芽胞形成細菌の芽胞の殺菌もしくは静菌作用を評価するための方法であって、該芽胞に殺菌処理を施し芽胞に損傷を与える工程、該損傷した芽胞を損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬と接触させて該蛍光染色試薬で芽胞を染色する工程、及び蛍光染色試薬によって染色される芽胞と蛍光染色試薬によって染色されない芽胞の割合を定量することによって該芽胞の殺菌もしくは静菌作用を評価する工程を含む、前記方法。前記蛍光染色試薬が、芽胞が損傷を受けた際にコア内部にあるDNAを染色することを可能にするヘキスト33342及びジアミジノ2フェニルインドール並びに、芽胞のコア内部の死菌DNAを染色することを可能にするプロピジウムイオダイドからなる群から選択されることを特徴とする、請求項1に記載の方法。前記芽胞形成細菌の芽胞が、バチルス網及びクロストリジウム網からなる群から選択される細菌の芽胞であることを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。非損傷芽胞が発芽した場合の生菌活性を測定することが可能である蛍光染色試薬を用いて該非損傷芽胞を染色し、これによって非損傷芽胞の割合を定量することをさらに含むことを特徴とする、請求項1~3のいずれか1項に記載の方法。前記蛍光染色試薬が、芽胞が損傷を受けなかった際に発芽したことを捉える生菌のもつエステラーゼによって活性化されるカルボキシフルオレセインジアセテートであることを特徴とする、請求項4に記載の方法。芽胞形成細菌の芽胞に対し殺菌もしくは静菌作用を有する薬剤をスクリーニングするための方法であって、芽胞形成細菌の芽胞を含有するサンプルに候補薬剤を添加し、該候補薬剤の殺菌もしくは静菌作用を、損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬を用いて評価することを含むことを特徴とする、前記方法。サンプル中の芽胞形成細菌の芽胞の生菌もしくは死菌割合を測定するための方法であって、該サンプルを蛍光染色試薬と接触させて、損傷した芽胞を蛍光染色試薬で染色し、蛍光染色試薬によって染色される芽胞と蛍光染色試薬によって染色されない芽胞の割合を定量することを含むことを特徴とする、前記方法。芽胞形成細菌の芽胞の殺菌もしくは静菌作用を評価するためのキットであって、損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬及び使用説明書を含むことを特徴とする、前記キット。芽胞形成細菌の芽胞の生菌もしくは死菌割合を測定するためのキットであって、損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬及び使用説明書を含むことを特徴とする、前記キット。請求項1~7のいずれか1項に記載の方法に使用するためのものであることを特徴とする、請求項8又は9のいずれか1項に記載のキット。食品、医薬品或いは化粧品等の様々の分野における製品或いはその製造工程において、微生物の増殖による製品の変質や品質低下或いは食中毒等の発生が問題となることがあり、その対策のために、物理的或いは化学的殺菌処理が行なわれている。特に、環境に対して耐久性のある芽胞を形成する芽胞形成細菌のような細菌の芽胞に対しては、その効果的な殺菌効果を得るために、過酷な殺菌処理条件が採用される。例えば、芽胞形成細菌の芽胞の殺菌には、高温と高圧による殺菌処理が施されている。しかし、一方で、かかる殺菌処理は、高温、高圧の処理による製品の品質への影響が避けられないという問題がある。したがって、芽胞形成細菌の芽胞の殺菌に際しては、必要最小限の殺菌条件で、効果的な殺菌を行なうことが可能な条件を、迅速に設定することが必要となる。従来の芽胞の耐久性の評価方法では、前記のように、耐久性のそれぞれの項目、例えば、耐熱性、UV耐性、薬剤耐性等において、個々の加熱条件、UV強度、薬剤濃度の試験区で、生残菌率を求め、それらの生残菌率を外挿し、例えば、加熱処理ならば、生残菌数が10分の1になるのに至る加熱条件の加熱時間の長短で、加熱に対する耐久性を評価していた。したがって、対象となる芽胞について、まず純粋に細胞株を単離し、これを前培養して供試に必要な菌数を獲得し、それら多くの試験区での生残菌率を求める必要があった。したがって、煩雑な実験を必要とすると同時に、正確な評価をするためには、熟練を要し、また、時間的にも長時間を要した。そこで、本発明の課題は、芽胞形成細菌の芽胞に対する加熱処理や薬剤処理のような殺菌処理条件の効果を、迅速かつ正確に評価できる新たな方法の提供と、芽胞形成細菌に対する殺菌静菌作用を有する新規薬剤のスクリーニング方法を提供することにある。本発明者らは、鋭意研究する中で、芽胞の加熱薬剤処理といった殺菌処理により芽胞内部への蛍光染色試薬の浸透性が増すこと、殺菌効果と蛍光染色された芽胞数に相関があり、芽胞の殺菌方法の評価や芽胞に対する殺菌静菌作用を有する薬剤のスクリーニングに培養を介さない迅速な評価法として活用可能であることを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、具体的には、本発明は、以下の特徴を包含する。1芽胞形成細菌の芽胞の殺菌もしくは静菌作用を評価するための方法であって、該芽胞に殺菌処理を施し芽胞に損傷を与える工程、該損傷した芽胞を損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬と接触させて該蛍光染色試薬で芽胞を染色する工程、及び蛍光染色試薬によって染色される芽胞と蛍光染色試薬によって染色されない芽胞の割合を定量することによって該芽胞の殺菌もしくは静菌作用を評価する工程を含む、前記方法。2前記蛍光染色試薬が、芽胞が損傷を受けた際にコア内部にあるDNAを染色することを可能にするヘキスト33342及びDAPI、並びに、芽胞のコア内部の死菌DNAを染色することを可能にするプロピジウムイオダイドからなる群から選択されることを特徴とする、網及びクロストリジウム網からなる群から選択される細菌の芽胞であることを特徴とする、1又は2に記載の方法。4非損傷芽胞が発芽した場合の生菌活性を測定することが可能である蛍光染色試薬を用いて該非損傷芽胞を染色し、これによって非損傷芽胞の割合を定量することをさらに含むことを特徴とする、1~3のいずれかに記載の方法。5前記蛍光染色試薬が、芽胞が損傷を受けなかった際に発芽したことを捉える生菌のもつエステラーゼによって活性化されるCFDAであることを特徴とする、4に記載の方法。6芽胞形成細菌の芽胞に対し殺菌もしくは静菌作用を有する薬剤をスクリーニングするための方法であって、芽胞形成細菌の芽胞を含有するサンプルに候補薬剤を添加し、該候補薬剤の殺菌もしくは静菌作用を、損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬を用いて評価することを含むことを特徴とする、前記方法。7サンプル中の芽胞形成細菌の芽胞の生菌もしくは死菌割合を測定するための方法であって、該サンプルを蛍光染色試薬と接触させて、損傷した芽胞を蛍光染色試薬で染色し、蛍光染色試薬によって染色される芽胞と蛍光染色試薬によって染色されない芽胞の割合を定量することを含むことを特徴とする、前記方法。8芽胞形成細菌の芽胞の殺菌もしくは静菌作用を評価するためのキットであって、損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬及び使用説明書を含むことを特徴とする、前記キット。9芽胞形成細菌の芽胞の生菌もしくは死菌割合を測定するためのキットであって、損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬及び使用説明書を含むことを特徴とする、前記キット。101~7のいずれかに記載の方法に使用するためのものであることを特徴とする、8又は9のいずれかに記載のキット。食品、医薬品、化粧品等の様々の分野における製品或いはその製造工程において、微生物の増殖による製品の変質や品質低下或いは食中毒等の発生が問題となることがあり、特に、殺菌処理に対する耐久性のある芽胞形成細菌のような芽胞に対しては、その効果的な殺菌効果を得るために、例えば、高温、高圧のような過酷な殺菌処理条件が採用されている。しかし、一方で、かかる殺菌処理は、かかる過酷な殺菌処理条件による製品の品質への影響が避けられないという問題がある。そこで、本発明の、芽胞に対する殺菌方法の評価方法を採用することにより、殺菌効果を迅速かつ正確に評価することが可能となり、製品の確実な殺菌と製品へのダメージを最小限に抑えることにより適切な殺菌条件を選択することが可能となる。さらに、本発明の、殺菌もしくは静菌効果の高い薬剤を効率的にスクリーニングする方法を利用することによって、より低濃度で効果を発揮するなど食品等の製品への影響の少ない新規な薬剤の開発を行なうことが可能となる。さらにまた、本発明は、芽胞形成細菌の芽胞の生菌もしくは死菌割合を測定するための方法を提供し、これによって種々の製品の品質を効率的に管理することを可能にする。本明細書中芽胞の生菌とは、発芽して栄養細菌となって増殖しうる芽胞をいい、芽胞の死菌とは、損傷を受けたために発芽しないで栄養細菌になることができない芽胞をいう。従来、芽胞染色法としてMoeller法石炭酸フクシン液使用が知られているが、生菌、死菌の区別ができなかった。以下、本発明を詳細に説明する。1.芽胞形成細菌芽胞菌の種類と芽胞形成方法本発明に係る方法において使用する芽胞形成細菌とは、芽胞sporeを形成する細菌であって、有芽胞菌とも呼ばれる細菌を指す。芽胞形成細菌としては、以下のものに限定されるものではないが、バチルス属に属する細菌、例えば炭疽菌Bacillusanthracis、枯草菌Bacillussubtilis、セレウス菌Bacilluscereus、バチルスチューリンゲンシスBacillusthuringiensis、バチルスブレビスBacillusbrevis、バチルスコアグランスBacilluscoagulans、バチルスアミロリケファシエンスBacillusamyloliquefaciens、バチルスプミリスBacilluspumilis、バチルスリケニフォルミスBacilluslicheniformis、バチルスコアフイレンシスBacilluscoahuilensis;クロストリジウム属に属する細菌、例えば破傷風菌Clostridiumtetani、ボツリヌス菌Clostridiumbotulinum、ウェルシュ菌Clostridiumperfringens;スポロラクトバチルス属に属する細菌、例えばスポロラクトバチルスイヌリナスSporolactobacillusinulinus;ゲオバチルス属に属する細菌、例えばゲオバチルスステアロサーモフィルスGeobacillusstearothermophilus;サーモアネロバクター属に属する細菌、例えばサーモアネロバクターマスラニイThermoanaerobactermathranii、サーモアネロバクターアセトエチリカスThermoanaerobacteracetoethylicus、サーモアネロバクターブロキイsubspブロキイThermoanaerobacterbrockiisubspbrockii、サーモアネロバクターブロキイsubspフィンニThermoanaerobacterbrockiisubspfinni、サーモアネロバクターブロキイsubspラクチエチリカスThermoanaerobacterbrockiisubsplactiethylicus、サーモアネロバクターセルロリティカスThermoanaerobactercellulolyticus、サーモアネロバクターエタノリカスThermoanaerobacterethanolicus、サーモアネロバクターイタリカスThermoanaerobacteritalicus、サーモアネロバクターキブイThermoanaerobacterkivui、サーモアネロバクターシデロフィラスThermoanaerobactersiderophilus、サーモアネロバクタースルフロフィラスThermoanaerobactersulfurophilus、サーモアネロバクターサーモコプリエThermoanaerobacterthermocopriae、サーモアネロバクターサーモヒドロスルフリカスThermoanaerobacterthermohydrosulfuricus、サーモアネロバクターウィエジェリイThermoanaerobacterwiegelii;サーモアネロバクテリウム属に属する細菌、例えばサーモアネロバクテリウムサーモサッカロリティカムThermoanaerobacteriumthermosaccharolyticum、サーモアネロバクテリウムアシジトレランスThermoanaerobacteriumaciditolerans、サーモアネロバクテリウムアオテアロエンスThermoanaerobacteriumaotearoense、サーモアネロバクテリウムポリサッカロリティカムThermoanaerobacteriumpolysaccharolyticum、サーモアネロバクテリウムサッカロリティカムThermoanaerobacteriumsaccharolyticum、サーモアネロバクテリウムサーモスルフリゲネスThermoanaerobacteriumthermosulfurigenes、サーモアネロバクテリウムキシラノリティカムThermoanaerobacteriumxylanolyticum、サーモアネロバクテリウムゼアエThermoanaerobacteriumzeae;モーレラ属に属する細菌、例えばモーレラサーモアセティカMoorellathermoacetica、モーレラグリセリニMoorellaglycerini、モーレラムルデリMoorellamulderi、モーレラサーモオートトロフィカMoorellathermoautotrophica;アリシクロバチルス属に属する細菌、例えばアリシクロバチルスアシドテレストリスAlicyclobacillusacidoterrestrisデスルフォトマキュラム属に属する細菌、例えばデスルフォトマキュラムニグリフィカンスDesulfotomaculumnigrificans、デスルファトマキュラムサーモアセトキシダンスDesulfotomaculumthermoacetoxidans、デスルファトマキュラムサーモベンゾイカムsubspサーモベンゾイカムDesulfotomaculumthermobenzoicumsubspthermobenzoicum、デスルファトマキュラムサーモベンゾイカムsubspサーモシントロフィカムDesulfotomaculumthermobenzoicumsubspthermosyntrophicum、デスルファトマキュラムサーモシステルナムDesulfotomaculumthermocisternum、デスルファトマキュラムサーモサポボランスDesulfotomaculumthermosapovorans、デスルファトマキュラムサーモサブテラネウムDesulfotomaculumthermosubterraneum;リシニバチルス属に属する細菌、例えばリシニバチルススフェリカスLysinibacillussphaericusが挙げられる。バチルス属、ゲオバチルス属、アリシクロバチルス属、サーモアネロバクター属、サーモアネロバクテリウム属を含む上に例示された属の細菌株については、非損傷芽胞は染色されず、損傷芽胞で染色されることが確認された。本発明において、特に好ましい細菌は、バチルス網及びクロストリジウム網に属する細菌である。なお、当業者には周知であるとおり、上記例示した細菌名及び分類は将来的に変更される可能性があることに留意されたい。本発明においては、上述した芽胞形成細菌であれば、任意の種及び株のものを用いることができる。本発明の方法に供される芽胞形成細菌は表層構造が完成した成熟芽胞休眠芽胞であることが好ましい。成熟芽胞休眠芽胞とは、芽胞形成細菌の母細胞内に存在するプレスポアやフォアスポアでなく、発芽芽胞でない状態の芽胞を指す。本発明方法では芽胞形成細菌の培養は実質的に必要としないが、これは、該方法が製品などのサンプル中に存在する損傷芽胞を直接的に高感度で測定することを可能にするからである。しかし、必要であれば芽胞形成細菌を培養して芽胞を形成してもよい。一般に芽胞形成好ましくは成熟芽胞形成のための細菌培養方法は公知であるので、そのような公知の方法を利用することができる。例えば、芽胞形成細菌の培養に通常用いられる培地を使用して、適当な条件下で培養することにより細菌を調製することができる。具体的には、炭素源ラクトース、グルコース、スクロース、フラクトース、ガラクトース、廃糖蜜など、窒素源ペプトン、カゼインの加水分解物、ホエータンパク質加水分解物、大豆タンパク質加水分解物等の有機窒素含有物、無機塩類リン酸塩、ナトリウム、カリウム、マグネシウムなどを含有し、芽胞形成細菌の培養を効率的に行うことができる培地天然培地又は合成培地、液体培地又は固体培地のいずれも使用可能を選択することができる。また芽胞形成細菌の培養は、20°C~70°C、好ましくは30°C~60°Cにおいて、好気性条件下又は嫌気性条件下で行うことができる。培養方法としては、静置培養、振とう培養、タンク培養などいずれの方法であってもよい。また、培養時間は12時間~20日、好ましくは12時間~10日とすることができる。培養開始時の培地のpHは5~9、好ましくは6~8に維持することが好ましい。当業者であれば、使用する芽胞形成細菌の種類に応じて、適当な培養条件を選択することができる。2.芽胞に対する殺菌もしくは静菌効果の評価方法評価手順本発明の、芽胞形成細菌の芽胞に対する殺菌もしくは静菌効果の評価方法は、以下の工程を含む。該芽胞に殺菌処理を施し芽胞に損傷を与える工程、該損傷した芽胞を蛍光染色試薬と接触させて該蛍光染色試薬で芽胞を染色する工程、及び該芽胞の殺菌もしくは静菌作用を評価する工程。食品、医薬品、化粧品などの、ヒトを含む動物例えば、ヒト、ペット動物イヌ、ネコ、鳥など、家畜動物ウシ、ブタ、家禽など、競技用動物ウマなどなどにおいて直接使用するための製品が、規制値を超える数量の芽胞によって汚染されないようにするために、該製品に対し殺菌もしくは静菌処理を施す必要がある。その理由は、前述の背景技術で記載したように、芽胞は、水分の少ない濃厚な原形質と核を厚い殻で覆われており、高い耐久性、すなわち耐熱性、耐圧性、耐薬品性と、長期休眠能とをもつからである。そのために、芽胞に対する殺菌方法や静菌方法を検討し、効率的に殺菌もしくは静菌効果を評価する必要性がある。しかし、従来の方法では、背景技術に記載したように、芽胞形成細菌を培養し増殖するなど手間のかかる手順からなっていた。これに対し、本発明の方法は、損傷した芽胞を蛍光染色試薬で染色するという極めて単純な手順からなるため、殺菌試験における評価を迅速に行うことができる。第1工程この工程では、芽胞に対し、種々の異なる条件で殺菌処理を施して、該芽胞に損傷を与える。そのような条件は特に制限されないが、化学的処理、物理的処理などが含まれる。このとき芽胞は、好ましくは、初発菌数を105CFUml以上になるように調整する。化学的処理には、芽胞に、殺菌剤又は静菌剤などの薬剤を作用することを含む。殺菌剤又は静菌剤には、例えば、界面活性剤ショ糖脂肪酸エステル、等、ガスエチレンオキシド、ホルマリン、加圧水蒸気、等、保存料ソルビン酸およびソルビン酸塩、安息香酸および安息香酸塩、プロピオン酸およびプロピオン酸塩、等、殺菌料ハロゲン系殺菌料、過酸化水素、過酢酸及び関連する過酸化物、等、グリシン、有機酸、バクテリオシンナイシン、等などが含まれる。物理的処理には、例えば、熱、高圧、紫外線、放射線ガンマ線、エックス線、等、フィルターろ過、マイクロバブル、交流高電界などが含まれる。殺菌条件を決定するために、例えば、殺菌剤又は静菌剤の種類、濃度等を種々変更したり、温度や圧力の大きさ、処理時間等を種々変更したり、紫外線や放射線のレベル、照射時間等の条件を種々変更したり、フィルターの材質、孔サイズ等の条件を種々変更したり、或いは、電気的条件を種々変更したりしながら、芽胞の殺菌状態を評価し、最適条件を見出すことができる。例えば、加熱処理による殺菌の場合には、芽胞形成細菌の菌種によって適切な温度条件や加熱設備を設定し、また文献記載の耐熱性を基に加熱条件温度×時間を適宜設定することができる。ラボにおいて、100°C以上の加熱時は、アンプル管に溶封し、オイルバスを用いることができる。一方、100°C以下の加熱時は、ウォーターバスやブロックヒーター、サーマルサイクラーを用いることができる。本発明においては、上記の化学的処理及び物理的処理における各種殺菌処理を単独で或いは組み合わせて行うことができる。第2工程この工程では、損傷した芽胞を蛍光染色試薬と接触させて該蛍光染色試薬で芽胞を染色する。すなわち、蛍光染色試薬は、損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬である。一方、非損傷芽胞では、蛍光染色試薬が芽胞内部に透過できないため染色されない。蛍光染色試薬は、損傷を受けた芽胞を染色できるものであれば種類は特定されない。このような蛍光染色試薬としては、芽胞のコア内の核酸を染色することを可能にする蛍光染色試薬、例えば、ヘキスト3334224ethoxyphenyl54methyl1piperazinyl25bi1Hbenzimidazoletrihydrochloridetrihydrate、Hoechst332584662bi1Hbenzimidazole2ylphenol、DAPI、ヘキシジウムイオダイド、SYTOTMRNASelect、芽胞のコア内部の死菌DNAを染色することを可能にする蛍光染色試薬、例えばプロピジウムイオダイドなどが挙げられ、これらの蛍光染色試薬は発芽していない芽胞では染色されず、加熱処理単独や薬剤処理の併用によって芽胞内部が染色されることを確認している。前述の蛍光染色試薬以外にも、生菌数との相関を比較することで、用いることができる蛍光染色試薬を適宜決定できる。そのような蛍光試薬は、例えば、致命的な損傷を免れた芽胞が発芽した場合の生菌活性を測定することが可能である蛍光染色試薬、例えば、芽胞が発芽したことを捉える生菌のもつエステラーゼによって活性化されるCFDAである。蛍光染色試薬を適宜適切な濃度に希釈し、芽胞と混合し数分~数十分常温で処理した後、蛍光顕微鏡により芽胞を観察、計測する。第3工程この工程では、芽胞の殺菌もしくは静菌作用を評価する。この評価は、例えば、蛍光染色試薬によって染色される芽胞と蛍光染色試薬によって染色されない芽胞の割合を定量することによって行うことができる。或いは、場合によっては、非損傷芽胞が発芽した場合の生菌活性を測定することが可能である蛍光染色試薬を用いて非損傷芽胞を染色し、これによって非損傷芽胞の割合を定量してもよい。この定量値と、前述の定量法による損傷芽胞の定量値とから、それぞれの芽胞の割合を決定することができる。非損傷で増殖能力を有する芽胞の計測は、処理したサンプルを適宜希釈し、菌株に合わせた適切な培地で培養し、出現したコロニーの数をカウントすることによって行ってもよい。このとき芽胞の数は、通常、CFUmlの単位で表記される。蛍光染色された芽胞とされていない芽胞の識別と定量は、蛍光顕微鏡やフローサイトメーターなど細胞の色調や蛍光を確認計測できる装置を用いて行うことができるが、機種や計測方法は限定されない。蛍光顕微鏡を用いる場合は、位相差顕微鏡にて、総芽胞数を計測し、蛍光顕微鏡にて、蛍光染色された芽胞数を計測することで染色率蛍光染色された染色芽胞数÷総芽胞数×100を算出する。使用した蛍光染色試薬の特性によって染色率が異なる場合があるが、染色率と生菌数には、負の相関が認められ、すなわち、染色率が高くなるほど、生菌数は低くなることを示す。従って、蛍光染色試薬による染色率と生菌数の相関を一度取得することで、染色率から生菌数を測定することなく、各種殺菌処理によって損傷を受けた芽胞の割合を算出することができ、各種殺菌の効果を決定することができる。これは、正確で迅速な加熱殺菌条件や薬剤濃度条件などの殺菌条件の設定につながる。また、各種薬剤の種類について染色率を比較することで、後述の3節で記載するような、芽胞に損傷を与える効果の高い薬剤をスクリーングすることも可能となる。さらに、本発明の方法は加熱と薬剤の相乗効果についても正確に判定できるという利点を有している。3.芽胞に対し殺菌もしくは静菌作用を有する薬剤のスクリーニング方法本発明はさらに、芽胞形成細菌の芽胞に対し殺菌もしくは静菌作用を有する薬剤をスクリーニングするための方法であって、芽胞形成細菌の芽胞を含有する疑いのあるサンプルに候補薬剤を添加し、該候補薬剤の殺菌もしくは静菌作用を、損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬を用いて評価することを含むことを特徴とする方法を提供する。ここで、サンプルには、食品、医薬品、化粧品などの製品、その製造工程の中間品などが含まれるが、これらに限定されない。候補薬剤には、殺菌剤もしくは静菌剤が含まれる。栄養菌と異なり芽胞の殺菌を可能にする薬剤は限られており、例えば界面活性剤、グルタラール、次亜塩素酸塩、過酢酸などが一般に知られているが、動物体に直接使用する場合には、それらの毒性のために問題がある。このため、無毒又はほとんど毒性のない薬剤のなかで殺芽胞剤となりうる薬剤を見出すために、本発明のスクリーニング法を利用することができる。候補薬剤は、公知の殺菌剤のなかから選択してもよいし、或いは殺菌効果が知られていなかった物質のなかから選択されてもよく、低分子化合物及び高分子化合物のいずれでもよい。候補薬剤の殺菌もしくは静菌作用を、損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬を用いて評価する手順は、上記2第3工程に記載したように行うことができる。必要に応じて、非損傷芽胞が発芽した場合の生菌活性を測定することが可能である蛍光染色試薬を用いて非損傷芽胞を染色し、これによって非損傷芽胞の割合を定量してもよい。4.芽胞の生菌もしくは死菌割合の測定方法本発明はさらに、サンプル中の芽胞形成細菌の芽胞の生菌もしくは死菌割合を測定するための方法であって、該サンプルを蛍光染色試薬と接触させて、損傷した芽胞を蛍光染色試薬で染色し、蛍光染色試薬によって染色される芽胞と蛍光染色試薬によって染色されない芽胞の割合を定量することを含む方法を提供する。この方法は、芽胞の殺菌もしくは静菌作用を評価する方法上記2参照の第2工程及び第3工程からなる。したがって、上記第2工程及び第3工程に関する説明をここでも引用することができる。5.キット本発明はさらに、芽胞形成細菌の芽胞の殺菌もしくは静菌作用を評価するためのキットであって、損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬及び使用説明書を含むキットを提供する。本発明はまた、芽胞形成細菌の芽胞の生菌もしくは死菌割合を測定するためのキットであって、損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬及び使用説明書を含むキットを提供する。蛍光染色試薬としては、上述したように、芽胞のコア内の核酸を染色することを可能にする蛍光染色試薬、例えば、Hoechst33342、Hoechst33258、DAPI、ヘキシジウムイオダイド、SYTOTMRNASelect、芽胞のコア内部の死菌DNAを染色することを可能にする蛍光染色試薬、例えばプロピジウムイオダイド、それらの組み合わせなどが挙げられ、これらの蛍光染色試薬は発芽していない芽胞では染色されない。前述の蛍光染色試薬以外にも、生菌数との相関を比較することで、用いることができる蛍光染色試薬を適宜決定できる。そのような蛍光試薬は、例えば、非損傷芽胞が発芽した場合の生菌活性を測定することが可能である蛍光染色試薬、例えば、芽胞が損傷を受けなかった際に発芽したことを捉える生菌のもつエステラーゼによって活性化されるCFDAである。芽胞形成細菌の芽胞は、特に制限されないものとし、上記例示のもの、例えばバチルス網及びクロストリジウム網からなる群から選択される細菌の芽胞である。本発明のキットはまた、本発明の上記の方法に使用することができるものである。使用説明書には、方法の手順、方法に必要な試薬、バッファなどが説明されている。以上、本発明を詳細に説明したが、本発明の範囲は以下のように要約される。芽胞形成細菌の芽胞の殺菌もしくは静菌作用を評価するための方法であって、該芽胞に殺菌処理を施し芽胞に損傷を与える工程、該損傷した芽胞を蛍光染色試薬と接触させて該蛍光染色試薬で芽胞を染色する工程、及び該芽胞の殺菌もしくは静菌作用を評価する工程を含む、前記方法。前記芽胞の殺菌もしくは静菌作用の評価を、蛍光染色試薬によって染色される芽胞と蛍光染色試薬によって染色されない芽胞の割合を定量することによって行うことを特徴とする、に記載の方法。前記芽胞の殺菌が、殺菌剤又は抗菌剤などによる化学的処理、或いは、熱、紫外線、放射線、マイクロバブルなどによる物理的処理によって行うことを特徴とする、又はに記載の方法。前記蛍光染色試薬が、損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬であることを特徴とする、~のいずれかに記載の方法。前記蛍光染色試薬が、芽胞が損傷を受けた際にコア内部にあるDNAを染色することを可能にするヘキスト33342及びDAPI、並びに、芽胞のコア内部の死菌DNAを染色することを可能にするプロピジウムイオダイドPIからなる群から選択されることを特徴とする、又はに記載の方法。前記芽胞形成細菌の芽胞が、バチルス網及びクロストリジウム網からなる群から選択される細菌の芽胞であることを特徴とする、~のいずれかに記載の方法。非損傷芽胞が発芽した場合の生菌活性を測定することが可能である蛍光染色試薬を用いて該非損傷芽胞を染色し、これによって非損傷芽胞の割合を定量することをさらに含むことを特徴とする、~のいずれかに記載の方法。前記蛍光染色試薬が、芽胞が損傷を受けなかった際に発芽したことを捉える生菌のもつエステラーゼによって活性化されるCFDAであることを特徴とする、に記載の方法。芽胞形成細菌の芽胞に対し殺菌もしくは静菌作用を有する薬剤をスクリーニングするための方法であって、芽胞形成細菌の芽胞を含有する疑いのあるサンプルに候補薬剤を添加し、該候補薬剤の殺菌もしくは静菌作用を、損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬を用いて評価することを含むことを特徴とする、前記方法。サンプル中の芽胞形成細菌の芽胞の生菌もしくは死菌割合を測定するための方法であって、該サンプルを蛍光染色試薬と接触させて、損傷した芽胞を蛍光染色試薬で染色し、蛍光染色試薬によって染色される芽胞と蛍光染色試薬によって染色されない芽胞の割合を定量することを含むことを特徴とする、前記方法。芽胞形成細菌の芽胞の殺菌もしくは静菌作用を評価するためのキットであって、損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬及び使用説明書を含むことを特徴とする、前記キット。芽胞形成細菌の芽胞の生菌もしくは死菌割合を測定するためのキットであって、損傷芽胞を染色することが可能な蛍光染色試薬及び使用説明書を含むことを特徴とする、前記キット。前記蛍光染色試薬が、ヘキスト33342、DAPI、プロピジウムイオダイドPI又はそれらの組合せであることを特徴とする、又はに記載のキット。非損傷芽胞が発芽した場合の生菌活性を測定することが可能である蛍光染色試薬をさらに含むことを特徴とする、~のいずれかに記載のキット。前記蛍光染色試薬が、芽胞が損傷を受けなかった際に発芽したことを捉える生菌のもつエステラーゼによって活性化されるCFDAであることを特徴とする、に記載のキット。前記芽胞形成細菌の芽胞が、バチルス網及びクロストリジウム網からなる群から選択される細菌の芽胞であることを特徴とする、~のいずれかに記載のキット。~のいずれかに記載の方法に使用するためのものであることを特徴とする、~のいずれかに記載のキット。以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの実施例に限定されるものではない。[実施例1]供試菌株Geobacillusstearothermophilus株を供試菌株として用いた。芽胞の調製供試菌株について、公知の文献近藤雅臣、渡部一仁偏著スポア実験マニュアル技報堂出版、1995、p19日本を参照し、芽胞を調製した。薬剤処理調製した芽胞液に、ショ糖脂肪酸エステル製品名:P1670三菱化学フーズ社製、界面活性剤製品名:TritonX100和光純薬社製を終濃度100ppmになるように添加した。また、芽胞液の終濃度は、105オーダーCFUml以上になるように調整した。加熱処理薬剤処理したサンプル2mlをアンプル管に溶封し、オイルバスを用いて121°Cで15又は30分間加熱処理した。加熱処理をしない処理区も設定した。生菌数の測定薬剤処理及び加熱処理したサンプル1mlは、希釈系列を作成し、標準寒天培地に混釈培養した。55°C72時間培養後、形成したコロニーを計数し生菌数を求めた。蛍光染色試薬処理薬剤処理及び加熱処理したサンプル1mlを15mLエッペンチューブに移し、15000rpm×3分間遠心分離し、上清を廃棄した。沈殿物に10μgml濃度のヘキスト33342Invitrogen社を10μL添加しよく混和した。数分~30分間染色した。蛍光顕微鏡観察染色したサンプルを顕微鏡にて観察した。蛍光顕微鏡観察は、公知の文献稲澤譲治、津田均、小島清嗣監修顕微鏡ふる活用術イラストレイテッド秀潤社、2007、p52~66、p196~198を参照した。蛍光色素の励起波長に適したフィルターと、蛍光波長に適した吸収フィルターがセットになった蛍光キューブを選択した。蛍光観察装置と位相差装置が装備された顕微鏡を用いて蛍光像と位相差像の合成画像を作成し、これをもとに染色芽胞と非染色芽胞を合計で100cell以上となるまで計測した。生菌数と染色性Geobacillusstearothermophilusの芽胞について、薬剤と加熱を組み合わせた場合のヘキスト33342による芽胞の染色率と生菌数の関係を表1に示す。加熱をしない処理区では、染色率、生菌数に変化はほとんど見られず、薬剤を添加しても、芽胞に対しては効果がないことが分かる。損傷していない芽胞の顕微鏡写真を図1に示す。ヘキスト33342によって芽胞は染色されていないことがわかる。加熱条件を121°C30分行った場合は、80以上染色され、生菌数も有意に減少している。損傷している芽胞の顕微鏡写真を図2に示す。ヘキスト33342によって芽胞のコア内部が染色されていることがわかる。121°C15分の殺菌では、薬剤なしの水処理区が染色率215であるのに対しショ糖脂肪酸エステル界面活性剤P1670100ppm添加区は、417と倍増していた。生菌数においても水処理区に比べP1670処理区のほうが13に減少していた。このことにより、加熱とP1670を組み合せることによって、加熱単独より芽胞を損傷させる効果が高まることが、染色率によって培養せずにリアルタイムに判定することが可能であった。染色率と生菌数には相関が認められた。このように加熱による芽胞の損傷や、加熱と薬剤の相乗効果による芽胞の損傷の影響を培養することなくリアルタイムに観察することが可能であった。[実施例2]供試菌株としてGeobacillusstearothermophilus株を、蛍光染色試薬としてプロピジウムイオダイドを用いた以外は全て実施例1と同様にして染色率と生菌数の相関を見た。Geobacillusstearothermophilusの芽胞について、薬剤と加熱を組み合わせた場合のPIによる芽胞の染色率と生菌数の関係を表2に示す。蛍光染色試薬としてヘキスト33342を用いた実施例1の場合と同様に染色率と生菌数には相関が認められ、PIを用いても殺菌処理による芽胞の損傷をリアルタイムに評価することが可能であった。