"a第1の面を有し、必要としている被検体の天然の管腔臓器または組織構造の少なくとも一部に一致するように成形される、マトリクスと、b前記マトリクスの前記第1の面の上または中に沈着される、腹膜由来の細胞集団と、を備え、前記マトリクスおよび前記細胞集団が移植可能な構築体を形成する、該移植可能な構築体。a第1の面を有し、必要としている被検体の天然の脈管からの流体の通過を可能にするように成形される、管状マトリクスと、b前記マトリクスの前記第1の面の上または中に沈着される、腹膜由来の細胞集団と、を備え、前記マトリクスおよび前記細胞集団が移植可能な構築体を形成する、該移植可能な構築体。前記細胞集団は、平滑筋細胞SMC集団である、請求項1または2に記載の移植可能な構築体。前記管状マトリクスは、第1の端部を備える、請求項2に記載の移植可能な構築体。前記第1の端部は、前記被検体の腹壁に接触するように構成される、請求項4に記載の移植可能な構築体。前記第1の端部は、前記被検体の腹壁の開口部への吻合のために構成される、請求項5に記載の移植可能な構築体。前記第1の端部は、前記被検体の皮膚に露出するように構成される、請求項5または6に記載の移植可能な構築体。前記管状マトリクスは、前記天然の脈管への接続のための、第1の側部開口部をさらに備える、請求項4~6のいずれか1項に記載の移植可能な構築体。前記天然の脈管は、第1の尿管である、請求項8に記載の移植可能な構築体。前記管状マトリクスは、第2の尿管への接続のための、第2の端部をさらに備える、請求項9に記載の移植可能な構築体。前記管状マトリクスは、第2の尿管への接続のための、第2の側部開口部をさらに備える、請求項9に記載の移植可能な構築体。移植したときに、前記第1の尿管から前記管状マトリクスの内部への尿の通過を可能にする、請求項9に記載の移植可能な構築体。移植したときに、前記第2の尿管から前記管状マトリクスの内部への尿の通過を可能にする、請求項10または11に記載の移植可能な構築体。移植したときに、前記被検体からの尿の通過を可能にする、請求項12に記載の移植可能な構築体。移植したときに、前記被検体からの尿の通過を可能にする、請求項13に記載の移植可能な構築体。前記管状マトリクスの前記第1の端部は、移植したときに、前記被検体の外部にストーマを形成する、請求項7に記載の移植可能な構築体。前記第1の端部は、前記被検体の腹壁を通って延在する、ストーマ端部を備える、請求項16に記載の移植可能な構築体。前記ストーマ端部は、前記被検体の皮膚に接続される、請求項17に記載の移植可能な構築体。移植したときに、前記ストーマ端部で上皮化した粘膜を形成する、請求項17または18に記載の移植可能な構築体。前記上皮化した粘膜は、前記ストーマ端部に皮膚粘膜領域を備える、請求項19に記載の移植可能な構築体。前記上皮化した粘膜は、前記皮膚粘膜領域に隣接する前庭領域を備える、請求項20に記載の移植可能な構築体。前記上皮化した粘膜は、最初に前記前庭領域に現れて、前記ストーマ端部に向かって前記皮膚粘膜領域を通して徐々に増加する上皮を特徴とする、請求項21に記載の移植可能な構築体。前記上皮は、上皮細胞マーカーの発現を特徴とする、請求項22に記載の移植可能な構築体。前記上皮化した粘膜は、自然発生の皮膚粘膜領域と同等である、請求項19に記載の移植可能な構築体。前記構築体は、尿路上皮細胞を含まないか、またはいかなる他の細胞集団も含まない、請求項1~24のいずれか1項に記載の移植可能な構築体。層状に組織化された管腔臓器または組織構造の再構築、増大、または置換を必要としている被検体におけるそのような治療のための方法であって、前記層状に組織化された管腔臓器または組織構造の形成のために、請求項1に記載の構築体を前記被検体の前記治療部位に移植することを含む、前記方法。層状に組織化された管腔臓器または組織構造の再構築、増大、または置換を必要としている被検体におけるそのような治療のための、移植可能な構築体を調製する方法であって、a第1の面を有し、前記被検体の天然の管腔臓器または組織構造の少なくとも一部に一致するように成形される、マトリクスを提供することと、b前記移植可能な構築体を形成するために、前記マトリクスの前記第1の面の上または中に腹膜由来の細胞集団を沈着させることと、を含む、前記方法。形成される前記移植可能な構築体は、請求項1に記載の構築体である、請求項27に記載の方法。治療を必要としている被検体における障害のある膀胱のための移植可能な構築体を提供する方法であって、請求項2に記載の構築体を前記被検体に移植することを含む、前記方法。治療を必要としている被検体における障害のある膀胱のための移植可能な構築体を調製する方法であって、a第1の面を有し、前記被検体の天然の脈管からの流体の通過を可能にするように形成される、マトリクスを提供することと、b前記移植可能な構築体を形成するために、前記マトリクスの前記第1の面の上または中に腹膜由来の細胞集団を沈着させることと、を含む、前記方法。形成される前記移植可能な構築体は、請求項2に記載の構築体である、請求項30に記載の方法。本発明は、腹膜組織源から得られた細胞を播種した足場を使用した、必要としている被検体における層状に組織化された管腔臓器または組織構造の再生、再構築、増大、または置換に関する。別の態様において、本発明は、腹膜組織源から得られた細胞を含有する新尿路導管として使用するための、移植可能な構築体を提供する。本発明は、腹膜組織源に由来する細胞集団、そのような細胞を単離する方法、そのような細胞構築体を播種した新臓器/組織構造足場またはマトリクス、およびその作製方法、ならびにそのような新臓器/組織構造の構築体を使用することを必要としている患者の治療方法に関する。本発明の構築体は、本明細書で説明されるように、臓器または組織構造の再構築、修復、増大、置換、または再生に使用されてもよい。1.定義別に定義されない限り、本明細書で使用する技術および科学用語は、本発明が属する当業者により一般的に理解されるものと同じ意味を有する。RLanza、RLanger、JVacanti編PrinciplesofTissueEngineering,3rdEd.,2007は、本出願で使用する多くの用語に対する一般的な指針を当業者へ提供する。当業者は、本発明の実施に使用することができ得る、本明細書に記載する多くの方法および材料と同様または同等のものを理解するであろう。実際に、本発明は、記載する方法および材料に決して限定されない。本発明の目的を達成するために、以下の用語を下記に定義する。本明細書で使用される平滑筋細胞またはSMCという用語は、本明細書で説明される再構築、修復、増大、または置換構築体および方法の対象である天然の臓器または組織とは異なる源に由来する、収縮細胞を指す。本発明によって提供される平滑筋細胞は、本明細書で説明される足場またはマトリクス上に播種されて培養されると、中空の臓器例えば、膀胱、腹腔、胃腸管等の壁に見られ、収縮および緩和する能力を特徴とする、非横紋筋を形成することが可能である。当業者は、平滑筋細胞の他の性状を理解するであろう。本明細書で使用される細胞集団という用語は、適切な哺乳動物の組織源から単離して、その後にインビトロで培養することによって得られる、多数の細胞を指す。当業者は、本発明とともに使用するための細胞集団を単離および培養するための種々の方法、ならびに本発明で使用するのに適切である細胞集団の中の種々の数の細胞、および本発明で使用するのに適切である細胞集団の中の種々の数の細胞を理解するであろう。細胞集団は、腹膜組織に由来する平滑筋細胞SMC集団であってもよい。腹膜組織は、網組織であってもよい。SMC集団は、平滑筋細胞と関連付けられるマーカーの発現を特徴とし得る。SMC集団はまた、精製された細胞集団であってもよい。SMC集団は、自己源または非自己源に由来してもよい。自己という用語は、同じ個人に由来すること、またはそこから移されることを指す。自己平滑筋細胞集団は、本明細書で説明される移植可能な構築体の受容体となる、被検体に由来する。非自己という用語は、本明細書で説明される移植可能な構築体の受容体とならない、被検体に由来するか、またはそこから移されることを指す。そのような非自己源としては、同種異系、同系自家、または同種、およびそれらの任意の組み合わせである源が挙げられる。マーカーまたはバイオマーカーという用語は、概して、DNA、RNA、タンパク質、炭水化物、または糖脂質に基づく分子マーカーを指し、培養細胞集団におけるその発現または存在は、標準的な方法または本明細書で開示される方法によって検出することができ、特定の種類の細胞である培養細胞集団の中の1つ以上の細胞と一致する。概して、細胞マーカーまたはバイオマーカーという用語は、一般的に天然の細胞によって発現される、本明細書で説明される細胞集団の中で発現される分子を指す。マーカーは、細胞または遺伝子等の染色体上の識別可能な物理的場所によって発現されるポリペプチド、制限エンドヌクレアーゼ認識部位、または天然の細胞によって発現されるポリペプチドをコードする核酸例えば、mRNAであってもよい。マーカーは、遺伝子発現マーカーと称される遺伝子の発現領域、またはいかなる既知のコード機能も伴わないDNAの何らかの切片であってもよい。平滑筋細胞マーカーという用語は、概して、DNA、RNA、タンパク質、炭水化物、または糖脂質に基づく分子マーカーを指し、培養細胞集団におけるその発現または存在は、標準的な方法または本明細書で開示される方法によって検出することができ、平滑筋細胞である培養細胞集団の中の1つ以上の細胞と一致する。概して、平滑筋細胞SMCマーカーまたはバイオマーカーという用語は、一般的に、天然の平滑筋細胞によって発現される分子を指す。マーカーは、細胞または遺伝子等の染色体上の識別可能な物理的場所によって発現されるポリペプチド、制限エンドヌクレアーゼ認識部位、またはSMCによって発現されるポリペプチドをコードする核酸であってもよい。マーカーは、遺伝子発現マーカーと称される遺伝子の発現領域、またはいかなる既知のコード機能も伴わないDNAのいくつかの切片であってもよい。本発明によって企図されるそのようなマーカーとしては、ミオカルディン、アルファ-平滑筋アクチン、カルポニン、ミオシン重鎖、BAALC、デスミン、筋線維芽細胞抗原、SM22、およびそれらの任意の組み合わせのうちの1つ以上が挙げられるが、これらに限定されない。差別的に発現した遺伝子、差別的遺伝子発現、およびそれらの同義語は、同じ意味で使用され、第1の細胞または細胞集団中のその発現が、第2の細胞または細胞集団中のその発現と比較して、より高いまたはより低いレベルに活性化される遺伝子を指す。この用語はまた、その発現が、第1または第2の培養細胞の継代中の経時的に異なる段階で、より高いまたはより低いレベルに活性化される遺伝子を指す。また、差別的に発現した遺伝子は、核酸レベルまたはタンパク質レベルで活性化または阻害され得るか、または代替のスプライシングを受けて異なるポリペプチド産物をもたらし得る。そのような差は、例えば、ポリペプチドのmRNAレベル、表面発現、分泌、または他の分配の変化によって明示されてもよい。差別的遺伝子発現は、2つ以上の遺伝子間の発現もしくはそれらの遺伝子産物の比較か、2つ以上の遺伝子間の発現もしくはそれらの遺伝子産物の比率の比較か、さらには第1の細胞と第2の細胞との間で異なる、2つの異なるように処理された同じ遺伝子の産物の比較を含んでもよい。差別的発現は、遺伝子の時間的もしくは細胞発現パターンの、または例えば第1の細胞と第2の細胞との間の、その発現産物の、定量的ならびに質的両方の差を含む。本発明では、第1の細胞と第2の細胞との所与の遺伝子の発現の間に、または培養細胞の継代中の経時的に異なる段階で、少なくとも約1倍、少なくとも約1.5倍、少なくとも約2倍、少なくとも約2.5倍、少なくとも約3倍、少なくとも約3.5倍、少なくとも約4倍、少なくとも約4.5倍、少なくとも約5倍、少なくとも約5.5倍、少なくとも約6倍、少なくとも約7倍、少なくとも約8倍、少なくとも約9倍、少なくとも約10倍、少なくとも約10.5倍、少なくとも約11倍、少なくとも約11.5倍、少なくとも約12倍、少なくとも約12.5倍、少なくとも約13倍、少なくとも約13.5倍、少なくとも約14倍、少なくとも約14.5倍、または、少なくとも約15倍の差があったときに、差別的遺伝子発現があるとみなされる。阻害する、下方制御する、過小発現させる、および低減するという用語は、同じ意味で使用され、遺伝子の発現、1つ以上のタンパク質もしくはタンパク質サブユニットをコードするRNA分子もしくは同等のRNA分子のレベル、または1つ以上のタンパク質もしくはタンパク質サブユニットの活性が、例えば1つ以上の陽性対照および/または陰性対照等の、1つ以上の対照と比較して、減少していることを意味する。上方制御するまたは過剰発現させるという用語は、遺伝子の発現、1つ以上のタンパク質もしくはタンパク質サブユニットをコードするRNA分子もしくは同等のRNA分子のレベル、または1つ以上のタンパク質もしくはタンパク質サブユニットの活性が、例えば1つ以上の陽性対照および/または陰性対照等の、1つ以上の対照と比較して、増加していることを意味する。収縮機能という用語は、ミオシンのカルシウム活性化リン酸化によって開始され、したがって、細胞内のカルシウムレベルに依存して収縮させる、アクチンフィラメントおよびミオシンフィラメントの滑り運動の相互作用を伴う、平滑筋収縮機能を指す。腹膜組織という用語は、概して、壁側腹膜、臓側腹膜、および網が挙げられるが、これらに限定されない、腹膜に由来する組織を意味するものとする。腹膜組織は、胃、肝臓、および/または腸が挙げられるが、これらに限定されない、内部臓器と密接に接触した状態であり得る。網組織は、大網および小網が上げられるが、これらに限定されない、異なる源から得てもよい。網組織は、切開および生検を介して得ることができる。構築体という用語は、1つ以上の合成または自然発生の生体適合材料で構成される足場またはマトリクスの表面の上もしくは中に沈着される、少なくとも1つの細胞集団を指す。細胞集団は、インビトロもしくはインビボで、足場またはマトリクスと組み合わせてもよい。試料、患者試料、または生物学的試料という用語は、概して、個人の体液、体組織、細胞株、組織培養物、または他の源から得られる、生物学的試料を意味するものとする。この用語は、例えば血液末梢血または静脈血等、尿、および他の生物学的起源の液体試料吸引脂肪等等の体液、ならびに生検標本等の固体組織生検材料例えば、腹膜組織生検材料、または組織培養物もしくはそれに由来する細胞、ならびにそれらの子孫を含む。この定義はまた、試料を源から得た後に、試薬による処理、可溶化、または特定の成分タンパク質またはポリヌクレオチド等の富化等の、任意の方法で操作された試料も含む。この定義はまた、臨床試料を包含し、さらに、細胞上清、細胞溶解物、血清、原形質、生物学的流体、および組織試料を含む。試料源は、固体組織新鮮な、冷凍の、および/もしくは保存した、臓器もしくは組織試料、生検材料、または吸引物等からの、血液または任意の血液成分、体液脳髄液、羊水、腹水、または間質液、被検体の発達における任意のときの細胞であってもよい。生物学的試料は、防腐剤、抗凝固剤、緩衝剤、固定剤、栄養素、抗生物質等の、実際は、組織とともに、またはその中に本質的に自然に存在しない化合物を含有してもよい。試料は、診断またはアッセイの監視のために使用することができる。哺乳動物から試料を得るための方法は、当技術分野でよく知られている。試料という用語が単独で使用された場合であっても、その試料が生物学的試料または患者試料であることを意味するものとする。すなわち、この用語は、同じ意味で使用される。試料はまた、試験試料であってもよい。試験試料という用語は、本明細書で説明される構築体の移植に伴う、被検体からの試料を指す。試験試料は、血液、血清、尿、精液、骨髄、粘膜、組織等が挙げられるが、これらに限定されない、哺乳動物の被検体の種々の源に由来してもよい。対照または対照試料という用語は、否定的結果が、試験試料における肯定的な結果を相関させるのに役立つことが予想される、陰性対照を指す。代替として、対照は、肯定的な結果が、試験試料における否定的な結果を相関させるのに役立つことが予想される、陽性対照であってもよい。本発明に適切である対照としては、サイトカインの正常なレベルを有することが分かっている試料、本明細書で説明される構築体が埋め込まれていないことが分かっている哺乳動物の被検体から得た試料、および正常であることが分かっている哺乳動物の被検体から得た試料が挙げられるが、これらに限定されない。対照はまた、本明細書で説明される構築体の移植前に被検体から得られる試料であってもよい。加えて、対照は、試験試料に含有される細胞と同じ起源を有する、正常な細胞を含有している試料であってもよい。当業者は、本発明で使用するための適切な他の対照を理解するであろう。患者という用語は、処置が所望される、任意の単一の動物、より好ましくは哺乳動物例えば、イヌ、ネコ、ウマ、ウサギ、動物園動物、雌ウシ、ブタ、ヒツジ、および非ヒト霊長類等の非ヒト動物を含むを指す。より好ましくは、本明細書における患者はヒトである。被検体という用語は、治療に適格であり、不全な、損傷した、または機能しない泌尿器系を含む臓器機能の不全もしくは故障の1つ以上の徴候、症状、または他の指標を経験している、または経験した患者を含む、任意の単一のヒトの被検体を意味するものとする。そのような被検体としては、新たに診断されたもしくは以前に診断されて現在再発もしくは再燃を経験している、またはその原因に関わらず臓器機能の不全もしくは故障の危険性がある被検体が挙げられるが、これらに限定されない。被検体は、以前に臓器機能の不全もしくは故障と関連付けられる状態を治療されていても、またはそのように治療されていなくてもよい。被検体は、膀胱切除を必要としている膀胱の癌を有する被検体、腎機能に衝撃を与える神経因性膀胱を有する被検体、膀胱に放射線傷害を有する被検体、および難治性失禁を有する被検体が挙げられるが、これらに限定されない、尿路変向の候補であってもよい。被検体は、尿路変向が必要であると新たに診断され得るか、以前に尿路変向が必要であると診断されて現在合併症を経験しているか、またはその原因に関わらず不全の、損傷した、もしくは機能しない泌尿器系の危険性があり得る。被検体は、以前に、不全の、損傷した、もしくは機能しない泌尿器系と関連付けられる状態を治療されていても、またはそのように治療されていなくてもよい。尿路変向または導管という用語は、被検体の、尿路変向構築体、吻合された尿管、および随意に、隣接する心房との経時的な相互作用に起因する、結果として生じる臓器または組織構造を指す。心房は、腹壁を通しての尿の通過を可能にし、かつ構築体の尾側端腹腔内空洞の中に位置するを皮膚に接続する腹膜ラップの最前方の管状部分によって作製され得る、前方接続チャンバである。尾側および頭側という用語は、尿の産生および流れに関連する記述用語である。尾側という用語は、移植したときにストーマに最も近い尿路変向構築体の端部を指し、一方で、頭側という用語は、移植したときに腎臓および尿管に最も近い尿路変向構築体の端部を指す。デトリタスという用語は、尿路変向構築体の移植後に起こる、治癒および再生過程中に形成される細片を指す。デトリタスは、はげ落ちた組織細胞、炎症性の滲出液、足場の生分解で構成される可能性がある。導管がそのような細片によって遮断された場合不適当な流出、停滞した細片は、導管の管腔内でデトリタスまたは半固体塊を形成する。創面切除という用語は、感染を予防する、閉塞を予防する、および治癒過程を促進するために、異物、または切り裂かれた、失活した、汚染された、もしくは死亡した細胞の導管からの外科的もしくは非外科的除去を指す。創面切除は、破片の除去を伴ってもよい。ストーマという用語は、尿を尿路変向構築体の流出端から体外に流出させるために使用される、外科的に作成された開口部を指す。尿は、一般的に、体外の貯留部で採集される。ストーマポートまたはストーマボタンという用語は、ストーマ開口部の健全性を維持するために使用されるデバイス等の手段を指す。本明細書で使用される拡張または拡大という用語は、既存の層状に組織化された管腔臓器または組織構造のサイズを増加させることを指す。例えば、本発明の一態様において、既存の層状に組織化された管腔臓器または組織構造は、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、または29パーセント拡大され得る。本発明の他の態様において、既存の層状に組織化された管腔臓器または組織構造は、既存の層状に組織化された管腔臓器または組織構造の既存の容積を増加させるため等に、拡大され得る。本明細書で使用される容積という用語は、規定の領域の中に含有することが可能な液体の量を指す。再生予後または再生の予後を示すという用語は、概して、本明細書で説明される構築体の移植の推定される経過もしくは結果の予想または予測を指す。本明細書で使用される再生予後は、膀胱置換または増大後の機能的膀胱の発達または改善、導管の移植後の機能的尿路変向の発達、改善された膀胱容量の発達、および改善された膀胱順応性の発達のうちの任意の1つ以上の予想または予測を含む。本明細書で使用される再生の予後は、新しい臓器または組織構造の移植の推定される経過もしくは結果の予想または予測を指す。いくつかの実施形態において、再生の予後を示すは、膀胱置換または増大後の機能的膀胱の発達または改善、導管の移植後の機能的尿路変向の発達、膀胱容量または改善された膀胱容量の発達、および膀胱順応性または改善された膀胱順応性の発達のうちの任意の1つ以上の予後の予想または予測を提供することを含む。再生された組織は、本明細書で説明される構築体の移植後に発達する、新しい臓器の組織または組織構造を指す。臓器または組織構造は、膀胱または膀胱の一部であってもよい。再生された組織は、その下に平滑筋を伴う連続する尿路上皮を含んでもよい。2.細胞集団本発明は、細胞集団が、収縮機能を有し、かつ1つ以上の平滑筋細胞マーカーに対して陽性である少なくとも1つの細胞を含む、層状に組織化された管腔臓器または組織構造の再構築、修復、増大、または置換で使用するための平滑筋細胞の集団を提供する。一般的に尿路上皮および平滑筋層から成る、膀胱または膀胱構成要素等の、層状に組織化された管腔臓器および組織構造の再構築、修復、増大、または置換で使用するための、移植可能な細胞播種したマトリクスを提供するために、本明細書で論じられる組織工学の原則が成功裏に適用されている。Beckeretal.Eur.Urol.51,1217-12282007、Frimbergeretal.Regen.Med.1,425-4352006、Rothetal.Curr.Urol.Rep.10,119-1252009、Woodetal.Curr.Opin.Urol.18,564-569。平滑筋細胞は、膀胱、尿道、尿管、および他の尿生殖器組織を含む、患者自身の組織に由来してもよい。しかしながら、例えば癌の膀胱組織の治療中等に、新しく健康な人工組織を発達させるための、基本単位としての原発臓器部位からの細胞培養系の発達および保守への依存に関連付けられる課題がある。明らかに、そのような癌性細胞は、移植可能な新膀胱足場またはマトリクスをポピュレートするためには不適当である。本発明は、再構築、修復、増大、または置換の対象である臓器または組織構造と異なる源に由来する、細胞集団を提供する。一実施形態において、源は、自己源である。別の実施形態において、源は、非自己源である。別の態様において、細胞集団は、平滑筋細胞集団と一致する、またはそれに典型的であるマーカーを発現する。他の一態様において、本発明は、再構築、修復、増大、または置換の対象である管腔臓器または組織構造と異なる源から単離される平滑筋細胞集団を提供する。好ましい実施形態において、管腔臓器または組織構造は、膀胱または膀胱の一部分である。一態様において、源は、腹膜組織である。一実施形態において、腹膜組織由来の平滑筋細胞集団は、患者試料またはドナー試料に由来する。患者試料またはドナー試料は、生検中に取り出された腹膜組織であってもよい。腹膜組織は、網組織であってもよいさらに他の一実施形態において、本発明の単離された細胞集団は、培養したときに、丘および谷形態、1つ以上の平滑筋細胞マーカーの発現、収縮機能、フィラメント形成、ならびにサイトカイン合成が挙げられるが、これらに限定されない、種々の平滑筋細胞特性を発達させることができる。一態様において、培養された細胞集団は、その丘および谷形態を特徴とする。丘および谷形態を有する細胞は、紡錘形状、通過時の平坦で線維芽細胞様、細長い並列な配列、回転状の成長形態、およびそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない、種々の特徴を有してもよい。一実施形態において、細胞集団は、適切な媒体中で培養したときに、培養された平滑筋細胞で典型的である、丘および谷形態を発達させる。別の態様において、培養された細胞集団は、1つ以上の平滑筋細胞マーカーの存在を特徴とする。一実施形態において、細胞集団は、適切な媒体中で培養したときに、デスミン、アルファ-平滑筋アクチン、ミオシン重鎖、カルポニン、ミオカルディン、ビメンチン、筋線維芽細胞、BAALC、SM22、およびそれらの任意の組み合わせのうちの1つ以上が挙げられるが、これらに限定されない、検出可能な平滑筋細胞マーカーを発達させる。一態様において、培養された細胞集団は、1つ以上の上皮または内皮マーカーの不在を特徴とする。一実施形態において、細胞集団は、適切な媒体中で培養したときに、ハリエニシダ凝集素1UEA-1、EpCam、CDH5、KDR、FLT1、PECAM、TEK、vWF、サイトケラチンAE1/AE3、およびそれらの任意の組み合わせのうちの1つ以上が挙げられるが、これらに限定されない、検出可能な上皮または内皮マーカーを発達させない。他の一態様において、培養された細胞集団は、収縮機能を有する1つ以上の細胞の存在を特徴とする。一実施形態において、細胞集団は、適切な媒体中で培養したときに、収縮機能を発達させる。別の実施形態において、収縮機能は、カルシウムに依存する。他の一実施形態において、カルシウム依存性の収縮機能は、カルシウムキレート化剤による収縮の阻害によって実証される。別の実施形態において、カルシウムキレート化剤は、EDTAである。当業者は、当技術分野で知られている他のキレート化剤が適切であり得ることを理解するであろう。さらに別の態様において、培養された細胞集団は、フィラメント形成を特徴とする。一実施形態において、細胞集団は、適切な媒体中で培養したときに、フィラメント形成を受ける。一態様において、細胞集団は、1つ以上のサイトカインを発現する、少なくとも1つの細胞を含む。一実施形態において、サイトカインは、MCP-1である。一態様において、本発明は、本明細書で説明される足場またはマトリクス上に沈着させて、必要としている被検体に移植したときに、本明細書で企図される再構築の被検体、修復、増大、または置換の対象である臓器または組織構造の再生効果を提供する少なくとも1つの再生細胞を含有する、再生細胞集団を提供する。再生細胞集団は、必要としている患者に移植したときに、層状に組織化された管腔臓器または組織構造の再生を刺激または開始する能力を有する。概して、臓器または組織構造の再生は、細胞成分、組織の機構および構造、機能、ならびに調節的発達の復元を特徴とする。加えて、再生細胞集団は、細胞播種した管腔臓器または組織構造構築体の移植部位で起こる傾向がある、不完全性または障害を最小化する。移植の部位の組織崩壊は、それ自体を、増加したコラーゲンの沈着および/または瘢痕組織の形成として表すことができ、それぞれ、再生細胞集団を使用することによって最小化することができる。加えて、特定の細胞的事象は、再生過程を示す。本明細書で説明される細胞集団および足場を使用して再生された膀胱または膀胱の一部の場合、再生臓器または組織構造は、管腔表面に向かって延在する多数の微小脈管の周辺で放射状に広がる線維脈管組織、ならびに粘膜表面に整合される十分に発達した血管を有するストローマ要素を伴う、平滑筋柔組織から成る上記JayoIIを参照のこと。再生膀胱または膀胱の一部はまた、紡錘/間葉細胞およびαSMA陽性筋肉前駆細胞の存在を特徴とする。一実施形態において、αSMA陽性紡錘細胞は、新ストローマ組織の中で、および複数の新脈管細動脈の周辺で観察される。一実施形態において、本発明は、本明細書で説明される足場またはマトリクス上に沈着させて、必要としている被検体に移植したときに、本明細書で企図される再構築、修復、増大、または置換の対象である臓器または組織構造の回復効果を提供する。他の実施態様において、回復効果は、瘢痕組織の形成および/またはコラーゲンの沈着を特徴とする。当業者は、当技術分野で知られている、修復の他の特性を理解するであろう。別の態様において、再生細胞集団は、復元された層状に組織化された管腔臓器または組織構造のサイズの適応調節を特徴とする、再生効果を提供する。一実施形態において、再生細胞集団再生効果は、再生細胞集団を播種した足場またはマトリクスを受容する被検体に特異的である、適応調節の確立である。一実施形態において、適応調節は、新膀胱が成長して、被検体の体のサイズに比例するサイズまで発達するように、本明細書で説明される構築体を使用した、被検体における膀胱の置換または増大である。一実施形態において、再生刺激が可能な細胞集団は、MCP-1産生細胞集団であり、ケモカイン産物MCP-1を発現する少なくとも1つの細胞を含有する。MCP-1再生刺激は、移植の部位への特定の細胞型の動員を特徴とする。一実施形態において、MCP-1は、新膀胱内で増殖させるために、筋肉前駆細胞を移植の部位に動員する。別の実施形態において、MCP-1は、単球を移植部位に動員し、その結果、種々のサイトカインおよび/またはケモカインを産生して、再生過程を促進する。他の一実施形態において、MCP-1は、網細胞を誘発して筋細胞に発達させる。一態様において、本発明は、組織再生の代理マーカーとしての、MCP-1等の特定のサイトカインの使用を提供する。そのようなマーカーは、機能が再構成されたかどうかに基づいた再生の評価と併せて使用することが可能である。また、再生の時間経過にわたって代理マーカーを監視することで、再生の予後指標としての役割を果たし得る。別の実施形態において、細胞集団は、精製された細胞集団である。本明細書で説明される精製された細胞集団は、形態、マーカーの発現、および機能のうちの1つに基づいた表現型を特徴とする。表現型は、丘および谷形態、1つ以上の平滑筋細胞マーカーの発現、サイトカインの発現、培養液の有限増殖寿命、収縮機能、およびフィラメント形成を誘発する能力のうちの1つ以上が挙げられるが、これらに限定されない。表現型は、本明細書で説明される、または当業者に知られている他の特徴を含んでもよい。別の実施形態において、精製された集団は、本明細書で説明される平滑筋細胞集団について実質的に均一である。実質的に均一である精製された集団は、一般的に、形態、マーカーの発現、および機能のうちの1つ以上によって判定したときに、少なくとも約90均一である。他の実施態様において、精製された集団は、少なくとも約95均一であるか、少なくとも約98均一であるか、または少なくとも約99.5均一である。全ての実施形態において、SMC集団は、自己源または非自己源に由来する。別の態様において、本発明は、本明細書で説明されるSMC集団の眼障害への適用を企図する。眼障害は、眼の筋肉の不適当な機能のため、被検体が不完全な眼を有するものである。平滑筋は、毛様体筋として眼の中に存在し、様々な距離で対象を概観するための眼の順応を制御し、かつシュレム管を通しての房水の流れを調節する。平滑筋はまた、眼の虹彩の中にも存在する。老眼および遠視等の眼障害を伴う個人は、これらのSMC集団から利益を得ることが可能である。一実施形態において、SMC細胞集団は、必要としている被検体またはドナーの腹膜組織から単離することが可能である。細胞集団は、被検体の眼内のある部位での移植に適切な足場上に播種することが可能である。本発明の細胞集団の利点は、被検体が不完全な眼を有する場合、または眼組織の限定された入手可能性のため、被検体の眼から供給するために、適切なSMCが利用できない場合があることである。SMC集団は、生検材料から単離され、培養され、適切な足場上に播種され、そして被検体に埋め込まれて、新しい眼組織を提供することが可能である。腹膜組織は、網組織であってもよい。別の実施形態において、本発明の平滑筋細胞集団は、移植等によって、足場の使用を伴わずに、眼障害を有する被検体に投与されてもよい。当業者は、移植の適切な方法を理解するであろう。一態様において、本発明は、腹膜組織に由来する単離された平滑筋細胞集団に関する。一実施形態において、腹膜由来の細胞集団は、平滑筋細胞マーカーに対して陽性である、収縮機能を有する1つ以上の細胞を含有する。全ての実施形態において、細胞集団は、ミオカルディン、アルファ-平滑筋アクチン、カルポニン、ミオシン重鎖、BAALC、デスミン、筋線維芽細胞抗原、ビメンチン、およびSM22から選択される、1つ以上の平滑筋細胞マーカーを特徴とし得る。いくつかの実施形態において、細胞集団は、ミオカルディンMYOCDを発現してもよい。全ての実施形態において、MYOCDという用語は、MYOCDポリペプチドをコードする核酸、およびMYOCDポリペプチドを含む。全ての実施形態において、細胞集団の収縮機能は、カルシウム依存性であってもよい。3.細胞集団を単離する方法自己細胞集団は、治療を必要としている被検体に直接由来する。非自己細胞集団は、ドナーに由来する。源組織は、概して、治療を必要としている臓器または組織構造と同じではない。細胞の集団は、患者自身の組織または例えば腹膜組織から等のドナー組織に由来してもよい。一実施形態において、源組織は、網組織である。細胞は、生検で単離されてもよい。加えて、細胞は、使用前に冷凍または拡張させてもよい。細胞播種した足場の構造を調製するために、平滑筋細胞を含有する試料を、適切な細胞懸濁液中に解離させる。細胞の単離および培養のための方法は、発行済み米国特許第5,567,612号で論じられており、参照により特に組み込まれる。単一細胞懸濁液は、インビトロ培養の期間後になされてもよいので、単一細胞段階への細胞の解離は、初期一次培養に必須ではない。組織解離は、細胞外マトリックス、およびともに細胞を保持する細胞間接合部の機械的および酵素の破壊によって行われてもよい。細胞は、所望であれば、インビトロで培養して、足場上に播種するために利用可能な細胞の数を増加させることができる。細胞は、遺伝物質を播種する前に形質移入されてもよい。平滑筋細胞は、ポリマー播種する前に特定の遺伝子を形質移入することが可能である。細胞ポリマー構築体は、宿主または組織工学によって作製された新臓器の長期生存のために必要とされる遺伝的情報を伝えることが可能である。細胞培養は、細胞分画ステップの有無に関わらず調製されてもよい。細胞分画は、当業者に知られている手法を使用して行われてもよい。細胞分画は、細胞サイズ、DNA含量、細胞表面抗原、および生存度に基づいて行われてもよい。例えば、平滑筋細胞は、腹膜組織から富化されてもよく、その一方で、内皮細胞は、平滑筋細胞回収のために低減させてもよい。細胞分画が使用され得るが、それは本発明の実践には不要である。腹膜組織は、網組織であってもよい。本明細書で説明される方法における別の随意的な手技は、極低温保存である。極低温保存は、例えば複数の侵襲的手術手技の必要性を低減するために有用であり得る。生検材料から、または被検体由来の試料から採取した細胞は、増幅させてもよく、増幅させた細胞の一部を使用してもよく、また別の部分を極低温的に保存してもよい。細胞を増幅して保存する能力は、必要とされる手術手技の数を最小化し得る。極低温保存の有用性の別の例は、組織バンクである。細胞は、例えば、ドナー組織バンクに貯蔵してもよい。新しい臓器または組織構造のために細胞が必要とされたときに、必要に応じて、極低温保存された細胞の供給を使用してもよい。既存の臓器または組織構造を損ない得る、疾患を有する、または治療を受けている患者は、1つ以上の生検材料を低温的に維持してもよい。後に、患者自身の組織または組織構造が機能しなくなった場合に、低温的に保存された細胞を解凍して、治療に使用してもよい。例えば、治療後に新しい臓器または組織構造の中で癌が再発した場合に、付加的な生検材料を必要とすることなく臓器または組織構造を再構築するために、極低温的に保存された細胞を使用してもよい。平滑筋細胞は、以下の一般プロトコルに基づいて腹膜組織から単離されてもよい。適切な重量例えば、グラムおよび/または面積例えば、cm2の生検標本を得ることができる。以下は、網組織から平滑筋細胞を単離するために適切なプロトコルの代表例である。適切なグラム重量例えば、7~25gの網組織を、生検によって得て、PBSで洗浄し例えば、3回、外科用メスおよびはさみで細かく切り刻み、50mLの円錐管に移して、コラゲナーゼ例えば、0.1~0.3WorthingtonおよびDMEM-HG中1のBSAの溶液中で、37°Cで60分間インキュベートする。管は、消化を促進するために、継続的に揺動させるか、または定期的に振盪させてもよい。消化された試料は、600gで10分間の遠心分離によってペレット化し、DMEM-HG10のFBS中に再懸濁することができる。ペレットは、次いで、継代0を播種するために使用されてもよい。図14は、腹膜組織から細胞を単離するための代表的なプロトコルを表す。当業者は、平滑筋細胞を単離するための付加的な方法を理解するであろう。一態様において、本発明は、平滑筋細胞集団を腹膜組織から単離する方法を提供する。別の態様において、本発明は、単離された平滑筋細胞集団を腹膜組織から単離する方法を提供する。腹膜組織は、網組織であってもよい。一実施形態において、本方法は、a網組織を得ることと、b網組織を消化することと、c消化された網組織を遠心分離してSMC含有画分をペレット化することと、dペレット化された画分を培養することと、e平滑筋細胞集団を画分から単離することと、を含む。一実施形態において、培養するステップは、ペレットを洗浄することと、ペレットを細胞培養媒体中に再懸濁することと、再懸濁されたペレットを平板培養することと、を含む。別の実施形態において、培養するステップは、平板またはコンテナ等の細胞培養支持体に接着する、細胞集団を提供することを含む。別の実施形態において、本方法は、培養された細胞集団を拡張することをさらに含む。他の実施態様において、本方法は、平滑筋細胞の特性について平滑筋細胞集団を分析することをさらに含む。一実施形態において、網組織は、自己源または非自己源に由来する。他の一態様において、本発明は、収縮機能を有し、かつ1つ以上の平滑筋細胞マーカーに対して陽性である少なくとも1つの細胞を含有する、平滑筋細胞の集団を単離して、培養する方法を提供する。一実施形態において、本方法は、層状に組織化された管腔臓器または組織構造の再構築、修復、増大、または置換を必要としている患者から試料を得るステップであって、該試料が、再構築、修復、増大、または置換を必要としている管腔臓器または組織構造から得られない、ステップを含む。別の実施形態において、平滑筋細胞は、患者試料に由来する。他の一実施形態において、管腔臓器または組織構造は、膀胱または膀胱の一部分である。一実施形態において、試料は、自己試料または非自己試料である。別の実施形態において、試料は、腹膜組織試料である。腹膜組織試料は、網組織試料であってもよい。別の実施形態において、得るステップは、その後に分離ステップが続く。網組織試料の場合、精製ステップは、コラゲナーゼによる試料の消化と、消化された試料を遠心分離することと、遠心分離された試料を混合してSMC含有画分を提供することと、混合された試料を遠心分離して以降に培養するために再懸濁することができる画分を得ることと、を含む。一実施形態において、培養する方法は、当業者に知られている標準状態によって、最小限の必須媒体例えば、DMEMまたはα-MEMおよび胎児のウシ血清例えば、10のFBSを含有する、細胞培養媒体の使用を含む。4.足場Atalaの米国特許第6,576,019号参照によりその全体が本明細書に組み込まれるで説明されるように、足場またはポリマーマトリクスは、種々の異なる材料から成ってもよい。概して、生体適合材料および特に生分解性材料は、本明細書で説明される足場の構造に好ましい材料である。足場は、少なくとも2つの別個の表面を伴う、移植可能であるか、生体適合性であるか、合成であるか、または天然ポリマーマトリクスである。足場は、治療を必要としている管腔臓器または組織構造の少なくとも一部に一致するように成形される。生体適合材料は、生分解性である。生体適合性とは、生物学的機能に対する中毒作用または有害作用を有しない材料を指す。生分解性とは、患者の体内で吸収または分解することができる材料を指す。生分解性材料の例としては、例えば、吸収性縫合糸が挙げられる。足場を形成するための代表的な材料としては、例えばコラーゲン、ポリ乳酸等のポリアルファヒドロキシエステル、ポリグリコール酸、ポリオルトエステル、およびポリ無水物、ならびに加水分解によって制御された速度で分解して再吸収されるそれらの共重合体等の、天然または合成ポリマーが挙げられる。これらの材料は、分解性、扱いやすさ、サイズ、および構成の最大制御を提供する。好ましい生分解性ポリマー材料としては、吸収性合成縫合糸材料として開発された、ポリグリコール酸およびポリグラクチンが挙げられる。ポリグリコール酸およびポリグラクチン繊維は、製造業者によって供給されるように使用されてもよい。他の足場材料としては、セルロースエーテル、セルロース、セルロースエステル、フッ素化ポリエチレン、ポリ-4-メチルペンテン、ポリアクリロニトリル、ポリアミド、ポリアミドイミド、ポリアクリレート、ポリベンゾオキサゾール、ポリカーボネート、ポリシアノアリールエーテル、ポリエステル、ポリエステルカーボネート、ポリエーテル、ポリエーテルエーテルケトン、ポリエーテルイミド、ポリエーテルケトン、ポリエーテルサルホン、ポリエチレン、ポリフルオロオレフィン、ポリイミド、ポリオレフィン、ポリオキサジアゾール、ポリフェニレンオキシド、ポリフェニレンスルフィド、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリスルフィド、ポリスルホン、ポリテトラフルオロエチレン、ポリチオエーテル、ポリトリアゾール、ポリウレタン、ポリビニル、ポリフッ化ビニリデン、再生されたセルロース、シリコーン、尿素ホルムアルデヒド、またはこれらの材料の共重合体もしくは物理的混和物が挙げられる。材料は、適切な抗微生物剤を含浸させてもよく、また、可視性を向上させて手術手技を支援するために、着色添加剤によって着色してもよい。生分解性である他の足場材料としては、MONOCRYL商標グリコリドおよびイプシロン-カプロラクトンの共重合体、VICRYL商標もしくはポリグラクチン910ポリグラクチン370およびステアリン酸カルシウムで被覆される、ラクチドおよびグリコリドの共重合体、およびPANACRYL商標カプロラクトンおよびグリコリドのポリマーで被覆される、ラクチドおよびグリコリドの共重合体等の、EthiconCo.EthiconCo.,Somerville,N.J.によって製造されている、合成縫合糸材料が挙げられるCraigP.H.,WilliamsJ.A.,DavisK.W.,etal.:ABiologicalComparisonofPolyglactin910andPolyglycolicAcidSyntheticAbsorbableSutures.Surg.141;1010,1975およびポリグリコール酸。これらの材料は、製造業者によって供給されるように使用することができる。さらに別の実施形態において、マトリクスまたは足場は、天然の脱細胞化された臓器の各部を使用して作成することができる。生体構造または臓器の各部は、臓器から細胞および組織含量全体を取り除くことによって、脱細胞化することができる。脱細胞化過程は、一連の順次抽出を含む。この抽出過程の1つの重要な事柄は、生体構造の錯体の基礎構造を阻害または破壊し得る、過酷な抽出が回避されることである。第1のステップは、細胞細片の除去および細胞膜の可溶化を伴う。この後には、核細胞質成分および核成分の可溶化が続く。好ましくは、生体構造例えば、臓器の一部は、穏やかな機械的破壊方法を使用して、臓器の一部を囲繞する細胞膜および細胞細片を取り除くことによって脱細胞化される。穏やかな機械的破壊方法は、細胞膜を破壊するのに十分でなければならない。しかしながら、脱細胞化の過程は、生体構造の錯体の基礎構造の損傷または障害を回避するべきである。穏やかな機械的破壊方法は、臓器部の表面をこすり取るか、臓器部をかき混ぜるか、または適切な容積の流体例えば、蒸留水中で臓器を撹拌することを含む。好ましい一実施形態では、穏やかな機械的破壊方法は、細胞膜が破壊されて細胞細片が臓器から取り除かれるまで、適切な容積の蒸留水中で攪拌することを含む。細胞膜を取り除いた後に、生体構造の核および細胞質成分を取り除く。これは、基礎構造を破壊せずに、細胞および核成分を可溶化することによって行うことができる。核成分を可溶化するために、非イオン性界面活性剤または界面活性剤を使用してもよい。非イオン洗浄剤または界面活性剤の例としては、RohmandHaasPhiladelphia,Pa.から入手可能なTritonシリーズTritonX-100、TritonN-101、TritonX-114、TritonX-405、TritonX-705、およびTritonDF-16を含む、多数の販売業者から商業的に入手可能である、TweenシリーズモノラウレートTween20、モノパルミタートTween40、モノオレエートTween80、およびポリオキシエチレン-23ラウリルエーテルBrij.35、ポリオキシエチレンエーテルW-1Polyox等、コール酸ナトリウム、デオキシコール酸、CHAPS、サポニン、n-デシル-D-グルコピラノシド、n-ヘプチル-D-グルコピラノシド、n-オクチル-D-グルコピラノシド、およびNonidetP-40が挙げられるが、これらに限定されない。当業者は、前述の分類および販売業者に属する合物の説明が、商業的に入手可能であり得、ChemicalClassification,EmulsifiersandDetergents、McCutcheon’s,EmulsifiersandDetergents,1986,NorthAmericanandInternationalEditions、McCutcheonDivision,MCPublishingCo.,GlenRock,N.J.,U.S.A.andJudithNeugebauer、AGuidetothePropertiesandUsesofDetergentsinBiologyandBiochemistry,Calbiochem.R.,HoechstCelaneseCorp.,1987に見出され得ることを理解するであろう。好ましい一実施形態において、非イオン性界面活性剤は、Tritonシリーズ、好ましくは、TritonX-100である。非イオン性界面活性剤の濃度は、脱細胞化されている生体構造の種類に応じて変更され得る。例えば、繊細な組織例えば、血管に対しては、洗浄剤の濃度を下げるべきである。非イオン性界面活性剤の好ましい濃度範囲は、約0.001~約2.0w/vとすることができる。より好ましくは、約0.05~約1.0w/vである。さらに好ましくは、約0.1w/v~約0.8w/vである。これらの好ましい濃度は、約0.001~約0.2w/v、特に好ましくは、約0.05~約0.1w/vの範囲である。高密度な細胞質フィラメントネットワーク、細胞間錯体、および頂端微小細胞構造を含む、細胞骨格成分は、水酸化アンモニウム等のアルカリ性溶液を使用して可溶化してもよい。細胞骨格成分を可溶化するために、アンモニウム塩またはそれらの誘導体から成る他のアルカリ性溶液が使用されてもよい。他の適切なアンモニウム溶液の例としては、硫酸アンモニウム、アンモニウム酢酸塩、および水酸化アンモニウムが挙げられる。好ましい実施形態では、水酸化アンモニウムが使用される。アルカリ性溶液例えば、水酸化アンモニウムの濃度は、脱細胞化されている生体構造の種類に応じて変更され得る。例えば、繊細な組織例えば、血管に対しては、洗浄剤の濃度を下げるべきである。好ましい濃度範囲は、約0.001~約2.0w/vとすることができる。より好ましくは、約0.005~約0.1w/vである。さらにより好ましくは、約0.01w/v~約0.08w/vである。脱細胞化し、凍結乾燥した構造は、使用に必要とされるまで適切な温度で貯蔵してもよい。使用前に、脱細胞化した構造は、適切な等張性緩衝剤または細胞培養媒体中で平衡させることができる。適切な緩衝剤は、リン酸緩衝生理食塩水PBS、生理食塩水、MOPS、HEPES、Hankの平衡塩溶液等が挙げられるが、これらに限定されない。適切な細胞培養媒体は、RPMI1640、Fisher媒体、Iscove媒体、McCoy媒体、Dulbecco媒体等が挙げられるが、これらに限定されない。使用してもよいさらに他の生体適合性材料としては、ステンレス鋼、チタン、シリコーン、金、およびサイラスティックが挙げられる。ポリマーマトリクスまたは足場は、強化することができる。例えば、強化材料を、合成マトリクスまたは足場の形成中に追加するか、もしくは移植前に天然または合成マトリクスに取り付けてもよい。強化を形成するための代表的な材料としては、例えばコラーゲン、ポリ乳酸等のポリアルファヒドロキシエステル、ポリグリコール酸、ポリオルトエステル、およびポリ無水物、ならびに加水分解によって制御された速度で分解して再吸収されるそれらの共重合体等の、天然または合成ポリマーが挙げられる。ここれらの材料は、分解性、扱いやすさ、サイズ、および構成の最大制御を提供する。生分解性ポリマーは、インストロン試験機を使用した引張強度等の、機械的性質に関して、ゲル透過クロマトグラフィGPCによるポリマー分子量、示差走査熱量測定DSCによるガラス転位温度、および赤外線IR分光法による結合構造について、ならびにAmesアッセイおよびインビトロの催奇形性アッセイを伴う初期スクリーニング試験、および免疫原性、炎症、放出および分解研究のための動物における移植研究に関して、特徴付けることができる。インビトロの細胞付着性および生存度は、走査電子顕微鏡法、組織学、および放射性同位元素による定量的評価を使用して評価することができる。生分解性材料はまた、患者に移植したときに材料が分解するのに必要な時間量に関して特徴付けられ得る。例えば厚さおよびメッシュサイズ等の構造を変動させることによって、生分解性材料は、約2年または約2ヵ月の間に、好ましくは約18ヵ月~約4ヵ月の間、より好ましくは約15ヵ月~約8ヵ月の間、最も好ましくは約12ヵ月~約10ヵ月の間に、実質的に生分解し得る。必要であれば、生分解性材料は、約3年もしくは約4年以内、または約5年以上実質的に分解しないように構築されてもよい。ポリマーマトリクスまたは足場は、前述のように、制御された孔構造を伴って製作されてもよい。孔のサイズは、細胞分布を決定するために使用されてもよい。例えば、ポリマーマトリクスまたは足場上の孔は、細胞が一方の面から反対の面に移動することを可能にする大きさであってもよい。代替として、孔は、ポリマーマトリクスまたは足場の両側の間で流体連通があるが、細胞は通過できない程度に小さくてもよい。この目的を達成するための適切な細孔寸法は、直径約0.04ミクロン~約10ミクロンの間、好ましくは直径約0.4ミクロン~約4ミクロンの間であってもよい。いくつかの実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場の表面は、細胞集団の孔への付着および移動を可能にするのに十分な大きさの孔を備えてもよい。孔サイズは、細胞がポリマーマトリクスまたは足場の一方から反対側に移動することを防止するために、ポリマーマトリクスまたは足場の内部で低減されてもよい。減少した孔サイズを伴うポリマーマトリクスまたは足場の一実施形態は、2つの大きい孔材料の間に挟まれる、小さい孔材料の積層構造である。ポリカーボネート膜が特に適切であるが、その理由は、この膜を、例えば、約0.01ミクロン、約0.05ミクロン、約0.1ミクロン、約0.2ミクロン、約0.45ミクロン、約0.6ミクロン、約1.0ミクロン、約2.0ミクロン、および約4.0ミクロン等の、非常に制御された孔サイズで製作することができるからである。サブミクロンレベルで、ポリマーマトリクスまたは足場は、細菌、ウイルス、および他の微生物に対して不透過性であってもよい。とりわけ、以下の特性または基準が、各離散的マトリクスまたはその一部の設計において考慮される。i形状、ii強度、iii硬さおよび剛性、ならびにiv縫合性マトリクスまたはその一部が容易に縫合されるか、別様には隣接する組織に取り付けられる程度。本明細書で使用される所与のマトリクスまたは足場の硬さは、弾性係数、すなわち、足場を変形させるように作用する単位面積当たりの応力と、それに起因する変形量との間の比率を表す係数によって定義される。例えば、HandbookofBiomaterialsevaluation,Scientific,Technical,andClinicalTestingofImplantMaterials,2ndedition,editedbyAndreasF.vonRecum,1999、Ratner,etal.,BiomaterialsScience:AnIntroductiontoMaterialsinMedicine,AcademicPress1996を参照されたい。足場の剛性は、所与の足場が呈する柔軟度またはその欠如を指す。これらの基準のそれぞれは、マトリクスまたはその一部が最良に配置されて、意図される医学的適用および生理学的機能に対処することを可能にするように、とりわけ、材料および製造工程の選択を通して変更することができる、変数である。例えば、膀胱の置換、再構築、および/または増大のためのマトリクスまたは足場を備える材料は、破れることなく縫合糸を支持するための十分な強さがある一方で、変動する尿量を収容するように十分に順応性がなければならない。最適には、マトリクスまたは足場は、その生分解の後に、結果として生じる再構築された膀胱が、空のときに天然の膀胱に類似した様式で折り畳み可能であり、かつ尿路カテーテルが、漏出点を残さずに、新しい臓器または組織構造から取り除かれている間、尿が遮断されないように成形されるべきである。生体工学によって作られた膀胱構築体は、1つの部品として製作することができ、もしくは各部分を個々に製作することができ、または断片を特定の部分として製作することができる。各特定のマトリクスまたは足場部分は、特定の機能を有するように製作されてもよい。他の特定の部分は、製造を容易にするように製作されてもよい。特定の部分は、特定の材料から構築されてもよく、特定の性質を提供するように設計されてもよい。特定の部分の性質としては、0.5~1.5MPa2の天然組織例えば、尿管に類似した引張強度、および30~100の極限伸びが挙げられ、または引張強度は、0.5~28MPa2であってもよく、極限伸びは、10~200の範囲であってもよく、また、圧縮強度は、12未満であってもよい。円形、波形、平坦形、星形であってもよい、繊維単独で、または他の繊維が巻き付いて形成される、メッシュ構造が好ましい。分岐繊維の使用は、容積の増加に比例する表面積の増加の問題を解決するために生理的に使用される、同じ原理に基づいている。全ての多細胞生物は、この繰り返し分岐構造を利用する。分岐系は、臓器間の通信ネットワーク、ならびに個々の臓器の機能ユニットを表す。この構成に細胞を播種して、移植することで、それぞれが宿主の環境に露出する多数の細胞の移植を可能にし、栄養素および老廃物の自由な交換を提供する一方で、新脈管化が達成される。ポリマーマトリクスまたは足場は、所望される最終的な形態、構造、および機能に応じて、柔軟または剛体に作製されてもよい。好ましい一実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、15μmの平均繊維直径を伴うポリグリコール酸で形成されて、4-0のポリグラクチン910縫合糸を使用して膀胱形状の金型に構成される。結果として生じる構造は、十分な機械的特性を達成し、かつその形状を設定するために、例えばポリ-DL-ラクチド-co-グリコリド50:50、1ミリリットルあたり80ミリグラムの塩化メチレン等の、液化共重合体で被覆される。さらなる実施形態では、本発明の足場は、生体適合性および生分解性形状設定材料で被覆される。一実施形態において、形状設定材料は、ポリ-ラクチド-co-グリコリド共重合体を含有する。別の実施形態において、形状設定材料は、液化される。他の一態様において、本発明の足場は、例えば移植後の新しい組織の再生を促進するために、移植前ポリマーマトリクスまたは足場に細胞を播種する前、またはその後に、添加剤または薬物で処理してもよい。したがって、移植片の治癒および新しい組織の再生を促進するために、例えば、成長因子、サイトカイン、細胞外マトリックスまたは足場成分、および他の生物活性材料を、ポリマーマトリクスまたは足場に加えることができる。そのような添加剤は、概して、適切な新しい組織が、移植された臓器または組織の中に形成されることを確実にするために、再構築、置換、または増大されている組織または臓器に従って選択される骨の治癒の促進で使用するためのそのような添加剤の例については、Kirker-Head,C.A.Vet.Surg.245:408-191995を参照されたい。例えば、脈管組織を増大させるために、ポリマーマトリクス随意に、内皮細胞が播種されるを使用するときには、新しい脈管組織の再生を促進するために、脈管内皮成長因子VEGF例えば、米国特許第5,654,273号を参照のことを用いることができる。成長因子および他の添加剤例えば、上皮細胞増殖因子EGF、ヘパリン-結合表皮状成長因子HBGF、線維芽細胞成長因子FGF、サイトカイン、遺伝子、タンパク質等を、加えられた細胞が用いられた場合に、ポリマーマトリクス上に播種された細胞によって産生され得る、該当する場合そのような成長因子の任意の量を超える量で加えることができる。そのような添加物は、好ましくは、例えば、宿主細胞の移植片の中への浸潤を引き起こす、または加速することによって修復、置換、または増大される組織または器官に適切な種類の新しい組織の再生を促進するのに十分な量で提供される。他の有用な添加剤としては、抗生物質等の抗菌剤が挙げられる。1つの好ましい支持マトリクスまたは足場は、細胞支持体を移植したときに、短い距離にわたる栄養素の拡散によって細胞生存を可能にすることができる、交差フィラメントから成る。細胞支持マトリクスまたは足場は、移植に伴う細胞塊の拡大と協調して脈管化した状態になる。移植前の、インビトロでの3次元構造構築体の組み立ては、インビボでの移植後の細胞の最終的な最終分化を促進し、かつマトリクスに対する炎症応答の危険性を最小化し、したがって、移植片の拘縮および収縮を回避する。ポリマーマトリクスまたは足場は、使用前に、任意の既知の方法を使用して殺菌してもよい。使用される方法は、ポリマーマトリクスで使用される材料に依存する。殺菌方法の例としては、蒸気、乾式加熱、放射線、ガス酸化エチレン等、ガス、および沸騰が挙げられる。足場を構成する合成材料は、例えば、溶液流延、圧縮成形、フィラメント引、メッシング、溶脱、製織、および被覆を使用して成形されてもよい。溶液流延では、塩化メチレン等の適切な溶媒中の1つ以上のポリマーの溶液が、分岐パターンの凸凹構造として鋳造される。溶媒の蒸発後に、薄い膜が得られる。圧縮成形では、1平方インチ約6.45cm2あたり最高30,000ポンド約13.6トンの圧力でポリマーを適切なパターンに圧縮する。フィラメント引は、融解したポリマーからの引き抜きを伴い、メッシングは、繊維をフェルト状の材料に圧縮することによってメッシュを形成することを伴う。溶脱では、2つの材料を含有する溶液を、構築体の最終的な形態に近い形状に広げる。次に、溶媒は、成分のうちのいずれか1つを溶解するために使用されて、孔の形成をもたらす。Mikosの米国特許第5,514,378号を参照のこと。参照により本明細書に組み込まれる。核形成では、足場の形状の薄い膜が、放射線損傷を受けた材料のトラックを作成する、放射性核分裂生成物に曝露される。次に、ポリカーボネートシートが、酸または塩基でエッチングされ、放射線損傷を受けた材料のトラックを孔にする。最後に、多数の材料を通して個々の孔を成形および焼いて、均一な孔サイズを伴う構造を形成するために、レーザを使用してもよい。被覆は、その機械的性質を変えるために、例えば液化共重合体ポリ-DL-ラクチド-co-グリコリド50:50、80mg/mlの塩化メチレン等の材料でポリマー構造を被覆すること、またはその材料をポリマー構造に浸透させることを指す。被覆は、1つの層で行われてもよく、または所望の機械的性質が達成されるまで複数の層で行われてもよい。これらの成形手法は、組み合わせて用いられてもよく、例えば、ポリマーマトリクスまたは足場を織り、圧縮整形し、そしてともに接着してもよい。さらに、異なる過程によって成形される異なるポリマー材料をともに接合して、複合形状を形成してもよい。複合形状は、層構造であってもよい。例えば、ポリマーマトリクスまたは足場を、1つ以上のポリマーマトリクスに取り付けて、多層ポリマーマトリクスまたは足場構造を形成してもよい。取り付けは、液体ポリマーによる接着によって、または縫合によって行われてもよい。加えて、ポリマーマトリクスまたは足場は、固体ブロックとして形成して、レーザまたは他の標準的な機械加工技術によって、その所望の最終形態に成形されてもよい。レーザ成形は、レーザを使用して材料を取り除く過程を指す。好ましい実施形態において、足場は、不織ポリグリコール酸PGAフェルトおよびポリ乳酸-co-グリコール酸ポリマーPLGAから形成される。別の好ましい実施形態において、足場は、尿路変向足場である。Bertram他の米国特許出願公開第20070276507号参照によりその全体が本明細書に組み込まれるで説明されるように、ポリマーマトリクスまたは足場は、任意の数の系、幾何学形状、または空間制限を満足するように、任意の数の所望の構成に成形されてもよい。マトリクスは、層状に組織化された管腔臓器または組織構造の寸法および形状に一致するように成形される、3次元マトリクスであってもよい。例えば、膀胱再構築に対するポリマーマトリクスの使用では、膀胱の全体または一部の寸法および形状に一致するように成形された、3次元マトリクスが使用されてもよい。必然的に、ポリマーマトリクスは、異なるようにサイズ決定された患者の膀胱に一致するように、異なるサイズおよび形状に成形されてもよい。随意に、ポリマーマトリクスは、その生分解後に、天然の膀胱に類似した様式で空になったときに、結果として生じる再構築された膀胱が折り畳み可能であり得るように成形されるべきである。ポリマーマトリクスはまた、患者の特別な必要性に適応するために、他の様式で成形されてもよい。例えば、以前に負傷した、または障害を持った患者は、異なる腹腔を有し得、また、合致するように適合された膀胱置換足場、膀胱増大足場、膀胱導管足場、および排尿筋等価足場が必要になり得る。一態様において、本発明は、本明細書で説明される平滑筋細胞集団とともに使用するのに適切な、付加的な足場を企図する。例えば、肺への移植に適切な足場が提供されてもよい。A.増大または置換足場他の一態様において、ポリマーマトリクスまたは足場は、膀胱の一部に一致するように成形される。一実施形態において、成形されたマトリクスは、受容体の既存の膀胱の少なくとも約50、少なくとも約60、少なくとも約70、少なくとも約80、少なくとも約90、または少なくとも約95を置換するように一致される。他の一態様において、ポリマーマトリクスまたは足場は、膀胱の100、すなわち全てに一致するように成形される。一実施形態において、ポリマーマトリクスは、少なくとも2つの別個の表面を有する、第1の移植可能で、生体適合性である、合成もしくは天然のポリマーマトリクスまたは足場と、少なくとも2つの別個の表面を有する、第2の移植可能で、生体適合性であり、合成もしくは天然のポリマーマトリクスまたは足場とを備え、これらは、互いに噛合するように適合され、かつ噛合したときに、治療を必要としている管腔臓器または組織構造の少なくとも一部に一致するように成形される。第1および第2のポリマーマトリクスは、噛合するように適合された、2つ以上の異なる部分に再分割される1つの一体型ユニットから、または2つ以上の異なる部分から形成されてもよい。いくつかの実施形態において、第1および第2のポリマーマトリクスは、噛合すると、管腔臓器または組織構造の再構築、修復、増大、または置換に使用されてもよい。いくつかの実施形態において、第1および第2のポリマーマトリクスは、対称である一方で、他の実施形態において、第1および第2のポリマーマトリクスは、非対称である。一実施形態において、第1のポリマーマトリクスまたは足場は、閉じたドーム形の端部および開いた赤道境界を有する、半球状または準半球状の形状を有し、第2のポリマーマトリクスまたは足場は、第1のポリマーマトリクスの赤道境界と噛合するように適合されたカラーである。別の実施形態において、第1および第2のポリマーマトリクスは、それぞれ、閉じたドーム形の端部および開いた赤道境界を有する、半球形状または準半球形状である。さらに別の実施形態において、第1および第2のポリマーマトリクスは、それぞれ、円形または半円形基部、および各基部から半径方向に延在する少なくとも2つの花弁から成る。この実施形態において、第1および第2のポリマーマトリクスの基部および花弁形状の部分は、中空の球状または準球状のマトリクスまたは足場を作成するように噛合し、よって、フランジ付きの縦楕円開口部が、噛合したポリマーマトリクスの一方に作成され、かつ円形の開口部が、縦開口部の反対側に作成される。別の実施形態において、第1および第2のポリマーマトリクスは、噛合するように適合された頂部、前部、および側面部から成る3つの部分から作製される。この実施形態において、3つの異なる部分は、少なくとも3つの、好ましくは4つの垂直の縫い目を使用して噛合され、それによって、冠状の新膀胱構築体を形成する。この冠状の構築体は、好ましくは、管腔臓器の再構築、修復、増大、または置換のためのデバイスとして、単独で使用される。一実施形態において、構築体は、膀胱増大足場である。膀胱増大足場の1つの実施例は、図1A~Dで表される。別の実施形態において、構築体は、膀胱置換足場である。膀胱置換足場の1つの実施例は、図2Dで表される。加えて、第1のポリマーマトリクス、第2のポリマーマトリクス、またはどちらも、天然の脈管または管への構築体の接続が必要である場合に、管状脈管またはインサートを受容するように適合される、少なくとも1つのレセプタクルまたはポートを含んでもよい。この脈管またはインサートは、それら自体が、例えば円筒状または管状のポリマーマトリクスであり、それぞれ、円筒ポリマーの第1の端部に位置する少なくとも1つのフランジを有する。この脈管またはインサートは、好ましくは、前述した第1または第2のポリマーマトリクスと同じ生体適合材料から成る。いくつかの実施形態において、この脈管またはインサートはまた、円筒もしくは管状の脈管またはインサートのポリマーマトリクス周辺に合致するように適合される、ワッシャを含む。例えば、ワッシャは、ヒドロゲルである。円筒もしくは管状の脈管またはインサートは、随意にワッシャを含んでもよい。ワッシャは、ヒドロゲルであってもよい。加えて、円筒または管状のインサートは、自己安定式でもよい。別の実施形態において、天然の脈管または管への細胞を播種した足場またはマトリクスの接続が必要である場合に、管状の脈管またはインサートを受容するように適合される、レセプタクルまたはポートはまた、下記で論じられるマトリクスにも適用する。一態様において、足場は、少なくとも2つのマトリクスを含む、臓器または組織構造置換足場である。一実施形態において、足場は、第1の面を有する第1のマトリクスと、第1の面を有する第2のマトリクスとを備える。第1のマトリクスおよび第2のマトリクスは、噛合するように構成または適合されてもよい。別の実施形態において、第1のマトリクスおよび第2のマトリクスは、噛合したときに、少なくとも管腔臓器の一部に一致するように成形されてもよい。第1および第2のマトリクスは、生体適合材料から成ってもよい。この生体適合材料は、生分解性材料から成ってもよい。一実施形態において、第1のマトリクスは、閉口端および開いた赤道境界を伴う半球形状を有してもよく、第2のマトリクスは、第1のマトリクスの赤道境界と噛合するように構成または適合される、カラーを有してもよい。閉口端は、ドーム形であってもよい。別の実施形態において、第1のマトリクスおよび第2のマトリクスは、それぞれ、閉口端および開いた赤道境界を有する半球形状を有してもよい。閉口端は、ドーム形であってもよい。さらに別の実施形態において、第1のマトリクスは、第1のマトリクスの少なくとも1つの境界に沿った、フランジ付き領域をさらに備える。第2のマトリクスは、第2のマトリクスの少なくとも1つの境界に沿った、フランジ付き領域をさらに備えてもよく、第2のマトリクスのフランジ付き領域は、第1のマトリクスのフランジ付き領域と噛合するように適合される。一実施形態において、足場は、第1の生体適合性マトリクスと、第2の生体適合性マトリクスとを備え、第1および第2のマトリクスは、それぞれ、基部を備えてもよく、また噛合するように構成または適合されてもよい。一実施形態において、第1および第2のマトリクスは、噛合したときに、管腔臓器の少なくとも一部に一致するように成形されてもよい。別の実施形態において、第1および第2のマトリクスは、各基部から半径方向に延在する少なくとも2つの花弁をさらに備えてもよい。他の一実施形態において、第1および第2のマトリクスのそれぞれは、本来、基部および少なくとも4つの花弁を備えるテンプレートに由来してもよい。1つの構成において、一対の対向する花弁は、他の花弁よりも長さが短くてもよい。別の実施形態において、第1および第2のマトリクスは、噛合するように適合される2つの異なるユニットであってもよい。一実施形態において、第1および第2のマトリクスの基部は、噛合するように適合される。いくつかの実施形態において、第1および第2のマトリクスは、第1および第2のマトリクスの花弁形状部分を介して噛合される。他の実施態様において、第1および第2のマトリクスは、第1のマトリクスと第2のマトリクスとの間の第1の噛合点に縦開口部を伴い、縦開口部の反対側にある、第1のマトリクスと第2のマトリクスとの間の第1の噛合点に円形開口部を伴う、中空の半球または準半球形状を形成するように構成または適合されてもよい。足場は、第1または第2のマトリクスの基部の中に組み込まれる、少なくとも1つのフラップをさらに含んでもよい。別の実施形態において、縦開口部は、リップを有し、少なくとも1つのフラップが縦開口部のリップに配置される。別の態様において、1つもしくは複数のマトリクスは、天然の脈管に接続可能であってもよい。一実施形態において、第1のマトリクス、第2のマトリクス、またはどちらも、それぞれ、天然の脈管を受容するように構成または適合される。別の実施形態において、第1のマトリクス、第2のマトリクス、またはどちらも、少なくとも1つのレセプタクルをさらに備える。少なくとも1つのレセプタクルは、管状インサートを受容するように構成または適合されてもよい。管状インサートは、レセプタクル内に配置されてもよい。いくつかの実施形態において、管状インサートは、端部を有する。インサートは、この端部に位置する、少なくとも1つのフランジを有してもよい。別の実施形態において、管状インサートは、天然の脈管に接続するように構成または適合されてもよい。さらなる実施形態において、足場は、表面と、管状インサートの周囲に配置されるワッシャとを有する。ワッシャは、フランジと構築体の表面との間に防水シールを形成するように構成または適合されてもよい。いくつかの実施形態において、ワッシャは、ヒドロゲルを含む。図1および図2は、少なくとも2つのマトリクスを含む、足場構成の代表的な描写を提供する。一態様において、足場は、1つ以上のマトリクスを含む、臓器または組織構造増大足場である。一実施形態において、足場は、基部および複数の切り欠きを有する第1のマトリクスを含み、第1のマトリクスは、組み立てたときに管腔臓器の少なくとも一部に一致する半形状を形成するように適合される。別の実施形態において、足場は、第2および第3のマトリクスを含み、第1、第2、および第3のマトリクスは、噛合するように構成または適合されてもよく、かつ噛合したときに、管腔臓器の少なくとも一部に一致するように成形される。第1、第2、および第3のポリマーマトリクスは、3つの再分割された部分を備えるテンプレートに由来してもよい。別の実施形態において、第1、第2、および第3のマトリクスは、3つの異なるテンプレートに由来し、かつ噛合するように構成または適合されてもよい。他の一実施形態において、第1、第2、および/または第3のマトリクスは、生体適合材料を含む。生体適合材料は、生分解性材料を含んでもよい。他の一態様において、足場は、異なる形状または構成を有する部分で構成される。一実施形態において、足場は、ともに噛合したときに第1の第1の冠形状を形成する、それぞれ、頂部部品、前部部品、および側部部品に対応する、第1、第2、および第3のポリマーマトリクスを含んでもよい。別の実施形態において、前部部品および側部部品は、それぞれ、第1の縁と、第2の縁とを備えてもよい。前部部品の第1の縁は、側部部品の第1の縁に接合されてもよい。前部部品の第2の縁は、側部部品の第2の縁に接合されてもよい。他の一実施形態において、第1の縁は縫い目によって接合されてもよく、および/または第2の縁は、縫い目によって接合されてもよい。他の実施態様において、前部部品は、第1の縁と、第2の縁とを有する、切り欠きを含んでもよい。第1および第2の縁は、例えば縫い目によって接合されてもよい。別の実施形態において、頂部部品は、第1の縁を有してもよく、側部部品は、第3の縁を有し、前部部品は、第3の縁を有する。頂部部品の第1の第1の縁は、側部部品の第3の縁に接合されてもよく、および/または頂部部品の第1の縁は、前部部品の第3の縁に接合されてもよい。第1および第3の縁は、縫い目によって接合されてもよい。別の実施形態において、各切り欠きは、第1の縁および第2の縁を有してもよい。これらの縁は、例えば縫い目によって接合されてもよい。他の実施態様において、側部部品は、少なくとも1つのフラップを含んでもよい。全ての実施形態において、足場の個々のマトリクスまたは全てのマトリクスは、生分解性材料を含んでもよい。材料は、ポリグリコール酸、ポリ乳酸、ならびにグリコール酸および乳酸の共重合体から成る群から選択されてもよい。他の実施態様において、1つもしくは複数のマトリクスは、ポリグリコール酸と、グリコール酸および乳酸の共重合体とを含む。一実施形態において、管腔臓器は、管状または中空の臓器である。臓器は、尿生殖器であってもよい。別の実施形態において、尿生殖器は、膀胱、尿管、および尿道から成る群から選択される。他の一実施形態において、尿生殖器は、膀胱または膀胱切片である。いくつかの実施形態において、使用される足場は、天然膀胱組織の順応性を呈する、再生された膀胱組織をインビボで形成するように構成または適合される。一実施形態において、沈着された細胞を伴う噛合したマトリクスは、移植可能な構築体を形成する。別の実施形態において、少なくとも第1の細胞集団は、本明細書で説明される筋肉細胞集団を備える。筋肉集団は、平滑筋細胞集団であってもよい。別の実施形態において、足場は、第1のマトリクスの第1の表面、第2のマトリクスの第1の表面、または双方の上もしくは中に沈着される、少なくとも第1の細胞集団を有してもよい。他の一実施形態において、足場は、第1のマトリクスの第2の表面、第2のマトリクスの第2の表面、または双方の上もしくは中に沈着される、第2の細胞集団をさらに含んでもよい。細胞の第2の集団は、尿路上皮細胞を含む。本明細書で説明される増大および置換足場、ならびにその作製および使用方法は、Bertram他の米国特許出願公開第20070276507号参照によりその全体が本明細書に組み込まれるでさらに説明される。B.尿路導管足場本発明は、細胞を播種することができ、かつ被検体の尿路変向の構築における胃腸組織の置換として使用することができる、新尿路変向または導管足場を提供する。例えば、本明細書で説明される新尿路変向は、別の場合であれば回腸ループ変向を受ける患者の治療のための根治的膀胱切除の後に、適用してもよい。一態様において、本発明は、本明細書で説明される方法によって形成される、必要としている被検体における尿路変向として使用するのに適切である、導管足場またはマトリクスを企図する。導管足場の一端は、1つ以上の尿管に接続されてもよく、他端は、被検体の体外にある尿貯留部に接続されてもよい。一実施形態において、導管は、ストーマを介して患者の体外に出る。別の実施形態において、ポリマーマトリクスは、管状形で提供される、第1の移植可能で、生体適合性である、合成ポリマーマトリクスまたは足場を備える。いくつかの実施形態において、管状の足場は、被検体の尿管に接続するように構成される、第1の端部を備える。別の実施形態において、第1の足場は、被検体のストーマまたは括約筋を形成するように構成される、第2の端部をさらに含む。別の実施形態において、第1の足場は、少なくとも1つの尿管に接続するように構成される、少なくとも1つの側部開口部をさらに含む。いくつかの実施形態において、第1の足場は、第1の尿管に取り付けるように構成される、第1の側部開口部と、第2の尿管に取り付けるように構成される第2の側部開口部とを含む。一態様において、足場は、被検体における尿管の一方または両方の取り付けに関して柔軟であるように設計される。一実施形態において、足場は、管状構造の側部上に尿管を取り付けるための、1つ以上の開口部を有してもよい。別の実施形態において、足場は、尿管を取り付けるための、開口部を管状構造の一端に有してもよい。取り付けられる尿管の端部と足場の端部との間の距離が、尿管の端部と足場の側部との距離よりも短い場合、側部ではなく構造の一端への尿管の取り付けは、尿管に対してより少ない張力を提示し得る。一態様において、管状導管足場は、一方または両方の尿管から管状の足場を通って最後に受容体の外に出る尿の流出端としての役割を果たす、管の一端を備える。一実施形態において、足場の流出端は、受容体の腹部空洞の壁で終了するように構成される。図11BパネルAは、足場のための例示的な構成を例証する。別の実施形態において、足場の流出端は、腹壁を通って延在してすなわち、経腹腔的であり、皮膚の皮下層に直接接続するすなわち、経皮的であるように構成される。図11BパネルBは、足場のための例示的な構成を例証する。当業者は、異なる構成が、受容体の腹腔の特定の寸法に依存することを理解するであろう。他の一実施形態において、管状構造は、均一な縁を備える第1の端部と、不均一または不均等な縁を備える第2の端部とを備える。不均一な縁は、基部から半径方向に延在する多数の花弁を伴う円形の基部を含んでもよい。花弁の数は、1つ、2つ、3つ、4つ、5つ、または6つであってもよい。不均等な縁は、例えば図3に示されているもの等の、一連の花弁を備えてもよい。一実施形態において、管状構造は、必要としている患者の尿路変向系または導管として使用するのに適切な形態を有する。別の実施形態において、この系は、例えば尿管造瘻術等の場合に、尿を1つ以上の尿管から腹壁断片に分流する。他の実施態様において、この系は、例えば膀胱造瘻術等の場合に、尿を膀胱から腹壁断片まで分流する。他の一実施形態において、この系は、膀胱を尿道に接続する。さらに別の実施形態において、第1の系は、1つ以上の尿管から腹壁断片に尿を分流してもよく、第2の系は、膀胱から腹壁断片に尿を分流してもよい。全ての実施形態において、この系は、例えばストーマの形成時等に、1つ以上の尿管から腹壁断片に尿を分流してもよい。別の実施形態において、管状マトリクスまたは足場は、尿路変向または導管足場である。一実施形態において、尿路変向系の管状構造は、長方形、円形、または三角形の断面である。図3Aは、本明細書で企図される、異なる断面構成の一部を例証する。別の実施形態において、管状構造は、移植後に開存したままにするのに十分な剛性を保持する。他の一実施形態において、管状構造の剛性は、その管腔におけるカテーテルの使用を伴って、または伴わずに保持される。カテーテルが使用される場合に、それは、付加的な開存性を提供するために、管状構造の管腔空間の中に配置することができる。他の一実施形態において、導管足場は、第1の足場の第1の端部を尿管に接続するように構成される、円形または卵形接続具の形態の第2の足場をさらに含んでもよい。さらに別の実施形態において、導管足場は、ストーマを被検体に作成するために、第1の管状の足場の第2の端部を伴うストーマまたは括約筋を形成するように構成される、ワッシャリングの形態の第3の足場をさらに含んでもよい。図3Bは、尿路変向構築体の変形例を例証するA:開いた卵形状、B:開いた卵形状レセプタクル、C:閉じた卵形状レセプタクルおよび3つの管。いくつかの実施形態において、管状構造は、禁制ストーマまたは括約筋を作成するための吻合を達成するために、組織、臓器、または体の部分に接続するためのワッシャ構造を含んでもよい。別の実施形態において、ワッシャは、約1mm未満、約1.5mm未満、約2mm未満、約2.5mm未満、約3mm未満、約3.5mm未満、約4mm未満、約4.5mm未満、または約5mm未満の厚さで提供される。一実施形態において、尿路変向または導管足場は、図3に示される構成に成形される。他の一実施形態において、管状構造は、均一な縁を備える第1の端部と、不均一または不均等な縁を備える第2の端部とを備える。不均一な縁は、例えば被検体への外部ストーマの形成時等に、被検体の外部領域に取り付けるために構成される、1つ以上の締結具を含んでもよい。一実施形態において、管状構造の第1および第2の端部は、図3で例証される形態であってもよい。締結具の数は、1つ、2つ、3つ、4つ、5つ、または6つであってもよい。別の実施形態において、管状の足場は、図27で表される形態である。図4Aは、ヒト尿路系の通常の解剖学的構造の一部を表す。一実施形態において、管状構造は、必要としている患者における尿路変向または導管として使用するのに適切な形態を有する。別の実施形態において、導管は、例えば尿管造瘻術等の場合に、1つ以上の尿管から腹壁断片に尿を分流する図4D。他の実施態様において、導管は、例えば膀胱造瘻術等の場合に、膀胱から腹壁断片に尿を分流する図4B。他の一実施形態において、導管は、膀胱を尿道に接続する図4D。さらに別の実施形態において、第1の導管は、1つ以上の尿管から腹壁断片に尿を分流してもよく、第2の導管は、尿を膀胱から腹壁断片まで分流してもよい。全ての実施形態において、導管は、1つ以上の尿管から腹壁断片に尿を分流してもよい図4B。全ての実施形態において、導管は、ストーマを形成するように構成されてもよい。一実施形態において、尿路変向または導管足場の管状構造は、長方形、円形、または三角形の断面である。別の実施形態において、管状構造は、移植後に開存したままにするのに十分な剛性を保持する。他の一実施形態において、管状構造の剛性は、その管腔におけるカテーテルの使用を伴って、または伴わずに保持される。いくつかの実施形態において、尿路変向足場は、移植したときに管状構造の管腔空間の中に配置するように構成される、カテーテルをさらに含む。一実施形態において、カテーテルは、フォーリー様のバルーンカテーテルである。カテーテルを使用する場合は、それを管状構造の管腔空間の中に配置して、付加的な開存性を提供することができる。当業者は、当技術分野で知られている他のカテーテルが、本発明とともに使用するのに適切であり得ることを理解するであろう。別の実施形態において、足場の管状壁の厚さは、約2mm未満、約2.5mm未満、約3.5mm未満、約4mm未満、約4.5mm未満、約5mm未満、約5.5mm未満、または約6mm未満である。いくつかの実施形態において、足場は、可変の外径および内径を有してもよい。一実施形態において、足場の端部は、広がっていても、広がっていなくても、密閉されていても、または丸くてもよい。他の実施態様において、足場は、尿に対して透過性である。一実施形態において、足場の孔サイズは、約0ミクロン超~約500ミクロンである。別の実施形態において、孔サイズは、約100ミクロン~約200ミクロンである。別の実施形態において、孔サイズは、約150ミクロン~約200ミクロンである。他の実施態様において、孔サイズは、約100ミクロン、約110ミクロン、約120ミクロン、約130ミクロン、約140ミクロン、約150ミクロン、約160ミクロン、約170ミクロン、約180ミクロン、約190ミクロン、または約200ミクロンである。いくつかの実施形態において、孔サイズは、約100ミクロン、約200ミクロン、約300ミクロン、約400ミクロン、約500ミクロン、または約600ミクロンである。他の実施態様において、足場は、単一の孔サイズ分布、複数の孔サイズ分布、または孔勾配分布である、孔構造を含む。別の実施形態において、足場材料は、縫合可能であり、漏出に対して耐性を示す組織で接続を形成してもよい。他の実施態様において、管状の足場材料は、移植使用の期間の全体を通して開存性を維持し、細胞付着性および宿主組織の内方成長を支持し、かつ柔軟性を保持するように選択される。別の実施形態において、材料は、正常なインビボの流体循環中に晒される圧力を超える、破裂強度を有する。他の実施態様において、材料は、宿主組織の内方成長に相応する分解時間を有する。本明細書で説明される導管足場、ならびにその作製および使用方法は、Ludlow他の米国特許出願公開第20100131075号参照によりその全体が本明細書に組み込まれるでさらに説明されている。C.筋肉等価物一態様において、本発明のポリマーマトリクスまたは足場は、筋肉等価足場である。一実施形態において、筋肉等価足場は、排尿筋等価足場である。別の実施形態において、足場は、腹腔鏡の移植に適切である。一態様において、ポリマーマトリクスは、治療を必要としている組織または組織構造の少なくとも一部に一致するように成形され、かつ腹腔鏡的に移植するのに十分なサイズのポリマーマトリクスまたは足場を備える。特定の実施形態において、本発明のポリマーマトリクスまたは足場は、長さが約3~約20cmの間である。一実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、最大長さが約20cmである。別の実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、最大長さが約15cmである。別の実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、最大長さが約10cmである。別の実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、最大長さが約8cmである。別の実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、最大長さが約4cmである。さらに別の実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、最大長さが約3cmである。特定の実施形態において、本発明のポリマーマトリクスまたは足場は、幅が約1~約8cmの間である。いくつかの実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、最大幅が約4cmである。他の実施態様において、ポリマーマトリクスまたは足場は、最大幅が約3cmである。さらに他の実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、最大幅が約5cmである。一実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、3次元3D形状を有する。別の実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、平坦形状を有する。一実施形態において、平坦形状のポリマーマトリクスまたは足場は、より高い柔軟性を可能にするために、前処理領域を備える。特定の実施形態において、前処理領域は、折り目が付く領域が被覆される。一実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、腹腔鏡管および/またはポートを通して移植するために、丸め、折り畳み、別様には成形に対して十分に順応性がある。そのような実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、腹腔鏡管および/またはポートを通して移植した後に、広げる、展開する、別様には形状に戻すことに対して十分に順応性がある。一実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、腹腔鏡管および/またはポートを通して移植する前に、2つ、3つ、4つ、5つ、6つ、7つ、8つ、9つ、または10の帯に切断される。特定の実施形態において、2つ、3つ、4つ、5つ、6つ、7つ、8つ、9つ、または10の帯は、腹腔鏡管および/またはポートを通して移植する前に噛合される。2つ、3つ、4つ、5つ、6つ、7つ、8つ、9つ、または10の帯は、接着剤、留め金、縫合糸、または当業者に知られている他の手法を使用して噛合されてもよい。このような実施形態において、2つ、3つ、4つ、5つ、6つ、7つ、8つ、9つ、または10の噛合した帯は、腹腔鏡管および/またはポートを通過するように折り畳まれ、および/または積み重ねられる。このような実施形態において、2つ、3つ、4つ、5つ、6つ、7つ、8つ、9つ、または10の帯は、腹腔鏡管および/またはポートを通して挿入した後に開かれる、および/または積み重ね解除される。いくつかの実施形態において、以前に配置した噛合手段は、腹腔鏡管および/またはポートを通して挿入した後に、必要に応じて締める。一実施形態において、ポリマーマトリクスは、パッチの形態または帯の形態で提供される、第1の移植可能な、生体適合性である、合成もしくは天然のポリマーマトリクスまたは足場を備える。一実施形態において、パッチは、必要としている患者の膀胱に相当する排尿筋として使用するのに適切な形態を有する。他の一実施形態において、パッチは、必要としている患者の既存の膀胱の容積容量を増加させるのに適切な形態を有する。特定の実施形態において、パッチは、膀胱サイズを約50mL~約500mLの間で増加させる。いくつかの実施形態において、パッチは、膀胱サイズを50mL単位で増加させる。いくつかの実施形態において、パッチは、膀胱サイズを約450mLに増加させる。一実施形態において、30cm2の表面積の増加は、200mLの膀胱の容積を250mLまで増加させる。別の実施形態において、25cm2の増加は、350mLの膀胱の容積を400mLまで増加させる。一実施形態において、足場は、約30cm2の2次元表面積を有する。別の実施形態において、足場は、約25cm2の2次元表面積を有する。一実施形態において、パッチは、帯、円盤、正方形、楕円面、または任意の他の適切な構成の形態である。他の実施態様において、パッチは、例えばアコーディオンのような、予め折り畳んだ形態で提供される。図5A~Bは、筋肉等価足場またはポリマーマトリクスの実施例を示す。一実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、二重ウェッジ形状例えば、図5Aに示される形状である。別の実施形態において、ポリマーマトリクスは、図6~9に示される構成のうちの1つに成形される。図9Dにおいて、折り目は、インプラントが12mmの管を通過することを可能にする。全ての実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、膀胱およびマトリクスまたは足場への張力を最小化するように成形される。別の実施形態において、ポリマーマトリクスは、パッチの形態または帯の形態で提供される、第1の移植可能な、生体適合性である、合成もしくは天然のポリマーマトリクスまたは足場を備える。一実施形態において、パッチは、必要としている患者の膀胱に相当する排尿筋として使用するのに適切な形態を有する。他の一実施形態において、パッチは、必要としている患者の既存の膀胱の容積容量を増加させるのに適切な形態を有する。いくつかの実施形態において、パッチは、50mL単位で膀胱サイズを増加させる。一実施形態において、パッチは、帯、円盤、正方形、楕円面、または任意の他の適切な構成の形態である。他の実施態様において、パッチは、例えばアコーディオンのような、予め折り畳んだ形態で提供される。一実施形態において、ポリマーマトリクスは、図1~9に示される構成のうちの1つに成形される。別の実施形態において、ポリマーマトリクスは、図10~13に示される構成のうちの1つに従って、必要としている被検体に埋め込まれる。全ての実施形態において、これらのマトリクスまたは足場に使用される生体適合材料は、例えば、生分解性である。全ての実施形態において、生体適合材料は、ポリグリコール酸であってもよい。全ての実施形態において、ポリマーマトリクスまたは足場は、生体適合性および生分解性の形状設定材料で被覆される。一実施形態において、形状設定材料は、液体共重合体を含んでもよい。別の実施形態において、液体コポリマーは、液化ラクチド/グリコリド共重合体を含んでもよい。一実施形態において、液体コポリマーは、ポリ-DL-ラクチド-co-グリコリドを含んでもよい。本明細書で説明される筋肉等価足場は、ならびにその作製および使用方法は、Ludlow他の米国特許出願公開第20100131075号参照によりその全体が本明細書に組み込まれるでさらに説明されている。5.構築体一態様において、本発明は、少なくとも1つの細胞集団が播種される、1つ以上のポリマー足場またはマトリクスを提供する。細胞集団を播種したそのような足場は、本明細書において構築体と称される場合がある。一実施形態において、細胞播種した1つもしくは複数のポリマーマトリクスは、膀胱置換構築体、膀胱増大構築体、膀胱導管構築体、および排尿筋等価構築体から成る群から選択される、新膀胱構築体を形成する。当業者は、本明細書で説明される1つ以上の細胞集団の播種または沈着が、当技術分野で知られている種々の方法によって達成されてもよいことを理解するであろう。例えば、生物反応器によるインキュベーションおよび培養Bertram他の米国特許出願公開第20070276507号、McAllister他の米国特許第7,112,218号、Auger他の米国特許第5,618,718号、Niklason他の米国特許第6,537,567号、圧力誘発播種Torigoeetal.2007CellTransplant.,167:729-39、Wangetal.2006Biomaterials.May,2713:2738-46、および静電播種Bowlin他の米国特許第5,723,324号を使用してもよい。加えて、電気紡糸繊維を細胞のエアロゾルと同時に被覆する最近の手法は、播種または沈着Stankusetal.2007Biomaterials,28:2738-2746に適切であり得る。一実施形態において、細胞の沈着は、足場を、細胞付着性強化タンパク質と接触させるステップを含む。別の実施形態において、強化タンパク質は、フィブロネクチン、コラーゲン、およびMatrigel商標のうちの1つ以上である。他の一実施形態において、足場は、細胞付着性強化タンパク質を含まない。別の実施形態において、細胞の沈着は、足場を細胞集団と接触させた後に培養するステップを含む。さらに別の実施形態において、培養は、生物反応器の拍動流および/または定常流による調整を含んでもよい。本明細書で説明されるように腹膜組織から単離した平滑筋細胞集団は、次いで、本明細書で説明される足場に播種してもよい。腹膜組織は、網組織であってもよい。以下は、網由来の平滑筋細胞を足場に播種するためのプロトコルの代表例である。網由来の平滑筋細胞は、足場に播種するために必要な細胞の数を発生させるために、数週間例えば、最高で7週間にわたって拡大させてもよい。足場に播種するのに適切な細胞の密度を下記で説明する。網由来の平滑筋細胞は、構築体を産生するように足場に播種するための細胞を収穫する前に、多数の継代にわたって拡大されてもよい。細胞播種のための足場を調製するために、適切な材料例えば、PGAフェルトを、あるサイズに切断し、適切な形状に縫合し、材料例えば、PLGAで被覆してもよい。足場は、次いで、適切な方法例えば、酸化エチレンを使用して殺菌してもよい。細胞播種の前日に、殺菌した足場を、60のエタノール/40のDPB、100のDPB、D-MEM/10のFBSもしくはα-MEM/10のFBSでの飽和によって連続的に予湿潤し、その後に、一晩室温で、D-MEM/10のFBSもしくはα-MEM/10のFBSでのインキュベーションを続けてもよい。足場は、次いで、網由来の平滑筋細胞を播種し、播種した構築体を、被検体に移植する例えば、7日目まで、5のCO2で、加湿した37°Cの恒温器の中で成熟させることができる。当業者は、足場への細胞の播種および細胞の播種のための足場を調製するためのさらなる方法を理解するであろう。一態様において、本発明は、腹膜由来の平滑筋細胞を有する構築体を調製する方法を提供する。一実施形態において、本方法は、aヒトの腹膜組織試料を得るステップと、b平滑筋細胞集団を試料から単離するステップと、c細胞集団を培養するステップと、d細胞集団を成形したポリマーマトリクス細胞構築体と接触させるステップとを含む。ヒトの腹膜組織試料は、自己源または非自己源から得てもよい。ヒトの腹膜組織試料は、網組織であってもよい。他の一実施形態において、本方法は、平滑筋細胞マーカーの発現を検出するステップをさらに含む。別の実施形態において、発現は、mRNA発現である。さらなる実施形態において、発現は、ポリペプチド発現である。一実施形態において、ポリペプチド発現は、細胞内免疫蛍光によって検出される。一実施形態において、足場は、本明細書で説明される細胞集団を含む。別の実施形態において、足場は、本質的に、本明細書で説明される細胞集団から成る。他の一実施形態において、足場は、本明細書で説明される細胞集団から成る。第1のポリマーマトリクスもしくは第2のポリマーマトリクスは、またはどちらも該当する場合、マトリクスまたは足場および細胞の構築体を構成するために、第1のポリマーマトリクスの第1の表面、第2のポリマーマトリクスの第1の表面、または双方の上もしくは中に沈着される、少なくとも1つの細胞集団を含み、少なくとも1つの細胞集団は、実質的に、筋肉細胞集団を含む。筋肉細胞集団は、例えば、平滑筋細胞集団である。好ましい実施形態において、第1の表面および第2の表面は、それぞれ、第1および第2のポリマーマトリクスの外面である。別の実施形態において、マトリクスおよび細胞を含む構築体は、いかなる他の細胞集団も含まない。好ましい実施形態において、構築体は、尿路上皮細胞を含まない。これらの構築体は、必要としている被検体に膀胱、尿管、および尿道を含む尿生殖器等の管腔臓器または組織構造を提供するために使用される。被検体は、そのような臓器または組織の再構築、修復、増大、または置換を必要とし得る。一実施形態において、管腔臓器または組織構造は、膀胱またはその一部分であり、ポリマーマトリクスまたは足場は、マトリクスの表面に沈着される平滑筋細胞を有する。構築体は、尿路変向もしくは導管、または排尿筋等価物を提供するために使用されてもよい。一態様において、本発明は、本明細書で説明される細胞集団を播種した、尿路変向または導管の足場またはマトリクスを提供する。細胞集団を播種した、そのような足場は、本明細書で構築体と称される場合がある。一実施形態において、尿路変向または膀胱導管構築体は、本明細書で説明される1つ以上の足場、および本明細書で説明される1つ以上の足場の上に沈着される細胞集団で構成される。一態様において、本発明は、尿路変向構築体、ならびにその作製および使用方法を提供する。一実施形態において、尿路変向は、被検体における障害のある膀胱のためのものであり、a腹壁断片に接続するように構成される第1の端部、第2の閉じた端部、および第1の尿管に接続するように構成される少なくとも第1の側部開口部を有する管状の足場を備える、第1の移植可能な生体適合性構築体と、b足場の表面の上または中に沈着される、腹膜由来の細胞集団とを含む。別の実施形態において、尿路変向は、被検体における障害のある膀胱のためのものであり、a被検体の腹壁の開口部に接続するように構成される第1の端部、第2の閉じた端部、および第1の尿管に接続して、第1の尿管から管状の足場の内部への尿の通過を可能にするように適合される少なくとも第1の側部開口部を備える、尿の一時的貯蔵および通過のために適合される、移植可能な生体適合性の管状の足場と、b足場の表面の上または中に沈着される、腹膜由来の細胞集団とを含む。一実施形態において、本発明は、必要としている被検体における障害のある膀胱のための尿路変向構築体を調製する方法を提供し、a腹壁断片に接触するように構成される第1の端部、第2の閉じた端部、および第1の尿管に接続するように構成される少なくとも第1の側部開口部を有する管状の足場を備える、第1の移植可能な生体適合性足場を提供するステップと、b尿路変向構築体を形成するために、足場の第1の領域の上または中に腹膜由来の細胞集団を沈着させるステップとを含む。別の実施形態において、本方法は、a被検体の腹壁の開口部に接続するように構成される第1の端部、第2の閉じた端部、および第1の尿管に接続して、第1の尿管から管状の足場の内部への尿の通過を可能にするように適合される少なくとも第1の側部開口部を備える、尿の一時的貯蔵および通過のために適合される、移植可能な生体適合性の管状の足場を提供するステップと、b尿路変向構築体を形成するために、足場の表面の上または中に腹膜由来の細胞集団を沈着させるステップとを含む。一態様において、本発明は、例えば膀胱を含む尿生殖器等の既存の管腔臓器または組織構造を高めるために使用されてもよい筋肉等価構築体を、必要としている被検体に提供する。被検体は、そのような臓器または組織の拡張または治療を必要とし得る。一実施形態において、管腔臓器または組織構造は、膀胱またはその一部分であり、ポリマーマトリクスまたは足場は、マトリクスの表面に沈着される平滑筋細胞を有する。一実施形態において、構築体は、排尿筋等価物を提供するために使用される。当業者は、細胞集団をマトリクスまたは足場に沈着するための複数の適切な方法がことを理解するであろう。一態様において、構築体は、新しい臓器または組織構造を必要とする被検体への移植に適切である。一実施形態において、構築体は、サイトカインMCP-1を産生する、細胞の集団を含む。別の実施形態において、MCP-1は、被検体または受容体の天然の間葉系幹細胞の移植部位への移動を誘発する。一実施形態において、移動する受容体の天然の間葉系幹細胞は、新しい臓器または組織構造の再生を援助する。他の一態様において、本発明は、特定の細胞密度で細胞を播種した足場を提供する。一実施形態において、足場には、約20×106~約30×106個の細胞の細胞密度で、平滑筋細胞集団を播種する。別の実施形態において、細胞密度は、約1×106~約40×106個、約1×106~約30×106個、約1×106~約20×106個、約1×106~約10×106個、または約1×106~約5×106個である。さらなる実施形態において、細胞密度は、約20×106~約98×106個の細胞である。さらなる実施形態において、細胞密度は、約21×106~約97×106個、約22×106~約95×106個、約23×106~約93×106個、約24×106~約91×106個、約25×106~約89×106個、約26×106~約87×106個、約28×106~約85×106個、約29×106~約83×106個、約30×106~約80×106個、約35×106~約75×106個、約40×106~約70×106個、約45×106~約65×106個、または約50×106~約60×106個である。好ましい実施形態において、細胞密度は、約24×106~約91×106個の細胞である。別の実施形態において、細胞密度は、約2.5×106~約40×106個、約5×106~約40×106個、約7.5×106~約35×106個、約10×106~約30×106個、約15×106~約25×106個、および約17.5×106~約22.5×106個である。別の実施形態において、細胞密度は、約1×106個、約2×106個、約3×106個、約4×106個、約5×106個、約6×106個、約7×106個、約8×106個、約9×106個、約10×106個、約11×106個、約12×106個、約13×106個、約14×106個、約15×106個、約16×106個、約17×106個、約18×106個、約19×106個、約20×106個、約21×106個、約22×106個、約23×106個、約24×106個、約25×106個、約26×106個、約27×106個、約28×106個、約29×106個、約30×106個、約31×106個、約32×106個、約33×106個、約34×106個、約35×106個、約36×106個、約37×106個、約38×106個、約39×106個、約40×106個、約41×106個、約42×106個、約43×106個、約44×106個、約45×106個、約46×106個、約47×106個、約48×106個、約49×106個、約50×106個、約51×106個、約52×106個、約53×106個、約54×106個、約55×106個、約56×106個、約57×106個、約58×106個、約59×106個、約60×106個、約61×106個、約62×106個、約63×106個、約64×106個、約65×106個、約66×106個、約67×106個、約68×106個、約69×106個、約70×106個、約71×106個、約72×106個、約73×106個、約74×106個、約75×106個、約76×106個、約77×106個、約78×106個、約79×106個、約80×106個、約81×106個、約82×106個、約83×106個、約84×106個、約85×106個、約86×106個、約87×106個、約88×106個、約89×106個、約90×106個、約91×106個、約92×106個、約93×106個、約94×106個、約95×106個、約96×106個、約97×106個、約98×106個、または約99×106個である。さらなる態様において、本発明は、足場1cm2あたり特定の細胞密度で細胞を播種した足場を提供する。一実施形態において、密度は、約3,000細胞/cm2~約15,000細胞/cm2、約3,500細胞/cm2~約14,500細胞/cm2、約4,000細胞/cm2~約14,000細胞/cm2、約4,500細胞/cm2~約13,500細胞/cm2、約5,000細胞/cm2~約13,000細胞/cm2、約4,500細胞/cm2~約13,500細胞/cm2、約5,000細胞/cm2~約13,000細胞/cm2、約5,500細胞/cm2~約12,500細胞/cm2、約6,000細胞/cm2~約12,000細胞/cm2、約6,500細胞/cm2~約11,500細胞/cm2、約7,000細胞/cm2~約11,000細胞/cm2、約7,500細胞/cm2~約10,500細胞/cm2、約8,000細胞/cm2~約10,000細胞/cm2、約7,500細胞/cm2~約9,500細胞/cm2、または約8,000細胞/cm2~約9,000細胞/cm2である。好ましい実施形態において、密度は、約3,000細胞/cm2~約7,000細胞/cm2、または約9,000細胞/cm2~約15,000細胞/cm2である。一態様において、本発明の構築体は、移植後に、特定の特徴を被検体に提供するように適合される。一実施形態において、構築体は、移植後に、再生を被検体に提供するように適合される。別の実施形態において、構築体は、移植部位での被検体における再生を促進するように適合される。例えば、移植後に、再生された組織は、移植部位で構築体自体から形成され得る。別の実施形態において、構築体は、移植後に被検体に機能的属性を与え得る。例えば、尿路変向構築体は、第1の尿管例えば、第1の側部開口部から管状の足場への被検体の尿の通過を可能にするように適合され得、ならびに/または尿の一時的貯蔵および被検体の外への通過例えば、管状の足場を提供するように適合され得る。一実施形態において、尿路変向構築体は、移植したときに上皮化した粘膜を提供するように適合されてもよい。別の実施形態において、構築体は、被検体における新しい臓器または組織構造の恒常的、調節的発達を提供するように適合されてもよい。6.使用方法一態様において、本発明は、治療を必要とする被検体に、層状に組織化された管腔臓器または組織構造を提供するための方法を企図する。一実施形態において、被検体は、臓器または組織の再生、再構築、修復、増大、または置換を必要とし得る。一実施形態において、本方法は、臓器または組織構造を必要としている臓器または組織構造の少なくとも一部に一致するように成形される、生体適合性で合成または天然のポリマーマトリクスを提供するステップを含む。提供するステップの後には、再構築、修復、増大、または置換の対象である臓器または組織構造に由来しない、少なくとも1つの細胞集団を沈着させることが続いてもよい。沈着させるステップは、ポリマーマトリクス上で細胞集団を培養することを含んでもよい。細胞集団をマトリクス上に沈着させた構築体を提供した後に、所望の層状に組織化された管腔臓器または組織構造を形成するために、この構築体を患者の治療部位に移植することができる。一実施形態において、層状に組織化された管腔臓器または組織構造は、膀胱または膀胱の一部である。他の一態様において、本発明は、必要としている被検体に層状に、組織化された管腔臓器または組織構造を提供するための方法を提供する。一実施形態において、本方法は、a治療を必要としている臓器または組織構造の少なくとも一部に一致するように成形される、生体適合性で合成または天然のポリマーマトリクスを提供するステップと、b新しい臓器または組織構造に対応する天然の臓器または組織に由来しない細胞集団を、ポリマーマトリクスの第1の領域の上または中に沈着させるステップと、c層状に組織化された管腔臓器または組織構造の形成のために、成形したポリマーマトリクス細胞構築体を該被検体に移植するステップとを含む。他の一態様において、本発明は、必要としている被検体に新膀胱またはその一部分を提供するための方法を提供する。一実施形態において、本方法は、a膀胱またはその一部分に一致するように成形される、生体適合性で合成または天然のポリマーマトリクスを提供することと、b被検体の膀胱に由来しない細胞集団をポリマーマトリクスの第1の領域の上または中に沈着させることと、c新膀胱またはその一部分の形成のために、成形したポリマーマトリクス細胞構築体を被検体に移植することとを含む。別の実施形態において、本明細書で説明される方法のステップbの細胞集団は、平滑筋細胞マーカーに対して陽性である、収縮機能を有する1つ以上の腹膜由来の平滑筋細胞を含む。他の一実施形態において、細胞集団の収縮機能は、カルシウム依存性である。SMCは、網に由来してもよい。一実施形態において、本発明の方法は、脈管化を可能にするために、移植した導管構築体を、被検体の網、腸間膜、筋肉筋膜、および/または腹膜で包むステップをさらに含む。他の一態様において、本発明は、必要としている被検体における障害のある膀胱のための、尿路変向または導管を提供するための方法を提供する。一実施形態において、必要としている被検体に尿路変向を提供するための方法は、a生体適合性の導管足場を提供するステップと、b実質的に筋肉細胞集団である第1の細胞集団を、該足場の第1の領域の上または中に沈着させるステップと、c被検体から尿が出ることを可能にする導管を形成するために、ステップbの足場を該被検体に移植するステップとを含む。別の実施形態において、生体適合材料は、生分解性である。他の実施態様において、生体適合材料は、ポリグリコール酸である。さらに別の実施形態において、第1の細胞集団は、実質的に平滑筋細胞集団である。一実施形態において、本方法は、本明細書で説明される尿路変向または導管足場を提供するステップを含む。他の付加的な実施形態において、尿路変向または導管足場は、本明細書で説明されるように、第1、第2、および第3の足場等の複数の部分が提供される。別の実施形態において、本方法は、尿路変向または導管構築体を形成するために、障害のある膀胱に由来しない細胞集団を沈着させるステップをさらに含む。他の一実施形態において、沈着させるステップは、足場上で細胞集団を培養することを含んでもよい。いくつかの実施形態において、本方法は、必要としている患者に尿路変向構築体を移植するステップをさらに含む。別の実施形態において、移植は、障害のある膀胱の部位である。一実施形態において、構築体の開口端部例えば、腹壁に接続するように構成される、第1の端部は、ストーマまたは括約筋を形成するために、腹部または恥骨上壁を通して皮膚に吻合される造瘻術。別の実施形態において、カテーテルは、尿の流出を提供するために、ストーマ開口部を通して構築体の管腔に挿入される。図10は、移植した導管構築体の構成を例証する。他の一実施形態において、本発明は、必要としている被検体における障害のある膀胱のための尿路変向を提供する方法を提供し、a腹壁断片に接続するように構成される第1の端部、第2の閉じた端部、および第1の尿管に接続するように構成される少なくとも第1の側部開口部を有する管状の足場を備える、第1の移植可能な生体適合性足場を提供するステップと、b尿路変向構築体を形成するために、足場の第1の領域の上または中に腹膜由来の細胞集団を沈着させるステップと、c尿路変向の形成のために、構築体を被検体に移植するステップとを含む。別の実施形態において、本方法は、a被検体の腹壁の開口部に接続するように構成される第1の端部、第2の閉じた端部、および第1の尿管に接続して、第1の尿管から管状の足場の内部への尿の通過を可能にするように適合される少なくとも第1の側部開口部を備える、尿の一時的貯蔵および通過のために適合される、移植可能な生体適合性の管状の足場を提供するステップと、b尿路変向構築体を形成するために、足場の表面の上または中に腹膜由来の細胞集団を沈着させるステップと、c尿路変向の形成のために、構築体を被検体に移植するステップとを含む。他の一実施形態において、本方法は、尿路変向構築体を被検体に移植するステップを含み、a腹壁断片に接触するように構成される第1の端部、第2の閉じた端部、および第1の尿管に接続するように構成される少なくとも第1の側部開口部を有する管状の足場を備える、第1の移植可能な生体適合性構築体と、b尿路変向の形成のために、足場の表面の上または中に沈着される、腹膜由来の細胞集団とを含む。全ての実施形態において、尿路変向足場は、第2の尿管に接続するように構成される、第2の側部開口部をさらに備えてもよい。全ての実施形態において、第1の端部は、腹壁と同一平面に位置付けられるように構成されてもよい。全ての実施形態において、第1の端部は、被検体の皮膚に縫合されるように構成されてもよい。全ての実施形態において、第1の端部は、ストーマを形成するように構成されてもよい。全ての実施形態において、ストーマは、ストーマボタンをさらに備えてもよい。全ての実施形態において、足場は、ストーマを形成するように構成される、ワッシャリングをさらに備える。全ての実施形態において、生体適合性足場は、生分解性である。全ての実施形態において、足場は、ポリグリコール酸、ポリ乳酸、ならびにポリグリコール酸およびポリ乳酸の共重合体から成る群から選択される材料を含んでもよい。全ての実施形態において、細胞集団は、平滑筋細胞集団である。全ての実施形態において、尿路変向は、障害のある膀胱のための置換であってもよい。全ての実施形態において、尿路変向は、一時的であってもよい。全ての実施形態において、尿路変向は、永続的であってもよい。全ての実施形態において、管状の足場は、長方形の断面構成、三角形の断面構成、または円形の断面構成を有してもよい。全ての実施形態において、尿路変向は、尿路上皮細胞を含まなくてもよい。全ての実施形態において、本発明の方法は、尿路状の組織再生を特徴とする、新尿路導管を提供してもよい。全ての実施形態において、再生された組織は、尿路上皮、固有層、および平滑筋束のうちの1つ以上の存在を特徴としてもよい。全ての実施形態において、再生された組織は、尿管-導管接合部UCJ、導管の頭側部分、および導管の中央心房部分のうちの1つ以上で観察することができる。全ての実施形態において、再生された組織は、粘膜、粘膜下組織、および線維血管性ストローマを伴う平滑筋のうちの1つ以上存在下を特徴としてもよい。全ての実施形態において、再生された組織は、その下に平滑筋を伴う連続する尿路上皮である。全ての実施形態において、尿路導管は、移植したときに上皮化した粘膜を形成する。別の実施形態において、本発明の方法は、尿路変向構築体の移植に伴う閉塞の存在について導管を監視するステップをさらに含む。閉塞は、デトリタスの蓄積によって引き起こされ得る。本方法は、閉塞が検出された場合に、導管の管腔からデトリタスを取り除くステップをさらに含んでもよい。一態様において、本発明は、臨時的に、必要としている被検体に尿路変向を提供する。一実施形態では、一時的な尿路変向または導管構築体を被検体に埋め込んでストーマの開口部を形成し、カテーテルまたは他のデバイスをストーマを通して導管構築体の管腔に一時的に挿入する。一時的な導管は、尿が被検体を出ることを可能にする一方で、永続的な解決策を障害のある膀胱に試みるといった利点を提供する。例えば、導管構築体の移植は、細胞集団を播種した新膀胱構築体の移植前、移植後、または移植と同時に行うことが可能である例えば、上記のBertram他の特許を参照のこと。図11は、一時的な尿路変向構築体の移植した構成要素の実施例を示す。一実施形態において、本発明の方法は、脈管化を可能にするために、移植した尿路変向または導管構築体を、被検体の網、腸間膜、筋肉筋膜、および/または腹膜で包むステップをさらに含む。一態様において、本発明は、永続的に、必要としている被検体に尿路変向を提供する。図12は、永続的な尿路変向構築体の移植した構成要素の実施例を示す。一実施形態において、本明細書で説明される構築体は、尿道前立腺部の置換および尿路変向に使用されてもよい。そのような手技は、根治的前立腺摘除術が必要な被検体の尿道前立腺部を取り除くために必要である。他の実施態様において、構築体は、経皮変向管が弁のようなよじれを伴う禁制管を形成するために使用されてもよい。さらなる実施態様では、構築体は、禁制チャネルまたはカテーテル挿入可能な開口部を伴う膀胱頸部手術および尿路出口で使用される、膀胱頸部のスリングおよびラッピング材料として使用されてもよい。そのような実施形態の実施例を図13に表す。尿は、尿道口開口部を局所的および/または上行性感染から守る特徴を組み込んだ異なる構造を介して体を出て、女性の膣前庭および男性の舟状窩を空にする。具体的には、この領域の中の皮膚粘膜は、保護内在性ラクトバクテリアフローラのための基質を提供するグリコーゲンの豊富な細胞から成る、非角化重層扁平上皮である。また、上皮が皮膚に近づくにつれて、殺菌性化合物を分泌するマクロファージの存在を示す、酸性ホスファターゼ活性およびリゾチーム様免疫反応性と関連付けられるHolsteinAFetal.1991CellTissueRes264:23。一態様において、本明細書で説明される尿路変向または新尿路導管NUC構築体は、天然の尿道で観察される皮膚粘膜領域の構造的特徴を有する、尿路粘膜と皮膚上皮との間の天然様転移の形成につながり得る。転移領域は、上皮化した粘膜と称される場合がある。一実施形態において、構築体は、移植したときに上皮化した粘膜を形成するように適合される。一実施形態において、上皮化した粘膜は、前庭領域と、皮膚粘膜領域とを備える。別の実施形態において、前庭領域は、皮膚粘膜領域に隣接する。別の実施形態において、皮膚粘膜領域は、被検体の腹壁および皮膚に接続される構築体のストローマ端部に位置する。概して、自然発生する皮膚粘膜領域は、粘膜および皮膚の存在を特徴とし、一般的に、外側の皮膚が終わり、体の内部を覆う粘膜が始まる、体のオリフィスの近くに存在する。本発明の構築体および方法によって提供される上皮化した粘膜は、被検体への移植後に、尿路変向の第1の端部で発達する。さらなる実施形態において、上皮化した粘膜は、最初に前庭領域に現れて、構築体のストーマ端部に向かって、皮膚粘膜領域を通して徐々に拡大または増加する、上皮の存在を特徴とする。別の実施形態において、上皮は、上皮細胞マーカーの発現を特徴とする。さらなる実施形態において、上皮細胞マーカーは、サイトケラチンである。サイトケラチンは、サイトケラチン1~19が挙げられるが、これに限定されない、当技術分野で知られているサイトケラチンのうちの1つ以上であってもよい。他の一実施形態において、サイトケラチンは、AE-1/AE3抗体で検出可能である。本明細書で説明される上皮化した粘膜を形成する構築体の能力は、腹部ストーマを介して尿路変向を達成するといった主要な課題の解決策を提供する。経皮的デバイスの寿命の長さが、しばしば、出口部位感染によって妨げられることが認められているKnabeCetal.1999Biomaterials20:503。カテーテル、カニューレ、プロテーゼ取り付け具、およびグルコースセンサ等の経皮デバイスは、皮膚を貫通し、その保護バリアを破壊して、細菌侵襲のための洞管を作成するIsenhathSNetal.2007JBiomedMaterResA83:915。不適切な表皮治癒による産物-皮膚界面の破損、生体適合性の不足、または機械的ストレスは、さらなる障害の危険性を引き起こす可能性があるvonRecumAFandParkJB.1981CritRevBioeng5:37。別の態様において、受容体の組織との相互作用を通しての尿路変向構築体は、管状の小器官を再生する。一実施形態において、構築体の受容体組織との相互作用は、経腹腔的-経皮的配置によるものである。他の一実施形態において、管状の小器官は、尿管から受容体の外部への尿の流れを可能にする。尿は、膀胱、尿道、およびストーマすなわち、道または開口部に見られる天然様の機能的性質を維持しながら、受容体から流出する。皮膚粘膜接合部は、前方尿道の開口部、すなわち、ヒトの女性および男性のそれぞれ膣前庭および舟状窩で見られる接合部に似ている。これらの天然の接合部は、上行性感染に対して保護を提供し得る、湿潤-乾燥表面に重要な粘膜区域によって覆われる。これらの粘膜区域の扁平上皮は、1グリコーゲンが豊富であり、2分泌腺酵素および殺菌剤を放出することが可能であり、3食細胞であり、また、傷ついた表面に迅速に移動することができる。拡大すべき臓器または組織への足場の移植は、実施例で説明される方法に従って、または技術的に認識された方法に従って行うことができる。マトリクスまたは足場は、標的臓器にグラフト材料を縫合することによって、被検体の臓器または組織に移植することができる。説明される手法は、治療を必要としている患者の既存の層状に組織化された管腔臓器または組織構造を拡大するために使用されてもよい。例えば、必要としている臓器または組織構造の少なくとも一部に一致するように成形され、かつ治療および腹腔鏡的に移植するのに十分なサイズであるポリマーマトリクスまたは足場を提供し、該臓器または組織構造に由来しない細胞集団を該ポリマーマトリクスの第1の領域の上または中に沈着させ、そして、既存の層状に組織化された管腔臓器または組織構造が拡大されるように、該患者の該治療部位に、成形したポリマーマトリクス構築体を腹腔鏡的に移植することによって、既存の層状に組織化された管腔臓器または組織構造を拡大させてもよい。図7Eは、本明細書で説明した筋肉等価足場の移植のための可能な手術方法を表す。図7Fは、空および満杯の膀胱上の移植部位を表す。図7Gは、表面を切断した際に作成される楕円面を示す手術スリットを伴う膀胱モデルを表す。折り畳んだ、または巻いたポリマーマトリクスまたは足場を通過させるために、プラスチック製の管を、利用可能な限定空間のモデルとして使用してもよい。説明される手法はまた、治療を必要としている患者の膀胱の容積を増加させるために使用してもよい。例えば、必要としている臓器または組織構造の少なくとも一部に一致するように成形され、かつ治療および腹腔鏡的に移植するのに十分なサイズである、生体適合性で、合成または天然のポリマーマトリクスまたは足場を提供し、該臓器または組織構造に由来しない細胞集団を該ポリマーマトリクスの第1の領域の上または中に沈着させ、そして、膀胱の容積容量が増加するように、該患者の該治療部位に、成形したポリマーマトリクス構築体を腹腔鏡的に移植することによって、膀胱の容積を増加させてもよい。一実施形態において、本発明のマトリクスまたは足場は、約50mLの膀胱の容積容量を増加させるのに適切である。他の実施態様において、本発明のマトリクスまたは足場は、約100mLの膀胱の容積容量を増加させるのに適切である。他の実施態様において、本発明のマトリクスまたは足場は、約60、約70、約80、または約90mLの膀胱の容積容量を増加させるのに適切である。説明される手法はさらに、治療を必要としている患者の膀胱の切開部位を拡大するために使用されてもよい。例えば、必要としている臓器または組織構造の少なくとも一部に一致するように成形され、かつ治療および腹腔鏡的に移植するのに十分なサイズである、生体適合性で、合成または天然のポリマーマトリクスまたは足場を提供し、b該臓器または組織構造に由来しない細胞集団を該ポリマーマトリクスの第1の領域の上または中に沈着させ、そして、c膀胱の切開部位が拡大するように、該患者の該治療部位に、成形したポリマーマトリクス構築体を腹腔鏡的に移植することによって、膀胱の切開部位を拡大させてもよい。本発明の別の限定的でない使用は、尿失禁の治療を必要としている患者におけるそのような治療のための方法を含む。例えば、必要としている臓器または組織構造の少なくとも一部に一致するように成形され、かつ治療および腹腔鏡的に移植するのに十分なサイズである、生体適合性で、合成または天然のポリマーマトリクスまたは足場を提供し、該臓器または組織構造に由来しない細胞集団を該ポリマーマトリクスの第1の領域の上または中に沈着させ、そして、膀胱の容積容量が増加するように、該患者の該治療部位に、成形したポリマーマトリクス構築体を腹腔鏡的に移植することによって、尿失禁を治療してもよい。一実施形態において、本明細書で説明される足場、細胞集団、および方法はさらに、本明細書で説明される障害の治療における有用な薬剤の調製のために使用されてもよい。障害は、層状に組織化された管腔臓器または組織構造の再生、再構築、修復、増大、または置換を必要とする被検体のあらゆる状態を含む。別の実施形態において、臓器または組織構造は、膀胱または膀胱の一部である。別の実施形態において、移植した構築体上に沈着させた細胞は、MCP-1を産生し、それを移植部位で放出し、天然の間葉系幹細胞MSCを刺激して移植部位に移動する。他の一実施形態において、天然のMSCは、移植部位で、移植した構築体の再生を促進および/または高める。一実施形態において、沈着させた細胞集団は、本明細書で説明される腹膜組織に由来する平滑筋細胞SMC集団である。腹膜組織は、網であってもよい。別の実施形態において、SMC集団は、収縮機能を有し、かつミオカルディン、アルファ-平滑筋アクチン、カルポニン、ミオシン重鎖、BAALC、デスミン、筋線維芽細胞抗原、SM22、ビメンチン、およびその任意の組み合わせ等の平滑筋細胞マーカーに対して陽性である、少なくとも1つの細胞を含む。他の実施態様において、SMC集団は、ミオカルディンMYOCDの発現を示す、少なくとも1つの細胞を含む。MYOCDの発現は、MYCODポリペプチドまたはMYOCDポリペプチドをコードする核酸の発現であり得る。別の実施形態において、SMCの収縮機能は、カルシウム依存性である。一実施形態において、再構築、修復、増大、または置換の対象である、層状に組織化された管腔臓器または組織構造は、膀胱または一部の膀胱である。別の実施形態において、ポリマーマトリクスは、尿路上皮細胞を含まない。全ての実施形態において、本発明の方法は、本明細書で説明されるように細胞集団を播種した、膀胱置換足場、膀胱増大足場、膀胱導管足場、または細胞集団に基づく移植のために、構築体を利用する。別の実施形態において、本明細書で説明される、層状に組織化された管腔臓器または組織構造の再生、再構築、修復、増大、または置換のための方法は、a治療を必要としている管腔臓器または組織構造の少なくとも一部に一致するように成形される、生体適合性で、合成または天然のポリマーマトリクスを提供するステップと、b実質的に筋肉細胞集団である第1の細胞集団を、本明細書で説明される細胞密度で、該ポリマーマトリクスの第1の領域の上または中に沈着させるステップと、c層状に組織化された管腔臓器または組織構造の形成のために、成形したポリマーマトリクス細胞集団を被検体の治療部位に移植するステップとを含む。他の一実施形態において、インビボで形成される層状に組織化された管腔臓器または組織構造は、天然の膀胱組織の順応性を呈する。他の一態様において、本発明は、生体力学的刺激または循環に基づいて、必要としている被検体への移植後に新膀胱を再生するための方法を提供する。一態様において、本方法は、膀胱または膀胱の一部の増大または置換のために移植した、移植した新膀胱構築体の再生を促進する際に使用するのに適切である。一実施形態において、新膀胱構築体は、細胞を新膀胱マトリクスまたは足場に播種することにより形成される。別の実施形態において、新膀胱足場は、膀胱置換足場、膀胱増大足場、膀胱導管足場、または排尿筋等価足場である。一態様において、本発明の方法は、少なくとも1つの細胞集団を新膀胱足場に播種することにより形成される、移植した新膀胱に適用する。一実施形態において、細胞播種した1つもしくは複数のポリマーマトリクスは、膀胱置換足場、膀胱増大足場、膀胱導管足場、または排尿筋等価足場である。一実施形態において、少なくとも1つの細胞集団は、実質的に筋肉細胞集団を含む。別の実施形態において、筋細胞集団は、平滑筋細胞集団であってもよい。播種のための細胞の異なる密度は、本明細書で説明されるように適切であり得る。一態様において、本発明の方法は、新膀胱の移植後の異なる時間に、異なる継続期間にわたって行われる。一実施形態において、循環は、ある期間にわたって毎日、ある期間にわたって毎週、または1週間おきに行われる。別の実施形態において、毎日の循環療法の継続期間は、約2週間、約3週間、約4週間、約5週間、約6週間、約7週間、約8週間、約9週間、約10週間、約11週間、約12週間、約13週間、約14週間であるか、または14週間を超える。一実施形態において、被検体のための毎日の循環プロトコルは、約1時間にわたって新膀胱を満たすステップと、満たした新膀胱を約1時間にわたって排出するステップと、新膀胱を自由に一般的に、一晩排出させるステップとを含んでもよい。このプロトコルは、被検体の循環療法の1日目に行うことができる。この1日の順序は、第1日目の後に連続する複数日にわたって行うことができる。一実施形態において、循環プロトコルは、1日目の後の日に行ってもよく、満たすステップの継続期間を、約2時間、約3時間、約4時間まで、または約4時間を超えて増加させる。別の実施形態において、満たすステップおよび排出するステップは、新膀胱が自由に排出することを可能にする前に、1日に1回を超えて繰り返してもよい。別の実施形態において、被検体は、移植後にカテーテルが挿入され、循環時間は、被検体のカテーテルを締め付けたり、緩めたりすることによって制御される。当業者は、付加的な循環療法が本明細書で企図されていることを理解するであろう。循環プロトコルの実施例は、以下の通りである。本明細書で説明される細胞を新膀胱マトリクスまたは足場に播種することによって形成される新膀胱構築体の移植後に、循環を、移植後約1ヶ月に開始し、約90日まで継続して、2週間おきに14±2日間隔で行う。循環は、移植した新膀胱の順応性測定等の特定の種類の評価の後だが、蛍光透視撮像等の他の種類の評価の前に完了する。循環は、順応性測定の完了後に、10~25mL/分の速度で、滅菌生理食塩水恒温器によって加温するで膀胱を再膨張させることによって行う。循環は、少なくとも5~10回、繰り返される。0~10mmHgの初期圧力を達成して、開始時間とともに記録する。時間、送達される等張溶液の容積、および得られる圧力は、カテーテルの周囲で漏出が観察されたとき別称、漏出点か、または観察された容積がちょうど行われた順応性測定の容積に等しくなったときのどちらかが先に起こったときに、各サイクルについて記録される。一実施形態において、本発明は、被検体に移植した新膀胱の再生を促進する方法を提供し、a移植した新膀胱を流体で満たすステップと、bステップaの満たした新膀胱を空にするステップとを含む。別の実施形態において、本方法は、ステップaおよびbを繰り返す、ステップcを含む。他の一実施形態において、本方法は、移植後の最初の2週間以内に開始される。一実施形態において、ステップaおよびbは、1日1回、週1回、または隔週に1回行われる。いくつかの他の実施態様では、満たすステップaは、約1時間行われ、空にするステップbは、約1時間行われる。さらに別の実施形態において、ステップaおよびbは、少なくとも移植後約6週間までに行われる。他の一実施形態において、ステップaおよびbは、移植後約10週間を超えて行われない。別の実施形態において、ステップaおよびbは、移植後約10週間を超えて行われる。他の実施態様において、満たすことは、新膀胱を拡大することを含む。別の実施形態において、再生は、循環を受けなかった被検体の新膀胱と比較して、新膀胱の容量の増加を含む。他の一実施形態において、再生は、循環を受けなかった被検体の新膀胱と比較して、新膀胱の順応性の増加を含む。他の実施態様において、再生は、循環を受けなかった被検体の新膀胱と比較して、新膀胱における細胞外マトリックス発達の増加を含む。一実施形態において、細胞外マトリックス発達の増加は、エラスチン繊維の発達を含む。他の一態様において、本発明は、移植した新膀胱が受容体の要求に応答するように、哺乳動物の新膀胱の恒常的、調節的発達を提供するための方法に関する。一実施形態において、移植した新膀胱は、受容体に比例するサイズまで成長する。別の実施形態において、被検体における新膀胱の恒常的、調節的発達を提供するための方法は、a生体適合性ポリマーの足場を提供するステップと、b実質的に筋肉細胞集団である第1の細胞集団を、該足場の第1の領域の上または中に沈着させるステップと、cステップbの足場を該被検体に埋め込んで、恒常的、調節的発達を確立するステップとを含む。他の一実施形態において、恒常的、調節的発達は、臓器のサイズおよび構造の復元を含む。別の実施形態において、恒常的、調節的発達は、体重に比例する新膀胱容量を含む。一実施形態において、比例する新膀胱容量は、移植後約4ヵ月で達成される。別の実施形態において、被検体における新膀胱の恒常的、調節的発達を提供するための方法は、移植した新膀胱の恒常的、調節的発達または進展の状態を監視するステップを含む。監視は、移植した新膀胱の位置および形状、ならびに/または尿力学的順応性および容量を示すために、膀胱造影手技を含んでもよい。別の態様において、本発明は、新しい臓器または組織構造を移植した後の患者の予後評価のための方法を提供する。一実施形態において、本方法は、該被検体から得られる試験試料中のMCP-1の発現レベルを検出するステップと、b対照試料または対照基準値と相対的なMCP-1の発現レベルに対する、試験試料中の発現レベルを判定するステップと、cMCP-1の発現レベルの判定に基づいて、患者の再生予後を予測するステップとを含み、試験試料中のより高いMCP-1の発現レベルは、対照試料または対照基準値と比較したときの、被検体における再生の予後を示す。別の態様において、本発明は、新しい臓器または組織構造を患者に移植した後の患者の予後評価のための方法を提供し、本方法は、a患者の生物学的試料を得ることと、生物学的試料中のMCP-1の発現を検出することとを含み、MCP-1の発現は、被検体における再生の予後を示す。いくつかの実施形態において、対照試料または対照基準値と相対的な患者の生物学的試料中の増加したMCP-1の発現は、被検体における再生の予後を示す。いくつかの実施形態において、対照試料または対照基準値と相対的な患者の生物学的試料中の減少したMCP-1の発現は、被検体における再生の予後を示さない。患者試料は、血液または尿等の体液を含む試験試料であってもよい。いくつかの実施形態において、判定ステップは、i試験試料および対照中のMCP-1の発現レベルの差を測定すること、および/またはii試験試料および対照中のMCP-1の発現レベル差の測定から得られるデータを分析すること、といった目的に適切なプロセッサによって実行されるソフトウェアプログラムの使用を含む。適切なソフトウェアおよびプロセッサは、当技術分野でよく知られており、市販されている。プログラムは、CD-ROM、フロッピーディスク、ハードドライブ、DVD、またはプロセッサに関連付けられたメモリ等の有形媒体に記憶させたソフトウェアで具現化されても良いが、当業者は、プログラムの全体またはその一部を、代替として、プロセッサ以外のデバイスによって実行すること、ならびに/または既知の様式でファームウェアおよび/もしくは専用ハードウェアで具現化することが可能であることを容易に理解するであろう。判定ステップの後には、一般的に、例えば、測定結果、所見、診断、予測、および/または治療の推奨が記録されて、技術者、医師、および/または患者に通信される。特定の実施形態では、そのような情報を患者および/または主治医等の当事者に通信するために、コンピュータを使用する。いくつかの実施形態では、結果もしくは診断が通信される国または管轄区域と異なる国または管轄区域でアッセイが行われるか、またはアッセイの結果が分析される。好ましい実施形態において、異なるMCP-1の発現レベルを有する試験被検体で測定したMCP-1の発現レベルに基づいた予後、予測、および/または治療の推奨は、アッセイが完了した後、ならびに予後または予測が発生した後にできる限り早く被検体に通信される。結果または関連の情報は、被検体を治療する医師によって被検体に通信されてもよい。代替として、結果は、電子メールまたは電話等の書き込みの電子的通信形態を含む、任意の通信手段によって、試験被検体に直接通信されてもよい。通信は、電子メール通信等の場合には、コンピュータの使用によって容易になり得る。特定の実施形態において、予後試験の結果、ならびに/または試験から引き出される結論および/もしくは試験に基づく治療の推奨は、電気通信の分野の当業者によく知られているコンピュータハードウェアおよびソフトウェアの組み合わせを使用して、自動的に発生されて、被検体に自動的に送達されてもよい。健康管理指向の通信システムの1つの例は、米国特許第6,283,761号で説明されている。しかしながら、本発明は、この特定の通信システムを利用する方法に限定されない。本発明の方法の特定の実施形態において、試料をアッセイするステップ、再生の予後および/または予測ステップ、およびアッセイ結果もしくは診断を通信するステップを含む、本方法の全てのもしくはいくつかの工程は、種々の管轄区域例えば、外国で行われてもよい。別の態様において、本明細書で説明される予後方法は、移植の成功、および再生のためのリハビリテーション/治療プロトコルに関する情報を当事者に提供する。一実施形態において、本方法は、被検体から得られる試験試料中のMCP-1の発現レベルを検出するステップと、b対照試料または対照基準値と相対的なMCP-1の発現レベルに対する、試験試料中の発現レベルを判定するステップと、cMCP-1の発現レベルの判定に基づいて、患者の再生予後を予測するステップとを含み、試験試料中のより高いMCP-1の発現レベルは、対照試料または対照基準値と比較したときに、新しい臓器または組織構造の再生の徴候を示す。概して、本明細書で使用される、再生予後は、本明細書で説明される構築体の移植を通した膀胱の置換または増大後の機能的膀胱の発達もしくは改善、本明細書で説明される構築体の移植後の機能的尿路変向の発達、本明細書で説明される構築体の移植後の膀胱容量の発達もしくは改善された膀胱容量、または本明細書で説明される構築体の移植後の膀胱順応性の発達もしくは改善された膀胱順応性のうちのいずれか1つの予想または予測を包含する。全ての実施形態において、本明細書で説明される、治療を必要としている被検体に、層状に組織化された管腔臓器または組織構造を提供する方法は、前述した再生の予後評価といった、移植後のステップを含んでもよい。全ての実施形態において、本発明は、必要としている被検体に、新しい臓器または組織構造を提供するための、特定の移植後の監視ステップを含む方法に関する。一実施形態において、移植した構築体の効果および性能は、移植後の異なる時間点での超音波撮像、腎盂像、ならびに尿および血液分析等を通して監視される。7.キット本発明は、本発明のポリマーマトリクスおよび足場、および関連する材料、ならびに/または細胞培養媒体および使用説明書を備える、キットをさらに含む。使用説明書は、例えば、細胞の培養ならびに細胞および/または細胞産物の投与のための指示を含んでいてもよい。使用説明書はまた、腹腔鏡的移植のために、本発明のポリマーマトリクスおよび足場を前処理する、折り畳む、または調製するための説明を含んでもよい。一実施形態において、本発明は、本明細書で説明される足場を備えるキットおよび使用説明書を提供する。別の実施形態において、キットの足場は、膀胱増大足場、膀胱置換足場、尿路導管足場、または筋肉等価足場のうちの1つ以上である。8.報告書本発明の方法は、市販目的で実践したときに、概して、再生予後の報告書または要約を作成する。本発明の方法は、本明細書で説明される構築体を提供するために、任意の手術手技の前後の再生の、起こり得る経過または結果の予測を含む報告書を作成する。報告書は、予後に関連する任意の指標に関する情報を含んでもよい。本発明の方法および報告書は、報告書をデータベースに記憶することをさらに含むことができる。代替として、本方法はさらに、被検体のデータベースの記録を作成することができて、データを伴う記録をポピュレートすることができる。一実施形態において、報告書は、紙の報告書であり、別の実施形態において、報告書は、聴覚的な報告書であり、別の実施形態において、報告書は、電子的な記録である。本報告書は、医師および/または患者に提供することが想定される。報告書の受信は、データおよび報告書を含むサーバコンピュータへのネットワーク接続を確立することと、サーバコンピュータからのデータおよび報告書を要求することとをさらに含むことができる。本発明によって提供される方法はまた、全体的または部分的に自動化されてもよい。以下の実施例は、例示目的のみのために提示されるのであって、決して本発明の範囲を限定することを意図するものではない。本明細書で引用される全ての特許、特許出願、および文献の参照は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。実施例1-SMC源としての網平滑筋細胞は、イヌおよびブタの網から、成功裏に単離した。最初に、網由来の平滑筋細胞を、緩衝生理食塩水中で組織を洗浄することによって表面の汚染物質を取り除いて、イヌのまたはブタ網組織から単離した。次いで、図14の図式で示すように、一連の酵素消化ステップおよび遠心分離ステップを網に受けさせて、さらに培養および特徴付けするための分離した網由来の細胞を得た。簡潔には、洗浄した網組織を、37°Cで1時間、0.1のコラゲナーゼIWorthingtonBiochemical,Lakewood,NJ、およびDMEM-HGInvitrogen,Carlsbad,CA中の1のBSASigma,St.Louis,MOの溶液で消化させた。組織消化を補助するために、溶液を、37°Cで1時間のインキュベーション中に、速度50および傾斜15で、プラットフォームシェーカー上に配置した50mlの管の中で攪拌した。消化させた後に、溶液を、5分間300×gで遠心分離し、次いで、網由来の細胞を含有する結果として生じるペレット化した材料を、脂肪プラグおよび他の非必須組織細片を取り除くために、PBS1のリン酸緩衝生理食塩水PBS中に再懸濁すること、および5分間300×gで遠心分離してペレット化することを含む、一連のステップによって洗浄した。洗浄後、細胞を、培養地を含むDMEM10のFBS中に再懸濁して、Tフラスコ上で平板培養した。培養は、生体外での拡張のためにサイトカインおよび成長因子を補充した、市販の媒体中で行った。以降の細胞通過によって適切な細胞数に到達した時に、細胞形態の観察を行い、平滑筋細胞タンパク質の免疫検出のために、アリコートを固定して処理した。比較分析のために、細胞は、Atala他J.Urol.150:608,1993、Cilento他J.Urol.152:655,1994、およびAtalaの米国特許第6,576,019号参照によりその全体が本明細書に組み込まれるで説明されるプロトコルを使用して組織外植片を培養することによって、膀胱の平滑筋層から単離した。当業者は、細胞を単離する他の適切な方法を理解するであろう。実施例2-SMCの特徴付け形態学。図15は、イヌ由来およびブタ由来の網細胞の細胞形態の、イヌ由来およびブタ由来の膀胱細胞との比較を示す。イヌおよびブタの膀胱の平滑筋および網由来の細胞の細胞形態は、DMEM10のFBS中で成長させたときに、全く同じではないにしても、類似した形態が認められる。細胞は、紡錘に成形されて、伸長され、渦巻状の丘および谷形成の形跡を示す。したがって、網由来のものは、それらの形態が平滑筋細胞様であると思われる。細胞表面マーカーの蛍光活性化細胞選別FACS分析。図16A~Dは、FACS分析による細胞表現型の特徴付けを例証し、イヌ由来の網細胞が、平滑筋細胞マーカーであるアルファ-アクチンおよびカルポニンに対して陽性であることを示す。簡潔には、データ点あたり0.5×106~1×106個の細胞を、2のパラホルムアルデヒドに付着させ、非特異的結合を防止するためにFcレセプタを遮断した。次いで、細胞を、製造業者によって推奨される平滑筋細胞アルファ-アクチンSMAおよびカルポニンに対する抗体でインキュベートした。イソタイプ対照抗体IgG1またはIgG2aを、陰性対照として使用した。最終的な洗浄PBS、0.1のTritonX-100の後に、適切な蛍光チャネルを使用して、BDFACSAria1またはGuavaEasyCyteMiniExpressAssayシステムを利用して、抗原検出を行った。各試料から、最小で5,000~10,000の事象が得られた。膀胱平滑筋細胞に類似して図16AおよびB、網から単離した98を超える細胞は図16CおよびD、平滑筋細胞マーカーであるアルファ-アクチンおよびカルポニンを発現する。したがって、網由来の細胞は、細胞表面マーカーに関して、膀胱から単離した平滑筋細胞と同じ表現型を有する。図17および図18は、平滑筋細胞マーカー、ならびに上皮および内皮抗原マーカーの双方を考察することによる、2頭の異なる動物からのイヌの網由来の細胞さらなるFACS光源発現分析を表す。1μg/mlの一次および二次抗体で、網由来の細胞への染色を行った。下記表2.1で要約されるように、イヌの網由来の細胞は、平滑筋細胞マーカーに対して陽性であり、上皮および内皮細胞マーカーに対して陰性である。免疫蛍光分析。図19~図21は、種々の平滑筋細胞マーカーの免疫蛍光分析、ならびに内皮および上皮細胞マーカーとの比較による、網および膀胱由来の平滑筋細胞の平滑筋細胞様表現型をさらに実証する。簡潔には、細胞を、2のパラホルムアルデヒドSigmaで固定し、10のウマ血清Gibco/0.2のTritonX-100Sigma/DPBGibcoで遮断した。一次抗体を加えて、プレートを4°Cで一晩インキュベートした。細胞は、2のウマ血清/0.2のTritonX-100/DPBで3回洗浄し、次いで、室温で1~3時間、1:500希釈の二次抗体ヤギ抗マウスIgG1およびヤギ抗マウスIgG2aでインキュベートした。核は、Hoechst33342で対比染色した。マウスIgG1InvitrogenおよびマウスIgG2aInvitrogenのイソタイプ対照を、陰性対照とした図示せず。画像は、SimplePCIソフトウェアを実行して、LeicaDMI4000Bエピ蛍光顕微鏡で取り込んだ。図19は、イヌの網および膀胱由来の細胞中の、カルポニン、平滑筋SMアルファ-アクチン、およびトランスゲリンSM22の発現の免疫染色を表す。緑色の蛍光は、網由来の細胞が、膀胱平滑筋細胞が発現するのと同等のレベルで、これら3つの平滑筋特異的タンパク質を発現することを裏付ける。図20Aおよび図20Bは、イヌの網由来の細胞が、平滑筋細胞マーカー平滑筋アクチン、ビメンチン、ミオカルディン、およびbaalc脳および急性白血病細胞質タンパク質に対して陽性であり、上皮および内皮細胞マーカーUEA-1およびEpCamに対して陰性であることを示す、これらの細胞の免疫蛍光分析を表す。各パネルの左側は、画像領域の細胞含量を検証する対照画像である。緑色の蛍光を示す、各パネルの右側の画像は、網由来の細胞が平滑筋特定のタンパク質を発現することを裏付けている。図21は、ブタ網由来の細胞もまた、免疫蛍光による平滑筋細胞マーカーに対して陽性であり、膀胱由来の細胞に類似していることを示す免疫染色分析を表す。この付加的な免疫蛍光データは、ブタの網およびブタの膀胱に由来するSMCの中の、平滑筋アクチン、baalc、ミオカルディン、およびミオシン重鎖の発現を示す。抗原マーカーの発現による細胞表現型分析の概要を下記表2.2で提供し、イヌおよびブタの網由来の細胞と、ヒトの膀胱平滑筋細胞との比較を示す。まとめると、これらのデータは、イヌの網由来の細胞3頭の異なるイヌから抽出し、継代2代目および3代目で、3つの異なる種類の媒体中で培養したおよびブタの網由来の細胞PODS、最終継代5代目で、2つの異なる種類の媒体中で培養したが、6つの異なる平滑筋マーカーに対して陽性であり、上皮および筋線維芽細胞マーカーに対して陰性であることを実証している。これらの同じマーカーは、対照として使用したヒトの膀胱平滑筋細胞Hu1022SMC、継代5代目上で発現する。さらに、網がSMCの代替の源であってもよいという考えを支持する。故に、これらの免疫組織化学的なデータは、平滑筋細胞が網組織から単離されているという発見をさらに支持する。ポリメラーゼ連鎖反応PCRに基づく遺伝子発現分析。内皮および平滑筋細胞の遺伝子発現分析を、PCRによって評価した。試料RNAを、製造業者の指示に従って、RNeasyPlusMiniKitQiagenで単離した。cDNAは、製造業者の命令に従って、SuperScriptVILOcDNASynthesisKitInvitrogenを使用して、2μgのRNAから発生させた。cDNA合成の後に、各試料を、蒸留水で1:10に希釈した。定量的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応qRT-PCRは、表2.2に列記されるTaqManプライマーおよびプローブAppliedBiosystems,Carlsbad,CA、ならびに10μlのMasterMix2倍濃度、1μlプライマー/プローブ、および9μlのcDNA希釈1:10を含む反応混合物を使用して設定した。反応物は、デフォルトの循環パラメータを使用して、ABI7300リアルタイムサーマルサイクラーで行った。PCRデータの分析は、比較Ctによる相対定量RQ法を使用して行った。相対定量は、内在性基準に正規化され、かつ校正器と相対的な標的の量であり、次の方程式によって与えられる。2-ΔΔCTを、ΔΔCT=ΔCTTest-ΔCTCalibratorとした。内在性参照内部対照を、18SrRNAとした。ヒトの大動脈内皮細胞ヒトのAECを、これらの遺伝子の発現に対する陽性対照として使用した。表2.3は、PCR実験における発現に対して試験した遺伝子を列記する。図22は、イヌの網由来の細胞と、イヌの膀胱由来の平滑筋細胞と、対照としてのヒトの膀胱細胞との間の、平滑筋細胞マーカーであるアクチン継代1代目の細胞、SM22、ミオシン重鎖、およびカルポニンの遺伝子発現レベルを例証する。網および膀胱由来の平滑筋細胞は、ヒトの膀胱対照と比較したときに、平滑筋細胞遺伝子の高い発現を示す。図23は、イヌの網由来の細胞と、イヌの膀胱由来の平滑筋細胞と、対照としてのヒトの膀胱細胞との間の、内皮細胞マーカーであるCDH5、FLT1、KDR、PECAM、TEK、およびvWFの遺伝子発現レベルを例証する。FLT1およびかなり少ないKDRを除いて、残りの内皮遺伝子は、膀胱平滑筋細胞または網由来の細胞によって発現されなかった。存在する場合、網平滑筋細胞および膀胱平滑筋細胞は、内皮細胞マーカーの同じ限定的な発現を示した。図24は、ブタ由来の細胞に対する平滑筋細胞マーカーMYOCD、SMA、SM22、SM-MHC、CNN、B-アクチンの遺伝子発現レベルを示す。ゲル電気泳動によって質的に分析したqRT-PCRの結果は、ブタの網由来の平滑筋細胞の遺伝子発現が、ブタの膀胱由来の平滑筋細胞のそれに類似していることを示している。ゲル収縮機能アッセイ。従来技術で一般的に使用される平滑筋細胞のための機能アッセイは、コラーゲンゲルの中に移植したときに収縮する能力である。イヌの膀胱またはイヌの網由来の平滑筋細胞は、2~3mg/mlのラット尾コラーゲンIBDBiosciences,SanJose,CA.,USAを含有する溶液中の500,000細胞/mLで懸濁した。1.8mg/mlのNaHCO3Sigma,StLouis,MO,USAを補充した濃縮MEMInvitrogen,Carlsbad,CA.,USA、および2.3mg/mlのL-グルタミンInvitrogenを希釈剤として使用し、3.7mg/mlのHEPESInvitrogenでpH調製して、コラーゲン重合を可能にした。陰性対照ヒドロゲルは、Ca2依存的な細胞収縮を抑えるために、5μMのEDTAInvitrogenを補充した。各複製について、250μLの細胞懸濁液を、48ウェルプレートの単一のウェルに分配した。重合すると、完全な収縮を妨げる可能性のある摩擦および付着を低減するために、コラーゲンゲルをウェルプレートから徐々に緩和した。無血清DMEM250μLを、ウェルプレートの中の各ゲルの頂部に加えて、加湿した5のCO2を含有する雰囲気中で、37°Cでインキュベートした。全てのゲルは、MolecularImagerChemiDocXRSSystemBIO-RAD,Hercules,CA,USAを使用して、0時間、24時間、および48時間の時間点で撮像した。画像は、ImageJソフトウェアバージョン1.40gで測定し、画素単位で表した。ウェルプレートのコラーゲンゲルの直径は、精度を向上させるために、表面積から計算した。ゲルの直径の減少は、ゲルが収縮したことを示す。図25は、網および膀胱由来の平滑筋細胞が、実証された収縮能力平滑筋細胞の特徴的機能であるを有することを示す。実施例3-新尿路導管足場に播種される網由来の平滑筋細胞本明細書で説明される新尿路導管は、管導管の形態で成形される生分解性足場、および足場に播種される平滑筋細胞から成る。この研究について、網組織に由来する平滑筋細胞は、新尿路導管に関するものと同じ過程を使用して調製した足場材料上に播種した。足場内部の細胞は、抗原発現による細胞表現型、タンパク質発現、細胞外マトリクスECMの産生、および代謝の活性プロファイルを含む、平滑筋細胞の特性について評価した。免疫組織化学的染色。図26は、足場材料上に播種した後の、膀胱および網由来の平滑筋細胞の免疫組織化学的染色を示す。細胞播種した足場は、前述のように、固定して、平滑筋アルファ-アクチンに対する抗体で着色した。足場内部の網由来の平滑筋細胞表現型の免疫染色分析は、平滑筋アルファ-アクチンの発現を示した。したがって、網由来の細胞は、足場上に播種したときに、足場内部で平滑筋細胞表現型を保持し、膀胱由来の平滑筋細胞と同様に振舞うと思われる。MCP1タンパク質分泌。MCP-1は、膀胱平滑筋細胞の正常な産物であり、効力、同一性、および機能のマーカーとして使用されてもよい。RDSystemsによるイヌのMCP-1に特異的なELISAに基づくアッセイ系を用いた。試料は、2回アッセイし、標準曲線と比較して、構築体媒体の中の推定したMCP-1レベルを提供した。図27で例証されるように、足場に播種した網由来の平滑筋細胞は、MCP1タンパク質を産生した。ECMの産生。ECMタンパク質を産生する網由来の細胞の能力を評価するために、足場材料上に播種した後に、膀胱および網由来の平滑筋細胞の免疫組織化学的染色を行った。細胞播種した足場は、前述のように、固定して、フィブロネクチンに対する抗体で着色した。図28で描写されるように、網由来の平滑筋細胞は、細胞外マトリクス材料であるフィブロネクチンを合成するが、これは、細胞の接着、移動、成長、および分化に重要である。さらに、網平滑筋細胞は、ここでも、足場上に播種したときに、膀胱平滑筋細胞と同様に振舞う。代謝のプロファイリング。足場に播種したときに、イヌの膀胱由来の平滑筋細胞および網由来の細胞の代謝のプロファイルをさらに分析した。媒体試料は、6日間の時間経過にわたって採取した。試料は、自動システムBiolyzerを使用して分析した。簡潔には、媒体を、試料チャンバに加え、機械に注入して種々の代謝物質のレベルを測定した。図29で描写されるように、イヌの膀胱平滑筋細胞および網由来の細胞の代謝プロファイルは、Gln、Glu、Gluc、Lac、およびNH4のレベルに関して類似している。したがって、網由来の細胞が、足場上に播種したときに、代謝的に活性であることを実証する。これらの研究は、網組織から平滑筋細胞を効果的に単離できることを示す。網由来の細胞は、膀胱から単離した平滑筋細胞と同じ特性を有する。網由来の細胞は、単離および拡張時に平滑筋細胞の形態を示した。抗原マーカーによる表現型分析は、膀胱平滑筋細胞に見られたものと同じであった。遺伝子発現は、網および膀胱由来の細胞について類似していた。内皮細胞マーカーの発現は、膀胱平滑筋細胞で検出されたものと同じであった。また、脂肪質マーカーは、細胞培養では検出されずデータ記載せず、膀胱平滑筋細胞に対するものと同じであった。最後に、網由来の細胞もまた、膀胱由来の細胞に類似する収縮表現型を示した。したがって、これらの観察に基づいて、平滑筋細胞が、イヌおよびブタの網から成功裏に単離されたことが分かった。また、網由来の平滑筋細胞が、新尿路導管足場上に播種したときに、抗原マーカーの発現平滑筋アルファ-アクチン、タンパク質の発現MCP-1、ECMの産生フィブロネクチン、代謝グルコース摂取、乳酸産生等といった特性で示されるように、膀胱組織から単離した平滑筋細胞と同様に振舞うことを実証した。図30は、移植した後に、代替として供給した別の種類の平滑筋細胞脂肪質由来の平滑筋細胞を播種した新尿路導管の特性を表す。天然様の再生は、免疫応答を伴わずに、3ヵ月で観察することができるA。加えて、尿管および皮膚接合部の粘膜裏打ちは、水密な尿の流れを可能にするB。いかなる異常な細胞成長もしくは組織発達、尿吸収、粘液分泌、または免疫拒絶反応の形跡も見られなかった。これらの発見は、新尿路導管の産生のために、平滑筋細胞の代替源として、網を使用できることを示唆する。"