免疫原を特異的に認識する非ヒト動物のポリクローナル抗血清組成物であって、前記抗血清組成物は、ヒト重鎖ポリペプチドの少なくとも一部で構成される実質的にヒトの免疫グロブリンタンパク質分子で優先的に構成され、前記実質的にヒトの免疫グロブリンタンパク質分子が前記免疫原に特異的に結合する組成物。前記トランスジェニック非ヒト動物が、前記抗原性実体で免疫され、少なくとも1kgの重量であり、相同的組換えによりそのゲノムに組み込まれた機能的ヒト重鎖免疫グロブリン遺伝子の少なくとも一部を含む、請求項1に記載のポリクローナル抗血清。前記トランスジェニック非ヒト動物が遺伝子変換により優先的に抗体多様性を生じる、請求項1に記載のポリクローナル抗血清組成物。前記トランスジェニック非ヒト動物がウサギ目からのものである、請求項1に記載のポリクローナル抗血清組成物。前記機能的ヒト重鎖免疫グロブリン遺伝子の一部が少なくとも1つの定常領域要素を含む、請求項1に記載のポリクローナル抗血清組成物。前記機能的ヒト重鎖免疫グロブリン遺伝子の一部が少なくとも1つの可変部要素をさらに含む、請求項5に記載のポリクローナル抗血清組成物。前記可変部要素がD領域に近傍の可変部要素である、請求項6に記載のポリクローナル抗血清組成物。前記免疫原が疾病を引き起こす生物またはその抗原性部分を含む、請求項1に記載のポリクローナル抗血清組成物。前記免疫原がヒトに対して内在性の抗原である、請求項1に記載のポリクローナル抗血清組成物。前記免疫原がヒトに対して外因性の抗原である、請求項1に記載のポリクローナル抗血清組成物。少なくとも1kgの重量であり、相同的組換えによりそのゲノムに組み込まれる機能的ヒト重鎖免疫グロブリン遺伝子の少なくとも一部を含むトランスジェニック非ヒト動物であって、前記機能的ヒト重鎖免疫グロブリン遺伝子の一部は、少なくとも部分的にヒト重鎖免疫グロブリンポリペプチド配列を含む機能的で実質的にヒトの抗体分子をコードする、前記非ヒト動物に内在性の重鎖免疫グロブリン配列枠内で再配列し、前記動物が、免疫を与えられたときに、前記機能的で実質的にヒトの抗体分子を優先的に生成するトランスジェニック非ヒト動物。少なくとも1kgの重量であり、相同的組換えによりそのゲノムに組み込まれた機能的ヒト軽鎖免疫グロブリン遺伝子の少なくとも一部を含むトランスジェニック非ヒト動物であって、前記ヒト軽鎖免疫グロブリン遺伝子が、少なくとも部分的にヒト軽鎖免疫グロブリンポリペプチド配列を含む機能的で実質的にヒトの抗体分子をコードする前記非ヒト動物に、内在の配列枠内で再配列するトランスジェニック非ヒト動物。前記トランスジェニック非ヒト動物が遺伝子変換により優先的に抗原多様性を発生する、請求項11または12に記載のトランスジェニック非ヒト動物。前記トランスジェニック非ヒト動物がウサギ目からのものである、請求項11または12に記載のトランスジェニック非ヒト動物。前記機能的ヒト重鎖免疫グロブリン遺伝子の一部が少なくとも1つの定常領域要素を含む、請求項11または12に記載のトランスジェニック非ヒト動物。前記機能的ヒト重鎖免疫グロブリン遺伝子の一部が少なくとも1つの可変部要素をさらに含む、請求項15に記載のトランスジェニック非ヒト動物。前記可変部要素がD領域に近傍の可変部要素である、請求項16に記載のトランスジェニック非ヒト動物。前記ヒト免疫グロブリン軽鎖遺伝子がκ鎖をコードする、請求項12に記載のトランスジェニック非ヒト動物。請求項11に記載のトランスジェニック非ヒト動物によって産生される抗血清組成物。ヒト体内要素での抗原性実体を中和する方法であって、前記体内要素を請求項1に記載の抗血清組成物と接触させ、それにより、前記抗血清組成物における前記実質的にヒトの免疫グロブリンタンパク質分子が、特異的に結合し、そして前記抗原性実体を中和することを含む方法。前記抗原性実体が感染性疾病を引き起こす生物から得られる、請求項20に記載の方法。前記抗原性実体が細胞表面分子である、請求項20に記載の方法。前記細胞表面分子がリンパ球または脂肪細胞から得られる、請求項22に記載の方法。前記抗原性実体がヒトサイトカインまたはヒトケモカインである、請求項20に記載の方法。前記抗原性実体が悪性癌細胞上の細胞表面分子である、請求項20に記載の方法。少なくとも1kgの重量であり、相同的組換えによってそのゲノムに組み込まれるヒト免疫グロブリン遺伝子を含むトランスジェニック非ヒト動物を生産する方法であって、前記動物が、免疫化されたときにヒト免疫グロブリンポリペプチド配列の少なくとも一部から構成される機能的で実質的にヒトの抗体分子を優先的に産生し、前記方法は、定常および/または可変部要素が、前記動物の細胞核の遺伝的改変によりヒト重鎖免疫グロブリン遺伝子座の少なくとも機能的部分に置換される重鎖免疫グロブリン遺伝子座を含む第一の突然変異動物を産生し;前記細胞核を、除核した核移植単位細胞に導入して、第一の胚幹細胞を提供し;前記第一の核移植単位細胞を、雌受容体宿主に導入して、第一の突然変異新生仔を産生し;定常および/または可変部要素が、前記動物の細胞核の遺伝的改変によってヒト軽鎖免疫グロブリン遺伝子座の少なくとも機能的部分に置換される軽鎖免疫グロブリン遺伝子座を含む第二の突然変異動物を産生し;前記細胞核を、除核した核移植単位細胞に導入して、第二の胚細胞幹細胞を提供し;前記第二の核移植単位細胞を、雌受容体宿主に導入して、第二の突然変異新生仔を産生し;そして成熟した第一および第二突然変異新生仔を交配させ、そして実質的にヒトの抗血清を産生する能力があり、そして内因性抗血清を産生する能力の少なくとも実質的にない動物を選択することを含む、方法。少なくとも1kgの重量であり、相同的組換えによってそのゲノムに組み込まれるヒト免疫グロブリン遺伝子を含むトランスジェニック非ヒト動物を産生する方法であって、前記動物が、免疫化されたときにヒト免疫グロブリンポリペプチド配列の少なくとも一部から構成される機能的に実質的なヒト抗体分子を優先的に産生し、前記方法は、定常および/または可変部要素が、前記動物の細胞核の遺伝的改変により少なくとも機能的部分またはヒト重鎖および/または軽鎖免疫グロブリン遺伝子座に置換される重および軽鎖免疫グロブリン遺伝子座を含む突然変異動物を産生し;前記細胞核を、除核した核移植単位細胞に導入して、胚幹細胞を提供し;前記核移植単位細胞を、雌受容与体宿主に導入して、突然変異新生仔を産生し;そして成熟した突然変異新生仔を交配させ、そして実質的にヒト抗血清を産生する能力があり、そして内因性抗血清を産生する能力が少なくとも実質的にない動物を選択することを含む、方法。前記核移植単位細胞が卵母細胞である、請求項26または27に記載の方法。前記動物がウサギ目から得られるものである、請求項26または27に記載の方法。前記重鎖遺伝子座が少なくとも1つの定常領域要素を含む、請求項26または27に記載の方法。前記重鎖遺伝子座が少なくとも1つの可変部要素を含む、請求項26または27に記載の方法。前記重鎖遺伝子座がD領域に近傍の可変部要素を含む、請求項26または27に記載の方法。遺伝的に改変された軽および重鎖免疫グロブリン遺伝子座および少なくともヒト軽および重鎖免疫グロブリン遺伝子座の一部を含むトランスジェニック家畜が、供給されることを特徴とする、特異的抗原に対する実質的にヒトポリクローナル抗血清の産生の方法が提供される。前記方法は、抗体レパートリーが、遺伝子変換によって優先的に多様化される家畜例えば、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシの段階的修飾を使用する。前記方法は、対応のヒト等価物との免疫グロブリン遺伝子座の内因性要素の相同的組換えによる置換、特に、重および軽鎖の定常領域、およびD領域の遺伝子座に近傍のものを含めた1種または数種の可変部要素をコードする1種または数種のエキソンの置換に関与する。抗体多様性が、遺伝子変換によって優先的に発生される動物では、ヒトV領域要素に、主にD領域に近傍のV領域を置換することは、免疫グロブリンの大半でのヒトV要素の発現を生じる。この遺伝子操作に続いて、同じ種の宿主を交配し、そして宿主グリコシル化を用いた実質的にヒトの抗血清の産生で免疫化に応答する能力のある宿主について選択し、免疫グロブリンは、ヒト重鎖の少なくとも機能的部分を有する。実質的にヒトのタンパク質配列免疫グロブリンを発現する動物を、目的の免疫原、特に、治療活性を示す抗体産生を開始させる免疫原との免疫化によるポリクローナル抗体調製物の生成のために使用する。抗血清の精製後、このような抗血清を、それ自身または、感染性試薬、悪性細胞、癌、歓迎されない標的細胞または免疫調節の消耗のための他の試薬との組み合わせで使用し得る。宿主を免疫原で免疫化させることによって、異種宿主中で実質的にヒトの抗血清を生成する方法が提供される。宿主は、内因性抗血清を産生する能力が少なくとも実質的になく、免疫原物質に露出することにより実質的にヒトのポリペプチド抗血清を優先的に産生する能力のあること;免疫グロブリン遺伝子座を転位し、V、DH、JおよびC領域を組換えて、実質的にヒトのタンパク質抗血清を産生させるそれの能力を保持することによって特徴づけられ、少なくとも1つのヒト免疫グロブリン定常領域および/または少なくとも1つのヒト可変V部要素を含む。特に目的であるのは、Cγサブクラス1、2、3および4のいずれかを含めたCαまたはCγのサブクラスの定常領域である。ヒト定常領域および可変部をコードするDNA断片は、対応する内因性要素の相同的組換えおよび置換によって、ゲノムに組み込まれる。種々な動物、特に適度な量の抗血清を供給できる家畜が、使用され得る。動物は、一般に、少なくとも1kg、好ましくは2kgであり、そして小型の動物は、適切であるとして使用できるが、成体の場合、5kgまたはそれ以上であってよい。さらに、妊娠期間は、12ヶ月未満、通常、1から4ヶ月の範囲にあるべきである。例示の動物は、ウサギ目、例えば、ネズミを除いた、ウサギ、ヒツジ、ウシ、イヌ、ネコ、ウマ等が挙げられる。特に目的であるものは、抗体レパートリーの多様性が、遺伝子変換によって優先的に達成される動物すなわち、ウサギ、ブタ、ヒツジ、ウシである。これらの動物の中で、D領域に近傍のV領域要素の、ヒトV領域要素への置換は、大半の免疫グロブリンでのヒトV領域要素の発現を生じる。主題の発明の説明された遺伝子操作のアプローチ法は、マウスで行われた他のアプローチ法より実質的に早い。しかし、マウスでは、抗体レパートリーの多様化は、遺伝子転位によって優先的に達成される。宿主細胞、例えば線維芽細胞、ケラチン細胞、ミオサイト、肝細胞、上皮細胞、または培地で育成および拡張され得るが、転位ゲノムを有しない他の細胞は、断片が宿主ゲノムに介入し始める細胞へのDNA断片の導入によって形質転換遺伝的に修飾される。裸のDNA、ウイルス性ベクターでの形質移入、融合、バイオリスティックス、リポソームなどを含めた種々の方法による導入がなされ得る。特定の方法は、DNAの導入、および介入の効力の目的にしたがって選択される。機能的免疫グロブリン軽および重鎖遺伝子座は、相同的組換えによって、宿主重鎖定常領域の少なくとも一部を、ヒト重鎖定常領域の少なくとも機能性部分に、そして所望の場合、類似に、宿主軽鎖定常領域を、ヒト軽鎖定常領域に置換することによって修飾される。特に目的であるのは、D領域に最も近傍のV領域を、ヒトV領域要素に置換することでもある。この方法では、免疫グロブリンのある部分は、宿主配列である一方で、抗血清は、抗血清中の非常に多様な可変部の観点で、強力な免疫応答を引き起こしそうにない。抗体多様性が、遺伝子変換によって優先的に発生される動物では、D領域に最も近傍のV領域をヒトV領域要素に置換することで、大半の免疫グロブリン中のヒトV要素の発現を生じる。定常領域の置換について、定常領域の3個のドメインCH1、CH2およびCH3の内の少なくとも約2を含むこと、特にCH3を含むことは、特に目的のものである。その範囲まで、このような抗血清は、宿主で、特に免疫適合化宿主で機能でき、このような抗血清を産生する宿主を保持する減少した数の段階は魅力的である。予定された部位での組込みについて、配列中に、組込みのためのDNA断片、および少なくとも約30ntの相同性配列によって境界線をなした第一のマーカー遺伝子、および第二のマーカー遺伝子を含めた構築物が作製され、それにより、相同性組込みで、第二のマーカー遺伝子の損失を生じる。負の選択を供する第二のマーカー遺伝子を有することによって、第二のマーカー遺伝子を有する細胞は、細胞混合物に対して選択され、それから除去される;正の選択を供する第一のマーカー遺伝子を有することによって、第一のマーカー遺伝子を有する細胞は、第二のマーカー遺伝子が感受性がある培地を使用することによって保持される。この手段で、構築物が、任意に組込まれるような細胞は、減少される。第一のマーカー遺伝子に感受性のある培地を用いることに続いて、第一のマーカー遺伝子を保持しない細胞は、減少される。この方法で、残りの細胞は、相同的組換えを有するものであるべきである。望ましくは、細胞は、非増殖状態よりむしろ、迅速に増殖する状態にある。FCSおよび成長因子を補足したRPMI1640またはDMEMのような育成用培地を使用することによって、成長サイクルが誘導され得る。細胞が形質転換または形質移入された後、使用されたマーカー、通常、抗生物質耐性またはtk遺伝子による選択性培地に、細胞を入れる。その細胞を、培養中に拡張し、その後クローン化する。その後、クローン中の個々の細胞を、所望の遺伝的修飾についてスクリーニングし得る。都合よく、PCRは、所望の修飾、消耗または組込みが起こったことを同定するために使用され得る。遺伝的修飾は、単独の修飾、または所望により、第一の修飾を示す細胞の拡張後、細胞を、次に第二の修飾にかけ得る。例えば、重鎖定常領域を置換した後、軽鎖定常領域を置換し得る。個々の修飾が生じるとき、正の選択のための単独のマーカーを使用し、そして反復して同じマーカーを使用し得る。同じ細胞に対する2つまたはそれ以上の修飾が、発生されるとき、様々な正の選択マーカーは、独立に各段階で選択するために、使用されるべきである。すでに示されるとおり、膨大な抗生物質耐性遺伝子があり、そしてその遺伝子は、組合せて使用でき、それにより各段階での選択に対処する。選択のために有用な遺伝子は、neo、tet、cam、tk、pen、mtxなどが挙げられる。宿主細胞が修飾され、そして所望の修飾を有することが示された後、その後、細胞は、除核された核移植単位細胞、例えば卵母細胞または胚の幹細胞、機能性新生仔を形成する全能性および能力のある細胞と融合させ得る。十分に樹立された従来の技術によって、融合は行われる。例えば、Cibelliら、Science1998年280巻:1256頁参照。代替的には、卵母細胞の除核および核移植は、注入ピペットを使用した微細手術によって行われ得る。例えば、Wakayamaら、Nature1998年394巻:369頁参照。その後、生じた機能性卵細胞は、適切な培地で培養され、そして同調した受容体に移植される。核移植単位細胞を生成する別の方法は、ヒト移入遺伝子を含むDNA構築物を、受精卵に導入することである。その後、卵を、胚の幹細胞を提供するために拡張し、そしてそれを、所望の遺伝的修飾についてスクリーニングし、そして続いて、卵を終末に至らせる育成母親に胚を移植し、そして生じた新生仔を、修飾ゲノタイプについてスクリーニングする。その後、生じた突然変異宿主は、他の突然変異宿主と交配させるために使用し得る。例えば、改変した重鎖免疫グロブリン遺伝子座を有する宿主を、改変した軽鎖免疫グロブリン遺伝子座を有する宿主と交配させて、実質的にヒトのポリペプチド免疫グロブリンを産生する能力のある宿主を交配し得る。その後、2つの突然変異遺伝子を含有する半接合姉妹細胞を交配させて、同型接合姉妹細胞を生じさせる。同型接合性は、歓迎されない遺伝子配列の不在によって容易に決定され得る。各交配の後、宿主を、その細胞、特に生殖細胞中の遺伝的修飾の存在について分析し、そして通常3世代より多くない別の世代に交配させて、修飾が、継代世代を通して安定に維持されることを確実にし得る。種々の子孫のゲノムを、遺伝的修飾の維持について分析し得るか、または適切な場合、子孫を、遺伝的修飾が発生した生物学的変化について分析し得る。いったん宿主が発生されると、宿主は、ここで、使用されて、種々の条件下で抗血清を生成し得る。抗血清の使用によって、抗原、抗原に共有結合で結合したハプテンを含む免疫原、生物、例えばウイルスおよび単細胞生物、生の、弱毒化した、または死滅した生物の断片、オルガネラ、細胞、特に、ヒト細胞または細胞の断片等が使用し得る。このように、抗血清を、抗原、小さな有機分子または種々の実体が、ヒト宿主に対して内因性または外因性であり得る細胞に向け得る。その免疫化組成物を、任意の従来の手段で、アジュバントと共に、またはなしに投与しでき、そして予め決定された日程にしたがって投与され得る。その後、免疫化組成物についての親和性が、監視でき、そしてその抗血清が、所望の特異性および親和性を示すときに収集される。抗血清の親和性は、少なくとも約107、通常少なくとも約108、好ましくは少なくとも約109、またはそれ以上である。ある種の用途については、D領域に近傍のV要素が種々のヒトV領域要素に置換された宿主を使用し得る。この方法で、同じ免疫原に対する様々な免疫応答は、可変部配列が遺伝子変換の結果であり得る様々な宿主から得られ、そしてそれにより様々の対立遺伝子が提供される。様々な宿主から得られる抗血清を混合して、境界線のレパートリーの抗体を提供し得る。10個までまたはそれ以上の異なる宿主が、目的の抗原によって、使用され得る。抗体調製物は、ヒト配列免疫グロブリンを発現する遺伝子操作した動物の血液を分画することによって得られる。濃縮免疫グロブリン分画は、クロマトグラフィー親和性、イオン交換、ゲル濾過など、硫酸アンモニウムのような塩、エタノールのような有機溶媒、またはポリエチレングリコールのような高分子との選択的沈降によって製造され得る。分画した抗体は、ヒトでの静脈投与のために適切な非毒性で、非発熱物質の培地、例えば滅菌平衡生理食塩水に溶解または希釈され得る。ある種の用途では、抗体調製物は、上皮に直接塗布され得る。このような用途のために、分画した抗体は、KYゼリー等のような水溶性ゲルに溶解させ得る。投与のために使用される抗体調製物は、0.1から100mg/ml、さらに通常には1から10mg/mlまでの免疫グロブリン濃度を示すポリクローナル抗体集団を含むことによって一般に特徴づけられる。抗体調製物は、種々のイソタイプの免疫グロブリンを含有し得る。代替的には、抗体調製物は、ただ1つのイソタイプ、または多数の選択イソタイプの抗体を含有できる。ほとんどの例では、抗体調製物は、未修飾免疫グロブリンから構成される。代替的には、免疫グロブリン分画は、酵素的消化例えば、ペプシン、パパイン、プラスミン、グリコシダーゼ、ヌクレアーゼなどを用いた、加熱などのような処置にかけ、および/またはさらに分画し得る。抗体調製物は、一般に、適切な静脈に埋められたカテーテルを介して注射または輸液により都合よく静脈で導管系に投与される。抗体調製物を、一般に約10分から約24時間まで、さらに一般的には約30分から約6時間までの範囲に入る適切な速度で、液体が患者によって許容され得る速度によって投与する。有効な投与量の投与は、単回注入、または一連の注入で起こり得る。反復注入は、抗体調製物の半減期および医療上の指示によって、一日一回、週一回、月一回、または三ヶ月に一回投与され得る。上皮表面への塗布については、抗体調製物を、治療の必要な表面に、意図される最終結果を提供するのに十分な量で塗布し、そして必要とされる場合、繰返され得る。その抗体調製物は、疾病を引き起こすか、または所望でないか、または異常な免疫応答を発揮するヒトの体組織中の抗原性実体を結合し、そして中性にするそれらの能力での用途を見出す。抗原性実体は、タンパク質、並びに、少なくとも抗体に結合する能力があり、そして好ましくは免疫応答を刺激する能力もある細胞または感染性疾病を引き起こす生物または剤を含めた任意の溶解性または細胞表面結合分子を含むことがここに定義される。単独療法、または化学療法との組み合わせとして感染性の剤に対する抗体調製物の投与で、感染性粒子の排除を生じる。抗体の単回投与は、一般に10から100倍まで、より一般的には1000倍以上、感染性粒子の数を減少させる。同様に、単独療法または化学療法との組み合わせとして悪性疾病を有する患者での抗体療法は、一般に10から100倍まで、または1000倍以上、悪性細胞の数を減少させる。療法は、拡張量の時間を越えて繰返されて、感染性粒子、悪性細胞などの完全な排除を保証し得る。ある種の例では、抗体調製物を用いた療法は、検出可能な量の感染性粒子または歓迎されない細胞の不在下で、拡張量の時間継続される。同様に、免疫応答の調節のための抗体療法の使用は、治療用抗体の単回または多重投与から構成され得る。療法は、任意の疾病症状の不在下で、拡張量の時間継続され得る。主題の治療は、感染性疾病または悪性疾患を阻害するのに十分な投与量で、化学療法と共に使用され得る。自己免疫疾病の患者または移植受容者で、抗体療法は、免疫反応を阻害するのに十分な投与量で免疫抑制療法と共に使用され得る。以下の実施例は、例示として供与され、そして限定としてでない。実験実質的にヒトの免疫グロブリンを発現するトランスジェニックウサギの発生ヒト定常領域要素および可変部要素をコードするエキソンは、相同的組換えによりウサギ線維芽細胞のゲノムに組み込まれる。ウサギ線維芽細胞を、ヒト免疫グロブリン遺伝子座要素を含む種々の線状DNA構築物と形質移入させる。成功裏に形質移入した細胞を選択し、そしてウサギのクローニングに使用する。ウサギのクローニング成熟オランダベルトンウサギを、毎12時間0.3mg×2および0.4mg×4に、濾胞刺激ホルモンFSHの皮下注射によって過剰排卵させる。卵発生は、最後のFSH注射の12時間後に、0.5mgの黄体形成ホルモンLHの静脈注射によって誘導される。卵母細胞は、LH注射の17時間後の卵管洗浄によって回収される。卵母細胞は、成熟の16~19時間後に機械的に除核される。染色体除去は、紫外線下で、bisBENSIMIDEホエスト33342、ミズーリー州セントルイスのシグマ染料で評価する。除核した卵母細胞を、15usエレクロセルマニュピュレーター200、カリフォルニア州サンディエゴのジェネトロニックスについて180V/cmの1回の電気パルスを使用することによって、活発に分割する線維芽細胞と融合させる。3~5時間後、卵母細胞を、4分間、カルシウムイオノファー6uM番号407952、カリフォルニア州サンディエゴのカルビオケム、および3時間、3mg/mlウシ血清アルブミン脂肪酸不含、シグマを用いて、CR2培地特に、ニュージャージー州ラバレットのメディア中の2mMの6-ジメチルアミノプリンDMAP、シグマで化学的に活性化させる。活性化に続いて、胚を、ハムスター胚培養用培地HECM-ヘペスで5回洗浄し、そして順次、7日間、37.8°Cで、そして空気中5CO2で、3mg/mgl脂肪酸不含BSAを含むCR2培地で培養する。その後、胚を、同調させた受容体に移植させる。子孫を、PCRによって移入遺伝子のセグメントについて分析する。ウサギで、B型肝炎表層抗原に対して発現されるヒト抗体の結合遺伝子操作したウサギ上に記述されるとおりに、0日目および14日目に、精製B型肝炎表層抗原HBsAg不完全フロイントアジュバント中10μgを筋肉内に免疫した。28日目に、動物を、耳から出血させ、そして血清を作成する。ELISAプレートNUNC、デンマークに、1時間、室温で、PBS中の1μg/mlのHBsAgを被覆させる。続いて、利用可能な結合部位は、PBS中1非脂肪スキムミルクNFM300μl/ウエルでのインキュベーションによって遮断される。ウサギ血清を、PBS/1NFMに希釈し、そして被覆ウエルに添加する。1時間のインキュベーションの後、プレートを、3回、PBS/0.05ツイーン20で洗浄し、そして結合Igを、西洋ワサビペルオキシダーゼで接合させたヤギ抗ヒトIgを使用して検出する。接合ヤギ抗体を、1mg/mlでo-フェニレンジアミンジヒドロクロリドシグマを使用して検出する。比色反応を、1MHCl溶液の添加によって停止させ、そして吸光度を、490nmで測定する。対照として、非免疫ウサギから得た血清を、使用する。非免疫ウサギから得た血清は、HBsAgと反応しない。1:100の希釈で、未被覆およびHBsAg被覆ウエルで測定した光学密度は、0.4未満である。対照的に、免疫ウサギから得た血清は、HBsAgと反応性のある実質的にヒトの抗体を含有する。1:100の血清希釈で、測定された光学密度は、2.8である。血清のさらなる希釈で、測定された光学密度は、0.2に25600の希釈で減少する。ヤギ抗ウサギIgG-HRP接合体と反応性のある抗体は、まったく検出されない。これは、遺伝子操作したウサギは、免疫化に続く実質的にヒトの抗-HBsAg抗体を産生することを示す。ヒト抗体を使用するウイルス感染セルラインの補体指向性細胞毒性HBsAgを発現するヒト肝癌腫セルラインを、1時間、37°Cで、100ulのPBS中の0.1mCi51Crで標識する。2千個の51Cr標識細胞を、抗-HBsAg免疫グロブリンを発現する遺伝子操作したウサギから得た血清上記参照とインキュベートする。37°Cで、2時間後、上清への51Crの放出は、シンチレーション測定装置を用いて放射活性を測定することによって測定される。最大限の放出の測定のために、1トリトン×100を添加する。細胞溶解の程度は、以下のとおり計算される:溶解率=実験的CPM±自発的CPM数/CPM総数±自発的CPM。非免疫化ウサギから得た血清1:30に希釈との標識細胞のインキュベーションは、細胞溶解<10を生じる。しかし、免疫化ウサギから得られる血清を用いた細胞のインキュベーションは、80細胞溶解を引き起こす。加熱処理30分間、56°Cによる血清中の補体の不活性化は、免疫化ウサギから得た血清を不活性にさせる。これらの結果は、遺伝子操作したウサギによって産生される実質的にヒトの抗体は、HBsAg陽性細胞に結合し、そして補体依存性溶解を引き起こすことを示す。感染を示す動物の処置実質的にヒトの免疫グロブリンを、硫酸アンモニウム沈降およびイオン変換クロマトグラフィーにより、遺伝子操作したウサギの血清から精製する。SCIDマウスに、HBsAgを発現する百万個のヒト肝臓癌腫細胞を注射する。続いて、25μgの免疫グロブリンを、日当たり一回腹膜に注射する。非免疫化ウサギ血清から単離される抗体で処置した動物は、約60日後に死ぬ。これは、肝臓癌腫細胞の未処置受容者に類似する。対照的に、免疫化ウサギ血清から単離される抗体で処置されるマウスは、150日以上の間生存する。これは、遺伝子操作されるウサギで産生されるヒト抗体は、SCIDマウスからヒト癌腫細胞を排出する能力のあることを示す。実質的にヒトの免疫グロブリン遺伝子を発現する遺伝子操作されたウサギを用いることによって、抗原、感染性粒子、癌細胞等に対するポリクローナル抗体調製物を発生させ得ることは、上の結果から明らかである。このようなポリクローナル抗体調製物は、感染性疾病または悪性疾患に罹っている患者を治療するために使用できる。抗血清も、細胞副集団の排出、サイトカインなどによる免疫応答を調節するために使用し得る。ヒト抗体調製物は、ヒト患者での免疫応答を生む見込みが実質的に減少されたことを示し、異種の抗血清に比べると、ほとんど副作用を示さず、そして正の結果で安全に使用できる。ここに引用される文献の全ては、各文献が、個々に全体的に組み込まれるように、参照してここに組み込まれる。多くの変化および修飾が、付随の請求項の概念および範囲から逸脱することなく、そこに行われ得ることは、当業者のだれにも明らかである。