"生体組織に存在する物質に対応するラマンスペクトルのC-Hバンドのスペクトル強度とアミドIバンドのスペクトル強度との比率を算出し、該比率に基づいて前記物質中のアミロイドベータの有無を自動判定するスペクトルデータ解析装置。前記比率は、前記ラマンスペクトルの波数1463cm-1におけるスペクトル強度と波数1658cm-1におけるスペクトル強度の比率である請求項1記載のスペクトルデータ解析装置。前記ラマンスペクトルをカーブフィッティングにより複数の波形成分に分解し、前記比率を算出する請求項2記載のスペクトルデータ解析装置。生体組織に存在する物質に対応するラマンスペクトルのアミドIバンドをカーブフィッティングにより複数の波形成分に分解し、1635~1700cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度と1635~1655cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度との比率を算出し、該比率に基づいて前記物質中のアミロイドベータの有無を自動判定するスペクトルデータ解析装置。生体組織に存在する物質に対応するラマンスペクトルを取得する測定装置と、請求項3または4記載のスペクトルデータ解析装置と、を含む生体内物質検出システム。生体組織に存在する物質に対応するラマンスペクトルのC-Hバンドのスペクトル強度とアミドIバンドのスペクトル強度との比率を算出し、該比率に基づいて前記物質中のアミロイドベータの有無を判定する生体内物質検出方法。生体組織に存在する物質に対応するラマンスペクトルのアミドIバンドをカーブフィッティングにより複数の波形成分に分解し、1635~1700cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度と1635~1655cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度との比率を算出し、該比率に基づいて前記物質中のアミロイドベータの有無を判定する生体内物質検出方法。アミロイドベータはアルツハイマー病や加齢黄斑変性の病態に関与するため、生体組織中に蓄積するアミロイドベータを非侵襲的に検出する技術は、これらの疾患を早期に発見、治療するために有用と考えられる。そこで、本発明は、生体組織中の物質を非侵襲的に検出するための技術を提供することを主な目的とする。本発明者らは、ラマン分光を用いて生体組織に存在する物質に対応するスペクトルを取得し、このスペクトルデータを所定の方法で処理することによって、生体組織中に存在するアミロイドベータを精度良く検出できることを見出した。この知見に基づき、本発明は、生体組織に存在する物質に対応するラマンスペクトルのC-Hバンドのスペクトル強度とアミドIバンドのスペクトル強度との比率を算出し、該比率に基づいて前記物質中のアミロイドベータの有無を自動判定するスペクトルデータ解析装置を提供する。このスペクトルデータ解析装置において、前記比率は、前記ラマンスペクトルの波数1463cm-1におけるスペクトル強度と波数1658cm-1におけるスペクトル強度の比率とできる。このスペクトルデータ解析装置は、前記ラマンスペクトルをカーブフィッティングにより複数の波形成分に分解し、前記比率を算出するものとできる。また、本発明は、生体組織に存在する物質に対応するラマンスペクトルのアミドIバンドをカーブフィッティングにより複数の波形成分に分解し、1635~1700cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度と1635~1655cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度との比率を算出し、該比率に基づいて前記物質中のアミロイドベータの有無を自動判定するスペクトルデータ解析装置をも提供する。さらに、本発明は、生体組織に存在する物質に対応するラマンスペクトルを取得する測定装置と、これらのスペクトルデータ解析装置と、を含む生体内物質検出システムをも提供する。これらの生体内物質検出装置によれば、前記比率に基づいて生体組織中に存在するアミロイドベータを非侵襲的に、かつ高精度に検出できる。加えて、本発明は、体組織に存在する物質に対応するラマンスペクトルのC-Hバンドのスペクトル強度とアミドIバンドのスペクトル強度との比率を算出し、該比率に基づいて前記物質中のアミロイドベータの有無を判定する生体内物質検出方法を提供する。また、本発明は、生体組織に存在する物質に対応するラマンスペクトルのアミドIバンドをカーブフィッティングにより複数の波形成分に分解し、1635~1700cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度と1635~1655cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度との比率を算出し、該比率に基づいて前記物質中のアミロイドベータの有無を判定する生体内物質検出方法を提供する。本発明において、生体組織には、網膜および脳が含まれ、さらに神経、血管、皮膚、胃、小腸、腎臓、体液などが包含され得る。本発明により、生体組織中の物質を非侵襲的に検出するための技術が提供される。以下、本発明を実施するための好適な形態について説明する。なお、以下に説明する実施形態は、本発明の代表的な実施形態の一例を示したものであり、これにより本発明の範囲が狭く解釈されることはない。なお、説明は以下の順序で行う。1.スペクトルデータ解析装置および生体内物質検出システム1第一実施形態2第二実施形態2.生体内物質検出方法1.スペクトルデータ解析装置および生体内物質検出システム1第一実施形態本発明の第一実施形態に係る生体内物質検出システムは、生体組織に存在する物質に対応するラマンスペクトルを取得する測定装置と、取得されたラマンスペクトルのアミドIバンド振動帯をカーブフィッティングにより複数の波形成分に分解し、1635~1700cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度と1635~1655cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度との比率を算出し、該比率に基づいて前記物質中のアミロイドベータの有無を自動判定するスペクトルデータ解析装置とを含んで構成される。本実施形態に係るスペクトルデータ解析装置は、より具体的には、1635~1700cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度に対する1635~1655cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度の比率を算出し、算出された比率が所定値以上である場合に、前記物質にアミロイドベータが含まれるとの判定を出力する。生体内物質検出システムは、ディスプレイやマウス、キーボード等のユーザインタフェース、中央演算装置CPU、メモリ、記録装置ハードディスクなどを備えた汎用のコンピュータに以下の手順を実行するプログラムを搭載したスペクトルデータ解析装置と、従来公知のラマン分光イメージング装置測定装置とから構成できる。ラマン分光イメージング装置は、光源と、光源からの光を生体組織に導光して照射する照射系と、光の照射によって生体組織に存在する物質から発生する散乱光からラマンシフト光を選択して検出する検出系などによって構成される。照射系及び検出系は、集光レンズや光ファイバ、ダイクロイックミラー、バンドパスフィルター、PMTphotomultipliertubeなどからなる。スペクトルデータ解析装置のCPUとメモリ、ハードディスクとこれに格納されたプログラムは、共動して以下のステップを実行する。まず、ラマン分光イメージング装置から出力されるラマンスペクトルデータをカーブフィッティングアルゴリズムによって処理し、ラマンスペクトルのアミドI振動帯1600-1700cm1を複数の波形成分に分解する。分解される波形成分には、1635~1700cm-1の波数域にピーク波数を有する複数の波形成分と、1635~1655cm-1の波数域にピーク波数を有する2つの波形成分と、が含まれ得る。次に、1635~1700cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度と、1635~1655cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度を算出する。ここで、スペクトル強度とは、ピーク強度あるいはピーク面積のいずれかを意味する。より具体的には、1635~1700cm-1の波数域にピーク波数を有する複数の波形成分のスペクトル強度和と、1635~1655cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度和を算出する。さらに具体的には、1635~1645cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分Iと、1645~1655cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分IIと、1655~1667.5cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分IIIと、1667.5~1677.5cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分IVと、1677.5~1700cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分Vのスペクトル強度和をそれぞれ算出する。そして、算出されたスペクトル強度から、1635~1700cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度に対する1635~1655cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度の比率を算出する。より具体的には、波形成分I~Vのスペクトル強度和に対する波形成分I,IIのスペクトル強度和の比率III/IIIIIIIVVを算出する。最後に、算出された上記比率が所定値以上である場合に、生体組織に存在する物質にアミロイドベータが含まれるとの判定を出力し、ディスプレイに表示してユーザに提示する。判定結果の出力は、算出された比率の数値、この数値が所定値以上であるか以下であるかについての情報、あるいはアミロイドベータの含有の有無についての情報などとされる。2第二実施形態本発明の第二実施形態に係る生体内物質検出システムは、生体組織に存在する物質に対応するラマンスペクトルを取得する測定装置と、生体組織に存在する物質に対応するラマンスペクトルのC-Hバンドのスペクトル強度とアミドIバンドのスペクトル強度との比率を算出し、該比率に基づいて前記物質中のアミロイドベータの有無を自動判定するスペクトルデータ解析装置とを含んで構成される。本実施形態に係るスペクトルデータ解析装置は、より具体的には、前記ラマンスペクトルの波数1658cm-1におけるスペクトル強度に対する波数1463cm-1におけるスペクトル強度の比率を算出し、算出された比率が所定値未満である場合に、前記物質にアミロイドベータが含まれるとの判定を出力する。本実施形態に係る生体内物質検出システムの測定装置は、第一実施形態で説明した通りとできる。一方、スペクトルデータ解析装置のCPUとメモリ、ハードディスクとこれに格納されたプログラムは、共動して以下のステップを実行する。まず、ラマン分光イメージング装置から出力されるラマンスペクトルデータから、C-Hバンドのスペクトル強度とアミドIバンドのスペクトル強度を抽出する。図1に、ラマンスペクトルデータを例示する。Aはアミロイドベータが存在する生体組織から得られるラマンスペクトル、Bはアミロイドベータが存在しない生体組織から得られるラマンスペクトルを例示している。C-Hバンドのスペクトル強度とアミドIバンドのスペクトル強度としては、それぞれの代表値として特に波数1658cm-1におけるスペクトル強度と波数1463cm-1におけるスペクトル強度を抽出することができる。また、この際、ラマンスペクトルをカーブフィッティングにより複数の波形成分に分解し、波数1658cm-1および1463cm-1にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度を抽出してもよい。図2および図3に、カーブフィッティングによる分離される波形成分を例示する。図2はアミロイドベータが存在する生体組織から得られるラマンスペクトルの波形成分、図3はアミロイドベータが存在しない生体組織から得られるラマンスペクトルの波形成分を例示している。次に、算出されたスペクトル強度から、波数1658cm-1におけるスペクトル強度に対する波数1463cm-1におけるスペクトル強度の比率1463cm-1/1658cm-1を算出する。そして、算出された上記比率が所定値未満である場合に、生体組織に存在する物質にアミロイドベータが含まれるとの判定を出力し、ディスプレイへの表示などによってユーザに提示する。判定結果の出力は、算出された比率の数値、この数値が所定値未満であるか以上であるかについての情報、あるいはアミロイドベータの含有の有無についての情報などとされる。以上に説明した本発明に係る生体内物質検出システムによれば、前記比率に基づいて生体組織中に存在するアミロイドベータを非侵襲的に、かつ高精度に検出できる。2.生体内物質検出方法本発明に係る生体内物質検出方法は、上記の生体内物質検出システムによって実行されるステップに対応する手順を含む。すなわち、生体内物質検出方法は、生体組織に存在する物質に対応するラマンスペクトルのC-Hバンドのスペクトル強度とアミドIバンドのスペクトル強度との比率を算出する手順、あるいはラマンスペクトルのアミドIバンドをカーブフィッティングにより複数の波形成分に分解し、1635~1700cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度と1635~1655cm-1の波数域にピーク波数を有する波形成分のスペクトル強度との比率を算出する手順と、該比率に基づいて前記物質中のアミロイドベータの有無を判定する手順とを含む。生体内物質検出方法は、さらに、生体組織の目的とする部分以外の部分に存在する物質に対応するラマンスペクトルをバックグランドデータとして取得する手順を含むことができる。生体組織の目的とする部分から得られたスペクトルデータから、目的としない部分から得られたスペクトルデータバックグランドデータを減算することで、前記比率をより高精度に算出してアミロイドベータの含有の有無をより正確に判定できる。波形成分のスペクトル強度は、各波形成分のピーク波数におけるピーク強度又はピーク波数帯のピーク面積として算出することができる。ピーク波数におけるピーク強度又はピーク波数帯のピーク面積は、ラマン分光イメージング装置の分解能が高い場合には等価に扱うことができる。<試験例1:網膜黄斑部アミロイドベータの検出1>1.ラマンスペクトルの取得眼底に存在する物質に対応するラマンスペクトルを以下の方法に従って取得した。1装置:顕微レーザーラマン分光装置inVia、レニショー株式会社。2測定条件:レーザー波長532nm、レーザー強度50mW、スペクトル取得波数域1500~1800cm1。3測定サンプル:顕微鏡下で、ICR系マウス8週齢、雄又はC57B6J系マウス8週齢、雄の眼球内に極細ガラスピペットを挿入し、アミロイドベータ溶液を網膜直下に注入した。アミロイドベータ溶液には、ヒト140Amyloidebetapeptideペプチド研究所又はヒト142AmyloidebetapeptideGLLabを、終濃度100μMでリン酸バッファーpH74に溶解し、37°Cで3日間以上振盪したものを用いた。アミロイドベータペプチドはアミロイドベータ溶液中に凝集体として分散している。2時間~1日後、マウスを安楽殺して眼球を摘出し、測定サンプルとした。取得されたラマンスペクトルを図4に示す。図中、縦軸はスペクトル強度、横軸はラマンシフトを示す。また、符号Aはアミロイドベータ溶液を注入した実験眼で得られたスペクトルを、符号Bはアミロイドベータ溶液を注入していない対照眼で得られたスペクトルを示す。2.カーブフィッティング取得されたラマンスペクトルのアミドI振動帯1600-1700cm1を、カーブフィッティングにより複数の波形成分に分解した。カーブフィッティングは、市販のソフトウェアを用いて行った。図5に、実験眼のラマンスペクトルのアミドI振動帯を分解した波形成分を示す。また、図6に、対照眼のラマンスペクトルのアミドI振動帯を分解した波形成分を示す。実験眼では、対照眼と異なり、複数の波形成分に分解された。3.アミロイドベータの存在判定分解された波形成分を、そのピーク波数の波数域によって5つの波形成分I~Vに区分し、各波形成分のピーク波数におけるスペクトル強度を抽出した。波数域I:1635~1645cm-1:波形成分I波数域II:1645~1655cm-1:波形成分II波数域III:1655~1667.5cm-1:波形成分III波数域IV:1667.5~1677.5cm-1:波形成分IV波数域V:1677.5~1700cm-1:波形成分V実験眼及び対照眼について、波形成分I~Vのスペクトル強度和に対する波形成分I,IIのスペクトル強度和の比率を算出した。実験眼及び対照眼それぞれ10眼の平均値を表1に示す。表に示されるように、実験眼では、波形成分I,IIのスペクトル強度和の比率が対照眼に比べて高いことが確認される。波形成分I,IIのスペクトル強度和が全体に占める比率は、対照眼では0であるのに対して、実験眼では0.3以上であり有意に高かった。この結果から、波形成分I,IIのスペクトル強度の全体に占める比率が所定値以上ここでは、例えば0.1以上、好ましくは0.2以上、さらに好ましくは0.3以上である場合には、網膜内にアミロイドベータが存在すると判定できることが分かる。<試験例2:網膜黄斑部アミロイドベータの検出2>1.ラマンスペクトルの取得眼底に存在する物質に対応するラマンスペクトルを以下の方法に従って取得した。1装置:顕微レーザーラマン分光装置inVia、レニショー株式会社。2測定条件:レーザー波長785nm、レーザー強度1mW、スペクトル取得波数域1000~2000cm1。3測定サンプル:顕微鏡下で、ICR系マウス8週齢、雄の眼球内に極細ガラスピペットを挿入し、アミロイドベータ溶液を網膜直下に注入した。アミロイドベータ溶液には、ヒト140Amyloidebetapeptideペプチド研究所又はヒト142AmyloidebetapeptideGLLabを、終濃度100μMでリン酸バッファーpH74に溶解したものを用いた。アミロイドベータペプチドはアミロイドベータ溶液中に凝集することなく分散している。2時間~1日後、マウスを安楽殺して眼球を摘出し、測定サンプルとした。2.カーブフィッティング取得されたラマンスペクトルをカーブフィッティングにより複数の波形成分に分解し、C-Hバンド波数1658cm-1およびアミドIバンド波数1463cm-1のスペクトル強度と、その比率1463cm-1/1658cm-1を算出した。3.アミロイドベータの存在判定得られた比率をイメージ化して得た画像と、該画像中の各領域内における1463cm-1/1658cm-1比の平均値を示すマトリックスを図7~図10に示す。図7および図8は、アミロイドベータ溶液を注入した実験眼のラマン分光イメージング画像とマトリックスを示す。図9および図10は、アミロイドベータ溶液をしていない対照眼のラマン分光イメージング画像とマトリックスを示す。図8および図10のマトリクスに示されるように、実験眼では1463cm-1/1658cm-1比が1.0未満である領域が大部分を占めたのに対して、対照眼では全領域で1.0以上であった。この結果から、C-Hバンドのスペクトル強度とアミドIバンドのスペクトル強度との比率が所定値未満1463cm-1/1658cm-1比が、例えば1.0未満、好ましくは0.5未満、さらに好ましくは0.1未満である場合には、網膜内にアミロイドベータが存在すると判定できることが分かる。なお、カーブフィッティングを行うことなく、ラマンスペクトルから直接に波数1658cm-1および波数1463cm-1におけるスペクトル強度を抽出し比率を求めた場合にも同様の結果が得られた。<試験例3:大脳アミロイドベータの検出>大脳組織に存在する物質に対応するラマンスペクトルを以下の方法に従って取得した。1装置:顕微レーザーラマン分光装置inVia、レニショー株式会社。水浸レンズ60倍NA10OLYMPUSLUMPlanFIN60xW。2測定条件:レーザー波長785nm、レーザー強度3mW、スペクトル取得波数域400~1900cm1。3測定サンプル:APPを過剰発現するトランスジェニックマウスCorrelativememorydeficitsAbetaelevationandamyloidplaquesintransgenicmiceScience1996427499102から大脳を摘出し、液体窒素中で凍結した。正中線と平行に10μmの厚さで凍結切片を作成し、金蒸着基板に配した。アミロイドベータに特異的な抗体6E10を用いて凍結切片を免疫蛍光染色し、大脳皮質および海馬にアミロイドベータプラークを多数確認した。またアミロイドベータに特異的な色素チオフラビンTを用いた染色によってもアミロイドベータプラークを確認した。チオフラビンT染色後の試料を金蒸着基板に配し、ラマン散乱スペクトルを測定した。測定は、3μm間隔の各点で行った。任意の散乱ピークを選択し、そのラマンシフトまたは強度の空間分布を用いてラマン散乱画像を構成した。その結果、チオフラビンTの2級アミンに由来するバンドとアミドIバンドとが画像中の同一領域に特定され、アミロイドベータプラークをラマン散乱画像により可視化することができた。"