"麦芽をパン酵母サッカロマイセスセレビジアSaccharomycescerevisiaeと水性媒体の中で発酵させることにより得られる発酵液に由来する免疫刺激及び転移阻害用の発酵乾燥植物性材料。図3に示すHPLCクロマトグラフィー図に実質的に相当するそれを有する請求項1記載の材料。HPLCによる決定に従い、2,6-ジメトキシ-p-ベンゾキノン含有量が0.12~0.52mg/g乾燥材料であり、そして2-メトキシ-p-ベンゾキノン含有量が0.05~0.28mg/g乾燥材料である請求項1記載の材料。2,6-ジメトキシ-p-ベンゾキノン含有量が0.4mg/g乾燥材料である、請求項3記載の物質。免疫刺激及び転移阻害用の発酵乾燥植物性材料を製造するための方法であって、粉砕麦芽を水性媒体の中でサッカロマイセスセレビジアの存在下で発酵させ、そしてその発酵液を分離し、厳格に濾過し、エバポレーションし、煮沸し、そしてそのまま又は補助乾燥物質の存在下で乾燥することを特徴とする方法。前記発酵を約30°Cの温度で約18時間、連続的に通気及び撹拌しながら実施する、請求項5記載の方法。前記乾燥をマルトデキストリンの存在下で実施する、請求項6記載の方法。麦芽の水性媒体の中でのサッカロマイセスセレビジアの存在下での発酵により得られる発酵液に由来する乾燥材料を活性成分として含む免疫刺激及び転移阻害用医薬製品。麦芽の水性媒体の中でのサッカロマイセスセレビジアの存在下での発酵により得られる発酵液に由来する乾燥材料を含む、哺乳動物用食品サプリメント。60重量の発酵材料及び40重量のマルトデキストリンから成る請求項5記載の方法により得られる乾燥材料を含む請求項9記載の食品サプリメント。麦芽の水性媒体の中でのサッカロマイセスセレビジアの発酵により得られる発酵液に由来する乾燥植物性材料の、免疫刺激及び転移阻害用医薬組成物の製造における利用。麦芽の水性媒体の中でのサッカロマイセスセレビジアの発酵により得られる発酵液に由来する乾燥植物性材料の哺乳動物用の食品サプリメントの製造における利用。以下の実施例は本発明に係る発酵乾燥植物性材料、その製造及びその薬理効果を例示する。実施例1麦芽の実験室スケール発酵33.3gの酵母サッカロマイセスセレビジア及び1000mlの飲料水の懸濁物をフラワー品質に至るまで粉砕した100gの新鮮な麦芽に加えたハンガリー国基準MSZ-081361-80に従い。この混合物を30°Cで18時間シェーカーの中で振盪させた。その間、この発酵液は発泡状となり、そしてそのもとの容積の約3倍にまで達した。発酵の後、この混合物を3000/minで15分遠心分離した。煮沸及び冷却の後、その上清液を凍結乾燥により乾かし、そして得られる凍結乾燥材料を次に使用するまで冷凍庫-10°Cに保存した。得られる凍結乾燥品の2.6DMBQ含有量は0.4mg/g乾燥材料0.04重量であった。実施例2麦芽の大量スケール発酵フラワー品質ハンガリー国基準に従うにまで粉砕した300kgの麦芽及び100kgの酵母を5m3の発酵槽に入れ、そして飲料水を容量が4000lとなるまで加えた。発酵時間は18時間とし、その間連続的な通気0.5lのエアー/発酵液l/分及びゆっくりとした撹拌30回転/分を利用した。発泡を防ぐため、1l/m3のひまわり油をこの混合物に加えた。発酵の後、通気及び撹拌を止め、そして発酵液をスクリューデカンターで、次いでセパレーターで、そして最後に繊維フィルターの付いたフィルタープレスで分離した。補助物質として、10kgの濾過用パーライト/m3を加えた。この発酵液を厳格に濾過し、そしてその厳格さを顕微鏡によりチェックした。濾過した発酵液は細胞を事実上含まず、このことは10回の検査視野当り最大で1個の酵母細胞しか見つからないことを意味する。約1.5重量の乾燥材料を含む得られる発酵液を真空コンデンサーの中で40~50°Cの温度でエバポレーションし、そして真空を破った後、大気圧で約15分煮沸した。その後、この溶液の乾燥材料含有量を決定し、そしてまず熱湯に溶かし、次いで冷却したマルトデキストリンをその溶液の乾燥材料含有量が約30重量となるように加えた。しかる後この溶液を剪断ノズル回転スプレードライヤーの中でスプレー乾燥し、その出口温度は90°Cとした。得られる最終製品粉末は本発明に係る発酵植物性材料60重量及びマルトデキストリン40重量を含んだ。2.6DMBQ含有量は下記の実施例に記載の方法に従うHPLCによる決定に従い、0.4mg/g乾燥材料であった。実施例3本発明に係る材料の特性決定本発明に係る材料を、その2.6DMBQ含有量を決定することにより、及びいわゆるフィンガープリントクロマトグラフィーにより2通りの方法で特性決定した。共にHPLCクロマトグラフィーを使用する。分析は実施例1に記載の通りに製造した材料及び実施例2に記載の通りにして得た材料に対して実施し、そして両方の結果は同じであった。A.ベンゾキノン誘導体の定量及び定性分析サンプルの調製分析の前に、凍結乾燥品中のベンゾキノン濃度を高めることが必要となった。そのため、この凍結乾燥品を蒸留水でそのもとの濃度にまで希釈した1重量の乾燥材料含有量0.5gの凍結乾燥品、50mlの蒸留水。その溶液を3×25mlのクロロホルムで3回抽出した。クロロホルム相に残った最終的な水分を無水硫酸Naで除去した。濾過後、クロロホルム相をエバポレーションし、残りのクロロホルムを5mlの最終容量となるように加えた。このサンプルをHPLC分析の際にインジェクションした。ベンゾキノン誘導体の定性及び定量分析はHPLC法により実施した。HPLC法の詳細利用したHPLC装置はBeckmanモデル114Mポンプ、LaborMimUVMerckHitachiDADmod4500ダイオードアレー検出器、及びWaters740型インテグレーターユニットから成る。測定のためにChromsilC18250×4mm10μlカラムを使用した。UV検出は290nmの周波数で実施し、流速は2ml/minとした。利用する溶出液の組成は下記の通りとした:Na2HPO425mmol、NaH2PO425mmol、Na2EDTA25mmol、NH2OHHCl20mmol、10容量のメタノール、pH=6.05。3種類のベンゾ-及びヒドロキノンを上記の方法により分析した。これらの化合物の保持時間の間には微差があった。溶出液の強度を下げることにより有機相を10にまで、選択性は著しく増大した。保持データーの分析はp-ベンゾキノンが対応のヒドロキノンよりも長い保持時間を示し、そして保持時間がメトキシ基の数で増長することを示した。3つの標準品全ての濃度を0.1mg/mlとした。表2は標準品の保持時間tR及びキャパシティー係数k′データーを示す。これらの測定の狙いは2,6-ジメトキシ-p-ベンゾキノンの検出及び定量規定にあり、従って以下にこの測定のこの部分について詳しく説明する。当該改善方法が2,6-ジメトキシ-p-ベンゾキノンの定量分析に適するかどうかを調べた。使用した検量線を図1に示す。0.99の相関係数をもって、その結果は直線となる。この測定が3回の平行測定を実施したサンプル全てで再現性を有するかもチェックし、そして結果の分散を計算した。表1は6ケ月間サンプルに対して実施した測定の平行結果及びその分散を示す。我々の結果はこの測定方法が2,6-ジメトキシ-p-ベンゾキノンの正確且つ再現性のある測定に適することを示した。図2は上記の通りに調製したクロロホルムサンプルのHPLCクロマトグラフィーを示す。このクロマトグラフィーは2.6-DMBQについて一本のピーク特性のみを示す。このサンプルの2.6-DMBQ含有量はこの基準に基づいて計算した。B.フィンガープリントクロマトグラフィーサンプルの調製96容量のエタノール50mlを5gのスプレー乾燥材料実施例2に記載の通りに調製に加えた。この混合物を50°Cの温度で30分、200/minで振盪した。しかる後、この混合物を濾過し、エバポレーション乾燥し、そして残留材料を10mlのメタノールに溶かした。濾過溶液をカラムにインジェクションした。HPLC法上記のHPLC装置、カラム及び条件をここでも利用したが、ただし溶出液の組成は下記の通りとした:Na2HPO41.25mmol、NaH2PO41.25mmol、Na2EDTA1.25mmol、NH2OHHCl2.50mmol、5容量のメタノール。図3は得られるクロマトグラフィー図を示す。これらの条件下で、2本の特徴的なピークが出現することが示され、一本は約4.7分5にあり、そして他方は5.8分6にあった。7.3分及び7.7分の保持時間において、2本のピーク7,8が接近して存在し、それらは完全に分離できなかった。弱い強度のピークが9.8分に出現し9、それに強いピーク11が約13.1分にて続いた。約15分目に、小さめのピーク12及び別の強いピーク14が18分目にあった。21.8分目にてクロマトグラフィー図は小さめのピーク15を示し、そして31分目前後では複数の物質を含む平らめのピークがあった。C.安定性試験本発明に係る材料の分解を2,6-ジメトキシ-p-ベンゾキノンの濃度の変化を介してチェックした。我々は3通りの温度室温20°C、40°C及び60°Cでの貯蔵実験を実施した。凍結乾燥品約1gを密閉した試験管に保存した。実験期間は8週間とし、別々の温度で保存した3系列全てから採取したサンプルに対して毎週3回の平行測定を行った。ベンゾキノン誘導体の定量分析をHPLCにより実施した。これらの試験は本発明に係る乾燥材料が室温で3年経ても安定であり続けることを示し、即ち、2.6DMBQ含有量は事実上変化しないままであり続けた。同時に、この材料は40°Cでは安定でなく2.6DMBQは週数間で分解した、そして60°Cでは2.6DMBQは数日で急速分解した。2-メトキシ-p-ベンゾキノンの分解も双方の系列の測定で研究した。この化合物は2,6-ジメトキシ-p-ベンゾキノンよりも不安定であり、そしてその結果その存在はサンプルを40°C又は60°Cで1週間保存した後に示されなかった。室温では、この化合物の濃度も一定のままであり続けた。実施例4効果についての試験実施例1に記載の通りにして調製した凍結乾燥品及び実施例2に記載の通りにして調製したスプレー乾燥材料の双方を結果について試験した。0.4mg/g乾燥材料の2.6DMBQ含有量及び図2に示す通りのHPLC曲線を有する標準化乾燥材料を使用した。双方の材料は同じ結果を示した。従って、本発明に係る材料は以降、単純に凍結乾燥品と呼ぶ。この凍結乾燥品についての生物学的及び毒素学的試験の結果を以下に、免疫再構築並びに腫瘍増殖及び転移阻害効果を特に強調しながら説明する。I.腫瘍増殖及び転移阻害効果invivo試験この試験のため、マウス又はラットの中で増殖中の以下の注入可能な腫瘍タイプを利用した:ルイス肺癌腫マウス肺癌の高度転移形成変異体3LL-HH、B16マウス黒色腫及びHCR-25ヒト結腸癌腫異種移植片。3LL-HHLLT-HH及びB16腫瘍をC57B1/6純系マウスの中に維持した。HCR-25異種移植片を胸腺摘出術及び完全身体照射により予め免疫抑制したCBA/CAマウスに注入した。3LL-HH及びHCR-25腫瘍の場合、腫瘍細胞を脾臓に移植し、B16黒色腫の場合は左下肢の筋肉に移植した。HCR-25腫瘍の注入された動物の処理及びコントロールグループも腫瘍移植の21日後に脾臓摘出術にかけた。本発明に係る凍結乾燥品による処理を腫瘍の注入の24時間後に開始した。3g/体重kgの毎回の用量を胃プローブにより0.6g/mlの水性懸濁物の形態で経口投与した。試験は3LL-HH腫瘍の場合は移植の14日後、B16腫瘍の場合は移植の21日後、そしてHCR-25腫瘍の場合は移植の51日後に、動物を麻酔にかけて死に至るまで出血させることにより終了した。表3,4及び5にこの試験の結果をまとめる。上記の結果は本発明に係る凍結乾燥品による処理が、3LL-HH腫瘍を脾臓に注入すると、肺転移の数を有意に71減少させることを示した表3。HCR-25ヒト結腸癌腫の場合、50日間の処理は腫瘍を有する脾臓の重量及び肝転移数を減少させた。コントロールグループと比較した転移数は脾臓摘出及び脾臓摘出なしグループの双方で約50であった表4。筋肉にB16黒色腫が注入された場合、筋肉中で増殖する腫瘍の重量は処理の効果として変化しなかったが、肺転移数は極めて顕著に減少し、コントロールグループと比べ85減少した表5。II.Invitro試験上記の試験が本発明に係る凍結乾燥品が悪性腫瘍の転移を著しく減少できることを明確に示したため、転移形成の様々な段階に対するこの製品の効果も調べた。転移の形成は複数の段階から成り、それにおいては一次腫瘍の細胞の増殖及びアポプト-シス活性の他に、腫瘍細胞の接着能力及び生体の腫瘍細胞に対する防御メカニズムが役割を果たしている。invitro試験において、細胞増殖並びにアポプト-シス及び接着に対する当該凍結乾燥品の効果を研究した。invivo試験の大半はB16マウス黒色腫細胞に対して実施されているため、第一段階においてこの腫瘍を凍結乾燥品の試験のために用いた。1.接着力試験腫瘍細胞の接着力を96穴マイクロプレートで試験した。凍結乾燥品の用量は300,3000及び30000μg/mlとした。RPMI培地を血清の非存在下及び10のFCSの存在下の双方で使用した。評価はSRBアッセイに基づく比色方法により実施したMossmannTJImmunolNeth6555631983。この試験は培養物の総タンパク質含有物のスルホローダミンB発色を基礎とし、吸収は光度計で570nmで測定した。図4は2回の瞬間しか示さないが、凍結乾燥品の効果が適切に表わされている。もし凍結乾燥品の用量が3000μg/ml又はその10倍高いなら、それは血清の存在下及び非存在下の双方で腫瘍細胞の接着力を劇的に低下させた。もし用量が300μg/mlなら、かかる効果は観察できなかった。2.増殖試験この試験において腫瘍細胞を処理の24時間前に96穴マイクロプレートに入れた。適当な用量の凍結乾燥品による処理の後、細胞に対する増殖活性を処理の24,48及び72時間後にSRBアッセイによっても試験した。反復試験の結果は900~15,000μg/mlの範囲における処理の効果として、腫瘍細胞が単層の表層に移動しトリパンブルー色素排除法により示される、そして死ぬことを示したKaltenbachJPら、ExpCellRes15112117図5。ヒトメラニン欠乏性黒色腫A2058腫瘍細胞-TodaroGJらProcNatlAcadSciUSA7752585262に対する我々の試験はマウスメラニン性黒色腫に対するものと似た結果を示した図6。この腫瘍の場合、SRBアッセイと平行して、細胞の代謝活性を示すMTTアッセイも実施したColeSPCCancerChemotherPharmacol17259263。この試験は代謝的に活性な細胞がテトラソリウム塩を主にそのデヒドロゲナーゼ活性を介して有色なホルマザン生成物へと変換する現象に基づく。活性に比例する発色反応は570nmにて光度計により測定でき、MTTアッセイは腫瘍細胞の機能活性が用量が300μg/mlのときでさえも低下することを明示した図4。細胞が表層に移動する場合のアポプト-シスの原因は不明であるため、完全な細胞集団のアポプト-シス活性をフローサイトメトリーFACS分析により試験した図7。図7が示すように、腫瘍細胞は用量に依存して、異常な程度にアポプト-シスとなっていた。III.免疫反応に対する効果の試験本発明に係る凍結乾燥品の効果を2通りのモデルで試験した。一連の試験において、凍結乾燥品で処理した動物の脾臓から獲得した単核細胞の出芽形質転換blasttransformationの可能性を試験し、一方で、同種移植皮膚モデルでは、マウスの背領域に移植した皮膚の総結合を調べた。I.T-リンパ球の出芽形質転換の試験本発明に係る凍結乾燥品による処理は免疫反応において重要な役割を果たすT-リンパ球の出芽形質転換を著しく高める。これは下記の実験により示される。C57BI10マウスを6週間にわたり毎週5回、胃プローブにより本発明に係る凍結乾燥品で3g/kgの用量0.6g/mlの水性懸濁物で経口投与により処理した。処理の完了後、動物の脾臓からの灌流により獲得したリンパ球を1μg/mlのConAで処理した細胞培養物に移した。48時間後、DNS合成を行っている細胞を0.4μCiの3Hチミジンで標識した。標識の程度は液体シンチレーションカウンターBeckmanで規定した。表6に示す通り、ConAによる処理は、コントロールと比べ、3H-TdRの組込み、即ち出芽形質転換を著しく高めた。2.同種皮膚移植モデルにおける免疫刺激効果の試験欠陥免疫反応の回復の例示の最良のモデルは胸腺摘出術胸腺の外科的手術により部分免疫欠陥にされたマウスにおける同種皮膚移植試験である。C57BI10及びB10LPマウスストックはH-3座でのみ相違し、従って一方のストックの構成員から他方へと移植された皮膚は7日以内では拒絶されず、約3週間後にだけ拒絶される。受容体が胸腺摘出を受けていると、拒絶は平均して50日後に起こる。髄質のリンパ球の成熟及び分化を発達させる物質、例えば胸腺ホルモンは全て移植した皮膚の拒絶にかかる時間を短くするJImmunpharmacology76778。同じ効果が本発明に係る凍結乾燥品による処理を利用した場合の我々の試験において観察された。C57BI10マウスを受容体として、そしてB10LPマウスを供与体として用いた。受容マウスを胸腺摘出し、そして7週間後に皮膚移植した。週当り5回の30mg/kgの凍結乾燥品による経口処理を胸腺摘出の1週間後に開始した。処理は皮膚移植の70日後に終了させた。皮膚の究極的な拒絶を毎日観察した。表7は非胸腺摘出マウスにおける拒絶時間が雄で21日、雌で28.7日であることを示した。胸腺摘出マウスでの拒絶時間はそれぞれ52.4及び41.6日まで延長した。本発明に係る凍結乾燥品による処理は胸腺摘出し、且つ処理したマウスの皮膚移植片グラフトの寿命を有意に短くした。このことは、胸腺摘出術により生ずる免疫欠陥がこの処理の結果有意に軽減されることを示し、即ち当該凍結乾燥品は免疫刺激効果を有することを意味する。本発明に係る凍結乾燥品によるinvivo及びinvitro試験はこの製品がいくつかの動物試験モデルにおいて有意義な抗転移効果を有することを示した。この効果はおそらくはinvivo及びinvitro試験の双方で観察される免疫刺激効果につながるか、転移の数の減少は抗増殖アポプト-シス誘導効果、接着に対するこの材料の効果、及びフリーラジカルの構築を及ぼす効果によっても影響される可能性がある。IV.ラジカル結合活性の試験ベンゾキノンがフリーラジカルの形成に対する周知の効果を有するため、本発明に係る凍結乾燥品のラジカル結合活性も試験した。スーパーオキサイドSSA及びヒドロキシル基結合OH-SAの双方を電子スピン共鳴法により測定した。この凍結乾燥品は有意義なSSA活性を有し、1mgのクリーンラジカル結合活性は5.64μgのスーパーオキサイドジスムターゼSOD活性に相当する。この凍結乾燥品はOH-SA活性は有さないが、過酸化水素/Feヒドロキシル基形成系は崩壊し、従ってそれはいわゆる非錯形成活性を有すると考えられうる。V.毒性試験亜急性77日間の毒性試験をRegistryofIndustrialToxicologyAnimaldataの推奨に従いF344ラット及びC57B10マウスに対して実施した。これらの動物を毎日3g/kg0.6g/mlの水性懸濁物の用量で処理した。処理の間、動物の体重変化、究極的な病理生理学的変化、動物の自発的死を観察した。試験を終了したら、心臓、肺、胸腺、脾臓、肝臓、腎臓及び精巣の重量を測定し、そしてRITAに規定の24の器官を病理検査した。自発的死は観察されず、動物の体重はコントロールグループのそれと似たように変化した。試験が終了時に、様々な器官の重量はコントロールと比べて変化していなかった。処理動物の病理進行の間にこの凍結乾燥品を原因とする変化は観察されなかった。上記の結果は本発明に係る発酵植物性材料が毒性ではなく、そしてその免疫刺激効果を理由にそれは免疫系が損傷を受けている全ての状態で有利である。その上記の生物学的特性を理由に、それは悪性腫瘍の医学的治療、主に転移の阻害における補助的な用途を有しうる。"