"第1全正味電荷を帯びている気体封入マイクロベシクルおよびマイクロベシクルに会合している成分から成るアセンブリーであって、上記会合成分は第1全正味電荷と反対符号の第2全正味電荷を帯び、かつ生物学的適合性界面活性剤からなり、かつ100nm以下の直径を有することを特徴とするアセンブリー。会合成分が80nm以下の直径を有する請求項1に記載のアセンブリー。会合成分が50nm以下の直径を有する請求項1に記載のアセンブリー。会合成分が標的配位子、対生物活性剤、診断剤またはこれらの組合せを含有する請求項1に記載のアセンブリー。さらに、全正味電荷を帯び、かつ必要に応じて別の標的配位子、対生物活性剤、診断剤またはこれらの組合せを含有する第2成分を包含する請求項4に記載のアセンブリー。第2成分が、マイクロベシクルの電荷と同じ符号の全正味電荷を帯びている請求項5に記載のアセンブリー。生物学的適合性界面活性剤が両親媒性物質である請求項1に記載のアセンブリー。生物学的適合性界面活性剤が、C2-C10有機酸、C12-C24脂肪族鎖を有する有機脂肪酸、その医薬的に許容しうる塩、ポリオキシエチレンとのそのエステル;ポリイオン性アルカリ塩;有機アミン;アミド;第四級アミン塩;アミノ酸;リン脂質;モノもしくはオリゴサッカリドとC12-C24有機脂肪酸のエステル;有機スルホネート;パーフルオロ有機酸;高分子界面活性物質;およびこれらの混合物の中から選ばれる請求項1に記載のアセンブリー。マイクロベシクルの1モル当りの電荷数と会合成分の1モル当りの電荷数の比が、約10:1~1:10である請求項1に記載のアセンブリー。上記比が約3:1以下である請求項9に記載のアセンブリー。上記比が約2:1以下である請求項9に記載のアセンブリー。マイクロベシクルが、両親媒性薄膜形成化合物からなるエンベロープで安定化したマイクロバブルまたは有形のエンベロープを有するマイクロバルーンである請求項1に記載のアセンブリー。マイクロベシクルを安定化するエンベロープに含まれる両親媒性薄膜形成化合物が、リン脂質である請求項12に記載のアセンブリー。エンベロープが、正または負の正味電荷を帯びているリン脂質もしくは脂質からなる請求項13に記載のアセンブリー。リン脂質もしくは脂質が、ホスファチジルセリン誘導体、ホスファチジン酸誘導体、ホスファチジルグリセロール誘導体、ポリエチレングリコール修飾ホスファチジルエタノールアミン、エチルホスファチジルコリン誘導体およびそれぞれのリゾ体;コ-ル酸塩;デオキシコ-ル酸塩;グリココ-ル酸塩;そのC12-C24脂肪酸塩;少なくとも1つのC10-C20アルキル鎖を有するアルキルアンモニウム塩;C3-C6アルキレン橋を介して窒素原子に結合した少なくとも1つのC10-C20アシル鎖を有する第三または第四級アンモニウム塩;およびこれらの混合物から選ばれる請求項14に記載のアセンブリー。マイクロバルーンの有形のエンベロープが、ポリマー物質、蛋白様物質、水不溶性脂質またはこれらの混合物からなる請求項12に記載のアセンブリー。マイクロバルーンの有形のエンベロープが、イオン性生分解性ポリマーからなる請求項12または13に記載のアセンブリー。マイクロバルーンの有形のエンベロープがさらに、正または負の正味電荷を帯びているリン脂質もしくは脂質を含有する請求項13に記載のアセンブリー。リン脂質もしくは脂質が、ホスファチジルセリン誘導体、ホスファチジン酸誘導体、ホスファチジルグリセロール誘導体、ポリエチレングリコール修飾ホスファチジルエタノールアミン、エチルホスファチジルコリン誘導体およびそれぞれのリゾ体;コ-ル酸塩;デオキシコ-ル酸塩;グリココ-ル酸塩;そのC12-C24脂肪酸塩;少なくとも1つのC10-C20アルキル鎖を有するアルキルアンモニウム塩;C3-C6アルキレン橋を介して窒素原子に結合した少なくとも1つのC10-C20アシル鎖を有する第三または第四級アンモニウム塩;およびこれらの混合物から選ばれる請求項18に記載のアセンブリー。マイクロベシクルに会合している成分がミセルである請求項1乃至6のいずれか1に記載のアセンブリー。ミセルが、ポリエチレングリコール修飾リン脂質;少なくとも1つのC10-C20アルキル鎖を有するアルキルアンモニウム塩;C3-C6アルキレン橋を介して窒素原子に結合した少なくとも1つのC10-C20アシル鎖を有する第三または第四アンモニウム塩;C12-C24脂肪酸塩:高分子界面活性物質:またはこれらの混合物からなる請求項20に記載のアセンブリー。ミセルが、ホスファチジルコリン,エチルホスファチジルコリン,ホスファチジルグリセロール,ホスファチジン酸,ホスファチジルエタノールアミン,ホスファチジルセリンまたはスフィンゴミエリンのC12-C24脂肪酸ジエステルからなる請求項20に記載のアセンブリー。ミセルが、正または負の正味電荷を帯びているリン脂質もしくは脂質、または高分子イオン性界面活性物質からなる請求項20に記載のアセンブリー。リン脂質もしくは脂質が、ホスファチジルセリン誘導体、ホスファチジン酸誘導体、ホスファチジルグリセロール誘導体、ポリエチレングリコール修飾ホスファチジルエタノールアミン、エチルホスファチジルコリン誘導体およびそれぞれのリゾ体;コ-ル酸塩;デオキシコ-ル酸塩;グリココ-ル酸塩;そのC12-C24脂肪酸塩;少なくとも1つのC10-C20アルキル鎖を有するアルキルアンモニウム塩;C3-C6アルキレン橋を介して窒素原子に結合した少なくとも1つのC10-C20アシル鎖を有する第三または第四級アンモニウム塩;およびこれらの混合物から選ばれる請求項23に記載のアセンブリー。マイクロベシクルに会合している成分が、コロイドナノ粒子である請求項1に記載のアセンブリー。マイクロベシクルに会合している成分が、固体のポリマーナノ粒子である請求項1に記載のアセンブリー。請求項1乃至26のいずれか1に記載のアセンブリーを含有する生理的に許容しうる液体の水性懸濁液。該アセンブリーの医薬的に許容しうる担体の水性懸濁液が、該アセンブリーを形成する気体封入マイクロベシクルの同じ担体中の水性懸濁液のζ-電位に対し絶対値で少なくとも50減少のζゼータ-電位を示す請求項1乃至26のいずれか1に記載のアセンブリー。該ζ-電位が、絶対値で少なくとも75の減少である請求項28に記載のアセンブリー。該ζ-電位が、絶対値で約100以上の減少である請求項28に記載のアセンブリー。a第1成分として、第1全正味電荷を帯びている気体封入マイクロベシクル、もしくはその前駆体と、b上記第1全正味電荷と反対符号の第2全正味電荷を帯び、上記マイクロベシクルに会合しうる第2成分、もしくはその前駆体を別々に包含する製薬キットであって、上記成分は100nm以下の直径を有することを特徴とする製薬キット。さらに、医薬的に許容しうる液体担体を包含する請求項31に記載の製薬キット。第1および第2成分が、別々に凍結乾燥した調製品の形状にある請求項32に記載の製薬キット。a第1成分として、第1全正味電荷を帯びている気体封入マイクロベシクル、もしくはその前駆体と、b上記第1全正味電荷と反対符号の第2全正味電荷を帯び、上記マイクロベシクルに会合しうる第2成分、もしくはその前駆体を含有する製薬キットであって、上記会合成分は生物学的適合性界面活性剤からなり、かつ100nm以下の直径を有することを特徴とする製薬キット。請求項1乃至26のいずれか1に記載のアセンブリーを製造する方法であって、気体封入マイクロベシクルもしくはその前駆体を含有する調製品を、上記マイクロベシクルに会合すべき成分もしくはその前駆体を含有する調製品と混合することを特徴とするアセンブリーの製造法。1気体封入マイクロベシクルを含有する第1水性懸濁液を調製し;2上記気体封入マイクロベシクルに会合すべき成分を含有する第2水性懸濁液を調製し;次いで3該2つの懸濁液を混合して、該アセンブリーを含有する水性懸濁液を得ることから成る請求項35に記載の製造法。1気体封入マイクロベシクルを含有する第1水性懸濁液を調製し;2該第一懸濁液を凍結乾燥して、第1凍結乾燥物を得;3上記気体封入マイクロベシクルに会合すべき成分を含有する第2懸濁液を調製し;4該第2懸濁液を凍結乾燥して、第2凍結乾燥物を得;次いで5該第1および第2凍結乾燥物を気体の存在下、生理的に許容しうる水性担体で再組成して、該アセンブリーを含有する水性懸濁液を得ることから成る請求項35に記載の製造法。工程5が、a第2凍結乾燥物を生理的に許容しうる水性担体で再組成して、気体封入マイクロベシクルに会合すべき成分を含有する懸濁液を得;次いでb第1凍結乾燥物を気体の存在下、該懸濁液で再組成する工程からなる請求項37に記載の製造法。1有機溶剤、リン脂質および分散保護剤を含有する水性エマルジョンを調製し;2気体封入マイクロベシクルに会合すべき成分を含有する水性懸濁液を調製し;3該水性懸濁液を上記水性エマルジョンと混合し;次いで4該混合物を凍結乾燥して水および有機溶剤を除去し、該アセンブリーを含有する凍結乾燥物を得ることから成る請求項35に記載の製造法。請求項6に記載のアセンブリーを製造する方法であって、請求項35乃至39のいずれか1に記載の製造法によって得られるアセンブリーに、気体封入マイクロベシクルの電荷と同じ符号の全正味電荷を帯びている第2成分を混合することを特徴とするアセンブリーの製造法。医薬的に活性な配合物を製造するための、請求項1乃至29のいずれか1に記載のアセンブリーの使用。超音波診断イメージングの方法であって、請求項1乃至26のいずれか1に記載のアセンブリーの水性懸濁液の造影増強量を投与することから成るイメージング法。請求項1乃至26のいずれか1に記載のアセンブリーのさらに対生物活性剤を含有する水性懸濁液の治療上有効量を投与することから成る治療処置の方法。各実施例で、以下に示す物質を使用する。PBS:リン酸塩緩衝食塩水,10mMリン酸塩ナトリウム、NaCl0.9W/W、pH=7.4Tris緩衝液:Tris緩衝食塩水,10mMトリスヒドロキシメチルアミノメタン、NaCl0.9、pH=7.4HEPES緩衝液:4-2-ヒドロキシエチル-1-ピペラジンエタンスルホン酸20mMおよびNaCl150mM、pH=7.4Trisグリセロール緩衝液:トリスヒドロキシメチルアミノメタン1g/Lおよび0.3Mグリセロール、pH=7.2DIO18マーカー:3,3’-ジオクタデシルオキサカルボシアニンMolecularProbesIncUSAGd-DTPA-SE2:ガドリニウム-ジエチレントリアミンペンタ酢酸複合体のジステアロイルエステルGWKabalkaらのMagneticResonanceinMedicine88995の記載に従って製造DSPG:ジステアロイルホスファチジルグリセロールナトリウム塩GenzymeIUPAC1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-[ホスホ-rac-1-グリセロール]DAPC:ジアラキドイルホスファチジルコリンAvantiPolarLipidsIUPAC1,2-ジアラキドイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリンDSTAP:1,2-ジステアロイル-3-トリメチルアンモニウム-プロパンクロリドAvantiPolarLipidsDSPC:ジステアロイルホスファチジルコリンGenzymeIUPAC1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリンDPPG:ジパルミトイルホスファチジルグリセロールナトリウム塩GenzymeIUPAC1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-[ホスホ-rac-1-グリセロール]DPPA:ジパルミトイルホスファチジン酸ナトリウム塩GenzymeIUPAC1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ホスフェートDPPC:ジパルミトイルホスファチジルコリンGenzymeIUPAC1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリンDC:ジステアロイルエチルホスファチジルコリンAvantiPolarLipidsIUPAC1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-エチルホスホコリンNaDOC:デオキシコール酸ナトリウムFlukaDSPE-PEG2000:PEG2000修飾ジステアロイルホスファチジルエタノールアミンナトリウム塩NektarTherapeuticsエチル-SPC3:大豆エチルホスホコリン,エチル-DSPCとエチル-DPPCの4:1W/W混合物DPPE-キャップ-ビオチン:1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン-N-キャップビオチニルナトリウム塩AvantiPolarLipidsPEG4000:ポリエチレングリコール,MW=4000FlukaPluronic68:エチレンオキシド/プロピレンオキシドブロックコポリマーFlukaC4F10:パーフルオロブタンマイクロベシクルの寸法および濃度は、CoultercounterMultisizer口径:30μmを用いて測定する。マイクロベシクル懸濁液のζ-電位は、NaCl1mM中MalvernZetasizer3000Hsaを用いて測定する。ミセル調製物の寸法は、MalvernZetasizer3000Hsaを用いて測定する。実施例1正荷電マイクロバルーンの製造:トリパルミチン60mgを40°Cで、シクロヘキサン0.6mLに溶解する。この有機相を乳化するまで、40°Cで保持する。40mgのエチル-SPC3カチオン性リン脂質を65°Cで30mLの蒸留水に15分間分散し、次いで分散液を40°Cに冷却せしめる。有機相を水性相にて、Polytron登録商標ホモジナイザーPT300010000rpm、1分を用いて乳化する。次いでエマルジョンを、5mLのPVA200mg、MW=9000、Aldrich/蒸留水で希釈し、次いで5°Cに冷却し、-45°Cで10分間凍結させ、次いで凍結乾燥する0.2mバール、24h。凍結乾燥物を空気の存在下、蒸留水20mLに再分散し、マイクロバルーンをリン酸塩緩衝食塩水を用いて遠心分離600g、10分で2回洗い、マイクロバルーンの最終懸濁液を得る。この調製物のサイズ特性決定の結果は、以下の通りである:DV50=2.54μm;DN=1.57μm。実施例1a蛍光標識した正荷電マイクロバルーンの製造:マイクロバルーンを蛍光標識するため、有機相に5重量トリパルミチンの総重量に対しての親油性蛍光プローブDIO18を加えて、実施例1を繰返す。この調製物のサイズ特性決定の結果は、以下の通りである:DV50=2.38μm;DN=1.45μm。実施例2a-2eDSTAP-含有正荷電マイクロバブルの製造:DAPCとカチオン性脂質DSTAPの混合物下記表1の相対比参照15mgおよび985mgのPEG4000を、50°Cでt-ブタノール10mLに溶解する。溶液を10mLバイアルにサンプリングし1バイアル当り50mgの乾燥物、次いでChristEpsilon2-12DS冷凍乾燥機-30°C、0.56mバール、24hで凍結乾燥する。さらに乾燥25°C、0.1mバール、5時間後、エラストマーストッパーでバイアルに栓をし、アルミニウムフリップで封鎖する。得られる凍結乾燥物を所望の気体C4F10/N2=50:50V/Vにさらし、次いで5mLのPBS緩衝溶液に再分散して、正荷電マイクロバブルの懸濁液を得る。懸濁マイクロバブルのサイズ特性決定を表1に示す。表1:DSTAP-含有マイクロバブル実施例3a-3c負荷電マイクロバブルの製造:DAPC/DSTAP混合物の代わりに、同じ合計量15mgのDPPG/DSPC混合物を表2に示す種々の相対量を用いて、実施例2a-2eの製法を繰返す、懸濁マイクロバブルのサイズ特性決定を表2に示す。表2:DPPG-含有マイクロバブル実施例4正荷電マイクロバブルの製造:プロピレングリコールとグリセロール3:10W/Wの混合物5.4W/Wを含有する100mLの水に、DSTAP200mgを80°Cで5分間分散し、次いで室温まで冷却する。分散液をC4F10雰囲気下の反応器に移し、20000rpmPolytronPT3000で10分間均質化し、その間、反応器口が液面より少し上になるように、回転固定子ミキシングシャフトを保持する。得られるマイクロバブルを、水を用い遠心分離で2回洗い、次いでデキストラン7.5溶液に再分散する。懸濁液を10mLバイアルにサンプリングする1バイアル当り2mL。バイアルを-45°Cに冷却し、24時間凍結乾燥し、次いで栓をし、封鎖し、室温保持する。蒸留水に再懸濁したマイクロバブルのサイズ特性決定は、以下の通りである:DV=4.04;DN=1.75。実施例5a-5d負荷電ミセルの製造:50mgのGd-DTPA-SE2痕跡量の放射性153Gdを含有および10mgのNaDOCを、3mm音波処理プローブを取付けたBranson250音波発生器出力:30、10分を用いて、5水性グルコース10mLに分散して、アニオン性ミセルの水性懸濁液を得る。下記表3で示されるように、異なる量の種々の化合物を同容量の水性グルコース溶液に分散して、同製法を繰返す。表3:負荷電ミセル実施例6a-6fDPPA-含有負荷電ミセルの製造:異なる量のアニオン性リン脂質DPPAおよび中性リン脂質DPPCを下記表4に示す、16mgのPluronicF68と共に、3mm音波処理プローブBranson250音波発生器、出力30、10分を用いて、10mLのPBSに分散する。少量のDPPC-H310mLの最終懸濁液に対し約2.5μCiを、放射性マーカーとしてミセル調製物に加える。音波処理後、溶液を0.2μmフィルターミリポアで濾過する。室温に冷却後、ミセルサイズをMalvernZetasizer3000HSAで測定し、10mLのLSCカクテルHionicFluorに希釈する50μLの溶液を用いて、比放射能を測定し、次いでTricarb2200A液体シンチレーション分析器PackardBioscienceでカウントする。表4:DPPA-含有負電荷ミセル実施例7a-7bDSPE-PEG含有負荷電ミセルの製造:20mgのDSPE-PEG2000を丸底フラスコにて、60°Cで1mLのクロロホルム/エタノール1/1,V/Vに溶解し、溶剤混合物を減圧下で蒸発し、フラスコの内壁に薄膜を形成する。次にこの脂質薄膜を60°Cにて10mLのHepes緩衝液で30分間水和する。次いで溶液を0.2μmフィルターで濾過し、室温に冷却せしめてから特性決定に付す。濾過した溶液を水に希釈し希釈比1:3、MalvernZetasizer3000HSAでサイズ分布を分析する。上記手順による2種調製物の結果を、下記表5に要約する。表5実施例8エチル-SPC3含有正荷電ミセルの製造:16mgのエチル-SPC3および16mgのPluronicF68を、3mm音波処理プローブを取付けたBranson250音波発生器出力:30、10分を用いて、5水性グルコース10mLに分散して、カチオン性ミセルの水性懸濁液を得る。実施例9a-9eDSTAP-含有正荷電ミセルの製造:負荷電DPPAの代わりに正荷電DSTAPを用いて、実施例6a-6fの製法を繰返す。各種調製物の脂質およびリン脂質の相対量を、下記表6に示す。表6:DSTAP-含有正荷電ミセル実施例10a-10bカチオン性マイクロバルーンとアニオン性ミセルによるアセンブリーの製造:実施例1のマイクロバルーン懸濁液1mLを、それぞれ実施例5aまたは実施例5bの、異なる容量下記表7に示すのミセル調製物と混合する。1時間後、懸濁液をPBSを用い遠心分離600g、5分間で2回洗い、PBS1.2mLに再分散する。懸濁液のGd153放射能ガンマ計数を測定することによりCobraIIAutogamma計器を使用、結合ミセルの量初期ミセル調製物で測定した放射能に対する、アセンブリー懸濁液で測定した放射能ので表示を測定する。結果を表7に示す。表7上記表7から推論できるように、結合ミセルの相対量すなわち、添加ミセルの総量に対する結合ミセルのは、マイクロベシクル懸濁液に加えたミセルの総量すなわち、ミセル懸濁液の容量の増加によって減少するが、それにもかかわらず、結合ミセルの絶対量表7の最初と最後の欄の積productによって示されるは増加する。実施例1のマイクロバルーンと実施例5cまたは5dのミセル調製物によるアセンブリーを製造することにより、実質的に同じ結果が得られる。実施例11実施例10a-10bのアセンブリーの結合活性の測定:実施例10aおよび10bのアセンブリー10μLおよび100μLの各ミセル懸濁液調製物の結合活性を試験するため、中性アビジン被覆面を以下の手順で準備する。12ウェルプレートNunc,登録商標の各ウェルに、カーボネート緩衝液carbonateBufferpH9.5、300μLおよび中性アビジンNeutrAvidin,登録商標Pierce、1mg/mL、50μLを加える。インキューベーション-4°C、一夜後、ウェルをTween200.1含有のPBSで2回およびPBSで2回洗う。ウシ血清アルブミンPBS中2、350μLを加え、インキューベーション25°C、1h後、ウェルをTween200.1含有のPBSで2回およびPBSで2回洗う。実施例10aおよび10bに従って製造した2108アセンブリーの一部を、各ウェルに加え、次いでウェルをPBSで満たし、密封し、プレートをひっくり返す。反転インキューベーション25°C、2h後、ウェルをPBSで2回洗い、40×倍率レンズの光学顕微鏡で表面を観察する。実施例10bの2つのアセンブリーは共にビオチン化ミセルを有し、中性アビジン被覆面に対し親和力を示し、100μL/mL調製物は10μL/mL調製物に対し、より高い有効範囲coverageの表面を付与する。その代わりに、実施例10aの対応する非ビオチン化調製物は、中性アビジン被覆面への結合活性を全く示さない。実施例1のマイクロバルーンおよび実施例5cの非ビオチン化ミセルからなるアセンブリーの結合活性を、実施例1のマイクロバルーンおよび実施例5dのビオチン化ミセルからなる対応アセンブリーのそれと比較することにより、実質的に同じ結果が得られる。実施例12a-12bカチオン性マイクロバブルとアニオン性ミセルによるアセンブリーの製造:実施例2dのマイクロバブル懸濁液1mLを、それぞれ実施例5aまたは5bの異なる容量下記表8に示すのミセル調製物と混合する。懸濁液を緩やかに1時間攪拌し、次いでTrisグリセロール緩衝液を用い、遠心分離180g、5分で2回洗う。下層液を捨て、残留物をTrisグリセロール緩衝液1mLに分散する。得られるアセンブリーのサイズ、濃度およびζ-電位を、表8に示す。表8両方の場合に、ミセル懸濁液の容量増加は、得られるそれぞれのアセンブリー懸濁液のζ-電位の減少を決定する。実施例2dのマイクロバブル懸濁液の代わりに実施例2cまたは2eのマイクロバブル懸濁液を使用し、または実施例5aおよび5bのミセル調製物のそれぞれの代わりに実施例5cおよび5dのミセル調製物を使用することにより、実質的に同じ結果が得られる。実施例13実施例12a-12bのアセンブリーの結合活性の測定:実施例12a-12bのアセンブリーの結合活性を試験するため、実施例11の記載に準じて、中性アビジン被覆面を準備し、次いで実施例12aおよび12bの調製物について、異なる量300、100、30および10μLで試験する。100μL/mLおよび300μL/mLの実施例12bの調製物について、光学顕微鏡で標識結合活性を観察する。30μL/mLの調製物の場合結合の低下が見られるが、10μL/mL混合物では粗末な結合を示す。実施例12aの全てのアセンブリービオチン化ミセルを含有せずは、結合活性を全く示さない。実施例14a-14bカチオン性マイクロバブルとアニオン性ミセルによるアセンブリーの製造:実施例4に従って得たバイアルの凍結乾燥内容物を、C4F10にさらし、2mLの蒸留水に再分散する。懸濁液を、PBSを用い遠心分離180g、10分で2回洗い、2mLのPBSに再分散する。実施例5aまたは5bに従って製造した50μLのミセル調製物をそれぞれ加え、混合物をC4F10雰囲気下、回転攪拌器で一夜攪拌し、次いでPBSを用い遠心分離180g、10分で2回洗い、最後に2mLのPBSに再分散する。下記表9に、実施例14aおよび14bのアセンブリーの特性決定を示す。表9上記表9から推論できるように、形成したアセンブリーにおいてミセルの実質的全体がマイクロバブルに会合し、そして該アセンブリーは初期のマイクロバブルと実質上同じ平均直径を有している。実施例15アニオン性マイクロバブルとカチオン性ミセルによるアセンブリーの製造:実施例3bに従って製造したマイクロバブル懸濁液1mLを、実施例8の異なる容量下記表10に示すのミセル調製物と混合する。懸濁液を緩やかに1時間攪拌し、次いでTrisグリセロール緩衝液を用い、遠心分離180g、5分で2回洗う。下層液を捨て、得られるアセンブリーをTrisグリセロール緩衝液1mLに分散する。表10にアセンブリーの特性決定を示す。表10マイクロバブル懸濁液の初期ζ-電位の符号の逆転を決定しうるミセルの量において、アセンブリーの平均寸法は、初期マイクロバブルの寸法に近づくことが観察される。実施例16カチオン性マイクロバブルとアニオン性ミセルを包含するアセンブリー調製物における荷電化合物量の関数として結合ミセル量の測定:トータル30のアセンブリー調製物を得るため、5mLガラスチューブにて、実施例2a-2eに従って製造したPBS中の1mLのマイクロバブル懸濁液に、実施例6a-6fに従って製造した300μLのミセル溶液を混合して、各種アセンブリー懸濁液を製造する。混合した懸濁液を30分間穏やかに攪拌し、次いで遠心分離180g、10分で2回洗って、未結合物質を除去する。ミセル内に組込まれる放射性標識分子DPPC-3Hを投与して、マイクロバブルに結合するミセルの脂質分子の量を求める。図1は測定結果を示し、ここで、線A~Eはそれぞれ、実施例2a-2eに従って製造した各マイクロベシクルを有するアセンブリーの、上記ミセル中の荷電化合物の量の関数として、マイクロベシクルに結合するミセルの量を表示する。実施例6a荷電界面活性剤なしのミセルを有するアセンブリー調製物の場合、結合ミセルが実質的に見られないことに注目することができる。さらに、マイクロベシクルに結合するミセルの量は、マイクロベシクルに含まれる荷電化合物の量の増加に伴なって増加する。結局、この特定組合せのミセル/マイクロベシクルアセンブリーの場合、ミセル中の荷電化合物の相対量が総重量の約1~5w/wであるとき、マイクロベシクルに結合するミセルの量が高くなることを認めることができる。実施例17アニオン性マイクロバブルとカチオン性ミセルを包含するアセンブリー調製物における荷電化合物量の関数として結合ミセル量の測定:トータル15のアセンブリー調製物を得るため、それぞれ5mLガラスチューブにて、実施例3a-3cに従って製造したマイクロバブル懸濁液各1mLに、実施例9a-9eに従って製造したミセル溶液各300μLを混合して、各種アセンブリー懸濁液を製造する。混合した懸濁液を30分間穏やかに攪拌し、次いで遠心分離180g、10分で2回洗って、未結合物質を除去する。ミセル内に組込まれる放射性標識分子DPPC-3Hを投与して、マイクロバブルに結合するミセルの脂質分子の量を求める。実施例16のアセンブリー調製物の場合と同様な結果が認められ、すなわち、マイクロベシクルに含まれる荷電化合物の量を増加することにより、マイクロベシクルに結合するミセルの量を増加でき、特にマイクロベシクルが低量の荷電化合物を含有するアセンブリーの場合、ミセル中の荷電成分の相対量が約1~5w/wのとき、マイクロベシクルに結合するミセルの量が高くなる。実施例18異なる量の荷電化合物を有するマイクロバブル懸濁液に加えるミセル量の関数として結合ミセル量の測定:トータル12のアセンブリー調製物を得るため、実施例7aまたは7bに従って製造した異なる量50、100、250および500μLのミセル調製物を、実施例2b、2dおよび2eに従って製造した1mLのマイクロバブル調製物とコンバインする特に2bおよび2dは7aとコンバインし、2eは7bとコンバインする。混合物を30分間穏やかに攪拌し、水中の遠心分離180g/10分で2回洗って、未結合物質を除去する。得られる懸濁液について、サイズ分布の測定にはCoulterCounterにより、およびζ-電位測定にはMalvernZetasizerにより特性決定する。サンプルの一部を0.2mバールで24時間凍結乾燥し、凍結乾燥物をHPLCで分析して、アセンブリー中のDSPE-PEGの量PE-PEGμg/バブルmLを測定する。結果を下記表11で要約するが、表11において、アセンブリーを形成する混合物に含まれるDSPE-PEGの初期量、アセンブリー中のDSPE-PEGの最終量結合ミセルの量に相当、最終アセンブリーの正電荷と負電荷の比電荷当量で表示および最終懸濁液のそれぞれのζ-電位が示されている。表11:カチオン性マイクロバブルとアニオン性ミセル上記表11から、一般に、マイクロベシクル中の荷電化合物の量が高くなればなる程、最終アセンブリー中の結合ミセルの量が高くなることが認められる。加えて、同じマイクロバブル調製物に関して、結合DSPE-PEGの量が高くなればなる程、EC比は高くなり、かつ各ζ-電位値は低くなる。実施例19カチオン性マイクロベシクルとアニオン性ミセルのアセンブリーおよびアニオン性マイクロベシクルとアニオン性ミセルの比較混合物:20mgのDSPE-PEG2000を計量し、丸底フラスコ中60°Cにてクロロホルム/メタノール1/1、v/vに溶解し、該溶剤混合物を減圧蒸発させて、フラスコの内壁に薄膜を沈着させる。この膜をさらに減圧室で一夜乾燥する。脂質薄膜を60°Cにて5グルコース10mLで30分間水和し、溶液を0.2μmフィルターで濾過し、次いで室温まで冷却してから、特性決定を行なう。この製造を2回繰返す。実施例2e正荷電および3b負荷電の記載に準じ、DAPCとDSTAPの混合物50/50、w/wまたはDSPCとDPPGの混合物50/50、w/wを用いて、マイクロバブルを製造する。バイアルをC4F10/N250:50、v/vにさらしてから、再組成する。2.5mLのミセル溶液を2.5mLの5グルコースで希釈する。ミセルの希釈溶液を用いて、凍結乾燥したマイクロバブルを再組成し、2分間渦攪拌し、次いで30分間穏やかに混合する。得られる懸濁液を5グルコースを用いて2回洗い遠心分離,180g/10分、上層液を2.5mLの5グルコースに再分散する。各懸濁液のζ-電位を、MalvernZetasizer3000Hsaで測定する50μL/NaCl10mL、1mM。各懸濁液のDSPE-PEG2000量をHPLCで測定する。結果を下記表12に示す。表12:アニオン性ミセルとアニオン性またはカチオン性マイクロバブルの混合物上記表12から、アニオン性マイクロバブルでのアニオン性ミセルの結合は実質的に得られず、すなわち、最終混合物においてごくわずかな量のDSPE-PEGが見つけられるにすぎず、一方、ζ-電位は実質的に負のままであることが認められる。実施例20カチオン性マイクロバルーン-コロイド金アセンブリー:実施例1に従って製造したカチオン性マイクロバルーンの懸濁液を、クエン酸ナトリウムで安定化した金粒子のコロイド懸濁液Polysciences、60nmと、各種の比金粒子の数/マイクロバルーンの数で表示、下記表13参照で混合する。2時間後、浮遊する粒子を分離し、蒸留水に再分散する。表13は、マイクロバルン1個当り約200金粒子の比でζ-電位の中性値が得られることを示す。表13実施例21カチオン性マイクロバブル-磁鉄鉱アセンブリー:US特許5545395の記載に従って、DPPA/PluronicF108FE/DPPA/PluronicF108比=3:15:15、mg/mLで被覆した磁鉄鉱を製造する。溶液をTris1g/L/グリセロール0.3M緩衝液pH7.05で100倍に希釈する。5mLの磁鉄鉱溶液を用い、SF6雰囲気下で、カチオン性マイクロバブル実施例2dに従って製造、但し、使用する気体はC4F10/N2混合物の代わりにSF6であるを再分散する。2分の渦攪拌後、懸濁液を1時間穏やかに混合する。次いで浮遊粒子を、Tris/グリセロール緩衝液を用い遠心分離180g/10分で2回洗う。サイズと濃度は、CoultercounterMultisizerで測定する。ζ-電位は、MalvernZetasizer3000Hsaで測定する希釈:50μL/10mL水。磁鉄鉱結合は、緩和時間T2測定法Bruecker:MinispecMQ20で評価し、磁鉄鉱粒子を有さないマイクロバブルの同じ製造で実施した対照と比較する。結果を下記表14に示す。表14上記表14に示されるように、対照懸濁液に関してζ-電位の減少に加えて、T2の実質的な減少も見られ、このことから、磁鉄鉱含有ミセルのマイクロバブルに対する実質的な結合が確認される。実施例22インビボ投与での荷電マイクロバブル表面に対する反対荷電ミセルの効果:DAPCとDSTAPの混合物80/20、w/wを用い、実施例2dの記載に準じて正荷電マイクロバブルを製造する。DSPCとDPPGの混合物50/50、w/wを用い、実施例3bの記載に準じて負荷電マイクロバブルを製造する。バイアルをC4F10/N250/50、v/vにさらしてから、Tris/グリセロール緩衝液5mLで再組成する。実施例6f負荷電および実施例8正荷電に従って、各ミセルを製造する。その後、以下に示すマイクロバブルまたはアセンブリーの懸濁液を製造する。懸濁液A:600μLのTris/グリセロール緩衝液を2mLのマイクロバブル実施例2d-正荷電と混合し、30分間穏やかに混合する。懸濁液B:実施例6g負荷電に係る600μLのミセルを、2mLのマイクロバブル実施例2d-正荷電と混合し、30分間穏やかに混合する。懸濁液C:600μLのTris/グリセロール緩衝液を2mLのマイクロバブル実施例3b-負荷電と混合し、30分間穏やかに混合する。懸濁液D:実施例8正荷電に係る600μLのミセルを2mLのマイクロバブル実施例3b-負荷電と混合し、30分間穏やかに混合する。全ての懸濁液を、Tris/グリセロール緩衝液を用い遠心分離で、180g/10分2回洗い、上層液を2mLの緩衝液に再分散する。サイズおよび濃度は、Coulterカウンターで測定する。各懸濁液のζ-電位は、MalvernZetasizer3000Hsaで測定し50μL/10mLNaCl,1mM、下記表15に示す。表15ウサギの耳静脈に、懸濁液を体重1kg当りマイクロバブル5E06の用量で注射する。CoherentContrastImagingCCIにて、断続イメージング2フレーム/sの4C1-Sトランスデューサーを備えたAcusonSequoia512および高いメカニカルインデックスmechanicalindexMIを用いて、二次元超音波検査を行なう。腎臓の映像を3分間ビデオレコーダーで記録し、一連の画面を分析して、皮質の選定した関心領域ROIの時間の関数として、平均ピクセル強さを測定する図2および3。図2および3で明らかなように、マイクロバブルに対する反対電荷のミセルの添加は、マイクロバブルのインビボ挙動を劇的に変える。すなわち、正荷電バブルは腎臓の皮質ではほとんど検出できない懸濁液A。しかし、負荷電ミセルとのインキュベーション後、同じマイクロバブルはROIで強いシグナルを示す懸濁液B。同様に、負荷電マイクロバブル懸濁液Cは腎臓で強いシグナルを示す。しかし、正荷電ミセルとの混合後では、ROIで検出できるシグナルはほとんどない。実施例23カチオン性マイクロバブルと、薬物を有するアニオン性ミセルのアセンブリー:2mLのマイクロバブル懸濁液実施例Ex.2aに従ってPBSに分散して製造を、下記表16に示す異なる量のFungizone登録商標溶液アンフォテリシンBのPBS中デオキシコール酸ナトリウムによるミセル懸濁液,BristolMyersSquibbと混合する。懸濁液を1時間穏やかに攪拌し、次いでPBS緩衝液を用い遠心分離180g/5分で2回洗う。下層液を捨て、得られるアセンブリーを緩衝液1mLに分散する。サイズおよび濃度は、CoulterCounterMultisizerで測定する孔:30μm、50μL/0.9NaCl100mL。ζ-電位はMalvernZetasizer3000Hsaで測定する50μL/蒸留水10mL。マイクロバブル上のアンフォテリシンB量を、吸光分光分析で測定し409nm、CHCl3/MeOH1:12mL中50μLのアセンブリー、Fungizone登録商標の検量線と比較する。表16で例証される結果は、ミセルの添加量を増加することにより、アセンブリー中に薬物の増量を含ませうることを示す。表16:薬物を持つアセンブリー実施例24二重層ミセルを持つアセンブリー:Ex.24a:負荷電バブルの製造US特許No.5830435の実施例3に記載の方法に類似する方法を用い、DPPC/DPPS-含有マイクロバブルを製造する。簡単に、1gのプロピレングリコールを含有する100mLの蒸留水に、59.2mgのDPPCおよび40.8mgのDPPSを分散することにより、多重層リポソームMLVsが得られる。このリポソームを攪拌下70°Cで30分間インキュベーションする。リポソームの平均直径は、DNで約1.4μmおよびDVで2.7μmである。高速機械式乳化器MegatronMT3000、Kinematica、スイスを備えた気密ガラス反応容器に、上記リポソーム懸濁液を入れる。乳化器の混合室に、C4F10含有気体袋を接続する。均質化10000rpm、1分の後に、マイクロバブルの乳白色懸濁液を得る。下層液大部分リポソーム含有、約90mLを、デカンテーションで除去する。上層液マイクロバブル含有を回収し、蒸留水に再懸濁して総容量100mLとする。デカンテーション工程を繰返し、最終のバブル懸濁液を10マルトースに再懸濁する。懸濁液のアリコートを10mLガラスバイアルに集めバイアル1個当り1mLの懸濁液、該サンプルを-45°Cで冷凍し、凍結乾燥する。凍結乾燥後、バイアルをゴム栓で閉鎖し、排気し、C4F10/空気1:1、v/v混合物を含有する気体混合物を充填する。バイアルに栓を介して2mLの蒸留水を注入し、ハンドシェイク手振動によって、マイクロバブルが生成する。Ex.24b:カチオン性およびアニオン性ミセルの製造Ex.24b13.73mg/mLのDSPE-PTE020マルチアームPEG-リン脂質、NOFCorporation、日本および1.27mgのカチオン性リン脂質DPEPCジパルミトイルグリセロ-3-エチルホスホコリン、Avanti登録商標、PolarLipidsIncUSAを用い、カチオン性ミセルを製造する。Ex.24b24.1mg/mLのDSPE-PEG2000および0.9mg/mLのGPIIbIIIa結合リポペプチドDPPE-PEG2000-Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val、US特許6139819の実施例3に従って製造を用い、アニオン性および官能化ミセルを製造する。正および負荷電ミセルは共に、5グルコース溶液中で製造する。Ex.24c:負荷電バブルと反対電荷を有するマルチ-MACs層によるアセンブリーの製造Ex.24aに従って製造した約1×109負荷電マイクロバブルを含有する2つの調製物に、Ex.24b1に従って製造した50μLまたは500μLのカチオン性ミセルをそれぞれ加える。混合物を30分間穏やかに攪拌し、次いで遠心分離1000rpm、10分で2回洗い、5グルコース溶液に再懸濁する。得られるアセンブリーAssemblyの測定したサイズおよびゼータ電位を、下記表17に示すAssembly1。結果から、負荷電マイクロバブルをカチオン性ミセルの層で被覆した後、アセンブリー懸濁液の測定ゼータ電位は正になることが示される。次に、50μLのカチオン性ミセルを含有するアセンブリーおよび500μLのカチオン性ミセルを含有するアセンブリーにそれぞれ、100μLおよび250μLのアニオン性ミセル懸濁液Ex.24b2に従って製造を加える。2つの混合物を30分間穏やかに攪拌し、遠心分離1000rpm、10分で2回洗い、5グルコース溶液に再懸濁する。得られる二重層アセンブリーの直径およびゼータ電位値を、表17に示すAssembly2。第二層の負ミセルの存在は、ゼータ電位の対応する負の値を決定する。表17また、他のタイプのMACs、たとえばリポソームおよびナノ粒子を用いて、複数の交番荷電層からなる同様なアセンブリーも製造することができる。たとえば、負荷電マイクロバブルを、カチオン性および薬物含有のリポソームで被覆し、次いで第二層の標的成分を有するアニオン性ミセルを被覆することができる。実施例25エマルジョンからアセンブリーの製造:DAPC/DSTAP80:20、2mg/mLを含有する50mLの蒸留水を、70°Cで30分間加熱し、次いで室温で冷却する。この水性相において、高速ホモジナイザーPolytron、10000rpm、1分を用い4mLのパーフルオロヘキサンを乳化する。得られるエマルジョンは、MalvernMastersizerで測定して、容量平均直径DV505.0μmおよび数平均直径DN2.7μmを示す。エマルジョンを遠心分離で洗い、水に再懸濁する。該カチオン性エマルジョンの3アリコートのそれぞれに、実施例24b2に従って製造した異なる量のアニオン性ミセルを加え、この場合の各濃度はエマルジョン1mL当り135μL、270μLおよび540μLである。インキュベーション穏やかな攪拌下、室温で30分および遠心分離による過剰ミセルの除去後、ミセル-被覆エマルジョンを20w/wPEG4000水溶液に再分散する。エマルジョン-ミセルアセンブリーをバイアルに分配し2mL/バイアル、次いで冷凍し、バイアル中で凍結乾燥する。凍結乾燥物バイアルの空気を排出し、C4F10に取り替える。2mLの5グルコース溶液で再組成後、乳白色のマイクロバブル-ミセルアセンブリー懸濁液を得る。Coulterカウンターおよびゼータ電位Z-pot分析を行ない、その結果を下記表18に示す。表18アニオン性ミセルを増量した製造は、マイクロバブルの増量をもたらす。さらに、表面電荷特性も要求に応じて調節しうるゼータ電位値が正から負に変化する。実施例26気体エマルジョンからアセンブリーの製造:実施例24aに従い、気相としてC4F10およびリン脂質としてDPPS2mg/mLを用いて負荷電マイクロバブルを得、安定したマイクロバブルとする。DPPSリポソーム懸濁液の高速機械乳化Megatron登録商標MT3000、Kinematica、スイスによるバブル発生後、マイクロバブルを、1μmポリカーボネート膜Nuclepore登録商標を用いる30分の濾過で洗って、バブル懸濁液中の過剰リン脂質を除去する。P-セレクチンselectinに反してラットの抗マウスモノクローナルIgG1に結合するDPEPCおよびDSPE-PEG2000含有のカチオン性ミセルモル比70:30、5mg/mLを、バブル懸濁液に加える1mLのマイクロバブル約5×109バブル/mLの場合、50μLのミセル。混合物を室温で30分間穏やかに攪拌し、次いで遠心分離する。アセンブリー上層液を10マルトース溶液に再懸濁し、冷凍し、凍結乾燥する2mL/バイアル。凍結乾燥後、凍結乾燥物をC4F10で処理し、2mLの蒸留水で再組成する。Coulter分析により、凍結乾燥後に、90以上のバブル-ミセルアセンブリーがなお無傷のままであることがわかった。これらのマイクロバブルは、DN1.3μmおよびDV2.9μmを示した。流動血球計算測定により、アセンブリー表面の生化学活性IgG1抗体の存在を確認した。"