"以下の化学式1ないし3のいずれか1つの構造を有し、式1ないし3において、R1は、式4のR10-か、式5のR20-かであり、R2は、CHO-か、HO-CH2-か、CH3-C=O-か、CH3-CH-OH-かであり、R3は、水素原子か、CH3-C=O-か、CH3-CH2-C=O-か、CH3-CH-OH-か、CH3-CH2-CH-OH-かであり、R4は、水素原子か、CH3-C=O-か、CH3-CH2-C=O-か、CH3-CH-OH-か、CH3-CH2-CH-OH-かであり、R11及びR12は、それぞれ独立に、水素原子、メチル基、又はハロゲン原子であり、R13は、-CH2-か、-CH-OH-か、-C=O-かであり、R21及びR22は、それぞれ独立に、水素原子、メチル基、又はハロゲン原子であり、R23は、-CH2-か、-CH-OH-か、-C=O-かであり、R24は、水素原子、ヒドロキシル基、メチル基、又はハロゲン原子であることを特徴とする、化合物又は薬学的に許容できる塩。12345以下の化学式6又は7の構造を有し、式6又は7において、R1は、式8のR10-か、式9のR20-かであり、R2は、CHO-か、HO-CH2-か、CH3-C=O-か、CH3-CH-OH-かであり、R3は、水素原子か、CH3-C=O-か、CH3-CH2-C=O-か、CH3-CH-OH-か、CH3-CH2-CH-OH-かであり、R4は、水素原子か、CH3-C=O-か、CH3-CH2-C=O-か、CH3-CH-OH-か、CH3-CH2-CH-OH-かであり、R5は、水素原子か、CH3-C=O-か、CH3-CH2-C=O-かで、R6は、水素原子か、CH3-C=O-か、CH3-CH2-C=O-かであり、R11及びR12は、それぞれ独立に、水素原子、メチル基、又はハロゲン原子であり、R13は、-CH2-か、-CH-OH-か、-C=O-かであり、R21及びR22は、それぞれ独立に、水素原子、メチル基、又はハロゲン原子であり、R23は、-CH2-か、-CH-OH-か、-C=O-かであり、R24は、水素原子、ヒドロキシル基、メチル基又はハロゲン原子であることを特徴とする、化合物又は薬学的に許容できる塩。6789以下の化学式10の構造を有することを特徴とする、化合物又はその薬学的に許容できる塩。10請求項1ないし3のいずれか1つに記載の化合物又はその薬学的に許容できる塩を生成する薬物前駆体であることを特徴とする、化合物又はその薬学的に許容できる塩。請求項1ないし4のいずれか1つに記載の化合物又はその薬学的に許容できる塩を含むことを特徴とする、原虫感染症治療用医薬品組成物。5価アンチモン剤、ペンタミジン、アミノサイジン、アムホテリシンB、リポソームアムホテリシンBからなるグループから選択される少なくとも1種類の医薬と、請求項1ないし4のいずれか1つに記載の化合物又はその薬学的に許容できる塩とを含み、前記少なくとも1種類の医薬と、請求項1又は4のいずれか1つの化合物又はその薬学的に許容できる塩とを、同時に、あるいは、逐次的に投与することを特徴とする、原虫感染症治療用医薬品組成物。前記原虫はリーシュマニア、トリパノソーマ及びマラリアからなるグループから選択される少なくとも1種類の原虫であることを特徴とする、請求項5又は6に記載の原虫感染症治療用医薬品組成物。リーシュマニア症の治療にはすべての病型に対して5価アンチモン剤が第1選択薬である。WHOが推奨する、本剤の使用法は、20mgアンチモン/kg/日で30日間となっている。WHOは、5価アンチモン剤による初回治療コースで症状の改善を認めない場合は、ペンタミジン、アミノサイジン、アムホテリシンB、リポソームアムホテリシンB等の第2選択薬に移行することを推奨する。かかるリーシュマニア症の処方の問題の1つは、第1選択薬及び第2選択薬の両方とも注射によって投与しなければならないことである。医療設備が不備な僻地の患者にアンチモン剤を1か月間連続して注射することはきわめて困難と考えられる。そこで、注射によらずに投与することができる新規の抗リーシュマニア症治療薬を開発する必要がある。また、前記アンチモン剤に対する耐性原虫が出現してきており、第2選択薬に対する耐性原虫の出現も時間の問題である。そこで、新規な作用機序を有する、抗リーシュマニア治療薬を開発する必要がある。本発明は、以下の化学式1ないし3のいずれか1つの構造を有し、式1ないし3において、R1は、式4のR10-か、式5のR20-かであり、R2は、CHO-か、HO-CH2-か、CH3-C=O-か、CH3-CH-OH-かであり、R3は、水素原子か、CH3-C=O-か、CH3-CH2-C=O-か、CH3-CH-OH-か、CH3-CH2-CH-OH-かであり、R4は、水素原子か、CH3-C=O-か、CH3-CH2-C=O-か、CH3-CH-OH-か、CH3-CH2-CH-OH-かであり、R11及びR12は、それぞれ独立に、水素原子、メチル基、又はハロゲン原子であり、R13は、-CH2-か、-CH-OH-か、-C=O-かであり、R21及びR22は、それぞれ独立に、水素原子、メチル基、又はハロゲン原子であり、R23は、-CH2-か、-CH-OH-か、-C=O-かであり、R24は、水素原子、ヒドロキシル基、メチル基、又はハロゲン原子である、化合物又はその薬学的に許容できる塩を提供する。12345本発明は、以下の化学式6又は7の構造を有し、式6又は7において、R1は、式8のR10-か、式9のR20-かであり、R2は、CHO-か、HO-CH2-か、CH3-C=O-か、CH3-CH-OH-かであり、R3は、水素原子か、CH3-C=O-か、CH3-CH2-C=O-か、CH3-CH-OH-か、CH3-CH2-CH-OH-かであり、R4は、水素原子か、CH3-C=O-か、CH3-CH2-C=O-か、CH3-CH-OH-か、CH3-CH2-CH-OH-かであり、R5は、水素原子か、CH3-C=O-か、CH3-CH2-C=O-かで、R6は、水素原子か、CH3-C=O-か、CH3-CH2-C=O-かであり、R11及びR12は、それぞれ独立に、水素原子、メチル基、又はハロゲン原子であり、R13は、-CH2-か、-CH-OH-か、-C=O-かであり、R21及びR22は、それぞれ独立に、水素原子、メチル基、又はハロゲン原子であり、R23は、-CH2-か、-CH-OH-か、-C=O-かであり、R24は、水素原子、ヒドロキシル基、メチル基又はハロゲン原子である、化合物又はその薬学的に許容できる塩を提供する。6789本発明は、以下の化学式10の構造を有する化合物又はその薬学的に許容できる塩を提供する。10本発明は、本発明の化合物又はその薬学的に許容できる塩を生成する薬物前駆体である化合物又はその薬学的に許容できる塩を提供する。本発明は、本発明の化合物又はその薬学的に許容できる塩を含む、原虫感染症治療用医薬品組成物を提供する。本発明の原虫感染症治療用医薬品組成物は、5価アンチモン剤、ペンタミジン、アミノサイジン、アムホテリシンB、リポソームアムホテリシンBからなるグループから選択される少なくとも1種類の医薬と、本発明の化合物又はその薬学的に許容できる塩とを含み、前記少なくとも1種類の医薬と、前記本発明の化合物又はその薬学的に許容できる塩とを、同時に、あるいは、逐次的に投与する場合がある。本発明の原虫感染症治療用医薬品組成物は、リーシュマニア、トリパノソーマ及びマラリアからなるグループから選択される少なくとも1種類の原虫感染症治療用医薬品組成物の場合がある。本発明の化合物の化学式において、立体異性体及び/又は幾何学的異性体を区別しない表記の場合には、可能ないずれか1つの立体異性体及び/又は幾何学的異性体か、2つ以上の立体異性体及び/又は幾何学的異性体の混合物かの場合がある。すなわち、本発明の化合物は、特別な立体構造についての記載がある化学結合を例外として、他の化学結合について任意の光学活性体又はラセミ体、ジアステレオ異性体又はそれらの任意の混合物がすべて含まれる。本発明の化合物におけるハロゲンは、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素のいずれでもよい。本発明の化合物の薬学的に許容できる塩の好ましい例としては、塩酸塩、酢酸塩、又はパラトルエンスルホン酸などの酸付加塩、アンモニウム塩又は有機アミン塩などの塩基付加塩、遊離形態及び塩の形態のペプチド誘導体の任意の水和物及び溶媒和物等があるが、これらに限られない。本発明の医薬品組成物は、本発明の化合物又はその薬学的に許容できる塩の少なくとも1つを有効成分として含む。本発明の医薬品組成物は、少なくとも1つの本発明の化合物又はその薬学的に許容できる塩と、少なくとも1つの薬学的に許容できる担体とを含む場合がある。本発明の化合物又はその薬学的に許容できる塩を有効成分として含む本発明の医薬品組成物は、リーシュマニア症の予防及び/又は治療を目的として使用することができ、静脈内投与、皮下投与、直腸内投与などの非経口投与のほか、経口投与、経粘膜投与、又は経皮投与により適用可能である。これらの投与経路に適する剤形は当業者に種々知られており、当業者は所望の投与形態に適する剤形を適宜選択し、必要に応じて当業界で利用可能な1種類又は2種類以上の薬学的に許容できる担体又は製剤用添加物を用いて医薬用組成物の形態の製剤を製造することが可能である。例えば、経皮投与には、軟膏その他の塗布剤、湿布その他の貼付剤などが好適である。本発明の医薬の有効成分として、本発明の化合物又はその薬学的に許容できる塩の水和物又は溶媒和物が用いられる場合がある。投与量は特に限定されないが、例えば、経皮投与又は経粘膜投与の場合には単回投与量を0.1~10mgとし、経口投与の場合には単回投与量を1~100mgとして、一日あたり2~3回投与することができる。あるいは、通常成人1日あたり約0.1~1,000mg、好ましくは、約1~300mg投与することができる。また、投与量を患者の体重、年齢、遺伝子型、病状等のパラメータと関連づけて設定することができる。本発明の医薬品組成物は、錠剤、顆粒剤細粒、カプセル剤、注射剤点滴静注剤、貼布剤、坐剤、懸濁液及びエマルジョン、ペースト、軟膏、クリーム、ローション、点鼻剤、点眼剤等の剤形で提供される場合があるが、これらに限られない。本発明の医薬品組成物は、持続時間を長時間維持することを目的として徐放化される場合がある。本発明の医薬品組成物に含まれる薬学的に許容できる担体又は製剤用添加物には、安定化剤、界面活性剤、可溶化剤、吸着剤等が含まれるが、これらに限られない。本発明の医薬品組成物に含まれる薬学的に許容できる担体又は製剤用添加物は、上記に列挙される本発明の医薬品組成物の剤形に対応して選択される。本発明において原虫とは、ヒトその他のほ乳類に感染し、人間に害を及ぼすいずれかの原生生物をいい、リーシュマニア、マラリア原虫、トキソプラズマ及びトリパノソーマと、アメーバ赤痢、シャーガス病その他の原虫感染症の病原体とを含むが、これらに限定されない。以下の実施例によって本発明について詳細な説明を行なうが、本発明はこれらの実施例により何ら限定されるものではない。1.日本近海産海洋無脊椎動物由来抗原虫活性物質のスクリーニング日本近海で採取された海洋無脊椎動物について、同じ生物種の検体ごとに個体がメタノールで抽出され、濃縮後水とクロロホルムとで二層分配された。得られた水溶性画分及び脂溶性画分の粗抽出物の乾燥重量が測定された。また、以下の生理活性試験から、リーシュマニア原虫に対する抗原虫活性と、ヒト子宮頚癌由来のHeLa細胞及びマウスリンパ腫由来のP388細胞での細胞毒性とが測定された。2.生理活性試験2-1抗リーシュマニア活性試験96穴プレートに1×105個のEGFP遺伝子導入リーシュマニア原虫LaEGFP、OkunoTら、Exp.Anim.52:1092003が播種され、培地で希釈されたサンプルを加えて72時間培養された。その後、蛍光プレートリーダーで各ウェルの蛍光強度が測定され、試験サンプルの抗リーシュマニア活性が算出された。2-2細胞毒性試験ヒト子宮頸癌由来のHeLa細胞及びマウスリンパ腫由来のP388細胞の懸濁液1×104個/mLが96穴マイクロプレートのA~H行1~11列のウェルに200μLずつ分注され、24時間37°Cで培養された。その後サンプルのメタノール溶液1mg/mLが96穴マイクロプレートのA行1~10列のウェルに2μLずつ添加され、A行11列のウェルには陽性対照としてアドリアマイシン1mg/mLが2μL添加された。A~D行12列のウェルには培地のみが200μLずつ添加され、E~H行12列のウェルには1×104個/mLの前記細胞の懸濁液が200μLずつ添加された。マルチチャンネルピペットを用いて、A行の各列のウェルの培養液が50μL吸引され、B行の各列のウェルに添加され、次に、B行の各列のウェルの培養液が50μL吸引され、C行の各列のウェルに添加され、というように5倍希釈をA列からH列まで順に行って、サンプルが8段階に希釈された。72時間の培養後、MTT臭化3-[4,5-ジメチルチアゾール-2-イル]-2,5-ジフェニルテトラゾリウム1mg/mLのPBS溶液が各ウェルに50μLずつ添加された。3時間の培養後、各ウェルの培養液が全て除去され、DMSOが150μLずつ添加された。各ウェルでDMSOに溶出した色素の吸光度がマルチウェルプレートリーダによって測定され、細胞の半数が死滅する濃度IC50値が決定された。3.結果腔腸動物ヤギAcanthoprimnoacristataの検体検体コード番号:C07110は、鹿児島県屋久島新曽根北緯29°46’55、東経130°21’92水深138m~北緯29°46’71、東経130°22’06、水深135mでドレッジ採取された。検体C07110と、同時にスクリーニングされた種名未同定の海綿動物の検体検体コード番号:S07161とについてのスクリーニング結果を表1に示す。表1に示すとおり、検体C07110の脂溶性画分のリーシュマニア原虫に対するIC50値は1.1μg/mLだが、ヒトHeLa細胞及びマウスP388細胞に対するIC50値は10μg/mLであった。すなわちこの画分の抗原虫活性は、ヒト及びマウスに対する細胞毒性に比べて約10倍選択性が高い。これに対し、検体S07161の脂溶性画分のリーシュマニア原虫に対するIC50値は0.6μg/mLでC07110より高いが、ヒトHeLa細胞及びマウスP388細胞に対するIC50値が0.08μg/mLで抗原虫活性より高いため、選択性に問題があった。そこで以下では、C07110からの抗リーシュマニア原虫活性物質単離を行った。新規抗原虫活性物質の単離1.画分5-10検体C07110の腔腸動物ヤギ類90g由来の抗原虫活性物質の分離手順が図1及び図2に示される。図1を参照して、動物個体がメタノールで抽出され、濃縮後水とクロロホルムとで二層分配された。水層はさらにn-ブタノールで抽出され、得られたn-ブタノール層はクロロホルム層と混合され、濃縮された。このエキス画分がKupchan分画Kupchan,S.M.ら、J.Org.Chem.、38:178-1791973.に付され、n-ヘキサン、クロロホルム、60メタノール可溶性画分2-3が得られた。前記2-3画分が、ODSフラッシュカラムクロマトグラフィー[50メタノール、70メタノール、70アセトニトリル、85アセトニトリル、メタノール、クロロホルム/メタノール/水6:4:1]にて分画された。この画分の中で強い抗リーシュマニア活性を示した70メタノール画分3-2画分、76.8mg、このうち71.2mgがさらなる分離に用いられた。が、最終的にC18カラム70-90メタノールを用いる逆層HPLCで分画された。図3は、画分3-2がCOSMOSIL-5C18-AR-IIが充填された直径2cm、長さ25cmのカラムに適用され、流速毎分6mLの70から90までのメタノール勾配で分離された結果を示す波形図である。図3の縦軸は220nmの紫外線の吸光度の相対値で、図3の横軸は右から左に保持時間の経過を示す。横軸の矢印は3分間を示す。太線で示されたピーク画分5-10の収量は19.7mgであった。画分5-10はさらなる分析により単一物質からなることが示された。そこで画分5-10は機器分析に供された。2.画分13-2及び13-4前記ODSフラッシュカラムクロマトグラフィーの70アセトニトリル画分3-3にも前記70メタノール画分3-2と同等の活性が認められた。C18カラム70-90メタノールを用いる逆層HPLCで分画された結果を図4に示す。図4は、画分3-3がCOSMOSIL-5C18-AR-IIが充填された直径2cm、長さ25cmのカラムに適用され、流速毎分8mLの70から90までのメタノール勾配で分離された結果を示す波形図である。図4の縦軸は220nmの紫外線の吸光度の相対値で、図4の横軸は右から左に保持時間の経過を示す。横軸の矢印は6分間を示す。太線で示されたピーク画分12-3、12-7及び12-10の収量は、それぞれ、2.5mg、3.4mg及び1.2mgであった。画分12-3、12-7及び12-10からの抗原虫活性成分の分離手順は図2に示される。図4を参照して、画分12-3、12-7及び12-10がC18カラムを用いる逆層HPLCで分画された。画分12-3はCOSMOSIL-5C18-AR-IIが充填された直径1cm、長さ25cmのカラムに適用され、流速毎分2mLの50から70までのメタノール勾配で分離された。図5は、画分12-3がCOSMOSIL-5C18-AR-IIが充填された直径1cm、長さ25cmのカラムに適用され、流速毎分2mLの50から70までのメタノール勾配で分離された結果を示す波形図である。図5の縦軸は220nmの紫外線の吸光度の相対値で、図5の横軸は右から左に保持時間の経過を示す。横軸の矢印は6分間を示す。画分12-3の収量の約半分がカラム分離に用いられ、太線で示されたピーク画分13-2及び13-4の収量は、それぞれ、0.2mg及び0.3mgであった。ピーク画分13-2及び13-4には抗原虫活性が認められた。画分13-2及び13-4はさらなる分析により単一物質からなることが示された図示されない。そこで画分13-2及び13-4は機器分析に供された。3.画分12-7画分12-7はさらなる分析により単一物質からなることが示された図示されない。そこで画分12-7は機器分析に供された。4.画分14-1及び14-2画分12-10はCOSMOSIL-5C18-AR-IIが充填された直径1cm、長さ25cmのカラムに適用され、流速毎分2mLの65から75までのメタノール勾配で分離された。図6は、画分12-10がCOSMOSIL-5C18-AR-IIが充填された直径1cm、長さ25cmのカラムに適用され、流速毎分2mLの65から75までのメタノール勾配で分離された結果を示す波形図である。図6の縦軸は220nmの紫外線の吸光度の相対値で、図6の横軸は右から左に保持時間の経過を示す。横軸の矢印は6分間を示す。画分12-10の収量の約半分がカラム分離に用いられ、太線で示されたピーク画分14-1及び14-2の収量は、それぞれ、0.8mg及び0.2mgであった。画分14-1及び14-2には抗原虫活性が認められた。画分14-1及び14-2はさらなる分析により単一物質からなることが示された図示されない。そこで画分14-1及び14-2は機器分析に供された。新規抗原虫活性物質の構造解析1.画分5-10抗リーシュマニア活性物質画分5-10の機器分析データは以下のとおりであった。[α]21.7D90.5°c0.22,MeOH;IR2931、1755、1681、1616、1454、1371、1340、1209、1176、1108、1076、1015cm-1;UVMeOH231nmlogε4.28;FABMSm/z431[MH]、453[MNa]:HRFABMSm/z431.2089calcdforC24H31O7431.2070高解像高速原子衝撃質量分析HRFABMSの結果、画分5-10として単離された抗リーシュマニア活性物質の分子式はC24H30O7であることがわかった。1HNMRスペクトル分析の結果、前記抗リーシュマニア活性物質は、2個のアセチル基δH2.10、2.05と、1個のアルデヒド基δH9.27と、2個のメチル基δH1.75、1.68とを有することが示された。13CNMRスペクトル分析結果から、24本のスペクトルが確認され、前記抗リーシュマニア活性物質は共役ケトン基δ198.2を有することがわかった。1H-1H相関2次元NMRスペクトル分析COSYの結果、3つのスピン系が得られた。HMBC分析の結果、前記アルデヒド基からC-6δ153.4、C-7δ144.9、C-8δ21.2に相関がみられたことから、前記抗リーシュマニア活性物質において、前記アルデヒド基はC-7に結合していることがわかった。また、H-18δH6.98からアセチル基のカルボニル炭素へ相関が見られることから、前記抗リーシュマニア活性物質の前記アセチル基の1個は酸素原子を介してC-18に結合していることがわかった。また、H-18からC-10δ28.8、C-11δ120.6、C-11aに相関が見られることから、2つのスピン相関系がつながり、9員環を形成することがわかった。一方、H-1δ5.86からアセチル基へ相関が見られたことから、前記アセチル基のもう1個は酸素原子を介してC-1に結合していることがわかった。H-3からC-4δ120.2、C-4aδ35.9、C-1δ94.5への相関と、H-3δH7.68及びH-1δH5.86のケミカルシフトとから、前記抗リーシュマニア活性物質はジヒドロピラン環構造を持つことがわかった。前記2個のメチル基H-16及びH-17からC-15δ134.9、C-14δ116.9への相関が見られることから、前記2個のメチル基はC-15へ結合していることがわかった。H-3、H-13a、H-13bからC-12δ198.2への相関が見られることから、前記共役ケトン基はC-13とC-4の間に位置していることがわかった。図7はCOSY及びHMBC相関の結果を示す。図8は前記抗リーシュマニア活性物質のNMR400MHz、CD3OD分析結果のデータを示す。以上の分析結果に基づいて、前記抗リーシュマニア活性物質は、以下の化学式11で表される構造を有する新規Xenicane型テルペノイドと決定された。この物質は出所の生物種名から、cristaxenicinAと命名された。前記抗リーシュマニア活性物質の相対配置について、H-11aとH-1及びH-4aとの間の結合定数が大きいJ=9.5、11.4Hzことから、これらはアキシャルプロトンであり、互いにantiの関係にあることが示唆された。2.画分12-7実施例2で説明されたC18カラムを用いる逆層HPLCによって、画分12-7はcristaxenicinAと保持時間が同じであるため、構造も同一であると結論された。3.画分13-2及び13-4画分13-2及び13-4は収量が少なかった。図5から、画分12-3には画分13-2及び13-4以外の主要成分が含まれないことが明かなので、画分13-2及び13-4の混合物として、画分12-3の1HNMRスペクトルを測定した。なお、以下では、画分13-2及び13-4の成分は、それぞれ、化合物A及び化合物Bという。その結果、画分12-3でcristaxenicinAに類似したピーク群が観測されたので、画分12-3の成分、すなわち、化合物A及びBはcristaxenicinAの類縁体であることが示唆された。ESIMSを測定した結果、469.2[MNa]と、485.2[MK]とのピークが観測され、分子式はcristaxenicinAより酸素が1つ多いC24H30O8と推定された。cristaxenicinAの1HNMRスペクトルと比較した結果、cristaxenicinAにみられたH-13δH3.33/3.40、H-14δH5.30のピークが消失し、代わりに低磁場側に2つのダブレットオレフィンのピーク[δH6.68d15.8Hz、6.91d15.8Hz]が観察された。また、cristaxenicinAの側鎖末端の2つのシングレットのメチル基が高磁場シフト1.36s、1.37sをしていることが明らかとなった。これらの解析の結果、化合物AおよびBは、cristaxenicinAの類縁体ではあるが、cristaxenicinAとはピラン環に結合している側鎖の部分構造が異なることが示唆された。化合物AおよびBの13CNMR及びHMQC、HMBCスペクトル解析の結果、ケトン基のスペクトルが高磁場シフトδ190付近しており、ダブレットオレフィンピーク[δH6.68d15.8Hz、6.91d15.8Hz]からケトン基へHMBC相関が確認されたことから、12C-13およびC-14間で2重結合を形成し、C-12のケトンと共役していることが明らかになった。C-14および2つのシングレットメチル基C-16、C-17のプロトンからδ82.5のカーボンシグナルにHMBC相関が観測されたことから、このカーボンシグナルはC-15に位置することが明らかになった。以下の化学式12に前記HMBC相関を示す。化学シフトの値δ82.5から、C-15にはヒドロキシル基が結合していると示唆された。以前に報告されているtsitsixenicinCHooper,G.J.及びDavies-Coleman,M.、Tetrahedron,51:99731995には推定された部分構造と同じユニットが存在しており、1HNMRおよび13CNMRスペクトルを比較したところ、スペクトルがほぼ一致した化合物A又はBについて化学式13、tsitsixenicinCについて化学式14。以上の結果から、化合物A又はBのいずれか一方は以下の化学式15の構造を有する。4.画分14-1及び14-2画分14-1はNMR解析結果の比較により、cristaxenicinAと同一であることが確認された。画分14-2は、プロトンNMRの解析結果が画分14-1とは異なるので、画分14-2の成分以下、化合物Cという。の構造は画分14-1と同一ではない。新規抗原虫活性物質の生理活性1.抗リーシュマニア活性試験96穴プレートに1×105個のEGFP遺伝子導入リーシュマニア原虫LaEGFP、OkunoTら、Exp.Anim.52:1092003が播種され、培地で希釈されたサンプルを加えて72時間培養された。その後、蛍光プレートリーダーで各ウェルの蛍光強度が測定され、試験サンプルの抗リーシュマニア原虫活性が算出された。2.抗トリパノソーマ原虫活性試験96穴プレートに2x105個のアフリカトリパノソーマ原虫Trypanosomacongolense血流型が播種され、培地で希釈されたサンプルを加えて48時間培養された。その後、生細胞数の計測のためTetraColorONE生化学バイオビジネス株式会社が各ウェルに10μLずつ添加され、4時間後に450nmの吸光度が測定された。3.抗マラリア原虫活性試験96穴プレートに同調化された0.5ringstageマラリア原虫PlasmodiumfalciparumK-1株が90μLずつ添加されたた後、培地で希釈されたサンプルを加えて48時間培養された。その後、lysisbuffer20mMTrispH7.5、5mMEDTA、0.008wt/volサポニン、0.08vol/volTritonX-1001mLに対してSYBRGREEN0.2μLを添加した混合液が100μLずつ添加され、ヴォルテックスミキサーにより撹拌された。暗所に1時間静置された後、励起波長485nm、検出波長530nmの蛍光プレートリーダーで測定された。4.細胞毒性試験ヒト子宮頸癌由来のHeLa細胞、ヒト前骨髄球性白血病由来のHL-60細胞及びマウスリンパ腫由来のP388細胞の懸濁液1×104個/mLが96穴マイクロプレートのA~H行1~11列のウェルに200μLずつ分注され、24時間37°Cで培養された。その後サンプルのメタノール溶液1mg/mLが96穴マイクロプレートのA行1~10列のウェルに2μLずつ添加され、A行11列のウェルには陽性対照としてアドリアマイシン1mg/mLが2μL添加された。A~D行12列のウェルには培地のみが200μLずつ添加され、E~H行12列のウェルには1×104個/mLの前記細胞の懸濁液が200μLずつ添加された。マルチチャンネルピペットを用いて、A行の各列のウェルの培養液が50μL吸引され、B行の各列のウェルに添加され、次に、B行の各列のウェルの培養液が50μL吸引され、C行の各列のウェルに添加され、というように5倍希釈をA列からH列まで順に行って、サンプルが8段階に希釈された。72時間の培養後、MTT臭化3-[4,5-ジメチルチアゾール-2-イル]-2,5-ジフェニルテトラゾリウム1mg/mLのPBS溶液が各ウェルに50μLずつ添加された。3時間の培養後、各ウェルの培養液が全て除去され、DMSOが150μLずつ添加された。各ウェルでDMSOに溶出した色素の吸光度がマルチウェルプレートリーダによって測定され、細胞の半数が死滅する濃度IC50値が決定された。5.結果前記LaEGFPに対するcristaxenicinAのIC50値は36ng/mLであった。これはリーシュマニア症の第2選択薬であるアムホテリシンBのIC50値約20ng/mLより高い。なお、リーシュマニア症の第1選択薬である5価アンチモン剤のリーシュマニアに対するIC50値は9μg/mLとの報告Vermeersch,M.ら、ANTIMICROB.AGENTSCHEMOTHER.53:38552009があり、cristaxenicinAのほうがはるかに活性が高い。T.congolenseに対するcristaxenicinAのIC50値は107ng/mLであった。これはトリパノソーマ原虫に活性を有すると報告があるアムホテリシンBのIC50値811ng/mLより低い。なお、家畜トリパノソーマ症の第1選択薬であるジミナゼンのT.congolenseに対するIC50値は0.1~1μg/mLとの報告Kaminskyら、VetParsitol52:2351994があり、cristaxenicinAがトリパノソーマ原虫に対しても活性が高いことが示された。また、PlasmodiumfalciparumK-1株に対するcristaxenicinAのIC50値は4.6μg/mLであった。なお、画分12-3化合物A及びBの混合物と、画分12-10cristaxenicinA及び化合物Cの混合物との抗リーシュマニア原虫活性IC50値は、それぞれ、1,209ng/mLと、286ng/mLとであった。ヒト子宮頚癌由来のHeLa細胞、ヒト前骨髄球性白血病由来のHL-60細胞及びマウスリンパ腫由来のP388細胞に対するcristaxenicinAのIC50値は、それぞれ、2.0μg/mL、0.727μg/mL及び0.89μg/mLであった。したがってcristaxenicinAは、ヒト培養細胞と比較して約20倍ないし約56倍の選択毒性をリーシュマニアに対して示した。"