"aフタルジアルデヒド、bC3-C6チオール、cpH約7.5~約10の範囲の緩衝液、およびd界面活性剤を含有する、タンパク質および/またはアミノ酸を検出するための組成物であって、eチオール還元剤、をさらに含む、組成物。a約0.1~約10mmol/Lのo-フタルジアルデヒド、b約1~約20mmol/LのC3-C6チオール、c約10~約100mmol/Lであり、pH7.5~10の範囲の緩衝液、d約0.01~約2v/vの界面活性剤、およびe約0.05~約5mmol/Lのチオール還元性化合物、を混合することにより調製される、請求項1に記載の組成物。前記C3-C6チオールが、N-アセチル-L-システイン、2-メルカプトエタノールまたはジチオスレイトールである、請求項1または2に記載の組成物。前記緩衝液が、pH9~9.5の範囲のものである、請求項1~3のいずれか1項に記載の組成物。前記界面活性剤が、非イオン性界面活性剤である、請求項1~4のいずれか1項に記載の組成物。前記チオール還元性化合物が、ジチオスレイトールまたはトリス2-カルボシキエチルホスフィンからなる、請求項1~5のいずれか1項に記載の組成物。キレート剤をさらに含む、請求項1~7のいずれか1項に記載の組成物。前記キレート剤の濃度が、約0.05~約5mmol/Lである、請求項7に記載の組成物。有機溶媒をさらに含む、請求項1~8のいずれか1項に記載の組成物。前記有機溶媒が、エタノール、メタノール、アセトンおよびアセトニトリルからなる群から選択される、請求項9に記載の組成物。前記有機溶媒が、メタノールである、請求項9または10に記載の組成物。a、b、dおよびeの各成分を緩衝液cに入れて攪拌することによる、請求項1~11のいずれか1項に記載の組成物を調製する方法。a表面および/または基板に請求項1~11のいずれか1項に記載の組成物を塗布し、b蛍光を検出する、ことを含む、タンパク質および/またはアミノ酸の検出方法。前記蛍光が、蛍光を検出できる任意の手段または装置によって検出される蛍光である、請求項13に記載の方法。a請求項1~11のいずれか1項に記載の組成物、およびb使用のための説明書、を含む、タンパク質および/またはアミノ酸を検出するためのキット。a請求項1~11のいずれか1項に記載の組成物、b表面および/または基板に前記組成物を塗布するための手段、およびc使用のための説明書、を含む、タンパク質および/またはアミノ酸を検出するためのキット。本発明者らは、定性的、定量的に微量レベルのタンパク質を検出するための、溶液中や器具の表面のようなインサイチュで使用できる、タンパク質および/またはアミノ酸を検出する組成物を発明した。そして、この組成物はSSDに使われる試薬としての要件を満たすものである。このタンパク質および/またはアミノ酸を検出する組成物は、それ自体が安定的であり、さらに、長期の保存可能期間を持つ。さらに、この組成物がタンパク質と反応すると、安定的なイソインドール蛍光色素分子誘導体を産生する。この誘導体は単純な計測手段を使って同定可能であり、視覚的に、または数値データ的方法により直ちに定量化可能である。この発明の第1の態様においては、ao-フタルジアルデヒドbC3-C6チオールcpHが約7.5~10の範囲の緩衝液d界面活性剤を含み、eチオール還元性化合物をさらに含むタンパク質および/またはアミノ酸を検出する組成物が提供される。この発明の一つの実施形態においては、ao-フタルジアルデヒドbC3-C6チオールcpHが約7.5~10の範囲の緩衝液d界面活性剤を含み、eチオール還元性化合物を0.05~約5mmol/Lの濃度でさらに含むタンパク質および/またはアミノ酸を検出する組成物が提供される。この発明の第1の態様の他の実施形態においては、以下の物質を含む組成物が提供される。a約0.1~約10mmol/Lのo-フタルジアルデヒドb約1~約20mmol/LのC3-C6チオールc約10~約100mmol/Lであり、pH7.5~10の緩衝液d約0.01~約2v/vの界面活性剤e約0.05~約5mmol/Lのチオール還元性化合物。各構成成分の濃度および範囲は、本発明に係るすべての構成成分が混合されて最終的なインサイチュタンパク質検出試薬とされた際の各構成成分の濃度である。本発明は、タンパク質および/またはアミノ酸を検出する組成物を提供する。この組成物は室温において安定で、タンパク質の広い範囲のスペクトルの検出に特異的であり、ナノグラムやピコグラムのような微量のタンパク質の残基の検出に感応し、さらに、単純な器具の使用で利用できる。したがって、本発明の組成物はタンパク質および/またはアミノ酸の検出における使用に適している。タンパク質は共有結合したアミノ酸からなる有機分子である。本明細書で定義される場合、タンパク質はペプチドおよびポリペプチドを含む。アミノ酸は20種類の天然アミノ酸とその他のアミノ酸のいずれかである。それぞれのアミノ酸は、アミン基、カルボキシル基、アミノ酸によって違う様々な側鎖からなる。典型的に、タンパク質および/またはアミノ酸を検出する組成物はアミン基を検出する。この発明の組成物はo-フタルジアルデヒドを含む。o-フタルジアルデヒドはC6H4CHO2の化学式であらわされる化合物である。フタルジアルデヒドはo-フタルジアルデヒド、フタル酸アルデヒド、フタラール、フタル酸ジアルデヒド、ジスパDisopa、フタルジカルボキシアルデヒド、1,2-ベンゼンジカルボキシアルデヒド、オルト-O-フタルジアルデヒド、オルトフタルジアルデヒド、ジスパDisopaTN、o-フタルジアルデヒド[French]、フタル酸ジカルボキシアルデヒド、オルト-フタル酸アルデヒド、フタルジアルデヒド試薬、o-フタル酸ジカルボキシアルデヒドとしても知られている。それらは共通してOPAオルト-O-フタルジアルデヒドと略される。OPAはベンゼン環の隣接する炭素中心に結合した二つのホルミルCHO基からなるジアルデヒドである。OPAはアミン、特に第一級アミンと反応する。いくつかの実施形態において、OPAは、OPAを溶解するために、および試薬の噴射特性を強化するために有機溶媒に浸される。有機溶媒はメタノール、アセトニトリル、その他の易揮発性の溶媒から選択可能である。易揮発性溶媒にはアセトン、エタノールその他のすぐに蒸発する溶媒が含まれる。典型的に、いくつかの実施形態においては、有機溶媒はメタノールである。有機溶媒の添加は組成物の噴射特性を改善し、組成物を素早く乾燥させるため、表面にみられる乾燥したタンパク質のスポットの拡大を防ぐ。いくつかの実施形態において、OPAの濃度は約0.1mmol/Lから10mmol/Lである。特定の実施形態においては、OPAの濃度は0.5mmol/Lから5mMである。好ましい実施形態においては、この発明において使用されるOPAは典型的に、0.75mmol/L、1mmol/L、2mmol/L、3mmol/Lまたは4mmol/Lの濃度である。典型的にいくつかの実施態様のOPAの濃度は2mmol/Lである。いくつかの実施形態において、有機溶媒は0.1v/vから10v/vからなる。特定の実施形態においては、有機溶媒は0.5v/vから5v/vからなる。好ましい実施形態においては、有機溶媒は0.5v/v、0.6v/v、0.7v/v、0.8v/v、0.9v/v、1v/v、1.5v/v、2v/v、2.5v/v、3v/v、3.5v/v、4v/v、4.5v/v、5v/vの量で含まれる。本発明に係る組成物はC3-C6チオールも含む。チオールは典型的に無臭である。このチオールはシステインのような遊離アミノ酸を含むべきではない。チオールは硫黄と水素の結合sulfur-hydrogenbond-SHによって構成されている。それは一般的にチオール基、メルカプト基もしくはスルフヒドリル基といわれる。より伝統的な意味では、チオールはメルカプタンと称されることもよくある。C3-C6チオール分子は、3、4、5つまたは6つの炭素原子とチオール官能基を含む任意の有機化合物でありうる。C3-C6チオールは、飽和、不飽和の場合があり、炭素鎖に沿って一つ以上の位置で不飽和であってもよい。C3-C6チオールは、分枝状、直鎖状、環状、炭化水素ラジカルであってもよいし、直鎖に沿って一つ以上の位置でヒドロキシル化されていてもよい。典型的なC3-C6炭化水素鎖は一般的な化学式としてCnH2n1のアルキルでありうる。典型的なアルキル基としては、以下のものに限られないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピルブチル、イソブチル、t-ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシルなどが挙げられる。好ましい実施形態においては、アルキル基はC3-C6アルキルである。特に、C3-C6アルキル基の例としては以下のものが挙げられる:n-プロピル基、イソプロピル基、n-ブチル基、イソブチル基、secブチル基、tert-ブチル基、n-ペンチル基、1,1-ジメチルプロピル基、1,2-ジメチルプロピル基、2,2-ジメチルプロピル基、1-エチルプロピル基、n-ヘキシル基、1-エチル-2-メチルプロピル基、1,1,2-トリメチルプロピル基、1-エチルブチル基、1-メチルブチル基、2-メチルブチル基、1,1-ジメチルブチル基、1,2-ジメチルブチル基、2,2-ジメチルブチル基、1,3-ジメチルブチル基、2,3-ジメチルブチル基、2-エチルブチル基、2-メチルペンチル基、3-メチルペンチル基など。場合によっては、アルキル基は、一つ以上の酸素原子によって中断されてもよい。いくつかの実施形態においては、C3-C6チオール分子は、N-アセチル-L-システインNAC2R-2-アセトアミド-3-スルファニルプロパノイック酸2R-2-acetamido-3-sulfanylpropanoicacid、2-メルカプトエタノール2-ヒドロキシ-1-エタンチオール、ヂチオスレイトールDTT2S,3S-1,4-ビス-スルファニルブタン-2,3-ジオール,N-アセチル-D-ペニシラミン,N-アセチル-システアミン,N-アセチル-ホモシステイそしてメルカプトコハク酸から選択することができる。典型的に、いくつかの実施様態において、タンパク質および/もしくはアミノ酸を検出する組成物中のC3-C6チオール分子はN-アセチル-L-システインである。いくつかの実施形態において、C3-C6チオールの濃度は、約1mmol/Lから約20mmol/Lである。特定の実施形態においては、C3-C6チオールの濃度は約5mmol/Lから約15mmol/Lであることがある。好ましい実施形態においては、本発明で使用されるC3-C6チオールの濃度は、典型的に6mmol/L、7mmol/L、8mmol/L、9mmol/L、10mmol/L、11mmol/L、12mmol/L、13mmol/Lまたは14mmol/L.典型的ないくつかの実施形態においては、C3-C6チオール濃度は10mmol/Lである。本発明の組成物は、pHが約7.5~約10の範囲の緩衝液を含む。緩衝液は、強い酸またはアルカリが加えられた時でも、pHを固定するか、ほぼ恒常的な値に維持するために機能する。緩衝液は、一般的に水溶性の緩衝液である。pHが約7.5から10までの緩衝液は、アルカリ性の緩衝液である。この発明で用いられる緩衝液は、典型的に、約pH8、約pH9または約pH10のpHを持つ。特定の実施態様においては、緩衝液は、pH9からpH9.5の間のpHを持つ。いくつかの実施形態において、C3-C6チオール分子はpH7.5からpH10の範囲のpHのアルカリ性の緩衝液中にある。典型的には、C3-C6チオールは約pH9からpH9.5の範囲にあるpHの緩衝溶液中にある。典型的には、緩衝溶液のpHは約pH9.2からpH9.3である。pH7.5からpH10のpHを持つ緩衝液の例は、リン酸塩緩衝液とホウ酸塩緩衝液である。緩衝液はナトリウム塩であることが好ましい。緩衝液は、アンモニウム塩でなく、またグリシン緩衝液のようなアミノ酸に基づくものでないことが好ましい。特定の実施形態においては、緩衝液の濃度は、約10mmol/Lから約100mmol/Lであることがある。特定の実施形態では、本発明の緩衝液は、約25mmol/Lから約75mmol/Lの濃度となることがある。特定の実施形態では、本発明の緩衝液は、約35mmol/Lから約65mmol/Lであることがある。好ましい実施形態においては、この発明の緩衝液は30mmol/L、35mmol/L、40mmol/L、45mmol/L、50mmol/L、55mmol/L、60mmol/L、65mmol/Lまたは70mmol/Lの濃度である。典型的に、いくつかの実施形態では、緩衝液の濃度は50mmol/Lである。好ましい実施形態では、緩衝剤はテトラホウ酸ナトリウムNa2B4O7である。典型的に、いくつかの実施形態では、緩衝剤はpH9.23、濃度50mmol/Lのテトラホウ酸ナトリウムである。発明の組成物は表面活性剤も含む。表面活性剤はイオン性であっても非イオン性であってもよい。イオン性界面活性剤の例は、レシチンホスファチジル基コリン、胆汁酸塩、および洗剤である。非イオン性界面活性剤の例は、モノグリセリド、クリモファーcremophore、ポリエチレングリコール脂肪アルコールエーテル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、Solutol登録商標HS15、ポロクサマーまたはそれらの組合せを含む。モノグリセリドの例は、グリセリルモノカプリル酸塩別名グリセリモノオクタン酸、グリセリルモノデカン酸、グリセリルモノラウレート、グリセリルモノミリスチン酸塩、グリセリルモノステアリン酸塩、グリセリルモノパルミチン酸塩とグリセロールオノオレートである。ソルビタン脂肪酸エステルの例は、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノオレイン酸塩そしてソルビタンモノパルミチン酸塩Span登録商標40またはそれらの組合せを含む。ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルの例は、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレイン酸塩Tween登録商標80、ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミチン酸塩またはその組合せを含む。いくつかの実施形態では、界面活性剤は非イオン性物質である。いくつかの実施態様では、非イオン性界面活性剤は、アルキルポリエチレンオキサイドに限られず、例えば、Tween登録商標シリーズTween登録商標20、Tween登録商標80その他、Brij登録商標35のようなBrij登録商標シリーズ、Triton登録商標洗剤シリーズTriton登録商標X-100、その他のようなポリキシエチレングリコールに基づくポリソルベートやポリエチレンオキサイドやポリプロピレンオキサイド商業的にPoloxamers登録商標またはPoloxamines登録商標と呼ばれているコポリマーを含む。一般的に、いくつかの実施態様において、界面活性剤や洗剤は、Triton登録商標X-100である。界面活性剤はタンパク質残基、特に疎水性タンパク質残基を変性させるため、検出する組成物とより容易に反応する。Triton登録商標X-100は化学式がC34H22OC2H4Onであり、界面活性剤として研究所で一般的に用いられる。一つ以上の実施態様において、界面活性剤はおよそ0.01v/vからおよそ2v/vまでの量で含まれる。特定の実施形態において、界面活性剤はおよそ0.5v/vからおよそ0.05v/vの量で含まれる。たとえば、100ml中の0.5mlは、組成物の100mlに対し0.5v/vに相当する。好ましい実施形態において、界面活性剤は0.06v/v、0.07v/v、0.08v/v、0.09v/v、0.1v/v、0.2v/v、0.3v/vまたは0.4v/vの量で含まれる。一般的に、界面活性剤は0.1v/vである。発明の組成物はチオール還元性化合物も含む。チオール還元性化合物は、ジチオスレイトールDTTと2-メルカプトエチルアミンのようなチオール基を含む合成物を含み、さらにそれらはホスフィンとそれらの誘導体例えばトリスカルボキシエチルホスフィンTCEPである。溶液中で、スルフヒドリル基は酸化とジスルフィド構造に影響されやすい。チオール還元性化合物の存在は、タンパク質そしてアミノ酸の組成物の中で、試薬の保存可能期間の不安定性を引き起こすチオールと反応の過程で形成される不安定な産生物間の過剰なジスルフィドと酸化の形成の防止に役立つ。チオール還元性化合物の添加は、本発明に係るタンパク質および/またはアミノ酸検出組成物を安定化する要素であると考えられる。チオール還元性化合物は、最終的な検出試薬におけるタンパク質の検出感度を強化するという点で有利である。特定の実施形態において、チオール還元性化合物の濃度は、およそ0.05mmol/lからおよそ5mmol/lでありうる。特定の実施形態において、チオール還元性化合物の濃度は、およそ0.1mmol/lからおよそ2.5mmol/lでありうる。いくつかの実施形態において、本発明で用いられるチオール還元性化合物の濃度はおよそ0.075mmol/L、0.15mmol/L、0.2mmol/L、0.35mmol/L、0.4mmol/L、0.55mmol/L、0.65mmol/L、0.75mmol/L、0.8mmol/L、0.95mmol/L、1mmol/L、2mmol/L、3mmol/Lまたは4mmol/Lである。典型的にいくつかの実施形態において、チオール還元性化合物の濃度は、0.5mmol/lである。特定の実施形態において、本発明に係る組成物はキレート剤をさらに含むことがある。キレート剤は、有機化合物の二つ以上の原子を通して金属イオンと配位結合を形成可能な有機化合物である。キレート剤と金属イオンによって形成されたこの化合物はキレートと呼ばれている。元素との配位結合を2つ持つキレート剤は二座と呼ばれている。配位結合を3つ持つキレート剤は三座と呼ばれている。それ故に、キレート試薬は二座、三座、四座、五座、六座、七座、八座、九座、十座でありうる。キレート剤は水溶媒の金属イオンをコントロールするための金属イオン封鎖剤として幅広い範囲を示す。キレート剤は、多価金属イオンで安定な水溶性複合体を形成することで、金属イオンの通常の反応性を妨げ、望ましくない相互作用を防ぐ。いくつかの実施様態においては、この発明のキレート剤は、2、2’、2、2’-エタン-1、2-ジルジニトリロ四酢酸エチレンジアミン四酢酸2,2’,2,2’-ethane-1,2-diyldinitrilotetraaceticacidethylenediaminetetraaceticacid、エチレンジニトリロ四酢酸、EDTA、EGTA、ジエチレントリアミン五酢酸DTPAまたはニトリロ三酢酸NTAに限られない。好ましくは、キレート試薬はアミンを含まないものとする。C30H16O8Nの化学式によるEDTAは、窒素原子と短い鎖のカルボキシル基を持つ一般的なキレート試薬の良い例だ。EDTAは、エデト酸、EDTAフリーベース、EDTA遊離酸、H4EDTA、ジアミノエタン四酢酸、エデト酸Edeticacid、エデト酸Edetate、エチレンジニトリロ四酢酸、バーセンVersene登録商標またはエチレンジアミン四酢酸塩としても知られているまた、C34H23N3O10の化学式によるDTPAは、ジエチレントリアミン-N,N,N’,N’,N-五酢酸Diethylenetriamine-N,N,N’,N’,N-pentaaceticacid、H5dtpa、ペンテト酸、N,N-ビス2-ビスカルボキシメチルアミノエチル-グリシンN,N-Bis2-bis-carboxymethylaminoethyl-glycine、ジエチレントリアミン五酢酸または[[カルボキシメチルイミノ]ビスエチレンニトリロ]-四-酢酸[[Carboxymethylimino]bisethylenenitrilo]-tetra-aceticacidとして知られている。化学式C6H9NO6をもつNTAは、2、2’、2-ニトリロ三酢酸、トリグリコールラミック酸Triglycollamicacid、トリロンTrilone登録商標A、α、α’、α-トリメチルアミントリカルボン酸、トリカルボキシメチルアミン、アミノ三酢酸、ハンプシャーNTA酸HampshireNTAacid、ニトリロ-2、2’、2-三酢酸、ティトリプレックスTitriplex登録商標またはニトリロ三酢酸として知られている。特定の実施形態において、キレート試薬の濃度は、およそ0.05mmol/lからおよそ5mmol/lでありうる。特定の実施形態において、キレート試薬の濃度は、およそ0.1mmol/lからおよそ2.5mmol/lでありうる。いくつかの実施形態において、本発明で用いられるキレート剤は、約0.075mmol/L、0.15mmol/L、0.2mmol/L、0.35mmol/L、0.4mmol/L、0.55mmol/L、0.65mmol/L、0.75mmol/L、0.8mmol/L、0.95mmol/L、1mmol/L、2mmol/L、3mmol/Lまたは、4mmol/Lの濃度を持つ。典型的にいくつかの実施形態においては、キレート剤の濃度は0.5mmol/lである。いくつかの実施形態において、組成物中のC3-C6チオールの濃度は、o-フタルジアルデヒドの濃度の5倍である。いくつかの実施形態において、キレート剤の濃度は、最大で2mmol/Lまでのチオール還元性化合物の濃度と等しい。いくつかの実施形態において、組成物中のチオール還元性化合物の濃度はC3-C6チオールの濃度の20倍でありうる。これらの状況下では、試薬の感度は増強される。高濃度のチオール還元性化合物は、検出組成物の感度を減少させる可能性があることに注意しなければならない。組成物は、4°Cでは6ヶ月まで、室温では3か月まで安定である。大気中のアンモニアによるバックグラウンドの蛍光を減少させるために、当該組成物を使用前、4°C、24時間で保存してもよい。組成物は脱イオン化された真水を使用したとき、調製から24時間後、35±10周辺の任意のユニット相対蛍光ユニット、RFUの低いバックグラウンド蛍光を達成することができる。本発明の第2の態様では、本発明の第1の態様において述べられたタンパク質および/またはアミノ酸の組成物を調製する方法が提供される。組成物を調製する方法は単純にa、b、dおよびeの成分を緩衝液cに入れて混合することである。本発明の第3の態様は、タンパク質および/またはアミノ酸を検出するための方法を提供することである。その方法は、以下を含む:a本発明に係る組成物を表面および/または基板に塗布すること、およびb蛍光を検出すること。本発明の第1の態様に示した通り、組成物はスプレーや拭き取り、液体、その他、当業者にはよく知られている適当な方法で塗布される。本発明に係る組成物を含むスプレーは瓶、または容器、および噴霧器もしくは噴射ノズルまたはその他適した手段をさらに含む。スプレーの瓶または容器はどのようなものでもよい。例えば、そのような瓶または容器はガラス製またはプラスチック製またはその他の不活性物質製であることがありうる。容器はチオールを酸化させるような金属性であってはならない。好ましくは、容器は透明体もしくは不透明体であることがありうる。この発明の実施形態における噴霧器または噴射ノズルは、ノズルの中を通すことによってバルク液体を霧粒子の集まりへ変換し、発明の組成物のむらのない塗布を可能にする。霧の密度は、組成物の乾燥、さらに蛍光物質の検出に要する時間に直接的に比例するため重要である。布swabの用語は、棒やワイヤーの端に取り付けられ、洗浄や塗布に使用される、レーヨンまたはその他の吸収性の素材のような当業者に知られているどんな吸収性の素材も含む。圧力および/または摩擦の量が表面および/または基板へ塗布される。タンパク質および/またはアミノ酸は布上に集められ、および布は本発明に係る組成物に浸される。あるいは、布は本発明に係る組成物に浸された後に、拭き取り、こすられ、圧力および/または摩擦が表面および/または基板へ塗布される。典型的に、本発明に係る組成物は表面および/または基板へ直接塗布されうる。表面および/または基板のタンパク質および/またはアミノ酸の存在下での、本発明に係る組成物の反応の検出は、直接的に、または間接的に測定できる。組成物反応の検出は1年またはそれよりも長い間、乾燥状態で安定である。本発明に係る組成物が塗布される表面および基板はどんな表面でも可能であり、例えば、ガラス、金属例えばステンレススチール、チタン、プラチナまたはアルミニウム、プラスチック、その他不活性の材質、水性媒体に限られない。特に、表面および/または基板は、医療用または歯科用器具、研究室の装置または溶液の表面に限られることなく、タンパク質および/またはアミノ酸が存在しているであろう表面および/または基板であれば可能である。医療機器は、汚染除去および/または滅菌工程を経て、患者に適用されるまたは挿入される再利用可能な機器を含む。そのような機器はカテーテル、カニューレ、メス、針、検鏡、ステントまたは鉗子を含む。そのような機器はさらに、エクストラクターextractors、マトリックスバンドmatrixbands、ハンドピースhandpiecesのような、歯の診療に使用される機器も含む。タンパク質および/またはアミノ酸の存在下では、本発明の組成物はタンパク質および/またはアミノ酸と反応し、改良された、および安定的な蛍光色素分子を産生する。安定的な蛍光色素分子は検出される蛍光を発する。タンパク質の蛍光色素分子は乾燥状態で1年以上安定である。それ故に、本発明に係る組成物を用いて検出すると、信頼性があり、矛盾のない結果を達成するために検出のタイミングに注意を払う必要はない。蛍光の検出は、ある化合物の分子内の電子を励起する光線、および典型的には可視光だが、必ずしもそうではない低いエネルギーの光の放出を引き起こす光線、通常紫外線、を利用することを含む。反応によって放出される光は約300から500ナノメーターの範囲でありうる。蛍光検出は、蛍光を検出できるどのような機器を使用しても実行可能である。蛍光を測定する機器は蛍光光度計fluorometersまたはfluorimetersと呼ばれる。蛍光光度計には2つのタイプが存在する。一つは、それは入射光線と蛍光を孤立させるためにフィルタを使用したフィルタ蛍光測定器、もう一つは、それは入射光線と蛍光を孤立させるために回折格子モノクロメーターを使う分光蛍光計である。様々な光源が励振源として使われる。レーザー、光ダイオード、特にキセノンアークや水銀灯などのランプが含まれるがそれらに限られない。蛍光光度計fluorimeterは蛍光を検出するために用いられる。蛍光光度計は生じた反応の溶液および/または基質中の分子を励起する選ばれた波長を生み出すことによって機能する。その光は分子を、光が放出される、および蛍光が産生される励起状態へ促進する。その後、その光は生じた反応に特有の波長で検出される。さらに、蛍光を測定し、検出できる他の適した機器は、2010年8月20日に出願されたタンパク質汚染の検出のための画像システムおよび関連方法ImagingSystemandAssociateMethodforDetectionofProteinContaminationという名称の特許出願GB1014016.8号から優先権を主張した同時継続のPCT出願中に書かれている。タンパク質汚染検出のための画像システムと関連方法はタンパク質残基が存在する場所を強調する表面および/または基板の画像を提供することができる。このシステムは機器を受け取るための光不浸透性のチャンバを含む。それぞれ可視光と励起光で暗室を照らすために、チャンバの中は2つの可視光源と励振タイプの光源がある。デジタルカメラは、表面および/または基板に本発明に係る組成物を塗布したその場所で、可視光によって照らされた機器の画像の第1の画像、そして表面および/または基質から放出された蛍光色素分子によって産生された蛍光のパターンの第2の画像を撮影するために使用可能である。これら2つの画像を合わせることによってタンパク質に汚染された場所を強調した、器具の合成画像を作ることができる。もっとも高い感度を求めるためには、蛍光は、タンパク質と蛍光色素分子の補助剤の蛍光特性をマップするのに適したスペクトル特性波長と強度を持つ光源と全体的に暗い環境の組み合わせが必要である。レーザービームは非常に高い強度を持つ一方で、高価なだけでなく、蛍光色素分子をマップしないであろう特殊な波長をもつ。水銀、キセノン、および水銀ドープキセノンのような強力なランプはタンパク質の日常分析により適している。加えて、背景をより低くし、感度を上げることが重要であるので、試薬はそれ自身が発行するべきではない。蛍光色素分子産生物はタンパク質BSAと不安定なOPA/NAC試薬との反応で蛍光を発したときに形成され、その蛍光は蛍光分光計を使って計測される。図1aに示されているように、励起と発光のピークはそれぞれおよそ350と450ナノメーターである。タンパク質BSAと安定的なOPA/NAC試薬との反応で蛍光を発した際に形成された蛍光色素分子産生物も、図1bに示す通り、励起と発光のピークはそれぞれおよそ350と450nmである。励起と発光の波長は蛍光の誘導体化反応に特異的であるから、それ故に安定的なOPA/NAC試薬を使用したときに形成された蛍光色素分子は同じものであるといえる。タンパク質検出におけるこの発明に係る組成物の大きな利点は、その蛍光分析による検出感度である。検出限界は非加熱でナノグラムまでおよび、また水銀灯で直ちに達成される励起波長で検出することができる。検出用組成物は検出が困難であることで知られるシトクロム-Cの検出も可能である。蛍光の検出は定量的または定性的な方法で計測することができる。蛍光の定性的な検出は、光を検出するどんな方法および/または機器によっても可能である。蛍光は暗室で、または適切なフィルタを通して視認可能である。適切な検出器およびエミッションフィルターを用いて、蛍光は検出可能であり、その強度は測定される。これは蛍光ダイオードで可能であり、、あるいは、可視化のために、同様に、すべての機器上の蛍光は、適切な暗い環境中に設置され、適切なソフトウェアを装備したCCD検知器の前に、適切なフィルタを装備したディジタルカメラか同様の装置を介して測定することができる。光を検知する手段および/または装置は視覚的になりえるか、あるいは特化された写真の手段で蛍光が検知されることを可能にするフィルタを含むことが可能である。また、それは適切な励起波長を得るため、蛍光ランプ、水銀灯あるいは水銀灯の派生品を使用し、適切な有色フィルターを通して蛍光を観察する単純な器械によっても達成することができる。蛍光の定量的な検出は一連の既知のタンパク質組成物の基準を作ることによって決定できる。標準として使われるタンパク質はウシ血清アルブミンBSAである。検量線を得るため、およびコントロールを得るため、様々な濃度のBSAを使って分析は行われ、この発明に係る組成物との反応によって放出された蛍光は、産生された蛍光を検出し、定量できる蛍光光度計またはその他の適切な機器によって測定および検出される。表面上の検出のため、ステンレス鋼帯の上で乾燥させられた一連のBSAの標準溶液が準備されうる。その次に、検量線は、表面および/または基盤上に存在する微量のタンパク質の量を定量的に評価するために表面および/または基盤と発明の組成物の反応によって放出された関連のある蛍光の計測に用いることができる。上記の検出方法に加えて、他の適したイメージングシステムは2010年8月に出願されたタンパク質汚染の検出のためのイメージングシステムおよび関連方法IMAGINGSYSTEMANDASSOCIATEDMETHODFORDETECTIONOFPROTEINCONTAMINATIONという名称の同時継続出願において述べられている。この同時継続出願は、表面および/または基質にこの発明に係る組成物が塗布されたときに表面および/または基質から放出される蛍光の画像を捉えるための機器に関連する。さらに処理装置と関連のある解析用ソフトウェアを適用することで、イメージングシステムはタンパク質および残存しているタンパク質残基量によって汚染されているかどうか、迅速で、正確な決定を提供することができる。表面および/または基板の視覚的なイメージはSSDにおいて再利用可能な器具を殺菌、滅菌する前に、表面が例えば、外科手術用のメスまたは歯科用の針が日常的な周期での除染の後に、残存タンパク質を含んでいるかどうかを決定する迅速な方法として、裸眼での観察と同様に、有利である。本発明の組成物は、蛍光色素分子産生物を直ちに表面から取り除き、毒性面での問題も最小化することを確認するために、表面からのタンパク質の除去を監視することに用いることもできる。本発明の第4の態様は、本発明の組成物と使用のための説明書を含む、表面のタンパク質および/またはアミノ酸を検出するためのキットを提供する。本発明の第5の態様は、本発明に係る組成物、当該組成物を表面および/または基板へ塗布する手段、および使用のための説明書を含む、タンパク質および/またはアミノ酸の検出のためのキットを提供する。典型的に説明書は本発明の第2の態様にしたがって、キットを使うよう使用者を導くためのものである。本発明に係る組成物は表面および/または基板に噴霧されるインサイチュ試薬でありうる。本発明の一つの実施形態では、典型的に組成物はメタノール中に溶解した約2mmol/LのOPAを含む。緩衝液は約9のpH、約50mmol/Lの濃度で作られ、0.1v/vの非イオン性界面活性剤を加え、さらに溶解するまで攪拌する。その後、約10mmol/Lのチオール、典型的にはNACが加えられ、約0.5mmol/LのDTTを加え、攪拌する。組成物は使用まで約4°Cで、およそ24時間保存することができる。組成物は直接的にまたは間接的に表面および/または基板に塗布することができる。タンパク質および/またはアミノ酸の存在下では、組成物は、それが塗布された表面および/または基質上のタンパク質および/またはアミノ酸と反応する。反応は例えば蛍光例えば水銀灯または蛍光計の使用のような、単純な機器によって定性的および/または定量的な方法で検出することができる蛍光を放出する安定的な蛍光色素分子を産生する。放出された蛍光はタンパク質検量線と照合され、定量される。発見されおよび定量化されたタンパク質の量は臨床的、生物学的および科学的環境下で、タンパク質の存在の監視において重要である。発明に係る検出用組成物は以下の利点があるこの組成物と方法はすべての器具上のタンパク質残基を明らかにすることができる。単純である。SSDの環境での使用に適している。永久の記録を得ることができる定量的なデータを得ることができるタンパク質特異的であるタンパク質残基に対する既存の手法よりも少なくとも100倍の感度がある瞬時に結果を得ることができる迅速で、高い処理能力と自動化が可能器具類はすぐに使用可能で、レーザーを使用する必要はない安定的である検出される産生物も安定的であるこの方法はほとんどの素材の表面で働く比較的無毒であり、安全な試薬であるステンレススチールの表面から簡単に取り除くことができるキャピタルコストもランニングコストも低いここに書かれている発明の組成物と方法は、タンパク質および/またはアミノ酸の検出および/または除去を決定するための化学的分析のすべての態様において使用することができる。本発明の第2および後続の態様のために推奨される特徴は、本発明の第1の態様のものが準用される。本発明はさらに以下の実施例と図を参照することによって説明される。それらは実例を示すだけの目的で提供され、発明を限定解釈するものではない。参照はいくつかの図で構成されている。実施例1:OPA/NAC試薬の調製脱イオン水500mlに9.5gのテトラホウ酸二ナトリウム十水和物を溶解し、数滴の1MNaOHでpHを調整して、pH9.23のホウ酸ナトリウム緩衝液を調製した。60mgのN-アセチル-L-システインを緩衝液中に加え、完全に溶けるまで、マグネチックスターラ―で攪拌した。60mgのOPAを5mlのメタノール中に溶解することによってOPA溶液を調製し、そしてこの溶液をホウ酸緩衝液中に加えた。このOPA/NAC試薬溶液は週一回調製され、バックグラウンドの蛍光を減少させるため、使用の前に24時間、4°Cで暗所に保存した。実施例2:タンパク質検出のための安定化されたOPA/NACの調製900mlの脱イオン水に19gのテトラホウ酸二ナトリウム十水和物を溶解して、数滴の1MNaOHによってpHを調整して、ホウ酸ナトリウム水溶液を調製した。次いで、緩衝液に1mlのTriton登録商標X-100、1.63gのN-アセチル-L-システイン、0.077gのDTTを加え、完全に溶解するまでマグネチックスターラ―で攪拌した。0.268gのOPAを10mlのメタノールに溶解することによってOPA溶液を調製し、ホウ酸緩衝液に加えた。この溶液は1Lで調製した。OPA/NAC溶液は、バックグラウンドの蛍光を減少させるため、使用の前に24時間、4°Cで暗所に保存した。実施例3:ナトリウムEDTAをさらに含む安定的なOPA/NACの調製0.32gの二ナトリウムEDTAを加えて、実施例2で述べたのと同様のOPA溶液を調製した。二ナトリウムEDTAを緩衝液に加え、完全に溶解するまでマグネチックスターラ―で攪拌した。実施例4;安定的なOPA/NAC試薬の安定性の決定安定的なOPA/NAC試薬の安定性と感度を評価するために、BSAとのインターアッセイを6ヶ月の期間実施した。ウシ血清アルブミンとの標準分析を実施した。標準BSA溶液は、作成され、脱イオン水に希釈され、0-100μg/mlの範囲の濃度で作成された。空測定とBSAの標準分析は、新たに調製されたOPA/NAC試薬溶液と室温および冷蔵庫内、4°Cで様々な期間保存された実施例2、3で述べられたように保存されていた安定的なOPA/NAC試薬溶液を用いて行われた。BSAと実施例2、3で言及されたOPA/NAC試薬を用いた反応分析は1cmのアクリルPMMAまたはシリカの細胞蛍光キュベット内で実施された。300μlのBSA濃度は200μlの安定化OPA/NAC試薬と完全に混合させ、その反応混合物は蛍光が励起/発光室温で350/450nmで測定されるまで、室温で5分間放置した。イソインドール生成物からの反応から放出られた蛍光はHITACHIF4500蛍光分光光度計によって計測された。分光光度計は、10nmの励起および2.5nmの放射の帯域幅および700VのPM電圧で、励起と放射は350nmおよび450nmの波長でそれぞれ設定した。室温における試薬の感度は最大3か月の間、室温で安定的であった。図2に示されている結果は、試薬の感度が4°Cで最大6ヶ月の間、安定性を保ったことを示している。BSA標準の線形は6ヶ月の期間を超えて0.99であり、その感応性は36±3.2μgmL-1/RFU表1である。表1:6ヶ月の保存期間を超えたBSAと安定的OPA/NAC試薬の安定性と感度安定的OPA/NAC試薬とタンパク質の反応速度と蛍光の発生は、完了時間が3分より短く、非常に速い。実際、イメージングシステムにおいて、蛍光の発生は画像が最初に捉えられる時間までには完了した。実施例5:タンパク質との反応後に形成される安定化OPA/NAC試薬産生物の安定性の決定形成されたイソインドール産生物の安定性を評価するために、既知の濃度で、分析を10回反復して実施し、蛍光性キュベットの中で、実施例4で述べた安定化OPA/NAC試薬と混合した。これは、蛍光の検出においての産生物の損失を比較するために、時間ごとにイソインドール産生物からの蛍光を測定することによって達成された。反応混合物から放出された蛍光は、その反応混合物を蛍光が励起/発光が350/450nmで測定されるまで、室温で5分間放置した後に、検出された。反応混合物は360分6時間放置され、および反応混合物から出た蛍光は、イソインドール産生物の安定性を検出するために、1時間おきに計測された。この例は、安定化OPA/NAC試薬が6ヶ月間を超えて安定ということだけではなく、溶液中のイソインドール産生物も6ヶ月の期間を超えて安定であることも示している。実施例6:安定化OPA/NAC試薬の特異性BSA、ヘモグロビン、フィブリノーゲン、シトクロム-C、グロブリン、ミオグロビンを含むタンパク質標準溶液0から100μg/mlは実施例2に述べられた通り、脱イオン水を用いて準備された。方法の再現性は、それぞれ10回反復したBSAとシトクロム-Cの分析によって評価された。異なるタンパク質と安定化OPA/NAC試薬を用いて、分光光度計によって測定された蛍光によって、試験したすべてのタンパク質に対応する検量線を得ることができた。感応性はタンパク質の性質によって異なっていた。この系におけるBSAの検出限界は0.3μg/mlであった表2。表2:水溶液中のタンパク質と安定化OPA/NAC試薬の感応性実施例7:手術用器具上でのタンパク質残基のインサイチュ検出安定化OPA/NAC試薬実施例2,3に記載は表面上のインサイチュでタンパク質残基を検出するために用いられた。インサイチュでのタンパク質残基の検出の利点は、すべてのアミノ酸およびアンモニア残基が単純な水洗浄で取り除かれているか確認できることにある。BSAを用いた標準分析は実施例4に述べられた通り実施された。タンパク質の可視化実験はシンジーン社SYNGENECambridge,UK製の修正されたゲルドキュメンテーションシステムgeldocumentationsystemG-BOXを用いて行った。リン光チューブphosphorescencetubesを備えた水銀灯を使ったシステムはOPA/NAC試薬に最適な350nmの励起波長を得るために最適化した。放出された光は、440nm干渉フィルタi.d.7cmを通過した後、冷却CCDカメラによって撮影した。スプレーボトルは大手の量販店で購入した。噴霧はすべて、黒の非蛍光性のアート紙のシート上でなされた。アート紙は各使用の後に交換した。G-BOXイメージの半定量分析は、ハイドソフトコンピューティング社、ビックスバーグ、米国HydeSoftComputing,Vicksburg,USAのソフトウェアプログラムD-PLOTを用いて行われた。タンパク質のスポットはステンレス鋼の表面に滴下され、調査前に、少なくとも4時間室温で空気乾燥した。器具および/または表面は基板上に置き、そしてOPA/NAC試薬の霧状ミストを噴霧した。基板のチャンバは閉じられ、および一連の画像はカメラで、正確に同じ設定で、最初の白色光、その後、UV350nmを撮影した。画像は疑似色と重ね合わせ、タンパク質スポットは定性的分析図5および半定量的分析実施例8参照に用いられた。実施例8:半定量的分析撮影された画像をD-Plotソフトウェアプログラムに取り込んだ。画像は、ソフトウェアLプラグインを用いて、ビットマップから3Dに変換した。表面のプロットにおいて、プラグインはピクセル値をZ値へマップする。蛍光スポットの表面の値は、蛍光の強度の程度として計測される。A:乾燥した蛍光誘導体の安定性試薬は4°Cで最大6ヶ月間、安定している。作成から4か月過ぎた試薬を手術用のメスの刃のタンパク質検出に用いた。驚くべきことに、形成された蛍光色素分子は、外気に触れる状態で9か月間放置した後でも蛍光を発していた。これは図7に示す。B:インサイチュでのタンパク質スポット検出における安定的なOPA/NACの感度標準タンパク質BSAを、ステンレス鋼表面上のタンパク質残基の検出におけるシステムの安定性を決定するために使用した。1μgのスポット2mm2中のBSA0から1200ngを、汚染されていないステンレス鋼の表面上に滴下し、室温で乾燥させた。スポットには安定化OPA/NAC試薬を噴霧し、実施例5および6に示した通りに分析した。インサイチュでのタンパク質の可視化のための試薬の線形の分析のために表面の値は濃度に対してプロットした図8。標準校正の回帰分析におけるR2乗値は0.98であった。このシステムを使用した検出限界は現在1スポットあたり500ピコグラムまたは250pg/mm2である図9。C:手術用器具上のタンパク質残基の半定量的分析洗浄後の手術用器具上のタンパク質残基を検出するための発達した系の適用性を評価するために、疎水性タンパク質フィブリノーゲンをはさみに使用した。器具は、汚染後、SSDの典型的な洗浄を受け、OPA/NAC/DTTを噴霧した。洗浄された器具を撮影し、再度噴霧し、さらに同じ条件で撮影した。画像を分析して、タンパク質残基を定量した。結果は、残存したタンパク質が可視化され、定量化されたことを示している。この写真の場合、フィブリノーゲンのキャリブレーションから計算すると140ngのフィブリノーゲンが存在した。これを達成するために、タンパク質の区域はD-Plotを用いて、手動で描かれた。タンパク質スポットの蛍光量は、D-Plotによって計算され、実際のタンパク質量は、図12に示された通り、一連の標準スポットを参照することで計算される。安定的な端線検出ソフトウェアとタンパク質のキャリブラントによって、この工程は自動化および単純化が可能であることは明白である。回帰と線形はエクセル2003で計算する。考察OPA/NAC溶液/試薬の不安定性は、試薬混合物中に存在するチオール間のジスルフィド架橋の形成によって引き起こされる。これは、反応試薬を形成するための溶液中でOPAとチオールの結合を阻害し、それ故に経時的に感度と安定性を失う。溶液/試薬の安定性はDTTジチオスレイトールまたはTCEPトリス2-カルボキシエチルホスフィン塩酸塩のようなチオール還元性化合物を添加することによって達成される。安定化OPA/NAC試薬によって形成されたイソインドールの安定化OPA/NAC試薬の第二の制限は蛍光信号を急速に失う不安定なイソインドール誘導体を産生することである。これは、この試薬を使って分析を実施する際、時間的な制約を引き起こす。計算と統計試薬の分析内および分析間の分析は、反応の再現性と試薬の妥当確認検証を示した。記述統計平均値、標準偏差、変動係数は安定化OPA/NAC試薬の検出限界の大きな改善を示すために計算された。検出限界および定量化は、95の信頼区間を考慮に入れ、以下の式によって計算された。LoD=CV×2/100×平均濃度LoQ=LoD×2.5統計的な計算はマイクロソフト社のエクセル2003を使って実施された。OPA/NAC試薬の長期間の安定性は、作成から24時間後の観察では、感応性が76μgml-1/RFUであるが、72時間経過後では16μgml-1/RFUまで低下する。試薬の安定性において、継続的な衰退が確認された。試薬の不安定性はチオール化合物が反応のイソインドール誘導体を産生するためにタンパク質および/またはアミノ酸と反応するためにOPAと結合するよりも試薬混合物とジスルフィド架橋を形成することに起因する。加えて、イソインドール蛍光色素分子誘導体は、それら自身が不安定であり、そして分析的研究の正確性の主要な制約の原因となる反応によって、30分後のシグナルの喪失を生じさせる。反応混合物にチオール還元性化合物を添加することで、試薬中におけるチオール間のジスルフィド架橋の形成が効果的に減少した。この結果は、試薬の長期的な安定性を改善することを示している。加えて、本発明に係る組成物は、BSAと試薬が反応する際の感度と安定性の増加、および反応混合物から産生されるイソインドール誘導体の長期間にわたる安定性の増加を示している。安定化OPA/NAC試薬は、長期間にわたり継続的に感応信号を維持することによって、原型および不安定なOPA/NAC試薬に比べ、試薬の長期間の安定性を増強する。本発明のOPA/NAC試薬の検出限界は、分析間の変動性から得られた変動係数に基づいて計算された。これらは、チオール還元性化合物とキレート剤のOPA/NAC試薬への添加がBSAとの反応の検出限界値を増加させたことを確認した。原型のOPA/NACは、~840ngml-1の検出限界を示すが、OPA/NAC試薬に所要のDTTおよびEDTAを添加すると~750-530ngml-1の検出限界を示し、さらにTCEPを加えると、700から10ngml-1という検出限界の著しい増加を示した。イソインドールの安定化原型のOPA/NACは当初の測定後30分で、イソインドール産生物の蛍光信号において、33の低下を示した。対照的に、TCEPを加えた場合、~2-80のイソインドール蛍光信号が増加した。DTTは~1-27の範囲の低下を示した。時間依存性は有意に、OPA/NAC試薬混合物に投入されるチオール試薬の量と種類によって変動性を示している。これらの結果はOPA/NAC試薬の長期間の安定性がチオール還元剤の添加によって達成されることを示している。チオール還元剤の添加は、検出限界値を増大させ、蛍光シグナルの変動性を減少させ、さらに試薬とその産生物の継続的な安定性と、タンパク質検出において少なくともニンヒドリンの300倍の検出限界値を持つことを示している。"