"藻類を培地で培養して得た培養物に有機溶剤を添加して、得られた混合物を攪拌することにより、脂質をエステル交換又は加水分解する反応を行い、上記反応物から、脂肪酸エステル又は脂肪酸を採取することを特徴とする脂肪酸類の製造方法。前記有機溶剤がエタノールであり、脂肪酸エステルを採取することを特徴とする、請求項1に記載の方法。前記有機溶剤が、アセトン、クロロホルム、酢酸エチル、酢酸メチル、ヘキサン、ベンゼン、トルエン、ジクロロメタン、アセトニトリル、ジメチルエーテル、ジエチルエーテルであり、脂肪酸を採取することを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。前記混合物における有機溶剤の濃度が5以上である、請求項1~3のいずれか1項に記載の方法。前記混合物における有機溶剤の濃度が65以下である、請求項1~4のいずれか項に記載の方法。前記有機溶剤が、炭素数5以下の低級アルコールである、請求項1~5のいずれか1項に記載の方法。前記有機溶剤が、炭素数6以上の高級アルコールである、請求項1~5のいずれか1項に記載の方法。前記反応の温度が10°C以上である、請求項1~7のいずれか1項に記載の方法。前記反応の温度が60°C以下である、請求項1~8のいずれか1項に記載の方法。前記反応のpHが弱酸性から弱アルカリである、請求項1~9のいずれか1項に記載の方法。脂肪酸エステル又は脂肪酸の採取が、前記反応物を有機溶剤処理することを含む請求項1~10のいずれか1項に記載の方法。前記藻類が微細藻類である請求項1~11のいずれか1項に記載の方法。前記藻類が緑色植物門に属する微細藻類である、請求項12に記載の方法。前記微細藻類が緑藻綱、トレボキシア藻綱、又はプラシノ藻綱に属する藻類である、請求項13に記載の方法。前記微細藻類が緑藻綱Chlorophyceaeに属する藻類である、請求項14に記載の方法。前記藻類が淡水性の緑藻鋼に属する微細藻類である、請求項12に記載の方法。前記藻類が海洋性の緑藻鋼に属する微細藻類であって、油脂を貯蔵物質として蓄積する微細藻類である、請求項12に記載の方法。L-アミノ酸の製造法であって、a請求項1及び3~17のいずれか1項に記載の方法により脂肪酸を調製し、bL-アミノ酸生産能を有する細菌を、aの脂肪酸を含む培地に培養し、培養物中にL-アミノ酸を生成蓄積させ、c該培養物からL-アミノ酸を採取することを特徴とするL-アミノ酸の製造法前記細菌が、腸内細菌科に属する細菌またはコリネ型細菌である、請求項18に記載の方法。前記腸内細菌科に属する細菌が、エシェリヒアコリである、請求項19に記載の方法。本発明は、より効率のよい脂肪酸類の製造法を提供するものであり、特には、従来、主として動物、植物、魚類及び廃液由来の油脂を基質として行われてきた酸又はアルカリ触媒を用いた脂肪酸類の製造法に対し、触媒の添加を必要としない、より安価な脂肪酸類の製造法を提供するものである。本発明者は、上記課題を解決すべく鋭意検討を行った結果、藻類培養物にアルコール又はアルコール以外の有機溶剤を添加するだけで、酸又はアルカリを添加することなく、藻類細胞内で効率よく脂肪酸エステル又は脂肪酸を生産できることを見出した。この知見に基づき本発明は完成された。本発明は以下のもの関する。1a藻類を培地で培養して得た培養物に有機溶剤を添加して、得られた混合物を攪拌することにより、脂質をエステル交換又は加水分解する反応を行い、b得られる反応物から脂肪酸エステル又は脂肪酸を採取することを特徴とする脂肪酸類の製造法。2前記有機溶剤がエタノールであり、脂肪酸エステルを採取することを特徴とする、上記に記載の方法。3前記有機溶剤が、アセトン、クロロホルム、酢酸エチル、酢酸メチル、ヘキサン、ベンゼン、トルエン、ジクロロメタン、アセトニトリル、ジメチルエーテル、ジエチルエーテルであり、脂肪酸を採取することを特徴とする、上記に記載の方法。4前記混合物における有機溶剤の濃度が5以上である、上記に記載の方法。5前記混合物における有機溶剤の濃度が60以下である、上記に記載の方法。6前記有機溶媒が、炭素数6以上の高級アルコールであることを特徴とする、上記に記載の方法。7前記有機溶媒が、炭素数6以上の高級アルコールであることを特徴とする、上記に記載の方法。8前記反応の温度が10°C以上である、上記に記載の方法。9前記反応の温度が60°C以下である、上記に記載の方法。10前記反応のpHが弱酸性から弱アルカリである、上記に記載の方法。11脂肪酸エステル又は脂肪酸の採取が、上記反応物を有機溶剤処理することを含む、上記に記載の方法。前記藻類が微細藻類である、上記に記載の方法。13前記藻類が緑色植物門に属する微細藻類である、上記に記載の方法。14前記藻類が緑藻綱、トレボキシア藻綱、又はプラシノ藻鋼に属する微細藻類である、上記に記載の方法。15前記藻類が緑藻綱に属する微細藻類である、上記に記載の方法。16前記藻類が淡水性の緑藻鋼に属する微細藻類である、上記に記載の方法。17前記藻類が海洋性の緑藻鋼に属する微細藻類であって、油脂を貯蔵物質として蓄積する微細藻類である、上記に記載の方法。18L-アミノ酸の製造法であって、a上記に記載の方法により脂肪酸を調製し、bL-アミノ酸生産能を有する細菌を、aの脂肪酸を含む培地に培養し、培養物中にL-アミノ酸を生成蓄積させ、c該培養物からL-アミノ酸を採取することを特徴とするL-アミノ酸の製造法。19前記細菌が、腸内細菌科に属する細菌またはコリネ型細菌である、上記に記載のアミノ酸製造方法。20前記腸内細菌科に属する細菌がエシェリヒアコリである、上記に記載のアミノ酸製造方法。本発明により、効率よく脂肪酸エステル又は脂肪酸が生産できる。以下、本発明を詳細に説明する。<1>本発明で使用する藻類とその培養法本発明における藻類algaeは、どのようなものでも用いることが出来るが、油脂を藻体内に蓄積する微細藻類であることが好ましい。藻類algaeとは、酸素発生型光合成を行う生物のうち、主に地上に生息するコケ植物、シダ植物、種子植物を除いたものを全て指す。藻類には、原核生物であるシアノバクテリア藍藻cyanobacteriaから、真核生物である灰色植物門Glaucophyta、紅色植物門紅藻Rhodophyta、緑色植物門Chlorophyta、クリプト植物門クリプト藻Cryptophyta、ハプト植物門ハプト藻Haptophyta、不等毛植物門Heterokontophyta、渦鞭毛植物門渦鞭毛藻Dinophyta、ユーグレナ植物門Euglenophyta、クロララクニオン植物門Chlorarachniophytaに分類される様々な単細胞生物及び多細胞生物が含まれる。微細藻類は、これら藻類から多細胞生物である海藻類を除いた微視的な構造を持つ藻類を指すバイオディバーシティシリーズ3藻類の多様性と系統:千原光雄編裳華房1999。藻類をはじめとする植物は、油脂を貯蔵物質として蓄積するものがあることが知られているChistiY2007BiotechnolAdv25294306。このような藻類としては、緑色植物門や不等毛植物門に属するものが、よく知られている。緑色植物門の中では、緑藻綱Chlorophyceaeに属する藻類が挙げられ、緑藻綱に属する藻類としては、クロレラミヌティッシマ、セネデスムスオブリカス、ネオクロリスオレオアバンダンスNeochlorisoleoabundansTornabeneTGetal1983EnzymeandMicrobTechnol5435440、ナノクロリスエスピーNannochlorisspTakagiMetal2000ApplMicrobiolBiotechnol54112117等を挙げることが出来る。不等毛植物門には黄金色藻綱Chrysophyceae、ディクチオカ藻綱Dictyochophyceae、ペラゴ藻綱Pelagophyceae、ラフィド藻綱Rhaphidophyceae、珪藻綱Bacillariophyceae、褐藻綱Phaeophyceae、黄緑藻綱Xanthophyceae、真正眼点藻綱Eustigmatophyceaeが分類されるが、よく用いられる珪藻綱に属する藻類としては、タラシオシラスードナナThalassiosirapseudonanaTononTetal2002Phytochemistry611524を挙げることが出来る。具体的にはクロレラミヌティッシマとして、ChlorellaminutissimaUTEX2314株、セネデスムスオブリカスとして、具体的には、ScenedesmusobliquusUTEX393株、ネオクロリスオレオアバンダンスとして、具体的には、NeochlorisoleoabundansUTEX1185株、ナノクロリスエスピーとしては、NannochlorisspUTEXLB1999株、タラシオシラスードナナとしては、ThalassiosirapseudonanaUTEXLBFD2株が挙げられる。これらの菌株は、テキサス大学藻類カルチャーコレクションTheUniversityofTexasatAustinTheCultureCollectionofAlgaeUniversityStationA6700AustinTX787120183USAより入手することができる。また、高機能性の脂肪酸であるEPADHA生産藻類として緑色植物門、不等毛植物門、紅色植物門、又はハプト植物門に属するものが、よく知られている。緑色植物門の中では、緑藻綱、プラシノ藻綱、トレボウクシア藻綱に属する藻類が挙げられ、よく知られる緑藻綱に属する藻類としてはクロレラミヌティッシマ不等毛植物門には珪藻綱Bacillariophyceae、真正眼点藻綱Eustigmatophyceaeに属する藻類が挙げられ、よく用いられる珪藻綱に属する藻類としてはタラシオシラスードナナThalassiosirapseudonanaTononTetal2002Phytochemistry611524、真正眼点藻綱EustigmatophyceaeにはナノクロロプシスオクラータNannochloropsisoculataが挙げられる。特に本発明においては、クロレラ属、セネデスムス属等の淡水性の緑藻が望ましい。微細藻類の培養については多くの知見があり、Chlorella属、Arthrospira属Spirulina、あるいは、Dunaliellasalinaなどは、食用として大規模な工業的な培養が行われているSpolaorePetal2006JBiosciBioeng1018796。クラミドモナスレインハルディには、例えば、03×HSM培地OyamaYetal2006Planta224646654を用いることが出来るし、クロレラケッサレリには、02×ガンボーグ培地IzumoAetal2007PlantScience17211381147などを用いることが出来る。クロレラブルガリスには、BG11培地又はM8培地Ramkumar、KMetal1998BiotechBioeng59605611などを用いることができる。ネオクロリスオレオアバンダンスやナノクロリスエスピーは、modifiedNORO培地YamaberiKetal1998JMarBiotechnol64448TakagiMetal2000ApplMicrobiolBiotechnol54112117やBoldsBasalMediumTornabeneTGetal1983EnzymeandMicrobTechnol5435440ArchibaldPAandBoldHC1970Phytomorphology20383389、ダイゴIMK培地を用いて培養することが出来る。珪藻綱に属する藻類としては、タラシオシラスードナナには、F2培地LieCPandLinLP2001BotBullAcadSin42207214などを好適に用いることが出来る。また微細藻類の培養には、フォトバイオリアクターを用いることも出来WO2003094598号パンフレット。培養は、本培養の体積に対し、150の前培養液を添加して行うことが通常である。初発のpHは69の中性付近が好ましく、培養中はpH調整を行わないことが通常であるが、必要に応じて調整してもよい。培養温度は、2035°Cが好ましく、特に28°C付近が一般的によく用いられる温度であるが、培養温度は、用いる藻類に適した温度であれば制限されない。培養液には、空気を吹き込むことが通常であり、通気量としては、1分間の培養液体積当たりの通気量012vvmvolumepervolumeperminuteが通常には用いられる。さらにCO2を吹き込むことも、生育を早めるために行うことができ、通気量に対して、055程度吹き込むのが好ましい。光の照射強度も微細藻類の種類によって、至適が異なるが、100030000lux程度が通常には用いられる。光源は、屋内では白色の蛍光灯を用いることが一般的であるが、これに制限されない。屋外にて太陽光で培養することも可能である。必要に応じて、培養液を適切な強度で撹拌、あるいは循環してもよい。また、藻類は、窒素源が枯渇すると油脂を藻体内に蓄積することが知られておりThompsonGAJr1996BiochimBiophysActa13021745、窒素源の濃度をより制限した培地を本培養に用いることもできる。本発明において藻類の培養物とは、藻体を含む培養液、培養液から回収した藻体を包含する。藻体を培養液から回収する方法は、一般的な遠心分離や濾過、あるいは、凝集剤flocculantを用いた重力による沈降などの方法で可能であるGrimaEMetal2003BiotechnolAdvances20491515。特に本発明においては、アルコール又はアルコール以外の有機溶剤を培養液に直接添加することもできるが、添加前に、藻類を遠心分離等で濃縮しておくことが好ましい。藻体の濃縮には、溶液成分を除去して、藻類の乾燥重量の溶液あたりの濃度として25gL以上、好ましくは250gL以上にすること、及び、沈殿させて藻体を培地から分離して用いることを含む。<2>本発明の藻類の培養物を用いる反応方法と反応物本発明においては、藻類の培養物に有機溶剤を添加して得られた混合物を攪拌することにより、脂質をエステル交換又は加水分解する反応を行い、その反応物から脂肪酸エステル又は脂肪酸を採取する。なお、本発明においては、脂肪酸エステル、脂肪酸をあわせて脂肪酸類と記載することがある。本発明において、藻類の培養物にアルコールを添加した場合には、脂質とアルコールのエステル交換反応による脂肪酸エステルの生成が、また、藻類の培養物にアルコール以外の有機溶剤を添加した場合には、脂質の加水分解による脂肪酸の生成が主に起こる。本発明において、反応物とは、藻類の培養物にアルコール又はアルコール以外の有機溶剤を添加して得られる混合物を攪拌して、脂質をエステル交換又は加水分解する反応を行った反応液を意味する。反応物は、その後の脂肪酸エステル又は脂肪酸の採取を妨げない限り、反応液をさらに抽出もしくは分画及び/又は別の処理に付してもよい。本発明の反応物中には、脂肪酸エステルの他に副生物が生じるが、生成したグリセロールは、Lアミノ酸生産能を有する細菌によるL-アミノ酸の生産や化成品に利用してもよい。本発明において、アルコール又はアルコール以外の有機溶剤添加混合物を用いる反応における温度は、反応物中の脂肪酸エステル又は脂肪酸が増加するのに十分な温度であればよく、ここでの反応の温度の下限としては、通常には10°C以上、好ましくは15°C以上、さらに好ましくは20°C以上、上限としては、通常には60°C以下、好ましくは50°C以下、さらに好ましくは40°C以下である。本発明においての反応は、上記藻類の培養方法で得られた培養物をそのまま反応させてもよいが、前述のように濃縮して用いてもよい。例えば、一旦遠心分離した後、沈殿した藻体を反応物として用いてもよい。またアルコール又はアルコール以外の有機溶剤の添加前に、反応中のpHを酸性から弱アルカリに調整してもよく、通常には20~110、好ましく30~105、さらに好ましくは35~90である。処理前に添加するアルコール又はアルコール以外の有機溶剤の濃度は、少なくても5以上、好ましくは15以上、さらに好ましくは25以上で反応させることが好ましい。また、上限として、通常65以下、好ましくは55、さらに好ましくは45以下であることが好ましい。また、添加するアルコールとしては、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、ペンタノール、エチレングリコールなどの炭素数5以下の低級アルコール又はヘキサノール、ヘプタノール、オクタノール、ノナノール、デカノール、ウンデカノール、ドデカノール、トリデカノール、テトラデカノールなど炭素数6以上の高級アルコールを用いてもよい。また、添加するアルコール以外の有機溶剤としては、アセトン、クロロホルム、酢酸エチル、酢酸メチル、ヘキサン、ベンゼン、トルエン、ジクロロメタン、アセトニトリル、ジメチルエーテル、ジエチルエーテルなどを用いてもよい。本発明において、アルコール又はアルコール以外の有機溶剤の添加混合物を用いる反応の時間は、下限としては、通常少なくても10分以上、好ましくは20分以上、さらに好ましくは30分以上、上限としては、通常15時間以下、好ましくは10時間以下、さらに好ましくは5時間以下である。撹拌の手段は、上記処理の効果が得られる限り、制限されず、旋回振盪による撹拌、ボルテックスミキサーによる渦流撹拌などが使用できる。アルコール又はアルコール以外の有機溶媒の水溶解度が低い場合には、十分な混合状態を維持するため、渦流撹拌などの強い撹拌手段を用いることが好ましい。本発明における反応後の反応物から脂肪酸エステル又は脂肪酸を抽出する方法は、一般的な藻類から油脂を抽出する方法が適用可能であり、例えば、有機溶剤処理や超音波処理、ビーズ破砕処理、酸処理、アルカリ処理、酵素処理、水熱処理、超臨界処理、マイクロ波処理、電磁場処理、あるいは、圧搾処理などの方法があり、特に好ましくはBlighDyer法が使用できるrapidmethodoftotallipidextractionandpurificationCanJBiochemPhysiol37911917。細胞外に脂肪酸エステル又は脂肪酸を溶出させ、該溶出物から脂肪酸エステル又は脂肪酸を採取する処理をすることが好ましい。本発明において、触媒の添加を必要としない理由は、藻類の細胞中の非組換えのリパーゼによって、油脂、セラミドceramide、リン脂質や糖脂質が外部より添加したアルコールとエステル交換反応又は加水分解するためと考えられる。<3>本発明で使用する細菌本発明において、上記方法により取得された脂肪酸は、L-アミノ酸発酵の炭素源として使用できる。本発明においては、L-アミノ酸生産には、L-アミノ酸生産能を有する細菌を使用することが出来る。細菌としては、微細藻類により生産される脂肪酸からLアミノ酸を効率よく製造し得るものであれば特に制限されず、例えばエシェリヒア属、パントエア属、エンテロバクター属等の腸内細菌科に属する細菌、及び、ブレビバクテリウム属、コリネバクテリウム属、ミクロバクテリウム属に属するいわゆるコリネ型細菌等が挙げられるが、これらに制限されない。腸内細菌科に属する細菌は、好ましくは、エシェリヒアコリである。本発明におけるL-アミノ酸生産菌は、油脂の加水分解物や脂肪酸の資化能力を高めるように改変されていても構わない。例えば、腸内細菌群に見出される脂肪酸代謝を調節するDNA結合能を有する転写因子FadRをコードする遺伝子の欠損などが挙げられるDiRussoCCetal1992JBiolChem26786858691DiRussoCCetal1993MolMicrobiol7311322。具体的には、エシェリヒアコリEscherichiacoliのfadR遺伝子は、GenBankAccessionNoU00096で登録されているエシェリヒアコリMG1655株のゲノム配列上の塩基番号1234161~1234880に位置し、GenBankaccessionNoAAC74271にて登録されているタンパク質をコードする遺伝子である。油脂の加水分解物や脂肪酸の資化能力を高めるためにはさらにfadA、fadB、fadI、fadJ、fadL、fadE、fadDから選択される1種または2種以上の遺伝子の発現量を強化してもよい。本発明におけるfadL遺伝子とは、腸内細菌群に見出される長鎖の脂肪酸の取り込み能を有する外膜のトランスポーターをコードする遺伝子を意味するKumarGBandBlackPN1993JBiolChem2681546915476StenbergFetal2005JBiolChem2803440934419。FadLをコードする遺伝子としては、具体的には、エシェリヒアコリのfadL遺伝子として、エシェリヒアコリのゲノム配列GenBankAccessionNoU00096の塩基番号2459322~2460668に位置する遺伝子を例示することができる。本発明におけるfadD遺伝子とは、腸内細菌群に見出される長鎖の脂肪酸からfattyacylCoAを生成するfattyacylCoAsynthetase活性を触媒すると同時に、内膜を通して取り込む酵素をコードする遺伝子を意味するDirussoCCandBlackPN2004JBiolChem2794956349566SchmelterTetal2004JBiolChem2792416324170。FadDをコードする遺伝子としては、具体的には、エシェリヒアコリのfadD遺伝子として、エシェリヒアコリのゲノム配列GenBankAccessionNoU00096の塩基番号1887770~1886085相補鎖に位置する遺伝子を例示することができる。本発明におけるfadE遺伝子とは、腸内細菌群に見出されるfattyacylCoAを酸化するacylCoAdehydrogenase活性を触媒する酵素をコードする遺伝子を意味するOBrienWJandFrermanFE1977JBacteriol132532540CampbellJWandCronanJE2002JBacteriol18437593764。FadEをコードする遺伝子としては、具体的には、エシェリヒアコリのfadE遺伝子として、エシェリヒアコリのゲノム配列GenBankAccessionNoU00096の塩基番号243303~240859相補鎖に位置する遺伝子を例示することができる。本発明におけるfadB遺伝子とは、腸内細菌群に見出されるfattyacidoxidationcomplexのαcomponentであり、enoylCoAhydratase、3hydroxyacylCoAdehydrogenase、3hydroxyacylCoAepimerase、Δ3cisΔ2transenoylCoAisomeraseの4つの活性を触媒する酵素をコードする遺伝子を意味するPramanikAetal1979JBacteriol137469473YangSYandSchulzH1983JBiolChem25897809785。FadBをコードする遺伝子としては、具体的には、エシェリヒアコリのfadB遺伝子として、エシェリヒアコリのゲノム配列GenBankAccessionNoU00096の塩基番号4028994~4026805相補鎖に位置する遺伝子を例示することができる。本発明におけるfadA遺伝子とは、腸内細菌群に見出されるfattyacidoxidationcomplexのβcomponentであり、3ketoacylCoAthiolase活性を触媒する酵素をコードする遺伝子を意味するPramanikAetal1979JBacteriol137469473。FadAをコードする遺伝子としては、具体的には、エシェリヒアコリのfadA遺伝子として、エシェリヒアコリのゲノム配列GenBankAccessionNoU00096の塩基番号4026795~4025632相補鎖に位置する遺伝子を例示することができる。腸内細菌群に見出されるfattyacidoxidationcomplexは、FadBとFadAが複合体を形成しており、遺伝子としてもfadBAオペロンを形成していることが知られているYangSYetal1990JBiolChem2651042410429。従って、fadBAオペロンとして、オペロン全体を増幅することも可能である。本発明におけるfadJ遺伝子とは、fadB遺伝子と相同性を有し、嫌気条件と好気条件にて機能するfattyacidoxidationcomplexのαcomponentでありCampbellJWetal2003MolMicrobiol47793805、enoylCoAhydratase、3hydroxyacylCoAdehydrogenase、3hydroxyacylCoAepimerase、Δ3cisΔ2transenoylCoAisomeraseの4つの活性を触媒する酵素をコードする遺伝子を意味するPramanikAetal1979JBacteriol137469473YangSYandSchulzH1983JBiolChem25897809785。FadJをコードする遺伝子としては、具体的には、エシェリヒアコリのfadJ遺伝子として、エシェリヒアコリのゲノム配列GenbankAccessionNoU00096の塩基番号2457181~2455037相補鎖に位置する塩基配列を有する遺伝子を例示することができる。本発明におけるfadI遺伝子とは、fadA遺伝子と相同性を有し、嫌気条件と好気条件にて機能するfattyacidoxidationcomplexのβcomponentでありCampbellJWetal2003MolMicrobiol47793805、3ketoacylCoAthiolase活性を触媒する酵素をコードする遺伝子を意味するPramanikAetal1979JBacteriol137469473。FadIをコードする遺伝子としては、具体的には、エシェリヒアコリのfadI遺伝子として、エシェリヒアコリのゲノム配列GenbankAccessionNoU00096の塩基番号2458491~2457181相補鎖に位置する塩基配列を有する遺伝子を例示することができる。腸内細菌群に見出されるfattyacidoxidationcomplexは、FadJとFadIが複合体を形成しており、遺伝子としてもfadIJオペロンを形成していることが知られているYangSYetal1990JBiolChem2651042410429。従って、fadIJオペロンとして、オペロン全体を増幅することも可能である。また、油脂の加水分解物や脂肪酸の資化能力は、cyoオペロンの増強によっても達成される。本発明におけるcyoABCDEとは、腸内細菌群に見出される末端酸化酵素の一つであるシトクロムbo型酸化酵素複合体cytochromeboterminaloxidasecomplexの各サブユニットをコードする遺伝子群であり、cyoBがsubunitIを、cyoAがsubunitIIを、cyoCがsubunitIIIを、cyoDがsubunitIVを、cyoEがhemeOsynthase活性を触媒する酵素をコードする遺伝子を意味するGennisRBandStewartV1996p217261InFDNeidhardtEscherichiacoliandSalmonellaCellularandMolecularBiologySecondEditionAmericanSocietyforMicrobiologyPressWashingtonDCChepurietal1990JBiolChem2651118511192。cyoAをコードする遺伝子としては、具体的には、エシェリヒアコリのcyoA遺伝子として、エシェリヒアコリのゲノム配列GenBankAccessionNoU00096の塩基番号450834~449887相補鎖に位置する遺伝子を例示することができる。cyoBをコードする遺伝子としては、具体的には、エシェリヒアコリのcyoB遺伝子として、エシェリヒアコリのゲノム配列GenBankAccessionNoU00096の塩基番号449865~447874相補鎖に位置する遺伝子を例示することができる。cyoCをコードする遺伝子としては、具体的には、エシェリヒアコリのcyoC遺伝子として、エシェリヒアコリのゲノム配列GenBankAccessionNoU00096の塩基番号447884~447270相補鎖に位置する遺伝子を例示することができる。cyoDをコードする遺伝子としては、具体的には、エシェリヒアコリのcyoD遺伝子として、エシェリヒアコリのゲノム配列GenBankAccessionNoU00096の塩基番号447270~446941相補鎖に位置する遺伝子を例示することができる。cyoE遺伝子をコードする遺伝子としては、具体的には、エシェリヒアコリのcyoE遺伝子として、エシェリヒアコリのゲノム配列GenBankAccessionNoU00096の塩基番号446929~446039相補鎖に位置する遺伝子を例示することができる。また、本発明の細菌は、ピルビン酸シンターゼ、または、ピルビン酸:NADPオキシドレダクターゼの活性が増大するように改変された菌株であってもよいWO2009031565号参照。本発明におけるピルビン酸シンターゼとは、アセチルCoAとCO2からピルビン酸を生成する下記の反応を、電子供与体存在下、例えばフェレドキシンあるいはフラボドキシン存在下で可逆的に触媒する酵素EC1271を意味する。ピルビン酸シンターゼは、PSと略称されることもあり、ピルビン酸オキシドレダクターゼ、ピルビン酸フェレドキシンオキシドレダクターゼ、ピルビン酸フラボドキシンオキシドレダクターゼ、または、ピルビン酸オキシドレダクターゼと命名されている場合もある。電子供与体としては、フェレドキシンまたはフラボドキシンを用いることが出来る。還元型フェレドキシンアセチルCoACO2→酸化型フェレドキシンピルビン酸CoAピルビン酸シンターゼの活性が増強されたことの確認は、増強前の微生物と、増強後の微生物より粗酵素液を調製し、そのピルビン酸シンターゼ活性を比較することにより達成される。ピルビン酸シンターゼの活性は、例えば、Yoonらの方法YoonKSetal1997ArchMicrobiol167275279に従って測定できる。例えば、電子受容体としての酸化型メチルビオロゲンとCoAと粗酵素液を含む反応液にピルビン酸を添加した際に、ピルビン酸の脱炭酸反応によって増大する還元型メチルビオロゲンの量を分光学的に測定することによって、測定可能である。酵素活性1ユニットUは1分間あたり1μmolのメチルビオロゲンの還元量で表される。親株がピルビン酸シンターゼ活性を有している場合、親株と比較して、好ましくは15倍以上、より好ましくは2倍以上、さらに好ましくは3倍以上酵素活性が上昇していることが望ましい。また親株がピルビン酸シンターゼ活性を有していない場合には、ピルビン酸シンターゼ遺伝子を導入することにより、ピルビン酸シンターゼが生成されていればよいが、酵素活性が測定できる程度に強化されていることが好ましく、好ましくは0001Umg菌体タンパク質以上、より好ましくは0005Umg以上、さらに好ましくは001Umg以上が望ましい。ピルビン酸シンターゼは、酸素に対して感受性であり、一般的に活性発現や測定は困難であることも多いBuckelWandGoldingBT2006AnnRevofMicrobiol602749。したがって、酵素活性の測定に際しては、反応容器中の酸素濃度を低下させて酵素反応を行うことが好ましい。ピルビン酸シンターゼをコードする遺伝子は、クロロビウムテピダム、ハイドロジェノバクターサーモファイラスHydrogenobacterthermophilus等、還元的TCAサイクルを持つ細菌のピルビン酸シンターゼ遺伝子を利用することが可能である。また、エシェリヒアコリEscherichiacoliをはじめとする、腸内細菌群に属する細菌由来のピルビン酸シンターゼ遺伝子を利用することも可能である。さらに、ピルビン酸シンターゼをコードする遺伝子は、メタノコッカスマリパルディスMethanococcusmaripaludis、メタノカルドコッカスジャナスチMethanocaldococcusjannaschii、メタノサーモバクターサーマトトロフィカスMethanothermobacterthermautotrophicusなどの独立栄養性メタン生成古細菌autotrophicmethanogensのピルビン酸シンターゼ遺伝子を利用することが可能である。本発明におけるピルビン酸:NADPオキシドレダクターゼとは、アセチルCoAとCO2からピルビン酸を生成する下記の反応を、電子供与体存在下、例えばNADPHあるいはNADH存在下で可逆的に触媒する酵素EC12115を意味する。ピルビン酸:NADPオキシドレダクターゼは、PNOと略称されることもあり、ピルビン酸デヒドロゲナーゼと命名されている場合もある。しかしながら、本発明においてピルビン酸デヒドロゲナーゼ活性というときは、後述するように、ピルビン酸を酸化的に脱炭酸し、アセチルCoAを生成する反応を触媒する活性であり、この反応を触媒するピルビン酸デヒドロゲナーゼPDHは、ピルビン酸:NADPオキシドレダクターゼとは別の酵素である。ピルビン酸:NADPオキシドレダクターゼは、電子供与体としては、NADPHあるいはNADHを用いることが出来る。NADPHアセチルCoACO2→NADPピルビン酸CoAピルビン酸:NADPオキシドレダクターゼの活性が増強されたことの確認は、増強前の微生物と、増強後の微生物より粗酵素液を調製し、そのピルビン酸:NADPオキシドレダクターゼ活性を比較することにより達成される。ピルビン酸:NADPオキシドレダクターゼの活性は、例えば、Inuiらの方法InuiHetal1987JBiolChem26291309135に従って測定できる。例えば、電子受容体としての酸化型メチルビオロゲンとCoAと粗酵素液を含む反応液に、ピルビン酸を添加した際にピルビン酸の脱炭酸反応によって増大する還元型メチルビオロゲンの量を分光学的に測定することによって、測定可能である。酵素活性1ユニットUは1分間あたり1μmolのメチルビオロゲンの還元量で表される。親株がピルビン酸:NADPオキシドレダクターゼ活性を有している場合、親株と比較して、好ましくは15倍以上、より好ましくは2倍以上、さらに好ましくは3倍以上酵素活性が上昇していることが望ましい。また親株がピルビン酸:NADPオキシドレダクターゼ活性を有していない場合には、ピルビン酸シンターゼ遺伝子を入することにより、ピルビン酸:NADPオキシドレダクターゼが生成されていればよいが、酵素活性が測定できる程度に強化されていることが好ましく、好ましくは0001Umg菌体タンパク質以上、より好ましくは0005Umg以上、さらに好ましくは001Umg以上が望ましい。ピルビン酸:NADPオキシドレダクターゼは、酸素に対して感受性であり、一般的に活性発現や測定は困難であることも多いInuiHetal1987JBiolChem26291309135RotteCetal2001MolBiolEvol18710720。ピルビン酸:NADPオキシドレダクターゼをコードする遺伝子は、光合成真核微生物で原生動物にも分類されるユーグレナグラシリスEuglenagracilisのピルビン酸:NADPオキシドレダクターゼ遺伝子NakazawaMetal2000FEBSLett479155156、原生生物クリプトスポルジウムパルバムCryptosporidiumparvumのピルビン酸:NADPオキシドレダクターゼ遺伝子RotteCetal2001MolBiolEvol18710720の他、珪藻タラシオシラスードナナTharassiosirapseudonanaにも相同な遺伝子が存在することが知られているCtrnactaVetal2006JEukaryotMicrobiol53225231。具体的には、ユーグレナグラシリスEuglenagracilisのピルビン酸:NADPオキシドレダクターゼ遺伝子が利用できるGenBankAccessionNoAB021127。本発明の微生物は、ピルビン酸シンターゼの活性に必要な電子供与体の酸化型を還元型にリサイクルする活性が、親株、例えば野生株や非改変株と比べて増大するように改変することによって、ピルビン酸シンターゼの活性が増大するように改変された微生物でもよい。電子供与体の酸化型を還元型にリサイクルする活性としては、フェレドキシンNADPレダクターゼ活性を挙げることができる。また、電子供与体のリサイクル活性の増強に加えて、ピルビン酸シンターゼ活性が増大するように改変することによって、ピルビン酸シンターゼの活性が増大するように改変された微生物でもよい。なお、上記親株は、本来内在的に電子供与体のリサイクル活性をコードする遺伝子を有しているものであってもよいし、本来は電子供与体のリサイクル活性を有さないが、当該活性をコードする遺伝子を導入することにより活性が付与され、L-アミノ酸生産能が向上するものであってもよい。フェレドキシンNADPレダクターゼとは、以下の反応を可逆的に触媒する酵素EC11812をいう。還元型フェレドキシンNADP→酸化型フェレドキシンNADPHH本反応は、可逆反応であり、NADPHと酸化型フェレドキシン存在下で、還元型フェレドキシンを産生することが可能である。フェレドキシンはフラボドキシンと代替可能でありフラボドキシンNADPレダクターゼと命名されているものも同等の機能を有する。フェレドキシンNADPレダクターゼは微生物から高等生物まで幅広く存在が確認されておりCarrilloNandCeccarelliEA2003EurJBiochem27019001915CeccarelliEAetal2004BiochimBiophysActa1698155165参照、フェレドキシンNADPオキシドレダクターゼ、NADPHフェレドキシンオキシドレダクターゼと命名されているものもある。フェレドキシンNADPレダクターゼの活性が増強されたことの確認は、改変前の微生物と、改変後の微生物より粗酵素液を調製し、そのフェレドキシンNADPレダクターゼ活性を比較することにより達成される。フェレドキシンNADPレダクターゼの活性は、例えば、Blaschkowskiらの方法BlaschkowskiHPetal1982EurJBiochem123563569に従って測定できる。例えば、基質としてフェレドキシンを用い、減少するNADPH量を分光学的に測定することによって測定可能である。酵素活性1ユニットUは1分間あたり1μmolのNADPHの酸化量で表される。親株がフェレドキシンNADPレダクターゼ活性を有している場合、親株の活性が十分高ければ、増強する必要はないが、親株と比較して、好ましくは15倍以上、より好ましくは2倍以上、さらに好ましくは3倍以上酵素活性が上昇していることが望ましい。フェレドキシンNADPレダクターゼをコードする遺伝子は、多くの生物種で見出されており、目的のL-アミノ酸生産株中で活性を有するものであれば使用することが可能である。エシェリヒアコリではフラボドキシンNADPレダクターゼとしてfpr遺伝子が同定されているBianchiVetal1993JBacteriol17515901595。また、シュードモナスプチダには、NADPHプチダレドキシンレダクターゼPutidaredoxinreductase遺伝子とプチダレドキシンPutidaredoxin遺伝子がオペロンとして存在することが知られている106831836。エシェリヒアコリのフラボドキシンNADPレダクターゼとしては、エシェリヒアコリK12株のゲノム配列GenBankAccessionNoU00096の塩基番号4111749~4112495相補鎖に位置する、fpr遺伝子を例示することができる。また、コリネバクテリウムグルタミカムのゲノム配列GenBankAccessionNoBA00036の塩基番号2526234~2527211にフェレドキシンNADPレダクターゼ遺伝子が見出されているGenBankAccessionNoBAB99777。ピルビン酸シンターゼの活性には、フェレドキシン又はフラボドキシンが電子供与体として存在することが必要である。従って、フェレドキシン又はフラボドキシンの産生能が向上するように改変することによって、ピルビン酸シンターゼの活性が増大するように改変された微生物であってもよい。また、ピルビン酸シンターゼ活性、又は、フラボドキシンNADPレダクターゼ及びピルビン酸シンターゼ活性が増強するように改変することに加えて、フェレドキシン又はフラボドキシンの産生能が向上するように改変してもよい。本発明におけるフェレドキシンとは、非ヘム鉄原子Feと、硫黄原子を含み、4Fe4S、3Fe4S、あるいは、2Fe2Sクラスターと呼ばれる鉄硫黄クラスターを結合したタンパク質で1電子の伝達体として機能するものを指す。フラボドキシンとはFMNFlavinmononucleotideを補欠分子属として含む1あるいは2電子の伝達体として機能するものタンパク質を指す。フェレドキシンとフラボドキシンについては、McLeanらの文献に記載されているMcLeanKJetal2005BiochemSocTrans33796801。なお、改変に用いる親株は、本来内在的にフェレドキシン又はフラボドキシンをコードする遺伝子を有しているものであってもよいし、本来はフェレドキシン又はフラボドキシン遺伝子を有さないが、フェレドキシン又はフラボドキシン遺伝子を導入することにより活性が付与され、L-アミノ酸生産能が向上するものであってもよい。また、フェレドキシン又はフラボドキシンの産生能が親株、例えば野生株や非改変株と比べて向上していることの確認は、SDSPAGEや二次元電気泳動あるいは、抗体を用いたウェスタンブロットによって検出することが出来るSambrookJetal1989MolecularCloningALaboratoryManualSecondEditionColdSpringHarborLaboratoryPressNewYork。生産量については、野生株あるいは非改変株と比較して、向上していればいずれでもよいが、例えば野生株、非改変株と比べて15倍以上、より好ましくは2倍以上、さらに好ましくは3倍以上上昇していることが望ましい。フェレドキシン及びフラボドキシンの活性は、適切な酸化還元反応系に加えることで測定することが可能である。例えば、Boyerらにより、産生されたフェレドキシンをフェレドキシンNADPレダクターゼにより還元し、生じた還元型フェレドキシンによるチトクロームCの還元を定量する方法が開示されているBoyerMEetal2006BiotechnolBioeng94128138。また、フラボドキシンの活性は、フラボドキシンNADPレダクターゼを用いることで、同じ方法で測定が可能である。フェレドキシン、又はフラボドキシンをコードする遺伝子は、広く分布しており、コードされるフェレドキシン又はフラボドキシンがピルビン酸シンターゼと電子供与体再生系が利用可能なものであれば、どのようなものでも用いることができる。例えば、エシェリヒアコリには、2Fe2Sクラスターを有するフェレドキシンをコードする遺伝子としてfdx遺伝子が存在しTaDTandVickeryLE1992JBiolChem2671112011125、4Fe4Sクラスターを有するフェレドキシン遺伝子としてyfhL遺伝子が予想されている。また、フラボドキシン遺伝子としては、fldA遺伝子OsborneCetal1991JBacteriol17317291737とfldB遺伝子GauduPandWeissB2000JBacteriol18217881793の存在が知られている。コリネバクテリウムグルタミカムのゲノム配列GenBankAccessionNoBA00036においては、塩基番号562643~562963番に複数のフェレドキシン遺伝子fdxGenBankAccessionNoBAB97942及び塩基番号1148953~1149270番にferGenBankAccessionNoBAB98495が見出されている。また、クロロビウムテピダムにおいては、多くのフェレドキシン遺伝子が存在するが、ピルビン酸シンターゼの電子受容体となる4Fe4S型のフェレドキシン遺伝子としてフェレドキシンI及びフェレドキシンIIが同定されているYoonKSetal2001JBiolChem2764402744036。ハイドロジェノバクターサーモファイラス等、還元的TCAサイクルを持つ細菌由来のフェレドキシン遺伝子あるいはフラボドキシン遺伝子を用いることもできる。具体的には、エシェリヒアコリのフェレドキシン遺伝子として、エシェリヒアコリK12株のゲノム配列GenBankAccessionNoU00096の塩基番号2654770~2655105番相補鎖に位置するfdx遺伝子、及び塩基番号2697685~2697945番に位置するyfhL遺伝子を例示することができる。本発明におけるLアミノ酸生産菌は、グリセロール代謝に関与する遺伝子が改変されていてもよい。グリセロール代謝に関与する遺伝子としては、グリセロールの資化性を高めるために、glpR遺伝子EP1715056の発現が弱化されているか、glpA、glpB、glpC、glpD、glpE、glpF、glpG、glpK、glpQ、glpT、glpX、tpiA、gldA、dhaK、dhaL、dhaM、dhaR、fsa及びtalC遺伝子等のグリセロール代謝遺伝子EP1715055Aの発現が強化されていてもよい。特にグリセロール資化性を高めるために、グリセロールデヒドロゲナーゼ遺伝子gldAとPEP依存型ジハイドロキシアセトンキナーゼ遺伝子遺伝子あるいはATP依存型ジハイドロキシアセトンキナーゼ遺伝子を組み合わせて強化することことが好ましい。さらには、フルクトース-6-リン酸アルドラーゼfsaBの発現が強化されていてもよいWO2008102861。また、グリセロールキナーゼにおいては、フルクトース16リン酸によるフィードバック阻害が解除された脱感作型glpK遺伝子を用いることが好ましい。WO2008081959WO2008107277腸内細菌科は、エシェリヒア、エンテロバクター、エルビニア、クレブシエラ、パントエア、フォトルハブドゥス、プロビデンシア、サルモネラ、セラチア、シゲラ、モルガネラ、イェルシニア等の属に属する細菌を含む。特に、NCBIのデータベースで用いられている分類法により腸内細菌科に分類されている細菌が好ましい。本発明において使用することができるエシェリヒア属に属する細菌は、特に制限されないが、例えば、ナイトハルトらの著書NeidhardtFCEd1996EscherichiacoliandSalmonellaCellularandMolecularBiologySecondEditionpp24772483Table1AmericanSocietyforMicrobiologyPressWashingtonDCに記述されている系統のものが含まれる。具体的には、プロトタイプの野生株K12株由来のエシェリヒアコリW3110ATCC27325、エシェリヒアコリMG1655等が挙げられる。これらの菌株は、例えばアメリカンタイプカルチャーコレクション住所POBox1549ManassasVA20108UnitedStatesofAmericaより分譲を受けることが出来る。すなわち各菌株に対応する登録番号が付与されており、この登録番号を利用して分譲を受けることが出来る。各菌株に対応する登録番号は、アメリカンタイプカルチャーコレクションのカタログに記載されている。以下のATCC番号が記載された菌株についても同様である。パントエア属に属する細菌とは、当該細菌が微生物学の専門家に知られている分類により、パントエア属に分類されていることを意味する。エンテロバクターアグロメランスのある種のものは、最近、16SrRNAの塩基配列分析等に基づき、パントエアアグロメランス、パントエアアナナティス、パントエアステワルティイその他に再分類された。本発明において、パントエア属に属する細菌には、このようにパントエア属に再分類された細菌も含まれる。パントエア属細菌の代表的な菌株として、パントエアアナナティスPantoeaananatis、パントエアスチューアルティPantoeastewartiiパントエアアグロメランス、パントエアシトレアPantoeacitreaが挙げられる。具体的には、下記の菌株が挙げられる。パントエアアナナティスAJ13355株FERMBP6614パントエアアナナティスAJ13356株FERMBP6615尚、これらの菌株は、欧州特許出願公開0952221号明細書にはエンテロバクターアグロメランスとして記載されているが、現在では、上記のとおり、16SrRNAの塩基配列解析などにより、パントエアアナナティスに再分類されている。エンテロバクター属細菌としては、エンテロバクターアグロメランスEnterobacteragglomerans、エンテロバクターアエロゲネスEnterobacteraerogenes等が挙げられる。具体的には、欧州特許出願公開952221号明細書に例示された菌株を使用することが出来る。エンテロバクター属の代表的な株として、エンテロバクターアグロメランスATCC12287株が挙げられる。エルビニア属細菌としては、エルビニアアミロボーラ、エルビニアカロトボーラが挙げられ、クレブシエラ属細菌としては、クレブシエラプランティコーラが挙げられる。具体的には、下記の菌株が挙げられる。エルビニアアミロボーラATCC15580株エルビニアカロトボーラATCC15713株クレブシエラプランティコーラAJ13399株FERMBP6600クレブシエラプランティコーラAJ13410株FERMBP6617本発明において、コリネ型細菌とは、従来ブレビバクテリウム属に分類されていたが、現在コリネバクテリウム属に分類された細菌も含みLieblWetal1991IntJSystBacteriol41255260、またコリネバクテリウム属と非常に近縁なブレビバクテリウム属細菌を含む。このようなコリネ型細菌の例として以下のものが挙げられる。コリネバクテリウムアセトアシドフィラムコリネバクテリウムアセトグルタミカムコリネバクテリウムアルカノリティカムコリネバクテリウムカルナエコリネバクテリウムグルタミカムコリネバクテリウムリリウムコリネバクテリウムメラセコーラコリネバクテリウムサーモアミノゲネスコリネバクテリウムハーキュリスブレビバクテリウムディバリカタムブレビバクテリウムフラバムブレビバクテリウムインマリオフィラムブレビバクテリウムラクトファーメンタムコリネバクテリウムグルタミカムブレビバクテリウムロゼウムブレビバクテリウムサッカロリティカムブレビバクテリウムチオゲニタリスコリネバクテリウムアンモニアゲネスブレビバクテリウムアルバムブレビバクテリウムセリヌムミクロバクテリウムアンモニアフィラム具体的には、下記のような菌株を例示することができる。コリネバクテリウムアセトアシドフィラムATCC13870コリネバクテリウムアセトグルタミカムATCC15806コリネバクテリウムアルカノリティカムATCC21511コリネバクテリウムカルナエATCC15991コリネバクテリウムグルタミカムATCC13020ATCC13032ATCC13060コリネバクテリウムリリウムATCC15990コリネバクテリウムメラセコーラATCC17965コリネバクテリウムサーモアミノゲネスAJ12340コリネバクテリウムハーキュリスATCC13868ブレビバクテリウムディバリカタムATCC14020ブレビバクテリウムフラバムATCC13826ATCC14067ブレビバクテリウムインマリオフィラムATCC14068ブレビバクテリウムラクトファーメンタムATCC13869コリネバクテリウムグルタミカムATCC13869ブレビバクテリウムロゼウムATCC13825ブレビバクテリウムサッカロリティカムATCC14066ブレビバクテリウムチオゲニタリスATCC19240コリネバクテリウムアンモニアゲネスATCC6871、ATCC6872ブレビバクテリウムアルバムATCC15111ブレビバクテリウムセリヌムATCC15112ミクロバクテリウムアンモニアフィラムATCC15354本発明において、アミノ酸生産能を有する細菌とは、培地に培養したとき、Lアミノ酸を生産し、培地中に分泌する能力を有する細菌をいう。また、好ましくは、目的とするLアミノ酸を好ましくは05gL以上、より好ましくは10gL以上の量を培地に蓄積させることができる細菌をいう。Lアミノ酸は、Lアラニン、Lアルギニン、Lアスパラギン、Lアスパラギン酸、Lシステイン、Lグルタミン酸、Lグルタミン、グリシン、Lヒスチジン、Lイソロイシン、Lロイシン、Lリジン、Lメチオニン、Lフェニルアラニン、Lプロリン、Lセリン、Lスレオニン、Lトリプトファン、Lチロシン及びLバリンを含む。特に、Lスレオニン、Lリジン及びLグルタミン酸が好ましい。以下、前記のような細菌にLアミノ酸生産能を付与する方法、又は前記のような細菌にLアミノ酸生産能を増強する方法について述べる。Lアミノ酸生産能を付与するには、栄養要求性変異株、Lアミノ酸のアナログ耐性株又は代謝制御変異株の取得や、Lアミノ酸の生合成系酵素の発現が増強された組換え株の創製等、従来、コリネ型細菌又はエシェリヒア属細菌等のアミノ酸生産菌の育種に採用されてきた方法を適用することができるアミノ酸発酵、株学会出版センター、1986年5月30日初版発行、第77~100頁参照。ここで、Lアミノ酸生産菌の育種において、付与される栄養要求性、アナログ耐性、代謝制御変異等の性質は、単独でもよく、2種又は3種以上であってもよい。また、発現が増強されるLアミノ酸生合成系酵素も、単独であっても、2種又は3種以上であってもよい。さらに、栄養要求性、アナログ耐性、代謝制御変異等の性質の付与と、生合成系酵素の増強が組み合わされてもよい。Lアミノ酸生産能を有する栄養要求性変異株、アナログ耐性株、又は代謝制御変異株を取得するには、親株又は野生株を通常の変異処理、すなわちX線や紫外線の照射、またはNメチルNニトロNニトロソグアニジン等の変異剤処理などによって処理し、得られた変異株の中から、栄養要求性、アナログ耐性、又は代謝制御変異を示し、かつLアミノ酸生産能を有するものを選択することによって得ることができる。また、Lアミノ酸生産能の付与又は増強は、遺伝子組換えによって、酵素活性を増強することによっても行うことが出来る。酵素活性の増強は、例えば、Lアミノ酸の生合成に関与する酵素をコードする遺伝子の発現が増強するように細菌を改変する方法を挙げることができる。遺伝子の発現を増強するための方法としては、遺伝子を含むDNA断片を、適当なプラスミド、例えば微生物内でプラスミドの複製増殖機能を司る遺伝子を少なくとも含むプラスミドベクターに導入した増幅プラスミドを導入すること、または、これらの遺伝子を染色体上で接合、転移等により多コピー化すること、またこれらの遺伝子のプロモーター領域に変異を導入することにより達成することもできる国際公開パンフレット第9534672号参照。上記増幅プラスミドまたは染色体上に目的遺伝子を導入する場合、これらの遺伝子を発現させるためのプロモーターはコリネ型細菌において機能するものであればいかなるプロモーターであっても良く、用いる遺伝子自身のプロモーターであってもよいし、改変したものでもよい。コリネ型細菌で強力に機能するプロモーターを適宜選択することや、プロモーターの35、10領域をコンセンサス配列に近づけることによっても遺伝子の発現量の調節が可能である。以上のような、酵素遺伝子の発現を増強する方法は、国際公開第0018935号パンフレット、欧州特許出願公開1010755号明細書等に記載されている。以下、細菌にLアミノ酸生産能を付与する方法、及びLアミノ酸生産能が付与された細菌について例示する。Lスレオニン生産菌Lスレオニン生産能を有する微生物として好ましいものは、Lスレオニン生合成系酵素の1種又は2種以上の活性が増強された細菌が挙げられる。Lスレオニン生合成系酵素としては、アスパルトキナーゼIIIlysC、アスパルテートセミアルデヒドデヒドロゲナーゼasd、thrオペロンにコードされるアスパルトキナーゼIthrA、ホモセリンキナーゼthrB、スレオニンシンターゼthrC、アスパルテートアミノトランスフェラーゼアスパルテートトランスアミナーゼが挙げられる。カッコ内は、その遺伝子の略記号である以下の記載においても同様。これらの酵素の中では、アスパルテートセミアルデヒドデヒドロゲナーゼ、アスパルトキナーゼI、ホモセリンキナーゼ、アスパルテートアミノトランスフェラーゼ、及びスレオニンシンターゼが特に好ましい。Lスレオニン生合成系遺伝子は、スレオニン分解が抑制されたエシェリヒア属細菌に導入してもよい。スレオニン分解が抑制されたエシェリヒア属細菌としては、例えば、スレオニンデヒドロゲナーゼ活性が欠損したTDH6株特開2001346578号等が挙げられる。Lスレオニン生合成系酵素は、最終産物のLスレオニンによって酵素活性が抑制される。従って、Lスレオニン生産菌を構築するためには、Lスレオニンによるフィードバック阻害を受けないようにLスレオニン生合成系遺伝子を改変することが望ましい。また、上記thrA、thrB、thrC遺伝子は、スレオニンオペロンを構成しているが、スレオニンオペロンは、アテニュエーター構造を形成しており、スレオニンオペロンの発現は、培養液中のイソロイシン、スレオニンに阻害を受け、アテニュエーションにより発現が抑制される。この改変は、アテニュエーション領域のリーダー配列あるいは、アテニュエーターを除去することにより達成出来るLynnSPetal1987JMolBiol1945969国際公開第0226993号パンフレット国際公開第2005049808号パンフレット参照。スレオニンオペロンの上流には、固有のプロモーターが存在するが、非天然のプロモーターに置換してもよいし国際公開第9804715号パンフレット参照、スレオニン生合成関与遺伝子の発現がラムダファージのリプレッサーおよびプロモーターにより支配されるようなスレオニンオペロンを構築してもよい。欧州特許第0593792号明細書参照また、Lスレオニンによるフィードバック阻害を受けないように細菌を改変するために、αaminoβhydroxyvalericacidAHVに耐性な菌株を選抜することも可能である。このようにLスレオニンによるフィドバック阻害を受けないように改変されたスレオニンオペロンは、宿主内でコピー数が上昇しているか、あるいは強力なプロモーターに連結し、発現量が向上していることが好ましい。コピー数の上昇は、プラスミドによる増幅の他、トランスポゾン、Muファージ等でゲノム上にスレオニンオペロンを転移させることによっても達成出来る。Lスレオニン生合成系酵素以外にも、解糖系、TCA回路、呼吸鎖に関する遺伝子や遺伝子の発現を制御する遺伝子、糖の取り込み遺伝子を強化することも好適である。これらのLスレオニン生産に効果がある遺伝子としては、トランスヒドロナーゼpntAB遺伝子欧州特許733712号明細書、ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼ遺伝子pepC、ホスホエノールピルビン酸シンターゼ遺伝子pps、コリネ型細菌あるいはバチルス属細菌のピルビン酸カルボキシラーゼ遺伝子国際公開第9918228号パンフレット、欧州出願公開第1092776号明細書が挙げられる。また、Lスレオニンに耐性を付与する遺伝子、Lホモセリンに耐性を付与する遺伝子の発現を強化することや、宿主にLスレオニン耐性、Lホモセリン耐性を付与することも好適である。耐性を付与する遺伝子としては、rhtA遺伝子、rhtB遺伝子欧州特許出願公開第0994190号明細書、rhtC遺伝子欧州特許出願公開第1013765号明細書、yfiK、yeaS遺伝子欧州特許出願公開第1016710号明細書が挙げられる。また宿主にLスレオニン耐性を付与する方法は、欧州特許出願公開第0994190号明細書や、国際公開第9004636号パンフレット記載の方法を参照出来る。Lスレオニン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、EcoliTDH6pVIC40、Ecoli472T23pYN7、EcoliNRRL21593、EcoliFERMBP3756、EcoliFERMBP3519及びFERMBP3520、EcoliMG44214947956、EcoliVL643及びVL2055などのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。TDH6株はthrC遺伝子を欠損し、スクロース資化性であり、また、そのilvA遺伝子がリーキー変異を有する。この株はまた、rhtA遺伝子に、高濃度のスレオニンまたはホモセリンに対する耐性を付与する変異を有する。B3996株は、RSF1010由来ベクターに、変異thrA遺伝子を含むthrABCオペロンを挿入したプラスミドpVIC40を保持する。この変異thrA遺伝子は、スレオニンによるフィードバック阻害が実質的に解除されたアスパルトキナーゼホモセリンデヒドロゲナーゼIをコードする。B3996株は、1987年11月19日、オールユニオンサイエンティフィックセンターオブアンチビオティクスに、受託番号RIA1867で寄託されている。この株は、また、1987年4月7日、ロシアンナショナルコレクションオブインダストリアルマイクロオルガニズムズに、受託番号B3996で寄託されている。EcoliVKPMB5318も、Lスレオニン生産菌又はそれを誘導するための親株として使用できる。B5318株は、イソロイシン非要求性であり、プラスミドpVIC40中のスレオニンオペロンの制御領域が、温度感受性ラムダファージC1リプレッサー及びPRプロモーターにより置換されている。VKPMB5318は、1990年5月3日、ロシアンナショナルコレクションオブインダストリアルマイクロオルガニズムズに、受託番号VKPMB5318で国際寄託されている。エシェリヒアコリのアスパルトキナーゼホモセリンデヒドロゲナーゼIをコードするthrA遺伝子はGenBankAccessionNoU00096で登録されているエシェリヒアコリMG1655株のゲノム配列上の塩基番号337~2799に位置し、GenBankaccessionNoAAC73113にて登録されているタンパク質をコードする遺伝子である。エシェリヒアコリのホモセリンキナーゼをコードするthrB遺伝子はGenBankAccessionNoU00096で登録されているエシェリヒアコリMG1655株のゲノム配列上の塩基番号2801~3733に位置し、GenBankaccessionNoAAC73114にて登録されているタンパク質をコードする遺伝子である。エシェリヒアコリのスレオニンシンターゼをコードするthrC遺伝子はGenBankAccessionNoU00096で登録されているエシェリヒアコリMG1655株のゲノム配列上の塩基番号3734~5020に位置し、GenBankaccessionNoAAC73115にて登録されているタンパク質をコードする遺伝子である。これら3つの遺伝子は、リーダーペプチドをコードするthrL遺伝子の下流に、thrLABCからなるスレオニンオペロンとしてコードされている。スレオニンオペロンの発現を増大させるには、転写に影響するアテニュエーター領域を、好ましくは、オペロンから除去することが有効である。スレオニンによるフィードバック阻害に耐性のアスパルトキナーゼホモセリンデヒドロゲナーゼIをコードする変異thrA遺伝子、ならびに、thrB遺伝子及びthrC遺伝子は、スレオニン生産株EcoliVKPMB3996に存在する周知のプラスミドpVIC40から一つのオペロンとして取得できる。プラスミドpVIC40の詳細は、米国特許第5705371号に記載されている。rhtA遺伝子は、ホモセリン及びスレオニンに耐性を与える遺伝子rhtresistanttothreoninehomoserineとして取得されたGenBankAccessionNoU00096で登録されているエシェリヒアコリMG1655株のゲノム配列上の塩基番号848433~849320相補鎖に位置し、GenBankaccessionNoAAC73900にて登録されているタンパク質をコードする遺伝子である。また、rthAの発現を向上させるrhtA23変異が、ATG開始コドンに対して1位のG→A置換であることが判明している。エシェリヒアコリのasd遺伝子はGenBankAccessionNoU00096で登録されているエシェリヒアコリMG1655株のゲノム配列上の塩基番号3571798~3572901相補鎖に位置し、GenBankaccessionNoAAC76458にて登録されているタンパク質をコードする遺伝子である。遺伝子の塩基配列に基づいて作製されたプライマーを用いるPCRにより得ることができる。他の微生物のasd遺伝子も同様に得ることができる。また、エシェリヒアコリのaspC遺伝子はGenBankAccessionNoU00096で登録されているエシェリヒアコリMG1655株のゲノム配列上の塩基番号983742~984932相補鎖に位置し、GenBankaccessionNoAAC74014にて登録されているタンパク質をコードする遺伝子であり、PCRにより得ることができる。他の微生物のaspC遺伝子も同様に得ることができる。Lリジン生産菌以下、L-リジン生産菌及びその構築方法を例として示す。例えば、L-リジン生産能を有する株としては、L-リジンアナログ耐性株又は代謝制御変異株が挙げられる。L-リジンアナログの例としては、オキサリジン、リジンヒドロキサメート、S-2-アミノエチル-L-システイン以下、AECと略記することがある。、γ-メチルリジン、α-クロロカプロラクタムなどが挙げられるが、これらに限定されない。これらのリジンアナログに対して耐性を有する変異株は、腸内細菌科に属する細菌やコリネ型細菌を通常の人工変異処理に付すことによって得ることができる。L-リジン生産菌として具体的には、エシェリヒアコリAJ11442株FERMBP1543、NRRLB12185;特開昭5618596号公報及び米国特許第4346170号明細書参照、エシェリヒアコリVL611株特開2000189180号公報等が挙げられる。また、エシェリヒアコリのL-リジン生産菌として、WC196株国際公開第9617930号パンフレット参照を用いることも出来る。また、L-リジン生合成系の酵素活性を上昇させることによっても、L-リジン生産菌を構築することが出来る。これらの酵素活性の上昇は、酵素をコードする遺伝子のコピー数を細胞内で上昇させること、または発現調節配列を改変することによって達成できる。遺伝子の発現を増強するための改変は、例えば、遺伝子組換え技術を利用して、細胞中の遺伝子のコピー数を高めることによって行うことができる。例えばgapA遺伝子を含むDNA断片を、宿主細菌で機能するベクター、好ましくはマルチコピー型のベクターと連結して組換えDNAを作製し、これを細菌に導入して形質転換すればよい。遺伝子のコピー数を高めることは、上述のような遺伝子を細菌のゲノムDNA上に多コピー存在させることによっても達成できる。細菌のゲノムDNA上に遺伝子を多コピーで導入するには、ゲノムDNA上に多コピー存在する配列を標的に利用して相同組換えにより行う。ゲノムDNA上に多コピー存在する配列としては、レペティティブDNA、転移因子の端部に存在するインバーテッドリピートが利用できる。また、ゲノム上に存在するgapA遺伝子の横に、それぞれの遺伝子をタンデムに連結させてもよいし、ゲノム上の不要な遺伝子上に重複して組み込んでもよい。これらの遺伝子導入は、温度感受性ベクターを用いて、あるいはintegrationベクターを用いて達成することが出来る。あるいは、特開平2109985号公報に開示されているように、遺伝子をトランスポゾンに搭載してこれを転移させてゲノムDNA上に多コピー導入することも可能である。ゲノム上に遺伝子が転移したことの確認は、遺伝子の一部をプローブとして、サザンハイブリダイゼーションを行うことによって確認出来る。さらに、遺伝子の発現の増強は、上記した遺伝子コピー数の増幅以外に、国際公開0018935号パンフレットに記載した方法で、ゲノムDNA上またはプラスミド上の遺伝子の各々のプロモーター等の発現調節配列を強力なものに置換することや、各遺伝子の-35、-10領域をコンセンサス配列に近づけること、遺伝子の発現を上昇させるようなレギュレーターを増幅すること、又は、遺伝子の発現を低下させるようなレギュレーターを欠失または弱化させることによっても達成される。例えば、lacプロモーター、trpプロモーター、trcプロモーター、tacプロモーター、araBAプロモーター、ラムダファージのPRプロモーター、PLプロモーター、tetプロモーター、T7プロモーター、φ10プロモーター等が強力なプロモーターとして知られている。また、gapA遺伝子のプロモーター領域、SD領域に塩基置換等を導入し、より強力なものに改変することも可能である。プロモーターの強度の評価法および強力なプロモーターの例は、Goldsteinらの論文ProkaryoticpromotersinbiotechnologyBiotechnolAnnuRev19951105128等に記載されている。さらに、リボソーム結合部位RBSと開始コドンとの間のスペーサー、特に開始コドンのすぐ上流の配列における数個のヌクレオチドの置換がmRNAの翻訳効率に非常に影響を及ぼすことが知られており、これらを改変することも可能である。遺伝子のプロモーター等の発現調節領域は、プロモーター検索ベクターやGENETYX等の遺伝子解析ソフトを用いて決定することも出来る。これらのプロモーター置換または改変により遺伝子の発現が強化される。発現調節配列の置換は、例えば温度感受性プラスミドを用いた方法や、Redドリブンインテグレーション法を使用することが出来る。L-リジン生合成系酵素をコードする遺伝子としては、ジヒドロジピコリン酸合成酵素遺伝子dapA、アスパルトキナーゼ遺伝子、ジヒドロジピコリン酸レダクターゼ遺伝子、ジアミノピメリン酸脱炭酸酵素遺伝子、ジアミノピメリン酸デヒドロゲナーゼ遺伝子以上、国際公開第9640934号パンフレット、ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼ遺伝子特開昭6087788号公報、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ遺伝子特公平6102028号公報、ジアミノピメリン酸エピメラーゼ遺伝子特開2003135066号公報、アスパラギン酸セミアルデヒド脱水素酵素遺伝子asd等のジアミノピメリン酸経路の酵素の遺伝子、あるいはホモアコニット酸ヒドラターゼ遺伝子特開2000157276号公報等のアミノアジピン酸経路の酵素等の遺伝子が挙げられる。また、親株は、エネルギー効率に関与する遺伝子、ニコチンアミドヌクレオチドトランスヒドロゲナーゼをコードする遺伝子、L-リジン排出活性を有するタンパク質をコードするybjE遺伝子、グルタミン酸デヒドロゲナーゼをコードする遺伝子、または、これらの任意の組み合わせの遺伝子の発現レベルが増大していてもよい。カッコ内は、それらの遺伝子の略記号である。エシェリヒアコリ由来の野生型ジヒドロジピコリン酸合成酵素はL-リジンによるフィードバック阻害を受けることが知られており、エシェリヒアコリ由来の野生型アスパルトキナーゼはL-リジンによる抑制及びフィードバック阻害を受けることが知られている。したがって、dapA遺伝子及びlysC遺伝子を用いる場合、これらの遺伝子は、L-リジンによるフィードバック阻害を受けない変異型遺伝子であることが好ましい。L-リジンによるフィードバック阻害を受けない変異型ジヒドロジピコリン酸合成酵素をコードするDNAとしては、118位のヒスチジン残基がチロシン残基に置換された配列を有するタンパク質をコードするDNAが挙げられる。また、L-リジンによるフィードバック阻害を受けない変異型アスパルトキナーゼをコードするDNAとしては、352位のスレオニン残基がイソロイシン残基に置換、323位のグリシン残基がアスパラギン残基に置換、318位のメチオニンがイソロイシンに置換された配列を有するAKIIIをコードするDNAが挙げられるこれらの変異体については米国特許第5661012号及び第6040160号明細書参照。変異型DNAはPCRなどによる部位特異的変異法により取得することができる。なお、変異型変異型ジヒドロジピコリン酸合成酵素をコードする変異型dapA及び変異型アスパルトキナーゼをコードする変異型lysCを含むプラスミドとして、広宿主域プラスミドRSFD80、pCAB1、pCABD2が知られている米国特許第6040160号明細書。同プラスミドで形質転換されたエシェリヒアコリJM109株米国特許第6040160号明細書は、AJ12396と命名され、同株は1993年10月28日に通産省工業技術院生命工学工業技術研究所現独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに受託番号FERMP13936として寄託され、1994年11月1日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、FERMBP4859の受託番号のもとで寄託されている。RSFD80は、AJ12396株から、公知の方法によって取得することができる。L-リジン生産において、このような酵素としては、ホモセリンデヒドロゲナーゼ、リジンデカルボキシラーゼcadAldcC、マリックエンザイム等があり、該酵素の活性が低下または欠損した株は国際公開第WO9523864号、第WO9617930号パンフレット、第WO2005010175号パンフレットなどに記載されている。リジンデカルボキシラーゼ活性を低下または欠損させるためには、リジンデカルボキシラーゼをコードするcadA遺伝子とldcC遺伝子の両方の発現を低下させることが好ましい。両遺伝子の発現低下は、WO2006078039号パンフレットに記載の方法に従って行うことができる。これらの酵素活性を低下あるいは欠損させる方法としては、通常の変異処理法又は遺伝子組換え技術によって、ゲノム上の上記酵素の遺伝子に、細胞中の当該酵素の活性が低下または欠損するような変異を導入すればよい。このような変異の導入は、例えば、遺伝子組換えによって、ゲノム上の酵素をコードする遺伝子を欠損させたり、プロモーターやシャインダルガルノSD配列等の発現調節配列を改変したりすることなどによって達成される。また、ゲノム上の酵素をコードする領域にアミノ酸置換ミスセンス変異を導入すること、また終始コドンを導入することナンセンス変異、一~二塩基付加欠失するフレームシフト変異を導入すること、遺伝子の一部分、あるいは全領域を欠失させることによっても達成出来るWangJPetal2006JAgricFoodChem5494059410WinklerWC2005CurrOpinChemBiol9594602QiuZandGoodmanMF1997JBiolChem27286118617WenteSRandSchachmanHK1991JBiolChem2662083320839。また、コード領域の全体又は一部が欠失したような変異酵素をコードする遺伝子を構築し、相同組換えなどによって、該遺伝子でゲノム上の正常遺伝子を置換すること、又はトランスポゾン、IS因子を該遺伝子に導入することによっても酵素活性を低下または欠損させることができる。例えば、上記の酵素の活性を低下または欠損させるような変異を遺伝子組換えにより導入する為には、以下のような方法が用いられる。目的遺伝子の部分配列を改変し、正常に機能する酵素を産生しないようにした変異型遺伝子を作製し、該遺伝子を含むDNAで腸内細菌科に属する細菌に形質転換し、変異型遺伝子とゲノム上の遺伝子で組換えを起こさせることにより、ゲノム上の目的遺伝子を変異型に置換することが出来る。このような相同組換えを利用した遺伝子置換は、Redドリブンインテグレーションと呼ばれる方法DatsenkoKAandWannerBL2000ProcNatlAcadSciUSA9766406645、Redドリブンインテグレーション法とλファージ由来の切り出しシステムChoEHGumportRIGardnerJFJ2002Bacteriol18452005203とを組合わせた方法WO2005010175号参照等の直鎖状DNAを用いる方法や、温度感受性複製起点を含むプラスミドを用いる方法などがある米国特許第6303383号特開平05007491号公報。また、上述のような相同組換えを利用した遺伝子置換による部位特異的変異導入は、宿主上で複製能力を持たないプラスミドを用いても行うことが出来る。好ましいL-リジン生産菌として、エシェリヒアコリWC196ΔcadAΔldcCpCABD2が挙げられるWO2006078039。この菌株は、WC196株より、リジンデカルボキシラーゼをコードするcadA及びldcC遺伝子を破壊し、リジン生合成系遺伝子を含むプラスミドpCABD2米国特許第6040160号を導入することにより構築した株である。WC196株は、EcoliK12に由来するW3110株から取得された株で、352位のスレオニンをイソロイシンに置換することによりL-リジンによるフィードバック阻害が解除されたアスパルトキナーゼIIIをコードする変異型lysC遺伝子米国特許第5661012号でW3110株の染色体上の野生型lysC遺伝子を置き換えた後、AEC耐性を付与することにより育種された米国特許第5827698号。WC196株は、EscherichiacoliAJ13069と命名され、1994年12月6日、工業技術院生命工学工業技術研究所現独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター、〒3058566日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に受託番号FERMP14690として寄託され、1995年9月29日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、受託番号FERMBP5252が付与されている。WC196ΔcadAΔldcC自体も、好ましいL-リジン生産菌である。WC196ΔcadAΔldcCは、AJ110692と命名され、2008年10月7日、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター〒3058566日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に国際寄託され、受託番号FERMBP11027が付与されている。pCABD2は、L-リジンによるフィードバック阻害が解除された変異を有するエシェリヒアコリ由来のジヒドロジピコリン酸合成酵素DDPSをコードする変異型dapA遺伝子と、L-リジンによるフィードバック阻害が解除された変異を有するエシェリヒアコリ由来のアスパルトキナーゼIIIをコードする変異型lysC遺伝子と、エシェリヒアコリ由来のジヒドロジピコリン酸レダクターゼをコードするdapB遺伝子と、ブレビバクテリウムラクトファーメンタム由来ジアミノピメリン酸デヒドロゲナーゼをコードするddh遺伝子を含んでいる国際公開第WO9516042、WO0153459号パンフレット。上記のようなLリジン生合成に関与する酵素の遺伝子発現を増強する手法、酵素活性を低下させる方法は、その他のLアミノ酸生合成酵素をコードする遺伝子についても同様に適用することができる。Lリジン生産能を有するコリネ型細菌としては、AEC耐性変異株ブレビバクテリウムラクトファーメンタムAJ11082NRRLB11470株など:特公昭561914号公報、特公昭561915号公報、特公昭5714157号公報、特公昭5714158号公報、特公昭5730474号公報、特公昭5810075号公報、特公昭594993号公報、特公昭6135840号公報、特公昭6224074号公報、特公昭6236673号公報、特公平511958号公報、特公平7112437号公報、特公平7112438号公報参照;その生育にLホモセリン等のアミノ酸を必要とする変異株特公昭4828078号公報、特公昭566499号公報参照;AECに耐性を示し、更にLロイシン、Lホモセリン、Lプロリン、Lセリン、Lアルギニン、Lアラニン、Lバリン等のアミノ酸を要求する変異株米国特許第3708395号及び第3825472号明細書参照;DLαアミノεカプロラクタム、αアミノラウリルラクタム、アスパラギン酸アナログ、スルファ剤、キノイド、Nラウロイルロイシンに耐性を示すLリジン生産変異株;オキザロ酢酸脱炭酸酵素デカルボキシラーゼまたは呼吸系酵素阻害剤の耐性を示すLリジン生産変異株特開昭5053588号公報、特開昭5031093号公報、特開昭52102498号公報、特開昭539394号公報、特開昭5386089号公報、特開昭559783号公報、特開昭559759号公報、特開昭5632995号公報、特開昭5639778号公報、特公昭5343591号公報、特公昭531833号公報;イノシトールまたは酢酸を要求するLリジン生産変異株特開昭559784号公報、特開昭568692号公報;フルオロピルビン酸または34°C以上の温度に対して感受性を示すLリジン生産変異株特開昭559783号公報、特開昭5386090号公報;エチレングリコールに耐性を示し、Lリジンを生産するブレビバクテリウム属またはコリネバクテリウム属の生産変異株米国特許第4411997号明細書などが挙げられる。Lシステイン生産菌Lシステイン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、フィードバック阻害耐性のセリンアセチルトランスフェラーゼをコードする異なるcysEアレルで形質転換されたEcoliJM15、細胞に毒性の物質を排出するのに適したタンパク質をコードする過剰発現遺伝子を有するEcoliW3110、システインデスルフォヒドラーゼ活性が低下したEcoli株、cysB遺伝子によりコードされる正のシステインレギュロンの転写制御因子の活性が上昇したEcoliW3110などのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。Lロイシン生産菌Lロイシン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、ロイシン耐性のEcoil株またはβ2チエニルアラニン、3ヒドロキシロイシン、4アザロイシン、555トリフルオロロイシンなどのロイシンアナログ耐性のEcoli株、国際公開第9606926号に記載された遺伝子工学的方法で得られたEcoli株、EcoliH9068などのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。本発明に用いる細菌は、Lロイシン生合成に関与する遺伝子の1種以上の発現が増大されることにより改良されていてもよい。このような遺伝子の例としては、好ましくはLロイシンによるフィードバック阻害が解除されたイソプロピルマレートシンターゼをコードする変異leuA遺伝子に代表される、leuABCDオペロンの遺伝子が挙げられる。さらに、本発明に用いる細菌は、細菌の細胞からLアミノ酸を排出するタンパク質をコードする遺伝子の1種以上の発現が増大されることにより改良されていてもよい。このような遺伝子の例としては、b2682遺伝子及びb2683遺伝子が挙げられる。コリネ型細菌のLイソロイシン生産菌としては、分岐鎖アミノ酸排出タンパク質をコードするbrnE遺伝子を増幅したコリネ型細菌特開2001169788、Lリジン生産菌とのプロトプラスト融合によりLイソロイシン生産能を付与したコリネ型細菌特開昭6274293、ホモセリンデヒドロゲナーゼを強化したコリネ型細菌特開昭6291193、スレオニンハイドロキサメート耐性株特開昭62195293、αケトマロン耐性株特開昭6115695、メチルリジン耐性株特開昭6115696が挙げられる。Lヒスチジン生産菌Lヒスチジン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、Ecoli24株、Ecoli80株、EcoliNRRLB12116B12121、EcoliH9342及びH9343、EcoliH9341、EcoliAI80pFM201などのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。Lヒスチジン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、Lヒスチジン生合成系酵素をコードする遺伝子の1種以上の発現が増大した株も挙げられる。かかる遺伝子の例としては、ATPフォスフォリボシルトランスフェラーゼ遺伝子、フォスフォリボシルAMPサイクロヒドロラーゼ遺伝子、フォスフォリボシルATPピロフォスフォヒドロラーゼ遺伝子、フォスフォリボシルフォルミミノ5アミノイミダゾールカルボキサミドリボタイドイソメラーゼ遺伝子、アミドトランスフェラーゼ遺伝子、ヒスチジノールフォスフェイトアミノトランスフェラーゼ遺伝子、ヒスチジノールフォスファターゼ遺伝子、ヒスチジノールデヒドロゲナーゼ遺伝子などが挙げられる。hisG及びhisBHAFIにコードされるLヒスチジン生合成系酵素はLヒスチジンにより阻害されることが知られており、従って、Lヒスチジン生産能は、ATPフォスフォリボシルトランスフェラーゼ遺伝子にフィードバック阻害への耐性を付与する変異を導入することにより効率的に増大させることができる。Lヒスチジン生産能を有する株の具体例としては、Lヒスチジン生合成系酵素をコードするDNAを保持するベクターを導入したEcoliFERMP5038及び5048、アミノ酸輸送の遺伝子を導入したEcoli株、スルファグアニジン、DL124トリアゾール3アラニン及びストレプトマイシンに対する耐性を付与したEcoli80株などが挙げられる。Lグルタミン酸生産菌Lグルタミン酸生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、EcoliVL334thrCなどのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。EcoliVL334は、thrC遺伝子及びilvA遺伝子に変異を有するLイソロイシン及びLスレオニン要求性株である。thrC遺伝子の野生型アレルは、野生型EcoliK12株の細胞で増殖したバクテリオファージP1を用いる一般的形質導入法により導入された。この結果、Lイソロイシン要求性のLグルタミン酸生産菌VL334thrCが得られた。Lグルタミン酸生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、Lグルタミン酸生合成系酵素1種又は2種以上の活性が増強された株が挙げられるが、これらに限定されない。かかる遺伝子の例としては、グルタメートデヒドロゲナーゼgdhA、グルタミンシンテターゼ、グルタメートシンテターゼ、イソシトレートデヒドロゲナーゼ、アコニテートヒドラターゼ、クエン酸シンターゼ、メチルクエン酸シンターゼprpC、フォスフォエノールピルベートカルボシラーゼ、ピルベートデヒドロゲナーゼ、ピルベートキナーゼ、フォスフォエノールピルベートシンターゼ、エノラーゼ、フォスフォグリセロムターゼ、フォスフォグリセレートキナーゼ、グリセルアルデヒド3フォスフェートデヒドロゲナーゼ、トリオースフォスフェートイソメラーゼ、フルクトースビスフォスフェートアルドラーゼ、フォスフォフルクトキナーゼpfkApfkB、グルコースフォスフェートイソメラーゼなどが挙げられる。これらの酵素の中では、グルタメートデヒドロゲナーゼ、クエン酸シンターゼ、フォスフォエノールピルベートカルボキシラーゼ、及びメチルクエン酸シンターゼが好ましい。シトレートシンテターゼ遺伝子、フォスフォエノールピルベートカルボキシラーゼ遺伝子、及び/またはグルタメートデヒドロゲナーゼ遺伝子の発現が増大するように改変された株の例としては、欧州特許出願公開第1078989号、欧州特許出願公開第955368号及び欧州特許出願公開第952221号に開示されたものが挙げられる。Lグルタミン酸生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、Lグルタミン酸の生合成経路から分岐してLグルタミン酸以外の化合物の合成を触媒する酵素の活性が低下または欠損している株も挙げられる。このような酵素の例としては、イソシトレートリアーゼ、αケトグルタレートデヒドロゲナーゼ、フォスフォトランスアセチラーゼ、アセテートキナーゼ、アセトヒドロキシ酸シンターゼ、アセトラクテートシンターゼ、フォルメートアセチルトランスフェラーゼ、ラクテートデヒドロゲナーゼ、グルタメートデカルボキシラーゼなどが挙げられる。αケトグルタレートデヒドロゲナーゼ活性が欠損した、または、αケトグルタレートデヒドロゲナーゼ活性が低下したエシェリヒア属に属する細菌、及び、それらの取得方法は米国特許第5378616号及び第5573945号に記載されている。具体例としては下記のものが挙げられる。EcoliW3110sucAKmrEcoliAJ12624EcoliAJ12628EcoliAJ12949EcoliW3110sucAKmrは、EcoliW3110のαケトグルタレートデヒドロゲナーゼ遺伝子以下、sucA遺伝子ともいうを破壊することにより得られた株である。この株は、αケトグルタレートデヒドロゲナーゼを完全に欠損している。また、αケトグルタレートデヒドロゲナーゼ活性が低下したコリネ型細菌としては、例えば、以下の株が挙げられる。ブレビバクテリウムラクトファーメンタムL302株特開2006340603号明細書ブレビバクテリウムラクトファーメンタムΔS株国際公開9534672号パンフレットブレビバクテリウムラクトファーメンタムAJ12821ブレビバクテリウムフラバムAJ12822コリネバクテリウムグルタミカムAJ12823コリネバクテリウムグルタミカムL302株特開2006340603号Lグルタミン酸生産菌の他の例としては、エシェリヒア属に属し、アスパラギン酸代謝拮抗物質に耐性を有するものが挙げられる。これらの株は、αケトグルタレートデヒドロゲナーゼを欠損していてもよく、例えば、EcoliAJ13199、さらにLグルタミン酸分解能が低下したFFRMP12379AJ13138などが挙げられる。パントエアアナナティスのLグルタミン酸生産菌の例としては、パントエアアナナティスAJ13355株が挙げられる。同株は、静岡県磐田市の土壌から、低pHでLグルタミン酸及び炭素源を含む培地で増殖できる株として分離された株である。パントエアアナナティスAJ13355は、1998年2月19日に、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター住所〒3058566日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に、受託番号FERMP16644として寄託され、1999年1月11日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、受託番号FERMBP6614が付与されている。尚、同株は、分離された当時はエンテロバクターアグロメランスEnterobacteragglomeransと同定され、エンテロバクターアグロメランスAJ13355として寄託されたが、近年16SrRNAの塩基配列解析などにより、パントエアアナナティスPantoeaananatisに再分類されている。また、パントエアアナナティスのLグルタミン酸生産菌として、αケトグルタレートデヒドロゲナーゼαKGDH活性が欠損した、または、αKGDH活性が低下したパントエア属に属する細菌が挙げられる。このような株としては、AJ13355株のαKGDHE1サブユニット遺伝子sucAを欠損させたAJ13356、及びAJ13355株から粘液質低生産変異株として選択されたSC17株由来のsucA遺伝子欠損株であるSC17sucAがある。AJ13356は、1998年2月19日、工業技術院生命工学工業技術研究所現独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター、〒3058566日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に受託番号FERMP16645として寄託され、1999年1月11日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、受託番号FERMBP6616が付与されている。AJ13355及びAJ13356は、上記寄託機関にEnterobacteragglomeransとして寄託されているが、本明細書では、Pantoeaananatisとして記載する。また、SC17sucA株は、ブライベートナンバーAJ417が付与され、2004年2月26日に上記の産業技術総合研究所特許生物寄託センターに受託番号FERMBP08646として寄託されている。さらに、パントエアアナナティスのLグルタミン酸生産菌として、SC17sucARSFCPGpSTVCB株、AJ13601株、NP106株、及びNA1株が挙げられる。SC17sucARSFCPGpSTVCB株は、SC17sucA株に、エシェリヒアコリ由来のクエン酸シンターゼ遺伝子gltA、ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼ遺伝子ppsA、およびグルタメートデヒドロゲナーゼ遺伝子gdhAを含むプラスミドRSFCPG、並びに、ブレビバクテリウムラクトファーメンタム由来のクエン酸シンターゼ遺伝子gltAを含むプラスミドpSTVCBを導入して得た株である。AJ13601株は、このSC17sucARSFCPGpSTVCB株から低pH下で高濃度のLグルタミン酸に耐性を示す株として選択された株である。また、NP106株は、AJ13601株からプラスミドRSFCPGpSTVCBを脱落させた株である。AJ13601株は、1999年8月18日に、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター〒3058566日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に受託番号FERMP17516として寄託され、2000年7月6日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、受託番号FERMBP7207が付与されている。さらにコリネ型細菌にLグルタミン酸生産能を付与する方法として、メカノセンシティブチャンネルmechanosensitivechannelをコードするyggB遺伝子を増幅する方法国際公開WO2006070944号、コード領域内に変異を導入した変異型yggB遺伝子を導入する方法を用いることも可能である。yggB遺伝子は、GenBankAccessionNoNC003450で登録されているコリネバクテリウムグルタミカムATCC13032株のゲノム配列上の塩基番号1337692~1336091相補鎖に位置し、NCgl1221とも呼ばれるGenBankaccessionNoNP600492にて登録されている膜タンパク質をコードする遺伝子である。Lグルタミン酸生産能を付与または増強する別の方法として、有機酸アナログや呼吸阻害剤などへの耐性を付与する方法や細胞壁合成阻害剤に対する感受性を付与する方法も挙げられる。例えば、モノフルオロ酢酸耐性を付与する方法特開昭50113209、アデニン耐性またはチミン耐性を付与する方法特開昭57065198、ウレアーゼを弱化させる方法特開昭52038088、マロン酸耐性を付与する方法特開昭52038088、ベンゾピロンまたはナフトキノン類への耐性を付与する方法特開昭561889、HOQNO耐性を付与する方法特開昭56140895、αケトマロン酸耐性を付与する方法特開昭572689、グアニジン耐性を付与する方法特開昭5635981、ペニシリンに対する感受性を付与する方法特開平488994などが挙げられる。このような耐性菌の具体例としては、下記のような菌株が挙げられる。ブレビバクテリウムフラバムAJ3949コリネバクテリウムグルタミカムAJ11628ブレビバクテリウムフラバムAJ11355コリネバクテリウムグルタミカムAJ11368ブレビバクテリウムフラバムAJ11217コリネバクテリウムグルタミカムAJ11218ブレビバクテリウムフラバムAJ11564ブレビバクテリウムフラバムAJ11439コリネバクテリウムグルタミカムH7684ブレビバクテリウムラクトファーメンタムAJ11426FERMP5123;特開平56048890号公報参照コリネバクテリウムグルタミカムAJ11440FERMP5137;特開平56048890号公報参照ブレビバクテリウムラクトファーメンタムAJ11796FERMP6402;特開平58158192号公報参照Lフェニルアラニン生産菌Lフェニルアラニン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、コリスミ酸ムターゼプレフェン酸デヒドロゲナーゼ及びチロシンリプレッサーを欠損したEcoliAJ12739、フィードバック阻害が解除されたコリスミ酸ムターゼプレフェン酸デヒドラターゼをコードする変異型pheA34遺伝子を保持するEcoliHW1089、EcoliMWEC101b、EcoliNRRLB12141NRRLB12145NRRLB12146及びNRRLB12147などのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。また、親株として、フィードバック阻害が解除されたコリスミ酸ムターゼプレフェン酸デヒドラターゼをコードする遺伝子を保持するEcoliK12W3110pPHAB、EcoliK12W3110pPHAD、EcoliK12W3110pPHATerm及びAJ12604と命名されたEcoliK12W3110pBRaroG4pACMABも使用できる。さらに、yedA遺伝子またはyddG遺伝子にコードされるタンパク質の活性が増大したエシェリヒア属に属するLフェニルアラニン生産菌も使用できる。コリネ型細菌のフェニルアラニン生産菌としては、ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼまたはピルビン酸キナーゼ活性が低下したコリネバクテリウムグルタミカBPS13株及びK78欧州特許公開公報331145号、特開平02303495号、チロシン要求性株特開平05049489等を使用することができる。また、フェニルアラニン生産菌としては、副生物を細胞内に取り込むように改変すること、例えば、Lトリプトファンの取り込み遺伝子tnaBmtrや、Lチロシンの取り込み遺伝子であるtyrPの発現量を向上させることによっても、効率よくLフェニルアラニンを生産する菌株を取得することができるEP1484410。Lトリプトファン生産菌Lトリプトファン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、変異trpS遺伝子によりコードされるトリプトファニルtRNAシンテターゼが欠損したEcoliJP4735pMU3028及びJP6015pMU91、セリンによるフィードバック阻害を受けないフォスフォグリセリレートデヒドロゲナーゼをコードするserAアレル及びトリプトファンによるフィードバック阻害を受けないアントラニレートシンターゼをコードするtrpEアレルを有するEcoliSV164、トリプトファナーゼが欠損したEcoliAGX17及びAGX6aroP、フォスフォエノールピルビン酸生産能が増大したEcoliAGX17pGX50pACKG4ppsなどのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。yedA遺伝子またはyddG遺伝子にコードされるタンパク質の活性が増大したエシェリヒア属に属するLトリプトファン生産菌も使用できる。Lトリプトファン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、アントラニレートシンターゼ、フォスフォグリセレートデヒドロゲナーゼ、3デオキシDアラビノヘプツロン酸7リン酸シンターゼ、3デヒドロキネートシンターゼ、シキミ酸デヒドロゲナーゼ、シキミ酸キナーゼ、5エノール酸ピルビルシキミ酸3リン酸シンターゼ、コリスミ酸シンターゼ、プレフェン酸デヒドラターゼ、コリスミ酸ムターゼ及び、トリプトファンシンターゼから選ばれる1種又は2種以上の酵素の活性が増強された株も挙げられる。プレフェン酸デヒドラターゼ及びコリスミ酸ムターゼは、2機能酵素chorismatemutaseprephenatedehydrogenaseとしてpheA遺伝子によってコードされている。これらの酵素の中では、フォスフォグリセレートデヒドロゲナーゼ、3デオキシDアラビノヘプツロン酸7リン酸シンターゼ、3デヒドロキネートシンターゼ、シキミ酸デヒドラターゼ、シキミ酸キナーゼ、5エノール酸ピルビルシキミ酸3リン酸シンターゼ、コリスミ酸シンターゼ、プレフェン酸デヒドラターゼ、コリスミン酸ムターゼプレフェン酸デヒドロゲナーゼが特に好ましい。アントラニレートシンターゼ及びフォスフォグリセレートデヒドロゲナーゼは共にLトリプトファン及びLセリンによるフィードバック阻害を受けるので、フィードバック阻害を解除する変異をこれらの酵素に導入してもよい。このような変異を有する株の具体例としては、脱感作型アントラニレートシンターゼを保持するEcoliSV164、及び、フィードバック阻害が解除されたフォスフォグリセレートデヒドロゲナーゼをコードする変異serA遺伝子を含むプラスミドpGH5をEcoliSV164に導入することにより得られた形質転換株が挙げられる。Lトリプトファン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、阻害解除型アントラニレートシンターゼをコードする遺伝子を含むトリプトファンオペロンが導入された株も挙げられる。さらに、トリプトファンオペロン中のトリプトファンシンターゼをコードする遺伝子の発現を増大させることによりLトリプトファン生産能を付与してもよい。トリプトファンシンターゼは、それぞれtrpA及びtrpB遺伝子によりコードされるα及びβサブユニットからなる。さらに、イソシトレートリアーゼマレートシンターゼオペロンの発現を増大させることによりLトリプトファン生産能を改良してもよい。コリネ型細菌としてはサルフアグアニジンに耐性株であるコリネバクテリウムグルタミクムAJ12118FERMBP478特許01681002号、トリプトファンオペロンが導入されたコリネ型細菌特開昭63240794号公報、コリネ型細菌由来のシキミ酸キナーゼをコードする遺伝子を導入したコリネ型細菌特開01994749号公報を用いることができる。Lプロリン生産菌Lプロリン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、ilvA遺伝子が欠損し、Lプロリンを生産できるEcoli702ilvAなどのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。本発明に用いる細菌は、Lプロリン生合成に関与する遺伝子の一種以上の発現を増大することにより改良してもよい。Lプロリン生産菌に好ましい遺伝子の例としては、Lプロリンによるフィードバック阻害が解除されたグルタメートキナーゼをコードするproB遺伝子が挙げられる。さらに、本発明に用いる細菌は、細菌の細胞からLアミノ酸を排出するタンパク質をコードする遺伝子の一種以上の発現が増大することにより改良してもよい。このような遺伝子としては、b2682遺伝子及びb2683遺伝子が挙げられる。Lプロリン生産能を有するエシェリヒア属に属する細菌の例としては、NRRLB12403及びNRRLB12404、VKPMB8012、ドイツ特許第3127361号に記載のプラスミド変異体、BloomFRetalに記載のプラスミド変異体などのEcoli株が挙げられる。Lアルギニン生産菌Lアルギニン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、Ecoli237株、及び、変異Nアセチルグルタメートシンターゼを保持するその誘導株、Ecoli382株、NアセチルグルタメートシンテターゼをコードするargA遺伝子が導入されたアルギニン生産株などのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。Lアルギニン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、Lアルギニン生合成系酵素をコードする遺伝子の1種以上の発現が増大した株も挙げられる。かかる遺伝子の例としては、Nアセチルグルタミルフォスフェートレダクターゼ遺伝子、オルニチンアセチルトランスフェラーゼ遺伝子、Nアセチルグルタメートキナーゼ遺伝子、アセチルオルニチントランスアミナーゼ遺伝子、オルニチンカルバモイルトランスフェラーゼ遺伝子、アルギノコハク酸シンテターゼ遺伝子、アルギノコハク酸リアーゼ遺伝子、カルバモイルフォスフェートシンテターゼ遺伝子が挙げられる。Lバリン生産菌Lバリン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、ilvGMEDAオペロンを過剰発現するように改変された株が挙げられるが、これらに限定されない。アテニュエーションに必要なilvGMEDAオペロンの領域を除去し、生産されるLバリンによりオペロンの発現が減衰しないようにすることが好ましい。さらに、オペロンのilvA遺伝子が破壊され、スレオニンデアミナーゼ活性が減少することが好ましい。Lバリン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、アミノアシルtRNAシンテターゼの変異を有する変異株も挙げられる。例えば、イソロイシンtRNAシンテターゼをコードするileS遺伝子に変異を有するEcoliVL1970が使用できる。EcoliVL1970は、1988年6月24日、ロシアンナショナルコレクションオブインダストリアルマイクロオルガニズムズに、受託番号VKPMB4411で寄託されている。さらに、生育にリポ酸を要求する、及び/または、HATPaseを欠失している変異株を親株として用いることができる。コリネ型細菌のLバリン生産菌としては、例えば、Lバリン酸生合成に関与する酵素をコードする遺伝子の発現が増強するように改変した菌株を挙げることができる。Lバリン酸生合成に関与する酵素としては、例えば、ilvBNCオペロンによりコードされる酵素、すなわちilvBNによりコードされるアセトヒドロキシ酸シンターゼやivlCによりコードされるイソメロリダクターゼが挙げられる。尚、ilvBNCオペロンは、Lバリン及び又はLイソロイシン及び又はLロイシンによるオペロンの発現調節を受けるので、生成するLバリンによる発現抑制を解除するためにアテニュエーションを解除することが望ましい。Lバリン生産能を有するコリネ型細菌としては、Lバリン産生を減少させる物質代謝経路に関与する、少なくとも1種の酵素の活性を低下あるいは欠損させることにより行ってもよい。例えば、Lロイシン合成に関与するスレオニンデヒドラターゼやDパントセナート合成に関与する酵素の活性を低下させることが考えられる国際公開0050624号。Lバリン生産能を付与する別の方法として、アミノ酸アナログなどへの耐性を付与する方法も挙げられる。例えば、LイソロイシンおよびLメチオニン要求性,ならびにDリボス,プリンリボヌクレオシドまたはピリミジンリボヌクレオシドに耐性を有し,かつLバリン生産能を有する変異株FERMP1841、FERMP29、特公昭53025034や、ポリケトイド類に耐性を有する変異株、更には酢酸を唯一の炭素源とする培地でLバリン耐性を示し、且つグルコースを唯一の炭素源とする培地でピルビン酸アナログに感受性を有する変異株FERMBP3006、FERMBP3007、特許3006929号が挙げられる。Lイソロイシン生産菌Lイソロイシン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、6ジメチルアミノプリンに耐性を有する変異株、チアイソロイシン、イソロイシンヒドロキサメートなどのイソロイシンアナログに耐性を有する変異株、さらにDLエチオニン及び/またはアルギニンヒドロキサメートに耐性を有する変異株が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、スレオニンデアミナーゼ、アセトヒドロキシ酸シンターゼなどのLイソロイシン生合成に関与するタンパク質をコードする遺伝子で形質転換された組換え株もまた親株として使用できる。コリネ型細菌のLイソロイシン生産菌としては、分岐鎖アミノ酸排出タンパク質をコードするbrnE遺伝子を増幅したコリネ型細菌特開2001169788、Lリジン生産菌とのプロトプラスト融合によりLイソロイシン生産能を付与したコリネ型細菌特開昭6274293、ホモセリンデヒドロゲナーゼを強化したコリネ型細菌特開昭6291193、スレオニンハイドロキサメート耐性株特開昭62195293、αケトマロン耐性株特開昭6115695、メチルリジン耐性株特開昭6115696が挙げられる。Lメチオニン生産菌Lメチオニン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、Lスレオニン要求株、ノルロイシンに耐性を有する変異株が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、メチオニンリプレッサーを欠損した株や、ホモセリントランスサクシニラーゼ、シスタチオニンγシンテースなどのLメチオニン生合成に関与するタンパク質をコードする遺伝子で形質転換された組換え株もまた親株として使用できる。遺伝子組換えにより、上記のLアミノ酸生産菌を育種する場合、使用する遺伝子は、上述した遺伝子情報を持つ遺伝子や、公知の配列を有する遺伝子に限られず、コードされるタンパク質の機能が損なわれない限り、その遺伝子のホモログや人為的な改変体等、保存的変異を有する遺伝子も使用することができる。すなわち、公知のタンパク質のアミノ酸配列において、1若しくは数個の位置での1若しくは数個のアミノ酸の置換、欠失、挿入又は付加等を含む配列を有するタンパク質をコードする遺伝子であってもよい。ここで、1若しくは数個とは、アミノ酸残基のタンパク質の立体構造における位置やアミノ酸残基の種類によっても異なるが、具体的には好ましくは1~20個、より好ましくは1~10個、さらに好ましくは1~5個を意味する。また、保存的変異とは、置換部位が芳香族アミノ酸である場合には、Phe、Trp、Tyr間で、置換部位が疎水性アミノ酸である場合には、Leu、Ile、Val間で、極性アミノ酸である場合には、Gln、Asn間で、塩基性アミノ酸である場合には、Lys、Arg、His間で、酸性アミノ酸である場合には、Asp、Glu間で、ヒドロキシル基を持つアミノ酸である場合には、Ser、Thr間でお互いに置換する変異である。保存的変異の代表的なものは、保存的置換であり、保存的置換とみなされる置換としては、具体的には、AlaからSer又はThrへの置換、ArgからGln、His又はLysへの置換、AsnからGlu、Gln、Lys、His又はAspへの置換、AspからAsn、Glu又はGlnへの置換、CysからSer又はAlaへの置換、GlnからAsn、Glu、Lys、His、Asp又はArgへの置換、GluからGly、Asn、Gln、Lys又はAspへの置換、GlyからProへの置換、HisからAsn、Lys、Gln、Arg又はTyrへの置換、IleからLeu、Met、Val又はPheへの置換、LeuからIle、Met、Val又はPheへの置換、LysからAsn、Glu、Gln、His又はArgへの置換、MetからIle、Leu、Val又はPheへの置換、PheからTrp、Tyr、Met、Ile又はLeuへの置換、SerからThr又はAlaへの置換、ThrからSer又はAlaへの置換、TrpからPhe又はTyrへの置換、TyrからHis、Phe又はTrpへの置換、及び、ValからMet、Ile又はLeuへの置換が挙げられる。また、上記のようなアミノ酸の置換、欠失、挿入、付加、または逆位等には、遺伝子が由来する微生物の個体差、種の違いに基づく場合などの天然に生じる変異mutant又はvariantによって生じるものも含まれる。このような遺伝子は、例えば、部位特異的変異法によって、コードされるタンパク質の特定の部位のアミノ酸残基が置換、欠失、挿入または付加を含むように公知の遺伝子の塩基配列を改変することによって取得することができる。さらに、上記のような保存的変異を有する遺伝子は、コードされるアミノ酸配列全体に対して、80以上、好ましくは90以上、より好ましくは95以上、特に好ましくは97以上の相同性を有し、かつ、野生型タンパク質と同等の機能を有するタンパク質をコードする遺伝子であってもよい。また、遺伝子の配列におけるそれぞれのコドンは、遺伝子が導入される宿主で使用しやすいコドンに置換したものでもよい。保存的変異を有する遺伝子は、変異剤処理等、通常変異処理に用いられる方法によって取得されたものであってもよい。また、遺伝子は、公知の遺伝子配列の相補配列又はその相補配列から調製され得るプローブとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、公知の遺伝子産物と同等の機能を有するタンパク質をコードするDNAであってもよい。ここで、ストリンジェントな条件とは、いわゆる特異的なハイブリッドが形成され、非特異的なハイブリッドが形成されない条件をいう。一例を示せば、相同性が高いDNA同士、例えば80以上、好ましくは90以上、より好ましくは95以上、特に好ましくは97以上の相同性を有するDNA同士がハイブリダイズし、それより相同性が低いDNA同士がハイブリダイズしない条件、あるいは通常のサザンハイブリダイゼーションの洗いの条件である60°C、1×SSC、01SDS、好ましくは、01×SSC、01SDS、さらに好ましくは、68°C、01×SSC、01SDSに相当する塩濃度、温度で、1回、より好ましくは2~3回洗浄する条件が挙げられる。プローブとしては、遺伝子の相補配列の一部を用いることもできる。そのようなプローブは、公知の遺伝子配列に基づいて作製したオリゴヌクレオチドをプライマーとし、これらの塩基配列を含むDNA断片を鋳型とするPCRによって作製することができる。例えば、プローブとして、300bp程度の長さのDNA断片を用いる場合には、ハイブリダイゼーションの洗浄の条件は、50°C、2×SSC、01SDSが挙げられる。<3>Lアミノ酸の製造法本発明のLアミノ酸の製造法は、本発明の脂肪酸類の製造方法により脂肪酸を調製し、L-アミノ酸生産能を有する細菌を該脂肪酸を含む培地で培養し、培養物中にLアミノ酸を生産蓄積させ、該培養物からLアミノ酸を採取することを特徴とする製造法である。培地に含まれる脂肪酸は、通常には、L-アミノ酸発酵の炭素源として使用される。炭素源としてとは、細菌の増殖及びLアミノ酸の製造において、菌体成分及びLアミノ酸を構成する炭素の供給源として実質的に寄与し得ることを意味する。本発明の方法は、回分培養batchculture、流加培養Fedbatchculture、連続培養法continuouscultureのいずれも用いることができ、培地中の中温処理物は初発培地に含まれていてもよいし、流加培地に含まれていてもよいし、これらの両方に含まれていてもよい。流加培養とは、培養容器に培地を連続的または間欠的に流加し、培養終了時までその培地を容器から抜き取らない培養方法をいう。また連続培養とは、培養容器に培地を連続的または間欠的に流加するとともに容器から培地通常、流加する培地と等量を抜き取る方法をいう。また、初発培地とは、流加培養または連続培養において流加培地を流加させる前の回分培養batch培養に用いる培地培養開始時の培地のことを意味し、流加培地とは流加培養または連続培養を行う際に発酵槽に供給する培地を意味する。また、回分培養batch培養とは、一回毎に新たな培地を用意し、そこへ株を植えて収穫まで培地を加えない方法を意味する。使用する脂肪酸は、Lアミノ酸を製造するのに適した濃度であればどのような濃度で用いてもかまわない。通常には、0.01~10w/v、好ましくは0.02~5w/v、さらに好ましくは0.05~2w/v程度培地に含有させることが望ましい。炭素源として脂肪酸は、単独で用いることも出来るし、グルコース、フラクトース、スクロース、廃糖蜜、澱粉加水分解物などの他の炭素源と組み合わせて用いることも出来る。この場合、脂肪酸と他の炭素源は任意の比率で混合することが可能であるが、炭素源中の微細藻類により生産される有機物の比率は、10重量以上、より好ましくは50重量以上、より好ましくは70重量であることが望ましい。他の炭素源として好ましいのは、グルコース、フラクトース、スクロース、ラクトース、ガラクトース、廃糖蜜、澱粉加水分解物やバイオマスの加水分解により得られた糖液などの糖類、エタノール、グリセロールなどのアルコール類、フマール酸、クエン酸、コハク酸等の有機酸類である。本発明においては、BygDye法等で調整した残渣に脂肪酸が存在するが、上清に存在するグリセロールも炭素源として使用してもよい。使用する培地は、脂肪酸を含むこと以外は、微生物を用いたLアミノ酸の発酵生産において従来より用いられてきた培地を用いることができる。すなわち、炭素源に加えて、窒素源、無機イオン及び必要に応じその他の有機成分を含有する通常の培地を用いることができる。ここで、窒素源としては、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム、酢酸アンモニウム、ウレア等の無機アンモニウム塩または硝酸塩、大豆加水分解物などの有機窒素、アンモニアガス、アンモニア水等を用いることができる。また、ペプトン、酵母エキス、肉エキス、麦芽エキス、コーンスティープリカー、大豆加水分解物等も利用できる。培地中にこれらの窒素源が1種のみ含まれていてもよいし、2種以上含んでいてもよい。これらの窒素源は、初発培地にも流加培地にも用いることができる。また、初発培地、流加培地とも、同じ窒素源を用いてもよいし、流加培地の窒素源を初発培地と異なるものを使用してもよい。本発明の培地には、炭素源、窒素源の他にリン酸源、硫黄源が含まれていることが好ましい。リン酸源としては、リン酸2水素カリウム、リン酸水素2カリウム、ピロリン酸などのリン酸ポリマー等が利用出来る。また、硫黄源とは、硫黄原子を含んでいるものであればいずれでもよいが、硫酸塩、チオ硫酸塩、亜硫酸塩等の硫酸塩、システイン、シスチン、グルタチオン等の含硫アミノ酸が望ましく、なかでも硫酸アンモニウムが望ましい。また、培地には、上記成分の他に、増殖促進因子増殖促進効果を持つ栄養素が含まれていてもよい。増殖促進因子とは、微量金属類、アミノ酸、ビタミン、核酸、更にこれらのものを含有するペプトン、カザミノ酸、酵母エキス、大豆たん白分解物等が使用できる。微量金属類としては、鉄、マンガン、マグネシウム、カルシウム等が挙げられ、ビタミンとしては、ビタミンB1、ビタミンB2、ビタミンB6、ニコチン酸、ニコチン酸アミド、ビタミンB12等が挙げられる。これらの増殖促進因子は初発培地に含まれていてもよいし、流加培地に含まれていてもよい。また、培地には、生育にアミノ酸などを要求する栄養要求性変異株を使用する場合には要求される栄養素を補添することが好ましい。特に本発明に用いることができるLリジン生産菌は、後述のようにLリジン生合成経路が強化されており、Lリジン分解能が弱化されているものが多いので、Lスレオニン、Lホモセリン、Lイソロイシン、Lメチオニンから選ばれる1種又は2種以上を添加することが望ましい。初発培地と流加培地は、培地組成が同じであってもよく、異なっていてもよい。また、初発培地と流加培地は、硫黄濃度が同じであってもよく、異なっていてもよい。さらには、流加培地の流加が多段階で行われる場合、各々の流加培地の組成は同じであってもよく、異なっていてもよい。なお、本発明で用いる培地は、炭素源、窒素源、及び必要に応じてその他の成分を含む培地であれば、天然培地、合成培地のいずれでもよい。培養は好気的条件下で1~7日間実施するのがよく、培養温度は20°C~45°C、好ましくは24°C~45°C、特に好ましくは33~42°Cで培養することが好ましい。培養は通気培養が好ましく、酸素濃度は、飽和濃度に対して5~50に、望ましくは10程度に調節して行うことが好ましい。また、培養中のpHは5~9が好ましい。尚、pH調整には無機あるいは有機の酸性あるいはアルカリ性物質、例えば炭酸カルシウム、アンモニアガス、アンモニア水等を使用することができる。上記のような条件下で、好ましくは10時間~120時間程度培養することにより、培養液中に著量のLアミノ酸が蓄積される。蓄積されるLアミノ酸の濃度は培地又は菌体から採取、回収できる濃度であればいずれでもよいが、好ましくは1g/L以上、より好ましくは50g/L以上、さらに好ましくは100g/L以上である。また、L-リジン等の塩基性アミノ酸を製造する際には、培養中のpHが6.5~9.0、培養終了時の培地のpHが7.2~9.0となるように制御し、発酵中の発酵槽内圧力が正となるように制御する、あるいは、炭酸ガスもしくは炭酸ガスを含む混合ガスを培地に供給して、培地中の重炭酸イオン及び/又は炭酸イオンが少なくとも2g/L20mM以上存在する培養期があるようにし、前記重炭酸イオン及び/又は炭酸イオンを塩基性アミノ酸を主とするカチオンのカウンタイオンとする方法で発酵し、目的の塩基性アミノ酸を回収する方法で製造を行ってもよい特開200265287、US20020025564A、EP1813677A。また、Lグルタミン酸発酵においては、Lグルタミン酸が析出するような条件に調整された液体培地を用いて、培地中にLグルタミン酸を析出させながら培養を行うことも出来る。Lグルタミン酸が析出する条件としては、例えば、pH5.0~4.0、好ましくはpH4.5~4.0、さらに好ましくはpH4.3~4.0、特に好ましくはpH4.0を挙げることができる。欧州特許出願公開第1078989号明細書培養液からのLアミノ酸の回収は通常イオン交換樹脂法、沈殿法その他の公知の方法を組み合わせることにより実施できる。なお、菌体内にLアミノ酸が蓄積する場合には、例えば菌体を超音波などにより破砕し、遠心分離によって菌体を除去して得られる上清からイオン交換樹脂法などによって、Lアミノ酸を回収することができる。回収されるLアミノ酸は、フリー体のLアミノ酸であっても、硫酸塩、塩酸塩、炭酸塩、アンモニウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩を含む塩であってもよい。また、本発明において採取されるLアミノ酸は、目的とするLアミノ酸以外に微生物菌体、培地成分、水分、及び微生物の代謝副産物を含んでいてもよい。採取されたLアミノ酸の純度は、50以上、好ましくは85以上、特に好ましくは95以上である。以下、実施例にて、本発明を更に具体的に説明する。本実施例には、テキサス大学藻類カルチャーコレクションTheUniversityofTexasatAustinTheCultureCollectionofAlgae1UniversityStationA6700AustinTX787120183USAより入手したChlorellakessleri11h株UTEX263、ChlorellakessleriUTEX398、ChlorellasorokinianaUTEX1230、ScenedesmusdimorphusUTEX417、ScenedesmusobliquusUTEXB2630、NannochlorisspUTEXLB1999、NannochlorisoculataUTEXLB1998、NeochlorisoleoabundansUTEX1185、DunaliellatertiolectaUTEXLB999を用いた。<実施例1>微細藻類Chlorellakessleri11h株のメディウムビン培養Chlorellakessleri11h株を、800mLの02×ガンボーグB5培地日本製薬を入れた1000mL容メディウムビンにて30°C、光強度7000luxTOMY社製培養装置CL301、400mLminで空気と3CO2の混合ガスを吹き込みながら、7日間培養し、これを前培養液とした。尚、光源には、蛍光灯からの白色光を用いた。02×ガンボーグB5培地800mLを入れた1000mL容メディウムビンに、前培養液16mLを添加し、培養温度30°C、光強度7000luxにて、400mLminで空気と3CO2の混合ガスを吹き込みながら、14日間培養を行った。KNO3500mgLMgSO47H2O50mgLNaH2PO4H2O30mgLCaCl22H2O30mgLNH42SO4268mgLNa2EDTA746mgLFeSO47H2O556mgLMnSO4H2O2mgLH3BO306mgLZnSO47H2O04mgLKI015mgLNa2MoO22H2O005mgLCuSO45H2O0005mgLCoCl26H2O0005mgL120°C15分オートクレーブ殺菌<実施例2>藻類のアルコール添加反応における温度条件の検討実施例1で得られた培養液を遠心分離し、その沈殿物に滅菌水を加え、1倍懸濁液を調製した。その1mlの懸濁液を15ml容量のエッペンチューブに入れ、再度遠心分離し、得られた沈殿物に200μlの30メタノール水溶液を加えた後、懸濁した。それらの懸濁液を5°C、10°C、15°C、20°C、25°C、30°C、35°C、40°C、45°C、50°Cの各温度、1000rpmの旋回振盪で2hrインキュベートして、エステル交換反応を行った。得られたサンプルから脂質をBlighDyer法に従って有機溶剤抽出を行い、脂肪酸メチルエステルの測定を行った。それらの測定結果を図1に示した。5°C、10°C及び15°Cの低温度と45°C及び50°Cの高温度では、脂肪酸エステルの収率が低い傾向であるが、20°C、25°C、30°C、35°C、40°C及び45°Cの比較的温和な条件では高い脂肪酸エステルの収率が確認された。<実施例3>藻類のアルコール添加反応におけるメタノール濃度の検討実施例1で得られた培養液を遠心分離し、その沈殿物に滅菌水を加え、1倍懸濁液を調製した。その1mlの懸濁液を15ml容量のエッペンチューブに入れ、再度遠心分離し、得られた沈殿物に200μlの5、10、20、25、30、35、40、45、50、55の各濃度のメタノール水溶液を加えた後、懸濁した。それらの懸濁液を35°C、1000rpmの旋回振盪で2hrインキュベートとして、エステル交換反応を行った。得られたサンプルから脂質をBlighDyer法に従って有機溶剤抽出を行い、脂肪酸メチルエステルの測定を行った。それらの測定結果を図2に示した。5、10及び20の低濃度メタノール溶液と50及び55の高濃度メタノール溶液では、脂肪酸エステルの収率が低い傾向であるが、25、30、35、40及び45のメタノール添加濃度では高い脂肪酸エステルの収率が確認された。<実施例4>藻類のアルコール添加反応におけるpH条件の検討実施例1で得られた培養液を遠心分離し、その沈殿物に滅菌水を加え、1倍懸濁液を調製した。その懸濁液に1NHCl溶液又は1NNaCl溶液を加えて、pH30、pH45、pH60、pH75、pH90、pH105、pH115に調整した後、それぞれの懸濁液1mlを15ml容量のエッペンチューブに入れ、再度遠心分離し、各pH上清と沈殿物に分画した。それぞれの沈殿物に先ほど分画した各pHの上清液140μl加えた後、60μlのメタノールを加えて、懸濁し30メタノール溶液を調製した。それらの懸濁液を30°C、1000rpmの旋回振盪で1hrインキュベートとして、エステル交換反応を行った。得られたサンプルから脂質をBlighDyer法に従って有機溶剤抽出を行い、脂肪酸メチルエステルの測定を行った。それらの測定結果を図3に示した。pH30の酸性及びpH105以上のアルカリ領域では、脂肪酸エステルの収率が低い傾向であるが、pH45、pH60、pH75、pH90の弱酸性から弱アルカリ領域では高い脂肪酸エステルの収率を示した。その中でもpH45の弱酸性条件が最も高い脂肪酸エステル収率であった。<実施例5>藻類のアルコール添加反応における反応時間の検討実施例1で得られた培養液を遠心分離し、その沈殿物に滅菌水を加え、1倍懸濁液を調製した。その1mlの懸濁液を15ml容量のエッペンチューブに入れ、再度遠心分離し、得られた沈殿物に200μlの30メタノール水溶液を加えた後、懸濁した。それらの懸濁液を30°C、1000rpmの旋回振盪で05hr、10hr、20hr、30hr、40hr、50hrの各時間インキュベートとして、エステル交換反応を行った。得られたサンプルから脂質をBlighDyer法に従って有機溶剤抽出を行い、脂肪酸メチルエステルの測定を行った。それらの測定結果を図4に示した。05hr、10hr、20hrの時間の経過と伴に脂肪酸メチルエステル生産の収率が増加し、20hr以降はほぼ一定の脂肪酸メチルエステル生産の収率を示した。<実施例6>藻類のアルコール添加反応の添加アルコールの検討実施例1で得られた培養液1mlを15ml容量のエッペンチューブに入れ、遠心分離し、その沈殿物に140μlの滅菌水を加え、懸濁した。その懸濁液に60μlの滅菌水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ブタノールを加え、反応液を30のアルコール溶液になるように調製した。それらの懸濁液を25°C、5hrボルテックスミキサー上で攪拌し、エステル交換反応を行った。得られたサンプルから脂質をBlighDyer法に従って有機溶剤抽出を行い、脂肪酸アルコールエステルの定性をTLCにて行った。それらの測定結果を図5に示した。未処理及び100の滅菌水場合では、エステル交換反応の基質となるトリグリセリドのスポットが確認され、脂肪酸アルコールエステルのスポットは確認されなかった。一方で、30メタノール溶液を添加した場合と同様に、30エタノール溶液、30イソプロパノール溶液、30ブタノール溶液でも、それぞれのアルコール種に対応した脂肪酸エチルエステル、脂肪酸イソプロピルエステル、脂肪酸ブチルエステルのスポットが確認された。<実施例7>微細藻類Chlorellakessleri11h株の6穴プレート培養Chlorellakessleri11h株を、5mLの02×ガンボーグB5培地日本製薬を各ウェルに入れた6穴プレートにて25°C、光強度7000luxの日照条件TOMY社製培養装置CL301、庫内CO2濃度を1として、10日間培養し、これを前培養液とした。尚、光源には、蛍光灯からの白色光を用い、日照条件は、0Luxから7000Luxまで1時間かけて上昇させ、7000Luxで11hr保持させた後、7000Luxから0Luxまで1時間かけて減少させ、0Luxで11hr保持させるサイクルを利用した。5mLの02×ガンボーグB5培地日本製薬を各ウェルに入れた6穴プレートにて、前培養液01mLを添加し、同条件にて10日間培養を行った。KNO3500mgLMgSO47H2O50mgLNaH2PO4H2O30mgLCaCl22H2O30mgLNH42SO4268mgLNa2EDTA746mgLFeSO47H2O556mgLMnSO4H2O2mgLH3BO306mgLZnSO47H2O04mgLKI015mgLNa2MoO22H2O005mgLCuSO45H2O0005mgLCoCl26H2O0005mgL120°C15分オートクレーブ殺菌<実施例8>藻類のアルコール添加反応によって生成した脂肪酸メチルエステルの定性実施例7で得られた培養液1mlを15ml容量のエッペンチューブに入れ、遠心分離し、その沈殿物に200μlの30メタノール溶液を加え、懸濁した。その懸濁液を30°C、1000rpmの旋回振盪で4hrインキュベートし、エステル交換反応を行った。得られたサンプルから脂質をBlighDyer法に従って有機溶剤抽出を行い、脂肪酸メチルエステルの定性を行った。それらの測定結果を図6に示した。主成分として、aリノレン酸メチルエステル、リノール酸メチルエステル、オレイン酸メチルエステル、パルミチン酸メチルエステル、ステアリン酸メチルエステルが確認された。それ以外の微量成分として、パルミトレイン酸メチルエステル、ミリスチン酸メチルエステルが確認された。<実施例9>緑藻類の培養緑藻類は、DunaliellatertiolectaUTEXLB999、NannochlorisoculataUTEXLB1998、NannochlorisspUTEXLB1999、NeochlorisoleoabundansUTEX1185、ScenedesmusobliquusUTEXB2630、ScenedesmusdimorphusUTEX417、ChlorellakessleriUTEX398、Chlorellakessleri11h、ChlorellasorokinianaUTEX1230を用いた。DunaliellatertiolectaUTEXLB999、NannochlorisoculataUTEXLB1998及びNannochlorisspUTEXLB1999の3株には海洋性ダイゴIMK培地、ScenedesmusobliquusUTEXB2630、ScenedesmusdimorphusUTEX417及びChlorellasorokinianaUTEX1230の3株にはBG11培地、ChlorellakessleriUTEX398及びChlorellakessleri11hの2株には02×ガンボーグ培地、NeochlorisoleoabundansUTEX1185にはModifiedBold3N培地を用いて、以下の条件にて培養を行った。緑藻類は、5mLの各培地を6穴プレートにて25°C、光強度7000luxの日照条件TOMY社製培養装置CL301、庫内CO2濃度を1として、10日間培養し、これを前培養液とした。尚、光源には、蛍光灯からの白色光を用い、日照条件は、0Luxから7000Luxまで1時間かけて上昇させ、7000Luxで11hr保持させた後、7000Luxから0Luxまで1時間かけて減少させ、0Luxで11hr保持させるサイクルを利用した。5mLの各培地を入れた6穴プレートに、前培養液を01mL又は025mL添加し、同条件にて10日間培養を行った。NaNO3750mgLMgSO47H2O75mgLKH2PO4175mgLK2HPO475mgLCaCl22H2O25mgLNaCl25mgLNa2EDTA2H2O45mgLFeCl36H2O0582mgLMnCl24H2O0246mgLZnCl2003mgLCoCl26H2O0012mgLNa2MoO42H2O0024mgLHEPES0036mgLThiamine11mgLBiotin0025mgLVitaminB12012mgLCaCO302mgLGreenhousesoil02tspLpH62に調整後、120°C15分オートクレーブ殺菌NaNO3200mgLNa2HPO414mgLK2HPO45mgLNH4Cl268mgLFeEDTA52mgLMnEDTA0332mgLNa2EDTA372mgLZnSO47H2O0023mgLCoSO47H2O0014mgLNa2MoO42H2O00073mgLCuSO45H2O00025mgLH2SeO300017mgLThiaminHCl02mgLBiotin00015mgLVitaminB1200015mgLMnCl24H2O018mgLダイゴ人工海水SP36gL1NKOHにてpH80に調整後、120°Cにて10分オートクレーブ殺菌KNO3500mgLMgSO47H2O50mgLNaH2PO4H2O30mgLCaCl22H2O30mgLNH42SO4268mgLNa2EDTA746mgLFeSO47H2O556mgLMnSO4H2O2mgLH3BO306mgLZnSO47H2O04mgLKI015mgLNa2MoO22H2O005mgLCuSO45H2O0005mgLCoCl26H2O0005mgL120°C15分オートクレーブ殺菌NaNO31500mgLMgSO47H2O75mgLK2HPO440mgLCaCl22H2O36mgLクエン酸H2O6mgLNa2EDTA2H2O1mgLクエン酸第二鉄アンモニウム6mgLNa2CO320mgLMnCl24H2O181mgLZnSO47H2O022mgLCo26H2O00494mgLNa2MoO42H2O039mgLCuSO45H2O0079mgLH3BO3286mgL1NKOHでpH72に調整後、120°C、10min<実施例10>緑藻類でのアルコール添加反応の実施実施例9で得られた培養液1mlを15ml容量のエッペンチューブに入れ、遠心分離し、その沈殿物に200μlの30メタノール溶液を加え、懸濁した。その懸濁液を30°C、1000rpmの旋回振盪で4hrインキュベートし、エステル交換反応を行った。得られたサンプルから脂質をBlighDyer法に従って有機溶剤抽出を行い、脂肪酸メチルエステルの定性を行った。それらの測定結果を図7に示した。Chlorella属やScenedesmus属の淡水性緑藻では、脂肪酸メチルエステル生産の収率が比較的高い傾向を示した。その一方で、Nannochloris属、Neochloris属及びDunaliella属などの海水性緑藻では、NannochlorisspUTEX1999では比較的高い脂肪酸メチルエステル生産の収率であるが、同属のNannochlorisoculataUTEX1998やDunaliella属の一株では全く生産が確認されなかった。<実施例11>藻類のアルコール以外の有機溶剤添加反応による脂肪酸生成の確認実施例1で得られた培養液1mlを15ml容量のエッペンチューブに入れ、遠心分離し、その沈殿物に200μlの10、20、30の各濃度のアセトン水溶液を加えた後、懸濁した。それらの懸濁液を25°C、5hrボルテックスミキサー上で攪拌し、脂質の加水分解を行った。得られたサンプルから脂質をBlighDyer法に従って有機溶剤抽出を行い、脂肪酸の定性をTLCにて行った。それらの測定結果を図8に示した。10のアセトン溶液では、脂肪酸生成は全く確認されないが、20と30のアセトン溶液の濃度では、高い脂肪酸生成の収率が確認された。<実施例12>藻類の有機溶剤添加反応による脂肪酸生成の添加有機溶剤の検討実施例1で得られた培養液1mlを15ml容量のエッペンチューブに入れ、遠心分離し、その沈殿物に140μlの滅菌水を加え、懸濁した。その懸濁液に60μlの滅菌水、アセトン、トルエン、クロロホルム、ジエチルエーテル、ヘキサンを加え、反応液を30の溶剤溶液又は溶剤混合液になるように調製した。それらの懸濁液を25°C、5hrボルテックスミキサー上で攪拌し、脂質の加水分解を行った。得られたサンプルから脂質をBlighDyer法に従って有機溶剤抽出を行い、脂肪酸の定性をTLCにて行った。それらの結果を、図9に示した。未処理及び100の滅菌水場合では、加水分解の基質になるトリグリセリドのスポットが確認され、脂肪酸のスポットは確認されなかった。一方で、30アセトン溶液を添加した場合と同様に、30トルエン混合液、30クロロホルム混合液、30ジエチルエーテル混合液、30ヘキサン混合液でも、トリグリセリドのスポットの減少と脂肪酸のスポットの出現が確認された。"