"式I式I中、R1およびR2は、それぞれ独立に水素またはC16アルコキシルただし、R1およびR2は同時に水素ではない、R3は水素またはニトロ、R4は水素、ニトロまたはC16アルコキシル、X-は陰イオンで表されるテトラゾリウム化合物。式I中、R1およびR2のいずれか一方はC16アルコキシルで他方は水素である請求項1に記載のテトラゾリウム化合物。式I中、R1はメトキシ、R2は水素、そしてR3およびR4の少なくともいずれか一方がニトロである請求項2に記載のテトラゾリウム化合物。テトラゾリウム化合物が、235フェニルテトラゾリウム塩、235フェニルテトラゾリウム塩、235ジフェニルテトラゾリウム塩、235フェニルテトラゾリウム塩または235フェニルテトラゾリウム塩である請求項1に記載のテトラゾリウム化合物。請求項1から請求項4のいずれかに記載のテトラゾリウム化合物を含む微生物検出用発色試薬。テトラゾリウム化合物の還元により生じるホルマザン色素の吸収波長域が400nm~420nmである請求項5に記載の微生物検出用発色試薬。微生物を含む検体と、請求項5または請求項6のいずれかに記載の発色試薬との接触によりテトラゾリウム化合物から生じるホルマザン色素の発色シグナルにより微生物を検出する検出方法。酵素的サイクリング反応により発色シグナルを増感する請求項7に記載の微生物の検出方法。上記のような状況において、特別な機器を必要とせず、迅速かつ確実に微生物を検出するための微生物検出用試薬に用いられる化合物および微生物検出用試薬、微生物の検出方法が望まれている。本発明は、以下のように、テトラゾリウム化合物、テトラゾリウム化合物を含む微生物検出用試薬および微生物の検出方法を提供する。<1>下記式I上記式Iにおいて、R1およびR2は、それぞれ独立に水素またはC16アルコキシルを示しただし同時に水素であることはない、R3は水素またはニトロ、R4は水素、ニトロまたはC16アルコキシル、X-は陰イオンであるテトラゾリウム化合物。<2>上記式I中、R1およびR2のいずれか一方はC16アルコキシルで他方は水素である上記<1>に記載のテトラゾリウム化合物。<3>上記式I中、R1はメトキシ、R2は水素、そしてR3およびR4の少なくともいずれか一方がニトロである上記<2>に記載のテトラゾリウム化合物。<4>235フェニルテトラゾリウム塩、235フェニルテトラゾリウム塩、235ジフェニルテトラゾリウム塩または235フェニルテトラゾリウム塩または235フェニルテトラゾリウム塩である上記<1>に記載のテトラゾリウム化合物。<5>上記<1>から<4>のいずれかに記載のテトラゾリウム化合物を含む微生物検出用発色試薬。<6>テトラゾリウム化合物の還元により生じるホルマザン色素の吸収波長域が400nm~420nmである、上記<5>に記載の微生物検出用発色試薬。<7>微生物を含む検体と、上記<5>または<6>のいずれかに記載の発色試薬との接触によりテトラゾリウム化合物から生じるホルマザン色素の発色シグナルにより微生物を検出する検出方法。<8>酵素的サイクリング反応により発色シグナルを増感する上記<7>に記載の微生物の検出方法。本発明においては、微生物等との接触により、確実に検出可能な発色シグナルを速やかに発生させるテトラゾリウム化合物が実現される。そしてこのようなテトラゾリウム化合物を用いることにより、特別な機器なしに迅速かつ確実に微生物を検出可能な発色試薬および検出方法もまた実現される。1.テトラゾリウム化合物本発明のテトラゾリウム化合物は、上記式Iで示される構造を有する。1A.置換基R1およびR2R1およびR2は、それぞれ水素またはC16アルコキシルであり、同時に水素であることはない。すなわちR1およびR2は、いずれか一方がC16アルコキシルであって他方が水素であるか、あるいは、いずれもC16アルコキシルである。好ましくは、R1およびR2のいずれか一方がC16アルコキシル、他方が水素であり、より好ましくは、R1およびR2のいずれか一方がC13アルコキシルである。また、C13アルコキシルは、さらに好ましくはメトキシである。C16C13アルコキシルは、例えばヒドロキシ、ハロゲンなどの置換基を有していても、有していなくてもよい。また、C16C13アルコキシルは、分岐していても、分岐していなくてもよい。1B.置換基R3およびR4R3は水素またはニトロであり、R4は水素、ニトロまたはC16アルコキシルである。好ましくは、R3は水素またはニトロであり、R4は水素、ニトロまたはC13アルコキシルである。より好ましくは、R3およびR4は、それぞれ水素またはニトロであり、R3およびR4の少なくともいずれか一方はニトロである。1C.陰イオンX-は陰イオンであり、好ましくは、塩化物イオン、臭化物イオン等のハロゲンイオンである。ただし、例えば四弗化ホウ素イオン等、他の陰イオンであってもよい。上述のテトラゾリウム化合物は、より複雑な構造を有するテトラゾリウム化合物、例えばNBTnitrobluetetrazoliumなどに比べ、微生物の細胞中に取り込まれやすい。このため、微生物検出用の発色試薬として上述のテトラゾリウム化合物を用いると、酵素によるテトラゾリウム化合物の還元反応が速やかに進行してホルマザン色素が生じ、微生物を速やかに検出することができる。より具体的には、本発明のテトラゾリウム化合物として、235フェニルテトラゾリウムクロライド下記式II参照、235フェニルテトラゾリウムクロライド下記式III参照、235ジフェニルテトラゾリウムクロライド下記式IV参照、235フェニルテトラゾリウムクロライド下記式V参照または235フェニルテトラゾリウムクロライド下記式VI参照を微生物の検出に用いることが好ましい。特に、2-フェニル環において少なくとも置換基R1オルト位がメトキシであるもの、例えば、2-フェニル環における置換基R3メタ位が水素、3-フェニル環における置換基R4がニトロである235フェニルテトラゾリウム塩下記式II参照、さらに2-フェニル環の置換基R3としてニトロを有する235フェニルテトラゾリウム塩下記式III参照等が好ましい。1D.テトラゾリウム化合物の合成方法本発明のテトラゾリウム化合物は、下記のいずれかの反応ルートによって合成することができる。反応式Aにおいて、R1~R4およびX-は、前記式Iにおいて定義された置換基あるいはイオンである。この反応式Aで表される反応ルートでは、まず、置換基R1~R3を有するフェニルヒドラジン塩酸塩1とベンズアルデヒド2を反応させ、中間体3を生成する。この中間体3と置換基R4を有するフェニルジアゾニウム化合物4との反応により、テトラゾリウム前駆体5を生成する。そしてテトラゾリウム前駆体5にハロゲン化チオニルを反応させ、上記式Iで表されるテトラゾリウム化合物6を得る。反応式Bにおいても、R1~R4およびX-は、前記式Iにおいて定義された置換基あるいはイオンである。この反応式Bで表される反応ルートでは、まず、置換基R4を有するフェニルヒドラジン塩酸塩7とベンズアルデヒド2を反応させ、中間体8を生成する。この中間体8と置換基R1~R3を有するアニリン誘導体9との反応により、テトラゾリウム前駆体10を生成する。そしてテトラゾリウム前駆体10にハロゲン化チオニルを反応させ、上記式Iで表されるテトラゾリウム化合物6を得る。これらの反応ルートは、目的とするテトラゾリウム化合物の構造、必要とされる材料物質の入手容易性等に応じて、適宜選択可能である。2.微生物検出用発色試薬本発明の微生物検出用発色試薬は、上述のテトラゾリウム化合物のいずれかを発色基質として含んでいるため、微生物を速やかに検出できる。さらにこの場合、特別な測定機器は不要であり、目視でも微生物を確実に検出できる。このように、本発明の微生物検出用発色試薬を用いると、簡便な手法で確実に微生物を検出できる。本発明の微生物検出用発色試薬においては、好ましくは、テトラゾリウム化合物の還元により生じるホルマザン色素の吸収波長域は380nm~480nm、より好ましくは400nm~430nm、特に好ましくは400nm~420nmである。この場合、ホルマザン色素は、青色、青紫色の発色シグナルを生じる。このような寒色系の発色シグナルを生じさせるテトラゾリウム化合物を発色基質として用いると、肉類等の暖色系のものを対象とした場合に、明らかに異なる色の発色シグナルにより微生物をより確実に検出できる。一般的に、微生物の検出対象である食品には肉類等の暖色系のものが数多く含まれるため、上述の微生物検出用発色試薬は、従来の暖色系の発色シグナルを生じるものに比べ、微生物をより確実に検出可能にする。3.微生物の検出方法本発明における微生物の検出方法では、上述の微生物検出用発色試薬が用いられる。そして、微生物を含む検体と上述の発色試薬とが接触すると、微生物の細胞内代謝系反応によりテトラゾリウム化合物が還元され、ホルマザン色素が生じる。この発色ホルマザンにより発色シグナルが生じる。3A.酵素的サイクリング反応発色シグナルは、例えば酵素的サイクリング反応により、増感されることが好ましい。酵素的サイクリング反応においては、微生物内に比較的多く存在する成分、例えば、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドの酸化型以下NADと略すおよびその還元型以下NADHと略す、あるいはニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸の酸化型以下NADPと略すおよびその還元型以下NADPHと略すが用いられる。NAD、NADH、NADPおよびNADPHは、生体含量の多い補酵素であり、水素の授受を介して可逆的に変化することによって多くの脱水素酵素の酸化還元反応に関与している。したがって、NAD、NADH、NADPまたはNADPHの酸化反応または還元反応に伴って生じる、テトラゾリウム化合物由来のホルマザン色素の発色または蛍光シグナルを、酵素的サイクリング反応によって増感させ、NAD、NADH、NADPまたはNADPHの存在を高感度に検出することができる。この場合、脱水素酵素、脱水素酵素の基質、およびジアホラーゼを反応系に加えることが必要である。脱水素酵素およびその基質の組み合わせとしては、アルコール脱水素酵素[EC1.1.1.1]とメタノール、エタノールまたはプロパノール、グリセロール脱水素酵素[EC1.1.1.6]とグリセリン、グリセロール3-リン酸脱水素酵素[EC1.1.1.8]とグリセロール3-リン酸、アルデヒド脱水素酵素[EC1.1.1.21]とアセトアルデヒド、乳酸脱水素酵素[EC1.1.1.27]と乳酸、リンゴ酸脱水素酵素[EC1.1.1.37]とリンゴ酸、グルコース脱水素酵素[EC1.1.1.47]とグルコース、グルコース6-リン酸脱水素酵素[EC1.1.1.49]とグルコース6-リン酸、蟻酸脱水素酵素[EC1.2.1.2]と蟻酸、アルデヒド脱水素酵素[EC1.2.1.3]とアセトアルデヒド、コレステロール脱水素酵素[EC1.3.1.22]とコレステロール、酵素番号が[EC1.4.1.1から20]で表される各種アミノ酸脱水素酵素と各種アミノ酸などが用いられる。また、ジアホラーゼとしては、バチルスステアロサーモフィルス、クロストリジウムクルイベリその他の微生物由来のものや、ブタ心臓由来のものが用いられる。さらに、保存安定性に優れているバチルスステアロサーモフィルス由来のジアホラーゼI[EC1.6.4.3]およびジアホラーゼII[EC1.6.99.-]がより好ましい。また、ジアホラーゼの代わりに、フェナジンメトサルフェートPMSやメルドラーブルーなどの電子伝達物質を用いてもよい。3B.微生物検出方法の対象および適用範囲本発明における微生物の検出方法の対象となる検体は、特に限定されず、食品、化粧品、実験用器具等が挙げられる。また、検出可能な微生物も特に限定されない。培地は、液状培地でも固体培地でもよい。固体培地としては、例えば、シート状フィルム状培地、シャーレ状乾式培地、寒天培地、試験紙等を挙げることができる。なお、脱水素酵素とその基質、検出対象および培地については、特開2005-110638号公報、特開2005-287452号公報などを引用することができる。また、微生物を培養する時間は、テトラゾリウム化合物を含む発色試薬の添加によりコロニー等を色素産生させることで肉眼でも観察できるようになる程度で十分である。なお、この場合の肉眼での観察にはルーペを用いての観察も含まれる。所定時間としては、好ましくは48時間以内、より好ましくは24時間以内である。なお培養温度は、検出対象の微生物に応じて適宜決定できる。次に、実施例について説明するが、本発明はこれらの実施例により限定されるものではない。テトラゾリウム化合物の合成方法実施例1235フェニルテトラゾリウムクロリド235フェニルテトラゾリウムクロリド以下、テトラゾリウム化合物A上記式II参照を、以下のように合成した下記式VII参照。まず、2-メトキシフェニルヒドラジン塩酸塩8gを水150mlに溶解し、室温で撹拌下、ベンズアルデヒド6gをエタノール75mlに混合した溶液を滴下して1時間撹拌した。析出した沈殿を水200mlで洗浄し、減圧下50°Cで乾燥し、10gの淡黄色固体を得た。この淡黄色固体をピリジン600mlに溶解し、氷冷下で撹拌した。次に4-ニトロベンゼンジアゾニウムテトラフルオロボレイト12gを水500mlに溶解してピリジン溶液に滴下し、氷浴上で2時間撹拌した。析出した沈殿物を濾別し、水200mlで洗浄した。これを減圧下50°Cで乾燥し、濃藍色固体8.63gを得た。これをトルエン250mlに溶解し、塩化チオニル2gを加えて90°Cで2時間、加熱撹拌した。そして冷却後に水250ml加え、水溶成分を抽出した。水層に酢酸エチル250mlを加えて洗浄した後に、水層を凍結乾燥し、5.4gの黄色固体として235フェニルテトラゾリウムクロリドを得た。実施例2235フェニルテトラゾリウムクロライド235フェニルテトラゾリウムクロライド以下、テトラゾリウム化合物B上記式III参照を、以下のように合成した下記式VIII参照。まず、4-ニトロフェニルヒドラジン3gを濃塩酸10mlと水50mlの混合溶液に溶解し、室温で撹拌下、フェニルアルデヒド2.5gをエタノール20mlに混合した溶液を滴下して1時間撹拌した。析出した沈殿を水200mlで洗浄し、減圧下50°Cで乾燥し、5gの淡黄色固体を得た。これをピリジン50mlに溶解し、氷冷下で撹拌した。次に、2-アミノ-5-ニトロアニソール5gを、濃塩酸20mlと水40mlの混合溶液に加え、氷浴下、撹拌した。そこへ亜硝酸ナトリウム7gを水20mlに溶解した水溶液を滴下し、氷浴下で1時間撹拌した。この水溶液を、上述のピリジン溶液に滴下し、氷浴下で1時間撹拌した。析出した沈殿物を濾別し、水200mlで洗浄した。これを減圧下50°Cで乾燥し、赤褐色固体4.76gを得た。この赤褐色固体をトルエン150mlに溶解し、塩化チオニル2gを加えて90°Cで2時間、加熱撹拌した。そして冷却後に水150mlを加え、水溶成分を抽出した。水層に酢酸エチル150mlを加え、洗浄した。水層を凍結乾燥し、2.54gの黄色固体として、235フェニルテトラゾリウムクロライドを得た。上記式VII、あるいは式VIIIの合成方法を応用することにより、テトラゾリウム化合物AおよびB以外の上述のテトラゾリウム化合物も合成することができる。次に、実施例1の発色試薬と、比較例の発色試薬とによる微生物の検出比較試験の結果につき、説明する。比較試験は以下のように行った。まず、発色試薬としての実施例1のテトラゾリウム化合物Aおよび比較例の2,3,5トリフェニルテトラゾリウムクロリドを、それぞれ0.03gm3ずつ含有する一般生菌検出用シート培地を調製した。一般生菌検出用シート培地は、発色試薬が異なる他は、いずれも同一のものである。そして、食肉、カット野菜、総菜など各種食品のいずれか1種類を10g、滅菌済袋に入れ、100mlの滅菌生理食塩水を加えてストマッカーでホモジナイズした。滅菌生理食塩水で10倍希釈水を作製し、上述の2種類の一般生菌検出用シート培地のポロプロピレンフィルムを、バックーシーリングテープを接着した部分まで開き、上述の希釈液1mlをそれぞれ加えた。その後、再度ポリプロピレンフィルムを被せて、一般生菌検出用シート培地とした。なお一般生菌検出用シート培地は、様々な種類の食品それぞれについて、実施例1、比較例の2つずつ調製した。実施例1の発色試薬を含む一般生菌検出用シート培地は24時間、比較の発色試薬を含む一般生菌検出用シート培地は48時間、それぞれ35°Cで培養した。そして目視により、実施例1の発色試薬により検出された生育菌数と、比較例の発色試薬により検出された生育菌数との生育菌数をそれぞれ比較した。この結果を、図1に示す。なお、図1における各点は、いずれか同じ食品についてのコロニー数の対数の比を示している。図1より明らかであるように、実施例1のテトラゾリウム化合物Aによる発色試薬は、テトラゾリウム化合物Aの置換基を有さない比較例の化合物による発色試薬よりも優れている。実施例1では、培養時間が半分である他は比較例と同じ条件下で培養された微生物を検出しているにも係わらず、ほぼ同等数以上のコロニー数が検出されたためである。このようにテトラゾリウム化合物Aは、微生物検出用の発色試薬としての使用に適していることが確認された。これらの結果は、主として、テトラゾリウム化合物Aからホルマザン色素を生じさせる酵素反応の進行が速やかであったことによると考えられる。このため、上述の比較試験においては、明確な結果を得るために実施例1においても培養時間を長く設定したものの、実際に実施例1の発色試薬を使用する場合、より短い時間、例えば16~24時間程度の培養で十分である。次に、実施例2の発色試薬テトラゾリウム化合物Bと、同様の比較試験を行った。比較例の化合物は、実施例1と同じ2,3,5トリフェニルテトラゾリウムクロリドである。この結果を、図2に示す。図2より明らかなように、テトラゾリウム化合物Bも、実施例1のテトラゾリウム化合物Aと同様の結果を示している。すなわち、比較例に比べて培養時間が半分であるにも係わらず、実施例2では、比較例と同等、あるいはそれ以上のコロニー数が検出された。このため、テトラゾリウム化合物Bについても、比較例の化合物よりも微生物検出用の発色試薬として優れていることが確認された。さらに、テトラゾリウム化合物AおよびBと類似の分子構造を有する本発明のテトラゾリウム化合物上述のI式等参照についても、NBT等のより大きくて複雑な分子構造を有するテトラゾリウム化合物よりも微生物の細胞に取り込まれ易いため、酵素によるテトラゾリウム化合物の還元反応が速やかに進行すると考えられる。さらに、2-フェニル環におけるオルト位上記式Iにおける置換基R1にメトキシを有するテトラゾリウム化合物A、B上記式IIおよびIII参照を含む本発明のテトラゾリウム化合物による発色試薬は、他のテトラゾリウム化合物、例えば、2-フェニル環におけるパラ位上記式Iの置換基R3のみにメトキシを有する化合物、あるいはメトキシを有さない化合物以下、対照化合物による発色試薬よりも優れていると考えられる。これは、対照化合物から生じたホルマザン色素が赤色を呈するのに対し、テトラゾリウム化合物A、B等から生じたホルマザン色素の呈する色は青色から青紫色だからである。このようなホルマザン色素を生じさせる本発明の発色試薬、微視物検出方法においては、例えば肉類等の暖色系の検体における微生物のコロニーがより明確に識別可能である。具体的には、対照化合物から生じるホルマゾン色素の吸収波長のピークが約430nmであるのに対し、テトラゾリウム化合物A、Bから生じるホルマゾン色素の吸収波長のピークは約410nmである。このように、400~430nmの範囲、より好ましくは400~420nmの範囲の吸収波長域を有するホルマゾン色素を生じさせる本発明のテトラゾリウム化合物は、特に、微生物検出用の試薬として適している。"