"Gsと共役するGPCR、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞。Gsと共役するGPCRが、GLP-1受容体またはV2Rである、請求項1に記載の細胞。cAMP依存性カルシウムチャンネルがCNGカルシウムチャンネルである、請求項1または請求項2に記載の細胞。カルシウム感受性タンパク質が、アポイクオリンである、請求項1-3のいずれかに記載の細胞。V2Rが配列番号1で示されるアミノ酸配列を有し、cAMP依存性カルシウムチャンネルが、配列番号2で示されるアミノ酸配列を有する改変CNGカルシウムチャンネルであり、カルシウム感受性タンパク質が、配列番号3で示されるアミノ酸配列を有する改変アポイクオリンである、請求項1-4のいずれかに記載の細胞。GLP-1受容体が配列番号8で示されるアミノ酸配列を有し、cAMP依存性カルシウムチャンネルが、配列番号2で示されるアミノ酸配列を有する改変CNGカルシウムチャンネルであり、カルシウム感受性タンパク質が、配列番号3で示されるアミノ酸配列を有する改変アポイクオリンである、請求項1-4のいずれかに記載の細胞。請求項1-6のいずれかに記載の細胞を含む、生物試料中の、活性型GLP-1量またはAVP量の測定用キット。尿崩症またはSIADHの診断用、低張または高張輸液の選択の判定用またはGLP1関連治療薬の効果判定用である、請求項7に記載のキット。細胞が凍結細胞である、請求項7または請求項8に記載のキット。さらに、カルシウム感受性タンパク質の発光基質を含む、請求項7-9のいずれかに記載のキット。カルシウム感受性タンパク質の発光基質が、セレンテラジンまたはセレンテラジン誘導体である、請求項10に記載のキット。下記工程1~3:1請求項1-6のいずれかに記載の細胞、カルシウム感受性タンパク質の発光基質、Ca2不含の培地、および被験者の血液由来のサンプルを含む混合物を調製する;21で調製した混合物にCa2含有溶液を添加する;および3該細胞より発生するカルシウム感受性タンパク質の発光を測定する、を含む、尿崩症またはSIADHの診断方法、低張または高張輸液の選択の判定方法またはGLP1関連治療薬の効果判定方法。下記工程A’~C’:A’請求項1-6のいずれかに記載の細胞、カルシウム感受性タンパク質の発光基質、Ca2不含の培地、請求項1-6のいずれかに記載の細胞に発現するGPCRのアゴニストおよび被験化合物を含む混合物を調製する;B’A’で調製した混合物にCa2含有溶液を添加する;およびC’該細胞より発生するカルシウム感受性タンパク質の発光を測定する、を含む、Gsと共役するGPCRのアンタゴニストをスクリーニングする方法。下記工程A’’~C’’:A’’請求項1-6のいずれかに記載の細胞、カルシウム感受性タンパク質の発光基質、Ca2含有の培地、請求項1-6のいずれかに記載の細胞に発現するGPCRのアゴニストおよび被験化合物を含む混合物を調製する;B’’A’’で調製した混合物にフォルスコリンを添加する;およびC’’該細胞より発生するカルシウム感受性タンパク質の発光を測定する、を含むGsと共役するGPCRのアンタゴニストをスクリーニングする方法。Gsと共役するGPCRが、GLP-1受容体またはV2Rである、請求項13または請求項14に記載の方法。本発明の目的は、特別な技術や設備を要するラジオアイソトープを使用せずに、従来法に比較し簡便に操作できる、生理活性物質の測定用組成物および臨床診断用組成物等を提供することである。また、本発明の更なる目的は、該組成物を用いた、該生理活性物質の関連する疾患の診断方法等を提供することである。本発明者は、細胞内のcAMP濃度を変化させる受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質の相互作用に着目し、細胞内のcAMP濃度を変化させる受容体の例としてV2RおよびGLP-1が結合する受容体以下、GLP-1受容体とも称すに着目した。そして、これら受容体にリガンドが結合することで生成されるcAMPが惹起するカルシウムイオンの細胞内への流入量を、カルシウム感受性タンパク質を用いて測定した。それにより本発明者は、リガンドの量を測定することに成功し、本発明を完成させた。一つの側面において、本発明は、細胞内のcAMP濃度を変化させる受容体以下、cAMP濃度を変化させる受容体とも称す、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキットを提供する。一つの側面において、本発明は、cAMP濃度を変化させる受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を含む、インビトロでの該cAMP濃度を変化させる受容体に結合する生理活性物質の量の測定用、該cAMP濃度を変化させる受容体アゴニストまたはアンタゴニストの活性測定用、該生理活性物質が関連する疾患の診断用、または上記疾患の薬物治療を受けているヒトの治療効果及び予後の判定用の組成物およびキット等を提供する。一つの側面において、本発明は、下記工程A~C:AcAMP濃度を変化させる受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、カルシウム感受性タンパク質の発光基質、Ca2不含の培地、および被験者由来の生物試料を含む混合物を調製する;BAで調製した混合物にCa2含有溶液を添加する;およびC該細胞より発生するカルシウム感受性タンパク質の発光を測定する、を含む、生物試料中の該cAMP濃度を変化させる受容体に結合する生理活性物質の量の測定方法、該生理活性物質が関連する疾患を診断する方法、該生理活性物質が関連する疾患を発症する危険性を判定する方法または、該生理活性物質が関連する疾患の治療の有効性を判定する方法等を提供する。一つの側面において、本発明は、下記工程A’~C’:A’cAMP濃度を変化させる受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、カルシウム感受性タンパク質の発光基質、Ca2不含の培地、および被験化合物を含む混合物を調製する;B’A’で調製した混合物にCa2含有溶液を添加する;およびC’該細胞より発生するカルシウム感受性タンパク質の発光を測定する、を含む、該cAMP濃度を変化させる受容体アゴニストまたはアンタゴニストをスクリーニングする方法を提供する。一つの側面において、本発明は、下記工程A’’~C’’:A’’cAMP濃度を変化させる受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、カルシウム感受性タンパク質の発光基質、Ca2含有の培地、該cAMP濃度を変化させる受容体に結合する生理活性物質および被験化合物を含む混合物を調製する;B’’A’’で調製した混合物にフォルスコリンを添加する;およびC’’該細胞より発生するカルシウム感受性タンパク質の発光を測定する、を含む該cAMP濃度を変化させる受容体アンタゴニストをスクリーニングする方法等を提供する。本発明によれば、ラジオアイソトープを使用することに伴う煩雑な操作を要せず、簡便且つ安全な操作で、細胞内のcAMP濃度を変化させる受容体に結合する生理活性物質の量を測定することができる。1.生理活性物質が結合するcAMP濃度を変化させる受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキット本発明は、生理活性物質が結合するcAMP濃度を変化させる受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキットを提供する。生理活性物質は、生物に対して生理作用ないしは薬理作用を発揮する物質である。生理活性物質の例としては、生理活性アミン類、神経伝達物質となるアミノ酸類、生理活性ペプチド類例えば、バソプレッシン、インクレチン等、脂質メディエーター類、ケモカイン類が挙げられる。バソプレッシンの例としては、AVPが挙げられる。インクレチンホルモンの例としては、GLP-1関連ペプチド類例えば、GLP-1、GLP1の分解産物、GLP-2、オキシントモヂュリン、グルカゴン、GLP-1様生理活性ペプチド薬エキセナチド、リナグルチドが挙げられる。cAMP濃度を変化させる受容体は、リガンドである生理活性物質が受容体に結合することにより、該受容体が発現する細胞内でcAMP濃度が変化する受容体である。cAMP濃度を変化させる受容体の例としては、cAMPがセカンドメッセンジャーである受容体、例えばcAMPがセカンドメッセンジャーであるGPCRが挙げられる。cAMPがセカンドメッセンジャーであるGPCRの例としては、GsがカップルするGPCRが挙げられる。GsがカップルするGPCRの例には、バソプレッシンV2受容体、GLP-1受容体が挙げられる。本発明は、一つの実施態様として、GsがカップルするGPCR、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキットを提供する。上記実施態様は別として、GqがカップルするGPCRとカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を用いても、理論上、GqがカップルするGPCRに結合するリガンドの量を定量できる。詳細には、リガンドがGq共役型GPCRに結合することにより惹起される小胞体のIP3チャネルから細胞質へのカルシウムイオンの流入をカルシウム感受性タンパク質で検出して、リガンドの量を定量できる。しかしながら、上記実施態様が提供する、GsがカップルするGPCR、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を用いれば、リガンドの量をより高感度に定量できる。例えば、GqがカップルするGPCRであるV1aまたはV1bおよびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を用いて、AVPを検出するシステムに比較し、GsがカップルするGPCRであるV2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を用いて、AVPを検出するシステムは、AVPをより高感度に検出できる。生理活性物質は疾患に関連し得る。本明細書において、生理活性物質が関連する疾患とは、生理活性物質が関係する疾患であれば、特に限定はされない。生理活性物質が関連する疾患の例には、該生理活性物質の量が異常に多いか少ないことが原因で発症する疾患、該生理活性物質の量が異常に多いか少ないことが原因で病態が進行する疾患、該生理活性物質が正常な機能を発揮しないことが原因で発症する疾患、該生理活性物質が正常な機能を発揮しないことが原因で病態が進行する疾患が含まれる。生理活性物質が関連する疾患の例には、抗利尿ホルモン以下、ADHとも称す不適合分泌症候群、尿崩症、2型糖尿病が挙げられる。一つの実施態様として、本発明により提供される、生理活性物質が結合するcAMP濃度を変化させる受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキットは、生理活性物質が関連する疾患の診断用の細胞、組成物およびキットであり得る。2.V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキット本発明は、一つの実施態様として、V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキットを提供する。V2Rは、AVPが結合する受容体の一種であり、アデニル酸シクラーゼを活性化してcAMPを増加させる受容体である。V2Rの由来は哺乳類であれば特に限定されず、例えば、ヒト、マウス、ウシ、ラットであり得る。また、V2Rは、適宜、そのアミノ酸配列において、1個または数個例えば、2、3、4、5、6、7、8、9または10個のアミノ酸が改変付加、置換、欠失等されてもよく、または、V2Rは、天然のV2Rに対して、アミノ酸配列の同一性が、70以上、80以上、85以上、90以上、95以上、98以上または99以上であるアミノ酸配列からなるタンパク質であって、AVPが結合し、アデニル酸シクラーゼを活性化してcAMPを増加させる機能を有するタンパク質であってもよい。V2Rは、配列番号1に示されるアミノ酸配列を有するタンパク質であり得る。さらに、V2Rは、配列番号1に示されるアミノ酸配列との同一性が、70以上、80以上、85以上、90以上、95以上、98以上または99以上であるアミノ酸配列からなるタンパク質であって、AVPが結合し、アデニル酸シクラーゼを活性化してcAMPを増加させる機能を有するタンパク質であり得る。また、本明細書において、AVPは哺乳類由来であれば特に限定されず、例えば、ヒト、マウス、ウシ、ラット由来であり得る。AVPは、適宜、そのアミノ酸配列において、1個または数個例えば、2、3、4、5、6、7、8、9または10個のアミノ酸が改変付加、置換、欠失等されてもよく、天然のAVPに対して、アミノ酸配列の同一性が、70以上、80以上、85以上、90以上、95以上、98以上または99以上であるアミノ酸配列からなるタンパク質であって、V2Rに結合し、アデニル酸シクラーゼを活性化してcAMPを増加させる機能を有するタンパク質であってもよい。cAMP依存性カルシウムチャンネルは、cAMPの濃度変化に応答してカルシウムイオンの細胞への流入量を変化させるチャンネルであり、cAMPの濃度増加に応答して細胞内へのカルシウムイオン流入量を増大させるチャンネルを含む。cAMP依存性カルシウムチャンネルの例としては、CNGcyclicnucleotidegatedionchannelカルシウムチャンネルがある。CNGカルシウムチャンネルは、そのアミノ酸配列において、1個または数個例えば、2、3、4、5、6、7、8、9または10個のアミノ酸が改変付加、置換、欠失等されていてもよく、例えば、cGMPに比較しcAMPにより感受性を示すように改変置換、付加、欠失を含むされてもよい。CNGカルシウムチャンネルは、天然のCNGカルシウムチャンネルに対して、アミノ酸配列の同一性が、70以上、80以上、85以上、90以上、95以上、98以上または99以上であるアミノ酸配列からなるタンパク質であって、cAMPの濃度増加に応答して細胞内へのカルシウムイオン流入量を増大させるタンパク質あり得る。改変の例としては、マウスCNGカルシウムチャンネルにおける460番目のシステインのトリプトファンへの置換、マウスCNGカルシウムチャンネルにおける583番目のグルタミン酸のメチオニンへの置換、ウシCNGカルシウムチャンネルにおける537番目のトレオニンのセリン、メチオニン、バリンまたはアラニンへの置換、およびそれらの組合せ等が挙げられる。上記に挙げた置換は、その由来とする動物種に限定されず、他の動物種の対応する部位でのアミノ酸の置換にも適用される。例えば、ウシCNGカルシウムチャンネルにおける537番目のトレオニンに対応するマウスCNGカルシウムチャンネルのトレオニンを、セリン、メチオニン、バリンまたはアラニンへ置換することができる。置換は、1以上の位置で行うことができ、例えば、マウスCNGカルシウムチャンネルにおける460番目のシステインのトリプトファンへの置換を行うと共に、583番目のグルタミン酸のメチオニンへの置換を行うこともできる。CNGカルシウムチャンネルは、α-サブユニットおよび/またはβ-サブユニットからなることができ、その構成は任意であり、例えば、α2サブユニット、α3サブユニット、α4サブユニットおよびβ1bサブユニットからなる群から選択される少なくとも1つのサブユニットからなる構成をとることができる。そして、サブユニットは、それぞれ上記のように改変され得る。CNGカルシウムチャンネルの由来は哺乳類であれば特に限定されず、例えば、ヒト、マウス、ウシ、ラット、ブタであり得る。CNGカルシウムチャンネルは、配列番号2に示されるアミノ酸配列を有するタンパク質であり得る。さらに、CNGカルシウムチャンネルは、配列番号2に示されるアミノ酸配列との同一性が、70以上、80以上、85以上、90以上、95以上、98以上または99以上であるアミノ酸配列からなるタンパク質であって、cAMPの濃度増加に応答して細胞内へのカルシウムイオン流入量を増大させるタンパク質であり得る。カルシウム感受性タンパク質は、カルシウムに応答して構造が変化するタンパク質を含み、カルシウムを感受して発光するタンパク質、所謂カルシウムセンサーとして機能するタンパク質を含む。カルシウム感受性タンパク質の例としては、イクオリンaequorin、cameleonインビトロジェン、Case12Evrogne社、カルシウムに感受性のあるカルモジュリンとそれに結合するミオシン軽鎖キナーゼの一部の配列と二つの色の異なるGFPを結合したタンパク質、GFPのアミノ酸配列の144番と146番の間にカルモジュリンを結合したカルシウム感受性タンパク質、および特開2002-153279に記載されているプローブナンバーG3-85、A1-2のタンパク質、または、存在する場合には、これらのアポタンパク質例えば、アポイクオリンが挙げられる。カルシウム感受性タンパク質は、適宜目的に応じそのアミノ酸配列が改変付加、置換、欠失等されてもよく、発光量を増加させる為および/またはSN比を良くする為に改変されてもよい。改変には、アミノ酸配列における、1個または数個例えば、2、3、4、5、6、7、8、9または10個のアミノ酸の付加、置換、欠失および天然のカルシウム感受性タンパク質のアミノ酸配列との同一性が、70以上、80以上、85以上、90以上、95以上、98以上または99以上であるアミノ酸配列からなるタンパク質であってカルシウムを感受して発光するタンパク質への改変が含まれる。例えば、カルシウム感受性タンパク質は、その遺伝子をヒト型のコドン頻度に最適化し、ミトコンドリア移行シグナルを有するように改変され得る。カルシウム感受性タンパク質は、配列番号3に示されるアミノ酸配列を有するタンパク質であり得る。さらに、カルシウム感受性タンパク質は、配列番号3に示されるアミノ酸配列との同一性が、70以上、80以上、85以上、90以上、95以上、98以上または99以上であるアミノ酸配列からなるタンパク質であって、カルシウムを感受して発光するタンパク質であり得る。本発明により提供されるV2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞において、V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質は、それぞれ、細胞に一過性または安定的に発現する。細胞は、特に限定されず、CHO細胞、HEK293細胞、3T3細胞等の細胞株であり得る。例えば、本発明により提供されるV2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞は、V2Rが配列番号1で示されるアミノ酸配列からなり、cAMP依存性カルシウムチャンネルが、配列番号2で示されるアミノ酸配列からなる改変CNGカルシウムチャンネルであり、カルシウム感受性タンパク質が、配列番号3で示されるアミノ酸配列からなる改変アポイクオリンであり、各タンパク質を安定的に発現させたCHO細胞であり得る。さらに、例えば、本発明により提供されるV2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞は、V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、カルシウム感受性タンパク質のそれぞれが、配列番号1-3のアミノ酸配列に対して、70以上、80以上、85以上、90以上、95以上、98以上または99以上の同一性を有するアミノ酸配列からなるタンパク質であって、それぞれが、V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、またはカルシウム感受性タンパク質の機能を保持したタンパク質を安定的に発現させたCHO細胞であり得る。また、V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質からなる群から選択される1以上のタンパク質を天然に発現する細胞を用いてもよく、該細胞に発現していないタンパク質を一過的または安定的に発現させることで、本発明により提供されるV2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を調製することもできる。このような例として、V2Rを内在的に発現する腎臓由来の細胞に、cAMP依存性カルシウムチャンネルおよびカルシウム感受性タンパク質を、それぞれ、一過性または安定的に強制発現させた細胞、CNGカルシウムチャンネルを内在的に発現する嗅組織由来の細胞に、V2Rおよびカルシウム感受性タンパク質を、それぞれ、一過性または安定的に強制発現させた細胞が挙げられる。本発明により提供されるV2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞は凍結保存することができる。凍結保存は、細胞凍結保存液にて、-20°Cから-80°Cで、例えば-80°Cで保存され得る。細胞凍結保存液は、限定はされないが、セルバンカー登録商標日本全薬工業、バンバンカー登録商標株式会社リンフォテック、Cellvation登録商標CELOXLABORATORIESInc、CryoStor登録商標BIOLIFESOLUTIONS等が含まれる。同一ロットの細胞を大量に凍結保存することにより、組成物間またはキット間での細胞に由来する測定誤差を大幅に抑制することができ、測定結果の再現性を良好なものとすることができる。また、本発明により提供されるV2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞は、凍結保存し、それを温浴等で解凍した後にも、ヒト血中に存在するAVPを検出するのに十分な感受性を保持する。また、解凍後に適切な容器に播種し、適切な培地中で培養を約3時間程度行うだけで、AVPの検出のために添加される試薬や、ヒト血液由来の成分により、細胞の状態が悪くなることはない。上記に説明した本発明により提供されるV2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を含む組成物は、インビトロでのAVP量の測定用、低張または高張輸液の選択の判定用、V2Rアゴニストまたはアンタゴニストの活性測定用、AVP関連疾患の診断用、AVP関連疾患を発症する危険性の高いヒトの判定用、および/または治療を受けているヒトの治療効果の判定用に使用され得る。よって、本発明は、更なる一つの実施態様として、V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を含む、インビトロでのAVP量の測定用、低張または高張輸液の選択の判定用、V2Rアゴニストまたはアンタゴニストの活性測定用、AVP関連疾患の診断用、AVP関連疾患を発症する危険性の高いヒトの判定用、またはAVP関連疾患の治療を受けているヒトの治療効果の判定用の組成物、キットを提供する。V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞については、上記で説明したとおりである。AVP関連疾患は、AVPの産生または作用が異常である疾患を含む。AVP関連疾患の例には、抗利尿ホルモン以下、ADHとも称す不適合分泌症候群以下、SIADHとも称す、尿崩症が挙げられる。SIADHは、AVPの分泌が不適切に多いか、あるいは腎臓のAVPに対する感受性が異常に高まっているために発症する病気である。SIADHは、単独の病気としておこることは通常なく、別の疾患の合併症あるいは部分症状として発症する。例えば、SIADHは、肺疾患例えば、肺炎、肺結核、中枢神経疾患例えば、髄膜炎、異所性抗利尿ホルモン産生腫瘍例えば、肺癌例えば、肺小細胞癌、膵癌などの疾患に伴って、または、薬剤処置例えば、ビンクリスチン、クロフィブラートに伴って発症する。SIADHの診断は、例えば下記の診断規準表1に基づいてなされる。尿崩症は、AVPの合成または作用が低下し多尿となる疾患である。尿崩症には、中枢性尿崩症と腎性尿崩症が含まれる。中枢性尿崩症の診断は、例えば、1.多尿の確認、2.尿検査:尿糖陰性、尿浸透圧低値、3.5高張食塩水負荷テストによるAVP分泌機能障害の確認、4.画像診断MRIによる視床下部下垂体領域の病変検索、5.デスモプレシン投与による尿濃縮能の確認、によってなされる。インビトロにおいて、AVPの量は、以下の現象を利用して測定され得る。生物試料中にAVPが存在する場合、AVPは本発明により提供される細胞上のV2Rに作用することによりcAMPを増加させる。これにより、CNGカルシウムチャンネルが活性化され、カルシウムの細胞内流入が増加するので、カルシウム感受性タンパク質が発光する。つまり、サンプル中のAVPの存在は、カルシウム感受性タンパク質の発光というアウトプットとして表れる。本発明の一つの実施態様においては、上記の現象を利用し、本発明により提供される組成物を用いることで、生物試料中におけるAVPの量を測定することができる。本明細書において、生物試料には、血液、尿、および血液または血液から調製された試料等の生物由来の試料が含まれ、例えばヒトの血液、ヒトの血液から調製された試料、ヒトの尿、ヒトの尿から調製された試料が含まれる。生物試料は適切な水溶液により適宜希釈されてもよい。例えば、ヒト尿の試料を生理食塩水にて4~20倍に希釈して、本発明により提供される組成物に用いてもよい。本発明により提供される組成物を用い、上記の現象を利用し、ヒトの血中または尿中におけるAVPの量を測定することにより、被験者がAVP関連疾患例えば、尿崩症、SIADHに罹患しているか否かを診断することができる。例えば、被験者がSIADHを発症していると疑われる場合、上記の1で説明した現象を利用し、本発明により提供される組成物を用いて、被験者の血液試料を添加した場合のカルシウム感受性タンパク質の発光量と、被験者の血液試料と同量の正常人の血液試料標準品を添加した場合のカルシウム感受性タンパク質の発光量を測定することにより、SIADHか否かを診断することができる。例えば、被験者の血液試料を添加した場合の発光量が、正常人の血液試料標準品を添加した場合の発光量より高ければ、被験者の血中におけるAVPの濃度が正常人に比較し高いと判断でき、被験者はSIADHであるとの診断の根拠となる。また、例えば、被験者が尿崩症を発症していると疑われる場合、上記の1で説明した現象を利用し、本発明により提供される組成物を用いて、被験者の血液試料を添加した場合のカルシウム感受性タンパク質の発光量と、被験者の血液試料と同量の正常人の血液試料標準品を添加した場合のカルシウム感受性タンパク質の発光量を測定することにより、尿崩症か否かを診断することができる。例えば、被験者の血液試料を添加した場合の発光量が、正常人の血液試料標準品を添加した場合の発光量より低ければ、被験者の血中におけるAVPの濃度が正常人に比較し低いと判断でき、被験者は尿崩症であるとの診断の根拠となる。発光量の測定については、一定時間の積算値を測定することが好ましく、例えば、5秒間、10秒間、15秒間、20秒間、30秒間、40秒間、50秒間、1分間の積算値を測定することができる。本発明により提供される組成物を用いSIADHと診断された患者に輸液を投与する場合には、高張輸液が選択され、本発明により提供される組成物を用い尿崩症と診断された患者に輸液を投与する場合には、低張輸液が選択される。よって、本発明により提供される組成物は、患者に低張輸液または高張輸液のどちらを投与するかを判断するために用いられる。また、本発明により提供される組成物を利用して、ヒトの血中または尿中におけるAVP量を測定することにより、AVP関連疾患を発症する危険性の高いヒト、例えば、SIADHまたは尿崩症を発症する危険性の高いヒトを判定することができる。例えば、健康診断のときに、本発明により提供される組成物を用いて血中のAVPの濃度が、SIADHを発症している患者の数値よりも低く、正常人の数値よりも高ければ、SIADHを発症する危険性の高いヒトと判定でき、血中のAVPの濃度が尿崩症を発症している患者の数値よりも高く、正常人の数値よりも低ければ、尿崩症を発症する危険性の高いヒトと判定できる。また、血中のAVPの濃度が経時的に徐々に増加していれば、SIADHを発症する危険性の高いヒトと判定でき、血中のAVPの濃度が、経時的に徐々に低下していれば、尿崩症を発症する危険性の高いヒトと判定できる。また、さらに、本発明により提供される組成物を利用してヒトの血中または尿中におけるAVPを測定することにより、AVP関連疾患の治療を受けているヒト、例えば、SIADHまたは尿崩症を発症し、その治療を受けているヒトの治療の有効性を判断できる。例えば、本発明により提供される組成物を用いて、治療の前と後の両方で同一個体より採取した血液サンプルにおける、AVPの濃度、該濃度の経時変化を測定することにより、治療の有効性の有無を判定できる。例えば、本発明により提供される組成物を用いて血中のAVPの濃度が治療前に比較し治療後に低下していれば、SIADHの治療が有効であったと判定でき、血中のAVP濃度が、治療前に比較し上昇していれば、尿崩症の治療が有効であったと判定できる。本発明により提供される組成物を用いて、V2Rアゴニストまたはアンタゴニストの活性を測定することができる。例えば、本発明により提供される組成物にV2RアゴニストをAVP非存在下で添加し、カルシウム感受性タンパク質の発光量を定量することにより、V2Rアゴニストの活性を測定できる。また、例えば、本発明により提供される組成物にV2RアンタゴニストをAVP存在下で添加し、カルシウム感受性タンパク質の発光量を定量することにより、V2Rアンタゴニストの活性を測定できる。本発明は、更なる一つの実施態様として、本発明により提供されるV2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を含む組成物に加えて、細胞培養液、検出液、カルシウム感受性タンパク質の発光基質またはその水溶液、細胞培養用プレートまたは試験管、AVPまたはその水溶液および正常人コントロール血清からなる群から選択される少なくとも1つを含み得るキットを提供する。キットの調製は当業者が適宜することができ、限定はされないが、例えば、キットを構成する物質、組成物を個別に梱包し、それらを纏めて一つの箱等の容器に入れて、キットを調製することができる。本発明により提供されるV2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を含む組成物は、適宜調製され得、限定はされないが、例えば、3X106cellsmlの濃度で水溶液に懸濁して調製される。細胞培養液は、本発明により提供される細胞を維持できるものであれば限定されず、Ca2不含またはCa2、Mg2不含であり得る。検出液は、CaCl2、トリパンブルー、イクオリンを発光させうるカルシウムと置換可能な陽イオン例えば、カドミウムイオン、ストロンチウムイオン、マグネシウムイオン、亜鉛イオン、硫酸イオンおよび/または炭酸イオンを含み得る。CaCl2およびトリパンブルーの濃度は、当業者が適宜設定でき、例えば、CaCl2の濃度は9~100mM、トリパンブルーの濃度は、0.001~0.010である。例えば、検出液は、9mMCaCl2、0.002トリパンブルーを含む水溶液である。カルシウム感受性タンパク質の発光量を測定する時のCaCl2の最終濃度は、3~33mMとすることができる。また、例えば、検出液にカルシウムと置換可能な陽イオン、マグネシウムイオン、亜鉛イオン、硫酸イオンおよび/または炭酸イオンを溶解させることで、検出液がカルシウムと置換可能な陽イオン、マグネシウムイオン、亜鉛イオン、硫酸イオンおよび/または炭酸イオンを含み得る。カルシウム感受性タンパク質の発光基質は、イクオリンの発光基質であるセレンテラジンまたはセレンテラジンの誘導体を含み、セレンテラジンの誘導体には、ViviRen登録商標、プロメガ社:8Benzyl26imidazo12apyrazin3butyryloxymethylesterが含まれる。カルシウム感受性タンパク質の発光基質例えばViviRenの濃度は適宜設定され得る。例えば、カルシウム感受性タンパク質の発光基質の水溶液は、4mMViviRenPromega水溶液である。細胞培養用プレートの例としては、ルミノメーターで発光量を測定できるものであり、細胞培養ができる96穴プレートが挙げられる。試験管は、特に限定されず、当業者が適宜選択できる。例えば、カルシウム感受性タンパク質から発せられる発光を測定する装置に適した試験管を用いることができる。AVPは、V2Rのアゴニストとして使用できるものであればよく、ポジティブコントロールとして使用され得る。AVPは、限定はされないが、ヒト由来のAVPであり得る。AVPの濃度は当業者が適宜調整できる。正常人コントロール血清は、ネガティブコントロールとして使用され得るものであり、当業者が適宜調製できる。本発明により提供されるキットは、上述した本発明により提供される組成物と同じ用途に用いることができる。本発明により提供される組成物またはキットは、また、患者の臨床症状および/または他の検査結果を考慮して、医師がAVP関連疾患例えば、SIADH、尿崩症と他の疾患を鑑別するための診断補助にも有用である。例えば、SIADHの症状を示す患者の血液試料中のAVPの量を本発明により提供される組成物またはキットを用いて測定することは、SIADHと心不全等との鑑別診断に有用であり得、また、尿崩症の症状を示す患者の血液試料中のAVPの量を本発明により提供される組成物またはキットを用いて測定することは、尿崩症と心因性多飲症等との鑑別診断に有用であり得る。一つの実施態様として、本発明により提供されるV2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を含む組成物は、感度よく、AVP、V2RアゴニストまたはV2Rアンタゴニストを検出できる。よって、一つの好ましい実施態様として、本発明により提供されるキットには、生物試料よりAVP、V2RアゴニストまたはV2Rアンタゴニストを濃縮する為の器具または装置例えば、カラム例えば、Sep-PakC18カラムなどのC18カラム、限外ろ過装置等を含まない。3.GLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキット本発明は、一つの実施態様として、GLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキットを提供する。GLP-1受容体は、GLP-1ペプチドが結合する受容体の一種であり、アデニル酸シクラーゼを活性化してcAMPを増加させる受容体である。GLP-1受容体の由来は哺乳類であれば特に限定されず、例えば、ヒト、マウス、ウシ、ラットであり得る。また、GLP-1受容体は、適宜、そのアミノ酸配列において、1個または数個例えば、2、3、4、5、6、7、8、9または10個のアミノ酸が改変付加、置換、欠失等されてもよく、または、GLP-1受容体は、天然のGLP-1受容体に対して、アミノ酸配列の同一性が、70以上、80以上、85以上、90以上、95以上、98以上または99以上であるアミノ酸配列からなるタンパク質であって、GLP-1が結合し、アデニル酸シクラーゼを活性化してcAMPを増加させる機能を有するタンパク質であってもよい。GLP-1受容体は、配列番号8に示されるアミノ酸配列を有するタンパク質であり得る。さらに、GLP-1受容体は、配列番号8に示されるアミノ酸配列との同一性が、70以上、80以上、85以上、90以上、95以上、98以上または99以上であるアミノ酸配列からなるタンパク質であって、GLP-1が結合し、アデニル酸シクラーゼを活性化してcAMPを増加させる機能を有するタンパク質であり得る。また、本明細書において、GLP-1関連ペプチドは哺乳類由来であれば特に限定されず、例えば、ヒト、マウス、ウシ、ラット、ウサギ由来であり得る。GLP-1は、適宜、そのアミノ酸配列において、1個または数個例えば、2、3、4、5、6、7、8、9または10個のアミノ酸が改変付加、置換、欠失等されてもよく、さらに当該ペプチド中アミノ酸に脂肪酸などの修飾基を導入したものでもよく、天然GLP-1に対して、アミノ酸配列の同一性が、70以上、80以上、85以上、90以上、95以上、98以上または99以上であるアミノ酸配列からなるタンパク質であって、GLP-1受容体に結合し、アデニル酸シクラーゼを活性化してcAMPを増加させる機能を有するタンパク質であってもよい。また、GLP-1様生理活性ペプチド薬は哺乳類由来に限定されず、例えば、トカゲ由来でも良く、天然GLP-1に対してアミノ酸配列の同一性が50、60、70、80、90、95または98以上であるタンパク質であって、GLP-1受容体に結合し、アデニル酸シクラーゼを活性化してcAMPを増加させる機能を有するタンパク質であってもよい。GLP-1様生理活性ペプチド薬の例としては、エキセナチド、リナグルチドが挙げられる。cAMP依存性カルシウムチャンネルおよびカルシウム感受性タンパク質については、上記2.V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキットで説明したものを使用することができる。本発明により提供されるGLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞において、GLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質は、それぞれ、細胞に一過性または安定的に発現する。細胞は、特に限定されず、CHO細胞、HEK293細胞、3T3細胞等の細胞株であり得る。例えば、本発明により提供されるGLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞は、GLP-1受容体が配列番号8で示されるアミノ酸配列からなり、cAMP依存性カルシウムチャンネルが、配列番号2で示されるアミノ酸配列からなる改変CNGカルシウムチャンネルであり、カルシウム感受性タンパク質が、配列番号3で示されるアミノ酸配列からなる改変アポイクオリンであり、各タンパク質を安定的に発現させたCHO細胞であり得る。さらに、例えば、本発明により提供されるGLP-1受容体細胞は、GLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、カルシウム感受性タンパク質のそれぞれが、配列番号8,2,3のアミノ酸配列に対して、70以上、80以上、85以上、90以上、95以上、98以上または99以上の同一性を有するアミノ酸配列からなるタンパク質であって、それぞれが、GLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、またはカルシウム感受性タンパク質の機能を保持したタンパク質を安定的に発現させたCHO細胞であり得る。また、GLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質からなる群から選択される1以上のタンパク質を天然に発現する細胞を用いてもよく、該細胞に発現していないタンパク質を一過的または安定的に発現させることで、本発明により提供されるGLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を調製することもできる。このような例として、GLP-1受容体を内在的に発現する膵臓由来の細胞に、cAMP依存性カルシウムチャンネルおよびカルシウム感受性タンパク質を、それぞれ、一過性または安定的に強制発現させた細胞、CNGカルシウムチャンネルを内在的に発現する嗅組織由来の細胞に、GLP-1受容体およびカルシウム感受性タンパク質を、それぞれ、一過性または安定的に強制発現させた細胞が挙げられる。本発明により提供されるGLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞は凍結保存することができる。凍結保存は、上記2.V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキットで説明したV2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞と同様に実施できる。本発明により提供されるGLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞は、凍結保存し、それを温浴等で解凍した後にも、ヒト血中に存在するGLP-1を検出するのに十分な感受性を保持する。また、解凍後に適切な容器に播種し、適切な培地中で培養を数時間程度行うだけで、GLP-1の検出のために添加される試薬や、ヒト血液由来の成分により、細胞の状態が悪くなることはない。本発明は、GLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を含む、インビトロでの活性型GLP-1量の測定用、GLP-1受容体アゴニストまたはアンタゴニストの活性測定用、またはGLP-1関連疾患の治療を受けているヒトの治療効果の判定用の組成物、キットを提供する。GLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞については、上記で説明したとおりである。GLP-1関連疾患は、2型糖尿病などGLP-1の作用増強がその治療に望ましい疾患を含む。2型糖尿病治療において、GLP-1作用の増強を目的にして、GLP-1分解酵素の一つであるDPP-IVの阻害剤が使用される。あるいは、DPP-IVによる分解に耐性を持つGLP-1類似体がその治療に使用される。インビトロにおいて、GLP-1の量は、以下の現象を利用して測定され得る。生物試料中に活性型GLP-1が存在する場合、活性型GLP-1は本発明により提供される細胞上のGLP-1受容体に作用することによりcAMPを増加させる。これにより、CNGカルシウムチャンネルが活性化され、カルシウムの細胞内流入が増加するので、カルシウム感受性タンパク質が発光する。つまり、サンプル中の活性型GLP-1の存在は、カルシウム感受性タンパク質の発光というアウトプットとして表れる。本発明の一つの実施態様においては、上記の現象を利用し、本発明により提供される組成物を用いることで、生物試料中における活性型GLP-1の量を測定することができる。生物試料については、上記2.V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキットで説明したとおりである。また、さらに、本発明により提供される組成物を利用してヒトの血中または尿中における活性型GLP-1を測定することにより、GLP-1関連疾患の治療を受けているヒト、例えば、2型糖尿病を発症し、活性型GLP-1量を増加させる治療を受けているヒトの治療の有効性を判断できる。例えば、本発明により提供される組成物を用いて、治療の前と後の両方で同一個体より採取した血液サンプルにおける、活性型GLP-1濃度、該濃度の経時変化を測定することにより、治療の有効性の有無を判定できる。例えば、本発明により提供される組成物を用いて血中の活性型GLP-1濃度が、治療前に比較し上昇していれば、活性型GLP-1量を増加させる治療薬例えば、DPP-IV阻害剤が有効であったと判定できる。本発明により提供される組成物を用いて、GLP-1アゴニストまたはアンタゴニストの活性を測定することができる。例えば、本発明により提供される組成物にGLP-1アゴニストをGLP-1非存在下で添加し、カルシウム感受性タンパク質の発光量を定量することにより、GLP-1アゴニストの活性を測定できる。また、例えば、本発明により提供される組成物にGLP-1アンタゴニストをGLP-1存在下で添加し、カルシウム感受性タンパク質の発光量を定量することにより、GLP-1アンタゴニストの活性を測定できる。本発明は、GLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を含む組成物に加えて、細胞培養液、検出液、カルシウム感受性タンパク質の発光基質またはその水溶液、細胞培養用プレートまたは試験管、GLP-1またはその水溶液、正常人コントロール血漿から選択される少なくとも1つを含み得るキットを提供する。キットの調製は当業者が適宜することができ、限定はされないが、例えば、キットを構成する物質、組成物を個別に梱包し、それらを纏めて一つの箱等の容器に入れて、キットを調製することができる。GLP-1は、GLP-1受容体のアゴニストとして使用できるものであればよく、ポジティブコントロールとして使用され得る。GLP-1は、限定はされないが、ヒト由来のGLP-1であり得る。GLP-1の濃度は当業者が適宜調整できる。その他のキットに含まれる物質については、上記2.V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキットを参考に調製することができる。本発明により提供されるキットは、上述した本発明により提供される組成物と同じ用途に用いることができる。一つの実施態様として、本発明により提供されるGLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を含む組成物は、感度よく、GLP-1、GLP-1受容体アゴニストまたはGLP-1受容体アンタゴニストを検出できる。よって、一つの好ましい実施態様として、本発明により提供されるキットには、生物試料よりGLP-1、GLP-1受容体アゴニストまたはGLP-1受容体アンタゴニストを濃縮する為の器具または装置例えば、カラム例えば、Sep-PakC18カラムなどのC18カラム、限外ろ過装置等を含まない。さらに、一つの実施態様として、本発明により提供されるキットは、活性型GLP-17-36および活性型GLP-17-37の両方の合計量を一回の操作で測定できる。4.V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を用いたバイオアッセイ法本発明は、また、一つの実施態様として、下記工程A~C:AV2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、カルシウム感受性タンパク質の発光基質、Ca2不含の培地、および被験者由来の生物試料を含む混合物を調製する;BAで調製した混合物にCa2含有溶液を添加する;およびC該細胞より発生するカルシウム感受性タンパク質の発光を測定する、を含む、生物試料中のAVP量の測定方法、AVP関連疾患を診断する方法、AVP関連疾患を発症する危険性を判定する方法または、AVP関連疾患の治療の有効性を判定する方法、を提供する。上記工程で用いる試薬、装置、生物試料等の物質および上記工程の条件は、上述した2.V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキットを参考にして、当業者が適宜調製または設定できる。Ca2含有溶液の例としては、CaCl2溶液が挙げられる。上記方法の工程Aに記載した物質をいかなる順番で添加するかは、当業者が適宜設定できる。例えば、本発明は、下記工程:1カルシウム感受性タンパク質の発光基質を添加したCa2不含の培地中で懸濁したV2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を、細胞培養用プレートに播種する工程;2被験者由来の生物試料を細胞に添加し、培養する工程;および3培養細胞にCaCl2溶液を添加し、該細胞より発生するカルシウム感受性タンパク質の発光を測定する工程を含む、生物試料中のAVP量の測定方法、AVP関連疾患を診断する方法、AVP関連疾患を発症する危険性を判定する方法、または、AVP関連疾患の治療の有効性を判定する方法を提供する。本発明により提供される細胞の培養は、無菌培養であってもよいが、無菌的な培養である必要はない。例えば、本発明により提供される細胞の培養時間が4時間以内であれば、時間が短いので無菌的な培養である必要はない。イクオリン等のカルシウム感受性タンパク質の発光はCaCl2溶液の添加後すぐに行われ、当業者により周知の方法で測定できる。例えば、攪拌と測定が自動で連続してできるルミノメーターPerkinElmer社、ARVOSxを使用し、攪拌後15-30秒間の発光値を積算して発光量を測定することができる。発光量の測定に使用できる装置は、当業者が適宜選択できる。上記方法を実施した結果得られたカルシウム感受性タンパク質の発光量に基づき、生物試料中のAVP量が測定される。測定されたAVP量に基づき、AVP関連疾患が診断され、AVP関連疾患を発症する危険性が判定され、または、AVP関連疾患の治療の有効性が判定される。例えば、SIADHが疑われる被験者の血液試料を添加した場合の発光量が、正常人の血液試料標準品を添加した場合の発光量より高ければ、被験者の血中におけるAVPの濃度が正常人に比較し高いと判断でき、被験者はSIADHであると判定される。また、例えば、尿崩症が疑われる被験者の血液試料を添加した場合の発光量が、正常人の血液試料標準品を添加した場合の発光量より低ければ、被験者の血中におけるAVPの濃度が正常人に比較し低いと判断でき、被験者は尿崩症であると判定される。一つの実施態様として、本発明により提供されるV2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を含む組成物は、感度よく、AVP、V2RアゴニストまたはV2Rアンタゴニストを検出できる。よって、一つの好ましい実施態様として、本発明により提供される方法には、生物試料よりAVP、V2RアゴニストまたはV2Rアンタゴニストを濃縮する工程例えば、カラム例えば、Sep-PakC18カラムなどのC18カラムを使用する工程、限外ろ過装置を使用する工程、遠心濃縮装置を使用する工程等を含まない。また、本発明は、更なる一つの実施態様として、下記工程A’~C’:A’V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、カルシウム感受性タンパク質の発光基質、Ca2不含の培地、および被験化合物を含む混合物を調製する;B’A’で調製した混合物にCa2含有溶液を添加する;およびC’該細胞より発生するカルシウム感受性タンパク質の発光を測定する、を含む、V2Rアゴニストまたはアンタゴニストの活性を測定する方法、またはV2Rアゴニストまたはアンタゴニストをスクリーニングする方法、を提供する。ここで、V2Rアンタゴニストの活性を測定する、またはV2Rアンタゴニストをスクリーニングする場合は、工程A’の混合物にさらにAVPを適量添加する。上記工程で用いる試薬、装置等の物質および上記工程の条件は、上記2.V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキットおよび上記工程A-Cを含む本発明により提供される方法の記載を参考にして、当業者が適宜調製または設定できる。当業者は、上記方法を実施した結果得られたカルシウム感受性タンパク質の発光量に基づき、適宜、被験化合物のV2Rアゴニスト活性またはV2Rアンタゴニスト活性を定量することができ、また、被験化合物がV2Rアゴニストであるか否か、V2Rアンタゴニストであるか否かを判断することができる。本発明は、また、更なる一つの実施態様として、下記工程A’’~C’’:A’’V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、カルシウム感受性タンパク質の発光基質、Ca2含有の培地、AVPおよび被験化合物を含む混合物を調製する;B’’A’’で調製した混合物にフォルスコリンを添加する;およびC’’該細胞より発生するカルシウム感受性タンパク質の発光を測定する、を含むV2Rアンタゴニストの活性測定方法、またはV2Rアンタゴニストをスクリーニングする方法、を提供する。上記工程で用いる試薬、装置等の物質および上記工程の条件は、上述した2.V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキットの記載および上記工程A-Cを含む本発明により提供される方法の記載を参考にして、当業者が適宜調製または設定できる。本方法は、cAMP依存性カルシウムチャンネルの脱感作を利用して、V2Rアンタゴニストの活性を検出する。具体的には、被験化合物がV2Rアンタゴニストであれば、AVPがV2Rに結合することは阻害される。この状態で、アデニレートサイクラーゼを活性化するフォルスコリンforskolinを添加すれば、cAMPが生成され、これがcAMP依存性カルシウムチャンネル例えば、CNGカルシウムを活性化させるので、カルシウム感受性タンパク質が発光する。しかしながら、被験化合物がV2Rアンタゴニストでなければ、AVPがV2Rに結合するので、フォルスコリンを添加する前にcAMPが生成され、cAMP依存性カルシウムチャンネル例えば、CNGカルシウムは活性化される。この状態で次にフォルスコリンを添加しても、一度活性化されたcAMP依存性カルシウムチャンネルは脱感作され、フォルスコリンの添加によって活性化されず、カルシウム感受性タンパク質は発光しない。1つの実施態様として、本発明により提供される工程A’’~C’’を含む方法は、高濃度域でのV2Rアンタゴニストの阻害活性を正確に定量できる。当業者は、上記方法を実施した結果得られたカルシウム感受性タンパク質の発光量に基づき、適宜、被験化合物のV2Rアンタゴニストの活性を定量することができ、また、被験化合物がV2Rアンタゴニストであるか否かを判断することができる。V2Rアンタゴニストは、血圧降下薬、低ナトリウム血症治療薬、SIADH治療薬等に利用できるので、上記方法を実施した結果V2Rアンタゴニストと判断された化合物を含む組成物を、血圧降下剤、低ナトリウム血症治療剤、SIADH治療剤として調製できる。5.GLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を用いたバイオアッセイ法本発明は、一つの実施態様として、下記工程A~C:AGLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、カルシウム感受性タンパク質の発光基質、Ca2不含の培地、および被験者由来の生物試料を含む混合物を調製する;BAで調製した混合物にCa2含有溶液を添加する;およびC該細胞より発生するカルシウム感受性タンパク質の発光を測定する、を含む、生物試料中の活性型GLP-1量の測定方法、GLP-1関連疾患を発症する危険性を判定する方法または、GLP-1関連疾患の治療の有効性を判定する方法、を提供する。上記工程で用いる試薬、装置、生物試料等の物質および上記工程の条件は、上述した3.GLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキットおよび4.V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を用いたバイオアッセイ法の記載を参考にして、当業者が適宜調製または設定できる。上記方法の工程Aに記載した物質をいかなる順番で添加するかは、当業者が適宜設定できる。例えば、本発明は、下記工程:1カルシウム感受性タンパク質の発光基質を添加したCa2不含の培地中で懸濁したGLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を、細胞培養用プレートに播種する工程;2被験者由来の生物試料を細胞に添加し、培養する工程;および3培養細胞にCaCl2溶液を添加し、該細胞より発生するカルシウム感受性タンパク質の発光を測定する工程を含む、生物試料中の活性型GLP-1量の測定方法、または、GLP-1関連疾患の治療の有効性を判定する方法を提供する。工程2の培養は、無菌培養であってもよいが、無菌的な培養である必要はない。例えば、工程2の培養時間が4時間以内であれば、時間が短いので無菌的な培養である必要はない。工程3において、イクオリン等のカルシウム感受性タンパク質の発光はCaCl2溶液の添加後すぐに行われ、当業者により周知の方法で測定できる。例えば、攪拌と測定が自動で連続してできるルミノメーターPerkinElmer社、ARVOSxを使用し、攪拌後15-30秒間の発光値を積算して発光量を測定することができる。発光量の測定に使用できる装置は、当業者が適宜選択できる。一つの実施態様として、本発明により提供されるGLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を含む組成物は、感度よく、GLP-1、GLP-1受容体アゴニストまたはGLP-1受容体アンタゴニストを検出できる。よって、一つの好ましい実施態様として、本発明により提供される方法には、生物試料よりGLP-1、GLP-1受容体アゴニストまたはGLP-1受容体アンタゴニストを濃縮する工程例えば、カラム例えば、Sep-PakC18カラムなどのC18カラムを使用する工程、限外ろ過装置を使用する工程、遠心濃縮装置を使用する工程等を含まない。さらに、一つの実施態様として、本発明により提供される方法は、活性型GLP-17-36および活性型GLP-17-37の両方の合計量を一回の操作で測定できる。また、本発明は、下記工程A’~C’:A’GLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、カルシウム感受性タンパク質の発光基質、カルシウム不含の培地、および被験化合物を含む混合物を調製する;B’A’で調製した混合物にカルシウム含有溶液を添加する;およびC’該細胞より発生するカルシウム感受性タンパク質の発光を測定する、を含む、GLP-1受容体アゴニストまたはアンタゴニストの活性を測定する方法、またはGLP-1受容体アゴニストまたはアンタゴニストをスクリーニングする方法、を提供する。ここで、GLP-1受容体アンタゴニストの活性を測定する、またはGLP-1受容体アンタゴニストをスクリーニングする場合は、工程A’の混合物にさらにGLP-1を適量添加する。上記工程で用いる試薬、装置等の物質および上記工程の条件は、上述した3.GLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキットおよび4.V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を用いたバイオアッセイ法の記載および上記工程A-Cを含む本発明により提供される方法の記載を参考にして、当業者が適宜調製または設定できる。当業者は、上記方法を実施した結果得られたカルシウム感受性タンパク質の発光量に基づき、適宜、被験化合物のGLP-1受容体アゴニスト活性またはGLP-1受容体アンタゴニスト活性を定量することができ、また、被験化合物がGLP-1受容体アゴニストであるか否か、アンタゴニストであるか否かを判断することができる。GLP-1受容体アゴニストは、2型糖尿病の治療薬に利用できるので、上記方法を実施した結果GLP-1受容体アゴニストと判断された化合物を含む組成物を2型糖尿病治療剤として調製できる。本発明は、また、一つの実施態様として、下記工程A’’~C’’:A’’GLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、カルシウム感受性タンパク質の発光基質、Ca2含有の培地、GLP-1および被験化合物を含む混合物を調製する;B’’A’’で調製した混合物にフォルスコリンを添加する;およびC’’該細胞より発生するカルシウム感受性タンパク質の発光を測定する、を含むGLP-1受容体アンタゴニストの活性測定方法、またはGLP-1受容体アンタゴニストをスクリーニングする方法、を提供する。上記工程で用いる試薬、装置等の物質および上記工程の条件は、上述した3.GLP-1受容体、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞、並びに該細胞を含む組成物およびキットおよび4.V2R、cAMP依存性カルシウムチャンネル、およびカルシウム感受性タンパク質を発現する細胞を用いたバイオアッセイ法の記載および上記工程A-Cを含む本発明により提供される方法の記載を参考にして、当業者が適宜調製または設定できる。当業者は、上記方法を実施した結果得られたカルシウム感受性タンパク質の発光量に基づき、適宜、被験化合物のGLP-1受容体アンタゴニストの活性を定量することができ、また、被験化合物がGLP-1受容体アンタゴニストであるか否かを判断することができる。以下、実施例により本発明をさらに説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。A.V2Rを発現する細胞に関する実験1.凍結細胞の構築方法の詳細ヒト由来のcDNAライブラリーからPCR法によりヒトV2RのcDNA配列GenbankNoNM0011461511配列番号5を増幅し、pUC18にクローニングした。pUC18にクローン化したヒトバソプレッシン受容体アイソフォーム2のcDNAをpEF2ベクターにリクローニングし、pEFhV2Rを作成した。マウス臭上皮細胞由来のcDNAライブラリーからサイクリックヌクレオチド依存型のカルシウムチャンネルGenbankNoBC048775配列番号4をPCR法で増幅し1994bp発現ベクターpCMVSPORTInvitrogenにクローニングしてpmCNGα2図18を作成した。更に、cAMPに対する選択性と感度を上昇させるために、460番目のシステインをトリプトファンに、583番目のグルタミン酸をメチオニンMにアミノ酸置換を導入した改変サイクリックヌクレオチド依存型のカルシウムチャンネル配列番号6を発現するコンストラクトpmCNGα2MWを点変異PCR法により作成した。また、オリゴDNA伸長法によってヒト型のコドン頻度に最適化し、ミトコンドリア移行シグナルを有する合成アポイクオリンcDNA配列676bp配列番号7を、KpnINheIで制限酵素処理し、KpnINheIで処理したpcDNA31にクローニングし、イクオリン発現ベクターpcDNAmtsAEQ図13を作成した。CHO細胞株を10cm2シャーレに細胞濃度10x105cellsmlで播種した。翌日、シャーレあたり1μgのpEF2V2R、2μgのpmCNGα2MW2μgのpcDNAmtsAEQをFuGENE6TMロッシュ社を用いて遺伝子導入した。翌日、シャーレに400μLのベルセン溶液を添加し、細胞をシャーレより剥がし、10mLの5cFCSを含むDMEMF12培地に懸濁した。得られた懸濁液を1000回転で5分間遠心分離後、ペレットを25×106cellsmLの濃度で1mLのセルバンカーに溶解させ80°Cで保存した。2.凍結細胞をもちいたAVPの濃度依存曲線と最低検出感度1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ10mLの洗浄バッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心後、得られた沈殿に12mLのカルチャーバッファー5PEG6000カルシウム不含CO2インディペンデント培地を加えて6μL4mMViviRenを添加し、50μLwellで96穴プレートに播種した。さらに、サンプルバッファーで段階希釈したAVPを50μL添加しn3、室温で3時間培養した。3mMCaCl2液を100μLwellで添加しルミノメーターPerkinElmer社、ARVOSx、以下、実施例において同機種を使用したで発光量を測定した。図1にAVPの濃度依存曲線を示した。低濃度域について拡大した図2で示したようにブランク値の3SDの値を有意に分離できるAVPの最低検出感度は、063pgmLで、あった。また、イクオリンは、発光反応を利用しているため、本法では、高いブランクシグナル比SN比80pgmLAVPSN比、約56倍が得られた。4.イクオリン発光基質の添加後の培養時間の検討1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ12mLの洗浄バッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心後、得られた沈殿に12mLのカルチャーバッファーを加えて6μL4mMViviRenを添加し、50μLwellで96穴プレートに播種した。カルチャーバッファーで段階希釈したAVPを50μL添加し、12345時間後、3mMCaCl2液を100μLwellで添加しルミノメーターで発光量を測定した。Viviren添加後4時間で発光量は、プラトーに達することがわかった図3参照。5.トランスフェクションするレセプタープラスミド量の検討CHO細胞を10cm2シャーレに1×105cellsmL濃度のCHO細胞を10mL播種し、1日培養後、3ugpcDNAmtsAEQ1ugpmCNGα2MWと0~1ugのpEF2V2Rプラスミドを混合し、600μLDMEMF12、18μLFugene6を混合し、トランスフェクションを行った。さらに一晩培養後、培地を除去し、10mLPBSで洗った後、800μLのベルセンを加えて37°C5分間培養した後10mLの洗浄バッファーに懸濁した。1000rpm5分間遠心した後、沈殿を12mLのカルチャーバッファーに溶解させ、65μLの4mMVivirenを添加した。AVPの濃度系列を50μL添加した96穴プレートに、50μLwellで細胞懸濁液を播種した。室温で3時間培養した後、3mMCaCl2液を100μLwellで添加しルミノメーターで発光量を測定した。最適な発光量を得るには、受容体プラスミドについて1ugplate量のトランスフェクションが必要であることが明らかになった図4参照。6.細胞濃度の最適化1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ10mLのサンプルバッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心後、得られた沈殿に10mLのサンプルバッファーを加えた。細胞濃度を10×105cellsmL~2×106cellsmL濃度に調整した細胞系列を作成し、6μL4mMViviRenを添加し懸濁した。カルチャーバッファーで段階希釈したAVPを50μL添加した96穴プレートに細胞懸濁液を播種した。3時間培養した後、3mMCaCl2液を100μLwellで添加しルミノメーターで発光量を測定した。図5および図6に示すように細胞濃度に依存して発光量は増加した。7.CaCl2検出液の添加濃度の検討1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ10mLの洗浄バッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心後、得られた沈殿に12mLのカルチャーバッファーを加えて6μL4mMViviRenを添加し、50μLwellで96穴プレートに播種した。カルチャーバッファーで段階希釈したAVPを50μL添加し、3時間培養した。最終濃度0~30mMのCaCl2検出液を100μLwellで添加しルミノメーターで発光量を測定した。バックグラウンド0での値が低く、サンプルで発光量が高い30mMのCaCl2濃度が最適であることが明らかになった図7参照。8.AVP溶液を用いた希釈直線性の検討1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ10mLの洗浄バッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心後、得られた沈殿に12mLのカルチャーバッファーを加えて6μL4mMViviRenを添加し、50μLwellで96穴プレートに播種した。AVP溶液をサンプルバッファーにて121418116132倍に希釈し、3時間培養した。3時間培養後、3mMCaCl2液を100μLwellで添加しルミノメーターで発光量を測定した。図8に示したように、直線性をもって発光量が増加することが確認された。11.AVP溶液を用いた既存キットとの感度比較1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ10mLの洗浄バッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心後、得られた沈殿に12mLのカルチャーバッファーを加えて6μL4mMViviRenを添加し、50μLwellで96穴プレートに播種した。AVP溶液をサンプルバッファーにて121418116132倍に希釈し、3時間培養した。別途、既存の三菱化学メディエンス社のAVPRIAキットにて測定した値を示した。RIAキットは、放射ラベルしたAVPに対する競合阻害率で表記される。したがって、比較上、100100で表記した。既存のRIAキットと比較して、20pgmL以上の用量においても線形性が保たれ、感度が優れていることが分かった図9参照。12.ヒト臨床検体を用いた検討1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ10mLの洗浄バッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心後、得られた沈殿に12mLのカルチャーバッファーを加えて6μL4mMViviRenを添加し、50μLwellで96穴プレートに播種した。標準液となるAVPの希釈系列、正常人血漿、及びAVPを添加して作成した高値血漿を用いた。検体80μLに320μLのカルチャーバッファーを加えて希釈し、50μLwellでプレートに添加し、3時間培養した。3mMCaCl2液を100μLwellで添加し、ルミノメーターで発光量を測定した。13.凍結細胞を用いたキットの発光の経時変化の検討1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ10mLの洗浄バッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心後、得られた沈殿に12mLのカルチャーバッファーを加えて6μL4mMViviRenを添加し、50μLwellで96穴プレートに播種した。カルチャーバッファーで段階希釈したAVPを50μL添加し、3時間培養した。3mMCaCl2液を100μLwellで添加し、3秒撹拌後、12秒間経時的にルミノメーターで発光量を測定した。その結果、図11に示すように、CaCl2液添加直後から比較的安定した発光が観察された。14.脱感作によるAVP及びV2Rアンタゴニストの検出の検討1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ10mLの洗浄バッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心分離した。得られた沈殿に12mLのカルチャーバッファーを加えて6μLの4mMViviRenを添加し、50μLwellで96穴プレートに播種した。カルシウム含のカルチャーバッファーで段階希釈したAVP、及びOPC41061を50μL添加し、3時間培養した。107MのAVPを50μLwellで添加し、ルミノメーターで発光量を測定した。バソプレッシンアンタゴニストであるOPC41061は、濃度依存的に添加されたAVPの作用を抑制した図14。また、AVPと細胞をカルシウム含培地で反応させた場合は、高濃度のAVP存在下では、一度反応がおこっているため、再度のAVP添加によっては発光が起こらなかった。脱感作により濃度依存的にAVPの添加によって発光量は減少した図15。脱感作によってもAVPを定量できることがわかった。さらに、つづけて、104Mのフォルスコリンを50μLwellで添加し、ルミノメーターで発光量を測定した。バソプレッシンアンタゴニストにより添加したAVPの作用が抑制された場合のみ、フォルスコリンによる発光が濃度依存的に検出され、脱感作によってバソプレッシンアンタゴニストが検出できることがわかった。B.GLP-1受容体を発現する細胞に関する実験1.凍結細胞の構築方法の詳細ヒト由来のcDNAライブラリーからPCR法によりヒトGLP-1受容体のcDNA配列GenbankNoBC113493配列番号9を増幅し、pUC18にクローニングした。pUC18にクローン化したヒトGLP-1受容体のcDNAをpCIneoベクターにリクローニングし、pCIneoGLP1Rを作製した。マウス臭上皮細胞由来のcDNAライブラリーからサイクリックヌクレオチド依存型のカルシウムチャンネルGenbankNoBC048775をPCR法で増幅し1994bp発現ベクターpCMVSPORTInvitrogenにクローニングしてpmCNGα2を作成した。更に、cAMPに対する選択性と感度を上昇させるために、460番目のシステインをトリプトファンに、583番目のグルタミン酸をメチオニンMにアミノ酸置換を導入した改変サイクリックヌクレオチド依存型のカルシウムチャンネルを発現するコンストラクトpmCNGα2MWを点変異PCR法により作成した。また、オリゴDNA伸長法によってヒト型のコドン頻度に最適化し、ミトコンドリア移行シグナルを有する合成アポイクオリンcDNA配列676bpを、KpnINheIで制限酵素処理し、KpnINheIで処理したpcDNA31にクローニングし、イクオリン発現ベクターpcDNAmtsAEQを作成した。CHO細胞株を10cm2シャーレに細胞濃度10x105cellsmlで播種した。翌日、シャーレあたり01μgのpCIneoGLP1R、1μgのpmCNGα2MW4μgのpcDNAmtsAEQをFuGENE6TMロッシュ社を用いて遺伝子導入した。翌日、シャーレに400μLのベルセン溶液を添加し、細胞をシャーレより剥がし、10mLの5cFCSを含むDMEMF12培地に懸濁した。得られた懸濁液を1000回転で5分間遠心分離後、ペレットを25×106cellsmLの濃度で1mLのセルバンカーに溶解させ80°Cで保存した。2.凍結細胞をもちいたGLP1の濃度依存曲線と最低検出感度1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ10mLの洗浄バッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心後、得られた沈殿に12mLのカルチャーバッファー5PEG6000カルシウム不含CO2インディペンデント培地を加えて6μL4mMViviRenを添加し、90μLwellで96穴プレートに播種した。さらに、サンプルバッファーで段階希釈した活性型GLP1を10μL添加しn3、室温で3時間培養した。100mMCaCl2液を50μLwellで添加しルミノメーターPerkinElmer社、ARVOSx、以下、実施例において同機種を使用したで発光量を測定した。図17に活性型GLP1の濃度依存曲線を示した。ブランク値の3SDの値を有意に分離できる活性型GLP-1の最低検出感度は、0078pgmLで、あった。また、イクオリンは、発光反応を利用しているため、本法では、高いブランクシグナル比SN比33pgmL活性型GLP-1SN比、約9.3倍が得られた。3.イクオリン発光基質の添加後の培養時間の検討1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ12mLの洗浄バッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心後、得られた沈殿に12mLのカルチャーバッファーを加えて6μL4mMViviRenを添加し、90μLwellで96穴プレートに播種した。カルチャーバッファーで段階希釈した活性型GLP1を10μL添加し、0123457時間後、100mMCaCl2液を50μLwellで添加しルミノメーターで発光量を測定した。Viviren添加後3時間で発光量は、プラトーに達することがわかった図18参照。4.トランスフェクションするレセプタープラスミド量の検討CHO細胞を10cm2シャーレに07×105cellsmL濃度のCHO細胞を10mL播種し、1日培養後、4ugpcDNAmtsAEQ1ugpmCNGα2MWと0~1ugのpCIneoGLP-1受容体プラスミドを混合し、600μLDMEMF12、18μLFugene6を混合し、トランスフェクションを行った。さらに一晩培養後、培地を除去し、10mLPBSで洗った後、800μLのベルセンを加えて37°C5分間培養した後10mLの洗浄バッファーに懸濁した。1000rpm5分間遠心した後、沈殿を12mLのカルチャーバッファーに溶解させ、6μLの4mMVivirenを添加した。GLP-1の濃度系列を10μL添加した96穴プレートに、90μLwellで細胞懸濁液を播種した。室温で3時間培養した後、100mMCaCl2液を50μLwellで添加しルミノメーターで発光量を測定した。最適な発光量を得るには、受容体プラスミドについて01ugplate量のトランスフェクションが必要であることが明らかになった図19参照。5.細胞濃度の最適化1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ10mLのサンプルバッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心後、得られた沈殿に10mLのサンプルバッファーを加えた。細胞濃度を125×105cellsmL~1×106cellsmL濃度に調整した細胞系列を作成し、6μL4mMViviRenを添加し懸濁した。カルチャーバッファーで段階希釈したGLP1を50μL添加した96穴プレートに細胞懸濁液を播種した。3時間培養した後、100mMCaCl2液を100μLwellで添加しルミノメーターで発光量を測定した。図20および図21に示すように細胞濃度に依存して発光量は増加した。6.GLP-1溶液を用いた希釈直線性の検討1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ10mLの洗浄バッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心後、得られた沈殿に12mLのカルチャーバッファーを加えて6μL4mMViviRenを添加し、50μLwellで96穴プレートに播種した。GLP1溶液をサンプルバッファーにて121418116132倍に希釈し、3時間培養した。3時間培養後、100mMCaCl2液を50μLwellで添加しルミノメーターで発光量を測定した。図22に示したように、直線性をもって発光量が増加することが確認された。7.GLP1溶液を用いた既存キットとの感度比較1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ10mLの洗浄バッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心後、得られた沈殿に12mLのカルチャーバッファーを加えて6μL4mMViviRenを添加し、90μLwellで96穴プレートに播種した。AVP溶液をサンプルバッファーにて121418116132倍に希釈し、4時間培養した。別途、既存のミリポア社のGLP1ELISAキットEGLP35Kにて測定した値を示した。ELISAキットは、蛍光強度として、本キットは化学発光強度として測定されるため、比較上、各最大発光量に対する相対値で表記した。既存のELISAキットと比較して、1pgmL以下の用量においても線形性が保たれ、感度が優れていることが分かった図23参照。最低検出感度は、それぞれ、既存ELISAキットでは373pgml、本キットでは0078pgmlであった。また、本発明により提供されるキットは、既存のELISAキットと比較して測定可能な活性型GLP-1の濃度範囲が大きいことが分かった図23参照。8.GLP-1類似ペプチドを用いたキット特異性検討1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ10mLの洗浄バッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心後、得られた沈殿に12mLのカルチャーバッファーを加えて6μL4mMViviRenを添加し、90μLwellで96穴プレートに播種した。GLP-1類似ペプチド溶液をサンプルバッファーにて1101100110001100001105倍に希釈し、3時間培養した。本キットにおけるGLP-1類似ペプチド測定感度を、それぞれのEC50値pMで示した図24参照。GLP-1受容体に対する弱いアゴニストである前駆体GLP-11-37、オキシントモジュリン、グルカゴンについては、活性型GLP-1であるGLP-17-37、GLP-17-36アミドに比較して、一万倍の高濃度で反応を示した。また、活性型GLP-1が生体内で分解されて生成するGLP-19-36アミド、他の受容体に作用するインクレチンであるGIP、GLP-2については、100万倍の高濃度でもほとんど反応しなかった。本キットは、活性型GLP-1である、GLP-17-36アミド、およびGLP-17-37を極めて高感度に、かつ特異的に測定できることが分った。9.ヒト血漿中での活性型GLP-1の測定1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ10mLの洗浄バッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心後、得られた沈殿に12mLのカルチャーバッファーを加えて6μL4mMViviRenを添加し、50μLwellで96穴プレートに播種した。正常人血漿、または緩衝液に活性型GLP-17-36アミドを終濃度165pgmlになるように添加して作成したGLP-1含有サンプルを用いた。血漿中のDPP-IVペプチダーゼの活性を阻害するために、ミリポア社DPPIV阻害剤DPP44010を血漿1mあたり20uL添加した。10μLwellでプレートに添加し、4時間培養した。100mMCaCl2液を50μLwellで添加し、ルミノメーターで発光量を測定した。結果を図25に示す。緩衝液に比較して、ヒト血漿では、GLP-1活性は時間とともに消失し、その消失はDPP-IV阻害剤によって抑制された。本キットを用いることで、DPP-IV酵素活性によるGLP-1分解をモニタリングすることができた。10.GLP-1アゴニスト、およびGLP-1アンタゴニストの検出1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ10mLの洗浄バッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心分離した。得られた沈殿に12mLのカルチャーバッファーを加えて6μLの4mMViviRenを添加し、90μLwellで96穴プレートに播種した。カルシウム含のカルチャーバッファーで段階希釈したエキセナチドを添加し、3時間培養した。100mMCaCl2液を50μLwellで添加し、ルミノメーターで発光量を測定した。エキセナチドはアメリカオオトカゲの唾液腺に含まれるGLP1類似ペプチドであり、DPP-IV抵抗性であるため半減期が長く、2型糖尿病治療薬として上市されている。本キットでは、天然GLP-1のみならず、GLP-1受容体アゴニスト活性を有する類似体も高感度で測定できることが分った。次にGLP-1アンタゴニストの活性測定を実施した。1で調製した凍結細胞1ml3x106cellsmlを温浴で溶解させ10mLの洗浄バッファーに懸濁して、1000rpm5分遠心分離した。得られた沈殿に12mLのカルチャーバッファーを加えて6μLの4mMViviRenを添加し、90μLwellで96穴プレートに播種した。Exendin4を10μL添加し、3時間培養した。1011MのGLP1を10μLwellで添加し、ルミノメーターで発光量を測定した。GLP-1アンタゴニストであるExendin4は、濃度依存的に添加されたGLP-1のアゴニスト作用を抑制した図27。"