"下記成分a少なくとも1種の電解質、b少なくとも1種の緩衝液、c少なくとも1種の浸透圧調節剤、及びdアリスキレン又はその誘導体を含む、腹膜透析液。前記電解質が、Na、Mg2、Ca2、Cl-及びこれらの組合せからなる群より選択される、請求項1に記載の腹膜透析液。各電解質が、下記濃度範囲:Na100~200mmol/l;K0~4mmol/l;Mg0.1~2mmol/l;Ca0.5~3mmol/l;Cl50~200mmol/l;にある、請求項2に記載の腹膜透析液。前記緩衝液が、乳酸塩、重炭酸塩又はこれらの組合せから選択される、請求項1~3のいずれか一項に記載の腹膜透析液。前記緩衝液の濃度が10~150mmol/lの範囲にある、請求項4に記載の腹膜透析液。前記浸透圧剤が、グルコース、ポリグルコース、マンニトール、グリセロール、アミノ酸、ポリペプチド、及びこれらの組合せからなる群より選択される、請求項1~5のいずれか一項に記載の腹膜透析液。添加される前記浸透圧剤の量が、100~600mOsm/kgの範囲にある、請求項6に記載の腹膜透析液。アリスキレン又はその誘導体の濃度が、50nM~1mMの範囲にある、請求項1~7のいずれか一項に記載の腹膜透析液。薬剤を調製するための前記腹膜透析液の使用。腎疾患を予防及び/又は治療するための薬剤を調製するための前記透析液の使用。腹膜中皮細胞に対する毒性を予防及び/又は治療するための薬剤を調製するための前記透析液の使用。活性酸素種、タンパク質p39MAPKのリン酸化、及びカスパーゼ-3の活性化を予防及び/又は低減するための薬剤を調製するための前記透析液の使用。酸化ストレス、アポトーシスプロセス、腹膜細胞に有害な遺伝子の発現、及び透析用液体によって引き起こされる腹膜損傷を予防及び/又は治療するための薬剤を調製するための前記透析液の使用。慢性腎不全を予防及び/又は治療するための薬剤を調製するための前記透析液の使用。[本発明の実施形態の実施例]以下の実施例は本発明を例示する。しかし、これらの実施例は非限定的な例である。それらの実施例は、単に情報を提供するものであり、使用される方法論を限定するものではなく、それらの実施例を類似の結果を達成する目的のために変更することができる。本明細書において、本明細書の方法、図及び実施例中で使用される記号及び慣習は、国際的な方式及び現代の科学文献、例えば医化学雑誌中で使用されるものからなる。そうでないことを指摘しない限り、すべての材料は、商業的供給業者から入手し、さらなる精製なしで使用した。具体的には、次の省略形を、実施例中、及び明細書中を通して使用することができる:gグラム、mgミリグラム、kgキログラム、mLミリリットル、μLマイクロリットル、mmolミリモル、M.P融点、Hzヘルツ、MHzメガヘルツ、δケミカルシフト、ppmパーツパーミリオン、s一重線、d二重線、t三重線、q四重線、c五重線、m多重線、Jカップリング定数、NMR核磁気共鳴、MS質量スペクトル、ESエレクトロスプレー、m/z質量/電荷比、Anal元素分析、Yld収率、TEAトリエチルアミン、CH2Cl2ジクロロメタン、CDCl3重水素化クロロホルム、DMSOジメチルスルホキシド、i.p.非経口投与。温度は、すべて°C摂氏で表現される。[実施例]ラット腹膜中皮細胞の培養ラット腹膜中皮細胞を、HjelleJT、GolinskaBT、WatersDCら、PeritDialInt1989;9:341~7中に記載のプロトコールに従って、酵素的消化により単離した。簡潔には、体重が200~400gの雌性スプラーグドーリー系ラットを、実験及びその他の科学目的に使用される動物の保護に関する10月10日の勅令1201/2005に従って屠殺した。腹腔を速やかに開き、腹壁腹膜及び平滑筋を無菌条件下で取り出した。腹壁の内部表面から、前記表面を199培養培地Sigma及び0.5mg/mLのコラゲナーゼSigma中、37°Cで30分間インキュベートする酵素的消化によって、中皮細胞を分離した。インキュベーションの後、消化された腹壁表面をかき取り、接着された中皮細胞を完全に剥離した。得られた中皮細胞を増殖及びその研究用の培養皿に播種し、10ウシ胎児血清、100U/mLペニシリン及び100μg/mLストレプトマイシンを補足された199培地中に維持した。各培養の後、腹膜中皮細胞の存在を、その組織形態学的外観及び特異的マーカーの発現により確認した。細胞は、3~6代の間に使用した。インビボでの研究動物体重が200~240gの78匹の雌性スプラーグドーリー系ラットCharlesRiverBreedingLaboratoriesを、インビボ実験に使用した。動物は、12時間の明と12時間の暗からなる周期で一定温度の雰囲気中に収容した。飼料及び飲料は、自由に与えた。すべての実験プロトコールは、欧州指令欧州共同体委員会指令86/609/EECに従って実施した。さらに、動物実験は、アルバセテAlbaceteスペインの大学/病院複合体の動物管理使用委員会によって承認された。さらに、動物実験は、アルバセテAlbaceteスペインの大学/病院複合体の動物管理使用委員会によって承認された。インビボ研究及び腹膜平衡試験PETの実験計画インビボ研究のため、体重が200~240gの78匹の雌性スプラーグドーリー系ラットCharlesRiverBreedingLaboratoriesを使用し:高グルコース腹膜透析液PDFを投与される動物に54匹のラットを割り当て、この54匹を、それぞれ異なるグルコース濃度を有する3種のPDFFreseniusMedicalCar、BadHomburg、ドイツを投与するそれぞれ18匹のラットからなる3つの異なるサブグループに分割した。さらに、18匹のラットには担体生理食塩水血清を投与し、別の6匹のラットは対照群透析なしとして使用した。担体群の18匹のラット、並びに1.5PDF群、2.3PDF群及び4.5PDF群に属するラットをそれぞれ6匹のラットからなる別の3つのサブグループに分割した。これらの群のそれぞれに投与されるPDFは、生理食塩水血清、0.1mg/kg/日のアリスキレンNovartisPharmaceuticals、Cambridge、マサチューセッツ州、米国又は1mg/kg/日のアリスキレンを補足した。腹膜透析のため、ラットには、4週間にわたって毎日、22Gニードルを介して対応する20mLのPDFを投与した。実験期間4週間の終末時点で、2.3のグルコースを含む30mLの市販PDFFreseniusMedicalCar、BanHomburg、ドイツを、22Gニードルを使用して腹膜内投与した。2時間後に、動物を、ペントバルビタール50mg/kgを用い腹膜内で麻酔し、心穿刺によって血液を抜き取った。次に、腹部正中切開を行い、シリンジを使用して腹膜から残量を集めた。PETの間、動物は覚醒しており、水及び飼料を自由に入手することができた。動物の体重を、実験期間の開始及び終了時に測定した。ラットは死亡せず、すべての動物は、反復PDF注入を含む研究中に良好な健康状態にあると思われた。血液及び透析物のサンプルを遠心分離し、-20°Cで貯蔵した。血清及び透析物中のクレアチニン及びグルコースの濃度を、酵素法を使用して測定した。溶質の腹膜輸送を、一方では、PDF中の初期グルコース濃度に対するPETの2時間後の透析物中のグルコース濃度D2/D0グルコースとして、他方では、PETの2時間後の透析物/血清中クレアチニン濃度比D2/P2クレアチニンとして計算した。PETの終了時点で、動物を、過剰用量の麻酔剤を使用して屠殺し、腹膜中皮細胞PMCを単離し、本明細書において後で説明するように培養した。本発明の腹膜透析液の調製腹膜透析液を、表2に記載の量のアリスキレン及び表3に記載の量のグルコースを、その組成を表1に示す培地M199に添加することによって調製した。表2に記載のそれぞれのアリスキレン濃度と、表3に記載のグルコース濃度との組合せについて研究した。細胞毒性研究毒性試験は、ラットの腹膜中皮細胞の培養物で実施し、乳酸デヒドロゲナーゼLDH酵素の活性を測定したPosadasI、Lopez-HernandezB、ClementeMIら、PharmRes2009;26:1181~91。これらの研究は、本発明の腹膜透析液の毒性を研究するために実施した。この目的のため、細胞を、24ウェルプレートに播種し、本発明の腹膜透析液対象に暴露し、それらの透析液の毒性を研究した。毒性効果は、細胞膜の破壊及び結果としての細胞上清へのLDHの放出をCytoTox96登録商標キットPromegaで測定して評価した。細胞を、機械的に取り出し、PBSで洗浄し、10,000rpmで10分間遠心した。マイクロプレート分光光度計を波長490nmで製造業者の説明書に従って使用して、細胞溶解物及び細胞上清の吸光度を得た。フローサイトメトリーを使用する活性酸素種の濃度変化の評価PBSで洗浄した後、細胞を、5.6-クロロメチル-2.7-ジクロロジヒドロフルオレセインジアセテートCM-H2DCFDA、Invitrogenと共に37°Cで15分間、標準的プロトコールに従ってインキュベートしたLeeHB、2004。インキュベーションの後、コンディション培地を集め、細胞をPBSで洗浄し、トリプシン処理した。トリプシン処理細胞を濃縮培地に結合させることにより得られる懸濁液中に存在する生存及び死滅細胞のすべてを、3000×g、4°Cで5分間遠心した。最後に、細胞をPBSで洗浄し、フローサイトメーターFACSCalibur、Becton-Dickinson、FranklinLakes、ニュージャージー州、米国での細胞分析用の培養培地199中に再懸濁した。活性酸素種の産生は、実験条件ごとに10,000個の細胞の評価に基づいて計算した。ウェスタンブロットによるp38MAPKのリン酸化/脱リン酸化の評価細胞培養物の全タンパク質を得るために、培養培地を集めPBSで置き換えた。細胞を、トリプシン処理によって取り出し、捕集培地に結合させた。3000×g、4°Cで5分間の遠心により得られるタンパク質に富むペレットを、細胞溶解物用緩衝液100mMHEPES、5mMDTT、5mMEGTA、0.04NonidetP-40、及び20グリセロール中にプロテアーゼ阻害剤及びホスファターゼと共に再懸濁し、4°Cで60分間インキュベートした。インキュベーションの後、サンプルを、13,000rpm、4°Cで15分間遠心し、上清液を-80°Cで保存した。細胞溶解物のタンパク質含有量を、Bradford法を標準的プロトコールVorobiovM、MalkiM、ShnaiderAら、PeritDialInt2008;28:648~54に従って使用して測定した。各サンプルを、20μgタンパク質/ウェルの量で10ポリアクリルアミドゲル上にロードした。セミドライ式ブロッターを使用して、ゲルを、電気泳動によってニトロセルロース膜に転写した。ニトロセルロースに結合されたタンパク質を、ポルソーS染色で検視し、5スキムミルクを含むTTBS50mMTris、pH7.5,200mMNaCl、0.1Tweenでブロックし、続いてp38MAPK又はリン酸化-p38MAPK一次抗体CellSignallingTechnology中、4°Cで一夜インキュベートした。TTBSで洗浄した後、二次抗体を環境温度で1時間適用した。検出は、ケミルミネセンスECLにより実施した。バンドの強度は、適切な画像解析装置QuantityOneを使用して、グレーレベルで定量化した。ELISAによるカスパーゼ-3活性の測定カスパーゼ-3の活性を測定するためPosadasI、VelleccoV、SantosPら、BrJPharmacol2007;150:577~85、ラットの中皮細胞を、6ウェルプレート上に80の集密度に到達するまで播種した。アリスキレンを含む腹膜透析液に暴露した後、培養培地を集め、PBSで置き換えた。細胞を、トリプシン処理によって取り出し、捕集培地に結合させた。3000×g、4°Cで5分間の遠心により得られるタンパク質に富むペレットを、細胞溶解物用緩衝液100mMHEPES、5mMDTT、5mMEGTA、0.04NonidetP-40、及び20グリセロール中に再懸濁し、4°Cで60分間インキュベートした。インキュベーションの後、サンプルを、13,000rpm、4°Cで15分間遠心し、上清液中のタンパク質濃度を、Bradford法を標準的プロトコールに従って使用して測定した。細胞抽出物40μgのタンパク質を、蛍光基質である50μMのAsp-Glu-Val-7-アミノ-4-トリフルオロメチル-クマリルZ-DEVD-AFCを含む反応緩衝液25mMHEPES、10ショ糖、0.13-[3-クロルアミドプロピル-ジメチルアンモニオ]-2-ヒドロキシ-1-プロパンスルホン酸、10mMDTT中、37°Cで1時間インキュベートした。蛍光発光を、分光蛍光光度計Tecan、オーストリアを用いて400nmの励起波長及び505nmの発光波長で測定した。リアルタイムRT-PCRRNAの発現を、PMCにおいてリアルタイムRT-PCRによって評価した。全RNAを、製造業者の説明書に従って市販の反応試薬Tripure、Sigma、St.Louis、ミズーリ州を使用して単離した。RNAの品質及び濃度は、1μLのRNAサンプルを使用し、分光光度法Infinite200、Tecan、Salzburg、オーストリアによって評価した。全RNAは、18S及び28SのmRNAバンドの完全性を確認するため、アガロースゲルで試験した。cDNAは、高性能cDNA逆転写キットAppliedBiosystems、FosterCity、カリフォルニア州を使用して合成した。リアルタイムRT-PCRの場合、cDNAはSYBRGreenPCRマスターミックスを使用し、1ステップリアルタイムPCRシステム及びソフトウェアStepOnev2.0AppliedBiosystems、FosterCity、カリフォルニア州を用いて増幅した。増幅には次のプライマー対を使用した:フィブロネクチンでは5’-GCA-CAG-GGG-AAG-AAA-AGG-AG-3’センス及び5’TTG-AGT-GGA-TGG-GAG-GAG-AG-3’アンチセンス;コラーゲンIでは5’-TCA-CCT-ACA-GCA-CGC-TTG-3’センス及び5’-GGT-CTG-TTT-CCA-GGG-TTG-3’アンチセンス;コラーゲンIIIでは5’-ATA-TCA-AAC-ACG-CAA-GGC-3’センス及び5’-GAT-TAA-AGC-AAG-AGG-AAC-AC-3’アンチセンス;P53では5’-CCT-CCT-CAG-CAT-CTT-ATC-CG-3’センス及び5’-CAC-AAA-CAC-GCA-CCT-CAA-A-3’アンチセンス;BAXでは5’-GAT-GCG-TCC-ACC-AAG-AA-3’センス及び5’-AGT-AGA-AGA-GGG-CAA-CCA-C-3’アンチセンス;並びにBcl-2では5’-CCC-AAG-GGA-AGA-CGA-TG-3’センス及び5’-GAG-CGG-GTA-GGG-AAA-GA-3’アンチセンス。該プライマー配列は、60°Cに近いアニーリング温度を有する。リアルタイムRT-PCR反応は、95°Cで10分間、続いて95°Cで15秒間、60°Cで1分間の40サイクルで実施した。解離曲線を分析して単一PCR産物の増幅を確認した。すべてのサンプルをトリプリケートで処理した。各実験において、平均サイクル閾値CTを、調べる各遺伝子についてトリプリケートから計算し、種々の処置後の遺伝子発現の比較を可能にしたMethods25、402~4082001。データを正規化するため、β-アクチンの遺伝子発現を内在性対照として使用した。データの収集及び解析得られた各値は、デュプリケートで実施された少なくとも3回の実験に対応する。すべてのデータは平均±SEMとして提示される。解析されるパラメーターのそれぞれに関する群間差を、ノンパラメトリックANOVA検定Kruskal-Wallis、続いてホック検定Dunnettを使用して解析した。0.05以下のp値を有意とみなした。SPSS13.0Chicago、イリノイ州ソフトウェアを使用して統計解析を実施した。結果本発明の実験で使用される中皮細胞培養物は、HBME-1に反応性を示す図1。透析用液体中の種々の濃度のグルコースへの暴露時間を増加させることは、中皮細胞に対して毒性があり、腹膜に対する腹膜透析液の毒性の基礎を構成する。グルコースへの暴露時間の増加は、中皮細胞中での遊離ラジカルの産生を増大させることが観察できる図2。この遊離ラジカルの産生のため、カスパーゼ-3の活性化などの細胞死のエフェクター機構が活性化される図3。高グルコース濃度の溶液への暴露は、中皮細胞における毒性指標と考えられるp38タンパク質のリン酸化を増大させる図4。培養培地へのアリスキレンの添加は、1mMの濃度に達するまで中皮細胞に対して毒性を示さなかった図5。透析培地へのアリスキレンの添加は、培養された腹膜細胞における活性酸素種の産生図6及びカスパーゼの活性化図7、並びにタンパク質p38のリン酸化図8の双方を予防した。透析培地へのアリスキレンの添加は、培養された腹膜細胞における腹膜線維症のマーカーであるコラーゲンI図9、コラーゲンIII図10、及びフィブロネクチン図11に関するmRNAレベルを低下させた。透析培地中でのアリスキレンの存在は、透析されたラットにおけるインビボでの腹膜損傷を低減した図12及び13。ラットにおける長期腹膜分析中にアリスキレンが存在することは、前記ラットから得られた腹膜細胞中での、アポトーシス促進性タンパク質p53図14及びBax図15に関するmRNAの発現を低減した。ラットにおける長期腹膜透析中にアリスキレンが存在することは、前記ラットから得られる腹膜細胞中での、抗アポトーシス性タンパク質Bcl-2に関するmRNAの発現を増加した図16。ラットにおける長期腹膜透析中にアリスキレンが存在することは、前記ラットから得られる腹膜細胞中での、腹膜線維症のマーカーであるフィブロネクチン図17及びコラーゲンIII図18に関するmRNAの発現を増大させた。"