"対象水溶液において少なくとも一つの対象ポリマに関する加水分解酵素活性を検出する測色装置1であって、i少なくとも一つの上面2aにより区切られる基板2と、ii初期厚さeを有し、前記対象ポリマを含む透明検出層3とを備え、前記透明検出層3は一方では前記対象水溶液を塗布して空気と検出層3間の第1の界面4を形成することを目的とする上面3aと、他方では基板2の前記上面2aに形成されて検出層3と基板2間の第2の界面5を一緒に形成する下面3bとを含み、前記第1の界面4と前記第2の界面5は光学反射現象を生じるように構成され、前記検出層3は、一方では、前記対象水溶液の塗布後、それが前記加水分解酵素活性を消失しているときに前記初期厚さeを維持し、他方では、前記対象水溶液の塗布後、それが前記加水分解酵素活性を含むときに前記初期厚さeより薄い第2の厚さe’を示すように構成され、それにより、前記透明検出層3の前記初期厚さe及び/又は前記第2の厚さe’は前記第1の界面4と前記第2の界面5で反射された光ビームを再結合することにより生じる光学干渉現象により色を生じるように構成されることを特徴とする測色装置。前記検出層3の前記初期厚さeは光学干渉現象により第1の色を生じるように選択され、前記検出層は、一方では、前記対象水溶液の塗布後、それが前記加水分解酵素活性を消失しているときに前記第1の色を生じる前記初期厚さeを維持し、他方では、前記対象水溶液の塗布後、それが前記加水分解酵素活性を含むときに前記初期厚さeより薄い第2の厚さe’を示し、光学干渉現象により前記第1の色とは異なる第2の色を生じ、あるいは前記第1の色を消滅させるように構成されることを特徴とする請求項1に記載の測色装置。前記透明検出層3の前記初期厚さeは70ないし900nmの厚さの範囲から選択される均一の厚さであることを特徴とする請求項1又は2何れか一つに記載の測色装置。前記透明検出層3の前記初期厚さe及び/又は前記第2の厚さe’は380nmないし780nmの波長で最大反射率を有する光学干渉現象により色を生じるように構成されることを特徴とする請求項1ないし3の何れか一つに記載の測色装置。前記透明検出層3は1.2ないし1.7、好ましくは1.4ないし1.6の屈折率ncを有することを特徴とする請求項1ないし4に記載の何れか一つに記載の測色装置。前記透明検出層3に含まれる前記ポリマはバイオポリマの中から選択されることを特徴とする請求項1ないし5の何れか一つに記載の測色装置。前記基板2は透明であり、前記透明検出層3は前記基板2の屈折率nsとは異なる屈折率ncを有することを特徴とする請求項1ないし6の何れか一つに記載の測色装置。前記基板2は不透明であり、反射性上面2aを有することを特徴とする請求項1ないし6の何れか一つに記載の測色装置。前記透明検出層3に含まれるポリマは固定化された状態であることを特徴とする請求項1ないし8の何れか一つに記載の測色装置。前記透明検出層3は前記対象ポリマと水素架橋ネットワークを形成するナノ結晶を含むことを特徴とする請求項9に記載の測色装置。前記ナノ結晶は多糖ナノ結晶、好ましくはセルロースナノ結晶から成ることを特徴とする請求項10に記載の測色装置。前記ナノ結晶は負表面電荷を有し、前記透明検出層3はそれぞれ前記対象ポリマを含む少なくとも二つの副層6から成り、前記副層6はポリカチオン性化合物を含む挿入された副層7により対として分離されることを特徴とする請求項10又は11の何れか一つに記載の測色装置。前記透明検出層3はそれぞれ少なくとも一つの対象ポリマを含む少なくとも一対の二つの副層6、7から成り、第1の副層6は一つ又はいくつかの第1の対象ポリマを備え、第2の副層7は一つ又はいくつかの第2の対象ポリマを含むことを特徴とする請求項10又は11の何れか一つに記載の測色装置。前記透明検出層3は前記対象ポリマと共有結合架橋ネットワークを形成する樹脂を含むことを特徴とする請求項9に記載の測色装置。対象水溶液において少なくとも一つの対象ポリマに関する加水分解酵素活性を検出する方法であって、少なくとも以下のステップを含む方法。請求項1ないし14の何れか一つに記載の測色装置1を設けるステップと、前記対象水溶液を前記透明検出層3の上面3aに塗布するステップと、前記透明検出層3の前記上面3aを洗浄するステップと、前記透明検出層3を乾燥するステップと、前記対象溶液の塗布個所において前記透明層3の色を分析するステップ。従って、対象水溶液において少なくとも一つの対象ポリマに関する加水分解酵素活性を検出できる、検出薄層上の光学干渉現象を用いるそのような測色装置の必要性がある。文献米国特許出願公開第2010/068749号明細書は一定の天然産物、例えば食料品の寿命及び/又は品質を分析するそのような測色装置を述べている。この測色装置は重畳層、すなわち基板、反射器、生分解性ポリマ層及びミラーから成る。この測色装置は、生分解性ポリマ層の厚さの変化が肉眼に見える色の変化を生じて酵素活性の存在を表すように構成される。このために、生分解性ポリマ層は生体分子、特に酵素又は触媒代謝物により分解可能なポリマで出来ており、ミラーはナノ粒子層から成る。しかしながらこの測色装置は十分に満足のいくものではなく、この特定の重畳層、詳細にはナノ粒子に基づくミラー層の存在は比較的製造するのに複雑である。この状況において、出願人は対象水溶液において少なくとも一つの対象ポリマに関する加水分解酵素活性を単純、高速かつ高感度に検出できる測色装置を開発した。このために、本発明による装置は酵素活性を検出するための干渉フィルタを形成する透明薄層又は透明薄膜を使用することに基づいている。この検出層は、所望の加水分解酵素活性を備える水溶液に曝されたときに状況に従って変化、出現又は消滅する干渉色を生じ得る。このために、本発明によるこの測色装置は、それがi少なくとも一つの上面により区切られる基板と、ii初期厚さeを有し、前記対象ポリマを含む透明検出層とを備えることを特徴とする。前記透明検出層は一方では前記対象水溶液を塗布して第1の空気/検出層界面を形成することを目的とする上面と、他方では基板の前記上面に形成されて第2の検出層/基板界面を一緒に形成する下面とを含む。前記二つの界面は、光学反射現象を生じる傾向がある。前記検出層は、一方では、前記対象水溶液の塗布後、それが前記加水分解酵素活性を消失しているときに前記初期厚さeを維持し、他方では、前記対象水溶液の塗布後、それが前記加水分解酵素活性を含むときに前記初期厚さeより薄い第2の厚さe’を示すように構成され、前記透明検出層の前記初期厚さe及び/又は前記第2の厚さe’は前記空気/検出層界面と検出層/基板界面で反射された光ビームを再結合することにより生じる光学干渉現象により色を生じるように構成される。好ましい実施例によれば、前記検出層の前記初期厚さeは光学干渉現象により第1の色を生じるように選択され、前記検出層は、一方では、前記対象水溶液の塗布後、それが前記加水分解酵素活性を消失しているときに前記第1の色を生じる前記初期厚さeを維持し、他方では、前記対象水溶液の塗布後、それが前記加水分解酵素活性を含むときに前記初期厚さeより薄い第2の厚さe’を示し、光学干渉現象により前記第1の色とは異なる第2の色を生じ、あるいは前記第1の色を消滅させるように構成される。組み合わせて考えても、互いに独立に考えてもよい発明の他の好都合な特徴は以下に明記される。すなわち、透明検出層の前記初期厚さeは70ないし900nm、好ましくは75ないし250nmの厚さの範囲から選択された均一厚さであり、前記透明検出層の初期厚さe及び/又は第2の厚さe’は380nmないし780nm、好ましくは400nmないし700nmの波長で最大反射率を有する光学干渉現象により色を生じ、前記透明検出層の屈折率ncは1.2ないし1.7、好ましくは1.4ないし1.6であり、上側検出層に含まれるポリマはバイオポリマの中から、すなわち好都合には、オリゴ糖、多糖、ペプチド、蛋白質、リグニン、核酸、角皮素及び/又はコルク質から選択される。特定の実施例によれば、前記基板は透明であり、透明検出層は基板屈折率nsとは異なる屈折率ncを有する。この場合、基板の屈折率nsは好都合には透明検出層の屈折率ncより大きい。代替実施例によれば、前記基板は不透明であり、反射性上面を有する。発明のなおもう一つの特性によれば、前記透明検出層に含まれるポリマは好ましくは酵素活性が消失した対象溶液の塗布に耐えるように固定化される。この場合、上側検出層は好都合には、前記対象ポリマと水素架橋ネットワークを形成する角質化ナノ結晶を含む。好ましくは、前記ナノ結晶は好都合には多糖ナノ結晶、好ましくはセルロースナノ結晶から成る。対応するナノ結晶は好都合には負表面電荷を有する。また透明検出層はそれぞれ対象ポリマを含む少なくとも二つの第1の副層から成り、前記第1の副層はポリカチオン性化合物を含む挿入された副層により対として分離される。一つの特定の実施例において、透明検出層はそれぞれ少なくとも一つの対象ポリマを含む少なくとも一対の二つの副層好ましくは少なくとも二対の二つの重畳副層から成り、第1の副層は第1又はいくつかの第1の対象ポリマ好都合には多糖ナノ結晶を備え、第2の副層は第2又はいくつかの第2の対象ポリマを含む。この場合も、代替案として、透明検出層は好都合には対象ポリマと共有結合架橋ネットワークを形成する樹脂を含む。この発明はまた対象水溶液において少なくとも一つの対象ポリマに関する加水分解酵素活性を検出する方法に関する。この方法は少なくとも以下の一連のステップを含むことを特徴とする。すなわち、上に定義された測色装置を設けるステップと、前記対象水溶液を前記透明検出層の上面に塗布するステップと、前記透明検出層の前記上面を洗浄して前記対象水溶液を除去するステップと、前記透明検出層を乾燥するステップと、前記対象溶液の塗布個所において前記透明検出層の色を分析するステップとである。この発明はまた対象水溶液において少なくとも一つの対象ポリマに関する加水分解酵素活性を検出する、上に定義された測色装置の使用法に関する。この発明は添付図に関連する以下の説明により決して限定されることなくさらに説明される。この発明は従って対象水溶液において少なくとも一つの対象ポリマに関する加水分解酵素活性を検出する測色装置に関する。用語検出は対象水溶液中の加水分解酵素活性の存在の有無を判別することを指す。代替又は補足的に、加水分解酵素活性の検出は対象水溶液中の定量的酵素活性値を決定することにある。この定量値は毎秒1モルの基質の変化に触媒作用を及ぼす酵素量であるカタールkatで表わすことができる。この定量値は以下として表わすこともできる。すなわち、毎分1μモルの基質の変化に触媒作用を及ぼす酵素量に対応する国際単位IU、毎秒酵素分子当たりの変化される基質分子数又は酵素モル当たりの変化される基質モル数である回転数kcat、毎分酵素モル当たりの変化される基質モル数であるモル活性、IU/mg酵素たんぱく質又はμkat/mgで表わされる酵素たんぱく質のミリグラム当たりの比活性度。用語検出はさらに対象水溶液中の前記加水分解酵素活性を含む活性酵素の存在の有無を判別することを指す。加水分解酵素活性は生化学加水分解反応に触媒作用を及ぼす加水分解酵素型酵素により実施される仕組みを指す。このような加水分解反応を実施し易い酵素は詳細には、ECEnzymeCommissionnumbers酵素番号の略-NomenclatureCommitteeoftheInternationalUnionofBiochemistryandMolecularBiologyとして知られる命名法のEC3グループに分類される。加水分解酵素型酵素の内、バイオポリマに対して加水分解活性を有する酵素に言及されてもよい。バイオポリマを加水分解できるこれらの酵素の内、詳細には配糖体又はグリコシダーゼ加水分解酵素これらの酵素は好都合にはEC3.2.1に分類されるとしても知られる多糖加水分解酵素に言及されてもよい。用語多糖加水分解酵素は例えばキシラナーゼ、セルラーゼ、キチナーゼ、ペクチナーゼ、マンナーゼ、及びCellulyve登録商標を指す。バイオポリマ加水分解酵素の内、例えばプロテアーゼ、ヌクレアーゼ、及びリグニアーゼにも言及されてもよい。対象水溶液はいくつかの化学種、すなわち、少なくともi実質的に水、好ましくは全て水から成る溶媒、及びii溶液と呼ばれる溶液又は懸濁液状の一つ又はいくつかの化合物を含む液相から成る。溶液又は懸濁液状の前記化合物の少なくとも一つは前記加水分解酵素活性を備える水溶液に対して前記活性を生じることができる活性酵素から成る。酵素活性が望まれるポリマの例は以下に挙げられる。本発明による測色装置1が図1に模式的に示される。この測色装置1は二つの重畳層、すなわちi担体の役目をして上面2aで区切られる基板2、及びii対象ポリマを備え、ncと表示される屈折率を有する透明検出層3を備える。一般的に言えば、本明細書において、与えられた屈折率は20°Cの温度と520nmの波長に適用される。透明検出層3は二つの対向面、すなわちi前記水溶液又は対象水溶液を塗布することを目的とする上面3aと、ii基板2の前記上面2aに形成される下面3bとにより区切られる。透明検出層3の上面3aは好都合には、決して付加的層例えばナノ粒子層で覆われないという点で自由である。検出層3のこれら二つの面3aと3b間の距離は前記透明検出層3の厚さを定める。この透明検出層3は初期は、eと称される初期厚さを含む図1。これらの層2及び3は一緒に、検出層3のそれぞれ上面3aと下面3bにおいて二つの光学界面、すなわち、空気と検出層3間に位置する第1の界面4屈折面を形成する、及び検出層3と基板2間の第2の界面5を形成する。本発明によれば、透明検出層3は試験される水溶液中の対象ポリマに関する加水分解酵素活性を検出できるように構成される。この検出層3は前記検出された加水分解酵素活性を光学信号に変換する手段である。このために、透明検出層3は、前記対象水溶液の塗布後、それが前記加水分解酵素活性を消失しているときに前記初期厚さeを維持するように構成される図1。この透明検出層3はまた、前記対象水溶液の塗布後、それが前記加水分解酵素活性を含むときに前記初期厚さeより薄い第2の厚さe’を有するように構成される図2。従って、対象水溶液中の加水分解酵素活性の存在は検出層3の厚さの減少初期厚さeから第2の厚さe’へのを生じ、この透明検出層3における観測可能なオペレータにより直接、あるいは適当な装置を用いて着色の変化をもたらす。これを達成するために、透明検出層3の初期厚さe及び/又は透明検出層3の第2の厚さe’は光学干渉現象により色を発生させることができる。以下に展開されるように、装置1のこれらの特性は対象酵素活性の存在下で検出層3において光学的変化が観測されることを可能にするであろう。好都合には、この光学的変化は以下の現象の内の一つである。すなわちi第1の干渉色から第2の干渉色への変化、又はii干渉色の出現、又はiii干渉色の消失である。実際、透明検出層3は干渉フィルタとして働く。その厚さe又はe’に応じて、透明検出層3は、好都合には可視域のいくつかの特定波長に対して光学反射及び干渉現象強め合う/弱め合うにより色を帯びる。より詳細には、光が第1の界面4空気/検出層3に当たったときに、ビームの一部は反射される。光の他の部分は検出層3を透過し、そこでそれは第2の界面5検出層3/基板2で反射される。第2の界面5で反射されたビームはより長い距離を移動して光の位相ずれを生じる。移動距離が入射光の半波長の桁にあるときは、反射ビームの再結合は干渉を生じて検出層3での色の出現をもたらす。検出層3において観測できるものは区別せずに干渉色とも干渉の色とも呼ばれる。検出層3に関する用語色、特に干渉色は好都合には人により肉眼で直接的に知覚される色に適用され、i色相色相は色自身を特徴付けるすなわち赤、緑、黄、青等及び/又はii明度及び/又はiii彩度を有する。用語色、特に干渉色はまた、強め合う干渉現象が最大になる波長に適用され、場合によってはこの色は、好都合には可視域において反射曲線が最大になる波長に対応し、この色はまたその分光曲線波長依存の反射率により定義できる。干渉、それに応じた色の出現は従って本質的にi検出層3の厚さ及びii前記検出層3を区切る二つの界面4、5での反射現象に関連する。この色はポリマの何れの化学マーキングも不要である。実際に上に述べられたように、検出層3の初期厚さeと第2の厚さe’に応じて、この色の変化は好都合には検出層3における干渉色の出現、消失又は変化である。この色の変化は従って好都合には人により直接的に観測可能なi色相及び/又はii明度及び/又はiii彩度の変化である。完全を期して、測色装置1の種々の態様が以下に詳細に述べられる。基板i透明検出層用の担体を形成し、またii測色装置1に当てられる光ビームの反射全反射又は部分反射及び好都合には正反射を保証できる材料で基板2は出来ている。第1の実施例によれば、基板2はnsと表示される屈折率を有する透明材料から成る。好都合には、この材料は等方性均一線形媒体型の材料である。この基板2の屈折率nsは透明検出層3の屈折率ncとは異なる。検出層3と基板2間の第2の界面5は従って屈折面を形成する。詳細には、基板2の構成材料は透明検出層3の屈折率ncより大きい屈折率nsをもつものが選択される。例えば、1.2ないし1.7の屈折率ncを有する上側検出層3に対し、基板2は好都合には3ないし5の屈折率を有するシリコンの薄片一般的にウエハと名付けられるから成る。一般的に言って、この界面5検出層3と基板2間の屈折率nc/ns間の差が大きければ大きいほど反射率反射光の百分率は大きくなる。第2の実施例において、基板2は反射性の上面2aを有する不透明材料から成る。ここで、反射は光学的全反射又は少なくとも半反射を指す。このような上側反射面2aを得るのに適した材料はアルミ、クロム、金、ニッケル、シリコン、銀のような化学金属元素又はそれらの混合物を含む。他の適切な材料は酸化クロム及び酸化チタンのような金属酸化物を含む。一般的に言って、実施例が何であれ、第2の界面5における反射率は例えば少なくとも20、場合によっては20ないし50であり、90より大きくてさえよい。透明検出層検出層3は少なくとも一つの対象ポリマ、すなわち単一ポリマ又はポリマの組合せを備える。用語ポリマは共重合体とホモポリマを含む。ポリマは好都合にはバイオポリマ、言い換えれば有機ポリマ、すなわち生物組織に由来するポリマの中から選択される。参考までに、これらのポリマは以下の中から選択することができる。すなわち、オリゴ糖及び多糖セルロース、キシレン、ペクチン、キトサン、キチン、キシログルカン、アラビノキシラン等、ペプチド及び蛋白質牛又は人の血清アルブミン、グルテニン等、核酸、詳細にはデオキシリボ核酸、リボ核酸等、クチン、スベリン及びリグニン。このようなバイオポリマは孤立状すなわち、別個のポリマ鎖であっても、塊状すなわち混合されたポリマ鎖であっても、結晶状すなわち規則的に反復されるパターンに従って配列されたポリマ鎖であってもよい。検出層3は、好都合には1.2ないし1.7、好ましくは1.4ないし1.6の屈折率ncを有する。検出層3の上面3aと下面3bは互いに平行、あるいは少なくとも近似的に平行である。これら二つの面3a及び3bは好ましくは平面、あるいは少なくとも近似的に平面である。上に述べられたように、これら二つの面3a及び3bは、好都合には全面にわたり均一又は一定の厚さから成る初期厚さeを定める。この初期厚さeは70ないし900nm、より好ましくは75ないし250nmの範囲から選択される。前に指摘されたように、透明検出層3は前記酵素活性が消失している溶液の塗布時に前記初期厚さeを維持することができる。このために、対象ポリマは好都合には固定化される。この固定化はi共有結合又は化学型収縮、及び/又はii非共有又は物理型静電、水素、ファンデルワールス力の架橋により発生できる。上のiの場合、上側検出層3は好都合には対象ポリマと共有結合架橋ネットワークを形成する樹脂を含む。この樹脂は網状化すべきポリマに応じて選択される。そのような樹脂を選択及び実施するために、参考文献として例えば以下の文献を使用することもできる。すなわち、Ducereetal2005AcapacitivehumiditysensorusingcrosslinkedcelluloseacetatebutyrateSensorsandActuatorsBChemical106331334、Wuetal2009MolecularlyimprintedorganicinorganichybridmembranesforselectiveseparationofphenylalanineisomersanditsanalogueSeparationandPurificationTechnology6897104、及びSchuleretal2001DecomposablehollowbiopolymerbasedcapsulesBiomacromolecules2921926。例えば、メラミン-尿素-ホルムアルデヒド樹脂MUFとしても知られるによる網状化は以下の利点を提供する。すなわち、網状化反応は多数のバイオポリマ類を網状化できる多くの化学官能アルコール、アミン、フェノールを用いて生じることができ、塗布すべき溶液の混合により単純な実施を可能にする水溶性製剤があり、網状化は単純である。すなわち、モノマは室温で安定であり、それは膜が1時間、乾燥雰囲気中で90°Cになったときに反応し、この処理はほとんどのバイオポリマに適合する。上のiiの場合、固定化は対象ポリマと水素架橋ネットワーク角質化現象とも呼ばれるを形成するナノ結晶により得ることができる。これを行うために、ナノ結晶は好都合には表面に負静電荷を含む化合物から成る。このために多糖ナノ結晶、好ましくはセルロースナノ結晶を選択することが好ましい。そのようなナノ結晶は例えば、RevoletalIntJBiolMacromol199214170172又はCranstonetalBiomacromoleculesvol72006p2522に述べられる手順を用いて綿の酸加水分解により作成される。例えば、キシログルカンに基づく透明検出層3を安定化するために、セルロースナノ結晶が添加される。アラビノキシランに基づく透明検出層3は実際には、好都合にはメラミン-尿素-ホルムアルデヒド樹脂を用いて凝固される。さらに、検出層3は等方性均一線形媒体又はIHLMを形成する単一層から成っていてもよい。この場合、検出層3は好都合にはその全高に至るまで対象ポリマで構成される。あるいは、透明検出層3はいくつかの重畳副層を備えてもよく、前記副層の少なくとも一つは対象ポリマを含む。後者の場合、対象ポリマを含む副層は好都合には少なくとも検出層3の上面3aを形成する。検出層3はそのとき好都合には少なくとも二つの副層を含み、やはり好都合には8ないし16層の副層を含む。この配置において、検出層3は好都合には、数対の重畳副層、好都合には4ないし8対の重畳副層から成る。前記対の重畳副層は互いに同一、あるいは少なくとも近似的に同一である。いくつかの副層を有するそのような構造において、検出層3は、例えば一つのセルロースの好都合にはナノ結晶状の副層と一つのキシログルカンの副層を順次有する重畳副層対を形成する対象ポリマの交互配列を含んでもよい。もう一つの例において、検出層3は、順次一つの高分子電解質例えば、ポリ-L-リシン又はPLL、又はポリアリラミン塩酸塩又はPAH副層と対象ポリマ例えばセルロースとキシログルカンの混合物を含む一つの副層とを有する重畳副層対を形成する副層の交互配列を含んでもよい。副層の交互配列は詳細には、堆積方法に関して以下に展開されるように、検出層3に望まれる厚さeを達成することを可能にする。さらに同じ静電荷を有する基板2と検出層3の場合、基板2の上面2aは好都合には高分子電解質から成る付着副層で裏打ちされて例えば図3に表わされ、参照番号7bで表示される前記基板2と前記検出層3間の架橋界面を形成する。例えば、高分子電解質副層はポリ-L-リシン又はポリアリラミン塩酸塩から成る。これは一方ではシリコンウエハから成る基板に対する事例であり、他方では共に負に帯電しているセルロースナノ結晶を含む検出層又は副層に対する事例である。製造方法透明検出層3は一つ又はいくつかのステップで適切な技術により基板2上に堆積される。一般的に言えば、透明検出層3を構築する様々の技術がある。浸漬積層技術又はディップコーティングは基板をポリマ溶液に浸漬することにある。この方法は数ナノメータ厚の非常に薄い層を生じる。この技術を実施するために、以下の文献を参照することもできる。すなわち、Jeanetal2008StructuralDetailsofCelluloseNanocrystalsPolyelectrolytesMultilayersProbedbyNeutronReflectivityandAFMLangmuir2434523458、又はCranstonetal2006MorphologicalandOpticalCharacterizationofPolyelectrolyteMultilayersIncorporatingNanocrystallineCelluloseBiomacromolecules2006725222530。スプレイ積層又はスプレイコーティングはポリマを担体上にスプレイすることにある。スプレイ中に溶媒は部分的に蒸発し、残りは堆積後蒸発する。この技術は浸漬積層より高速であるという利点を有する。この技術は例えばWagbergetalTheBuildUpofPolyelectrolyteMultilayersofMicrofibrillatedCelluloseandCationicPolyelectrolytesLangmuir24784795による文献に述べられる。遠心積層又はスピンコーティングは基板上、好ましくはその中心にポリマを含む溶液を滴下することにある。回転基板はその表面上に滴下された溶液をスピンにより拡げて過剰液体を排出し、残留溶媒は蒸発して基板上に原料のみを残す。得られた薄膜の厚さは回転速度、溶液の粘度及び/又は濃度により変化する。この最後の技術は例えばCranstonetalMorphologicalandOpticalCharacterizationofPolyelectrolyteMultilayersIncorporatingNanocrystallineCelluloseBiomacromolecules2006725222530又はCranstonetalBirefringenceinSpinCoatedFilmsContainingCelluloseNanocrystalsColloidsandSurfacesA20083254451による文献に研究されている。最後の技術の枠内において、検出層3を形成するように設計された層又は副層の厚さを調節するために、好都合にはDavidetalSpinCoatingofThinandUltrathinPolymerFilmsPolymerengineeringandsciencevol38No12December1998p2040から得られた以下の式1を参照することが可能である。すなわち、ただし、hf:層の厚さη0:溶液の初期粘度ρ:液体密度ω:スピン速度この原理は高分子電解質に特に有効であるが、他のタイプの相互作用を互いに有する何れの材料にも適用される。実際、検出層3は好都合には副層の重畳を形成するいくつかのステップに適用される。このような手順は例えば以下の実施例の項で展開される。このやり方を用いて、検出層3の製造と安定性が最適化できる。そのようなやり方はまたその厚さに、酵素作用後の検出層3の最終厚さe’を定めることを目的とする副層を導入するのに有用となり得る。酵素活性を検出する方法実際、対象水溶液において少なくとも一つの対象ポリマに関する加水分解酵素活性を検出する方法は少なくとも以下の一連のステップを含む。図1に関連して上に定義された測色装置1を設けた後、透明検出層3の上面3aに対象水溶液が塗布される。この水溶液は、その体積が好ましくは20μLないし1mLである液滴として堆積される。測色装置1は次いで、詳細には検討される酵素活性に依存する適切な時間と条件の下でインキュベートされる。透明検出層3の上面3aは次いで洗浄されて対象水溶液を除去し、酵素加水分解を経たかもしれない検出層の一部を除去する。これを行うために、酵素活性の消失した水溶液、例えば水又は適当な溶解緩衝剤を使用することが好ましい。前記透明検出層3は次いで乾燥される。最後に、前記対象溶液の塗布個所において透明検出層3の色が分析される。これを行うために、透明検出層3に光源が又は光ビームが向けられる。この光源は自然光でも人工光でもよい。この光は好ましくは多色型の光であり、好ましくはまた連続スペクトル型の光である。別段に定めがない限り、測色装置1は基板2の上面2aに対して直角に観測される。他の視角、例えば基板2の上面2aに垂直な軸に対して30度未満、好ましくは15度未満を使用してもよい。前に述べられたように、対象水溶液に加水分解活性がなければ、透明検出層3は初期厚さeを維持する。この場合、検出層3に光学的変化はない。逆に、対象水溶液中の加水分解活性の存在は透明検出層3の分解を生じ、その厚さの減少をもたらす。この場合、最初に初期厚さeを有する透明検出層3図1は、前記初期厚さeより薄い第2の厚さe’で終了する図2。この第2の厚さe’は好都合には0検出層3が除去されるないし250nm、好ましくは70ないし250nmである。初期厚さeから第2の厚さe’へのこの変化は好都合には以下の光学的変化の内の一つを生じる。すなわち、i互いに異なる第1の干渉色から第2の干渉色への変化、ii干渉色無しから干渉色出現までの変化、又はiiiある干渉色から前記干渉色の消滅までの変化。検出層3の色はi直接オペレータにより読み取っても、ii適当な読み取りシステムにより読み取ってもよい。透明検出層3の色の変化は可視光域において最も上手く観測され、従って読み取り装置を使用せずに人により検出できる。この場合、検出層3の初期厚さe及び/又は第2の厚さe’は、その最大反射率が380nmないし780nm、好ましくは400nmないし700nmの波長に位置する干渉色を得るように選択される。より一般的には、光学変化は好都合には、結果の読み取りと解釈を容易にする色相の変化である。オペレータにより直接行われるこの読み取りを容易にするために、対象溶液の塗布個所近傍の同じ検出層3に基準水溶液が塗布されてもよい。この基準水溶液は好都合には、酵素活性を消失した例えば、好都合には過熱による酵素活性の不活性化により水溶液からなる。対象水溶液の塗布個所と基準水溶液の塗布個所間の異なる色は前記対象溶液中の酵素活性の存在を示す。また、対象溶液の塗布個所と基準個所間の同一色は対象溶液中に何れの酵素活性もないことを示す。必要であれば、特に測色装置が紫外UV線、赤外線、近赤外線のような他の光源に曝されたときに透明検出層中に色の変化を観測するために読み取り装置が使用される。そのために、測色装置1の分析用に読み取り装置、例えば電荷結合素子CCD、デジタルカメラ等を含む光検出器が使用されてもよい。この場合、測色装置1は、好都合には光学的読み取り装置、光源及び随意には色変化を分析する手段を含む自動測色システムにおいて使用される。酵素活性は次いでi対象溶液と基準溶液により得られた色、あるいはii対象水溶液の塗布前後に得られた色を比較することにより求めることができる。この場合、読み取り装置は、好都合には検出層3での可視反射スペクトルを判定する手段である。好都合には、例として、前記検出層3における最大反射率波長がi対象溶液と基準溶液間、あるいはii対象水溶液の塗布前後で異なるときに光学的変化があると見なすことができる。対象水溶液の塗布前後の異なる色は前記対象水溶液中の酵素活性の存在を示す。対象水溶液の塗布前後の同一又は近似的に同一の色は前記対象水溶液中に酵素活性がないことを示す。さらに、対象水溶液中の酵素活性に対する定量値を決定するために、単純には、例えば対象水溶液の希釈、及び/又は検出層のインキュベーション時間及び/又は構造を適合することで十分である。そのとき、最終色は前記定量値に依存すると見なすことができる。特定の実施態様図1による第1の実施例において、透明検出層3は好都合には、一つ又はいくつかのステップで堆積された等方性均一線形媒体又はIHLMから成る。この場合、検出層3の減少厚さ図1の初期厚さeから図2の最終厚さe’へのは本質的にはインキュベーション時間に依存する。代わりに図3に示されるように、透明検出層3は以下の4つの副層6及び7の重畳から成っていてもよい。すなわち、それぞれが、好都合にはアニオン性ナノ粒子により固定化された対象ポリマを備える二つの副層6a及び6b、及びそれぞれがポリカチオン性化合物を含む二つの他の副層7a及び7b。各副層6、7は等方性均一線形媒体又はIHLMを形成する。これらの副層6及び7は交互に堆積されて、詳細には検出層3の上面3aを形成するポリマの副層6を有する重畳副層対6a、7a及び6b、7bを形成する。この構造は特に、厚い個々の副層を得る難しさを克服することを目的とし、副層の交互配列は所望の初期厚さeを得ることを可能にする。例えば、ポリカチオン性副層7はポリアリラミン塩酸塩又はポリ-L-リシンから成る。この場合、検出層3の減少した厚さ図3の初期厚さeから図4の最終厚さe’へのは好都合には検出層3の上面3aを形成する単層または複数層のポリマの副層6aに依存する。言い換えれば、加水分解酵素活性は好ましくは検出層3の上面3aを最初に形成する図4に示されるようにポリマの副層6aの全面的分解を保証する。この酵素作用の後、検出層3の上面3aは直接下にあるポリカチオン性副層7aの上面から成る。この実施例は初期厚さeや酵素活性の存在下で生じる最終厚さe’の試験を可能にするという利点を有する。やはり代案として図3に従って、透明検出層3は以下の副層6及び7の重畳を備えてもよい。すなわち、それぞれが第1又はいくつかの第1の対象ポリマを有する二つの副層6a及び6b、及びそれぞれが第2又はいくつかの第2の対象ポリマを有する二つの他の副層7a及び7b。これらの副層6及び7は交互に堆積されて重畳副層対6a、7a及び6b、7bを形成する。例えば、第1の対象ポリマはセルロースナノ結晶から成り、第2の対象ポリマはキシログルカンから成る。一般的に言えば、本発明による測色装置は従って対象ポリマに関して加水分解活性を検出するように構成されてもよい。この装置の利点はi使用するのに複雑な装置を必要としないこと、ii高い小型化能力を有すること、及びiii高速分析システムに組み込めることである。詳細には検出層の厚さと反応時間に適合することにより加水分解活性の半定量的測定に使用できることも興味深い。例えば、水溶液中のこの種の加水分解活性の半定量的測定の一つの可能な方法は好都合には以下のステップを含む。すなわち、その透明検出層が前記加水分解活性の存在下で加水分解を行うのに適した少なくとも一つの対象ポリマから成る、本発明による測色装置を設けるステップと、前記測色装置の前記透明検出層の上面に前記対象水溶液を塗布するステップと、前記透明検出層の前記上面を洗浄するステップと、前記透明検出層を乾燥するステップと、この前記水溶液中の加水分解活性を半定量評価するために前記対象溶液の前記塗布個所において前記検出透明層の色を分析し、一つ又はいくつかの基準個所例えば較正範囲と比較するステップとである。本発明によるこの測色装置はまた決定されたポリマに関する比加水分解活性の同定を可能にするという利点を提供する。例えば、水溶液中のこの種の比加水分解活性を同定する一つの可能な方法は好都合には以下のステップを含む。すなわち、その透明検出層が前記加水分解活性の存在下で加水分解を行うのに適した少なくとも一つの対象ポリマから成る、本発明による測色装置を設けるステップと、前記測色装置の前記透明検出層の上面に前記対象水溶液を塗布するステップと、前記透明検出層の前記上面を洗浄するステップと、前記透明検出層を乾燥するステップと、前記対象溶液の前記塗布個所における前記透明検出層の色を分析するステップと、前記塗布個所の色を基準個所と比較して前記加水分解活性の有無を判定するステップと、比較により、前記試験される水溶液が適切に前記透明検出層の色を変化することが明らかになれば、前記水溶液、又はその中に含まれる酵素を確実に選択するステップとである。この発明はまた以下に展開される実施例により説明される。基板上の透明検出層の作成とその安定性の検討装置使用される種々の製品は以下を含む。すなわち、高粘度小麦アラビノキシランAX-MV、47cStメガザイム社により販売と、中粘度小麦アラビノキシランAX-MV、22cStメガザイム社により販売と、ポリアリラミン塩酸塩PAHシグマ社により販売と、Cranstonetalに述べられる手順を用いて綿の酸加水分解により作成されたセルロースナノ結晶Cヒゲ結晶とも呼ばれると、タマリンドの種から抽出されたキシログルカンXGSilvestreVirginie2004thesisNantesUniversityと、メラミンホルムアルデヒド樹脂MUFレジメンAQ-7550イネオスメラミン社により販売この樹脂は最初に640μLの市販溶液から10に希釈され、10-2モル/LのHCl、5mLまで補充されると、その上面が研磨されたシリコンウエハとである。方法1.1.薄層の作成1.1.1.スピン層形成による構築担体は70硫酸H2SO4と30過酸化水素H2O2から成る腐食性混合物中で30分間クリーニングされる。支持体は次いで二つの連続する水槽内でリンスされ、窒素中で乾燥される。全ての試験に対して秒当たり1400rpmの同一加速度により2000RPMの回転速度でスピン層形成装置、SPIN150NPPSPS欧州により層は作成される。1.1.2.セルロース/キシログルカン層セルロース/キシログルカン層はセルロース分解活性を検出するように設計される。キシログルカンとセルロースはセルラーゼに敏感であることが知られているそれらは同じ骨格を有する。シリコンウエハはスピン層形成装置に入れられる。PAH0.5g/Lがシリコンウエハの中心に置かれ、5分間静止状態に置かれる。シリコンウエハは選択された速度で1分間回転され、次いで1分間水中でリンスされる。次いで、5g/Lのセルロースナノ結晶と5g/Lのキシログルカンを含むセルロース/キシログルカン溶液が中心に置かれ、5分間静止状態に置かれる。キシログルカンとセルロースナノ結晶は乾燥後混合物を固定化することができるネットワークを生成できる非共有相互作用を確立できる。シリコンウエハは次いで3分間回転され、3分間リンスされる。これらのステップは2回繰り返されて二対の副層一つはPAH副層、一つはセルロース/キシログルカン混合物の副層を有する膜を得る。1.1.3.アラビノキシラン膜AXアラビノキシラン膜は樹脂あり10及び15g/LのAX、あるいは樹脂なし5、10及び15g/LのAXで作成された。5の樹脂を有する15g/Lのアラビノキシラン溶液の作成は例えば以下のように得られる。すなわち、20g/Lのアラビノキシラン3.75mLが採取され、10の樹脂37.5μLが添加され、この混合物は超純水で5mLまで補充される。添加される樹脂量は所望の濃度5、10、15及び20に合うように調整される。10g/Lのアラビノキシランを含む溶液は上に述べられた原理に従って15g/Lの溶液から作られる。実際には、PAH溶液はシリコンウエハの中心に置かれて5分間静止状態に置かれる。次いで、シリコンウエハは3分間回転され、3分間リンスされる。最後に、アラビノキシラン溶液が中心に置かれ、5分間静止状態に置かれ、3分間回転される。1.2.干渉計による厚さ測定シリコンウエハ上に堆積された表面の厚さを測定するために、UV-可視SpecordS6000分光光度計が用いられる。シリコンウエハは二つのミラーの前にある支持台に置かれる。光は第1のミラーで反射され、サンプルに送られ、次いで第2のミラーまで反射され、検出器に送られる。反射光による膜厚測定は膜と光の相互作用に基づく周知の技術である。それは種々の界面での部分的反射及び透過から生じる干渉に依存する。分光光度計により対処される波長範囲182nmないし1019nmにわたりスペクトルが記録される。スペクトルの取得と膜厚の計算はWinAspectのソフトウェアを使用する。1.3.安定性試験まず、ポリマが堆積されるシリコンウエハが水中に浸漬され、次いで乾燥される。第2に、iイオン力の効果を評価する食塩水0.1モル/LのNaCl、及びiipHの効果を評価する酸性及び塩基性溶液pH2のHCl及びpH12のNaOHを用いて検出層の耐性が試験される。各溶液の液滴が基板の上に堆積され、3分間静止状態に置かれる。装置は水中でリンスされ、次いで乾燥される。検出層は安定性試験の各ステップで写真撮影される。結果:検出層の安定性効率的であるためには、薄層は酵素がない場合は一貫して安定していなければならない。検出層はまた水でリンスされねばならず、被検水溶液中で安定していなければならない。二つの場合が区別される。すなわち、セルロース/キシログルカン混合物:膜は網状化剤の添加無しに安定であり、薄層に対するイオン力とpHの効果のみが試験された。アラビノキシラン:膜は単独で安定していない層中のポリマ鎖の低凝集の故に色を消失させるには単純な水洗で十分である。pH及びイオン力に関してアラビノキシランに基づく検出層を安定化させるためにホルムアルデヒド/尿素樹脂の添加が試験され、次いで必要な樹脂量が最適化された。2.1.セルロース/キシログルカン安定性試験時に、NaCl0.1モル/L、HClpH2及びNaOHpH12の液滴がそれぞれ検出層上に堆積され、3分間そこに放置され、検出層は次いで水でリンスされる。試験前後で表面の色が変化しないことが観測される。従って、セルロースとキシログルカンの二重層は被検媒体に対して安定している。2.2.アラビノキシランアラビノキシラン層の安定性に関して以下のいくつかのパラメータの影響が調査された。すなわち、アラビノキシランのタイプ高粘度HVと中粘度MV、濃度15g/Lと10g/L及びアラビノキシラン溶液中の網状化樹脂百分率5ないし20。2.2.1.アラビノキシランのタイプの効果厳しい条件下で安定性試験を行う前に、層は水に浸された。このために15g/Lと10g/Lの中粘度を有するアラビノキシラン層が20の樹脂で検討された。それらを水に浸した後、層は均一なままであることが観測された。15g/Lと10g/Lの高粘度を有するアラビノキシラン層が次いで20の樹脂で検討された。それらを水に浸した後、厚さの減少に起因し、ポリマの損失に関連し得る色の変化が観測される。さらに、これらの層が中粘度アラビノキシラン層より均一でないことが観測される。従って高粘度アラビノキシラン層は安定していない。これは、アラビノキシランの分子密度が高いために凝集体を形成することに関連することが考えられる。これは樹脂が網状化することを困難にする。2.2.2.樹脂の濃度と百分率の層安定性への効果前の結果を踏まえて、2000rpmの回転速度と10及び15g/Lの濃度の溶液から作られた中粘度アラビノキシラン層に対して試験が行われる。層の安定性を判定するために二つのパラメータ、すなわちイオン力とpH酸性及び塩基性が使用された。0.1モル/LのNaCl、pH2のHCl及びpH12のNaOHの溶液が同じ方法で薄層上に堆積された。キシラナーゼが酢酸塩緩衝剤中で希釈されるので、緩衝剤がポリマ層を分解するかどうかをチェックする必要がある。この酢酸塩緩衝剤は従ってアラビノキシラン層に対しても試験される。安定性試験は15g/L及び10g/Lの中粘度アラビノキシラン膜について種々の樹脂濃度5、10、15及び20に対して行われた。特に5、10及び15樹脂濃度に対して色の変化が堆積個所において観測される。この色の変化は樹脂百分率が増すと見えにくくなる。残りの検討において、対象層は、溶液中でリンスされないが酵素活性を示す程度に安定していなければならない。これら二つの基準に対処するために、15の樹脂を含む層を選択することが推奨される。15g/Lの中粘度アラビノキシラン層は20の樹脂百分率に対して安定しており、10g/Lのアラビノキシラン層は15及び20の樹脂百分率に対して安定している。15g/Lと10g/Lのアラビノキシランの二つの中粘度サンプルに対して、樹脂濃度に関わらず、酸性溶液に対応する永続的な染みがあることが観測された。それは、アラビノキシランが酸の存在下で加水分解されたことに起因すると考えられる。それは、予防策を取って低酸性媒体中の酵素を使用しなければならないことを意味する。酢酸塩緩衝剤が薄層を分解しないことは注目に値する。これは従って、酵素に対する最適条件であるpH5の酢酸塩緩衝剤中で酵素を希釈できることを意味する。2.3.結論セルロース/キシログルカン層は酸pHとアルカリpHの食塩の存在下で安定している。高粘度アラビノキシラン層は水に浸された後は均一でないが、中粘度アラビノキシラン膜は安定している。アラビノキシランの中粘度層に対して樹脂濃度が増加するにつれ、これらの染みがあまり見えなくなることが観測される。従って、15樹脂の中粘度アラビノキシラン膜を用いて検討を継続することが決断される。同様の試験はまた24時間の安定性を明らかにした。酵素活性の測定上の実施例1に由来する装置による酵素活性の検出は従来のネルソン法と比較される。以下に検討される酵素は以下から成る。すなわち、βキシラナーゼM18000U、216U/mg、2300U/mL、メガザイム社により販売、及び完全に精製されていないトリコデルマリーゼイに由来するcellulyve理論的活性は4880nkat/g、49mg/gLyven社により販売。1.ネルソン法ネルソン法は多糖の加水分解中に遊離された還元末端を酵素により定量することを可能にする。定量は間接的であり、アルカリ媒体では沸点において、還元末端の疑似アルデヒド基は第2銅イオンを第1銅イオンに還元する。後者はヒ素-モリブデン試薬と反応して、その光学濃度ODが還元単糖の量に直線的に変化する青色を生じる。末端の数は10分のインキュベーションの後に定量される。ネルソンの定量は二段階で行われる。すなわち、還元末端での濃度に従ってこの方法の応答を定める較正線の決定。この段階は単糖類グルコースとキシロ-スに対して行われる。溶液中のポリマについて検討しようとする酵素活性の定量。それぞれアラビノキシランとキシログルカンに対するキシラナーゼとセルロースの活性が測定される。1.1.装置溶液A:200gの無水Na2SO425gの無水Na2CO325gのNa-Kの重酒石酸塩20gの無水NaHCO3溶液B:30gのCuSO45H2O4滴の高濃度H2SO4H2O適量200mL溶液C:25mLの溶液A1mLの溶液B溶液D:800mLのH2O中で溶解された50gのNH46MO7O244H2O速やかに注入された42mLの高濃度H2SO4小量の水で溶解された6gのNa2HAsO47H2OH2O適量1L1.2.標準範囲の作成250μg/mLの単糖母液の作成この場合、キシログルカンに対する基準としてグルコース母液が使用される。キシロース母液は二つの高及び中粘度アラビノキシラン溶液に対する基準となるであろう。0ないし250μg/mLの種々の母液希釈が行われる。各濃度に対して光学濃度が測定されて標準範囲を得る。1.3.酵素活性の定量酵素反応サンプルを作成するために、135μLの母液と15μLの酵素溶液が管に入れられ、40°Cで10分間インキュベートされる。10分後、100μLのサンプルを100μLの溶液Cに加えて酵素活性が停止される。白色基準の作成は酵素が不活性化されたときのODを測定することを可能にする。白色基準は10μLの酵素と90μLの母液が加えられた100μLの溶液Cから成る。測色反応サンプルは熱湯槽に15分間入れられる。サンプルは次いで冷却され、溶液Dが加えられて100μL白色とサンプル間の異なる色を得る。プレートが10分間撹拌し続け、次いで1mLの水が加えられる。最後に、プレート読み取り装置により600nmで光学濃度を読み取るために各穴の250μLが96個の穴を有するプレートに移される。結果を表わすために、標準範囲の濃度はμモルで表わさねばならない。活性を計算するために以下の式1が使用される。a=DeltaDO勾配×15015×1000t×dil1ただし、a:酵素活性nkat/mL、DeltaDO:サンプルと白色間の光学濃度差、勾配はμモルで表わされ、150は反応媒体の総量であり、15は酵素試験量の体積であり、tはインキュベーション時間秒この実験ではt=600秒であり、dilは酵素反応が生じた酵素の希釈である。測定が有効であるために許容できる最小のOD変動は0.1である。最小活性を計算するために用いられる式2は以下の通り。Delta=DeltaDeltaDO勾配×15015×1000t2計算はキシロ-スとグルコースの標準範囲に対して行われた。これらの結果に基づいて、この方法を用いる最低の測定可能な活性が3nkat/mLであることが演繹できる。2.検出層上の酵素活性の評価被検酵素溶液の液滴と基準溶液希釈され、110°Cで1時間加熱された1mLの酵素溶液の液滴が検出層上に3分間堆積される。本発明による装置は水中でリンスされ、乾燥される。検出層は酵素試験の各ステップで写真撮影される。第1の試験はCellulyveに対する125μg/mLの酵素溶液0.6nkat/mLを用いて行われ、溶液はキシラナーゼ19nkat/mLに対して2000分の1に希釈される。次いで酵素溶液は酵素活性が最早表面上に見えなくなるまで希釈される。3.結果3.1ネルソン法較正線まず、測定された光学濃度と還元末端における濃度の関係を決定するための二つの標準範囲が設定される。グルコースの標準範囲はキシログルカンに対する基準であり、キシロ-スの標準範囲はアラビノキシランに対する基準である。較正線は所定の期間で遊離還元末端従って酵素により行われた切断の数を決定することにより酵素の活性を計算することを可能にする。Cellulyve活性の測定キシログルカンに対するCellulyveの活性が調査された。Cellulyveは、大量のセルロース酵素を分泌できる真菌であるトリコデルマリーゼイに由来する。およそ2.4nkat/mLの理論的活性を有する0.5mg/mLのCellulyveの母液が作成された。較正線から、7nkat/mLの酵素活性が決定された。この結果は理論的活性とわずかに異なるが、同じ桁を有する。キシラナーゼ活性の測定二つの基板、すなわち高及び中粘度アラビノキシラン上のキシラナーゼの活性が確認された。供給業者により提出された純粋のキシラナーゼの活性はおよそ38,000nkat/mLと推定される。2000分の1ないし1000分の1に希釈された溶液に対して得られた結果に基づいて純粋のキシラナーゼの活性が計算された。得られた結果は下の表1に示される。およそ32,000nkat/mLの値が見出されたが、これは供給業者により与えられた値と同じ桁を有する。3.2.検出層上の酵素活性セルロース/キシログルカン上に実施例1で展開されるように、セルロース/キシログルカン検出層はポリアリラミン塩酸塩PAHの副層と交互に堆積された綿セルロースナノ結晶Ct及びキシログルカンXGの混合物の副層により形成される。得られた層は175nmの全厚を有し、淡黄色である。最初に、ネルソン法で用いられたものと同じCellulyveの濃度125μg/mL又は0.6nkat/mLが用いられた。酵素溶液の液滴が堆積され0.6nkat/mL、不活性化された酵素の液滴も堆積される基準:110°Cに1時間加熱された1mLの希釈酵素溶液。セルロースの液滴の堆積、リンス及び乾燥後、酵素が堆積された個所に青色が出現し、層厚が減少したことを示唆する。この厚さの減少は干渉法と原子間力顕微鏡法により確認された。酵素作用の前後の干渉曲線の測定図5は明らかに、その領域での干渉現象酵素作用の前のが酵素の作用により消滅したことを示す。この結果は、検出層の厚さが150nm未満であることを示唆する。水洗後に層は変化しないけれども、酵素作用によりその厚さはかなり減少した。酵素作用後の層の粗さは著しく小さいままであることに注目のこと。それを確認する理論はないけれども、i構造中に浸透することなく層の浸食により酵素が機能するか、iiPAHが酵素の作用に対する障壁となるのではないかと思われる。ここで、この装置が固体基板に対する酵素の作用を検討する好機になり易いことが分かる。この装置はまた不均一な媒体中のモデルシステムの再構築を可能にするはずである。次いで、酵素は酵素活性検出閾値を決定するために数回希釈される。被検溶液は以下の表2に提示される。実際に、希釈すればするほどS1からS4に、元の色と比較して色変化が顕著ではなくなることが分かる。従って、希釈すればするほど、ポリマ膜は分解されない。3分後に目視検出できる最小活性は0.06nkat/mLS1である。しかしネルソン法は3nkat/mLの最小活性を検出することを可能にする。本発明による装置による試験は従ってネルソン法より20倍敏感である。さらに、ネルソン法は10分のインキュベーション時間を必要とするが、本発明による試験は3分しか必要でない。これもまた、本発明による方法がより高速であることを証明している。アラビノキシランHV-MVここでも、ネルソン法と同じ酵素濃度2000分の1又は19nkat/mLに希釈されたキシラナーゼが使用される。酵素溶液19nkat/mLの液滴と不活性化された酵素基準が15g/L青色と10g/L灰褐色のアラビノキシラン膜上に堆積される。次いで、インキュベーションとリンス後、酵素が堆積された個所では色が消滅するが、基準個所では色が不変のままであることが分かる。セルロースとキシログルカンに基づく層と同様に、酵素活性が有効に検出される。10g/Lのアラビノキシランに対し、検出層の初期の色灰褐色がシリコンウエハのものと比較的似ているので、酵素活性はより見にくい。色相のレベル変化はほとんどない、あるいは皆無である。次いで、最小検出閾値を決定するために酵素の希釈により他の試験が行われた。被検溶液は以下の表3に提示される。まず、15g/Lと10g/Lの中粘度アラビノキシラン膜に作用するキシラナーゼの種々の希釈液が調査される。15g/Lの中粘度アラビノキシラン膜に関し、酵素溶液の活性が1.9nkat/mLS1であるときに色が消滅する。1.9×10-2nkat/mLS3までの酵素活性に対し色の変化はなお識別される。従って、アラビノキシランによる試験はネルソン法より150倍敏感である。10g/Lの中粘度アラビノキシラン膜厚は15g/Lの中粘度アラビノキシラン膜のものより小さく、酵素は10g/Lのアラビノキシラン膜をより容易に分解する。10g/Lの中粘度アラビノキシラン膜に対し、色変化は15g/Lの中粘度アラビノキシラン膜に対するより見にくい。これは、10g/Lの中粘度アラビノキシラン膜の膜厚がより小さく、色がシリコンウエハのものに近いという事実による。4.結論ネルソン法により決定された酵素活性は供給業者により与えられた活性に対応する。本発明による装置による試験に対し、ネルソン法に対して使用されるものと同じ酵素濃度が使用された。酵素活性は実際に観測された。本発明による装置により酵素活性の検出閾値を決定するために希釈が行われた。得られた結果は、本発明による装置がネルソン法により測定されるものより20ないし150倍少ない酵素活性を3倍少ない時間で検出できることを示す。酵素活性検出装置酵素活性検出に関する補足試験が実施例1に詳述される手順に従って堆積された検出層を含む装置により行われた。以下PAH-C5/XG14と呼ばれる使用される第1の装置は各副層対が以下から成る4対の副層から成る青色検出層を含む。すなわち、0.5g/Lの濃度で堆積されたPAHの副層、及びそれぞれ5g/L及び1g/Lの濃度で堆積されたセルロースナノ結晶及びキシログルカンの混合物から成る副層。本検出層は160nmと推定される初期厚を有する。以下C5/XG18と呼ばれる使用される第2の装置は各副層対が以下から成る8対の副層から成る青色検出層を含む。すなわち、5g/Lの濃度で堆積されたセルロースナノ結晶の副層、及び1g/Lの濃度で堆積されたキシログルカンの副層。本検出層は90nmと推定される初期厚を有する。被検酵素は、その初期活性が4880nkat/gであるいくつかのセルラーゼの混合物から成るLyven社のCellulyveTR酵素の混合物から成る。この酵素溶液はこれら二つの装置により、それぞれ0.6nkat/mL、0.24nkat/mL、0.12nkat/mL、0.06nkat/mL、0.024nkat/mL及び0.006nkat/mLの異なる濃度で試験された。結果異なる濃度の酵素溶液の液滴は50°Cのオーブンに3、5、10及び15分間入れられた検出層上に堆積される。膜C5/XG18及びPAH-C5/XG14の外観が酵素感度試験の前後で比較される。検出層の色が変化したときに活性が検出される。サンプルC5/XG18に対し、種々の時間に以下が観測された。すなわち、3分で、検出された活性は0.6、0.24及び0.12nkat/mLの活性であり、シリコンウエハの表面は0.6nkat/mLで見える。5分で、0.06nkat/mLの活性が識別でき、基板表面は0.6及び0.24nkat/mLの活性に対して影響を受ける。10分で、0.06nkat/mLの活性がはっきりと見え、表面は最初の3つの濃度に対して影響を受ける。15分で、酵素活性があらゆる濃度に対して検出され、最初の4つの濃度に対してウエハ表面が見え、0.024nkat/mLの活性は青い染みを形成する。サンプルPAH-C5/XG14に対し、種々のインキュベーション時間に以下が観測された。すなわち、3分で、検出された活性は0.6及び0.24nkat/mLの活性である。5分で、0.12nkat/mLの活性も検出される。10分で、0.024nkat/mLの活性も識別できる。15分で、0.024nkat/mLの濃度での浸食がなお見られる。目視試験は明らかに、酵素の作用が時間に依存することを示す。実際、高酵素活性レベル又は低活性レベルを有し、しかし長いインキュベーション時間のサンプルに対し、シリコンウエハの表面は見える。さらに、中間色の染み薄青色又は暗青色は、時間及び/又は濃度がシリコンウエハへの浸食を許さないときに現れる。サンプルPAH-C5/XG14に対し、あらゆる濃度及び時間において酵素浸食後に得られた色は多かれ少なかれ濃青色である。従って、浸食は膜C5/XG18の厚さ全体にわたり、3分でシリコンウエハの表面を露わにする。しかしながら、サンプルPAH-C5/XG14に対し、浸食は、PAH-C5/XG1の3.5二重層と等価な120nmの厚さ、つまりPAHの堆積後の厚さに相当する暗青色と同じ深さレベルで停止するように見える。これらの結果によれば、何れの理論にも結び付かないが、膜PAH-C5/XG14に対する酵素の浸食がPAH層により停止することはあり得ると思われる。PAHは従って、セルロースとキシログルカンのみを浸食して膜C5/XG18と同様にシリコンウエハの表面に到達できない酵素に対する障壁の役目をする。これらの構造のそれぞれは従って利点を提供する。構造PAH-C5/XG1はその厚さを変化させることにより試験の終わりに所望される色の選択を可能にする。しかしながら、最終の色が同じであるので浸食の強さを定量化することはできないであろう。構造PAH-C5/XG1は酵素の浸食をより明確に示す。実際、条件が組み合わされたときに検出層全体が浸食され、検出層の色変化により不完全な浸食を見ることを可能にする。二つの状況において、検出は実施例2による試験時より50倍敏感である。酵素活性検出装置酵素活性検出に関する補足試験が実施例1に詳述される手順に従って堆積された検出層を含む装置により行われた。以下C5-XG15及びC5-XG18と表示される使用される二つの装置はそれぞれ5及び8対の副層から成る検出層を備える。各副層対は以下を備える。すなわち、5g/Lの濃度で堆積されたセルロースナノ結晶の副層、及び1g/Lの濃度で堆積されたキシログルカンの副層。膜はそれぞれ以下を示す。すなわち、膜C5-XG15に対し、褐色及び70nm近辺の厚さ、及び膜C5-XG18に対し、青色及び3.28nmの標準偏差を有する127.5nm近辺の厚さ。被検酵素は、その初期活性が4880nkat/gであるいくつかのセルラーゼの混合物から成るLyven社のCellulyveTR酵素の混合物から成る。この酵素溶液は以下のそれぞれの濃度、すなわち100mg/L、50mg/L、25mg/L、20mg/L、15mg/L、10mg/L、1mg/L及び0.1mg/Lで二つの装置により試験された。結果異なる濃度の酵素溶液の2μL液滴は50°Cのオーブンに10、30及び60分間入れられた検出層上に堆積される。膜C5-XG15及びC5-XG18の外観は酵素感度試験の前後で比較される。検出層の色が変化したときに活性が検出される。サンプルC5-XG18に対し、10分の反応後、基板は100mg/L及び50mg/Lの濃度に対して見え、膜の全分解を示唆する。さらに、以下のより低い濃度、すなわち25mg/L、20mg/L及び15mg/Lのいくつかに対し膜の色は褐色に変わり、10mg/Lの濃度からはそれは不変のままである。30分の反応後、15及び10mg/Lの濃度の酵素溶液によるサンプルC5-XG18の分解ははっきりと見える。反応時間の60分への増加は、最低の濃度1mg/L及び0.1mg/Lが必ずしも色変化を生じないという点において検出を顕著に改善しない。一方、10mg/Lの濃度の酵素溶液による分解が30分のインキュベーション時間と比較して60分のインキュベーションに対して増加することでは注目に値する。これは30分後に見える褐色が60分で基板の灰色に置き換わるからである。サンプルC5-XG15に対する試験は同様の特性を示す。唯一の相違は10mg/Lの濃度の酵素溶液から生じ、30分後のサンプルC5-XG15に対して分解は完全であるが、上に明記されたサンプルC5-XG18に対して分解はほんの部分的であった。これらの結果は、膜の反応時間と厚さが試験時の感度と応答を最適化するために重要なパラメータであることを示す。さらに、検出層の反応時間と厚さの組合せは酵素活性の半定量評価に対して調整可能なパラメータである。例えば、その濃度が10mg/Lである酵素溶液は10分のインキュベーション後に検出されないが、30分のインキュベーション後には確実な結果を生じるサンプルC5-XG18に対して部分分解が得られることを念頭に置くこと。さらなるバイオポリマの処方と分解本発明による方法の他のバイオポリマへの適用可能性を評価するために、活性検出の確認として色の消滅を用いたいくつかのバイオポリマ/酵素対の評価概要が作成された。実施例1ないし3に従って、色を強調するために、バイオポリマ層のものより高い屈折率を有するシリコン基板上に堆積が行われた。それぞれの場合、基準として水、及び熱的に不活性化された酵素溶液この溶液は数分間沸騰してから堆積されるが使用される。以下に与えられる全ての結果に対し、酵素溶液、不活性化された酵素溶液、及び水溶液が室温で30分間インキュベートされた。ウシアルブミン血清の堆積トリプシンによる分解0.1g/LのMUF樹脂を含む10g/Lの溶液をスピン層形成することによりウシアルブミン血清の層が得られた。層は90°Cで1時間網状化された。チトサンと混合されたウシアルブミン血清の堆積、トリプシンによる分解網状化を助けるためにチトサン10g/Lと混合された10g/LのBAS溶液をスピン層形成することによりウシアルブミン血清の層が得られた。層は0.1g/LのMUF樹脂溶液を添加した後に90°Cで1時間網状化することにより固定化された。ペクチンの堆積とペクチン分解混合物による分解MUF樹脂を5重量含む10g/Lの溶液をスピン層形成することによりペクチン層が得られた。層は90°Cで1時間網状化された。結果三つの場合全てにおいて、インキュベーションとリンス後、活性酵素溶液が堆積された個所にのみ色変化がある。"