている可変ドメインを修飾すること、または本明細書に記載されている可変ドメインのうちの1つまたはそれ以上のCDRを別の骨格上に移植することが含まれる多くの手段により同定することができる。また、結合性物質は、例えば、スクリーニングにより、多様なライブラリーから同定することができる。タンパク質ライブラリーをスクリーニングするための一方法は、ファージディスプレーを用いる。タンパク質の特定の領域を改変し、IL-13と相互作用するタンパク質を、例えば、固体支持体上の保持により、または他の物理的会合により同定する。IL-13上でmAb13.2と同一のエピトープまたは重複するエピトープと結合する特定の結合性物質を同定するため、結合性物質を、mAb13.2または、関連抗体を添加することにより溶出するか、あるいは、結合性物質を、mAb13.2または、関連抗体との競合実験で評価することができる。また、ライブラリーを、IL-13およびmAb13.2または、関連抗体を含む複合体と接触させることにより、他のエピトープと結合する物質のライブラリーを減少させることが可能である。次いで、わずかになったライブラリーを、IL-13と接触させ、IL-13と結合するが、mAb13.2と結合している場合にはIL-13と結合しない結合性物質を得ることができる。また、標的としてmAb13.2エピトープを含むIL-13由来のペプチドを使用することが可能である。ファージディスプレーについては、例えば、米国特許第5,223,409号;Smith1985Science228:1315-1317;WO92/18619;WO91/17271;WO92/20791;WO92/15679;WO93/01288;WO92/01047;WO92/09690;WO90/02809;WO94/05781;Fuchs他1991Bio/Technology9:1370-1372;Hay他1992HumAntibodHybridomas3:81-85;Huse他1989Science246:1275-1281;Griffiths他1993EMBOJ12:725-734;Hawkins他1992JMolBiol226:889-896;Clackson他1991Nature352:624-628;Gram他1992PNAS89:3576-3580;Garrard他1991Bio/Technology9:1373-1377;Rebar他1996MethodsEnzymol.267:129-49;およびBarbas他1991PNAS88:7978-7982に記載されている。酵母表面ディスプレーについては、例えば、BoderおよびWittrup1997Nat.Biotechnol.15:553-557に記載されている。ディスプレーの別の形態は、リボソームディスプレーである。例えば、Mattheakis他1994Proc.Natl.Acad.Sci.USA91:9022およびHanes他2000NatBiotechnol.18:1287-92;Hanes他2000MethodsEnzymol.328:404-30.およびSchaffitzel他1999JImmunolMethods.2311-2:119-35を参照されたい。IL-13と結合する結合性物質は、1つの骨格タンパク質の構造的特徴、例えば、折り畳みドメインを有することがある。ある抗体に基づいた例示的骨格ドメインは、モノクローナル抗体の重鎖可変ドメインから3個のβ鎖を除去することにより設計されたミニボディー骨格であるTramontano他、1994、J.Mol.Recognit.7:9;およびMartin他、1994、TheEMBOJournal13、pp.5303-5309。このドメインには、61個の残基が含まれ、このドメインを用いて、2個の超可変ループ、例えば、本明細書に記載されている可変ドメインまたは本明細書に記載されている変異体の1つまたはそれ以上の超可変ループを提供することができる。別のアプローチにおいて、結合性物質には、V様ドメインである骨格ドメインが含まれるCoia他WO99/45110。V様ドメインは、抗体の可変重VHまたは可変軽VLドメインと類似した構造的特徴を有するドメインを指す。別の骨格ドメインは、2個のジスルフィド結合によりつなぎ合わされている74個の残基の6鎖βシートサンドイッチのテンダミスタチンtendamistatinに由来するMcConnellおよびHoess、1995、J.Mol.Biol.250:460。この親タンパク質には3つのループが含まれる。これらのループを修飾例えば、本明細書に記載されているCDRまたは超可変ループを用いまたは改変し、例えば、IL-13と結合するドメインを選択することができる。WO00/60070は、天然に存在するCTLA-4の細胞外ドメインに由来するβサンドイッチ構造について記載しており、骨格として使用している。IL-13結合性物質のためのさらに別の骨格ドメインは、フィブロネクチンドIII型メインまたは関連するフィブロネクチン様タンパク質に基づくドメインである。フィブロネクチンIII型Fn3ドメインの全体的な折り畳みは、最小の機能的抗体フラグメントである抗体重鎖の可変領域の全体的な全折り畳みと密接に関連している。Fn3は、Fn3が、9個ではなく7個のβ鎖を有していることを除いては、抗体VHドメインのβサンドイッチと類似したβサンドイッチである。Fn3の末端には3つのループがあり、BC、DEおよびFGループの位置は、抗体のVHドメインのCDR1、2および3の位置にほぼ対応している。Fn3が有利なのは、ジスルフィド結合を有していないためである。したがって、Fn3は、抗体およびそれらのフラグメントと異なり、還元条件下で安定であるWO98/56915;WO01/64942;WO00/34784を参照。Fn3ドメインを、修飾例えば、本明細書に記載されているCDRまたは超可変ループを用いまたは改変し、例えば、IL-13と結合するドメインを選択することができる。さらに他の例示的骨格ドメインには、T細胞受容体;MHCタンパク質;細胞外ドメイン例えば、フィブロネクチンIII型リピート、EGFリピート;プロテアーゼ阻害剤例えば、クニッツドメイン、エコチンecotin、BPTIなど;TPRリピート;トレフォイル構造;亜鉛フィンガードメイン;DNA結合性タンパク質;特に、単量体DNA結合性タンパク質;RNA結合性タンパク質;酵素、例えば、プロテアーゼ特に、不活性化プロテアーゼ、RNA分解酵素;シャペロン、例えば、チオレドキシンおよび熱ショックタンパク質;および細胞内シグナル伝達ドメインSH2およびSH3ドメインなどが含まれる。US20040009530は、いくつかの代替骨格の例について記載している。小さな骨格ドメインの例には、クニッツドメイン58個のアミノ酸、3個のジスルフィド結合、セイヨウカボチャCucurbidamaximaトリプシン阻害剤ドメイン31個のアミノ酸、3個のジスルフィド結合、グアニリンに関連するドメイン14個のアミノ酸、2個のジスルフィド結合、グラム陰性菌由来の耐熱性エンテロトキシンIAに関連するドメイン18個のアミノ酸、3個のジスルフィド結合、EGFドメイン50個のアミノ酸、3個のジスルフィド結合、クリングルドメイン60個のアミノ酸、3個のジスルフィド結合、真菌の炭水化物結合ドメイン35個のアミノ酸、2個のジスルフィド結合、エンドセリンドメイン18個のアミノ酸、2個のジスルフィド結合および連鎖球菌GIgG結合ドメイン35個のアミノ酸、ジスルフィド結合なしが含まれる。小さな細胞内骨格ドメインの例には、SH2、SH3およびEVHドメインが含まれる。一般に、細胞内または細胞外の任意のモジュラードメインを使用することができる。骨格ドメインを評価するための例示的基準には、1アミノ酸配列、2いくつかの相同ドメインの配列、3三次元構造および/または4一連のpH、温度、塩分、有機溶媒、酸化剤濃度にわたる安定性データが含まれてよい。一実施形態において、骨格ドメインは、小さく安定なタンパク質ドメイン、例えば、100、70、50、40または30個未満のアミノ酸のタンパク質である。ドメインには、1つまたはそれ以上のジスルフィド結合が含まれるか、あるいは、金属、例えば、亜鉛をキレートすることがある。さらに他の結合性物質は、ペプチド、例えば、30、25、24、20、18、15または12個未満のアミノ酸であるアミノ酸配列のタンパク質に基づく。ペプチドを、より大きなタンパク質、通常は、IL-13、例えば、本明細書に記載されているエピトープと独立して結合することができる領域に組み入れることができる。ペプチドを、ファージディスプレーにより同定することができる。IL-13結合性物質には、非ペプチド結合および他の化学修飾が含まれてよい。例えば、結合性物質の一部またはすべてを、ペプチドミメティック、例えば、ペプトイドとして合成することができる例えば、Simon他1992Proc.Natl.Acad.Sci.USA89:9367-71およびHorwell1995TrendsBiotechnol.13:132-4を参照。結合性物質には、1つまたはそれ以上の例えば、すべてが非加水分解性の結合が含まれてよい。多くの非加水分解性ペプチド結合は、そのような結合を含むペプチドを合成するための手順と共に、当技術分野において知られている。例示的非加水分解性結合には、--[CH2NH]--還元型アミドペプチド結合、--[COCH2]--ケトメチレンペプチド結合、--[CHCNNH]--シアノメチレンアミノペプチド結合、--[CH2CHOH]--ヒドロキシエチレンペプチド結合、--[CH2O]--ペプチド結合および--[CH2S]--チオメチレンペプチド結合が含まれる米国特許第6,172,043号を参照。医薬組成物、用量および投与方法抗IL-13抗体または、他のIL-13結合性物質は、例えば、薬学的に許容できる担体との組合せにより、医薬組成物中に組み入れることができる。また、そのような組成物は、例えば、様々な希釈剤、充填剤、塩、緩衝液、安定剤、可溶化剤および当技術分野においてよく知られている他の材料を含有することができる。用語薬学的に許容できるは、1つまたはそれ以上の活性成分の生物学的活性の有効性を妨害しない非毒性材料を意味する。担体の特徴は、投与の経路によって異なることがある。また、医薬組成物は、以下でより詳細に記載されるような他の抗サイトカイン抗体または他の抗炎症薬などであるがこれらに限定されない他の要素を含有することができる。そのような追加の要素および/または物質を医薬組成物に含め、本明細書に記載されている抗体との相乗効果を生み出すことができる。例えば、アレルギー性喘息の治療において、医薬組成物には、例えば、抗IL-4抗体またはアレルギー反応を軽減することが知られている薬物も含まれてもよい。一実施形態において、医薬組成物には、唯一の生物製剤例えば、唯一のタンパク質成分として、または唯一の生物学的活性成分として抗IL-13抗体が含まれる。例えば、組成物には、w/wベースで25、20、15、10、5、3、2、1、0.4または0.1の他のタンパク質成分が含まれてよい。医薬組成物は、抗体が、他の薬学的に許容できる担体の他に、水溶液中でミセル、不溶性単層、液晶またはラメラ層として凝集した形態で存在する脂質などの両親媒性物質と組み合わされているリポソームの形態であってよい。リポソーム調剤に適している脂質には、モノグリセリド、ジグリセリド、スルファチド、リゾレシチン、リン脂質、サポニン、胆汁酸などが含まれるが、これらに限定されるものではない。そのようなリポソーム調剤の調製は、例えば、米国特許第4,235,871号;第4,501,728号;第4,837,028号;および第4,737,323号に開示されているように、当業者のレベルの範囲内にあり、これらの特許はすべて、参照により本明細書に組み込まれるものとする。本明細書で使用する用語治療有効量は、意味のある患者の有益性、例えば、そのような状態の症状の改善、そのような状態の治癒またはそのような状態の治癒の速度増加を示すのに十分である医薬組成物または方法の各活性成分の総量を意味する。単独で投与される個々の活性成分に当てはめた場合、この用語は、その成分単独を指す。組合せに当てはめた場合、この用語は、組み合わせて、連続してまたは同時に投与されるか否かにかかわらず、治療効果をもたらす活性成分を合わせた量を指す。本明細書に記載されている例示的な治療方法または使用方法を実施するにあたり、IL-13と結合し、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を妨害し例えば、1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を中和または阻害する治療有効量の抗体を対象、例えば、哺乳類例えば、ヒトに投与することができる。抗体を、記載されている方法に従い、単独か、サイトカイン、リンホカインもしくは他の造血因子または抗炎症薬を用いる治療などの他の療法と組み合わせて投与することができる。1つまたはそれ以上の物質と同時投与する場合、抗体を、第二の物質と同時か、または別々に、例えば、順次に投与することができる。別々に、例えば、順次に投与する場合、主治医は、他の物質と組み合わせて抗体を投与する適切な順序を決めるものとする。医薬組成物例えば、IL-13と結合する抗体を含有する医薬組成物の投与は、経口摂取、吸入または皮膚、皮下、もしくは静脈内注射などの様々な従来法で行うことができる。患者への皮下投与が好ましい。IL-13と結合し、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を妨害する治療有効量の抗体を経口投与する場合、結合性物質は、錠剤、カプセル、粉末、溶液またはエリキシルの形態とする。錠剤形態で投与する場合、医薬組成物は、ゼラチンなどの固体担体または補助剤をさらに含有することができる。錠剤、カプセルおよび粉末は、約5~95の結合性物質、好ましくは約25~90の結合性物質を含有する。液体形態で投与する場合、水、石油、ピーナッツ油、鉱油、ダイズ油、もしくはゴマ油などの動物もしくは植物起源の油または合成油を加えることができる。液体形態の医薬組成物は、生理的食塩水、ブドウ糖もしくは他のサッカリド溶液またはエチレングリコール、プロピレングリコールもしくはポリエチレングリコールなどのグリコールをさらに含有することができる。液体形態で投与する場合、医薬組成物は、約0.5~約95重量の結合性物質、好ましくは約1~50の結合性物質を含有する。IL-13と結合する治療有効量の抗体を静脈内、皮膚または皮下注射により投与する場合、結合性物質は、パイロジェンフリーの非経口的に許容できる水溶液の形態とする。pH、等張性、安定性などを十分に顧慮し、そのような非経口的に許容できるタンパク質溶液の調製は、当業者の範囲内にある。静脈内、皮膚または皮下注射に好ましい医薬組成物は、結合性物質の他に、塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、ブドウ糖注射液、ブドウ糖および塩化ナトリウム注射液、乳酸リンゲル注射液または当技術分野において知られているような他のビヒクルを含有するべきである。また、医薬組成物は、安定剤、保存剤、緩衝液、抗酸化剤または当業者に知られている他の添加剤を含有することができる。医薬組成物における抗体または、他のIL-13結合性物質の量は、治療されている状態の性質および重症度および患者が受けた前治療の性質によって異なることがある。最終的に、主治医は、個々の患者を治療するための抗体の量を決定することとする。初めに、主治医は、低用量の抗体を投与し、患者の反応を観察することとする。患者に最適な治療効果が得られるまで、より高用量の抗体を投与することができ、その時点で、用量をさらに増加するのは一般的ではない。例えば、体重1kg当たり0.1~50mg、0.5~50mg、1~100mg、0.5~25mg、0.1~15mgまたは1~8mgの範囲の用量を投与することができる。医薬組成物は、正常な患者または症状を示さない患者に、例えば、予防的方法で投与することができる。吸入IL-13抗体またはそのフラグメントが含まれる組成物は、吸入または肺デリバリーの他の方法のために調剤することができる。したがって、本明細書に記載されている化合物は、肺組織へ吸入により投与することができる。本明細書で使用する用語肺組織は、呼吸器管の任意の組織を指し、他に指示されている場所を除いて、上部呼吸器管と下部呼吸器管の両方が含まれる。IL-13抗体またはそのフラグメントは、肺疾患を治療するための既存の方法のうちの1つまたはそれ以上と組み合わせて投与することができる。一例において、化合物は、ネブライザー用に調剤される。一実施形態において、化合物は、凍結乾燥形態例えば、室温にてで保存し、吸入に先立って溶液に再構成することができる。医療装置、例えば、インヘイラーを用いる吸入のために化合物を調剤することも可能である例えば、米国特許第6,102,035号粉末インヘイラーおよび第6,012,454号乾燥粉末インヘイラーを参照。インヘイラーには、保存に適しているpHの活性化合物用の区切られた区画および中和緩衝液用の別の区画、ならびにアトマイゼーションの直前に化合物を中和緩衝液と混ぜ合わせるための機構が含まれてよい。一実施形態において、インヘイラーは、定量インヘイラーである。薬物を局所的に肺気道に送達するのに使用される3つの一般的システムには、乾燥粉末インヘイラーDPI、定量インヘイラーMDIおよびネブライザーが含まれる。吸入投与の最も人気のある方法において使用されるMDIを用い、可溶化形態で、または分散液として薬物を送達することができる。通常、MDIは、装置の活性化によりエアゾール化した薬物を呼吸器官中に送り込むフレオンまたは他の比較的高い蒸気圧の噴射剤を含む。MDIと異なり、DPIは、通常、薬物を乾燥粉末形態で肺に導入するための患者の吸気努力に全面的に頼っている。ネブライザーは、液体溶液にエネルギーを付与することにより、吸入される薬物エアゾールを形成する。フッ素化学媒体を用いる液体換気または肺洗浄中の薬物の直接肺デリバリーも検討されている。これらおよび他の方法を用い、IL-13抗体またはそのフラグメントを送達することができる。一実施形態において、IL-13抗体またはそのフラグメントは、ポリマー、例えば、化合物の半減期を安定化または増加させるポリマーと結び付けられる。例えば、吸入による投与の場合、IL-13抗体またはそのフラグメントは、適当な噴射剤を含む加圧容器もしくはディスペンサーまたはネブライザーからエアゾールスプレーの形態で送達される。化合物は、乾燥粒子または液体の形態であってよい。化合物が含まれる粒子は、例えば、噴霧乾燥により、IL-13抗体またはそのフラグメントの水溶液を電荷中和剤と共に乾燥し、次いで乾燥粉末から粒子を作成することにより、または有機修飾剤中で水溶液を乾燥し、次いで乾燥粉末から粒子を作成することにより調製することができる。化合物は、適当な噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または他の適当なガスの使用により、加圧パックまたはネブライザーからのエアゾールスプレー提供の形態で好都合に送達することができる。加圧エアゾールの場合、用量単位は、一定量を送達するためのバルブを提供することにより決定することができる。粒子が、調剤された粒子である場合には、IL-13抗体またはそのフラグメントとラクトースまたはデンプンなどの適当な粉末基剤の粉末ミックスを含有するインヘイラーまたはインサフレーターにおいて使用するためのカプセルおよびカートリッジを調剤することができる。調剤または非調剤化合物の他に、100DPPCまたは他の界面活性物質などの他の材料を、IL-13抗体またはそのフラグメントと混合し、調剤または非調剤化合物のデリバリーおよび分散を促進することができる。乾燥粒子を調製する方法については、例えば、PCT公開WO02/32406に記載されている。IL-13抗体またはそのフラグメントは、投与した場合、速やかに吸収され、速やかな局所的または全身的な治療結果を生み出すことができるように、エアゾールデリバリー用に、例えば、乾燥エアゾール粒子として調剤することができる。投与を調整し、投与から2分、5分、1時間または3時間以内に検出可能な活性を提供することができる。一部の実施形態において、ピーク活性は、さらに速く、例えば、30分以内または10分以内にさえ達成することができる。IL-13抗体またはそのフラグメントは、より長い生物学的半減期のために調剤することができ例えば、PEGなどのポリマーとの会合により、例えば、化合物が肺から循環に入り、他の器官または特定の標的器官に分布されるように、他の投与方法の代用品として使用することができる。一実施形態において、IL-13抗体またはそのフラグメントは、ポリペプチドの量の少なくとも5が、下部呼吸器管または深部肺に送達されるような量で送達される。深部肺は、極めて豊富な毛細血管網を有する。毛細管腔を肺胞空域から分ける呼吸器膜は、極めて薄くかつ極めて透過性である。さらに、肺胞表面の内側を覆う液体層は、肺表面活性物質に富む。他の実施形態において、IL-13抗体またはそのフラグメントの組成物の少なくとも、2、3、5、10、20、30、40、50、60、70または80が、下部呼吸器管または深部肺に送達される。これらの組織のどちらか、または両方へのデリバリーは、化合物の十分な吸収および高いバイオアベイラビリティをもたらす。一実施形態において、化合物は、例えば、インヘイラーまたはネブライザーを用いて一定量で提供される。例えば、化合物は、1パフ当たり少なくとも約0.02、0.1、0.5、1、1.5、2、5、10、20、40または50mg以上の用量単位形態で送達される。パーセントバイオアベイラビリティは、以下の通り、パーセントバイオアベイラビリティ=AUC非侵襲的/AUCi.v.またはs.c.×投与量i.v.またはs.c./投与量非侵襲的×100で計算することができる。必要ではないにしても、界面活性物質などのデリバリーエンハンサーを用い、肺デリバリーをさらに増強することができる。本明細書で使用する界面活性物質は、2つの不混和相間の界面と相互作用することにより薬物の吸収を促進する親水性および疎水性部分を有する化合物を指す。界面活性物質は、いくつかの理由、例えば、粒子凝集の低下、マクロファージ食作用の低下などのため、乾燥粒子に有用である。肺界面活性物質と組み合わせる場合、化合物のより十分な吸収が達成できるのは、DPPCなどの界面活性物質が、化合物の拡散を容易にするためである。界面活性物質は、当技術分野においてよく知られており、ホスホグリセリド、例えば、ホスファチジルコリン、ジパルミトイルL-α-ホスファチジルコリンDPPCおよびジホスファチジルグリセロールDPPG;ヘキサデカノール;脂肪酸;ポリエチレングリコールPEG;ポリオキシエチレン-9-ラウリルエーテル;パルミチン酸;オレイン酸;ソルビタントリオレエートSPAN商標85;グリココール酸塩;サーファクチン;ポロキサマー;ソルビタン脂肪酸エステル;ソルビタントリオレエート;チロキサポール;およびリン脂質が含まれるが、これらに限定されるものではない。安定化および保持一実施形態において、IL-13抗体またはそのフラグメントは、循環における、例えば、血液、血清、リンパ、気管支肺もしくは気管支肺胞洗浄液または他の組織におけるその安定化および/または保持を、例えば、少なくとも1.5、2、5、10または50倍改善する部分と物理的に連結される。例えば、IL-13抗体またはそのフラグメントを、ポリマー、例えば、ポリアルキレンオキシドまたはポリエチレンオキシドなどの実質的に非抗原性のポリマーと連結することができる。適当なポリマーは、重量によって実質的に異なるはずである。約200~約35,000または約1,000~約15,000または約2,000~約12,500の数平均分子量を有するポリマーを使用することができる。例えば、IL-13抗体またはそのフラグメントを、水溶性ポリマー、例えば、親水性ポリビニルポリマー、例えば、ポリビニルアルコールおよびポリビニルピロリドンにコンジュゲートさせることができる。そのようなポリマーの非限定的リストには、ポリエチレングリコールPEGまたはポリプロピレングリコールなどのポリアルキレンオキシド、ポリオキシエチル化されたポリオール、それらのコポリマーおよびそれらのブロックコポリマーが含まれるが、ただし、ブロックコポリマーの水溶性は、維持されるものとする。ポリマーの分子量は、約500,000Daまで及ぶことができ、好ましくは、少なくとも約20,000Daまたは少なくとも約30,000Daまたは少なくとも約40,000Daである。選択される分子量は、得られるコンジュゲートの有効サイズ、ポリマーの性質例えば、直鎖または分岐および誘導体化の程度によって異なることがある。共有結合を用い、IL-13抗体またはそのフラグメントを、ポリマー、例えば、抗体のN末端アミノ基および抗体のリジン残基上に見い出されるεアミノ基、ならびに他のアミノ、イミノ、カルボキシル、スルフヒドリル、ヒドロキシルまたは他の親水基と架橋するポリマーに接続することができる。IL-13抗体またはそのフラグメントに接続することができる官能基付きのPEGポリマーは、例えば、ShearwaterPolymers,Inc.Huntsville、ALから入手できる。PEGおよび他のポリマーをカップリングするための反応条件は、IL-13抗体またはそのフラグメント、PEG化の望ましい程度および利用されるポリマーに応じて変わることがある。PEG誘導体の選択に関与するいくつかの要素には、望ましい接続点リジンまたはシステインR基など、誘導体の加水分解安定性および反応性、安定性、結合の毒性および抗原性、分析にとっての適合性などが含まれる。特定の誘導体の具体的な使用説明書は、製造者から入手できる。IL-13抗体またはそのフラグメントとポリマーのコンジュゲートは、例えば、ゲル濾過またはイオン交換カラムクロマトグラフィー、例えば、HPLCにより、未反応出発材料から分離することができる。コンジュゲートの異種分子種は、同じ様にお互いから精製される。異なる分子種例えば、1つまたはそれ以上のPEG残基を含むの分割も、未反応アミノ酸のイオン特性の差により可能である例えば、WO96/34015を参照。抗IL-13抗体の治療的および予防的使用さらに別の態様において、本開示は、IL-13と結合しかつ/またはIL-13を中和する抗体、例えば、本明細書に記載されている抗体を、その活性を阻害するのに十分な量で投与することによる、インビボでIL-13の1つまたはそれ以上の関連活性を中和および/または阻害するための方法を扱う。また、そのような抗体を、IL-13仲介性炎症反応の阻害を必要とする対象に投与することができる。これらの状態には、例えば、気道炎症、喘息、線維症、好酸球増加症および粘液産生の増加が含まれる。我々は、IL-13と結合する抗体が、アレルゲンブタ回虫Ascarissuumに暴露されたカニクイザルにおける気道炎症を低減することを明らかにした実施例3.6。また、我々は、ヒト末梢血単球におけるCD23のIL-13によるアップレギュレーションを立証した。したがって、IL-13と結合し、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を妨害し、1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を中和することができる本明細書に開示されている抗体を用い、喘息および/またはその関連症状および/またはアトピー性障害例えば、IL-13に対する感受性増加に起因するが含まれるIL-13関連病変を治療または予防するため、インビボでIL-13仲介性炎症を低減することができる。したがって、本明細書に開示されている抗体を用い、本明細書に記載されているように、IL-13関連障害、例えば、呼吸器障害、例えば、喘息例えば、アレルギー性および非アレルギー性喘息例えば、低年齢の小児における、例えば、呼吸器合胞体ウイルスRSVの感染による喘息、慢性閉塞性肺疾患COPD、ならびに気道炎症、好酸球増加症、線維症および過剰な粘液産生を含む他の状態、例えば、嚢胞性線維症および肺線維症;アトピー性障害、例えば、IL-13に対する感受性の増加に起因する例えば、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、湿疹、アレルギー性鼻炎およびアレルギー性胃腸炎;皮膚例えば、アトピー性皮膚炎、胃腸器官例えば、潰瘍性大腸炎および/またはクローン病などの炎症性腸疾患IBD、肝臓例えば、肝硬変、肝細胞癌および強皮症の炎症性および/または自己免疫性状態;白血病、神経膠芽腫およびリンパ腫、例えば、ホジキンリンパ腫などの腫瘍または癌例えば、軟組織または固形腫瘍;ウイルス感染例えば、HTLV-1から;他の器官の線維症、例えば、肝臓の線維症例えば、B型および/またはC型肝炎ウイルスによって引き起こされる線維症;ならびに防御性1型免疫応答の発現の抑制例えば、ワクチン接種中ののうちの1つまたはそれ以上から選択される障害を治療することができる。呼吸器障害IL-13アンタゴニスト例えば、本明細書に記載されている抗体または抗原結合性フラグメントなどのIL-13結合性物質を用い、喘息例えば、アレルギー性および非アレルギー性喘息例えば、低年齢の小児における、例えば、呼吸器合胞体ウイルスRSVの感染による;気管支炎例えば、慢性気管支炎;慢性閉塞性肺疾患COPD例えば、肺気腫例えば、タバコ誘発性肺気腫;気道炎症、好酸球増加症、線維症および過剰な粘液産生を含む状態、例えば、嚢胞性線維症、肺線維症およびアレルギー性鼻炎が含まれるがこれらに限定されない呼吸器障害を治療または予防することができる。喘息は、無数の条件、例えば、アレルゲンの吸入、上気道感染または耳感染の存在などにより引き起こされることがるOpperwall2003Nurs.Clin.NorthAm.38:697-711。アレルギー性喘息は、様々な特異的および非特異的刺激に対する気道過敏性AHR、血清免疫グロブリンEIgEの上昇、過剰な気道粘液産生、浮腫および気管支上皮傷害を特徴とするWills-Karp、前掲書。アレルギー性喘息は、アレルゲンが最初期の気道応答を引き起こす時に始まり、遅延性の遅延相気道応答LARによりその後数時間続くことが多いHenderson他2000J.Immunol.164:1086-95。LARの間には、気道壁および気管支液の至る所に好酸球、リンパ球およびマクロファージの流入が存在するHenderson他、前掲書。肺好酸球は、アレルギー性喘息の特徴であり、呼吸器上皮への損傷の大半を負っているLi他1999J.Immunol.162:2477-87。CD4TヘルパーTh細胞は、喘息に伴う慢性炎症にとって重要であるHenderson他、前掲書。いくつかの研究は、2型TヘルパーTh2細胞に対するCD4細胞の関与とそれに続く2型サイトカイン例えば、IL-4、IL-5、IL-10およびIL-13の産生が、AHRにつながるアレルギー性炎症反応において重要であることを明らかにしているTomkinson他2001J.Immunol.166:5792-5800、その中に引用されている参考文献。第一に、CD4T細胞は、マウスモデルにおけるアレルギー誘発性喘息に必要であることが明らかにされた。第二に、2型サイトカインを産生するCD4T細胞は、これらの動物においてばかりではなく、アレルギー性喘息患者においても拡大を起こす。第三に、2型サイトカインレベルは、動物モデルおよび喘息患者の気道組織において増加する。第四に、Th2サイトカインは、アレルギー性喘息のマウスモデルにおける好酸球動員において中心的役割を果たすことに関係があり、養子移入されたTh2細胞は、肺ならびに肺好酸球増加症におけるエオタキシン強力な好酸球化学誘引物質のレベル増加と関連していたWills-Karp他、前掲書;Li他、前掲書。本明細書に記載されている喘息を治療または予防するための方法には、外因性喘息アレルギー性喘息またはアトピー性喘息としても知られる、内因性喘息非アレルギー性喘息または非アトピー性喘息としても知られるまたは混合型喘息と呼ばれている両方の組合せのための方法が含まれる。外因性すなわちアレルギー性喘息には、例えば、花粉、胞子、牧草または雑草、ペット鱗屑、粉塵、ダニなどのアレルゲンによって引き起こされるか、あるいはそれらに関係する出来事が含まれる。アレルゲンおよび他の刺激物は、それ自体、年間を通じて様々な時点で存在するため、これらのタイプの出来事は、季節性喘息とも呼ばれる。気管支喘息およびアレルギー性気管支肺アスペルギルス症も外因性喘息の群に含まれる。本明細書に記載されている物質により治療または軽減することができる障害には、ウイルス例えば、風邪およびインフルエンザウイルス、呼吸器合胞体ウイルスRSV、パラミクソウイルス、ライノウイルスおよびインフルエンザウイルスなどの感染物質により引き起こされる呼吸器障害および喘息が含まれる。RSV、ライノウイルスおよびインフルエンザウイルス感染は、小児によく見られ、幼児および低年齢の小児における呼吸器管の病気の1つの主要原因である。ウイルス性気管支炎の小児は、慢性の喘鳴および喘息を発症することがあり、それらを、本明細書に記載されている方法を用いて治療することができる。運動および/または冷気により一部の喘息患者において引き起こされることがある喘息状態も含まれる。これらの方法は、煙暴露例えば、タバコ誘発性および工場煤煙、ならびに煙、オゾン、毒ガス、二酸化イオウ、亜酸化窒素、塗料、プラスチック、ポリウレタン、ワニスなどからのイソシアネートを含む煙霧、木材、植物または他の有機粉塵などに関係する喘息に有用である。また、これらの方法は、食品添加物、保存剤または薬理作用のある物質に関係する喘息性の出来事に有用である。サイレント喘息または咳型喘息と呼ばれる喘息のタイプを治療、抑制または軽減するための方法も含まれる。本明細書に開示されている方法は、気管支収縮を刺激することがある胃食道逆流GERDに伴う喘息の治療および軽減にも有用である。GERDは、身体分泌物の停滞、咳の抑制および寝室におけるアレルゲンおよび刺激物への暴露と並び、喘息状態の一因となることがあり、まとめて夜間nighttime喘息または夜間nocturnal喘息と呼ばれている。GERDに伴う喘息の治療、抑制または軽減の方法において、本明細書に記載されているように、治療有効量のIL-13アンタゴニストを、GERDを治療するための治療有効量の物質と組み合わせて使用することができる。これらの物質には、PROTONIX登録商標ブランドの遅延放出性パントプラゾールナトリウム錠剤、PRILOSEC登録商標ブランドのオメプラゾール遅延放出性カプセル剤、ACIPHEX登録商標ブランドのレベプラゾールrebeprazoleナトリウム遅延放出性錠剤またはPREVACID登録商標ブランドの遅延放出性ランソプラゾールカプセル剤のようなプロトンポンプ阻害薬が含まれるが、これらに限定されるものではない。アトピー性障害およびそれらの症状アトピー性のは、アレルギー反応を発症する遺伝的傾向が存在することが多い一群の疾患を指す。アトピー性障害の例には、アレルギー、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、喘息および枯草熱が含まれる。喘息は、例えば、気管支過敏性および可逆的気流閉塞などの間欠性呼吸器症状に伴う表現型的に異種性の障害である。喘息の免疫病理組織学的特徴には、例えば、気道上皮の裸出、基底膜下のコラーゲン沈着、浮腫、肥満細胞活性化および炎症性細胞浸潤例えば、好中球、好酸球およびリンパ球によるが含まれる。さらに、気道炎症は、気道過敏性、気流制限、急性気管支収縮、粘液栓形成、気道壁リモデリングおよび他の呼吸器症状の一因となることがある。IL-13アンタゴニスト例えば、本明細書に記載されている抗体または抗原結合性フラグメントなどのIL-13結合性物質を投与し、これらの症状のうちの1つまたはそれ以上を改善することができる。アレルギー性鼻炎枯草熱の症状には、痒い、鼻水が垂れている、くしゃみを起こす、または詰まった鼻および痒い眼が含まれる。IL-13アンタゴニストを投与し、これらの症状のうちの1つまたはそれ以上を改善することができる。アトピー性皮膚炎は、皮膚に影響を及ぼす慢性持続性疾患である。アトピー性皮膚炎に関する情報は、例えば、NIHPublicationNo.03-4272から入手できる。アトピー性皮膚炎において、皮膚は、極めて痒くなり、発赤、腫脹、ひび割れ、透明液の浸出および最終的には、痂皮および落屑につながることがある。多くの場合、疾患が悪化する期間増悪またはフレアと呼ばれるに続いて、皮膚が完全に好転または治癒する時期寛解と呼ばれるが存在する。アトピー性皮膚炎は、いくつかのタイプの皮膚の炎症についての一般用語である湿疹と呼ばれることが多い。アトピー性皮膚炎は、多くのタイプの湿疹のうちで最も一般的である。アトピー性皮膚炎の例には、アレルギー性接触湿疹皮膚炎:皮膚が、ツタウルシまたはクリーム剤およびローション剤中の特定の保存剤などの、免疫系が異物として認識する物質と接触した場所の赤色で、痒く、滴を垂らす反応;接触湿疹皮膚が、アレルゲンアレルギーを引き起こす物質または酸、洗浄剤、もしくは他の化学物質などの刺激物に接触した場所の発赤、痒みおよび灼熱感が含まれる限局性反応;発汗異常性湿疹痒く火照る透明な深い疱疹を特徴とする手のひらおよび足の裏の皮膚の刺激;神経皮膚炎引っかいた場合に激しくヒリヒリする限局性の痒み昆虫咬傷などによって引き起こされる頭部、下肢、手首または前腕の皮膚の鱗屑性斑点;貨幣状湿疹炎症を起こした皮膚の貨幣形斑点-痂皮形成性、落屑性および極めて掻痒性になることがある腕、背部、臀部および下肢に最もよく見られる;脂漏性湿疹頭皮、顔面およびたまに身体の他の部分の皮膚の黄色がかった油状の鱗屑性斑点が含まれる。追加の特定の症状には、うっ滞性皮膚炎、アトピー性プリーツデニーモルガンひだ、口唇炎、超直線状手掌hyperlinearpalms、色素沈着過剰眼瞼炎症または枯草熱により暗黒色となった眼瞼、魚鱗癬、毛孔性角化症、苔癬化、丘疹および蕁麻疹が含まれる。IL-13アンタゴニスト例えば、本明細書に記載されている抗体または抗原結合性フラグメントなどのIL-13結合性物質を投与し、これらの症状のうちの1つまたはそれ以上を改善することができる。アレルギー性鼻炎または他のアレルギー性障害を治療するための例示的方法には、アレルゲンへの暴露に先立つ、例えば、アレルゲンへの季節的暴露に先立つ、例えば、アレルゲン開花に先立つIL-13アンタゴニストによる開始療法が含まれてよい。そのような療法には、1回またはそれ以上の投与、例えば、一定の間隔をおく投与が含まれてよい。癌IL-13およびその受容体は、少なくとも一部のタイプの癌、例えば、造血細胞に由来する癌または脳もしくは神経細胞に由来する癌例えば、神経膠芽腫の発生に関与することがある。例えば、IL-13シグナル伝達経路の遮断は、例えば、可溶性IL-13受容体またはSTAT6-/-欠損マウスの使用を介して、それぞれホジキンリンパ腫細胞系または転移性乳癌の腫瘍発症および/または増殖の遅延につながるTrieu他2004CancerRes.64:3271-75;Ostrand-Rosenberg他2000J.Immunol.165:6015-6019。IL-13Rα2を発現する癌HusainおよびPuri2003J.Neurooncol.65:37-48;Mintz他2003J.Neurooncol.64:117-23は、本明細書に記載されている抗IL-13抗体により特異的に標的とされることがある。IL-13アンタゴニスト、例えば、抗IL-13抗体およびそれらのフラグメントは、癌細胞増殖または他の癌細胞活性を阻害するのに有用なことがある。癌は、正常な増殖制御に対する反応性を失い、通常は、対応する正常細胞に比べて調節低下を伴って増殖する1つまたはそれ以上の細胞を指す。IL-13アンタゴニスト例えば、本明細書に記載されている抗体または抗原結合性フラグメントなどのIL-13結合性物質を治療に使用することができる癌の例には、白血病、例えば、B細胞慢性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病およびヒトT細胞白血病ウイルス1型HTLV-1形質転換T細胞;リンパ腫、例えば、T細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫;神経膠芽腫;膵臓癌;腎細胞癌;卵巣癌;およびAIDSカポジ肉腫が含まれる。線維症IL-13アンタゴニスト例えば、本明細書に記載されている抗体または抗原結合性フラグメントなどのIL-13結合性物質は、炎症および線維症、例えば、肝臓の線維症を治療するのにも有用である。IL-13産生は、肝臓炎症例えば、ウイルス性肝炎の肝硬変およびおそらく肝細胞癌への進行と相関関係があるとされているdeLalla他2004J.Immunol.173:1417-1425。線維症は、例えば、正常な組織が、炎症後に多い瘢痕組織により置き換えられる場合に起きる。B型肝炎ウイルスとC型肝炎ウイルスは共に、肝臓において線維形成反応を引き起こし、肝硬変に進行することがある。次いで、肝硬変は、肝不全または肝細胞癌などの重症な合併症に発展することがある。本明細書に記載されているIL-13アンタゴニスト、例えば、抗IL-13抗体を用いてIL-13活性を遮断することは、炎症および線維症、例えば、肝疾患、特にB型肝炎およびC型肝炎に伴う炎症、線維症および肝硬変を低減することができる。炎症性腸疾患炎症性腸疾患IBDは、腸の炎症を引き起こす疾患の一般名である。炎症性腸疾患の2つの例は、クローン病および潰瘍性大腸炎である。IL-13/STAT6シグナル伝達は、炎症性腸疾患のモデルであるマウス平滑筋の炎症誘発性収縮性亢進hypercontractivityに関与していることが見い出されているAkiho他2002Am.J.Physiol.Gastrointest.LiverPhysiol.282:G226-232。IL-13アンタゴニスト例えば、本明細書に記載されている抗体または抗原結合性フラグメントなどのIL-13結合性物質は、炎症性腸疾患または炎症性腸疾患の1つまたはそれ以上の症状を治療、予防または軽減するのに有用なことがある。一実施形態において、本明細書に記載されている抗体、例えば、その医薬組成物は、組合せ療法で投与され、すなわち、他の物質、例えば、アレルギー性および炎症性障害などの病的状態または障害を治療するのに有用である治療薬と組み合わせられる。この文脈における用語組合せでは、物質が、実質的に同時に、同時に、あるいは順次にどちらかで与えられることを意味する。順次に与える場合、第二の化合物の投与が始まる時に、2つの化合物のうち第一の化合物が、治療部位において有効な濃度で依然として検出可能であることが好ましい。例えば、組合せ療法には、本明細書に記載されている、すなわち、IL-13と結合し、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を妨害し、以下でより詳細に記載されているように、1つまたはそれ以上の追加治療薬、例えば、1つまたはそれ以上のサイトカインおよび成長因子阻害剤、免疫抑制薬、抗炎症薬、代謝阻害剤、酵素阻害剤および/または細胞傷害性または細胞増殖抑制性物質と同時調剤および/または同時投与される1つまたはそれ以上の抗体が含まれてよい。さらに、本明細書に記載されている1つまたはそれ以上の抗IL-13抗体は、本明細書に記載されている治療薬のうちの2つまたはそれ以上との組合せで使用することができる。そのような組合せ療法は、低用量の投与治療薬を有利に利用するため、様々な単独療法に伴う可能な毒性または合併症を避けることができる。さらに、本明細書に開示されている治療薬は、IL-13/IL-13受容体経路と異なる経路に作用するため、IL-13抗体の効果を増強しかつ/またはIL-13抗体の効果と相乗することが予想される。1つまたはそれ以上のIL-13アンタゴニスト、例えば、抗IL-13抗体またはそれらのフラグメントと同時投与および/または同時調剤することができる好ましい追加治療薬の例には、吸入ステロイド;βアゴニスト、例えば、短時間作用型または長時間作用型βアゴニスト;ロイコトリエンアンタゴニストまたはロイコトリエン受容体アンタゴニスト;ADVAIR登録商標などの配合剤;IgE阻害剤、例えば、抗IgE抗体例えば、XOLAIR登録商標;ホスホジエステラーゼ阻害剤例えば、PDE4阻害剤;キサンチン;抗コリン薬;クロモリンなどの肥満細胞安定化薬;IL-4阻害剤;IL-5阻害剤;エオタキシン/CCR3阻害剤;および抗ヒスタミン薬のうちの1つまたはそれ以上が含まれるが、これらに限定されるものではない。そのような組合せを用い、喘息および他の呼吸器障害を治療することができる。1つまたはそれ以上の抗IL-13抗体またはそのフラグメントと同時投与および/または同時調剤することができる治療薬の追加例には、とりわけ、TNFアンタゴニスト例えば、TNF受容体の可溶性フラグメント、例えば、p55またはp75ヒトTNF受容体またはその誘導体、例えば、75kdTNFR-IgG75kDTNF受容体-IgG融合タンパク質、ENBREL商標;TNF酵素アンタゴニスト、例えば、TNFα変換酵素TACE阻害剤;ムスカリン受容体アンタゴニスト;TGF-βアンタゴニスト;インターフェロンガンマ;ペルフェニドンperfenidone;化学療法剤、例えば、メトトレキセート、レフルノミドまたはシロリムスラパマイシンもしくはその類縁体、例えば、CCI-779;COX2およびcPLA2阻害剤;NSAID;免疫調節薬;p38阻害剤、TPL-2、Mk-2およびNFκB阻害剤のうちの1つまたはそれ以上が含まれる。1つまたはそれ以上の他の治療化合物とのIL-13抗体の併用投与を行うため、またはELISAキットなどの、生物学的サンプルにおいてIL-13の存在および/またはレベルを決定するための研究または治療ツールとして抗IL-13抗体を用いるためのキットを提供することも可能である。一実施形態において、キットは、医薬担体に調剤される1つまたはそれ以上の抗IL-13抗体、および、必要に応じて、1つまたはそれ以上の別々の医薬調製物に調剤される少なくとも1つの物質、例えば、治療薬を含む。ワクチン調剤IL-13アンタゴニスト例えば、本明細書に記載されている抗体または抗原結合性フラグメントなどのIL-13結合性物質を用い、対象を免疫化するためのワクチン調剤の有効性を高めることができる。例えば、IL-13アンタゴニストを、免疫化の前、免疫化中および/または免疫化後に投与し、ワクチン有効性を高めることができる。一実施形態において、ワクチン調剤は、1つまたはそれ以上のIL-13アンタゴニストおよび抗原、すなわち、免疫原を含有する。別の実施形態において、IL-13アンタゴニストおよび免疫原は、お互いに、例えば、1時間、3時間、1日または2日以内に別々に投与される。IL-13の阻害は、例えば、細胞ワクチン、例えば、癌およびウイルス感染、例えば、レトロウイルス感染、例えば、HIV感染などの疾患に対するワクチンの有効性を改善することがある。ワクチンによるCD8細胞傷害性Tリンパ球CTLの誘導は、おそらくサイトカインIL-13を介し、CD4T細胞により抑制的に調節される。IL-13の阻害は、CTL応答のワクチン誘導を亢進することが明らかにされているAhlers他2002Proc.Natl.Acad.Sci.USA99:13020-13025。IL13アンタゴニスト、例えば、本明細書に記載されている抗IL-13抗体またはそのフラグメント、抗体をワクチンと併せて使用し、ワクチン有効性を高めることができる。癌およびウイルス感染レトロウイルス例えば、HIV感染などは、細胞性ワクチン応答が有効なことがある例示的障害である。ワクチン有効性は、ワクチン接種時にIL-13シグナル伝達を遮断することにより増強されるAhlers他2002Proc.Natl.Acad.Sci.USA99:13020-13025。ワクチン調剤は、医薬組成物または治療組成物の形態で対象に投与することができる。本明細書に記載されているIL-13アンタゴニストおよび抗原を含む医薬組成物は、従来の混合、溶解、顆粒化、糖剤製造、粉末化、乳化、カプセル化、封入または凍結乾燥プロセスにより製造することができる。医薬組成物は、本明細書に記載されている抗原およびアンタゴニストを、薬学的に使用することができる調製物への加工するのを容易にする1つまたはそれ以上の薬学的に許容できる担体、希釈剤、賦形剤または補助剤を用い、従来の方法で調剤することができる。適切な調剤は、選択される投与経路によって異なる。全身性調剤には、注射、例えば、皮下、皮内、筋肉内または腹腔内注射による投与のために設計される調剤が含まれる。注射の場合、ワクチン調製物は、水溶液、好ましくは、ハンクス液、リンゲル液、リン酸緩衝食塩水などの生理学的に適合する緩衝液またはその他の生理食塩水緩衝液で調剤することができる。溶液は、懸濁化、安定化および/または分散剤などの調剤物質を含有することができる。あるいは、タンパク質は、使用前の、適当なビヒクル、例えば、滅菌したパイロジェンフリーの水による構成のための粉末形態であってよい。有効投与量は、初めに動物モデルを用いて推定することができる。例えば、ある投与量を動物モデルで調剤し、当技術分野においてよく知られている技法を用いて免疫応答の誘導を行うことができる。用量および間隔は、個別に調整することができる。例えば、ワクチンとして使用する場合、ワクチン調剤は、1~36週の間に約1~3回の投与で投与することができる。1または2回の投与を約3週から約4カ月の間隔で投与し、その後にブースターワクチン接種を定期的に与えることが好ましい。代替プロトコルは、個々の動物にふさわしいことがある。適当な投与量は、上記に記載されているように投与する場合、少なくとも4~12カ月間、対象を感染から守るのに十分な免疫応答を、免疫化された対象で産生することができるワクチン調剤の量である。一般に、抗原の量は、宿主1kg当たり約1pg~約100mg、通常は、約10pg~約1mg、好ましくは約100pg~約1μgの用量範囲である。適当な用量範囲は、注射の経路および患者のサイズによって変わるが、通常、約0.1mL~約5mLであろう。障害を診断、予知およびモニターするための方法本明細書に記載されているIL-13と結合するタンパク質、例えば、抗体は、インビトロおよびインビボでの診断上の有用性を有する。例示的方法には、iIL-13抗体を対象に投与すること;およびii対象においてIL-13抗体を検出することが含まれる。検出することには、対象におけるIL-13抗体の位置を決定することが含まれてよい。別の例示的方法には、IL-13抗体をサンプル、例えば、対象からのサンプルに接触させることが含まれる。別の態様において、本発明は、インビトロ例えば、組織、生検などの生物学的サンプルまたはインビボ例えば、対象におけるインビボイメージングでIL-13の存在を検出するための診断方法を提供する。この方法には、iサンプルをIL-13抗体と接触させること;およびiiIL-13抗体とサンプルの間の複合体の形成を検出することが含まれる。また、この方法には、参考サンプル例えば、対照サンプルをリガンドと接触させること、および参考サンプルと比べて、リガンドとサンプルの間の複合体の形成の程度を決定することが含まれてよい。対照サンプルまたは対象と比べて、サンプルまたは対象における複合体の形成の変化、例えば、統計的に有意な変化は、サンプルにおけるIL-13の存在を示すことがある。IL-13抗体は、結合または非結合タンパク質の検出を容易にするため、検出可能な物質で直接的または間接的に標識することができる。適当な検出可能な物質には、様々な酵素、補欠分子族、蛍光材料、発光材料および放射性材料が含まれる。IL-13抗体とIL-13の間の複合体形成は、IL-13と結合しているリガンドか非結合リガンドのどちらかを測定または可視化することにより検出することができる。従来の検出アッセイ、例えば、酵素結合免疫吸着アッセイELISA、ラジオイムノアッセイRIAまたは組織の免疫組織化学を使用することができる。IL-13抗体を標識することに加え、IL-13の存在は、検出可能な物質で標識された標準品および非標識IL-13抗体を利用する競合イムノアッセイによりサンプル中でアッセイすることができる。喘息の進行を診断、予知およびモニターするための方法生物学的サンプル中のIL-13のレベルを測定することにより、喘息および/またはアトピー性障害例えば、IL-13に対する感受性増加に起因するの進行を診断、予知および/またはモニターすることも可能である。特に、本明細書に開示されている抗体は、ある患者が、アレルギー性喘息を患っているか非アレルギー性喘息を患っているかかを区別する方法において使用することができる。アレルギー性および非アレルギー性喘息を診断するためのそのような方法には、生物学的サンプル、例えば、血清、血漿、気管支肺胞洗浄液、喀痰などにおけるIL-13の変動例えば、増加または減少を検出することが含まれてよい。診断的すなわち診断することは、病的状態の有無を同定することを意味する。診断的方法は、対象ヒトまたは非ヒト哺乳類由来の生物学的サンプル、例えば、気管支肺胞洗浄液中のIL-13ポリペプチドの試験量を決定し、試験量を、IL-13ポリペプチドの正常な量または範囲すなわち、喘息を患っていないことが知られている1つまたはそれ以上の個体由来の量または範囲と比較することによりIL-13の存在を検出するものである。特定の診断的方法は、喘息の確定診断を提供しないこともあるが、この方法が、診断を助ける陽性徴候を提供すれば十分である。喘息および/またはアトピー性障害を予知するための方法には、mRNAまたはタンパク質レベルでIL-13のアップレギュレーションを検出ことが含まれてよい。予知的すなわち予知することは、病的状態のあり得る発生および/または重症度を予測することを意味する。予知的方法は、対象由来の生物学的サンプル中のIL-13の試験量を決定し、試験量を、IL-13の予知的量または範囲すなわち、喘息の様々な重症度の個体由来の量または範囲と比較するものである。試験サンプルにおけるIL-13の様々な量は、喘息についての特定の予後と一致する。特定の予知的レベルにおけるIL-13の量の検出は、対象に予後を提供する。また、本発明は、IL-13のアップレギュレーションを検出することにより喘息および/またはアトピー性障害の経過をモニターするための方法を提供する。モニターする方法は、第一および第二の時点で対象から採取された生物学的サンプル中のIL-13の試験量を決定し、それらの量を比較するものである。第一と第二の時点間のIL-13の量の変化は、喘息および/またはアトピー性障害の経過の変化を示し、量の減少は、喘息の寛解を示し、量の増加は、喘息および/またはアトピー性障害の進行を示す。そのようなモニタリングアッセイは、喘息および/またはアトピー性障害を治療されている患者において特定の治療的介入例えば、疾患の減弱および/または逆転の有効性を評価するのにも有用である。蛍光団および発色団で標識されたタンパク質リガンドを調製することができる。抗体および他のタンパク質は、約310nmまでの波長を有する光を吸収するため、蛍光性部分は、310nm以上、好ましくは400nm以上の波長で実質的吸収を有するように選択されなければならない。様々な適当な蛍光剤および発色団は、StryerScience1968162:526およびBrand他AnnualRev.Biochem.197241:843868により記載されている。タンパク質リガンドは、米国特許第3,940,475号、第4,289,747号および第4,376,110号に開示されている手順などの従来に手順により、蛍光性発色団基で標識することができる。上記に記載されている多くの望ましい特性を有する蛍光剤の一群は、キサンテン色素であり、フルオレセインおよびローダミンが含まれる。蛍光性化合物の別の群は、ナフチルアミンである。蛍光団または発色団で標識すれば、タンパク質リガンドを用い、例えば、蛍光顕微鏡共焦点顕微鏡またはデコンボリューション顕微鏡を用い、サンプル中のIL-13の存在または局在化を検出することができる。免疫組織化学は、本明細書に記載されているタンパク質リガンドを用いて行うことができる。例えば、抗体の場合、抗体を、標識精製タグまたはエピトープタグなどと一緒に合成するか、あるいは、例えば、標識または標識結合基をコンジュゲートすることにより検出可能に標識することができる。例えば、キレート剤を抗体に接続することができる。次いで、抗体を、組織プレパラート、例えば、顕微鏡スライド上にある組織の固定切片と接触させる。結合のためのインキュベーション後、調製物を洗浄し、非結合抗体を除去する。次いで、調製物を、例えば、顕微鏡を用いて解析し、抗体が調製物と結合したかどうかを同定する。抗体または他のポリペプチドまたはペプチドは、結合の時点で非標識であってよい。結合および洗浄後、検出可能にするために抗体を標識する。また、IL-13抗体をタンパク質アレイ上に固定化することができる。タンパク質アレイを診断ツールとして使用し、例えば、医学的サンプル単離細胞、血液、血清、生検などをスクリーニングすることができる。また、タンパク質アレイには、例えば、IL-13または他の標的分子と結合する他のリガンドが含まれてよい。ポリペプチドアレイを作成する方法については、例えば、DeWildt他2000Nat.Biotechnol.18:989-994;Lueking他1999Anal.Biochem.270:103-111;Ge2000NucleicAcidsRes.28、e3、I-VII;MacBeathおよびSchreiber2000Science289:1760-1763;WO01/40803およびWO99/51773A1に記載されている。アレイのためのポリペプチドは、例えば、GeneticMicroSystemsまたはBioRobotics製の市販のロボット装置を用い、高速でスポッとすることができる。アレイ基板は、例えば、ニトロセルロース、プラスチック、ガラス、例えば、表面修飾ガラスであってよい。また、アレイには、多孔性マトリックス、例えば、アクリルアミド、アガロースまたは別のポリマーが含まれてよい。例えば、アレイは、例えば、DeWildt、前掲書に記載されているように、抗体のアレイであってよい。タンパク質リガンドを産生する細胞は、アレイ化フォーマットのフィルター上で生育することができる。ポリペプチド産生が誘導され、発現したポリペプチドは、細胞の位置でフィルターに固定化される。タンパク質アレイを標識標的と接触させ、多様性鎖ライブラリーから、各々の固定化ポリペプチドに対する標的の結合の程度を決定することができる。標的が非標識である場合、例えば、標識プローブを用い、サンドイッチ法を使用して非標識標的の結合を検出することができる。アレイの各アドレスにおける結合の程度に関する情報は、例えば、コンピューターデータベース中に、プロファイルとして保存することができる。タンパク質アレイを複製で作成して使用し、例えば、標的および非標的の結合プロファイルを比較することができる。したがって、タンパク質アレイを用い、1つまたはそれ以上の分子に関して望ましい結合特性を有する多様性鎖ライブラリーの個々のメンバーを同定することができる。IL-13抗体を用い、細胞、例えば、サンプル例えば、患者サンプル中の細胞を標識することができる。また、リガンドは、蛍光性化合物に接続されるか、接続可能である。次いで、細胞を、選別された例えば、BectonDickinsonImmunocytometrySystems、SanJoseCAから入手できる選別機を用い;米国特許第5,627,037号;第5,030,002号;および第5,137,809号も参照蛍光性活性化細胞を用いて選別することができる。細胞が選別機を通過すると、レーザービームは、蛍光性化合物を励起し、一方、検出器は、通過する細胞をカウントし、蛍光を検出することにより蛍光性化合物が細胞と接続しているか否かを決定する。各細胞と結合している標識の量を定量して分析し、サンプルを特徴付けることができる。また、選別機は、細胞を一方にそらせ、リガンドが結合している細胞をリガンドが結合していない細胞から分離することができる。分離した細胞を培養しかつ/または特徴付けることができる。さらに別の実施形態において、本発明は、インビボで対象内のIL-13の存在を検出するための方法を提供する。この方法には、i検出可能なマーカーとコンジュゲートされた抗IL-13抗体を対象例えば、IL-13関連障害を有する患者に投与すること;ii検出可能なマーカーを検出するための手段に対象を暴露することが含まれる。例えば、対象は、例えば、NMRまたは他の断層撮影手段により、撮像される。診断イメージングに有用な標識の例には、131I、111In、123I、99mTc、32P、33P、125I、3H、14Cおよび188Rhなどの放射性標識、フルオレセインおよびローダミンなどの蛍光性標識、核磁気共鳴活性標識、ポジトロン放出断層撮影PETスキャナーにより検出可能なポジトロン放出同位体、ルシフェリンなどの化学発光剤およびペルオキシダーゼまたはホスファターゼなどの酵素マーカーが含まれる。短距離検出器プローブにより検出可能な同位体などの短距離放射線エミッターも用いることができる。タンパク質リガンドは、知られている技法を用い、そのような試薬で標識することができる。例えば、抗体の放射標識に関する技法についてのWenselおよびMeares1983RadioimmunoimagingandRadioimmunotherapy、Elsevier、NewYorkおよびColcher他1986Meth.Enzymol.121:802816を参照されたい。放射標識リガンドは、インビトロの診断テストにも使用することができる。同位体標識リガンドの比活性は、半減期、放射性標識の同位体純度および標識が抗体に組み入れられた方法によって異なる。放射性同位体14C、3H、35S、99mTc、125I、32P、33Pおよび131Iなどでポリペプチドを標識するための手順は、一般的に知られている。例えば、米国特許第4,302,438号;Goding,J.W.Monoclonalantibodies:principlesandpractice:productionandapplicationofmonoclonalantibodiesincellbiology,biochemistry,andimmunology第2版London;Orlando:AcademicPress、1986.pp124126およびその中に引用されている参考文献;ならびにA.R.Bradwell他、DevelopmentsinAntibodyImaging、MonoclonalAntibodiesforCancerDetectionandTherapy、R.W.Baldwin他、編、pp6585AcademicPress1985を参照されたい。本明細書に記載されているIL-13抗体は、磁気共鳴イメージングMRI造影剤にコンジュゲートすることができる。一部のMRI技法は、EP-A-0502814に要約されている。これらの緩和時間定数の差を造影剤によって増強することができる。そのような造影剤の例には、多くの磁気物質、常磁性物質主にT1を変えるおよび強磁性または超常磁性主にT2応答を変えるが含まれる。キレート例えば、EDTA、DTPAおよびNTAキレートを用い、一部の常磁性物質例えば、Fe3、Mn2、Gd3に接続しそれらの毒性を軽減することができる。他の物質は、例えば、直径10mm未満~約10nmで強磁性、反強磁性または超常磁性を有する粒子の形態であってよい。また、IL-13抗体を、NMR活性な19F原子またはPykett1982ScientificAmerican246:78-88により記載されているような複数の原子を含む指示基で標識し、IL-13分布を見つけて撮像することができる。また、本明細書に記載されている範囲内には、IL-13と結合するタンパク質リガンドおよび診断的使用、例えば、インビトロで、例えば、サンプル、例えば、IL-13関連障害を有する患者由来の生検または細胞において、または、例えば、対象を撮像することによりインビボでIL-13を検出するためのIL-13抗体例えば、抗体またはその抗原結合性フラグメントまたは他のポリペプチドもしくはペプチドの使用のための説明書を含むキットが含まれる。キットは、標識または追加の診断薬などの少なくとも1つの追加試薬を含むことができる。インビボ使用の場合、リガンドは、医薬組成物として調剤することができる。キットIL-13アンタゴニスト、例えば、抗IL-13抗体またはそのフラグメントは、キットにおいて、例えば、キットの構成要素として提供することができる。例えば、キットには、aIL-13アンタゴニスト、例えば、抗IL-13抗体またはそのフラグメント、例えば、IL-13抗体またはそのフラグメントが含まれる組成物および、所望により、b情報材料が含まれる。情報材料は、本明細書に記載されている方法のための、記述的材料、教育的材料、マーケティング材料または本明細書に記載されている方法および/またはIL-13アンタゴニスト、例えば、抗IL-13抗体またはそのフラグメントの使用に関する他の材料であってよい。キットの情報材料は、その形態に限定されるものではない。一実施形態において、情報材料には、化合物の製造、化合物の分子量、濃度、使用期限、バッチまたは製造地情報などに関する情報が含まれてよい。一実施形態において、情報材料は、本明細書に記載されている障害を治療、予防、診断、予知またはモニターするためにリガンドを使用することに関する。一実施形態において、情報材料には、本明細書に記載されている方法を行うのに適している方法で、例えば、適当な投与量、剤形または投与方法例えば、本明細書に記載されている投与量、剤形または投与方法でIL-13アンタゴニスト、例えば、抗IL-13抗体またはそのフラグメントを投与するための説明書が含まれてよい。別の実施形態において、情報材料には、適当な対象、例えば、ヒト、例えば、アレルギー性喘息、非アレルギー性喘息または他のIL-13仲介性障害、例えば、アレルギー性および/または炎症性障害またはHTLV-1感染を有するか、それらの危険性のあるヒトにIL-13アンタゴニスト、例えば、抗IL-13抗体またはそのフラグメントを投与するための説明書が含まれてよい。IL-13産生は、HTLV-1感染と相関関係があるとされているChung他、2003Blood102:4130-36。例えば、材料には、アレルギー性喘息、非アレルギー性喘息またはIL-13仲介性障害、例えば、アレルギー性および/または炎症性障害またはHTLV-1感染があるか、それらの危険性のあるヒトにIL-13アンタゴニスト、例えば、抗IL-13抗体またはそのフラグメントを投与するための説明書が含まれてよい。キットには、IL-13アンタゴニスト、例えば、抗IL-13抗体またはそのフラグメントを含有する組成物のための1つまたはそれ以上の容器が含まれてよい。一部の実施形態において、キットは、組成物および情報材料のための別々の容器、仕切りまたは区画を含む。例えば、組成物は、ビン、バイアルまたは注射器に入れることができ、情報材料は、プラスチックのスリーブまたはパケットに入れることができる。他の実施形態において、キットの別々の要素は、単一の分割されていない容器内に入れる。例えば、組成物を、ラベルの形態の情報材料を貼り付けたビン、バイアルまたは注射器に入れる。一部の実施形態において、キットには、各々が、IL-13アンタゴニスト、例えば、抗IL-13抗体またはそのフラグメントの1つまたはそれ以上の単位剤形例えば、本明細書に記載されている剤形を含む複数例えば、一組の個別容器が含まれる。例えば、キットには、各々が、IL-13アンタゴニスト、例えば、抗IL-13抗体またはそのフラグメントの単一単位投与量または複数の単位投与量を含む複数の注射器、アンプル、ホイルパケット、アトマイザーまたは吸入装置が含まれる。所望により、キットには、組成物の投与に適している装置、例えば、注射器、吸入器、ピペット、ピンセット、測定スプーン、点滴器例えば、点眼器、綿棒例えば、木綿製綿棒または木製綿棒または任意のそのようなデリバリー装置が含まれる。好ましい実施形態において、装置は、リガンドの一定量を分配する埋め込み可能な装置である。以下に続く実施例は、本発明の理解を助けるために示されるものであり、決して、本発明の範囲を限定しようと意図するものではなく、限定すると解釈されるべきではない。実施例1ヒトIL-13に特異的なマウスモノクローナル抗体の作成実施例1.1:ヒトIL-13と結合するマウスモノクローナル抗体mAb13.2の単離ポリクローナル抗血清は、組換えヒトIL-13RDSystems、Minneapolis、MNによる雌性BALB/cマウスの免疫化により調製した。血清を、ELISAにより、ヒトIL-13との結合についてスクリーニングした。高い血清抗体価を示すマウス由来の脾細胞を、P3X63_AG8.653骨髄腫ATCCと融合させ、選択培地にプレートした。融合物を、限界希釈による3回のサブクローニングで単離し、ヒトIL-13に対する結合親和性を有する抗体の産生についてスクリーニングした。3種のモノクローナル抗体は、IL-13と結合し、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を妨害し、1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を中和および/または阻害することができ、抗体mAb13.2IgG1κをさらなる研究のために選択した。実施例1.2:マウスモノクローナル抗体、mAb13.2は、高い親和性および特異性でヒトIL-13と結合する実施例1.1において単離されたマウスモノクローナル抗体、すなわち、mAb13.2が、ヒトIL-13と高い親和性および特異性で結合することを確認するためのいくつかの措置を講じた。第一に、ヒトIL-13に対する3種のモノクローナル抗体mAb13.2、mAb13.4およびmAb13.9のBIACORE商標分析を、ビオチン化IL-13が固定化されている69RUストレプトアビジンチップを用いて行った。3種の抗体を個別にチップ上へ通すと、各々は、速やかな結合を示した図1。緩衝液交換すると、解離は遅かった図1。第二に、mAb13.2のBIACORE商標分析を、mAb13.2が固定化されているBiacoreチップを用いて行った。様々な濃度のIL-13をチップ上へ通した。この場合も、速やかな結合および遅い解離が見られた図2。第三に、ELISAによる分析は、mAb13.2が、臍帯血T細胞に由来する天然IL-13が含まれる試験されたすべての形態のヒトIL-13と結合することを決定した図3。プレートは、抗FLAG商標M2抗体でコーティングした。FLAG-ヒトIL-13の結合は、ビオチン化mAb13.2およびストレプトアビジン-ペルオキシダーゼで検出した。ELISAは、mAb13.2とIL-13の間の結合が、マイトジェン活性化、Th2優性型、臍帯血単核細胞から単離された天然ヒトIL-13および組換えヒトIL-13と競合することを立証した図3。mAb13.2の組換えマウスIL-13との検出可能な結合は認められなかった図3。ELISAにより見い出された結果を確認するため、モノクローナル抗体、mAb13.2を、Biacoreチップ上にコーティングし、組換えヒトIL-13または喘息に苦しむ患者において高頻度で発現されるHeinzmann他2000Hum.Mol.Genet.9:594多形形態のIL-13ARG変異体を含有する溶液をチップ上へ通した。両形態は、速やかな結合および抗体からの検出不可能な解離を示した図4A。最後に、GLP優良実験室規範条件下で行われた予備的な交差反応性研究中に、mAb13.2は、剖検または生検で得られた37種の正常なヒト組織の一団、すなわち、DCCPMPGuidelineIII/5271/94Draft5、モノクローナル抗体の製造および品質管理ProductionandqualitycontrolofmonoclonalantibodiesのAnnexII中の交差反応の免疫組織化学的検討に使用すべきヒト組織の提案リストsuggestedlistofhumantissuestobeusedforimmunohistochemicalinvestigationsofcross-activity上のすべての組織および1997USFDA/CBERPointstoConsiderintheManufactureandTestingofMonoclonalAntibodyProductsforHumanUseの表2に推奨されているすべての組織が含まれる組織の一団に対して有意な交差反応性を示さなかった。実施例1.3:マウスモノクローナル抗体mAb13.2は、インビトロでIL―13関連活性を中和するインビトロで1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を中和するmAb13.2の能力を、TF1バイオアッセイ、ヒト末梢血単球およびヒト末梢血B細胞を用いて確認した。適切な条件下、ヒトTF1赤白血病細胞系の増殖を、IL-13依存性にすることができる。第一に、最適以下の濃度の組換えヒトIL-13かヒトIL-13のARG変異体のどちらかで誘発されるサイトカイン依存性TF1細胞系の増殖がmAb13.2により阻害されるか否かを決定した。図4Bは、mAB13.2が、TF1増殖を刺激する組換えヒトIL-13とヒトIL-13のARG変異体の両方の能力を阻害したことを示している。第二に、TF1細胞系をIL-13不足とし、次いで、最適以下の濃度の組換えヒトIL-13に暴露し、精製マウスmAb13.2か可溶性IL-13受容体rhuIL-13Rα2のどちらかの存在下で増殖を誘導した。細胞を3日間インキュベートし、最後の4時間にわたる3H-チミジン取り込みを、液体シンチレーションカウンティングにより測定した。最適以下のIL-13濃度において、mAb13.2は、TF1増殖の用量依存的阻害を引き起こした図5。この効果のIC50、250pMは、可溶性rhuIL-13Rα2のIC50に極めて匹敵する図5。例示的抗体は、この効果について、約50~500pMまたは120~300pMまたは240~350pMのIC50を有する。ヒト末梢血単球は、低親和性IgE受容体CD23の細胞表面発現を増加させることにより用量依存的にIL-13またはIL-4に反応するため図6A、ヒト単球を用い、このIL-13関連活性を中和するmAb13.2の能力を確認した。mAb13.2が、単球によるIL-13仲介性CD23細胞表面発現を中和するか否かを決定するため、末梢血単核細胞を健康なドナーから単離し、漸増量のIL-13のみ、漸増量のIL-4のみ、1ng/mlのIL-13と漸増量のmAb13.2または0.3ng/mlのIL-4と漸増量のmAb13.2と共にインキュベートした。翌日、細胞を収集し、CYCHROME商標標識抗CD11b単球マーカーおよびPE標識抗CD23で染色した。ゲートされたCD11b単球を、フローサイトメトリーによりCD23発現についてアッセイした。予想通り、mAb13.2は、IL-13仲介性CD23発現を阻害したが図6B、IL-4誘発性CD23発現を阻害しなかった図6C。また、mAb13.2の効果を、ヒト末梢血B細胞によるIL-13仲介性IgE産生のモデルで試験した。IL-13およびT細胞マイトジェン、PHAに反応し、ヒトB細胞は、IgEに対するIgアイソタイプスイッチ組換えを受け、培養液中により高いIgEレベルをもたらす。この効果は、IgE産生B細胞の頻度増加として観察することができる。健康なドナー由来のPBMCを、フィーダーとしての自家放射線照射PBMCの存在下、マイクロタイターウエル中で培養し、PHAおよびIL-13で刺激した。3週間後、各ウエルを、ELISAによりIgE濃度についてアッセイした。PHAIL-13は、IgE産生B細胞クローンの頻度を増加させた図7。この効果は、mAb13.2により阻害されたが、IL-13特異的非中和抗体mAb13.8または対照マウスIgGmsIgGにより阻害されず図7、mAb13.2が、培養B細胞によるIL-13仲介性IgEアイソタイプスイッチングを効率的に遮断したことを示した。最後に、IL-13に対する初期細胞応答を遮断するmAb13.2の能力を、シグナル伝達性転写因子STAT6リン酸化に対するその効果を調べることにより試験した。その細胞表面受容体とのIL-13相互作用により、STAT6は、二量体化し、リン酸化され、細胞質から核に転位し、その場所で、サイトカイン応答性遺伝子の転写を活性化するMurata他1995J.Biol.Chem.270:30829-36。リン酸化STAT6に対する特異抗体は、IL-13暴露の30分以内のウエスタンブロットおよび/またはフローサイトメトリー分析により、この活性化を検出することができる。HT-29ヒト上皮細胞系を用い、STAT6リン酸化をアッセイした。HT-29細胞を、37°Cにて30分間、漸増濃度のIL-13中でインキュベートした。細胞ライセートのウエスタンブロット分析は、STAT6の用量依存的IL-13仲介性リン酸化を立証した図8A。同様に、フローサイトメトリー分析は、37°Cで30分間、飽和濃度のIL-13で処理し、固定し、透過化処理し、ホスホ-STAT6に対してALEXA商標Fluor488標識mAbで染色したHT-29細胞におけるリン酸化STAT6を立証した図8B。アイソタイプ対照抗体で染色した処理細胞は、蛍光を示さなかった。最後に、細胞を、最適以下の濃度のIL-13のみ、IL-13とmAb13.8、IL-13とmAb13.2またはIL-13と対照msIgG1抗体で処理した場合、フローサイトメトリー分析は、細胞を、mAb13.2の存在下で処理した場合にのみSTAT6リン酸化の完全な抑止を示し、すなわち、mAb13.2は、STAT6リン酸化を遮断したが、IL-13特異的非中和抗体mAb13.8および対照マウスIgG1には、効果がなかった図8C。これらの研究は、mAb13.2が、IL-13仲介性STAT6リン酸化を阻害することを立証した。実施例1.4:マウスモノクローナル抗体mAb13.2は、インビボでIL-13関連活性を中和するインビボで1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を中和するマウスmAb13.2の有効性を、ブタ回虫Ascarissuumに対して生まれつきアレルギーのあるカニクイザルにおける抗原誘発性気道炎症のモデルを用いて試験した。このモデルにおいて、ブタ回虫Ascarissuum抗原によるアレルギー性サルのチャレンジは、炎症細胞、特に、好酸球の気道中への流入をもたらす。細胞のこの流入を予防するmAb13.2の能力を試験するため、ブタ回虫Ascarissuum抗原によるチャレンジの24時間前に抗体を投与した。チャレンジの日に、ベースラインの気管支肺胞洗浄液BALサンプルを、左肺から採取した。次いで、抗原を、右肺中に気管内注入した。24時間後、右肺を洗浄し、8mg/kgの腹水-精製mAb13.2で静脈内処置した動物由来のBAL液を、未処置の動物由来のBAL液と比較した。好酸球数は、チャレンジ後に5頭の未処置動物のうちの4頭で増加し、それと比較して、mAb13.2で処置した6頭の動物のうち1頭で増加した図9。BAL好酸球百分率は、未処置群については有意に増加したがp<0.02、抗体処置群については有意に増加しなかった。これらの結果は、mAb13.2が、アレルゲンをチャレンジされたアレルギー性動物における気道好酸球増加症を効率的に予防することを裏付けた。マウスmAb13.2の平均血清半減期は、サルにおいて1週間未満であった。痕跡のmAb13.2すべてが血清から消えたであろう3カ月時点で、mAb13.2処置動物にブタ回虫Ascarissuumを再チャレンジし、これらの個体の回虫Ascaris応答性を確認した。処置群における6頭のサルのうちの2頭は、ノンレスポンダーであることが見い出された。実施例1.5:マウスモノクローナル抗体mAb13.2は、通常はIL-4Rαと結合するIL-13の領域に結合するおそらく、IL-13関連活性は、IL-13Rα1およびIL-4Rα鎖からなる受容体複合体を介して仲介される。先ず、サイトカインは、細胞の表面上で、比較的低親和性のIL-13Rα1との相互作用を起こす。次いで、IL-13/IL-13Rα1複合体は、IL-4Rαを動員し、完全IL-13受容体を形成し、高い親和性でそのリガンドIL-13と結合するZurawski他1993EMBOJ.12:2663;Zurawski他1995J.Biol.Chem.270:23869。次いで、IL-13の高親和性受容体との結合は、ヤヌスキナーゼ-シグナル伝達性転写因子JAK-STAT経路が関わるIL-4Rα鎖を介し、例えば、IL-13に対する初期細胞応答のうちの1つとしてモニターすることができるSTAT6のリン酸化を介して下流シグナルを送るMurata他、前掲書。エピトープマッピング、X線結晶学、さらにはBIACORE商標分析などのいくつかのアプローチを用い、マウスmAb13.2とヒトIL-13の間の相互作用を解明し、さらに、1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を変調するmAb13.2の能力の根底にある基盤を調べた。mAb13.2とIL-13の間の相互作用は、X線結晶学により研究した。腹水由来の全IgGを、タンパク質Aカラム上で単離し、パパインで消化し、mAb13.2Fabフラグメントを作成し、次いで、高度に精製した。Fabフラグメント自体を結晶化し、構造解析を、シンクロトロン放射を用い、2.8Åの解像度で入手した。さらに、mAb13.2Fabフラグメントを、ヒトIL-13と共結晶化し、この結晶構造を、1.8Åの解像度で解析した。mAb13.2とIL-13の間の主要な接触部位は、主に、抗体のCDRループおよびIL-13のCヘリックスのC末端領域において集まっていると識別された図10。成熟IL-13タンパク質、すなわち、シグナルペプチドが切断されているIL-13タンパク質について図11に示されるナンバリング配列によると、mAb13.2と接触するIL-13の主要な残基は、配列番号32のGLU49、ASN53、GLY69、PRO72、HIS73、LYS74およびARG86である。ヒトIL-13と結合するmAb13.2Fabフラグメントの能力は、ELISAにより確認された。抗FLAG商標M2抗体で一夜コーティングされたELISAプレートへのFLAG-ヒトIL-13の結合は、ビオチン化mAb13.2を用いて検出した。非標識mAb13.2、単離mAb13.2Fabフラグメントまたは無関係な抗体を導入し、FLAG-ヒトIL-13に対するビオチン化mAb13.2の結合と競合させた。データは、非標識mAb13.2およびmAb13.2Fabフラグメントが、FLAG-ヒトIL-13との結合についてビオチン化mAb13.2と競合することができたことを示している図12。さらに、非標識mAb13.2と類似した競合の程度を達成するには、より高濃度のFabフラグメントが必要であるように見えるが図12A、この相違は、競合を結合部位の濃度の関数として分析した場合、例えば、各単離Fabフラグメント当たり1つの結合部位および各非標識mAb13.2当たり2つの結合部位を仮定すれば解決する図12B。非標識mAb13.2およびmAb13.2Fabフラグメントと対照的に、無関係な抗体は、FLAG-ヒトIL-13との結合についてビオチン化mAb13.2と競合することができなかった図12。インビトロで1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を中和するmAb13.2Fabフラグメントの能力は、mAb13.2Fabフラグメントの非存在下また存在下、上記に記載されているように、ヒト末梢血単球によるTF1細胞の増殖およびCD23の発現を測定することにより確認された。図13Aは、mAb13.2Fabフラグメントが、mAb13.2と同様に、結合部位濃度依存的にTF1増殖を刺激する組換えヒトIL-13の能力を阻害したことを示している。さらに、mAb13.2Fabフラグメントは、mAb13.2と同様に、結合部位濃度依存的にCD23のIL-13仲介性発現を阻害した図13B。上記に記載されているX線結晶学、エピトープマッピング、ELISA、TF1増殖およびCD23発現分析は、mAb13.2が、IL-13ヘリックスのC末端領域、すなわち、IL-4R結合領域に結合することを示した。この分析を確認するため、mAb13.2とIL-13の間の相互作用を、BIACORE商標チップで分析した。この分析は、いくつかのフォーマットで行った。第一に、IL-4RをBIACORE商標チップに結合させ、IL-13Rα1に予め結合させたIL-13の複合体をチップ上へ流した。mAb13.2の非存在下では、3分子複合体の形成が立証された。しかしながら、IL-13Rα1に予め結合させたIL-13の混合物へのmAb13.2の添加は、チップ上のIL-4Rとの結合を妨害した。第二に、mAb13.2をチップ上に固定化し、結合IL-13を溶液相に加えた。IL-13Rα1は、結合IL-13と相互作用することが認められたが、IL-4Rと結合IL-13との相互作用は認められなかった。第三に、mAb13.2は、チップ上に固定化されたIL-13Rα1-FcまたはIL-13Rα1単量体と結合しているIL-13と結合することが立証された。これらの知見は、mAb13.2が、IL-13Rα1とのIL-13相互作用を阻害しないが、IL-13Rα1のIL-4Rαとの相互作用を分断することを裏付けている。この分断は、機能性IL-13シグナル伝達複合体の形成を妨害すると考えられる。これらの知見は、この抗体の中和活性についての理論モデルを提供する。mAb13.2のIL-13およびIL-13Rα1との複合体のインビトロでの証明は、mAb13.2が、細胞表面において受容体結合型のIL-13と結合している可能性を示唆している。細胞に結合したmAb13.2が、受容体に結合したIL-13が飽和している条件下で検出することができるか否かを判定するため、HT-29ヒト上皮細胞系を、4°Cにて様々な濃度のIL-13で処理し、続いて、モノクローナル抗体mAb13.2、mAb13.8または対照マウスIgG1を添加した。結合は、ビオチン化抗マウスIgG1およびPE-ストレプトアビジンを用いるフローサイトメトリー分析により検出した。HT-29細胞は、IL-13Rα1を発現するが、細胞表面に結合したIL-13とのmAb13.2の結合は、2mg/mlまでのmAb13.2の濃度にて検出されなかった。この知見は、mAb13.2が1つまたはそれ以上のIL-13関連活性の強力な中和物であるという証明と共に、IL-13シグナル伝達複合体、すなわち、IL-13受容体の正常な機能が、mAb13.2により分断されることを示している。上記に記載されている知見は、マウスモノクローナル抗体mAb13.2が、高い親和性および特異性でIL-13と結合し、強力な中和活性を示すこと、すなわち、mAb13.2が、試験されたすべてのIL-13関連活性を効率的に遮断することを裏付けている。これらの知見は、ヒトIL-13についての、mAb13.2が、IL-4Rα結合部位と相互作用するが、IL-13Rα1結合部位とは相互作用しないという知見と関連している。実施例2キメラmAb13.2抗体ch13.2の作成実施例2.1:キメラmAb13.2抗体ch13.2の単離mAb13.2をコードする可変重VHおよび可変軽VL遺伝子を、抗体を産生するハイブリドーマから単離されたmRNAからクローン化し配列決定した。VH配列は、ヒトFc受容体および補体成分との結合を低減するための2つの点変異L234AおよびG237Aを含むヒトIgG1をコードするpED6huIgG1_mut発現ベクター配列番号17;Morgan他1995Immunology86:319-24;Shields他2001J.Biol.Chem.276:6591-604中にサブクローニングした。mAb13.2のVL配列は、pED6Kappa発現ベクター中にサブクローニングした。mAb13.2のVHおよびVL配列を含む発現ベクターをCOS-1細胞中に同時形質移入し、キメラmAb13.2抗体ch13.2を馴化培地から精製した。実施例2.2:キメラmAb13.2抗体ch13.2は、インビトロでIL-13関連活性を中和するキメラ抗体、ch13.2を、IL-13結合について試験した。モノクローナル抗体mAb13.2、mAb13.2のキメラ形態ch13.2および対照抗体13.8を、抗FLAG抗体と共にELISAプレート上に固定化されたヒトIL-13-FLAGとの結合についてビオチン化マウスmAb13.2と競合するそれらの能力について試験した。キメラ抗体、ch13.2は、mAb13.2と同様に、IL-13と競合的に結合することができた図14A。別の試験において、ヒト末梢血単球を、IL-13で一夜処理し、様々な濃度のマウスmAb13.2またはch13.2の存在下でCD23発現を誘導した。図14Bに示されるように、ch13.2は、mAb13.2と同程度に、単球によるIL-13仲介性CD23発現を妨害した。実施例3部分および完全ヒト化mAb13.2抗体h13.2v1およびh13.2v2の作成実施例3.1:部分ヒト化mAb13.2抗体h13.2v1の単離mAb13.2のヒト化は、アミノ酸配列相同性、CDRクラスター分析、発現ヒト抗体の中での使用頻度およびヒト抗体の結晶構造に関する入手可能な情報に基づいた。ヒト化は、ヒトDP-54可変重VHおよびDPK-9可変軽VL生殖系列遺伝子それぞれ、例えば、図16および17に示すに基づいた。抗体結合、VH-VL対合および他の要素に対する可能な影響を考慮に入れ、マウス残基を、若干の例外はあるものの、マウスおよびヒトフレームワーク残基が異なるヒト残基に変異させた。ch13.2VH鎖アミノ酸配列のヒトDP-54生殖系列遺伝子の予想アミノ酸配列および得られた部分ヒト化h13.2v1VH鎖アミノ酸配列との比較を図15に示す。ch13.2VL鎖アミノ酸配列のヒトDPK-9の予想アミノ酸配列および得られた部分ヒト化h13.2v1VL鎖との比較を図16に示す。図16および17に見られるように、h13.2v1VHおよびVL鎖は、それぞれch13.2VHおよびVL鎖の相補性決定領域CDR、すなわち抗原結合性領域を保持していた。さらに、VHフレームワーク中の1つの残基およびVLフレームワーク中の2つの残基のみをマウスに保ち、抗原結合性領域およびVH-VL対合を劇的に変化させる危険性を軽減した図16および17。mAb13.2の部分ヒト化は、ヒト生殖系列遺伝子に対応するアミノ酸が、指示されたフレームワーク位置で置換されるように、マウスmAb13.2をコードするヌクレオチド配列を変異させることにより行った。導入される各アミノ酸変化について、CHO細胞における発現に最適化されたコドンによる適切なヌクレオチド置換を考案した。VHのヒト化は、PCR変異誘発のプロセスにより行い、一度に1つまたは2つのアミノ酸について変異を組み入れるオリゴヌクレオチドプライマーを用い、マウステンプレート遺伝子配列を増幅した。部分ヒト化を行うには、数回のPCR変異誘発が必要であった。VLのヒト化は、適切なヌクレオチド置換のあるマウスVL配列に対応する9個の重複オリゴヌクレオチドの一団を用い、PCRにより行った。テンプレートの役割を果たす重複領域およびPCRを用い、センスおよびアンチセンス鎖上のプライマー間のギャップを埋めた。得られた部分ヒト化抗体をh13.2v1と名付けた。h13.2v1のVLおよびVHをコードするヌクレオチド配列を、それぞれ配列番号3および配列番号7と命名する。実施例3.2:完全ヒト化mAb13.2h13.2v2の単離図15および図16に示すように、h13.2v1は、フレームワーク領域中に3つのマウス残基、すなわちVH鎖に1つおよびVL鎖に2つを保持していた。mAb13.2FabとヒトIL-13の共結晶構造についての予備的作業および分析は、3つの残基すべてをヒトに変異させ得ることを裏付けた。これらは、VH鎖における3番残基マウスではK、ヒトではQ、VL鎖における4番残基マウスではL、ヒトではMおよびVL鎖における72番残基生殖系列では68番;マウスではR、ヒトではGであった。したがって、mAb13.2の完全ヒト化バージョン、h13.2v2を作成するため、PCR変異誘発を用い、h13.2v1のVH鎖における変異K3Qおよびh13.2v1のVL鎖におけるL4MおよびR72Gを導入した。h13.2v2の最終VHおよびVL配列を、それぞれ図17および図18に示す。h13.2v2のVLおよびVHをコードするヌクレオチド配列を、それぞれ配列番号4および配列番号8と命名する。図29に示す配列に従い直線ナンバリングスキームを用い、IL-13との水素結合接触を作るmAb13.2重鎖の主要な残基は、SER50CDR2、SER53CDR2、TYR101CDR3およびTYR102CDR3であることが決定された。さらに、IL-13とのファンデルワールス接触を作るmAb13.2重鎖の主要な残基は、ILE30CDR1、SER31CDR1、ALA33CDR1、TRP47、SER50CDR2、SER52CDR2、SER53CDR2、TYR58CDR2、LEU98CDR3、ASP99CDR3、GLY100CDR3、TYR101CDR3、TYR102CDR3およびPHE103CDR3であることが決定された直線ナンバリングスキームを用いる図29に基づく。図30に示す配列に従い直線ナンバリングスキームを用い、IL-13との水素結合接触を作るmAb13.2軽鎖の主要な残基は、ASN31CDR1、TYR32CDR1、LYS34CDR1、ASN96CDR3およびASP98CDR3であることが決定された。さらに、IL-13とのファンデルワールス接触を作るmAb13.2軽鎖の主要な残基は、ASN31CDR1、TYR32CDR1、LYS34CDR1、ARG54CDR2、ASN96CDR3、ASP98CDR3およびTRP100CDR3であることが決定された直線ナンバリングスキームを用いる図30に基づく。実施例3.3:完全ヒト化mAb13.2h13.2v2は、IL-13との完全な結合活性を保持するIL-13-FLAGとの結合についてビオンチン化mAb13.2と競合する完全ヒト化mAb13.2h13.2v2の能力は、実施例2に記載されているようなELISAにより判定した。データは、mAb13.2のキメラch13.2、部分ヒト化h13.2v1および完全ヒト化バージョンが、同程度までFLAG-ヒトIL-13との結合について、ビオチン化mAb13.2と競合することができることを立証した図19A。BIACORE分析も、IL-13が、固定化h13.2v2に対する速やかな結合および遅い解離を有することを裏付けた図19B。実施例3.4:完全ヒト化mAb13.2h13.2v2は、インビトロでIL-13関連活性を中和するさらに、ヒト単球によるCD23のIL-13仲介性細胞表面発現を阻害し、HT-29細胞におけるIL-13誘発性STAT6リン酸化を低減するmAb13.2のキメラch13.2、部分ヒト化h13.2v1および完全ヒト化h13.2v2バージョンの能力を、実施例1.3に記載されているように、フローサイトメトリー分析により判定した。手短に言うと、ヒト末梢血単球を、漸増濃度のch13.2、h13.2v1またはh13.2v2の存在下、最適以下の濃度の組換えヒトIL-13と共に一夜インキュベートした。単球をゲートし、IL-13応答性の指標としてのCD23発現についてアッセイした。フローサイトメトリー分析は、mAb13.2の3種のバージョン、すなわち、ch13.2、h13.2v1およびh13.2v2のすべてが、用量依存的に単球によるIL-13仲介性CD23発現を低減することができることを立証した図20A。STAT6リン酸化について試験するため、HT-29ヒト上皮細胞系を、最適以下の用量の組換えヒトIL-13および漸増濃度のch13.2、h13.2v1またはh13.2v2と共に、37°Cにて30分間インキュベートし、次いで、リン酸化STAT6に対するALEXA商標Fluor488標識モノクローナル抗体を用い、リン酸化STAT6発現についてアッセイした。フローサイトメトリー分析は、mAb13.2の3種のバージョン、すなわち、ch13.2、h13.2v1およびh13.2v2のすべてが、IL-13仲介性STAT6リン酸化を軽減することができることを立証した図20B。h13.2v2が、インビトロで組換えIL-13関連および天然ヒトIL-13関連活性を阻害することできたことから図21、動物モデルにおいてIL-13関連障害を阻害するその能力について試験した。完全ヒト化mAb13.2、h13.2v2を試験することに備えて、呼吸器疾患の非ヒト霊長類NHPおよびヒツジモデルにおいて、カニクイザル由来またはヒツジ由来の組換えIL-13を中和する抗体の能力をアッセイした。IL-13を、カニクイザルまたはヒツジからクローン化した。NHPIL-13は、大腸菌E.coliにおいて発現させ、精製し、組換えヒトIL-13用としてリフォールディングした。対照的に、組換えヒツジIL-13は、チャイニーズハムスター卵巣CHO細胞において発現させた。IL-13の組換えNHPカニクイザル形態またはIL-13の組換えヒツジ形態に関係する1つまたはそれ以上の活性を阻害するmAb13.2またはh13.2v2の能力をインビトロで試験した。図22は、h13.2v2が、ヒト単球によるCD23の細胞表面発現を誘導するカニクイザルNHPIL-13の能力を強力に中和したことを示している。しかしながら、ヒツジIL-13関連活性の中和が、かなり高濃度の抗体を必要としたように、h13.2v2は、ヒツジIL-13を弱く中和したに過ぎなかった図22。実施例3.5:完全ヒト化mAb13.2h13.2v2は、喘息のヒツジモデルにおいてIL-13活性を中和するIL-13のヒツジ形態の生物活性を中和する際の比較的低い効力にもかかわらず、回虫Ascaris誘発性気道過反応性のヒツジモデルにおける有効性についてh13.2v2を試験した。ヒツジを、自然暴露により、線虫寄生虫、ブタ回虫Ascarissuumに感作させた。回虫Ascaris抗原による肺チャレンジを与えると、動物は、抗原チャレンジに対する喘息のヒトの応答と類似した気管支収縮を起こす。この応答は、即時型反応と、続く、チャレンジの4~5時間後に始まる晩期応答からなる。初期相は、平滑筋応答であると考えられるが、晩期は、炎症反応である。回虫Ascaris誘発性気管支収縮を低減するh13.2v2の能力を試験するため、ヒツジに、20mg/kg、5mg/kgまたは2mg/kgの抗体を静脈内i.v.注入により投与した。注入の24時間後、動物に、ブタ回虫Ascarissuum抗原による気管内チャレンジを行った。結果は、20mg/kgまたは5mg/kgにおけるh13.2v2が、抗原に対する晩期応答を減弱することを示した図23。2mg/kgのh13.2v2には、おそらく、ヒツジIL-13に対するh13.2v2の弱い中和活性により、対照と比べて抗原応答に対する有意な効果はなかった。さらに、ヒツジにおいて、コリン作動薬、カルバコールの気道チャレンジによって誘発される気道過反応性を低減するh13.2v2の能力を試験した。カルバコールは、強制呼気容量FEVの減少として測定される気管支収縮を誘発し、所与の応答の大きさを誘発するのに必要とされる刺激の用量PC400は、通常、健康な対象の場合よりも喘息患者の場合の方が低い。ヒツジは、未処置のままとするか、カルバコール吸入チャレンジの24時間前に20mg/kg、5mg/kgまたは2mg/kgのh13.2v2を静脈内投与し、PC400を、ブタ回虫Ascarissuumのチャレンジ前後にヒツジで決定した。データは、20mg/kgまたは5mg/kgにおけるh13.2v2が、ブタ回虫Ascarissuumのチャレンジによって引き起こされるPC400の低下を防いだことを示している図24。抗原応答実験の結果と同様、2mg/kgのh13.2v2には、対照と比べてPC400に対する有意な効果はなかった。実施例3.6:完全ヒト化mAb13.2h13.2v2は、喘息の非霊長類モデルにおいてIL-13活性を中和する非ヒト霊長類における回虫Ascaris誘発性肺炎症を予防するh13.2v2の能力を試験するため、対照カニクイザルを、食塩水、8mg/kgの無関係なヒトIgGIVIGまたは2mg/kgのデキサメタゾン陽性対照としてで筋肉内処置した。試験カニクイザルには、10mg/kgのh13.2v2を静脈内投与した。翌日、チャレンジ前のBALサンプルを左肺から集め、動物の右肺にブタ回虫Ascarissuumを気管内にチャレンジした。チャレンジの24時間後、BALサンプルを右肺から集め、細胞浸潤物についてアッセイした。結果は、h13.2v2よる動物の前処置が、ブタ回虫Ascarissuum抗原によって引き起こされる気道炎症を予防することを示した図25。並行実験において、IL-5およびエオタキシンが、回虫Ascarisチャレンジ後のBAL中に誘導された。h13.2v2よる動物の前処置は、IL-5とエオタキシンの両方の誘導のレベルを低減した。ブタ回虫Ascarissuumに感作された非ヒト霊長類は、回虫Ascaris抗原に対するIgEを発現する。このIgEは、循環する好塩基球上のRcεRIと結合するため、回虫Ascaris抗原による末梢血好塩基球のインビトロチャレンジは、脱顆粒およびヒスタミンの放出を引き起こす。繰り返される抗原暴露は、好塩基球過敏化を高め、ヒスタミン放出応答の増強をもたらす。このプロセスに対するh13.2v2の効果を試験するため、h13.2v2もしくは食塩水または記載されているようなIVIG対照を投与したカニクイザルから、回虫Ascarisチャレンジの8週後に採血し、血漿中の全IgEおよび回虫Ascaris特異的IgEのレベルを、ELISAにより測定した。回虫Ascaris特異的IgEのレベルは、食塩水またはIVIGで処置した対照動物において、チャレンジの8週後に増加した図31B。対照的に、h13.2v2で処置した動物は、回虫Ascarisに特異的な循環IgEのレベルに有意な低下を示した図31A。処置群のいずれについても全IgE力価の有意な変化は認められなかった。好塩基球ヒスタミン放出に対する効果を評価するため、動物から、回虫Ascarisチャレンジの24時間後、8週後および4カ月後に採血した。全血に、37°Cにて30分間、回虫Ascaris抗原をチャレンジし、上清中に放出されるヒスタミンを、ELISABeckmanCoulter、Fullerton、CAにより定量化した。図32Aに示すように、これらの感作動物は、部分的抗原チャレンジ前でさえある程度の回虫Ascaris誘発性好塩基球ヒスタミン放出を示した。チャレンジ後、対照動物は、好塩基球応答性の予想された増加を示した。対照的に、h13.2v2で処置された動物は、好塩基球感作におけるこの増加を起こすことなく、チャレンジの2~4カ月後に、動物の回虫Ascarisに対するインビトロのヒスタミン放出応答は有意に低かった図32B。したがって、h13.2vの単回投与は、このモデルにおいて長期の疾患修飾活性を有していた。実施例4様々なヒト生殖系列遺伝子に基づくmAb13.2のヒト化実施例3は、DP-54およびDPK9生殖系列遺伝子に基づいてmAb13.2をヒト化するための方法および結果を提供した。本実施例では、他の生殖系列遺伝子に基づくmAb13.2のヒト化について手短に詳述する。追加のヒト化戦略を、マウス抗体可変領域の実際のアミノ酸配列に対して高度の相同性、すなわち、配列類似性を有するヒト生殖系列抗体配列、またはそれらのサブグループの分析に基づいて設計した。例えば、V-BASEのVHグループ3は、mAb13.2と高度な類似性を示した。mAb13.2の重鎖可変領域のCDRは、VHグループ3内の生殖系列遺伝子のサブグループ、すなわち、3-53DP-42、3-48DP-51、3-09DP-31、3-13DP-48、3-15DP-38、3-20DP-32、3-21DP-77、3-23DP-47、3-30および3-30.5DP-49、3-64DP-45、3-66DP-86および3-73YAC-9のうちのどの1つにも移動できると判断した図26。mAb13.2をヒト化するためにも使用することができるDP-61の配列も図26に示す。以下の共通アミノ酸置換、すなわち、K3Q、K13QまたはK13R、K19R、T40A、E42G、R44G、R75K、I77SまたはI77T、S83N、S87AまたはS87D、M92VまたはM92LおよびT113Lを、mAb13.2中に導入し、そのVHフレームワークを、提案されているヒト生殖系列化フレームワークのいずれかに変換できると判断した。特定の生殖系列遺伝子に基づくヒト化のための個々のアミノ酸置換も描かれており、例えば、DP-47に基づくヒト化は、V5L、A49SおよびA74Sの追加変異を含み、DP-42に基づくヒト化は、V12I、A49SおよびA74Sの追加変異を含み、DP-51に基づくヒト化は、A49Sの追加変異を含み、DP-48に基づくヒト化は、P41T、D72EおよびE88Gの追加変異を含み、DP-53に基づくヒト化は、E46VおよびA49Sの追加変異を含み、DP-32に基づくヒト化は、L11V、A49SおよびY94Hの追加変異を含み、DP-38に基づくヒト化は、A49G、A74D、R75S、N76K、R86KおよびS87Tの追加変異を含み、DP-31に基づくヒト化は、G16R、A49SおよびR97Kの追加変異を含み、DP-61に基づくヒト化は、W47Y、A49S、A74SおよびT90Mの追加変異を含み、DP-45に基づくヒト化は、E6Q、A24G、A49SおよびT90Mの追加変異を含むことがある。例えば、mAb13.2のヒト化が、79の配列同一性を有するヒト生殖系列遺伝子DP-47に基づく場合、以下の変異、K3Q、V5L、K13Q、K19R、T40A、E42G、R44G、A49S、A74S、R75K、I77T、S83N、S87A、M92VおよびT113Lを、mAb13.2中に導入することができる。ヒト化の間のmAb13.2中への共通アミノ酸置換の単独、または特定のヒト生殖系列遺伝子に基づく個々のアミノ酸置換と組み合わせた導入は、活性な抗体をもたらすはずである。例えば、活性抗体、h13.2v3は、以下に記載するように、mAb13.2のヒト化が3-21DP-77に基づく場合に得られる。mAb13.2の代替ヒト化は、生殖系列遺伝子DP-77およびB1に基づく。DP-77の予想アミノ酸配列、ch13.2の可変重鎖アミノ酸配列および完全ヒト化mAb13.2抗体h13.2v3の重鎖アミノ酸配列の間のアラインメントを図27に示す。B1の予想アミノ酸配列、ch13.2の可変軽鎖アミノ酸配列およびh13.2v3の可変軽鎖アミノ酸配列の間のアラインメントを図28に示す。DP-77およびB1の予想アミノ酸配列は、それぞれmAb13.2の可変重鎖と80.4のアミノ酸同一性を、mAb13.2の可変軽鎖と77.5のアミノ酸同一性を示した。DP-77とmAb13.2の重鎖その上にch13.2の重鎖の間およびB1とmAb13.2の軽鎖その上にch13.2の軽鎖の間のアミノ酸差は、フレームワーク領域と相補性決定領域の両方に見い出されたが、CDRにおける差は、未変化のままであった。対照的に、重鎖mAb13.2のフレームワーク領域に見い出されるアミノ酸が、DP-77の同じ位置におけるアミノ酸と異なった場合、mAb13.2の可変重鎖のアミノ酸を、DP-77中のアミノ酸に変化させた。同様に、mAb13.2の軽鎖のフレームワーク領域に見い出されるアミノ酸が、B1の同じ位置におけるアミノ酸と異なった場合、mAb13.2の可変軽鎖のアミノ酸を、B1におけるアミノ酸に変化させた。2回のPCR変異誘発は、上記に記載されているように、それらの変化を導入した。重鎖および軽鎖における1回目の変化後、実施例2に記載されているようにELISAを行い、変化が、IL-13と結合する抗体の能力に影響を及ぼさないことを保証した。第2回目の変化後、mAb13.2の重鎖および軽鎖内のフレームワーク領域のアミノ酸配列は、それぞれDP-77およびB1のフレームワーク領域のアミノ酸配列と一致した。ヒト化mAb13.2抗体、h13.2v3も、インビトロでIL-13関連活性を阻害することができた。h13.2v3を、ELISAおよびTF1増殖アッセイにより試験し、結合して1つまたはそれ以上のIL-13関連活性を阻害するその能力を判定した。h13.2v3は、ch13.2およびh13.2v1と比較した場合、IL-13との結合についてmAb13.2と同様に競合することが立証された。さらに、h13.2v3は、mAb13.2およびh13.2vと同程度にTF1増殖を阻害することができた。実施例5h13.2v2の野生型Fc復帰変異体により仲介されるエフェクター活性IL-13Rα1およびIL-4Rαポリペプチドが含まれるIL-13受容体の細胞シグナル伝達形態は、サイトカインに反応する細胞タイプの表面上に見い出される。IL-13Rα2は、IL-13応答性細胞の表面上には通常発現されないが、脳、頭部および頸部の腫瘍で報告されているKawakami他2003Clin.CancerRes.9:6381-8;Mintz他2002Neoplasia4:388-99;Liu他2000CancerImmunol.Immunother.49:319-24。また、IL-13Rα2発現は、IFNγで処理した初代ヒト単球Daines他2002J.Biol.Chem.277:10387-93またはTNFαまたはIL-13で処理した初代ヒト線維芽細胞Yoshikawa他2003Biochem.Biophys.Res.Commun.312:1248-55上で誘発されることがある。この受容体は、IL-13に対するシグナル伝達応答を仲介する能力はないがKawakami他2001Blood97:2673-9、代わりに、おとり受容体としての役割を果たし、IL-13Rα1との生産的IL-13相互作用に競合するように見えるFeng他1998Lab.Invest.78:591-602。IL-13Rα2は、IL-13に対して高い親和性を有しAndrews他2002J.Biol.Chem.277:46073-8、h13.2v2結合部位が含まれるとは予測されていないサイトカインのC末端領域と主に相互作用するように見えるMadhankumar他2002J.Biol.Chem.277:43194-205。したがって、h13.2v2が、細胞表面上のIL-13Rα2により捕捉されたIL-13と相互作用するか否かを調べた。A375は、IL-13Rα2を発現するヒトメラノーマ細胞系である。組換えヒトIL-133ng/mlを、4°Cにて20分間、これらの細胞と接触させた。細胞を洗浄し、ビオチン化h13.2v2の結合について試験した。結果は、IL-13の存在下でこれらの細胞への抗体の用量依存的結合を示し、IL-13に結合しているh13.2v2は、その受容体に結合していることを示している図33。h13.2v2が、Fc依存的エフェクター機能を促進するか否かを判定するため、h13.2v2の変異Fc残基L234A/G237A;配列番号17の残基116および119を野生型に戻し、野生型または変異Fcを発現する抗体を発現させ精製した。エフェクター機能は、標的として、IL-13をロードしたA375細胞を用い、抗体依存性細胞傷害アッセイADCCで試験した。A375標的細胞をクロミウム51で標識し、10ng/mlの組換えヒトIL-13と共にインキュベートした。ROSETTE登録商標HumanNKEnrichmentCocktailStemCellTechnologies、Seattle、WAの処理によりナチュラルキラーNK細胞を富化させたヒトPBMCをエフェクターとして使用した。エフェクターと標的細胞を一緒に、漸増濃度のh13.2v2またはその野生型Fc復帰変異体の存在下で37°Cにて5時間インキュベートした。細胞傷害性は、上清中へのクロミウム51の放出として測定し、TRITON登録商標X-100でA375標的細胞を溶解することにより測定される最大放出の百分率として表した。結果は、野生型Fc復帰変異体は、IL-13をロードしたA375標的細胞のADCCを仲介することができるが、h13.2vは仲介することができないことを示した図34A。IL-13の非存在下では、細胞傷害性は観察されなかった図34B。同様な結果は、3人の異なるドナー由来のエフェクター細胞を用いても認められた。これらの結果は、L234AおよびG237AFc変異の存在により、h13.2v2は、たとえ最適なインビトロ条件下であってもADCCを仲介できないことを示している。まとめると、これらの知見は、h13.2v2が、IL-13Rα2を発現する細胞と結合することができるが図33、IL-13Rα1を発現する細胞とは結合することができないことを示している。実験を行い、h13.2v2野生型復帰変異体が、たとえ検出可能な結合が存在しなくても、IL-13Rα1を発現するHT-29細胞のADCCを仲介するか否かを試験した。HT-29細胞を、上記に記載されているように行ったADCCアッセイにおける標的として使用した。結果は、IL-13Rα2を発現するA375細胞の細胞溶解につながる条件下で、IL-13Rα1を発現するHT-29細胞は溶解されないことを示した図35。また、これらの結果は、L234AおよびG237AFc変異が含まれる抗体はADCCを誘導しないが、野生型Fcエフェクター機能を持つ抗体は、IL-13Rα2を発現する特定の癌の治療に有用であることを示している。実施例6COS細胞におけるヒト化13.2抗体の発現哺乳類組換え系におけるヒト化抗IL-13抗体の発現を評価するため、マウス13.2配列番号9および配列番号13、hu13.2V1配列番号11および配列番号15およびhu13.2V2配列番号12および配列番号16の可変領域を、ヒトκおよびIgG1mut定常領域を含むpED6発現ベクター中にサブクローニングした。サル腎臓COS-1細胞を、10の熱失活したウシ胎児血清、1mMのグルタミンおよび0.1mg/mlのペニシリン/ストレプトマイシンを含有するDME培地Gibco中で生育させた。COS細胞の形質移入は、供給業者により推奨されているプロトコルに従い、TRANSITIT登録商標-LT1Transfection試薬MirusBioCorp.、Madison、WIを用いて行った。形質移入されたCOS細胞を、10CO2の存在下、37°Cにて24時間インキュベートし、無菌PBSで洗浄し、次いで、無血清培地R1CD1Gibco中で48時間生育させ、馴化培地における抗体の分泌およびその蓄積を可能にした。13.2抗体の発現は、標準品として精製されたヒトIgG1/κ抗体を用いる全ヒトIgGELISAにより定量化した。キメラ13.2抗体ならびに両方のヒト化バージョンは、COS細胞において十分に発現した。表5.COS細胞におけるヒト化13.2抗体の一過性発現"