血液中の稀少細胞を検出する細胞の検出方法であって、血液から赤血球を除く前処理を行い、白血球及び稀少細胞が含まれる細胞懸濁液を得る第1工程と、前記第1工程で得られた前記細胞懸濁液に含まれる全部の細胞を、複数の穴が設けられた観察領域に展開する第2工程と、前記観察領域に展開された細胞を光学的に撮影する第3工程と、前記第3工程の撮影で得られた画像から稀少細胞を検出する第4工程と、を備えることを特徴とする細胞の検出方法。前記観察領域に設けられた前記複数の穴は所定のピッチで配置されたウェルにより形成されており、前記第2工程は、前記ウェルに細胞を沈殿させることにより、前記細胞懸濁液に含まれる全部の細胞を展開することを特徴とする請求項1に記載の細胞の検出方法。前記ウェルの上部穴径は、前記観察領域に展開された細胞の最大径の2倍未満であることを特徴とする請求項2に記載の細胞の検出方法。前記ウェルの上部穴径は、前記観察領域に展開された細胞の最大径の2倍以上の大きさであることを特徴とする請求項2に記載の細胞の検出方法。前記観察領域に設けられた前記複数の穴は、所定の孔密度で配置され前記細胞懸濁液に含まれる細胞よりも小径の貫通した穴を有するフィルタにより形成されており、前記第2工程は、前記細胞懸濁液を前記フィルタに通すことにより、前記フィルタ上に、前記細胞懸濁液に含まれる全部の細胞を展開することを特徴とする請求項1に記載の細胞の検出方法。血液中の稀少細胞を検出する細胞の検出方法であって、血液から赤血球を除く前処理を行い、白血球及び稀少細胞が含まれる細胞懸濁液を得る第1工程と、第1工程で得られた前記細胞懸濁液に含まれる全部の細胞を、該細胞の最大径の2倍未満の厚みの薄層に伸ばすことにより観察領域に展開する第2工程と、前記観察領域に展開された細胞を光学的に撮影する第3工程と、前記第3工程の撮影で得られた画像から稀少細胞を検出する第4工程と、を備えることを特徴とする細胞の検出方法。前記第2工程は、スピンコート方式により前記細胞懸濁液に含まれる細胞を前記観察領域に展開することを特徴とする請求項6に記載の細胞の検出方法。前記第2工程は、バーコート方式により前記細胞懸濁液に含まれる細胞を前記観察領域に展開することを特徴とする請求項6に記載の細胞の検出方法。複数の穴が設けられ、血液から赤血球を除く前処理をすることにより得られた細胞懸濁液に含まれる全部の細胞を展開する観察部と、前記観察部に展開された全部の細胞を光学的に撮影して画像を得る撮影部と、前記撮影部で得られた画像から、稀少細胞を検出する解析部と、を備え、前記観察部に設けられた前記複数の穴は、所定ピッチで配置されたウェルにより形成されており、前記ウェルに細胞を沈殿させることにより、前記細胞懸濁液に含まれる全部の細胞が展開されることを特徴とする細胞検出システム。前記ウェルの上部穴径は、前記細胞懸濁液に含まれる細胞の最大径の2倍未満であることを特徴とする請求項9に記載の細胞検出システム。前記ウェルの上部穴径は、前記細胞懸濁液に含まれる細胞の最大径の2倍以上の大きさであることを特徴とする請求項9に記載の細胞検出システム。複数の穴が設けられ、血液から赤血球を除く前処理をすることにより得られた細胞懸濁液に含まれる全部の細胞を展開する観察部と、前記観察部に展開された全部の細胞を光学的に撮影して画像を得る撮影部と、前記撮影部で得られた画像から、稀少細胞を検出する解析部と、を備え、前記観察部に設けられた前記複数の穴は、所定の孔密度で配置され前記細胞懸濁液に含まれる細胞よりも小径の貫通した穴を有するフィルタにより形成されており、前記細胞懸濁液を前記フィルタに通すことにより、前記フィルタ上に、前記細胞懸濁液に含まれる全部の細胞が展開されることを特徴とする細胞検出システム。特許文献1では、磁気粒子を用いて稀な細胞を血液から分離しているので、その工程において本来的には対象となる稀な細胞を全て分離できるとは限らず、細胞の性質によっては取りこぼしが発生する可能性がある。また特許文献2では、蛍光物質により標識をつけた細胞を透明なスライドに塗りつたスミア標本を観察している。特許文献1、2では観察の対象とする細胞を抽出あるいは限定して稀少細胞の検出を行っている過程で、取りこぼしが発生し、その結果、検出感度が低下するおそれがある。取りこぼしが生じないようにするには、対象となる希少細胞及び白血球の細胞をすべて観察すればよい。全ての細部を観察する場合、観察領域に対象となる細胞同士が重ならないように展開しなくてはならないが、単純にまばらに広げただけでは、観察領域を広くしなくてはならず、検出機器のサイズが大きくなり現実的ではない。本願発明はこのような問題に鑑み、検出感度を低下させずに、効率よく稀少細胞を検出することが可能となる細胞の検出方法及び細胞検出システ提供することを目的とする。上記の目的は、下記に記載する発明により達成される。1.血液中の稀少細胞を検出する細胞の検出方法であって、血液から赤血球を除く前処理を行い、白血球及び稀少細胞が含まれる細胞懸濁液を得る第1工程と、前記第1工程で得られた前記細胞懸濁液に含まれる全部の細胞を、複数の穴が設けられた観察領域に展開する第2工程と、前記観察領域に展開された細胞を光学的に撮影する第3工程と、前記第3工程の撮影で得られた画像から稀少細胞を検出する第4工程と、を備えることを特徴とする細胞の検出方法。2.前記観察領域に設けられた前記複数の穴は所定のピッチで配置されたウェルにより形成されており、前記第2工程は、前記ウェルに細胞を沈殿させることにより、前記細胞懸濁液に含まれる全部の細胞を展開することを特徴とする前記1に記載の細胞の検出方法。3.前記ウェルの上部穴径は、前記観察領域に展開された細胞の最大径の2倍未満であることを特徴とする前記2に記載の細胞の検出方法。4.前記ウェルの上部穴径は、前記観察領域に展開された細胞の最大径の2倍以上の大きさであることを特徴とする前記2に記載の細胞の検出方法。5.前記観察領域に設けられた前記複数の穴は、所定の孔密度で配置され前記細胞懸濁液に含まれる細胞よりも小径の貫通した穴を有するフィルタにより形成されており、前記第2工程は、前記細胞懸濁液を前記フィルタに通すことにより、前記フィルタ上に、前記細胞懸濁液に含まれる全部の細胞を展開することを特徴とする前記1に記載の細胞の検出方法。6.血液中の稀少細胞を検出する細胞の検出方法であって、血液から赤血球を除く前処理を行い、白血球及び稀少細胞が含まれる細胞懸濁液を得る第1工程と、第1工程で得られた前記細胞懸濁液に含まれる全部の細胞を、該細胞の最大径の2倍未満の厚みの薄層に伸ばすことにより観察領域に展開する第2工程と、前記観察領域に展開された細胞を光学的に撮影する第3工程と、前記第3工程の撮影で得られた画像から稀少細胞を検出する第4工程と、を備えることを特徴とする細胞の検出方法。7.前記第2工程は、スピンコート方式により前記細胞懸濁液に含まれる細胞を前記観察領域に展開することを特徴とする前記6に記載の細胞の検出方法。8.前記第2工程は、バーコート方式により前記細胞懸濁液に含まれる細胞を前記観察領域に展開することを特徴とする前記6に記載の細胞の検出方法。9.複数の穴が設けられ、血液から赤血球を除く前処理をすることにより得られた細胞懸濁液に含まれる全部の細胞を展開する観察部と、前記観察部に展開された全部の細胞を光学的に撮影して画像を得る撮影部と、前記撮影部で得られた画像から、稀少細胞を検出する解析部と、を備え、前記観察部に設けられた前記複数の穴は、所定ピッチで配置されたウェルにより形成されており、前記ウェルに細胞を沈殿させることにより、前記細胞懸濁液に含まれる全部の細胞が展開されることを特徴とする細胞検出システム。10.前記ウェルの上部穴径は、前記細胞懸濁液に含まれる細胞の最大径の2倍未満であることを特徴とする前記9に記載の細胞検出システム。11.前記ウェルの上部穴径は、前記細胞懸濁液に含まれる細胞の最大径の2倍以上の大きさであることを特徴とする前記9に記載の細胞検出システム。12.複数の穴が設けられ、血液から赤血球を除く前処理をすることにより得られた細胞懸濁液に含まれる全部の細胞を展開する観察部と、前記観察部に展開された全部の細胞を光学的に撮影して画像を得る撮影部と、前記撮影部で得られた画像から、稀少細胞を検出する解析部と、を備え、前記観察部に設けられた前記複数の穴は、所定の孔密度で配置され前記細胞懸濁液に含まれる細胞よりも小径の貫通した穴を有するフィルタにより形成されており、前記細胞懸濁液を前記フィルタに通すことにより、前記フィルタ上に、前記細胞懸濁液に含まれる全部の細胞が展開されることを特徴とする細胞検出システム。本願発明によれば、血液から赤血球を除く前処理を行って得られた細胞懸濁液に含まれる全部の細胞を複数の穴が設けられた観察領域に展開する工程、或いは該細胞の最大径の2倍未満の厚みの薄層に伸ばすことにより該細胞を観察領域に展開する工程を備えることにより、全部の細胞同士を重なりを抑制して狭い面積に展開できるので、検出感度を低下させずに稀少細胞を検出することが可能となる。本発明を実施の形態に基づいて説明するが、本発明は該実施の形態に限られない。図1は、本実施の形態に係る細胞検出システムの概略の構成を示す図である。同図に示す細胞検出システムは、不図示のモータにより回転移動させられるエンドレスベルト40上に観察部30が配置されている。観察部30の上方には、所定の波長の照射光レーザ光Lを発する光源11と、照射光Lを反射偏向させる回転多面鏡12と、この回転多面鏡12を回転させるモータ13と走査光学系14が配置されている。走査光学系14は、回転多面鏡12で反射偏向された照射光Lを観察部30上に収束させ、かつ等速度で走査させるものである。照射光Lが走査される観察部30の直上には、照射光Lを照射させることにより観察部30の上面から発せられる反射光Mを上方より集光する光ガイド21が近接配置されている。光ガイド21には、受光部22が接続されている。また、受光部22と光ガイド21の間には、反射光M以外の不要な光が受光部22に入射しないよう照射光の波長以外の光をカットする光学フィルタ23が配置されている。受光部22には撮影部24が接続されている。撮影部24では受光部22から出力されるデジタル信号を処理してデジタル画像データに変換し、後段の解析部25に出力する。以下、同図に示す細胞検出システムの動作概略について簡単に説明する。観察部30は、ガラス等の材料で形成された表面が平滑な板状のものであり、その表面には後述する前処理を行った血液中の細胞が展開されている。観察部30はエンドレスベルト40上の所定の位置にセットされ、エンドレスベルト40が可動することにより、矢印Y方向に搬送副走査される。一方、光源11から発せられた照射光レーザ光Lは、モータ13により高速回転する回転多面鏡12によって反射偏向される。この反射偏向された照射光Lは走査光学系14により観察部30の表面上で収束され、かつ等速度で観察部30の表面を矢印X方向に主走査する。照射光Lの主走査と観察部30の矢印Y方向への副走査とにより、観察部30は全面に亘って照射光Lが照射される。観察部30の表面全面が観察領域となる。観察部30の、照射光Lが照射された部分から順次発せられる反射光Mは観察部30の上面に近接して配された光ガイド21によって受光部22に導かれる。受光部22は入射した反射光Mを検出し、検出した反射光Mの光量に対応した画像信号に変換し、撮影部24に出力する。撮影部24は、照射光Lの走査に同期して所定のサンプリング間隔でサンプリングされ、量子化により画素ごとのデジタル画像データに変換される。撮影した画像は、解析部25に送られる。解析部25では後述するように、細胞の抽出及び、抽出した細胞の中から、白血球細胞及び腫瘍細胞その他の稀少細胞rarecellの選別を行う。[検出方法]図2は、本実施形態にかかる稀少細胞の検出方法を説明するフロー図である。ステップS1の前処理工程第1工程では、被験者から採取した血液に前処理を行う。前処理としては血液に対して、少なくとも赤血球と血小板等を除く処理を行う。これに加えて安定化剤を入れたり、所定の濃度に希釈したりしても良い。例えば採取した血液を安定化剤と混ぜ合わせて、その後に1500rpmで5分間遠心後に、上澄みを取り除いて、残った白血球層バフィーコートを用いる。血液を白血球と赤血球との中間の比重の液体に加えてから遠心分離後に白血球層を含む上澄みを用いる様にしても良い。これにより用いる上澄みから白血球及び稀少細胞が取りこぼれる虞は低くなる。以下、前処理した血液を細胞懸濁液と称する。なお当該細胞懸濁液には少なくとも白血球細胞場合によっては白血球細胞及び稀少細胞が含まれている。ステップS2の展開工程第2工程では、ステップS1で生成した細胞懸濁液を複数の穴が設けられた観察部30に展開する。当該展開工程により観察部30には全ての細胞が概ね単層で、かつ狭い面積で効率よく配置されることになる。展開方法についての詳細は後述する。ステップS3の撮影工程第3工程では、撮影部24により観察部30に展開した細胞主に白血球細胞の撮影を行い、画像データを得る。ステップS4の検出工程第4工程では、ステップS3で得られた画像データに対して解析部25により画像処理を行うことにより、腫瘍細胞その他の稀少細胞の有無あるいはその個数の検出を行う。検出方法の例としては、得られた画像データに対してコントラスト調整、2値化処理、エッジ抽出、を行うことにより複数107~108個の細胞の検出及びその形態情報を得る。形状から特徴の抽出を行い、正常な白血球細胞の形態とは異なる場合には稀少細胞と判断する。このときにステップS2の展開工程では、複数の細胞を重ならないように単層で、かつ狭い面積に効率よく観察部30に配置させている。続くステップS4での検出工程では、全ての細胞に対して正常な白血球細胞であるか、それ以外の稀少細胞であるかを判断することができる。全ての細胞を、撮影を行う高さ方向では細胞同士の重なりが少なく、平面方向では高密度の最密充填に近い状態で充填することにより狭い面積に効率よく配置させているので、大面積の観察部30を必要とせず、結果として検出装置を大型化せずにすむ。[他の検出方法]更に以下に説明する細胞の固定と染色を行うことにより、より正確に細胞を観察することができる。細胞の固定方法としては、例えばホルマリン法、メタノール法などが行われる。細胞の染色方法としては、例えば核内のDNAを染色するDAPI染色やヘキスト染色、細胞種に特異的な抗体を用いる免疫染色が行われる。免疫染色としては、例えば白血球共通抗原CD45、腫瘍マーカーCKサイトケラチンが行われる。これらの固定、染色作業を行う場合はステップS1とステップS2の間でステップS1の2として、ステップS1で得られた沈殿物に対して行う。または、ステップS2とステップS3の間でステップS2の2として、ステップS2で展開した細胞に対して観察部30において行う。[展開方法]細胞懸濁液の観察部30への展開方法としては大別すると2つある。1極少量の細胞懸濁液を所定のピッチで展開する方法と、2所定量の細胞懸濁液を平面方向に広げて薄層に伸ばす方法である。1所定のピッチで展開する方法としては、MWC方式、貫通穴フィルタ方式、がある。MWC方式、貫通穴フィルタ方式についての詳細は後述する。ここでピッチとはそれぞれの隣接する対象物の中心間の平均距離のことであり、例えば後述のウェル、フィルタ孔の中心間の距離である。いずれの方法においても、白血球細胞のサイズ直径5~30μmよりも同等以上のピッチ、例えば0~50μmのピッチで細胞懸濁液の塗布配置を行う。また採取した血液が10mlであれば展開する細胞数は107~108となるので観察部30の面積としては10cm四方32μmピッチで107個の場合~A4判サイズ50μmピッチで5×107個の場合となる。2薄層に伸ばす方法としては、大別するとスピンコート方式及びバーコート方式の二つがある。更にバーコート方式としてはギャップコート方式とワイヤーバー方式に分けられる。スピンコート方式は、スピナーSpinnerと呼ばれる装置により真空吸引等により観察部30を固定し、その上面に細胞懸濁液を滴下した後、高速で一定時間回転させることで観察部30に一定の薄層を得るものである。スピナーの回転数は、細胞懸濁液の濃度粘度にもよるが、100~5000rpmで均一に伸ばすことができる。バーコート方式では、観察部30上に滴下された細胞懸濁液を、観察部30の上面に対して一定のギャップ塗布ギャップをあけたバー状のものをスライドさせるギャップコート方式。または、丸棒にある太さのワイヤーを巻き付けたワイヤーバーを観察部30の上面に接触させた状態でスライドさせるワイヤーバー方式。このようにすることにより、観察部30に一定の膜厚の薄膜を得るものである。ギャップコート方式における塗布ギャップとしては細胞懸濁液に含まれる細胞の最大径の数倍未満が好ましい。本実施形態では対象となる細胞は白血球及び稀少細胞特に腫瘍細胞であり、その細胞の最大径としては20~100μm程度である。塗布ギャップとしてはその数倍の50~300μmとしている。ワイヤーバーに巻き付けるワイヤーの径としては100~数百μmが好ましい。いずれの方法においても、諸条件を適正化することにより、観察部30上において細胞同士が重ならないように、対象となる白血球細胞直径10~30μmの最大径概ね30μmの2倍未満の厚みとした薄膜を得ることができる。[MWCマイクロウェルチャンバー:microwellchamber方式]第1の例図3は、展開方法の一つとしてMWC方式を用いた観察部30の第1の例である。図3aは観察部30の上面図であり、図3bは、図3aの3a枠の拡大図、図3cは図3bの3b枠の拡大図であり、図3dは、図3cの断面図である。これらの図に示すように、MWC方式の観察部30においては多数のウェルweが均等のピッチで平面状に配置されている。図3に示す例においては各々のウェルweは半球状の形状である。ウェルweの上部穴径上面視の直径は、展開する細胞の直径よりも大径にしている。その大きさは白血球細胞wbc及び稀少細胞を1個ずつ入れることができる程度であり好ましくは、白血球細胞その他の細胞の最大径の2倍未満である。例えば深さ中心部の高さは5~30μm、直径上部穴径は10~35μmとしている。隣接するウェルweの間隔は0~20μmとして、その配置のピッチはウェルweの直径よりも大きく10~50μm程度で0.01m2の面積に渡って配置されている。細胞懸濁液を観察部30の上面全面に広げ、自然沈降あるいは微少振動させることにより、細胞懸濁液に含まれる全部の細胞をそれぞれのウェルweに入れることができるMWC方式の観察部30を用いることにより、全部の細胞を細胞同士が重ならないように展開させることが可能となる。第2の例図4は、展開方法の一つとしてMWC方式を用いた観察部30の第2の例である。図4aは観察部30の上面図であり、図4bは、図4aの4a枠の拡大図、図4cは図4bの4b枠の拡大図であり、図4dは、図4cの断面図である。それぞれ図3a~図3dに対応している。図3に示す例と事なり図4に示す例では、それぞれのウェルweは、数十から数百個程度の複数個の細胞を入れることが可能な大きさである。各ウェルweの大きさの例としては、直径上部穴径で数百μmである。観察領域に展開される細胞に対してその最大径の2倍以上の大きさとしている。高さ深さとしては最も深い中心部において細胞の最大径の数倍以下が好ましく、より好ましくは2倍未満である。このように直径に比べて高さが低い扁平形状が、細胞同士を重ならずに展開するためには好ましい。図4の図3c、図3dに示すように、ひとつのウェルweには、十数個の細胞を入れている。ひとつのウェルweに複数個の細胞を入れることにより、デッドスペースが減少するので、図3の第1の例に比べてより高密度で、より狭い面積に展開できるので観察領域を狭くすることができる。なお、図4の各ウェルweへの細胞懸濁液の展開として、インクジェット方式やディスペンサー方式により、各ウェルweの略中心に細胞懸濁液を供給するようにすることが好ましい。これにより、細胞懸濁液を供給した時点で細部を分散して展開することになるので、細胞同士の重なりを早期に防ぐことができる。インクジェット方式としては、サーマルヘッドあるいは圧電ヘッドを用いる方式がある。ディスペンサー方式としてはマイクロピペットやマイクロディスペンサーを用いる方式がある。いずれも液滴の突出口を一定の速度で被塗布物の表面を走査させることにより、所定のピッチで微量の液滴を塗布させるものである。各ウェルweに供給する液滴の液量としては数百nl以下が好ましい。なお図3、図5に示す実施形態においてはウェルwe形状としては上面視で円状のものを示しているが、これに限られず、上面視形状断面形状がハニカム形状の角柱とし、これを平面方向に隙間無く配置させたものであってもよい。例えばNuncライブセルアレイナルジュヌンクインターナショナル株製である。この場合の直径平面方向は、ハニカムに外接する外接円の直径となり、当該直径が細胞の直径よりも大径であればよい。[貫通穴フィルタ方式]図5は、展開方法の一つとして貫通穴フィルタ方式を用いた観察部30の例である。図5aは観察部30の一部拡大図であり、図5bは、図5aのA-A断面図。図5cは、白血球細胞wbcがフィルタの穴hにせき止められている状態を示す図である。図5の示す、貫通穴フィルタ方式を用いた観察部30では、多数の穴hが、図3と同様に所定の孔密度で0.01m2の面積に渡って配置されている。孔密度としては例えば、1×107/cm2~6×108/cm2である。それぞれの穴hは貫通穴であり、穴hの直径は、白血球細胞wbc及び稀少細胞の直径よりも小さく、例えば0.5μmである。なお図5に示す実施形態においてはフィルタの貫通穴を平面方向で均等配置としているが特にこれに限定されず、ランダムな配置であってもよい。例えばニュークリポアNucleporeメンブレンGEヘルスケアジャパン株販売元である。観察部30の外縁は突起壁部eにより囲まれている。細胞懸濁液の中の細胞を展開するには、細胞懸濁液を観察部30の上面に流し込めばよい。細胞懸濁液に含まれる液体及び微少な血小板等の混合物は、穴hから下方に流れ落ちて排出され、穴hよりも大きな細胞のみが、穴hの上流側つまり観察部30の上面フィルタ上に残ることになる図5c。なお、下方へ液体等を排出する際に、処理を促進するために穴hの上流側と下流側で圧力差を設けるようにしてもよい。このような貫通穴フィルタ方式の観察部30を用いることによっても、全部の細胞を細胞同士が重ならないように穴hの配置で展開させることが可能となる。次にMWC方式と貫通穴フィルタ方式を用いた観察部30の実施例について説明する。図6は、MWC方式の観察部30に細胞懸濁液中の細胞を展開沈殿した状態を示した図である。観察部30としてNuncライブセルアレイを用いている。それぞれのウェルweの断面形状はハニカム形状であり、ウェルweの直径外接円の直径は20μmである。観察部30のそれぞれのウェルweには、それぞれ1個ずつの細胞が、細胞同士が重ならずに展開されていることがわかる。図7は、図6と同様にMWC方式の観察部30に細胞懸濁液中の細胞を展開沈殿した状態を示した図である。観察部30としてNuncライブセルアレイを用いている。それぞれのウェルweの断面形状はハニカム形状であり、ウェルweの直径外接円の直径は250μmである。同図においては視野範囲としては略1500μm直径であり、縦横にそれぞれ6個ずつのウェルが配置されており、それぞれのウェルweには、百数十個の細胞が、細胞同士が重ならずに展開されていることがわかる。図8は、貫通穴フィルタ方式の観察部30に細胞懸濁液中の細胞を展開した状態を示した図である。観察部30としてニュークリポアメンブレンのフィルタを用いている。カタログ値としては貫通穴の直径は0.4μm以下である。図8の淡い6箇所の白丸部が細胞を示し、コの字状の引き出し線16.03μmはその内のひとつの細胞の直径を示している。同図から明らかなように観察部30のフィルタ上には、細胞同士が重ならずに展開されていることがわかる。[細胞染色等の実施条件]ステップS2で展開した細胞に対して前述したステップS2の2で観察部30Nuncライブセルアレイまたはニュークリポアメンブレンにおいて細胞の固定と染色を行う。なおこの手順に替えてステップS1の沈殿物に対してステップS1の2で固定と染色以下の1~6を行った後、観察部に展開しても良い。また、観察を容易に行う工夫として、2時間静置による自然乾燥接着を行うようにしてもよい。培養により調整した懸濁液Jurkat細胞105~106cells/ml、MCF-7細胞約102cells/mlを等量混合し、混合した混合液を300g5分間遠心分離した後、上清を廃棄、PBSPhosphateBufferedSaline、例えばインビトロジェンを添加する。1細胞の固定上記により調整したJurkat細胞とMCF-7細胞の混合液を観察部30に滴下し、毛細管現象または吸引を利用して排液した後に、3PFAパラホルムアルデヒド、例えば和光純薬を添加して20分静置して懸濁。2PFAの洗浄除去PBSを添加し、1と同様に排液。3ブロッキング3BSA例えばpierce-PBS滴下、45分静置によりブロッキングを行い、PBSで洗浄除去。4一次抗体反応抗CKマウスConeA45-B/B3、抗CD45ラビットsc-25590抗CK、抗CD45共に例えばASdiagnostikを原液100倍希釈にて45分静置により反応。5二次抗体反応Alexa488標識抗マウスIgG、Alexa555標識抗ラビットIgG共に例えばインビトロジェンを原液1000倍希釈にて45分静置により反応。6核染色DAPI液原液40万倍希釈、例えばインビトロジェンを添加、45分静置により染色。7封入退色防止剤ProLongGold例えばインビトロジェンと共に細胞をカバーガラスにて封入。8CTCカウント蛍光顕微鏡下38HEフィルタAlexa488CKに対応にて緑色の蛍光像を示す細胞をカウント。