"親α-アミラーゼの変異体を含む組成物であって、前記変異体が、配列番号6に従う番号付けを用いて195、193、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される1又は2以上の位置に置換を含み、前記組成物が更に少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、組成物。前記キレート剤が10mM未満の濃度で、80mM塩化カリウム及び49mMEPPS中、21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、請求項1に記載の組成物。前記キレート剤が10mM未満の濃度で、材料及び方法に記載のアッセイで測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、請求項1又は2に記載の組成物。前記キレート剤が、キレート剤濃度8mM未満、好ましくは7mM未満、好ましくは6mM未満、好ましくは5mM未満、好ましくは4mM未満で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、請求項1~3の何れか一項に記載の組成物。親α-アミラーゼの変異体を含む組成物であって、前記変異体が、配列番号6に従う番号付けを用いて195、193、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される1又は2以上の位置に置換を含み、前記組成物が更に少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が、21°C及びpH8で測定した場合に、遊離カルシウムイオン濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得るクエン酸citrate濃度の0.9倍未満のキレート剤濃度で、遊離カルシウムイオン濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、組成物。前記キレート剤が、遊離カルシウムイオン濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得るクエン酸濃度の0.7倍未満、例えば0.5倍未満、例えば0.3倍未満のキレート剤濃度で、遊離カルシウムイオン濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、請求項1~5の何れか一項に記載の組成物。前記変異体が、配列番号6の成熟ポリペプチドの位置195、193、197、198、200、203、206、210、212、213又は243に対応する1又は2以上の位置に、少なくとも2の置換を含む、請求項1~6の何れか一項に記載の組成物。前記親α-アミラーゼの配列が、位置193の[G、A、S、T又はM]による;位置195の[F,W,Y,L,I又はV]による置換;位置197の[F,W,Y,L,I又はV]による;位置198の[Q又はN]による;位置200の[F,W,Y,L,I又はV]による;位置203の[F,W,Y,L,I又はV]による;位置206の[F,W,Y,N,L,I,V,H,Q,D又はE]による;位置210の[F,W,Y,L,I又はV]による;位置212の[F,W,Y,L,I又はV]による;位置213の[G,A,S,T又はM];又は位置243の[F,W,Y,L,I又はV]による置換のうち、少なくとも1つの置換により修飾される、請求項1~7の何れか一項に記載の組成物。前記親α-アミラーゼの配列が、位置193のTによる;位置195のF又はYによる;位置197のF又はLによる;位置198のNによる;位置200のFによる;位置203のFによる;位置206のYによる;位置210のYによる;位置212のV、位置213のA又は位置243のFによる置換のうち、少なくとも1の置換により修飾される、請求項1~8の何れか一項に記載の組成物。前記変異体が更に、配列番号6を番号付けに用いて、181、182、183又は184のアミノ酸領域内に、少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含む、請求項1~9の何れか一項に記載の組成物。前記変異体が、配列番号6の成熟ポリペプチドの、位置195、193、197、198、200、203、206、210、212、213又は243に対応する1又は2以上の位置に置換を含むとともに、位置116、118、129、133、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447又は458に対応する1又は2以上の位置に置換を含む、請求項1~10の何れか一項に記載の組成物。前記変異体が18時間後、pH8及び31°Cで、キレート剤の存在下少なくとも60の残存活性を有し、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る請求項1~11の何れか一項に記載の組成物。前記変異体が18時間後、pH8及び31°Cで、キレート剤の存在下少なくとも70の残存活性を有し、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得るとともに、前記残存活性が材料及び方法の記載に従い測定される、請求項1~12の何れか一項に記載の組成物。前記変異体が、材料及び方法の記載に従いAMSAで測定した場合に、親α-アミラーゼと比較して改善された洗浄性能を有する、請求項1~13の何れか一項に記載の組成物。前記キレート剤が、EDTA、MGDA、EGTA、DTPA、DTPMP及びHEDPからなる群より選択される、請求項1~14の何れか一項に記載の組成物。ポリペプチドを調製する方法であって、aアミラーゼ活性を有する親ポリペプチドのアミノ酸配列を用意し、b配列番号6の成熟ポリペプチドの位置195、197、198、200、203、206、210、212、213又は243に対応する1又は2以上の位置を占める1又は2以上のアミノ酸を選択すると共に、更に位置116、118、129、133、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447又は458に対応する1又は2以上の位置を選択し、c前記選択されたアミノ酸残基の置換若しくは欠失、又は前記選択されたアミノ酸残基に隣接する1又は2以上のアミノ酸残基の挿入により前記配列を修飾し、d前記修飾された配列を有する変異ポリペプチドを生成し、e前記変異ポリペプチドをアミラーゼ活性及び安定性について検証し、fアミラーゼ活性を有すると共に、前記親ポリペプチドと比較してキレート剤存在下の安定性が向上した変異ポリペプチドを選択し、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、方法。親α-アミラーゼの変異体であって、195、197、198、200、203、206、210、212、213、243からなる群より選択される位置に対応する1又は2以上の位置に改変を含むと共に、更に116、118、129、133、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447及び458からなる群より選択される位置に対応する1又は2以上の位置に改変を含み、a前記改変が各々独立に、i前記位置の下流側に隣接するアミノ酸の挿入、ii前記位置を占めるアミノ酸の欠失、及び/又はiii前記位置を占めるアミノ酸の置換であり、b前記変異体がα-アミラーゼ活性を有し、c各位置が、配列番号6のアミノ酸配列を有する酵素のアミノ酸配列の位置に対応する、変異体。親α-アミラーゼの変異体であって、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に、少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に195、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される1又は2以上の位置に改変を含み、更に116、118、129、133、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447及び458からなる群より選択される1又は2以上の位置に改変を含み、a前記改変が各々独立に、i前記位置の下流側に隣接するアミノ酸の挿入、ii前記位置を占めるアミノ酸の欠失、及び/又はiii前記位置を占めるアミノ酸の置換であり、b前記変異体がα-アミラーゼ活性を有し、c各位置が、配列番号6のアミノ酸配列を有する酵素のアミノ酸配列の位置に対応する、変異体。前記変異体が、キレート剤を含む組成物中で、親α-アミラーゼ又は配列番号6と比較して改善された安定性を有し、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、請求項17又は18に記載の変異体。前記変異体が18時間後、pH8で、キレート剤の存在下、少なくとも60の残存活性をし、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得るとともに、前記残存活性が材料及び方法の記載に従い測定される、請求項17~19の何れか1項に記載の変異体。前記変異体が、材料及び方法の記載に従いAMSAで測定した場合に、親α-アミラーゼと比較して改善された洗浄性能を有する、請求項17~20の何れか1項に記載の変異体。アミロース分解活性を有する前記変異体が、配列番号6、8、10、12、18又は20の成熟ポリペプチドと、好ましくは少なくとも60、より好ましくは少なくとも65、より好ましくは少なくとも70、より好ましくは少なくとも75、より好ましくは少なくとも80、より好ましくは少なくとも85、より一層好ましくは少なくとも90、最も好ましくは少なくとも95のアミノ酸配列の同一性を有する、請求項17~21の何れか1項に記載の変異体。アミロース分解活性を有する前記変異体が、i配列番号5、7、9又は11、17、19の成熟ポリペプチドコーディング配列、ii配列番号5、7、9、11、17、19の成熟ポリペプチドコーディング配列を含むゲノムDNA配列、又はiiii又はiiの全長相補鎖と、好ましくは少なくとも低ストリンジェンシー条件、より好ましくは少なくとも中ストリンジェンシー条件、より一層好ましくは少なくとも中ないし高ストリンジェンシー条件、最も好ましくは少なくとも高ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコード化される、請求項17~22の何れか1項に記載の変異体。請求項17~23の何れか1項に記載の変異体をコード化する単離ヌクレオチド配列。請求項24に記載のヌクレオチド配列を含む組換宿主細胞。従って、キレート剤に対して安定であるとともに、好ましくは親α-アミラーゼと比較して、洗浄性能が維持又は増強された組成物及びα-アミラーゼの変異体を提供できれば、有益だと考えられる。即ち、本発明の第1の側面は、親α-アミラーゼの変異体を含む組成物であって、前記変異体が、配列番号6に従う番号付けを用いて195、193、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される1又は2以上の位置に置換を含み、前記組成物が更に少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、組成物に関する。別の側面は、親α-アミラーゼの変異体を含む組成物であって、前記変異体が、配列番号6に従う番号付けを用いて195、193、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される1又は2以上の位置に置換を含み、前記組成物が更に少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が、21°C及びpH8で測定した場合に、遊離カルシウムイオン濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得るクエン酸citrate濃度の0.9倍未満のキレート剤濃度で、遊離カルシウムイオン濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、組成物に関する。本発明は更に、ポリペプチドを調製する方法であって、aアミラーゼ活性を有する親ポリペプチドのアミノ酸配列を用意し、b配列番号6の成熟ポリペプチドの位置195、197、198、200、203、206、210、212、213又は243に対応する1又は2以上の位置を占める1又は2以上のアミノ酸を選択すると共に、更に位置116、118、129、133、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447又は458に対応する1又は2以上の位置を選択し、c前記選択されたアミノ酸残基の置換若しくは欠失、又は前記選択されたアミノ酸残基に隣接する1又は2以上のアミノ酸残基の挿入により前記配列を修飾し、d前記修飾された配列を有する変異ポリペプチドを生成し、e前記変異ポリペプチドをアミラーゼ活性及び安定性について検証し、fアミラーゼ活性を有すると共に、前記親ポリペプチドと比較してキレート剤存在下の安定性が向上した変異ポリペプチドを選択し、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、方法に関する。好ましい側面によれば、本発明は、親α-アミラーゼの変異体であって、195、197、198、200、203、206、210、212、213、243からなる群より選択される位置に対応する1又は2以上の位置に改変を含むと共に、更に116、118、129、133、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447及び458からなる群より選択される位置に対応する1又は2以上の位置に改変を含み、a前記改変が各々独立に、i前記位置の下流側に隣接するアミノ酸の挿入、ii前記位置を占めるアミノ酸の欠失、及び/又はiii前記位置を占めるアミノ酸の置換であり、b前記変異体がα-アミラーゼ活性を有し、c各位置が、配列番号6のアミノ酸配列を有する酵素のアミノ酸配列の位置に対応する、変異体に関する。別の側面によれば、本発明は、親α-アミラーゼの変異体であって、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に、少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に195、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される1又は2以上の位置に改変を含み、更に116、118、129、133、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447及び458からなる群より選択される1又は2以上の位置に改変を含み、a前記改変が各々独立に、i前記位置の下流側に隣接するアミノ酸の挿入、ii前記位置を占めるアミノ酸の欠失、及び/又はiii前記位置を占めるアミノ酸の置換であり、b前記変異体がα-アミラーゼ活性を有し、c各位置が、配列番号6のアミノ酸配列を有する酵素のアミノ酸配列の位置に対応する、変異体に関する。本発明は更に、本発明の変異体をコード化する単離ヌクレオチド配列、及び、本発明に係る変異体をコード化するヌクレオチド配列を含む組換宿主細胞に関する。定義α-アミラーゼα-1,4-グルカン-4-グルカノヒドロラーゼ、EC3211は、でんぷん等の直鎖及び分岐鎖の1,4-グルコシドオリゴ糖及び多糖類の加水分解を触媒する酵素群である。α-アミラーゼは種々の生物から得られることが知られている。例としては細菌、例えばバシラス属thegenusBacillusの各種、例えばバシラスリケニホルミスBacilluslicheniformis;真菌の各種、例えばアスペルギウスオリザエAspergillusoryzaeTAKA-アミラーゼ又はアスペルギウスニジェールAspergillusniger;植物、例えば大麦;及び哺乳類等が挙げられる。野生型酵素:野生型wildtypeα-アミラーゼという語は、天然微生物、例えば天然に見出される細菌、酵母又は糸状菌等によって発現されるα-アミラーゼを意味する。野生型酵素wildtypeenzymeという語と親酵素parentenzymeという語は、親酵素が変異体酵素でない場合、相互交換可能に使用し得る。変異体酵素:本明細書において変異体variantという語は、α-アミラーゼ活性を有するポリペプチドであって、親又は野生型α-アミラーゼの1又は2以上の或いは1又は数個の特定の位置における1又は2以上の或いは1又は数個のアミノ酸残基の置換、挿入、及び/又は欠失等の改変を含むポリペプチドとして定義される。修飾数は50未満が好ましく、30未満がより好ましい。改変α-アミラーゼは親α-アミラーゼの修飾により人為的に得られる。親酵素:本明細書で使用される親parentα-アミラーゼという語は、本発明の変異体α-アミラーゼを産生するべく修飾を施す対象となるα-アミラーゼを意味する。この語はまた、本発明の変異体の比較対象となるポリペプチドも指す。親は天然野生型ポリペプチドであってもよく、任意の適切な手法で調製されたその変異体であってもよい。例えば、親タンパク質は、天然ポリペプチドのアミノ酸配列が修飾又は改変された変異体であってもよい。即ち、親α-アミラーゼは、1又は2以上の或いは1又は数個のアミノ酸の置換、欠失、及び/又は挿入を有していてもよい。即ち、親α-アミラーゼは、親α-アミラーゼの変異体であってもよい。また、親は対立遺伝子多型であってもよい。対立遺伝子多型allelicvariantとは、同一の染色体座を択一的に占める一遺伝子の複数形態の何れかによってコードされるポリペプチドである。改善された特性:本明細書において改善された特性improvedpropertyとは、変異体に伴う特性であって、親α-アミラーゼと比較して改善された特性として定義される。斯かる改善された特性としては、これらに限定されるものではないが、本明細書の実施例に記載のEnzChekアッセイ又はPNPG7アッセイで測定した場合に、向上したアミロース分解活性、例えば向上した洗浄性能、例えばよごれ性能、例えばでんぷん含有よごれに対する性能、汚れ除去、退色防止、安定性、例えば熱安定性、pH安定性、キレート剤等の助剤builder存在下での安定性、粉末、液体又はゲルの洗剤処方又は食器洗い組成物中での安定性、改変された温度依存性能及び活性プロファイル、pH活性、基質特異性、生成物特異性、及び化学的安定性等が挙げられる。洗浄性能及び/又は食器洗浄性能は、本明細書の材料及び方法の記載に従って測定可能である。本発明の変異体は、改善された特性の組み合わせ、例えば、改善された安定性、改善された洗浄性能、改善された食器洗浄性能及び/又は改善された洗剤中での活性を有することが好ましい。改善された安定性には、保存時の濃縮洗剤製品中における安定性と、洗浄時の希釈洗剤中における安定性の双方が含まれる。改善された特性には、低温での改善された洗浄又は食器洗浄性能が含まれる。活性:本発明との関連において活性activityという語は、アミロース分解活性のことをいう。これは、3以上の1,4-α-結合D-グルコース単位を含む多糖でんぷん等について、単位時間当たり単位量の酵素タンパク質によって特定条件下で加水分解される1,4-α-D-グリコシド結合の数によって測定される活性であり、例えば単位量の酵素タンパク質の酵素サンプル1mL当たり特定条件下で得られる活性である。活性は例えば、本明細書の材料及び方法に記載のEnzChekアッセイ又はPNPG7アッセイで測定することができる。本願において活性activityという語は、アミロース分解活性amylolyticactivityと相互交換可能に使用される。比活性specificactivityという語は、酵素タンパク質1mL単位量当たり得られる最大活性を表すのにしばしば用いられる。改善された化学的安定性:本明細書において改善された化学的安定性improvedchemicalstabilityという語は、親酵素の酵素活性を低減する1又は複数の天然又は合成の化学物質の存在下で一定期間インキュベートした後に、酵素活性が維持される変異体酵素として定義される。改善された化学的安定性は、斯かる化学物質の存在下でも首尾よく反応を触媒し得る変異体にも繋がる。本発明の特定の側面によれば、改善された化学的安定性は、洗剤において、特に液体洗剤において改善された安定性である。改善された洗剤安定性は特に、キレート剤を含む液体洗剤処方ここで液体にはゲルやペーストも含まれるに本発明のα-アミラーゼ変異体を混合した場合における、α-アミラーゼ活性の改善された安定性である。ここで液体洗剤処方は、洗濯又は自動食器洗浄プロセスにおいて添加される濃縮洗剤や、洗浄溶液即ち水溶液に濃縮洗剤を添加してなる溶液等の希釈洗剤をも指すものとする。本発明において、液体洗剤は、特に洗濯用液体洗剤として有用である。安定性:安定性stabilityという語は、保存安定性、及び使用の間の、例えば洗浄プロセス又は別の産業プロセスの間の安定性を含み、時間に応じたアミラーゼの安定性、例えばアミラーゼが溶液中、特に洗剤溶液中に保存された場合にどの程度の活性が保持されるのか、を反映する。例えば、α-アミラーゼ変異体は、31°Cで18時間後に、70超の残存活性、即ちどの程度の活性が保持されるか、を有し得る。安定性は、多くの要因、例えばpH、温度、洗剤組成物、例えば助剤、界面活性剤等の量及び種類により、影響を受ける。アミラーゼ安定性は、材料及び方法に記載のEnzCheckアッセイ又はPNPG7アッセイのいずれかを用いて測定される。改善された安定性:本明細書において改善された安定性improvedstabilityという語は、例えば、材料及び方法の記載に従いEnzCheckアッセイにおいて測定された場合、31°C、1.5w/vDTPAの存在下で、pH8において18時間後に、70超の残存活性を有すること、又は親と比較して残存活性の少なくとも10pp改善を有することにより、親α-アミラーゼの安定性よりも高い、向上した安定性を示す変異体酵素として定義される。親と比較した変異体の残存活性のポイントpercentagepoint:pp改善は、材料及び方法の記載に従い、変異体の残存活性と親の残存活性との差異として計算される。助剤:助剤builderは、溶液中でpH8において水硬度を2.0mMCaCO3換算から0.10mMまで低減するのに必要な最低助剤レベルを決定する、MKNagarajanetalJAOCSVol61no9pp14751478に記載の試験により分類され得る。助剤は、具体的には、例えばカルシウム及びマグネシウムイオンと水溶性錯体を形成するキレート剤でもよい。キレート剤chelatingagents又はキレーターchelatorsは、特定の金属イオンと分子を形成して、当該イオンが他の要素と反応できないようにこれを不活性化する化学物質であり、従って、キレートを形成することにより化学的活性を抑制する結合剤である。キレート化chelationとは、リガンドと一つの中心原子との間に二つ又はそれ以上の分離した結合が形成されること、又は存在することをいう。リガンドは、任意の有機化合物、シリケート又はホスフェートでもよい。本発明との関連において、キレート剤chelatingagentsという語は、キーラントchelants、キレート剤chelatingagentchelatingagents、錯化剤complexingagents、又は、金属イオン例えばカルシウムやマグネシウム等と水溶性錯体を形成する封鎖剤sequesteringagents、を含む。キレート効果chelateeffectとは、ある金属イオンに対するキレート化リガンドの親和性が、同じ金属に対する類似の非キレート化リガンド群の親和性と比較して増大していることを意味する。金属イオン、特にカルシウムCa2イオンとの結合能を有するキレート剤は、一般的に、洗浄、例えば、洗濯又は食器洗浄のための洗剤及び組成物に広く用いられている。しかしながら、キレート剤はそれら自身が酵素活性を阻害することを示している。キレート剤chelatingagentという語は、本願において、錯化剤complexingagent又はキレート剤chelatingagent又はキーラントchelantと相互交換可能に用いられる。多くのα-アミラーゼはカルシウム感受性であるので、キレート剤の存在下では酵素活性を損なう場合がある。α-アミラーゼのカルシウム感受性は、強キレート剤の存在下で所定のα-アミラーゼをインキュベートし、当該α-アミラーゼの活性に対するこのインキュベーションの影響を分析することにより測定することができる。カルシウム感受性α-アミラーゼは、インキュベーションの間にその活性の大部分又は全てを失う。キレート剤の特徴付けCharacterizingchelatingagents:上述のように、キレート効果chelateeffectorchelatingeffectは、ある金属イオンに対するキレート化リガンドの親和性が、同じ金属に対する類似の非キレート化リガンド群の親和性と比較して、増大していることを意味する。しかしながら、このキレート効果の強度は、様々な種類のアッセイ又は測定方法により測定することができ、これにより、キレート剤をそのキレート効果又は強度に従って差別化又はランク付けすることができる。好ましいアッセイによれば、キレート剤は、例えばMKNagarajanetalJAOCSVol61no9pp14751478に記載の方法に基づいた試験を用いることにより、pH8.0において、遊離カルシウムイオンの濃度Ca2を2.0mMから0.10mM以下まで低減させる能力により特徴付けることができる。Nagarajanらに基づく方法を用いたキレート剤の特徴付けの例は、実施例2aに記述される。好ましくは、本発明のキレート剤は、10mM未満、好ましくは9.5mM未満、好ましくは9mM未満、好ましくは8.5mM未満、好ましくは8mM未満、好ましくは7.5mM未満、好ましくは7mM未満、好ましくは6.5mM未満、好ましくは6mM未満、好ましくは5.5mM未満、好ましくは、好ましくは5mM未満、好ましくは4.5mM未満、4mM未満、好ましくは3.5mM未満、好ましくは3mM未満、好ましくは2.5mM未満、好ましくは2mM未満、好ましくは1.5mM未満又は好ましくは1mM未満の濃度で、21°CでpH8.0において測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.1mM以下まで低減し得るキレート剤を含む。好ましくは、本発明のキレート剤は、10mM未満、好ましくは9.5mM未満、好ましくは9mM未満、好ましくは8.5mM未満、好ましくは8mM未満、好ましくは7.5mM未満、好ましくは7mM未満、好ましくは6.5mM未満、好ましくは6mM未満、好ましくは5.5mM未満、好ましくは、好ましくは5mM未満、好ましくは4.5mM未満、4mM未満、好ましくは3.5mM未満、好ましくは3mM未満、好ましくは2.5mM未満、好ましくは2mM未満、好ましくは1.5mM未満又は好ましくは1mM未満の濃度で、21°CでpH8において、80mM塩化カリウム及び49mMEPPS4-2-ヒドロキシエチルピペラジン-1-プロパンスルホン酸中で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.1mMまで低減し得るキレート剤を含む。特に好ましい実施形態によれば、キレート剤は、pH8及び21°Cにおいて、80mM塩化カリウム及び49mMEPPS中で測定され、材料及び方法の記載に従い遊離カルシウム濃度の測定にカルシウムイオン選択電極を用いた場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.1mM以下まで低減し得る。従って、好ましくは、キレート剤は、10mM未満、好ましくは9.5mM未満、好ましくは9mM未満、好ましくは8.5mM未満、好ましくは8mM未満、好ましくは7.5mM未満、好ましくは7mM未満、好ましくは6.5mM未満、好ましくは6mM未満、好ましくは5.5mM未満、好ましくは、好ましくは5mM未満、好ましくは4.5mM未満、4mM未満、好ましくは3.5mM未満、好ましくは3mM未満、好ましくは2.5mM未満、好ましくは2mM未満、好ましくは1.5mM未満又は好ましくは1mM未満の濃度で、材料及び方法の記載に従い、pH8.0及び21°Cで試験した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.1mMまで低減し得るキレート剤を含む。特に好ましい実施形態によれば、キレート剤は、9mM~0.5mM、好ましくは9mM~1mM、好ましくは8mM~1mM、好ましくは7mM~1mM、好ましくは6mM~1mM、好ましくは5mM~1mM、好ましくは4mM~1mM、好ましくは3mM~1mM、好ましくは2mM~1mM、好ましくは9.0mM~1.5mM、好ましくは8.0mM~1.5mM、好ましくは7.0mM~1.5mM、好ましくは6.0mM~1.5mM、好ましくは5.0mM~1.5mM、好ましくは4.0mM~1.5mM、好ましくは3.0~1.5mM、好ましくは2.5mM~1.0mM、好ましくは2.0mM~1.1mM、好ましくは1.85mM~1.0mMの濃度で、pH8及び21°Cで80mM塩化カリウム及び49mMEPPS中で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る。2.0mMCa2から0.10mMまでの遊離カルシウムイオン濃度の低減は、200ppm酸性CO2の存在下でCaHCO32の形態でのCaCO3換算から10ppmまで水硬度を低減することに相当する。最低助剤レベルは、100乾燥キレート剤に基づいて、キレート剤のナトリウム塩から計算される。キレート剤のキレート効果は、クエン酸を基準として測定することもできる。遊離カルシウムイオン濃度の量を2.0mMから0.10mMまで低減し得るクエン酸の濃度に1の値を割り当て、キレート剤の結果をこの値と比較する。本発明の好ましいキレート剤は、pH8.0及び21°Cで測定した場合に、クエン酸の濃度に対する比で、0.9未満、例えば0.8未満、例えば0.7未満、例えば0.6未満、例えば0.5未満、例えば0.4未満、例えば0.3未満、例えば0.2未満、例えば0.1未満という低い濃度で、遊離カルシウム濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る。本発明の好ましいキレート剤は、pH8.0及び21°Cで80mM塩化カリウム及び49mMEPPS中で測定した場合、遊離カルシウム濃度の測定にカルシウムイオン選択電極を用いて8.0及び21°C中で測定した場合に、クエン酸の濃度に対する比で、0.9未満、例えば0.8未満、例えば0.7未満、例えば0.6未満、例えば0.5未満、例えば0.4未満、例えば0.3未満、例えば0.2未満、例えば0.1未満という低い濃度で、遊離カルシウム濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る。特に好ましい実施形態によれば、前記キレート剤は、pH8.0及び21°Cで測定した場合に、遊離カルシウム濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得るクエン酸の濃度に対する比で、1.0~0.1、例えば0.9~0.1、例えば0.8~0.1、例えば0.7~0.1、例えば0.6~0.1、例えば0.5~0.1、例えば0.4~0.1、例えば0.35~0.1、例えば0.3~0.1という低いキレート剤濃度で、遊離カルシウム濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る。従って、本発明の好ましい実施形態は、親α-アミラーゼの変異体を含む組成物であって、前記変異体が、配列番号6に従う番号付けを用いて193~213の範囲において1又は2以上の位置に置換を含み、前記組成物が更に少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が21°C及びpH8で測定した場合に、遊離カルシウムイオン濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得るクエン酸の濃度の0.9倍未満のキレート剤の濃度で、遊離カルシウムイオン濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、組成物に関する。本発明のさらに好ましい実施形態は、親α-アミラーゼの変異体を含む組成物であって、前記変異体α-アミラーゼが、配列番号6に従う番号付けを用いて193、195、197、198、200、203、206、210、212及び213からなる群より選択される1又は2以上の位置に置換を含み、前記組成物が更に少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、組成物に関する。本発明のさらに好ましい実施形態は、親α-アミラーゼの変異体を含む組成物であって、前記変異体α-アミラーゼが、配列番号6に従う番号付けを用いて193、195、197、198、200、203、206、210、212及び213からなる群より選択される1又は2以上の位置に置換を含み、前記組成物が更に少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得るとともに、任意により洗浄助剤cleaningadjunctを含んでいてもよい、組成物に関する。本発明のさらに好ましい実施形態は、親α-アミラーゼの変異体を含む組成物であって、前記変異体α-アミラーゼが、配列番号6と少なくとも70同一であるアミノ酸配列を含み、更に配列番号6に従う番号付けを用いて193、195、197、198、200、203、206、210、212及び213からなる群より選択される1又は2以上の位置に置換を含み、前記組成物が更に少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、組成物に関する。従って、本発明のキレート剤は、同一の条件で、遊離カルシウムイオン濃度を2.0mMから0.10mMまで低減させるのに必要なクエン酸の濃度よりも低い濃度で、遊離カルシウムイオン濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る。あるいは、キレート剤と金属イオン例えばカルシウム及び/又はマグネシウムとで形成された錯体の強度は、logK値平衡又は結合又は解離又は安定性定数で表される。この定数は、所定のpH、所定の温度、及び所定のイオン強度で測定され得る。上述のように、キレート剤と金属イオン例えばカルシウム及び/又はマグネシウムとで形成された錯体の強度は、logK値平衡又は結合又は解離又は安定性定数で表され、前記定数は、ANielsenetalAnalBiochemVol314pp227234に記載のように等温滴定熱量計ITCにより、K値から求めることができるlogKは、底を10とするK値の対数として計算される。この方法により測定されるlogK値は、温度、pH、イオン強度に依存するので、logK値を比較する場合には、それらが同様の条件、好ましくは同一の条件で測定されたものであることが重要である。更に、参照として標準例えばクエン酸等を導入することにより、実験時の変動による影響を軽減することができる。好ましくは、logKは、本願の材料及び方法の記載に従い測定され、従って本発明の一つの実施形態によれば、本発明の組成物中のキレート剤は、logKが材料及び方法の記載に従い、pH10及び19°Cで測定された場合、少なくとも3、例えば少なくとも4、例えば少なくとも5、例えば少なくとも6、例えば少なくとも7、例えば少なくとも8、例えば少なくとも9、例えば少なくとも10、例えば少なくとも11のlogKを有する。本発明の組成物中のキレート剤のlogK値はまた、3~11、例えば3~10、例えば3~9、例えば3~8、例えば4~11、例えば5~11、例えば6~11、例えば4~10、例えば5~10、例えば4~9、例えば5~9、例えば4~8、特に5~8の範囲でもよい。好ましくは、本発明の組成物中のキレート剤のlogKはまた、材料及び方法の記載に従い測定されるクエン酸のlogKの少なくとも1、例えば少なくとも1.33、例えば少なくとも1.67、例えば少なくとも2、例えば少なくとも2.33、例えば少なくとも2.67、例えば少なくとも3、例えば少なくとも3.33、例えば少なくとも3.67倍である。本発明の組成物中のキレート剤はまた、材料及び方法の記載に従い測定されるクエン酸のlogKの1~3.67、例えば1~3.33、例えば1~3.00、例えば1~2.67、例えば1.33~3.67、例えば1.33~3.33、例えば1.33~3.00、例えば1.33~2.67、例えば1.67~3.67、例えば1.67~3.33、例えば1.67~3、特に1.67~2.67倍の範囲内でもよい。有用なキレート剤としては、これらに限定されるものではないが、N-1,2-ジカルボキシ-エチル-D,L-アスパラギン酸IDS、N-2-ヒドロキシエチルイミノジ酢酸EDG、アスパラギン酸-N-モノ酢酸ASMA、アスパラギン酸-N,N-ジ酢酸ASDA、アスパラギン酸-N-モノプロピオン酸ASMP、イミノジコハク酸IDA、N-2-スルホメチルアスパラギン酸SMAS、N-2-スルホエチルアスパラギン酸SEAS、N-2-スルホメチルグルタミン酸SMGL、N-2-スルホエチルグルタミン酸SEGL、N-メチルイミノジ酢酸MIDA、α-アラニン-N,N-ジ酢酸α-ALDA、セリン-N,N-ジ酢酸SEDA、イソセリン-N,N-ジ酢酸ISDA、フェニルアラニン-N,N-ジ酢酸PHDA、アントラニル酸-N,N-ジ酢酸ANDA、スルファニル酸-N、N-ジ酢酸SLDA、タウリン-N、N-ジ酢酸TUDA、スルホメチル-N,N-ジ酢酸SMDA、N-ヒドロキシエチル-エチレンジアミントリ酢酸HEDTA、ジエタノールグリシンDEG、アミノトリスメチレンホスホン酸ATMP等が挙げられる。好ましいキレート剤は、アミノ基を含んでもよく、例えば、アミノ-ポリカルボン酸塩又はホスホン酸塩でもよい。それは、1、2、又は3のアミノ基典型的には、第二級又は第3級アミノ基を含む単量体分子でもよく、また、2、3、4、又は5のカルボキシル基、更にはそれ以上のカルボキシル基を含んでもよい。キレート剤はリンを含有するものでもよく、この場合、リン光体を含んでいてもいなくてもよい。キレート剤を分類する方法は多数存在するが、その一つは例えば以下のとおりである。キレート剤は、カルボキシレートであるか、又はカルボキシレート基を有するものでもよい。例としては、EDTAエチレンジアミンテトラ酢酸、NTA2,2’,2-ニトリロトリ酢酸、クエン酸、2-ヒドロキシプロパン-1,2,3-トリカルボン酸、DTPAジエチレントリアミンペンタ酢酸、MGDAメチルグリシンジ酢酸又はN,N’-ビスカルボキシメチルアラニン、EGTAエチレングリコールテトラ酢酸、EDDSエチレンジアミン-N,N’-ジコハク酸、GLDAL-グルタミン酸、N,N-ジ酢酸、ポリカルボキシレート、例えばPAA[ポリアクリル酸]、PAA/PMA[コポリアクリル酸/マレイン酸]等が挙げられる。リンを含むキレート剤としては、ポリホスフェート又はホスフォネート、例えばトリポリリン酸ナトリウムSTP、HEDP1-ヒドロキシエチリデン-1,1-ジホスホン酸、EDTMP[ビスホスホノメチルアミノ]メチルホスホン酸]又はエチレンジアミンテトラメチレンホスホン酸、EDTMPAエチレンジアミンテトラメチレンテトラホスホン酸、DTPMPジエチレントリアミンペンタメチレンホスホン酸、DTMPAジエチレントリアミンペンタメチレンホスホン酸等が挙げられる。キレート剤は窒素を含んでいてもよく、例えば、EDTA、NTA、DTPA、PDTA、GLDA、MGDA、EDDS、EDTMP、EDTMPA、及びDTPMP又はASMA、ASDA、ASMP、IDA、SMAS、SEAS、SMGL、SEGL、MIDA、α-ALDA、SEDA、ISDA、PHDA、ANDA、SLDA、TUDA、SMDA、HEDTA、DEG、ATMP、又はそれらの混合物等の形態であってもよい。従って、好ましいキレート剤としては、これらに限定されるものではないが、エチレン-ジアミン-テトラ-酢酸EDTA、ジエチレントリアミンペンタメチレンホスホン酸DTMPA、DTPMP、ヒドロキシエタンジホスホン酸HEDP、エチレンジアミンN,N’-ジコハク酸EDDS、メチルグリシンジ酢酸MGDA、ジエチレントリアミンペンタ酢酸DTPA、プロピレンジアミンテトラ酢酸PDTA、2-ヒドロキシピリジン-N-オキシドHPNO、メチルグリシンジ酢酸MGDA、グルタミン酸N,N-ジ酢酸N,N-ジカルボキシメチルグルタミン酸テトラナトリウム塩GLDA及びニトリロトリ酢酸NTA又はそれらの混合物等が挙げられる。キレート剤は、その酸形態として存在しても、塩として存在してもよいが、ナトリウム、アンモニウム、又はカリウム塩として存在することが好ましい。更なるキレート剤としては、植物原料由来のキレート剤、例えば、以下に詳述するようなでんぷん含有物質に由来するキレート剤等が挙げられる。斯かる天然キレート剤の例としては、これらに限定されるものではないが、フィチン酸別称イノシトール六リン酸IP6、又はフィチン、又は塩の場合はフィチン酸塩フィテート:phytate、イノシトール二リン酸、イノシトール三リン酸又はイノシトール五リン酸等が挙げられる。キレート剤は、0.0001wt~20wtで、好ましくは0.01~10wtで、より好ましくは0.1~5wtの量で組成物中に存在し得る。親α-アミラーゼparentalphaamylase:親α-アミラーゼは、保存中又は使用時、例えば洗浄中又はでんぷん加水分解プロセスにおいて、改善された安定性を有する変異体の調製が望まれるものであれば、原則として任意のα-アミラーゼでよい。即ち、改善された安定性は、例えば、保存時のアミロース分解活性の損失の減少として、又は、使用時の活性及び性能の増加として現れる。公知のα-アミラーゼとしては、細菌例えばバシラス属の種Bacillusspp、例えばバシラスリケニホルミスBacilluslicheniformis等;真菌例えばアスペルギウスオリザエAspergillusoryzaeTAKA-アミラーゼ又はアスペルギウスニジェールAspergillusniger等;植物例えばオオムギ等及び哺乳類等、多種多様な生物に由来するものが存在する。親α-アミラーゼは、原則として由来に関わりなく、このようなα-アミラーゼの何れであってもよい。バシラス属により産生される多数のα-アミラーゼが、アミノ酸レベルで高い同一性を有することはよく知られている。これらのα-アミラーゼは、それらの間で見出される実質的な同一性のために、同一分類のα-アミラーゼ、すなわちターマミル様α-アミラーゼの分類に属すると考えられる。従って、本発明との関連において、ターマミル様Termamyllikeα-アミラーゼという語は、本明細書で配列番号20Termamyl商標に示されるアミノ酸配列を有するB.リケニホルミスα-アミラーゼと、アミノ酸レベルにおいて、実質的な、即ち少なくとも60の同一性を示すα-アミラーゼ、特にバシラス属α-アミラーゼを示すことを意図する。ターマミル様α-アミラーゼ多数の公知のバシラス属α-アミラーゼの同一性を下記の表1に示す。例えば、配列番号20Termamyl商標として市販に示されるアミノ酸配列を含むB.リケニホルミスα-アミラーゼは、配列番号14BANに示されるアミノ酸配列を含むB.アミロリケファシエンスBamyloliquefaciensα-アミラーゼと約81相同、配列番号16BSGに示されるアミノ酸配列を含むB.ステアロサーモフィラスBstearothermophilusα-アミラーゼと約65相同であることが見出されている。更なる相同のα-アミラーゼとしては、国際公開第95/26397号に開示され、更に本明細書でそれぞれ配列番号6及び配列番号12で表されるSP722及びSP690が挙げられる。他のアミラーゼとしては、配列番号10に表されるバシラス属由来のAA560α-アミラーゼ、及び配列番号8に示され、TsukamotoetalBiochemicalandBiophysicalResearchCommunications1511988pp2531に記述される、バシラス属由来のSP707又は707α-アミラーゼが挙げられる。更なる相同のα-アミラーゼとしては、国際公開第97/00324号KAOCorporationによる、配列番号18に開示されるKSMAP1378α-アミラーゼが挙げられる。さらに別の相同のα-アミラーゼとしては、配列番号22を含むSP.7-7α-アミラーゼが挙げられる。別の好適な親アミラーゼとしては、配列番号2のK38、又は国際公開第2005/001064号に開示され、配列番号4及び配列番号24を含むB.サーキュランスアミラーゼが挙げられる。更に別の興味深いα-アミラーゼとしては、欧州特許第0252666号明細書に記述されるB.リケニホルミス株により産生されるα-アミラーゼATCC27811、及び国際公開第91/00353号及び国際公開第94/18314号に同定されるα-アミラーゼが挙げられる。他の市販のターマミル様α-アミラーゼとしては、商品名Optitherm商標及びTakatherm商標Solvay;Maxamyl商標GistbrocadesGenencorから入手可能、SpezymAA商標及びSpezymeDeltaAA商標Genencorから入手可能、及びKeistase商標Daiwaから入手可能、Dexlo、GC521Genencorから入手可能及びUltraphlowEnzymeBiosystemsから、Purastar商標ST5000E、PURASTRA商標HPAML、POWERASE商標、SpezymeFRED、GC358、ClearFlowAADaniscoから、又はα-アミラーゼTS23配列番号26LinetalJAppMicrobiol199782325334として販売されている製品に含まれるものが挙げられる。非ターマミル様α-アミラーゼとしては、例えば、真菌性α-アミラーゼ、哺乳類又は植物性α-アミラーゼ、又はターマミル様α-アミラーゼとは異なる細菌性α-アミラーゼが挙げられる。斯かるα-アミラーゼの具体例としては、アスペルギウスオリザエTAKAα-アミラーゼ、A.ニジェール酸α-アミラーゼ、バシラスサブティリスα-アミラーゼ、ブタ膵臓α-アミラーゼ、及びオオムギα-アミラーゼが挙げられる。これらのα-アミラーゼはいずれも、本明細書で言及されるような典型的なターマミル様α-アミラーゼの構造とは著しく異なる構造を有することが明らかになっている。上述の真菌性α-アミラーゼ、即ちA.ニジェール及びA.オリザエ由来の真菌性α-アミラーゼは、アミノ酸レベルで高い同一性を有し、一般的にα-アミラーゼの同一のファミリーに属すると考えられている。アスペルギウスオリザエ由来の真菌性α-アミラーゼは、Fungamyl商標の商標名の下で市販されている。親ハイブリッドα-アミラーゼ親α-アミラーゼは、ハイブリッドα-アミラーゼ、即ち、少なくとも2つのα-アミラーゼ由来の部分的なアミノ酸配列の組み合わせを含むα-アミラーゼでもよい。親ハイブリッドα-アミラーゼは、上述のようなアミノ酸相同性及び/又は免疫学的交差反応性及び/又はDNAハイブリダイゼーションに基づいて、ターマミル様α-アミラーゼファミリーに属すると決定され得るものでもよい。この場合、ハイブリッドα-アミラーゼは、典型的に、少なくとも1のターマミル様α-アミラーゼの部分と、微生物細菌又は真菌及び/又は哺乳類由来のターマミル様α-アミラーゼ又は非ターマミル様α-アミラーゼから選択される1又は2以上の他のα-アミラーゼの1又は2以上の部分とからなる。従って、親ハイブリッドα-アミラーゼは、少なくとも2のターマミル様α-アミラーゼ由来、又は少なくとも1のターマミル様及び少なくとも1の非ターマミル様細菌性α-アミラーゼ由来、又は少なくとも1のターマミル様及び少なくとも1の真菌性α-アミラーゼ由来の部分的アミノ酸配列の組み合わせを含み得る。部分的アミノ酸配列が由来するターマミル様α-アミラーゼは、本明細書で言及されるそれらの任意のターマミル様α-アミラーゼでもよい。一つの実施形態によれば、親ターマミル様α-アミラーゼは、成熟タンパク質のN-末端の35アミノ酸残基が、配列番号14に示されるバシラスアミロリケファシエンスBacillusamyloliquefaciensα-アミラーゼの成熟タンパク質のN-末端の33アミノ酸残基と置き換えられることを除いて、配列番号20に示されるバシラスリケニホルミスα-アミラーゼと同一のハイブリッドターマミル様α-アミラーゼであり、前記ハイブリッドは、更にLE174と称される以下の変異:156YA181TN190FA209VQ264S配列番号6における番号付けを用いてを有する。別の実施形態によれば、変異G48A、T49I、G107A、I201Fをさらに含むLE174は、LE399と称される。一つの実施形態によれば、親は、変異I181G182N195Fを有する配列番号16である。本発明の好ましい側面によれば、親α-アミラーゼは、本明細書で配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26に示されるアミノ酸配列を有するα-アミラーゼである。別の好ましい側面によれば、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26の成熟ポリペプチドの60、好ましくは少なくとも65、好ましくは少なくとも70、好ましくは少なくとも75、好ましくは少なくとも80、好ましくは少なくとも81、好ましくは少なくとも82、好ましくは少なくとも83、好ましくは少なくとも84、好ましくは少なくとも85、好ましくは少なくとも86、好ましくは少なくとも87、好ましくは少なくとも88、好ましくは少なくとも89、特に好ましくは少なくとも90、特に好ましくは少なくとも91、特に好ましくは少なくとも92、特に好ましくは少なくとも93、特に好ましくは少なくとも94、さらに特により好ましくは少なくとも95の相同性、より好ましくは少なくとも96、より好ましくは少なくとも97、より好ましくは少なくとも98、より好ましくは少なくとも99の相同性を示すα-アミラーゼである。一側面によれば、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26の成熟ポリペプチドと、1又は数個のアミノ酸により、好ましくは10個のアミノ酸により、より好ましくは9、8、7、6、5個のアミノ酸により、より好ましくは4個のアミノ酸により、さらにより好ましくは3個のアミノ酸により、最も好ましくは2個のアミノ酸により、さらに最も好ましくは1個のアミノ酸により異なる例えば、欠失、挿入又は置換アミノ酸配列を有する。親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24及び26からなる群より選択されるアミノ酸配列の1つを有するα-アミラーゼに対して産生された抗体と免疫学的交差反応を示すα-アミラーゼでもよい。好ましい実施形態によれば、親α-アミラーゼは、当該親α-アミラーゼに対して産生された抗体が、競合アッセイ技術、例えば、ELISA又はBiaCoreのそれぞれにおいて、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26に示されるアミノ酸配列のうちの1つを有するα-アミラーゼに対して親和性affinity又はアビディティーavidityを示す、又は親α-アミラーゼに匹敵する親和性又はアビディティーを示すα-アミラーゼであって、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26に示されるアミノ酸配列のうちの1つを有するα-アミラーゼに対して産生された抗体が、前記競合アッセイ技術において、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26に示されるアミノ酸配列のうちの1つを有するα-アミラーゼに対する親和性又はアビディティーに匹敵する親α-アミラーゼに対して親和性又はアビディティーを示すα-アミラーゼである。更なる実施形態によれば、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26に示されるアミノ酸配列のうちの一つを有するα-アミラーゼの親和性又はアビディティーの少なくとも70、好ましくは少なくとも75、好ましくは少なくとも80、好ましくは少なくとも85、好ましくは少なくとも90、好ましくは少なくとも95、好ましくは少なくとも100、好ましくは少なくとも110、好ましくは少なくとも120、特に好ましくは少なくとも125である親和性又はアビディティーを有するα-アミラーゼである。親α-アミラーゼはまた、本願の配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23又は25から明らかである上記の特定のα-アミラーゼをコード化するDNA配列にハイブリダイズするDNA配列によりコード化されるα-アミラーゼでもよい。従って、一つの実施形態は、親α-アミラーゼの変異体α-アミラーゼに関し、前記親α-アミラーゼは、AB.リケニホルミス、B.アミロリケファシエンス、B.ステアロサーモフィラス、バシラス属又はKSMAP1378の株に由来し、B配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26に示されるアミノ酸配列を有する群から選択され、C配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26のうちの一つと、少なくとも70、好ましくは少なくとも80、より好ましくは少なくとも約90、より一層好ましくは少なくとも95、より一層好ましくは少なくとも97、及びより一層好ましくは少なくとも99の配列同一性を有し、又はD低、好ましくは中、好ましくは高ストリンジェンシー条件下で、配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23又は25のうちの1つの核酸配列とハイブリダイズする核酸配列によりコード化される。一側面によれば、アミロース分解増強活性を有する親ポリペプチドは、A配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26の成熟ポリペプチドと少なくとも60の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチド;b少なくとも低ストリンジェンシー条件下で、i配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23又は25の成熟ポリペプチドコーディング配列、ii配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23又は25の成熟ポリペプチドコーディング配列を含むゲノムDNA配列、又はiiii又はiiの全長相補鎖、とハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコード化されたポリペプチド;又はc配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23又は25の成熟ポリペプチドコーディング配列と少なくとも60の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによりコード化されたポリペプチドである。親α-アミラーゼの特定の変異体を、従来どおり特定のα-アミラーゼのアミノ酸配列における特定のアミノ酸残基の修飾例えば、欠失又は置換を用いて表す場合、その中には、各アミノ酸配列間の可能な限り最良のアミノ酸配列アライメントで決定される同等の1又は2以上の位置において修飾された別のα-アミラーゼの変異体も含まれるものと解される。本発明の特定の側面によれば、親α-アミラーゼは、任意の適切な手法により調製された天然野生型の変異体である。例えば、親α-アミラーゼは、天然α-アミラーゼのアミノ酸配列が修飾又は改変された変異体でもよい。親α-アミラーゼは、1又は2以上の数個のアミノ酸置換、欠失、及び/又は挿入を有し得る、実質的に相同な親α-アミラーゼでもよい。これらの変化は軽微なものであることが好ましい。すなわち、後述のような保存的アミノ酸置換、及び、タンパク質又はポリペプチドの三次元折り畳み又は活性に著しい影響を与えない他の置換;小さな欠失、典型的には1~約30のアミノ酸;及び小さなアミノ末端又はカルボキシル末端の伸長、例えばアミノ末端のメチオニン残基、約20~25残基までの小さいリンカーペプチド、又は精製を容易にする小さい伸長アフィニティータグ、例えばポリヒスチジン鎖、又はタンパク質AであるNilssonetal1985EMBOJ41075Nilssonetal1991MethodsEnzymol1983。また、概説として、Fordetal1991ProteinExpressionandPurification295107を参照のこと。上述の変化は軽微なものであることが好ましいが、斯かる変化は実質的なものであってもよい。例えば、最大300又はそれ以上のアミノ酸からなる大きいポリペプチドの融合による、アミノ末端又はカルボキシル末端の双方の伸長等であってもよい。親α-アミラーゼの特定の変異体本発明の変異体を、従来どおり特定の親α-アミラーゼのアミノ酸配列における特定のアミノ酸残基の修飾例えば、欠失又は置換を用いて表す場合、その中には、各アミノ酸配列間の可能な限り最良のアミノ酸配列アライメントで決定される同等の1又は2以上の位置において修飾された別の親α-アミラーゼの変異体も含まれるものと解される。相同性配列同一性相同性は、第一の配列が第二の配列に由来することderivationを示す、二つの配列間の同一性の程度として決定され得る。本発明の目的において、2つのアミノ酸配列間の配列同一性の程度は、EMBOSSパッケージEMBOSS:TheEuropeanMolecularBiologyOpenSoftwareSuiteRiceetal2000TrendsinGenetics16276277のNeedleプログラム好ましくはバージョン300以降により実行される、NeedlemanWunschアルゴリズムNeedlemanandWunsch1970JMolBiol48443453を用いて決定される。用いられる任意のパラメーターは、10のギャップオープンペナルティーgapopenpenalty、0.5のギャップエクステンションペナルティーgapextensionpenalty、及びEBLOSUM62BLOSUM62のEMBOSSバージョン置換マトリックスである。最長同一性longestidentityと表示されたNeedleのアウトプットnobriefオプションを用いて得られるは、同一性として用いられ、以下の式に従い計算される。同一の残基×100/アラインメント長-アラインメント中のギャップ総数本発明の目的において、2つのデオキシリボヌクレオチド配列間の配列同一性の程度は、EMBOSSパッケージEMBOSS:TheEuropeanMolecularBiologyOpenSoftwareSuiteRiceetal2000、同上のNeedleプログラム、好ましくはバージョン300以降、により実行されるように、NeedlemanWunschアルゴリズムNeedlemanandWunsch1970、同上を用いて決定される。用いられる任意のパラメーターは、10のギャップオープンペナルティー、05のギャップエクステンションペナルティー、及びEDNAFULLNCBINUC44のEMBOSSバージョン置換マトリックスである。最長同一性と表示されたNeedleのアウトプットnobriefオプションを用いて得られるは、同一性として用いられ、以下の式に従い計算される。同一のデオキシリボヌクレオチド×100/アラインメント長-アラインメント中のギャップ総数また、相同性又は配列同一性は、第一の配列が第二の配列に由来することを示す、二つの配列間の同一性の程度として決定され得る。相同性は、当該技術分野において知られている旧来のコンピュータープログラムの方法、例えばGCGプログラムパッケージに提供されるGAPにより適切に決定され得る。従って、GapGCGv8は、同一性についてのデフォルトスコアリングマトリックス及び以下のデフォルトパラメーター:核酸配列比較についてそれぞれ、5.0のギャップクリエーションペナルティーGAPcreationpenalty、及び03のギャップエクステンションペナルティー、並びにタンパク質配列比較についてそれぞれ、3.0のギャップクリエーションペナルティー、及び01のギャップエクステンションペナルティー、を用いて使用され得る。GAPは、アライメントを作成するために、及び同一性を計算するために、NeedlemanandWunsch1970JMolBiol48p443453の方法を用いる。例えば、ターマミルとα-アミラーゼと間の構造アライメントを、他のα-アミラーゼにおける同等の/対応の位置を特定するために用いてもよい。前記構造アライメントを得る一つの方法は、ギャップペナルティーのデフォルト値、即ち、3.0のギャップクリエーションペナルティー、及び01のギャップエクステンションペナルティーを用いたGCGパッケージからのPileUpプログラムを使用することである。他の構造アライメント方法は、疎水性クラスター分析Gaboriaudetal1987FEBSLETTERS224pp149155及びリバーススレッディングreversethreadingHuberT;TordaAEPROTEINSCIENCEVol7No1pp1421491998を含む。α-アミラーゼの特性、即ち、免疫学的交差反応性は、関連するターマミル様α-アミラーゼの少なくとも1のエピトープに対する、又は反応性を有する抗体を用いてアッセイされ得る。モノクローナル又はポリクローナルのいずれかでもよい抗体は、当該技術分野において知られている方法、例えば、HudsonetalPracticalImmunologyThirdedition1989BlackwellScientificPublicationsに記述されるように、産生され得る。免疫学的交差反応性は、当該技術分野において知られているアッセイを用いて決定され得、その例は、例えば、Hudsonetal1989により記述されるような、ウェスタンブロッティング又は放射免疫拡散アッセイである。ハイブリダイゼーション一側面によれば、アミロース分解活性を有する親ポリペプチドは、極めて低いストリンジェンシー条件、好ましくは低いストリンジェンシー条件、より好ましくは中程度のストリンジェンシー条件、より好ましくは中程度ないし高いストリンジェンシー条件、より一層好ましくは高ストリンジェンシー条件、及び最も好ましくは極めて高いストリンジェンシー条件の下で、i配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23又は25の成熟ポリペプチドコーディング配列、ii配列番号1の成熟ポリペプチドコーディング配列を含むゲノムDNA配列、iiii若しくはiiのサブ配列、又はivi、ii、若しくはiiiの全長相補鎖とハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコード化されるJSambrookEFFritschandTManiatis1989MolecularCloningALaboratoryManual2deditionColdSpringHarborNewYork。サブ配列は、アミロース分解活性を有するポリペプチドフラグメントをコード化し得る。一側面によれば、相補鎖は、配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23又は25の成熟ポリペプチドコーディング配列の全長相補鎖である。所望の特性例えばα-アミラーゼ活性に基づくα-アミラーゼの特徴付けに用いられるオリゴヌクレオチドプローブは、当該α-アミラーゼの全長又は部分的ヌクレオチド又はアミノ酸配列に基づいて、適切に調製することができる。ハイブリダイゼーションを試験するための好適な条件は、5×SSC標準クエン酸ナトリウム、0.1650MNaClに対して、1×SSCに予浸すること、20ホルムアミド、5×デンハルト溶液、50mMリン酸ナトリウム、pH6.8、及び50mgの変性され超音波処理された仔牛胸腺DNAの溶液中に約40°Cで1時間プレハイブリダイゼーションすること、続いて100mMATPアデノシン三リン酸が添加された同一の溶液中で、約40°Cで18時間ハイブリダイゼーションすること、続いて40°Cで30分間低いストリンジェンシー、好ましくは50°Cで中程度のストリンジェンシー、より好ましくは65°Cで高いストリンジェンシー、より一層好ましくは約75°Cで極めて高いストリンジェンシー、2×SSC、0.2SDS中でフィルターを3回洗浄すること、を含む。ハイブリダイゼーション方法についての詳細は、SambrooketalMolecularCloning:ALaboratoryManual2ndEdColdSpringHarbor1989に見ることができる。本発明との関連において、由来するderivedfromは、対象となる生物の株により産生される又は産生され得るα-アミラーゼのみではなく、斯かる株から単離されたDNA配列によりコードされ、前記DNA配列で形質転換された宿主生物において産生されるα-アミラーゼをも指すことが意図される。従って、この用語は、合成及び/又はcDNA由来のDNA配列によりコードされ、当該α-アミラーゼを特定する特徴を有するα-アミラーゼをも意味することが意図される。また、この用語は、親α-アミラーゼが、天然α-アミラーゼの変異体、即ち天然α-アミラーゼの1又は2以上のアミノ酸残基の修飾挿入、置換、欠失の結果である変異体でもよいことを意味する。α-アミラーゼ変異体を調製するための方法本技術分野において、遺伝子に変異を導入するための方法は幾つか知られている。α-アミラーゼをコード化するDNA配列のクローニングについて簡単に説明した後、α-アミラーゼをコード化する配列中の特定部位に変異を生成する方法について説明する。α-アミラーゼをコード化するDNA配列のクローニング親α-アミラーゼをコード化するDNA配列は、当該α-アミラーゼを産生する任意の細胞又は微生物から、本技術分野で周知の様々な方法を用いて単離することができる。最初に、研究されるα-アミラーゼを産生する生物の染色体DNA又はメッセンジャーRNAを用いて、ゲノムDNA及び/又はcDNAライブラリーを構築すべきである。その後、例えば、α-アミラーゼのアミノ酸配列が公知の場合、対応する標識されたオリゴヌクレオチドプローブを合成し、これを用いて、当該生物から調製されたゲノムライブラリーからα-アミラーゼをコード化するクローンを同定することができる。あるいは、既知のα-アミラーゼ遺伝子と対応する配列を含む標識されたオリゴヌクレオチドプローブをプローブとして用い、低ストリンジェンシーのハイブリダイゼーション及び洗浄条件を用いて、α-アミラーゼをコード化するクローンを同定することができる。α-アミラーゼをコード化するクローンを同定するためのさらに別の方法は、発現ベクター、例えばプラスミドにゲノムDNAのフラグメントを挿入すること、得られたゲノムDNAライブラリーを用いてα-アミラーゼ陰性細菌を形質転換すること、及びα-アミラーゼの基質を含むアガー上に形質転換された細菌をプレーティングすること、その結果α-アミラーゼを発現するクローンを同定すること、を含む。あるいは、酵素をコード化するDNA配列を、確立されている標準的な方法、例えば、SLBeaucageandMHCaruthers1981TetrahedronLetters22:1859に記述されるアミド亜りん酸エステル法、又はMatthesetal1984EMBOJ3801805により記述される方法により合成的に調製してもよい。アミド亜りん酸エステル法によれば、オリゴヌクレオチドを例えば自動DNA合成装置によって合成し、精製し、アニールし、ライゲートし、適切なベクターにクローン化する。最終的に、DNA配列は、標準的な技術に従って、合成、ゲノム又はcDNA由来のフラグメント必要に応じて、DNA配列全体の様々な部分に対応するフラグメントをライゲートすることにより調製された、ゲノム及び合成由来の混成、合成及びcDNA由来の混成、又は、ゲノム及びcDNA由来の混成のDNA配列でもよい。DNA配列はまた、例えば、米国特許第4,683,202号明細書又はRKSaikietal1988ScienceVol239no4839pp487491に記述されるような、特異的なプライマーを用いたポリメラーゼ連鎖反応PCRにより調製され得る。部位特異的変異誘発法α-アミラーゼをコード化するDNA配列を単離し、変異のための所望の部位を特定したら、合成オリゴヌクレオチドを用いて変異を導入してもよい。これらのオリゴヌクレオチドは、所望の変異部位に隣接するヌクレオチド配列を含み、変異体ヌクレオチドは、オリゴヌクレオチド合成時に挿入される。特定の方法によれば、α-アミラーゼ遺伝子を有するベクター内に、α-アミラーゼをコード化する配列に架かるDNAの一本鎖ギャップを生成する。その結果、所望の変異を含む合成ヌクレオチドが、一本鎖DNAの相同な部分にアニールされる。残っているギャップは、その後、DNAポリメラーゼIKlenowフラグメントを用いて塞がれ、コンストラクトは、T4リガーゼを用いてライゲートされる。この方法の具体例は、Morinagaetal1984、Biotechnology2pp636639に記載されている。米国特許第4,760,025号明細書は、カセットに小さな改変を加えることにより、複数の変異をコード化するオリゴヌクレオチドを導入する手法を開示する。しかしながら、Morinaga法によれば、様々な長さの多数のオリゴヌクレオチドが導入され得るので、より多くの種類の変異を導入することも可能である。α-アミラーゼをコード化するDNA配列に変異を導入するための別の方法は、NelsonandLongに記載される。この方法は、化学合成されたDNA鎖をPCR反応のプライマーの一つとして用いることにより所望の変異が導入されたPCRフラグメントの3段階生成を含む。PCRで生成されたフラグメントから、変異を有するDNAフラグメントを、制限エンドヌクレアーゼでの切断により単離し、発現プラスミドに再挿入することができる。ランダム変異誘発法ランダム変異誘発法は、局所的又は領域特異的ランダム変異誘発の何れかにより、対象となるアミノ酸配列に翻訳される遺伝子の少なくとも3つの部分において、又は全遺伝子内において、好適に行われる。親α-アミラーゼをコード化するDNA配列のランダム変異誘発は、当該技術分野において知られている任意の方法の使用により便宜的に行われ得る。上記に関して、本発明の更なる側面は、親α-アミラーゼの変異体であって、例えば、親に対して改変されたでんぷん親和性を示す変異体、を生成するための方法であって、a親α-アミラーゼをコード化するDNA配列をランダム変異誘発に供すること、b宿主細胞において、ステップaで得られる変異誘発されたDNA配列を発現すること、及びc親α-アミラーゼと比較して改変されたでんぷん親和性を有するα-アミラーゼ変異体を発現する宿主細胞についてスクリーニングすること、を含む、方法に関する。本発明の上記方法のステップaは、好ましくは、ドープされたdopedプライマーを用いて行われる。例えば、ランダム変異誘発は、好適な物理的又は化学的変異誘発剤を使用することにより、好適なオリゴヌクレオチドを使用することにより、又はDNA配列をPCR生成変異誘発法に供することにより行うことができる。更に、ランダム変異誘発法は、これらの変異誘発剤の任意の組み合わせを用いて行うこともできる。変異誘発剤は、例えば、転移、転換、反転、スクランブリング、欠失、及び/又は挿入を誘発するものでもよい。本目的に適した物理的又は化学的変異誘発剤の例としては、紫外線UV照射、ヒドロキシルアミン、N-メチル-N’-ニトロ-N-ニトロソグアニジンMNNG、O-メチルヒドロキシルアミン、亜硝酸、エチルメタンスルホン酸EMS、亜硫酸水素ナトリウム、ギ酸、及びヌクレオチドアナログが挙げられる。斯かる試薬を使用する場合、変異誘発は、変異誘発の対象となる親酵素をコード化するDNA配列を、選択された変異誘発剤の存在下、所望の変異誘発を生じさせるのに適した条件下でインキュベートすること、及び、所望の性質を有する変異誘発されたDNAを選択すること、により行われる。オリゴヌクレオチドを用いて変異誘発を行う場合、変更すべき位置でのオリゴヌクレオチドの合成時に、3つの非親ヌクレオチドを用いてオリゴヌクレオチドをドープdoped又はスパイクspikedしてもよい。ドーピングdoping又はスパイキングspikingは、望ましくないアミノ酸のコドンを避けるように行ってもよい。ドープ又はスパイクされたオリゴヌクレオチドは、例えば、PCR、LCR又は適切と見なされた任意のDNAポリメラーゼ及びリガーゼを用いた任意の公知の技術により、α-アミラーゼ酵素をコード化するDNAに組み込まれ得る。好ましくは、ドーピングは、各位置における野生型及び変異の百分率が予め定義されている定数ランダムドーピングconstantrandomdopingを用いて行われる。更に、ドーピングは、特定のヌクレオチドの導入についての優先度、ひいては、1又は2以上の特定のアミノ酸残基の導入についての優先度を高めるように実施してもよい。例えば、ドーピングは、各位置に野生型が90、変異が10の比率で導入されるように実施することができる。ドーピングスキームの選択において更に考慮すべきは、遺伝子及びタンパク質の構造的な制約についてである。ドーピングスキームは、DOPEプログラムを用いて行ってもよい。これにより、とりわけ、停止コドンの導入を確実に避けることができる。PCR生成変異誘発を用いる場合、親α-アミラーゼをコード化する化学的処理又は未処理の遺伝子を、ヌクレオチドの誤取り込みを増加させる条件下でPCRに供するDeshler1992GeneticAnalysis:BiomolecularEngineering94pp103106;Leungetal1989TechniqueVol1pp1115。E.コリEcoliFowleretal1974MolecGenGenet133pp179191、S.セレヴィシエScereviseae又は任意の他の微生物の変異誘発株を用いて、例えば、変異誘発株に親グリコシダーゼを含むプラスミドを形質転換し、プラスミドを含む変異誘発株を培養し、変異誘発株から変異誘発されたプラスミドを単離することにより、α-アミラーゼをコード化するDNAのランダム変異誘発を実施することができる。変異誘発されたプラスミドは、続いて発現生物に形質転換され得る。変異誘発されたDNA配列は、親α-アミラーゼを発現する生物から調製されるゲノム又はcDNAライブラリーに存在するのが好適である。あるいは、DNA配列は、好適なベクター、例えばプラスミド又はバクテリオファージ上に存在してもよく、これをそのまま変異誘発剤とインキュベートし、或いは別の手法で変異誘発剤に曝露してもよい。また、変異誘発されたDNAは、前記細胞のゲノムに統合されることにより、又は細胞内に取り込まれたベクター上に存在することにより、宿主細胞内に存在してもよい。最終的に、変異誘発されたDNAは、単離された形態でもよい。ランダム変異誘発に供されるDNA配列は、好ましくはcDNA又はゲノムDNA配列であると理解される。場合によっては、発現ステップb又はスクリーニングステップcを行う前に、変異誘発されたDNA配列を増幅することが好都合である。斯かる増幅は、本技術分野で公知の方法を用いて実施することができる。現在好まれている手法は、親酵素のDNA又はアミノ酸配列に基づいて調製されるオリゴヌクレオチドプライマーを用いたPCR生成増幅である。変異誘発剤とのインキュベート又は曝露に続いて、変異誘発されたDNAは、当該DNA配列を有する好適な宿主細胞を、発現を可能とする条件下で培養することにより発現される。この目的のために用いられる宿主細胞は、変異誘発されたDNA配列任意によりベクター上に存在してもよいで形質転換されたものや、変異誘発処理時に親酵素をコード化するDNA配列が導入されたものが挙げられる。好適な宿主細胞の例は、以下:グラム陽性細菌、例えばバシラスサブティリスBacillussubtilis、バシラスリケニホルミス、バシラスレンタスBacilluslentus、バシラスブレビスBacillusbrevis、バシラスステアロサーモフィラス、バシラスアルカロフィラスBacillusalkalophilus、バシラスアミロリケファシエンス、バシラスコアグランスBacilluscoagulans、バシラスサーキュランスBacilluscirculans、バシラスロータスBacilluslautus、バシラスメガテリウムBacillusmegaterium、バシラスチューリンゲンシスBacillusthuringiensis、ストレプトマイセスリビダンスStreptomyceslividans又はストレプトマイセスムリヌスStreptomycesmurinus;及びグラム陰性細菌、例えばE.コリである。変異誘発されたDNA配列は、変異誘発されたDNA配列の発現を許容する機能をコード化するDNA配列をさらに含み得る。局所的ランダム変異誘発法ランダム変異誘発法は、親α-アミラーゼの所望の部分に対して局所的に実施するのが有利である。これは例えば、酵素の特定の領域が、酵素の所定の特性に特に重要であることが特定されており、当該領域が修飾された場合に、改善された特性を有する変異体が得られると予測される場合等に有用である。斯かる領域は、通常、親酵素の三次構造が解明されている、及び酵素の機能に関連している場合に、特定され得る。局所的又は領域特異的ランダム変異誘発は、上述のPCR生成変異誘発技術、又は当該技術分野において知られている任意の他の好適な技術の使用により、都合良く行なわれる。あるいは、修飾されるDNA配列の部分をコード化するDNA配列は、例えば、好適なベクターへの挿入により単離され得、前記部分は上述の任意の変異誘発法の使用により続いて変異誘発に供され得る。α-アミラーゼ変異体を用意する代替の方法本発明の変異体を用意するための代替の方法は、例えば、国際公開第95/22625号AffymaxTechnologiesNVによる及び国際公開第96/00343号NovoNordiskASによるに記述される方法を含む、当該技術分野において知られている遺伝子シャッフリング法を含む。α-アミラーゼ変異体の発現本発明に従って、上述の方法により、又は当該技術分野において知られている任意の代替の方法により生産される変異体をコード化するDNA配列は、典型的に、プロモータ、オペレータ、リボゾーム結合部位、及び翻訳開始シグナルをコード化する調節配列を含むと共に、更には任意により、抑制遺伝子又は様々な活性化遺伝子を含む発現ベクターを用いて、酵素の形態で発現され得る。本発明のα-アミラーゼ変異体をコード化するDNA配列を有する組換発現ベクターは、組換DNA手順に好適に供され得るベクターであれば任意であるが、ベクターの選択は多くの場合、その導入対象となる宿主細胞に依存する。従って、ベクターは、自律複製ベクターautonomouslyreplicatingvector、即ち、染色体外物質extracheomosomalentityとして存在し、その複製が、染色体複製から独立しているベクターであってもよい。その例としては、、プラスミド、バクテリオファージ、又は染色体外因子extracheomosomalelement、微小染色体又は人工染色体等が挙げられる。あるいは、ベクターは、宿主細胞に導入された場合、宿主細胞ゲノムに統合され、それが統合された1又は2以上の染色体と共に複製されるものであってもよい。ベクターにおいて、DNA配列は、好適なプロモータ配列と作動式にoperably連結されるべきである。プロモータは、選択された宿主細胞において転写活性を示すDNA配列であれば任意であり、宿主細胞に対して同種又は異種のいずれのタンパク質をコード化する遺伝子に由来するものでもよい。特に細菌宿主において、本発明のα-アミラーゼ変異体をコード化するDNA配列の転写のために好適なプロモータの例は、E.コリのlacオペロンのプロモータ、ストレプトマイセスセリカラーストレプトマイセスセリカラーアガラーゼ遺伝子dagAプロモータ、バシラスリケニホルミスα-アミラーゼ遺伝子amyLのプロモータ、バシラスステアロサーモフィラスマルトース生成型アミラーゼ遺伝子amyMのプロモータ、バシラスアミロリケファシエンスα-アミラーゼamyQのプロモータ、バシラスサブティリスxylA及びxylB遺伝子のプロモータ等である。真菌宿主における転写について、有用なプロモータの例は、A.オリザエTAKAアミラーゼ、リゾムコルミエヘイRhizomucormieheiアスパラギン酸プロテイナーゼ、A.ニジェール中性α-アミラーゼ、A.ニジェール酸安定性α-アミラーゼ、A.ニジェールグルコアミラーゼ、リゾムコルミエヘイリパーゼ、A.オリザエアルカリ性プロテアーゼ、A.オリザエトリオースリン酸イソメラーゼ又はA.ニデュランスAnidulansアセトアミダーゼをコード化する遺伝子由来のものである。本発明の発現ベクターはまた、好適な転写ターミネータ、及び真核生物において、本発明のα-アミラーゼ変異体をコード化するDNA配列と作動式に連結されるポリアデニル化配列を含み得る。終結及びポリアデニル化配列は、好適には、プロモータとして同一の起源由来でもよい。ベクターは、所望の宿主細胞においてベクターの複製を可能にするDNA配列を更に含んでもよい。斯かる配列の例としては、プラスミドpUC19、pACYC177、pUB110、pE194、pAMB1及びpIJ702の複製起点が挙げられる。ベクターはまた、選択可能なマーカー、例えば、宿主細胞の欠損を補う遺伝子産物を生成する遺伝子を含んでいてもよい。その例としては、B.サブティリス又はB.リケニホルミス由来のdal遺伝子、又は抗生物質耐性、例えばアンピシリン、カナマイシン、クロラムフェニコール又はテトラサイクリン耐性を付与する遺伝子等が挙げられる。更に、ベクターは、アスペルギルス属選択マーカー、例えばamdS、argB、niaD及びsC、ハイグロマイシン耐性を与えるマーカーを含んでいてもよい。或いは、例えば国際公開第91/17243号等に記載の共形質転換により、選択を達成してもよい。細胞内発現は幾つかの点で例えば宿主細胞として特定の細菌を用いた場合等に有利な場合もあるものの、通常は発現が細胞外であることが好まれる。一般的に、本明細書で言及されるバシラス属のα-アミラーゼは、発現されたプロテアーゼの培地への分泌を可能とするプレ領域を含む。必要であれば、このプレ領域を、異なるプレ領域又はシグナル配列に置き換えてもよい。これは好適には、各プレ領域をコード化するDNA配列の置換により達成される。α-アミラーゼ変異体をコード化する本発明のDNAコンストラクトを、プロモータ、ターミネータ及び他の要素とそれぞれライゲートし、更に複製に必要な情報を含む好適なベクターに挿入するために用いられる手順は、当業者には周知である例えば、Sambrooketal,MolecularCloning:ALaboratoryManual,2ndEd,ColdSpringHarbor,1989を参照のこと。上記で定義されたような、本発明のDNAコンストラクト又は発現ベクターのいずれかを含む本発明の細胞は、本発明のα-アミラーゼ変異体の組換生産における宿主細胞として有利に用いられる。変異体をコード化する本発明のDNAコンストラクトによるこの細胞の形質転換は、好適には、DNAコンストラクトを1又は2以上のコピーとして宿主染色体に統合することにより達成することができる。この統合は、一般的に、DNA配列が細胞中に安定的に維持される可能性が高いので有利であると考えられている。DNAコンストラクトの宿主染色体への統合は、従来の方法に従って、例えば、相同又は非相同組み換えにより行ってもよい。あるいは、細胞は、宿主細胞の様々な種類に関連して、上述のような発現ベクターを用いて形質転換されてもよい。本発明の細胞は、高等生物、例えば哺乳類又は昆虫の細胞でもよいが、好ましくは、微生物細胞、例えば細菌又は真菌酵母を含む細胞である。好適な細菌の例は、グラム陽性細菌、例えばバシラスサブティリス、バシラスリケニホルミス、バシラスレンタス、バシラスブレビス、バシラスステアロサーモフィラス、バシラスアルカロフィラス、バシラスアミロリケファシエンス、バシラスコアグランス、バシラスサーキュランス、バシラスロータス、バシラスメガテリウム、バシラスチューリンゲンシス、又はストレプトマイセスリビダンス若しくはストレプトマイセスムリヌス、又はグラム陰性細菌、例えばE.コリである。細菌の形質転換は、例えば、プロトプラスト形質転換により、又はコンピテント細胞を用いることにより、それ自体公知の方法で実施してもよい。酵母生物は、サッカロマイセス属Saccharomyces、又はシゾサッカロマイセス属Schizosaccharomycesの種、例えばサッカロマイセスセレヴィシエSaccharomycescerevisiaeから選択することが望ましい。糸状菌は、アスペルギウス属の種、例えばアスペルギウスオリザエ又はアスペルギウスニジェールに属するものが有利である。真菌細胞は、プロトプラスト形成、及びプロトプラストの形質転換、続いてそれ自体公知の手法による細胞壁の再生を含むプロセスにより、形質転換されてもよい。アスペルギルス属宿主細胞の形質転換についての好適な手順は、欧州特許第238023号明細書に記述される。なお、更なる側面によれば、本発明は、本発明のα-アミラーゼ変異体を生産する方法に関し、その方法は、変異体の産生をもたらす条件下で上述のような宿主細胞を培養すること、及び、細胞及び/又は培養培地からの変異体を回収することを含む。細胞を培養するための培地としては、対象となる宿主細胞を培養し、本発明のα-アミラーゼ変異体の発現を得るのに適した培地であれば、任意の従来の培地を用いることができる。好適な培地は、商業的供給者から入手可能であり、或いは公開されているレシピ例えば、theAmericanTypeCultureCollectionのカタログ参照に従って調製してもよい。宿主細胞から分泌されるα-アミラーゼ変異体は、遠心分離又は濾過により培地から細胞を分離すること、及び塩、例えば硫酸アンモニウムの手法により培地のタンパク質成分を沈殿させること、続いて、クロマトグラフィー手順、例えばイオン交換クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー等の使用を含む、周知の手順により、培養培地から簡便に回収され得る。変異体の命名についての規約配列番号6に開示されるα-アミラーゼのアミノ酸配列を、他の多数のα-アミラーゼのアミノ酸配列とアラインすることにより得られた番号付けシステムを用いることにより、構造的相同性の領域において、α-アミラーゼのアミノ酸残基の位置を示すことが可能である。本発明の様々なα-アミラーゼ変異体を記述するにあたり、参照の便宜のため、以下に説明する命名法を採用する。いずれの場合も、認められているIUPACの1文字又は3文字のアミノ酸の略称が用いられる。本明細書及び特許請求の範囲において、アミノ酸残基についての従来の1文字又は3文字のコードを用いる。参照の便宜のために、本発明のα-アミラーゼ変異体は、以下の命名法を用いて記載する。1又は2以上の元のアミノ酸:1又は2以上の位置:1又は2以上の置換後のアミノ酸この命名法によれば、例えば位置30におけるアラニンのアスパラギンへの置換は:Ala30Asn又はA30Nとして表され、同一の位置におけるアラニンの欠失は:Ala30又はA30として表され、位置30の後ろへの更なるアミノ酸残基、例えばリジンの挿入は:Ala30AlaLys又はA30AKとして表される。アミノ酸残基の連続した範囲、例えばアミノ酸残基30-33の欠失は、30-33又はΔA30-N33として表される。一つのアミノ酸残基の欠失は、単純に30と表してもよい。ある特定のα-アミラーゼが、他のα-アミラーゼとの比較において欠失を含み、斯かる位置に挿入がされる場合、例えば、位置36におけるアスパラギン酸の挿入であれば:36Asp又は36Dとして表される。多重変異は、プラス記号により、又はスペースを用いて区切られる。即ち:Ala30AsnGlu34Ser又はA30NE34SAla30AsnGlu34Ser又はA30NE34Sは、位置30及び34のアラニン及びグルタミン酸を、それぞれアスパラギン及びセリンに置換する変異を表す。あるいは、多重変異は、カンマ又はセミコロンにより区切ってもよい。即ち:Ala30Asn,Glu34Ser又はA30N,E34S。より簡略化する場合、多重変異は、スペース等により区切ってもよい。あるいは、多重変異は、カンマ又はセミコロンにより区切ってもよい。即ち:Ala30AsnGlu34Ser又はA30NE34S。所定の位置に1又は2以上の代替のアミノ酸残基が挿入され得る場合:A30N,E又はA30N又はA30Eとして表される。あるいは、所定の位置に1又は2以上の代替のアミノ酸残基が挿入され得る場合:A30[N,E]又はA30[NE]、あるいはA30{N,E}又はA30{NE}として表される。簡略化のために、特定の位置で置換され得る代替のアミノ酸は、以下:A30N,E,H,L又はVとして表してもよい。更に、本明細書において、具体的な修飾を特定することなく、修飾に好適な位置のみが表示されている場合、その位置に存在するアミノ酸残基が任意のアミノ酸残基で置換され得るものと解される。従って、例えば、位置30のアラニンの修飾が言及されているが、修飾が特定されていない場合、アラニンが欠失され、又は任意の他のアミノ酸、即ち:R,N,D,A,C,Q,E,G,H,I,L,K,M,F,P,S,T,W,Y,Vのうちのいずれかで置換され得ると解される。更に、A30Xは、以下の置換:A30R,A30N,A30D,A30C,A30Q,A30E,A30G,A30H,A30I,A30L,A30K,A30M,A30F,A30P,A30S,A30T,A30W,A30Y,又はA30V;又は簡潔に:A30R,N,D,C,Q,E,G,H,I,L,K,M,F,P,S,T,W,Y,V,又は、例えばA30[R,N,D,C,Q,E,G,H,I,L,K,M,F,P,S,T,W,Y,V]のうちの任意の一つを意味する。当業者には周知のとおり、例えば配列番号6に従う番号付けを用いることは、必ずしも親が配列番号6であることを意味するものではなく、単に改変される位置が配列番号6に従って定義されることを意味するにすぎない。それ故、特定の置換を記述する別の方法は、Xを用いて改変されるアミノ酸を示すことである。すなわち、X30Nは、位置30に存在する任意のアミノ酸がNで置換され得ることを意味し、親α-アミラーゼとして様々なα-アミラーゼが用いられ得ることを反映している。従って、X30N又はX30Vの命名は、親α-アミラーゼ中の位置30に存在する任意のアミノ酸が、アスパラギン又はバリンにより置換されることを意味する。アミノ酸残基の特性帯電アミノ酸:Asp、Glu、Arg、Lys、His負帯電アミノ酸一番目が最も負の残基:Asp、Glu正帯電アミノ酸一番目が最も正の残基:Arg、Lys、His中性アミノ酸:Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Phe、Tyr、Trp、Met、Cys、Asn、Gln、Ser、Thr、Pro疎水性アミノ酸残基最後に挙げた残基が最も疎水性の残基:Gly、Ala、Val、Pro、Met、Leu、Ile、Tyr、Phe、Trp親水性アミノ酸最後に挙げた残基が最も親水性の残基:Thr、Ser、Cys、Gln、Asnこの命名法は特に、特定の共通の特性を有するアミノ酸残基の置換、挿入、又は欠失を含む修飾に関連する。斯かる修飾は、保存的アミノ酸修飾と呼ばれる。保存的修飾の例としては、塩基性アミノ酸アルギニン、リジン及びヒスチジン、酸性アミノ酸グルタミン酸及びアスパラギン酸、極性アミノ酸グルタミン及びアスパラギン、疎水性アミノ酸ロイシン、イソロイシン及びバリン、芳香族アミノ酸フェニルアラニン、トリプトファン及びチロシン、及び小さいアミノ酸グリシン、アラニン、セリン、スレオニン及びメチオニンの各群内で行われる修飾が挙げられる。比活性を大きく改変しないアミノ酸修飾は、本技術分野では周知であり、例えば、HNeurathandRLHill1979InTheProteinsAcademicPressNewYorkに記載されている。最も一般的に行なわれる変換は、Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Tyr/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu、及びAsp/Gly、並びにその逆であるTaylor1986JournalofTheoreticalBiology119205218。本発明の変異体好ましい実施形態によれば、変異体は、親α-アミラーゼの領域193~213における1又は2以上の或いは1又は数個のアミノ酸残基の1又は2以上の改変を含む。特に好ましい実施形態によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に、少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、さらに193~213のアミノ酸領域内に、1又は2以上の或いは1又は数個のアミノ酸残基の改変を含むここで、番号付けは、配列番号6の成熟ポリペプチドに対応する、即ち配列番号6の番号付けを用いる。本発明者等は、斯かる改変によって得られる変異体が、キレート剤を含む組成物において、向上した安定性を有し得ることを見出した。斯かる安定性は、特にキレート剤が、材料及び方法の記載に従って、21°C及びpH8.0で測定した場合に、10mM未満、好ましくは9.5mM未満、好ましくは9.0mM未満、好ましくは8.5mM未満、好ましくは8.0mM未満、好ましくは7.5mM未満、好ましくは7.0mM未満、好ましくは6.5mM未満、好ましくは6.0mM未満、好ましくは5.5mM未満、好ましくは、好ましくは5.0mM未満、好ましくは4.5mM未満、4.0mM未満、好ましくは3.5mM未満、好ましくは3.0mM未満、好ましくは2.5mM未満、好ましくは2.0mM未満、好ましくは1.5mM未満又は好ましくは1.0mM未満の濃度で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得るものである場合に顕著である。本発明の第一の側面は、親α-アミラーゼの変異体を含む組成物であって、前記変異体が、配列番号6に従う番号付けを用いて範囲193~213において1又は2以上の位置に置換を含み、更に前記組成物が少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、組成物に関する。本発明の第一の側面は、親α-アミラーゼの変異体を含む組成物であって、前記変異体が、配列番号6に従う番号付けを用いて範囲193~213において1又は2以上の位置に置換を含み、更に前記組成物が少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得るとともに、任意により洗浄助剤を含んでいてもよい、組成物に関する。第二の側面は、親α-アミラーゼの変異体を含む組成物であって、前記変異体α-アミラーゼが、配列番号6、8、10、12、18、及び22と、少なくとも70、例えば少なくとも75、例えば少なくとも80、例えば少なくとも85、例えば少なくとも90、例えば少なくとも95、例えば少なくとも100同一であるアミノ酸配列を含み、更に配列番号6に従う番号付けを用いて195、193、197、198、200、203、206、210、212、213及び243を含む群から選択される1又は2以上の位置に置換を含み、更に前記組成物が少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、組成物を提供する。更なる側面は、配列番号6に従う番号付けを用いて195、193、197、198、200、203、206、210、212、213及び243を含む群から選択される1又は2以上の位置に置換を含む変異体を含む組成物であって、前記組成物が更に少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、組成物を提供する。更なる側面は、配列番号6に従う番号付けを用いて195、193、197、198、200、203、206、210、212、213及び243を含む群から選択される1又は2以上の位置に置換を含む変異体を含む組成物であって、前記変異体が配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24及び26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、配列番号8、配列番号10、配列番号12、配列番号18、又は配列番号22からなる群より選択されるアミノ酸配列と、少なくとも70の同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記組成物が更に少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、組成物を提供する。更なる側面は、配列番号6に従う番号付けを用いて195、193、197、198、200、203、206、210、212、213及び243を含む群から選択される1又は2以上の位置に置換を含む変異体を含む組成物であって、前記変異体が配列番号14、配列番号16又は配列番号20からなる群より選択されるアミノ酸配列と、少なくとも70の同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記組成物が更に少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、組成物を提供する。第三の側面は、21°C及びpH8.0で、80mM塩化カリウム及び49mMEPPS中で測定した場合に、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、組成物に関する。第三の側面は、材料及び方法に記載のアッセイで測定した場合に、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、組成物に関する。従って、本発明の好ましい側面によれば、変異体は、配列番号6の成熟ポリペプチドの位置193~213に対応する範囲の1又は2以上の位置に少なくとも1の置換を含む。本願において、~に従う番号付けを用いてusingthenumberingaccordingto又は~に対応するcorrespondingtoという語は、相互交換可能に用いられ、本願において用いられる番号付けシステムを意味する。従って、位置195は、配列番号6の位置195に対応するアミノ酸である。従って、各アミノ酸配列間の可能な限り最良のアミノ酸配列アラインメントにより決定される同等の1又は2以上の位置で修飾された他の親α-アミラーゼの変異体も、含まれることになる。欠失が存在する場合は、欠失が存在しないものと仮定して、番号付けを決定する。特に好ましい実施形態によれば、組成物は変異体を含み、その変異体は、配列番号6の番号付けを用いて193、195、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される位置に対応する1又は2以上の位置に改変を含み、更に、116、118、129、133、134、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447、458からなる群より選択される位置に対応する1又は2以上の位置に改変を含む。特に好ましい実施形態によれば、組成物は変異体を含み、その変異体は、配列番号6の番号付けを用いて181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に193、195、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される位置に対応する1若しくは2以上の、又は1若しくは数個の位置に改変を含み、更に、116、118、129、133、134、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447、458からなる群より選択される位置に対応する1若しくは2以上の、又は1若しくは数個の位置に改変を含む。本発明の一側面によれば、組成物は、配列番号6に従う番号付けを用いて、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に、少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に193、195、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される1又は2以上の或いは1又は数個の位置に置換を含む親α-アミラーゼの変異体を含み、前記変異体は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22を含む任意の配列でもよい、親α-アミラーゼのアミノ酸配列と少なくとも70、好ましくは少なくとも75、好ましくは少なくとも80、好ましくは少なくとも81、好ましくは少なくとも82、好ましくは少なくとも83、好ましくは少なくとも84、好ましくは少なくとも85、好ましくは少なくとも86、好ましくは少なくとも87、好ましくは少なくとも88、好ましくは少なくとも89、特に好ましくは少なくとも90、好ましくは少なくとも91、好ましくは少なくとも92、好ましくは少なくとも93、好ましくは少なくとも94、好ましくは少なくとも95、好ましくは少なくとも96、好ましくは少なくとも97、好ましくは少なくとも98、好ましくは少なくとも99の同一性の程度を有するアミノ酸配列を有し、前記変異体は、残存活性がキレート剤前記キレート剤が、後述のように、21°C及びpH8.0で測定した場合に、10mM未満の濃度で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得るの存在下でEnzChek又はPNPG7アッセイ詳細については材料及び方法を参照のことに記述されるようにpH8及び31°Cで18時間後に測定される場合に、少なくとも70の残存活性、好ましくは少なくとも75の残存活性、好ましくは少なくとも80の残存活性、好ましくは少なくとも85の残存活性、好ましくは少なくとも90の残存活性、好ましくは少なくとも95の残存活性、好ましくは少なくとも100の残存活性、好ましくは少なくとも105の残存活性、好ましくは少なくとも110の残存活性を有する、又は親α-アミラーゼの残存活性と比較して少なくとも5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100pp改善された残存活性を有する。本発明の組成物は、好ましくは、α-アミラーゼを含み、ここで親α-アミラーゼが、以下の置換:位置193の[G,A,S,T,又はM]による;位置195の[F,W,Y,L,I,又はV]による;位置197の[F,W,Y,L,I,又はV]による;位置198の[Q又はN]による;位置200の[F,W,Y,L,I,又はV]による;位置203の[F,W,Y,L,I,又はV]による;位置206の[F,W,Y,N,L,I,V,又はH]による;位置210の[F,W,Y,L,I,又はV]による;位置212の[F,W,Y,L,I,又はV]又は位置213の[G,A,S,T,又はM]による置換の少なくとも1により修飾され、前記位置は、配列番号6を有する成熟ポリペプチドの位置に対応し、更に前記組成物は、少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、材料及び方法の記載に従い21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る。本発明の組成物は、好ましくは、α-アミラーゼ変異体を含み、前記変異体が181、182、183、又は184のアミノ酸領域内少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、ここで親α-アミラーゼが以下の置換:193の[G,A,S,T,又はM]による;位置195の[F,W,Y,L,I,又はV]による;位置197の[F,W,Y,L,I,又はV]による;位置198の[Q又はN]による;位置200の[F,W,Y,L,I,又はV]による;位置203の[F,W,Y,L,I,又はV]による;位置206の[F,W,Y,N,L,I,V,又はH]による;位置210の[F,W,Y,L,I,又はV]による;位置212の[F,W,Y,L,I,又はV]、位置213の[G,A,S,T,又はM]又は位置243の[F,W,Y,L,I又はV]による置換のうち少なくとも1つにより修飾され、前記位置が、配列番号6を有する成熟ポリペプチドの位置に対応し、更に前記組成物は、少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、材料及び方法の記載に従い21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る。特に、本発明は、α-アミラーゼを含む組成物に関し、ここでアミノ酸配列が以下の置換:193のTによる;位置195のF又はYによる;位置197のF又はLによる;位置198のNによる;位置200のFによる;位置203のFによる;位置206のF、L又はYによる;位置210のYによる;位置212のVによる;位置213のAによる;位置243のFによる置換の少なくとも1つにより修飾され、前記位置が、配列番号6を有する成熟ポリペプチドの位置に対応し、更に、前記組成物が少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、材料及び方法の記載に従い21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る。更なる側面によれば、組成物は、α-アミラーゼ変異体を含み、前記変異体が193、195、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される2若しくはそれ以上の、又は2若しくは数個の位置での置換を含み、前記位置が、配列番号6の成熟ポリペプチドの位置に対応し、更に、前記組成物が少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、材料及び方法の記載に従い21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る。更に別の側面によれば、組成物は、α-アミラーゼ変異体を含み、前記変異体が181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも2若しくはそれ以上、又は少なくとも3若しくはそれ以上の欠失を含み、更に193、195、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される2又はそれ以上の位置に置換を含み、前記位置が、配列番号6の成熟ポリペプチドの位置に対応し、更に、前記組成物が少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、材料及び方法の記載に従い21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得、ここで、キレート剤前記キレート剤は10mM未満の濃度で、後述のように、21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得るの存在下で、EnzChek又はPNPG7アッセイ詳細については材料及び方法を参照のことに記述されるように、残存活性がpH8及び31°Cで18時間後に測定された場合、前記変異体が、少なくとも70の残存活性、好ましくは少なくとも75の残存活性、好ましくは少なくとも80の残存活性、好ましくは少なくとも85の残存活性、好ましくは少なくとも90の残存活性、好ましくは少なくとも95の残存活性、好ましくは少なくとも100の残存活性、好ましくは少なくとも105の残存活性、好ましくは少なくとも110の残存活性を有し、又は親α-アミラーゼの残存活性と比較して、少なくとも5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100pp改善された残存活性を有する。好ましい実施形態によれば、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内の少なくとも2の欠失は、181182;181183、182183;181184、182184及び183184からなる群より選択される。更に別の側面によれば、組成物は、α-アミラーゼ変異体を含み、前記変異体が配列番号6の番号付けを用いて181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失含み、更に193、195、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される2又はそれ以上の位置に置換を含み、前記位置は、配列番号6の成熟ポリペプチドの位置に対応し、116、118、129、133、134、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447、458からなる群より選択される位置に対応する1若しくは又は2以上の、又は1又若しくは数個の位置に改変を含み、更に、前記組成物は少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤は10mM未満の濃度で、材料及び方法の記載に従い21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る。本発明の一側面によれば、組成物は、少なくとも1のキレート剤を含み、前記キレート剤は10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得、以下のアミラーゼ変異体;SP722R181G182N195F;SP722G182D183N195F;SP722D183G184N195F;SP722R181G182N195FM202L;SP722G182D183N195FM202L;SP722D183G184N195FM202L;SP722D183G184N195FV206LY243F;SP722D183G184N195FV206YY243F;SP722R181G182L118KN195FR458K;SP722G182D183L118KN195FH458K;SP722D183G184L118KN195FH458K;SP722D183G184G133EG149RN195YY203FV206LAA560R181G182N195F;AA560G182D183N195F;AA560D183G184N195F;AA560D183G184I206Y;AA560D183G184Y243F;AA560D183G184V206L、Y243F;AA560D183G184N195FV206L;AA560D183G184N195FY243F;AA560D183G184N195FV206LY243F;AA560D183G184N195FV206YY243F;AA560R181G182N195FM202L;AA560G182D183N195FM202L;AA560D183G184N195FM202L;AA560R181G182R118KN195FR320KR458K;AA560G182D183R118KN195FR320KR458K;AA560D183G184R118KN195FR320KR458K;AA560D183G184R118KN195FI206LR320KR458K;AA560D183G184R118KN195FI206YR320KR458K;AA560D183G184R118KN195FY243FR320KR458K;AA560D183G184R118KN195FI206LY243FR320KR458K、SP707R181G182N195F;SP707G182H183N195F;SP707H183G184N195F;SP707H183G184I206Y;SP707H183G184N195FI206Y;SP707H183G184N195FY243F;SP707H183G184I206YY243F;SP707H183G184N195FI206LY243F;SP707H183G184N195FI206YY243F;SP707R181G182N195FM202L;SP707G182H183N195FM202L;SP707H183G184N195FM202L;SP707R181G182R118KN195FR320KR458K;SP707G182H183R118KN195FR320KR458K;SP707H183G184R118KN195FR320KR458K;SP690R181G182N195F;SP690G182T183N195F;SP690T183G184N195F;SP690H183G184V206Y;SP690H183G184N195FV206Y;SP690H183G184N195FY243F;SP690H183G184V206YY243F;SP690H183G184N195FV206LY243F;SP690H183G184N195FV206YY243F;SP690R181G182N195FM202L;SP690G182T183N195FM202L;SP690T183G184N195FM202L;SP690R181G182R118KN195FR320KR458K;SP690G182T183R118KN195FR320KR458K;SP690T183G184R118KN195FR320KR458K、の1又は2以上或いは1又は数個、を含む。有用な実施形態によれば、本発明の組成物は、親α-アミラーゼの変異体であるアミラーゼを含み、ここで、親α-アミラーゼが配列番号6の配列であり、前記変異体が欠失D183及びG184、並びに以下の一組の変異:aN195FH210Y;bN195FV206L,H,Y;cN195FV206L,FH210Y;dN195FV206YY243F;eN195FY243F;fS193TV206L;gG133EG149RN195YY203FV206L;hV206L,Y;iY243F;jN195FV206LY243F;kN195F;又はlV206FY243Fのうちの一つを含む。本発明の別の実施形態は、材料及び方法に記載のEnzChek又はPNPG7アッセイの記述に従って、pH8及び31°Cで18時間後に残存活性を決定した場合に、変異体の残存活性が、親α-アミラーゼと比較して、少なくとも70、例えば少なくとも75、例えば少なくとも80、例えば少なくとも85、例えば少なくとも90、例えば少なくとも95、例えば少なくとも100、例えば少なくとも105、例えば少なくとも110、例えば少なくとも115の残存活性であり、且つ、材料及び方法の記載に従って21°C及びpH8.0で測定した場合に、前記キレート剤が10mM未満、好ましくは9.5mM未満、好ましくは9mM未満、好ましくは8.5mM未満、好ましくは8mM未満、好ましくは7.5mM未満、好ましくは7mM未満、好ましくは6.5mM未満、好ましくは6mM未満、好ましくは5.5mM未満、好ましくは、好ましくは5mM未満、好ましくは4.5mM未満、4mM未満、好ましくは3.5mM未満、好ましくは3mM未満、好ましくは2.5mM未満、好ましくは2mM未満、好ましくは1.5mM未満又は好ましくは1mM未満の濃度で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、組成物に関する。本発明のさらなる実施形態は、材料及び方法に記載のEnzChek又はPNPG7アッセイの記述に従い、pH8及び31°Cで18時間後に残存活性を決定した場合に、変異体の残存活性が、キレート剤の存在下で親α-アミラーゼ残存活性と比較して、少なくとも5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100pp改善され、且つ、材料及び方法の記載に従って21°C及びpH8.0で測定した場合に、前記キレート剤が10mM未満、好ましくは9.5mM未満、好ましくは9mM未満、好ましくは8.5mM未満、好ましくは8mM未満、好ましくは7.5mM未満、好ましくは7mM未満、好ましくは6.5mM未満、好ましくは6mM未満、好ましくは5.5mM未満、好ましくは、好ましくは5mM未満、好ましくは4.5mM未満、4mM未満、好ましくは3.5mM未満、好ましくは3mM未満、好ましくは2.5mM未満、好ましくは2mM未満、好ましくは1.5mM未満又は好ましくは1mM未満の濃度で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、組成物に関する。親と比較した変異体の残存活性のポイントppの向上は、変異体の残存活性と親の残存活性との差として計算される。従って、本発明の特定の側面によれば、組成物は、リン含有、リン不含有、カルボキシレート含有、窒素含有、又は窒素不含有のキレート剤からなる群より選択されるキレート剤を含み、好ましいキレート剤は、EDTA、MGDA、EGTA、DTPA、DTPMP、HEDP、及びそれらの混合物である。本発明の好ましい側面によれば、変異体は、195、193、197、198、200、203、206、210、212及び213からなる群より選択される1又は2以上の位置に置換を含み、前記位置は配列番号6の成熟ポリペプチドの位置に対応する。本発明の特に好ましい側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に195、193、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される1又は2以上の位置に置換を含みむ前記位置は配列番号6の成熟ポリペプチドの位置に対応する。好ましい実施形態によれば、181、182、183、又は184のアミノ酸領域における少なくとも2の欠失は、181182;181183、182183;181184、182184及び183184からなる群より選択される。本発明の別の好ましい側面によれば、変異体は、195、193、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される1又は2以上の位置に置換を含み、更に、116、118、129、133、134、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447、458からなる群より選択される1又は2以上の或いは1又は数個の位置に置換を含む前記位置は配列番号6の成熟ポリペプチドの位置に対応する。本発明のさらに好ましい側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、195、193、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される1又は2以上の位置に置換を含み、更に、116、118、129、133、134、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447、458からなる群より選択される1又は2以上の位置に置換を含み、前記位置は配列番号6の成熟ポリペプチドの位置に対応する。更なる側面によれば、変異体は、116、118、129、133、134、142、146、147、149、151、152、169、174、186、193、195、197、198、200、203、206、210、212、213、235、243、244、303、320、339、359、418、431、434、447及び458からなる群より選択される2又は3以上の位置に置換を含み、前記位置は配列番号6の成熟ポリペプチドの位置に対応する。更に別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、116、118、129、133、134、142、146、147、149、151、152、169、174、186、193、195、197、198、200、203、206、210、212、213、235、243、244、303、320、339、359、418、431、434、447及び458からなる群より選択される2又は3以上の位置に置換を含み、前記位置は配列番号6の成熟ポリペプチドの位置に対応する。好ましくは、1又は2以上の上述の特定された位置に改変を含む変異体は、親α-アミラーゼと比較して、キレート剤を含む組成物中、例えば洗剤中、好ましくは液体洗剤中で向上した安定性を有する。従って、本発明の変異体は、好ましい実施形態によれば、1又は2以上のキレート剤の存在下でその親アミラーゼと比較して改善された安定性を有する。好ましい側面によれば、本発明の変異体は、1又は2以上のキレート剤及び低カルシウム濃度の存在下で、その親アミラーゼと比較して、改善された安定性を有する。さらに好ましい側面によれば、本発明の変異体は、キレート剤前記キレート剤は10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得るの存在下で、その親アミラーゼと比較して、改善された安定性を有する。特定の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、193、195、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される1又は2以上の位置の置換、及び116、118、129、133、134、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、338、359、418、431、434、447及び458からなる群より選択される1又は2以上の位置の置換を含み、前記位置は配列番号6の成熟ポリペプチドの位置に対応し、残存活性が、材料及び方法の記載に従いEnzChekアッセイ又はPNPG7アッセイに記述されるように31°C及びpH8.0で、18時間後に測定される場合、キレート剤の存在下で、前記変異体は、更に、少なくとも60、例えば少なくとも65、例えば少なくとも70、例えば少なくとも75、例えば少なくとも80、例えば少なくとも85、例えば少なくとも90、例えば少なくとも95、例えば少なくとも100の残存活性を有し、前記キレート剤は10mM未満、好ましくは9.5mM未満、好ましくは9mM未満、好ましくは8.5mM未満、好ましくは8mM未満、好ましくは7.5mM未満、好ましくは7mM未満、好ましくは6.5mM未満、好ましくは6mM未満、好ましくは5.5mM未満、好ましくは、好ましくは5mM未満、好ましくは4.5mM未満、4mM未満、好ましくは3.5mM未満、好ましくは3mM未満、好ましくは2.5mM未満、好ましくは2mM未満、好ましくは1.5mM未満又は好ましくは1mMの未満の濃度で、後述のように21°C及びpH8.0で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る。好ましい実施形態によれば、181、182、183、又は184のアミノ酸領域における少なくとも2の欠失は、181182;181183、182183;181184、182184及び183184からなる群より選択される。別の特定の側面によれば、変異体は、193、195、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される1又は2以上の位置に置換を含み、更に、116、118、129、133、134、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447及び458からなる群より選択される1又は2以上の位置に置換を含み、前記位置は配列番号6の成熟ポリペプチドの位置に対応し、更に、材料及び方法の記載に従いEnzChekアッセイ又はPNPG7アッセイに記述されるように、31°CでDTPAの存在下で、pH8で18時間後に残存活性を決定した場合に、キレート剤の存在下で、前記変異体が、少なくとも60、例えば少なくとも65、例えば少なくとも70、例えば少なくとも75、例えば少なくとも80、例えば少なくとも85、例えば少なくとも90、例えば少なくとも95、例えば少なくとも100の残存活性を有する、又は親α-アミラーゼの残存活性と比較して、少なくとも5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100pp改善された残存活性を有し、且つ、材料及び方法の記載に従い21°C及びpH8.0で測定した場合に、前記キレート剤が10mM未満、好ましくは9.5mM未満、好ましくは9mM未満、好ましくは8.5mM未満、好ましくは8mM未満、好ましくは7.5mM未満、好ましくは7mM未満、好ましくは6.5mM未満、好ましくは6mM未満、好ましくは5.5mM未満、好ましくは、好ましくは5mM未満、好ましくは4.5mM未満、4mM未満、好ましくは3.5mM未満、好ましくは3mM未満、好ましくは2.5mM未満、好ましくは2mM未満、好ましくは1.5mM未満又は好ましくは1mMの未満の濃度で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る。本発明の変異体は、それらの親α-アミラーゼと比較して、強キレート剤に対してより安定であるという利点を有するが、しかしながら、それらは同時に、親α-アミラーゼの性能特性、例えば洗浄性能又は食器洗浄性能を保持している。好ましい実施形態によれば、本発明の変異体は、キレート剤に対してより安定である利点を有し、前記キレート剤は10mM未満の濃度で、材料及び方法の記載に従い21°C及びpH8.0で、80mM塩化カリウム及び49mMEPPS中で測定された場合、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る。これらの好ましいキレート剤は、限定されるものではないが、EDTA、MGDA、EGTA、DTPA、DTPMPHEDP及びそれらの混合物から選択することができる。従って、本発明の変異体は、それらの親α-アミラーゼと比較して、金属イオン、特にカルシウムイオンと結合するキレート剤の存在下で、向上した安定性を有する。洗剤においては、洗濯プロセスにおける有益な効果のために、キレート剤を含むことは一般的であるが、向上した安定性は、天然のキレート剤、例えば、フィチン酸又はクエン酸を含む植物材料が存在する条件下でも存在し得る。特に、強キレート剤は、カルシウムイオンに対してカルシウム感受性α-アミラーゼと競合し、α-アミラーゼの構造中のカルシウムイオン結合をある程度奪ってしまう結果、α-アミラーゼの安定性又は活性が減少する。従って、本発明の変異体は、それらの親α-アミラーゼと比較して、キレート剤、例えばEDTA、MGDA、EGTA、DTPA、DTPMPHEDP及びそれらの混合物の存在下で、改善された安定性及び/又は活性を有する。親α-アミラーゼと比較してキレート剤に対する向上した安定性に加えて、本発明の変異体は、親α-アミラーゼと比較した場合、保持された又は改善された洗浄性能を有する。改善された洗浄性能は、材料及び方法の記載に従い、AMSA、又はビーカーを用いた洗浄性能試験において測定され得る。従って、本発明の特定の実施形態によれば、残存活性がキレート剤前記キレート剤は、10mM未満の濃度で、後述のように21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得るの存在下で、EnzChek又はPNPG7アッセイ詳細については材料及び方法を参照のことの記載に従いpH8及び31°Cで18時間後に測定される場合、変異体が、少なくとも60、例えば少なくとも65の残存活性、好ましくは少なくとも70の残存活性、好ましくは少なくとも75の残存活性、好ましくは少なくとも80の残存活性、好ましくは少なくとも85の残存活性、好ましくは少なくとも90の残存活性、好ましくは少なくとも95の残存活性を有し、又は親α-アミラーゼの残存活性と比較して、少なくとも5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100pp改善された残存活性を有し、材料及び方法の記載に従い、AMSA又はビーカーを用いた洗浄性能試験において測定された場合、及び変異体が、更に、親α-アミラーゼと比較して、少なくとも40、例えば少なくとも50、例えば少なくとも55、例えば少なくとも60、例えば少なくとも65、例えば少なくとも70、例えば少なくとも75、例えば少なくとも80、例えば少なくとも85、例えば少なくとも90、例えば少なくとも95、例えば少なくとも100改善された洗浄性能を有する。本発明の好ましい側面によれば、実施例2aの記載に従い21°C及びpH8.0で測定した場合に、並びに残存活性が材料及び方法に記載のEnzChek又はPNPG7アッセイの記載に従い、31°CでpH8で、18時間後に測定された場合に、組成物は、キレート剤前記キレート剤が、10mM未満好ましくは9.5mM未満、好ましくは9mM未満、好ましくは8.5mM未満、好ましくは8mM未満、好ましくは7.5mM未満、好ましくは7mM未満、好ましくは6.5mM未満、好ましくは6mM未満、好ましくは5.5mM未満、好ましくは、好ましくは5mM未満、好ましくは4.5mM未満、4mM未満、好ましくは3.5mM未満、好ましくは3mM未満、好ましくは2.5mM未満、好ましくは2mM未満、好ましくは1.5mM未満又は好ましくは1mM未満の濃度で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得るの存在下で、親α-アミラーゼと比較して、少なくとも60、例えば少なくとも65、例えば少なくとも70、例えば少なくとも75、例えば少なくとも80、例えば少なくとも85、例えば少なくとも90、例えば少なくとも95、例えば少なくとも100の残存活性を有する変異体を含む。従って、本発明の特定の側面によれば、組成物は、リン含有、リン不含有、窒素含有、又は窒素不含有のキレート剤からなる群より選択されるキレート剤を含み、好ましいキレート剤は、EDTA、MGDA、EGTA、DTPA、DTPMP、HEDP及びそれらの混合物である。好ましい側面によれば、本発明の変異体は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは、配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の配列でもよい、親α-アミラーゼのアミノ酸配列と、少なくとも60、好ましくは少なくとも65、好ましくは少なくとも70、好ましくは少なくとも75、好ましくは少なくとも80、好ましくは少なくとも81、好ましくは少なくとも82、好ましくは少なくとも83、好ましくは少なくとも84、好ましくは少なくとも85、好ましくは少なくとも86、好ましくは少なくとも87、好ましくは少なくとも88、好ましくは少なくとも89、特に好ましくは少なくとも90、好ましくは少なくとも91、好ましくは少なくとも92、好ましくは少なくとも93、好ましくは少なくとも94、好ましくは少なくとも95、好ましくは少なくとも96、好ましくは少なくとも97、好ましくは少なくとも98、好ましくは少なくとも99の同一性の程度を有するアミノ酸配列を有する。本発明の一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、193、195、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される1又は2以上の位置の置換を含み、前記変異体が、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の配列でもよい、親α-アミラーゼのアミノ酸配列と少なくとも60、好ましくは少なくとも65、好ましくは少なくとも70、好ましくは少なくとも75、好ましくは少なくとも80、好ましくは少なくとも81、好ましくは少なくとも82、好ましくは少なくとも83、好ましくは少なくとも84、好ましくは少なくとも85、好ましくは少なくとも86、好ましくは少なくとも87、好ましくは少なくとも88、好ましくは少なくとも89、特に好ましくは少なくとも90、好ましくは少なくとも91、好ましくは少なくとも92、好ましくは少なくとも93、好ましくは少なくとも94、好ましくは少なくとも95、好ましくは少なくとも96、好ましくは少なくとも97、好ましくは少なくとも98、好ましくは少なくとも99の同一性の程度を有するアミノ酸配列を有する。本発明の一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、193、195、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される1又は2以上の位置に置換含み、前記変異体が、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の配列でもよい、親α-アミラーゼのアミノ酸配列と、少なくとも60、好ましくは少なくとも65、好ましくは少なくとも70、好ましくは少なくとも75、好ましくは少なくとも80、好ましくは少なくとも81、好ましくは少なくとも82、好ましくは少なくとも83、好ましくは少なくとも84、好ましくは少なくとも85、好ましくは少なくとも86、好ましくは少なくとも87、好ましくは少なくとも88、好ましくは少なくとも89、特に好ましくは少なくとも90、好ましくは少なくとも91、好ましくは少なくとも92、好ましくは少なくとも93、好ましくは少なくとも94、好ましくは少なくとも95、好ましくは少なくとも96、好ましくは少なくとも97、好ましくは少なくとも98、好ましくは少なくとも99の同一性の程度を有するアミノ酸配列を有する。本発明の一つの更なる側面によれば、変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、193、195、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される1又は2以上の位置に置換を含み、前記変異体が、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12に示されるアミノ酸配列と、少なくとも60、好ましくは少なくとも65、好ましくは少なくとも70、好ましくは少なくとも75、好ましくは少なくとも80、好ましくは少なくとも81、好ましくは少なくとも82、好ましくは少なくとも83、好ましくは少なくとも84、好ましくは少なくとも85、好ましくは少なくとも86、好ましくは少なくとも87、好ましくは少なくとも88、好ましくは少なくとも89、特に好ましくは少なくとも90、好ましくは少なくとも91、好ましくは少なくとも92、好ましくは少なくとも93、好ましくは少なくとも94、好ましくは少なくとも95、好ましくは少なくとも96、好ましくは少なくとも97、好ましくは少なくとも98、好ましくは少なくとも99の同一性の程度を有するアミノ酸配列を有する。本発明の別の側面によれば、変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、1又は2以上の位置193、195、197、198、200、203、206、210、212、213又は243に置換を含み、1又は2以上の位置116、118、129、133、134、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447、458に置換を含み、前記変異体が、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の配列でもよい、親α-アミラーゼのアミノ酸配列と、少なくとも60の、好ましくは少なくとも65、好ましくは少なくとも70、好ましくは少なくとも75、好ましくは少なくとも80、好ましくは少なくとも81、好ましくは少なくとも82、好ましくは少なくとも83、好ましくは少なくとも84、好ましくは少なくとも85、好ましくは少なくとも86、好ましくは少なくとも87、好ましくは少なくとも88、好ましくは少なくとも89、特に好ましくは少なくとも90、好ましくは少なくとも91、好ましくは少なくとも92、好ましくは少なくとも93、好ましくは少なくとも94、好ましくは少なくとも95、好ましくは少なくとも96、好ましくは少なくとも97、好ましくは少なくとも98、好ましくは少なくとも99の同一性の程度を有するアミノ酸配列を有する。本発明の別の側面によれば、変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、1又は2以上の位置193、195、197、198、200、203、206、210、212、213又は243に置換、及び1又は2以上の位置116、118、129、133、134、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447、458に置換を含み、前記変異体が、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の配列でもよい、親α-アミラーゼのアミノ酸配列と、少なくとも60、好ましくは少なくとも65、好ましくは少なくとも70、好ましくは少なくとも75、好ましくは少なくとも80、好ましくは少なくとも81、好ましくは少なくとも82、好ましくは少なくとも83、好ましくは少なくとも84、好ましくは少なくとも85、好ましくは少なくとも86、好ましくは少なくとも87、好ましくは少なくとも88、好ましくは少なくとも89、特に好ましくは少なくとも90、好ましくは少なくとも91、好ましくは少なくとも92、好ましくは少なくとも93、好ましくは少なくとも94、好ましくは少なくとも95、好ましくは少なくとも96、好ましくは少なくとも97、好ましくは少なくとも98、好ましくは少なくとも99の同一性の程度を有するアミノ酸配列を有する。一側面によれば、本発明の変異体中のアミノ酸置換の数は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10又は12を含む任意の配列でもよい、親α-アミラーゼと比較して、10置換未満、例えば9置換未満、例えば8置換未満、例えば7置換未満、例えば6置換未満、例えば5置換未満、例えば4置換未満、例えば3置換未満、例えば2置換未満である、及び/又は欠失の数が、10欠失未満、例えば9欠失未満、例えば8欠失未満、例えば7欠失未満、例えば6欠失未満、例えば5欠失未満、例えば4欠失未満、例えば3欠失未満、例えば2欠失未満、例えば1欠失未満である、又は前記変異体が欠失を含まない、及び/又は挿入の数が、10挿入未満、例えば9挿入未満、例えば8挿入未満、例えば7挿入未満、例えば6挿入未満、例えば5挿入未満、例えば4挿入未満、例えば3挿入未満、例えば2挿入未満、例えば1挿入未満である、又は前記変異体が挿入を含まない。一側面によれば、変異体は、位置193に対応する位置に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6の成熟ポリペプチドの、位置193に対応する位置の[G,A,T又はM]による置換を含む。一つの特定の実施形態によれば、変異体は、配列番号6の成熟ポリペプチドの置換S193Tを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、置換S193Tを含み、ここで、親α-アミラーゼが、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、位置195に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置195の[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置195にFを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は置換N195Fを含み、ここで、親は配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、位置195に置換としてYを含む。別の側面によれば、変異体は、置換N195Yを含み、ここで親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置195の[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置195にFを含み、別のさらに好ましい側面によれば、変異体は、置換N195Fを含み、ここで親は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、位置195にYを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、置換N195Yを含み、ここで親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、位置197に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置197の[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置197にFを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、置換N197Fを含み、ここで親は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、位置197に置換としてLを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、置換N197Lを含み、ここで、親α-アミラーゼが配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置197に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置197の[F、W、Y、L、I又はV]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置197にFを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、置換N197Fを含み、ここで、親が配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、位置197に置換としてLを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、置換N197Lを含み、ここで、親α-アミラーゼが配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、位置198に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置198の[Q,N,D,E,R,K又はH]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置198にNを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、置換Y198Nを含み、ここで、親α-アミラーゼが配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18、20又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置198に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置198の[Q、N、D、E、R、K又はH]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置198にFを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、置換Y198Nを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、位置200に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置200の[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置200にFを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、置換Y200Fを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置200に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置200の[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置200にFを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、置換Y200Fを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、位置203に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置203の[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置203にFを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、置換Y203Fを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置203に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置203の[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置203にFを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、置換Y203Fを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、位置206に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置206の[F,W,Y,N,L,I,V,H,Q,D,又はE]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置206にFを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、位置206にYを含み、更に別の側面によれば、変異体は、位置206にLを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一つの特定の実施形態によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換V206Yを含む。別の特定の実施形態によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換I206Yを含む。一つの特定の実施形態によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換V206Fを含む。別の特定の実施形態によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換I206Fを含む。一つの特定の実施形態によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換V206Lを含む。別の特定の実施形態によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換I206Lを含む。一つの特定の実施形態によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換V206Hを含む。別の特定の実施形態によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換I206Hを含む。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置206に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置206の[F,W,Y,N,L,I,V,H,Q,D,又はE]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置206にFを含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置206にYを含む。一つの特定の実施形態によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換V206Yを含む。別の特定の実施形態によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換I206Yを含む。一つの特定の実施形態によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換V206Lを含む。別の特定の実施形態によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換I206Lを含む。一つの特定の実施形態によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換V206Hを含む。別の特定の実施形態によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換I206Hを含む。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、位置210に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置210の[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置210にYを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、置換H210Yを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内にに少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置210に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置210の[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は位置210にYを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、置換H210Yを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、位置212に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置212の[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置212にVを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、置換E212Vを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置212に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置212の[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置212にVを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、置換E212Vを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、位置213に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置213の[G,A,S,T又はM]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置213にAを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、置換V213Aを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置213に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置213の[G,A,S,T又はM]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置213ににAを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、置換V213Aを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、位置243に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置243の[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置243にFを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、置換Y243Fを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。一側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置243に置換を含み、好ましい側面によれば、変異体は、位置243の[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含み、別の好ましい側面によれば、変異体は、位置243にAを含み、更に別の好ましい側面によれば、変異体は、置換Y243Fを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、位置193及び195に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、位置193及び195の[F,W,Y,L,I,V,N,G,A,T,M又はQ]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置193及び195に、置換としてT及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6の成熟ポリペプチドの置換S193TN195Fを含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置193及び195に、置換としてT及びYを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6の成熟ポリペプチドの置換S193TN195Yを含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置193及び195に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置193及び195の[F,W,Y,L,I,V,N,G,A,T,M又はQ]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置193及び195に置換としてT及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6の成熟ポリペプチドの置換S193TN195Fを含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置193及び195にT及びYを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6の成熟ポリペプチドの置換S193TN195Yを含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6の番号付けを用いて、位置195及び198に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、位置195及び198の[F,W,Y,L,I,V,N又はQ]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195及び198に、置換としてF及びNを含む。別の側面によれば、変異体は、置換N195FY198Nを含み、ここで、親は、配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195及び198に置換としてY及びNを含む。別の側面によれば、変異体は置換N195YY198Nを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6の番号付けを用いて、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195及び198に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195及び198の[F,W,Y,L,I,V,N又はQ]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195及び198に置換としてF及びNを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、置換N195FY198Nを含み、ここで、親は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195及び198に置換としてY及びNを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、置換N195YY198Nを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6の番号付けを用いて、位置195及び206に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、位置195及び206の[F,W,Y,V,I,L,C,N,S,T,D,E又はH]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195及び206に置換としてF及びLを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195FV206[F,Y,L,H,又はN]を含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195FI206[F,Y,L,又はH]を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、195及び206に置換としてY及びLを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195YV206[F,Y,L,H,又はN]を含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195YI206[F,Y,L,H,又はN]を含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195及び206に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195及び206の[F,W,Y,V,I,L,C,N,S,T,D,E又はH]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195及び206に置換としてF及びLを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195FV206[F又はY]を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195FI206[F,Y,L,H,又はN]を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195及び206に置換としてY及びLを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195YV206[F,Y,L,H,又はN]を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195YI206Fを含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、位置195及び210に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、位置195及び210の[F,W,Y,V,I,L,C,N,S,T又はH]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195及び210に置換としてF及びYを含む。別の側面によれば、変異体は、置換N195FH210Yを含み、ここで、親は、配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、位置195及び210に置換としてYを含む。別の側面によれば、変異体は、置換N195YH210Yを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195及び210に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195及び210の[F,W,Y,V,I,L,C,N,S,T又はH]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195及び210に置換としてF及びYを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、置換N195FH210Yを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、位置195及び210に対応する位置に置換としてYを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、置換N195YH210Yを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6の番号付けを用いて、位置198及び206に対応する位置に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、位置198及び206の[N,Q,L,I,F,Y,C,N,S,T,D,E又はH]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置198及び206に置換としてN及び[F又はY]を含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換Y198NV206[F,Y,L,H,又はN]を含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換Y198NI206[F,Y,L,H又はN]を含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6の番号付けを用いて、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置198及び206に対応する位置に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置198及び206の[N,Q,L,I,F,Y,C,N,S,T,D,E又はH]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置198及び206に置換としてN及び[F又はY]を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換Y198NV206[F,Y,L,H,又はN]を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換Y198NI206[F,Y,L,H又はN]を含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、位置206及び213に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、位置206及び213の[D,E,L,I,V,F,Y,W,G,A,S,T又はM]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置206及び210に置換として[F又はY]及びAを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換V206F又はYV213Aを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの。置換I206[F,Y,L,H,又はN]V213Aを含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に位置206及び213に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置206及び213の[D,E,L,I,V,F,Y,W,G,A,S,T又はM]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置206及び210に置換として[F又はY]及びAを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換V206[F,Y,L,H,又はN]、V213Aを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換I206[F,Y,L,H,又はN]V213Aを含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、位置195及び243に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、位置195及び243に[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195及び243に置換としてFを含む。別の側面によれば、変異体は、置換N195FY243Fを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195及び243に置換としてY及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、置換N195YY243Fを含み、ここで、親α-アミラーゼは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195及び243に対応する位置に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195及び243の[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195及び243に置換としてFを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、置換N195FY243Fを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195及び243に置換としてY及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、置換N195YY243Fを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、位置206及び243に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、位置206及び243の[H,D,E,N,F,W,Y,L,I又はV]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置206及び243に置換としてL及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換V206[F,Y,L,H,又はN]Y243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換V206[F,Y,L,H,又はN]Y243Fを含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置206及び243に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置206及び243の[H,D,E,N,F,W,Y,L,I又はV]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置206及び243に置換としてL及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換V206[F,Y,L,H,又はN]Y243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換V206[F,Y,L,H,又はN]Y243Fを含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、位置193、195、及び197に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、位置193、195、及び197の[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置193、195、及び197に対応する位置に置換としてT及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、置換S193TN195FN197Fを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置193、195、及び197に置換としてT、F及びLを含む。別の側面によれば、変異体は、置換S193TN195FN197Lを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、位置193、195、及び197に対応する位置に置換としてT、Y及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、置換S193TN195YN197Fを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置193、195、及び197に対応する位置に、置換としてT、Y及びLを含む。別の側面によれば、変異体は、置換S193TN195YN197Lを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18、20又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置193、195、及び197に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置193、195、及び197の[F,W,Y,L,I又はV]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置193、195、及び197に置換としてT及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、置換S193TN195FN197Fを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置193、195、及び197に置換としてT、F及びLを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、置換S193TN195FN197Lを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置193、195、及び197に置換としてT、Y及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、置換S193TN195YN197Fを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置193、195、及び197に置換としてT、Y及びLを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、置換S193TN195YN197Lを含み、ここで、親α-アミラーゼは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、18又は22、好ましくは配列番号6、8、10又は12を有する任意の成熟ポリペプチドである。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、位置195、206及び243に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、位置195、206及び243の[D,E,L,I,F,V,Y,C,N,S,T又はH]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に置換としてF、Y及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195FV206YY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195FI206YY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に、置換としてY、Y及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195YV206YY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195YI206YY243Fを含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、位置195、206及び243に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、位置195、206及び243の[D,E,L,I,F,V,Y,C,N,S,T又はH]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に置換としてF、L及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195FV206LY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195FI206LY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に置換としてY、L及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195YV206LY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195YI206LY243Fを含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、位置195、206及び243に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、位置195、206及び243の[D,E,L,I,F,V,Y,C,N,S,T又はH]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に置換としてF、N及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195FV206NY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195FI206NY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に、置換としてY、N及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195YV206NY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195YI206NY243Fを含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、位置195、206及び243に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、位置195、206及び243の[D,E,L,I,F,V,Y,C,N,S,T又はH]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に、置換としてF、H及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195FV206HY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195FI206HY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に置換としてY、H及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195YV206HY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195YI206HY243Fを含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、位置195、206及び243に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、位置195、206及び243の[D,E,L,I,F,V,Y,C,N,S,T又はH]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に置換としてF、F及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195FV206FY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195FI206FY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に置換としてY、F及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195YV206FY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195YI206FY243Fを含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195、206及び243に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195、206及び243の[D,E,L,I,F,V,Y,C,N,S,T又はH]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に、置換としてF、Y及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195FV206YY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195FI206YY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に置換としてY、Y及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195YV206YY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195YI206YY243Fを含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195、206及び243に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195、206及び243の[D,E,L,I,F,V,Y,C,N,S,T又はH]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に置換としてF、L及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195FV206LY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195FI206LY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に置換としてY、L及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195YV206LY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195YI206LY243Fを含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195、206及び243に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195、206及び243の[D,E,L,I,F,V,Y,C,N,S,T又はH]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に、置換としてF、N及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195FV206NY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195FI206NY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に置換としてY、N及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195YV206NY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195YI206NY243Fを含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195、206及び243に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195、206及び243の[D,E,L,I,F,V,Y,C,N,S,T又はH]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に、置換としてF、H及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195FV206HY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195FI206HY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に置換としてY、H及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195YV206HY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195YI206HY243Fを含む。別の側面によれば、親α-アミラーゼの変異体は、配列番号6に従う番号付けを用いて、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195、206及び243に置換を含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、位置195、206及び243に、[D,E,L,I,F,V,Y,C,N,S,T又はH]による置換を含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に置換としてF、F及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195FV206FY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195FI206FY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、それぞれ、位置195、206、及び243に置換としてY、F及びFを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号6又は12の成熟ポリペプチドの置換N195YV206FY243Fを含む。別の側面によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、更に、配列番号8又は10の成熟ポリペプチドの置換N195YI206FY243Fを含む。本発明の一側面によれば、変異体は、配列番号10の成熟ポリペプチド配列の、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失、及び1又は2以上の以下の置換、N195[F又はY]、N197[F又はL]、Y198N、Y200F、Y203F、I206[H、L、N、F、又はY]、H210Y、E212[V又はG]、V213A、及び1又は2以上の位置における置換、M116T、Q129L、G133E、E134Y、K142R、P146S、G147E、G149R、N151R、Y152H、Q169E、N174R、G186R、Y243F、S244Q、G303V、R320N、R359I、N418D、A447Vを含む、又はアミノ酸配列は、配列番号10を有するアミノ酸配列と少なくとも60、好ましくは少なくとも65、好ましくは少なくとも70、好ましくは少なくとも75、好ましくは少なくとも80、好ましくは少なくとも81、好ましくは少なくとも82、好ましくは少なくとも83、好ましくは少なくとも84好ましくは少なくとも85、好ましくは少なくとも86、好ましくは少なくとも87、好ましくは少なくとも88、好ましくは少なくとも89、特に好ましくは少なくとも90、特に好ましくは少なくとも91、特に好ましくは少なくとも92、特に好ましくは少なくとも93、特に好ましくは少なくとも94、さらに特により好ましくは少なくとも95の相同性、より好ましくは少なくとも96、より好ましくは少なくとも97、より好ましくは少なくとも98、より好ましくは少なくとも99の同一性の程度を有する。本発明の別の側面によれば、変異体は、配列番号8の成熟ポリペプチド配列の181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失、及び1又は2以上の以下の置換、N195[F又はY]、N197[F又はL]、Y198N、Y200F、Y203F、I206[F,Y,L,H,又はN]、H210Y、E212[V又はG]、V213A、及び1又は2以上の位置における置換、M116T、Q129L、G133E、E134Y、P146S、G147E、G149R、T151R、Y152H、Q169E、N174R、A186R、Y243F、S244Q、G303V、R320N、R359I、N418D、A447Vを含む、又はアミノ酸配列は、配列番号8を有するアミノ酸配列と少なくとも60、好ましくは少なくとも65、好ましくは少なくとも70、好ましくは少なくとも75、好ましくは少なくとも80、好ましくは少なくとも81、好ましくは少なくとも82、好ましくは少なくとも83、好ましくは少なくとも84、好ましくは少なくとも85、好ましくは少なくとも86、好ましくは少なくとも87、好ましくは少なくとも88、好ましくは少なくとも89、特に好ましくは少なくとも90、特に好ましくは少なくとも91、特に好ましくは少なくとも92、特に好ましくは少なくとも93、特に好ましくは少なくとも94、さらに特により好ましくは少なくとも95の相同性、より好ましくは少なくとも96、より好ましくは少なくとも97、より好ましくは少なくとも98、より好ましくは少なくとも99の同一性の程度を有する。本発明の一側面によれば、変異体は、配列番号6の成熟ポリペプチド配列の181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失、及び1又は2以上の以下の置換、N195[F又はY]、N197[F又はL]、Y198N、Y200F、Y203F、V206[F,Y,L,H,又はN]、H210Y、E212[V又はG]、V213A、又はY243F、及び1又は2以上の位置における置換、I116T、Q129L、G133E、E134Y、K142R、P146S、G147E、G149R、N151R、Y152H、Q169E、Q174R、A186R、S244Q、G303V、K320N、R359I、N418D、A447Vを含む、又はアミノ酸配列は、配列番号6を有するアミノ酸配列と少なくとも60、好ましくは少なくとも65、好ましくは少なくとも70、好ましくは少なくとも75、好ましくは少なくとも80、好ましくは少なくとも81、好ましくは少なくとも82、好ましくは少なくとも83、好ましくは少なくとも84、好ましくは少なくとも85、好ましくは少なくとも86、好ましくは少なくとも87、好ましくは少なくとも88、好ましくは少なくとも89、特に好ましくは少なくとも90、特に好ましくは少なくとも91、特に好ましくは少なくとも92、特に好ましくは少なくとも93、特に好ましくは少なくとも94、さらに特により好ましくは少なくとも95の相同性、より好ましくは少なくとも96、より好ましくは少なくとも97、より好ましくは少なくとも98、より好ましくは少なくとも99の同一性の程度を有する。本発明の一側面によれば、変異体は、配列番号12の成熟ポリペプチド配列の181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含み、及び1又は2以上の以下の置換、N195[F又はY]、N197[F又はL]、Y198N、Y200F、Y203F、V206[F,Y,L,H,又はN]、H210Y、E212[V又はG]、V213A又はY243F、及び1又は2以上の位置における置換、I116T、Q129L、G133E、E134Y、K142R、P146S、G147E、G149R、N151R、Y152H、Q169E、Q174R、A186R、S244Q、G303V、K320N、R359I、N418D、A447Vを含む、又はアミノ酸配列は、配列番号12を有するアミノ酸配列と少なくとも60、好ましくは少なくとも65、好ましくは少なくとも70、好ましくは少なくとも75好ましくは少なくとも80、好ましくは少なくとも81、好ましくは少なくとも82、好ましくは少なくとも83、好ましくは少なくとも84、好ましくは少なくとも85、好ましくは少なくとも86、好ましくは少なくとも87、好ましくは少なくとも88、好ましくは少なくとも89、特に好ましくは少なくとも90、特に好ましくは少なくとも91、特に好ましくは少なくとも92、特に好ましくは少なくとも93、特に好ましくは少なくとも94、さらに特により好ましくは少なくとも95の相同性、より好ましくは少なくとも96、より好ましくは少なくとも97、より好ましくは少なくとも98、より好ましくは少なくともの同一性の程度を有する。従って、本発明の一つの側面は、親α-アミラーゼの変異体であって、195、197、198、200、203、206、210、212、213及び243からなる群より選択される1又は2以上の位置に改変を含み、更に、116、118、129、133、134、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、359、418、431、434、447及び458からなる群より選択される1又は2以上の位置に改変を含み、a前記改変が各々独立に、i前記位置のすぐ下流のアミノ酸の挿入、ii前記位置を占めるアミノ酸の欠失、及び/又はiii前記位置を占めるアミノ酸の置換であり、b前記変異体がα-アミラーゼ活性を有し;及びc各位置が、配列番号6のアミノ酸配列を有する酵素のアミノ酸配列の位置に対応する、変異体に関する。従って、本発明の一つの側面は、親α-アミラーゼの変異体であって、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失、及び195、197、198、200、203、206、210、212、213、243からなる群より選択される1又は2以上の位置に改変を含み、更に、116、118、129、133、134、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447及び458からなる群より選択される1又は2以上の位置に改変を含み、a前記改変が各々独立に、i前記位置の下流側に隣接するアミノ酸の挿入、ii前記位置を占めるアミノ酸の欠失、及び/又はiii前記位置を占めるアミノ酸の置換であり、b前記変異体がα-アミラーゼ活性を有し;及びc各位置が、配列番号6のアミノ酸配列を有する酵素のアミノ酸配列の位置に対応する、変異体に関する。好ましくは、変異体は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24又は26、好ましくは配列番号14、16又は20、好ましくは配列番号6、8、10、12、14、16、18、22、又は20のうちの一つのアミノ酸配列と、少なくとも70、好ましくは少なくとも75、より好ましくは少なくとも80、より好ましくは少なくとも85、より一層好ましくは少なくとも90、最も好ましくは少なくとも95、及びさらに最も好ましくは少なくとも約97の同一性の程度を有するアミノ酸配列を含む。好ましくは、1又は2以上の上記の特定された位置に改変を含む変異体は、キレート剤を含む組成物、例えば産業用組成物、例えば洗剤、好ましくは液体洗剤中において、親α-アミラーゼと比較して、向上した安定性を有する。本発明者等は、これらの変異体が、キレート剤前記キレート剤は10mM未満の濃度で、、材料及び方法の記載に従い、21°C及びpH8.0において、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得るを含む組成物中で、親α-アミラーゼと比較して、改善された安定性を有することを見出した。従って、本発明の別の側面は、ポリペプチドを調製する方法であって、aアミラーゼ活性を有する親ポリペプチドのアミノ酸配列を用意し;b配列番号6の成熟ポリペプチドの位置195、197、198、200、203、206、210、212、213、243に対応する1又は2以上の位置を占める1又は2以上のアミノ酸を選択すると共に、更に位置116、118、129、133、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、431、434、447、458に対応する1又は2以上の位置を選択し;c前記選択されたアミノ酸残基の置換若しくは欠失、又は前記選択されたアミノ酸残基の下流側に隣接する1又は2以上のアミノ酸残基の挿入により前記配列を修飾し;d前記修飾された配列を有する変異ポリペプチドを生成し;e前記変異ポリペプチドをアミラーゼ活性及び安定性について検証し;及びfアミラーゼ活性を有すると共に、前記親ポリペプチドと比較してキレート剤存在下の安定性が向上した変異ポリペプチドを選択し、前記キレート剤が10mM未満の濃度で、21°C及びpH8.0で、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る、方法に関する。好ましくは、変異体は、3の位置、より好ましくは4の位置、さらにより好ましくは5の位置、及び最も好ましくは6の位置に改変を含み、特に好ましい実施形態によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失、及び更に、193、195、197、198、200、203、206、210、212、213、243配列番号6の番号付けを用いてからなる群より選択される親α-アミラーゼの位置に対応する1又は2以上の位置に1又は2以上の置換を含む。従って、好ましい側面は、親α-アミラーゼの変異体であって、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失、及び195、197、198、200、203、206、210、212、213、243からなる群より選択される1又は2以上の位置に改変を含み、更に、116、118、129、133、134、142、146、147、149、151、152、169、174、186、235、244、303、320、339、359、418、413、434、447、458からなる群より選択される1又は2以上の位置に改変を含み、a前記改変が各々独立に、i前記位置の下流側に隣接するアミノ酸の挿入、ii前記位置を占めるアミノ酸の欠失、及び/又はiii前記位置を占めるアミノ酸の置換であり、b前記変異体がα-アミラーゼ活性を有し;及びc各位置が、配列番号6のアミノ酸配列を有する酵素のアミノ酸配列の位置に対応する、変異体に関する。好ましい実施形態によれば、変異体α-アミラーゼは、1又は2以上の数個のアミノ酸欠失及び/又は置換及び/又は挿入を有する。特に好ましい実施形態によれば、変異体α-アミラーゼは、本明細書で配列番号6に示されるアミノ酸配列を有し、更に以下の改変:D183G184位置183及び184で欠失を含むα-アミラーゼを含み、この変異体が洗剤中で優れた性能を示し、キレート剤の存在下で改善された安定性を有する。好ましい実施形態によれば、変異体α-アミラーゼは、SP707R181G182、SP707G182H183、SP707H183G184のいずれかを含むSP707配列番号8を含む。別の好ましい実施形態によれば、変異体α-アミラーゼは、SP722R181G182、SP722G182D183、SP722D183G184のいずれかを含むSP722配列番号6を含む。更なる別の好ましい実施形態によれば、変異体α-アミラーゼは、AA560R181G182、AA560G182D183、AA560D183G184のいずれかを含むAA560配列番号10を含む。別の好ましい実施形態によれば、親α-アミラーゼは、SP690R181G182;SP690G182T183;SP690T183G184のいずれかを含むSP690配列番号12を含む。SP722R181G182とは、バシラス属α-アミラーゼSP722が、位置R181及びG182において欠失により変異誘発されていることを意味し、ここで、番号付けは、配列番号6に対応する。従って、本発明の一側面によれば、変異体α-アミラーゼは、以下:SP722R181G182、SP722G182D183、SP722D183G184;SP722R181G182N195F;SP722G182D183N195F;SP722D183G184N195F;SP722R181G182M202L;SP722G182D183M202L;SP722D183G184M202L;SP722R181G182N195FM202L;SP722G182D183N195FM202L;SP722D183G184N195FM202L;SP722D183G184N195FV206LY243F;SP722D183G184N195FV206YY243FSP722D183G184N195FV206FY243F;SP722R181G182R181Q;SP722G182D183R181Q;SP722D183G184R181Q;SP722R181G182L118KN195FH458K;SP722G182D183L118KN195FH458K;SP722D183G184L118KN195FH458K;SP722D183G184G133EG149RN195YY203FV206L、AA560R181G182、AA560G182D183、AA560D183G184;AA560R181G182N195F;AA560G182D183N195F;AA560D183G184N195F;AA560D183G184I206Y;AA560D183G184Y243F;AA560D183G184I206LY243F;AA560D183G184N195FI206L;AA560D183G184N195FY243F;AA560D183G184N195FI206L、Y243F;AA560D183G184N195FI206YY243F;AA560D183G184N195FI206F;AA560R181G182M202L;AA560G182D183M202L;AA560D183G184M202L;AA560R181G182N195FM202L;AA560G182D183N195FM202L;AA560D183G184N195FM202L;AA560R181G182R118KN195FR320KT458K;AA560G182D183R118KN195FR320KT458K;AA560D183G184R118KN195FR320KT458K;AA560D183G184R118KN195FI206LR320KR458K;AA560D183G184R118KN195FI206YR320KR458K;AA560D183G184R118KN195FY243FR320KR458K;AA560D183G184R118KN195FI206LY243FR320KR458K、SP707R181G182、SP707G182H183、SP707H183G184;SP707R181G182N195F;SP707G182H183N195F;SP707H183G184N195FI206L、Y243F;SP707H183G184N195FI206YY243F;SP707H183G184N195FI206FY243F;SP707H183G184N195F;SP707R181G182M202L;SP707G182H183M202L;SP707D183G184M202L;SP707R181G182N195FM202L;SP707G182H183N195FM202L;SP707H183G184N195FM202L;SP707R181G182R181Q;SP707G182H183R181Q;SP707H183G184R181Q;SP707R181G182R118KN195FR320KR458K;SP707G182H183R118KN195FR320KR458K;SP707H183G184R118KN195FR320KR458K;SP690R181G182、SP690G182T183、SP690T183G184;SP690R181G182N195F;SP690G182T183N195F;SP690T183G184N195F;SP690T183G184N195FV206L、Y243F;SP690T183G184N195FV206YY243F;SP690T183G184N195FV206FY243FSP690R181G182M202L;SP690G182T183M202L;SP690T183G184M202L;SP690R181G182N195FM202L;SP690G182T183N195FM202L;SP690T183G184N195FM202L;SP690R181G182R118KN195FR320KR458K;SP690G182T183R118KN195FR320KR458K;SP690T183G184R118KN195FR320KR458K、のいずれかを含む、以下:SP722、SP690、SP707又はAA560のいずれか一つを含む。SP722R181G182N195Fとは、バシラス属α-アミラーゼSP722が以下:位置R181及びG182における欠失及び位置195におけるAsnNからPheFへの置換、のように変異誘発されていることを意味し、ここで、番号付けは配列番号6に対応する欠失した位置が未だ存在するかのように数える、即ち2つの位置を欠失する場合、番号付けは、下方に2つシフトしない。本発明の特に好ましい実施形態によれば、改変は、以下の置換:X193A,C,E,F,G,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,X,Y、好ましくはS193T;X195A,C,E,F,G,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,X,Y、好ましくはN195[F又はY];X197A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,N,P,Q,R,S,T,V,W,X,Y、好ましくはN197[F又はL];X198A,C,E,F,G,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,X,Y、好ましくはY198N;X200A,C,D,E,F,G,H,I,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,X,Y、好ましくはY200F;X203A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,T,V,W,X,Y、好ましくはY203F.X206A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,N,P,Q,R,S,T,V,W,X,Y、好ましくはV206[F、Y、L、H、又はN];X210A,C,E,F,G,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,X,Y、好ましくはH210Y;X212A,C,D,E,F,G,H,I,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,X,Y、好ましくはE212[V又はG];及びX213A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,T,V,W,X,Y、好ましくはV213A.X243A,C,D,E,F,G,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはY243F、から選択される。別の好ましい実施形態によれば、変異体は、3の位置、より好ましくは4の位置、より好ましくは5の位置、及びより好ましくは6の位置に改変を含み、特に好ましい実施形態によれば、変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失、及び更に、193、195、197、198、200、203、206、210、212、213、243、からなる群より選択される位置に対応する1又は2以上の位置における改変、及び116、129、133、142、146、147、149、151、152、169、174、186、244、303、320、359、418、447からなる群より選択される位置に対応する1又は2以上の位置における改変を含む配列番号6の番号付けを用いて。従って、本発明の特に好ましい実施形態によれば、改変は、以下の置換:X116A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはN116TX118A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはR118KX129A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,N,P,Q,S,T,V,W,Y、好ましくはQ129LX133A,C,D,E,F,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはG133EX134A,C,D,E,F,G,H,I,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはD134YX142A,C,D,E,F,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはK142RX146A,C,E,F,G,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはP146SX147A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,W,Y、好ましくはG147EX149A,C,D,E,F,G,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはG149RX151A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはT151RX152A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはY152HX169A,C,E,F,G,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはQ169EX174C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはQ174RX186A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,W,Y、好ましくはA186RX235A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはI235NX244A,C,D,E,F,G,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはS244QX303A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはG303VX320A,C,E,F,G,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはK320NX339A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはS339PX359C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはR359IX418A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはN418DX431A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはS431TX434A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはP434TX447A,C,E,F,G,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはA447VX458A,C,D,E,F,G,H,I,K,L,M,P,Q,R,S,T,V,W,Y、好ましくはR458Kから選択される。特に好ましい実施形態によれば、変異体は、更に、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失を含む。好ましい実施形態によれば、本発明の変異体中のアミノ酸置換の数は、好ましくは17置換、より好ましくは16置換、より好ましくは15置換、より好ましくは14置換、より好ましくは13置換、より好ましくは12置換、より好ましくは11置換、より好ましくは10置換、より好ましくは9置換、より好ましくは8置換、より好ましくは7置換、より好ましくは6置換、より好ましくは5置換、より好ましくは4置換、より一層好ましくは3置換、及び最も好ましくは2置換である。別の好ましい実施形態によれば、本発明の変異体中のアミノ酸置換の数は、好ましくは17置換、より好ましくは16置換、より好ましくは15置換、より好ましくは14置換、より好ましくは13置換、より好ましくは12置換、より好ましくは11置換、より好ましくは10置換、より好ましくは9置換、より好ましくは8置換、より好ましくは7置換、より好ましくは6置換、より好ましくは5置換、より好ましくは4置換、より一層好ましくは3置換、及び最も好ましくは2置換からなる。特に好ましい実施形態によれば、本発明の変異体は、様々な改変の組み合わせを含む。従って、好ましい実施形態によれば、本発明の変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失、好ましくは位置183及び184における欠失を含み、更に、改変の以下の組み合わせ、位置186及び195における置換;位置174及び212における置換;位置206及び212における置換;位置206、212及び304における置換;位置206、212、304及び447における置換;位置116及び133における置換;位置235及び339における置換;位置193及び206における置換;位置116、133及び142における置換;位置116、133、142及び198における置換;位置116、133、142、198及び206における置換;位置133及び195における置換;位置133、195及び198における置換;位置133、195、198及び200における置換;位置116及び195における置換;位置116、195及び198における置換;位置142及び146における置換;位置142、146及び149における置換;位置142、146、149及び195における置換;位置142、146、149、195及び198における置換;位置142、146、149、195、198及び206における置換;位置151及び210における置換;位置151、210及び320における置換;位置186、195、212及び213における置換;位置151、210、320及び359における置換;位置151、210、320、359及び418における置換;位置147及び149における置換;位置147、149及び169における置換;位置147、149、169及び198における置換;位置147、149、169、198及び203における置換;位置147、149、169、198、203及び206における置換;位置133及び149における置換;位置133、149及び195における置換;位置133、149、195及び198における置換;位置133、149、195、198及び203における置換;位置147及び152における置換;位置147、152及び169における置換;位置147、152、169及び198における置換;位置147、152、169、198及び206における置換;位置195及び206における置換;位置195及び243における置換;位置195及び210における置換;位置206及び210における置換;位置186及び195における置換;位置195及び206における置換;位置195、206及び243における置換;位置206及び243における置換;位置133及び149における置換;位置133、149及び198における置換;位置133、149、198及び206における置換;位置116及び133における置換;位置116、133及び147における置換;位置116、133、147及び152における置換;位置116、133、147、152及び198における置換;位置116、133、147、152、198及び203における置換;位置116、133、147、152、198、203及び206における置換;位置147及び149における置換;位置147、149及び195における置換;位置147、149、195及び198における置換;位置147、149、195、198及び206における置換;位置133及び142における置換;位置133、142及び195における置換;位置133、142、195及び198における置換;位置133及び149における置換;位置133、149及び152における置換;位置133、149、152及び195における置換;位置133、149、152、195及び198における置換;位置133、149、152、195、198及び206における置換;位置116及び129における置換;位置116、129及び142における置換;位置116、129、142及び195における置換;位置116、129、142、195及び198における置換;位置116、129、142、195、198及び203における置換;位置116、129、142、195、198、203及び206における置換;位置133及び149における置換;位置133、149及び152における置換;位置133、149、152及び195における置換;位置133、149、152、195及び198における置換;位置133、149、152、195、198及び203における置換;位置133、149、152、195、198、203及び206における置換;位置116及び133における置換;位置116、133及び149における置換;位置116、133、149及び198における置換;位置116、133、149、198及び203における置換;位置116、133、149、198、203及び206における置換;位置195及び198における置換;位置195、198及び203における置換;位置195、198、203及び206における置換;位置133、149、195、203、及び206における置換、のうちの一つを含む。別の特に好ましい実施形態によれば、本発明の変異体は、様々な改変の組み合わせを含む。従って、好ましい実施形態によれば、本発明の変異体は、181、182、183、又は184のアミノ酸領域内に少なくとも1の、少なくとも2の、又は少なくとも3の欠失、好ましくは位置183及び184における欠失を含み、更に、改変の以下の組み合わせ、位置186の[R,T,K,H,E,D,Q,又はN]による及び195の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置174の[R,K,H,E,D,Q,又はN]による及び212の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置206の[D,E,F,W,Y,L,I,V,N,Q,又はH]による及び212の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置206の[F,W,Y,L,I,V,N,Q,又はH]による、212の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び304の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置206の[F,W,Y,L,I,V,N,Q,又はH]による、212の[F,W,Y,L,I,又はV]による、304の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び447の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による及び133の[E又はD]による置換;位置235の[N又はL]による及び339の[P]による置換;位置193の[G,A,T又はM]による及び206の[F,W,Y,L,I,V,N,Q,又はH]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による、133の[E又はD]による及び142の[R,K,H,Q,又はN]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による、133の[E又はD]による、142の[R,K,H,Q,又はN]による及び198の[Q又はN]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による、133の[E又はD]による、142の[R,K,H,Q,又はN]による、198の[Q又はN]による[Q又はN]による及び206の[F,W,Y,L,I,V,N,Q,又はH]による置換;位置133の[E又はD]による及び195の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置133の[E又はD]による、195の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び198の[Q又はN]による置換;位置186の[R,T,K,H,E,D,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による,212の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び213の[A]による置換;位置133の[E又はD]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による,198の[Q又はN]による及び200の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による及び195の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び198の[Q又はN]による置換;位置142の[R,K,H,Q,又はN]による及び146の[G,A,S,T,又はM]による置換;位置142の[R,K,H,Q,又はN]による,146の[G,A,S,T,又はM]による及び149の[R,K,H,Q,又はN]による置換;位置142の[R,K,H,Q,又はN]による,146の[G,A,S,T,又はM]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による及び195の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置142の[R,K,H,Q,又はN]による,146の[G,A,S,T,又はM]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び198の[Q,又はN]による置換;位置142の[R,K,H,Q,又はN]による,146の[G,A,S,T,又はM]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による,198の[Q,N]による及び206の[F,W,Y,L,I,V,N,Q,又はH]による置換;位置151の[R]による及び210の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置151の[R]による,210の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び320の[Q,又はN]による置換;位置151の[R]による,210の[F,W,Y,L,I,又はV]による,320の[Q,N]による及び359の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置151の[R]による,210の[F,W,Y,L,I,又はV]による,320の[Q,又はN]による,359の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び418の[E,又はD]による置換;位置147の[E,又はD]による及び149の[R,K,H,Q,又はN]による置換;位置147の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による及び169の[E,又はD]による置換;位置147の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,169の[E,又はD]による及び198の[Q,又はN]による置換;位置147の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,169の[E,又はD]による,198の[Q,又はN]による及び203の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置147の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,169の[E,又はD]による,198の[Q,又はN]による,203の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び206の[F,W,Y,L,I,V,N,Q,又はH]による置換;位置133の[E,又はD]による及び149の[R,K,H,Q,又はN]による置換;位置133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による及び195の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び198の[Q,又はN]による置換;位置133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による,198の[Q,又はN]による及び203の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置147の[E,又はD]による及び152の[R,K,H,Q,又はN]による置換;位置147の[E,又はD]による,152の[R,K,H,Q,又はN]による及び169の[E,又はD]による置換;位置147の[E,又はD]による,152の[R,K,H,Q,又はN]による,169の[E,又はD]による及び198の[Q,又はN]による置換;位置147の[E,又はD]による,152の[R,K,H,Q,又はN]による,169の[E,又はD]による,198の[Q,又はN]による及び206の[F,W,Y,L,I,V,N,Q,又はH]による置換;位置195の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び206の[F,W,Y,L,I,V,N,Q,又はH]による置換;位置195の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び243の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置195の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び210の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置206の[F,W,Y,L,I,V,N,Q,又はH]による及び210の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置186の[R,T,K,H,E,D,Q,又はN]による及び195の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置195の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び206の[F,W,Y,L,I,V,N,Q,又はH]による置換;位置195の[F,W,Y,L,I,又はV]による,206及び243の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置206及び243の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置133の[E,又はD]による及び149の[R,K,H,Q,又はN]による置換;位置133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による及び198の[Q,又はN]による置換;位置133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,198の[Q,又はN]による及び206の置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による及び133の[E,又はD]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による,133の[E,又はD]による及び147の[E,又はD]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による,133の[E,又はD]による,147の[E,又はD]による及び152の[R,K,H,Q,又はN]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による,133の[E,又はD]による,147の[E,又はD]による,152の[R,K,H,Q,又はN]による及び198の[Q,又はN]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による,133の[E,又はD]による,147の[E,又はD]による,152の[R,K,H,Q,又はN]による,198の[Q,又はN]による及び203の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による,133の[E,又はD]による,147の[E,又はD]による,152の[R,K,H,Q,又はN]による,198の[Q,又はN]による,203の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び206の置換;位置147の[E,又はD]による及び149の[R,K,H,Q,又はN]による置換;位置147の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による及び195の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置147の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び198の[Q,又はN]による置換;位置147の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による,198の[Q,又はN]による及び206の置換;位置133の[E,又はD]による及び142の[R,K,H,Q,又はN]による置換;位置133の[E,又はD]による,142の[R,K,H,Q,又はN]による及び195の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置133の[E,又はD]による,142の[R,K,H,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び198の[Q,又はN]による置換;位置133の[E,又はD]による及び149の[R,K,H,Q,又はN]による置換;位置133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による及び152の[R,K,H,Q,又はN]による置換;位置133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,152の[R,K,H,Q,又はN]による及び195の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,152の[R,K,H,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び198の[Q,又はN]による置換;位置133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,152の[R,K,H,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による,198の[Q,又はN]による及び206の置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による及び129の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による,129の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び142の[R,K,H,Q,又はN]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による,129の[F,W,Y,L,I,又はV]による,142の[R,K,H,Q,又はN]による及び195の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による,129の[F,W,Y,L,I,又はV]による,142の[R,K,H,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び198の[Q,又はN]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による,129の[F,W,Y,L,I,又はV]による,142の[R,K,H,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による,198の[Q,又はN]による及び203の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による,129の[F,W,Y,L,I,又はV]による,142の[R,K,H,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による,198の[Q,又はN]による,203の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び206の置換;位置133の[E,又はD]による及び149の[R,K,H,Q,又はN]による置換;位置133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による及び152の[R,K,H,Q,又はN]による置換;位置133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,152の[R,K,H,Q,又はN]による及び195の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,152の[R,K,H,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び198の[Q,又はN]による置換;位置133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,152の[R,K,H,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による,198の[Q,又はN]による及び203の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,152の[R,K,H,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による,198の[Q,又はN]による,203の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び206の置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による及び133の[E,又はD]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による,133の[E,又はD]による及び149の[R,K,H,Q,又はN]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による,133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による[R,K,H,Q,又はN]による及び198の[Q,又はN]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による,133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,198の[Q,又はN]による及び203の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置116の[G,A,S,T,又はM]による,133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,198の[Q,又はN]による,203の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び206の置換;位置195の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び198の[Q,又はN]による置換;位置195の[F,W,Y,L,I,又はV]による,198の[Q,又はN]による及び203の[F,W,Y,L,I,又はV]による置換;位置195の[F,W,Y,L,I,又はV]による,198の[Q,又はN]による,203の[F,W,Y,L,I,又はV]による及び206の[F,W,Y,L,I,V,N,Q,又はH]による置換;位置133の[E,又はD]による,149の[R,K,H,Q,又はN]による,195の[F,W,Y,L,I,又はV]による,203の[F,W,Y,L,I,又はV]による,及び206の[F,W,Y,L,I,V,N,Q,又はH]による置換、のうちの一つを含む。特に有用な本発明の変異体は、以下:D183G184N195L;D183G184N197F;D183G184N197L;D183G184Y243F;D183G184N195F、D183G184N277F;D183G184S431T;D183G184P434T;D183G184I235NS339P;D183G184L351F;D183G184A186R、N195F;D183G184H210Y;D183G184V206Y;D183G184V206L;D183G184V206F;D183G184V213AQ174R;D183G184E212V;D183G184V206FE212GG304VA447V;N116TG133EK142RD183G184Y198NV206Y;G133ED183G184N195YY198NY200F;D183G184A186DN195FE212VV213A;N116TD183G184N195YY198N;K142RP146SG149KD183G184N195YY198NV206I;D134YD183G184;T151RD183G184H210YK320NR359IN418DQ490H;G147EG149RQ169ED183G184Y198NY203FV206Y;G133EG149RD183G184N195YY198NY203FV206Y;G147EY152HQ169ED183G184Y198NV206Y;D183G184N195FV206Y;D183G184N195FV206L;D183G184N195FV206F;D183G184V206LY243F;D183G184V206FY243F;D183G184N195FY243F;D183G184N195FH210Y;D183G184V206YH210Y;D183G184V213A;D183G184S193T;D183G184A186TN195F;D183G184N195FV206YY243F;D183G184N195FV206LY243F;D183G184N195FV206YY243F;D183G184N195FV206FY243F;D183G184V206YY243F;D183G184N195Y;G133DG149RD183G184Y198NV206Y;N116TG133EG147EY152HD183G184Y198NY203FV206Y;G147EG149RD183G184N195FY198NV206Y;G133EK142RD183G184N195FY198N;G133EG149RY152HD183G184N195YY198NV206Y;N116TQ129LK142RD183G184N195YY198NY203FV206Y;G133EG149RY152HD183G184N195YY198NY203FV206Y;N116TG133EG149RG182D183Y198NY203FV206Y、D183G184S193TV206L、D183G184G133EG149RN195YY203FV206L、を含む配列番号6の番号付けを用いて。好ましい実施形態によれば、本発明の変異体は、SP722SP722D183G184N195L;SP722SP722D183G184N197F;SP722SP722D183G184N197L;SP722SP722D183G184Y243F;SP722SP722D183G184N195F、SP722SP722D183G184N277F;SP722D183G184S431T;SP722D183G184P434T;SP722D183G184I235NS339P;SP722D183G184L351F;SP722D183G184A186DN195FE212VV213A;SP722D183G184A186RN195F;SP722D183G184H210Y;SP722D183G184V206Y;SP722D183G184V206L、SP722D183G184V206F;SP722D183G184V213AQ174R;SP722D183G184E212V;SP722D183G184V206YE212GG304VA447V;;SP722N116TG133EK142RD183G184Y198NV206Y;SP722G133ED183G184N195YY198NY200F;SP722N116TD183G184N195YY198N;SP722K142RP146SG149KD183G184N195YY198NV206I;SP722D134YD183G184;SP722T151RD183G184H210YK320NR359IN418D;SP722G147EG149RQ169ED183G184Y198NY203FV206Y;SP722G133EG149RD183G184N195YY198NY203FV206Y;SP722G147EY152HQ169ED183G184Y198NV206Y;SP722D183G184N195FV206Y;SP722D183G184N195FV206F;SP722D183G184N195FV206L;SP722D183G184I206LY243F;SP722D183G184I206FY243F;SP722D183G184N195FY243F;SP722D183G184N195FH210Y;SP722D183G184V206YH210Y;SP722D183G184V213A;SP722D183G184S193T;SP722D183G184A186TN195F;SP722D183G184N195FV206YY243F;SP722D183G184V206YY243F;SP722D183G184N195Y;SP722G133DG149RD183G184Y198NV206Y;SP722N116TG133EG147EY152HD183G184Y198NY203FV206Y;SP722G147EG149RD183G184N195FY198NV206Y;SP722G133EK142RD183G184N195FY198N;SP722G133EG149RY152HD183G184N195YY198NV206Y;SP722N116TQ129LK142RD183G184N195YY198NY203FV206Y;SP722G133EG149RY152HD183G184N195YY198NY203FV206Y;SP722N116TG133EG149RG182D183Y198NY203FV206Y、SP722D183G184G133EG149RN195YY203FV206L、を含む。一つの好ましい実施形態によれば、変異体は、以下:SP722D183G184N195FV206LY243F;SP722D183G184N195FV206YY243F;SP722D183G184N195FV206NY243F;SP722D183G184N195FV206FY243F;SP722D183G184N195FV206H;SP722D183G184N195FV206Y;SP722D183G184V206FY243F;SP722D183G184N195FV206LH210Y;SP722D183G184S193TV206L;SP722D183G184G133EG149RN195YY203FV206L、から選択される。別の好ましい実施形態によれば、本発明の変異体は、SP707H183G184N195L;SP707H183G184N197F;SP707H183G184N197L;SP707H183G184Y243F;SP707H183G184N195F、SP707H183G184N277F;SP707H183G184A186DN195FE212VV213A;SP707H183G184S431T;SP707H183G184A434T;SP707H183G184I235NA339P;SP707H183G184L351F、SP707H183G184A186R、N195F;SP707H183G184H210Y;SP707H183G184I206Y;SP707H183G184I206L、SP707H183G184I206F;SP707H183G184V213AQ174R;SP707H183G184E212V;SP707H183G184I206YE212GG304VA447V;;SP707M116TG133EH183G184Y198NI206Y;SP707G133EH183G184N195YY198NY200F;SP707M116TH183G184N195YY198N;SP707P146SG149KH183G184N195YY198NV206I;SP707E134YH183G184;SP707T151RH183G184H210YR320NR359IN418D;SP707G147EG149RQ169EH183G184Y198NY203FI206Y;SP707G133EG149RH183G184N195YY198NY203FI206Y;SP707G147EQ169EH183G184Y198NI206Y;SP707H183G184N195FI206Y;SP707H183G184N195FI206L;SP707H183G184N195FI206F;SP707H183G184N195FY243F;SP707H183G184N195FH210Y;SP707H183G184I206YH210Y;SP707H183G184V213A;SP707H183G184S193T;SP707H183G184A186TN195F;SP707H183G184N195FI206YY243F;SP707H183G184N195FI206FY243F;SP707H183G184N195FI206LY243F;SP707H183G184N195FI206YY243FSP707H183G184I206YY243F;SP707H183G184I206LY243F;SP707H183G184I206FY243F;SP707H183G184N195Y;SP707G133DG149RH183G184Y198NI206Y;SP707M116TG133EG147EH183G184Y198NY203FI206Y;SP707G147EG149RH183G184N195FY198NI206Y;SP707G133EH183G184N195FY198N;SP707G133EG149RH183G184N195YY198NI206Y;SP707M116TQ129LH183G184N195YY198NY203FI206Y;SP707G133EG149RH183G184N195YY198NY203FI206Y;SP707M116TG133EG149RG182H183Y198NY203FI206Y;SP707D183G184R118KN195FR320KR458K;SP707D183G184R118KN195FI206LR320KR458K;SP707D183G184R118KN195FI206YR320KR458K;SP707D183G184R118KN195FY243FR320KR458K;SP707D183G184R118KN195FI206LY243FR320KR458K、を含む。好ましい実施形態によれば、本発明の変異体は、AA560D183G184N195L;AA560D183G184N197F;AA560D183G184N197L;AA560D183G184Y243F;AA560D183G184N195F、AA560D183G184N277F;AA560D183G184S431T;AA560D183G184A434T;AA560D183G184I235NA339P;AA560D183G184L351F;D183G184G186DN195FE212VV213AAA560D183G184G186R、N195F;AA560D183G184H210Y;AA560D183G184I206Y;AA560D183G184I206L;AA560D183G184I206F;AA560D183G184V213AQ174R;AA560D183G184E212V;AA560D183G184I206YE212GG304VA447V;AA560M116TG133EK142RD183G184Y198NI206Y;AA560G133ED183G184N195YY198NY200F;AA560M116TD183G184N195YY198N;AA560K142RP146SG149KD183G184N195YY198NI206I;AA560E134YD183G184;AA560T151RD183G184H210YR320NR359IN418D;AA560G147EG149RQ169ED183G184Y198NY203FI206Y;AA560G133EG149RD183G184N195YY198NY203FI206Y;AA560G147EY152HQ169ED183G184Y198NI206Y;AA560D183G184N195FI206Y;AA560D183G184N195FI206L;AA560D183G184N195FI206F;AA560D183G184I206LY243F;AA560D183G184I206FY243F;AA560D183G184N195FY243F;AA560D183G184N195FH210Y;AA560D183G184I206YH210Y;AA560D183G184V213A;AA560D183G184S193T;AA560D183G184G186TN195F;AA560D183G184N195FI206YY243F、AA560D183G184N195FI206LY243F;AA560D183G184N195FI206YY243FAA560D183G184I206YY243F;AA560D183G184I206LY243F;AA560D183G184N195Y;AA560G133DG149RD183G184Y198NI206Y;AA560M116TG133EG147EY152HD183G184Y198NY203FI206Y;AA560G147EG149RD183G184N195FY198NI206Y;AA560G133EK142RD183G184N195FY198N;AA560G133EG149RY152HD183G184N195YY198NI206Y;AA560M116TQ129LK142RD183G184N195YY198NY203FI206Y;AA560G133EG149RY152HD183G184N195YY198NY203FI206Y;AA560M116TG133EG149RG182D183Y198NY203FI206Y;AA560D183G184R118KN195FR320KR458K;AA560D183G184R118KN195FI206LR320KR458K;AA560D183G184R118KN195FI206YR320KR458K;AA560D183G184R118KN195FY243FR320KR458K;AA560D183G184R118KN195FI206LY243FR320KR458K、を含む。好ましい実施形態によれば、本発明の変異体は、SP690T183G184N195L;SP690T183G184N197F;SP690T183G184N197L;SP690T183G184Y243F;SP690T183G184N195F、SP690T183G184N277F;SP690T183G184S431T;SP690T183G184P434T;SP690T183G184I235NA339P;SP690T183G184L351F;SP690T183G184A186DN195FE212VV213A;SP690T183G184A186RN195F;SP690T183G184H210Y;SP690T183G184V206Y;SP690T183G184V206L、SP690T183G184V206F;SP690T183G184V213AQ174R;SP690T183G184E212V;SP690T183G184V206YE212GG304VA447V;SP690N116TG133EK142RT183G184Y198NV206Y;SP690G133ET183G184N195YY198NY200F;SP690N116TT183G184N195YY198N;SP690K142RP146SG149KT183G184N195YY198NV206I;SP690E134YT183G184;SP690N151RT183G184H210YK320NR359IN418D;SP690G147EG149RQ169ET183G184Y198NY203FV206Y;SP690G133EG149RT183G184N195YY198NY203FV206Y;SP690G147EY152HQ169ET183G184Y198NV206Y;SP690T183G184N195FV206Y;SP690T183G184N195FV206F;SP690T183G184N195FV206L;SP690T183G184I206LY243F;SP690T183G184I206FY243F;SP690T183G184N195FY243F;SP690T183G184N195FH210Y;SP690T183G184V206YH210Y;SP690T183G184V213A;SP690T183G184S193T;SP690T183G184A186TN195F;SP690T183G184N195FV206YY243F;SP690T183G184V206YY243F;SP690T183G184N195Y;SP690G133DG149RT183G184Y198NV206Y;SP690N116TG133EG147EY152HT183G184Y198NY203FV206Y;SP690G147EG149RT183G184N195FY198NV206Y;SP690G133EK142RT183G184N195FY198N;SP690G133EG149RY152HT183G184N195YY198NV206Y;SP690N116TQ129LK142RT183G184N195YY198NY203FV206Y;SP690G133EG149RY152HT183G184N195YY198NY203FV206Y;SP690N116TG133EG149RG182T183Y198NY203FV206Y、SP690T183G184G133EG149RN195YY203FV206L、SP690T183G184R118KN195FR320KR458K;SP690T183G184N118KN195FV206LR320KR458K;SP690T183G184N118KN195FV206YR320KR458K;SP690T183G184N118KN195FY243FR320KR458K;SP690T183G184N118KN195FV206LY243FR320KR458K;SP690T183G184N195FV206LY243F;SP690T183G184N195FV206YY243F;SP690T183G184N195FV206NY243F;SP690T183G184N195FV206FY243F;SP690T183G184N195FV206H;SP690T183G184N195FV206Y;SP690T183G184V206FY243F;SP690T183G184N195FV206LH210Y;SP690T183G184S193TV206L;SP690T183G184G133EG149RN195YY203FV206L、を含む。好ましい実施形態によれば、本発明の変異体は、親α-アミラーゼの変異体を含み、ここで、親α-アミラーゼは配列番号6の配列であり、前記変異体は、欠失D183及びG184並びに変異の以下のセット:aN195FH210Y;bN195FV206L、H,Y;cN195FV206L、FH210Y;dN195FV206YY243F;eN195FY243F;fS193TV206L;gG133EG149RN195YY203FV206L;hV206L,Y;iY243F;jN195FV206LY243F;kN195F;又はlV206FY243F、のうちの一つを含む。洗剤組成物detergentcomposition:本発明によれば、上述のα-アミラーゼ変異体は、典型的に、洗剤組成物、例えば洗濯洗剤組成物又は食器洗浄洗剤組成物の成分であり得る。本発明の特別な実施形態によれば、組成物は、更に、強キレート剤、又は錯化剤を含む。従って、本発明の一つの側面は、配列番号6の成熟ポリペプチドの位置193~213に対応する範囲中の1又は2以上の位置に置換を含む親α-アミラーゼの変異体を含み、更に、前記キレート剤を含む、組成物に関し、前記キレート剤は10mM未満の濃度で、材料及び方法の記載に従い21°C及びpH8.0で測定した場合に、遊離カルシウムイオンの濃度を2.0mMから0.10mMまで低減し得る。別の実施形態によれば、本組成物が含有するキレート剤は、限定されるものではないが、以下のものから選択される。即ち、キレート剤は、アミノ基を含んでもよく、例えば、アミノ-ポリカルボン酸塩又はホスホン酸塩でもよい。それは、1、2、又は3のアミノ基典型的には、第二級又は第三級アミノ基を含む単量体分子でもよく、また、2、3、4、又は5又はそれ以上のカルボキシル基を含んでいてもよい。キレート剤としては、限定されるものではないが、エチレンジアミンテトラ酢酸EDTA、ジエチレントリアミンペンタメチレンホスホン酸DTPMP、ヒドロキシエタンジホスホン酸HEDP、エチレンジアミンN,N’-ジコハク酸EDDS、メチルグリシンジ酢酸MGDA、ジエチレントリアミンペンタ酢酸DTPA、プロピレンジアミンテトラ酢酸PDTA、2-ヒドロキシピリジン-N-オキシドHPNO、又はエチレンジニトリロテトラキスメチレンホスホン酸N,N,-ジオキシド、メチルグリシンジ酢酸MGDA、グルタミン酸N,N-ジ酢酸N,N-ジカルボキシメチルグルタミン酸テトラナトリウム塩GLDA、及びニトリロトリ酢酸NTA又はそれらの混合物が挙げられる。キレート剤は、典型的に、洗剤中に、0.1重量~75重量のレベルで存在する。本発明の洗剤組成物は、更に、上述のようなキレート剤でない洗浄/洗剤助剤を含んでもよく、好ましくは、成分の混合物を含む。典型的には、洗浄助剤は、0.001~99.9wt、より典型的には、0.01~80wtの洗浄助剤の量で、組成物中に存在する。好適な洗浄助剤は以下:界面活性剤、洗浄助剤、漂白剤bleaches、漂白触媒、着色剤、漂白増強剤、染料移動剤、付着助剤depositionaids、分散剤、更なる酵素、及び酵素安定化剤、触媒材料、漂白活性化剤、過酸化水素、過酸化水素源、光学的光沢剤、光活性化剤、蛍光剤、布地色調剤fabrichueingagents、柔軟剤fabricconditioners、予調製過酸、ポリマー状分散剤、土壌粘土除去/再付着防止剤antiredepositionagents、充填剤塩、ヒドロトロープhydrotropes、光沢剤brighteners、消泡剤、可塑剤、柔軟剤fabricsofteners、加水分解性界面活性剤、保存料、抗酸化剤、縮み防止剤、殺菌剤、殺真菌剤、変色防止剤、防腐剤、アルカリ源、溶解剤、担体、処理助剤、顔料、染料、香料、及びpH調整剤を含む。例えば、それらは、以下:漂白成分、例えばイミン漂白増強剤;過酸化水素源、例えば過炭酸塩及び/又は過ホウ酸塩、特に材料でコートされた過炭酸塩、例えば炭酸塩及び/又は硫酸塩、ケイ酸塩、ホウケイ酸塩、及びそれらの任意の混合物;カプセル化形態中の予調製過酸を含む、予調製過酸;遷移金属触媒;消泡剤又は消泡系、例えばシリコーン系消泡剤及び/又は脂肪酸系消泡剤;柔軟剤fabric-softeners、例えば粘土、シリコーン及び/又は第4級アンモニウム化合物;凝集剤、例えばポリエチレンオキシド;染料移動阻害剤、例えばポリビニルピロリドン、ポリ4-ビニルピリジンN-オキシド及び/又はビニルピロリドン及びビニルイミダゾールのコポリマー;布地統合成分fabricintegritycomponents、例えばイミダゾール及びエピクロルヒドリンの縮合により生成されたオリゴマー;よごれ分散剤及びよごれ再付着防止剤、例えばアルコキシル化ポリアミン及びエトキシ化エチレンイミンポリマー;再付着防止成分、例えばポリエステル;カルボン酸系ポリマー、例えばマレイン酸ポリマー又はマレイン酸及びアクリル酸のコポリマー;香料、例えば香料マイクロカプセル、でんぷんカプセル化剤accords、スプレー式香料;石鹸リングsoaprings;美的粒子aestheticparticles;染料;充填剤、例えば硫酸ナトリウム、もっとも、組成物は実質的に遊離の充填剤であることが好ましい;ケイ酸塩、例えば1.6R及び2.0Rケイ酸ナトリウムを含むケイ酸ナトリウム、又はメタケイ酸ナトリウム;ジカルボン酸とジオールのコポリエステル;セルロース系ポリマー、例えばメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエトキシセルロース、又は他のアルキル又はアルキルアルコキシセルロース;溶媒、例えば1,2プロパンジオール、モノエタノールアミン;ジエチレングリコール、エタノール、及びそれらの任意の混合物;ヒドロトロープ、例えばクメンスルホン酸ナトリウム、キシレンスルホン酸ナトリウム、トルエンスルホン酸ナトリウム、及び任意の混合物;有機酸、例えばクエン酸;及びそれらの任意の組み合わせを含んでもよい。従って、組成物は、更に助剤、例えば、炭酸酸、重炭酸塩、又はケイ酸塩系助剤を含んでもよく、それは、ゼオライト、例えばゼオライトA、ゼオライトMAP最小アルミニウムP型MiximumAluminiumtypePでもよい。洗濯に有用なゼオライトは、好ましくは、式Na12AlO212SiO21227H2Oを有し、粒子径は、通常、ゼオライトAについて1~10μm、ゼオライトMAPついて通常0.7-2μmである。他の助剤は、メタケイ酸ナトリウムNa2SiO3nH2O又はNa2Si2O5nH2O強アルカリ性であり、好ましくは食器洗浄に用いられる。好ましい実施形態によれば、洗剤助剤の量は、5超、10超、20超、30超、40超、又は50超でもよく、80、65未満でもよい。食器洗浄洗剤において、助剤のレベルは、典型的には40~65、具体的には50~65、更には75~90である。別の好ましい側面によれば、組成物は、1又は2以上の界面活性剤を含み、それは、半極性含む非イオン性、及び/又はアニオン性、及び/又はカチオン性、及び/又は双イオン性、及び/又は両イオン性、及び/又は半極性非イオン性、及び/又はそれらの混合物でもよい。界面活性剤は典型的には、洗剤組成物の重量に対して、0.1~60重量のレベルで存在し、一方代替の実施形態では、約1~約50のレベルであり、一方更に別の実施形態では、約5~約40のレベルである。その中に含まれる場合、洗剤は、通常、約1~約40のアニオン性界面活性剤、例えば直鎖アルキルベンゼンスルホネート、α-オレフィンスルホネート、アルキルスルフェート脂肪アルコールスルフェート、アルコールエトキシスルフェート、2級アルカンスルホネート、α-スルホ脂肪酸メチルエステル、アルキル-又はアルケニルコハク酸、又は石鹸を含む。その中に含まれる場合、洗剤は、通常、約0.2~約40の非イオン性界面活性剤、例えばアルコールエトキシレート、ノニルフェノールエトキシレート、アルキルポリグリコシド、アルキルジメチルアミンオキシド、エトキシ化脂肪酸モノエタノールアミド、脂肪酸モノエタノールアミド、ポリヒドロキシアルキル脂肪酸アミド、又はグルコサミンのN-アシルN-アルキル誘導体グルカミドを含む。更なる適切なアニオン性界面活性剤は、石鹸、及び硫酸基又はスルホン酸基を含むものである。考慮されるスルホン酸型の界面活性剤は、C9-C13-アルキルベンゼンスルホン酸塩及びオレフィンスルホン酸塩であり、後者は、例えば、末端又は内部に位置する二重結合を有するC12-C18モノオレフィンのスルホン酸化により得られるような、アルケンスルホン酸塩及びヒドロキシアルカンスルホン酸塩及び同ジスルホン酸塩の混合物であると理解される。また、C12-C18アルカンスルホネート、及びα-スルホ脂肪酸のエステルエステルスルホネート、例えば典型的に、植物油又は動物油からのトリグリセリドの鹸化により、続いてメチル化及びスルホン化により製造される、水素添加されたココナッツ、パーム核又は獣脂の脂肪酸のα-スルホン酸化メチルエステルは、適切であり、用いられ得る。更に適切なアニオン性界面活性剤は、モノ-、ジ-及びトリ-エステル並びにそれらの混合物を含む、スルホン酸化された脂肪酸グリセロールエステルである。好適なアルキルアルケニル硫酸塩は、C12-C18脂肪アルコール、例えば、ココナッツ脂肪アルコール、獣脂脂肪アルコール、ラウリル、ミリスチル、セチル若しくはステアリルアルコールの、又はC10-C20オキソアルコールの硫酸モノエステル、及びその鎖長を有する2級アルコールの硫酸モノエステル、のアルカリ金属塩及びナトリウム塩である。洗浄技術の観点から、とりわけ好適なのはC12-C16アルキルスルホン酸塩、及びC12-C15アルキルスルホン酸塩、及びまたC14-C15アルキルスルホン酸塩である。好適なアニオン性界面活性剤はまた、例えば米国特許第3,234,258号明細書又は米国特許第5,075,041号明細書に従って調製されるアルカン-2,3-ジイルビス硫酸塩である。また、1~6モルのエチレンオキシドでエトキシ化された直鎖又は分岐のC7-C21アルコール、例えば平均3.5モルのエチレンオキシドEOを含む2-メチル-分岐C9-C11アルコール、又は1~4EOを含むC12-C18脂肪アルコールの硫酸モノエステルは、適切である。それらの高い発泡特性のため、それらは、通常は洗浄及び清浄組成物において比較的低いレベルでのみ、例えば1重量~5重量のレベルで用いられる。アニオン性界面活性剤はまた、スルホコハク酸とC8-C18脂肪アルコール残基とのジエステル及び/又はモノエステルの塩、或いはそれらの混合物を含んでいてもよい。脂肪アルコール残基が狭い鎖長分布を有するスルホコハク酸塩は、とりわけ好まい。好ましくはアルキルアルケニル鎖内に8~18個のC原子を有するアルキルアルケニルスルホコハク酸又はそれらの塩を使用することはまた、同様に可能である。考慮される更なるアニオン性界面活性剤は、アミノ酸、例えばメチルタウリンの誘導体タウリドtaurides及び/又はメチルグリシンの誘導体サルコシドsarcosidesある。考慮される更なるアニオン性界面活性剤は石鹸である。飽和脂肪酸石鹸、例えばラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、水素化エルカ酸及びベヘン酸の塩、並びに天然脂肪酸、例えばココナッツ、パーム核又は獣脂脂肪酸由来の石鹸混合物。石鹸を含むアニオン性界面活性剤は、それらのナトリウム、カリウム又はアンモニウム塩の形態、及び有機塩基、例えばモノ-、ジ-又はトリエタノールアミンの可溶性塩の形態で存在してもよい。アニオン性界面活性剤はそれらのナトリウム又はカリウム塩の形態で存在してもよい。非イオン性界面活性剤として、8~18個のC原子を有し、アルコール1モルに対して平均1~12モルのエチレンオキシドEO及び/又は1~10モルのプロピレンオキシドPOを有する、好ましくはアルコキシル化された、有利にはエトキシ化された、及び/又はプロポキシ化された、特に1級アルコールは、用いられる。C8-C16アルコールアルコキシレート、有利にはエトキシ化及び/又はプロポキシ化されたC10-C15アルコールアルコキシレート、特に2~10の、又は3~8のエトキシ化の程度、及び/又は1~6の、又は1.5~5のプロポキシ化の程度を有するC12-C14アルコールアルコキシレートは、とりわけ好ましい。アルコール残基は、好ましくは、直鎖、若しくは特に2位のメチル分岐鎖でもよく、又はオキソアルコールに通常存在するように、直鎖とメチル分岐鎖の混合物を含んでもよい。しかしながら、12~18個のC原子例えばココナッツ、パーム及び獣脂脂肪アルコール又はオレイルアルコール等、及びアルコール1モルあり平均2~8のEOを含む、天然由来の直鎖アルコール由来のアルコールエトキシレートは、とりわけ好ましい。エトキシ化アルコールは、例えば、3EO又は4EOを有するC12-C14アルコール、7EOを有するC9-C11アルコール、3EO、5EO、7EO又は8EOを有するC13-C15アルコール、3EO、5EO又は7EOを有するC12-18アルコール、それらの混合物、例えば3EOを有するC12-C14アルコールと5EOを有するC12-C18アルコールとの混合物を含む。エトキシ化及びプロポキシ化の上述の程度は、統計学的平均を表し、特定の製品において、それは整数又は小数でもあり得る。好ましいアルコールエトキシレート及びプロポキシレートは、限定された同族体分布を有する狭い範囲のエトキシレート/プロポキシレート、NRE/NRP。これらの非イオン性界面活性剤に加えて、12超のEOを有する脂肪アルコールエトキシレートは、用いられ得る。それらの例は、14EO、25EO、30EO又は40EOを有する獣脂脂肪アルコールエトキシレートである。また、エトキシ化及び/又はプロポキシ化された、1アルキル鎖当たり1~18個のC原子を有し、平均でアミン1モル当たり1~12モルのエチレンオキシドEO及び/又は1~10モルのプロピレンオキシドPOを有する、特に1級及び2級アミンである、アルコキシル化されたアミンは、適切である。加えて、更なる非イオン性界面活性剤として、一般式R1OGx式中、R1は、8~22個の、好ましくは12~18個のC原子を有する1級直鎖又はメチル分岐特に2位メチル分岐鎖アルキル基であり、記号Gは、5又は6のC原子を有するグリコース単糖単位を指し、好ましくは、Gはグルコースである。オリゴマー化の程度xは、グリコース単位の平均数を指し、一般的には1~10に亘り;xは、好ましくは、1.2~1.4である。のアルキルポリグリコシドもまた使用され得る。単独の非イオン性界面活性剤として、又は他の非イオン性界面活性剤と組み合わせて使用される、用いられる非イオン性界面活性剤の更なる種類は、アルキル鎖中に1~4個のC原子をする、アルコキシル化、好ましくはエトキシ化、又はエトキシ化、及びプロポキシ化脂肪酸アルキルエステル、特には、例えば特開昭58-217598に記載されるような脂肪酸メチルエステルである。アミンオキシド型の非イオン性界面活性剤、例えばN-ココアルキル-N,N-ジメチルアミンオキシド及びN-獣脂-アルキル-N,N-ビス2-ヒドロキシエチルアミンオキシド、並びに脂肪酸アルカノールアミド又はエトキシ化脂肪酸アルカノールアミド型の非イオン性界面活性剤はまた、適切である。より好ましい実施形態によれば、界面活性剤は、ドデシル硫酸ナトリウム、4級アンモニウム化合物、ヨウ化アルキルピリジニウム、Tween80、Tween85、TritonX100、Brij56、生物学的界面活性剤、ラムノリピドrhamnolipid、サーファクチンsurfactin、ビスコンシンvisconsin、又はスルホン酸である。いくつかの実施形態によれば、本発明は、洗浄において、少なくとも1つの界面活性剤の濃度が、布地1グラム当たり、0~500、0.00001~100、0.0001~50、0.0001~40、0.001~30、0.01~20、0.1~15、1~10ミリグラムである組成物に関する。いくつかの実施形態によれば、本発明は、少なくとも1つの界面活性剤の濃度が、溶液1L当たり、0~50、0.0001~40、0.001~30、0.01~20、0.1~10、又は1~5gである組成物に関する。本発明の洗剤組成物は、例えば、汚れた布地の前処理に適した洗濯助剤組成物、及びリンスが添加された柔軟剤組成物を含む、手洗い用若しくは機械用洗濯洗剤組成物として調製され、又は一般家庭用の硬表面清浄作業に使用のための洗剤組成物として調製され、又は手洗い用若しくは機械用食器洗浄作業のために調製され得る。洗剤は、粉末若しくは又は顆粒形態でもよく、又はそれは、液体、ゲル若しくはペーストの形態、又は単一用量製品、例えば錠剤若しくは多区画パウチを含むパウチの形態でもよく、又は洗剤は、シートの形態でもよい。洗剤組成物は、1又は2以上の他の酵素、例えばプロテアーゼ、リパーゼ、ペルオキシダーゼ、別のアミロース分解酵素、例えば、別のα-アミラーゼ、グルコアミラーゼ、マルトース生成アミラーゼ、CGTase及び/又はセルラーゼ、マンナナーゼ例えば、NovozymesDenmark製MANNAWAY商標、ペクチナーゼ、ペクチンリアーゼ、クチナーゼ、及び/又はラッカーゼを含んでもよい。一般的に、選択された酵素単数又は複数の特性は、選択された洗剤と適合するべきであり、即ち、最適pH、他の酵素成分及び非酵素成分との適合性等、酵素単数又は複数は有効量で存在すべきである。プロテアーゼ:好適なプロテアーゼは、メタロプロテアーゼ、及び/又は中性又はアルカリ性微生物性セリンプロテアーゼ、例えばサブチリシンEC3.4.21.62を含むセリンプロテアーゼを含む。好適なプロテアーゼは、動物、植物又は微生物由来のものを含む。一側面によれば、斯かる好適なプロテアーゼは、微生物由来でもよい。好適なプロテアーゼは、前述の好適なプロテアーゼの化学的に又遺伝子学的に修飾された変異体を含む。一側面によれば、好適なプロテアーゼは、セリンプロテアーゼ、例えばアルカリ性微生物性プロテアーゼ又は/及びトリプシン型プロテアーゼでもよい。好適な中性又はアルカリ性プロテアーゼの例は、以下:a米国特許第6,312,936B1号明細書、米国特許第5,679,630号明細書、米国特許第4,760,025号明細書、米国特許第7,262,042号明細書及び国際公開第09/021867号に記述される、バシラス属、例えばバシラスレンタス、B.アルカロフィラス、B.サブティリス、B.アミロリケファシエンス、バシラスプミラスBacilluspumilus、及びバシラスギブソニイBacillusgibsonii由来のものを含む、サブチリシンEC3.4.21.62、b国際公開第89/06270号に記述される、フザリウム属Fusariumプロテアーゼ、及び国際公開第05/052161号及び国際公開第05/052146号に記述される、セルロモナス属Cellumonas由来のキモトリプシンプロテアーゼを含む、トリプシン型又はキモトリプシン型プロテアーゼ、例えばトリプシン例えば、ブタ又はウシ由来、c国際公開第07/044993A2号に記述されているバシラスアミロリケファシエンス由来のものを含む、メタロプロテアーゼ、を含む。好ましいプロテアーゼは、バシラスギブソニイ又はバシラスレンタス由来のものを含む。好適な市販のプロテアーゼ酵素は、NovozymesASDenmarkによりAlcalase登録商標、Savinase登録商標、Primase登録商標、Durazym登録商標、Polarzyme登録商標、Kannase登録商標、Liquanase登録商標、LiquanaseUltra登録商標、SavinaseUltra登録商標、Ovozyme登録商標、Neutrase登録商標、Everlase登録商標及びEsperase登録商標の商標名の下に販売されているもの、GenencorInternationalによりMaxatase登録商標、Maxacal登録商標、Maxapem登録商標、Properase登録商標、Purafect登録商標、PurafectPrime登録商標、PurafectOx登録商標、FN3登録商標、FN4登録商標、Excellase登録商標及びPurafectOXP登録商標の商標名のもとに販売されているもの、SolvayEnzymesによりOpticlean登録商標及びOptimase登録商標商標名のもとに販売されているもの、HenkelKemiraから入手可能なもの、即ち、BLAP以下の変異S99DS101RS103AV104IG159Sを有する米国特許第5,352,604号明細書の図29に示される配列、以下BLAPという、BLAPRS3TV4IV199MV205IL217Dを有するBLAP、BLAPXS3TV4IV205Iを有するBLAP及びBLAPF49S3TV4IA194PV199MV205IL217Dを有するBLAP-全てHenkelKemiraによる;及びKaoによるKAP変異A230VS256GS259Nを有するバシラスアルカロフィラスサブチリシンを含む。リパーゼ:好適なリパーゼは、細菌又は真菌由来のものを含む。化学修飾された又はタンパク質工学により操作された変異体は含まれる。有用なリパーゼの例は、フミコラ属HumicolaシノニムテルモミセスsynonymThermomyces由来、例えば欧州特許第258068号明細書及び欧州特許第305216号明細書に記述されるようなH.ラヌギノーサHlanuginosaT.ラヌギノーサスTlanuginosus由来、又は国際公開第96/13580号に記述されるようなH.インソレンスHinsolens由来のリパーゼ、シュードモナス属Pseudomonasリパーゼ、例えばP.アルカリゲネスPalcaligenes又はP.シュードアルカリゲネスPpseudoalcaligenes欧州特許第218272号明細書、P.セパシアPcepacia欧州特許第331376号明細書、P.シュトゥッツェリPstutzeri英国特許第1,372,034号明細書、P.フルオレスセンスPfluorescens、シュードモナス種株SD705国際公開第95/06720号及び国際公開第96/27002号、P.ウィスコンシネンシスPwisconsinensis国際公開第96/12012号由来、バシラス属リパーゼ、例えば、B.サブティリス由来Dartoisetal1993BiochemicaetBiophysicaActa1131、253360、B.ステアロサーモフィラス特開昭64-744992号公報又はB.プミルスBPumilus国際公開第91/16422号由来を含む。リパーゼは、第一サイクルリパーゼfirstcyclelipases、例えば、米国特許第6,939,702B1号明細書及び米国特許出願公開第2009/0217464号明細書に記述されたものでもよい。一側面によれば、リパーゼは、第一洗浄リパーゼ、好ましくはT231R及びN233R変異を含むサーモミセスラヌギノサスThermomyceslanuginosus由来の野生型リパーゼの変異体でもよい。野生型配列は、Swissprot登録番号SwissProtO59952サーモミセスラヌギノサスフミコララヌギノサHumicolalanuginosa由来の269のアミノ酸アミノ酸23-291である。好ましいリパーゼは、Lipex登録商標、Lipolex登録商標及びLipoclean登録商標の商標名の下に販売されるものを含む。セルラーゼ:好ましいセルラーゼは、細菌又は真菌由来のものを含む。化学修飾された又はタンパク質工学により操作された変異体は含まれる。好ましいセルラーゼは、バシラス属、シュードモナス属、フミコラ属、フザリウム属Fusarium、チエラビア属Thielavia、アクレモニウム属Acremonium由来のセルラーゼ、例えば、米国特許第4,435,307号明細書、米国特許第5,648,263号明細書、米国特許第5,691,178号明細書、米国特許第5,776,757号明細書及び国際公開第89/09259号に開示されるフミコラインソレンスHumicolainsolens、ミセリオフトラサーモフィラMyceliophthorathermophila及びフザリウムオキシスポルムFusariumoxysporumから生産される真菌性セルラーゼを含む。セルラーゼ:好ましいセルラーゼは、細菌又は真菌由来のものを含む。化学修飾された又はタンパク質工学により操作された変異体は含まれる。好ましいセルラーゼは、バシラス属、シュードモナス属、フミコラ属、フザリウム属Fusarium、チエラビア属Thielavia、アクレモニウム属Acremonium由来のセルラーゼ、例えば、米国特許第4,435,307号明細書、米国特許第5,648,263号明細書、米国特許第5,691,178号明細書、米国特許第5,776,757号明細書及び国際公開第89/09259号に開示されるフミコラインソレンスHumicolainsolens、ミセリオフトラサーモフィラMyceliophthorathermophila及びフザリウムオキシスポルムFusariumoxysporumから生産される真菌性セルラーゼを含む。特に好適なセルラーゼは、色彩の面で利点を有するアルカリ性又は中性セルラーゼである。斯かるセルラーゼの例は、欧州特許第0495257号明細書、欧州特許第0531372号明細書、国際公開第96/11262号、国際公開第96/29397号、国際公開第98/08940号に記述されたセルラーゼである。他の例は、セルラーゼ変異体、例えば国際公開第94/07998号、欧州特許第0531315号明細書、米国特許第5,457,046、米国特許第5,686,593、米国特許第5,763,254、国際公開第95/24471号、国際公開第98/12307号及びPCT/DK98/00299に記述されたものである。市販のセルラーゼとしては、CELLUZYME登録商標、及びCAREZYME登録商標NovozymesAS、CLAZINASE登録商標、及びPURADAXHA登録商標GenencorInternationalInc、及びKAC500B登録商標KaoCorporationが挙げられる。ペルオキシダーゼオキシダーゼ:好適なペルオキシダーゼオキシダーゼは、植物、細菌又は真菌由来のものを含む。化学修飾された又はタンパク質工学により操作された変異体は含まれる。有用なペルオキシダーゼの例は、コプリヌス属Coprinus由来、例えばC.シネレウスCcinereus由来のペルオキシダーゼ、及び国際公開第93/24618号、国際公開第95/10602号、及び国際公開第98/15257号に記述されるもののようなそれらの変異体を含む。市販なペルオキシダーゼは、GUARDZYME登録商標NovozymesASを含む。他の酵素:他の好ましい酵素は、Pectawash登録商標、Pectaway登録商標の商標名のもとに販売されるペクチン酸リアーゼ、及びMannaway登録商標全てNovozymesASBagsvaerdDenmarkによる、及びPurabrite登録商標GenencorInternationalIncPaloAltoCaliforniaの商標名のもとに販売されるマンナナーゼを含む。洗剤酵素単数又は複数は、1又は2以上の酵素を含む分離した助剤を添加することにより、又はこれらの酵素の全てを含む合わされた助剤を添加することにより、洗剤組成物に含まれ得る。本発明の洗剤助剤、即ち、分離した助剤又は合わされた助剤は、例えば、顆粒、液体、スラリー等に調製され得る。好ましい洗剤助剤調製物は、顆粒、特に非粉状顆粒、液体、特に安定化された液体、又はスラリーである。非粉状顆粒は、例えば、米国特許第4,106,991号明細書及び同第4,661,452号明細書の開示に従って製造されてもよく、当該技術分野において知られている方法により任意にコートされてもよい。ワックスコーティング材料の例は、1000~20000の平均分子量を有するポリエチレンオキシド製品ポリエチレングリコール、PEG;16~50エチレンオキシド単位を有するエトキシ化ノニルフェノール;12~20個の炭素原子を有するアルコールであり、15~80エチレンオキシド単位を含むエトキシ化脂肪アルコール;脂肪アルコール;脂肪酸;及び脂肪酸のモノ-及びジ-及びトリグリセリドである。流動床技術による適用に好適なフィルム形成コーティング材料の例は、英国特許第1483591号明細書に与えられる。液体酵素調製物は、例えば、確立された方法に従って、ポリオール、例えばプロピレングリコール、糖又は糖アルコール、乳酸又はホウ酸を添加することにより安定化され得る。保護された酵素は、欧州特許第238,216号明細書に開示された方法に従って調製され得る。本発明の洗剤組成物は、任意の便利な形態、例えば、バー、錠剤、粉末、顆粒、ペースト、ゲル、液体、汎用粉末形態、強力heavyduty洗浄剤、汎用ペースト形態、強力液体型、液体高級布地用finefabric、手洗い用食器洗浄剤、簡易用lightduty食器洗浄剤、高泡立ち型、機械用食器洗浄剤、様々な錠剤、食器洗浄顆粒、食器洗浄液体、リンス補助型でもよい。組成物はまた、当該技術分野において知られているもの、及び水溶性、水不溶性及び/又は水透過性であるものを含む、単位用量パッケージであり得る。液体洗剤は、典型的には最大70の水、及び0~30の有機溶媒を含む水性、又は非水性、又は0.5g/L超の洗剤組成物を含む溶液でもよい。本発明の組成物は、例えば、汚れた布地の前処理に好適な洗濯助剤組成物及びリンスが添加された柔軟剤組成物を含む、手洗い用若しくは機械用洗濯洗剤組成物として調製され得、又は一般家庭用の硬表面清浄作業に使用のための洗剤組成物として調製されてもよく、又は手洗い用若しくは機械用食器洗浄作業のために調製されてもよい。洗剤は、粉末若しくは顆粒形態でもよく、又はそれは、液体、ゲル若しくはペーストの形態、又は単一用量製品、例えば錠剤若しくは多区画パウチを含むパウチの形態でもよく、又は洗剤は、シートの形態でもよい。組成物は、布地色調剤fabrichueingagentを含んでいてもよい。好適な布地色調剤としては、好ましくは本明細書において後述する試験方法1の要件を満たす、染料、染料-粘土dyeclay複合物、及び顔料が挙げられる。好適な染料としては、小分子染料及びポリマー染料が挙げられる。適切な小分子染料としては、ダイレクトブルー、ダイレクトレッド、ダイレクトバイオレット、アシッドブルー、アシッドレッド、アシッドバイオレット、ベーシックブルー、ベーシックバイオレット及びベーシックレッドの色指数C.I.分類に該当する染料からなる群より選択される小分子染料、又はそれらの混合物が挙げられる。例を以下に示す。1式:のトリス-アゾダイレクトブルー染料[式中、A、B及びCのナフチル環の少なくとも2つは、スルホン酸基により置換され、C環は、NH2又はNHPh基により5位で置換されていてもよく、Xは、最大2のスルホン酸基で置換されたベンジル又はナフチル環であり、これは2位でOH基により置換されていてもよく、また、NH2又はNHPh基により置換されていてもよい。]。2式:のビス-アゾダイレクトバイオレット染料[式中、ZはH又はフェニルであり、A環は、矢印により示された位置で、好ましくはメチル及びメトキシ基により置換され、A環はまた、ナフチル環でもよく、Y基はベンジル又はナフチル環であり、それは硫酸基により置換されるとともに、任意によりメチル基により一又は二置換されていてもよい。]。3式:のブルー又はレッド酸性染料[式中、X及びYの少なくとも1つは芳香族基である。一側面によれば、双方の芳香族基が、置換されたベンジル又はナフチル基でもよく、これは更に、非水溶性基、例えばアルキル又はアルキルオキシ又はアリールオキシ基で置換されていてもよく、X及びYは、水溶性基、例えばスルネート又はカルボネートで置換されていなくともよい。別の側面によれば、Xはニトロ置換ベンジル基であり、Yはベンジル基である。]。4構造:のレッド酸性染料[式中、Bは、非水溶性基、例えばアルキル又はアルキルオキシ又はアリールオキシ基で置換されていてもよいナフチル又はベンジル基であり、Bは、水溶性基、例えばスルネート又はカルボネートで置換されていなくともよい。]。5構造:のジス-アゾ染料、及びこれらの対応する塩、並びにこれらの混合物[式中、X及びYは、互いに独立に、それぞれ水素、C1-C4アルキル又はC1-C4-アルコキシであり、Rαは、水素又はアリールであり、Zは、C1-C4アルキル;C1-C4-アルコキシ;ハロゲン;ヒドロキシル又はカルボキシルであり、nは、1又は2であり、mは0、1又は2である。]。6以下の構造:のトリフェニルメタン染料並びにそれらの混合物。別の側面によれば、好適な小分子染料は、色指標SocietyofDyersandColourists、Bradford、UK番号、ダイレクトバイオレット9、ダイレクトバイオレット35、ダイレクトバイオレット48、ダイレクトバイオレット51、ダイレクトバイオレット66、ダイレクトブルー1、ダイレクトブルー71、ダイレクトブルー80、ダイレクトブルー279、アシッドレッド17、アシッドレッド73、アシッドレッド88、アシッドレッド150、アシッドバイオレット15、アシッドバイオレット17、アシッドバイオレット24、アシッドバイオレット43、アシッドレッド52、アシッドバイオレット49、アシッドブルー15、アシッドブルー17、アシッドブルー25、アシッドブルー29、アシッドブルー40、アシッドブルー45、アシッドブルー75、アシッドブルー80、アシッドブルー83、アシッドブルー90及びアシッドブルー113、アシッドブラック1、ベーシックバイオレット1、ベーシックバイオレット3、ベーシックバイオレット4、ベーシックバイオレット10、ベーシックバイオレット35、ベーシックブルー3、ベーシックブルー16、ベーシックブルー22、ベーシックブルー47、ベーシックブルー66、ベーシックブルー75、ベーシックブルー159及びそれらの混合物からなる群より選択される小分子染料を含む。別の側面によれば、好適な小分子染料は、色指標SocietyofDyersandColourists、Bradford、UK番号、アシッドバイオレット17、アシッドバイオレット43、アシッドレッド52、アシッドレッド73、アシッドレッド88、アシッドレッド150、アシッドブルー25、アシッドブルー29、アシッドブルー45、アシッドブルー113、アシッドブラック1、ダイレクトブルー1、ダイレクトブルー71、ダイレクトバイオレット51及びそれらの混合物からなる群より選択される小分子染料を含む。別の側面によれば、好適な小分子染料は、色指標SocietyofDyersandColourists、Bradford、UK番号、アシッドバイオレット17、ダイレクトブルー71、ダイレクトバイオレット51、ダイレクトブルー1、アシッドレッド88、アシッドレッド150、アシッドブルー29、アシッドブルー113又はそれらの混合物からなる群より選択される小分子染料を含む。好適なポリマー染料は、複合体化した色原体を含むポリマー染料-ポリマー複合体、及びポリマーの主鎖にコポリマー化した色原体を含むポリマー並びにそれらの混合物、からなる群より選択されるポリマー染料を含む。別の側面によれば、好適なポリマー染料は、商品名Liquitint登録商標Milliken、Spartanburg、SouthCarolina、USAとして販売されている布地材料着色剤fabricsubstantivecolorants、少なくとも1の反応性染料及びヒドロキシル部分、一級アミン部分、二級アミン部分、チオール部分、及びこれらの混合物からなる群より選択される部分を含むポリマーからなる群より選択されるポリマーから形成される染料-ポリマー複合体、からなる群から選択されるポリマー染料を含む。さらに別の側面によれば、好適なポリマー染料は、Liquitint登録商標Milliken、Spartanburg、SouthCarolina、USAバイオレットCT、リアクティブブルー、リアクティブバイオレット又はリアクティブレッド染料と複合体化したカルボキシメチルセルロースCMC、例えば商品名AZOCMCELLULOSE、製品コードSACMCの下でMegazymeWicklowIrelandにより販売されているC.I.リアクティブブルー19と複合体化したCMC、アルコキシル化トリフェニル-メタンポリマー着色剤、アルコキシル化チオフェンポリマー着色剤、及びそれらの混合物からなる群より選択されるポリマー染料を含む。好適な染料粘土複合体は、少なくとも1のカチオン性塩基性染料及びスメクタイト粘土、及びそれらの混合物を含む群から選択される染料粘土複合体を含む。別の側面によれば、好適な染料粘土複合体は、C.I.ベーシックイエロー1~108、C.I.ベーシックオレンジ1~69、C.I.ベーシックレッド1~118、C.I.ベーシックバイオレット1~51、C.I.ベーシックブルー1~164、C.I.ベーシックグリーン1~14、C.I.ベーシックブラウン1~23、CIベーシックブラック1~11からなる群より選択される一つのカチオン性/塩基性染料、及びモンモリロナイト粘土、ヘクトライト粘土、サポナイト粘土からなる群より選択される粘土からなる群より選択される染料粘土複合体、及びそれらの混合物を含む。さらに別の側面によれば、好適な染料粘土複合体は、以下:モンモリロナイトベーシックブルーB7C.I.42595複合体、モンモリロナイトベーシックブルーB9C.I.52015複合体、モンモリロナイトベーシックバイオレットV3C.I.42555複合体、モンモリロナイトベーシックグリーンG1C.I.42040複合体、モンモリロナイトベーシックレッドR1C.I.45160複合体、モンモリロナイトC.I.ベーシックブラック2複合体、ヘクトライトベーシックブルーB7C.I.42595複合体、ヘクトライトベーシックブルーB9C.I.52015複合体、ヘクトライトベーシックバイオレットV3C.I.42555複合体、ヘクトライトベーシックグリーンG1C.I.42040複合体、ヘクトライトベーシックレッドR1C.I.45160複合体、ヘクトライトC.I.ベーシックブラック2複合体、サポナイトベーシックブルーB7C.I.42595複合体、サポナイトベーシックブルーB9C.I.52015複合体、サポナイトベーシックバイオレットV3C.I.42555複合体、サポナイトベーシックグリーンG1C.I.42040複合体、サポナイトベーシックレッドR1C.I.45160複合体、サポナイトC.I.ベーシックブラック2複合体からなる群より選択される、染料粘土複合体及びそれらの混合物を含む。適切な顔料は、フラバントロン、インダントロン、1~4個の塩素原子を有する塩素化インダントロン、ピラントロン、ジクロロピラントロン、モノブロモジクロロピラントロン、ジブロモジクロロピラントロン、テトラブロモピラントロン、ペリレン-3,4,9,10-テトラカルボン酸ジイミドイミド基は、未置換、またはC1~C3-アルキル若しくはフェニル或いは複素環式ラジカルで置換されていてもよく、フェニルおよび複素環式ラジカルは更に水溶性を付与しない置換基を有していてもよい、アントラピリミジンカルボン酸アミド、ビオラントロン、イソビオラントロン、ジオキサジン顔料、銅フタロシアニン1分子当たり最大2個の塩素原子を有していてもよい、ポリクロロ-銅フタロシアニン、又はポリブロモクロロ-銅フタロシアニン1分子当たり最大14個の臭素原子を有する、及びこれらの混合物からなる群より選択される顔料を含む。別の側面によれば、好適な顔料は、ウルトラマリンブルーC.I.ピグメントブルー29、ウルトラマリンバイオレットC.I.ピグメントバイオレット15及びそれらの混合物からなる群より選択される顔料を含む。前述の布地色調剤は、組み合わせて用いることができる布地色調剤の任意の混合物が使用できる。好適な布地色調剤は、例えばAldrich、Milwaukee、Wisconsin、USA;CibaSpecialtyChemicalsBaselSwitzerland;BASFLudwigshafenGermany;DaygloColorCorporationMumbaiIndia;OrganicDyestuffsCorpEastProvidenceRhodeIslandUSA;DystarFrankfurtGermany;LanxessLeverkusenGermany;MegazymeWicklowIreland;ClariantMuttenzSwitzerland;AveciaManchesterUKから購入し、及び/又は本明細書に記載の実施例に従って作製することができる。好適な色調剤は、米国特許第7,208,459号B2に詳細に記載されている。試験方法1染料又は顔料材料が本発明の目的に適した布地色調剤であるかどうかを特定するためのプロトコールをここに記す。12つのターゴトメーターポットを800mlのNewcastleuponTyneUKの水道水米国ガロンあたり約12グレインの総硬度、NorthumbrianWaterPityMeDurhamCoDurhamUKにより供給されるで満たす。2ポットはターゴトメーターに挿入され、試験中、水温は30°Cに制御され、攪拌は40rpmに設定される。3各ポットにwfkBruggenBrachtGermanyより供給された4.8gのIECB洗剤IEC60456洗濯機用参照用基準洗剤タイプBを加える。42分後、第1のポットに2.0mgの活性着色剤を加える。51分後、5cm×5cmの材料標本に切断された50gの平坦な綿肌着WarwickEquestConsettCountyDurhamUKにより供給されるを各ポットに加える。610分後、ポットを排水し、3:1のカルシウム対マグネシウムモル比を有する14.4のEnglishClarkDegreesHardnessの水硬度を有する冷水16°Cで再び満たす。72分間すすいだ後、布地を取り除く。8同一の処理を用いて、ステップ3~7を更に3サイクル繰り返す。9布地を回収し、屋内で12時間自然乾燥させる。10D65光源及びUVA遮断フィルターを取り付けたHunterMiniscanスペクトロメーターを用いて材料標本を分析し、Huntera赤-緑軸及びHunterb黄-青軸値を得る。11各セットの布地についてHuntera及びHunterb値を平均する。評価において、着色剤で処理された布地がa軸またはb軸のいずれか上で、0.2単位より大きい色調の平均の差を示した場合、本発明の目的の布地色調剤であるとみなされる。組成物は、カプセル化物を含んでもよい。一側面によれば、カプセル化物は、コアを含み、シェルは内部及び外部表面を有し、前記シェルは前記コアをカプセル化する。前記カプセル化物の一側面によれば、前記コアは、香料;光沢剤;染料;防虫剤;シリコーン;ワックス;香料;ビタミン;柔軟剤;スキンケア剤、一側面によれば、パラフィン;酵素;抗細菌剤;漂白剤;五感で知覚されるものsensates;及びそれらの混合物からなる群より選択される材料を含んでもよく、前記シェルは、ポリエチレン;ポリアミド;ポリスチレン;ポリイソプレン;ポリカーボネート;ポリエステル;ポリアクリレート;アミノプラストからなる群より選択される材料を含んでもよく、一側面によれば、前記アミノプラストは、ポリウレア、ポリウレタン、及び/又はポリウレアウレタンを含んでもよく、一側面によれば前記ポリウレアは、ポリオキシメチレンウレア及び/又はメラミンホルムアルデヒド;ポリオレフィン;多糖を含んでもよく、一側面によれば前記多糖は、アルギネート及び/又はキトサン;ゼラチン;シェラック;エポキシ樹脂;ビニルポリマー;水不溶性無機物;シリコーン;及びそれらの混合物を含んでもよい。前記カプセル化物の一側面によれば、前記コアは、香料を含んでもよい。前記カプセル化物の一側面によれば、前記シェルは、メラミンホルムアルデヒド及び/又は交差架橋されたメラミンホルムアルデヒドを含んでもよい。一側面によれば、好適なカプセル化物は、コア材料、及びシェルを含んでもよく、前記コア材料を少なくとも部分的に包む前記シェルは、開示される。少なくとも75、85又はさらに90の前記カプセル化物は、約0.2MPa~約10MPa、約0.4MPa~約5MPa、約0.6MPa~約3.5MPa、又はさらに約0.7MPa~約3MPaの破壊強度;及び0~約30、0~約20、又はさらに0~約5の有益剤漏出を有し得る。一側面によれば、少なくとも75、85又はさらに90の前記カプセル化物は、約1ミクロン~約80ミクロン、約5ミクロン~60ミクロン、約10ミクロン~約50ミクロン、又はさらに約15ミクロン~約40ミクロンの粒子径を有し得る。一側面によれば、少なくとも75、85又はさらに90の前記カプセル化物は、約30nm~約250nm、約80nm~約180nm、又はさらに約100nm~約160nmの粒子壁の厚さを有し得る。一側面によれば、前記カプセル化物のコア材料は、香料原料からなる群より選択される材料、及び/又は、任意で、ヒマシ油、ココナッツ油、綿実油、グレープ油、菜種油、大豆油、コーン油、パーム油、アマニ油、サフラワー油、オリーブ油、ピーナッツ油、ココナッツ油、パーム核油、ヒマシ油、レモン油及びそれらの混合物を含む原液及び/又は混合された植物油を含む植物油;植物油のエステル、アジピン酸ジブチル、フタル酸ジブチル、アジピン酸ブチルベンジル、アジピン酸ベンジルオクチル、リン酸トリクレジル、リン酸トリオクチルを含むエステル、及びそれらの混合物;約80°C超の沸点を有するこれらの直鎖又分岐鎖の炭化水素を含む直鎖又分岐鎖の炭化水素;部分的に水素化されたテルフェニル、ジアルキルフタレート、モノイソプロピルビフェニルを含むアルキルビフェニル、ジプロピルナフタレンを含むアルキル化されたナフタレン、灯油、鉱物油及びそれらの混合物を含む石油スピリット;ベンゼン、トルエンを含む芳香族溶媒、及びそれらの混合物;シリコーン油;及びそれらの混合物、からなる群より選択される物質を含む。一側面によれば、前記カプセル化物の壁材料は、アルデヒド及びアミンの反応生成物を含む好適な樹脂を含んでもよく、適切なアルデヒドは、ホルムアルデヒドを含む。好適なアミンは、ウレア、ベンゾグアナミン、グリコールウリル、及びそれらの混合物を含む。好適なメラミンは、メチロールメラミン、メチル化メチロールメラミン、イミノメラミン、及びそれらの混合物を含む。好適なウレアは、ジメチロールウレア、メチル化ジメチロールウレア、ウレア-レゾルシノール、及びそれらの混合物を含む。一側面によれば、好適なホルムアルデヒドスカベンジャーは、カプセル化物と共に、例えばカプセルスラリー中に使用してもよく、及び/又は、カプセル化物の消費者製品への添加前、添加時、又は添加後に、斯かる消費者製品に添加してもよい。好適なカプセルは、米国特許出願公開第2008/0305982A1号;及び/又は米国特許出願公開第2009/0247449A1号の教示に従って作製することができる。あるいは、適切なカプセルは、Appleton、WisconsinUSAのAppletonPapersIncから購入することができる。加えて、前述のカプセル化物を作るための材料は、SolutiaIncStLouisMissouriUSA、CytecIndustriesWestPatersonNewJerseyUSA、sigmaAldrichStLouis、MissouriUSA、SanDiegoCaliforniaUSAのCPKelcoCorp;LudwigshafenGermanyのBASFAG;CranburyNewJerseyUSAのRhodiaCorp;Wilmington、DelawareUSAのHerculesCorp;CalgaryAlbertaCanadaのAgriumInc、NewJerseyUSAのISPChicago、IL、USAのAkzoNobel;BremenGermanyのStroeverShellacBremen;MidlandMIUSAのDowChemicalCompany;LeverkusenGermanyのBayerAG;StLouisMissouriUSAのSigmaAldrichCorpから入手し得る。一側面によれば、組成物は、aカルシウム塩、マグネシウム塩及びそれらの混合物からなる群より選択される無機塩;bオリゴ糖、多糖及びそれらの混合物からなる群より選択される糖質;cフェニルボロン酸及びそれらの誘導体からなる群より選択される質量効率の高いmassefficient可逆的プロテアーゼ阻害剤;及びdそれらの混合物からなる群より選択される酵素安定化剤を含んでもよい。別の実施形態によれば、組成物は、以下:1可逆的プロテアーゼ阻害剤、例えばホウ素を含む化合物;21-2プロパンジオール;3ギ酸カルシウム及び/又はギ酸ナトリウム;及び4それらの任意の組み合わせを含む。一側面によれば、組成物はジグリセリド及びトリグリセリド、ジステアリン酸エチレングリコール、微結晶性セルロース、セルロース系材料、微小繊維セルロース、生体ポリマー、キサンタンゴム、ジェランガム、及びそれらの混合物からなる群より選択される構造物を含んでもよい。洗剤は、1又は2以上のポリマーを含んでいてもよい。例としては、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリビニルピリジン-N-オキシド、ポリビニルイミダゾール、ポリカルボキシレート、例えばポリアクリレート、マレイン酸/アクリル酸コポリマー、及びラウリルメタクリレート/アクリル酸コポリマーである。洗剤は、漂白系を含んでいてもよく、それはH2O2源、例えば過ホウ酸塩又は過カルボン酸塩等含んでいてもよく、それは過酸形成漂白活性化剤、例えばテトラアセチルエチレンジアミン又はノナノイルオキシベンゼンスルホンと組み合わせられてもよい。あるいは、漂白系は、例えばアミド、イミド、又はスルホン型のペルオキシ酸を含んでいてもよい。一般的に、漂白剤が使用される場合、本発明の組成物は、対象清浄組成物の重量比で、約0.1~約50、又更には約0.1~約25の漂白剤を含んでもよい。本発明の酵素変異体は、従来の安定化剤又はプロテアーゼ阻害剤、例えば、ポリオール、例えばプロピレングリコール又はグリセロール、糖又は糖アルコール、異なる塩、例えばNaCl及びKCl;乳酸、ギ酸、ホウ酸、又はホウ酸誘導体、例えば芳香族ホウ酸エステル、又はフェニルホウ酸誘導体、例えば4-ホルミルフェニルホウ酸、又はペプチドアルデヒド、例えばジ-、トリ-又はテトラペプチドアルデヒド又はアルデヒドアナログ形態B1-B0-R式中、RはH、CH3、CX3、CHX2、又はCH2XX=ハロゲンであり、B0は単一のアミノ酸残基好ましくは、任意で置換された脂肪族又は芳香族側鎖を有するであり;及びB1は、1又は2以上好ましくは1、2又は3つのアミノ酸残基からなり、任意でN末端保護基を有する、又は国際公開第09118375号及び国際公開第98/13459号に記載のもののいずれか、又はタンパク質型のプロテアーゼ阻害剤、例えばRASI、BASI、WASI米、大麦及び小麦の二機能性α-アミラーゼ/サブチリシン阻害剤又はCI2又はSSIを用いて安定化され得る。組成物は、例えば国際公開第92/19709号、及び国際公開第92/19708号又は米国特許6,472,364号の記載に従って調製され得る。いくつかの実施形態によれば、本明細書で用いられる酵素は、最終的な組成物において、水溶性の亜鉛II、カルシウムII及び/又はマグネシウムIIイオン源の存在により安定化され、それは、斯かるイオン、及びその他の金属イオン例えばバリウムII、スカンジウムII、鉄II、マンガンII、アルミニウムIII、錫II、コバルトII、銅II、ニッケルII、及びオキソバナジウムIV等を酵素に提供する。洗剤はまた、他の従来の洗剤成分、例えば、粘土を含む柔軟剤、泡増強剤、消泡剤、抗腐食剤、よごれ懸濁剤、よごれ再付着防止剤、染料、殺菌剤、光学的光沢剤、ヒドロトロープ、退色阻害剤、有機溶媒、例えばエタノール、又は香料を含んでもよい。更に、洗剤は、染み抜き剤prespotter又は増強剤boosterを含み得、それは一般的な清浄レベル向上させるために洗浄に添加され、これらの助剤のいくつかはまた、洗浄ステップの前に、布地に適用される前処理剤として用いられ得る。洗剤組成物中に、任意の酵素、特に本発明の酵素は、1リットルの洗浄溶液あたり0.001~100mgの酵素タンパク質、好ましくは1リットルの洗浄溶液あたり0.005~5mgの酵素タンパク質、より好ましくは1リットルの洗浄溶液あたり0.01~1mgの酵素タンパク質、特に、1リットルの洗浄溶液あたり0.1~1mgの酵素タンパク質に対応する量で添加され得ることが、現在熟考される。しかしながら、本発明の洗剤組成物は、少なくとも0.0001~約0.1重量、例えば約0.0001~約0.01、約0.001~約0.01、又は約0.001~約0.01の純粋な酵素タンパク質を含む。しかしながら、調製された酵素を用いる場合、洗剤組成物は、約0.02~約20重量、例えば約0.05~約15重量、又は約0.05~約20、又は約0.05~約5、又は約0.05~約3含む。本発明のα-アミラーゼ変異体は、参照により本明細書に援用される国際公開第97/07202号に開示される洗剤調製物にさらに援用され得る。組成物は、典型的には他の洗浄成分を含む。好適な洗剤成分は、以下:漂白剤;イミン漂白増強剤;過酸化水素源、例えば過炭酸塩及び/又は過ホウ酸塩、特に材料、例えば炭酸塩及び/又は硫酸塩、ケイ酸塩、ホウケイ酸塩、及びそれらの任意混合物でコートされた過炭酸塩;カプセル化形態中の予調製過酸を含む、予調製過酸;遷移金属触媒;消泡剤系、例えばシリコーン系消泡剤、及び/又は脂肪酸系消泡剤;光沢剤;光退色剤;柔軟剤、例えば粘土、シリコーン及び/又は第4級アンモニウム化合物;凝集剤、例えばポリエチレンオキシド;染料移動阻害剤、例えばポリビニルピロリドン、ポリ4-ビニルピリジンN-オキシド、及び/又はビニルピロリドン及びビニルイミダゾールのコポリマー;布地統合成分fabricintegritycomponents、例えばイミダゾール及とエピクロルヒドリンの縮合により生成されたオリゴマー;よごれ分散剤及びよごれ再付着防止剤、例えばアルコキシル化ポリアミン及びエトキシ化エチレンイミンポリマー;再付着防止成分、例えばポリエステル;カルボン酸ポリマー、例えばマレイン酸ポリマー又はマレイン酸及びアクリル酸のコポリマー;香料、例えば香料マイクロカプセル、でんぷんカプセル化剤accords、スプレー式香料;石鹸リングsoaprings;美的粒子aestheticparticles;染料;充填剤、例えば硫酸ナトリウム、もっとも、組成物は実質的に遊離の充填剤であることが好ましい;ケイ酸塩、例えば1.6R及び2.0Rケイ酸ナトリウムを含むケイ酸ナトリウム、又はメタケイ酸ナトリウム;ジカルボン酸及びジオールのコポリエステル;セルロースポリマー、例えばメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエトキシセルロース、又は他のアルキル又はアルキルアルコキシセルロース;溶媒、例えば1,2プロパンジオール、モノエタノールアミン;ジエチレングリコール、エタノール、及びそれらの任意の混合物;ヒドロトロープ、例えばクメンスルホン酸ナトリウム、キシレンスルホン酸ナトリウム、トルエンスルホン酸ナトリウム、及び任意の混合物;有機酸、例えばクエン酸;及びそれらの任意の組み合わせを含む。洗濯洗剤組成物の例以下は、トップ-ローディング自動洗濯機1及び2及びフロントローディング洗濯機3に適した液体洗濯洗剤組成物である。組成物4~8自動食器洗浄用ゲル食器洗浄洗剤組成物本発明の酵素はまた、食器洗浄洗剤組成物に用いられ得、以下を含む:1粉末自動食器洗い組成物2粉末自動食器洗い組成物3粉末自動食器洗い組成物4粉末自動食器洗い組成物5粉末自動食器洗い組成物6清浄界面活性剤系を含む粉末及び液体食器洗い組成物7非水性液体自動食器洗い組成物8非水性液体食器洗い組成物9揺変性液体自動食器洗い組成物10液体自動食器洗い組成物11保護された漂白粒子を含む液体自動食器洗い組成物121、2、3、4、6及び10に記載の組成物において、過ホウ酸塩を過炭酸塩に置き換えた自動食器洗い組成物。13マンガン触媒をさらに更に含む、1~6に記載の自動食器洗い組成物。マンガン触媒としては、例えば、低温度漂白のための有効的なマンガン触媒、Nature、3691994pp637639に記載の化合物の何れかが挙げられる。産業利用本発明はまた、α-アミラーゼ変異体を用いるための方法を対象とする。変異体α-アミラーゼは、好ましくは、洗剤組成物、例えば、洗濯洗剤組成物、例えば家庭用洗濯洗剤組成物、特に液体洗濯洗剤組成物に組み込まれ、及び/又は一緒に用いられる。特に、洗剤は、少なくとも1のキレート剤を含み、洗剤組成物は、典型的に、従来の洗剤成分、例えば界面活性剤アニオン製、カチオン性、非イオン性、双性イオン性、両性イオン性、助剤、漂白剤、ポリマー、他の酵素及び例えば国際公開第2007/130562号及び国際公開第2007/149806号それは、その全体において参照により本明細書に援用されるに記述されるような他の成分、を含む。アルカリ性pH値におけるそれらの活性のために、本発明のα-アミラーゼは、様々な産業プロセスにおける使用に適しており、特に、酵素は、洗浄、食器洗浄及び硬表面清浄洗剤組成物の成分として潜在的な用途を発見するが、それはまた、甘味料、シロップ、例えばグルコース等、プラスチック前駆体、発酵製品、特にエタノール、ブタノール及びメエタノール、及びバイオガス、例えばメタン、又は任意の他のでんぷん由来の製品の産生に有用である。従来のでんぷん変換プロセス及び液化及び/又は糖化プロセスについての条件は、例えば、米国特許第3,912,590号及び欧州特許出願公開第252,730号明細書及び欧州特許出願公開第63,909号明細書に記述される。本発明のα-アミラーゼ変異体は、特にpH7超で再パルプ化が起こり、アミラーゼが強化するでんぷんの分解を通して古紙材料の分解を容易にする、でんぷんで強化された古紙及びボール紙からの、リグノセルロース物質、例えば、パルプ、紙、及びボール紙の製造に用いられ得る。本発明のα-アミラーゼ変異体はまた、酵素的に修飾されたでんぷんが、アルカリ性充填剤、例えば炭酸カルシウム、カオリン及び粘土と共に製紙に用いられる、修飾でんぷんにおいて有用であり得る。従って、上述の組成物は更に、非洗剤成分、発酵生物、例えば酵母、好ましくはサッカロミセス属の株、植物材料、又はでんぷんを含む物質、例えば塊茎、根、茎、全粒粉、トウモロコシ、トウモロコシの穂軸、コムギ、オオムギ、ライムギ、ミロ、サゴ、キャッサバ、タピオカ、ソルガム、コメ、マメ、サツマイモ、又はそれらの混合物、又は穀物、糖を含む原料、例えば糖液、果物、サトウキビ、又はサトウダイコン、ポテト、及びセルロースを含む物質、例えば木又は植物遺体、又はそれらの混合物を含んでもよい。本発明のα-アミラーゼ変異体はまた、布地糊抜きに有用であり得る。布地加工産業において、α-アミラーゼは、織込みの間、横糸上に保護コーティングとして役立つ、でんぷんを含む糊の除去を容易にするために、糊抜きプロセスにおいて補助物として、伝統的に用いられている。織込み後、糊コーティングの完全な除去は、布地が洗浄され、脱色され、染色されるその後のプロセスにおける最適な結果を確かにするために重要である。それは布地材料への何らかの悪影響を含まないので、酵素的でんぷん分解は好ましい。加工コストを減少させる、及び工場処理量を増加させるために、糊抜きプロセスは、しばしば洗浄及び漂白ステップと組み合わされる。斯かる場合では、伝統的なα-アミラーゼは、高いpHレベル及び漂白剤と非常に適合しないため、非酵素補助物、例えばアルカリ又は酸化剤は、典型的にでんぷんを分解するために用いられる。でんぷん糊の非酵素的分解は、用いられるより攻撃的な化学物質のために、いくらかの繊維損傷を導く。従って、それらはアルカリ性溶液で改善された性能を有するので、本発明のα-アミラーゼ変異体を使用することが望まれる。α-アミラーゼ変異体は、単独で、又はセルロースを含む布地又は布地を糊抜きする場合、セルラーゼと組み合わせて用いられ得る。一つの実施形態によれば、本発明は、空気ケアaircareについてではない、請求された組成物についての製品及び/又は方法及び/又は使用に関する。一つの実施形態によれば、本発明は、車ケアcarcareについてではない、請求された組成物についての製品及び/又は方法及び/又は使用に関する。一つの実施形態によれば、本発明は、食器洗浄についてではない、請求された組成物についての製品及び/又は方法及び/又は使用に関する。一つの実施形態によれば、本発明は、布地柔軟化fabricconditioning柔軟化softeningを含むについてではない、請求された組成物についての製品及び/又は方法及び/又は使用に関する。一つの実施形態によれば、本発明は、洗濯洗浄力についてではない、請求された組成物についての製品及び/又は方法及び/又は使用に関する。一つの実施形態によれば、本発明は、洗濯及び濯ぎ助剤及び/又はケアcareについてではない、請求された組成物についての製品及び/又は方法及び/又は使用に関する。一つの実施形態によれば、本発明は、硬表面清浄及び/又は処理、及び消費者用又は業務用の他の清浄についてではない、請求された組成物についての製品及び/又は方法及び/又は使用に関する。一つの実施形態によれば、本発明は、空気ケアaircare、車ケアcarcare、食器洗浄、布地柔軟化fabricconditioning柔軟化softeningを含む、洗濯洗浄力、洗濯及び濯ぎ助剤及び/又はケアcare、硬表面清浄及び/又は処理、及び消費者用又は業務用の他の清浄についてではない、請求された組成物についての製品及び/又は方法及び/又は使用に関する。材料及び方法酵素:SP722:配列番号6、Novozymesより入手可能、国際公開第95/26397号に開示。SP707又は707:配列番号8AA560:配列番号10一般的な分子生物学的方法:別途記載しない限り、DNA操作及び形質転換は、分子生物学の標準的な方法Sambrooketal1989;Ausubeletal1995;HarwoodandCutting1990を用いて実施した。α-アミラーゼ及び変異体の発酵発酵は、本技術分野で周知の方法、又は以下の方法により行われ得る。適切な発現プラスミドを含むB.サブティリス株を、適切な抗生物質を含むLBアガープレート上に縞状播種し、37°Cで一晩培養する。コロニーを、500ml撹拌フラスコ中の適切な抗生物質例えば10mg/lクロラムフェニコールを含む100mlBPX培地に移送する。BPX培地の組成:培養物を、37°C、270rpmで、4~5日間振盪する。細胞及び細胞残屑を、4500rpmで20~25分の遠心分離により、発酵培養液から除去する。その後、上清を濾過し、完全に清明な溶液を得る。濾液をUF-フィルター10000カットオフ膜で濃縮し、洗浄し、バッファを透析又はゲル濾過等により20mM酢酸pH5.5に変更する。UF濾液をSsepharoseFFGeneralElectric製、陽イオン交換、マトリックス:架橋アガロース、官能基:-OCH2CHOHCH2OCH2CH2CH2SO3に適用し、溶出は同一のバッファ中で、0.2MNaClを用いたステップ溶出により行う。溶出液を、10mMトリス2-アミノ-2-ヒドロキシメチル-プロパン-1,3-ジオール、pH9.0に対して透析し、QsepharoseFFGeneralElectric製、陰イオン交換、マトリックス:架橋アガロース、官能基:-OCH2CHOHCH2OCH2CHOHCH2NCH33に適用し、0~0.3MNaClの線形グラジエンドを用いて6カラム容量まで溶出する。活性EnzCheckアッセイにより測定を含む画分をプールし、pHを7.5に調整し、5分間の0.5w/vol.活性炭処理により残留色素分を除去する。更には、バッファ交換ステップを加え、例えば透析又はゲル濾過等により、それ自体は洗浄結果に影響を与えないバッファシステム、例えば、EPPS-バッファ、グリシン-バッファ、酢酸バッファ等、好ましくは保存時にアミラーゼを安定化するための低濃度のカルシウム例えば0.1mM、及び、容器及びピペットへの酵素タンパク質の吸着のリスクを減少させるための約0.01TritonX100を含むバッファに交換することが好ましい。洗剤モデル洗剤モデルAの組成物:洗剤モデルBの組成物:遊離カルシウムイオンの測定のためのアッセイ以下のアッセイは、溶液中の遊離カルシウムイオンの測定のために、惹いては、遊離カルシウムイオンCa2の濃度をpH8で、例えば2.0mMから0.10mMまで減少させるキレート剤の能力の測定に用いられ得る。アッセイ原理:種々の量のキレート剤を、2.0mMCa2の溶液に添加し、一定のpH及び温度において、カルシウムイオン選択電極を用いることにより、遊離のCa2濃度を測定する。測定された遊離カルシウム濃度のキレート剤の濃度に対するプロットから、遊離カルシウム濃度を2.0mMから0.10mMまで減少するのに必要なキレート剤の濃度を決定することができる。本アッセイによれば、遊離カルシウム濃度を2.0mMから0.10mMまで減少するのに必要なキレート剤の濃度は、塩化カリウム及び49mMEPPS中、pH8、21°Cで測定される。溶液:電解質溶液:超純水MilliQ水中4M塩化カリウム。pH8バッファ:50mMEPPS4-2-ヒドロキシエチルピペラジン-1-プロパンスルホン酸、最小量の1N水酸化ナトリウムを用いてpH8.0に調整。カルシウムストック溶液:CaCl22H2Oから作製したpH8バッファ中25mMCa2。キレート剤ストック溶液:pH8バッファ中15mMキレート剤100乾燥キレート剤換算、最小量の1MNaOH又は1MHClを用いてpH8.0に再調整。全てのバッファ及び溶液の調製に超純水MilliQ水を用いる。装置:ThermoScientific製カルシウムイオン選択電極catNo9720BNWPを、塩化カルシウム標準溶液を用いて校正。電極の校正は、電極添付のガイドラインの記載に従い行う。手順:各々4mlのカルシウムストック溶液最終濃度2.0mM、1mL電解質溶液最終濃度80mM塩化カリウム、様々な量0~45mLのキレート剤ストック溶液を含み、pH8バッファを用いて全容量を50mLに調製した一連のバイアルを用意する。アッセイにおけるEPPSの最終濃度は49mMである。混合後、遊離Ca2の濃度をカルシウム電極により測定する。試験対象キレート剤の各々について、十分な数の種々のキレート剤濃度について、遊離カルシウム濃度の決定を行うことにより、得られるデータセットが、2.0mMの遊離カルシウムイオンから0.10mM未満の値まで、又はアッセイにおける最終キレート剤濃度である10.0mM超まで、全体の範囲を確実に網羅するようにすべきである。データ点の好適な数は、8又はそれ以上である。初期の2.0mMの遊離カルシウムイオンを0.10mMまで低減するために要求されるキレート剤濃度は、内挿により、キレート剤濃度に対する測定された遊離カルシウムイオン濃度のプロットから得られる。溶液を所望の温度に平衡化する。本アッセイでは21°Cである。logKの測定キレート剤は、キレート剤とカルシウムイオンとの結合定数によっても特徴付けることができる。この定数は、ADNielsenCCFuglsangandPWesthAnalyticalBiochemistryVol3142003page227234及びTWisemanSWillistonJFBrandts及びLNLinAnalyticalBiochemistryVol1791989page131137の記載に従って、ITC等温滴定熱量計により測定することができる。使用する全てのガラス製品及びプラスチックボトルは、1w/wEDTA溶液で洗浄し、続いて、Chelex100で処理された超純水MilliQ水中で完全に濯ぐ。溶液はプラスチックボトル中に保存し、使用時まで5°Cで維持する。バッファ:超純水MilliQ水で調製された20mMHEPES2-[4-2-ヒドロキシエチル-1-ピペラジニル]-エタンスルホン酸、pH8超純水MilliQ水で調製された20mMグリシン、pH10溶液:-20mMHEPES、pH8中125μMキレート剤、又は20mMグリシン、pH10中125μMキレート剤-20mMHEPES、pH8中4mMCaCl2、又は20mMグリシン、pH10中4mMCaCl2-超純水MilliQ水全てのバッファは、カルシウムイオンを除去するために、Chelex100カラムSigmaAldrichC7901、マトリックス1架橋ポリスチレンマトリックス活性基イミノジ酢酸ナトリウム形態マトリックスメチル基を介して芳香族環に付着を通される。装置:MCSITCMicroCalIncNorthamptonMAUSA手順参照セルを超純水MilliQ水で満たす。サンプルセルを、前記の選択されたpHのキレート剤溶液で満し、シリンジを選択されたpHのカルシウム溶液で満す。溶液を所望の温度、例えば19°Cに平衡化する。次に、サンプルセル中のキレート剤溶液を、8μLのカルシウム溶液の30~40分割量で滴定する。続いて、ITCから得られた信号を、MicroCalIncにより供給される独自のソフトウェアを用いて積分する。結合等温線を得るために、同一のソフトウェアパッケージを用いて回帰ルーチンを実施する。次に、これらのデータを、Originソフトウェアに組み込まれたルーチンを用いて、モデルにフィッティングする。現時点で好ましいのは、一般的に用いられるキレート剤の大部分について最適なフィッティングを与えるワンサイトOneSitesモデルである。即ち、残差はゼロ付近に均等に分布される。logKは、底を10とするK値の対数として計算される。洗浄性能を測定するためのアッセイ洗剤組成物中のα-アミラーゼ変異体の洗浄性能を評価するために、洗浄実験を実施してもよい。酵素は、自動機械ストレスアッセイAMSA、又はビーカーを用いた洗浄性能試験を用いて試験される。AMSA試験によれば、少量ずつ多数の酵素-洗剤溶液の洗浄性能を試験することができる。AMSAプレートは、試験溶液用の多数のスロットと、これらのスロットの全ての開口に対して、洗浄対象となる布地材料標本標本を堅く絞るリッドとを有する。洗浄時間の間、プレート、試験溶液、布地、及びリッドを烈しく振盪し、試験溶液を布地に接触させるとともに、定期的且つ周期的な振動による機械的応力を印加する。更なる記述については、国際公開第02/42740号、特に23~24ページのSpecialmethodembodimentsのパラグラフを参照のこと。一般的な洗浄性能説明:水15°dH、0.8g/L洗剤、例えば上述のような洗剤モデルA若しくはB、又は50mMHCO3-、及び本発明の酵素、例えば濃度0、0.2、0.4、0.8及び/又は1.2mg/Lの酵素タンパク質を含む試験溶液を調製する。でんぷん例えばCenterForTestmaterialsBV、POBox1203133KTVlaardingenTheNetherlands製CS28で汚れた布地を加え、20°Cで30分間洗浄する。水道水の流水で濯ぎ、暗所で乾燥した後、続いて汚れた布地の光強度又は反射率を、洗浄性能の尺度として測定する。0mg/Lの酵素タンパク質を用いた試験をブランクとして実施し、デルタ減少remission値を得る。洗浄ステップ時には、布地と共に洗浄溶液に対して、機械的動作を例えば振盪、回転、又は撹拌等の形態で適用することが好ましい。AMSA洗浄性能実験は、例えば以下に示す実験条件で実施する。試験系へのCaCl2、MgCl2、及びNaHCO3Ca2:Mg2:HCO3-=4:1:7.5、モル基準の添加により、水硬度を15 ゚dHに調整した。洗浄後、布地を水道水で洗浄し、暗所で乾燥した。酵素変異体の性能は、その特定のアミラーゼで洗浄された布地の色の明るさとして測定される。明るさはまた、サンプルへの白色光の照射時に、サンプルにより反射される光の強度としても表すことができる。サンプルが汚れた場合、反射光の強度は、清浄サンプルの反射光よりも減少する。従って、反射光の強度を用いて、アミラーゼの洗浄性能を測定することができる。色測定は、プロフェッショナルフラッドベッドスキャナーprofessionalflatbedscannerKodakiQsmart、Kodakを用いて、洗浄された布地の画像を撮影することにより行われる。スキャン画像から光強度の値を抽出するには、画像の24ビットの画素値を、赤r、緑g及び青bの値別名RGB値に変換する。強度値Intは、RGB値をベクトルとして加算し、得られるベクトルの長さを求めることにより算出される。布地:布地サンプルCS-28コメでんぷん付着綿は、CenterForTestmaterialsBV、POBox1203133KTVlaardingentheNetherlandsから得ることができる。ビーカーを用いた洗浄性能試験は、上部ロード型洗浄機の小スケールモデルとなるアッセイであり、アミラーゼの洗浄性能を評価するために用いられる。ビーカー洗浄性能試験は、250mLビーカーを用いるとともに、1分あたり80の頻度で、各方向に180°の周期的な回転的動作を提供するパドル攪拌機を使用して行われ、以下のステップを含む。即ち、50mMNaHCO3及び0.4mg/L酵素を含む100mL洗浄溶液6°C、15°dH、pH8.0を用意し;CS-285×5cmの二つの材料標本及びEMPA1625×5cmの二つの材料標本を、洗浄溶液に加えて洗浄を開始し;撹拌速度を80rpmに設定し;60分後に撹拌を停止し、冷たい水道水の流水で材料標本を濯ぎ;濯がれた材料標本を暗所で一晩乾燥させ:及び後述のようにColorEyeを用いて460nmにおける入射光の低減を測定することにより、洗浄性能を評価する。装置及び材料循環機を備えた水槽5°C;ガラスビーカー250mL;洗浄溶液容量100mLのビーカー1つあたり1の回転アーム;試験材料標本:CenterforTestmaterialsBVVlaardingen、TheNetherlands製CS-28綿上のコメでんぷん、及びEMPATestmaterialsAG、StGallenSwitzerland製EMPA162コメでんぷん付着綿/ポリエステル、材料標本は5×5cmに切断される。洗浄溶液:50mMNaHCO3バッファ、pH8.0、水硬度:15°dH、カルシウム:マグネシウム比は4:1。アミラーゼストック溶液:1mlあたり1mg酵素タンパク質。-超純水MilliQ水中0.1w/vTritonX100及び0.1mMCaCl2の溶液は、アミラーゼの希釈に用いられるアミラーゼ希釈バッファ。ColorEye測定洗浄性能は、デルタ減少値ΔRemとして表される。材料標本の光反射評価は、極小の即ち0.7cm2約0.7×1.0cm楕円開口部を有するMacbethColorEye7000反射分光光度計を用いて行った。測定はUVを含まない入射光で実施し、460nmにおける減少を抽出した。測定開口に対して材料標本を押圧するピストンからの反射を減少するべく、測定前に、測定対象となる材料標本を、同一の種類の別の材料標本の上に配置した。個別の材料標本のデルタ減少値は、アミラーゼを用いて洗浄された材料標本の減少値から、アミラーゼを添加することなく洗浄された材料標本対照の減少値を減算することにより算出した。アミロース分解活性α-アミラーゼ活性の測定のためのアッセイEnzChekアッセイアミラーゼ活性又は残存アミラーゼ活性は、以下のEnzCheckアッセイにより測定され得る。基質としてトウモロコシでんぷん誘導体であるDQ登録商標でんぷんトウモロコシでんぷんBODIPYFL複合体を用いる。これは、蛍光が消光される程度までBODIPY登録商標FL4,4-ジフルオロ-5,7-ジメチル-4-ボラ-3a,4a-ジアゾ-s-インダセン-3-プロピオン酸染料で標識されたトウモロコシでんぷんである。約1mgの凍結乾燥された基質を含む一つのバイアルを、100μLの50mM酢酸ナトリウムpH4.0に溶解させる。バイアルを約20秒間ボルテックスし、時折攪拌しながら、溶解するまで室温で暗所に放置する。その後、950μLの10mM酢酸ナトリウム、0.01w/VTritonX100ポリエチレングリコールp-1,1,3,3-テトラメチルブチル-フェニルエーテルC14H22OC2H4Onn=9~10、pH5.0を添加し、十分にボルテックスし、使用時まで室温で暗所に保存する。この溶液1mLを、5mL50mMHEPES、0.01w/VTritonX100、1mMCaCl2、pH7.0と混合することにより、基質作用溶液を調製した。洗剤を含む酵素を、50mMHEPES、0.01TritonX100、1mMCaCl2、pH7.0中15ng酵素タンパク質/ml6826.7倍希釈の濃度に希釈する。アッセイ用に、25μLの基質作用溶液を、黒色384ウェルマイクロタイタープレート中で、25μLの希釈された酵素と10秒間混合する。蛍光強度を、25°Cで、各ウェルについて隔分毎に1回、30分間測定し励起:485nm、発光:555nm、Vmaxを時間に対する蛍光強度のプロットの傾きとして算出する。プロットは線形である必要があるため、希釈された参照酵素溶液が活性アッセイの線形範囲内となるように、残存活性アッセイを調整する。場合によっては、アッセイが、アミラーゼを含まない洗剤から著しい干渉を受ける場合がある。斯かる場合には、代替のアミラーゼアッセイを用いることができる。アミラーゼアッセイに対する洗剤からの干渉は、洗剤に既知の量のアミラーゼを二つのレベルで添加し、その後二つのサンプルの活性を測定することにより試験することができる。測定された活性の差異が、添加されたアミラーゼ間のレベルの差異と対応すれば、保存後のアミラーゼの残存活性を測定するためにそのアッセイを用いることができる。PNPG7アッセイα-アミラーゼ活性は、PNPG7基質を用いる方法により測定することができる。PNPG7は、4,6-エチリデンG7-p-ニトロフェニルG1-α,D-マルトヘプタオシドの略称である。これは、α-アミラーゼ等のエンドアミラーゼにより切断され得るブロック化オリゴ糖である。切断後、キットに含まれるα-グルコシダーゼによって、加水分解された基質を消化し、遊離PNP分子を放出させる。遊離PNP分子は黄色を呈するため、λ=405nm400~420nmでの可視分光測定により測定することができる。PNPG7基質及びα-グルコシダーゼを含むキットは、RocheHitachicatNo11876473により製造されている。試薬:このキットのG7-PNP基質は、22mM4,6-エチリデン-G7-PNP及び52.4mMHEPES2-[4-2-ヒドロキシエチル-1-ピペラジニル]-エタンスルホン酸、pH7.0を含む。α-グルコシダーゼ試薬は、52.4mMHEPES、87mMNaCl、12.6mMMgCl2、0.075mMCaCl2、≧4kU/Lα-グルコシダーゼを含む。基質作用溶液は、1mLのα-グルコシダーゼ試薬と0.2mLのG7-PNP基質を混合することにより調製される。この基質作用溶液の調製は、使用の直前に行う。希釈バッファ:50mMEPPS、0.01w/vTritonX100ポリエチレングリコールp-1,1,3,3-テトラメチルブチル-フェニルエーテルC14H22OC2H4Onn=9~10、1mMCaCl2、pH7.0。手順:分析対象となるアミラーゼサンプルを希釈バッファで希釈し、希釈されたサンプルのpHが7であることを確認した。希釈された酵素サンプル20μlを96ウェルマイクロタイタープレートに移送し、80μlの基質作用溶液を添加してアッセイを行った。溶液を混合し、室温で1分間プレインキュベートし、20秒毎に5分間に亘り、OD405nmで吸光度を測定した。時間依存吸収曲線の傾き1分あたりの吸光度は、所定の条件群の下では、当該α-アミラーゼの比活性酵素1mgあたりの活性に直接比例する。アミラーゼサンプルは、傾きが1分あたり0.4吸光度単位未満であるレベルまで希釈すべきである。ポイントppの測定親と比較しての変異体の残存活性安定性のポイントpp改善は、変異体の残存活性と親の残存活性との差異、即ち、変異体の残存活性引く親の残存活性として計算される。実施例実施例1:変異体の調製配列番号6のアミラーゼ変異体SP722は、標準的な手順、手短に言えば:遺伝子へのランダム及び/又は部位特異的な変異を導入すること、変異誘発された遺伝子でバシラスサブティリス宿主細胞を形質転換すること、形質転換された宿主細胞例えば国際公開第2004/111220号の実施例1に開示されるようにを発酵させること、及び発酵培地からアミラーゼを精製すること、により調整された。参照アミラーゼ配列番号6は、同様の方法でバシラスサブティリスにおいて組み換え的に生産された。実施例2:キレート剤の特徴付け実施例2a.遊離カルシウムイオンの測定キレート剤chelatingagentsキレート剤chelantsは、MKNagarajanetalJAOCSVol61、no9September1984pp14751478に記載の方法から導出された、pH8において、2.0mMから0.10mMまで遊離カルシウムイオンの濃度Ca2を低減させる能力に基づいてランク付けすることができる。遊離カルシウムイオンの測定には、上記材料及び方法で説明したアッセイを用いた。即ち、水硬度を2.0mMから0.10mMまで低減させるのに必要なキレート剤の濃度を、上述のように測定した。実験は、21°Cで、pH8バッファを用いて行った。用いられたキレート剤の最終濃度及び測定された遊離Ca2濃度を、以下の表2.1に示す。これらのデータから、遊離Ca2濃度を2.0mMから0.10mM未満まで低減させるために必要なキレート剤の濃度を、内挿により決定した。このアッセイを用いて、多数のキレート剤を特徴付けした。49mMEPPSバッファ及び80mM塩化カリウム中で、pH8.0において、遊離カルシウムイオンの濃度2.0mMから0.10mMまで低減させるために必要なキレート剤の濃度を、表2.2に示す。実施例2b.logKの測定あるいは、キレート剤chelatingagentsは、キレート剤とカルシウムイオンとの結合定数により特徴付けることができる。この定数は、ADNielsenCCFuglsangandPWesthAnalyticalBiochemistryVol3142003page227234及びTWisemanSWillistonJFBrandtsandLNLinAnalyticalBiochemistryVol1791989page131137の記載に従って、ITC等温滴定熱量計により測定することができる。logKの測定のための手順は、上記の材料及び方法に詳細に記載したとおりである。logKの測定のためのこの手順を用いて、幾つかのキレート剤について、pH10におけるlogK値を、以下のとおり決定した表2.3。実施例3:キレート剤とインキュベーション後の残存活性EnzChekアッセイ本発明において、アミラーゼ活性又は残存アミラーゼ活性は、上述のようにEnzCheckアッセイにより測定される。概略として、洗剤モデルBにおける残存アミラーゼ活性を、31°Cで18時間のインキュベーション後に測定し、得られた活性を、その後、上述のように4°Cで18時間インキュベーションされた参照の活性と比較した。キレート剤として1.5DTPAを含む洗剤中のアミラーゼ変異体の安定性の試験洗剤中のアミラーゼ安定性の測定のために、試験対象となる酵素を、20mMHEPES、0.1w/VTritonX100、pH8.0で希釈し、酵素タンパク質濃度を0.6mg/mLに調整された。当初のアミラーゼ濃度が低過ぎる場合は、10kDaのカットオフを有するUF膜を用いた限外濾過UFにより濃縮してもよい。25μLのアミラーゼ溶液及び125μLの洗剤洗剤モデルBを、同一実験につき4連ずつ、96ウェルマイクロタイタープレートに移した。各ウェル内に小型の磁石5×2mmを1つずつ配置し、磁気攪拌機を用いて、混合物を室温で5分間混合した。同一のプレートを2つ調製した。一方のプレートは4°Cで18時間インキュベートし参照サンプル、他方のプレートは、31°Cで18時間インキュベートした31°Cサンプル。インキュベーション直後、プレート上のサンプルのアミラーゼ活性を、洗剤中の残存アミラーゼ活性の測定のためのEnzCheckアッセイの記載に従い分析した。ここで留意すべきは、アッセイに対する酵素以外の他の洗剤成分の干渉を減少させるために、参照及び31°Cサンプルの双方を、同一のタンパク質濃度に希釈した点である。参照サンプル及び31°Cサンプルの双方の活性を、同一の384-ウェルプレート上で測定した。全ての試験マイクロタイタープレートに参照アミラーゼが含まれているのを確認した。残存活性は、100Vmax31°Cサンプル/Vmax参照サンプルとして計算した。参照アミラーゼ親としてSP722又はSP722D183G184のいずれかを用いた結果を表3.1に示す。親に対する変異体の残存活性のポイントpp改善は、変異体の残存活性と親の残存活性との差異として計算される。この結果は、本発明の変異体が、参照α-アミラーゼと比較して、強キレート剤の存在に対して著しく優れた耐性を有することを明らかに示している。極少数の例においては、残存活性は100超であるが、これはアッセイの分析上の誤差を反映したものである。また、この結果は、本発明の変異体が、pH8.0において、参照α-アミラーゼ即ち、配列番号6SP722、又は配列番号6D183G184、即ち、配列番号6のアミノ酸183及び184の欠失体と比較して、改善された安定性を有することを示している。実施例4:pH8及びpH10におけるキレート剤とのインキュベーション後の残存活性この実施例では、上述のPNPG7アッセイを用いて、キレート剤DTPAの存在下でのインキュベーション後の残存アミラーゼ活性を測定する。その原理は、上述のEnzCheckアッセイを用いた活性の測定の場合と同一である。概略として、残存アミラーゼ活性を、上述の材料及び方法に従って記述されるように、pH8及び49°C又はpH10及び42°Cのいずれかで、キレート剤を含むバッファ中で、1時間のインキュベーション後に測定し、得られた活性を、その後、4°Cで1時間インキュベートされた参照の活性と比較する。バッファ中でのpH8及びpH10におけるキレート剤とインキュベーション後のアミラーゼ変異体の安定性の試験原理:酵素サンプルは、最終濃度1.5のDTPAを含むバッファpH8.0において、49°Cで1hインキュベートし、参照サンプルは4°Cで1hインキュベートした。加えて、酵素サンプルは、最終濃度1.5のDTPAを含むバッファpH10.0において、42°Cで1hインキュベートし、それらの参照サンプルは4°Cで1hインキュベートした。インキュベーション後、残存活性を、PNPG7アミラーゼ活性アッセイを用いて測定した。試薬:DTPAを含むpH8バッファ:50mMEPPS、0.01TritonX100、1.875DTPAジエチレントリアミンペンタ酢酸、casno67436、pH8.0DTPAを含むpH10バッファ:50mMEPPS、0.01TritonX100、1.875DTPAジエチレントリアミンペンタ酢酸、casno67436、pH10.0アミラーゼ溶液:5mMEPPS、0.01TritonX100、pH8.0中0.25及び0.5mg活性アミラーゼタンパク質/mL手順:160μLバッファDTPAを含むpH8バッファ又はDTPAを含むpH10バッファ及び40μLのアミラーゼ溶液を、同一実験につき2連ずつ、96-ウェルPCRマイクロタイタープレートに移し、内容物を1分間混合したPCR:ポリメラーゼ連鎖反応。DTPAの最終濃度は、各ウェルにおいて1.5である。各ウェルの20μlを、新しいPCRマイクロタイタープレートPCRMTPに移し、4°Cで維持した参照サンプル。PCRMTPは、バッファがpH8.0である場合、49°Cで1時間pH8、49°Cサンプル、バッファがpH10.0である場合、42°Cで1時間pH10、42°Cサンプル、PCR装置中でインキュベートされた。インキュベーションの直後、PCRプレート上のサンプルを、希釈バッファで10倍に希釈し、PNPG7アッセイの記述に従い、アミラーゼ活性について分析した。ここで留意すべきは、アッセイに対するキレート剤ここではDTPAの干渉を減少させるべく、参照及びpH8、49°Cサンプル/pH10、42°Cサンプルの双方を、残存活性の試験前に、同一の濃度に希釈した点である。参照サンプル及びpH8、49°Cサンプル又はpH10、42°Cサンプルの双方の活性を、同一の96ウェルプレート上で測定した。全ての試験マイクロタイタープレート上に親アミラーゼが含まれていることを確認した。残存活性は、100VmaxpH8、42°C又はpH10、49°Cサンプル/Vmax参照サンプルとして計算した。結果を表4.1に示す。ポイントpp改善は、変異体の残存活性から親の残存活性を減算して算出される。この結果は、本発明の変異体が非常に安定的であり、変異体の残存活性を親のものと比較した場合、及び変異体のポイントで見た場合の双方で、pH8、49°Cで、及びpH10、42°Cで1時間の双方でのインキュベーション後、高い残存活性を有することを明らかに示している。これに対して、SP722D183G184アミラーゼの残存活性は20であり、SP722は更に低い残存活性を有する。実施例5:pH8及びpH10において1.5w/vDTPAを含むバッファ中でインキュベートした後の残存活性この実施例では、上述のPNPG7アッセイを用いて、キレート剤DTPAの存在下でインキュベートした後、SP722変異体の残存アミラーゼ活性を決定する。一般的に、残存アミラーゼ活性は、上述の材料及び方法の記載に従って、所定の温度及びインキュベーション時間において、pH8又はpH10のいずれかで、キレート剤を含むバッファ中でインキュベートした後に測定し、得られた活性を、その後、4°Cでインキュベートされた参照の活性と比較する。バッファ中でのpH8及びpH10におけるキレート剤とのインキュベート後のアミラーゼ変異体の安定性の試験原理:酵素サンプルを、所定の温度及びインキュベーション時間で、最終濃度1.5w/vのDTPAを含むバッファpH8.0中でインキュベートし、参照サンプルは、4°Cで同一のインキュベーション時間でインキュベートした。加えて、酵素サンプルは、所定の温度及びインキュベーション時間で、最終濃度1.5w/vのDTPAを含むバッファpH10.0中でインキュベートし、それらの参照サンプルは、4°Cで同一のインキュベーション時間でインキュベートした。インキュベーション後、残存活性は、PNPG7アミラーゼ活性アッセイを用いて測定した。試薬:DTPAを含むpH8バッファ:50mMEPPS、0.01w/vTritonX100、1.875w/vDTPAジエチレントリアミンペンタ酢酸、casno67436、pH8.0DTPAを含むpH10バッファ:50mMグリシン、0.01w/vTritonX100、1.875w/vDTPAジエチレントリアミンペンタ酢酸、casno67436、pH10.0アミラーゼ溶液:5mMEPPS、0.01TritonX100、pH8.0中0.25及び0.5mg/mL活性アミラーゼタンパク質手順:160μLバッファDTPAを含むpH8バッファ又はDTPAを含むpH10バッファ及び40μLのアミラーゼ溶液を、同一実験につき2連ずつ、96-ウェルPCRマイクロタイタープレートに移し、内容物を1分間混合したPCR:ポリメラーゼ連鎖反応。DTPAの最終濃度は、各ウェルにおいて1.5w/vであった。各ウェルの20μlを、マイクロタイタープレートMTPに移し、4°Cに維持した参照サンプル。PCRMTPストレス負荷サンプルを、下記の表に記載のとおり、PCR装置中でインキュベートされた。インキュベーションの直後、PCRプレート上のサンプルを、希釈バッファで10倍に希釈し、PNPG7アッセイの記載に従ってアミラーゼ活性を分析した。ここで留意すべきは、アッセイに対するキレート剤ここではDTPAの干渉を減少させるために、参照及びストレス負荷サンプルの双方を、残存活性の試験前に、同一の濃度に希釈した点である。参照サンプル及びストレス負荷サンプルの双方の活性は、同一の96ウェルプレート上で測定した。親アミラーゼが、全ての試験マイクロタイタープレートに含まれていることを確認した。残存活性は、100Vmaxストレス負荷サンプル/Vmax参照サンプルとして計算した。親に対する変異体の安定性のポイントpp改善は、変異体の残存活性から親の残存活性を減算することにより算出される。結果を表5.1に示す。得られた残存活性から、SP722の変異体は、DTPAの存在下でより安定的であることが明らかである。これは、親に対する変異体の安定性のポイント改善にも反映されている。実施例6:pH10におけるHEDPとのインキュベーション後の残存活性この実施例では、上述のPNPG7アッセイを用いて、キレート剤HEDPの存在下でインキュベーション後、残存アミラーゼ活性を測定する。概略として、残存アミラーゼ活性は、上述のような材料及び方法に従って、所定の温度及びインキュベーション時間で、pH10でキレート剤を含むバッファ中でのインキュベーション後に測定し、得られた活性を、その後、4°Cでインキュベートされた参照の活性と比較する。バッファ中でのpH10におけるキレート剤とインキュベーション後のアミラーゼ変異体の安定性の試験原理:酵素サンプルは、所定の温度及びインキュベーション時間で、最終濃度1.5w/vのHEDPを含むバッファpH10.0中でインキュベートし、参照サンプルは、4°Cで同一のインキュベーション時間でインキュベートした。インキュベーション後、残存活性は、PNPG7アミラーゼ活性アッセイを用いて測定した。試薬:HEDPを含むpH10バッファ:50mMグリシン、0.01w/vTritonX100、1.875w/vHEDP1-ヒドロキシエチリデンジホスホン酸、casno2809214、pH10.0アミラーゼ溶液:5mMEPPS、0.01w/vTritonX100、pH8.0中0.25及び0.5mg活性アミラーゼタンパク質/mL手順:160μLバッファHEDPを含むpH10バッファ及び40μLのアミラーゼ溶液を、同一実験につき2連ずつ、96-ウェルPCRマイクロタイタープレートに移し、内容物を1分間混合したPCR:ポリメラーゼ連鎖反応。HEDPの最終濃度は、各ウェルにおいて1.5w/vであった。各ウェルから20μlをマイクロタイタープレートMTPに移し、4°Cに維持した参照サンプル。PCRMTPストレス負荷サンプルを、下記の表6.1に指示されるようにPCR装置中でインキュベートした。残存活性は、100Vmaxストレス負荷サンプル/Vmax参照サンプルとして計算した。親と比較した変異体の安定性のポイントpp改善は、変異体の残存活性から親の残存活性を減算することにより算出される。この結果は、変異体が、親と比較して、HEDPの存在下でインキュベートされた場合、より安定的であることを明らかに示している。実施例7:1.5w/vHEDPとSP722D183G184及びそれらの変異体の安定性この実施例では、上述のPNPG7アッセイを用いて、キレート剤HEDPの存在下でインキュベーション後、残存アミラーゼ活性を測定する。概略として、残存アミラーゼ活性は、上述の材料及び方法に従って、所定の温度及びインキュベーション時間で、pH8又はpH10のいずれかでキレート剤を含むバッファ中でのインキュベーション後に測定し、得られた活性を、その後、4°Cでインキュベートされた参照の活性と比較する。バッファ中でのpH8及びpH10におけるキレート剤とのインキュベーション後のアミラーゼ変異体の安定性の試験原理:酵素サンプルを、所定の温度及びインキュベーション時間で、最終濃度1.5w/vのHEDPを含むバッファpH8.0中でインキュベートし、参照サンプルは、4°Cで同一のインキュベーション時間でインキュベートした。加えて、酵素サンプルは、所定の温度及びインキュベーション時間で、最終濃度1.5w/vのHEDPを含むバッファpH10.0中でインキュベートし、参照サンプルは、4°Cで同一のインキュベーション時間でインキュベートした。インキュベーション後、残存活性を、PNPG7アミラーゼ活性アッセイを用いて測定した。試薬:HEDPを含むpH8バッファ:50mMEPPS、0.01w/vTritonX100、1.875w/vHEDP1-ヒドロキシエチリデンジホスホン酸、casno2809214、pH8.0HEDPを含むpH10バッファ:50mMグリシン、0.01w/vTritonX100、1.875w/vHEDP1-ヒドロキシエチリデンジホスホン酸、casno2809214、pH10.0アミラーゼ溶液:5mMEPPS、0.01w/vTritonX100、pH8.0中0.25及び0.5mg/mL活性アミラーゼタンパク質手順:160μLバッファHEDPを含むpH8バッファ又はHEDPを含むpH10バッファ及び40μLのアミラーゼ溶液を、同一実験につき2連ずつ、96-ウェルPCRマイクロタイタープレートに移し、内容物を1分間混合したPCR:ポリメラーゼ連鎖反応。HEDPの最終濃度は、各ウェルにおいて1.5w/vであった。各ウェルから20μlを、マイクロタイタープレートMTPに移し、4°Cで維持した参照サンプル。PCRMTPストレス負荷サンプルは、下記の表7.1に記載のようにPCR装置中でインキュベートした。残存活性は、100Vmaxストレス負荷サンプル/Vmax参照サンプルとして計算した。親と比較した変異体の安定性のポイントpp改善は、変異体の残存活性から親の残存活性を減算することにより算出される。この結果は、SP722D183G184の変異体が、キレート剤としてHEDPの存在下でインキュベートした場合、より一層安定であることを明らかに示している。実施例8:1.5w/vDTPA又は1.5w/vHEDPの存在下でのAA560変異体の安定性この実施例では、上述のPNPG7アッセイは、キレート剤DTPA又はHEDPの存在下でインキュベーション後、残存アミラーゼ活性を測定するために用いられる。一般的に、残存アミラーゼ活性は、上述のような材料及び方法に従って、所定の温度及びインキュベーション時間で、pH8又はpH10のいずれかでキレート剤を含むバッファ中でのインキュベーション後に測定し、得られた活性を、その後、4°Cでインキュベートされた参照の活性と比較する。バッファ中でのpH8及びpH10におけるキレート剤とインキュベーション後のアミラーゼ変異体の安定性の試験原理:酵素サンプルは、指示される温度及びインキュベーション時間で、最終濃度1.5w/vのDTPA又はHEDPを含むバッファpH8.0中でインキュベートし、参照サンプルは、4°Cで同一のインキュベーション時間でインキュベートした。加えて、酵素サンプルは、指示される温度及びインキュベーション時間で、最終濃度1.5w/vのDTPA又はHEDPを含むバッファpH10.0中でインキュベートされ、参照サンプルは、4°Cで同一のインキュベーション時間でインキュベートした。インキュベーション後、残存活性を、PNPG7アミラーゼ活性アッセイを用いて測定した。試薬:DTPAを含むpH8バッファ:50mMEPPS、0.01w/vTritonX100、1.875w/vDTPAジエチレントリアミンペンタ酢酸、casno67436、pH8.0DTPAを含むpH10バッファ:50mMグリシン、0.01w/vTritonX100、1.875w/vDTPAジエチレントリアミンペンタ酢酸、casno67436、pH10.0HEDPを含むpH8バッファ:50mMEPPS、0.01w/vTritonX100、1.875w/vHEDP1-ヒドロキシエチリデンジホスホン酸、casno2809214、pH8.0HEDPを含むpH10バッファ:50mMグリシン、0.01w/vTritonX100、1.875w/vHEDP1-ヒドロキシエチリデンジホスホン酸、casno2809214、pH10.0アミラーゼ溶液:5mMEPPS、0.01w/vTritonX100、pH8.0中0.25及び0.5mg/mL活性アミラーゼタンパク質手順:160μLバッファDTPA若しくはHEDPを含むpH8バッファ又はDTPA若しくはHEDPを含むpH10バッファ及び40μLのアミラーゼ溶液を、同一実験につき2連ずつ、96-ウェルPCRマイクロタイタープレートに移し、内容物を1分間混合したPCR:ポリメラーゼ連鎖反応。DTPA又はHEDPの最終濃度は、各ウェルにおいて1.5w/vであった。各ウェルから20μlをマイクロタイタープレートMTPに移し、4°Cに維持した参照サンプル。PCRMTPストレス負荷サンプルは、下記の表8.1及び8.2に記載されるようにPCR装置中でインキュベートした。残存活性は、100Vmaxストレス負荷サンプル/Vmax参照サンプルとして計算した。親と比較した変異体の安定性のポイントpp改善は、変異体の残存活性から親の残存活性を減算することにより算出される。本明細書では種々の参考文献を引用するが、これらの文献の開示内容は、その全体が、参照により援用される。実施例9:キレート剤を含む洗剤中でインキュベーション後の残存活性この実施例では、PNPG7アッセイを用いて、上述の材料及び方法に従って、キレート剤の存在下において洗剤中でインキュベーション後、残存アミラーゼ活性を測定する。概略として、残存アミラーゼ活性を、pH8.2においてキレート剤DTPMP及びHEDPを含む洗剤C中で、30°Cで、3週間及び6週間インキュベーション後に測定した表9.1。得られたアミラーゼの残存活性を、その後、後述のように0日インキュベーション前における作りたての洗剤中のアミラーゼの活性と比較する。pH8.2においてキレート剤を含む洗剤C中でインキュベーション後のアミラーゼ変異体の安定性の試験方法本発明のアミラーゼ変異体、又は、二つの欠失D183G184を含む配列番号6SP722のアミラーゼ変異体別名SP722D183G184を夫々含む洗剤CpH8.2のサンプルを調製した。それぞれの洗剤サンプルについて、インキュベーション前における初期の残存酵素活性を測定した参照サンプル。各サンプルの残存酵素活性を、30°Cで3週間及び6週間インキュベーション後に測定し、それらの参照サンプルと比較した。残存活性は、PNPG7アミラーゼ活性アッセイを用いて測定した。アミラーゼ溶液:100g洗剤C、pH8.2中13.77mg活性アミラーゼタンパク質手順:アミラーゼを含む洗剤C5g、pH8.2を、同一実験につき2連ずつ、密閉蓋を有する7mlガラスバイアル中に入れた。初期サンプルの残存酵素活性を、インキュベーション前に二重に測定された。サンプルを、30°Cで3週間及び6週間、インキュベーター内で維持した。インキュベーションの直後、PNPG7アッセイの記述に従って、サンプルの残存アミラーゼ活性を分析された。この試験によれば、100の残存活性は、インキュベーション前の初期残存酵素活性参照サンプルと比較して、アミラーゼ活性の損失がないことに対応する。親に対する変異体の残存活性安定性のポイントpp改善は、変異体の残存活性と親の残存活性との差異として計算される。これらの結果は、本発明の変異体が、30°Cで3週間及び6週間、pH8.2の洗剤C中でのインキュベーション後、非常に安定的であり、高い残存活性を有したことを明らかに示している。これに対して、SP722D183G184アミラーゼは、3週間後に19、6週間後に3の残存活性を有する。本明細書では種々の参考文献を引用するが、これらの文献の開示内容は、その全体が、参照により援用される。本明細書で開示される物理量及び値は、記載された数値そのものに厳密に限定されるもの解すべきではない。代わりに、別途支持されない限り、斯かる物理量は、記載された値と、その値を含む機能的に均等の範囲の双方を意味することが意図される。例えば、40mmとして開示された物理量は、約40mmを意味することが意図される。本明細書及び添付の特許請求の範囲に記載される本発明の範囲は、本明細書に記載の特定の実施形態に限定されるべきではない。これらの実施形態は、本発明の幾つかの側面の実例として意図したものであるからである。本発明の範囲には、任意の均等の実施形態が含まれることが意図される。実際、本明細書で提示及び記載されるものに加えて、本発明の様々な変形例が、先の記述から当業者に明らかとなるであろう。斯かる変形例は、また、添付される特許請求の範囲内に含まれることが意図される。矛盾がある場合には、定義を含む本開示が優先される。"