"単一鎖基準で15,000~50,000g/molの重量平均モル質量、および凝集体基準で水溶液中に4~20×105g/molの重量平均モル質量を有し、水溶液中で濃度≧1で25°Cおよび中性のpHでゲル形態で存在し、2の濃度で水に溶解された場合、35~60°Cのゲルからゾルへの融解温度を有するグルカン。単一鎖基準で20,000~40,000g/molの重量平均モル質量を有する、請求項1に記載のグルカン。約40°Cのゲルからゾルへの融解温度を有する、請求項1または請求項2に記載のグルカン。前記グルカンが約2の濃度の水溶液で存在する、請求項1から3のいずれか1項に記載のグルカン。酵母に由来する、請求項1から4のいずれか1項に記載のグルカン。サッカロミュケスケレウィシアエSaccharomycescerevisiaeに由来する、請求項5に記載のグルカン。β-1,3連結グルコシル残基の骨格、および2個以上のβ-1,3連結グルコシル残基を含む側鎖を含むベータグルカンである、側鎖がβ-1,6連結経由で骨格に結合している、請求項1から6のいずれか1項に記載のグルカン。繰り返しのβ-1,6連結グルコシル残基を本質的に含まない、請求項1から7のいずれか1項に記載のグルカン。水溶液中1~6の濃度のグルカンを含むゲルグルカン製品であって、グルカンが凝集体基準で4~20×105g/molの重量平均モル質量、および単一鎖基準で15,000~50,000g/molの重量平均モル質量を有し、ゲルグルカン製品が35~60°Cのゲルからゾルへの融解温度を有する、ゲルグルカン製品。請求項1から9のいずれか1項に記載のグルカンを製造する方法であって、以下のステップ:aグルカンの水素結合を解離する薬剤でグルカン分子の水溶液を処理し;bステップaの製品を、グルカン内の水素結合の再形成を可能にする薬剤と接触させること、を含む、製造方法。水素結合を解離する薬剤が、アルカリ塩、水素化ナトリウム、ナトリウムアミド、尿素またはホルムアミドである、請求項10に記載の方法。水素結合を解離する薬剤が水酸化ナトリウムである、請求項11に記載の方法。水素結合を解離する薬剤が、50mMを超える最終濃度で使用される、請求項10から12のいずれか1項に記載の方法。水素結合を解離する薬剤が、約150mMの最終濃度で使用される、請求項13に記載の方法。水素結合の再形成を可能にする薬剤が強酸である、請求項10から14のいずれか1項に記載の方法。前記酸が、塩酸、ギ酸、硫酸、リン酸、酢酸またはクエン酸である、請求項15に記載の方法。ステップbが10分未満、好ましくは4分未満でゲル形成を引き起こす、請求項10から15のいずれか1項に記載の方法。ステップaおよびbの薬剤が等モル量添加される、請求項10から17のいずれか1項に記載の方法。β-1,6結合グルコシル側鎖を除去し微粒子グルカンを可溶性化するために、微粒子グルカン出発物質をギ酸に懸濁する、加ギ酸分解のステップが先に実施される、請求項10から18のいずれか1項に記載の方法。請求項10から19のいずれか1項に記載の方法によって入手可能なグルカン。請求項1から9または20のいずれか1項に記載のグルカン、および1種または複数の薬学的に許容される希釈剤または担体を含む、医薬組成物。治療で使用するための、請求項1から9または20のいずれか1項に記載のグルカン。創傷または潰瘍の治癒の支援で使用するための、請求項1から9または20のいずれか1項に記載のグルカン。対象に局所的に適用される、請求項21または請求項22に記載の使用のためのグルカン。創傷または潰瘍の治癒を支援するまたは口腔の粘膜炎または癌を治療する必要のある対象の、創傷または潰瘍の治癒を支援するまたは口腔の粘膜炎または癌を治療する方法であって、請求項1から9または20のいずれか1項に記載のグルカンを前記対象に投与することを含む、方法。前記潰瘍が糖尿病性潰瘍である、請求項23から25のいずれか1項に記載の使用のためのグルカンまたは方法。口腔の粘膜炎または癌の治療での使用のための、請求項1から9または20のいずれか1項に記載のグルカン。請求項1から9または20のいずれか1項に記載のグルカンが適用または含浸されている、物理的支持体。織布、不織布、編み物、発泡体または接着性の基材;貼付剤、包帯、膏薬、絆創膏、フィルムまたはガーゼからなる群から選択される、請求項28に記載の物理的支持体。請求項1から9または20のいずれか1項に記載のグルカンに皮膚細胞の集団を接触させることを含む、皮膚細胞増殖のインビトロの方法。中性のpHとはpH7を意味する。単一鎖は、個々のグルカン分子、すなわちグリコシル残基が共有結合で連結されたものを指す。凝集体は、水素結合相互作用によって形成され、超分子またはより高次の秩序構造を規定する。そのような会合は共有結合によって得られるほど永続的ではないが、本明細書に記載される方法は、認識し得るパターンの凝集をもたらし、その平均モル質量は本明細書に言及される技法を使用して分析することができる。水溶液は通常pH7である。代替として眺めれば、本発明は、1~6の濃度の水溶液のグルカンを含むゲルグルカン生成物であって、グルカンが4~20×105g/molの凝集体基準の重量平均モル質量および15,000~50,000g/molの単一鎖基準の重量平均モル質量を有し、ゲルグルカン生成物が、30°Cを超える、好ましくは35°C~80°Cの間、より好ましくは35~60°Cの間、なおさらに好ましくは37°C~60°Cの間、最も好ましくは約40°Cのゲルからゾルへの融解温度を有する、ゲルグルカン生成物を提供する。グルカン生成物は、通常、微粒子、またはある場合、可溶性である。ゲル形態はまったく普通でないが、しかし本ゲル生成物は、他のグルカン生成物と比較して、特に創傷治癒において優れた生物学的活性を提供することが見出された。創傷治癒において、創傷の湿度化を確保するように医薬品または医療機器を適用することが最も重要であり、生成物は、感染を回避するために創面を覆い粘着し、医師によって適切と、または創傷の型により必要と見なされる投与プロファイルを提供しなければならない。通常、微粒子、半可溶性または液状形態のグルカンは、有効ではないか、創傷治癒目的に適用できない状態であるといういずれか、またはその両方の理由で、これらの基本的要件を解決しない。本発明のグルカンは、それにより純粋なグルカンゲルが適当な使用を見出し得るすべての用途のために有用にするこれらの必要な特性を組み合わせている。厳密に局所用の適用に加えて、他の可能な使用は、本ゲル生成物が優れた活性を有することが見出された癌治療に加えて胃腸管または口腔の疾患を治療する経口および/または粘膜の投与であってもよい。本発明によるグルカンの優れた接着性によって粘膜壁を作用点で覆うことができ、それにより治癒過程を加速する。したがって、本発明のグルカンは、口腔の粘膜炎および粘膜に影響を与える他の徴候の治療において特に有用性を有している。本発明によれば、ゲル構造への可溶性グルカンの新規の組織は、グルカン鎖内のおよびグルカン鎖間の水素結合を共に解離することができる薬剤で、可溶性グルカンの十分に濃い溶液を処理し、続いて、分子鎖間および分子内水素結合相互作用を速やかに回復することができる薬剤を添加することにより得ることができる。グルカンの超分子の三次の、または三次元の構造、この場合、全体としてグルカン生成物内の分子鎖の構成は、効能にとって最も重要に思われる。理論に拘束されることを望むわけではないが、生物学上有効な分子構造のみが、標的細胞で異なる受容体に結合することを可能にするように思われる。好適な三次元の複雑な方式で構築されていない単一鎖、短鎖または生成物は、同じ方法で身体免疫系を刺激することはできない。単一鎖が含むゲルの三次元の三次または超分子の構造としても定義される分子構造を特性評価する方法は限定されている。そのようなゲルを記載する一般方法は、単一鎖の平均モル質量およびモル質量分布、ならびに粘性などの物理的特性によることができる。免疫調節生成物の場合には、ゲルはまた、それらの生物学的な効能プロファイルによって間接的に記載することができ、または、言いかえれば、いわゆる生物学的な指紋を測定する。規定する物理的特性として分子量を使用する場合、生物学上有効な三次元超分子構造を与えるために必要なこれらの単一鎖の間の分子相互作用の詳細な絵を与えるのではなく、ゲル生成物、またはより小さい凝集構造の単一鎖成分の分析をもたらす分析法が一般に破壊的であることは認識されている。それにもかかわらず、生物学的な効能プロファイルと組み合わせたそれらの粘性を含むグルカンの他のいくつかの物理的特性の詳細な分析によって、熟練者は、様々な異なるグルカンを識別することができる。これらの判定基準の一つは特定の分子量範囲である。グルカンのモル質量は異なる方法で求めることができる。可溶性グルカン生成物の場合には、モル質量がSEC-MALS-RI分析多重角度光散乱および屈折率検出を含むサイズ排除クロマトグラフィーによって好都合に測定され、そのような分析は試料の重量平均モル質量値MW、ならびに試料内の異なる分子量の分布を提供する。本発明において、重量平均分子量MWは以下のように定義される:式中、niはモル質量Miを有する分子数である。モル質量Miを有する分子の重量濃度ciは、モル質量Miおよび分子数niに比例する。クロマトグラムにおいて各切片の重量濃度は、RI検出器によって求められるが、一方、クロマトグラム中の各切片のモル質量は、RI検出器と組み合わせたMALS検出器によって測定される。その計算は光散乱理論に基く。具体的には、本発明による平均モル質量単一鎖のは、この溶媒中でグルカンに対して0.12のdn/dcを仮定して、0.5LiClを含むDMAc0.5の塩化リチウムを含むジメチルアセトアミド中でSEC-MALS-RIによって求められる。DMAc/LiCl溶媒は、前記グルカンを単一鎖へ完全に溶解する。それに続く溶離液としての0.5LiClを含むDMAcでのSEC-MALS-RI分析は、したがって単一鎖レベルでの分子量分布の尺度を与える。手短に言えば、DMAc/LiCl中のグルカンの分析は、3×PLgelMixed-ALSカラムおよび溶離液としての0.5LiClを含むDMAcを使用するSEC-MALS-RIによる分析前に、約3mg/mlの濃度で室温で終夜溶液を撹拌し、100°Cで1時間それを加熱することによる乾燥したグルカンの溶媒への溶解を必要とする。この方法によって求められる単一鎖基準の本発明のグルカンの重量平均モル質量は、15,000~50,000g/mol、好ましくは25,000~45,000g/mol、より好ましくは30,000~40,000g/molである。水溶液中で、主としてより高次の秩序構造および存在する凝集体の重量平均モル質量は、4~20×105g/mol、好ましくは5~15×105g/mol、より好ましくは6~12×105g/molである。これらの平均は、非常に大きな凝集体、すなわち、1.0×107g/molを超えるモル質量が除外される場合に好ましくは計算される。水溶液中でのグルカンの分析は、0.02のNaN3を含む0.1MNaNO3中で約3mg/mlにゲル溶液を希釈すること、ふたをしたガラス管中で30分間100°Cに加熱すること、室温に冷却すること、0.2μm注射器フィルターで濾過すること、および、TSKgelG5000PWXLTSKgelG4000PWXLカラムおよび溶離液として0.02NaN3を含む0.1MNaNO3を使用するSEC-MALS-RIによる分析を伴う。溶媒/溶離液として、例えば0.05MNa2SO4/0.01MEDTAを含む類似の設定は同等の結果を与える。水溶液中の、単一鎖に対するモル質量値およびより高次の秩序構造/凝集体の組み合わせは、ゲルの分子および超分子構造の良好な指標を全体として与え、本発明のグルカンを有用に定義する。本発明のグルカンは、25°Cで、3~8の間のpHでゲル形態であることをさらに特徴とする。本発明のグルカンゲルは、30°Cを超えかつ最高80°C、好ましくは正常体温を超え、より好ましくは37°C~60°Cの間、最も好ましくは39°C~60°Cの間、例えば40~50°Cのゲルのゲルからゾルへの融解温度によって例示される粘性プロファイルをさらに特徴とする。上記の図は、2の濃度の水溶液のグルカンゲルに対して与えられる。グルカン生成物のゲル融点、すなわち、ゲル→ゾル転移温度は、好都合には、StresstechHRレオメーターまたは類似機を使用し、グルカン溶液の冷却70→10°Cおよび加熱10→70°Cの間の粘弾性の変化を調べる小歪み振動の測定によって求められる。そのような実験において温度に対してプロットされた貯蔵弾性率G’の例は、図1に示される。この特定の試料のための融解温度は、温度の上昇に対して貯蔵弾性率の曲線が約0Paで平坦になるところと等価であり、これは約40°Cである。ゲルのおよその融解温度を求める別の方法は、粘性が本質的になくなり、ゲルが溶液へ転換するまで、ゲルの粘性例えば、回転粘度計を使用してを連続してより高温で測定することである。局所適用のための安定したグルカンゲルを保証するために、融解温度は好ましくは約30~44°Cであり、好ましくは体温を超える。局所投与は、経口投与または感染部位への投与と比較して低い融解温度を要求する。本発明のグルカンゲルは水性ゲルであり、目視検査によってゲル形態を確証することができるが、グルカンゲルの粘性ならびに擬塑性およびチキソトロピーの性質はまた、粘度測定によって、例えば、回転粘度計の使用によって求めることができる。本発明による2のグルカンゲルは、少なくとも1000cP、好ましくは少なくとも1500cPの粘性を有し、これは、小さい試料アダプターおよびスピンドルSC4-313.40sec1の剪断速度に対応するを有するBrookfieldDV-IIProProgrammable粘度計を使用して、25°Cおよび10rpmの回転速度で測定される。この擬塑性およびチキソトロピーのゲルの粘性を測定する好都合な方法は、例えば2rpmで開始し2rpmの増分で10rpmまで上げ、次いで、2rpmステップで下げ戻す、いわゆるアップダウン速度傾斜を使用することである。そのような実験からのデータは、ゲルの擬塑性剪断速度の増加につれて粘性が減少するおよびチキソトロピー剪断を施すと経時的に粘性が低下するの特性を示し、しかも例えば10rpmの粘性の測定を提供することができる。本発明のグルカンは、通常酵母に由来し、好ましくはサッカロマイセスセレビシエSaccharomycescerevisiaeの形態である。これらのグルカンの基本的な分子構造は、通常β-1,3-骨格β-1,3連結によって連結したグルコース分子の鎖を意味するであり、それに加えて、β-1,3側鎖β-1,3連結によって連結した少なくとも2個のグルコース分子の鎖を意味する、および側鎖を骨格に連結したβ-1,3,6-連結点である。さらに、酵母からのグルカンは、側鎖または直接骨格に連結されていてもよいβ-1,6連結を含む。さらなる型の連結も存在するが、比較的低濃度である。グルカンの起源として提供し得る他の酵母は、ビール酵母Brewersyeast、カンジダ種Candidasp、例えばカンジダアルビカンスCandidaalbicans、カンジダクロアカエCandidacloacae、カンジダトロピカリスCandidatropicalis、カンジダユティリスCandidautilis、ハンゼヌラ種Hansenulasp、例えばハンゼヌラウィングエイHansenulawingei、ハンゼヌラアーニHansenulaarni、ハンゼヌラヘンリシイHansenulahenriciiおよびハンゼヌラアメリカーナHansenulaamericana、ヒストプラズマ種Histoplasmasp、クロエケラ種Kloeckerasp、クルイベロマイセス種Kluyveromycessp、例えばクルイベロマイセスラクティスKluyveromyceslactis、クルイベロマイセスフラギリスKluyveromycesfragilis、クルイベロマイセスポリスポラスKluyveromycespolysporus、ピキア種Pichiasp、ロドトルラ種Rhodotorulasp、サッカロマイセス種Saccharomycessp、例えばサッカロマイセスデルブルエキイSaccharomycesdelbruekii、サッカロマイセスロゼイSaccharomycesrosei、サッカロマイセスマイクロエリプソデスSaccharomycesmicroellipsodes、サッカロマイセスカールスベルゲンシスSaccharomycescarlsbergensisまたは別のサッカロマイセス株、例えばサッカロマイセスセレビシエR4SaccharomycescerevisiaeR4NRRLY-15903およびR4Ad受入番号74181、シゾフィラム種Schizophyllumsp、シゾサッカロマイセス種Schizosaccharomycessp、例えばシゾサッカロマイセスポンベSchizosaccharomycespombe、トルラ種Torulaspおよびトルロプシス種Torulopsisspが挙げられる。しかし、本発明のゲルグルカンは他の適切な起源、例えば細菌、菌類、穀物グルカンに由来してもよい。様々なグルカンの治療活性は当業界で十分立証され、本発明の方法は、一般にグルカンの活性を増強するために、特に、グルカン生成物の物理的形態および分子間構造が特に意義深いことが本発明者らによって示されている創傷治癒において、使用することができる。理論に拘束されることを望むわけではないが、一般則によれば、本発明に従って使用されるグルカンの単一鎖基準の重量平均モル質量が高いほど、より効果的なグルカンゲルを製造することができる。本発明のグルカンゲルの側鎖は、通常2個以上のβ1,3連結グルコシル単位を含む。本発明によれば、主鎖に連結した単一分子は側鎖と見なされない。本発明のグルカンは、好ましくは、β1,3連結グルコシル単位の側鎖を有する、すなわち、β1,3連結グルコシル単位からなる、またはβ1,3連結グルコシル単位から本質的になる。このβ1,3連結側鎖に加えて、グルカンはまた1個または複数のβ1,6連結側鎖があってもよい。構造の鎖を改変することによって、最終生成物の特性を変えることが可能である。酵素処理、ギ酸もしくは塩酸のような酸または異なる塩基の使用ならびに他の手段を含むグルカンを改変する様々な方法がある。好ましいグルカンは、酸例えばギ酸もしくは酵素または他の適切な方法によって処理され、グルカン内の繰返しの1,6連結グルコース分子の数を著しく減らした、またはなくしたものである。これらの1,6連結グルコシル部分は、酵母に由来するベータグルカンの側鎖中で通常見出される。結果として得られたグルカンは、β1,3脱離処理によって切断されない単一β1,6連結によってそれに連結した主鎖およびβ1,3側鎖を有する。好ましいグルカンは、繰返しのβ1,6連結グルコシル残基を本質的に含まない。分岐点β1,3,6分岐点での単一1,6連結は、繰返しのβ1,6連結グルコシル単位を与えない。本質的に含まないによって、グルコシル単位全体の6未満、好ましくは4、最も好ましくは3未満を意味する。酵素処理などのいくつかの処理は、側鎖中に切断されない最大4個のベータ-1,6-連結を、しかし、通常は、2個のベータ1,6連結グルコシル単位を残すことがある。そのような分子はまた、繰返しのベータ1,6-連結グルコシル単位を本質的に含まない。本発明の好ましいグルカンの内の連結の分布は以下のように表すことができる。β1,3,6は、骨格中で1,3連結する分岐点残基を指し、1,6接続に関与して、側鎖を与える。本発明のグルカンは、単一の形態、または抽出分画もしくは異なる平均分子量を有する2以上の異なる分画であってもよい。グルカンは、化学変性基の点からは誘導体化されていない。本発明のグルカンは新規の方法によって生成される。本発明者らは、グルカン鎖間の水素結合を解離することができる薬剤で、可溶性グルカンの十分に濃い溶液を処理し、続いて鎖間の相互作用を回復することができる薬剤を添加して、他の類似したグルカン生成物と比較して、改善された活性を有する新規のゲルグルカン生成物が得られることを見出した。こうすることによって、非常にランダムに組織化された干し草の山ゲルは、アニールされたベータグルカン鎖の典型的な三重螺旋構造を有することなく作られる。驚くべきことに、この種のゲル構造は、三重螺旋配座または多重螺旋のいずれかにおいても、古典的な組織化された可溶性ベータグルカンより免疫調節薬として有意により強力であることが観察された。したがって、さらなる態様において、本発明は、グルカン鎖間の水素結合を解離するためにグルカン分子の水溶液を薬剤で処理し、次いで、グルカン鎖間の水素結合の再形成を可能にする薬剤で処理する、上記に定義されるゲルグルカン生成物を製造する方法を提供する。したがって、本発明は、a水素結合を解離することができる薬剤でグルカン分子の水溶液を処理するステップと、b水素結合を速やかに再形成することができる薬剤を添加するステップとを含むグルカンゲルを製造する方法を提供する。代替として眺めれば、本発明は、aグルカンの水素結合を解離する薬剤でグルカン分子の水溶液を処理するステップと、bグルカン内の水素結合を再形成することができる薬剤とステップaの生成物を接触させるステップとを含む本明細書に記載されているグルカンゲル生成物を製造する方法を提供する。解離され再形成される水素結合は、分子内、すなわち、単一鎖内、または分子間、すなわち鎖間であってもよく、結果として凝集体を形成する。好ましくは水素結合を解離することができる薬剤は、アルカリ塩である。好ましくは水素結合を解離することができる薬剤は、50mMを超える、好ましくは約150mMの最終濃度で使用される。ステップaは、好ましくは10°C~25°C、より好ましくは15°C~20°C、最も好ましくは約18°Cの温度で実施される。水素結合を解離することができる薬剤の添加は、好ましくは徐々に、好ましくは水10リットルに溶解した24モルのNaOHを1分当たり約1リットルの速度で2のグルカン溶液200リットルに、または体積または濃度が異なる場合、同等の速度で実施される。ポリグルコース鎖のOH基間の水素結合を溶解する、そのような一薬剤は、鎖中の多数のOH基を脱プロトン化する、十分な濃度の水酸化ナトリウムNaOHである。このことにより、これらの高分子量グルカンに典型的なすべての分子間結合を完全に解離し、結果として溶液中の鎖のランダムな組織をもたらす。アルカリを中和するために酸の添加による溶液を中和することによってOH基は再形成され、鎖間の新しい水素結合を構築することができる。薬剤としてのNaOHの使用は、通常、例えば、2MNaOH溶液から、50mMを超える、またはより好ましくは約150mMの最終濃度を水溶液中の1~6、より好ましくは1.5~4、または最も好ましくは2~4の可溶性グルカン濃度に添加する必要がある。水素結合を再形成するステップはまた、水素結合を解離することができる薬剤の添加後の溶液の中和として眺めることができる。水素結合を解離することができる薬剤が好ましくはアルカリ塩であるので、好ましくは、速やかに水素結合を再形成することができる薬剤、すなわちステップaで生成した溶液を中和する薬剤は、酸、好ましくは強酸である。好ましくは、方法のステップaおよびステップbの薬剤は、等モル量で添加される。例えば、2MNaOH溶液がステップaで添加された場合、溶液を中和するために、等モル量の、例えば、2M塩酸HClを溶液に添加することができる。好ましくは、中和ステップは、効率的な中和を保証するのに十分に長く、短時間の揺動下に実施される。1000mlの体積に対して、1分未満、例えば30秒未満でこのステップを実施することができよう。実施例に示されるように、大量の場合は、必然的に酸がすべて添加され混合されるようにより長時間かかる。この後、溶液はゲル配座を構築するために静置し、1000mlの体積に対してゲル生成にかかる時間は1~10分であり、大量の場合は長時間かかり得る。水素結合の迅速な再形成は、ゲル形成の速度の点から評価することができる。薬剤復元剤と考えることができるの最初の添加から15分未満でゲルが形成する場合、これは水素結合の迅速な再形成を示すが、迅速なは、通常、10分未満、好ましくは8分または6分未満、より好ましくは4分または3分未満を意味する。それにもかかわらず、大量の場合は、一般にゲル形成/水素結合再形成のためにより長時間を必要とすることは理解されている。水素結合を解離する能力を有する他の任意の薬剤は、NaOHを置き換えることができ、干し草の山型のゲルを形成する水素結合の再構築を速やかに可能にすることができる他の任意の薬剤はHClを置き換えることができる。熟練者は、水素結合を妨害すし、次いで、回復することができる他の薬剤に気づいているが、一方が他方に対して容易に均衡させ、水素結合を妨害した薬剤の影響を中和することができるので、塩基および酸は特に好都合である。ギ酸または硫酸などの他の強酸が使用されてもよい。また、水酸化カリウム、水酸化リチウムおよび水酸化カルシウムを含むがこれらに限定されない他のアルカリ塩、ならびに、ことによると超塩基と呼ばれる水素化ナトリウムまたはナトリウムアミドなどは、水素結合のプロトン脱離および妨害にとって潜在的な薬剤になり得る。好適な特質を有する任意の酸もまた、水素結合を回復するために溶液の中和に使用することができる。-これには、リン酸、酢酸およびクエン酸を含むがこれらに限定されない。尿素またはホルムアミドも水素結合を妨害するために普通に使用され、この方法でおそらく使用することができよう。大きく複雑な有機分子を含む系において、水素結合がすべて妨害され、または、水素結合の修復を可能にする条件が適用された後、すべての分子鎖が相当の水素結合に関与することを保証することは実現可能でなく必要でない。しかしながら、適用した条件は、グルカン溶液全体の組織および水素結合度を根本的に改変するようなものである。熟練した読者は、例えば、150mMNaOHのグルカン溶液への影響に気づいており、他の水素結合破壊剤の濃度はそれに応じて選択することができる。水素結合の再構築を可能にする条件が提供される第2のステップの目的は、効果的に速やかに中和する、または水素結合破壊剤の添加によって引き起こされた、分子間静電的相互作用のポテンシャルへの影響を逆転することである。したがって、この第2の薬剤の性質および濃度は水素結合破壊剤の選択から随伴するものである。また、迅速な中和の条件は、エネルギー的にメタ安定な超分子構造の凍結を与え、迅速な中和がなければ、エネルギー的により最適な、しかしそれほど生理活性でなく再組織化する傾向があるということに言及することは重要である。本発明による処理から結果として得られた最終生成物の安定性を増やす追加の方法は、当然評価することができる。可能な追加の方法は、その生物学的活性プロファイルを大きく損なわずに最終生成物の安定性を増強する、安定剤の添加またはエネルギー的により最適な分子構造を構築する任意の方法であってもよい。工業的プロセスにおいて、このステップは、生成物のバッチ全体を保持するほど大きな貯槽において、好都合に実施される。水素結合妨害およびその次の上記の修復のステップは、反復されてもよく、例えば、もう一度繰り返されてもよい。好ましくは、本方法は、添加されたイオン例えばNaおよびClが、上記aおよびbのステップの間に、例えば濾過によって除去される、さらなるステップcを含む。濾過の方法は当業界で周知である。例えば、生成物を精製水の必要とされる量に対して十字流フィルターで透析濾過することができる。水素結合の妨害の前の水溶液のグルカン濃度は、好ましくは1.5~6、より好ましくは2~4、最も好ましくは約2である。好ましくはグルカンゲル中のグルカン濃度は、約2、例えば1.8~2.2である。したがって、好ましくは、水素結合の妨害の前の水溶液中のグルカン濃度はまた、約2である。上記の方法のステップaおよびbの薬剤の添加によって、水溶液の量を増やし、そのため、溶液中のグルカンの濃度は低下し得る。しかしながら、好ましくはステップaおよびbで加えられる薬剤の量は、出発および最終生成物のグルカンの濃度がほぼ等しくなるように、溶液の量を著しくは変えない。所望の場合、ステップaおよびbにおける薬剤の添加が最終生成物中で所望の正確なグルカン濃度をもたらすように、出発生成物中にグルカンのより高濃度を使用することができることを熟練者は、当然、理解している。熟練者は、結果として得られたゲル生成物中で所望のグルカン濃度を達成するために、出発生成物中の好適なグルカン濃度、およびステップaおよびbで添加する薬剤の好適な量を計算することができる。上記の水素結合の妨害および修復は、グルカン分子の任意の水溶液で実施されてもよい。変性した分岐を含むグルカンを含む好ましいグルカンは上で論じられ、グルカン溶液は、好ましくは酵母グルカン溶液である。出発物質はゲルであってもよく、その場合には、ステップaでは非ゲル溶液を結果として生じ、ステップbはゼラチン状態を呼び戻す。出発溶液中のグルカンの重量平均モル質量Mwは、好ましくは高く、好ましくは、単一鎖基準で、溶液中のグルカンの重量平均モル質量は、15,000を超え、より好ましくは20,000を超え、最も好ましくは25,000g/molを超える。これらの質量値を求める適切な方法は上記のとおりである。本発明の方法は、可溶性ベータグルカンの1~4の水溶液が出発物質であり、約2Mの濃度から約150mMの最終濃度でNaOHが添加され、次いで溶液が完全に可溶化し透明になるまで撹拌される方法を含む。ゲル形態は撹拌しながら等モルの量のHClの添加により再構築し、生理的なオスモル濃度および約7のpHを有するゲルを結果として生じる。ゲルは任意の量で製造することができる。試薬、すなわち、ステップaおよびステップbで使用される出発物質および薬剤がキットとして提供されるなら、素人も本発明のゲルを製造することができる。したがって、さらなる態様において、本発明は、グルカン分子の水溶液を含有する密封容器、グルカンの水素結合を解離することができる薬剤を含有する第2の密封容器、およびグルカン内の水素結合を再形成することができる薬剤を含む第3の密封容器を含むキットを提供する。グルカン分子の水溶液およびキットを含む2つの薬剤は、本明細書のどこかに定義される通りであってよい。そのような一キットは、水溶液中の85mlの2.2ベータグルカンの瓶、7.5mlの2MNaOHの封管および7.5mlの2MHClの封管を含み、後者の2つの試薬は2.2のベータグルカンの瓶に連続的に添加され、等張の2の最終ゲルを与える。さらなる実施例は、水溶液中の70mlの4ベータグルカンを含む瓶、15mlの1MNaOHの封管および15mlの1MHClの封管を含むキットであり、後者の2つの試薬がベータグルカンの瓶に連続的に添加された場合、約3よりやや少ないの濃度を有する100mlのゲルを結果として生じる。グルカンは、一般に、微粒子形態の原材料例えば真菌類、酵母または穀物から抽出されるが、微粒子グルカンから可溶性形態を生成する方法は当業界で公知であり、国際公開第95/30022号に記載されている加ギ酸分解formolysisステップなどの酸またはアルカリ処理、および例えば、SigmaChemicalからの大麦のような穀物からの様々なタイプのグルカンを含む。本発明によれば、国際公開第95/30022号の実施例1のプロトコルによって調製することができるような微粒子の出発物質は、少なくとも2時間ギ酸中で加熱することによって好ましくは可溶化される。微粒子グルカン出発物質で実施される加ギ酸分解は、好都合に、任意のβ1,6連結グルコシル側鎖の選択的な除去、ならびに微粒子グルカンの可溶化を引き起こすことができる。本発明の方法はまた、場合によって、ギ酸処理した生成物が少なくとも30分間沸騰される>100°C加熱ステップを含む。生成物が冷却された後、好ましくは、微粒子物質を除去するために当業界で公知の一般的な方法によって、例えば、遠心分離または濾過によって処理される。本発明による加工のための可溶性形態を得るために処理される微粒子グルカンは、好ましくは細胞壁、特に酵母細胞壁に由来し、これは、例えば洗浄によってそこから除去したタンパク質成分およびマンナンおよびキチンのような他の残存物を含んでいたものである。適切な微粒子酵母グルカン生成物の一例はBiotecPharmaconASAによって製造されており、これはパン酵母サッカロマイセスセレビシエに由来し、NBGCOS登録商標として知られている。微粒子グルカン原料の別の例は、生成物ImprimeWGP商標のような全グルカン粒子である。本生成物は、天然の誘導体化されていない化学変性基の点で微粒子β1,3/1,6グルカンであり、NMRおよび化学分析によって特性評価され、ベータ-1,3およびベータ-1,6連結Dグルコースの側鎖を含有するベータ-1,3-連結Dグルコースのポリマーからなる。本発明の好ましいゲル生成物の外観は、固く不透明で白っぽく、他の表面に対し強い接着能力を有する。さらなる態様において、本発明は、前述の方法のいずれかによって得られたまたは入手可能なグルカン生成物を提供する。本発明のグルカンは強力な治療剤であり、さらなる態様において、本発明は、治療に使用するために、特に対象が、免疫応答の全身的または局所的な増強を必要としている、例えば、組織損傷または感染症がある、症状の治療のために、本明細書に記載されるグルカンを提供する。グルカンは、創傷または潰瘍の治癒の支援に、ならびに口腔の粘膜炎および癌または腫瘍の大きさを低下させる治療において特に有益である。さらなる態様において、本発明は、したがって本明細書に記載される本発明のグルカンの対象への投与を含む、それを必要とする前記対象において創傷または潰瘍の治癒の支援、または口腔の粘膜炎を治療する方法を提供する。創傷または潰瘍が自然に治る場合があるが、そうでない場合もあり、本発明のグルカンは創傷および潰瘍の治癒を加速することが示されるので、創傷または潰瘍の治癒を支援することが言及される。いくつかの事例において、治癒は、治療なしでは十分でない。治癒に対して治療を必要とするような創傷の例は糖尿病性足部潰瘍である。この徴候において、患者は、糖尿病である根底の原因に基く創傷を発症する。多くの場合治療していない根底の原因およびこれらの創傷が患者の足で見つけられることになるという事実により、これらの潰瘍は独力で治らず、足の切断で通常終わる患者にとって大きな問題を引き起こす。さらなる態様において、本発明は、本明細書に記載される本発明のグルカンの対象への投与を含む、前記対象の癌を治療する、または腫瘍の大きさを低下させる方法を提供する。好ましくは、グルカンは経口で投与される。好ましくはグルカンは、5~200mg/kg/日、より好ましくは20~100mg/kgの投薬量/日が投与される。さらなる態様において、本発明はまた、上記に定義されるゲル形態のグルカン、および1種もしくは複数の薬学的に許容される希釈剤または担体、好ましくは水および場合によって、1種もしくは複数の生理学的に許容される安定剤、または追加の希釈剤もしくは担体を含む医薬組成物を提供する。組成物は、好都合に、任意の局所用剤形へ製剤化されてもよい。局所用剤形は、ゲル剤、パスタ剤、クリーム剤、スプレー剤、ローション剤、溶液、軟膏剤、フィルムなどであってもよい。いくつかの変形において、本明細書に記載される組成物は、軟膏剤の形態をしている。軟膏基剤は、脂肪性基剤、乳化可能な基剤、乳濁液基剤、または水溶性基剤であってもよい。他の変形において、本発明による組成物は、クリーム剤の形態をしている。クリーム剤は、粘稠な液剤または水中油または油中水型いずれかの半固体乳濁液であってもよい。クリーム基剤は水洗濯可能であり、油相、乳化剤、および水相を含んでいてもよい。またさらなる変形において、本発明の組成物は、ローション剤の形態をしている。ローション剤は固体の懸濁液として製剤化され、より良好な分散液を生ずるように懸濁化剤を含んでいてもよい。本発明による組成物はまた製剤化されたパスタ剤であってもよい。パスタ剤は、活性剤が適切な基剤に懸濁された半固体の剤形である。基剤の性質に応じて、パスタ剤は、脂肪質ペーストまたは単相水性ゲルから生じるものとの間で分割される。いくつかの変形において、組成物は創面でフィルムを形成する。このフィルムはスプレー剤または他の適切な手段によって適用することができる。フィルム形成を助けるために、フィルム形成剤、例えば、アクリル酸およびその誘導体、ポリアクリル酸およびポリブチルメタクリラートおよびポリメタクリル酸、ポリメタクリラートなどのその誘導体、パルミチン酸アスコルビル、カルボマー、カルナバワックス、酢酸フタル酸セルロース、ロスカメロースナトリウムroscamellosesodium、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロースおよび関連化合物、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタラート、ヒプロメロースフタラートなどのセルロース誘導体、セチルアルコールおよび誘導体、微結晶性ワックス、ポロキサマー、ポリエチレングリコール、ポリウレタン、ポリ酢酸ビニル、ポリ酢酸ビニルフタラート、ポリビニルアルコール、シリコーンゴムおよび誘導体、シェラック、トリグリセリド誘導体、およびその組み合わせが使用されるが、これらに限定されない。組成物はまた、亀裂または剥離なしで身体の領域で適用され動かすのに十分な可撓性になるように、フィルム形成剤によって形成されたポリマーフィルムを柔らかくする役目をし得る少なくとも1種のフィルム可塑剤を含むことができる。いくつかの変形において、組成物は創傷への適用前にフィルムにキャストされてもよく、または創傷に直接適用され、インサイチューで重合されてもよい。皮膚に適用されたら、スプレッドオンフィルムは重合し、チューブ、ロールオン、スプレー剤などからクリーム剤または軟膏剤として送達されてもよい。フィルムは外相にシリコーンゴムを組み込むことにより作られてもよい。内相と混合すると、結果として生じた乳濁液を硬化し、創傷に適用されたら重合するスプレッドオンフィルムを提供する。乳濁液は、基材上に広げ所望の厚さを達成することができる。他の場合、組成物は層または貼付剤に前もって形成されてもよい。貼付剤は厚さが変動するものであってもよい。貼付剤はまた、一般に創傷端部に従う形状を有するように切断することができる。いくつかの変形において、貼付剤は、創傷または皮膚に貼付剤を固定する役目をする薬学的に許容される接着剤を含んでいてもよい。貼付剤裏板もまた含まれていてもよい。組成物は、創傷に直接配置されるか、または創傷に適用するための基材に配置されてもよい。任意の基材担体が、本明細書に記載される組成物と共に使用されてもよい。例えば、織布、不織布、編み物、発泡体または接着性の基材が使用されてもよい。吸収性または非吸収性基材も使用されてもよい。いくつかの変形において、組成物は基材上に散布または展開される。他の変形において、組成物は基材内に含浸される。創傷包帯が任意の適切な時間適用されてもよい。例えば、それらは、1日の時間にわたって数日にわたって、数週間にわたって、または数か月間以上適用されてもよい。一般に、創傷が治癒するまで、創傷包帯は再適用される。本明細書に記載される包帯で創傷を治療する継続時間は、治療されている創傷の型、創傷の位置、および適用されている組成物の形態などの因子に依存し得る。使用される形態に応じて、組成物は水で除去する、または創傷から拭き取る、もしくは剥ぎ取ることができる。本明細書に記載される組成物は、任意の病因学から結果として得られる創傷を治療するために使用されてもよい。例えば、創傷は、熱傷、感染、虚血、リンパ浮腫、新生物、神経病変、放射線損傷、外科手術手順、静脈不全、および外傷によるものであってよい。本発明の組成物は、創傷または潰瘍の治癒の支援に特に有益である。本発明は、物理的支持体、例えば、本明細書に定義される本発明のグルカンをそこに適用したそこへの含浸を含む、医療用の任意の医療機器または材料をさらに提供する。そのようなベータグルカンの重要な一特性は、非中性pHのような条件またはゲルでの治癒を促進し得る陽イオンの欠如した状態においてさえ、その水収容力およびゲル形成特性があることである。いくつかのベータグルカンは、1もの低濃度で、しかしより典型的には2~4の範囲でゲルを形成する。本明細書に記載されるもののような酵母からの可溶性ベータグルカンは、陽イオンの存在と無関係に、1~6の濃度で3~7のpH範囲で水溶液に溶解されると、チキソトロピーおよび擬塑性のゲルを形成する。本発明の組成物は、水溶液中に1.5~6、好ましくは1.5~5のベータグルカンを含み、より好ましくは組成物は、水溶液中に約2~3のグルカンを含む。異なる濃度の使用は、投与の目的および種々の様式に依存する。概して、水溶液中で6を超える濃度を有し、他の安定化物質を含まない、酵母グルカンは、固体のゲル特性により製造するのが困難な最終ゲル生成物をもたらす。用語創傷および潰瘍が包含するのは、表面創傷、外科的創傷、熱傷、解放骨折、下腿潰瘍、アフター性apthous潰瘍、糖尿病潰瘍および褥瘡性潰瘍である。創傷は損傷、手術または疾患の結果であってもよいが、すべては、皮膚の完全性の損失を特徴とする。皮膚は裂かれ、切断され、または穴をあけられたかもしれず、皮膚の再生には開口を密封する必要がある。本発明のグルカンは、創傷閉鎖を加速することが示されている。実施例で示されるように、効能は、開いた創傷の大きさの測定により容易に示すことができる。本組成物は、例えば、ゲル剤、経皮貼布剤、ローション剤、軟膏剤、クリーム剤などとして、好ましくは局所的に適用される。組成物は、毎日、より頻繁にまたはそれほど頻繁でなく、例えば、1日2回、または隔日に、および臨床医によって、またはある場合には患者または他の健康助言者によって決定される継続時間の間、適用されてもよい。治療の継続時間は、一般に目視検査によって容易に決定されている進展と共に創傷または潰瘍の性質および重症度に依存する。局所投与は口腔内の投与を含み、口腔粘膜への送達に適切なゲル剤、貼付剤、スプレー、ロゼンジなどが当業界で知られている。グルカンおよびそれを含有する組成物は、ヒトおよび畜産の医学に有用性を見出す。本明細書において使用される場合、用語医学のは、畜産の用途および文脈を含む。ヒトは治療にとって好ましい対象であるが、有用に治療されてもよい他の動物は、家畜およびコンパニオンアニマルを含む。本発明のグルカンおよびそれを含有する組成物は、創傷または潰瘍部位に適用することができる、例えば貼付剤、包帯、膏薬、絆創膏、フィルム、ガーゼなどの物理的/固体支持体に塗布、または組み込むことができ、そのような生成物は、本発明のさらなる態様を構成する。本発明のグルカンはまた、皮膚細胞株の培養、例えば、皮膚移植における使用のための、インビトロの用途に対応する有用性がある。したがって、さらなる態様において、本発明は、本明細書に記載される本発明のグルカンと皮膚細胞集団を接触させることを含む、皮膚細胞を増殖するインビトロの方法を提供する。本発明の一態様または一実施形態に適用できる好ましい特色は、必要な変更を加えて、すべての態様および実施形態に対して当てはまることは理解されよう。本発明のグルカンは、実施例で示されるように抗ガン剤および創傷治癒剤として優れたインビボの効能を有している。実施例はまた、様々な治療の文脈で関係のあるサイトカインの産生を刺激する、本発明のグルカンの能力を示す。実施例は、酵母からまた得られ、可溶性であり、1,3連結側鎖を保持しながら1,6連結側鎖を選択的に減少させるように処理された、表面的に類似したグルカン生成物と比較して、本発明のグルカンが、サイトカイン産生の誘発によって示される異なる生物学的活性を有することを示す。特に、本発明のグルカンは、炎症の表現型へのヒト骨髄性樹状細胞の分化を誘発し、TNFアルファ分泌を著しく刺激し、これらの細胞によるG-CSFおよびIL-10の発現を誘発することができるが、CXCL-10の分泌は、基本的に基準線レベルにあり、本明細書に記載される処置に影響されないと思われる。このことは重要であり、本発明の好ましいグルカンが、サイトカインの特定の一組または組み合わせの分泌を刺激することを説明する。本発明のグルカンはまた、糖尿病マウスdb/dbからのマクロファージを刺激してCXCL2、PGE2およびGM-CSFを分泌させることができ、これらにはすべて創傷治癒において顕著な役割がある。さらに、本発明のゲルグルカンはヒト補体系を活性化する。TNFαの放出に対する好ましいベータグルカンの影響は用量依存性であり、ベータグルカン受容体デクチン-1を過剰発現するRAW細胞株の変種において、一定の閾値、例えば、100μg/mlを超えるグルカン濃度で縮小するように見える。最大のTNFα分泌を与える濃度、およびまた応答の大きさは共に、本明細書に記載される処置にかけられていない可溶性ベータグルカンを使用して見られるものと比較してより大きい。実施例1本発明のゲルグルカン生成物の調製SG-LS2の酵母グルカン分子の水溶液を下記のように処理した。この水溶液を加ギ酸分解によって微粒子グルカン調製から調製し、選択的にβ-1,6側鎖を除去し、続く精製および透析濾過によって加ギ酸分解溶液からの粒子状物質および低分子量成分を除去した。適切な加ギ酸分解ステップは、欧州特許第0759089B1号の実施例3に開示されている。微粒子グルカンは、アルカリ、エタノールおよび水での別々の抽出によってパン酵母S.cerevisiaeの細胞壁からそれ自体調製し、各抽出に続いて好適な乾燥噴霧乾燥および真空乾燥を行った。a.水酸化ナトリウムの添加による水素結合の妨害:グルカン溶液の濃度を調節した後、水酸化ナトリウムの添加を行い、貯槽を取り囲むジャケットに水蒸気または水の導入によって加熱または冷却して、閉じて揺動した800リットルの貯槽中で約200リットルの生成物量が得られた。生成物温度を18°Cに調節し、約10リットルの精製水に溶解した24モルのNaOHを、貯槽のハッチを通して徐々に毎分約1リットル注いだ。b.塩酸の添加による水素結合の修復:最後のNaOHを貯槽へ注いだ直後に、修復工程を始めた。精製水中のわずかに24モルに足りないHCl、約9リットルの2.4M溶液を、貯槽へ比較的速やかに約2分で注ぎ、生成物のpHを測定し、pHが約4に到達するまで追加の酸を少量ずつ加えた。c.塩の除去ステップaおよびbの間に添加したイオンNaおよびClを除去するために、生成物は、精製水の必要とされる量に対して十字流フィルター上で透析濾過することができる。実施例2ヒト樹状細胞の成熟の刺激単球由来未熟な樹状細胞iDCを成熟した樹状細胞mDCへ分化させる、可溶性ベータグルカンの異なる製剤の効力は異なる。活性化のレベルは、選択したDC細胞表面マーカーの発現の測定により視覚化することができる。リンホプレップ勾配によって精製し、続いて抗CD14微小ビーズを用いて磁性細胞選別MACSしたヒト単球を、未熟樹状細胞への分化を促進する、IL-4および組み換えヒトGM-CSFの組み合わせで5日間培養した。単球由来の未熟樹状細胞iDCをphysO2レベルで栽培した。5日目から6日目に、iDCを、50μg/ml可溶性ベータグルカンSG、または10ug/ml不溶性ベータグルカンNGで刺激した。表面分子HLA-DR、CD83およびCD86の発現をiDCの成熟DCへの分化を調査するために使用し、蛍光性活性化細胞選別法FACSによって分析した。また、Cタイプレクチン受容体DC-SIGNの発現を分析した。負の対照PBSと比較して、加ギ酸分解後であり、実施例1のNaOH処理前のグルカンであり、2の濃度で水溶液中に存在するグルカンである可溶性グルカンSGは、CD83、CD86、MHCクラスIIHLADRおよびDC-SIGNの発現をわずかに下方制御する。下方制御は、本来タンパク質を発現する細胞の恋人数alovernumberの結果であるが、CD86タンパク質の発現は一細胞当たりわずかに同様に下方制御されている。対照的に、本発明によるグルカンであり実施例1に従って調製したSG-LSは、iDCsを活性化してCD83、CD86およびHLA-DRの発現を上方制御する強力な刺激である。また、SGとは対照的に、DC-SIGNの発現は、SG-LSによって効率的に下方制御される。サッカロマイセスセレビシエからの不溶性ベータグルカンは、はるかに強力であるが、SG-LSのように、CD83、CD86、HLA-DRおよびDC-SIGNの類似したパターンのタンパク質発現を活性化する。CD83、CD86およびMHCクラスIIの上方制御に関連するDC-SIGNの下方制御は、樹状細胞活性化の認められた特徴である。したがって、SG-LSは樹状細胞をインビトロで活性化するが、SGは活性化せず、この機能に関するSG-LSの特性は、サッカロマイセスセレビシエからの不溶性ベータグルカン粒子に類似している。実施例3ヒト樹状細胞DCによるサイトカイン分泌の刺激ヒトDCによってインビトロで分泌されたサイトカインプロファイルを求めるために、標準法を使用して末梢血単球を単離しmDCを繁殖させた。続いてmDCを異なる濃度の可溶性ベータグルカンで、単独でまたは細菌性脂質多糖体LPS1ngml1と合わせて刺激した。サイトカインプロファイルは、Luminexシステムを使用して多重分析によって求めた。図2は、SG刺激がTNFα分泌の弱い誘発を引き起こすが、G-CSF、IL-10、CXCL-10およびIL-12は影響されないでいることを示す。対照的に、SG-LS図2中421-4、新規は、TNFα分泌を強く刺激するが、G-CSFおよびIL-10は共に低レベルの分泌である。SGは、本発明によるグルカンではないが、本発明によるゲルグルカン生成物であり、実施例1に従って調製したSG-LSによって例証される提示プロトコルに従って強化することができる。CXCL-10の分泌は、SGに関しては、SG-LS刺激によって影響を受けなかったが、IL-12の産生はSG-LSによって弱く阻害された。SGまたはSG-LSを用いるLPSとのヒトmDCsの共刺激は、LPS単独と比較して、IL-12の分泌は明らかに下方制御されたが、TNFα、CXCL-10、IL-10およびG-CSFの分泌に対しSG-LSが相乗効果または相加効果があることを示した図3。SGおよびLPSの共刺激は、試験サイトカインのいずれにおいても明瞭な変化を誘発しなかった図3。SGおよびSG-LSは、一緒に、インビトロ刺激したヒトmDCから際立った生物学的機能を誘発する。この実施例は、本明細書に記載された処置にかけない可溶性グルカンと比較して、本発明に従って製造された可溶性グルカンが他の病原体関連分子パターンの影響を調整する、より強い能力を有することを示す。実施例4マウスマクロファージによるサイトカイン分泌の刺激糖尿病db/dbマウスBKS.Cg-mDock7m/Leprdb/Jからのマクロファージを、腹腔内の洗浄によってEDTAで補足したPBSを使用して収穫した。細胞はマイクロプレートに接種し、37°Cで12時間SGまたはSG-LSのいずれかで、単独でまたはLPSとの組み合わせのいずれかで刺激した。上澄を、創傷治癒および炎症に関与する一連のシグナル伝達分子に関して、ELISAによって分析した。SGおよびSG-LSは共に、CXCL2を分泌するdb/dbマウスからマクロファージを刺激した図4。SG刺激した細胞からの上澄中の分泌されたケモカインの濃度は、リン酸緩衝生理食塩水のみを与えた細胞から測定されたものと有意差がなかった。対照的に、SG-LSを与えた細胞は、対照細胞より著しくCXCL2を分泌した。db/dbマウスからのマクロファージは、SG-LSによってPGE2図5およびGM-CSF図6分泌を刺激する。アッセイでの大きいばらつきにより、シグナル伝達分子の上澄中の濃度は、リン酸緩衝生理食塩水中でインキュベートした細胞からの上澄中の濃度と有意差がなかった。これに反して、SGは、PGE2またはGM-CSFのいずれかの分泌も刺激しなかったそれぞれ、図5および6。実施例5RAW/デクチン-1細胞株によるTNFα分泌の刺激RAW/デクチン-1細胞株は、ベータグルカン受容体、デクチン-1を過剰発現するRAW264.7マウス白血病性単球マクロファージ細胞株の安定なトランスフェクタントである。細胞株はInvivogenからのRAWblue商標細胞株に対応する。細胞株は、可溶性ベータグルカンの異なる製剤間の個体差を求めるのに適切であり、この細胞株によって増加するベータグルカン応答は、デクチン-1受容体との相互作用を示す。SGおよびSG-LSは共に、37°Cで刺激後24時間にELISA法に基くアッセイで測定してTNFαの分泌を誘発する図7。両製剤は、典型的な用量応答を誘発する。SGの最大効果は1~2μg/ml付近にあり、より低濃度でもより高濃度でも低下する。それに比べて、SG-LSの最大効果は100μg/mlで見られ、細胞を取り囲む培地中のTNFαの5倍の高濃度を生じる。このように、SGおよびSG-LSは共にデクチン-1過剰発現ネズミ細胞株を刺激してTNFαを分泌するが、応答は特徴的であり、容易に識別可能である。SGに対する応答は4μg/mlを超えると縮小するにもかかわらず、SG-LSに対する応答は100μg/mlまでより強くなる。このことは、SGおよびSG-LSが主要なベータグルカン受容体、デクチン-1とは別な風に相互作用することを示唆する。実施例6インビトロ創傷治癒糖尿病db/dbマウスモデルすなわちBKS.Cg-mDock7m/Leprdb/Jマウスにおいて、創傷治癒へのSGおよびSG-LSの影響を全層除去した皮膚創傷の修復を分析することにより調べた。順応させた後外乱がない5~7日、動物は、本社規則および糖尿病動物の特定要件に従って5匹の動物の群で収容した。実験的に傷つけた後、個々のケージケージ寸法35×15×15cm、週に2度交換するおがくずを敷いたに、12時間の明/暗サイクルで23°Cの常温に維持した環境に動物を収容した。マウスには、食物標準げっ歯類食餌および水を適宜提供した。すべての麻酔事象の後、処置から完全に回復するまで動物を暖かい環境に置きモニターした。動物にはすべて、必要とされる手術および付加的な鎮痛薬の後、好適な無痛法ブプレノルフィンを受けさせた。動物の処置はすべて、本社ライセンスの下PCD:50/2505;PPL:40/3300;PIL:50/3482;PIL:70/4934で本社の許可を設定して行った。動物の健康を調査の全体にわたって一日単位で病気のモニターをした。0日目に、動物に麻酔をかけイソフルオランおよび空気、毛を剃り、食塩水を吸わせたガーゼで浄化した。標準化した単一の全層創傷10.0mm×10.0mmを、各実験動物の左の背側横腹皮膚に作り出した。すべての処置群中の創傷は、続いて透明フィルム包帯Bioclusive商標SystagenixWoundManagement,UKの円周バンドで巻いた;その後、それらは、Bioclusiveフィルムを通して29ゲージ針を使用し、精製水中の2溶液50μlの注射によってSGまたはSG-LSのいずれかを受けさせた。糖尿病動物を好適なソフトウェアを使用して、処置方式の1つに無作為化した。実験群に対して、SGまたはSG-LSのいずれかの処置の施しを負傷後2、4および6日に再適用した。これらの動物の創傷部位は、適用した薬剤の過剰集積および過剰な創傷部位での水和について入念にモニターした;過剰に適用した薬剤の蓄積/水和が明白であれば、先に適用した材料は再適用前に吸引によって除去した。正の対照群の処置に対して、負傷後6日まで処置を毎日再適用した。-この群の創傷は、成長因子合剤処置の合計7つの適用を受けた。負傷後4、8および12日に、動物すべてを再度麻酔をかけ、そのフィルム包帯およびなんらかの遊離デブリを除去し、食塩水を含ませた滅菌ガ-ゼを使用して創傷を浄化した。撮影後4および8日に、創傷は上記のようにBioclusiveフィルム包帯で再度巻いた。治癒は、0日目の創傷の大きさに対する創傷閉鎖として求めた。創傷閉鎖データは、各評価時点で各創傷の得られた創傷画像から、計測して求めた。得られた創傷の面積は、所定の時点で、負傷直後すなわち0日目のその創傷の面積の百分率として表した。残存している創傷の平均百分率面積および平均値の標準誤差を各群に対して計算し、グラフで表示した図8。各グルカン調製品の影響は、以下を受けた創傷のものと比較した:iビヒクル水;iiPDGF-BBTGF-α正の対照。SG131-9LS2を受けた創傷は、評価した全時点でSG131-92を受けた創傷と比べて高い創傷閉鎖率を示した図8。この観察された差異は、4および8日目で統計的に有意であったそれぞれ、p=0.015および0.001。初期の時点4および8日目で、SG131-9LSで処置した創傷の創傷閉鎖プロファイルは、正の対照処置の創傷のものと同等であった。実施例7融点の測定明細書に記載されているように、本発明に従って製造されたグルカンゲルの融点の測定を実施した。結果は図1に示される。アルカリ酸処理は、一般にグルカンゲルのゲルからゾルへの融解温度を上げる。実施例8SGおよびSG-LSそれぞれの抗腫瘍活性に対する影響を、マトリゲル中で107BT474細胞の皮内移植を有するNMRInu/nuマウスを使用して調べた。腫瘍成長の期間の後、明白80mm3になるまでの7日間、SGおよびSG-LSを経口胃管栄養によって毎日投与した。腫瘍の直径を31日間にわたって1日おきに測定し、体積を求めた。この分析図10は、SGおよびSG-LS共に、ビヒクル水に比較して腫瘍増殖を遅延することを示した。また、SG-LSが、SGと比較してより効率的に成長速度を阻害したことは明らかであり、SGの癌抗特性がまた、本明細書において記載された製造方法によって強化されることを示唆する。実施例9SGとSG-LSの間の効能の差を細胞の相互作用のメカニズムを解析することによって調べた。結果は図11および12に示される。ヒトのインビトロで生成された血中単球mDCに由来する骨髄性樹状細胞におけるLS変種の取り込みは、デクチン-1拮抗薬によって阻害される抗-デクチン-1抗体、図11a。SGの取り込みは、その抗体によってわずかに阻害され、SGが主としてデクチン-1と無関係のメカニズムによって細胞に進入することを示唆する。成熟したmDCおよび未熟なmDCにおけるフルオレセイン標識付けグルカンの取り込みを調べることによって、この所見がさらに示された。それは周知である、デクチン-1の表面発現は、未熟なmDCと比較して成熟mDCでは低く、したがって、未熟なmDC図11b、100、図示されていないと比較して、成熟したmDCにおけるSG-LSの取り込みが減少する~30。SGの取り込みは、成熟および未熟mDCにおいて類似し、デクチン-1拮抗薬のデータを支持し、SG-LSおよびSGは細胞と別々に相互作用することを示唆する。正確なメカニズムは特異的な阻害薬を使用して求めた図12。SGの取り込みはクロルプロマジンに影響されないが、SG-LSのエンドサイトーシスはこの化合物によって阻害された。このことは、SG-LSがクラスリンを媒介したエンドサイトーシスによって取上げられるが、SGはそうではないことを示唆する。これに反して、SGの取り込みは、マクロピノサイトーシスに干渉するロットレリンによって阻害される。SG-LSの細胞内蓄積はロットレリンによって影響を受けない。サイトカラシンDは両リガンドの取り込みを部分的に阻害し、細胞骨格の再配置、すなわち食作用にとって細胞に入るために必要な条件を示唆する。これらの結果は、まとめると、SGおよびSG-LSは異なるメカニズムによって取上げられが、食作用は両方に共通であることを示している。"