"aキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、bキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、cキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖であるコンジュゲートとを含む免疫原性組成物。GBS莢膜糖の総量が≦70μgである、請求項1に記載の免疫原性組成物。各GBS莢膜糖が単位用量あたり1μg~30μgの量で存在する、請求項1または請求項2に記載の免疫原性組成物。各GBS莢膜糖が単位用量あたり5μg、10μgまたは20μgの量で存在する、請求項3に記載の免疫原性組成物。単位用量あたりの前記GBS血清型Ia、IbおよびIIIの莢膜糖の量が、表Cの2列目に記載の投薬の選択肢のうちの1つに対応する、請求項4に記載の免疫原性組成物。単位用量あたりの前記GBS血清型Ia、IbおよびIIIの莢膜糖の量が、20μg、20μgおよび20μg;10μg、10μgおよび10μg;ならびに5μg、5μgおよび5μgからなる群から選択される、請求項5に記載の免疫原性組成物。単位用量あたりの前記GBS血清型Ia、IbおよびIIIの莢膜糖の量が5μg、5μgおよび5μgである、請求項6に記載の免疫原性組成物。各GBS莢膜糖が単位用量あたり0.1μg~5μgの量で存在する、請求項1または請求項2に記載の免疫原性組成物。各GBS莢膜糖が単位用量あたり0.5μg、2.5μgまたは5μgの量で存在する、請求項8に記載の免疫原性組成物。単位用量あたりの前記GBS血清型Ia、IbおよびIIIの莢膜糖の量が、表C’に記載の投薬の選択肢のうちの1つに対応する、請求項9に記載の免疫原性組成物。前記GBS血清型Ia、IbおよびIIIの莢膜糖の質量比が、表Fの2列目に記載の比率の選択肢のうちの1つに対応する、請求項1から10のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。前記GBS血清型Ia、IbおよびIIIの莢膜糖の質量比が1:1:1である、請求項11に記載の免疫原性組成物。1つの単位用量を投与し、その後、該第1の単位用量の3カ月後に第2の単位用量を投与するためのものである、請求項1から12のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。dキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型V由来の莢膜糖であるコンジュゲートをさらに含む、請求項1から12のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。1つの単位用量を投与し、その後、該第1の単位用量の1カ月後に第2の単位用量を投与するためのものである、請求項14に記載の免疫原性組成物。単回用量で投与するためのものである、請求項1から12および14のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。アルミニウム塩アジュバントを含有しない、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。いかなるアジュバントも含有しない、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。前記a、bおよび/またはc中のキャリアタンパク質が、ジフテリアトキソイド、破傷風トキソイドまたはCRM197である、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。前記a、bおよびc中のキャリアタンパク質がCRM197である、請求項19に記載の免疫原性組成物。前記コンジュゲート複数可が、コンジュゲーション前に糖複数可のシアル酸残基の10~30を酸化することによって生じたアルデヒド基の還元アミノ化によって得ることができる、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。前記GBS莢膜糖複数可が、7位、8位および/または9位のシアル酸残基のO-アセチル化を実質的に有さない、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。前記GBS血清型Ia由来の莢膜糖が、150~300kDaの範囲のMWを有し、前記GBS血清型Ib由来の莢膜糖が、150~300kDaの範囲のMWを有し、かつ/または前記GBS血清型III由来の莢膜糖が50~200kDaの範囲のMWを有する、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であるコンジュゲートが、約1:1から1:2の間の糖:タンパク質比w/wを有し、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であるコンジュゲートが、約1:1から1:2の間の糖:タンパク質比w/wを有し、かつ/またはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖であるコンジュゲートが、約3:1から1:1の間の糖:タンパク質比w/wを有する、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。筋肉内に投与するためのものである、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。a配列番号1~3から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチド、ならびに/またはbi配列番号1~3のうちの1または複数に対する配列同一性を有するアミノ酸配列および/もしくはii配列番号1~3の断片を含むポリペプチドをさらに含む、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。注射可能な液剤または懸濁剤である、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。凍結乾燥されている、請求項1から26のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。前記コンジュゲート複数可を安定化するためにマンニトールを含む、請求項28に記載の免疫原性組成物。リン酸二水素カリウムバッファを含む、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。塩化ナトリウムを含む、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。ワクチンである、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。ヒトに投与するためのものである、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。妊娠可能な年齢の女性、妊婦および高齢の患者から選択されるヒトに投与するためのものである、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。妊婦に投与するためのものである、請求項34に記載の免疫原性組成物。投与前に、前記ヒトが、検出不可能なレベルの、GBS血清型Ia由来の莢膜糖に対する抗体、GBS血清型Ib由来の莢膜糖に対する抗体、および/またはGBS血清型III由来の莢膜糖に対する抗体を有する、請求項33から35のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。医薬品として用いるためのものである、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。S.agalactiaeによって引き起こされる疾患を予防および/または処置するためのものである、請求項37に記載の免疫原性組成物。前記疾患が新生児敗血症、菌血症、新生児肺炎、新生児髄膜炎、子宮内膜炎、骨髄炎または化膿性関節炎である、請求項38に記載の免疫原性組成物。前記組成物がジフテリアトキソイドまたはその誘導体を用いて予備免疫した患者に投与するためのものであり、前記免疫原性組成物中の少なくとも1つのコンジュゲートがジフテリアトキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖である、前記請求項のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。GBSによる感染に対して患者を免疫するための方法であって、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体を用いて予備免疫した患者に、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖であるコンジュゲートを投与するステップを含む方法。前記コンジュゲートが、aキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、bキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、cキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖であるコンジュゲートとを含む免疫原性組成物中に存在し、前記GBS由来の莢膜糖が、該GBS血清型Ia、IbまたはIII由来の莢膜糖である、請求項41に記載の方法前記GBS由来の莢膜糖が前記GBS血清型III由来の莢膜糖である、請求項42に記載の方法。前記免疫原性組成物が請求項1から39のいずれか一項に記載の特徴を有する、請求項42または請求項43に記載の方法。GBSによる感染に対して患者を免疫するための方法であって、破傷風トキソイドまたはその誘導体を用いて予備免疫した患者に、破傷風トキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖であるコンジュゲートを投与するステップを含む方法。前記コンジュゲートが、aキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、bキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、cキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖であるコンジュゲートとを含む免疫原性組成物中に存在し、前記GBS由来の莢膜糖が、前記GBS血清型Ia、IbまたはIII由来の莢膜糖である、請求項45に記載の方法。前記GBS由来の莢膜糖が前記GBS血清型III由来の莢膜糖である、請求項46に記載の方法。前記免疫原性組成物が請求項1から39のいずれか一項に記載の特徴を有する、請求項46または請求項47に記載の方法。コンジュゲートワクチンについて記載されている別の細菌はStreptococcusagalactiaeであり、これはB群連鎖球菌または単にGBSとしても公知である。この研究の大半は、DennisKasperおよび共同研究者によって実施され、参考文献1~9などの文書に記載されている。GBS血清型Ia、Ib、II、III、およびVのそれぞれに対するコンジュゲートワクチンは、ヒトにおいて安全かつ免疫原性であることが示されている[10]。しかし、別の改善されたGBSコンジュゲートワクチンが依然として必要である。第1の態様では、本発明は、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia、Ib、IIIまたはV由来の莢膜糖である1または複数のコンジュゲートを用いる。特に、本発明は、これらのコンジュゲートのうちの1または複数を含む免疫原性組成物を提供する。この組成物は、これらのGBS血清型複数可による感染を予防するためのワクチンとして用いることができる。第2の態様では、本発明は、GBSによる感染に対して患者を免疫するための方法であって、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体を用いて予備免疫したpre-immunised患者に、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖であるコンジュゲートを投与するステップを含む方法を提供する。典型的には、コンジュゲートは、本発明の第1の態様の免疫原性組成物中のGBSコンジュゲートのうちの1種である。免疫原性組成物一実施形態では、本発明は、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であるコンジュゲートを含む免疫原性組成物を提供する。第2の実施形態では、本発明は、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であるコンジュゲートを含む免疫原性組成物を提供する。第3の実施形態では、本発明は、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖であるコンジュゲートを含む免疫原性組成物を提供する。第4の実施形態では、本発明は、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型V由来の莢膜糖であるコンジュゲートを含む免疫原性組成物を提供する。免疫原性組成物は、1より多いコンジュゲートを含んでよい。2種、3種または4種のコンジュゲートを含む本発明の実施形態が下に記載されている。これらの組成物に関して、本発明者らは、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であるコンジュゲートを含む組成物により、GBS血清型Ibに加えて、GBS血清型Iaに対する防御を付与することができることを見出した。この知見は、Ib型コンジュゲートではIa型細菌を死滅させることができる抗体を誘導することができないことを示唆している参考文献11の教示とは対照的である。したがって、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であるコンジュゲートを含む下記の実施形態は、それにより、血清型Iaに対する防御が増強され組成物がキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であるコンジュゲートも含む場合、また、組成物がキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であるコンジュゲートを含まない場合でさえも防御がもたらされ得るという点で有利であり得る。上記の通り、免疫原性組成物は、2種のコンジュゲートを含んでよい。一実施形態では、第1のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であり、第2のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖である。第2の実施形態では、第1のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であり、第2のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖である。第3の実施形態では、第1のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であり、第2のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型V由来の莢膜糖である。第4の実施形態では、第1のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であり、第2のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖である。第5の実施形態では、第1のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であり、第2のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型V由来の莢膜糖である。第6の実施形態では、第1のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖であり、第2のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型V由来の莢膜糖である。同様に、免疫原性組成物は、3種のコンジュゲートを含んでよい。一実施形態では、第1のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であり、第2のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であり、第3のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖である。本発明者らは、そのような組成物例えば、下に例示されているが、GBSによる感染を予防するためのワクチンとして用いるために特に適していることを見出した。したがって、この実施形態は本発明の好ましい実施形態である。第2の実施形態では、第1のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であり、第2のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であり、第3のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型V由来の莢膜糖である。第3の実施形態では、第1のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であり、第2のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖であり、第3のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型V由来の莢膜糖である。第4の実施形態では、第1のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であり、第2のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖であり、第3のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型V由来の莢膜糖である。同様に、免疫原性組成物は、4種のコンジュゲートを含んでよい。一実施形態では、第1のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であり、第2のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であり、第3のコンジュゲートは、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖であり、第4のコンジュゲートはキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型V由来の莢膜糖である。典型的には、上記の免疫原性組成物は、具体的に記載されているもの以外の任意のコンジュゲート、特に、具体的に記載されているもの以外のGBS血清型由来の莢膜糖を含むコンジュゲートは含まない。しかし、いくつかの実施形態では、組成物は、他のGBS血清型由来の莢膜糖を含むコンジュゲートを含めた他のコンジュゲートを含んでよい。例えば、組成物は、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型II由来の莢膜糖であるコンジュゲートを含んでよい。同様に、組成物は、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型VI由来の莢膜糖であるコンジュゲートを含んでよい。別の可能性では、組成物は、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型VIII由来の莢膜糖であるコンジュゲートを含んでよい。上記の免疫原性組成物は、単位用量あたり任意の適切な量の莢膜糖複数可を含んでよい。莢膜糖複数可の適量は、単位用量あたり0.1μg~50μgであり得る。典型的には、各GBS莢膜糖は、1μg~30μg、例えば、2μg~25μg、特に、5μg~20μgの量で存在する。莢膜糖複数可の適量としては、単位用量あたり5μg、10μgおよび20μgを挙げることができる。本発明者らは、これらの量が、特に、免疫原性組成物がGBS血清型Ia、Ibおよび/またはIII由来の莢膜糖を含む場合に適することを見出した。したがって、上記の実施形態における各莢膜糖の単位用量あたりの適量は、以下の表中の番号を付した選択肢から選択することができ、組成物中の莢膜糖複数可が由来する血清型複数可を参照することにより関連する実施形態が示されている:表Cに記載の投薬の選択肢に関して、本発明者らは、選択肢1、14および27が、特に、免疫原性組成物が、aキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、bキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、cキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖であるコンジュゲートとを含む場合に有効であることを見出した。したがって、これらの投薬の選択肢は、本発明において用いるため、特に、この実施形態のために好ましい。潜在的な毒性を低下させるために、単位用量あたりの莢膜糖複数可の総量を最小限にすることが有利であり得る。したがって、投薬の選択肢1が特に好ましい。単位用量あたりの莢膜糖複数可の量をさらに少なくすることが可能であり得る。特に、莢膜糖複数可の適量は、単位用量あたり0.1μg~5μgであり得る。したがって、典型的には、各GBS莢膜糖は、単位用量あたり0.1μg~5μg、例えば、0.5μg、2.5μgまたは5μgの量で存在してよい。例えば、各GBS莢膜糖は、単位用量あたり0.5μg~5μg、1μg~4μg、2μg~3μg、または約2.5μgの量で存在してよい。本発明者らは、これらの量が、特に、免疫原性組成物が、aキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、bキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、cキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖であるコンジュゲートとを含む場合に適切であると想定する。したがって、この実施形態における各莢膜糖の単位用量あたりの適量は、下記の表中の番号を付した選択肢から選択することができる:表C’に記載の投薬の選択肢に関して、本発明者らは、特に、選択肢1、14および27を想定する。これらの選択肢では、各GBS莢膜糖の量は同じである例えば、下に例示されている高用量の組成物の場合と同様に。免疫原性組成物が1より多いコンジュゲートを含む上記の実施形態では、所与の莢膜糖の質量と他の莢膜糖複数可の質量の比率は変動してよい。したがって、上記の実施形態における各莢膜糖についての適切な比率w/wは、以下の表中の番号を付した選択肢から選択することができ、組成物中の莢膜糖複数可が由来する血清型複数可を参照することにより関連する実施形態が示される:表Fに記載の比率の選択肢に関して、本発明者らは、選択肢1が、特に、免疫原性組成物が、aキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、bキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、cキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖であるコンジュゲートとを含む場合に有効であることを見出した。したがって、この比率の選択肢は、本発明において用いるため、特に、この実施形態のために好ましい。上記の通り、本発明は、一部において、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型V由来の莢膜糖であるコンジュゲートを含む免疫原性組成物に関する。本発明者らは、これらの組成物中のGBS血清型V由来の莢膜糖に対する免疫応答が、免疫原性組成物が1または複数の別の抗原を含む場合に減弱し得ることを見出した。理論に束縛されることを望むものではないが、別の抗原複数可が存在することにより免疫干渉が生じ、GBS血清型V由来の莢膜糖に対する応答が減弱すると考えられる。本発明者らは、これらの免疫原性組成物中のGBS血清型V由来の莢膜糖に対する応答が、組成物がアジュバントを含む場合に改善され得ることを見出した。この知見は、アジュバントではGBSコンジュゲートに対する免疫応答を改善することができないことを示唆している参考文献12の教示とは対照的である。したがって、別の実施形態では、本発明は、aキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型V由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、bGBS血清型V由来の莢膜糖を含まない1または複数の抗原と、cアジュバントとを含む免疫原性組成物を提供する。成分bの抗原複数可は、他のGBS血清型複数可由来の莢膜糖複数可を含むコンジュゲート複数可であってよい。例えば、これらのコンジュゲート複数可は、キャリアタンパク質複数可にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia、Ibおよび/またはIII複数可由来の莢膜糖複数可であってよい。したがって、本発明のこの実施形態は、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型V由来の莢膜糖であるコンジュゲートを含み、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia、Ibおよび/またはIII由来の莢膜糖である1または複数のコンジュゲートをさらに含み、アジュバントをさらに含む本明細書に記載の任意の免疫原性組成物を包含する。あるいは、成分bの抗原複数可は、他の種類複数可の抗原、例えば、下でコンジュゲートと他の抗原の組み合わせおよびGBSタンパク質抗原という表題の下で記載されている抗原であってよい。したがって、本発明のこの実施形態は、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型V由来の莢膜糖であるコンジュゲート、および他のGBS血清型複数可由来の莢膜糖複数可を含むコンジュゲートを含まない1または複数の抗原を含み、アジュバントをさらに含む本明細書に記載の任意の免疫原性組成物も包含する。本発明者らは、下記の通り、本発明のこの実施形態におけるアジュバントは、例えばアルミニウム塩であってよいことを見出した。当業者は、これらの組成物において用いることができる他のアジュバントを同定することができるであろう。本発明者らは、この莢膜糖の用量を増加させると、GBS血清型V由来の莢膜糖に対する応答を改善することができることも見出した。特に、免疫原性組成物が、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたV型以外のGBS血清型由来の莢膜糖であるコンジュゲートを含む場合には、V型の莢膜糖の用量が他のGBS血清型由来の莢膜糖の用量よりも多いと、V型の莢膜糖に対する応答を改善することができる。したがって、別の実施形態では、本発明は、aキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型V由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、bそれぞれがキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたV型以外のGBS血清型由来の莢膜糖である1または複数のコンジュゲートとを含み、V型の莢膜糖の用量が他のGBS血清型複数可由来の莢膜糖複数可の総用量複数可よりも多い、または他のGBS血清型由来の莢膜糖の用量の少なくとも1つの用量、もしくは平均用量よりも多い免疫原性組成物を提供する。V型の莢膜糖の用量は、1.1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍または10倍多くてよい。成分bが1より多いコンジュゲートを含む場合、V型の莢膜糖の用量は他のGBS血清型由来の莢膜糖の平均用量よりも多いことが典型的である。成分bのコンジュゲート複数可は、V型以外の任意のGBS血清型由来の莢膜糖を含むコンジュゲートであってよい。例えば、これらのコンジュゲート複数可は、キャリアタンパク質複数可にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia、Ibおよび/またはIII複数可由来の莢膜糖複数可であってよい。したがって、本発明のこの実施形態は、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型V由来の莢膜糖であるコンジュゲートを含み、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia、Ibおよび/またはIII由来の莢膜糖である1または複数のコンジュゲートをさらに含み、V型の莢膜糖の用量が他のGBS血清型複数可由来の莢膜糖複数可の総用量複数可よりも多い、または他のGBS血清型由来の莢膜糖の用量の少なくとも1つの用量、もしくは平均用量よりも多い、本明細書に記載の任意の免疫原性組成物を包含する。本発明者らは、これらの組成物中の他のGBS血清型複数可由来の莢膜糖に対する免疫応答が、V型の莢膜糖の用量の方が多いことにより減弱し得ることも見出した。この結果は、上記の通り、組成物がアジュバントを含む場合に軽減され得る。さらに、この知見は、アジュバントではGBSコンジュゲートに対する免疫応答を改善することができないことを示唆している参考文献12の教示とは対照的である。本発明の免疫原性組成物を投与する方法を以下に論じる。簡単に述べると、本発明の免疫原性組成物は、単回用量または複数回用量で投与することができる。本発明者らは、特に、免疫原性組成物がGBS血清型Ia、Ibおよび/またはIII由来の莢膜糖を含む場合、より詳細には、免疫原性組成物が、aキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、bキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、cキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖であるコンジュゲートとを含む場合には、本発明の免疫原性組成物を単回用量で投与することが有効であることを見出した。したがって、単回用量で投与することは本発明において、特に、これらの実施形態に好ましい。あるいは、1つの単位用量の後に第2の単位用量を続けることが有効であり得る。典型的には、第2または第3、第4、第5などの単位用量は第1の単位用量と同一である。第2の単位用量は、第1の単位用量の後の任意の適切な時間、特に、1カ月後、2カ月後または3カ月後に投与することができる。例えば、免疫原性組成物が、GBS血清型Ia、Ibおよび/またはIII由来の莢膜糖を含む場合には、第1の単位用量の3カ月後に第2の単位用量を投与することができる。別の例では、免疫原性組成物が、GBS血清型V由来の莢膜糖を含む場合には、第1の単位用量の1カ月後に第2の単位用量を投与することができる。典型的には、本発明の免疫原性組成物は、例えば、下記の通り、大腿または上腕への筋肉内投与により、筋肉内に投与される。下記の通り、本発明の免疫原性組成物は、1または複数のアジュバントを含んでよい。しかし、本発明者らは、特に、免疫原性組成物が、GBS血清型Ia、Ibおよび/またはIII由来の莢膜糖を含む場合、より詳細には、免疫原性組成物が、aキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、bキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、cキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖であるコンジュゲートとを含む場合には、アジュバントを含まない組成物を用いることが有効であることを見出した。潜在的な毒性を低下させるために、アジュバントを除くことが有利であり得る。したがって、本発明において用いるため、特に、これらの実施形態には、いかなるアジュバントも含有しない特に、いかなるアルミニウム塩アジュバントも含有しない免疫原性組成物が好ましい。莢膜糖本発明は、Streptococcusagalactiaeの莢膜糖に基づく。莢膜糖は、GBSのペプチドグリカン骨格と共有結合で連結し、また、ペプチドグリカン骨格に結合した別の糖であるB群抗原とは異なる。GBS莢膜糖は化学的に関連するが、抗原性が全く異なる。すべてのGBS莢膜糖が以下の三糖コアを共有する:β-D-GlcpNAc1→3β-D-Galp1→4β-D-Glcp種々のGBS血清型は、このコアの修飾のされ方が異なる。血清型IaとIIIの差異は、例えば、このコアにおいて、連続した三糖コアを連結するためにGlcNAcIaまたはGalIIIのいずれかが使用されることから生じる図1。血清型IaおよびIbはどちらも、コア内のGlcNAcに連結した[α-D-NeupNAc2→3β-D-Galp-1→]二糖を有するが、連結は1→4Iaまたは1→3Ibのいずれかである。GBS関連疾患は、主に血清型Ia、Ib、II、III、IV、V、VI、VII、およびVIIIから生じ、その85超が5種の血清型:Ia、Ib、IIIおよびVによって引き起こされる。本発明は、これらの4種の血清型のうちの1または複数由来の糖、特に、血清型:Ia、IbおよびIIIのうちの1または複数由来の糖を用いることが好ましい。図2に示されている通り、これらの4種の血清型のそれぞれの莢膜糖は、aすべての場合においてガラクトース残基に2→3で連結している末端のN-アセチル-ノイラミン酸NeuNAc残基一般にシアル酸と呼ばれると、b三糖コア内部のN-アセチル-グルコサミン残基GlcNAcとを含む。4種の糖のすべてが三糖コア内部のガラクトース残基を含むが、血清型Ia、Ib、IIおよびIIIは、各繰り返し単位内に追加的なガラクトース残基も含有する。本発明に従って使用される糖は、それらの天然の形態であってよく、または修飾されていてよい。例えば、糖は、天然の莢膜糖よりも短くてよく、または化学的に修飾されていてよい。特に、本発明において使用される血清型Vの莢膜糖は、参考文献13および14に記載の通り修飾されていてよい。例えば、参考文献13および14に記載の通り実質的に脱シアル化された血清型Vの莢膜糖図3が、本発明において用いるために具体的に想定される。脱シアル化されたGBS血清型Vの莢膜糖は、参考文献13に記載の通り、精製されたGBS血清型Vの莢膜糖を弱酸性条件下で例えば、0.1Mの硫酸、80°Cで60分間処理することによって、またはノイラミニダーゼで処理することによって調製することができる。脱シアル化されたGBS血清型Vの莢膜糖を調製するための好ましい方法は、精製された糖を1Mの酢酸を用いて、81°C/-3°Cで2時間処理することによる。したがって、本発明に従って使用される糖は、天然に見出されるような実質的に全長の莢膜多糖であってよく、または、天然の長さよりも短くてよい。全長の多糖は、本発明で用いるために、例えば、弱酸中での加水分解によって、加熱によって、サイズ選別クロマトグラフィーsizingchromatographyなどによって解重合させて、より短い断片を得ることができる。鎖長は、ウサギにおいてGBS糖の免疫原性に影響を及ぼすことが報告されている[4]。特に、本発明において使用される血清型IIおよび/またはIIIの莢膜糖は、参考文献15および16に記載の通り解重合させることができる。これらの文書には、II型およびIII型の莢膜糖を、穏やかな脱アミノ切断により部分的に解重合させて、末端の2,5-アンヒドロ-D-マンノース残基が還元された抗原断片にすることが記載されている。簡単に述べると、莢膜糖を0.5NのNaOHに溶解させ、70°Cで約1~4時間加熱する。このインキュベーションの長さによって解重合の程度を制御し、これは、標準の方法によって例えば、参考文献15に記載のHPLCによって決定することができる。試料を氷水浴内で冷却した後、氷酢酸を加えてpH4にする。次いで、部分的にN-脱アシル化された生成物を、5wt/volのNaNO2を4°Cで2時間にわたって撹拌しながら加えることによって脱アミノ化する。新たに形成された2,5-アンヒドロ-D-マンノース残基の遊離のアルデヒドは、下記の通り、キャリアタンパク質とコンジュゲートするために用いることができる。破傷風トキソイドキャリアとコンジュゲートを形成するために、解重合した材料を用いることを含めた、エンド-β-ガラクトシダーゼによる血清型IIIの莢膜糖の解重合が報告されている[参考文献14~6]。GBS血清型IIIおよびVIII由来の莢膜多糖のオゾン分解も解重合のために用いられている[17]。MW>30kDaの糖を用いることが好ましく、実質的に全長の莢膜多糖を用いることができる。血清型Iaについては、MWが150~300kDa、特に、175~275kDaの範囲である多糖を用いることが好ましい。典型的には、MWが約200kDaまたは約260kDaである血清型Iaの糖を用いる。血清型Ibについては、MWが150~300kDa、特に、175~250kDaの範囲である多糖を用いることが好ましい。典型的には、MWが約200kDaまたは約230kDaである血清型Ibの糖を用いる。血清型IIIについては、MWが50~200kDa、特に、80~150kDaの範囲である多糖を用いることが好ましい。典型的には、MWが約100kDaまたは約140kDaである血清型III糖を用いる。血清型Vについては、MWが最大で約50kDaである多糖を用いることも好ましい。典型的には、MWが約100kDaである血清型Vの糖を用いる。これらの分子質量は、PolymerStandardServiceから入手可能なものなどのデキストラン標準物質と比較してゲル濾過によって測定することができる[18]。糖は、天然に見出される莢膜糖と比較して化学的に修飾することができる。例えば、糖は、脱O-アセチル化部分的にまたは完全に、脱N-アセチル化部分的にまたは完全に、N-プロピオン酸化N-propionated部分的にまたは完全になどをされてよい。脱アセチル化は、コンジュゲートする前、その間、またはその後に起こり得るが、コンジュゲートする前に起こることが好ましい。特定の糖に応じて、脱アセチル化は免疫原性に影響を及ぼす場合と影響を及ぼさない場合がある。種々の血清型のGBS糖に対するO-アセチル化の関連性は参考文献19において論じられており、いくつかの実施形態では、7位、8位および/または9位のシアル酸残基のO-アセチル化が、コンジュゲートする前、その間およびその後で、例えば、保護/脱保護によって、再アセチル化によってなどで保持される。しかし、典型的には、本発明において使用されるGBS糖は、7位、8位および/または9位のシアル酸残基のO-アセチル化を実質的に有さない。特に、GBS糖が、下記の通り塩基抽出によって精製された場合には、O-アセチル化は一般には失われる参考文献19。脱アセチル化の作用などは、常套的なアッセイによって評価することができる。莢膜糖は、本明細書の参考文献、例えば、参考文献2および20などに記載の公知の技法によって精製することができる。典型的なプロセスは、塩基抽出、遠心分離、濾過、RNアーゼ/DNアーゼ処理、プロテアーゼ処理、濃縮、サイズ排除クロマトグラフィー、限外濾過、陰イオン交換クロマトグラフィー、およびさらなる限外濾過を伴う。GBS細胞を、細菌の細胞壁を切断して細胞壁成分を遊離させる酵素であるムタノリシンmutanolysinで処理することも有用である。代替として、参考文献21に記載の精製プロセスを用いることができる。このプロセスは、塩基抽出、エタノール/CaCl2処理、CTAB沈殿、および再可溶化を伴う。別の代替のプロセスが参考文献22に記載されている。しかし、本発明は、天然の供給源から精製された糖に限定されず、糖は、全合成または部分合成などの他の方法によって得ることができる。コンジュゲーション本発明は、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia、Ib、IIIまたはV由来の莢膜糖であるコンジュゲートに関する。一般に、糖とキャリアの共有結合性コンジュゲーションにより、糖の免疫原性がT非依存性抗原からT依存性抗原に変換されるので、糖の免疫原性が増強され、したがって免疫記憶が刺激される。コンジュゲーションは、小児用ワクチンに特に有用であり[例えば、参考文献23]、これは周知の技法である[例えば、参考文献24~32に概説されている]。したがって、本発明のプロセスは、精製された糖をキャリア分子とコンジュゲートするさらなるステップを含み得る。GBS糖のコンジュゲーションは、広く報告されている。例えば、参考文献1~9を参照されたい。GBS糖をコンジュゲートするための典型的な先行技術のプロセスは、典型的には、精製された糖の、破傷風トキソイドTTまたはCRM197などのキャリアタンパク質との還元アミノ化を伴う[2]。還元アミノ化には、キャリアのアミノ酸の側鎖上のアミン基および糖のアルデヒド基が関与する。GBS莢膜糖はそれらの天然の形態ではアルデヒド基を含まないので、典型的には、これを生じさせた後に、糖のシアル酸残基の一部例えば、5から40間、特に、10から30間、好ましくは約20を酸化することに例えば、過ヨウ素酸酸化よってコンジュゲートする[2、33]。GBS血清型Ia、Ib、II、III、およびVのそれぞれについて、このように調製されたコンジュゲートワクチンはヒトにおいて安全かつ免疫原性であることが示されている[10]。典型的には、本発明の免疫原性組成物中のコンジュゲートのすべてがこのように調製されたものである。しかし、本発明において脱シアル化された血清型Vの莢膜糖を用いる場合には、この糖にアルデヒド基を生じさせた後に、糖のガラクトース残基の一部例えば、5から40間、特に、10から30間、好ましくは約20を酸化すること例えば、過ヨウ素酸酸化によってコンジュゲートすることができる[14]。代替のコンジュゲーションプロセスは、参考文献34に記載の通り、糖の-NH2基脱N-アセチル化によるものか、またはアミンの導入後のものを、二官能性リンカーと併せて用いることを伴う。いくつかの実施形態では、本発明の免疫原性組成物中のコンジュゲートのうちの1または複数はこのように調製されたものである。別の代替のプロセスが参考文献15および16に記載されている。このプロセスでは、穏やかな脱アミノ切断によるII型またはIII型の莢膜糖の解重合に由来する、末端の2,5-アンヒドロ-D-マンノース残基の遊離のアルデヒド基を還元アミノ化によるコンジュゲーションのために用いる。いくつかの実施形態では、本発明の免疫原性組成物中のコンジュゲートのうちの1または複数はこのように調製されたものである。本発明は、一般にはタンパク質であるキャリア分子の使用に関する。有用なキャリアタンパク質としては、ジフテリアトキソイドまたは破傷風トキソイドなどの、細菌の毒素または類毒素が挙げられる。毒素または類毒素の断片、例えば、破傷風トキソイドの断片Cも用いることができる[35]。ジフテリア毒素のCRM197変異体[36~38]は、本発明に対して特に有用である。他の適切なキャリアタンパク質としては、N.meningitidisの外膜タンパク質[39]、合成ペプチド[40、41]、熱ショックタンパク質[42、43]、百日咳タンパク質[44、45]、サイトカイン[46]、リンフォカイン[46]、ホルモン[46]、増殖因子[46]、ヒト血清アルブミン組換え型であることが好ましい、種々の病原体由来抗原由来の複数のヒトCD4T細胞エピトープを含む人工タンパク質[47]例えば、N19[48]、H.influenzae由来のタンパク質D[49、50]、肺炎球菌の表面タンパク質PspA[51]、ニューモリシン[52]、鉄取り込みタンパク質iron-uptakeprotein[53]、C.difficile由来の毒素Aまたは毒素B[54]、組換え型のPseudomonasaeruginosaの細胞外タンパク質exoproteinArEPA[55]、GBSタンパク質下記特にGBS67を参照されたい[206]などが挙げられる。キャリアへの結合は、例えば、キャリアタンパク質のリジン残基の側鎖の-NH2基、またはアルギニン残基の側鎖の-NH2基、またはN末端の-NH2基を介することが好ましい。結合は、例えば、システイン残基の側鎖の-SH基を介してもよい。例えば、キャリアが抑制される危険性を低下させるために、1より多いキャリアタンパク質を用いることが可能である。したがって、異なるGBS血清型に対して異なるキャリアタンパク質を用いることができ、例えば、血清型Iaの糖をCRM197とコンジュゲートすることができ、その一方で血清型Ibの糖を破傷風トキソイドとコンジュゲートすることができる。特定の糖抗原に対して1より多いキャリアタンパク質を用いることも可能であり、例えば、血清型IIIの糖を2群にし、その一部をCRM197とコンジュゲートし、その他を破傷風トキソイドとコンジュゲートすることができる。しかし、典型的には、すべての糖に対して同じキャリアタンパク質を用いることが好ましい。単一のキャリアタンパク質は、1より多い糖抗原を保有してよい[56、57]。例えば、単一のキャリアタンパク質を、血清型IaおよびIb由来の糖とコンジュゲートすることができる。この目標を実現するために、コンジュゲーション反応の前に異なる糖を混合することができる。しかし、典型的には、各血清群に対してコンジュゲートを別々にし、コンジュゲートした後に異なる糖を混合することが好ましい。別々のコンジュゲートは、同じキャリアに基づいてよい。典型的には、糖:タンパク質比w/wが1:5すなわちタンパク質過剰から5:1すなわち糖過剰の間、特に、1:5から2:1の間の比率であるコンジュゲートを用いる。本発明においてキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であるコンジュゲートを用いる場合には、糖:タンパク質比w/wは、典型的には、約1:1から1:2の間、特に、約1:1.3である。同様に、本発明においてキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であるコンジュゲートを用いる場合には、比率は、典型的には、約1:1から1:2の間、特に、約1:1.3である。本発明においてキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖であるコンジュゲートを用いる場合には、糖:タンパク質比w/wは、典型的には、約3:1から1:1の間、特に、約2:1である。しかし、糖:タンパク質比w/wが約1:1~1:5、特に、約1:3.3である、キャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型IIIも用いることができる。最後に、本発明においてキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型V由来の莢膜糖であるコンジュゲートを用いる場合には、比率は、典型的には、約2:1から1:1の間、特に、約1.1:1である。したがって、特に、長い糖鎖では、糖の重量過剰が典型的である。組成物は、少量の遊離のキャリアを含んでよい[58]。所与のキャリアタンパク質が本発明の組成物中に遊離の形態にコンジュゲートさせた形態の両方で存在する場合、コンジュゲートしていない形態は、全体として、組成物中のキャリアタンパク質の総量の5以下であることが好ましく、2重量未満で存在することがより好ましい。コンジュゲートした後、遊離の糖にコンジュゲートさせた糖を分離することができる。疎水性クロマトグラフィー、タンジェンシャル限外濾過、ダイアフィルトレーションなどを含めた多くの適切な方法がある[参考文献5960なども参照されたい]。好ましい方法は参考文献61に記載されている。本発明の組成物が解重合したオリゴ糖を含む場合、解重合がコンジュゲーションに先行することが好ましい。コンジュゲートと他の抗原の組み合わせ本発明の免疫原性組成物は、1または複数の別の抗原を含んでよい。別の抗原複数可は、別のGBSコンジュゲートを含んでよい。異なるGBSコンジュゲートは同じGBS血清型由来の異なる種類のコンジュゲートおよび/または異なるGBS血清型由来のコンジュゲートを含んでよい。組成物は、典型的には、別々のコンジュゲート例えば、各血清型に対して異なるコンジュゲートを調製し、次いでコンジュゲートを組み合わせることによって生成される。別の抗原複数可は、下に詳述されているGBSのアミノ酸配列を含んでよい。別の抗原複数可は、非GBS病原体由来の抗原を含んでよい。したがって、本発明の組成物は、追加的な細菌性抗原、ウイルス性抗原または寄生生物性抗原を含めた1または複数の非GBS抗原をさらに含んでよい。これらは以下から選択することができる:-N.meningitidis血清群B由来のタンパク質抗原、参考文献62~68中のものなど。タンパク質287以下を参照されたいおよび誘導体例えば、ΔG287が特に好ましい。-N.meningitidis血清群B由来の外膜小胞OMV調製物、例えば、参考文献69、70、71、72などに開示されているものなど。-N.meningitidis血清群A、C、W135および/またはY由来の糖抗原、例えば、参考文献73に開示されている血清群C由来のオリゴ糖または参考文献74のオリゴ糖。-Streptococcuspneumoniae由来の糖抗原[例えば、参考文献75~77;参考文献84の第22章および23章]。-A型肝炎ウイルス由来の抗原、例えば、不活化ウイルス[例えば、78、79;参考文献84の第15章]。-B型肝炎ウイルス由来の抗原、例えば、表面抗原および/またはコア抗原など[例えば、79、80;参考文献84の第16章]。-C型肝炎ウイルス由来の抗原[例えば、81]。-Bordetellapertussis由来の抗原、例えば、B.pertussis由来の百日咳ホロ毒素PTおよび線維状赤血球凝集素FHA、必要に応じてパータクチンならびに/または凝集原2および凝集原3とも組み合わせて[例えば、参考文献8283;参考文献84の第21章]。-ジフテリア抗原、例えば、ジフテリアトキソイド[例えば、参考文献84の第13章]。-破傷風抗原、例えば、破傷風トキソイド[例えば、参考文献84の第27章]。-HaemophilusinfluenzaeB由来の糖抗原[例えば、参考文献84の第14章]-N.gonorrhoeae由来の抗原[例えば、62、63、64]。-Chlamydiapneumoniae由来の抗原[例えば、85、86、87、88、89、90、91]。-Chlamydiatrachomatis由来の抗原[例えば、92]。-Porphyromonasgingivalis由来の抗原[例えば、93]。-ポリオ抗原複数可[例えば、94、95;参考文献84の第24章]、例えば、IPV。-狂犬病抗原複数可[例えば、96]、例えば、凍結乾燥不活化ウイルス[例えば97、RabAvert商標]。-麻疹抗原、流行性耳下腺炎抗原および/または風疹抗原[例えば、参考文献84の第19章、20章および26章]。-インフルエンザ抗原複数可[例えば、参考文献84の第17章および18章]、例えば、赤血球凝集素および/またはノイラミニダーゼ表面タンパク質。-Moraxellacatarrhalis由来の抗原[例えば、98]。-StreptococcuspyogenesA群連鎖球菌由来の抗原[例えば、99、100、101]。-Staphylococcusaureus由来の抗原[例えば、102]。糖抗原または炭水化物抗原を用いる場合、免疫原性を増強するために、その抗原をキャリアとコンジュゲートすることが好ましい。H.influenzaeB、髄膜炎菌および肺炎球菌の糖抗原のコンジュゲーションが周知である。毒性のタンパク質抗原は、必要な場合、解毒することができる例えば、化学的手段および/または遺伝的手段による百日咳毒素の解毒[83]。組成物にジフテリア抗原が含まれる場合、破傷風抗原および百日咳抗原も含むことが好ましい。同様に、破傷風抗原が含まれる場合、ジフテリア抗原および百日咳抗原も含むことが好ましい。同様に、百日咳抗原が含まれる場合、ジフテリア抗原および破傷風抗原も含むことが好ましい。抗原をアルミニウム塩に吸着させることができる。組成物中に1より多いコンジュゲートが存在する場合、すべてのコンジュゲートを吸着させる必要はない。ある種類の好ましい組成物は、ヘルペスウイルス、N.gonorrhoeae、C.trachomatisなどの性感染病原体由来の別の抗原を含む。別の種類の好ましい組成物は、高齢者および/または免疫無防備状態に影響を及ぼす別の抗原を含み、したがって、本発明のGBS抗原を、以下の非GBS病原体由来の1または複数の抗原と組み合わせることができる:インフルエンザウイルス、Enterococcusfaecalis、Staphylococcusaureus、Staphylococcusepidermis、Pseudomonasaeruginosa、Legionellapneumophila、Listeriamonocytogenes、Neisseriameningitidis、およびパラインフルエンザウイルス。組成物中の抗原は、典型的には、それぞれ少なくとも1μg/mlの濃度で存在する。一般に、任意の所与の抗原の濃度は、その抗原に対する免疫応答を惹起するために十分なものである。本発明の組成物にタンパク質抗原を用いる代替として、抗原をコードする核酸を用いることができる[例えば、参考文献103~111]。したがって、本発明の組成物のタンパク質成分を、そのタンパク質をコードする核酸例えば、プラスミドの形態のDNAであることが好ましいで置き換えることができる。実際面で、本発明の組成物に含める抗原の数には上限がある場合がある。本発明の組成物中の抗原GBS抗原を含むの数は、20未満、19未満、18未満、17未満、16未満、15未満、14未満、13未満、12未満、11未満、10未満、9未満、8未満、7未満、6未満、5未満、4未満、3未満、または2未満であってよい。本発明の組成物中のGBS抗原の数は、6未満、5未満、4未満、3未満、または2未満であってよい。薬学的方法および使用本発明の免疫原性組成物は、薬学的に許容されるキャリアをさらに含んでよい。典型的な薬学的に許容されるキャリアとしては、それ自体は、組成物を受け取る個体に対して有害な、抗体の産生を誘導しない任意のキャリアが挙げられる。適切なキャリアは、典型的には、大きな、ゆっくりと代謝される巨大分子、例えば、タンパク質、多糖、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、重合アミノ酸、アミノ酸共重合体、スクロース[112]、トレハロース[113]、ラクトース、および脂質凝集体例えば、油滴またはリポソームである。そのようなキャリアは当業者に周知である。ワクチンは、例えば、水、食塩水、グリセロールなどの希釈剤も含有してよい。さらに、補助物質、例えば、湿潤剤または乳化剤、pH緩衝物質などが存在してよい。滅菌された、発熱物質を含まないリン酸緩衝生理食塩水が典型的なキャリアである。薬学的に許容される賦形剤の詳細な論述は、参考文献114において入手可能である。本発明の組成物は、水性形態すなわち、溶液または懸濁液または乾燥した形態例えば、凍結乾燥したものであってよい。乾燥ワクチンを用いる場合には、注射する前に液体媒体中に再構成する。コンジュゲートワクチンの凍結乾燥は当技術分野で公知であり、例えば、Menjugate商標製品が凍結乾燥した形態で存在している。本発明の免疫原性組成物が1より多いGBS血清型由来の莢膜糖を含むコンジュゲートを含む場合、コンジュゲートを別々に調製し、混合し、次いで凍結乾燥することが典型的である。このように、本明細書に記載のコンジュゲートを2種、3種または4種などを含む凍結乾燥した組成物を調製することができる。凍結乾燥の間、コンジュゲートを安定化するために、糖アルコール例えば、マンニトールおよび/または二糖例えば、スクロースまたはトレハロースを、例えば、1mg/mlから30mg/mlの間例えば、約25mg/mlで組成物に含めることが好ましい場合がある。スクロースの使用は、GBSコンジュゲートワクチンの安定剤として推奨されている参考文献115。しかし、本発明の安定剤はマンニトールであることが典型的である。乾燥ワクチンを、注射する前に液体媒体中に再構成する場合、残留するマンニトールの濃度は、典型的には、約2~20mg/ml、例えば、3.75mg/ml、7.5mg/mlまたは15mg/mlになる。マンニトールの使用は、マンニトールがGBS莢膜糖の単糖サブユニットとは化学的に別個であるので有利である。これは、例えば品質管理分析のための莢膜糖の検出は、マンニトールに干渉されない上記糖のサブユニットの存在に基づいてよいことを意味する。対照的に、スクロースのような安定剤は、グルコースを含有し、これは上記糖におけるグルコースサブユニットの検出に干渉し得る。組成物はバイアル中に存在してよく、または組成物は充填済み注射器中に存在してよい。注射器は、針を伴って、または伴わずに供給することができる。注射器は、組成物の単回用量を含み、一方バイアルは、単回用量または複数回用量を含むことができる。本発明の水性組成物は、他のワクチンを凍結乾燥した形態から再構成するためにも適している。本発明の組成物がそのような即時の再構成のために用いるものである場合、本発明は、バイアル2つを含み得るキット、または、充填済み注射器1つとバイアル1つを含み、注射する前に注射器の内容物を用いてバイアルの内容物を再活性化することができるキットを提供する。本発明の組成物は、単位用量形態または複数回用量形態に包装することができる。複数回用量形態には充填済み注射器よりもバイアルの方が好ましい。有効な投与体積は常套的に確立することができるが、組成物の典型的なヒト用量は、例えば、筋肉内注射するためには、体積0.5mlである。組成物のpHは、6から8の間であることが好ましく、約7であることが好ましい。安定なpHは、緩衝液を用いることによって維持することができる。典型的には、本発明の免疫原性組成物はリン酸二水素カリウム緩衝液を含む。リン酸二水素カリウム緩衝液は、約1~10mM、例えば、1.25mM、2.5mMまたは5.0mMのリン酸二水素カリウムを含んでよい。組成物が、水酸化アルミニウム塩を含む場合、ヒスチジン緩衝液を用いることが好ましい[116]。組成物は、滅菌され得、かつ/または発熱物質が不含であり得る。本発明の組成物は、ヒトに対して等張性であり得る。本発明の組成物は免疫原性であり、ワクチン組成物であることがより好ましい。本発明によるワクチンは、予防的すなわち、感染を予防するためのものまたは治療的すなわち、感染を処置するためのもののいずれかであり得るが、典型的には、予防的である。ワクチンとして用いる免疫原性組成物は、免疫学的有効量の抗原複数可、ならびに必要に応じて、任意の他の成分を含む。免疫学的有効量とは、その量を個体に単回用量またはシリーズの一部として投与することが、処置または予防に有効であることを意味する。この量は、処置される個体の健康および身体の状態、処置される個体の年齢、分類群例えば、非ヒト霊長類、霊長類など、抗体を合成する個体の免疫系の能力、所望の防御の程度、ワクチンの処方、処置にあたる医師による医学的な状況に関する評価、および他の関連因子に応じて変動する。常套的な試行によって決定することができる量は比較的広範囲に入ることが予想される。各用量の中で、個々の糖抗原の量は、一般に、0.1μgから50μgの間糖の質量として測定する、特に、1μgから50μgの間または0.5μgから25μgの間、より詳細には、2.5~7.5μg、例えば、約1μg、約2.5μg、約5μg、約10μg、約15μg、約20μgまたは約25μgになる。各用量の中で、GBS莢膜糖の総量は、一般に≦70μg糖の質量として測定する、例えば、≦60μgである。特に、総量は、≦40μg例えば、≦30μgまたは≦20μg例えば、≦15μgであってよい。本発明者らは、これらの総量が、特に、免疫原性組成物が、aキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ia由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、bキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型Ib由来の莢膜糖であるコンジュゲートと、cキャリアタンパク質にコンジュゲートさせたGBS血清型III由来の莢膜糖であるコンジュゲートとを含む場合に有効であることを見出した。したがって、これらの総量は、本発明において用いるため、特に、この実施形態のために好ましい。潜在的な毒性を低下させるために、単位用量あたりの莢膜糖複数可の総量を最小限にすることが有利であり得る。したがって、総量は≦20μg、例えば、≦15μg、≦7.5μgまたは≦1.5μgであることが好ましい。GBSは、体の種々の領域に影響を及ぼし、したがって、本発明の組成物は、様々な形態で調製することができる。例えば、組成物は、注射剤として、液剤または懸濁剤のいずれかとして調製することができる。組成物は、肺への投与のために、例えば、細粉または噴霧剤を用いて吸入器inhalerとして調製することができる。組成物は、坐薬または膣坐薬として調製することができる。組成物は、鼻、耳または眼に投与するために、例えば、噴霧剤、点滴薬、ゲル剤または散剤として調製することができる[例えば、参考文献117118]。肺炎球菌の糖[119、120]、Hibの糖[121]、MenCの糖[122]、およびHib糖とMenC糖のコンジュゲートの混合物[123]の経鼻投与での成功が報告されている。本発明の組成物は、特に、複数回用量形式で包装する場合には、抗菌薬を含んでよい。本発明の組成物は、洗浄剤、例えば、Tween80などのTweenポリソルベートを含んでよい。洗浄剤は、一般に、低レベルで、例えば、<0.01で存在する。本発明の組成物は、張度を与えるためにナトリウム塩例えば、塩化ナトリウムを含んでよい。10±2mg/mlのNaClの濃度が典型的である。いくつかの実施形態では、4~10mg/ml、例えば、9.0mg/ml、7.0mg/ml、6.75mg/mlまたは4.5mg/mlのNaClの濃度を用いることができる。本発明の組成物は、一般に、バッファを含む。リン酸バッファが典型的である。本発明の組成物は、他の免疫調節剤と併せて投与することができる。特に、組成物は、1または複数のアジュバントを含んでよい。そのようなアジュバントとしては、これらに限定されないが、以下のものが挙げられる:A.無機物を含有する組成物本発明においてアジュバントとして用いるのに適した、無機物を含有する組成物としては、無機塩、例えば、アルミニウム塩およびカルシウム塩またはそれらの混合物が挙げられる。カルシウム塩としては、リン酸カルシウム例えば、参考文献124に開示されているCAP粒子が挙げられる。アルミニウム塩としては、水酸化物、リン酸塩、硫酸塩などが挙げられ、塩は任意の適切な形態例えば、ゲル、結晶、非晶質などを取る。これらの塩への吸着が好ましい。無機物を含有する組成物は、金属塩の粒子として処方することもできる[125]。水酸化アルミニウムおよびリン酸アルミニウムとして公知のアジュバントを用いることができる。これらの名称は慣習的であるが、どちらも、存在する実際の化合物についての正確な記載ではないので、利便性のためだけに使用される例えば、参考文献126の第9章を参照されたい。本発明では、アジュバントとして一般に使用される任意の水酸化物アジュバントまたはホスフェートアジュバントを用いることができる。水酸化アルミニウムとして公知のアジュバントは、典型的には、オキシ水酸化アルミニウム塩であり、これは、通常、少なくとも部分的に結晶である。リン酸アルミニウムとして公知のアジュバントは、典型的には、アルミニウムヒドロキシホスフェートであり、多くの場合、少量の硫酸塩も含有するすなわち、アルミニウムヒドロキシホスフェートサルフェートaluminiumhydroxyphosphatesulfate。これらは、沈殿により得ることができ、沈殿の間の反応条件および濃度は、塩中のヒドロキシルのホスフェートによる置換の程度に影響する。繊維状の形態例えば透過型電子顕微鏡写真で観察されるようなは、水酸化アルミニウムアジュバントに典型的である。水酸化アルミニウムアジュバントのpIは、典型的に約11であり、すなわち、アジュバント自体は生理的なpHにおいて正の表面電荷を有する。pH7.4でAl1mgあたり1.8~2.6mgのタンパク質の吸着能力が、水酸化アルミニウムアジュバントについて報告されている。リン酸アルミニウムアジュバントは、一般に、0.3から1.2の間、好ましくは0.8から1.2の間、より好ましくは0.95±0.1のPO4/Alモル比molarratioを有する。リン酸アルミニウムは、特にヒドロキシリン酸塩については一般に非晶質である。典型的なアジュバントは、0.84~0.92のPO4/Alモル比を有する非晶質アルミニウムヒドロキシホスフェートであり、0.6mgAl3/mlで含まれる。リン酸アルミニウムは、一般に、粒子状例えば、透過型電子顕微鏡写真で観察されるような板状の形態である。粒子の典型的な直径は、任意の抗原が吸着した後に0.5~20μm例えば、約5~10μmの範囲である。pH7.4でAl1mgあたり0.7から1.5mgの間のタンパク質の吸着能力が、リン酸アルミニウムアジュバントについて報告されている。リン酸アルミニウムのゼロ電荷点PZCは、ヒドロキシルのホスフェートによる置換の程度と反比例し、この置換の程度は、沈殿により塩を調製するために用いる反応条件および反応物の濃度に依存して変動し得る。PZCは、溶液中の遊離ホスフェートイオンの濃度を変化させることより多いホスフェート=より酸性側のPZC、またはヒスチジンバッファのようなバッファを加えることPZCをより塩基性にするによっても変更される。本発明に従って使用されるリン酸アルミニウムは、通常、4.0から7.0の間、より好ましくは5.0から6.5の間、例えば、約5.7のPZCを有する。本発明の組成物を調製するために用いるアルミニウム塩の懸濁液は、バッファ例えば、リン酸バッファまたはヒスチジンバッファまたはトリスバッファを含有してよいが、これは必ずしも必要ではない。懸濁液は、滅菌されており、発熱物質を含まないことが好ましい。懸濁液は、例えば、1.0mMから20mMの間、好ましくは5mMから15mMの間、およびより好ましくは約10mMの濃度で存在する遊離の水性ホスフェートイオンを含んでよい。懸濁液は、塩化ナトリウムも含んでよい。本発明では、水酸化アルミニウムとリン酸アルミニウムの両方の混合物を用いることができる。この場合、リン酸アルミニウムが水酸化物よりも多く、例えば、少なくとも2:1、例えば、≧5:1、≧6:1、≧7:1、≧8:1、≧9:1などの重量比で存在してよい。患者に投与するための組成物中のAlの濃度は、10mg/ml未満、例えば、≦5mg/ml、≦4mg/ml、≦3mg/ml、≦2mg/ml、≦1mg/mlなどであることが好ましい。好ましい範囲は、0.3mg/mlから1mg/mlの間である。最大0.85mg/用量が好ましい。典型的なアジュバントであるリン酸アルミニウムアジュバントは、0.84から0.92の間のPO4/Alモル比を有する非晶質のアルミニウムヒドロキシホスフェートであり、0.6mgAl3/mlで含まれる。低用量のリン酸アルミニウム、例えば、用量あたりコンジュゲートあたり50μgから100μgの間のAl3を用いた吸着を用いることができる。B.油エマルジョン本発明においてアジュバントとして用いるのに適した油エマルジョン組成物としては、MF59マイクロフルイダイザーを用いてサブミクロンの粒子に処方した5スクアレン、0.5Tween80、および0.5Span85などのスクアレン-水エマルジョンが挙げられる[参考文献126の第10章;参考文献127~129も参照されたい]。MF59は、FLUAD商標インフルエンザウイルス三価サブユニットワクチンにおいてアジュバントとして使用される。組成物において用いるために特に好ましいアジュバントはサブミクロンの水中油エマルジョンである。本明細書で用いるための好ましいサブミクロンの水中油エマルジョンは、必要に応じて様々な量のMTP-PEを含有するスクアレン/水エマルジョン、例えば、4~5w/vのスクアレン、0.25~1.0w/vのTween80ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートpolyoxyelthylenesorbitanmonooleate、および/または0.25~1.0Span85ソルビタントリオレエート、および、必要に応じて、N-アセチルムラミル-L-アラニル-D-イソグルタミニルisogluatminyl-L-アラニン-2-1’-2’-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヒドロキシホスホリルオキシhydroxyphosphophoryloxy-エチルアミンMTP-PEを含有するサブミクロンの水中油エマルジョンである。組成物において用いるためのサブミクロンの水中油エマルジョン、それを作製する方法、およびムラミルペプチドなどの免疫賦活剤は、参考文献127130~131に詳しく記載されている。完全フロイントアジュバントCFAおよび不完全フロイントアジュバントIFAも、本発明においてアジュバントとして用いることができる。C.サポニン処方物[参考文献126の第22章]サポニン処方物も、本発明においてアジュバントとして用いることができる。サポニンは、広範囲の植物種の樹皮、葉、茎、根、さらには花において見出されるステロール配糖体およびトリテルペノイド配糖体の不均一な群である。QuillaiasaponariaMolinaの木の樹皮から単離されたサポニンがアジュバントとして広く研究されている。サポニンは、Smilaxornataサルサパリラ、Gypsophillapaniculataブライダルベール、およびSaponariaofficianalisカスミソウから、商業的に得ることもできる。サポニンアジュバント処方物としては、QS21などの精製された処方物、ならびにISCOMなどの脂質処方物が挙げられる。サポニン組成物は、HPLCおよびRP-HPLCを用いて精製されてきた。これらの技法を用いて特異的に精製された画分が同定されており、それらとしては、QS7、QS17、QS18、QS21、QH-A、QH-BおよびQH-Cが挙げられる。サポニンはQS21であることが好ましい。QS21の生成方法は参考文献132に開示されている。サポニン処方物は、コレステロールなどのステロールも含んでよい[133]。サポニンとコレステロールの組み合わせを用いて、免疫賦活複合体ISCOMと呼ばれる独特の粒子を形成することができる[参考文献126の第23章]。ISCOMは、典型的には、リン脂質、例えば、ホスファチジルエタノールアミンまたはホスファチジルコリンも含む。任意の公知のサポニンをISCOMに用いることができる。ISCOMは、QuilA、QHAおよびQHCのうちの1または複数を含むことが好ましい。ISCOMは、参考文献133~135にさらに記載されている。必要に応じて、ISCOMは、追加的な洗浄剤複数可を欠いてよい[136]。サポニンに基づくアジュバントの開発についての総説は、参考文献137138に見出すことができる。D.ビロソームおよびウイルス様粒子ビロソームおよびウイルス様粒子VLPも、本発明においてアジュバントとして用いることができる。これらの構造は、一般に、必要に応じてリン脂質と組み合わされ、またはリン脂質と一緒に処方される、ウイルス由来の1または複数のタンパク質を含有する。これらは、一般に、非病原性、非複製的であり、概して、いかなる天然のウイルスのゲノムも含有しない。ウイルスタンパク質を、組換え生成することができ、またはウイルス全体から単離することができる。ビロソームまたはVLPにおいて用いるのに適したこれらのウイルスタンパク質としては、インフルエンザウイルス例えば、HAまたはNA、B型肝炎ウイルス例えば、コアタンパク質またはカプシドタンパク質、E型肝炎ウイルス、麻疹ウイルス、シンドビスウイルス、ロタウイルス、口蹄疫ウイルス、レトロウイルス、ノーウォークウイルス、ヒトパピローマウイルス、HIV、RNA-ファージ、Qβ-ファージ例えば、コートタンパク質、GA-ファージ、fr-ファージ、AP205ファージ、およびTy例えば、レトロトランスポゾンTyタンパク質p1に由来するタンパク質が挙げられる。VLPは、参考文献139~144においてさらに論じられている。ビロソームは、例えば、参考文献145においてさらに論じられている。E.細菌誘導体または微生物誘導体本発明において用いるのに適したアジュバントは、細菌誘導体または微生物誘導体、例えば、腸内細菌のリポ多糖LPSの無毒性の誘導体、リピドA誘導体、免疫賦活性オリゴヌクレオチドおよびADP-リボシル化毒素およびその解毒された誘導体を含む。LPSの無毒性の誘導体としては、モノホスホリルリピドAMPLおよび3-O-脱アシル化MPL3dMPLが挙げられる。3dMPLは、4、5または6のアシル化された鎖を有する3脱O-アシル化モノホスホリルリピドAの混合物である。好ましい3脱O-アシル化モノホスホリルリピドAの小粒子形態は、参考文献146に開示されている。そのような3dMPLの小粒子は、0.22μmの膜を通して滅菌ろ過するのに十分小さい[146]。他の無毒性のLPS誘導体としては、モノホスホリルリピドA模倣体、例えば、アミノアルキルグルコサミニドホスフェート誘導体、例えば、RC-529が挙げられる[147、148]。リピドA誘導体としては、Escherichiacoli由来のリピドAの誘導体、例えば、OM-174が挙げられる。OM-174は、例えば、参考文献149150に記載されている。本発明においてアジュバントとして用いるのに適した免疫賦活性オリゴヌクレオチドとしては、CpGモチーフを含有するヌクレオチド配列リン酸結合によってグアノシンと連結した、メチル化されていないシトシンを含有するジヌクレオチド配列が挙げられる。パリンドローム配列またはポリdG配列を含有する二本鎖RNAおよびオリゴヌクレオチドも、免疫賦活性であることが示されている。CpGは、ヌクレオチドの修飾/類似体、例えば、ホスホロチオエート修飾を含んでよく、また、二本鎖または一本鎖であってよい。参考文献151、152および153には、可能性のある類似体の置換、例えば、グアノシンの、2’-デオキシ-7-デアザグアノシンによる置き換えが開示されている。CpGオリゴヌクレオチドのアジュバント効果は、参考文献154~159においてさらに論じられている。CpG配列、例えば、GTCGTTモチーフまたはTTCGTTモチーフは、TLR9に向けられ得る[160]。CpG配列は、CpG-AODNなどの、Th1免疫応答の誘導に特異的であってよく、または、CpG-BODNなどのB細胞応答誘導により特異的であってよい。CpG-AODNおよびCpG-BODNは、参考文献161~163において論じられている。CpGはCpG-AODNであることが好ましい。CpGオリゴヌクレオチドは、受容体を認識するために5’末端を利用できるように構築することが好ましい。必要に応じて、2つのCpGオリゴヌクレオチド配列を、それらの3’末端で結合させて、イムノマーimmunomerを形成することができる。例えば、参考文献160164~166を参照されたい。細菌性のADP-リボシル化毒素およびその解毒された誘導体を、本発明においてアジュバントとして用いることができる。タンパク質は、E.coliE.coli熱不安定性エンテロトキシンLT、コレラCT、または百日咳PTに由来することが好ましい。解毒されたADP-リボシル化毒素の、粘膜アジュバントとしての使用は、参考文献167に記載されており、非経口的なアジュバントとしての使用は参考文献168に記載されている。毒素または類毒素は、AサブユニットおよびBサブユニットの両方を含むホロ毒素の形態であることが好ましい。Aサブユニットは、解毒性変異を含有することが好ましく、Bサブユニットは変異していないことが好ましい。アジュバントは、解毒されたLT変異体、例えば、LT-K63、LT-R72、およびLT-G192であることが好ましい。ADP-リボシル化毒素およびその解毒された誘導体、特にLT-K63およびLT-R72の、アジュバントとしての使用は、参考文献169~176に見出すことができる。アミノ酸置換についての数値での参照は、その全体が参照により具体的に本明細書に組み込まれる参考文献177に記載のADP-リボシル化毒素のAサブユニットとBサブユニットのアラインメントに基づくことが好ましい。F.ヒト免疫調節物質本発明においてアジュバントとして用いるのに適したヒト免疫調節物質としては、サイトカイン、例えば、インターロイキン例えば、IL-1、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-12[178]など[179]、インターフェロン例えば、インターフェロン-γ、マクロファージコロニー刺激因子、および腫瘍壊死因子が挙げられる。G.生体接着剤bioadhesiveおよび粘膜接着剤mucoadhesive生体接着剤および粘膜接着剤も、本発明においてアジュバントとして用いることができる。適切な生体接着剤としては、エステル化されたヒアルロン酸ミクロスフェア[180]または粘膜接着剤、例えば、ポリアクリル酸、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、多糖およびカルボキシメチルセルロースの架橋した誘導体が挙げられる。キトサンおよびそれらの誘導体も、本発明においてアジュバントとして用いることができる[181]。H.微小粒子微小粒子も、本発明においてアジュバントとして用いることができる。ポリラクチド-co-グリコリドを用いて、生分解性かつ無毒性の材料例えば、ポリα-ヒドロキシ酸、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリ酸無水物、ポリカプロラクトンなどから形成された微小粒子すなわち、直径約100nm~約150μm、より好ましくは直径約200nm~約30μm、最も好ましくは直径約500nm~約10μmの粒子が好ましく、必要に応じて、それを、負に荷電した表面を有するように処理する例えば、SDSを用いてまたは正に荷電した表面を有するように処理する例えば、CTABなどの陽イオン洗浄剤を用いて。I.リポソーム参考文献126の第13章第14章アジュバントとして用いるのに適したリポソーム処方物の例は、参考文献182~184に記載されている。J.ポリオキシエチレンエーテルおよびポリオキシエチレンエステル処方物本発明において用いるのに適したアジュバントは、ポリオキシエチレンエーテルおよびポリオキシエチレンエステル[185]を含む。そのような処方物としては、さらに、オクトキシノールと組み合わせたポリオキシエチレンソルビタンエステル界面活性剤[186]ならびに少なくとも1つの追加的な非イオン性界面活性剤、例えば、オクトキシノールと組み合わせたポリオキシエチレンアルキルエーテルまたはエステル界面活性剤[187]が挙げられる。好ましいポリオキシエチレンエーテルは、以下の群から選択される:ポリオキシエチレン-9-ラウリルエーテルラウレス9、ポリオキシエチレン-9-ステアリルsteorylエーテル、ポリオキシエチレンpolyoxytheylene-8-ステアリルエーテル、ポリオキシエチレン-4-ラウリルエーテル、ポリオキシエチレン-35-ラウリルエーテル、およびポリオキシエチレン-23-ラウリルエーテル。K.ポリホスファゼンPCPPPCPP処方物は、例えば、参考文献188および189に記載されている。L.ムラミルペプチド本発明においてアジュバントとして用いるのに適したムラミルペプチドの例としては、N-アセチル-ムラミル-L-トレオニル-D-イソグルタミンthr-MDP、N-アセチル-ノルムラミルnormuramyl-L-アラニル-D-イソグルタミンnor-MDP、およびN-アセチルムラミル-L-アラニル-D-イソグルタミニル-L-アラニン-2-1’-2’-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヒドロキシホスホリルオキシ-エチルアミンMTP-PEが挙げられる。M.イミダゾキノロンImidazoquinolone化合物本発明においてアジュバントとして用いるのに適したイミダゾキノロン化合物の例としては、イミキモドImiquamodおよびその同族化合物レシキモドResiquimod3Mが挙げられ、参考文献190および191にさらに記載されている。N.チオセミカルバゾン化合物すべてが本発明においてアジュバントとして用いるのに適したチオセミカルバゾン化合物、ならびに化合物を処方、製造、およびスクリーニングする方法の例としては、参考文献192に記載のものが挙げられる。チオセミカルバゾンは、ヒト末梢血単核細胞を、TNF-αなどのサイトカイン産生について刺激することにおいて特に有効である。O.トリプタントリン化合物すべてが本発明においてアジュバントとして用いるのに適したトリプタントリン化合物、ならびに化合物を処方、製造、およびスクリーニングする方法の例としては、参考文献193に記載のものが挙げられる。トリプタントリン化合物は、ヒト末梢血単核細胞を、TNF-αなどのサイトカイン産生について刺激することにおいて特に有効である。本発明は、上記で同定したアジュバントの1または複数の態様の組み合わせも含んでよい。例えば、以下の組み合わせを本発明においてアジュバント組成物として用いることができる:1サポニンおよび水中油エマルジョン[194];2サポニン例えば、QS21無毒性のLPS誘導体例えば、3dMPL[195];3サポニン例えば、QS21無毒性のLPS誘導体例えば、3dMPLコレステロール;4サポニン例えば、QS213dMPLIL-12必要に応じて、ステロール[196];53dMPLと、例えば、QS21および/または水中油エマルジョンの組み合わせ[197];6サブミクロンのエマルジョンに微小流動化した、またはボルテックスしてより大きな粒子サイズのエマルジョンを生じさせたかのいずれかの、10スクアラン、0.4Tween80商標、5プルロニック-ブロックポリマーL121、およびthr-MDPを含有するSAF。72スクアレン、0.2Tween80、ならびに、モノホスホリルリピドAMPL、トレハロースジミコレートTDM、および細胞壁の骨格CWS、好ましくはMPLCWSDetox商標からなる群からの1または複数の細菌の細胞壁成分を含有するRibi商標アジュバント系RAS、RibiImmunochem;および81または複数の無機塩類例えば、アルミニウム塩などLPSの無毒性の誘導体例えば、3dMPL。免疫賦活剤としての機能を果たす他の物質は、参考文献126の第7章に開示されている。アルミニウム塩アジュバントの使用が特に好ましく、一般に、抗原はそのような塩に吸着される。本発明の組成物では、いくつかの抗原は水酸化アルミニウムに吸着させるが、他の抗原はリン酸アルミニウムと会合させることが可能である。しかし、一般には、単一の塩、例えば、水酸化物またはリン酸塩を用いるがその両方は用いないことが好ましい。すべてのコンジュゲートが吸着する必要はない、すなわち、一部またはすべてが溶液中で遊離していてよい。処置方法本発明は、哺乳動物における免疫応答を上昇させるための方法であって、本発明の薬学的組成物を哺乳動物に投与する工程を含む方法も提供する。免疫応答は、防御的であることが好ましく、抗体を伴うことが好ましい。この方法により、追加免疫応答を生じさせることができる。哺乳動物はヒトであることが好ましい。ワクチンが予防的に使用するためのものである場合、ヒトは、子例えば、幼児または乳児またはティーンエイジャーであることが好ましく、ワクチンが治療的に使用するためのものである場合、ヒトは、成人であることが好ましい。例えば、安全性、投与量、免疫原性などを評価するために小児用ワクチンを成人に投与することもできる。処置するために好ましいヒトのクラスは、妊娠可能な年齢の女性例えば、ティーンエイジャー以上である。別の好ましいクラスは妊婦である。高齢の患者例えば、50歳超、60歳超、70歳超、80歳超または90歳超など、特に、65歳超の高齢の患者、特に、GBS感染の危険性が増す可能性があるナーシングホームで生活している高齢の患者[198]は、処置するために好ましい別のヒトのクラスである。いくつかの実施形態では、ヒトは、薬学的組成物を投与する前にGBS血清型Ia由来の莢膜糖に対する抗体を検出不可能なレベルで有する。他の実施形態では、ヒトは、薬学的組成物を投与する前に、GBS血清型Ib由来の莢膜糖に対する抗体を検出不可能なレベルで有する。他の実施形態では、ヒトは、薬学的組成物を投与する前に、GBS血清型III由来の莢膜糖に対する抗体を検出不可能なレベルで有する。特に、ヒトは、薬学的組成物を投与する前に、GBS血清型Ia由来の莢膜糖に対する抗体を検出不可能なレベルで有し、GBS血清型Ib由来の莢膜糖に対する抗体を検出不可能なレベルで有する可能性がある。その代わりに、またはそれに加えて、ヒトは、薬学的組成物を投与する前に、GBS血清型III由来の莢膜糖に対する抗体を検出不可能なレベルで有し得る。莢膜糖複数可に対する抗体のレベル複数可は、下のヒト試験1において記載されているELISAを用いて決定することができる。抗体のレベル複数可は、投与する1カ月前、特に、投与する1カ月前以内例えば、2週間以内、1週間以内または投与当日のレベルと同様であってよい。これらの検出不可能なレベル複数可の莢膜糖複数可に対する抗体を有する女性の新生児のGBS感染率はより高い可能性がある。これは、この母系のGBS莢膜糖に対する抗体のレベルが高いことが、新生児における疾患リスクの低下と相関するからである[参考文献199および200]。したがって、これらの女性への投与が本発明において具体的に想定される。いくつかの実施形態では、患者は、例えば、予備免疫した患者のセクションで本発明の第2の態様に関して下に記載されている通り、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体を用いて予備免疫されている。これらの実施形態では、免疫原性組成物中の少なくとも1つのコンジュゲートは、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖であることが好ましい。本発明者らは、患者がジフテリアトキソイドまたはその誘導体を用いて予備免疫されている場合、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体上に糖が提示されることによって莢膜糖に対する免疫応答が改善され得ることを見出した。組成物中の、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせた莢膜糖は、例えば、GBS血清型Ia、IbまたはIII由来であってよい。特に、莢膜糖は、GBS血清型III由来であってよい下に例示されている通り。これらの実施形態では、組成物中のGBS由来の莢膜糖のすべてがジフテリアトキソイドまたはその誘導体とコンジュゲートしていることが典型的である。キャリアまたは予備免疫抗原がジフテリアトキソイドの誘導体である場合には、その誘導体は、Dtと免疫学的に交差反応性のままであることが好ましく、CRM197であることが好ましい。他の実施形態では、患者は、例えば、予備免疫した患者および破傷風トキソイドキャリアのセクションで本発明の第2の態様に関して下に記載されている通り、破傷風トキソイドまたはその誘導体を用いて予備免疫されている。これらの実施形態では、免疫原性組成物中の少なくとも1つのコンジュゲートは、破傷風トキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖であることが好ましい。莢膜糖に対する免疫応答は、患者が、破傷風トキソイドまたはその誘導体を用いて予備免疫されている場合、破傷風トキソイドまたはその誘導体上に糖が提示されることによって改善され得る。組成物中の、破傷風トキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせた莢膜糖は、例えば、GBS血清型Ia、IbまたはIII由来であってよい。特に、莢膜糖は、GBS血清型III由来であってよい。これらの実施形態では、組成物中のGBS由来の莢膜糖のすべてが破傷風トキソイドまたはその誘導体とコンジュゲートしていることが典型的である。本発明は、医薬品として使用するための本発明の組成物も提供する。医薬品は、哺乳動物における免疫応答を生じさせることができることすなわち、免疫原性組成物であるが好ましく、ワクチンであることがより好ましい。本発明は、哺乳動物における免疫応答を上昇させるための医薬品の製造における本発明の組成物の使用も提供する。これらの使用および方法は、S.agalactiaeによって引き起こされる疾患、例えば、新生児敗血症または菌血症、新生児肺炎、新生児髄膜炎、子宮内膜炎、骨髄炎、化膿性関節炎などを予防および/または処置するためのものであることが好ましい。疾患を予防する被験体は、本発明のコンジュゲートを受ける被験体と同じでなくてよい。例えば、子を保護するために、女性妊娠前または妊娠中のにコンジュゲートを投与することができるいわゆる母体免疫[201~203]。治療的処置の効力を調査する1つの方式は、本発明の組成物を投与した後に、GBS感染をモニターすることを包含する。予防的処置の効力を調査する1つの方式は、組成物を投与した後に、GBS抗原に対する免疫応答をモニターすることを包含する。本発明の好ましい組成物は、各抗原性成分に対する抗体保有率seroprotectionの基準よりも優れている抗体価を、ヒト被験体の許容できる百分率でヒトに付与することができる。関連する抗体価が、宿主が抗原に対して抗体陽転すると考えられる抗体価を超える抗原は周知であり、そのような力価は、WHOなどの組織により公開されている。被験体の統計的に有意な試料の80超、より好ましくは90超、さらに好ましくは93超、最も好ましくは96~100が抗体陽転することが好ましい。本発明の組成物は、一般に、患者に直接投与される。直接的な送達は、非経口的な注射例えば、皮下に、腹腔内に、静脈内に、筋肉内に、もしくは組織の間質腔へ、または直腸投与、経口投与、膣への投与、局所投与、経皮投与、鼻腔内投与、眼への投与、耳への投与、肺への投与は他の粘膜投与によって実現することができる。大腿または上腕への筋肉内投与が好ましい。注射は、針例えば、皮下針を介してよいが、その代わりに無針注射を用いることができる。典型的な筋肉内用量は0.5mlである。本発明は、全身免疫および/または粘膜免疫を惹起するために用いることができる。投薬処置は、単回用量スケジュールまたは複数回用量スケジュールであってよい。複数回用量は、一次免疫スケジュールおよび/または追加免疫スケジュールで用いることができる。一次用量スケジュールの後に、追加免疫用量スケジュールを続けることができる。初回刺激用量の間例えば、4~16週の間、および初回刺激と追加免疫との間の適切なタイミングは、常套的に決定することができる。GBSタンパク質抗原上記の通り、GBSタンパク質を本発明の組成物に含めることができる。GBSタンパク質は、本発明のコンジュゲートのためのキャリアタンパク質、他のコンジュゲートのためのキャリアタンパク質、またはコンジュゲートしていないタンパク質抗原として用いることができる。本発明で用いるためのGBSタンパク質抗原としては、参考文献99および204~206に開示されているものが挙げられる。本発明で用いるための2種の好ましいGBSタンパク質抗原はGBS67およびGBS80として公知である[参考文献99を参照されたい]。本発明で用いるためのさらに好ましいGBSタンパク質抗原は、Spb1として公知である[参考文献207を参照されたい]。これらの3つの抗原のさらなる詳細は下に示されている。これらの3種のGBSタンパク質の全長配列は、本明細書の配列番号1~3である。したがって、本発明の組成物は、a配列番号1~3から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチド、ならびに/またはbi配列番号1~3のうちの1または複数に対する配列同一性を有するアミノ酸配列および/もしくはii配列番号1~3の断片を含むポリペプチドを含んでよい。本発明の組成物は、これらのGBSタンパク質抗原の混合物も含んでよい。特に、本発明の組成物は、a1配列番号1のアミノ酸配列を含むポリペプチド、ならびに/またはb1i配列番号1に対して配列同一性を有するアミノ酸配列および/もしくはii配列番号1の断片を含むポリペプチドと、a2配列番号2のアミノ酸配列を含むポリペプチド、ならびに/またはb2i配列番号2に対して配列同一性を有するアミノ酸配列および/もしくはii配列番号2の断片を含むポリペプチドとを含んでよい。同様に、本発明の組成物は、a1配列番号1のアミノ酸配列を含むポリペプチド、ならびに/またはb1i配列番号1に対して配列同一性を有するアミノ酸配列および/もしくはii配列番号1の断片を含むポリペプチドと、a2配列番号3のアミノ酸配列を含むポリペプチド、ならびに/またはb2i配列番号3に対して配列同一性を有するアミノ酸配列および/もしくはii配列番号3の断片を含むポリペプチドとを含んでよい。同様に、本発明の組成物は、a1配列番号2のアミノ酸配列を含むポリペプチド、ならびに/またはb1i配列番号2に対して配列同一性を有するアミノ酸配列および/もしくはii配列番号2の断片を含むポリペプチドと、a2配列番号3のアミノ酸配列を含むポリペプチド、ならびに/またはb2i配列番号3に対して配列同一性を有するアミノ酸配列および/もしくはii配列番号3の断片を含むポリペプチドとを含んでよい。本発明の組成物は、a1配列番号1のアミノ酸配列を含むポリペプチド、ならびに/またはb1i配列番号1に対して配列同一性を有するアミノ酸配列および/もしくはii配列番号1の断片を含むポリペプチドと、a2配列番号2のアミノ酸配列を含むポリペプチド、ならびに/またはb2i配列番号2に対して配列同一性を有するアミノ酸配列および/もしくはii配列番号2の断片を含むポリペプチドと、a3配列番号3のアミノ酸配列を含むポリペプチド、ならびに/またはb3i配列番号3に対して配列同一性を有するアミノ酸配列および/もしくはii配列番号3の断片を含むポリペプチドとを含んでよい。本発明で用いるために好ましい他の3種のGBSタンパク質抗原が、GBS104、GBS276、およびGBS322として公知である[参考文献99を参照されたい]。血清型Vの2603V/R分離株由来の野生型GBS104のアミノ酸配列が、参考文献21において配列番号3としてその中に示されている。本明細書において、配列番号1を参照することによって本発明の実施形態が定義されている場合、配列番号1への参照は、参考文献21の配列番号3への参照で置き換えることができる。血清型Vの2603V/R分離株由来の野生型GBS276のアミノ酸配列が、参考文献21において配列番号4としてその中に示されている。本明細書において、配列番号2を参照することによって本発明の実施形態が定義されている場合、配列番号2への参照は、参考文献21の配列番号4への参照で置き換えることができる。血清型Vの2603V/R分離株由来の野生型GBS322のアミノ酸配列が、参考文献21において配列番号5としてその中に示されている。本明細書において、配列番号3を参照することによって本発明の実施形態が定義されている場合、配列番号3への参照は、参考文献21の配列番号5への参照で置き換えることができる。特定の配列番号に応じて、iにおける配列同一性の程度は、50例えば、60、70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99以上を超えることが好ましい。これらのポリペプチドは、ホモログ、オルソログ、対立遺伝子バリアントおよび機能的変異体を含む。典型的には、2つのポリペプチド配列間の50以上の同一性が、機能的同等性の指標になると考えられる。ポリペプチド間の同一性は、MPSRCHプログラムOxfordMolecularで実行されるSmith-Waterman相同性検索アルゴリズムにより、ギャップオープンペナルティgapopenpenalty=12およびギャップ伸長ペナルティgapextensionpenalty=1のパラメータを用いたアフィンギャップ検索を用いて決定することが好ましい。特定の配列番号に応じて、iiの断片は、該配列由来の少なくともn個の連続したアミノ酸を含むべきであり、特定の配列に応じて、nは、7以上例えば、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、35、40、45、50、60、70、80、90、100以上である。断片は、該配列の少なくとも1つのT細胞エピトープ、または、好ましくはB細胞エピトープを含んでよい。T細胞エピトープおよびB細胞エピトープは経験的に同定することができる例えば、PEPSCAN[208、209]または同様の方法を用いて、またはT細胞エピトープおよびB細胞エピトープは、予測することができる例えば、Jameson-Wolf抗原性指標[210]、マトリックスベースの手法[211]、TEPITOPE[212]、ニューラルネットワーク[213]、OptiMerEpiMer[214、215]、ADEPT[216]、Tsites[217]、親水性[218]、抗原性指標[219]または参考文献220に開示されている方法などを用いて。他の好ましい断片は、配列番号1~3の、それらのN末端のアミノ酸残基を有さない、またはそれらのN末端のシグナルペプチドを有さない断片である。リーダー配列領域もしくはシグナル配列領域、膜貫通領域、細胞質領域または細胞壁アンカリングモチーフなどの1または複数のドメインの除去を用いることができる。特定のタンパク質の好ましい断片を、全長の特定のタンパク質に結合させることができる抗体に結合させることができ、例えば、配列番号1、2または3に結合する抗体に結合させることができる。いくつかの有用な断片が下に示されている配列番号4~13。これらのポリペプチドは、配列番号1~3と比較して、1または複数例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10などの保存されたアミノ酸の置き換え、すなわち、1つのアミノ酸の、関連する側鎖を有する別のアミノ酸との置き換えを含んでよい。遺伝子にコードされるアミノ酸は、一般に、4つのファミリー:1酸性、すなわち、アスパルテート、グルタメート;2塩基性、すなわち、リジン、アルギニン、ヒスチジン;3非極性、すなわち、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン;および4非荷電極性、すなわち、グリシン、アスパラギン、グルタミン、シスチン、セリン、トレオニン、チロシンに分けられる。フェニルアラニン、トリプトファン、およびチロシンは、時には、一緒に芳香族アミノ酸に分類される。一般に、これらのファミリー内の単一のアミノ酸の置換は、生物活性に対して主要な影響を有さない。ポリペプチドは、配列番号1~3と比較して、1または複数例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10などの単一のアミノ酸の欠失を含んでもよい。ポリペプチドは、配列番号1~3と比較して、1または複数例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10などの挿入例えば、1アミノ酸、2アミノ酸、3アミノ酸、4アミノ酸または5アミノ酸のそれぞれを含んでもよい。本発明のポリペプチドは、多くの方式で、例えば、化学合成によって全体的または部分的に、長いポリペプチドを、プロテアーゼを用いて消化することによって、RNAからの翻訳によって、細胞培養物から例えば、組換え発現体から、生物体自体から例えば、細菌培養後に、もしくは患者から直接精製することによってなどで調製することができる。<40アミノ酸長のペプチドを生成するための好ましい方法は、invitro化学合成を伴う[221、222]。tBocまたはFmoc[223]化学に基づく方法などの固相ペプチド合成が特に好ましい。酵素的合成[224]も一部または全部に用いることができる。化学合成の代替として、生物学的合成を用いることができ、例えば、ポリペプチドを翻訳によって生成することができる。これは、invitroまたはinvivoで行うことができる。生物学的方法は、一般に、L-アミノ酸に基づくポリペプチドの生成に限られるが、翻訳機構例えば、アミノアシルtRNA分子のの操作を用いて、D-アミノ酸または他の非天然アミノ酸、例えば、ヨードチロシンまたはメチルフェニルアラニン、アジドホモアラニンazidohomoalanineなどの導入を可能にすることができる[225]。しかし、D-アミノ酸が含まれる場合、化学合成を用いることが好ましい。本発明のポリペプチドは、C末端および/またはN末端に共有結合による修飾を有してよい。これらのGBSタンパク質が本発明の組成物に含まれる場合には、これらのGBSタンパク質は種々の形態をとることができる例えば、天然の形態、融合形態、グリコシル化された形態、グリコシル化されていない形態、脂質付加された形態、脂質付加されていない形態、リン酸化された形態、リン酸化されていない形態、ミリストイル化された形態、ミリストイル化されていない形態、単量体の形態、多量体の形態、粒子形態、変性した形態など。これらのGBSタンパク質は、精製された形態または実質的に精製された形態、すなわち、他のポリペプチドを実質的に含まない例えば、天然に存在するポリペプチドを含まない、特に、他のGBSポリペプチドまたは宿主細胞ポリペプチドを含まない形態で用いることが好ましい。GBS67血清型Vの2603V/R株から配列決定されたGBS67のヌクレオチド配列およびアミノ酸配列は、参考文献99に配列番号37453746として記載されている。このアミノ酸配列は、本明細書では配列番号1である:GBS67は、C末端の膜貫通領域を含有し、それは、上記の配列番号1のC末端に最も近い下線が引かれている領域によって示されている。膜貫通領域から1または複数のアミノ酸を除去することができ、またはアミノ酸を膜貫通領域の前で切断することができる。そのようなGBS67断片の例は、配列番号4として下に記載されている。GBS67は、細胞壁アンカーを示すアミノ酸モチーフを含有し、それは上記の配列番号1においてイタリック体で示されている。いくつかの組換え型の宿主細胞系では、宿主細胞からの組換えGBS67タンパク質の分泌を容易にするために、このモチーフを除去することが好ましい場合がある。したがって、本発明において用いるためのGBS67の1つの好ましい断片では、上記膜貫通および上記細胞壁アンカーモチーフをGBS67から除去する。そのようなGBS67断片の例は下に配列番号5として記載されている。あるいは、いくつかの組換え型の宿主細胞系では、組換えによって発現させたタンパク質を細胞壁に係留するために、細胞壁アンカーモチーフを用いることが好ましい場合がある。発現されたタンパク質の細胞外ドメインは、精製中に切断することができ、または組換えタンパク質は、最終の組成物中に、不活化した宿主細胞または細胞膜のいずれかに結合させたまま残すことができる。保存されたリジン残基を含有する3つのピリンモチーフがGBS67において同定されている。保存されたリジン残基は、アミノ酸残基478および488、アミノ酸残基340および342、およびアミノ酸残基703および717にある。ピリン配列、特に、保存されたリジン残基は、GBS67のオリゴマーのピリ線毛様構造の形成に重要であると考えられている。GBS67の好ましい断片は、少なくとも1つの保存されたリジン残基を含む。保存されたグルタミン酸残基を含有する2つのEボックスもGBS67において同定されている。GBS67の好ましい断片は、少なくとも1つの保存されたグルタミン酸残基を含む。GBS67は、アルファヘリックス構造を形成することが予測されるいくつかの領域を含有する。そのようなアルファヘリックス領域は、コイルドコイル構造を形成する可能性があり、また、GBS67のオリゴマー形成に関与する可能性がある。GBS67は、S.aureusコラーゲン結合表面タンパク質pfam05738のCna_Bドメインと相同な領域も含有する。この領域は、ベータサンドイッチ構造を形成し得る。GBS67は、フォンウィルブランド因子vWF型Aドメインと相同な領域を含有する。血清型IbのH36B株から配列決定されたGBS67のアミノ酸配列が参考文献226に配列番号20906として記載されている。このアミノ酸配列は、本明細書では配列番号24である:いくつかの実施形態では、GBS67のこのバリアントを用いることができる。したがって、本明細書において、配列番号1を参照することによって本発明の実施形態が定義されている場合、配列番号1への参照は、配列番号24への参照で置き換えることができる。血清型Vの2603V/R株から配列決定されたGBS67と同様に、血清型IbのH36B株から配列決定されたGBS67は、C末端の膜貫通領域を含有し、それは、上記の配列番号24のC末端に最も近い下線が引かれている領域によって示されている。膜貫通領域から1または複数のアミノ酸を除去することができ、またはアミノ酸を膜貫通領域の前で切断することができる。そのようなGBS67断片の例は下に配列番号25として記載されている。血清型Vの2603V/R株から配列決定されたGBS67と同様に、血清型IbのH36B株から配列決定されたGBS67は、細胞壁アンカーを示すアミノ酸モチーフを含有し、それは上記の配列番号24においてイタリック体で示されている。したがって、本発明において用いるためのGBS67の1つの好ましい断片では、上記膜貫通および上記細胞壁アンカーモチーフをGBS67から除去する。そのようなGBS67断片の例は下に配列番号26として記載されている。GBS80GBS80とは、推定上の細胞壁表面アンカーファミリータンパク質をいう。血清型Vの2603V/R分離株から配列決定されたGBS80のヌクレオチド配列およびアミノ酸配列は、参考文献99において配列番号87798780として記載されている。このアミノ酸配列は下に配列番号2として記載されている:GBS80は、N末端のリーダー配列領域またはシグナル配列領域を含有し、それは、上記の下線が引かれている配列によって示されている。GBS80のリーダー配列領域またはシグナル配列領域から1または複数のアミノ酸を除去することができる。そのようなGBS80断片の例は下に配列番号6として記載されている:GBS80は、C末端の膜貫通領域を含有し、それは、上記の配列番号2の末端近くの下線が引かれている配列によって示される。1または複数のアミノ酸を膜貫通領域および/または細胞質領域から除去することができる。そのような断片の例は下に配列番号7として記載されている:GBS80は、細胞壁アンカーを示すアミノ酸モチーフを含有し、それは上記の配列番号2においてイタリック体で示されている。いくつかの組換え型の宿主細胞系では、宿主細胞からの組換えGBS80タンパク質の分泌を容易にするために、このモチーフを除去することが好ましい場合がある。したがって、膜貫通領域および/または細胞質領域ならびに細胞壁アンカーモチーフを、GBS80から除去することができる。そのような断片の例は下に配列番号8として記載されている。あるいは、いくつかの組換え型の宿主細胞系では、組換えによって発現させたタンパク質を細胞壁に係留するために、細胞壁アンカーモチーフを用いることが好ましい場合がある。発現されたタンパク質の細胞外ドメインは、精製中に切断することができ、または組換えタンパク質は、最終の組成物中に、不活化した宿主細胞または細胞膜のいずれかに結合させたまま残すことができる。一実施形態では、リーダー配列領域もしくはシグナル配列領域、膜貫通領域および細胞質領域および細胞壁アンカーモチーフをGBS80配列から除去する。そのようなGBS80断片の例は下に配列番号9として記載されている:GBS80の特定の免疫原性断片はタンパク質のN末端に向かって位置し、本明細書では配列番号10として示される:Spb1血清型IIIのCOH1株由来の野生型SpbI配列は、本明細書では配列番号3である:野生型SpbIは、N末端のリーダー配列領域またはシグナル配列領域を含有し、それは、上記の下線が引かれた配列によって示されているアミノ酸1~29。SpbIのリーダー配列領域またはシグナル配列領域由来の1または複数のアミノ酸を除去することができる。そのようなSpbI断片の例は下に配列番号11として記載されている:野生型SpbI配列は、細胞壁アンカーを示すアミノ酸モチーフLPSTGを含有する。いくつかの組換え型の宿主細胞系では、宿主細胞からの組換えSpbIタンパク質の分泌を容易にするために、このモチーフを除去することが好ましい場合がある。したがって、細胞壁アンカーモチーフおよびこのモチーフのC末端側の配列を、SpbIから除去することができる。そのような断片の例は下に配列番号12として記載されている:あるいは、いくつかの組換え型の宿主細胞系では、組換えによって発現されたタンパク質を細胞壁に係留するために、細胞壁アンカーモチーフを用いることが好ましい場合がある。発現されたタンパク質の細胞外ドメインは、精製中に切断することができ、または組換えタンパク質は、最終の組成物中に、不活化した宿主細胞または細胞膜のいずれかに結合させたまま残すことができる。一実施形態では、リーダー配列領域もしくはシグナル配列領域、細胞壁アンカーモチーフおよびこのモチーフのC末端側の配列をSpbIから除去する。そのようなSpbI断片の例は下に配列番号13として記載されている:保存されたグルタミン酸残基を含有するEボックスもSpbIにおいて同定されており下線が引かれている、残基423太字に保存されたグルタミン酸を有する。Eボックスモチーフは、オリゴマーのピリ線毛様構造の形成に重要である可能性があり、したがって、SpbIの有用な断片は保存されたグルタミン酸残基を含んでよい。野生型Spb1配列は、シャイン-ダルガルノ配列のコア配列下線が引かれているを含む上流の12merの配列配列番号14を有する内部メチオニンコドンMet-162を含む。このシャイン-ダルガルノ配列には、切断されたSpb1配列の翻訳が開始されることが見出されている。この部位における翻訳の開始を妨げるために、シャイン-ダルガルノ配列を、発現のために用いられるSpb1-コード配列において攪乱することができる。任意の適切なヌクレオチドを変異させてリボソームの結合を妨げることができるが、この配列は、シャイン-ダルガルノコアおよび内部メチオニンコドンを有するインフレームの両者の一部であるGGAグリシンコドンを含む。コードされるグリシンを変化させず、それにより、Spb1配列のいかなる変化も回避しながら、このコドンの3番目の塩基をC、GまたはTに変異させることができる。本発明の組成物は、参考文献[227]においてアミノ酸配列NH2-W-X-L-Y-Z-CO2H式中:Xは、Spb1配列であり、Lは任意選択のリンカーであり、Yは、GBS80配列であり、Wは任意選択のN末端配列であり、Zは任意選択のC末端配列であるで定義済みのポリペプチドを含んでもよい。このポリペプチドのさらなる詳細は、下に示されている。これらの組成物は、上記のGBSタンパク質抗原のうちの1または複数も含んでよい。特に、本発明の組成物は、aアミノ酸配列NH2-W-X-L-Y-Z-CO2Hのポリペプチドと、b1上記の配列番号1のアミノ酸配列を含むポリペプチドならびに/またはb2i上記の配列番号1に対して配列同一性を有するアミノ酸配列および/もしくはii上記の配列番号1の断片を含むポリペプチドとを含んでよい。ポリペプチドNH2-W-X-L-Y-Z-CO2H典型的には、ポリペプチドは、アミノ酸配列X-L-Yを含み、式中、XはSpb1配列であり、Lは任意選択のリンカーであり、Yは、GBS80配列である。X:Spb1配列X部分はSpb1配列である。このSpb1配列は、被験体に投与されると、野生型Spb1タンパク質、例えば、配列番号3のアミノ酸配列を有するS.agalactiaeタンパク質COH1株の全長の野生型配列に結合する抗体を含む抗体応答を惹起する。Spb1配列は、配列番号13に対して少なくともaの同一性を有するアミノ酸配列を含んでよい。aの値は、50、60、70、80、85、90、95、96、97、98、99以上から選択することができる。Spb1配列は、配列番号13を含み得る。Spb1配列は、配列番号3の断片および/または配列番号13の断片を含み得る。断片は、通常、配列番号3/13の少なくともbアミノ酸を含み、bは、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、22、24、26、28、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、175、200以上から選択される。断片は、通常、配列番号3/13の少なくとも1つのT細胞エピトープ、または、好ましくはB細胞エピトープを含む。T細胞エピトープおよびB細胞エピトープは、上記の方法によって同定することができる。上で説明した通り、配列番号13はそれ自体が配列番号3の断片である。Spb1配列は、上で定義された配列番号13に対する少なくともaの同一性も有し、配列番号13の断片も含むアミノ酸配列を含み得る。X部分は、通常、少なくともcアミノ酸長であり、cは、50、60、70、80、90、100、120、140、160、180、200、220、240、260、280、300、320、340、360、380、400以上から選択される。X部分は、通常、dアミノ酸長以下であり、dは、500、480、460、440、420、400、380、360、340、320、300、280、260、240、220、200、またはそれ未満から選択される。X部分は、通常、300~500の間のアミノ酸長、例えば、350~480アミノ酸長、400~460アミノ酸長、430~450アミノ酸長である。血清型IIIのCOH1株由来の野生型SpbI配列は上記の配列番号3である。上記のSpbIセクションに記載のそれらの特定の誘導体を本発明のこの実施形態のSpb1配列に適用することができる。Y:GBS80配列Y部分は、GBS80配列である。このGBS80配列は、被験体に投与されると、野生型GBS80タンパク質、例えば、配列番号2のアミノ酸配列2603V/R株由来の全長の野生型配列を有するS.agalactiaeタンパク質に結合する抗体を含む抗体応答を惹起する。GBS80配列は、配列番号9に対して少なくともeの同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。eの値は、50、60、70、80、85、90、95、96、97、98、99以上から選択することができる。GBS80配列は、配列番号9を含み得る。GBS80配列は、配列番号2の断片または配列番号9の断片を含み得る。断片は、通常、配列番号2/9の少なくともfアミノ酸を含み、fは、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、22、24、26、28、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、175、200以上から選択される。断片は、通常、配列番号2/9の少なくとも1つのT細胞エピトープ、または、好ましくはB細胞エピトープを含む。上で説明した通り、配列番号9はそれ自体が配列番号2の断片である。GBS80配列は、上で定義された、配列番号9に対する少なくともeの同一性も有し、配列番号9の断片も含むアミノ酸配列を含み得る。Y部分は、通常、少なくともgアミノ酸長であり、gは、50、60、70、80、90、100、120、140、160、180、200、220、240、260、280、300、320、340、360、380、400、420、440、460、480、500、520、540、560、580、600以上から選択される。Y部分は、通常、hアミノ酸長以下であり、hは、600、580、560、540、520、500、480、460、440、420、400、380、360、340、320、300、280、260、240、220、200、またはそれ未満から選択される。Y部分は、通常350~550の間のアミノ酸長、例えば、400~520アミノ酸長、450~500アミノ酸長、470~490アミノ酸長である。血清型Vの2603V/R分離株由来の野生型GBS80配列は上記の配列番号2である。上記のGBS80セクションに記載のそれらの特定の誘導体を本発明のこの実施形態のGBS80配列に適用することができる。L:リンカーポリペプチドは、必要に応じて、X部分とY部分を連結するためのL部分を含む。L部分は、典型的には、短いアミノ酸配列、例えば、2~40アミノ酸の範囲のアミノ酸配列であり、例えば、2アミノ酸、3アミノ酸、4アミノ酸、5アミノ酸、6アミノ酸、7アミノ酸、8アミノ酸、9アミノ酸、10アミノ酸、11アミノ酸、12アミノ酸、13アミノ酸、14アミノ酸、15アミノ酸、16アミノ酸、17アミノ酸、18アミノ酸、19アミノ酸、20アミノ酸、21アミノ酸、22アミノ酸、23アミノ酸、24アミノ酸、25アミノ酸、26アミノ酸、27アミノ酸、28アミノ酸、29アミノ酸、30アミノ酸、31アミノ酸、32アミノ酸、33アミノ酸、34アミノ酸、35アミノ酸、36アミノ酸、37アミノ酸、38アミノ酸、39アミノ酸または40アミノ酸からなる。リンカーは、通常、少なくとも1つのグリシン残基を含有し、それにより、構造的な柔軟性が高まる。リンカーは、例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、またはそれより多くのグリシン残基を含有してよい。グリシンは、少なくとも2つの連続したグリシンを、Gly-Glyジペプチド配列、またはそれよりも長いオリゴGly配列、すなわち、Glynn=2、3、4、5、6、7、8、9、10、またはそれより多くの、例えば、配列番号15で含むように配置されていてよい:GGGG。リンカーは、制限酵素の認識配列に見出されるコドンにコードされ得る。例えば、特定の制限酵素の標的である6merの配列がジペプチドをコードし得る。したがって、BamHIGGATCCの認識配列がGly-Serをコードし、したがって、リンカーは、Gly-Serジペプチド配列を含み得る。そのような配列により、クローニングおよび操作が容易になる。有用なリンカー配列としては、上記の配列番号15および下記の配列番号16、17および18が挙げられる:GGGGSGGGGSGGGG配列番号16GGGGSGGGGSGGGGSEL配列番号17GSGGGG配列番号18。しかし、好ましいリンカーは、ヒトポリペプチド配列に共通する10以上連続したアミノ酸を共有する配列を含まない。例えば、本発明で用いることができる1つのグリシンリッチリンカー配列は、14merの配列番号16である。しかし、この14merは、ヒトRNA結合性タンパク質gi:8051631にも見出され、したがって、L部分内では避けることが好ましい。W:N末端配列X部分はポリペプチドのN末端にあってよいが、Xの上流にアミノ酸を有することも可能である。これらの任意選択のアミノ酸がW部分を形成する。W部分は、典型的には、短いアミノ酸配列、例えば、2~40アミノ酸の範囲のアミノ酸配列であり、例えば、2アミノ酸、3アミノ酸、4アミノ酸、5アミノ酸、6アミノ酸、7アミノ酸、8アミノ酸、9アミノ酸、10アミノ酸、11アミノ酸、12アミノ酸、13アミノ酸、14アミノ酸、15アミノ酸、16アミノ酸、17アミノ酸、18アミノ酸、19アミノ酸、20アミノ酸、21アミノ酸、22アミノ酸、23アミノ酸、24アミノ酸、25アミノ酸、26アミノ酸、27アミノ酸、28アミノ酸、29アミノ酸、30アミノ酸、31アミノ酸、32アミノ酸、33アミノ酸、34アミノ酸、35アミノ酸、36アミノ酸、37アミノ酸、38アミノ酸、39アミノ酸または40アミノ酸からなる。W部分の例は、タンパク質の輸送を導くリーダー配列であり、または、クローニングまたは精製を容易にする短いペプチド配列例えば、ヒスチジンタグ、すなわち、Hisnn=3、4、5、6、7、8、9、10、またはそれより多くのを含む。他の適切なN末端アミノ酸配列は、当業者には明らかである。新生ポリペプチドのW部分には、ポリペプチドのN末端メチオニン細菌におけるホルミル-メチオニン、fMetがもたらされ得る。しかし、1または複数のアミノ酸を新生W部分のN末端から切断し、本発明のポリペプチドのW部分が必ずしもN末端メチオニンを含まないようにすることができる。有用なW部分としては、配列番号19:MASが挙げられる。Z:C末端配列Y部分はポリペプチドのC末端にあってよいが、Yの下流のアミノ酸を有することも可能である。これらの任意選択のアミノ酸がZ部分を形成する。Z部分は、典型的には、短いアミノ酸配列、例えば、2~40アミノ酸の範囲のアミノ酸配列であり、例えば、2アミノ酸、3アミノ酸、4アミノ酸、5アミノ酸、6アミノ酸、7アミノ酸、8アミノ酸、9アミノ酸、10アミノ酸、11アミノ酸、12アミノ酸、13アミノ酸、14アミノ酸、15アミノ酸、16アミノ酸、17アミノ酸、18アミノ酸、19アミノ酸、20アミノ酸、21アミノ酸、22アミノ酸、23アミノ酸、24アミノ酸、25アミノ酸、26アミノ酸、27アミノ酸、28アミノ酸、29アミノ酸、30アミノ酸、31アミノ酸、32アミノ酸、33アミノ酸、34アミノ酸、35アミノ酸、36アミノ酸、37アミノ酸、38アミノ酸、39アミノ酸または40アミノ酸からなる。Z部分の例としては、タンパク質の輸送を誘導する配列、クローニングまたは精製を容易にする短いペプチド配列例えば、ヒスチジンタグ、すなわち、Hisnn=3、4、5、6、7、8、9、10、またはそれより多くのを含む、またはタンパク質の安定性を増強する配列が挙げられる。他の適切なC末端アミノ酸配列、例えば、グルタチオン-S-トランスフェラーゼ、チオレドキシン、S.aureusプロテインAの14kDaの断片、ビオチン化したペプチド、マルトース結合タンパク質、エンテロキナーゼフラグなどは、当業者には明らかである。1つの有用なZ部分は、配列番号20:HHHHHHを含む。有用な組み合わせ種々のX部分、Y部分およびL部分の有用な組み合わせとしては以下が挙げられるが、これに限定されない:ポリペプチドは、配列番号21に対して少なくともiの配列同一性を有するアミノ酸配列を含んでよい。iの値は、50、60、70、80、85、90、95、96、97、98、99以上から選択することができる。ポリペプチドは、配列番号21を含み得る。ポリペプチドは、配列番号23に対して少なくともiの配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。iの値は、50、60、70、80、85、90、95、96、97、98、99以上から選択することができる。ポリペプチドは、配列番号23を含んでよい。本発明で使用するポリペプチドは、a配列番号21または23と同一すなわち、100同一であり、b配列番号21または23と配列同一性を共有し、caまたはbの配列と比較して、別々の位置にあってよく、または連続してよい、1、2、3、4、5、6、7、8、9または10またはそれを超える単一のアミノ酸の変更欠失、挿入、置換を有し、かつd配列番号21または23を、ペアワイズアラインメントアルゴリズムを用いてアラインメントすると、xアミノ酸のN末端からC末端まで動くウィンドウのそれぞれがpアミノ酸p>xまで伸長するアラインメントについて、そのようなウィンドウがp-x1存在するような少なくともxy同一のアラインメントされたアミノ酸を有するxは、20、25、30、35、40、45、50、60、70、80、90、100、150、200から選択され、yは、0.50、0.60、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.91、0.92、0.93、0.94、0.95、0.96、0.97、0.98、0.99から選択され、xyが整数でない場合には、最も近い整数に切り上げるアミノ酸配列を含んでよい。好ましいペアワイズアラインメントアルゴリズムは、Needleman-Wunschグローバルアラインメントアルゴリズム[228]であり、そこでは初期状態のパラメータ例えば、ギャップ開始ペナルティgapopeningpenalty=10.0、およびギャップ伸長ペナルティgapextensionpenalty=0.5を用いてEBLOSUM62スコアリング行列を用いるを用いる。このアルゴリズムは、EMBOSSパッケージ内のニードルneedleツールにおいて都合よく実行される[229]。群cの中で、欠失または置換はN末端および/またはC末端におけるものであってよく、または、2つの末端の間におけるものであってよい。したがって、切断truncationは欠失の例である。切断は、N末端および/またはC末端における40またはそれより多くのアミノ酸に至るまでの欠失を伴ってよい。ポリペプチド内のSpb1配列およびGBS80配列は、1または複数のGBS株から得ることができる。例えば、配列番号21および23は、COH1株由来のSpb1配列と2603V/R株由来のGBS80配列を含む。ポリペプチドポリペプチド、または個々の部分は、配列番号2、3、9、10、13、21または23と比較して、1または複数例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10などの保存されたアミノ酸の置き換え、すなわち、1つのアミノ酸の、関連する側鎖を有する別のアミノ酸での置き換えを含み得る。遺伝子にコードされるアミノ酸は、一般に、4つのファミリー:1酸性、すなわち、アスパルテート、グルタメート;2塩基性、すなわち、リジン、アルギニン、ヒスチジン;3非極性、すなわち、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン;および4非荷電極性、すなわち、グリシン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セリン、トレオニン、チロシンに分けられる。フェニルアラニン、トリプトファン、およびチロシンは、時には、一緒に芳香族アミノ酸に分類される。一般に、これらのファミリー内の単一のアミノ酸の置換は、生物活性に対して主要な影響を有さない。ポリペプチドは、参照配列と比較して、1または複数例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10などの単一のアミノ酸の欠失を有し得る。ポリペプチドは、参照配列と比較して、1または複数例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10などの挿入例えば、1アミノ酸、2アミノ酸、3アミノ酸、4アミノ酸または5アミノ酸のそれぞれも含み得る。ポリペプチドは、上記の通り、多くの方式で調製することができる。ポリペプチドは、上記の通り、種々の形態例えば、天然の形態、融合形態、グリコシル化された形態、グリコシル化されていない形態、脂質付加された形態、脂質付加されていない形態、リン酸化された形態、リン酸化されていない形態、ミリストイル化された形態、ミリストイル化されていない形態、単量体の形態、多量体の形態、粒子形態、変性された形態などを取ることができる。ポリペプチドは、上記の通り、精製された形態または実質的に精製された形態で提供されることが好ましい。ポリペプチドという用語は、任意の長さのアミノ酸のポリマーを指す。ポリマーは、直鎖状または分岐状であってよく、ポリマーは、修飾されたアミノ酸を含んでよく、また、ポリマーは、非アミノ酸により乱されていてよい。この用語は、自然に修飾された、または介入;例えば、ジスルフィド結合の形成、グリコシル化、脂質付加、アセチル化、リン酸化、または標識化成分とのコンジュゲーションなどの任意の他の操作もしくは改変により修飾されたアミノ酸のポリマーも包含する。この定義には、例えば、アミノ酸の1または複数の類似体例えば、非天然アミノ酸などを含めた、ならびに当技術分野で公知の他の修飾を含有するポリペプチドも含まれる。ポリペプチドは、単鎖または会合した鎖として生じ得る。ポリペプチドは、自然にまたは人為的にグリコシル化され得るすなわち、ポリペプチドが、対応する天然に存在するポリペプチドに見出されるグリコシル化パターンとは異なるグリコシル化パターンを有する。ポリペプチドは、少なくとも40アミノ酸長例えば、少なくとも40、50、60、70、80、90、100、120、140、160、180、200、220、240、260、280、300、350、400、450、500以上であり得る。ポリペプチドは1100アミノ酸よりも短くてよい。予備免疫第2の態様では、本発明は、GBSによる感染に対して患者を免疫するための方法であって、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体を用いて予備免疫した患者に、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖であるコンジュゲートを投与するステップを含む方法を提供する。典型的には、コンジュゲートは、上記の通り、本発明の第1の態様の免疫原性組成物中のGBSコンジュゲートのうちの1つである。言い換えれば、少なくとも1つのコンジュゲートが、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖である本発明の第1の態様の免疫原性組成物を、本発明の第2の態様において用いることができる。組成物中の、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせた莢膜糖は、例えば、GBS血清型Ia、IbまたはIII由来であってよい。特に、莢膜糖は、GBS血清型III由来であってよい下に例示されている通り。この態様では、組成物中のGBS由来の莢膜糖のすべてがジフテリアトキソイドまたはその誘導体とコンジュゲートしていることが典型的である。キャリアまたは予備免疫抗原がジフテリアトキソイドの誘導体である場合には、その誘導体は、Dtと免疫学的に交差反応性のままであることが好ましく、CRM197であることが好ましい。本発明者らは、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖であるコンジュゲートは、キャリア誘導性エピトープ抑制または一般に公知の通りキャリア抑制、特に、キャリアによる初回刺激から生じる抑制を受けないようであることを見出した。以下に論じるように、キャリア抑制とは、動物を、キャリアタンパク質を用いて予備免疫することにより、その動物において後に、そのキャリア上に提示される新しい抗原エピトープに対する免疫応答が惹起されることが妨げられる現象である[230]。この公知の現象とは対照的に、本発明者らは、GBS莢膜糖とジフテリアトキソイドまたはその誘導体のコンジュゲートに対する免疫応答を、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体を用いた予備免疫により実際に改善することができることを見出した。参考文献231において報告されている通り、いくつかのワクチン抗原が同じタンパク質成分コンジュゲート中の免疫原および/またはキャリアタンパク質として用いられるを含有する場合には、それらの抗原間で干渉が潜在的に存在する。参考文献231では、破傷風トキソイドTtキャリアにコンジュゲートさせた抗原に対する免疫応答は、Ttに対する既存の免疫によって抑制された。参考文献232では、HibコンジュゲートのためのキャリアがD-T-Pワクチン由来の破傷風抗原と同じである場合に、D-T-PワクチンとHibコンジュゲートワクチンの組み合わせがどのように悪影響を及ぼしたかが報告されている。その著者らは、複数のコンジュゲートを含むワクチンを導入する場合には、一般的なキャリアタンパク質による干渉から生じるこのキャリア抑制現象を考慮に入れるべきであると結論づけている。参考文献231および232とは対照的に、参考文献233では、破傷風トキソイドを用いた初回刺激には、その後に投与されたHib-Ttコンジュゲートに対する免疫応答に対する負の影響はなかったが、母体から獲得した抗Tt抗体を有する患者において抑制が認められたことが報告されている。しかし、参考文献234では、破傷風ワクチン接種によって生じた既存の抗Tt抗体を有する患者においてTtベースのペプチドコンジュゲートについてのエピトープ抑制作用が報告された。参考文献235では、キャリアとしてCRM197ジフテリア毒素の解毒された変異体を有するコンジュゲートは、以前にジフテリア毒素をワクチンの一部として例えば、D-T-PワクチンまたはD-Tワクチンの一部として受けたことのない小児では効力がない可能性があることが示唆された。この研究は、参考文献236においてさらに発展され、そこでは、D-T免疫により、キャリアによる初回刺激作用がその後のHibコンジュゲートを用いた免疫にわたって持続することが認められた。参考文献237では、その著者らは、ジフテリアトキソイドキャリアタンパク質または破傷風トキソイドキャリアタンパク質を用いた予備免疫により、これらのキャリアにコンジュゲートさせたHib莢膜糖を用いたその後の免疫後の抗Hib抗体レベルの上昇が低下し、IgG1およびIgG2が同等に影響を受けたことを見出した。コンジュゲートのキャリア部分に対する応答も抑制された。さらに、1種のコンジュゲートを用いた予備免疫が、4週間後に投与した第2のコンジュゲートのキャリア部分および糖部分の両方に対する免疫応答に影響を及ぼすことが認められたので、より一般的な非エピトープ特異的抑制が認められた。異なるキャリアタンパク質の、単一の多価肺炎球菌コンジュゲートワクチンへの使用が参考文献238に報告されており、そこでは、キャリア抑制を回避するために複数のキャリアが用いられている。その著者らは、多価のコンジュゲートワクチンにおいて、負の干渉が生じることなく許容され得るキャリアタンパク質の最大負荷量が存在すると予測している。参考文献239では、混合キャリアタンパク質を含む肺炎球菌コンジュゲートワクチンにより、抗肺炎球菌への応答と並行して、キャリアに対する意図しない追加免疫応答が惹起されたことが報告された。参考文献240では、ジフテリアおよび破傷風による追加免疫を、一価の髄膜炎菌血清群Cコンジュゲートと一緒に施すことができるかどうかの調査であり、キャリアが破傷風トキソイドキャリアであり、患者が破傷風を含有するワクチンを用いた予備免疫を受けている場合に、髄膜炎菌コンジュゲートに対する力価が低下したことが見出された。糖コンジュゲートに対する免疫応答への負の影響を有するキャリアを用いた初回刺激の問題に加えて、逆も起こり得る、すなわち、コンジュゲートを用いた免疫がキャリアに対する免疫応答への負の影響を有する場合がある[241]。したがって、この本発明の第2の態様は、GBSによる感染に対して患者を免疫するための方法であって、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体を用いて予備免疫した患者に、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖であるコンジュゲートを投与するステップを含む方法を提供する。この態様は、GBSによる感染に対してジフテリアトキソイドまたはその誘導体を用いて予備免疫した患者を免疫することに用いるためのジフテリアトキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖であるコンジュゲートも提供する。この態様は、さらに、GBSによる感染に対して、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体を用いて予備免疫した患者を免疫するための医薬品の製造における、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖であるコンジュゲートの使用を提供する。予備免疫した患者免疫されるこの患者は、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体で予備免疫されている。ジフテリアトキソイドまたはその誘導体は、GBS以外の生物体の莢膜糖とジフテリアトキソイドまたはその誘導体のコンジュゲート中のキャリアとして投与することができる。典型的な予備免疫は、ジフテリアトキソイド抗原;ジフテリアトキソイドキャリアまたはCRM197キャリアを用いたHib莢膜糖コンジュゲート;および/またはジフテリアトキソイドキャリアまたはCRM197キャリアを用いた肺炎球菌の莢膜糖コンジュゲートを含む。患者は、予備免疫抗原複数可の少なくとも1回の例えば、1回、2回、3回またはそれより多くの用量を受け、その用量または複数回用量の最初を、患者に、GBSコンジュゲートを用いて免疫する少なくとも6カ月前例えば、6カ月前、9カ月前、12カ月前、15カ月前、18カ月前、21カ月前、24カ月前、36カ月前、48カ月前、60カ月前、120カ月前、180カ月前、240カ月前、300カ月前、またはそれよりも前に、本発明のこの態様に従って投与する。患者の好ましい群では、予備免疫は、出生後3年以内、例えば、出生後2年以内、出生後1年以内、出生後6カ月以内、または、さらには出生後3カ月以内、出生後2カ月以内または出生後1カ月以内に行われる。本発明のこの態様に従って免疫される適切な患者については、上の処置方法のセクションにおいて記載されている。予備免疫抗原がジフテリアトキソイドである場合には、患者は、典型的には、トキソイドをD-T-P予備免疫またはD-T予備免疫においてD抗原として受ける。そのような免疫は、典型的には、2カ月齢、3カ月齢、および4カ月齢の新生児に与えられる。免疫が百日咳ワクチンを含む場合、そのワクチンは、細胞全体または細胞性の百日咳ワクチンPwであってよいが、無細胞の百日咳ワクチンPaであることが好ましい。予備免疫Paワクチンは、一般に、以下の周知かつよく特徴付けられたB.pertussis抗原:1化学的手段または部位特異的変異誘発のいずれかによって解毒された百日咳トキソイドPT、例えば、9K/129G変異体[242];2線維状赤血球凝集素FHA;3パータクチン69キロダルトンの外膜タンパク質としても公知のうちの1つ、2つまたは3つを含む。無細胞の百日咳ワクチンは、凝集原2および/または凝集原3を含んでもよい。D-T-P予備免疫におけるT抗原は、典型的には、破傷風トキソイドである。予備免疫抗原がジフテリアトキソイドである場合には、患者は、同様に、またはその代わりに、トキソイドをタンパク質-糖コンジュゲートのキャリアタンパク質として受けることができる。そのようなコンジュゲートとしては、PRP-DHibコンジュゲート[参考文献[243]の表14-7を参照されたい、例えば、ProHIBIT商標製品が挙げられる。予備免疫抗原がCRM197である場合には、患者は、典型的には、Hibコンジュゲートおよび/または多価の肺炎球菌コンジュゲートを用いて予備免疫されている。そのような免疫は、典型的には、2カ月齢、3カ月齢、および4カ月齢の新生児に与えられる。CRM197キャリアを用いるHibコンジュゲートとしては、HbOCコンジュゲート[参考文献243の表14-7]、例えば、HibTITER商標製品が挙げられる。CRM197キャリアを用いる肺炎球菌コンジュゲートとしては、7価のPCV7混合物、例えば、PrevNar商標ワクチン[244]が挙げられる。患者は、血清群C髄膜炎菌MenCコンジュゲートを用いて予備免疫されていてもよい。CRM197キャリアを用いるMenCコンジュゲートとしては、Meninvact商標/Menjugate商標[245]およびMeningitec商標が挙げられる。予備免疫が、コンジュゲートした抗原を用いたものであった場合には、患者は、ほぼ必然的に、コンジュゲートの低レベルのコンタミネーション例えば、保管している間にコンジュゲートが加水分解することによって引き起こされるの結果として少量の遊離のジフテリアトキソイドまたは誘導体も受けているが、この少量では、典型的には、有意な免疫応答をもたらすためには適していない。ジフテリアトキソイドは、周知のよく特徴付けられたタンパク質であり[例えば、参考文献243の第13章を参照されたい]、CorynebacteriumdiphtheriaeのADPリボシル化外毒素を、ホルマリンまたはホルムアルデヒドなどの不活性化する化学物質で処理することによって得ることができる。CRM197も周知であり、よく特徴付けられており[246~249]、コンジュゲートさせた糖ワクチン中のキャリアとして広く用いられている。CRM197およびDtは多くのキャリアエピトープを共有する。予備免疫の結果は、患者の免疫系が予備免疫抗原に曝露されているということである。ジフテリアトキソイドDtを用いた予備免疫については、これは一般に、患者が抗Dt抗体応答を生じ典型的には、抗Dt力価>0.01IU/mlが得られるまで、Dtに特異的な記憶Bリンパ球および/またはTリンパ球を保有することになることを意味する、すなわち、Dtを用いた予備免疫は、典型的には、患者における既往性の抗Dt免疫応答を惹起するために適している。Dtまたは誘導体がコンジュゲート中の糖のキャリアである場合の予備免疫については、予備免疫により抗糖応答が生じ、患者は糖に特異的な記憶Bリンパ球および/またはTリンパ球を保有することになる、すなわち、予備免疫は、典型的には、患者における既往性の抗糖免疫応答を惹起するために適している。予備免疫は、好ましくは、患者において、例えば、ジフテリア疾患に対して防御免疫を惹起するために適していた。したがって、本発明のこの態様に従って免疫される患者は、一般の患者とは区別可能である。なぜなら、彼らは、その免疫系がすでに予備免疫抗原に対する免疫応答を開始している一般集団のサブセットのメンバーであり、したがって、ジフテリアトキソイドまたはその誘導体キャリアを含むGBSコンジュゲートを用いたこの態様による免疫により、このサブセットでは、以前に予備免疫抗原に対する免疫応答が開始されていない患者における免疫応答とは異なる免疫応答が惹起されるからである。Dtまたは誘導体をコンジュゲート特に、Hibコンジュゲートのキャリアとして用いて予備免疫されている患者が好ましい。特に好ましい患者は、Dtまたは誘導体をコンジュゲートのキャリアとして、そして、また、Dtをコンジュゲートしていない免疫原として用いて予備免疫されている。ジフテリアトキソイドまたは誘導体をコンジュゲートした形態またはコンジュゲートしていない形態で用いて予備免疫されているだけでなく、患者は、他の抗原を用いて予備免疫されていてもよい。そのような抗原としては、これらに限定されないが、百日咳抗原複数可-上記を参照されたい;破傷風トキソイド-上記を参照されたい;HaemophilusinfluenzaeB型-上記を参照されたい;B型肝炎表面抗原HBsAg;ポリオウイルス、例えば、不活化ポリオウイルスワクチンIPV;Streptococcuspneumoniae-上記を参照されたい;インフルエンザウイルス;BCG;A型肝炎ウイルス抗原;麻疹ウイルス;流行性耳下腺炎ウイルス;風疹ウイルス;水痘ウイルスなどが挙げられる。患者は、1または複数のGBSコンジュゲートを用いて予備免疫されていてもされていなくてもよい。いくつかの好ましい実施形態では、患者が最初にGBSコンジュゲートに受けた時点で、その患者はすでにDtまたは誘導体を用いて予備免疫されている。他の実施形態では、GBSコンジュゲートを、すでにiDtまたは誘導体およびiiGBSコンジュゲートの両方を用いて予備免疫されている患者に投与する。破傷風トキソイドキャリアこの本発明の第2の態様は、ジフテリアトキソイドキャリアおよびそれらの誘導体との関連で、破傷風トキソイドは用いないことが好ましいことが上記されているが、この態様の代替的な実施形態では、破傷風トキソイドまたは誘導体キャリアを用い、ジフテリアトキソイドは用いないことが好ましい。したがって、これらの代替的な実施形態では、上記の定義をそのように改変することができる。例えば、本発明の第2の態様は、GBSによる感染に対して患者を免疫するための方法であって、破傷風トキソイドまたはその誘導体を用いて予備免疫した患者に、破傷風トキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖であるコンジュゲートを投与するステップを含む方法を提供する。この態様は、GBSによる感染に対して、破傷風トキソイドまたはその誘導体を用いて予備免疫した患者を免疫することにおいて用いるための、破傷風トキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖であるコンジュゲートも提供する。この態様は、さらに、GBSによる感染に対して、破傷風トキソイドまたはその誘導体を用いて予備免疫した患者を免疫するための医薬品の製造における、破傷風トキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖であるコンジュゲートの使用を提供する。破傷風トキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖であるコンジュゲートは、キャリア抑制、特に、キャリアによる初回刺激から生じる抑制を受けない可能性がある。GBS莢膜糖-破傷風トキソイドまたはその誘導体のコンジュゲートに対する免疫応答を、破傷風トキソイドまたはその誘導体を用いた予備免疫により、実際に改善することができる。典型的には、コンジュゲートは、上記の通り、本発明の第1の態様の免疫原性組成物中のGBSコンジュゲートのうちの1つである。言い換えれば、少なくとも1つのコンジュゲートが、破傷風トキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせたGBS由来の莢膜糖である本発明の第1の態様の免疫原性組成物を、本発明の第2の態様において用いることができる。組成物中の、破傷風トキソイドまたはその誘導体にコンジュゲートさせた莢膜糖は、例えば、GBS血清型Ia、IbまたはIII由来であってよい。特に、莢膜糖は、GBS血清型III由来であってよい。この態様では、組成物中のGBS由来の莢膜糖のすべてが破傷風トキソイドまたはその誘導体とコンジュゲートしていることが典型的である。破傷風トキソイドは、周知のタンパク質であり[例えば、参考文献243の第27章を参照されたい]、ClostridiumtetaniのADPリボシル化外毒素を不活性化することによって得ることができる。患者は、典型的には、破傷風トキソイドをD-T-P予備免疫またはD-T予備免疫においてT抗原として、またはコンジュゲート中のキャリアタンパク質として受けている。そのようなコンジュゲートとしては、PRP-THibコンジュゲート[参考文献243の表14-7を参照されたい]、例えば、ActHIB商標製品、OmniHIB商標製品およびHIBERIX商標製品が挙げられる。一般含むcomprisingという用語は、含むincludingならびにからなるconsistingを包含し、例えば、Xを含むcomprising組成物は、Xから独占的になり、または、追加的な何か、例えば、XYを含んでよい。約という用語は、数値xとの関連では、例えば、x±10を意味する。実質的にという単語により、完全には排除されず、例えば、Yを実質的に含まない組成物は、Yを完全に含まなくてよい。必要な場合、実質的にという単語を本発明の定義から除くことができる。糖環は、開いた形態および閉じた形態で存在できること、ならびに、本明細書の構造式において閉じた形態が示されていても、開いた形態も本発明に包含されることが理解されよう。同様に、糖は、ピラノース型およびフラノース型で存在できること、ならびに、本明細書の構造式においてピラノース型が示されていても、フラノース型も包含されることが理解される。糖の異なるアノマー形態も包含される。具体的に規定されていない限り、2つまたはそれより多くの成分を混合するステップを含むプロセスは、いかなる特定の混合の順序も必要としない。したがって、成分を任意の順序で混合することができる。3つの成分が存在する場合には、2つの成分を互いに組み合わせることができ、次いでその組み合わせ物を、第3の成分と組み合わせることができるなどである。抗体は、一般に、それらの標的に特異的である。したがって、抗体は、標的に対して、無関連の対照タンパク質、例えば、ウシ血清アルブミンに対する親和性よりも高い親和性を有する。別段の指定のない限り、ポリペプチド配列間の同一性は、MPSRCHプログラムOxfordMolecularにおいて実行されるSmith-Waterman相同性検索アルゴリズムによって、ギャップオープンペナルティgapopenpenalty=12およびギャップ伸長ペナルティgapextensionpenalty=1のパラメータを用いたアフィンギャップ検索を用いて決定することが好ましい。コンジュゲート生成Streptococcusagalactiae血清型Ia、Ib、およびIII由来の精製莢膜糖を、過ヨウ素酸酸化、その後の還元アミノ化によってキャリアタンパク質にコンジュゲートさせた参考文献2。Streptococcusagalactiae血清型V由来の精製脱シアル化莢膜糖を、過ヨウ素酸酸化、その後の還元アミノ化によってキャリアタンパク質にコンジュゲートさせた参考文献14。ほとんどの場合におけるキャリアタンパク質は、CRM197であった。破傷風トキソイドを、特に示された場合、キャリアタンパク質として使用した。マウス試験1。この試験では、一価ワクチンまたは混合ワクチンのいずれかとしての、GBS血清型Ia、Ib、およびIIIコンジュゲートの効力および免疫原性に対するアジュバントの効果を、能動的母体-新生仔攻撃マウスモデルactivematernal-neonatalchallengemousemodelにおいて評価した。参考文献250から適応された母体-新生仔攻撃マウスモデルを使用することによって、能動ワクチン接種した雌親から経胎盤性に得た特異的抗体の新生仔における効力を評価する。具体的には、CharlesRiverLaboratoriesCalco、Italyからの5~6週齢の雌CD-1マウスに、アジュバントあり、およびアジュバントなしで、1日目、21日目、および最終的に35日目に、腹腔内注射によってワクチン接種し、2回または3回免疫する。最後の免疫の後、マウスを出産まで飼育し、保持する。免疫されていない子の90に致死性であるGBS株の種菌Todd-Hewittブロス0.05mL100~1000倍のLD50を使用して、新生仔マウスを攻撃する。攻撃は、生後48時間以内の腹腔内経路によるものである。72時間で生存している子の数を記録し、フィッシャーの正確検定を使用して、生存率をすべての処置群において比較する。対照群において、雌親に、同じ経路によって、同じ投与スケジュールを使用してPBSを与える。最後に免疫してから2週間後に血液試料を収集し、2つのinvitroアッセイ以下に記載するELISA、およびオプソノファゴサイトーシスOpsonophagocytosisアッセイを使用して免疫原性評価を行う。ELISAアッセイを実施して免疫後に生成されるGBS特異的抗体の力価を決定する。ELISAは、各莢膜糖saccharde抗原に対する全IgGを定量化するのにも使用する。各個々のマウスからの血清を分析し、幾何平均力価GMTを各群について計算する。莢膜糖の型Ia、Ib、およびIIIについての抗体価を、マウスELISA単位MouseELISAUnitMEUとして表し、基準線アッセイ法ReferenceLineAssayMethodに基づいて計算する。オプソノファゴサイトーシスアッセイOPAを実施して、補体媒介のGBS死滅化をなすことができるワクチン誘導抗体の力価を評価する参考文献251に記載された手法を使用して。アッセイは、以下の成分、すなわち、細菌、食細胞ヒト血液から抽出されたPMN、または分化HL-60細胞系、補体、および免疫血清を組み合わせることによって実施する。反応ミックスのアリコートを、37°Cで1時間インキュベートする前およびその後に蒔いて、残っているコロニー形成単位CFUを決定した。オプソノファゴサイトーシス死滅化の量死滅の対数を、初期時点で存在するCFU数の対数から生存するコロニー数の対数を減じることによって決定する。免疫前の血清、およびPMNを含まない熱不活化した補体を、陰性対照として使用する。殺菌力価を、細菌を50低減する血清希釈度の逆数reciprocalserumdilutionとして表す。本試験では、0日目および21日目に、アジュバント水酸化アルミニウムまたはMF59の存在下で、3つの異なるコンジュゲートを2回投与してそれぞれ1μg、雌CD1マウスを免疫した。新生仔を、以下の表1に示す型特異的株で攻撃した。水酸化アルミニウムおよびMF59の両方で、3つすべての血清型について、一価ワクチンを用いて高レベルの防御が達成された。しかし、アジュバントMF59を用いた場合、より高い抗体価が存在したけれども、生存率はわずかにより低かった。追加の実験では、アジュバントが存在する各コンジュゲート1μgでの組み合わせ物の、0日目、21日目、および35日目における3回の投与でマウスを免疫した。新生仔を、以下の表2に示すように型特異的株で攻撃した。アジュバントが存在するまたはアジュバントが存在しない、3つすべての処方物中の、混合ワクチンを用いて高レベルの防御が達成されたが、アジュバントが存在しないものでは、抗体価がより低かった。マウス試験2この試験では、能動的母体-新生仔攻撃マウスモデルにおける、血清型Ia、Ib、およびIII/CRM197コンジュゲートの効力および免疫原性に対する凍結乾燥の効果を評価した。アジュバントが存在するまたはアジュバントが存在しない、3つの異なるコンジュゲートの、0日目および21日目における2回の投与でそれぞれ1μgマウスを免疫した。新生仔を、以下の表3に示す型特異的株で攻撃した。凍結乾燥プロセスは、GBSコンジュゲートの免疫原性に影響しなかった。抗体価および殺菌力価は、両方の液体処方物および凍結乾燥処方物を投与されたマウスにおいて同等であった。マウス試験3この試験では、能動的母体-新生仔攻撃マウスモデルにおける、血清型V/CRM197コンジュゲートの効力に対する凍結乾燥の効果を評価した。アジュバントが存在するまたはアジュバントが存在しないコンジュゲートの、0日目および21日目における2回の投与でそれぞれ1μg、5μg、または10μgマウスを免疫した。新生仔を、V型株で攻撃した。結果を、以下の表4に示す。凍結乾燥プロセスは、GBSコンジュゲートの免疫原性に影響しなかった。生存率Survialratesは、両方の液体処方物および凍結乾燥処方物を投与されたマウスにおいて同等であった。マウス試験4この試験では、能動的母体-新生仔攻撃マウスモデルにおいて、GBS血清型Ia、Ib、IIIおよびVコンジュゲートの混合物の効力に対する様々な用量の効果を評価した。アジュバントを用いないGBS血清型Ia、Ib、III、およびVコンジュゲートのそれぞれの0.2μg、1μg、または5μgでの組み合わせ物の、0日目、および21日目における2回の投与でマウスを免疫した。以下の表5に示すように、新生仔を型特異的株で攻撃した。より高い投与量のGBS血清型Vコンジュゲートは、防御のレベルを上昇させた。マウス試験5この試験では、能動的母体-新生仔攻撃マウスモデルにおいて、GBS血清型Ia、Ib、IIIおよびVコンジュゲートの混合物の効力に対する様々な数の投与の効果を評価した。必要に応じて、アラムalumアジュバントが存在する組み合わせ物の、0日目、21日目、および35日目における1回、2回、または3回の投与で各コンジュゲート1μgマウスを免疫した。以下の表6に示したように、新生仔を型特異的株で攻撃した。この試験における血清型Ia、Ib、III、およびVコンジュゲートの混合物を投与した後に、殺菌bactericidial力価を測定した。OPA力価を以下に示す。免疫の数は、GBS血清型Vコンジュゲートに対する免疫応答に強く影響した。マウス試験6この試験では、能動的母体-新生仔攻撃マウスモデルにおいて、GBS血清型Vコンジュゲート単独と比較したGBS血清型Ia、Ib、III、およびVコンジュゲートの混合物の効力を評価した。アラムアジュバントが存在する、各コンジュゲート1μgの組み合わせ物、または1μgのGBS血清型Vコンジュゲートの、0日目、21日目、および35日目における3回の投与でマウスを免疫した。新生仔を、CJB111および2603V/RのV型株で攻撃した。結果を以下の表7に示す。GBS血清型V由来の莢膜糖に対する免疫応答は、GBS血清型Ia、Ib、およびIIIコンジュゲートも組成物中に存在する場合、減少した。マウス試験7この試験では、能動的母体-新生仔攻撃マウスモデルにおいて、GBS血清型Vコンジュゲート単独と比較したGBS血清型Ia、Ib、III、およびVコンジュゲートの混合物の免疫原性および効力に対するアジュバントの効果を評価した。アジュバントが存在するまたはアジュバントが存在しない、各コンジュゲート1μgの組み合わせ物、または1μgのGBS血清型Vコンジュゲートの、0日目、21日目、および35日目における3回の投与でマウスを免疫した。新生仔をCJB111のV型株で攻撃した。結果を以下の表8に示す。やはりまた、GBS血清型V由来の莢膜糖に対する免疫応答は、GBS血清型Ia、Ib、およびIIIコンジュゲートも組成物中に存在する場合、減少した。アジュバントの添加によって生存が改善されたが、GBS血清型Vコンジュゲート単独へのアジュバントの添加は、この実験において、この効果がなかった。マウス試験8この試験では、能動的母体-新生仔攻撃マウスモデルにおいて、GBS血清型Ia、Ib、III、およびVコンジュゲートの混合物の効力に対する、GBS血清型Vコンジュゲートの用量を増大させることの効果を評価した。アジュバントが存在するまたはアジュバントが存在しない、各コンジュゲート1μgの組み合わせ物の、0日目、および21日目における2回の投与で、または1μgのGBS血清型Ia、Ib、IIIコンジュゲート、およびGBS血清型Vコンジュゲート5μgの組み合わせ物の、0日目、および21日目における2回の投与で、マウスを免疫した。以下の表9に示されるように、新生仔を型特異的株で攻撃した。この実験において、混合物中のGBS血清型V由来の莢膜糖に対する免疫応答は、アジュバントの添加によってやはりまた改善された。応答は、組成物中のこの莢膜糖の用量を増大させることによっても改善された。しかし、GBS血清型V由来の莢膜糖が高用量で存在すると、GBS血清型Ia、Ib、およびIII由来の莢膜糖に対する応答が低減するようであった。この結果は、アジュバントの添加によって低減された。マウス試験9この試験では、能動的母体-新生仔攻撃マウスモデルにおいて、GBS血清型Ia、Ib、およびIIIコンジュゲートと、GBS67タンパク質およびGBS80タンパク質との混合物の効力を評価した。様々な異なるアジュバントが存在するまたはアジュバントが存在しない、組み合わせ物を用いてマウスを免疫した。以下の表10に示したように、新生仔を型特異的株で攻撃した。この試験において、血清型Ia、Ib、III、およびVコンジュゲートと、GBS67タンパク質およびGBS80タンパク質との混合物を投与した後、抗体価を測定した。5つの別個の実験からの結果を以下に示す。マウス試験10この試験では、能動的母体-新生仔攻撃マウスモデルにおいて、GBS血清型Ia、Ib、およびIIIコンジュゲートと、GBS67タンパク質およびGBS80タンパク質との混合物の効力を評価した。0日目、21日目、および35日目における、様々な異なるアジュバントが存在するまたはアジュバントが存在しない、組み合わせ物の3回の投与でマウスを免疫した。以下の表11に示すように、新生仔を型特異的株で攻撃した。マウス試験11この試験では、能動的母体-新生仔攻撃マウスモデルにおいて、GBS血清型Ia、Ib、III、およびVコンジュゲートと、GBS67タンパク質およびSpbI-GBS80融合タンパク質との混合物の効力を評価した。アジュバントが存在する組み合わせ物を用いてマウスを免疫した。以下の表12に示されるように、新生仔を型特異的株で攻撃した。マウス試験12この試験では、能動的母体-新生仔攻撃マウスモデルにおいて、GBS血清型Ia、Ib、III、およびVコンジュゲートの効力を評価した。マウスを各コンジュゲート1μgで免疫した。以下の表13に示されるように、新生仔を型特異的株で攻撃した。実験を2回繰り返した。GBS血清型Ib由来の莢膜糖を含むコンジュゲートは、GBS血清型Ibに加えて、GBS血清型Iaに対する防御を付与した。マウス試験13この試験では、破傷風トキソイドTTキャリアタンパク質またはCRM197キャリアタンパク質にコンジュゲートさせた莢膜糖を試験し、これらの免疫原性について比較した。水酸化アルミニウムアジュバントとともに、それぞれ1μgのGBS血清型Ia、Ib、およびIIIコンジュゲートの、0日目および21日目における2回の投与で、雌CD1マウスを免疫した。以下の表14で示されるように、新生仔を、特異的株型で攻撃した。3つすべての血清型のCRM197コンジュゲートで免疫された群における生存率は、TTコンジュゲートで免疫された群において観察された生存率と同等であった。これらの結果に基づいて、CRM197を、さらなる開発のためのキャリアタンパク質として選択した。マウス試験14この試験では、免疫原性に対する共有結合性コンジュゲーションプロセスの間の莢膜糖酸化のレベルの影響を評価した。いくつかのバッチのGBS血清型Ia、Ib、およびIIIコンジュゲートは、TTおよび/またはCRM197のいずれかにコンジュゲートさせた、様々な百分率の酸化で調製した糖を用いて得られ、これらの免疫原性について雌CD1マウスにおいて試験した。水酸化アルミニウムアジュバントが存在する、3つの異なるコンジュゲートの、0日目、および21日目における2回の投与で各1μgマウスを免疫した。以下の表15で示されるように、新生仔を型特異的株で攻撃した。15~20酸化された糖から調製されたコンジュゲートで雌親を免疫したとき、生存率はピークに到達した。抗体価は、機能に何ら影響することなく、酸化のレベルの増大とともに増大した。殺菌力価は、抗体価がより高くなっても増大しなかった。これらの結果および追加の実験データを示さずに基づいて、3つすべての血清型についてのCPS酸化の最適な百分率は、10~30の間であると定義した。ウサギおよびラットにおける生殖毒性試験および発生毒性試験2つの種からの結果は、胚発生または胎児発生に対する、血清型Ia、Ib、およびIII/CRM197コンジュゲートの作用がないことを示した。ウサギにおいて、3つのコンジュゲートと水酸化アルミニウムアジュバントとの組み合わせ物を、0日目の交配に対して-35日目、-21日目、および-7日目交配前期間に、ならびに妊娠7日目および20日目に、または妊娠7日目もしくは20日目のみに、20/20/20μg各糖の質量に基づくの臨床用量で、筋肉内注射によって投与した。処置により、任意の用量レベルにおいて、母体毒性、交配に対する作用も、胚致死性、胎児毒性、または催奇形性の証拠ももたらされなかった。ラットにおいて、同様に、組み合わせ物が投与されたとき、母体毒性、ならびに生殖機能および胚-胎児発生に対する作用の証拠はまったくなく、3回妊娠中のみまたは6回妊娠前および妊娠中の注射で、食塩水中の組み合わせ物を投与された群と、水酸化アルミニウムアジュバント中の組み合わせ物を投与された群の間で、差異はまったく認められなかった。0日目の交配に対して、-35日目、-21日目、および-7日目に、ならびに妊娠の6日目、12日目、および17日目に、または妊娠の6日目のみ、12日目のみ、および17日目のみに注射を与えた。離乳前期間中のF1世代仔の生存、臨床状態、または体重に対する作用はまったくなかった。ヒト試験1この試験では、一価GBS血清型Ia莢膜糖-CRM197コンジュゲートワクチンを調査した。10名の被験体の試験群に、5μg、10μg、または20μg糖の質量として測定の用量で、1回または2回の注射を与えた。3名の被験体および2名の被験体のプラセボ群に、それぞれ、食塩水の1回および2回の注射を与えた。スクリーニングのとき、および1回目の注射をして1カ月後に各被験体から血液を抜き取り、ELISAによって分析した。さらに、試験に入って3カ月のときに、2つの注射群は、2回目の注射を受けたその時点で採血され、次いで1カ月後に再び訪れて別の採血を受けた。被験体に最後の注射をしてから6カ月後、12カ月後、および24カ月後にさらなる採血を実施した。ELISAは、GBSIaまたは以下に記載する試験におけるIbおよびIII莢膜糖に対する特異的抗体の濃度を測定する。マイクロタイタープレートを1μg/mlの適切なGBS糖HSAにコンジュゲートさせたでコーティングし、試験被験体からの血清とともに、37°Cで1時間インキュベートした。3回洗浄した後、プレートを、アルカリホスファターゼAP標識抗ヒトIgG二次抗体とともに、37°Cで90分間インキュベートし、その後、追加で3回洗浄した。基質pNPPをプレートに添加し、室温で30分間インキュベートした。APは、基質の加水分解を触媒し、比色反応を生じ、これは、405nm参照フィルター650nmで、ELISAリーダーによって定量化することができる。抗体濃度の評価は、検量曲線を使用して行った。各群についての抗Ia抗体の幾何平均濃度μg/mlの要約を、以下の表16に示す。全体的に、GMCデータは、ベースラインと後の時点との間に有意な増大を示し例えば、GMCは、最後にワクチン接種してから1カ月後に6~43μg/mlの範囲である、試験に入って24カ月の期間にわたって低下するが、群GMCは、依然としてベースラインより数倍高かったGMRは、24カ月で7~14の範囲である。GMC点推定によって判定すると、1回のワクチン接種として5μgの用量を投与された群は、最後にワクチン接種をしてから1カ月後に、全体的な応答が最も高かった。3μg/mL以上の抗体レベルを有する被験体の数は、最後にワクチン接種して1カ月後において、異なる用量5用量、10用量、および20用量について、それぞれ20のうち11、13、および12、ならびに異なるワクチン接種スケジュール両方について、20のうち18にわたって同様の数の応答者を示したデータを示さず。5μg/mL以上の抗体レベルを有する被験体の百分率により、同じ観察結果が確認されたデータを示さず。これらのカットオフは、防御の潜在的な血清学的相関物との関連で応答を評価することを可能にすることが意図されている参考文献252に基づく。これらのデータは、2回目のワクチン接種、またはより高いワクチン用量のいずれかによる観察可能な寄与はまったくないことを示唆する。用量-応答がまったく観察されなかったので、5μg以下の用量が成人集団における最適用量となり得ると考えられる。5μgおよび20μgを投与される群について、1回の注射と比較して、2回の注射を与えることから裏付けられる利点は、まったく観察されなかった。10μgの用量を投与される群は、1回の注射に対して、2回の注射をした後で、より高いピーク応答を示したがワクチン接種後1カ月において、この傾向は、後続の定常状態の時点で逆転した。安全性分析をいくつかの異なる判定基準に基づいて評価した。安全性問題は目につくことはまったくなく、用量依存応答は、まったく認められなかった。ヒト試験2この試験では、一価GBS血清型IbおよびIII莢膜糖-CRM197コンジュゲートワクチンを調査した。10名の被験体subectの試験群に、5μg、10μg、または20μg糖の質量として測定の用量で、1回または2回の注射を与えた。3名の被験体および2名の被験体のプラセボ群に、それぞれ、食塩水の1回および2回の注射を与えた。スクリーニングのとき、および1回目の注射をして1カ月後に各被験体から血液を抜き取り、ELISAによって分析した。さらに、試験に入って3カ月のときに、2つの注射群は、2回目の注射を受けたその時点に採血され、次いで1カ月後に再び訪れて別の採血を受けた。被験体に最後の注射をしてから6カ月後、12カ月後、および24カ月後にさらなる採血を実施した。各群についての抗Ib抗体および抗III抗体の幾何平均濃度の要約を、以下の表17に示す。やはりまた、1回の注射と比較して、2回の注射を与えることからの有意な用量-応答または利点は、この小試験において観察されなかった。安全性分析を、いくつかの異なる判定基準に基づいて評価した。安全性問題は目につくことはまったくなく、用量依存応答は、まったく認められなかった。反応原性指標reactogenicityindocatorの中で、注射部位での痛み血清型Ibについて、98回の注射のうち15回発生し、血清型IIIについて、96回の注射のうち14回発生が、両血清型についての応答型solicited局所反応における最も一般的な苦情であり、頭痛が応答型全身性反応における最も一般的な苦情であったが、プラセボを受けた個体と、ワクチン接種された個体との間の明白な差異は、まったく観察されなかった。ヒト試験3この試験では、健康な、妊娠中でない女性における、三価GBS血清型Ia、Ib、およびIII莢膜糖-CRM197コンジュゲートワクチンを調査した。それぞれ等比率で3種の糖を組み合わせて、2つの異なるワクチン処方物を試験した。2つの異なる用量5μgおよび20μg、各糖の質量として測定、0.5ml中を、アラムアジュバントあり、およびアラムアジュバントなしで試験した。上記試験では、各処方物について、1回および2回30日間離したの筋肉内注射スケジュールも評価した。ワクチンは、塩化ナトリウムsodiumcholoride4.5mg、リン酸二水素カリウム0.34mg、およびマンニトール7.5mgも含んでいた。試験群を以下の表18に要約する。20名の被験体を伴ったプラセボ群30日間離した2回の0.9の食塩水の注射も試験した。スクリーニングのとき、および1回目の注射をして1カ月後に各被験体から血液を抜き取り、ELISAによって免疫原性を分析した。2回注射群は、1カ月の時点で採血を受けた後、2回目の注射を受けた。試験に入って3カ月のときにおいても、すべての群から血液を抜き取った。各群についての抗Ia抗体、抗Ib抗体、および抗III抗体の幾何平均濃度ベースラインの抗体濃度について調整し、プラセボ群を除外の要約を、以下の表19に示す。ワクチンは、免疫原性であり、被験体の80~100の間において、異なる血清型にわたってGBS特異的抗体の少なくとも2倍の増大を誘導した。8つの群からのGMCの比較により、a1回の注射のみと比較して、2回目の注射からの寄与はまったくないこと、bアジュバントなしと比較してアラムアジュバントを含めることからの寄与はまったくないこと、およびc5/5/5μgに対して、20/20/20μgのより高い用量からの寄与はまったくないことが明らかになった。より具体的には、GBS血清型Ia、Ib、またはIIIのいずれに対しても、1回だけのワクチン注射を与える被験体と比較して、2回のワクチン注射を与える被験体の中で、抗体応答の一貫した増大はまったくなかった。2回目のワクチン注射の寄与のこの欠如は、用量5/5/5μgまたは20/20/20μg、または処方アラムなし、またはアラムアジュバントにかかわらず観察された。GBSIaについて、8つの群のそれぞれについてのGMC測定値は、試験の61日目で7~20μg/mlの範囲であった。これらの結果から、1回注射GMC範囲[9~20μg/ml]すべてがオーバーラップしている95CIと比較して、2回注射GMC範囲[7~16μg/ml]の寄与はまったく観察されなかった。さらに、1回注射対2回注射の比は、1.2[95CI0.7、2.0]であった。この結果は、1回注射対2回注射の実用上の同等性を示すp値=0.5。GBSIbについて、8つの群のそれぞれについてのGMC測定値は、試験の61日目で2~7μg/mlの範囲であった。1回注射GMC範囲[4~7μg/ml]すべてがオーバーラップしている95CIと比較して、2回注射GMC範囲[2~5μg/ml]の寄与はまったく観察されなかった。今回、1回注射対2回注射の比は、1.2[95CI0.7、2.0]であった。やはりまた、この結果は、実用上の同等性を示すp値=0.5。GBSIIIについて、8つの群のそれぞれについての測定値は、試験の61日目で5~13μg/mlの範囲であった。1回注射GMC範囲[5~13μg/ml]すべてがオーバーラップしている95CIと比較して、2回注射GMC範囲[5~11μg/ml]の寄与はまったく観察されなかった。1回注射対2回注射の比は、0.94[95CI0.55、1.66]であり、同等性を示したp値=0.8。同様に、アラムなしと比較して、アラムを含めることからのGMCへの寄与はまったく追加されなかった。アラムアジュバントの寄与のこの欠如は、用量5/5/5μgまたは20/20/20μgまたは注射数にかかわらず観察され、3つすべての血清型Ia、Ib、およびIIIにわたって認められた。GBSIaについて、8つの群にわたるGMCは、試験の61日目で7~20μg/mlの範囲であり、アラムなしGMC範囲[13~16μg/ml]すべてがオーバーラップしている95CIと比較して、アラムの寄与をまったく示さなかったGMC範囲[7~15μg/ml]。アラム群と比較したアラムなし群についての群GMC比は、1.6[95CI0.9、2.6]であった。これは、アラムなしの応答は、アラムありのワクチン処方物と比べて潜在的により高いことを示唆するp値=0.11。GBSIbについて、GMCは、試験の61日目で2~7μg/mlの範囲であり、アラムなしGMC範囲[4~7μg/ml]すべてがオーバーラップしている95CIと比較して、アラムの寄与をまったく示さなかったGMC範囲[2~4μg/ml]。アラム群と比較したアラムなし群についての群GMC比は、1.4[95CI0.8、2.4]であり、GMC値においてほぼ同等性を意味したp値=0.2。GBSIIIについて、GMCは、試験の61日目で5~13μg/mlの範囲であり、アラムなしGMC範囲[5~13μg/ml]すべてがオーバーラップしている95CIと比較して、アラムの寄与をまったく示さなかったGMC範囲[5~11μg/ml]。アラム群と比較したアラムなし群についての群GMC比は、1.09[95CI0.6、1.9]であり、GMC値においてほぼ同等性を意味したp値=0.7。最後に、データは、2つの用量コンジュゲート中の3種の糖のそれぞれの5μg対20μgの評価を可能にする。結果は、より高い用量20μgが、より高い抗体応答を誘導しないことを示唆する。特に、5μgを投与される被験体すべての群にわたると20μgを投与される被験体すべての群にわたるについてのGMCの比は、GBSIaについて1.2[95CI0.7、2.1]、GBSIbについて0.7[95CI0.4、1.2]、およびGBSIIIについて1.4[95CI0.9、2.5]である。これらの比は、1に近く、1に等しいことについての統計的検定のp値は、3つすべての血清型について0.15超であり、このことは、2つの用量レジメンの間で、誘導される抗体のレベルの識別できる差異がまったくないことを示唆する。安全性は、局所的および全身性の反応原性の発生率、有害事象および重篤な有害事象、ならびに臨床検査室結果によって測定した。三価GBSワクチンは、プラセボと比較した場合、8つのワクチン試験群のすべてにおいて、安全で耐容性良好であることが判明した。安全性は、反応の重症度と一緒に、各ワクチン接種後の7日の間に起こる、応答型局所的なすなわち、注射部位の痛み、斑状出血、紅斑、硬結、および腫張反応、ならびに応答型全身性のすなわち、悪寒、吐き気、倦怠感、筋肉痛、頭痛、疲労、関節痛、発疹、発熱[38°C以上の腋窩温として定義される]、その他反応を有する被験体の百分率;各ワクチン接種後の1日目から23日目までに報告された他の有害事象のすべて;最大61日目までについて、1ワクチン群当たりの、試験からの脱退をもたらす重篤な有害事象および/または有害事象が報告された被験体の百分率によって評価した。ヒト試験4試験エントリー時点で検出未満の抗体Abレベル血清型Ia、Ib、およびIIIについて、それぞれ0.4μg/ml、0.084μg/ml、および0.068μg/mlを有する被験体の応答は、特に重要なものであった。このサブセット分析を、上記ヒト試験3からのデータで実施した。各血清型について、データを以下のように評価した。a各注射/処方物/用量群についてのGMC、および対応する95CI。b群の割り当てにかかわらずi1回の注射を受けるすべての被験体にわたるGMC、およびこれを、2回の注射を受けるすべての被験体のGMCと比較した。同様に、アラムを投与される被験体のGMCと比較したアジュバントを投与されない被験体のGMC、ならびに20/20/20μgを投与されるすべての被験体のGMCと比較した5/5/5μgの用量を投与されるGMC。評価は、計算された比のまわりの両側95CIとともに、GMC比に基づいた。c検出の最低レベルlldの半分として仮定される、ベースラインから少なくとも4倍の変化を有する被験体の比率。一般に、女性の約25および50が、それぞれ血清型IIIおよびIa/Ibについての検出限界未満のAbレベルを提示した。ベースラインベースライン値がlldの半分を割り当てられる場合と比較した、61日目におけるAbレベルの4倍以上の増大を達成するこのサブセット中の被験体の百分率は、64~95血清型Ia、80~100血清型III、および81~100血清型Ibの範囲である。完全な試験コホートからの結果と同様に、試験エントリー時点で検出不可能なAbレベルを有する被験体はまた、2回注射1回注射に対してから、より高い投与量より低い投与量に対してから、またはアラムを含めることアジュバントなしに対してから追加の利点を示すことができない。すべての1回注射被験体対すべての2回注射被験体についてのGMCの比61日目は、1.10.6~1.8;血清型Ia、0.70.3~1.5;血清型III、および0.90.5~1.4;血清型Ibであり、すべての5μgの投与量の被験体対すべての20μgの投与量の被験体については、1.30.8~2.1;血清型Ia、1.40.7~2.8;血清型III、および1.40.9~2.3;血清型Ibであり、すべてのアジュバントなしの被験体対すべてのアラムの被験体については、1.40.8~2.4;血清型Ia、10.5~2.0;血清型III、および1.71.1~2.7;血清型Ibであった。マウス試験15マウスに、0日目に、CRM197と水酸化アルミニウムアジュバント、または水酸化アルミニウムアジュバント単独で初回刺激し、次いで、21日目および35日目に、アジュバントの水酸化アルミニウムアジュバントあり、またはなしの、GBS血清型III/CRM197コンジュゲートで免疫した。0日目、ならびに21日目および35日目のワクチン接種前に血液を抜き取った。GBS血清型III多糖およびCRM197キャリアタンパク質に対するIgG/IgM血清力価を、血液試料から測定した。図4に示したように、CRM197キャリアで初回刺激すると、初回刺激されていないマウスと比較して、ワクチンアジュバントあり、またはなしを1回および2回投与した後に、キャリアに対する、有意に高いIgG抗体応答がもたらされたP<0.0002。初回刺激により、ワクチンアジュバントあり、またはなしを2回投与した後に、GBS血清型III多糖に対する良好な抗体応答ももたらされた。初回刺激されていないマウスは、初回刺激されたマウスにおいて観察されたものと同等の抗多糖抗体価に到達するためにアジュバントを必要とした。初回刺激されていないマウスにおいて、複合糖質ワクチンがアジュバントなしで投与されたとき、抗体価は、他の群におけるものより有意に低かったP<0.03。したがって、CRM197で初回刺激すると、アジュバントなしで投与される場合であっても、コンジュゲートのGBS莢膜糖成分に対するその後の抗体応答に対して正に影響するようである。ラット試験およびウサギ試験三価GBS血清型Ia、Ib、およびIII莢膜糖-CRM197コンジュゲートワクチンの潜在的な生殖毒性および発生毒性を評価するための試験を、ラットおよびウサギにおいて実施した。ラット試験は、以下の表20に従って実施した。水酸化アルミニウムあり、またはなしで、20μgの用量で、試験1日目、15日目、29日目交配前期間、ならびに/または妊娠6日目、12日目、および17日目に、雌ラットに三価ワクチンを皮下投与しても、母体毒性および生殖機能もしくは胚胎仔のembryofetal発生に対する作用をもたらさなかった。水酸化アルミニウムアジュバントあり、または水酸化アルミニウムアジュバントなしの三価ワクチンを3回または6回注射して処置された群間で、差異はまったく認められなかった。さらに、F1世代仔の生存、臨床状態、または体重、または生殖能力に対する作用もまったくなかった。ウサギ試験を、以下の表21に従って実施した。試験1日目、15日目、および29日目交配前期間、ならびに/または妊娠7日目および20日目に、20μgの用量で、雌ウサギに三価ワクチンと水酸化アルミニウムを筋肉内投与しても、母体毒性、交配に対する作用も、胚致死性embryolethality、胎児毒性もしくは催奇形性の証拠ももたらさなかった。対照およびワクチンで処置された雌ウサギの成体F1世代の間の差異はまったくなかった。これらの試験は、三価ワクチンが、免疫原性であり、妊娠中のラットもしくはウサギ、またはこれらの子孫に対する出産前や出産後の作用が全くないことを示した。安定性試験三価GBS血清型Ia、Ib、およびIII莢膜糖-CRM197コンジュゲートワクチンの安定性を、2つの異なる温度で1カ月貯蔵する間に測定した。10mMのKH2PO4および3のマンニトール中に80μgの糖/mlで存在するそれぞれ1の3種の複合糖質をプールすることによって、ワクチンを処方した。3mlの単回用量バイアルに溶液0.3mlを満たし、シリコーン処理されたブロモブチルbromobuthylゴムストッパーで部分的にキャップし、凍結乾燥サイクルに供した。凍結乾燥プロセスが終わった後、バイアルを2~8°C、または36~38°Cで貯蔵した。36~38°Cで貯蔵すると、遊離糖内容物のわずかな増加が検出されたHPAEC-PADを使用。しかし、全体的に、三価ワクチンは、2~8°C、および36~38°Cの両方において、最大1カ月貯蔵した後、安定であった。本発明は、例としてのみ記載されており、本発明の範囲および精神の範囲内に依然としてありながら改変を行うことができることが理解される。"