"ヒトモノクローナル抗タウ抗体またはそのタウ結合断片。請求項1に記載の抗体であって、i組換えヒトタウに結合可能である;ii病理的修飾型タウに結合可能である;iii脳内の神経原線維濃縮体NFT、糸屑状構造物および/またはジストロフィー性神経突起におけるプレタングルステージpre-tanglestageの病理的凝集型タウに結合する;iv脳内で生理型タウに実質的に結合しない;v配列番号1~6によって表されるタウアイソフォームB~Fまたは胎児型タウのいずれか1つに特異的に結合する;viタウC末端に特異的に結合する;viiタウN末端に特異的に結合する;viii生理的微小管結合タウではマスクされている微小管結合ドメインに局在するタウエピトープに特異的に結合する;ix脳内の神経原線維濃縮体NFT、糸屑状構造物および/またはジストロフィー性神経突起におけるプレタングルステージpre-tanglestageの病理的凝集型タウに特異的に結合する;x配列番号7のアミノ酸配列を含むタウエピトープに特異的に結合する;xi配列番号41のアミノ酸配列を含むタウエピトープに特異的に結合する;xii配列番号7および41のアミノ酸配列を含むタウエピトープに特異的に結合する;またはxiii配列番号42のアミノ酸配列を含むタウエピトープに特異的に結合する前記抗体。a配列番号23、29および35からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む重鎖CDR1、配列番号24、30および36からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む重鎖CDR2、ならびに配列番号25、31および37からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む重鎖CDR3;b配列番号26、32および38からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖CDR1、配列番号27、33および39からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖CDR2、ならびに配列番号28、34および40からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖CDR3;c配列番号9、13、17および93からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域;またはd配列番号11、15および19からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項1または2に記載の抗体またはそのタウ結合断片。キメラマウス-ヒト抗体またはマウス化抗体である、請求項1~3のいずれか1項に記載の抗体またはそのタウ結合断片。請求項1~4のいずれか1項に記載の抗体とタウに対する特異的結合について競合する抗体またはその抗原結合断片。単鎖Fv断片scFv、Fab’断片、Fab断片およびFab’2断片からなる群より選択される、請求項1~5のいずれか1項に記載の抗体またはそのタウ結合断片。請求項1~6のいずれか1項に記載の抗体またはそのタウ結合断片をコードするポリヌクレオチド。請求項7に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。請求項7に記載のポリヌクレオチドまたは請求項8に記載のベクターを含む宿主細胞。抗タウ抗体またはそのタウ結合断片を調製するための方法であって、a請求項9に記載の細胞を培養すること;およびb前記培養物から前記抗体またはそのタウ結合断片を単離することを含む前記方法。請求項7に記載のポリヌクレオチドによってコードされる、または請求項10に記載の方法によって獲得可能である抗タウ抗体またはそのタウ結合断片。a酵素、放射性同位元素、フルオロフォアおよび重金属からなる群より選択される標識で検出可能であるように標識される;またはb薬品に結合される請求項1~6または11のいずれか1項に記載の抗体またはそのタウ結合断片。請求項1~6、11または12のいずれか1項に記載の抗体またはそのタウ結合断片、請求項7に記載のポリヌクレオチド、請求項8に記載のベクターまたは請求項9に記載の宿主細胞を含む組成物であって、i薬剤的に許容可能な担体をさらに含む医薬組成物;またはii免疫ベースもしくは核酸ベースの診断方法で従来使用される1つ以上の試薬をさらに含む診断用組成物である前記組成物。神経変性タウオパチーの治療に有用な追加的な薬剤をさらに含む、請求項13に記載の組成物。神経変性タウオパチーがアルツハイマー病、筋委縮性側索硬化症/パーキンソン症-認知症複合体、嗜銀性グレイン型認知症、英国型アミロイド血管症、脳アミロイド血管症、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルトヤコブ病、ボクシング認知症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、ダウン症候群、前頭側頭型認知症、17番染色体に連鎖しパーキンソン症を伴う前頭側頭型認知症、前頭側頭葉変性症、ゲルストマンストロイスラーシャインカー病、ハレルフォルデンスパッツ病、封入体筋炎、多系統委縮症、筋強直性ジストロフィー、C型ニーマンピック病、神経原線維変化を伴う非グアム島人型運動ニューロン病、ピック病、脳炎後パーキンソン症、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、多発梗塞性認知症および虚血性脳卒中からなる群より選択されるものであって、i対象における前記神経変性タウオパチーの予防処置もしくは治療処置、またはii対象における前記神経変性タウオパチーの進行もしくは対象における神経変性タウオパチーの治療に対する反応のモニタリングに使用される請求項1~6、11または12のいずれか1項に記載の抗タウ抗体またはそのタウ結合断片、請求項7に記載のポリヌクレオチド、請求項8に記載のベクターまたは請求項9に記載の宿主細胞。対象において神経性タウオパチーの進行を診断またはモニターする方法であって、a請求項1~6、11または12のいずれか1項に記載の少なくとも1つの抗体を用いて、診断される前記対象に由来する試料中の病理的修飾型タウまたは凝集型タウのレベルを評価すること;およびb修飾型タウまたは凝集型タウのレベルを、1つ以上の対照対象における病理的修飾型タウまたは凝集型タウのレベルを示す参照標準と比較することを含み、病理的修飾型タウまたは凝集型タウのレベルと参照標準の間の差異または類似性が、前記対象が神経変性タウオパチーを持っていることを示し、前記神経変性タウオパチーがアルツハイマー病、筋委縮性側索硬化症/パーキンソン症-認知症複合体、嗜銀性グレイン型認知症、英国型アミロイド血管症、脳アミロイド血管症、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルトヤコブ病、ボクシング認知症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、ダウン症候群、前頭側頭型認知症、17番染色体に連鎖しパーキンソン症を伴う前頭側頭型認知症、前頭側頭葉変性症、ゲルストマンストロイスラーシャインカー病、ハレルフォルデンスパッツ病、封入体筋炎、多系統委縮症、筋強直性ジストロフィー、C型ニーマンピック病、神経原線維変化を伴う非グアム島人型運動ニューロン病、ピック病、脳炎後パーキンソン症、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、多発梗塞性認知症および虚血性脳卒中からなる群より選択される前記方法。ヒトまたは動物の身体でのタウのインビボ検出、または治療薬剤もしくは診断薬剤のタウへのターゲティングに使用するための請求項1~6、11または12のいずれか1項に記載の抗体またはそのタウ結合断片であって、前記インビボ検出が陽電子放出トモグラフィーPET、単一光子放出トモグラフィーSPECT、近赤外NIR光学イメージングまたは磁気共鳴イメージングMRIを含む、前記抗体またはそのタウ結合断片。請求項1~6、11または12のいずれか1項に記載の抗体によって特異的に認識されるタウのエピトープを有するペプチドであって、配列番号9、41、42およびそれらの組合せからなる群より選択されるアミノ酸配列を含む前記ペプチド。対象において神経変性タウオパチーを診断するための方法であって、前記対象の生物試料中に請求項18に記載のペプチドに結合する抗体の存在を検出することを含む前記方法。神経変性タウオパチーの診断に有用なキットであって、請求項1~6、11または12のいずれか1項に記載の抗体もしくはそのタウ結合断片、請求項7に記載のポリヌクレオチド、請求項8に記載のベクターまたは請求項9に記載の宿主細胞または請求項18に記載のペプチドを試薬または取扱説明書と共に含む前記キット。本発明は、天然抗タウ特異的ヒトモノクローナル抗体の単離のために健康なヒト対象のタウ特異的免疫反応を活用する。特に、本発明に従って行われた実験は、神経変性タウオパチーの徴候を示さない健康なヒト対象のプールからモノクローナルタウ特異的抗体を単離することに成功した。したがって、本発明は、タウを特異的に認識することが可能であるヒト抗体、抗原結合断片および類似の抗原結合分子に向けられたものである。タウを特異的に認識するという表現によって、タウ特異的抗体および抗タウ抗体は天然型タウまたは凝集型タウアイソフォームまたは病理的修飾型タウアイソフォームに対する抗体を具体的に、全般的に、そして、集合的に意味する。全長型形態、病理的リン酸化形態および凝集型形態に選択的なヒト抗体が本明細書において提供される。本発明の特定の実施形態において、前記ヒト抗体またはその抗原結合断片は、図1に示されるようなVH可変領域および/またはVL可変領域を特徴とする抗体の免疫学的結合特性を示す。前記抗体の抗原結合断片は単鎖Fv断片、Fab’断片、Fab断片およびFab’2断片、または他の任意の抗原結合断片であり得る。特定の実施形態において、以後、前記抗体またはその断片はヒトIgGアイソタイプ抗体である。あるいは、前記抗体はヒト-マウスキメラ抗体またはマウス化抗体であり、後者は動物での診断方法および診断的研究に特に有用である。また、本発明は、本発明の抗体もしくはその活性断片、またはアゴニストおよび同じ性質の分子、または代わりにそのアンタゴニストを含む組成物に関連し、そして、タウオパチーの予防、診断または治療にそのような組成物を使用する、有効量の前記組成物がそれを必要とする患者に投与される免疫療法的方法および免疫診断的方法に関連する。当然、本発明は、それぞれ、以下に限定するように、明確でユニークな特徴を有する抗体を産生する不死化ヒトメモリーBリンパ球およびB細胞にまで範囲が広がる。本発明はまた、本発明の抗体の免疫グロブリン鎖の少なくとも可変領域をコードするポリヌクレオチドに関連する。1つの実施形態において、前記可変領域は、図1に示されるようなVH可変領域および/またはVL可変領域の少なくとも1つの相補性決定領域CDRを含む。したがって、本発明はまた、前記ポリヌクレオチドを含むベクターおよびそれを用いて形質転換された宿主細胞ならびにタウに特異的な抗体および同等の結合分子の生産のためのそれらの使用を包含する。抗体およびその模倣物の組換え技術による産生の手段と方法、ならびに、抗体であってもなくてもよい、競合的結合分子のスクリーニング方法は当技術分野において公知である。しかしながら、本明細書に記載されるように、特にヒトでの治療用途に関連して、ヒト抗体でなければ、キメラ抗体およびヒト化抗体にさえ観察される、そのような抗体に対して向けられる免疫反応が無いという意味で、本発明の抗体はヒト抗体である。また、試料中のタウを同定するために使用され得る組成物および方法が本明細書において開示される。例えば、ELISAベースの測定法または表面順応測定法surfaceadaptedassayを用いることにより、試料中のタウの存在についてヒトの血液、脳脊髄液CSFおよび尿をスクリーニングするために、開示された抗タウ抗体を使用することができる。本明細書において開示される方法および組成物は、アルツハイマー病などの神経変性タウオパチーでの診断の役に立ち、そして、疾患の進行および治療の有効性をモニターするために使用され得る。それ故に、アルツハイマー病、筋委縮性側索硬化症/パーキンソン症-認知症複合体、嗜銀性グレイン型認知症、英国型アミロイド血管症、脳アミロイド血管症、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルトヤコブ病、ボクシング認知症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、ダウン症候群、前頭側頭型認知症、17番染色体に連鎖しパーキンソン症を伴う前頭側頭型認知症、前頭側頭葉変性症、ゲルストマンストロイスラーシャインカー病、ハレルフォルデンスパッツ病、封入体筋炎、多系統委縮症、筋強直性ジストロフィー、C型ニーマンピック病、神経原線維変化を伴う非グアム島人型運動ニューロン病、ピック病、脳炎後パーキンソン症、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、多発梗塞性認知症および虚血性脳卒中などの神経変性タウオパチーの治療、診断または予防のための方法を提供することは、本発明に特有の目的である。前記方法は、前記対象に有効濃度の、タウを標的とする抗体であるヒト抗体または抗体誘導体を投与することを含む。本発明のさらなる実施形態は、以下の説明と実施例から明らかになるであろう。本発明の詳細な説明I.定義神経変性タウオパチーは、ニューロンおよび/またはグリア細胞において主に病理的に高リン酸化されたタウより構成される異常な線維の細胞内凝集体からなる共通した病理的傷害を共有する多様な集団の神経変性障害である。タウオパチーの臨床的特色は不均一であり、認知症および/または運動性症候群を特徴とする。線維性タウ封入体の累進的な蓄積は、例えば、アルツハイマー病におけるβアミロイドのような他の沈着物と組み合わさって、または、家族型前頭側頭型認知症および17番染色体連鎖パーキンソン症FTDP-17に関係するタウ遺伝子内の突然変異によって示されるような唯一の病原性実体として、ニューロンとグリア細胞の変性の原因となる可能性がある。それらの臨床症状が不均一であるため、アルツハイマー病、筋委縮性側索硬化症/パーキンソン症-認知症複合体、嗜銀性グレイン型認知症、英国型アミロイド血管症、脳アミロイド血管症、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルトヤコブ病、ボクシング認知症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、ダウン症候群、前頭側頭型認知症、17番染色体に連鎖しパーキンソン症を伴う前頭側頭型認知症、前頭側頭葉変性症、ゲルストマンストロイスラーシャインカー病、ハレルフォルデンスパッツ病、封入体筋炎、多系統委縮症、筋強直性ジストロフィー、C型ニーマンピック病、神経原線維変化を伴う非グアム島人型運動ニューロン病、ピック病、脳炎後パーキンソン症、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、多発梗塞性認知症および虚血性脳卒中を含むタウオパチー疾患の潜在的に非排他的なリストが提供され得る。レビューとして、例えば、その表1がタウオパチーの特有のメンバーをカタログ化するLeeetal.,Annu.Rev.Neurosci.242001,1121-1159、または、Sergeantetal.,Bioch.Biophy.Acta17392005,179-97をその中の図2内のリストと共に参照のこと。本明細書において、用語タウは、天然単量体型のタウを特異的に指すために互換的に使用される。用語タウはまた、他のコンフォーマーのタウ、例えば、タウオリゴマーまたはタウ凝集体を全般的に特定するために使用される。用語タウはまた、全ての種類と形態のタウを集合的に指すために使用される。オルタナティブスプライシングによって、ヒトの脳の中には6つのタウアイソフォームが存在する。これらのアイソフォームのタンパク質配列は以下のとおりである。野生型タウアミノ酸配列は、hTau40、TauF、Tau-4または全長型タウとしてもさらに参照される441アミノ酸のTau-Fアイソフォーム配列番号6によって表される。タウのアミノ酸配列を文献と適切なデータベースから引き出すことができる。Goedertetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA851988,4051-4055、Goedertetal.,EMBOJ.81989,393-399、Goedertetal.,EMBOJ.91990,4225-4230およびGenBankUniProtKB/swissprot:locusTAU_HUMAN,アクセッション番号P10636-2胎児型タウおよびP10636-4~-8Bアイソフォーム~Fアイソフォームを参照のこと。タウタンパク質の別の顕著な特色はリン酸化であり、それは、79か所の潜在的なセリンSerリン酸化部位とトレオニンThrリン酸化部位のうちの約30か所で起こる。タウは脳の発生の間に高リン酸化される。成体期ではリン酸化の程度は減少する。リン酸化部位のいくつかはタウの微小管結合ドメイン内に局在し、そして、タウのリン酸化の増加が微小管の結合を負に調節することが示されている。例えば、セリン262およびセリン396は微小管結合モチーフ内に、または、それに隣接して位置するが、AD患者の脳中の神経原線維濃縮体NFTの主要な構成成分である異常対らせん状細線維PHFのタウタンパク質では、それらは高リン酸化される。PHFは、異常なほど高リン酸化されているタウタンパク質の線維状凝集体であり、そして、特異的な抗タウ抗体で染色し、光学顕微鏡法で検出することができる。いわゆる直鎖状タウ線維について同じことが当てはまる。PHFは、約80nmの周期性で互いに巻きつく2つの線維からなるねじれたリボンを形成する。これらの病理的特色はタウ病理、タウオパソロジーまたはタウ関連病理と一般的に称される。タウオパチーの神経病理的特色のさらに詳細な説明については、Leeetal.,Annu.Rev.Neurosci.242001,1121-1159およびGoetz,Brain.Res.Rev.352001,266-286を参照のこと。その開示の内容が参照により本明細書に組み込まれる。生理的なタウタンパク質はニューロンにおいて微小管を安定化する。病理的なリン酸化により、タウの異常な局在と凝集が起こり、それが微小管の不安定化と細胞輸送の障害を引き起こす。凝集したタウはインビトロでは神経毒性を有するKhlistunovaetal.,J.Biol.Chem.2812006,1205-1214。しかしながら、ニューロンを死に至らしめる機序を実行する、的確な神経毒性を有する種類は不明確なままである。アルツハイマー病AD、前頭側頭型認知症、核上性麻痺、ピック病、嗜銀性グレイン型疾患AGD、大脳皮質基底核変性症、FTDP-17、パーキンソン病、ボクシング認知症などの多くのタウオパチーでの神経原線維濃縮体NFTの主要な構成成分としてタウ凝集体を観察することができるGendronandPetrucelli,Mol.Neurodegener.4:132009に概説されている。これらの観察の他にも、タウが介在するニューロンの死が、濃縮体形成が無い状態であっても起こり得るという証拠が明らかになっている。可溶性リン酸化タウ種は脳脊髄液CSFに存在するAluiseetal.,Biochim.Biophys.Acta.17822008,549-558。タウ凝集体は細胞の外から内に誤って折りたたまれた状態を伝達し、そして、共培養されている細胞の間でその状態を伝達することができるFrostetal.,J.Biol.Chem.2842009,12845-12852。神経変性タウオパチーへの関与に加えて、虚血/再灌流の間および後に観察されるタウリン酸化の変化は、虚血性脳卒中などの神経血管性障害の神経損傷と臨床病態生理においてタウが果たす重要な役割を示唆するZhengetal.,J.Cell.Biochem.1092010,26-29。本明細書において開示されるヒト抗タウ抗体はタウおよびそのエピトープならびに様々な立体構造のタウおよびそのエピトープに特異的に結合する。例えば、タウ、その全長のタウ、病理的修飾型タウアイソフォームおよびタウ凝集体に特異的に結合する抗体が本明細書において開示される。本明細書において使用される場合、タウに特異的に結合する、選択的に結合するまたは優先的に結合する抗体への言及は、他の無関連のタンパク質には結合しない抗体に当てはまる。1つの例では、本明細書において開示されるタウ抗体はタウまたはそのエピトープに結合することが可能であり、そして、他のタンパク質にはバックグランドの約1.5倍を超える結合を示さない。タウコンフォーマーに特異的に結合するまたは選択的に結合する抗体は、あらゆる立体構造のタウに結合する訳ではない、すなわち、少なくとも1つの他のタウコンフォーマーに結合しない抗体を意味する。例えば、AD組織内の凝集型タウに優先的に結合することができる抗体が本明細書において開示される。本発明のヒト抗タウ抗体は、タウ特異的免疫反応を示す健康なヒト対象のプールから単離されているので、それらの抗体が前記対象によって実際に発現されたのであって、例えば、ヒト様抗体を提供しようとするための一般的な1つの方法を今まで代表した、ヒト免疫グロブリンを発現するファージライブラリーから単離したのではないということを強調するために、本発明のタウ抗体をヒト自己抗体と呼ぶこともまた可能である。用語単数aまたは単数anの実体は1つ以上のその実態に当てはまることに留意するものとする。例えば、単数のan抗体は1つ以上の抗体を表すと理解される。したがって、用語単数aまたは単数an、1つ以上および少なくとも1つは本明細書において互換的に使用され得る。本明細書において使用される場合、用語ポリペプチドは単数のポリペプチドならびに複数のポリペプチドを包含することが意図されており、そして、用語ポリペプチドはペプチド結合としても知られるアミド結合により直鎖状に連結したモノマーアミノ酸から構成される分子を意味する。用語ポリペプチドは2個以上のアミノ酸からなる任意の単数の鎖または複数の鎖を意味し、そして、特定の長さの前記産物を意味しない。したがって、ペプチド、ジペプチド、トリペプチド、オリゴペプチド、タンパク質、アミノ酸鎖または2個以上のアミノ酸からなる単数の鎖または複数の鎖を意味するために使用される他のどのような用語もポリペプチドの定義内に含まれ、そして、これらの用語のいずれかの代わりに、または、それと互換的に用語ポリペプチドを使用することができる。用語ポリペプチドはまた、グリコシル化、アセチル化、リン酸化、アミド化、公知の保護基/ブロック基による誘導体化、タンパク質分解による切断、または非天然アミノ酸による修飾を含むが、これらに限定されないポリペプチドの発現後修飾産物を意味することが意図されている。ポリペプチドは天然の生物源から得られる、または、組換え技術によって作製され得るが、必ずしも所定の核酸配列から翻訳される訳ではない。それは、化学合成を含む任意の方法で生成され得る。本発明のポリペプチドは、サイズが約3以上、5以上、10以上、20以上、25以上、50以上、75以上、100以上、200以上、500以上、1、000以上または2、000以上のアミノ酸であり得る。ポリペプチドは一定の三次元構造を有する可能性があるが、しかし、それらは必ずしもそのような構造を有する訳ではない。一定の三次元構造を有するポリペプチドは折りたたまれたポリペプチドと呼ばれ、そして、一定の三次元構造を持たないどころか、非常に多数の異なる立体構造を採用することができるポリペプチドは折りたたまれていないポリペプチドと呼ばれる。本明細書において使用される場合、糖タンパク質という用語は、アミノ酸残基、例えば、セリン残基またはアスパラギン残基の酸素含有側鎖または窒素含有側鎖を介してタンパク質に結合する少なくとも1つの炭水化物部分に結合したタンパク質を意味する。単離されたポリペプチドまたはその断片、異型体もしくは誘導体という表現によって、その自然環境の状態ではないポリペプチドが意図される。特定の精製レベルは必要とされない。例えば、単離されたポリペプチドはその天然または自然の環境から取り出され得る。宿主細胞で発現する組換え技術により作製されたポリペプチドおよびタンパク質は、任意の適切な技術により分離され、分画され、または部分的もしくは実質的に精製された天然ポリペプチドまたは組換えポリペプチドがそうであるように、本発明の目的のために単離されたとみなされる。本発明のポリペプチドとして、前述のポリペプチドの断片、誘導体、類似体または異型体およびそれらの任意の組合せもまた含まれる。用語断片、異型体、誘導体および類似体には、本発明の抗体または抗体ポリペプチドに言及するとき、対応する天然結合分子、抗体またはポリペプチドの抗原結合特性の少なくともいくらかを保持する任意のポリペプチドが含まれる。本発明のポリペプチド断片は、本明細書の他の箇所で考察される具体的な抗体断片に加えて、タンパク質分解断片ならびに欠失断片を含む。本発明の抗体および抗体ポリペプチドの異型体は上述したような断片、およびまたアミノ酸置換、欠失または挿入によりアミノ酸配列が変化したポリペプチドも含む。異型体は天然に生じる、または、非天然的に生じることができる。非天然的に生じた異型体は当技術分野で公知の突然変異形成技術を用いて作製され得る。異型体ポリペプチドは保存的アミノ酸置換または非保存的アミノ酸置換、欠失または付加を含むことができる。タウ特異的結合分子、例えば、本発明の抗体および抗体ポリペプチドの誘導体は、天然型ポリペプチドでは見られない追加的な特色を示すように改変されたポリペプチドである。例には融合タンパク質が含まれる。異型体ポリペプチドはまた本明細書においてポリペプチド類似体とも称され得る。本明細書において使用される場合、結合分子もしくはその断片、抗体または抗体ポリペプチドの誘導体は、側鎖官能基の反応により化学的に誘導体化した1つ以上の残基を有する対象ポリペプチドを意味する。誘導体として、1つ以上の20種の標準的アミノ酸の天然に生じたアミノ酸誘導体を含有するペプチドもまた含まれる。例えば、4-ヒドロキシプロリンをプロリンの代わりに置換することができ、5-ヒドロキシリシンをリシンの代わりに置換することができ、3-メチルヒスチジンをヒスチジンの代わりに置換することができ、ホモセリンをセリンの代わりに置換することができ、そしてオルニチンをリシンの代わりに置換することができる。用語ポリヌクレオチドは単数の核酸ならびに複数の核酸を包含することが意図され、そして、単離された核酸分子またはコンストラクト、例えば、メッセンジャーRNAmRNAまたはプラスミドDNApDNAを意味する。ポリヌクレオチドは通常のホスフォジエステル結合または非通常型結合例えば、ペプチド核酸PNAに見られるようなアミド結合を含むことができる。用語核酸は、ポリヌクレオチドに存在する任意の1つ以上の核酸断片、例えば、DNA断片またはRNA断片を意味する。単離された核酸またはポリヌクレオチドという表現によって、その天然環境から取り出された核酸分子、DNAまたはRNAが意図される。例えば、ベクターに含まれる抗体をコードする組換えポリヌクレオチドは、本発明の目的のために、単離されたとみなされる。単離されたポリヌクレオチドのさらなる例には、異種の宿主細胞で維持される組換えポリヌクレオチドまたは溶液中に部分的または実質的に精製されたポリヌクレオチドが含まれる。単離されたRNA分子には、本発明のポリヌクレオチドのインビボRNA転写物またはインビトロRNA転写物が含まれる。本発明に従って単離されたポリヌクレオチドまたは核酸は、合成により作製されたそのような分子をさらに含む。さらに、ポリヌクレオチドまたは核酸は、プロモーター、リボソーム結合部位または転写ターミネーターなどの調節エレメントであり得る、またはそれらのような調節エレメントを含むことができる。本明細書において使用される場合、コード領域は、アミノ酸に翻訳されるコドンからなる核酸の部分である。停止コドンTAG、TGAまたはTAAはアミノ酸に翻訳されないが、それはコード領域の一部とみなされ得る。しかし、例えば、プロモーター、リボソーム結合部位、転写ターミネーター、イントロンなどの任意の隣接配列はコード領域の一部ではない。本発明の2つ以上のコード領域が単一のポリヌクレオチドコンストラクト内に、例えば、単一のベクターに、または別々のポリヌクレオチドコンストラクト内に、例えば、別々の異なるベクターに存在することができる。また、どんなベクターも1つのコード領域を含有することができ、または、2つ以上のコード領域を含むことができ、例えば、単一のベクターが免疫グロブリン重鎖可変領域と免疫グロブリン軽鎖可変領域を別々にコードすることができる。さらに、本発明のベクター、ポリヌクレオチドまたは核酸は、結合分子、抗体またはそれらの断片、異型体もしくは誘導体をコードする核酸に融合した、または、融合していない異種のコード領域をコードすることができる。異種のコード領域は分泌シグナルペプチドまたは異種機能性ドメインなどの特別なエレメントまたはモチーフを含むが、これらに限定されない。ある実施形態において、前記ポリヌクレオチドまたは核酸はDNAである。DNAの場合では、ポリペプチドをコードする核酸を含むポリヌクレオチドは通常、1つ以上のコード領域と機能するように結合したプロモーターおよび/または他の転写制御エレメントもしくは翻訳制御エレメントを含むことができる。遺伝子産物、例えば、ポリペプチドのコード領域が1つ以上の調節配列と、前記遺伝子産物の発現を前記調節配列の影響下または制御下に置くような方法で結合しているときが機能的な結合である。プロモーター機能の誘導が所望の遺伝子産物をコードするmRNAの転写という結果になる場合、および、2つのDNA断片の間の結合の性質が前記遺伝子産物の発現を制御する発現調節配列の能力を妨害しない、または、前記鋳型DNAが転写される能力を妨害しない場合、ポリペプチドコード領域およびそれと結合するプロモーターなどのその2つのDNA断片は機能するように結合しているまたは機能するように連結している。したがって、プロモーターがポリペプチドをコードする核酸の転写をもたらすことが可能であるなら、前記プロモーター領域はその核酸と機能するように結合しているであろう。プロモーターは、予定された細胞でのみDNAの実質的な転写を制御する細胞特異的プロモーターであり得る。プロモーターの他には、例えば、エンハンサー、オペレーター、リプレッサーおよび転写終結シグナルなどの他の転写制御エレメントが、細胞特異的転写を制御するために前記ポリヌクレオチドと機能するように結合することができる。適切なプロモーターおよび他の転写制御領域は本明細書において開示される。様々な転写制御領域が当業者に知られている。これらには、サイトメガロウイルスイントロン-Aを含む最初期プロモーター、シミアンウイルス40初期プロモーターおよびラウス肉腫ウイルスなどのレトロウイルスに由来するプロモーター断片およびエンハンサー断片などの、しかし、これらに限定されない脊椎動物細胞で機能する転写制御領域が含まれるが、これらに限定されない。他の転写制御領域には、アクチン、ヒートショックプロテイン、ウシ成長ホルモンおよびウサギβグロビンなどの脊椎動物の遺伝子に由来するもの、ならびに真核細胞での遺伝子発現を制御することができる他の配列が含まれる。その他の適切な転写制御領域には組織特異的プロモーターおよびエンハンサー、ならびにリンホカイン誘導性プロモーター例えば、インターフェロンまたはインターロイキンによって誘導可能なプロモーターが含まれる。同様に、様々な翻訳制御エレメントが当業者に知られている。これらにはリボソーム結合部位、翻訳開始コドンおよび翻訳停止コドン、およびピコルナウイルスに由来するエレメント特に、CITE配列とも称される、配列内リボソーム侵入部位、すなわち、IRESが含まれるが、これらに限定されない。他の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドはRNA、例えば、メッセンジャーRNAmRNAの形態のRNAである。本発明のポリヌクレオチドコード領域および核酸コード領域は、本発明のポリヌクレオチドによってコードされるポリペプチドの分泌を制御する分泌ペプチドまたはシグナルペプチドをコードする追加的なコード領域と結合することができる。シグナル仮説によれば、哺乳類細胞によって分泌されたタンパク質は、一旦、成長しつつあるタンパク質鎖の粗面小胞体からの搬出が始まると、成熟型タンパク質から切り出されるシグナルペプチドまたは分泌リーダー配列を有する。当業者は、哺乳類細胞によって分泌されたポリペプチドは前記タンパク質のN末端に融合したシグナルペプチドを一般的に有し、それは前記の完全体のポリペプチドまたは全長のポリペプチドから切り出されて、分泌型または成熟型の前記ポリペプチドを産生するということを理解している。ある実施形態において、天然のシグナルペプチド、例えば、免疫グロブリン重鎖もしくは軽鎖のシグナルペプチド、または、その配列の機能性誘導体であって、それと機能するように結合しているポリペプチドの分泌を制御する能力を保持している機能性誘導体が使用される。あるいは、異種性の哺乳類シグナルペプチドまたはその機能性誘導体を使用することができる。例えば、野生型リーダー配列をヒト組織プラスミノーゲン活性化因子TPAまたはマウスβ-グルクロニダーゼのリーダー配列で置換することができる。別途、明言されない限り、用語障害および疾患は本明細書において互換的に使用される。本発明の文脈で使用される場合、結合分子は主に、抗体およびその断片に関連するが、ホルモン、受容体、リガンド、主要組織適合複合体MHC分子、ヒートショックプロテインHSPなどのシャペロンならびにカドヘリン、インテグリン、C型レクチンおよび免疫グロブリンIgスーパーファミリーなどの細胞間接着分子を含むが、これらに限定されない、タウに結合する非抗体分子を意味することも可能である。したがって、本発明の範囲を限定することなく、ただ明確にすることを目的として、治療用薬剤および診断用薬剤の開発のための結合分子についての特定の実施形態を表す抗体および抗体様分子に関して、以下の実施形態の大半が考察される。用語抗体および免疫グロブリンは本明細書において互換的に使用される。抗体または免疫グロブリンは、少なくとも重鎖の可変ドメインを含み、そして通常、少なくとも重鎖と軽鎖の可変ドメインを含む、タウ結合分子である。脊椎動物系における基本的な免疫グロブリンの構造は比較的によく理解されている。例えば、Harlowetal.,Antibodies:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratoryPress,2nded.1988を参照のこと。以下により詳細が考察されるように、用語免疫グロブリンは、生化学的に区別することができる、さまざまな広範なクラスのポリペプチドを含む。当業者は、重鎖がガンマ、ミュー、アルファ、デルタまたはイプシロンγ、μ、α、δ、εとそれらの間のいくつかのサブクラス例えば、γ1~γ4に分類されることを理解するであろう。この鎖の性質こそが抗体のクラスをそれぞれIgG、IgM、IgAIgGまたはIgEと決定する。免疫グロブリンサブクラスアイソタイプ、例えば、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1などはよく特徴づけられており、そして、機能分化を付与することが知られている。これらのクラスおよびアイソタイプの各々の修飾型は、本開示を考慮すると、当業者にとって容易に識別可能であり、したがって、本発明の範囲内である。全ての免疫グロブリンのクラスが明らかに本発明の範囲内にあり、以下の考察は全般的にIgGクラスの免疫グロブリン分子に向けられるものである。IgGに関して、標準的な免疫グロブリン分子は約23,000ダルトンの分子量の2つの同一な軽鎖ポリペプチド、および53,000~70,000の分子量の2つの同一な重鎖ポリペプチドを含む。典型的には、4本の鎖がY字形にジスルフィド結合によって結合され、軽鎖が、Y字の口の部分で始まり、可変領域を通じて継続する重鎖とひとまとまりに繋がっている。軽鎖はカッパまたはラムダκ、λのどちらかに分類される。各重鎖クラスはカッパ軽鎖またはラムダ軽鎖のどちらかと結合することができる。一般に、ハイブリドーマ、B細胞または遺伝子操作した宿主細胞のいずれかによって免疫グロブリンが生成されるとき、軽鎖および重鎖は互いに共有結合し、そして、2本の重鎖のテール部分が互いに共有結合性ジスルフィド結合により結合する。重鎖では、アミノ酸配列は、Y字形のフォークヘッド末端にあるN末端から各鎖の下部にあるC末端へと延びている。軽鎖および重鎖の両方が構造的および機能的相同性がある領域に分けられる。用語定常および可変を機能的に使用する。この点について、軽鎖部分および重鎖部分の可変ドメインVLおよびVHが抗原認識と抗原特異性を決定することが理解されるであろう。反対に、軽鎖の定常ドメインCLおよび重鎖の定常ドメインCH1、CH2またはCH3が、分泌、経胎盤移動性、Fc受容体結合、補体結合などのような重要な生物学的特性を付与する。慣習的に、定常領域ドメインが抗原結合部位または抗体のアミノ末端から遠ざかるにつれ、定常領域ドメインの番号付が増加する。N末端部分は可変領域であり、定常領域はC末端部分にある。CH3ドメインとCLドメインは実際には、それぞれ、重鎖と軽鎖のカルボキシ末端を含む。先に示したように、抗体が抗原上のエピトープを選択的に認識し、特異的に結合することが可変領域によって可能になる。すなわち、抗体のVLドメインおよびVHドメインまたは相補性決定領域CDRのサブセットが組み合わさって、三次元の抗原結合部位を限定する可変領域を形成する。この四要素から成る抗体構造が、Y字の各アームの末端にある抗原結合部位を形成する。さらに具体的には、VH鎖とVL鎖の各々の3つのCDRによって抗原結合部位が限定される。タウに特異的に結合するのに充分な構造を含有する任意の抗体断片または免疫グロブリン断片は結合断片または免疫特異的断片として互換的に本明細書に示される。天然の抗体では、抗体は、各抗原結合ドメインに存在する相補性決定領域またはCDRと時々呼ばれる6つの超可変領域を含み、それらは、水性環境での抗体の三次元構造を想定すると、抗原結合ドメインを形成するように特異的に配置されるアミノ酸の短い非連続的な配列である。分子間の多様性がより少ない、4つの比較的に保存されたフレームワーク領域またはFRがCDRに隣接する。フレームワーク領域は主としてβシート立体構造を採り、CDRは、前記βシート構造と連結し、いくつかの場合では、その一部を形成するループを形成する。したがって、フレームワーク領域は、鎖間非共有結合性相互作用によりCDRの正しい方向での配置を規定する足場を形成するように作用する。配置されたCDRによって形成された抗原結合ドメインは、免疫反応性抗原上のエピトープに対して相補的な表面を限定する。この相補性表面が、抗体のその同種のエピトープへの非共有結合を促進する。CDRとフレームワーク領域をそれぞれ含むアミノ酸は、正確に定義されているので、任意の所与の重鎖可変領域または軽鎖可変領域について当業者によって容易に同定され得る。SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,Kabat,E.,etal.,U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,1983、およびChothiaandLesk,J.Mol.Biol.,1961987,901-917を参照のこと。それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。当技術分野内で使用および/または受容される用語に2つ以上の定義がある場合、本明細書において使用される用語の定義が、明確に反論されない限り、そのような意味を全て含むと意図される。具体的な例は、重鎖ポリペプチドと軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内に見られる非連続的な抗原結合部位を説明するために、相補性決定領域CDRという用語を使用することである。この特定の領域は、Kabatetal.,U.S.Dept.ofHealthandHumanServices,SequencesofProteinsofImmunologicalInterest1983およびChothiaandLesk,J.Mol.Biol.,1961987,901-917によって説明されており、互いに比較されると、アミノ酸残基の重複またはサブセットが定義に含まれる。それらの文献は参照により本明細書に組み込まれる。それでもなお、抗体またはその異型体のCDRを意味するいずれかの定義の適用は、本明細書において定義され、使用される用語の範囲内にあると意図される。先に引用した参照文献の各々が定義するCDRを包含する適切なアミノ酸残基は、比較として、以下の表1に示される。特定のCDRを包含する正確な残基の番号は、CDRの配列とサイズに応じて変化する。当業者は、どの残基がヒトIgGサブタイプの抗体の特定の超可変領域またはCDRを含むか、その抗体の可変領域のアミノ酸配列を得てルーチン的に決定することができる。Kabatらはまた、いかなる抗体にも適用できる可変ドメイン配列の番号付システムを定義した。当業者は、配列そのもの以外のいかなる実験データにも頼ることなく、任意の可変ドメイン配列にこのKabat番号付システムを明確に割り当てることができる。本明細書において使用される場合、Kabat番号付は、Kabatetal.,U.S.Dept.ofHealthandHumanServices,SequenceofProteinsofImmunologicalInterest1983によって示される番号付システムを指す。別途、明示されない限り、本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体における特定のアミノ酸残基の位置の番号付に対する言及はKabat番号付システムに従うものであるが、しかしながら、それは理論上のものであり、本発明の全ての抗体を等しく適用することができない。例えば、最初のCDRの位置に応じて、以降のCDRがどちらかの方向に移動する可能性がある。本発明の抗体、またはその抗原結合断片、免疫特異的断片、異型体もしくは誘導体にはポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、多重特異的抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、霊長類化抗体、マウス化抗体またはキメラ抗体、単鎖抗体、エピトープ結合断片、例えば、Fab、Fab’およびFab’2、Fd、Fv、単鎖FvscFv、単鎖抗体、ジスルフィド結合FvsdFv、VLドメインかVHドメインのどちらかを含む断片、Fab発現ライブラリーによって産生される断片、ならびに抗イディオタイプ抗Id抗体例えば、本明細書において開示される抗体に対する抗Id抗体を含むが含まれるが、これらに限定されない。scFv分子は当技術分野において公知であり、そして、例えば、米国特許第5,892,019号に記載される。本発明の免疫グロブリンまたは抗体分子は免疫グロブリン分子の任意の型例えば、IgG、IgE、IgM、IgD、IgAおよびIgY、クラス例えば、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1およびIgA2またはサブクラスであり得る。1つの実施形態において、本発明の抗体はIgMまたは5価構造を有するその誘導体ではない。とりわけ、本発明の特定の用途、特に治療上の使用において、IgMは多くの場合、その5価構造と親和性成熟の欠如のために非特異的な交差反応性と非常に低い親和性を示すので、IgMはIgGおよび他の2価の抗体または対応する結合分子よりも有用ではない。特定の実施形態において、本発明の抗体はポリクローナル抗体ではない、すなわち、それは、血漿免疫グロブリン試料から得られる混合物である、というよりもむしろ1つの特定の抗体種から実質的になる。単鎖抗体を含む抗体断片は、可変領域のみ、または次のもの、すなわち、ヒンジ領域、CH1ドメイン、CH2ドメインおよびCH3ドメインの全体もしくは一部と併せて含むことができる。可変領域のヒンジ領域、CH1ドメイン、CH2ドメインおよびCH3ドメインとの任意の組合せをまた含むタウ結合断片もまた本発明に含まれる。本発明の抗体またはその免疫特異的断片は、鳥類および哺乳類動物を含む任意の動物起源であり得る。1つの実施形態において、抗体はヒト、マウス、ロバ、ウサギ、ヤギ、モルモット、ラクダ、リャマ、ウマまたはニワトリ抗体である。別の実施形態において、可変領域は、起源がコンドリクトイドcondricthoid例えば、サメ由来であり得る。1つの態様において、本発明の抗体は、ヒトから単離されたヒトモノクローナル抗体である。所望により、ヒト抗体のフレームワーク領域が、データベース中の適切なヒト生殖系列可変領域配列に従って整列され、採択される。例えば、MRCタンパク質工学センターケンブリッジ、英国によって主催されるVbasehttp://vbase.mrc-cpe.cam.ac.uk/を参照のこと。例えば、本当の生殖系列配列から潜在的に逸脱しているとみなされるアミノ酸は、クローニング工程の間に組み込まれたPCRプライマーの配列に起因する可能性がある。ファージディスプレイ抗体ライブラリーまたはゼノジニックマウスに由来する単鎖抗体断片scFvなどの人工的に生成されたヒト様抗体と比較して、本発明のヒトモノクローナル抗体は、i代用とした動物の免疫反応よりもむしろヒト免疫反応を用いて得られていること、すなわち、人体においてその適切な立体構造をとる天然のタウに対する反応でその抗体が生成されたこと、ii個体を保護してきたこと、または、タウの存在について少なくとも重要であること、およびiii抗体の起源がヒトであるので、自己抗原に対する交差反応性の危険性が最小化されることを特徴とする。なので、本発明に従って、タウ結合分子の起源がヒトである、すなわち、B細胞またはそのハイブリドーマなどのヒト細胞から単離された、または、そのcDNAがヒト細胞、例えば、ヒトメモリーB細胞のmRNAから直接的にクローンされたことを示すために、用語ヒトモノクローナル抗体、ヒトモノクローナル自己抗体、ヒト抗体などが使用される。ヒト抗体は、例えば、結合特性を改善するためにその抗体にアミノ酸置換がなされてもなお、ヒト抗体である。以下に記載するような、および、例えば、Kucherlapatiらによる米国特許第5,939,598号に記載されるような、ヒト免疫グロブリンライブラリー、または内在性免疫グロブリンを発現しない、1つ以上のヒト免疫グロブリンについての遺伝子導入動物に由来する抗体は、それらを本発明の真のヒト抗体から区別するためにヒト様抗体と示される。例えば、典型的にはファージディスプレイから単離された合成抗体および半合成抗体などのヒト様抗体の重鎖と軽鎖の対合は、オリジナルのヒトB細胞で生じた通りのオリジナルの対合を必ずしも反映している訳ではない。したがって、先行技術において一般的に用いられるような組換え発現ライブラリーから得られたFab断片とscFv断片は、関連の、免疫原性と安定性へのあらゆる可能な効果に関して人工的であるとみなされ得る。対照的に、本発明は、ヒトにおけるその治療上の有用性とその許容性を特徴とする、選別されたヒト対象から単離された親和性成熟抗体を提供する。本明細書において使用される場合、用語マウス化抗体またはマウス化免疫グロブリンは、本発明のヒト抗体由来の1つ以上のCDR、およびマウス抗体配列に基づくアミノ酸置換および/または欠失および/または挿入を含有するヒトフレームワーク領域を含む抗体を指す。CDRを提供するヒト免疫グロブリンは親またはアクセプターと呼ばれ、フレームワーク変化をもたらすマウス抗体はドナーと呼ばれる。定常領域は存在する必要がないが、存在する場合、それらはたいていマウス抗体の定常領域と実質的に同一、すなわち、少なくとも約85~90、約95、約96、約97、約98、約99またはそれ以上同一である。それ故に、いくつかの実施形態において、全長のマウス化ヒト重鎖免疫グロブリンまたは軽鎖免疫グロブリンはマウス定常領域、ヒトCDR、および多数のマウス化アミノ酸置換を有する実質的にヒトのフレームワークを含有する。典型的には、マウス化抗体はマウス化可変軽鎖および/またはマウス化可変重鎖を含む抗体である。例えば、マウス化抗体は、例えば、キメラ抗体の可変領域全体は非マウスであるため、典型的なキメラ抗体を包含しないであろう。マウス化の工程によりマウス化した修飾型抗体は、CDRを提供する親抗体と同じ抗原に結合し、そして、親抗体と比較して、マウスではたいてい免疫原性が低い。本明細書において使用される場合、用語重鎖部分は、免疫グロブリン重鎖に由来するアミノ酸配列を含む。重鎖部分を含むポリペプチドはCH1ドメイン、ヒンジ例えば、上部ヒンジ領域、中部ヒンジ領域および/または下部ヒンジ領域ドメイン、CH2ドメイン、CH3ドメインまたはその異型体もしくは断片のうちの少なくとも1つを含む。例えば、本発明において使用される結合ポリペプチドは、CH1ドメインを含むポリペプチド鎖;CH1ドメイン、ヒンジドメインの少なくとも一部およびCH2ドメインを含むポリペプチド鎖;CH1ドメインおよびCH3ドメインを含むポリペプチド鎖;CH1ドメイン、ヒンジドメインの少なくとも一部およびCH3ドメインを含むポリペプチド鎖、またはCH1ドメイン、ヒンジドメインの少なくとも一部、CH2ドメインおよびCH3ドメインを含むポリペプチド鎖を含むことができる。別の実施形態において、本発明のポリペプチドは、CH3ドメインを含むポリペプチド鎖を含む。また、本発明において使用される結合ポリペプチドは、CH2ドメインの少なくとも一部例えば、CH2ドメインの全体または部分を欠失することができる。先に示したように、これらのドメイン例えば、重鎖部分のアミノ酸配列が天然の免疫グロブリン分子と異なるように、これらのドメインを修飾することができると当業者により理解される。本明細書において開示される特定の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体では、多量体の1つのポリペプチド鎖の重鎖部分は、前記多量体の2つ目のポリペプチド鎖上の重鎖部分と同一である。あるいは、本発明の重鎖部分含有単量体は同一ではない。例えば、各単量体は、異なる標的結合部位を含むことができ、例えば、二重特異性抗体または二特異性抗体を形成する。別の実施形態において、本明細書において開示される抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体は、scFvなどの単一ポリペプチド鎖から構成され、そして、潜在的なインビボ治療用途および診断用途のために細胞内に発現され得る細胞内抗体。本明細書において開示される診断方法および治療方法において使用される結合ポリペプチドの重鎖部分は様々な免疫グロブリン分子に由来し得る。例えば、ポリペプチドの重鎖部分は、IgG1分子に由来するCH1ドメインとIgG3分子に由来するヒンジ領域を含むことができる。別の例では、重鎖部分は、部分的にIgG1分子と部分的にIgG3分子に由来するヒンジ領域を含むことができる。別の例では、重鎖部分は、部分的にIgG1分子と部分的にIgG4分子に由来するキメラヒンジを含むことができる。本明細書において使用される場合、用語軽鎖部分は免疫グロブリン軽鎖に由来するアミノ酸配列を含む。1つの実施形態において、軽鎖部分はVLドメインまたはCLドメインのうちの少なくとも1つを含む。抗体のペプチドエピトープまたはポリペプチドエピトープの最小サイズは約4~5アミノ酸であると考えられている。ペプチドエピトープまたはポリペプチドエピトープは少なくとも7、少なくとも9または少なくとも約15~約30の間のアミノ酸を含有することができる。CDRはその三次形態をとる抗原性ペプチドまたはポリペプチドを認識することができるので、エピトープを含むアミノ酸は連続的である必要はなく、いくつかの場合では、同じペプチド鎖上に存在していなくてもよい。本発明において、本発明の抗体によって認識されるペプチドエピトープまたはポリペプチドエピトープは、少なくとも4個、少なくとも5個、少なくとも6個、少なくとも7個、少なくとも8個、少なくとも9個、少なくとも10個、少なくとも15個、少なくとも20個、少なくとも25個、または約5~約30個の間、約10~約30個の間または約15~約30個の間の連続的または非連続的なタウのアミノ酸からなる配列を含有する。本明細書において互換的に使用される特異的に結合するまたは特異的に認識するという表現によって、結合分子、例えば、抗体はその抗原結合ドメインを介してエピトープに結合すること、および、その結合が抗原結合ドメインとエピトープの間のある程度の相補性を必要とすることが一般的に示される。この定義によれば、抗体が無作為な関係が無いエピトープに結合する場合よりも容易に、その抗原結合ドメインを介してエピトープに結合するとき、その抗体はそのエピトープに特異的に結合すると言われる。抗体は、非連続的エピトープの直鎖状部分に対応するアミノ酸残基を含む、または、それらからなる単離されたポリペプチドに特異的に結合する、またはそのようなポリペプチドを特異的に認識することができることを当業者は理解する。ある抗体があるエピトープに結合する相対的親和性を限定するために用語特異性は本明細書において使用される。例えば、抗体Aは抗体Bよりも所与のエピトープへの高い特異性を有するとみなされ得る、または、抗体Aは、関連するエピトープDについて有する特異性よりも高い特異性でエピトープCに結合すると言うことができる。存在する場合、用語免疫学的結合特性または抗体の抗原とのその他の結合特性は、その全ての文法の形式で、抗体の特異性、親和性、交差反応性おおび他の結合特性を指す。優先的に結合するという表現により、結合分子、例えば、抗体が、関連する、同様の、相同な、または類似のエピトープに結合する場合よりも容易にエピトープに特異的に結合することが示される。したがって、所与のエピトープに優先的に結合する抗体は、そのような抗体が、関連するエピトープに交差反応することが可能であっても、関連のエピトープよりもそのエピトープに結合する可能性が高いであろう。非限定的な例として、結合分子、例えば、抗体が、その抗体の第2エピトープに対する解離定数KDよりも低いKDで第1エピトープと結合する場合、それは前記第1エピトープに優先的に結合するとみなされ得る。別の非限定的な例では、抗体が、その抗体の第2エピトープに対するKDよりも少なくとも1桁低い親和性で第1エピトープに結合する場合、前記抗体は前記第1抗原に優先的に結合するとみなされ得る。別の非限定的な例では、抗体が、その抗体の第2エピトープに対するKDよりも少なくとも2桁低い親和性で第1エピトープに結合する場合、前記抗体は前記第1エピトープに優先的に結合するとみなされ得る。別の非限定的な例では、結合分子、例えば、抗体が、その抗体の第2エピトープに対する解離速度koffよりも低いkoffで第1エピトープと結合する場合、それは前記第1エピトープに優先的に結合するとみなされ得る。別の非限定的な例では、抗体が、その抗体の第2エピトープに対するkoffよりも少なくとも1桁低い親和性で第1エピトープに結合する場合、前記抗体は前記第1抗原に優先的に結合するとみなされ得る。別の非限定的な例では、抗体が、その抗体の第2エピトープに対するkoffよりも少なくとも2桁低い親和性で第1エピトープに結合する場合、前記抗体は前記第1エピトープに優先的に結合するとみなされ得る。本明細書において開示される結合分子、例えば、抗体または抗原結合断片、異型体、または誘導体は、5×10-2秒-1、10-2秒-1、5×l0-3秒-1またはl0-3秒-1以下の解離速度koffでタウまたはその断片もしくは異型体と結合すると言うことができる。1つの実施形態において、本発明の抗体は、5×10-4秒-1、10-4秒-1、5×10-5秒-1、または10-5秒-1、5×10-6秒-1、10-6秒-1、5×10-7秒-1または10-7秒-1以下の解離速度koffでタウまたはその断片もしくは異型体と結合すると言うことができる。本明細書において開示される結合分子、例えば、抗体または抗原結合断片、異型体、または誘導体は、103M-1秒-1、5×103M-1秒-1、104M-1秒-1または5×104M-1秒-1以上の結合速度konでタウまたはその断片もしくは異型体と結合すると言うことができる。1つの実施形態において、本発明の抗体は、105M-1秒-1、5×105、M-1秒-1、106M-1秒-1、5×106M-1秒-1or107M-1秒-1以上の結合速度konでタウまたはその断片もしくは異型体と結合すると言うことができる。結合分子、例えば、抗体が、基準抗体の所与のエピトープへの結合を幾分妨げる程度まで、そのエピトープに優先的に結合する場合、それは前記基準抗体の前記エピトープへの結合を競合的に阻害すると言われる。当技術分野において公知の任意の方法、例えば、競合ELISA法によって競合的阻害を判定することができる。抗体が前記基準抗体の所与のエピトープへの結合を少なくとも90、少なくとも80、少なくとも70、少なくとも60、または少なくとも50競合的に阻害すると言うことができる。抗体のそのエピトープへの結合がまた、抗体ではない結合分子によって競合的に阻害され得るということを当業者は理解する。例えば、本明細書に記載される抗体のタウ、例えば、hTau40への特異的な結合が微小管により競合的に阻害され得る。本明細書において使用される場合、用語親和性は、結合分子、例えば、免疫グロブリン分子のCDRとの個々のエピトープの結合強度の程度を意味する。例えば、Harlowetal.,Antibodies:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratoryPress,2nded.1988の27頁~28頁を参照のこと。本明細書において使用される場合、用語結合活性は、免疫グロブリンの集団と抗原の間の複合体の総合的な安定性、すなわち、免疫グロブリン混合物の前記抗原との機能的結合強度を意味する。例えば、Harlowの29頁~34頁を参照のこと。結合活性は、集団中の個々の免疫グロブリン分子の特異的エピトープとの親和性、およびまた、免疫グロブリンと抗原の結合価の両方に関連する。例えば、2価のモノクローナル抗体とポリマーなどの高頻度反復エピトープ構造を有する抗原の間の相互作用は高い結合活性の1つであるであろう。任意の適切な方法を用いて抗体の抗原への親和性または結合活性を実験的に決定することができる。例えば、FundamentalImmunology,Paul,W.E.,Ed.,RavenPressNewYork,NY1984内のBerzofskyetal.,Antibody-AntigenInteractions、Kuby,JanisImmunology,W.H.FreemanandCompanyNewYork,NY1992、および本明細書に記載される方法を参照のこと。抗体の抗原への親和性を測定するための一般的な技術にはELISA、RIAおよび表面プラズモン共鳴が含まれる。塩濃度、pHなどの異なる条件下で測定される場合、特定の抗体抗原間相互作用の測定された親和性は変化し得る。したがって、標準化した抗体抗原溶液および標準化した緩衝液を用いて、親和性と他の抗原結合パラメータ、例えば、KD、IC50を測定することが好ましい。本発明の結合分子、例えば、抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体はまた、それらの交差反応性に関して、記載または明示され得る。本明細書において使用される場合、用語交差反応性は、1つの抗原に対して特異的な抗体の第2抗原と反応する能力、つまり、2つの異なる抗原性物質の間の関連性の程度を意味する。したがって、抗体が、その抗体の形成を誘導したエピトープと異なるエピトープに結合する場合、その抗体は交差反応性である。交差反応性エピトープは一般的に、抗体を誘導したエピトープと同じ相補的な構造的特色の多くを含み、いくつかの場合では、実際にはオリジナルのエピトープよりも適合する可能性がある。例えば、ある抗体が、関連するが同一ではないエピトープ、例えば、基準エピトープに対して少なくとも95、少なくとも90、少なくとも85、少なくとも80、少なくとも75、少なくとも70、少なくとも65、少なくとも60、少なくとも55、および少なくとも50の当技術分野において公知の、および本明細書に記載される方法を用いて計算されるような同一性を有するエピトープに結合するという点で、それらはある程度の交差反応性を有する。抗体が基準エピトープに対して95未満、90未満、85未満、80未満、75未満、70未満、65未満、60未満、55未満、および50未満の当技術分野において公知の、および本明細書に記載される方法を用いて計算されるような同一性を有するエピトープに結合しない場合、それは交差反応性をほとんど、または全く持たないと言うことができる。抗体があるエピトープの他の任意の類似体、オーソログまたは相同体に結合しない場合、それはそのエピトープに対して非常に特異的であるとみなすことができる。本発明の結合分子、例えば、抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体はまたタウに対する親和性に関して記載または明示され得る。1つの実施形態において、結合親和性には5×10-2M、10-2M、5×10-3M、10-3M、5×10-4M、10-4M、5×10-5M、10-5M、5×10-6M、10-6M、5×10-7M、10-7M、5×10-8M、10-8M、5×10-9M、10-9M、5×10-10M、10-10M、5×10-11M、10-11M、5×10-12M、10-12M、5×10-13M、10-13M、5×10-14M、10-14M、5×10-15M、または10-15M未満の解離定数、すなわち、Kdを有する結合親和性が含まれる。先に示したように、様々な免疫グロブリンクラスの定常領域のサブユニット構造および三次元構造が周知である。本明細書において使用される場合、用語VHドメインは免疫グロブリン重鎖のアミノ末端可変ドメインを含み、そして、用語CH1ドメインは免疫グロブリン重鎖の第1最もアミノ末端の定常領域ドメインを含む。CH1ドメインはVHドメインに隣接し、免疫グロブリン重鎖分子のヒンジ領域に対してアミノ末端側にある。本明細書において使用される場合、用語CH2ドメインは、例えば、従来の番号付体系を用いて、抗体の約残基244から残基360までKabat番号付システムでは残基244~残基360、およびEU番号付システムでは残基231~残基340、KabatEAら、前掲書を参照のことにわたる重鎖分子の部分を含む。CH2ドメインは、別のドメインと密接に対合していないという点でユニークである。どちらかというと、完全な天然IgG分子の2つのCH2ドメインの間に2つのN-結合分岐型炭水化物鎖が挿入される。CH3ドメインがCH2ドメインからIgG分子のC末端までにわたり、そして、約108残基を含むこともまた詳細に記載されている。本明細書において使用される場合、用語ヒンジ領域は、CH1ドメインをCH2ドメインに結合する重鎖分子の部分を含む。このヒンジ領域は約25残基を含み、そして、柔軟であり、したがって、2つのN末端抗原結合領域が独立的に動くことを可能にする。ヒンジ領域を、3つの明確なドメイン、すなわち上部ヒンジドメイン、中部ヒンジドメイン、および下部ヒンジドメインに細分化することができる。Rouxetal.,J.Immunol.1611998,4083を参照のこと。本明細書において使用される場合、用語ジスルフィド結合は2個のイオウ原子の間に形成される共有結合を含む。アミノ酸システインは、ジスルフィド結合を形成することができる、または、第2のチオール基と架橋を形成することができるチオール基を含む。大半の天然のIgG分子では、CH1領域とCL領域はジスルフィド結合によって連結されており、そして、Kabat番号付システムを用いる、239番と242番に対応する位置でEU番号付システムでは、位置226または位置2292本の重鎖が2つのジスルフィド結合によって連結される。本明細書において使用される場合、用語結合した、融合したまたは融合は互換的に使用される。これらの用語は、化学的複合体化または組換え技術を含むどのような手段によっても2つ以上の要素または構成部分を1つにまとめることを指す。インフレーム融合は、オリジナルのオープンリーディングフレームORFの正しい翻訳上の読み枠が維持されるように、2つ以上のポリヌクレオチドオープンリーディングフレームORFを結合してより長い連続的なORFを形成することを指す。したがって、組換え融合タンパク質は、オリジナルのORFによってコードされるポチペプチドに対応する自然界では通常、そのように結合していない2つ以上の区分を含有する単一のタンパク質である。読み枠は、このように、融合した区分を通して連続的になっているが、前記区分は、例えば、インフレームリンカー配列によって物理的または空間的に区切られる可能性がある。例えば、免疫グロブリン可変領域のCDRをコードするポリヌクレオチドがインフレームで融合され得るが、その融合したCDRが連続的なポリペプチドの一部として共翻訳される限り、それは、少なくとも1つの免疫グロブリンのフレームワーク領域または付加的なCDR領域をコードするポリヌクレオチドにより区切られ得る。用語発現は、本明細書において使用される場合、遺伝子が生化学物質、例えば、RNAまたはポリペプチドを産生する工程を意味する。その工程は、遺伝子ノックダウンならびに一過性発現と安定発現の両方を含むが、これらに限定されない、細胞内での遺伝子の機能的存在のどのような顕在化をも含む。それは、遺伝子のメッセンジャーRNAmRNA、トランスファーRNAtRNA、短ヘアピンRNAshRNA、低分子干渉RNAsiRNAまたは他の任意のRNA産物への転写、およびそのようなmRNAのポリペプチドへの翻訳を含むが、これらに限定されない。最終目的物質が生化学物質である場合、発現にはその生化学物質と任意の前駆体の作製が含まれる。遺伝子の発現が遺伝子産物を作製する。本明細書において使用される場合、遺伝子産物は核酸、例えば、遺伝子の転写により産生されるメッセンジャーRNA、または転写物から翻訳されるポリペプチドのどちらかであり得る。本明細書に記載される遺伝子産物には、転写後修飾、例えば、ポリアデニル化を受けた核酸、または翻訳後修飾、例えば、メチル化、グリコシル化、脂質付加、他のタンパク質サブユニットとの会合、タンパク質分解性切断などを受けたポリペプチドがさらに含まれる。本明細書において使用される場合、用語試料は、対象または患者から得られる任意の生物物質を意味する。1つの態様において、試料は血液、脳脊髄液CSFまたは尿を含み得る。他の態様において、試料は全血、血漿、血液試料から濃縮されたB細胞、および培養細胞例えば、対象に由来するB細胞を含み得る。試料はまた、生検試料、または神経組織を含む組織試料を含み得る。さらに他の態様において、試料は細胞全体および/または細胞の溶解物を含み得る。当技術分野において公知の方法により血液試料を採取することができる。1つの態様において、200μLの緩衝液20mMトリス、pH.7.5、0.5ノニデット、1mMEDTA、1mMPMSF、0.1MNaCl、1Xシグマプロテアーゼ阻害剤、および1Xシグマホスファターゼ阻害剤1および2中に4°Cでボルテックスすることにより沈殿物を再懸濁することができる。断続的にボルテックスをしながら、前記懸濁液を氷上で20分間放置することができる。約4°Cで5分間、15,000×gで遠心した後に、上清のアリコットを約-70°Cで保存することができる。本明細書において使用される場合、用語治療するまたは治療は、治療的処置、およびパーキンソン症などの望まれない生理的変化または障害を防止する、または遅延減少させることを目的とする予防的または防止的手段の両方を意味する。有益な、または、所望の臨床結果には、検出可能であろうと検出不可能であろうと、症状の軽減、疾患の程度の縮小、安定化したすなわち、悪化していない疾患状態、疾患の進行の遅延または緩慢化、疾患状態の寛解または緩和、および部分的であろうと完全であろうと寛解が含まれるが、これらに限定されない。治療はまた、治療を受けない場合に予想される生存期間と比較して生存期間を延長させることを意味し得る。治療を必要とする人々には、症状または障害を既に有する人々、ならびに症状または障害を有する傾向がある人々、または症状または障害の出現が防止されるべき人々が含まれる。対象または個体または動物または患者または哺乳類動物は、診断、予後予測、予防または治療が望ましい任意の対象、特に哺乳類の対象、例えば、ヒトの患者を意味する。II.抗体本発明は全般的にヒト抗タウ抗体およびその抗原結合断片に関連する。1つの実施形態において、本発明の抗体は、実施例において例証される抗体について概説されるような免疫学的結合特性および/または生物学的特質を示す。本発明に従って、タウに特異的なヒトモノクローナル抗体が健康なヒト対象のプールからクローン化された。本発明に従って実行される実験の過程で、最初の試みはタウ特異的抗体をクローン化することに失敗したが、ほぼ毎回偽陽性のクローンをもたらした。この問題を回避するために、組換えタウタンパク質、ADの脳から抽出されたPHFTau、健常対照の脳抽出物およびウシ血清アルブミンBSAへの結合について、ヒトメモリーB細胞培養物の条件培地中の抗体を並行してスクリーニングした。組換えタウおよび/またはPHFTauについて陽性であるが対照脳抽出物またはBSAについて陽性ではないB細胞培養物のみが抗体のクローン化の対象とされた。循環するタウ抗体血漿のレベルの上昇を示唆する、タウに対する高い血漿結合活性を有する健康なヒト対象のプールに、特異的な抗体を単離する最初の試みを集中した。予想外にも、これらの試みはタウ特異的ヒトメモリーB細胞を作製することに失敗し、そして、本発明において記載される抗体は、高いタウ血漿反応性について予備選択されていない、または、タウに対して低い血漿反応性を有する健康なヒト対象のプールから単離された。この方法によって、いくつかの抗体を単離することができた。クラスと軽鎖サブクラスの決定のために、選択された抗体をさらに分析した。メモリーB細胞培養物からの選択された適切な抗体のメッセージは、次に、RT-PCRによって転写され、クローン化され、そして、組換え体の生産のために発現ベクターに組み込まれる。添付されている実施例を参照のこと。HEK293細胞またはCHO細胞でのヒト抗体の組換え発現、ならびにその後の、全長型タウ図2、図7および図12、ウェスタンブロットでのその病理的修飾型図3および図8に対するそれらの結合特異性の性質決定および病理的凝集型タウに対するそれらの特色のある結合についての性質決定によって、初めて、タウに対して非常に特異的であり、そして、病理的修飾型タウタンパク質を特徴的に認識するヒト抗体がクローン化されたことが確認された。したがって、本発明は全般的に、単離された天然のヒトモノクローナル抗タウ抗体、ならびにその結合断片、誘導体および異型体に関連する。本発明の1つの実施形態において、前記抗体は、ウェスタンブロットで全長型組換えタウならびに/またはADの脳から単離した病理的凝集型および/もしくはリン酸化型PHFTauに変性条件下で結合することが可能である。図3および図8を参照のこと。1つの実施形態において、本発明は、NI-105-4E4、NI-105-24B2またはNI-105.4A3からなる群より選択される基準抗体と同じエピトープに特異的に結合する抗タウ抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体を対象とする。さらに、例示的な抗体であるNI-105-4E4を使用して実行された直接ELISA法の予備的な結果により、NI-105-4E4はタウのC末端を特異的に認識することが明らかになった。実行されたさらなる測定により、NI-105.4E4は2つの直鎖状配列を含む断続的なエピトープ、すなわち、図11に示されるようなR4微小管結合ドメイン内の第1直鎖状配列とR4ドメインとCドメインの間の領域内の第2直鎖状配列を認識することが示唆されている。1つの実施形態において、非連続的なエピトープから構成される直鎖状ポリペプチド、すなわち、本発明によって提供される抗体が認識するエピトープはタウの微小管結合ドメイン内に局在し、それは生理的微小管結合タウではマスクされている。本発明の抗体NI-105.4E4が認識するエピトープによって構成されるユニークな直鎖状ポリペプチドとして、アミノ酸337~343VEVKSEK配列番号7を含むヒトタウの微小管結合ドメイン内の第1配列がエピトープマッピングにより同定された。さらなる実験および市販されているAT180マウスモノクローナルタウ抗体との比較により、NI-105-4E4が配列番号7のユニークなエピトープを特異的に認識することが確認された。最も有利なことに、本発明の抗体NI-105.4E4が認識する配列番号7のエピトープは、配列番号1~6によって表されるアミノ酸配列を有する、ヒト脳に存在する6つのタウアイソフォーム全てで100保存されており、そして、マウスおよびラットなどの他の種においても同様に100保存されており、各動物モデルでの追加的な試験手段に本発明の抗体を提供する。配列番号6の残基V339および残基E342に対応する、配列番号7のポリペプチドの残基3および残基6がNI-105.4E4の結合に寄与することがさらなる実験法により示された。本発明の抗体NI-105.4E4が認識するエピトープから構成されるユニークな直鎖状ポリペプチドとして、ヒトタウの微小管結合ドメイン内に配列番号6のアミノ酸387~397を含む第2配列配列番号41がエピトープマッピングによりさらに同定された。配列番号6の残基D387、E391およびK395に対応する配列番号41の残基1、5および9がNI-105.4E4の結合に寄与する。1つの実施形態において、本明細書に記載される抗体は、配列番号7のアミノ酸残基を含むエピトープでタウに特異的に結合する。別の実施形態において、本明細書に記載される抗体は、配列番号41のアミノ酸残基を含むエピトープでタウに特異的に結合する。特定の実施形態において、本明細書に記載される抗体は、配列番号7と配列番号41のアミノ酸残基を含むエピトープでタウに特異的に結合する。さらなる実施形態において、本明細書に記載される抗体は、配列番号6の残基V339、E342、D387、E391およびK395からなる群より選択される1つ以上のアミノ酸残基を含むエピトープでタウに特異的に結合する。前記エピトープは、配列番号6の残基V339、E342、D387、E391およびK395からなる群のいずれか1つの、いずれか2つの、いずれか3つの、いずれか4つの、または5つ全ての残基を含む可能性がある。特定の実施形態において、タウはhTau40である。1つの実施形態において、本明細書に記載される抗体は、タウの微小管結合ドメインを含むエピトープでタウに結合する。特定の実施形態において、本明細書に記載される抗体は、図11に示されるようなタウのR4領域に由来するアミノ酸残基を含むエピトープでタウに結合する。1つの実施形態において、本明細書に記載される抗体はタウへの特異的結合について微小管と競合する。別の実施形態において、本明細書に記載される抗体は、微小管と結合していないタウへの抗体結合親和性と比較して、微小管が結合したタウへの低下した結合親和性を有する。さらなる実施形態において、本明細書に記載される抗体は、微小管と結合したタウに結合しない、または実質的に結合しない。特定の実施形態において、タウタンパク質は天然タウタンパク質または組換えタウタンパク質であり得る。特定の実施形態において、タウはhTau40である。エピトープマッピングにより、本発明の抗体NI-105.4A3が認識するユニークな直鎖状エピトープとして、配列番号6のアミノ酸35~49を含むヒトタウの配列配列番号42がさらに同定された。配列番号6の残基D40、A41およびK44に対応する配列番号42の残基6、7および10がNI-105.4A3の結合に寄与する。1つの実施形態において、本明細書に記載される抗体は、配列番号42のアミノ酸残基を含むエピトープでタウに特異的に結合する。さらなる実施形態において、本明細書に記載される抗体は、配列番号6の残基D40、A41およびK44からなる群より選択される1つ以上のアミノ酸残基を含むエピトープでタウに特異的に結合する。前記エピトープは、配列番号6の残基D40、A41およびK44からなる群のいずれか1つの、いずれか2つの、または3つ全ての残基を含む可能性がある。特定の実施形態において、タウはhTau40である。また、実施例で実証され、そして、図6に示されるような最初の実験観察にとらわれるつもりはないが、本発明のヒトモノクローナルNI-105-4E4抗タウ抗体は、脳組織において病理的凝集型タウに特異的に結合するが、生理型タウを実質的に認識しないことを特徴とする。1つの実施形態において、本発明のヒト抗タウ抗体は、脳組織において病理的凝集型タウに特異的に結合するが、生理型タウを実質的に認識しない可能性がある。さらに、本発明のヒト抗タウ抗体は、脳内で神経原線維濃縮体NFT、糸屑状構造物および/またはジストロフィー性神経突起の中の、プレタングルステージpre-tanglestageのタウを認識するその能力をさらに特徴とする可能性がある。それ故に、本発明は、診断目的および治療目的にかように特に有用である、結合特異性を有するヒトタウ抗体一式を提供する。1つの実施形態において、本発明の抗体は、実施例において記載されるように、例示的なNI-105-4E4抗体の結合特性を示す。さらに、または代わりに、本発明の抗タウ抗体は、特に実施例4に従って解析されると、生理的形態よりもむしろ病理的凝集型のタウを優先的に認識する。さらに、または代わりに、本発明の抗タウ抗体は、ヒトタウの疾患の原因となる突然変異体、特に実施例4において記載されるものに結合する。これに関連して、結合特異性は、例示的なNI-105.4E4抗体、NI-1054A3抗体およびNI-105.24B2抗体について、それぞれ、図2、図12および図7に示されるような範囲内であり得る、すなわち、約100pM~100nMの2分の1最大有効濃度EC50、または野生型タウに対して約100pM~10nMのEC50を有する。それ故に、本発明の抗タウ抗体は、実施例4に記載される免疫組織学的染色により例示されるように、脳内においてタウの病理的修飾形態、例えばタウの病理的凝集体に優先的に結合する。別の実施形態において、本発明の抗タウ抗体は、ウェスタンブロットによって実施例2において例示されるように、組換えタウと病理的修飾型タウの両方に優先的に結合する。本発明は、NI-105-4E4、NI-105-24B2およびNI-105.4A3からなる群より選択される抗体の抗原結合ドメインと同一の抗原結合ドメインを含む抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体に関連する。本発明は、図1に示されるアミノ酸配列うちのいずれか1つを含むVH可変領域および/またはVL可変領域の少なくとも1つの相補性決定領域CDRを可変領域、例えば、結合ドメインに含むことを特徴とし得る、そのような結合分子、例えば、抗体およびその結合断片をさらに例示する。先に特定された可変領域をコードする、対応するヌクレオチド配列は以下の表2に示される。図1に示されるようなVH領域および/またはVL領域の上記のアミノ酸配列を有する例示的な一式のCDR。しかしながら、以下に考察するように、さらに、または代わりに、CDR2およびCDR3の場合では、図1に示されるものとそれらのアミノ酸配列が、1個、2個、3個、またはもっと多くのアミノ酸だけ異なるCDRを使用することが可能であるという事実を当業者はよく理解する。1つの実施形態において、本発明の抗体は、配列番号23~25、26~28、29~31、32~34、35~37および38~40からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、またはそのようなアミノ酸配列からなる少なくとも1つのCDRを含む。1つの実施形態において、本発明の抗体は、配列番号23~25、26~28、29~31、32~34、35~37および38~40からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、またはそのようなアミノ酸配列からなる1つ、2つ、3つ、4つ、5つ、または6つのCDRを含む。前記抗体は、配列番号23、29もしくは35のVHCDR1;配列番号24、30もしくは36のVHCDR2;または配列番号25、31もしくは37のVHCDR3を含む重鎖可変領域を含む可能性がある。前記抗体は、配列番号26、32もしくは38のVLCDR1;配列番号27、33もしくは39のVLCDR2;または配列番号28、34もしくは40のVLCDR3を含む軽鎖可変領域を含む可能性がある。前記抗体は、配列番号23、29もしくは35のVHCDR1;配列番号24、30もしくは36のVHCDR2;または配列番号25、31もしくは37のVHCDR3を含む重鎖可変領域を含む可能性があり、そして、配列番号26、32もしくは38のVLCDR1;配列番号27、33もしくは39のVLCDR2;または配列番号28、34もしくは40のVLCDR3を含む軽鎖可変領域をさらに含む可能性がある。1つの実施形態において、本発明の抗体は、配列番号23、29または35のVHCDR1;配列番号24、30または36のVHCDR2;および配列番号25、31または37のVHCDR3を含む重鎖可変領域を含む可能性がある。1つの実施形態において、本発明の抗体は、配列番号26、32または38のVLCDR1;配列番号27、33または39のVLCDR2;および配列番号28、34または40のVLCDR3を含む軽鎖可変領域を含む可能性がある。前記抗体は、配列番号23、29または35のVHCDR1;配列番号24、30または36のVHCDR2;および配列番号25、31または37のVHCDR3を含む重鎖可変領域をさらに含む可能性があり、ならびに配列番号26、32または38のVLCDR1;配列番号27、33または39のVLCDR2;および配列番号28、34または40のVLCDR3を含む軽鎖可変領域をさらに含む可能性がある。1つの実施形態において、本発明の抗体は、配列番号23のVHCDR1、配列番号24のVHCDR2、および配列番号25のVHCDR3を含む重鎖可変領域を含む可能性がある。1つの実施形態において、本発明の抗体は、配列番号29のVHCDR1、配列番号30のVHCDR2、および配列番号31のVHCDR3を含む重鎖可変領域を含む可能性がある。1つの実施形態において、本発明の抗体は、配列番号35のVHCDR1、配列番号36のVHCDR2、および配列番号37のVHCDR3を含む重鎖可変領域を含む可能性がある。1つの実施形態において、本発明の抗体は、配列番号26のVLCDR1、配列番号27のVLCDR2、および配列番号28のVLCDR3を含む軽鎖可変領域を含む可能性がある。1つの実施形態において、本発明の抗体は、配列番号32のVLCDR1、配列番号33のVLCDR2、および配列番号34のVLCDR3を含む軽鎖可変領域を含む可能性がある。1つの実施形態において、本発明の抗体は、配列番号38のVLCDR1、配列番号39のVLCDR2、および配列番号40のVLCDR3を含む軽鎖可変領域を含む可能性がある。1つの実施形態において、本発明の抗体は、配列番号23のVHCDR1、配列番号24のVHCDR2、および配列番号25のVHCDR3を含む重鎖可変領域を含む可能性があり、ならびに配列番号26のVLCDR1、配列番号27のVLCDR2、および配列番号28のVLCDR3を含む軽鎖可変領域をさらに含む可能性がある。1つの実施形態において、本発明の抗体は、配列番号29のVHCDR1、配列番号30のVHCDR2、および配列番号31のVHCDR3を含む重鎖可変領域を含む可能性があり、ならびに配列番号32のVLCDR1、配列番号33のVLCDR2、および配列番号34のVLCDR3を含む軽鎖可変領域をさらに含む可能性がある。1つの実施形態において、本発明の抗体は、配列番号35のVHCDR1、配列番号36のVHCDR2、および配列番号37のVHCDR3を含む重鎖可変領域を含む可能性があり、ならびに配列番号38のVLCDR1、配列番号39のVLCDR2、および配列番号40のVLCDR3を含む軽鎖可変領域をさらに含む可能性がある。1つの実施形態において、本発明の抗体は、図1に示されるようなVH領域および/またはVL領域のアミノ酸配列を含む抗体のいずれか1つである。1つの実施形態において、本発明の抗体は、ヒトB細胞で存在したような、重鎖と軽鎖の同じ性質の対合を維持していることを特徴とする。1つの実施形態において、本発明の抗体は、配列番号9、13、17および93からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、またはそのようなアミノ酸配列からなる重鎖可変領域VHを含む。1つの実施形態において、本発明の抗体は、配列番号11、15および19からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、またはそのようなアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域VLを含む。1つの実施形態において、本発明の抗体は、配列番号9、13、17および93からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、またはそのようなアミノ酸配列からなる重鎖可変領域VHを含み、ならびに配列番号11、15および19からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、またはそのようなアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域VLをさらに含む。特定の実施形態において、前記抗体は、配列番号9のVHおよび配列番号11のVL、または配列番号93のVHおよび配列番号11のVL、配列番号13のVHおよび配列番号15のVL、または配列番号17VHおよび配列番号19のVLを含む。あるいは、本発明の抗体は、図1に示されるようなVH領域および/またはVL領域を有する抗体のうちの少なくとも1つと、例えば、hTau40などのタウへの結合について競合する抗体、またはその抗原結合断片、誘導体もしくは異型体である。1つの実施形態において、本発明の抗体はhTau40への特異的結合についてNI-105-4E4、NI-105-24B2またはNI-105.4A3と競合する。それらの抗体は、特に、治療用途について、同様にヒト抗体であり得る。あるいは、前記抗体は、診断方法と動物での研究に特に有用なマウス抗体、マウス化抗体およびキメラマウス-ヒト抗体である。1つの実施形態において、本発明の抗体は、培養されている単一クローン性B細胞またはオリゴクローン性B細胞の培養物によって供給され、そして、前記B細胞が産生する抗体を含有する前記培養物の上清をその中の抗タウ抗体の存在と親和性についてスクリーニングする。スクリーニングの工程は、その開示の内容が参照により本明細書に組み込まれる国際出願公開第WO2004/095031号に記載されるような、鋭敏な組織アミロイド斑免疫反応性TAPIRアッセイの工程;脳切片でのPHFTauへの結合についてのスクリーニングの工程;アミノ酸セリン202およびトレオニン205にリン酸基を有する、配列番号6によって表されるアミノ酸配列のタウに由来するペプチドの結合についてのスクリーニングの工程;アミノ酸トレオニン231にリン酸基を有する、配列番号6によって表されるアミノ酸配列のタウに由来するペプチドの結合についてのスクリーニングの工程;および/または前記配列のアミノ酸トレオニン231、および/またはアミノ酸セリン396およびセリン404にリン酸基を有する、配列番号6によって表されるアミノ酸配列のタウに由来するペプチドの結合についてのスクリーニングの工程;配列番号6によって表されるアミノ酸配列の組換えヒトタウの結合についてのスクリーンの工程;および結合が検出される抗体または前記抗体を産生する細胞の単離の工程、を含む。先に言及したように、ヒト免疫反応に応じて生成されるため、本発明のヒトモノクローナル抗体は、特定の病理と関連があり、例えば、マウスモノクローナル抗体の生成のための免疫過程の場合、およびファージディスプレイライブラリーのインビトロスクリーニングの場合、それぞれ、アクセスできる可能性が無い、または免疫原性が低い可能性が無いエピトープを認識する。したがって、本発明のヒト抗タウ抗体のエピトープはユニークであり、本発明のヒトモノクローナル抗体が認識するエピトープに結合することが可能である他の抗体は存在しないと明記することが賢明である。抗体NI-105.4E4およびNI-105.4A3のユニークなエピトープを示す図11も参照のこと。したがって、本発明はまた全般的に、本発明のヒトモノクローナル抗体とタウに対する特異的結合について競合する抗タウ抗体およびタウ結合分子にまで及ぶ。本発明は、NI-105.4E4、NI-105.24B2およびNI-105.4A3からなる群より選択される基準抗体と同じタウのエピトープに特異的に結合する抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体をより具体的に対象とする。試験している免疫グロブリンが基準抗体の、タウなどの共通の抗原への特異的な結合を阻害する測定法により抗体間の競合を判定する。多種類の競合的結合アッセイが公知である。例えば、固相直接または間接放射免疫アッセイRIA、固相直接または間接酵素免疫アッセイEIA、サンドイッチ競合アッセイについて、Stahlietal.,MethodsinEnzymology91983,242-253を参照のこと;固相直接ビオチン-アビジンEIAについて、Kirklandetal.,J.Immunol.1371986,3614-3619andCheungetal.,Virology1761990,546-552を参照のこと;固相直接標識アッセイ、固相直接標識サンドイッチアッセイについてHarlowandLane,Antibodies,ALaboratoryManual,ColdSpringHarborPress1988を参照のこと;I125標識を用いる固相直接標識RIAについて、Moreletal,Molec.Immunol.251988,7-15およびMoldenhaueretal.,Scand.J.Immunol.321990,77-82を参照のこと。典型的には、そのような測定法は、固相表面に結合した精製されたタウもしくはその凝集体、またはこれらのいずれかを担持する細胞、未標識の試験免疫グロブリンおよび標識された基準免疫グロブリン、すなわち、本発明のヒトモノクローナル抗体の使用を含む。試験免疫グロブリンの存在下で前記の固相表面または細胞に結合した標識の量を測定することにより競合的阻害を測定する。通常、試験免疫グロブリンは過剰に存在する。1つの実施形態において、添付されている実施例におけるELISA法について説明されるような条件で、競合的結合アッセイを実行する。競合的測定法競合性抗体により同定された抗体には、基準抗体と同じエピトープに結合する抗体、および基準抗体が結合するエピトープに立体障害が生じるほど充分近位の隣接するエピトープに結合する抗体が含まれる。通常、競合性抗体が過剰に存在するとき、それは基準抗体の共通の抗原への特異的な結合を少なくとも50または75阻害する。それ故に、本発明は、NI-105.4E4、NI-105.24B2またはNI-105.4A3からなる群より選択される基準抗体がタウに結合することを競合的に阻害する抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体にさらに関連する。別の実施形態において、本発明は、重鎖可変領域のVH-CDRの少なくとも1つまたは重鎖可変領域のVH-CDRの少なくとも2つが、本明細書において開示される抗体の基準重鎖VH-CDR1アミノ酸配列、VH-CDR2アミノ酸配列またはVH-CDR3アミノ酸配列と少なくとも80、85、90、95、96、97、98または99同一である免疫グロブリン重鎖可変領域VHを含む、そのような免疫グロブリン重鎖可変領域VHから基本的になる、またはそのような免疫グロブリン重鎖可変領域VHからなる単離されたポリペプチドを提供する。あるいは、前記VHのVH-CDR1領域、VH-CDR2領域およびVH-CDR3領域は、本明細書において開示される抗体の基準重鎖VH-CDR1アミノ酸配列、VH-CDR2アミノ酸配列およびVH-CDR3アミノ酸配列と少なくとも80、85、90、95、96、97、98または99同一である。このように、この実施形態に従って、本発明の重鎖可変領域は、図1に示される群に関連するVH-CDR1ポリペプチド配列、VH-CDR2ポリペプチド配列およびVH-CDR3ポリペプチド配列を有する。図1はKabatシステムにより定義されたVH-CDRを示すが、他のCDR定義、例えば、Chothiaシステムにより定義されたVH-CDRもまた本発明に含まれ、そして、それは、図1に提示されるデータを使用して当業者により容易に特定され得る。1つの実施形態において、基準VHCDR1のアミノ酸配列は配列番号23、29または35であり、基準VHCDR2のアミノ酸配列は配列番号24、30または36であり、そして、基準VHCDR3のアミノ酸配列は配列番号25、31または37である。別の実施形態において、本発明は、図1に示されるVH-CDR1群、VH-CDR2群およびVH-CDR3群と同一であるポリペプチド配列を有するVH-CDR1領域、VH-CDR2領域およびVH-CDR3領域を持つ免疫グロブリン重鎖可変領域VHを含む、そのような免疫グロブリン重鎖可変領域VHから基本的になる、またはそのような免疫グロブリン重鎖可変領域VHからなる単離されたポリペプチドを提供する。1つの実施形態において、VHCDR1のアミノ酸配列は配列番号23、29、または35であり、VHCDR2のアミノ酸配列は配列番号24、30または36であり、そして、VHCDR3のアミノ酸配列は配列番号25、31または37である。別の実施形態において、本発明は、図1に示されるVH-CDR1群、VH-CDR2群およびVH-CDR3群と、いずれか1つのVH-CDRにおける1、2、3、4、5、6、7、8、9または10アミノ酸置換を例外として、同一であるポリペプチド配列を有するVH-CDR1領域、VH-CDR2領域およびVH-CDR3領域を持つ免疫グロブリン重鎖可変領域VHを含む、そのような免疫グロブリン重鎖可変領域VHから基本的になる、またはそのような免疫グロブリン重鎖可変領域VHからなる単離されたポリペプチドを提供する。ある実施形態において、前記アミノ酸置換は保存的アミノ酸置換である。1つの実施形態において、VHCDR1のアミノ酸配列は配列番号23、29または35であり、VHCDR2のアミノ酸配列は配列番号24、30または36であり、そして、VHCDR3のアミノ酸配列は配列番号25、31または37である。別の実施形態において、本発明は、軽鎖可変領域のVL-CDRの少なくとも1つまたは軽鎖可変領域のVL-CDRの少なくとも2つが、本明細書において開示される抗体の基準軽鎖VL-CDR1アミノ酸配列、VL-CDR2アミノ酸配列またはVL-CDR3アミノ酸配列と少なくとも80、85、90、95、96、97、98または99同一である免疫グロブリン軽鎖可変領域VLを含む、そのような免疫グロブリン軽鎖可変領域VLから基本的になる、またはそのような免疫グロブリン軽鎖可変領域VLからなる単離されたポリペプチドを提供する。あるいは、前記VLのVL-CDR1領域、VL-CDR2領域およびVL-CDR3領域は、本明細書において開示される抗体の基準軽鎖VL-CDR1アミノ酸配列、VL-CDR2アミノ酸配列およびVL-CDR3アミノ酸配列と少なくとも80、85、90、95、96、97、98または99同一である。このように、この実施形態に従って、本発明の軽鎖可変領域は、図1に示される群に関連するVL-CDR1ポリペプチド配列、VL-CDR2ポリペプチド配列およびVL-CDR3ポリペプチド配列を有する。図1はKabatシステムにより定義されたVL-CDRを示すが、他のCDR定義、例えば、Chothiaシステムにより定義されたVL-CDRもまた本発明に含まれる。1つの実施形態において、基準VLCDR1のアミノ酸配列は配列番号26、32または38であり、基準VLCDR2のアミノ酸配列は配列番号27、33または39であり、そして、基準VLCDR3のアミノ酸配列は配列番号28、34または40である。別の実施形態において、本発明は、図1に示されるVL-CDR1群、VL-CDR2群およびVL-CDR3群と同一であるポリペプチド配列を有するVL-CDR1領域、VL-CDR2領域およびVL-CDR3領域を持つ免疫グロブリン軽鎖可変領域VLを含む、そのような免疫グロブリン軽鎖可変領域VLから基本的になる、またはそのような免疫グロブリン軽鎖可変領域VLからなる単離されたポリペプチドを提供する。1つの実施形態において、VLCDR1のアミノ酸配列は配列番号26、32または38であり、VLCDR2のアミノ酸配列は配列番号27、33または39であり、そして、VLCDR3のアミノ酸配列は配列番号28、34または40である。別の実施形態において、本発明は、図1に示されるVL-CDR1群、VL-CDR2群およびVL-CDR3群と、いずれか1つのVL-CDRにおける1、2、3、4、5、6、7、8、9または10アミノ酸置換を例外として、同一であるポリペプチド配列を有するVL-CDR1領域、VL-CDR2領域およびVL-CDR3領域を持つ免疫グロブリン軽鎖可変領域VLを含む、そのような免疫グロブリン軽鎖可変領域VLから基本的になる、またはそのような免疫グロブリン軽鎖可変領域VLからなる単離されたポリペプチドを提供する。ある実施形態において、前記アミノ酸置換は保存的アミノ酸置換である。1つの実施形態において、VLCDR1のアミノ酸配列は配列番号26、32または38であり、VLCDR2のアミノ酸配列は配列番号27、33または39であり、そして、VLCDR3のアミノ酸配列は配列番号28、34または40である。免疫グロブリンまたはそれをコードするcDNAをさらに修飾することができる。したがって、さらなる実施形態において、本発明の方法は、キメラ抗体、マウス化抗体、単鎖抗体、Fab断片、二重特異性抗体、融合抗体、標識化抗体またはこれらのいずれか1つの類似体を作製する工程のいずれか1つを含む。対応する方法が当業者に知られており、そして、例えば、HarlowandLaneAntibodies,ALaboratoryManual,CSHPress,ColdSpringHarbor1988に記載される。ファージディスプレイ技術によって前記抗体の誘導体を得るとき、本明細書に記載される抗体のいずれか1つのものと同じエピトープに結合するファージ抗体の効率性を上昇させるために、BIAcoreシステムにおいて使用されるような表面プラズモン共鳴を使用することができるSchier,HumanAntibodiesHybridomas71996,97-105、Malmborg,J.Immunol.Methods1831995,7-13。例えば、国際出願公開第WO89/09622号にキメラ抗体の作製が記載される。欧州出願公開第EP-A10239400号および国際出願公開第WO90/07861号にヒト化抗体の作製方法が記載される。本発明に従って利用される抗体のさらなる供給源はいわゆるゼノジニック抗体である。例えば、国際出願公開第WO91/10741号、第WO94/02602号、第WO96/34096号および第WO96/33735号に、マウスにおけるヒト様抗体などのゼノジニック抗体の作製についての一般的原理が記載される。先に考察したように、本発明の抗体は完全抗体の他に、例えば、Fv、FabおよびFab2を含む様々な形態で、ならびに単鎖形態で存在し得る。例えば、国際出願公開第WO88/09344号を参照のこと。当技術分野において公知の従来の技術を用いて、例えば、アミノ酸欠失、挿入、置換、付加、および/または組換えおよび/または当技術分野において公知の他の任意の修飾を単独か併用のどちらかで用いることにより、本発明の抗体またはそれらの対応する免疫グロブリン鎖をさらに修飾することができる。免疫グロブリン鎖アミノ酸配列の基礎となるDNA配列にそのような修飾を導入する方法は当業者によく知られている。例えば、Sambrook,MolecularCloningALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratory1989N.Y.およびAusubel,CurrentProtocolsinMolecularBiology,GreenPublishingAssociatesandWileyInterscience,N.Y.1994を参照のこと。本発明の抗体の修飾には、アセチル化、ヒドロキシル化、メチル化、アミド化、および炭水化物もしくは脂質部分、補因子などの結合を含む、側鎖修飾、骨格修飾、ならびにN末端およびC末端修飾を含む、1つ以上の構成アミノ酸における化学的および/または酵素的誘導体化が含まれる。同様に、本発明は、アミノ末端に記載の抗体またはそのある断片を含み、それに融合した免疫刺激性リガンドなどの異種性分子をカルボキシル末端に含むキメラタンパク質の作製を包含する。対応する技術の詳細について、例えば、国際出願公開第WO00/30680号を参照のこと。さらに、例えば、重鎖CDR3HCDR3は可変性の程度がより大きく、そして、抗原抗体相互作用への関与が顕著である領域であるということがしばしば観察されているので、言及した抗体のいずれか1つの可変領域のCDR3領域、特に重鎖のCDR3を含有する、上述したような結合分子を含有するものが含まれるペプチドを本発明は包含する。組換え技術により、そのようなペプチドを容易に合成または作製して、本発明に従って有用な結合因子を作製することができる。そのような方法は当業者によく知られている。例えば、市販されている自動化ペプチド合成機を用いて、ペプチドを合成することができる。前記ペプチドを発現するDNAを発現ベクターに組み込み、そして、前記ペプチドを産生するその発現ベクターで細胞を形質転換することにより、前記ペプチドを組換え技術によって作製することもできる。それ故に、本発明は、本発明のヒト抗タウ抗体に適合し、そして、言及された特性を示す、すなわち、タウを特異的に認識する任意の結合分子、例えば、抗体またはその結合断片に関連する。そのような抗体および結合分子は、本明細書に記載されるようなELISAおよびウェスタンブロットおよび免疫組織化学によりそれらの結合特異性と親和性について試験され得る。例えば、実施例を参照のこと。また、本発明に従って実行される以後の実験の予備的結果により、本発明のヒト抗タウ抗体、特に抗体NI-105.4E4が、アルツハイマー病ADに冒されている患者のヒト脳切片に存在する神経原線維濃縮体NFT、糸屑状構造物にさらに共通点がある病理的凝集型タウに主に結合することが明らかになった。したがって、本発明の特定の好ましい実施形態において、ヒト抗体、またはその結合断片、誘導体もしくは異型体はヒトADの脳の切片上でタウを認識する。さらに、ヒトタウP301Lを過剰発現する遺伝子導入マウスにおいて、病理的タウに差示的に結合する抗体NI-105.4E4の明確な能力がまた示され得るであろう。既に言及したNFTと糸屑状構造物に加えて、抗体NI-105.4E4はマウス脳切片上でジストロフィー性神経突起にも結合し、そして、プレタングルステージpre-tanglestageのタウ凝集体を同定する。実施例4および図6を参照のこと。不死化したB細胞またはメモリーB細胞の培養物から直接的に免疫グロブリンを得る代わりに、前記の不死化細胞を、その後の発現および/または遺伝子操作のために、再構成された重鎖および軽鎖の供給源として使用することができる。再構成された抗体遺伝子について、適切なmRNAから逆転写してcDNAを作製することができる。所望により、重鎖定常領域を異なるアイソタイプの重鎖定常領域と交換する、または、完全に除去することができる。単鎖Fv領域をコードするために可変領域を連結することができる。複数のFv領域を連結して1つよりも多い標的への結合能を付与することができ、または、キメラ重鎖軽鎖結合体を使用することができる。一旦、前記遺伝物質が利用可能になると、それら両方の所望の標的に結合する能力を保持する、上述したような類似体の設計は簡単である。抗体可変領域のクローン化と組換え抗体の作製の方法は当業者に知られており、そして、例えば、Gillilandetal.,TissueAntigens471996,1-20、Doeneckeetal.,Leukemia111997,1787-1792に記載されている。一旦、適切な遺伝物質を得て、所望により、類似体をコードするように修飾すると、最小でも重鎖および軽鎖の可変領域をコードするものを含む、そのコード配列を、標準的な組換え宿主細胞に形質移入することができるベクターに含有される発現システムに挿入することができる。そのような様々な宿主細胞を使用することができる。しかしながら、哺乳類細胞が効率的な処理に向いていると考えられ得る。この目的に有用な典型的な哺乳類細胞株にはCHO細胞、HEK293細胞またはNSO細胞が含まれるが、これらに限定されない。次に、前記宿主細胞の増殖と前記コード配列の発現に適切な培養条件下で、改変された組換え宿主を培養することにより、前記抗体または類似体の作製を行う。次に、前記培養物から抗体を単離することによりそれらを回収する。前記発現システムはシグナルペプチドを含むように設計されており、結果生じる抗体が培地中に分泌される。しかしながら、細胞内生産もまた可能である。上記に従って、本発明はまた、本発明の抗体または同等の結合分子をコードするポリヌクレオチドに関連する。1つの実施形態において、前記ポリヌクレオチドは上述の抗体の免疫グロブリン鎖の少なくとも可変領域をコードする。典型的には、前記ポリヌクレオチドによりコードされる前記可変領域は、前記抗体の可変領域であるVHおよび/またはVLの少なくとも1つの相補性決定領域CDRを含む。当業者は、所望の特異性と生物学的機能を有する他のポリペプチドまたは抗体の構築のために上述の可変ドメインを有する前記抗体の可変ドメインを使用することができることを容易に理解する。したがって、本発明はまた、上述の可変ドメインの少なくとも1つのCDRを含むポリペプチドおよび抗体を包含し、そして、それらは、添付されている実施例に記載されている抗体と実質的に同じ、または、同様の結合特性を有利なことに有する。当業者は、CDR内、またはKabatにより定義されたようなCDRと部分的に重複する超可変ループChothiaandLesk,J.Mol.Biol.1961987,901-917内でアミノ酸置換を行うことにより結合親和性が増大し得ることを知っている。例えば、Riechmann,etal,Nature3321988,323-327を参照のこと。したがって、本発明はまた、言及されたCDRのうちの1つ以上が1つ以上の、または2つ以下のアミノ酸置換を含む抗体に関連する。1つの実施形態において、本発明の抗体は、その免疫グロブリン鎖の一方または両方に、図1に示されるような可変領域の2つ、または3つ全てのCDRを含む。本発明の結合分子、例えば、抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体は、当業者に知られるように、1つ以上のエフェクター機能を仲介する定常領域を含むことができる。例えば、補体のC1成分の抗体定常領域への結合が補体系を活性化し得る。補体の活性化はオプソニン作用と細胞病原体の溶解に重要である。補体の活性化はまた炎症反応を刺激し、そしてまた、自己免疫過敏症に関与する可能性がある。また、抗体のFc領域にあるFc受容体結合部位が細胞上のFc受容体FcRに結合して、抗体がFc領域を介して様々な細胞の受容体に結合する。IgGガンマ受容体、IgEイプシロン受容体、IgAアルファ受容体およびIgMミュー受容体を含む様々なクラスの抗体に特異的な多数のFc受容体受容体が存在する。抗体の細胞表面上のFc受容体への結合が、抗体に覆われた粒子の貪食と分解、免疫複合体の除去、キラー細胞による抗体に覆われた標的細胞の溶解抗体依存性細胞介在性細胞傷害、またはADCCと呼ばれる、炎症メディエーターの放出、胎盤通過および免疫グロブリン生産の制御を含む多数の重要で多様な生物学的反応を引き起こす。したがって、本発明のある実施形態には、ほぼ同じ免疫原性を有する改変されていない抗体全体と比較するとき、低下したエフェクター機能、非共有結合により二量体化する能力、タウが凝集および沈着した部位に局在する上昇した能力、減少した血清中半減期、または増加した血清中半減期などの所望の生化学的性質をもたらすように、定常領域ドメインの1つ以上の少なくとも小断片を欠失、または、欠失でなければ、改変した抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体が含まれる。例えば、本明細書に記載される診断方法および治療方法で使用されるある抗体は、免疫グロブリン重鎖に類似のポリペプチド鎖を含むが、1つ以上の重鎖ドメインの少なくとも一部を欠くドメイン欠失抗体である。例えば、ある抗体では、修飾型抗体の定常領域の1つのドメイン全体を欠失する。例えば、CH2ドメインの全てまたは一部を欠失する。他の実施形態において、本明細書に記載される診断方法および治療方法で使用されるある抗体は、本明細書の他の箇所で脱グリコシル化抗体またはアグリ抗体と称される、グリコシル化を除くように改変されている定常領域、例えば、IgG重鎖定常領域を有する。酵素的に、ならびに定常領域内のグリコシル化コンセンサス配列を操作することにより、そのようなアグリ抗体を調製することができる。理論にとらわれるものではないが、アグリ抗体はインビボで改善された安全性および安定性プロファイルを有する可能性があると考えられている。所望のエフェクター機能を有する脱グリコシル化抗体の作製方法は、例えば、国際出願公開第WO2005/018572号に見出され、その全体が参照により組み込まれる。本明細書に記載されるある抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体では、当技術分野において公知の技術を用いてFc部分に突然変異を形成し、エフェクター機能を減少させることができる。例えば、定常領域ドメインの点突然変異または他の手段による欠失または不活化が、循環する修飾型抗体のFc受容体結合を低下させることができ、それによって、タウへの局在性が増加する。他の場合では、本発明と矛盾しない定常領域の修飾が補体の結合を軽減し、したがって、血清中半減期と共役化細胞毒の非特異的結合を低下させることがあり得る。上昇した抗原特異性または抗体柔軟性が原因の局在の向上を可能とするジスルフィド結合またはオリゴサッカリド部分を修飾するために、定常領域のさらに他の修飾を用いることができる。その修飾の結果の生理学的プロファイル、生物学的利用能、および他の生化学効果、例えば、タウ局在性、生体内分布および血清中半減期を、周知の免疫学的技術を用いて、過度に実験を行うことなく、容易に測定および定量することができる。本明細書に記載されるある抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体では、例として、Fcγ受容体、LRP、もしくはThy1受容体を介した抗体の受容体介在性飲食作用を増強させることにより、または、抗体が生きている細胞を損傷することなくそれらに輸送されることを可能とすると言われているスーパー抗体技術ExpertOpin.Biol.Ther.2005,237-241により抗体の細胞内取込を増加させるために、Fc部分に突然変異を形成する、またはFc部分を別のタンパク質配列と交換することがでる。例えば、前記抗体結合領域と細胞表面受容体の同種のタンパク質リガンドの融合タンパク質、またはタウと細胞表面受容体に同様に結合する特異的配列を有する二重特異性もしくは多重特異性抗体の生成が当技術分野において公知の技術を用いて操作され得る。本明細書に記載されるある抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体では、血液脳関門透過性を上昇させるために、Fc部分に突然変異を形成する、またはFc部分を別のタンパク質配列と交換することができ、または化学的に前記抗体を修飾することができる。当技術分野において公知の技術を用いて前駆体全体または親抗体から本発明の修飾型抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体を作製することができる。本明細書においてより詳細に代表的な技術が考察される。当技術分野において公知の技術を用いて、本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体を作製または製造することができる。ある実施形態において、抗体分子またはその断片が組換え技術によって作製される、すなわち、組換えDNA技術を用いて作製される。本明細書の他の箇所でより詳細に、抗体分子またはその断片を作製するための代表的な技術が考察される。本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体はまた、例えば、前記抗体への任意の種類の分子の共有結合であって、前記抗体のその同じ性質のエピトープへの特異的な結合を妨げないような共有結合によって修飾されている誘導体を含む。例えば、限定するものではないが、前記抗体誘導体は、例えば、グリコシル化、アセチル化、ペグ化、リン酸化、アミド化、公知の保護基/ブロック基による誘導体化、タンパク質分解による切断、細胞性リガンドまたは他のタンパク質への結合などにより修飾された抗体を含む。特異的化学切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシンの代謝性合成などを含むが、これらに限定されない、多数の化学修飾のいずれかを公知の技術により実行することが可能である。さらに、前記誘導体は1個以上の非古典的アミノ酸を含有することができる。特定の実施形態において、本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体は、治療される動物、例えば、ヒトにおいて有害な免疫反応を誘発しない。ある実施形態において、本発明の結合分子、例えば、抗体またはその抗原結合断片は患者、例えばヒトの患者に由来し、そして、それらが由来する同じ種、例えば、ヒトにおいて使用され、有害な免疫反応の発生を軽減または最小化する。抗体の免疫原性を低下させるために脱免疫化を用いることも可能である。本明細書において使用される場合、用語脱免疫化には、T細胞エピトープを修飾するための抗体の改変が含まれる。例えば、国際出願公開第WO98/52976号および第WO00/34317号を参照のこと。例えば、出発抗体のVH配列およびVL配列が分析され、そして、各V領域に由来するヒトT細胞エピトープマップが配列内の相補性決定領域CDRと他の重要な残基との関係でエピトープの位置を示す。最終抗体の活性を変える危険性が低い代替的アミノ酸置換を特定するために、T細胞エピトープマップの個々のT細胞エピトープが分析される。アミノ酸置換の組合せを含む、様々な代替的VH配列およびVL配列が設計され、そして、これらの配列がその後に様々な結合ポリペプチド、例えば、本明細書において開示される診断方法および治療方法において使用されるタウ特異的抗体またはその免疫特異的断片に組み込まれ、それらは次に機能試験を受ける。典型的には、12個と24個の間の異型抗体が生成され、試験される。次に、修飾型V領域およびヒトC領域を含む完全な重鎖遺伝子および軽鎖遺伝子が発現ベクターにクローン化され、そして、それに引き続くプラスミドが抗体全体の生産のために細胞株に導入される。次に、適切な生化学的測定法および生物学的測定法で前記抗体を比較して、最適な異型体を特定する。ハイブリドーマ技術、組換え技術、およびファージディスプレイ技術またはそれらの組合せの使用を含む、多種多様の、当技術分野において公知の技術を用いて、モノクローナル抗体を調製することができる。例えば、当技術分野において公知の、および、例えば、Harlowetal.,Antibodies:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratoryPress,2nded.1988、Hammerlingetal.,in:MonoclonalAntibodiesandT-CellHybridomasElsevier,N.Y.,563-6811981に教示されるものを含む、ハイブリドーマ技術を用いてモノクローナル抗体を作製することができる。前記参照文献は全体が参照により組み込まれる。用語モノクローナル抗体は、本明細書において使用される場合、ハイブリドーマ技術により作製される抗体に限定されない。用語モノクローナル抗体は、任意の真核生物クローン、原核生物クローンまたはファージクローンを含む、単一クローンに由来する抗体を意味し、それが作製される方法を意味しない。したがって、用語モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ技術により作製される抗体に限定されない。ある実施形態において、本発明の抗体は、本明細書に記載されるように、エプスタインバールウイルスを用いる形質転換により不死化したヒトB細胞から得られる。周知のハイブリドーマ工程Kohleretal.,Nature2561975,495では、哺乳類由来の比較的生存期間が短い、または致死性のリンパ球、例えば、ヒト対象に由来するB細胞が、本明細書に記載されるように、不死性腫瘍細胞株例えば、骨髄腫細胞株と融合し、そうして、不死であり、且つ、B細胞の遺伝的にコードされた抗体を産生することが可能であるハイブリッド細胞、すなわち、ハイブリドーマを作製する。その結果のハイブリッドは選別、希釈および再増殖により単一の遺伝的系統へと分離され、各々個々の系統が、単一の抗体を形成する特異的な遺伝子を含む。それらは、所望の抗原に対して均一である抗体を産生し、そして、その純粋な遺伝的系統に関して、モノクローナルと呼ばれる。このようにして調製されたハイブリドーマ細胞は、未融合の親骨髄腫細胞の増殖または生存を阻害する1つ以上の物質を含有する適切な培地に蒔かれ、培養される。当業者は、ハイブリドーマの形成、選別および増殖のための試薬、細胞株および培地が多数の供給元から市販されており、そして、標準的なプロトコルがよく確立されていることを理解する。一般的に、所望の抗原に対するモノクローナル抗体の産生についてハイブリドーマ細胞が増殖する培地を試験する。本明細書に記載されるような、免疫沈降、放射免疫アッセイRIAまたは酵素結合免疫吸着アッセイELISAなどのインビトロ測定法により、ハイブリドーマ細胞が産生するモノクローナル抗体の結合特異性を決定する。所望の特異性、親和性および/または活性を有する抗体を産生するハイブリドーマ細胞を同定した後に、限界希釈法によりそのクローンをサブクローン化し、標準的な方法で培養することができる。例えば、Goding,MonoclonalAntibodies:PrinciplesandPractice,AcademicPress,pp59-1031986を参照のこと。サブクローンによって分泌されるモノクローナル抗体が、例えば、プロテインA、ハイドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析または親和性クロマトグラフィーなどの従来の精製法により、培地、腹水または血清から分離されることがさらに理解される。別の実施形態において、顕微操作によりリンパ球を選別し、そして、可変遺伝子を単離することができる。例えば、末梢血液単核細胞を免疫した哺乳類動物または自然免疫性哺乳類動物、例えば、ヒトから単離し、そして、インビトロで約7日間培養することができる。選別基準に合う特定のIgGについて前記培養物を選別することができる。陽性のウェルから細胞を単離することができる。個々の免疫グロブリン産生B細胞を、FACSにより、または補体介在溶血性プラークアッセイでそれらを同定することにより単離することができる。顕微操作により免疫グロブリン産生B細胞をチューブに移すことができ、そして、VH遺伝子およびVL遺伝子を、例えば、RT-PCRを用いて増幅することができる。VH遺伝子およびVL遺伝子を抗体発現ベクターにクローン化し、そして、発現のために細胞例えば、真核細胞または原核細胞に形質移入することができる。あるいは、当業者に周知の技術を用いて抗体産生細胞株を選択および培養することができる。様々な実験マニュアルおよび一次刊行物にそのような技術が記載されている。この点に関し、CurrentProtocolsinImmunology,Coliganetal.,Eds.,GreenPublishingAssociatesandWiley-Interscience,JohnWileyandSons,NewYork1991に以下に記載されるような、本発明での使用に適切な技術が記載されている。その全体が、補遺を含み、参照胃より本明細書に組み込まれる。公知の技術により、特定のエピトープを認識する抗体断片を生成することができる。例えば、Fab断片およびFab’2断片を組換え技術により、または、Fab断片を作製するためにパパインまたはFab’2断片を作製するためにペプシンなどの酵素を用いる免疫グロブリン分子のタンパク質分解性切断により作製することができる。Fab’2断片は可変領域、軽鎖定常領域および重鎖のCH1ドメインを含有する。そのような断片は、例えば、免疫グロブリンの免疫特異的部分を放射性同位元素などの検出試薬に結合させることを含む免疫診断的方法で使用するのに充分である。本明細書に記載されるようなヒト抗体はヒトの患者での治療上の使用に特に望ましい。本発明のヒト抗体を、例えば、その年齢のため、タウオパチー障害、例えば、アルツハイマー病になる危険性があると疑うことができる健康なヒト対象、または前記障害が持病であるが、著しく安定した疾患経過を有する患者から単離する。しかしながら、老齢で健康な対象および老齢で無症状の対象は、それぞれ、より若い対象よりも本式に保護性抗タウ抗体を生じているであろうと予測するのが賢明ではあるが、本発明のヒト抗体を得るための供給源として、後者も同様に使用することができる。このことは、家族型タウオパチー疾患になりやすいが、免疫系がより老齢の成人よりも有効に機能するので無症状なままである、より若い患者に特に当てはまる。1つの実施形態において、本発明の抗体は、抗体分子の少なくとも1つの重鎖CDRまたは軽鎖CDRを含有する。別の実施形態において、本発明の抗体は、1つ以上の抗体分子に由来する少なくとも2つのCDRを含む。別の実施形態において、本発明の抗体は、1つ以上の抗体分子に由来する少なくとも3つのCDRを含む。別の実施形態において、本発明の抗体は、1つ以上の抗体分子に由来する少なくとも4つのCDRを含む。別の実施形態において、本発明の抗体は、1つ以上の抗体分子に由来する少なくとも5つのCDRを含む。別の実施形態において、本発明の抗体は、1つ以上の抗体分子に由来する少なくとも6つのCDRを含む。前記対象抗体に含まれ得る少なくとも1つのCDRを含む例示的抗体分子は本明細書に記載される。抗体を合成するための、当技術分野において公知の任意の方法により、特に、化学合成により、または本明細書に記載されるような組換え発現技術により本発明の抗体を作製することができる。1つの実施形態において、本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体は、1つ以上のドメインが部分的または全体的に欠失している合成定常領域を含むドメイン欠失抗体。ある実施形態において、互換的修飾型抗体は、CH2ドメイン全体が除去されたドメイン欠失構成体または異型体ΔCH2構成体を含む。他の実施形態において、欠失したドメインの代わりに短鎖連結ペプチドを置換して、可変領域に柔軟性と運動の自由をもたらすことができる。そのような構成体は、抗体の分解速度についてのCH2ドメインの調節特性のために、特に好ましいことを当業者は理解する。IgG1ヒト定常ドメインをコードするベクターを用いてドメイン欠失構成体を得ることができる。例えば、国際出願公開第WO02/060955号および第WO02/096948A2号を参照のこと。このベクターを操作してCH2ドメインを欠失し、そしてドメイン欠失IgG1定常領域を発現する合成ベクターを提供する。ある実施形態において、本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体はミニ抗体minibodyである。当技術において説明される方法を用いてミニ抗体を作製することができる。例えば、米国特許第5,837,821号または国際出願公開第WO94/09817号を参照のこと。1つの実施形態において、本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体は、単量体サブユニット間の結合が可能である限り、2、3個の、または1個でもアミノ酸が欠失または置換した免疫グロブリン重鎖を含む。例えば、CH2ドメインの選択された領域内での1アミノ酸の突然変異が、Fc結合を実質的に低下させ、それによってタウ局在性を増加させるのに充分であり得る。同様に、調節されるエフェクター機能例えば、補体結合を制御する1つ以上の定常領域ドメインの一部を単に欠失することが望ましい可能性がある。定常領域のそのような部分的欠失が抗体の選択された特性血清中半減期を改善し、一方、対象定常領域ドメインに付随する他の望ましい機能をそのままにしておくことができる。さらに、先に言及されたように、開示される抗体の定常領域は、結果生じる構成体のプロファイルを改善する1つ以上のアミノ酸の突然変異または置換により合成されたものであり得る。この点に関して、修飾型抗体の立体構造と免疫原性プロファイルを実質的に維持しつつ、保存された結合部位によりもたらされる活性例えば、Fc結合を破壊することが可能であり得る。さらに他の実施形態は、エフェクター機能などの所望の特性を増強するように、または、より多くの細胞毒もしくは炭水化物が結合するように、定常領域へ1つ以上のアミノ酸を付加することを含む。そのような実施形態において、選択された定常領域ドメインに由来する特定の配列を挿入または複製することが望ましい可能性がある。本発明はまた、抗体またはその断片がタウに免疫特異的に結合する、本明細書に記載される抗体分子例えば、VH領域および/またはVL領域の誘導体を含む異型体を含む、そのような異型体から基本的になる、またはそのような異型体からなる抗体を提供する。抗体をコードするヌクレオチド配列に突然変異を導入するために、アミノ酸置換をもたらすことになる部位特異的突然変異形成およびPCR介在性突然変異形成を含むが、これらに限定されない、当業者に知られている標準的な技術を使用することができる。1つの実施形態において、誘導体を含む異型体が、基準VH領域、VH-CDR1、VH-CDR2、VH-CDR3、VL領域、VL-CDR1、VL-CDR2またはVL-CDR3に対して、50アミノ酸未満の置換、40アミノ酸未満の置換、30アミノ酸未満の置換、25アミノ酸未満の置換、20アミノ酸未満の置換、15アミノ酸未満の置換、10アミノ酸未満の置換、5アミノ酸未満の置換、4アミノ酸未満の置換、3アミノ酸未満の置換、または2アミノ酸未満の置換をコードする。保存的アミノ酸置換は、類似の電荷を有する側鎖を持つアミノ酸残基でアミノ酸残基を置換するアミノ酸置換である。類似の電荷を有する側鎖を持つアミノ酸残基のファミリーは当技術分野で定義されている。これらのファミリーには、塩基性側鎖を有するアミノ酸例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン、酸性側鎖を有するアミノ酸例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸、非荷電極性側鎖を有するアミノ酸例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン、非極性側鎖を有するアミノ酸例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、β分岐側鎖を有するアミノ酸例えば、トレオニン、バリン、イソロイシンおよび芳香族側鎖を有するアミノ酸例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジンが含まれる。あるいは、飽和突然変異誘発などにより、コード配列の全体または一部に無作為的に突然変異を導入することができ、そして、活性を保持する突然変異体を同定するために、結果生じた突然変異体を生物活性例えば、タウ結合能についてスクリーニングすることができる。例えば、抗体分子のフレームワーク領域のみに、またはCDR領域のみに突然変異を導入することが可能である。導入された突然変異はサイレント突然変異または中立的ミスセンス突然変異である、例えば、抗体の抗原に結合する能力に全く、またはほとんど効果が無い可能性があり、実際にいくつかのそのような突然変異はアミノ酸配列を全く変えない。これらの種類の突然変異は、コドン使用頻度を最適化する、またはハイブリドーマの抗体産生を改善するために有用であり得る。本発明の抗体をコードするコドン最適化コード領域が本明細書の他の箇所で開示される。あるいは、非中立的ミスセンス突然変異が抗体の抗原に結合する能力を変える可能性がある。大半のサイレント突然変異および中立的ミスセンス突然変異の位置はフレームワーク領域内である可能性があり、一方、大半の非中立的ミスセンス突然変異の位置はCDR内である可能性があるが、これは絶対的な必要要件ではない。当業者は、抗原結合活性の無変化または結合活性の変化例えば、抗原結合活性の改善または抗体特異性の変化などの所望の特質を持つ突然変異体分子を設計および試験することができるであろう。突然変異形成の後に、本明細書に記載される技術を用いて、または当技術分野において公知のルーチン的修正技術により、コードされるタンパク質をルーチン的に発現することができ、そして、コードされるタンパク質の機能的活性および/または生物活性例えば、タウの少なくとも1つのエピトープに免疫特異的に結合する能力を測定することができる。神経変性タウオパチーのインビボモデルまたはインビトロモデルを用いてタウ結合因子、例えば、これらに限定されないが、本発明のタウ結合抗体の特性解析を行うことができる。神経変性タウオパチーのマウスモデルで本発明のタウ結合因子例えば、抗体の特性解析を行うことができると当業者は容易に理解する。例えば、これに限定されないが、本発明のタウ抗体およびその結合特異性を有する分子の特性解析を行い、そして検証するために、タウオパチーの以下の3つの異なる動物モデルのいずれか1つを用いることができる。1.遺伝子導入TauP301Lマウス系統183:マウスThy1.2プロモーターの制御下で、P301L突然変異を有するヒトタウ40を発現する。これらの遺伝子導入動物の作製は、Goetzetal.,J.Biol.Chem.2762001,529-534および国際出願公開第WO2003/017918号に記載される。その開示の内容が参照により本明細書に組み込まれる。2.マウスPrPプロモーターの制御下で、P301L突然変異を有する最短4Rヒトタウアイソフォームを発現するJNPL3マウス米国、ニューヨーク州、ハドソンのTaconic社より入手可能。3.マウスPrPプロモーターの制御下で、P301S突然変異を有するヒトタウを発現するP301STau系統PS19マウス米国、メイン州、バーハーバーのJacksonLaboratory社より入手可能。神経変性タウオパチーの実験モデルを予防的環境で使用することができる、またはそれを治療的環境で使用することができることを当業者は理解する。予防的環境では、神経変性タウオパチーまたはその症状の発症の前に動物への投与が始まる。予防的環境では、本発明のタウ結合因子例えば、抗体は、神経変性タウオパチーまたはその症状の発症を防ぐ、低減させる、または遅延させるその能力について評価される。治療的環境では、神経変性タウオパチーまたはその症状の発症の後に動物への投与が始まる。治療的環境では、本発明のタウ結合因子例えば、抗体は、神経変性タウオパチーまたはその症状と治療する、低減させる、または軽減するその能力について評価される。神経変性タウオパチーの症状には実験対象のニューロン、脳、脊髄、脳脊髄液または血清における病理的タウ沈着物、神経原線維濃縮体NFT、高リン酸化タウポリペプチド、不溶性タウ画分の蓄積が含まれるが、これらに限定されない。神経変性タウオパチーの任意の動物モデルでのポジティブな予防的結果または治療的結果が、その特定のタウ結合因子例えば、抗体を予防目的または治療目的のために実験モデル生物以外の対象で使用することが可能である、例えば、それを必要とするヒト対象で神経変性タウオパチーを治療するためにそれを使用することが可能であることを示していると当業者は理解する。1つの実施形態において、タウオパチーマウスモデルと対応する対照野生型マウスに本発明のタウ結合因子例えば、抗体を投与することができる。投与された抗体は本発明のマウス化抗体または本発明の抗体のヒト-マウスキメラであり得る。例えば、実施例6および7を参照のこと。当技術分野において公知の任意の手段、例えば、腹腔内投与、頭蓋内投与、筋肉内投与、静脈内投与、皮下投与、経口投与およびエアロゾル投与によりタウ結合因子例えば、抗体を投与することができる。実験動物に1、2、3、4、5もしくはそれ以上の用量のタウ結合因子例えば、抗体またはPBSなどの対照組成物を与えることができる。1つの実施形態において、実験動物に1用量または2用量のタウ結合因子例えば、抗体を与える。例えば、実施例9を参照のこと。別の実施形態において、数週間または数か月にわたって、動物にタウ結合因子例えば、抗体を慢性的に投与する。例えば、実施例10を参照のこと。当業者は、実験目的に合う投与計画、例えば、急性試験用の投与計画、慢性試験用の投与計画、毒性試験用の投与計画、予防的試験用の投与計画または治療的試験用の投与計画を容易に設計することができる。当技術分野の周知の方法を用いて、実験動物の特定の組織区画、例えば、これらに限定されないが、血清、血液、脳脊髄液、脳組織におけるタウ結合因子例えば、抗体の存在を確証することができる。例えば、実施例9および10を参照のこと。1つの実施形態において、本発明のタウ結合因子例えば、抗体は血液脳関門を透過することが可能である。タウ結合因子例えば、抗体の用量と投与頻度を調節することにより実験動物において所望のタウ結合因子例えば、抗体の濃度を維持することができることを当業者は理解する。治療した動物および対照動物におけるタウのレベル、生化学的特性または分布を比較することにより、タウオパチーモデルにおける本発明のタウ結合因子例えば、抗体の効果を評価することができる。一例では、神経原線維濃縮体NFT中の病理的リン酸化タウを認識する、Gallyasの鍍銀染色技術を用いて、またはモノクローナルマウス抗体AT100およびAT180による免疫染色によりNFTを調査する。抗体で処理したマウスと対照動物の脳と脊髄におけるGallyas陽性ニューロンおよび/またはAT100、AT180標識ニューロンの数と頻度が抗体処理の効果を評価すると判断することができる。1つの実施形態において、本発明の抗体は動物モデルの脳または脊髄における神経原線維濃縮体のレベル、量または濃度を減少させることができる。前記抗体は神経原線維濃縮体のレベル、量または濃度を少なくとも約5、10、20、30、50、70、90またはそれ以上減少させることができる。別の実施形態において、本発明の抗体は動物モデルの脳または脊髄におけるGallyas陽性ニューロンの数または頻度を、例えば、少なくとも約5、10、20、30、50、70、90またはそれ以上減少させることができる。さらなる実施形態において、本発明の抗体は動物モデルの脳または脊髄におけるAT100抗体またはAT180抗体陽性ニューロンの数または頻度を、例えば、少なくとも約5、10、20、30、50、70、90またはそれ以上減少させることができる。抗体投与後のタウの分布および生化学的性質を調査することにより、本発明の抗体の効果を評価することができる。1つの実施形態において、本発明の抗体は動物モデルの脳または脊髄におけるタウタンパク質の量または濃度を、例えば、少なくとも約5、10、20、30、50、70、90またはそれ以上減少させることができる。別の実施形態において、本発明の抗体は動物モデルの脳または脊髄における不溶性タウタンパク質の量または濃度を、例えば、少なくとも約5、10、20、30、50、70、90またはそれ以上減少させることができる。例えば、実施例10またはGoedertM,SpillantiniMG,CairnsNJ,CrowtherRA.Neuron8,1591992に記載されるように不溶性タウ画分を調製することができる。例えば、実施例10に記載されるような当業者に公知の任意の方法により生物試料中のタウタンパク質の量を測定することができる。さらなる実施形態において、本発明の抗体は動物モデルの脳または脊髄における高リン酸化タウタンパク質の量または濃度を、例えば、少なくとも約5、10、20、30、50、70、90またはそれ以上減少させることができる。AT100またはAT180などの病理的高リン酸化型タウに特異的な抗体を用いて高リン酸化タウを検出することができる。本発明の抗体はまた、動物モデルの血液、血清または脳脊髄液におけるタウの濃度を、例えば、少なくとも約5、10、20、30、50、70、90またはそれ以上変化、例えば、減少または増加させることができる。1つの実施形態において、減少または増加は、治療前に存在したレベル、数、頻度、量もしくは濃度、または未処理/対照処理対象に存在するレベル、数、頻度、量もしくは濃度に対して相関的である。1つの実施形態において、本発明の抗体は対象における神経変性タウオパチーの少なくとも1つの症状の発症を予防する、または遅延させることができる。1つの実施形態において、本発明の抗体は対象における神経変性タウオパチーの少なくとも1つの症状を低減または除去することができる。前記症状は、対象の脳または脊髄における病理的タウ沈着物、高リン酸化タウ沈着物、不溶性タウ沈着物、神経原線維性線維、神経原線維性線維、プレタングルpre-tangleリン酸化タウ凝集体、ニューロン内神経原線維濃縮体またはニューロン外神経原線維濃縮体の形成であり得る。例えば、Augustinacketal,ActaNeuropathol103:26-352002を参照のこと。前記症状はまた、血清、血液、尿または脳脊髄液中のタウの存在、または健康対象と比較した濃度もしくは量の上昇であり得る。前記症状は神経性の症状、例えば、条件味覚嫌悪の変化、恐怖条件付け文脈の変化、記憶障害、運動機能の喪失であり得る。1つの実施形態において、2試験性Y迷路試験を用いて記憶障害を評価する。特定の実施形態において、実質的に実施例10に記載されるように2試験性Y迷路試験を実行する。1つの実施形態において、少なくとも1つの症状が少なくとも約5、10、15、20、30、50、70または90減少する。別の実施形態において、2試験性Y迷路試験比率は対照対象よりも抗体処理対象において著しく高い。特定の実施形態において、2試験性Y迷路試験比率は少なくとも約5、10、20、30、40、50、60、70、80または90増加する。別の実施形態において、2試験性Y迷路試験比率は少なくとも約2倍、3倍、4倍、5倍、10倍、または20倍高い。本発明はまた、治療上有効量の本明細書に記載されるタウ抗体を投与することを含む、それを必要とする対象の神経変性タウオパチーの少なくとも1つの症状の発症を予防する、または遅延させる方法を提供する。本発明は、治療上有効量の本明細書に記載されるタウ抗体を投与することを含む、それを必要とする対象の神経変性タウオパチーの最小の1つの症状を低減または除去する方法をさらに提供する。1つの実施形態において、前記対象は、これに限定されないが、遺伝子導入マウスなどの実験生物である。1つの実施形態において、前記対象はヒトである。III.抗体をコードするポリヌクレオチド抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体をコードするポリヌクレオチドは任意のポリリボヌクレオチドまたはポリデオキシリボヌクレオチドから構成されることができ、それは非修飾型RNAもしくはDNAまたは修飾型RNAもしくはDNAであり得る。例えば、抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体をコードするポリヌクレオチドは、一本鎖DNAおよび二本鎖DNA、一本鎖領域と二本鎖領域の混合物であるDNA、一本鎖RNAおよび二本鎖RNA、および一本鎖領域と二本鎖領域の混合物であるRNA、一本鎖領域もしくは、より典型的には、二本鎖領域、または一本鎖領域と二本鎖領域の混合物であり得るDNAとRNAを含むハイブリッド分子から構成され得る。さらに、抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体をコードするポリヌクレオチドは、RNAまたはDNAまたはRNAとDNAの両方を含む三重鎖領域から構成され得る。抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体をコードするポリヌクレオチドはまた1つ以上の修飾型塩基、または安定性もしくは他の理由のために修飾されたDNA骨格もしくはRNA骨格を含有することができる。修飾型塩基には、例えば、トリチル化塩基およびイノシンなどの非通常型塩基が含まれる。DNAおよびRNAに様々な修飾を行うことができる。したがって、ポリヌクレオチドは化学的、酵素的、または代謝的に修飾された形態を包含する。免疫グロブリンに由来するポリペプチド例えば、免疫グロブリン重鎖部分または軽鎖部分の非天然型異型体をコードする単離されたポリヌクレオチドを、その免疫グロブリンのヌクレオチド配列に1つ以上のヌクレオチド置換、付加または欠失を導入することにより作製することができ、そのコードするタンパク質に1つ以上のアミノ酸置換、付加または欠失が導入される。部位特異低突然変異形成およびPCR介在性突然変異形成などの標準的技術により突然変異を導入することができる。1つの実施形態において、1つ以上の非必須アミノ酸残基で保存的アミノ酸置換を行う。良く知られるように、グアニジンイソチオシアネート抽出および沈殿とそれに続く遠心分離またはクロマトグラフィーなどの標準的技術によりオリジナルのB細胞、ハイブリドーマ細胞から、または他の形質転換細胞からRNAを単離することができる。所望により、オリゴdTセルロースでのクロマトグラフィーなどの標準的技術により全RNAからmRNAを単離することができる。適切な技術は当技術分野においてよく知られている。1つの実施形態において、周知の方法に従って、逆転写酵素およびDNAポリメラーゼを用いて同時または別々のどちらかで抗体の軽鎖および重鎖をコードするcDNAを作製することができる。コンセンサス定常領域プライマーにより、または公表されている重鎖DNAおよび軽鎖DNAおよびアミノ酸配列に基づくより特異的なプライマーによりPCRを開始することができる。先に考察したように、PCRはまた、抗体の軽鎖および重鎖をコードするDNAクローンを単離するために用いられ得る。この場合では、コンセンサスプライマーまたはヒト定常領域プローブなどのより大きい相同性プローブによりライブラリーをスクリーニングすることができる。DNA、典型的にはプラスミドDNAが、当技術分野において公知の技術を用いて細胞から単離され、例えば、組換えDNA技術に関する先述の参照文献に詳細が示される標準的な周知の技術に従って制限酵素地図が作製され、そして、シークエンス解析され得る。当然、単離工程とその後の分析の間のいかなる点でも、本発明によれば前記DNAは合成物であり得る。1つの実施形態において、本発明は、重鎖可変領域のCDRの少なくとも1つ、または重鎖可変領域のVH-CDRの少なくとも2つが、本明細書において開示される抗体の基準重鎖VH-CDR1アミノ酸配列、VH-CDR2アミノ酸配列またはVH-CDR3アミノ酸配列と少なくとも80、85、90、95、96、約97、98または99同一である免疫グロブリン重鎖可変領域VHをコードする核酸を含む、そのような核酸から基本的になる、またはそのような核酸からなる単離されたポリヌクレオチドを提供する。あるいは、前記VHのVH-CDR1領域、VH-CDR2領域またはVH-CDR3領域は、本明細書において開示される抗体の基準重鎖VH-CDR1アミノ酸配列、VH-CDR2アミノ酸配列およびVH-CDR3アミノ酸配列と少なくとも80、85、90、95、96、約97、98または99同一である。したがって、この実施形態によれば、本発明の重鎖可変領域は、図1に示されるポリペプチド配列に関連するVH-CDR1ポリペプチド配列、VH-CDR2ポリペプチド配列またはVH-CDR3ポリペプチド配列を有する。1つの実施形態において、基準VHCDR1のアミノ酸配列は配列番号23、29または35であり、基準VHCDR2のアミノ酸配列は配列番号24、30または36であり、そして、基準VHCDR3のアミノ酸配列は配列番号25、31または37である。1つの実施形態において、本発明は、図1に示されるVH-CDR1群、VH-CDR2群およびVH-CDR3群と、いずれか1つのVH-CDRにおける1、2、3、4、5、6、7、8、9または10アミノ酸置換を例外として、同一であるポリペプチド配列を有するVH-CDR1領域、VH-CDR2領域およびVH-CDR3領域を含む免疫グロブリン重鎖可変領域VHをコードする核酸を含む、そのような核酸から基本的になる、またはそのような核酸からなる単離されたポリヌクレオチドを提供する。ある実施形態において、前記アミノ酸置換は保存的アミノ酸置換である。1つの実施形態において、VHCDR1のアミノ酸配列は配列番号23、29または35であり、VHCDR2のアミノ酸配列は配列番号24、30または36であり、そして、VHCDR3のアミノ酸配列は配列番号25、31または37である。別の実施形態において、本発明は、軽鎖可変領域のVL-CDRの少なくとも1つ、または軽鎖可変領域のVL-CDRの少なくとも2つが、本明細書において開示される抗体の基準軽鎖VL-CDR1アミノ酸配列、VL-CDR2アミノ酸配列またはVL-CDR3アミノ酸配列と少なくとも80、85、90、95、96、約97、98または99同一である免疫グロブリン軽鎖可変領域VLをコードする核酸を含む、そのような核酸から基本的になる、またはそのような核酸からなる単離されたポリヌクレオチドを提供する。あるいは、前記VLのVL-CDR1領域、VL-CDR2領域またはVL-CDR3領域は、本明細書において開示される抗体の基準軽鎖VL-CDR1アミノ酸配列、VL-CDR2アミノ酸配列およびVL-CDR3アミノ酸配列と少なくとも80、85、90、95、96、約97、98または99同一である。したがって、この実施形態によれば、本発明の軽鎖可変領域は、図1に示されるポリペプチド配列に関連するVL-CDR1ポリペプチド配列、VL-CDR2ポリペプチド配列またはVL-CDR3ポリペプチド配列を有する。1つの実施形態において、基準VLCDR1のアミノ酸配列は配列番号26、32または38であり、基準VLCDR2のアミノ酸配列は配列番号27、33または39であり、そして、基準VLCDR3のアミノ酸配列は配列番号28、34または40である。別の実施形態において、本発明は、図1に示されるVL-CDR1群、VL-CDR2群およびVL-CDR3群と、いずれか1つのVL-CDRにおける1、2、3、4、5、6、7、8、9または10アミノ酸置換を例外として、同一であるポリペプチド配列を有するVL-CDR1領域、VL-CDR2領域およびVL-CDR3領域を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域VLをコードする核酸を含む、そのような核酸から基本的になる、またはそのような核酸からなる単離されたポリヌクレオチドを提供する。ある実施形態において、前記アミノ酸置換は保存的アミノ酸置換である。1つの実施形態において、VLCDR1のアミノ酸配列は配列番号26、32または38であり、VLCDR2のアミノ酸配列は配列番号27、33または39であり、そして、VLCDR3のアミノ酸配列は配列番号28、34または40である。別の実施形態において、本発明は、図1に示されるVH-CDR群、VH-CDR2群およびVH-CDR3群と同一であるポチペプチド配列を有するVH-CDR1領域、VH-CDR2領域およびVH-CDR3領域を含む免疫グロブリン重鎖可変領域VHをコードする核酸を含む、そのような核酸から基本的になる、またはそのような核酸からなる単離されたポリヌクレオチドを提供する。1つの実施形態において、VHCDR1のアミノ酸配列は配列番号23、29または35であり、VHCDR2のアミノ酸配列は配列番号24、30または36であり、そして、VHCDR3のアミノ酸配列は配列番号25、31または37である。別の実施形態において、本発明は、図1に示されるVL-CDR1群、VL-CDR2群およびVL-CDR3群と同一であるポリペプチド配列を有するVL-CDR1領域、VL-CDR2領域およびVL-CDR3領域を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域VLをコードする核酸を含む、そのような核酸から基本的になる、またはそのような核酸からなる単離されたポリヌクレオチドを提供する。1つの実施形態において、VLCDR1のアミノ酸配列は配列番号26、32または38であり、VLCDR2のアミノ酸配列は配列番号27、33または39であり、そして、VLCDR3のアミノ酸配列は配列番号28、34または40である。当技術分野において知られるように、1つのポリペプチドまたはポリヌクレオチドのアミノ酸配列または核酸配列を2つ目のポリペプチドまたはポリヌクレオチドの配列と比較することにより2つのポリペプチド間または2つのポリヌクレオチド間の配列同一性を決定する。本明細書において考察されるとき、任意の特定のポリペプチドが別のポリペプチドに対して少なくとも約40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90または95同一であるか、これに限定されないが、BESTFITプログラムウィスコンシン配列解析パッケージ、Unix登録商標用第8版、ジェネティクスコンピュータグループ、ユニバーシティーリサーチパーク、575サイエンスドライブ、マジソン、ウィスコンシン州53711などの当技術分野において公知の方法およびコンピュータプログラムを用いて決定することができる。BESTFITは、2つの配列間の最も良い相同性区間を見つけ出すためにスミスおよびウォーターマンの局所的相同性アルゴリズムAdvancesinAppliedMathematics21981,482-489を使用する。特定の配列が本発明に従う基準配列に対して、例えば、95同一であるか決定するためにBESTFITまたは他の任意の配列整列プログラムを使用するとき、同一性のパーセンテージが基準ポリペプチド配列の全長にわたって計算され、そして、基準配列の総アミノ酸数の5までの相同性のギャップが許容されるように、パラメータが当然設定される。本発明の1つの実施形態において、前記ポリヌクレオチドは、表2に示されるような抗タウ抗体のVH領域またはVL領域のポリヌクレオチド配列を有する核酸を含む、そのような核酸から基本的になる、またはそのような核酸からなる。この点に関して、少なくとも軽鎖および/または重鎖の可変ドメインをコードするポリヌクレオチドは両方の免疫グロブリン鎖または一方のみの可変ドメインをコードする可能性があることを当業者は容易に理解する。本発明は、配列番号93のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含む、またはそのようなヌクレオチド配列からなるポリヌクレオチドをさらに提供する。1つの実施形態において、本発明は、基準重鎖VHと少なくとも80、85、90、95、96、約97、98または99または95同一である免疫グロブリン重鎖可変領域をコードする核酸を含む、そのような核酸から基本的になる、またはそのような核酸からなる単離されたポリヌクレオチドを提供する。1つの実施形態において、基準重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号9、13、17または93である。1つの実施形態において、本発明は、基準軽鎖VLと少なくとも80、85、90、95、96、約97、98または99または95同一である免疫グロブリン軽鎖可変領域をコードする核酸を含む、そのような核酸から基本的になる、またはそのような核酸からなる単離されたポリヌクレオチドを提供する。1つの実施形態において、基準軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号11、15または19である。本発明はまた、他の箇所で記載されるような、本発明のポリヌクレオチドの断片を含む。さらに、本明細書に記載されるような融合ポリヌクレオチド、Fab断片および他の誘導体をコードするポリヌクレオチドもまた本発明によって考慮される当技術分野において公知の任意の方法によって前記ポリヌクレオチドを作製または製造することができる。例えば、前記抗体のヌクレオチド配列が公知である場合、例えば、Kutmeieretal.,BioTechniques171994,242に記載されるように、その抗体をコードするポリヌクレオチドを化学合成したオリゴヌクレオチドから組み立てることができ、それは、簡単に述べると、前記抗体をコードする配列の一部を含有する重複するオリゴヌクレオチドの合成とそれらのオリゴヌクレオチドのアニーリングおよびライゲーション、ならびにその次の連結されたオリゴヌクレオチドのPCRによる増幅を含む。あるいは、適切な供給源に由来する核酸から抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体をコードするポリヌクレオチドを生成することができる。特定の抗体をコードする核酸を含有するクローンが利用可能ではないが、その抗体分子の配列が知られている場合、前記抗体をコードする核酸を化学合成することができ、または、前記配列の3’末端および5’末端にハイブリダイズする合成プライマーを用いるPCR増幅により、もしくは、例えば、cDNAライブラリーから前記抗体をコードするcDNAクローンを同定するために、特定の遺伝子配列に特異的なオリゴヌクレオチドプローブを用いてクローン化することにより適切な供給源例えば、抗体cDNAライブラリー、または抗体を発現する選択されたハイブリドーマ細胞などのタウ特異的抗体を発現する任意の組織または細胞から単離された核酸、好ましくはポリARNAから作製されたcDNAライブラリーから前記抗体をコードする核酸を得ることができる。次に、当技術分野において周知の任意の方法を用いて、PCRにより生成された増幅核酸を複製可能なクローニングベクターにクローン化することができる。一旦、前記抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体のヌクレオチド配列および対応するアミノ酸配列が決定されると、異なるアミノ酸配列を有する抗体を作製するために、例えば、アミノ酸置換、欠失および/または挿入を生成するために、ヌクレオチド配列を操作するための当技術分野において周知の方法、例えば、組換えDNA技術、部位特異的突然変異形成、PCRなどを用いてそのヌクレオチド配列を操作することができる例えば、Sambrooketal.,MolecularCloning,ALaboratoryManual,2dEd.,ColdSpringHarborLaboratory,ColdSpringHarbor,N.Y.1990およびAusubeletal.,eds.,CurrentProtocolsinMolecularBiology,JohnWileySons,NY1998に記載される技術を参照のこと。それらは両方の全体が参照により本明細書に組み込まれる。IV.抗体ポリペプチドの発現本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体をもたらす単離された遺伝物質の操作に続いて、前記抗体をコードするポリヌクレオチドを、典型的には、所望の量の抗体を産生するために使用することができる宿主細胞への導入用の発現ベクターに挿入する。抗体またはその断片、誘導体もしくは類似体、例えば、標的分子に結合する抗体の重鎖または軽鎖の組換え発現が本明細書に記載される。一旦、本発明の抗体分子または抗体の重鎖もしくは軽鎖、または好ましくは重鎖可変ドメインまたは軽鎖可変ドメインを含有するそれらの部分をコードするポリヌクレオチドが得られると、当技術分野において周知の技術を用いる組換えDNA技術により前記抗体分子の産生用のベクターを作製することができる。したがって、抗体をコードするヌクレオチド配列を含有するポリヌクレオチドを発現することによるタンパク質を調製するための方法が本明細書に記載される。抗体をコードする配列と適切な転写制御シグナルおよび翻訳制御シグナルを含有する発現ベクターを構築するために、当業者に周知の方法を用いることができる。これらの方法には、例えば、インビトロ組換えDNA技術、合成技術およびインビボ遺伝的組換えが含まれる。したがって、本発明は、プロモーターに機能するように結合した、本発明の抗体分子、またはその重鎖もしくは軽鎖、または重鎖可変ドメインもしくは軽鎖可変ドメインをコードするヌクレオチド配列を含む複製可能なベクターを提供する。そのようなベクターは、前記抗体分子の定常領域をコードするヌクレオチド配列を含むことが可能であり例えば、国際出願公開第WO86/05807号および第WO89/01036号、ならびに米国特許第5,122,464号を参照のこと、そして、重鎖または軽鎖の全体を発現するために前記抗体の可変ドメインをそのようなベクターにクローン化することができる。用語ベクターまたは発現ベクターは、宿主細胞に所望の遺伝子を導入し、そしてそれを発現させるための媒体として、本発明に従って使用されるベクターを意味するために本明細書において使用される。当業者に知られるように、そのようなベクターをプラスミド、ファージ、ウイルスおよびレトロウイルスからなる群より容易に選択することができる。一般に、本発明と適合するベクターは選択マーカー、所望の遺伝子のクローニングを容易にする適切な制限酵素部位、ならびに真核細胞もしくは原核細胞に侵入および/またはそれらの中で複製する能力を含む。本発明の目的のために、多数の発現ベクターシステムを使用することができる。例えば、1つのクラスのベクターは、ウシパピローマウイルス、ポリオーマウイルス、アデノウイルス、ワクシニアウイルス、バキュロウイルス、レトロウイルスRSV、MMTVまたはMOMLVまたはSV40ウイルスなどの動物ウイルスに由来するDNAエレメントを活用する。他のベクターは、内部リボソーム結合部位を用いるポリシストロン性システムの使用を含む。さらに、形質移入宿主細胞の選択を可能にする1つ以上のマーカーを導入することにより、DNAをその染色体に組み込んだ細胞を選択することができる。前記マーカーは栄養要求性宿主に原栄養性を、殺生物剤例えば、抗生物質耐性または銅などの重金属に対する耐性を付与することができる。選択マーカー遺伝子は、発現されるDNA配列に直接連結されるか、または、共形質転換により同じ細胞に導入されるかのどちらかであり得る。最適のmRNA合成のためにその他のエレメントも必要とされ得る。これらのエレメントには、シグナル配列、スプライシングシグナル、ならびに転写プロモーター、エンハンサーおよびターミネーションシグナルが含まれ得る。特定の実施形態において、先に考察したように、クローンした可変領域遺伝子が重鎖定常領域遺伝子および軽鎖定常領域遺伝子例えば、ヒト重鎖定常領域遺伝子および軽鎖定常領域遺伝子と共に発現ベクターに挿入される。1つの実施形態において、米国特許第6,159,730号に開示されるNEOSPLAという名称の、BiogenIDEC,Inc.社の特許権がある発現ベクターを用いてこれがもたらされる。このベクターはサイトメガロウイルスプロモーター/エンハンサー、マウスβグロビンメジャープロモーター、SV40の複製起点、ウシ成長ホルモンポリアデニル化配列、ネオマイシンホスフォトランスフェラーゼのエクソン1およびエクソン2、ジヒドロ葉酸レダクターゼ遺伝子およびリーダー配列を含有する。このベクターは、可変領域遺伝子と定常領域遺伝子の組み込み、CHO細胞への形質移入とそれに続くG418含有培地での選別とメトトレキサート増幅により、非常に高レベルで抗体を発現することが分かった。当然、真核細胞での発現を誘発することが可能である任意の発現ベクターを本発明において使用することができる。適切なベクターの例にはプラスミドpcDNA3、pHCMV/Zeo、pCR3.1、pEF1/His、pIND/GS、pRc/HCMV2、pSV40/Zeo2、pTRACER-HCMV、pUB6/V5-His、pVAX1およびpZeoSV2カリフォルニア州、サンディエゴのInvitrogen社から入手可能およびプラスミドpCIウィスコンシン州、マジソンのPromega社から入手可能が含まれるが、これらに限定されない。一般に、適切にも高レベルの免疫グロブリン重鎖および軽鎖を発現する細胞について大多数の形質転換細胞をスクリーニングすることは、例えば、ロボットシステムによって実行可能であるルーチン的な実験である。ベクターシステムはまた、米国特許第5,736,137号および第5,658,570号において教示され、それらの各々の全体が参照により本明細書に組み込まれる。このシステムは高い発現レベル、例えば、>30pg/細胞/日をもたらす。他の例示的なベクターシステムは、例えば、米国特許第6,413,777号に開示される。他の実施形態において、米国特許出願公開第2003-0157641A1号に開示され、その全体が本明細書に組み込まれるものなどのポリシストロン性コンストラクトを用いて本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体を発現させることができる。これらの発現システムでは、単一のポリシストロン性コンストラクトから、抗体の重鎖および軽鎖などの目的の複数の遺伝子産物を産生することができる。これらのシステムは、有利なことに、比較的高いレベルの抗体を供給するために配列内リボソーム進入部位IRESを使用する。適合性のIRES配列は米国特許第6,193,980号に開示され、それもまた本明細書に組み込まれる。本願に開示される最大限の抗体を効果的に産生するためにそのような発現システムを用いることができると当業者は理解する。より一般的には、一旦、抗体の単量体サブユニットをコードするベクターまたはDNA配列が調製されると、適切な宿主細胞にその発現ベクターが導入され得る。当業者に周知の様々な技術により宿主細胞へのプラスミドの導入を達成することができる。これらには、例えば、FuGene登録商標またはリポフェクタミンを用いるリポトランスフェクション、プロトプラスト融合、リン酸カルシウム沈殿、被覆DNAを用いる細胞融合、マイクロインジェクション、およびウイルス完全体を用いる感染を含む形質移入が含まれるが、これらに限定されない。典型的には、宿主へのプラスミド導入は標準的なリン酸カルシウム共沈殿法によるものである。発現コンストラクトを保持する宿主細胞は軽鎖および重鎖の産生に適切な条件下で培養され、そして、重鎖タンパク質合成および/または軽鎖タンパク質合成についてアッセイされる。例示的なアッセイ技術には、酵素結合免疫吸着アッセイELISA、放射免疫アッセイRIA、または蛍光活性化セルソーター分析FACS、免疫組織化学などが含まれる。従来の技術により宿主細胞に発現ベクターを導入し、そして、次に従来の技術によりその形質移入細胞を培養して、本明細書に記載される方法において使用される抗体を産生する。したがって、本発明は、異種性プロモーターに機能するように結合した本発明の抗体またはその重鎖もしくは軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含有する宿主細胞を含む。二本鎖抗体の発現についての特定の実施形態において、以下に詳述されるように、免疫グロブリン分子全体の発現のために重鎖および軽鎖の両方をコードするベクターを宿主細胞中で共発現させることができる。本発明の2つの発現ベクター、つまり、重鎖由来のポリペプチドをコードする第1ベクターおよび軽鎖由来のポリペプチドをコードする第2ベクターで宿主細胞を共形質移入することができる。その2つのベクターは、重鎖ポリペプチドおよび軽鎖ポリペプチドの等発現を可能にする同一の選択マーカーを含有することができる。あるいは、重鎖ポリペプチドおよび軽鎖ポリペプチドの両方をコードする単一のベクターを使用することができる。そのような状況では、有害な遊離重鎖が過剰であることを避けるために、軽鎖を重鎖の前に配置することが有利である。Proudfoot,Nature3221986,52;Kohler,Proc.Natl.Acad.Sci.USA771980,2197を参照のこと。重鎖および軽鎖のコード配列はcDNAまたはゲノムDNAを含むことができる。本明細書において使用される場合、宿主細胞は、組換えDNA技術を用いて構築され、そして、少なくとも1つの異種性遺伝子をコードするベクターを保持する細胞を意味する。組換え宿主からの抗体の単離工程の説明では、用語細胞および細胞培養物は、別途、明確に特定されない限り、抗体の供給源を示すために互換的に使用される。言い換えると、細胞からのポリペプチドの回収は、遠心沈殿した細胞全体からの回収、または、培地と懸濁細胞の両方を含有する細胞培養物からの回収のどちらかを意味することができる。本明細書に記載される方法において使用される抗体分子を発現するために、様々な宿主-発現ベクターシステムを活用することができる。そのような宿主-発現システムは、目的のコード配列が精製される前にそれを産生する媒体を表すが、しかしまた、適切なヌクレオチドコード配列で形質転換または形質移入されると、インサイチュで本発明の抗体分子を発現することができる細胞をも表す。これらには、抗体をコードする配列を含有する組換えバクテリオファージDNA発現ベクター、プラスミドDNA発現ベクターまたはコスミドDNA発現ベクターで形質転換される細菌などの微生物例えば、大腸菌、枯草菌;抗体をコードする配列を含有する組換え酵母発現ベクターで形質転換される酵母例えば、サッカロマイセス属Saccharomyces、ピチア属Pichia;抗体をコードする配列を含有する組換えウイルス発現ベクター例えば、バキュロウイルスで感染される昆虫細胞システム;抗体コード配列を含有する組換えウイルス発現ベクター例えば、カリフラワーモザイクウイルス、CaMV;タバコモザイクウイルス、TMVで感染される、または組換えプラスミド発現ベクター例えば、Tiプラスミドで形質転換される植物細胞システム;または細胞のゲノムに由来するプロモーター例えば、メタロチオネインプロモーターもしくは哺乳類ウイルスに由来するプロモーター例えば、アデノウイルス後期プロモーター;ワクシニアウイルス7.5Kプロモーターを含有する組換え発現コンストラクトを保持する哺乳類細胞システム例えば、COS細胞、CHO細胞、NSO細胞、BLK細胞、293細胞、3T3細胞が含まれるが、これらに限定されない。1つの実施形態において、大腸菌などの細菌細胞、およびより好ましくは特に組換え抗体分子全体の発現のために真核細胞を、組換え抗体分子の発現のために使用する。例えば、チャイニーズハムスター卵巣CHO細胞などの哺乳類細胞は、ヒトサイトメガロウイルス由来の主要中間初期遺伝子プロモーターエレメントmajorintermediateearlygenepromoterelementなどのベクターと共に、抗体にとって有効な発現システムである。例えば、Foeckingetal.,Gene451986,101;Cockettetal.,Bio/Technology81990,2を参照のこと。タンパク質発現に使用される宿主細胞系列は、多くの場合、哺乳類起源である。当業者は、所望の遺伝子産物が中で発現するのに最も適した特定の宿主細胞系列を決定する能力を持っていると信じられている。例示的な宿主細胞系列にはCHOチャイニーズハムスター卵巣、DG44およびDUXB11チャイニーズハムスター卵巣系列、DHFRマイナス、HELAヒト子宮頚部癌、CVIサル腎臓系列、COSSV40T抗原を用いるCVIの誘導体、VERY、BHKベビーハムスター腎臓、MDCK、WI38、R1610チャイニーズハムスター線維芽細胞BALBC/3T3マウス線維芽細胞、HAKハムスター腎臓系列、SP2/Oマウス骨髄腫、P3x63-Ag3.653マウス骨髄腫、BFA-1c1BPTウシ内皮細胞、RAJIヒトリンパ球および293ヒト腎臓が含まれるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、宿主細胞系列はCHO細胞または293細胞である。宿主細胞株は、典型的には、商用サービス、米国培養細胞系統保存機関から、または公開された文献により入手可能である。さらに、所望の特定の様式で挿入配列の発現を調節し、または、遺伝子産物を修飾およびプロセッシングする宿主細胞株を選ぶことができる。タンパク質産物のそのような修飾例えば、グリコシル化とプロセッシング例えば、切断はそのタンパク質の機能にとって重要であり得る。様々な宿主細胞が、タンパク質と遺伝子産物の翻訳後プロセッシングと修飾に特徴的で、特異的な機構を持っている。発現される外来タンパク質の正しい修飾とプロセッシングを確実にするために、適切な細胞株または宿主システムを選ぶことができる。この目的のため、一次転写物の適切なプロセッシング、グリコシル化、および遺伝子産物のリン酸化のための細胞装置を所有する真核宿主細胞を使用することができる。長期にわたる高収量の組換えタンパク質の産生のために、安定的な発現が好ましい。例えば、抗体分子を安定的に発現する細胞株を操作して作製することができる。ウイルス性複製起点を含有する発現ベクターを使用するよりはむしろ、適切な発現制御配列例えば、プロモーター配列、エンハンサー配列、転写ターミネーター、ポリアデニル化部位などで制御されるDNAおよび選択マーカーを用いて宿主細胞を形質転換することができる。外来DNAの導入の後に、操作した細胞を1~2日間富化培地中で増殖させておくことができ、次に、選択培地に切り替える。組換えプラスミド中の選択マーカーが選択に対する耐性を付与し、そして、細胞がその染色体にプラスミドを組み込むこと、および、後にクローン化し、そして、細胞株に発展することができる増殖巣を形成することを可能とする。有利なことに、抗体分子を安定的に発現する細胞株を操作して作製するためにこの方法を使用することができる。tk-細胞、hgprt-細胞またはaprt-細胞でそれぞれ使用することができる単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ遺伝子Wigleretal.,Cell111977,223、ヒポキサンチン-グアニンホスフォリボシルトランスフェラーゼ遺伝子SzybalskaSzybalski,Proc.Natl.Acad.Sci.USA481992,202およびアデニンホスフォリボシルトランスフェラーゼ遺伝子Lowyetal.,Cell221980,817を含むが、これらに限定されない多くの選択システムを使用することができる。また、次の遺伝子について選択の原理として抗代謝物耐性を用いることができる:メトトレキサートに対する耐性を付与するdhfrWigleretal.,Natl.Acad.Sci.USA771980,357、O’Hareetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA781981,1527;ミコフェノール酸に対する耐性を付与するgptMulliganBerg,Proc.Natl.Acad.Sci.USA781981,2072;アミノグリコシドG-418に対する耐性を付与するneoGoldspieletal.,ClinicalPharmacy121993,488-505、WuandWu,Biotherapy31991,87-95、Tolstoshev,Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.321993,573-596、Mulligan,Science2601993,926-932、およびMorganandAnderson,Ann.Rev.Biochem.621993,191-217;TIBTECH111993,155-215;およびハイグロマイシンに対する耐性を付与するhygroSanterreetal.,Gene301984,147。使用することができる、組換えDNA技術の技術分野で通常知られている方法はAusubeletal.eds.,CurrentProtocolsinMolecularBiology,JohnWileySons,NY1993、Kriegler,GeneTransferandExpression,ALaboratoryManual,StocktonPress,NY1990;ならびにDracopolietal.eds,CurrentProtocolsinHumanGenetics,JohnWileySons,NY1994の第12章および第13章、Colberre-Garapinetal.,J.Mol.Biol.150:11981に記載される。それらは全体が参照により本明細書に組み込まれる。ベクター増幅により抗体分子の発現レベルを増大させることができる。レビューには、BebbingtonandHentschel,TheuseofvectorsbasedongeneamplificationfortheexpressionofclonedgenesinmammaliancellsinDNAcloning,AcademicPress,NewYork,Vol.3.1987を参照のこと。抗体を発現するベクターシステム内のマーカーが増幅可能であるとき、宿主細胞の培養物に存在する阻害剤のレベルの上昇によって、マーカー遺伝子のコピー数が増加する。前記増幅領域は抗体遺伝子と結合しているので、抗体の産生もまた増大する。Crouseetal.,Mol.Cell.Biol.31983,257を参照のこと。大量の所望のポリペプチドをもたらすスケールアップがインビトロ生産により可能になる。組織培養条件下での哺乳類細胞培養の技術は当技術分野において公知であり、そして、それには、例えば、エアリフト反応器もしくは連続撹拌反応器における均一懸濁培養、または例えば、中空糸中、マイクロカプセル中、アガロースマイクロビーズもしくはセラミックカートリッジ上での固定化細胞培養もしくは封入細胞培養が含まれる。必要に応じて、および/または所望により、例えば、合成ヒンジ領域ポリペプチドの優先的な生合成の後に、または本明細書に記載されるHICクロマトグラフィー工程の前もしくは後に、通常のクロマトグラフィー方法、例えば、ゲル濾過、イオン交換クロマトグラフィー、DEAEセルロース上のクロマトグラフィー、または免疫親和性クロマトグラフィーにより、ポリペプチド溶液を精製することができる。本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体をコードする遺伝子はまた、細菌または昆虫または酵母または植物の細胞などの非哺乳類細胞で発現させることができる。核酸を容易に取り込む細菌には、大腸菌またはサルモネラ属Salmonellaの細胞株などのエンテロバクター科;枯草菌Bacillussubtilisなどのバシラス科;ニューモコッカス属Pneumococcus;ストレプトコッカス属StreptococcusのメンバーおよびヘモフィルスインフルエンザHaemophilusinfluenzaeが含まれる。細菌内で発現すると、異種性ポリペプチドは典型的には封入体の一部になることがさらに理解される。異種性ポリペプチドは単離され、精製され、それから、機能性の分子に組み立てられなければならない。四価形態の抗体が望ましい場合、その時にはサブユニットが四価抗体に自己組織化する。例えば、国際出願公開第WO02/096948号を参照のこと。細菌システムでは、有利なことに、発現する抗体に意図されている使用法に応じて多数の発現ベクターを選択することができる。例えば、抗体分子からなる医薬組成物の作製のために大量のそのようなタンパク質を生産する予定であるとき、容易に精製される融合タンパク質産物の高レベルの発現を制御するベクターが望ましい可能性がある。そのようなベクターには、抗体コード配列が個々にlacZコード領域とインフレームでベクターに連結されることができ、それによって融合タンパク質が産生される大腸菌発現ベクターpUR278Rutheretal.,EMBOJ.21983,1791;pINベクターInouyeInouye,NucleicAcidsRes.131985,3101-3109;VanHeekeSchuster,J.Biol.Chem.241989,5503-5509などが含まれるが、これらに限定されない。外来ポリペプチドをグルタチオンS-トランスフェラーゼGSTとの融合タンパク質として発現させるためにpGEXベクターもまた使用することができる。一般に、そのような融合タンパク質は可溶性であり、そして、溶解した細胞からグルタチオンアガロースビーズマトリックスへの吸着および結合と引き続く遊離グルタチオンの存在下での溶出により容易に精製され得る。pGEXベクターはトロンビン切断部位または第Xa因子プロテアーゼ切断部位を含むように設計されており、クローン化した標的遺伝子産物をGST部分から解離することができる。原核生物に加えて、真核微生物もまた使用することができる。多数のその他の株、例えば、ピチアパストリスPichiapastorisが一般的に利用可能であるが、出芽酵母Saccharomycescerevisiae、すなわち一般的なパン酵母が真核微生物の中で最も一般的に使用される。サッカロマイセス属Saccharomycesでの発現には、例えば、プラスミドYRp7Stinchcombetal.,Nature2821979,39;Kingsmanetal.,Gene71979,141;Tschemperetal.,Gene101980,157が一般的に使用される。このプラスミドは、トリプトファン中で増殖する能力を欠く酵母の突然変異株、例えば、ATCC番号44076またはPEP4-1Jones,Genetics851977,12用の選択マーカーを提供するTRP1遺伝子を既に含有する。前記酵母宿主細胞ゲノムの特性としてのtrp1損傷の存在が、次にトリプトファンの非存在下での増殖によって形質転換を検出するための有効な環境をもたらす。昆虫システムでは、オートグラファカリフォルニカAutographacalifornica核多角体病ウイルスAcNPVが、典型的には、外来遺伝子を発現するためのベクターとして使用される。前記ウイルスはヨトウガSpodopterafrugiperda細胞で増殖する。抗体コード配列を前記ウイルスの非必須領域例えば、ポリヘドリン遺伝子に個々にクローン化し、そして、AcNPVプロモーター例えば、ポリヘドリンプロモーターの制御下に置くことができる。一旦、本発明の抗体分子が組換え技術により発現すると、例えば、クロマトグラフィー例えば、イオン交換クロマトグラフィー、親和性クロマトグラフィー、特にプロテインA後の特定の抗原に対する親和性クロマトグラフィー、およびサイズ排除カラムクロマトグラフィー、遠心分離、硫酸アンモニウム沈殿などの差示的溶解性による、またはタンパク質精製の他の任意の標準的な技術による方法を含む、当技術分野の標準的な方法に従って、本発明の抗体全体、それらの二量体、個々の軽鎖および重鎖、または他の免疫グロブリン形態を精製することができる。例えば、Scopes,ProteinPurification,SpringerVerlag,N.Y.1982を参照のこと。あるいは、本発明の抗体の親和性を上昇させる別の方法が米国特許出願公開第2002-0123057A1号に開示される。V.融合タンパク質および複合体ある実施形態において、前記抗体ポリペプチドは、通常、抗体と結合していないアミノ酸配列または1つ以上の部分を含む。以下により詳細に例示的修飾が説明される。例えば、本発明の単鎖fv抗体断片はフレキシブルリンカー配列を含むことができ、または機能性部分例えば、PEG、薬剤、毒物または蛍光標識、放射性標識、酵素標識、核磁気標識、重金属標識などの標識を付加するために修飾され得る。本発明の抗体ポリペプチドは融合タンパク質を含む、融合タンパク質から基本的になる、または融合タンパク質からなることができる。融合タンパク質は、例えば、免疫グロブリンタウ結合ドメインを少なくとも1つの標的結合部位および少なくとも1つの異種性部分、すなわち、自然界では本来それと結合していない部分と共に含むキメラ分子である。前記アミノ酸配列は通常、融合ポリペプチドにおいてひとまとまりになる別々のタンパク質に存在することができ、または、それらは通常同じタンパク質に存在することができるが、融合ポリペプチドでは新しい配置になる。例えば、化学合成によって、または所望の位置関係でペプチド領域がコードされるポリヌクレオチドを作製し、そしてそれを翻訳することにより融合タンパク質を作製することができる。用語異種性は、ポリヌクレオチドまたはポリペプチドに適用される場合、そのポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、それが比較されている実体の残りのものとは別個の実体に由来するということを意味する。例えば、本明細書において使用される場合、抗体、またはその抗原結合断片、異型体、もしくは類似体に融合される異種性ポリペプチドは、同じ種の非免疫グロブリンポリペプチドまたは異なる種の免疫グロブリンポリペプチドもしくは非免疫グロブリンポリペプチドに由来する。本明細書の他の箇所により詳細が考察されるように、本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体は、異種性ポリペプチドとN末端もしくはC末端で組換え技術によりさらに融合され、またはポリペプチドもしくは他の組成物と化学的に複合体化共有結合的複合体化および非共有結合的複合体化を含むされ得る。例えば、検出アッセイでの標識として有用な分子および異種性ポリペプチド、薬剤、放射性核種または毒物などのエフェクター分子に抗体を組換え技術により融合する、または複合体化することができる。例えば、国際出願公開第WO92/08495号、第WO91/14438号、第WO89/12624号、米国特許第5,314,995号、および欧州特許出願第EP0396387号を参照のこと。本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体は、ペプチド結合または改変型ペプチド結合、すなわち、ペプチドイソエステルによって互いに結合するアミノ酸から構成されることができ、そして、20種の遺伝子にコードされるアミノ酸以外のアミノ酸を含むことができる。翻訳後プロセッシングなどの天然の過程により、または当技術分野において周知の化学修飾技術により抗体を修飾することができる。そのような修飾は、基本的な教科書、およびより詳細にはモノグラフとおびただしい研究文献によく記載されている。修飾は、ペプチド骨格、アミノ酸側鎖およびアミノ末端もしくはカルボキシル末端を含む抗体、または炭水化物などの部分のどこにでも生じ得る。所与の抗体に同じ、または、異なる程度で同じ種類の修飾がいくつかの部位に存在し得ることが理解される。また、所与の抗体は多くの種類の修飾を含有し得る。抗体は、例えば、ユビキチン化の結果として分岐状抗体である可能性があり、そして、それらは分岐を持つ、または、持たない環状抗体である可能性がある。環状抗体、分岐状抗体および分岐環状抗体は翻訳後の天然の過程により生じることができ、または、合成方法によって作製され得る。修飾にはアセチル化、アシル化、ADP-リボシル化、アミド化、フラビンの共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチドまたはヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質または脂質誘導体の共有結合、ホスファチジルイノシトールの共有結合、架橋形成、環状化、ジスルフィド結合形成、脱メチル化、共有結合性架橋形成、システイン形成、ピログルタメート形成、ホルミル化、γ-カルボキシル化、グリコシル化、GPIアンカー形成、ヒドロキシル化、ヨウ素化、メチル化、ミリストイル化、酸化、peg化、タンパク質分解性プロセッシング、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレノイル化、硫酸化、アルギニル化などのアミノ酸のタンパク質へのトランスファーRNA介在性付加、およびユビキチン化が含まれる。例えば、Proteins-StructureAndMolecularProperties,T.E.Creighton,W.H.FreemanandCompany,NewYork2ndEd.,1993、PosttranslationalCovalentModificationOfProteins,B.C.Johnson,Ed.,AcademicPress,NewYork,pgs.1-121983、Seifteretal.,Meth.Enzymol.1821990,626-646、Rattanetal.,Ann.NYAcad.Sci.6631992,48-62を参照のこと。本発明はまた、抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体および異種性ポリペプチドを含む融合タンパク質を準備する。1つの実施形態において、本発明の融合タンパク質は、本発明の抗体のVH領域のうちのいずれか1つ以上のアミノ酸配列、または本発明の抗体もしくはその断片もしくは異型体のVL領域のうちのいずれか1つ以上のアミノ酸配列を有するポリペプチド、および異種性ポリペプチド配列を含む、それらから基本的になる、またはそれらからなる。別の実施形態において、本明細書において開示される診断方法および治療方法に使用される融合タンパク質は、抗体、もしくはその断片、異型体もしくは誘導体のVH-CDRのうちのいずれか1つ、2つ、3つのアミノ酸配列、または抗体、もしくはその断片、異型体もしくは誘導体のVL-CDRのうちのいずれか1つ、2つ、3つのアミノ酸配列を有するポリペプチド、および異種性ポリペプチド配列を含む、それらから基本的になる、またはそれらからなる。1つの実施形態において、前記融合タンパク質は、本発明の抗体、もしくはその断片、誘導体もしくは異型体のVH-CDR3のアミノ酸配列を有するポリペプチドおよび異種性ポリペプチド配列を含み、その融合タンパク質はタウに特異的に結合する。別の実施形態において、融合タンパク質は、本発明の抗体の少なくとも1つのVH領域のアミノ酸配列および本発明の抗体、またはその断片、誘導体もしくは異型体の少なくとも1つのVL領域のアミノ酸配列を有するポリペプチドならびに異種性ポリペプチド配列を含む。1つの実施形態において、前記融合タンパク質のVH領域およびVL領域は、タウに特異的に結合する単一起源抗体またはscFv断片またはFab断片に対応する。さらに別の実施形態において、本明細書において開示される診断方法および治療方法で使用される融合タンパク質は、抗体のVHCDRのうちのいずれか1つ、2つ、3つ、またはそれ以上のアミノ酸配列、および抗体、またはその断片もしくは異型体のVLCDRのうちのいずれか1つ、2つ、3つ、またはそれ以上のアミノ酸配列を有するポリペプチド、ならびに異種性ポリペプチド配列を含む。1つの実施形態において、VH-CDRまたはVL-CDRのうちの2つ、3つ、4つ、5つ、6つ、またはそれ以上が本発明の単一起源抗体またはscFv断片またはFab断片に対応する。これらの融合タンパク質をコードする核酸分子もまた本発明に包含される。文献に報告される例示的な融合タンパク質は、T細胞受容体Gascoigneetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA841987,2936-2940;CD4Caponetal.,Nature3371989,525-531;Trauneckeretal.,Nature3391989,68-70;Zettmeissletal.,DNACellBiol.USA91990,347-353およびByrnetal.,Nature3441990,667-670;L-セレクチンホーミング受容体Watsonetal.,J.Cell.Biol.1101990,2221-2229、およびWatsonetal.,Nature3491991,164-167;CD44Aruffoetal.,Cell611990,1303-1313;CD28とB7Linsleyetal.,J.Exp.Med.1731991,721-730;CTLA-4Lisleyetal.,J.Exp.Med.1741991,561-569;CD22Stamenkovicetal.,Cell661991,1133-1144;TNF受容体Ashkenazietal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA881991,10535-10539;Lesslaueretal.,Eur.J.Immunol.271991,2883-2886、およびPeppeletal.,J.Exp.Med.1741991,1483-14891991、およびIgE受容体aRidgwayandGorman,J.Cell.Biol.1151991,AbstractNo.1448の融合を含む。本明細書の他の箇所で考察されるように、ポリペプチドのインビボ半減期を増加させるため、または当技術分野において公知の方法を用いる免疫アッセイで使用するために、本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体を異種性ポリペプチドに融合することができる。例えば、1つの実施形態において、本発明の抗体に、そのインビボ半減期を増加させるために、PEGを複合体化させることができる。例えば、Leongetal.,Cytokine162001,106-119;Adv.inDrugDeliv.Rev.542002,531またはWeiretal.,Biochem.Soc.Transactions302002,512を参照のこと。さらに、本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体をマーカー配列、例えば、それらの精製または検出を容易にするためのペプチドに融合することができる。特定の実施形態において、前記マーカーアミノ酸配列は、市販されている多くのものの中でもpQEベクターQIAGEN,Inc.社、9259EtonAvenue、Chatsworth、カリフォルニア州、91311に提供されるタグのようなヘキサ-ヒスチジンペプチドHISである。Gentzetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA861989,821-824に記載されるように、例えば、ヘキサ-ヒスチジンは融合タンパク質の簡便な精製を準備する。精製に有用な他のペプチドタグには、インフルエンザヘマグルチニンタンパク質に由来するエピトープに対応するHAタグWilsonetal.,Cell371984,767およびFLAGタグが含まれるが、これらに限定されない。当技術分野において周知の方法を用いて融合タンパク質を調製することができる。例えば米国特許第5,116,964号および第5,225,538号を参照のこと。融合タンパク質の分泌特性または結合特性を最適化するための融合が行われる正確な部位は実証的に選択され得る。次に、融合タンパク質をコードするDNAは、発現のため宿主細胞に形質移入される。非複合体化形態で本発明の抗体を使用することができ、または、様々な分子の少なくとも1つと、例えば、前記分子の治療特性を改善するために、標的の検出を容易にするために、または患者のイメージングもしくは治療のために、本発明の抗体を複合体化することができる。本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体を、精製が行われるとき、精製の前に、または後に標識または複合体化することができる。特に、治療薬、前駆薬、ペプチド、タンパク質、酵素、ウイルス、脂質、生物学的反応修飾因子、医薬薬剤またはPEGに本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体を複合体化することができる。従来の抗体を含む免疫毒素である複合体は当技術分野において広く説明されている。従来のカップリング技術により毒素を抗体に結合することができ、または、タンパク質毒素部分を含有する免疫毒素を融合タンパク質として産生することができる。そのような免疫毒素を得るための対応する方法で本発明の抗体を使用することができる。Byers,SeminarsCell.Biol.21991,59-70およびFanger,Immunol.Today121991,51-54によって記載されるものがそのような免疫毒素を説明する。複合体はまた、複合体化される選択された因子に応じて、様々な技術を用いて組み立てられ得ることを当業者は理解する。例えば、ビオチンとの複合体を、例えば、タウ結合ポリペプチドをビオチンN-ヒドロキシスクシンイミドエステルなどのビオチンの活性化エステルと反応させることにより調製する。同様に、蛍光マーカーとの複合体を、カップリング剤、例えば、本明細書に記載されるカップリング剤の存在下で、または、イソチオシアネート、すなわち、フルオレセイン-イソチオシアネートとの反応により調製することができる。本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体の複合体を類似の方法で調製する。本発明は、診断薬または治療薬に複合体化した本発明の抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体を包含する。例えば、所与の治療計画および/または予防計画の有効性を判定するための臨床試験手順の一部として、例えば、神経性疾患の存在を示すために、神経性疾患になる危険性を示すために、神経性疾患、すなわち、タウオパチー疾患の発生または進行をモニターするために、診断的に前記抗体を使用することができる。抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体を検出可能な物質に結合することにより検出を容易にすることができる。検出可能な物質の例には様々な酵素、補欠分子族、蛍光物質、発光物質、生物発光物質、放射性物質、様々なポジトロン放射トモグラフィーを使用するポジトロン放射金属、および非放射性常磁性金属イオンが含まれる。例えば、本発明による診断薬として使用される抗体に複合体化され得る金属イオンについて、米国特許第4,741,900号を参照のこと。適切な酵素の例にはホースラディッシュペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β-ガラクトシダーゼまたはアセチルコリンエステラーゼが含まれる。適切な補欠分子族複合体の例にはストレプトアビジン/ビオチンおよびアビジン/ビオチンが含まれる。適切な蛍光物質の例にはウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセイン、塩化ダンシルまたはフィコエリスリンが含まれる。発光物質の例にはルミノールが含まれる。生物発光物質の例にはルシフェラーゼおよびイクオリンが含まれる。そして、適切な放射性物質の例には125I、131I、111Inまたは99Tcが含まれる。抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体はまた、それを化学発光化合物に結合させることにより検出可能であるように標識され得る。化学発光タグ化抗体の存在は、次に、化学反応の最中に生じる発光の存在を検出することにより決定される。特に有用な化学発光標識化合物の例はルミノール、イソルミノール、セロマチックアクリジニウムエステル、イミダゾール、アクリジニウム塩およびシュウ酸エステルである。検出可能であるように抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体を標識することができる1つの方法は同物質を酵素に結合し、そして酵素免疫アッセイEIAVoller,A.,TheEnzymeLinkedImmunosorbentAssayELISAMicrobiologicalAssociatesQuarterlyPublication,Walkersville,Md.,DiagnosticHorizons21978,1-7、Volleretal.,J.Clin.Pathol.311978,507-520、Butler,Meth.Enzymol.731981,482-523、Maggio,E.ed.,EnzymeImmunoassay,CRCPress,BocaRaton,Fla.,1980、Ishikawa,E.etal.,eds.,EnzymeImmunoassay,KgakuShoin,Tokyo1981で前記結合産物を使用することによる。分光光度法、蛍光定量法または視覚的手段により検出することができる化学部分を生じるように、抗体に結合している酵素が適切な基質、好ましくは発色性基質と反応する。検出可能であるように抗体を標識するために使用され得る酵素にはリンゴ酸デヒドロゲナーゼ、ブドウ球菌ヌクレアーゼ、デルタ-5-ステロイドイソメラーゼ、酵母アルコールデヒドロゲナーゼ、アルファ-グリセロホスフェートデヒドロゲナーゼ、トリオースホスフェートイソメラーゼ、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、アスパラギナーゼ、グルコースオキシダーゼ、β-ガラクトシダーゼ、リボヌクレアーゼ、ウレアーゼ、カタラーゼ、グルコース-6-リン酸デヒドロゲナーゼ、グルコアミラーゼおよびアセチルコリンエステラーゼが含まれるが、これらに限定されない。さらに、前記酵素の発色性基質を使用する比色分析法によって検出を達成することができる。同様に調製した標準物質との比較で、基質の酵素反応の程度を視覚的に比較することにより検出を達成することもできる。様々な他の免疫アッセイのいずれかを用いて検出を達成することもできる。例えば、抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体を放射性物質で標識することにより、放射免疫アッセイRIA例えば、参照により本明細書に組み込まれる、Weintraub,B.,PrinciplesofRadioimmunoassays,SeventhTrainingCourseonRadioligandAssayTechniques,TheEndocrineSociety,March,1986を参照のことの使用により前記抗体を検出することが可能である。ガンマカウンター、シンチレーションカウンターまたはオートラジオグラフィーを含むが、これらに限定されない手段により放射性同位元素を検出することができる。抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体を、152Euまたはランタノイド系の他のものなどの蛍光放射金属を用いて、検出可能であるように標識することもできる。ジエチレントリアミン五酢酸DTPAまたはエチレンジアミン四酢酸EDTAなどの金属キレート性基を用いてこれらの金属を抗体に結合させることができる。様々な部分を抗体、またはその抗原結合断片、異型体もしくは誘導体に複合体化する技術は周知である。例えば、Arnonetal.,MonoclonalAntibodiesForImmunotargetingOfDrugsInCancerTherapy,inMonoclonalAntibodiesAndCancerTherapy,Reisfeldetal.eds.,pp.243-56AlanR.Liss,Inc.1985、Hellstrometal.,AntibodiesForDrugDelivery,inControlledDrugDelivery2ndEd.,Robinsonetal.eds.,MarcelDekker,Inc.,pp.623-531987、Thorpe,AntibodyCarriersOfCytotoxicAgentsInCancerTherapy:AReview,inMonoclonalAntibodies’84:BiologicalAndClinicalApplications,Pincheraetal.eds.,pp.475-5061985、Analysis,Results,AndFutureProspectiveOfTheTherapeuticUseOfRadiolabeledAntibodyInCancerTherapy,inMonoclonalAntibodiesForCancerDetectionAndTherapy,Baldwinetal.eds.,AcademicPresspp.303-161985、およびThorpeetal.,ThePreparationAndCytotoxicPropertiesOfAntibody-ToxinConjugates,Immunol.Rev.621982,119-158を参照のこと。言及したように、ある実施形態において、結合分子、例えば、結合ポリペプチド、例えば、抗体またはその免疫特異的断片の安定性または有効性を向上させる部分を複合体化することができる。例えば、1つの実施形態において、本発明の結合分子に、そのインビボ半減期を増加させるためにPEGを複合体化することができる。Leongetal.,Cytokine162001,106;Adv.inDrugDeliv.Rev.542002,531;orWeiretal.,Biochem.Soc.Transactions302002,512.VI.組成物および使用方法本発明は前述のタウ結合分子、例えば、本発明の抗体もしくはその抗原結合断片、またはその誘導体もしくは異型体、または本発明のポリヌクレオチド、ベクターもしくは細胞を含む組成物に関連する。本発明の組成物は薬剤的に許容可能な担体をさらに含むことができる。また、本発明の医薬組成物は、その医薬組成物の意図した使用法に応じて、インターロイキンまたはインターフェロンなどの薬剤をさらに含むことができる。タウオパチー疾患、例えば、アルツハイマー病の治療での使用には、前記の追加的な薬剤が、小有機分子、抗タウ抗体、およびそれらの組合せからなる群より選択され得る。それ故に、特定の実施形態において、本発明は、タウオパチー疾患の予防的処置および治療的処置のための医薬組成物もしくは診断用組成物の調製のために、対象におけるタウオパチー疾患の進行もしくはタウオパチー疾患の治療に対する反応をモニターするために、または、対象のタウオパチー疾患になる危険性を判定するために、タウ結合分子、例えば、本発明の抗体またはその抗原結合断片を使用すること、またはそれらのいずれか1つと実質的に同じ結合特異性を有する結合分子、本発明のポリヌクレオチド、ベクターもしくは細胞を使用することに関連する。それ故に、1つの実施形態において、本発明は、それぞれ、脳および中枢神経系内のタウの異常蓄積および/または沈着を特徴とする神経性障害を治療する方法であって、治療上有効量の前述の本発明のタウ結合分子、抗体、ポリヌクレオチド、ベクターまたは細胞のうちのいずれか1つを、それを必要とする対象に投与することを含む方法に関連する。用語神経性障害にはアルツハイマー病、筋委縮性側索硬化症/パーキンソン症-認知症複合体、嗜銀性グレイン型認知症、英国型アミロイド血管症、脳アミロイド血管症、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルトヤコブ病、ボクシング認知症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、ダウン症候群、前頭側頭型認知症、17番染色体に連鎖しパーキンソン症を伴う前頭側頭型認知症、前頭側頭葉変性症、ゲルストマンストロイスラーシャインカー病、ハレルフォルデンスパッツ病、封入体筋炎、多系統委縮症、筋強直性ジストロフィー、C型ニーマンピック病、神経原線維変化を伴う非グアム島人型運動ニューロン病、ピック病、脳炎後パーキンソン症、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、多発梗塞性認知症および虚血性脳卒中などのタウオパチー疾患が含まれるが、これらに限定されない。別途、明言されない限り、神経変性、神経性または精神神経性という用語は本明細書において互換的に使用される。本発明の抗体は、タウオパチー疾患の徴候が無い健康なヒト対象のB細胞またはメモリーB細胞に由来し、したがって、ある確率で、臨床的に明らかなタウオパチー疾患を予防することができる、または前記の臨床的に明らかな疾患が発生する危険性を減少させることができる、または前記の臨床的に明らかな疾患の発症もしくは進行を遅延させることができるという事実に本発明の治療アプローチの特定の利点がある。典型的には、本発明の抗体はまた、体細胞成熟、すなわち、標的タウ分子への高親和性結合における選択性と有効性について、抗体の可変領域の体細胞変異による最適化にすでに成功している。インビボでの、例えば、ヒトのそのような細胞は、自己免疫反応またはアレルギー反応という意味で、関連の、または他の生理的なタンパク質または細胞構造によって活性化されていないという知識もまた、このことが臨床試験相を通して成功的に生存する著しく増大した可能性を示すので、医学的に非常に重要である。言わば、少なくとも1つのヒト対象において、予防用抗体または治療用抗体の臨床前開発または臨床開発の前に、有効性、受容性、および耐容性がすでに示されている。したがって、本発明のヒト抗タウ抗体の、その治療薬としての標的構造に特異的な有効性とその減少した副作用の可能性の両方が、その臨床上の成功の可能性を著しく増加させることを想定することができる。本発明はまた、上述の成分、例えば、本発明の抗タウ抗体、その結合断片、誘導体または異型体、ポリヌクレオチド、ベクターまたは細胞のうちの1つ以上で満たされた1つ以上の容器を含む、それぞれ、医薬用および診断用のパックまたはキットを提供する。そのような容器には、薬学的製品または生物学的製品の製造、使用または販売を監督する官庁が規定する形態の通知書を付随させることができ、その通知書は製造、使用または販売についての前記監督官庁によるヒトへの投与に対する認可を反映する。さらに、または代わりに、前記キットは、適切な診断アッセイでの使用のための試薬および/または説明書を含む。前記組成物、例えば、本発明のキットは、当然、タウの存在に伴う障害の危険性評価、診断、予防および治療に特に適切であり、そして、アルツハイマー病AD、筋委縮性側索硬化症/パーキンソン症-認知症複合体ALS-PDC、嗜銀性グレイン型認知症AGD、英国型アミロイド血管症、脳アミロイド血管症、大脳皮質基底核変性症CBD、クロイツフェルトヤコブ病CJD、ボクシング認知症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化、ダウン症候群、前頭側頭型認知症、17番染色体に連鎖しパーキンソン症を伴う前頭側頭型認知症FTDP-17、前頭側頭葉変性症、ゲルストマンストロイスラーシャインカー病、ハレルフォルデンスパッツ病、封入体筋炎、多系統委縮症、筋強直性ジストロフィー、C型ニーマンピック病NP-C、神経原線維変化を伴う非グアム島人型運動ニューロン病、ピック病PiD、脳炎後パーキンソン症、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺PSP、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、多発梗塞性認知症および虚血性脳卒中の治療に特に適用できる。当技術分野において周知の方法に従って本発明の医薬組成物を製剤することができる。例えば、Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy2000bytheUniversityofSciencesinPhiladelphia,ISBN0-683-306472を参照のこと。適切な医薬担体の例は当技術分野において周知であり、そして、それらにはリン酸緩衝生理食塩水溶液、水、油/水乳剤などの乳剤、様々な種類の湿潤剤、滅菌溶液などが含まれる。周知の従来の方法によってそのような担体を含む組成物を製剤することができる。適切な用量で対象にこれらの医薬組成物を投与することができる。様々な方法で、例えば、静脈内投与、腹腔内投与、皮下投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、局所投与または皮内投与または脊髄送達または脳送達により適切な組成物の投与をもたらすことができる。点鼻薬製剤などのエアロゾル製剤は、保存剤および等張剤を有する、活性薬剤の精製した水溶液または他の溶液を含む。そのような製剤は、鼻粘膜に適合するpHと等張状態に調節される。直腸投与用または経膣投与用の製剤は、適切な担体を有する坐剤として提供され得る。また、本発明は、今では標準的な幸いにも、まれではあるが本発明の薬品を投与するために頭骨に小さい穴をあける方法を含むが、1つの態様では、本発明の結合分子、特に抗体または抗体ベースの薬品は血液脳関門を越えることができ、静脈内投与または経口投与を可能とする。投薬計画は、担当の医師および臨床的要因によって決定される。医学分野で周知であるとおり、任意の1人の患者への投薬量は、その患者の体格、体表面、年齢、投与される特定の化合物、性別、投与時間および経路、一般的健康状態、同時に投与されている他の薬品を含む多数の因子次第である。典型的な用量は、例えば、0.001~1000μgの範囲内であり得るすなわち、この範囲内の、発現のための、または発現の阻害のための核酸。しかしながら、この例示的な範囲の下または上の用量が、特に前述の因子を考慮して、想定される。一般的に、用量は、例えば、宿主の体重に対して約0.0001mg/kgから100mg/kgまでの範囲であることが可能であり、より一般的には0.01~5mg/kg例えば、0.02mg/kg、0.25mg/kg、0.5mg/kg、0.75mg/kg、1mg/kg、2mg/kgなどの範囲であることが可能である。例えば、用量は1mg/kg体重または10mg/kg体重または1~10mg/kgの範囲内または少なくとも1mg/kgであり得る。上記の範囲の中間の用量もまた本発明の範囲内であると意図される。対象はそのような用量を毎日、隔日、毎週または実証的な分析により決定される他のスケジュールに従って投与され得る。例示的な治療は、長期、例えば、少なくとも6か月にわたる複数回の投薬を伴う。その他の例示的な治療計画は、二週間毎に1回、または1か月に1回、または3~6か月毎に1回の投与を伴う。例示的な投薬スケジュールには、連日1~10mg/kgもしくは15mg/kg、隔日30mg/kg、または毎週60mg/kgが含まれる。いくつかの方法では、異なる結合特異性を有する2つ以上のモノクローナル抗体を同時に投与し、その場合、投与された各抗体の投薬量は示された範囲内に収まる。定時的評価によって経過をモニターすることができる。非経口投与用の製剤は滅菌水性または非水性溶液、懸濁液および乳剤を含む。非水性溶媒の例はプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、およびエチルオレエートなどの注射可能な有機エステルである。水性担体には、生理食塩水および緩衝媒体を含む、水、アルコール溶液/水溶液、乳剤または懸濁液が含まれる。非経口投与用担体には塩化ナトリウム溶液、リンゲルブドウ糖液、ブドウ糖および塩化ナトリウム、乳酸化リンゲル液、または固定化油が含まれる。静脈内投与用担体には、体液および栄養補充液、リンゲルブドウ糖液に基づくものなどの電解質補充液などが含まれる。例えば、抗微生物薬、抗酸化剤、キレート剤、および不活性ガスなどのような保存剤および他の添加物も存在し得る。また、本発明の医薬組成物は、その医薬組成物の意図される使用法に応じて、ドーパミンまたは精神薬理学的薬品などの薬剤をさらに含むことができる。また、本発明の特定の実施形態において、例えば、本発明の医薬組成物が受動免疫のために抗タウ抗体またはその結合断片、誘導体もしくは異型体を含む場合、ワクチンとして前記医薬組成物を製剤することができる。背景技術の節で言及したように、リン酸化タウ種が細胞外に、血漿および脳脊髄液CSFに存在することが報告されておりAluiseetal.,Biochim.Biophys.Acta.17822008,549-558、そして、遺伝子導入マウス系列でのリン酸化タウペプチドを使用する能動的ワクチン投与を用いる研究により、タウ凝集体の脳内レベルの低下と行動障害の進行の遅滞が明らかになったSigurdsson,J.AlzheimersDis.152008,157-168;Boimeletal.,ExpNeurol.2242010,472-485。したがって、本発明のヒト抗タウ抗体および同等のタウ結合分子を用いる受動免疫は、背景技術の節で既に考察したように、能動免疫療法構想のいくつかの有害作用を回避するのに役立つであろうと想定するのが賢明である。したがって、本発明の本抗タウ抗体およびそれらの同等物は、AD、ALS-PDC、AGD、CBD、CJD、FTD、FTDP-17、NP-C、PiD、PSPまたは以前に言及したような他のタウオパチーなどのタウオパチー疾患の予防または改善のためのワクチンとして特に有用である。1つの実施形態において、本発明の抗体の組換え二重特異性または多重特異性構成体を使用することが有益である可能性がある。参考に、FischerandLeger,Pathobiology742007,3-14を参照のこと。そのような二重特異性分子を、1つの結合アームでタウを標的とし、そして2つ目の結合アームでβアミロイドまたはα-シヌクレインまたは異なるタウの病理的立体構造などの別の病理的実体を標的とするように設計することができる。あるいは、脳への抗体の透過を促進するために、血液脳関門に存在するタンパク質を標的とするように第2の結合アームを設計することができる。1つの実施形態において、細胞膜をより容易に透過することができる、本発明の抗体の組換えFabrFab断片および単鎖断片scFvを使用することが有益であり得る。例えば、先にインターネット上で公開されたRobertetal.,ProteinEng.Des.Sel.2008Oct16;S1741-0134は、βアミロイドのN末端領域にあるエピトープを認識するモノクローナル抗体WO-2のキメラ組換えFabrFab断片および単鎖断片scFvの使用について記載する。操作された断片は、IgG分子全体と同じ程度に有効にiアミロイド線維形成を防止し、ii先に形成されたAβ1-42原線維を脱凝集させ、そして、iiiAβ1-42原線維オリゴマー介在性神経毒性をインビトロで阻害することができた。エフェクター機能を欠く小さいFab操作抗体フォーマットおよびscFv操作抗体フォーマットを使用することに認められた利点には、血液脳関門のより効率的な通過および炎症性副反応の危険性の最小化が含まれる。また、scFvと単一ドメイン抗体が全長型抗体の結合特異性を保持することに加えて、それらは単一遺伝子として発現することができ、そして哺乳類細胞では細胞内に、それらの標的の折りたたみ構造、相互作用、修飾または細胞内局在を変える可能性がある細胞内抗体として発現することができる。レビューとして、例えば、MillerandMesser,MolecularTherapy122005,394-401を参照のこと。異なるアプローチでは、Mulleretal.,ExpertOpin.Biol.Ther.2005,237-241がスーパー抗体技術と称される技術プラットフォームについて記載しており、その技術は、抗体が細胞を損傷することなくそれらに輸送されることを可能にすると言われている。そのような細胞透過性抗体は新しい診断的および治療的な窓口を開く。用語TransMabはこれらの抗体のために造り出された。さらなる実施形態において、タウオパチー疾患の治療に有用な他の抗体の共投与または連続投与が望ましい可能性がある。1つの実施形態において、追加の抗体が本発明の医薬組成物に含まれる。対象を治療するために使用することができる抗体の例にはβアミロイド、α-シヌクレイン、TDP-43およびSOD-1を標的とする抗体が含まれるが、これらに限定されない。さらなる実施形態において、タウオパチー疾患の治療に有用な他の神経保護薬剤の共投与または連続投与が望ましい可能性がある。1つの実施形態において、追加の薬剤が本発明の医薬組成物に含まれる。対象を治療するために使用することができる神経保護薬剤の例にはアセチルコリンエステラーゼ阻害剤、グルタミン酸作動性受容体アンタゴニスト、キナーゼ阻害剤、HDAC阻害剤、抗炎症剤、ジバルプロエクスナトリウム、またはそれらの任意の組合せが含まれるが、これらに限定されない。本発明の医薬組成物と同時に使用することができる他の神経保護薬剤の例は当技術分野において説明されている。例えば、国際出願公開第WO2007/011907号を参照のこと。1つの実施形態において、その追加的な薬剤はドーパミンまたはドーパミン受容体アゴニストである。治療上有効用量または治療上有効量は、症状または病状を改善するのに充分な有効成分の量を意味する。細胞培養物または実験動物において標準的な薬学的手順、例えば、ED50集団の50で治療的に有効な用量およびLD50集団の50にとって致死的である用量によって、そのような化合物の治療上の有効性および毒性を決定することができる。治療的効果と有毒的効果の間の用量比が治療指数であり、そして、それはLD50/ED50の割合として表すことができる。1つの実施形態において、前記組成物中の治療薬は、AD、ALS-PDC、AGD、CBD、CJD、FTD、FTDP-17、NP-C、PiD、PSP、または以前に言及されたような他のタウオパチー疾患の場合、正常な行動および/または認知特性を再建または保護するのに充分な量で存在する。前述したことから、とりわけ、先に言及したようなタウオパチー疾患、特に、アルツハイマー病の診断および/または治療のために、上述した抗体の少なくとも1つのCDRを含むタウ結合分子のいかなる使用法をも本発明は包含する。1つの実施形態において、前記結合分子は本発明の抗体またはその免疫グロブリン鎖である。さらに、本発明は、上文に記載される言及された抗体のいずれか1つの抗イディオタイプ抗体に関連する。これらは、抗体の抗原結合部位の近くの可変領域に位置するユニークな抗原性ペプチド配列に結合する抗体または他の結合分子であり、そして、例えば、対象の試料での抗タウ抗体の検出に有用である。別の実施形態において、本発明は、上述の本発明のタウ結合分子、抗体、抗原結合断片、ポリヌクレオチド、ベクター細胞のうちのいずれか1つ、および、所望により、免疫ベースまたは核酸ベースの診断方法で従来使用されている試薬などの検出に適切な手段を含む診断用組成物に関連する。本発明の抗体は、例えば、それらを液相で、または、固相担体に結合して利用することができる免疫アッセイでの使用に適している。本発明の抗体を利用することができる免疫アッセイの例は、直接的フォーマットか間接的フォーマットのどちらかの競合的および非競合的免疫アッセイである。そのような免疫アッセイの例は放射免疫アッセイRIA、サンドイッチ免疫アッセイ、フローサイトメトリーおよびウェスタンブロットアッセイである。多くの異なる担体に本発明の抗原および抗体を結合させることができ、そして、それらに特異的に結合する細胞を単離するために本発明の抗原および抗体を使用することができる。周知の担体の例にはガラス、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリカーボネート、デキストラン、ナイロン、アミロース、天然型および修飾型セルロース、ポリアクリルアミド、アガロース、およびマグネタイトが含まれる。前記担体の性質は、本発明の目的のため、可溶性または不溶性のどちらかであり得る。当業者に知られている多くの異なる標識および標識方法がある。本発明において使用することができる標識の種類の例には酵素、放射性同位元素、コロイド状金属、蛍光化合物、化学発光化合物および生物発光化合物が含まれる。本明細書上部で考察された実施形態も参照のこと。さらなる実施形態によって、試験される個体から血液試料、リンパ液試料または他の任意の体液試料であり得る体液試料を取得し、そして、抗体抗原複合体の形成を可能とする条件下で前記体液試料を本発明の抗体と接触させることによる、個体において障害を診断するための方法にタウ結合分子、特に本発明の抗体を使用することもできる。次に、そのような複合体のレベルは当技術分野において公知の方法によって決定され、対照試料で生じたレベルよりも著しく高いレベルが、試験された個体での疾患を示す。同じ方法で、本発明の抗体が結合する特異的な抗原も使用することができる。したがって、本発明は、結合分子、例えば、本発明の抗体またはその抗原結合断片を含むインビトロ免疫アッセイに関連する。これに関して、本発明はまた、この目的のために特異的に設計される手段に関連する。例えば、タウを特異的に認識する本発明の抗体または同等の抗原結合分子が負荷された抗体ベースのアレイを使用することができる。マイクロアレイ免疫アッセイの設計はKusnezowetal.,Mol.CellProteomics52006,1681-1696に要約される。したがって、本発明はまた、本発明に従って同定されたタウ結合分子が負荷されたマイクロアレイに関連する。1つの実施形態において、本発明は、対象においてタウオパチー疾患を診断する方法であって、少なくとも1つの本発明の抗体、そのタウ結合断片、またはそれらのいずれか1つと実質的に同じ結合特異性を有するタウ結合分子を用いて、診断される対象に由来する試料中にタウおよび/または病理的修飾型タウおよび/または凝集型タウの存在を判定することを含む方法に関連し、その方法では、病理的修飾型タウおよび/または凝集型タウの存在が神経変性タウオパチーの指標であり、そして、生理的タウ形態のレベルと比較した病理的修飾型タウおよび/または凝集型タウのレベルの上昇が前記対象における神経変性タウオパチーの進行の指標である。診断される対象は前記疾患について無症状または前臨床段階であり得る。1つの実施形態において、対照対象はタウオパチー疾患、例えば、AD、ALS-PDC、AGD、CBD、CJD、FTD、FTDP-17、NP-C、PiD、PSPまたは以前に言及された他のタウオパチーを持ち、病理的修飾型タウおよび/または凝集型タウのレベルと参照標準の間の類似性により、診断される対象がタウオパチー疾患を持っていることが示される。あるいは、またはさらに、第2の対照として、対照対象はタウオパチー疾患を持たず、タウおよび/または病理的修飾型タウおよび/または凝集型タウのレベルと参照標準の間の差異により、診断される対象がタウオパチー疾患を持っていることが示される。1つの実施形態において、診断される対象および対照対象の年齢が一致する。分析される試料は、病理的修飾型タウおよび/または凝集型タウを含有すると疑われる任意の体液、例えば、血液試料、脳脊髄液CSF試料または尿試料であり得る。例えば、ウェスタンブロット、免疫沈降、酵素結合免疫吸着アッセイELISA、放射免疫アッセイRIA、蛍光活性細胞選別FACS、二次元ゲル電気泳動、質量分光分析法MS、マトリックス支援レーザー脱離/イオン化-飛行時間-MSMALDI-TOF、表面増強レーザー脱離イオン化-飛行時間SELDI-TOF、高速液体クロマトグラフィーHPLC、高速タンパク質液体クロマトグラフィーFPLC、多次元液体クロマトグラフィーLC後のタンデムマススペクトロメトリーMS/MS、およびレーザーデンシトメトリーから選択される1つ以上の技術によるタウの分析を含む、当技術分野において公知の任意の適切な方法によりタウおよび/または病理的修飾型タウおよび/または凝集型タウのレベルを評価することができる。1つの実施形態において、タウの前記インビボ画像化法は陽電子放出トモグラフィーPET、単一光子放出トモグラフィーSPECT、近赤外NIR光学イメージングまたは磁気共鳴イメージングMRIを含む。本発明に従って適応することができる抗体および関連の手段を用いる、アルツハイマー病などのタウオパチー疾患を診断する方法、タウオパチー疾患の進行をモニターする方法、およびタウオパチー疾患の治療をモニターする方法はまた、国際出願公開第WO93/08302号、第WO94/13795号、第WO95/17429号、第WO96/04309号、第WO2002/062851号および第WO2004/016655号に記載される。同様に、タウの抗体ベースの検出方法は国際出願公開第WO2005/080986号に記載される。全ての開示の内容が参照により本明細書に組み込まれる。本発明のタウ特異的抗体、結合断片、誘導体または異型体を用いることを除いて、記載されるとおりにそれらの方法を適用することができる。さらなる態様において、本発明はまた、本発明の任意の抗体によって特異的に認識されるタウのエピトープを有するペプチドに関連する。1つの実施形態において、そのようなペプチドは、配列番号7、配列番号41、配列番号42に示されるアミノ酸配列、または1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個もしくはそれ以上のアミノ酸が置換、欠失および/または付加されたそれらの改変された配列を含み、前記ペプチドは本発明の任意の抗体、例えば、抗体NI-105.4E4またはNI-105.4E3によって認識される。本発明の1つの実施形態において、そのようなペプチドは、対象における神経変性タウオパチーの診断であって、前記対象の生物試料中のペプチドに結合する抗体の存在を判定する工程を含む診断に使用されることが可能であり、そして、そのようなペプチドは、上述の本発明のペプチドを認識する抗体のレベルを測定し、そして、同等の年齢と性別の健康な対象に見出されるレベルに対してその測定値を比較することによる、前記対象におけるタウオパチーの診断に使用される。本発明の前記ペプチドに特異的な測定された抗体のレベル上昇は前記対象におけるタウオパチーの指標である。本発明のペプチドは、上文に記載されるようにアレイ、キットおよび組成物にそれぞれ製剤され得る。これらおよび他の実施形態は、本発明の記述および実施例によって開示および包含される。本発明に従って採用される材料、方法、使用法および化合物のうちのいずれか1つに関するさらなる文献は公開ライブラリーおよびデータベースから、例えば、電子機器を使用して引き出され得る。例えば、米国国立衛生研究所の国立生物工学情報センターおよび/または国立医学図書館が主催する公開データベースMedlineを活用することができる。欧州分子生物学研究所EMBLの一部である欧州バイオインフォマティクス研究所EBIのデータベースとアドレスなどのさらなるデータベースとウェッブアドレスが当業者に知られており、そして、インターネットの検索エンジンを用いてそれらを得ることもできる。遡及的な検索および現状の認識に有用な生物工学の特許情報の概要、および関連する特許情報の供給源の調査は、Berks,TIBTECH121994,352-364において与えられる。上記の開示は全般的に本発明を説明する。別途、明言されない限り、本明細書において使用される用語には、OxfordDictionaryofBiochemistryandMolecularBiology,OxfordUniversityPress,1997年,2000年改編および2003年再版,ISBN0198506732において提供されるような定義が与えられる。いくつかの文献が本明細書の本文を通して引用される。本明細書の末尾、特許請求の範囲の直前に、完全な書誌引用を見出すことができる。引用した参考文献、公開された特許、本願を通して引用された特許出願公開、および製造業者の仕様書、説明書などを含む参照文献全ての内容は本明細書に参照により明確に組み込まれる。しかしながら、引用したいかなる文書も実に本発明に対する先行技術であると認めるものではない。以下の具体的な実施例を参照することにより、さらに完全な理解を得ることができるが、それは例証のみを目的として本明細書に提供されるものであり、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。以下の実施例は本発明をさらに解説するが、本発明の範囲を多少なりとも限定するものと理解されてはならない。クローン化された抗体NI-105.4E4、NI-105.24.B2および105.4A3、すなわち、ヒト可変重鎖および軽鎖の生殖系列GL配列に適合していないフレームワーク1FR1免疫グロブリン可変領域に関して、実施例1~4の以下の実験を解説および記述する。図1を参照のこと。材料と方法引用した参照文献中に、本明細書において使用した方法などの、従来の方法についての詳細な説明を見出すことができる。TheMerckManualofDiagnosisandTherapySeventeenthEd.editedbyBeersandBerkowMerckCo.,Inc.2003もまた参照のこと。本発明の実施は、別途、示されない限り、当分野の技術の範囲内である、細胞生物学、細胞培養、分子生物学、遺伝子導入生物学、微生物学、組換えDNA、および免疫学の従来の技術を使用する。本発明の実施において有用な一般的な技術のさらなる詳細については、実施者は細胞生物学と組織培養の標準的な教科書と概説を参照することができる。実施例において引用される参照文献もまた参照のこと。分子生化学および細胞生化学の一般的な方法は、MolecularCloning:ALaboratoryManual,3rdEd.Sambrooketal.,HarborLaboratoryPress2001;ShortProtocolsinMolecularBiology,4thEd.Ausubeletal.eds.,JohnWileySons1999;DNACloning,VolumesIandIIGlovered.,1985;OligonucleotideSynthesisGaited.,1984;NucleicAcidHybridizationHamesandHigginseds.1984;TranscriptionAndTranslationHamesandHigginseds.1984;CultureOfAnimalCellsFreshneyandAlan,Liss,Inc.,1987;GeneTransfervectorsforMammalianCellsMillerandCalos,eds.;CurrentProtocolsinMolecularBiologyandShortProtocolsinMolecularBiology,3rdEditionAusubeletal.,eds.;およびRecombinantDNAMethodologyWu,ed.,AcademicPressのような標準的な教科書に見つけ出すことができる。GeneTransfervectorsForMammalianCellsMillerandCalos,eds.,1987,ColdSpringHarborLaboratory;MethodsInEnzymology,Vols.154および155Wuetal.,eds.;ImmobilizedCellsAndEnzymesIRLPress,1986;Perbal,APracticalGuideToMolecularCloning1984;学術論文、MethodsInEnzymologyAcademicPress,Inc.,N.Y.;ImmunochemicalMethodsInCellAndMolecularBiologyMayerandWalker,eds.,AcademicPress,London,1987;HandbookOfExperimentalImmunology,VolumesI-IVWeirandBlackwell,eds.,1986。ProteinMethodsBollagetal.,JohnWileySons1996;Non-viralvectorsforGeneTherapyWagneretal.eds.,AcademicPress1999;ViralvectorsKaplittLoewyeds.,AcademicPress1995;ImmunologyMethodsManualLefkovitsed.,AcademicPress1997;andCellandTissueCulture:LaboratoryProceduresinBiotechnologyDoyleGriffiths,JohnWileySons1998。本開示において言及される遺伝子操作用の試薬、クローニングベクターおよびキットはBioRad社、Stratagene社、Invitrogen社、Sigma-Aldrich社およびClonTech社のような販売業者から入手可能である。細胞培養と培地コレクションについての一般的な技術はLargeScaleMammalianCellCultureHuetal.,Curr.Opin.Biotechnol.81997,148;Serum-freeMediaKitano,Biotechnology171991,73;LargeScaleMammalianCellCultureCurr.Opin.Biotechnol.21991,375;およびSuspensionCultureofMammalianCellsBirchetal.,BioprocessTechnol.191990,251;ExtractinginformationfromcDNAarrays,Herzeletal.,CHAOS112001,98-107に概説されている。タウ特異的B細胞の同定とそれぞれの抗体のクローン化の方法以下において、別途、示されない限り、タウ特異的B細胞の同定および目的の特異性を示す抗タウ抗体の分子的クローン化ならびにそれらの組換え発現および機能的特性解析は一般的に、その開示の内容全体が参照により本明細書に組み込まれる国際出願公開第WO2008/081008号として公開された国際出願第PCT/EP2008/000053号の実施例および補足の方法の節において記載されるとおりに実行されており、または実行することができる。本願において、タウ特異的B細胞の同定および目的の特異性を示すタウ抗体の分子的クローン化ならびにそれらの組換え発現および機能的特性解析の新しい方法が提供される。上述したように、本発明の1つの実施形態において、単一クローン性B細胞またはオリゴクローン性B細胞の培養物を培養し、そして、前記B細胞が産生した抗体を含有する前記培養物の上清を、その中の新しい抗タウ抗体の存在と親和性についてスクリーニングする。そのスクリーニング工程は、実施例1で説明され、図9に示されるような鋭敏な組織アミロイド斑免疫反応性TAPIRアッセイの工程;実施例2で説明され、図3および8に示されるようなPHFTauへの結合についての脳抽出液のスクリーンの工程;アミノ酸セリン202およびセリン205にリン酸基を有する配列番号6に表されるアミノ酸配列のタウに由来するペプチドの結合についてのスクリーニングの工程;アミノ酸トレオニン231にリン酸基を有する配列番号6に表されるアミノ酸配列のタウに由来するペプチドの結合についてのスクリーニングの工程;および/または抗体NI-105.4E4のエピトープ確定実験のため、非リン酸化ペプチドを用いる、同様に実施例3で説明され、図5に示される、前記配列のアミノ酸セリン396およびセリン404にリン酸基を有するタウに由来するペプチドの結合についてのスクリーニングの工程;国際特許公開第WO2008/081008号に記載され、そして、実施例1で説明され、図2、5および7に示されるように、配列番号6で表されるアミノ酸配列の全長型タウの結合についてのスクリーンの工程および結合が検出される抗体または前記抗体を産生する細胞を単離する工程を含む。抗原の精製組換えヒトタウ40をrPeptide社Bogart、ジョージア州、米国より購入した。PHFTauはADの脳から抽出された。改変したGoedertらの方法Goedertetal.,Neuron81992,159-168に従って病理的リン酸化タウ線維PHFTauを含有する対らせん状細線維の単離を実行した。1グラムのADの脳組織を、目に見える全ての血管を取り除き、5mmの小片に切断した。前記組織を40mLの氷冷洗浄溶液100mMトリスpH7.4、6mMEGTA、1mMNa3VO4および1mMNaFで3回洗浄し、引き続いて20mLの溶解緩衝液10mMトリスpH7.4、0.8MNaCl、1mMEGTA、1×プロテアーゼ阻害剤カクテル、1mMNa3VO4、1mMNaF、1mMAEBSF、10ショ糖を用いてホモジナイズした。ホモジネートを4°C、20,000×gで20分間遠心分離した。上清を回収し、N-ラウロイルサルコシネートSigma社、スイスを1重量/体積まで添加した。振盪しながら37°Cで2時間保温した後、上清を4°C、100,000×gで1時間遠心分離した。沈殿物を回収し、そして、PBSに再懸濁した。プロテインA磁性ビーズで混入している可能性がある免疫グロブリンを除去した後に、PHFTau懸濁液を使用前に-80°Cで保存した。健常対照のヒト脳組織からの対照抽出物を同様に調製した。ヒトタウ抗体スクリーニングELISA:炭酸ELISAコーティング緩衝液pH9.6中の標準的な濃度である1μg/mLの組換えタウタンパク質rPeptide社、Bogart、米国を用いて4°Cで一晩、96ウェルハーフエリアマイクロプレートCorning社をコーティングした。PHFTauのスクリーニングには、炭酸ELISAコーティング緩衝液pH9.6中に1:100で希釈したヒトADの脳から抽出したPHFTauを用いて4°Cで一晩、96ウェルイモビライザーマイクロプレートNunc社、デンマークをコーティングした。プレートをPBS-T、pH7.6で洗浄し、そして、2BSASigma社、Buchs、スイスを含有するPBS-Tを用いて室温で2時間非特異的結合部位をブロックした。B細胞条件培地をメモリーB細胞培養プレートからELISAプレートに移し、そして室温で1時間インキュベートした。PBS-TでELISAプレートを洗浄し、次に、ホースラディッシュペルオキシダーゼHRP複合体化ロバ抗ヒトIgGFcγ断片特異的ポリクローナル抗体JacksonimmunoResearch社、ニューマーケット、英国とインキュベートした。PBS-Tを用いて洗浄した後、標準的な比色分析でHRP活性を測定することによりヒト抗体の結合を決定した。マルチアレイ登録商標マイクロプレートスクリーニング標準的な96ウェル10-スポットマルチ-スポットプレートMesoScaleDiscovery社、米国をPBS中の30μg/mLのrTaurPeptide社、PHFTau脳抽出物および健常対照脳抽出物を用いてコーティングした。3BSAを含有するPBS-Tを用いて室温で1時間非特異的結合部位をブロックし、引き続いてB細胞条件培地と室温で1時間インキュベートした。PBS-Tでプレートを洗浄し、次に、SULFO-タグ複合体化抗ヒトポリクローナル抗体MesoScaleDiscovery社、米国とインキュベートした。PBS-Tを用いて洗浄した後、SECTORイメージャ6000MesoScaleDiscovery社、米国を用いる電気化学発光測定により抗体の結合を検出した。タウ抗体の分子的クローン化健康なヒト対象からメモリーB細胞を含有する試料を得た。選別されたメモリーB細胞培養物の生きているB細胞を回収し、そして、mRNAを調製する。次にネステッドPCRアプローチを用いて免疫グロブリン重鎖配列および軽鎖配列を得る。ヒト免疫グロブリン生殖系列レパートリーの全ての配列ファミリーに対応するプライマーの組合せを、リーダーペプチド、V断片およびJ断片の増幅のために使用する。5’末端のリーダーペプチド特異的プライマーと3’末端の定常領域特異的プライマーを用いて1回目の増幅を行うSmithetal.,NatProtoc.42009,372-384。重鎖およびカッパ軽鎖については、5’末端のV断片特異的プライマーと3’末端のJ断片特異的プライマーを用いて2回目の増幅を行う。ラムダ軽鎖については、5’末端のV断片特異的プライマーと3’末端のC領域特異的プライマーを用いて2回目の増幅を行うMarksetal.,Mol.Biol.2221991,581-597、deHaardetal.,J.Biol.Chem.261999,18218-18230。完全抗体を組換え発現させて、ELISAに基づく再スクリーニングにより、所望の特異性を有する抗体クローンの同定を行う。5’末端にリーダーペプチドをコードする配列および3’末端に適切な定常ドメインをコードする配列を有する可変領域配列を相補する、可変重鎖配列および軽鎖配列が正しい読み枠で発現ベクターに挿入されて、完全ヒトIgG1抗体またはキメラIgG2a抗体の組換え発現が達成される。その目的のために、プライマーは、抗体発現ベクターへの可変重鎖配列および軽鎖配列のクローン化を容易にするように意図された制限酵素部位を含んだ。シグナルペプチドとヒト免疫グロブリンγ1またはマウス免疫グロブリンγ2aの定常ドメインを担持する重鎖発現ベクターに免疫グロブリン重鎖RT-PCR産物をインフレームで挿入することにより、重鎖免疫グロブリンが発現する。シグナルペプチドとヒトカッパ軽鎖免疫グロブリンの定常ドメインを提供する軽鎖発現ベクターにカッパ軽鎖RT-PCR産物をインフレームで挿入することにより、カッパ軽鎖免疫グロブリンが発現する。シグナルペプチドとヒトまたはマウスのラムダ軽鎖免疫グロブリンの定常ドメインを提供するラムダ軽鎖発現ベクターにラムダ軽鎖RT-PCR産物をインフレームで挿入することにより、ラムダ軽鎖免疫グロブリンが発現する。免疫グロブリン重鎖発現ベクターおよびカッパまたはラムダ免疫グロブリン軽鎖発現ベクターをHEK293細胞またはCHO細胞または、ヒトもしくはマウス起源の他の適切な受容細胞株に共形質移入して、機能性組換えモノクローナル抗体を得る。その後に標準的なプロテインAカラム精製を用いて条件培地から組換えヒトモノクローナル抗体を精製する。一過性形質移入細胞か安定的形質移入細胞のどちらかを用いて無限量の組換えヒトモノクローナル抗体を産生することができる。前記免疫グロブリン発現ベクターを直接使用するか、異なる発現ベクターに免疫グロブリン可変領域を再クローン化するかのどちらかにより、組換えヒトモノクローナル抗体を産生する細胞株を構築することができる。Fab、Fab2およびscFvなどの誘導体をこれらの免疫グロブリン可変領域から作製することもできる。抗体製造業者のプロトコルに従って、マウスモノクローナル抗ヒトタウ抗体Tau12Covance社、カリフォルニア州、米国およびマウスモノクローナルタウ抗体AT180ThermoScientifi社、米国を使用した。組換えヒトタウ抗体NI-105.4E4、NI105.24B2およびNI-105.4A3は本発明の抗体である。それらはHEK293細胞またはCHO細胞で発現され、条件培地から精製され、そして、この後の適用では、別途、示されない限り、直接的に使用された。実施例1~4では、精製された本発明の組換え抗体が使用された。直接ELISA炭酸ELISAコーティング緩衝液50mM、pH9.6中に1μg/mLの濃度に希釈した組換えタウタンパク質hTau40、rPeptide社、Bogart、米国を用いて4°Cで一晩、96ウェルマイクロプレートCostar、Corning社、米国をコーティングした。2BSASigma社、Buchs、スイスおよび0.5ツイーン20を含有するPBSを用いて室温で2時間非特異的結合部位をブロックした。HRP複合体化ヤギ抗ヒトIgGFcγJacksonimmunoResearch社、ニューマーケット、英国を用い、引き続いて標準的な比色分析でHRP活性を測定して本発明のヒト抗体NI-105.4E4、NI-105.24B2およびNI-105.4A3の結合が測定された。GraphPadPrismソフトウェアサンディエゴ、米国を用いる非線形回帰によりEC50値を推定した。ウェスタンブロッティングタンパク質染色PHFTauおよび組換えhTau40をグラジエントSDS-PAGENuPAGE4~12;Invitrogen社、バーゼル、スイスにより分離し、引き続いてニトロセルロース膜へのエレクトロブロッティングを行った。2BSAを用いて室温で1時間非特異的な結合をブロックした後、ブロットを一次抗体NI-105.4E4、NI-105.24B2ヒトまたはTau12マウスモノクローナル抗体、Covance社、カリフォルニア州、米国と一晩インキュベートし、引き続いてHRP複合体化ヤギ抗ヒトIgGFcγ二次抗体ヒト一次抗体用またはHRP複合体化ヤギ抗マウスIgG二次抗体とインキュベートした。ECLおよびImageQuant350検出法GEHealthcare社、Otelfingen、スイスを用いてブロットを現像した。ADの脳からのPHFTauの抽出改変したGoedertらの方法Goedertetal.,Neuron81992,159-168に従って病理的リン酸化タウ線維PHFTauを含有する対らせん状細線維の単離を実行した。1グラムのADの脳組織を、目に見える全ての血管を取り除き、5mmの小片に切断した。前記組織を40mLの氷冷洗浄溶液100mMトリスpH7.4、6mMEGTA、1mMNa3VO4および1mMNaFで3回洗浄し、引き続いて20mLの溶解緩衝液10mMトリスpH7.4、0.8MNaCl、1mMEGTA、1×プロテアーゼ阻害剤カクテル、1mMNa3VO4、1mMNaF、1mMAEBSF、10ショ糖を用いてホモジナイズした。ホモジネートを4°C、20,000×gで20分間遠心分離した。上清を回収し、N-ラウロイルサルコシネートSigma社、スイスを1重量/体積まで添加した。振盪しながら37°Cで2時間保温した後、上清を4°C、100,000×gで1時間遠心分離した。沈殿物を回収し、そして、PBSに再懸濁した。プロテインA磁性ビーズで混入している可能性がある免疫グロブリンを除去した後に、PHFTau懸濁液を使用前に-80°Cで保存した。健常対照のヒト脳組織からの対照抽出物を同様に調製した。タウペプチドの合成Pepspotマッピングにより特定されたNI-105.4E4のエピトープアミノ酸337~343を含むhTau40のアミノ酸333~346に対応するペプチド333GGGQVEVKSEKLDF346がSchafer-N社コペンハーゲン、デンマークにより合成された。イモビライザーマイクロプレートNunc社、デンマークへの共有結合を可能にするために追加のシステインをC末端に付加した。市販されているマウスモノクローナルタウ抗体AT180ThermoScientific社、米国の同じ性質のエピトープである、ヒトタウのアミノ酸226~239に対応する第2ペプチド226VAVVRpTPPKSPSSA239が同様に合成され、そして、対照として使用された。遺伝子導入マウス本発明のタウ抗体およびその結合特異性を有する分子を検証するために、3つの異なるタウオパチーの動物モデルを使用する。1.遺伝子導入TauP301Lマウス系統183:マウスThy1.2プロモーターの制御下で、P301L突然変異を有するヒトタウ40を発現する。これらの遺伝子導入動物の作製は、Goetzetal.,J.Biol.Chem.2762001,529-534および国際出願公開第WO2003/017918号に記載される。その開示の内容が参照により本明細書に組み込まれる。2.マウスPrPプロモーターの制御下で、P301L突然変異を有する最短4Rヒトタウアイソフォームを発現するJNPL3マウス米国、ニューヨーク州、ハドソンのTaconic社より入手可能。3.マウスPrPプロモーターの制御下で、P301S突然変異を有するヒトタウを発現するP301STau系統PS19マウス米国、メイン州、バーハーバーのJacksonLaboratory社より入手可能。タウオパチーマウスモデルおよび対応する野生型マウスは、自由に摂食と飲水が可能であり、12時間:12時間転換の明暗周期で標準的な居住条件下で飼育される。処理群は年齢と性別について釣り合いがとれている。実施例1:ヒトタウ-抗体の標的と結合特異性の検証単離した抗体が認識する標的としてのタウを検証するために、上述したように直接ELISA法を実行した。例示的な組換えヒトNI-105.4A3抗体について、炭酸ELISAコーティング緩衝液pH9.6中に3μg/mLの濃度に希釈した組換えヒトタウhTau40、rPeptide社、Bogart、米国、または炭酸ELISAコーティング緩衝液pH9.6中のBSAを用いて96ウェルマイクロプレートCostar、Corning社、米国をコーティングし、そして、前記抗体の結合効率を試験した。例示的なNI-105.4A3抗体は、ELISAによりヒトタウに特異的に結合する。BSAに対して結合は観察されない図10。例示的な抗体NI-105.4E4およびNI-105.24B2の2分の1最大有効濃度EC50の決定のために、様々な濃度の抗体を用いる追加的な直接ELISA実験を行った。炭酸ELISAコーティング緩衝液中にNI-105.4E4抗体を用いるアッセイについて1μg/mLの濃度、またはNI-105.24B2抗体を用いるアッセイについて3μg/mLの濃度に希釈した組換えヒトタウhTau40、rPeptide社、Bogart、米国を用いて96ウェルマイクロプレートCostar、Corning、米国をコーティングし、そして、前記抗体の結合効率を試験した。GraphPadPrismソフトウェアを用いる非線形回帰によりEC50値を推定した。組換えヒト由来抗体NI-105.4E4は2.4nMEC50という低ナノモル範囲の高親和性でhTau40に結合する図2。NI-105.24B2は6.6nMのEC50という低ナノモル範囲の高親和性でhTau40に結合する図7。直接ELISA実験を用いて例示的な抗体NI-105.4A3の2分の1最大有効濃度EC50もまた決定された。組換えヒトタウhTau40、1μg/mL、PHFTau1:100および対照調製物1:100を用いてELISAプレートをコーティングし、そして、さまざまな濃度の抗体とインキュベートした。NI-105.4A3は1.4nMのEC50という低ナノモル範囲の高親和性でrTauに結合する。NI-105.4A3は1.2nMのEC50という低ナノモル範囲の高親和性でPHFTauに結合する図12。実施例2:組換えタウおよびADの脳から抽出された病理的タウへの組換えヒト抗体の結合の解析ADの脳から抽出された病理的タウ種へのNI-105.4E4およびNI-105.24B2の結合能を決定するために、先に詳細を説明したとおりに、SDS-PAGEとウェスタンブロット分析を実行した。ブロットを一次抗体NI-105.4E4ヒト、NI-105.24B2ヒトまたはTau12マウスモノクローナル抗体、Covance社、カリフォルニア州、米国と一晩インキュベートし、引き続いてHRP複合体化ヤギ抗ヒトIgGFcγ二次抗体ヒト抗体用またはHRP複合体化ヤギ抗マウスIgG二次抗体とインキュベートした。組換え抗体NI-105.4E4図3およびNI-105.24B2図8はウェスタンブロットで組換えhTau40ならびにADの脳から抽出された病理的修飾型PHFTauを認識する。予想されたとおり、対照抗体Tau12は同様に両方のタウ種を認識する図3。さらに、上記の実施例1で考察したように、PHFTauを用いる直接ELISA実験で、例示的な抗体NI-105.4A3の2分の1最大有効濃度EC50が決定された。NI-105.4A3は1.2nMのEC50という低ナノモル範囲の高親和性でPHFTauに結合する図12。実施例3:hTau40上のNI-105.4E4およびNI-105.4A3の結合エピトープのマッピング2つの隣接するペプチドの間で11個のアミノ酸が重複する118ペプチド配列からなる、全長型hTau40アミノ酸1~441をカバーするペプチドアレイJPTPeptideTechnologiesGmbH社、ベルリン、ドイツをニトロセルロース膜にスポットした。製造業者の使用説明書に従って抗体の免疫標識ならびに膜の再生を行った。検出抗体の非特異的な結合を除外するために、最初に一次抗体を省略してHRP複合体化ヤギ抗ヒトIgGによって前記膜を探索した図4B。再生した後に、100nMの組換えNI-105.4E4抗体で前記膜を探索した。ECLおよびImageQuant350検出法GEHealthcare社、Otelfingen、スイスを用いて結合した抗体を検出した。検出抗体のみと比較されると図4B、2つのグループの隣接するペプチドスポットペプチド83、84および85;ペプチド96および97がNI105.4E4によって特異的に同定された図4AおよびA’。これらの2つのグループのペプチドによってカバーされる配列はhTau40のアミノ酸329~351および387~397に対応する。これらのデータは、NI-105.4E4が2つの直鎖状配列、すなわち、R4微小管結合ドメイン内の1つの配列とC末端ドメインの別の配列を含む非連続的なエピトープを認識することを示唆する。ペプチド83~85によって共有される配列はhTau40のアミノ酸残基337~343を含む。PepspotJPTのデータは、NI-105.4E4が、ヒトタウのアミノ酸337~343を含むhTau内のエピトープを認識することを示唆する。この領域はタウの微小管結合ドメイン内に局在し、そして、全ての神経性ヒトタウアイソフォームの間ならびにマウスおよびラットを含む他の種の間にも保存されている。生理的微小管結合タウでは、このドメインは微小管と結合しているので、NI-105.4E4は、微小管から脱離した病理的に関連のあるタウのプールを優先的に標的とすると予想される。NI-105.4E4結合ペプチド内の重要な残基を決定するために、アラニンスキャニングを実行して、1つずつ各残基をアラニンで置換した。オリジナルの配列中のアラニン残基A384およびA390はプロリンとグリシンに置換された図4E。スポット35~50および51~68図4Cはオリジナルのペプチドスポット35およびスポット51およびそれらのアラニン置換異型体であり、それらのアミノ酸配列は図4DおよびEに示される。アラニンスキャンは、V339、E342、D387、E391およびK395がNI-105.4E4の結合に必要であることを示唆している。NI-105.4E4のタウペプチドへの結合を試験することにより、追加の実験が実行された。NI-105.4E4は、Pepspotマッピングにより同定されたアミノ酸残基337~343を含有する、hTau40のアミノ酸333~346に対応するペプチドを特異的に認識することが直接ELISAによって示されている図5。AT180エピトープをカバーする対照ペプチドに対して、NI-105.4E4の交差反応性は観察されていない。その反対に、AT180はその同じ性質のエピトープを含有するペプチドを認識するが、NI-105.4E4特異的ペプチドに結合することができない。種特異的二次抗体は前記ペプチドのいずれにも結合しない。まとめると、NI-105.4E4は、Pepspotマッピングにより同定された、ヒトタウのアミノ酸残基337~343を含有するペプチドを特異的に認識することが被覆ペプチドを用いる直接ELISAにより、確認される。hTau40上のNI-105.4A3結合エピトープの位置を全体的に特定するために、4つのタウドメインポリペプチドタウドメインI、ドメインII、ドメインIIIおよびドメインIVを作製した。N末端に6×ヒスチジンでタグした各タウドメインをコードする、GeneArt登録商標Invitrogen社を用いて合成したDNA断片をpRSET-A発現ベクターInvitrogen社にクローン化し、大腸菌BL21DE3株NewEnglandBiolabs社に形質移入した。ヒスチジンタグ化タウドメインの発現を0.5mMのIPTGにより6時間誘導した後に細菌をリゾチームと超音波処理により溶解した。溶菌液を5分間煮沸した後に、Ni-NTASuperflowカラムQiagen社を用いてさらに精製した。溶出したヒスチジンタグ化タウドメインは、ELISAプレートのコーティングに用いられるか、またはウェスタンブロットのためにポリアクリルアミドゲルに負荷された。これらの連続的に重複するタウドメインポリペプチドはhTau40の全長をカバーする図13A。精製したタウドメインがELISAプレートのコーティングに用いられ、そして、NI-105.4A3の結合が試験された。NI-105.4A3はタウドメインIおよび全長型hTau40にのみ結合し、このことは、前記エピトープがhTau40のN末端部分アミノ酸1~136の内部にあることを示している図13B。NI-105.4A3のタウドメインIへの特異的な結合がウェスタンブロットにより確認される図13C。PepSpotJPTテクノロジーを用いるNI-105.4A3エピトープマッピングがヒトTau40のアミノ酸Q35~Q49を特定した図14AおよびC。NI-105.4A3の結合にとっての前記エピトープ内の重要な残基を決定するために、アラニンスキャニングを実行し、1つずつ各残基をアラニンで置換した。オリジナルの配列中のアラニン残基A41をグリシンまたはプロリンで置換した図14B。左から右へ1および17で番号付けしたスポットはオリジナルのエピトープスポット1およびそのアラニン置換体であり、それらのアミノ酸配列は図14Cに示されている。アラニンスキャンは、D40、A41およびK44がNI-105.4A3の結合に重要な残基であることを示している。実施例4:ADの脳組織およびヒトタウ遺伝子導入マウスにおけるタウの生理的形態ならびに病理的凝集体へのNI-105.4E4の結合の評価高リン酸化タウ線維から構成される神経原線維濃縮体NFTはADの神経病理的特徴である。高リン酸化タウ線維はまたジストロフィー性神経突起および糸屑状構造物の主要な成分でもあり、それらの両方がADの共通した神経病理的特色である。家族性P301Lタウ突然変異を含有するヒトタウのマウスでの過剰発現が6か月齢でのNFT形成を誘導するGotzetal.,2001a。タウの生理的形態ならびに病理的凝集体への組換えヒトタウ抗体の結合を評価するために、本発明の例示的なNI-105.4E4抗体を用いてADの脳組織とTauP301L遺伝子導入マウスでの免疫組織学的染色を実行した。深麻酔下、室温で20mLの100mMトリスCl/6mMEGTApH7.4を用いてマウスに灌流を行った。脳を取り出し、固定のために4°Cで一晩、PBSpH7.4中の4PFAに浸漬し、引き続いてパラフィンに包埋した。ヒト組織については、ADおよび健康な対照対象に由来する脳組織のパラフィンブロックを用いた。標準的なプロトコルに従ってDAB染色を行った。陽性対照として、マウスモノクローナル抗体Tau-12Covance社、カリフォルニア州、米国を用いた。一次抗体無しのHRP複合体化検出抗体もまた含まれた。組換えヒト抗体NI-105.4E4がADの脳で多数のNFTおよび糸屑状構造物を同定したが図6A、それらは健常対照の脳では存在しない図6B。二次抗体のみではAD図6Cと対照の脳図6Dの両方でシグナルが得られない。P301Lタウ遺伝子導入マウスの脳では、NI-105.4E4は、NFT図6E、FおよびH、糸屑状構造物図6EおよびGおよびジストロフィー性神経突起図6EおよびHに類似する病理的タウに強く結合する。さらに、NI-105.4E4はまたプレタングルステージpre-tanglestageのタウ凝集体を同定する図6I。ヒトP301Lタウならびにスウェーデン型および北極型突然変異を有するヒトAPPの両方を過剰発現する遺伝子導入マウスの脳では、NI-105.4E4は、βアミロイド斑を取り囲むジストロフィー性神経突起に特異的に結合する図6J。実施例5:本発明の抗体のインビボ試験既に上述したように、遺伝子導入マウス系列でのリン酸化タウペプチドを使用する能動的ワクチン投与を用いる研究により、脳におけるタウ凝集体の脳内レベルの減少と行動障害の進行の遅滞が明らかになったSigurdsson,J.AlzheimersDis.152008,157-168;Boimeletal.,Exp.Neurol.2242010,472-485。しかしながら、老齢集団のかなりの部分がワクチン投与に対する非反応者であると予想されるので、能動的ワクチン投与はヒトではあまり使用に適していない可能性がある。また、タウ指向性免疫反応に関連する潜在的な副作用が制御しがたい可能性がある。本発明のタウ結合分子は、病理的タウ種に対する類似の結合特異性のため、マウス抗体について上述したように、同様のタウ凝集体の脳内レベルの減少を達成すると合理的に予想することができる。しかしながら、進化的に最適化とヒト免疫システム内での親和性成熟のため、本発明の抗体は、優れた安全性プロファイルと免疫原性の欠如の可能性が高い健康なヒト対象から単離されたことにより、価値のある治療手段を提供する。これらの予想される治療効果の確証は、先に言及したマウス抗体を用いる実験において説明された試験方法によってもたらされ得る。特に、腹腔内抗体注射、頭蓋内注射、脳室内脳点滴などのありとあらゆる経路で前記動物にスクリーニングする抗体を投与し、治療効果について試験することができる。βアミロイド誘導性タウ病理への治療効果を評価するために、タウ遺伝子導入マウスの脳へのβアミロイド調製物の先の脳内注射の後に、先に言及した応用可能性のいずれかを用いることもできる。Gallyas陽性細胞数、総ヒトタウ染色量、リン酸化タウの脳負荷の定量化および/または連続的な脳抽出に基づく脳内の可溶性タウおよび不溶性タウおよびリン酸化タウのレベルの生化学的決定を含む組織化学的方法により治療効果の評価を行うことができる。さらに、本発明の抗体の治療効果の確認のために、処理されたマウスの行動試験、例えば、味覚嫌悪条件づけまたは文脈恐怖条件づけを行うことができるPennanen,GenesBrainBehav.52006,369-79、PennanenNeurobiolDis.152004,500-9.。実施例6:抗体4E4と4A3のマウスIgG2a定常ドメインとのキメラ化慢性治療試験用の免疫原性が低下した抗体を作製するために、組換えDNA技術を用いて、マウスキメラ版の抗体4E4と4A3を作製した。高い親和性でマウスFc-ガンマ受容体に結合し、したがって、免疫エフェクター反応を誘導することが可能である分子を作製するため、これらのキメラ抗体用にマウスIgG2a/ラムダアイソタイプを選択した。キメラ4E4ch4E4およびキメラ4A3ch4A3重鎖コンストラクトおよび軽鎖コンストラクトのアミノ酸配列が下記に示される。実施例7:抗体4E4と4A3のマウスIgG2a定常ドメインとのキメラ化4E4重鎖のCDR1領域にコンセンサスN-結合型グリコシル化部位が特定された。哺乳類CHO細胞で発現すると、マススペクトロメトリーにより示されるとおり、予想されたN-グリコシル化部位アスパラギン30が完全にグリカンによって占められた。この領域でのN-グリコシル化を除去し、そして、産物の不均質性を低下させるために、ch4E4の重鎖のアスパラギン30がグルタミンに変更された表4。産生され、CHO細胞から精製されると、その改変型抗体は、オリジナルのグリコシル化抗体に対して見かけ上、約4倍高い結合親和性で組換えタウに結合した図15を参照のこと。実施例8:脱グリコシル化キメラ4E4ch4E4N30QmIgG1アグリ抗体の作製抗体のエフェクター機能と活性の間の関係を評価するために、4E4のマウスキメラ脱グリコシル化異型体を作製したch4E4N30QIgG1-アグリ抗体。重鎖については、コンセンサスFcグリコシル化部位を除去するためのアスパラギンからグルタミンへの突然変異を含有するマウスIgG1重鎖定常領域に4E4の可変ドメインを融合させた。前記重鎖可変領域はまた、CDR1のコンセンサスN-グリコシル化部位実施例7を除去するために、N30Q変異を含有した。軽鎖は上述したch4E4ラムダ軽鎖であった。実施例9:ヒト4E4および4A3の急性脳透過性試験CHO細胞の一過性形質移入によりヒト4E4および4A3を産生し、そして、親和性精製により精製した。エンドトキシンのレベルが管理され、それらは全て1EU/mgよりも低かった。30mg/kgの4E4抗体n=7、4A3抗体n=7または等体積のPBSn=7で第1日と第4日にTauP301Lマウスを腹腔内注射した。第5日に、麻酔下で、1Unit/mlのヘパリンを含有するPBSを用いてマウスに灌流を行った。分析のために血液、脳および脊髄を採取した。脳の右半球は-80°Cで凍結し、脳の左半球と脊髄は、10の中和化ホルマリン中に4°Cで2日間後固定された後にパラフィンブロックに包埋され、切片が作製された。血漿はアリコットに分けて-80°Cで保存された。脳タンパク質の抽出:凍結した右半球の重量を量り、そして、5倍の体積5mL/g湿組織の50mMNaCl、0.2ジエチルアミン、プロテアーゼ阻害剤RocheDiagnosticsGmbH社およびホスファターゼ阻害剤RocheDiagnosticsGmbH社を含有する溶液中でホモジナイズした。次に、試料をポリカーボネート製のチューブに移し、さらに5倍の体積のホモジナイズ溶液を加え、そして、氷上で30分間保持した。次に、100,000g、4°Cで30分間の遠心分離の後、可溶性画分を回収した。ヒトIgGアッセイにこの可溶性画分を使用した。3倍の体積の、プロテアーゼ阻害剤とホスファターゼ阻害剤を含むPBSに沈殿物を再懸濁した。16,000g、4°Cで30分間の遠心分離の後に、さらなる不溶性タウ抽出のために上清と沈殿物を別々に-80°Cで保存した。改変サルコシル抽出GoedertM,SpillantiniMG,CairnsNJ,CrowtherRA.Neuron8,1591992を用いて沈殿物をさらに抽出した。ヒトIgG特異的サンドイッチELISA:50mM炭酸ELISAコーティング緩衝液pH9.6中の2μg/mLのヤギ抗ヒトIgGFabJackson社を捕捉抗体として使用した。捕捉抗体を用いて30μL/ウェルでハーフエリア96ウェルマイクロプレートを4°Cで一晩コーティングした。次に、0.1ツイーン20を含有するPBSを用いて前記プレートを4回洗浄した後に、2BSAを含有するPBSを50μL/ウェルで用いて室温で1時間インキュベートした。脳抽出物の可溶性画分、血漿試料および標準抗体4A3を、2BSAおよび0.1ツイーン20を含有するPBS中に希釈した。30μLの希釈した試料を各ウェルに添加し、そして、室温で1時間インキュベートした。次に、0.1ツイーン20を含有するPBSを200μL/ウェルで用いて前記プレートを4回洗浄した後に、HRP複合体化ロバ抗ヒトFcγJackson社、2BSAおよび0.1ツイーン20を含有するPBS中に1:10,000で希釈と室温で1時間インキュベートした。次に、0.1ツイーン20を含有するPBSを200μL/ウェルで用いて前記プレートを4回洗浄した後に、テトラメチルベンジジンTMB10mMクエン酸溶液pH=4.1中に1:20で希釈を20μL/ウェルで添加した。次に、各ウェルに10μLの1MH2SO4を添加することにより、反応を停止した。4A3の段階希釈から抗体の検量線を得た。前記検量線に従って、血漿および脳試料中の抗体濃度を計算した。次に、図17に示されるように、脳ヒトIgGレベルをμg抗体/g新鮮脳組織1g/10mLと仮定するに変換した。4E4および4A3で処理されたマウス全てで血漿中に高レベルのヒトIgGが検出された。対照的に、PBSで処理されたマウスの血漿中にはヒトIgGは検出されなかった図16。4E4および4A3で処理されたマウスの脳ホモジネートで著しい量のヒトIgGが検出された図17。実施例10:キメラ4E4および4A3を用いる慢性試験オリジナルのヒト抗体の可変ドメインとマウスIgG2aの定常領域を含有するキメラ4E4および4A3をCHO細胞の一過性形質移入より作製することができ、そして、親和性精製により精製することができる。抗体の各バッチのエンドトキシンのレベルが管理され、そして、1Eu/mgより低く保たれる。性別について釣り合いをとった、7.5~8か月齢のTauP301Lマウスに10mg/kg、3mg/kgの抗体溶液、または等体積のPBS対照を用いて腹腔内注射する。各処理群は20~25匹のマウスを有する。前記処理は26週間にわたって週に1回行われる。あるいは、前記処理は13週間にわたって週に2回行われる。体重を2週間ごとにモニターする。処理期間の最後に麻酔下でマウスに灌流を行う。脳、脊髄および血液を回収する。脳の半分と脊髄を10ホルマリン中で後固定した後、パラフィンブロックに包埋することができる。これらの組織ブロックから作製された4~6μmの厚みの切片を免疫組織化学試験に使用することができる。他方の脳の半分の重量を量り、生化学分析のためにそれを-80°Cで深凍結する。神経原線維濃縮体NFTのレベルと様々な可溶性特性を有するタウのレベルを処理試料と対照試料で比較することにより、薬品の効能を評価する。Gallyasの鍍銀染色FGallyasActaMorphol.Acad.Sci.Hung19.11971、または、NFT中の病理的リン酸化タウを認識するモノクローナルマウス抗体AT100およびAT180を用いる免疫染色によりNFTを可視化することができる。抗体処理マウスおよび対照動物の脳および脊髄中のGallyas陽性ニューロンおよび/またはAT100、AT180標識化ニューロンの数または頻度によって、抗体処理の効果が評価されると判断することができる。本明細書に記載される脳タンパク質抽出プロトコルに従って、可溶性タウおよび不溶性タウを抽出することができる。あるいは、可変サルコシル抽出GoedertM,SpillantiniMG,CairnsNJ,CrowtherRA.Neuron8,1591992を用いて可溶性タウおよび不溶性タウを抽出することができる。簡単に説明すると、凍結した脳を10倍の体積重量/体積の、10mMトリス塩酸pH7.4、0.8MNaCl、1mMEGTA、1mMNa3VO4、1mMNaF、1mMAEBSF、プロテアーゼ阻害剤RocheDiagnosticsGmbH社およびホスファターゼ阻害剤RocheDiagnosticsGmbH社からなる10ショ糖ホモジネート緩衝液の中でホモジナイズする。ホモジネートを20,000gで20分間遠心分離し、上清を保持する。沈殿物を10倍の体積のホモジナイズ緩衝液中でホモジナイズし、そして、2回目の遠心分離を行う。上清を一つにまとめることができ、そして、N-ラウリル-サルコシネートSigma社を1重量/体積の終濃度まで添加し、そして、300rpmで回転しながら37°Cで1.5時間保温し、引き続き100,000gで1時間遠心分離を行う。サルコシル可溶性画分として上清を回収し、そして、沈殿物1gの脳組織の沈殿物をPHF画分として0.2mLの50mMトリス塩酸pH7.4に再懸濁する。市販されているタウELISAキットInvitrogen社を用いて可溶性タウおよび不溶性タウのレベルを測定する。さらに、脳タンパク質抽出物を4~12Bis-トリスSDS-PAGEで分離し、Tau12ヒトタウ抗体、AT8pS202/pT205抗体、AT100pT212/pS214抗体、AT180pT231抗体およびE178pS396抗体を用いるイムノブロッティングを行った。既知の量のタウの標準物質に対する各試料の総密度を測定することで半定量的分析を行う。さらに、先に実施例5で示したように、行動試験を行うことができる。例えば、2試験性Y迷路試験を用いて、抗体処理TauP301Lマウスにおける作業記憶の改善を試験することができる例えば、Pennanen,GenesBrainBehav.52006,369-79、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。その迷路の3つのアームは長さが22cmであり、幅が5cmであり、高さが15cmである。迷路を囲む黒いカーテンに黒と白の抽象的な迷路の手がかりが配置される。暗期の間は、6ルクスの環境光を用いて実験を実行する。各実験はトレーニングセッションと観察セッションを含む。トレーニングセッションの間では、3つのアームのうちの2つ開始アームおよび第2アームにマウスを配置し、マウスがそれらのアームを4分間自由に探索することができるが、第3アーム新規のアームにはアクセスできない。次に、マウスが迷路から取り出され、そして、いかなる嗅覚の手がかりも除去するために70エタノールで迷路を徹底的に掃除している間、マウスがかごに1.5~5分間保持される。次に、前記マウスが再び迷路に戻され、3つのアーム全てをアクセス可能にして4分間観察される。各アームへの進入の順序、進入の回数および各アームで過ごした時間が記録される。その記録から、新規の第3アームで過ごした時間の、他の2つのアーム開始アームおよび第2アームで過ごした時間の平均値に対する割合が計算され、そして、タウオパチーマウスモデルの異なる処理群および対応する対照野生型マウスの間で比較される。げっ歯類動物は、典型的には、既に訪れたアームに戻るよりはむしろ迷路の新しいアームを調べることを好む。タウオパチーモデルマウスの疾患に関連する作業記憶障害のため、未処理のマウスの区別できない行動と比べて、処理されたタウオパチーモデルマウスがこの好みを取り戻すことについて、抗体の効果をモニターすることができる。したがって、1に近い割合は作業記憶障害を表す。割合が高いほど、良い作業記憶を表す。TauP301Lマウスの作業記憶障害は、ヒトタウの過剰発現から生じるタウ病理に起因すると考えられる。したがって、対照TauP301Lマウスよりも抗タウ抗体処理TauP301Lマウスで観察された著しく高い割合は、抗タウ抗体がタウ病理に治療効果を有することを表す。本発明は、本発明の個々の態様の1つの例示として意図される、記載の特定の実施形態によって本発明の範囲が限定されることがないものとする。そして機能的に同等の任意の組成物または方法は本発明の範囲内である。実に、本明細書において示され、そして、記載されるものに加えて、本発明の様々な改変が、前出の説明および添付の図面から当業者に明らかとなるであろう。そのような改変は添付の特許請求項の範囲の範囲内に収まるものと意図される。"