A配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雄カニクイザル;及びB配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雌カニクイザルを含む、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を作製するためのキット。a配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雄カニクイザルの精子;及びb配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雌カニクイザルの卵子を含む、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を作製するためのキット。a配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雄カニクイザルの精子;及びb配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雌カニクイザルの卵子を受精させて得られうる受精卵。請求項3記載の受精卵を含む、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を作製するためのキット。a配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雄カニクイザルの精子;及びb配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雌カニクイザルの卵子を受精させる工程を含む、カニクイザルMHC遺伝子ホモ接合体の作製方法。請求項5の方法により得られうるカニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体。A配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雄カニクイザル;及びB配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雌カニクイザルを含む、カニクイザルの集団。MHC全遺伝子以外の遺伝子は不均質heterogeneousである、請求項7に記載の集団。請求項7に記載のカニクイザルの集団のモデル動物としての使用であって、移植、再生医療、癌、骨髄移植及び感染症からなる群から選ばれるいずれかのモデル動物としての使用。請求項7に記載のカニクイザルの集団の維持方法であって、配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雄カニクイザルの精子と配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雌カニクイザルの卵子を体外受精により受精させ、受精卵を雌のカニクイザルの子宮内に移して胎児を発生させることを特徴とする、方法。本発明は、個体間で移植を行っても拒絶反応の起こらないカニクイザル集団を提供することを課題とする。本発明者らは、純系動物をわざわざ得るまでもなく、MHC全遺伝子に関してホモ接合体であるカニクイザルを安定的に供給しうるシステムを構築することにより上記課題を解決するという従来なかった新しい解決手段を着想した。しかしながら、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を安定的に供給するという技術的手段は未だかつて全く知られておらず、本発明者らはその具現化のため多大な試行錯誤を余儀なくされた。膨大な労力と時間を投入して精力的に調査を行った結果、本発明者らは最終的に全MHC遺伝子に関してホモ接合体である雄カニクイザル及び雌カニクイザルを新たに見出すことに成功した。それぞれ別個に200分の1の確率でしか存在しない雌雄のカニクイザルを両方とも発見したことになる。また、雌雄がつがいの形で存在している確率は計算上わずか40000分の1にすぎない。本発明者らは、このつがいのカニクイザルを利用することにより特定のMHC遺伝子に関してホモ接合体であるカニクイザルを安定的に供給しうるシステムを構築でき、ひいては前述の課題を解決できることに思い至った。本発明はかかる知見に基づきさらに検討を重ねた結果完成されたものであり、下記に掲げるものである。[項1]A配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雄カニクイザル;及びB配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雌カニクイザルを含む、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を作製するためのキット。[項2]a配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雄カニクイザルの精子;及びb配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雌カニクイザルの卵子を含む、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を作製するためのキット。[項3]a配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雄カニクイザルの精子;及びb配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雌カニクイザルの卵子を受精させて得られうる受精卵。[項4]項3記載の受精卵を含む、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を作製するためのキット。[項5]a配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雄カニクイザルの精子;及びb配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雌カニクイザルの卵子を受精させる工程を含む、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の作製方法。[項6]項5の方法により得られうるカニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体。[項7]A配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雄カニクイザル;及びB配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雌カニクイザルを含む、カニクイザルの集団。[項8]MHC全遺伝子以外の遺伝子は不均質heterogeneousである、項7に記載の集団。[項9]項7に記載のカニクイザルの集団のモデル動物としての使用であって、移植、再生医療、癌、骨髄移植及び感染症からなる群から選ばれるいずれかのモデル動物としての使用。[項10]項7に記載のカニクイザルの集団の維持方法であって、配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雄カニクイザルの精子と配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雌カニクイザルの卵子を体外受精により受精させ、受精卵を雌のカニクイザルの子宮内に移して胎児を発生させることを特徴とする、方法。本発明のキット及び作製方法を用いると、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を多数作製することができる。カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体が多数存在していると、それらの個体間で移植を行ったとしても拒絶反応が起こらないため、再生医療や癌治療等の研究のための強力なツールとなりうる。これらのカニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を使用して得られたデータは、ヒトに容易に外挿することができる。このため、動物実験からヒトの治療への移行に要する期間が飛躍的に短縮されうる。I.キット本発明のキットは、次の通りである。<キット1>A配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雄カニクイザル;及びB配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雌カニクイザルを含む、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を作製するためのキット。<キット2>a配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雄カニクイザルの精子;及びb配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雌カニクイザルの卵子を含む、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を作製するためのキット。<キット3>a配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雄カニクイザルの精子;及びb配列番号1~10で表されるDNA配列からなるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である少なくとも1種の雌カニクイザルの卵子を受精させて得られうる受精卵を含む、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を作製するためのキット。1.配列番号1~10で表されるDNA配列それぞれ配列番号1~10で表されるDNA配列からなる遺伝子群は、カニクイザルの全てのMHC遺伝子本発明においてMHC全遺伝子という。に相当する。配列番号1はMHCクラスIIβ鎖MHCclassIIantigenbetachainであるMafaDPB1遺伝子のMafaDPB149アレルと呼ばれるDNA配列である。配列番号2はMHCクラスIIα鎖MHCclassIIantigenalphachainであるMafaDPA1遺伝子のMafaDPA10205アレルと呼ばれるDNA配列である。配列番号3はMHCクラスIIβ鎖MHCclassIIantigenbetachainであるMafaDQB1遺伝子のMafaDQB10608アレルと呼ばれるDNA配列である。配列番号4はMHCクラスIIα鎖MHCclassIIantigenalphachainであるMafaDQA1遺伝子のMafaDQA10107アレルと呼ばれるDNA配列である。配列番号5はMHCクラスIIβ鎖MHCclassIIantigenbetachainであるMafaDRB1遺伝子のMafaDRB11007アレルと呼ばれるDNA配列である。配列番号6はMHCクラスIIα鎖MHCclassIIantigenalphachainであるMafaDRA1遺伝子のMafaDRA1010201アレルと呼ばれるDNA配列である。配列番号7はMHCクラスIα鎖MHCclassIIantigenalphachainであるMafaB遺伝子のMafaB0490101アレルと呼ばれるDNA配列である。配列番号8はMHCクラスIα鎖MHCclassIIantigenalphachainであるMafaB遺伝子のMafaB06502アレルと呼ばれるDNA配列である。配列番号9はMHCクラスIα鎖MHCclassIIantigenalphachainであるMafaI遺伝子のMafaI0111アレルと呼ばれるDNA配列である。配列番号10はMHCクラスIα鎖MHCclassIIantigenalphachainであるMafaA遺伝子のMafaA05202アレルと呼ばれるDNA配列である。2.MHC全遺伝子ホモ接合体雄カニクイザル及びMHC全遺伝子ホモ接合体雌カニクイザルそれぞれ配列番号1~10で表されるMHC全遺伝子に関してホモ接合体である雄カニクイザル及び雌カニクイザルは、本発明者らが初めて発見したものである。以下、この雄カニクイザル及び雌カニクイザルのことをそれぞれ雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体及び雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体ということがある。3.雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の精子及び雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の卵子雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の精子は、雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体から得ることができる。取得源としては7~20歳の雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体が好ましい。精子の取得方法としては、特に限定されないが、例えば実施例2の方法等が挙げられる。また、雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の卵子は、雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体から得ることができる。取得源としては4~15歳の雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体が好ましい。取得源としては、特に限定されないが、体重25~35kgの雌カニクイザルが好ましい。卵子の取得方法としては、特に限定されないが、例えば実施例3の方法等が挙げられる。また、特に限定されないが、これらの精子は次のようにして保存することができる。[必要な試薬]1BWWBiggersWhittenandWhittingham’s2BWWCaffeinecAMP3TTEG[必要な物品]1インキュベータ2遠心分離機3顕微鏡415mlチューブ5電動ピペット610mlピペット71mlピペットマン1mlチップ8アスピレータ9冷蔵庫10氷11精子凍結用ストロー12ストロー封入用シリンジ13ストロー封入用パウダー、水14液体窒素15発泡スチロールケース16気層上部凍結用ネット、気層下部凍結用の発泡スチロール板17ピンセット18液体窒素保存用タンク19マクラー精子数カウントチャンバー[方法]I.精液採取後の処理と凍結保存法1精子を電気刺激法により採取した。2採取した精液は15mlチューブに入れ、37°C、5CO2インキュベータ内で静置後、液状部分のみを別のチューブに移し、10mlBWWを加え混和した。3遠心分離による洗浄後、約05ml残して上清を捨てた。4精子数が5000万~1億mlになる様にBWWを加えた後、4°Cで60分間静置した。5その後、氷水中で精子溶液の15量のTTEGTesTriseggyorkbaseglycerol溶液を加え、5分間静置する。これを5回繰り返した。6氷水中で60分間静置した後、精子溶液を凍結用ストローに封入した。7ストローは、液体窒素の気層上部、気層下部で5分ずつ保持し、その後液体窒素中に投入し凍結した。8精子の凍結ストローは、液体窒素の凍結タンク内で保存した。[参考:精子融解法]1チューブにBWWCaffeinecAMPを37°Cに暖めておいた。2液体窒素中からストローを取り出し、室温で30秒間融解する。その後、37°Cの温水中で30秒間融解した。3ストローの両端を切断し、BWWCaffeinecAMP内に融解精子を入れ混和した。437°C、5CO2インキュベータ内で30分間静置した。5その後、遠心分離により洗浄し、スイムアップさせて使用した。なお、本出願人はこれらの精子及び卵子をそれぞれ特許法施行規則第27条の3第1項の規定に準じて分譲する用意がある。4.雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の精子及び雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の卵子を受精させて得られうる受精卵雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の精子及び雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の卵子を受精させて得られうる受精卵は、限定されないが、例えば両者を顕微授精により受精させることによって得ることができる。顕微授精の方法としては、特に限定されないが、例えば実施例4に記載の方法を挙げることができる。顕微授精の他に体外受精法も利用できるが、顕微授精は必要とする精子数が卵子1個につき1個であるのに対し、体外受精法は1~5x105個もの大量の個数が必要である。また顕微授精法の方が受精効率は高くなる。このようにして得られうる受精卵胚を、すぐさま次に説明するとおり雌の子宮内に移すなどして胎児を発生させてもよいし、いったん保存してもよい。なお、特に限定されないが、これらの受精卵胚は次のようにして保存することができる。[胚の凍結融解に必要な試薬]1凍結キットVITRIFICATIONKITVitrificationMediaES、VSKITAZATOBiopharma2融解キット[胚の凍結融解に必要な物品]14welldish21mlピペットマンチップ3Cryotop4実体顕微鏡5胚操作用ガラスピペット6タイマー7ピンセット8液体窒素9発泡スチロールケース10アルミケーン11ケーン用チューブ12加温プレート13インキュベータ[方法]I.胚の凍結1凍結操作の30分以上前から凍結キットのES、およびVSをクリーンベンチ内に置き、室温に温めた。2ES、VSのチューブを転倒混和させた後それぞれを4welldishの別々のwellに注入した。3凍結する胚をインキュベータから取り出し、観察を行った。4胚をピペット先端に保持して、持ち込むメディウムの量を極力少なくし、ES表面に静かにのせてストップウォッチをセットした。5卵子が沈降しながら収縮する事を観察し、その後細胞質体積が完全に回復することを確認した。6持ち込むESを極力少なくして胚をVS表面に移動した。7ピペット内のESをVSで洗浄した後、VS中で胚を2、3度ピペッティングすることで洗浄した。8ポリプロピレンのシートに極少量のVSと共に胚をのせ、液体窒素中に浸漬して凍結を行った。9その後、液体窒素内でシート部にキャップをしてケーンに移し、液体窒素用凍結保存タンク中にて保存した。II.胚の融解1融解操作1時間以上前からTSと融解用の4welldishを37°Cに温めておいた。2融解する胚が凍結保存されているケーンからCryotopを取り出し、液体窒素中に保持しながら融解操作を行う実体顕微鏡の近くに移動させた。3DS、WS12をそれぞれ転倒混和し、4welldishの別々のwellに注入した。4最後に、温めておいたTSを転倒混和して4welldishに注入した。5液体窒素中にてCryotopのキャップをはずし、37°CのTS中にシート部分を浸漬して胚の融解を行い、ストップウォッチをセットした。6融解開始から1分以内に、胚をDS底面中央に移し、上からピペット内のTSをかけて3分間静置する。7次にWS1底面中央に胚を移動して、上からピペット内のDSを振りかけて5分静置する。8最後にWS1の持ち込みを極力少なくして、胚をWS2の中央表面に乗せ加温プレート上で5分間静置した。9形態的に正常な胚のみを20BS添加のCMRL1066に移し、38°C、5CO2、5O2条件下で培養した。このようにして得られうる受精卵胚を従来の方法にしたがって雌の子宮内に移すなどすることにより胎児とし、さらにこれを従来の方法にしたがって飼育することによって、雄MHC全遺伝子ホモ接合体又は雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を得ることができる。発情期にある6歳以上の雌の子宮内に移すのが好ましい。子宮内に戻してから通常約160日後に子供が産まれる。受精卵から個体を取得する方法として具体的には、限定されないが、例えば次の方法を挙げることができる。腹腔鏡によって卵巣観察を行い、排卵跡の確認された6歳以上のメス個体の卵管内に腹腔鏡を用いて胚移植する。その方法としては、下記を挙げることができる。移植後約30日後に超音波診断装置を用いて胎嚢と心拍動を確認し、その後移植後約160日後に子供が得られる。[準備物品等]1腹腔鏡2胚移植カテーテル用外套管トラカール、移植鉗子用外套管トラカール移植用鉗子および操作用鉗子3移植用カテーテル4カテーテルのホルダー5移植用ガイド61mlシリンジ7ディッシュFalcon30372枚8実体顕微鏡9CMRL106610ピンセットレシピエント個体月経から1016日目の成熟メスカニクイザルの卵巣を腹腔鏡下で観察し、排卵跡の確認された個体を用いた。[胚移植]48細胞期または胚盤胞期の顕微授精胚を移植胚とし、移植した。1移植当日の朝、受精胚を観察し写真等記録しておいた。21mlシリンジに胚移植用カテーテルを装着し、カテーテル内には前日からインキュベートしておいた培養液を充填させたカテーテル内には先端まで培養液があること。3胚を1枚目のディッシュで洗浄し、2枚目のディッシュに移した2個以上の場合は胚をくっつけておいた。4ピンセットでカテーテルを保持し、2枚目のディッシュを使ってカテーテル内に胚を吸引した。[卵管内胚移植]1レシピエントとなる個体の排卵側の卵管および卵管采の場所を確認した。2腹腔鏡の操作鉗子挿入部とは逆の位置に、移植用外套管を挿入し、カテーテル用ガイドを入れた。3卵管采から卵管内に、移植用カテーテルのガイドを挿入した。4卵管走行などの確認ができた後、移植用カテーテルをゆっくり挿入した。5卵管采に移植用カテーテルを確実に挿入したら、内筒をゆっくり押し、胚を卵管内に移植し、移植した胚が戻らないように慎重に卵管内からカテーテルを抜いた。6すぐに実体顕微鏡下で、カテーテル内を洗浄し、胚が残っていないことを確認した。妊娠診断は、移植約1ヶ月目に超音波診断にて行った。そして、このようにして得られた雄雌カニクイザルを利用することにより、雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の精子及び雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の卵子を受精させて得られうる受精卵を再び得ることができる。これを繰り返すことにより、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を容易に多数取得することができる。5.キット1キット1は、少なくとも1種の雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体及び少なくとも1種の雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を含む、カニクイザルMHC遺伝子ホモ接合体を作製するためのキットである。キット1は、雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体及び雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の生命を維持するために必要な機器又は材料を含んでいてもよい。そのような機器としては、限定されないが、例えば、飼育用ケージ等が挙げられる。飼育用ケージとしては、特に限定されないが、例えば、幅x高さx奥行が500x800x800mmを規格とする箱形ステンレス製ケージで、給水、給餌設備と排尿、排糞等の生理的要求を満たすものであり、かつ、清浄状態と保つために洗浄作業が行いやすい構造をもつものであれば好ましい。さらに、動物の福祉エンリッチメントに配慮し、止まり木、ぶら下がり棒等の設備が備わっているものであればより好ましい。キット1は、雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体及び雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を受精させるために必要な機器又は材料を含んでいてもよい。そのような機器としては、限定されないが、例えば、顕微授精法に用いられる機器又は材料等が挙げられる。そのような材料としては、限定されないが、例えば、実施例4に記載のもの等が挙げられる。キット1は、カニクイザルMHC遺伝子ホモ接合体を作製するための手順を示した指示書を含んでいてもよい。6.キット2キット2は、少なくとも1種の雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の精子及び少なくとも1種の雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の卵子を含む、カニクイザルMHC遺伝子ホモ接合体を作製するためのキットである。キット2は、雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の精子及び雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の卵子の活性を維持するために必要な機器又は材料を含んでいてもよい。そのような機器としては、限定されないが、例えば、実施例4で使用したもの等が挙げられる。キット2は、精子と卵子を受精させるために必要な機器又は材料を含んでいてもよい。そのような機器としては、限定されないが、実施例4で使用したもの等が挙げられる。キット2は、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を作製するための手順を示した指示書を含んでいてもよい。7.キット3キット3は、少なくとも1種の雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の精子及び少なくとも1種の雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の卵子を受精させて得られうる受精卵を含む、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を作製するためのキットである。キット3は、前述の受精卵の活性を維持するために必要な機器又は材料を含んでいてもよい。そのような機器としては、限定されないが、例えば、実施例4で使用したもの等が挙げられる。キット3は、受精卵から個体を得るために必要な機器又は材料を含んでいてもよい。そのような機器としては、限定されないが、実施例4で使用したもの、及び胚移植に使用するものとして先述したもの等が挙げられる。キット3は、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体を作製するための手順を示した指示書を含んでいてもよい。II.作製方法本発明の作製方法は、雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の精子及び雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の卵子を受精させる工程を含む、カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の作製方法である。精子と卵子の受精は、顕微授精によって行うことが好ましい。両者を受精させることによって受精卵を生じさせ、さらにこれから個体を生じさせて飼育することにより多数のカニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体カニクイザルの集団を得ることができる。以下、本発明を試験例及び実施例に基づき具体的に説明する。ただし、本発明はこれらの具体例に限定されるものではない。実施例1.雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体及び雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の取得[実験方法]1.約千頭のカニクイザルにおける末梢血よりRNAを抽出した。具体的には次の通り行った。大腿静脈より約1mLを採血した。1mLの血液に3mLのTRIzolReagentInvitrogenを加え、両者を混合することにより、RNAをTriSol溶液中に固定させた。この溶液に800μLのクロロホルムを加え混合した後、8000xg、4°C、20分間の条件にて遠心分離し、1mLの上層を2mLチューブEppendorfに移した。この溶液に1mLのイソプロピルアルコールWakoを加え、転倒撹拌した後、12000xg、4°C、20分間の条件にて遠心分離し、上清を捨て沈査を得た。この沈査に1mLの70エタノールWakoを加え、転倒撹拌した後、12000xg、4°C、20分間の条件にて遠心分離し、上清を捨て沈査を得た。最終的に、この沈査を風乾させた後、20μLのDEPCtreatedWaterを加えることによりRNAを抽出して溶解させた。RNA溶液の純度や濃度は分光光度計により測定した。すなわち、RNA溶液の純度は260nm280nmにより算出した。また、RNA溶液の濃度は260nmにおける吸光度より算出した。RNA溶液から1本鎖DNAおよび2本鎖DNAを除去するために、DNaseIAmplificationグレイド、Invitrogenを用いたDNAase処理を行った。すなわち、1μgのRNAに1μLの10XDNaseIReactionBuffer、1μL1UμLのDNaseIを加え、反応液の全量をDEPCtreatedwaterにて10μLに調整した。これを15分間室温に放置した後、1μLの25mMEDTA溶液を加え、85°Cで15分間の熱処理によりDNaseIを失活させた。2.そのRNAを鋳型として、逆転写反応によりcDNAを合成した。具体的には次の通り行った。DNaseI処理したRNAを鋳型として、逆転写酵素ReverTraAceキットTOYOBOを用いて逆転写反応により1本鎖cDNAを合成した。すなわち、1μLのDNaseI処理RNA溶液に、4μLの5xRT緩衝液、2μLのdNTP溶液、1μLのRNAinhibitor、1μLの逆転写酵素、1μLのオリゴdプライマーを加え、反応液の全量をDEPCtreatedwaterにて20μLに調整した。これを30°Cで10分間の後、続いて42°Cで20分間、99°Cで5分間、4°Cで5分間の順で逆転写酵素反応を行い、1本鎖cDNAを合成した。3.そのcDNAを鋳型として、各MHC遺伝子特定的プライマーを用いてPCR反応を行った。具体的には次の通り行った。下記の表1に記したPCRプライマーを選択あるいは設計したものをRTPCR増幅に用いた。PCR増幅はKODFXポリメラーゼTOYOBOを用いた。すなわち、1μLのcDNA溶液に、10μLの2xPCR緩衝液、4μLのdNTP溶液、1μLずつのPCRプライマー、04μLのKODFXポリメラーゼを加え、反応液の全量を滅菌水にて20μLに調整した。これを94°Cで2分間の保温後、続いて98°Cで10秒間、60°Cで30秒間、68°Cで1分間の3ステップを1工程として、これを35回繰り返した。なお、このPCR増幅にはGeneAmpPCRSystem9700を用いた。4.そのPCR産物の塩基配列を決定した。具体的には次の通り行った。1PCR産物の精製はExoSAPを用いた。すなわち、5μLのPCR産物に2μLのExoSAPITを加えた混合液を37°Cで15分間、続いて80°Cで15分間の条件で反応させた。PCR産物のシークエンシング反応には、BigDyeTerminatorv31CycleSequencingKitを用いた。すなわち、1μLの産物に、1μLのTerminatorReadyReactionMix、15μLの5xSequencingBuffer、1μLのPCR増幅用プライマーを加え、55μLの滅菌水にて反応液の全量を10μLに調整した。これを95°Cで1分間の保温後、続いて95°Cで10秒間、50°Cで5秒間、60°Cで25分間の3ステップを1工程として、これを30回繰り返した。なお、このPCR増幅にはGeneAmpPCRSystem9700を用いた。シークエンシング反応産物はCleanSEQを用いて精製した。すなわち、シークエンシング反応産物に10μLの磁気ビーズ溶液および42μLの85エタノールを加えて攪拌した後、PCRプレートをマグネットプレート上に置き、磁気ビーズを5分間吸着させた。その後、溶液のみを取り除き、室温にて10分間乾燥させ、これに40μLの滅菌水を加え、マグネットプレート上で5分間静置することでDNAを溶解させた。このうちの35μLを別のPCRプレートに移し取り、塩基配列の解読に供した。シークエンシング反応精製産物の塩基配列は、3130xlGeneticAnalyzerを用いて決定した。5.MafaAならびにMafaB由来のPCR産物の塩基配列はサブクローニング法とシークエンシング法の併用により決定した。具体的には次の通り行った。MafaAならびにMafaB由来のPCR産物をTargetClone登録商標にクローニングした。すなわち、45μLのPCR産物に05μLの10xAattachmentMixを加え、60°Cで10分間反応させた後、そのうちの3μLに5μLの2xLigationBuffer、1μLのpTA2Vector50ngμl、1μLのT4DNALigaseを加え、24°Cで30分間の条件でライゲーション反応をさせた。氷中で10μlのDH5αCompetentCellsHighEfficiencyに15μlのライゲーション産物を加え、氷中で30分間、42°Cで30秒間、氷中で2分間静置した。その後、90μLのSOC培地を加え、37°Cで1時間の予備培養を行った。これをLBプレート培地に50μLを塗り広げ、37°Cで一晩培養した。得られたコロニーのうち、インサートDNAを有する白いコロニーを選別し、これを12mLのLB培地にて37°Cで12時間振とう培養した。培養後、3000rpm、室温、15分間の条件で遠心分離した。その後、Robot96PlasmidKitならびにep5075プラスミド抽出装置の手順に従いプラスミドDNAを抽出した。最終的に100μLの滅菌水に溶解、これを塩基配列決定の鋳型DNAとした。なお、サブクローニングの際の人工的な塩基置換を避けるために、1個体サンプルあたり32個のサブクローン由来のプラスミドDNAを抽出した。塩基配列決定法は4~にしたがった。6.その情報よりMHC全遺伝子ホモ接合体を特定した。具体的には次の通り行った。得られた塩基配列データはDNAシークエンスアセンブルソフトウェアSequencher41を用いてデータの結合ならびに編集を加えることにより決定し、遺伝情報処理ソフトウェアGENETYXMacv110および類似配列検索プログラムBLASTを用いて、決定した塩基配列が目的とするカニクイザルMHC遺伝子の対立遺伝子であることを確認した。その塩基配列情報より、各遺伝子座ともに1種類の対立遺伝子しか認められなかった個体をMHC全遺伝子ホモ接合体とした。7.その個体について、混合リンパ球反応によりMHC全遺伝子ホモ接合体であることを確認した。具体的には次の通り行った。カニクイザルよりヘパリンを加えた注射器で2mlを採血した。1200rpm、22°Cで10分間遠心し、血漿を分離した。細胞成分をPBS25mlに浮遊後、FicollPaque液上に重層し、1800rpm、22°Cで、30分間遠心した。リンパ球成分を回収し、Hanks液で2回洗浄した。その後培養液RPMI1640FCS102MEに浮遊させた。MHC全遺伝子ホモ接合体ではないstimulator細胞には30Gyの放射線を照射した。MHC全遺伝子ホモ接合体であるresponder細胞1x105個100μlwellを放射線照射したstimulator細胞1x105個100μlwellと混合し、96ウェルU底プレート内で72時間培養した37°C、二酸化炭素5。3Hmethylthymidineを05μCi加えてさらに16時間培養後、フィルター上に細胞をハーベストし、液体シンチレーションカウンターで3HmethylthymidineのDNAへの取り込みを測定した。その結果、responder細胞のみの培養では179cpmの反応を示したnegativecontrol。一方、stimulator細胞と培養するとそれぞれ655及び440cpmの増殖反応を示したpositivecontrol。これに対して、MHC全遺伝子ホモ接合体由来の細胞に対する増殖反応は263cpmで、MHC全遺伝子ホモ接合体ではないstimulator由来の細胞に対する反応より低値であった。[考察]遺伝学的手法及び免疫学的手法という二つの性格の異なる実験系で同じ結果が得られたことから、得られた2個体はMHC全遺伝子ホモ接合体と言える。遺伝子のレベルでMHC全遺伝子ホモ接合体であることが明らかになったが、まだ同定していないMHC遺伝子が蛋白質として発現されて拒絶反応を起こす可能性があった。そこで、拒絶反応を試験管内で見ることができる混合リンパ球反応を上記のように行なった。その結果、MHC全遺伝子ホモ接合体リンパ球はMHC全遺伝子ホモ接合体ではないリンパ球には反応したが、MHC全遺伝子ホモ接合体リンパ球には反応しなかった。従って、機能的にも得られた2個体はMHC全遺伝子ホモ接合体であることが判明した。実施例2.雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の精子の取得[精液採取対象個体]7歳以上のオスカニクイザルを用いた。[精液採取に必要な物品]1サル保定用ロープ2電気刺激機315mlチューブ4ケラチンクリーム5ペーパータオル6皮膚保護用軟膏[方法]1対象個体の給餌器を外し、狭体をゆっくり引いて保定を行った。2ロープをサルの手足にかけ、サルの体がケージの扉に大の字の格好で張り付く様に調整して、ロープの端をケージに結びつけた。3ケージの前面扉の小窓を開け、サルのペニスを露出させ、生理食塩液でよく洗浄し水分はペーパータオルで拭き取った。4ペニスに電極ホルダーを付け、ケラチンクリームを塗って電気の通りを良くし、ホルダーに電極をつないだ。5ペニスの反応に注意しながら5Vの直流電気を約5秒間パルス状に通電した。6電気刺激を行っても精液を採取出来なかった場合、通電を停止した。通電と停止の操作を、3回まで繰り返した。7精液の採取が出来なかった場合、電圧を10Vに上げて同様の操作を行った。それでも精液が採取出来なかった場合、電圧を5Vずつ20Vまで上げながら操作を繰り返した。8直流電流で4段階5V、10V、15V、20Vの電圧による電気刺激を行っても、精液の採取が出来なかった場合は、電流を直流から交流に切り変えた。9直流と同様に、5Vの電圧の交流電流で、約5秒間パルス状に電気刺激を3回まで繰り返した。10この操作でも精液が採取出来なかった場合、電圧を10Vに上げて同様の操作を行った。11それでも精液が採取出来なかった場合、電圧を5Vずつ上げながら操作を繰り返した。12交流電流で4段階の電圧による電気刺激を行っても、精液が採取出来なかった場合、そのサルからの精液採取は終了して、他のオス個体の精液採取に取りかかった。13サルが射精し始めたら電気刺激を止め、出た精液は無菌の15mlチューブに採取した。14精液の採取が終わったら電極とホルダーを外し、ペニスに皮膚保護軟膏を塗布しておいた。15ケージの小窓を閉めてから、足、手の順にロープを解き、狭体を戻した。16採取した精液は、出来る限り人肌程度の温度に保ちながら搬出した。実施例3.雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の卵子の取得[実験方法][採卵対象個体]年齢4歳以上15歳まで、体重25~35kgのメスカニクイザルを用いた。[必要な試薬]1性腺刺激ホルモン放出ホルモン;GnRH2性腺刺激ホルモンFSH3ヒト絨毛性性腺刺激ホルモンhCG4硫酸ジヒドロストレプトマイシンマイシリンゾル登録商標5ブプレノルフィン塩酸塩レペタン登録商標6塩酸ケタミンケタラール登録商標7塩酸キシラジンセラクタール登録商標8イソフルランフォーレン登録商標9ポピドンヨードイソジン軟膏登録商標1070アルコールアルコール綿花11ポピドンヨードイソジン液登録商標12採卵用培養液;αMEM10SSS13培養用培養液;TALP03BSA[準備物品等]1腹腔鏡関節鏡2腹腔鏡外套管3操作用鉗子4操作用外套管520Gカテラン針625mlシリンジ7実体顕微鏡8モニター[卵巣刺激法]1採卵予定日を決めた。2GnRHリュープリンを投与するための個体を選抜した。3成熟メスカニクイザルの月経が観察された日、または3ヶ月以上月経が確認できない個体の卵巣を腹腔鏡により観察した。4新たな発育卵胞や排卵痕がない、または卵巣周期休止状態にある個体にGnRH09mgheadを皮下投与した。5GnRH投与から約2週間後、再度腹腔鏡により卵巣観察を行い、卵巣が休止状態にあることを確認し、FSH製剤である卵胞成熟ホルモンを使用し、9日間微量連続投与した。6ホルモン投与量は15IUkgdayから開始した。7途中、ホルモン投与5日目に、腹腔鏡にて卵胞発育状態を確認した。なお、卵胞発育が十分な個体は同量を維持し、不十分な個体は20IUkgdayに増量して、いずれも計9日間微量連続投与した。8ホルモン投与から10日目、ヒト絨毛性性腺刺激ホルモンhCG:プベローゲン;400IUkgを投与し、40時間目に採卵した。[採卵方法]ヒト絨毛性性腺刺激ホルモンの投与40時間目に、卵巣刺激を行った個体から麻酔下にて腹腔鏡を用い、成熟未受精卵子を吸引採取した。1あらかじめ採卵用培養液を入れた25mlシリンジを挿入した20Gカテラン針に付け、腹腔鏡下にて発育卵胞より卵胞液と共に卵丘卵子複合体を丁寧に吸引採取した。2同様に発育卵胞からの採卵を繰り返した。3回収液は直ちに実体顕微鏡下で検卵し、卵丘卵子複合体はαMEM10SSS、37°C、5CO2条件下で培養した。4採卵作業が終了した後、抗生物質と鎮痛剤を3日間連続して筋肉内投与した。[麻酔法]腹腔鏡による卵巣観察、採卵のそれぞれの手術の際の麻酔法は、塩酸ケタミン5mgkgと塩酸キシラジン1mgkgの混合液を筋肉内投与とした。30分を超える場合は、1530イソフルランによる吸入麻酔を施した。[採取卵子のステージ分けと前培養]採卵した卵子の発育段階によるステージ分けを行った。1卵胞から採取された卵丘卵子複合体はαMEM10SSS、37°C、5CO2条件下で培養した。2その後、ヒアルロニダーゼに曝すことにより卵丘細胞を除去し、卵子の成熟ステージごとにMII卵子、MI卵子、GV卵子、Dg卵子の4つに分類し、TALP03BSAにて37°C、5CO2条件下で約1時間、インキュベートを行った。実施例4.雄カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の精子及び雌カニクイザルMHC全遺伝子ホモ接合体の卵子から得られうる受精卵の取得次のようにして卵子を準備した。[必要な試薬]1Hyaluronidase2TALP03BSA3TALPHepes03BSA[必要な物品]1インキュベータ2倒立型顕微鏡3200μlピペット4Doubledish5ガラスピペット[方法]1採取した卵子をヒアルロニダーゼにて処理し、卵丘細胞を除去した。2裸化した卵子はT3培地に入れ、インキュベータで約1時間前培養した。3前培養の後、MII卵子を顕微授精ICSIに供した。次のようにして精子を調製した。[必要な試薬]1BWW2BWWCaffeinecAMP[必要な物品]1インキュベータ2遠心分離機3倒立型顕微鏡415mlチューブ510mlピペット61mlピペットマン7マクラー精子数カウントチャンバー[方法]新鮮な精子を使用する場合は、次のようにした。1精子を電気刺激法により採取した。2採取した精液は15mlチューブに入れ、37°C、5CO2インキュベータ内で静置後、液状部分のみを別の15mlチューブに移し、BWWCaffeinecAMPを10ml加えて混和した。337°C、5CO2インキュベータ内で1時間の前培養を行った後、1400rpmで3分間遠心した。4約05ml残して上清を捨てた。5沈殿を崩さない様に約1mlになる様にBWWCaffeinecAMPを加え、インキュベータ内でスイムアップさせた。6スイムアップした精子を顕微授精に使用した。凍結保存精子を使用する場合は、精子融解後に次のようにした。1ラウンドチューブにBWW03BSACaffeinecAMPを37°Cに暖めておいた。2液体窒素中からストローを取り出し、室温で30秒間融解した。その後、37°Cの温水中で30秒間融解した。3ストローの両端を切断し、BWWCaffeinecAMP内に融解精子を混和した。437°C、5CO2インキュベータ内で静置した。5その後、1400rpmで3分間遠心し、約05ml残して上清を捨てた。6沈殿を崩さない様にBWWCaffeinecAMPで約1mlまでメスアップし、インキュベータ内でスイムアップさせた。7スイムアップした精子を回収し、使用した。次のようにして顕微授精を行った。[必要な試薬]1PVP2TALPHepes03BSA3TALP03BSA4CMRL20BS[必要な物品]1倒立型顕微鏡2マイクロマニュピレーター3インジェクター4インキュベータ56cmdish610μlピペットチップ7ICSI用インジェクションピペット8ICSI用ホールディングピペット9ガラスピペット[方法]1第一極体の放出が見られる第二減数分裂中期卵MII卵子を用いた。2顕微授精IntraCytoplasmicSpermInjectionICSIには、オスカニクイザルから採取した新鮮精子または凍結融解精子を用いた。3ICSIは、マイクロマニュピレーターを装備した倒立型顕微鏡を用い、インジェクターの先端にICSI用インジェクションピペットを接続して行った。4運動性良好の精子を探し、不動化した。5MII卵子は、ホールディングピペットで保持した。6不動化した精子を1個ずつインジェクションピペット内に吸引し、卵子細胞質内に、精子をゆっくり注入した。7精子が卵子細胞質内に入ったことを確認した後、インジェクションピペットをゆっくり抜いた。8ホールディングピペットから卵子を離し、生存卵子をT3培地に移し、2細胞期胚までT3培地で培養し、2細胞期胚以降はCMRL20BSに移して、38°C、5CO2、5O2インキュベータ内で7~9日間培養した。顕微授精後、2026時間目までに2細胞期胚へと発生した。2日目に4細胞期胚、3日目に6-8細胞期胚、4日目に8-10細胞期胚、5日目に12-桑実胚、6日目に桑実胚凝集桑実胚、7日目に早期胚盤胞期胚胚盤胞期胚、8日目に胚盤胞期胚拡張胚盤胞期胚へと発生した。