ペプチドであり、前記ペプチドは、アミノ酸配列LKCX4QHGKVVTCHRDMKFCYHNTGMPFRNLKLILQGCSSSCSETENNKCCSTDRCNK配列番号1を持ち、X4は、全てのアミノ酸であり;又は配列番号1の配列と少なくとも56の同一性を示し、かつ前記配列番号1の配列を含む前記ペプチドの生物学的性質を維持する、アミノ酸配列を含む、ペプチド。請求項1に記載のペプチドであり、前記ペプチドは少なくとも1つのASICチャンネルのブロッカーである、ペプチド。請求項2に記載のペプチドであり、前記ペプチドが、ASIC1a及びASIC1bサブユニットからなる群から選択される少なくとも1つのサブユニットを含むASICチャンネルのブロッカーである、ペプチド。請求項3に記載のペプチドであり、前記ペプチドが、ホモメリックASIC1aチャンネル、ホモメリックASIC1bチャンネル、ヘテロメリックASIC1aASIC1bチャンネル及び/又はヘテロメリックASIC1aASIC2aチャンネルのブロッカーである、ペプチド。請求項1乃至4のいずれか一項に記載のペプチドであり、配列番号1での前記X4が、Y又はFを表す、ペプチド。請求項乃至5のいずれか一項に記載のペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド。請求項6に記載のポリヌクレオチドであり、ヌクレオチド配列:atgaaaactctgctgctgaccttgctggtggtgacaatcgtgtgcctagacttaggatactccctgaaatgt73txx75caacatggtaaagttgtgacttgtcatcgagatatgaagttttgctatcataacactggcatgccttttcgaaatctcaagctcatcctacagggatgttcttcttcgtgcagtgaaacagaaaacaataagtgttgctcaacagacagatgcaacaaatag配列番号4;又はctgaaatgt10txx12caacatggtaaagttgtgacttgtcatcgagatatgaagttttgctatcataacactggcatgccttttcgaaatctcaagctcatcctacagggatgttcttcttcgtgcagtgaaacagaaaacaataagtgttgctcaacagacagatgcaacaaatag配列番号22;を含み、ここで73txx75及び10txx12が、tac、tat、ttt又はttcを表す、ポリヌクレオチド。請求項6に記載のポリヌクレオチドであり、前記ポリヌクレオチドが、ストリンジェントな条件下で、配列番号4又は配列番号22又はこれらの相補的配列とハイブリダイズする、ポリヌクレオチド。請求項6又は8のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドであり、前記ポリヌクレオチドが、配列番号4又は配列番号22の配列と少なくとも76の同一性を示す天然又は合成配列を含む、ポリヌクレオチド。請求項6乃至9のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。請求項10に記載のベクターであり、前記ベクターが発現ベクターである、ベクター。請求項9又は10に記載のベクターの1以上を含む宿主細胞。請求項1乃至5のいずれか一項に記載のペプチド、請求項6乃至9のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、又は請求項9又は10に記載のベクター、又は請求項12に記載の宿主細胞の1以上を含む、医薬組成物。物質であり、前記物質は:請求項1乃至5のいずれか一項に記載のペプチド;請求項65乃至9のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド;請求項10又は11に記載のベクター;又は請求項12に記載の宿主細胞;請求項13に記載の医薬組成物から選択される、医薬として使用される、物質。請求項14に記載の物質であり、前記医薬が鎮痛剤である、物質。請求項15に記載の物質であり、前記鎮痛剤が、ASICチャンネルの活性化を含む生理的状態の予防又は痛みの治療のためである、物質。請求項16に記載の物質であり、前記ASICチャンネル活性化を含む痛み及び請求項理学的状態が、炎症性、神経障害、癌関連、術後関連、筋骨格、及び内蔵痛み、炎症、癌、線維筋痛症及び過敏性腸症候群からなる群から選択される、物質。請求項14に記載の物質であり、前記医薬が、うつ病、不安症、脳卒中、癲癇、中枢炎症及び神経変性疾患からなる群から選択される中枢神経疾患の予防及び治療のために使用される、物質。請求項14乃至18のいずれか一項に記載の物質であり、前記医薬が、中央、皮下、全身、経口又は呼吸経路を介して、投与される、物質。物質であって:請求項1乃至5のいずれか一項に記載のペプチド;請求項6乃至9のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド;請求項10又は11に記載のベクター;又は請求項12に記載の宿主細胞;請求項13に記載の医薬組成物から選択される、診断ツールとして使用される、物質。請求項1乃至5のいずれか一項に記載のペプチドの鎮痛活性を模倣する化合物の同定のための方法であり、次のステップ:a請求項1乃至5のいずれか一項に記載のペプチドの鎮痛活性を決定するステップ;b候補化合物の前記鎮痛活性を決定するステップ;cステップa及びbで得られる鎮痛活性を比較するステップ;d前記ペプチドの鎮痛活性と同等以上の前記候補化合物を選択するステップ、を含む方法。請求項1乃至5のいずれか一項に記載のペプチドの鎮痛活性を模倣する化合物の同定のための方法であり、次のステップ:a請求項1乃至5のいずれか一項に記載のペプチドをサンプルに接触させ、かつ前記ペプチドを前記サンプルに接触させるステップ;b候補化合物を添加して、前記サンプルにと前記ペプチドとの結合における前記化合物の効果を評価するステップ;c前記サンプルにと前記ペプチドとの結合を変更し得る前記候補化合物を選択するステップ、を含む方法。従って、ASICチャンネル又は特定のASICサブユニットに特異的であり、鎮痛効果を持ち、一方で同時に、従来の鎮痛薬の依存性、欠点及び障害を解消する、他のエフェクターを同定する真の必要性がある。本発明者は、ブラックマンバ蛇の毒から、新規なペプチドであって、鎮痛効果を誘導し、ASICチャンネル酸性感受性イオンチャンネル、より具体的にはホモメリックASIC1aチャンネル、ホモメリックASIC1bチャンネル、ヘテロメリックASIC1a2aチャンネル及びヘテロメリックASIC1a1bチャンネルを阻害するペプチドを見出し、同定した。これらは特にペプチドASICalgin-1π-Dp1及びASICalgin-2π-Dp2であり、これらは、マウスにインビボで中央髄腔内及び脳室内注射後、異なる痛みモード化学的、熱的、炎症性で強い鎮痛効果を示し、これはモルヒネと同等であるが、アヘンレセプター活性とは独立している。さらに、これらのペプチドは、中央に注射した場合に神経毒性を示さない。皮下抹消注射による投与の場合、これらのペプチドはまた鎮痛効果を持ち、炎症性痛覚過敏を回復させた。これらの2つのペプチドは、鎮痛効果を持つ、ブラックマンバ蛇毒から抽出された最初のペプチドである。この説明に限定されるものではないが、これらのペプチドの最も可能性のあるメカニズムは、ASICイオンチャンネルの阻害であり、ASICイオンチャンネルは痛み情報の受容、伝達及び変調において重要な役割を演じている。事実、これらのペプチドは効果的に、ラット及びヒトの、ASIC1aチャンネル、ホモメリックASIC1bチャンネル及び/又はASCI1a及び/又はASIC1bサブユニットを含むのヘテロメリックチャンネルを阻害する。これらの2つのペプチドは、特に、ホモメリックASIC1b及びASIC1aチャンネル及びヘテロメリックASIC1aASIC1b及びASIC1aASIC2aチャンネルの最初に知られたインヒビター阻害剤である。前記ASICalgin-1π-Dp1及びASICalgin-2π-Dp2ペプチドはまた、感覚ニューロン及び中枢神経ニューロンに存在するASICの伝達を阻害する。これらは、これ自体が痛み受容に関与する、カプサイシン及び熱により活性化されるTRPV1伝達への効果を持たない。これらは、基底状態でのニューロンの電気的性質を変更せず、ASICチャンネル活性化可能な細胞外酸性化に応じる入ーロン興奮可能性を低下させる。ASICalgin-1π-DP1及びASICalgin-2π-DP2ペプチドは従って、げっ歯類では、モルヒネと匹敵する強力な鎮痛性を持ち、これはアヘンレセプターがブロックされている場合でも観察され、このことはある種類のげっ歯類及びヒトASICチャンネルを特異的に阻害することができるということで説明され得る。前記ペプチドの中央注射は、毒性を示さず尊敬毒性、痙攣など、運動活性加速ローターロッド試験にもなんら効果を持たない。ASICalgin-1π-DP1及びASICalgin-2π-DP2ペプチドは、従って、人の痛みに対する治療可能性を持つ分子に含まれ得る例えば、癌関連痛み、神経因性痛み、術後痛みなど。本発明の対象は従ってペプチドであって:iアミノ酸配列LKCX4QHGKVVTCHRDMKFCYHNTGMPFRNLKLILQGCSSSCSETENNKCCSTDRCNK配列番号1又はii配列番号1と少なくとも50、好ましくは少なくとも70、好適には少なくとも80、最も好ましくは少なくとも98の同一性を示す天然又は合成配列であって、配列番号1のペプチの生物的性質を保持するものであり、即ち、鎮痛効果を誘導し、前記ASIC1a及びASIC1bサブユニとからなる群から選択される少なくとも1つのサブユニットを含む少なくとも1つのASICチャンネルを阻害する、ペプチドである。本発明による前記ペプチドは、より具体的には、ホモメリックASIC1aチャンネル、ホモメリックASIC1bチャンネル及び/又は前記ASIC1a及びASIC1bサブユニとからなる群から選択される少なくとも1つのサブユニットを持つヘテロメリックASIC1aチャンネル、特にヘテロメリックASIC1aASIC1bチャンネル及び/又はASIC1aASICを2aチャンネルのブロッカーとして作用する。本発明の目的で、用語ブロッカーとは、前記チャンネルによる生成される伝達を濃度依存的に阻害することができるペプチドを意味する。例えば、PcTx1[Escoubasetal.、2000、mentionedabove][25]などのペプチドは、1nM濃度でホモメリックASIC1aチャンネルにより生成される伝達の50を阻害することができ、又はPcTx2[Diochotetal.、2004、mentionedabove][26]などのペプチドは、2μM濃度でラットで、ヘテロメリックASIC1aASIC3チャンネルにより生成される伝達の50を阻害することができる。好ましくは、本発明の前記ペプチドは、蛇マンバ属ブラックマンバから抽出される。例えば、これらは、前記毒から、逆極性高性能液体クロマトグラフRP-HPLC手段により連続的に分離して得られる。前記ペプチドはまた、DNA組み換え方法、又は化学的合成で製造され得る。好ましくは、本発明の前記ペプチドは、ASICalgin-1π-Dp1又はASICalgin-2π-Dp2ペプチドを含み、これらは、配列番号1の配列を持ち、ここでX4はそれぞれY又はFであるそれぞれ配列番号2及び3。本発明の課題はまた、本発明のペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドである。好ましくは、本発明のポリヌクレオチドは、配列:atgaaaactctgctgctgaccttgctggtggtgacaatcgtgtgcctagacttaggatactccctgaaatgt73txx75caacatggtaaagttgtgacttgtcatcgagatatgaagttttgctatcataacactggcatgccttttcgaaatctcaagctcatcctacagggatgttcttcttcgtgcagtgaaacagaaaacaataagtgttgctcaacagacagatgcaacaaatag配列番号4;又はctgaaatgt10txx12caacatggtaaagttgtgacttgtcatcgagatatgaagttttgctatcataacactggcatgccttttcgaaatctcaagctcatcctacagggatgttcttcttcgtgcagtgaaacagaaaacaataagtgttgctcaacagacagatgcaacaaatag配列番号22;であり、ここで73txx75及び10txx12はtac、tat、ttt又はttcを表す。好ましくは、本発明の前記ポリヌクレオチドは、ストリンジェントな条件で、配列番号4又は配列番号22の核酸配列とハイブリダイズできる核酸配列又はその相補的配列を含む。例えば、配列番号4又は配列番号22の配列と少なくとも76、好ましくは少なくとも80、最も好ましくは98の同一性を示す天然又は合成配列を含むポリヌクレオチドである。本発明の課題はまた、本発明のポルヌクレオチドを含むベクターである。好ましくは前記ベクターは発現ベクターである。本発明の課題はまた、本発明の1以上を含む、本発明のポリヌクレオチド又は本発明のベクターを含む宿主細胞である。本発明の課題はまた、本発明の1以上のペプチド、本発明のポルヌクレオチド、本発明のベクター又は本発明の宿主細胞を含む医薬組成物である。本発明の医薬組成物はまた、1以上の薬学的に許容される担体炭酸カルシウム、澱粉、タルク、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、アカシアゴムなどを含んでよく、かつ溶液、懸濁、ペースト、ゲルカプル、錠剤、カプセル、粉末、顆粒、凍結乾燥物、制御徐放性剤、ミクロ粒子、ミクロ又はナノスフェア、リポソームなどの剤形であり得る。本発明による医薬組成物は、経口、筋肉内、静脈内、皮下、局所的、肺経由、鼻腔内、直腸、舌下、皮内、腹腔内、くも膜下などに投与可能である。活性成分本発明のペプチド、ポリヌクレオチド、ベクター又は宿主細胞の、本発明の医薬組成物中での有効量は、有効投与量が得られるように及び鎮痛量が哺乳類に投与されるように変更し得るものである。特定の哺乳類へ投与される量は、いくつかの因子で決定され、例えば:投与経路、処置期間、哺乳類の大きさと生理的状態、活性成分の力価及び前記活性成分への哺乳類の応答性などである。例えば、くも膜下投与される活性成分の鎮痛有効量は、一般に、約5ng/kgから500μg/kg哺乳類の体重の範囲、好ましくは約50ng/kgから50μg/kg哺乳類の体重、最も好ましくは約500ng/kgから5μg/kg哺乳類の体重の範囲である。活性成分の有効量は、他の投与経路を使用する場合には変更され得る。有効鎮痛量は、哺乳類に投与されるべき活性成分の量を決定するために、活性成分を以下説明する1以上の痛み試験を行い、その投与量を前記の判断基準により変更することで推定され得る。本発明の課題はまた、本発明のペプチド、本発明のヌクレオチド、本発明のベクター、本発明の宿主細胞又は本発明の医薬組成物から選択される物質を医薬として応用することである。好ましくは、前記医薬は、鎮痛剤であり、例えば、ASICチャンネル特に、前記ASIC1a及びASIC1bサブユニットからなる群から選択される少なくとも1つのサブユニット、最も好ましくはホモメリックASIC1aチャンネル、ホモメリックASIC1bチャンネル、ヘテロメリックASIC1aASIC1bチャンネル及び/又はヘテロメリクASIC1aASIC2aチャンネルを含むASICチャンネルの活性化に伴う痛みの防止及び治療のための使用である。例えば、前記痛みはi中枢又は末梢ASICをチャンネルの活性化から生じるか又はiiその活性化を誘導する。例えば、前記痛みは、ASICチャンネル活性化を伴う痛みであり、炎症性、神経性、癌関連性、術後関連、筋骨格系、内臓系などの痛みからなる群から選択される。好ましくは、前記医薬は、例えば、ASICチャンネル特に、前記ASIC1a及びASIC1bサブユニットからなる群から選択される少なくとも1つのサブユニット、最も好ましくはホモメリックASIC1aチャンネル、ホモメリックASIC1bチャンネル、ヘテロメリックASIC1aASIC1bチャンネル及び/又はヘテロメリクASIC1aASIC2aチャンネルを含むASICチャンネルの活性化に伴う病的症状防止及び治療のための使用である。例えば、前記症状は、炎症、癌、線維筋痛症、過敏性腸症候群などの症状である。好ましくは、前記医薬は、例え心的外傷後ストレス、うつ病、不安、発作、癲癇、中央炎症、多発性硬化症、神経変性疾患などからなる群から選択される中枢神経系疾患の予防及び治療のためである。好ましくは、前記医薬は、非経口で、即ち局所的又は中央腹腔内、硬膜外腔内、髄腔内、脳室内、皮内など及び全身筋肉内、静脈内、皮下など、経口、曲種的経皮など又は呼吸系呼吸などを介して投与される。最も好ましくは、前記医薬は、髄腔外腔内、硬膜内、脳室内、又は腹腔内投与である。本発明の課題はまた、本発明のペプチド、本発明のポリヌクレオチド、本発明のベクター、本発明の宿主細胞又は本発明の医薬組成物から選択される物質の診断用ツールとしての使用である。本発明の課題はまた、本発明のペプチドの鎮痛活性を模倣する化合物の同定の方法であり、前記方法は次のステップ:a本発明によるペプチドの鎮痛活性を決定し;b候補化合物の鎮痛活性を決定し;cステップa及びbで得られた鎮痛活性とを比較し;及びd本発明のペプチドと同等又はそれを超える活性を持つ候補化合物を選択するステップ、とを含む。本発明の課題はまた、本発明のペプチドの鎮痛活性を模倣する化合物を同定するための方法であり、前記方法は次にステップ:a本発明のペプチドをサンプルと接触させ、前記サンプルとの前記ペプチドの結合を測定し;b候補化合物を添加し、及び前記サンプルと前記ペプチドとの結合への前記化合物の効果を評価し;c前記サンプルと前記ペプチドとの結合を変動させることができる候補化合物を選択する、ステップを含む。本発明の目的で、表現本発明のペプチドの鎮痛活性を模倣する化合物とは、次のような候補化合物を意味することを意図しており、鎮痛を誘導することができ、及び本発明のペプチドが結合するASCIチャンネルに結合し、又は本発明のペプチドと同一又は類似の生理的方法で作用することができ、即ち、前記ASIC1a及びASIC1bサブユニットからなる群から選択される少なくとも1つのサブユニット、特にホモメリックASIC1aチャンネル、ホモメリックASIC1bチャンネル、ヘテロメリックASIC1aASIC1bチャンネル及び/又はヘテロメリクASIC1aASIC2aチャンネルを含む少なくとも1つのチャンネルで生成される伝達を、可逆的にかつ用量依存的に変調阻害又は刺激することができる、候補化合物である。例えば、それはPcTx1[Escoubasetal.、2000、mentionedabove][25]などのペプチドを含み、これは1nM濃度で、50のホモメリックASIC1aチャンネルにより生成される伝達を阻害することができ、又はAPETx2[Diochotetal.、2004、mentionedabove][26]などのペプチドは、2μMの濃度で、50のラットヘtロメリックASIC1aASIC3チャンネルを阻害する。本発明の目的で、用語サンプルとは、昆虫又は哺乳類の全有機体又は不死化細胞から前もって分離された細胞又は組織を意味する。用語鎮痛活性とは、以下で説明される痛みの試験又は鎮痛評価のための従来の実験室モデルにより示されるような、本発明のペプチドの哺乳類の痛みを処置又は軽減するための容量を意味する。従って、本発明のペプチドの鎮痛活性は例えば次の方法で決定され得る、i尾/足引っ込め時間熱侵害測定[Abottetal.、1982;CridlandandHenry、1992][29、30]、ii熱/冷プレート閾値熱侵害測定[WoolfeandMacdonald、1944、Ankier、1974][31、32]、iiiフォンフレイフィラメント閾値又はランドール-セリット又は装置ピンチ試験機械的侵害活性測定[Kimetal.、1993][33]。iv動的重量分布試験姿勢リンク侵害活性測定、v自発的侵害挙動の測定、及び/又は1以上のインビトロ試験:例えば、候補化合物の選別を次のように行う、ラベル化例えば、C14、H3又はI125などの放射性元素ラベル、パーオキシダーゼ又はアルカリ又は酸ホスファターゼの酵素ラべル、FITC又はローダミンなどの蛍光ラベル、抗体、抗原、ビオチン、常磁性イオン、ラテックス粒子などでした本発明のペプチドを前記サンプルと結合することができる条件下でサンプルと接触させ、前記サンプルに結合した前記ラベル化ペプチドの結合を測定し、および、前記ラベル化ペプチドの活性を模倣する前記化合物が前記レセプターASIC1a及びASIC1bサブユニットからなる群から選択される少なくとも1つを含むASICチャンネルのサイトへの結合を前記ペプチドと競争させる。従って、より少ない量の検出可能なラベル剤が、前記試験化合物が前記ペプチドの活性を模倣せず前記レセプターと結合しないか、より小さい親和性で結合する場合よりも、より強く前記試験化合物が前記ペプチドの活性を、前記レセプターに結合することで模倣する場合に、測定される。又は、競争選別方法は、本発明のペプチドをラベル化する代わりに候補化合物をラベル化することで実施され得る。従って、より高い量の検出可能なラベル剤が、前記試験化合物が前記ペプチドの活性を模倣せず前記レセプターと結合しないか、より小さい親和性で結合する場合よりも、より強く前記試験化合物が前記ペプチドの活性を、前記レセプターに結合することで模倣する場合に、測定される。ペプチドの鎮痛活性を模倣する化合物を同定する方法の例は、例えばこれには限定されるものではないが米国特許第5877026[34]に記載されている。他の利点は、添付図面により示される以下の実施例に基づき、当業者にはより明らかなものとなる。実施例1:2つのペプチド、ASICalgin-1π-Dp1及びASICalgin-2π-Dp2を蛇ブラックマンバからの分離毒物及びペプチド毒の生成凍結乾燥毒はLatoxanValence、France.社から入手した。毒を酢酸1で希釈し、それをSephadexG50樹脂を含むカラムに通して分画した。ペプチド画分を回収し、続いて高性能液体クロマトグラフHPLCシステムで分画した:1ペプチド画分を、カチオン交換樹脂に負荷し、溶媒pH3.0の1酢酸及び1Mの酢酸アンモニウムでpH勾配を付けた。ASICalginを含む画分を、60酢酸アンモニウムから出発して流出させた。2このペプチド画分を、C18逆相カラムに負荷し、内容物を、溶媒水-0.1TFAとアセトニトル-0.1TFAの間で疎水性勾配で溶出させた。ASICalgin-1及びASICalgin-2ペプチドは、それぞれアセトニトリルの26及び27で純粋に溶出された。ペプチド分析アミノ酸分析ASICalgin-1及びASICalgin-2は2つの塩基性イソペプチドであり、57アミノ酸を持ち、8個のシステインを持っておち4個のジスルフィド架橋を形成しており図1A、それぞれ配列番号2及び3、21個のアミノ酸図1B、配列番号6参照のシグナル配列が先行している。これらはお互いに、配列番号1、2又は3の4番目のアミノ酸の点でのみ相違する配列番号6の25番目の位置クローン化によるアミノ酸配列決定ASICalgin-1の全アミノ酸配列図1Bは、粗毒内に痕跡量存在するメッセージRNAmRNAから、PCRによりcDNAをクローニングすることで決定された。蛇ブラックマンバ毒Sigmaの毒25mgを、溶解緩衝液500mMのLiCl、10mMのEDTA、1重量/容積のLiDS及びpH7.5の100mMのトリス-HCl緩衝液中の5mMのジチオスレイトールに懸濁させた。メッセンジャーRNAを、dT25オリゴヌクレオチドでグラフト化磁気ビーズDynal、UKの手段で補足した。このオリゴヌクレオチドを、PrimeScriptTM逆転写酵素TaKaRaBioInc.、Japanを用いて、mRNAからcDNAへの逆転写を実施するためのプライマーとして直接使用した。得られた固相cDNAライブラリーを、直接N末端配列決定に寄る前記毒の部分タンパク質配列から定められた、センスTGITTYCARCAYGGIAARGT、配列番号7及びアンチセンスYTTIARRTTICGRAAIGGCAT、配列番号8オリゴヌクレオチドを用いて、縮重PCRの実施に使用された。前記ポリメラーゼによるエラーを除外するために、3つの独立したPCRを実施し、望ましいサイズ89塩基対を持つ断片を生成し、続いてこれらをpGEMTeasyベクターPromegaにサブクローニングして配列決定された。これらの配列により、付加EcoRI制限サイトを持たせた特定のセンスオリゴヌクレオチドACACGAATTCGCTATCATAACACTGGCATG、配列番号9を合成し、同様に付加EcoRIサイトを持たせた特定のポリ-dT30アンチセンスオリゴヌクレオチドACACGAATTCdT30、配列番号10を合成した。これらの2つのオリゴヌクレオチドは、PCRによって、同定目的で全3’コード及び3’非コード末端を増幅することができた。3つの独立した約400塩基対のPCR生成バンドが生成され、これらをEcoRI制限サイトでpGEMTeasyベクターにサブクローニングすることで、ポリメラーゼにより生成されるエラーを除外して配列を決定することができた。3’末端及び5’非コード配列にもとづいて、前記コード配列を含むセンスオリゴヌクレオチドACACGAATTCTCCAGAGAAGATCGCAAGATG、配列番号11及びアンチセンスオリゴヌクレオチドACACGAATTCATTTAGCCACTCGTAGAGCTA、配列番号12を合成した。4つの独立したPCRを、固相cDNAライブラリー上で実施し、得られたPCR産物を再びpGEMTeasyベクターにサブクローニングして、ASICalgin-1毒前駆体の完全ヌクレオチド配列を得た。ペプチド配列前記配列は、自動配列決定装置LC491、AppliedBiosystems、USAで、前記制限されアルキル化されたペプチドのアミノ酸Asp40までを直接N-末端配列方法で確認した。酵素開裂前記配列を確認するために、銭ペプチドが次の構想処理の対象とされた:aV8プロテアーゼで消化されたペプチドの分離をC18逆相HPLCカラムで行った。D15及びE43での開裂及びHPLCで分離された2つのペプチドの分子量は、1786.9Daペプチド1から15部分配列、及び3195.5Daペプチド16から43部分配列である、これによりN末端配列が確認できた。bトリプシン消化物を、質量スペクトルによる直接分析された。前記トリプシン消化断片もまた、N末端配列を確認し、かつASICaiginの他のペプチド配列部分も確認された。トリプシン消化ペプチドでMS/MS分析により検出された配列は以下表1に与えられている。質量分析MALDI-TOF全ての場合に、質量スペクトル分析は、MALDI-TOF-TOFスペクトル装置AppliedBiosystems、USAで実施された。シナピン酸マトリクスSigmaAldrich、USAを用いて、既知分子量のタンパク質の混合物の内部較正を用いて、検量天然タンパク質が陽イオンリニアモードで分析された。測定された分子量は、ASICalgin-1で6554.8Da、ASICalgin-2で6538.4Daであった。これは、GPMAWタンパク質分析ソフトウェアで、配列から計算される分子量と完全に一致した。これらの結果は、遊離カルボン酸Cで末端を示唆する。280nmで計算される分子吸収係数は、ε=3040ASICalgin-1及びε=1760ASICalgin-2である。ホモログのデータベース検索ASICalgin-1及びASICalgin-2は、データベースにはなく、知られたペプチド又は毒との完全な配列一致はなかった。BLAST配列整列プログラムは、ASICalgin-1及びASCalgin-2はそれにもかかわらず、種々のコブラ蛇からの毒から精製されたペプチドCM-1、CM-3及びCM-2a、また、キングコブラの毒中に存在するα-神経毒OH-26と47から55の配列同一性65から66配列同一性を示す。しかし、これらのCM及びOH-26神経毒は、ASICをチャンネルへの作用を記載されておらず、インビボでの鎮痛効果についても示されておらず、むしろ細胞毒性効果が示されている。従って、ASICalgin-1又はASICalgin-2との55未満の配列同一性では、本発明のペプチドで示される生理学的性質は失われる、と考えられる。一方で、当該技術分野では、イソフォーム及び/又はオーソログ毒物は、約70の配列同一性の結果それらのタンパク質配列におけるくらかの相違にもかかわらず保持された活性を示す、ということが知られている。従って、ASICailgin-1又はASICalgin-2と少なくとも56から70の配列同一性を示すイソフォーム及び/又はオーソログ毒物は、本発明のペプチドの性質を保持し得る。実施例2:ASICailgin-1π-Dp1及びASICalgin-2π-Dp2ペプチドの、髄膜注射後の鎮痛効果マウスC57B16J、7-から11週齢オスの痛み挙動が、Hylden及びWilcox[1980][35]の手順に従い、脊椎のL5とL6の間に、前記ペプチドを髄膜注射ITした後、評価された。34μMのASICalgin-10.34nmol又は2μMのASICalgin-20.2nmolの効果を、3.1mMのモルヒネ31nmol又は10μlの生理的食塩水145mMのNaC、5mMのKCl、2mMのCaCl2、10mMのHEPES、pH7.4、0.05ウシ血清アルブミンのIT注射の効果と比較した。実験のいくつかの系列で、ナキソロン、アヘンレセプター阻害剤特にμタイプを、50μlの0.9のNaCl中で2mg/kgを、前記ASICalginペプチドのIT注射の10分前に、皮下に注射した。毒性ASICalgin-1及びASICalgin-2ペプチドの髄膜注射は、マウスの、運動障害の挙動、平衡障害、無関心、麻痺又は痙攣タイプに何ら変化を誘導せず、いかなる死亡をも引き起こさない。急性化学的及び炎症性痛みホルマリン0.9NaCl溶液中、2で15μlをマウスの後足のアーチ部分へ皮下注射して、2つの相の痛みを誘導した:相Iは化学的痛みが10分間の急性痛み、相IIは炎症性痛みで15から45分間図2Aである。前記痛みは、棒物の自発的痛み挙動を観察することで測定され、即ち、マウスが注射された足を持ち上げる、そこをつつき、舌でなめ、足を振る間の時間を計測することで、測定される統合自発挙動。ASICalgin-1の前記IT注射は、相Iの痛みを40、相IIの痛みを70まで大きく低減する。この鎮痛効果は、モルヒネと類似する図2B。ASICalgin-2のIT注射は、ASICalgin-1と同一の効果である。ナキソロン、アヘンレセプター阻害剤での前処置は、前記2つの相II及び相IIのいずれにおいてもASICalgin-1の鎮痛効果に影響はない。ASICalgin-1及びASICalgin-2ペプチドは、蛇ブラックマンバの毒から抽出された最初の鎮痛性ペプチドである。急性熱痛み熱痛みが、マウスを用いて、46°C反射運動、動物はブレースされているの水中に浸漬させた尾を引っ張る時間を、30秒の時間に限定して、研究した。ASICalgin-1ペプチドは、モルヒネと同等の強さの鎮痛効果を誘導したがIT注射後7分間、より高濃度ではより長い時間である図2C。ASICalgin-1の鎮痛効果は、ナキソロンの前処置によって大きくは阻害されない図2D。炎症性過敏痛感マウスの後ろ脚のアーチ内に2のカラギーナンを皮下注射は、炎症性及び過敏痛感を誘導し、これは、46°Cの水中に浸漬された後ろ脚を引き込む時間統合自発運動、動物はブレースされているが、30秒限定で、カラギーナンの注射後2時間、測定される図2E、。ASICalgin-1のIT注射は、急激に鎮痛効果を誘導し、これは、モルヒネと同程度であり、実験期間を通じて持続した67分間、図2E。ASICalgin-1の鎮痛効果は、ナキソランの前処理により20程度の僅かな阻害を受けるのみである。運動活性ASICalgin-1ぺの運動活動への効果は、ローターロッド試験の手段で評価された。マウスを1分間で4回転rpmする軸回転体上に置き、5rpmから40rpmまで一定に加速して実施する。落下するまでの時間を、最大300秒限定で測定する。ASICalgin-1ペプチドのIT注射は、ベヒクル溶液の注射と比較して運動活性に関してはマウスの性能レベルでなんら有意な効果ANOVA試験も誘導しない。実施例3:ASICalgin-1π-Dp1の、インビボ脳室内注射後の鎮痛効果ASICalgin-1の脳室内ICV注射は、定位置座標皮質表面下-2.4mm、前後軸で-0.5mm、前頂に対して中外軸で1.6mmを用いて、前記第3脳室内にイソフラン1.5で麻酔されたマウス57B16J、7-から11週齢オスに実施された。34μMのASICalgin-10.34nmolを含む溶液の5μlのICV注射の効果が、5μlの生理的食塩水145mMのNaCl、5mMのKCl、2mMのCaCl2、10mMのHEPES、pH7.4、0.05ウシ血清アルブミンの効果と比較された。アヘンレセプター特にμタイプの阻害剤であるナキソロンが、ASICalgin-1のICV注射の10分前に、0.9のNaClの50μl中の2mg/kgで皮下注射された。毒性ASICalgin-1のICV注射は、マウスの、運動問題、平衡問題、無関心、麻痺又は痙攣タイプに変化を誘導せず、3日後でさえ死亡もない。急性熱痛み熱的痛みが、マウスを用いて、46°Cの水に浸漬された尾を引き上げる反射運動、動物はブレースされている時間を、限度を30秒として測定することで研究された。ASICalgin-1のICV注射は、強い鎮痛効果を示し、実験を通じて持続し67分、図3、この効果は、ナキソロンの前処理で変化はなかった。鎮痛効果は、尾の引き込み時間値は、コントロール値まで戻るまで数時間持続する。実施例4:ASICalgin-1ペプチドπ-Dp1の皮下注射後の鎮痛効果ASICalgin-1ペプチドの皮下SC注射の効果が、カラギーナン誘導炎症性痛覚過敏について試験された。マウスC57B16J、7-から11週齢のオスの後ろ脚のアーチ内に2のカラギーナンの皮下注射は、炎症性及び過敏痛感を誘導し、これは、46°Cの水中に浸漬された後ろ脚を引き込む時間統合自発運動、動物はブレースされているが、30秒限定で、カラギーナンの注射後2時間、測定される。ASICalgin-1ペプチド0.9のNaCl、0.05のウシ血清アルブミン中の34μMのASICalgin-10.34nmolを含む10μlをカラギーナンと共に注射した場合、熱的炎症過敏痛感は観察されない図4、□。この条件下で、2時間後のASICalgin-1の第2のSC注射は、なんらさらなる有意な効果を生じない図4、□。ASICalgin-1ペプチドをカラギーナンと共注射しなかった場合、前記炎症が既に生じている場合に、カラギーナンのみの注射の2時間後の前記ペプチドのSC注射は、炎症性痛感過敏を逆転させ、さらに、カラギーナンの注射前のコントロールと比較して鎮痛効果を発揮した図4、■及び。実施例5:ASICalgin-1π-Dp1及びASICalgin-2π-Dp2ペプチドの前記ASICを伝達に対する活性ASICalgin-1π-Dp1及びASICalgin-2π-Dp2ペプチドは、COS細胞で異種的に発現され全細胞構成でパッチクランプ技術を用いて記録されるASICチャンネルにより精製される伝達を阻害する適用電位モード。ペプチドは、pH7.4から6又は5.5へ細胞外で低下させる前にpH7.4で30秒、適用される。ASICalgin-1及びASICalgin-2ペプチドは同じ効果を持ち、ラットホモメリックASIC1aチャンネルにより生成される伝達を49nMで50阻害IC50を生成する濃度で図5A、ヒトホモメリックASICチャンネルにより生成される伝達を127nMでIC50で阻害する図5B。ラットホモメリックASIC1bチャンネルで生成される伝達は、650nMのIC50で阻害され図5C、ラット及びヒトヘテロメリックASIC1aASIC2aチャンネルでは308nMのIC50、及びラットヘテロメリクASIC1aASIC1bチャンネルでは223nMのIC50で阻害される図5DASICチャンネルはヒトでは記載されていない。ASICalgin-1及びASICalgin-2ペプチドは、ラット及びヒトホモメリックASIC2a及びASIC3チャンネルは阻害せず、またラットヘテロメリックASIC1aASIC3及びASIC1bASIC3チャンネルも阻害しない。前記ペプチドの適用が停止されると、ASICalgin-1及びASICalgin-2ペプチドの効果は可逆的である。ASICalgin-1及びASICalgin-2ペプチドは、現在まで、ホモメリックASIC1bチャンネル及びヘテロメリックASIC1aASIC1b及びASIC1aASIC2aチャンネルの阻害可能として記載された最初の例である。他方では、ASICalgin-1ペプチド2μMは、カプサイシン1μMで活性化させたラットTRPV1チャンネルこれはまた感覚神経端部で痛み伝達の関与するにより生成される伝達を阻害しない。この説明に限定されるものではないが、ASICalgin-1及びASICalgin-2ペプチドの鎮痛効果は、中枢神経系ニューロンでのホモメリックASICする1aチャンネル及びヘテロメリックASICする1aASIC2aチャンネルの阻害を含みIT及びICV注射、及び感覚ニューロンでのホモメリックASIC1a及びASIC1bチャンネル、及びヘテロメリックASICする1aASIC1bチャンネルの阻害を含む皮下注射、IT注射、ただしホモメリックASIC1a及びASIC1b及びヘテロメリックASIC1aASIC1bが、脊髄後角のレベルで感覚ニューロンの中枢端部に存在する場合。実施例6:中枢神経系ニューロン及び感覚ニューロンの天然ASIC伝達におけるASICalgin-1π-Dp1及びASICalgin-2π-Dp2の活性ASICalgin-1及びASICalgin-2ペプチドは、大人ラット脊髄神経節から図6A、マウス胚背側脊髄から図6B、及び新生マウス2日海馬から図6Cから単離された主培地でのニューロンでの全細胞構成適用電位モードでのパッチクランプ技術を用いて記録されたASIC伝達を阻害する。ASICalgin-1及びASICalgin-2ペプチドの、感覚ニューロンの全ASIC伝達の部分的阻害は、感覚ニューロンでのASIC3タイプこれはASICalgin-1及びASICalgin-2ペプチドでは阻害されないの大部分からなる、一方で、中枢系海馬及び脊髄SIC伝達は、ホモメリックASIC伝達及びヘテロメリックASIC1aASIC2a伝達共にASICalgin-1及びASICalgin-2ペプチドで阻害されるの混合からなる、ことで説明される。実施例7:ニューロンへの、ASICalgin-1π-Dp1及びASICalgin-2π-Dp2ペプチドの活性培地での脊髄ニューロンへのASICalgin-1及びASICalgin-2ペプチドの適用は、基底伝達レベルになんの変更も誘導しないし、全細胞構成でのパッチクランプ技術を用いて記録される静止電位にも変化を誘導しない図7A。ASICalgin-1及びASICalgin-2ペプチドの適用は、培地中の脊髄ニューロンの自発的シナプス電気活性を変更せず、電気刺激パッチクランプの適用モードにより誘導される作用電位の形状及び閾値も変化させない図7B。この結果は、ASICalgin-1及びASICalgin-2ペプチドは、ニューロンの本質的な興奮性、シナプス機能又は作用電位の生成Naチャンネル又は脱分極Kチャンネルで関与する電位依存伝達にも、影響を与えないということを示す。他方で、ASICalgin-1及びASICalgin-2ペプチドでのASICチャンネルの阻害は、酸性pH低下7.4から6.0に応答するニューロン興奮を低減させ、ASIC伝達により生成される脱分極が作用電位を生じさせるには十分ではない図7A。参考文献1.BertinandVergne-Salle、Traitementsmedicamenteuxdel’inflammationetdesdouleursinflammatoires[Drugtreatmentsforinflammationandinflammatorypain]UPSAPainInstituteAEditorialParis、p.113-132、20072.GutsteinandAkil、Opioidanalgesics、inThePharmacologicalBasisofTherapeuticsBruntonetal.、Eds.McGraw-Hill、2006.3.BannisterDickenson、Curr.Opin.SupportPalliat.Care、4:1-5、20104.Yennurajalingametal.、SupportCancerTher.、1:97-110、20045.Mizoguchietal.、Int.Rev.Neurobiol.、85:249-260、20096.WaldmannandLazdunski、Curr.Opin.Neurobiol.、3:418-424、19987.Wemmieetal.、TrendsNeurosci.、29:578-586、20068.Linguegliaetal.、J.Biol.Chem.、282:17325-17329、20079.Jastietal.、Nature、449:316-323、200710.Linguegliaetal.、J.Biol.Chem.、272:29778-29783、199711.Bensonetal.、Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.、95:10240-10245、200212.Hesselageretal.、J.Biol.Chem.、279:11006-11015、200413.Waldmannetal.、Nature、386:173-177、1997a14.Noeletal.、Currentperspectivesonacid-sensingionchannels:newadvancesandtherapeuticimplicationsExpertRev.Clin.Pharmacol.ClinicalPharmacologyofIonChannels、3:331-346、201015.Waldmannetal.、J.Biol.Chem.、272:20975-20978、1997b16.Bassleretal.、J.Biol.Chem.、276:33782-33787、200117.Chenetal.、Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.、95:10240-10245、199818.ReehandSteen、Prog.BrainRes.、113:143-151、199619.Steenetal.、Neurosci.Lett.、199:29-32、1995a20.Issberneretal.、Neurosci.Lett.、208:191-194、199621.Ugawaetal.、J.Clin.Invest.、10:1185-1191、200222.Jonesetal.、J.Neurosci.、24:10974-10979、200423.Voilleyetal.、J.Neurosci.、21:8026-8033、200124.Dubeetal.、Pain、117:88-96、200525.Escoubasetal.、J.Biol.Chem.、275:25116-25121、200026.Diochotetal.、EMBOJ.、23:1516-1525、200427.Devaletal.、EMBOJ.、27:3047-3055、200828.Mazzucaetal.、NatureNeuroscience、10:943-945、200729.Abottetal.、Pharmacol.Biochem.Behav.、176:1213-1219、198230.CridlandandHenry、BrainRes.、5841-2:163-168、199231.WoolfeandMacdonald、J.Pharmacol.Exp.Ther.、80:300-307、194432.Ankier、Eur.J.Pharmacol.、271:1-4、197433.Kimetal.、Pain、55:85-92、199334.米国特許第5、877、026号35.HyldenandWilcox、Eur.J.Pharmacol.、67:313-316、198036.Devaletal.、J.Neurosci.、3116:6059-6066、2011