"本明細書に記載の抗体薬物結合体化合物。要旨本発明は、癌細胞に対する生物学的活性を有する新規化合物を提供する。その化合物は、哺乳動物において腫瘍増殖を阻害し得、そしてヒト癌患者を処置するのに有用であり得る。本発明は、細胞内で治療的抗体-薬物結合体ADC化合物の送達、輸送、蓄積または保持に関する。本発明は、より詳細には、癌細胞において活性な代謝産物分子の高い濃度を達成することに関する。細胞内ターゲッティングは、細胞内で生物学的に活性な因子の蓄積または保持を可能にする方法および化合物によって達成され得る。そのような有効なターゲッティングは、種々の治療的処方物および手順に利用可能であり得る。メイタンシノイド薬物部分を抗体に結合させる安定な非ジスルフィドリンカー基を有する抗体-薬物結合体がインビトロ効力potencyおよびインビボ効能efficacyの増加を生じるという驚くべき発見がなされた。さらに、その抗体-薬物結合体は、特定のジスルフィドリンカー結合体に対してインビボでより安全である予期せぬ結果を示す。抗体-薬物結合体ADC化合物は、1以上のメイタンシノイド薬物部分にリンカーによって共有結合される抗体を含む。ADCは、式I:によって表され得、ここで、1以上のメイタンシノイド薬物部分Dは、Lによって抗体Abに共有結合される。Abは、ErbBレセプターに結合するかあるいは1以上の腫瘍関連抗原または細胞表面レセプターに結合する抗体である。リンカーLは、細胞の外側すなわち、細胞外で安定であり得る。リンカーLも、メイタンシノイド薬物部分Dも、一緒になったリンカーとメイタンシノイド薬物部分L-Dも、ジスルフィド基を含まない。一実施形態において、上記薬物部分の相当量は、上記抗体-薬物結合体がその抗体-薬物結合体の抗体に特異的な細胞表面レセプターを有する細胞に入るまで、抗体から切断されず、その薬物部分は、抗体-薬物結合体が細胞に入るときに抗体から切断される。別の実施形態において、上記ADCは、ErbB遺伝子によってコードされるレセプター例えば、EGFR、HER2、HER3およびHER4に特異的に結合する。ADCは、HER2レセプターの細胞外ドメインに特異的に結合し得る。ADCは、HER2レセプターを過剰発現する腫瘍細胞の増殖を阻害し得る。別の実施形態において、上記式Iの抗体Abは、ヒト化抗体例えば、huMAb4D5-1、huMAb4D5-2、huMAb4D5-3、huMAb4D5-4、huMAb4D5-5、huMAb4D5-6、huMAb4D5-7またはhuMAb4D5-8トラスツズマブである。本発明の別の局面は、式Iの化合物あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物と、薬学的に受容可能な希釈剤、キャリアまたは賦形剤を含む薬学的組成物である。別の局面は、式Iの化合物と抗癌特性または他の治療効果を有する第二化合物とを含む薬学的組み合わせを提供する。別の局面は、本明細書に開示される化合物および組成物についての診断的用途および治療的用途を包含する。別の局面は、腫瘍細胞もしくは癌細胞を殺傷するかまたは腫瘍細胞もしくは癌細胞の増殖を阻害するための方法であって、この方法は、その細胞を、腫瘍細胞もしくは癌細胞を殺傷するかまたは腫瘍細胞もしくは癌細胞の増殖を阻害するのに有効である一定量の抗体-薬物結合体あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物で処理する工程を包含する。別の局面は、式Iの化合物の処方物を患者に投与する工程を包含する、癌を処置する方法である。1つの方法は、哺乳動物における癌を処置するためであり、ここで、その癌は、ErbBレセプターの過剰発現によって特徴付けられる。その哺乳動物は、必要に応じて、非結合型抗ErbB抗体での処置に対して応答しないか、またはほとんど応答しない。この方法は、治療有効量の抗体-薬物結合体化合物をその哺乳動物に投与する工程を包含する。別の局面は、HER2レセプターおよびEGFレセプターからなる群より選択される成長因子レセプターを過剰発現する腫瘍細胞の成長を阻害する方法であり、この方法は、上記成長因子レセプターに特異的に結合する抗体-薬物結合体化合物と化学療法剤とを患者に投与する工程を包含し、この抗体-薬物結合体化合物およびこの化学療法剤は各々、その患者における腫瘍細胞の成長を阻害するために有効な量で投与される。別の局面は、ErbB2レセプターの過剰発現によって特徴付けられる障害の影響を受けやすいかまたはErbB2レセプターの過剰発現によって特徴付けられる障害と診断されたヒト患者の処置のための方法であって、この方法は、式Iの抗体-薬物結合体化合物と化学療法剤との組み合わせを投与する工程を包含する。別の局面は、癌細胞を検出するためのアッセイ方法であって、該方法は、細胞を抗体-薬物結合体化合物に曝露する工程、およびその細胞に対する抗体-薬物結合体化合物の結合の程度を決定する工程を包含する。別の局面は、疾患または障害の処置のためにADC薬物候補物をスクリーニングするための方法に関し、ここで、その疾患または障害は、HER2の過剰発現によって特徴付けられる。別の局面は、製造物品すなわち、キットを包含し、この製造物品は、抗体-薬物結合体、容器、および処置を示すパッケージ挿入物またはラベルを備える。別の局面は、患者においてHER2の過剰発現によって特徴付けられる疾患または障害を、上記抗体-薬物結合体化合物を用いて処置する方法を包含する。別の局面は、上記抗体-薬物結合体化合物ならびにその抗体-薬物結合体化合物の調製、合成および結合のための中間体を作製する方法、それらを調製する方法、それらを合成する方法、それらを結合する方法、ならびにそれらを精製する方法を包含する。例えば、本発明は、以下の項目を提供する:項目1リンカーによって1以上のメイタンシノイド薬物部分に共有結合される抗体を含む抗体-薬物結合体化合物あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物であって、該化合物は、式I:を有し、ここで、Abは、ErbBレセプターに結合するか、あるいは以下:1BMPR1B骨形成タンパク質レセプターIB型、Genbankアクセッション番号NM_001203;2E16LAT1、SLC7A5、Genbankアクセッション番号NM_003486;3STEAP1前立腺の6回膜貫通上皮抗原、Genbankアクセッション番号NM_012449;40772PCA125、MUC16、Genbankアクセッション番号AF361486;5MPFMPF、MSLN、SMR、巨核球増強因子、メソテリン、Genbankアクセッション番号NM_005823;6Napi3bNAPI-3B、NPTIIb、SLC34A2、溶質キャリアファミリー34リン酸ナトリウム、メンバー2、II型ナトリウム依存型リン酸輸送体3b、Genbankアクセッション番号NM_006424;7Sema5bFLJ10372、KIAA1445、Mm.42015、SEMA5B、SEMAG、セマホリン5bHlog、semaドメイン、トロンボスポンジン7回繰り返し1型および1型様、膜貫通ドメインTMおよび短い細胞質ドメイン、セマホリン5B、Genbankアクセッション番号AB040878;8PSCAhlg2700050C12Rik、C530008O16Rik、RIKENcDNA2700050C12、RIKENcDNA2700050C12遺伝子、Genbankアクセッション番号AY358628;9ETBRエンドセリンB型レセプター、Genbankアクセッション番号AY275463;10MSG783RNF124、仮想タンパク質FLJ20315、Genbankアクセッション番号NM_017763;11STEAP2HGNC_8639、IPCA-1、PCANAP1、STAMP1、STEAP2、STMP、前立腺癌関連遺伝子1、前立腺癌関連タンパク質1、前立腺の6回膜貫通上皮抗原2、6回膜貫通前立腺タンパク質、Genbankアクセッション番号AF455138;12TrpM4BR22450、FLJ20041、TRPM4、TRPM4B、一過性レセプター潜在的カチオンチャネル、サブファミリーM、メンバー4、Genbankアクセッション番号NM_017636;13CRIPTOCR、CR1、CRGF、CRIPTO、TDGF1、奇形癌由来成長因子、Genbankアクセッション番号NP_003203またはNM_003212;14CD21CR2補体レセプター2またはC3DRC3d/エプスタインバーウイルスレセプターまたはHs.73792Genbankアクセッション番号M26004;15CD79bCD79B、CD79β、IGb免疫グロブリン関連β、B29、Genbankアクセッション番号NM_000626;16FcRH2IFGP4、IRTA4、SPAP1ASH2ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質1a、SPAP1B、SPAP1C、Genbankアクセッション番号NM_030764;17HER2Genbankアクセッション番号M11730;18NCAGenbankアクセッション番号M18728;19MDPGenbankアクセッション番号BC017023;20IL20RαGenbankアクセッション番号AF184971;21BrevicanGenbankアクセッション番号AF229053;22EphB2RGenbankアクセッション番号NM_004442;23ASLG659Genbankアクセッション番号AX092328;24PSCAGenbankアクセッション番号AJ297436;25GEDAGenbankアクセッション番号AY260763;26BAFF-RB細胞活性化因子レセプター、BLySレセプター3、BR3、NP_443177.1;27CD22B細胞レセプターCD22-Bアイソフォーム、NP-001762.1;28CD79aCD79A、CD79α;免疫グロブリン関連α;Igβと共有性相互作用しCD79B、IgM分子と表面で複合体を形成し、B細胞分化に関与するシグナルを変換する、B細胞特異的タンパク質;Genbankアクセッション番号NP_001774.1;29CXCR5バーキットリンパ腫レセプター1;CXCL13ケモカインによって活性化され、リンパ球移動および体液性防御において機能し、HIV-2感染においてそしておそらくAIDS、リンパ腫、黒色腫および白血病の発症において役割を果たすGタンパク共役レセプター;Genbankアクセッション番号NP_001707.1;30HLA-DOBペプチドに結合しCD4Tリンパ球にそのペプチドを提示するMHCクラスII分子Ia抗原のβサブユニット、Genbankアクセッション番号NP_002111.1;31P2X5プリン作動性レセプターP2Xリガンドゲート制御イオンチャネル5;細胞外ATPによってゲートされ、シナプス伝達および神経発生に関与し得るイオンチャネル;欠乏症が特発性不安定膀胱の病態生理に寄与し得る;Genbankアクセッション番号NP_002552.2;32CD72B細胞分化抗原CD72、Lyb-2、Genbankアクセッション番号NP_001773.1;33LY64リンパ球抗原64RP105、ロイシンリッチリピートLRRファミリーのI型膜タンパク質、B細胞活性化およびアポトーシスを調節する、機能の欠損が全身性エリテマトーデスを有する患者の疾患活性の増加に関与する、Genbankアクセッション番号NP_005573.1;34FcRH1Fcレセプター様タンパク質1;C2型Ig様ドメインおよびITAMドメインを含み、Bリンパ球分化において役割を果たし得る免疫グロブリンFcドメインに対する推定レセプター;Genbankアクセッション番号NP_443170.1;35IRTA2免疫グロブリンスーパーファミリーレセプター転座関連2、B細胞発生およびリンパ腫形成において役割を果たし得る推定免疫レセプター;転座によるこの遺伝子の脱調節がいくつかのB細胞性悪性腫瘍において生じる、Genbankアクセッション番号NP_112571.1;ならびに36TENB2推定膜貫通プロテオグリカン、EGF/ヘレグリンファミリーの成長因子およびホリスタチンに関連する、Genbankアクセッション番号AF179274から選択される1以上の腫瘍関連抗原または細胞表面レセプターに結合する抗体であり;ただし、該抗体はTA.1ではなく;Lは、非ジスルフィドリンカーであり;Dは、メイタンシノイド薬物部分であり;そしてpは、1~8である、抗体-薬物結合体化合物。項目2Abが、1~16および18~36から選択される1以上の腫瘍関連抗原または細胞表面レセプターに結合する、項目1に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目3Lが、から選択されるリンカーであり、ここで、波線は、AbおよびDに対する共有結合を示し;Xは、であり;Yは、であり;Rは、独立して、HまたはC1~C6アルキルであり;そしてnは、1~12である、項目1に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目4Dが、から選択され、ここで、波線は、Lに対する共有結合を示し、Rは、独立して、HまたはC1~C6アルキルであり、そしてmは、1、2または3である、項目1~3のいずれかに記載の抗体-薬物結合体化合物。項目5mが2であり、そしてRがHである、項目4に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目6上記メイタンシノイド薬物部分が、構造:を有するDM1である、項目1~5のいずれかに記載の抗体-薬物結合体化合物。項目7構造:を有する、項目3に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目8構造:を有する、項目7に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目9構造:を有する、項目3に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目10構造:を有する、項目1に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目11Abがトラスツズマブであり、そしてpが1、2、3または4である、項目10に記載の抗体-薬物結合体。項目12構造:を有する項目1に記載の抗体-薬物結合体化合物であって、ここで、Trは、トラスツズマブであり、そしてpは、1、2、3または4である、抗体-薬物結合体化合物。項目13構造:を有する項目1に記載の抗体-薬物結合体化合物であって、ここで、nは、0、1または2であり;そしてpは、1、2、3または4である、抗体-薬物結合体化合物。項目14Abがトラスツズマブである、項目13に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目15pが1、2、3または4である、項目1に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目16上記抗体が、ErbB遺伝子によってコードされるレセプターに結合する、項目1に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目17上記レセプターが、EGFR、HER2、HER3およびHER4から選択される、項目16に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目18上記抗体が、HER2レセプターに特異的に結合する、項目17に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目19HER2レセプターの細胞外ドメインに特異的に結合し、HER2レセプターを過剰発現する腫瘍細胞の成長を阻害する、項目1に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目20上記抗体が、モノクローナル抗体、抗体フラグメント、キメラ抗体およびヒト化抗体から選択される抗体である、項目1~19のいずれかに記載の抗体-薬物結合体化合物。項目21上記抗体が、huMAb4D5-1、huMAb4D5-2、huMAb4D5-3、huMAb4D5-4、huMAb4D5-5、huMAb4D5-6、huMAb4D5-7およびhuMAb4D5-8トラスツズマブから選択されるヒト化抗体である、項目1に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目22上記抗体がhuMAb4D5-8トラスツズマブである、項目21に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目23上記抗体がFabフラグメントである、項目20に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目24上記抗体が、該抗体のシステインチオールを介して上記リンカーと結合する、項目1に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目25pが1、2、3または4である、項目24に記載の抗体-薬物結合体化合物。項目26項目1または項目2に記載の抗体-薬物結合体化合物またはその薬学的に受容可能な塩と、薬学的に受容可能な希釈剤、キャリアまたは賦形剤とを含む、薬学的組成物。項目27エルロチニブ、ボルテゾミブ、フルベストラント、スーテント、レトロゾール、メシル酸イマチニブ、PTK787/ZK222584、オキサリプラチン、5-FU、ロイコボリン、ラパマイシン、ラパチニブ、ロナファーニブ、ソラフェニブおよびゲフィチニブから選択される化学療法剤の治療有効量をさらに含む、項目26に記載の薬学的組成物。項目28抗脈管形成因子の治療有効量をさらに含む、項目26に記載の薬学的組成物。項目29ベバシツマブの治療有効量をさらに含む、項目26に記載の薬学的組成物。項目30細胞培養培地中の哺乳動物細胞を項目1または項目2に記載の抗体-薬物結合体化合物で処理する工程を包含する、細胞増殖を阻害する方法であって、それによって、該細胞が阻害される、方法。項目31上記哺乳動物細胞が、上記抗体-薬物結合体化合物に対してHER2レセプタータンパク質を有する、項目30に記載の方法。項目32上記哺乳動物細胞が乳房腫瘍細胞である、項目31に記載の方法。項目33上記抗体-薬物結合体化合物が、該抗体-薬物結合体化合物のメイタンシノイド部分を含むメイタンシノイド化合物よりも細胞毒性である、項目30に記載の方法。項目34上記抗体-薬物結合体化合物がアポトーシスを誘導する、項目30に記載の方法。項目35項目1または項目2に記載の抗体-薬物結合体化合物と、薬学的に受容可能な希釈剤、キャリアまたは賦形剤との処方物を患者に投与する工程を包含する、癌を処置する方法。項目36上記癌が、乳癌、卵巣癌、胃癌、子宮内膜癌、唾液腺癌、肺癌、腎臓癌、結腸癌、結腸直腸癌、甲状腺癌、膵臓癌、前立腺癌および膀胱癌からなる群より選択される、項目35に記載の方法。項目37上記癌が、レベル2以上でErbB2を過剰発現する乳癌である、項目36に記載の方法。項目38上記患者に投与される抗体-薬物結合体化合物の量が、1用量あたり患者の体重1kgあたり約0.1mg~約10mgの範囲である、項目35に記載の方法。項目39上記抗体-薬物結合体が、約3週間間隔で投与される、項目35に記載の方法。項目40上記抗体-薬物結合体が注入によって投与される、項目35に記載の方法。項目41上記抗体-薬物結合体が、薬学的に受容可能な非経口ビヒクルとともに処方される、項目35に記載の方法。項目42上記抗体-薬物結合体が、単位投与注射可能形態で処方される、項目41に記載の方法。項目43上記抗体-薬物結合体が静脈内投与される、項目42に記載の方法。項目44上記患者が、上記抗体-薬物結合体化合物との併用で、成長阻害性抗体を投与される、項目35に記載の方法。項目45上記患者が、上記抗体-薬物結合体化合物との併用で、ErbB2に結合しErbBレセプターのリガンド活性化をブロックする二次抗体を投与される、項目35に記載の方法。項目46上記二次抗体が、モノクローナル抗体2C4またはヒト化2C4を含む、項目45に記載の方法。項目47上記二次抗体が、細胞毒性因子と結合される、項目46に記載の方法。項目48上記患者が、上記抗体-薬物結合体化合物との併用で、化学療法剤を投与され、ここで、該化学療法剤が、エルロチニブ、ボルテゾミブ、フルベストラント、スーテント、レトロゾール、メシル酸イマチニブ、PTK787/ZK222584、オキサリプラチン、5-FU、ロイコボリン、ラパマイシン、ラパチニブ、ロナファーニブ、ソラフェニブおよびゲフィチニブから選択される、項目35に記載の方法。項目49上記患者が、上記抗体-薬物結合体化合物との併用で、抗脈管形成因子を投与され、ここで、該脈管形成因子が、ベバシツマブから選択される、項目35に記載の方法。項目50成長因子レセプターを過剰発現する腫瘍細胞の成長を阻害する方法であって、該方法は、HER2またはEGFから選択される成長因子レセプターに特異的に結合する項目1に記載の抗体-薬物結合体と、化学療法剤とを患者に投与する工程を包含し、ここで、該抗体-薬物結合体および化学療法剤は各々、患者における腫瘍細胞の成長を阻害するために有効な量で投与される、方法。項目51ErbB2レセプターの過剰発現によって特徴付けられる障害の影響を受けやすいかまたはErbB2レセプターの過剰発現によって特徴付けられる障害と診断されたヒト患者の処置のための方法であって、該方法は、項目1に記載の抗体-薬物結合体と化学療法剤または成長阻害性因子との組み合わせを投与する工程を包含する、方法。項目52上記抗体-薬物結合体の抗体が、抗ErbB2抗体である、項目51に記載の方法。項目53上記抗ErbB2抗体が、4D5モノクローナル抗体の生物学的特徴を有する、項目52に記載の方法。項目54上記抗ErbB2抗体が、4D5モノクローナル抗体と本質的に同じエピトープに結合する、項目52に記載の方法。項目55上記抗ErbB2抗体が、huMAb4D5-1、huMAb4D5-2、huMAb4D5-3、huMAb4D5-4、huMAb4D5-5、huMAb4D5-6、huMAb4D5-7およびhuMAb4D5-8トラスツズマブからなる群より選択される、項目52に記載の方法。項目56癌細胞を検出するためのアッセイであって、該アッセイは、a細胞を項目1または項目2に記載の抗体-薬物結合体化合物に曝露する工程;およびb該細胞に対する該抗体-薬物結合体化合物の結合の程度を決定する工程を包含する、アッセイ。項目57上記細胞が乳房腫瘍細胞である、項目56に記載のアッセイ。項目58上記結合の程度が、蛍光インサイチュハイブリダイゼーションFISHによってErbBをコードする核酸のレベルを測定することによって決定される、項目56に記載のアッセイ。項目59上記結合の程度が免疫組織化学によって決定される、項目56に記載のアッセイ。項目60以下:項目1または項目2に記載の抗体-薬物結合体化合物;容器;および該化合物がErbBレセプターの過剰発現によって特徴付けられる癌を処置するために使用され得ることを示すパッケージ挿入物またはラベルを備える、製造物品。項目61上記パッケージ挿入物またはラベルが、上記化合物がErbB2レセプターの過剰発現によって特徴付けられる癌を処置するために使用され得ることを示す、項目60に記載の製造物品。項目62上記癌が乳癌である、項目61に記載の製造物品。項目63上記癌が、レベル2以上でのErbB2レセプターの過剰発現によって特徴付けられる、項目62に記載の製造物品。項目641以上のメイタンシノイドにリンカーによって共有結合される抗体を含む抗体-薬物結合体化合物あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物を作製する方法であって、該化合物は、式I:を有し、ここで、Abは、ErbBレセプターに結合するか、あるいは以下:1BMPR1B骨形成タンパク質レセプターIB型、Genbankアクセッション番号NM_001203;2E16LAT1、SLC7A5、Genbankアクセッション番号NM_003486;3STEAP1前立腺の6回膜貫通上皮抗原、Genbankアクセッション番号NM_012449;40772PCA125、MUC16、Genbankアクセッション番号AF361486;5MPFMPF、MSLN、SMR、巨核球増強因子、メソテリン、Genbankアクセッション番号NM_005823;6Napi3bNAPI-3B、NPTIIb、SLC34A2、溶質キャリアファミリー34リン酸ナトリウム、メンバー2、II型ナトリウム依存型リン酸輸送体3b、Genbankアクセッション番号NM_006424;7Sema5bFLJ10372、KIAA1445、Mm.42015、SEMA5B、SEMAG、セマホリン5bHlog、semaドメイン、トロンボスポンジン7回繰り返し1型および1型様、膜貫通ドメインTMおよび短い細胞質ドメイン、セマホリン5B、Genbankアクセッション番号AB040878;8PSCAhlg2700050C12Rik、C530008O16Rik、RIKENcDNA2700050C12、RIKENcDNA2700050C12遺伝子、Genbankアクセッション番号AY358628;9ETBRエンドセリンB型レセプター、Genbankアクセッション番号AY275463;10MSG783RNF124、仮想タンパク質FLJ20315、Genbankアクセッション番号NM_017763;11STEAP2HGNC_8639、IPCA-1、PCANAP1、STAMP1、STEAP2、STMP、前立腺癌関連遺伝子1、前立腺癌関連タンパク質1、前立腺の6回膜貫通上皮抗原2、6回膜貫通前立腺タンパク質、Genbankアクセッション番号AF455138;12TrpM4BR22450、FLJ20041、TRPM4、TRPM4B、一過性レセプター潜在的カチオンチャネル、サブファミリーM、メンバー4、Genbankアクセッション番号NM_017636;13CRIPTOCR、CR1、CRGF、CRIPTO、TDGF1、奇形癌由来成長因子、Genbankアクセッション番号NP_003203またはNM_003212;14CD21CR2補体レセプター2またはC3DRC3d/エプスタインバーウイルスレセプターまたはHs.73792Genbankアクセッション番号M26004;15CD79bCD79B、CD79β、IGb免疫グロブリン関連β、B29、Genbankアクセッション番号NM_000626;16FcRH2IFGP4、IRTA4、SPAP1ASH2ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質1a、SPAP1B、SPAP1C、Genbankアクセッション番号NM_030764;17HER2Genbankアクセッション番号M11730;18NCAGenbankアクセッション番号M18728;19MDPGenbankアクセッション番号BC017023;20IL20RαGenbankアクセッション番号AF184971;21BrevicanGenbankアクセッション番号AF229053;22EphB2RGenbankアクセッション番号NM_004442;23ASLG659Genbankアクセッション番号AX092328;24PSCAGenbankアクセッション番号AJ297436;25GEDAGenbankアクセッション番号AY260763;26BAFF-RB細胞活性化因子レセプター、BLySレセプター3、BR3、NP_443177.1;27CD22B細胞レセプターCD22-Bアイソフォーム、NP-001762.1;28CD79aCD79A、CD79α;免疫グロブリン関連α;Igβと共有性相互作用しCD79B、IgM分子と表面で複合体を形成し、B細胞分化に関与するシグナルを変換する、B細胞特異的タンパク質;Genbankアクセッション番号NP_001774.1;29CXCR5バーキットリンパ腫レセプター1;CXCL13ケモカインによって活性化され、リンパ球移動および体液性防御において機能し、HIV-2感染においてそしておそらくAIDS、リンパ腫、黒色腫および白血病の発症において役割を果たすGタンパク共役レセプター;Genbankアクセッション番号NP_001707.1;30HLA-DOBペプチドに結合しCD4Tリンパ球にそのペプチドを提示するMHCクラスII分子Ia抗原のβサブユニット、Genbankアクセッション番号NP_002111.1;31P2X5プリン作動性レセプターP2Xリガンドゲート制御イオンチャネル5;細胞外ATPによってゲートされ、シナプス伝達および神経発生に関与し得るイオンチャネル;欠乏症が特発性不安定膀胱の病態生理に寄与し得る;Genbankアクセッション番号NP_002552.2;32CD72B細胞分化抗原CD72、Lyb-2、Genbankアクセッション番号NP_001773.1;33LY64リンパ球抗原64RP105、ロイシンリッチリピートLRRファミリーのI型膜タンパク質、B細胞活性化およびアポトーシスを調節する、機能の欠損が全身性エリテマトーデスを有する患者の疾患活性の増加に関与する、Genbankアクセッション番号NP_005573.1;34FcRH1Fcレセプター様タンパク質1;C2型Ig様ドメインおよびITAMドメインを含み、Bリンパ球分化において役割を果たし得る免疫グロブリンFcドメインに対する推定レセプター;Genbankアクセッション番号NP_443170.1;35IRTA2免疫グロブリンスーパーファミリーレセプター転座関連2、B細胞発生およびリンパ腫形成において役割を果たし得る推定免疫レセプター;転座によるこの遺伝子の脱調節がいくつかのB細胞性悪性腫瘍において生じる、Genbankアクセッション番号NP_112571.1;ならびに36TENB2推定膜貫通プロテオグリカン、EGF/ヘレグリンファミリーの成長因子およびホリスタチンに関連する、Genbankアクセッション番号AF179274から選択される1以上の腫瘍関連抗原または細胞表面レセプターに結合する抗体であり;ただし、該抗体は、TA.1ではなく;Lは、構造:から選択されるリンカーであり、ここで、波線は、AbおよびDに対する共有結合を示し;Xは、であり、Yは、であり、ここで、Rは、独立して、HまたC1~C6アルキルであり;そしてnは、1~12であり;Dは、構造:から選択されるメイタンシノイド薬物部分であり、ここで、波線は、Lに対する共有結合を示し;Rは、独立して、HまたはC1~C6アルキルであり;mは、1、2または3であり;そしてpは、1~8であり;ここで、該方法は、Abとリンカー試薬とを反応させ、抗体-リンカー中間体Ab-Lを形成させ、次いで、Ab-Lと薬物部分Dとを反応させ、該抗体-薬物結合体を形成させる工程;または薬物部分Dとリンカー試薬とを反応させ、薬物-リンカー中間体D-Lを形成させ、次いで、D-LとAbとを反応させ、該抗体-薬物結合体を形成させる工程を包含する、方法。項目65Abが1~16および18~36から選択される1以上の腫瘍関連抗原または細胞表面レセプターに結合する、項目64に記載の方法。項目66上記リンカー試薬がSMCCである、項目64または項目65に記載の方法。項目67上記リンカー試薬が、DTME、BMB、BMDB、BMH、BMOE、BMPEO3およびBMPEO4から選択されるビスマレイミド試薬である、項目64または項目65に記載の方法。例示的実施形態の詳細な説明本発明の特定の実施形態に関する言及が、ここで詳細になされる。その実施形態の例は、添付の構造および式において示される。本発明は、多数の実施形態と組み合わせて記載されるが、本発明をそれらの実施形態に限定することは意図されないことが、理解される。対照的に、本発明は、すべての代替形、改変形、等価物を網羅することが意図され、これらは、特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲内に包含され得る。当業者は、本明細書虫に記載される方法および物質と類似するかもしくは等価である多くの方法および物質を認識する。本発明は、記載される方法および物質に決して限定はされない。そうではないと規定されない限り、本明細書において使用される技術用語および科学用語は、本発明が属する分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有し、それらは、Singletonら1994DictionaryofMicrobiologyandMolecularBiology,2ndEd.,J.WileySons,NewYork,NY;およびJaneway,C.,Travers,P.,Walport,M.,Shlomchik2001ImmunoBiology,5thEd.,GarlandPublishing,NewYork.と一致する。定義そうではないと記載されない限り、以下の用語および句は、本明細書中で使用される場合、以下の意味を有することが意図される:商標名が本明細書において使用される場合、本出願人は、その商標名の製品処方物、遺伝子薬物、およびその商標名の製品の活性薬剤成分を独立して包含することを意図する。用語抗体とは、本明細書において、その最も広い意味で使用され、具体的には、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、ダイマー、マルチマー、多重特異性抗体例えば、二重特異性抗体、および抗体フラグメントを、それらが望ましい生物学的活性を示す限り、網羅するMillerら2003Jour.ofImmunology170:4854-4861。抗体は、マウス抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、または他の種由来であり得る。抗体は、特定の抗原を認識および結合することが可能な、免疫系によって生成されるタンパク質であるJaneway,C.,Travers,P.,Walport,M.,Shlomchik2001ImmunoBiology,5thEd.,GarlandPublishing,NewYork。標的抗原は、一般的には、複数の抗体上にあるCDRによって認識される多数の結合部位エピトープとも呼ばれるを有する。異なるエピトープ特異的に結合する抗体は、異なる構造を有する。従って、ある1つの抗原は、1つよりも多くの対応する抗体を有し得る。抗体は、全長免疫グロブリン分子、または全長免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な部分すなわち、対象とする抗原もしくはその部分に免疫特異的に結合する抗原結合部位を含む分子を包含する。そのような標的としては、癌細胞、または自己免疫疾患に関連する自己免疫抗体を生成する細胞が挙げられるが、これらに限定はされない。本明細書において開示される免疫グロブリンは、任意の型例えば、IgG、IgE、IgM、IgD、およびIgA、クラス例えば、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1、およびIgA2またはサブクラスの免疫グロブリン分子であり得る。上記免疫グロブリンは、任意の種に由来し得る。しかし、一局面において、上記免疫グロブリンは、ヒト起源、マウス起源、またはウサギ起源である。抗体フラグメントとは、全長抗体の部分一般的には、その抗原結合領域もしくは可変領域を包含する。抗体フラグメントの例としては、Fabフラグメント;Fab’フラグメント;Fab’2フラグメント;およびFvフラグメント;ダイアボディdiabody;直鎖状抗体;Fab発現ライブラリーによって生成されるフラグメント;抗イディオタイプ抗Id抗体;CDR相補性決定領域;および癌細胞抗原、ウイルス抗原、もしくは微生物抗原に免疫特異的に結合する上記のうちのいずれかのエピトープ結合フラグメント;単鎖抗体分子、および複数の抗体フラグメントから形成された多重特異性抗体が挙げられる。用語モノクローナル抗体とは、本明細書中で使用される場合、実質的に均一な抗体の集団すなわち、その集団を構成する個々の抗体は、微量で存在し得るあり得る天然に存在する変異以外は同じであるを指す。モノクローナル抗体は、非常に特異的であり、1つの抗原性エピトープに対する。さらに、種々の決定基エピトープに対する種々の抗体を包含するポリクローナル抗体とは対照的に、各モノクローナル抗体は、1つの抗原上の1つの抗原決定基に対する。その特異性に加えて、上記モノクローナル抗体は、他の抗体が混入していない状態で合成され得るという点で、有利である。修飾語モノクローナルとは、実質的な均一な抗体集団から得られている抗体の特徴を示し、これは、特定の何らかの方法によるその抗体の生成を必要とするとは解釈されるべきではない。例えば、本発明に従って使用されるべきモノクローナル抗体は、Kohlerら1975Nature256:495によって最初に記載されたハイブリドーマ方法によって生成され得るか、または組換えDNA方法例えば、米国特許第4,816,567号を参照のことによって生成され得る。上記モノクローナル抗体はまた、例えば、Clacksonら1991Nature352:624-628およびMarksら1991J.Mol.Biol.222:581-597に記載された技術を使用して、ファージ抗体ライブラリーから単離され得る。本明細書におけるモノクローナル抗体は、具体的には、重鎖および/または軽鎖の部分が、特定の種に由来する抗体または特定の抗体クラスもしくは抗体サブクラスに属する抗体中の対応配列と同一であるかまたはそれに相同であるが、その鎖の残りは、別の種に由来する抗体または別の抗体クラスもしくは抗体サブクラスに属する抗体中の対応配列と同一であるかまたはそれに相同である、キメラ抗体;ならびにそのような抗体のフラグメント;を、それらが望ましい生物学的活性を示す限りは、包含する。米国特許第4,816,567号;およびMorrisonら1984Proc.Natl.Acad.Sci.USA81:6851-6855。本明細書における対象となるキメラ抗体は、非ヒト霊長類例えば、旧世界サルもしくは類人猿に由来する可変ドメイン抗原結合配列と、ヒト定常領域配列とを含む、霊長類化primatized抗体を包含する。インタクトな抗体とは、本明細書において、VLドメインおよびVHドメイン、ならびに軽鎖定常ドメインCLおよび重鎖定常ドメイン、CH1、CH2、およびCH3を含む、抗体である。上記定常ドメインは、ネイティブ配列定常ドメイン例えば、ヒトネイティブ配列定常ドメインであっても、そのアミノ酸配列改変体であってもよい。上記インタクトな抗体は、1つ以上のエフェクター機能を有し得る。このエフェクター機能とは、抗体のFc領域ネイティブ配列Fc領域またはアミノ酸配列改変体Fc領域に起因し得る生物学的活性を指す。抗体エフェクター機能の例としては、C1q結合;補体依存性細胞傷害;Fcレセプター結合;抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCC;ファゴサイトーシス;および細胞表面レセプター例えば、B細胞レセプターおよびBCRのダウンレギュラーションが挙げられる。その重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に依存して、インタクトな抗体は、種々のクラスに割り当てられ得る。インタクトな抗体の5つの主要なクラスが存在し、それは、IgA、IgD、IgE、IgG、およびIgMである。これらのうちのいくつかは、サブクラスアイソタイプ例えば、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、およびIgA2へとさらに分割され得る。種々のクラスの抗体に対応する重鎖定常ドメインは、それぞれ、α、δ、ε、γ、およびμと呼ばれる。種々のクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造および3次元構造は、周知である。ErbBレセプターとは、細胞の増殖、分化、および生存のために重要な媒介因子である、ErbBレセプターファミリーに属するレセプタータンパク質チロシンキナーゼである。そのErbBレセプターファミリーは、4つの別個のメンバー上皮増殖因子レセプターEGFR、ErbB1、HER1、HER2ErbB2もしくはp185neu、HER3ErbB3およびHER4ErbB4もしくはtyro2を含むを包含する。一群の抗ErbB2抗体が、ヒト乳癌細胞株SKBR3を使用して特徴付けられているHudziakら1989Mol.Cell.Biol.93:1165-1172。最大の阻害が、4D5と呼ばれる抗体を用いて得られた。この抗体は、細胞増殖を56阻害した。上記の群における他の抗体は、このアッセイにおいて、より弱い程度まで細胞増殖を低減させた。この抗体4D5は、TNF-αの細胞傷害効果に対して、ErbB2過剰発現乳癌細胞株を感受性にすることがさらに見出された米国特許第5677171号。Hudziakらにおいて考察された抗ErbB2抗体は、Fendlyら1990CancerResearch50:1550-1558;Kottsら1990InVitro263:59A;Sarupら1991GrowthRegulation1:72-82;ShepardらJ.1991Clin.Immunol.113:117-127;Kumarら1991Mol.Cell.Biol.112:979-986;Lewisら1993CancerImmunol.Immunother.37:255-263;Pietrasら1994Oncogene9:1829-1838;Vitettaら1994CancerResearch54:5301-5309;Sliwkowskiら1994J.Biol.Chem.26920:14661-14665;Scottら1991J.Biol.Chem.266:14300-5;D’souzaらProc.Natl.Acad.Sci.199491:7202-7206;Lewisら1996CancerResearch56:1457-1465;およびSchaeferら1997Oncogene15:1385-1394においてさらに特徴付けられている。種々の特性を有する他の抗ErbB2抗体が、Franklinら2004CancerCell5:317-328;Tagliabueら1991Int.J.Cancer47:933-937;McKenzieら1989Oncogene4:543-548;Maierら1991CancerRes.51:5361-5369;Bacusら1990MolecularCarcinogenesis3:350-362;Stancovskiら1991PNASUSA88:8691-8695;Bacusら1992CancerResearch52:2580-2589;Xuら1993Int.J.Cancer53:401-408;WO94/00136;Kasprzykら1992CancerResearch52:2771-2776;Hancockら1991CancerRes.51:4575-4580;Shawverら1994CancerRes.54:1367-1373;Arteagaら1994CancerRes.54:3758-3765;Harwerthら1992J.Biol.Chem.267:15160-15167;米国特許第5783186号;およびKlapperら1997Oncogene14:2099-2109において記載されている。配列同一性スクリーニングが、他の2つのErbBレセプターファミリーのメンバーであるErbB3米国特許第5,183,884;米国特許第5,480,968;Krausら1989PNASUSA86:9193-9197;ならびにErbB4EP599274;Plowmanら1993Proc.Natl.Acad.Sci.USA,90:1746-1750;およびPlowmanら1993Nature366:473-475の同定をもたらした。これらのレセプターは両方とも、少なくともいくつかの乳癌細胞株における発現の増加を示す。上記ErbBレセプターは、一般的には、細胞外ドメインこれは、ErbBリガンドに結合し得る;親油性膜貫通ドメイン;保存的細胞内チロシンキナーゼドメイン;およびカルボキシル末端シグナル伝達ドメインリン酸化され得るいくつかのチロシン残基を保有するを含む。上記ErbBレセプターは、ネイティブ配列ErbBレセプターであっても、そのアミノ酸配列改変体であってもよい。上記ErbBレセプターは、ネイティブ配列ヒトErbBレセプターであり得る。従って、ErbBレセプターファミリーのメンバーとは、現在公知であるかまたは将来同定され得る、EGFRErbB1、ErbB2、ErbB3、ErbB4または他の任意のErbBレセプターである。用語ErbB1、上皮増殖因子レセプター、EGFRおよびHER1は、本明細書において互換可能に使用され、これらは、例えば、Carpenterら1987Ann.Rev.Biochem.56:881-914において開示されるようなEGFR天然に存在するその変異体形態例えば、Humphreyら1990PNASUSA,87:4207-4211におけるような欠失変異体EGFRを含むを指す。用語erbB1とは、EGFRタンパク質生成物をコードする遺伝子を指す。HER1に対する抗体は、例えば、Murthyら1987Arch.Biochem.Biophys.、252:549-560およびWO95/25167において記載されている。用語ERRP、EGFレセプター関連タンパク質、EGFR関連タンパク質および上皮増殖因子レセプター関連タンパク質は、本明細書において互換可能に使用され、これらの用語は、例えば、米国特許第6399743号および米国特許第2003/0096373号に開示されるようなERRPを指す。表現ErbB2およびHER2は、本明細書において互換可能に使用され、これらの表現は、例えば、Sembaら1985PNASUSA,82:6497-6501およびYamamotoら1986Nature,319:230-234Genbank登録番号X03363に記載されるようなヒトHER2タンパク質を指す。用語erbB2とは、ヒトErbB2をコードする遺伝子を指し、neuとは、ラットp185neuをコードする遺伝子を指す。ErbB3およびHER3とは、例えば、米国特許第5183884号;米国特許第5480968号;Krausら1989PNASUSA86:9193-9197に開示されるようなレセプターポリペプチドを指す。ErbB3に対する抗体は、当該分野で公知である米国特許第5183884号;米国特許第5480968号;WO97/35885。用語ErbB4およびHER4とは、本明細書において、例えば、欧州特許出願第599,274号;Plowmanら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA,90:1746-17501993;およびPlowmanら、Nature,366:473-4751993に開示されるようなレセプターポリペプチド例えば、WO99/19488に開示されるような、そのアイソフォームを含むを指す。HER4に対する抗体が、例えば、WO02/18444に記載されている。ErbBレセプターに対する抗体は、多数の供給源例えば、SantaCruzBiotechnology,Inc.,California,USAが挙げられるから市販されている。ErbBリガンドによって、ErbBレセプターに結合および/またはそれを活性化する、ポリペプチドが意味される。上記ErbBリガンドは、ネイティブ配列ヒトErbBリガンド例えば、上皮増殖因子EGFSavageら1972J.Biol.Chem.,247:7612-7621;トランスフォーミング増殖因子αTGF-αMarquardtら1984Science223:1079-1082;アンフィレグリンamphiregulin神経鞘腫オートクライン増殖因子またはケラチノサイトオートクライン増殖因子としても公知であるShoyabら1989Science243:1074-1076;Kimuraら1990Nature348:257-260;およびCookら1991Mol.Cell.Biol.,11:2547-2557;ベータセルリンbetacellulinShingら1993Science259:1604-1607;およびSasadaら1993Biochem.Biophys.Res.Commun.190:1173;ヘパリン結合上皮増殖因子HB-EGFHigashiyamaら1991Science251:936-939;エピレグリンepiregulinToyodaら1995J.Biol.Chem.270:7495-7500;およびKomurasakiら1997Oncogene15:2841-2848;ヘレグリン下記参照;ニューレグリンneuregulin-2NRG-2Carrawayら、Nature,387:512-5161997;ニューレグリンneuregulin-3NRG-3Zhangら1997Proc.Natl.Acad.Sci.,94:9562-9567;ニューレグリンneuregulin-4NRG-4Harariら1999Oncogene,18:2681-89またはクリプトcriptoCR-1Kannanら1997J.Biol.Chem.,2726:3330-3335が挙げられるであり得る。EGFRに結合するErbBリガンドとしては、EGF、TGF-α、アンフィレグリンamphiregulin、ベータセルリンbetacellulin、HB-EGFおよびエピレグリンepiregulinが挙げられる。ErbB3に結合するErbBリガンドとしては、ヘレグリン類が挙げられる。ErbB4に結合可能なErbBリガンドとしては、ベータセルリンbetacellulin、エピレグリンepiregulin、HB-EGF、NRG-2、NRG-3、NRG-4およびヘレグリン類が挙げられる。上記ErbBリガンドはまた、合成ErbBリガンドであり得る。上記合成リガンドは、特定のErbBレセプターに特異的であり得るか、または特定のErbBレセプター複合体を認識し得る。合成リガンドの例は、合成ヘレグリン/EGFキメラヘレグリンである例えば、Jonesら1999FEBSLetters,447:227-231これは、参考として援用されるを参照のこと。ヘレグリンHeregulinHRGとは、米国特許第5641869号またはMarchionniら1993Nature362:312-318において開示されるようなヘレグリン遺伝子生成物によってコードされるポリペプチドを指す。ヘレグリンの例としては、ヘレグリン-α、ヘレグリン-β1、ヘレグリン-β2およびヘレグリン-β3Holmesら1992Science256:1205-1210;および米国特許第5641869号;neu分化因子NDFPelesら1992Cell69:205-216;アセチルコリンレセプター誘導活性ARIAFallsら1993Cell72:801-815;グリア増殖因子GGFMarchionniら1993Nature、362:312-318;感覚運動ニューロン由来因子SMDFHoら1995J.Biol.Chem.270:14523-14532;γ-ヘレグリンSchaeferら1997Oncogene、15:1385-1394が挙げられる。上記用語は、ネイティブ配列HRGポリペプチドの生物学的に活性なフラグメントおよび/またはアミノ酸配列改変体例えば、そのEGF様ドメインフラグメント例えば、HRGβ1177-244を包含する。ErbBヘテロオリゴマーとは、少なくとも2つの異なるErbBレセプターを含む、非共有結合したオリゴマーである。ErbBダイマーとは、2つの異なるErbBレセプターを含む、非共有結合したオリゴマーである。そのような複合体は、2つ以上のErbBレセプターを発現する細胞がErbBリガンドに対して曝露された場合に、形成し得る。ErbBオリゴマー例えば、ErbBダイマーは、例えば、Sliwkowskiら1994J.Biol.Chem.,26920:14661-14665に記載されるように、免疫沈降によって単離され得、SDS-PAGEによって分析され得る。そのようなErbBヘテロオリゴマーの例としては、EGFR-ErbB2HER1/HER2とも呼ばれる、ErbB2-ErbB3HER2/HER3およびErbB3-ErbB4HER3/HER4複合体が挙げられる。さらに、上記ErbBヘテロオリゴマーは、2つ以上のErbB2レセプターを異なるErbBレセプター例えば、ErbB3、ErbB4もしくはEGFRErbB1と組み合わせて含み得る。他のタンパク質例えば、サイトカインレセプターサブユニット例えば、gp130が、上記ヘテロオリゴマー中に含まれ得る。ErbBレセプターのリガンド活性化によって、対象とするErbBレセプターを含むErbBヘテロオリゴマーへのErbBリガンド結合によって媒介される、シグナル伝達例えば、ErbBレセプターまたは基質ポリペプチドにおけるチロシン残基をリン酸化する、ErbBレセプターの細胞内キナーゼドメインによって引き起こされるが意味される。一般的に、これは、ErbBヘテロオリゴマーに対するErbBリガンドの結合を含み、これが、そのヘテロオリゴマー中にあるErbBレセプターのうちの1つ以上のキナーゼドメインを活性化し、それによって、そのErbBレセプターのうちの1つ以上におけるチロシン残基のリン酸化、および/またはさらなる基質ポリペプチドにおけるチロシン残基のリン酸化を生じる。ErbBレセプター活性化は、種々のチロシンリン酸化アッセイを使用して定量され得る。ネイティブ配列ポリペプチドとは、自然に由来するポリペプチド例えば、ErbBレセプターまたはErbBリガンドと同じアミノ酸配列を有する、ポリペプチドである。そのようなネイティブ配列ポリペプチドは、自然から単離され得るか、または組換え手段もしくは合成手段によって生成され得る。従って、ネイティブ配列ポリペプチドは、天然に存在するヒトポリペプチド、マウスポリペプチド、または他の任意の哺乳動物種由来のポリペプチドの、アミノ酸配列を有し得る。用語アミノ酸配列改変体とは、ネイティブ配列ポリペプチドとはある程度異なるアミノ酸配列を有するポリペプチドを指す。通常、アミノ酸配列改変体は、ネイティブErbBリガンドの少なくとも1つのレセプター結合ドメインと、またはネイティブErbBレセプターの少なくとも1つのリガンド結合ドメインと、少なくとも約70の配列同一性を有するか、あるいはそのようなレセプター結合ドメインもしくはリガンド結合ドメインと少なくとも約80もしくは少なくとも約90相同である。上記アミノ酸配列改変体は、上記ネイティブアミノ酸配列のアミノ酸配列における特定の位置において、置換、欠失、および/または挿入を保有する。配列同一性は、配列を整列して必要な場合にはギャップを導入して配列同一性最大パーセントに達した後に同じである、上記アミノ酸配列改変体中の残基の割合として定義される。上記整列のための方法およびコンピュータープログラムは、当該分野において周知である。そのようなコンピュータープログラムのうちの1つは、Align2であり、これは、Genentech,Inc.によって作成されており、1991年12月10日に、米国著作権局Washington,DC20559に提出された。抗体依存性細胞媒介性細胞傷害およびADCCとは、FcレセプターFcRを発現する非特異的細胞傷害性細胞例えば、ナチュラルキラーNK細胞、好中球、およびマクロファージが、標的細胞上の結合した抗体を認識した後、その標的細胞の溶解を引き起こす、細胞媒介性反応である。ADCCを媒介するための主な細胞であるNK細胞は、FcγRIIIのみを発現するが、単球は、FcγRI、FcγRIIおよびFcγRIIIを発現する。造血細胞におけるFcR発現が、RavetchおよびKinet,1991Annu.Rev.Immunol,9:457-92の第464頁表3にまとめられている。対象とする分子のADCC活性を評価するために、インビトロADCCアッセイが、実施され得る米国特許第5500362l号;米国特許第5821337号。そのようなアッセイのための有用なエフェクター細胞としては、末梢血単核球PBMCおよびナチュラルキラーNK細胞が挙げられる。あるいは、またはさらに、対象とする分子のADCC活性は、インビボで例えば、動物モデル例えば、Clynesら1998PNASUSA,95:652-656に開示されるにおいて評価され得る。メイタンシノイドmaytansinoid薬物部分とは、メイタンシンmaytansine化合物の構造を有する抗体-薬物結合体の部分構造を意味する。メイタンシンは、東アフリカの低木であるMaytenusserrataから最初に単離された米国特許第3896111号。驚くべきことに、特定の微生物もまた、メイタンシノイド類例えば、メイタンシノールおよびC-3メイタンシノールエステルを生成することが、発見された米国特許第4151042号。合成メイタンシノールおよびメイタンシノールアナログが、報告されている。米国特許第4137230号;同第4248870号;同第4256746号;同第4260608号;同第4265814号;同第4294757号;同第4307016号;同第4308268号;同第4308269号;同第4309428号;同第4313946号;同第4315929号;同第4317821号;同第4322348号;同第4331598号;同第4361650号;同第4364866号;同第4424219号;同第4450254号;同第4362663号;および同第4371533号、ならびにKawaiら1984Chem.Pharm.Bull.3441-3451これらの各々は、明示的に参考として援用されるを参照のこと。用語FcレセプターまたはFcRとは、抗体のFc領域例えば、ネイティブ配列ヒトFcRに結合するレセプターを記載するために使用される。FcRは、IgG抗体に結合し得γレセプター、これは、FcγRIサブクラスのレセプター、FcγRIIサブクラスのレセプター、およびFcγRIIIサブクラスのレセプターこれらのレセプターの対立遺伝子改変体および選択的スプライス形態を包含する。FcγRIIレセプターとしては、FcγRIIA活性化レセプターおよびFcγRIIB阻害レセプターが挙げられ、これらは、その細胞質ドメインが主に異なる、類似するアミノ酸配列を有する。活性化レセプターであるFcγRIIAは、免疫レセプターのチロシンベースの活性化モチーフITAMを、その細胞質ドメイン中に含む。阻害レセプターであるFcγRIIBは、免疫レセプターのチロシンベースの阻害モチーフITIMを、その細胞質ドメイン中に含む概説M.inDaeron,Annu.Rev.Immunol.,15:203-2341997を参照のこと。FcRは、RavetchおよびKinet,Annu.Rev.Immunol.,9:457-921991;Capelら1994Immunomethods,4:25-34;およびdeHaasら1995J.Lab.Clin.Med.,126:330-41において概説されている。他のFcR将来同定されるものを包含するも、本明細書において用語FcRによって包含される。上記用語はまた、新生児レセプターであるFcRnを包含し、これは、胎児への母系IgGの転移を担うGuyerら1976J.Immunol.117:587,andKimら1994J.Immunol.,24:249。補体依存性細胞傷害またはCDCとは、補体の存在下で分子が標的を溶解する能力を指す。補体活性化経路は、同族抗原と複合体化した分子例えば、抗体に対して、補体系の第一成分C1qが結合することによって開始される。補体活性化を評価するために、CDCアッセイ例えば、Gazzano-Santoroら1996J.Immunol.Methods,202:163に記載されるが、実施され得る。ネイティブ抗体は、通常は、約150,000ダルトンのヘテロテトラマー糖タンパク質であり、2つの同じ軽L鎖および2つの同じ重H鎖から構成される。各軽鎖は、1つの共有ジスルフィド結合によって重鎖に結合されるが、ジスルフィド結合の数は、種々の免疫グロブリンアイソタイプの重鎖の間で変動する。各重鎖および軽鎖はまた、規則的に間隔を空けた鎖内ジスルフィド架橋を有する。各重鎖は、一方の末端に、1つの可変ドメインVHを有し、その後に、多数の定常ドメインを有する。各軽鎖は、一方の末端に、1つの可変ドメインVLを有し、もう一方の末端に、定常ドメインを有する。その軽鎖の定常ドメインは、重鎖の第一の定常ドメインと整列され、その軽鎖の可変ドメインが、重鎖の可変ドメインと整列される。特定のアミノ酸残基が、この軽鎖および重鎖の可変ドメインの間で境界面を形成すると考えられる。用語可変とは、可変ドメインの特定部分が抗体間で広範に異なり、かつその特定の抗原に対する特定の抗体各々の結合および特異性において使用されるという事実を指す。しかし、その可変性は、抗体の可変ドメイン全体にわたって均一に分布しているわけではない。その可変性は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインの両方における、超可変領域と呼ばれる3つのセグメントにおいて集中している。可変ドメインの非常に保存された領域は、フレームワーク領域FRと呼ばれる。ネイティブの重鎖および軽鎖の可変ドメイン各々は、4つのFRこれは、βシート構造を主に呈するを含み、これらは、3つの超可変領域によって結合されており、これは、そのβシート構造に接続し、場合によってはそのβシート構造の一部を形成する、ループを形成する。各鎖における超可変領域は上記のFRによって近接した状態で一緒に保持され、他の鎖に由来する超可変領域とともに、抗体の抗原結合部位の形成に寄与するKabatら1991SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,5thEd.PublicHealthService,NationalInstitutesofHealth,Bethesda,MDを参照のこと。上記の定常ドメインは、抗原に抗体を結合することには直接には関与しないが、種々のエフェクター機能例えば、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCにおける抗体の関与を示す。用語超可変領域とは、本明細書において使用される場合、抗原結合を担う抗体のアミノ酸残基をさす。上記超可変領域は、一般的には、相補性決定領域またはCDRに由来するアミノ酸残基例えば、軽鎖可変ドメインにおける残基24~34L1、50~56L2および89~97L3、ならびに軽鎖可変ドメインにおける残基31~35H1、50~65H2および95~102H3;Kabatら前出ならびに/または超可変ループ中の残基例えば、軽鎖可変ドメイン中の残基26~32L1、50~52L2および91~96L3ならびに重鎖可変ドメイン中の残基26~32H1、53~55H2および96~101H3;ChothiaおよびLesk1987J.Mol.Biol.、196:901-917を含む。フレームワーク領域またはFR残基とは、本明細書中において定義されるような超可変領域残基以外の、可変ドメイン残基である。抗体のパパイン消化は、2つの同じ抗原結合フラグメントFabフラグメントと呼ばれ、これらは各々、1つの抗原結合部位を含むと、残りのFcフラグメントこの名前は、容易に結晶化する能力を反映するとを生じる。パパイン消化は、2つの抗原結合部位を有し、かつ抗原を依然として架橋可能である、Fab’2フラグメントを生じる。Fvとは、完全な抗原認識部位および抗原結合部位を含む、最小限の抗体フラグメントである。この領域は、緊密に非共有結合している1つの重鎖可変ドメインおよび1つの軽鎖可変ドメインからなる。各可変ドメインの3つの超可変領域が、VH-VLダイマーの表面上に抗原結合部位を規定するように相互作用するのは、この構成にある場合である。まとめると、6つの超可変領域が、上記抗体に対して抗原結合特異性を付与する。しかし、1つの可変ドメインまたは1つの抗原に対して特異的な3つの超可変領域のみを含むFvの半分部分でさえ、抗原を認識して結合する能力を有するが、結合部位全体よりは低い親和性である。上記Fabフラグメントはまた、軽鎖の定常ドメインおよび重鎖の第一定常ドメインCH1を含む。Fab’フラグメントは、重鎖CH1ドメインのカルボキシ末端における少数の残基抗体ヒンジ領域に由来する1つ以上のシステインの添加によって、Fabフラグメントとは異なる。Fab’-SHは、定常ドメインのシステイン残基が少なくとも1つの遊離チオール基を保有するFab’についての、本明細書における表示である。Fab’2抗体フラグメントは、もともと、それらの間にヒンジシステインを有するFab’フラグメント対として、生成された。抗体フラグメントの他の化学的カップリングもまた、公知である。任意の脊椎動物種に由来する抗体の軽鎖が、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、2つの明確に別個である型カッパκおよびラムダλと呼ばれるのうちの1つに割り当てられる。単鎖FvまたはscFvとは、抗体VHドメインおよびVLドメインを含む、単鎖可変領域抗体フラグメントを意味し、これらのドメインは、1つのポリペプチド鎖中に存在する。上記Fvポリペプチドは、抗原結合のために望ましい構造をscFvが形成するのを可能にするポリペプチドリンカーを、VHドメインとVLドメインとの間にさらに含み得るPluckthuninThePharmacologyofMonoclonalAntibodies,vol.113,RosenburgおよびMooreeds.,Springer-Verlag,NewYork,pp.269-3151994。抗ErbB2抗体scFvフラグメントは、WO93/16185;米国特許第5571894号;米国特許第5587458号に記載されている。用語ダイアボディdiabodyとは、2つの抗原結合部位を含む小さい抗体フラグメントを指し、このフラグメントは、同じポリペプチド鎖中に軽鎖可変ドメインVLに結合体化している重鎖可変ドメインVHを含むVH-VL。同じ鎖上の2つのドメイン間での対合を可能にするには短か過ぎるリンカーを使用することによって、それらのドメインは、別の鎖の相補的ドメインと対合させられ、2つの抗原結合部位を生成する。ダイアボディは、例えば、EP404,097;WO93/11161;およびHollingerら1993Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:6444-6448において、より完全に記載される。非ヒト例えば、げっ歯類抗体のヒト化形態とは、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小限の配列を含むキメラ抗体である。ほとんどの部分について、ヒト化抗体は、ヒト免疫グロブリンレシピエント抗体であり、この抗体において、このレシピエントの超可変領域に由来する残基が、望ましい特異性、親和性、および能力を有する非ヒト種ドナー抗体例えば、マウス、ラット、ウサギ、および非ヒト霊長類の超可変領域に由来する残基によって置換されている。いくつかの場合においては、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域FR残基が、対応する非ヒト残基によって置換される。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体中にもドナー抗体中にも見出されない残基を含み得る。これらの改変は、抗体の性能をさらに精緻化するためになされる。一般的には、上記ヒト化抗体は、少なくとも1つ代表的には2つの可変ドメインのうちの実質的にすべてを含み、その超可変ループのうちのすべてまたは実質的にすべてが、非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、そのFRのうちのすべてまたは実質的にすべてが、ヒト免疫グロブリン配列のものである。上記ヒト化抗体はまた、必要に応じて、免疫グロブリン定常領域Fcのうちの少なくとも部分代表的にはヒト免疫グロブリンのうちの少なくとも部分を含む。さらなる詳細について、Jonesら1986Nature,321:522-525;Riechmannら1988Nature332:323-329;およびPresta,1992Curr.Op.Struct.Biol.、2:593-596を参照のこと。ヒト化抗ErbB2抗体としては、米国特許第5821337号本明細書において明示的に参考として援用されるの表3において記載されるようなhuMAb4D5-1、huMAb4D5-2、huMAb4D5-3、huMAb4D5-4、huMAb4D5-5、huMAb4D5-6、huMAb4D5-7およびhuMAb4D5-8ハーセプチンHERCEPTIN登録商標、トラスツズマブ;ヒト化520C9WO93/21319およびヒト化2C4抗体が挙げられる。単離された抗体とは、その天然環境から同定されそして分離および/または回収されている、抗体である。その天然環境の混入成分は、その抗体についての診断的用途または治療的用途を妨害する物質であり、それには、酵素、ホルモン、および他のタンパク質性溶質もしくは非タンパク質性溶質が挙げられ得る。上記抗体は、1Lowry法によって決定した場合に95重量よりも多い抗体になるまで、または99重量よりも多い抗体になるまで精製され得るか、2タンパク質配列決定機の使用によってN末端アミノ酸配列もしくは内部アミノ酸配列のうちの少なくとも15残基を得るために十分な程度まで精製され得るか、あるいは、3クマシーブルー染色もしくは銀染色を使用する還元条件もしくは非還元条件下でのSDS-PAGEによって均一になるまで精製され得る。単離された抗体とは、その抗体の天然環境の少なくとも1つの成分が存在しないので組換え細胞中でインサイチュで存在する抗体を包含する。しかし、通常は、単離された抗体は、少なくとも1つの精製工程によって調製される。対象とする抗原例えば、ErbB2抗原に結合する抗体とは、その抗原に十分な親和性で結合可能であり、その結果、その抗体がその抗原を発現する細胞を標的化する際に有用である、抗体である。上記抗体がErbB2に結合する場合、その抗体は、通常は、他のErbBレセプターに対してよりも優先的にErbB2に結合し、この抗体は、他のタンパク質例えば、EGFR、ErbB3またはErbB4と有意には交差反応しない抗体であり得る。そのような実施形態において、上記抗体がこれらの非ErbB2タンパク質に結合する程度例えば、内因性レセプターに対する細胞表面結合は、蛍光細胞分析分離FACS分析または放射性免疫沈降法RIAによって決定した場合、10未満である。ときには、上記抗ErbB2抗体は、例えば、Schecterら1984Nature312:513、およびDrebinら1984Nature,312:545-548に記載されるように、ラットneuタンパク質と有意には交差反応しない。ErbBレセプターのリガンド活性化をブロックする抗体は、そのような活性化を低減もしくは防止し、その抗体は、ErbBレセプターのリガンド活性化を、モノクローナル抗体4D5よりも実質的に有効に、例えば、モノクローナル抗体7F3もしくは2C4またはそれらのFabフラグメントとほぼ同定度有効に、ブロックすることが可能である。例えば、ErbBレセプターのリガンド活性化をブロックする抗体は、ErbBヘテロオリゴマーの形成をブロックする場合に、4D5よりも約50~約100有効な抗体であり得る。ErbBレセプターのリガンド活性化のブロックは、任意の手段によって、例えば、ErbBレセプターに対するリガンドの結合、ErbB複合体形成、ErbB複合体におけるErbBレセプターのチロシンキナーゼ活性および/またはErbBレセプター中もしくはErbBレセプターによるチロシンキナーゼ残基のリン酸化によって、生じ得る。指定された抗体例えば、2C4と称するモノクローナル抗体Omnitarg,Genentech,Inc.の生物学的特徴を有する抗体は、同じ抗原例えば、ErbB2に結合する他の抗体と区別する上記抗体の生物学的特徴のうちの1つ以上を保有する、抗体である。例えば、2C4の生物学的特徴を有する抗体は、ErbBヘテロオリゴマーErbB2およびErbB3、ErbB1またはErbB4を含むのHRG活性化をブロックし得;ErbBレセプターEGFRおよびErbB2を含むのEGF、TGF-α、HB-EGF、エピレグリンepiregulinおよび/またはアンフィレグリンamphiregulin活性化をブロックし得;MAPKのEGF、TGF-αおよび/またはHRGによって媒介される活性化をブロックし得;かつ/あるいは2C4により結合されるエピトープと同じ、ErbB2の細胞外ドメイン中のエピトープに結合し得る例えば、これは、ErbB2に対するモノクローナル抗体2C4の結合をブロックする。そうではないと示されない限り、表現モノクローナル抗体2C4とは、下記の実施例のマウス2C4抗体の抗原結合残基もしくはマウス2C4抗体に由来する抗原結合残基を有する、抗体を指す。例えば、上記モノクローナル抗体2C4は、マウスモノクローナル抗体2C4またはその改変体例えば、マウスモノクローナル抗体2C4の抗原結合アミノ酸残基を有するヒト化抗体2C4WO01/00245であり得る。そうではないと示されない限り、表現rhuMAb2C4とは、本明細書中で使用される場合、それぞれ配列番号3および4の可変軽鎖VL配列および可変重鎖VH配列を、ヒト軽鎖および重鎖のIgG1非Aアロタイプ定常領域配列を融合して含み、必要に応じてチャイニーズハムスター卵巣CHO細胞によって発現される、抗体WO01/00245を指す。そうではないと示されない限り、用語モノクローナル抗体4D5とは、マウス4D5抗体ATCCCRL10463の抗原結合残基またはマウス4D5抗体に由来する抗原結合残基を有する、抗体を指す。例えば、上記モノクローナル抗体4D5は、マウスモノクローナル抗体4D5またはその改変体例えば、マウスモノクローナル抗体4D5の抗原結合残基を保有するヒト化4D5であり得る。例示的ヒト化4D5抗体としては、米国特許第5821337号におけるような、huMAb4D5-1、huMAb4D5-2、huMAb4D5-3、huMAb4D5-4、huMAb4D5-5、huMAb4D5-6、huMAb4D5-7およびhuMAb4D5-8ハーセプチンHERCEPTIN登録商標が挙げられる。増殖阻害因子とは、細胞例えば、ErbB発現癌細胞の増殖を、インビトロまたはインビボのうちのいずれかで阻害する、化合物または組成物を指す。従って、上記増殖阻害因子は、S期にあるErbB発現細胞の割合を有意に減少させる因子であり得る。増殖阻害因子の例としては、細胞周期の進行をS期以外の位置でブロックする因子例えば、G1停止M期停止を誘導する因子TheMolecularBasisofCancer,MendelsohnおよびIsrael編,Chapter1,表題Cellcycleregulation,oncogenes,andantineoplasticdrugsMurakamiらWBSaunders:Philadelphia,1995,特にp.13が挙げられる。増殖阻害抗体の例は、ErbB2に結合しかつErbB2を過剰発現する癌細胞の増殖を阻害する抗体である。増殖阻害抗ErbB2抗体は、細胞培養におけるSK-BR-3乳癌細胞の増殖を約0.5μg/ml~約30μg/mlの抗体濃度にて、20よりも高くかまたは50よりも高く例えば、約50~約100阻害し得、この増殖阻害は、上記抗体にSK-BR-3細胞を曝露した6日間後に決定される米国特許第5677171号。細胞死を誘導する抗体とは、生細胞が生存不能になるのを引き起こす抗体である。上記細胞は、一般的には、ErbB2レセプターを発現する細胞であり、特に、ErbB2レセプターを過剰発現する場合である。上記細胞は、癌細胞例えば、乳細胞、卵巣細胞、胃細胞、子宮内膜細胞、唾液腺細胞、肺細胞、腎臓細胞、結腸細胞、甲状腺細胞、膵臓細胞、または膀胱細胞であり得る。インビトロにおいて、上記細胞は、SK-BR-3細胞、BT474細胞、Calu3細胞、MDA-MB-453細胞、MDA-MB-361細胞、またはSKOV3細胞であり得る。インビトロでの細胞死は、補体および免疫エフェクター細胞の非存在化で決定されて、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCまたは補体依存性細胞傷害CDCによって誘導された細胞死と区別される。従って、細胞死についてのアッセイは、熱非働体化血清を使用してすなわち、補体の非存在下で、免疫エフェクター細胞の非存在下で、実施され得る。上記抗体が細胞死を誘導可能であるか否かを決定するために、ヨウ化プロピジウムPI、トリパンブルーMooreら1995Cytotechnology,17:1-11を参照のことまたは7AADの取り込みによって評価される膜完全性の喪失が、未処理細胞と比較して評価され得る。細胞死誘導性抗体は、BT474細胞におけるPI取り込みアッセイ下記を参照のことにおいて、PI取り込みを誘導する抗体である。アポトーシスを誘導する抗体とは、アネキシンannexinV、DNAの断片化、細胞収縮、小胞体の拡張、細胞断片化、および/または膜小胞アポトーシス体と呼ばれるの形成によって決定される、プログラムされた細胞死を誘導する抗体である。上記細胞は、通常は、ErbB2レセプターを過剰発現する細胞腫瘍細胞例えば、乳房細胞、卵巣細胞、胃細胞、子宮内膜細胞、唾液腺細胞、肺細胞、腎臓細胞、結腸細胞、甲状腺細胞、膵臓細胞、または膀胱細胞を含むである。インビトロにおいて、上記細胞は、SK-BR-3細胞、BT474細胞、Calu3細胞、MDA-MB-453細胞、MDA-MB-361細胞、またはSKOV3細胞であり得る。用語処置するまたは処置とは、治療的処置および防御的手段もしくは予防的手段の両方を指し、その目的は、望ましくない生理学的変化または障害例えば、癌の発症もしくは伝播を防止または鈍化減弱化することである。本発明の目的のためには、有益な臨床結果または望ましい臨床結果としては、症状の緩和、疾患の程度の減少、疾患の安定化したすなわち、悪化しない状態、疾患進行の遅延もしくは軽減、ならびに寛解部分的であろうと、全体的であろうと検出可能であろうと、検出不能であろうとが挙げられるが、これらに限定はされない。処置はまた、処置を受けない場合に予期される生存と比較して生存を延長させることも意味し得る。処置が必要な被験体としては、その状態もしくは障害を既に有する被験体、ならびにその状態もしくは障害を有する傾向がある被験体、またはその状態もしくは障害が予防されるべき被験体が挙げられる。障害とは、本発明の処置から恩恵を受ける任意の状態である。これは、慢性および急性の障害もしくは疾患問題となる障害に哺乳動物がなりやすくする病理的状態を含むを包含する。本明細書において処置されるべき障害の非限定的例としては、良性腫瘍および悪性腫瘍;白血病およびリンパ系悪性腫瘍特に、乳癌、卵巣癌、胃癌、子宮内膜癌、唾液腺癌、肺癌、腎臓癌、結腸癌、甲状腺癌、膵臓癌、または膀胱癌;神経障害、グリア障害、神経膠星状細胞障害、視床下部障害、および他の腺障害、マクロファージ障害、上皮障害、間質障害、および胞胚腔障害;ならびに炎症障害、脈管形成障害、および免疫障害が挙げられる。本発明に従って処置されるべき例示的障害は、固形悪性腫瘍である。用語治療有効量とは、哺乳動物において疾患または障害を処置するために有効な薬物の量を指す。癌の場合、上記薬物の治療有効量は、i癌細胞の数を低減し得;ii腫瘍の大きさを低減し得;iii末梢器官への癌細胞の浸潤をある程度阻害し、遅滞させ、遅延させ、好ましくは停止させ得;iv腫瘍転移を阻害しすなわち、ある程度遅延させ、好ましくは停止させ得;v腫瘍の増殖を阻害し得、かつ/またはvi上記癌に関連する症状のうちの1つ以上をある程度軽減し得る。上記薬物が、存在する癌細胞の増殖を防止し得かつ/またはそれを死滅させ得る程度まで、その薬物は、細胞増殖抑制性および/または細胞毒性であり得る。動物モデルにおいて、効力は、ADCの投与後の経過の間に腫瘍の物理的測定によって、そして腫瘍の部分的後退および完全な後退を決定することによって、評価され得る。癌治療について、効力は、例えば、疾患進行時間TTPを評価すること、および/または応答速度RRを決定することによって、測定され得る。用語バイオアベイラビリティとは、患者に対して投与される所定量の薬物の全身利用性すなわち、血液レベル/血漿レベルを指す。バイオアベイラビリティは、投与される投与形態から全身循環に達する薬物の時間速度および総量程度の両方の尺度を示す絶対的用語である。用語癌および癌性とは、調節されていない細胞増殖によって代表的には特徴付けられる、哺乳動物における生理状態を指すかまたは記載する。腫瘍は、1つ以上の癌性細胞を含む。癌の例としては、癌腫、リンパ腫、芽腫、肉腫、および白血病、またはリンパ系悪性腫瘍が挙げられるが、これらに限定はされない。そのような癌のより具体的な例としては、扁平上皮癌例えば、扁平上皮細胞癌、肺癌小細胞肺癌、非小細胞肺癌NSCLC、肺腺癌、および肺扁平上皮細胞癌を含む、腹膜の癌、肝細胞癌、胃癌gastriccancerまたはstomachcancer胃腸癌を含む、胃腸間質腫瘍GIST、膵臓癌、多形グリア芽細胞腫、子宮頚部癌、肝臓癌、膀胱癌、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌、または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌kidneycancerまたはrenalcancer、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌腫、肛門癌腫、陰茎癌、ならびに頭部頚部癌が挙げられる。ErbB発現癌とは、その細胞表面に存在するErbBタンパク質を有する細胞を含む癌である。ErbB2発現癌とは、その細胞表面に十分なレベルのErbB2を精製し、その結果、抗ErbB2抗体がその癌に結合し得、かつその癌に対して治療効果を有し得る、癌である。レセプター例えば、ErbBレセプターを過剰発現する癌とは、同じ組織型の非癌性細胞と比較して、その細胞表面に有意に高いレベルの上記レセプター例えば、ErbB2を有する癌である。そのような過剰発現は、遺伝子増幅によってか、または転写の増加もしくは翻訳の増加によって、引き起こされ得る。ErbBレセプター過剰発現は、細胞表面上に存在するErbBタンパク質のレベル増加を例えば、免疫組織化学アッセイ;IHCを介して評価することによって、診断アッセイまたは予後判定アッセイにおいて決定され得る。あるいは、またはさらに、上記細胞におけるErbBコード核酸のレベルを、例えば、蛍光インサイチュハイブリダイゼーションFISH;WO98/45479を参照のこと、サザンブロッティング、またはポリメラーゼ連鎖反応PCR技術例えば、リアルタイム定量PCRRT-PCRを介して、測定し得る。ErbBリガンドの過剰発現は、患者における上記リガンドまたはそれをコードする核酸のレベルを、例えば、腫瘍生検においてかまたは種々の診断アッセイ例えば、上記のIHC、FISH、サザンブロッティング、PCR、またはインビボアッセイによって評価することによって、診断的に決定され得る。また、生物学的流体例えば、血清中の落ちたshed抗原例えば、ErbB細胞外ドメインを測定することによって例えば、米国特許第4933294号;WO91/05264;米国特許第5401638号;およびSiasら1990J.Immunol.Methods132:73-80を参照のこと、ErbBレセプターの過剰発現を研究し得る。上記のアッセイに加えて、他の種々のインビボアッセイが、当業者にとって利用可能である。例えば、患者の身体中にある細胞を、検出可能な標識例えば、放射性同位体で必要に応じて標識した抗体に曝露させ得、その患者における細胞に対する上記抗体の結合が、例えば、放射能活性の外部スキャンによってか、または上記抗体に対して以前に曝露された患者から得た政権を分析することによって、評価され得る。HER2を過剰発現する腫瘍が、細胞1つ当たりで発現されるHER2のコピー数に対応する免疫組織学的スコアによって評点付けされ、それは、生化学的に決定され得る:0=0コピー/細胞~10,000コピー/細胞、1=少なくとも約200,000コピー/細胞、2=少なくとも約500,000コピー/細胞、3=約1×106~約2×106コピー/細胞。3レベルのHER2過剰発現これは、チロシンキナーゼのリガンド非依存性活性化をもたらすHudziakら1987Proc.Natl.Acad.Sci.USA84:7159-7163が、乳癌のうちの約30において生じ、これらの患者において、再発しない生存および全体的生存は、減少するSlamonら1989Science244:707-712;Slamonら1987Science,235:177-182。逆に、ErbB2レセプターの過剰発現によって特徴付けられない癌は、診断アッセイにおいて、同じ組織型の非癌性細胞と比較して、正常レベルよりも高いレベルのErbB2レセプターを発現しない癌である。上記マウスモノクローナル抗HER2抗体は、2および31つの細胞につき1×106~-2×106のHER2レセプターレベルでHER2を過剰発現する乳癌細胞の増殖を阻害するが、それよりも低いHER2レベルを有する細胞に対しては、何の活性も有さないLewisら1993CancerImmunol.Immunother.37:255-263。この知見に基づいて、抗体4D5が、ヒト化されhuMAb4D5-8、rhuMAbHER2、米国特許第5821337号;Carterら1992Proc.Natl.Acad.Sci.USA89:4285-4289、そして腫瘍がHER2を過剰発現するが従来の化学療法の後に進行した乳癌患者において試験されたCobleighら1999J.Clin.Oncol.17:2639-2648。この試験におけるほとんどの患者腫瘍は、3レベルでHER2を発現したが、一部は、2であった。ホルモン非依存性癌とは、その増殖が、その癌における細胞により発現されるレセプターに結合するホルモンの存在下で依存性ではない、癌である。癌は、その腫瘍中またはその腫瘍付近でのホルモン濃度を低減する薬理学的ストラテジーもしくは外科手術的ストラテジーの投与の際に、臨床的退縮をしない。ホルモン非依存性癌の例としては、アンドロゲン非依存性前立腺癌、エストロゲン非依存性乳癌、子宮内膜癌、および卵巣癌が挙げられる。そのような癌は、ホルモン依存性腫瘍として始まり得、抗ホルモン療法の後にホルモン感受性段階からホルモン難治性腫瘍へと進行する。用語細胞毒性因子とは、本明細書中で使用される場合、細胞の機能を阻害もしくは防止し、かつ/または細胞の破壊を引き起こす、因子を指す。上記用語は、放射性同位体例えば、211At、131I、125I、90Y、186Re、188Re、153Sm、212Bi、32P、60C、およびLuの放射性同位体、化学療法剤、および毒素例えば、細菌起源、真菌起源、植物起源、もしくは動物起源の、低分子毒素もしくは酵素的に活性な毒素その合成アナログおよび誘導体を含むを包含することが意図される。化学療法剤とは、癌の処置において有用な化合物である。化学療法剤の例としては、ErlotinibTARCEVA登録商標、Genentech/OSIPharm.、BortezomibVELCADE登録商標、MilleniumPharm.、FulvestrantFASLODEX登録商標、Astrazeneca、SutentSU11248、Pfizer、LetrozoleFEMARA登録商標、Novartis、イマチニブメシレートImatinibmesylateGLEEVEC登録商標、Novartis、PTK787/ZK222584Novartis、OxaliplatinEloxatin登録商標、Sanofi、5-FU5-フルオロウラシル、Leucovorin、RapamycinSirolimus、RAPAMUNE登録商標、Wyeth、LapatinibGSK572016、GlaxoSmithKline、LonafarnibSCH66336、SorafenibBAY43-9006、BayerLabs.、およびGefitinibIRESSA登録商標、Astrazeneca、AG1478、AG1571SU5271;Sugen、アルキル化剤例えば、チオテパおよびCYTOXAN登録商標、シクロホスファミド;アルキルスルホネート例えば、ブスルファン、インプロスルファンおよびピポスルファン;アジリジン例えば、ベンゾドパ、カルボコンcarboquone、メチュレドパmeturedopa、およびウレドパuredopa;エチレンイミンおよびメチラメラミンmethylamelamineアルトレタミンaltretamine、トリエチレンメラミンtriethylenemelamine、トリエチレンホスホロアミド、トリエチレンチオホスホロアミド、およびトリメチロメラミンtrimethylomelamineを含む;アセトゲニンacetogenin特に、ブラタシンbullatacinおよびブラタシノンbullatacinone;カンプトテシンその合成アナログであるトポテカンを含む;ブリオスタチンbryostatin;カリスタチンcallystatin;CC-1065そのアドゾレシンadozelesin合成アナログ、カルゼレシンcarzelesin合成アナログおよびビゼレシンbizelesin合成アナログを含む;クリプトフィシンcryptophycin類特に、クリプトフィシンcryptophycin1およびクリプトフィシンcryptophycin8;ドラスタチンdolastatin;デュオカルマイシンduocarmycinその合成アナログであるKW-2189およびCB1-TM1を含む;エロイテロビンeleutherobin;パンクラチスタチンpancratistatin;サルコジクチンsarcodictyin;スポンジスタチンspongistatin;ナイトロジェンマスタード例えば、クロラムブシル、クロルナファジンchlornaphazine、クロロホスファミド、エストラムスチン、イフォスファミドifosfamide、メクロレタミン、塩酸メクロメタミンオキシドmechlorethamineoxidehydrochloride、メルファラン、ノベンビシンnovembichin、フェネステリンphenesterine、プレドニムスチンprednimustine、トロフォスファミドtrofosfamide、ウラシルマスタード;ニトロソ尿素類例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチンfotemustine、ロムスチン、ニムスチン、およびラニムスチンranimnustine;抗生物質例えば、エネジインenediyne抗生物質例えば、カリケアマイシンcalicheamicin特に、カリケアマイシンγIIcalicheamicingamma1IおよびカリケアマイシンωIIcalicheamicinomegaI1AngewChemIntl.Ed.Engl.199433:183-186;ダイネマイシンdynemicinダイネマイシンdynemicinAを含む;ビスホスホネート例えば、クロドロネートclodronate;エスペラマイシンesperamicin;ならびにネオカルジノスタチン発色団neocarzinostatinchromophoreおよび関連する色素タンパク質エネジインenediyne抗生物質発色団、アラシノマイシンaclacinomysin、アクチノマイシン、オートラマイシンauthramycin、アザセリンazaserine、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシンcarabicin、カルミノマイシンcarminomycin、カルジノフィリンcarzinophilin、クロモマイシンchromomycinis、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトロルビシンdetorubicin、6-ジアゾ-5-オキソ-L-ノルロイシン、アドリアマイシンADRIAMYCIN登録商標、ドキソルビシンモルホリノ-ドキソルビシン、シアノモルホリノ-ドキソルビシン、2-ピロリノ-ドキソルビシンおよびデオキシドキソルビシン、エピルビシンepirubicin、エソルビシンesorubicin、イダルビシンidarubicin、マルセロマイシンmarcellomycin、マイトマイシン例えば、マイトマイシンC、マイコフェノール酸mycophenolicacid、ノガラマイシンnogalamycin、オリボマイシンolivomycin、ペプロマイシン、ポトフィロマイシンpotfiromycin、ピューロマイシンpuromycin、キュエラマイシンquelamycin、ロドルビシンrodorubicin、ストレプトニグリンstreptonigrin、ストレプトゾシン、ツベルシジンtubercidin、ユベニメックスubenimex、ジノスタチンzinostatin、ゾルビシンzorubicin;代謝拮抗剤例えば、メトトレキサートおよび5-フルオロウラシル5-FU;葉酸アナログ例えば、デノプテリンdenopterin、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート;プリンアナログ例えば、フルダラビンfludarabine、6-メルカプトプリン、チアミプリンthiamiprine、チオグアニンthioguanine;ピリミジンアナログ例えば、アンシタビンancitabine、アザシチジンazacitidine、6-アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン;アンドロゲン例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノールepitiostanol、メピチオスタン、テストラクトン;アンチアドレナールanti-adrenal例えば、アミノグルテチミドaminoglutethimide、ミトーテン、トリロスタン;葉酸補充剤replenisher例えば、フロリン酸frolinicacid;アセグラトンaceglatone;アルドホスファミドグリコシドaldophosphamideglycoside;アミノレブリン酸;エニルウラシルeniluracil;アムサクリンamsacrine;ベストラブシルbestrabucil;ビスアントレンbisantrene;エダトラキセートedatraxate;デフォファミンdefofamine;デメコルチン;ジアジクオンdiaziquone;エルフォルニチンelfornithine;酢酸エリプチニウムelliptiniumacetate;エポチロンepothilone;エトグルシドetoglucid;窒化ガリウム;ヒドロキシ尿素;レンチナンlentinan;ロニダニンlonidainine;メイタンシノイドmaytansinoid例えば、メイタンシンmaytansineおよびアンサミトシンansamitocin;ミトグアゾンmitoguazone;ミトザントロン;モピダンモールmopidanmol;ニトラエリンnitraerine;ペントスタチイン;フェナメットphenamet;ピラルビシンpirarubicin;ロソキサントロンlosoxantrone;ポドフィリン酸podophyllinicacid;2-エチルヒドラジド;プロカルバジン;PSK登録商標多糖複合体JHSNaturalProducts,Eugene,OR;ラゾキサンrazoxane;リゾキシンrhizoxin;シゾフィランsizofiran;スピロゲルマニウムspirogermanium;テヌアゾニン酸tenuazonicacid;トリアジキオンtriaziquone;2,2’,2-トリクロロトリエチルアミン;トリコテセンtrichothecene特に、T-2トキシン、ベラクリンverracurinA、ロリジンroridinAおよびアングイジンanguidine;ウレタン;ビンデシン;ダカルバジン;マンノムスチン;ミトブロニトールmitobronitol;ミトラクトールmitolactol;ピポブロマンpipobroman;ガシトシンgacytosine;アラビノシドAra-C;シクロホスファミド;チオテパ;タキソイドtaxoid例えば、TAXOL登録商標パクリタキセルBristol-MyersSquibbOncology、Princeton、N.J.、ABRAXANETMパクリタキセルのCremophorフリーでアルブミンを操作したナノ粒子処方物AmericanPharmaceuticalPartners、Schaumberg、Illinois、およびTAXOTERE登録商標ドキセタキセルdoxetaxelRhone-PoulencRorer、Antony、France;クロラムブシルchloranbucil;GEMZAR登録商標ゲンシタビンgemcitabine;6-チオグアニン;メルカプトプリンmercaptopurine;メトトレキサート;白金アナログ例えば、シスプラチンおよびカルボプラチン;ビンブラスチン;白金;エトポシドVP-16;イフォスファミドifosfamide;ミトザントロン;ビンクリスチン;NAVELBINE登録商標ビノレルビンvinorelbine;ノバントロンnovantrone;テニポシドteniposide;エダトレキサートedatrexate;ダウノマイシン;アミノプテリン;キセロダxeloda;イバンドロネートibandronate;CPT-11;トポイソメラーゼインヒビターRFS2000;ジフルオロメチルオルニチンDMFO;レチノイド例えば、レチノイン酸;カペシタビンcapecitabine;および上記のうちのいずれかの薬学的に受容可能な塩、酸、または誘導体が挙げられる。また、この化学療法剤の定義に包含されるのは、i腫瘍に対するホルモンの作用を調節もしくは阻害するように作用する抗ホルモン剤例えば、抗エストロゲンおよび選択的エストロゲンレセプターモジュレーターSERM例えば、タモキシフェンNOLVADEX登録商標タモキシフェンを含む、ラロキシフェン、ドロロキシフェンdroloxifene、4-ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェンtrioxifene、ケオキシフェンkeoxifene、LY117018、オナプリストンonapristone、およびFARESTONトレミフェンtoremifeneが挙げられる;ii酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼインヒビターこれは、副腎におけるエストロゲン生成を調節する例えば、45-イミダゾール、アミノグルテチミド、MEGASE登録商標酢酸メゲストール、AROMASIN登録商標エキセメスタンexemestane、フォルメスタニーformestanie、ファドロゾールfadrozole、RIVISOR登録商標ボロゾールvorozole、FEMARA登録商標レトロゾールletrozole、およびARIMIDEX登録商標アナストロゾールanastrozole;iii抗アンドロゲン例えば、フルタミド、ニルタミドnilutamide、ビカルタミドbicalutamide、ロイプロリド、およびゴセレリン;ならびにトロキサシタビンtroxacitabine1,3-ジオキソランヌクレオシドシトシンアナログ;ivアロマターゼインヒビター;vプロテインキナーゼインヒビター;vi脂質キナーゼインヒビター;viiアンチセンスオリゴヌクレオチド特に、異常な細胞増殖に関与するシグナル伝達経路PKC-α、RalfおよびH-Ras中の遺伝子の発現を阻害するもの;viiiリボザイム例えば、VEGF発現インヒビター例えば、ANGIOZYME登録商標リボザイムおよびHER2発現インヒビター;ixワクチン例えば、遺伝子治療ワクチン例えば、ALLOVECTIN登録商標ワクチン、LEUVECTIN登録商標ワクチン、およびVAXID登録商標ワクチン;PROLEUKIN登録商標rIL-2;LURTOTECAN登録商標トポイソメラーゼ1インヒビター;ABARELIX登録商標rmRH;x抗脈管形成因子例えば、ベバシツマブbevacizumabAVASTIN登録商標、Genentech;およびxi上記のうちのいずれかの薬学的に受容可能な塩、酸、または誘導体が挙げられる。プロテインキナーゼインヒビターとしては、チロシンキナーゼ例えば、ErbBレセプターのチロシンキナーゼ活性をある程度まで阻害するチロシンキナーゼインヒビターが挙げられる。チロシンキナーゼインヒビターの例としては、EGFR標的化薬物例えば、iEGFRに結合する抗体MAb579ATCCCRLHB8506、MAb455ATCCCRLHB8507、MAb225ATCCCRL8508、MAb528ATCCCRL8509米国特許第4943533号、Mendelsohnらを参照のこと、およびそれらの改変体例えば、キメラ化chimerized225C225またはCetuximab;ERBITUX登録商標、Imcloneおよび再成形reshapedヒト225H225WO96/40210、ImcloneSystemsInc.;II型変異体EGFRに結合する抗体米国特許第5212290号;EGFR米国特許第5891996号;およびEGFRに結合する抗体例えば、ABX-EGFWO98/50433;ii細胞毒性因子に結合体化した抗EGFR抗体EP659439A2;およびEGFRに結合する低分子ZD1839またはGefitinibを含むIRESSA登録商標;AstraZeneca、ErlotinibHClCP-358774,TARCEVA登録商標;Genentech/OSIおよびAG1478、AG1571SU5271;Sugen、キナゾリン例えば、PD153035、4-3-クロロアニリノキナゾリン、ピリドピリミジン、ピリミドピリミジン、ピロロピリミジン例えば、CGP59326、CGP60261およびCGP62706、ならびにピラゾロピリミジン、4-フェニルアミノ-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン、クルクミンジフェルロイルメタン、4,5-ビス4-フルオロアニリノフタリミド、ニトロチオフェン部分を含むチロホスチンtyrphostine;PD-0183805Warner-Lambert;アンチセンス分子例えば、ErbBコード核酸に結合するもの;キノキサリンquinoxaline米国特許第5804396号;トリホスチンtryphostin米国特許第5804396号;ZD6474AstraZeneca;PTK-787Novartis/ScheringAG;汎ErbBインヒビター例えば、CI-1033Pfizer;AffinitacISIS3521;Isis/Lilly;イマチニブメシレートImatinibmesylateGleevac;Novartis;PKI166Novartis;GW2016GlaxoSmithKline;CI-1033Pfizer;EKB-569Wyeth;SemaxanibSugen;ZD6474AstraZeneca;PTK-787Novartis/ScheringAG;INC-1C11Imclone;または米国特許第5804396号;WO99/09016AmericanCyanamid;WO98/43960AmericanCyanamid;WO97/38983WarnerLambert;WO99/06378WarnerLambert;WO99/06396WarnerLambert;WO96/30347Pfizer、Inc;WO96/33978Zeneca;WO96/3397Zeneca;およびWO96/33980Zenecaに記載されるものが挙げられる。抗脈管形成因子とは、血管の発達をある程度までブロックまたは妨害する化合物を指す。上記抗脈管形成因子は、例えば、脈管形成を促進することに関与する増殖因子または増殖因子レセプターに結合する、低分子もしくは抗体であり得る。例示的な抗脈管形成因子は、血管内皮増殖因子VEGFに結合する抗体例えば、ババシツマブbevacizumabAVASTIN登録商標,Genentechである。用語サイトカインとは、細胞間メディエーターとして別の細胞に対して作用する、ある細胞集団によって放出されるタンパク質に関する一般用語である。そのようなサイトカインの例は、リンホカイン、モノカイン、および伝統的ポリペプチドホルモンである。上記サイトカイン中に包含されるのは、成長ホルモン例えば、ヒト成長ホルモン、N-メチオニルヒト成長ホルモン、およびウシ成長ホルモン;副甲状腺ホルモン;サイロキシン;インスリン;プロインスリン;レラキシン;プロレラキシン;糖タンパク質ホルモン例えば、卵胞刺激ホルモンFSH、甲状腺刺激ホルモンTSH、および黄体化ホルモンLH;肝増殖因子;線維芽細胞増殖因子;プロラクチン;胎盤ラクトゲン;腫瘍壊死因子αおよび腫瘍壊死因子β;ミュラー管阻害物質;マウスゴナドトロピン関連ペプチド;インヒビン;アクチビン;血管内皮増殖因子;インテグリン;トロンボポエチンTPO;神経成長因子;例えば、NGF-β;血小板増殖因子;トランスフォーミング増殖因子TGF例えば、TGF-αおよびTGF-β;インスリン様増殖因子-Iおよびインスリン様増殖因子-II;エリスロポエチンEPO;骨誘導因子osteoinductivefactor;インターフェロン例えば、インターフェロン-α、インターフェロン-β、およびインターフェロン-γ;コロニー刺激因子CSF例えば、マクロファージ-CSFM-CSF;顆粒球-マクロファージ-CSFGM-CSF;および顆粒球-CSFG-CSF;インターロイキンIL例えば、IL-1、IL-1α、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12;腫瘍壊死因子例えば、TNF-αまたはTNF-β;および他のポリペプチド因子LIFおよびkitリガンドKLが挙げられるが挙げられる。本明細書で使用される場合、用語サイトカインとは、天然供給源由来のタンパク質、または組換え細胞培養由来のタンパク質、およびネイティブ配列サイトカインの生物学的に活性な等価物を包含する。用語プロドラッグとは、本出願において使用される場合、親薬物と比較して腫瘍細胞に対して細胞傷害性が低く、かつ酵素的に活性化され得るかまたはより活性な親形態へと変換され得る、薬学的に活性な物質の前駆体もしくは誘導体を指す。例えば、Wilman,ProdrugsinCancerChemotherapy,BiochemicalSocietyTransactions,14,pp.375-382,615thMeetingBelfast1986、ならびにStellaら、Prodrugs:AChemicalApproachtoTargetedDrugDelivery,DirectedDrugDelivery,Borchardtらed.,pp.247-267,HumanaPress1985を参照のこと。本発明のプロドラッグとしては、より活性な細胞傷害性遊離薬物へと変換され得る、ホスフェート含有プロドラッグ、チオホスフェート含有プロドラッグ、スルフェート含有プロドラッグ、ペプチド含有プロドラッグ、D-アミノ酸改変型プロドラッグ、グリコシル化プロドラッグ、β-ラクタム含有プロドラッグ、必要に応じて置換されたフェノキシアセトアミド含有プロドラッグ、または必要に応じて置換されたフェニルアセトアミド含有プロドラッグ、5-フルオロシトシンおよび他の5-フルオロウリジンプロドラッグが挙げられるが、これらに限定はされない。本発明における使用のためのプロドラッグ形態へと誘導体化され得る細胞傷害性薬物の例としては、上記の化学療法剤が挙げられるが、これらに限定はされない。リポソームとは、薬物例えば、本明細書中に開示される抗ErbB2抗体、および必要に応じて、化学療法剤を哺乳動物に送達するために有用な、種々の型の脂質、リン脂質、および/または界面活性剤から構成される、小胞である。上記リポソームの成分は、生物膜の脂質配置と類似している二重層形態で一般的に配置される。用語パッケージ挿入物とは、治療製品の商業的パッケージ中に通例含まれ、そのような治療製品の仕様に関する指示、使用法、投与量、投与、禁忌、および/または警告に関する情報を含む、指示書を指すために使用される。心臓保護剤とは、薬物例えば、アントラサイクリン抗生物質および/もしくは抗ErbB2抗体の患者への投与に関連する心筋機能不全すなわち、心筋症および/または鬱血性心不全を予防または低減する化合物もしくは組成物である。上記心臓保護剤は、例えば、フリーラジカル媒介性の心臓毒性効果をブロックもしくは低減し得、かつ/または酸化的ストレス傷害を予防もしくは低減し得る。本発明によって包含される心臓保護剤としては、鉄キレート剤であるデキスラゾキサンdexrazoxaneICRF-187Seifertら、TheAnnalsofPharmacotherapy,28:1063-10721994;脂質低減剤および/または抗酸化剤例えば、プロブコールSingalら、J.Mol.CellCardiol.,27:1055-10631995;アミフォスチンamifostineアミノチオール2-[3-アミノプロリルアミノ]エタンチオール-リン酸二水素エステルWR-2721とも呼ばれる、その脱リン酸化細胞取込み形態WR-1065と呼ばれる、およびS-3-3-メチルアミノプロピルアミノプロピルホスホロチオン酸propylphosphorothioicacidWR-151327Greenら1994CancerResearch,54:738-741を参照のこと;ジゴキシンBristow,M.R.ed.1980Drug-InducedHeartDisease.NewYork:Elsevier191-215;β遮断剤例えば、メトプロロールHjalmarsonら1994Drugs47:Suppl4:31-9;およびShaddyら1995Am.HeartJ.,129:197-9;ビタミンE;アスコルビン酸ビタミンC;フリーラジカルスカベンジャー例えば、オレアノール酸、ウルソル酸、およびN-アセチルシステインNAC;スピン捕捉化合物例えば、α-フェニル-tert-ブチル二トロンPBN;Paracchiniら1993AnticancerRes.,13:1607-1612;セレン有機化合物例えば、P251Elbesenなどが挙げられる。単離された核酸分子とは、その分子が通常は抗体核酸の天然供給源中で会合している少なくとも1つの混入核酸から同定および分離されている、核酸分子である。単離された核酸分子は、その分子が天然で見出される形態または状態以外の形態または状態である。従って、単離された核酸分子は、天然細胞中に存在するその核酸分子とは区別される。しかし、単離された核酸分子は、その抗体を通常は発現する細胞中に含まれる核酸分子であり、例えば、その核酸分子は、天然細胞の染色体位置とは異なる染色体位置にある。アルキルとは、直鎖炭素原子、二級炭素原子、三級炭素原子、または環状炭素原子を含む、C1~C18炭化水素である。アルキルラジカルの例としては、C1~C8炭化水素部分例えば、メチルMe、-CH3、エチルEt、-CH2CH3、1-プロピルn-Pr、n-プロピル、-CH2CH2CH3、2-プロピルi-Pr、i-プロピル、-CHCH32、1-ブチルn-Bu、n-ブチル、-CH2CH2CH2CH3、2-メチル-1-プロピルli-Bu、i-ブチル、-CH2CHCH32、2-ブチルs-Bu、s-ブチル、-CHCH3CH2CH3、2-メチル-2-プロピルt-Bu、t-ブチル、-CCH33、1-ペンチルn-ペンチル、-CH2CH2CH2CH2CH3、2-ペンチル-CHCH3CH2CH2CH3、3-ペンチル-CHCH2CH32、2-メチル-2-ブチル-CCH32CH2CH3、3-メチル-2-ブチル-CHCH3CHCH32、3-メチル-1-ブチル-CH2CH2CHCH32、2-メチル-1-ブチル-CH2CHCH3CH2CH3、1-ヘキシル-CH2CH2CH2CH2CH2CH3、2-ヘキシル-CHCH3CH2CH2CH2CH3、3-ヘキシル-CHCH2CH3CH2CH2CH3、2-メチル-2-ペンチル-CCH32CH2CH2CH3、3-メチル-2-ペンチル-CHCH3CHCH3CH2CH3、4-メチル-2-ペンチル-CHCH3CH2CHCH32、3-メチル-3-ペンチル-CCH3CH2CH32、2-メチル-3-ペンチル-CHCH2CH3CHCH32、2,3-ジメチル-2-ブチル-CCH32CHCH32、3,3-ジメチル-2-ブチル-CHCH3CCH33であるが、これらに限定はされないが挙げられる。アルケニルとは、少なくとも1つの不飽和部位すなわち、炭素間sp2二重結合を有する、直鎖状炭素原子、二級炭素原子、三級炭素原子、または環状炭素原子を含む、C2~C18炭化水素である。アルケニルラジカルの例としては、C2~C8炭化水素部分が挙げられ、これは、例えば、エチレンまたはビニル-CH=CH2、アリル-CH2CH=CH2、シクロペンテニル-C5H7、および5-ヘキセニル-CH2CH2CH2CH2CH=CH2であるが、これらに限定はされない。アルキニルとは、少なくとも1つの不飽和部位すなわち、炭素間sp三重結合を有する、直鎖状炭素原子、二級炭素原子、三級炭素原子、または環状炭素原子を含む、C2~C18炭化水素である。アルキニルラジカルの例としては、C2~C8炭化水素部分が挙げられ、これは、例えば、アセチレン性-C≡CHおよびプロパルギル-CH2C≡CHであるが、これらに限定はされない。アルキレンとは、1~18個の炭素原子からなる飽和した、分枝もしくは直鎖もしくは環状の炭化水素ラジカルであり、かつ親アルカンの同じ炭素原子もしくは異なる2つの炭素原子から2つの水素原子が除去されることによって誘導される2つの一価ラジカル中心を有する。代表的なアルキレンラジカルとしては、C1~C8炭化水素部分が挙げられ、例えば、メチレン-CH2-1,2-エチル-CH2CH2-、1,3-プロピル-CH2CH2CH2-、1,4-ブチル-CH2CH2CH2CH2-であるが、これらに限定はされない。アルケニレンとは、2~18個の炭素原子の不飽和の、分枝もしくは直鎖の、または、環式の炭化水素ラジカルであって、親アルケンの同じかまたは2つの異なる炭素原子から、2つの水素原子を除去することによって誘導された2個の一価ラジカル中心を有する、炭化水素ラジカルをいう。代表的なアルケニレンラジカルとしては、C2~C8炭化水素部分例えば、1,2-エチレン-CH=CH-であるがこれらに限定されないが挙げられる。アルキニレンとは、2~18個の炭素原子の、不飽和の、分枝もしくは直鎖の、または、環式の炭化水素ラジカルであって、親アルキンの同じかまたは2つの異なる炭素原子から、2つの水素原子を除去することによって誘導された2個の一価ラジカル中心を有する、炭化水素ラジカルをいう。代表的なアルキニレンラジカルとしては、C2~C8炭化水素部分例えば、アセチレン-C≡C-、プロパルギル-CH2C≡C-および4-ペンチニル-CH2CH2CH2C≡C-であるがこれらに限定されないが挙げられる。アリールは、単独で、もしくは、組み合せて、親の芳香族環系の単一の炭素原子から1個の水素原子を除去することによって誘導された、6~20個の炭素原子の、一価の芳香族炭化水素ラジカルを意味する。アリールラジカルは、1、2または3個の環を含み得、このような環は、吊り下がった様式で互いに結合していても例えば、ビフェニル、縮合していても例えば、ナフタレンまたはアントラセンよい。いくつかのアリール基は、Arとして例示的な構造において表される。代表的なアリール基としては、C6~C12の炭化水素部分例えば、ベンゼンから誘導されたラジカル、置換ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、ビフェニルなどであるがこれらに限定されないが挙げられる。アリールアルキルとは、炭素原子代表的には、末端もしくはsp3の炭素原子に結合した水素原子の1つが、アリールラジカルによって置き換えられている、非環式のアルキルラジカルをいう。代表的なアリールアルキル基としては、ベンジル、2-フェニルエタン-1-イル、2-フェニルエテン-1-イル、ナフチルメチル、2-ナフチルエタン-1-イル、2-ナフチルエテン-1-イル、ナフトベンジル、2-ナフトフェニルエタン-1-イルなどが挙げられるが、これらに限定はされない。アリールアルキル基は、6~20個の炭素原子を含み、例えば、アリールアルキル基のアルキル部分アルカニル基、アルケニル基もしくはアルキニル基を含むは、1~6個の炭素原子であり、そして、アリール部分は、5~14個の炭素原子である。ヘテロアリールアルキルとは、炭素原子代表的には、末端もしくはsp3の炭素原子に結合した水素原子の1つが、ヘテロアリールラジカルによって置き換えられている、非環式のアルキルラジカルをいう。代表的なヘテロアリールアルキル基としては、2-ベンズイミダゾリルメチル、2-フリルエチルなどが挙げられるがこれらに限定はされない。ヘテロアリールアルキル基は、6~20個の炭素原子を含み、例えば、ヘテロアリールアルキル基のアルキル部分アルカニル基、アルケニル基もしくはアルキニル基を含むは、1~6個の炭素原子であり、そして、ヘテロアリール部分は、5~14個の炭素原子、および、N、O、PおよびSから選択される1~3個の複素原子である。ヘテロアリールアルキル基のヘテロアリール部分は、3~7個の環員を有する単環環員のうち2~6個は炭素原子である、または、7~10個の環員を有する二環式環員のうち4~9個は炭素原子であり、1~3個は、N、O、PおよびSから選択されるの複素原子である例えば、ビシクロ[4,5]、[5,5]、[5,6]、または[6,6]の系であり得る。アルキル基、アルキレン基、アリール基、アリールアルキル基およびヘテロアリールアルキル基は、置換され得、これらの基において、1つ以上の水素原子が、各々、置換基によって置換される。代表的な置換基としては、-X、-R、-O-、-OR、-SR、-S-、-NR2、-NR3、=NR、-CX3、-CN、-OCN、-SCN、-N=C=O、-NCS、-NO、-NO2、=N2、-N3、-NC=OR、-C=OR、-C=ONR2、-SO3-、-SO3H、-S=O2R、-OS=O2OR、-S=O2NR、-S=OR、-OP=OOR2、-P=OOR2、-PO-3、-PO3H2、-C=OR、-C=OX、-C=SR、-CO2R、-CO2-、-C=SOR、-C=OSR、-C=SSR、-C=ONR2、-C=SNR2、-C=NRNR2ここで、各Xは、独立してハロゲンF、Cl、BrまたはIであり;そして、各Rは、独立して、H、C1~C18アルキル、C6~C20アリール、C3~C14複素環、保護基もしくはプロドラッグ部分であるが挙げられるが、これらに限定はされない。上述のアルキレン基、アルケニレン基およびアルキニレン基もまた同様に置換され得る。ヘテロアリールは、複素環もしくはヘテロシクリルとしても公知であり、環系ラジカルであって、1個以上の環原子がヘテロ原子例えば、窒素、酸素および硫黄であるものをいう。このヘテロアリールラジカルは、5~14個の炭素原子およびN、O、PおよびSから選択される1~3個のヘテロ原子を含む。ヘテロアリールは、3~7個の環員2~6個の炭素原子およびN、O、PおよびSから選択される1~3個のヘテロ原子を有する単環であってもよいし、または7~10個の環員4~9個の炭素原子およびN、O、PおよびSから選択される1~3個のヘテロ原子を有する二環例えば、ビシクロ[4,5]系、ビシクロ[5,5]系、ビシクロ[5,6]系、またはビシクロ[6,6]系であってもよい。ヘテロアリール化合物は、Paquette,LeoA.;PrinciplesofModernHeterocyclicChemistryW.A.Benjamin,NewYork,1968,特に第1章、第3章、第4章、第6章、第7章および第9章;TheChemistryofHeterocyclicCompounds,AseriesofMonographsJohnWileySons,NewYork,1950から現在、特に第13巻、第14巻、第16巻、第19巻、および第28巻;ならびにJ.Am.Chem.Soc.196082:5566において記載されている。リンカーまたは連結とは、抗体を薬物部分に共有結合する共有結合または原子の鎖を含む化学部分を意味する。種々の実施形態において、リンカーは、Lとして特定される。リンカーとしては、二価ラジカル例えば、アルキレン、アリーレン、ヘテロアリーレン、-CR2nOCR2n-のような部分、アルコキシの反復単位例えば、ポリエチレンオキシ、PEG、ポリメチレンオキシおよびアルキルアミノ例えば、ポリエチレンアミノ、JeffamineTM;ならびに二酸エステルおよびアミドスクシネート、スクシンアミド、ジグリコレート、マロネート、およびカプロアミドが挙げられるが挙げられる。用語キラルとは、鏡像パートナーの重ね合わせできない特性を有する分子をいう一方で、用語アキラルとは、それらの鏡像パートナーが重ね合わせできる分子をいう。用語立体異性体とは、同一の化学組成を有するが、空間における原子または基の配置が異なる化合物をいう。ジアステレオマーとは、2つ以上のキラル中心を有しかつその分子が互いに鏡像でない立体異性体をいう。ジアステレオマーは、異なる物理的特性例えば、融点、沸点、スペクトル特性、および反応性を有する。ジアステレオマーの混合物は、高分離能分析手順例えば、電気泳動およびクロマトグラフィーの下で分離し得る。エナンチオマーとは、互いに鏡像を重ね合わせられない化合物の立体異性体をいう。本明細書で使用される立体化学の定義および規約は、一般に、S.P.Parker,編,McGraw-HillDictionaryofChemicalTerms1984McGraw-HillBookCompany,NewYork;ならびにEliel,E.およびWilen,S.,StereochemistryofOrganicCompounds1994JohnWileySons,Inc.,NewYorkに従う。多くの有機化合物は、光学的に活性な形態で存在するすなわち、それらは、平面偏光の面を回転する能力を有する。光学的に活性な化合物を記載するにあたって、接頭辞DおよびL、またはRおよびSは、そのキラル中心について分子の絶対配置を示すために使用される。接頭辞dおよびlまたはおよび-は、その化合物による平面偏光の回転のしるしを示すように示される。-またはlは、その化合物が左旋性であることを意味する。またはdの接頭辞が付いた化合物は、右旋性である。所定の化学構造に関して、これらの立体異性体は、それらが互いに鏡像であることを除いて、同一である。特定の立体異性体はまた、エナンチオマーをいい、このような異性体の混合物はしばしば、鏡像体混合物といわれる。エナンチオマーの50:50混合物は、ラセミ混合物またはラセミ体といわれ、これは、化学反応またはプロセスにおいて立体選択性または立体特異性がない場合に生じ得る。用語ラセミ混合物およびラセミ体とは、光学活性を除いて、2つのエナンチオマー種の当モル混合物をいう。語句薬学的に受容可能な塩とは、本明細書で使用される場合、ADCの薬学的に受容可能な有機塩または無機塩をいう。例示的な塩としては、硫酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩酸塩、臭素酸塩、ヨウ化物塩、硝酸塩、硫酸水素塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシネートgentisinate、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、サッカリン酸塩、蟻酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩、およびパモ酸塩すなわち、1,1’-メチレン-ビス-2-ヒドロキシ-3-ナフトエ酸塩が挙げられるが、これらに限定されない。薬学的に受容可能な塩は、別の分子例えば、酢酸イオン、コハク酸イオンまたは他の対イオンの包含を伴い得る。この対イオンは、親化合物の電荷を安定させる任意の有機部分または無機部分であり得る。さらに、薬学的に受容可能な塩は、その構造において1つより多くの荷電した原子を有し得る。複数の荷電した原子が、薬学的に受容可能な塩の一部である場合は、複数の対イオンを有し得る。従って、薬学的に受容可能な塩は、1個以上の荷電した原子および/または1個以上の対イオンを有し得る。薬学的に受容可能な溶媒和物とは、1個以上の溶媒分子と1個のADCの会合をいう。薬学的に受容可能な溶媒和物を形成する溶媒の例としては、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、DMSO、酢酸エチル、酢酸、およびエタノールアミンが挙げられるが、これらに限定されない。抗体-薬物結合体本発明の化合物は、抗癌活性に関する有用性を有するものを包含する。特に、この化合物は、結合体化した、すなわち、リンカーによって、薬物部分に共有結合した抗体を包含し、ここでこの薬物は、抗体に結合体化していない場合、細胞毒性効果または細胞増殖抑制性効果を有する。従って、薬物部分の生物学的活性は、抗体への結合体化によって調節される。本発明の抗体-薬物結合体ADCは、腫瘍組織への有効用量の細胞毒性薬剤を選択的に送達し得、それによって、より大きな選択性、すなわち、より低い効果的用量が達成され得る。一実施形態において、ADC、またはこのADCの細胞内代謝産物のバイオアベイラビリティーは、対応するメイタンシノイド化合物単独と比較した場合、哺乳動物において改善される。また、このADCのバイオアベイラビリティー、またはこのADCの細胞内代謝産物は、その対応する抗体単独薬物部分もリンカーもなしの、このADCの抗体と比較した場合、哺乳動物において改善される。一実施形態において、上記ADCのメイタンシノイド薬物部分は、抗体-薬物結合体が、細胞表面レセプターに結合するかまたは抗体-薬物結合体の抗体に対して特異的な細胞表面レセプターを有する細胞に入るまで、抗体から切断されない。この薬物部分は、抗体-薬物結合体が細胞に入った後に抗体から切断され得る。このメイタンシノイド薬物部分は、この化合物の抗体またはこの化合物の細胞内代謝産物から、酵素作用、加水分解、酸化、または他の機構によって、哺乳動物の内部で細胞内で切断され得る。例であって、特定作用機構に本発明を限定するとは決して意味せず、上記ADCのメイタンシノイド薬物部分の硫黄原子は、スルホン基またはスルホキシド基に酸化され得る。スルホンおよびスルホキシドに結合した炭素上のプロトンは、細胞内での一般的なまたは酵素的な触媒の条件下で除去され得、ADCの抗体から薬物部分を切断かつ分離するβ脱離断片化fragmentationを生じ得る。あるいは、他の電子吸引基例えば、リンカー、抗体または薬物部分におけるアミドが、細胞内で類似の断片化/切断機構をもたらし得る。抗体-薬物結合体ADCは、以下の式Iによって表され得るか:またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物であり、ここで:Abは、ErbBレセプターに結合するかまたは以下の1~36から選択される1種以上の腫瘍関連抗原もしくは細胞表面レセプターに結合する抗体である:1BMPR1B骨形成タンパク質レセプターIB型、Genbankアクセッション番号NM_001203;2E16LAT1、SLC7A5、Genbankアクセッション番号NM_003486;3STEAP1前立腺の6回膜貫通上皮抗原、Genbankアクセッション番号NM_012449;40772PCA125、MUC16、Genbankアクセッション番号AF361486;5MPFMPF、MSLN、SMR、巨核球増強因子、メソテリン、Genbankアクセッション番号NM_005823;6Napi3bNAPI-3B、NPTIIb、SLC34A2、溶質キャリアファミリー34リン酸ナトリウム、メンバー2、II型ナトリウム依存型リン酸輸送体3b、Genbankアクセッション番号NM_006424;7Sema5bFLJ10372、KIAA1445、Mm.42015、SEMA5B、SEMAG、セマホリン5bHlog、semaドメイン、トロンボスポンジン7回繰り返し1型および1型様、膜貫通ドメインTMおよび短い細胞質ドメイン、セマホリン5B、Genbankアクセッション番号AB040878;8PSCAhlg2700050C12Rik、C530008O16Rik、RIKENcDNA2700050C12、RIKENcDNA2700050C12遺伝子、Genbankアクセッション番号AY358628;9ETBRエンドセリンB型レセプター、Genbankアクセッション番号AY275463;10MSG783RNF124、仮想タンパク質FLJ20315、Genbankアクセッション番号NM_017763;11STEAP2HGNC_8639、IPCA-1、PCANAP1、STAMP1、STEAP2、STMP、前立腺癌関連遺伝子1、前立腺癌関連タンパク質1、前立腺の6回膜貫通上皮抗原2、6回膜貫通前立腺タンパク質、Genbankアクセッション番号AF455138;12TrpM4BR22450、FLJ20041、TRPM4、TRPM4B、一過性レセプター潜在的カチオンチャネルtransientreceptorpotentialcationchannel、サブファミリーM、メンバー4、Genbankアクセッション番号NM_017636;13CRIPTOCR、CR1、CRGF、CRIPTO、TDGF1、奇形癌由来成長因子、Genbankアクセッション番号NP_003203またはNM_003212;14CD21CR2補体レセプター2またはC3DRC3d/エプスタインバーウイルスレセプターまたはHs.73792Genbankアクセッション番号M26004;15CD79bCD79B、CD79β、IGb免疫グロブリン関連β、B29、Genbankアクセッション番号NM_000626;16FcRH2IFGP4、IRTA4、SPAP1ASH2ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質1a、SPAP1B、SPAP1C、Genbankアクセッション番号NM_030764;17HER2Genbankアクセッション番号M11730;18NCAGenbankアクセッション番号M18728;19MDPGenbankアクセッション番号BC017023;20IL20RαGenbankアクセッション番号AF184971;21BrevicanGenbankアクセッション番号AF229053;22EphB2RGenbankアクセッション番号NM_004442;23ASLG659Genbankアクセッション番号AX092328;24PSCAGenbankアクセッション番号AJ297436;25GEDAGenbankアクセッション番号AY260763;26BAFF-RB細胞活性化因子レセプター、BLySレセプター3、BR3、NP_443177.1;27CD22B細胞レセプターCD22-Bアイソフォーム、NP-001762.1;28CD79aCD79A、CD79α;免疫グロブリン関連α;Igβと共有性相互作用しCD79B、IgM分子と表面で複合体を形成し、B細胞分化に関与するシグナルを変換する、B細胞特異的タンパク質;Genbankアクセッション番号NP_001774.1;29CXCR5バーキットリンパ腫レセプター1;CXCL13ケモカインによって活性化され、リンパ球移動および体液性防御において機能し、HIV-2感染においてそしておそらくAIDS、リンパ腫、黒色腫および白血病の発症において役割を果たすGタンパク共役レセプター;Genbankアクセッション番号NP_001707.1;30HLA-DOBペプチドに結合しCD4Tリンパ球にそのペプチドを提示するMHCクラスII分子Ia抗原のβサブユニット、Genbankアクセッション番号NP_002111.1;31P2X5プリン作動性レセプターP2Xリガンドゲート制御イオンチャネル5;細胞外ATPによってゲートされ、シナプス伝達および神経発生に関与し得るイオンチャネル;欠乏症が特発性不安定膀胱の病態生理に寄与し得る;Genbankアクセッション番号NP_002552.2;32CD72B細胞分化抗原CD72、Lyb-2、Genbankアクセッション番号NP_001773.1;33LY64リンパ球抗原64RP105、ロイシンリッチリピートLRRファミリーのI型膜タンパク質、B細胞活性化およびアポトーシスを調節する、機能の欠損が全身性エリテマトーデスを有する患者の疾患活性の増加に関与する、Genbankアクセッション番号NP_005573.1;34FcRH1Fcレセプター様タンパク質1;C2型Ig様ドメインおよびITAMドメインを含み、Bリンパ球分化において役割を果たし得る免疫グロブリンFcドメインに対する推定レセプター;Genbankアクセッション番号NP_443170.1;35IRTA2免疫グロブリンスーパーファミリーレセプター転座関連2、B細胞発生およびリンパ腫形成において役割を果たし得る推定免疫レセプター;転座によるこの遺伝子の脱調節がいくつかのB細胞性悪性腫瘍において生じる、Genbankアクセッション番号NP_112571.1;ならびに36TENB2推定膜貫通プロテオグリカン、EGF/ヘレグリンファミリーの成長因子およびホリスタチンに関連する、Genbankアクセッション番号AF179274ただし抗体は、TA.1ではない。Lは、非ジスルフィドリンカーである。Lとしては、以下の構造が挙げられるが、これらに限定されない:ここで波線は、AbおよびDへの共有結合を示し;Xは、以下であり:Yは以下であり:Rは、独立して、HもしくはC1C6アルキルであり;そしてnは1~12であり;Dは、メイタンシノイド薬物部分である。メイタンシノイドとしては、以下の構造が挙げられるが、これらに限定されない:ここで波線は、Lへの共有結合を示し;Rは、独立して、独立して、HまたはC1~C6アルキルであり;そしてmは、1、2、または3である。この薬物:抗体の比または薬物負荷drugloadingは、式Iの化合物についてのpによって表される。この薬物負荷値pは、1~8である。式Iの化合物としては、種々に負荷されかつ1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個および8個の薬物部分がこの抗体に共有結合されている結合した抗体-薬物結合体の全ての混合物が挙げられる。別の実施形態において、Abは、1個以上の腫瘍関連抗原または1~16および18~36から選択される細胞表面レセプターに結合するすなわち、ErbBレセプターに結合しないHER2が挙げられる抗体である。抗体式Iの抗体単位Ab-は、その範囲内に、レセプター、抗原または所定の標的細胞集団と会合する他の受容部分receptivemoietyと結合するか、または反応的に会合するかまたは複合体形成する抗体の任意の単位を含む。抗体は、任意のタンパク質またはタンパク質様分子であって、治療的にまたは他の方法で生物学的に改変されていると考えられる細胞集団の部分に結合するかまたはこの部分と複合体形成するかまたはこの部分と反応するものであり得る。一局面において、この抗体単位は、メイタンシノイド薬物部分を、この抗体単位が反応する特定の標的細胞集団に送達するように作用する。このような抗体としては、高分子量タンパク質例えば、全長抗体および抗体フラグメントが挙げられるが、これらに限定されない。本発明の抗体-薬物結合体を含む抗体は、好ましくは、それらのネイティブの野生型対応物の抗原結合能力を維持する。従って、本発明の抗体は、好ましくは、特異的に抗原に結合し得る。このような抗原としては、例えば、腫瘍関連抗原TAA、細胞表面レセプタータンパク質および他の細胞表面分子、細胞生存調節因子、細胞増殖調節因子、組織発生もしくは組織分化と関連する例えば、組織発生もしくは組織分化に機能的に寄与することが公知であるかまたは疑われている分子、リンホカイン、サイトカイン、細胞周期調節に関与している分子、脈管形成vasculogenesisに関与する分子および新脈管形成angiogenesisと関連する例えば、新脈管形成に機能的に寄与することが公知であるかまたは疑われている分子が挙げられる。この腫瘍関連抗原は、クラスター分化因子clusterdifferentiationfactorすなわち、CDタンパク質であり得る。本発明の抗体が結合することができる抗原は、上記分類のうちの1つの多くのサブセットであり得る。ここで上記分類の他のサブセットは、別個の特徴目的の抗原に関してを有する他の分子/抗原を含む。一実施形態において、上記抗体-薬物結合体ADCの抗体は、ErbB遺伝子によってコードされるレセプターに特異的に結合する。この抗体は、EGFR、HER2、HER3およびHER4から選択されるErbBレセプターに特異的に結合し得る。このADCは、HER2レセプターの細胞外ドメインECDに特異的に結合し得、HER2レセプターを過剰発現する腫瘍細胞の増殖を阻害する。上記ADCの抗体は、モノクローナル抗体例えば、マウスモノクローナル抗体、キメラ抗体、またはヒト化抗体であり得る。ヒト化抗体は、huMAb4D5-1、huMAb4D5-2、huMAb4D5-3、huMAb4D5-4、huMAb4D5-5、huMAb4D5-6、huMAb4D5-7またはhuMAb4D5-8トラスツズマブであり得る。上記抗体は、抗体フラグメント例えば、Fabフラグメントであり得る。式Iの抗体-薬物結合体ADC中の、癌の処置において有用であり得る抗体としては、細胞表面レセプターおよび腫瘍関連抗原TAAに対する抗体が挙げられるが、これらに限定されない。このような腫瘍関連抗原は、当該分野で公知でありかつ当該分野で周知の方法および情報を用いて抗体を生成することにおいて調製され得る。ガン診断および癌治療のための有効な細胞標的を発見しようとする試みにおいて、研究者らは、膜貫通ポリペプチドまたはそうでなければ、1個以上の正常非癌細胞と比較して、癌細胞の1つ以上の特定の癌細胞の表面に特異的に発現される腫瘍関連ポリペプチドを同定しようとしていた。しばしば、このような腫瘍関連ポリペプチドは、非癌細胞の表面と比較して、癌細胞の表面により豊富に発現される。このような腫瘍関連細胞表面抗原ポリペプチドの同定は、抗体ベースの治療を介する破壊のために、癌細胞を特異的に標的とする能力を起こした。TAAの例としては、以下に列挙された腫瘍関連抗原1~36が挙げられるが、これらに限定されない。便宜上、これらの抗原に関する情報これらの全ては、当該分野で公知であるは、以下に列挙され、NationalCenterforBiotechnologyInformationNCBIの核酸配列およびタンパク質配列の同定の慣例に従って、名称、別名、Genbankアクセッション番号および主な参考文献を含む。TAA1~36に対応する核酸配列およびタンパク質配列は、公のデータベース例えば、GenBankにおいて利用可能である。抗体による標的となる腫瘍関連抗原は、引用された参考文献において同定されている配列に対して、すくなくとも約70、80、85、90、または95の配列同一性を有するか、または引用された参考文献において見いだされる配列を有するTAAと同じ生物学的特性もしくは特徴を実質的に示す全てのアミノ酸配列改変体およびアイソフォームを含む。例えば、改変配列を有するTAAは、一般に、列挙される対応する配列を有するTAAに特異的に結合する抗体に特異的に結合し得る。この配列および本明細書中で具体的に記載される参考文献中の開示は、明確に参考として援用される。腫瘍関連抗原1~36:1BMPR1B骨形態形成タンパク質レセプターIB型、Genbankアクセッション番号NM_001203tenDijke,P.ら,Science2645155:101-1041994,Oncogene1411:1377-13821997;WO2004063362請求項2;WO2003042661請求項12;US2003134790-A1Page38~39;WO2002102235請求項13;Page296;WO2003055443Page91~92;WO200299122実施例2;Page528~530;WO2003029421請求項6;WO2003024392請求項2;図112;WO200298358請求項1;Page183;WO200254940Page100-101;WO200259377Page349-350;WO200230268請求項27;Page376;WO200148204実施例;図4NP_001194骨形態形成タンパク質レセプター,IB型/pid=NP_001194.1-相互参照:MIM:603248;NP_001194.1;AY0659942E16LAT1,SLC7A5,Genbankアクセッション番号NM_003486Biochem.Biophys.Res.Commun.2552,283-2881999,Nature3956699:288-2911998,Gaugitsch,H.W.ら,1992J.Biol.Chem.26716:11267-11273;WO2004048938実施例2;WO2004032842実施例IV;WO2003042661請求項12;WO2003016475請求項1;WO200278524実施例2;WO200299074請求項19;Page127~129;WO200286443請求項27;Pages222,393;WO2003003906請求項10;Page293;WO200264798請求項33;Page93~95;WO200014228請求項5;Page133~136;US2003224454図3;WO2003025138請求項12;Page150;US20050107595;US20050106644;NP_003477溶質キャリアファミリー7陽イオン性アミノ酸トランスポーター,y系,膜5/pid=NP_003477.3-Homosapiens相互参照:MIM:600182;NP_003477.3;NM_015923;NM_003486_13STEAP16回膜貫通前立上皮抗原,Genbankアクセッション番号NM_012449CancerRes.6115,5857-58602001,Hubert,R.S.ら,1999Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.9625:14523-14528;WO2004065577請求項6;WO2004027049図1L;EP1394274実施例11;WO2004016225請求項2;WO2003042661請求項12;US2003157089実施例5;US2003185830実施例5;US2003064397図2;WO200289747実施例5;Page618-619;WO2003022995実施例9;図13A,実施例53;Page173,実施例2;図2A;NP_0365816回膜貫通前立腺上皮抗原相互参照:MIM:604415;NP_036581.1;NM_012449_140772PCA125,MUC16,Genbankアクセッション番号AF361486J.Biol.Chem.27629:27371-273752001;WO2004045553請求項14;WO200292836請求項6;図12;WO200283866請求項15;Page116-121;US2003124140実施例16;US2003091580請求項6;WO200206317請求項6;Page400-408;相互参照:GI:34501467;AAK74120.3;AF361486_15MPFMPF,MSLN,SMR,巨核球増強因子,メソセリン,Genbankアクセッション番号NM_005823Yamaguchi,N.ら,Biol.Chem.2692,805-8081994,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.9620:11531-115361999,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.931:136-1401996,J.Biol.Chem.27037:21984-219901995;WO2003101283請求項14;WO2002102235請求項13;Page287-288;WO2002101075請求項4;Page308-309;WO200271928Page320-321;WO9410312Page52-57;相互参照:MIM:601051;NP_005814.2;NM_005823_16Napi3bNAPI-3B,NPTIIb,SLC34A2,溶質キャリアファミリー34リン酸ナトリウム,メンバー2,II型ナトリウム依存性ホスフェートトランスポーター3b,Genbankアクセッション番号NM_006424J.Biol.Chem.27722:19665-196722002,Genomics622:281-2841999,Feild,J.A.ら,1999Biochem.Biophys.Res.Commun.2583:578-582;WO2004022778請求項2;EP1394274実施例11;WO2002102235請求項13;Page326;EP875569請求項1;Page17-19;WO200157188請求項20;Page329;WO2004032842実施例IV;WO200175177請求項24;Page139-140;相互参照:MIM:604217;NP_006415.1;NM_006424_17Sema5bFLJ10372,KIAA1445,Mm.42015,SEMA5B,SEMAG,セマフォリン5bHlog,semaドメイン,7回トロンボスポンジン反復1型および1型様,膜貫通ドメインTMおよび短い細胞質ドメイン,セマフォリン5B,Genbankアクセッション番号AB040878NagaseT.ら,2000DNARes.72:143-150;WO2004000997請求項1;WO2003003984請求項1;WO200206339請求項1;Page50;WO200188133請求項1;Page41-43,48-58;WO2003054152請求項20;WO2003101400請求項11;アクセッション:Q9P283;EMBL;AB040878;BAA95969.1.Genew;HGNC:10737;8PSCAhlg2700050C12Rik,C530008O16Rik,RIKENcDNA2700050C12,RIKENcDNA2700050C12遺伝子,Genbankアクセッション番号AY358628;Rossら,2002CancerRes.62:2546-2553;US2003129192請求項2;US2004044180請求項12;US2004044179請求項11;US2003096961請求項11;US2003232056実施例5;WO2003105758請求項12;US2003206918実施例5;EP1347046請求項1;WO2003025148請求項20;相互参照:GI:37182378;AAQ88991.1;AY358628_19ETBRエンドセリンB型レセプター,Genbankアクセッション番号AY275463;NakamutaM.ら,Biochem.Biophys.Res.Commun.177,34-39,1991;OgawaY.ら,Biochem.Biophys.Res.Commun.178,248-255,1991;AraiH.ら,Jpn.Circ.J.56,1303-1307,1992;AraiH.ら,J.Biol.Chem.268,3463-3470,1993;SakamotoA.,YanagisawaM.ら,Biochem.Biophys.Res.Commun.178,656-663,1991;ElshourbagyN.A.ら,J.Biol.Chem.268,3873-3879,1993;HaendlerB.ら,J.Cardiovasc.Pharmacol.20,s1-S4,1992;TsutsumiM.ら,Gene228,43-49,1999;StrausbergR.L.ら,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.99,16899-16903,2002;BourgeoisC.ら,J.Clin.Endocrinol.Metab.82,3116-3123,1997;OkamotoY.ら,Biol.Chem.272,21589-21596,1997;VerheijJ.B.ら,Am.J.Med.Genet.108,223-225,2002;HofstraR.M.W.ら,Eur.J.Hum.Genet.5,180-185,1997;PuffenbergerE.G.ら,Cell79,1257-1266,1994;AttieT.ら,Hum.Mol.Genet.4,2407-2409,1995;AuricchioA.ら,Hum.Mol.Genet.5:351-354,1996;AmielJ.ら,Hum.Mol.Genet.5,355-357,1996;HofstraR.M.W.ら,Nat.Genet.12,445-447,1996;SvenssonP.J.ら,Hum.Genet.103,145-148,1998;FuchsS.ら,Mol.Med.7,115-124,2001;PingaultV.ら,2002Hum.Genet.111,198-206;WO2004045516請求項1;WO2004048938実施例2;WO2004040000請求項151;WO2003087768請求項1;WO2003016475請求項1;WO2003016475請求項1;WO200261087図1;WO2003016494図6;WO2003025138請求項12;Page144;WO200198351請求項1;Page124-125;EP522868請求項8;図2;WO200177172請求項1;Page297-299;US2003109676;US6518404図3;US5773223請求項1a;Col31-34;WO2004001004;10MSG783RNF124,仮想タンパク質FLJ20315,Genbankアクセッション番号NM_017763;WO2003104275請求項1;WO2004046342実施例2;WO2003042661請求項12;WO2003083074請求項14;Page61;WO2003018621請求項1;WO2003024392請求項2;図93;WO200166689実施例6;相互参照:LocusID:54894;NP_060233.2;NM_017763_111STEAP2HGNC_8639,IPCA-1,PCANAP1,STAMP1,STEAP2,STMP,前立腺癌関連遺伝子1,前立腺癌関連タンパク質1,6回膜貫通前立腺上皮抗原2,6回膜貫通前立腺タンパク質,Genbankアクセッション番号AF455138Lab.Invest.8211:1573-15822002;WO2003087306;US2003064397請求項1;図1;WO200272596請求項13;Page54-55;WO200172962請求項1;図4B;WO2003104270請求項11;WO2003104270請求項16;US2004005598請求項22;WO2003042661請求項12;US2003060612請求項12;図10;WO200226822請求項23;図2;WO200216429請求項12;図10;相互参照:GI:22655488;AAN04080.1;AF455138_112TrpM4BR22450,FLJ20041,TRPM4,TRPM4B,一過性レセプター電位陽イオン性チャネル,サブファミリーM,メンバー4,Genbankアクセッション番号NM_017636Xu,X.Z.ら,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.9819:10692-106972001,Cell1093:397-4072002,J.Biol.Chem.27833:30813-308202003;US2003143557請求項4;WO200040614請求項14;Page100-103;WO200210382請求項1;図9A;WO2003042661請求項12;WO200230268請求項27;Page391;US2003219806請求項4;WO200162794請求項14;図1A-D;相互参照:MIM:606936;NP_060106.2;NM_017636_113CRIPTOCR,CR1,CRGF,CRIPTO,TDGF1,奇形癌由来増殖因子,Genbankアクセッション番号NP_003203またはNM_003212Ciccodicola,A.ら,EMBOJ.87:1987-19911989,Am.J.Hum.Genet.493:555-5651991;US2003224411請求項1;WO2003083041実施例1;WO2003034984請求項12;WO200288170請求項2;Page52-53;WO2003024392請求項2;図58;WO200216413請求項1;Page94-95,105;WO200222808請求項2;図1;US5854399実施例2;Col17-18;US5792616図2;相互参照:MIM:187395;NP_003203.1;NM_003212_114CD21CR2補体レセプター2またはC3DRC3d/エプスタインバーウイルスレセプターまたはHs.73792Genbankアクセッション番号M26004Fujisakuら,1989J.Biol.Chem.2644:2118-2125;WeisJ.J.ら,J.Exp.Med.167,1047-1066,1988;MooreM.ら,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.84,9194-9198,1987;BarelM.ら,Mol.Immunol.35,1025-1031,1998;WeisJ.J.ら,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.83,5639-5643,1986;SinhaS.K.ら,1993J.Immunol.150,5311-5320;WO2004045520実施例4;US2004005538実施例1;WO2003062401請求項9;WO2004045520実施例4;WO9102536図9.1-9.9;WO2004020595請求項1;アクセッション:P20023;Q13866;Q14212;EMBL;M26004;AAA35786.1.15CD79bCD79B,CD79β,IGb免疫グロブリン関連β,B29,Genbankアクセッション番号NM_000626または11038674Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.20031007:4126-4131,Blood20021009:3068-3076,Mullerら,1992Eur.J.Immunol.226:1621-1625;WO2004016225請求項2,図140;WO2003087768,US2004101874請求項1,page102;WO2003062401請求項9;WO200278524実施例2;US2002150573請求項5,page15;US5644033;WO2003048202請求項1,pages306および309;WO99/558658,US6534482請求項13,図17A/B;WO200055351請求項11,pages1145-1146;相互参照:MIM:147245;NP_000617.1;NM_000626_116FcRH2IFGP4,IRTA4,SPAP1Aホスファターゼアンカータンパク質1aを含むSH2ドメイン,SPAP1B,SPAP1C,Genbankアクセッション番号NM_030764,AY358130GenomeRes.1310:2265-22702003,Immunogenetics542:87-952002,Blood998:2662-26692002,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.9817:9772-97772001,Xu,M.J.ら,2001Biochem.Biophys.Res.Commun.2803:768-775;WO2004016225請求項2;WO2003077836;WO200138490請求項5;図18D-1-18D-2;WO2003097803請求項12;WO2003089624請求項25;相互参照:MIM:606509;NP_110391.2;NM_030764_117HER2ErbB2,Genbankアクセッション番号M11730CoussensL.ら,Science19852304730:1132-1139;YamamotoT.ら,Nature319,230-234,1986;SembaK.ら,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.82,6497-6501,1985;SwierczJ.M.ら,J.CellBiol.165,869-880,2004;KuhnsJ.J.ら,J.Biol.Chem.274,36422-36427,1999;ChoH.-S.ら,Nature421,756-760,2003;EhsaniA.ら,1993Genomics15,426-429;WO2004048938実施例2;WO2004027049図1I;WO2004009622;WO2003081210;WO2003089904請求項9;WO2003016475請求項1;US2003118592;WO2003008537請求項1;WO2003055439請求項29;図1A-B;WO2003025228請求項37;図5C;WO200222636実施例13;Page95-107;WO200212341請求項68;図7;WO200213847Page71-74;WO200214503Page114-117;WO200153463請求項2;Page41-46;WO200141787Page15;WO200044899請求項52;図7;WO200020579請求項3;図2;US5869445請求項3;Col31-38;WO9630514請求項2;Page56-61;EP1439393請求項7;WO2004043361請求項7;WO2004022709;WO200100244実施例3;図4;アクセッション:P04626;EMBL;M11767;AAA35808.1.EMBL;M11761;AAA35808.1.18NCACEACAM6,Genbankアクセッション番号M18728;BarnettT.ら,Genomics3,59-66,1988;TawaragiY.ら,Biochem.Biophys.Res.Commun.150,89-96,1988;StrausbergR.L.ら,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.99:16899-16903,2002;WO2004063709;EP1439393請求項7;WO2004044178実施例4;WO2004031238;WO2003042661請求項12;WO200278524実施例2;WO200286443請求項27;Page427;WO200260317請求項2;アクセッション:P40199;Q14920;EMBL;M29541;AAA59915.1.EMBL;M18728;19MDPDPEP1,Genbankアクセッション番号BC017023Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.9926:16899-169032002;WO2003016475請求項1;WO200264798請求項33;Page85-87;JP05003790図6-8;WO9946284図9;相互参照:MIM:179780;AAH17023.1;BC017023_120IL20RαIL20Ra,ZCYTOR7,Genbankアクセッション番号AF184971;ClarkH.F.ら,GenomeRes.13,2265-2270,2003;MungallA.J.ら,Nature425,805-811,2003;BlumbergH.ら,Cell104,9-19,2001;DumoutierL.ら,J.Immunol.167,3545-3549,2001;Parrish-NovakJ.ら,J.Biol.Chem.277,47517-47523,2002;PletnevS.ら,2003Biochemistry42:12617-12624;SheikhF.ら,2004J.Immunol.172,2006-2010;EP1394274実施例11;US2004005320実施例5;WO2003029262Page74-75;WO2003002717請求項2;Page63;WO200222153Page45-47;US2002042366Page20-21;WO200146261Page57-59;WO200146232Page63-65;WO9837193請求項1;Page55-59;アクセッション:Q9UHF4;Q6UWA9;Q96SH8;EMBL;AF184971;AAF01320.1.21BrevicanBCAN,BEHAB,Genbankアクセッション番号AF229053GaryS.C.ら,Gene256,139-147,2000;ClarkH.F.ら,GenomeRes.13,2265-2270,2003;StrausbergR.L.ら,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.99,16899-16903,2002;US2003186372請求項11;US2003186373請求項11;US2003119131請求項1;図52;US2003119122請求項1;図52;US2003119126請求項1;US2003119121請求項1;図52;US2003119129請求項1;US2003119130請求項1;US2003119128請求項1;図52;US2003119125請求項1;WO2003016475請求項1;WO200202634請求項1;22EphB2RDRT,ERK,Hek5,EPHT3,Tyro5,Genbankアクセッション番号NM_004442Chan,J.およびWatt,V.M.,Oncogene66,1057-10611991Oncogene105:897-9051995,Annu.Rev.Neurosci.21:309-3451998,Int.Rev.Cytol.196:177-2442000;WO2003042661請求項12;WO200053216請求項1;Page41;WO2004065576請求項1;WO2004020583請求項9;WO2003004529Page128-132;WO200053216請求項1;Page42;相互参照:MIM:600997;NP_004433.2;NM_004442_123ASLG659B7h,Genbankアクセッション番号AX092328US20040101899請求項2;WO2003104399請求項11;WO2004000221図3;US2003165504請求項1;US2003124140実施例2;US2003065143図60;WO2002102235請求項13;Page299;US2003091580実施例2;WO200210187請求項6;図10;WO200194641請求項12;図7b;WO200202624請求項13;図1A-1B;US2002034749請求項54;Page45-46;WO200206317実施例2;Page320-321,請求項34;Page321-322;WO200271928Page468-469;WO200202587実施例1;図1;WO200140269実施例3;Pages190-192;WO200036107実施例2;Page205-207;WO2004053079請求項12;WO2003004989請求項1;WO200271928Page233-234,452-453;WO0116318;24PSCA前立腺幹細胞抗原前駆体,Genbankアクセッション番号AJ297436ReiterR.E.ら,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.95,1735-1740,1998;GuZ.ら,Oncogene19,1288-1296,2000;Biochem.Biophys.Res.Commun.20002753:783-788;WO2004022709;EP1394274実施例11;US2004018553請求項17;WO2003008537請求項1;WO200281646請求項1;Page164;WO2003003906請求項10;Page288;WO200140309実施例1;図17;US2001055751実施例1;図1b;WO200032752請求項18;図1;WO9851805請求項17;Page97;WO9851824請求項10;Page94;WO9840403請求項2;図1B;アクセッション:O43653;EMBL;AF043498;AAC39607.1.25GEDAGenbankアクセッション番号AY260763;AAP14954脂肪腫HMGIC融合パートナー様タンパク質/pid=AAP14954.1-Homosapiens種:HomosapiensヒトWO2003054152請求項20;WO2003000842請求項1;WO2003023013実施例3,請求項20;US2003194704請求項45;相互参照:GI:30102449;AAP14954.1;AY260763_126BAFF-RB細胞活性化因子レセプター,BLySレセプター3,BR3,Genbankアクセッション番号AF116456;BAFFレセプター/pid=NP_443177.1-HomosapiensThompson,J.S.ら,Science2935537,2108-21112001;WO2004058309;WO2004011611;WO2003045422実施例;Page32-33;WO2003014294請求項35;図6B;WO2003035846請求項70;Page615-616;WO200294852Col136-137;WO200238766請求項3;Page133;WO200224909実施例3;図3;相互参照:MIM:606269;NP_443177.1;NM_052945_1;AF13260027CD22B細胞レセプターCD22-Bアイソフォーム,BL-CAM,Lyb-8,Lyb8,SIGLEC-2,FLJ22814,Genbankアクセッション番号AK026467;Wilsonら,1991J.Exp.Med.173:137-146;WO2003072036請求項1;図1;相互参照:MIM:107266;NP_001762.1;NM_001771_128CD79aCD79A,CD79α,免疫グロブリン関連α,Igβと共有結合的に相互作用し、IgM分子と細胞表面上で複合体を形成し、B細胞分化に関与するシグナルを伝達するB細胞特異的タンパク質CD79BPROTEINSEQUENCEFullmpggpgv...dvqlekp1..226;226aa,pI:4.84,MW:25028TM:2[P]GeneChromosome:19q13.2,Genbankアクセッション番号NP_001774.10WO2003088808,US20030228319;WO2003062401請求項9;US2002150573請求項4,pages13-14;WO9958658請求項13,図16;WO9207574図1;US5644033;Haら,1992J.Immunol.1485:1526-1531;Muellerら,1992Eur.J.Biochem.22:1621-1625;Hashimotoら,1994Immunogenetics404:287-295;Preud’hommeら,1992Clin.Exp.Immunol.901:141-146;Yuら,1992J.Immunol.1482633-637;Sakaguchiら,1988EMBOJ.711:3457-3464;29CXCR5バーキットリンパ腫レセプター1,CXCL13ケモカインによって活性化され、リンパ球移動および体液性防御において機能し、HIV-2感染、およびおそらく、AIDS、リンパ腫、骨髄腫、および白血病の発生においてにおいて役割を果たすGタンパク質共役レセプターPROTEINSEQUENCEFullmnypltl...atslttf1..372;372aa,pI:8.54MW:41959TM:7[P]GeneChromosome:11q23.3,Genbankアクセッション番号NP_001707.1WO2004040000;WO2004015426;US2003105292実施例2;US6555339実施例2;WO200261087図1;WO200157188請求項20,page269;WO200172830pages12-13;WO200022129実施例1,pages152-153,実施例2,pages254-256;WO9928468請求項1,page38;US5440021実施例2,col49-52;WO9428931pages56-58;WO9217497請求項7,図5;Dobnerら,1992Eur.J.Immunol.22:2795-2799;Barellaら,1995Biochem.J.309:773-779;30HLA-DOBペプチドに結合しかつCD4Tリンパ球にこのペプチドを提示するMHCクラスII分子のβサブユニットIa抗原PROTEINSEQUENCEFullmgsgwvp...vllpqsc1..273;273aa,pI:6.56MW:30820TM:1[P]GeneChromosome:6p21.3,Genbankアクセッション番号NP_002111.1Tonnelleら,1985EMBOJ.411:2839-2847;Jonssonら,1989Immunogenetics296:411-413;Beckら,1992J.Mol.Biol.228:433-441;Strausbergら,2002Proc.Natl.Acad.SciUSA99:16899-16903;Serveniusら,1987J.Biol.Chem.262:8759-8766;Beckら,1996J.Mol.Biol.255:1-13;Naruseら,2002TissueAntigens59:512-519;WO9958658請求項13,図15;US6153408Col35-38;US5976551col168-170;US6011146col145-146;Kasaharaら,1989Immunogenetics301:66-68;Larhammarら,1985J.Biol.Chem.26026:14111-14119;31P2X5プリン作動性レセプターP2Xリガンドゲート制御イオンチャネル5,細胞外ATPによってゲート制御されたイオンチャネルは、シナプス伝達および神経発生に関与し得る。欠損は、突発性排尿筋不安定の病態生理に寄与し得るPROTEINSEQUENCEFullmgqagck...lephrst1..422;422aa,pI:7.63,MW:47206TM:1[P]GeneChromosome:17p13.3,Genbankアクセッション番号NP_002552.2Leら,1997FEBSLett.4181-2:195-199;WO2004047749;WO2003072035請求項10;Touchmanら,2000GenomeRes.10:165-173;WO200222660請求項20;WO2003093444請求項1;WO2003087768請求項1;WO2003029277page82;32CD72B細胞分化抗原CD72,Lyb-2PROTEINSEQUENCEFullmaeaity...tafrfpd1..359;359aa,pI:8.66,MW:40225TM:1[P]GeneChromosome:9p13.3,Genbankアクセッション番号NP_001773.1WO2004042346請求項65;WO2003026493pages51-52,57-58;WO200075655pages105-106;VonHoegenら,1990J.Immunol.14412:4870-4877;Strausbergら,2002Proc.Natl.Acad.SciUSA99:16899-16903;33LY64リンパ球抗原64RP105,B細胞活性化およびアポトーシスを調節するロイシンリッチ反復LRRファミリーのI型膜タンパク質,機能の喪失は、全身性エリテマトーデスを有する患者において増大した疾患活性と関連するPROTEINSEQUENCEFullmafdvsc...rwkyqhi1..661;661aa,pI:6.20,MW:74147TM:1[P]GeneChromosome:5q12,Genbankアクセッション番号NP_005573.1US2002193567;WO9707198請求項11,pages39-42;Miuraら,1996Genomics383:299-304;Miuraら,1998Blood92:2815-2822;WO2003083047;WO9744452請求項8,pages57-61;WO200012130pages24-26;34FcRH1Fcレセプター様タンパク質1,C2型Ig様ドメインおよびITAMドメインを含む免疫グロブリンFcドメインの推定レセプターは、Bリンパ球分化において役割を有し得るPROTEINSEQUENCEFullmlprlll...vdyedam1..429;429aa,pI:5.28,MW:46925TM:1[P]GeneChromosome:1q21-1q22,Genbankアクセッション番号NP_443170.1WO2003077836;WO200138490請求項6,図18E-1-18-E-2;Davisら,2001Proc.Natl.Acad.SciUSA9817:9772-9777;WO2003089624請求項8;EP1347046請求項1;WO2003089624請求項7;35IRTA2免疫グロブリンスーパーファミリーレセプタートランスロケーション関連2,B細胞発生およびリンパ腫発生において考えられる役割を有する推定イムノレセプター;トランスロケーションによる遺伝子の制御解除は、いくつかのB細胞悪性疾患において生じるPROTEINSEQUENCEFullmllwvil...assaphr1..977;977aa,pI:6.88MW:106468TM:1[P]GeneChromosome:1q21,Genbankアクセッション番号ヒト:AF343662,AF343663,AF343664,AF343665,AF369794,AF397453,AK090423,AK090475,AL834187,AY358085;マウス:AK089756,AY158090,AY506558;NP_112571.1WO2003024392請求項2,図97;Nakayamaら,2000Biochem.Biophys.Res.Commun.2771:124-127;WO2003077836;WO200138490請求項3,図18B-1-18B-2;36TENB2TMEFF2,tomoregulin,TPEF,HPP1,TR,推定膜貫通プロテオグリカン,増殖因子およびフォリスタチンのEGF/ヘレグリンファミリーに関連PROTEINSEQUENCEFullmvlwesp...rastrli1..374;374aa,NCBIアクセッション:AAD55776,AAF91397,AAG49451,NCBIRefSeq:NP_057276;NCBIGene:23671;OMIM:605734;SwissProtQ9UIK5;Genbankアクセッション番号AF179274;AY358907,CAF85723,CQ782436WO2004074320配列番号810;JP2004113151配列番号2,4,8;WO2003042661配列番号580;WO2003009814配列番号411;EP1295944pages69-70;WO200230268page329;WO200190304配列番号2706;US2004249130;US2004022727;WO2004063355;US2004197325;US2003232350;US2004005563;US2003124579;US6410506;US6642006l;Horieら,2000Genomics67:146-152;Uchidaら,1999Biochem.Biophys.Res.Commun.266:593-602;Liangら,2000CancerRes.60:4907-12;Glynne-Jonesら,2001IntJCancer.Oct15;942:178-84。抗体の生成種々の方法が、モノクローナル抗体MAbを生成するために使用されてきた。ハイブリドーマ技術これは、単一の型の抗体を生成するクローン化細胞株に言及するは、種々の種マウスmouseマウスmurine、ハムスター、ラットおよびヒトが挙げられるの細胞を利用する。MAbキメラ抗体およびヒト化抗体を含むを調製する他の方法は、遺伝子操作、すなわち、組換えDNA技術を利用する。ポリクローナル抗体は、関連する抗原およびアジュバントの複数回の皮下scまたは腹腔内ip注射によって、動物において惹起され得る。モノクローナル抗体は、実質的に均一な抗体集団から得られる。すなわち、その集団を構成する個々の抗体が、少量で存在し得る天然に存在する考えられる変異を除いて、同一である。ヒト骨髄腫およびマウス-ヒトヘテロミエローマheteromyeloma細胞株もまた、ヒトモノクローナル抗体の生成について記載されてきたKozbor,1984J.Immunol.,133:3001,およびBrodeurら,MonoclonalAntibodyProductionTechniquesandApplications,pp.51-63MarcelDekker,Inc.,NewYork,1987。ハイブリドーマ細胞が増殖している培養培地は、その抗原に対して指向するモノクローナル抗体の生成についてアッセイされる。ハイブリドーマ細胞によって生成されるモノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈降によって、またはインビトロ結合アッセイ例えば、ラジオイムノアッセイRIAもしくは酵素結合免疫ソルベントアッセイELISAによって決定され得る。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、Munsonら,1980Anal.Biochem.107:220のスキャッチャード分析によって決定され得る。モノクローナル抗体をコードするDNAは、従来の手順を使用して例えば、マウス抗体の重鎖および軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合し得るオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって、容易に単離され、配列決定される。このハイブリドーマ細胞は、DNAの供給源として働く。一旦単離されると、このDNAは、発現ベクターの中に配置され得、次いでその発現ベクターは、組換え宿主細胞においてモノクローナル抗体の合成を獲得するために、宿主細胞例えば、E.coli細胞、サルCOS細胞、チャイニーズハムスター卵巣CHO細胞、または別の状況では抗体タンパク質を産生しないミエローマ細胞にトランスフェクトされるUS2005/0048572;US2004/0229310。抗体をコードするDNAの細菌における組換え発現に関する総説論文としては、Skerraら,1993Curr.OpinioninImmunol.5:256-262およびPluckthun1992Immunol.Revs.130:151-188が挙げられる。さらなる実施形態において、モノクローナル抗体または抗体フラグメントは、それぞれ、ファージライブラリーを使用するマウスおよびヒトの抗体の単離を記載する、McCaffertyら,1990Nature348:552-554;Clacksonら,1991Nature352:624-628;およびMarksら,1991J.Mol.Biol.,222:581-597に記載される技術を使用して生成される抗体ファージライブラリーから単離され得る。その後の刊行物は、鎖シャッフリングMarksら、1992Bio/Technology10:779-783ならびに非常に大規模なファージライブラリーを構築するためのストラテジーとしての組み合わせ感染およびインビボ組換えによる高い親和性のnM範囲ヒト抗体の産生を記載しているWaterhouseら1993Nuc.Acids.Res.21:2265-2266。従って、これらの技術は、モノクローナル抗体の単離のための伝統的なモノクローナル抗体ハイブリドーマ技術に対する実行可能な代替技術である。DNAはまた、例えば、相同マウス配列の代わりにヒト重鎖および軽鎖の定常ドメインをコードする配列に置換することによってか米国特許第4,816,567号;およびMorrisonら1984Pros.NatlAcad.Sci.USA,81:6851、または免疫グロブリンコード配列を、非免疫グロブリンポリペプチドをコードする配列の全てまたは一部に共有結合させることによって改変され得る。代表的には、そのような非免疫グロブリンポリペプチドは、抗原に対する特異性を有する一つの抗原結合部位および異なる抗原に対する特異性を有する別の抗原結合部位を含むキメラ二価抗体を作製するために、抗体の定常ドメインに対して置換されるか、またはそれらは、抗体の一つの抗原結合部位の可変ドメインに対して置換される。本発明の抗体-薬物結合体ADCにおいて使用される上記抗体Abの生成についての例示的技術に関する説明が続けられる。抗体の生成は、抗ErbB2抗体に関して例示されるが、ErbBレセプターファミリーの他のメンバーに対する抗体、ならびに任意の他のレセプターまたは腫瘍関連抗原または標的が、類似の様式において生成および改変され得ることは当業者にとって明らかである。抗体の生成のために使用されるべきErbB2抗原は、例えば、所望のエピトープを含む、ErbB2の細胞外ドメインの可溶性形態またはその一部であり得る。あるいは、ErbB2をそれらの細胞表面に発現する細胞例えば、ErbB2を過剰発現するように形質転換されたNIH-3T3細胞;または癌細胞株例えば、SK-BR-3細胞Stancovskiら,1991PNASUSA88:8691-8695は、抗体を生成するために使用され得る。抗体を生成するために有用な他の形態のErbB2は、当業者に明らかである。実施例1は、例示的なヒト化抗ErbB2抗体の生成を記載する。このヒト化抗体は、例えば、ヒト可変重鎖ドメインに組み込まれる非ヒト超可変領域残基を含み得、そしてKabatら,SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版.PublicHealthService,NationalInstitutesofHealth,Bethesda,MD1991に記載される可変ドメイン番号付けシステムを利用して、69H、71Hおよび73Hからなる群より選択される位置で、フレームワーク領域FR置換をさらに含み得る。一実施形態において、このヒト化抗体は、69H、71Hおよび73Hの位置の2つまたは3つの位置においてFR置換を含む。ヒト化の代替法として、ヒト抗体が生成され得る。例えば、免疫に際して、内因性免疫グロブリン生成の非存在かでヒト抗体の完全レパートリーを生成することができるトランスジェニック動物例えば、マウスを生成することが今や可能であるJakobovitsら,1993Proc.Natl.Acad.Sci.USA,90:2551;Jakobovitsら,1993Nature362:255-258;Bruggermannら,1993YearinImmuno.7:33;およびUS5591669;US5589369;US5545807。あるいは、ファージディスプレイ技術McCaffertyら,1990Nature348:552-553は、免疫していないドナーに由来する免疫グロブリン可変Vドメイン遺伝子レパートリーから、インビトロでヒト抗体または抗体フラグメントを生成するために使用され得るJohnson,KevinS.およびChiswell,DavidJ.1993CurrentOpinioninStructuralBiology3:564-571。免疫していないヒトドナー由来のV遺伝子のレパートリーが構築され得、そして多岐のアレイの抗原自己抗原を含むに対する抗体は、以下に記載される技術に本質的に従って単離され得るMarksら,1991J.Mol.Biol.222:581-597;Griffithら,1993EMBOJ.12:725-734;US5565332;US5573905。ヒト抗体はまた、インビトロで活性化したB細胞により生成され得るUS5567610;US5229275。ヒト抗ErbB2抗体が記載されているUS5772997およびWO97/00271。種々の技術が抗体フラグメントの産生のために開発されてきた。伝統的には、これらのフラグメントは、インタクトな抗体のタンパク質分解消化を介して誘導された例えば、以下を参照のこと:Morimotoら,1992JournalofBiochemicalandBiophysicalMethods24:107-117;およびBrennanら,1985Science,229:81。フラグメントは、組換え宿主細胞によっておよび上記で議論された抗体ファージライブラリーから直接産生され得る。Fab’-SHフラグメントは、E.coliから直接回収され得、化学的に結合されて、Fab’2フラグメントを形成し得るCarterら,1992Bio/Technology10:163-167。別のアプローチに従って、Fab’2フラグメントは、組換え宿主細胞培養物から直接単離され得る。抗体フラグメントの産生のための他の技術は、当業者に明白である。他の実施形態において、えり抜きの抗体は、単鎖FvフラグメントscFvである。以下を参照のこと:WO93/16185;米国特許第5,571,894号;および同第5,587,458号。この抗体フラグメントはまた、線状抗体linearantibodyであり得る例えば、米国特許第5,641,870号に記載されるとおり。そのような線状抗体フラグメントは、単一特異性または二重特異性であり得る。少なくとも2つの異なるエピトープについての結合特異性を有する二重特異性抗体Millsteinら,1983,Nature305:537-539は、ErbB2タンパク質の2つの異なるエピトープに結合し得る。他のそのような抗体は、ErbB2結合部位と、EGFR、Erb3および/またはErbB4についての結合部位とを兼ね備え得る。あるいは、抗ErbB2アームは、T細胞レセプター分子例えば、CD2またはCD3のような白血球上のトリガー分子に結合するアームと組み合わされて、またはIgGについてのFcレセプター例えば、FcγRICD64、FcγRIICD32およびFcγRIIICD16、細胞防御機構をErbB2発現細胞へと集中させ得る。二重特異性抗体はまた、ErbB2を発現する細胞に対して細胞毒性因子を局在化させるために使用され得るWO96/16673;US5837234;WO98/02463;US5821337。二重特異的抗体のための精製法が、開示されたWO93/08829;Trauneckerら,1991EMBOJ.10:3655-3659;WO94/04690;Sureshら,1986MethodsinEnzymology121:210;US5731168。二重特異的抗体は、ロイシンジッパーを用いてKostelnyら,1992J.Immunol.1485:1547-1553、および単鎖FvsFv二量体を用いてGruberら,1994J.Immunol.152:5368生成され得る。例えば、インタクトな抗体がFab’2フラグメントを生成するためにタンパク質分解により切断される化学的結合を用いて、抗体フラグメントから二重特異性抗体を生成するための技術もまた、文献に記載されている。調製され得るBrennanら,1985Science229:81。Fab’-SHフラグメントは、E.coliから回収され得、そして二重特異的抗体を形成するために化学的に結合され得るShalabyら,1992J.Exp.Med.175:217-225。ダイアボディー技術は、二重特異的抗体フラグメントを作成するための代替法を提供するHollingerら,1993Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:6444-6448。二価より多い価数を有する抗体が企図される。3つ以上の抗原結合部位を有し、2つ以上の可変ドメインを有する多価のオクトパスOctopus抗体は、上記抗体のポリペプチド鎖をコードする核酸の組換え発現によって容易に生成され得るUS2002/0004586;WO01/77342。例えば、三重特異的抗体trispecificantibodyが、調製され得るTuttら,1991J.Immunol.147:60。抗体のアミノ酸配列改変が企図される。例えば、腫瘍関連抗原に結合する抗体の変異体および種々のアイソフォームは、その抗体の結合親和性および/または他の生物学的特性を改善することが企図される。抗体のアミノ酸配列改変体は、適切なヌクレオチド変化を、その抗体をコードする核酸に導入するか、またはペプチド合成によって調製される。このような改変としては、例えば、その抗体のアミノ酸配列からの残基の欠失および/またはその配列への残基の挿入および/またはその配列内の残基の置換が挙げられる。欠失、挿入、および置換の任意の組み合わせが、最終構築物が、望ましい特性を有することを条件として、最終的構築物に達するために行われる。アミノ酸変化はまた、その抗体の翻訳後プロセスを変化させ得る例えば、グリコシル化部位の数または位置の変化。変異誘発のための好ましい位置である抗体の特定の残基または領域を同定するために有用な方法は、アラニンスキャニング変異誘発CunninghamおよびWells1989Science244:1081-1085であり、この方法において、アミノ酸残基、または、標的残基の群が同定され例えば、荷電した残基例えば、arg、asp、his、lys、およびgluが、アミノ酸と抗原との相互作用を最適にするために、中性アミノ酸または負に荷電した残基例えば、アラニンまたはポリアラニンによって置換される。アミノ酸配列挿入は、1残基~100個以上の残基を含むポリペプチドの長さの範囲に及ぶアミノ末端融合物および/またはカルボキシル末端融合物、ならびに単一アミノ酸残基または複数アミノ酸残基の内部配列挿入物を含む。末端挿入の例としては、N末端メチオニル残基を有する抗ErbB2抗体または細胞毒性ポリペプチドに融合された抗体が挙げられる。抗ErbB2抗体分子の他の挿入改変体としては、酵素への例えば、ADEPTに関して:Tietzeら,2003CurrentPharm.Design9:2155-2175、または抗体の血清半減期を増大させるポリペプチド例えば、アルブミン結合ペプチドへの抗ErbB2抗体のN末端またはC末端の融合物が挙げられる。血漿-タンパク質結合は、短命の分子の薬物動態特性を改善する有効な手段であり得る。アルブミンは、結晶中で最も豊富なタンパク質である。血清アルブミン結合ペプチドABPは、融合した活性ドメインタンパク質の薬物動態組織取り込み、浸透、および拡散を含むを変化させ得る。これらの薬物動態パラメーターは、適切な血清アルブミン結合ペプチド配列の具体的な選択によって調節され得るUS20040001827。一連のアルブミン結合ペプチドは、ファージディスプレイスクリーニングによって同定されたDennisら,2002AlbuminBindingAsAGeneralStrategyForImprovingThePharmacokineticsOfProteinsJBiolChem.277:35035-35043;WO01/45746。本発明の化合物は、以下によって教示されるABP配列を含む:iDennisら,2002JBiolChem.277:35035-35043表IIIおよび表IV、35038頁;iiUS20040001827[0076]配列番号9~22;およびiiiWO01/4574612~13頁、配列番号z1-z14これらは全て、本明細書に参考として援用される。上記のアミノ酸配列は、通常、基礎となる核酸配列を変更することによって変化させられる。上記抗体のアミノ酸配列改変体をコードする核酸分子は、当該分野で公知の種々の方法によって調整される。これらの方法としては、天然供給源からの単離天然に存在するアミノ酸配列改変体の場合またはオリゴヌクレオチド指向性または部位指向性変異誘発による調製、PCR変異誘発、および先に調製した改変体または抗体の非改変バージョンのカセット変異誘発が挙げられるが、これらに限定されない。実質的な変異誘発のための最も重要な部位としては、超可変領域が挙げられる、FR改変もまた、企図される。上記抗体の生物学的特性における実質的な改変は、a置換の領域におけるポリペプチド骨格の例えば、シートコンホメーションまたはらせんコンホメーションとしての維持、b標的部位における分子の荷電もしくは疎水性の維持、またはc側鎖のかさ高さの維持、に対するそれらの影響が有意に異なる置換を選択することによって達成される。天然に存在する残基は、共通の側鎖の特性に基づいて以下のような群に分類される:1疎水性:ノルロイシン、met、ala、val、leu、ile;2中性親水性:cys、ser、thr;3酸性:asp、glu;4塩基性:asn、gln、his、lys、arg;5鎖方向に影響を与える残基:gly、pro;および6芳香族性:trp、tyr、phe。非保存的置換は、これらのクラスのうちの1つのメンバーを他のクラスのものに交換することを包含する。上記抗体の適切なコンホメーションの維持に関与しない任意のシステイン残基はまた、一般にセリンに置換されて、その分子の酸化に対する安定性を改善し得、そして異常な架橋を妨害し得る。逆に、システイン結合は、その抗体に付加されて、その安定性特に、その抗体がFvフラグメントのような抗体フラグメントである場合を改善し得る。上記抗体の血清半減期を増大させるために、例えば、US5739277に記載のように、サルベージレセプター結合エピトープsalvagereceptorbindingepitopeが上記抗体特に抗体フラグメントに組み込まれ得る。本明細書で使用される場合、用語サルベージレセプター結合エピトープとは、IgG分子のインビボでの血清半減期の増大を担う、IgG分子例えば、IgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4のFc領域のエピトープをいうUS2003/0190311、US6821505;US6165745;US5624821;US5648260;US6165745;US5834597。抗体のグリコシル化改変体は、抗体のグリコシル化パターンが変化した改変体である。変化するとは、抗体において見出される1つ以上の炭水化物部分の欠失、抗体への1つ以上の炭水化物部分の付加、グリコシル化の組成グリコシル化パターン、またはグリコシル化の程度の変化を意味する。抗体は、それらの定常領域における保存された位置でグリコシル化され得るN結合型またはO結合型Hseら,1997J.Biol.Chem.272:9062-9070;JefferisおよびLund,1997Chem.Immunol.65:111-128;WrightおよびMorrison,1997TibTECH15:26-32。免疫グロブリンのオリゴ糖側鎖は、タンパク質の機能にBoydら,1996Mol.Immunol.32:1311-1318;WittweおよびHoward,1990Biochem.29:4175-4180、ならびに糖タンパク質のコンホメーションに影響を与え得る糖タンパク質の部分と糖タンパク質の提示された三次元表面との間の分子内相互作用にHefferisおよびLund,前出;WyssおよびWagner1996CurrentOpin.Biotech.7:409-416影響を及ぼす。オリゴ糖はまた、特定の認識構造に基づいて、特定の分子へ、所定の糖タンパク質を標的化するように作用し得るMalhotraら,1995NatureMed.1:237-243;Umanaら,1999NatureBiotech.17:176-180。オリゴ糖の除去は、抗体の抗原結合および他の特性を最適化し得るBoydら,1996Mol.Immunol.32:1311-1318。抗体の組換え生成の間のグリコシル化に影響を及ぼす要因としては、増殖様式、培地処方、培養密度、酸素付加、pH、精製スキームなどが挙げられるUS5047335;US5510261;US5278299。グリコシル化、またはグリコシル化の特定の型は、例えば、エンドグリコシダーゼHEndoHを用いて、糖タンパク質から酵素的に除去され得る。さらに、組換え宿主細胞は、遺伝子的に操作され得、例えば、特定の型の多糖をプロセシングすることにおいて欠損性にし得る。これらおよび類似の技術が、当該分野で周知である。抗体のグリコシル化構造は、炭水化物分析レクチンクロマトグラフィー、NMR、質量分析法、HPLC、GPC、単糖組成分析、逐次的酵素消化、およびHPAEC-PADこれは、電荷に基づいてオリゴ糖を分離するために、高pH陰イオン交換クロマトグラフィーを利用するが挙げられるの従来からの技術によって、容易に分析され得る。分析目的でオリゴ糖を遊離させるための方法もまた公知であり、これらの方法としては、酵素処理一般には、ペプチド-N-グリコシダーゼF/エンド-β-ガラクトシダーゼを用いて行われる、主にO結合型構造を遊離させるために、過酷なアルカリ性環境を使用する脱離、ならびにN結合型オリゴ糖およびO結合型オリゴ糖の両方を遊離させるために無水ヒドラジンを使用する化学的方法が挙げられるが、これらに限定されない。メイタンシノイド薬物部分メイタンシン化合物は、マイクロチューブリンタンパク質、チューブリンの重合の阻害を介して、有糸分裂の間に微小管の形成を阻害することによって、細胞増殖を阻害するRemillardら,1975Science189:1002-1005;US5208020。メイタンシンおよびメイタンシノイドは、高度に細胞毒性であるが、それらの癌治療における臨床使用は、主にそれらの腫瘍に対する選択性が乏しいことに起因したそれらの重篤な全身的な副作用によって、非常に制限されてきた。メイタンシンの臨床試験は、中枢神経系および胃腸系に対する重篤な副作用に起因して中断されたIsselら,1978Can.Treatment.Rev.5:199-207。メイタンシノイド薬物部分は、抗体-薬物結合体における魅力的な薬物部分である。なぜなら、それらは、i比較的、醗酵または化学的修飾、醗酵生成物の誘導体化による調製のために接近しやすい、ii非ジスルフィドリンカーを介して抗体に結合体化するために適切な官能基で誘導体化しやすい、iii結晶中で安定である、そしてiv種々の腫瘍細胞株に対して有効である、からである。メイタンシノイド薬物部分としての使用に適したメイタンシン化合物は、当該分野で周知であり、そして公知の方法に従って、天然の供給源から単離され得るか、遺伝子操作技術を使用して生成され得るYuら,2002PNAS99:7968-7973を参照のことか、またはメイタンシノールmaytansinolおよびメイタンシノールアナログは、公知の方法に従って合成により調製され得る。例示的なメイタンシノイド薬物部分としては、改変された芳香族環を有するもの例えば、C-19-デクロロUS4256746アンサマイトシンP2の水酸化リチウムアルミニウム還元により調製される;C-20-ヒドロキシまたはC-20-デメチル/-C-19-デクロロ米国特許第4361650号および同第4307016号StreptomycesまたはActinomycesを使用する脱メチル化あるいはLAHを使用する脱塩素によって調製される;およびC-20-デメトキシ、C-20-アシルオキシ-OCOR、/-デクロロUS4294757アシルクロリドを使用するアシル化によって調製される、ならびに他の位置で改変を有するものが挙げられる。例示的なメイタンシノイド薬物部分はまた、改変を有するもの例えば、C-9-SHメイタンシノールと、H2SもしくはP2S5との反応によって調製されるUS4424219;C-14-アルコキシメチルデメトキシ/CH2ORUS4331598;Nocardiaから調製されるC-14-ヒドロキシメチルまたはアシルオキシメチルCH2OHもしくはCH2OAcUS4450254;C-15-ヒドロキシ/アシルオキシStreptomycesによるメイタンシノールの変換によって調製されるUS4364866;C-15-メトキシTrewianudlfloraから単離されるUS4313946およびUS4315929;C-18-N-デメチルStreptomycesによりメイタンシノールの脱メチル化によって調製されるUS4362663およびUS4322348;ならびに4,5-デオキシメイタンシノールの三塩化チタン/LAH還元によって調製されるUS4371533が挙げられる。メイタンシン化合物上の多くの位置が、結合の型に依存して、結合位置として有用であることが公知である。例えば、エステル結合の形成に関しては、ヒドロキシル基を有するC-3位、ヒドロキシメチルで改変されたC-14位、ヒドロキシル基で改変されたC-15位、およびヒドロキシル基で改変されたC-20位は、全て適している。メイタンシノイド薬物部分Dとしては、以下の構造を有するものが挙げられる:ここで波線は、抗体-薬物結合体ADCのリンカーLへの、Dの硫黄原子の共有結合を示す。Rは、独立して、HもしくはC1C6アルキルであり得る。この硫黄原子へアミド基を結合するアルキレン鎖は、メタニルmethanyl、エタニルethanyl、またはプロピルであり得るすなわち、mは、1、2、もしくは3であるUS633410、5208020、Chariら,1992CancerRes.52:127-131;Liuら,1996Proc.Natl.Acad.Sci93:8618-8623。メイタンシノイド薬物部分の全ての立体異性体は、本発明の化合物について企図されるすなわち、Dのキラル炭素におけるR配置とS配置との任意の組み合わせ。一実施形態において、上記メイタンシノイド薬物部分Dは、以下の立体配置を有する:Dの実施形態としては、以下が挙げられる:DM1N2’-デアセチル-N2’-3-メルカプト-1-オキソプロピル-メイタンシンここでCR2m=CH2CH2;DM3N2’-デアセチル-N-2’4-メルカプト-1-オキソペンチル-メイタンシンここでCR2m=CH2CH2CHCH3;DM4N2’-デアセチル-N2’-4-メチル-4-メルカプト-1-オキソペンチル-メイタンシンここでCR2m=CH2CH2CCH32:アルキル基例えば、DM3およびDM4の硫黄原子に隣り合う炭素上のメチル基により与えられる立体障害は、ADCの細胞内切断の速度に影響を及ぼし得るUS2004/0235840A1。変数アルキル単位CR2mは、従って、インビトロおよびインビボでの効力、有効性、および安全性/毒性に影響を及ぼし得る。リンカー上記リンカーすなわち、Lは、共有結合を介してジスルフィド基を含まない、薬物部分へ抗体を結合する。このリンカーは、式Iの抗体-薬物結合体ADCを形成するために、1以上の薬物部分Dおよび抗体単位Abを連結するために使用され得る二官能性または多官能性部分である。抗体-薬物結合体ADCは、薬物へおよび抗体へ結合するための反応性官能基を有するリンカーを使用して、従来通り調製され得る。システインチオール、またはアミン例えば、抗体AbのN末端もしくはリジンのようなアミノ酸側鎖は、リンカー試薬、薬物部分または薬物-リンカー試薬の官能基との結合を形成する。上記リンカーは、好ましくは、細胞外で安定である。細胞への輸送または送達の前に、上記抗体-薬物結合体ADCは、好ましくは、安定でありかつインタクトなままであるすなわち、抗体は、薬物部分に結合されたままである。このリンカーは、標的細胞の外で安定であり、細胞内である効率的速度で切断され得る。有効なリンカーは、i抗体の特異的結合特性を維持する;ii上記結合体または薬物部分の細胞内送達を可能にする;iiiその標的とされた部位に送達または輸送されるまで、安定でありかつインタクトなままであるすなわち、切断されない;そしてivメイタンシノイド薬物部分の細胞毒性、細胞殺傷効果または細胞増殖抑制性効果を維持する。上記ADCの安定性は、標準的な分析技術例えば、質量分析法、HPLC、および分離/分析技術LC/MSにより測定され得る。上記抗体および薬物部分の共有結合は、リンカーが2つの反応性官能基すなわち、反応の意味において二価を有することを要する。2つ以上の官能部分または生物学的に活性な部分例えば、ペプチド、核酸、薬物、毒素、抗体、ハプテン、およびレセプター基を結合するために有用である二価リンカー試薬は公知であり、方法は、それらの得られた結合体を記載したHermanson,G.T.1996BioconjugateTechniques;AcademicPress:NewYork,p234-242。リンカーは、以下から選択される構造を有し得る:ここで波線は、何れの方向でのAbおよびDへの共有結合を示す。Xは、何れの方向においても上記の構造を有し得る:ここでRは、独立して、HまたはC1~C6アルキルであり;そしてnは1~12である。Yは、何れの方向においても、以下の構造を有し得る:ここでRは、独立して、HまたはC1~C6アルキルであり;そしてnは1~12である。例えば、このリンカーは、SMCCと称される以下の構造を有し得る:。別の実施形態において、リンカーLは、以下の構造を有する:。ここで波線は、何れの方向においても、AbおよびDへの共有結合を示す。例えば、上記リンカーは、SIABと称される以下の構造を有し得る:。別の実施形態において、リンカーLは、以下の構造を有する:。別の実施形態において、上記リンカーは、可溶性または反応性を調節した基で置換され得る。例えば、スルホネート置換基は、試薬の水溶性を増大し得、そしてADCを調製するために使用される合成経路に依存して、リンカー試薬と上記抗体または薬物部分との結合反応を促進し得るかまたはAb-LとD、またはD-LとAbとの結合反応を促進し得る。別の実施形態において、リンカーは、抗体上に存在する求電子性基に反応性である求核性基を有する反応性官能基を有する。抗体上の有用な求電子性基としては、アルデヒド基およびケトンカルボニル基が挙げられるが、これらに限定されない。リンカーの求電子性基のヘテロ原子は、抗体上の求電子性基と反応し得、かつ抗体単位への共有結合を形成し得る。リンカー上の有用な求核性基としては、ヒドラジド、オキシム、アミノ、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレート、およびアリールヒドラジドが挙げられるが、これらに限定されない、抗体上の求電子性基は、リンカーへの結合に都合のよい部位を提供する。リンカーは、1個以上のアミノ酸単位を含む、ペプチド単位であり得る。ペプチドリンカー試薬は、自動化合成機例えば、RaininSymphonyPeptideSynthesizerProteinTechnologies,Inc.,Tucson,AZまたはModel433AppliedBiosystems,FosterCity,CAでのペプチド化学の分野において周知の固相合成法または液相合成法t-BOC化学Geiserら,Automationofsolid-phasepeptidesynthesis、MacromolecularSequencingandSynthesis,AlanR.Liss,Inc.,1988,pp.199-218およびFmoc/HBTU化学Fields,G.およびNoble,R.1990Solidphasepeptidesynthesisutilizing9-fluoroenylmethoxycarbonylaminoacids,Int.J.PeptideProteinRes.35:161-214を含むによって調製され得るE.SchroederおよびK.Lubke,ThePeptides,volume1,pp76-1361965AcademicPress。この化合物は、PierceBiotechnology,Inc.,CustomerServiceDepartment,P.O.Box117,Rockford,IL61105U.S.A,U.S.A1-800-874-3723,International815-968-0747から市販されている架橋リンカー試薬:BMPEO、BMPS、EMCS、GMBS、HBVS、LC-SMCC、MBS、MPBH、SBAP、SIA、SIAB、SMCC、SMPB、SMPH、スルホ-EMCS、スルホ-GMBS、スルホ-KMUS、スルホ-MBS、スルホ-SIAB、スルホ-SMCCおよびスルホ-SMPB、ならびにSVSBスクシンイミジル-4-ビニルスルホンベンゾエートビス-マレイミド試薬:DTME、BMB、BMDB、BMH、BMOE、BMPEO3、およびBMPEO4が挙げられるで調製されたADCが明らかに企図されるが、これらに限定されない。467~498頁、2003-2004ApplicationsHandbookandCatalogを参照のこと。ビス-マレイミド試薬は、逐次的または同時の様式で、チオール含有薬物部分、標識、またはリンカー中間体への、抗体のシステイン残基の遊離チオール基の結合を可能にする。抗体、メイタンシノイド薬物部分、またはリンカー中間体のチオール基と反応する、マレイミド以外の官能基としては、ヨードアセトアミド、ブロモアセトアミド、ビニルピリジン、ジスルフィド、ピリジルジスルフィド、イソシアネート、およびイソチオシアネートが挙げられる。。DM1がBMPEOリンカーを介してトラスツズマブのチオール基に連結される例示的な抗体-薬物結合体は、以下の構造を有する:ここでTrは、トラスツズマブであり;nは、0、1、または2であり;そしてpは、1、2、3、または4である。有用なリンカー試薬はまた、他の商業的供給源例えば、MolecularBiosciencesInc.Boulder,COを介して得られ得るかまたはTokiら,2002J.Org.Chem.67:1866-1872;FirestoneらのUS6214345;WO02/088172;US2003130189;US2003096743;WO03/026577;WO03/043583;およびWO04/032828に記載される手順に従って合成され得る。上記リンカーは、分枝状多官能性リンカー部分を介して抗体へ1つより多い薬物部分を共有結合するための樹枝状リンカーであり得るSunら,2002BioorganicMedicinalChemistryLetters12:2213-2215;Sunら,2003BioorganicMedicinalChemistry11:1761-1768;Kingら,2002TetrahedronLetters43:1987-1990。樹枝状リンカーは、上記ADCの効力に関連する薬物:抗体のモル比すなわち、負荷を増大し得る。従って、抗体が唯一の反応性システインチオール基を有する場合、複数の薬物部分が、樹枝状リンカーを介して結合され得る。樹枝状リンカー試薬の以下の例示的実施形態は、9つまでの求核性薬物部分試薬が、クロロエチルナイトロジェンマスタードの官能基との反応によって結合体化することを可能にする:。薬物負荷薬物負荷は、式Iの分子におけるp1抗体あたりのメイタンシノイド薬物の平均数によって表される。薬物負荷は、1抗体Abあたり1~8個の薬物Dの範囲であり得る。すなわち、ここで1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、および8個の薬物部分が、上記抗体に共有結合される。式IのADCの組成物は、1個~8個の範囲の薬物と結合体化した抗体の集まりを包含する。結合体化反応からのADCの調製における1抗体あたりの平均薬物数は、従来の手段例えば、質量分析法、ELISAアッセイ、電気泳動、およびHPLCによって特徴づけられ得る。pに関するADCの定量的分布はまた、決定され得る。ELISAによって、ADCの特定の調製物中のpの平均値が、決定され得るHamblettら,2004ClinicalCancerRes.10:7063-7070;Sandersonら,2005ClinicalCancerRes.11:843-852。しかし、p薬物値の分布は、抗体-抗原結合およびELISAの検出限界によって見分けられない。また、抗体-薬物結合体の検出のためのELISAアッセイは、上記薬物部分が、上記抗体例えば、重鎖フラグメントもしくは軽鎖フラグメント、または特定のアミノ酸残基に結合したか否かを決定しない。いくらかの場合において、均質なADCここでpは、他の薬物負荷を有するADCからの特定の値であるの分離、精製、および特徴付けは、逆相HPLCまたは電気泳動のような手段によって達成され得る。いくらかの抗体-薬物結合体に関して、pは、上記抗体上の結合部位の数によって制限され得る。例えば、結合がシステインチオールの場合、上記の例示的実施形態と同様に、抗体は、唯一のまたは数個のシステインチオール基を有し得るか、または唯一のまたは数個の十分に反応性の、リンカーが結合され得るチオール基を有し得る。より多くの薬物負荷例えば、p>5が、特定の抗体-薬物結合体の凝集、不溶性、毒性、または細胞透過性の喪失を引き起こし得る。代表的には、理論的最大値未満の薬物部分が、結合体化反応の間に、抗体に結合される。抗体は、例えば、薬物-リンカー中間体D-Lまたはリンカー試薬と反応しない多くのリジン残基を含み得る。最も反応性のリジン基のみが、アミン反応性リンカー試薬と反応し得る。また、最も反応性のシステインチオール基のみが、チオール反応性リンカー試薬と反応し得る。一般に、抗体は、薬物部分に連結され得る多くの存在する場合遊離および反応性システインチオール基を含まない。化合物の抗体中の大部分のシステインチオール残基は、ジスルフィド結合として存在し、部分的または完全な還元条件下で、還元剤例えば、ジチオスレイトールDTTまたはTCEPで還元されなければならない。さらに、上記抗体は、反応性の求核性基例えば、リジンまたはシステインを曝すために、変性条件に曝されなければならない。ADCの負荷薬物/抗体比は、いくつかの異なる様式において集められ得る。この様式としては、以下が挙げられる:i抗体に対してモル過剰の薬物-リンカー中間体D-Lまたはリンカー試薬を制限すること、ii結合体化反応の時間または温度を制限すること、そしてiiiシステインチオール改変のための部分的または限定的な還元条件。上記抗体の1個より多い求核性基または求電子性基が、薬物-リンカー中間体と反応するか、またはリンカー試薬、続いて薬物部分試薬と反応する場合、得られた生成物は、抗体へ結合した薬物部分のある分布例えば、1、2、または3などを有するADC化合物の混合物である。液体クロマトグラフィー法例えば、ポリマー逆相PLRPおよび疎水性相互作用HICは、薬物負荷値によって、混合物中の化合物を分離し得る。単一の薬物負荷値pを有するADCの調製物が、単離され得るEffectofdrugloadingonthepharmacology,pharmacokinetics,andtoxicityofananti-CD30antibody-drugconjugate,Hamblett,K.J.ら,AbstractNo.624,AmericanAssociationforCancerResearch;2004AnnualMeeting,March27-31,2004,ProceedingsoftheAACR,Volume45,March2004;ControllingtheLocationofDrugAttachmentinantibody-drugconjugates,Alley,S.C.ら,AbstractNo.627,AmericanAssociationforCancerResearch;2004AnnualMeeting,March27-31,2004,ProceedingsoftheAACR,Volume45,March2004。しかし、これらの単一の負荷値のADCは、なお不均質な混合物であり得る。なぜなら、この薬物部分は、上記抗体の異なる部位で、リンカーを介して結合され得るからである。抗体-薬物結合体の調製式IのADCは、以下を含む当業者に公知の有機化学反応、条件および試薬を使用する幾つかの経路によって調製され得る:1共有結合を介して抗体-リンカー中間体Ab-Lを形成する抗体の求核基もしくは求電子基と二価リンカー試薬との反応、およびそれに続く活性化薬物部分Dとの反応;ならびに2共有結合を介して薬物-リンカー中間体D-Lを形成する薬物部分の求核基もしくは求電子基とリンカー試薬との反応、およびそれに続く抗体の求核基もしくは求電子基との反応。結合体化方法1および2は、種々の抗体、薬物部分、およびリンカーと共に使用されて、式Iの抗体-薬物結合体を調製する。抗体上の求核基としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない:iN末端アミン基、ii側鎖アミン基例えば、リジン、iii側鎖チオール基例えば、システイン、およびiv糖ヒドロキシル基もしくは糖アミノ基であって、ここで、抗体は、グリコシル化されている。アミン基、チオール基、ヒドロキシル基は、求核基であり、そして以下を含むリンカー部分およびリンカー試薬上の求電子基と反応して、共有結合を形成することが可能である:iNHSエステル、HOBtエステル、ハロホルメート、および酸ハロゲン化物のような活性エステル;iiハロアセトアミドのようなハロゲン化アルキルおよびハロゲン化ベンジル;iiiアルデヒド基、ケトン基、カルボキシル基およびマレイミド基。特定の抗体は、還元性鎖内ジスルフィドすなわち、システイン架橋を有する。抗体は、例えば、DTTCleland試薬、ジチオスレイトールもしくはTCEPtris2-カルボキシエチルホスフィンヒドロクロリド;Getzら1999Anal.Biochem.Vol273:73-80;SoltecVentures,Beverly,MAのような還元性試薬による処理によって、リンカー試薬との結合体化について反応性にされ得る。理論上、このようにして、各システインジスルフィド架橋は、2つの反応性チオール求核剤を形成する。さらなる求核基は、リジンの2-イミノチオランTraut試薬との反応アミンのチオールへの変換をもたらすを通して抗体内に導入され得る。抗体-薬物結合体はまた、求電子部分を導入する抗体の改変によって産生され得、この求電子部分は、リンカー試薬もしくは薬物上の求核置換基と反応し得る。グリコシル化抗体の糖は、例えば、過ヨウ素酸酸化によって酸化されて、アルデヒド基もしくはケトン基を形成し得、これらのアルデヒド基もしくはケトン基は、リンカー試薬もしくは薬物部分のアミン基と反応し得る。得られたイミンシッフ塩基の基は、安定的な連結を形成し得るか、または、例えばホウ化水素試薬によって還元されて、安定的なアミン連結を形成し得る。一実施形態において、グリコシル化抗体の炭水化物部分とガラクトース酸化酵素もしくはメタ-過ヨウ素酸ナトリウムのいずれかとの反応は、タンパク質中のカルボニルアルデヒドおよびケトン基を生じ得、これらは、薬物における適切な基と反応し得るHermanson,G.T.1996BioconjugateTechniques;AcademicPress:NewYork,p234-242。別の実施形態において、N末端セリン残基もしくはN末端トレオニン残基を含むタンパク質は、メタ-過ヨウ素酸ナトリウムと反応し得、第1アミノ酸の代わりにアルデヒドの産生をもたらすGeogheganおよびStroh,1992BioconjugateChem.3:138-146;US5362852。このようなアルデヒドは、薬物部分もしくはリンカー求核剤と反応され得る。同様に、薬物部分上の求核基としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない:アミン基、チオール基、ヒドラジン基、オキシム基、ヒドラジン基、チオセミカルバゾン基、ヒドラジンカルボキシレート基、およびアリールヒドラジン基。これらは、以下を含むリンカー部分およびリンカー試薬上の求電子基と反応して共有結合を形成し得る:iNHSエステル、HOBtエステル、ハロホルメート、および酸ハロゲン化物のような活性エステル;iiハロアセトアミドのようなハロゲン化アルキルおよびハロゲン化ベンジル;iiiアルデヒド基、ケトン基、カルボキシル基およびマレイミド基。メイタンシンは、例えば、May-SSCH3に変換され得、May-SSCH3は、遊離のチオールであるMay-SHに還元され得、そして改変抗体と反応されてChariら1992CancerResearch52:127-131、ジスルフィドリンカーによって、メイタンシノイド-抗体免疫結合体を産生し得る。ジスルフィドリンカーを有する抗体-メイタンシノイド結合体は、報告されているWO04/016801;US6884874;US2004/039176A1;WO03/068144;US2004/001838A1;US6441163;US5208020;US5416064;WO01/024763。ジスルフィドリンカーSPPは、リンカー試薬であるN-スクシンイミジル4-2-ピリジルチオペンタノエートによって構築される。抗体-SPP-DM1結合体は、構造によって表される:ジスルフィドS-Sリンカー抗体-薬物結合体は、本発明の非ジスルフィドリンカーADCとの比較の目的のために試験された。トラスツズマブtrastuzumab-SPP-DM1は、実施例3に従って調製されたRanson,M.およびSliwkowskiM.2002Oncology63補遺1:17-24。また、ジスルフィド抗体-薬物結合体:トラスツズマブ-SPDP-DM1、トラスツズマブ-SPP-DM3およびトラスツズマブ-SPP-DM4が、試験された。そしてこれらは以下の構造を有する:。本発明のADCは、SMCCリンカーおよびDM1メイタンシノイド薬物部分を含み、Ab-SMCC-DM1と表される:。Ab-SMCC-DM1の一実施形態は、トラスツズマブ-SMCC-DM1であり、ここで、pは、1、2、3、または4であるAb=トラスツズマブ、Tr、WO2005/037992。ADCの別の実施形態は、トラスツズマブ-SIAB-DM1トラスツズマブ=Trであって、以下の構造を有する:。腫瘍関連抗原および細胞表面レセプターに対して指向される抗体-薬物結合体ADCについてのスクリーニングトランスジェニック動物および細胞株は、腫瘍関連抗原および細胞表面レセプター例えば、HER2US6632979の過剰発現に関する疾患もしくは障害の予防的処置または治療的処置としての可能性を有する抗体-薬物結合体ADCのスクリーニングにおいて、特に有用である。有用なADCについてのスクリーニングは、一定の用量範囲にわたる候補ADCをトランスジェニック動物に投与する工程、および評価されるべき疾患もしくは障害に対するADCの効果を種々の時点でアッセイする工程を、包含する。あるいは、またはさらに、適切な場合、この薬物は、疾患の誘導剤への曝露より前に投与され得るか、もしくは、疾患の誘導剤への曝露と同時に投与され得る。候補ADCは、連続的にかつ個別にスクリーニングされてもよく、または培地の下でもしくは高処理スクリーニングフォーマットの下で平行してスクリーニングされてもよい。疾患もしくは障害の予防的処置または治療的処置のための有用性についてADCがスクリーニングされ得る速度は、合成の速度およびスクリーニング方法論によってのみ制限され、このスクリーニング方法論は、データの検出/測定/分析を含む。一実施形態は、a安定した乳癌細胞株から非ヒト動物へ細胞を移植する工程、bADC薬物候補をこの非ヒト動物に投与する工程、およびcこの移植された細胞株からの腫瘍の形成を阻害するこの候補の能力を決定する工程を包含する、スクリーニング方法である。本発明はまた、レセプタータンパク質の過剰発現によって特徴付けられる疾患または障害の処置のためのADC候補をスクリーニングする方法にも関し、この方法は、a安定した乳癌細胞株由来の細胞を薬物候補に接触させる工程、およびbこの安定した細胞株の増殖を阻害するこのADC候補の能力を評価する工程を包含する。一実施形態は、a安定した乳癌細胞株由来の細胞をADC薬物候補に接触させる工程、およびbHER2のリガンド活性化を遮断するこのADC候補の能力を評価する工程を包含する、スクリーニング方法である。別の実施形態において、ヘレグリン結合を遮断するADC候補の能力が、評価される。別の実施形態において、リガンドによって刺激されるチロシンリン酸化を遮断するADC候補の能力が、評価される。別の実施形態は、a安定した乳癌細胞株からの細胞をADC薬物候補に接触させる工程、およびb細胞死を誘導するADC候補の能力を評価する工程を包含する、スクリーニング方法である。一実施形態において、アポトーシスを誘導するADC候補の能力が、評価される。別の実施形態は、a例えばその乳腺細胞において、天然ヒトタンパク質例えばHER2もしくはそのフラグメントを過剰発現するトランスジェニック非ヒト哺乳動物であって、ここで、このようなトランスジェニック哺乳動物は、この天然ヒトタンパク質もしくはこの天然ヒトタンパク質の生物学的活性を有するそのフラグメントをコードする核酸配列をそのゲノム内に安定的に組み込んでおり、この核酸配列は、この核酸配列の発現を指向する転写調節配列に作動可能に連結されている、トランスジェニック非ヒト哺乳動物であって、そして抗体例えば抗HER2処置に反応しないかもしくはわずかに反応する腫瘍例えば乳房腫瘍を発達させる、トランスジェニック非ヒト哺乳動物、またはこのトランスジェニック非ヒト哺乳動物から移植された腫瘍を保有する非ヒト哺乳動物に、ADC薬物候補を投与する工程、およびb標的疾患もしくは障害に対するADC候補の効果を評価する工程を包含する、スクリーニング方法である。限定されないが、この疾患もしくは障害は、HER2を過剰発現する癌例えば、乳癌、卵巣癌、胃癌、子宮内膜癌、唾液腺癌、肺癌、腎臓癌、結腸癌、甲状腺癌、膵臓癌および膀胱癌である。この癌は、HER2を1細胞あたり少なくとも約500,000コピー発現する乳癌、または1細胞あたり少なくとも約200,000コピー発現する乳癌であり得る。ADC薬物候補は、例えば、細胞死および/またはアポトーシスを誘導するその能力について、当該分野で周知であるアッセイ方法および本明細書中で後述されるアッセイ方法を用いて評価され得る。一実施形態において、候補ADCは、一定の用量範囲にわたってトランスジェニック動物に投与され、そしてこの動物のこの化合物に対する生理学的応答を時間をかけて評価することによってスクリーニングされる。投与は、評価される化合物の化学的性質に依存して、経口であっても、または適切な注射によってもよい。いくつかの場合、この化合物を、この化合物の効力を増強する補因子と組み合わせて投与することが、適切であり得る。被験トランスジェニック動物由来の細胞株が、特定の腫瘍関連抗原タンパク質もしくは細胞表面レセプターの過剰発現例えばHER2過剰発現に関連する種々の疾患の処置において有用である化合物についてのスクリーニングに使用される場合、この試験化合物は、適切な時に細胞培養培地に添加され、そしてこの化合物に対する細胞性応答は、適切な生化学アッセイおよび/または組織学的アッセイを用いて、時間をかけて評価される。幾つかの場合、目的の化合物を、この化合物の効力を増強する補因子と組み合わせて培養培地に加えることが適切であり得る。従って、本発明は、過剰発現されたHER2タンパク質を特異的に標的化しそして結合するADCを同定するためのアッセイを提供する。過剰発現されたHER2タンパク質の存在は、異常な細胞機能に関連し、そして乳房腫瘍の発達の原因として関連する乳腺の細胞性増殖および/または分化の病因に関連する。ErbB例えば、ErbB2レセプターのリガンド活性化を遮断するADCを同定するために、ErbBErbB2レセプターを例えば、目的のErbBレセプターと共にErbBヘテロオリゴマーを形成する別のErbBレセプターと組み合わせて発現する細胞へのErbBリガンド結合を遮断するこの化合物の能力が、決定され得る。例えば、HER2を過剰発現するトランスジェニック動物から単離され、そしてHER2が共にヘテロオリゴマーを形成する別のErbBレセプターを発現するようにトランスフェクトされた細胞は、ADCと共にインキュベートすなわち、培養され得、次いで、標識されたErbBリガンドに曝露され得る。次いで、ErbBヘテロオリゴマーにおいて、ErbBレセプターに対するリガンドを遮断するこの化合物の能力が、評価され得る。例えば、HER2を過剰発現する、本明細書中でトランスジェニック非ヒト哺乳動物例えば、マウスから樹立された乳房腫瘍細胞株への、候補ADCによるヘレグリンHRG結合の阻害は、単層培養物を用いて、24ウェルプレートフォーマットにおいて氷上で実施され得る。抗ErbB2モノクローナル抗体は、各ウェルに添加されて、30分間にわたってインキュベートされ得る。次いで、125I標識化rHRGβ1177-22425,000cpmが添加され、そしてインキュベーションが、4時間~16時間にわたって続けられ得る。用量応答曲線が作成され得、そして目的の化合物についてのIC50値が、計算され得る。あるいは、またはさらに、ErbBヘテロオリゴマーにおいて存在する、ErbBリガンドによって刺激されるErbBレセプターのチロシンリン酸化を遮断する、ADCの能力が、評価され得る。例えば、本明細書中でトランスジェニック動物から樹立された細胞株は、試験ADCと共にインキュベートされ得、次いで、抗ホスホチロシンモノクローナル抗体これは、必要に応じて検出可能な標識と結合体化されるを用いて、ErbBリガンド依存性チロシンリン酸化活性についてアッセイされ得る。US5766863に記載されるキナーゼレセプター活性化アッセイもまた、ErbBレセプター活性化およびこの活性化の上記化合物による遮断を決定するために利用可能である。一実施形態において、MCF7細胞におけるp180チロシンリン酸化のHRG刺激を阻害するADCについて、本質的に以下に記載されるようにスクリーニングし得る。例えば、HER2トランスジェニック動物から樹立された細胞株は、24ウェルプレート中に平板培養され得、そして上記化合物は、各ウェルに添加され得、そして室温で30分間インキュベートされ得る。次いで、rHRGβ1177-244が、0.2nMの終濃度まで各ウェルに添加され得、そしてインキュベーションは、約8分間にわたって続けられ得る。培地は、各ウェルからアスピレーションされ得、そして反応は、100μlのSDS緩衝液5SDS、25mMDTT、および25mMTris-HCl、pH6.8の添加によって停止され得る。各サンプル25μlは、4~12勾配ゲルNovex上で電気泳動され得、次いで、ポリビニリデンジフルオリド膜に電気泳動的に移動され得る。抗ホスホチロシン1μg/mlにおいて免疫ブロットが展開され得、そしてMr-180,000における主な反応性バンドの強度が、反射率デンシトメトリーによって定量され得る。レセプターリン酸化の阻害を評価する代替の方法は、KIRAキナーゼレセプター活性化アッセイSadickら1998Jour.ofPharm.andBiomed.Anal.1-9である。p180チロシンリン酸化のHRG刺激を阻害することが公知であるよく確立されたHER2に対するモノクローナル抗体の幾つかは、このアッセイにおいて、ポジティブコントロールとして使用され得る。反射率デンシトメトリーによって決定されるp180チロシンリン酸化のHRG刺激の阻害についての用量-応答曲線が、作成され得、そして目的の化合物についてのIC50が、計算され得る。HER2トランスジェニック動物由来の細胞株における試験ADCの増殖阻害効果を、評価し得るSchaeferら1997Oncogene15:1385-1394。このアッセイに従い、細胞は、種々の濃度の試験化合物で4日間にわたって処理され得、そしてクリスタルバイオレットもしくは酸化還元色素であるAlamarBlueによって染色される。この化合物と一緒のインキュベーションは、MDA-MB-175細胞においてモノクローナル抗体2C4によって示される増殖阻害効果と類似の増殖阻害効果を、この細胞株において示し得るSchaeferら、前出。さらなる実施形態において、外因性HRGは、この阻害を有意に逆転しない。HER2を特異的に標的化する増殖阻害性ADC化合物を同定するために、トランスジェニックマウスに由来するHER2過剰発現癌細胞US5677171の増殖を阻害するADCについてスクリーニングし得る。このアッセイに従い、HER2過剰発現細胞は、10ウシ胎仔血清、グルタミンおよびペニシリンストレプトマイシンで補充された、F12とDMEM培地との1:1混合物において増殖される。細胞は、35mm細胞培養皿中20,000細胞2ml/35mm皿で平板培養され、そして試験化合物は、種々の濃度で添加され得る。6日後、未処理細胞と比較した細胞の数は、電子COULTERTM細胞カウンターを用いて計数される。約20~100の量もしくは約50~100の量で細胞増殖を阻害するADCが、増殖阻害性化合物として選択され得る。細胞死を誘導するADCについて選択するために、例えば、PI、トリパンブルーもしくは7AADの取り込みによって示される膜強度の減少が、コントロールと比較して評価され得る。PI取り込みアッセイは、トランスジェニック動物の乳房腫瘍組織から単離された細胞を使用する。このアッセイに従い、細胞は、10熱不活性化FBSHycloneおよび2mML-グルタミンで補充された、Dulbeccoの改変イーグル培地D-MEM:Ham’sF-1250:50中で培養される。従って、このアッセイは、補体および免疫エフェクター細胞の非存在下で実施される。細胞は、100×20mmの皿1枚あたり3×106個の細胞の濃度で播種され、そして一晩接着させられる。次いで、培地は除去され、そして新鮮な培地のみもしくは種々の濃度の上記化合物を含む培地と置き換えられる。細胞は、3日間の期間の間、インキュベートされる。各処理の後、単層は、PBSで洗浄され、そしてトリプシン処理によって剥離される。次いで、細胞は、4°Cで1200rpmで5分間遠心分離され、ペレットは、3mlの冷Ca2結合緩衝液10mMHepes、pH7.4、140mMNaCl、2.5mMCaCl2中に再度懸濁され、そして細胞凝集塊の除去のために、35mmのストレーナーでキャップされた12×75mmチューブに等分されるチューブ1本あたり1ml、処理群あたりチューブ3本。次いで、このチューブは、PI10μg/mlを与えられる。サンプルを、FACSCANTMフローサイトメーターおよびFACSCONVERTTMCellQuestソフトウェアBectonDickinsonを用いて分析し得る。PI取り込みによって決定される、実質的に有意なレベルの細胞死を誘導する化合物が、細胞死誘導性化合物として選択され得る。アポトーシスを誘導する化合物について選択するために、トランスジェニック動物の乳房腫瘍組織から樹立された細胞を用いるアネキシン結合アッセイが、実施される。細胞は、上記段落において考察されたように、皿の中に培養されそして播種される。次いで、培地は除去され、そして新鮮な培地のみもしくは10μg/mlの抗体-薬物結合体ADCを含む培地によって置き換えられる。3日間のインキュベーション期間後、単層はPBSで洗浄され、そしてトリプシン処理によって剥離される。次いで、細胞は遠心分離され、Ca2結合緩衝液中に再度懸濁され、そして上で考察されたように、細胞死アッセイのためにチューブ中に等分される。次いで、チューブは、標識化アネキシン例えば、アネキシンV-FITC1μgmlを与えられる。サンプルは、FACSCANTMフローサイトメーターおよびFACSCONVERTTMCellQuestソフトウェアBectonDickinsonを用いて分析され得る。コントロールと比較して実質的に有意なレベルのアネキシン結合を誘導する化合物は、アポトーシス誘導性化合物として選択される。インビトロ細胞増殖アッセイ一般に、抗体-薬物結合体ADCの細胞毒性活性または細胞分裂抑制活性は、以下の方法により測定される:腫瘍関連抗原または腫瘍関連レセプタータンパク質を有する哺乳動物細胞を、細胞培養培地中のADCの抗体に曝露し;細胞を、約6時間~約5日の期間にわたり培養し;そして、細胞の生存率を測定する。細胞ベースのインビトロアッセイを用いて、ADCの、生存率、すなわち、増殖率IC50、細胞毒性EC50、および、アポトーシスカスパーゼ活性化誘導を測定した。抗体-薬物結合体のインビトロにおける効力を、細胞増殖アッセイ図1~4により測定した。CellTiter-Glo登録商標LuminescentCellViabilityAssayが市販されておりPromegaCorp.,Madison,WI、これは、Coleopteraルシフェラーゼの組換え発現に基づいた、均質なアッセイ法である米国特許第5,583,024号;米国特許第5,674,713号;米国特許第5,700,670号。この細胞増殖アッセイは、ATPの存在量に基づいて、培養中の生存細胞の数を決定し、この数は、代謝的に活性な細胞の指標であるCrouchら1993J.Immunol.Meth.160:81-88;米国特許第6,602,677号。CellTiter-Glo登録商標アッセイを、96ウェル形式で行い、これを、自動化されたハイスループットスクリーニングHTSに従うようにしたCreeら1995AntiCancerDrugs6:398-404。均質なアッセイ手順は、単一の試薬CellTiter-Glo登録商標試薬を、血清を補充した培地中で培養した細胞に直接加える工程を包含する。細胞を洗浄する工程、培地を除去する工程、および、複数回ピペッティングする工程は、必要とされない。このシステムは、試薬を加え、混合してから10分間で、384ウェルの形式で、わずか15細胞/ウェルを検出する。均質な添加-混合-測定形式は、細胞の溶解と、ATPの存在量に比例する発光信号の発生とを生じる。ATPの量は、培養物中に存在する細胞数に直接比例する。CellTiter-Glo登録商標アッセイは、ルシフェラーゼ反応により生成される、グロー型glow-typeの発光信号を生成し、これは、使用される細胞の型および培地に依存して、一般に5時間より長い半減期を有する。生存細胞は、相対発光単位RLUで示される。基質である、Beetleルシフェリンは、ATPのAMPへの変換と、光子の生成と同時に、組換えホタルルシフェラーゼにより、酸化的に脱炭酸される。長時間の半減期が、試薬注入器を使用する必要性を排除し、そして、複数のプレートの、連続的もしくはバッチモードによる処理に対する柔軟性を提供する。この細胞増殖アッセイは、マルチウェルの形式例えば、96ウェル形式または384ウェル形式で使用され得る。データは、ルミノメーター、または、CCDカメラ画像化デバイスにより記録され得る。発光の出力は、経時的に測定される、相対光単位RLUとして表される。。3つの抗体-薬物結合体の抗増殖性効果を、4つの異なる乳癌細胞株に対する、上述の細胞増殖、インビトロ細胞殺傷アッセイにより測定した図1~4。図1は、SK-BR-3HER23乳癌細胞に対する3日の処置の後の、トラスツズマブ-SPP-DM1、トラスツズマブ-SPDP-DM1、およびトラスツズマブ-SMCC-DM1の濃度を増加させたときの、効力の測定を示す。図2は、BT-474HER23乳癌細胞に対する3日の処置の後の、トラスツズマブ-SPP-DM1、トラスツズマブ-SPDP-DM1、およびトラスツズマブ-SMCC-DM1の濃度を増加させたときの、効力の測定を示す。図3は、MCF7HER2低乳癌細胞に対する3日の処置の後の、トラスツズマブ-SPP-DM1、トラスツズマブ-SPDP-DM1、およびトラスツズマブ-SMCC-DM1の濃度を増加させたときの、効力の測定を示す。図4は、MDA-MB-468HER2陰性乳癌細胞に対する3日の処置の後の、トラスツズマブ-SPP-DM1、トラスツズマブ-SPDP-DM1、およびトラスツズマブ-SMCC-DM1の濃度を増加させたときの、効力の測定を示す。IC50値を、HER2レセプタータンパク質を過剰発現することが知られるSK-BR-3およびBT-474について確立した。1トラスツズマブあたり2.8のDM1薬物/Abを有する、トラスツズマブ-SPP-DM1の結合体のロットは、SK-BR-3細胞に対する6回の実験について、9.1μg/ml~22.3μg/mlの範囲で、14.4μg/mlの平均IC50を、そして、BT-474細胞に対する4回の実験について、28.7μg/ml~63.1μg/mlの範囲で、51.7μg/mlの平均IC50を生じた。1トラスツズマブあたり2.7のDM1薬物/Abを有する、トラスツズマブ-SMCC-DM1の結合体のロットは、SK-BR-3細胞に対する4回の実験について、12.6μg/ml~18.8μg/mlの範囲で、15.2μg/mlの平均IC50を、そして、BT-474細胞に対する2回の実験について、75.2μg/ml~114.6μg/mlの範囲で、94.9μg/mlの平均IC50を生じた。これらの結合体は、HER2を過剰発現しないMCF7細胞およびMDA-MB-468細胞に対して不活性であった。抗CD19-SMCC-DM1は、Raji細胞において、インビトロでの強力な細胞殺傷を示したIC50=0.25μ/ml未満。Raji細胞において、裸の抗体、およびコントロールのADC、トラスツズマブ-SMCC-DM1は、効果を示さなかった。抗CD79a-SMCC-DM1および抗CD79b-SMCC-DM1は、Ramos細胞において、インビトロでの強力な細胞殺傷を示したIC50=<0.25μ/ml未満。Ramos細胞において、裸の抗体、およびコントロールのADC、トラスツズマブ-SMCC-DM1は、効果を示さなかった。図17は、抗EphB2R2H9抗体-薬物結合体:2H9-SPP-DM1IC5080ng/mlおよび2H9-SMCC-DM1IC5050ng/mlで処理した、HT1080EphB2C8細胞を用いた、インビトロ細胞増殖アッセイ実施例5を示す。マウスにおけるインビボでの血清クリアランスおよび安定性ADCの血清クリアランスおよび安定性を、ネイティブな外来性の移植片により受け入れた腫瘍を有さないヌードマウスにおいて調べた。図5は、7日間にわたる6回の時点において、結合体の血清濃度と総抗体血清濃度を測定した、トラスツズマブ-SMCC-DM1対トラスツズマブ-SPP-DM1の腫瘍を有さないベージュヌードマウスにおける血清クリアランスを示す。総抗体およびADCの量の差は、リンカーの切断およびそのDM1部分からの抗体の分離を示す。7日目におけるより高い結合体化した抗体の血清濃度により示されるように、SMCCで連結したADCは、SPPで連結した結合体よりも長く、インビボにおいてインタクトなままであった。図6は、7日間にわたる6回の時点において、血清濃度を測定した、結合体:トラスツズマブ-SPDP-DM1、トラスツズマブ-SPP-DM1、トラスツズマブ-SPP-DM3、トラスツズマブ-SPP-DM4およびトラスツズマブ-SMCC-DM1の腫瘍を有さないヌードマウスにおける経時的な安定性を示す。SMCCリンカーを有するADCは、SPPまたはSPDPにより連結された結合体よりもインビボにおいてより安定であったが、トラスツズマブ-SMCC-DM1は、最もかさ高いジスルフィド結合体であるトラスツズマブ-SPP-DM4とほぼ同じ安定性を有した。図5および図6に示される実験を、腫瘍を有さないヌードマウスにおいて行なった。しかし、SMCCで連結した結合体は、腫瘍を有するヌードマウスにおけるSPPで連結した結合体と比較して、同じ、安定性の増加を示した。図7に示されるように、最初のトラスツズマブ-SMCC-DM1の約72が、処置後7日目に結合体として残っており、一方で、最初のトラスツズマブ-SPP-DM1の約10が、処置後7日目に結合体として残っており、これは、腫瘍を有するヌードマウスにおける、非酵素的に切断可能なトラスツズマブ-SMCC-DM1結合体の安定性の向上を示した。ラットにおけるインビボでの血清クリアランスおよび安定性図8および図9は、ジスルフィドリンカーADCトラスツズマブ-SPP-DM1、および非ジスルフィドリンカーADCトラスツズマブ-SMCC-DM1の、ラットにおける匹敵する安定性およびクリアランスのプロフィールを示す。研究のパラメータは、以下を含む:非ジスルフィドリンカーADCであるトラスツズマブ-SMCC-DM1図9は、ジスルフィドリンカーADCであるトラスツズマブ-SPP-DM1図8よりも良いラットの血清における安定性を示した。インビボ効能本発明の抗体-薬物結合体の効能は、げっ歯類に、癌細胞の同種移植片または異種移植片を移植し、そして、ADCを用いてこれらの腫瘍を処置することによって、インビボにおいて測定し得る。細胞株、癌細胞上に存在するレセプターに対するADCの抗体結合の特異性、投薬レジメン、および他の要因に依存して、変動性の結果が予測される。抗HER2ADCのインビボ効果を、HER2を高く発現するトランスジェニック外植マウスモデルにより測定した。同種移植片を、HERCEPTIN療法に対して応答しないか、または、ほとんど応答しない、Fo5mmtvトランスジェニックマウスから増殖させた。被験体を、ADCを用いて1回処置し、そして、3~6週間にわたってモニターし、腫瘍倍化時間、細胞殺傷対数期logcellkillおよび腫瘍の減少を測定した。追跡の投薬応答および複数回の投薬による実験を行なった。腫瘍は、neuHER2のラットホモログの変異により活性化された形態を発現するトランスジェニックマウスにおいて容易に生じるが、乳癌において過剰発現されるHER2は、変異しておらず、そして、腫瘍の形成は、変異していないHER2を過剰発現するトランスジェニックマウスにおいては、ましてや強力ではないWebsterら1994Semin.CancerBiol.5:69-76。変異していないHER2を有する腫瘍の形成を促進させるために、HER2cDNAプラスミド上流のATGコドンにおける翻訳の開始を防止するために、上流のATGを欠失させたか、または、HER2の下流にある本来の開始コドンからの翻訳開始の頻度を他の方法で減少させたを用いて、トランスジェニックマウスを作製した例えば、Childら1999J.Biol.Chem.274:24335-24341を参照のこと。さらに、5’末端にキメライントロンを追加し、これもまた、以前に報告されたものよりも、発現レベルを高めるはずであるNeubergerおよびWilliams1988NucleicAcidsRes.16:6713;BuchmanおよびBerg1988Mol.Cell.Biol.8:4395;Brinsterら1988Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:836。このキメライントロンは、Promega製のベクター、pCI-neo哺乳動物発現ベクター890bp~1022bpに由来した。cDNAの3’末端に、ヒト成長ホルモンのエキソン4および5、ならびに、ポリアデニル化配列を隣接させた。さらに、FVBマウスを用いた。なぜならば、この系統は、腫瘍の発生に対してより感受性であるからである。MMTV-LTRからのプロモーターを用いて、乳腺における組織特異的なHER2の発現を確実なものとした。腫瘍形成に対する感受性を高めるため、動物には、AIN76A食餌を与えたRaoら1997BreastCancerRes.andTreatment45:149-158。図10~13は、ADCが、元々は、MMTV-HER2トランスジェニックマウスにおいて生じたHER2陽性腫瘍Fo5において、強力な抗腫瘍活性を有することを示す。抗体単独例えば、トラスツズマブでは、このモデルにおいて、有意な抗腫瘍活性は有さないEricksonら、米国特許第6,632,979号。図10および図11に示すように、腫瘍の増殖は、コントロールビヒクルの増殖レベルと比較して、ADCを用いる処置により遅延した。腫瘍の増殖は、トラスツズマブ-SMCC-DM1結合体およびトラスツズマブ-SIAB-DM1結合体を用いる処置によって、最も遅くなった。図10、図12および図13に示されるように、トラスツズマブ-SMCC-DM1結合体は、ヌードマウスにおける腫瘍の倍化時間として測定したとしても、または、示される倍化時間に対応する細胞殺傷対数期として測定したとしても、SPPリンカーを有する結合体よりも腫瘍の増殖を遅くし、すなわち、より強力であった図13。抗CD22ADCのインビボ効果を、マウスの腫瘍異種移植片モデルを用いて測定した。1匹あたり2,000万個のBjab-lucルシフェラーゼを発現するBjab細胞異種移植片腫瘍細胞を有する8匹のSCIDマウスの群に、抗CD22抗体-薬物結合体または裸の抗体を、1日目に1回記されている場合を除く投薬した実施例8。腫瘍サイズが倍化する時間を測定したMTD,平均腫瘍倍化時間。3つの裸の抗CD22抗体は、非特異的に結合するADCトラスツズマブ-SMCC-DM1と比較して、本質的に効果を示さなかった。対応する結合体は全て、有意な腫瘍増殖の遅延効果を示した。複数回の投薬による効果は、RFB4-SMCC-DM1により確立され、ここでは、単回投薬したマウスについてのMTDが18日であったのに対し、3回投薬1日目、7日目、および17日目したマウスについてのMTDは、55日であった。8匹全てのマウスにおいて、腫瘍の完全な寛解は、3回投薬した群において生じた。他の抗CD22-SMCC-DM1結合体は、抗体12F7、9A8、8C9、8G10、3F11、10D2、6C9、14D1および11H10と共に、1匹あたり2,000万個のBjab-luc異種移植片腫瘍細胞を有するSCIDマウスにおいて、単回投薬400μgDM1/m2から7日後に、最初の腫瘍容積の縮小、または、コントロールトラスツズマブ-SMCC-DM1に対する、腫瘍増殖の遅延を示した。抗CD22結合体である、RFB4-SMCC-DM1、5E8-SMCC-DM1および7A2-SMCC-DM1もまた、1匹あたり500万個のRamosRA1異種移植片腫瘍細胞を有するSCIDマウスにおいて、単回投薬200μgDM1/m2から11日後に、コントロールトラスツズマブ-SMCC-DM1に対する、腫瘍増殖の遅延において有効であった。結合体RFB4-SMCC-DM1を、Bjab-luc異種移植片を有する10匹のSCIDマウスの群に対する3つの異なる薬物負荷loadingで研究した実施例8。低い1.95および中程度3.7の薬物負荷の結合体は、各々、有意な腫瘍増殖遅延効果を示し、MTDは約15日であった。高負荷6.75の結合体は、コントロール結合体であるGP120-SMCC-DM1または裸の抗体RFB4と有意に異なる効果を示さなかった。抗CD19-SMCC-DM1結合体および抗CD22-SMCC-DM1結合体は、Raji細胞マウス腫瘍異種移植片モデルにおいて、インビボ活性を示さなかった。他の抗CD19結合体および抗CD22結合体は、他の癌細胞腫瘍モデルに対してインビボ活性を有し得る。抗CD79aαADCおよび抗CD79bβADCのインビボ効果を、マウス腫瘍異種移植片モデルを用いて測定した。マウス1匹あたり2,000万個のBjab-luc異種移植片腫瘍細胞を有する8匹のSCIDマウスの群に、以下の表および以下の実施例8におけるサンプルを、1日目に投薬した。結合体SN8抗CD79b-SMCC-DM1、17A7抗CD79b-SMCC-DM1および8H9抗CD79a-SMCC-DM1は、全て、7日後に、最初の腫瘍容積平均160mm3の縮少を示した。8匹のマウスの群において、結合体SN8抗CD79b-SMCC-DM1は、4匹の動物において部分的な寛解PRを、そして、2匹の動物において完全な寛解CRをもたらした。結合体17A7抗CD79b-SMCC-DM1は、1匹の動物においてCRをもたらした。結合体8H9抗CD79a-SMCC-DM1は、2匹の動物においてPRを、そして、1匹の動物においてCRをもたらした。他の抗CD79b-SMCC-DM1結合体は、抗体2F2、5C3、7H7、8D11、15E4および16C11と共に、マウス1匹あたり2,000万個のBjab-luc異種移植片腫瘍細胞を有するCB17ICRSCIDマウスにおいて、単回投薬192μgDM1/m2から8日後に、コントロールトラスツズマブ-SMCC-DM1に対して、腫瘍増殖の遅延、または、最初の腫瘍容積の縮小を示した。抗CD79b-SMCC-DM1を投与したマウスにおける用量応答効果を測定した。マウス1匹あたり2,000万個のBjab-luc異種移植片腫瘍細胞を有する8匹のSCIDマウスの群に、以下の表におけるサンプルを1日目に投薬した実施例8。抗CD79b-SMCC-DM1を、マウス1kgあたり0.5mgのAb、2.0mgのAb、および3.64mgのAbのレベルで投薬した。抗TENB2ADCのインビボ効果を、マウス腫瘍異種移植片モデルを用いて測定した。TENB2は、ヒト前立腺においてほぼ排他的に発現しており、そして、ヒト前立腺腫瘍において過剰発現していることが示されている、腫瘍抗原であるGlynne-Jonesら2001IntJCancer.Oct15;942:178-84。PC3-TVA-919cv1:5は、高レベルのTENB2を発現するヒト前立腺癌細胞株である。胸腺欠損したヌードマウスに、マウス1匹あたり0.2mlの用量で、500万個のPC3-TVA-919を高く発現するか、もしくは中程度に発現する細胞を皮下注射した。細胞を、HBSS中に懸濁した。平均腫瘍サイズが100~200mm3に達したとき、マウスを、無作為に、各群8~10匹の8つの群に群分けし、そして、以下のサンプルの単回のIV処置を与えた実施例8。マウス抗-TENB2-DM1結合体は、ネガティブコントロールおよびビヒクルコントロールに対して、PC3-TENB2腫瘍に対する抗腫瘍効果を示した。マウス10H1抗NaPi3b-SMCC-DM1結合体は、ネガティブコントロールおよびビヒクルコントロールに対して、PC3-NaPi3b腫瘍に対する抗腫瘍効果を示さなかった。抗NaPi3b結合体の他の抗体改変体は、PC3-NaPi3b腫瘍または他の癌細胞株に対してインビボ活性を有し得る。げっ歯類の毒性抗体-薬物結合体およびADCなしのコントロールであるビヒクルを、急性毒性のラットモデルにおいて評価した。ADCの毒性を、ADCを用いた雌性Sprague-Dawleyラットの処置、ならびに、その後の、種々の器官に対する効果の検査および分析によって調べた。巨視的な観察体重、臨床的な病理学的パラメータ血清化学および血液学ならびに組織病理学に基づいて、ADCの毒性を観察、特徴付け、および測定し得る。等価な用量レベルにおいては、トラスツズマブ-SMCC-DM1は、トラスツズマブ-SPP-DM1よりも低い急性毒性を伴ったことが分かった。青年期の雌性ラット100~125グラムにおける5日の急性毒性研究を、トラスツズマブ-SMCC-DM12つの用量:1860μgDM1/m2および3260μgDM1/m2、比較例のジスルフィドADC、トラスツズマブ-SPP-DM12つの用量:1860μgDM1/m2および3260μgDM1/m2、遊離のDM1メイタンシンmaytansineチオールおよびコントロールビヒクルの単回注射0日目により行なった。体重を毎日測定した。臨床化学、血清酵素および血液学の分析を、3日目および5日目に行った;組織病理学的な評価により、完全な検死を結論付けた。毒性のシグナルには、体重減少の臨床的な観察も含めた。ADCを投薬した後の動物における、ビヒクルのみを投薬した動物に対する体重の減少または体重の変化は、全身性または局所的な毒性の、巨視的および一般的な指標であると考えられる。図14は、5日間にわたる、体重グラムの変化を示す。ジスルフィドADC、トラスツズマブ-SPP-DM1を受けたラットは、より高い用量における致死性、および、より低い用量における体重の減少により示されるように、顕著な用量依存性の毒性を示した。対照的に、トラスツズマブ-SMCC-DM1を受けたラットは、プラシーボのビヒクル投薬したラットと比較して、体重が増加し、そして、より低い用量で投薬したラットは、体重増加速度の低下を示さなかった。より高いレベルのトラスツズマブ-SMCC-DM1を投薬したラットもまた、遊離のDM1細胞毒と比較して、体重が増加した。肝臓毒性を、肝臓酵素の増加、有糸分裂像およびアポトーシス像の数の増加、ならびに、肝細胞の壊死によって測定した。血液リンパ系の毒性hematolymphoidtoxicityを、白血球主に、顆粒球好中球および/または血小板の欠乏、および、リンパ系器官の関与すなわち、萎縮活性またはアポトーシス活性により観察した。毒性をまた、有糸分裂像およびアポトーシス像の数の増加、ならびに、変性全腸炎のような、消化管の病変により記述した。研究した肝臓損傷の酵素的指標には、以下が含まれる:ASTアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ-局在:細胞質;肝臓、心臓、骨格筋、腎臓-肝臓:血漿の比=7000:1-T1/2:17時間ALTアラニンアミノトランスフェラーゼ-局在:細胞質;肝臓、腎臓、心臓、骨格筋-肝臓:血漿の比3000:1-T1/2:42時間;日変化GGTg-グルタミルトランスフェラーゼ-局在:高分泌能または高吸収能を有する細胞の原形質膜;肝臓、腎臓、腸-肝臓損傷の弱い指標;胆管障害において共通して上昇している。上記の測定した3つの酵素のいずれもが、肝臓特異的ではない。本発明のADCが、一過性の網状赤血球減少症を伴って、肝臓酵素ALTおよびASTの一過性の穏やかな上昇をもたらしたことが分かった図15。末梢血顆粒球または血小板に対しては、有意な効果が観察されなかった図16。図15および図16は、22.3mg/kgのトラスツズマブ-SPP-DM1に曝露したラット群2が、この5日間の急性毒性研究において、最も重篤な臨床毒性を示したことを示す。これらの動物は、最も顕著な体重の減少、肝機能試験の上昇、白血球減少症および血小板減少症、ならびに、血液リンパ系の組織に対する毒性の形態学的な徴候を示した。毒性の程度は、25mg/kgの用量を用いた以前の研究において見られたものと比較して同様であった。対照的に、それぞれ、10mg/kgおよび25mg/kgのトラスツズマブ-SMCC-DM1を与えた群3および群4の動物は、臨床病理学および体重のデータに基づいて、ビヒクル処置した動物とは区別できなかった。形態学的に、これらの動物は、肝臓における有糸分裂像の数の穏やかな上昇を示したが、末梢のリンパ系および造血組織は、正常な限界の範囲内であった。群5の動物50mg/kgのトラスツズマブ-SMCC-DM1は、毒性の徴候を示した。しかし、1つの肝機能試験ALTを除いて、毒性の重篤度は、同じ薬物用量の50のトラスツズマブ-SPP-DM1を受けた動物群2未満であった。これとほぼ同じ用量において、トラスツズマブ-SMCC-DM1群4、22.3mg/kgは、トラスツズマブ-SPP-DM1群2、25mg/kgの約25のASTレベルを示した。この研究の5日目までに、群5の動物は、体重の増加と、その後、3日目および4日目の間に、一時的な減少と、血清中ビリルビンの減少と、血小板数の上昇を示した図15。遊離なメイタンシノイドmaytansinoidDM1に曝露した群群6は、トラスツズマブ結合体で処置した動物と同じ毒性のパターンを示す。遊離DM1のこの用量は、以前の研究において10mg/kgのトラスツズマブ-SPP-DM1の用量として与えた薬物の量に相当する。群6の動物における毒性の重篤度は、群2の動物において見られるものより低かったが、10mg/kgのトラスツズマブ-SPP-DM1で処置した動物において以前に見られたものより高かった。回復は、かなり速いようであった:脾臓の切片は、遊離メイタンシンで処置した動物における、不成熟な造血分子の数の増加を示した;また、LFTおよび臨床的な血液学的パラメータは、5日目までに、群6の動物において、正規化に向かう明確な傾向を示した。カニクイザルの毒性/安全性カニクイザルに投与したADCの毒性および安全性を評価し得る。抗体-薬物結合体であるトラスツズマブ-SMCC-DM1の毒性/安全性研究を、カニクザルにおいて行なった。3群のサルを、段階的に上昇する用量で静脈内注射により投与したトラスツズマブ-SMCC-DM1の毒性を、コントロールビヒクルに対して評価するために研究した。群14匹の被験体は、ビヒクルPBS、pH6.5、すなわち、ADCのない処方物のみを1日目および22日目に受け、その後、36日目に検死した。群24匹の被験体は、1日目および22日目に4900μg/m2のトラスツズマブ-SMCC-DM1を受けた。群34匹の被験体は、22日目に、7200μg/m2のトラスツズマブ-SMCC-DM1を受けた。肝臓毒性を、げっ歯類の毒性研究からの上昇した肝臓酵素の測定により推測した。カニクイザルに、ビヒクル群1およびトラスツズマブ-SMCC-DM1群2:4900μg/m2;群3:7200μg/m2を投薬した。肝臓酵素AST、血小板数、白血球、絶対的な好中球、赤血球、網状赤血球、および2回のIV投薬レジメンの比較を、カニクイザルにおけるトラスツズマブ-SMCC-DM1について測定した実施例10。抗体-薬物結合体の薬学的処方物の投与治療用の抗体-薬物結合体ADCは、処置される状態に対して適切なあらゆる経路により投与され得る。ADCは、代表的には、非経口、すなわち、注入、皮下、筋肉内、静脈内、皮内、くも膜下腔内、ボーラス、腫瘍内の注射、または、硬膜外で投与されるShireら2004J.Pharm.Sciences936:1390-1402。治療用の抗体-薬物結合体ADCの薬学的処方物は、代表的には、薬学的に受容可能な非経口投与用ビヒクルと共に非経口投与するために調製され、そして、単一投薬形態の注射可能な形状である。所望の程度の純度を有する抗体-薬物結合体ADCは、必要に応じて、凍結乾燥形態または水溶液の形態で、薬学的に受容可能な希釈剤、キャリア、賦形剤または安定化剤と混合されるRemington’sPharmaceuticalSciences1980第16版,Osol,A.編。受容可能な非経口用のビヒクル、希釈剤、キャリア、賦形剤および安定化剤は、使用される投薬量および濃度において、レシピエントに対して非毒性であり、そして、以下のようなものが挙げられる:緩衝剤例えば、リン酸、クエン酸および他の有機酸;抗酸化物質例えば、アスコルビン酸およびメチオニン;保存料例えば、オクタデシルジメチルベン汁アンモニウムクロリド;ヘキサメトニウムクロリド;塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム;フェノール、ブチルアルコールまたはベンジルアルコール;アルキルパラベン例えば、メチルパラベンまたはプロピルパラベン;カテコール;レゾルシノール;シクロヘキサノール;3-ペンタノール;およびm-クレゾール;低分子量約10残基未満ポリペプチド;タンパク質例えば、血清アルブミン、ゼラチン、または、免疫グロブリン;親水性ポリマー例えば、ポリビニルピロリドン;アミノ酸例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、またはリジン;単糖、二糖、および他の炭水化物例えば、グルコース、マンノースまたはデキストリン;キレート化剤例えば、EDTA;糖類例えば、スクロース、マンニトール、トレハロース、またはソルビトール;塩形成対イオン例えば、ナトリウム;金属錯体例えば、Zn-タンパク質錯体;および/または、非イオン性界面活性剤例えば、TWEENTM、PLURONICSTM、またはポリエチレングリコールPEG。例えば、凍結乾燥抗ErbB2抗体処方物は、WO97/04801特別に、本明細書中に参考として援用されるに記載されている。トラスツズマブ-SMCC-DM1のようなADCの例示的な処方物は、約100mg/mlのトレハロース2-ヒドロキシメチル-6-[3,4,5-トリヒドロキシ-6-ヒドロキシメチルテトラヒドロピラン-2-イル]オキシ-テトラヒドロピラン-3,4,5-トリオール;C12H22O11;CAS番号99-20-7、および約0.1のTWEENTM20ポリソルベート20;ドデカン酸2-[2-[3,4-ビス2-ヒドロキシエトキシテトラヒドロフラン-2-イル]-2-2-ヒドロキシエトキシエトキシ]エチルエステル;C26H50O10;CAS番号9005-64-5pH約6を含有する。治療用抗体-薬物結合体ADCの薬学的処方物は、ADCを作製するプロセスにおける、過剰の試薬、不純物および副産物の不完全な精製および分離の結果として;または、大量のADC、もしくは、処方したADC組成物の保存時の、時間/温度による加水分解もしくは分解の結果として、未反応の薬物部分D、抗体-リンカー中間体Ab-L、および/または、薬物/リンカー中間体D-Lの特定の量を含有し得る。例えば、ADCの処方物である、トラスツズマブ-SMCC-DM1は、遊離薬物DM1の検出可能な量を含有し得る。あるいは、もしくはこれに加えて、この処方物は、薬物-リンカー中間体DM1-SMCCの検出可能な量を含有し得る。あるいは、そしくはこれに加えて、この処方物は、抗体、トラスツズマブの検出可能な量を含有し得る。トラスツズマブ-SMCC-DM1の例示的な処方物は、10モル等量までのDM1-SMCCを含有し得る。予想外なことに、DM1-SMCCIC500.05μMは、SK-BR-3乳癌細胞およびBT-474乳癌細胞に対して、遊離薬物DM1IC500.0045μMよりも約20倍細胞殺傷能力が劣ることがインビトロ細胞増殖アッセイ実施例5により決定された。活性な薬学的成分もまた、例えば、コアセルベーション技術により調製されたマイクロカプセルヒドロキシメチルセルロース中に、または、界面重縮合により調製されたマイクロカプセルゼラチン-マイクロカプセル、およびポリ-メチルメタクリレートマイクロカプセル中に、または、コロイド状薬物送達系例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子およびナノカプセル中に、または、マクロエマルジョンmacroemulsion中に取り込まれ得る。このような技術は、Remington’sPharmaceuticalSciences1980第16版,Osol,A.編に開示されている。徐放性調製物が調製され得る。徐放性調製物の適切な例としては、ADCを含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリクスが挙げられ、このマトリクスは、成形された物品例えば、フィルムまたはマイクロカプセルの形状である。徐放性マトリクスの例としては、ポリエステル、ヒドロゲル例えば、ポリ2-ヒドロキシエチル-メタクリレートまたはポリビニルアルコール、ポリラクチド米国特許第3,773,919号、L-グルタミン酸とγ-エチル-L-グルタメートとのコポリマー、非分解性エチレン-酢酸ビニル、分解性乳酸-グリコール酸コポリマー例えば、LUPRONDEPOTTM乳酸-グリコール酸コポリマーおよび酢酸ロイプロリドから構成される、注射可能なマイクロスフェアおよびポリ-D---3-ヒドロキシ酪酸が挙げられる。インビボ投与のために使用される処方物は、無菌でなければならず、これは、滅菌ろ過膜を通すろ過によって、容易に達成される。処方物は、上述の投与経路に適したものを含む。処方物は、単位投薬形態で簡便に提示され得、そして、薬学の分野で周知の任意の方法によって調製され得る。技術および処方物は、一般に、Remington’sPharmaceuticalSciencesMackPublishingCo.,Easton,PAに見られる。このような方法は、活性成分を1種以上の補助成分を構成するキャリアと会合させる工程を包含する。一般に、処方物は、活性成分を、液体キャリア、もしくは、細かく砕いた固体キャリア、または、この両方と、均一かつ緊密に会合させ、次いで、必要に応じて、生成物を成形することによって調製される。水性懸濁物は、水性懸濁物の製造に適した賦形剤と混合した活性物質ADCを含有する。このような賦形剤としては、懸濁剤例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、クロスカルメロース、ポビドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガム、およびアカシアゴム、および分散剤もしくは湿潤剤例えば、天然に存在するホスファチド例えば、レシチン、アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレン、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物例えば、ヘプタデカアセチレンオキシセタノール、エチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール無水物から誘導された部分エステルとの縮合生成物例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートが挙げられる。水性懸濁物はまた、1種以上の保存料例えば、エチルp-ヒドロキシ-ベンゾエートまたはn-プロピルp-ヒドロキシ-ベンゾエート、1種以上の着色剤、1種以上の矯味矯臭剤、および、1種以上の甘味料例えば、スクロースまたはサッカリンも含有し得る。ADCの薬学的組成物は、滅菌の注射可能な調製物例えば、滅菌の注射可能な水性懸濁物または油性懸濁物の形態であり得る。この懸濁物は、上述されたこれらの適切な分散剤もしくは湿潤剤、および懸濁剤を用いて、公知技術に従って処方され得る。滅菌の注射可能な調製物はまた、非毒性の非経口的に受容可能な希釈剤もしくは溶剤中の、滅菌の注射可能な溶液もしくは懸濁液例えば、1,3-ブタン-ジオール中の溶液であり得るか、または、凍結乾燥粉末として調製され得る。使用され得る受容可能なビヒクルおよび溶剤の中でも、好ましいのは、水、リンガー溶液および等張性の塩化ナトリウム溶液である。さらに、滅菌の不揮発性油が、溶剤もしくは懸濁媒体として簡便に使用され得る。この目的のために、あらゆる無刺激性の不揮発性油例えば、合成モノグリセリドまたは合成ジグリセリドが使用され得る。さらに、脂肪酸例えば、オレイン酸も同様に、注射剤injectableの調製において使用され得る。単一の投薬形態を生成するためにキャリア材料と合わされ得る活性成分の量は、処置される宿主、および、特定の投与様式に依存して変動する。例えば、静脈内注入のために意図される水溶液は、約30mL/時間の速度での適切な用量の注入が生じ得るように、溶液1mlあたり約3~500μgの活性成分を含有し得る。皮下大量投与は、約1.5ml以下の総容量、および1mlあたり約100mgのADCの濃度で達成され得る。頻繁かつ慢性的な投与を要するADCについては、予め充填したシリンジ、または、自動注入デバイス技術などによって皮下経路が使用され得る。一般的な提案として、1回の投薬あたりに投与されるADCの初期の薬学的に有効な量は、約0.01~100mg/kgの範囲、すなわち、1日あたり、患者の体重1kgあたり、約0.1~20mgの範囲内であり、使用され得る化合物の代表的な初期の範囲は、0.3~15mg/kg/日である。例えば、ヒト患者は、患者の体重1kgあたり、約1.5mgのADCで最初に投薬され得る。投薬は、最大耐用量MTDまで段階的に増やされ得る。投薬計画は、約3週おきであり得るが、診断される状態または応答によっては、この計画は、より頻繁であっても、より頻繁でなくてもよい。投薬は、さらに、処置の過程の間に、MTD以下まで調節され得、複数回にわたって例えば、約4回以上安全に投与され得る。非経口投与に適切な処方物としては、抗酸化物質、緩衝剤、静菌剤、および、処方物を意図されるレシピエントの血液と等張にする溶質を含有し得る、水性および非水性の滅菌注射溶液;ならびに、懸濁剤および増粘剤を含有し得る、水性および非水性の滅菌懸濁剤が挙げられる。タンパク質治療剤の経口投与は、一般に、消化管におけるその制限された吸収、加水分解もしくは変性に起因するその乏しいバイオアベイラビリティに起因して好まれないが、経口投与に適したADCの処方物は、各々が、ADCの所定の量を含有するカプセル、カシェ剤、または錠剤のような別個の単位として調製され得る。処方物は、単一投薬または複数回投薬の容器例えば、密封されたアンプルおよびバイアル中にパッケージ化され得、そして、使用の直前に、注射のために、滅菌液体キャリア例えば、水を加えることのみを必要とする、フリーズドライ凍結乾燥の状態で保存され得る。即座の注射用溶液および懸濁物は、滅菌の粉末、顆粒、および、これまでに記載されている種類の錠剤から調製される。例示的な単位投薬処方物は、活性成分の毎日用量dailydose、または、単位毎日分割用量unitdailysub-dose、または、その適切な画分を含有する。本発明は、さらに、獣医学的なキャリアと共に、上に定義された少なくとも1つの活性成分を含有する、獣医学用組成物を提供する。獣医学的なキャリアは、組成物を投与する目的のために有用な物質であり、そして、獣医学において不活性であるか、もしくは受容可能であり、そして、活性成分と適合性である、固体物質、液体物質もしくは気体物質であり得る。これらの獣医学用組成物は、非経口、経口、または、任意の他の所望される経路によって投与され得る。抗体-薬物結合体による処置本発明の抗体-薬物結合体ADCは、種々の疾患もしくは障害例えば、癌および自己免疫状態を処置するために使用され得ることが企図される。例示的な状態もしくは障害としては、良性もしくは悪性の腫瘍;白血病およびリンパ球性悪性腫瘍lymphoidmalignancy;他の障害例えば、神経障害、グリア細胞障害、星状細胞障害、視床下部障害、腺障害、マクロファージ障害、上皮障害、間質障害、胞胚腔障害、炎症障害、血管形成障害および免疫学的障害が挙げられる。ADC処置に感受性の癌としては、特定の腫瘍関連抗原または細胞表面レセプター例えば、HER2の過剰発現により特徴付けられる癌が挙げられる。動物モデルおよび細胞ベースのアッセイにおいて同定されたADC化合物は、さらに、腫瘍を有するより高等な霊長類およびヒトの臨床治験において試験され得る。ヒト臨床治験は、Baselgaら1996J.Clin.Oncol.14:737-744により報告されたような、以前に長期にわたり抗癌治療を受けた、HER2を過剰発現する転移性乳癌を有する患者における抗HER2モノクローナル抗体であるHERCEPTINの効力を試験する臨床治験と同様に設計され得る。臨床治験は、放射線療法、ならびに/または、公知の化学療法剤および/もしくは細胞傷害剤を含む化学療法のような、公知の治療レジメンと組み合せて、ADCの効力を評価するように設計され得るPegramら1999Oncogene18:2241-2251。一般に、処置される疾患または障害は癌である。本明細書において処置される癌の例としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない:癌種、リンパ種、芽腫、肉腫および白血病、または、リンパ球性悪性腫瘍。このような癌のより具体的な例としては、以下が挙げられる:扁平上皮細胞癌例えば、上皮性扁平上皮細胞癌、肺癌例えば、小細胞肺がん、非小細胞肺癌、肺の腺癌、および肺の扁平上皮細胞癌、腹膜の癌、肝細胞癌、胃癌gastricorstomachcancer例えば、消化管癌、消化管間質腫瘍GIST、膵臓癌、神経膠芽腫、頸部癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞癌、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌もしくは子宮癌、唾液線癌腫、腎臓癌kidneyorrenalcancer、前立腺癌、外陰部の癌、甲状腺癌、肝細胞癌腫、肛門癌、陰茎癌、ならびに、頭頸部癌。本明細書において処置される癌は、ErbBレセプター例えば、HER2の過度の活性化により特徴付けられる癌であり得る。このような過度の活性化は、ErbBレセプターまたはErbBリガンドの過剰発現もしくは生成の増加に寄与し得る。一実施形態において、診断アッセイもしくは予後のアッセイが、患者の癌が、ErbBレセプターの過度の活性化により特徴付けられるかどうかを決定するために行なわれる。例えば、癌における、ErbBレセプターにおけるErbB遺伝子の増幅および/または過剰発現が決定され得る。このような増幅/過剰発現を決定するための種々のアッセイが、当該分野において利用可能であり、そして、このようなアッセイとしては、上記のような、IHC、FISH、およびシェッド抗原アッセイshedantigenassayが挙げられる。あるいは、もしくは、さらに、腫瘍内もしくは腫瘍に関連する、ErbBリガンド例えば、TGF-αのレベルが、公知の手順に従って決定され得る。このようなアッセイは、試験されるサンプル中で、タンパク質、および/または、これをコードする核酸を検出し得る。一実施形態において、腫瘍内のErbBリガンドのレベルは、免疫組織化学IHCを用いて決定され得る;例えば、Scherら1995Clin.CancerResearch1:545-550を参照のこと。あるいは、もしくは、さらに、例えば、FISH、サザンブロッティング、またはPCR技術によって、試験されるサンプル中のErbBリガンドをコードする核酸のレベルを評価し得る。一実施形態において、ErbB2の過剰発現は、HERCEPTESTDakoを用いて、IHCによって分析され得る。腫瘍生検からのパラフィン包埋組織切片を、IHCアッセイに供し、そして、以下のような、ErbB2タンパク質の染色強度の指標を与え得る:スコア0、染色が観察されないか、または、膜の染色が、腫瘍細胞の10より多くにおいて観察される;スコア1、かすかな/弱く認知できる膜の染色が、主要紙ア棒の10より多く検出される、細胞は、その膜の一部分においてのみ染色されている;スコア2、弱い~中程度の膜全体の染色が、腫瘍細胞の10より多くで観察される;スコア3、中程度~強い膜全体の染色が、腫瘍細胞の10より多くで観察される。ErbB2過剰発現評価について、0または1のスコアを有する腫瘍細胞は、ErbB2を過剰発現していないものと特徴づけられ得るが、2または3のスコアを有する腫瘍細胞は、ErbB2を過剰発現するものとして特徴付けられ得る。あるいは、もしくはさらに、FISH分析例えば、INFORMTMVentanaCo.,Ariz.またはPATHVISIONTMVysis,Ill.が、腫瘍中のErbB2の過剰発現の程度もしあればを決定するために、ホルマリン固定した、パラフィン包埋腫瘍組織において行なわれ得る。さらに、ErbBレセプターまたはErbBリガンドの過剰発現または増幅は、インビボ診断アッセイ例えば、検出される分子に結合し、そして、検出可能な標識例えば、放射性同位元素とタグ化された分子例えば、抗体を投与し、標識の位置について患者を外部からスキャンすることによるを用いて評価され得る。疾患の予防もしくは処置について、ADCの適切な投薬量は、上で規定されるような、処置される疾患の型、疾患の重篤度および経過、分子が、予防目的で投与されるのか、治療目的で投与されるか、以前の治療、患者の臨床的な病歴および抗体に対する応答性、ならびに、主治医の裁量に依存する。分子は、一度に、または、一連の処置にわたって、患者に適切に投与される。疾患の型および重篤度に依存して、例えば、1回以上の別々の投与によるものであっても、連続注入によるものであっても、約1μg/kg~15mg/kg例えば、0.1~20mg/kgの分子が、患者に対する投与の最初の候補投薬量である。代表的な毎日の投薬量は、上記の要因に依存して、約1μg/kg~100mg/kg以上の範囲であり得る。患者に投与されるADCの例示的な投薬量は、患者の体重1kgあたり、約0.1mg~約10mgの範囲である。数日以上にわたる反復投与については、状態に依存して、所望の疾患症状の抑制が生じるまで、処置が持続される。例示的な投薬レジメンは、約4mg/kgの抗ErbB2抗体の初期の負荷投薬、その後の、約2mg/kgの抗ErbB2抗体の毎週の持続投薬の投与を包含する。他の投薬レジメンが有用であり得る。この治療の進行は、従来の技術およびアッセイによって容易にモニターされる。組み合わせ治療抗体-薬物結合体ADCは、薬学的な組み合わせ処方物中で、または、組み合わせ治療のような投薬レジメンにおいて、抗癌特性を有する第2の化合物と組み合され得る。薬学的な組み合わせ処方物または投薬レジメンの第2の化合物は、好ましくは、互いに有害な影響を与えないように、組み合わせのADCに対して補完的な活性を有する。第2の化合物は、化学療法剤、細胞傷害剤、サイトカイン、増殖阻害剤、抗ホルモン剤、アロマターゼインヒビター、プロテインキナーゼインヒビター、脂質キナーゼインヒビター、抗アンドロゲン、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、遺伝子治療用ワクチン、抗血管新生剤および/または心臓保護物質であり得る。このような分子は、意図される目的に有効な量で、組み合わせ中に適切に存在する。ADCを含有する薬学的組成物はまた、チューブリン形成インヒビター、トポイソメラーゼインヒビター、またはDNA結合剤のような、化学療法剤の治療有効量も有し得る。あるいは、もしくはさらに、第2の化合物は、ErbB2に結合し、ErbBレセプターのリガンド活性化をブロックする抗体であり得る。この第2の抗体は、モノクローナル抗体2C4またはヒト化2C4OmnitargWO01/00245であり得る。第2の抗体は、細胞傷害剤もしくは化学療法剤たとえば、メイタンシノイド、オーリスタチンauristatin、カリケアミシンcalicheamicin、または、1,8ビス-ナフタルイミド部分と結合体化され得る。例えば、1つの処方物または投薬レジメンにおいて、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、または血管内皮因子VEGFと結合する抗体をさらに提供ことが望ましくあり得る。他の治療レジメンが、本発明に従う抗癌剤の投与と組み合され得る。組み合わせ治療は、同時もしくは連続したレジメンとして投与され得る。連続的に投与される場合、組み合わせは、2回以上の投与で投与され得る。組み合わせられた投与としては、別個の処方物または単一の薬学的処方物を用いる同時投与coadministration、および、いずれかの順序による連続投与consecutiveadministrationが挙げられ、これらの投与において、両方または全ての活性成分が同時にその生物学的活性を発揮する時間が存在する。一実施形態において、本発明のADCを用いる処置は、本明細書中で同定される抗癌剤、および、1種以上の化学療法剤または増殖阻害剤の組み合せた投与を包含し、これには、異なる化学療法剤のカクテルの、必要に応じて、抗ErbB2抗体例えば、トラスツズマブを用いる処置と同時の、同時投与が含まれる。化学療法剤としては、ErlotinibHClCP-358774、TARCEVATM;Genentech/OSI、タキサン例えば、パクリタキセルおよびドセタキセルおよび/またはアントラサイクリン抗生物質が挙げられる。このような化学療法剤についての調製および投薬計画は、製造業者の説明書に従って、または、当業者により経験的に決定されたように、使用され得る。このような化学療法剤の調製および投薬計画はまた、ChemotherapyServiceEd.,M.C.Perry,WilliamsWilkins,Baltimore,Md.1992に記載される。抗癌剤は、抗ホルモン化合物例えば、抗エストロゲン化合物例えば、タモキシフェン;抗プロゲステロン例えば、オナプリストンEP616812;または抗アンドロゲン例えば、フルタミドと、このような分子について公知の投薬量において組み合され得る。処置される癌が、ホルモン非依存性の癌である場合、患者は、以前に抗ホルモン治療に供され、癌がホルモン非依存性になった後に、抗ErbB2抗体および、必要に応じて、本明細書中に記載される他の因子が患者に投与され得る。治療に伴う心筋の機能不全を防止もしくは減らすために心臓保護物質、または、1種以上のサイトカインを患者に同時投与することもまた有益であり得る。上記の治療レジメンに加えて、患者は、癌細胞の外科的な除去および/または放射線治療に供され得る。上記の同時投与される因子のいずれかのついての適切な投薬量は、現在使用されているものであり、そして、新たに同定された因子および他の化学療法剤もしくは治療の組み合せた作用相乗作用に起因して低下され得る。組み合わせ治療は、相乗作用を提供し得、そして、相乗作用的であると判明し得る。すなわち、活性成分を一緒に使用した場合に達成される効果は、これらの化合物を別個の使用した場合に得られる効果の合計よりも大きい。相乗作用は、活性成分が、1組み合わせられた単位投薬処方物において、同時に処方されて投与されるか、または、連続的に送達されるか;2別個の処方物として交互にもしくは平行して送達されるか;あるいは、3いくつかの他のレジメンによって投与される場合に達成され得る。交互の治療において送達される場合、相乗作用は、例えば、別個のシリンジ内の異なる注射剤によって、連続的に投与もしくは送達される場合に達成され得る。一般に、交互療法の間に、各活性成分の有効投薬量は、連続してすなわち、段階的に投与されるが、組み合わせ療法においては、2以上の活性成分の有効投薬量が、一緒に投与される。抗体-薬物結合体の代謝産物また、本明細書中に記載されるADC化合物のインビボ代謝産物も、このような産物が、先行技術を上回って新規かつ進歩性を有する範囲まで、本発明の範囲内に入る。このような産物は、投与される化合物の、例えば、酸化、還元、加水分解、アミド化、エステル化、酵素的切断などから生じ得る。従って、本発明は、本発明の化合物をこの化合物の代謝産物を得るために十分な時間にわたり哺乳動物に接触させる工程を包含するプロセスによって生成される、新規かつ進歩性を有する化合物を包含する。代謝産物は、放射標識例えば、14Cまたは3HしたADCを調製し、これを検出可能な用量で例えば、約0.5mg/kgより多い用量、ラット、マウス、モルモット、サルのような動物またはヒトに対して非経口的に投与し、代謝が生じるのに十分な時間代表的には、約30秒~30時間を経過させ、そして、尿、血液もしくは他の生物学的サンプルから変換された生成物を単離することによって同定され得る。これらの生成物は、容易に単離される。なぜならば、これらは、標識されているからである代謝産物中に残るエピトープに結合し得る抗体を用いることによって単離されるものもある。代謝産物の構造は、従来の様式で例えば、MS、LC/MSまたはNMR分析によって決定される。一般に、代謝産物の分析は、当業者に周知の従来の薬物代謝研究と同じ方法で行われる。変換された生成物は、変換されない場合にはインビボにおいて見られない限り、ADC化合物の治療用投薬についての診断アッセイにおいて有用である。代謝産物としては、ADCのインビボ切断による生成物が挙げられ、このインビボ切断においては、薬物部分を抗体に連結するあらゆる結合の切断が生じる。代謝的切断は、こうして、裸の抗体、または、抗体フラグメントをもたらし得る。抗体の代謝産物は、リンカーの一部または全体に連結され得る。代謝的切断はまた、生成物中に、薬物部分またはその一部を生じ得る。薬物部分の代謝産物は、リンカーの一部もしくは全体に連結され得る。製造物品別の実施形態において、ADCおよび上記の障害の処置に有用な物質を含有する製造物品またはキットが提供される。製造物品は、容器と、容器上のラベルもしくはパッケージ挿入物または容器に付随したラベルもしくはパッケージ挿入物を含む。適切な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、シリンジまたはブリスターパックが挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチックなどの種々の材料から形成され得る。この容器は、状態の処置に有効な抗体-薬物結合体ADC組成物を保持し、そして滅菌アクセスポートを有し得る例えば、容器は、静脈内溶液バッグまたは皮下注射針によって貫通され得るストッパーを有するバイアルであり得る。この組成物中の少なくとも1つの活性因子は、ADCである。このラベルまたはパッケージ挿入物は、組成物が目的の状態例えば、癌を処置するために使用されることを示す。一実施形態において、ラベルまたはパッケージ挿入物は、ErbB2と結合する抗体を含む組成物が、上皮増殖因子レセプターEGFR、ErbB2、ErbB3およびErbB4からなる群より選択されるErbBレセプターを発現する癌を処置するのに使用され得ることを示す。さらに、ラベルまたはパッケージ挿入物は、処置される患者が、EGFR、ErbB2、ErbB3またはErbB4から選択されるErbBレセプターの過度の活性化により特徴付けられる癌を有する患者であることを示し得る。例えば、癌は、これらのレセプターのうちの1つを過剰発現するか、そして/または、ErbBリガンド例えば、TGF-αを過剰発現する癌であり得る。ラベルまたはパッケージ挿入物はまた、この組成物が、ErbB2レセプターの過剰発現により特徴付けられない癌を処置するために使用され得ることも示し得る。他の実施形態において、パッケージ挿入物は、ADC組成物が、ホルモン非依存性の癌、前立腺癌、結腸癌、または結腸直腸癌を処置するためにも使用され得ることを示し得る。製造物品は、a製造物品に含まれる化合物を有する第1の容器ここで、その化合物は、本発明のADCを含み、このADCの抗体は、ErbB2に結合し、そしてErbB2を過剰発現する癌細胞の増殖を阻害する第1の抗体である;およびb製造物品に含まれる化合物を有する第2の容器ここで、その化合物は、ErbB2に結合し、そしてErbBレセプターのリガンド活性化をブロックする第2の抗体、または、この第2の抗体とメイタンシノイドとの結合体を含むを含み得る。この実施形態における製造物品は、第1および第2の化合物が、癌を処置するために使用され得ることを示すパッケージ挿入物をさらに含み得る。あるいは、もしくはさらに、この製造物品は、薬学的に受容可能な緩衝液注射のための静菌水BWFI、リン酸緩衝化生理食塩水、リンガー溶液およびデキストロース溶液などを含む第2または第3の容器をさらに含み得る。それは、商業的観点および利用者の観点から所望される他の物質をさらに含み得、これらの物質としては、他の緩衝液、希釈液、フィルター、針、およびシリンジが挙げられる。実施例1-抗ErbB2モノクーナル抗体4D5の産生、特徴付けおよびヒト化ErbB2の細胞外ドメインに特異的に結合するマウスモノクローナル抗体4D5を、Fendlyら1990CancerResearch50:1550-1558に記載されるように産生した。簡単に述べると、Hudziakら1987Proc.Natl.Acad.Sci.USA84:7158-7163に記載されるように産生したNIH3T3/HER2-3400細胞1細胞あたりおよそ1×105ErbB2分子を発現するを、25mMEDTAを含むリン酸緩衝化生理食塩水PBS用いて収集し、BALB/cマウスを免疫するために使用した。そのマウスに、0週目、2週目、5週目および7週目に、0.5mlPBS中107細胞の腹腔内注射を与えた。32P標識したErbB2を免疫沈降した抗血清を有するマウスに、9週目および13週目に、コムギ胚芽凝集素-セファロースWGA精製したErbB2膜抽出物の腹腔内注射を与えた。その後、0.1mlのErbB2調製物の静脈内注射を行い、脾細胞をマウス黒色腫株X63-Ag8.653と融合したハイブリドーマ上清をELISAおよび放射性免疫沈降法によってErbB2結合についてスクリーニングした。マウスモノクローナル抗体4D5を、米国特許第5821337号その全開示は、明確に参考として本明細書に援用されるに記載されるように、遺伝子変換変異誘発ストラテジーを用いてヒト化した。以下の実験で使用されるヒト化モノクローナル抗体4D5は、huMAb4D5-8と称される。この抗体は、IgG1アイソタイプである。実施例2-トラスツズマブの精製440mgのHERCEPTIN登録商標huMAb4D5-8、rhuMAbHER2、米国特許第5821337号抗体を含む1つのバイアルを、50mLMES緩衝液25mMMES、50mMNaCl、pH5.6に溶解させ、同じ緩衝液で平衡化したカチオン交換カラムSepharoseS、15cm×1.7cmにロードした。次いで、このカラムを同じ緩衝液5カラム体積で洗浄した。トラスツズマブを、緩衝液のNaCl濃度を200mMまで上昇させることによって溶出させた。抗体を含む画分をプールし。10mg/mLに希釈し、そして50mmリン酸カリウム、50mMNaCl、2mMEDTAを含む緩衝液pH6.5に透析した。実施例3-抗体-薬物結合体:トラスツズマブ-SPP-DM1の調製精製したトラスツズマブを、N-スクシンイミジル-4-2-ピリジルチオペンタン酸で誘導体化して、ジチオピリジル基を導入した。NaCl50mMおよびEDTA1mMを含む44.7mLの50mMリン酸カルシウム緩衝液pH6.5中のトラスツズマブ376.0mg、8mg/mLを、SPP2.3mLエタノール中5.3モル当量で処理した。周囲温度でアルゴン雰囲気下での90分間のインキュベーションの後、この反応混合物を、35mMクエン酸ナトリウム、154mMNaCl、2mMEDTAで平衡化したSephadexG25カラムでゲル濾過した。抗体を含む画分をプールし、アッセイした。抗体の改変の程度を、上記のように決定した。改変型抗体トラスツズマブ-SPP-Pyの回収は、337mg89.7であり、1抗体あたりに連結された4.5個の放出可能な2-チオピリジン基を含むp’。トラスツズマブ-SPP-Py337.0mg、9.5μmolの放出可能な2-チオピリジン基を、上記の35mMクエン酸ナトリウム緩衝液pH6.5で2.5mg/mLの最終濃度に希釈した。次いで、3.0mMジメチルアセトアミドDMA、最終反応混合物中3v/v中のDM1N2’-デアセチル-N2’-3-メルカプト-1-オキソプロピル-メイタンシンその構造は、図1に示されている1.7当量、16.1μmolを、抗体溶液に添加した。この反応をアルゴン雰囲気下で20分間進めた。その反応物を、35mMクエン酸ナトリウム,154mMNaClpH6.5で平衡化したSephacrylS300ゲル濾過カラム5.0cm×90.0cm、1.77Lにロードした。流速は、5.0mL/分であり、65個の画分各々20.0mLを回収した。主要なピークは、画分番号47付近に集中した図3。主要なピークは、モノマーのトラスツズマブ-SPP-DM1を含む。画分44~51をプールし、アッセイした。1抗体分子あたりに連結されたDM1薬物分子の数p’を、252nmおよび280nmでの吸光度を測定することによって決定し、1抗体分子あたり3.7個の薬物分子であることを見出した。実施例4-抗体-薬物結合体:トラスツズマブ-SMCC-DM1の調製精製したトラスツズマブを、スクシンイミジル4-N-マレイミドメチルシクロヘキサン-1-カルボキシレート,SMCC,PierceBiotechnology,Incで誘導体化して、SMCCリンカーを導入した。トラスツズマブを、実施例2のようにHERCEPTIN登録商標から精製し、7.5~10モル当量のSMCCDMSOまたはDMAジメチルアセトアミド中20mM、6.7mg/mLを含む50mMリン酸カリウム/50mM塩化ナトリウム/2mMEDTA,pH6.5中、20mg/mLで緩衝液交換処理した。アルゴン雰囲気下、周囲温度で2~4時間攪拌後、その反応混合物を、50mMリン酸カリウム/50mM塩化ナトリウム/2mMEDTApH6.5で平衡化したSephadexG25カラムで濾過した。あるいは、その反応混合物をpH6で30mMクエン酸および150mM塩化ナトリウムでゲル濾過した。抗体を含む画分をプールし、アッセイした。トラスツズマブ-SMCCの回収は、88であった。薬物-リンカー中間体である上記からのトラスツズマブ-SMCCを、50mMリン酸カリウム/50mM塩化ナトリウム/2mMEDTApH6.5で希釈して、10mg/mlの最終濃度にし、ジメチルアセトアミド中DM1の10mM溶液1つのトラスツズマブあたり5つのSMCCと仮定して1.7当量、7.37mg/mlと反応させた。この反応物をアルゴン雰囲気下、周囲温度で4~16時間攪拌した。この結合体化反応混合物を、pH6.5で、1×PBSを使用してSephadexG25ゲル濾過カラム1.5×4.9cmで濾過した。あるいは、その反応混合物を、pH5で、10mMスクシナートおよび150mM塩化ナトリウムでゲル濾過した。DM1/トラスツズマブ比pは、252nmおよび280nmでの吸光度から測定すると3.1であった。薬物対抗体の比pはまた、質量分析法によって測定され得る。結合体化はまた、SDSポリアクリルアミドゲル電気泳動によってモニタリングされ得る。凝集はレーザー光散乱分析によって評価され得る。抗体-SMCC-DM1結合体:このプロトコルの後、SMCCリンカーおよびDM1薬物部分を含む他の抗体-薬物結合体を調製した。これらとしては、以下が挙げられる:。抗体-BMPEO-DM1結合体:システイン結合体化について、抗体を、EDTAの存在下、還元剤例えば、ジチオスレイトールDTTまたはTCEPを用いて還元し得る。37°Cで1時間インキュベートした後、pHを、100mMリン酸カリウムを用いて約7に調整する。還元された抗体を、ビスマレイミド試薬BMPEO4PierceChemicalによって改変し、抗体の表面上の未反応のマレイミド基を離す。これは、50エタノール/水混合物中のBMPEO4を10mMの濃度に溶解させ、10倍のモル過剰量をおよそ1.6mg/ml10μMの濃度でリン酸緩衝化生理食塩水中の抗体を含む溶液に添加し、1時間反応させてAb-BMPEOを形成することによって達成され得る。過剰なBMPEO4を、30mMシトラート、pH6で150mMNaCl緩衝液を用いてゲル濾過HiTrapカラム、Pharmaciaによって除去する。およそ10倍のモル過剰のDM1を、ジメチルアセトアミドDMAに溶解させ、Ab-BMPEO中間体を添加する。ジメチルホルムアミドDMFもまた、薬物部分試薬を溶解させるために使用され得る。その反応混合物を一晩反応させ、その後、ゲル濾過またはPBSに透析して、未反応のDM1を除去する。PBS中のS200カラムでのゲル濾過を使用して、高分子量集合体を除去し、精製されたAb-BMPEO-DM1を提供する。このプロトコルの後、BMPEOリンカーおよびDM1薬物部分を含む他の抗体-薬物結合体を調製した。それらとしては、以下が挙げられる:。実施例5-インビトロ細胞増殖アッセイADCの効能を、以下のプロトコルPromegaCorp.TechnicalBulletinTB288;Mendozaら2002CancerRes.62:5485-5488を使用する細胞増殖アッセイによって測定した:1培地中の約104細胞SKBR-3、BT474、MCF7またはMDA-MB-468を含む100μlの細胞培養物のアリコートを、96ウェルの不透明な壁を備えるプレートの各ウェルに堆積させた。2培地を含むが細胞を含まないコントロールウェルを準備した。3ADCを実験用ウェルに添加し、3~5日間インキュベートした。4プレートをおよそ30分間室温で平衡化した。5各ウェルに存在する細胞培養培地の体積に等しい体積のCellTiter-GloReagentを添加した。6内容物を軌道振盪機で2分間混合して、細胞溶解を誘導した。7プレートを室温で10分間インキュベートし、発光シグナルを安定化した。8発光を記録し、RLU=相対発光単位としてグラフで報告した。実施例6-マウスにおける血清クリアランスおよび安定性4匹の動物の群6つにおいて、beige変異の、未処置腫瘍無しヌードマウスを、研究した。0日目に、キャリアのみを与えたビヒクル群を除いて、各マウスに、200μlの水性キャリア中、1回の2mg/kg用量のADCを与えた。血液を、投与後の各時点5分後、1時間後、6時間後、24時間後、72時間後、および168時間後で、麻酔下で心臓穿刺によって回収した。その血清を単離し、抗体およびADCを測定した。群1:ビヒクルPBS、pH6.5、ADCなし群2:トラスツズマブ-SMCC-DM1群3:トラスツズマブ-SPP-DM1群4:トラスツズマブ-SPDP-DM1群5:トラスツズマブ-SPP-DM3群5:トラスツズマブ-SPP-DM4。実施例7-ラットにおける血清安定性1用量群あたり6匹のSprague-Dawleyラット各100~125グラムの6つの用量群を研究した。0日目に、動物に、外側尾静脈を介して1用量体積10ml/kgで、ビヒクルのIV用量、10mg/kgトラスツズマブ-SPP-DM1、または10mg/kgトラスツズマブ-SMCC-DM1を1回投与した。約300μlの全血を、投与後の各時点:0分後投与前、10分後、および30分後;1時間後、2時間後、4時間後、8時間後、24時間後、および36時間後;ならびに2日後、3日後、4日後、7日後、14日後、21日後、28日後で回収した。実施例8-腫瘍体積のインビボ効力高発現HER2トランスジェニック外植片マウス:トランスジェニック実験に適した動物は、標準的な商業的供給源例えば、TaconicGermantown,N.Y.から得られ得る。多くの系統が適切であるが、FVB雌性マウスは、彼らが非常に腫瘍形成しやすいので、好ましい。FVB雄性を、交配のために使用し、精管切除したCD.1雄性studを、偽妊娠を刺激するために使用した。精管切除したマウスは、任意の業者から得ることができる。創始動物を、FVBマウスまたは129/BL6×FVBp53ヘテロ接合性マウスのいずれかと交配した。p53対立遺伝子においてヘテロ接合性を有するマウスを、腫瘍形成を潜在的に増大させるために使用した。しかし、これは、不要であることが判明した。従って、いくらかのF1腫瘍は、混合系統のものである。創始動物の腫瘍は、FVBのみである。いくらかの発生しつつある腫瘍を有するが、同腹仔を有さない6匹の創始動物を得た。腫瘍Fo5mmtvトランスジェニックマウスから増殖させた同種移植片を有する動物を、トラスツズマブ-DM1マイタンシノイド結合体10mg/kg用量の1回の注射で処置し、腫瘍体積を、注射後20日間にわたって評価した。Bjab-luc異種移植片SCIDマウス:マウス1匹あたり2000万個のBjab-luc異種移植片腫瘍細胞を有する8~10匹のSCIDマウスの群に、1日目に抗体-薬物結合体、または裸の抗体を投与した。8匹のマウスの群を、抗CD22ADC、裸の抗CD22抗体、およびコントロールで各々試験した。コントロールADCトラスツズマブ-SMCC-DM1;負荷:DM1/トラスツズマブ=3.2は、特異的結合物specificbinderではなく、200μgのDM1/m2,4.2トラスツズマブ/kgマウスで投与し、約3日の平均腫瘍倍加時間を生じた。抗CD22結合体7A2-SMCC-DM1負荷:DM1/Ab=3.6、5E8-SMCC-DM1負荷:DM1/Ab=3.6、およびRFB4-SMCC-DM1負荷:DM1/Ab=4.3、裸の抗体7A2、5E8およびRFB4を、4mg/kgマウスで投与した。実施例9-ラットの毒性トラスツズマブ-SPP-DM1ジスルフィドリンカーの急性毒性プロフィールを、遊離DM1およびトラスツズマブ-SMCC-DM1非ジスルフィドリンカーのプロフィールと比較し、評価した。動物に、1日目に注射し、完全な化学的プロフィールおよび血液プロフィールをベースライン、3日目および5日目において得、そして完全な剖検を、5日に行った。慣用的な組織学を、以下の組織に関して、各群につき3匹の無作為の動物に対して行った:胸骨、肝臓、腎臓、胸腺、脾臓、大腸および小腸。実験群は、以下のとおりであった:群1:ビヒクル10mMコハク酸ナトリウム、100mg/mLスクロース、0.1Tween20、pH5.0群2:トラスツズマブ-SPP-DM1、22.3mg/kg群3:トラスツズマブ-SMCC-DM1、10mg/kg群4:トラスツズマブ-SMCC-DM1、25mg/kg群5:トラスツズマブ-SMCC-DM1、50mg/kg群6:遊離DM1、160μg/kg。実施例10-カニクイザルの毒性/安全性4頭2頭のオス、2頭のメスの未処置Macacafascicularisカニクイザルの3つの群を、研究した。群1:4頭の動物に、1日目および22日目に、ビヒクルPBS、pH6.5すなわち、ADCなし処方物のみを与え、続いて、36日目に剖検した。群2:4頭の動物に、1日目および22日目に、トラスツズマブ-SMCC-DM14900μg/m2を与えた。群3:4頭の動物に、22日目に、トラスツズマブ-SMCC-DM17200μg/m2を与えた。投与を、他の種に関連させるために、動物の表面積で表すすなわち、種に関係なくμg/m2での投与量、よって種間で比較可能。群2および群3の研究のためのトラスツズマブ-SMCC-DM1の処方物は、PBS、5.4mMリン酸ナトリウム、4.2mMリン酸カリウム、140mM塩化ナトリウム、pH6.5を含んでいた。血液分析のために、最初に投与する前馴化期間、ならびに最初に投与して3日後、7日後、11日後、および14日後に群1および群2、ならびに2回目に投与して3日後、7日後、11日後、14日後、および21日後群1、群2および群3に、血液を採取した。赤血球RBC数および血小板PLT数を、光散乱法によって測定した。白血球WBC数を、ペルオキシダーゼ/好塩基球法により測定した。網状赤血球数を、カチオン性色素を用いた光散乱法により測定した。細胞数を、Advia120装置で測定した。ALTアラニンアミノトランスフェラーゼおよびASTアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼを、UV/NADHによるU/Lにおいて;OlympusAU400装置のIFCC方法、およびTotalAbELISA-ECD/GxhuFc-HRP.Conj.AbELISA-xDM1/ECD-Bio/SA-HRP試験を用いて測定した。本明細書全体にわたって引用されている全ての特許、特許出願、および参考文献は、明らかに本明細書に参考として援用される。"