"DNaseをコードする核酸配列の転写を植物において調節する調節性ヌクレオチド配列の制御下の前記核酸配列を含む核酸コンストラクトが導入された前記植物をインキュベーションすることを含む、植物においてDNaseを発現させる方法。前記核酸コンストラクトが、タンパク質顆粒の形成を植物において誘導する融合タンパク質パートナーをコードし、任意でその中の天然に存在しない反復配列モチーフをコードする1つまたは複数の核酸配列をさらに含む核酸配列を加えて含み;前記核酸配列はDNaseをコードし、前記核酸配列はタンパク質顆粒の形成を植物において誘導するタンパク質をコードし、前記調節配列は互いに作動可能に連結される、請求項1に記載の方法。前記核酸コンストラクトが、タンパク質顆粒の形成を植物において誘導する融合タンパク質パートナーをコードする第1の核酸配列と;任意でアミノ酸リンカー中のペプチド結合が特異的に切断され得るアミノ酸リンカーをコードする第2の核酸配列と;DNaseをコードする第3の核酸配列と;前記核酸配列の転写を前記植物において調節する調節性ヌクレオチド配列とを、前記核酸配列が互いに作動可能に連結されて、含む、請求項2に記載の方法。前記核酸コンストラクトが、融合タンパク質を植物細胞の小胞体に向けて導くペプチド、好ましくはシグナルペプチドをコードする核酸配列をさらに含む、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。タンパク質顆粒の形成を植物において誘導する前記タンパク質が、プロラミンまたはその断片、好ましくはトウモロコシプロラミンである、請求項1~4のいずれか一項に記載の方法。前記プロラミンが、γゼインまたはその断片、好ましくはトウモロコシγゼインである、請求項5に記載の方法。前記DNaseが、DNaseI、好ましくはヒトDNaseまたはヒトDNaseIである、請求項1~6のいずれか一項に記載の方法。前記DNaseが組換えDNaseである、請求項1~7のいずれか一項に記載の方法。DNaseをコードする核酸配列、およびそれへ作動可能に連結された前記DNaseの転写を植物において調節する調節性ヌクレオチド配列を含むか、それからなるか、または本質的になる核酸コンストラクト。前記核酸コンストラクトが、タンパク質顆粒の形成を植物において誘導する融合タンパク質パートナーであって、任意で1つまたは複数の天然に存在しない反復配列モチーフを含む前記タンパク質をコードする第1の核酸配列と;任意でアミノ酸リンカー中のペプチド結合が特異的に切断され得るアミノ酸リンカーをコードする第2の核酸配列と;DNaseをコードする第3の核酸配列と、前記第1の核酸配列、第2の核酸配列および第3の核酸配列の転写を植物において調節する調節性ヌクレオチド配列とを;前記核酸配列が互いに作動可能に連結されて、含む、請求項9に記載の核酸コンストラクト。請求項9または請求項10のいずれか一項に記載の核酸コンストラクトを含むベクター。iタンパク質顆粒の形成を植物において誘導する融合タンパク質パートナーであって、任意で1つまたは複数の天然に存在しない反復配列モチーフをコードするアミノ酸配列をさらに含む前記タンパク質をコードするアミノ酸配列と;ii任意でリンカー中のペプチド結合が特異的に切断され得るリンカーをコードするアミノ酸配列と;iiiDNaseをコードするアミノ酸配列とを含むか、それからなるか、または本質的になる融合タンパク質。請求項9もしくは請求項10のいずれか一項に記載の核酸コンストラクト、または請求項11に記載のベクター、または請求項12に記載の融合タンパク質を含む、植物またはそれに由来する植物材料。組換えDNaseを産生することができ、好適には前記植物または植物材料が消費可能な産物の中へ取り込まれる、請求項13に記載の植物または植物材料。請求項12に記載の融合タンパク質を含む、植物タンパク質顆粒、植物または消費可能な産物。DNaseをコードする核酸配列は、DNase、好ましくはDNaseIの核酸配列に対する実質的な相同性すなわち配列類似性または実質的な同一性を備えた核酸配列を包含する。一実施形態において、DNaseIはヒトDNaseIである。ヒトにおいて、DNaseIの遺伝子は第16染色体に位置し、Genbankアクセッション番号NG_009285を有する。DNaseのバリアントに対する実質的な相同性すなわち配列類似性または実質的な同一性を備えたDNaseのバリアントも包含される。本明細書において記載されるように、DNaseポリヌクレオチドのバリアントは、Genbankアクセッション番号NG_009285において報告された配列に対して、少なくとも60、65、70、71、72、73、74、75、80、85、90、95、96、97、98、99または100の配列同一性を有することができる。DNaseバリアントは、DNaseタンパク質の生物学的および/または免疫学的な活性を提示するDNaseその断片等のバリアントであり得る。本明細書において使用される時、DNaseタンパク質の生物学的活性という語句は、DNase様のポリペプチドが、少なくとも1つの天然に存在するDNaseタンパク質と実質的に同じかまたはそれに類似する少なくとも1つの生物学的活性を有することを意味する。本明細書において使用される時、DNaseタンパク質の免疫学的活性という語句は、天然に存在するDNaseタンパク質に特異的な抗体とDNase様のポリペプチドが交差反応する能力を指す。かかる抗体は、当該技術分野において容易に利用可能であり、当該技術分野において公知の方法を使用して、容易に調製することができる例えば、カタログSC-30058下でSantaCruzBiotechnologyから利用可能なヒトDNaseIに対する抗体。DNaseのバリアントは生来のDNaseタンパク質のアミノ酸に加えてアミノ酸を含んでもよいか、または生来のDNaseタンパク質のすべてのアミノ酸を含まなくてもよい。バリアントは、アミノ酸残基の欠失、挿入または置換を有し、それはサイレントな変化を生み、機能的に等価なタンパク質をもたし得る。物質の二次的結合活性が保持される限り、残基の極性、電荷、可溶性、疎水性、親水性、および/または両親媒性における類似性に基づいて、慎重なアミノ酸置換を行なうことができる。例えば、負に荷電したアミノ酸は、アスパラギン酸およびグルタミン酸を含み;正に荷電したアミノ酸は、リジンおよびアルギニンを含み;類似の親水性値を有する非荷電性極性頭部基を備えたアミノ酸は、ロイシン、イソロイシン、バリン、グリシン、アラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、フェニルアラニンおよびチロシンを含む。保存的置換は、例えば以下の表に従って行なうことができる。第2のカラムにおける同じブロック中のアミノ酸、および好ましくは第3のカラムにおける同じ行中のアミノ酸は、互いに置換することができる。さらに、ポリペプチドは、成熟タンパク質または未成熟タンパク質または未成熟タンパク質に由来したタンパク質であり得る。かかるポリペプチドの例は、特性の改善例えば、高保存安定性またはinvivoの半減期の増加を達成するDNaseアミノ酸配列の修飾によって調製されているDNaseポリペプチドの誘導体である。一実施形態において、DNaseの核酸配列は植物における発現のために至適化されたコード配列であり、配列番号:1中に記載される配列を含むか、それからなるか、もしくは本質的になるか、またはそのバリアント、断片もしくはホモログである。一実施形態において、DNaseのアミノ酸配列は、配列番号:2中に記載される配列を含むか、それからなるか、もしくは本質的になるか、またはそのバリアント、断片もしくはホモログである。これらのDNase配列のバリアント、断片、ホモログおよび突然変異体は、本発明の範囲内に包含される。特に、DNaseのバリアントは当該技術分野において記載されている。一例として、DNaseIのバリアントは、生来のヒトDNaseIと比較して、DNA加水分解活性が増加し塩化ナトリウムにより阻害されにくい過活性バリアントを含む例えば、US20050170365を参照されたい。DNA加水分解活性が増加しているので、過活性バリアントは、一般的には、DNAの分解消化において生来のヒトDNaseIよりも粘液溶解活性が増加しより効果的であり、比較的多量のDNAを含む肺分泌物を有する患者の治療において特に有用であり得る。したがって、活性増加を備えたかかるバリアント、好適には比較可能な条件下で決定されるように生来のヒトDNaseIよりも高い程度までDNAを加水分解するDNaseのバリアントは、本発明によって包含される。例えば、直線状DNA消化アッセイを使用して、本明細書において記載されるようなDNA加水分解活性を決定することができる。かかる活性増加を有するバリアントは、比較可能な条件下で決定されるようなアッセイにおいて、生来のヒトDNaseIを超える活性を有するバリアントであるだろう。典型的には、過活性バリアントは、生来のヒトDNaseよりも少なくとも10、20、30、40もしくは50または100以上高いDNA加水分解活性を有するだろう。一実施形態において、DNaseは、それが発現される細胞とは異なる属または種に由来する。したがって、発現されるDNaseおよび前記タンパク質が発現される細胞は異なる属または種からのものである。したがって、一実施形態において、タンパク質はヒトタンパク質であり、それが発現される細胞は植物である。言いかえれば、タンパク質は異なる属または種からのものであるので、通常そのタンパク質を発現しない細胞によって発現される。本発明は、コードする核酸配列DNaseまたはその断片の使用を包含する。DNaseまたはDNaseのバリアントをコードする限り、核酸配列は天然に存在するDNaseに同一でなくてもよい。したがって、核酸配列は、DNaseの天然に存在するコード配列と比較して、少なくとも80、85、90、95、96、97、98、99または100の配列同一性を有し得る。好ましい実施形態において、本発明において使用されるDNaseをコードする核酸配列は、植物におけるコドン使用に従って特定のコドンを代替のコドンと置換することによって、植物における発現のために至適化されている。タンパク質顆粒の形成を植物において誘導するタンパク質をコードする核酸配列は、本発明の方法において使用することができる。タンパク質顆粒は、正確な折り畳みおよび生物学的活性を保持しながら真核細胞中で貯蔵タンパク質を細胞内で濃縮するように進化させた、特定の植物種子中に天然に存在する構造である。タンパク質顆粒は、細菌からの封入体の特徴のうちのいくつかを共有する。それらは高密度であり、疎水性相互作用によって緊密に充填された多量の凝集タンパク質を含む。貯蔵タンパク質は、シグナルペプチドを介して小胞体の内腔の中へ挿入することができ、小胞体由来タンパク質顆粒と呼ばれる特異的細胞内小器官を発達させている小胞体中で、またはタンパク質貯蔵液胞中でのいずれかで集合する。タンパク質顆粒の形成を植物において誘導するタンパク質の例は、貯蔵タンパク質または修飾された貯蔵タンパク質プロラミンまたは修飾されたプロラミンまたはプロラミンドメイン等を含む。γゼインはトウモロコシ貯蔵タンパク質であり、4つのトウモロコシプロラミンのうちの1つである。他の穀物プロラミンとして、αゼインおよびγゼインは粗面小胞体の細胞質側の膜結合型ポリソーム中で生合成され、内腔内で集合し、次いで小胞体由来タンパク質顆粒の中へ隔離される。好適なプロラミンは、γゼイン、αグリアジン、コメrP13タンパク質およびトウモロコシαゼインの22kDaのN末断片を含むが、これらに限定されない。一実施形態において、タンパク質顆粒の形成を植物において誘導するタンパク質はγゼインであり、以下の4つの特徴的なドメインからなる。i19アミノ酸のペプチドシグナル、ii8単位のヘキサペプチドPPPVHLを含む反復ドメイン53アミノ酸、iiiプロリン残基が他のアミノ酸と交互にあるProXドメイン29アミノ酸、およびiv疎水性システインリッチC末ドメイン。1つまたは複数の天然に存在しない反復配列モチーフはγゼインの中へ取り込まれるかまたは置換することができ、植物細胞におけるDNaseの発現量を改善することができる。天然に存在しない反復配列モチーフ複数可で置換した場合、反復ドメインもしくはProXドメインまたはこれらのドメインの両方が突然変異されて、天然に存在しない配列モチーフを生じる。反復配列は天然に存在しない配列モチーフであるので、生来のγゼイン例えば生来のトウモロコシγゼイン配列中に存在しないだろう。一実施形態において、天然に存在しない反復配列モチーフ複数可はγゼインの反復ドメインの中へ取り込まれるかまたは置換する。別の実施形態において、天然に存在しない反復配列モチーフ複数可はγゼインのProXドメインの中へ取り込まれる。別の実施形態において、天然に存在しない反復配列モチーフ複数可はγゼインの反復ドメインおよびProXドメインの中へ取り込まれる。好ましい実施形態において、天然に存在しない反復配列モチーフ複数可は、γゼインの反復ドメインおよびProXドメインから本質的になる断片の中で置換する。かかる断片の一例は、γゼインのアミノ酸残基の少なくとも22~109、22~110、22~111、22~112、22~113、22~114または22~115を含むか、それからなるか、または本質的になる。言いかえれば、融合タンパク質パートナーのN末は、γゼインのシグナルペプチドを含んで、前述のものにおいて記載されるような様々な置換を備えたγゼインの最初の105~115アミノ酸を含む。天然に存在しない反復配列モチーフの1つの例はPPPVHL以外のモチーフである。天然に存在しない反復配列モチーフの他の非限定的例は、PPPVALnもしくはProProProValAlaLeun;PPPVELnもしくはProProProValGluLeun;PPPAPAnもしくはProProProAlaProAlan;およびPPPEPEnもしくはProProProGluProGlunまたはその2つ以上の組み合わせ、式中、n=1~5、1~6、1~7、1~8、1~9、1~10、1~15、1~20または1~25などからなる群から選択される。好ましい実施形態において、n=7または8である。アラニンおよびグルタミン酸以外に、他のアミノ酸スレオニン等であるがこれらに限定されないを、プロリンリッチの天然に存在しない反復配列例えばPPPVTL中で使用することができる。別の実施形態において、2つ以上の異なる天然に存在しない反復配列モチーフの組み合わせを、反復ドメイン、ProXドメインまたは両方中で使用することができ、PPPVALnおよびPPPVELn;またはPPPAPAnおよびPPPEPEn;またはPPPVALnおよびPPPVELnおよびPPPAPAn;またはPPPVELnおよびPPPAPAnおよびPPPEPEn;またはPPPVALnおよびPPPVELnおよびPPPAPAnおよびPPPEPEn等である。一実施形態において、γゼインの反復ドメイン中のPPPAPAn配列は、配列番号:6中に記載される配列を含むか、それからなるか、または本質的になる。一実施形態において、γゼインの反復ドメイン中のPPPEPEn配列は、配列番号:7中に記載される配列を含むか、それからなるか、または本質的になる。一実施形態において、γゼインの反復ドメイン中のPPPVELn配列は、配列番号:8中に記載される配列を含むか、それからなるか、または本質的になる。一実施形態において、γゼインの反復ドメイン中のPPPVALn配列は、配列番号:9中に記載される配列を含むか、それからなるか、または本質的になる。一実施形態において、γゼインの反復ドメイン中のPPPVTLn配列は、配列番号:10中に記載される配列を含むか、それからなるか、または本質的になる。一実施形態において、γゼインのProXドメイン中のPPPAPAn配列は、配列番号:11中に記載される配列を含むか、それからなるか、または本質的になる。一実施形態において、γゼインのProXドメイン中のPPPEPEn配列は、配列番号:12中に記載される配列を含むか、それからなるか、または本質的になる。天然に存在しない反復配列モチーフ複数可は、γゼインの反復ドメインおよび/またはProXドメインの5’末端または3’末端に配置することができる。天然に存在しない反復配列モチーフ複数可は、γゼインの反復ドメインおよび/またはProXドメインの5’末端および3’末端に配置することができる。好適な実施形態において、天然に存在しない反復配列モチーフ複数可は、γゼインの反復ドメインおよび/または、ProXドメイン内に配置される。好適には、前記植物細胞は、融合タンパク質をコードする核酸の非存在下においてタンパク質顆粒を産生しない。好適には、タンパク質顆粒誘導配列は、融合タンパク質を植物細胞の小胞体に向けて導くペプチドをコードする配列をさらに含む。ペプチドは多くの場合リーダー配列またはシグナルペプチドと呼ばれ、融合タンパク質が発現される同じ植物または異なる植物からのものであり得る。シグナルペプチドの例は19残基のγゼインシグナルペプチド配列WO2004003207を参照されたい;19残基のαグリアジンのシグナルペプチド配列または21残基のγグリアジンシグナルペプチド配列例えば、PlantCell19935:443-450およびEMBOJ198436,1409-11415を参照されたいである。同様に機能する他の植物からのシグナルペプチドも文献中で報告される。シグナルペプチドはγゼインおよび/またはデオキシリボヌクレアーゼに対する天然のシグナルペプチドであり得る。シグナルペプチドをコードする核酸は、タンパク質のN末またはC末で発現されるように核酸コンストラクト中に配置され得る。一実施形態において、シグナルペプチドはN末で発現される。γゼインに対する実質的な相同性すなわち配列類似性または実質的な同一性を備えたバリアントも本明細書中に包含される。γゼインポリヌクレオチドのバリアントは、Genbankアクセッション番号NM_001111884において報告された配列に対して、少なくとも60、65、70、71、72、73、74、75、80、85、90、95、96、97、98、99または100の配列同一性を有することができる。この用語は、γゼインに対する実質的な相同性すなわち配列類似性または実質的な同一性を備えたγゼインの断片も包含する。γゼインバリアントは、γゼインの生物学的および/または免疫学的な活性を提示するバリアントであり得る。本明細書において使用される時、γゼインの生物学的活性という語句は、γゼインバリアントが、天然に存在するγゼインと実質的に同じかまたはそれに類似する少なくとも1つの生物学的活性を有することを意味する。本明細書において使用される時、γゼインの免疫学的活性という語句は、天然に存在するγゼインに特異的な抗体とγゼインバリアントが交差反応する能力を指す。γゼインのバリアントは生来のγゼインタンパク質のアミノ酸に加えてアミノ酸を含んでもよいか、または生来のγゼインタンパク質のすべてのアミノ酸を含まなくてもよい。バリアントは、アミノ酸残基の欠失、挿入または置換を有し、それはサイレントな変化を生み、機能的に等価なタンパク質をもたらし得る。物質の二次的結合活性が保持される限り、残基の極性、電荷、可溶性、疎水性、親水性、および/または両親媒性における類似性に基づいて、慎重なアミノ酸置換を行なうことができる。例えば、負に荷電したアミノ酸は、アスパラギン酸およびグルタミン酸を含み;正に荷電したアミノ酸は、リジンおよびアルギニンを含み;類似の親水性値を有する非荷電性極性頭部基を備えたアミノ酸は、ロイシン、イソロイシン、バリン、グリシン、アラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、フェニルアラニンおよびチロシンを含む。保存的置換は、例えば以下の表に従って行なうことができる。第2のカラムにおける同じブロック中のアミノ酸、および好ましくは第3のカラムにおける同じ行中のアミノ酸は、互いに置換することができる。γゼインはγゼインタンパク質の断片であり得、前記断片はタンパク質顆粒の形成を植物において誘導するタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む。したがって、一例として、γゼインは、タンパク質γゼインの反復ドメインのすべてもしくは一部またはProXドメインのすべてもしくは一部をコードし得る。一実施形態において、タンパク質顆粒の形成を植物において誘導するタンパク質はトウモロコシγゼインである。別の実施形態において、タンパク質顆粒の形成を植物において誘導するタンパク質は、配列番号:3中に記載される核酸配列を含むか、またはそのバリアント、断片もしくホモログである。別の実施形態において、タンパク質顆粒の形成を植物において誘導するタンパク質は、配列番号:4中に記載されるアミノ酸配列を含むか、またはそのバリアント、断片もしくホモログである。別の実施形態において、γゼインの断片のアミノ酸配列は、配列番号:5中に記載される配列を含むか、またはそのバリアント、断片もしくはホモログである。好適には、前記植物細胞は、融合タンパク質をコードする核酸の非存在下においてタンパク質顆粒を産生しない。好適には、核酸配列は、DNaseおよびγゼインを含む融合タンパク質が植物細胞において発現されるように、互いに作動可能に連結される。一実施形態において、核酸分子は、5’末端でDNaseおよび3’末端でγゼインを含む。別の実施形態において、核酸分子は、3’末端でDNaseおよび5’末端でγゼインを含む。好適には、核酸分子は、タンパク質顆粒の形成を植物において誘導する核酸配列とDNaseをコードする核酸配列との間にリンカー配列を含む。前記リンカー配列はそれに作動可能に連結することができる。一実施形態において、リンカー配列は、アミノ酸リンカー中の1つまたは複数のペプチド結合が特異的に切断され得るアミノ酸リンカーをコードする。したがって、それは、互いから2つのタンパク質を分離することができるように、酵素またはインテインおよび同種のもののための認識部位として機能することができる。リンカーは、1つまたは複数のペプチド結合を切断できる任意の構成要素によって特異的に切断することができる。有利なことには、リンカーは融合タンパク質からのDNaseの分離を可能にし、続いて所望されるならばDNaseの精製を可能にし、それによって実質的に均質の組換えDNaseタンパク質が提供される。好適には、DNaseは内部で切断されず、したがってDNaseの所望されない断片は生じない。好適には、DNaseは、3、2または1以下の残存するアミノ酸がDNaseのN末またはC末で残るように切断される。好適には、DNaseは、残存するアミノ酸がDNaseのN末またはC末で残らないように切断される。一実施形態において、エンテロキナーゼはDNaseを内部で切断するので、融合タンパク質はエンテロキナーゼで切断されない。融合タンパク質を切断してDNaseを放出する好ましい方法は、融合パートナーのN末がアミノ酸リンカーを介してDNaseのC末へ連結され、アミノ酸リンカー中でその中のペプチド結合は特異的に切断することができ、アミノ酸リンカーは融合タンパク質中の他のところに現われないようなやり方で融合タンパク質をデザインすることである。このアプローチは、特異的アミノ酸配列特異的認識配列等への参照によって切断手段を選択することができるという長所を有する。リンカーは、1つまたは複数のペプチド結合の特異的切断を導くのに必要な絶対最小値以上の配列を含むことができる。リンカーは2つの核酸配列の間の結合の結果として生成することができる。この実施形態において、各々の配列は、ライゲーションされて切断可能リンカー切断可能認識部位等を形成できる多数のヌクレオチドを含む。プロテアーゼを使用してリンカー中の1つまたは複数のペプチド結合を特異的に切断することができる。プロテアーゼはAla-Cエンドプロテアーゼであり得る。別の実施形態において、プロテアーゼは黄色ブドウ球菌のプロテアーゼV8として公知のGlu-Cエンドプロテアーゼである。このプロテアーゼは、グルタミン酸残基のC末ペプチド結合を選択的に切断するセリンプロテアーゼである。プロテアーゼは、グルタミン酸残基よりも100~300倍遅い速度でアスパラギン酸残基で切断する。別の実施形態において、プロテアーゼはTEVプロテアーゼである。TEVプロテアーゼは、タバコエッチウイルス中で見出される高度に部位特異的システインプロテアーゼである。このプロテアーゼの至適切断認識部位は配列Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly/Serであり、切断はGln及びGly/Ser残基との間で起こる。したがって、好適なリンカーの非限定的例は、Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly/Ser、Glyx式中xは2、3、4、5、6、7、8、9または10以上である、またはGly4Sery式中yは2、3、4、5、6、7、8、9または10以上であるを含む。一実施形態において、リンカーはGly4である。別の実施形態において、リンカーはGly4Ser3である。さらなる実施形態において、DNaseをコードする配列は、前記リンカーの3’末端に位置する。他の実施形態によれば、タンパク質分解によらない手段を2つのタンパク質の分離に使用することができる。したがって、例えば、インテインは使用することができる。多様な異なるインテインは当該技術分野において公知であり、切断は定義された条件還元条件等下で誘導され得る。したがって一実施形態によれば、アミノ酸リンカーはインテインをコードすることができる。インテインは、例えば様々な細菌種Synechocystis属の種またはMycobacteriumxenopi等のMycobacterium属の種等に由来するものであり得る。インテインは、Saccharomycescerevisiae等のSaccharomyces属の種から由来する、例えばSaccharomycescerevisiaeの液胞膜ATPaseインテインであり得る。一実施形態において、インテインはMycobacteriumxenopiジャイレースAインテインである。化学物質も融合タンパク質からのDNaseの分離に使用することができ、その事例においてアミノ酸リンカーは必要とされなくてもよい。本明細書において記載される核酸およびアミノ酸配列は植物に至適化された配列であり得る。さらなる実施形態によれば、本発明の方法で使用される核酸コンストラクトは、iタンパク質顆粒の形成を植物において誘導するタンパク質であって、任意で1つまたは複数の天然に存在しない反復配列モチーフを含む前記タンパク質をコードする第1の核酸配列と;任意でアミノ酸リンカー中のペプチド結合が特異的に切断され得るアミノ酸リンカーをコードする第2の核酸配列と;DNaseをコードする第3の核酸配列と;ii前記核酸配列の転写を調節する調節性ヌクレオチド配列とを含み、前記配列は互いに任意で作動可能に連結される。したがって、前記核酸配列の転写を調節する様々な調節性ヌクレオチド配列も含まれ得る。これらは、栄養組織または生殖組織において等の植物発生の間の特異的時間の特定の細胞または組織においてのみ活性のある転写制御エレメントを含む。以下で記載されるように、かかるプロモーターは誘導可能プロモーターであり得る。1つのかかる例は、典型的には上流に配置され、二本鎖DNA断片に作動可能に連結されるポリヌクレオチドエレメント/配列を指すプロモーターである。好適なプロモーターは、転写複合体RNAポリメラーゼおよび様々な因子を含むの動員によって核酸配列の転写を活性化してRNA合成の開始を可能にするだろう。プロモーターは生来の遺伝子に近位の領域に完全に由来し得るか、または異なる生来のプロモーターに由来する異なるエレメントまたは合成DNAセグメントから構成され得る。一実施形態によれば、組織特異的発現を使用することができ、特定の組織における1つまたは複数のポリヌクレオチドの発現が好ましいとき有利だろう。発生調節下の組織特異的プロモーターの例は、栄養組織例えば根または葉または生殖組織果実、胚珠、種子、花粉、雌蕊、花または任意の胚組織等等の特定の組織のみまたは主にその組織のみにおける転写を開始することができるプロモーターを含む。生殖組織に特異的プロモーターは、例えば、葯特異的、胚珠特異的、胚特異的、内乳特異的、珠皮特異的、種子および種子外皮特異的、花粉特異的、花弁特異的、萼片特異的、またはその組み合わせであり得る。好適な葉特異的プロモーターは、C4植物トウモロコシからのピルビン酸正リン酸ジキナーゼPPDKプロモーター、トウモロコシからのcab-m1Ca2プロモーター、Arabidopsisthalianaのmyb関連遺伝子プロモーターAtmyb5、リブロース二リン酸カルボキシラーゼRBCSプロモーター例えば、葉および光生育実苗において発現されるトマトRBCS1、RBCS2およびRBCS3A遺伝子、発達中のトマト果実において発現されるRBCS1およびRBCS2また葉身および葉鞘における葉肉細胞においては高いレベルでほとんどもっぱら発現されるリブロース二リン酸カルボキシラーゼプロモーターを含む。好適な老化特異的プロモーターは、果実の成熟、老化、および葉の離脱の間に活性のあるトマトプロモーター、システインプロテアーゼをコードする遺伝子のトウモロコシプロモーターを含む。好適な葯特異的プロモーターを使用することができる。当業者に公知の好適な根に優先的なプロモーターを選択することができる。好適な種子に優先的なプロモーターは、種子特異的プロモーター種子貯蔵タンパク質のプロモーター等の種子発生の間に活性のあるそれらのプロモーター、および種子発芽プロモーター種子発芽の間に活性のあるそれらのプロモーターの両方を含む。かかる種子に優先的なプロモーターは、Cim1サイトカイニン誘導メッセージ;milpsミオイノシトール-1-リン酸シンターゼ;Zm-40としても公知のmZE40-2;nuclc;およびcelAセルロース合成酵素を含むが、これらに限定されない。Glob-1は胚特異的プロモーターである。双子葉植物については、種子特異的プロモーターは、マメβファセオリン、ナピン、βコングリシニン、ダイズレクチン、クルシフェリンおよび同種のものを含むが、これらに限定されない。単子葉植物については、種子特異的プロモーターは、トウモロコシ15kDaゼインプロモーター、22kDaゼインプロモーター、27kDaゼインプロモーター、gゼインプロモーター、27kDaγゼインプロモーターgzw64Aプロモーター等、Genbankアクセッション番号S78780を参照、waxyプロモーター、シュランケン1プロモーター、シュランケン2プロモーター、グロブリン1プロモーターGenbankアクセッション番号L22344を参照、Itp2プロモーター、cim1プロモーター、トウモロコシend1およびend2プロモーター、nuc1プロモーター、Zm40プロモーター、eep1およびeep2;lec1、チオレドキシンHプロモーター;mlip15プロモーター、PCNA2プロモーター;ならびにシュランケン2プロモーターを含むが、これらに限定されない。誘導可能プロモーターの例は、病原体攻撃、嫌気条件、高温、光、渇水、低温または高塩濃度に応答性のプロモーターを含む。病原体誘導可能プロモーターは病原性関連タンパク質PRタンパク質からのものを含み、病原体による感染に続いて誘導される例えばPRタンパク質、SARタンパク質、β-1,3-グルカナーゼ、キチナーゼ。植物プロモーターに加えて、他の好適なプロモーターは、細菌起源例えば、オクトピンシンターゼプロモーター、ノパリンシンターゼプロモーターおよびTiプラスミドに由来する他のプロモーターに由来し得るか、またはウイルスプロモーター例えば、カリフラワーモザイクウイルスCaMVの35Sおよび19SRNAプロモーター、タバコモザイクウイルスの構成的プロモーター、カリフラワーモザイクウイルスCaMV19Sおよび35Sプロモーター、またはゴマノハグサモザイクウイルス35Sプロモーターに由来し得る。調節配列は植物において機能的な転写終結配列も含むことができる。調節配列は植物において機能的な翻訳エンハンサーも含むことができる。エンハンサーは、転写調節タンパク質転写アクチベーター等を動員して、プロモーター活性の増加によって転写活性化を促進することができる核酸配列である。好適なエンハンサーは、対象となる生来のプロモーターに近位の領域相同なソースに由来することができるか、または非生来のコンテキスト異種のソースに由来することができ、対象となる任意のプロモーターに作動可能に連結してプロモーターの活性または組織特異性を促進する。いくつかのエンハンサーは転写単位の向きに関して任意の向きで作動させることができる。例えば、エンハンサーは、プロモーターおよび核酸コンストラクトを含む転写単位の上流または下流に配置することができる。一実施形態において、DNaseは植物の葉において発現される。別の実施形態において、植物または植物材料葉等は、少なくとも導入の5、6または7日後に収穫される。核酸配列、核酸コンストラクトまたはベクターおよび同種のものは、さらなる実施形態において、例えばウイルス起源の遺伝子サイレンシングの抑制因子をコードする核酸配列を含む。一実施形態において、遺伝子サイレンシングの抑制因子は、ハーフェル川ウイルスHaRV、西洋ナシ潜在ウイルスPeLV、トルコギキョウ壊死ウイルス、ブドウアルジェリア潜在ウイルス、テンジクアオイ壊死スポットウイルスPeNSV、シンビジウムリングスポットウイルスCymRSV、アーティチョークモトルドクリンクルウイルスmottledcrinklevirusAMCV、カーネーションイタリアンリングスポットウイルスCIRV、レタス壊死スタントウイルス、コメ黄色斑紋ウイルスRYMV、ジャガイモXウイルスPVX、アフリカンキャッサバモザイクウイルスACMV、キュウリモザイクウイルスCMV、キュウリ壊死ウイルスCNV、ジャガイモウイルスYPVY、タバコエッチウイルスTEV、およびトマトブッシースタントウイルスTBSVまたはその2つ以上の組み合わせからなる群から選択されるウイルスのものである。本発明において使用することができる遺伝子サイレンシングの抑制因子の例は、コメ黄色斑紋ウイルスRYMVのp1タンパク質、ジャガイモXウイルスPVXのp25タンパク質、アフリカンキャッサバモザイクウイルスACMVのAC2タンパク質、キュウリモザイクウイルスCMVの2bタンパク質、キュウリ壊死ウイルスCNVの19kDaのp19タンパク質、ジャガイモウイルスYPVY、タバコエッチウイルスTEVおよびトマトブッシースタントウイルスTBSVのヘルパー成分プロテイナーゼHcProを含むが、これらに限定されない。一実施形態において、遺伝子サイレンシングの抑制因子はタバコエッチウイルスTEVのHcProである。別の実施形態において、遺伝子サイレンシングの抑制因子はトマトブッシースタントウイルスTBSVのp19タンパク質である。したがってさらなる実施形態において、タンパク質顆粒の形成を植物において誘導するタンパク質をコードし、任意で天然に存在しない反復配列モチーフをコードする核酸配列をさらに含む第1の核酸配列と;DNaseをコードする第2の核酸配列と;任意でアミノ酸リンカー中のペプチド結合が特異的に切断され得るアミノ酸リンカーをコードする第3の核酸配列とを;前記第1の核酸配列、第2の核酸配列および第3の核酸配列が互いに作動可能に連結されて、含み、任意で前記核酸配列複数可の転写を調節する調節性ヌクレオチド配列および任意で好適にはウイルス起源の遺伝子サイレンシングの抑制因子をコードする発現可能な核酸を含む、核酸コンストラクトが提供される。代替の実施形態において、遺伝子サイレンシングの抑制因子をコードする発現可能な核酸は、植物または植物細胞に導入され、DNaseも産生している植物または植物細胞において共発現される、分離した第2の核酸分子または第2の核酸の一部であり得る。組換えDNaseの発現のために使用される植物宿主細胞は、植物に由来または由来可能であり得るか、または植物の外部で培養された培養植物細胞であり得る。したがって一実施形態において、植物は、植物細胞invitroで成長させた植物細胞または細胞のクランプ等の培養でまたは植物の外部で成長させた植物細胞等である。植物の非限定例は、単子葉植物および双子葉植物作物植物、観賞植物、および非栽培植物または野生植物等を含む。さらなる例は、作物植物特にヒト食品または動物食物のために使用される作物植物、木材またはパルプを産生する樹木、野菜植物、果実植物および観賞植物等の商業用または農業用に興味を持たれる植物を含む。植物単子葉植物および双子葉植物等の中への1つまたは複数の核酸分子の導入例えば、形質転換またはインフィルトレーションのための技法は、当該技術分野において公知である。任意の方法を使用して、植物の中へ核酸分子複数可、ベクター、コンストラクトおよび同種のものを導入することができる。一例として、それらは、コンストラクト複数可によりコートし微粒子を用いる微粒子銃または遺伝子銃の技法、アグロバクテリウム媒介性形質転換例えば、A.radiobacter、A.rhizogenes、A.rubiまたはA.tumefaciensを使用して、ウイルスベクター媒介性形質転換、電気穿孔およびアグロバクテリウム細胞によるインフィルトレーションアグロインフィルトレーションとも称されるによって植物の中へ導入することができる。一実施形態において、植物細胞のアグロバクテリウム媒介性形質転換が使用される。別の実施形態において、アグロインフィルトレーションを使用して、植物全体、インタクトな植物またはその一部の中へ核酸を導入する。アグロインフィルトレーションは当該技術分野において公知の技法および機器によって減圧または真空下で実行することができる。植物の中への核酸の導入は、核酸によってコードされたタンパク質の安定した発現を生じ得る。典型的には、安定した発現は、トランスジェニック植物を生じるように宿主ゲノムの中への核酸の組み込みをもたらし、核酸は次世代に受け渡されるだろう。植物の中への核酸の導入は、核酸によってコードされたタンパク質の一過性発現を生じ得る。一過性発現は、必ずしも宿主ゲノムの中への核酸の組み込みに依存しない。典型的には、組換えにより産生されたタンパク質を回収するために植物部分が収穫される前に、アグロバクテリウム細胞によりインフィルトレーションしたタバコ植物を、5、10、15、または20日以上の間インキュベーションする。発現の両方の形態は本発明によって意図される。任意で選択可能なマーカー遺伝子を用いるならば、核酸が導入された植物をインキュベーションし、選択下で子孫を得ることができる。これらの子孫を使用してトランスジェニック種子を調製するか、またはあるいは他の植物と交配することができる。かかる子孫から得られた種子を、発芽させ、培養し、もともと導入された核酸を含む子孫の後続の世代の調製に使用することができる。植物からの未成熟胚または胚発生カルスを出発材料として使用することができる。これらの技法は当業者にルーチンかつ周知である。一旦植物が成熟すれば、次いでヌクレオチド配列が発現される組織は収穫され、本明細書において記載される方法を使用してそれから回収される。いくつかの実施形態において、植物の中へ核酸を導入する方法は植物をより健全でなくし、その場合にはその生存を延長しようとする条件下で植物をインキュベーションすることが所望され得る。いくつかの実施形態によれば、核酸の導入後の5、10、15、または20日以上後に植物組織を収穫することが所望されるだろう。例えば、安定した植物形質転換は以下のように実行することができる。ベクターはAgrobacteriumtumefaciensの中へ移行される。タバコNicotianabenthamianaまたはN.tabacumの葉片を、Draperetal.1988PlantGeneticTransformationandGeneExpression.ALaboratoryManualDraper,J.、Scott,R.、Armitage,P.およびWalden,R.編、BlackwellScientificPublications中の方法に従って形質転換する。再生させた植物を200mg/Lのカナマイシンを含む培地上で選択し、温室へ移行させる。最も高い導入遺伝子産物レベルを有する形質転換されたタバコ植物を培養して、T1世代を得る。発達した葉約12cm長を収穫し、直ちに液体窒素により凍結し、追加実験のために-80°Cで保存する。植物宿主細胞は、穀類作物植物コムギ、カラスムギ、オオムギ、トウモロコシ、ライムギ、ライコムギ、コメ、キビ、ソルガム、キノア、アマランサスおよびソバ等;飼料作物植物アルファルファ、カラスノエンドウ、クローバおよび同種のものを含む飼料用草および飼料用双子葉植物等;脂肪種子作物植物綿、ベニバナ、ヒマワリ、ダイズ、キャノーラ、ナタネ、アマ、ピーナッツおよびアブラヤシ等;樹木の木の実クルミ、カシュー、ヘーゼルナッツ、ピーカン、アーモンドおよび同種のもの等;サトウキビ、ココナッツ、ナツメヤシ、オリーブ、テンサイ、茶およびコーヒー;木材またはパルプを産生する樹木;マメ科植物例えばマメ、エンドウ、ヒラマメ、アルファルファ、ピーナッツ、レタス、アスパラガス、アーティチョーク、セロリ、ニンジン、ラディッシュ、アブラナ科植物例えばキャベツ、ケール、カラシナおよび他の葉が多いアブラナ科植物、ブロッコリ、カリフラワー、メキャベツ、カブ、コールラビ、ウリ科植物例えばキュウリ、メロン、夏カボチャ、冬カボチャ、ネギ科植物例えばタマネギ、ニンニク、リーキ、エシャロット、チャイブ、ナス科植物のメンバー例えばトマト、ナス、ジャガイモ、コショウ、ホオズキ、およびアカザ科の植物のメンバー例えばビート、フダンソウ、ホウレンソウ、キノア、アマランサス;リンゴ、西洋ナシ、柑橘類例えばオレンジ、ライム、レモン、グレープフルーツおよび他のもの、核果例えばアプリコット、モモ、プラム、ネクタリン、バナナ、パイナップル、ブドウ、キーウィフルーツ、パパイア、アボカドおよびベリー等の果実作物植物;ならびに観賞用顕花植物、観賞用樹木および低木、観賞用地被植物ならびに観賞用草を含む観賞用植物であり得る。双子葉植物のさらなる例は、キャノーラ、綿、ジャガイモ、キノア、アマランサス、ソバ、ベニバナ、ダイズ、テンサイおよびヒマワリ、より好適にはダイズ、キャノーラおよび綿を含むが、これらに限定されない。単子葉植物のさらなる例は、コムギ、カラスムギ、オオムギ、トウモロコシ、ライムギ、ライコムギ、コメ、観賞用草および飼料草、ソルガム、キビならびにサトウキビを含むが、これらに限定されない。植物宿主細胞は、以下の科のうちの1つからの種を含む単子葉植物もしくは双子葉植物またはそれらの植物細胞システムであり得るかまたはそれらに由来し得る。Acanthaceae、Alliaceae、Alstroemeriaceae、Amaryllidaceae、Apocynaceae、Arecaceae、Asteraceae、Berberidaceae、Bixaceae、Brassicaceae、Bromeliaceae、Cannabaceae、Caryophyllaceae、Cephalotaxaceae、Chenopodiaceae、Colchicaceae、Cucurbitaceae、Dioscoreaceae、Ephedraceae、Erythroxylaceae、Euphorbiaceae、Fabaceae、Lamiaceae、Linaceae、Lycopodiaceae、Malvaceae、Melanthiaceae、Musaceae、Myrtaceae、Nyssaceae、Papaveraceae、Pinaceae、Plantaginaceae、Poaceae、Rosaceae、Rubiaceae、Salicaceae、Sapindaceae、Solanaceae、Taxaceae、Theaceae、またはVitaceae。好適な種は、属、Abelmoschus、Abies、Acer、Agrostis、Allium、Alstroemeria、Ananas、Andrographis、Andropogon、Artemisia、Arundo、Atropa、Berberis、Beta、Bixa、Brassica、Calendula、Camellia、Camptotheca、Cannabis、Capsicum、Carthamus、Catharanthus、Cephalotaxus、Chrysanthemum、Cinchona、Citrullus、Coffea、Colchicum、Coleus、Cucumis、Cucurbita、Cynodon、Datura、Dianthus、Digitalis、Dioscorea、Elaeis、Ephedra、Erianthus、Erythroxylum、Eucalyptus、Festuca、Fragaria、Galanthus、Glycine、Gossypium、Helianthus、Hevea、Hordeum、Hyoscyamus、Jatropha、Lactuca、Linum、Lolium、Lupinus、Lycopersicon、Lycopodium、Manihot、Medicago、Mentha、Miscanthus、Musa、Nicotiana、Oryza、Panicum、Papaver、Pennisetum、Petunia、Phalaris、Phleum、Pinus、Poa、Poinsettia、Populus、Rauwolfia、Ricinus、Rosa、Saccharum、Salix、Sanguinaria、Scopolia、Secale、Solanum、Sorghum、Spartina、Spinacea、Tanacetum、Taxus、Theobroma、Triticosecale、Triticum、Uniola、Veratrum、Vinca、Vitis、およびZeaのメンバーを含み得る。他の好適な種は、Panicum属の種、Sorghum属の種、Miscanthus属の種、Saccharum属の種、Erianthus属の種、Populus属の種、Andropogongerardiiビッグブルーステム、Pennisetumpurpureumエレファントグラス、Phalarisarundinaceaクサヨシ、Cynodondactylonバミューダグラス、Festucaarundinaceaヒロハノウシノケグサ、Spartinapectinataプレーリーコードグラス、Medicagosativaアルファルファ、Arundodonaxダンチク、Secalecerealeライムギ、Salix属の種ヤナギ、Eucalyptus属の種ユーカリ、Triticosecaleコムギ、タケ、Helianthusannuusヒマワリ、Carthamustinctoriusベニバナ、Jatrophacurcasジャトロファ、Ricinuscommunisキャスター、Elaeisguineensisヤシ、Linumusitatissimumアマ、Brassicajuncea、Betavulgarisテンサイ、Manihotesculentaキャッサバ、Lycopersiconesculentumトマト、Lactucasativaレタス、Musaparadisiacaバナナ、Solanumtuberosumジャガイモ、Brassicaoleraceaブロッコリ、カリフラワー、メキャベツ、Camelliasinensis茶、Fragariaananassaイチゴ、Theobromacacaoココア、Coffeaアラビカコーヒー、Vitisviniferaブドウ、Ananascomosusパイナップル、Capsicumannumトウガラシおよび甘トウガラシ、Alliumcepaタマネギ、Cucumismeloメロン、Cucumissativusキュウリ、Cucurbitamaxima西洋カボチャ、Cucurbitamoschata西洋カボチャ、Spinaceaoleraceaホウレンソウ、Citrulluslanatusスイカ、Abelmoschusesculentusオクラ、Solanummelongenaナス、Rosa属の種バラ、Dianthuscaryophyllusカーネーション、Petunia属の種ペチュニア、Poinsettiapulcherrimaポインセチア、Lupinusalbusルピナス、Uniolapaniculataカラスムギ、ベントグラスAgrostis属の種、Populustremuloidesアスペン、Pinus属の種マツ、Abies属の種モミ、Acer属の種モミジ、Hordeumvulgareオオムギ、Poapratensisブルーグラス、Lolium属の種ライグラスおよびPhleumpratenseオオアワガエリ、Panicumvirgatumスイッチグラス、Sorghumbicolorソルガム、スーダングラス、Miscanthusgiganteusススキ、Saccharum属の種エネルギー用サトウキビ、Populusbalsamiferaポプラ、Zeamaysトウモロコシ、Glycinemaxダイズ、Brassicanapusキャノーラ、Triticumaestivumコムギ、Gossypiumhirsutum綿、Oryzasativaコメ、Helianthusannuusヒマワリ、Medicagosativaアルファルファ、BetavulgarisテンサイまたはPennisetumglaucumトウジンヒエを含み得る。特に好適な実施形態において、宿主植物は、天然に存在する植物、突然変異植物、天然に存在しない植物またはトランスジェニックタバコ植物であり得るか、またはそれらに由来し得る。タバコ植物は、属Nicotianaの植物、およびN.rusticaおよび/またはN.tabacumを含むNicotiana属の様々な種を含む。他の種は、N.acaulis、N.acuminata、N.acuminata多花性変種、N.africana、N.alata、N.amplexicaulis、N.arentsii、N.attenuata、N.benavidesii、N.benthamiana、N.bigelovii、N.bonariensis、N.cavicola、N.clevelandii、N.cordifolia、N.corymbosa、N.debneyi、N.excelsior、N.forgetiana、N.fragrans、N.glauca、N.glutinosa、N.goodspeedii、N.gossei、N.hybrid、N.ingulba、N.kawakamii、N.knightiana、N.langsdorffii、N.linearis、N.longiflora、N.maritima、N.megalosiphon、N.miersii、N.noctiflora、N.nudicaulis、N.obtusifolia、N.occidentalis、N.occidentalis亜種hesperis、N.otophora、N.paniculata、N.pauciflora、N.petunioides、N.plumbaginifolia、N.quadrivalvis、N.raimondii、N.repanda、N.rosulata、N.rosulata亜種ingulba、N.rotundifolia、N.setchellii、N.simulans、N.solanifolia、N.spegazzinii、N.stocktonii、N.suaveolens、N.sylvestris、N.tabacum、N.thyrsiflora、N.tomentosa、N.tomentosiformis、N.trigonophylla、N.umbratica、N.undulata、N.velutina、N.wigandioides、およびN.xsanderaeが含まれる。栽培品種または選良栽培品種であるかまたはそれらに由来する植物宿主細胞の使用も意図される。品種または栽培品種の非限定例は以下のとおりである。BD64、CC101、CC200、CC27、CC301、CC400、CC500、CC600、CC700、CC800、CC900、Coker176、Coker319、Coker371Gold、Coker48、CD263、Denzizli、DF911、Galpaoタバコ、GL26H、GL350、GL600、GL737、GL939、GL973、HB04P、K149、K326、K346、K358、K394、K399、K730、KDH959、KT200、KT204LC、KY10、KY14、KY160、KY17、KY171、KY907、KY907LC、KTY14xL8LC、Karabaglar、LittleCrittenden、McNair373、McNair944、msKY14xL8、NarrowLeafMadole、NC100、NC102、NC2000、NC291、NC297、NC299、NC3、NC4、NC5、NC6、NC7、NC606、NC71、NC72、NC810、NCBH129、NC2002、NealSmithMadole、OXFORD207、Periqueタバコ、PVH03、PVH09、PVH19、PVH50、PVH51、R610、R630、R7-11、R7-12、RG17、RG81、RGH51、RGH4、RGH51、RS1410、Speight168、Speight172、Speight179、Speight210、Speight220、Speight225、Speight227、Speight234、SpeightG-28、SpeightG-70、SpeightH-6、SpeightH20、SpeightNF3、TI1406、TI1269、TN86、TN86LC、TN90、TN97、TN97LC、TND94、TND950、TRTomRossonMadole、TurkishSamson、VA309、VA359、DAC、Mata、Fina、PO2、BY-64、AS44、RG17、RG8、HB04P、BasmaXanthiBX2A、Coker319、Hicks、McNair944MN944、Burley21、K149、YakaJB125/3、KasturiMawar、NC297、Coker371Gold、PO2、Wislica、Simmaba、TurkishSamsun、AA37-1、B13P、BU21×HojaParado系統97の交配からのF4、Samsun、PO1、LAB21、LNKY171、TI1406、Basma、Galpao、Beinhart1000-1、またはPetico。N.tabacum栽培品種の非限定例は、AA37-1、B13P、XanthiMitchell-Mor、KTRD3Hybrid107、Bel-W3、79-615、SamsunHolmesNN、KTRDC2Hybrid49、KTRDC4Hybrid110、Burley21、BY-64、KTRDC5KY160SI、KTRDC7FCA、KTRDC6TN86SI、Coker371Gold、K149、K326、K346、K358、K394、K399、K730、KY10、KY14、KY160、KY17、KY8959、KY9、KY907、MD609、McNair373、NC2000、PG01、PG04、M066、PO1、PO2、PO3、RG11、RG17、RG8、SpeightG-28、TN86、TN90、VA509、AS44、BanketA1、BasmaDramaB84/31、BasmaIZichnaZP4/B、BasmaXanthiBX2A、Batek、BesukiJember、C104、Coker319、Coker347、CriolloMisionero、DACMataFina、Delcrest、Djebel81、DVH405、GalpaoComum、HB04P、HicksBroadleaf、KabakulakElassona、KasturiMawar、KutsageE1、KY14xL8、KY171、LABU21、McNair944、NC2326、NC71、NC297、NC3、PVH03、PVH09、PVH19、PVH2110、RedRussian、Samsun、Saplak、Simmaba、Talgar28、TurkishSamsun、Wislica、Yayaldag、NC4、TRMadole、PrilepHC-72、PrilepP23、PrilepPB156/1、PrilepP12-2/1、YakaJK-48、YakaJB125/3、TI-1068、KDH-960、TI-1070、TW136、SamsunNN、Izmir、Basma、TKF4028、L8、TKF2002、TN90、GR141、Basmaxanthi、GR149、GR153、PetitHavanaまたはXanthiNNである。植物宿主細胞を修飾して、組換えDNaseタンパク質の発現および/または活性を改善することができる。宿主細胞は、例えばDNaseの形成をさらに促進するシャペロンタンパク質を含むように修飾され得る。宿主細胞をリプレッサータンパク質を含むように修飾し、DNaseまたはさらにエンハンサータンパク質の発現をより効率的に調節して発現量を改善する。植物においてDNaseを産生する方法は、本明細書において記載されるようなDNase任意で前記植物において融合タンパク質としての発現を可能にする条件下で前記植物を成長させる第2の工程を含むことができる。したがって、DNaseポリペプチドは、任意で融合タンパク質としてポリペプチドを発現するのに好適な培養条件下で、核酸が導入された植物細胞をインキュベーション例えば培養することによって調製される。生じたポリペプチドは、植物細胞の小胞体に向けて導かれるか、その中で集合するか、またはその中に含まれるタンパク質顆粒の形態であり得る。DNase発現は、細胞中のDNaseポリペプチドをコードするmRNAの量の検出によって測定することができ、例えばPCRまたはノーザンブロットによって定量化することができる。サンプル中のDNaseポリペプチドの量における変化を測定する場合、抗DNase抗体の使用によるDNaseの検出を使用して、細胞におけるDNaseポリペプチドの量を公知の技法を使用して定量化することができる。あるいは、DNaseの生物学的活性を、本明細書において記載されるように測定することができる。様々な方法を利用して、融合タンパク質を含むタンパク質顆粒を回収することができる。組換えのタンパク質顆粒様集合体は、特定の融合タンパク質についてあらかじめ決定できる密度を有する。あらかじめ決定される密度は、典型的にはホモジネート中に存在する内在性宿主細胞タンパク質の実質的に全てを超え、典型的には約1.1~約1.35g/mlである。タンパク質顆粒の高密度は、組換え融合タンパク質が多量体として集合し、蓄積する一般的な能力のためであり得る。植物において発現される場合、タンパク質顆粒は、約1ミクロンの直径を備えた典型的には球状の形状で、周囲の膜を有する。典型的には密度によるタンパク質顆粒の回収は遠心分離機を使用して実行される。遠心分離は、塩例えば塩化セシウムまたは糖例えばショ糖等の密度差を提供する溶質の存在下において実行することができる。異なる密度の領域がホモジネート中に形成されて、タンパク質顆粒の比較的増強された濃度を含む領域およびタンパク質顆粒の比較的枯渇した濃度を含む領域を提供する。タンパク質顆粒の比較的増強された濃度の領域からタンパク質顆粒の枯渇した領域を分離し、それによって前記融合タンパク質を回収する。タンパク質顆粒を、回収することができるか、または1つまたは複数の試薬により処理することができるか、または本明細書において記載されるように融合タンパク質を含むタンパク質顆粒の単離の前に1つまたは複数の手順を行なうことができる。いくつかの実施形態において、回収されたタンパク質顆粒は、融合タンパク質を単離する必要性なしに、そのままで使用される。いくつかの実施形態において、ペレットの形態でタンパク質顆粒を回収するのに1つの遠心分離工程で十分であり得る。したがって、一例として、固形物および細胞残屑を取り除くのに約1500×g~約4500×gの間の遠心分離工程で十分であり得る。この工程は、例えば約6000×gのより速いスピードの遠心分離工程と組み合わせて、ペレット中の融合タンパク質を回収することができる。遠心分離工程は4°Cで約10分間行なうことができる。遠心分離工程の後に、任意で融合タンパク質を回収する精密濾過等の1つまたは複数のさらなる工程があり得る。この遠心分離工程複数可およびさらなる任意の工程の後に、界面活性剤を含む溶液中での1つまたは複数の洗浄工程が、融合タンパク質を含むタンパク質顆粒を濃縮および凝縮するさらなる任意の遠心分離工程と共にあり得、その後それらの可溶化がある。さらなる任意の遠心分離工程を洗浄の間に行なうことができる。一実施形態において、トリトンX-100等の非イオン性界面活性剤、好適には約1のトリトンX-100が使用される。別の実施形態において、さらなる遠心分離工程は4°Cで10分間約6000×gで行なわれ、洗浄の間に起こり得る。したがって、本発明の一実施形態に従って、方法は、c植物または植物材料から融合タンパク質を含むタンパク質顆粒を回収する追加の工程を含み、好ましくは工程cは、i植物材料を均質化する工程と;ii均質化された植物材料を遠心分離する工程と;ivペレットにした画分中の融合タンパク質を含むタンパク質顆粒を回収する工程とを含む。ペレットにした画分中に含まれ得る融合タンパク質を可溶化するために、様々なバッファーおよび試薬を使用することができる。一例として、DNaseを含む融合タンパク質は、界面活性剤および/または還元剤を含むバッファー水溶液中での周囲の膜の崩壊によって回収されたタンパク質顆粒から得ることができる。還元剤の例は、2-メルカプトエタノール、チオグリコール酸、チオグリコラート塩、ジチオスレイトール、亜硫酸塩または亜硫酸水素イオンを含む。界面活性剤の例は、ドデシル硫酸ナトリウム、イオン性洗剤例えばデオキシコール酸塩およびラウロイルサルコシン、非イオン性界面活性剤例えばツイーン20、ノニデットP-40およびオクチルグルコシドおよび両性イオン性界面活性剤例えばCHAPSを含む。好ましくはDNaseタンパク質を破壊せず、折り畳みをほどかないような条件が選択される。適切な可溶化条件を同定するために試験できる変数は、pH、塩、界面活性剤、還元剤に加えて、他の変数成分の比率、時間および温度等を含む。様々なバッファーはバッファーの所望されるpHに応じて用いることができる。pH範囲の制御に使用できるバッファー成分の非限定例は、酢酸塩、クエン酸塩、ヒスチジン、リン酸塩、アンモニウムバッファー酢酸アンモニウム等、コハク酸塩、MES、CHAPS、MOPS、MOPSO、HEPES、トリスおよび同種のものに加えて、これらのトリス-リンゴ酸-NaOHの組み合わせ、マレイン酸塩、クロロ酢酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、プロピオン酸塩、ピリジン、ピペラジン、ADA、PIPES、ACES、BES、TES、トリシン、ビシン、TAPS、エタノールアミン、CHES、CAPS、メチルアミン、ピペリジン、ホウ酸、炭酸、乳酸、ブタンアンジオイックbutaneandioic酸、ジエチルマロン酸、グリシルグリシン、HEPPS、HEPPSO、イミダゾール、フェノール、POPSO、コハク酸塩、TAPS、アミンベースベンジルアミン、トリメチルアミン、ジメチルアミン、エチルアミン、フェニルアミン、エチレンジアミンまたはモルホリンを含む。したがって、本発明の方法は、d融合タンパク質を含むペレットにした画分を可溶化するさらなる工程を含むことができる。任意で、次の方法工程の前に、調製物を例えば約20000×gで約10分間等遠心分離することができる。DNaseタンパク質を含む分離され可溶化された融合タンパク質を回収することができる。このステージで、DNaseタンパク質はそのままで使用することができる。好ましくは、DNaseタンパク質はさらに加工される。したがって、一実施形態において、方法は、前記融合タンパク質からDNaseを放出するさらなる工程を含む。融合タンパク質からのDNaseの切断は本明細書において記載される。切断後に、さらなる実施形態において、方法は、f切断/放出されたDNaseタンパク質を精製する追加の工程を含む。したがって一実施形態において、このようにして精製された組換えDNaseは、例えばSDS-PAGEまたはELISAによって決定されるような他のポリペプチドを実質的に不含有である。別の実施形態において、精製されたDNaseは、例えばSDS-PAGEまたはELISAによって決定されるように、100ppm未満の宿主タンパク質、および好適には90ppm未満、80ppm未満、70ppm未満、60ppm未満、50ppm未満、40ppm未満、30ppm未満、20ppm未満、10ppm未満、または5ppm未満の宿主タンパク質を含むDNase組成物であると判断される。本発明に従って得られるかまたは得ることができるDNaseタンパク質は、配列が由来する生来のタンパク質の少なくとも50、60または70、および最も好適には少なくとも80、90、95または100の特異的活性を有することができる。タンパク質精製は陽イオン交換樹脂を利用することができ、それは負に荷電しており、吸着剤または固相の上またはそれらを通って通過される水溶液中の陽イオンとの交換のための遊離陽イオンを有する。陽イオン交換樹脂の形成に好適な任意の負に荷電したリガンド、例えばカルボン酸塩、スルホン酸塩および以下で記載されるような他のものを使用することができる。商業的に入手可能な陽イオン交換樹脂は、例えば、スルホナートベースの基を有するもの例えばGEHealthcareからのMonoS、MiniS、Source15Sおよび3OS、SPSepharoseFastFlow商標、SPSepharoseHighPerformance、TosohからのToyopearlSP-650SおよびSP-650M、BioRadからのMacro-PrepHighS、PallTechnologiesからのCeramicHyperDS、TrisacrylMおよびLSSPおよびSpherodexLSSP;スルホエチルベースの基を有するもの例えばEMDからのFractogelSE、AppliedBiosystemsからのPorosS-10およびS-20;スルホプロピルベースの基を有するもの例えばTosohからのTSKGelSP5PWおよびSP-5PW-HR、AppliedBiosystemsからのPorosHS-20およびHS50;スルホイソブチルベースの基を有するもの例えばEMDからのFractogelEMDSO3;スルホキシエチルベースの基を有するもの例えばWhatmanからのSE52およびSE53およびExpress-IonS、カルボキシメチルベースの基を有するもの例えばGEHealthcareからのCMSepharoseFastFlow、BiochromLabsInc.からのHydrocellCM、BioRadからのMacro-PrepCM、PallTechnologiesからのCeramicHyperDCM、TrisacrylMCM、TrisacrylLSCM、MilliporeからのMatrxCellufmeC500およびC200、WhatmanからのCM52、CM32およびCM23およびExpress-IonC、TosohからのToyopearlCM-650S、CM-650MおよびCM-650C;スルホン酸およびカルボン酸ベースの基を有するもの例えばJ.T.BakerからのBAKEPVBONDカルボキシ-スルホン;カルボン酸ベースの基を有するもの例えばJ.TBakerからのWPCBXDowLiquidSeparationsからのDOWEXMAC-3、Sigma-AldrichからのAmberliteWeakCationExchangers、DOWEXWeakCationExchangerおよびDiaionWeakCationExchangersならびにEMDからのFractogelEMDCOO-;スルホン酸ベースの基を有するもの例えばBiochromLabsInc.からのHydrocellSP、DowLiquidSeparationsからのDOWEXFineMeshStrongAcidCationResin、J.T.BakerからのUNOsphereS、WPSulfonic、SartoriusからのSartobindS膜、Sigma-AldrichからのAmberliteStrongCationExchangers、DOWEXStrongCationおよびDiaionStrongCationExchanger;およびオルトリン酸塩ベースの基を有するもの例えばWhatmanからのPI1を含むが、これらに限定されない。タンパク質精製は陰イオン交換樹脂を利用することができ、それは正に荷電しており、したがってそれへ付着された1つまたは複数の正に荷電したリガンドを有する。陰イオン交換樹脂の形成に好適な吸着剤または固相に付加された任意の正に荷電したリガンド四級アミノ基等を使用することができる。商業的に入手可能な陰イオン交換樹脂は、AppliedBiosystemsからのDEAEセルロース、PorosPI20、PI50、HQ10、HQ20、HQ50、D50、SartoriusからのSartobindQ、そしてMonoQ、MiniQ、Source15Qおよび3OQ、Q、DEAEおよびANXSepharoseFastFlow、QSepharosehighPerformance、QAEHADEX商標およびFASTQHAROSE商標GEHealthcare、J.T.BakerからのWPPEI、WPDEAM、WPQUAT、BiochromLabsInc.からのHydrocellDEAEおよびHydrocellQA、BioradからのUNOsphereQ、Macro-PrepDEAEおよびMacro-PrepHighQ、PallTechnologiesからのCeramicHyperDQ、CeramicHyperDDEAE、TrisacrylMおよびLSDEAE、SpherodexLSDEAE、QMASpherosilLS、QMASpherosilMおよびMustangQ、DowLiquidSeparationsからのDOWEXFineMeshStrongBaseTypeIおよびTypeIIAnionResins、およびDOWEXMONOSPHERE77弱塩基陰イオン、MilliporeからのInterceptQ膜、MatrexCellufmeA200、A500、Q500およびQ800、EMDからのFractogelEMDTMAE、FractogelEMDDEAEおよびFractogelEMDDMAE、Sigma-AldrichからのAmberiite弱および強陰イオン交換体タイプIおよびII、DOWEX弱および強陰イオン交換体タイプIおよびII、Diaionの弱および強陰イオン交換体タイプIおよびII、Duolite、TosohからのTSKゲルQおよびDEAE5PWおよび5PW-HR、ToyopearlSuperQ-650S、650Mおよび650C、QAE-550Cおよび650S、DEAE-650Mおよび650C、WhatmanからのQA52、DE23、DE32、DE51、DE52、DE53、Express-IonDおよびExpress-IonQを含む。親和性クロマトグラフィーはタンパク質精製の他の方法であり、タンパク質が、通常、空間的相補性および1つまたは複数のタイプの化学的相互作用例えば結合部位での静電力、水素結合、疎水性力および分子間力の組み合わせとして、生物学的に特異的なリガンドに可逆的および特異的に結合される分離技法を指す。これらの相互作用は、分子の一般的特性等電点、疎水性またはサイズ等起因するものではないが、タンパク質とリガンドとの間の特異的な相互作用例えばエピトープに結合する免疫グロブリン、免疫グロブリンに結合するプロテインA、生物学的応答修飾因子とその細胞表面受容体との間の相互作用の結果である。多くの実例において、生物学的に特異的なリガンドはタンパク質またはポリペプチドでもあり、固相ビーズ等上に固定化され得る。混合モードイオン交換樹脂はタンパク質精製の他の方法であり、陽イオン性モイエティ、陰イオン性モイエティまたは疎水性モイエティにより共有結合で修飾される固相を指す。混合モードイオン交換樹脂の例は、BAKERBONDABX商標J.T.Baker;Phillipsburg、NJ、セラミックハイドロキシアパタイトタイプIおよびIIならびにフッ化物ハイドロキシアパタイトBioRad;Hercules、CAならびにMEPおよびMBIHyperCelPallCorporation;EastHills、NYを含む。疎水性電荷誘導クロマトグラフィーまたはHCICは、添加塩例えばリオトロピック塩の非存在下において穏やかな疎水性相互作用を介してイオン化リガンドに混合物中のタンパク質が結合するタイプのミックストモードクロマトグラフィープロセスである。ミックストモードは、結合のための1つのモードおよび溶出のための他のモードを指す。例えば、HCICにおいて有用な固相は、その分離性能のためにチオフィリック効果すなわち、チオフィリッククロマトグラフィーの特性を利用する、疎水性およびイオン化基の組み合わせた特性を有するリガンドを含む。したがって、本発明の方法において使用される吸着剤は、イオン化リガンドを含み、中性生理的または弱酸性のpH例えば約pH5~10、好ましくは約pH6~9.5で穏やかに疎水性である.このpH範囲で、リガンドの大部分は非荷電であり、穏やかな非特異的疎水性相互作用によってタンパク質を結合する。pHが減少するにつれて、リガンドは電荷を獲得し、疎水性結合はpHシフトに起因して溶質への静電荷反発作用によって破壊される。HCICで使用される好適なリガンドの例は、任意のイオン化芳香族または複素環構造例えば2-アミノメチルピリジン、3-アミノメチルピリジンおよび4-アミノメチルピリジン、2-メルカプトピリジン、4-メルカプトピリジンまたは4-メルカプトエチルピリジン等のピリジン構造を有するもの、メルカプト酸、メルカプトアルコール、イミダゾリルベースのもの、メルカプトメチルイミダゾール、2-メルカプトベンズイミダゾール、アミノメチルベンズイミダゾール、ヒスタミン、メルカプトベンズイミダゾール、ジエチルアミノプロピルアミン、アミノプロピルモルホリン、アミノプロピルイミダゾール、アミノカプロン酸、ニトロヒドロキシ安息香酸、ニトロチロシン/エタノールアミン、ジクロロサリチル酸、ジブロモチラミン、クロロヒドロキシフェニル酢酸、ヒドロキシフェニル酢酸、チラミン、チオフェノール、グルタチオン、重硫酸塩、および色素を含み、その誘導体を含む。当該技術分野において記載されるDNaseを精製する方法も使用することができる。一例として、Biotechnol.Letters2006284:215-21は、コンカナバリンAおよびコムギ胚芽凝集素混合物-アガロースカラムを使用するDNaseIのレクチン親和性および脱グリコシル化分析による単工程精製を記載する。DNaseの精製は、J.Biol.Chem.248:1489-14951973、J.Mol.Biol.192:605-6321986;J.Mol.Biol.221:645-6671991、J.Biol.Chem.261:16006-160111986およびJ.Biol.Chem.261:16012-160171986中にも記載されている。一実施形態において、植物中のDNaseを産生する方法は、aタンパク質顆粒の形成を植物において誘導するタンパク質をコードする核酸配列を含むか、それからなるか、または本質的になる核酸コンストラクトと;DNaseをコードする核酸配列とが、前記核酸配列が互いに作動可能に連結されて、導入された植物をインキュベーションする工程と;b融合タンパク質としてのDNaseの発現を前記植物において可能にする条件下で前記植物を成長させる工程と;c植物から融合タンパク質を含むタンパク質顆粒を回収する工程と;d融合タンパク質を含むペレットにした画分を可溶化する工程と;e前記融合タンパク質からDNaseを放出する工程と;f放出されたDNaseタンパク質を精製する工程とを含む。さらなる態様は、本明細書において記載されるように、前記核酸配列および前記核酸配列の転写を調節する調節性ヌクレオチド配列を含む核酸コンストラクトに関する。コンストラクトは、1つまたは複数のDNase核酸を含む二本鎖の組換えDNA断片であり得る。さらなる態様は、核酸配列、核酸分子または核酸コンストラクトを含むベクターに関する。好適なベクターは、染色体外の複製が可能なエピソーム円形の二本鎖DNAプラスミド等;直線状二本鎖DNAプラスミド;および任意の起源の他のベクターを含むが、これらに限定されない。ベクターは、細菌を形質転換するのにおよび/または植物の中へ核酸を導入するのに好適なベクターを含む。本明細書において記載された核酸配列、核酸分子またはコンストラクトを含むベクターは、細胞の中へ導入された場合、前記細胞のゲノムの中へ組込まれ、それが組込まれた染色体複数可と共に複製されるプラスミド、コスミドまたは植物ベクターであり得る。基本的な細菌のベクターまたは植物ベクターは、好適には広範囲の宿主範囲の複製開始点;選択可能なマーカー;およびアグロバクテリウム形質転換のためには植物染色体へのアグロバクテリウム媒介性移行のためのT-DNA配列を含む。植物ゲノムの中への異種配列の組み込みを可能にするのに好適な配列は、同様に使用することができる。これらは、トランスポゾン配列および同種のもの、相同組換えのためのCre/lox配列および宿主ゲノム断片に加えて、植物ゲノムの中へランダム挿入を可能にするTi配列を含み得る。プロモーターをベクターの中へ取り込んで、本明細書において記載される融合タンパク質を発現するのに特に有用であり得る発現ベクターを作成することができる。好適な発現ベクターは、染色体外の複製が可能なエピソーム円形の二本鎖DNAプラスミド等;直線状二本鎖DNAプラスミド;および任意の起源の他の機能的に等価な発現ベクターを含む。発現ベクターは、少なくともDNase核酸またはDNase核酸コンストラクトへ作動可能に連結されたプロモーターおよび同種のものを含む。プロモーターは、DNase核酸に直接連結されてもよいし、介在する核酸融合タンパク質の1つまたは複数の成分をコードする核酸等が中間にあってもよい。核酸配列、核酸コンストラクト、核酸ベクターおよび同種のものの調製において、その様々な断片は、異なる加工条件ライゲーション、制限酵素消化、PCR、invitroの突然変異誘発、リンカーおよびアダプター添加ならびに同種のもの等へかけることができる。したがって、ヌクレオチドのトランジション、トランスバージョン、挿入、欠失または同種のものを、DNaseの発現のためのコンストラクトにおいて用いられるDNA上で実行することができる。制限消化、クレノウ平滑断端処理、ライゲーションおよび同種のもののための方法は、当業者に周知であり、例えばManiatisetal.MolecularCloning:ALaboratoryManual1989ColdSpringHarborLaboratoryPress、ColdSpringHarbor、N.Y.中によって記載される。他の態様において、iタンパク質顆粒の形成を植物において誘導するタンパク質をコードするアミノ酸配列と;ii切断認識部位をコードするアミノ酸配列と;iiiDNaseをコードするアミノ酸配列とを、前記第1のアミノ酸配列、第2のアミノ酸配列および第3のアミノ酸配列が互いに作動可能に連結されて、含む、融合タンパク質が記載される。融合タンパク質は、本明細書において記載される核酸配列または核酸分子の植物細胞における発現産物である。融合タンパク質は、植物細胞において安定して小胞体由来タンパク質顆粒中に蓄積される。さらなる態様において、本明細書において記載される核酸配列、核酸コンストラクト、ベクターまたは融合タンパク質を含む植物または植物材料が記載される。さらなる態様において、本発明の方法によって、得られるかまたは得ることができるDNaseが記載される。本発明によって得られるかもしくは得ることができる組換えDNase、またはDNaseを含み所望される純度を有するタンパク質顆粒の処方は、任意の薬学的に許容されるキャリアー、賦形剤または安定剤Remington’sPharmaceuticalSciences第16版、Osol,A.編1980を参照と混合することによって、凍結乾燥処方または水溶液の形態で、保存のために調製することができる。許容可能なキャリアー、賦形剤または安定剤は、用いられた用量および濃度でレシピエントに無毒であり、バッファーリン酸塩、クエン酸塩および他の有機酸等;アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤;防腐剤オクタデシルジメチルベンジル塩化アンモニウム等;塩化ヘキサメトニウム;塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム;フェノール、ブチルアルコールまたはベンジルアルコール;メチルパラベンまたはプロピルパラベン等のアルキルパラベン;カテコール;レゾルシノール;シクロヘキサノール;3-ペンタノール;およびm-クレゾール等;低分子量約10残基未満ポリペプチド;タンパク質血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリン等;親水性ポリマーポリビニルピロリドン等;アミノ酸グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニンまたはリジン等;単糖、二糖類、および他の炭水化物グルコース、マンノースまたはデキストリンを含む;キレート試薬EDTA等;糖ショ糖、マンニトール、トレハロースまたはソルビトール等;塩形成カウンターイオンナトリウム等;金属錯体;または非イオン性界面活性剤ポリエチレングリコールPEG等を含む。組換えDNaseタンパク質は、PEG化または公知の方法を使用してポリエチレングリコールに結合することもできる。PEG化DNaseタンパク質はinvivoでより安定し、治療を必要とする哺乳動物に投与されたときに身体中で結果としてより長い半減期を有する。一般的には、医薬組成物は、他の薬学的に重要なポリペプチドのために使用されるものに類似する方法を使用して処方および投与することができる。組換えDNaseタンパク質は、凍結乾燥された形態で保存し、投与の直前に滅菌水により再構成し、静脈内に投与することができる。好ましくは、医薬処方は、治療される特定の条件のためのルーチンの用量力価測定実験によって決定される投薬量で投与されるだろう。本発明のさらなる態様は、組換えDNaseを含むかまたは産生する植物または植物材料産物に関する。好適には、前記植物または植物材料は、葉巻き、シガレットおよび無煙タバコ産物すなわち不燃物等の様々な喫煙に適した物品等の様々な消費可能な産物の中へ取り込まれる。以下の実施例は限定としてではなく例証として提供される。特別の指示の無い限り、本発明は、分子生物学、植物生物学および育種の従来の技法および方法を用いる。実施例1-材料および方法クローニングおよびインフィルトレーションγゼイン野生型遺伝子、その断片およびバリアントをコードするヌクレオチド配列を含む核酸コンストラクトの各々を、DNaseをコードする合成配列にライゲーションする。γゼインの断片またはバリアントが使用される場合、それが断片またはバリアント中に存在するものならば、核酸コンストラクトは、生来のγゼインシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列を5’末端でさらに含む。特定の実験については、プロテアーゼ切断部位を含むリンカーをコードする合成核酸配列もコンストラクト中に含まれ、γゼインとDNaseコード配列との間に配置される。DNaseのコード配列は植物における発現のために至適化されている。核酸コンストラクトは、min35Sプロモーターが核酸コンストラクトの発現をタバコ植物細胞において駆動する部位で、ベクターの中へクローン化される。クローン化された核酸コンストラクトを含むベクターを、Agrobacteriumtumafaciensの系統Agl1の中へ導入する。アグロバクテリウム細胞を、1.6を超えるOD600までロータリーシェーカー上で28°Cおよび250rpmで増殖させる。増殖後に、細菌を8000gおよび4°Cで15分間の遠心分離によって回収し、10mMMgCl2および5mM2-n-モルホリノ-エタンスルホン酸MESを含むインフィルトレーション溶液中に、最終的にpH5.6およびOD600=2で再懸濁する。植物Nicotianabenthamianaを通常の状態下で成長させ、個々の葉を注射器を使用して標準的な技法によってインフィルトレーションする。葉を慎重に裏返し、背軸側を曝露し、細菌懸濁液を含む1mL無針注射器を使用して、葉の細胞内空間を圧力インフィルトレーションする。インフィルトレーションの6~10日後に、葉ディスクをヒートシール可能なパウチ中に回収し、シールし、ドライアイスの層の間に少なくとも10分間置く。組換えタンパク質の抽出およびウエスタンブロット分析タバコ葉を液体窒素中で粉砕し、1グラムの新鮮葉材料につき抽出バッファー50mMトリスHClpH8、200mMジチオスレイトールDTTおよび任意のプロテアーゼ阻害剤アプロチニン、ペプスタチ、ロイペプチン、フッ化フェニルメチルスルホニルおよびE64[N-N-L-3-トランス-カルボキシオキシラン-2-カルボニル-L-ロイシル-アグマチン]を使用してホモジナイズする。ホモジネートを4°Cで30分間撹拌し、次いで15000rpm、30分、4°C2回遠心分離して不溶性物質を取り除く。Bradfordタンパク質分析Bio-Radを使用して全可溶性タンパク質を定量化する。タンパク質を15のSDSポリアクリルアミドゲル上で分離し、セミドライの装置を使用してニトロセルロース膜0.22ptMに移行させた。膜を、γゼイン特異的抗体Ludevidetal.1985PlantSci.41:41-48.によりインキュベーションし、ホースラディッシュペルオキシダーゼコンジュゲート抗体によりインキュベーションする。免疫反応性バンドを増感化学発光ECLウエスタンブロッティングシステム、Amershamによって検出する。ELISAアッセイELISAアッセイを、可溶性葉タンパク質抽出物および部分的に精製された融合タンパク質でのヒトDNaseI定量化のために行なう。マイクロタイタープレートMaxiSorp、NalgeneNuncInternationalに、リン酸緩衝生理食塩水pH7.5PBS中で希釈した可溶性タンパク質100μをロードし、4°Cで一晩インキュベーションする。ウェルを3回洗浄した後に、特異的結合部位を、PBS-T0.1ツイーン20を含むPBS中の3のウシ血清アルブミンBSAにより室温で1時間ブロックする。プレートをヒトDNaseI抗血清により2時間インキュベーションし、PBS-Tによる4回の洗浄後に、ペルオキシダーゼコンジュゲート二次抗体により2時間インキュベーションする。一次抗体および二次抗体を1BSAを含むPBS-T中で希釈する。PBS-Tにより大規模に洗浄した後に、酵素反応を基質バッファーを含む過酸化水素により37°Cで行なう。反応を10分後に2N硫酸により停止し、光学的濃度をMultiskanEX分光光度計Labsystemsを使用して450nmで測定する。植物抽出物中の抗原濃度をヒトDNaseI抗血清の使用によって得られた標準曲線から推定する。融合タンパク質の可溶化融合タンパク質を可溶化のために選択したバッファー中で室温で一晩インキュベーションする。実施例2-γゼイン-DNaseI融合タンパク質の発現レベルγゼイン-DNaseI融合タンパク質コンストラクトγゼイン-DNaseIを上記のように調製し、アグロバクテリウムアグロインフィルトレーションを使用してタバコ植物を形質転換する。全タンパク質を抽出し、γゼイン特異的抗体を使用してウエスタンブロットによって定量化する。γゼインのタグなしで同じ条件下で発現させたDNaseIを使用する対照実験も実行するhDNaseI。アグロインフィルトレーションイベントからの発現レベルは以下のとおりである。FW=フリーウェイト。これらの結果に基づいて、γゼイン-hDNaseIの発現はγゼインなしのヒトDNaseIの発現よりも高いと結論される。実施例3-γゼイン中の異なる天然に存在しない反復モチーフの分析。γゼイン中の異なる天然に存在しない反復モチーフを使用して、γゼイン-DNaseI融合コンストラクトを調製する。以下のコンストラクトを使用する。γゼインペプチドのみγゼイン-野生型;γゼイン-PPPVALn;γゼイン-PPPVELn;γゼイン-PPPAPAn;およびγゼインなし。コンストラクトを、アグロバクテリウムアグロインフィルトレーションを使用して、異なるタバコ植物に別々に形質転換する。3つの独立した形質転換を実行する。全タンパク質を抽出し、γゼイン特異的抗体を使用してウエスタンブロットによって定量化する。3つのアグロインフィルトレーションイベントからの平均発現レベルは以下のとおりである。結果をγゼイン野生型と比較して相対的定量化として示す。予想外に、ヒトDNaseIはγゼインなしに発現され、最も高いレベルで発現される。すべての他の天然に存在しない反復モチーフも、γゼイン野生型と比較して、発現上昇をもたらす。実施例4-DNase酵素アッセイ植物において発現されるDNaseのDNA加水分解活性を決定するために、2つの異なるプラスミド消化アッセイが使用される。第1のアッセイスーパーコイルDNA消化アッセイは、スーパーコイルの二本鎖pBR322プラスミドDNAから弛緩ニックの入った形態、直線状形態、および分解形態への転換を測定する。第2のアッセイ直線状DNA消化アッセイは、直線状二本鎖pBR322プラスミドDNAから分解形態への転換を測定する。DNase調製物を、スーパーコイルpBR322DNAまたはEcoRIで消化した直線状pBR322DNAのいずれかを含む溶液に添加し、サンプルを室温でインキュベーションする。様々な時間で、反応混合物のアリコートを取り出し、キシレンシアノール、ブロモフェノールブルーおよびグリセロールと共にEDTAの添加によってクエンチする。クエンチしたサンプルにおけるpBR322DNAの完全性を、0.8重量/体積アガロースゲル上でのサンプルの電気泳動によって解析する。電気泳動後に、エチジウムブロマイドの溶液によりゲルを染色し、ゲル中のDNAを紫外線によって可視化する。pBR322DNAのスーパーコイル形態、弛緩形態および直線状形態の相対量を決定する。本明細書において引用または記載される任意の公開は、本出願の出願日の前に開示される関連情報を提供する。本明細書における記述は、本発明者がかかる開示に先行する権利がないことの承認として解釈されるべきではない。上記の明細書中で言及された出版物はすべて、参照として本明細書に援用される。本発明の様々な修飾および変形は本発明の範囲および趣旨から逸脱せずに当業者に明らかであろう。本発明は特に好ましい実施形態に関して記載されたが、請求の範囲に記載される本発明は、かかる特定の実施形態に過度に限定されるべきでないことを理解すべきである。実際、細胞生物学、分子的生物学および植物生物学または関連する分野における当業者に明らかな、本発明の実行のために記載されるモードの様々な修飾は、以下の請求項の範囲内であることが意図される。配列の要約配列番号:1植物に至適化されたヒトDNaseIのDNA配列ctcaagattgctgctttcaacatccaaactttcggagagactaagatgtctaacgctactcttgtgtcctacatcgttcagattctctccagatacgatattgctcttgttcaggaagttagggattctcaccttactgctgtgggaaagcttcttgataacctcaatcaggatgctccagatacttaccactacgttgtgtctgaaccacttggaagaaactcctacaaagagcgttacctctttgtttaccgtccagatcaagtttctgctgtggattcctactactacgatgatggatgtgagccatgcggaaacgatactttcaatagagagccagctatcgttcgttttttcagtaggttcactgaagttcgtgagtttgctattgtgccacttcatgctgctccaggtgatgctgttgctgagattgatgctctctacgatgtgtaccttgatgttcaagagaagtggggacttgaggatgttatgctcatgggagatttcaatgctggatgctcttatgttaggccatctcagtggtcatctattaggctttggacttccccaactttccaatggcttatcccagattccgctgatacaactgctactccaactcattgtgcttacgataggattgtggtggctggaatgcttcttagaggtgctgttgttccagattctgctctcccattcaatttccaagctgcttacggactttctgatcaacttgctcaggctatttctgatcactacccagttgaggtgatgcttaagtga配列番号:2植物に至適化されたDNaseIのアミノ酸配列LKIAAFNIQTFGETKMSNATLVSYIVQILSRYDIALVQEVRDSHLTAVGKLLDNLNQDAPDTYHYVVLGRNSYKERYLFVYRPDQVSAVDSYYYDDGCEPCGNDTFNREPAIVRFFSRFTEVREFAIVPLHAAPGDAVAEIDALYDVYLDVQEKWGLEDVMLMGDFNAGCSYVRPSQWSSIRLWTSPTFQWLIPDSADTTATPTHCAYDRIVVAGMLLRGAVVPDSALPFNFQAAYGLSDQLAQAISDHYPVEVMLK配列番号:3ZeamaysγゼインのDNA配列Genbankアクセッション番号NM_0011118841gcaccagtttcaacgatcgtcccgcgtcaatattattaaaaaactcttacatttctttat61aatcaacccgcactcttataatctcttctctactactataataagagagtttatgtacaa121aataaggtgaaattatgtataagtgttctggatattggttgttggctccatattcacaca181acctaatcaatagaaaacatatgttttattaaaacaaaatttatcatatatcatatatat241atatatacatatatatatatatatataaaccgtagcaatgcacgggcatataactagtgc301aacttaatacatgtgtgtattaagatgaataagagggtatccaaataaaaaacttgttcg361cttacgtctggatcgaaaggggttggaaacgattaaatctcttcctagtcaaaattgaat421agaaggagatttaatctctcccaatccccttcgatcatccaggtgcaaccgtataagtcc481taaagtggtgaggaacacgaaacaaccatgcattggcatgtaaagctccaagaatttgtt541gtatccttaacaactcacagaacatcaaccaaaattgcacgtcaagggtattgggtaaga601aacaatcaaacaaatcctctctgtgtgcaaagaaacacggtgagtcatgccgagatcata661ctcatctgatatacatgcttacagctcacaagacattacaaacaactcatattgcattac721aaagatcgtttcatgaaaaataaaataggccggacaggacaaaaatccttgacgtgtaaa781gtaaatttacaacaaaaaaaaagccatatgtcaagctaaatctaattcgttttacgtaga841tcaacaacctgtagaaggcaacaaaactgagccacgcagaagtacagaatgattccagat901gaaccatcgacgtgctacgtaaagagagtgacgagtcatatacatttggcaagaaaccat961gaagctgcctacagccgtctcggtggcataagaacacaagaaattgtgttaattaatcaa1021agctataaataacgctcgcatgcctgtgcacttctccatcaccaccactgggtcttcaga1081ccattagctttatctactccagagcgcagaagaacccgatcgacaccatgagggtgttgc1141tcgttgccctcgctctcctggctctcgctgcgagcgccacctccacgcatacaagcggcg1201gctgcggctgccagccaccgccgccggttcatctaccgccgccggtgcatctgccacctc1261cggttcacctgccacctccggtgcatctcccaccgccggtccacctgccgccgccggtcc1321acctgccaccgccggtccatgtgccgccgccggttcatctgccgccgccaccatgccact1381accctactcaaccgccccggcctcagcctcatccccagccacacccatgcccgtgccaac1441agccgcatccaagcccgtgccagctgcagggaacctgcggcgttggcagcaccccgatcc1501tgggccagtgcgtcgagttcctgaggcatcagtgcagcccgacggcgacgccctactgct1561cgcctcagtgccagtcgttgcggcagcagtgttgccagcagctcaggcaggtggagccgc1621agcaccggtaccaggcgatcttcggcttggtcctccagtccatcctgcagcagcagccgc1681aaagcggccaggtcgcggggctgttggcggcgcagatagcgcagcaactgacggcgatgt1741gcggcctgcagcagccgactccatgcccctacgctgctgccggcggtgtcccccactgaa1801gaaactatgtgctgtagtatagccgctggctagctagctagttgagtcatttagcggcga1861tgattgagtaataatgtgtcacgcatcac配列番号:4配列番号:3の翻訳されたアミノ酸配列。MRVLLVALALLALAASATSTHTSGGCGCQPPPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHVPPPVHLPPPPCHYPTQPPRPQPHPQPHPCPCQQPHPSPCQLQGTCGVGSTPILGQCVEFLRHQCSPTATPYCSPQCQSLRQQCCQQLRQVEPQHRYQAIFGLVLQSILQQQPQSGQVAGLLAAQIAQQLTAMCGLQQPTPCPYAAAGGVPH配列番号:5γゼインの断片のアミノ酸配列MRVLLVALALLALAASATSTHTSGGCGCQPPPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHLPPPVHVPPPVHLPPPPCHYPTQPPRPQPHPQPHPCPCQQPHPSPCQ配列番号:6PPPAPAnのアミノ酸配列APAPPPAPAPPPAPAPPPAPAPPPAPAPPPAPAPPPAPAPPPA配列番号:7PPPEPEnのアミノ酸配列EPAPPPEPEPPPEPEPPPEPEPPPEPEPPPEPEPPPEPEPPPE配列番号:8PPPVELnのアミノ酸配列VELPPPVELPPPVELPPPVELPPPVELPPPVELPPPVEVPPPVE配列番号:9PPPVALnのアミノ酸配列VALPPPVALPPPVALPPPVALPPPVALPPPVALPPPVAVPPPVA配列番号:10PPPVTLnのアミノ酸配列VTLPPPVTLPPPVTLPPPVTLPPPVTLPPPVTLPPPVTVPPPVT配列番号:11PPPAPAnのアミノ酸配列PPPAPAPPPAPAPPPAPCPCPAPAPPPCP配列番号:12PPPEPEnのアミノ酸配列PPPEPEPPPEPEPPPEPCPCPEPEPPPCP"