非グリコシル化組換えヒトG-CSFを安定して長期貯蔵する方法であって:a非グリコシル化組換えヒトG-CSFおよびソルビトールを含有する酢酸またはグルタミン酸塩緩衝化G-CSF水性組成物を提供し;b工程aにて提供されたG-CSF組成物を-15°Cまたはそれ以下の温度に冷却し、凍結されたG-CSF組成物を得;c工程bで得られたG-CSF組成物を凍結状態にて貯蔵し;およびd工程cの凍結されたG-CSF組成物の温度を、該組成物を解凍させるのに調節された期間にわたって2°Cないし8°Cの範囲内にある温度にまで上げ、工程aにて提供された組成物のG-CSF含量の少なくとも95のG-CSF含量を有する液体組成物を得る、工程を含む、方法。工程aの緩衝化G-CSF組成物中のG-CSFの量が、0.1mg/ml~8.0mg/mlの、好ましくは0.25mg/ml~6.5mg/mlの範囲にある、請求項1記載の方法。緩衝化G-CSF組成物が3.5~5の、好ましくは3.7~4.8のpHを有する、請求項1または請求項2記載の方法。緩衝化G-CSF組成物中の酢酸またはグルタミン酸塩の濃度が、0.5mM~100mMの、好ましくは2mM~80mMの範囲にある、請求項1ないし3のいずれか一項に記載の方法。G-CSF組成物中のソルビトールの量が、10~100mg/mlの、好ましくは25~75mg/mlの範囲にある、請求項1ないし4のいずれか一項に記載の方法。工程aにて提供される酢酸またはグルタミン酸塩緩衝化G-CSF水性組成物が、0.1ml~8L、好ましくは5ml~4L、より好ましくは100ml~1.5Lの容量を有する、請求項1ないし5のいずれか一項に記載の方法。工程bにおけるG-CSF組成物を、-15°Cと-25°Cの間の温度に、または-60°Cと-80°Cの間の温度に冷却する、請求項1ないし6のいずれか一項に記載の方法。工程cにおける凍結されたG-CSF組成物が、少なくとも2日間、好ましくは少なくとも1ヶ月、より好ましくは少なくとも3ヶ月の期間にわたって貯蔵される、請求項1ないし7のいずれか一項に記載の方法。工程dにおける凍結されたG-CSF組成物の、2°C~8°Cの範囲内にある温度までの昇温が、少なくとも6時間にわたって、徐々にまたは直線的に、温度を上昇させることによりなされる、請求項1ないし8のいずれか一項に記載の方法。凍結されたG-CSF組成物の、工程dにおける温度までの昇温が、該凍結された組成物を2°C~8°Cの範囲内にある温度に移し、該組成物を該温度で少なくとも12時間、好ましくは少なくとも24時間、より好ましくは少なくとも36時間維持することによりなされる、請求項1ないし8のいずれか一項に記載の方法。G-CSF組成物が界面活性剤を含まない、請求項1ないし10のいずれか一項に記載の方法。G-CSF組成物が界面活性剤を含む、請求項1ないし10のいずれか一項に記載の方法。非グリコシル化組換えヒトG-CSFの医薬組成物を提供する方法であって、a非グリコシル化組換えヒトG-CSFを酢酸またはグルタミン酸塩緩衝剤およびソルビトールと共に処方し、緩衝化G-CSF水性組成物を得;b工程aのG-CSF組成物を-15°Cまたはそれ以下の温度に冷却し、凍結されたG-CSF組成物を得;c工程bで得られたG-CSF組成物を凍結状態にて貯蔵し;d工程cの凍結されたG-CSF組成物の温度を、該組成物を解凍させるのに調節された期間にわたって2°Cないし8°Cの範囲内にある温度にまで上げ、工程aにて提供された組成物のG-CSF含量の少なくとも95のG-CSF含量を有する液体組成物を得;およびe工程dにて得られた液体組成物を非経口的使用のためのプライマリーパッケージに充填する、工程を含む方法。本願発明の組成物にて使用される非グリコシル化組換えヒトG-CSF蛋白以下、G-CSFとも称されるは、ヒトG-CSFの非グリコシル化アミノ酸配列を含み、その生物学的活性を有するいずれの蛋白であってもよい。非グリコシル化組換えヒトG-CSFは、典型的には、ヒトG-CSF遺伝子をイーコリなどの原核生物宿主にて発現させることで得られる。イーコリにて発現された非グリコシル化組換えヒトG-CSFは、典型的には、N-末端Met残基を有する。本願発明の好ましい実施態様にて、ヒトG-CSFは、欧州薬局方6.3モノグラフ01/2009:2206;FilgrastimConcentratedSolution4142頁またはHermanACら前掲に示されるように、ヒトG-CSFN-末端メチオニンr-metHUG-CSFの主構造、すなわち、フィルグラスチムのアミノ酸配列、またはフィルグラスチムの生物学的活性を本質的に有するその変種、例えば融合蛋白などのN-末端またはC-末端拡張を有する変種、N-末端のメチオニン残基がグリシンなどの他のアミノ酸で置換されている変種、またはアミノ酸配列にて中立変異を有する変種を含むか、または有する。本願発明の製剤にて有用なG-CSF変種は、例えばEP-A-0456200に開示されている。本願発明のG-CSF組成物にて使用される緩衝系は酢酸/酢酸塩緩衝剤またはグルタミン酸/グルタミン酸塩緩衝剤である。本願発明にて使用される組成物は他の緩衝剤を含まないことが好ましい。本願発明にて使用される緩衝剤は、例えば酢酸またはグルタミン酸および/またはその塩で出発し、対応する酸または塩基あるいは塩酸またはアルカリ水酸化物またはアルカリ土類水酸化物などの他の適当な無機または有機酸または無機塩基を用いて所望の値にpHを調節して調製され得る。生理学的に許容される酢酸塩またはグルタミン酸塩は、例えばアルカリ、アルカリ土類またはアンモニウム塩であることが好ましい。アルカリまたはアンモニウム塩、特にモノナトリウム塩が好ましい。好ましくは、該緩衝剤は、酢酸またはグルタミン酸より出発し、そのpH値を適当な無機塩基、例えば水酸化ナトリウムを用いて調節することで調製される。本願発明の方法の工程aにて提供される組成物のpH値は、典型的には、3.5~5.0の範囲に、好ましくは、3.7~4.8の範囲にある。より好ましくは、該pHは3.7~4.6の、例えば4.0~4.6の範囲にある。酢酸またはグルタミン酸塩緩衝剤の濃度は、有利には、所望のpH値でpH安定化作用および十分な緩衝能を達成するように調整されている。通常、酢酸またはグルタミン酸塩緩衝剤は少なくとも0.5mM、好ましくは1~100mM、より好ましくは2~80mMの濃度を有する。2~40mMの、特に2~25mM、例えば5~15mMの範囲の、好ましくは約10mMの緩衝剤濃度は、十分な安定性を提供するであろうし、組成物を注射した際の望ましくない組織反応を回避するのにも十分に低いであろう。本願発明の方法の工程aにて提供される組成物のG-CSF濃度は意図する使用に依存するであろう。その濃度の上限は、G-CSFの緩衝剤中の溶解度に由来する。典型的には、G-CSF濃度は0.1~8mg/ml、好ましくは0.25~6.5mg/mlの範囲にある。分析試料またはさらに希釈されることなく投与される医薬組成物にて、G-CSFは、典型的には、0.1~2.0mg/mlの範囲の、好ましくは2.5mg/mlまでの量にて配合される。さらに濃縮される組成物、例えば、加工処理の中間体として、患者に投与するのに適する薬物を得るのにさらに処理されてもよい、G-CSF含有の組成物にて、G-CSF濃度は、典型的には、2.5mg/ml~8.0mg/ml、好ましくは2.5mg/ml~6.5mg/mlの範囲、より好ましくは5.5mg/mlまでの範囲である。本願発明の方法の工程aにて提供される組成物は、等張化修飾剤としてソルビトールを含む。好ましくは、ソルビトールは、緩衝系を除き、組成物にて使用される等張化修飾剤に過ぎない。ソルビトールは、典型的には、200mg/mlまでの、好ましくは10~100mg/mlの、より好ましくは25~75mg/mlの、例えば約50mg/mlの量にて配合される。本願発明の方法にて使用される組成物は界面活性剤を含んでいても、いなくてもよい。界面活性剤が配合されている場合、該界面活性剤は、典型的には、非イオン性界面活性剤である。好ましくは、該非イオン性界面活性剤は、脂肪族アルコール、エトキシレート、アルキル多糖類、ポリオキシアルキレン、ポリソルベートあるいはそれらの2種またはそれ以上の混合物からなる群より選択される。ポリオキシアルキレンブロックコポリマー、例えばポロキサマー188PluronicF68の商品名で入手可能などのポリオキシアルキレン、およびポリソルベート、すなわち脂肪族の脂肪酸のポリオキシエチレンソルビタンエステルが好ましい。最も好ましくは、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレートTween20の商品名で入手可能、ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミテートTween40、ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレートTween60、ポリオキシエチレンソルビタントリステアレートTween65、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートTween80、およびポリオキシエチレンソルビタントリオレエートTween85などのポリソルベートである。ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレートおよびポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートが最も好ましい。界面活性剤が用いられる場合、該界面活性剤は、5mg/ml以下の、好ましくは1mg/ml以下の量で配合されるのが好ましい。好ましくは、界面活性剤、特にポリソルベートは、0.001~1.0mg/mlの、より好ましくは0.01~0.5mg/mlの量で使用される。本願発明の方法の工程aにて提供される組成物は、アミノ酸、還元剤、酸化防止剤および血清蛋白などのさらなる薬剤を含んでもよいが、該組成物は、典型的には、G-CSF、酢酸またはグルタミン酸水性緩衝剤、ソルビトール、および所望により界面活性剤からなり、かくして他の薬剤は不含である。本願発明の方法の工程aにて提供される組成物は、自体公知の方法にて調製されてもよい。例えば、緩衝物質、すなわち酢酸またはグルタミン酸あるいはその塩、ソルビトール、および任意の、界面活性剤などの他の添加剤が、適量の水性媒体、通常、水中に溶解される。必要ならば、上記した適当な酸または塩基を用いてpH値を調整する。例えば、滅菌フィルターを介して濾過することで滅菌処理を行った後、G-CSFを所望の濃度で添加する。あるいはまた好ましくは、工程aにて使用されるG-CSFは、再度緩衝処理を行って、または行うことなく、生成工程よりバッチとして得られる。本願発明の方法の工程aにて提供されるG-CSF水性組成物は、望ましい容量にて提供されうるが、好ましくは0.1ml~8Lの、好ましくは5ml~4Lの、より好ましくは10ml~2.0Lの、最も好ましくは100ml~1.5Lの範囲の容量を有する。該組成物はポリエチレンPE容器、ガラス瓶、あるいはグリコールを含まないポリエチレンテレフタレートPETまたはグリコールとのポリエチレンテレフタレートPETGでできたボトルなどの適当な容器にて提供される。該組成物の容器への充填は、典型的には、滅菌条件下、好ましくは窒素などの不活性気体を用いて実施される。典型的には、部分的に該組成物だけで、好ましくは多くて90の容量まで該容器を充填し、該容器の上部空間は、不活性気体で満たされていることが好ましい。所望の容量にて提供される本願発明のG-CSFの水性液体組成物は、-15°C以下の温度に凍結するまで冷却される。典型的には、該組成物を-15°Cと-25°Cの間の温度、例えば約-20°Cに冷却するか、または-60°Cと-80°Cの間の温度に冷却する。冷却は、例えば冷凍庫または冷却室で、あるいはG-CSF組成物含有の容器を液体窒素に沈めることによりなされうる。工程bにて得られる凍結したG-CSFを、-15°C以下の所望の温度で凍結状態にて貯蔵する。典型的には、該組成物が冷却されている、すなわち、上記の温度で、好ましくは、標準的な冷却室またはディープフリーザーが規定する温度である、-15と-25°Cの間の、または-60と-80°Cの間の温度で該組成物を貯蔵する。典型的には、凍結されたG-CSF組成物を少なくとも2日間、好ましくは少なくとも1ヶ月、例えば少なくとも3ヶ月または少なくとも6ヶ月にわたって貯蔵する。G-CSF組成物が凍結状態で貯蔵されている期間の間にアミド分解がかなり減少することが判明した実施例4および図1を参照のこと。工程cにて凍結されたG-CSF組成物を貯蔵した後、凍結された組成物の温度を、該組成物が解凍し、工程aにて提供される組成物のG-CSF含量の少なくとも95のG-CSFの含量を有する液体組成物を得ることを可能とするように調整されている期間にわたって2°C~8°Cの範囲内にある温度にまで上げる。温度を2°C~8°Cの範囲内にある温度にまで上げるなる語は、組成物が8°Cよりも高い温度に暴露されないことを意味する。具体的には、本願発明の一の実施態様によれば、凍結された組成物は、徐々にまたは直線的に長時間にわたって昇温させることにより、2°Cと8°Cの間の温度に加温され得る。凍結組成物を解凍し、最初に提供される組成物のG-CSF含量の少なくとも95であるG-CSFの含量を有する液体組成物を得るのに必要な長い時間は、典型的には、少なくとも6時間である。例えば、組成物が-20°Cの温度で凍結状態に維持される場合には、該組成物は6時間にわたって徐々にまたは直線的に1時間に4°C昇温させることで-20°Cから4°Cにまで加温され得る。直線的な温度勾配は、例えば、IntegratedBiosystemsCryoPilot登録商標Systemを用いて行われうる。本願発明の好ましい実施態様によれば、凍結された組成物は直ちに2°Cと8°Cの所望の温度に移され、ついでその温度で長時間にわたって維持され、凍結された組成物を解凍させ、必要とされるG-CSF含量を有する液体組成物を得るであろう。典型的には、凍結された組成物は冷却室またはこの温度範囲に調節されている水浴に移される。この場合、組成物がこの温度で維持される時間は、例えば凍結されたG-CSF組成物の容量および組成物中のG-CSFの濃度に依存する。概して、大容量、例えば、100ml以上で、高濃度のG-CSFの組成物で必要とされる時間は、小容量、例えば100ml以下で、低濃度のG-CSFの組成物に対する時間よりも長い。同様に、冷却室にて必要とされる時間は水浴での時間よりも長い。一般に、所望の高含量のG-CSFを得るのに必要とされる時間は少なくとも12時間であり、典型的には、該時間は12時間ないし72時間の範囲内にある。例えば、100mlよりも小容量の組成物について必要とされる時間は、一般に、12ないし24時間の範囲内にある一方で、100ml以上、例えば0.8Lなどの100mlないし8Lの大容量、および/またはG-CSFの、例えば2.5ないし8mg/mlの高濃度の組成物で必要とされる時間は、典型的には水浴にて18時間以上、例えば24ないし48時間、および冷却室にて36時間以上、例えば36ないし72時間である。さらに大容量では直線的に多くの時間を必要とするかもしれない。得られる液体組成物中のG-CSF含量は、工程aにて提供される組成物のG-CSFの含量の少なくとも95、好ましくは少なくとも97、最も好ましくは少なくとも99である。G-CSF含量なる語は、G-CSFの単量体およびその多量体ならびにアミド分解および酸化された変種などのそれより誘導される関連蛋白を包含することを意味する。G-CSF含量は、例えば、欧州薬局方6.3モノグラフ01/2009:2206;FilgrastimConcentratedSolution、41434144頁、特に4143頁:ImpuritieswithmolecularmasseshigherthanthatoffilgrastimSizeexclusionchromatographyおよびRelatedproteinsLiquidchromatographyに記載されるように、サイズ排除クロマトグラフィーSECまたは逆相HPLCRP-HPLCによって測定され得る。両方の方法ともに同じ結果をもたらすが、典型的にはRP-HPLCが使用される。本願発明の方法を用いた場合、工程dにて得られる組換えG-CSFの生物学的効果は本質的に維持される。具体的には、生物学的効果は、工程aにて提供されるG-CSFの生物学的効果に対して、少なくとも90、好ましくは少なくとも95、より好ましくは少なくとも97、98または99である。生物学的活性は、欧州薬局方6.3モノグラフ01/2009:2206;FilgrastimConcentratedSolution、41424144頁、特に4143頁:ASSAY-Potencyにてフィルグラスチムについて記載されるように測定される。簡単には、工程dにて得られる組成物の生物学的効果は、工程aにて提供される組成物と比較した、基準としての国際単位にて修正される、NFS-360細胞の増殖の刺激能を測定することにより決定される。生存細胞の数を決定するのに、ルシフェラーゼ化学発光システムを用いて細胞内ATPが定量されてもよい。測定される発光シグナルはATPの量に比例し、その量は存在する細胞数に正比例する。相対効果は、適当な統計方法、例えば、欧州薬局方5.3モノグラフによるパラレルラインアッセイを用いて計算され、工程dにて得られた組成物の、工程aの組成物と比べた割合にて表される。工程dに続いて、特に非グリコシル化組換えヒトG-CSFの医薬組成物を提供する方法にて、得られた液体組成物はバイアルまたはシリンジなどの非経口的使用のためのプライマリーパッケージに充填されてもよい。有利には、液体組成物は、充填の前に、注射または注入で患者への投与に適するアリコートに分割されてもよい。G-CSFの濃縮溶液は、充填前に希釈されてもよく、所望により、希釈緩衝剤は界面活性剤および添加剤を含有してもよい。本願発明の方法の工程cおよびdにおける貯蔵および解凍の後に得られるG-CSF製剤は、蛋白の吸着、アミド分解または凝集による、G-CSF蛋白の喪失がないか、またはほんの少量の喪失を示すに過ぎなかった。上記したように、本願発明の方法によって最終的に得られるG-CSF組成物は、G-CSFの最初の含量の、全体として少なくとも95のG-CSF含量を有する。所望により希釈された後のこれらの組成物は種々の適用形態の治療薬として、例えば注射または注入用製剤、特に静脈内、筋肉内または皮下投与用製剤として、使用されてもよい。得られた治療薬は、好中球減少症の処置、骨髄移植、ならびに炎症疾患および腫瘍疾患の処置などの、G-CSFが利用され得る適応症にて使用されてもよい。本願発明を何ら限定することを意図としない、以下の実施例および図1に言及して、該発明をさらに詳細に説明する。実施例方法1.サイズ排除クロマトグラフィーSECSECによる凝集分析を、蛍光検出が使用されることを除いて、欧州薬局方6.3モノグラフ01/2009:2206;FilgrastimConcentratedSolution、4143頁:ImpuritieswithmolecularmasseshigherthanthatoffilgrastimSizeexclusionchromatographyに記載の方法に従って実施した。簡単には、親水性シリカゲルを固定相として30°Cの温度で用いた。リン酸塩緩衝化の炭酸水素アンモニウム溶液を0.5ml/分の流速で移動相として用いて溶出を行った。蛍光検出を345nmで行い、励起を280nmで行った。クロマトグラムを定量し、G-CSFの単量体と、不純物としてのより高分子の凝集体とを区別した。実験結果をピーク面積割合として表す。2.逆相RPHPLC長期貯蔵後の試料中のG-CSF含量および不純物アミド分解および酸化変種が、RP-HPLCを用い、蛍光検出が上記したように純度の測定のために使用されることを除いて、欧州薬局方6.3モノグラフ01/2009:2206;FilgrastimConcentratedSolution、4143頁:RelatedproteinsLiquidchromatographyに記載の方法に従って決定された。蛋白含量が215nmでのUV検出によりG-CSF対照基準に対して決定された。試験結果をピーク面積割合として表す。3.分画電気泳動IEF凍結および解凍後の試料の、フィルグラスチムの特性と異なる変化を有する不純物についての分析が、低濃度の基準溶液および銀染色法を用いてより高感度を達成することを除き、欧州薬局方6.3モノグラフ01/2009:2206;FilgrastimConcentratedSolution、4143頁:ImpuritieswithchangesdifferingfromthatoffilgrastimIsielectricfocusingに記載される方法に従って、IEFにより実施された。実施例1非グリコシル化組換えヒトG-CSFとしてのフィルグラスチムの以下に示される酢酸またはグルタミン酸塩緩衝化の水性組成物を、表1に示されるように調製し、次の実験に使用した:表1各組成物のG-CSF含量mg/mlは、以下のすべての実験にて100値であると規定された。実施例2組成物1および2ポリエチレンPEバッグ中30mlをIntegratedBiosystemsCryoPilot登録商標Systemを用いて種々の条件下で凍結および解凍に供した。G-CSFの凝集体、オリゴマー、二量体および単量体の割合、ならびにG-CSFの全含量を、欧州薬局方6.3モノグラフ01/2009:2206;FilgrastimConcentratedSolution、4143頁:ImpuritieswithmolecularmasseshigherthanthatoffilgrastimSizeexclusionchromatographyに記載されるように、SECを用いて決定した。すべての値を、以下の条件A、BおよびCに従って、凍結前T0および凍結および解凍後に測定した。結果および凍結/解凍F/T条件を以下の表2に示す。F/T条件:T0:凍結前の組成物A:組成物を-20°Cに急冷した。該組成物をこの温度で4時間貯蔵した後、凍結された組成物を20°Cの温度に直ちに移した。組成物を該温度で2時間保持し、ついで4°Cの温度に移し、そこでさらに12時間保持した。20°Cで2時間および4°Cで1時間経過した後には、組成物は完全に解凍した。B:組成物を4°Cから-20°Cに急冷した。この温度で4時間貯蔵した後、CryoPilot登録商標のプログラムされた温度直線勾配を用いて、温度を7時間にわたって4°Cの温度までゆっくりと上昇させた。C:CryoPilot登録商標のプログラムされた温度直線勾配を用い、組成物を17時間にわたって4°Cから-20°Cの温度まで冷却した。その後で、CryoPilot登録商標システムのプログラムされた温度勾配を用いて、温度を7時間にわたって4°Cの温度までゆっくりと上昇させた。結果は、条件Aの下での迅速な解凍がG-CSF含量の有意な喪失をもたらす一方で、条件BおよびCの下での-20°Cから4°Cへの凍結された組成物の温度のゆっくりとした上昇は、最初に提供されたG-CSF組成物のG-CSF含量に匹敵するG-CSF含量を有する液体組成物をもたらしうることを示す。実施例3組成物3および45mlのPETGボトル中にて3.5mlを5回連続したF/Tサイクルに供した。各サイクルにて、試料を4°Cから-20°Cに冷凍庫にて冷却し、-20°Cで20時間貯蔵した後、それを4°Cの温度に調節した冷却室に直ちに移した。試料を該温度で16時間放置して解凍させ、該組成物にてG-CSFの最初の含量を再び得た。G-CSF含量および不純物を、実験の開始の際に、サイクル1、3および5の後で、上記したように、SECフィルグラスチムの多量体およびRP-HPLCG-CSF含量およびアミド分解および酸化G-CSF変種を用いて測定した。結果を以下の表3に示す。表3上記した結果から分かるように、G-CSF含量ならびに不純物の合計は、各サイクルの後で本質的に同じままであり、あらゆる値は実験誤差の範囲内にある。実施例4組成物5および610mlのPETGボトル中にて7mlを冷凍庫にて4°Cから-20°Cに冷却した。凍結された試料を-20°Cで2ヶ月間貯蔵し、ついで4°Cの温度に調節した冷却室に移した。試料を該温度で24時間放置して解凍させ、該組成物にてG-CSFの最初の含量を再び得た。実験の間、組成物5および6の試料を対照として25°Cに保持した。すべての試料を上記したように分画電気泳動IEFを用い、フィルグラスチムの特性と異なる変化を有する不純物について分析した。結果を図1に示し、そこで主たるバンド、すなわち最大強度のバンドはフィルグラスチムを表し、主要バンドより下方に移動する強度の低いバンドは主にそのアミド分解変種を表す。図1から分かるように、-20で貯蔵された試料レーン1および2は、25°Cで貯蔵された試料レーン3および4よりもフィルグラスチムのアミド分解変種がかなり少ないことを示す。さらには、-20°Cで貯蔵した試料のG-CSFの全含量および不純物を、凍結の前にT0および2ヶ月間貯蔵し、解凍した後にT1/-20°C、RP-HPLCG-CSF含量およびアミド分解および酸化G-CSF変種およびSECG-CSFの多量体を用いて測定した。結果を25°Cで貯蔵した対照となる試料T1/25°Cについての結果と一緒に以下の表4に示す。表4上記した結果から分かるように、G-CSF含量は、凍結の前後で本質的に同じままであり、あらゆる値は実験誤差の範囲内にある。RP-HPLCによって測定されるようなアミド分解および酸化の変種の増加は、図1に示されるIEFを用いて得られる結果に適合している。実施例5組成物5、7および81000mlのPETGボトル中にて800mlを-20°Cで36ヶ月間貯蔵した。貯蔵の後で、該組成物を4°Cの温度に調節した冷却室に移し、該温度で解凍のために48時間放置した。こうして得られた液体組成物を5回連続したF/Tサイクルに供した。各サイクルにて、試料を4°Cから-20°Cに冷凍庫にて冷却し、-20°Cで少なくとも24時間貯蔵した後、それを4°Cの温度に調節した冷却室に直ちに移した。試料を該温度で少なくとも48時間放置して解凍させ、該組成物にてG-CSFの最初の含量を再び得た。G-CSF含量および不純物を、実験の開始の際にF/T0、サイクル5の完了後F/T5で、上記したように、RP-HPLCG-CSF含量およびアミド分解および酸化G-CSF変種およびSECG-CSFの多量体を用いて測定した。結果を以下の表5に示す。表5上記した結果から分かるように、G-CSF含量ならびに不純物の合計は、凍結の前およびサイクル5の完了後で本質的に同じままであり、あらゆる値は実験誤差の範囲内にある。