エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストを含む組成物を用いた対象の処置を含む、対象においてアミロイド沈着を予防及び又は軽減する方法。対象においてアミロイド沈着を予防及び又は軽減するための、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストを含む組成物。対象においてアミロイド沈着を予防及び又は軽減するための医薬品の製造におけるエンドトキシンを含まないTLR4アゴニストを含む組成物の使用。エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストを含む組成物を用いた対象の処置を含む、対象においてアルツハイマー病を予防及び又は軽減する方法。アルツハイマー病を予防及び又は軽減するための、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニスト。アルツハイマー病を予防及び又は軽減するための医薬品の製造におけるエンドトキシンを含まないTLR4アゴニストの使用。処置した対象における空間記憶の改善によって評価される、請求項1~6のいずれか1項に記載の使用又は方法。アミロイドベータ斑の減少及び行動試験の双方によって評価される、請求項1~6のいずれか1項に記載の使用又は方法。処置が3DMPL又はMPLを用いたものである、請求項8に記載の使用又は方法。MPL又は3DMPLが水中油型エマルションと組み合わせたものである、請求項9に記載の方法又は使用。組成物が3DMPL、QS21及びリポソーム、例えばAS01Bを含む、請求項1~10のいずれか1項に記載の方法又は使用。組成物がベータアミロイド又はその断片若しくはミモトープを含有しない、請求項1~11のいずれか1項に記載の方法又は使用。組成物がアミノアルキルグルコサミニドホスフェートAGP、3DMPL、AS01B又は水中油型エマルションと組み合わせたAGPからなる、又は本質的になる、請求項1~12のいずれか1項に記載の方法又は使用。アミノアルキルグルコサミニドホスフェートAGP、3DMPL、AS01B又は水中油型エマルションと組み合わせたAGPからなる、又は本質的になる、医薬組成物。脳内のミクログリアの活性化を増加させるための、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストの使用。アミロイド沈着若しくはアルツハイマー病の予防及び又は軽減が、アミロイドベータの食作用の増加によるものである、請求項1~15のいずれか1項に記載の方法又は使用。アルツハイマー病の予防的処置及び治癒的処置の双方に対する緊急の必要性がある。ネズミ科モデルにより、免疫療法又はワクチン接種のアプローチは、AD用のワクチンを開発するのに実行可能であることが示されているMalmTMらNeurobiolDis18、134~142。本発明は以下に関するエンドトキシンを含まないTLR4アゴニストを含む組成物の有効量を用いた対象の処置を含む、対象においてアミロイド沈着を予防及び又は軽減する方法。対象においてアミロイド沈着を予防及び又は軽減するのに使用される、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストを含む組成物。対象においてアミロイド沈着を予防及び又は軽減するための医薬品の製造におけるエンドトキシンを含まないTLR4アゴニストの使用。エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストを含む組成物の有効量を用いた対象の処置を含む、対象においてアルツハイマー病を予防及び又は軽減する方法。アルツハイマー病を予防及び又は軽減するのに使用するための、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストを含む組成物。アルツハイマー病を予防及び又は軽減するための医薬品の製造におけるエンドトキシンを含まないTLR4アゴニストを含む組成物の使用。AGP、3DMPL、AS01b、又は水中油型エマルションと組み合わせたAGPからなる、又は本質的になる、医薬組成物を使用する、本発明の前述の全ての態様に記載される、アミロイド沈着及び又はアルツハイマー病の予防又は軽減のための方法。エンドトキシンを含まないTLR4アゴニスト及び薬学的に許容される添加剤からなる、又は本質的になる、医薬組成物。3DMPL及び薬学的に許容される添加剤からなる、又は本質的になる、医薬組成物。MPL及び薬学的に許容される添加剤からなる、又は本質的になる、医薬組成物。AS01B及び薬学的に許容される添加剤からなる、又は本質的になる、医薬組成物。AGP及び薬学的に許容される添加剤からなる、又は本質的になる、医薬組成物。本発明は、一般には、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストを含む、例えば、アミノアルキルグルコサミニドホスフェート、3DMPL又はMPLを含む、組成物を用いた対象の処置を含む、対象において、アミロイド沈着又はアルツハイマー病を予防及び又は軽減する方法に関する。本明細書中で使用される場合、アミロイドとは、体内に沈着されるいかなる不溶性線維性タンパク質凝集体をも包含する。アミロイド沈着は、器官特異的又は全身性であってもよい。本発明のこの態様によれば、沈着しやすいアミロイド形成的タンパク質としては、ベータタンパク質前駆体、プリオン、アルファシヌクレイン、タウ、ABri前駆体タンパク質、ADan前駆体タンパク質、アミリン、アポリポタンパク質AI、アポリポタンパク質All、リゾチーム、シスタチンC、ゲルソリン、タンパク質、心房性ナトリウム利尿因子、カルシトニン、ケラトエピテリン、ラクトフェリン、免疫グロブリン軽鎖、トランスチレチン、Aアミロイドーシス、ベータ2ミクログロブリン、免疫グロブリン重鎖、フィブリノーゲンアルファ鎖、プロラクチン、ケラチン、及びメジンが挙げられる。アミロイド沈着は、それ自体の実体として又はもう一つの疾患の結果として生じ得る。したがって、本発明の方法は、アミロイド形成的タンパク質の沈着に関連した、又はその結果として生じる、状態又は疾患を有する対象を治療するためにさらに使用され得る。こうした状態としては、アルツハイマー病、びまん性レビー小体病、ダウン症候群、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血、クロイツフェルトヤコブ病、ゲルストマンストロイスラーシャインカー病、致死性家族性不眠症、イギリス型家族性認知症、デンマーク型家族性認知症、家族性角膜アミロイドーシス、家族性角膜ジストロフィー、甲状腺髄様癌、インスリノーマ、2型糖尿病、限局性心房アミロイドーシス、下垂体アミロイドーシス、大動脈アミロイドーシス、形質細胞障害、家族性アミロイドーシス、老人性心アミロイドーシス、炎症に関連したアミロイドーシス、家族性地中海熱、透析に関連したアミロイドーシス、全身性アミロイドーシス、及び家族性全身性アミロイドーシスが挙げられるが、これらに限定されない。アルツハイマー病の治療又は予防は、本発明の好ましい特徴である。本発明は、対象において疾患を予防又は治療する方法に関する。一態様において、予防又は治療の対象は、アミロイド沈着を特徴とする疾患の症状を有するとすでに診断されていてもよい。一態様において、治療の対象は、アミロイド沈着を特徴とする疾患の症状を有するとそれまでに診断されていなくてもよい。一態様において、本発明は、アミロイドタンパク質の沈着物に対する効果に関し、他の一態様において、疾患状態に関連した行動に対する効果、及び特にアルツハイマー病に関連した行動の予防又は減少に関する。一態様において、本発明の方法及び組成物は、アミロイドタンパク質の沈着及び、アルツハイマー病に関連した行動などの、疾患に関連した行動の双方に対する効果を有するが、他の一態様において、本発明の方法及び組成物は、アミロイド沈着物のレベル又は行動のレベルのいずれかにおける効果を有する。一態様において、アルツハイマー病の重症度における予防又は軽減は、記憶の喪失の予防又は軽減を含む。さらなる一態様において、本発明は、記憶の改善に関する。該記憶は、空間記憶であってもよい。さらなる一態様において、本発明は、アミロイドベータの食作用の改善のための、本明細書中に開示の組成物の使用、及びアミロイドベータの食作用の改善に使用するための組成物に関する。理論に拘束されることを望むものではないが、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニスト、例えば、アミノアルキルグルコサミニドホスフェート、3DMPL又はMPL、の使用は、先天性免疫系の刺激によって本発明に貢献すると考えられる。したがって、一態様において、本発明は、以下を含む、対象においてアミロイド沈着又はアルツハイマー病を予防及び軽減する方法に関するアミロイド沈着物を有する対象を選択すること、及びアミロイド沈着物を減少させるのに有効な条件下で、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストを使用して、選択した対象の先天性免疫系を刺激すること。一態様において、本発明は、ミクログリア細胞活性の刺激のための、本明細書中に開示の組成物の使用に関する。他の一態様において、ミクログリア細胞は、培養中に、アミロイドβクリアランスのために脳に送達される前に、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニスト、又は他の好適な活性化因子によって活性化されてもよい。さらなる態様において、本発明は以下に関する本明細書中に開示の本発明の方法において使用するための、即ち、アルツハイマー病の予防若しくは治療、及び又はBアミロイドの減少において使用するための、特に、記憶の喪失の予防若しくは軽減、又は記憶の改善のように、アルツハイマー病に関連した有害な行動の予防又は治療に使用するための、TLR2アゴニストを含まないTLR4アゴニスト。該記憶は、空間記憶であってもよい。TLR4アゴニストは、本明細書中に記載されるもののうちのいずれであってもよい。記憶の喪失の予防若しくは軽減、及び又は記憶の改善のように、アルツハイマー病に関連した有害な行動の予防又は治療に使用するためのTLR4アゴニスト。該記憶は、空間記憶であってもよい。TLR4アゴニストは、本明細書中に記載されるものであることができる。好適には、本発明のアゴニストは、好適な対照と比較したときに、T型水迷路、巣作り又は受動的回避の試験などの、本明細書中で行われている動物アッセイのいずれかにおける結果において改善をもたらす。一態様において、本発明は、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニスト、例えば、アミノアルキルグルコサミニドホスフェート、3DMPL又はMPLを含む医薬組成物、を利用する。TLR4アゴニストは、エンドトキシンを含まずに合成してもよいし、エンドトキシンを含まないように精製してもよい。一態様において、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストの基準は、存在するエンドトキシンが何らかの方法で完全に又は部分的に不活化又は除去されており、したがって、エンドトキシンの活性が本質的にない、TLR4アゴニストを含有する組成物であり得る。一態様において、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストを含む組成物は、その中のエンドトキシンレベルが、許容される最高の規制限度よりも低い組成物である。一態様において、エンドトキシンを含まないとは、その組成物がLPSを実質的に含まないことを意味する。一態様において、エンドトキシンを含まない組成物は、投与したときに発熱を引き起こさないものである。一般に、エンドトキシンについて定義されている限度はないが、しかし、医薬品の限度は、一般に、最大02~5EU製品1kgであり、ここで、FDAは、02ngの参照エンドトキシン標準、EC2又は5EUngのエンドトキシン活性として最初にエンドトキシン単位を定義している。一態様において、エンドトキシンは、LAL試験によって検出されてもよい。もう一つの許容されるアプローチは、ウサギ発熱性物質試験であり、これは、例えば、3DMPL又はAGPに使用されてもよく、そこでは、3DMPL又はAGPの溶液がウサギにiv注射されて、温度の上昇がモニターされる。発熱性物質の除去は、イオン交換クロマトグラフィー又は限外濾過が挙げられる、よく知られている技術によって達成され得る。適切なTLR4アゴニストとしては、MPL及び3DMPLが挙げられ、これらは、リピドAよりも毒性が低い。いずれもTLR4アゴニストである。米国特許第4436727号には、モノホスホリルリピドAMPL及びその製造が開示されている。米国特許第4912094号及び再審査証明書B14912094には、3O脱アシル化モノホスホリルリピドA3DMPL及びその製造の方法が開示されており、これらの双方は、参照により本明細書に組み込まれている。一態様において、本発明は、エンドトキシンを含まない合成TLR4アゴニストを利用する。合成のTLR4アゴニストの場合、エンドトキシンレベルはゼロであってもよい。一態様において、合成のTLR4アゴニストは、MPL及び3DMPLと構造が類似した、合成の二糖分子であってもよく、又は、例えば、WO9850399、WO0134617、WO0212258、W03065806、WO04062599、WO06016997、WO0612425、WO03066065、及びWO0190129に開示されているアミノアルキルグルコサミニドホスフェート化合物などの、合成単糖分子であってもよく、これらの開示は、参照により本明細書に組み込まれている。こうした分子は、科学文献及び特許文献にもリピドA模倣体として記載されており、これらも本発明の一態様を形成している。TLR4アゴニストは、リピドA模倣体であってもよい。リピドA模倣体は、いくつかの機能的活性及び又は構造的活性をリピドAと好適に共有し、一態様において、TLR4受容体によって認識される。本明細書中に記載されるAGPは、時に、当技術分野においてリピドA模倣体と呼ばれる。リピドA模倣体は、一態様において、リピドAよりも毒性が低い。一態様において、アミノアルキルグルコサミニドホスフェートは、アミノアルキル基が、2デオキシ2アミノaDグルコピラノースにグリコシド結合で連結されて、特許請求の範囲に記載されている分子の基本構造を形成しているものである。この化合物は、グルコサミニド環上の4又は6個の炭素においてリン酸化されている。さらに、この化合物は、各炭素鎖が2~24個の炭素原子から、好ましくは7~16個の炭素原子からなる、脂肪族アシルの主鎖及び副鎖を含む、3個の3アルカノイルオキシアルカノイル残基を有する。好ましい一態様において、各主鎖は14個の炭素原子を含有し、各副鎖は10個及び14個の間の炭素原子を有する。一態様において、AGP化合物は、以下の一般式によって記載されるこうした化合物は、アミノアルキル基とのグリコシド結合における2デオキシ2アミノaDグルコピラノースを含む。化合物は、グルコサミン環上の4又は6個の炭素においてリン酸化されており、3個のアルカノイルオキシアルカノイル残基を有する。該化合物は、一般に、式Iによって記載され、式中、Xは、酸素又は硫黄原子を表し、Yは、酸素原子又はNH基を表し、n、m、p及びqは、0から6までの整数であり、R1、R2、及びR3は、7から16個の炭素原子を有する直鎖状脂肪族アシル残基を表し、R4及びR5は、水素又はメチルであり、R6及びR7は、水素、ヒドロキシ、アルコキシ、ホスホノ、ホスホノオキシ、スルホ、スルホオキシ、アミノ、メルカプト、シアノ、ニトロ、ホルミル又はカルボキシ並びにこれらのエステル及びアミドでありR8及びR9は、ホスホノ又は水素である。直鎖状脂肪族アシル残基が付加される3不斉中心の立体配置は、R又はSであるが、好ましくはRである。R4又はR5が付加される炭素原子の立体化学は、R又はSであり得る。全ての立体異性体、すなわち、エナンチオマー及びジアステレオマーの双方、並びにこれらの混合物は、本発明の範囲内に入るとみなされる。本発明のこうした化合物のヘテロ原子Xは、酸素又は硫黄であり得る。好ましい一実施形態において、Xは酸素である。分子の安定性はXの置換によって生じ得るが、これらの置換を有する分子の免疫調節活性が変化することは予想されない。ヘテロ原子Xとアグリコン窒素原子との間の炭素原子の数は、変数n及びmによって決定される。変数n及びmは、0から6までの整数であり得る。好ましい一実施形態において、ヘテロ原子Xとアグリコン窒素原子との間の炭素原子の総数は、約2個から約6個までであり、最も好ましくは約2個から約4個までである。こうした化合物は、リン酸化されたアミノアルキルグルコサミン化合物である。化合物は、グルコサミン環上の4又は6位においてリン酸化されていてもよく、これらの部位のうちの少なくとも一つにおいてリン酸化されている場合に最も有効である。好ましい一実施形態において、R8はホスホノであり、R9は水素である。こうした化合物は、ヘキサアシル化されており、即ち、合計6個の脂肪酸残基を含有する。アミノアルキルグルコサミン部分は、グルコサミン単位の2アミノ基及び3ヒドロキシル基において並びにアグリコン単位のアミノ基において3ヒドロキシアルカノイル残基でアシル化される。式Iにおいて、これらの三つの部位は、3ヒドロキシテトラデカノイル部分でアシル化される。この3ヒドロキシテトラデカノイル残基は、次いで、直鎖状脂肪酸で置換され、合計で3個の3nアルカノイルオキシテトラデカノイル残基又は6個の脂肪酸基を提供する。直鎖状脂肪酸R1~R3の鎖長は、約7から約16炭素であり得る。好ましくは、R1~R3は、約9から約14炭素である。これらの直鎖状脂肪酸の鎖長は、同一であってもよく、又は異なっていてもよい。直鎖状脂肪酸のみを説明しているが、該化合物上のR1、R3において置換されている不飽和脂肪酸は、生物学的に活性な分子を生じるはずであることが予想される。さらに、3ヒドロキシアルカノイル残基の鎖長におけるわずかな変更が生物活性を劇的に生じるとは思われない。AGPの特定の例としては、CRX527が挙げられ、これは、JBC2004279、第6号、4440~4449ページに開示されている。WO0212258及びW03065806には、一般に環式AGPと呼ばれる、2デオキシ2アミノaDグルコピラノースに連結された環式アミノアルキルを有するAGPのさらなる実施形態が開示されている。本明細書において一般にAGPに対する言及は、環式及び非環式の双方のAGPを含む。環式AGPは、各炭素鎖が2~24個の炭素原子から、好ましくは7~16個の炭素原子からなる、脂肪族アシルの主鎖及び副鎖を含む、3個の3アルカノイルオキシアルカノイル残基を有する。好ましい一態様において、各主鎖は14個の炭素原子を含有し、各副炭素鎖は鎖当たり10個及び14個の間の炭素原子を有する。環式AGPは、以下の一般式IIによって記載されるこれらの化合物は、環式アミノアルキル基にグリコシド結合で連結された2デオキシ2アミノpDグルコピラノースを含む。該化合物は、グルコサミン環の4位又は6位でリン酸化されており、アグリコン窒素並びにグルコサミン環の2位及び3位でアルカノイルオキシテトラデカノイル残基でアシル化されている。該化合物は、一般に、式及び薬学的に許容されるその塩によって記載され、式中、Xは、O又はNHであり、Yは、O又はSでありR1、R2、及びR3は、それぞれ独立にアシル基であり、これは、飽和、不飽和及び分枝のアシル基を含みR4は、H又はPO3R7R8であり、式中、R7及びR8は、それぞれ独立に、H又はアルキルでありR5は、H、CH3又はPO3R9R10であり、式中、R9及びR10は、H及びアルキルからそれぞれ独立に選択されR6は、H、OH、アルコキシ、PO3R11R12、OPO3R11R12、SO3R11、OSO3R11、NR11R12、SR11、CN、NO2、CHO、CO2R11、及びCONR11R12から独立に選択され、式中、R11及びR12は、H及びアルキルからそれぞれ独立に選択されR4がPo3R7R8であるときには、R5はP0R9R10以外であるという条件付きで、式中、1~3及びは、キラル中心を表し式中、下付き文字n、m、p及びqは、p及びmの和が0から6までであるという条件付きで、それぞれ独立に0から6までの整数である。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、X及びYにおいてOを含有し、R4はPO3R7R8であり、R5及びR6はHであり、下付き文字n、m、p、及びqは、0から3までの整数である。より好ましい一実施形態において、R7及びR8はHである。さらにより好ましい一実施形態において、下付き文字nは1であり、下付き文字mは2であり、下付き文字p及びqは0である。まださらにより好ましい一実施形態において、R1、R2、及びR3は、テトラデカノイル残基である。さらにより好ましい一実施形態において、1~3はR立体配置にあり、Yは赤道位にあり、はS立体配置にある3テトラデカノイルオキシテトラデカノイル2ピロリジノメチル2デオキシ40ホスホノ23テトラデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ303テトラデカノイルオキシテトラデカノイルpDグルコピラノシド及び薬学的に許容されるその塩。好ましい環式構造としては、以下が挙げられる式VはCRX590である。他の一態様において、TLR4受容体リガンドは、エステルで連結されるよりもむしろエーテルで連結された1個以上の第一及び又は第二の脂質基を有するAGPである。この実施形態において、R1~R3は、直鎖アルキル基を表し、アシル基を表さず、アルカノイルオキシ基ではなくR1O、R2O、及びR3Oアルコキシ基を形成し、アシル主鎖への結合を、エステル結合ではなくエーテル結合とする。エーテルで連結された第一の脂質基の場合には、グルコサミン単位の3ヒドロキシ基に付加される3アルカノイルオキシアルカノイル残基は、3アルカノイルオキシアルキル部分又は3アルコキシアルキル部分のいずれかで置き換えられており、グルコサミン3位への第一の脂質基の結合を、エステル結合ではなくエーテル結合とする。エーテルの一般式は、WO2006016997の式IVのものである。好ましい化合物の一例は、CRX601である。他の一態様において、AGP分子は、分子の主鎖及び又は副鎖中に異なる数の炭素を有していてもよい。こうした化合物は、WO04062599及びWO06016997に開示されている。他のAGPと同様に、各炭素鎖は、2~24個の炭素原子から、好ましくは7~16個の炭素原子からなっていてもよい。好ましい一態様において、各主鎖は14個の炭素原子を含有し、各副炭素鎖は鎖当たり10個及び14個の間の炭素原子を有する。こうした化合物は、以下の構造によって表される式中、Xは、軸位又は赤道位においてO及びSからなる群から選択されYは、O及びNHからなる群から選択されn、m、p及びqは、0から6までの整数でありR1、R2及びR3は、同一であり又は異なり、1個から約20個までの炭素原子を有する脂肪族アシル残基であり、式中、R1、R2又はR3のうちの一つは、場合によっては水素でありR4及びR5は、同一であり又は異なり、H及びメチルからなる群から選択されR6及びR7は、同一であり又は異なり、H、ヒドロキシ、アルコキシ、ホスホノ、ホスホノオキシ、スルホ、スルホオキシ、アミノ、メルカプト、シアノ、ニトロ、ホルミル及びカルボキシ、並びにこれらのエステル及びアミドからなる群から選択されR8及びR9は、同一であり又は異なり、ホスホノ及びHからなる群から選択され、R8及びR9のうちの少なくとも一つはホスホノでありR10、R11及びR12は、1から10個までの炭素原子を有する直鎖無置換飽和脂肪族基から独立に選択される又は薬学的に許容されるこれらの塩。式中、Xは、軸位又は赤道位においてO及びSからなる群から選択されYは、O及びNHからなる群から選択されn及びmは0でありR1、R2及びR3は、同一であり又は異なり、1個から約20個までの炭素原子を有する脂肪族アシル残基であり、式中、R1、R2又はR3のうちの一つは、場合によっては水素でありR4は、H及びメチルからなる群から選択されpは1であって且つR6はCOOHであるか、又はpは2であって且つR6はOP03H2でありR8及びR9は、同一であり又は異なり、ホスホノ及びHからなる群から選択され、R8及びR9のうちの少なくとも一つはホスホノでありR10、R11及びR12は、1から10個までの炭素原子を有する直鎖無置換飽和脂肪族基から独立に選択される又は薬学的に許容されるこれらの塩。式中、Xは、軸位又は赤道位においてO及びSからなる群から選択されYは、O及びNHからなる群から選択されn、m、p及びqは、0から6までの整数でありR1、R2及びR3は、同一であり又は異なり、1個から約20個までの炭素原子を有する直鎖飽和脂肪族基であり、式中、R1、R2又はR3のうちの一つは、場合によっては水素でありR4及びR5は、同一であり又は異なり、H及びメチルからなる群から選択されR6及びR7は、同一であり又は異なり、H、ヒドロキシ、アルコキシ、ホスホノ、ホスホノオキシ、スルホ、スルホオキシ、アミノ、メルカプト、シアノ、ニトロ、ホルミル及びカルボキシ、並びにこれらのエステル及びアミドからなる群から選択されR8及びR9は、同一であり又は異なり、ホスホノ及びHからなる群から選択され、R8及びR9のうちの少なくとも一つはホスホノでありR10、R11及びR12は、1個から11個までの炭素原子を有する直鎖無置換飽和脂肪族基から独立に選択される又は薬学的に許容されるこれらの塩。この一般式は、上記の式VI中に示しているのと同じ位置に、R5基を含んでいてもよく、このとき、R5は、H及びメチルからなる群から選択される。さらにもう一つの型の本発明の化合物は、式を有する式中、Yは、ここでは酸素として固定されXは、軸位又は赤道位においてO及びSからなる群から選択されn及びmは0でありR1、R2及びR3は、同一であり又は異なり、1個から約20個までの炭素原子を有する脂肪族アシル残基であり、式中、R1、R2又はR3のうちの一つは、場合によっては水素でありR4は、H及びメチルからなる群から選択されpは0若しくは1であって且つR6はCOOHであるか、又はpは1若しくは2であって且つR6はOPO3H2でありR8及びR9は、同一であり又は異なり、ホスホノ及びHからなる群から選択され、R8及びR9のうちの少なくとも一つはホスホノでありR10、R11及びR12は、1個から10個までの炭素原子を有する直鎖無置換飽和脂肪族基から独立に選択される又は薬学的に許容されるこれらの塩。したがって、これらの化合物は、アシル化された2本の鎖及びアシル化されていない1本のエーテル鎖を有する。AGPを作製するためのプロセスは、WO0612425にも開示されている。外因性抗原の非存在下でAGPを投与することによって疾患を予防及び治療する方法は、WO03066065及びWO0190129に開示されている。CRX524等の他のAGP構造は、InfectionandImmunity、2005年5月、3044~3052ページ第73巻、第5号に開示されている。本発明は、アミノアルキルグルコサミニドホスフェート、3DMPL又はMPLなどの、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストを含む医薬組成物にさらに関する。組成物は、代替的に、MPL、3DMPL及びAGPなどの、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストからなっているか、又は本質的になっていてもよく、これは、これらの作用剤が、単独で、又は担体、添加剤、緩衝液等のような添加剤との組合せで、それぞれ送達されてもよいという点からである。さらなる態様において、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストは、有効性を高め得る他の成分と共に製剤化されてもよい。エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストは、薬学的に活性のある他の作用剤と組み合わされてもよい。一態様において、3DMPLを含む医薬組成物は、QS21などの、サポニン及びリポソームと組み合わせた3DMPLからなる、又は本質的になる。一態様において、該組成物は、AS01Bからなる又は本質的になる。一態様において、本発明の前述の態様のいずれかによる、3DMPLを用いた処置又は3DMPLの使用は、AS01Bの使用を含む。一態様において、AGPを含む医薬組成物は、AS03などの、水中油型エマルションと組み合わせたAGPからなる又は本質的になる。一態様において、本発明の前述の態様のいずれかによる、AGPを用いた処置又はAGPの使用は、水中油型エマルションと組み合わせたAGPの使用を含む。一態様において、本発明の組成物は、アミロイドポリペプチド又はその断片を含まない。一態様において、それは、アミロイドベータ又はその断片などの、アルツハイマー病に特異的な抗原を含まない。それは、アミロイド沈着を特徴としない疾患に特異的な抗原又は作用剤を含んでいてもよい。したがって、一態様において、本発明は、アルツハイマー抗原などの、疾患に特異的な抗原の非存在下で、アミノアルキルグルコサミニドホスフェート、MPL又は3DMPLなどのエンドトキシンを含まないTLR4アゴニスト及び薬学的に許容される添加剤を含む医薬組成物に関する。一態様において、本発明は、AGP水中油型エマルションと組み合わせたAGP3DMPLQS21及びリポソームと組み合わせた3DMPLからなる、又は本質的になる、医薬組成物、及び組成物の使用に関する。一態様において、本発明は、ヒト等の個体における使用に好適な、添加剤と組み合わせた、AGP水中油型エマルションと組み合わせたAGP3DMPL並びにQS21及びリポソームと組み合わせた3DMPLからなる、又は本質的になる、医薬組成物、及び組成物の使用に関する。一般に、医薬組成物は、ヒトへの送達に好適なものである。一態様において、アミノアルキルグルコサミニドホスフェート、3DMPL又はMPLなどの、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストは、免疫刺激剤と共に製剤化された医薬組成物の形態にある。該免疫刺激剤は、QS21などの、サポニンであってもよく、若しくは、トコフェロールをさらに含むエマルションなどの、水中油型エマルションであってもよく、又は他の任意の好適な免疫刺激剤であってもよい。一態様において、エンドトキシンを含まない該TLR4アゴニストは、CRX601と組み合わせたAS03である。一態様において、該免疫刺激剤は、先天性免疫応答の刺激因子であり、一態様において、特定の疾患に関連した抗原ではない。一態様において、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストは、CpGオリゴデオキシヌクレオチドと共に製剤化されない。一態様において、本発明において使用される組成物は、スクアレン、アルファトコフェロール及びポリソルベート80を含有する、例えば、ヒト用量の1069mgのスクアレン、1186mgのDLαトコフェロール、486mgのポリソルベート80、又はその一般的比率の成分を有する、水中油型エマルションと組み合わせた、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストを含む。一態様において、本発明において使用される組成物は、モノホスホリルリピドAなどのエンドトキシンを含まないTLR4アゴニストとサポニン誘導体との組合せ、特に、WO9400153に開示されているようなQS21と3DMPLとの組合せ、又はW09633739に開示されているようにQS21がコレステロールでクエンチされている反応源性がより少ない組成物を含む。水中油型エマルション中にQS213DMPL及びトコフェロールを含む特に強力なアジュバント製剤は、W09517210に記載されており、好適な製剤である。本発明は、これらの科学的結果において本明細書中に開示の組成物にも関する。上述のように、本発明の組成物は、アミロイドタンパク質の沈着物に対する予防又は減少の効果、ミクログリア細胞を介した先天性免疫の刺激、アミロイド食作用の増大及びアルツハイマー病などの疾患状態に関連した行動の予防又は減少のうちの一つ以上において使用され得る。本明細書中に記載の実施例は、これらのパラメータを評価するのに好適な方法を提供する。ベータアミロイド沈着物は、添付の実施例に記載のように、脳切片中の斑の面積の関数として測定されてもよく、又は全タンパク質濃度によって評価されてもよい。他の好適な方法は、参照により本明細書に組み込まれている、WO2009105641に開示されている。アルツハイマー病に関連した行動に対する本発明の処置及び組成物の効果は、例えば、ヒトの患者において、又は動物モデルにおいて、評価されてもよい。好適な動物モデルとしては、アルツハイマー病のマウスAPPモデル、PS1マウスモデル及びAPPPS1モデル等が挙げられる。RichardKLらJNeurosci28、5784~5793を参照されたい。好適な動物試験は、本明細書中に記載されるT型水迷路試験、受動的回避試験、又は巣作り行動試験のうちの一つ以上を含む143~8。Epub2008年12月3日。PubMedPMID19077180。用いられ得る他の行動試験は、参照により本明細書に組み込まれている、WO2009105641に記載されている。先天性免疫系の刺激は、ミクログリアの刺激によって、達成及び又は測定されてもよい。他の一態様において、先天性免疫応答は、例えば適切な動物マウスモデルにおいて、脳組織内のTLR2の転写活性化を開始させることによって評価されてもよい。本発明の製剤は、全身又は粘膜の経路を介して投与することによって哺乳動物を保護又は治療するために使用されてもよい。これらの投与は、筋肉内、腹腔内、皮内又は皮下の経路を介した注射又は口消化管、気道、尿生殖路への粘膜投与を含み得る。本発明の組成物は、単回投与、又は多回投与として投与されてもよい。さらに、本発明の組成物は、プライミング及びブースティングのために異なる経路によって、例えば、IMのプライミング投与且つブースター投与にはINで、投与されてもよい。本発明の組成物は、単独で又は好適な医薬担体と共に投与されてもよく、例えば、タブレット、カプセル、粉末、溶液、懸濁液、又はエマルションなどの、固体又は液体の形態であり得る。アミノアルキルグルコサミニドホスフェート、3DMPL若しくはMPL又は本発明のいずれの組成物も、ワクチン中に製剤化されて自由溶液で投与されてもよく、又はアジュバント、若しくは添加剤と共に製剤化されてもよい。ワクチン製剤は、VaccineDesignPlenumPressNewYorkに一般的に記載されている。リポソーム中へのカプセル化は、Fullerton、米国特許第4235877号によって記載されている。本発明のワクチンは、溶液中で又は凍結乾燥して保管されてもよい。アミロイド沈着物又はADを有する対象の治療のための、本発明の組成物の有効用量は、さまざまな因子によって変化し、これには、投与の手段、標的部位、患者の生理的状態、投与される他の薬剤、他の内科的合併症と関連した患者の身体的状態、及び処置が予防的であるか又は治療的であるかどうかなどが挙げられる。治療投与量は、安全性と有効性を最適化するために漸増させることが必要である。アゴニストの量は、アジュバントも投与するかどうかによって決まる。本明細書中に記載のアゴニストの対象用量は、典型的には1回の投与につき約01μgから50mgまでの範囲に及び、これは、その用途に依存して、1日1回、週1回、又は月1回及びその間の他のいかなる時間の長さでも投与され得る。より典型的には、粘膜又は局所の用量は、数日又は数週間の間隔をあけて2~4回の投与で、1回の投与につき約10μgから10mgまで、場合によっては約100μgから1mgまでの範囲に及ぶ。より典型的には、免疫刺激剤用量は、1日1回又は週1回の投与で、1回の投与につき1μgから10mgまで、最も典型的には、10μgから1mgまでの範囲に及ぶ。非経口送達のための、例えば先天性免疫応答を誘導するための、又は特殊な送達ビヒクル中の、本明細書中に記載の化合物の用量は、典型的には1回の投与につき約01μgから10mgまでの範囲に及び、これは、その用途に依存して、1日1回、週1回、又は月1回及びその間の他のいかなる時間の長さでも投与され得る。より典型的には、これらの目的のための非経口用量は、数日又は数週間の間隔をあけて2~4回の投与で、1回の投与につき約10μgから5mgまで、最も典型的には約100μgから1mgまでの範囲に及ぶ。しかし、いくつかの実施形態において、これらの目的のための非経口用量は、上述の典型的な用量よりも5から10000倍高い範囲内で使用され得る。本出願中の全ての参照の教示は、特許出願及び付与された特許を含め、参照により本明細書に完全に組み込まれている。本出願が優先権を主張するいかなる特許出願も、その全体が参照により刊行物及び参照について本明細書中に記載の様式で本明細書に組み込まれている。本発明のいかなる態様又は特徴も、特定の実施例において開示される場合であっても、文脈から明らかである場合を除き、本発明の他のいかなる態様又は特徴と組み合わせ可能であり得る。疑問を避けるために、本明細書中の含んでいる及び含むという用語は、全ての事例において、それぞれ、からなっている、及びからなるofという用語と場合によっては代替可能であることが本発明者らによって意図されている。本明細書中及び特許請求の範囲中で使用される場合、含んでいる、有している、挙げられている又は含有しているという語は、包括的又は拡張可能であり、記載されていないさらなる要素又は方法ステップを除外しない。本開示のワクチン組成物に関する本明細書中の実施形態は、本開示の免疫原性組成物に関する実施形態にも適用可能であり、逆もまた同じである。全ての数値において、約という用語は、5の変動が許容され、即ち、約125の値は、119~131の間から意味するはずである。a又はanという用語の使用は、特許請求の範囲及び又は明細書中で含んでいるという用語と併せて使用されるときには、一つを意味し得るが、一つ以上、少なくとも一つ、及び一つ又は二つ以上の意味とも両立する。特許請求の範囲における又はという用語の使用は、明確に代替のみを指すことが示されない限り、又は代替が相互排他的でない限り、及び又はを意味するように使用されるが、本開示は代替及び及び又はのみを指すという定義を支持する。本出願の全体を通して、約という用語は、値が、測定値についての誤差の固有の変動、その値を決定するために用いられている方法、又は試験対象の間に存在する変動を含むことを示すのに使用される。本明細書中で使用される場合、又はこれらの組合せという用語は、その用語に先行する挙げられた項目の全ての順列及び組合せを指す。例えば、A、B、C、又はこれらの組合せとは、以下のうちの少なくとも一つを含むことが意図されるA、B、C、AB、AC、BC、又はABC、特定の状況において順序が重要である場合には、さらに、BA、CA、CB、CBA、BCA、ACB、BAC、又はCAB。この例を続けると、明白に含まれるのは、1種以上の項目又は用語の反復を含有する組合せ、例えば、BB、AAA、BBC、AAABCCCC、CBBAAA、CABABB等である。当業者は、典型的には、それ以外の場合に文脈から明らかでない限り、いかなる組合せにおいても項目又は用語の数に対する制限がないことを理解するであろう。本明細書において開示されている及び特許請求の範囲に記載されている全ての組成物及び又は方法は、本開示に鑑みて不適当な実験法なしで作製及び実行され得る。本開示の組成物及び方法は、好適な実施形態の観点から説明されているが、該組成物及び又は方法に、並びに本明細書に記載の方法のステップにおいて又は一連のステップにおいて、本開示の概念、趣旨及び範囲から逸脱することなく変形が適用され得ることは当業者に明らかであろう。当業者に明らかであるこうした類似の代用及び変更の全ては、添付の特許請求の範囲によって定義されているような本開示の趣旨、範囲及び概念に入るものとみなされる。本明細書に記載の特定の実施形態は、実例として示されており、本開示を限定するものとして示されているのではないことが理解されるであろう。本開示の主な特徴は、本開示の範囲から逸脱することなく多様な実施形態において用いられ得る。当業者は、本明細書に記載の特定の手順に対する多数の同等のものを、認識するであろう、又は日常の試験のみを使用して確認できるであろう。こうした同等のものは、本開示の範囲内にあるとみなされ、特許請求の範囲によってカバーされる。本明細書中で言及されている全ての刊行物及び特許出願は、本開示が関連している技術分野の当業者の技能のレベルを示すものである。全ての刊行物及び特許出願は、各個の刊行物又は特許出願が参照により本明細書に組み込まれているものとして具体的且つ個別に示されているのと同程度に、参照により本明細書に組み込まれている。本開示は、以下の非限定的な実施例を参照することによってさらに説明されることになる以下に記載の実施例及び図において、MPLに対する全ての言及は、3DMPLに対する言及である。実施例1CRX524又はCRX527、又はCRX601又は3DMPLの単回注射後の脳内への先天性活性化LPSなどのTLR4リガンドは、付随性のTLR2mRNAの発現を誘導することが示されている1234JClinInvest。現在に至るまで、脳内でのこうした先天性活性化を末梢注射から誘導する他のLPS模倣体は、文献に示されていない。TLR4アゴニストによって活性化される脳内の最初の直接の受容体のうちの一つはTLR2mRNAである。脳内での先天性活性化を評価するために、本発明者らは、腹腔内経路を使用して3DMPL、CRX524又はCRX527又はCRX601のいずれかの全身注射の24時間後、insituハイブリダイゼーションを行った。特に、GSKBioは、C57BL6Jマウスにおいて種々の組成物を注射して、末梢注射の24時後に、脳内のミクログリア細胞活性化を誘発するそれらのアジュバントの効力を評価した。動物試験群は、以下の通りであった1NaCl09、ip注射2CRX524、ip注射3CRX527、ip注射4CRX601、ip注射53DMPL、ip注射6AS01B、50μl、n5群、im注射GSKBioは、theCentredebiologieexperimentaledelINRSIAFにおいてIACUC承認プロトコルの下でC57BL6マウスにおける注射を行った。注射24時間後、塩酸ケタミンとキシラジンとの混合物の腹腔内注射を介してマウスを深麻酔して、次いで、氷冷した09の生理食塩水、その後、01Mのホウ砂緩衝液、pH95中の4のパラホルムアルデヒド、4°Cを用いて心臓内に潅流させた。脳を頭蓋から迅速に摘出して、4°CのPFA中で13d後固定し、CHULに送った。次いで、これらを、PFA中に希釈した10のショ糖中で一晩凍結保護した。凍結した脳を、ミクロトームを使用して25μmの厚さの冠状切片に切断して、切片を、冷却した凍結保護溶液中に収集した。insituハイブリダイゼーション及び免疫組織化学法嗅球の端から始めて大脳皮質の終わりまで、12枚目の切片毎に脳切片を、ColorfrostPlus顕微鏡スライド上に載せた。TLR2転写産物のinsituハイブリダイゼーション組織化学的局在を、35S標識cRNAプローブを使用して行った。リボプローブの合成及び調製並びにinsituハイブリダイゼーションを、以前に記載されているプロトコルに従って行った223~40Laflamme及びRivest、2001Nadeau及びRivest、2000Naertら、2009。デュアル標識結合型免疫細胞化学及びinsituハイブリダイゼーションを、以前に記載されているように行い、ミクログリア内にTLR2転写産物を局在化させた。本発明者らは、ポリクローナルウサギ抗イオン化カルシウム結合アダプター分子1を使用して、ミクログリアを染色した。全ての画像は、デジタルカメラを備えたNikonEclipse80i顕微鏡を使用して取り込み、コントラスト及び鮮鋭度を上げるためにAdobePhotoshop7を使用して加工し、次いで、AdobeIllustratorを使用して集結させた。異なるパネルによって表されている画像は、各群のマウスについてのスライド上で検出されたシグナルの代表例である。本明細書において、、本発明者らは、CRX524、CRX527及びCRX601の注射後に、TLR2mRNAが脳室領域及び脈絡叢において明らかに活性化されることを示している。より小さい程度で、本発明者らは、3DMPLがTLR2mRNA転写を活性化することを示している。TLR2転写産物の局在を決定するために、本発明者らは、ミクログリア細胞マーカーを使用して対比免疫染色を行った。実施例2図23DMPL又はエンドトキシン分子を含まない他のTLR4アゴニストの末梢注射後のマウス血清においてサイトカインを測定した。図2に結果を示している。実施例3図3~73DMPL、AS01B、AS15、CRX527又はCRX601などの、エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストを含む組成物の注射後の循環している単球数の上方制御単球は、ミクログリアの末梢血前駆細胞である1544~53Epub2007年11月18日PubMedPMID18026096。胚発生の間に、ミクログリアは、骨髄内のミエロイド系列の前駆体からCNSに集合する。これらの細胞は、それらの浸潤組織内でマクロファージになるまで末梢血中を循環している。CD11b及びLy6Cなどのマーカーは、末梢血単球上に存在して、それらが脳に浸潤しているときに残存する免疫学的マーカーである9651~8PubMedPMID20660248。アジュバントを含有する3DMPL及びsが末梢血中の単球の数を誘導するのに貢献するかどうかを調べるために、本発明者らは、それらの分子の単回注射を行い、24時間後にフローサイトメトリー法によってCD11b単球数を測定した1544~53。Epub2007年11月18日PubMedPMID18026096。図3に記載のように、本発明者らは、3DMPL又はAS15又はAS01B又はCRX527又はCRX601の注射後における、CD11b、系列混合陰性のマーカー表現型組成を有するCD11b単球数の増加を示している。末梢血における通常の単球数計数と比較すると、これは5であるのに対して、AS01B、及びAS15の筋肉内注射は循環している単球の数を最高20まで増加させることを示している。さらに、腹腔内経路を使用した3DMPL又はCRX601又はCRX601の注射も、末梢血中の全単球のうちの22を示す。より低い程度で、CRX601又は3DMPLの筋肉内注射は、単球数の増加を実証した。結果本明細書中の図4において、5ugの用量の3DMPLは、末梢血におけるCD11b単球の2倍の増加を誘発するのに十分である。より高用量の筋肉内の3DMPLは、24時間後にその末梢血単球計数の減少を示している。図5において、AS01Bの120の希釈物は、末梢血中の単球計数の増加を誘発するのに十分である。一定の増加がマウス全用量まで認められ、即ち、AS01Bマウス全用量は5μgの3DMPL及び5μgのQS21を含有している。図6において、本発明者らは、CRX601の徹底的な希釈解析を行い、CD11b単球数を誘発するCRX601の最適用量を特定している。漸増している六つのCRX601用量を試験することによって、本発明者らは、1μgのCRX601の量が、末梢血中の単球計数の増加を誘発するのに十分であることを示している。一定の増加が10μg用量の最大反応まで認められ、その効果は20ug用量で下方変調された。図7において、本発明者らは、一定用量のAS03と組み合わせたCRX601の希釈解析を行っている。種々の用量のCRX601の単回筋肉内注射後に、末梢血単球数を算出した。方法フローサイトメトリー解析TLRアジュバントの注射の24時間後に、抗凝固剤としてリチウムヘパリンを用いて心臓穿刺によってC57BL6マウスから末梢血を抜いた。プールした血液において塩化アンモニウムベースの緩衝液を用いて赤血球溶解を2回行い、細胞をEasyCountシステムで計数した。1回の洗浄ステップの後に、500000細胞を、ラット抗マウスCD16CD32と共に氷上で10分間インキュベートし、細胞を、Mildnerら、2007年によって記載されているように予め決定された各最適濃度の以下の直接に結合された抗体の組合せと共にさらに30分間インキュベートしたPerCP標識ストレプトアビジン、PEハムスター抗マウスCD3、ラット抗マウスCD45RB220、ラット抗マウスLy6G、マウス抗マウスNK11APC結合型ラット抗マウスCD11b、PECy7結合型ハムスター抗マウスCD11c、FITCラット抗マウスLy6C及びPacificBlueラット抗マウスCD62L。細胞を、最後に3回洗浄し、PBS中の2のパラホルムアルデヒド溶液で15分間固定した。1種引いた蛍光の対照を、蛍光補正設定のためにこのアッセイに常に含めた。試料をフローサイトメーター上で獲得して、データをFACSDivaソフトウェアで解析した。単球を、それらの側方前方散乱特性によって識別して、CD3CD45RB220Ly6GNK11CD11b細胞としてゲートをかけた。CD11b単球出現頻度が、デブリを除外した全細胞のうちの百分率として報告された。実施例4図8末梢血中の単球の増加の機能を調べ始めるために、本発明者らは、試験管内でAβ42を取り込むそれらの単球の能力を調べた。その食作用活性を測定するために、本発明者らは、蛍光HiLyteFluoAβ42を使用している。フローサイトメトリー解析により、AS01B又はCRX601の筋肉内注射は、アジュバントされていないマウス単球と比較して、単球を始動させてより多量のAβ42を取り込めるようにすることが実証された。実施例5図9~12エンドトキシンを含まないTLR4アゴニストがAPPPS1マウスにおいて認知障害及びAβのクリアランスを改善することになるかどうかの決定注射五つの群のAPPSwePS1マウスに、1週間に1回、12週間、以下の処置を行った群1APPSwePS1NaCl09n、ip注射群4APPSwePS1CRX527、ip注射群5APPSwePS1CRX601、ip注射群6APPSwePS13DMPL、ip注射群8APPSwePS1AS15群9APPSwePS1AS01B、50μl、n10、im注射12行動解析T型水迷路昼の点灯期の間にマウスを試験した。行動の実験者は、動物の遺伝的な状況及び処置の状況について盲検化された。海馬依存的な空間学習及び記憶を評価するために、T型水迷路課題においてマウスを訓練させた。このパラダイムにおいて、本発明者らは、沈水したプラットフォームの空間的位置を記憶するマウスの能力を評価する。T迷路装置を透明なファイバーガラスで作製して、水で12cmの高さに満たした。プラットフォームを目標アームの終端に配置し、表面より1cm下に沈水させた。習得期に、左右の空間学習について動物を評価することができる。最初の2回の試験中に、プラットフォームを迷路のそれぞれのアーム上に置いて、マウスが自発的に曲がる優先度を試験した。これらの2回の試験の後に、最も少なく選択されたアームを逃避プラットフォームによって補強した。マウスをT迷路の基部に配置して、それらが沈水したプラットフォームを見つけてそこに逃避するまで、最高60秒間、左又は右のいずれかに泳ぐように選択させた。プラットフォームに到達した後に、マウスを、20秒間その上に残し、次いで、直ちに迷路に戻して配置した。動物が制限時間内にプラットフォームを見つけなかった場合には、それらをその上に優しく導いた。反復試験を最高48試験まで同日に行った。10回の試験のブロック毎の間に少なくとも10~15分間の休憩時間入れた。マウスは、それが5回の連続した試験のブロックにおいて間違いをしなかったときに、タスクを学んだとみなされた。次いで、反転学習期を48時間後に行った。この期間中、マウスが習得期に学習したのと反対側にある逃避プラットフォームを見つけ出すようにマウスを訓練させたことを除き、同一のプロトコルを再度行った。基準に到達した試験の数並びに逃避プラットフォームを見つけるまでの潜時を測定した。受動的回避試験暗い環境を好むこの動物の自然の傾向に基づき、これらの動物を、一つの試験的な受動的回避課題についての非空間記憶の保持においても評価した。受動的回避装置を二つの区分に分けて、一方を照明し、一方を暗くした。それぞれの区画の床は、格子を含有し、暗い区画のみに発電機によって電流が流されている。訓練日に、マウスを、60秒間の環境順化期間の間、点灯した区画内に配置した。次いで、ギロチンドアを開けて、暗い方に入るまでの潜時を記録した。暗い区画に入った直後に、ドアが閉鎖されて、電気ショックが与えられた。このマウスは、自分のケージに戻される前に暗い区画に10秒間維持された。翌日に、これらのマウスを再び明区画に入れて、暗い方に入るまでの潜時を通してのステップである、時間を最長300秒間測定した。巣作り行動その後、巣作り行動を用いて、情動的状態における変化について試験した。巣作りの減少は、海馬が損傷されたマウス及びアルツハイマー病のマウスモデルにおいて認められている。おがくずを含有するケージ内に動物を個別に収容し、巣作り行動ができるようにその中に5×5cmの綿片を導入した。1日後、Deaconによって記載されている以下の五点の尺度に従って巣の質を決定した1外見上手がつけられていないネストレット、2部分的に引き裂かれたネストレット、3主として細かく切られたネストレット、しかし、営巣地の明らかな存在はない、4観察可能な平らな巣、5観察可能な完全な巣。組織解析マウスを、イソフルオラン下で麻酔して、心臓穿刺によって血液を抜き、その後、断頭した。脳を頭蓋から迅速に摘出して、冷却したリン酸緩衝生理食塩水溶液に入れた。次いで、二つの脳半球を分離して、嗅球及び小脳を摘出した。一方の脳半球を、液体窒素中で急速に凍結させて、タンパク質解析用に80°Cで保存した。他の一方を、4のパラホルムアルデヒド、4°CでpH95中で2~4日間、後固定し、次いで、10のショ糖を含有するPFA溶液中に4°Cで一晩入れた。凍結した脳を、ミクロトーム上に取り付けて、25μmの冠状切片に切断した。切片を、冷却した凍結保護溶液中に回収して、免疫細胞化学又はinsituハイブリダイゼーション組織化学まで20°Cで保管した。立体解析学的解析材料の処置状況について盲検化された観察者が全ての定量的組織学的解析を行った。Aβ斑を計数するために、以前に報告されているように、APPSwePS1マウスの切片をAβについて免疫染色した。定位アトラスに従ってブレグマから234及び210mmで前頭前野についての二つの切片及び170、194、246及び292mmで海馬大脳皮質についての四つの切片を選択した。不偏性立体解析学的解析を、以前に記載されているように行った。簡単に説明すると、前頭前野、海馬及び皮質領域の輪郭をスチーム画像上での仮想的オーバーレイとして追跡して、面積を算出した。Aβ標識された全ての斑によって占有されている面積を決定した。電動式ステージ及びMicrofireCCDカラーカメラの双方を備えたNikonC80i顕微鏡を使用して、リアルタイム画像を得た。こうした装置は、Microbrightfieldによって設計されたStereoInvestigatorソフトウェアを使用して作動させた。Cintiq18Sinteractivependisplayを使用して皮質及び海馬領域の双方を追跡した。タンパク質抽出、及びウエスタンブロットによる全Aβレベルの検出Lesneらによって公表された手順を変更した方法を使用して、前脳半球からのタンパク質を抽出した。タンパク質分解を最小限に抑えるために、全ての操作を氷上で行った。一つの前脳半球を、20Gの針で1mlのシリンジに入れた。500lの緩衝液A、プロテアーゼ阻害剤カクテルを添加して、10回上下させて組織をホモジナイズした後に、3000RPM、4°Cで5分間の遠心分離を行った。次いで、その上清を回収して、80°Cで凍結させた。不溶性のペレットを、500μlのTNT緩衝液中に懸濁して、その後、13000RPM、4°Cで90分間の遠心分離を行った。次いで、その上清を回収して、80°Cで凍結させた。ペレットを、500μlの緩衝液C中に懸濁して、4°C、50RPMで1時間インキュベートした。これらの試料を、13000RPM、4°Cで90分間遠心分離して、その上清を回収して、80°Cで凍結させた。QuantiproBCAアッセイキットを製造業者のプロトコルに従って使用して、各画分のタンパク質濃度を決定した。全Aβ検出のために、10~30μgの細胞外、細胞質及び膜のタンパク質画分を、プレキャスト10~20SDSポリアクリルアミドTrisTricineゲル上で分離した。次いで、分離したタンパク質を、ポリフッ化ビニリデンメンブレン上に転写して、ウエスタンブロッティングによって検出した。ブロットを、1MのTrisHCl、pH80、5MのNaCl、5のスキムミルク、及び005のTween20中、マウス抗アミロイドベータタンパク質モノクローナル抗体クローン6E10でプローブした。ブロットを、ホースラディッシュペルオキシダーゼでタグ付けされた抗マウス二次抗体及び増強された化学発光を使用して可視化した。メンブレンを、1のSDSを含有する、25mMのグリシンHCl、pH20中でストリップして、第一のマウスアクチン抗体、及び、次いで、ヤギ抗マウスペルオキシダーゼ結合二次抗体を使用して、アクチンの顕色を可能にした。ゲル画像化システムを使用してバンドの統合的な密度を決定することによって定量を行い、バックグラウンドの値を除いた。光学的な値を、アクチン負荷量対照によって標準化した。結果は、平均±SEMとして表される。結果図9にAβ斑総負荷量についての結果を示している。Aβ斑総負荷量解析は、免疫蛍光法によるAベータ斑負荷量測定の観点からPBS対照群対3DMPL群の間の有意な差を明らかにする。は、ANOVA、P005対PBS群を示す。行動解析についての結果は、図10及び11に提供されている。図10において、APPPS1マウスモデルにおける3DMPL又はCRX527又はCRX601又はAS01Bの12回の週1回の注射により、無処置のマウスと比較して空間記憶の改善が示される。図11において、AS01Bで処置した動物は、無処置の動物と比較して有意な保持スコアを示す。12回目の週1回の注射後の受動的回避中に、潜時を通してのステップを測定した。データは、平均として表される。脳組織構造についての結果は、図12に提供されている。3DMPLは、アミロイドベータ斑の数における統計的に有意な減少をもたらす。3DMPL、CRX527、CRX601及びAS01Bは全て、T型水迷路試験によって評価されるように、行動における有意な改善をもたらす。実施例6図13以下の群を使用してさらなる実験を行った。群1PBSim12×週1回、陰性対照n10群2CRX601imn10群3CRX601im、12×週1回n10群5AS03CRX601群6AS01Bim、12×週1回n10群7AS01Bim、12×週1回n10群93D3DMPL腹腔内、マウス1匹につき50ug、12×週1回n10群103DMPLim、12×週1回n10結果により、T型迷路反転試験において、群3、5、9及び10は、群1と比較して有意に改善されたことが示される。実施例7図143DMPL及びPBSをマウスに注射して、細胞内アミロイドベータの単量体化状態をImmunoblot抗Aβ116抗体を使用して免疫ブロットによって行った。3DMPLを注射したマウスの脳からの細胞外濃縮画分中の単量体Aβの減少があった。実施例8図15本発明のさまざまな化合物の添加後、ヒトのミクログリア細胞によるベータアミロイド142ペプチドの食作用を観察した。使用される化合物の大部分は、ヒトのミクログリア細胞によるベータアミロイド142ペプチドの食作用の百分率を上昇させる。この実験において、食作用の最も高い上昇は、AS01B及びAS15で認められる。図15において、ヒトのミクログリア細胞株は、細胞をアジュバントと18時間プレインキュベーションすることによってそのAβ42食作用活性が上昇することを示している。そのインビトロ食作用アッセイのためのアジュバント用量は、MPL含有量に基づいていた。Cpg7909アジュバントは、Invivogenから購入し、1mlにつき79ugで使用した。Aβ42は、DMEM完全培地中、1mlにつき1ugで使用した。実施例9図16ヒトのミクログリア細胞を、1μgmlのHiLyteFluoAβ142の存在下で、1μgmlの3DMPLを有するAS01Bで18時間処理した。Lysotracker赤色染色を行い、スライドにDAPIを載せてスライドをDAPIで共染色して核を示した。ヒトのミクログリア細胞株の蛍光顕微鏡法の代表的な画像により、AS01B処理後のリソソーム内でのAβ142の局在が示される。ヒトのミクログリア細胞株は、リピドAを含有するアジュバントでの刺激後により高いアミロイド食作用活性を有する。アミロイドは、リソソームへ標的化される。図15に記載されるようなこれまでの実験の代表的な画像。本発明者らは、二重免疫蛍光法を行い、CHMEヒトミクログリア細胞株内のリソソーム区画内のAベータを検出した。CHME細胞を、1mlにつき1ugのAベータ42蛍光及び1mlにつき1ugのMPLと共にインキュベートした。Lysotracker赤色試薬を、Invitrogenから購入して、製造業者の推奨のように使用した。実施例10図17及び18ミクログリアは、多くの場合アルツハイマー病の脳内のアミロイドβ斑の周囲に、且つより低い程度でその内部に認められ、それらの斑を取り除こうと努めている。ミクログリア活性化のこの現象は、CNS免疫細胞を活性化し過ぎるという有害な効果を回避するために、制御された様式で調節されることが必要とされ得る。最も強力なミクログリアの活性化剤は、リポポリサッカリドなどのToll様受容体4アゴニストである。LPSは、脳細胞、例えば、ミクログリア、及び末梢血中のそれらの前駆体、例えば、骨髄ミエロイド細胞由来の単球の迅速で強い先天性の活性化を引き起こす。しかし、大腸菌、サルモネラ及びごく少数の他のグラム陰性細菌からのLPSは、強いエンドトキシンであって、毒性であり、マウスにおいて末梢血で注射したときに既存の神経病理を悪化させることが示されている。LPSは、毒性が高いために、臨床レベルで使用することができなかった。したがって、それらの有害作用を回避するために、本発明者らは、本明細書において、グラム陰性菌サルモネラミネソタR595株から単離される3DMPLと呼ばれるリポポリサッカリドの無毒化された誘導体分子を評価した。本発明者らは、腹腔内経路によって送達された3DMPLが、LPSと比較して弱毒化されたサイトカインプロファイルを促進すると同時に、食細胞及び食作用における増大を活性化し得ることを示す。これにより、3DMPLは、神経変性病変を悪化させるリスクがある炎症誘発性サイトカインのバーストを引き起こすことなく、食細胞、例えばミクログリア細胞の活性化を誘導するのにより適していることが示唆される。同様に、本発明者らは、筋肉内の経路によって注射された、3DMPLを含有するリポソーム製剤である、AS01Bが、サイトカイン産生に対して3DMPLと同様の生物活性までさらに弱毒化されることを示すことを証明し、それにより、同等の全身の先天性の活性化を達成するためにMPLの代わりにそれが使用され得ることが示唆される。結果図173DMPLは、マウスにおいて低い炎症反応を誘導する本発明者らは、MPL又はLPSのいずれかの単回腹腔内注射の2及び6時間後にC57BL6マウスの血清中の数種のサイトカイン及びケモカインを測定した。本発明者らは、3DMPLを注射したマウスにおいてほとんどのサイトカイン及びケモカインのレベルが上昇したことを見出したが、これらのレベルは、LPSで処置した動物のそれらよりも実質的に低かった。TNFα及びIL6のレベルは、LPS注射後2時間においてきわめて高かったのに対して、3DMPLを注射したマウスでは中等度の上昇が認められたが、それは6時間後に本質的に消えた。興味深いことに、注射2時間後、CXCL1及びCCL2のように単球及びミクログリアの活性化とより関連があるケモカインは、MPLで処置したマウスにおいてLPS群と比較してそれぞれ同様のレベル又はより高いレベルまで変調された。図183DMPLは、マウスにおいて低い炎症反応を誘導する筋肉内の経路を使用してAS01B、AS03又はAS04Dのいずれかをマウスに注射した後の血清からの先天性サイトカインプロファイル、試料は、注射後2時間又は6時間の時点で採取された。結果は、PBS及びLPS又はMPLを注射されたマウスについての2時間又は6時間後の血清中の多様なサイトカインケモカインの相対単位で示されている。1群につきN5マウス。バーは平均±SEMを表す。実施例11マウスにおけるアジュバント注射後の単球の解析及び計数TLRアジュバントを、末梢単球を刺激するそれらの能力について試験した。TLRアジュバントの注射の24時間後に、抗凝固剤としてリチウムヘパリンを用いて心臓穿刺によってC57BL6マウスから末梢血を抜いた。プールした血液において塩化アンモニウムベースの緩衝液を用いて赤血球溶解を2回行い、細胞をEasyCountシステムで計数した。1回の洗浄ステップの後に、500000細胞を、ラット抗マウスCD16CD32と共に氷上で10分間インキュベートし、細胞を、Mildnerら、2007年によって記載されているように予め決定された各最適濃度の以下の直接に結合された抗体の組合せと共にさらに30分間インキュベートしたPerCP標識ストレプトアビジン、PEハムスター抗マウスCD3、ラット抗マウスCD45RB220、ラット抗マウスLy6G、マウス抗マウスNK11APC結合型ラット抗マウスCD11b、PECy7結合型ハムスター抗マウスCD11c、FITCラット抗マウスLy6C及びPacificBlueラット抗マウスCD62L。細胞を、最後に3回洗浄し、PBS中の2のパラホルムアルデヒド溶液で15分間固定した。1種引いた蛍光の対照を、蛍光補正設定のためにこのアッセイに常に含めた。試料をフローサイトメーター上で獲得して、データをFACSDivaソフトウェアで解析した。単球を、それらの側方前方散乱特性によって識別して、CD3CD45RB220Ly6GNK11CD11b細胞としてゲートをかけた。CD11b単球出現頻度が、デブリを除外した全細胞のうちの百分率として報告された。実施例11種々の組成物を使用して、末梢単球の刺激について試験した。AS01Bは、単球の上方制御において3DMPL単独よりも良好である。実施例12図20図20に示した各単一成分の筋肉内注射の24時間後に試料を採取した。それぞれの免疫調節物質又はアジュバントの注射の24時間後に、抗凝固剤としてリチウムヘパリンを用いて心臓穿刺によってC57BL6マウスから末梢血を抜いた。プールした血液において塩化アンモニウムベースの緩衝液を用いて赤血球溶解を2回行い、細胞をEasyCountシステムで計数した。1回の洗浄ステップの後に、500000細胞を、ラット抗マウスCD16CD32と共に氷上で10分間インキュベートし、細胞を、Mildnerら、2007年によって記載されているように予め決定された各最適濃度の以下の直接に結合された抗体の組合せと共にさらに30分間インキュベートしたPerCP標識ストレプトアビジン、PEハムスター抗マウスCD3、ラット抗マウスCD45RB220、ラット抗マウスLy6G、マウス抗マウスNK11APC結合型ラット抗マウスCD11b、PECy7結合型ハムスター抗マウスCD11c、FITCラット抗マウスLy6C及びPacificBlueラット抗マウスCD62L。細胞を、最後に3回洗浄し、PBS中の2のパラホルムアルデヒド溶液で15分間固定した。1種引いた蛍光の対照を、蛍光補正設定のためにこのアッセイに常に含めた。試料をフローサイトメーター上で獲得して、データをFACSDivaソフトウェアで解析した。単球を、それらの側方前方散乱特性によって識別して、CD3CD45RB220Ly6GNK11CD11b細胞としてゲートをかけた。CD11b単球出現頻度が、デブリを除外した全細胞のうちの百分率として報告された。AS01B及びQS21リポソームは、単回注射後のC57BL6マウス末梢血において24時間後に最も有意な単球数増加及び単球活性化状態を示す。実施例13図21本発明者らは、試験管内でAβ42を取り込む単球の能力を調べた。その食作用活性を測定するために、本発明者らは、蛍光HiLyteFluoAβ42を使用している。フローサイトメトリー解析により、DQの筋肉内注射は、PBS又はQS21を注射したマウス又はリポソーム型MPL又は本明細書中で使用される5μg用量のMPL自体と比較して、単球を始動させてより多量のAβ42を取り込めるようにすることが実証された。これは、QS21はAβの取り込みを促進せず、リポソームQS21は最後に記載した効果を促進するのに必要であることを我々に示唆している。全ての実験及びアッセイは、カナダ動物管理協会の動物実験法のためのガイドラインに従って行った。8週齢の雌のC57BL6マウスを、CharlesRivers研究所から得た。APPPS1マウスモデルを、Jackson研究所、ストック5866から得た。マウスにおける筋肉内注射を、いずれかの前側腓腹筋上で実験に応じて50又は25μLで行った。静脈内注射を尾静脈において行った。アジュバント組成物は、以下の通りであったアジュバント組成物AS01B、AS03及びAS15について。マウスの用量は、ヒトの110の用量と等しい。AS01Bは、3DMPL及びQS21を含有するリポソームから成る。AS01Bのマウス用量は、中性リポソーム中に共製剤化された5μgのMPL3D、5μgのQS21を含有する。それらの用量は、マウス1匹当たりであり、筋肉内経路のマウス1匹当たり25μlのAS01B25ulのPBS又は25μlの適切なペプチドを使用して注射された。エキソビボでのAb42の取り込みアッセイ細胞の調製本明細書中で使用されるアジュバントの注射の24時間後に、抗凝固剤としてリチウムヘパリンを用いて心臓穿刺によってC57BL6マウスから末梢血を抜いた。プールした血液において塩化アンモニウムベースの緩衝液を用いて赤血球溶解を2回行い、細胞をEasyCountシステムで計数した。細胞刺激Aβ食作用細胞を、24ウェルの組織培養プレート上に106細胞mLで播種して、1μgmlのAβ142HiLyteFluor488の存在下又は非存在下で2又は24時間刺激した。これは、1μgmlの抗アミロイドβ抗体と共に又は、対照として、マウス血清から精製されたIgGと共に、予め1時間インキュベートしていたか、又はしていなかった。FACS解析細胞を、トリプシンEDTA及び冷却したPBSを用いて蛍光Aβペプチドと共にインキュベートした後に回収して3回洗浄した。500000細胞を、96ウェルプレート中、ラット抗マウスCD16CD32の存在下で氷上で10分間インキュベートし、予め決定された各最適濃度の以下の直接に結合された抗体の組合せを用いてさらに30分間染色したPEハムスター抗マウスCD3、ラット抗マウスCD45RB220、ラット抗マウスLy6G、マウス抗マウスNK11、APC結合型ラット抗マウスCD11b、PECy7結合型ハムスター抗マウスCD11c、。細胞を、最後に2回洗浄し、PBS中の2のパラホルムアルデヒド溶液で15分間固定した。FMO対照を、このアッセイに常に含めた。試料をフローサイトメーター上で獲得して、データをFACSDivaソフトウェアで解析した。単球を、それらの側方前方散乱特性によって識別して、デブリを除外し、CD3CD45RB220Ly6GNK11CD11b細胞としてゲートをかけた。ゲートをかけた単球のうちの陽性HiLytefluor488Aβ142細胞の百分率及び平均蛍光強度を報告することによってAβの取り込みを評価した。