"ヒトDR4またはDR5に特異的に結合し、そしてこれらをアゴナイズする、高アフィニティFc-ポリペプチド。前記Fc-ポリペプチドが抗体である、請求項1のFc-ポリペプチド。前記抗体が抗DR5抗体である、請求項2のFc-ポリペプチド。前記抗体が完全ヒトIgG1抗体である、請求項3のFc-ポリペプチド。前記抗体が脱フコシル化されている、請求項4のFc-ポリペプチド。前記抗体がEUインデックスにしたがって番号付けされたFcの332位のアミノ酸を含み、前記アミノ酸がヒトFCGR3Aへの前記Fc-ポリペプチドのアフィニティを増加させる、請求項4のFc-ポリペプチド。ヒト患者において癌増殖を阻害する方法であって、前記患者に療法的有効量の請求項4の高アフィニティFc-ポリペプチドを投与する工程を含む、前記方法。前記癌が非小細胞肺癌NSCLCである、請求項7の方法。前記高アフィニティFc-ポリペプチドを単独療法として投与する、請求項8の方法。前記ヒト患者がFCGR3AのアレルF158に関してヘテロ接合性またはホモ接合性である、請求項8の方法。ヒト癌細胞の増殖を阻害する方法であって、前記細胞に有効量の請求項4の高アフィニティFc-ポリペプチドを投与する工程を含む、前記方法。癌細胞が非小細胞肺癌である、請求項11の方法。ヒト癌細胞の増殖を阻害する方法であって、前記細胞に有効量の請求項5の高アフィニティFc-ポリペプチドを投与する工程を含む、前記方法。癌細胞が非小細胞肺癌である、請求項13の方法。ヒト癌細胞の増殖を阻害する方法であって、前記細胞に有効量の請求項6の高アフィニティFc-ポリペプチドを投与する工程を含む、前記方法。癌細胞が非小細胞肺癌である、請求項15の方法。ヒトDR4またはDR5に特異的に結合し、そしてこれらをアゴナイズする高アフィニティFc-ポリペプチドで治療するための癌患者を選択するための方法であって、前記患者がFCGR3Aの少なくとも1つのF158アレルを有する、前記方法。前記患者が2つのF158FCGR3Aアレルを有する、請求項17の方法。前記患者が非小細胞肺癌を有する、請求項18の方法。ヒトゲノムDNA試料において、F158VFCGR3A多型に関して遺伝子型決定する方法であって、配列番号1の順方向プライマーおよび配列番号2の逆方向プライマーを用いて、前記ゲノムDNA試料において、前記FCGR3A多型を含む領域を増幅し、そして配列番号3および配列番号4のプローブを用いて、前記F158V多型のホモ接合性またはヘテロ接合性に関して前記DNA試料を遺伝子型決定する工程を含む、前記方法。当該技術分野に必要なものは、DRアゴニストの臨床的利点をさらに改善する手段である。00041つの側面において、本発明は、ヒトDR4および/またはDR5を発現する細胞に特異的に結合し、そしてアポトーシス誘導感受性細胞、例えばヒト癌細胞またはウイルス感染細胞においてアポトーシスを誘導する、アゴニスト性高アフィニティFc-ポリペプチド、例えば抗体またはペプチボディに関する。本発明のFc-ポリペプチドのFcは、天然Fcに比較して、FCGR3A受容体に対して増加したアフィニティを有する。いくつかの態様において、Fc-ポリペプチドは、完全ヒトIgG1抗体である。いくつかの態様において、Fcは332位KabatのEUインデックスによるで脱フコシル化されるかまたは修飾されている。0005本発明にはまた、本発明の高アフィニティFc-ポリペプチドの有効量を投与することによって、invitroまたはinvivoでヒト癌細胞の増殖を阻害する方法も含まれる。いくつかの態様において、高アフィニティFc-ポリペプチドを、癌を含むヒト患者に投与する。いくつかの態様において、癌は非小細胞肺癌である。いくつかの態様において、Fc-ポリペプチドを単独療法として投与し、一方、他の態様において、パクリタキセルと組み合わせて、カルボプラチンなどの1またはそれより多い化学療法剤とともに投与する。さらなる側面において、本発明は、本発明の高アフィニティFc-ポリペプチドでの治療から臨床的利点を得る統計的可能性が増加したヒト癌患者を選択する手段に関する。選択される患者はFCGR3AF158アレルに関してヘテロ接合性またはホモ接合性である。ヒトゲノムDNA試料において、FCGR3A多型を遺伝子型決定するための組成物および方法もまた提供する。0006本発明は、部分的に、ヒト細胞上のDR5および/またはDR4に特異的に結合し、そしてDR5および/またはDR4仲介性アポトーシス誘導に感受性である細胞においてアポトーシスを誘導する点で、DR5またはDR4をアゴナイズする、高アフィニティFc-ポリペプチドに関する。いくつかの高アフィニティ抗体がADCC抗体依存性細胞仲介性細胞傷害を改善すると報告されてきている。しかし驚くべきことに、本発明のアポトーシス性Fc-ポリペプチドの抗癌活性もまた増強される。0007セクションの見出しは、本明細書において、構成目的のみのために用いられ、そして記載する主題を限定すると解釈してはならない。本明細書に引用するすべての特許、特許出願、および他の文書の開示は、その全体が、本明細書に明確に援用される。特定の定義が提供されない限り、本明細書に記載する分析化学、合成有機化学、ならびに医学的および薬学的化学と関連して利用される術語体系、ならびにこうした化学の実験法および技術は、当該技術分野において周知であり、そして一般的に用いられるものである。標準的技術を化学合成、化学分析、薬学的調製、配合、および送達、ならびに患者の治療に用いてもよい。定義0008本明細書全体で用いる用語は、特別な例で別に限定されない限り、以下のように定義される。0009Fcとの関連において、用語脱フコシル化または脱フコシル化されたは、EUインデックスKabatら,SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版PublicHealthService,NationalInstitutesofHealth,メリーランド州ベセスダ1991にしたがって番号付けされたヒトIgG1Fcの残基297、あるいは非IgG1または非ヒトIgG1免疫グロブリンにおける対応する残基に直接または間接的に共有結合したフコースが、実質的に欠如していることを指す。したがって、複数の脱フコシル化Fc-ポリペプチドを含む組成物において、少なくとも70のFc-ポリペプチドが、Fcの残基297で、直接または間接的に例えば介在する糖を通じてフコシル化されず、そしていくつかの態様において、少なくとも80、85、90、95、または99が、Fcの残基297で、直接または間接的にフコシル化されないであろう。0010Fc-ポリペプチドとの関連において、用語アゴニストまたはアゴニスト性またはアゴナイズするは、細胞表面上にDR4および/またはDR5を発現する、ヒト癌細胞などのアポトーシス感受性哺乳動物癌細胞における、DR4および/またはDR5仲介性のアポトーシス誘導を指す。例示的な感受性ヒト癌細胞は、Colo205ATCCCCL-222である。DR5アゴニストはDR5を通じてアポトーシスを誘導し、DR4アゴニストはDR4を通じてアポトーシスを誘導し、二重DR5/DR4アゴニスト例えばTRAILリガンドまたは二重特異性アゴニスト性抗DR4/DR5抗体は、DR4および/またはDR5の両方を通じてアポトーシスを誘導可能である。アポトーシス誘導が、DR5および/またはDR4を通じて仲介されるかどうかは、当該技術分野に知られる方法および試薬を用いて決定可能である。したがって、例えば、アポトーシス感受性DR特異的細胞株が当該技術分野に知られる。例示的なDR5/DR4-細胞株はWM35ATCCCRL-2807である。例示的なDR5-/DR4細胞株はST486ATCCCRL1647である。0011用語抗体には、任意のアイソタイプまたはサブクラスのグリコシル化および非グリコシル化免疫グロブリン両方の単離型への言及が含まれ、これには:1ヒト例えばCDR移植、ヒト化、およびキメラ抗体、2単一特異性例えばDR5またはDR4または多重特異性抗体例えばDR4およびDR5、および3モノクローナルまたはポリクローナル抗体の任意の組み合わせが含まれ、こうした抗体が、完全にまたは部分的に、免疫を通じて、組換え技術を通じて、invitro合成手段によって、または別の方式で、産生されるかどうかには関わりがない。したがって、用語抗体には、組換え手段によって調製されるか、発現されるか、生成されるか、または単離される抗体、例えばaヒト免疫グロブリン遺伝子に関してトランスジェニックである動物例えばマウス、または該動物から調製されたハイブリドーマから単離される抗体、b抗体を発現するようにトランスフェクションされた宿主細胞から例えばトランスフェクトーマから単離される抗体、c組換えコンビナトリアル抗体ライブラリーから単離される抗体、およびd免疫グロブリン遺伝子配列を他のDNA配列にスプライシングすることを含む他の手段いずれかによって、調製されるか、発現されるか、生成されるか、または単離される抗体が含まれる。抗体はまた、抗体断片、例えばFab、Fab’2、scFv一本鎖Fv、および誘導体、例えばディアボディも含む。いくつかの態様において、本発明の抗体は、モノクローナル抗体、例えばヒト化または完全ヒトモノクローナル抗体である。典型的には、本発明の抗体は、IgG1またはIgG2サブクラス抗体であろう。抗体は、約10nM、5nM、1nM、または500pM未満のKdで、そのターゲットに結合可能である。0012用語誘導または誘導体は、半減期、生物学的利用能、免疫原性、可溶性、または過敏特性などの性質を修飾する一方、その療法的利点を保持するように、直接または間接的に共有結合することによる、Fc-ポリペプチド例えば抗体および/または化学療法剤の修飾を指す。誘導体は、グリコシル化、PEG化、および脂質化によって、またはタンパク質コンジュゲート化によって、作製可能である。例示的な誘導化剤には、直鎖ポリマー例えばポリエチレングリコールPEG、ポリリジン、デキストラン等;分枝鎖ポリマー例えば、1981年9月15日発行のDenkenwalterらに対する米国特許第4,289,872号;1993年7月20日発行のTamに対する米国特許第5,229,490号;1993年10月28日に公表されたFrechetらによるWO93/21259;脂質またはリポソーム;コレステロール基例えばステロイド;炭水化物またはオリゴ糖が含まれる。0013用語DR4またはデスレセプター4またはTRAIL-R1またはTR-1は、米国特許第6,342,363号本明細書に援用されるの配列番号2に示される468アミノ酸、ならびに関連する天然すなわち野生型ヒトポリペプチド、例えば該ポリペプチドのアレル変異体、スプライス変異体、および成熟型すなわちリーダー配列を欠くを指す。0014用語DR5またはTRAIL-RまたはApo-2またはTR-2またはTRAIL受容体2は、米国特許第7,528,239号の配列番号2に示される440アミノ酸ポリペプチド、ならびに該ポリペプチドの成熟型すなわちリーダー配列を欠くを含む、関連する天然すなわち野生型ヒトポリペプチド、例えばアレル変異体またはスプライス変異体、例えば限定されるわけではないが、米国特許第6,342,369号の配列番号1、および米国特許第6,743,625号の配列番号2各特許は配列番号に援用されるに示される411アミノ酸アイソフォームを指す。0015用語DR5アゴニストは、発現している細胞上の天然ヒトDR5に特異的に結合し、そしてこの受容体を介して、アポトーシスカスケードを誘発し、少なくとも1つのDR5アゴニスト感受性細胞株限定されるわけではないが、ヒト結腸癌細胞株Colo205、またはヒト肺癌細胞株H2122を含むで測定した際、細胞死すなわちアポトーシスの統計的に有意な増加を生じる分子を指す。用語DR4アゴニストは、発現している細胞上の天然ヒトDR4に特異的に結合し、そしてこの受容体を介して、アポトーシスカスケードを誘発し、少なくとも1つのDR4アゴニスト感受性細胞株限定されるわけではないが、ヒト結腸癌細胞株Colo205、またはヒト肺癌細胞株H2122を含むで測定した際、細胞死すなわちアポトーシスの統計的に有意な増加を生じる分子を指す。特定の態様において、DR5および/またはDR4アゴニストは、Fc-ポリペプチド、例えば抗体、ペプチボディ、ヒトTRAILどちらも本明細書に援用される米国特許第6,284,236号;第6,998,116号を参照されたい、Fc-ヒトTRAILリガンド融合、あるいは約1000ダルトン未満の非タンパク質性非ポリマー性分子小分子、例えばUSSN11/866,162SrivastavaらのDR5小分子アゴニストまたはDR5小分子に共有結合したFcのようなものである。0016用語有効量または療法的有効量は、DR5および/またはDR4感受性癌を、単独ですなわち単独療法としてまたは化学療法剤と組み合わせてすなわち併用療法として治療するため、exvivoでヒト患者由来の癌細胞と接触させることによってまたはinvivoでヒト患者への投与によって投与した際に、癌進行の統計的に有意な阻害を生じる、Fc-ポリペプチドの量および/または濃度を指す。本明細書において、用語治療、あるいは癌を阻害する、癌を阻害しているまたは癌の阻害は:限定されるわけではないが、固形腫瘍に関する反応評価基準RECISTなどの標準的基準によって測定した際の、腫瘍増殖速度の統計的に有意な減少、腫瘍増殖の休止、または腫瘍のサイズ、質量、代謝活性、もしくは体積の減少、あるいは無進行生存PFSまたは全生存OSの統計的に有意な増加、の少なくとも1つを指す。0017Fc-ポリペプチドとの関連において、用語Fcは、ヒトFCGR3Aに特異的に結合する免疫グロブリンのFc結晶化可能断片を指す。Fcは、一般的に、天然存在天然ヒトIgG1Fcであるが、FCGR3Aに特異的に結合するIgG1Fcの一部切除truncated型一部切除Fc、あるいはアミノ酸残基の置換、欠失、または付加によって作製される天然存在IgG1Fcの変異体Fc変異体であって、FCGR3Aに特異的に結合する前記変異体もまた含む。一部切除Fcは、全長Fcの少なくとも80、85、90、95、96、97、98、または99であってもよい。一部切除FcまたはFc変異体の置換、欠失、または付加の数は、最大、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、または20であってもよい。一部切除FcまたはFc変異体のFCGR3Aへの特異的結合は、一般的に、天然Fc特異的結合の少なくとも80、85、90または95である。0018用語FCGR3AまたはCD16aFcγ受容体IIIAまたはFcγRIIIAは、同じ指定のヒトFc受容体を意味する。F158Vと称されるヒトIgG受容体FcγRIIIACD16aの二アレル多型は、NationalCenterforBiotechnologyInformationNCBI一塩基多型SNPデータベース、クラスターレポートrs396991で同定される遺伝子座で、アミノ酸バリンVまたはフェニルアラニンFの存在によって区別可能である。これらの2つのアレル型は、一般的に、文献において、そして本明細書において、ヒトFcγRIIIAのrs396991SNP遺伝子座で残基バリンを有する多型に関しては、バリン158またはV158として、そしてヒトFcγRIIIAのrs396991SNP遺伝子座で残基フェニルアラニンを有する多型に関しては、フェニルアラニン158またはF158として、称される。Leppers-vandeStraatら,J.ImmunologicalMethods,242:127-1322000、ならびにRavetchおよびPerussia,J.Exp.Med.,170:481-4971989もまた参照されたい。0019用語Fc-ポリペプチドは、Fc、ならびにDR4および/またはDR5に特異的に結合する少なくとも1つのポリペプチド間の共有結合産物を指す。Fcおよびポリペプチドの融合は、直接共有結合ペプチド結合を介するまたは間接的共有結合人工化学的リンカーを介するを介してであってもよい。典型的には、Fc-ポリペプチドはアゴニスト性Fc-ポリペプチドである。例示的なFc-ポリペプチドには、抗体、ペプチボディ本明細書に援用されるWO2000/24782、ターゲティングペプチド例えば、本明細書に援用されるUS7,521,425を参照されたいまたは細胞毒にコンジュゲート化された抗体、あるいはFc-ヒトTRAILリガンド融合体が含まれる。いくつかの態様において、Fc-ポリペプチドは二価である。いくつかの態様において、Fc-ポリペプチドは二価および二重特異性である。いくつかの態様において、Fc-ポリペプチドは2つのIgG1Fcを含むホモ二量体であり、そしていくつかの態様において、Fc-ポリペプチドは1つのIgG1Fcおよび1つの非IgG1Fcを含むヘテロ二量体である。いくつかの態様において、ホモ二量体およびヘテロ二量体は、完全ヒト抗体である。0020Fc-ポリペプチドに関連した用語高アフィニティは:同一であるが脱フコシル化されたヒトFc-ポリペプチド例えば抗体、またはイソロイシンからグルタミン酸置換のように、残基332KabatのEUインデックスによる;米国特許第7,317,091号および/または米国特許第7,662,925号を参照されたいでFCGR3Aアフィニティを増加させる修飾を含む同一ヒトFcポリペプチド、の少なくとも1つと少なくとも同じアフィニティで、F158アレルに関してホモ接合性である天然細胞例えばヒトNK細胞によって発現されるヒトFCGR3Aに特異的に結合するように、Fcが修飾されるかまたは構築されることを意味する。一般的に、高アフィニティFc-ポリペプチドは、天然フコシル化Fc-ポリペプチドがV158アレルに関してホモ接合性である天然細胞によって発現されるヒトFCGR3Aに特異的に結合するのと少なくとも同じアフィニティで、ヒトFCGR3Aに特異的に結合する。結合アフィニティを測定する手段は、当該技術分野に知られ、そしてこれには、限定されるわけではないが、AlphaLISATMPerkinElmer、米国マサチューセッツ州ウォルサムELISAアッセイなどの競合アッセイが含まれる。Poulsen,J.ら2007.J.BiomolScreen.12:240;Cauchon,E.ら2009.AnalBiochemを参照されたい。0021用語宿主細胞は、核酸、例えば本発明の核酸、を発現するために使用可能な細胞を指す。宿主細胞は、原核生物、例えば大腸菌E.coliであってもよいし、または真核生物、例えば単細胞真核生物例えば酵母yeastまたは他の真菌、植物細胞例えばタバコtobaccoまたはトマトtomato植物細胞、動物細胞例えばヒト細胞、サル細胞、ハムスター細胞、ラット細胞、マウス細胞、または昆虫細胞またはハイブリドーマであってもよい。宿主細胞の例には、チャイニーズハムスター卵巣CHO細胞またはVeggieCHOなどのその誘導体および血清不含培地中で増殖する関連細胞株Rasmussenら,Cytotechnology28:31,1998を参照されたいまたはDHFRが欠損しているCHO株DX-B11Urlaubら,Proc.Natl.Acad.Sci.USA77:4216-20,1980を参照されたいが含まれる。0022用語ヒト抗体または完全ヒト抗体は、ヒト抗体が、ヒトに投与された際に、それ自体に対する免疫原性反応を実質的にまったく誘発せず、そして好ましくは検出可能な免疫原性反応をまったく誘発しないように、定常領域およびフレームワークの両方が、完全にまたは実質的にヒト配列からなる抗体を指す。したがって、定義される用語は、例えば、改善された配合または製造可能性を可能にする、天然ヒト抗体配列に比較して作製される、重要でないアミノ酸修飾しばしば1、2、3、または4より多くないアミノ酸置換、付加、または欠失例えば不対システイン残基の除去を意図する。0023用語ヒト化抗体は、実質的に定常領域のすべてがヒト免疫グロブリン由来であるか、またはこれに対応するが、1またはそれより多い可変領域のすべてまたは一部が、別の種、例えばマウス由来である単離抗体を指す。0024用語単離されたは:1発現された状態で混合されている細胞構成要素から、存在する主な種であるように実質的に精製される例えば少なくとも60、70、80、または90か、2天然には連結されていないポリペプチドまたはポリヌクレオチドまたは他の部分にコンジュゲート化されるか、3より大きいポリペプチドまたはポリヌクレオチド配列の一部として、天然には存在しないか、4よく定義された組成物において、異なる特異性を有する他の化学的または生物学的剤と組み合わされるか、あるいは5そうでなければ天然には見られない人為的操作配列を含む化合物を指す。0025用語モノクローナル抗体またはモノクローナル抗体組成物は、典型的には同じ核酸分子によってコードされる、単一分子組成の単離抗体分子例えば翻訳後修飾、例えばグリコシル化および/またはシグナル配列切断から生じる、重要でない不均一性にもかかわらずの調製物を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対する単一の結合特異性およびアフィニティを示す。特定の態様において、モノクローナル抗体は、単一ハイブリドーマまたは他の細胞株例えばトランスフェクトーマによって、あるいはトランスジェニック哺乳動物によって、産生される。用語モノクローナルは、抗体を作製するための任意の特定の方法には限定されない。0026用語天然存在または天然は、核酸分子、ポリペプチド、宿主細胞等の生物学的物質と関連して用いた場合、天然に見られ、そして人間によって修飾されていないものを指す。0027用語核酸およびポリヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチドポリマー、あるいはそのキメラを指し、そして別に限定されない限り、参照配列の相補鎖を含む。核酸配列は、制御配列が該核酸配列の発現例えば発現のレベル、タイミング、または位置に影響を及ぼすならば、該制御配列に機能可能であるように連結されている。制御配列は、第二の核酸の発現例えば発現のレベル、タイミング、または位置に影響を及ぼす核酸である。したがって、制御配列および第二の配列は、制御配列および第二の配列間の機能的連結が、第二の配列に対応するDNA配列の転写を制御配列が開始し、そして仲介するようなものである場合、機能可能であるように連結されている。制御配列の例には、プロモーター、エンハンサーおよび他の発現調節要素例えばポリアデニル化シグナルが含まれる。制御配列のさらなる例は、例えばGoeddel,1990,GeneExpressionTechnology:MethodsinEnzymology185,AcademicPress,カリフォルニア州サンディエゴおよびBaronら,NucleicAcidsRes.23:3605-3606,1995に記載される。0028用語ペプチド、ポリペプチドおよびタンパク質は、本明細書全体で交換可能に用いられ、そしてペプチド結合によって互いに連結された2またはそれより多いアミノ酸残基を含む分子を指す。用語ポリペプチド、ペプチドおよびタンパク質はまた、限定されるわけではないが、グリコシル化、脂質付着、硫酸化、グルタミン酸残基のガンマ-カルボキシル化、ヒドロキシル化およびADP-リボシル化を含む修飾も含む。0029用語ペプチボディは、指定されたターゲットに特異的に結合し、そしてペプチドがヒトIgG1Fcなどの抗体FcのNまたはC末端に共有結合する例えばペプチド結合を介してペプチドを指す。ペプチボディの産生は、一般的に、本明細書に援用される2000年5月4日公表のPCT公報WO00/24782に記載される。例示的なペプチドは、本明細書に示す方法いずれかによって生成されてもよく、例えばペプチドライブラリー例えばファージディスプレイライブラリー中に所持されても、化学合成によって生成されても、タンパク質消化によって得られても、または組換えDNA技術を用いて生成されてもよい。0030用語ペプチボディ断片または抗体断片は、完全な損なわれていないintactペプチボディまたは抗体より小さいものを含むが、そのターゲット分子すなわちヒトDR5またはヒトDR4に特異的に結合する能力を保持するペプチボディまたは抗体のペプチドを指す。例示的な断片には、FabまたはFab’2断片が含まれる。こうした断片は、例えば、アミノ末端での一部切除、カルボキシ末端での一部切除、および/またはアミノ酸配列からの残基単数または複数の内部欠失から生じることも可能である。断片は、選択的RNAスプライシングから、あるいはinvivoまたはinvitroプロテアーゼ活性から生じてもよい。こうした断片はまた、化学ペプチド合成法によって、あるいは抗体またはペプチボディをコードするポリヌクレオチドを修飾することによっても構築可能である。0031用語ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチドおよび核酸は、本明細書全体で交換可能に用いられ、そしてこれには、DNA分子例えばcDNAまたはゲノムDNA、RNA分子例えばmRNA、およびそのハイブリッドが含まれる。核酸分子は、一本鎖または二本鎖であってもよい。0032用語特異的に結合するは、本発明のFc-ポリペプチドが、特定の結合条件下で、十分な統計的サイズのランダムペプチドまたはポリペプチドのコレクションに対する同じ分子の平均アフィニティよりも、そのアフィニティが少なくとも10倍大きいが、場合によって50倍大きい、100、250または500倍大きい、あるいはさらに少なくとも1000倍大きいように、ターゲット例えばヒトDR5、ヒトDR4、またはヒトFCGR3Aに結合する能力を指す。Fc-ポリペプチドは、単一ターゲット分子に排他的に結合する必要はなく、ターゲットおよび非ターゲット例えばパラログまたはオルソログ間の構造的コンホメーションの類似性により、非ターゲット分子に特異的に結合してもよい。当業者は、異なる種の動物における同じ機能を有する分子すなわちオルソログ、またはターゲット分子と実質的に類似のエピトープを有する分子例えばパラログへの特異的結合が、ユニークな非ターゲット例えばランダムポリペプチドの統計的に有効な提示に比較して決定される用語特異的結合の範囲内に含まれることを認識するであろう。したがって、本発明の抗DR5Fc-ポリペプチドは、ターゲット分子の1より多くの別個の種より多くに特異的に結合してもよく、例えばDR5およびDR4両方に特異的に結合してもよい。固相ELISAイムノアッセイを用いて、特異的結合を決定してもよい。一般的に、特異的結合は、少なくとも約1x107M-1、そしてしばしば、少なくとも1x108M-1、1x109M-1、または1x1010M-1の会合定数で進行する。0033用語ベクターは、宿主細胞内への本発明のポリヌクレオチドの導入に用いられる核酸を指す。ベクターはしばしばレプリコンである。発現ベクターは、適切な宿主細胞に、または適切なinvitro条件下に存在する場合、挿入された核酸の転写を可能にする。Fc-ポリペプチド0034本発明は、増強された抗癌活性を持つFc-ポリペプチドを提供する。構造的に、これらのFc-ポリペプチドは、ヒトFCGR3Aに対する増強されたアフィニティ高アフィニティを、DR4および/またはDR5アゴニスト性機能と組み合わせる。アゴニストとして、本発明のFc-ポリペプチドは、ヒトDR4および/またはヒトDR5に特異的に結合し、そしてこれらを通じてアポトーシスを仲介することによって、感受性ヒト癌細胞のアポトーシスを誘導する。0035本発明は、したがって、Fcが脱フコシル化されて、ヒトFCGR3Aに対するアフィニティが増加している、アゴニスト性高アフィニティFcポリペプチドを提供する。いくつかの態様において、Fcは、脱フコシル化完全ヒトIgG1Fcである。いくつかの態様において、Fc-ポリペプチドは、脱フコシル化完全ヒトIgG1モノクローナル抗体である。いくつかの態様において、脱フコシル化完全ヒトIgG1モノクローナル抗体は、ヒトDR5および/またはヒトDR4に特異的に結合する。したがって、いくつかの態様において、脱フコシル化完全ヒトIgG1モノクローナル抗体は、ヒトDR5およびヒトDR4に特異的に結合する二重特異性抗体である。いくつかの態様において、Fc-ポリペプチドは、ヒトDR5に特異的に結合するが、ヒトDR4に特異的に結合しないすなわち交差反応しない完全ヒトIgG1モノクローナル抗体である。いくつかの態様において、Fc-ポリペプチドは、ヒトDR4に特異的に結合するが、ヒトDR5に特異的に結合しないすなわち交差反応しない。脱フコシル化または抗体またはFc-融合ペプチドを生成する方法が当該技術分野に知られ、そしてこれには、限定されるわけではないが、細胞性フコシルトランスフェラーゼ機能を阻害するために遺伝子例えばsiRNA手段または化学的手段を用いる組換え体発現、フコシルトランスフェラーゼ遺伝子を欠く宿主細胞例えばfut8ノックアウトの使用、あるいはinvitro化学的手段または酵素的手段によるFcの脱フコシル化が含まれる。例えば、本明細書に援用される米国特許第6,946,292号を参照されたい。当業者は、本発明の複数の高アフィニティFc-ポリペプチドを含む組成物が、増強された抗癌活性を示すために100脱フコシル化されている必要はなく、一般的に少なくとも50、60、70、75、80、85、90、95、97、98、または99の脱フコシル化Fc-ポリペプチドを含むことを認識するであろう。0036本発明はまた、Fcが米国特許第7,317,091号本明細書に援用されるに記載されるような増強されたFCGR3Aアフィニティを生じる少なくとも1つのアミノ酸置換を含む、アゴニスト性高アフィニティFc-ポリペプチドも提供する。いくつかの態様において、前述のアミノ酸置換を含むFcは、ヒトIgG1Fcである。いくつかの態様において、FCGR3A結合を増強する少なくとも1つのアミノ酸置換を含むポリペプチドは、完全ヒトIgG1Fcモノクローナル抗体である。いくつかの態様において、完全ヒトIgG1モノクローナル抗体は、ヒトDR5および/またはヒトDR4に特異的に結合する。したがって、いくつかの態様において、完全ヒトIgG1モノクローナル抗体は、ヒトDR5およびヒトDR4に特異的に結合する二重特異性抗体である。いくつかの態様において、Fc-ポリペプチドは、ヒトDR5に特異的に結合するが、ヒトDR4に特異的に結合しないすなわち交差反応しない完全ヒトIgG1モノクローナル抗体である。いくつかの態様において、Fc-ポリペプチドは、ヒトDR4に特異的に結合するが、ヒトDR5に特異的に結合しないすなわち交差反応しない。いくつかの態様において、Fcは、残基:230、233、234、235、239、240、243、264、266、272、274、275、276、278、302、318、324、325、326、328、330、332、および335の少なくとも1つで置換を含み、Fc領域における残基の番号付けは、KabatにおけるようなEUインデックスのものである。いくつかの態様において、Fcは:P230A、E233D、L234E、L234Y、L234I、L235D、L235S、L235Y、L235I、S239D、S239E、S239N、S239Q、S239T、V240I、V240M、F243L、V264I、V264T、V264Y、V266I、E272Y、K274T、K274E、K274R、K274L、K274Y、F275W、N276L、Y278T、V302I、E318R、S324D、S324I、S324V、N325T、K326I、K326T、L328M、L328I、L328Q、L328D、L328V、L328T、A330Y、A330L、A330I、I332D、I332E、I332N、I332Q、T335D、T335R、およびT335Yからなる群より選択される少なくとも1つのアミノ酸置換を含み、数字に先行する文字は置換残基を1文字アミノ酸コードで示し、数字はKabatにおけるようなEUインデックスにしたがって番号付けされるFcの残基を示し、そして数字の後の文字は天然残基を示す。いくつかの態様において、高アフィニティFc-ポリペプチドは、上述のような、脱フコシル化FcおよびFCGR3Aアフィニティを増強させるアミノ酸置換の両方を含む。いくつかの態様において、Fc-ポリペプチドのFcは、FCGR3Aに対するアフィニティを増加させる置換を1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10含む。0037本発明の高アフィニティFc-ポリペプチドのポリペプチドは、ヒトDR4および/またはヒトDR5に特異的に結合し、そしてこれらをアゴナイズし、それによって、感受性ヒト癌細胞においてアポトーシスを誘導する。DR5および/またはDR4をアゴナイズする能力に関してFc-ポリペプチドをスクリーニングする方法は、一般の当業者に知られる。本発明のFc-ポリペプチドのポリペプチドは、DR4および/またはDR5ターゲットに特異的に結合するペプチドに関して、ファージライブラリーをスクリーニングすることによるなど、多くの供給源から得られうる。ペプチドライブラリーを作製し、そしてスクリーニングする方法が、当該技術分野に周知である。所望の特異的結合特性を有するペプチドを、直接または間接的にすなわちリンカーを介してFcに共有結合させて、Fc-ポリペプチドを得ることも可能である。いくつかの態様において、FcはヒトIgG1Fcである。他の態様において、ポリペプチドは、抗体の相補性決定領域CDR:CDR1、CDR2、および/またはCDR3を含む抗DR4および/または抗DR5抗体の抗原結合部位である。好適には、免疫グロブリン、例えばヒトDR4および/またはヒトDR5に特異的に結合する抗体の可変重鎖および可変軽鎖を、本発明のFc-ポリペプチドにおいて利用してもよい。したがって、いくつかの態様において、Fc-ポリペプチドは、それ自体、ヒトDR5および/またはヒトDR4に特異的に結合する、二価IgG1抗体、例えば完全ヒトモノクローナル抗体である。いくつかの態様において、Fc-ポリペプチドのポリペプチドは、ヒトDR4および/またはヒトDR5に特異的に結合する抗体のscFv一本鎖Fv、FabまたはFab’2断片、あるいはヒトDR4および/またはヒトDR5に特異的に結合するペプチドアプタマーである。本発明の方法にしたがって修飾して、増強された抗癌活性を持つ高アフィニティFc-ポリペプチドを得ることが可能である、代表的なFc-ポリペプチドには、抗DR5アゴニスト抗体、コナツムマブAmgenInc.、レキサツムマブHumanGenomeSciences,Inc.、ドロジツマブGenentech,Inc.、およびチガツズマブ第一三共、ならびに抗DR4アゴニスト抗体、マパツムマブHumanGenomeSciences,Inc.が含まれる。別の態様において、本発明のFc-ポリペプチドのポリペプチドは、ヒトTRAILTNF受容体アポトーシス誘導リガンドリガンドである。特定の態様において、Fc-ポリペプチドは二価Fc-ポリペプチドであり、ポリペプチドはヒトTRAILリガンドである。0038本発明のFc-ポリペプチドのFcは、当該技術分野に周知の多様な方法によって得られることも可能であり、これには、限定されるわけではないが、組換え発現法、固相ペプチド合成法、ヒト免疫グロブリンなどの天然供給源からの単離、またはこれらの方法の組み合わせが含まれる。いくつかの態様において、FcはヒトIgG1である。特定の態様において、1つのアイソタイプのFcを、アイソタイプスイッチングによって、異なるアイソタイプに変換する。アイソタイプスイッチングの方法には、限定されるわけではないが、とりわけ、直接組換え技術および細胞-細胞融合技術例えば米国特許第5,916,771号が含まれる。特定の態様において、FcをヒトIgG2、IgG3、またはIgG4サブクラスからヒトIgG1サブクラスに変換する。当業者は、可溶性、製造可能性、安定性、および生物製剤の製造に関連する他の要因を最適化するために、天然ヒトIgG1のいくつかのアミノ酸残基を修飾して、なおヒトIgG1の定義内にあることが可能であることを認識するであろう。一般的に、総数最大15を越えない残基が、欠失され、付加され、およびまたは置換され、そしてこれらは、しばしば10、9、8、7、6、5、4、3、2、または1を越えない。しかし、Fc-ポリペプチドのFcは、Fc-ポリペプチドの薬物動態学的または薬力学的特性を増強させる、標識、毒素、薬剤、組織特異的結合剤等に、直接または間接的に連結させることも可能である。0039いくつかの態様において、2またはそれより多いFc-ポリペプチドを、例えばシステイン-システインジスルフィド結合によって互いに共有結合させて、Fc-ポリペプチドの二価すなわち2つの抗原結合部位、三価、またはより高次の構造を生成することも可能である。二価Fc-ポリペプチド、例えば抗体は、単一特異性であり、そしてターゲットの単一エピトープに特異的に結合してもよいし、あるいは同じターゲット例えばヒトDR5またはヒトDR4上の2つのユニークなエピトープ、または異なるターゲット例えばヒトDR4およびヒトDR5の2つのユニークなエピトープに特異的に結合するように、二重特異性であってもよい。さらなる態様において、ヒトDR4および/またはヒトDR5に特異的に結合する2またはそれより多いポリペプチドを単一のFcに共有結合させて、本発明のFc-ポリペプチドを形成する。したがって、いくつかの態様において、2、3、または4のこうしたポリペプチドを、単一のFcに共有結合させる。こうしたFc-ポリペプチドを二量体化例えば、二価Fc-ポリペプチドを形成するFc鎖間のジスルフィド結合によって、三量体化等に供してもよい。ポリペプチドをFcのN末端またはC末端で、またはその近傍で、あるいはFc内の残基で、Fcに直接または間接的に付着させてもよい。他の態様において、ヒトDR4および/またはヒトDR5に特異的に結合する第二のまたはさらなるポリペプチドを、それ自体がFcに共有結合しているポリペプチドに、共有結合させる。したがって、Fc-ポリペプチドは、Fcに、あるいはそれ自体がFcに直接または間接的に共有結合しているポリペプチドに、直接または間接的に共有結合している多数のポリペプチドを含んでもよい。0040特定の態様において、組換え法を用いて、本発明のFc-ポリペプチド例えば抗体を構築してもよい。したがって、本発明の別の側面は、本発明のFc-ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドである。別の側面において、本発明は、Fc-ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターを含む。特定の態様において、発現ベクターは、適切な宿主細胞において、発現を補助するように、Fc-ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに機能可能であるように連結される調節配列例えばプロモーター、エンハンサーを含む。特定の態様において、発現ベクターはまた、宿主細胞において、染色体独立複製を可能にするポリヌクレオチド配列もまた含む。例示的なベクターには、限定されるわけではないが、プラスミド、コスミド、およびYACが含まれる。さらに別の側面において、本発明は、本発明の発現ベクターを含む宿主細胞を含む。適切な宿主細胞例えばCHO細胞を本発明の発現ベクターでトランスフェクションし、そしてFc-ポリペプチドの発現に適した条件下で、トランスフェクションされた宿主細胞を培養する方法が、当該技術分野に知られる。用いるトランスフェクション法は、形質転換される宿主に応じる可能性もある。哺乳動物細胞内に異種ポリヌクレオチドを導入するための特定の方法が当該技術分野に知られ、そしてこれには、限定されるわけではないが、デキストラン仲介トランスフェクション、リン酸カルシウム沈殿、ポリブレン仲介トランスフェクション、プロトプラスト融合、エレクトロポレーション、リポソーム中でのポリヌクレオチド単数または複数の被包、および核内へのDNAの直接マイクロインジェクションが含まれる。発現のための宿主として利用可能な特定の哺乳動物細胞株が当該技術分野に知られ、そしてこれには、限定されるわけではないが、アメリカンタイプカルチャーコレクションATCCから入手可能な多くの不死化細胞株が含まれ、これには、限定されるわけではないが、チャイニーズハムスター卵巣CHO細胞、E5細胞、ベビーハムスター腎臓BHK細胞、サル腎臓細胞COS、ヒト肝細胞性癌腫細胞例えばHepG2、および多くの他の細胞株が含まれる。特定の態様において、どの細胞株が高レベル発現を有し、そして所望の抗原結合特性を持つFc-ポリペプチドを産生するかを決定することを通じて、細胞株を選択してもよい。療法適用0041本発明のFc-ポリペプチド療法組成物を用いて、単独療法としてすなわち単一の剤として、少なくとも1つの化学療法剤と組み合わせてすなわち併用療法、および/または放射線療法と組み合わせて、ヒト癌細胞の増殖を阻害してもよい。療法組成物の有効量を投与して、DR4および/またはDR5仲介性アポトーシスに感受性である癌の進行を阻害するか、停止するか、または逆転させる。ヒト癌細胞をinvivoまたはexvivoで治療してもよい。ヒト患者のexvivo治療において、癌細胞を含有する組織または体液を体外で処置して、そして次いで、組織または体液を患者内に再導入する。いくつかの態様において、ヒト患者に療法組成物を投与することによって、患者において、癌をinvivoで治療する。したがって、本発明は、対照での治療に比較して、腫瘍の進行を阻害するか、停止させるか、または逆転させるか、あるいは別の方式で、無進行生存すなわち患者が悪化しない膵臓癌を患いつつ生存している、治療中および治療後の期間の長さまたは全生存生存率とも呼ばれる;すなわち癌と診断されるかまたは癌に関して治療された後、特定の期間に渡って生存している研究または治療群の人々の割合の統計的に有意な増加を生じる、exvivoおよびinvivo法を提供する。0042本発明の方法によって治療可能な癌には、限定されるわけではないが、肝臓癌、脳癌、腎癌、乳癌、膵臓癌腺癌、結腸直腸癌、肺癌小細胞肺癌および非小細胞肺癌、脾臓癌、胸腺または血球の癌すなわち白血病、前立腺癌、精巣癌、卵巣癌、子宮癌、胃癌、頭頸部扁平細胞癌、黒色腫、およびリンパ腫が含まれる。いくつかの態様において、癌は非小細胞肺癌NSCLCである。薬剤組成物0043本発明の療法組成物すなわちFc-ポリペプチドを各々、単独療法として、または併用療法として、すなわち他の剤例えば抗血管新生剤、化学療法剤、放射線療法と組み合わせて投与してもよい。例示的な化学療法剤には、限定されるわけではないが、アドリアマイシン、ドキソルビシン、5-フルオロウラシル、シトシンアラビノシド、シクロホスファミド、チオテパ、ドセタキセル、ブスルファン、シトキシンcytoxin、タキソール、パクリタキセル、メトトレキセート、ゲムシタビン、シスプラチン、メルファラン、ビンブラスチン、ブレオマイシン、エトポシド、イホスファミド、マイトマイシンC、ミトキサントロン、ビンクリスチン、ビノレルビン、カルボプラチン、テニポシド、ダウノマイシン、カルミノマイシン、アミノプテリン、ダクチノマイシン、マイトマイシン、エスペラマイシン、メルファランおよび他の関連ナイトロジェンマスタードが含まれる。0044本発明の化学療法剤を、本発明の特異的結合剤の前におよび/または後に集合的に連続治療、ならびに/あるいはそれと同時に同時治療投与してもよい。組み合わせの連続治療例えば前治療、後治療、または重複治療にはまた、薬剤を交互に投与する措置、または1つの構成要素を長期間投与し、そして他のもの単数または複数を断続的に投与する措置も含まれる。組み合わせの構成要素を、同じまたは別個の組成中で投与してもよいし、そして同じまたは異なる投与経路によって投与してもよい。0045本発明の療法組成物と同時投与してもよい例示的な癌療法には、乳癌および他の型の癌を治療するのに使用可能なHERCEPTINTMトラスツズマブ;非ホジキンリンパ腫および他の型の癌を治療するのに使用可能なRITUXANTMリツキシマブ、ZEVALINTMイブリツモマブチウキセタンおよびLYMPHOCIDETMエプラツズマブ;慢性骨髄性白血病および胃腸間質腫瘍を治療するのに使用可能なGLEEVECTMメシル酸イマチニブ;ならびに非ホジキンリンパ腫の治療に使用可能なBEXXARTMトシツモマブが含まれる。特定の例示的な抗体にはまた、ERBITUXTM;VECTIBIXTM、IMC-C225;IRESSATMゲフィチニブ;TARCEVATMエルロチニブ;KDRキナーゼドメイン受容体阻害剤;抗VEGF抗体およびアンタゴニスト例えばAVASTINTMおよびVEGF-トラップ;抗VEGF血管内皮増殖因子受容体抗体、ペプチボディ、および抗原結合領域;抗Ang-1およびAng-2抗体、ペプチボディ例えばAMG386、AmgenInc、および抗原結合領域;Tie-2、ならびに他のAng-1およびAng-2受容体に対する抗体;Tie-2リガンド;Tie-2キナーゼ阻害剤に対する抗体;およびCAMPATHTMアレムツズマブも含まれる。薬学的配合物0046本発明の療法組成物を含む薬学的組成物は、例えば組成物のpH、モル浸透圧濃度、粘性、清澄性、色、等張性、匂い、無菌性、安定性、溶解または放出速度、吸着、あるいは浸透を修飾するか、維持するか、または保存するための配合材料を含有してもよい。薬学的組成物中の主なビヒクルまたはキャリアーは、天然で、水性または非水性いずれであってもよい。例えば、適切なビヒクルまたはキャリアーは、非経口投与のための組成物において一般的な他の材料を補充可能な、注射用水または生理学的生理食塩水であってもよい。中性緩衝生理食塩水または血清アルブミンと混合された生理食塩水は、さらなる例示的なビヒクルである。他の例示的な薬学的組成物は、約pH7.0~8.5のTris緩衝液または約pH4.0~5.5の酢酸緩衝液を含み、これらはさらに、ソルビトールまたは適切なその代替物を含んでもよい。本発明の1つの態様において、所望の度合いの純度を有する選択した組成物を、凍結乾燥ケークまたは水溶液の形で、場合による配合剤Remington’sPharmaceuticalSciences、上記と混合することによって、結合剤組成物を貯蔵用に調製してもよい。さらに、適切な賦形剤、例えばスクロースを用いて、結合剤産物を凍結乾燥物として配合してもよい。0047配合構成要素は、投与部位に許容されうる濃度で存在する。例えば、組成物を生理学的pHまたはわずかにより低いpH、典型的には約5~約8のpH範囲内に維持するように、緩衝剤を用いる。非経口投与に特に適したビヒクルは、結合剤が適切に保存された無菌等張溶液として配合される、無菌蒸留水である。さらに別の調製は、産物の徐放または持続放出を提供する、注射可能微小球体、生体内分解性粒子、ポリマー性化合物ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ビーズ、またはリポソームなどの剤と、所望の分子を配合することを伴ってもよく、これを次いで、デポ注射を介して送達してもよい。0048別の側面において、非経口投与に適した薬学的配合物を、水溶液中で、好ましくは生理学的に適合する緩衝液、例えばハンクス溶液、リンゲル溶液、または生理学的緩衝生理食塩水において、配合してもよい。水性注射懸濁物は、懸濁物の粘性を増加させる物質、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、またはデキストランを含有してもよい。さらなる薬学的組成物が当業者には明らかであり、これには、持続送達または調節送達配合物中に結合剤分子を含む配合物が含まれる。多様な他の持続送達手段または調節送達手段、例えばリポソームキャリアー、生体内分解性微小粒子または多孔性ビーズおよびデポ注射を配合するための技術もまた当業者に知られる。invivo投与に使用しようとする薬学的組成物は、典型的には無菌でなければならない。これは、無菌ろ過膜を通じたろ過によって達成可能である。組成物を凍結乾燥する場合、この方法を用いた滅菌を、凍結乾燥および再構成の前または後のいずれに行うことも可能である。非経口投与のための組成物を、凍結乾燥型で、または溶液中で貯蔵してもよい。さらに、非経口組成物は、一般的に、無菌アクセスポートを有する容器、例えば静脈内溶液バッグまたは皮下注射針によって貫通可能な栓を有するバイアル内に入れられる。0049薬学的組成物が配合されたならば、これを、溶液、懸濁物、ジェル、エマルジョン、固体、あるいは脱水または凍結乾燥粉末として、無菌バイアル中に貯蔵することも可能である。こうした配合物をすぐに使用できる型または投与前に再構成を必要とする型例えば凍結乾燥型のいずれで保存してもよい。療法的に使用するための薬学的組成物の有効量は、例えば、療法背景および目的に応じるであろう。当業者は、したがって、治療に適切な投薬レベルが、部分的に、送達する分子、結合剤分子を用いている徴候、投与経路、ならびに患者のサイズ体重、体表面積または臓器サイズおよび状態年齢および全身健康状態に応じて多様であろうことを認識するであろう。したがって、臨床医は、投薬量を力価決定titerし、そして最適療法効果を得るために投与経路を修飾してもよい。典型的な投薬量は、上述の要因に応じて、約0.1mg/kg~最大約50mg/kgまたはそれより多い可能性もある。いくつかの態様において、投薬量は、1、3、5、10、15、20、25、または30mg/kgであってもよい。0050任意の化合物に関して、療法的有効用量は、まず、細胞培養アッセイにおいて、あるいは動物モデル、例えばマウス、ラット、ウサギ、イヌ、ブタ、またはサルにおいてのいずれかで概算可能である。また、動物モデルを用いて、適切な濃度範囲および投与経路を決定することも可能である。次いで、こうした情報を用いて、ヒトにおいて投与に有用な用量および経路を決定してもよい。正確な投薬量は、治療を必要とする被験体に関連する要因を考慮して決定されるであろう。投薬量および投与を調整して、十分なレベルの活性化合物を提供するか、または所望の効果を維持する。考慮されうる要因には、疾患状態の重症度、被験体の全身健康状態、被験体の年齢、体重、および性別、投与の時期および頻度、薬剤の組み合わせ単数または複数、反応感受性、ならびに療法に対する反応が含まれる。特定の配合物の半減期およびクリアランス速度に応じて、長期作用薬学的組成物を3~4日ごと、毎週、または2週ごとに投与してもよい。投薬頻度は、用いる配合物における結合剤分子の薬物動態学的パラメーターに応じるであろう。典型的には、所望の効果を達成する投薬量に到達するまで、組成物を投与する。したがって、組成物を単一用量として、または長期に渡る多数回用量として同じまたは異なる濃度/投薬量、または連続注入として、投与してもよい。適切な投薬量のさらなる改良は、ルーチンに行われる。適切な用量-反応データの使用によって、適切な投薬量を確認してもよい。FCGR3A遺伝子型決定0051本発明は、無進行生存および/または全生存において、統計的に有意な、増加した反応によって立証されるように、対照に比較して本発明のアゴニスト性高アフィニティFc-ポリペプチドでの治療から、臨床的利点を得る可能性がより高い、ヒト患者単数または複数を同定する方法を提供する。こうした患者は、FCGR3AのF158多型に関して、ヘテロ接合性F158/V158またはホモ接合性F158/F158である。このアレル相違に基づいて、患者を階層化し、そして次いで、FCGR3AのF158アレルをコードするアレルを1または2コピー有すると同定されるものを、本明細書に開示する療法組成物によって治療することも可能である。V158およびF158多型を有する患者を同定する工程は、PCRに基づく方法など、当業者に知られる分析法を使用して、達成可能であるLeppers-vandeStraatら,J.ImmunologicalMethods,242:127-1322000。好適には、臨床医は、こうした方法を実行する第三者実験室のサービスを用いて、こうした患者を同定してもよい。癌患者におけるFCGR3AのV158またはF158アレルを0、1、または2コピー有する患者を同定するためのキットもまた、本発明の範囲内である。こうしたキットは、場合によって、高アフィニティFc療法組成物に反応する可能性がより高い患者すなわちF158/V158およびF158/F158患者のアレル型を同定する書面の使用説明書を含有してもよい。0052別の側面において、本発明は、アレル識別アッセイを用いて、FCGR3A多型、F158およびV158に関して、ヒトゲノムDNAをリアルタイムPCRポリメラーゼ連鎖反応で遺伝子型決定するための組成物および方法に関する。ヒトゲノムDNAを単離し、そして精製する方法が当該技術分野に知られる。該方法において、PCRプライマーは、F158VSNPID:rs396991と一般的に称されるFCGR3Aの一塩基多型SNPを含有する領域を特異的に増幅する。該方法において、順方向プライマーは、配列5’-TTCCAAAAGCCACACTCAAACAC-3’配列番号1を含み、一方、逆方向プライマーは:5’-TGGTGATGTTCACAGTCTCTGAAGA-3’配列番号2を含む。順方向プライマーは、SNPの上流の、FCGR3AおよびFCGR2A遺伝子間の一塩基相違を持つ領域中で特異的にアニーリングする。さらに、順方向プライマーには、3’端から3ヌクレオチドにミスマッチが取り込まれ、3’端の識別能を最大限にしている。逆方向プライマーは、FCGR3AおよびFCGR2A両方において、SNPの下流の、正確に同じ配列である領域中でアニーリングする。したがって、該アッセイは、遺伝子特異性に関して、順方向プライマーに頼る。該プライマーは、93塩基対アンプリコンを増幅する。0053PCR増幅後、1対の二重標識プローブが、ドナーの遺伝子型を決定する。該プローブは、特定のアニーリング条件下で、ハイブリダイゼーション領域中央付近に位置するSNPを含むアンプリコンの内部領域に特異的にアニーリングする。特異的アニーリングのための方法および組成物が、当業者に知られる。1つのプローブは、2つの測定されるSNPアレル各々に特異的である。いくつかの態様において、プローブは標識される。1つの態様において、1つのプローブは、5’端で、蛍光レポーター色素、フルオレセインアミダイトFAMで標識される。FAMは、多くの供給源より商業的に得られうる。例えば、GlenResearch、米国バージニア州スターリングを参照されたい。もう一方のプローブは、異なるレポーター色素で標識される。1つの態様において、プローブは、ヤキマイエローYAKで標識される。Eurogentee、米国カリフォルニア州サンディエゴを参照されたい。どちらのプローブも3’端で、消光剤、例えばBlack-Hole消光剤BHQで修飾されてもよい。BHQは、多くの供給源より商業的に得られうる。例えば、GlenResearch、米国バージニア州スターリングを参照されたい。したがって、いくつかの態様において、1つのプローブはV158に関して特異的であり、そして配列:5’-<FAM>TTACTCCCAAAAAGCCCCCTGCA-3’<BHQ>配列番号3を含み、そしてもう一方のプローブは、F158アレルに関して特異的であり、そして配列:5’<YAK>TACTCCCAACAAGCCCCCTGCA-3’<BHQ>配列番号4を含む。0054プローブが損なわれていない場合、レポーター色素の蛍光は、消光剤色素が近接していることによって消光される。各PCR周期の伸長期中、DNAポリメラーゼがアニーリングしたプローブを切断し、プローブからレポーター色素を放出させ、蛍光の増加を生じる。プローブは、PCR周期中、ハイブリダイゼーションに関して競合し、そしてDNAに存在するSNPアレルに相補的なプローブからのみ、蛍光が生じる。ヘテロ接合の場合は、両方のプローブによって蛍光が生じる。PCRの十分な増幅周期後、例えば40周期後に、蛍光レベルを測定する。したがって、このSNPアッセイは、ヒトゲノムDNA試料を、F158/F158ホモ接合体、V158/V158ホモ接合体、およびF158/V158ヘテロ接合体として分類する。0055上記リストは、例示目的のみであり、そして当業者によって知られるかまたは本明細書に示すガイドラインを用いて、当業者によって到達可能な、本明細書記載の化合物と同時に使用可能な他の化合物または治療の使用を排除しない。実施例10056実施例1は、進行した非小細胞肺癌の第一の治療のための、パクリタキセルおよびカルボプラチンと組み合わせた、コナツムマブの1b/2相研究を記載する。主な目的は、無進行生存時間によって評価されるような、パクリタキセル/カルボプラチンと組み合わせた、コナツムマブAMG6551b相において選択された2つの用量:3mg/kgおよび15mg/kgでの有効性を概算することである。研究のための包含基準には:組織学的または細胞学的に確認された非小細胞肺癌。被験体は、悪性胸水を伴う病期IIIBまたは病期IVと定義される進行した非小細胞肺癌あるいは再発疾患に罹患していなければならない。最大6周期の化学療法を受けるよう計画される0または1層の米国東海岸癌臨床試験グループECOGスコア年齢>18歳の男性または女性適切な血液学的、腎、肝および凝固機能0057研究の1b相部分の間に、2相のコナツムマブ用量を決定した。この研究の2相部分は多施設無作為化二重盲検プラセボ対照研究であり、計画された総試料サイズは150人の被験体であった。1~3の治療アームに対して、被験体を1:1:1の比に無作為化した:アーム1:パクリタキセル/カルボプラチンに加えて15mg/kgコナツムマブアーム2:パクリタキセル/カルボプラチンに加えて3mg/kgコナツムマブアーム3:パクリタキセル/カルボプラチンに加えてプラセボ米国東海岸癌臨床試験グループ成績状態ECOG0または1、および疾患病期IIIbまたはIV/再発によって無作為化を階層化した。0058登録後、パクリタキセル200mg/m2およびカルボプラチンAUC曲線下面積=6mg/mL分を、コナツムマブアーム1およびアーム2またはプラセボアーム3と組み合わせて、各21日周期の第1日に、最大6周期に渡って投与した。最大6周期のパクリタキセル/カルボプラチンを完了したか、または化学療法関連毒性のため、パクリタキセル/カルボプラチンを中断した被験体に、続けて、疾患進行、薬剤コナツムマブまたはプラセボ不耐容性、同意の取り下げ、または研究治療の最初の投与から30ヶ月のうち、最初に生じるものが起こるまで、コナツムマブまたはプラセボ単独療法を行った。薬剤不耐容性が疑われるために、コナツムマブまたはプラセボ治療を中断した被験体では、すべての研究治療を中止した。0059プロトコルに明記するすべての治療の最後の投与後、各被験体は、30日3日後に、安全性追跡調査来診を受けるよう計画された。次いで、被験体は、長期追跡調査に入り、この間、生存状態を3ヶ月±2週間ごとに確認された。0060疾患進行が立証される治療研究者により、修飾RECISTにしたがって、臨床的または放射線学的に決定されるまで、治療周期とは独立に、研究第1日から、6週ごと±7日に、腫瘍反応を評価する放射線画像撮影を行った。一般的に、疾患進行臨床的進行を示唆する症状を持つ被験体もまた、放射線学的に評価して、症状が生じた時点での疾患状態を評価した。疾患進行または死の前に、研究治療を中断した被験体はいずれも、長期追跡期間中、6週ごと±7日に放射線画像撮影を受け続けて、疾患進行、新規治療の開始、死亡、同意の取り下げ、管理上の決定または研究終了のうち、いずれか早いものが起こるまで、疾患状態を評価された。120人の被験体が、研究者が評価する疾患進行または死亡と立証された際に、一次分析を行った。0061結果は、PFS無進行生存における改善をまったく示さなかった。しかし、OS全生存曲線における改善を示唆する傾向が、およそ7ヶ月後から出現し;これは、治療の単独療法コナツムマブ期の開始の直後であった。患者は、6周期の化学療法コナツムマブまたはプラセボを完了した後およそ4.2ヶ月、単独療法期にあった。単独療法は、併用化学療法後、被験体の51で行われた。患者転帰を性別、ECOG、年齢、および組織学扁平に関して調整し、そしてFCGR3A遺伝子型と関連付けると、用量依存性反応がV158に関してヘテロ接合性およびホモ接合性である患者に関して観察された。示すように、FCGR3A多型のF158/V158またはV158/V158遺伝子型に関連する生存傾向は、F158ホモ接合性患者に関する1.37に比較した際、0.72の危険率HRを生じた。さらに、FVF158/V158およびVVV158/V158患者のHRは、用量-反応効果を示し、3mg/kgの用量での0.85と対照的に、15mg/kgの用量に関して0.63のHRである。以下の表1は、危険率HRおよび95信頼区間95CIを示す。表1"