"核酸の塩基配列中に含まれる特定の位置のシトシンがメチル化しているか否かを判別する方法であって、測定対象となるシトシン以外の配列に塩基対を形成させることにより、測定対象のシトシンの運動性を確保した後、該核酸への抗メチルシトシン抗体の結合量によって、測定対象のシトシンがメチル化しているか否かを判別することを特徴とする方法。測定対象となるシトシンの運動性を確保する方法として、測定対象のシトシンを含む一本鎖核酸と、該シトシンがバルジ構造内に配置されるように設計された一本鎖核酸との間で二重螺旋構造を形成させることを特徴とする、請求項1に記載の方法。測定対象となるシトシンの運動性を確保する方法として、測定対象のシトシンを含む一本鎖核酸と、該シトシンと塩基対を形成すべき箇所がグアニン以外に設計された一本鎖核酸間で二重螺旋構造を形成させることを特徴とする、請求項1に記載の方法。測定対象となるシトシンの運動性を確保する方法として、測定対象のシトシンを含む一本鎖核酸が自己相補鎖を有し、かつ、該シトシンが該自己相補鎖の対合により形成されるループ領域に位置するように設計されていることを特徴とする、請求項1に記載の方法。抗メチルシトシン抗体の結合量を測定する際に、西洋わさびペルオキシターゼ、又はアセチルコリンエステラーゼを標識した2次抗体と抗メチルシトシン抗体を反応させ、吸光度測定により測定することを特徴とする、請求項1に記載の方法。抗メチルシトシン抗体の結合量を測定する際に、ビオチン化した抗IgG抗体と抗メチルシトシン抗体を反応させ、さらにアビジン化したアセチルコリンエステラーゼを反応させ、電気化学発光法により測定することを特徴とする、請求項1に記載の方法。測定対象となるシトシンと塩基対を形成する箇所が不対となるように設計された一本鎖核酸と、抗メチルシトシン抗体を組み合わせて構成したメチル化核酸検出キット。本発明は、上述した核酸の塩基配列中の特定の位置のメチルシトシンを、核酸の損傷無く、簡便かつ高感度で、選択性良く定量する手法を提供することを目的とする。発明者等は、抗メチルシトシン抗体は2重螺旋内でグアニンと塩基対を形成したメチルシトシンを認識出来ないが、塩基対を形成していないメチルシトシンを認識可能であることを見いだした。これは、抗体の分子量は150kDa程度と核酸の二重螺旋の半径に比べ遙かに嵩高いために二重螺旋構造を形成した内向きのメチルシトシンを認識できないためである。この特性を利用することにより、測定対象とすべきシトシンのみについてメチル化されているか否かを判断することができ、測定対象外のシトシンのメチル化の状態に影響を受けない、選択的な測定を実現することができる。すなわち、塩基配列中の測定対象とする部位のシトシンあるいはメチルシトシンのみを塩基二本鎖内で不対状態とし、その後、当該二本鎖に対する抗メチルシトシン抗体の結合量を測定することにより、測定対象とする部位のシトシンのメチル化状態を知ることが可能になる。より具体的には、測定対象とする部位のシトシンのみを二本鎖内で不対状態とするために、測定対象とするシトシンを二本鎖において形成されるバルジ構造やループ構造内に配置させたり、測定対象とするシトシンと塩基対を形成すべき位置の塩基をシトシンやアデニン、またはチミンすなわち、シトシンに対しミスマッチとしたりする。これにより、測定対象とするメチルシトシンは、二重螺旋の外向きとなりうる運動性を獲得できるために、嵩高い抗体とも結合可能となる。この抗体の嵩高さを利用することで、メチルシトシンの検出に選択性を付与し、特定の部位の塩基のメチル化状態のみを検出できるようにすることが本発明の重要な要素となっている。本発明による特定部位のメチルシトシンの検出は、以下のような手順で行われる。1目的試料である一本鎖核酸と、別途一本鎖核酸との間で二重螺旋構造を形成させる。この際に、二重螺旋構造を形成させるための一本鎖核酸の塩基配列としては、二重螺旋構造を形成するに十分な程度相補的な配列を有しながらも、測定対象とするシトシンもしくはメチルシトシンと塩基対を形成しないような塩基配列が必要である。具体的には、測定対象とするシトシンもしくはメチルシトシンが二重螺旋形成時に、バルジ構造内に配置されるような塩基配列にする方法がある。もしくは、測定対象とするシトシンもしくはメチルシトシンと塩基対を形成すべき位置の塩基をミスマッチつまり、アデニン、シトシンもしくはチミンとした一本鎖核酸と二重螺旋構造を形成させる。もしくは、一本鎖のみであっても、自己相補配列を有し、当該自己相補鎖により二重螺旋構造を形成させた際に、測定対象とするシトシンもしくはメチルシトシンがループ構造内に配置されるような一本鎖核酸とすることも可能である。いずれにしても、測定対象とするシトシンもしくはメチルシトシンがグアニンと水素結合対を形成していない状態であり、測定対象外のメチルシトシンがグアニンと水素結合対を形成している状態とする。これにより、測定したいシトシンもしくはメチルシトシンは塩基対を形成していないために、二重螺旋の外側を向いている頻度が高くなる。一方、測定したくない配列部分は塩基対を形成しているため、二重螺旋の内側を向いている頻度が高くなり、抗体に認識されない状態となる。2メチルシトシンに結合する抗メチルシトシン抗体を測定試料溶液に加える。これにより、塩基対を形成せず二重螺旋構造の外向きのメチルシトシンは、抗メチルシトシン抗体と結合する。しかしながら、測定対象外のメチルシトシンは、グアニンと塩基対を形成し二重螺旋構造の内側を向いているために、抗メチルシトシン抗体と結合できない。3核酸中のメチルシトシンに結合した抗メチルシトシン抗体量を検出することにより、メチルシトシンの量を測定する。抗メチルシトシン抗体の検出は、従来のイムノアッセイ法に用いられてきた一般的手法を幅広く用いることが可能である。例えば、酵素西洋わさびペルオキシターゼやアルカリフォスファターゼが一般的に良く用いられるを標識した2次抗体を導入して、吸光度を測定することにより検出が可能である。また、抗メチルシトシン抗体を予め上記酵素で標識しておいても良い。また、抗メチルシトシン抗体をビオチン化しておき、アビジン化した酵素を導入しても良い。また、蛍光標識した2次抗体やアビジンを使用することも可能である。放射性同位体を標識物として用いることも可能である。すなわち、本出願は、具体的には、以下の発明を提供するものである。1核酸の塩基配列中に含まれる特定の位置のシトシンがメチル化しているか否かを判別する方法であって、測定対象となるシトシン以外の配列に塩基対を形成させることにより、測定対象のシトシンの運動性を確保した後、該核酸への抗メチルシトシン抗体の結合量によって、測定対象のシトシンがメチル化しているか否かを判別することを特徴とする方法。2測定対象となるシトシンの運動性を確保する方法として、測定対象のシトシンを含む一本鎖核酸と、該シトシンがバルジ構造内に配置されるように設計された一本鎖核酸との間で二重螺旋構造を形成させることを特徴とする、1に記載の方法。3測定対象となるシトシンの運動性を確保する方法として、測定対象のシトシンを含む一本鎖核酸と、該シトシンと塩基対を形成すべき箇所がグアニン以外に設計された一本鎖核酸間で二重螺旋構造を形成させることを特徴とする、1に記載の方法。4測定対象となるシトシンの運動性を確保する方法として、測定対象のシトシンを含む一本鎖核酸が自己相補鎖を有し、かつ、該シトシンが該自己相補鎖の対合により形成されるループ領域に位置するように設計されていることを特徴とする、1に記載の方法。5抗メチルシトシン抗体の結合量を測定する際に、西洋わさびペルオキシターゼ、又はアセチルコリンエステラーゼを標識した2次抗体と抗メチルシトシン抗体を反応させ、吸光度測定により測定することを特徴とする、1に記載の方法。6抗メチルシトシン抗体の結合量を測定する際に、ビオチン化した抗IgG抗体と抗メチルシトシン抗体を反応させ、さらにアビジン化したアセチルコリンエステラーゼを反応させ、電気化学発光法により測定することを特徴とする、1に記載の方法。7測定対象となるシトシンと塩基対を形成する箇所が不対となるように設計された一本鎖核酸と、抗メチルシトシン抗体を組み合わせて構成したメチル化核酸検出キット。本発明は、従来のメチルシトシン検出法であるbisulfite法において必要とされたウラシルへの変換反応時間やPCR時間が不要であり、また、本発明における抗体の反応時間はこれらに比べ短いために、総測定時間を短縮できる。また、bisulfite法では核酸サンプルの断片化が進行することが多いが、本発明の方法では、抗体の結合を利用しているために、原理上、目的核酸の損傷は一切起こらない。また、本発明は、従来のオスミウム酸を使う方法と異なり、チミンに対する選択性も高く、正確かつ簡便にメチルシトシンを計測可能である。また、オスミウム酸による標識反応は不可逆的な反応であるのに対し、本発明の方法は、pHを3程度に低下させることにより、抗体を解離させることも可能であるため、可逆の反応である。また、本発明は、従来の抗メチルシトシン抗体を用いた測定法ではメチルシトシンの量的情報しか得ることが出来なかったのに対し、本発明者らの重要な知見である不対塩基の選択的検出を利用することにより、配列中の任意の位置のシトシンがメチル化しているか否かを知ることが可能であり、メチルシトシンの検出に1塩基レベルでの高い位置選択性を付与することができる。このように、本発明は、塩基配列中のメチルシトシンについて、量的情報だけでなく、位置情報も、正確かつ簡便に取得することが可能であるという優れた効果を有している。本発明では、二重螺旋構造を形成させた核酸中のメチル化シトシンを測定するにあたり、測定したいシトシンもしくはメチルシトシンを意図的に不対とすることで、任意のシトシンもしくはメチルシトシンのみに対して抗体が結合するか否かを測定している。二重螺旋構造を形成させるには、2本の1本鎖核酸をハイブリダイゼーションさせる方法が一般的である。また、1本鎖核酸のみにおいても、自己相補鎖配列を有していれば二重螺旋を形成するので、これも利用可能である。2本の1本鎖核酸をハイブリダイゼーションさせる方法としては、一方の1本鎖核酸をマイクロプレートに固定し、固相化させて測定を行う方法がある。予め、図1-1の様に目的核酸TargetDNAと二重螺旋を形成する1本鎖核酸ProbeDNAを固定化する。このProbeDNAの配列は、メチルシトシンを含むTargetDNAと相補的な配列を有しながらも、測定対象のシトシンもしくはメチルシトシンと対になるグアニンはProbeDNAには存在しないように設計されている。なお、固定化する基材としては金属、炭素、ガラス、高分子等の固体材料が広く利用される。例えばポリスチレンを基材とする場合にはProbe分子を含む溶液を数時間から一昼夜滴下しておくことにより吸着固定化することが可能である。また、核酸の末端をアミノ化あるいはチオール化することにより共有結合で基材と固定することも可能である。次いで、メチルシトシンを含むTargetDNAを導入し、二重螺旋構造を形成させ、図1-2の状態とする。二重螺旋構造を形成させるには、従来知られている手法を幅広く用いることが出来る。一般的にはpH6575の中性のリン酸バッファやトリスバッファ中で行うことが多い。温度は一般的に溶解温度Tm値よりも10°C程度低い温度で行う。図12の例では、TargetDNA中の測定対象のメチルシトシンがバルジ構造内に配置されるように、ProbeDNAが設計されている。図1-2の状態となった固定化Probeを洗浄し、未反応のTargetDNAを除去した後、抗メチルシトシン抗体をProbeDNATargetDNA間で形成された二重螺旋構造へ加えることで、不対のメチルシトシンのみに抗メチルシトシン抗体を結合させる。通常、抗メチルシトシン抗体は中性付近のバッファで溶解させ、この溶液を加えて1時間程度室温で静置する。これにより、図1-3の様な二重螺旋抗体複合体が形成される。これを洗浄し、未反応の抗メチルシトシン抗体を除去した後、抗メチルシトシン抗体を検出するための抗IgG抗体2次抗体を導入し、1時間程度反応させる。2次抗体には予め標識となる西洋わさびペルオキシターゼなどを修飾しておく。これにより、図14の様な複合体が形成される。未反応の2次抗体を洗浄により除去した後、標識酵素の基質を加える。西洋わさびペルオキシターゼを標識した2次抗体の場合には、3355tetramethylbenzideneを加えて発色させる。塩酸などで標識酵素の反応を停止した後、450nmの吸光度を測定することによりTargetDNA中に含まれるメチルシトシンの内、ProbeDNAと塩基対を形成しなかったメチルシトシンの定量が可能である。図2は、測定対象となるメチルシトシンがバルジ構造内ではなく、単なる不対塩基として存在する場合の模式図である。測定対象となるシトシンを不対にするには、対になるべきProbeDNAの塩基をグアニン以外図2中の例ではシトシンとする。これにより、測定対象のシトシンやメチルシトシンを二重螺旋構造の外向きにすることが可能である。その後の、抗メチルシトシン抗体による結合量の測定は、上述と同様である。図3は、本発明の方法を用いて、1本鎖核酸中のメチル化シトシンを測定する方法の模式図である。自己相補鎖を形成しない1本鎖核酸単独では、配列内に存在するすべてのメチルシトシンを検出する。しかしながら、自己相補鎖を有する配列では、塩基対を形成したメチルシトシンを抗体は認識できない。よって、図3に示すように、自己相補鎖内でループ領域にあるメチルシトシンを選択的に検出することが可能である。以上の説明は、抗メチルシトシン抗体を用いて塩基配列中の特定の位置のシトシンのメチル化の有無を検出する方法について行ったが、本発明のメチルシトシンの検出原理はその他のメチル化塩基をはじめとする各種修飾塩基についても同様に適用できることは明らかであり、例えば6-メチルアデニンであれば抗メチルアデニン抗体を用いることにより、同様に、塩基配列中の特定の位置のアデニンのメチル化の有無を検出することができる。以下、本発明を実施例に基づいて説明する。ただし本発明は以下の実施例にのみに限定されるものではない。実施例1.本実施例では、本発明によってメチルシトシンが定量的に測定可能であることを確認した実験結果を示す。先ず、市販のDNA固定化用96ウエルマイクロプレートキット住友ベークライト社製、BS61601を用いて、目的核酸を捕捉するための5種類の一本鎖核酸の固定化行った。おのおのの塩基配列は、Probe1は5GAAGTCAACAGGACGGACGCCGCGCAA3、Probe2は5GAAGTCAACAGGACGACGCCGCGCAA3、Probe3は5GAAGTCAACAGGAACGCCGCGCAA3、Probe4は5GAAGTCAACAGGCGCCGCGCAA3、Probe5は5GAAGTCAACAGGCCGCGCAA3であり、5’末端をアミノ化してある。固定化は、各一本鎖核酸を100nMに希釈し、おのおの100μLずつ加え計10pmol固定、80°Cで2時間加熱、乾燥させることにより固定化した。300μLの蒸留水で2回洗浄し、過剰の核酸を除去した。その後、測定対象の核酸としてTarget1をマイクロプレートに100μLずつ入れた。Target1の塩基配列は、5TTGCGCGGCGTCCGTCCTGTTGACTTC3であり、5‘末端から13塩基目のシトシンの5位をメチル化してある。なお、Target1はダルベッコリン酸バッファ緩衝液を用いて希釈系列を作製し、マイクロプレートの各ウエルに10210402010010pmol導入した。その後、37°Cで1時間反応させ、二重螺旋構造を形成させた。その後、300μLのバッファで2回洗浄した。さらに、05μgmLの抗メチルシトシン抗体Avivasystemsbiology社製クローンコード33D3を50μLずつ加え、37°Cで1時間反応させた。バッファで洗浄した後、05μg/mLのペルオキシターゼ標識抗IgG抗体を50μLずつ加え、37°Cで30分反応させた。バッファで洗浄した後、3355tetramethylbenzidineを加え、遮光室温で10分反応させた。その後、2N塩酸溶液を50μLずつ加え、酵素反応を停止させ、マイクロプレートリーダーBiorad社製により450nmの吸光度を測定した。測定結果を図4に示す。Probe2Probe3Probe4Probe5を固定化したウエルでは、導入した測定対象であるTarget1の量の増加に伴い吸光度の増加を確認することが出来た。一方、Probe1を固定化したウエルではTarget1の量増加に伴う吸光度の増加は観測されなかった。これは、Probe2Probe3Probe4Probe5では測定対象のメチルシトシンがバルジ構造内に配置されるようにprobeが設計されているの対し、Probe1ではこのようなバルジ構造がなく、完全相補鎖のためである。図5に、Probe1Probe2Probe3Probe4Probe5とTarget1が二重螺旋構造を形成した際の模式図を示す。Target1とProbe1は完全相補鎖であるため図51の様な二重螺旋構造を形成しており、メチルシトシンはグアニンと水素結合対を形成している。抗体の分子量は150kDa程度と嵩高いため二重螺旋構造内部のメチルシトシンとは結合できない。他方、Probe2Probe3Probe4Probe5を用いた際には、Target1とは、おのおの図52,53,54,55に示すようなバルジ構造を有する2本鎖を形成している。バルジ構造内のメチルシトシンは水素結合対を形成していないため、2本鎖の外を向いている確率が高く、抗体と結合可能である。本実験では、バルジの大きさを、1塩基、3塩基、5塩基、7塩基と変えて実験を行ったが、いずれも良好な応答を得ることが出来、完全相補鎖との差異を観測することが出来た。実施例2.本実施例では、目的とするシトシンのみが、メチル化しているか否かを判別する測定対象となっていることを確認した検出例について述べる。実施例1と同様に目的核酸を捕捉するための一本鎖核酸の固定化行った。300μLの蒸留水で2回洗浄し、過剰のDNAを除去した。その後、測定対象のDNAとしてTarget1Target2Target3Target4をマイクロプレートに100μLずつ入れた。Target1Target2Target3Target4はすべて同じ配列5TTGCGCGGCGTCCGTCCTGTTGACTTC3であるが、シトシンのメチル化の箇所が異なる。Target1では、5‘末端から13塩基目のシトシンをメチル化してある。Target2では、5‘末端から4塩基目のシトシンをメチル化してある。Target3では、5‘末端から4塩基目と13塩基目の2箇所のシトシンをメチル化してある。Target4では、メチル化したシトシンを含んでいない。Target1Target2Target3Target4はダルベッコリン酸バッファ緩衝液を用いて希釈系列を作製し、マイクロプレートの各ウエルに10210402010010pmol導入した。その後、37°Cで1時間反応させ、2本鎖を形成させた。その後、300μLのバッファで2回洗浄した。その後、実施例1と同様に、抗メチルシトシン抗体を50μLずつ加え、37°Cで1時間反応させた。バッファで洗浄した後、ペルオキシターゼ標識抗IgG抗体を50μLずつ加え、37°Cで30分反応させた。バッファで洗浄した後、3355tetramethylbenzidineを加え、遮光室温で10分反応させた。その後、2N塩酸溶液を50μLずつ加え、酵素反応を停止させ、マイクロプレートリーダーにより450nmの吸光度を測定した。図6に吸光度測定の結果を示す。Target1Target3では目的試料量の上昇に伴い吸光度が上昇、つまりメチルシトシンが検出されている。しかしながら、Target2Target4では吸光度の上昇は見られなかった。これは、測定目的のシトシンがメチル化しているか否かを選択的に判別しているためである。具体的には、図7において説明する。Target1では、Probe2との二重螺旋構造形成時に目的とするシトシンがバルジ構造内に配置されており、この部分が抗体によって認識されている。しかしながら、Target2はメチルシトシンを含んでいるものの、そのメチルシトシンはバルジ内に配置されていないために抗体によって認識されない。よって吸光度の上昇は見られず、位置選択的に検出できていることが確認できた。Target3ではメチルシトシンを2箇所有しているが、Target1と同等の大きさの応答を得ており、2倍の応答が出ることは無かった。つまり、バルジ構造内にある目的のメチルシトシンのみを選択的に検出しており、非目的対象のメチルシトシンを測定していない。Target4では、目的とするDNA内にメチルシトシンを含んでいないために検出されない。本実施例が示すように、本発明の方法によれば、核酸中の目的箇所のシトシンがメチル化されているか否かを選択的に検出が可能である。たとえ目的箇所以外がメチル化されていても測定結果に影響を与えないので、極めて位置依存性が高く、選択的な検出が可能である。実施例3.以下に、アセチルコリンエステラーゼ標識抗体を用いて検出を行った例を示す。実施例1において、抗メチルシトシン抗体をマイクロウエルに導入、バッファで洗浄した後、5μgmLのビオチン化抗IgG抗体を50μLずつ加え、37°Cで30分反応させた。その後、アビジン化アセチルコリンエステラーゼCayman社製を50μLずつ加え、室温で120分反応させた。バッファで洗浄した後、1mMアセチルチオコリンと1mMの55’ジチオビス混合液を100μL加え、室温で90分間反応させた。その後、マイクロプレートリーダーで415nmの吸光度を測定した。結果、実施例1と同様にProbe2Probe3Probe4Probe5ではTarget1の量の増加に伴い、吸光度の増加が観測された。これは、本発明による抗体によるメチルシトシン検出が、西洋わさびペルオキシターゼのみでなく、従来用いられている標識酵素を幅広く用いることが可能であることを示している。実施例4.以下に、電気化学発光法により検出を行った例を示す。実施例3において、アビジン化アセチルコリンエステラーゼを反応させ、洗浄した後、1mMアセチルチオコリンを100μL加え、室温で90分間反応させアセチルチオコリンの一部をチオコリンへと分解した。その後、チオコリンを含むアセチルチオコリン溶液を、金電極を有するフローセルへ流速20μL/分で10分間導入し、チオコリンを金電極へ濃縮させた。その後、1mMのトリス2,2’-ビピリジルルテニウムを流速20μL/分で10分間導入した。さらに、金電極の電位を0から2.0Vへと掃引しながら、電極表面での電気化学発光量の計測を行った。なおこれらの試料溶液の導入にはシリンジポンプCMA社製を用いた。電極電位を0から2.0Vへと掃引した際には、1150mV付近に発光ピークを示し、その発光ピークは、実施例1と同様にProbe2Probe3Probe4Probe5ではTarget1の量の増加に伴い、発光強度の増加が観測された。これは、本発明による抗体によるメチルシトシン検出が吸光度計測のみでなく、電気化学発光などの従来用いられている検出法に幅広く適用可能であることを示している。実施例5.本実施例では、自己相補鎖を有する一本鎖DNA中に含まれるメチルシトシンの検出例について述べる。本実施例では、核酸固定化用96ウエルマイクロプレートキット住友ベークライト社製、BS61601を用いて、核酸の固定化行った。まず、3‘末端をアミノ化したDNAオリゴマーを上記キットに付属のマイクロプレートに固定化した。Target5の塩基配列は、5’AACGAAACGTTTCGAAAGCGCGCGCGCGCGCGCTTTCGAAACGTTTCGTT3’であり、5’末端から25番目と27番目のシトシンがメチル化してある。固定化は、DNAオリゴマーを付属の固定化液を用いて任意の濃度に希釈し、希釈した溶液を100μLずつ各ウエルに滴下し、80°C、2時間オーブンで乾燥させることで行った。蒸留水300μLで2回洗浄した後、非特異吸着を防ぐことを目的として、ブロッキング材ピアス社製、品番37538を300μL加え室温で30分間放置した。洗浄用バッファダルベコリン酸緩衝液に005Tween20を加えた溶液を用いて300μLで2回洗浄した後、抗メチルシトシン抗体を反応させた。抗メチルシトシン抗体は、インキュベーションバッファダルベコリン酸緩衝液に005Tween20と01ウシ血清アルブミンを加えた溶液で05μgmLに希釈した溶液を、50μLずつ加え、37°Cで1時間反応させることにより行った。洗浄用バッファを用いて300μLで2回洗浄した後、2次抗体を反応させた。2次抗体は、ビオチン化抗IgG抗体Abcam社製、品番ab6788をインキュベーションバッファで02μg/mLに希釈した溶液を用いた。洗浄用バッファを用いて300μLで2回洗浄した後、Avidin化アセチルコリンエステラーゼを各ウエルに50μLずつ加え、室温で2時間反応させた。300μLで4回洗浄した後、1mMアセチルチオコリンを100μL加えて、室温で1時間反応させアセチルチオコリンの一部をチオコリンへと分解した。その後、実施例4と同様に電気化学発光法によりメチルシトシンの検出を行った。電極電位を0から2.0Vへと掃引した際には、1150mV付近に発光ピークを示した。これは、Target5では自己相補鎖を形成させた際に、メチルシトシンが自己相補鎖内のループ構造内に配置され、グアニンと水素結合対を形成していないためである。このように、1本鎖のみであっても目的とするシトシンもしくはメチルシトシンがループ内に配置する場合には、検出が可能である。実施例6.本実施例では、二重螺旋構造形成時に、測定対象のメチルシトシンと水素塩基対を形成すべき位置の塩基をチミンとすることでメチルシトシンを不対にした実施例を示す。実施例1と同様に、目的核酸を捕捉するための2種類の一本鎖核酸をマイクロプレートに固定化した。Probe6の塩基配列は、5ACAGAGCCTAAAAAGGACAAAAAGAAAAAG3であり、目的試料核酸とは完全相補鎖である。Probe7の塩基配列は、5ACAGAGCCTAAAAAGGACAAAAATAAAAAG3であり、Probe6との違いは、5‘末端から24番目の塩基がチミンである。その後、測定対象の核酸として、Target6をマイクロプレートに100μLずつ入れた。なおTarget6の塩基配列は5CTTTTTCTTTTTGTCCTTTTTAGGCTCTGT3であり、5‘末端から7塩基目のシトシンをメチル化してある。Target6とProbe6は完全相補鎖であるが、Probe7とはメチルシトシンの部分が不対となる。Target6はダルベッコリン酸バッファ緩衝液を用いて希釈し、マイクロプレートの各ウエルに10pmol導入した。その後、37°Cで1時間反応させ、二重螺旋構造を形成させた。その後、300μLのバッファで2回洗浄した。その後、210502010050020μgmLに希釈した抗メチルシトシン抗体を250μLずつ加え、37°Cで24時間反応させた。バッファで洗浄した後、ペルオキシターゼ標識抗IgG抗体を50μLずつ加え、37°Cで30分反応させた。バッファで洗浄した後、3355tetramethylbenzidineを加え、遮光室温で10分反応させた。その後、2N塩酸溶液を50μLずつ加え、酵素反応を停止させ、マイクロプレートリーダーにより450nmの吸光度を測定した。図8に吸光度測定の結果を示す。大過剰の抗体を導入することにより、完全相補鎖であるProbe6に於いても吸光度の上昇が見られる。しかしながら、不対構造を有するProbe7の方がProbe6に比べ十分に有意差のある大きな応答を得ることが可能であった。本結果は、抗体の量に依存せず、測定対象となるシトシンがメチル化しているか否かを判別可能であることを示している。図9に、Probe6及びProbe7と二重螺旋構造を形成した核酸への抗メチルシトシン抗体の解離定数Kdを算出するためのスキャッチャードプロットを作成した結果を示す。スキャッチャードプロットの傾きから、完全相補鎖のProbe6と二重螺旋構造を形成したTarget6への抗体のKdは75nMであり、測定対象となるシトシンが不対であるProbe7と二重螺旋構造を形成したTarget6への抗体のKdは96nMであった。また、最大結合量BmaxはProbe6と二重螺旋構造を形成したときに比べ、Probe7と二重螺旋構造を形成したときの方が13倍大きかった。この差を利用することによりシトシンがメチル化しているか否かを判別可能である。"