シトクロムP450ポリペプチドをコードする組換えポリヌクレオチドを含む植物または植物部分であって、該シトクロムP450ポリペプチドの発現が該植物または植物部分にサフルフェナシルへの耐性を付与し、該ポリペプチドがCYP72A15ポリペプチドまたはCYP81AもしくはCYP73Aのアイソフォームであるが、但し、CYP81AのアイソフォームがトウモロコシNSF1ポリペプチドではない、前記植物または植物部分。CYP72A15ポリペプチドがイネポリペプチドまたはそのオルソログであり、該イネポリペプチドが配列番号7に記載のアミノ酸配列を有する、請求項1に記載の植物または植物部分。CYP81AのアイソフォームがイネCYP81A6ポリペプチドまたはそのオルソログであり、該イネCYP81A6ポリペプチドが配列番号1または配列番号29に記載のアミノ酸配列を有する、請求項1に記載の植物または植物部分。CYP73ポリペプチドがイネCYP73A38ポリペプチドまたはそのオルソログであり、該イネCYP73A38ポリペプチドが配列番号5に記載のアミノ酸配列を有する、請求項1に記載の植物または植物部分。植物の細胞の少なくともいくつかに、該植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含む植物に発芽することができる種子であって、該プロモーターが該ポリヌクレオチドによりコードされるシトクロムP450ポリペプチドを発現することができ、該ポリペプチドの発現が前記植物にサフルフェナシルへの耐性を付与し、該ポリペプチドがCYP72A15ポリペプチドまたはCYP81AもしくはCYP73Aのアイソフォームであるが、但し、CYP81AのアイソフォームがトウモロコシNSF1ポリペプチドではない、前記種子。植物の細胞の少なくともいくつかに、植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含む植物の植物細胞または該植物を再生することができる植物細胞であって、該プロモーターが該ポリヌクレオチドによりコードされるシトクロムP450ポリペプチドを発現することができ、該ポリペプチドの発現が前記植物にサフルフェナシルへの耐性を付与し、前記植物細胞がプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含み、前記ポリペプチドがCYP72A15ポリペプチドまたはCYP81AもしくはCYP73Aのアイソフォームであるが、但し、CYP81AのアイソフォームがトウモロコシNSF1ポリペプチドではない、前記植物細胞。植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含む植物細胞であって、該プロモーターが該ポリヌクレオチドによりコードされるシトクロムP450ポリペプチドを発現することができ、該ポリペプチドの発現が前記細胞にサフルフェナシルへの耐性を付与し、前記ポリペプチドがCYP72A15ポリペプチドまたはCYP81AもしくはCYP73Aのアイソフォームであるが、但し、CYP81AのアイソフォームがトウモロコシNSF1ポリペプチドではない、前記植物細胞。植物または植物部分の細胞の少なくともいくつかに、植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含む植物または植物部分から調製された植物産物であって、該プロモーターが該ポリヌクレオチドによりコードされるシトクロムP450ポリペプチドを発現することができ、該ポリペプチドの発現が前記植物または植物部分にサフルフェナシルへの耐性を付与し、前記ポリペプチドがCYP72A15ポリペプチドまたはCYP81AもしくはCYP73Aのアイソフォームであるが、但し、CYP81AのアイソフォームがトウモロコシNSF1ポリペプチドではない、前記植物産物。植物の細胞の少なくともいくつかに、植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含む植物から誘導された後代または子孫植物であって、該プロモーターが該ポリヌクレオチドによりコードされるシトクロムP450ポリペプチドを発現することができ、該ポリペプチドの発現が前記植物にサフルフェナシルへの耐性を付与し、前記後代または子孫植物が、その細胞の少なくともいくつかに、調節配列に機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含み、該後代または子孫植物中での前記ポリペプチドの発現が、該後代または子孫植物にサフルフェナシルへの耐性を付与し、前記ポリペプチドがCYP72A15ポリペプチドまたはCYP81AもしくはCYP73Aのアイソフォームであるが、但し、CYP81AのアイソフォームがトウモロコシNSF1ポリペプチドではない、前記後代または子孫植物。植物の成長のための場所にある雑草を制御する方法であって、サフルフェナシルを含む除草剤組成物を前記場所に適用することを含み、前記場所が、前記植物を生産することができる植物もしくは種子を含む場所;または前記植物もしくは種子を含むようにされた、前記適用後である場所、であり、前記植物または種子が、その細胞の少なくともいくつかに、植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含み、該プロモーターが該ポリヌクレオチドによりコードされるシトクロムP450ポリペプチドを発現することができ、該ポリペプチドの発現が前記植物にサフルフェナシルへの耐性を付与し、前記ポリペプチドがCYP72A15ポリペプチドまたはCYP81AもしくはCYP73Aのアイソフォームであるが、但し、CYP81AのアイソフォームがトウモロコシNSF1ポリペプチドではない、前記方法。工程を工程の前、後、またはそれと同時に行う、請求項10に記載の方法。除草剤組成物を雑草および前記種子により産生された植物に適用する、請求項10に記載の方法。前記場所に適用される除草剤組成物が、除草上有効なイミダゾリノンをさらに含む、請求項10に記載の方法。前記場所に適用される除草剤組成物が、イマゼタピルをさらに含む、請求項10に記載の方法。前記場所に適用される除草剤組成物が、イマザピックをさらに含む、請求項10に記載の方法。前記場所に適用される除草剤組成物が、イマザキンをさらに含む、請求項10に記載の方法。前記場所に適用される除草剤組成物が、イマザモックスをさらに含む、請求項10に記載の方法。前記場所に適用される除草剤組成物が、イマザピルをさらに含む、請求項10に記載の方法。前記場所に適用される除草剤組成物が、除草上有効なスルホニルウレアをさらに含む、請求項10に記載の方法。前記場所に適用される除草剤組成物が、ニコスルフロンをさらに含む、請求項10に記載の方法。前記場所に適用される除草剤組成物が、メトスルフロンメチルをさらに含む、請求項10に記載の方法。前記場所に適用される除草剤組成物が、チフェンスルフロンメチルをさらに含む、請求項10に記載の方法。前記場所に適用される除草剤組成物が、トリベヌロンメチルをさらに含む、請求項10に記載の方法。前記場所に適用される除草剤組成物が、ピリチオバックナトリウムをさらに含む、請求項10に記載の方法。サフルフェナシルに対する耐性を有する植物を作製する方法であって、植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドで形質転換された植物細胞から植物を再生することを含み、前記プロモーターが該ポリヌクレオチドによりコードされるシトクロムP450ポリペプチドを発現することができ、該ポリペプチドの発現が前記植物にサフルフェナシルへの耐性を付与し、前記ポリペプチドがCYP72A15ポリペプチドまたはCYP81AもしくはCYP73Aのアイソフォームであるが、但し、CYP81AのアイソフォームがトウモロコシNSF1ポリペプチドではない、前記方法。サフルフェナシルに対する耐性を有する後代植物を作製する方法であって、第1のサフルフェナシル耐性植物と、第2の植物とを交配させて、サフルフェナシル耐性後代植物を作製することを含み、該第1の植物と後代植物が、その細胞の少なくともいくつかに、植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含み、前記プロモーターが該ポリヌクレオチドによりコードされるシトクロムP450ポリペプチドを発現することができ、該ポリペプチドの発現がサフルフェナシルへの耐性を付与し、前記ポリペプチドがCYP72A15ポリペプチドまたはCYP81AもしくはCYP73Aのアイソフォームであるが、但し、CYP81AのアイソフォームがトウモロコシNSF1ポリペプチドではない、前記方法。植物または植物部分の細胞の少なくともいくつかに、植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含む植物または植物部分であって、前記プロモーターが該ポリヌクレオチドによりコードされるシトクロムP450ポリペプチドを発現することができ、該ポリペプチドの発現が前記植物または植物部分にサフルフェナシルへの耐性を付与し、該植物または植物部分が第2の除草剤耐性特性をさらに示し、前記ポリペプチドがCYP72A15ポリペプチドまたはCYP81AもしくはCYP73Aのアイソフォームであるが、但し、CYP81AのアイソフォームがトウモロコシNSF1ポリペプチドではない、前記植物または植物部分。第2の除草剤耐性特性が、イミダゾリノン除草剤耐性である、請求項27に記載の植物。前記種子が、その表面上で処理された、少なくとも1種の農学上許容し得る活性成分を含む組成物を有する、請求項5に記載の種子。前記種子が、その表面上で処理された、少なくとも1種の農学上許容し得る防かび剤、殺線虫剤、または殺虫剤AIまたはその組合せを含む組成物を有する、請求項5に記載の種子。前記種子が、その表面上で処理された、少なくとも1種の農学上許容し得る除草剤、防かび剤、殺線虫剤、もしくは殺虫剤AI、またはその組合せを含む組成物であるが、但し、除草剤AIがサフルフェナシルAIではない、前記組成物を有する、請求項5に記載の種子。請求項5に記載の種子を提供すること、およびそれに対して種子処理組成物を適用することを含む、処理された種子を調製する方法。請求項1に記載の植物を農学上許容し得る組成物で処理する方法であって、農学上許容し得る組成物を前記植物と接触させることを含み、該組成物がサフルフェナシルを含む、前記方法。請求項1に記載の植物を農学上許容し得る組成物で処理する方法であって、農学上許容し得る組成物を前記植物と接触させることを含むが、但し、該組成物がサフルフェナシルAIを含まない、前記方法。前記組成物が防かび剤、殺虫剤、または殺線虫剤をさらに含む、請求項33に記載の方法。請求項1に記載の種子を農学上許容し得る組成物で処理する方法であって、農学上許容し得る組成物を前記種子と接触させることを含み、該組成物がサフルフェナシルを含む、前記方法。前記組成物が防かび剤、殺虫剤、または殺線虫剤をさらに含む、請求項36に記載の方法。請求項1に記載の植物の種子または該植物を産生することができる種子を植えることを含む、子孫種子を調製する方法。前記種子から子孫植物を成長させることをさらに含む、請求項38に記載の方法。前記子孫植物から子孫種子を収穫することをさらに含む、請求項39に記載の方法。オーキシン除草剤組成物を前記子孫植物に適用することをさらに含む、請求項39に記載の方法。請求項1に記載の植物から植物産物を製造する方法であって、該植物またはその植物部分を加工して、植物産物を取得することを含む、前記方法。前記植物産物が飼料、種子粉末、油、または種子処理コーティングされた種子である、請求項42に記載の方法。前記植物部分が種子である、請求項42に記載の方法。植物または植物部分が、その細胞の少なくともいくつかに、植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含む植物または植物部分から得られる植物産物であって、該プロモーターが該ポリヌクレオチドによりコードされるシトクロムP450ポリペプチドを発現することができ、該ポリペプチドの発現が前記植物または植物部分にサフルフェナシルへの耐性を付与し、該植物または植物部分が第2の除草剤耐性特性をさらに示し、前記ポリペプチドがCYP72A15ポリペプチドまたはCYP81AもしくはCYP73Aのアイソフォームであるが、但し、CYP81AのアイソフォームがトウモロコシNSF1ポリペプチドではない、前記植物産物。前記産物が飼料、種子粉末、油、または種子処理コーティングされた種子である、請求項45に記載の植物産物。定義本明細書で用いられる耐性または除草剤耐性は、非耐性例えば、野生型植物またはその一部において通常は成長阻害を引き起こす量の除草剤の存在下で成長することができる植物またはその植物部分を示す。通常は非耐性植物の成長を阻害する除草剤のレベルは公知であり、当業者であれば容易に決定することができる。例としては、適用のために製造業者により推奨される量が挙げられる。最大速度は、通常は非耐性植物の成長を阻害するであろう除草剤の量の一例である。本発明に関して、用語除草剤耐性および除草剤抵抗性は互換的に用いられ、等価な意味および等価な範囲を有すると意図される。同様に、用語除草剤耐性および除草剤抵抗性は互換的に用いられ、等価な意味および等価な範囲を有すると意図される。同様に、用語耐性および抵抗性は互換的に用いられ、等価な意味および等価な範囲を有すると意図される。本明細書で用いられる通り、本明細書に記載の様々な実施形態において有用な除草剤組成物に関して、PPO阻害剤例えば、サフルフェナシル、アセトヒドロキシ酸シンターゼAHAS阻害剤、アセチルコエンザイムAカルボキシラーゼACCase阻害剤、5エノールピルビルシキミ酸3リン酸シンターゼEPSPS阻害剤、イミダゾリノン、スルホニルウレアなどの用語は、当業界で認識されるその農学上許容し得る除草活性成分AIを指す。同様に、防かび剤、殺線虫剤、殺虫剤などの用語は、当業界で認識される他の農学上許容し得る活性成分を指す。特定の突然変異酵素またはポリペプチドを参照して用いられる場合、除草剤耐性および除草剤耐性とは、そのような酵素またはポリペプチドが、通常は野生型非突然変異体の前記酵素またはポリペプチドの活性を不活化または阻害するであろう量の除草活性成分の存在下でその生理活性を実行する能力を指す。例えば、特にAHAS酵素、またはAHASLポリペプチドに関して用いられる場合、それは特に、AHAS阻害剤を許容する能力を指す。AHAS阻害剤のクラスとしては、スルホニルウレア、イミダゾリノン、トリアゾロピリミジン、スルホニルアミノカルボニルトリアゾリノン、およびピリミジニルオキシチオ安息香酸が挙げられる。イミダゾリノン除草剤を用いるいくつかの実施形態においては、アミノ酸残基位置122、205、574、または653シロイヌナズナ種およびシナピス種との関連では、種子は別途特定しない限り、樹木種子複数も可を指す。例えば、種子は、トランスジェニック植物または伝統的な育種方法により得られた植物の種子であってよい。伝統的な育種方法の例としては、交雑育種、自殖、戻し交配、胚救出、近交系交配、異系交配、同系交配、選択、無性繁殖、および当業界で公知である他の伝統的技術が挙げられる。特定の植物または植物種およびそのハイブリッドを参照して例示したが、様々な実施形態においては、サフルフェナシルを用いる本明細書に記載の方法を、様々な商業的に価値のある植物と共に用いることができる。本明細書で有用なものとして記載されるサフルフェナシル耐性植物系を、伝統的な植物育種などにより、直接的または間接的に、すなわち、除草剤処理のための作物として、または開発のためのサフルフェナシル耐性形質ドナー系として、雑草制御方法において用いて、そのような形質または複数の形質を含む他の変種および/またはハイブリッド作物を作製することができる。先祖のサフルフェナシル耐性形質または複数の形質を含むそのような得られる変種またはハイブリッド作物は全て、本明細書では先祖のサフルフェナシル耐性系複数も可の後代または子孫と呼ぶことができる。そのような得られる植物を、先祖植物の除草剤耐性特性複数も可を保持すると言うことができる、すなわち、それらは前記形質の原因となる先祖の遺伝分子成分を有し、発現することを意味している。一態様において、本発明は、シトクロムP450ポリペプチドの発現が植物または植物部分にサフルフェナシルへの耐性を付与する前記ポリペプチドをコードする組換えポリヌクレオチドを含む前記植物または植物部分を提供する。いくつかの実施形態においては、シトクロムP450ポリペプチドは、CYP81AアイソフォームまたはCY73Aアイソフォームポリペプチドである。他の実施形態においては、シトクロムP450ポリペプチドは、CYP81A6、NSF1、CYP73A38、またはCYP72A15である。一実施形態においては、CYP81AアイソフォームはCYP81A6またはNSF1である。他の実施形態においては、本発明は、P450ポリペプチドがNSF1以外のシトクロムP450であるという条件で、シトクロムP450ポリペプチドの発現が植物または植物部分にサフルフェナシルへの耐性を付与する前記ポリペプチドをコードする組換えポリヌクレオチドを含む前記植物または植物部分を提供する。別の実施形態においては、NSF1はトウモロコシNSF1以外のものである。CYP81A6アミノ酸配列は、例えば、GenBank受託番号AAK639201その全体が参照により本明細書に組入れられるものとするにより開示されている。一実施形態においては、本発明の植物または植物部分は、CYP81A6ポリペプチドの発現が植物または植物部分にサフルフェナシルへの耐性を付与する前記ポリペプチドをコードする組換えポリヌクレオチドを含む。別の実施形態においては、CYP81A6ポリペプチドは、イネポリペプチドである。他の実施形態においては、CYP81A6ポリペプチドは、配列番号1表1に記載のアミノ酸配列を有する。表1:配列番号1CYP81A6ポリペプチドをコードする核酸配列を表2に示す。表2:配列番号2別の実施形態においては、CYP81A6ポリペプチドをコードする組換えポリヌクレオチドは、配列番号2に記載の核酸配列を有する。NSF1アミノ酸配列は、例えば、GenBankアクセッション番号ACG280281その全体が参照により本明細書に組入れられるものとするにより開示されている。一実施形態においては、本発明の植物または植物部分は、NSF1ポリペプチドの発現が植物または植物部分にサフルフェナシルへの耐性を付与する前記ポリペプチドをコードする組換えポリヌクレオチドを含む。別の実施形態においては、NSF1ポリペプチドは、トウモロコシポリペプチドである。他の実施形態においては、NSF1ポリペプチドは、配列番号3表3に記載のアミノ酸配列を有する。表3:配列番号3NSF1ポリペプチドをコードする核酸配列を表4に示す。表4:配列番号4一実施形態においては、NSF1ポリペプチドをコードする組換えポリヌクレオチドは、配列番号4に記載の核酸配列を有する。CYP73A38アミノ酸配列は、例えば、GenBankアクセッション番号NP0010551901その全体が参照により本明細書に組入れられるものとするにより開示されている。一実施形態においては、本発明の植物または植物部分は、CYP73A38ポリペプチドの発現が植物または植物部分にサフルフェナシルへの耐性を付与する前記ポリペプチドをコードする組換えポリヌクレオチドを含む。別の実施形態においては、CYP73A38ポリペプチドは、イネポリペプチドである。他の実施形態においては、CYP73A38ポリペプチドは、配列番号5表5に記載のアミノ酸配列を有する。表5:配列番号5CYP73A38ポリペプチドをコードする核酸配列を表6に示す。表6:配列番号6別の実施形態においては、CYP73A38ポリペプチドをコードする組換えポリヌクレオチドは、配列番号7に記載の核酸配列を有する。CYP72A15アミノ酸配列は、例えば、GenBankアクセッション番号NP0010436321その全体が参照により本明細書に組入れられるものとするに開示されている。一実施形態においては、本発明の植物または植物部分は、CYP72A15ポリペプチドの発現が植物または植物部分にサフルフェナシルへの耐性を付与する前記ポリペプチドをコードする組換えポリヌクレオチドを含む。別の実施形態においては、CYP72A15ポリペプチドはイネポリペプチドである。他の実施形態においては、CYP72A15ポリペプチドは配列番号7表7に記載のアミノ酸配列を有する。表7:配列番号7CYP72A15ポリペプチドをコードする核酸配列を表8に示す。表8:配列番号8別の実施形態においては、CYP72A15ポリペプチドをコードする組換えポリヌクレオチドは、配列番号8に記載の核酸配列を有する。限定されるものではないが、シトクロムP450アミノ酸および核酸配列のさらなる例を、それぞれ表9および10に示す。表9:CYP450ポリペプチドアミノ酸配列の例表10:CYP450ポリペプチドをコードする核酸配列の例他の実施形態においては、本発明による使用のためのシトクロムP450ポリペプチドは、変異体の完全長にわたって、配列番号1、3、5、7、または29に対して少なくとも約80、例えば、少なくとも約80、90、95、98、99以上のアミノ酸配列同一性を有する機能的変異体である。別の実施形態においては、本発明による使用のためのシトクロムP450ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、または29に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドの機能的断片である。ポリヌクレオチドについては、シトクロムP450ポリペプチドをコードする縮重配列およびコドン最適化配列も、本発明の範囲内にある。かくして、シトクロムポリペプチドの機能的変異体および断片、ならびにそれらをコードする核酸分子も、本明細書で別途具体的に記載されない限り、P450ポリペプチドの起源およびそれが天然に存在するかどうかとは無関係に、本発明の範囲内にある。P450ポリペプチドの機能性に関する様々なアッセイを用いることができる。例えば、P450ポリペプチドの機能的変異体または断片をアッセイして、サフルフェナシル解毒を付与するその能力を決定することができる。例として、サフルフェナシル解毒速度を、P450ポリペプチドの変異体または断片をコードする組換えポリヌクレオチドを含む植物または植物部分であって、該変異体または断片を発現しない同様に処理された対照植物と比較して、全細胞タンパク質の最大で約05、例えば、約005~約05、約01~約04、および約02~約03の該変異体または断片を発現する前記植物または植物部分におけるサフルフェナシルへの耐性の決定可能な増加を提供するのに十分な触媒速度と定義することができる。いくつかの実施形態においては、P450ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7または29に記載のアミノ酸配列を有するシトクロムの機能的変異体または断片であって、配列番号1、3、5、7または29に対して少なくとも約80のアミノ酸配列同一性を有する、前記機能的変異体または断片である。他の実施形態においては、前記機能的変異体または断片はさらに、該変異体または断片をコードする組換えポリヌクレオチドを含む植物または植物部分であって、該変異体または断片を発現しない同様に処理された対照植物と比較して全細胞タンパク質の最大で約05の該変異体または断片を発現する前記植物または植物部分において、サフルフェナシルへの耐性の決定可能な増加を提供するのに十分な触媒速度と定義されるサフルフェナシル解毒速度を有する。さらに、当業者であれば、本発明のヌクレオチド配列中に突然変異により変化を導入することによって、タンパク質の生物活性を変化させることなく、コードされたタンパク質のアミノ酸配列の変化をもたらすことができることをさらに理解するであろう。かくして、例えば、配列番号1、3、5、7または29のものと異なるアミノ酸配列を有するP450ポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチド分子を、1個以上のアミノ酸置換、付加または欠失がコードされたタンパク質中に導入されるように、対応するヌクレオチド配列中に1個以上のヌクレオチド置換、付加または欠失を導入することにより作製することができる。部位特異的突然変異誘発およびPCR媒介性突然変異誘発などの標準的な技術により、突然変異を導入することができる。そのような変異ヌクレオチド配列も本発明により包含される。例えば、好ましくは、1個以上の予測される、好ましくは非必須アミノ酸残基で保存的アミノ酸置換を行うことができる。非必須アミノ酸残基は、生物活性を変化させることなく、タンパク質の野生型配列から変化させてもよい残基であるが、必須アミノ酸残基は、生物活性にとって必要である。保存的アミノ酸置換は、アミノ酸残基が類似する側鎖を有するアミノ酸残基で置換されたものである。類似する側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当業界で定義されている。これらのファミリーとしては、塩基性側鎖例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン、酸性側鎖例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸、非荷電極性側鎖例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン、非極性側鎖例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、β分枝側鎖例えば、トレオニン、バリン、イソロイシンおよび芳香族側鎖例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジンを有するアミノ酸が挙げられる。そのような置換は、保存されたアミノ酸残基または保存されたモチーフ内にあるアミノ酸残基について行うことはできない。本発明のタンパク質を、アミノ酸置換、欠失、トランケーション、および挿入などの様々な方法で変化させることができる。そのような操作の方法は、当業界で一般的に公知である。例えば、DNA中での突然変異によりアミノ酸配列変異体を調製することができる。突然変異誘発およびヌクレオチド配列変化のための方法は、当業界でよく知られている。例えば、KunkelPNAS82488492KunkelらMethodsinEnzymol154367382米国特許第4873192号WalkerおよびGaastra編、TechniquesinMolecularBiologyならびにそこに引用された参考文献を参照されたい。目的のタンパク質の生物活性に影響しない好適なアミノ酸置換に関する指針を、参照により本明細書に組入れられるものとするDayhoffらAtlasofProteinSequenceandStructureのモデルに見出すことができる。あるアミノ酸を類似する特性を有する別のアミノ酸と交換することなどの保存的置換が好ましい。あるいは、飽和突然変異誘発などにより、コード配列の全部または一部に沿って無作為に突然変異を導入することによって変異ヌクレオチド配列を作製し、得られた突然変異体をスクリーニングして、活性を保持するタンパク質をコードする突然変異体を同定することができる。例えば、突然変異誘発の後、コードされたタンパク質を組換え的に発現させ、該タンパク質の活性を標準的なアッセイ技術を用いて決定することができる。他の態様において、本発明は、本発明のサフルフェナシル耐性植物の後代または子孫ならびに本発明のサフルフェナシル耐性植物から誘導された種子および本発明のサフルフェナシル耐性植物から誘導された細胞を包含する。いくつかの実施形態においては、本発明は、植物の細胞の少なくともいくつかに、植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含む植物から誘導される後代または子孫植物であって、該プロモーターが該ポリヌクレオチドによりコードされるCYP81AまたはCYP73Aポリペプチドを発現することができ、該ポリペプチドの発現が前記植物にサフルフェナシルへの耐性を付与する前記後代または子孫植物であって、その細胞の少なくともいくつかに、調節配列に機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含み、該後代または子孫植物中での前記ポリペプチドの発現が該後代または子孫植物にサフルフェナシルへの耐性を付与する、前記後代または子孫植物を提供する。他の実施形態においては、前記組換えポリヌクレオチドはCYP72A15ポリペプチドをコードし、該ポリペプチドの発現は前記植物にサフルフェナシルへの耐性を付与する。一実施形態においては、本発明の種子は、好ましくは、サフルフェナシル耐性植物のサフルフェナシル耐性特性を含む。他の実施形態においては、種子は、植物の細胞の少なくともいくつかに、植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含む植物であって、該プロモーターが該ポリヌクレオチドによりコードされるCYP81AまたはCYP73Aポリペプチドを発現することができ、該ポリペプチドの発現が前記植物にサフルフェナシルへの耐性を付与する、前記植物に発芽することができる。他の実施形態においては、前記組換えポリヌクレオチドはCYP72A15ポリペプチドをコードし、該ポリペプチドの発現は前記植物にサフルフェナシルへの耐性を付与する。いくつかの実施形態においては、本発明の植物細胞は、植物または植物部分を再生することができる。他の実施形態においては、植物細胞は、植物または植物細胞を再生することができない。植物を再生することができない細胞の例としては、限定されるものではないが、内胚乳、種子外皮種皮および果皮、ならびに根冠が挙げられる。別の実施形態においては、本発明は、植物の細胞の少なくともいくつかに、植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含む植物の植物細胞または該植物を再生することができる植物細胞であって、該プロモーターが該ポリヌクレオチドによりコードされるCYP81AまたはCYP73Aポリペプチドを発現することができ、該ポリペプチドの発現が前記植物にサフルフェナシルへの耐性を付与し、前記植物細胞がプロモーターに機能し得る形で連結された前記組換えポリヌクレオチドを含む、前記植物細胞を提供する。他の実施形態においては、前記組換えポリヌクレオチドはCYP72A15ポリペプチドをコードし、該ポリペプチドの発現は前記植物にサフルフェナシルへの耐性を付与する。他の実施形態においては、本発明は、植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含む植物細胞であって、該組換えポリヌクレオチドが、該ポリヌクレオチドによりコードされるCYP81AまたはCYP73Aポリペプチドを発現するために前記細胞中で有効であり、該ポリペプチドの発現が該細胞にサフルフェナシルへの耐性を付与する、前記植物細胞を提供する。他の実施形態においては、前記組換えポリヌクレオチドはCYP72A15ポリペプチドをコードし、該ポリペプチドの発現は前記細胞にサフルフェナシルへの耐性を付与する。いくつかの態様において、本発明は、本明細書に記載のサフルフェナシル耐性植物から調製された植物産物を提供する。いくつかの実施形態においては、植物産物の例としては、限定されるものではないが、穀物、油、および粉末が挙げられる。一実施形態においては、植物産物は、植物穀物例えば、食品としての使用にとって、もしくは加工にとって好適な穀物、植物油例えば、食品もしくはバイオディーゼルとしての使用にとって好適な油、または植物粉末例えば、飼料としての使用にとって好適な粉末である。一実施形態においては、植物または植物部分が、その細胞の少なくともいくつかに、植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含み、該組換えポリヌクレオチドが該ポリヌクレオチドによりコードされるCYP81AまたはCYP73Aポリペプチドを発現するために該植物または植物部分の細胞中で有効であり、該ポリペプチドの発現が該植物または植物部分にサフルフェナシルへの耐性を付与する、前記植物または植物部分から調製された植物産物を提供する。他の実施形態においては、前記組換えポリヌクレオチドはCYP72A15ポリペプチドをコードし、該ポリペプチドの発現は前記植物または植物部分にサフルフェナシルへの耐性を付与する。いくつかの態様において、本発明は、サフルフェナシル耐性植物の作製方法を提供する。一実施形態においては、前記方法は、植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドで形質転換された前記植物細胞であって、該組換えポリヌクレオチドが該ポリヌクレオチドによりコードされるCYP81AまたはCYP73Aポリペプチドを発現するために前記細胞中で有効であり、該ポリペプチドの発現が前記植物にサフルフェナシルへの耐性を付与する前記植物細胞から植物を再生させることを含む。他の実施形態においては、前記組換えポリヌクレオチドはCYP72A15ポリペプチドをコードし、該ポリペプチドの発現は前記植物にサフルフェナシルへの耐性を付与する。必要に応じて、形質転換植物中での発現の増加のために、核酸配列を最適化することができる。例えば、植物中での発現の改善のための植物にとって好ましいコドンを含むコード配列を提供することができる。宿主にとって好ましいコドン使用の考察については、例えば、CampbellおよびGowriPlantPhysiol92111を参照されたい。植物にとって好ましい遺伝子を調製するための方法も当業界で公知である。例えば、米国特許第5380831号および第5436391号、ならびにMurrayらNucleicAcidsRes17477498参照により本明細書に組入れられるものとするを参照されたい。さらに、細胞宿主中での遺伝子発現を増強するさらなる配列改変が公知である。これらのものとしては、疑似ポリアデニル化シグナル、エクソンイントロンスプライス部位シグナル、トランスポゾン様反復、および遺伝子発現にとって有害であり得る他のそのようなよく特性評価された配列をコードする配列の排除が挙げられる。前記配列のGC含量を、宿主細胞中で発現される既知の遺伝子を参照して算出される、所与の細胞宿主の平均レベルに調整することができる。また、必要に応じて、予測されるヘアピン二次mRNA構造を回避するために、配列を容易に改変することができる。遺伝子発現を増強するためのヌクレオチド配列を、植物発現ベクター中で用いることもできる。これらのものとしては、例えば、トウモロコシAdhlのイントロン、intronl遺伝子Callisら、GenesandDevelopment1118312001987、ならびにタバコモザイクウイルスTMV、トウモロコシ退緑斑紋ウイルスおよびアルファルファモザイクウイルスGallieら、NucleicAcidRes15869387111987およびSkuzeskiら、PlantMoIBiol1565791990に由来するリーダー配列W配列が挙げられる。トウモロコシのshrunken1遺伝子座に由来する第1イントロンは、キメラ遺伝子構築物中での遺伝子の発現を増加させることが示されている。米国特許第5424412号および第5593874号は、遺伝子発現構築物中での特異的イントロンの使用を開示し、Gallieらも、組織特異的な遺伝子発現を調節するのにイントロンが有用であることを示している。遺伝子発現をさらに増強するか、または最適化するために、本発明の植物発現ベクターはまた、マトリックス結合領域MARを含むDNA配列を含んでもよい。次いで、そのような改変された発現系で形質転換された植物細胞は、本発明のヌクレオチド配列の過剰発現または構成的発現を示してもよい。発現ベクターは、発現構築物中に5リーダー配列をさらに含んでもよい。そのようなリーダー配列は、翻訳を増強するように作用することができる。翻訳リーダーは当業界で公知であり、ピコルナウイルスリーダー、例えば、EMCVリーダー脳心筋炎5非コード領域PNAS8661266130ポチウイルスリーダー、例えば、TEVリーダーGene165233238、MDMVリーダー、およびヒト免疫グロブリン重鎖結合タンパク質Nature3539094アルファルファモザイクウイルスの外被タンパク質mNRAに由来する非翻訳リーダーNature325622625タバコモザイクウイルスリーダーMolecularBiologyofRNA、Cech編pp237256ならびにトウモロコシ退緑斑紋ウイルスリーダーVirology81382385が挙げられる。また、DellaCioppaらPlantPhysiol84965968も参照されたい。翻訳を増強することが知られる他の方法、例えば、イントロンなどを用いることもできる。発現ベクターを調製する際に、様々な核酸断片を操作して、適切な向きに、および必要に応じて、適切な読み枠で核酸配列を提供することができる。このような目的で、アダプターまたはリンカーを用いて核酸断片を連結するか、または他の操作を含有させて、都合の良い制限部位、余分な核酸の除去、制限部位の除去などを提供することができる。この目的のために、invitro突然変異誘発、プライマー修復、制限酵素処理、アニーリング、再置換、例えば、転移およびトランスバージョンを含有させることができる。多数のプロモーターを、本発明の実施において用いることができる。所望の結果に基づいて、プロモーターを選択することができる。植物中での発現のために構成的、組織にとって好ましい、または他のプロモーターと前記核酸を組合わせることができる。構成的プロモーターとしては、例えば、Rsyn7プロモーターのコアプロモーターならびにWO9943838および米国特許第6072050号に開示された他の構成的プロモーターコアCaMV35SプロモーターNature313810812イネアクチンPlantCell2163171ユビキチンPlantMoIBiol12619632およびChristensenらPlantMoIBiol18675689pEMUTheorApplGenet81581588MASEMBOJ327232730ALSプロモーター米国特許第5659026号などが挙げられる。他の構成的プロモーターとしては、例えば、米国特許第5608149号第5608144号第5604121号第5569597号第5466785号第5399680号第5268463号第5608142号および第6177611号が挙げられる。組織にとって好ましいプロモーターを用いて、特定の植物組織内での発現の増強を標的化することができる。そのような組織にとって好ましいプロモーターとしては、限定されるものではないが、葉にとって好ましいプロモーター、根にとって好ましいプロモーター、種子にとって好ましいプロモーター、および茎にとって好ましいプロモーターが挙げられる。組織にとって好ましいプロモーターのいくつかの例は、例えば、YamamotoらPlantJ12255265KawamataらPlantCellPhysiol38792803HansenらMoIGenGenet254337343RussellらTransgenicRes6157168RinehartらPlantPhysiol11213311341VanCampらPlantPhysiol112525535CanevasciniらPlantPhysiol112513524YamamotoらPlantCellPhysiol35773778LamResultsProblCellDiffer20181196OrozcoefαPlantMoIBiol2311291138MatsuokaらVocNatlAcadScLUSA9095869590およびGuevaraGarciaらPlantJ4495505により記載されている。必要に応じて、弱い発現のためにプロモーターを改変してもよい。いくつかの実施形態においては、目的の核酸を、発現のために葉緑体に対して標的化することができる。このように、目的の核酸を葉緑体中に直接挿入しない場合、発現ベクターは、目的の遺伝子産物を葉緑体に指向させる葉緑体輸送ペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む葉緑体標的化配列をさらに含むであろう。そのような輸送ペプチドは当業界で公知である。葉緑体標的化配列に関して、機能し得る形で連結されたとは、輸送ペプチドをコードする核酸配列すなわち、葉緑体標的化配列が、本発明の望ましいコード配列に、その2個の配列が連続的であり、同じ読み枠にあるように連結されていることを意味する。例えば、VonHeijneらPlantMoIBiolRep9104126ClarkらJBiolChem2641754417550DellaCioppaらPlantPhysiol84965968RomerらBiochemBiophysResCommun19614141421およびShahらScience233478481を参照されたい。例えば、当業界で公知の葉緑体輸送ペプチドを、P450をコードするヌクレオチド配列の5末端に葉緑体標的化配列を機能し得る形で連結することにより、本発明のP450ポリペプチドのアミノ酸配列に融合させることができる。葉緑体標的化配列は当業界で公知であり、リブロース15ビスリン酸カルボキシラーゼRubiscoの葉緑体小サブユニットPlantMoIBiol30769780SchnellらJBiolChem26633353342EPSPSJBioenergBiomemb22789810トリプトファンシンターゼJBiolChem27060816087プラストシアニンJBiolChem2722035720363コリスミ酸シンターゼJBiolChem2682744727457および集光性葉緑素ab結合タンパク質JBiolChem2631499614999が挙げられる。また、VonHeijneらPlantMoIBiolRep9104126ClarkらJBiolChem2641754417550DellaCioppaらPlantPhysiol84965968RomerらBiochemBiophysResCommun19614141421およびShahらScience233478481も参照されたい。葉緑体の形質転換のための方法は、当業界で公知である。例えば、SvabらProcNatlAcadScLUSA8785268530SvabおよびMaligaProcNatlAcadSciUSA90913917SvabおよびMaligaEMBOJ12601606を参照されたい。この方法は、選択マーカーを含むDNAの粒子銃送達および相同組換えによるプラスチドゲノムへのDNAの標的化に依存する。さらに、プラスチド形質転換を、核にコードされ、プラスチドを指向するRNAポリメラーゼの組織にとって好ましい発現によるサイレントプラスチド媒介性トランスジーンのトランス活性化によって達成することができる。そのような系は、McBrideらProcNatlAcadSciUSA9173017305に報告されている。葉緑体に対して標的化される目的の核酸を、植物の核とこの器官との間のコドン使用の差異の原因となる葉緑体中での発現のために最適化することができる。このように、目的の核酸を、葉緑体にとって好ましいコドンを用いて合成することができる。例えば、参照により本明細書に組入れられるものとする米国特許第5380831号を参照されたい。多数の植物形質転換ベクターおよび植物を形質転換するための方法が利用可能である。例えば、AnGらPlantPysioL81301305FryJらPlantCellRep6321325BlockMTheorApplGenet1616111AHincheeらStadlerGenetSymp2032220322CousinsらAustJPlantPhysiol18481494CheePPおよびSlightomJLGene118255260ChristouらTrendsBiotechnol10239246ΗalluinらBioTechnol10309314DhirらPlantPhysiol998188CasasらProcNatAcadSdUSA901121211216ChristouPInVitroCellDevBiolPlant29P119124DaviesらPlantCellRep12180183DongJAおよびMchughenAPlantScL91139148FranklinCIおよびTrieuTNPlantPhysiol102167GolovkinらPlantScL904152GuoChinScLBull3820722078AsanoらPlantCellRep13AyeresNMおよびParkWDCritRevPlantSci13219239BarceloらPlantJ5583592BeckerらPlantJ5299307BorkowskaらActaPhysiolPlant16225230ChristouPAgroFoodIndHiTech51727EapenらPlantCellRep13582586HartmanらBioTechnology12919923RitalaらPlantMolBiol24317325ならびにWanYCおよびLemauxPGPlantPhysiol1043748を参照されたい。いくつかの実施形態においては、本発明の方法は、ポリヌクレオチド構築物を植物中に導入することを含む。導入することは、構築物が植物の細胞の内部に進入するような様式で植物にポリヌクレオチド構築物を提供することを意図する。本発明の方法は、ポリヌクレオチド構築物が植物の少なくとも1個の細胞の内部に進入するというだけで、ポリヌクレオチド構築物を植物に導入するための特定の方法に依らない。ポリヌクレオチド構築物を植物に導入する方法は当業界で公知であり、限定されるものではないが、安定な形質転換法、一過的形質転換法、およびウイルスを媒介する方法が挙げられる。安定な形質転換とは、植物に導入されるポリヌクレオチド構築物が該植物のゲノム中に組込まれ、その子孫によって受け継がれ得ることを意図する。一過的形質転換とは、植物に導入されるポリヌクレオチド構築物が該植物のゲノム中に組込まれないことを意図する。植物および植物細胞の形質転換のために、本発明のヌクレオチド配列を、植物または植物細胞中でのヌクレオチド配列の発現にとって好適である当業界で公知の任意のベクター中に、標準的な技術を用いて挿入する。ベクターの選択は、好ましい形質転換技術および形質転換される標的植物種に依存する。本発明の一実施形態においては、コードヌクレオチド配列を、植物プロモーター、例えば、植物細胞中での高レベルの発現のための当業界で公知のプロモーターに機能し得る形で連結した後、この構築物を、サフルフェナシルに対する感受性の高い植物細胞中に導入する;および形質転換植物を再生させる。いくつかの実施形態においては、形質転換植物は、非形質転換細胞から再生された植物を殺傷するか、または著しく損傷するであろうレベルのサフルフェナシルへの曝露に対して耐性である。この方法を、任意の植物種または作物に適用することができる。植物発現ベクターを構築し、外来核酸を植物に導入する方法は、当業界で一般的に公知である。例えば、腫瘍誘導性Tiプラスミドベクターを用いて、外来DNAを植物に導入することができる。外来DNAの送達に用いられる他の方法は、PEG媒介性プロトプラスト形質転換、エレクトロポレーション、マイクロインジェクションウィスカー、直接DNA取込みのための遺伝子銃または微粒子銃の使用を含む。そのような方法は、当業界で公知であるVasilらの米国特許第5405765号BilangらGene100247250ScheidらMoLGenGenet228104112GuercheらPlantScience52111116NeuhauseらTheorApplGenet753036KleinらNature3277073HowellらScience2081265HorschらScience22712291231DeBlockらPlantPhysiology91694701MethodsforPlantMolecularBiologyAcademicPressIncならびにMethodsinPlantMolecularBiologyAcademicPressInc。植物細胞にヌクレオチド配列を導入する他の好適な方法としては、例えば、CrosswayらBiotechniques4320334により記載されたマイクロインジェクション、例えば、RiggsらProcNatlAcadScLUSA8356025606により記載されたエレクトロポレーション、例えば、Townsendら、米国特許第5563055号、Zhaoら、米国特許第5981840号により記載されたアグロバクテリウム媒介性形質転換、例えば、PaszkowskiらEMBOJ327172722により記載された直接遺伝子導入、ならびに例えば、米国特許第4945050号第5879918号第5886244号および第5932782号TomesらDirectDNATransferintoIntactPlantCellsviaMicroprojectileBombardmentPlantCellTissueandOrganCultureFundamentalMethodsGamborgおよびPhillips編McCabeらBiotechnology6923926により記載された弾道粒子加速法およびLecl形質転換が挙げられる。また、WeissingerらAnnRevGenet22421477SanfordらParticulateScienceandTechnology52737ChristouらPlantPhysiol87671674McCabeらBioTechnology6923926FinerおよびMcMullenInVitroCellDevBiol27P175182SinghらTheorApplGenet96319324DattaらBiotechnology8736740KleinらPNAS8543054309KleinらBiotechnology6559563米国特許第5240855号第5322783号および第5324646号TomesらDirectDNATransferintoIntactPlantCellsviaMicroprojectileBombardmentPlantCellTissueandOrganCultureFundamentalMethodsGamborg編KleinらPlantPhysiol91440444FrommらBiotechnology8833839HooykaasVanSlogterenらNature311763764Bowenら、米国特許第5736369号BytebierらPNAS8453455349DeWetらTheExperimentalManipulationofOvuleTissuesChapmanら編pp197209KaepplerらPlantCellReports9415418およびKaepplerらTheorApphGenet84560566DHalluinらPlantCell414951505LiらPlantCellReports12250255ならびにChristouおよびFordAnnalsofBotany75407413OsjodaらNatureBiotechnology14745750を介するトウモロコシそれぞれ参照により本明細書に組入れられるものとするも参照されたい。いくつかの実施形態においては、本発明のポリヌクレオチドを、植物とウイルスまたはウイルス核酸とを接触させることにより植物に導入することができる。一般的には、そのような方法は、ウイルスDNAまたはRNA分子内に本発明のポリヌクレオチド構築物を組込むことを含む。本発明のポリペプチドをウイルスポリタンパク質の一部として最初に合成した後、invivoまたはinvitroでのタンパク質溶解により処理して、所望の組換えポリペプチドを産生することができることが認識される。さらに、本発明のプロモーターはまた、ウイルスRNAポリメラーゼによる転写に用いられるプロモーターも包含することが認識される。ポリヌクレオチド構築物を植物に導入し、ウイルスDNAまたはRNA分子を含む、その中でコードされるタンパク質を発現させる方法は、当業界で公知である。例えば、米国特許第5889191号、第5889190号、第5866785号、第5589367号および第5316931号参照により本明細書に組入れられるものとするを参照されたい。形質転換された細胞を、従来の方法に従って植物に成長させることができる。例えば、McCormickらPlantCellReports58184を参照されたい。次いで、これらの植物を成長させ、同じ形質転換株または異なる株に受粉させ、所望の表現型特性を構成的に発現する得られたハイブリッドを同定することができる。2以上の世代を成長させて、所望の表現型特性の発現が安定に維持、遺伝されることを確保した後、種子を収穫して所望の表現型特性の発現が達成されたことを確保することができる。本発明を、限定されるものではないが、単子葉植物および双子葉植物などの任意の植物種の形質転換に用いることができる。目的の植物種の例としては、限定されるものではないが、コーンもしくはトウモロコシZeamays、アブラナ種例えば、ブラシカナプス、ブラシカラパ、ブラシカジュンセア、特に、種油の起源として有用なアブラナ種、アルファルファ、イネ、ライムギ、ソルガム、ソルガムブルガレ、キビ例えば、トウジンビエ、キビ、アワ、シコクビエ、ヒマワリ、ベニバナ、コムギ、トリチカムツルギダム亜種デュラム、大豆、タバコ、ジャガイモ、ピーナッツ、ワタ、ゴシピウムヒルスタム、サツマイモ、キャッサバ、コーヒー、ココナッツ、パインアップル、シトラスの木、ココア、茶、バナナ、アボカド、イチジク、グアバ、マンゴー、オリーブ、パパイヤ、カシュー、マカダミア、アーモンド、サトウダイコン、サトウキビ、オートムギ、オオムギ、野菜、観賞植物、および針葉樹が挙げられる。好ましくは、本発明の植物は、作物植物例えば、ヒマワリ、アブラナ種、ワタ、サトウダイコン、大豆、ピーナッツ、アルファルファ、ベニバナ、タバコ、コーン、イネ、コムギ、ライムギ、オオムギ、ライコムギ、ソルガム、キビなどである。他の態様において、本発明のサフルフェナシル耐性植物を、伝統的な植物育種などによる開発のためのサフルフェナシル耐性形質供与系として用いて、そのような形質複数も可を含む他の品種および/またはハイブリッド作物を作製することができる。先祖のサフルフェナシル耐性形質複数も可を含む、そのような得られた品種またはハイブリッド作物は全て、本明細書では先祖サフルフェナシル耐性系複数も可の後代または子孫と呼ぶことができる。他の実施形態においては、本発明は、サフルフェナシル耐性植物を作製する方法を提供する。前記方法は、第1のサフルフェナシル耐性植物と第2の植物とを交配させて、サフルフェナシル耐性後代植物を作製することを含み、第1の植物および後代植物はその細胞の少なくともいくつかに、植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドであって、該ポリヌクレオチドによりコードされるCYP81AまたはCYP73Aポリペプチドを発現するのに第1の植物の細胞中で有効であり、該ポリペプチドの発現がサフルフェナシルへの耐性を付与する、前記組換えポリヌクレオチドを含む。他の実施形態においては、前記組換えポリヌクレオチドは、CYP72A15ポリペプチドをコードし、該ポリペプチドの発現はサフルフェナシルへの耐性を付与する。例えば、アブラナのA、B、およびCゲノムのサフルフェナシル形質複数も可の場合、これらを、対応するゲノムを有するアブラナ種、例えば、ブラシカナプス、ブラシカジュンセア、ブラシカオレラセア、ブラシカラパ、ブラシカニグラ、ブラシカカリナタ、ならびに上記のいずれかと、ダイコン種との交雑種の後代であるラファノブラシカ品種、例えば、ブラシカオレラセアxラファヌスサチバスに由来するラファノブラシカバルラベッジまたはブラシカラパxラファヌスサチバスに由来するラファノブラシカバルラパラディッシュに育種することができる。特に、ブラシカナプス、ブラシカラパ、およびブラシカジュンセアは特に興味深く、いくつかの実施形態においては、ブラシカナプスが好ましい。いくつかの実施形態においては、伝統的な植物育種を用いることによって、それから得られる後代植物にサフルフェナシル耐性形質を導入する。一実施形態においては、本発明は、サフルフェナシル耐性後代植物を作製する方法であって、親植物と、サフルフェナシル耐性植物とを交配させて、サフルフェナシル耐性植物のサフルフェナシル耐性特性を後代植物の生殖細胞質に導入することを含み、後代植物が親植物と比較して増加したサフルフェナシルへの耐性を有する、前記方法を提供する。他の実施形態においては、前記方法は、伝統的な植物育種技術によりサフルフェナシル耐性特性を遺伝子移入して、サフルフェナシル耐性特性を有する子孫植物を取得する工程をさらに含む。他の実施形態においては、本発明のサフルフェナシル耐性特性/形質を、目的の植物特性複数も可/形質複数も可の任意の組合せと共に積み重ねて、所望の複数の特性/形質の組合せを有する植物を提供することができる。他の態様において、本発明の植物として、サフルフェナシル耐性であることに加えて、育種、突然変異誘発または遺伝子操作によってさらに遺伝子改変にかけられた植物、例えば、AHAS阻害剤;オーキシン除草剤;ヒドロキシフェニルピルビン酸ジオキシゲナーゼ阻害剤もしくはフィトエンデサチュラーゼ阻害剤などの漂白除草剤;グリホサートなどのEPSPS阻害剤;グルホシナートなどのグルタミンシンテターゼ阻害剤;サフルフェナシル以外のプロトポルフィリノーゲンIXオキシダーゼ阻害剤例えば、アシフルオルフェン、ブタフェナシル、カルフェントラゾン、フルフェンピルエチル、ホメサフェン、フルミクロラック、フルミオキサジン、ラクトフェン、オキサジアルギル、オキサジアゾン、オキシフルオルフェン、スルフェントラゾン;アセチルCoAカルボキシラーゼ阻害剤などの脂質生合成阻害剤;または育種もしくは遺伝子操作の従来方法の結果としてのオキシニルすなわち、ブロモキシニルもしくはイオキシニル除草剤などの特定の他のクラスの除草剤の適用に対して耐性にされた植物が挙げられる。かくして、本発明のサフルフェナシル耐性植物を、グリホサートとグルホシナートの両方またはグリホサートと、HPPD阻害剤、AHAS阻害剤、もしくはACCase阻害剤などの別のクラスに由来する除草剤の両方に対する抵抗性などの、複数の遺伝子改変を介して複数のクラスの除草剤に対して抵抗性にすることができる。これらの除草剤抵抗性技術は、例えば、PestManagementScience612005246612005258612005277612005269612005286642008326642008332WeedScience572009108AustralianJournalofAgriculturalResearch582007708Science31620071185およびそこに引用された参考文献に記載されている。例えば、本発明のサフルフェナシル耐性植物は、いくつかの実施形態においては、ジム例えば、シクロキシジム、セトキシジム、クレトジム、またはテプラロキシジム、ホップ例えば、クロジナホップ、ジクロホップ、フルアジホップ、ハロキシホップ、またはキザロホップ、およびデンピノキサデンなどなどのACCase阻害剤;ジカンバなどのオーキシン除草剤;グリホサートなどのEPSPS阻害剤;他のPPO阻害剤;ならびにグルホシナートなどのGS阻害剤に対して耐性であってよい。これらのクラスの阻害剤に加えて、本発明のサフルフェナシル耐性植物はまた、他の作用様式を有する除草剤、例えば、クロロフィル/カロテノイド色素阻害剤、細胞膜破壊剤、光合成阻害剤、細胞分裂阻害剤、根阻害剤、シュート阻害剤、およびその組合せに対しても耐性であってもよい。そのような耐性形質を、例えば、突然変異AHASLタンパク質、突然変異ACCaseタンパク質、突然変異EPSPSタンパク質、もしくは突然変異グルタミンシンテターゼタンパク質として;または突然変異体の天然、近交系、もしくはトランスジェニックのアリールオキシアルカノエートジオキシゲナーゼAADもしくはDHT、ハロアリールニトリラーゼBXN、22ジクロロプロピオン酸デハロゲナーゼDEH、グリホサートNアセチルトランスフェラーゼGAT、グリホサートデカルボキシラーゼGDC、グリホサートオキシドリダクターゼGOX、グルタチオンSトランスフェラーゼGST、ホスフィノトリシンアセチルトランスフェラーゼPATもしくはバー、または除草剤分解活性を有するシトクロムP450CYP450タンパク質として発現させることができる。また、本明細書に記載のサフルフェナシル耐性植物に、限定されるものではないが、BtCryおよび鞘翅目昆虫、鱗翅目昆虫、線虫、もしくは他の害虫に対する殺虫活性を有する他のタンパク質などの殺虫形質;改変油含量もしくは油プロフィール形質、高いタンパク質もしくは高いアミノ酸濃度形質などの栄養もしくは栄養補助形質、ならびに当業界で公知の他の形質型などの他の形質を積み重ねることもできる。さらに、他の実施形態においては、組換えDNA技術の使用により、および/または育種により、1種以上の殺虫タンパク質、特に、バチルス属細菌、特に、バチルスチューリンゲンシスBacillusthuringiensisに由来する公知のもの、例えば、δエンドトキシン、例えば、CryIA、CryIA、CryIF、CryIF、CryIIA、CryIIIA、CryIIIBもしくはCry9c;植物性殺虫タンパク質、例えば、VIP1、VIP2、VIP3もしくはVIP3A;細菌定着性線虫、例えば、フォトラブダス種もしくはゼノラブダス種の殺虫タンパク質;サソリ毒、クモ毒、ハチ毒、もしくは他の昆虫特異的神経毒などの動物により産生される毒素;ストレプトミセス毒素などの菌類により産生される毒素、エンドウ豆レクチンもしくはオオムギレクチンなどの植物レクチン;アグルチニン;トリプシン阻害剤、セリンプロテアーゼ阻害剤、パラチン、シスタチンもしくはパパイン阻害剤などのプロテイナーゼ阻害剤;リシン、トウモロコシRIP、アブリン、ルフィン、サポリンもしくはブリオジンなどのリボソーム不活化タンパク質;3ヒドロキシステロイドオキシダーゼ、エクジステロイドIDPグリコシルトランスフェラーゼ、コレステロールオキシダーゼ、エクジソン阻害剤もしくはHMGCoAリダクターゼなどのステロイド代謝酵素;ナトリウムもしくはカルシウムチャンネルの遮断剤などのイオンチャンネル遮断剤;幼若ホルモンエステラーゼ;利尿ホルモン受容体ヘリコキニン受容体;スチルベンシンターゼ、ビベンジルシンターゼ、キチナーゼもしくはグルカナーゼを合成することができるようにされた、および/またはさもなければそのような特性について選択された、サフルフェナシル耐性植物も包含される。本発明の文脈において、これらの殺虫タンパク質または毒素は、プレ毒素、ハイブリッドタンパク質、トランケート型またはさもなければ改変型タンパク質としても明確に理解されるべきである。ハイブリッドタンパク質は、タンパク質ドメインの新しい組合せを特徴とする例えば、WO02015701を参照されたい。そのような毒素またはそのような毒素を合成することができる遺伝的に改変された植物のさらなる例は、例えば、EPA374753、WO93007278、WO9534656、EPA427529、EPA451878、WO0318810およびWO0352073に開示されている。そのような遺伝的に改変された植物を作製する方法は、当業者には一般的に公知であり、例えば、上記の刊行物に記載されている。遺伝的に改変された植物に含まれるこれらの殺虫タンパク質は、これらのタンパク質を産生する植物に、節足動物の全ての分類群に由来する害虫、特に、甲虫鞘翅目、双翅目昆虫双翅目、および蛾鱗翅目ならびに線虫線形動物門に対する耐性を付与する。いくつかの実施形態においては、サフルフェナシル耐性植物中での1種以上のタンパク質毒素例えば、殺虫タンパク質の発現は、生物、例えば、以下の網および目のメンバー:鞘翅目、例えば、アメリカマメゾウムシアカントセリデスオブテクタスAcanthoscelidesobtectus;ハムシアゲラスティカアルニAgelasticaalniコメツキムシアグリオテスリネアタスグレインビートルアハスベルスアドベナAhasverusadvenaサマーシェーファーアンフィマロンソルスティティアリスAmphimallonsolstitialis家具食い虫アノビウムパンクタタムAnobiumpunctatumアントノマス種AnthonomussppゾウムシピグミーマンゴールドビートルアトマリアリネアリスAtomarialinearisカーペットビートルアントレナス種ヨツモンマメゾウムシカロソブラクスマクラテスCallosobruchusmaculatesクリヤケシキスイカルポフィルスヘミプテルスCarpophilushemipterusキャベツサヤゾウムシセウトリンクスアシミリスCeutorhynchusassimilisナタネ冬茎ゾウムシセウトリンクスピシタルシスCeutorhynchuspicitarsisハリガネムシコノデルスベスペルチヌスConoderusvespertinusおよびコノデルスファリConoderusfalliバショウオサゾウムシコスモポリテスソルディダスCosmopolitessordidusニュージーランド草地虫コステリトラジーランディカCostelytrazealandicaコフキコガネコチニスニチダCotinisnitidaヒマワリ茎ゾウムシシリンドロコプツラスアドスペルサスCylindrocopturusadspersusオビカツオブシムシデルメステスラルダリウスDermesteslardariusネクイハムシディアブロティカビルギフェラDiabroticavirgifera、ディアブロティカビルギフェラビルギフェラDiabroticavirgiferavirgifera、およびディアブロティカバルベリDiabroticabarberiインゲンテントウエピラクナバリベスティスEpilachnavarivestisイエカミキリヒロトロペスバジュラスHylotropesbajulusアルファルファタコゾウムシハイペラポスティカHyperaposticaセマルヒョウホンムシギビウムサイロイデスGibbiumpsylloidesタバコシバンムシラシオデルマセリコルネLasiodermaserricorneコロラドハムシレプチノタルサデセムリネアタLeptinotarsadecemlineataヒラタキクイムシ花粉ビートルメリゲテスアエネウスMeligethesaeneusヨーロッパコフキコガネメロロンタメロロンタMelolonthamelolonthaアメリカヒョウホンムシメジウムアメリカナムMeziumamericanumキンイロヒョウホンムシニプタスホロレウクスNiptushololeucusグレインビートルオリザエフィルススリナメンシスOryzaephilussurinamensisおよびオリザエフィルスメルカトールOryzaephilusMercatorキンケクチブトゾウムシオチオリンクススルカタスOtiorhynchussulcatusマスタードビートルファエドンコクレアリアPhaedoncochleariae、アブラナノミハムシフィロトレタクルシフェラPhyllotretacruciferaeキスジノミハムシフィロトレタストリオラタPhyllotretastriolataキャベツ茎ノミハムシサイリオデスクリソセファラPsylliodeschrysocephalaプチナス種PtinussppコナナガシンクイムシリゾペルタドミニカRhizoperthadominicaアカアシチビコフキゾウムシシトナリネアタスSitonalineatusココクゾウシトフィルスオリザエSitophilusoryzaeおよびシトフィルスグラナリエスSitophilusgranaries赤ヒマワリ種子ゾウムシスミクロニクスフルバスSmicronyxfulvusジンサンシバンムシステゴビウムパニセウムStegobiumpaniceumチャイロコメノゴミムシダマシテネブリオモリトルTenebriomolitorフラワービートルトリボリウムカスタネウムTriboliumcastaneumおよびトリボリウムコンフサムTriboliumconfusumキマダラカツオブシムシおよびキャビネットビートルサンフラワービートルザイゴグラマエクスクラマチオニスZygogrammaexclamationis革翅目ハサミムシ類、例えば、ヨーロッパクギヌキハサミムシフォルフィクラアウリクラリアForficulaauriculariaおよびオオハサミムシラビデュラリパリアLabidurariparia網翅目、例えば、コバネゴキブリブラッタオリエンタリスBlattaorientalisヤケヤスデオキシダスグラシリスOxidusgracilisテンサイモグリハナバエペゴミアベタエPegomyiabetaeキモグリバエオシネラフリットOscinellafritミバエダクス種等翅目シロアリ類、例えば、シュウカクシロアリ科Hodotermitidae、レイビシロアリ科Kalotermitidae、ムカシシロアリ科Mastotermitidae、ミゾガシラシロアリ科Rhinotermitidae、セリテルメス科Serritermitidae、シロアリ科Termitidae、オオシロアリ科Termopsidaeの種ミドリメクラガメライグスリネオラリスLyguslineolarisマメクロアブラムシアフィスファバエAphisfabaeワタアブラムシアフィスゴシピAphisgossypiiリンゴアブラムシアフィスポミAphispomiミカントゲコナジラミアレウロカンタススピニフェルスAleurocanthusspiniferusタバココナジラミベメシアタバシBemesiatabaciダイコンアブラムシブレビコリネブラシカエBrevicorynebrassicaeヨーロッパナシキジラミカコプシラピリコラCacopsyllapyricolaカランツアブラムシクリプトミザスリビスCryptomyzusribisブドウネアブラムシダクツロスファイラビチフォリアDaktulosphairavitifoliaeミカンキジラミジアフォリナシトリDiaphorinacitriジャガイモヒメヨコバイエンポアスカファバエEmpoascafabaeマメヨコバイエンポアスカソラナEmpoascaSolanaブドウ葉ヨコバイエンポアスカビティスEmpoascavitisリンゴワタムシエリオソマラニゲルムEriosomalanigerumセイヨウカジツカイガラムシエウレカニウムコルニEulecaniumcorniモモコフキアブラムシヒアロプテルスアルンジニスHyalopterusarundinisヒメトビウンカラオデルファクスストリアテルスLaodelphaxstriatellusチューリップヒゲナガアブラムシマクロシファムユーフォビアMacrosiphumeuphorbiaeモモアカアブラムシミズスペルシカエMyzuspersicaeツマグロヨコバイネフォテチクスシンチセプスNephotettixcinticepsトビイロウンカニラパルバタルーゲンスNilaparvatalugensホップイボアブラムシフォロドンヒュムリPhorodonhumuliムギクビレアブラムシロパロシファムパジRhopalosiphumpadiムギヒゲナガアブラムシシトビオンアベナエSitobionavenae鱗翅目、例えば、アドキソフィエスオラナAdoxophyesoranaアルチプスポダナArchipspodanaブクラトリックスピリボレラBucculatrixpyrivorellaブクラトリックスサルベリエラBucculatrixthurberiellaブパルスピニアリウスBupaluspiniariusカルポカプサポモネラCarpocapsapomonellaチロスプレサリスChilosuppressalisコリストネウラフミフェラナChoristoneurafumiferanaコキリスホスペスCochylishospesディアトラエアグランジオセラDiatraeagrandiosellaユーポエシリアアンビグエラEupoeciliaambiguellaヘリコベルパアルミゲラHelicoverpaarmigeraヘリコベルパジーHelicoverpazeaヘリオシスビレセンスHeliothisvirescens、ホメオソマエレクテラムHomeosomaelectellumホモナマグナニマHomonamagnanimaリトコレティスブランカルデラLithocolletisblancardellaリマントリアディスパルLymantriadisparマラコソマネウストリアMalacosomaneustriaマメストラブラシカエMamestrabrassicaeマメストラコンフィグラタMamestraconfigurataオペロフテラブルマタOperophterabrumataオストリニアヌビラリスOstrinianubilalis、パノリスフラメアPanolisflammea、フィロクニスティスシトレラPhyllocnistiscitrellaピエリスブラシカエPierisbrassicaeラチプルシアニRachiplusianiスポドプテラエキシグアSpodopteraexiguaスポドプテラリトラリスSpodopteralittoralisシレプタデロガタSyleptaderogataトリコプルシアニTrichoplusiani直翅目、例えば、イエコオロギアチェタドメスティカスAchetadomesticus、樹木イナゴアナクリジウム種Anacridiumspp、ワタリバッタロカスタミグラトリアLocustamigratoria、ツーストライプグラスホッパーメラノプルスビビタタスMelanoplusbivittatus、ディファレンシャルグラスホッパーメラノプルスディフェレンチアリスMelanoplusdifferentialis、アカアシバッタメラノプルスフェムルブルムMelanoplusfemurrubrum、トビバッタメラノプルスサンギニペスMelanoplussanguinipes、キタモグラコオロギNeocurtillahexadectyla、アカトビバッタNomadacrisseptemfasciata、ショートウィングドモールクリケットスカプテリスクスアブレビアタスScapteriscusabbreviatus、ミナミモグラコオロギスカプテリスクスボレリScapteriscusborellii、トーニーモールクリケットスカプテリスクスビシヌスScapteriscusvicinus、およびエジプトツチイナゴシストセルカグレガリアSchistocercagregaria結合類、例えば、ガーデンシンフィランスクチゲレライマクラタScutigerellaimmaculata総翅目、例えば、タバコアザミウマフランクリニエラフスカFrankliniellafusca、ヒラズハナアザミウマフランクリニエライントンサFrankliniellaintonsa、ミカンキイロアザミウマフランクリニエラオクシデンタリスFrankliniellaoccidentalis、コットンバッドスリップスフランクリニエラシュルツェイFrankliniellaschultzei、バンデッドグリーンハウススリップスヘルシノスリプスフェモラリスHercinothripsfemoralis、ダイズアザミウマネオヒダトスリプスバリアビリスNeohydatothripsvariabilis、ケリーズシトラススリップスペゾスリプスケリアヌスPezothripskellyanus、アボカドアザミウマシルトスリプスペルセアScirtothripsperseae、ミナミキイロアザミウマスリプスパルミThripspalmi、およびネギアザミウマスリプスタバシThripstabaciなど、ならびに上記の生物のうちの1種以上を含む組合せを制御するのに有効である。いくつかの実施形態においては、サフルフェナシル耐性植物中での1種以上のタンパク質毒素例えば、殺虫タンパク質の発現は、ハムシ、すなわち、ハムシ科Chrysomelidaeのハムシ族のメンバー、好ましくは、フィロトレタ種Phyllotretaspp、例えば、フィロトレタクルシフェラPhyllotretacruciferaeおよび/またはフィロトレタトリオラータPhyllotretatriolataを制御するのに有効である。他の実施形態においては、サフルフェナシル耐性植物中での1種以上のタンパク質毒素例えば、殺虫タンパク質の発現は、キャベツサヤゾウムシ、バーサアーミーワーム、カメムシLygus、またはコナガを制御するのに有効である。さらに、一実施形態においては、例えば、組換えDNA技術の使用により、および/もしくは育種により、細菌、ウイルスまたは菌類病原体に対するサフルフェナシル耐性植物の抵抗性または耐性を増加させる1種以上のタンパク質を合成することができるようにされた、ならびに/またはさもなければそのような形質について選択された、サフルフェナシル耐性植物も包含される。そのような遺伝的に改変された植物を作製する方法は、当業者には一般的に知られている。さらに、別の実施形態においては、例えば、組換えDNA技術の使用により、および/もしくは育種により、サフルフェナシル耐性植物の生産性例えば、油含量、乾燥、塩分もしくは他の成長を制限する環境因子に対する耐性または害虫および菌類、細菌もしくはウイルス病原体に対する耐性を増加させる1種以上のタンパク質を合成することができるようにされた、ならびに/またはさもなければそのような形質について選択された、サフルフェナシル耐性植物も包含される。さらに、他の実施形態においては、例えば、組換えDNA技術の使用により、および/もしくは育種により、例えば、ヒトもしくは動物の栄養を改善する1種以上の物質または新規物質の改変された量を含むように変化させた、ならびに/またはさもなければそのような形質について選択されたサフルフェナシル耐性植物、例えば、健康を増進する長鎖ω3脂肪酸または不飽和ω9脂肪酸を産生する油作物例えば、Nexera登録商標アブラナ、DowAgroSciencesCanadaも包含される。さらに、いくつかの実施形態においては、例えば、組換えDNA技術の使用により、および/もしくは育種により、ビタミンおよび/もしくはミネラルの増加した量、および/または栄養補助化合物の改善されたプロフィールを含むように変化させた、ならびに/またはさもなければそのような形質について選択された、サフルフェナシル耐性植物も包含される。一実施形態においては、本発明のサフルフェナシル耐性植物は、野生型植物と比較して、グルコシノレート例えば、グルコラファニン、スルホラファン、3インドリルメチルグルコシノレートグルコブラシシン、1メトキシ3インドリルメチルグルコシノレートネオグルコブラシシン;フェノール類例えば、フラボノイド例えば、ケルセチン、ケンペロール、ヒドロキシシンナモイル誘導体例えば、122トリシナポイルゲンチオビオース、12ジフェルロイルゲンチオビオース、12ジシナポイル2フェルロイルゲンチオビオース、3Oカフェオイルキニックネオクロロゲン酸;ならびにビタミンおよびミネラル例えば、ビタミンC、ビタミンE、カロテン、葉酸、ナイアシン、リボフラビン、チアミン、カルシウム、鉄、マグネシウム、カリウム、セレン、および亜鉛からなる群より選択される化合物の増加した量、または改善されたプロフィールを含む。別の実施形態においては、本発明のサフルフェナシル耐性植物は、野生型植物と比較して、プロゴイトリン;イソチオシアネート;インドールグルコシノレート加水分解の産物;グルタチオン;βカロテン、リコペンなどのカロテノイド、ならびにルテインおよびゼアキサンチンなどのキサントフィルカロテノイド;フラボノール例えば、ケルセチン、ルチン、フラバン/タンニンクマリン、プロアントシアニジン、カテキン、およびアントシアニンを含むプロシアニジンなどなどのフラボノイドを含むフェノール類;フラボン;フィトエストロゲン、例えば、クメスタン、リグナン、レスベラトロール、イソフラボン、例えば、ゲニステイン、ダイドゼイン、およびグリシテイン;レソルシル酸ラクトン;有機硫黄化合物;フィトステロール;カルノソール、ロスマリン酸、グリチルリチンおよびサポニンなどのテルペノイド;クロロフィル;クロルフィリン、糖類、アントシアニン、ならびにバニラからなる群より選択される化合物の増加した量、または改善されたプロフィールを含む。他の実施形態においては、本発明のサフルフェナシル耐性植物は、野生型植物と比較して、ビンクリスチン、ビンブラスチン、タキサン例えば、タキソールパクリタキセル、バッカチンIII、10デスアセチルバッカチンIII、10デスアセチルタキソール、キシロシルタキソール、7エピタキソール、7エピバッカチンIII、10デスアセチルセファロマンニン、7エピセファロマンニン、タキソテール、セファロマンニン、キシロシルセファロマンニン、タキサジフィン、8ベンキソイルオキシタキサジフィン、9アセチルオキシタクスシン、9ヒドロキシタクスシン、タイワンキサム、タキサンIa、タキサンIb、タキサンIc、タキサンId、GMPパクリタキセル、9ジヒドロ13アセチルバッカチンIII、10デスアセチル7エピタキソール、テトラヒドロカンナビノール、カンナビジオール、ゲニステイン、ダイドゼイン、コデイン、モルヒネ、キニーネ、シコニン、アジマリシン、セルペンチンなどからなる群より選択される化合物の増加した量、または改善されたプロフィールを含む。一実施形態においては、本発明のサフルフェナシル耐性植物はまた、アセトヒドロキシ酸シンターゼを阻害する除草剤に対して耐性であってもよい。本明細書で用いられる除草剤耐性AHASLとは、植物細胞中のAHASL遺伝子の1つのAHASL対立遺伝子突然変異体から、および/または同じAHASL遺伝子突然変異体の、すなわち、植物細胞の同じゲノム中の2個の相同な対立遺伝子の一方もしくは両方から発現され、それによって、AHASL突然変異体が植物細胞のAHAS酵素に対する除草剤耐性を提供することができる、AHASラージサブユニットポリペプチドを指す。AHASL遺伝子突然変異体は、組換えであっても、または突然変異誘発プロセス、育種プロセス、もしくは当業界で公知の他のプロセスの適用により取得することができる。そのような遺伝子は、半接合性、ヘテロ接合性、またはホモ接合性であってよい。本明細書で用いられるAHASおよびAHASLはそれぞれ、機能的な、プラスチドAHAS酵素およびそのAHASLポリペプチド、すなわち、本明細書に記載の植物の細胞中で機能的であるものを指す。同様に、遺伝子およびポリヌクレオチドなどの用語は、そのようなAHASおよびAHASLをコードするものを参照して用いる場合、その機能的遺伝子、すなわち、そのような細胞中で発現可能である遺伝子を指す。本明細書で用いられる場合、アミノ酸に関する標準的な1文字の省略形を用いることができる、例えば、Aはアラニンを示し、Pはプロリンを示し、Wはトリプトファンを示し、Xは任意のアミノ酸を示す、などである。野生型配列と比較した突然変異を、野生型アミノ酸と位置、次いで、突然変異体中に存在するアミノ酸を特定することにより示すことができる。例えば、P197Xは、位置197のプロリンを任意のアミノ酸で置換することができることを示すように用いることができる。理解を容易にするために、AHASL中のアミノ酸位置に言及する場合、本明細書で用いられるアミノ酸番号付け系は、シロイヌナズナAHASL配列について用いられる業界標準番号付けであってよく、と共に示すことができる。例えば、P197は、シロイヌナズナAHASLの位置197のプロリンに対応する植物AHASL中の位置のプロリン残基を指してもよい。本明細書で用いられる場合、AHAS除草剤耐性誘導突然変異は、1種以上の除草剤すなわち、スルホニルウレア除草剤、イミダゾリノン除草剤などに対する耐性を付与するAHASL酵素のアミノ酸配列中の変化である。以下の表11は、AHASL突然変異の可能な部位、許容し得る置換、好ましい置換、およびより好ましい置換の非限定的一覧を提供する。Xは任意のアミノ酸を示す。表11:AHASL突然変異いくつかの実施形態においては、AHASL突然変異を、A122X、P197X、R199X、A205X、S653X、およびG654X、ならびにその組合せからなる群より選択することができる。他の実施形態においては、AHASL突然変異を、A122T、A122V、A122D、A122P、A122Y、P197S、P197L、P197T、R199A、R199E、A205V、A205C、A205D、A205E、A205R、A205T、A205W、A205Y、A205N、S653N、S653I、S653F、S653T、G654Q、G654C、W574L、W574M、W574C、W574S、W574R、W574G、W574A、W574F、W574Q、W574Y、G654E、G654Dおよびその組合せからなる群より選択することができる。いくつかの実施形態においては、AHASL突然変異を、A122T、A122V、R199A、R199E、A205V、S653N、G654E、およびその組合せからなる群より選択することができる。様々な実施形態において、サフルフェナシル耐性植物は、プラスチドAHASLポリペプチド中にW574XおよびS563Xの両方を含むAHASLをさらに含んでもよい。これらのAHASL突然変異は、異なるゲノム上などの異なる対立遺伝子中に存在してもよく、それぞれ、それぞれのAHASL遺伝子中に1個の突然変異を含むか、またはこれらの2個が1個のAHASL中に、二重突然変異体対立遺伝子として存在してもよい。様々な実施形態において、これらのものはW574LおよびS653Nであってよい:前者をPM2突然変異、後者をPM1突然変異と呼ぶことができる。いくつかの実施形態においては、本明細書に記載のサフルフェナシル耐性植物は、近交系品種、例えば、開放授粉品種、またはハイブリッド、例えば、F1ハイブリッドであってよい。様々な実施形態においては、AHAS形質または複数の形質を、組換えDNA技術以外の、突然変異誘発、遺伝子形成術、および/または自然発生突然変異植物の単離を含むプロセスにより取得することができる。多くの突然変異誘発技術が当業界で公知であり、これらのものは種子、植物部分、もしくは培養植物細胞への変異原性化学剤もしくは放射線の適用を含んでもよい;あるいは、またはさらに、植物細胞の培養、もしくは植物細胞を培養する条件は、自然発生突然変異の出現率もしくは蓄積率を増加させることができる。遺伝子形成技術は、不一致修復系に媒介されるヌクレオチド置換を容易にするオリゴヌクレオチドの植物細胞核への導入を含む方法などの、部位特異的突然変異誘発型戦略を含んでもよい。他の態様においては、本発明は、通常は野生型植物の成長を阻害するであろうレベルの少なくとも1種のACCase阻害剤除草剤に対する耐性をさらに含むサフルフェナシル耐性植物を提供する。いくつかの実施形態においては、本発明のサフルフェナシル耐性植物は、アミノ酸配列が野生型植物のACCaseのアミノ酸配列と異なるACCaseを発現する。理解を容易にするために、ACCase中のアミノ酸位置に言及する場合、本明細書で用いられるアミノ酸番号付け系は、ノスズメノテッポウブラックグラスとも呼ばれるに由来するACCaseに用いられる業界標準番号付け系であってよい。ノスズメノテッポウのACCaseをコードするmRNA配列はGenBankアクセッション番号AJ310767で入手可能であり、そのタンパク質配列はGenBankアクセッション番号CAC84161で入手可能であり、両方とも参照により本明細書に具体的に組入れられるものとする。言及されるアミノ酸の番号の後のは、アミノ酸が対応するノスズメノテッポウの配列中のアミノ酸を示す。表12は、ノスズメノテッポウのACCaseアミノ酸配列GenBankアクセッション番号CAC84161を示す。本発明のACCase酵素において変化させることができるアミノ酸を、太字の二重下線で示す。表12:ノスズメノテッポウのACCaseアミノ酸配列GenBankアクセッション番号CAC84161本発明のサフルフェナシル耐性植物のACCaseが対応する野生型のACCaseと異なるアミノ酸位置の例としては、限定されるものではないが、以下の位置:1781、1785、1786、1811、1824、1864、1999、2027、2039、2041、2049、2059、2074、2075、2078、2079、2080、2081、2088、2095、2096、または2098のうちの1個以上が挙げられる。他の態様においては、本発明の植物を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態においては、前記方法は、前記植物を農学上許容し得る組成物と接触させることを含む。一実施形態においては、農学上許容し得る組成物は、オーキシン除草剤AIを含む。別の態様においては、本発明は、子孫種子を調製する方法を提供する。前記方法は、本発明の植物の種子または本発明の植物を産生することができる種子を植えることを含む。一実施形態においては、前記方法は、前記種子から子孫植物を成長させること;および該子孫植物から子孫種子を収穫することをさらに含む。他の実施形態においては、前記方法は、子孫植物に対してサフルフェナシル除草剤組成物を適用することをさらに含む。さらに他の態様においては、本発明は、植物産物を製造する方法を提供する。いくつかの実施形態においては、前記方法は、本発明の植物またはその植物部分を加工することを含む。いくつかの実施形態においては、植物産物は飼料、種子粉末、油、または種子処理コーティングされた種子である。他の実施形態においては、植物部分は種子である。除草剤いくつかの実施形態においては、本発明の除草剤組成物は、サフルフェナシルならびにその農学上許容し得る塩およびエステルを含む。本明細書で用いられるサフルフェナシルは、別途明確に記述しない限り、化合物サフルフェナシルならびにその塩およびエステルを含む。一実施形態においては、サフルフェナシルAIは、例えば、IUPAC:2クロロ536ジヒドロ3メチル26ジオキソ41ピリミジニル4フルオロNメチルアミノスルホニルベンザミドピリミジン1イルベンゾイルNイソプロピルNメチルスルファミド;登録番号372137354;BASH800である。本明細書に記載の様々な実施形態において有用な発芽後の雑草制御方法は、約03倍以上のサフルフェナシル適用率を用いる;いくつかの実施形態においては、これは例えば、約03倍以上、04倍以上、05倍以上、06倍以上、07倍以上、08倍以上、09倍以上、または1倍以上のサフルフェナシルであってよい。一実施形態においては、本発明のサフルフェナシル耐性植物は、約25~約200gaihの量のサフルフェナシルの発芽後適用に対する耐性を有する。いくつかの実施形態においては、サフルフェナシル耐性植物が双子葉植物例えば、大豆、綿である場合、サフルフェナシルの発芽後適用は、約50gihの量である。別の実施形態においては、サフルフェナシル耐性植物が単子葉植物例えば、トウモロコシ、イネ、ソルガムである場合、サフルフェナシルの発芽後適用は、約200gihの量である。他の実施形態においては、サフルフェナシル耐性植物がアブラナ例えば、キャノーラである場合、サフルフェナシルの発芽後適用は、約25gihの量である。本明細書に記載の発芽後の雑草制御方法においては、いくつかの実施形態においては、前記方法は発芽後約7~10日でサフルフェナシル適用率を用いることができる。別の実施形態においては、適用率は、1倍のサフルフェナシルを超えてもよい;いくつかの実施形態においては、適用率は、最大で4倍のサフルフェナシルであってよいが、より典型的には、それは約25倍以下、または約2倍以下、または約1倍以下であろう。他の実施形態においては、1種以上のサフルフェナシルAIに加えて、本発明の除草剤組成物は、必要に応じて、サフルフェナシル以外の1種以上の農学上許容し得るAIをさらに含んでもよい。本明細書で用いられる場合、農学上許容し得るAIは、AIならびにその農学上許容し得る塩およびエステルを含む。さらなるクラスの除草剤としては、限定されるものではないが、AHAS阻害剤;ヒドロキシフェニルピルビン酸ジオキシゲナーゼ阻害剤もしくはフィトエンデサチュラーゼ阻害剤などの漂白除草剤;グリホサートなどのエノールピルビルシキミ酸3リン酸シンターゼ阻害剤;グルホシナートなどのグルタミンシンテターゼ阻害剤;オーキシン除草剤;ACCase阻害剤などの脂質生合成阻害剤;またはオキシニルすなわち、ブロモキシニルもしくはイオキシニル除草剤が挙げられる。AHAS阻害剤除草剤としては、例えば、イミダゾリノン除草剤、アミドスルフロン、フルピルスルフロン、ホラムスルフロン、イマゾスルフロン、ヨードスルフロン、メソスルフロン、ニコスルフロン、チフェンスルフロン、およびトリベヌロンからなる群より選択される1種以上のSU除草剤、ならびにその農学上許容し得る塩およびエステルが挙げられる。ACCase阻害剤除草剤としては、例えば、ジム例えば、シクロキシジム、セトキシジム、クレトジム、もしくはテプラロキシジム、ホップ例えば、クロジナホップ、ジクロホップ、フルアジホップ、ハロキシホップ、もしくはキザロホップ、およびデンピノキサデンなどが挙げられる。1種以上のサフルフェナシルに加えて、本発明の除草剤組成物は、必要に応じて、他のクラスの1種以上の農学上許容し得るAI、例えば、農業用防かび剤、殺菌剤、殺藻剤、殺線虫剤、殺虫剤など例えば、ピレトリン/ピレトラム、カルバリル、スピノサド、ペルメトリン、ビフェントリン、およびエスフェンバレレートをさらに含んでもよい。1種以上のサフルフェナシル、および必要に応じて、他の農学上のAIを含む本明細書に記載の除草剤組成物を、任意の農学上許容し得る形式で用いることができる。例えば、これらのものを即時噴霧可能な水性溶液、粉末、懸濁液として、濃縮もしくは高度濃縮された水性、油性もしくは他の溶液、懸濁液もしくは分散物として、乳濁液、油分散物、ペースト、ダスト、顆粒、もしくは他の散布可能な形式として製剤化することができる。前記除草剤組成物を、例えば、噴霧、霧化、ダスティング、拡散、散水、種子処理、または種子と混合した同時塗布などの当業界で公知の任意の方法により適用することができる。使用形態は、意図される目的に依存する;いずれの場合でも、それらは本発明によるAIの可能な最良の分布を確保すべきである。いくつかの実施形態においては、本明細書に記載の除草剤組成物は、例えば、サフルフェナシル;AHAS阻害剤、例えば、イミダゾリノンおよび/またはスルホニルウレア;ACCase阻害剤;EPSPS阻害剤、例えば、グリホサート;グルタミンシンテターゼ阻害剤、例えば、グルホシナート;オーキシン除草剤、例えば、ジカンバ;防かび剤、例えば、ピラクロストロビンなどのストロビルリン防かび剤などの組合せを含んでもよい。いくつかの実施形態においては、本明細書に記載の除草剤組成物は、例えば、サフルフェナシル;およびピラクロストロビンなどのストロビルリン防かび剤の組合せを含んでもよい。除草剤組成物を、本明細書に記載の植物の耐性に従って選択することができ、該植物を、積み重ねられた耐性形質を有するものから選択することができる。いくつかの実施形態においては、任意のAIがAHAS阻害剤を含む場合、これを、イミダゾリノン、例えば、イマザモックス、イマゼタピル、イマザピル、イマザピック、イマザキン、およびイマザメタベンズ、好ましくは、イマザモックス、イマゼタピル、イマザピル、およびイマザピック、好ましくは、イマザモックス;SU、例えば、アミドスルフロン、フルピルスルフロン、ホラムスルフロン、イマゾスルフロン、ヨードスルフロン、メソスルフロン、ニコスルフロン、チフェンスルフロン、およびトリベヌロン;ピリミジニルオキシチオ安息香酸、例えば、ピリミジニルオキシ安息香酸例えば、ビスピリバック、ピリミノバック、およびピリベンゾキシムおよびピリミジニルチオ安息香酸例えば、ピリチオバックおよびピリフタリド;ならびにスルホンアミド、すなわち、スルホニルアミノカルボニルトリアゾリノン例えば、フルカルバゾンおよびプロポキシカルバゾンおよびトリアゾピリミジン例えば、クロランスラム、ジクロスラム、フロラスラム、フルメツラム、メトスラム、およびペノキススラムから選択することができる。上記のものの農学上許容し得る塩およびエステル、ならびにその組合せも包含される。他の実施形態においては、任意のAIが、本明細書に記載の植物が通常は感受性が高い異なるクラスに由来する除草剤を含む場合、用いられる植物を、そのような除草剤に対する耐性の形質をさらに含むものから選択する。そのようなさらなる耐性形質を、例えば、ハイブリダイゼーションもしくは遺伝子移入による耐性形質遺伝子を取得するための伝統的な育種、突然変異誘発、および/または形質転換の技術などの当業界で公知の任意の方法により、前記植物に対して提供することができる。そのような植物を、積み重ねられた形質を有するものとして記載することができる。他の除草剤クラスの任意のAIとしては、ACCase阻害剤、オーキシン除草剤、EPSPS阻害剤、グルタミンシンテターゼ阻害剤、pヒドロキシフェニルピルビン酸ジオキシゲナーゼ阻害剤が挙げられる。他の型の任意のAIとしては、限定されるものではないが、ストロビルリンなどの防かび剤、例えば、ピラクロストロビンのみ、またはボスカリド、エピコナゾール、メタコナゾール、テブコナゾール、クレソキシムメチルなどと組合せたピラクロストロビン;殺線虫剤、殺鱗翅目剤、殺鞘翅目剤などの殺虫剤;殺カタツムリ剤;および当業界で公知の他のものが挙げられる。例えば、ACCase阻害剤である除草剤の好適な例としては、限定されるものではないが、シクロヘキサンジオン除草剤など、毒性緩和剤、殺菌剤、凍結防止剤、消泡剤、着色剤、ならびに接着剤が挙げられる。本明細書で有用な除草剤組成物の製剤を、当業界で有用な公知の任意の方法に従って調製することができる。増粘剤すなわち、改変された流動特性、すなわち、休止状態では高粘度および運動中では低粘度を製剤に与える化合物の例は、多糖類、例えば、キサンタンゴム、Rhodopol23またはVeegumであり、また、Attaclayなどの有機および無機層構造鉱物である。消泡剤の例は、シリコン乳濁液例えば、SilikonSRE、WackerまたはRhodia社製のRhodorsil、長鎖アルコール、脂肪酸、脂肪酸の塩、有機フッ素化合物およびそれらの混合物である。水性除草剤製剤を安定化させるために、殺菌剤を添加することができる。殺菌剤の例は、ジクロロフェンおよびベンジルアルコールヘミホルマールICI社製のProxelまたはThorChemie社製のActicideおよびRohnHaas社製のKathonMK、ならびにまた、アルキルイソチアゾリノンおよびベンズイソチアゾリノンThorChemie社製のActicideなどのイソチアゾリン誘導体に基づく殺菌剤である。凍結防止剤の例は、エチレングリコール、プロピレングリコール、尿素またはグリセロールである。着色剤の例としては、水難溶性顔料および水溶性染料などの着色剤クラスのメンバーが挙げられる。これらのうちのいくつかの特定例としては、ローダミンB、CIピグメントレッド112およびCIソルベントレッド1、ならびにまた、ピグメントブルー154、ピグメントブルー153、ピグメントブルー152、ピグメントブルー151、ピグメントブルー80、ピグメントイエロー1、ピグメントイエロー13、ピグメントレッド112、ピグメントレッド482、ピグメントレッド481、ピグメントレッド571、ピグメントレッド531、ピグメントオレンジ43、ピグメントオレンジ34、ピグメントオレンジ5、ピグメントグリーン36、ピグメントグリーン7、ピグメントホワイト6、ピグメントブラウン25、ベーシックバイオレット10、ベーシックバイオレット49、アシッドレッド51、アシッドレッド52、アシッドレッド14、アシッドブルー9、アシッドイエロー23、ベーシックレッド10、ベーシックレッド108の名称の下で知られる染料が挙げられる。接着剤の例は、ポリビニルピロリドン、ポリビニル酢酸、ポリビニルアルコールおよびチロースである。好適な不活性補助剤は、例えば、以下のもの:ケロセンおよびディーゼル油などの中沸点から高沸点のミネラルオイル画分、さらにコールタール油および植物もしくは動物起源の油、脂肪族、環式および芳香族炭化水素、例えば、パラフィン、テトラヒドロナフタレン、アルキル化ナフタレンおよびその誘導体、アルキル化ベンゼンおよびその誘導体、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールおよびシクロヘキサノールなどのアルコール、シクロヘキサノンなどのケトンまたは強極性溶媒、例えば、Nメチルピロリドンなどのアミン、ならびに水である。好適な担体としては、液体および固体担体が挙げられる。液体担体としては、例えば、非水性溶媒、例えば、環式および芳香族炭化水素、例えば、パラフィン、テトラヒドロナフタレン、アルキル化ナフタレンおよびその誘導体、アルキル化ベンゼンおよびその誘導体、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールおよびシクロヘキサノールなどのアルコール、シクロヘキサノンなどのケトン、強極性溶媒、例えば、Nメチルピロリドンなどのアミンなどの非水性溶媒、および水、ならびにその混合物が挙げられる。固体担体としては、例えば、シリカ、シリカゲル、ケイ酸塩、タルク、カオリン、石灰石、石灰、チョーク、赤土、黄土、粘土、ドロマイト、珪藻土、硫酸カルシウム、硫酸マグネシウムおよび酸化マグネシウム、地盤合成材料などの鉱物土類、硫酸アンモニウム、リン酸アンモニウム、硝酸アンモニウムおよび尿素などの肥料、ならびに穀粉、樹皮粉、木粉、および堅果殻粉、セルロース粉末などの植物起源の産物、または他の固体担体が挙げられる。好適な界面活性剤アジュバント、湿潤剤、粘着付与剤、分散剤およびまた乳化剤は、芳香族スルホン酸、例えば、リグノスルホン酸例えば、Borrespersタイプ、Borregaard、フェノールスルホン酸、ナフタレンスルホン酸Morwetタイプ、AkzoNobel、およびジブチルナフタレンスルホン酸Nekalタイプ、BASFAGの、ならびに脂肪酸の、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、およびアンモニウム塩、アルキルスルホネートおよびアルキルアリールスルホネート、アルキルスルフェート、ラウリルエーテルスルフェート、および脂肪アルコールスルフェート、ならびに硫酸化ヘキサ、ヘプタ、およびオクタデカノールの塩、さらには脂肪アルコールグリコールエーテルの塩、スルホン化ナフタレンおよびその誘導体とホルムアルデヒドとの縮合物、ナフタレンまたはナフタレンスルホン酸とフェノールおよびホルムアルデヒドとの縮合物、ポリオキシエチレンオクチルフェノールエーテル、エトキシル化イソオクチル、オクチル、またはノニルフェノール、アルキルフェニルまたはトリブチルフェニルポリグリコールエーテル、アルキルアリールポリエーテルアルコール、イソトリデシルアルコール、脂肪アルコール/エチレンオキシド縮合物、エトキシル化ヒマシ油、ポリオキシエチレンアルキルエーテルまたはポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ラウリルアルコールポリグリコールエーテルアセテート、ソルビトールエステル、リグノサルファイト廃液およびタンパク質、変性タンパク質、ポリサッカリド例えば、メチルセルロース、疎水変性デンプン、ポリビニルアルコールMowiolタイプ、Clariant、ポリカルボキシレートBASFAG、Sokalanタイプ、ポリアルコキシレート、ポリビニルアミンBASFAG、Lupamineタイプ、ポリエチレンイミンBASFAG、Lupasolタイプ、ポリビニルピロリドンおよびそのコポリマーである。粉末、散布用材料、およびダストを、AIを固体担体と混合または同時粉砕することにより調製することができる。顆粒、例えば、被覆顆粒、含浸顆粒、および均質顆粒を、AIを固体担体に結合させることにより調製することができる。水性使用形態を、水を添加することにより、乳濁濃縮物、懸濁液、ペースト、湿潤性粉末または水分散性顆粒から調製することができる。乳濁液、ペーストまたは油分散物を調製するために、オーキシン除草剤と、必要に応じて、他の農学上のAIならびに/またはその農学上好適な塩およびエステルを含む除草剤組成物をそのまま、または油もしくは溶媒に溶解した前記除草組成物を、湿潤剤、粘着付与剤、分散剤または乳化剤を用いて水中で均質化することができる。あるいは、活性化合物、湿潤剤、粘着付与剤、分散剤または乳化剤と、必要に応じて、水を用いる希釈にとって好適である溶媒または油とを含む濃縮物を調製することもできる。オーキシン除草剤と、必要に応じて、他の農学上のAIならびに/またはその農学上好適な塩およびエステルを含む除草剤組成物中に存在する除草剤の濃度を、広い範囲内で変化させることができる。一般的には、前記製剤は、約0001~98重量、好ましくは、001~95重量の少なくとも1種の活性成分を含む。AIを、90~100。好ましくは、95~100の純度NMRスペクトルに従うで用いる。前記製剤中に、いくつかの実施形態においては、除草剤は懸濁、乳濁、または溶解された形態で存在する。本発明による製剤は、水性溶液、粉末、懸濁液、また、高濃縮の水性、油性または他の懸濁液もしくは分散物、水性乳濁液、水性マイクロエマルジョン、水性懸濁乳濁液、油分散物、ペースト、ダスト、拡散用材料または顆粒の形態にあってもよい。様々な実施形態においては、前記除草剤を、例えば、以下のように製剤化することができる。1水による希釈のための生成物A水溶性濃縮物10重量部の活性化合物を90重量部の水または水溶性溶媒に溶解する。代替として、湿潤剤または他のアジュバントを添加する。活性化合物は水による希釈の際に溶解する。これにより、10重量の活性化合物含量を有する製剤が得られる。B分散性濃縮物20重量部の活性化合物を、70重量部のシクロヘキサノンに、10重量部の分散剤、例えば、ポリビニルピロリドンを添加しながら溶解する。水で希釈すれば、分散物が得られる。活性化合物含量は20重量である。C乳化性濃縮物15重量部の活性化合物を、75重量部の有機溶媒例えば、アルキル芳香族に、ドデシルベンゼンスルホン酸カルシウムおよびヒマシ油エトキシレートそれぞれ、5重量部を添加しながら溶解する。水で希釈すれば、乳濁液が得られる。製剤は15重量の活性化合物含量を有する。D乳濁液25重量部の活性化合物を、35重量部の有機溶媒例えば、アルキル芳香族に、ドデシルベンゼンスルホン酸カルシウムおよびヒマシ油エトキシレートそれぞれ、5重量部を添加しながら溶解する。この混合物を、乳化剤Ultraturraxを用いて30重量部の水に導入し、均一な乳濁液を作製する。水で希釈すれば、乳濁液が得られる。製剤は25重量の活性化合物含量を有する。E懸濁液撹拌されたボールミル中で、20重量部の活性化合物を、10重量部の分散剤および湿潤剤ならびに70重量部の水または有機溶媒を添加しながら粉末状にすれば、微細な活性化合物の懸濁液が得られる。水で希釈すれば、活性化合物の安定な懸濁液が得られる。製剤中の活性化合物含量は20重量である。F水分散性顆粒および水溶性顆粒50重量部の活性化合物を、50重量部の分散剤および湿潤剤を添加しながら微細に粉砕し、技術電気製品例えば、押出装置、スプレータワー、流動床を用いて水分散性または水溶性顆粒を作製する。水で希釈すれば、活性化合物の安定な分散物または溶液が得られる。製剤は50重量の活性化合物含量を有する。G水分散性粉末および水溶性粉末75重量部の活性化合物を、25重量部の分散剤、湿潤剤およびシリカゲルを添加しながらローターステーターミル中で粉砕する。水で希釈すれば、活性化合物の安定な分散物または溶液が得られる。製剤の活性化合物含量は75重量である。Hゲル製剤ボールミル中で、20重量部の活性化合物、10重量部の分散剤、1重量部のゲル化剤および70重量部の水または有機溶媒を混合すれば、微細な懸濁液が得られる。水で希釈すれば、20重量の活性化合物含量を有する安定な懸濁液が得られる。2希釈せずに適用される生成物Iダスト5重量部の活性化合物を微細に粉砕し、95重量部の微細に分割されたカオリンとよく混合する。これにより、5重量の活性化合物含量を有するダスト粉末が得られる。J顆粒GR、FG、GG、MG05重量部の活性化合物を微細に粉砕し、995重量部の担体と結合させる。ここでの現在の方法は、押出し、噴霧乾燥または流動床である。これにより、05重量の活性化合物含量を有する希釈せずに適用される顆粒が得られる。KULV溶液10重量部の活性化合物を、90重量部の有機溶媒、例えば、キシレンに溶解する。これにより、10重量の活性化合物含量を有する希釈せずに適用される生成物が得られる。水性使用形態を、水を添加することにより、乳濁液濃縮物、懸濁液、ペースト、湿潤性粉末または水分散性顆粒から調製することができる。除草剤または除草剤を含む除草剤組成物を、発芽前、発芽後もしくは植える前に、または種子と一緒に適用することができる。また、作物植物の除草剤組成物または活性化合物で予備処理された種子を適用することにより、除草剤組成物または活性化合物を適用することもできる。さらなる実施形態においては、除草剤または除草剤組成物を、種子を処理することにより適用することができる。種子の処理は、本質的には当業者に知られたあらゆる手順を含む例えば、種子ドレッシング、種子コーティング、種子ダスティング、浸種、種子フィルムコーティング、種子多層コーティング、種子エンクラスティング、種子ドリッピングおよび種子ペレッティング。いくつかの実施形態においては、除草剤組成物を希釈して、または希釈せずに適用することができる。一実施形態においては、サフルフェナシルおよび、必要に応じて、他の農学上のAIを、多くの代表的な他の除草剤または成長調節活性成分群と混合した後、同時に適用することができる。混合物のための好適な成分は、例えば、124チアジアゾール、134チアジアゾール、アミド、アミノリン酸およびその誘導体、アミノトリアゾール、アニリド、アリールオキシアルカン酸およびその誘導体、安息香酸およびその誘導体、ベンゾチアジアジノン、2アロイル13シクロヘキサンジオン、2ヘタロイル13シクロヘキサンジオン、ヘタリルアリールケトン、ベンジルイソキサゾリジノン、メタCF3フェニル誘導体、カルバメート、キノリンカルボン酸およびその誘導体、クロロアセタニリド、シクロヘキセノンオキシムエーテル誘導体、ジアジン、ジクロロプロピオン酸およびその誘導体、ジヒドロベンゾフラン、ジヒドロフラン3オン、ジニトロアニリン、ジニトロフェノール、ジフェニルエーテル、ジピリジル、ハロカルボン酸およびその誘導体、尿素、3フェニルウラシル、イミダゾール、イミダゾリノン、Nフェニル3456テトラヒドロフタルイミド、オキサジアゾール、オキシラン、フェノール、アリールオキシおよびヘタリールオキシフェノキシプロピオン酸エステル、フェニル酢酸およびその誘導体、2フェニルプロピオン酸およびその誘導体、ピラゾール、フェニルピラゾール、ピリダジン、ピリジンカルボン酸およびその誘導体、ピリミジルエーテル、スルホンアミド、スルホニルウレア、トリアジン、トリアジノン、トリアゾリノン、トリアゾールカルボキサミド、ウラシル、フェニルピラゾリンならびにイソキサゾリンおよびその誘導体である。本段落の目的のために、オーキシン除草剤のメンバーは、以下のクラス:安息香酸およびその誘導体、キノリンカルボン酸およびその誘導体、2フェニルプロピオン酸およびその誘導体、ならびにピリジンカルボン酸およびその誘導体から排除される。さらに、除草剤を単独で、もしくは他の除草剤と組合わせて、または他に、他の作物保護剤との混合物の形態で、例えば、害虫もしくは植物病原性菌類もしくは細菌を制御するための薬剤と一緒に適用することが有益であってよい。また、栄養不足および微量元素不足を治療するのに用いられるミネラル塩溶液との混和性も興味深い。また、非植物毒性的な油および油濃縮物などの他の添加物を添加してもよい。さらに、毒性緩和剤と組合せた除草剤を適用することが有用であり得る。毒性緩和剤は、除草剤の除草作用に大きく影響することなく、有用植物に対する除草剤により誘導される損傷を防止するか、または減少させる化学物質である。それらを、有用植物の播種前例えば、種子処理、シュートもしくは苗の際に、または発芽前適用もしくは発芽後適用において適用することができる。毒性緩和剤と除草剤とを、同時に、または連続的に適用することができる。好適な毒性緩和剤は、例えば、酢酸、1フェニル5ハロアルキル1H124トリアゾール3カルボン酸、1フェニル45ジヒドロ5アルキル1Hピラゾール35ジカルボン酸、45ジヒドロ55ジアリール3イソキサゾールカルボン酸、ジクロロアセタミド、αオキシミノフェニルアセトニトリル、アセトフェノノキシム、46ジハロ2フェニルピリミジン、N4フェニルスルホニル2安息香酸アミド、18ナフタル酸無水物、2ハロ45チアゾールカルボン酸、ホスホルチオレートおよびNアルキルOフェニルカルバメートならびにその農学上許容し得る塩ならびにアミド、エステル、およびチオエステルなどの農学上許容し得る誘導体但し、それらが酸基を有するものとするである。毒性緩和剤の例は、ベノキサコール、クロキントセット、シオメトリニル、シプロスルファミド、ジクロルミド、ジシクロノン、ジエトレート、フェンクロラゾール、フェンクロリム、フルラゾール、フルキソフェニム、フリラゾール、イソキサジフェン、メフェンピル、メフェナート、ナフタル酸無水物、オキサベトリニル、41オキサ4アザスピロ45デカンおよび225トリメチル313オキサゾリジンである。当業者であれば、上記の除草剤および/または毒性緩和剤のいくつかが、幾何異性体、例えば、EZ異性体を形成することができることを認識するであろう。本発明による組成物中では、純粋な異性体およびその混合物の両方を用いることができる。さらに、上記の除草剤および/または毒性緩和剤のいくつかは、1個以上のキラル中心を有し、結果として、エナンチオマーまたはジアステレオマーとして存在する。本発明による組成物中では、純粋なエナンチオマーおよびジアステレオマーの両方を用いることができる。特に、いくつかのアリールオキシフェノキシプロピオナート除草剤はキラルであり、またそれらのいくつか、例えば、クロジナホップ、シハロホップ、フェノキサプロップP、フルアジホップP、ハロキシホップP、メタミホップ、プロパキザホップまたはキザロホップPは、エナンチオ濃縮された形態またはエナンチオピュアな形態で一般的に用いられる。さらなる例として、グルホシナートはエナンチオ濃縮された形態またはエナンチオピュアな形態で用いることができ、グルホシナートPとしても知られる。当業者であれば、上記の除草剤および/または毒性緩和剤の任意の誘導体、例えば、農学上好適な塩およびエステルを、本発明の実施において用いることができることを認識するであろう。雑草を制御する方法発明の除草剤耐性植物を、それらが耐性である除草剤と共に用いることができる。当業者には公知の任意の技術を用いて、本発明の植物に除草剤を適用することができる。植物の栽培プロセスにおける任意の時点で除草剤を適用することができる。例えば、除草剤を、植える前に、植える時に、発芽前に、発芽後に、またはその組合せで適用することができる。除草剤を種子に適用し、乾燥させて、種子上に層を形成させることができる。いくつかの実施形態においては、種子を毒性緩和剤で処理した後、サフルフェナシルを発芽後適用する。一実施形態においては、サフルフェナシルの発芽後適用は、毒性緩和剤で処理された種子を植えた後、約7~10日間である。いくつかの実施形態においては、毒性緩和剤は、クロキントセット、ジクロルミド、フルキソフェニム、またはその組合せである。他の態様においては、本発明は、植物またはその植物部分の成長のための場所にある雑草を制御するための方法であって、サフルフェナシルを含む組成物を前記場所に適用することを含む前記方法を提供する。いくつかの態様においては、本発明は、植物の成長のための場所にある雑草を制御する方法であって、サフルフェナシルを含む除草剤組成物を前記場所に適用することを含み、前記場所が、前記植物を生産することができる植物もしくは種子を含む場所;または前記植物もしくは種子を含むようにされた、前記適用後である場所であり;前記植物または種子が、その細胞の少なくともいくつかに、植物細胞中で機能し得るプロモーターに機能し得る形で連結された組換えポリヌクレオチドを含み、該プロモーターが該ポリヌクレオチドによりコードされるシトクロムP450ポリペプチドを発現することができ、該ポリペプチドの発現が前記植物にサフルフェナシルへの耐性を付与する、前記方法を提供する。本明細書に記載の除草剤組成物を、例えば、葉面処理、土壌処理、種子処理、または土壌水浸として適用することができる。例えば、噴霧、ダスティング、散布、または当業界で公知有用な任意の他の様式により、適用を行うことができる。一実施形態においては、除草剤を用いて、本発明の除草剤耐性植物のそばで成長していると認められる雑草の成長を制御することができる。この型の実施形態においては、本発明の除草剤耐性植物が雑草のそばで成長している土地に除草剤を適用することができる。次いで、本発明の除草剤耐性植物が耐性である除草剤を、雑草を殺傷するか、またはその成長を阻害するのに十分な濃度で前記土地に適用することができる。雑草を殺傷するか、またはその成長を阻害するのに十分な除草剤の濃度は、当業界で公知であり、上記に開示されている。他の実施形態においては、本発明は、本発明のサフルフェナシル耐性植物のそばにある雑草を制御するための方法を提供する。前記方法は、有効量のサフルフェナシルを雑草およびオーキシン除草剤耐性植物に適用することを含み、該植物は野生型植物と比較した場合、オーキシン除草剤に対する増加した耐性を有する。いくつかの実施形態においては、本発明のサフルフェナシル耐性植物は、好ましくは、作物植物、例えば、限定されるものではないが、ヒマワリ、アルファルファ、アブラナ種、大豆、綿、ベニバナ、ピーナッツ、タバコ、トマト、ジャガイモ、小麦、イネ、トウモロコシ、ソルガム、オオムギ、ライムギ、キビ、およびソルガムである。他の態様においては、除草剤例えば、サフルフェナシルを種子処理として用いることもできる。いくつかの実施形態においては、有効濃度もしくは有効量の除草剤、または有効濃度もしくは有効量の除草剤を含む組成物を、種子の播種の前、またはその間に、種子に直接適用することができる。種子処理製剤はさらに、結合剤および必要に応じて、着色剤を含んでもよい。結合剤を添加して、処理後の種子への活性材料の付着を改善することができる。一実施形態においては、好適な結合剤は、ブロックコポリマーEOPO界面活性剤であるが、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリレート、ポリメタクリレート、ポリブテン、ポリイソブチレン、ポリスチレン、ポリエチレンアミン、ポリエチレンアミド、ポリエチレンイミンLupasol、Polymin、ポリエーテル、ポリウレタン、ポリビニルアセテート、チロースおよびこれらのポリマーから誘導されるコポリマーもである。必要に応じて、製剤中に着色剤を含有させてもよい。種子処理製剤のための好適な着色剤または染料は、ローダミンB、CIピグメントレッド112、CIソルベントレッド1、ピグメントブルー154、ピグメントブルー153、ピグメントブルー152、ピグメントブルー151、ピグメントブルー80、ピグメントイエロー1、ピグメントイエロー13、ピグメントレッド112、ピグメントレッド482、ピグメントレッド481、ピグメントレッド571、ピグメントレッド531、ピグメントオレンジ43、ピグメントオレンジ34、ピグメントオレンジ5、ピグメントグリーン36、ピグメントグリーン7、ピグメントホワイト6、ピグメントブラウン25、ベーシックバイオレット10、ベーシックバイオレット49、アシッドレッド51、アシッドレッド52、アシッドレッド14、アシッドブルー9、アシッドイエロー23、ベーシックレッド10、ベーシックレッド108である。用語種子処理は、種子ドレッシング、種子コーティング、種子ダスティング、浸種、および種子ペレッティングなどの当業界で公知のあらゆる好適な種子処理技術を含む。一実施形態においては、本発明は、特に、種子ドリル中に、必要に応じて、1種以上の固体もしくは液体の農学上許容し得る担体および/または必要に応じて、1種以上の農学上許容し得る界面活性剤と共に、組成物/製剤例えば、顆粒製剤としてサフルフェナシルを含有する顆粒製剤の適用により、土壌を処理する方法を提供する。この方法は、例えば、穀類、トウモロコシ、綿、およびヒマワリの苗床において有利に用いられる。本発明はまた、サフルフェナシルと、例えば、アミドスルフロン、アジムスルフロン、ベンスルフロン、クロリムロン、クロルスルフロン、シノスルフロン、シクロスルファムロン、エタメツルフロン、エトキシスルフロン、フラザスルフロン、フルピルスルフロン、ホラムスルフロン、ハロスルフロン、イマゾスルフロン、ヨードスルフロン、メソスルフロン、メトスルフロン、ニコスルフロン、オキサスルフロン、プリミスルフロン、プロスルフロン、ピラゾスルフロン、リムスルフロン、スルホメツロン、スルホスルフロン、チフェンスルフロン、トリアスルフロン、トリベヌロン、トリフロキシスルフロン、トルフルスルフロン、トリトスルフロン、イマザメタベンズ、イマザモックス、イマザピック、イマザピル、イマザキン、イマゼタピル、クロランスラム、ジクロスラム、フロラスラム、フルメトスラム、メトスラム、ペノキススラム、ビスピリバック、ピリミノバック、プロポキシカルバゾン、フルカルバゾン、ピリベンゾキシム、ピリフタリドおよびピリチオバックからなる群より選択されるAHAS阻害剤などの少なくとも1種の他の除草剤とを含む種子処理製剤でコーティングされた種子またはそれを含有する種子を含む。用語コーティングされた、および/または含有するは、一般的には、活性成分が多くの部分について、適用時に増殖産物の表面上にあるが、該成分の大きい方または小さい方の部分が、適用方法に応じて、増殖産物中に浸透することができることを意味する。前記増殖産物を再度植えた場合、それは活性成分を吸収することができる。いくつかの実施形態においては、サフルフェナシルまたはサフルフェナシルを含む製剤による種子処理適用を、植物の播種前に、および植物の発芽前に種子に噴霧またはダスティングすることにより実行する。他の実施形態においては、種子の処理において、有効量のサフルフェナシルまたはサフルフェナシルを含む製剤で種子を処理することにより、対応する製剤を適用する。他の態様においては、本発明は、播種前および/または発芽後に本発明のサフルフェナシル耐性植物の種子をサフルフェナシルと接触させることを含む、望ましくない植物と戦うか、または雑草を制御するための方法を提供する。前記方法は、例えば、畑の中の土壌または温室中の培養土中に種子を播種することをさらに含んでもよい。前記方法は、種子のすぐそばにある望ましくない植物と戦うか、または雑草を制御するのに特に有用である。望ましくない植物の制御は、雑草の殺傷および/またはさもなければ、雑草の通常の成長の遅延もしくは阻害と理解される。雑草は、最も広い意味で、それらが望ましくない場所で成長する全ての植物を意味すると理解される。本発明の雑草としては、例えば、双子葉植物および単子葉植物の雑草が挙げられる。双子葉植物の雑草としては、限定されるものではないが、属:シナピス、レピジウム、ガリウム、ステラリア、マトリカリア、アンテミス、ガリンソガ、チェノポジウム、ウルティカ、セネシオ、アマランタス、ポルツラカ、キサンチウム、コンボルブルス、イポメア、ポリゴナム、セスバニア、アンブロシア、シルシウム、カルドゥウス、ソンクス、ソラナム、ロリッパ、ロタラ、リンデルニア、ラミウム、ベロニカ、アブティロン、エメックス、ダツラ、ビオラ、ガレオプシス、パパベル、センタウレア、トリホリウム、ラヌンクルスおよびタラキサカムの雑草が挙げられる。単子葉植物の雑草としては、限定されるものではないが、属:エチノクロア、セタリア、パニカム、デジタリア、フレウム、ポア、フェツカ、エレウシン、ブラチアリア、ロリウム、ブロムス、アベナ、シペルス、ソルガム、アグロピロン、シノドン、モノコリア、フィンブリスチスリス、サギッタリア、エレオカリス、シルプス、パスパルム、イシェマム、スフェノクレア、ダクチロクテニウム、アグロスティス、アロペクルスおよびアペラの雑草が挙げられる。さらに、本発明の雑草としては、例えば、望ましくない場所で成長している作物植物が挙げられる。例えば、トウモロコシ植物が大豆植物の畑において望ましくない場合、主に大豆植物を含む畑の中にある自生トウモロコシ植物を雑草と考えることができる。他の実施形態においては、種子の処理において、有効量のサフルフェナシルまたはサフルフェナシルを含む製剤で種子を処理することにより、対応する製剤を適用する。さらなる態様において、本発明の場所、植物、植物部分、または種子の処理は、AIを含まない農学上許容し得る組成物の適用を含む。一実施形態においては、前記処理は、サフルフェナシルAIを含まない農学上許容し得る組成物の適用を含む。いくつかの実施形態においては、前記処理は、1種以上の農学上許容し得る担体、希釈剤、賦形剤、植物成長調節剤などを含む、サフルフェナシルAIを含まない農学上許容し得る組成物の適用を含む。他の実施形態においては、前記処理は、アジュバントを含む、サフルフェナシルAIを含まない農学上許容し得る組成物の適用を含む。一実施形態においては、前記アジュバントは、界面活性剤、スプレッダー、ステッカー、浸透剤、ドリフト制御剤、作物油、乳化剤、相溶剤、またはその組合せである。本明細書に記載の方法および適用に対する他の好適な改変および適合が明らかであり、本発明の範囲またはその任意の実施形態を逸脱することなくそれらを行うことができることが、関連する業界の当業者には容易に明らかであろう。ここまで本発明を詳細に説明してきたが、例示目的のみで本明細書に含まれ、本発明を限定することを意図するものではない以下の実施例を参照することにより、同じ事をより明確に理解できるであろう。前記発明を明確性および理解の目的のためにいくらか詳細に説明してきたが、当業者であれば、本発明の真の範囲および添付の特許請求の範囲から逸脱することなく、形態および詳細の様々な変更を行うことができることを、本開示の理解から理解できるであろう。本明細書に記載の全ての特許および刊行物は、その全体が参照により本明細書に組入れられるものとする。毒性緩和剤およびサフルフェナシルに誘導される単子葉植物のP450遺伝子の発現分析イネ、コムギ、およびトウモロコシにおいて実験を設計して、毒性緩和剤および/またはサフルフェナシルの適用により誘導されるP450遺伝子を同定した。10個の種子を、Midwest土壌を充填した4インチのポットに播種し、標準的な温室条件で4~5日間発芽させた。土壌から発芽が明らかになったら、表15に示されるプロトコルに従って、苗に噴霧した。表15:P450発現分析に用いられるコムギ、イネ、およびトウモロコシの苗のための噴霧プロトコル実験あたり7~10個の独立した処理があり、それぞれ、2回行った。処理の24時間後、種子コート上の全ての組織を採取し、液体窒素中で簡易凍結した。その後、組織を凍結しながら粉砕し、改変GentraSystemsVersageneプロトコルを用いてRNAを単離した。RNAを標識し、標準的なAffymetrixプロトコルに従ってコムギ、イネ、またはトウモロコシの遺伝子チップアレイにハイブリダイズさせた。データをRMA正規化し、バックグラウンドを引き、変位値を正規化した。潜在的なP450遺伝子に対応するプローブセットを、プローブセットの翻訳されたヌクレオチド配列と、イネおよびシロイヌナズナにおける既知のP450のアミノ酸配列とを比較する配列相同性検索blastxプログラムを介して同定した。基準が、少なくとも40アミノ酸長内で少なくとも50の同一性を満たす場合、配列を潜在的なP450と考えた。合計349個のコムギおよび460個のトウモロコシのP450標的配列を同定した。GenedataExpressionistソフトウェアを用いて、遺伝子注釈を含むANOVA表を作成した。トウモロコシについては、510個のうちの43個のP450プローブセットが、005以下のレベルのFDRで示差的に発現された。有意に示差的に発現され、噴霧されていない、および/またはアジュバントのみの対照よりも処理の際に4~10倍の誘導を示したプローブセットを同定し、その後のクローニングおよび以下に記載の様々な植物系への形質転換のために標的化した。最大の誘導倍数と共にイネおよびトウモロコシのP450遺伝子の発現を示すグラフを、図1に示す。これらのデータに基づいて、9個のイネ遺伝子および4個のトウモロコシ遺伝子を、迅速な耐性植物アッセイにおける試験のために選択した。いくつかのコムギ転写物が処理の際に誘導されたが、完全長配列を有していたのはただ1個、TaCYP709C1のみであった。イネにおけるその最も近い相同体はOsjCYP72A1である。この理由から、コムギに由来するこの1個の遺伝子のみを、その後の分析に含有させた。このスクリーニングで同定された遺伝子産物のアミノ酸配列を比較し、リレーショナルツリーを図2に示す。サフルフェナシルへの耐性を付与するものとして本明細書に開示される配列の対表も表16に提供する。表16は、本明細書に記載のようにサフルフェナシルに対する耐性を付与することがわかったP450遺伝子のアラインメント表である。アミノ酸配列同一性を、全体アラインメントのとして示す。表16:配列同一性表選択された単子葉植物のP450遺伝子を、標準的なクローニング手順を用いて、単子葉植物および双子葉植物の形質転換ベクター中にクローニングした。単子葉植物の発現については、構成的トウモロコシユビキチンプロモーター、双子葉植物の発現については、構成的パセリユビキチンプロモーターにより、P450発現を誘導した。トウモロコシ未熟胚を、表面滅菌した穂軸から単離し授粉の9~10日後、MMS101培地上で1週間培養した表17。表17:トウモロコシ用培地胚発生カルスを含む胚を、0、50、100、250、500、750または1000nMのサフルフェナシル含有培地改変MLS213:表17に無作為に分布させた。応答を上述のように評価した。2個のプレートは使用/レベル/条件であり、10個のカルス/プレートであった。さらに、成長しているカルスを、上記レベルのサフルフェナシルを含む再生培地改変MLS513:表17に移した。シュート形成の後、成長しているシュートを、上記のサフルフェナシル濃度ならびにさらに2および3μMの濃度を有するMLS616表17を含有する発根用の箱に移した。トウモロコシ未熟胚の形質転換および除草剤に対する応答未熟胚の形質転換:PengらのWO2006136596に概略された手順に従って、未熟胚を形質転換した。例外は、一定割合の胚多くの場合、25個を、サフルフェナシル含有培地上に塗布し、直接選択のために明るいところで保持した。それぞれの実験の残りの胚を、記載のようにPursuit上で選択した。全ての構築物中に存在するnosターミネーターである標的に関して、Taqman分析を用いて植物を試験した。健康に見える植物を強健にした後、噴霧試験を行うために温室に送った。BMS細胞に関して、形質転換、サフルフェナシル選択、および噴霧試験の両方のための対照としてRCB958を用いた。合計82個のトランスジェニックトウモロコシ植物2個の目的の構築物と1個の対照構築物を、組織培養で温室に送達した。4インチのポット中のMetroMix360土壌に植物を個別に移植した。それらが温室に入ったら600W高圧ナトリウム光により支援された14時間の昼の長さの27°C/21°Cの昼/夜サイクル、それらを14日間成長させた。次いで、それらに200gaihaのサフルフェナシル10vvのMSOの処理で噴霧した。除草剤による損傷の評価を噴霧の2および7日後の両方で取得して、新しい成長点および全体的な植物の健康に対する損傷について見た。最も長く生き延びたものを、種子生産のためにMetroMix360を充填したガロンポットに移植した。図3に示される独立事象を示すT0トランスジェニック植物を温室に移植し、方法の節に示されるように噴霧した。噴霧のちょうど2日後、植物はその成長点に対する重篤な損傷を示し、除草剤が接触した葉組織に対して主要なストレス損傷を示した。しかしながら、OsCYP72A15、OsjCYP81A6およびOsCYP73A38を発現するいくつかの独立トランスジェニック事象は、2および3の損傷スコアにより示されるように、耐性の増加を示した。大豆の形質転換および除草剤に対する根の応答これらの実験全てにおいて、大豆品種William82を用いた。Hongら、InVitroCellDevBiolPlant200743558568により記載のように、種子を滅菌し、7日間、種子発芽培地中で発芽させた。苗から上胚軸を完全に除去し、子葉節の下05~1cmの胚軸を切断した。胚軸の切断表面がアグロバクテリウム感染および根再生の標的であった。RTP3137などの全てのバイナリーベクターを担持する安全なアグロバクテリウムリゾゲネスSHA17を、50mgLのカナマイシンを含有するYEP増殖培地上で2~4日間培養した。上記のように調製された胚軸切断端部をYEPプレート上のアグロバクテリウム細胞上に浸した後、1寒天プレート上に塗布した。プレートをパラフィンまたは3MMテープで密封した。胚軸外植片をアグロバクテリウムと共に7~10日間、光の下で同時培養した。同時培養の7~10日後、胚軸外植片を、アーセナルイマザピル選択を用いる根誘導培地に移した根誘導培地は、12のMS塩および12のB5ビタミン、20glのスクロース、7glの精製寒天、1mglのナフタレン酢酸、400mglのチメンチンおよび1μMのアーセナルを含有する。根誘導培地の3日後、胚軸を、根の伸長のために15のMS塩および15のB5ビタミン、20glのスクロース、400mglのチメンチン、1μMのアーセナルおよび7glのゲルライトを含有する成長調節剤を含まない根成長培地に移した。伸長した根は通常、この培地上で12~20日後に得られた。様々な量のサフルフェナシル0、25、50、75、200、400、600、800、1000nMを補給した培地上でアグロバクテリウムに感染した胚軸外植片を培養することにより、予備実験でサフルフェナシル殺傷曲線を決定した。この実験では、対照構築物を含むSHA17を用いた。最適濃度として400nMのサフルフェナシルを選択して、耐性について試験した。根成長アッセイ:トランスジェニック根を含有する胚軸外植片10~12日間、根成長培地上で培養を、サフルフェナシル含有培地15のMS塩および15のB5ビタミン、20gLのスクロース、200mgLのチメンチン、7gLのゲルライトおよび400nMのサフルフェナシルに移した。根を培地中に押し入れた。2~3週間の培養後、根の成長を記録し、対照としてAHASIIのみを含む構築物を用いてデータを収集した。根がさらに伸長し、第2の根を生成し、さらに根の先端が白いか、またはクリームのような黄色のままであった場合、根がサフルフェナシルに対して耐性であると考えた。根貫通アッセイ:トランスジェニック根を含有する胚軸外植片20日間、根成長培地上で培養を上記と同じ培地に移したが、根を培地の内部に入れる代わりに、培地の表面上に置いた。白い根の先端と共に培地中に貫通し、最小で長さ05cm伸長した根を、サフルフェナシルに対して耐性であると考えた。現在まで、様々なP450GOIを含有する18個の構築物を、上記の2つの方法を用いてアッセイしたところ、構築物RTP3173を含有する根は、根の成長能力と根の貫通能力の両方に基づいてサフルフェナシルに対する耐性を示した。構築物RTP3155を含有する根は、対照と比較してわずかな耐性を示した表18。表18:大豆TRAP根を用いるサフルフェナシル耐性実験の概要ベクター名と発現カセットの関係を表19に示す。表19:ベクター名とP450発現カセットの関係他の16個の構築物はいずれも、このトランスジェニック大豆根アッセイを用いるこのバイオアッセイにおいては耐性を示さなかった。参考文献:Didierjeanら、PlantPhysiol130179189、Siminszkyら、PhytochemRev5445458、Nelsonら、PhytochemRev5193204、Williamsら、Mapbasedcloningofthensf1geneofmaize、InProgramandAbstractsofthe48thMaizeGeneticConferencePacificGroveCaliforniaUSA、Damら、WO2007103567、Riechersら、PersonalcommunicationBiochemicalmechanismsfortolerancetoBAS800HincornandsoybeansBASFAPKixorMetabolismmeetingRTPNCUSA、Bellら、BiochemSocTrans31558562、Abecassisら、BiocatalBiotrans215566、Siminszkyら、PesticBiochemPhysiol773543、HieiおよびKomariNatProtoc382434、Pengら、WO2006136596。CYP450のアミノ酸および核酸配列CYP450のアミノ酸および核酸配列の例を、表20に示す。表20:CYP450配列サフルフェナシル噴霧試験トウモロコシ全植物の形質転換およびサフルフェナシル耐性試験:Pengら、上掲に概略された手順に従って、未熟胚を形質転換した。全ての構築物中に存在するnosターミネーターである標的を用いて、Taqman分析によりTDNAの存在について植物を試験した。健康に見える植物を、強健にした後、噴霧試験を行うために温室に送った。植物を、4インチのポット中のMetroMix360土壌に個別に移植した。それらを温室に入れたら600W高圧ナトリウム光により支援される14時間の昼の長さで27°C/21°Cの昼/夜サイクル、それらを14日間成長させた。次いで、それらに200gaihaのサフルフェナシル10vvのメチル化種子油の処理と共に噴霧した。除草剤による損傷の評価を、噴霧の2および7日後の両方に取得して、新しい成長点および全体的な植物の健康に対する損傷について見た。最も長く生き延びたものを、種子生産のためにMetroMix360を充填したガロンポットに移植した。大豆の形質転換およびサフルフェナシル耐性試験:大豆品種Williams82を、Siminszkyら、PhytochemRev5445458により以前に記載されたように形質転換した。再生後、形質転換体を小さいポット中の土壌に移植し、成長チャンバーに入れ16時間の昼/8時間の夜;25°Cの昼/23°Cの夜;65の相対湿度;130~150μEm2s1、次いで、Taqman分析によりTDNAの存在について試験した。2~3週間後、健康な、トランスジェニック陽性の単一コピーの事象をより大きいポットに移植し、成長チャンバー中で成長させた。切断のための最適なシュートは、少なくとも2個の節が存在するおよそ3~4インチの高さのものであった。元の形質転換体母植物からそれぞれの切断物を取得し、発根ホルモン粉末インドール3酪酸、IBAに浸した。次いで、切断物をバイオドーム内部のオアシスウェッジに入れた。母植物を温室中で成熟させ、種子を収穫した。また、野生型切断物を同時に取得して、陰性対照として用いた。切断物をバイオドーム中で5~7日間保持した後、3インチのポットに移植し、次いで、さらに2日間、成長チャンバー中で順応させた。続いて、切断物を温室に移し、約4日間順応させた後、0、25および50gaihaのサフルフェナシル1DMSOを含有する噴霧試験にかけた。除草剤による損傷の評価を、処理の7日後に取得した。酵母発現系およびサフルフェナシル代謝の分析:イネのシトクロムP45081A6を、BamH1およびSal1を用いてpESCHis酵母発現ベクター中にクローニングした。Clontech社製のYeastMakerTransformationSystemを用いて、YPH500酵母株中に構築物を形質転換した。陽性クローンをSD寒天プレートアミノ酸を含まない07酵母窒素ベース、2グルコース、ヒスチジンを含まない013アミノ酸ドロップアウト;2寒天で固形化されたプレート上で選択した。基質の生物変換を、それぞれのシトクロムP450遺伝子を発現する酵母細胞中で直接アッセイした。細胞を、SGHis培地SDと同じ組成であるが、グルコースの代わりにガラクトースを含む中で18~24時間誘導したUrbanら、EurJBiochem222853850。その後、BAS800H基質を添加し、サンプルをさらに24時間インキュベートした。サンプルをLCMSMSにより分析した。ベクター名とそれから発現される遺伝子の関係を表21に示す。表21:ベクター名とそれから発現される遺伝子の関係トウモロコシ全植物の形質転換およびサフルフェナシル耐性試験異なるP450遺伝子を担持する16個のベクターを、T0トウモロコシ植物においてサフルフェナシルに対する耐性を増加させる能力について試験した。図3は、200gaihaのサフルフェナシル1MSOで処理したこれらの形質転換体の損傷スコアを示す。OsCYP72A15およびOsCYP73A38は、トウモロコシにおいて最良の性能であり、いくつかの事象は3以下の損傷スコアを有していた。選択された耐性T0植物からT1種子を収穫し、再度植えて、2~4枚の葉の段階播種の2週間後で240gaihaのサフルフェナシル1MSOを噴霧した。損傷率を適用の7および14日後に評価した。図4は、除草剤による損傷について評価およびスコア化されたそれぞれの分離事象に由来する植物の数を示す。OsjCYP81A6およびOsICYP81Aは両方とも、J553野生型生殖質のみと比較した場合、損傷スコアの低下により示されるように、トウモロコシ植物に対して高い耐性を付与した。大豆の形質転換およびサフルフェナシル耐性試験異なる単子葉植物のP450遺伝子を担持する4個のベクターを、T0大豆切断物においてサフルフェナシルに対する耐性を付与する能力について試験した。図5~7は、0、25、または50gaihaのサフルフェナシル1MSOで処理した植物の損傷のレベルを示す。これらのアッセイでは、ZmNSF1およびOsjCYP81A6は、最も高い耐性レベルを付与した。酵母発現系およびサフルフェナシル代謝の分析OsICYP81A6およびSb01g0074201は、BAS800Hの分解を触媒した。24時間のインキュベーション後、BAS800Hの初期含量の10がいくつかの代謝物に変換され、その大部分が不活性のBAS800H02であることがわかった。