哺乳動物の鼓膜の上皮表面に製剤を適用する段階を含む、該哺乳動物の中耳にモキシフロキサシンを投与するための方法であって、該製剤が水性であり、かつ粘度生成剤およびモキシフロキサシンを含み、該製剤が流動性であり、かつ100000cps未満の粘度を有し、かつ、該製剤が、該鼓膜への適用後に、該製剤を該鼓膜に接触した状態で維持するのに十分な降伏応力を有するゲルを形成し、該モキシフロキサシンが、該鼓膜を通過して中耳腔内に移動する、方法。前記粘度生成剤がジェランである、請求項1記載の方法。前記粘度生成剤が、アクリル酸ナトリウムとnNアルキルアクリルアミドとを伴うNイソプロピルアクリルアミドである、請求項1記載の方法。前記粘度生成剤が、ポリエチレングリコールを伴うポリアクリル酸である、請求項1記載の方法。前記粘度生成剤が、ポリエチレングリコールを伴うポリメタクリル酸である、請求項1記載の方法。前記粘度生成剤が、ヒドロキシプロピルメチルセルロースを伴うポリアクリル酸である、請求項1記載の方法。前記粘度生成剤が酢酸フタル酸水素セルロースラテックスである、請求項1記載の方法。前記粘度生成剤がアルギン酸ナトリウムである、請求項1記載の方法。前記粘度生成剤が逆熱硬化性ゲルである、請求項1記載の方法。前記粘度生成剤がポロキサマーである、請求項9記載の方法。前記粘度生成剤がポロキサミンである、請求項9記載の方法。前記製剤が、抗炎症剤、麻酔薬、接着促進物質、透過促進剤もしくは浸透促進剤、生体接着剤、吸湿剤、耳垢軟化剤、または保存剤をさらに含む、請求項1記載の方法。前記哺乳動物がヒトである、請求項1記載の方法。前記哺乳動物がげっ歯動物である、請求項1記載の方法。約06μgmlより高いレベルを少なくとも約24時間維持するのに十分な量の前記モキシフロキサシンが中耳液に送達される、請求項1記載の方法。製剤と該製剤を鼓膜に適用することを指示する取り扱い説明書とを含むキットであって、該製剤が水性であり、かつ粘度生成剤およびモキシフロキサシンまたはその塩を含み、該製剤が流動性であり、かつ100000cps未満の粘度を有し、かつ、該製剤が、該鼓膜への適用後に、該製剤を該鼓膜に接触した状態で維持するのに十分な降伏応力を有するゲルを形成し、該製剤が、該モキシフロキサシンが該鼓膜を通過して中耳腔内に移動することを可能にする、キット。前記粘度生成剤がジェランである、請求項16記載のキット。前記粘度生成剤が、アクリル酸ナトリウムとnNアルキルアクリルアミドとを伴うNイソプロピルアクリルアミドである、請求項16記載のキット。前記粘度生成剤が、ポリエチレングリコールを伴うポリアクリル酸である、請求項16記載のキット。前記粘度生成剤が、ポリエチレングリコールを伴うポリメタクリル酸である、請求項16記載のキット。前記粘度生成剤が、ヒドロキシプロピルメチルセルロースを伴うCARBOPOLである、請求項16記載のキット。前記粘度生成剤が酢酸フタル酸水素セルロースラテックスである、請求項16記載のキット。前記粘度生成剤がアルギン酸ナトリウムである、請求項16記載のキット。前記粘度生成剤が逆熱硬化性ゲルである、請求項16記載のキット。前記粘度生成剤がポロキサマーである、請求項24記載のキット。前記粘度生成剤がポロキサミンである、請求項24記載のキット。抗炎症剤、麻酔薬、接着促進剤、透過促進剤もしくは浸透促進剤、生体接着剤、吸湿剤、耳垢軟化剤、または保存剤をさらに含む、請求項16記載のキット。詳細な説明全体として、本発明は、モキシフロキサシンおよび1種または複数種の粘度生成剤を含む組成物を用いて、耳にモキシフロキサシンを適用するための方法を提供する。具体的には、組成物は、それらが液体様状態、すなわち流動性の形態で鼓膜の外側上皮表面に送達され得るように製剤化される。しかしながら、投与後、組成物は、鼓膜と接触したままとなるように固体様状態に転換する。結果として、組成物は鼓膜に接触した状態で局在したままとなり、モキシフロキサシンは鼓膜を通過して、例えば中耳腔内に移動して、中耳および内耳の障害を治療するためのより有効な方法を提供し得る。また、適切な組成物は、例えば、鼓膜への製剤の付着を促進するため、かつまたは鼓膜の透過性を上昇させ、それによってモキシフロキサシンの浸透を増加させるために、他の構成成分を含んでもよい。中耳炎に関連付けられている一般的な病原体には、肺炎連鎖球菌、インフルエンザ菌、およびモラクセラカタラーリスが含まれる。これらの生物はモキシフロキサシンに感受性でありそれぞれMIC90値は013μgml、006μgml、および006μgmlである。当業者によって理解されている通り、MIC90とは、90の生物の増殖を阻害するのに必要とされる最小発育阻止濃度を意味する。本明細書において説明するモキシフロキサシンの経鼓膜送達を用いた治療目標は、MIC90値の10倍より高い中耳液レベルを達成し、このレベルを24時間より長く維持することである。これらの標的濃度は、本明細書において説明するモキシフロキサシンゲル製剤を1回適用することによって達成された。本発明の組成物は、25°Cで100000センチポアズ未満の粘度を有する。粘度とは、流動に対する組成物の抵抗を指す。典型的には、ツベルクリン用1mL容シリンジに取り付けられた19ゲージ針を、25°Cで、適度な力によって機械的装置の助けを借りずに1分未満で通過できる体積05mLの組成物の粘度は100000cps未満である。組成物の粘度は、市販の粘度標準物を用いて較正した粘度計によって測定することができる。また、本発明の組成物は、鼓膜に接触した状態で製剤を維持するのに十分な最小降伏応力を有する。降伏応力とは、固体材料に加えられた場合に、応力をそれ以上増大させなくても固体材料が変形し続ける液体様の挙動を固体材料に示させる力の量を意味する。本発明の組成物の最小降伏応力は、適用されるゲルの厚さに依存するが、ゲルの形状寸法および環境の温度には依存しない。本明細書において使用される場合、組成物の最小降伏応力は、厚さ4mmおよび密度1gLの適用されたゲルに関するものである。降伏応力は、σ0ρghとして表され、式中、ρは密度であり、gは重力による加速度であり、hは層の厚さである。典型的には、最小降伏応力は約39パスカルである。また、本明細書において説明する方法は、鼓膜に接触した状態で維持されるのに十分な降伏応力を組成物が有するかどうかを推定するために用いることもできる。例えば、試験組成物をチンチラなどの動物の耳に投与することができ、その動物の耳をモニターして、より固体様の状態にその組成物が転換し、鼓膜に接触した状態で維持されるかどうかを判定することができる。例えば、本明細書の実施例のセクションを参照されたい。粘度生成剤本明細書において使用される場合、粘度生成剤とは、流体の粘度を上昇させるポリマーまたは他の化学的単位を意味する。適切な粘度生成剤は、本発明の組成物に含められた場合、組成物が25°Cでの液体様状態から、鼓膜と接触した後に固体様状態に転換するのを可能にし、これらは非生分解性、すなわち、哺乳動物中に天然に存在する化学物質もしくは酵素によって分解されなくてもよく、または生分解性であってもよい。組成物は、25°Cで100000cps未満の組成物粘度、および一般的に、鼓膜適用後に39Paの最小降伏応力をもたらすのに有効な量の粘度生成剤を含む。典型的には、組成物は、005~50の粘度生成剤を含む。例示的な粘度生成剤には、ジェランまたはKELCOGEN、ヒドロキシプロピルメチルセルロースを伴うCARBOPOL940、アクリル酸ナトリウムとnNアルキルアクリルアミドとを伴うNイソプロピルアクリルアミド、ポリエチレングリコールを伴うポリアクリル酸またはPEGを伴うポリメタクリル酸、酢酸フタル酸水素セルロースラテックス、アルギン酸ナトリウム、ならびに非イオン性界面活性剤、例えば可逆性温度依存性ゲル化系であるポロキサマーおよびポリオキサミンが含まれる。ジェランは、シュードモナスエロデアによって分泌される天然ポリマーの陰イオン性脱アセチル化細胞外多糖である。四糖反復単位は、1個のαLラムノース部分、1個のβDグルクロン酸部分、および2個のβDグルコース部分からなる。ジェランのインサイチューのゲル化メカニズムは、陽イオン誘導性かつ温度依存性である。ゲル化は熱可逆性である。HPMCを伴うCARBOPOL940は、pH依存性の様式においてインサイチューでゲル化する。CARBOPOLはゲル化剤であり、HPMCはゲルの粘度を高めるために使用される。アクリル酸ナトリウムとnNアルキルアクリルアミドとを伴うNiPAAmは、温度に基づく可逆的ゾルゲル転換を経ることができるターポリマーヒドロゲルである。アクリル酸ナトリウムおよびnNアルキルアクリルアミドは、ヒドロゲルの特性、特に転移温度を変更するために使用される。PEGを伴うポリアクリル酸またはPEGを伴うポリメタクリル酸は、水素結合に基づいてゲル化すると考えられている。ポリアクリル酸は、水性アルコール溶液に溶解することができ、注射された後にアルコールは拡散して、ポリマーの沈殿および溶液のゲル化を引き起こす。CAPはpH依存性の様式でゲル化するナノ粒子系である。活性化合物はポリマー粒子の表面に部分的に吸着され得る。アルギン酸ナトリウムは、カルシウムまたは他の多価イオンの存在下でゲル化する。ポロキサマーおよびポロキサミンなどの非イオン性界面活性剤は特に有用である。ポロキサマーは製薬技術分野で周知であり、例えば、PolymersforControlledDrugDelivery、第10章のIrvingRSchmolkaによるPoloxamersinthePharmaceuticalIndustryにおいて説明されている。ポロキサマーは、2種の異なるポリマーブロックブロックおよび疎水性ポリブロックから構成され、これらがポリポリポリというトリブロックとして配置されるため、トリブロックコポリマーである。ポロキサマーは、プロピレンオキシドブロック疎水性物質およびエチレンオキシド親水性物質を有するブロックコポリマー界面活性剤の一クラスである。ポロキサマーは市販されているポリオールがBASFCorporationから入手可能である。あるいは、公知の技術によってポロキサマーを合成することもできる。これまで、ポロキサマーの非生分解性、水溶性、および比較的急速な薬物放出動態を考慮すれば、ポロキサマーには薬理学的作用物質を投与するための有用性がないと考えられていた。それでもなお、本明細書において説明する通り、ポロキサマーは製剤を鼓膜に適用するために有利な特性を有する。ポロキサマーの水性調合物は逆熱ゲル化または逆熱硬化性を示す。ポロキサマー水性調合物をそのゲル化温度より高い温度に加熱した場合、その粘度は上昇し、ゲルに転換する。ポロキサマー水性調合物をそのゲル化温度より低い温度に冷却した場合、その粘度は低下し、液体に転換する。ゲルと液体の転移は、調合物の化学組成の変化を伴わず、可逆的かつ反復可能である。ポロキサマー水性調合物のゲル液体転移温度は、日常的な実験法を用いて当業者が調節することができる。いくつかの態様において、組成物は、周囲温度よりも高く、かつ鼓膜の温度以下であるゲル化温度を有する。このような組成物は、個体の外耳道を介して液剤として簡便に適用することができ、次いで、鼓膜に接触してゲルに転換し、それによって、製剤中のモキシフロキサシンを鼓膜の極めて近くで維持することができる。モキシフロキサシンまた、本明細書において説明する組成物は、モキシフロキサシンまたはその塩も含む。モキシフロキサシンは、化学式C21H24FN3O4で表される第三世代合成フルオロキノロンである。モキシフロキサシンは、細菌酵素DNAギラーゼおよびトポイソメラーゼIVに結合して阻害し、その結果、DNAの複製および修復を阻害し、最終的に、感受性細菌種の細胞死をもたらす。本明細書において説明する組成物中のモキシフロキサシンまたはその塩の量は、約01~約50の範囲でよい。モキシフロキサシンの塩には、例えば、非限定的に、塩酸、硫酸、酢酸、乳酸、水酸化ナトリウム、および水酸化カリウムが含まれる。モキシゲル組成物の他の構成成分いくつかの態様において、本明細書において説明する組成物は、粘度生成物質およびモキシフロキサシンに加えて1種または複数種の化合物を含む。例えば、組成物は、例えば、アドレノコルチコイド、鎮痛薬、鎮痛補助薬、鎮痛麻酔薬、麻酔薬、モキシフロキサシン以外の抗生物質、抗菌薬、抗感染薬、抗生物質治療補助薬、解毒薬、制吐薬、抗真菌薬、抗炎症薬、抗めまい薬、抗ウイルス薬、生物学的応答調節物質、細胞障害性物質、診断助剤、免疫化剤、免疫調節薬、タンパク質、ペプチド、および耳障害の治療に有用であり得る他の作用物質を含む、1種または複数種の薬理学的作用物質を含んでよい。モキシフロキサシンに加えて、本明細書において説明する組成物は、1種または複数種の薬理学的作用物質を含んでよい。例えば、細菌感染と戦うため、組織炎症を軽減するため、および刺激を緩和するために、組成物は、モキシフロキサシン、抗炎症薬、および麻酔薬または鎮痛薬を含んでよい。当業者は、薬理学的作用物質を特定し、所望の効果を実現するために必要とされるようにそれらを組み合わせることができる。以下は、可能性のある薬理学的作用物質の代表的なリストを提供するにすぎない。例示的なアドレノコルチコイドには、ベタメタゾン、コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、パラメタゾン、プレドニゾロン、プレドニゾン、およびトリアムシノロンが含まれる。例示的な鎮痛薬には、アセトアミノフェン、アスピリン、ブプレノルフィン、ブタルビタール、ブトルファノール、コデイン、デゾシン、ジフルニサル、ジヒドロコデイン、エトドラク、フェノプレフェン、フェンタニル、フロクタフェニン、ヒドロコドン、ヒドロモルホン、イブプロフェン、ケトプロフェン、ケトロラク、レボルファノール、サリチル酸マグネシウム、メクロフェナマート、メフェナム酸、メペリジン、メプロバマート、メサドン、メトトリメプラジン、モルヒネ、ナルブフィン、ナプロキセン、オピウム、オキシコドン、オキシモルホン、ペンタゾシン、フェノバルビタール、プロポキシフェン、サルサラート、およびサリチル酸ナトリウムが含まれる。1つの例示的な鎮痛補助薬は、カフェインである。例示的な麻酔薬には、アルチカインエピネフリン、ブピバカイン、クロロプロカイン、エチドカイン、ケタミン、リドカイン、メピバカイン、メトヘキシタール、プリロカイン、プロポフォール、プロポキシカイン、テトラカイン、およびチオペンタールが含まれる。1つの例示的な鎮痛薬麻酔薬は、アンチピリンベンゾカインである。例示的な抗生物質、抗菌薬、および抗感染薬には、スルホンアミド、トリメトプリムスルファメトキサゾール、キノロン類、ペニシリンまたはセファロスポリンなどのβラクタム系抗生物質、アミノグリコシド系、ゲンタマイシンC、アミカシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、ストレプトマイシン、またはバンコマイシン、テトラサイクリン系、クロラムフェニコール、およびマクロライド系が含まれる。適切なペニシリンの非限定的な例には、ペニシリンG、ペニシリンV、メチシリン、オキサシリン、ナフシリン、アンピシリン、およびアモキシシリンが含まれる。適切なセファロスポリンの非限定的な例には、セファロチン、セフジニル、セファゾリン、セファレキシン、セファドロキサル、セファマンドール、セフォキシチン、セファクロル、セフォニシド、セフォレタン、セフォタキシム、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフジトレン、およびセフェピムが含まれる。OMを治療するのに有用である例示的な抗生物質には、アモキシシリンおよびアモキシシリンクラブラン酸などのペニシリンエリスロマイシンスルフイソキサゾール、トリメトプリムスルファメトキサゾール、TRAなどスルホンアミド類をベースとする組合せアジスロマイシンまたはクラリスロマイシンなどのマクロライド系アザライドセファクロル、セフプロジル、セフロキシムアキセチル、またはロラカルベフなどの第二世代セファロスポリンならびにセフジニル、セフィキシム、セフポドキシムプロクセチル、セフチブテン、セフジトレン、およびセフトリアキソンなどの第三世代セファロスポリンが含まれる。好適な制吐薬には、ブクリジン、クロルプロマジン、シクリジン、ジメンヒドリナート、ジフェンヒドラミン、ジフェニドール、ドンペリドン、ドロナビノール、ハロペリドール、ヒドロキシジン、メクリジン、メトクロプラミン、ナビロン、オンダンセトロン、ペルフェナジン、プロクロルペラジン、プロメタジン、スコポラミン、チエチルペラジン、トリフルプロマジン、およびトリメトベンザミンが含まれる。例示的な抗真菌薬には、アムホテリシンB、クリオキノール、クロトリマゾール、フルコナゾール、フルシトシン、グリセオフルビン、ケトコナゾール、ミコナゾール、およびヨウ化カリウムが含まれる。例示的な抗炎症剤には、酢酸アルミニウム、アスピリン、ベタメタゾン、ブフェキサマク、セレコキシブ、デキサメタゾン、ジクロフェナク、エトドラク、フルルビプロフェン、ヒドロコルチゾン、インドメタシン、サリチル酸マグネシウム、ナプロキセン、プレドニゾロン、ロフェコキシブ、サルサラート、スリンダク、およびトリアムシノロンが含まれる。適切な例示的抗めまい剤には、ベラドンナ、ジメンヒドリナート、ジフェンヒドラミン、ジフェニドール、メクリジン、プロメタジン、およびスコポラミンが含まれる。適切な例示的抗ウイルス剤には、アシクロビル、アマンタジン、デラビルジン、ジダノシン、エファビレンツ、ホスカルネット、ガンシクロビル、インジナビル、ネルフィナビル、リバビリン、リトナビル、ザルシタビン、およびジドブジンが含まれる。例示的な生物学的応答調節物質には、アルデスロイキン、インターフェロンα2a、インターフェロンα2b、インターフェロンαn1、インターフェロンαn3、インターフェロンγ、およびレバミソールが含まれる。例示的な細胞障害剤には、ポドフィロックスおよびポドフィルムが含まれる。例示的な免疫化剤には、インフルエンザウイルスワクチン、多価肺炎球菌ワクチン、および免疫グロブリンが含まれる。例示的な免疫調節薬は、インターフェロンγである。本発明に適する他の薬理学的作用物質には、ベタヒスチン、プロクロルペラジン、およびヒヨスチンが含まれる。その代わりにまたは追加的に、組成物は、次の化合物の内の1種または複数種を含んでよい生理食塩水などの溶剤または希釈剤、生体接着剤、透過促進剤もしくは浸透促進剤、吸湿剤、耳垢軟化剤、保存剤、または他の添加剤。このような化合物は、001~99の範囲の量で組成物中に存在することができる。例えば、組成物は、1種または複数種の粘度生成剤F-127およびCARBOPOL、モキシフロキサシン、および1種または複数種の透過促進剤もしくは浸透促進剤を含んでよい。他の態様において、組成物は、1種または複数種の粘度生成剤、モキシフロキサシン、および1種または複数種の耳垢軟化剤を含んでよい。また、組成物は、1種または複数種の粘度生成剤、モキシフロキサシン、1種または複数種の吸湿剤、および1種または複数種の保存剤を含んでもよい。ある種の作用物質は製剤内で様々な役割を果たし得ることに留意されたい。例えば、CARBOPOLは、その濃度によって、粘度生成剤としてまたは生体接着剤として機能することができる。ビタミンEは、透過促進剤または浸透促進剤、保存剤、および抗酸化剤として機能することができる。生体接着剤は、鼓膜への組成物の接着を促進する。適切な生体接着剤には、親水コロイド、例えば、アラビアゴム寒天アルギナートCABOPOLカルボキシメチルセルロースナトリウムカルボキシメチルセルロースカルシウムデキストランゼラチングアーゴムヘパリンヒアルロン酸ヒドロキシエチルセルロースカラヤゴムメチルセルロースペクチンポリアクリル酸ポリエチレングリコールポリNビニル2ピロリドンおよびトラガカントゴムが含まれる。透過促進剤または浸透促進剤は、鼓膜の透過性を増大させて、モキシフロキサシンに対する鼓膜の透過性を高める。例示的な透過促進剤または浸透促進剤には次のものが含まれるアルコール多価アルコールスルホキシドエステル、およびカプリン酸カプリル酸トリグリセリドケトンアミドオレアート界面活性剤アルカン酸ラクタムアルカノールジアルキルアミノアセタート多価不飽和脂肪酸オレイン酸タラ肝油メントール誘導体スクアレン直鎖状飽和脂肪アルコールから誘導されたグリセロールモノエーテルフラボンビタミンEならびにそのエステルおよび類似体ならびにセンキュウエーテル抽出物。フルクトース、フタル酸、およびソルビトールなどの吸湿剤によって、流体が中耳から鼓膜を通過してゲルマトリックス中に移動するのが容易になる。吸湿剤は、中耳での流体蓄積および加圧に関連する疼痛を緩和するのに寄与することができ、中耳内でモキシフロキサシンをより小さな流体体積に濃縮することができる。耳垢軟化剤によって、鼓膜と組成物との接触が促進される。アスコルビン酸および安息香酸などの抗酸化剤または他の保存剤は、保管期間中の製剤の貯蔵寿命を延長するために使用され得る。鼓膜への組成物の適用方法本発明の組成物は、例えば、中耳障害または内耳障害を治療するために、外耳道を介して鼓膜の上皮表面に適用することができる。また、本発明の組成物は、予防的に適用することもできる。組成物は、鼓膜の下方部分である緊張部または鼓膜の上方部分である弛緩部を含む、鼓膜の任意の部分を標的とすることができる。ヒト成人において、鼓膜は直径約9~10mmであり、厚さは30~230μmの範囲である。ヒトならびに動物、例えば、ネコ、モルモット、およびチンチラでは、弛緩部が占めるのは鼓膜面積の3未満である。他の哺乳動物では、弛緩部は、鼓膜面積の10~25を占める。薄い上皮層がヒト鼓膜を覆い、厚い上皮層がヒト身体の他の領域を覆っている。5~10層の細胞層が弛緩部を覆っているのに対し、3~5層の細胞層が緊張部を覆っている。したがって、緊張部は鼓膜の他の部分より薄いことが多く、モキシフロキサシンまたは別の薬理学的作用物質に対して、より高い透過性を有し得る。緊張部の中央部分が、音に応答する活発な振動領域を提供することは当業者によって理解されるであろう。当技術分野において公知である任意の方法が、本発明の組成物を鼓膜に適用するために使用され得る。例えば、液体分配器具を用いて、組成物を鼓膜に適用することができる。典型的には、分配器具は、導水管と連結された貯蔵器を有し、この導水管が、貯蔵器から直接的または間接的に流動性組成物を受け取り、その組成物を分配出口へと送る。当業者は、日常的なこととして、柔軟な管に連結されたシリンジから簡単な分配器具を作製することができる。分配器具はまた、CDTSpeculumなどの鼓室穿刺器具の針を流体導水管と交換することによって作製することもできる。分配器具は、組成物を鼓膜に適用するための正確なプラットホームを作るために、気密耳鏡または診断用耳鏡のヘッド製に取り付けることができる。組成物および中耳障害または内耳障害に応じて、モキシフロキサシンが鼓膜を通過して移送された後に、組成物を耳から除去することが望ましい場合がある。これは、綿棒またはピンセットを用いて手作業で遂行することができる。また、シリンジまたはピペットバルブを用いて水、生理食塩水、または他の生体適合性水溶液を注入して、製剤を柔らかくし、溶解させ、かつまたは洗い流すこともできる。他の態様において、組成物は、一定期間後に鼓膜から単にはげ落ち、耳から落ちる場合がある。あるいは、生分解性製剤は、耳から除去する必要がない場合がある。製造品本明細書において説明する組成物は、包装資材と組み合わせ、製造品またはキットとして販売することができる。製造品を製造するための構成要素および方法は周知である。製造品は、本明細書において説明する1種または複数種の組成物を組み合わせてよい。さらに、製造品は、1種または複数種の薬理学的作用物質、滅菌水もしくは生理食塩水、薬学的担体、緩衝剤、または液体分配器具をさらに含んでもよい。内耳障害または中耳障害の治療のために組成物をどのように耳に送達できるかを説明したラベルまたは取扱い説明書を、このようなキットに含めてよい。1回または複数回の投与に十分な量の組成物が、事前に包装された形態で提供され得る。本発明を以下の実施例においてさらに説明するが、これらの実施例は特許請求の範囲に記載する本発明の範囲を限定しない。実施例1-化学物質および試薬塩酸モキシフロキサシン粉末は、AlconLabsIncによって提供された。PluronicF127、塩酸シプロフロキサシン、ウシアルブミン、ギ酸、ミリスチン酸イソプロピル、および一塩基性リン酸アンモニウムは、SigmaAldrichから購入した。次の化学物質を購入し、受領したままの状態で使用したBurdickandJacksonLaboratoriesまたはFisherScientificからアセトニトリルおよびメタノールMallinckrodtIncから塩化ナトリウムUnitedStatesBiochemicalから二塩基性リン酸ナトリウム、七水和物FisherScientificから一塩基性リン酸ナトリウムUniversityofMinnesotaからプロピレングリコールRugerChemicalCoIncからPEG4000およびPEG6000。溶媒はHPLCグレードであり、他の化学物質はすべて分析用グレードであった。実施例2-微小透析プローブCMA20微小透析プローブを用いて、中耳液の透析液試料を得た。プローブのポリカーボネート膜の分子量カットオフ値は20000ダルトンである。プローブの透析膜の長さは10mmであった。プローブ膜の外径は05mmであった。実施例3-人工中耳液エウスタキオ管閉塞を患っている非感染チンチラにおいて蓄積する漿液状中耳液の体積は、大きく異なる。微小透析法のために十分なMEFを蓄積する成功比率は、50をかなり下回る。MEFを再現する人工中耳液を調製することが必要となった。外耳にゲル製剤を投薬するために、プローブ埋め込み直前に、リン酸緩衝化生理食塩水溶液を3ウシアルブミンと共にチンチラ中耳鼓胞中に滴下注入した。実施例4-モキシフロキサシンの逆透析較正物質としてのシプロフロキサシンの検証シプロフロキサシンは、モキシフロキサシンの化学的類似体であり、どちらもキノロン系抗生物質である。シプロフラキシンの物理的特性および化学的特性は、モキシフロキサシンのものにいくらか類似している。したがって、有望な逆透析較正物質としてこれを選択した。インビトロのAMEF中への同時消失研究を灌流速度04μl分、05μl分、06μl分、および07μl分で実施し、10分間隔で透析液を回収した。灌流液は、1μgmlのモキシフロキサシンおよびシプロフロキサシンを含んだ。透析液中濃度と灌流液中濃度の比を1から引くことによって、各化合物の消失を測定した。4種の流速すべてにおいて、モキシフロキサシンのインビトロでの消失がシプロフロキサシンの消失と有意に異ならないことが判明して、微小透析較正物質としてのシプロフロキサシンの有用性が確認された。実施例5-人工のおよび保温されたチンチラ中耳液中のモキシフロキサシンの遊離率の測定以前の施設内研究により、人工中耳液は、チンチラ中耳中に滴下注入後18~24時間目に天然MEFに似始め、細菌増殖を助けることが示された。遊離率を測定するために、前日のAMEF滴下注入後に体液を中耳から採取し、この体液を、保温された中耳液と呼んだ。AMEFおよびIMEF中のモキシフロキサシンのタンパク質結合を限外ろ過によって測定した。本研究は、生理的温度で、名目上の濃度220μgmlおよび492μgmlを用いて実施した。添加されたAMEF溶液またはIMEF溶液の分取物120μlずつをMicroconCentrifugalDeviceの先端部分に入れ、2000×gで15~20分間、ClayAdamsTriac0200スインギングバケットローター遠心機を用いて遠心分離した。Microcon装置へのモキシフロキサシンの非特異的結合がもしあるならばその程度を検査するために、同じ薬物濃度をリン酸緩衝化生理食塩水に添加し、MEF分取物と同様に装置を用いて遠心分離した。MEF中の総濃度に対する限外ろ過液中の濃度の比率を、モキシフロキサシンの遊離率として算出した。実施例6-製剤開発基剤調合物PluronicF127を、熱硬化性ゲル基剤を形成させるためのポリマーとして選択した。PF127は、低温では水に溶解して溶液を形成し、温度がゾルゲル転移温度より高くなるとゲル化する。PF127溶液は室温では極めてよく流動し、適用された表面の輪郭をたどる。研究した最初の調合物は、20PF127水溶液からなる。PF127溶液は、低温法によって調製した。計量したPF127を、必要量の冷水にゆっくりと加え、穏やかに撹拌し、4°Cで一晩保存して、ポリマーを完全に水和および溶解させた。転移温度の測定最終調合物の少量の分取物を微量遠心分離チューブに移した。次いで、室温の水浴中でチューブをインキュベートした。水浴の温度を徐々に上昇させた。微量遠心分離チューブ中のゲル溶液のメニスカスが、90度またはそれ以上の角度に傾けられてもゆがまない場合、ゲル化が起こっていると考えた。転移温度は、ゲル化が起こる前後の2つの温度値とみなした。基剤調合物の転移温度は22~23°Cであった。最終調合物のための目標転移温度は28°C~32°Cの間であった。添加剤いくつかの添加剤を試験して、ゲルの転移温度および他の特性に対するそれらの影響を評価した-これらには、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール4000、PEG6000、およびミリスチン酸イソプロピルが含まれる。PEG6000およびエタノールのみが、ゲル基剤の転移温度を有意に上昇させることが判明した。表1および表2は、20PF127溶液の転移温度に対するPEG6000およびエタノールの影響を示す。表1様々な濃度のPEG6000を含む20PF127溶液の転移温度表2様々な濃度のアルコールおよび2PEG4000を含む20PF127溶液の転移温度より高濃度のPF127も試験したが、これらの調合物は、完全に水和するのに長い期間がかかり、粘度が高いために取り扱いが困難であった。また、これらは室温よりもはるかに低い転移温度を示し、その範囲は、基剤ゲルの場合の零下温度から、22ゲルの場合のPEG6000添加後10°C未満、および21ゲルの場合の23~24°Cまでであった。開発された最も有望な基剤ゲル調合物は、転移温度が23~24°Cであり、室温での流動性が良好であり、以下の組成を有する。PEG60002プロピレングリコール20PF127202種類のレベルの塩酸モキシフロキサシンおよび3を基剤ゲル中に混合した。1モキシゲルは、明るい黄色の清澄な溶液であるのに対し、3モキシゲルは、黄色の液体中に白色粉末が分散した希薄な懸濁液である。どちらのモキシゲルも、29~31°Cの転移温度範囲を最終的に示す。1回分の1モキシゲル10mlを調製するために、以下の手順を確立した。1シンチレーションバイアルに、PEG6000水溶液50mlを添加する。2プロピレングリコール20mlを添加する。3塩酸モキシフロキサシン100mgをゆっくりと添加する。4この混合物を3~5分間超音波処理する。5水13mlを添加する。6PF1272グラムを添加する。7シンチレーションバイアルを穏やかに回転させてPF127粉末を湿らせる。8この混合物を冷蔵庫中で一晩保管して完全に水和させる。かつ、9使用する前に溶液を入念にボルテックスする。塩酸モキシフロキサシン300mgを添加し、11mlの水しか必要とされないことを除いては、3モキシゲルを調製するための手順は1モキシゲルのための手順とほぼ同一である。インビトロの放出研究モキシフロキサシンのインビトロでの放出を研究する目的は、ゲル製剤からの放出の速度および程度を測定することであった。各放出研究のために、フランツ型拡散セルをHansonMicroette装置にセットアップした。レシーバー区画を80mlの放出媒体、すなわち水に溶かし250rpmで磁気撹拌した15PF127で満たした。水循環ジャケットで各フランツ型セルの下側部分を取り囲んで、温度を37°Cで維持した。セルロース透析膜シート、MWカットオフ値6kD、BelArtProductsPequannockNJUSAを小さな円形に切り、各レシーバー区画の上部に載せた。ドーナツ形のTeflonディスクを膜の上に置いて、ドナー区画を作った。次いで、各モキシフロキサシンゲル調合物の分取物350μlを投薬区画に添加した。フランツ型セルを密閉する前に待ち時間5分を与えて、完全なゲル形成を徹底させた。試料アームをフィルムで覆って、蒸発を防止した。ゲル投与後05時間、1時間、2時間、3時間、4時間、6時間、12時間、24時間、36時間、48時間、60時間、72時間、84時間、および96時間目にレシーバー区画から各試料40μlを取り出した。これらの試料は、分析するまで20°Cで保存した。インビトロ試料中のモキシフロキサシン濃度は、本明細書において概説する通りに、オフラインのHPLC蛍光法によって測定した。各試料の分取物10μlにリン酸緩衝化生理食塩水125μlを添加して、検量線試料と同じ体積にした。次いで、移動相を用いて最終体積50mlに希釈する前に、内部標準を添加した。005~200μgmlのモキシフロキサシン標準試料を、1000μgml、100μgml、10μgml、および1μgmlのPBS中標準原液から調製した。移動相を用いて最終体積50mlに希釈する前に、内部標準の65μl、15PF12710μl、および様々な体積のPBSを各検量線試料に添加して、インビトロ試料と同じ体積にした。この混合物を高速で30秒間ボルテックスした。注入体積は50μlであった。実施例7-手術動物390~670gの雄のチンチララニガーを本研究で使用した。プロトコールは、ミネソタ大学の研究機関の動物管理使用委員会によって承認された。エウスタキオ管閉塞ETO処置の目的は、微小透析の実施中、適切な体液が鼓胞中に確実に残存するように、人工中耳液が鼻咽頭中に排出するのを防止することである。ガッタパーチャポイントDiaDentGroupInternationalIncKoreaの中央部分を長さ4mmに切断し、エウスタキオ管を閉塞させるために使用した。ETO手術は、Jossartらに従い、改良して実施した。簡単に説明すると、ケタミンおよびペントバルビタールで動物を麻酔した。次いで、軟口蓋を小さく切開してエウスタキオ管を露出させた。各エウスタキオ管の開口部を、ポイントの4mm切片を用いて閉塞させた。手術の最後に、組織接着剤3MStPaulMNを用いて、切開部を閉じた。人工中耳液の滴下注入各鼓胞中への人工中耳液の滴下注入を、微小透析プローブ埋め込みに先立って投薬日に実施した。チンチラの中耳腔へは、頭蓋の背中側にある頭方向の鼓胞を介して接近した。15GA112B皮下注射針を用いて、骨が薄い右鼓胞と左鼓胞の頂端に手作業で小さな穴をあけた。最上部まで完全に満たされるまで、PE50管の長さによって各鼓胞中に十分なAMEFを滴下注入した。耳鏡を用いて、鼓膜の完全性を検査した。外耳道中へのAMEF漏出の証拠がある耳には投薬しなかった。微小透析プローブの埋め込みAMEF滴下注入後すぐに、微小透析プローブを埋め込んだ。チンチラの中耳腔へは、頭方向の鼓胞における同じ穴を介して接近した。次いで、その穴から、CMA20微小透析プローブを慎重に各中耳腔中に挿入した。Huangらによって開発された方法に従い、歯科用セメントおよびアンカー針によって固定されたプラスチック製かぶせものを用いて、これらのプローブをチンチラの頭蓋に固定した。実施例8-分析方法微小透析液中のモキシフロキサシンおよびシプロフロキサシンのオンラインHPLCMSMS分析オンラインの微小透析HPLCMSMSシステムを確立した。微小透析の灌流流速は、1ml容マイクロシリンジ、25ml容マイクロシリンジ、または5ml容マイクロシリンジを取り付けたHarvard製マイクロインジェクションポンプを用いて制御した。シーケンスプログラマーによって制御される10ポート弁本体の2つの10μl試料ループまたは25μl試料ループ中に、両耳からの微小透析液を交互に採取した。05μl分の微小透析灌流流速を本研究において使用した。HPLCカラムは、YMCJsphereM804μm逆相カラムであった。移動相は、01ギ酸水溶液およびアセトニトリルからなり、流速は01ml分であった。カラムの性能は時間とともに変化するため、異なる割合のアセトニトリルを用いて、カラム温度を40°Cで維持しつつピーク形状および保持時間を最適化した。Valco製オンライン試料採取システムと接続して機能させるためにShimadzu10AHPLCシステムを使用した。これは、LC10ADvpポンプ、SIL10Aシステムコントローラー、CTO10Aカラムヒーター、FCV10ALvpプロポーショナー、およびDGU14A脱ガス装置からなる。HPLC溶出液は、PESciexAPI365三重四重極MSMS質量分析計のTurboIonSpray供給源に入る。検出は、親プロダクトイオン対に関する多重反応モニタリングモードにおいて、モキシフロキサシンに対しては4025~3582で、逆透析較正物質であるシプロフロキサシンに対しては332~288で実施した。各実験に使用した濃度範囲は、中耳液透析液において観察された濃度によって様々であった。使用した最低標準濃度は01μgmlであったのに対し、最高は118μgmlであった。標準濃度範囲が広くなるにつれて、わずかに非線形性になると思われ、濃度上昇の際のシグナル増大は比例未満であった。この問題を解決するために、均一な重み付けを用いて線形回帰を実施する前に、シグナルと標準濃度の両方に対数変換を適用した。微小透析液中のモキシフロキサシンおよびシプロフロキサシンのオンラインHPLC蛍光分析生産性を改善するために、複数の動物実験を同時に行うのを可能にし、かつ機器の不備が発生した場合にバックアップとしての機能を果たすように、追加のオンラインアッセイ法を開発した。このアッセイ法は、励起波長295nmおよび発光波長490nmでの蛍光検出の使用を伴った。YMCODSA5μm、120Aカラムを、リン酸アンモニウムおよびアセトニトリルの移動相組成ならびに流速05ml分で使用した。モキシフロキサシンの場合は74分およびシプロフロキサシンの場合は36分の保持時間を実現するために、45°Cのカラム温度を使用した。蛍光検出器は、ShimadzuRF535またはJasco821FPのいずれかであった。オンラインシステムの他の構成要素および装備は、本明細書において概説したものと同一である。このアッセイ法のために使用した標準濃度範囲は、01~205μgmlであった。このアッセイ法の応答シグナルには非線形性は全くないと思われたが、傾きおよびy切片を求めるために線形回帰をする前に、一貫性を持たせるためにシグナルおよび標準濃度の対数変換を実施した。オンラインHPLCMSMSおよびオンラインHPLC蛍光によるモキシフロキサシン中耳液微小透析試料の分析の精度および正確度中耳液の微小透析液中のモキシフロキサシンに関する両方のアッセイ法の精度および正確度を、検量線を読み返すことによって評価した。典型的には、05~100μgmlの濃度範囲の6個の標準物質をオンラインHPLCMSMSアッセイ法で使用した。05~50μgmlの範囲における正確度は96~105の範囲と算出された。100μgmlの場合の正確度は91であったことから、この範囲では微小透析液レベルの測定に少しの下向き傾向があることが示された。精度は、HPLCMSMS検量線の全範囲において11~62の範囲であった。典型的には、01~200μgmlの濃度範囲の5個または6個の標準物質をオンラインHPLC蛍光アッセイ法で使用した。検量線の全範囲における正確度は98~102の範囲と算出された。精度は、05~200μgmlの範囲において03~36の範囲であり、01μgmlの場合は133であった。中耳液試料中およびインビトロ放出試料中の総濃度および未結合濃度についてのアッセイ法タンパク質結合研究試料中およびインビトロ放出試料中のモキシフロキサシン濃度を、蛍光検出を用いるHPLCによって測定した。構成要素およびクロマトグラフィー条件は、本明細書において概説したものと同様であった。インビトロ放出試料の処理は、本明細書において概説したとおりであった。タンパク質結合研究試料に対して、3つの個別の検量線を使用した。1つは限外ろ過液試料およびPBS試料のためのものであり、他の2つは、AMEF試料およびIMEF試料中の薬物総濃度をそれぞれのブランクマトリックスを用いて測定するためのものであった。分析用に50μl分取物を採取する前に、添加されたPBS、AMEF、およびIMEF中の濃度が最も高い試料は対応するブランクマトリックスで3倍に希釈し、最高濃度群に由来する限外ろ過液はPBSで2倍に希釈した。標準試料を含む全試料に、内部標準を添加した。各試料にアセトニトリル200μlを添加して、タンパク質を沈殿させた。次いで、これらの試料をボルテックスし、2000×gで10分間遠心分離した後、ろ過した20mM一塩基性リン酸アンモニウム300μlに上清100μlを添加して、最終試料が移動相に似るようにした。注入体積25μlを使用した。実施例9-鼓胞内投薬研究これらの研究は、デコンボリューション解析で使用するための単位インパルス応答関数を決定するために実施した。このために、中耳中のモキシフロキサシン初期濃度および半減期を、鼓胞内ボーラス投薬研究から推定した。鼓胞内投薬に先立って、動物はすべて、本明細書において概説したエウスタキオ管閉塞処置を受けた。用量を投与し、微小透析プローブを埋め込む間は、ケタミンおよびペントバルビタールでチンチラを麻酔したが、実験の残り期間は麻酔から回復させた。2種の用量レベルを目標に定めた。本明細書において説明する手順を用いて、モキシフロキサシン50μgおよび150μgのボーラス用量をAMEF1mlに溶かして中耳中に直接送達した。4~5半減期の間、HPLCMSMSまたはHPLC蛍光と一緒に微小透析を用いて、各耳の未結合モキシフロキサシン濃度を、投薬後最長845分まで20分毎にモニターした。実施例10-外耳ゲル製剤投薬研究投薬の1日前に、動物は両側の耳にエウスタキオ管閉塞手術を受けた。ティンパノメトリーにおいて負の圧力測定値を示している動物は、エウスタキオ管の閉塞が成功していることを示した。投薬当日にETOを受けたチンチラの場合、ティンパノメトリーは行わなかった。AMEF滴下注入、プローブ埋め込み後、かつ投薬前に、耳鏡を用いて鼓膜の完全性を視覚的に検査した。鼓膜に欠陥が生じている耳には投薬しなかった。投薬日に、ケタミンおよびペントバルビタールで動物を麻酔し、温熱パッド上に置いて通常体温を維持した。ティンパノメトリー後、次いでチンチラを口棒クランプ上に置いて、本明細書において概説する通りにAMEFを滴下注入しプローブを埋め込めるようにした。歯科用セメントによってかぶせものを固定した後で、動物を口クランプから取り外し、横向きに寝かせた。耳鏡を用いて、鼓膜の完全性をもう一度確認した。ツベルクリン用1ml容シリンジに取り付けられたポリエチレン管の断片を用いて、100ミリスチン酸イソプロピル50μlの形態の浸透促進剤による前処理を鼓膜に適用した。PE50管は、耳鏡の先端部を通して外耳中に進入させ、耳鏡の助けを借りて鼓膜近くに配置した。ミリスチン酸イソプロピルを耳に適用した後、タイマーを始動させ、PE50管を引き抜いた。05分、2分、5分、および20分の4回の前処理時間を含めた。前処理時間に達したら、ゲル製剤を満たしたツベルクリン用1ml容シリンジに取り付けられた別のPE管断片を、耳鏡の助けを借りて、鼓膜近くの外耳道中に進入させた。ゲル製剤は、耳鏡の先端に到達するまでゆっくりと適用した。タイマーを開始し、外側の耳介を少なくとも5分間そっと上に引っ張って製剤をゲル化させている間に、PE管および耳鏡を引き抜いた。外側の耳介を放し、反対側の耳に投薬する前に、合計10分のゲル化時間を与えた。処置の間ずっと、動物の心拍数、呼吸速度、体温、および麻酔深度を頻繁にモニターした。一方または両方の耳への投薬が完了した後、エリザベスカラーを動物にしっかりと取り付け、その後、自由に動物が動けるRaturnケージシステムの内部に動物を入れ、麻酔から完全に回復させた。中耳液微小透析液試料を各耳から20分毎に採取し、HPLCMSMSシステムまたはHPLC蛍光システムで分析するためにオンラインで注入した。実験期間の間ずっと、動物が食物および水に自由に到達できるようにした。10~14時間毎に、ブプレノルフィンおよび皮下液体補充を提供した。1モキシゲルの外耳投薬後最長5375分間および3モキシゲルの投薬後最長6180分間、中耳液微小透析液中のモキシフロキサシン濃度をモニターした。実施例11-データ解析プローブによる回収および遅延時間に関する中耳液微小透析液濃度の補正微小透析プローブを試料ループに連結する管の長さおよび微小透析灌流流速に基づいて、遅延時間を推定した。この値は、プローブ先端から試料採取ループまでの透析液移行時間に相当する。典型的な遅延時間は約45分であった。実際の試料採取時間は、10分の採取間隔の中間点であり、遅延時間に関して補正し、最も近い5分に端数を丸めた。各透析液試料について、透析液中の較正物質ピーク領域と灌流液中のそれとの比を1から引くことによって、プローブによる回収率recoveryを測定した。偏りを減らし、実験過程を通じてのプローブ性能の変化を反映するために、2点間補正法の代わりに推定値5個の移動平均を用いて、プローブによる回収に関して補正した。実際の中耳液の薬物濃度を得るために、各透析液中のモキシフロキサシン濃度を、平均プローブ回収率で割った。モキシフロキサシン濃度-鼓胞内投薬後の中耳液における時系列データ単一指数的減少に従って、データセット9個のそれぞれにおける中耳液のモキシフロキサシンレベルを分析し、その際、初期体積および消失速度定数は推定されたパラメーターであった。非線形回帰分析を用いて、1コンパートメントモデルのパラメーターを明らかにした。重み関数は変動係数5を想定し、選択された分散モデルは、フィットされた関数ではなくデータと関連していた。1モキシフロキサシン製剤および3モキシフロキサシン製剤の外耳投薬後の中耳液中モキシフロキサシン濃度の解析データの調査は、中耳液の濃度が予想よりはるかに高かったデータセットの慎重な解析を伴った。確証的な証拠により、これらが鼓膜の欠陥の結果であることが示唆された場合、そのデータセットは以降の解析から除外した。1モキシゲル適用については23個、3モキシゲル適用については13個の使用可能なデータセットがあった。その後の非コンパートメント解析およびデコンボリューション手順用にデータをビニングするために、中耳液のモキシフロキサシン濃度-時間データの時間を、最も近い10分に調整した。このビニング段階は、実際の時間から名目上の時間への10分未満の調整を要した。WinNonlinProfessionalを用いて、各中耳液の濃度データセットの非コンパートメント解析を実施した。線形台形オプションおよび線形補間オプションと共に、血管外投薬を選択した。対数回帰および均一な重み付けと共に、λzのための最適フィットオプションを選択した。以下の式の通り、外耳用量、鼓胞内投薬研究によって測定した時間0から無限時間までの曲線下面積、および中耳液からの平均消失クリアランスから、中耳液中へのモキシフロキサシンの移行程度を各データセットについて算出した。WinNonlinProfessional内でデコンボリューションを実施して、流入関数を決定した。その際、鼓胞内投薬データの解析により決定した平均分布体積および平均消失速度定数を用いて、二項単位インパルス応答関数を定義した。対応のないt検定により、体積パラメーターおよび速度定数パラメーターが、2種の鼓胞内用量レベルにおいて有意に異ならないことが示された。実施例12-インビトロにおける1モキシゲルおよび3モキシゲルからのモキシフロキサシンの放出分析したゲル中モキシフロキサシン濃度に関連して表した、ゲル製剤から放出されたモキシフロキサシンの累積率のプロットを図1に示す。初期にあまり大きくない放出速度を示した後、どちらの製剤も、約2~6時間の間に生じるインビトロでの最大放出速度を示した。その後、放出速度はゆっくりと低下した。データの補間により、1モキシゲルは5時間でその内容物の約50、95時間で75、および16時間で90を放出することが明らかになった。1モキシゲル製剤で観察された最大放出速度は約12時であり、これは、1モキシゲルを用いて外耳中に投与されるゲルの典型的体積である製剤500μlから約94μg分の放出速度に相当した。3モキシゲルは75時間でその内容物の約50、15時間で75、および26時間で90を放出した。3モキシゲル製剤で観察された最大放出速度は約91時であり、これは、3モキシゲルを用いて外耳中に投与されるゲルの典型的体積である製剤350μlから約15μg分の放出速度に相当した。インビトロにおいて3モキシゲル製剤の方が1モキシゲルよりも高いモキシフロキサシン絶対放出速度を示したものの、3モキシゲルからの時間あたり放出速度の方が遅いのは、懸濁状態で存在する用量部分が原因であり、したがって、ゲルから放出される前に溶解するのにいくらかの時間が必要となる可能性が高い。実施例13-人工の保温された中耳液中のモキシフロキサシン遊離率タンパク質結合研究の結果を表3に要約する。PBSの場合に観察された遊離率はいずれも100に近かったことから、限外ろ過装置の膜への薬物吸着はほとんどまたはまったく無いことが示された。AMEFの場合、濃度範囲全域で非常に高い未結合率が算出されたことから、ウシアルブミンへのモキシフロキサシン結合は最小限であることが示された。IMEFにおいて、モキシフロキサシンの遊離率は、類似濃度のAMEFにおいて観察されたものよりも低かったことから、このマトリックス中に別の結合タンパク質が存在することが示唆された。全体として、モキシフロキサシンの遊離率は、試験した濃度範囲において比較的高いままであった。したがって、微小透析によって測定される薬物濃度は、中耳液中に存在する総モキシフロキサシンレベルの大部分に相当する。投薬後最初の数時間の間、試料マトリックスはAMEFに良く似ている。実験時間が18時間またはそれ以上に近づくにつれて、試料マトリックスはIMEFのより優れた見本となることが予想される。表3に示した結果から、2種のマトリックスにおける遊離率の有意な差が示された。しかしながら、この差が、MEF微小透析データの解釈に何らかの意味ある影響を与える可能性は低い。表3保温した中耳液、人工中耳液、およびリン酸緩衝化生理食塩水中の未結合モキシフロキサシンの割合実施例14-鼓胞内投薬後の中耳液のモキシフロキサシン濃度約50μgおよび150μgを中耳中に直接投薬した後、微小透析によって測定した中耳液の未結合モキシフロキサシン濃度のプロットを図2および図3に示す。中耳液のモキシフロキサシン濃度は単一指数的に低下し、被験体間のばらつきは比較的少なめであった。これらの濃度時間プロファイルを用いて、経鼓膜送達後のCmefデータのデコンボリューション解析において単位インパルス応答関数を明確にした。中耳液中のモキシフロキサシンの分布体積は、鼓胞内低用量および鼓胞内高用量に対して、それぞれ175±079mlおよび190±043mlであると推定された。消失速度定数は、それぞれ00102±00040min1および00075±00010min1であると推定された。体積も消失速度定数も、用量依存性ではなかった。したがって、これら2つのパラメーターの平均値を用いて、デコンボリューション手順においてUIRFを明確にした。実施例15-1モキシゲルおよび3モキシゲルを用いた外耳投薬後の中耳液のモキシフロキサシン濃度1モキシゲルを用いた外耳投薬1モキシゲルを用いた外耳投薬後の中耳液のモキシフロキサシン濃度のプロットを図4Aおよび図4Bにグループ別に示す。測定可能なレベルは、投薬後最長4日間得られた。IPMによる前処理時間の長さは、これらの研究で測定したCmax値にもAUCinf値にも影響を及ぼさなかった。これらのデータを図5に線形濃度尺度および対数濃度尺度で平均値±SDとして提示する。モキシフロキサシンの最高平均濃度は約48μgmlであり、投薬後約900分目に発生した。約90分の時点で平均濃度は10μgmlに到達し、投薬後約2100分までそのレベルを上回ったままであった。約230分の時点で平均濃度は20μgmlに到達し、投薬後約1610分までそのレベルを上回ったままであった。中耳液の未結合濃度時間データの非コンパートメント解析の結果を表4に要約する。Cmaxおよび最終速度定数λzに有意なばらつきが観察された。後者のパラメーターは、Cmefの時間当たりの低下速度を説明するものであり、中耳液中へのからのモキシフロキサシンの移行および退出の律速段階を反映する。ここで、律速段階とは、鼓膜を通過して抗生物質が浸透する速度である。鼓胞内投薬研究において測定した、中耳液からの消失に関連付けられている平均速度定数が、0008~0010min1の範囲であり、ここで測定された平均値00043より実質的に大きかったことから、これは明らかである。表41モキシゲルの外耳投薬後のCmefデータのNCA由来のモキシフロキサシンパラメーター未結合Cmefの平均最大値578μgmlは、ヒトに400mgを経口投与した後に血漿中で観察される値より20~30倍大きい。1モキシゲルに由来するモキシフロキサシンの中耳液中への生物学的利用能を、式1で説明した通りに算出した。表5Aでは、Cmefが10μgmlに到達するまでに必要とされる時間、10μgml未満に低下するまでに必要とされる時間、および10μgmlを上回っている持続時間を要約する。表にした値は、1モキシゲル投薬後の各データセットを調査することによって得た。Cmefレベルが10μgmlを上回ったままである平均時間は、1700分より長かった。表5A1モキシゲルを用いた外耳投薬後に10μgmlに到達するまでの時間、10μgml未満に低下するまでの時間、および10μgmlを上回っている時間表5Bでは、Cmefが20μgmlに到達するまでに必要とされる時間、20μgml未満に低下するまでに必要とされる時間、および20μgmlを上回っている持続時間を要約する。表にした値は、1モキシゲル投薬後の各データセットを調査することによって得た。Cmefレベルが20μgmlを上回ったままである平均時間は、1100分より長かった。データセットの内の2つのCmefは20μgmlまで上昇せず、その結果、2つのデータセットに関する20μgmlを上回っている時間は0分という値になっている。表5B1モキシゲルの外耳投薬後に20μgmlに到達するまでの時間、20μgml未満に低下するまでの時間、および20μgmlを上回っている時間3モキシゲルを用いた外耳投薬3モキシゲルを用いた外耳投薬後の中耳液のモキシフロキサシン濃度のプロットを図6にグループ別に示す。測定可能なレベルは、投薬後最長4日間得られた。1モキシゲル投薬データの場合と同様に、IPMによる前処理時間の長さは、これらの研究で測定したCmax値にもAUCinf値にも影響を及ぼさなかった。これらのデータを図7に線形濃度尺度および対数濃度尺度で平均値±SDとして提示する。モキシフロキサシンの最高平均濃度は約120μgmlであり、投薬後約1300分目に発生した。約60分の時点で平均濃度は10μgmlに到達し、投薬後の研究期間の間ずっとそのレベルを上回ったままであった。約230分の時点で平均濃度は20μgmlに到達し、約5340分までそのレベルを上回ったままであった。57時間を超える測定可能レベルを示したデータセットは2つだけであったため、この観察結果は、データの全般的傾向を反映しているわけではない。3モキシゲルの外耳投薬後の中耳液の未結合濃度時間データの非コンパートメント解析の結果を表6に要約する。表63モキシゲルを用いた外耳投薬後のCmefデータのNCA由来のモキシフロキサシンパラメーター1モキシゲルと同様に、Cmaxおよび最終速度定数λzに有意なばらつきが観察された。この速度定数の平均値は00029min1であり、鼓胞内投薬後に測定した消失速度定数を実質的に下回っていた。これは、約350分の半減期幾何平均値に相当し、中耳液中にモキシフロキサシンを直接投与した場合に観察される消失半減期よりはるかに長い。これは、1モキシゲル研究の場合のように、鼓膜を通過してのモキシフロキサシンの浸透が、中耳液からの消失速度を制限することの証拠である。中耳液中への外耳投与の平均生物学的利用能は約35であったが、かなり変化しやすかった。これは、おそらくはゲルと膜との不十分な接触にある程度起因する、ゲルと鼓膜の接触のばらつきが原因である可能性が高かった。Fのこのばらつきにもかかわらず、本研究では、平均130μgmlという極めて高い中耳液のモキシフロキサシン最高濃度が観察された。実際、生物学的利用能が29であったデータセットは、277μgmlのCmaxを示し、これは、モキシフロキサシン400mgの経口投与後に通常観察される最大血漿中未結合濃度の10倍より多かった。表7Aでは、Cmefが10μgmlに到達するまでに必要とされる時間、10μgml未満に低下するまでに必要とされる時間、および10μgmlを上回っている持続時間を要約する。表にした値は、3モキシゲル投薬後の各データセットを調査することによって得た。Cmefレベルが10μgmlを上回ったままである平均時間は、2800分より長かった。表7A3モキシゲルを用いた外耳投薬後に10μgmlに到達するまでの時間、10μgml未満に低下するまでの時間、および10μgmlを上回っている時間表7Bでは、Cmefが20μgmlに到達するまでに必要とされる時間、20μgml未満に低下するまでに必要とされる時間、および20μgmlを上回っている持続時間を要約する。表にした値は、3モキシゲル投薬後の各データセットを調査することによって得た。Cmefレベルが20μgmlを上回ったままである平均時間は、2500分より長かった。表7B3モキシゲルの外耳投薬後に20μgmlに到達するまでの時間、20μgml未満に低下するまでの時間、20μgmlを上回っている時間実施例16-1モキシゲルおよび3モキシゲルを用いた外耳投薬後のモキシフロキサシンの比較計量1モキシゲルおよび3モキシゲルを用いた外耳投薬後の中耳液の濃度時間プロファイルの比較を図8に提供する。図8では、中耳液のモキシフロキサシン濃度の平均値およびSDを時間に対してプロットしている。外耳中に導入される各製剤の体積は同じではなかったため、外耳に入れた用量は、3モキシゲルコホートの方が1モキシゲルグループよりも平均で約2倍多かった。さらに、3モキシゲルコホートの方が、そのより遅いモキシフロキサシン相対放出速度のおそらくは結果として、浸透の経時変化は顕著に長期化された。用量および放出速度のこれらの差は図8で明らかであり、図8において、3モキシゲルの平均Cmax値の方が高いことおよび平均Cmefの最大値に到達する時間が明らかに遅いことが実証されている。これら2種の製剤に関して観察された中耳液のモキシフロキサシンレベルのCmax値およびTmax値の比較を、図9の比較用箱ひげ図に示す。これらのプロットは、これらの計量の中央値および四分位数間範囲を示す。また、これらのプロットは、2種の製剤のTmax中央値は、ノンパラメトリックマンホイットニー検定によって差異はなかったが、Cmax中央値はp値00084で有意に異なった。実施例17-中耳液中へのモキシフロキサシン浸透の速度および程度鼓胞内投薬研究の結果、およびモキシゲルを用いた外耳投薬後のCmefの経時変化を用いて、デコンボリューションを用いてモキシフロキサシンの経鼓膜浸透の速度および程度を算出した。1モキシゲルを用いた場合の中耳液中へのモキシフロキサシン浸透1モキシゲルを用いた外耳投薬後に中耳液に到達するモキシフロキサシン累積量の経時変化を図10に示す。中耳液に送達される累積量は、約250~2300μgの範囲であった。この範囲は、1モキシゲル投薬の際に観察されるAUCinf値の範囲を反映している。また、デコンボリューションによって算出した対応する浸透速度を図11Aおよび図11Bにグループ別にグラフで示す。各コホートにスプライン関数をフィッティングさせて、そのグループのデータセットにおける流入速度の全般的傾向を反映させた。これは、10個のデータ点の範囲をその手順において用いる局所重み付き散布図平滑化によって行った。図11Aおよび図11Bのスプラインの調査により、中耳液中へのモキシフロキサシンの最大浸透速度が約02~2μg分の範囲であり、インビトロ条件下での1モキシゲルの比較可能な投薬に関して推定される対応する放出速度よりかなり少ないことが示される。これらの最大浸透速度は、約12~120μg時のインビボでのモキシフロキサシン送達速度におおよそ相当する。3モキシゲルを用いた場合の中耳液中へのモキシフロキサシン浸透3モキシゲルを用いた外耳投薬後に中耳液に到達するモキシフロキサシン累積量の経時変化を図12に示す。中耳液に送達される累積量は、約200~6000μgの範囲であった。この範囲は、3モキシゲル投薬の際に観察されるAUCinf値の範囲をほぼ反映している。デコンボリューションによって算出した対応する浸透速度を図13にグループ別にグラフで示す。これらのデータにおける流入速度の全般的傾向を反映する、各コホートにフィッティングされたスプライン関数もまた、示す。図13のスプラインの調査により、中耳液中へのモキシフロキサシンの最大浸透速度が約05~5μg分の範囲であり、インビトロ条件下での3モキシゲルの比較可能な投薬に関して推定される対応する放出速度よりかなり少ないことが示される。これらの最大浸透速度は、約30~300μg時のインビボでのモキシフロキサシン送達速度におおよそ相当する。1モキシゲルおよび3モキシゲルの中耳液中への相対的モキシフロキサシン浸透速度1モキシゲルデータセットおよび3モキシゲルデータセットのそれぞれについてデコンボリューションによって推定した浸透速度を、前述した通りにスプライン関数によってデータにフィッティングし、用量別にグループ分けした。データおよび対応する流入速度スプラインを図14にグラフで示す。これらのプロットから、1モキシゲルの場合の典型的な最大浸透速度が約07μgmlであり、約700~800分の時点で生じることが示される。3モキシゲルの場合の対応する最大浸透速度は約2μg分であり、1600~2000分の範囲で生じる。3モキシゲルの場合に認められる最大浸透速度の方が大きいことは、この製剤に付随する用量がより多いことと一致している。1モキシゲルを用いた場合の典型的な外耳用量は約4800μgであり、3モキシゲルを用いた場合の対応する用量は約9900μgであったことに留意すべきである。したがって、3モキシゲルに付随する用量は、1モキシゲルの場合の用量の約2倍であった。3モキシゲルの場合に浸透速度ピークが遅くに観察されることは、3ゲル製剤中でモキシフロキサシンは部分的に懸濁状態であるため、インビトロで、およびおそらくインビボで、よりゆっくりとこの製剤からモキシフロキサシンが放出されることを反映している。実施例18-中耳液中モキシフロキサシン標的濃度に到達するまでの時間および該標的濃度を上回っている持続時間この調査の具体的目的は、10μgmlを上回る中耳液中モキシフロキサシン濃度を最低24~48時間維持するための経鼓膜送達系を開発することであった。図15は、1モキシゲル外耳投薬を用いた研究において認められた、10μgmlおよび20μgmlの両方に到達するまでに必要とされる時間の中央値および四分位数間範囲を示す。中耳液レベル10μgmlおよび20μgmlを達成するのに必要とされる時間中央値はそれぞれ180分および300分であった。図面は、これらのレベルが維持された時間の中央値も示している。これらはそれぞれ、1660分および1160分、または約28時間および19時間であった。したがって、この目的は、1モキシゲル製剤を用いて実現されたようである。さらに、図16は、3モキシゲルを用いた研究において認められた、10μgmlおよび20μgmlの両方に到達するまでに必要とされる時間の中央値および四分位数間範囲を示す。中耳液レベル10μgmlおよび20μgmlを達成するのに必要とされる時間中央値はそれぞれ180分および240分であった。図面は、これらのレベルが維持された時間の中央値も示している。これらはそれぞれ、2740分および2420分、または約46時間および40時間であった。10μgmlを超えている持続時間に関する前述の目的は、3モキシゲル製剤を用いても実現された。さらに、これは目的として明示的に述べはしなかったものの、3モキシゲル製剤により、ほぼ2日間という20μgmlを超えている持続時間の中央値が実現した。この製剤が溶解状態だけでなく懸濁状態でモキシフロキサシンを含むと思われることが、インビトロでのより遅い相対的放出速度と一致するインビボでの長期に渡る放出速度をもたらした可能性が高い。1モキシゲルおよび3モキシゲルそれぞれについて、図15および図16に示す時間および持続時間を表8Aおよび表8Bならびに表9Aおよび表9Bに要約する。また、個々のデータセットで観察された平均時間、ならびに最短時間および最長時間も表にしている。表8A1モキシゲルを用いた外耳投薬後に10μgmlに到達するまでの時間、10μgml未満に低下するまでの時間、および10μgmlを上回っている時間表8B1モキシゲルを用いた外耳投薬後に20μgmlに到達するまでの時間、20μgml未満に低下するまでの時間、および20μgmlを上回っている時間表9A3モキシゲルを用いた外耳投薬後に10μgmlに到達するまでの時間、10μgml未満に低下するまでの時間、および10μgmlを上回っている時間表9B3モキシゲルを用いた外耳投薬後に20μgmlに到達するまでの時間、20μgml未満に低下するまでの時間、および20μgmlを上回っている時間実施例19-1モキシゲルおよび3モキシゲルの外耳投薬後のモキシフロキサシンのAUIC比Schentagらによって殺菌速度に関係付けられている通り、3つの重要なブレークポイントがフルオロキノロンに対して提唱されている。これらのブレークポイントは、このクラスの抗生物質の見かけ濃度に依存する殺菌を考慮して、インビトロおよび動物モデルにおいて確立されている。AUICは、24時間を通しての曲線下面積を、特定の生物に対する当該フルオロキノロンの最小阻止濃度によって割った値と定義される。Schentagらは、フルオロキノロンの以下のブレークポイントを報告した。aAUIC値<30~50またはピークMIC比が51の範囲の場合、フルオロキノロンは静菌性である。bAUIC値>100であるがAUIC値<250の場合、生物はゆっくりした速度で、通常は処置から7日目までに、死滅する。cAUIC>250またはピークMICが251の場合、フルオロキノロンは急速な濃度依存性殺菌を示し、細菌根絶は24時間以内に起こる。1モキシゲル研究および3モキシゲル研究の全データセットに関するAUIC値は、外耳投薬後の連続的な24時間の各期間について算出した。これらの計算から、モキシフロキサシンのMICは025μgmlと想定された。図17に示す通り、1モキシゲル投薬後の1日目、2日目、および3日目の中耳液におけるAUIC中央値は、それぞれ2398、7756、および62であった。1モキシゲルの場合の1日目および2日目のこれらの値は、上記に特定したカテゴリーc、すなわち、24時間以内の細菌根絶に含まれる。1モキシゲル研究において3日に測定されたAUIC中央値は、カテゴリーbおよびaの間に位置する。同じく図17に示す通り、3モキシゲル投薬後の1日目、2日目、および3日目のAUIC中央値は、それぞれ5930、4901、および570であった。3モキシゲルの場合の外耳投薬後3日間すべてのこれらの値は、上記に特定したカテゴリーc、すなわち、24時間以内の細菌根絶に含まれる。この知見から、3モキシゲル後のチンチラの中耳液中モキシフロキサシン濃度の経時変化は、1モキシゲル適用で観察されるものよりも優れた実際の利点をもたらすことが示唆される。しかしながら、Schentagらの推奨が正確であるならば、1日目および2日目の関連するAUICは、24時間以内の細菌根絶をもたらすのに十分であると思われるため、1モキシゲル外耳投薬によってもたらされるモキシフロキサシンレベルが適切であり得る。上記のAUIC算出における025μgmlというモキシフロキサシンについてのMICは、妥当であり、かつおそらく控えめな値である。その後の論文で、Schentagらは、フルオロキノロンの殺菌効果を評価するために、ブレークポイントの使用を重点的に取り扱い、中耳炎で発生する一般的病原菌である肺炎連鎖球菌株に対するモキシフロキサシンのMIC90を0125μgmlと報告している。興味深いことに、この論文では、ヒト臨床試験の結果を検討し、以前に報告されているブレークポイントを確認している。実際、著者らは、フルオロキノロンによる濃度依存性殺菌により、ヒトにおいて1~2時間で細菌が根絶され、その際、AUICが250より大きいか、またはCmaxとMICの比が151を上回ることを述べている。公表されたこれらのブレークポイントは、タンパク質結合を考慮に入れていないと思われる。本研究で測定される中耳液の濃度は未結合レベルであり、生じるAUICを算出する際に全レベルが使用されるならば、これらはいくらか高くなり、それらがクラスcに入ることがより確実になると思われる。実施例20-1モキシゲルおよび3モキシゲルの外耳投薬後のモキシフロキサシンのCmaxMIC比上記の実施例19で考察したブレークポイントはまた、CmaxMIC比に関係する基準を含んだ。上記のクラスaおよびクラスcにおけるこれらの比に注目して、Schentagらは以下を述べた。a51の範囲のピークMIC比において、フルオロキノロンは静菌性である。cピークMICが251の場合、フルオロキノロンは急速な濃度依存性殺菌を示し、細菌根絶は24時間以内に起こる。2つ目の論文においてブレークポイントが若干修正され、クラスa、b、およびcのCmaxMIC比はそれぞれ31、61、および151と報告された。1モキシゲル研究および3モキシゲル研究の全データセットに関するCmaxMICを、外耳投薬後の連続的な24時間の各期間について算出した。以前と同様に、これらの計算から、モキシフロキサシンのMICは025μgmlと想定された。図18に示す通り、1モキシゲル投薬後の中耳液におけるCmaxMIC中央値は、1651であった。この値は、24時間以内の細菌根絶が予想されているクラスc251または151と報告されているについて特定された値の数倍である。図18に示す通り、3モキシゲル投薬後の中耳液におけるCmaxMIC中央値は、4361であった。この値は、クラスcについて特定された値より何倍も高いことから、24時間以内の細菌根絶がやはり示唆される。上記の通り、公表されたこれらのブレークポイントは、タンパク質結合を考慮に入れていない。本研究で測定される中耳液の濃度は未結合レベルであり、報告されたブレークポイントにおいて考慮されるCmaxMIC比を算出する際に全レベルが使用されるならば、これらの比はいくらか高くなり、それらがcクラスに入ることがさらにより確実になると思われる。実施例21-10浸透促進剤および50浸透促進剤による前処理を比較するための方法投薬の1日前に、動物は両側の耳にエウスタキオ管閉塞手術を受けた。ティンパノメトリーにおいて負の圧力測定値を示している耳は、エウスタキオ管の閉塞が成功していることを示した。鼓胞中への人工中耳液AMEF滴下注入、プローブ埋め込み後、かつ投薬前に、耳鏡を用いて鼓膜の完全性を視覚的に検査した。鼓膜に欠陥が生じている耳には投薬しなかった。投薬日に、ケタミンおよびペントバルビタールで動物を麻酔し、温熱パッド上に置いて通常体温を維持した。ティンパノメトリー後、チンチラを口バークランプ上に置いて、AMEFを滴下注入し微小透析プローブを埋め込めるようにした。チンチラの中耳腔へは、頭蓋の背中側にある頭方向の鼓胞を介して接近した。15GA皮下注射針を用いて、骨が薄い右鼓胞と左鼓胞の頂端に手作業で小さな穴をあけた。最上部まで完全に満たされるまで、PE50管の長さをよって各鼓胞中にAMEFを滴下注入した。AMEF滴下注入後すぐに、左中耳鼓胞および右中耳鼓胞の両方に10mm膜を備えた微小透析プローブを埋め込んだ。チンチラの中耳腔へは、頭方向の鼓胞における同じ穴を介して接近した。その接近用の穴から、プローブを慎重に各中耳腔中に挿入した。耳鏡を用いて、鼓膜の完全性を検査した。歯科用セメントおよびアンカー針によって固定されたプラスチック製かぶせものを用いて、これらのプローブをチンチラの頭蓋に固定した。前述した通りに外耳中に3モキシゲル溶液を用いて投薬する前に、鉱油に溶かした10vvミリスチン酸イソプロピル溶液または50vvミリスチン酸イソプロピル溶液のいずれかの形態の浸透促進剤で前処理を実施した。これは、耳鏡の助けを借りて外耳経由で鼓膜領域中に前処理溶液50μLを適用することからなった。これは、ツベルクリン用1mL容シリンジに取り付けられたポリエチレン管の断片を用いて遂行した。投薬に先立って05分間、この前処理溶液を鼓膜上に置いておいた。少量の3モキシフロキサシン製剤を、耳鏡の助けを借りて外耳経由で鼓膜領域中に液剤として滴下注入した。この液体製剤は、ゾルゲル転移温度が約29~31°Cであり、その温度がゆっくりと上昇するにつれてゲル化する。反対側の耳に投薬する前に、合計10分のゲル化時間を与えた。処置の間ずっと、動物の心拍数、呼吸速度、体温、および麻酔深度を頻繁にモニターした。9mgの1回量を適用した後、後述する通りに、投与後最長7200分間、中耳液中未結合モキシフロキサシン濃度を、オンライン微小透析を用いてモニターした。オンライン微小透析HPLCシステムを用いて、透析液中のモキシフロキサシンおよびシプロフロキサシンを定量した。微小透析の灌流流速は、5mL容マイクロシリンジを取り付けたHarvard製マイクロインジェクションポンプを用いて制御した。シーケンスプログラマーによって制御される10ポート弁本体の2つの25μl試料ループ中に、両耳からの微小透析液を交互に採取した。プローブに流速05μL分で逆透析較正物質を灌流させた。Valco製オンライン試料採取システムと接続して機能させるためにShimadzu10AHPLCシステムを使用した。これは、LC10ADvpポンプ、SIL10Aシステムコントローラー、CTO10Aカラムヒーター、FCV10ALvpプロポーショナー、およびDGU14A脱ガス装置からなる。また、励起波長295nmおよび発光波長490nmのShimadzu製分光蛍光検出器も使用した。YMCODSA5μm、120Åカラムを、これらの化合物の分離のために使用し、リン酸アンモニウム76およびアセトニトリル24から構成される移動相を流速05mL分で用いて溶出させた。40°Cのカラム温度を用いた結果、モキシフロキサシンの場合は約6分および較正物質シプロフロキサシンの場合は3分の保持時間が得られた。実施例22-10浸透促進剤による前処理と50浸透促進剤による前処理の比較結果鼓膜を10IPMで前処理して3モキシゲルを外耳投薬した後、中耳液中未結合モキシフロキサシン濃度は、典型的には、定量下限よりも低かった。前処理で10IPMを使用した場合に観察される測定可能なレベルは極めて少数であったため、モキシフロキサシンの送達に関係するパラメーターを算出することができなかった。それに対して、鼓膜を50IPMで前処理して3モキシゲルを外耳投薬した後、中耳液中未結合モキシフロキサシン濃度は、最長7200分または5日の期間に渡って、完全に測定可能であった。研究した9個の耳において、中耳液中のCmaxは333±233μgmLであった。ヒトにおいて血清タンパク質に30~50結合することが報告されているモキシフロキサシンの400mgの経口投薬後に血漿中で観察された合計最高濃度は31μgmLである。対応する血漿中未結合Cmaxは約19μgmLである。したがって、本研究による外耳中への9mgの単回投与後のチンチラ中耳液において観察された未結合モキシフロキサシン最高濃度平均値は、用量400mgを与えられたヒトの血漿において観察された未結合Cmax平均値の約15~20倍である。最高濃度が観察される時点であるTmaxは、1410±486分であった。0時点からtlastまでのAUCは、約74400±52100μg分mLであり、時間0から無限時間までのAUCは、約93400±79200μg分mLであった。400mgを1回経口投薬された健常なヒトの平均AUCは、2170μg分mLであることが報告されている。対応する未結合AUCはこの約60、または約1300μg分mLである。したがって、チンチラ外耳中に9mgを1回投薬した後の未結合レベルのモキシフロキサシンへの中耳液の平均曝露は、モキシフロキサシン400mgを1回経口投与された健常なヒトの血漿で認められる曝露の約75倍である。中耳腔中にモキシフロキサシンを直接投薬した後に、中耳液中へのモキシフロキサシンの経鼓膜送達の程度を、微小透析を用いて測定した単一指数的濃度時間プロファイルから算出した。中耳液中のモキシフロキサシンの分布体積は、18mLであると推定された。消失速度定数は、00093min1であると推定された。中耳液からのモキシフロキサシンの平均クリアランスは、00167mL分と算出された。以下の式の通りに、外耳用量、時間0から無限時間までの曲線下面積、および鼓胞内投薬研究によって測定した中耳液からの平均クリアランスから、中耳液中へのモキシフロキサシンの送達程度を各データセットについて算出した。中耳腔に送達される外耳用量の割合は、174±147と測定された。9mgモキシフロキサシン投薬および50ミリスチン酸イソプロピルによる鼓膜の前処理後のチンチラ中耳液中へのモキシフロキサシンの経鼓膜送達を検査した本発明の研究の結果を図19Aおよび図19Bに示す。対応するパラメーターおよび対応するパラメーターおよび計量値を表10に示す。表10浸透促進剤による前処理後のモキシフロキサシンの送達他の態様本発明をその詳細な説明と共に説明してきたが、前述の説明は、添付の特許請求の範囲によって定められる本発明の範囲を例示することを意図し、限定することを意図しないことを理解すべきである。他の局面、利点、および修正は、以下の特許請求の範囲に含まれる。