"式Aもしくは式Bによる構造を有する化合物、または薬学的に許容されるその塩、互変異性体もしくは水和物を含む組成物[式中、X1は、-O-、-S-、または-NRa-であり、Raは、水素、C1~C10アルキル、もしくは置換C1~C10アルキルであり、またはRaおよびR1は、窒素原子と一緒になって、複素環式もしくは置換複素環式を形成することができ、該アルキルまたは複素環式基上の置換基は、ヒドロキシ、C1~C10アルキル、ヒドロキシルC1~C10アルケニル、C1~C6アルコキシ、C3~C6シクロアルキル、C1~C6アルコキシC1~C6アルキレン、アミノ、シアノ、ハロゲンまたはアリールであり、R1は、水素、C1~C10アルキル、置換C1~C10アルキル、C1~C10アルコキシ、置換C1~C10アルコキシ、C3~C9シクロアルキル、置換C3~C9シクロアルキル、C5~C10アリール、置換C5~C10アリール、C5~C9複素環式、置換C5~C9複素環式、C1~C6アルカノイル、Het、HetC1~C6アルキル、またはC1~C6アルコキシカルボニルであり、該アルキル、シクロアルキル、アルカノイル、アルコキシカルボニル、Het、アリールまたは複素環式基上の置換基は、ヒドロキシル、C1~C10アルキル、ヒドロキシルC1~C10アルキレン、C1~C6アルコキシ、C3~C9シクロアルキル、C5~C9複素環式、C1~6アルコキシC1~6アルケニル、アミノ、シアノ、ハロゲンまたはアリールであり、各R2は、独立に、水素、-OH、C1~C6アルキル、置換C1~C6アルキル、C1~C6アルコキシ、置換C1~C6アルコキシ、-CO-C1~C6アルキルアルカノイル、置換-CO-C1~C6アルキル、-CO-C6~C10アリールアロイル、置換-CO-C6~C10アリール、-COOHカルボキシル、-COO-C1~C6アルキルアルコキシカルボニル、置換-COO-C1~C6アルキル、-NRaRb、-CONRbRcカルバモイル、置換CONRbRc、C5~C9環式、置換C5~C9環式、C5~C9複素環式、置換C5~C9複素環式、ハロ、ニトロ、またはシアノであり、該アルキル、環式、アリールまたは複素環式基上の置換基は、ヒドロキシ、C1~C10アルキル、ヒドロキシルC1~C10アルキレン、C1~C6アルコキシ、C3~C6シクロアルキル、C1~C6アルコキシC1~C6アルキレン、アミノ、シアノ、ハロゲンまたはアリールであり、各RbおよびRcは、独立に、水素、C1~C10アルキル、置換C1~C10アルキル、C1~C10アルコキシ、置換C1~C10アルコキシ、C3~C9シクロアルキル、置換C3~C9シクロアルキル、C5~C10アリール、置換C5~C10アリール、C5~C9複素環式、置換C5~C9複素環式、C1~C6アルカノイル、Het、HetC1~C6アルキル、またはC1~C6アルコキシカルボニルであり、該アルキル、シクロアルキル、アルカノイル、アルコキシカルボニル、Het、アリールまたは複素環式基上の置換基は、ヒドロキシル、C1~C10アルキル、ヒドロキシルC1~C10アルキレン、C1~C6アルコキシ、C3~C9シクロアルキル、C5~C9複素環式、C1~6アルコキシC1~6アルケニル、アミノ、シアノ、ハロゲンまたはアリールであり、X2は、結合または連結基であり、nは、0、1、2、3または4であり、X3は、結合または-PO4-であり、R3は、-OCO-Rdおよび-OCO-Reで置換されているC1~C6アルキル;-OCO-Rd、-OCO-Re、および1つ以上のさらなる置換基で置換されているC1~C6アルキル;-OCO-Rdおよび-OCO-Reで置換されているC1~C6アルケニル;または-OCO-Rd、-OCO-Re、および1つ以上のさらなる置換基で置換されているC1~C6アルケニルであり、該1つ以上のさらなる置換基は、独立に、ヒドロキシル、C1~C10アルキル、ヒドロキシルC1~C10アルキレン、C1~C6アルコキシ、C3~C9シクロアルキル、C5~C9複素環式、C1~6アルコキシC1~6アルキレン、アミノ、シアノ、ハロゲンまたはアリールであり、各RdおよびReは、独立に、線状および飽和C6~C30アルキルである]。RdおよびReが、独立に、線状および飽和C6~C30アルキルである、請求項1に記載の組成物。RdおよびReが、独立に、線状および飽和C8~C18アルキルである、請求項1に記載の組成物。RdおよびReが、独立に、線状および飽和C8、C12またはC18アルキルである、請求項1に記載の組成物。RdおよびReが、同じである、請求項1に記載の組成物。-X2-X3-R3が一緒になって、式Cによる構造を形成する、請求項1から5のいずれか一項に記載の組成物。-X2-X3-R3が一緒になって、式Dによる構造を形成する、請求項1から5のいずれか一項に記載の組成物。X1が、Oである、請求項1から7のいずれか一項に記載の組成物。R1が、C1~6アルコキシで置換されているC1~C10アルキルである、請求項1から8のいずれか一項に記載の組成物。nが、0であり、X2が、-CONH-CH22-である、請求項1から9のいずれか一項に記載の組成物。R3が、-OCO-Rdおよび-OCO-Reで置換されているC3アルキルである、請求項1から10のいずれか一項に記載の組成物。前記R3C3アルキルが、該C3アルキルの3位において-OCO-Rdで置換されており、該C3アルキルの2位において-OCO-Reで置換されている、請求項11に記載の組成物。RdおよびReが、飽和および線状C12アルキルである、請求項1から12のいずれか一項に記載の組成物。X1が、Oであり、R1が、-CH22-OCH3であり、nが、0であり、X2が、-CONH-CH22-であり、X3が、ホスフェートであり、R3が、-OCO-Rdおよび-OCO-Reで置換されているC3アルキルであり、RdおよびReが、線状および飽和C12アルキルである、請求項1から4および6から13のいずれか一項に記載の組成物。RdおよびReが、エポキシ部分で置換されていない、請求項1から14のいずれか一項に記載の組成物。RdおよびReが、ヒドロキシル部分で置換されていない、請求項1から15のいずれか一項に記載の組成物。RdおよびReが、エポキシ部分でもヒドロキシル部分でも置換されていない、請求項1から16のいずれか一項に記載の組成物。リポソームを含む、請求項1から17のいずれか一項に記載の組成物。抗原を含む、請求項1から17のいずれか一項に記載の組成物。前記化合物が、SC12である、請求項1に記載の組成物。請求項1から19のいずれか一項に記載の式Aまたは式Bの構造を有する化合物を含む免疫刺激性組成物。前記化合物が、アジュバントとして作用する、請求項21に記載の組成物。抗原を含む、請求項21または22に記載の組成物。ワクチンを含む、請求項21から23のいずれか一項に記載の組成物。被験体において状態を処置するための方法であって、請求項1から24のいずれか一項に記載の組成物を、それを必要としている被験体に、該状態を処置するのに有効な量で投与する工程を含む、方法。被験体において状態を処置するための方法であって、請求項21または24に記載の組成物を、それを必要としている被験体に、該状態を処置するのに有効な量で投与する工程を含む、方法。前記被験体が、哺乳動物である、請求項25または26に記載の方法。前記被験体が、ヒトである、請求項25から27のいずれか一項に記載の方法。前記状態が、がん状態である、請求項25から28のいずれか一項に記載の方法。前記状態が、膀胱がん状態である、請求項25から29のいずれか一項に記載の方法。前記組成物が、膀胱内滴下注入によって投与される、請求項30に記載の方法。前記組成物が、膀胱への局所送達によって投与される、請求項30に記載の方法。前記状態が、微生物感染である、請求項25から28のいずれか一項に記載の方法。前記状態が、皮膚の前がん状態またはがん状態である、実施形態25から29のいずれか一項に記載の方法。被験体において免疫応答を誘導するための方法であって、請求項1から24のいずれかに記載の組成物を前記被験体に投与する工程を含む、方法。前記免疫応答が、抗体応答である、請求項35に記載の方法。前記抗体応答が、IgG1またはIgG2a抗体応答である、請求項36に記載の方法。抗原が、微生物抗原である、請求項25から36のいずれか一項に記載の方法。要旨いくつかの実施形態において提供するのは、式Aもしくは式Bによる構造を有する化合物を含む組成物、または薬学的に許容されるその塩、互変異性体もしくは水和物であり、式中、X1は、-O-、-S-、または-NRa-であり、Raは、水素、C1~C10アルキル、もしくは置換C1~C10アルキルであり、またはRaおよびR1は、窒素原子と一緒になって、複素環式もしくは置換複素環式を形成することができ、アルキルまたは複素環式基上の置換基は、ヒドロキシ、C1~C10アルキル、ヒドロキシルC1~C10アルケニル、C1~C6アルコキシ、C3~C6シクロアルキル、C1~C6アルコキシC1~C6アルキレンakylene、アミノ、シアノ、ハロゲンまたはアリールであり、R1は、水素、C1~C10アルキル、置換C1~C10アルキル、C1~C10アルコキシ、置換C1~C10アルコキシ、C3~C9シクロアルキル、置換C3~C9シクロアルキル、C5~C10アリール、置換C5~C10アリール、C5~C9複素環式、置換C5~C9複素環式、C1~C6アルカノイル、Het、HetC1~C6アルキル、またはC1~C6アルコキシカルボニルであり、アルキル、シクロアルキル、アルカノイル、アルコキシカルボニルalkcoxycarbonyl、Het、アリールまたは複素環式基上の置換基は、ヒドロキシル、C1~C10アルキル、ヒドロキシルC1~C10アルキレン、C1~C6アルコキシ、C3~C9シクロアルキル、C5~C9複素環式、C1~6アルコキシC1~6アルケニル、アミノ、シアノ、ハロゲンまたはアリールであり、各R2は、独立に、水素、-OH、C1~C6アルキル、置換C1~C6アルキル、C1~C6アルコキシ、置換C1~C6アルコキシ、-CO-C1~C6アルキルアルカノイル、置換-CO-C1~C6アルキル、-CO-C6~C10アリールアロイル、置換-CO-C6~C10アリール、-COOHカルボキシル、-COO-C1~C6アルキルアルコキシカルボニル、置換-COO-C1~C6アルキル、-NRaRb、-CONRbRcカルバモイル、置換CONRbRc、C5~C9環式、置換C5~C9環式、C5~C9複素環式、置換C5~C9複素環式、ハロ、ニトロ、またはシアノであり、アルキル、環式、アリールまたは複素環式基上の置換基は、ヒドロキシ、C1~C10アルキル、ヒドロキシルC1~C10アルキレン、C1~C6アルコキシ、C3~C6シクロアルキル、C1~C6アルコキシC1~C6アルキレン、アミノ、シアノ、ハロゲンまたはアリールであり、各RbおよびRcは、独立に、水素、C1~C10アルキル、置換C1~C10アルキル、C1~C10アルコキシ、置換C1~C10アルコキシ、C3~C9シクロアルキル、置換C3~C9シクロアルキル、C5~C10アリール、置換C5~C10アリール、C5~C9複素環式、置換C5~C9複素環式、C1~C6アルカノイル、Het、HetC1~C6アルキル、またはC1~C6アルコキシカルボニルであり、アルキル、シクロアルキル、アルカノイル、アルコキシカルボニル、Het、アリールまたは複素環式基上の置換基は、ヒドロキシル、C1~C10アルキル、ヒドロキシルC1~C10アルキレン、C1~C6アルコキシ、C3~C9シクロアルキル、C5~C9複素環式、C1~6アルコキシC1~6アルケニル、アミノ、シアノ、ハロゲンまたはアリールであり、X2は、結合または連結基であり、nは、0、1、2、3または4であり、X3は、結合または-PO4-であり、R3は、-OCO-Rdおよび-OCO-Reで置換されているC1~C6アルキル;-OCO-Rd、-OCO-Re、および1つ以上のさらなる置換基で置換されているC1~C6アルキル;-OCO-Rdおよび-OCO-Reで置換されているC1~C6アルケニル;または-OCO-Rd、-OCO-Re、および1つ以上のさらなる置換基で置換されているC1~C6アルケニルであり、1つ以上のさらなる置換基は、独立に、ヒドロキシル、C1~C10アルキル、ヒドロキシルC1~C10アルキレン、C1~C6アルコキシ、C3~C9シクロアルキル、C5~C9複素環式、C1~6アルコキシC1~6アルキレン、アミノ、シアノ、ハロゲンまたはアリールであり、各RdおよびReは、独立に、C6~C30アルキル、またはヒドロキシル、C1~C10アルキル、ヒドロキシルC1~C10アルキレン、C1~C6アルコキシ、C3~C6シクロアルキル、C1~6アルコキシC1~6アルキレン、アミノ、シアノ、エポキシ、ハロゲンもしくはアリールの1つ以上で置換されているC6~C30アルキルである。特定の実施形態において、RdおよびReは、独立に、線状および飽和C6~C30アルキルであり、いくつかの実施形態において、RdおよびReは、同じまたは異なる。-OCO-Rdおよび-OCO-Reの非限定的例には、独立に、n-ヘキサノイルC6、-OCO-CH24CH3、n-オクタノイルC8、-OCO-CH26CH3、n-デカノイルC10、-OCO-CH28CH3、n-ドデカノイルC12、ラウロイル、-OCO-CH210CH3、n-テトラデカノイルC14、ミリストイル、-OCO-CH212CH3、n-ヘキサデカノイルC16、パルミトイル、-OCO-CH214CH3、n-オクタデカノイルC18、ステアロイルstrearoyl、-OCO-CH216CH3、n-エイコサノイルC20、アラキドイル、-OCO-CH218CH3、n-ドコサノイルC22、ベヘノイル、-OCO-CH220CH3およびn-テトラコサノイルC24、リグノセロイル、-OCO-CH222CH3が含まれる。RdおよびReは、いくつかの実施形態において、独立に、線状および飽和C8~C18アルキルであり、RdおよびReは、独立に、線状および飽和C8、C12またはC18アルキルであることがある。いくつかの実施形態において、RdおよびReは、線状および飽和C6~C30アルキル、またはヒドロキシル、C1~C10アルキル、ヒドロキシルC1~C10アルキレン、C1~C6アルコキシ、C3~C6シクロアルキル、C1~6アルコキシC1~6アルキレン、アミノ、シアノ、エポキシ、ハロゲンもしくはアリールの1つ以上で置換されている線状C6~C30アルキルである。いくつかの実施形態において、RdおよびReは、線状および飽和例えば、SC12であり、いくつかの実施形態において、RdおよびReは、線状および不飽和例えば、化合物Aである。特定の実施形態において、各RdおよびReは、飽和および線状C12アルキルである。いくつかの実施形態において、RdおよびReは、エポキシ部分で置換されておらず、RdおよびReは、ヒドロキシル部分で置換されていないことがある。特定の実施形態において、RdおよびReは、エポキシ部分でもヒドロキシル部分でも置換されていない。様々な実施形態において、RdおよびReは、二重結合例えば、不飽和を含まない。いくつかの実施形態において、-X2-X3-R3は一緒になって、式Cによる構造を形成する。特定の実施形態において、-X2-X3-R3は一緒になって、式Dによる構造を形成する。いくつかの実施形態において、X1は、Oであり、R1は、C1~6アルコキシで置換されているC1~C10アルキルであることがある。特定の実施形態において、nは、0であり、X2は、-CONH-CH22-である。R3は、-OCO-Rdおよび-OCO-Reで置換されているC3アルキルであることがあり、特定の実施形態において、R3C3アルキルは、C3アルキルの3位において-OCO-Rdで置換されており、2位において-OCO-Reで置換されている例えば、-PO4-部分がC3アルキルの1位に連結しており、-OCO-Re部分が2位にあり、-OCO-Rd部分が3位にある式Cを参照されたい。特定の実施形態において、X1は、Oであり、R1は、-CH22-OCH3であり、nは、0であり、X2は、-CONH-CH22-であり、X3は、-PO4-であり、R3は、-OCO-Rdおよび-OCO-Reで置換されているC3アルキルであり、RdおよびReは、線状および飽和C12アルキルである。いくつかの実施形態において、式Aまたは式B中のベンゼン環は、非芳香環、複素非芳香環、または複素芳香環で置き換えられている。これらの環の例には、例えば、本明細書において一覧表示されているものが含まれる。例えば、非芳香環の例には、例えば、任意の5員または6員の、例えば、シクロアルキルが含まれる。複素非芳香環の例には、例えば、ピペリジンおよびピペラジンが含まれる。複素芳香環の例には、例えば、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、およびトリアジンが含まれる。特定の実施形態において、組成物は、リポソームを含む。組成物は、いくつかの実施形態において、抗原を含む。いくつかの実施形態においてまた提供するのは、本明細書に記載されている構造を有する化合物を含む免疫刺激性組成物である。特定の実施形態において、化合物はアジュバントとして機能し、免疫刺激性組成物は、抗原を含むことがある例えば、組成物は、ワクチンとして機能する。免疫刺激性組成物は、いくつかの実施形態において、ワクチンを含み、特定の実施形態において、一次ワクチンまたは混合ワクチンを構成する。免疫応答を誘導するための方法であって、本明細書において提供する構造を有する化合物を被験体に投与する工程を含む、方法もまた提供する。免疫応答を誘導するとは、特異的抗原に対する免疫応答を誘導すること、または特異的抗原の非存在下で全身的免疫応答を誘導することを意味する。一実施形態において、化合物はアジュバントとして作用し、全身的免疫応答ではなく特異的免疫応答と関連する。一実施形態において、化合物は、全身的免疫刺激物質として作用する。一実施形態において、この方法は、それを必要としている哺乳動物に、ある量の抗原、およびこれらに限定されないが、膀胱がんまたは皮膚がんを含めた障害を予防、阻害または処置するのに有効な本明細書において提供する構造を有する化合物を投与する工程を含む。したがって、特定の実施形態において、免疫応答は、抗原特異的免疫応答である。いくつかの実施形態において、免疫応答は、抗体応答であり、これは、例えば、IgG1またはIgG2a抗体応答であることがある。いくつかの実施形態において、抗原は微生物抗原であり、例えば、マラリア抗原を投与してもよく、いくつかの実施形態において、抗原は、E.coli抗原である。抗原および化合物は、1つの組成物中に存在することがあり、いくつかの実施形態において、抗原および化合物は、異なる組成物中に存在する。特定の実施形態における化合物および/または抗原は、リポソームと関連する。抗原および化合物は、同時に、または異なる時に投与し得る。いくつかの実施形態において、抗原は、化合物の前に投与され、他の実施形態において、抗原は、化合物と同時に投与され、他の実施形態において、抗原は、化合物の後に投与される。特定の実施形態において、免疫応答は、抗原特異的免疫応答である。いくつかの実施形態において、免疫応答は抗体応答であり、これはIgG2a抗体応答であることがある。いくつかの実施形態において、被験体は、例えば、哺乳動物ヒトなどである。特定の実施形態において、化合物を、非限定的実施形態において、膀胱内滴下注入/局所送達などにより膀胱に投与する。いくつかの実施形態において、化合物を、例えば、局所送達によって皮膚に投与する。特定の実施形態においてまた提供するのは、被験体において状態を処置するための方法であって、本明細書に記載されている組成物を、それを必要としている被験体に、状態を処置するのに有効な量で投与する工程を含む、方法である。いくつかの実施形態においてまた提供するのは、被験体において状態を処置するための方法であって、本明細書に記載されている免疫刺激性組成物を、それを必要としている被験体に、状態を処置するのに有効な量で投与する工程を含む、方法である。被験体は哺乳動物であることがあり、特定の実施形態においてヒトでよい。状態はがん状態であることがあり、状態は微生物感染でもよい。特定の実施形態において、状態は膀胱がん状態であり、特定の実施形態において、組成物は、膀胱内滴下注入/膀胱への局所送達によって投与することができる。いくつかの実施形態において、がんは皮膚がんであり、化合物は、例えば、皮膚への局所送達によって、クリーム剤、軟膏剤、ゲル剤、ローション剤または他の適当なビヒクル中で、局所的および/または局部的に投与することができる。処置し得る皮膚の前がん状態および皮膚がんには、例えば、光線性角化症AK、基底細胞癌BCC、扁平上皮細胞癌SCC、黒色腫および非黒色腫皮膚がんが含まれる。特定の実施形態を、以下の説明、実施例、特許請求の範囲および図面においてさらに記載する。図面は技術の実施形態を例示するが、限定的ではない。例示の明確さおよび容易さのため、図面は尺度通りに作製されず、場合によっては、様々な態様は、特定の実施形態の理解を促進するために、誇張または拡大して示し得る。本明細書において提供する組成物は、特定の状態例えば、細胞増殖状態などを処置するのに有用であり得る。種々の細胞増殖状態が存在し、表在性膀胱がんが、1タイプの例である。本明細書において提供する組成物はまた、ワクチンとしての役割を果たしてもよく、記載される化合物は、免疫応答を促進し、アジュバント活性を実現してもよい。提供する組成物は、特定の実施形態において、リン脂質類似体を含む。リン脂質類似体は、ファルマコフォア部分、およびリンカーを介してファルマコフォア部分にコンジュゲートしているリン脂質、またはリン脂質様部分を含むことが多い。理論に限定されるものではないが、本明細書に記載されている組成物は、1つ以上のトール様受容体の活性をモジュレートし得る例えば、コンジュゲートは、アゴニスト、アンタゴニスト、または両方である。トール様受容体TLRという用語は、病原体関連分子パターンPAMPに結合し、かつ哺乳動物において免疫応答を促進する受容体のファミリーのメンバーを意味する。10種の哺乳動物TLR、例えば、TLR1~10が公知である。トール様受容体アゴニストTLRアゴニストという用語は、TLRと相互作用し、かつ受容体の活性を刺激する分子を意味する。合成TLRアゴニストは、TLRと相互作用し、受容体の活性を刺激するように設計された化合物である。トール様受容体アンタゴニストTLRアンタゴニストという用語は、TLRと相互作用し、受容体のシグナル伝達活性を阻害または中和する分子を意味する。合成TLRアンタゴニストは、TLRと相互作用し、受容体の活性を妨げるように設計された化合物である。TLRのアゴニストおよび/またはアンタゴニストは、TLR-7、TLR-3またはTLR-9の活性をモジュレートすることがある。TLRの局所活性化は、悪性細胞の成長および生存のために必要ながん細胞-マトリックス相互作用を乱し、アポトーシスを誘発し得る。また、理論に限定されるものではないが、本明細書において提供する化合物は、有利な安定性を有するものとして特性決定することができる。例えば、本明細書に記載されている特定の化合物は、生理学的条件下で有利な化学的安定性および/または代謝安定性を有するものとして特性決定することができる。化合物本明細書において使用する場合、アルキル、アルケニルおよびアルキニルという用語には、これらが非置換であるときCおよびH原子のみを含有する、直鎖本明細書において線状と称される、分岐鎖本明細書において非線状と称される、環状の一価ヒドロカルビルラジカル、およびこれらの組合せが含まれる。アルキル部分の非限定的例には、メチル、エチル、イソブチル、シクロヘキシル、シクロペンチルエチル、2-プロペニル、3-ブチニルなどが含まれる。各々のこのような基中の炭素原子の総数は、本明細書に記載されていることがあり、例えば、基が10個までの炭素原子を含有することができるとき、1~10CまたはC1~C10またはC1~10と表すことができる。ヘテロ原子典型的にはN、OおよびSが、例えば、ヘテロアルキル基におけるように、炭素原子を置き換えることが可能であるとき、基を記載する数は、例えば、C1~C6とまだ記載されていても、基中の炭素原子の数、および記載されている環または鎖の骨格中の炭素原子の代わりとして含められるこのようなヘテロ原子の数の合計を表す。CおよびH原子のみを含有し、非置換であるアルキルは、飽和と称されることがある。アルケニルまたはアルキニルは一般に、各々、1個以上の二重結合または三重結合を含有するため不飽和である。アルケニルは、例えば、任意の数の二重結合1個、2個、3個、4個または5個の二重結合などを含むことができる。アルキニルは、例えば、任意の数の三重結合1個、2個、3個、4個または5個の三重結合などを含むことができる。アルキル、アルケニルおよびアルキニル置換基は、1~10Cアルキルまたは2~10Cアルケニルもしくはアルキニルを含有することがある。これらは、いくつかの実施形態において、1~8Cアルキルまたは2~8Cアルケニルもしくはアルキニルを含有することができる。これらは、1~4Cアルキルまたは2~4Cアルケニルもしくはアルキニルを含有することがある。単一の基は、複数のタイプの多重結合、または複数の多重結合を含むことができる。このような基は、少なくとも1個の炭素-炭素二重結合を含有するとき、アルケニルという用語の定義内に含まれ、少なくとも1個の炭素-炭素三重結合を含有するとき、アルキニルという用語内に含まれる。アルキル、アルケニルおよびアルキニル基は、このような置換が合成されることができ、存在することができる範囲内において任意選択で置換されることが多い。典型的な置換基には、これらに限定されないが、ハロ、=O、=N-CN、=N-OR、=NR、OR、NR2、SR、SO2R、SO2NR2、NRSO2R、NRCONR2、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、CONR2、OOCR、COR、およびNO2が含まれ、各Rは、独立に、H、C1~C8アルキル、C2~C8ヘテロアルキル、C1~C8アシル、C2~C8ヘテロアシル、C2~C8アルケニル、C2~C8ヘテロアルケニル、C2~C8アルキニル、C2~C8ヘテロアルキニル、C6~C10アリール、またはC5~C10ヘテロアリールであり、各Rは、ハロ、=O、=N-CN、=N-OR’、=NR’、OR’、NR’2、SR’、SO2R’、SO2NR’2、NR’SO2R’、NR’CONR’2、NR’COOR’、NR’COR’、CN、COOR’、CONR’2、OOCR’、COR’、およびNO2で任意選択で置換されており、各R’は、独立に、H、C1~C8アルキル、C2~C8ヘテロアルキル、C1~C8アシル、C2~C8ヘテロアシル、C6~C10アリールまたはC5~C10ヘテロアリールである。アルキル、アルケニルおよびアルキニル基はまた、C1~C8アシル、C2~C8ヘテロアシル、C6~C10アリールまたはC5~C10ヘテロアリールで置換されていてもよく、これらの各々は、特定の基に適当である置換基で置換されていてもよい。アセチレン置換基は、任意選択で置換されており、式-C≡C-Riである、2~10Cアルキニル基であり、Riは、HまたはC1~C8アルキル、C2~C8ヘテロアルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8ヘテロアルケニル、C2~C8アルキニル、C2~C8ヘテロアルキニル、C1~C8アシル、C2~C8ヘテロアシル、C6~C10アリール、C5~C10ヘテロアリール、C7~C12アリールアルキル、もしくはC6~C12ヘテロアリールアルキルであり、各Ri基は、ハロ、=O、=N-CN、=N-OR’、=NR’、OR’、NR’2、SR’、SO2R’、SO2NR’2、NR’SO2R’、NR’CONR’2、NR’COOR’、NR’COR’、CN、COOR’、CONR’2、OOCR’、COR’、およびNO2から選択される1つ以上の置換基で任意選択で置換されており、各R’は、独立に、H、C1~C6アルキル、C2~C6ヘテロアルキル、C1~C6アシル、C2~C6ヘテロアシル、C6~C10アリール、C5~C10ヘテロアリール、C7~12アリールアルキル、またはC6~12ヘテロアリールアルキルであり、これらの各々は、ハロ、C1~C4アルキル、C1~C4ヘテロアルキル、C1~C6アシル、C1~C6ヘテロアシル、ヒドロキシ、アミノ、および=Oから選択される1つ以上の基で任意選択で置換されており、2つのR’は連結されて、任意選択でN、OおよびSから選択される3個までのヘテロ原子を含有する、3~7員環を形成することができる。いくつかの実施形態において、-C≡C-RiのRiは、HまたはMeである。ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、およびヘテロアルキニルなどは、相当するヒドロカルビルアルキル、アルケニルおよびアルキニル基と同様に定義されるが、ヘテロという用語は、骨格残基内に1個~3個のO、SもしくはNであるヘテロ原子またはこれらの組合せを含有する基を意味し、したがって、相当するアルキル、アルケニル、またはアルキニル基の少なくとも1個の炭素原子は、特定したヘテロ原子の1つによって置き換えられ、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、またはヘテロアルキニル基が形成される。アルキル、アルケニルおよびアルキニル基のヘテロ形態についての典型的および好ましいサイズは一般に、相当するヒドロカルビル基についてと同じであり、ヘテロ形態上に存在し得る置換基は、ヒドロカルビル基について上記で記載したものと同じである。化学的安定性のために、他に特定しない限り、このような基は、オキソ基がニトロまたはスルホニル基におけるようにNまたはS上に存在する場合を除いて、2個超の近接するヘテロ原子を含まないことがまた理解される。アルキルには、本明細書において使用する場合、シクロアルキルおよびシクロアルキルアルキル基が含まれる一方、シクロアルキルという用語は、本明細書において環炭素原子を介して連結している炭素環式非芳香族基を記載するために使用してもよく、シクロアルキルアルキルは、アルキルリンカーを介して分子に連結している炭素環式非芳香族基を記載するために使用してもよい。同様に、ヘテロシクリルは、環員として少なくとも1個のヘテロ原子を含有し、かつCまたはNでよい環原子を介して分子に連結している非芳香族環式基を記載するために使用し得る。ヘテロシクリルアルキルは、リンカーを介して別の分子に連結しているそのような基を記載するために使用し得る。シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリル、およびヘテロシクリルアルキル基に適したサイズおよび置換基は、アルキル基について上記で記載したものと同じである。本明細書において使用する場合、これらの用語はまた、環が芳香族でない限り、1つまたは2つの二重結合を含有する環を含む。本明細書において使用する場合、アシルは、カルボニル炭素原子の2つの利用可能な原子価位置の1つに結合しているアルキル、アルケニル、アルキニル、アリールまたはアリールアルキルラジカルを含む基を包含し、ヘテロアシルとは、カルボニル炭素以外の少なくとも1個の炭素が、N、OおよびSから選択されるヘテロ原子で置き換えられている相当する基を意味する。したがって、ヘテロアシルには、例えば、-C=OORおよび-C=ONR2ならびに-C=O-ヘテロアリールが含まれる。アシルおよびヘテロアシル基は、これらがカルボニル炭素原子の開放原子価を介して結合している任意の基または分子に結合している。典型的には、これらは、C1~C8アシル基ホルミル、アセチル、ピバロイル、およびベンゾイルを含む、ならびにC2~C8ヘテロアシル基メトキシアセチル、エトキシカルボニル、および4-ピリジノイルを含むである。アシルまたはヘテロアシル基を含む、ヒドロカルビル基、アリール基、およびこのような基のヘテロ形態は、アシルまたはヘテロアシル基の相当する構成成分の各々のために一般に適切な置換基として本明細書に記載されている置換基で置換することができる。芳香族部分またはアリール部分は、芳香族性の周知の特徴を有する単環式または縮合二環式部分を意味する。例には、フェニルおよびナフチルが含まれる。同様に、複素環式芳香族化合物およびヘテロアリールとは、環員としてO、SおよびNから選択される1個以上のヘテロ原子を含有する、このような単環式または縮合二環式環系を意味する。ヘテロ原子を含むことによって、5員環ならびに6員環において芳香族性が可能となる。典型的な芳香族複素系には、単環式C5~C6芳香族基ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、チエニル、フラニル、ピロリル、ピラゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、およびイミダゾリルなど、ならびにこれらの単環式基の1つと、フェニル環とを、または芳香族複素単環式基のいずれかとを縮合させることによって形成される縮合二環式部分C8~C10二環式基インドリル、ベンズイミダゾリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、イソキノリル、キノリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾフラニル、ピラゾロピリジル、キナゾリニル、キノキサリニル、シンノリニルなどが形成されるが含まれる。環系に亘る電子分布に関して芳香族性の特徴を有する任意の単環式または縮合環二環式系は、この定義に含まれる。この定義はまた、少なくとも、分子の残りの部分に直接結合している環が、芳香族性の特徴を有する二環式基を含む。典型的には、環系は、5~12個の環員原子を含有する。単環式ヘテロアリールは、5~6環員を含有することがあり、二環式ヘテロアリールは、8~10環員を含有することがある。アリールおよびヘテロアリール部分は、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、C5~C12アリール、C1~C8アシル、およびこれらのヘテロ形態を含めた種々の置換基これらの各々は、それ自体がさらに置換されていてもよいで置換されていてもよい。アリールおよびヘテロアリール部分についての他の置換基には、ハロ、OR、NR2、SR、SO2R、SO2NR2、NRSO2R、NRCONR2、NRCOOR、NRCOR、CN、COOR、CONR2、OOCR、COR、およびNO2が含まれ、各Rは、独立に、H、C1~C8アルキル、C2~C8ヘテロアルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8ヘテロアルケニル、C2~C8アルキニル、C2~C8ヘテロアルキニル、C6~C10アリール、C5~C10ヘテロアリール、C7~C12アリールアルキル、またはC6~C12ヘテロアリールアルキルであり、各Rは、アルキル基について上記のように、任意選択で置換されている。アリールまたはヘテロアリール基上の置換基は、このような置換基の各タイプまたは置換基の各構成成分に適したものとして、本明細書に記載されている基でさらに置換されていてもよい。したがって、例えば、アリールアルキル置換基は、アリール部分上でアリール基に典型的な置換基で置換されていてもよく、アルキル部分上でアルキル基に典型的または適した置換基でさらに置換されていてもよい。同様に、アリールアルキルおよびヘテロアリールアルキルとは、置換または非置換、飽和または不飽和の環状または非環状リンカーを含めた連結基アルキレンなどを介してそれらの結合ポイントに結合している芳香族環系および芳香族複素環系を意味する。リンカーは、C1~C8アルキルまたはそのヘテロ形態であることが多い。これらのリンカーはまた、カルボニル基を含んでもよく、したがって、これによってこれらのリンカーがアシルまたはヘテロアシル部分として置換基を提供することが可能となる。アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル基中のアリールまたはヘテロアリール環は、アリール基について上記で記載した同じ置換基で置換されていてもよい。アリールアルキル基は、アリール基について上記で定義した基で任意選択で置換されているフェニル環、および非置換であるかまたは1つもしくは2つのC1~C4アルキル基もしくはヘテロアルキル基で置換されているC1~C4アルキレンを含むことがあり、アルキルまたはヘテロアルキル基は、任意選択で環化し、環シクロプロパン、ジオキソラン、またはオキサシクロペンタンなどを形成することができる。同様に、ヘテロアリールアルキル基は、アリール基上の典型的な置換基として上記に記載した基の1つ以上で任意選択で置換されているC5~C6単環式ヘテロアリール基、および非置換であるC1~C4アルキレンを含むことが多い。ヘテロアリールアルキル基は、1つまたは2つのC1~C4アルキル基またはヘテロアルキル基で置換されていることがあり、あるいは任意選択で置換されているフェニル環またはC5~C6単環式ヘテロアリール、および非置換であるか、または1つもしくは2つのC1~C4アルキルもしくはヘテロアルキル基で置換されているC1~C4ヘテロアルキレンを含み、アルキルまたはヘテロアルキル基は、任意選択で環化し、環シクロプロパン、ジオキソラン、またはオキサシクロペンタンなどを形成することができる。アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル基が任意選択で置換されていると記載されている場合、置換基は、基のアルキルもしくはヘテロアルキル部分上、またはアリールもしくはヘテロアリール部分上にあってよい。アルキルまたはヘテロアルキル部分上に任意選択で存在する置換基は、アルキル基について上記で記載したものと同じであることがあり、アリールまたはヘテロアリール部分上に任意選択で存在する置換基は、一般にアリール基について上記で記載したものと同じであることが多い。アリールアルキル基は、本明細書において使用する場合、これらが非置換である場合、ヒドロカルビル基であり、環およびアルキレンまたは同様のリンカー中の炭素原子の総数によって記載される。したがって、ベンジル基は、C7-アリールアルキル基であり、フェニルエチルは、C8-アリールアルキルである。上記のようなヘテロアリールアルキルとは、連結基を介して結合しており、かつアリール部分の少なくとも1個の環原子または連結基中の1個の原子が、N、OおよびSから選択されるヘテロ原子であるという点でアリールアルキルと異なるアリール基を含む部分を意味する。ヘテロアリールアルキル基は、環中およびリンカー中を合わせた原子の総数によって本明細書に記載されており、これらには、ヘテロアルキルリンカーを介して連結しているアリール基;ヒドロカルビルリンカーアルキレンなどを介して連結しているヘテロアリール基;およびヘテロアルキルリンカーを介して連結しているヘテロアリール基が含まれる。したがって、例えば、C7-ヘテロアリールアルキルには、ピリジルメチル、フェノキシ、およびN-ピロリルメトキシが含まれる。アルキレンとは、本明細書において使用する場合、二価のヒドロカルビル基を意味する。アルキレンは二価であるため、2つの他の基を一緒に連結することができる。アルキレンは、-CH2n-nは、1~20、1~10、1~8、または1~4でよいと称されることが多いが、特定される場合、アルキレンはまた、他の基で置換することができ、他の長さでもよく、開放原子価は、鎖の反対端にある必要はない。したがって、-CHMe-および-CMe2-をまたアルキレンと称してもよく、シクロプロパン-1,1-ジイルなどの環式基も同様である。アルキレン基が置換されている場合、置換基は、本明細書に記載のようなアルキル基上に典型的には存在するものを含む。適切なリンカーを利用して、リン脂質類似体例えば、X2を構築することができ、複数のリンカーが公知である。リンカーの非限定的例には、-Yy-、-Yy-CON-Zz-、-CH2y-CON-CH2z-、-Yy-NCO-Zz-、-CH2y-NCO-CH2z-が含まれ、各y下付き文字およびz下付き文字は、独立に、0~20であり、各YおよびZは、独立に、C1~C10アルキル、置換C1~C10アルキル、C1~C10アルコキシ、置換C1~C10アルコキシ、C3~C9シクロアルキル、置換C3~C9シクロアルキル、C5~C10アリール、置換C5~C10アリール、C5~C9複素環式、置換C5~C9複素環式、C1~C6アルカノイル、Het、HetC1~C6アルキル、またはC1~C6アルコキシカルボニルであり、アルキル、シクロアルキル、アルカノイル、アルコキシカルボニル、Het、アリールまたは複素環式基上の置換基は、ヒドロキシル、C1~C10アルキル、ヒドロキシルC1~C10アルキレン、C1~C6アルコキシ、C3~C9シクロアルキル、C5~C9複素環式、C1~6アルコキシC1~6アルケニル、アミノ、シアノ、ハロゲンまたはアリールである。特定の実施形態において、リンカーは、-CY’Z’-CY’’Z’’-リンカーであることがあり、各Y’、Y’’、Z’およびZ’’は、独立に、水素、C1~C10アルキル、置換C1~C10アルキル、C1~C10アルコキシ、置換C1~C10アルコキシ、C3~C9シクロアルキル、置換C3~C9シクロアルキル、C5~C10アリール、置換C5~C10アリール、C5~C9複素環式、置換C5~C9複素環式、C1~C6アルカノイル、Het、HetC1~C6アルキル、またはC1~C6アルコキシカルボニルであり、アルキル、シクロアルキル、アルカノイル、アルコキシカルボニル、Het、アリールまたは複素環式基上の置換基は、ヒドロキシル、C1~C10アルキル、ヒドロキシルC1~C10アルキレン、C1~C6アルコキシ、C3~C9シクロアルキル、C5~C9複素環式、C1~6アルコキシC1~6アルケニル、アミノ、シアノ、ハロゲンまたはアリールである。利用することができるリンカーの特定の非限定的例には、下記が含まれる。いくつかの実施形態において、適切な血漿安定性をもたらすリンカーが選択される。適切な安定性は、約60以上例えば、約65、70、75、80、85、90のコンジュゲート類似体がヒト血漿と約300分接触した後に存在することがあることである。一般に、置換基中に含有される、任意のアルキル、アルケニル、アルキニル、アシル、またはアリールもしくはアリールアルキル基、またはこれらの基の1つの任意のヘテロ形態は、それ自体がさらなる置換基で任意選択で置換されていてもよい。置換基がその他で記載されていない場合、これらの置換基の性質は、一次置換基自体に関して記載したものと同様である。したがって、例えば、R1がアルキルである実施形態の場合、このアルキルは、R1についての実施形態として一覧表示されている残りの置換基によって任意選択で置換されていてもよく、これは化学的に道理にかなっており、これは、アルキル自体について提供されるサイズ限界を損なわない。例えば、アルキルでまたはアルケニルで置換されているアルキルは、これらの実施形態についての炭素原子の上限を単純に拡張し、含まれない。しかし、アリール、アミノ、アルコキシ、=Oなどで置換されているアルキルは本発明の範囲内に含まれ、これらの置換基の原子は、記載されているアルキル、アルケニルなどの基を記載するために使用される数にカウントされない。置換基の数が特定されていない場合、各々のこのようなアルキル、アルケニル、アルキニル、アシル、またはアリール基は、その利用可能な原子価によっていくつかの置換基で置換されていてもよい。特に、これらの基のいずれかは、例えば、その利用可能な原子価のいずれかまたは全てにおいてフッ素原子で置換されていてもよい。ヘテロ形態とは、本明細書において使用する場合、指定した炭素環基の少なくとも1個の炭素原子が、N、OおよびSから選択されるヘテロ原子で置き換えられている、アルキル、アリール、またはアシルなどの基の誘導体を意味する。したがって、アルキル、アルケニル、アルキニル、アシル、アリール、およびアリールアルキルのヘテロ形態は、各々、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロアシル、ヘテロアリール、およびヘテロアリールアルキルである。オキソ基がNまたはSに結合しており、ニトロまたはスルホニル基を形成する場合を除いて、2個以下のN、OまたはS原子が、逐次的に通常連結していることが理解される。ヘテロ形態部分は、本明細書においてHetと称されることがある。ハロまたはハロゲンには、本明細書において使用する場合、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードが含まれる。フルオロおよびクロロが好ましいことが多い。アミノは、本明細書において使用する場合、NH2を意味するが、アミノが置換されているまたは任意選択で置換されていると記載されている場合、この用語は、NR’R’’を含み、各R’およびR’’は、独立にHであり、あるいはアルキル、アルケニル、アルキニル、アシル、アリール、もしくはアリールアルキル基、またはこれらの基の1つのヘテロ形態であり、アルキル、アルケニル、アルキニル、アシル、アリール、もしくはアリールアルキル基、またはこれらの基の1つのヘテロ形態の各々は、相当する基について適切であると本明細書に記載されている置換基で任意選択で置換されている。この用語はまた、R’およびR’’が一緒に連結し、3~8員環を形成する形態を含み、3~8員環は、飽和、不飽和または芳香族でよく、かつ環員としてN、OおよびSから独立に選択される1~3個のヘテロ原子を含有し、かつアルキル基について適切であると記載されている置換基で任意選択で置換されており、または、NR’R’’が芳香族基である場合、これはヘテロアリール基について典型的であると記載されている置換基で任意選択で置換されている。本明細書において使用する場合、炭素環という用語は、環中に炭素原子のみを含有する環式化合物を意味し、一方、複素環とは、ヘテロ原子を含む環式化合物を意味する。炭素環および複素環構造は、単環式、二環式または複数の環系を有する化合物を包含する。本明細書において使用する場合、ヘテロ原子という用語は、炭素または水素でない任意の原子窒素、酸素または硫黄などを意味する。複素環の実例には、これらに限定されないが、テトラヒドロフラン、1,3ジオキソラン、2,3ジヒドロフラン、ピラン、テトラヒドロピラン、ベンゾフラン、イソベンゾフラン、1,3ジヒドロイソベンゾフラン、イソオキサゾール、4,5ジヒドロイソオキサゾール、ピペリジン、ピロリジン、ピロリジン2オン、ピロール、ピリジン、ピリミジン、オクタヒドロピロロ[3,4b]ピリジン、ピペラジン、ピラジン、モルホリン、チオモルホリン、イミダゾール、イミダゾリジン2,4ジオン、1,3ジヒドロベンゾイミダゾール2オン、インドール、チアゾール、ベンゾチアゾール、チアジアゾール、チオフェン、テトラヒドロチオフェン1,1ジオキシド、ジアゼピン、トリアゾール、グアニジン、ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン、2,5ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン、2,3,4,4a,9,9aヘキサヒドロ1Hβカルボリン、オキシラン、オキセタン、テトラヒドロピラン、ジオキサン、ラクトン、アジリジン、アゼチジン、ピペリジン、ラクタムが含まれ、ヘテロアリールをまた包含し得る。ヘテロアリールの他の実例には、これらに限定されないが、フラン、ピロール、ピリジン、ピリミジン、イミダゾール、ベンゾイミダゾールおよびトリアゾールが含まれる。場合によっては、本明細書に記載されている化合物は、1つ以上のキラル中心を含有する。この技術は、異なる程度のキラル純度の、単離した立体異性体の形態の各々、ならびに立体異性体の混合物ラセミ混合物を含めたを含む。この技術はまた、形成することができる様々なジアステレオマーおよび互変異性体を包含する。本明細書に記載されている化合物はまた、1つ以上の互変異性型で存在し得る。例えば、Rが-OHであるとき、本明細書に記載されている化合物は、1つ以上の互変異性型で存在し得る。本明細書に記載されている化合物は、特定の塩として存在することができる。薬学的に許容される塩の非限定的例は、本明細書に記載されている。任意選択で置換されているという用語は、本明細書において使用する場合、記載されている特定の基複数可が、非水素置換基を有さなくてもよく、または基複数可が、1つ以上の非水素置換基を有してもよいことを示す。他に特記されない限り、存在し得るこのような置換基の総数は、記載されている基の非置換形態上に存在するH原子の数に等しい。任意選択の置換基が二重結合を介して結合している場合カルボニル酸素=Oなど、基は、2つの利用可能な原子価を占め、そのため含まれてもよい置換基の総数は、利用可能な原子価の数によって減少する。リン脂質類似体ファルマコフォア特定の実施形態において提供するのは、式Eによる化合物、P1-X2-X3-R3式Eまたは薬学的に許容されるその塩もしくは水和物を含む組成物であり、式中、X2、X3およびR3は、上記の通りであり、P1は、ファルマコフォアである。いくつかの実施形態においてまた提供するのは、式Fもしくは式Gによる化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは水和物を含む組成物であり、式中、X2、X3、R3、RdおよびReは、上記の通りであり、P1は、ファルマコフォアである。式E、FまたはGによる構造を有する化合物に関して、RdおよびReは、特定の実施形態において、独立に、線状および飽和C6~C30アルキルである。いくつかの実施形態において、RdおよびReは、同じまたは異なる。いくつかの実施形態において、RdおよびReは、独立に、1個、2個、3個、4個または5個の二重結合例えば、不飽和を含む。特定の実施形態において、RdおよびReは、エポキシ部分で置換されておらず、RdおよびReは、ヒドロキシル部分で置換されていないことがある。特定の実施形態において、RdおよびReは、エポキシ部分でもヒドロキシル部分でも置換されていない。様々な実施形態において、RdおよびReは、二重結合例えば、不飽和を含まない。式E、FまたはGによる構造を有する化合物に関して、ファルマコフォアP1は、免疫刺激性活性を示す任意の分子でよい。特定の実施形態において、ファルマコフォアP1は、式Hによる構造、または薬学的に許容されるその塩を有し、リン脂質、またはリン脂質様構造は、任意の適切な連結ポイントにおいてファルマコフォアに連結しており、式H中のR10、R20、およびR30は、各々独立に、水素;3個、4個、もしくは5個の炭素原子の環状アルキル;1個~約10個の炭素原子を含有する直鎖もしくは分岐鎖アルキル、および1個~約10個の炭素原子を含有する置換直鎖もしくは分岐鎖アルキル置換基は、3個~約6個の炭素原子を含有するシクロアルキル、および1個~約4個の炭素原子を含有する直鎖または分岐鎖アルキルで置換されている3個~約6個の炭素原子を含有するシクロアルキルからなる群から選択される;1個~約10個の炭素原子および1個以上のフッ素または塩素原子を含有するフルオロもしくはクロロアルキル;2個~約10個の炭素原子を含有する直鎖もしくは分岐鎖アルケニル、および2個~約10個の炭素原子を含有する置換直鎖もしくは分岐鎖アルケニル置換基は、3個~約6個の炭素原子を含有するシクロアルキル、および1個~約4個の炭素原子を含有する直鎖または分岐鎖アルキルで置換されている3個~約6個の炭素原子を含有するシクロアルキルからなる群から選択される;1個~約6個の炭素原子のヒドロキシアルキル;アルコキシアルキルアルコキシ部分は、1個~約4個の炭素原子を含有し、アルキル部分は、1個~約6個の炭素原子を含有する;アシルオキシアルキルアシルオキシ部分は、2個~約4個の炭素原子のアルカノイルオキシまたはベンゾイルオキシであり、アルキル部分は、1個~約6個の炭素原子を含有し、ただし、任意のこのようなアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、またはアシルオキシアルキル基は、窒素原子に直接結合した完全に炭素置換された炭素原子を有さない;ベンジル;フェニルエチル;ならびにフェニル前記ベンジル、フェニルエチルまたはフェニル置換基は、ベンゼン環上において1個~約4個の炭素原子のアルキル、1個~約4個の炭素原子のアルコキシ、およびハロゲンからなる群から独立に選択される1つまたは2つの部分で任意選択で置換されており、ただし、前記ベンゼン環が、前記部分の2つで置換されているとき、それらの部分は一緒になって、6個以下の炭素原子を含有する;-CHRxRy[Ryは、水素または炭素-炭素結合であり、ただし、Ryが水素であるとき、Rxは、1個~約4個の炭素原子のアルコキシ、1個~約4個の炭素原子のヒドロキシアルコキシ、2個~約10個の炭素原子の1-アルキニル、テトラヒドロピラニル、アルコキシアルキルアルコキシ部分は、1個~約4個の炭素原子を含有し、アルキル部分は、1個~約4個の炭素原子を含有する、2-、3-、または4-ピリジルであり、さらにただし、Ryが炭素-炭素結合であるとき、RyおよびRxは一緒になって、1個~約4個の炭素原子のヒドロキシまたはヒドロキシアルキル、1個~約8個の炭素原子を含有する直鎖または分岐鎖アルキル、1個~約6個の炭素原子を含有する直鎖または分岐鎖ヒドロキシアルキル、モルホリノメチル、ベンジル、フェニルエチルおよびフェニルからなる群から独立に選択される1個以上の置換基で任意選択で置換されているテトラヒドロフラニル基を形成し、ベンジル、フェニルエチルまたはフェニル置換基は、ベンゼン環上でメチル、メトキシ、またはハロゲンからなる群から選択される部分で任意選択で置換されている];または-CRSRTXRSおよびRTは、水素、1個~約4個の炭素原子のアルキル、フェニル、および置換フェニル置換基は、1個~約4個の炭素原子のアルキル、1個~約4個の炭素原子のアルコキシ、およびハロゲンからなる群から選択されるからなる群から独立に選択されるであり、Xは、1個~約4個の炭素原子を含有するアルコキシ、アルコキシアルキルアルコキシ部分は、1個~約4個の炭素原子を含有し、アルキル部分は、1個~約4個の炭素原子を含有する、1個~約4個の炭素原子のハロアルキル、アルキルアミドアルキル基は、1個~約4個の炭素原子を含有する、アミノ、置換アミノ置換基は、1個~約4個の炭素原子のアルキルもしくはヒドロキシアルキルである、アジド、1個~約4個の炭素原子のアルキルチオ、またはモルホリノアルキルアルキル部分は、1個~約4個の炭素原子を含有するであり、式HにおけるR40は、水素、C1~8アルキル、C1~8アルコキシ、またはハロであり、式Hにおけるnnは、1、2、3、または4であり、式HにおけるRaaおよびRbbは、各々独立に、水素、C1~C6アルキル、ヒドロキシC1~C6アルキル、アダマンチル、アダマンチルC1~C6アルキル、アミノC1~C6アルキル、アミノスルホニル、C1~C6アルカノイル、アリール、もしくはベンジルであり、またはRaaおよびRbbは、それらが結合している窒素と一緒になって、ピロリジノ、ピペリジノ、もしくはモルホリノ基を形成し、式Hの5員環における破線は、5員環の窒素を、5員環の2個の窒素の間にある炭素と連結する任意選択の結合を示し、結合が存在するとき、R10またはR30は存在しない。いくつかの実施形態において、式HにおけるRaaまたはRbbの1つは、独立に、-X2-X3-R3であり、または式Cもしくは式Dによる構造を有し、他方のRaaまたはRbbは、水素、C1~C6アルキルまたはC1~C6アルコキシである。特定の実施形態において、ファルマコフォアP1は、式Iによる構造、または薬学的に許容されるその塩を有し、リン脂質、またはリン脂質様構造は、任意の適切な連結ポイントにおいてファルマコフォアに連結しており、RaaおよびRbbは、上記に定義されている通りである。いくつかの実施形態において、式IにおけるRaaまたはRbbの1つは、-X2-X3-R3であり、または式Cもしくは式Dによる構造を有し、他方のRaaまたはRbbは、水素、C1~C6アルキルまたはC1~C6アルコキシである。また式E、FまたはGによる構造を有する化合物に関して、ファルマコフォアP1は、特定の実施形態において、式Jまたは式Kによる構造、または薬学的に許容されるその塩を有し、リン脂質、またはリン脂質様構造は、任意の適切な連結ポイントでファルマコフォアに連結しており、R40、nn、RaaおよびRbbは、上記に定義されている通りであり、Rccは、水素、C1~C6アルキルまたはC1~C6アルコキシである。いくつかの実施形態において、式Jまたは式K中のRaaまたはRbbの1つは、-X2-X3-R3でありまたは式Cもしくは式Dによる構造を有し、他方のRaaまたはRbbは、水素、C1~C6アルキルまたはC1~C6アルコキシである。後者の実施形態において、Rccは、水素であることがある。特定の実施形態において、式Jまたは式K中のRccは、-X2-X3-R3であり、または式Cもしくは式Dによる構造を有する。後者の実施形態において、RaaまたはRbbは、独立に、水素、C1~C6アルキルまたはC1~C6アルコキシである。医薬組成物および製剤本明細書に記載されている化合物は、薬学的に許容される塩として調製することができる。本明細書において使用する場合、薬学的に許容される塩という用語は、親化合物がその酸性または塩基性塩を作製することによって修飾される、開示された化合物の誘導体を意味する。薬学的に許容される塩の例には、これらに限定されないが、塩基性残基アミンなどの鉱酸塩または有機酸塩;酸性残基カルボン酸などのアルカリ塩または有機塩などが含まれる。薬学的に許容される塩には、例えば、無毒性の無機酸または有機酸から形成される親化合物の、従来の無毒性塩または第四級アンモニウム塩が含まれる。例えば、従来の無毒性塩には、無機酸塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などに由来するもの;および有機酸酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、2-アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸などから調製される塩が含まれる。他の例において、従来の無毒性の塩には、塩基水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化アンモニウム、カフェイン、様々なアミンなどに由来するものが含まれる。薬学的に許容される塩は、従来の化学的手法によって、塩基性または酸性部分を含有する親化合物から合成することができる。一般に、このような塩は、水中でまたは有機溶媒中で、または2つの混合物中で、これらの化合物の遊離酸または遊離塩基形態と、化学量論量の適当な塩基または酸とを反応させることによって調製することができる。一般に、非水性媒体エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルのようなが好ましい。適切な塩の一覧は、その開示が参照により本明細書に組み込まれているRemington’sPharmaceuticalSciences、第17版、MackPublishingCompany、Easton、PA、1418頁1985年に見出される。薬学的に許容されるという用語は、本明細書において使用する場合、過剰な毒性、刺激作用、アレルギー反応、または妥当な便益/リスク比と釣り合った他の問題もしくは合併症を伴わずに、正しい医学的判断の範囲内で、人間および動物の組織と接触させる使用に適した化合物、材料、組成物、および/または剤形を意味する。安定的な化合物および安定的な構造という用語は、反応混合物からの有用な程度の純度への単離、および効果的な治療剤への製剤の後に残存するように十分に強い化合物を示すことを意味する。安定的な化合物は、記載された処置方法において使用するために本明細書において意図される。本明細書に記載されている化合物は、1種以上の他の薬剤と組み合わせて製剤することができる。1種以上の他の薬剤は、これらに限定されないが、本明細書に記載されている別の化合物、抗細胞増殖剤例えば、化学療法剤、抗炎症剤、および抗原を含むことができる。本明細書に記載されている化合物は、医薬組成物として製剤し、哺乳動物宿主ヒト患者またはヒトではない動物などに、選択した投与経路に適合した種々の形態で投与することができる。投与経路の非限定的例には、経口、非経口、静脈内、筋内、局部的、滴下注入例えば、膀胱滴下注入、皮下、皮内の経路が含まれる。特定の実施形態において、組成物は、例えば、小胞内で局所的に投与される。組成物は、賦形剤、および時にはアジュバント、担体例えば、同化可能、食用、緩衝液、保存剤などを含むことがある。化合物は、特定の実施形態において、リポソーム組成物中でまたはマイクロエマルジョンとしてまた投与することができる。様々な薬物の持続放出系がまた考案されてきており、本明細書に記載されている化合物に適用することができる。例えば、その方法が参照により本明細書中に組み込まれている米国特許第5,624,677号を参照されたい。被験体の膀胱への投与のために、いくつかの実施形態において、約10nM~約1000nM、または約100nM~約10,000nMの濃度の本明細書に記載されている化合物を送達し得る。特定の実施形態において、本明細書に記載されている組成物は、局所的に適用される超音波、電磁放射もしくは電気穿孔もしくは他の電気をベースとした薬物送達技術、局所的化学的摩耗、または局所的物理的摩耗と併せて投与される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている組成物は、例えば、局所的に適用される界面活性剤を含み、または界面活性剤と共に投与され、本明細書に記載されている化合物が膀胱粘膜を通る透過性を増強させる。特定の実施形態において、本明細書における組成物は、例えば、粒径、受容体多量体化または持続放出に起因し得るエンドソーム取込みの増強を実現する。本明細書に記載されている化合物はハードもしくはソフトシェルゼラチンカプセル剤中に封入してもよく、錠剤に圧縮してもよく、または患者の食事の食物に直接組み込んでもよい。経口治療のための投与のために、活性化合物は、1種以上の添加剤と組み合わせてもよく、摂取可能な錠剤、バッカル錠剤、トローチ剤、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、ウエファーなどの形態で使用し得る。このような組成物および調製品は、少なくとも0.1の活性化合物を含有することがある。組成物および調製品の百分率は変化してもよく、所与の単位剤形の重量の約2~約60であることがある。このような治療的に有用な組成物中の活性化合物の量は、有効量レベルが得られる量である。錠剤、トローチ剤、丸剤、カプセル剤などはまた、下記を含有し得る。結合剤トラガカントガム、アカシア、トウモロコシデンプンまたはゼラチンなど;添加剤リン酸二カルシウムなど;崩壊剤トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、アルギン酸など;滑沢剤ステアリン酸マグネシウムなど;および甘味剤スクロース、フルクトース、ラクトースまたはアスパルテームなどまたは香味剤ペパーミント、冬緑油、またはサクランボ香味料などを加えてもよい。単位剤形がカプセル剤であるとき、上記のタイプの材料に加えて、液体担体植物油またはポリエチレングリコールなどを含有し得る。様々な他の材料は、コーティングとして、または固体単位剤形の物理的形態を他の方法で修飾するために存在し得る。例えば、錠剤、丸剤、またはカプセル剤は、ゼラチン、ワックス、セラックまたは糖などでコーティングし得る。シロップ剤またはエリキシル剤は、活性化合物、甘味剤としてスクロースまたはフルクトース、保存剤としてメチルおよびプロピルパラベン、色素、ならびに香味料サクランボまたはオレンジフレーバーなどを含有し得る。当然ながら、任意の単位剤形の調製において使用される任意の材料は、用いられる量において、薬学的に許容されおよび実質的に無毒性であるべきである。さらに、活性化合物は、持続放出調製品および器具中に組み込み得る。活性化合物は、注入または注射によって投与し得る。活性化合物または薬学的に許容されるその塩の溶液は、無毒性の界面活性剤と任意選択で混合して、水中で調製することができる。分散液はまた、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、トリアセチン、およびこれらの混合物中で、ならびに油中で調製することができる。貯蔵および使用の通常の条件下で、これらの調製品は、微小生物の成長を防止するための保存剤を含有することがある。医薬品剤形は、活性成分を含む無菌水溶液もしくは分散液または無菌粉末を含むことができ、これらは無菌溶液剤または分散剤の即時調製のために適合され、任意選択でリポソーム中にカプセル化される。最終的な剤形は、製造および貯蔵の条件下で、無菌流体であり、安定的であることがある。液体担体またはビヒクルは、例えば、水、エタノール、ポリオール例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコールなど、植物油、無毒性グリセリルエステル、および適切なこれらの混合物を含む溶剤または液体分散媒でよい。例えば、リポソームを形成することによって、分散剤の場合は必要とされる粒径を維持することによって、または界面活性剤を使用することによって、適切な流動性を維持することができる。微小生物の作用の防止は、様々な抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどによってもたらすことができる。等張剤、例えば、糖、緩衝液または塩化ナトリウムは、いくつかの実施形態において含まれる。注射可能な組成物の長時間吸収は、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンの組成物において使用することによってもたらすことができる。無菌溶液剤は、必要とされる量の活性化合物を、時には上記で列挙した他の成分の1つ以上と共に適当な溶剤に組み込み、それに続く濾過滅菌によって調製されることが多い。無菌の注射可能な溶液剤の調製のための無菌粉末の場合、利用されることがある調製方法は、真空乾燥および凍結乾燥技術であり、これによって従前に滅菌濾過した溶液中に存在する任意のさらなる所望の成分に加えて活性成分の粉末が生じる。局所投与のために、本明細書における化合物は、例えば、液体形態であるときに、純粋な形態で施し得る。しかし、化合物を、固体または液体でよい許容される担体と組み合わせて、組成物または製剤として投与することが一般に望ましい。有用な固体担体には、微粉化した固体タルク、クレイ、微結晶性セルロース、シリカ、アルミナなどが含まれる。有用な液体担体には、水、アルコールまたはグリコールまたは水-アルコール/グリコールブレンド、またはプロピレングリコールpropylenglycol/エチレングリコールethylenglycol中のリン脂質が含まれ、有用な液体担体において、任意選択で無毒性の界面活性剤の助けによって、本化合物を有効なレベルで溶解または分散することができる。アジュバント香料およびさらなる抗菌剤などを加えて、所与の使用のための特性を最適化することができる。生成した液体組成物は、包帯および他の手当用品を含浸させるのに使用する吸収パッドから施し、またはポンプタイプもしくはエアゾール噴霧器を使用して患部上に噴霧することができる。増粘剤合成ポリマー、脂肪酸、脂肪酸塩およびエステル、脂肪アルコール、変性セルロースまたは変性鉱物材料などをまた、液体担体と共に用いて、使用者の皮膚へ直接施すための、広げられるペースト剤、ゲル剤、軟膏剤、セッケンなどを形成させることができる。TLRアゴニストまたはTLRアンタゴニストとして作用する本明細書における化合物の能力は、Leeら、PNAS、100巻:6646頁2003年によって開示されている手順を含めた公知の薬理学的モデルを使用して決定し得る。化合物の有用な投与量は、動物モデルにおける化合物のインビトロの活性、およびインビボの活性を比較することによって決定することができる。マウス、および他の動物、ヒトへの有効な投与量を推定する方法は、当技術分野では公知である。いくつかの実施形態において、液体組成物中の本明細書に記載されている化合物の濃度は、約0.1~25重量、および時には約0.5~10重量である。半固体または固体組成物ゲルまたは粉末など中の濃度は、時には約0.1~5重量、および時には約0.5~2.5重量である。処置において使用するのに必要な化合物、またはその活性塩もしくは誘導体の量は、選択された特定の塩によってだけでなく、投与経路、処置される状態の性質、ならびに患者の年齢および状態によっても変化し、最終的に担当の医師または臨床医の判断による。一般に、適切な用量は、1日当たり約0.5~約100mg/kg、例えば、約10~約75mg/kg体重の範囲、例えば、1日当たり3~約50mg/キログラムレシピエントの体重であることがあり、6~90mg/kg/日、または約15~60mg/kg/日の範囲であることが多い。適切な用量は一般に、1日当たり約1~150mg/kgレシピエントの体重の範囲、例えば、約10~約130mg/kg、約40~約120mg/kg、約50~約100mg/kg、約60~90mg/kg、約65~85mg/kg、または例えば、約80mg/kg/日であることがある。化合物は、単位剤形で好都合に投与され、例えば、単位剤形毎に5~1000mg、または10~750mg、または50~500mgの活性成分を含有し得る。活性成分を投与して、約0.01~約100pM、約0.5~約75pM、約1~50pM、または約2~約30pMの活性化合物のピーク血漿濃度を達成することができる。このような濃度は、例えば、任意選択で食塩水中で、活性成分の0.05~5溶液の静脈内注射、または約1~100mgの活性成分を含有する急速投与として経口的に投与することによって達成し得る。望ましい血中濃度は、約0.01~5.0mg/kg/時間を実現する持続注入によって、または約0.4~15mg/kgの活性成分複数可を含有する断続的注入によって維持し得る。所望の用量は、単回用量で、または適当な間隔で投与される分割用量として、例えば、1日当たり2つ、3つ、4つもしくはそれを超える部分用量として好都合に提示し得る。部分用量自体は、例えば、吸入器からの複数回の吸入または目へ複数の液滴を施すことなどにより、いくつかの別々の大まかに間隔を空けた投与にさらに分割し得る。処置提供する組成物は、被験体において特定の状態の処置または予防に有用であり得る。特定の実施形態において、このような状態には、例えば、増殖性状態がん、微生物感染、心臓の状態および肥満状態など、炎症状態および自己免疫性状態が含まれる。処置するおよび処置することという用語は、本明細書において使用する場合、i病的状態が起こることを予防すること例えば、予防法;ii病的状態を阻害し、もしくはその発生を抑止すること;iii病的状態を軽減すること;ならびに/またはiv疾患もしくは状態の症状を寛解、緩和、低下させ、取り除くことを意味する。本明細書に記載されている候補分子または化合物は、製剤または医薬品において治療有効量でよく、これは、例えば、生物学的作用例えば、炎症の阻害をもたらし、または疾患もしくは状態の症状の寛解、緩和、低下、軽減、減少させもしくは取り除くことをもたらすことができる量である。これらの用語はまた、細胞の増殖速度を減少もしくは停止させ例えば、腫瘍成長を遅延または休止させ、または増殖性がん細胞の数を減少させる例えば、腫瘍の部分または全体を除去することを意味することができる。本明細書に記載されている分子は、それを必要としている被験体に投与して、黒色腫を潜在的に処置することができる。このような処置において、処置すること、処置および治療効果という用語は、細胞増殖速度を減少または停止させ例えば、腫瘍成長を遅延または休止させ、増殖性がん細胞の数を減少させ例えば、腫瘍の部分または全部を切除し、黒色腫状態を完全にまたは部分的に緩和することを意味することができる。予防剤または治療剤でよい薬物は、本明細書に記載のような黒色腫を有する任意の適当な被験体に投与することができる。被験体の非限定的例には、哺乳動物、ヒト、類人猿、サル、有蹄動物例えば、ウマ、ウシ、ヤギ、ヒツジ、ブタ、バッファロー、ラクダなど、イヌ、ネコ、げっ歯類例えば、ネズミ、マウス、ラットなどが含まれる。被験体は、雄または雌でよく、薬物は、特定の年齢群例えば、若年、小児、青年、成人などを含めたの被験体に投与することができる。治療有効量という用語は、本明細書において使用する場合は、被験体において、疾患もしくは障害を処置もしくは予防し、または疾患もしくは障害の症状を処置するために、本明細書において提供する化合物の量、または本明細書において提供する化合物の組合せの量を意味する。本明細書において使用する場合、被験体および患者という用語は一般に、本明細書に記載されている方法による処置例えば、本明細書に記載されている化合物の投与をこれから受ける、または受けた個体を意味する。増殖性状態は、がんであることがある。がんおよび関連する障害は、上皮細胞起源のものであることがある。いくつかの実施形態において、増殖性状態は、血液と関連する白血病など。白血病および他の血液の状態の非限定的例には、急性白血病、急性リンパ球性白血病、急性骨髄球性白血病例えば、骨髄芽球性、前骨髄球性、骨髄単球性、単球性、および赤白血病の白血病および骨髄異形成症候群;慢性白血病これらに限定されないが慢性骨髄球性顆粒球性白血病、慢性リンパ球性白血病、有毛細胞白血病など;および真性赤血球増加症が含まれる。特定の実施形態において、増殖性状態は、リンパ腫として提示される。リンパ腫の非限定的例には、ホジキン病および非ホジキン病が含まれる。増殖性状態は、多発性骨髄腫であることがあり、この非限定的例には、くすぶり型多発性骨髄腫、非分泌性骨髄腫、骨硬化性骨髄腫、形質細胞白血病、孤立性形質細胞腫および髄外性形質細胞腫が含まれる。増殖性状態は、いくつかの実施形態において、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症;意義不明の単クローン性ガンマグロブリン血症;良性単クローン性ガンマグロブリン血症;または重鎖病として提示される。増殖性状態は、いくつかの実施形態において、肉腫例えば、骨または結合組織におけるとして提示される。肉腫の非限定的例には、骨肉腫、骨の肉腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性巨細胞腫、骨の線維肉腫、脊索腫、骨膜肉腫、軟部組織肉腫、血管肉腫血管の肉腫、線維肉腫、カポジ肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、リンパ管肉腫、神経鞘腫、横紋筋肉腫、滑膜肉腫が含まれる。いくつかの実施形態において、増殖性状態は、脳の状態例えば、脳腫瘍として提示される。脳の増殖性状態の非限定的例には、神経膠腫、星状細胞腫、脳幹神経膠腫、上衣腫、乏突起膠腫、非グリア腫瘍、聴神経鞘腫、頭蓋咽頭腫、髄芽腫、髄膜腫、脳松果体細胞腫、松果体芽細胞腫、原発性脳リンパ腫が含まれる。増殖性状態は、いくつかの実施形態において、乳がんである。非限定的な乳がんには、腺管癌、腺癌、小葉小細胞癌、腺管内癌、髄様乳がん、粘液性乳がん、管状乳がん、乳頭乳がん、パジェット病、および炎症性乳がんが含まれる。特定の実施形態において、増殖性状態は、副腎がんとして提示される。副腎がんの非限定的例には、褐色細胞腫pheochromocytomおよび副腎皮質癌が含まれる。増殖性状態は、これらに限定されないが、乳頭状または濾胞性甲状腺がん、甲状腺髄様がんおよび未分化甲状腺がんを含めた甲状腺がんとして提示されるであることがある。特定の実施形態において、増殖性状態は、これらに限定されないが、インスリノーマ、ガストリノーマ、グルカゴノーマ、ビポーマ、ソマトスタチン分泌腫瘍、およびカルチノイドまたは島細胞腫瘍を含めた膵臓がんとして提示される。増殖性状態は、いくつかの実施形態において、下垂体がんとして提示され、この非限定的例には、クッシング病、プロラクチン分泌腫瘍、末端肥大症、および尿崩症diabetesinsipiusが含まれる。いくつかの実施形態において、増殖性状態は、これらに限定されないが、眼の黒色腫虹彩黒色腫、脈絡膜黒色腫、および毛様体黒色腫cilliarybodymelanoma、および網膜芽細胞腫などを含めた眼がんとして提示される。特定の実施形態における増殖性状態は、これらに限定されないが、扁平上皮細胞癌、腺癌、黒色腫、扁平上皮細胞癌、黒色腫、腺癌、基底細胞癌、肉腫、およびパジェット病を含むことができる腟がんまたは外陰部がんとして提示される。いくつかの実施形態において、増殖性状態は、子宮頸がんとして提示され、これらに限定されないが、扁平上皮細胞癌および腺癌を含むことができる。子宮がんはまた、これらに限定されないが、子宮内膜癌および子宮肉腫を含めた特定の増殖性状態の一形態である。増殖性状態は、卵巣がんであることがあり、この非限定的例には、卵巣上皮癌、境界型腫瘍、生殖細胞腫瘍、および間質腫瘍が含まれる。いくつかの実施形態において、増殖性状態は食道がんであり、この非限定的例には、扁平上皮がん、腺癌、腺様嚢胞癌、粘表皮癌、腺扁平上皮癌、肉腫、黒色腫、形質細胞腫、疣贅癌、および燕麦細胞小細胞癌が含まれる。増殖性状態は、これらに限定されないが、腺癌、菌状発育性ポリポイド、潰瘍性、表在性拡大型、散在性拡大型、悪性リンパ腫、脂肪肉腫、線維肉腫、および癌肉腫を含めた胃がんとして提示されることがある。増殖性状態は、結腸がんまたは直腸がんとして提示されることがある。いくつかの実施形態において、増殖性状態は肝臓がんであり、この非限定的例には、肝細胞癌および肝芽腫が含まれる。特定の実施形態における増殖性状態は、これらに限定されないが、腺癌を含めた胆嚢がんとして提示される。特定の実施形態において、増殖性状態は、例えば、胆管癌例えば、乳頭状、結節性、およびびまん性などの胆管がんとして提示される。増殖性状態は、いくつかの実施形態において、肺がんである。肺がんの非限定的例には、非小細胞肺がん、扁平上皮細胞癌類表皮癌、腺癌、大細胞癌および小細胞肺がんが含まれる。特定の実施形態において、増殖性状態は、胚腫瘍、精上皮腫、未分化、古典的典型的、精母細胞性、非セミノーマ、胎児性癌、奇形腫癌または絨毛癌卵黄嚢腫瘍などの睾丸がんとして提示される。増殖性状態は、いくつかの実施形態において、これらに限定されないが、前立腺上皮内異常増殖、腺癌、平滑筋肉腫、および横紋筋肉腫を含めた前立腺がんである。特定の実施形態において、増殖性状態は、陰茎がんpenalcancerである。増殖性状態は、口腔がんであることがあり、この非限定的例には、扁平上皮細胞癌;基底細胞がんbasalcancers;これらに限定されないが腺癌、粘表皮癌、および腺様嚢胞癌などの唾液腺がんが含まれる。いくつかの実施形態において、増殖性状態は、これらに限定されないが、扁平上皮細胞がんおよびいぼ状を含めた咽頭がんである。増殖性状態は、皮膚がんとして提示されることがあり、この非限定的例には、基底細胞癌、扁平上皮細胞癌、黒色腫、表在拡大型黒色腫、結節性黒色腫、黒子悪性黒色腫、および末端黒子型黒色腫が含まれる。いくつかの実施形態において、増殖性状態は、腎細胞癌、腺癌、グラヴィッツ腫瘍hypemephroma、線維肉腫、移行細胞がん腎盂および/または尿管、およびウィルムス腫瘍などの腎臓がんである。特定の実施形態において、増殖性状態は膀胱がんであり、この非限定的例には、表在性膀胱がん、移行上皮癌、扁平上皮細胞がん、腺癌および癌肉腫が含まれる。特定の実施形態において、増殖性状態は、粘液肉腫、骨原性肉腫、内皮肉腫、リンパ管内皮肉腫、中皮腫、滑膜腫、血管芽細胞腫、上皮癌、嚢胞腺癌、気管支癌、汗腺癌、脂腺癌、乳頭状癌および乳頭状腺癌;膀胱、乳房、結腸、腎臓、肝臓、肺、卵巣、膵臓、胃、子宮頸部、甲状腺および皮膚のものを含めた癌腫例えば、扁平上皮細胞癌;リンパ球系統の造血器腫瘍白血病、急性リンパ球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、B細胞リンパ腫、T細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫を含めた;骨髄細胞系統の造血器腫瘍hematopoictictumors急性および慢性骨髄性白血病ならびに前骨髄球性白血病promyclocyticleukemiaを含めた;中枢および末梢神経系の腫瘍星状細胞腫、神経芽細胞腫、神経膠腫、およびシュワン細胞腫を含めた;間葉起源の腫瘍線維肉腫、横紋筋肉腫rhabdomyoscarama、および骨の肉腫を含めた;ならびに他の腫瘍黒色腫、色素性乾皮症、角化棘細胞腫keratoactanthoma、精上皮腫、甲状腺濾胞がんおよび奇形癌を含めたから選択されるがんである。アポトーシスにおける異常によってもたらされるがんは、本明細書に記載されている組成物によって対処することができることがまた意図される。このようながんは、濾胞性リンパ腫、p53変異を有する癌腫、乳房、前立腺および卵巣のホルモン依存性腫瘍、ならびに前がん病変家族性腺腫性ポリポーシス、および骨髄異形成症候群などを含んでもよいが、それだけに限られない。特定の実施形態において、悪性病変もしくは異常増殖性変化化生および異形成など、または高増殖性障害は、皮膚、肺、結腸、乳房、前立腺、膀胱、腎臓、膵臓、卵巣、または子宮において処置または予防し得る。細胞増殖性状態はまた、例えば、後天性免疫不全症候群、アデノウイルス感染症、アルファウイルス感染症、アルボウイルス感染症、ボルナ病、ブニヤウイルス感染症、カリシウイルス感染症、水痘、コロナウイルス感染症、コクサッキーウイルス感染症、サイトメガロウイルス感染症、デング熱、DNAウイルス感染症、伝染性膿瘡ecthyma,contagious、脳炎、アルボウイルス、エプスタインバーウイルス感染症、伝染性紅斑、ハンタウイルス感染症、出血熱、ウイルス性肝炎、ウイルス性ヒト単純疱疹、帯状疱疹、耳性帯状疱疹、ヘルペスウイルス感染症、伝染性単核症、例えば、鳥またはヒトにおけるインフルエンザ、ラッサ熱、麻疹、伝染性軟属腫、流行性耳下腺炎、パラミクソウイルス感染症oaramyxoviridaeInfections、サシチョウバエ熱、ポリオーマウイルス感染症、狂犬病、呼吸器合胞体ウイルス感染症、リフトバレー熱、RNAウイルス感染症、風疹、遅発型ウイルス病、痘瘡、亜急性硬化性全脳炎、腫瘍ウイルス感染症、疣贅、西ナイル熱、ウイルス疾患および黄熱病を含めたウイルス性疾患を含む。例えば、SV40形質転換ウイルスのラージT抗原は、UBF上で作用し、UBFを活性化し、他のウイルスタンパク質をPolI複合体に補充し、それによって細胞増殖を刺激して、ウイルス繁殖を確実にする。細胞増殖性状態はまた、血管形成に関連する状態例えば、がん、ならびに含脂肪細胞および他の脂肪細胞の増殖によってもたらされる肥満症を含む。細胞増殖性状態には、微生物感染が含まれる。微生物の非限定的例には、ウイルス、細菌、酵母および真菌が含まれる。記載された組成物によって処置し得る特定の微生物の例を、本明細書において一覧表示する。細胞増殖性状態はまた、心臓ストレス高血圧症、バルーン血管形成、弁膜症および心筋梗塞などからもたらされる心臓の状態を含む。例えば、心筋細胞は、心室壁の大半を構成する心臓中の分化した筋細胞であり、血管平滑筋細胞は、血管を裏打ちしている。両方とも筋細胞のタイプであるが、心筋細胞および血管平滑筋細胞は、収縮、成長および分化のそれらの機序において異なっている。心筋細胞は心臓の形成のすぐ後に高分化し、したがって、分裂する能力を失い、一方、血管平滑筋細胞は、収縮性から増殖性表現型へのモジュレーションを連続的に起こす。様々な病態生理学的ストレス高血圧症、バルーン血管形成、弁膜症および心筋梗塞など下で、例えば、心臓および血管は、心機能を低下させ、最終的に心不全として現れることがある形態学的成長が関連する変化を起こす。したがって、本明細書において提供するのは、心臓の状態を処置するために本明細書に記載されている化合物を有効量で投与することによって、心臓細胞の増殖性状態を処置する方法である。化合物は、心臓ストレスが起こりまたは検出される前または後に投与してもよく、化合物または核酸は、例えば、高血圧症、バルーン血管形成、弁膜症または心筋梗塞の発生または検出後に投与してもよい。このような化合物の投与は、血管筋細胞および/または平滑筋細胞の増殖を減少させ得る。細胞増殖状態はまた、肥満症に関し得る。いくつかの実施形態において、細胞増殖性状態は、含脂肪細胞の異常な増殖である。本明細書に記載されている化合物は、それを必要としている被験体に投与し、被験体において免疫応答を誘導することができる。免疫応答は、特定の実施形態において、異種抗原例えば、病原体感染に対して被験体によって自動的に生じさせ得る。いくつかの実施形態において、抗原は、本明細書に記載されている化合物と同時投与され、免疫応答は、抗原に対して被験体において開始される。特定の実施形態において、抗原は、特定の細胞増殖性状態例えば、特定のがん抗原または特定の病原体例えば、グラム陽性菌壁抗原;S.aureus抗原に対して特異的であり得る。免疫刺激性組成物は、いくつかの実施形態において、ワクチンまたは混合ワクチン中で投与し得る。免疫刺激性組成物は、特定の実施形態において、アジュバント組成物として投与してもよく、特定の実施形態において、抗原と併せて投与例えば、抗原との逐次投与または同時の投与し得る。本明細書に記載されている化合物は、それを必要としている被験体に投与し、1つ以上の炎症障害を潜在的に予防、阻害または処置することができる。本明細書において下記で使用する場合、処置すること、処置および治療効果という用語は、炎症反応を減少、阻害または停止予防し例えば、抗体産生または特異的抗原に対する抗体の量を遅延または休止させ、炎症性組織の量を減少させ、炎症状態を完全にまたは部分的に緩和することを意味することができる。炎症障害には、これらに限定されないが、アレルギー、喘息、自己免疫障害、慢性炎症、慢性前立腺炎、糸球体腎炎、過敏症、炎症性腸疾患、ミオパチー例えば、全身性硬化症、皮膚筋炎、多発性筋炎、および/または封入体筋炎と組み合わせた、骨盤内炎症性疾患、再潅流傷害、関節リウマチ、移植片拒絶、脈管炎、および白血球障害例えば、チェディアック-東症候群、慢性肉芽腫症が含まれる。特定の自己免疫障害はまた、炎症障害例えば、関節リウマチである。いくつかの実施形態において、炎症障害は、慢性炎症、慢性前立腺炎、糸球体腎炎、過敏症、ミオパチー、骨盤内炎症性疾患、再潅流傷害、移植片拒絶、脈管炎、および白血球障害からなる群から選択される。特定の実施形態において、炎症状態には、これらに限定されないが、気管支拡張症、細気管支炎、嚢胞性線維症、急性肺傷害、急性呼吸窮迫症候群ARDS、アテローム性動脈硬化症、および敗血症性ショック例えば、多臓器不全を伴う敗血症が含まれる。いくつかの実施形態において、炎症障害は、アレルギー、喘息、ARDSおよび自己免疫障害からなる群から選択される状態ではない。特定の実施形態において、炎症障害は、消化管炎症、脳炎、皮膚炎および関節の炎症からなる群から選択される状態ではない。特定の実施形態において、炎症障害は、好中球が媒介する障害である。いくつかの実施形態において、炎症状態はまた、細胞増殖状態例えば、皮膚の炎症状態例えば、湿疹、円板状エリテマトーデス、扁平苔癬、硬化性苔癬、菌状息肉腫、光線皮膚症、バラ色粃糠疹および乾癬などである。本明細書に記載されている化合物は、それを必要としている被験体に投与し、1つ以上の自己免疫障害を潜在的に処置することができる。このような処置において、処置すること、処置および治療効果という用語は、自己免疫応答を減少、阻害または停止し例えば、抗体産生または特異的抗原に対する抗体の量を遅延または休止させ、炎症性組織の量を減少させ、自己免疫状態を完全にまたは部分的に緩和することを意味することができる。自己免疫障害には、これらに限定されないが、自己免疫性脳脊髄炎、大腸炎、自己免疫性インスリン依存性真性糖尿病automimmuneinsulindependentdiabetesmellitusIDDM、およびウェゲナー肉芽腫症および高安動脈炎が含まれる。このような疾患について化合物を試験するためのモデルには、これらに限定されないが、a自己免疫性脳脊髄炎についての、iミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質MOGペプチドによって誘発されるC5BL/6、iiSJLマウスPLP139~151、または178~191EAE、およびiiiMOGまたはPLPペプチドによって誘発されるEAEの養子移入モデル;b自己免疫性IDDMについての、非肥満糖尿病NODマウス;c大腸炎についての、デキストラン硫酸ナトリウムDSSが誘発する大腸炎モデルおよびトリニトロベンゼンスルホン酸TNBSが誘発する大腸炎モデル;ならびにd全身性小血管炎障害ウェゲナー肉芽腫症および高安動脈炎についてのモデルとしてが含まれる。本明細書に記載されている化合物を被験体に投与して、下記の障害の1つ以上を潜在的に処置し得る。急性播種性脳脊髄炎ADEM;アジソン病;円形脱毛症;強直性脊椎炎;抗リン脂質抗体症候群APS;自己免疫性溶血性貧血;自己免疫性肝炎;自己免疫性内耳疾患;水疱性類天疱瘡;セリアック病;シャーガス病;慢性閉塞性肺疾患;クローン病特発性炎症性腸疾患IBDの2つのタイプの1つ;皮膚筋炎;1型真性糖尿病;子宮内膜症;グッドパスチャー症候群;グレーブス病;ギランバレー症候群GBS;橋本病;化膿性汗腺炎;特発性血小板減少性紫斑病;間質性膀胱炎;エリテマトーデス;混合性結合組織疾患;モルフェア;多発性硬化症MS;重症筋無力症;ナルコレプシー;神経性筋強直症;尋常性天疱瘡;悪性貧血;多発性筋炎;原発性胆汁性肝硬変;関節リウマチ;統合失調症;強皮症;シェーグレン症候群;側頭動脈炎巨細胞性動脈炎としてもまた公知である;潰瘍性大腸炎特発性炎症性腸疾患IBDの2つのタイプの1つ;脈管炎;白斑;ならびにウェゲナー肉芽腫症。いくつかの実施形態において、自己免疫障害は、クローン氏病またはクローン病、関節リウマチ、ループスおよび多発性硬化症からなる群から選択される状態ではない。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている化合物は、1つ以上の他の療法これらに限定されないが、化学療法、放射線療法、ホルモン療法、および/または生物学的療法例えば、免疫療法が含まれるの投与と組み合わせて利用される。これらに限定されないが、本明細書に記載されている化合物と組み合わせて使用することができる薬剤には、これらに限定されないが、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質翻訳後修飾タンパク質を含めた、抗体などを含めたタンパク性分子;小分子1000ダルトン未満;無機または有機化合物;これらに限定されないが、二本鎖もしくは一本鎖DNA、または二本鎖もしくは一本鎖RNA、および三重らせん体核酸分子を含めた核酸分子を含めることができる。本明細書に記載されている化合物と組み合わせて使用される薬剤は、任意の公知の生物これらに限定されないが、動物、植物、細菌、真菌、および原生生物、またはウイルスを含めたに、または合成分子のライブラリーに由来することができる。本明細書に記載されている化合物と組み合わせて利用し得る薬剤には、タンパク質キナーゼ阻害剤例えば、受容体タンパク質キナーゼ阻害剤および血管形成阻害剤が含まれる。免疫刺激性組成物本明細書に記載されている化合物は免疫刺激性活性を有してもよく、抗原に対する免疫応答のレベルを増強することができる。したがって、本明細書に記載されている化合物は、抗原と併せて投与することができるアジュバントとして有用であり得る。したがって、本明細書に記載されている化合物は、いくつかの実施形態において、抗原を含有するワクチン組成物の部分として組み込むことができ、特定の実施形態において、アジュバント組成物中の抗原とは別々に投与することができる。ワクチン組成物およびアジュバント組成物は、本明細書において集合的に免疫刺激性組成物と称される。免疫刺激性組成物構成成分本明細書に記載されている化合物は、免疫刺激性組成物中で任意の有効量で利用することができる。特定の実施形態において、本明細書に記載されている化合物は、用量毎に約1マイクログラム~約100,000マイクログラムの量で使用することができる。本明細書に記載されている化合物はまた、用量毎に約1マイクログラム~約50,000マイクログラム、用量毎に約1マイクログラム~約25,000マイクログラム、用量毎に約1マイクログラム~約5,000マイクログラム、用量毎に約1マイクログラム~約4,000マイクログラム、用量毎に約1マイクログラム~約3,000マイクログラム、用量毎に約1マイクログラム~約2,000マイクログラム、および用量毎に約1マイクログラム~約1,000マイクログラムの量で使用することができる。本明細書に記載されている化合物はまた、いくつかの実施形態において、用量毎に約5マイクログラム~約750マイクログラム、用量毎に約5マイクログラム~約500マイクログラム、用量毎に約5マイクログラム~約200マイクログラム、用量毎に約5マイクログラム~約100マイクログラム、用量毎に約15マイクログラム~約100マイクログラムの量で、および用量毎に約30マイクログラム~約75マイクログラムの量で使用し得る。本明細書に記載されている化合物に加えて、免疫刺激性組成物は、1種以上の他の構成成分を含むことができる。例えば、トリテルペノイドを、免疫刺激性組成物に含めることができる。免疫刺激性組成物中での使用に適したトリテルペノイドは、これらに限定されないが、Quillajasaponaria、トマチン、ニンジン抽出物、キノコ、およびステロイド系サポニンと構造的に類似したアルカロイドグリコシドを含めた多くの源例えば、植物由来のまたは合成の同等物に由来することができる。したがって、免疫刺激性組成物中での使用に適したトリテルペノイドには、サポニン、スクアレン、およびラノステロールが含まれる。免疫刺激性組成物中での使用に適したトリテルペノイドの量は、使用するトリテルペノイドの性質によって決まる。しかし、これらは一般に、用量毎に約1マイクログラム~約5,000マイクログラムの量で使用される。これらはまた、用量毎に約1マイクログラム~約4,000マイクログラム、用量毎に約1マイクログラム~約3,000マイクログラム、用量毎に約1マイクログラム~約2,000マイクログラム、および用量毎に約1マイクログラム~約1,000マイクログラムの量で使用することができる。これらはまた、用量毎に約5マイクログラム~約750マイクログラム、用量毎に約5マイクログラム~約500マイクログラム、用量毎に約5マイクログラム~約200マイクログラム、用量毎に約5マイクログラム~約100マイクログラム、用量毎に約15マイクログラム~約100マイクログラムの量で、および用量毎に約30マイクログラム~約75マイクログラムの量で使用し得る。サポニンが使用される場合、免疫刺激性組成物は、Quillajasaponariaの樹皮からの免疫学的に活性なサポニン画分を含有することが多い。サポニンは、例えば、QuilA、または別の精製されたもしくは部分的に精製されたサポニン調製品でよく、これは商業的に得ることができる。このように、サポニン抽出物は、混合物または精製された個々の構成成分QS-7、QS-17、QS-18、およびQS-21などとして使用することができる。いくつかの実施形態において、QuilAは、少なくとも85の純度である。他の実施形態において、QuilAは、少なくとも90、91、92、93、94、95、96、97、98、または99の純度である。CpGオリゴデオキシ核酸は、特異的塩基配列コンテクストCpGモチーフにおける非メチル化CGジヌクレオチドの存在によって特性決定され、免疫刺激性特性を与えることができる。これらの免疫刺激性特性は、IFN-、IL-12、およびIL-18の顕著な放出を伴うTh1型応答の誘発を含む。CpGODN長さ18~24bp。担体QCDC、QCDCRおよび他の組合せなどは、CpGオリゴデオキシ核酸の取込みを促進することができる。免疫刺激性組成物において使用するためのCpGの量は、使用されるCpGの性質および意図する種によって決まる。しかし、これらは、用量毎に約1マイクログラム~約20mgの量で使用されることが多い。これらはまた、用量毎に約1マイクログラム~約10mg、用量毎に約1マイクログラム~約5mg、用量毎に約1マイクログラム~約4mg、用量毎に約1マイクログラム~約3mg、用量毎に約1マイクログラム~約2mg、および用量毎に約1マイクログラム~約1mgの量で使用することができる。これらは、用量毎に約5マイクログラム~約750マイクログラム、用量毎に約5マイクログラム~約500マイクログラム、用量毎に約5マイクログラム~約200マイクログラム、用量毎に約5マイクログラム~約100マイクログラム、用量毎に10マイクログラム~約100マイクログラム、用量毎に約15マイクログラム~約100マイクログラムの量で、および用量毎に約30マイクログラム~約75マイクログラムの量で使用することができる。ステロールはまた免疫刺激性組成物において使用することができ、使用に適したステロールには、β-シトステロール、スチグマステロール、エルゴステロール、エルゴカルシフェロール、およびコレステロールが含まれる。これらのステロールは当技術分野において公知であり、商業的に購入することができる。免疫刺激性組成物において使用するのに適したステロールの量は、使用されるステロールの性質によって決まる。しかし、これらは、用量毎に約1マイクログラム~約5,000マイクログラムの量で使用されることが多い。これらはまた、用量毎に約1マイクログラム~約4,000マイクログラム、用量毎に約1マイクログラム~約3,000マイクログラム、用量毎に約1マイクログラム~約2,000マイクログラム、および用量毎に約1マイクログラム~約1,000マイクログラムの量で使用することができる。これらはまた、用量毎に約5マイクログラム~約750マイクログラム、用量毎に約5マイクログラム~約500マイクログラム、用量毎に約5マイクログラム~約200マイクログラム、用量毎に約5マイクログラム~約100マイクログラム、用量毎に約15マイクログラム~約100マイクログラム、および用量毎に約30マイクログラム~約75マイクログラムの量で使用することができる。免疫刺激性組成物は、1種以上の免疫調節剤をさらに含むことができ、この非限定的例には、第四級アンモニウム化合物例えば、DDA、およびインターロイキン、インターフェロン、または他のサイトカインが含まれる。これらの材料は、商業的に購入することができる。免疫刺激性組成物中での使用に適した免疫調節剤の量は、使用される免疫調節剤および被験体の性質によって決まる。しかし、これらは、用量毎に約1マイクログラム~約5,000マイクログラムの量で使用されることが多い。これらはまた、用量毎に約1マイクログラム~約4,000マイクログラム、用量毎に約1マイクログラム~約3,000マイクログラム、用量毎に約1マイクログラム~約2,000マイクログラム、および用量毎に約1マイクログラム~約1,000マイクログラムの量で使用することができる。これらはまた、用量毎に約5マイクログラム~約750マイクログラム、用量毎に約5マイクログラム~約500マイクログラム、用量毎に約5マイクログラム~約200マイクログラム、用量毎に約5マイクログラム~約100マイクログラム、用量毎に約15マイクログラム~約100マイクログラムの量で、および用量毎に約30マイクログラム~約75マイクログラムの量で使用することができる。具体例において、DDAを含有する免疫刺激性組成物は、抗原溶液と新たに調製したDDAの溶液とを単純に混合することによって調製することができる。免疫刺激性組成物は、1種以上のポリマーをさらに含むことができ、この非限定的例には、DEAEデキストラン、ポリエチレングリコール、ならびにポリアクリル酸およびポリメタクリル酸例えば、CARBOPOL登録商標が含まれる。免疫刺激性組成物において使用するのに適したポリマーの量は、使用されるポリマーの性質によって決まる。しかし、これらは、約0.0001容量/容量v/v~約75v/vの量で使用されることが多い。いくつかの実施形態において、これらは、約0.001v/v~約50v/vの量、約0.005v/v~約25v/vの量、約0.01v/v~約10v/vの量、約0.05v/v~約2v/vの量、および約0.1v/v~約0.75v/vの量で使用される。特定の実施形態において、これらは、約0.02v/v~約0.4v/vの量で使用される。DEAE-デキストランは、50,000Da~5,000,000Daの範囲の分子の大きさを有することができ、またはこれらは、500,000Da~2,000,000Daの範囲でよい。このような材料は、商業的に購入し、またはデキストランから調製し得る。いくつかの実施形態において、利用されるポリマーは、76の平均当量を有するポリアクリル酸例えば、CARBOPOL登録商標ポリマーである。ポリアクリル酸は、平均直径が約0.2~6.0ミクロンの一次ポリマー粒子から生成されることが多い。CARBOPOL登録商標ポリマーは、カルボン酸基のpKaより高いpH環境に曝露されたときに、これらの最初の容量の1000倍およびこれらの最初の直径の10倍まで水で膨張して、ゲルを形成する。カルボン酸基のpKaより高いpHで、カルボン酸基はイオン化し、これは負の電荷間の反発をもたらし、これによってポリマーの膨張を増加させる。免疫刺激性組成物は、1つ以上のTh2刺激物質例えば、BayR1005登録商標およびアルミニウムなどをさらに含むことができる。免疫刺激性組成物中での使用に適したTh2刺激物質の量は、使用されるTh2刺激物質の性質によって決まる。しかし、Th2刺激物質は、用量毎に約0.01mg~約10mgの量で使用されることが多い。いくつかの実施形態において、このような刺激物質は、用量毎に約0.05mg~約7.5mgの量、用量毎に約0.1mg~約5mgの量、用量毎に約0.5mg~約2.5mgの量、および用量毎に1mg~約2mgの量で使用される。具体例は、化学名N-2-デオキシ-2-L-ロイシルアミノ-β-D-グルコピラノシル-N-オクタデシルドデカンアミドアセテートを有する糖脂質であるBayR1005登録商標である。これは当技術分野において公知の手順によって合成することができる。これは空気の漏れない容器中で2~8摂氏温度にて貯蔵されることが多い。この化学的または物理学的性質は、僅かに吸湿性であり、多形を形成せず、50摂氏温度までの温度にて空気および光中で、ならびにpH2~12の水性溶媒中で周囲温度にて化学的に安定的である。これは水溶液中でミセルを形成する両親媒性分子である。抗原免疫刺激性組成物は、1種以上の抗原を含有することができる。抗原は、被験体において所望の免疫応答を生じさせることができる多種多様の物質のいずれかでよい。QuilA単独は殺ウイルス性であるが、QuilAは、らせん状ミセルを形成するときに、コレステロールを加えると解毒される。免疫刺激性組成物は、非殺ウイルス性、および非溶血性または非膜溶解性でよい。したがって、免疫刺激性組成物と共に使用される抗原は、ウイルス不活化、弱毒性、および修飾生、細菌、寄生虫、ヌクレオチド、ポリヌクレオチド、ペプチド、ポリペプチド、組換えタンパク質、合成ペプチド、タンパク質抽出物、細胞腫瘍細胞を含めた、組織、多糖類、炭水化物、脂肪酸、テイコ酸teichiocacid、ペプチドグリカン、脂質、または糖脂質個々に、または任意のこれらの組合せでの1つ以上でよい。抗原はまた、本明細書において言及した生物から単離することができるヌクレオチド、ポリヌクレオチド、ペプチド、ポリペプチドの免疫原性フラグメントを含むことができる。抗原は、いくつかの実施形態において、がん特異的分子タンパク質、ペプチド、脂質、核酸、炭水化物などである。被験体において疾患をもたらさない生、修飾生、および弱毒性ウイルス株は、非病原性形態で単離することができ、または当技術分野において公知の方法適切な細胞株における連続継代、または紫外線光もしくは化学的突然変異原への曝露を含めたを使用して弱毒化することができる。不活化または死滅ウイルス株は、ホルマリン、βプロピオラクトンbetapropriolactoneBPL、バイナリーエチレンイミンBEI、滅菌放射、熱などによる処理を含めて、当技術分野において公知の方法によって不活化されてきたものである。2種以上の抗原を組み合わせて、病原体によってもたらされる多種多様の疾患から被験体を保護することができる多価組成物を生成することができる。抗原は、いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている化合物を含む単一の組成物中で組み合わせることができる。特定の実施形態において、複数の抗原を含む組成物は、本明細書に記載されている化合物を含む別々のアジュバント組成物と併せて例えば、併行的または逐次的に投与される。免疫刺激性組成物は、抗原としての微生物例えば、不活化または弱毒性の細菌、ウイルスまたは微生物構成成分を含むことができる。選択することができる細菌の非限定的例には、Aceinetobactercalcoaceticus、Acetobacterpaseruianus、Actinobacilluspleuropneumoniae、Aeromonashydrophila、Alicyclobacillusacidocaldarius、Arhaeglobusfulgidus、Bacillusanthracis、Bacilluspumilus、Bacillusstearothermophillus、Bacillussubtilis、Bacillusthermocatenulatus、Bordetellabronchiseptica、Burkholderiacepacia、Burkholderiaglumae、Campylobactercoli、Campylobacterfetus、Campylobacterjejuni、Campylobacterhyointestinalis、Chlamydiapsittaci、Chlamydiatrachomatis、クラミドフィラ属、Chromobacteriumviscosum、Erysipelothrixrhusiopathieae、Listeriamonocytogenes、Ehrlichiacanis、Escherichiacoli、Haemophilusinfluenzae、Haemophilussomnus、Helicobactersuis、Lawsoniaintracellularis、Legionellapneumophilia、モラクセラ属Moraxellsasp.、Mycobactriumbovis、Mycoplasmahyopneumoniae、Mycoplasmamycoides亜種mycoidesLC、Clostridiumperfringens、Odoribacterdenticanis、PasteurellaMannheimiahaemolytica、Pasteurellamultocida、Photorhabdusluminescens、Porphyromonasgu/ae、Porphyromonasgingivalis、Porphyromonassalivosa、Propionibacteriumacnes、Proteusvulgaris、Pseudomonaswisconsinensis、Pseudomonasaeruginosa、PseudomonasfluorescensC9、PseudomonasfluorescensSIKW1、Pseudomonasfragi、Pseudomonasluteola、Pseudomonasoleovorans、シュードモナス属B11-1、Alcaligeseutrophus、Psychrobacterimmobilis、Rickettsiaprowazekii、Rickettsiarickettsia、Salmonellatyphimurium、Salmonellabongori、Salmonellaenterica、Salmonelladublin、Salmonellatyphimurium、Salmonellacholeraseuis、Salmonellanewport、Serratiamarcescens、Spirlinaplatensis、Staphlyoccocusaureus、Staphyloccoccusepidermidis、Staphylococcushyicus、Streptomycesalbus、Streptomycescinnamoneus、Streptococcussuis、Streptomycesexfoliates、Streptomycesscabies、Sulfolobusacidocaldarius、シネコシスティス属Syechocystissp.、Vibriocholerae、Borreliaburgdorferi、Treponemadenticola、Treponemaminutum、Treponemaphagedenis、Treponemarefringens、Treponemavincentii、TreponemapallidumTreponemapalladium、およびレプトスピラ属公知の病原体であるLeptospiracanicola、Leptospiragrippotyposa、Leptospirahardjo、Leptospiraborgpeterseniihardjo-bovis、Leptospiraborgpeterseniihardjo-prajitno、Leptospirainterrogans、Leptospiraicterohaemorrhagiae、Leptospirapomona、およびLeptospirabratislavaなど、ならびにこれらの組合せが含まれる。不活化ウイルス、弱毒性生ウイルス、および/またはウイルスの部分を、免疫刺激性組成物中で使用し得る。抗原産生のために使用することができるウイルスのいくつかの例には、これらに限定されないが、トリヘルペスウイルス、ウシヘルペスウイルス、イヌヘルペスウイルス、ウマヘルペスウイルス、ネコウイルス鼻気管炎ウイルス、マレック病ウイルス、ヒツジヘルペスウイルス、ブタヘルペスウイルス、仮性狂犬病ウイルス、トリパラミクソウイルス、ウシ呼吸器合胞体ウイルス、イヌジステンパーウイルス、イヌパラインフルエンザウイルス、イヌアデノウイルス、イヌパルボウイルス、ウシパラインフルエンザウイルス3、ヒツジパラインフルエンザ3、牛疫ウイルス、ボーダー病ウイルス、ウシウイルス性下痢ウイルスBVDV、BVDVI型、BVDVII型、ブタコレラウイルス、トリ白血病ウイルス、ウシ免疫不全ウイルス、ウシ白血病ウイルス、ウシ型結核、ウマ伝染性貧血ウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、ネコ白血病ウイルスFeLV、ニューカッスル病ウイルス、ヒツジ進行性肺炎ウイルス、ヒツジ肺腺癌ウイルス、イヌコロナウイルスCCV、向汎性CCV、イヌ呼吸器系コロナウイルス、ウシコロナウイルス、ネコカリシウイルス、ネコ腸コロナウイルス、ネコ伝染性腹膜炎ウイルス、ブタ流行性下痢ウイルス、ブタ血球凝集性脳脊髄炎ウイルスPorcinehemagglutinatingencephalomyletitisvirus、ブタパルボウイルス、ブタサーコウイルスPCVI型、PCVII型、ブタ繁殖呼吸障害症候群PRRSウイルス、伝染性胃腸炎ウイルス、シチメンチョウコロナウイルス、ウシ流行熱ウイルス、狂犬病、ロタウイルスRotovirus、水疱性口内炎ウイルス、レンチウイルス、トリインフルエンザ、ライノウイルス、ウマインフルエンザウイルス、ブタインフルエンザウイルス、イヌインフルエンザウイルス、ネコインフルエンザウイルス、ヒトインフルエンザウイルス、東部ウマ脳炎ウイルスEEE、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、西ナイルウイルス、西部ウマ脳炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、ヒトパピローマウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、肝炎Bウイルス、ライノウイルス、および麻疹ウイルス、ならびにこれらの組合せが含まれる。ペプチド抗原の非限定的例には、Bordetellabronchisepticap68、GnRH、IgEペプチド、Feld1、およびがん抗原、ならびにこれらの組合せが含まれる。他の抗原の例には、ヌクレオチド、炭水化物、脂質、糖脂質、ペプチド、脂肪酸、テイコ酸、およびペプチドグリカン、ならびにこれらの組合せが含まれる。免疫刺激性組成物による抗原の調製のために使用することができる寄生虫の非限定的例には、アナプラズマ属、肝蛭肝吸虫、コクシジウム、エイメリア属、ネオスポラカニナム、Toxoplasmagondii、ジアルジア属、ディロフィラリア属イヌ糸条虫、アンシロストーマ属鉤虫、トリパノソーマ属、リーシュマニア属、トリコモナス属、Cryptosporidiumparvum、バベシア属、シストソーマ属、テニア属、ストロンギロイデス属、アスカリス属、トリキネラ属、サルコシスティス属、ハモンディア、およびイソプソラ、ならびにこれらの組合せが含まれる。また意図されるのは、これらに限定されないが、マダニイクソデス属、コイタマダニ属、デルマセントル属、キララマダニ属、ウシマダニ属、イボマダニ属、およびチマダニ属、ならびにこれらの組合せを含めたを含めた外部寄生虫である。免疫応答を誘導するために使用される抗原の量は、使用される抗原、被験体、および所望の反応のレベルによってかなり変化することができ、当技術分野において公知のように決定することができる。修飾生ウイルスまたは弱毒性ウイルスを含有するワクチンについて、抗原の治療有効量は、約102組織培養感染量TCID50以上~約1010TCID50以下の範囲であることがある。多くのこのようなウイルスについて、治療有効用量は、約102TCID50以上~約108TCID50以下の範囲であることがある。いくつかの実施形態において、治療有効用量の範囲は、約103TCID50以上~約106TCID50以下である。特定の実施形態において、治療有効用量の範囲は、約104TCID50以上~約105TCID50以下である。不活化ウイルスを含有するワクチンについて、抗原の治療有効量は、用量毎に少なくとも約100相対単位であることがあり、用量毎に約1,000以上~約4,500相対単位以下の範囲であることが多い。いくつかの実施形態において、抗原の治療有効量は、用量毎に約250以上~約4,000相対単位以下、用量毎に約500以上~約3,000相対単位以下、用量毎に約750以上~約2,000相対単位以下、または用量毎に約1,000以上~約1,500相対単位以下の範囲である。不活化ウイルスを含有するワクチン中の抗原の治療有効量はまた、相対的作用強度RP/mLに関して測定することができる。治療有効量は、約0.1以上~約50RP/mL以下の範囲であることが多い。いくつかの実施形態において、抗原の治療有効量は、約0.5以上~約30RP/mL以下、約1以上~約25RP/mL以下、約2以上~約20RP/mL以下、約3以上~約15RP/mL以下、または約5以上~約10RP/mL以下の範囲である。ワクチン中で投与される特定の細菌性抗原についての細胞の数は、特定の実施形態において、約1×106以上~約5×1010コロニー形成単位CFU/用量以下の範囲である。いくつかの実施形態において、細胞の数は、約1×107以上~5×1010CFU/用量以下、または約1×108以上~5×1010CFU/用量以下の範囲である。様々な実施形態において、細胞の数は、約1×102以上~5×1010CFU/用量以下、または約1×104以上~5×109CFU/用量以下、または約1×105以上~5×109CFU/用量以下、または約1×106以上~5×109CFU/用量以下、または約1×106以上~5×108CFU/用量以下、または約1×107以上~5×109CFU/用量以下の範囲である。ワクチン中で投与される特定の寄生虫抗原についての細胞の数は、特定の実施形態において、用量毎に約1×102以上~約1×1010以下の範囲である。いくつかの実施形態において、細胞の数は、用量毎に約1×103以上~約1×109以下、または用量毎に約1×104以上~約1×108以下、または用量毎に約1×105以上~約1×107以下、または用量毎に約1×106以上~約1×108以下の範囲である。添加剤水性免疫刺激性組成物は、特定の利点を実現することができる。これらは容易に製剤および投与され、注射部位反応の誘発がより少なくまたはより重大でないことがある。しかし、抗原を有する水性免疫刺激性組成物は、注射部位から拡散する傾向があり、被験体の肝臓によって取り除かれ、望ましくない非特異的免疫応答を生じさせる。油は、アジュバントの構成成分として加えられるとき、一般に、長期の遅延放出プロファイルを実現する。利用することができる油は、代謝可能な油または代謝可能でない油である。油は、水中油型、油中水型、または水中油中水型エマルジョンの形態でよい。水中油型エマルジョンは、いくつかの実施形態において提供することができ、AMPHIGEN登録商標製剤からなってもよい。この製剤は、水性構成成分、レシチン、鉱油、および界面活性剤を含む。この製剤の構成成分を記載している特許は、米国特許第5,084,269号および米国特許第6,572,861号を含む。油性構成成分は、いくつかの実施形態において、1容量~50容量の量で、または10~45の量で、または20~40の量で存在することができる。適切な油は、アルカン、アルケン、アルキン、ならびにこれらの相当する酸およびアルコール、これらのエーテルおよびエステル、ならびにこれらの混合物を含むことができる。油の個々の化合物は、軽質炭化水素化合物であることが多く、すなわち、このような構成成分は、6~30個の炭素原子を有することが多い。油は、石油製品から合成的に調製または精製することができる。部分は、直鎖または分岐鎖構造を有し得る。部分は完全飽和であり、または1個以上の二重もしくは三重結合を有し得る。本発明において使用するためのいくつかの代謝可能でない油には、例えば、鉱油、パラフィン油、およびシクロパラフィンが含まれる。軽鉱油を、免疫刺激性組成物における使用のために選択することができる。利用される油の1タイプは、ペトロラタムの蒸留によって得られ、白色鉱油より僅かに低い比重を有する。代謝可能な油には、代謝可能な無毒性油が含まれる。このタイプの油は、免疫刺激性組成物が投与される被験体の体によって代謝されることができ、被験体に対して毒性ではない、任意の植物油、魚油、動物油または合成的に調製された油でよい。植物油のための源には、木の実、種および穀物が含まれる。免疫刺激性組成物の他の構成成分は、薬学的に許容される添加剤担体、溶剤、および賦形剤、等張剤、緩衝剤、安定剤、保存剤、血管収縮剤、抗菌剤、抗真菌剤などを含むことができる。担体、溶剤、および賦形剤の非限定的例には、水、食塩水、デキストロース、エタノール、グリセロール、油などが含まれる。等張剤の例には、塩化ナトリウム、デキストロース、マンニトール、ソルビトール、ラクトースなどが含まれる。有用な安定剤には、ゼラチン、アルブミンなどが含まれる。界面活性剤を使用して、エマルジョンの安定化を支援することができ、アジュバントおよび/または抗原のための担体として作用するように選択することができる。使用に適した界面活性剤には、いくつかの実施形態において、天然の生物学的に適合性の界面活性剤および非天然の合成界面活性剤が含まれる。生物学的に適合性の界面活性剤には、リン脂質化合物またはリン脂質の混合物が含まれる。リン脂質の一例は、ホスファチジルコリンレシチンダイズまたは卵レシチンなどである。レシチンは、粗植物油を水洗浄し、このように得られた水和したガムを分離および乾燥することによって、ホスファチドおよびトリグリセリドの混合物として得ることができる。精製した生成物は、アセトン洗浄によってトリグリセリドおよび植物油を除去した後に残ったアセトン不溶性リン脂質および糖脂質についての混合物を分画することによって得ることができる。代わりに、レシチンは、様々な商業的なソースから得ることができる。他の適切なリン脂質には、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、カルジオリピン、およびホスファチジルエタノールアミンが含まれる。リン脂質は、自然源から単離し、または通常のように合成し得る。使用することができる非天然の合成界面活性剤には、これらに限定されないが、ソルビタンをベースとする非イオン性界面活性剤、例えば、脂肪酸置換ソルビタン界面活性剤名称SPAN登録商標またはARLACEL登録商標で市販されている;ポリエトキシ化ソルビトールの脂肪酸エステルTWEEN登録商標;ヒマシ油などの源からの脂肪酸のポリエチレングリコールエステルEMULFOR登録商標;ポリエトキシ化脂肪酸例えば、名称SIMULSOLM-53登録商標で利用可能なステアリン酸;ポリエトキシ化イソオクチルフェノール/ホルムアルデヒドポリマーチロキサポール登録商標;ポリオキシエチレン脂肪アルコールエーテルBRIJ登録商標;ポリオキシエチレンノニルフェニルnonphenylエーテルTRITON登録商標N、ポリオキシエチレンイソオクチルフェニルエーテルTRITON登録商標Xが含まれる。いくつかの実施形態において、界面活性剤、または界面活性剤の組合せは、0.01容量~10容量、時には0.1容量~6.0容量、および時々0.2容量~5.0容量の量で、エマルジョン中に存在する。薬学的に許容される担体には、ありとあらゆる溶剤、分散媒、コーティング、安定化剤、賦形剤、保存剤、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤、吸着遅延剤などが含まれる。担体複数可は一般に、免疫刺激性組成物の他の構成成分と適合性であり、投与されたとき被験体に有害でない。担体は無菌および発熱物質なしであることが多く、使用される投与様式に基づいて選択され、利用される担体は、医薬品の開発および使用を監督する適当な政府機関によって承認され、または今後承認されることが多い。免疫刺激性組成物は、特定の実施形態において、医薬ビヒクル、添加剤、または媒体としての役割を果たす、適合性の薬学的に許容されるすなわち、無菌または無毒性の液体、半固体、または固体の賦形剤を含むことができる。賦形剤は、例えば、水、食塩水、デキストロース、エタノール、グリセロールなどを含むことができる。等張剤は、とりわけ、塩化ナトリウム、デキストロース、マンニトール、ソルビトール、およびラクトースを含むことができる。安定剤は、とりわけ、アルブミンを含むことができる。免疫刺激性組成物は、いくつかの実施形態において、例えば、ゲンタマイシン、メルチオラート、またはクロロクレゾールを含めた、抗生物質または保存剤を含むことができる。免疫刺激性組成物の調製本明細書に記載されている化合物は、免疫刺激性組成物の製造において使用することができる。各用量は、被験体の年齢および全身状態、投与経路、抗原の性質、ならびに他の要因によって変化することができる治療有効量の抗原複数可例えば、ワクチンを含有することができる。免疫刺激性組成物中の他の構成成分の量および濃度を調節して組成物の物理的および化学的性質を修飾してもよく、決定することができる。免疫刺激性組成物は、以下に記載するように、ホモジナイズまたは微小流体操作することができる。免疫刺激性組成物は、免疫刺激複合体ISCOMとして調製することができる。ISCOMは、サポニン、ステロール、およびリン脂質を組み合わせることによって調製することができる。例えば、ISCOMは、5重量~10重量のQuilA、1~5のコレステロールおよびリン脂質、ならびに残部はタンパク質を含有することができる。アジュバント製剤中のサポニンとステロールの比は、ほぼ1:100重量/重量w/w~5:1w/w程度であることがある。いくつかの実施形態において、過剰なステロールが存在し、サポニンとステロールの比は、少なくとも1:2w/w、または1:5w/wでよい。特定の実施形態において、サポニンは、ステロールに対して過剰であり、約5:1w/wのサポニンとステロールの比が使用される。ISCOMおよびISCOMATRIXは、市販されている例えば、IsconovaABSweden。いくつかの実施形態において、CARBOPOL登録商標は、1重量部のDDA毎に少なくとも0.1重量部のCARBOPOL登録商標の量でDDAと組み合わせて使用される。特定の実施形態において、1重量部のDDA毎に少なくとも0.5重量部のCARBOPOL登録商標を使用する。様々な実施形態において、1重量部のDDA毎に少なくとも1重量部のCARBOPOL登録商標を使用する。CARBOPOL登録商標およびDDAの組合せは複合体を形成することが多く、それによってDDA第三級アミン官能基は、ポリマー上のカルボン酸側基を免疫機能化する。この複合体によって、特異的免疫細胞が、抗原およびアジュバントを同時に標的とし、抗原およびアジュバントを一緒に最適な時間および濃度で前記細胞に同時送達することを可能にする。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている化合物は、特定の担体と共に製剤されず、免疫刺激性組成物の調製のための水性または他の薬学的に許容される緩衝液中で製剤されることがある。いくつかの実施形態において、免疫刺激性組成物は、適切なビヒクル例えば、さらなるリポソーム、ミクロスフィアまたはカプセル化された抗原粒子など中で提示される。抗原は、免疫刺激性組成物中に存在する場合、小胞膜中に含有され、または小胞膜の外に含有されてもよい。可溶性抗原は内側にあることが多く、疎水性または脂質付加された抗原は膜中に含有されていることが多い。免疫刺激性組成物は、投与経路、貯蔵の必要条件などによって様々な形態で作製することができる。例えば、これらは、注射用の使用に適した無菌水溶液剤もしくは分散剤の形態で作製することができ、または凍結乾燥、真空乾燥、もしくは噴霧乾燥技術を使用して凍結乾燥した形態で作製することができる。凍結乾燥した組成物は、安定化溶液、例えば、食塩水またはHEPES中で、使用する前に再構成することができる。したがって、免疫刺激性組成物は、固体、半固体、または液体剤形として使用することができる。リン酸緩衝生理食塩水PBSを水性緩衝媒体として使用してもよく、緩衝液のpHは、中性または僅かにアルカリ性または僅かに酸性でよい。したがって、pHは6~8のpH範囲でよく、約7.0~約7.3のpHを特定の実施形態において使用することができる。塩基例えば、NaOHまたは塩基例えば、HClを必要に応じて使用して、pHを調節することができる。典型的な濃度には、例えば、1N~10NのHClおよび1N~10NのNaOHが含まれる。緩衝液の強度は、いくつかの実施形態において、10~50mMのPO4および10~150mMのPO4でよい。特定の実施形態において、組成物は、粒子、例えば、約10ナノメートル~約1000ナノメートルのナノ粒子を形成し、組成物は、約100ナノメートル~約400ナノメートルの平均、平均的または公称サイズを有する粒子を形成することがある。免疫刺激性組成物は、いくつかの実施形態において、ホモジナイズまたは微小流体操作することができる。免疫刺激性組成物は、特定の実施形態において、1つまたは複数のホモジナイザーを1回または複数回通過させることなどにより一次ブレンド工程に供してもよい。任意の市販のホモジナイザー例えば、Ross乳化装置Hauppauge、N.Y.、GaulinホモジナイザーEverett、Mass.、またはマイクロフルイディクスNewton、Mass.を、この目的のために使用することができる。いくつかの実施形態において、免疫刺激性組成物を10,000rpmで3分間ホモジナイズする。MicrofluidicsNewton、Mass.から入手可能なモデル番号11OY;Gaulinモデル30CDGaulin,Inc.、Everett、Mass.;およびRainnieMinilabタイプ8.30HMiroAtomizerFoodandDairy,Inc.、Hudson、Wis.などの市販のマイクロフルイダイザーを使用することによって、微小流体操作を達成することができる。これらのマイクロフルイダイザーは、2つの流体の流れが相互作用チャンバーにおいて高速度で相互作用し、サブミクロンサイズの液滴を有する組成物を形成するように、高圧下で小さな開口部を通して流体を押し出すことによって作動する。特定の実施形態において、200ミクロンの限界寸法のチャンバーを10,000/-500psiで通過させることによって、製剤を微小流体操作する。免疫刺激性組成物の投与免疫刺激性組成物の用量サイズは、被験体および抗原によって、約1mL以上~約5mL以下の範囲でよい。例えば、イヌまたはネコについて、約1mLの用量が典型的には使用され、一方、ウシにおいて、約2~5mLの用量が典型的には使用される。しかし、免疫刺激性組成物は、マイクロドーズで製剤することができ、約100マイクロリットルの用量を使用することができる。免疫刺激性組成物のための非限定的投与経路には、非経口、経口、口腔鼻腔、鼻腔内、気管内、局部的、注射および皮内が含まれる。シリンジ、ドロッパー、針なし注射器具、パッチ、ポンプ、粒子例えば、金微粒子、電気伝達、電気穿孔法などを含めた任意の適切な器具を使用して、組成物を投与し得る。使用のために選択される経路および器具は、当技術分野において公知のように、アジュバントの組成、抗原、および被験体によって決まる。いくつかの実施形態において、免疫刺激性組成物は、膀胱内滴下注入によって投与される。免疫刺激性組成物を被験体に投与した後に、免疫応答をモニターすることができる。免疫応答を査定するための方法は当技術分野において公知であり、例えば、特異的または非特異的抗体価をアッセイすること、および血清サイトカインレベルを測定することなどの本明細書において提供する方法を含む。いくつかの実施形態において、免疫刺激性組成物を送達した後に、抗原特異的免疫応答例えば、抗原特異的抗体、抗原特異的細胞毒性T細胞CTLを査定する。いくつかの実施形態において、IgG1および/またはIgG2例えば、IgG2a抗体応答が誘発される。免疫刺激性組成物を送達した後で、免疫応答を査定することができる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている組成物は、被験体に投与されたときに、副作用例えば、脾腫大を殆ど誘発しないか全く誘発しない。下記に記載する実施例は特定の実施形態を例示し、技術を限定しない。実施例14-6-アミノ-2-2-メトキシエトキシ-8-オキソ-7H-プリン-98H-イルメチル安息香酸化合物7の合成この実施例は、化合物AおよびSC12を調製することができる方法を詳述し、下記の方法およびデータが含まれる。-4-6-アミノ-2-2-メトキシエトキシ-8-オキソ-7H-プリン-98H-イルメチル安息香酸化合物7の調製方法、および1,2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミンDOPEとのそのコンジュゲート-化合物7の調製のための条件、およびマルチグラムスケールでの調製のスケールアップ-化合物Aを得るための、化合物7と1,2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミンDOPEとのコンジュゲートの方法-マルチグラムスケールで化合物Aを調製する方法-中間体およびコンジュゲート化合物のための分析方法-化合物Aの安定性研究-7と1,2-ジラウロイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミンDLPEとのコンジュゲート誘導体である、SC12としても公知である化合物8の調製方法-SC12の安定性研究。下記のスキームは、化合物AおよびSC12を調製するために使用し得る方法の例を提示する。他の合成法を化合物AおよびSC12を調製するために使用してもよく、これらの他の合成法の例を、図20~23に提供する。スキーム1A.4-6-アミノ-2-2-メトキシエトキシ-8-オキソ-7H-プリン-98H-イルメチル安息香酸7の調製化合物22,6-ジクロロプリン100g、0.53molを、機械式撹拌機、油浴、温度計、滴下漏斗、還流凝縮器および窒素注入口を備えた四つ口丸底フラスコ3Lに充填する。N,N-ジメチルアセトアミド1L、続いて固体ブロモメチル-ベンゾニトリル114.6g、0.58mol、1.1当量および炭酸カリウム109.7g、0.79mol、1.5当量を加える。混合物を激しく撹拌し、85~90°Cで3時間加熱し、次いでこれを室温に冷却し、水2Lと共に加える。大量の黄色の固体が直ちに形成される。混合物を30分間撹拌し、次いでこれをブフナー漏斗中で濾過し、水2×200mLおよび酢酸エチルで洗浄し、恒量が観察されるまで65°Cにて真空中で乾燥させる約5時間。中間体2バッチCH730/2/1を、下記の試料の量および純度で淡黄色の固体として得る。160g;99Y;90.2HPLC純度。NMRおよびMS分析は、構造と一致する。600gの2,6-ジクロロプリンから出発して、反応をスケールアップし、繰り返す。下記の試料の量および純度で中間体2バッチCH730/3/1を得る。950g;98.3Y;92HPLC純度。化合物3中間体2100g、0.33molを、機械式撹拌機、油浴、温度計、滴下漏斗、還流凝縮器および窒素注入口を備えた四つ口丸底フラスコ3Lに充填する。乾燥ジメチルホルムアミド700mL、続いてメタノール中のアンモニア溶液7N100mL、0.66mol、2当量を加える。混合物を室温で激しく撹拌する。2時間後、茶色の溶液を得て、次いで大量の固体が沈殿する。混合物を12時間さらに撹拌し、次いで固体をブフナー漏斗上で濾過し、酢酸エチル200mLで洗浄する。生成物を、恒量が観察されるまで65°Cにて真空中で乾燥させる約6時間。中間体3バッチCH730/3/2を、下記の試料の量および純度で白っぽい固体として得る。66g;71Y;92.9HPLC純度。NMRおよびMS分析は、構造と一致する。900gの中間体2で反応をスケールアップし、繰り返す。中間体3バッチCH730/6/2を、下記の試料の量および純度で得る。680g;77Y;91HPLC純度。化合物4機械式撹拌機、油浴、温度計、滴下漏斗、還流凝縮器および窒素注入口を備えた四つ口丸底フラスコ1Lに、2-メトキシエタノール500mLを充填する。ナトリウム6g、0.26mol、1.5当量を、室温でアルゴン雰囲気下にて少量ずつ加える。中間体350g、0.175molを一度に加える。反応混合物を撹拌し、100°Cに6時間加熱し、次いでこれを室温に冷却する。水1Lを加え、混合物を室温で30分間撹拌する。固体をブフナー漏斗上で濾過し、水200mLで洗浄し、恒量まで真空中で65°Cにて乾燥させる約8時間。中間体4バッチCH730/2/3を、下記の試料の量および純度で白っぽい固体として得る。40g;70Y;95HPLC純度。NMRおよびMS分析は、構造と一致する。反応をスケールアップし、550gの化合物3で繰り返す。中間体4バッチCH730/6/3を、下記の試料の量および純度で得る。532g;78Y、94HPLC純度。化合物5中間体4100g、0.3molを、機械式撹拌機、油浴、温度計、滴下漏斗、還流凝縮器および窒素注入口を備えた四つ口丸底フラスコ2Lに充填する。ジクロロメタン1.5Lを加え、混合物を室温で激しく撹拌する。臭素19mL、0.37mol、1.2当量を、室温にて滴下で添加する。8時間撹拌した後、固体を濾過し、ジクロロメタン300mLで洗浄し、粗化合物5を黄色の固体として得る。これをアセトン500mLで結晶化し、中間体5を下記の試料の量および純度で淡黄色の固体として得る。バッチCH730/3/4;109g;88Y。82HPLC純度。反応を、150gの化合物4で繰り返す。中間体5バッチCH730/4/4を下記の試料の量および純度で得る。170g;92Y;81HPLC純度。第3の調製を行う。中間体5バッチCH730/11/4を下記の試料の量および純度で得る。80g;91HPLC純度。化合物7機械式撹拌機、油浴、温度計、滴下漏斗、還流凝縮器および窒素注入口を備えた四つ口丸底フラスコ3Lに、メタノール700mLを充填する。ナトリウム11.9g、0.52mol、3当量を、少量ずつ加える。中間体570g、0.17molを、溶液に一度に加える。透明な溶液が得られる約6時間まで、懸濁液を還流させながら激しく撹拌する。混合物を室温に冷却し、次いで水500mL、続いて水酸化ナトリウム34g、0.85molを加える。混合物を8時間再び加熱還流させ、次いで室温に冷却する。濃塩酸を加える120mL。白色の固体が反応混合物から沈殿する。1時間撹拌した後、固体をブフナー漏斗上で濾過する。真空中で65°Cにて乾燥させた後約8時間、粗化合物650gを得る。これをアセトニトリル500mLに懸濁させ、ヨウ化ナトリウムAldrich、34g、0.23molと共に加える。クロロトリメチルシランAldrich、29mL、0.23molを滴下で添加した後、混合物を激しく撹拌し、50°Cに3時間加熱する。室温に冷却した後に、炭酸水素ナトリウムの飽和溶液を加え、反応混合物中でpH6を得る。沈殿した固体をブフナー漏斗上で濾過し、最初に水100mLで、次いでメタノール50mLで洗浄する。粗化合物7バッチCH730/18/6bを、下記の試料の量および純度で淡黄色の固体として得る。40g、HPLC純度89これを氷酢酸で2回結晶化させる各回600mL。真空中で65°Cにて8時間乾燥させた後、化合物7バッチCH730/18/6cを、下記の試料の量および純度で得る。34g;5から55Y;93.6HPLC純度。反応を、70gの中間体5で繰り返す。化合物7バッチCH730/16/6bを、下記の試料の量および純度で得る。38g;61Y;92HPLC純度。反応を、30gの化合物5で再び繰り返す。化合物7バッチCH730/21/6dを、下記の試料の量および純度で得る。18g;62Y;92.2HPLC純度。酸7は、通常の溶媒メタノール、エタノール、ジクロロメタン、酢酸エチル、アセトニトリル、アセトン、クロロホルムの大部分において可溶性でない。酸7を結晶化することを目的に多くの試みがなされる。ジメチルホルムアミド、ジメチルホルムアミド/水、DMSO/水、メタノール、アセトンを試験するが、全ての場合において、結晶化後の生成物は、結晶化前と同じ純度を有する。氷酢酸は、7の純度を増強するのに有効であり得る。最初の結晶化後に純度は増加するが、処理を繰り返すときに変化しない。目標値98HPLCは達成されなかった。化合物Aの調製良好な収率および純度で化合物Aを調製することを目的に多くの試みがなされる。最初に、酸7とDOPEとの直接のカップリングを試みる方法Aおよび方法B。次いで、酸7を、DOPEとのカップリングの前に活性化させる方法Cおよび方法D。方法Aおよび方法Dの両方によって合理的な結果が得られる一方、反応混合物の後処理の間および精製相の間、困難が生じ得る。方法A:酸72.6g、7.2mmolを、アルゴン雰囲気下にて乾燥ジメチルホルムアミド10mLに懸濁させる。HATUO-7-アザベンゾトリアゾール-1-イル-N,N,N,N-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート;2.94g、7.6mmol、1.05当量を一度に、続いてトリエチルアミン2mL、14.4mmol、2当量を加える。混合物を室温で15分間撹拌し、次いでDOPE1,2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン、5.37g、7.2mmol、1当量の乾燥ジクロロメタン150mL溶液を滴下で添加する。このように得られた溶液を、試薬が完全に変換するまで12時間撹拌する。HPLC分析は、化合物Aが粗反応混合物において約85であることを示す。ジクロロメタンを減圧下で蒸発させ、残渣を水150mLに滴下で添加する。固体が反応混合物から分離する。生成物は結晶性ではなく、フィルターがブロックされるため、真空下での濾過の試みは失敗し得る。この時点でジクロロメタン150mLを加え、相を分離させる。ミルク状懸濁液が形成され、2相の分離は可能でない。濾過および抽出手順が失敗した場合、溶媒を真空下で蒸留によって完全に除去し、残渣を、ジクロロメタン/メタノール/酢酸8/2/0.1で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによって精製する。化合物Aを、一例のHPLC純度94.60.5gで、白色のアモルファス固体として得る。15gの酸7から出発して反応を繰り返す。反応の結果は、前の操作と同様である。粗製物をクロマトグラフィーによって精製するが、標的生成物は低い収率で得られる7.2g;16Y。精製のために使用したシリカゲルをメタノール/酢酸7/3で洗浄するとき、残留生成物を回収する。その精製を、クロマトグラフィーによって再び試みる。クロマトグラフィーによる精製は、1~2グラムのスケールで有効である。カラムに充填した化合物Aの量を増加させ、多量の生成物をシリカゲルによって保持するが、回収率は低い。メタノールおよび酢酸の量を増加させなくてならず、この時点で生成物を、その不純物と一緒に定量的に回収する。結晶化技術をまた試みて、化合物Aを精製する。ジエチルエーテル、ヘキサン、アセトン、アセトン/水および他の溶媒を試験する。メタノールはいくつかの不純物を低下させるのに有効であるが、メタノール中での長時間加熱の後で、新しい不純物が検出される20まで。この時点で、反応条件を研究し、反応粗製物中の不純物を最小化する。温度を低下させることは、より良好なプロファイルをもたらし、化合物Aは、反応混合物中にて88HPLC純度で得られる。方法B:酸7とDOPEとの反応を、ジシクロヘキシルカルボジイミドDCCおよび1-エチル-3-3-ジメチルアミノプロピルカルボジイミドEDCIをカップリング剤として使用して試みる。どちらの場合でも、反応は起こらず、出発物質は未変化で回収される。方法C:酸7の活性化は、溶媒としてジクロロメタン中の1-ヒドロキシピロリジンで試みる。ジクロロメタン中での7の不溶性によって、反応は失敗する。方法D:酸710g、0.028molを、室温およびアルゴン雰囲気下にて、アセトニトリル60mLおよびジメチルスルホキシドDMSO60mLの混合物に溶解する。カルボニルジイミダゾール4.55g、0.028mol、1当量を加え、このように得られた溶液を1時間撹拌する。DOPE日油株式会社、>99;20.8g、0.028mol、1当量の乾燥ジクロロメタン溶液を、滴下で添加する。反応混合物を、試薬が完全に変換するまで16時間撹拌する。アセトニトリルを蒸留によって真空中で除去する。水200mLを残渣に加える。白色の固体が分離するが、濾過は可能でない。混合物を30分間遠心分離する。溶媒を廃棄し、化合物AバッチCH730/16/8を固体25gとして得る。これをシリカゲルに急速に通過させ、ジクロロメタン/イソプロパノール/酢酸7/2/1CH730/16/8c、下記の試料の量および純度:21g;89.6HPLC純度で溶出させ、次いで室温にて30分間メタノールで処理し、ブフナー漏斗上で濾過する。化合物Aを、固体として得る19g、HPLC純度94.5。20gの酸7で反応を繰り返し、同様の結果を得る。方法AおよびDを比較し、粗化合物Aの収率および純度に関する限りは同様の結果が得られるが、不純物プロファイルは異なる。マルチグラムスケールで方法Aによって得た試料の精製は実現可能でないことが決定される。酸7とDOPEとの間のカップリング反応を数回繰り返すが、純度>90の化合物Aの単離は容易に達成されない。合成工程図20は、式Aまたは式Bの構造を有する特定の化合物を製造するために利用することができる他の合成工程の実施形態の例を示す。図20は、化合物AおよびSC12を製造するための合成工程を特に示す。これらの工程の実施形態は、縮合環部分8-ヒドロキシルに結合しているヒドロキシル部分が、-O-C1~C6アルキル部分であることを除いて、式Aまたは式Bの構造を有する中間体を含む。次いで、この-O-C1~C6アルキル部分を、式Aまたは式Bに示すヒドロキシル部分に変換する。-O-C1~C6アルキル部分は、図20の中間体9において特に示すように-OCH3部分すなわち、-OMe部分であることがある。-O-C1~C6アルキル部分は、TMSCl/NaI加水分解手順例えば、Carey、AdvancedOrganicChemistryIVEd.-PartB:ReactionandSynthesis、163頁および/またはメチルエノールエーテル加水分解例えば、BioorganicMedicinalChemistry、12巻2004年1091~1099頁などの当技術分野において公知の工程によって、ヒドロキシル部分に変換することができる。図21および22は、式Aまたは式Bの構造を有する特定の化合物を製造するために利用することができる合成工程の実施形態のさらなる例を示す。図21および図22は、化合物AおよびSC12を製造するための合成工程を特に示す。これらの工程の実施形態は、スキーム1の中間体7における第一級アミン部分が、構造-NH-protを有する第二級アミンであるprot部分は、保護基である例えば、図21における中間体13および図22における中間体17ことを除いて、上記に示したスキーム1における中間体7の構造を有する中間体を含む。これらの工程の実施形態はまた、式Aまたは式Bにおける第一級アミン部分が、構造-NH-protを有する第二級アミンである例えば、図21における中間体14および図22における中間体18ことを除いて、式Aまたは式Bの構造を有する中間体を含む。当技術分野において公知の任意の適切な保護基を利用することができ、保護基は、例示として図21に示すようなtert-ブトキシカルボニルBoc保護基例えば、図21における中間体13および14、または例示として図22に示すようなベンジル保護基例えば、図22における中間体17および18であることがある。特定の保護基は、RdおよびReが飽和アルキル部分例えば、Bocおよびベンジルである化合物を生成するのに適しており、特定の保護基は、RdおよびReが1つ以上の不飽和を含むアルキル部分例えば、Bocである化合物を生成するのに適している。図23は、式Aまたは式Bの構造を有する特定の化合物を製造するために利用することができる他の合成工程の実施形態の例を示す。図23は、SC12を製造するための合成工程を特に示す。この工程の実施形態は、中間体7における第一級アミン部分が、構造-NH-protを有する第二級アミンであるprot部分は、保護基である例えば、図23における中間体17ことを除いて、上記に示したスキーム1における中間体7の構造を有する中間体を含む。この工程の実施形態はまた、式Aまたは式Bにおける第一級アミン部分が、構造-NH-protを有する第二級アミンである例えば、図23における中間体18ことを除いて、式Aまたは式Bの構造を有する中間体を含む。この工程の実施形態は、中間体6における第一級アミン部分が、構造-NH-protを有する第二級アミンである例えば、図23における中間体21ことを除いて、上記に示したスキーム1における中間体6の構造を有する中間体をさらに含む。当技術分野において公知の任意の適切な保護基を利用することができ、保護基は例示として図23に示すようなベンジル保護基であることがある。図20~23において、合成スキームにおける様々な化合物についての番号の指定は、他の図において使用される数、またはこの実施例1において使用される数と対応しなくてもよい。HPLCのための試料の調製:中間体番号5:10mlのクラスAメスフラスコ中で、約10mgの正確に秤量した試料を、数滴のジメチルスルホキシドと共にメタノールに溶解した最終濃度、約1mg/ml。中間体番号7:10mlのクラスAメスフラスコ中で、約5mgの正確に秤量した試料を、数滴のジメチルスルホキシドと共にメタノールに溶解した最終濃度、約0.5mg/ml。化合物A下記で示した一番上の化合物の断片化X線回折XRD化合物Aの試料がアモルファスであったことが決定された。乾重量および化学組成CHN実験値は、化合物Aの構造と一致した。旋光度試料調製:20mgの化合物Aをクロロホルムに溶解し、分析した。[α]D=-37.08分析の偏差:43。偏差の高い値は溶液の乳白光を発する挙動によるものである可能性があると決定された。5mgの化合物Aをクロロホルムに溶解して分析を繰り返した。[α]D=-8.7であることが見出された分析の偏差:16。溶解性ヨーロッパ薬局方6.0に報告されている方法を使用した。化合物Aは、水に可溶性でなかった。化合物Aは、アセトニトリルに可溶性でなかった。化合物Aは、クロロホルム100mg/mLに可溶性であった。化合物Aは、DMSOに可溶性であった。DMSOへの化合物Aの溶解性は、生成物の3つの異なるバッチを使用して決定した。-CH730/16/8cHPLC純度59-CH730/16/8gHPLC純度71.5-CH730/23/8eHPLC純度95.6バッチCH730/16/8gを、ヨーロッパ薬局方に記載されている方法によって試験した。DMSOを0.1mLずつ103.7mgの生成物に加え、各々の添加の後に、懸濁液をVortex機器で3分間振盪した。DMSO中の化合物AバッチCh730/16/8gの溶解性は、259mg/mLであることが見出された。次いで、バッチCH730/16/8c、CH730/16/8gおよびCH730/23/8eを、各懸濁液をより長時間撹拌しながら試験した。30分間撹拌した後、100mgの各バッチは、0.2mLのDMSOに完全に溶解した。この方法によると、DMSO中の化合物Aの溶解性は、500mg/mLであった。化合物Aの安定性化合物Aのいくつかの試料をHPLCによって再試験し、それらの純度が数日で減少したことが見出された。結果を下記の表Aに報告する。表A分解を起こした試料は、結晶化容器中で室温にて自然光下で貯蔵した。RRT1.1およびRRT1.2において2つの主要な不純物はいつも存在した。結果として、化合物Aは、室温および/または光の存在下で安定的な化合物でなかったことが決定された。この時点で、安定性研究をバッチCH730/16/8gで行った。下記の貯蔵条件を試験した。-室温約25°Cおよび光の存在下での固体-外部温度28~35°C、太陽光下での固体-4°Cでの固体-室温および光の存在下でのクロロホルム中の溶液-4°Cでのクロロホルム中の溶液-外部温度28~35°C、太陽光下でのクロロホルム中の溶液得られた結果は、以下の表Bに報告する。表B:CH730/16/8Gの安定性数日後に、固体試料は殆ど完全に分解した。化合物Aは、溶液中でより安定的のようであった。化合物AバッチCH730/16/8gの試料は、t=0で低い純度を有したため、安定性研究を新たに調製した試料バッチCH730/23/8eで繰り返した。得られた結果を、以下の表Cに報告する。表C:CH730/23/8Eの安定性化合物AはT>25°Cおよび光の存在下で急速な分解を起こすことが、HPLC分析によって確認された。化合物は溶液中でより安定的であったことが示された。化合物Aのストレスをかけた試料についてのHPLC-MS分析6日間外部温度28~35°C;HPLC純度35.4;報告番号0112にて太陽光下で貯蔵した化合物AバッチCH730/16/8gの試料を、HPLC-MSによって分析し、新たに調製したバッチCH730/23/8eと比較した。この研究の目的は、安定性研究の間にHPLCによって検出した不純物が、分析の人為産物ではなく、不純物が熱および光の作用によって本当に形成されたことを示すことであった。試料調製溶液a:2mg/mlの濃度を有するために、試料をジメチルスルホキシド-イソプロパノール20:80に溶解した。溶液b:溶液aを、メタノール:イソプロパノール:水50:20:300.1ギ酸で1:5に希釈した。実施例2SC12の合成以下で記載するのは、2-4-6-アミノ-2-2-メトキシエトキシ-8-オキソ-7H-プリン-98H-イルメチルベンズアミドエチル2,3-ビスオレオイルオキシプロピルホスフェートの調製である。化合物AバッチCH730/16/8gで行ったHPLC-MS分析は、化合物の分解によって形成された主要な不純物が、酸化誘導体であったことを示した。酸7化合物7を1,2-ジラウロイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミンDLPEとコンジュゲートさせ、その安定性を研究した。生成物は、化合物8およびSC12と称される。化合物SC8およびSC18は、化合物7を、DLPEとコンジュゲートする代わりに、各々、1,2-ジオクタノイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミンまたは1,2-ジステアロイルdistrearoyl-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミンとコンジュゲートすることを除いて同様に合成した。A.SC12化合物8の調製SC12を調製する方法のこの例において、酸7化合物7バッチCH730/18/6d;1g、0.0028molを、アセトニトリル6mLおよびDMSO6mLの混合物に室温およびアルゴン雰囲気下にて溶解する。カルボニルジイミダゾール455mg、0.0028mol、1当量を加え、このように得られた溶液を1時間撹拌する。DLPE>99;1.78g、0.0028mol、1当量の乾燥ジクロロメタン溶液を、滴下で添加する。試薬が完全に変換するまで、反応混合物を16時間撹拌する。アセトニトリルを真空中で蒸留によって除去する。水200mLを残渣に加える。白色の固体が分離する。固体をブフナー漏斗上で濾過し、メタノール5mLで洗浄する。真空中で35°Cにて乾燥させた後、白色の固体としてSC12を得る。1.8g、Y65、HPLC純度90.3、HPLC報告番号0121。B.SC12の分析的特性決定SC12の構造を、1H-NMR、13C-NMRおよびMSによって確認した。C.SC12の安定性安定性研究をSC12で行い、下記の条件を試験した。-室温約25°Cおよび光の存在下でクロロホルム中の溶液-室温および光の存在下での固体-外部温度28~35°C、太陽光下での固体試料を、t=0においておよび20日後に分析した。結果を下記の表1において報告し、これらのRRTと共に形成された主要な不純物を一覧表示する。表1得られたデータは、SC12が化合物Aより安定的であったことを示す。さらに、表2は、熱に関して化合物AおよびSC12の安定性の間の比較を示す。各化合物の固体試料を80°Cで維持し、HPLCによって分析した。表2実施例3化合物の作用強度PBMCモデルおよびマウスマクロファージ細胞株Raw264.7におけるTLR7アゴニスト活性を有する5つの試料の作用強度は、炎症促進性サイトカインであるIL-6およびTNF-αの用量依存的な刺激を測定することによって決定した。方法および実験配置研究は、下記に概要を述べるように2つのモデルにおいて配置した。-モデル1:5つのTLR7アゴニストを、マウスマクロファージ細胞株モデルRaw264.7において試験した。エンドポイントは、IL-6およびTNF-αの測定であった。-モデル2:5つのTLR7アゴニストを、PBMCモデルにおける作用強度について試験した。エンドポイントは、分泌されたIL-6およびTNF-αの測定であった。モデル15つのTLRアゴニストの作用強度を、Raw264.7細胞株において、陽性対照イミキモドと比較して査定した。EC50値を、IL-6およびTNF-α分泌について対照および各薬物候補について決定した。方法:Raw264.7細胞を、RPMI培地および10FCSを使用してサプライヤーからの条件によって増殖させた。細胞を96ウェルプレートに蒔き、7つの用量でTLR7アゴニストによって24時間処理した。条件培地をELISA分析のために24時間後に除去した。サプライヤーからのガイドラインによるXTTアッセイを使用して、細胞を生存率について続いてアッセイした。実験配置:1.未処理細胞2.イミキモド3.TLR7アゴニスト14.TLR7アゴニスト25.TLR7アゴニスト36.TLR7アゴニスト47.TLR7アゴニスト5化合物を、7つの用量0.003、0.01、03、0.1、0.5、2.0、10.0マイクロモルで試験した。各試験シリーズについて4連ウェルにおいて実験を行い、上清をプールし、ELISAによって3連で測定した。モデル25つのTLRアゴニストの作用強度を、IL-6およびTNF-α分泌を刺激する能力に基づいて査定し、作用強度をPBMCモデルにおいて陽性対照イミキモドと比較した。IL-6およびTNF-α分泌についてのEC50値を、対照および各薬物候補について決定した。方法:PBMCを3人のドナーから精製し、96ウェルプレート中、ヒト2加熱不活化AB血清、グルタミン、Pen-strepおよびβ-メルカプトエタノールを含むRPMI培地において2×105個の細胞/ウェルで蒔いた。細胞を、7つの用量でTLR7アゴニストによって24時間処理した。条件培地を、IL-6およびTNF-αについてのELISA分析のために除去し、細胞生存をサプライヤーからのプロトコルに従ってXTT法によって決定した。実験配置:1.未処理細胞2.イミキモド3.TLR7アゴニスト14.TLR7アゴニスト25.TLR7アゴニスト36.TLR7アゴニスト47.TLR7アゴニスト57つの用量0.003、0.01、03、0.1、0.5、2.0、10.0マイクロモルで化合物を試験した。データ処理:IL-6およびTNF-αの濃度を、MicrosoftExcelソフトウェアを使用してRDSystemsからのELISAによって決定した。結果を、用量反応曲線を調製するために、およびEC50値の決定のために、GraphPadPrismで分析した。統計分析:ドナーの数によって、個々のEC50値の間の統計的評価は関連性のあるものでなかった。結果および考察:モデル1において、IL-6およびTNF-α分泌は、全ての化合物によって用量依存的に誘発されたが、DMSO自体によって誘発されなかった図1~2。化合物は、異なるレベルの最大サイトカインレベルに達し、また異なるEC50値を示した。作用強度の順序は、最も強力なものが最初で下記の通りである。化合物A<SC12<SC18<SC8=遊離ファルマコフォア<イミキモド表3。遊離ファルマコフォア遊離phは、構造を有する。XTTアッセイ図3、Y軸=相対的生存、x軸=処理のための濃度は、細胞が、より高い濃度の化合物によって僅かに影響されたことを示し、これはいくつかの化合物については、最も高い濃度におけるサイトカイン産生の減少に反映された特に、化合物A、SC12およびSC18について;図1および2。最も高い濃度によって誘発されたサイトカインレベルに基づいて、用量反応曲線の最大プラトーが決定されたため、最も高い濃度の化合物を考慮しなかった場合、このプラトーは僅かに増加した可能性がある。しかし、ダイナミックレンジにおける用量は、これによって影響されず、これはEC50値が最小限に影響されることを意味する。表3、各化合物の試験した7つの用量に基づいてRaw264.7細胞株において決定されたEC50値モデル1について結論として、化合物Aは、最も強力なTLR7アゴニストであり、続いてSC12、SC18、遊離ファルマコフォアと共にSC8、最後にイミキモドであった。この点において、このモデルにおいて5つの化合物全てはイミキモドより強力であった。モデル2について、PBMCは、健康な匿名の成人ヒトドナーからのバフィーコートに由来した。3人のドナーにおいて、両方のIL-6およびTNF-α分泌は、大部分の化合物によって用量依存的に誘発された。イミキモド、SC8および遊離ファルマコフォアなどのいくつかの化合物は、あるドナーにおいてサイトカインを誘発する弱い能力を示し、そこでは最も高い用量のみがサイトカイン産生を誘発した。化合物Aは、3人のドナー全てにおいて、IL-6分泌について最も強力な化合物であった。ドナー2において、SC12は化合物Aと同じぐらい強力であり、一方、ドナー1および3において、SC12は2番目に強力な化合物であった表4。平均して、化合物は、下記のような作用強度の順序を示した。化合物A<SC12<遊離ファルマコフォア<イミキモド<SC18<SC8。SC8は、確固とした用量反応曲線を可能としないサイトカインのレベルを示した。3人のドナーからの結果に基づいて、TNF-α分泌について、SC12は、化合物Aより平均して僅かに強力であった表4。作用強度の順序は下記の通りである。SC12<化合物A<遊離ファルマコフォア<SC18<SC8<イミキモド図7~9。しかし、イミキモドおよびSC8についてのデータは不明確であり、3人のドナー全てにおいて、弱いTNF-α分泌のみを誘発した。生存アッセイは、研究に亘って試験した全ての濃度で全体的に良好な細胞の生存を示し、明らかな細胞毒性は観察されなかった。SC12で処置された1人のドナー2番は、生存反応の増加を有した図10が、サイトカイン反応の違いを反映しなかった図5および8。表4、6つのTLR7アゴニストについて3人のドナーからのPBMCにおいて決定したEC50値平均作用強度を示すモデル2について結論として、化合物AおよびSC12は、最も強力なTLR7アゴニストであった。化合物Aは、IL-6の最も強力な刺激物質であり、SC12は、TNF-α分泌について化合物Aより僅かに強力であった。他の化合物は、異なるドナーにおけるPBMCからIL-6およびTNF-αを誘発する異なる能力を示したが、これらの作用強度は一般に、順序付けることができない。イミキモドおよびSC8は、試験した最も高い濃度におけるサイトカイン誘発、および低いレベルの分泌されたサイトカインを示した。したがって、EC50値は、イミキモドおよびSC8について決定することができない。SC18および遊離ファルマコフォアは、IL-6およびTNF-α分泌の両方について同様の反応を示し、イミキモドおよびSC8についてよりも高いレベルに達したが、Raw264.7モデルについてよりも高い値を有した。Raw264.7細胞株は試験した全ての化合物に反応し、化合物Aが最も強力であり、続いてSC12であった。これらの2つの後がSC18、SC8および遊離ファルマコフォアであり、同様の作用強度を示し、イミキモドはIL-6およびTNF-αの最も弱い誘発を示した。PBMC実験は、2つの最も強力なTLR7アゴニストとして化合物AおよびSC12、続いてSC18および遊離ファルマコフォアを示したが、イミキモドおよびSC8による処理の後に低いサイトカイン分泌が測定された。実施例4ヒトPBMCにおける化合物AおよびSC12の2つの異なるバッチからのTLR7アゴニストの作用強度についての試験目的IL-6分泌の誘発について、ヒトPBMCにおける2つの異なるバッチにおいて産生される2つのTLR7アゴニストの作用強度を決定すること。方法および実験配置PBMCを2人のドナーから精製し、96ウェルプレートにおいて、ヒト2加熱不活化AB血清、グルタミン、Pen-strepおよびβ-メルカプト-エタノールを含むRPMI培地中で、2×105個の細胞/ウェルで蒔いた。細胞を、4つの用量においてTLR7アゴニストによって24時間処理した。条件培地を、IL-6のためのELISA分析のために除去し、EC50値を各化合物および各バッチについて決定した。実験配置:1.未処理細胞2.未処理細胞ビヒクル対照3.イミキモド4.化合物A新しいバッチ202895.化合物A古いバッチCH730/25/86.SC12新しいバッチ202887.SC12古いバッチCH730/2/13D全ての化合物を、4つの濃度10、1、0.1、0.01マイクロモルで試験した。IL6を、ELISAによって条件培地中での24時間のインキュベーションの後で決定したIL6は、最後の実験において、最も比較できる用量反応結果を生じた。データ処理:IL-6の濃度は、MicrosoftExcelソフトウェアを使用してRDSystemsからのELISAによって決定した。結果は、用量反応曲線を調製するために、およびEC50値の決定のために、GraphPadPrismで分析した。統計分析:少ない数のドナーのために、個々のEC50値の間の統計的評価は決定されなかった。結果および考察IL-6は、最も高い濃度10マイクロモルでのみIL-6を誘発することにおいて活性であったイミキモドを除いて、全ての化合物によって用量依存的に誘発された。結果の要約を試験した2人のドナーについてのEC50値上の2つの列を示した表5に示し、3人のドナーで行った2つの化合物についての第1の実験からの値下の3つの列と比較した。イミキモドについてのEC50値は、この本実験において最後の実験と比較していくらかより高いようであった。これは、4°Cでの貯蔵、および潜在的に、使用前に完全に化合物を可溶化するのに使用する加熱手順によって説明することができる。この実験と、バッチCH730/2/13Dを試験したときの前の実験とを比較して、SC12は同様のEC50値を示した。古いSC12バッチCH730/2/13Dは、新しいバッチ20288と比較して、また同様のEC50値を示した。化合物Aは、この実験とバッチCH730/25/8を試験したときの前の実験との両方においてまた同様のEC50値を示した。新しい化合物Aバッチ20289は、古いバッチと比較して、また同様のEC50値を示した。最後の実験が試験した濃度において細胞毒性活性を示さなかったため、細胞生存についての試験は行わなかった。表5:SC12および化合物Aの異なるバッチによる、異なる時点において5人の異なるドナーからのPBMCにおいて決定したEC50値結論2つのTLR7アゴニストであるSC12および化合物Aは、本実験において同様のEC50を示したが、これらは同じ量の活性化合物を含有することを示す。これは、化合物CH730/2/13DおよびCH730/25/8は、4°CでのDMSO中の5カ月の貯蔵の間、活性を失わなかったことをさらに示す。実施例5ラット、ウサギ、ミニブタおよびヒト血漿における化合物Aの代謝安定性の調査、ならびにウサギおよびヒト血漿における代謝プロファイル;ヒト血漿における化合物AおよびSC12安定性の比較略語:2-ピペリジノエチル4-アミノ-5-クロロ-2-メトキシベンゾエート-M7319アセトニトリル-ACN大気圧化学イオン化-APCIジメチルスルホキシド-DMSO電子スプレーイオン化-ESIギ酸-HCOOH液体クロマトグラフィー/質量分析法-LC/MSメタノール-MeOH多重反応モデル-MRM保持時間-R.T.超高性能液体クロマトグラフィー-UPLC。要約化合物A化合物Aの別のバッチの安定性を、ラット、ウサギ、ミニブタおよびヒト血漿において試験し、代謝プロファイルをウサギおよびヒト血漿において査定した。化合物Aは、ウサギおよびヒトにおいてエステラーゼによって高度に代謝され、ミニブタおよびラット種においてより低い程度で代謝された。ウサギについて30分および120分において、ならびにヒトについて60分および300分において、2つの種において親化合物の残存百分率を概ね一定に維持しながら代謝を研究した。3つの代謝物がウサギにおいて見出され、ヒトにおいてこれらの2つが見出された。ウサギにおいて、主要な代謝物はモノエステルおよび酸代謝物であり、一方、僅かに微量のジ加水分解された代謝物が観察された。ヒト血漿において、ウサギで従前に検出された最初の2つの主要な代謝物のみが、選択された時点において同定され、酸生成物は120分において主流の代謝物であった。ヒトおよびウサギ種において、2つの主要な代謝物のみの形成に伴い、クリアランスの比較できるプロファイルおよび代謝プロファイルが見出され、律速段階はモノエステルの形成をもたらす加水分解であったが、これは酸誘導体に急速に変換されたことがこの研究によって見出された。ヒト血漿においてSC12と比較して化合物Aの第2のバッチバッチ20289で行った第2の実験において、SC12は120分まで代謝されず、化合物の70超は300分においてまだ存在したため、SC12は化合物Aより安定的であったことが示唆された。これに反して、化合物Aは、60分のインキュベーションの後で不安定性を示した。イントロダクション血漿中に存在する加水分解酵素は、化合物の代謝に強力に貢献した。エステル結合を含有する多くの薬物をプロドラッグとして使用して、透過性もしくは溶解性を増加させ、または全身の毒性作用を減少させた。エステラーゼは多くの種類で存在し、種差は一般に、生体媒質中の異なるタイプの存在、およびこれらの基質特異性の差異からもたらされることがある。さらに、生物変換は、様々な要因年齢、性別および疾患などによって影響されることがある。目的アッセイの目的は、異なる時点におけるいくつかの血漿種における、親化合物の残存百分率として安定性を比較することであった。2つの時点において血漿中のインキュベーションの後で形成された主要な代謝物のプロファイリングを、ウサギおよびヒト血漿において行った。化合物Aの異なるバッチによる第2の実験を、異なるバッチのヒト血漿を利用することによって、SC12と比較して行った。血漿安定性および代謝研究材料下記の物質は、示したソースから得た。ACNは、J.TBaker、Germanyから、リドカイン、ベラパミルおよびM7319は、Sigma-Aldrichから、HCOOHは、Flukaから、脱イオン水は、MilliQapparatusMilliporeから。血漿試料は、示したソースから得た。ラット血漿は、CharlesRiver、Calco、Italyから、ミニブタ、ヒトおよびウサギ血漿は、Biopredic、Rennes、Franceから。化合物A、2-4-6-アミノ-2-2-メトキシエトキシ-8-オキソ-7H-プリン-98H-イルメチルベンズアミドエチル2,3-ビスオレオイルオキシプロピルホスフェートバッチコード:化合物A第1の実験、20289第2の実験貯蔵条件:粉末として4°C、DMSO中のストック溶液として-20°C化合物SC-12:2-4-6-アミノ-2-2-メトキシエトキシ-8-オキソ-7H-プリン-98H-イルメチルベンズアミドエチル2,3-ビスオレオイルオキシプロピルホスフェートバッチコード:20288貯蔵条件:粉末として4°C、乾燥させて、直接光から離して貯蔵機器クリアランス決定のためのPremiereXEトリプル四重極WatersとインターフェースしているUPLCWaters、および代謝プロファイルのためのイオントラップHCTultraBrukerDaltonicsとインターフェースしているUPLCWaters。方法第1の実験:試験化合物50mMのDMSOを、ACNで250μMの最終濃度に希釈した2連で。異なる種の血漿1mlを化合物の250μM溶液10μlでスパイクし、一定分量の50μl容量を、0分、15分、30分、60分、120分および5時間で採取し、ベラパミル250ng/ml内部標準、I.S.のACN溶液200μlで直ちにクエンチした。10μlのMeOHを加えて、溶解性を改善した。次いで、試料を13000rpmで5分間遠心分離し、下記で報告するように分析した。リドカインおよびM7319を参照標準として使用し、上記のようにインキュベートした。上清画分を、LC/MS/MSによって分析した。ゼロ時間インキュベーションを、100値として使用した。インキュベーションにおける基質の喪失パーセントを決定し、試験化合物のインビトロの半減期を推定した。50μMの試験化合物の最終濃度で代謝実験を行い、化合物の半減期に照らして確立した試料を2つの時点で集め、ACNおよび内部標準を加えた後でLC/MS/MSによって分析した。第2の実験:試験化合物DMSO中5mMを、ACN-MeOH1:1で250μMの最終濃度に希釈した。ヒト血漿1.180mlを、化合物の250μM溶液20μl4.16μMの最終濃度でスパイクし、一定分量の50μl容量を、0分、15分、30分、60分、120分および5時間で採取し、ベラパミル250ng/ml内部標準、I.S.のACN:MeOH95:5溶液200μlで直ちにクエンチした。次いで、試料を3000rpmで10°Cにて20分間遠心分離し、下記で報告するように分析した。リドカインおよびM7319を参照標準として使用し、上記のようにインキュベートした。上清画分を、LC/MS/MSによって分析した。ゼロ時間インキュベーションを、100値として使用した。試料分析血漿安定性決定についての試料分析第1の実験試料を、PremiereXEトリプル四重極WatersとインターフェースしているUPLCWatersで分析した。溶離液は、以下であった。相A:95H2O、5MeOH、0.1HCOOH相B:5H2O、95MeOH、0.1HCOOHカラム:AcquityBEHC8、2.1×5mm、1.7um、55°C注入容量:5μlクロマトグラフ法を、表6において下記で報告する。表6、クリアランス決定のためのクロマトグラフ法ESI陽性、キャピラリー3.4kV、抽出器5V、ソース温度115°C、脱溶媒和温度450°C、コーンガス98L/h、増倍管630V。表7において、化合物Aに適用したMRM転移を報告した。表7、適用したMRM転移およびパラメーター代謝プロファイルのための試料分析試料を、BrukerDaltonicsHCTultra登録商標イオントラップ質量分析計とカップリングしたWatersUPLCクロマトグラフィーシステムを使用して分析した。インキュベートした試料の分析の前に、化合物Aを手動で注入し、親化合物の断片化を理解した。DMSO中の50mM溶液をACN/MeOH1/1で1μMに希釈することによって、注入を行った。試料溶液を、イオントラップソースに4ul/分の流量で注入した。Tユニオンを介して、UPLCシステムからの75μl/分のH2O/ACN1/10.1ギ酸を、化合物溶液流と混合し、流量およびシグナルを安定化させた。下記の条件をイオントラップに適用した。ESI陽性、キャピラリー-4KV、キャピラリー出口164.3V、スキマー40V、トラップドライブ88.4、ネブライザーガス70psi、ドライガス10l/分、乾燥温度350°C。インキュベートした試料を、イオントラップHCTultraBrukerDaltonicsとインターフェースしているUPLCWatersで分析した。溶離液は、以下であった。相A:95H2O、5MeOH、0.1HCOOH相B:5H2O、95MeOH、0.1HCOOHカラム:AcquityBEHC8、50×2.1mm、1.7um、55°C注入容量:5ulクロマトグラフ法を、表8において下記で報告する。表8、代謝プロファイルのためのクロマトグラフ法試料分析第2の実験化合物AおよびSC12を、BrukerDaltonicsHCTultra登録商標イオントラップ質量分析計とカップリングしたWatersUPLCクロマトグラフィーシステムを使用して分析した。溶離液は、以下であった。相A:95H2O、5MeOH、0.1HCOOH相B:5H2O、95MeOH、0.1HCOOH流量0.6ml/分、カラム:Supelco、DiscoveryHSF5、3.3cm×2.1mm;55°C注入量:10μlクロマトグラフ法を、表9において下記で報告する。表9、クロマトグラフ法下記の条件を、イオントラップに適用した。-化合物Aについて:ESI陽性、キャピラリー-4KV、キャピラリー出口164.3V、スキマー40V、トラップドライブ88.4、ネブライザーガス70PSI、ドライガス10l/分、乾燥温度350°C。-SC12について:ESI陽性、キャピラリー-4KV、キャピラリー出口200V、スキマー49.5V、トラップドライブ85.0、ネブライザーガス70PSI、ドライガス10l/分、乾燥温度350°C。定量化のために使用するMRM転移を、表10において報告した。表10、MRM転移データ分析安定性を、0分時点における面積比化合物/I.S.に対する各時点における面積比化合物/I.S.の残存百分率として計算した。一般安定性分類を、表11に報告する。表11、1時間のインキュベーションにおける一般安定性分類ヒト血漿について60分および300分において、ならびにウサギ血漿について30分および120分において、すなわち、2つの種が、親化合物の同様の残存百分率を示した時点において、代謝を研究した。スペクトルのMS/MS分析と親スペクトルを比較することによって構造の割当を行った。結果血漿安定性第1の実験血漿安定性実験で得た結果を、表12に示す。化合物Aは、全ての試験した種において不安定であった。ウサギは最も高いクリアランスを有する種であり、続いてヒトおよびラット種であり、ミニブタは最も低いクリアランスを示した。ウサギ、ラットおよびヒト血漿において、30分までの曲線の最初の部分は急勾配であり、一方、残りの部分は、より穏やかな勾配を有する。標準物質は、文献のデータと一致した。表12、ラット、ウサギ、ミニブタおよびヒト血漿における化合物Aの残存百分率残存-平均±S.D.データは、平均±S.D.として表す、n=2、であるときn=1を除いて血漿安定性第2の実験化合物AおよびSC12についてのヒト血漿安定性実験の結果を表13に示した。化合物Aについて、60分のインキュベーション後に不安定性約80の残存が観察され、300分において56の残存に到達した。この第2の実験において、異なるバッチの化合物Aが、第1の実験に関してヒト血漿の異なる分析条件およびバッチと一緒に利用された。これによって、得られた残存パーセントの間に観察された差異について説明することができた。SC12は、120分までヒト血漿において安定的であった。化合物の70超が、300分のインキュベーションの後にまだ存在した。このデータは、前の実験において見出されたものと一致するデータは示さず。同じ実験において試験した標準化合物は、文献のデータと一致した表14。表13、ヒト血漿における化合物AおよびSC12の残存百分率データは、平均±S.D.として表す、n=2;であるときn=1を除いて表14、ヒト血漿における標準化合物の残存百分率代謝プロファイル親化合物の断片化:主要なフラグメントは、表15に報告するようにMS/MSスペクトルから属性付けした。表15、化合物Aの主要なフラグメントの属性代謝物プロファイリング代謝プロファイルを、ウサギおよびヒト血漿において研究した。両方のマトリックスにおいて、親化合物50uM、開始濃度は最後の時点で完全に代謝された。代謝物をフルスキャンで検出し、ピークをMHおよびMS/MSスペクトルによって割り当てた。親化合物はフルスキャンプロファイルにおいて低い反応を示し、したがって最初のフルスキャンクロマトグラムは有意でなかった。代謝物の概略をMHおよび保持時間と共に、表16において報告した。ウサギ種において、各々、557、821および360のMHを有する3つの代謝物を、1.1分、6.3分および6.4分の保持時間r.t.で検出した。最も大量のピークは、MH821M2に相当し、これはモノ-エステル生成物に割り当てられたが、120分において酸代謝物に1:1で変換された。ジ加水分解された生成物に相当する小さなピークのみが、存在したMH557、M1。ヒト血漿において同様のプロファイルがまた観察されたが、2つの主要な代謝物は、ウサギプロファイルと同じMHおよび保持時間を示し、これらの比は60分のインキュベーションの後で1:1であり、一方、代謝物M3が300分において主要な生成物であった。微量のジ加水分解された代謝物MH557が、ヒト血漿中で既に0時間において存在し、したがってこれは代謝物と見なさなかった。したがって、代謝の律速段階はモノエステルの形成であったが、一方、全ての他の分解段階はより一層速く起こると仮定された。ジアシルグリセロール部分の1位または3位における加水分解の潜在的選択性は属性付けられなかった。表16、ウサギおよびヒト血漿において同定される代謝物結論血漿中の化合物Aの安定性を、4つの種ウサギ、ヒト、ラットおよびミニブタにおいて研究した。生成物は、ウサギおよびヒトにおいてエステラーゼによって高度に、ならびにミニブタおよびラットにおいてより少ない程度で代謝された。ウサギについて30分および120分において、ならびにヒトについて60分および300分において、2つの種において親化合物の残存百分率を概ね一定に維持しながら、代謝を研究した。3つの代謝物がウサギにおいて見出されM1、M2およびM3、それらの2つがヒトにおいて見出されたM2およびM3。ウサギにおいて、主要な代謝物は、モノエステルおよび酸代謝物であり、一方で、ほんの微量のジ加水分解された代謝物が観察された。ヒト血漿において、ウサギにおいて従前に検出されたモノエステルおよび酸代謝物のみが、選択された時点で同定され、酸生成物は120分において主流の代謝物であった。結論として、2つの種は、2つの主要な代謝物のみの形成によって、クリアランスの比較できるプロファイルおよび代謝プロファイルを提示し、律速段階はモノエステル形成をもたらす加水分解であったが、これは酸誘導体に急速に変換された。SC12は、ヒト血漿において化合物Aより安定的であると思われ、化合物の70が300分においてまだ存在した。実施例6ヒト全血アッセイにおける形質細胞様DC、骨髄DCおよびB細胞に対するTLR7アゴニストの作用強度目的イミキモドと比較して、全血アッセイにおいて2つのTLR7アゴニストの作用強度を決定すること。具体的には、2つのTLR7アゴニストである化合物AおよびSC12が、全血アッセイにおける免疫細胞の活性化における作用強度の差異を示すかについて調査する。化合物AおよびSC12の生物学的作用の間の差異を示すことができるための最適なパラメーターは、B細胞、骨髄DCおよび形質細胞様DCの活性化の測定であると考えられた。方法および実験配置概ね55mLの新鮮な全血の容量を、J.A.Ida、JournalofImmunolMethods、310巻、2006年、86~99頁に記載されているように、3人の健康な成人の匿名ボランティアからのヘパリン添加Vacutainer中に採取した。ドナーは健康であり、公知の免疫障害を患っておらず、薬物治療を受けていなかった。血液を採取する前に、化合物を、10×希釈した試料に20ulで96ウェル丸底プレートへと加えた。化合物を、血清を有さず、抗生物質を有するRPMI培地で希釈した。抗生物質を、10×濃度で加えた。血液を採取した後、全血試料を穏やかに混合し、均一な試料を得て、180ulを、各ウェルに加えた。6時間および24時間のインキュベーション後に、血漿を、ELISAのために取り出したIL-6、IL-10、IL-12p40およびIFN-α。ELISAは、全ての濃度について6時間および24時間の時点において行った。選択された化合物濃度での24時間のインキュベーションの後、細胞をFACSによって活性化マーカーについて分析した。下記の試料を調製した。実験配置:1.未処理細胞2.未処理細胞ビヒクル対照3.イミキモド古いバッチ4.化合物A古いバッチ5.SC12古いバッチ全ての化合物を、最終濃度として0、0.01、0.03、0.1、0.5、2.0、10.0マイクロモルの濃度で配置した。ビヒクル対照はDMSO対照であり、本発明者らは化合物について使用した最も高い濃度を使用した。血液を加えた後、全てのプレートを、収集まで37°Cおよび5CO2で穏やかに撹拌した。試料を6時間または24時間のインキュベーションの後に取り出し、適当なチューブ2ml中にプールした。6時間の時点について、プレートを500×gで遠心分離した。上清SNをチューブに移し、10.000×gで10分間遠心分離し、細胞およびタンパク質凝集物を除いた。浄化した上清を、分析まで-80Cで冷凍した。24時間の時点について、ウェル中の試料をチューブ中にプールし、これを500×gで4Cにて10分間遠心分離し、SNを浄化した。SNを別のチューブに取り出し、10.000×gで10分間遠心分離し、凝集物などを除いた。浄化した上清を、分析まで-80°Cで冷凍した。FACS分析フローサイトメトリー分析は、2つの化合物濃度による24時間の処理の後に、3人のドナーからの全血で行った。ドナー1およびドナー2についてのFACS分析は、ドナー3とは異なる日に行った。化合物濃度は下記の通りであった。B細胞活性化:2uMおよび10uMmDC/pDC:0.1uMおよび0.5uM。FACS分析を使用して、試験化合物が、B細胞、ならびに2つの異なるサブセットの樹状細胞、すなわち、骨髄CD11c/CD123-DCおよび形質細胞様CD11c-/CD123DCの活性化を誘発することができるかを同定した。下記のマーカーを研究し、異なるサブセットの活性化状態を同定した。B細胞:HLA-DR/CD20/CD40pDC:HLA-DR/CD123/CD11c-/CD80HLA-DR/CD123/CD11c-/CD86HLA-DR/CD123/CD11c/CCR7mDC:HLA-DR/CD123-/CD11c/CD80HLA-DR/CD123-/CD11c/CD86HLA-DR/CD123-/CD11c/CCR7。メーカーの説明書によって、FACS染色を行った。自己蛍光を最小化するために、赤血球の溶解はFACS染色の前に行った。研究にできるだけ多くのB細胞およびDCを含めるために、FACS分析は各染色について全部で500,000個の細胞で行った。P1ゲートを設定して、FSC対SSC上の関連する細胞のみを含めた図12~15を参照されたい。所与のゲート設定における特定の活性化マーカーは実際の細胞サブセットを表すため、個々の分析の結果を平均蛍光強度MFI値として提示した。アイソタイプバックグラウンド値を使用して、最大で非特異的染色細胞の2が陽性ゲートにおいて見出すことができるようにゲートを設定した。データ処理:サイトカインの濃度は、RDSystemsからのELISAによって決定した。結果は、用量反応曲線を調製するために、およびEC50値の決定のために、GraphPadPrismで分析した。FACS分析をBecton-DickinsonFACSDivaソフトウェアを使用することによって行い、続いてGraphPadPrismで例示した。統計分析:個々のEC50値の間の統計的評価は、不均一分散を伴う両側T検定を使用して決定する関連するサイトカインについてであった。結果および考察:サイトカイン分泌6時間および24時間後のIL-6分泌化合物AおよびSC12との6時間のインキュベーションの後に、全てのドナーは、IL-6分泌を用量依存的に誘発した。イミキモドは、低く僅かな量のIL-6を誘発し、これによって化合物AおよびSC12についてのようにシグモイド用量反応曲線は可能でなかった。表17に見られるように、EC50値を化合物AおよびSC12について決定した。3人のドナー全てにおいて、SC12が化合物Aより僅かに強力なEC50値を示す傾向があった。しかし、3人のドナーのみに基づいており、これは統計的に有意であると確認することができなかった。表17、TLR7アゴニストによる全血における6時間のインキュベーションの後のIL-6分泌についてのEC50値化合物A、SC12およびイミキモドとの24時間のインキュベーションの後、全てのドナーは、IL-6分泌を誘発したが、イミキモドは、試験した最も高い濃度においてのみ誘発した。EC50値を全ての化合物について決定したが、しかしイミキモドについては最も高い濃度のみが検出可能なレベルを有意に超えたためこの決定は正確でなく、これによってシグモイド用量反応曲線は可能ではなかった。24時間のインキュベーション後のIL-6のレベルは、6時間のインキュベーションの後に見られたIL-6のレベルをほんの僅かに超えた。24時間のインキュベーション後のIL-6分泌についての全ての化合物のEC50値は、表18に見られた。SC12が僅かにより強力であり、3人のドナー全てにおいて化合物Aより低いEC50値を示したという6時間においての傾向と同じ傾向が24時間においてあった。化合物AおよびSC12についてのEC50値における3人のドナー全てについての結果の間の両側T検定を使用した比較は、0.07のP値を示したが、これは2つの化合物についての反応に有意差がなかったことを示す。表18、TLR7アゴニストによる全血における24時間のインキュベーションの後のIL-6分泌についてのEC50値要約すれば、3人のドナー全てにおいて、化合物AおよびSC12によってIL6-分泌が同様のレベルまで誘発され、同様のEC50値であったが、SC12は僅かにより強力である傾向を示した。さらに、IL-6分泌の範囲4000~8000pg/mlは、Clarkeら、Jour.InterferonCytokineResearch、29巻、2号、2009年、113~126頁によって公開された結果と一致した。6時間および24時間後のIFN-α分泌化合物AおよびSC12との6時間のインキュベーションの後に、全てのドナーは、IFN-α分泌を用量依存的に誘発し、一方、イミキモドは、IFN-α分泌を誘発しなかった。ドナー1および2は、IFN-αを2000pg/ml範囲のレベルに誘発したが、一方、ドナー3は、500pg/ml範囲に誘発したのみであった。表19に見られるように、化合物AおよびSC12についてEC50値を決定した。3人のドナー全てにおいてSC12が化合物Aより僅かに強力なEC50値を示す傾向が再びあったが、これは有意でなかったP=0.23。表19、TLR7アゴニストによる全血における6時間のインキュベーションの後のIFN-α分泌についてのEC50値化合物A、SC12およびイミキモドとの24時間のインキュベーションの後に、全てのドナーは、IFN-α分泌を誘発したが、イミキモドは再び、試験した最も高い濃度においてのみ誘発した。EC50値を、化合物AおよびSC12について決定した。イミキモドについてのEC50値は、最も高い濃度のみにおける誘発によって再び正確ではなかった。ドナー1および2について、24時間のインキュベーションの後のIFN-αのレベルは、6時間のインキュベーションの後に見られるIFN-αのレベル未満であったが、このサイトカインはアッセイにおいて細胞によって除去することができることを示す。24時間のインキュベーション後のIFN-α分泌についての全ての化合物のEC50値は、表20において見られた。24時間後、3人のドナー全ては、1000pg/ml範囲でIFN-αを誘発し、ドナー3は、ドナー1および2より遅く化合物AおよびSC12に反応したことを示した。SC12は再び、化合物Aより僅かに強力であったが、これは有意差がなかったP=0.11。表20、TLR7アゴニストによる全血における24時間のインキュベーションの後のIFN-α分泌についてのEC50値結論として、IFN-α分泌は、3人のドナー全てにおいて化合物AおよびSC12によって同様のレベルまで誘発され、同様のEC50値を有したが、SC12は、僅かにより強力である傾向を示した。公開された結果と比較して、この研究において分泌されたIFN-αの範囲1000~2000pg/mlは、レシキモドで示された公開されたデータよりも高かった<200pg/mlClarkeら、Jour.InterferonCytokineResearch、29巻、2号、2009年、113~126頁。しかし、これは化合物AおよびSC12と比較した、予想されるより低いレシキモドの作用強度によって説明することができる。第2に、IFN-α分泌は主にpDCによって誘発されることが公知であったが、この研究においてIFN-αが6時間後に既に分泌されていたため、pDCは、化合物AおよびSC12による全血細胞の処理の後に見られる最初の反応の1つとして活性化されたことをこれは示すJ.A.Ida、Journalofimmunolmethods、310巻、2006年、86~99頁。6時間および24時間後のIL-10分泌イミキモド、化合物AまたはSC12との6時間のインキュベーションの後に、IL-10産生は見られなかったが、これは、IL-10分泌が、TLR7アゴニストによる全血細胞の処理に対する二次的作用であったことを示す。化合物A、SC12またはイミキモドとの24時間のインキュベーションの後に、全てのドナーはIL-10分泌を誘発したが、イミキモドは再び、試験した最も高い濃度のみにおいて誘発した。EC50値を全ての化合物について決定したが、しかしイミキモドについて、この決定は再び最も高い濃度のみにおけるIL-10の誘発によって正確でなかった。24時間のインキュベーションの後のIL-10分泌についての全ての化合物のEC50値は、表21に見られた。24時間後、3人のドナー全ては、2000~40000pg/ml範囲でIL-10を誘発した。化合物AおよびSC12は、IL-10を誘発する同様の能力を示したが、2つの化合物の間に有意差はなかった。表21、TLR7アゴニストによる全血における24時間のインキュベーションの後のIL-10分泌についてのEC50値結論として、IL-10は、アッセイにおいて後で誘発された6時間後に誘発はないが、24時間のインキュベーションの後にのみ誘発された。これは、IL-10が、恐らく試験した化合物によるTLR7ライゲーションの直接の作用としてではなく、アッセイにおける二次反応として誘発されたことを示す。これは、IL-10がヒトPBMCモデルにおいて4時間後ではなく、12時間および20時間後にのみ誘発されたDouagiら、JournalofImmunology、182巻、2009年、1991~2001頁による研究と一致した。さらに、Douagiらは、mDCが、pDCと比較して、IL-10の主要な産生細胞であったことを示した。マウスマクロファージおよびmDCが、TLRライゲーションの後でpDCよりIL-10を一層強力に産生したことを示したBoonstraら、JournalofImmunology、177巻、2006年、7551~7558頁による研究によって支持されて、TLR7ライゲーションによるIL-10分泌についての現在の結果は、IL-10の分泌が、mDCまたは潜在的に全血アッセイにおいて存在するマクロファージにおいて、潜在的に二次反応として起こることを示す。6時間および24時間後のIL-12p40分泌化合物AおよびSC12との6時間のインキュベーションの後に、全てのドナーは、用量反応的態様でIL-12p40分泌を誘発し、一方、イミキモドは、最も高い濃度においてでさえもIL-12p40分泌を誘発しなかった。全てのドナーは、8.000~12.000pg/ml範囲のレベルにIL-12p40を誘発した。表22に見られるように、EC50値は化合物AおよびSC12について決定した。化合物は、IL-12p40の誘発において同様に強力であるようであった有意差なし。表22、TLR7アゴニストによる全血における6時間のインキュベーションの後のIL-12p40分泌についてのEC50値化合物A、SC12またはイミキモドとの24時間のインキュベーションの後に、全てのドナーは、化合物AおよびSC12による処理の後で、20.000~25.000pg/ml範囲のIL-12p40のレベルにIL-12p40分泌を誘発し、一方、イミキモドは、最も高い濃度においてでさえもIL-12p40を誘発しなかった。表23に見られるように、EC50値を化合物AおよびSC12について決定した。両方の化合物は、同様のEC50値を示した有意差なし。表23、TLR7アゴニストによる全血における24時間のインキュベーションの後のIL-12p40分泌についてのEC50値結論として、IL-12p40-分泌は、3人のドナー全てにおいて化合物AおよびSC12によって同様のレベルに誘発され、同様のEC50値を有した。誘発は6時間および24時間の処理の両方において見られ、24時間の時点で量は増加した。マクロファージおよびpDCにおける産生と比較して、マウス細胞においてIL-12p40は、TLRライゲーションによってmDCにより主に産生されるBoonstraら、Journalofimmunology、177巻、2006年、7551~7558頁。IL-12p40発現の同様のパターンがヒト細胞について見られた場合、化合物AおよびSC12が、ヒトmDCにおいて同様の活性化プロファイルに従うことを示す。サイトカイン分泌に関する結論化合物AおよびSC12は、全血細胞アッセイからの上清において同定されたDCにより分泌されるサイトカインの強力な誘発物質であり、一方、イミキモドはこれらのサイトカインの弱い誘発物質であった。PBMCモデルにおける同じ化合物による従前の結果に基づいて、この結果は予想された。SC12が、化合物Aの作用強度と比較して、IL-6およびIFN-αの誘発において僅かにより強力である傾向があった。しかし、使用された3人のドナーの数によって、これは、統計的に有意であると示すことができなかった。IL-10およびIL-12p40分泌について、化合物AおよびSC12は、この研究に基づいて同様に強力であった。IL-10は、6時間のインキュベーション後に産生されなかったが、24時間のインキュベーションの後のみに産生された。IL-12p40は、6時間のインキュベーションの後および24時間のインキュベーションの後の両方で誘発された。PBMCおよび全血アッセイのTLR7活性化に関する現在の知識に基づいて、pDCは、IFN-αの主要な産生細胞であることが公知である。IL-6は、mDCおよびpDCの両方によって産生され、IL-10は、mDCによって主に産生され、IL-12p40は、mDCによって主に産生された。IL-6およびIFN-αの産生パターンは、SC12が化合物AよりpDCの活性化において僅かに強力であったことを示すことができた。ヒト初代細胞によるアッセイにおいて、pDCのTLR7リガンドの存在および活性化は、B細胞増殖の刺激のために必要であり、pDCからのIFN-αの産生は、B細胞増殖の活性化および抗体産生の開始のために必要であることが公知であったDouagiら、Journalofimmunology、182巻、2009年、1991~2001頁、図2および3。PBMCモデルにおける化合物AおよびSC12の試験による従前のモデルにおいて、化合物Aは、IL-6分泌においてSC12より僅かに強力である傾向を示したが、これは従前の研究において有意でなかった。2つのモデルにおける化合物の作用強度における差異は、親油性の差異が各アッセイにおける細胞プールへの分配における差異を潜在的に示すため、化合物の化学的または物理学的性質における差異によって潜在的に説明することができる。全血アッセイは、大量の赤血球および血小板の存在によって概ね50の細胞容積を含有する。対照的に、PBMCモデルは、より一層低い細胞容積<5を含有する。これに関して、全血アッセイ中に存在する多量の細胞は、高度に親油性の化合物のための緩衝液として作用し得る。FACS分析B細胞分析図12:B細胞上の活性化マーカーCD40の発現の分析を、二重陽性HLA-DRMHCクラスIIP4ゲートおよびCD20細胞B細胞マーカーP8ゲートで行った。図12は、3人のドナーD1~D3からの全血で行った、示したような試験試薬による24時間のインキュベーションの後の、二重陽性HLA-DR/CD20B細胞に対するCD40発現についてのMFI値を含めた、試験化合物による24時間の処理の後の3人のドナーからの結果を示す。活性化マーカーCD40は、最も高い濃度10uMでの対照化合物イミキモドによる処理の後で、未処理またはDMSO処理細胞と比較して、3人のドナー全てにおいて発現の増加を示す。試験化合物である化合物AおよびSC12の両方は、ドナー1およびドナー2において、全ての試験した濃度でCD40発現を誘発した。しかし、ドナー3において、未処理細胞と比較して、最も高い濃度の2つの試験化合物のみがCD40発現を誘発した。3人のドナー全てにおいて、化合物Aは、10uMで試験したときに、3人のドナー全てにおいてSC12より僅かに高いCD40発現を刺激する弱い傾向を示した。しかし、この傾向は、少数のドナーのために、統計的に有意であると確認することができない。DC分析図13~15:同時刺激活性化マーカーCD80およびCD86ならびにケモカイン受容体CCR7の発現パターンを、2つの異なるサブセットのDCで調査した。ドナー1からの未処理細胞についてのDC分析のための試料は失われたが、未処理のDMSO対照細胞であった平行試料は、同様の対照細胞としての役割を果たした。1.骨髄樹状細胞mDC:骨髄DCの分析は、HLA-DR/CD11c/CD123-細胞に基づいており、したがって、全ての分析した細胞は、HLA-DRP3ゲートおよびCD11c/CD123-Q4ゲートに含まれた図13~15におけるゲートを参照されたい。ドナー1および2においてイミキモドはCD80の弱い発現を誘発したことが見出されたが、これはCD80発現が高かったドナー3と対照的であった。試験化合物である化合物AおよびSC12の両方は、3人のドナー全てにおいて、注目すべきCD80発現を誘発した。3人のうち2人のドナーD1およびD3において、最も高い濃度0.5uMのSC12は、CD80発現に対して強力な刺激を示したが、これは化合物Aについて見られたレベルより高かった。ドナー2において、化合物Aは、最も高い濃度においてのみSC12より僅かに強力にCD80発現を刺激した。mDCにおけるCD86発現の分析は、未処理細胞が、3人のドナー全てにおいて高レベルのCD86を既に発現していたことを示したが、これは珍しい観察ではなかった。しかし、化合物Aは、3人のドナー全てにおいて、CD86の発現をさらに刺激する。SC12は、ドナー2および3において、弱いCD86発現を誘発するが、ドナー1において誘発しない。0.1uMでの最も低い濃度の両方の試験化合物は、CD86発現を最も強力に誘発することを示した。これは、0.5uMでの最も高い試験した用量が最も強力な濃度であったCD80発現と対照的であった。リンパ節ホーミング受容体であるケモカイン受容体CCR7をまた、mDCで調査した。CCR7発現は、CD80およびCD86より高いドナー間の差異を示した。全てのドナーについて、化合物Aは、最も高いCCR7発現を誘発し、ドナー1および3について、イミキモドはまた、高いCCR7発現を示したが、これはドナー2において見られなかった。SC12は、全てのドナーについてCCR7発現のより強力でない刺激物質であった。2.形質細胞様樹状細胞pDCpDCの分析は、HLA-DR/CD11c-/CD123細胞に基づき、したがって、全ての分析した細胞は、HLA-DRP3ゲートおよびCD11c-/CD123Q1ゲートに含まれた。図13~15。pDCにおいて、化合物AおよびSC12の両方は、3人のドナー全てにおいてCD80発現パターンにおける比較できる作用を示す。しかし、SC12は、3人のドナー全てにおいて、化合物Aより僅かに高いCD80発現を誘発するドナー3におけるより低い濃度を除く。pDCにおけるCD86の発現は、SC12が、3人のドナー全てにおいて、化合物Aよりも高いCD86発現を誘発する傾向を有することを示す。しかし、ドナー1および3において、0.1uMでの最も低い用量が最も高いCD86発現を誘発し、一方、ドナー2において、0.5uMは最も強力な濃度であったため、最も強力な濃度は変化する。イミキモドは、ドナー3においてSC12および化合物Aと同様の高いCD86発現を誘発する。pDCにおけるCCR7発現パターンは、mDCにおいて本発明者らが見出したものと同様であった。化合物Aは、3人のドナー全てにおいて、SC12より非常に高いCCR7発現を誘発した。図16において、イミキモドは、3人のドナーD1~D3からの全血に対して行った、示されるような試験試薬による24時間のインキュベーションの後に、HLA-DR/CD11c-/CD123pDCにおいてCD80、CD86およびCCR7発現についてMFI値を示す。FACS分析の結論:B細胞研究についての全体的な結論は、3人のドナー全てにおいて、最も高い濃度10uMでの化合物AがSC12より僅かに高いレベルの成熟マーカーCD40を刺激するということであった。DC活性化について、SC12は、活性化マーカーCD80の刺激に関して、化合物Aより非常に強力であったが、少数の例外が見られたがmDCおよびpDCの両方についても同様であった。活性化マーカーCD86について、化合物Aは、mDCにおいてSC12より僅かに強力であり、一方、SC12は、pDCにおいて化合物Aより僅かに強力であったため、結果は少し異なった。しかし、CD86の発現についての最も強力な濃度は、ドナーによって異なる。ケモカイン受容体CCR7の発現は、化合物Aが、大部分のドナーにおいて両方のDCサブセットにおいてSC12より強力であったことを示した。CD86発現に関して、CCR7誘発についての最も強力な化合物濃度は、ドナーによって異なった。イミキモドは一般に、全ての調査したマーカーの発現について、B細胞、mDCならびにpDCにおいて、ドナー3においてのみ強力であることを示した。結果化合物AおよびSC12は、サイトカインIL-6、IL-10、IL-12p40およびIFN-αの誘発、ならびにB細胞、pDCおよびmDCの両方における成熟マーカーの発現の増加において強力であった。これらのパラメーターについて測定した化合物AおよびSC12の生物学的作用の間の差異は、有意でなかった。しかし、より多数のドナーが使用された場合、統計的に有意な作用を示すことが可能であり得る。いくつかの作用は、ボーダーラインの有意性を示し、いくつかの成熟マーカーは、化合物の1つによってより強力に誘発される傾向を示した。傾向は、以下を示した。化合物Aは、下記のエンドポイントについてSC12より強力である傾向を示した。1.mDCにおける成熟マーカーCD86の誘発2.mDCおよびpDCの両方についての移動受容体CCR7の誘発3.B細胞活性化マーカーCD40の誘発SC12は、下記のエンドポイントについて化合物Aより強力である傾向を示した。1.mDCおよびpDCの両方における成熟マーカーCD80の誘発2.pDCにおける移動マーカーCD86の誘発3.サイトカインIL-6およびIFN-αの誘発IL-10またはIL-12p40誘発のレベルにおいて、傾向を見ることができなかった。これらの結果に基づいて、化合物AおよびSC12は、新鮮なヒト血液と共にインキュベートするときに、有意に異なって挙動すると結論付けることはできない。CD80およびCD86は、SC12によってpDCにおいてより強力に誘発され、pDCサイトカインIFN-αは、SC12によってより強力に誘発されたため、SC12は、pDC活性化において化合物Aより僅かに強力であった。さらに、化合物Aは、B細胞活性化において僅かにより強力であり得る10uMの濃度で試験したときに特に見られる。実施例7正所性ラット膀胱におけるイミキモドおよびSC12による前臨床プラセボ対照有効性研究この研究のゴールは、F344ラットの正所性膀胱がんモデルにおけるイミキモドR-4871およびSC12の液体製剤の有効性を評価することであった。4つの群イミキモド、SC12、ビヒクルおよびプラセボ群を比較した。処理後、動物の健康な状態をモニターし、ラット膀胱および腫瘍に対する反応を組織病理学的に評価した。動物、材料および方法腫瘍細胞AY-27ラット膀胱がん細胞株は、FANFTN-[4-5-ニトロ-2-フリル-2-チアゾリル]ホルムアミドを与えられたFischerF344ラットにおける原発性膀胱腫瘍から確立した。細胞株は、UniversityofAlbertaおよびCrossCancerInstitute、Edmonton、Alberta、Canadaから親切にも提供された。細胞を、加湿した95空気/5二酸化炭素雰囲気中で、10ウシ胎仔血清Sigma-Aldrich、St.Louis、Missouri、100U/mLのペニシリンGおよび100μg/mLのストレプトマイシンInvitrogen、Carlsbad、Californiaを補充したRPMI-1640L-グルタミンを有する培地Invitrogen、Carlsbad、Californiaにおいて単層として培養した。培地を1週間に2回交換し、コンフルエントとなったとき、細胞を標準的トリプシン処理手順で継代した。実験のために使用した継代数は、28および29であった。動物全部で56匹の雌性FischerF344ラットはCharlesRiverL’ArbresleCedex、Franceから購入し、実験の開始前に少なくとも1週間順応させた。170g±10gの体重のラットを、12時間の明/暗サイクルを伴う温度制御した環境で、goldflakes敷料SPPS、Frasne、Franceを有し、環境に恵まれた個々のケージTechniplast、Milan、Italyに収容し、標準的な固形飼料および水に自由にアクセスさせた。毎日、ラットを秤量し、健康な状態についてモニターした。動物手順は動物実験委員会IACUC、CommitteeforAnimalExperimentsRadboudUniversityNijmegenMedicalCentre、TheNetherlandsによって承認される必要があり、オランダおよびヨーロッパの規制に従ったプロトコルに従って行った。試料サイズの計算50の予想される治療作用、0.05のα、80の累乗および80腫瘍発生を使用して、群のサイズを計算した。これによって、14の最小の群のサイズを得た。腫瘍細胞埋込み腫瘍細胞埋込みを、Xiaoらのプロトコルによって0日目に行った2。F344ラットは、アイソジェニック腫瘍細胞を受け入れ、80超の膀胱腫瘍の確立がもたらされた3。エンロフロキサシンBayer、Leverkusen、Germany5~10mg/kgを、各カテーテル処置前に抗菌予防のために皮下に注射した。吸入麻酔:イソフルラン2~5導入、続いてイソフルラン2、一酸化窒素0.5L/分および酸素1L/分下で実験を行った。ラット膀胱を、16ゲージ1.4mmのプラスチック静脈内カニューレBDBiosystems、Erembodegem-Aalst、Belgiumによって尿道を介してカテーテル処置し、排出させた。膀胱を0.1Mの塩酸塩HCl0.4mLの15秒の滴下注入によって事前調整し、0.1Mの水酸化カリウムKOH0.4mLを15秒間加えることによって中和した。膀胱から排出させ、0.01MのPBS0.8mLで3回フラッシュした。新たに収集したAY-27細胞28継代および29継代を培地に再懸濁させた。膀胱調整の直後、および細胞収集後1時間以内に、細胞0.5mlの培地中1.5106個をラット膀胱に滴下注入し、1時間留置した。ラットを15分毎に90°回転させた。1時間後、カテーテルを除去し、ラットは自発的に排泄することができた。表24:処理群処理全てのラットは、膀胱内滴下注入を2日目および5日目に受けた。最初に上記のように、ラットを1時間の吸入によって麻酔した。続いてラットを、1.4mmカニューレBDBiosystemsを使用して尿道を介してカテーテル処置し、膀胱から排出させ、pHインジケーターストリップMerck、DarmstadtGermanyを使用してpHを測定した。膀胱内滴下注入を、1mLのLuer-LokシリンジBDBiosystemsを使用して投与した。群1n=14を、0.5mlのイミキモド0.1で処理した。群2を、0.5mlのSC120.38で処理した。群3は、ビヒクルによる滴下注入Phosal50を受け、群4は、対照としてNaClによる滴下注入を受けた。試験剤を、ビヒクルとしてPhosal50LipoidAGに溶解した。滴下注入は膀胱内に1時間留まり、ラットを15分毎に90°回転させた。1時間後、カテーテルを除去した。自発的に排出された尿のpHを、pHインジケーターストリップMerckを使用して測定した。病理学的評価12日目に、二酸化炭素吸入を使用してラットを殺処分した。屍検で内臓を検査し、嚢胞切除を行った。膀胱を秤量し、4緩衝を使用して固定し、薄片にし、パラフィンに包埋した。5μmの切片を、ヘマトキシリンおよびエオシンHEを使用して染色した。泌尿器病理学者が膀胱切片を評価し、TNM分類を使用してT段階をスコア化したUnionInternationalContreleCancer、UICC、2002年。さらに、膀胱毎の腫瘍の総数および腫瘍の浸潤深度を測定した。膀胱壁および/または周辺組織における炎症の量を、0炎症なし、1軽度、2中程度および3重度の炎症でスコア化した。結果実験の間、ラットの健康な状態が損なわれた徴候はなく、人道的なエンドポイントに達したラットはなかった。予想される体重の僅かな減少が麻酔後の一日目にのみ見られたが、滴下注入後の日においては、全てのラットは体重を取り戻した。カテーテル処置の日に軽度の血尿が時折報告された。後日、尿は正常となった。処理の前および後の尿のpHは差異を示さなかった。全ての尿のpHは、6.5~7.0で変化した。屍検において、膀胱以外の内臓への異常は見られなかった。肉眼での評価において、腫瘍陽性膀胱は、膀胱外の成長を伴わずに腫瘍塊を有するようである。1つのラット膀胱のみ群3、ビヒクル処理が、右の尿道口の近くに右尿管に向かって伸びる塊を示した。膀胱重量膀胱重量は、腫瘍の存在と相関したp<0.0001、独立試料T検定。表において、平均および範囲の概要を示す。群2SC12と群3ビヒクルとの間に平均膀胱重量の差異があったp=0.005、独立試料T検定。他の群の間に平均膀胱重量における差異は見られなかった。表25:処理群および対照群毎のラット膀胱の重量、重量グラム炎症殆ど全部のラットにおいて、ある程度の炎症が存在した。群の間で、統計的有意差は観察されなかったp=0.106、ピアソンのカイ二乗検定。軽度および中程度の炎症は、全ての56ケースの87.5を占めた。腫瘍および腫瘍反応腫瘍陽性膀胱を有するラットの数は、イミキモド処理群群1について14匹中9匹、SC12処理群群2について14匹中8匹、ビヒクル対照群群3について14匹中11匹、およびまたNaCl対照群群4について14匹中11匹であった。ビヒクル群における1つのpTa腫瘍を除いて、全ての腫瘍はpT2段階を示す。pT2腫瘍は、排尿筋に及ぶ。pTa腫瘍を有するラットにおいて、がん細胞の小さな部分が、正常な尿路上皮内層の上に見られ、浸潤は見られなかった。腫瘍発生に関して、個々の群の間に統計的有意差はなかった。群2と群4との間の腫瘍発生の差異は、0.210の有意でないp値を示すフィッシャー直接検定。所与の処理例えば、イミキモド、SC12、ビヒクルまたはNaClは、ロジスティック回帰分析をデータ上で行ったときに、結果を予測するものでなかった腫瘍陽性対腫瘍陰性。浸潤深度腫瘍の浸潤深度を、HE染色した膀胱切片の組織病理学的評価において泌尿器病理学者が測定した。腫瘍細胞が見られた最も深いポイントを、浸潤深度とした。腫瘍陽性膀胱の平均浸潤深度は、個々の処理群独立試料T検定、p=0.486~0.912の間で、またはSC12処理群1、2および対照処理群3、4動物独立試料T検定、p=0.705の間で有意差を示さなかった。表27:平均腫瘍浸潤深度腫瘍数膀胱毎の腫瘍の絶対数は、泌尿器病理学者がカウントした。ビヒクル対照群における腫瘍の数は、他の群より多かった。単変量解析において、ビヒクル群群3における腫瘍の数は、群1および群4p=0.02と、ならびに群2p=0.006と有意に異なった。表28:ラット膀胱毎の腫瘍の平均数結論イミキモドおよびSC12は、抗腫瘍活性を引き起こし得る局所的免疫応答をもたらす。この実験の間に毒性の徴候は見られなかった。腫瘍割合に対する処理の作用は統計的に有意ではなかったが、イミキモドおよびSC12処理された動物に対して好ましい傾向が見られる。これらのデータに基づいて、今後の実験は、有効性を改善するために処理頻度の増加を有し得る。実施例7についての参照文献1HayashiT、CrainB、CorrM、ChanM、CottamHB、MajRら、IntravesicalToll-likereceptor7agonistIMIQUIMOD:Optimizationofitsformulationinanorthotopicmousemodelofbladdercancer1、InternationalJournalofUrology、2010年5月;17巻5号:483~90頁。2XiaoZ、McCallumTJ、BrownKM、MillerGG、HallsSB、ParneyIら、Characterizationofanoveltransplantableorthotopicratbladdertransitionalcelltumormodel3、BritishJournalofCancer、1999年10月;81巻4号:638~46頁。3HendricksenK、Molkenboer-KuenenJ、OosterwijkE、DeKaaCAHV、WitjesJA.、Evaluationofanorthotopicratbladderurothelialcellcarcinomamodelbycystoscopy、BjuInternational、2008年4月;101巻7号:889~93頁。実施例8SC12-細菌変異アッセイの毒性分析SalmonellatyphimuriumおよびEscherichiacoliの試験株における遺伝子変異を誘発する能力について、栄養要求性菌株から原栄養性への復帰変異によって測定するように、SC12を調査した。5つの試験株であるTA1535、TA1537、TA98、TA100およびWP2uvrAを使用した。フェノバルビトンおよびβナフトフラボンで事前処理したラットからの肝臓S9画分を使用して、代謝活性化の不存在下および存在下の両方で実験を行った。SC12をジメチルスルホキシドDMSO中の溶液として使用した。SC12を、5000マイクログラム/プレートの最高濃度、および概ねハーフログ間隔を置いた4つのより低い濃度1580、500、158および50.0マイクログラム/プレートで毒性試験においてアッセイした。インキュベーション期間の終わりに、SC12の沈殿が2つの最も高い濃度において観察された。S9代謝の存在下または不存在下で、任意の用量レベルの任意の試験株において毒性は観察されなかった。平板混入法を使用して、5000マイクログラム/プレートの最大用量レベル、および2倍希釈によって間隔を置いた4つのより低い用量レベル2500、1250、625、および313マイクログラム/プレートでSC12をアッセイした。S9代謝の存在下または不存在下で、任意の用量レベルの任意の試験株において毒性は観察されなかった。インキュベーション期間の終わりに、2つの最も高い濃度において、SC12の沈殿が観察された。試験した任意の濃度で復帰変異体の数の増加は観察されなかったため、プレインキュベーションステップを、主要アッセイIIの全ての処理のために含めた。SC12を、主要アッセイIにおいて用いた同じ用量範囲でアッセイした。S9代謝の存在下または不存在下で、任意の用量レベルの任意の試験株において毒性は観察されなかった。スコア化を妨げなかったSC12の用量が関連する沈殿は、インキュベーション期間の終わりに4つの最も高い濃度において観察された。SC12は、平板混入またはプレインキュベーションアッセイにおいて、任意の用量レベルで、S9代謝の存在下または不存在下で、任意の試験株によって復帰変異体コロニーの数の2倍の増加を誘発しなかった。SC12は、報告した実験条件下で、S9代謝の存在下または不存在下で、SalmonellatyphimuriumまたはEscherichiacoliにおいて復帰突然変異を誘発しないことが結論付けられた。実施例9ラットにおけるSC12-単回用量静脈内研究の毒性分析SC12の急性毒性を、Sprague-Dawleyラットへの単一の静脈内投与、それに続く14日の観察期間の後に調査した。引き続いて1匹の雄および1匹の雌ラットの群に76、100、85および90mg/kgを投与し、7日の期間観察することによって予備相を行った。同様に構成されたさらなる群は、ビヒクル単独を投与され、対照としての役目を果たした。76mg/kgで死亡は起こらなかった。臨床的症状は、投与の日に観察された立毛および活性の低下に限定された。第2の群は、100mg/kgで投与された。両方の動物は投与によって痙攣の後に死亡した。次いで、第3の群は、85mg/kgで投与された。投与の日に、立毛が観察された。第4の群は、最終的に90mg/kgで投与された。死亡は起こらなかった。研究の2日目から4日目まで、立毛は観察されなかった。ビヒクル単独で処理された雄および雌動物において死亡は起こらず、臨床的症状は指摘されなかった。主要相において、5匹の雄動物および5匹の雌動物を90mg/kgで投与し、14日の期間観察した。同様に構成された第2の群は、ビヒクル単独を受け、対照としての役目を果たした。90mg/kgで処理された3匹の雄は、投与の直後に死亡し、一方、2匹の雌は投与後2時間で死亡した。さらに、90mg/kgで投与された1匹の雄および1匹の雌は、研究の2日目に死亡していることが見つかった。単収縮、運動失調、立毛、活性の低下および猫背の姿勢が、動物において死亡前に観察される主要な徴候であった。運動失調、立毛、活性の低下、猫背の姿勢および半分閉じた目が、投与の日に生き残っている動物において指摘された。立毛は、研究の3日目まで観察された。同様に構成された第2の群は、80mg/kgで投与された。観察期間の間に、死亡は起こらず、臨床的症状は記録されなかった。ビヒクル単独を受けた動物において、死亡は起こらず、臨床的症状は観察されなかった。90mg/kgで処理された生き残っている動物、および80mg/kgで投与された動物は、研究の2日目に僅かから中程度の体重の減少を示した。15日目までに回復が起こり、体重の変化は、研究の終わりに動物のこの種および年齢について予想される範囲内であった。研究の間にビヒクル単独を受けた動物において、体重の関連する変化は観察されなかった。生き残っている動物を、観察期間の終わりに二酸化炭素麻酔によって死亡させた。初期に死亡した動物を含めた全ての動物は、屍検に供された。90mg/kgでの処理された動物初期に死亡した動物を含めた、80mg/kgでの処理された動物、および対照動物の全てにおいて行った屍検において、異常は観察されなかった。これらの結果は、試験品目SC12が、90mg/kgでの単回用量の静脈内投与に続いてラットにおいて死亡または毒性の有意な徴候を誘発し、一方、死亡および毒性の徴候は80mg/kgでは観察されなかったことを示す。したがって、この研究における最大耐用量は、80mg/kgであると考えられた。実施例10結合アッセイイミキモドおよびSC12を、各々図17、および18に示すように、酵素学的および放射線学的結合アッセイにおいて分析した。SC12およびイミキモドを、異なるヒト組換え受容体タイプおよびサブタイプ、またはげっ歯類組織ホモジネートからの膜画分を使用して、放射性リガンド結合アッセイにおいて73の主要な分子標的の中で評価した。30マイクロモルの一定の濃度でSC12を試験した。Aldaraイミキモドによる処理の後に、イミキモドは、患者において最も通常の有害事象である疼痛関連症候群と関連する受容体例えば、アデノシンおよびナトリウムチャネルと結合することが示された。SC12は、このタイプの受容体に結合しなかった。実施例11マウスにおけるSC12の静脈内薬物動態の調査空腹時CD-1雄マウスにおいてSC12の薬物動態をアッセイした。材料および方法IV急速投与を、5ml中1mg/kgの用量で尾静脈に投与した。化合物重量は、2.08/10.04mlであった。24匹のマウスを研究した。麻酔下の瀉血によって5分、15分、30分、60分、240分、480分、および24時間においてサンプリングを得た。SC12を、5ml/kgの用量で、水中の3DMSO、20β-シクロ-デキストリンの製剤で投与した。実験の終わりにエチルエーテルを使用して動物を殺処分した。試料の調製:Siroccoフィルタープレート中で、100マイクロリットルの血漿を、5マイクロリットルのISIV298、10マイクログラム/mlおよび10マイクロリットルの5H3PO4でスパイクした300マイクロリットルのACN/MeOHに加えた。プレートを80rpmで10分間振盪し、次いで真空下で5分間濾過した。分析方法:LC/MS/MS:PremiereXE、溶離液:水A、MeOHBおよび0.1HCOOH、勾配15B~100B、0.1~0.5、次いで、均一濃度100B、1.5分まで、流量0.8ml/分;カラムAcquityUPLCBEHC18、1.7マイクロメートル、2.1×50mm、50°Cのカラム温度で5マイクロリットルの注入量、ESI陽性、MRM、抽出器5V;キャピラリー3.5kV;ソース温度115°C;溶解温度450°C。SC12:MH921.5>385.05/439.29、CV35CE33、LLOQ:5ng/ml。データ分析:ノンコンパートメント分析、WinNonlin5.1;線形台形、均一な重量。結果有害な行動上の作用は、処理において指摘されなかった。SC12は、高いクリアランスに反映される、短いMRTを伴う541ng/mlの血漿中のCmaxを示す表29。恐らく減衰の最初の部分における非常に急速なクリアランスによって、最初の時点5分においていくらかの動物間のばらつきが観察され、一方、曲線の第2の部分において、血漿中濃度はゆっくりと減少し、2時間後にLLOQ定量化の下限未満となった。生データおよびノンコンパートメント分析結果を、表30に報告する。表29:薬物動態パラメーター表30:生データおよびノンコンパートメント分析結果実施例12ヒトCYP450のインビトロでの阻害SC12とチトクロムP450酵素との相互作用を、蛍光ハイスループットP450アッセイGentest使用して試験した。化合物のIC50は、アイソエンザイムCYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2C8、CYP2B6、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A4およびCYP3A5で計算した。材料および方法P450アイソフォームの阻害を、CYP代謝によって蛍光性となった特異的基質を使用して特異的アッセイにおいて測定した。ACNアセトニトリルCYP2E1、CYP2C8、CYP2B6、CYP3A5またはDMSO全ての残りのアイソフォームに溶解した化合物を、インキュベーション/NADPH再生緩衝液を含有する96ウェルプレートにおいて、濃度反応曲線8つの濃度において2連で試験したn=2。特異的アイソエンザイムおよび基質を加え、37°Cでインキュベートした。アッセイによって反応は異なる時に終了し、プレートを適当な発光/励起波長でFluoroskanAscentで読み取った。各アイソエンザイムのための公知の阻害剤についての2連で行った濃度反応曲線を、全てのアッセイにおいて陽性対照として試験した。データ分析各化合物および標準物質について、IC5050阻害における濃度は、Grafitv.5.0.1を使用することによって決定した。結果結果を、表31化合物および表32標準物質に示す。SC12は、CYP2E1、CYP3A5およびCYP3A4アイソフォームに対して中程度の阻害、ならびにCYP2C9に対して弱い阻害を示した一方、他のアイソフォーム活性を阻害しないようであった。SC12は、特にACN中で低溶解性を示したため、結果を過小評価することができた。行われた実験の全てにおいて標準参照阻害剤は、予想される作用強度を示した。表31:P450の結果略語BFC:7-ベンジルオキシ-4-トリフルオロメチル-クマリンCEC:3-シアノ-7-エトキシクマリンAMMC:3-[2N,N-ジエチル-N-メチルアミノエチル]-7-メトキシ-4-メチルクマリンDBF:ジベンジルフルオレセインDMSO:ジメチルスルホキシドEFC:7-エトキシ-4-トリフルオロメチルクマリンMFC:7-メトキシ-4-トリフルオロメチルクマリン。表32:標準的阻害剤に対するP450の結果実施例13哺乳動物血漿における化合物Aの代謝安定性およびプロファイリングの調査、ならびにヒト血漿における化合物AおよびSC12の安定性の比較化合物Aの安定性を、5時間までラット、ウサギ、ミニブタおよびヒト血漿において試験し、代謝プロファイルを、ウサギおよびヒト血漿において査定した。化合物Aは、ウサギおよびヒトにおいてエステラーゼ/アミダーゼによって高度に代謝され、ならびにミニブタおよびラット種においてより少ない程度で代謝された。ウサギについて30分および120分において、ならびにヒトについて60分および300分においてすなわち、2つの種において、親化合物の概ね同じ残留百分率で機能する代謝を研究した。3つの代謝物がウサギにおいて見出され、ヒトにおいてそれらの2つが見出された。ウサギにおいて、主要な代謝物は、モノエステル1つのオレイン酸の喪失、M2および酸代謝物アミド加水分解、M3であったが、一方、ほんの微量のジ加水分解された代謝物両方のオレイン酸の喪失、M1が観察された。ヒト血漿において、ウサギにおいて従前検出された最初の2つの主要な代謝物のみが、選択した時点で同定され、酸生成物M3は、120分において主流の代謝物であった。結論として、ヒトおよびウサギ種において、2つの主要な代謝物のみの形成によって、クリアランスの比較できるプロファイル、および代謝プロファイルが見出され、律速段階はモノエステル形成M2をもたらす加水分解であり、これは酸誘導体M3に急速に変換される。SC12は120分まで代謝されず、化合物の70超が300分においてまだ存在した300分において未変化の化合物A:55ため、SC12と比較して、ヒト血漿において化合物Aの第2のバッチによって行った第2の実験は、SC12が化合物Aより少し安定的であることを示唆した。実施例14皮膚がん細胞株に対するSC12の直接的アポトーシス促進性作用:イミキモドとの比較イミキモドは、その免疫調節性作用に加えて、腫瘍細胞においてアポトーシスを直接的に誘発することが報告されてきており、これはインビボでの異なる起源の腫瘍において確認されてきた。必要とされる濃度はAldara5クリーム中の濃度のまだ概ね3ログ未満であるであるため、イミキモドのアポトーシス促進性活性は、インビボでのイミキモドの抗腫瘍作用の一因となり得る。実験方法および結果細胞株:皮膚扁平上皮細胞癌SCC細胞株ヒトSCL-I、SCL-II、SCC-12、SCC-13は、これらの成長挙動、およびデスリガンドCD95L、TRAIL、TNF-αに対するアポトーシス感受性に関して、ならびに他の処理に関して良好に特性決定された。SCC細胞は、標準条件10FBS下で増殖する。SCC細胞に対するSC12の直接アポトーシス促進性および細胞毒性作用の決定:総細胞数に対する作用の時間依存性および用量依存性を、細胞数に相当する、マイクロタイターウェルE-plates、Rocheにおける電導度の連続モニタリングに基づくリアルタイム細胞分析によって調査した。異なる濃度のSC12ならびにイミキモドImqを使用して4つの細胞株を処理し、細胞数を未処理対照細胞と比較した各細胞株について2つの独立した実験、トリプル値、異なる濃度。これらのアッセイについて、4つの細胞株を使用して、SCC細胞に対する作用についての代表的な概要が得られるはずである。このように、細胞を異なる濃度のSC12またはイミキモドで処理した。成長およびアポトーシス作用を、少なくとも7日間顕微鏡によってモニターした。図17は、SC12およびイミキモドによる細胞数の減少を示す。皮膚SCC細胞株を、細胞数に相当する、マイクロタイターウェルE-plates、Rocheにおける電導度について連続的にモニターした。TMXは、チャートにおいてSC12を示す。図18は、SC12およびイミキモドによって誘発された同様の形態学的変化を示す写真を提供する。3日目に、細胞脱離、形態学的変化および増殖の阻害を、SC12またはイミキモドで処理されたSCC細胞において観察することができる。処理時間3d、濃度:120マイクロモル。実施例15アジュバントとしての化合物AおよびSC12化合物AおよびSC12のアジュバントタンパク質抗原を使用してパイロット免疫化研究を行った。免疫化実験を、E.coliにおいて発現している2つの組換えタンパク質で行った。1つの抗原はマラリア寄生虫Plasmodiumfalciparumに由来し、他の抗原はMycobacteriumulcerans潰瘍性皮膚疾患であるブルーリ潰瘍をもたらすに由来した。5匹のマウスの群は、3週間の間隔で、10ナノモルの化合物AまたはSC12と混合した20マイクログラムの標的抗原による3回の皮下免疫化を受けた。第3の免疫化の後、20匹の免疫されたマウスの全ては、各々の標的抗原に対してIgG応答を発生した。化合物AおよびSC12の性能は同程度であった。局所的副作用腫脹または潰瘍形成などは観察されなかった。マウスにおける使用について承認された市販のアジュバントによる平行した免疫化は、より高い抗体価を生じたが、ここで局所的反応が観察された。図19は、M.ulcerans抗原に対するIgG力価の発生を示す左:化合物A、右、SC12。実施例16膀胱内の慢性処理後のマウス血清におけるイミキモドおよびSC12の曝露の調査材料および方法6~8週齢のC57BL/6雌マウスを、イミキモド全部で208nmol中0.1w/vまたはSC12全部で206.5nmol中0.38w/vによって膀胱内で処理した。血清試料をいくつかの時点0日目、2時間、1日目、24時間、および6日目、2時間において採取した。試料の調製イミキモド:SiroccoフィルタープレートWaters中で、50マイクロリットルのマウス血清を、5マイクロリットルのISイミキモド-D9、100マイクログラム/mlでスパイクした195マイクロリットルのアセトニトリル/メタノール1:1に加えた。プレートを10分間振盪し、真空下で濾過した5~10mmHg。SC12:SiroccoフィルタープレートWaters中で、70マイクロリットルのマウス血清を、5マイクロリットルのISイミキモド-D9、100ng/mlでスパイクした210マイクロリットルのアセトニトリル/メタノール1:1に加えた。プレートを10分間振盪し、真空下で濾過した5~10mmHg。試料を蒸発させ、70マイクロリットルのアセトニトリル/メタノール1:1に再懸濁させた。分析方法イミキモド:LC/MS/MS:PremiereXE、溶離液:ACN/H2O95/5A0.1HCOOH、5/95B、流量0.60ml/分、98A0~0.20分から100Bへの勾配0.6分で、次いで、1.1分まで100Bとする、0.4分間再調整。カラム:AcquityBEHC18、50×2.1mm、1.7マイクロメートル;注入量5マイクロリットル、カラム温度50°C。SC12:LC/MS/MS:PremiereXE、溶離液:MeOH/H2O95/5A0.1HCOOH、5/95B、流量0.80ml/分、85A0~0.10分から100Bへの勾配0.4分で、次いで、1.5分まで100Bとする、0.7分間再調整。カラム:AcquityBEHC8、50×2.1mm、1.7マイクロメートル、注入容量10マイクロリットル、カラム温度50°C。SC12、Q1/Q3921.5/385.05;CV35、CE33921.5/439.29;CV35、CE33イミキモド、Q1/Q3241.1/113.98;CV30、CE45241.1/140.9;CV30、CE40IS:イミキモド-D9、Q1/Q3250.1/113.98;CV30、CE45ESI陽性、MRM、抽出器5V;キャピラリー3.5kV;ソース温度140°C;脱溶媒和温度450°CLLOQ:SC12について0.5ng/ml、およびイミキモドについて2.5ng/ml結果この研究の目的は、イミキモドおよびSC12の膀胱内慢性投与後の、血清の曝露を評価することであった。SC12およびイミキモドの血清レベルを、各々表33および表34に報告する。両方の化合物について、特に、SC12について、低濃度が観察されたが、試料の主要な部分は、たとえSC12について得たLLOQが、イミキモドについて得たLLOQの5分の1であったとしても0.5対2.5ng/ml、LLOQ未満であった。イミキモドは投与の2時間後まで血清中に存在したが、蓄積は起こらず、24時間においてLLOQ未満をもたらし、処理の6日後の値は1日目と同程度である。表33:血清中のSC12レベル結果は平均±S.D.として表す、n=2表34:血清中のイミキモドレベル結果は平均±S.D.として表す、n=2略語の一覧アセトニトリルACN衝突エネルギーCEコーン電圧CVジメチルスルホキシドDMSO電子スプレーイオン化ESI内部標準IS液体クロマトグラフィー/質量分析法LC-MS/MS定量化の下限LLOQメタノールMeOH多重反応モニタリングMRM超高性能液体クロマトグラフィーUPLC。実施例17RAW264細胞における細胞内取込み細胞アッセイにおいて、SC12は、高い細胞内濃度に急速に達する。5×106個のRAW264細胞は、10cmの組織培養皿に一晩接着した。培地を、10マイクロモルの化合物AおよびSC12を含有する10mlの新しい培地に交換した。細胞を、1時間、6時間、および18時間インキュベートした。上清2mlおよび細胞ペレットをトリプシン処理によって集め、LC-MSによるそれに続く分析のために20°Cで冷凍した。表35は、この分析の結果を示す。表35、細胞内取込みアッセイの結果本明細書において参照されている各特許、特許出願、刊行物および文献の全体は、参照により組み込まれている。上記の特許、特許出願、刊行物および文献を引用することは、上記のいずれかが適切な従来技術であるという承認ではなく、これらの刊行物または文献の内容または日付に関する承認を構成しない。技術の基本的態様から逸脱することなく上記に対して修正を行ってもよい。技術を1つ以上の特定の実施形態を参照して十分に詳細に記載してきたが、本出願に特に開示されている実施形態に対して変更を行ってもよいことを当業者は認識するが、これらの修正および改善は、技術の範囲内および精神内である。本明細書に例示的に適切に記載されている技術は、本明細書において特に開示されていない任意の要素複数可の非存在下で行ってもよい。したがって、例えば、本明細書においてどの場合にも、含む、本質的にからなるおよびからなるという用語のいずれかは、他の2つの用語のいずれかと置き換えてもよい。用いられてきた用語および表現は、限定する用語としてではなく記載する用語として使用し、このような用語および表現を使用することは、示され、記載されている特徴またはその部分の任意の同等物を除外せず、様々な修正が特許請求した技術の範囲内で可能である。aまたはanという用語は、要素の1つまたは要素の複数が記載されていることが文脈的に明らかでない限り、それが修飾する要素の1つ以上を意味することができる例えば、1つの試薬は、1つ以上の試薬を意味することができる。約という用語は、本明細書において使用する場合、基礎を成すパラメーターの10以内の値すなわち、プラスまたはマイナス10を意味し、一連の値の最初の約という用語の使用は、値の各々を修飾するすなわち、約1、2および3は、約1、約2および約3を意味する。例えば、約100グラムの重量は、90グラム~110グラムの重量を含むことができる。さらに、値の一覧が本明細書に記載されているとき例えば、約50、60、70、80、85または86、一覧は、全ての中間値およびその小数値例えば、54、85.4を含む。したがって、本技術は代表的実施形態および任意選択の特徴によって特に開示されているが、本明細書において開示されている概念の修正および変形を当業者は用いてもよく、このような修正および変形はこの技術の範囲内であると考えられることを理解すべきである。技術の特定の実施形態を、下記の特許請求の範囲複数可において記載する。"