"細菌sigN代替シグマ54因子の結合部位、またはその変異体もしくは類似体の全てもしくはその一部をコードする配列を含むデコイ核酸配列であって、前記結合部位配列は、配列番号2、配列番号8、配列番号14、および配列番号20からなる群から選択される、デコイ核酸配列。前記結合部位配列は、配列番号1、配列番号3および4、配列番号7、配列番号9および10、配列番号13、配列番号15および16、ならびに配列番号21および22からなる群から選択される、請求項1に記載のデコイポリヌクレオチド。請求項1または請求項2に記載のデコイ核酸配列、および1つ以上の送達部分を含む、抗菌性複合体。前記送達部分は、第四級アミン化合物、アミノアルカンのアミノ成分が複素環式環の一部を形成するアミノ基である、ビスアミノアルカンおよびその不飽和誘導体、ならびに抗菌性ペプチドから選択される、請求項3に記載の抗菌性複合体。前記送達部分は、キノリンまたはアクリジンの第四級誘導体および抗菌性ペプチドから選択される、請求項4に記載の抗菌性複合体。前記送達部分は、ビスキノリニウムである、請求項3~5のいずれか1項に記載の複合体。前記送達部分は、デカリニウムまたはその類似体である、請求項5に記載の複合体。前記デカリニウム類似体のアルキル鎖は、8個~14個のメチル基を有する、請求項7に記載の複合体。前記デカリニウム類似体のアルキル鎖は、10個または12個のメチル基を有する、請求項8に記載の複合体。前記デカリニウム類似体は、10,10’-ドデカン-1,12-ジイルビス9-アミノ-1,2,3,4-テトラヒドロアクリジニウムジクロライドである、請求項9に記載の複合体。前記抗菌性ペプチドは、天然ペプチドである、請求項3~10のいずれか1項に記載の複合体。前記抗菌性ペプチドは、天然のペプチドのペプチド模倣物または合成変異体である、請求項11に記載の複合体。前記抗菌性ペプチドは、細菌の細胞膜を透過性にする、請求項11または請求項12に記載の複合体。前記抗菌性ペプチドは、デフェンシン、プロイロシジンpleuricidin、マガイニン、デルマセプチン、アピデシン、セクロピン、ミクロシン、およびペジオシンからなる群から選択される、請求項13に記載の複合体。前記抗菌性ペプチドは、グラミシジンおよびポリミキシンからなる群から選択される、請求項14に記載の複合体。送達を促進するためにポリエチレンイミンを含有する、請求項14に記載の複合体。前記抗菌性ペプチドは、細胞内標的を有する、請求項11または請求項12に記載の複合体。前記抗菌性ペプチドは、抗生物質、グリコペプチド抗生物質、ポリリシンおよびポリアルギニン等のカチオン性ポリペプチドからなる群から選択される、請求項17に記載の複合体。前記抗菌性ペプチドは、ブフォリンまたはその誘導体である、請求項18に記載の複合体。細菌感染の治療における、請求項1もしくは請求項2に記載されるデコイ核酸配列、または請求項3~19のいずれか1項に記載される抗菌性複合体の使用。前記細菌感染の治療は、1つ以上の抗生物質および/または他の抗菌剤複数可の使用をさらに含む、請求項20に記載の使用。任意に1つ以上の抗生物質および/または抗菌剤を組み合わせた、請求項1もしくは請求項2に記載されるデコイ核酸配列、または請求項3~19のいずれか1項に記載される抗菌性複合体と、生理学的に許容される担体または賦形剤と、を含む、薬学的組成物または薬剤。細菌感染の治療で使用するための、請求項22に記載の薬学的組成物または薬剤。任意に1つ以上の抗生物質および/または抗菌剤を組み合わせた、請求項1もしくは請求項2に定義されるデコイ核酸配列、または請求項3~19のいずれか1項に記載の抗菌性複合体を投与することを含む、細菌感染を治療する方法。細菌感染の治療が、肺炎、菌血症、百日咳、ライム病、ブルセラ症、急性腸炎、敗血症、野兎病、インフルエンザ、消化性潰瘍、レジオネラ症、淋病、院内感染、敗血症、くる病、腸チフス、赤痢、コレラ、疫病、炭疽、偽膜性大腸炎、ジフテリア、リステリア病、結核、敗血症、Q熱、および髄膜炎から選択される状態を治療することを含む、請求項20~24のいずれか1項に記載の使用、薬学的組成物、または方法。細菌感染の治療は、肺炎、菌血症、百日咳、ライム病、ブルセラ症、急性腸炎、敗血症、野兎病、インフルエンザ、消化性潰瘍、レジオネラ症、淋病、院内感染、敗血症、くる病、腸チフス、赤痢、コレラ、疫病、炭疽、偽膜性大腸炎、ジフテリア、リステリア病、結核、敗血症、Q熱、および髄膜炎から選択される状態を治療することを含む、請求項20~24のいずれか1項に記載の使用、薬学的組成物、または方法。任意に1つ以上の抗生物質および/または抗菌剤と組み合わせて、請求項1もしくは請求項2に定義されるデコイ核酸配列、または請求項3~19のいずれか1項に記載の抗菌性複合体を適用することを含む、細菌を死滅させる、細菌増殖を阻害する、または細菌毒性を低減させるエクスビボ方法。任意に1つ以上の抗生物質および/または抗菌剤と組み合わせた、請求項1もしくは請求項2に記載されるデコイ核酸配列、または請求項3~19のいずれか1項に記載の抗菌性複合体を含む、洗浄組成物。請求項1もしくは請求項2に記載されるデコイ核酸配列、または請求項3~19のいずれか1項に記載の抗菌性複合体と、1つ以上の抗生物質および/または抗菌剤と、を含むキットであって、前記デコイならびに前記1つ以上の抗生物質および/または抗菌剤は、細菌の死滅、細菌増殖の阻害、または細菌毒性の低減において併用するためのものである、キット。[実施例]一般に本明細書に記述される技法の多くは、当業者に周知であるが、特にSambrookandRussell,3rdEdition2001,MolecularCloning:alaboratorymanualを参照されたい。実施例1.ECSigTFDはインビトロで大腸菌を死滅させるsigN代替シグマ因子σ54様の結合部位を含有するTFDは、配列番号1に記述される配列を有した。配列は、Barriosetal.[1999]Nucl.AcidsRes.22:4305-4313に記載される大腸菌glnA遺伝子の促進因子領域に基づいた。EC_Sig:TGGCACAGATTTTGCT配列番号1Barriosらに列挙される他の大腸菌遺伝子fdhF、hycA、hypA、nac、glnH、およびpspAで発見された類似する結合部位は、大腸菌の結合部位にIUPAC変質DNAアルファベットを使用してコンセンサス配列を生成するために使用された。EC_Sigコンセンサス:TGGCACNNWWNTTGCW配列番号2IUPAC一文字コードが使用され、その場合、WはAまたはTである。配列番号1の配列は、TFDに組み込まれ、大腸菌培養物に送達された場合、成長を防止するかどうかをみるために試験された。材料および方法結紮DB-TFDによるTFD亜鈴型の調製それぞれ、大腸菌sigNタンパク質の一本鎖の認識部位を含有する、2つの5’-リン酸化オリゴヌクレオチドを合成した。分子のいずれかの末端では、小さいヘアピンループが、分子を分解から保護するように作用した。各オリゴヌクレオチドは、250pmol/μLの濃度で、dH2O中で再懸濁した。大腸菌Sig亜鈴型TFDEC_SigTFDと称するを形成するために、以下のリン酸化したオリゴヌクレオチドを合成した。EC_SigDB1:CTTGGTTTTTCCAAGTGGCACAGATTTTGCT配列番号3EC_SigDB2:CCCTCTTTTTGAGGGAGCAAAATCTGTGCCA配列番号4典型的に、30μLの各オリゴヌクレオチドを、27μLのdH2Oと混合し、以下のPCRプログラムを使用してアニールした:95°Cで3分間、-0.1°C/sで8°Cまで冷却して終了。続いて、10μLの10×NEBリガーゼバッファ、および3μLのHCT4DNAリガーゼNEBを添加した。混合物は、16°Cで一晩インキュベートした。次いで、材料をT7エキソヌクレアーゼNEBで十分に消化して、未結紮オリゴヌクレオチドを全て除去し、エタノール沈殿を2回行うことによって回収した。EC_ScrTFDと称する、スクランブルされたバージョンのEC_Sig結合部位を含有する、DB_TFDも調製した。この場合、使用するリン酸化プライマーは、以下の通りとした。EC_ScrDB1:CTTGGTTTTTCCAAGACCTAGTTAGGGTTTC配列番号5EC_ScrDB2:CCCTCTTTTTGAGGGGAAACCCTAACTAGGT配列番号6脂溶性カチオンの調製15mgの化合物7SygnatureLtd.、C7と称するを10mLのメタノール中に溶解し、回転式蒸発器を使用して完全に乾燥させ、そして、10mMの最終濃度まで、5mMのHepespH7.4に再懸濁した。化合物7は直ちに溶解して、澄んだ淡黄色の溶液を生じ、これは、次いで、MSESoniprep150を使用して、氷上でプローブ音波処理を受けた。使用条件:60サイクルの30秒オン振幅10ミクロンおよび60秒オフ。この処理後、試料は完全に透明になった。続いて、試料を遠心分離して細片を取り除き、sC7音波処理された化合物7と称する。このステップで、小胞またはボラソームを形成した。TFD複合体の形成送達のために、TFD複合体はsC7を用いて形成された。2μgのいずれかのTFDを結合するために必要なC7ボラソームの最小量は、経験的に確立され、適切な量のボラソームを、5mMのHepespH7.4中でTFDと混合して、複合体を形成した。TFD複合体の希釈物は、以降のバイオアッセイで使用した。96ウェルプレートにおける成長研究の実行EC_SigTFDまたはEC_ScrTFDのいずれかからなるTFD複合体を使用して、大腸菌の成長への影響を判定するために成長アッセイを行った。96ウェルプレートを使用して、細菌細胞の成長への影響を判定するためのアッセイを行い、各ウェルは、LB媒体からなる200μLのブロスを含有するLuria-BertaniLB媒体1[w/v]Bacto-トリプトン、0.5[w/v]酵母抽出物、1[w/v]NaCl。1μLの種々の濃度のTFD複合体を各ウェルに加え、大腸菌の細菌増殖への影響は、インキュベーション中に周期的にブロスの吸光度を測定することによって観察した。プレートは、振盪しながら37°Cでインキュベートし、450nMでの吸光度読み取り値は、プレートリーダーを使用して取り込んだ。結果TFD複合体は、インビトロで大腸菌を効率的に死滅させることができるLBブロスを播種するために大腸菌細胞を使用して、5×105/mLの細胞の最終濃度を得た。200μLアリコートを、96ウェルプレートのウェルに分配した。ウェルは、様々な濃度のEC_SigTFD複合体、EC_ScrTFD複合体TFD対照で補足されるか、またはウェルは未処理であった。どちらのTFD複合体も、500ng/mLの濃度のC7と、5μg/mLのTFDとを含有した。図1に示されるように、細胞成長は、基本的に未処理試料およびTFD対照試料において同じであった。しかしながら、EC_SigTFD複合体は、細菌増殖を防止した。したがって、C7ボラソームの特にEC_SigTFDとの組み合わせは、大腸菌株を死滅させ、一方、対照TFD複合体は大腸菌株を死滅させなかった。この効果は、複合体が細菌に効果的にTFD治療を送達していることに起因した。随従性膜損傷を伴う送達単独の作用は、TFD対照試料が細胞成長に影響を及ぼさなかったため、細胞を死滅させなかった。実施例2.PA_SIGTFDはインビトロで緑膿菌を死滅させるsigN代替シグマ因子σ54様の結合部位を含有するTFDは、配列番号7に記述される配列を有した。配列は、Barriosら上記に記載される緑膿菌algC遺伝子の促進因子領域に基づいた。PA_Sig:CGGGCAACGCACTGCC配列番号7Barriosらに列挙される他の緑膿菌遺伝子oprE、cpg2、rhlAB、algD、およびfleSRで発見された類似する結合部位は、緑膿菌の結合部位にIUPAC変質DNAアルファベットを使用してコンセンサス配列を画定するために使用された。PA_Sigコンセンサス:GGNANWCSCNTNSCN配列番号8配列番号7の配列は、TFDに組み込まれ、緑膿菌培養物に送達された場合、細菌増殖を防止するかどうかをみるために試験された。TFDの緑膿菌細胞への送達を可能にするために、TFD複合体を抗微生物性ペプチドと混合した。この実施例において、ブフォリンIIを使用しParketal.[2000]Proc.Natl.Acad.Sci.USA97:8245-8250、典型的に、200μLのブロスを1μgのペプチドで補足した。材料および方法結紮DB-TFDによるTFD亜鈴型の調製それぞれ、緑膿菌代替シグマタンパク質の一本鎖の認識部位を含有する、2つの5’-リン酸化オリゴヌクレオチドを合成し、一緒に結紮して、実施例1に記載されるように亜鈴型TFDを形成した。使用した配列は、PA_SigDB1:CTTGGTTTTTCCAAGCGGGCAACGCACTGCC配列番号9PA_SigDB2:CCCTCTTTTTGAGGGGGCAGTGCGTTGCCCG配列番号10であった。同様に、スクランブルされたバージョンのTFDをリン酸化したプライマーを使用して作製した。PA_ScrDB1:CTTGGTTTTTCCAAGTCAAGAGGGCCCCCC配列番号11PA_ScrDB2:CCCTCTTTTTGAGGGGGGGGGCCCTCTTGA配列番号12成長アッセイ実施例1に記載されるようにTFD複合体を形成した。成長アッセイは、緑膿菌の成長への影響を判定するために、PA_SigTFDまたはPA_ScrTFDのいずれかからなる複合体を使用して実行した。96ウェルプレートを使用して、細菌細胞の成長への影響を判定するためのアッセイを行い、各ウェルは、1μg/mLのブフォリンIIで補足されたLB媒体からなる200μLのブロスを含有する。1μLの種々の濃度のTFD複合体を各ウェルに加え、緑膿菌の細菌増殖への影響は、インキュベーション中に周期的にブロスの吸光度を測定することによって観察した。プレートは、振盪しながら37°Cでインキュベートし、450nMでの吸光度読み取り値は、プレートリーダーを使用して取り込んだ。結果TFD複合体はインビトロで効果的に緑膿菌を死滅させるLBブロスを播種するために緑膿菌細胞を使用して、5×105/mLの細胞の最終濃度を得た。200μLアリコートを、96ウェルプレートのウェルに分配した。ウェルは、様々な濃度のPA_SigTFD複合体、PA_ScrTFD複合体TFD対照、ブフォリンに添加された化合物7からなる送達対照相乗効果を試験するためで捕捉されるか、またはウェルは未処理であった。どちらのTFD複合体も、500ng/mLの濃度のC7と、5μg/mLのTFDとを含有した。図2に示されるように、細胞成長は、基本的に未処理試料、送達対照、およびTFD対照試料において同じであった。しかしながら、PA_SigTFD複合体は、細菌増殖を防止した。したがって、送達ビヒクルの特にPA_SigTFDとの組み合わせは、緑膿菌株を死滅させ、一方、対照TFD複合体は、緑膿菌株を死滅させなかった。この効果は、複合体が細菌に効果的にTFD治療を送達していることに起因した。随従性膜損傷を伴う送達単独の作用は、TFD対照試料が細胞成長に影響を及ぼさなかったため、細胞を死滅させなかった。実施例3.KP_SIGTFDはインビトロで肺炎桿菌を死滅させるsigN代替シグマ因子σ54様の結合部位を含有するTFDは、配列番号13に記述される配列を有した。配列は、Barriosら上記に記載される肺炎桿菌glnA遺伝子の促進因子領域に基づく。KP_Sig:TGGCACAGATTTCGCT配列番号13Barriosらに列挙される他の肺炎桿菌遺伝子nifB、nifE、nifH、nifJ、nifL、nifM、およびnifUで発見された類似する結合部位は、肺炎桿菌の結合部位にIUPAC変質DNAアルファベットを使用してコンセンサス配列を生成するために使用された。KP_Sigコンセンサス:TGGNNNNNNWTTTGCW配列番号14配列番号13の配列は、TFDに組み込まれ、肺炎桿菌培養物に送達された場合、成長を防止するかどうかをみるために試験された。結紮DB-TFDによるTFD亜鈴型の調製それぞれ、肺炎桿菌代替シグマタンパク質の一本鎖の認識部位を含有する、2つの5’-リン酸化オリゴヌクレオチドを合成し、一緒に結紮して、実施例1に記載されるように亜鈴型TFDを形成した。使用した配列は、KP_SigDB1:CTTGGTTTTTCCAAGTGGCACAGATTTCGCT配列番号15KP_SigDB2:CCCTCTTTTTGAGGGAGCGAAATCTGTGCCA配列番号16であった。同様に、スクランブルされたバージョンのTFDをリン酸化したプライマーを使用して作製した。KP_ScrDB1:CTTGGTTTTTCCAAGCTACATTTAGCGGTGC配列番号17KP_ScrDB2:CCCTCTTTTTGAGGGGCACCGCTAAATGTAG配列番号18肺炎桿菌細胞への送達を可能にするために、TFD複合体を抗微生物性ペプチドと混合した。TFDを細胞浸透性ペプチドと複合することによって、トランスフェクションを達成した。ペプチドは、前述されており、肺炎桿菌の膜を浸透することが可能であることが分かっているVaara[1996]Antimicrob.AgentsChemother.40:1801。使用されたペプチドの配列は、KPトランスフェクションペプチド:IKFLKFLKFL配列番号19であった。成長アッセイ実施例1に記載されるようにTFD複合体を形成した。成長アッセイは、肺炎桿菌の成長へのそれらの影響を判定するために、KP_SigTFDまたはKP_ScrTFDのいずれかからなる複合体を使用して行った。96ウェルプレートを使用して、細菌細胞の成長への影響を判定するためにアッセイを行った。各ウェルは、5μg/mLのIKFLKFLKFLペプチドで補足されたM9媒体からなる200μLのブロスを含有する。1μLの種々の濃度のTFD複合体を各ウェルに加え、肺炎桿菌の細菌増殖への影響は、インキュベーション中に周期的にブロスの吸光度を測定することによって観察した。プレートは、振盪しながら37°Cでインキュベートし、450nMでの吸光度読み取り値は、プレートリーダーを使用して取り込んだ。結果TFD複合体はインビトロで肺炎桿菌を効果的に死滅させる1μg/mLのIKFLKFLKFLペプチドで補足されたM9ブロスを播種するために、肺炎桿菌細胞を使用して、5×105/mLの細胞の最終濃度を得た。200μLアリコートを、96ウェルプレートのウェルに分配した。ウェルは、様々な濃度のKP_SigTFD複合体、EC_ScrTFD複合体TFD対照で補足されるか、またはウェルは、未処理であった。どちらのTFD複合体も、500ng/mLの濃度のC7と、5μg/mLのTFDとを含有した。図3に示されるように、細胞成長は、基本的に、未処理試料およびTFD対照試料において同じであった。しかしながら、KP_SigTFD複合体は、細菌増殖を防止した。したがって、C7ボラソームの特にKP_SigTFDとの組み合わせは、肺炎桿菌株を死滅させ、一方、対照TFD複合体は、肺炎桿菌株を死滅させなかった。この効果は、複合体が細菌に効果的にTFD治療を送達していることに起因した。随従性膜損傷を伴う送達単独の作用は、TFD対照試料が細胞成長に影響を及ぼさなかったため、細胞を死滅させなかった。実施例4.コンセンサスSIGTFDはインビトロで大腸菌および緑膿菌の両方を死滅させる上記のコンセンサス配列配列番号2、配列番号8、および配列番号14の目視検査により、グラム陰性コンセンサス配列を導き出した。GNegコンセンサス:TGGCACACATATTGCA配列番号20このコンセンサス配列を有するTFDが大腸菌、緑膿菌、および肺炎桿菌、ならびに他のグラム陰性感染においてSigTFDとして機能するという予測を検査するために、実験を行った。材料および方法結紮DB-TFDによるTFD亜鈴型の調製それぞれ、グラム陰性代替シグマタンパク質の一本鎖の認識部位を含有する、2つの5’-リン酸化オリゴヌクレオチドを合成し、一緒に結紮して、実施例1に記載されるように亜鈴型TFDを形成した。使用した配列は、GN_SigDB1:CTTGGTTTTTCCAAGTGGCACACATATTGCA配列番号21GN_SigDB2:CCCTCTTTTTGAGGGTGCAATATGTGTGCCA配列番号22であった。成長アッセイ実施例2に記載されるようにTFD複合体を形成した。成長アッセイは、大腸菌と緑膿菌の混合培養物の成長への影響を判定するために、GN_SigTFDまたはPA_ScrTFD実施例2:配列番号11および12のいずれかからなる複合体を使用して行った。96ウェルプレートを使用して、細菌細胞の成長への影響を判定するためにアッセイを行い、各ウェルは、1μg/mLのブフォリンIIで補足されたLB媒体からなる200μLのブロスを含有する。1μLのTFD複合体または対照を1→2および1→10希釈で、各ウェルに添加した。両種の細菌増殖への影響は、振盪しながら37°Cで一晩プレートをインキュベートすることによって評価された。結果GNTFD複合体はインビトロで大腸菌および緑膿菌の両方を効果的に死滅させる全てのGNTFD複合体およびブフォリンIIの希釈物で処理された細胞だけが本アッセイで成長しなかった図5。他の全ての条件下の細菌は成長した:未処理細胞、ブフォリンIIを含む類似する濃度の対照TFD複合体で処理された細胞、ならびに類似する濃度の送達化合物を含む対照、ブフォリンIIおよび化合物7を含む対照。したがって、コンセンサスTFDの送達は、同時に2つのグラム陰性病原体を死滅させることができる。実施例5.コンセンサスSIGTFDはインビトロでどちらの大腸菌も死滅させる上記のコンセンサス配列配列番号2、配列番号8、および配列番号14の目視検査により、グラム陰性コンセンサス配列を導き出した。GNegコンセンサス:TGGCACACATATTGCA配列番号:20このコンセンサス配列を有するTFDが大腸菌、緑膿菌、および肺炎桿菌、ならびに他のグラム陰性感染においてSigTFDとして機能するという予測を検査するために、実験を行った。材料および方法結紮DB-TFDによるTFD亜鈴型の調製それぞれ、グラム陰性代替シグマタンパク質の一本鎖の認識部位を含有する、2つの5’-リン酸化オリゴヌクレオチドを合成し、一緒に結紮して、実施例1に記載されるように亜鈴型TFDを形成した。使用した配列は、GN_SigDB1:CTTGGTTTTTCCAAGTGGCACACATATTGCA配列番号21GN_SigDB2:CCCTCTTTTTGAGGGTGCAATATGTGTGCCA配列番号22であった。成長アッセイ実施例2に記載されるようにTFD複合体を形成した。成長アッセイは、緑膿菌の培養物の成長への影響を判定するために、GN_SigTFDまたはPA_ScrTFD実施例2;配列番号11および12のいずれかからなる複合体を使用して行った。96ウェルプレートを使用して、細菌細胞の成長への影響を判定するためにアッセイを行い、各ウェルは、8μg/mLのポリエチレンイミンPEIで補足されたLB媒体からなる200μLのブロスを含有する。このポリカチオン性ポリマーは、以前に、これらの細菌の外膜を破壊することによって、グラム陰性菌を透過性にし、それらを抗生物質により敏感にさせることを示しているHelanderetal.[1997]Microbiology143:3193-3199。1μLのTFD複合体または対照を1→2および1→10希釈で、各ウェルに添加した。両種の細菌増殖への影響は、振盪しながら37°Cで一晩プレートをインキュベートすることによって評価された。結果GNTFD複合体は、インビトロで大腸菌を効果的に死滅させることができる全てのGNTFD複合体およびPEIの希釈物で処理された細胞だけが本アッセイで成長しなかった図8。他の全ての条件下の細菌は成長した:未処理細胞、PEIを含む類似する濃度の対照TFD複合体で処理された細胞、ならびに類似する濃度の送達化合物、PEI、および化合物7を含む対照。したがって、PEIによって媒介されるコンセンサスTFDの送達は、大腸菌種を死滅させることができる。PEIは、ブフォリンIIまたは他の抗微生物性ペプチドの使用に対していくつかの利点を有する:低コストの商品製品であり、非毒性であると考えられHelanderetal.[1998]Microbiology144:385-390、したがって、TFDの製剤化において適切な賦形剤であると考えられてもよい。"