第1のfHbp抗原および第2のfHbp抗原、並びにアルミニウムホスフェートアジュバントを含む免疫原性組成物であって、前記第1のfHbp抗原は、配列番号:23より密接に配列番号:26に関連があるアミノ酸配列を含み;および前記第2のfHbp抗原は、配列番号:26より密接に配列番号:23に関連があるアミノ酸配列を含む、免疫原性組成物。第1のfHbp抗原および第2のfHbp抗原、並びにアルミニウムホスフェートアジュバントを含む免疫原性組成物であって、前記第1のfHbp抗原は、配列番号:23より密接に配列番号:26に関連があるアミノ酸配列を含み;および前記第2のfHbp抗原は、i配列番号:25に対し少なくとも94の配列同一性を有する、および/またはii配列番号:25から少なくとも50個の連続したアミノ酸の断片からなるアミノ酸配列を含む、免疫原性組成物。請求項1の組成物であって、前記第1のfHbp抗原は、a血清殺菌アッセイにおいて株MC58に対して殺菌性である抗体をマウスにおいて誘発することができる、および/またはb配列番号:26および配列番号:23の両方に対し少なくとも75の配列同一性を有するが、同じアルゴリズムおよびパラメーターを使用して整列させたとき配列番号:23よりも配列番号:26に対しより高い配列同一性を有する、組成物。請求項2の組成物であって、前記第1のfHbp抗原は、a血清殺菌アッセイにおいて株MC58に対して殺菌性である抗体をマウスにおいて誘発することができる、および/またはb配列番号:26および配列番号:23の両方に対し少なくとも75の配列同一性を有するが、同じアルゴリズムおよびパラメーターを使用して整列させたとき配列番号:23よりも配列番号:26に対しより高い配列同一性を有する、組成物。請求項2または請求項4の組成物であって、前記第2のfHbp抗原が血清殺菌アッセイにおいて株9615945に対して殺菌性である抗体をマウスにおいて誘発することができる、組成物。請求項1または請求項3の組成物であって、前記第2のfHbp抗原が、a血清殺菌アッセイにおいて株MC58に対して殺菌性でない抗体をマウスにおいて誘発する、および/またはb配列番号:26および配列番号:23の両方に対し少なくとも75の配列同一性を有するが、同じアルゴリズムおよびパラメーターを使用して整列させたとき配列番号:26よりも配列番号:23に対しより高い配列同一性を有する、組成物。i配列番号:25に対し少なくとも94の配列同一性を有する、および/またはii配列番号:25から少なくとも50個の連続したアミノ酸の断片からなるアミノ酸配列を含む第3のfHbp抗原を含む、請求項1、請求項3または請求項6の組成物。請求項7の組成物であって、前記第3のfHbp抗原が、血清殺菌アッセイにおいて株9615945に対して殺菌性である抗体をマウスにおいて誘発することができる、組成物。前記組成物がi配列番号:23に対し>95の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む抗原、またはii配列番号:24に対し>95の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む抗原を含まない、請求項2、請求項4または請求項5の組成物。請求項1~9のいずれか1項の組成物であって、前記fHbp抗原の少なくとも1つがN末端システインにて脂質付加された、組成物。ポリペプチドおよびアルミニウムホスフェートアジュバントを含む免疫原性組成物であって、前記ポリペプチドは、式NH2A{XL}nBCOOHを有し、式中:nは2である;第1のXは、配列番号:23より密接に配列番号:26に関連があるアミノ酸配列である;第2のXは、配列番号:26より密接に配列番号:23に関連があるアミノ酸配列である;各Lは、随意のリンカーアミノ酸配列である;Aは、随意のN末端アミノ酸配列である;およびBは、随意のC末端アミノ酸配列である;またはnは3である;第1のXは、配列番号:23より密接に配列番号:26に関連があるアミノ酸配列である;第2のXは、配列番号:26より密接に配列番号:23に関連があるアミノ酸配列である;第3のXは、i配列番号:25に対し少なくとも94の配列同一性を有する、および/またはii配列番号:25から少なくとも50個の連続したアミノ酸の断片からなる、アミノ酸配列である;各Lは、随意のリンカーアミノ酸配列である;Aは、随意のN末端アミノ酸配列である;およびBは、随意のC末端アミノ酸配列である;またはnは2である;第1のXは、配列番号:23より密接に配列番号:26に関連があるアミノ酸配列である;第2のXは、i配列番号:25に対し少なくとも94の配列同一性を有する、および/またはii配列番号:25から少なくとも50個の連続したアミノ酸の断片からなる、アミノ酸配列である;各Lは、随意のリンカーアミノ酸配列である;Aは、随意のN末端アミノ酸配列である;およびBは、随意のC末端アミノ酸配列である、免疫原性組成物。請求項1~11のいずれか1項の組成物であって、担体タンパク質に結合体化された、髄膜炎菌血清群類A、C、W135および/またはYからの莢膜サッカライドをさらに含む、組成物。請求項1~12のいずれか1項の組成物であって、担体タンパク質に結合体化された肺炎球菌莢膜サッカライドをさらに含む、組成物。fHbpのファミリーIは、株MC58を含み、それは最初のゲノム配列公開[9]のために使用された株であり、およびBAA335としてATCCから入手できる。fHbpについてのMC58配列は、本明細書において配列番号:1であり、成熟した髄膜炎菌タンパク質のN末端のシステインにて始まる配列番号:26に示してある。ファミリーIはまた、株M01573を含み[5]、その配列は本明細書において配列番号:23であるB01またはCDC1573配列ともいわれる;データベース登録GI:40353481を参照されたい。配列番号:23および26は、下で整列してある。M01573fHbp配列は、ヒトワクチンにおける使用のために提唱されるが[10]、株MC58からのfHbpとのその緊密な配列関係にもかかわらず、本発明者らは、M01573配列に対して生じた血清が、MC58株に対して不十分な防御を提供することを見いだした。MC58は、広まっているファミリーI株の少なくとも30を代表するため、したがって、M01573配列はファミリーIの不十分な適用範囲を提供する。本発明の目的は、この不十分な適用範囲に対処し、かつ複数のファミリーからのfHbp抗原を含む、さらなるおよび改善されたワクチン組成物を提供することである。幅広い点において、この目的は、2つの方法で達成される:第1の側面において、fHbpに基づいたワクチンは、2つのファミリーIfHbp配列を含み、一方はM01573配列番号:23より密接にMC58配列番号:1に関連があり、および他方はその逆である。したがって、本発明は、第1のfHbp抗原および第2のfHbp抗原を含む免疫原性組成物を提供し、第1のfHbp抗原は、配列番号:23より密接に配列番号:1に関連があるアミノ酸配列を含み;および第2のfHbp抗原は、配列番号:1より密接に配列番号:23に関連があるアミノ酸配列を含む。以下により詳しく述べるように、この免疫原性組成物は、これらの2つのfHbp抗原に加えてさらなる抗原成分を含むことができる。第2の側面において、複数のファミリーのfHbpに基づいたワクチンは、M01573より密接にMC58に関連があるファミリーI配列を、ファミリーIII配列たとえば株M01240320からの配列番号:25と組み合わせて使用する。したがって、本発明は、第1のfHbp抗原および第2のfHbp抗原を含む免疫原性組成物を提供し、第1のfHbp抗原は、配列番号:23より密接に配列番号:1に関連があるアミノ酸配列を含み;および第2のfHbp抗原は、以下のアミノ酸配列を含む:i配列番号:25に対し少なくともwの配列同一性を有する、および/またはii配列番号:25から少なくともx個の連続したアミノ酸の断片からなる。wの値は、少なくとも94たとえば95、96、97、98、99またはそれ以上である。xの値は、a少なくとも50、たとえば55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、110、120、130、140、150、160、180、200またはb少なくとも7たとえば8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、60、70、80、90、100、120、140、160、180、200のいずれかであり、ただし、上記断片はまた、配列番号:2および/または配列番号:3の断片でない。第1および第2のfHbp抗原は、異なるアミノ酸配列を有する。以下により詳しく述べるように、この免疫原性組成物はこれらの2つのfHbp抗原に加えてさらなる抗原成分を含むことができるが、好ましくは、配列番号:23に対して≧95の同一性のアミノ酸配列を含むfHbp抗原を含まない。本発明の免疫原性組成物は、アジュバントされる。アジュバントは、アルミニウムホスフェート塩を含む下記を参照されたい。H因子結合タンパク質群本発明の組成物は、少なくとも2つの異なる髄膜炎菌H因子結合タンパク質fHbpを含み、異なった免疫応答を生じ、それは完全には交差反応性でなく、およびそれは髄膜炎菌に対して単一のfHbp単独よりも広い範囲の株適用範囲を提供する。本発明の第1の側面において、組成物は、2つのファミリーIfHbp抗原配列を含む。これらの第1のものは、M01573より密接にMC58に関連がある;第2は、MC58より密接にM01573に関連がある。本発明の側面において、組成物は、M01573より密接にMC58に関連があるfHbpを含む。fHbp抗原配列は、以下の基準の1つまたは複数を満たす場合、M01573より密接にMC58に関連があると定義してもよい:a配列番号:1を含む野生型髄膜炎菌fHbpを認識するが、同じ結合条件下で、配列番号:4を含む野生型髄膜炎菌fHbpを認識しない抗体をマウスにおいて誘発することができる[NB:それは、両方の配列番号:1および4を認識するいくつかの抗体を誘発してもよい]。b血清殺菌アッセイにおいて株MC58に対して殺菌性である抗体をマウスにおいて誘発することができる;たとえば、ヒト補体でゴールドシュナイダーGoldschneiderアッセイを使用して≧1:4の血清殺菌力価を提供する[1112、13]、および/または仔ウサギの補体を使用して≧1:128の血清殺菌力価を提供する。c配列番号:1および配列番号:23の両方に、少なくとも75の配列同一性を有するが、同じアルゴリズムおよびパラメーターを使用して整列させたとき配列番号:23よりも配列番号:1に対しより高い配列同一性を有する。d配列番号:27~37としてリストされた6merの1つまたは複数を含む。NB:配列番号:27~34の6merは、配列において重複してもよい:および配列番号:36および37の6merは、配列において重複してもよい。e配列番号:1と整列させたときに、配列番号:1のAla2と整列されるアミノ酸残基にスレオニン残基を有しないおよび好ましくは、アラニン残基を有する。f配列番号:1と整列させたときに、配列番号:1のGly141と整列されるアミノ酸残基にバリン残基を有しないおよび好ましくは、グリシン残基を有する。これらの6つの基準の中で、配列は、好ましくは少なくとも基準bまたはc、より好ましくは少なくともbおよびc、さらにより好ましくは少なくともa、bおよびc、並びに最も好ましくは6つ全てを満たす。第1の側面については、fHbp抗原配列は、以下の基準の1つまたは複数を満たす場合、MC58より密接にM01573に関連があると定義してもよい:a配列番号:4を含む野生型髄膜炎菌fHbpを認識するが、同じ結合条件下で、配列番号:1を含む野生型髄膜炎菌fHbpを認識しない抗体をマウスにおいて誘発することができる[NB:それは、両方の配列番号:1および4を認識するいくつかの抗体を誘発してもよい]。b血清殺菌アッセイにおいて株MC58に対して殺菌性でない抗体をマウスにおいて誘発する;たとえば、ヒト補体でゴールドシュナイダーアッセイを使用して≦1:4の血清殺菌力価を提供する[1113]、および/または仔ウサギの補体を使用して≦1:128の血清殺菌力価を提供する。c配列番号:1および配列番号:23の両方に、少なくとも75の配列同一性を有するが、同じアルゴリズムおよびパラメーターを使用して整列させたとき配列番号:1よりも配列番号:23に対しより高い配列同一性を有する。d配列番号:38~48としてリストされた6merの1つまたは複数を含む。NB:配列番号:38~45の6merは、配列において重複してもよい:および配列番号:47および48の6merは、配列において重複してもよい。e配列番号:1と整列させたときに、配列番号:1のAla2と整列されるアミノ酸残基にスレオニン残基を有する。f配列番号:1と整列させたときに、配列番号:1のGly141と整列されるアミノ酸残基にバリン残基を有する。これらの6つの基準の中で、配列は、好ましくは少なくとも基準aまたはc、より好ましくは少なくともaおよびc、さらにより好ましくは少なくともa、bおよびc、並びに最も好ましくは6つ全てを満たす。本発明の第2の側面については、第2のfHbp抗原は、以下のアミノ酸配列を含む:i配列番号:25に対し少なくともwの配列同一性を有する、および/またはii配列番号:25から少なくともx個の連続したアミノ酸の断片からなる。wの値は、少なくとも94たとえば95、96、97、98、99またはそれ以上である。xの値は、a少なくとも50、たとえば55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、110、120、130、140、150、160、180、200またはb少なくとも7たとえば8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、60、70、80、90、100、120、140、160、180、200のいずれかであり、ただし、上記断片はまた、配列番号:2および/または配列番号:3の断片でない。好ましい断片は、配列番号:25からのエピトープを含む。M01573より密接にMC58に関連がある、もしくはその逆である、または配列番号:25に対し≧94の同一性を持つ配列および/または配列番号:25の断片を含む、fHbp配列は、これらの公知の配列に基づいて設計することができ、または当該技術分野において報告されていた多数の野生型fHbp配列から選択することができ、たとえば参照文献18および1415、16、17、18、19を参照されたい。本発明で使用される適したアミノ酸配列は、配列番号:1および23と比較して、1つまたは複数たとえば1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、その他の保存的アミノ酸置換、すなわち1つのアミノ酸における、関連する側鎖を有する別のものへの交換を含んでもよい。遺伝的にコードされたアミノ酸は、一般に4つのファミリーに分けられる:1酸性、すなわちアスパルテート、グルタマート;2塩基性、すなわちリジン、アルギニン、ヒスチジン;3非極性、すなわちアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン;および4極性無電荷、すなわちグリシン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セリン、スレオニン、チロシン。フェニルアラニン、トリプトファンおよびチロシンは、合わせて芳香族アミノ酸として時には分類される。一般には、これらのファミリーの中での単一のアミノ酸の置換は、生物学的活性に対して大きな影響を与えない。抗原は、参照配列に対して1つまたは複数たとえば1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、その他の単一のアミノ酸欠失を有してもよい。抗原はまた、参照配列に対して1つまたは複数たとえば1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、その他の挿入たとえばそれぞれ1、2、3、4または5アミノ酸を含んでもよい。本発明の組成物は、2つの異なるfHbp配列のみを含むことができ、または2つを超える異なるfHbp配列を含むことができる。たとえば、第1の側面の組成物は、上述した2つのfHbp配列を超えてさらなるfHbp配列を含んでもよいし、または含まなくてもよく、たとえばファミリーIIから、および/またはファミリーIIIからのfHbp配列、たとえば本明細書において配列番号:2および/または配列番号:3を含んでもよい。したがって、組成物は、二価のfHbp組成物でもよく、またはたとえば、三価または四価のfHbp組成物での2つを超える異なるfHbp配列を含んでもよい。第1の側面の組成物は、2つのファミリーIfHbp配列を含み、および理想的にはファミリーIIおよび/またはファミリーIIIからもまたfHbp配列を含む。有用には、それは、以下のアミノ酸配列を含むfHbp抗原を含有する:i配列番号:25に対し少なくともwの配列同一性を有する、および/またはii配列番号:25から少なくともx個の連続したアミノ酸の断片からなる。wおよびxの値は上で示してあり、および好ましい断片は配列番号:25からのエピトープを含む。このようなfHbp抗原第2の側面の組成物においてもまた存在するは、血清殺菌アッセイにおいて株9615945に対して殺菌性である抗体をマウスにおいて誘発してもよい;たとえば、ヒト補体でゴールドシュナイダーアッセイを使用して≧1:4の血清殺菌力価を提供する[1113]、および/または仔ウサギの補体を使用して≧1:128の血清殺菌力価を提供する。株9615945は、文献において広く報告されておりたとえば、参照文献1、2および2021、22、23、24、25、26を参照されたい。、およびナイセリアNeisseriaPubMLSTコレクションから、分離株MDU9615945、id1002として入手できる。それは、電気泳動型A4およびMLST型153のB2bP12116株である。そのfHbp配列は、参照文献23、GI:106073476において与えられる。したがって、第1の側面の組成物は、以下を含んでもよい:i上記記載の通り第1および第2のfHbp抗原、およびii以下のアミノ酸配列を含む第3のfHbp抗原:i配列番号:25に対し少なくともwの配列同一性を有する、および/またはii配列番号:25から少なくともx個の連続したアミノ酸の断片からなる。第2の側面の組成物は、上で開示したように、2つの異なるfHbp抗原を含む。組成物は、第3のfHbp抗原を含んでもよいが、いずれにしろ組成物が以下を含まないことが好ましい:i配列番号:23に対し>95の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む抗原、またはii配列番号:24に対し>95の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む抗原。本発明の組成物におけるfHbp抗原は、たとえばN末端システインにて、脂質付加されてもよい。しかし、その他の態様において、fHbp抗原群は、脂質付加されない。脂質付加されたfHbpについて、システインに付着される脂質は、通常、たとえばトリパルミトイルSグリセリルシステインPam3Cys、ジパルミトイルSグリセリルシステインPam2Cys、NアセチルジパルミトイルSグリセリルシステイン、その他のように、パルミトイル残基を含むだろう。脂質付加された成熟fHbp配列の例は、配列番号:23配列番号:4を含む、配列番号:24配列番号:5を含むおよび配列番号:25配列番号:6を含むである。組成物が異なる髄膜炎菌fHbp抗原を含む場合、これらは別々のポリペプチドたとえば第1および第2のポリペプチドとして存在してもよく、またはこれらは単一のハイブリッドポリペプチドの一部として存在してもよく、すなわちその場合には、参照文献27において髄膜炎菌抗原について開示されるように、少なくとも2つたとえば2、3、4、5またはそれ以上のfHbp抗原が単一のポリペプチド鎖融合タンパク質として発現される。ハイブリッドポリペプチドは、式NH2A{XL}nBCOOHによって表すことができ、式中、各Xは、上に定義したとおり、異なるfHbp抗原のアミノ酸配列である;Lは、随意のリンカーアミノ酸配列である;Aは、随意のN末端アミノ酸配列である;Bは、随意のC末端アミノ酸配列である;nは、2つ以上たとえば2、3、4、5、6、その他の整数である。通常、nは、2または3である。X部分がその野生型形態におけるリーダーペプチド配列を有する場合、これはハイブリッドタンパク質において含まれてもよいし、または省略されてもよい。いくつかの態様において、リーダーペプチドは、ハイブリッドタンパク質のN末端に位置するX部分のもの以外は欠失されるだろう、すなわち、X1のリーダーペプチドは保持されるが、X2...Xnのリーダーペプチドは省略されるだろう。これは、全てのリーダーペプチドを欠失させて、部分AとしてX1のリーダーペプチドを使用することに等しい。{XL}の各nの例について、リンカーアミノ酸配列Lは、存在するか、または存在しなくてもよい。例として、n2のとき、ハイブリッドは、NH2X1L1X2L2COOH、NH2X1X2COOH、NH2X1L1X2COOH、NH2X1X2L2COOH、その他であってもよい。リンカーアミノ酸配列群Lは、典型的には短いだろうたとえば20以下のアミノ酸、すなわち20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1。例には、クローニングを容易にする短いペプチド配列、ポリグリシンリンカーすなわちGlynであって、n2、3、4、5、6、7、8、9、10またはそれ以上を含むおよびヒスチジンタグすなわちHisnであって、n3、4、5、6、7、8、9、10またはそれ以上を含む。その他の適したリンカーアミノ酸配列は、当業者にとって明らかだろう。有用なリンカーは、GSGGGG配列番号:15またはGSGSGGGG、配列番号:16であり、BamHI制限酵素切断部位から形成されるGlySerジペプチドを持ち、したがってクローニングおよび操作を補助し、およびGly4テトラペプチドは典型的なポリグリシンリンカーである。別の適したリンカーは、特に最終的なLnとしての使用のために、LeuGluジペプチドである。Aは、随意のN末端アミノ酸配列である。これは、典型的には短いだろうたとえば40以下のアミノ酸、すなわち40、39、38、37、36、35、34、33、32、31、30、29、28、27、26、25、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1。例には、タンパク質輸送に向かわせるためのリーダー配列、またはクローニングもしくは精製を容易にする短いペプチド配列たとえばヒスチジンタグ、すなわちHisnであって、n3、4、5、6、7、8、9、10またはそれ以上を含む。その他の適したN末端アミノ酸配列は、当業者にとって明らかだろう。X1がそれ自体のN末端メチオニンを欠いている場合、Aは好ましくは、N末端メチオニンを提供するオリゴペプチドたとえば1、2、3、4、5、6、7または8アミノ酸、たとえばMetAlaSerまたは単一のMet残基である。Bは、随意のC末端アミノ酸配列である。これは、典型的には短いだろうたとえば40以下のアミノ酸、すなわち39、38、37、36、35、34、33、32、31、30、29、28、27、26、25、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1。例には、タンパク質輸送に向かわせるための配列、クローニングもしくは精製を容易にする短いペプチド配列たとえばヒスチジンタグ、すなわちHisnであって、n3、4、5、6、7、8、9、10またはそれ以上、配列番号:17などまたはタンパク質安定性を増強する配列を含む。その他の適したC末端アミノ酸配列は、当業者にとって明らかだろう。第1および第2の側面の好ましい組成物は、配列番号:25に対し少なくとも99の配列同一性たとえば100の同一性を有するアミノ酸配列を含むfHbp抗原を含む。これは、第1の側面における第3の抗原および第2の側面における第2の抗原であることができる。この抗原は、N末端システインを持つリポタンパク質であることができる。アジュバント上述したように、本発明の組成物は、アジュバントされている。組成物は、アルミニウムホスフェートとして公知のアジュバントを含む。この名前は、慣習的であるが、便宜のためにだけ使用され、実際には存在する実際の化学的化合物の正確な記述でないたとえば、参照文献28の第9章を参照されたい。本発明は、一般的な使用におけるホスフェートアジュバントのいずれかを使用することができる。アルミニウムホスフェートとして公知のアジュバントは、典型的にはアルミニウムヒドロキシホスフェートであり、たいてい少量のサルフェートをもまた含有するすなわちアルミニウムヒドロキシホスフェートサルフェート。これらは沈澱によって得られてもよく、および沈澱の間の反応条件および濃度は、塩におけるヒドロキシルに対するホスフェートの置換度に影響する。アルミニウムホスフェートは、一般に03~12のPO4Alモル比を有する。アルミニウムホスフェートは、ヒドロキシル基の存在によって、厳密なAlPO4から区別することができる。たとえば、3164cm1でのIRスペクトルバンドたとえば200°Cまで加熱されるときは、構造的なヒドロキシルの存在を示す。アルミニウムホスフェートアジュバントは、少量のサルフェートを含有してもよくすなわちアルミニウムヒドロキシホスフェートサルフェート、並びにナトリウムおよび/または塩化物イオンをもまた含有してもよい[29]。アジュバントは、沈澱によって得られてもよい。アルミニウムヒドロキシホスフェートは、化学量論的な化合物ではなく、並びにそのヒドロキシルおよびホスフェート組成は、沈澱反応物および条件に依存する。このヒドロキシルホスフェート組成は、アジュバントのゼロ電荷点PZC;表面がゼロの正味電荷を有するpHに影響を及ぼす。PZCは、ヒドロキシルに対するホスフェートの置換度PAlモル比に反比例する。ヒドロキシルアニオンに対するホスフェートアニオンの置換は、PZCを低下させる。したがって、PZCは、溶液における遊離型リン酸イオンの濃度を変えることによってより多くのホスフェートより酸性のPZC、またはヒスチジン緩衝液などの緩衝液を添加することによってPZCをより塩基性にする、変化させることができる。本発明で使用するアルミニウムホスフェートは、一般に50~66、たとえば54~62のPZCを有する。アルミニウムホスフェートアジュバントのPAlモル比は、一般に03~12、好ましくは08~12、または085~10、およびより好ましくは、約09であるだろう。少なくとも05のPAlモル比は、熟成特性がより優れたアジュバントを提供することができる。アルミニウムホスフェートは、一般に非晶質だろうすなわちX線に対し非晶質。それは一般に粒子だろうたとえば透過型電子顕微鏡写真に示されるように板状形態。プレートの典型的な直径は10100nmであり、およびこれらは0520μmたとえば約110μmの大きさの凝集体を形成する。pH74にてmgAl当たり0715mgタンパク質の吸着能力は、アルミニウムホスフェートアジュバントについて報告されている。典型的なアジュバントは、084~092のPAlモル比を持つ非晶質のアルミニウムヒドロキシホスフェートであり、およびこのアジュバントは06mgAl3mlにて含有されてもよい。患者に対する投与のための組成物におけるAlの濃度は、好ましくは5mgml未満であり、たとえば≦4mgml、≦3mgml、≦2mgml、≦1mgml、その他である。好ましい範囲は、02~1mgmlである。最大Al濃度085mg用量が好ましい。単一のワクチンにおいて異なるアルミニウム塩の混合物を使用することが公知であり、たとえば参照文献30を参照されたい。アルミニウムホスフェートおよび水酸化アルミニウムの両方を含有するアジュバントをfHbpと使用することができるが、組成物が任意の水酸化アルミニウムアジュバントを含むべきでないことが好ましく、なぜなら上記の通り、それがfHbpと混合してもよい一定の抗原を分解することができるからである特に、結合体化された細菌莢膜サッカライド。その代わりに、アルミニウムホスフェートアジュバントのみを使用することが好ましい。アルミニウム塩群がアジュバントとして使用されるとき、本発明の組成物において少なくとも75重量でのfHbpが、アルミニウム塩に、たとえば≧80、≧75、≧90、≧95またはさらに100吸着されるべきである。吸着されるfHbpの比率は、製剤の間の塩濃度および/またはpHを変化させることによって制御することができ、たとえば一般に、NaCl濃度が高いほどfHbpの吸着を減少させることができる。任意の製剤のための吸着量は、アジュバントのPZC、製剤の間の塩濃度およびpH、アジュバント濃度、抗原濃度、並びに抗原のpIを含むパラメーターの組み合わせに依存するだろう。吸着に対する各々のこれらのパラメーターの影響は、容易に評価することができる。吸着の程度は、組成物におけるfHbp抗原の総量たとえば吸着が生じる前に測定される、または吸着された抗原を脱着することによって測定されるを遠心分離後の上清に残る量と比較することによって、決定することができるたとえば参照文献31の第4章を参照されたい。遠心分離後の上清における検出可能な抗原の非存在は、完全な吸着が生じたこと、すなわちfHbpの全てがペレットにあり、ペレットは不溶性アジュバントおよびその吸着された内容物を含有することを示す。fHbp抗原の効率的な吸着は、参照文献32に開示された技術を使用することができる。さらなる抗原群fHbp抗原群に加えて、本発明の組成物は、髄膜炎菌からの、またはその他の病原体からの、たとえば肺炎球菌などのその他の細菌からの、さらなる抗原を含むことができる。さらなる髄膜炎菌ポリペプチド抗原髄膜炎菌fHbp抗原を含むことに加えて、組成物は、1つまたは複数のさらなる髄膜炎菌ポリペプチド抗原群を含んでいてもよい。したがって、組成物は、以下からなる群より選択されるポリペプチド抗原を含んでもよい:287、NadA、NspA、HmbR、NhhA、Appおよび/またはOmp85。これらの抗原は、精製したポリペプチド、たとえば組換えポリペプチドとして、有用に存在するだろう。抗原は、好ましくは被験体に投与した後に殺菌抗髄膜炎菌抗体を誘発するだろう。組成物がPorA抗原を含む場合、いくつかの態様において、1つの髄膜炎菌PorA血清サブタイプのみが含まれる。いくつかの態様において、髄膜炎菌PorA外膜タンパク質は、組成物に含まれない。本発明の組成物は、287抗原を含んでもよい。287抗原は、遺伝子NMB2132GenBankアクセッション番号GI:7227388;本明細書において配列番号:9として、髄膜炎菌血清群B株MC58[9]について公開されたゲノム配列に含まれていた。多くの株からの287抗原の配列が、それ以来公開されてきた。たとえば、287の対立遺伝子の形態は、参照文献33の図5および15において、並びに参照文献34その中において配列番号3179~3184の実施例13および図21において参照することができる。287抗原の種々の免疫原性の断片もまた報告されてきた。本発明で使用するための好ましい287抗原は、以下のアミノ酸配列を含む:a配列番号:9に対し50またはそれ以上の同一性を有するたとえば60、65、70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、995またはそれ以上;および/またはb配列番号:9の少なくともn個の連続したアミノ酸の断片を含み、nは7またはそれ以上であるたとえば8、10、12、14、16、18、20、25、30、35、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250またはそれ以上。bの好ましい断片は、配列番号:9からのエピトープを含む。本発明で最も有用な287抗原は、被験体に投与した後に配列番号:9のアミノ酸配列からなる髄膜炎菌ポリペプチドに結合することができる抗体を誘発することができる。本発明で使用するための有利な287抗原は、被験体に投与した後に殺菌抗髄膜炎菌抗体を誘発することができる。本発明の組成物は、NadA抗原を含んでもよい。NadA抗原は、遺伝子NMB1994GenBankアクセッション番号GI:7227256;本明細書において配列番号:10として、髄膜炎菌血清群B株MC58[9]について公開されたゲノム配列に含まれていた。多くの株からのNadA抗原の配列が、それ以来公開されており、ナイセリアのNeisserial付着因子としてのタンパク質の活性がよく考証されてきた。NadAの種々の免疫原性の断片もまた報告されてきた。本発明で使用するための好ましいNadA抗原は、以下のアミノ酸配列を含む:a配列番号:10に対し50またはそれ以上の同一性を有するたとえば60、65、70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、995またはそれ以上;および/またはb配列番号:10の少なくともn個の連続したアミノ酸の断片を含み、nは7またはそれ以上であるたとえば8、10、12、14、16、18、20、25、30、35、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250またはそれ以上。bの好ましい断片は、配列番号:10からのエピトープを含む。本発明で最も有用なNadA抗原は、被験体に投与した後に配列番号:10のアミノ酸配列からなる髄膜炎菌ポリペプチドに結合することができる抗体を誘発することができる。本発明で使用するための有利なNadA抗原は、被験体に投与した後に殺菌抗髄膜炎菌抗体を誘発することができる。本発明で使用するための有用なNadA抗原は、配列番号:49のアミノ酸配列を有する。本発明の組成物は、NspA抗原を含んでもよい。NspA抗原は、遺伝子NMB0663GenBankアクセッション番号GI:7225888;本明細書において配列番号:11として、髄膜炎菌血清群B株MC58[9]について公開されたゲノム配列に含まれていた。抗原は、参照文献35および36により以前に公知であった。多くの株からのNspA抗原の配列がそれ以来公開されてきた。NspAの種々の免疫原性の断片もまた報告されてきた。本発明で使用するための好ましいNspA抗原は、以下のアミノ酸配列を含む:a配列番号:11に対し50またはそれ以上の同一性を有するたとえば60、65、70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、995またはそれ以上;および/またはb配列番号:11の少なくともn個の連続したアミノ酸の断片を含み、nは7またはそれ以上であるたとえば8、10、12、14、16、18、20、25、30、35、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250またはそれ以上。bの好ましい断片は、配列番号:11からのエピトープを含む。本発明で最も有用なNspA抗原は、被験体に投与した後に配列番号:11のアミノ酸配列からなる髄膜炎菌ポリペプチドに結合することができる抗体を誘発することができる。本発明で使用するための有利なNspA抗原は、被験体に投与した後に殺菌抗髄膜炎菌抗体を誘発することができる。本発明の組成物は、髄膜炎菌HmbR抗原を含んでもよい。全長HmbR配列は、遺伝子NMB1668本明細書において配列番号:7として、髄膜炎菌血清群B株MC58[9]について公開されたゲノム配列に含まれていた。参照文献37は、異なる株からのHmbR配列を報告する本明細書において配列番号:8。配列番号:7および8は、1つのアミノ酸だけ長さが異なり、および942の同一性を有する。本発明は、全長HmbR配列を含むポリペプチドを使用することができるが、たいてい部分的なHmbR配列を含むポリペプチドを使用するだろう。したがって、いくつかの態様において、本発明に従って使用されるHmbR配列は、配列番号:7に対し少なくともiの配列同一性を有するアミノ酸配列であって、iの値は、50、60、70、80、90、95、99またはそれ以上であるアミノ酸配列を含んでもよい。その他の態様において、本発明に従って使用されるHmbR配列は、配列番号:7の少なくともj個の連続したアミノ酸の断片であって、jの値は、7、8、10、12、14、16、18、20、25、30、35、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250またはそれ以上である、断片を含んでもよい。その他の態様において、本発明に従って使用されるHmbR配列は、以下のアミノ酸配列を含んでもよいi配列番号:7に対し少なくともiの配列同一性を有する、および/またはii配列番号:7の少なくともj個の連続したアミノ酸の断片を含む。j個のアミノ酸の好ましい断片は、配列番号:7からのエピトープを含む。このようなエピトープは、HmbRの表面に位置されるアミノ酸を通常含むだろう。有用なエピトープは、ヘモグロビンに対するHmbRの結合に関与するアミノ酸を有するものを含む。なぜなら、これらのエピトープに結合する抗体が宿主ヘモグロビンに結合するための細菌の能力を遮断することができるためである。HmbRのトポロジーおよびその重要な官能残基は、参照文献38において調査された。本発明で最も有用なHmbR抗原は、被験体に投与した後に配列番号:7のアミノ酸配列からなる髄膜炎菌ポリペプチドに結合することができる抗体を誘発することができる。本発明で使用するための有利なHmbR抗原は、被験体に投与した後に殺菌抗髄膜炎菌抗体を誘発することができる。本発明の組成物は、NhhA抗原を含んでもよい。NhhA抗原は、遺伝子NMB0992GenBankアクセッション番号GI:7226232;本明細書において配列番号:12として、髄膜炎菌血清群B株MC58[9]について公開されたゲノム配列に含まれていた。多くの株からのNhhA抗原の配列は、たとえば参照文献33および39から公開されており、およびNhhAの種々の免疫原性の断片が報告されてきた。それは、Hsfとしても知られる。本発明で使用するための好ましいNhhA抗原は、以下のアミノ酸配列を含む:a配列番号:12に対し50またはそれ以上の同一性を有するたとえば60、65、70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、995またはそれ以上;および/またはb配列番号:12の少なくともn個の連続したアミノ酸の断片を含み、nは7またはそれ以上であるたとえば8、10、12、14、16、18、20、25、30、35、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250またはそれ以上。bの好ましい断片は、配列番号:12からのエピトープを含む。本発明で最も有用なNhhA抗原は、被験体に投与した後に配列番号:12のアミノ酸配列からなる髄膜炎菌ポリペプチドに結合することができる抗体を誘発することができる。本発明で使用するための有利なNhhA抗原は、被験体に投与した後に殺菌抗髄膜炎菌抗体を誘発することができる。本発明の組成物は、App抗原を含んでいてもよい。App抗原は、遺伝子NMB1985GenBankアクセッション番号GI:7227246;本明細書において配列番号:13として、髄膜炎菌血清群B株MC58[9]について公開されたゲノム配列に含まれていた。多くの株からのApp抗原の配列がそれ以来公開されてきた。Appの種々の免疫原性の断片もまた報告されてきた。本発明で使用するための好ましいApp抗原は、以下のアミノ酸配列を含む:a配列番号:13に対し50またはそれ以上の同一性を有するたとえば60、65、70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、995またはそれ以上;および/またはb配列番号:13の少なくともn個の連続したアミノ酸の断片を含み、nは7またはそれ以上であるたとえば8、10、12、14、16、18、20、25、30、35、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250またはそれ以上。bの好ましい断片は、配列番号:13からのエピトープを含む。本発明で最も有用なApp抗原は、被験体に投与した後に配列番号:13のアミノ酸配列からなる髄膜炎菌ポリペプチドに結合することができる抗体を誘発することができる。本発明で使用するための有利なApp抗原は、被験体に投与した後に殺菌抗髄膜炎菌抗体を誘発することができる。本発明の組成物は、Omp85抗原を含んでもよい。Omp85抗原は、遺伝子NMB0182GenBankアクセッション番号GI:7225401;本明細書において配列番号:14として、髄膜炎菌血清群B株MC58[9]について公開されたゲノム配列に含まれていた。多くの株からのOmp85抗原の配列が、それ以来公開されてきた。Omp85のさらなる情報は、参照文献40および41において見いだすことができる。Omp85の種々の免疫原性の断片もまた報告されてきた。本発明で使用するための好ましいOmp85抗原は、以下のアミノ酸配列を含む:a配列番号:14に対し50またはそれ以上の同一性を有するたとえば60、65、70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、995またはそれ以上;および/またはb配列番号:14の少なくともn個の連続したアミノ酸の断片を含み、nは7またはそれ以上であるたとえば8、10、12、14、16、18、20、25、30、35、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250またはそれ以上。bの好ましい断片は、配列番号:14からのエピトープを含む。本発明で最も有用なOmp85抗原は、被験体に投与した後に配列番号:14のアミノ酸配列からなる髄膜炎菌ポリペプチドに結合することができる抗体を誘発することができる。本発明で使用するための有利なOmp85抗原は、被験体に投与した後に殺菌抗髄膜炎菌抗体を誘発することができる。髄膜炎菌リポオリゴ糖髄膜炎菌fHbpポリペプチド抗原を含むことに加えて、組成物は、1つまたは複数の髄膜炎菌リポオリゴ糖LOS抗原群を含んでもよい。髄膜炎菌LOSは、細菌の外膜の外側の単層において見いだされるグルコサミンに基づいたリン脂質である。それは、リピドA部分およびコアオリゴ糖領域を含み、リピドA部分が膜における疎水性アンカーとして作用する。オリゴ糖コアの中の不均質性は、異なる髄膜炎菌株の中の構造的および抗原性の多様性を生じ、それは12の免疫型L1からL12に株を細分化するために使用されてきた。本発明は、任意の免疫型からの、たとえばL1、L2、L3、L4、L5、L6、L7および/またはL8からのLOSを使用してもよい。L2およびL3のα鎖は、ラクトNネオテトラオースLNnTを天然に含む。本発明がL2またはL3免疫型からのLOSを使用する場合、このLNnTは存在しなくてもよい。この不存在は、α鎖の中でLNnT四糖を合成するためのこれらの能力を破壊するように操作された変異株を使用することによって、都合よく達成することができる。関連する生合成付加を担う酵素のノックアウトによってこの目標を達成することが公知である42、43]。例として、LgtB酵素のノックアウトは、LNnTの末端ガラクトースの付加を妨げ、同様に下流のα鎖の末端シアル酸の付加を妨げる。LgtA酵素のノックアウトは、LNnTのNアセチルグルコサミンの付加およびまた下流の付加を妨げる。LgtAノックアウトは、LgtCノックアウトが付随し得る。同様に、LgtEおよび/またはGalE酵素のノックアウトは、内部ガラクトースの付加を妨げ、およびLgtFのノックアウトはHepI残基へのグルコースの付加を妨げる。これらのノックアウトのいずれかを、単独でまたは組み合わせて、L2、L3、L4、L7またはL9免疫型株におけるLNnT四糖を破壊するために使用することができる。LNnTエピトープを取り除くと共に有用な免疫原性を保持するLOSを提供するため、少なくともLgtBのノックアウトが好ましい。LNnTエピトープを破壊する変異に加えて、またはこれに代えて、galE遺伝子のノックアウトもまた有用な修飾されたLOSを提供し、およびリピドA脂肪トランスフェラーゼ遺伝子は同様にノックアウトしてもよい[44]。少なくとも1つの一次O結合型の脂肪酸をLOSから除去してもよい[45]。LOS分子当たりの二次アシル鎖の数が減少したLOSもまた使用することができる[46]。LOSは、典型的には少なくともGlcNAcHep2ホスホエタノールアミンKDO2リピドA構造を含むだろう[47]。LOSは、LNnT四糖を欠くと共にGlcNAcβ13Galβ14Glc三糖を含んでもよい。LOSは、種々の形態において本発明の組成物に含まれてもよい。それは、精製した形態でそれ自体に対して使用してもよい。それは、担体タンパク質に結合体化されてもよい。LOSが結合体化されるとき、結合体化は、LOSにおけるリピドA部分を介して、または任意のその他の適した部分、たとえばそのKDO残基によってされてもよい。LOSのリピドA部分が不在である場合、このような代わりの架橋が必要とされる。LOSのための結合体化技術は、たとえば参照文献45、47、48、49、その他により公知である。これらの結合体のための有用な担体タンパク質、たとえばジフテリアもしくは破傷風毒素などの細菌毒素、またはそれらのトキソイドもしくは変異体を以下で考察してある。LOSは、参照文献50に記載されるように、固定されたすなわち可変性の相でないLOS免疫型を有する株たとえば遺伝的に操作された髄膜炎菌株由来であってもよい。たとえば、L2およびL3LOS免疫型は、固定されてもよい。このような株は、本来の野生型菌株に対して2倍を超えて>50倍さえ減少した、免疫型間で切り替わる割合を有してもよい。参照文献50は、lgtAおよび/またはlgtG遺伝子産物の修飾によって、この結果がどのように達成することができるかについて開示する。LOSは、たとえばL3について、そのHeptoseII残基に付着されたGlcNac残基においてOアセチル化されてもよい[51]。免疫原性組成物は、LOS、たとえば髄膜炎菌免疫型L2およびL3由来のLOSの複数のタイプを含むことができる。たとえば、参照文献52において開示されるLOSの組み合わせを使用してもよい。LOS抗原は、好ましくは被験体に投与した後に殺菌抗髄膜炎菌抗体を誘発することができる。しかし、本発明の好ましい組成物は、髄膜炎菌リポオリゴ糖がない。髄膜炎菌莢膜サッカライド抗原髄膜炎菌fHbp抗原を含むことに加えて、組成物は、1つまたは複数の髄膜炎菌莢膜サッカライド結合体を含んでもよい。本発明の組成物は、髄膜炎菌血清群A、C、W135およびYの1、2、3、または4つ、たとえばAC、AW135、AY、CW135、CY、W135Y、ACW135、ACY、AW135Y、ACW135Y、その他からの莢膜サッカライドの1つまたは複数の結合体を含んでもよい。結合体化された血清群C莢膜サッカライドを含む組成物は有用であり、および血清群A、C、W135およびYの全てからのサッカライドを含む組成物は理想的である。血清群A髄膜炎菌の莢膜サッカライドは、C3およびC4位置における部分的なOアセチル化を持つ、α1→6結合NアセチルDマンノサミン1ホスフェートのホモポリマーである。C3位置におけるアセチル化は、7095であることができる。サッカライドを精製するために使用する条件は脱Oアセチル化を生じ得るがたとえば塩基性条件下で、このC3位置にてOAcを保持することは有用である。いくつかの態様において、血清群Aサッカライドにおけるマンノサミン残基の少なくとも50たとえば少なくとも60、70、80、90、95またはそれ以上が、C3位置にてOアセチル化される。アセチル基は加水分解を妨げるためにブロック基で置換することができ[53]、このような修飾されたサッカライドは、まだ本発明の意味の範囲内で血清群Aサッカライドである。血清群C莢膜サッカライドは、α2→9結合シアル酸Nアセチルノイラミン酸、すなわちNeuNAcのホモポリマーである。サッカライド構造は、以下のように書かれる:→9NeupNAc78OAcα2→。大部分の血清群C株は、シアル酸残基のC7および/またはC8にてOアセチル基を有するが、臨床分離株の約15はこれらのOアセチル基を欠いている54、55]。OAc基の有無は独特のエピトープを生じ、およびサッカライドに対する抗体結合の特異性は、Oアセチル化OAcおよび脱Oアセチル化OAc株に対するその殺菌活性に影響を及ぼし得る[56、57、58]。本発明で使用される血清群Cサッカライドは、OAcまたはOAc株のいずれかから調製してもよい。認可を受けたMenC結合体ワクチンは、OAcNEISVACC商標およびOAcMENJUGATE商標およびMENINGITEC商標サッカライドの両方を含む。いくつかの態様において、血清群C結合体の産生のための株は、OAc株、たとえば血清型16、血清サブタイプP17a1、その他である。したがって、C:16:P17a1OAc株を使用してもよい。血清サブタイプP11におけるOAc株もまた有用であり、C11株などである。血清群W135サッカライドは、シアル酸ガラクトース二糖ユニットのポリマーである。血清群Cサッカライドの様に、それは可変性のOアセチル化を有するが、シアル酸7および9位置においてである59]。構造は、以下のように書かれる:→4DNeup5Ac79OAcα2→6DGalα1→。血清群Yサッカライドは、二糖反復単位がガラクトースの代わりにグルコースを含むことを除き、血清群W135サッカライドに類似する。血清群W135の様に、それはシアル酸7および9位置にて可変性のOアセチル化を有する59]。血清群Y構造は、以下のように書かれる:→4DNeup5Ac79OAcα2→6DGlcα1→。本発明に従って使用されるサッカライドは、上記の通りにOアセチル化されてもよくたとえば天然の莢膜サッカライドに見られるものと同じOアセチル化パターンを持つ、またはこれらはサッカライド環の1つまたは複数の位置にて部分的にまたは完全に脱Oアセチル化されてもよく、またはこれらは天然の莢膜サッカライドに対して過剰にOアセチル化されてもよい。結合体におけるサッカライド部分は、髄膜炎菌から調製される全長サッカライドを含んでもよく、および/または全長サッカライドの断片を含んでもよく、すなわちサッカライドは細菌において見られる天然の莢膜サッカライドより短くてもよい。したがって、サッカライドは、解重合してもよく、解重合はサッカライド精製の間か後だが結合体化の前に生じる。解重合は、サッカライドの鎖長を減少させる。1つの解重合方法は、過酸化水素の使用を包含する。過酸化水素をサッカライドに添加したとえば1のH2O2終濃度を与える、および所望の鎖長の減少が達成されるまで、次いで混合物をインキュベートするたとえば約55°Cにて。別の解重合方法は、酸加水分解を包含する。その他の解重合方法は、当該技術分野において公知である。本発明に従って使用するための結合体を調製するために使用されるサッカライドは、これらの解重合方法のいずれかによって得られてもよい。解重合は、免疫原性に最適の鎖長を提供するために、および/またはサッカライドの物理的な扱いやすさのために鎖長を減少させるために、使用することができる。いくつかの態様において、サッカライドは、以下の平均重合度Dpの範囲を有する:A1020;C1222;W1351525;Y1525。Dpよりもむしろ、分子量の点で、全ての血清群のために有用な範囲は、以下である:<100kDa;5kDa75kDa;7kDa50kDa;8kDa35kDa;12kDa25kDa;15kDa22kDa。いくつかの態様において、それぞれの髄膜炎菌血清群A、C、W135およびYからのサッカライドの平均分子量は、50kDaを超えてもよく、たとえば≧75kDa、≧100kDa、≧110kDa、≧120kDa、≧130kDa、その他であり[60]、および特にMALLSによって決定されるように、最高1500kDaでさえもよい。例として:MenAサッカライドは、範囲50500kDa、たとえば6080kDaであってもよい;MenCサッカライドは、範囲100210kDaであってもよい;MenW135サッカライドは、範囲60190kDa、たとえば120140kDaであってもよい;および/またはMenYサッカライドは、範囲60190kDa、たとえば150160kDaであってもよい。組成物における血清群当たりの髄膜炎菌サッカライドの質量は、通常1μg~20μg、たとえば血清群当たり2~10μgまたは約4μgまたは約5μgまたは約10μgであるだろう。複数の血清群からの結合体が含まれる場合、これらは実質的に同等の質量にて存在してもよく、たとえば各血清群のサッカライドの質量は互いの10以内にある。同等の比率に代わるものとして、血清群Aサッカライドの倍の質量を使用してもよい。したがって、ワクチンは、10μgにてMenAサッカライドを、およびそれぞれ5μgにてMenC、W135およびYサッカライドを含んでもよい。髄膜炎菌結合体のための有用な担体タンパク質は、ジフテリアもしくは破傷風毒素などの細菌毒素またはそれらのトキソイドもしくは変異体を含む。これらは、結合体ワクチンにおいて一般に使用される。たとえば、CRM197ジフテリア毒素変異体は、有用である[61]。その他の適した担体タンパク質は、合成のペプチド[62、63]、熱ショックタンパク質[64、65]、百日咳タンパク質[66、67]、サイトカイン[68]、リンホカイン[68]、ホルモン[68]、成長因子[68]、種々の病原体由来抗原からの複数のヒトCD4T細胞エピトープを含む人工のタンパク質[69]、例えば、N19[70]、インフルエンザ菌Hinfluenzaeからのタンパク質D7172、73]、肺炎球菌産生毒素[74]またはその無毒の誘導体[75]、肺炎球菌表面タンパク質PspA[76]、鉄取り込みタンパク質[77]、クロストリジウムディフィシレCdifficileからの毒素AまたはB[78]、組換え緑膿菌Pseudomonasaeruginosaのエキソタンパク質ArEPA[79]、その他を含む。CRM197が好ましい。組成物が複数の髄膜炎菌血清群からの結合体を含む場合、それぞれ別々の結合体に同じ担体タンパク質を使用すること、または異なる担体タンパク質を使用することが可能である。しかし、両方の場合において、異なる結合体の混合物は、通常、以下によって形成されるだろう:別々に各血清型結合体を調製すること、および次いでこれらを混合して別々の結合体の混合物を形成すること。サッカライド:タンパク質比率wwが1:5すなわちタンパク質過剰~5:1すなわちサッカライド過剰である結合体を使用してもよく、たとえば比率1:2~5:1および比率1:125~1:25である。参照文献80に記載されるように、混合物における異なる髄膜炎菌血清群結合体は、異なるサッカライド:タンパク質比率を有することができ、たとえば1つが1:2~1:5の比率を有してもよいのに対して、もう一方が5:1~1:199の比率を有する。担体タンパク質は、直接またはリンカーを介して髄膜炎菌サッカライドに共有結合で結合体化されてもよい。種々のリンカーが公知である。たとえば、付着はカルボニルを介してもよく、それは、CDIとの修飾されたサッカライドの遊離ヒドロキシル基の反応によって形成してもよく81、82]、続いてタンパク質との反応によってカルバメート結合を形成する。カルボジイミド縮合を使用することができる[83]。アジピン酸リンカーを使用することができ、それは遊離NH2基たとえばアミノ化によってサッカライドに導入されるをアジピン酸とカップリングすることたとえば、ジイミド活性化を使用する、および次いで生じるサッカライドアジピン酸中間体にタンパク質をカップリングすることによって形成してもよい84、85]。その他のリンカーは、βプロピオンアミド[86]、ニトロフェニルエチルアミン[87]、ハロアシルハライド[88]、グリコシド結合[89]、6アミノカプロン酸[90]、Nスクシンイミジル32ピリジルジチオプロピオナートSPDP[91]、アジピン酸ジヒドラジドADH[92]、C4~C12部分[93]、その他を含む。還元的アミノ化を介した結合体化を使用することができる。サッカライドは、まず過ヨウ素酸塩で酸化してアルデヒド基を導入してもよく、これは次いで還元的アミノ化を介して担体タンパク質への、たとえばリジンのεアミノ基への、直接の共有結合を形成することができる。サッカライドが分子当たり複数のアルデヒド基を含む場合、この結合技術は架橋された生成物を生成することができ、複数のアルデヒドが複数の担体アミンと反応する。参照文献94に記載されるように、混合物は、直接のサッカライドタンパク質結合を持つ1つの結合体およびリンカーを介した結合を持つもう一つの結合体を含むことができる。この配置は、特に異なる髄膜炎菌血清群からのサッカライド結合体を使用するときに適用し、たとえばMenAおよびMenCサッカライドはリンカーを介して結合体化してもよく、一方でMenW135およびMenYサッカライドは担体タンパク質に直接結合体化してもよい。髄膜炎菌サッカライドは、髄膜炎菌から調製されるような全長の無傷のサッカライドを含んでもよく、および/または全長サッカライドの断片を含んでもよく、すなわちサッカライドは細菌において見られる天然の莢膜サッカライドより短くてもよい。したがって、サッカライドは、解重合してもよく、解重合はサッカライド精製の間か後だが結合体化の前に生じる。解重合は、サッカライドの鎖長を減少させる。解重合は、免疫原性に最適の鎖長を提供するために、および/またはサッカライドの物理的な扱いやすさのために鎖長を減少させるために使用することができる。結合体化された肺炎球菌莢膜サッカライド本発明の組成物は、担体タンパク質に結合体化された肺炎球菌莢膜サッカライドを含んでもよい。本発明は、1つまたは複数の異なる肺炎球菌血清型からの莢膜サッカライドを含むことができる。組成物が複数の血清型からのサッカライド抗原を含む場合、好ましくはこれらは別々に調製し、別々に結合体化し、および次いで組み合わせる。肺炎球菌莢膜サッカライドを精製するための方法は当該技術分野において公知でありたとえば、参照文献95を参照されたい、および23個の異なる血清型からの精製したサッカライドに基づいたワクチンは長年公知であった。これらの方法に対する改善はまた、たとえば、参照文献96に記載されるような血清型3について、または参照文献97に記載されるような血清型1、4、5、6A、6B、7Fおよび19Aについて、記述されてきた。肺炎球菌莢膜サッカライド群は、典型的には以下の血清型から選択されるだろう:1、2、3、4、5、6A、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23Fおよび/または33F。したがって、全体で、組成物は、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23またはそれ以上の異なる血清型からの莢膜サッカライドを含んでもよい。血清型の有用な組み合わせは、7価の組み合わせであり、たとえば血清型4、6B、9V、14、18C、19Fおよび23Fのそれぞれからの莢膜サッカライドを含む。別の有用な組み合わせは、9価の組み合わせであり、たとえば血清型1、4、5、6B、9V、14、18C、19Fおよび23Fのそれぞれからの莢膜サッカライドを含む。別の有用な組み合わせは、10価の組み合わせであり、たとえば血清型1、4、5、6B、7F、9V、14、18C、19Fおよび23Fのそれぞれからの莢膜サッカライドを含む。11価の組み合わせは、血清型3からのサッカライドをさらに含んでもよい。12価の組み合わせは、10価の混合物に以下を添加してもよい:血清型6Aおよび19A;6Aおよび22F;19Aおよび22F;6Aおよび15B;19Aおよび15B;または22Fおよび15B。13価の組み合わせは、11価の混合物に以下を添加してもよい:血清型19Aおよび22F;8および12F;8および15B;8および19A;8および22F;12Fおよび15B;12Fおよび19A;12Fおよび22F;15Bおよび19A;15Bおよび22F;6Aおよび19A、その他。したがって、有用な13価の組み合わせは、血清型1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19、19Fおよび23Fからの莢膜サッカライドを含み、たとえば参照文献9899、100、101において開示されるように調製される。1つのこのような組み合わせは、約8μgmlにて血清型6Bサッカライド、およびそれぞれ約4μgmlの濃度にてその他の12のサッカライドを含む。別のこのような組み合わせは、それぞれ約8μgmlにて血清型6Aおよび6Bサッカライド、並びにそれぞれ約4μgmlにてその他の11のサッカライドを含む。結合体のための適した担体タンパク質は、髄膜炎菌結合体に関して上で考察してある。特に肺炎球菌結合体ワクチンのための有用な担体タンパク質はCRM197、破傷風トキソイド、ジフテリアトキソイドおよびインフルエンザ菌タンパク質Dである。CRM197はPREVNAR商標において使用される。13価の混合物は、13個の結合体のそれぞれのための担体タンパク質としてCRM197を使用してもよく、およびCRM197は約5560μgmlにて存在してもよい。組成物が複数の肺炎球菌血清型からの結合体を含む場合、それぞれ別々の結合体に同じ担体タンパク質を使用すること、または異なる担体タンパク質を使用することが可能である。しかし、両方の場合において、異なる結合体の混合物は、通常、別々に各血清型結合体を調製すること、および次いでこれらを混合して別々の結合体の混合物を形成すること以下によって形成されるだろう。参照文献102は、多価の肺炎球菌結合体ワクチンに異なる担体タンパク質を使用するときの潜在的な利点を記述するが、PREVNAR商標製品は、7個の異なる血清型のそれぞれに同じ担体を首尾よく使用する。担体タンパク質は、上で考察したように髄膜炎菌結合体に対して、直接またはリンカーを介して肺炎球菌サッカライドに共有結合的に結合体化されてもよい。架橋結合体化技術は、少なくとも肺炎球菌血清型4、6B、9V、14、18C、19Fおよび23Fのために特に有用である。髄膜炎菌サッカライドについて上で考察したように、肺炎球菌サッカライドは、肺炎球菌から調製されるような全長の無傷のサッカライドを含んでもよく、および/または全長サッカライドの断片を含んでもよい。複数の肺炎球菌血清型を使用する場合、各血清型についての無傷のサッカライドを使用すること、各血清型についての断片またはいくつかの血清型についての無傷のサッカライドおよびその他の血清型についての断片を使用することが可能である。組成物が血清型4、6B、9V、14、19Fおよび23Fのいずれかからのサッカライドを含む場合、これらのサッカライドは好ましくは無傷である。これに対し、組成物が血清型18Cサッカライドを含む場合、それは好ましくは解重合される。血清型3サッカライドを、また解重合してもよく、例として、血清型3サッカライドは、たとえば酢酸を使用して、解重合のために酸加水分解に供することができる[98]。次いで、生じる断片を活性化のために酸化したとえば過ヨウ素酸塩酸化、おそらく二価カチオンの存在下、たとえばMgCl2とともに、還元条件下たとえばナトリウムシアノボロハイドライドを使用してで担体たとえばCRM197に結合体化させてもよく、および次いで随意にサッカライドにおける任意の未反応のアルデヒドをキャップすることができるたとえば水素化ホウ素ナトリウムを使用して[98]。結合体化は、たとえば活性化されたサッカライドおよび担体を共に凍結乾燥した後に、凍結乾燥された材料に対し行ってもよい。血清型1サッカライドは、少なくとも部分的に脱Oアセチル化されてもよく、たとえばビカルボナートカルボナート緩衝液を使用することによるなどのアルカリ性pH緩衝液処理[99]によって達成される。このような部分的に脱Oアセチル化サッカライドは、活性化のために酸化したとえば過ヨウ素酸塩酸化、還元条件下たとえばナトリウムシアノボロハイドライドを使用してで担体たとえばCRM197に結合体化させることができ、および次いで随意にサッカライドにおける任意の未反応のアルデヒドをキャップすることができるたとえば水素化ホウ素ナトリウムを使用して[99]。結合体化は、たとえば活性化されたサッカライドおよび担体を共に凍結乾燥した後に、凍結乾燥された材料に対し行ってもよい。血清型19Aサッカライドは、活性化のために酸化したとえば過ヨウ素酸塩酸化、還元条件下でDMSOにおいて担体たとえばCRM197に結合体化させてもよく、および次いで随意にサッカライドにおける任意の未反応のアルデヒドをキャップすることができるたとえば水素化ホウ素ナトリウムを使用して[103]。結合体化は、たとえば活性化されたサッカライドおよび担体を共に凍結乾燥した後に、凍結乾燥された材料に対し行ってもよい。肺炎球菌結合体は、理想的には関連するサッカライドに結合する抗莢膜抗体を誘発することができ、たとえば抗サッカライド抗体レベル≧020μgmLを誘発する[104]。抗体は、エンザイムイムノアッセイEIAおよび/またはオプソニン化貪食活性OPAの測定によって評価してもよい。EIA方法は、広範囲に確証されており、抗体濃度とワクチンの有効性との間に関連がある。その他の病原体群からのさらなる抗原本発明の組成物は、さらなる病原体群からの抗原群を含むことができる。たとえば、組成物は、以下のさらなる抗原群の1つまたは複数を含んでもよい:-B型肝炎ウイルスからの抗原、表面抗原HBsAgなど。-百日咳菌Bordetellapertussisからの抗原、百日咳菌からの百日咳全毒素PTおよび線状の血球凝集素FHAなど、随意にまたパータクチンpertactinおよび/または凝集原2および3と組み合わせて。-ジフテリア抗原、ジフテリアトキソイドなど。-破傷風抗原、破傷風トキソイドなど。-インフルエンザ菌HaemophilusinfluenzaeBHibからのサッカライド抗原、典型的には結合体化される。-不活化ポリオウイルス抗原群。ジフテリア抗原が組成物に含まれる場合、破傷風抗原および百日咳抗原を含むこともまた好ましい。同様に、破傷風抗原が含まれる場合、ジフテリアおよび百日咳抗原を含むこともまた好ましい。同様に、百日咳抗原が含まれる場合、ジフテリアおよび破傷風抗原を含むこともまた好ましい。したがって、DTPの組み合わせは好ましい。即時調製本発明は、また:i上で記述したとおりのfHbp抗原を含む第1の構成要素;およびii非髄膜炎菌免疫原を含む第2の構成要素を含むキットを提供する。キットの構成要素は、混合して、患者に投与して複数の病原体から防御するための免疫原性組成物を与えることができる。本発明はまた、混合ワクチンを調製するための方法を提供し、以下を混合する工程を含む:i上で記述したとおりのfHbp抗原を含む第1の構成要素;およびii非髄膜炎菌免疫原を含む第2の構成要素。次いで、混合材料を患者に投与してもよい。第2の構成要素は凍結乾燥し、水性の第1の構成要素でそれを再構成するようにしてもよい。医薬組成物本発明は、患者に投与するための免疫原性組成物に関する。これらの組成物は、薬学的に許容可能であり、および典型的には好適な担体を含むだろう。薬学的に許容可能な担体の完全な考察は、参照文献105において利用できる。有効な投薬量容積は、ルーチン的に確立することができるが、組成物の典型的なヒト単位用量は約05mlの容積を有する。単位用量におけるfHbpポリペプチドの総量は、通常1~500μg用量、たとえば60~200μg用量または120~500μgmlであるだろう。各fHbp抗原について20、40、50、60、80、100または200μgの量がヒトワクチン用量において典型的である。したがって、ワクチンは、この量の各fHbpを含むように製剤化してもよい。本発明の組成物のpHは、通常、6~8、およびより好ましくは、65~75たとえば約7である。すでに上で考察したように、組成物は緩衝液、たとえばトリス緩衝液、シトラート緩衝液、スクシナート緩衝液コハク酸ナトリウム緩衝液などまたはヒスチジン緩衝液を含んでもよい。組成物は、無菌でもよく、および/または発熱物質がなくてもよい。本発明の組成物は、ヒトに関して等張性でもよい。本発明の組成物は、張度を与えるためにナトリウム塩たとえば塩化ナトリウムを含んでもよい。10±2mgmlNaClの濃度が典型的であり、たとえば約9mgmlである。患者に対する投与のための本発明の組成物は、免疫原性であり、およびより好ましくは、ワクチン組成物である。本発明に従ったワクチンは、予防的すなわち感染を予防するまたは治療的すなわち感染を治療するのいずれでもよいが、典型的には予防的であるだろう。ワクチンとして使用される免疫原性組成物は、抗原群の免疫学的に有効な量、並びに必要に応じて任意のその他の構成要素を含む。免疫学的に有効な量によって、個体に対するその量の投与が、単一用量においてまたは一連の一部として、治療または予防のために有効であることが意味される。この量は、治療される個体の健康および身体条件、年齢、治療される個体の分類群たとえば非ヒト霊長類、霊長類、その他、抗体を合成する個体の免疫系の能力、所望の防御度、ワクチンの製剤、医学的な状況における治療医師の評価、およびその他の関連因子に応じて、変化する。この量は、日常的な試行を通して決定することができる比較的広い範囲にはいることが予想される。本発明の組成物の抗原含量は、一般に、用量当たりのタンパク質の量の点から表されるだろう。髄膜炎菌は体の種々の領域に影響を及ぼすため、本発明の組成物は種々の液体の形態に調製してもよい。たとえば、組成物は、溶液または懸濁液のいずれかのような、注射剤として調製してもよい。組成物は、肺投与、たとえば吸入器による、微細スプレーを使用する肺投与のために調製してもよい。組成物は、経鼻、経耳または経眼投与、たとえばスプレーまたは滴下のような投与のために調製してもよい。筋肉内投与のための注射剤は、最も典型的である。本発明の組成物は、特に複数の用量形式にパッケージされるときに、抗菌物質を含んでもよい。チオメルサールおよび2フェノキシエタノールなどの抗菌物質は、ワクチンにおいて一般に見いだされるが、水銀フリーの保存剤を使用することまたは全く保存剤を使用しないことが好ましい。本発明の組成物は、洗浄剤、たとえばポリソルベートTween、ポリソルベート80など、を含んでもよい。洗浄剤は、一般に低レベル、たとえば<001にて存在するが、抗原製剤を安定させるために、高レベル、たとえば最高10が示唆されてきた[106]。実施例の組成物は、001~005のポリソルベートを含んでもよく、およびこれは脂質付加されたfHbp抗原群を使用するときに特に有用である。治療方法本発明はまた、哺乳動物における免疫応答を上げるための方法を提供し、哺乳動物に本発明の組成物を投与することを含む。免疫応答は、好ましくは髄膜炎菌から防御し、および好ましくは抗体を包含する。本方法は、すでに初回刺激された患者における二次免疫応答を上げ得る。哺乳動物は、好ましくはヒトである。ワクチンが予防的使用のためにある場合、ヒトは好ましくは小児たとえば幼児または乳児または10代である;ワクチンが治療的使用のためにある場合、ヒトは好ましくは成人である。子供のために意図されるワクチンはまた、成人に投与され、たとえば安全性、投薬量、免疫原性、その他を評価し得る。本発明はまた、本発明の組成物を医薬としての使用のために提供する。医薬は、好ましくは上記のように哺乳動物における免疫応答を上げるために使用されすなわち、それは免疫原性組成物である、およびより好ましくは、ワクチンである。本発明はまた、上記のような哺乳動物における免疫応答を上げるための医薬の製造における、上記記載のような少なくとも2つのfHbp抗原の使用を提供する。これらの使用および方法は、好ましくは髄膜炎菌Nmeningitidisによって生じる疾患、たとえば細菌のまたはより特異的に、髄膜炎菌の髄膜炎または敗血症の予防および/または治療のためのものでる。治療的処置の有効性をチェックする1つの方法は、本発明の組成物の投与後の髄膜炎菌感染をモニターすることを包含する。予防的処置の有効性をチェックする1つの方法は、組成物の投与後の抗原に対する免疫応答をモニターすることを包含する。本発明の組成物の免疫原性は、被験体たとえば子供1216月齢または動物モデルを試験するためにこれらを投与すること、並びに次いで髄膜炎菌のための血清殺菌性抗体SBAおよびELISA力価GMTを含む標準的なパラメーターを決定することによって、決定することができる。これらの免疫応答は、一般に、組成物の投与後のおよそ4週間に決定され、および組成物の投与前に決定される値と比較されるだろう。少なくとも4倍または8倍のSBA増大が好ましい。組成物の複数の用量が投与される場合、複数の投与後決定がなされてもよい。本発明の組成物は、一般に患者に直接投与されるだろう。直接の送達は、非経口注射たとえば皮下に、腹膜内に、静脈内に、筋肉内に、または組織の間隙に対してによって、または任意のその他の適した経路によって達成してもよい。本発明は、全身性のおよび/または粘膜の免疫を誘発するために使用してもよい。大腿または上腕に対する筋肉内投与が好ましい。注射は針たとえば皮下針を介してでもよいが、針を用いない注射を代わりに使用してもよい。典型的な筋肉内用量は、05mlである。投薬処置は、単一用量計画または複数用量計画であることができる。複数の用量は、一次免疫化計画において、および/または追加免疫化計画において使用してもよい。一次用量計画のあとに、追加用量計画を続けてもよい。一次用量の間たとえば416週間および一次と追加との間の適したタイミングは、ルーチン的に決定することができる。全般本発明の実施は、特に明記しない限り、当該技術分野の技術の範囲内で、化学、生化学、分子生物学、免疫学および薬学における従来の方法を使用するだろう。このような技術は、文献において完全に説明される。たとえば参照文献107108、109、110、111、112、113その他を参照されたい。用語含むは、含む、並びになるを包含し、たとえば、Xを含む組成物は、Xのみからなってもよいし、またはさらなる何かを含んでもよく、たとえばXY。数値xに関して用語約は、随意的であり、およびたとえば、x±10を意味する。本発明がエピトープに関する場合、このエピトープはB細胞エピトープおよび/またはT細胞エピトープでもよいが、通常B細胞エピトープであるだろう。このようなエピトープは、経験的に同定することができたとえばPEPSCAN[114、115]または類似の方法を使用して、またはこれらは予測することができるたとえば、JamesonWolf抗原性インデックス[116]、マトリックスに基づいたアプローチ[117]、MAPITOPE[118]、TEPITOPE[119、120]、ニューラルネットワーク[121]、OptiMerおよびEpiMer[122、123]、ADEPT[124]、Tsites[125]、親水性[126]、抗原性インデックス[127]または参照文献128129、130、131、132その他において開示される方法を使用して。エピトープは、抗体またはT細胞受容体の抗原結合部位によって認識され、およびこれに結合する抗原の部分であり、およびこれらはまた抗原決定基として称し得る。本発明が精製した抗原を使用する場合、この抗原はその天然に存在する環境から分離される。たとえば、抗原は、存在する任意のその他の精製した抗原から以外の、その他の髄膜炎菌成分が実質的にないだろう。精製した抗原の混合物は、2つの抗原が混合した状態で天然に存在する場合であっても、別々に各抗原を精製すること、および次いでこれらを再び組み合わせることによって典型的には調製されるだろう。2つのアミノ酸配列間の配列同一性の割合への言及は、整列させたときに、2つの配列を比較して同じであるアミノ酸の割合を意味する。この整列および相同性の割合または配列同一性の割合は、当該技術分野において公知のソフトウェアプログラム、たとえば参照文献133の項7718において記述されたものを使用することにより決定することができる。好ましい整列は、ギャップ開始ペナルティ12およびギャップ伸長ペナルティ2、BLOSUMマトリックス62でアフィンギャップ検索を使用するSmithWaterman相同性検索アルゴリズムによって、決定される。SmithWaterman相同性検索アルゴリズムは、参照文献134において開示される。用語実質的には完全にを除外せず、たとえばYが実質的にない組成物は、Yが完全になくてもよい。必要な場合、用語実質的には、本発明の定義から省略してもよい。GI番号付与を上で使用してある。GI番号、またはGenInfoIdentifierは、NCBIによって配列がそのデータベースに加えられるときに処理される、各配列記録に対して連続的に割り当てられる一連の数字である。GI番号は、配列記録のアクセッション番号と類似しない。配列が更新されるときたとえば、修正のために、またはさらに注釈もしくは情報を加えるために、それは、新たなGI番号を受ける。したがって、与えられたGI番号と関連する配列は、決して更新されない。3つのfHbpタンパク質を使用し、以下の株およびfHbpファミリーを表した:これらは、単価ワクチンまたは二価ワクチンMC58M01573またはMC58M01240320のどちらかとして試験した。抗原は、水酸化アルミニウムアジュバントAHまたはアルミニウムホスフェートアジュバントAPに吸着した。図1は、個々のfHbp抗原が、両方のアジュバントによく吸着し、および無傷で脱着することができることを確認した。図2は、この結果が二価の混合物でも見られたことを示す。これらの一価および二価ワクチンはまた、マウスを免疫化するために使用し、および生じた血清は種々の髄膜炎菌株に対する殺菌活性について試験した。以下の表は、それぞれのfHbpファミリーI、IIおよびIIIからの2つの株に対する結果を示し、は、128またはそれ以上の殺菌力価を示す:したがって、MC58抗原は、両方のアジュバントで同種の株から防御することができたが、その他の株に対してはできなかった。M01240320抗原は、両方のアジュバントで同種の株から、および別のファミリーIII株からも防御することができたが、ファミリーI株からは防御しなかった、そしてAHアジュバントを使用したときにファミリーII株から防御することができた。M01573抗原単独は、いずれのアジュバントでも、これらの6株のいずれからも防御しなかった。したがって、結果は、単価ワクチンと混合させた。MC58およびM01573の組み合わせに基づいた二価ワクチンは、上記抗原単独のいずれもNZ98254から防御しなかったにもかかわらず、両方のファミリーI株から防御した。この結果は、両方のアジュバントで見られた。しかし、予想通り、2つのファミリーI抗原の混合物は、ファミリーIIまたはファミリーIII株からの防御をもたらさなかった。MC58およびM01240320の組み合わせに基づいた二価ワクチンは、ファミリーII株を含む6つ全ての株但し、APアジュバントを使用したとき1つの株は除くから防御した。多くの広まっている髄膜炎菌株は、fHbpファミリーIであり、およびこれらの大きな割合はサブファミリーI1MC58によって表されるである。したがって、この大きなサブファミリーの適用範囲を保証するために、M01573配列単独は不適当である。したがって、M01573にのみ依存する代わりに、ワクチンは、それを置換するか、または第2のファミリーI配列をそれに補充するか、たとえばM01573MC58、のいずれかをすべきである。サブファミリーI1配列とファミリーIII配列との組み合わせは、AHまたはAPアジュバントを使用して、広い防御を与えることができる。配列番号:23および26の整列配列番号:23および26は、それぞれ、株MC58およびM01573からの成熟アミノ酸配列N末端システインである。これらは、以下のように整列される:配列番号:26のVal8および配列番号:23のVal13から開始するとすなわちN末端リピート領域を除外する、これらは、875同一である217248の同一の残基。MC58、9615945およびM1239からの配列と整列させるとき、2つの残基が配列番号:23に独特であり、すなわちThr14およびVal153、それらは配列番号:1の残基2および残基141と整列される。本発明が例示する目的のみによって記述されたこと、並びに本発明の範囲および趣旨の中にとどまるならば変更がなされてもよいことが理解されよう。参照文献1Masignaniら2003JExpMed1977897992Welschら2004JImmunol1725606153Houら2005JInfectDis1924580904国際公開第03063766号5Fletcherら2004InfectImmun72208821006Zhuら2005InfectImmun73106838457Cantiniら2006JBiolChem281722072278国際公開第2004048404号9Tettelinら2000Science2871809181510Mascioniら2009JBiolChem28487384611Goldschneiderら1969JExpMed12913072612Santosら2001ClinicalandDiagnosticLaboratoryImmunology86162313Fraschら2009Vaccine27SB112614国際公開第2004094596号15国際公開第2008079372号16国際公開第03020756号17国際公開第2006024954号18国際公開第2007060548号19国際公開第2009104097号20Comanducciら2002JExpMed19514455421DunningHotoppら2006Microbiol15237334922Giulianiら2005InfectImmun7311516023Beerninkら2006ClinVaccineImmunol137586324Pajonら2010Vaccine282122925Orienteら2009JBacterioldoi101128JB013080926Metruccioら2009PLoSPathog512e100071027Giulianiら2006PNASUSA10310834928VaccineDesignTheSubunitandAdjuvantApproachPowellNewman1995ISBN030644867X29Burrellら2001Vaccine192758130国際公開第0122992号31MethodsinMoelcularMedicineVol42edO’HaganVaccineAdjuvants...32国際出願番号PCTIB201000073333国際公開第0066741号34国際公開第9957280号35Martinら1997JExpMed185711738336国際公開第9629412号37米国特許第5698438号明細書38PerkinsBaldingら2003Microbiology14934233539国際公開第0155182号40国際公開第0138350号41国際公開第0023595号42Ramら2003JBiolChem278508536243国際公開第2004014417号44国際公開第9853851号45米国特許第6531131号明細書46国際公開第0026384号47米国特許第6645503号明細書48国際公開第03070282号49国際公開第9408021号50国際公開第2004015099号51国際公開第2007144316号52国際公開第2007144317号53国際公開第03080678号54Glodeら1979JInfectDis139525655国際公開第9405325号米国特許第5425946号明細書56ArakereFrasch1991InfectImmun594349-435657Michonら2000DevBiol103151-16058RubinsteinStein1998JImmunol1414357-436259国際公開第2005033148号60国際公開第2007000314号61ResearchDisclosure453077Jan200262欧州特許出願公開第0378881号明細書63欧州特許出願公開第0427347号明細書64国際公開第9317712号65国際公開第9403208号66国際公開第9858668号67欧州特許出願公開第0471177号明細書68国際公開第9101146号69Falugiら2001EurJImmunol313816382470Baraldoら2004InfectImmun7284884771欧州特許出願公開第0594610号明細書72Ruanら1990JImmunol1453379338473国際公開第0056360号74Kuoら1995InfectImmun6327061375Michonら1998Vaccine1617324176国際公開第02091998号77国際公開第0172337号78国際公開第0061761号79国際公開第0033882号80国際公開第2007000341号81BethellGSらJBiolChem19792542572482HearnMTWJChromatogr19812185091883国際公開第2007000343号84MolImmunol19852290791985欧州特許出願公開第0208375号明細書86国際公開第0010599号87GeverらMedMicrobiolImmunol165171288197988米国特許第4057685号明細書89米国特許第467357447612834808700号明細書90米国特許第4459286号明細書91米国特許第5204098号明細書92米国特許第4965338号明細書93米国特許第4663160号明細書94国際公開第2007000342号95WHOTechnicalReportSeriesNo9272005Pages649896米国特許出願公開第20080102498号97米国特許出願公開第20060228381号98米国特許出願公開第20070231340号99米国特許出願公開第20070184072号100米国特許出願公開第20060228380号101国際公開第2008143709号102国際公開第2007071707号103米国特許出願公開第20070184071号104Jodarら2003Vaccine21326572105Gennaro2000RemingtonTheScienceandPracticeofPharmacy20theditionISBN0683306472106国際公開第2007127665号107MethodsInEnzymologySColowickandNKaplanedsAcademicPressInc108HandbookofExperimentalImmunologyVolsIIVDMWeirandCCBlackwelleds1986BlackwellScientificPublications109Sambrookら2001MolecularCloningALaboratoryManual3rdeditionColdSpringHarborLaboratoryPress110HandbookofSurfaceandColloidalChemistryBirdiKSedCRCPress1997111Ausubelらeds2002Shortprotocolsinmolecularbiology5theditionCurrentProtocols112MolecularBiologyTechniquesAnIntensiveLaboratoryCourseReamらeds1998AcademicPress113PCRIntroductiontoBiotechniquesSeries2ndedNewtonGrahameds1997SpringerVerlag114Geysenら1984PNASUSA8139984002115Carter1994MethodsMolBiol3620723116JamesonBAら1988CABIOS41181186117RaddrizzaniHammer2000BriefBioinform1217989118Bublilら2007Proteins681294304119DeLallaら1999JImmunol163172529120Kwokら2001TrendsImmunol2258388121Brusicら1998Bioinformatics14212130122Meisterら1995Vaccine13658191123Robertsら1996AIDSResHumRetroviruses127593610124MaksyutovZagrebelnaya1993ComputApplBiosci932917125FellerdelaCruz1991Nature34963117201126Hopp1993PeptideResearch6183190127Wellingら1985FEBSLett188215218128Davenportら1995Immunogenetics42392297129TsuruiTakahashi2007JPharmacolSci1054299316130Tongら2007BriefBioinform8296108131Schirleら2001JImmunolMethods25712116132Chenら2007AminoAcids3334238133CurrentProtocolsinMolecularBiologyFMAusubelらeds1987Supplement30134SmithWaterman1981AdvApplMath2482489