式I、CO、OC、NO2、アミノ、ヒドロキシCl6アルキル、アリール、OCPhおよびC2から選択される;またはR1およびR2は、それらが結合しているY1基と一体として、またはR1、R2およびR3は、それらが結合しているY1基と一体として任意にヘテロシクロアルキル基を形成してもよく;R4およびR5は、それらが結合しているY2基と一体として、またはR4、R5およびR6は、それらが結合しているY2基と一体として任意にヘテロシクロアルキル基を形成してもよく;該ヘテロシクロアルキル基の各々は、C16アルキル、C26アルケニル、C26アルキニル、ヒドロキシル、ハロゲン、O、CO、OC、NO2、アミノ、ヒドロキシCl6アルキル、アリール、OCPhおよびC2から選択される1つまたは複数の基で置換されていてもよく;R7、R7、R8およびR8は同じであってもまたは異なってもよく、独立に、水素、FおよびClから選択され;Aは、置換されていてもよいアルキレン、置換されていてもよいアルケニレン、置換されていてもよいアルキニレン、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいC57シクロアルキルおよびCから選択される1つまたは複数の基を含み、Aの長さは炭素原子数5~18であり、置換基は、独立に、C16アルキル、C26アルケニル、C26アルキニル、ヒドロキシル、ハロゲン、N02、CR10、OR11、CH20R11、CH2NR12R13、SR11、NR12R13、CONR12R13、アミノ酸、ジペプチジル、トリペプチジル、テトラペプチジルおよびペンタペプチジルから選択され;R10は、OH、OR11、C16アルキルから選択され;R11は、水素、置換されていてもよいC110アルキル、置換されていてもよいC210アルケニル、置換されていてもよいC210アルキニル、置換されていてもよいC310シクロアルキル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいアラルキルからなる群から選択され、該任意の置換基は、独立に、C14アルキル、ヒドロキシルおよびハロゲンから選択され;R12およびR13は、独立に、水素、置換されていてもよいC110アルキル、置換されていてもよいC210アルケニル、置換されていてもよいC210アルキニル、置換されていてもよいC310シクロアルキル、置換されていてもよいアラルキル、置換されていてもよいアルキルヘテロアリールからなる群から選択され、該置換基は、独立に、C14アルキル、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノおよびCOR11から選択される;またはR12およびR13は、それらが結合している窒素原子と一体として、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル基を形成してもよく、該置換基は、独立に、C14アルキル、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノおよびCOR11から選択されるの化合物およびその塩であるが、ただし式の化合物が以下:から選択されない化合物およびその塩。Y1およびY2が各々Nである、請求項1記載の化合物。R7、R7、R8およびR8が各々水素である、請求項1記載の化合物。R1~R6は、独立に、置換されていてもよいC110アルキル、置換されていてもよいC110アルキレン、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいヘテロシクロアルキルからなる群から選択されるか、R1およびR2は、それらが結合しているY1基と一体として、またはR1、R2およびR3は、それらが結合しているY1基と一体としてヘテロシクロアルキル基を形成し;R4およびR5は、それらが結合しているY2基と一体として、またはR4、R5およびR6は、それらが結合しているY2基と一体としてヘテロシクロアルキル基を形成し;任意の置換基は、独立に、C16アルキル、C26アルケニル、C26アルキニル、ヒドロキシル、ハロゲン、O、CO、OC、NO2、アミノ、ヒドロキシCl6アルキルおよびアリールから選択される、請求項1記載の化合物。Aは、置換されていてもよいアルキレン、置換されていてもよいアルケニレン、置換されていてもよいフェニルおよびCから選択される1つまたは複数の基を含み、置換基は、独立に、C16アルキル、C26アルケニル、ヒドロキシル、ハロゲン、N02、CR10、OR11、CH20R11、CH2NR12R13、SR11、NR12R13、CONR12R13、アミノ酸、ジペプチジル、トリペプチジル、テトラペプチジルおよびペンタペプチジルから選択される、請求項1記載の化合物。Aの長さが炭素原子数5~9である、請求項1記載の化合物。式Ia、CO、NO2、アミノ、ヒドロキシCl6アルキル、アリールおよびOCPhから選択される;またはR1およびR2は、それらが結合しているY1基と一体として任意にヘテロシクロアルキル基を形成してもよく;R4およびR5は、それらが結合しているY2基と一体として任意にヘテロシクロアルキル基を形成してもよく;該ヘテロシクロアルキル基の各々は、C16アルキル、C26アルケニル、ヒドロキシル、ハロゲン、O、CO、アミノ、ヒドロキシCl6アルキルおよびアリールから選択される1つまたは複数の基で置換されていてもよく;Aは、置換されていてもよいアルキレン、置換されていてもよいアルケニレンおよび置換されていてもよいフェニルから選択される1つまたは複数の基を含み、Aの長さは炭素原子数5~18であり、置換基は、独立に、C16アルキル、C26アルケニル、C26アルキニル、ハロゲン、CR10、OR11、SR11、CH2OR11、CH2NR12R13、NR12R13、CONR12R13、アミノ酸、ジペプチジル、トリペプチジル、テトラペプチジルおよびペンタペプチジルから選択され;R10は、OH、OR11、C16アルキルから選択され;R11は、水素、置換されていてもよいC110アルキル、置換されていてもよいC210アルケニル、置換されていてもよいC210アルキニル、および置換されていてもよいC310シクロアルキルからなる群から選択され、該任意の置換基は、独立に、C16アルキル、C26アルケニル、アリールおよびヒドロキシルから選択され;R12およびR13は、独立に、水素、置換されていてもよいC110アルキル、置換されていてもよいC210アルケニル、置換されていてもよいC210アルキニル、置換されていてもよいC310シクロアルキル、置換されていてもよいアルキルヘテロアリールからなる群から選択され、該置換基は、独立に、C16アルキル、C26アルケニル、アリール、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノおよびCOR11から選択される;またはR12およびR13は、それらが結合している窒素原子と一体として、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル基を形成してもよく、該置換基は、独立に、C16アルキル、C26アルケニル、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノおよびCOR11から選択されるの化合物およびその塩。111ビスウンデカン、116ビスヘキサデカン、112ビスドデカン、112ビスドデカン、112ビスドデカン、112ビスドデカン、112ビスドデカンおよび112ビスドデカンから選択される、請求項1記載の化合物ならびにその塩。脊椎動物の微生物感染症の治療方法、阻止方法および予防方法のうちの1つまたは複数であって、式、CO、NO2、アミノ、ヒドロキシCl6アルキル、アリール、OCPhおよびC2から選択される;またはR1およびR2は、それらが結合しているY1基と一体として、またはR1、R2およびR3は、それらが結合しているY1基と一体として任意にヘテロシクロアルキル基を形成してもよく;R4およびR5は、それらが結合しているY2基と一体として、またはR4、R5およびR6は、それらが結合しているY2基と一体として任意にヘテロシクロアルキル基を形成してもよく;該ヘテロシクロアルキル基の各々は、C16アルキル、C26アルケニル、C26アルキニル、ヒドロキシル、およびハロゲン、O、CO、NO2、アミノ、ヒドロキシCl6アルキル、アリールおよびC2から選択される1つまたは複数の基で置換されていてもよく;R7、R7、R8およびR8は同じであってもまたは異なってもよく、独立に、水素、FおよびClから選択され;Aは、置換されていてもよいアルキレン、置換されていてもよいアルケニレン、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいC57シクロアルキルおよびCから選択される1つまたは複数の基を含み、Aの長さは炭素原子数4~18であり、置換基は、独立に、C16アルキル、C26アルケニル、ヒドロキシル、ハロゲン、ニトロ、CR10、OR11、CH20R11、CH2NR12R13、SR11、NR12R13、CONR12R13、アミノ酸、ジペプチジル、トリペプチジル、テトラペプチジルおよびペンタペプチジルから選択され;R10は、OH、OR11、C16アルキル、置換されていてもよいアミノC16アルキルスルホネート、置換されていてもよいアミノC16アルキルホスホネート、置換されていてもよいアミノCl6アルキルグアニジニルおよび置換されていてもよいアミノC16アルキルトリアンモニウムから選択され;R11は、水素、置換されていてもよいC110アルキル、置換されていてもよいC210アルケニル、置換されていてもよいC210アルキニル、置換されていてもよいC310シクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールアルキル、置換されていてもよいアミノC16アルキルスルホネート、置換されていてもよいアミノC16アルキルホスホネート、置換されていてもよいアミノCl6アルキルグアニジニルおよび置換されていてもよいアミノC16アルキルトリアンモニウムからなる群から選択され、該任意の置換基は、独立に、C14アルキル、ヒドロキシルおよびハロゲンから選択され;R12およびR13は、独立に、水素、置換されていてもよいC110アルキル、置換されていてもよいC210アルケニル、置換されていてもよいC210アルキニル、置換されていてもよいC310シクロアルキル、置換されていてもよいアリールアルキル、置換されていてもよいアルキルヘテロアリール、置換されていてもよいアミノC16アルキルスルホネート、置換されていてもよいアミノC16アルキルホスホネート、置換されていてもよいアミノCl6アルキルグアニジニルおよび置換されていてもよいアミノC16アルキルトリアンモニウムからなる群から選択され、該置換基は、独立に、C13アルキル、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノおよびCOR11から選択される;またはR12およびR13は、それらが結合している窒素原子と一体として、置換されていてもよいヘテロシクロアルキル基を形成してもよく、該置換基は、独立に、C13アルキル、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノおよびCOR11から選択されるの少なくとも1つの化合物の有効量を該脊椎動物に投与する段階を含む方法。化合物が請求項1に定義される式の化合物である、請求項9記載の方法。微生物感染症が、細菌、真菌、ウイルスおよび寄生虫感染症の1つまたは複数から選択される、請求項9記載の方法。感染症が真菌感染症である、請求項11記載の方法。感染症が細菌感染症である、請求項11記載の方法。式の少なくとも1つの化合物または式の少なくとも1つの化合物の有効量を生物に接触させる段階を含む、生物のホスホリパーゼを阻害する方法。生物が細菌、真菌、ウイルスおよび寄生虫から選択される、請求項14記載の方法。ホスホリパーゼがホスホリパーゼBである、請求項14記載の方法。抗微生物的性質を有すると思われる式または式の化合物を微生物細胞に接触させる段階、ホスホリパーゼ酵素の阻害が抗微生物活性を示す該化合物が微生物ホスホリパーゼ酵素を阻害するかどうかを判定する段階、およびそれによって抗微生物剤を同定する段階を含む、抗微生物剤を同定する方法。発明の詳細な説明本発明は、ビスアンモニウム化合物、ビスホスホニウム化合物およびアンモニウムホスホニウム化合物を含むビス陽イオン化合物、ならびに抗微生物剤、例えば、抗菌剤、抗真菌剤、抗ウイルス剤、抗寄生虫剤および/または抗原虫剤としてのそれらの用途に関する。本明細書に開示する式および式のビス陽イオン化合物は広範囲の抗微生物活性を示すことができる。本明細書に開示するビス陽イオン化合物は、微生物ホスホリパーゼを阻害することができる可能性がある。しかし、本発明は、ホスホリパーゼ阻害剤であるビス陽イオン化合物に限定されない。細胞内ホスホリパーゼ、例えば、細胞質ゾルまたは膜結合ホスホリパーゼを阻害することができる化合物は抗微生物特性を有する可能性がある。細胞外ホスホリパーゼの阻害は静真菌特性および/または静菌特性および/または静ウイルス特性を有する可能性がある。本発明によるビス陽イオン化合物は、非極性または実質的に非極性基で置換されている2つの陽イオン頭部基を含む。頭部基は非極性または実質的に非極性スペーサー基が結合している。本発明の範囲内の化合物には、本明細書に定義する式および式のビス陽イオン化合物が挙げられる。式および式において、陽イオン頭部基Y1およびY2は同じであってもまたは異なってもよく、独立に、四級アンモニウム基および四級ホスホニウム基から選択される。従って、陽イオン頭部基は共に四級アンモニウム基であっても、一方が四級アンモニウム基で、他方がホスホニウム基であっても、または共にホスホニウム基であってもよい。陽イオン四級NまたはPに結合しているR1~R6基は同じであってもまたは異なってもよい。本発明の一態様において、R1~R3は同じである。別の態様において、R4~R6は同じである。さらに別の態様において、R1~R6基は同じである。陽イオン四級NまたはP原子に結合しているR1~R6基は、一般に、非極性または実質的に非極性である。従って、R1~R6基は、水素結合に関与する可能性のある極性基を2つ以上含有しなくてもよい。従って、例えば、それぞれのR1~R6基は各々1つのヒドロキシル基で置換されていてもよい。いくつかの態様において、R1~R6基は、プロトン化されて正電苛を形成することができる、または解離してpH範囲約4~約9の負電苛を形成することができる基を含有しなくてもよい。R1~R6は同じであってもまたは異なってもよく、一態様において、独立に、置換されていてもよいC210アルキルから選択される。別の態様において、R1~R6は、独立に、置換されていてもよいC28アルキルから選択される。さらに別の態様において、R1~R6は、独立に、置換されていてもよいC36アルキルから選択される。本発明の一態様において、Y1およびY2は各々Nであり、R1~R6は独立に、C210アルキルから選択される。それぞれの陽イオンNまたはPに結合している異なる基は、互いに長さが、例えば、2~6炭素異なってもよい。例えば、陽イオン頭部基は:等を含んでもよい。スペーサー基CACは非極性または実質的に非極性残基であり、極性陽イオン頭部基を結合する置換されていてもよい炭素骨格を含む。スペーサー部分は、式化合物では長さが炭素原子数7~20であってもよく、式化合物では長さが炭素原子数6~20であってもよい。例えば、スペーサーは、式の化合物では長さが炭素原子数7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19または20であってもよく、式の化合物では長さが6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19または20であってもよい。本発明の種々の態様において、スペーサーは長さが炭素原子数C1016、C1018またはC1020であってもよく、それぞれの炭素原子は置換されていてもよい。別の態様において、スペーサーは長さが炭素原子数6~11または7~11であってもよい。スペーサー基は、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、シクロアルキレン、アリーレンおよびカルボニル基から選択される1つまたは複数の置換されていてもよい基を含んでもよい。任意の置換基の例には、ハロゲン化物、アルキル、アルケニル、アルコキシ、カルボン酸、エステル、エーテル、チオエーテル、二級または三級アミン、二級または三級アミド、ニトロ、ヒドロキシル、チオール、アミノ酸、低分子ペプチド等から選択される1つまたは複数の基が挙げられる。それぞれの陽イオン基のすぐ隣に位置するスペーサー基のそれぞれの末端の基は、独立に、CH2、CC12、CFClおよびCF2基から選択されてもよい。式および式の化合物は、スペーサー基の1つまたは複数の炭素に結合している1つまたは複数のアミノ酸またはオリゴアミノ酸を含んでもよい。本明細書に関連して、オリゴアミノ酸は、それぞれのアミノ基および酸基を介して結合されて、ジペプチジル、トリペプチジル、テトラペプチジルおよびペンタペプチジル残基を形成しているアミノ酸をいう。本発明による化合物は、任意に、デプシ、すなわち、エステル結合を含むペプチドをさらに含んでもよい。α、βまたはγアミノ酸を使用してもよく、および異性体を使用してもよい。アミノ酸置換基の例には、グリシニル、アラニニル、バリニル、ロイシニル、イソロイシニル、メチオニニル、プロリニル、フェニルアラニニル、トリプトファニル、セリニル、スレオニニル、システイニル、チロシニル、アスパラギニル、グルタミニル、アスパルチル、グルタミル、リジニル、アルギニニルおよびヒスチジニルが挙げられる。他のアミノ酸は当技術分野において公知である。アミノ酸基は、化合物のスペーサー部分にNまたはC結合していてもよい。アミノ酸基は、アミノ酸側鎖、例えば、アスパラギン酸またはグルタミン酸のCOOH置換基、メチオニンまたはシステインのSH基等を介して結合されてもよい。本発明の別の態様において、式の化合物は:である。本発明のさらに別の態様において、式の化合物は:である。本発明の別の態様において、式の化合物は:である。本発明のさらに別の態様において、式の化合物は:である。本発明の別の態様において、式の化合物は:である。本発明のさらに別の態様において、式の化合物は:である。本発明の別の態様において、式の化合物は:である。本発明のさらに別の態様において、式の化合物は:である。本発明の他の態様において、式の化合物は:111ビスウンデカン、116ビスヘキサデカン、112ビスドデカン、112ビスドデカン、112ビスドデカン、112ビスドデカン、112ビスドデカン、および112ビスドデカンならびにそれらの塩から選択される。本発明の一態様において、式の化合物は:である。本発明の別の態様において、式の化合物は:である。本発明の別の態様において、式の化合物は:である。本発明のさらに別の態様において、式の化合物は:である。本発明の別の態様において、式の化合物は:である。本発明のさらに別の態様において、式の化合物は:である。本発明の別の態様において、式の化合物は:である。本発明の別の態様において、式の化合物は:である。本発明のさらに別の態様において、式の化合物は:である。本発明のビス陽イオン化合物は微生物のホスホリパーゼB酵素を阻害することができるが、本発明は、その活性を有する化合物だけに制限されない。ホスホリパーゼB酵素は、ホスホリパーゼB活性、リゾホスホリパーゼ活性およびリゾホスホリパーゼトランスアシラーゼ活性の1つまたは複数を含む活性を有することによって識別される。ホスホリパーゼBは細胞結合酵素または分泌ホスホリパーゼB酵素であってもよい。従って、このクラスの酵素はホスホリパーゼBといわれ、ホスホリパーゼB酵素は、ホスホリパーゼB活性を含む1つまたは複数の活性を示すことができる。従って、本明細書に関連して、PLBは酵素の作用をいい、ホスホリパーゼBは酵素のクラスをいう。ホスホリパーゼBの特徴づけおよび活性の概説は、WiltonetalによってBiochemistryofLipidsLipoproteinsandMembranesDEVanceandJEVance2002pp291314に提供されている。化合物の合成式および式の化合物は当業者に公知の方法によって調製することができる。好適な方法および中間体は、一般に、HoubenWeylMethodenderOrganischenChemieJMarchAdvancedOrganicChemistry4thEditionDCLiottaandMVolmeredsOrganicSynthesesReactionGuideRCLarockComprehensiveOrganicTransformationsHOHouseModernSyntheticReactions2ndEditionに記載されている。当業者は、種々の保護基を合成に使用することができることも理解するだろう。保護基の例は当業者に公知であり、例えば、GreeneetalProtectiveGroupsinOrganicSynthesisJohnWileySons2ndEdition1991に記載されている。式および式のビス陽イオン化合物は塩として製造することができ、任意の好適な対イオンの1つまたは複数を含んでもよいことも当業者は理解するだろう。対イオンは陰イオン、2価陰イオンまたはポリアニオンであってもよい。2つ以上の対イオンが存在する場合には、対イオンは同じであってもまたは異なってもよい。対イオンの例には、ハロゲン化物およびは、各場合において、適宜、E、Z、cis、trans、、、、、および/または形態の化合物を含むことが理解されるべきである。式および式の化合物は以下の一般的なスキーム~により調製することができる。スキームスキームスキームスキームスキームスキーム上記スキーム~を参照すると、YはNまたはPを示す。LGは、求核アミンまたはホスフィンによって置換されうる離脱基を示す。好適な離脱基の例は当業者に公知であり、例えば、クロロ、ブロモ、ヨード、メシレート、トシレートおよびトリフレート基が挙げられる。上記スキーム~の種々の離脱基は同じであってもまたは異なってもよく、反応性を改良するために適宜変更することができる。同様に、異なる離脱基および求核試薬を異なる合成段階において使用することができる。上記スキームにおいて、R1、R2、R3、R4、R5およびR6基は、式および式について上記に定義する非極性または実質的に非極性の基、例えば、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、ベンジルなどのアラルキル基、ヘテロアリール基、ヘテロアルキル基等を示す。それぞれのR1、R2、R3、R4、R5およびR6基は同じであってもまたは異なってもよく、各々が例えば、C16アルキル、C26アルケニル、C26アルキニル、ヒドロキシル、ハロゲン化物、O、CO、NO2、アミノ、ヒドロキシCl6アルキル、アリール、OCPhまたはC2から選択される1つまたは複数の基で置換されていてもよい。スキームは、対称ビス陽イオン化合物の合成経路を例示する。しかし、化学量論比および反応条件を変更することによって、またはR1、R2およびR3基を変更することによって、非対称化合物も上記の経路により製造することができることを当業者は理解するだろう。スキームを参照すると、好適な還元剤は当業者に公知であり、例えば、H2、PdC、LiALH4、NaBH4、ZnHCl、SnHCl等が挙げられる。上記のスキーム~を参照すると、好適な試薬、反応条件等は当技術分野において公知である。例として、好適な溶媒には、アセトニトリル、エタノール、エーテル、メチルイソブチルアルコール、メチルイソブチルケトン等の比較的極性の溶媒を挙げることができる。反応温度は、反応速度を制御するように適宜調節することができる。例として、好適な反応温度は室温より高温、例えば、50°Cより高い温度であってもよい。本発明のビス陽イオン化合物は塩として調製してもよい。対イオンは、例えば、イオン交換カラムおよび結晶化技法を含む当業者に公知の方法を使用して変更することができる。本発明による化合物は、真菌、細菌、ウイルスおよび原虫感染症などの微生物感染症の治療、阻止または予防に有用となりうる。従って、本発明による化合物は、薬学的および獣医学的適用を含む治療的適用を服務。本発明による化合物は産業用適用も含み、例えば、殺菌剤として有用となりうる。本発明による化合物は農業用適用も含み、例えば、植物および作物の微生物感染症を治療、阻止または予防するために使用することができる。化合物は、目的の用途のために適当な方法で組成物として製剤化することができる。従って、本発明はまた、微生物感染症の治療、阻止および予防の1つまたは複数のための医薬品を製造するための、本明細書に定義する式または式の少なくとも1つの化合物の使用に関する。微生物感染は、物品の表面などの表面、例えば、手術用物品または装置、床、ベンチトップまたは産業加工物表面におけるものであってもよい。微生物感染症は、脊椎動物の感染症、例えば、脊椎動物の全身感染症または脊椎動物の皮膚表面の感染症であってもよい。微生物感染は、細菌、真菌、ウイルスおよび寄生虫の1つまたは複数を含んでもよい。本発明はまた、脊椎動物の微生物感染症の治療方法、阻止方法、および予防方法のうちの1つまたは複数であって、本明細書に定義する式または式の少なくとも1つの化合物の有効量を脊椎動物に投与する段階を含む方法に関する。本発明はまた、植物の微生物感染症の治療、阻止および予防の1つまたは複数の方法であって、本明細書に定義する式または式の少なくとも1つの化合物の有効量を植物に接触させる段階を含む方法に関する。式または式の化合物と、葉、果実、花、幹、塊茎または根を含む植物の任意の部分を接触させることができる。植物は農業的または園芸的に重要な植物であってもよい。一態様において、感染症は真菌感染症である。本発明はまた、本明細書に定義する式の少なくとも1つの化合物または式の化合物と、産業的、獣医学的、農業的または薬学的に好適な担体、希釈剤または担体を含む抗微生物組成物に関する。組成物は、抗真菌、抗菌、抗ウイルスおよび抗寄生虫組成物のうちの1つまたは複数であってもよい。一態様において、組成物は抗真菌組成物である。別の態様において、組成物は抗菌組成物である。本発明はまた、式または式の少なくとも1つの化合物と、薬学的に有効な担体、補助剤または希釈剤を含む薬学的組成物に関する。本発明はまた、生物のホスホリパーゼを阻害する方法であって、生物と式の化合物の少なくとも1つ、もしくは式の化合物の少なくとも1つ、またはその組成物の有効量を接触させる段階を含む方法に関する。生物は、例えば細菌、真菌、ウイルスまたは原虫を含む寄生虫などの微生物であってもよい。ホスホリパーゼはホスホリパーゼBであってもよい。本発明はまた、抗微生物的性質を有すると思われる化合物を微生物細胞に接触させる段階、化合物が微生物ホスホリパーゼ酵素を阻害するかどうかを判定する段階であって、ホスホリパーゼ酵素の阻害が抗微生物活性を示す段階およびそれによって抗微生物剤を同定する段階を含む、抗微生物剤を同定する方法に関する。化合物は、本明細書に定義する式または式の化合物であってもよい。ホスホリパーゼはホスホリパーゼBであってもよい。本発明の一態様において、真菌感染症の治療、予防または阻止に使用する場合には、化合物は、式または式の化合物ではない。本発明の別の態様において、マラリアおよびバベシア症から選択される寄生虫感染症の治療、予防または阻止に使用する場合には、化合物は、式または式の化合物でない。本発明のさらに別の態様において、マラリアおよびバベシア症から選択される寄生虫感染症の治療、予防または阻止に使用する場合には、化合物は、式または式の化合物でない。本発明の別の態様において、真菌感染症の治療、予防または阻止に使用する場合には、化合物は式または式の化合物でない。微生物の種類およびクラスは当技術分野において公知である。微生物のクラスは、例えば、全体の内容が参照により本明細書に組み入れられる、ManualofClinicalMicrobiology7thEdition1999AmericanSocietyofMicrobilogyに掲載されている。微生物のいくつかの一般例には以下が挙げられるが、本発明の範囲は、公知の手段によって、これらの微生物に制限されることが理解されるべきである:スタヒロコッカス属、スタヒロコッカス属、ストレプトコッカス属、エンテロコッカス属などのグラム陽性球菌;コリネフォルム、リステリア属、エリシペロトリックス属およびクルシア属、バシラス属、マイコバクテリウム属などのグラム陽性桿菌;エンテロバクテリアセエ属、エシェリシア属、シゲラ属、サルモネラ属、クレブシエラ属、エンテロバクター属、シトロバクター属、セラチア属、アエロモナス属およびプレシオモナス属、シュードモナス属などのグラム陰性細菌;アシネトバクター属、アルカリゲネス属、モラクセラ属およびメチロバクテリウム属;アクチノバシラス属、カプノシトファガ属、エイケネラ属、レジオネラ属などのキンゲラ属、ナイセリア属、ブランハメラ属;クロストリジウム属、ペプトストレプトコッカス属、プロピオニバクテリウム属、ラクトバシラス属、アクチノマイセス属を含む嫌気性菌バクテロイデス属、ポルフィロモナス、プレボテラ属、フソバクテリウム属ならびに他の嫌気性グラム陰性球菌;ヘリコバクター属、ボレリア属を含む曲線状およびラセン形状グラム陰性桿菌;マイコプラズマ属、ウレアプラズマ属、クラミジア属、コクシエラ属などのマイコプラズマおよび偏性細胞内細菌を含む細菌;ヒト免疫不全ウイルス、IおよびII型ヒトT細胞白血病ウイルス、単純ヘルペスウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、ヒトヘルペスウイルス6、7および8ならびにヘルペスBウイルス、麻疹ウイルス、おたふく風邪ウイルス、アデノウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、BおよびD型肝炎ウイルス、CおよびG型肝炎ウイルス、ヒトパピローマウイルスを含むウイルス;カンジダ属、クリプトコッカス属および医学的に重要な酵母、ニューモシスティスカリニ属、アスペルギルス属、フサリウム属および他のカンジダ症を生ずる真菌、リゾプス属、リゾムコール属、アブシディア属ならびに全身性および皮下接合菌症の他の菌、トリコフィトン属、ミクロスポルム属、エピデルモフィトン属、ビポラリス属、エクソフィアラ属、セドスポリウム属、スポロスリックス属および他の黒色真菌、真菌性菌腫を生ずる真菌;コレクティトリカムココデス、植物の饂飩粉病、ベト病、ボトリチス、黒点および黒色の表皮を生じる真菌、を含む真菌;プラスモジウム属、バベシア属、リーシュマニア属、トリパノソーマ属、トキソプラズマギアルディア属、病原性および日和見性自由生活アメーバ、腸管および泌尿生殖器アメーバ、鞭毛虫および繊毛虫;クリプトスポリジウム、シクロスポラ、イソスポラ、ミクロスポリジアおよび腸管蠕虫を含む寄生虫。製剤本発明によると、微生物感染症の治療または予防に使用する場合には、本発明の化合物は単独で投与してもよい。または、化合物は、本発明による少なくとも1つの化合物を含む薬学的、獣医学的、農業的または産業的製剤として投与することができる。化合物はまた、薬学的に許容される塩を含む好適な塩として存在してもよい。本発明によると、本発明の化合物は、他の公知の治療または抗真菌治療、抗生物質、殺菌剤等を含む抗微生物剤と併用して使用してもよい。好適な薬剤は、例えば、全体の開示内容が参照により本明細書に組み入れられる、MerckIndexAnEncyclopoediaofChemicalsDrugsandBiologicals12thEd1996に掲載されている。本発明の化合物を含む活性物質の併用は相乗的となりうる。薬学的に許容される塩は、健全な医学的判断の範囲において、過度の毒性、刺激、アレルギー反応等を生じないでヒトおよび下等動物の組織と接触するのに好適であるような塩を意味する。薬学的に許容される塩は当技術分野において周知である。例えば、本発明による化合物の好適な薬学的に許容される塩は、塩酸、硫酸、メタンスルホン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、安息香酸、リン酸、酢酸、シュウ酸、炭酸、酒石酸またはクエン酸などの薬学的に許容される酸と本発明の化合物を混合することによって製造することができる。従って、本発明の化合物の薬学的に許容される塩は酸付加塩を含む。SMBergeetalは、JPharmaceuticalSciences197766119において薬学的に許容される塩を詳細に記載している。塩は本発明の化合物の最終的な単離および精製中にインサイチューにおいて製造しても、または別個に遊離塩基官能基を好適な有機酸と反応させることによって製造してもよい。代表的な酸付加塩には、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、二硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、カンフォレート、カンフォスルホネート、クエン酸塩、二グルコン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトネート、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプトネート、ヘキサン酸塩、集荷水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、2ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、2ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、3フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩等が挙げられる。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩には、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム等およびをアンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミン、トリエタノールアミン等含むが、それに限定されるわけではない無毒性アンモニウム、四級アンモニウムおよびアミン陽イオンが挙げられる。便利な投与様式には、注射、経口投与、吸入、経皮適用、局所クリームもしくはゲルまたは粉末、または直腸投与が挙げられる。投与経路に応じて、製剤および/または化合物は、酵素、酸および化合物の治療活性を不活性化する可能性のある他の天然条件から化合物を保護するための物質でコーティングすることができる。化合物は非経口的または腹腔内投与してもよい。本発明による化合物の分散剤も、グリセロール、液体ポリエチレングリコールおよびそれらの混合物ならびにオイル中で製剤化することができる。通常の保存および使用条件下において、製剤は、微生物の増殖を防止する保存剤を含有してもよい。注射に好適な薬学的組成物には、滅菌注射液または分散剤の即時調製のための滅菌水溶液または分散剤が挙げられる。理想的には、組成物は製造および保存条件下において安定であり、細菌および真菌などの微生物の汚染作用から組成物を安定化する保存剤を含んでもよい。本発明の一態様において、本発明の化合物は、例えば、不活性な希釈剤または吸収性の食用担体と共に経口投与することができる。化合物および他の成分は、硬もしくは軟シェルゼラチンカプセルに封入されても、錠剤に圧縮されても、または患者の食餌に直接組み入れてもよい。経口治療投与のためには、化合物は賦形剤と共に組み入れられ、経口摂取用錠剤、口腔錠、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ、ウェハー等の形態で使用してもよい。好適には、このような組成物および製剤は少なくとも1重量の活性化合物を含有することができる。当然のことながら、薬学的組成物および製剤中の式および/またはの化合物の割合は変わってもよく、例えば、便利なことに、単位剤形の約2重量~約90重量、約5重量~約80重量、約10重量~約75重量、約15重量~約65重量、約20重量~約60重量、約25重量~約50重量、約30重量~約45重量または約35重量~約45重量の範囲であってもよい。治療的に有用な組成物中の化合物の量は、好適な用量が得られるようである。薬学的に許容される担体は、溶媒、分散媒体、コーティング、抗菌および抗真菌剤、等張剤ならびに吸収遅延剤を含むことが意図されている。薬学的に活性な物質のためのこのような媒体および薬剤の使用は当技術分野において周知である。任意の従来の媒体または薬剤が化合物と適合性のない場合を除いて、治療的組成物ならびに治療および予防方法におけるその使用が企図される。補助的な活性化合物を本発明による組成物に組み入れてもよい。投与の容易さおよび用量の均一性のために単位剤形で非経口組成物を製剤化することは特に有利である。本明細書において使用する単位剤形は、治療対象の患者の単回用量として好適な物理的に別個の単位をいう。各単位は、必要な薬学的担体に関連して望ましい治療効果を生ずるように算出されている所定の量の化合物を含有する。化合物は、許容される単位剤形において好適な薬学的に許容される担体と共に有効な量が便利かつ効果的に投与されるように製剤化することができる。補助的な活性成分を含有する組成物の場合には、剤形は、その成分の通常の投与量および投与様式を参照することによって決定される。一態様において、担体は経口投与可能な担体であってもよい。薬学的組成物の別の剤形は、経口投与に好適な腸溶コーティング顆粒、錠剤またはカプセルとして製剤化された剤形である。徐放性製剤も本発明の範囲に含まれる。本発明の化合物はプロドラッグの形態でも投与することができる。プロドラッグは、インビボにおいて活性な形態に変換される不活性な形態の化合物である。好適なプロドラッグには、化合物の活性型のエステル、ホスホン酸エステル等が挙げられる。一態様において、化合物は注射によって投与することができる。注射液の場合には、担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール、それらの好適な混合液および植物油を含有する溶媒または分散媒体であってもよい。例えば、レシチンなどのコーティングを使用することによって、分散剤の場合には必要な粒子サイズを維持することによっておよび界面活性剤を使用することによって適切な流動性を維持することができる。微生物の作用の防止は、種々の抗菌および/または抗真菌剤を含有させることによって実施することができる。好適な薬剤は当業者に周知であり、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ベンジルアルコール、アスコルビン酸、チメロサール等が挙げられる。多数の場合において、組成物に、例えば、糖、マンニトール、ソルビトールなどのポリオール、塩かナトリウムなどの等張剤を含有させることが好ましいだろう。注射用組成物の持続的吸収は、吸収を遅延する薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを組成物に含有させることによって実施されうる。滅菌注射液は、必要な量のアナログを適宜上記に列挙した成分の1つまたは組み合わせと共に導入し、次にろ過滅菌することによって製剤化することができる。一般に、分散剤は、基本的な分散媒体および上記に列挙する中の必要な他の成分を含有する滅菌基剤にアナログを組み入れることによって製剤化される。錠剤、トローチ、ピル、カプセル等は以下も含有してもよい:トラガカントガム、アカシア、トウモロコシデンプンまたはゼラチンなどの結合剤;リン酸二カルシウムなどの賦形剤;トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、アルギン酸等の崩壊剤;ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤およびスクロース、ラクトースもしくはサッカリンなどの甘味剤またはペパーミント、ウィンターグリーン油もしくはチェリーフレーバーなどの矯味矯臭剤。単位剤形がカプセルの場合には、上記の種類の物質以外に、液体の担体を含有してもよい。種々の他の物質がコーティングとしてまたは単位剤形の物理的形態を改良するために含有されてもよい。例えば、錠剤、ピルまたはカプセルはシェラック、糖または両方がコーティングされてもよい。シロップまたはエリキシルは、アナログ、甘味剤としてのスクロース、保存剤としてのメチルおよびプロピルパラベン、チェリーまたはオレンジフレーバーなどの染料および矯味矯臭剤を含有してもよい。当然のことながら、任意の単位剤形を製剤化する際に使用する任意の物質は薬学的に純粋で、使用する量において実質的に無毒性であるべきである。また、アナログを徐放性製剤および製剤に組み入れてもよい。好ましくは、薬学的組成物は、酸加水分解を最小にするのに好適な緩衝液をさらに含んでもよい。好適な緩衝剤は当業者に周知であり、リン酸塩、クエン酸塩、炭酸塩およびそれらの混合物が挙げられるが、それに限定されるわけではない。本発明による薬学的組成物の単回投与または複数回投与を実施することができる。当業者は、通常の実験によって、化合物および組成物が適用可能である疾病および/または感染症を治療するのに好適であると思われる本発明の化合物および/または組成物の有効で無毒性の用量および投与パターンを設定することができると思われる。さらに、定義された日数にわたって1日あたり投与される本発明の化合物または組成物の投与回数などの最適な治療経過は従来の治療判定試験を使用して確かめることができることは当業者に明らかである。一般に、24時間あたりの有効量は約00001mg~約1000mg体重1kgの範囲であってもよく;好適には、約0001mg~約750mg体重1kg;約001mg~約500mg体重1kg;約01mg~約500mg体重1kg;約01mg~約250mg体重1kg;または約10mg~約250mg体重1kgの範囲であってもよい。さらに好適には、24時間あたりの有効量は、約10mg~約200mg体重1kg;約10mg~約100mg体重1kg;約10mg~約50mg体重1kg;約10mg~約25mg体重1kg;約50mg~約50mg体重1kg;約50mg~約20mg体重1kg;または約50mg~約15mg体重1kgの範囲であってもよい。または、有効量は最高約500mgm2であってもよい。例えば一般に、有効量は約25~約500mgm2、約25~約350mgm2、約25~約300mgm2、約25~約250mgm2、約50~約250mgm2および約75~約150mgm2の範囲であることが予想される。本発明は、以下の実施例に関して例示のためだけにここでさらに詳細に記載される。実施例は、本発明を例示する働きをすることが意図されており、本明細書全体にわたる記載の開示の一般性を限定すると解釈されるべきではない。実施例1ビス陽イオン化合物の合成および特徴づけ112ビスドデカンジブロミド112ジブロモドデカンのメチルイソブチルケトン溶液にキヌクリジンを添加した。混合物を凍結融解によって脱酸素化し、24時間還流して撹拌し、その間に沈殿が形成された。粗混合物を冷却し、沈殿をろ別して、望ましい化合物を白色の固体045g54として得た。112ビスドデカンジブロミド112ジブロモドデカンをNメチルモルホリンに溶解した。凍結融解によって混合物を脱酸素化し、80°Cにおいて24時間撹拌して、望ましい化合物を白色の吸湿性の固体として得、ろ過して回収し、乾燥ジエチルエーテルで洗浄した。111ビスウンデカンジクロライド111ジブロモウンデカンをトリブチルアミンに溶解した。得られた混合物を凍結融解によって混合物を脱酸素化し、130°Cにおいて20時間撹拌した。減圧下溶媒を除去し、粗混合物をフラッシュクロマトグラフィーで精製した。次いで、分画を合わせてLewatitMP64陰イオン樹脂カラムに通した。得られた分画を合わせて、減圧下溶媒を除去して上記の化合物を淡褐色の油状物質として得た。112ビスドデカンジクロライド112ジブロモドデカンをメチルイソブチルケトンに溶解した。トリブチルアミンを添加し、得られた混合物を凍結融解によって脱酸素化した。混合物を24時間還流して撹拌し、減圧下溶媒を除去した。粗混合物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。次いで、分画を合わせてLewatitMP64陰イオン樹脂カラムに通した。得られた分画を合わせて、減圧下溶媒を除去して上記の化合物を黄色の油状物質として得た。112ビスドデカンジブロミド112ジアミンドデカンの無水エタノール溶液に、ブチルブロミドおよびK2CO3を添加した。混合物を3日間還流して撹拌し、望ましい化合物を黄色の油状物質として得た。これは上記のものと同一の1Hおよび13C分光学的データを有した;mzESI270M2Br2619MBr。116ビスドデカンジクロライド116ジブロモヘキサデカンをトリブチルアミンに溶解した。得られた混合物を凍結融解によって脱酸素化し、3日間130°Cにおいて撹拌した。粗混合物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。分画を合わせてLewatitMP64陰イオン樹脂カラムに通した。得られた分画を合わせて、減圧下溶媒を除去して上記の化合物を褐色の油状物質として得た。112ビスドデカンジブロミド112ジブロモドデカンにトリイソブチルアミンを添加し、得られた混合物を凍結融解によって脱酸素化した。混合物を3日間還流して撹拌した。粗生成物をエーテルで洗浄して、上記の化合物を褐色の油状物質として得た。112ビスドデカンジクロライド112ジブロモドデカンをメチルイソブチルケトンに溶解した。トリヘキシルアミンを添加し、得られた混合物を凍結融解によって脱酸素化した。混合物を4日間還流して撹拌し、減圧下溶媒を除去した。粗混合物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。次いで、分画を合わせてLewatitMP64陰イオン樹脂カラムに通した。得られた分画を合わせて、減圧下溶媒を除去して上記の化合物を黄色の油状物質として得た。112ビスドデカンジクロライド112ジブロモドデカンをメチルイソブチルケトンに溶解した。トリオクチルアミンを添加し、得られた混合物を凍結融解によって脱酸素化した。混合物を7日間還流して撹拌し、減圧下溶媒を除去した。粗混合物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。次いで、分画を合わせてLewatitMP64陰イオン樹脂カラムに通した。得られた分画を合わせて、減圧下溶媒を除去して上記の化合物を黄色の油状物質として得た。112ビスドデカンジブロミド112ジブロモドデカンにトリイソブチルアミンを添加し、得られた混合物を凍結融解によって脱酸素化した。混合物を48時間還流して撹拌した。混合物を冷却し、上記の化合物を白色の沈殿物として得た。112ビスドデカンジクロライド112ジブロモドデカンをメチルイソブチルケトンに溶解した。トリイソペンチルアミンを添加し、得られた混合物を凍結融解によって脱酸素化した。混合物を48時間還流して撹拌し、減圧下溶媒を除去した。粗混合物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。次いで、分画を合わせてLewatitMP64陰イオン樹脂カラムに通した。得られた分画を合わせて、減圧下溶媒を除去して上記の化合物を淡黄色の油状物質として得た。112ビスドデカンジブロミド112ジブロモドデカンをトリプロピルアミンに溶解した。得られた混合物を凍結融解によって脱酸素化し、80°Cにおいて48時間撹拌した。減圧下溶媒を除去し、得られた油状物質をエーテルによって研和triturateし、上記の化合物を暗褐色の油状物質として得た。112ビスドデカンジブロミド112ジブロモドデカンをトリエチルアミンに溶解した。得られた混合物を凍結融解によって脱酸素化し、80°Cにおいて24時間撹拌した。減圧下溶媒を除去し、得られた油状物質をエーテルによって研和し、上記の化合物を吸湿性の白色固体として得た。112ビスドデカンジブロミド水酸化ナトリウムを塩酸トリメチルアミンの乾燥メタノール溶液に添加した。混合物をろ過し、112ジブロモドデカンをろ液に添加した。混合物を12時間還流し、減圧下溶媒を除去した。粗生成物をメタノールエーテルから再結晶して、上記の化合物を白色の固体として得た。データはJMedChem19974035573566と同じである。112ビスドデカンジブロミド112ジブロモドデカンを1メチルピロリジンに溶解した。得られた混合物を凍結融解によって脱酸素化し、80°Cにおいて20時間撹拌した。減圧下溶媒を除去して上記化合物を白色の吸湿性の固体として得た。112ビスドデカン112ジブロモドデカンをピロリジンに溶解した。混合物を90°Cにおいて20時間撹拌した。粗混合物を80182CH2C12MeOHNH3で溶出してフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、上記化合物を黄色固体として得た。112ビスドデカンジブロミド112ビスドデカンのメチルイソブチルケトン溶液にブチルブロミドを添加した。得られた混合物を20時間還流して撹拌した。粗混合物を80182CH2C12MeOHNH3で溶出してフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、上記化合物を淡黄色の油状物質として得た。実施例2酵素活性の特徴づけクリプトコッカスネオフォルマンスは、治療されないと致死的になる真菌性髄膜炎の最も一般的な原因菌である。病原性株のクリプトコッカスは数多くのいわゆる病原性因子を産生し、その1つがホスホリパーゼBと名づけられている分泌型ホスホリパーゼである。このホスホリパーゼは、リン脂質から両方のアシル鎖を同時に離脱するホスホリパーゼB活性、リゾリン脂質から1つのアシル鎖を離脱するリゾホスホリパーゼ、およびアシル鎖をリゾリン脂質に付加して、リン脂質を形成するリゾホスホリパーゼトランスアシラーゼLPTAを含む3つの別個の活性を有する単一タンパク質である。分泌型ホスホリパーゼBは、マクロファージにおけるクリプトコッカスの生存、肺組織の破壊および食作用を調節するエイコサノイドの産生に関与する。このホスホリパーゼBはまた、カンジダアルビカンスおよびアスペルギルスフミガツスなどの医学的に重要な他の真菌の病原性にも関連する。結果として、分泌型ホスホリパーゼB酵素は、例えば、抗菌、抗真菌、抗ウイルスおよび抗寄生虫治療を含む微生物感染症の治療の有用と思われる標的となりうる。Cネオフォルマンスにおける細胞結合型ホスホリパーゼB活性が特徴づけられた。材料および方法真菌単離株および培地。高レベルの分泌型ホスホリパーゼB活性を産生するCネオフォルマンスグルビイ、H99を、細胞結合ホスホリパーゼの特徴づけおよびホスホリパーゼ活性の阻害に使用した。単離株H99は親切なことにDrGrayCoxによる供与を受け、30°Cにおいてサブローデキストロース寒天で継代培養した。分泌型ホスホリパーゼ活性を含有する上清の調製。単離株H99を、大気中で30°Cにおいて72時間径16cmのペトリ皿のSDAで集密化するまで増殖させた。10~20の皿から掻き取った細胞を等張生理食塩液およびイミダゾール緩衝液で逐次的に洗浄し、約10の細胞容量のこの緩衝液中で再懸濁し、37°Cにおいて24時間インキュベートした。以前に記載されているように、無細胞上清を遠心分離によって分離し、70°Cで保存した。膜および細胞質ゾル分画を調製するための細胞の破壊。上記の上清調製物からの細胞ペレットも70°Cで凍結した。イミダゾール緩衝液で2回洗浄後、MiniBeadbeater8CellDisputerでプロテアーゼ阻害剤カクテルベンゼンスルホニルフルオリド塩酸塩、100mM、110フェナントロリン、500mM、ペプスタチンA、22mM、E64、14mM;Sigmaの存在下において、氷上での1分の冷却期間と交互に1分3サイクル破壊した。ホモジネートを14000gで15分遠心分離して、膜および細胞質ゾル分画を得た。細胞質酵素活性は70°Cにおいて最高3ヶ月間の保存中安定であったが、膜結合活性は安定性が悪かった。ホスホリパーゼの放射測定アッセイ。最終容量125μL、37°Cにおいて以前に記載されているように酵素活性を測定した。分泌型PLB活性の測定は、キャリヤージパルミトイルホスファチジルコリンおよび12ジ114Cパルミトイルホスファチジルコリンを窒素雰囲気下で乾燥し、125mMイミダゾールアセテート緩衝液にBranson450ソニファイアーを使用する超音波処理によって懸濁した。反応時間は、総タンパク質1μgを使用するとき22分で、PLB活性は、遊離酸に標識が出現し、放射性標識PC基質が減少する速度によって測定した。細胞質ゾルおよび膜分画アッセイのためのこれらの条件の変更を表1に示す。このアッセイはまた、ホスホリパーゼA、CおよびD活性の測定も同時に可能にする。これらの活性は、それぞれ、リゾPC、ジアシルグリセロールおよびホスファチジン酸におけるPCからの放射性標識の出現によって測定した。分泌型LPLおよびLPTA活性は、アッセイ緩衝液に114CパルミトイルリゾPCおよびキャリヤーリゾPCを含有する反応混合物中で同時に測定した。反応時間は、総タンパク質1μgを使用するとき15秒で、LPL活性は、放射性標識脂肪酸が放出され、114CパルミトイルリゾPCが損失する速度によって測定した。LPTA活性は、放射性標識PCの形成速度から推定した。膜および細胞質ゾル分画のためのこれらの条件の変更を表1に示す。05mLのクロロホルム:メタノールを添加することによって全ての反応を停止した。反応生成物は、BlighECandWJDyer1959ArapidmethodoftotallipidextractionandpurificationCanJBiochemPhysiol37911917に開示されている方法によって抽出し、TLCで分離し、以前に記載されているように定量した。PLC活性の場合には、TLCプレートを、クロロホルム:メタノール:水の代わりに石油エーテル;ジエチルエーテル:酢酸で展開した。表1H99細胞結合型および分泌型ホスホリパーゼの最適条件酵素活性の特徴づけ実験はすべて二つ組または三つ組で実施した。種々のホスホリパーゼ活性に対するpHの影響は、最終濃度50mMのイミダゾールアセテート緩衝液、MES緩衝液およびグリシン緩衝液を使用して測定した。基質の非酵素的破壊の対照を全てのpH値に加えた。陽イオン、TritonX100および金属キレートをストック水溶液として調製し、適当なアッセイ緩衝液で最終濃度に希釈した。タンパク質アッセイ標準としてBSAを用いて、クーマシーブルー結合アッセイを使用し、または細胞結合分画はビシンコニン酸を使用して総タンパク質評価を実施した。細胞結合分画におけるPLB、LPLおよびLPTAの同定パルミトイルリゾホスファチジルコリンおよびDPPCは天然状態および精製状態の両方において分泌型酵素の好ましい基質であり、酵素活性はpH40において最大であったので、細胞結合型ホスホリパーゼ活性のアッセイは、これらの化合物を使用してpH40において実施した。クリプトコッカス膜および細胞質ゾル分画による基質リゾPCの加水分解によって、遊離脂肪酸およびPCだけが形成され、分泌型酵素について見られるようにLPLおよびLPTA両方の存在を示している。同様に、両方のアシル鎖が放射性標識されたDPPCが分解されて遊離の脂肪酸だけを生じ、活性はpH40においてPLBによることを示した。ホスホリパーゼ活性に対するタンパク質濃度および時間の影響タンパク質濃度が漸増する細胞質ゾル分画の活性は、分泌型酵素の値と同様に、LPLLPTAではわずか1μgまで、PLBでは4μgまで直線状であった。一方、膜結合型LPLおよびLPTA活性は80μgまでタンパク質濃度に伴って直線状であり、その後はさらには増加しなかった。PLB活性はタンパク質160μgまで直線状であった。細胞質ゾルおよび膜活性の時間経過は分泌型酵素と類似しており、LPLLPTAはわずか20~30秒まで直線状で、その後は増加しなかった。膜結合PLB活性は30分まで直線状であったが、細胞質ゾル活性は22分まで直線状であった。酵素活性に対する基質濃度の影響細胞質ゾルLPLLPTA活性は最大50~200μMリゾPCに達し、その後基質濃度の増加と共に活性は急激に低下した。細胞質PLB活性は400μMDPPCにおいて飽和に達し、1000μM以降低下した。膜結合LPLLPTAは約50μMリゾPCで最大に達したが、600μMまで同じレベルの活性を維持し、その後低下した。膜結合PLB活性は200μMDPPCで最大に達し、800μM以降低下した。酵素活性に対するpHの影響さらなる検討のための最適条件を表1から選択した。細胞結合ホスホリパーゼ活性の変動はpH範囲3~10で観察された。細胞質ゾルLPLLPTA活性は、40および60において2つのpH最適値を示し、活性はpH90において低下してゼロになった。細胞質ゾルホスホリパーゼBのpHプロファイルは、シャープさには欠けるが、膜結合PLBと類似していた。pH最適値は膜結合LPLおよびLPTAともに3~4であり、pH90では徐々に低下してゼロになった。膜PLBの最適pHは非常に狭く、pH70では活性は実質的になかった。細胞結合活性と粗および精製分泌型酵素の活性との最も明らかな差は、pH60および7~8において細胞結合酵素の活性は大きかった。興味深いことに、LPLLPTAアッセイのインキュベーション時間を20~30秒から10分に延長したとき、膜および細胞質ゾル酵素調製物ではpH7~9の範囲では活性は増加したが、低いpH値では増加しなかった。ホスホリパーゼB活性の細胞分布3つ全ての活性の最適pHとして40を取ると、総活性の最も大きな割合は分泌されるという点において、PLBの分布はLPLおよびLPTAの分布と異なることが明らかである。LPLおよびLPTAの場合には、活性のほとんどは細胞質ゾルである。3つ全ての活性の比活性および割合は膜分画において最も低かった。表2pH40において測定されたホスホリパーゼ活性の細胞分布データは少なくとも3つのアッセイの平均およびSEMとして表し、活性は、細胞分画において分解される基質μmolまたは形成される産物分タンパク質1mgaまたは総タンパク質bとして算出した。P001、膜活性と比較;P001、細胞質ゾル活性と比較調節剤および細胞結合活性pH40において10mMカルシウムまたはマグネシウムによって細胞質ゾルまたは膜結合活性はいずれも刺激されなかった。TritonX100はpH40における唯一の顕著な阻害剤で、細胞質ゾルおよび膜結合LPTAおよびPLBは最も影響された。表3細胞質ゾルおよび膜結合活性に対する調節剤の影響a活性は、100とした対照に対する割合として表す。値は三つ組またはb二つ組アッセイの平均である。調節剤の最終濃度は、01であったTritonX100を除いて10mMであった。対照からの有意差、P001、ダネットの多重比較検定による。pH70でアッセイする場合には、細胞質ゾルおよび膜結合活性の3つ全てはカルシウムで刺激した。これは細胞質ゾルLPLおよびLPTAについてはEDTAおよびEGTAの存在下における低い活性において反映されていた。FeCl3およびTritonX100は共に、細胞質ゾルおよび膜結合分画の3つ全ての活性の阻害剤である。TritonX100は、LPLおよびLPTA活性よりPLBを阻害する際に有効性が低かった。ホスホリパーゼA、CおよびD分泌型のホスホリパーゼA、CおよびDはクリプトコッカス上清では同定されていない。高レベルのホスホリパーゼAは、膜調製物においてpH7~8においてDPPCからの放射性標識リゾPCの形成によって検出されたが図6A、細胞質ゾルでは微量のPLAしか見られなかった。少量のホスホリパーゼD活性は、pH7~8において細胞質ゾルおよび膜分画からの放射性標識ホスファチジン酸の形成によって検出された図6B、膜PLD。基質としてDPPCを使用するとき、任意のpHにおいてPLCの痕跡は見られなかった。試験したアッセイ条件下では、ホスホリパーゼBは、Cネオフォルマンスの細胞質ゾルおよび分泌型に存在する主要なホスホリパーゼであった。一方、ホスホリパーゼAおよびDは膜結合型であり、細胞質ゾルでは弱冠のPLD活性が見られた。PLB活性のpH最適値は、分泌型、膜結合または細胞質ゾルであっても、常に酸性であったが、細胞質ゾルLPLLPTAは二峰性であった。PLAおよびPLD活性はpH7~8においてのみ検出された。ホスホリパーゼBの作用部位であると推定されるところは、インビボにおいてマクロファージ様細胞系統およびマウスマクロファージの酸性液胞であるので、これらの観察は、クリプトコッカス病原性における分泌型PLB活性の役割に一致している。膜結合LPLLPTA活性をカルシウムおよびマグネシウムの両方で刺激した。pH70におけるカルシウムおよびマグネシウムによる細胞結合型PLB活性の予測されなかった刺激は、一部には、PLA活性による可能性がある。実施例3潜在的ホスホリパーゼ阻害剤の選択および試験材料および方法潜在的ホスホリパーゼ阻害剤の選択。潜在的な阻害剤の選択は、基質、すなわちホスホリパーゼに構造的に関連する化合物を試験する従来の方法に基づいている。代謝的に安定で、アッセイにおける溶媒の使用を回避する程度に十分に水溶性であると思われるリン脂質の2つの主要な特徴を有する市販の化合物を最初に使用した。阻害剤の調製およびアッセイにおける使用。以下の化合物を試験した:化合物1、112ビスドデカンジブロミド化合物2、110ビスデカンジブロミド化合物3、112ビスドデカンジブロミド化合物4、110ビスデカンジブロミドデカメトニウム。全ての化合物は、5mMEDTAを含有するアッセイ緩衝液で700μMのストック溶液として調製し、次いで70、7、07および007μMの溶液が得られるように緩衝液で逐次的に希釈した。各アッセイにおいて、これらの溶液の45μLを使用し、最終容量125μLを基質、酵素および緩衝液から調製した。放射測定アッセイは上記のように実施した。阻害は、PLBおよびLPL活性の場合には残存する基質のパーセントまたはLPTA活性の場合には産生されるDPPCのパーセントとして算出した。無阻害剤対照において変換または産生される量を100に正規化し、それに対して阻害を算出した。全てのアッセイは三つ組で実施した。膵臓ホスホリパーゼアッセイ。ブタ膵臓ホスホリパーゼA2の32M硫酸アンモニウム懸濁液を使用した。十分に混合した酵素の1部を4部の緩衝液に添加した。次いで、試験化合物による活性および阻害は、真菌PLB活性について実施例2に記載する放射測定方法によって測定した。しかし、25μL酵素液を使用し、反応時間は1時間であった。これらの条件により、無阻害剤対照では基質変換は~60であった。抗真菌性感受性試験。標準的な微量希釈方法によって化合物の抗真菌活性を測定した。各化合物の最小阻止濃度は、35°Cにおいて48時間および72時間後に増殖が見られない濃度と定義した。試験した真菌株は、クリプトコッカスネオフォルマンスH99、クリプトコッカスネオフォルマンスATCC90112およびカンジダアルビカンスATCC10231を含んだ。全ての試験は二つ組で実施した。アンモニウムおよびホスホニウム化合物を調査した。検討した4つの化合物の構造および一般名を図2に示す。これらの化合物は各々強力な正電苛および脂肪酸様疎水性を有する。アッセイは、表1に要約する最適条件を使用して、陽イオンを添加しないでpH4において実施した。これらの条件下では、PLB、LPLおよびLPTA活性のみを測定した。最初は、阻害剤の可能性があると思われるものを25および250μMにおいてアッセイした。次いで、幾分かの阻害を示すものを25および025μMにおいてアッセイした。このビストリブチルホスホニウム化合物は、LPLまたはLPTAよりPLB活性を阻害する。重要なことに、それは細胞質ゾルおよび分泌型酵素を阻害するが、膜結合酵素に影響を与えない。興味深いことに、それは、真菌分泌型ホスホリパーゼBよりさらに強力にブタ膵臓PLA2を阻害する。これは、真菌酵素をより強力に阻害する2つのビストリブチルアンモニウム化合物と対照的であり、さらに高い選択性を達成するプラットフォームを形成する。これら3つのトリブチルビス陽イオン化合物の抗真菌作用は極めて強力で、最高は25μモルのMICを有する。長さが2CH2基増加するとMICは急激に低下し、重要なことに、長さの増加は阻害効力を増加する。四級窒素にメチルアルキル化のみを有する化合物は、酵素阻害も抗真菌作用も示さない。表4112ビスドデカンジブロミドによるCネオフォルマンス株H99ホスホリパーゼ活性の阻害aこれらの化合物の構造および略語を図2に示す。化合物4は、これらの濃度においていかなる酵素の活性のいずれも阻害しなかった。bデータは、少なくとも3つのアッセイの平均およびSEMとして表す。阻害剤を含まない対照からの有意差、P001ダネットの多重比較検定による。c濃度はμMである。nd未決定表5二量体陽イオン化合物による分泌型クリプトコッカスH99ホスホリパーゼおよびppPLA2の阻害aaデータは活性の阻害率として表し、少なくとも3つのアッセイの平均である。b構造および略語を図2に示す。nd未決定実施例4抗真菌活性Cネオフォルマンスの2つの株およびカンジダアルビカンスの1つの株に対する標準化されている連続希釈感受性試験において抗真菌活性について実施例3に言及する化合物1~4をアッセイした。2つのより強力なホスホリパーゼ阻害剤は極めて強力で、MICは25~10μMの範囲であったが、非阻害性デカメトニウム化合物はMICがきわめて大きかった。実施例5抗真菌活性CネオフォルマンスおよびCアルビカンスに対する標準化されている連続希釈感受性試験において抗真菌活性についてある範囲の陽イオン化合物をアッセイした。結果を表7に示す。阻害と抗真菌活性の間に良好な相関が観察された。表6Cネオフォルマンス基準株ATCC90112およびカンジダアルビカンス基準株ATCC10231に対して試験した合成化合物のMIC表7実施例6溶血活性アッセイヒト血液を、抗凝固剤としてカリウムEDTAを含有する10mLVacutainerチューブに採血した。各Vacutainerの血液を50mLの遠心管に移し、2000xgで15分遠心分離することによってカルシウムおよびマグネシウムを含まないリン酸緩衝生理食塩液で3回洗浄した。3回目の上清は無色透明であった。細胞は最高2週間PBS中で保存した。細胞のPBS懸濁液に、適当な濃度において試験物質のストック溶液と混合した。ゆっくり振とうしながら混合物を37°Cにおいて1時間インキュベートし、次いで2000xgにおいて10分遠心分離した。上清をPBSで10倍希釈し、光学密度を540nmで測定した。0および100溶血は、細胞をそれぞれPBSまたは01TritonX100と共にインキュベートすることによって求めた。アッセイは三つ組で実施した。結果を表7に示す。強力な抗真菌化合物の溶血活性は、MICを50倍以上上回る濃度においてごくわずかであることが見出された。実施例7インビトロにおける抗菌活性抗菌活性について2つのビス陽イオン化合物を試験した。使用したアッセイは、米国臨床検査標準協議会NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards2003MethodsforDilutionAntimicrobialSusceptibilityTestsforBacteriaThatGrowAerobicallyApprovedStandardSixthEditionNCCLSドキュメントM7A6VillanovaPaUSAによって発表されたものであった。結果を表8に示す。実施例8インビトロにおける抗真菌活性抗真菌活性について2つのビス陽イオン化合物を試験した。糸状菌に使用したアッセイは、米国臨床検査標準協議会2002ReferenceMethodforBrothDilutionAntifungalSusceptibilityTestingofFilamentousFungiApprovedStandardNCCLSドキュメントM38AVillanovaPaUSAによって発表されたものであった。酵母に使用したアッセイは、GhannoumMAASIbrahimYFuMCShafiqJEEdwardsJrandRSCriddle1992SusceptibilitytestingofCryptococcusneoformansAmicrodilutiontechniqueJClinMicrobiol3028812886に発表されている、米国臨床検査標準協議会1997ReferenceMethodforBrothDilutionAntifungalSusceptibilityTestingofYeastsApprovedStandardNCCLSドキュメントM27AVillanovaPaUSAのものである。結果を表9に示す。表82つのビスアンモニウム化合物のインビトロにおける抗菌特性a陽性対照はアモキシリンであった。得られたMICは8~16μgmlであった。b陽性対照はゲンタマイシンであった。得られたMICは10μgmlであった。c陽性対照はアモキシリンであった。得られたMICは025~050μgmlであった。d陽性対照はバンコマイシンであった。得られたMICは10μgmlであった。e陽性対照はアモキシリンであった。得られたMICは006~012μgmlであった。f陽性対照は存在しない。表92つのビスアンモニウム化合物のインビトロにおける抗真菌活性aこれらの皮膚糸状菌の陽性対照はイトラコナゾールであった。それは、Tルブラムが03μgml、Tトンスランスが11μgml、Mジプセウムが09μgml、Mカニスが06μgmlのMICを有する。実施例9ホスホリパーゼ阻害剤に対すする皮膚糸状菌の感受性糸状菌の米国臨床検査標準協議会ドキュメントM38Pに記載されている方法を使用し、FernandezTorresetalCurrenttopicsinMedicalMycology1419Feb1999によって記載されている皮膚糸状菌に特異的な改良を加えて単離株を試験した。材料および方法試験生物5種類の皮膚糸状菌単離株、すなわち;Tルブラム、Tメンタグロフィテス、Tトンスランス、MカニスおよびMジプセウムで、それらは全てリパーゼを産生し、ホスホリパーゼを産生するものもある。これらの単離株は、選択した抗真菌剤に対する活性について、NCCLSドキュメントM38Pによるブロス微量希釈方法によって試験した。また、無作為に選択したTトンスランスの10の単離株も試験した。全ての単離株はSDA上で28°Cにおいて維持した。基準対照生物としてカンジダパラシローシスを使用した。抗真菌化合物112ビスドデカン、ジブロミド以下:イトラコナゾールおよびテルビナフィンは標準的な粉末として業者からの提供を受け、基準薬剤として使用した。ブロス培地使用した微量希釈プレートは、Lグルタミンを含有し、炭酸水素ナトリウムを含有せず、0165Mモルホリンプロパンスルホン酸でpH70に緩衝化した25°Cの単一ロットのRPMI1640基礎培地であった。ブロス微量希釈手法ストック溶液の調製ストック溶液の調製は、NCCLSM38Pに記載されているガイドラインを幾分か変更したものによるかまたは製造業者の指示により実施した。粉末状の薬剤を100ジメチルスルホキシドに溶解し、最終試験濃度より100倍高い濃度とした。化合物は全て100で調製した。ITRAおよびTRBでは、100DMSOで最終濃度の100倍の2倍薬剤希釈を調製し、次にRPMI培地でさらに150に希釈して試験に必要な最終強度の2×とした。イトラコナゾール10000μgml溶液をさらに110に希釈して11000濃度とした。少量の薬剤を70°Cで凍結した。試験日に少量を融解し、さらに希釈して32μgmlの2×薬剤濃度。ITRAの試験濃度範囲は003~16μgmlであった。テルビナフィン、1000μgml溶液も少量を70°Cにおいて凍結した。試験日に、さらに150希釈して、20μgml濃度とした。最後に、さらに110に希釈して、2μgml濃度とした。TRBについて試験した濃度範囲は00019~1μgmlであった。112ビスドデカン、ジブロミドの濃度範囲は045~244μgmlであった。真菌接種材料の調製真菌培養物をジャガイモデキストロース寒天で継代培養し、28°Cにおいて7~10日間増殖させた。真菌懸濁液を5mlの蒸留水で覆い、次いでコロニーを綿棒で掻き取った。得られた分生子と菌糸の混合物を取り、滅菌チューブに移し、次いでガラスビーズと共にボルテックスした。粒子が沈んだら、上層の均一な懸濁液を回収し、密度を530nmの波長の05McFarland標準にデンシトメーターで調整した。次いで、これらのストック懸濁液をRPMI培地で150に希釈して、03×104~9×104CFUmlの範囲の最終作業接種濃度を得た。接種材料の定量は、調整後の接種材料の11000希釈の100μlをSDAプレートで平板培養して実施し、28°Cにおいてインキュベートし、7日のインキュベーション後、コロニーを数えた。試験手法試験は、糸状菌を試験するNCCLSM38Pドキュメントに基づいて行われた。試験は、滅菌した96ウェル平底マイクロタイタープレートで実施した。カラム1および3~12は100μlのRPMI培地を充填し、カラム2は何も充填しなかった。カラム1、2および3は2×薬剤濃度の100μlを充填した。次いで、カラム3の100μlをカラム11までの各カラムに移すことによって連続希釈を作製し、カラム11の100μlを破棄した。カラム12は薬剤を含まない増殖対照とした。最後に、接種材料懸濁液の100μlを、滅菌対照としたカラム1を除く全てのウェルに添加した。プレートを28°Cにおいて7日間インキュベートし、インキュベーション3日目および7日目に読んだ。試験は全て二つ組で別個に3回実施した。MICエンドポイントの決定マイクロタイタートレーにおける増殖は、照明付きリバースミラーを使用することによって目視検査によって読んだ。各ウェルの増殖を増殖対照の薬剤を含まないウェルと比較した。全ての薬剤のMICエンドポイントは100増殖阻止が見られた最初のウェルであるように選択した。結果ITRAのMIC範囲は003~20μgmlで、TRBは0007~025μgmlであった。112ビスドデカン、ジブロミド、VS132はTトンスランスおよびMジプセウムに対して19~76μgmlのMIC範囲を有した。最も低いGMはTトンスランスに対してであった。最も高いGMはMカニスであった。表10皮膚糸状菌単離株に対する選択した抗真菌化合物のMIC値表1110種類のTトンスランス単離株のMIC値VS132はクリプトコッカスネオフォルマンスH99およびCアルビカンスホスホリパーゼを阻害し、それらの酵母に対する殺真菌活性も有する。本発明の検討では、VS132の平均MICは全ての単離株において比較的高かった。実施例10製剤本発明の抗微生物化合物は単独で投与してもよいが、それらは製剤として投与してもよい。例えば、活性成分は、局所投与には、製剤の0001重量~10重量、さらに典型的には、製剤の1重量~5重量を含んでもよいが、10重量までも含んでよい。例として、本発明による薬学的組成物の具体的な例を以下に概略する。以下は製剤の例示的にすぎない例として考慮されるべきであり、いかなる意味においても本発明の範囲を限定するものと考慮されるべきではない。実施例10局所クリーム組成物局所クリームとして送達するための典型的な組成物を以下に概略する:式の化合物10gポラワックスGP200250g無水ラノリン30g白色ミツロウ45gヒドロキシ安息香酸メチル01g1000gまでの脱イオンおよび滅菌水ポラワックス、ミツロウおよびラノリンを60°Cにおいて加熱し、ヒドロキシ安息香酸メチル溶液を添加し、高速撹拌を使用して均一にする。次いで、温度を50°Cに低下させる。次いで、式の化合物を添加し、全体に分散し、低速撹拌で組成物を冷却させる。実施例10局所ローション組成物局所ローションとして送達するための典型的な組成物を以下に概略する:式の化合物12gモノラウリン酸ソルビタン08gポリソルベート2007gセトステアリルアルコール15gグリセリン70gヒドロキシ安息香酸メチル04g約10000mlまでの滅菌水ヒドロキシ安息香酸メチルおよびグリセリンを75°Cにおいて70mlの水に溶解する。モノラウリン酸ソルビタン、ポリソルベート20およびセトステアリルアルコールを一緒に75°Cにおいて融解し、水溶液に添加する。得られたエマルジョンを均一にし、連続的に撹拌して冷却させ、式の化合物を、残りの水の懸濁液として添加する。懸濁液全体を均一になるまで撹拌する。実施例10点眼組成物点眼剤として送達するための典型的な組成物を以下に概略する:式の化合物03gヒドロキシ安息香酸メチル0005gヒドロキシ安息香酸プロピル006g約10000mlまでの精製水。ヒドロキシ安息香酸メチルおよびプロピルを75°Cにおいて70mlの精製水に溶解し、得られた溶液を冷却させる。次いで、式の化合物を添加し、膜フィルターでろ過して溶液を滅菌し、無菌的に滅菌容器に充填する。実施例10エアゾール組成物容量20~30mlのエアゾール容器には:式の化合物の10mgとポリソルベート85またはオレイン酸などの05~08重量の潤滑剤をフレオンなどの噴射剤に分散させ、鼻腔内もしくは経口吸入投与または局所適用に適当なエアゾール容器に充填する。実施例10非経口投与のための組成物筋肉内注射のための本発明の薬学的組成物は、1mLの滅菌緩衝液および1mgの式の化合物を含有するように調製してもよい。同様に、静脈内注入のための薬学的組成物は、250mlの滅菌リンガー液および5mgの式の化合物を含んでもよい。実施例10カプセル組成物カプセルの形態の式の化合物の薬学的組成物は、標準的なツーピース硬ゼラチンカプセルに粉末状の50mgの式の化合物、100mgのラクトース、35mgのタルクおよび10mgのステアリン酸マグネシウムを充填することによって調製することができる。実施例10注射用非経口組成物注射による投与に好適な形態の本発明の薬学的組成物は、1重量の式の化合物を10容量のプロピレングリコールおよび水中で混合することによって調製することができる。溶液をろ過滅菌する。実施例10軟膏軟膏として送達するための典型的な組成物は、10gの式の化合物と1000gまでの白色軟パラフィンを分散させて、均一で滑らかな製品にしたものを含む。実施例10ゲル組成物経皮的ゲルは以下に概略するように調製することができる:式の化合物10gプロピレングリコール50gイソプロピルアルコール200gカルボキシビニルポリマー20gアンモニア水溶液を適量精製水720g式の化合物をプロピレングリコールおよびイソプロピルアルコールの混合溶媒に分散する。精製水中で膨潤させてから、カルボキシビニルポリマーを溶液に添加する。撹拌後、アンモニア水溶液で混合物をpH7に調整する。実施例10粉末組成物60gのカゼイン酸ナトリウム、30gのキサンタンガムおよび600gの水を室温において30分混合することによって粉末組成物を調製することができる。この水相に、溶液を撹拌しながら20gの式の化合物を添加して、pH約7のエマルジョンを形成する。エマルジョンをホモジナイズし、エマルジョンを加熱することによって脱水して乾燥粉末粒子を形成する。次いで、乾燥後の粉末を篩過して、メッシュサイズ120~180μmの微細な粉末粒子を得る。本発明の好ましい形態は、添付の図面を参照して例としてここで記載されている: