被験者における乳癌の存在を検出する方法であって、被験者から得た試料中の、線維芽細胞増殖因子受容体4FGFR4チロシンキナーゼドメインの82番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異の存在を検出する工程を包含する、方法。前記変異が下記1乃至2に記載のFGFR4における変異である、請求項1に記載の方法。1FGFR4アイソフォーム1の535番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異;あるいは2FGFR4アイソフォーム2の495番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異。前記変異が下記1乃至2に記載のFGFR4における変異である、請求項1に記載の方法。1配列番号2に示されるアミノ酸配列からなるFGFR4の535番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異;あるいは2配列番号4に示されるアミノ酸配列からなるFGFR4の495番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異。下記1乃至2に記載のFGFR4遺伝子における変異の存在を検出する工程を包含する、請求項1に記載の方法。1FGFR4アイソフォーム1遺伝子の1603番目のアラニンからグアニンへの変異又は1605番目のシトシンからアラニンへの変異;あるいは2FGFR4アイソフォーム2遺伝子の1483番目のアラニンからグアニンへの変異又は1485番目のシトシンからアラニンへの変異。下記1乃至2に記載のFGFR4遺伝子における変異の存在を検出する工程を包含する、請求項1に記載の方法。1配列番号1に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1603番目のアラニンからグアニンへの変異又は1605番目のシトシンからアラニンへの変異;あるいは2配列番号3に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1483番目のアラニンからグアニンへの変異又は1485番目のシトシンからアラニンへの変異。下記1乃至2に記載のFGFR遺伝子における領域を増幅できるように設計したプライマーセットを用いて、前記被験者から得た試料中の核酸を増幅させる工程を包含する、請求項1に記載の方法。1配列番号1に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1603番目、1605番目又はそれら両方の塩基を含む領域;あるいは2配列番号3に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1483番目、1485番目又はそれら両方の塩基を含む領域。下記1乃至2に記載のFGFR4遺伝子における変異を含む領域にストリンジェント条件下でハイブリダイズすることができるように設計したプローブを、前記被験者から得た試料中の核酸にハイブリダイズさせる工程を包含する、請求項1に記載の方法。1配列番号1に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1603番目のアラニンからグアニンへの変異又は1605番目のシトシンからアラニンへの変異;あるいは2配列番号3に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1483番目のアラニンからグアニンへの変異又は1485番目のシトシンからアラニンへの変異。前記乳癌がトリプルネガティブ乳癌である、請求項1に記載の方法。前記被験者が乳癌患者である、請求項8に記載の方法。乳癌の原因である新たな遺伝子変異を解明し、これにより、当該遺伝子変異又は当該変異を有するタンパク質を検出することによる、被験者における乳癌の存在を検出する方法、被験者における乳癌を診断する方法、並びにそのためのプライマーセット、プローブ及び検出用キットを提供することを課題とする。本発明は、チロシンキナーゼドメイン内に変異を有するFGFR4が、乳癌患者から得た検体に存在すること実施例1~4、これらの変異FGFR4遺伝子を発現させるためのレンチウイルスベクターを作製し実施例5~6、変異FGFR4遺伝子の感染細胞が腫瘍形成能を有し、該遺伝子が癌の原因遺伝子であることを見出した実施例7~8。本発明者は、これらの知見から、これらの変異FGFR4遺伝子の乳癌の検出法を構築し、そのためのプライマーセット、プローブ及び検出用キットを提供し、これらの変異FGFR4遺伝子を検出することにより、FGFR4阻害薬物治療の対象となる癌患者を選別することを可能とした。すなわち、本発明は、以下の[1]~[10]に関する。[1]被験者における乳癌の存在を検出する方法であって、被験者から得た試料中の、線維芽細胞増殖因子受容体4FGFR4チロシンキナーゼドメインの82番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異の存在を検出する工程を包含する、方法。[2]前記変異が下記1乃至2に記載のFGFR4における変異である、[1]に記載の方法。1FGFR4アイソフォーム1の535番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異;あるいは2FGFR4アイソフォーム2の495番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異。[3]前記変異が下記1乃至2に記載のFGFR4における変異である、[1]又は[2]に記載の方法。1配列番号2に示されるアミノ酸配列からなるFGFR4の535番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異;あるいは2配列番号4に示されるアミノ酸配列からなるFGFR4の495番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異。[4]下記1乃至2に記載のFGFR4遺伝子における変異の存在を検出する工程を包含する、[1]又は[2]に記載の方法。1FGFR4アイソフォーム1遺伝子の1603番目のアラニンからグアニンへの変異又は1605番目のシトシンからアラニンへの変異;あるいは2FGFR4アイソフォーム2遺伝子の1483番目のアラニンからグアニンへの変異又は1485番目のシトシンからアラニンへの変異。[5]下記1乃至2に記載のFGFR4遺伝子における変異の存在を検出する工程を包含する、[1]~[4]のいずれかに記載の方法。1配列番号1に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1603番目のアラニンからグアニンへの変異又は1605番目のシトシンからアラニンへの変異;あるいは2配列番号3に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1483番目のアラニンからグアニンへの変異又は1485番目のシトシンからアラニンへの変異。[6]前記変異がFGFR4アイソフォーム1の535番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異である、[2]に記載の方法。[7]前記変異が配列番号2に示されるアミノ酸配列からなるFGFR4の535番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異である、[6]に記載の方法。[8]FGFR4アイソフォーム1遺伝子の1603番目のアラニンからグアニンへの変異又は1605番目のシトシンからアラニンへの変異の存在を検出する工程を包含する、[4]に記載の方法。[9]配列番号1に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1603番目のアラニンからグアニンへの変異又は1605番目のシトシンからアラニンへの変異の存在を検出する工程を包含する、[8]に記載の方法。[10]下記1乃至2に記載のFGFR遺伝子における領域を増幅できるように設計したプライマーセットを用いて、前記被験者から得た試料中の核酸を増幅させる工程を包含する、[1]~[9]のいずれかに記載の方法。1配列番号1に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1603番目、1605番目又はそれら両方の塩基を含む領域;あるいは2配列番号3に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1483番目、1485番目又はそれら両方の塩基を含む領域。[11]下記1乃至2に記載のFGFR4遺伝子における変異を含む領域にストリンジェント条件下でハイブリダイズすることができるように設計したプローブを、前記被験者から得た試料中の核酸にハイブリダイズさせる工程を包含する、[1]~[9]のいずれかに記載の方法。1配列番号1に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1603番目のアラニンからグアニンへの変異又は1605番目のシトシンからアラニンへの変異;あるいは2配列番号3に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1483番目のアラニンからグアニンへの変異又は1485番目のシトシンからアラニンへの変異。[12]前記乳癌がトリプルネガティブ乳癌である、[1]~[11]のいずれかに記載の方法。[13]前記被験者が乳癌患者である、[12]に記載の方法。また、本発明は、以下の[14]~[18]に関する。[14]被験者における乳癌を診断する方法であって、前記[1]~[11]のいずれかに記載の検出工程を包含する、方法。[15]前記変異が被験者から得た試料から検出された場合に、前記被験者が乳癌に罹患している可能性が高いと判定する工程をさらに包含する、[14]に記載の方法。[16]前記乳癌がトリプルネガティブ乳癌である、[14]に記載の方法。[17]前記変異が被験者から得た試料から検出された場合に、前記被験者がトリプルネガティブ乳癌に罹患している可能性が高いと判定する工程をさらに包含する、[16]に記載の方法。[18]前記被験者が乳癌患者である、[16]又は[17]に記載の方法。また、本発明は、以下の[19]~[21]に関する。[19]被験者における乳癌の存在を検出するためのプライマーセットであって、下記1乃至2に記載のFGFR遺伝子における領域を増幅できるように設計した、プライマーセット。1配列番号1に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1603番目、1605番目又はそれら両方の塩基を含む領域;あるいは2配列番号3に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1483番目、1485番目又はそれら両方の塩基を含む領域。[20]以下の1~6からなる群より選択される、[19]に記載のプライマーセット:1配列番号1の塩基番号1から1602間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドからなるセンスプライマー及び配列番号1の塩基番号1604から2409間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドに対して相補的であるオリゴヌクレオチドからなるアンチセンスプライマーのプライマーセット;2配列番号1の塩基番号1から1604間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドからなるセンスプライマー及び配列番号1の塩基番号1606から2409間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドに対して相補的であるオリゴヌクレオチドからなるアンチセンスプライマーのプライマーセット;3配列番号1の塩基番号1から1602間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドからなるセンスプライマー及び配列番号1の塩基番号1606から2409間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドに対して相補的であるオリゴヌクレオチドからなるアンチセンスプライマーのプライマーセット;4配列番号3の塩基番号1から1482間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドからなるセンスプライマー及び配列番号3の塩基番号1484から2289間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドに対して相補的であるオリゴヌクレオチドからなるアンチセンスプライマーのプライマーセット;5配列番号3の塩基番号1から1484間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドからなるセンスプライマー及び配列番号3の塩基番号1486から2289間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドに対して相補的であるオリゴヌクレオチドからなるアンチセンスプライマーのプライマーセット;並びに6配列番号3の塩基番号1から1482間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドからなるセンスプライマー及び配列番号3の塩基番号1486から2289間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドに対して相補的であるオリゴヌクレオチドからなるアンチセンスプライマーのプライマーセット。[21]前記乳癌がトリプルネガティブ乳癌である、[19]又は[20]に記載のプライマーセット。また、本発明は、以下の[22]~[23]に関する。[22]被験者における乳癌の存在を検出するためのプローブであって、下記1乃至2に記載のFGFR4遺伝子における変異を含む領域にストリンジェント条件下でハイブリダイズすることができるように設計した、プローブ。1配列番号1に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1603番目のアラニンからグアニンへの変異又は1605番目のシトシンからアラニンへの変異;あるいは2配列番号3に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1483番目のアラニンからグアニンへの変異又は1485番目のシトシンからアラニンへの変異。[23]前記乳癌がトリプルネガティブ乳癌である、[22]に記載のプローブ。また、本発明は、以下の[24]~[25]に関する。[24]被験者における乳癌の存在を検出するための検出用キットであって、前記[19]又は[20]に記載のプライマーセット或いは前記[22]に記載のプローブの少なくとも1つを含む、検出用キット。[25]前記乳癌がトリプルネガティブ乳癌である、[24]に記載の検出用キット。また、本発明は、以下の[26]~[32]に関する。[26]被験者における乳癌の存在を検出する方法であって、前記[19]又は[20]に記載のプライマーセットを用いて、被験者から得た試料中の核酸を増幅させる工程を包含する、方法。[27]前記プライマーセットを用いて、下記1乃至2に記載のFGFR遺伝子における領域を増幅させる工程を包含する、[26]に記載の方法。1FGFR4アイソフォーム1遺伝子の1603番目、1605番目又はそれら両方の塩基を含む領域;あるいは2FGFR4アイソフォーム2遺伝子の1483番目、1485番目又はそれら両方の塩基を含む領域。[28]前記プライマーセットを用いて、下記1乃至2に記載のFGFR遺伝子における領域を増幅させる工程を包含する、[26]又は[27]に記載の方法。1配列番号1に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1603番目、1605番目又はそれら両方の塩基を含む領域;あるいは2配列番号3に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子のの1483番目、1485番目又はそれら両方の塩基を含む領域。[29]被験者における乳癌の存在を検出する方法であって、前記[22]に記載のプローブを、被験者から得た試料中の核酸にハイブリダイズさせる工程を包含する、方法。[30]前記プローブを、下記1乃至2に記載のFGFR4遺伝子における変異を含む領域にハイブリダイズさせる工程を包含する、[29]に記載の方法。1FGFR4アイソフォーム1遺伝子の1603番目のアラニンからグアニンへの変異又は1605番目のシトシンからアラニンへの変異;あるいは2FGFR4アイソフォーム2遺伝子の1483番目のアラニンからグアニンへの変異又は1485番目のシトシンからアラニンへの変異。[31]前記プローブを、下記1乃至2に記載のFGFR4遺伝子における変異を含む領域にハイブリダイズさせる工程を包含する、[29]又は[30]に記載の方法。1配列番号1に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1603番目のアラニンからグアニンへの変異又は1605番目のシトシンからアラニンへの変異;あるいは2配列番号3に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1483番目のアラニンからグアニンへの変異又は1485番目のシトシンからアラニンへの変異。[32]前記乳癌がトリプルネガティブ乳癌である、[26]~[31]のいずれかに記載の方法。また、本発明は、以下の[33]~[37]に関する。[33]被験者における乳癌を診断する方法であって、前記[26]~[31]のいずれかに記載の工程を包含する、方法。[34]前記変異が被験者から得た試料から検出された場合に、前記被験者が乳癌に罹患している可能性が高いと判定する工程をさらに包含する、[33]に記載の方法。[35]前記乳癌がトリプルネガティブ乳癌である、[33]に記載の方法。[36]前記変異が被験者から得た試料から検出された場合に、前記被験者がトリプルネガティブ乳癌に罹患している可能性が高いと判定する工程をさらに包含する、[35]に記載の方法。[37]前記被験者が乳癌患者である、[35]又は[36]に記載の方法。本発明の検出方法は、被験者における乳癌特にはトリプルネガティブ乳癌を検出する方法として利用できる。また、本発明の検出方法によれば、乳癌患者に対してFGFR阻害剤の適用対象者であるか否かを鑑別することができる。本発明のプライマーセット、プローブ及び検出用キットは、本発明の検出方法に用いることができる。《本発明の検出方法》本発明の検出方法は、被験者における乳癌の存在を検出する方法であり、被験者から得た試料中の線維芽細胞増殖因子受容体4FGFR4のチロシンキナーゼドメインにおける変異の存在を検出する工程を含む。被験者から得た試料としては、被験者からの採取物生体から分離した試料、具体的には、任意の採取された細胞組織、体液血液、口腔粘液、循環腫瘍細胞Circulatingtumorcell、エキソソーム等、生検された試料等を用いるが、好適には生検された試料を用いる。採取した試料からゲノムDNAもしくはRNAを抽出して用いることができ、またその転写産物ゲノムが転写及び翻訳される結果生じる産物;例えば、mRNA、cDNA、蛋白質を用いることができる。特には、mRNA又はcDNAを調製して用いることが好ましい。現在まで、FGFR4には2つのアイソフォーム、アイソフォーム1及び2が存在することが知られている。FGFR4アイソフォーム1は全長802アミノ酸からなるFGFR4であり、例えば、野生型のFGFR4アイソフォーム1は、配列番号2に示されるアミノ酸配列からなり、配列番号1に示される塩基配列からなるポリヌクレオチドにコードされる。FGFR4アイソフォーム2は全長762アミノ酸からなるFGFR4であり、例えば、野生型のFGFR4アイソフォーム2は、配列番号4に示されるアミノ酸配列からなり、配列番号3に示される塩基配列からなるポリヌクレオチドにコードされる。FGFR4のアイソフォーム1及び2は、その細胞膜内領域において共通のチロシンキナーゼドメインを有する。本明細書中で使用される場合、FGFR4のチロシンキナーゼドメインとは、FGFR4アイソフォーム1のアミノ酸第454~764位、アイソフォーム2のアミノ酸第414~724位にそれぞれ対応する、311アミノ酸からなる領域を意味する。野生型のFGFR4アイソフォーム1及び2のチロシンキナーゼドメインは、配列番号14に示されるアミノ酸配列からなり、配列番号13に示される塩基配列からなるポリヌクレオチドにコードされる。本発明の方法における検出対象となる変異検出対象変異とも称するは、FGFR4のチロシンキナーゼドメイン内の変異であり、具体的には、FGFR4のチロシンキナーゼドメインの82番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異である。本検出対象変異の代表的な例としては、配列番号14に示されるアミノ酸配列からなるFGFR4チロシンキナーゼドメインの82番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異が挙げられる。本検出対象変異は、FGFR4遺伝子のチロシンキナーゼドメインコード領域における変異に起因し、従って、本発明の方法において遺伝子変異の存在を検出してもよい。このような遺伝子変異の代表的な例としては、配列番号13に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子のチロシンキナーゼドメインコード領域の244番目のアラニンからグアニンへの変異又は246番目のシトシンからアラニンへの変異が挙げられる。前述の検出対象変異は、FGFR4アイソフォーム1においては535番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異に対応し、FGFR4アイソフォーム2においては495番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異に対応する。また、これらの変異にそれぞれ対応するFGFR4遺伝子における変異としては、FGFR4アイソフォーム1遺伝子の1603番目のアラニンからグアニンへの変異又は1605番目のシトシンからアラニンへの変異、FGFR4アイソフォーム2遺伝子の1483番目のアラニンからグアニンへの変異又は1485番目のシトシンからアラニンへの変異が挙げられる。本発明の方法における検出対象変異のより具体的な例としては、配列番号2に示されるアミノ酸配列からなるFGFR4の535番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異、配列番号4に示されるアミノ酸配列からなるFGFR4の495番目のアスパラギンからアスパラギン酸又はリジンへの変異が挙げられる。また、これらに対応するFGFR4遺伝子における変異の例としては、配列番号1に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1603番目のアラニンからグアニンへの変異又は1605番目のシトシンからアラニンへの変異、配列番号3に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1483番目のアラニンからグアニンへの変異又は1485番目のシトシンからアラニンへの変異が挙げられる。本明細書中、前記FGFR4におけるアスパラギンNからアスパラギン酸Dへの変異をND-FGFR4、アスパラギンNからリジンKの変異をNK-FGFR4とも称する。本発明の方法においては、検出対象変異を有するタンパク質変異型タンパク質とも称する又は検出対象変異を有するタンパク質をコードするポリヌクレオチド変異型ポリヌクレオチドとも称するのいずれを検出対象としてもよい。変異型タンパク質の例としては、ND-FGFR4については、配列番号6又は配列番号10に示されるアミノ酸配列からなるタンパク質、NK-FGFR4については、配列番号8又は配列番号12に示されるアミノ酸配列からなるタンパク質が挙げられる。また、変異型ポリヌクレオチドの例としては、ND-FGFR4については、配列番号5又は配列番号9に示される塩基配列からなるポリヌクレオチド、NK-FGFR4については、配列番号7又は配列番号11に示される塩基配列からなるポリヌクレオチドが挙げられる。本発明の検出方法において変異型ポリヌクレオチドの存在を検出する場合、本検出工程は、被験者から得た試料のゲノムDNA中の変異型ポリヌクレオチドの存在を検出すること、あるいは、被験者から得た試料から抽出したゲノムDNAの転写産物例えば、mRNA又はcDNAを調製し、変異型ポリヌクレオチドに対応するmRNA又はcDNAの存在を検出することにより実施できる。ゲノムDNAの抽出、mRNA及びcDNAの調製は当該分野で公知の方法で行うことができ、市販のキットを用いて簡便に行うことができる。本検出工程は、当該分野で公知の遺伝子変異解析方法を使用することができる。例えば、本検出工程は、被験者から得た試料由来の核酸例えば、mRNAやcDNA等に対して公知の核酸増幅方法PCR法、RT-PCR法、LCR法LigasechainReaction、SDA法Stranddisplacementamplification、NASBA法Nucleicacidsequence-basedamplification、ICAN法Isothermalandchimericprimer-initiatedamplificationofnucleicacids、LAMP法Loop-mediatedisothermalamplification、TMA法Gen-Probe’sTMAsystem等を用いて、変異型ポリヌクレオチド中の検出対象変異に対応する部分を含む領域検出対象変異領域とも称するを増幅させる工程を含み、増幅後、この増幅産物について配列決定を行うことによって変異の有無を確認することができる。このような配列決定法としては、ダイレクトシーケンス法等の当該分野で公知の方法を使用することができる。前述の核酸増幅方法に用いられるプライマーは、変異型ポリヌクレオチド中の検出対象変異領域を増幅できるものであれば、特には限定されず、変異型ポリヌクレオチドの塩基配列に基づいて設計する。プライマー設計は、プライマー設計ソフトウェア例えば、PrimerExpress;PEBiosystems等を利用してできる。また、増幅産物のサイズが大きくなると増幅効率が悪くなるため、センスプライマーとアンチセンスプライマーは、mRNA又はcDNAを対象に増幅したときの増幅産物の大きさが1kb以下になるように設定するのが適切である。核酸増幅方法を用いる別の公知の遺伝子変異解析方法として、RFLP法制限酵素断片長多型解析法、TaqMan法、アレル特異的プライマーPCRASP-PCR法、SSCP法等のPCRに基づく方法も使用可能である。RFLP法は、PCRにより検出対象変異領域を増幅した後、変異に基づき制限酵素認識部位に変化が生じる場合に、その制限酵素処理後の核酸断片の差異を電気泳動により解析する。TaqMan法は、5’末端に蛍光物質FAM、VIC等、3’末端にクエンチャー消光物質で修飾したプローブTaqManプローブをPCR反応系に添加する方法である。本方法では、検出対象変異領域に対してTaqManプローブをハイブリダイズさせ、プライマーからのPCR反応を行うと、伸長反応におけるDNAポリメラーゼの5’→3’エキソヌクレアーゼ活性によりTaqManプローブが分解され、それにより蛍光物質がプローブより遊離し、クエンチャーによる抑制が解除されて蛍光物質から蛍光が発し、これにより目的の変異が検出される。ASP-PCR法は、3’末端に検出対象変異部位を有するようにプライマーを設計し、PCRによる核酸増幅の有無を検出する方法である。SSCP法では、検出対象変異領域をPCR増幅した後、一本鎖DNAに分離し、これを非変性ゲルでの電気泳動により分離する。変異によりDNAの高次構造が変化し、これがゲル上の移動度の差異を反映する。また別の公知の遺伝子変異解析方法として、プローブハイブリダイゼーションに基づく方法も使用可能であり、例えば、DNAチップ法、Invader法、融解曲線解析法等が挙げられる。DNAチップ法では、検出対象変異領域を含むDNAを基板上に配置し、被験者由来の核酸をDNAチップにハイブリダイズさせ、ハイブリダイズの有無を確認する。Invader法では、検出対象変異部位の前後にハイブリダイズする2種の核酸Invaderオリゴ及びシグナルプローブを被験者由来の核酸に反応させた後、形成されるDNAの三重鎖構造を認識するClevase酵素を作用させ、シグナルプローブ中のFlapを遊離させる。次いで、Flapが検出用FRETProbeとハイブリダイズし、これに同酵素が再度作用し、FRETProbeから遊離された蛍光物質の蛍光を検出する。融解曲線解析法は、検出対象変異領域に蛍光標識プローブをハイブリダイズさせた後、徐々に温度を上昇させ、温度上昇に伴う蛍光の変化を測定して融解曲線を作成する。これにより、変異の有無に伴う融解温度の変化を確認する。また別の公知の遺伝子変異解析方法として、プライマーエクステンションに基づく方法も使用可能であり、例えば、SNaPshot法、Pyrosequencing法が挙げられる。SNaPshot法では、検出対象変異部位に隣接するプライマーと蛍光標識したddNTPを用い、プライマーから一塩基のみを伸長させて取り込まれた塩基を検出する。Pyrosequencing法では、プライマー伸長反応において、1種類ずつdNTPを添加し、ポリメラーゼの反応によりdNTPが取り込まれるとピロリン酸が生じる。生じたピロリン酸をルシフェラーゼによる蛍光反応で検出し、発光ピークパターンから塩基配列を決定する。当業者であれば、使用する遺伝子変異解析方法に基づいて、使用されるプライマー及びプローブを適宜設計することができ、特に限定されることはないが、例えば、化学合成法によって製造することができる。本発明の検出方法においては、被験者から得た試料中の変異型タンパク質の存在を検出してもよく、例えば、変異型タンパク質を特異的に認識する抗体を用いて実施できる。このような抗体の作製及び抗体を用いたタンパク質の検出は、当該分野で公知の方法を用いて行うことができる。本発明の方法において、検出対象変異が被験者から得た試料から検出された場合、当該被験者が乳癌に罹患している可能性が高いと判定できる。また、後記実施例に示されるように、当該変異はトリプルネガティブ乳癌患者において高い割合で確認されるため、本発明の方法において、当該変異が被験者から得た試料から検出された場合、当該被験者がトリプルネガティブ乳癌に罹患している可能性が高いとも判定できる。トリプルネガティブ乳癌とは、乳癌原因遺伝子であるエストロゲン受容体EstrogenReceptor;ER、プロゲステロン受容体ProgesteroneReceptor;PR、上皮細胞増殖因子受容体2型HumanEpidermalgrowthfactorReceptor2;HER2の過剰発現がいずれも認められないタイプの乳癌である。それゆえ、確立した治療方針がなく予後不良であり、アンメットメディカルニーズが非常に高い癌種である。従って、本発明の方法においては、乳癌患者を被験者として、当該被験者におけるトリプルネガティブ乳癌の存在を検出してもよい。また、当該変異陽性の乳癌を有する被験者患者は、FGFR4阻害剤による治療の適用対象となり得る。本発明の検出方法は、被験者における乳癌より詳細には、トリプルネガティブ乳癌の診断方法に使用することができる。本発明の診断方法は、本発明の検出工程に加えて、当該変異が被験者から得た試料から検出された場合に、被験者が乳癌又はトリプルネガティブ乳癌に罹患している可能性が高いと判定する工程を含んでもよい。《本発明のプライマーセット、プローブ、検出用キット》本発明のプライマーセットは、被験者における乳癌の存在を検出するためのプライマーセットであって、本発明の検出工程における変異型ポリヌクレオチド中の検出対象変異領域を増幅できるように設計したセンスプライマー及びアンチセンスプライマーを含む。アンチセンスプライマーは、変異型ポリヌクレオチドにストリンジェントな条件下好ましくは、よりストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸分子好ましくは、少なくとも16塩基の核酸分子からなり、センスプライマーは、変異型ポリヌクレオチドの相補鎖にストリンジェントな条件好ましくは、よりストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸分子好ましくは、少なくとも16塩基の核酸分子からなる。好ましくは、本発明のプライマーセットは、配列番号1に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1603番目、1605番目又はそれら両方の塩基を含む領域、あるいは配列番号3に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1483番目、1485番目又はそれら両方の塩基を含む領域を増幅できるように設計したセンスプライマー及びアンチセンスプライマーを含む。本発明のプライマーセットの具体的な態様としては、以下1~6からなる群より選択されるプライマーセットが挙げられる:1配列番号1の塩基番号1から1602間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドからなるセンスプライマー及び配列番号1の塩基番号1604から2409間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドに対して相補的であるオリゴヌクレオチドからなるアンチセンスプライマーのプライマーセット;2配列番号1の塩基番号1から1604間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドからなるセンスプライマー及び配列番号1の塩基番号1606から2409間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドに対して相補的であるオリゴヌクレオチドからなるアンチセンスプライマーのプライマーセット;3配列番号1の塩基番号1から1602間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドからなるセンスプライマー及び配列番号1の塩基番号1606から2409間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドに対して相補的であるオリゴヌクレオチドからなるアンチセンスプライマーのプライマーセット;4配列番号3の塩基番号1から1482間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドからなるセンスプライマー及び配列番号3の塩基番号1484から2289間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドに対して相補的であるオリゴヌクレオチドからなるアンチセンスプライマーのプライマーセット;5配列番号3の塩基番号1から1484間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドからなるセンスプライマー及び配列番号3の塩基番号1486から2289間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドに対して相補的であるオリゴヌクレオチドからなるアンチセンスプライマーのプライマーセット;並びに6配列番号3の塩基番号1から1482間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドからなるセンスプライマー及び配列番号3の塩基番号1486から2289間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドに対して相補的であるオリゴヌクレオチドからなるアンチセンスプライマーのプライマーセット。より好ましくは、本発明のプライマーセットは、配列番号13に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子のチロシンキナーゼドメインコード領域の244番目、246番目又はそれら両方の塩基を含む領域を増幅できるように設計したセンスプライマー及びアンチセンスプライマーを含み、具体的な態様としては、以下1~3からなる群より選択されるプライマーセットが挙げられる:1配列番号13の塩基番号1から243間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドからなるセンスプライマー及び配列番号13の塩基番号245から933間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドに対して相補的であるオリゴヌクレオチドからなるアンチセンスプライマーのプライマーセット;2配列番号13の塩基番号1から245間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドからなるセンスプライマー及び配列番号13の塩基番号247から933間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドに対して相補的であるオリゴヌクレオチドからなるアンチセンスプライマーのプライマーセット;並びに3配列番号13の塩基番号1から243間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドからなるセンスプライマー及び配列番号13の塩基番号247から933間の任意の連続する少なくとも16塩基のオリゴヌクレオチドに対して相補的であるオリゴヌクレオチドからなるアンチセンスプライマーのプライマーセット。本発明のプライマーセットは、本発明の方法において使用することができ、例えば、本発明の方法において、本発明のプライマーセットを用いて、被験者から得た試料中の核酸を増幅させる工程を含んでもよい。本発明のプローブは、被験者における乳癌の存在を検出するためのプローブであって、本発明の検出工程における変異型ポリヌクレオチド中の検出対象変異領域にハイブリダイズすることができるように設計したプローブである。本発明のプローブは、変異型ポリヌクレオチド又はその相補鎖中の検出対象変異領域にストリンジェントな条件下好ましくは、よりストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸分子好ましくは、少なくとも16塩基の核酸分子からなる。好ましくは、本発明のプローブは、配列番号1に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1603番目のアラニンからグアニンへの変異又は1605番目のシトシンからアラニンへの変異、あるいは配列番号3に示される塩基配列からなるFGFR4遺伝子の1483番目のアラニンからグアニンへの変異又は1485番目のシトシンからアラニンへの変異を含む領域にハイブリダイズするように設計される。本発明のプローブは、本発明の方法において使用することができ、例えば、本発明の方法において、被験者から得た試料中の核酸に本発明のプローブをハイブリダイズさせる工程を含んでもよい。前記ストリンジェントな条件とは、ハイブリダイゼーションのための条件として、5×SSPE、5×Denhardt’s液、0.5SDS、50ホルムアミド、200μg/mL鮭精子DNA、42°Cオーバーナイト、洗浄のための条件として、0.5×SSC、0.1SDS、42°Cの条件である。よりストリンジェントな条件とは、ハイブリダイゼーションのための条件として、5×SSPE、5×Denhardt’s液、0.5SDS、50ホルムアミド、200μg/mL鮭精子DNA、42°Cオーバーナイト、洗浄のための条件として、0.2×SSC、0.1SDS、65°Cの条件である。前記プライマーセットにおいては、センスプライマーとアンチセンスセンスプライマーの選択位置の間隔が1kb以下であるか、あるいは、センスプライマーとアンチセンスセンスプライマーにより増幅される増幅産物の大きさが1kb以下であることが好ましい。また、本発明のプライマー及びプローブは、通常、15~40塩基、好ましくは16~24塩基、更に好ましくは18~24塩基、特に好ましくは20~24塩基の鎖長を有する。本発明のプライマーセット及びプローブは、例えば、化学合成法によって当業者に容易に製造することができ、また、検出方法に応じて、蛍光標識等で標識化してもよい。本発明の検出用キットは、被験者における乳癌又はトリプルネガティブ乳癌の存在を検出するためのキットであり、好ましくは、本発明のプライマーセット又は本発明のプローブの少なくとも1つを含む。本発明のプライマーセット、プローブ及び検出用キットは、前述の本発明の検出方法において使用することもできる。例えば、本発明の検出方法は、本発明のプライマーセットを用いて検出対象変異領域を増幅する工程を含んでもよく、本発明のプローブを検出対象変異領域にハイブリダイズさせる工程を含んでよい。以下、実施例によって本発明を詳述するが、本発明は該実施例によって限定されるものではない。なお、特に断りがない場合は、公知の方法に従って実施可能である。また、市販の試薬やキット等を用いる場合には市販品の指示書に従って実施可能である。[実施例1]乳癌臨床検体におけるND変異FGFR4ND-FGFR4ポリヌクレオチドの発見乳癌患者組織由来RNA米国アステランド社Br031検体RNAに対して、逆転写酵素SuperScriptIII、ライフテクノロジーズ社及びオリゴdTプライマーオリゴdT20プライマー、ライフテクノロジーズ社を用いて、キットのプロトコールにしたがって逆転写反応を行い、cDNAを合成した。次に、配列番号15及び配列番号16のプライマーを用いて、上記で得たcDNAを鋳型として、DNAポリメラーゼKOD-Plus-Ver.2;東洋紡社株式会社を行いてPCR98°C30秒、52°C30秒、68°C30秒を35サイクルを行った。その後、前述PCR産物をカラムPCRPurifycationKit;キアゲン社を用いて精製した。その後、配列番号17及び配列番号18のプライマーを用いて、上記で得た精製PCR産物を鋳型として、シークエンス反応を実施したBigDyeTerminatorv3.1CycleSequencingKit;ライフテクノロジーズ社。この結果、FGFR4アイソフォーム1GenBank登録番号:NM002011.3、GenBank登録番号:NM_213647.1のコーディング領域配列番号1における1603番目、FGFR4アイソフォーム2GenBank登録番号:NM_022963.2のコーディング領域配列番号3における1483番目にそれぞれ対応する位置での、アラニンAからグアニンGへの置換が見いだされた。この変異は、アイソフォーム1のアミノ酸配列配列番号2における535番目、アイソフォーム2のアミノ酸配列配列番号4における495番目にそれぞれ対応するアミノ酸位置での、アスパラギンNからアスパラギン酸Dへの変異に相当する。このFGFR4における変異をND-FGFR4とも称する。[実施例2]乳癌臨床検体におけるNK変異FGFR4NK-FGFR4ポリヌクレオチドの発見乳癌患者組織由来RNA米国アステランド社Br036検体RNAに対して、実施例1と同様の方法を用いてcDNAを合成した。次に、得られたcDNAを鋳型として、実施例1と同じプライマー及び反応条件でPCRを行った。その後、実施例1と同様に、PCR産物をカラムを用いて精製した後、同じプライマーを用いてPCR産物についてシークエンス反応を実施した。この結果、FGFR4アイソフォーム1のコーディング領域配列番号1における1605番目、FGFR4アイソフォーム2のコーディング領域配列番号3における1485番目にそれぞれ対応する位置での、シトシンCからアラニンAへの置換が見いだされた。この変異は、アイソフォーム1のアミノ酸配列配列番号2における535番目、アイソフォーム2のアミノ酸配列配列番号4における495番目にそれぞれ対応するアミノ酸位置での、アスパラギンNからリジンKへの変異に相当する。このFGFR4における変異をNK-FGFR4とも称する。[実施例3]乳癌サンプルにおけるND-FGFR4の検出乳癌臨床検体由来RNA米国アステランド社149サンプルに対して、実施例1と同じ方法を用いて、ND-FGFR4変異の有無を確認した。その結果、サンプルBr031及びBr032において、前述のND-FGFR4変異が見出された。非常に興味深いことに、これらND変異陽性乳癌検体は、エストロゲン受容体ER、プロゲステロン受容体PR、上皮細胞増殖因子受容体2型HER2の強発現を認めないトリプルネガティブ乳癌検体であった。以上から、上記方法により、乳癌臨床検体由来の試料中のND-FGFR4の存在を検出することができ、ND-FGFR4の陽性患者を選択できることが示された。[実施例4]乳癌サンプルにおけるNK-FGFR4の検出乳癌臨床検体由来cDNA米国アステランド社149サンプルに対して、実施例1と同じ方法を用いて、NK-FGFR4変異の有無を確認した。その結果、サンプルBr036、Br082及びBr145において、前述のNK-FGFR4変異が見出された。非常に興味深いことに、これらNK変異陽性乳癌検体も、前述と同様に、トリプルネガティブ乳癌検体であった。以上から、上記方法により、乳癌臨床検体由来の試料中のNK-FGFR4の存在を検出することができ、NK-FGFR4の陽性患者を選択できることが示された。[実施例5]野生型及び変異体FGFR4のクローニングND-FGFR4及びNK-FGFR4変異をそれぞれ含むFGFR変異体のORF全長をタンパク質として発現するため、FGFR4アイソフォーム1をクローニングした。配列番号19制限酵素サイトとして、SpeIを含む及び配列番号20制限酵素サイトとして、XhoIを含むのプライマーにて、全長FGFR4UltimateTMORFCardforCloneIDIOH13371:ライフテクノロジーズ社を鋳型として、DNAポリメラーゼPrimeSTARGXLDNAPolymerase;タカラバイオ株式会社を行いてPCR98°C10秒、55°C15秒、68°C2分を30サイクルを行った。本PCR産物をクローニングベクターTOPOXLPCRCloningKit;ライフテクノロジーズ社にクローニングしたFGFR4/TOPOXL。次に、FGFR4/TOPOXLを鋳型に、配列番号21及び配列番号22のプライマーを用いてMutagenesis法PrimeSTAR登録商標MutagenesisBasalKit;タカラバイオ株式会社にて、ND変異N535Dを導入したN535D-FGFR4/TOPOXL。作製したN535D-FGFR4の塩基配列及びアミノ酸配列を、配列番号5及び配列番号6にそれぞれ示す。同様に、FGFR4/TOPOXLを鋳型に、配列番号23及び配列番号24のプライマーを用いてMutagenesis法にて、NK変異N535Kを導入したN535K-FGFR4/TOPOXL。作製したN535D-FGFR4の塩基配列及びアミノ酸配列を、配列番号7及び配列番号8にそれぞれ示す。[実施例6]野生型及び変異体FGFR4のレンチウイルス発現ベクターの作製FGFR4/TOPOXLをSpeI、XhoIで消化し、核酸断片をSpeI、SalI消化したレンチウイルス発現ベクターpLenti6.3/V5-TOPO;ライフテクノロジーズ社のマルチクローニングサイトに存在するSpeI-SalIサイトにクローニングしたFGFR4/pLenti6.3と命名。同様の手法にて、N535D-FGFR4/TOPOXL及びN535K-FGFR4/TOPOXLから、各レンチウイルス発現ベクターN535D-FGFR4/pLenti6.3及びN535K-FGFR4/pLenti6.3をそれぞれ構築した。上記、FGFR4/pLenti6.3、N535D-FGFR4/pLenti6.3、及びN535K-FGFR4/pLenti6.3をそれぞれ3μg、パッケージング用プラスミド9μgViraPowerTMPackagingMix;ライフテクノロジーズ社と共に、トランスフェクション試薬LipofectAmine2000;ライフテクノロジーズ社を用いて、293FT細胞パッケージング細胞ライフテクノロジーズ社に導入した。導入3日後の培養上清を、レンチウイルスとして回収し、ポリブレンpolybrene;Sigma社を6μg/mlの濃度で添加した後、マウスNIH3T3細胞に添加した。2日後にNIH3T3細胞の培養上清をDMEM培地インビトロジェン社に10牛血清インビトロジェン社及びBlastcidinInvivogen社5μg/mlを添加したものに交換し、さらに2週間培養を続け、野生型FGFR4、N535D-FGFR4、及びN535K-FGFR4をそれぞれ安定発現するNIH3T3細胞それぞれ、FGFR4/NIH3T3、N535D-FGFR4/NIH3T3、及びN535K-FGFR4/NIH3T3と命名を取得した。[実施例7]変異体FGFR4の足場非依存的増殖亢進作用の検討96ウェルスフェロイドプレートスミロンセルタイトスフェロイド96U;住友ベークライトに、FGFR4/NIH3T3、N535D-FGFR4/NIH3T3、及びN535K-FGFR4/NIH3T3を、それぞれ1ウェル当り3×103個となるように10牛胎児血清を含む培地で播種した。5CO2存在下、37°Cにて培養後、翌日Day1および6日後Day6の細胞数を細胞数測定試薬CellTiter-GloTMLuminescentCellViabilityAssay;Promega社をマニュアルの方法に従って測定した。検出には発光測定装置Envision;パーキンエルマー社を用いた。FGFR4/NIH3T3細胞は、Day1からDay6までで細胞数のカウントが増加しなかったのに対して、N535D-FGFR4/NIH3T3及びN535K-FGFR4/NIH3T3細胞は、Day1からDay6までで細胞数のカウントの増加が確認された。以上から、ND-FGFR4及びNK-FGFR4を有する変異体FGFR4は足場非依存的細胞増殖を亢進させる作用を有することが明らかとなった。[実施例8]変異体FGFR4の腫瘍形成能の検討invivoにおける造腫瘍能を検討するため本細胞株をヌードマウスに移植し腫瘍形成能を検討した。N535D-FGFR4/NIH3T3及びN535K-FGFR4/NIH3T3細胞をヌードマウスの皮下に3x106個ずつ接種し8日観察したところ腫瘍形成が確認された。以上から、ND-FGFR4及びNK-FGFR4は癌の原因遺伝子であることが示された。