少なくとも、下記1および2の要件:1POU5F1遺伝子、NANOG遺伝子、SOX2遺伝子、ZFP42遺伝子、LIN28遺伝子及びTERT遺伝子の6遺伝子を発現すること;2a内在性がん抑制遺伝子の変異、またはb内在性がん関連遺伝子の発現上昇のいずれかの異常を有すること;を具備することを特徴とする、誘導前がん幹細胞又は誘導悪性幹細胞である誘導がん幹細胞。前記誘導がん幹細胞で発現している前記1自己複製関連遺伝子の発現量が、胚性幹細胞で発現している遺伝子の発現量と比較して18から8倍である、請求項1に記載された誘導がん幹細胞。誘導前がん幹細胞である、請求項1または2に記載の誘導がん幹細胞。a前記がん抑制遺伝子が、APC遺伝子、またはRB1遺伝子である、請求項3に記載された誘導がん幹細胞。誘導悪性幹細胞である、請求項1または2に記載の誘導がん幹細胞。b前記がん関連遺伝子が、血管新生関連遺伝子群、がん関連パスウェイ遺伝子群、間質バリア関連遺伝子群、上皮間葉転換関連遺伝子群、胃がん関連遺伝子群、自律増殖関連遺伝子群、TGFβBMPシグナル関連遺伝子群、組織侵潤転移関連遺伝子群、Wntシグナル関連遺伝子群、シグナル伝達関連遺伝子群、Notchシグナル関連遺伝子群、乳がん及びエストロジェン受容体シグナル関連遺伝子群、結腸がん関連遺伝子群、低酸素シグナル関連遺伝子群、GPCRシグナル関連遺伝子群、薬剤耐性関連遺伝子群、Hedgehogシグナル関連遺伝子群、PI3KAKTシグナル関連遺伝子群、薬物代謝遺伝子群、がん分子メカニズム遺伝子群、SMADシグナルネットワーク関連遺伝子群、膵がん関連遺伝子群、前立腺がん関連遺伝子群、肝がん関連遺伝子群、肺がん関連遺伝子群からなる群に含まれる遺伝子の群の中から選択される少なくとも1種の遺伝子群である、請求項5に記載された誘導がん幹細胞。b前記内在性がん関連遺伝子に加え、ストレス及び毒性関連遺伝子群、エピジェネティクスクロマチン修飾酵素遺伝子群、幹細胞転写因子遺伝子群からなる群に含まれる遺伝子の群の中から選択される少なくとも1種の内在性の遺伝子に、遺伝子の発現上昇が生じている、請求項5または6に記載された誘導がん幹細胞。b前記内在性がん関連遺伝子に加え、肝細胞特異的遺伝子群に含まれる遺伝子の群の中から選択される少なくとも1種の遺伝子に、遺伝子の発現上昇が生じている、請求項5~7の何れかに記載された誘導がん幹細胞。更に、中内胚葉系幹細胞、または内胚葉系幹細胞に特徴的な遺伝子を発現している、請求項5~8の何れかに記載された誘導がん幹細胞。前記中内胚葉系幹細胞に特徴的な遺伝子がGSC遺伝子であり、前記内胚葉系幹細胞に特徴的な遺伝子が、GSC遺伝子、GATA4遺伝子、FOXA2遺伝子、SOX17遺伝子から選択された少なくとも1種である、請求項9に記載された誘導がん幹細胞。a内在性がん抑制遺伝子の変異を有する哺乳動物から採取した体細胞、並びに、発がんした哺乳動物から採取した、非胚性の原料体細胞から、請求項1の1および2の特徴を有する誘導がん幹細胞を製造する方法であって、該方法が、前記原料体細胞を、POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子及びSOX2遺伝子の遺伝子産物が前記原料体細胞内に存在する状態におく誘導工程を行うことを特徴とする、誘導前がん幹細胞又は誘導悪性幹細胞である誘導がん幹細胞の製造方法。POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子及びSOX2遺伝子の遺伝子産物の前記原料体細胞内における存在比率が、POU5F1遺伝子>SOX2遺伝子の関係を満たす、請求項11に記載された誘導がん幹細胞の製造方法。POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子及びSOX2遺伝子又はこれらの遺伝子産物を使用する、請求項11または12に記載されたの製造方法。更に、1ウェルに1細胞をソーティングして増殖させる工程を含む、請求項11~13の何れかに記載された製造方法。更に、invitroで自己複製可能な誘導がん幹細胞の悪性の性質又は特異マーカーを同定して選別する選別工程を含む、請求項11~14の何れかに記載された製造方法。前記選別工程が、a内在性がん抑制遺伝子の変異を有する哺乳動物から採取した体細胞、並びに、発がんした哺乳動物から採取した、非胚性の原料体細胞を誘導処理した細胞と、比較対象となる哺乳動物から採取した体細胞から誘導した、誘導中内胚葉系幹細胞、誘導内胚葉系幹細胞又は誘導多能性幹細胞、若しくは、胚性幹細胞と比較し、悪性の性質又は特異マーカーを同定して選別する選別工程である、請求項15に記載された製造方法。前記選別工程が、血管新生関連遺伝子群、がん関連パスウェイ遺伝子群、間質バリア関連遺伝子群、上皮間葉転換関連遺伝子群、胃がん関連遺伝子群、自律増殖関連遺伝子群、TGFβBMPシグナル関連遺伝子群、組織侵潤転移関連遺伝子群、Wntシグナル関連遺伝子群、シグナル伝達関連遺伝子群、Notchシグナル関連遺伝子群、乳がん及びエストロジェン受容体シグナル関連遺伝子群、結腸がん関連遺伝子群、低酸素シグナル関連遺伝子群、GPCRシグナル関連遺伝子群、薬剤耐性関連遺伝子群、Hedgehogシグナル関連遺伝子群、PI3KAKTシグナル関連遺伝子群、薬物代謝遺伝子群、がん分子メカニズム遺伝子群、SMADシグナルネットワーク関連遺伝子群、膵がん関連遺伝子群、前立腺がん関連遺伝子群、肝がん関連遺伝子群、肺がん関連遺伝子群からなる群に含まれる遺伝子の群の中から選択される、少なくとも1種の遺伝子に係るがん関連遺伝子の発現上昇から同定し選別する選別工程である、請求項15または16に記載された製造方法。がん創薬標的のスクリーニング方法、がん治療薬のスクリーニング方法及びがん診断薬のスクリーニング方法の中から選択された1種のスクリーニング方法であって、該方法が、請求項1~10の何れかに記載された誘導がん幹細胞を用いることを特徴とする、スクリーニング方法。請求項1~10の何れかに記載された誘導がん幹細胞を用いることを特徴とする、がんワクチンの作製方法。請求項1~10の何れかに記載された誘導がん幹細胞を実験動物に移植することを特徴とする、がんモデル動物の作製方法。従って本発明の目的は、発がんに関連する特定の遺伝子変異又は遺伝子発現異常を有する、invitroで自己複製可能な誘導がん幹細胞およびその誘導がん幹細胞を製造する方法を提供することにある。本発明の別の目的は、本発明のinvitroで自己複製可能な誘導がん幹細胞を用いた、がん創薬標的のスクリーニング、がん治療薬のスクリーニング、がん診断薬のスクリーニング等のスクリーニング方法、あるいはこの誘導がん幹細胞を用いたがんワクチンの作製方法を提供することにある。本発明のさらなる目的は、本発明のinvitroで自己複製可能な誘導がん幹細胞を実験動物に移植する、がんモデル動物の作製方法を提供することにある。本発明の第1の態様において、下記1および2の要件:1POU5F1遺伝子、NANOG遺伝子、SOX2遺伝子、ZFP42遺伝子、LIN28遺伝子及びTERT遺伝子の6遺伝子自己複製関連遺伝子を発現すること;そして2a内在性のがん抑制遺伝子の変異、またはb内在性のがん関連遺伝子の発現上昇のいずれかの異常を有すること;を具備することを特徴とする、invitroで増殖可能な誘導がん幹細胞を提供する。本発明のこの態様においては、前記誘導がん幹細胞で発現している前記1自己複製関連遺伝子の発現量は、胚性幹細胞で発現している遺伝子の発現量と比較して18から8倍以内であることが好ましい。本発明の誘導がん幹細胞としては、b前記内在性がん関連遺伝子の発現上昇に加え、ストレス及び毒性関連遺伝子群、エピジェネティクスクロマチン修飾酵素遺伝子群、幹細胞転写因子遺伝子群からなる群に含まれる遺伝子の群の中から選択される少なくとも1種の内在性の遺伝子に、遺伝子の発現上昇が生じている細胞であってもよく、また、b前記内在性がん関連遺伝子の発現上昇に加え、肝細胞特異的遺伝子群に含まれる遺伝子の群の中から選択される少なくとも1種の内在性の遺伝子に、遺伝子の発現上昇が生じている細胞であってもよい。本発明の誘導がん幹細胞においては、更に、中内胚葉系幹細胞、内胚葉系幹細胞に特徴的な遺伝子を発現していてもよい。本発明の第2の態様において、aがん抑制遺伝子の変異を有する哺乳動物から採取した体細胞、並びに、発がんした哺乳動物から採取した、aがん抑制遺伝子の変異またはbがん関連遺伝子の発現上昇のいずれかの異常を有する体細胞からなる群の中から選択された非胚性の原料体細胞から、invitroで自己複製可能な誘導がん幹細胞を製造する方法であって、該方法が、前記原料体細胞を、POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子、及びSOX2遺伝子の遺伝子産物が前記原料体細胞内に存在する状態におく誘導工程を行うことを特徴とする、本発明の誘導がん幹細胞の製造方法を提供する。細胞が非胚性であるという場合、胚性幹細胞、胚、生殖細胞、始原生殖細胞の細胞ではないことを意味する。本発明においては、POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子、及びSOX2遺伝子の遺伝子産物の前記原料体細胞内における存在比率が、POU5F1遺伝子>SOX2遺伝子の関係を満たすことができる。更に本発明においては、POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子、及びSOX2遺伝子又はこれらの遺伝子産物を使用することが好ましく、これらPOU5F1遺伝子、KLF4遺伝子及びSOX2遺伝子又はこれらの遺伝子産物の使用比率が、POU5F1遺伝子>SOX2遺伝子の関係を満たすことができる。本発明においては、前記誘導工程に加え、更に、1ウェルに1細胞をソーティングして増殖させる工程を含んでもよい。本発明においては、前記誘導工程に加え、更に、invitroで自己複製可能な誘導がん幹細胞の悪性の性質又は特異マーカーを同定して選別する選別工程を含んでもよい。この選別工程は、aがん抑制遺伝子の変異を有する哺乳動物から採取した体細胞、並びに、発がんした哺乳動物から採取した、非胚性の原料体細胞を誘導処理したaがん抑制遺伝子の変異、またはbがん関連遺伝子の発現上昇のいずれかの異常を有する誘導がん幹細胞と、比較対象となる哺乳動物から採取した体細胞から誘導した、誘導中内胚葉系幹細胞、誘導内胚葉系幹細胞又は誘導多能性幹細胞、若しくは、胚性幹細胞とを比較し、悪性の性質又は特異マーカーを同定して選別する選別工程であってもよい。特に、血管新生関連遺伝子群、がん関連パスウェイ遺伝子群、間質バリア関連遺伝子群、上皮間葉転換関連遺伝子群、胃がん関連遺伝子群、自律増殖関連遺伝子群、TGFβBMPシグナル関連遺伝子群、組織侵潤転移関連遺伝子群、Wntシグナル関連遺伝子群、シグナル伝達関連遺伝子群、Notchシグナル関連遺伝子群、乳がん及びエストロジェン受容体シグナル関連遺伝子群、結腸がん関連遺伝子群、低酸素シグナル関連遺伝子群、GPCRシグナル関連遺伝子群、薬剤耐性関連遺伝子群、Hedgehogシグナル関連遺伝子群、PI3KAKTシグナル関連遺伝子群、薬物代謝遺伝子群、がん分子メカニズム遺伝子群、SMADシグナルネットワーク関連遺伝子群、膵がん関連遺伝子群、前立腺がん関連遺伝子群、肝がん関連遺伝子群、肺がん関連遺伝子群からなる群に含まれる遺伝子の群の中から選択される、少なくとも1種の遺伝子に係るbがん関連遺伝子の発現上昇によって、前記特異マーカーを同定し選別する選別工程であってもよい。本発明の第3の態様において、がん創薬標的のスクリーニング方法、がん治療薬のスクリーニング方法及びがん診断薬のスクリーニング方法の中から選択された1種のスクリーニング方法であって、本発明の誘導がん幹細胞を用いることを特徴とするスクリーニング方法を提供する。本発明の第4の態様において、本発明の誘導がん幹細胞を用いることを特徴とするがんワクチンの作製方法を提供し、本発明の第5の態様において、本発明の誘導がん幹細胞を実験動物に移植することを特徴とするがんモデル動物の作製方法を提供する。本発明によれば、a内在性がん抑制遺伝子の変異、またはb内在性がん関連遺伝子の発現上昇等の異常を有すると共に、POU5F1遺伝子、NANOG遺伝子、SOX2遺伝子、ZFP42遺伝子、LIN28遺伝子、TERT遺伝子等の自己複製関連遺伝子が発現している、誘導がん幹細胞、その製造方法、及びこれらの細胞の応用を実施することができる。本発明の誘導がん幹細胞は、原料体細胞が有するaがん抑制遺伝子の変異、またはbがん関連遺伝子の発現上昇等の異常をそのまま維持するだけでなく、幹細胞の特徴の一つである理論的に無限に自己複製可能であるという特徴を併せて有する。従って本発明の誘導がん幹細胞は実質的に長期継代培養可能であり、組織細胞の性質を有するがん細胞へ誘導しやすいため、がん創薬における標的のスクリーニング方法、がん治療薬のスクリーニング方法及びがん診断薬のスクリーニング方法などのスクリーニング方法や、がんワクチンの作製方法、がんモデル動物の作製等、がん治療の研究及びがん関連創薬の研究に非常に有用である。前述したように、現在では、体細胞が誘導多能性幹細胞にリプログラミングされるのと同様に、がん細胞をリプログラミングすることによって、がん細胞を正常な細胞に戻すことができるという概念が定着している。これに対し本発明者らは、一般に、新鮮がん組織及び初代培養がん細胞集団は何れも異質性heterogeneousがあるため、一口にがん組織やがん細胞群と言っても、その中には、正常細胞と同じか又は近似したジェネティクスとエピジェネティクスをもった正常細胞や非がん細胞が混在することから、がん細胞が正常細胞にリプログラミングされるのではなく、新鮮がん組織、及び初代培養がん細胞集団中に混在する非がん細胞や正常細胞が正常な誘導多能性幹細胞に誘導される一方、新鮮がん組織及び初代培養がん細胞集団の中に存在する、がん抑制遺伝子の変異、遺伝子発現異常等を有するがん細胞から、該がん細胞に由来するがん抑制遺伝子の変異、遺伝子発現異常等を有するがん幹細胞が誘導されるという仮説を立てた。この仮説に基づけば、POU5F1遺伝子、SOX2遺伝子、KLF4遺伝子及びcMYC遺伝子の導入、或いは、POU5F1遺伝子、SOX2遺伝子及びKLF4遺伝子の導入などの誘導多能性幹細胞作製技術を応用して、invitroで自己複製可能な誘導がん幹細胞を作製することができ、更に、得られた誘導がん幹細胞をinvitroで自己複製させれば、ジェネティクス的又はエピジェネティクス的にがんとしての悪性の性質を維持させた、invitroで自己複製可能な誘導がん幹細胞を、培養条件下で無限増殖させることができる可能性があると考えられる。そこで、本発明者らはこのような仮説のもとに鋭意研究した結果、原料として、内在性がん抑制遺伝子の変異を有する哺乳動物から採取した体細胞、並びに、発がんした哺乳動物から採取した、非胚性の細胞を用い、POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子及びSOX2遺伝子の遺伝子産物を前記原料体細胞内に存在させることにより、invitroで自己複製可能な誘導がん幹細胞が得られることを見出した。更に、原料体細胞をこのような状態におく際に、POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子及びSOX2遺伝子の遺伝子産物の細胞内存在比率が、分化を決定づける重要な要因の一つと考えられることが判明した。更に、POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子、SOX2遺伝子等の細胞内存在比率を変えることにより、誘導中内胚葉系幹細胞、誘導内胚葉系幹細胞を作製することができることもまた見出した。すなわち、本発明者等は、SOX2遺伝子、POU5F1遺伝子及びKLF4遺伝子の翻訳産物の細胞内存在比率を変えることにより、誘導中内胚葉系前がん幹細胞又は誘導中内胚葉系悪性幹細胞、誘導内胚葉系前がん幹細胞又は誘導内胚葉系悪性幹細胞、誘導前がん多能性幹細胞又は誘導悪性多能性幹細胞などの、本発明の誘導がん幹細胞を作製することができることを見出した。しかも、このようにして得られた本発明の誘導がん幹細胞は、bFGFを除去した培地、胚性幹細胞用培地以外の培地での培養や、実験動物への移植等の方法により、分化誘導して自己複製を解除することにより、容易にがん細胞に誘導させることができる。このように、本発明者らは、遺伝子変異又は遺伝子発現の上昇、すなわち、生体内においてがんとしての悪性の性質、すなわち、原料体細胞が有する異常を維持すると共に、理論的には無限に自己複製が可能であり、実質的に長期継代培養可能な、本発明の誘導がん幹細胞を見出すと共に、これらの細胞をinvitroで創薬に応用したり、がん研究に用いたりすることができることを見出し、本発明を完成させるに至った。本明細書の以下において、がん抑制遺伝子とは、がんの発生を抑制する機能を持つタンパク質をコードする遺伝子であり、本発明の誘導がん幹細胞において、変異を生じている遺伝子のことを意味する。本発明におけるがん関連遺伝子とは、遺伝子発現上昇の異常により細胞のがん化を引き起こす遺伝子、及び、細胞のがん化に関連する遺伝子であり、本発明の誘導がん幹細胞において、遺伝子の発現上昇を生じている遺伝子のことを意味する。以下、本発明の誘導がん幹細胞、これらの製造方法、及び、これらの細胞の応用について詳細に説明する。誘導がん幹細胞本発明の第1の態様において、下記1および2の要件:1POU5F1遺伝子、NANOG遺伝子、SOX2遺伝子、ZFP42遺伝子、LIN28遺伝子及びTERT遺伝子の6遺伝子自己複製関連遺伝子を発現すること;そして2a内在性がん抑制遺伝子の変異、またはb内在性がん関連遺伝子の発現上昇のいずれかの異常を有していること;を具備することを特徴とする誘導がん幹細胞を提供する。この様な特徴を有する細胞は、invitroで自己複製可能な誘導がん幹細胞であることが明らかになった。本発明において、1自己複製関連遺伝子、2a内在性がん抑制遺伝子、b内在性がん関連遺伝子等における内在性とは、これらの遺伝子が、遺伝子導入等により細胞に導入された外来性の遺伝子ではなく、細胞にもともと存在する遺伝子であることを意味する。当該技術分野において一般的に幹細胞と言う場合、特定の細胞に分化できる能力分化能と、細胞分裂を経てももとの細胞と同じ性質分化能を維持できる能力自己複製能とを持つ細胞のことをいう。このうち、自己複製能という場合、分裂して同じ細胞を作り出すことができることをいい、本発明の1の性質および2の性質を有する細胞の場合、少なくとも3日間増殖培養または継代培養が可能であることを意味する。本発明の誘導がん幹細胞は、誘導前がん幹細胞と誘導悪性幹細胞とを含む概念である。本発明において誘導前がん幹細胞とは、家族性腫瘍を引き起こす遺伝子異常を片側アリルに有している体細胞である、がん化する予備段階の前がん細胞であって、POU5F1遺伝子、NANOG遺伝子、SOX2遺伝子、ZFP42遺伝子、LIN28遺伝子及びTERT遺伝子の6遺伝子自己複製関連遺伝子を発現することにより、少なくとも自己複製能を有するように誘導された細胞を意味する。本発明において誘導悪性幹細胞とは、内在性がん関連遺伝子の発現上昇を有している細胞であって、POU5F1遺伝子、NANOG遺伝子、SOX2遺伝子、ZFP42遺伝子、LIN28遺伝子及びTERT遺伝子の6遺伝子自己複製関連遺伝子を発現することにより、少なくとも自己複製能を有するように誘導された細胞、又は家族性腫瘍を引き起こす遺伝子異常を少なくとも片側アリルに有している体細胞であり、家族性腫瘍患者のがん組織由来の細胞から作製し、POU5F1遺伝子、NANOG遺伝子、SOX2遺伝子、ZFP42遺伝子、LIN28遺伝子及びTERT遺伝子の6遺伝子自己複製関連遺伝子を発現することにより、少なくとも自己複製能を有するように誘導された細胞を意味する。本発明の誘導がん幹細胞には、多能性を示す誘導がん幹細胞のみならず、中内胚葉系、内胚葉系の誘導がん幹細胞が含まれる。ここで中内胚葉系の幹細胞という場合、中胚葉系又は内胚葉系の組織に属する細胞に分化する能力を有する幹細胞であって、中内胚葉系の遺伝子を発現している細胞を意味し、血管、血液細胞、筋肉、骨、軟骨、心筋、骨格筋、胃、肺、膵臓、肝臓、小腸、大腸等へと分化する細胞である。また内胚葉系の幹細胞という場合、分化の階層において、前記中内胚葉系の幹細胞の下位に存在する幹細胞であり、内胚葉系の組織に属する細胞に分化する能力を有する幹細胞であって、内胚葉系の遺伝子を発現している細胞を意味する。これらの幹細胞は、胃、肺、膵臓、肝臓、小腸、大腸等へと分化する細胞である。誘導がん幹細胞における遺伝子発現1本発明における前記1の遺伝子自己複製関連遺伝子は、胚性幹細胞のマーカー遺伝子として知られている遺伝子である。これらの遺伝子は、本発明の誘導がん幹細胞が、理論的には無限に自己複製し、事実上invitroで自己複製可能な誘導がん幹細胞のまま長期継代培養可能な性質を有する細胞であることを特定する遺伝子自己複製関連遺伝子である。これらの遺伝子の具体的な例としては、以下の表1の遺伝子を挙げることができる。本発明においては、前記1表1の遺伝子群の中から選択された、POU5F1遺伝子、NANOG遺伝子、SOX2遺伝子、ZFP42遺伝子、LIN28遺伝子及びTERT遺伝子の6遺伝子自己複製関連遺伝子を発現していることが必要であるが、これ以上の遺伝子が発現していてもよい。ここで本発明において挙げられる6遺伝子は、胚性幹細胞に特異的かつ高発現している特に典型的な遺伝子であることが知られている遺伝子であり、これらの遺伝子の胚性幹細胞中での機能は、これまでよく調べられている。また、本発明においては、前記1自己複製関連遺伝子が発現していれば良く、これらの遺伝子の発現量は、特に制限されるものではないが、本発明の誘導がん幹細胞で発現している前記1自己複製関連遺伝子の発現量は、胚性幹細胞例えば、hESH9GSM194390、hESBG03GSM194391、hESES01GSM194392の何れかで発現している遺伝子の発現量と比較してほぼ同等、すなわち、18~8倍、特に14~4倍以内であることが、invitroで自己複製可能な誘導がん幹細胞の状態を維持する上から、又は長期継代培養の観点から好ましく、12~2倍以内であることが最も好ましい。前記した必須遺伝子6遺伝子の中でも、本発明の誘導がん幹細胞で発現しているPOU5F1遺伝子、NANOG遺伝子、SOX2遺伝子の発現量が、胚性幹細胞で発現している遺伝子の発現量と比較して、18~8倍であることが好ましく、特に、14~4倍であることが好ましく、12~2倍であることが最も好ましい。本発明においては、本発明の誘導がん幹細胞で発現している前記1自己複製関連遺伝子の内、胚性幹細胞で発現している遺伝子と比較して5種以上の遺伝子が12~2倍、10種以上の遺伝子が14~4倍、20種以上の遺伝子が18~8倍の範囲で発現していることが好ましい。これらの中でも、本発明においては、特に、NANOG遺伝子、POU5F1遺伝子、SOX2遺伝子、TDGF1遺伝子、DNMT3B遺伝子、ZFP42遺伝子、TERT遺伝子、GDF3遺伝子、SALL4遺伝子、GABRB3遺伝子、LIN28遺伝子が、胚性幹細胞で発現している遺伝子に比べて14~4倍の範囲で発現しているものが好ましく、ACVR2B遺伝子、CD24遺伝子、CDH1遺伝子、CYP26A1遺伝子、DNMT3B遺伝子、DPPA4遺伝子、EDNRB遺伝子、FLT1遺伝子、GABRB3遺伝子、GATA6遺伝子、GDF3遺伝子、GRB7遺伝子、LIN28遺伝子、NANOG遺伝子、NODAL遺伝子、PODXL遺伝子、POU5F1遺伝子、SALL4遺伝子、SOX2遺伝子、TDGF1遺伝子、TERT遺伝子、ZFP42遺伝子、ZIC3遺伝子の全てを発現しているものが最も好ましい。誘導がん幹細胞における遺伝子発現2本発明の誘導がん幹細胞は、2a内在性がん抑制遺伝子の変異、またはb内在性がん関連遺伝子の発現上昇のいずれかの異常を有している。本発明の誘導がん幹細胞が有するこれらの異常は、誘導がん幹細胞の由来となる原料体細胞が本来有していた異常をそのまま承継するものである。ここで、2a内在性がん抑制遺伝子の変異という場合、どのようなタイプの変異であってもよいが、たとえば、内在性がん抑制遺伝子の片側アリルに関する生殖系列変異を例として挙げることができる。また、2b内在性がん関連遺伝子の発現上昇という場合、胚性幹細胞での発現と比較して、その遺伝子の発現が2倍以上に上昇している場合のことをいう。遺伝子の発現は、2倍以上であればどの程度であってもよく、たとえば、3倍以上、4倍以上、5倍以上、6倍以上、7倍以上、8倍以上、など発現の差が大きい方が好ましい。変異を生じているaがん抑制遺伝子、遺伝子の発現上昇が生じているbがん関連遺伝子としては、公知のものであれば特に制限されることはないが、以下のような遺伝子を例示することができる。すなわち、本発明におけるaがん抑制遺伝子としては、例えば、APC遺伝子GenBankアクセッション番号:NM-0000383、RB1遺伝子RB1、GenBankアクセッション番号:NM-0003212を例としてあげることができる。a内在性がん抑制遺伝子の変異として家族性腫瘍の原因遺伝子に変異が認められる本発明の誘導がん幹細胞は、家族性腫瘍に関連する遺伝子変異遺伝子発現異常を有しているため、家族性腫瘍の発がんメカニズムの解明や分子標的の発見等のがん研究に極めて有用である。また、本発明における前記bがん関連遺伝子としては、血管新生関連遺伝子群、がん関連パスウェイ遺伝子群、間質バリア細胞外マトリックスおよび接着分子関連遺伝子群、上皮間葉転換関連遺伝子群、胃がん関連遺伝子群、自律増殖関連遺伝子群、TGFβBMPシグナル関連遺伝子群、組織侵潤転移関連遺伝子群、Wntシグナル関連遺伝子群、シグナル伝達関連遺伝子群、Notchシグナル関連遺伝子群、乳がん及びエストロジェン受容体シグナル関連遺伝子群、結腸がん関連遺伝子群、低酸素シグナル関連遺伝子群、GPCRシグナル関連遺伝子群、薬剤耐性関連遺伝子群、Hedgehogシグナル関連遺伝子群、PI3KAKTシグナル関連遺伝子群、薬物代謝遺伝子群、がん分子メカニズム遺伝子群、SMADシグナルネットワーク関連遺伝子群、膵がん関連遺伝子群、前立腺がん関連遺伝子群、肝がん関連遺伝子群、肺がん関連遺伝子群等に含まれる遺伝子を例として挙げることができる。本発明の誘導がん幹細胞においては、これらの遺伝子からなる群の中から選択される少なくとも1種の遺伝子について、b内在性がん関連遺伝子の発現上昇が認められることが好ましい。これらの遺伝子は、がん細胞で遺伝子の発現上昇が認められる遺伝子群であり、このようなb内在性がん関連遺伝子の発現上昇などの異常がある誘導がん幹細胞について、解析を行うことにより、発がんメカニズムの解明などが期待され、がん研究及びがん創薬研究に非常に有用である。前記したがん関連遺伝子bについては、下記表2~26に記載された遺伝子を例示することできる。各遺伝子シンボルに対するGenBankアクセッション番号も例示するが、本発明は係る記載により制限されるものではない。血管新生関連遺伝子群としては、下記表2の遺伝子を例示することができる。がん関連パスウェイ遺伝子群としては、下記表3の遺伝子を例示することができる。間質バリア関連遺伝子群としては、下記表4の遺伝子を例示することができる。上皮間葉転換関連遺伝子群としては、下記表5の遺伝子を例示することができる。胃がん関連遺伝子群としては、下記表6の遺伝子を例示することができる。自律増殖関連遺伝子群としては、下記表7の遺伝子を例示することができる。TGFβBMPシグナル関連遺伝子群としては、下記表8の遺伝子を例示することができる。組織侵潤転移関連遺伝子群としては、下記表9の遺伝子を例示することができる。Wntシグナル関連遺伝子群としては、下記表10の遺伝子を例示することができる。シグナル伝達関連遺伝子群としては、下記表11の遺伝子を例示することができる。Notchシグナル関連遺伝子群としては、下記表12の遺伝子を例示することができる。乳がん及びエストロジェン受容体シグナル関連遺伝子群としては、下記表13の遺伝子を例示することができる。結腸がん関連遺伝子群としては、下記表14の遺伝子を例示することができる。低酸素シグナル関連遺伝子群としては、下記表15の遺伝子を例示することができる。GPCRシグナル関連遺伝子群としては、下記表16の遺伝子を例示することができる。薬剤耐性関連遺伝子群としては、下記表17の遺伝子を例示することができる。Hedgehogシグナル関連遺伝子群としては、下記表18の遺伝子を例示することができる。PI3KAKTシグナル関連遺伝子群としては、下記表19の遺伝子を例示することができる。薬物代謝遺伝子群としては、下記表20の遺伝子を例示することができる。がん分子メカニズム遺伝子群としては、下記表21の遺伝子を例示することができる。SMADシグナルネットワーク関連遺伝子群としては、下記表22の遺伝子を例示することができる。膵がん関連遺伝子群としては、下記表23の遺伝子を例示することができる。前立腺がん関連遺伝子群としては、下記表24の遺伝子を例示することができる。肝がん関連遺伝子群としては、下記表25の遺伝子を例示することができる。肺がん関連遺伝子群としては、下記表26の遺伝子を例示することができる。誘導がん幹細胞における追加の遺伝子更に、本発明の誘導がん幹細胞においては、b前記内在性がん関連遺伝子に加え、ストレス及び毒性関連遺伝子群、エピジェネティクスクロマチン修飾酵素遺伝子群、幹細胞転写因子遺伝子群からなる群に含まれる遺伝子の群の中から選択される少なくとも1種の内在性の遺伝子に、遺伝子の発現上昇が生じていることが好ましい。これらの遺伝子群については、下記表27~29に記載された遺伝子を例示することができる。各遺伝子シンボルに対するGenBankアクセッション番号も例示するが、本発明はかかる記載によって制限されるものではない。ストレス及び毒性関連遺伝子群としては、下記表27の遺伝子を例示することができる。エピジェネティクスクロマチン修飾酵素遺伝子群としては、下記表28の遺伝子を例示することができる。幹細胞転写因子遺伝子群としては、下記表29の遺伝子を例示することができる。本発明においてはまた、b前記内在性がん関連遺伝子に加え、肝細胞特異的遺伝子群に含まれる遺伝子からなる群の中から選択される少なくとも1種の内在性の遺伝子に、遺伝子の発現上昇が生じていてもよい。肝細胞特異的遺伝子群としては、下記のような肝臓の機能に関連する遺伝子を例として挙げることができる。これらの遺伝子は、何れもがんとしての性質に関連する遺伝子として機能する場合があるため、本発明の誘導がん幹細胞においては、b前記がん関連遺伝子に加え、肝細胞特異的遺伝子群の遺伝子に、遺伝子の発現上昇が認められることが好ましい。また、肝細胞特異的遺伝子群としては、具体的に下記表30に記載された肝細胞関連遺伝子群Hepaを例として挙げることができる。表中には各遺伝子シンボルに対するGenBankアクセッション番号も例示するが、本発明はかかる記載によって制限されるものではない。本発明の誘導がん幹細胞においては、更に、中内胚葉系幹細胞、内胚葉系幹細胞に特徴的な遺伝子が、発現していることが好ましく、特に、対照となる未分化な誘導多能性幹細胞の遺伝子の発現量と比較して発現上昇していることが好ましい。対象となる未分化な誘導多能性幹細胞としては、hiPS201B7が用いられる。この細胞の遺伝子発現データは、前記したGeneExpressionOmnibusGEOから取得することが可能である。中内胚葉系幹細胞、内胚葉系幹細胞に特徴的な遺伝子としては、各幹細胞に特徴的な遺伝子であれば特に制限されることはない。特に、中内胚葉系幹細胞に特徴的な遺伝子としては、GSC遺伝子等、内胚葉系幹細胞に特徴的な遺伝子としては、GSC遺伝子、GATA4遺伝子、FOXA2遺伝子、SOX17遺伝子等を好ましい例として挙げることができる。本発明の誘導がん幹細胞は、特定の組織細胞の性質を有するがん細胞へ分化誘導しやすいため、家族性腫瘍でがん化する細胞、例えば、網膜芽細胞や腸管上皮細胞に分化誘導し、網膜芽細胞腫や大腸ポリポーシスのようながん細胞に誘導することができる。また、本発明の誘導がん幹細胞は3日以上増殖培養又は継代培養が可能であるが、実質的に、1カ月以上、半年或いは1年以上という長期に渡って増殖可能なinvitroで自己複製可能な誘導がん幹細胞であり、この事は理論的には無限に自己複製が可能であることを意味する。使用する培地および培養方法本発明の誘導がん幹細胞を増殖培養又は継代培養する培地としては、胚性幹細胞、多能性幹細胞等を増殖培養又は継代培養することが可能な培地であれば、特に制限されることはないが、胚性幹細胞、多能性幹細胞等の培養に適した培地が好ましく用いられる。このような培地としては、例えば、ES培地40のダルベッコ改変イーグル培地DMEM、40のF12培地シグマ社製、2mMLグルタミン又はGlutaMAXシグマ社製、1の非必須アミノ酸シグマ社製、01mMのβメルカプトエタノールシグマ社製、15~20のノックアウト血清リプレースメントインビトロジェン社製、10μgmlのゲンタマイシンインビトロジェン社製、4~10ngmlのFGF2因子、01mMのβメルカプトエタノールを除いたES培地で、マウス胚性繊維芽細胞以下MEFを24時間培養した上清である馴化培地に、01mMのβメルカプトエタノール及び10ngmlのFGF2を加えた培地以下MEF馴化ES培地、iPS細胞用最適培地イプセロン社製、フィーダー細胞用最適培地イプセロン社製、StemPro登録商標hESCSFMインビトロジェン社製、mTeSR1ステムセルテクノロジーベリタス社製、アニマルプロテインフリーのヒトESiPS細胞維持用無血清培地TeSR2ST05860ステムセルテクノロジーベリタス社製、霊長類ESiPS細胞用培地リプロセル社、ReproStemリプロセル社、ReproFFリプロセル社、ReproFF2リプロセル社などを例示することができるが、これらの培地に制限されることはない。ヒトの細胞を用いる場合には、ヒト胚性幹細胞の培養に適した培地を用いてもよい。培養皿をコートする細胞外マトリックスとしては、ゼラチン、コラーゲン、マトリゲル、ラミニン、Synthemaxなどが用いられる。本発明の誘導がん幹細胞を増殖培養又は継代培養する手法については、胚性幹細胞、多能性幹細胞等の培養において当業者が通常用いる方法であれば、特に制限されることはない。例えば、細胞から培地を除きPBSで洗浄し、細胞剥離液を加えて静置した後、細胞剥離液を除き、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地を加えて遠心分離し、更に、上清を除去した後、1×抗生物質抗真菌剤、mTeSR及びY27632を加え、MEFが播種してあるゼラチンコート又はコラーゲンコートに細胞懸濁液を播種することによって、継代培養する方法などを具体的に例示することができる。前記した培地には、更に、FGF2bFGFを添加することが好ましく、添加量は1~100ngmlであることが好ましい。FGF2bFGFは、誘導される体細胞の種に応じて選択され、本発明においては、ヒト、マウス、ウシ、ウマ、ブタ、ゼブラフィッシュ等を由来とするFGF2bFGFを用いることができる。その他、前記した下垂体抽出物、血清、LIF、ZVADFMK、ALK5阻害剤、PD032591、CHIR00921等を添加することも可能である。更に、Rho関連キナーゼRho関連コイルドコイル含有タンパク質キナーゼの阻害剤であるY27632カルビオケム水溶性、或いは、ファスジルHA1077カルビオケムは、継代時に培地中に添加することもできる。その他にも、FGFreceptortyrosinekinase、MEKmitogenactivatedproteinkinaseERKextracellularsignalregulatedkinases1and2経路、及びGSKGlycogenSynthaseKinase3の三つの低分子阻害剤SU5402、PD184352及びCHIR99021、MEKERK経路及びGSK3の二つの低分子阻害剤PD0325901及びCHIR99021、ヒストンメチル化酵素G9aの阻害剤である低分子化合物BIX01294BIX、アザシチジン、トリコスタチンATSA、7hydroxyflavone、lysergicacidethylamide、kenpaullone、TGFβreceptorIkinaseactivinlikekinase5ALK5の阻害剤EMD616452、TGFβreceptor1TGFBR1kinaseの阻害剤E616452及びE616451、Srcfamilykinaseの阻害剤EI275、thiazovivin、PD0325901、CHIR99021、SU5402、PD184352、SB431542、抗TGFβ中和抗体、A8301、Nr5a2、p53阻害化合物、p53に対するsiRNA、p53経路の阻害剤等を添加することもできる。また、本発明の誘導がん幹細胞は、公知の方法により凍結及び解凍することが可能である。凍結方法としては、例えば、細胞から培地を除きPBSで洗浄し、細胞剥離液を加えて静置した後、細胞剥離液を除き、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地を加えて遠心分離し、次いで、上清を除去した後、凍結用保存液を加えてセラムチューブに分注し、80°Cで一晩凍結させた後、液体窒素にて保管する方法等を例示することができる。また、解凍方法としては、37°Cの恒温槽中で解凍し、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地に懸濁させて用いる方法等が例示できる。誘導がん幹細胞の製造方法本発明の第2の態様において、aがん抑制遺伝子の変異を有する哺乳動物から採取した体細胞、並びに、発がんした哺乳動物から採取した、aがん抑制遺伝子の変異、またはbがん関連遺伝子の発現上昇のいずれかの異常を有する体細胞からなる群の中から選択された非胚性の原料体細胞から、invitroで自己複製可能な誘導がん幹細胞を製造する、本発明の誘導がん幹細胞の製造方法を提供する。この方法は、前記原料体細胞を、POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子、及びSOX2遺伝子の遺伝子産物が前記原料体細胞内に存在する状態におく誘導工程を行うことを特徴とする。これにより、前記原料体細胞に内在される前記1の遺伝子自己複製関連遺伝子が発現し、最終的に、本発明の誘導がん幹細胞が誘導される。なお、ここで状態におくとは、そのような状態になるように調節する場合のみならず、そのような状態になっている細胞を選択して調製する場合をも含む概念である。誘導がん幹細胞の原料細胞本発明の誘導がん幹細胞は、本発明の誘導がん幹細胞の由来となる原料体細胞が本来有していた、aがん抑制遺伝子の変異、またはbがん関連遺伝子の発現上昇等の異常をそのまま継承するため、原料となる体細胞、すなわち原料体細胞は、aがん抑制遺伝子の変異を有する哺乳動物から採取した体細胞、並びに、発がんした哺乳動物から採取した、aがん抑制遺伝子の変異、またはbがん関連遺伝子の発現上昇のいずれかの異常を有する体細胞からなる群の中から選択された体細胞であることが必要である。前記原料体細胞を採取する哺乳動物としては、哺乳動物であれば特に制限されることはなく、ラット、マウス、モルモット、イヌ、ネコ、ミニブタなどのブタ、ウシ、ウマ、カニクイザルなどのサル等の霊長類、ヒト等を挙げることができるが、ラット、マウス、モルモット、イヌ、ネコ、ミニブタ、ウマ、カニクイザル、ヒトが好ましく、特にヒトが好ましく用いられる。本発明の製造方法における原料体細胞は、非胚性の細胞、すなわち非生殖組織由来の細胞であることが必要である。従って、生殖組織由来の細胞は、本発明の原料体細胞には含まれない。この様な非胚性の原料体細胞としては、上記したように非胚性の細胞であれば特に制限されることはなく、様々な時期の哺乳動物の各組織から採取された体細胞を用いることができる。以下具体的に例示するが、これらの記載に制限されるものではない。脳、肝臓、食道、胃、十二指腸、小腸、大腸、結腸、膵臓、腎臓、肺、乳腺等の各臓器から採取された体細胞のみならず、骨髄液、脂肪組織、末梢血、皮膚、骨格筋から採取された体細胞も用いることができる。これらのほとんどの細胞は、がん治療の手術時などに、医療廃棄物として容易に入手することが可能である。また、臍帯組織臍帯、臍帯血、羊膜、胎盤、羊水由来細胞などの出産時に付随する組織も用いることが可能であり、特に新生仔の各組織のような出生直後の組織新生仔の皮膚等及び臍帯由来の血管に由来する組織のような臍帯組織臍帯、臍帯血を用いてもよい。哺乳動物から採取した、前記aがん抑制遺伝子の変異を有する体細胞としては、このような異常を有する体細胞であれば、特に制限されることはなく、例えば、家族性腫瘍を引き起こす遺伝子異常を有する哺乳動物から採取した体細胞等を用いることができる。遺伝子異常を有する哺乳動物から採取した体細胞としては、家族性腫瘍を発症した哺乳動物から採取した体細胞や、前記哺乳動物の血縁関係にある個体の家族性腫瘍を引き起こす遺伝子異常を有する体細胞を例示することができる。これらの体細胞は、家族性腫瘍を引き起こす遺伝子異常を、片側アリルに有している体細胞前がん細胞であっても、両側アリルに有している体細胞悪性細胞であっても良い。なお、前がん細胞を用いた場合には、本発明の誘導前がん幹細胞が誘導され、悪性細胞を用いた場合には、本発明の誘導悪性幹細胞が誘導される。前記した片側アリルに遺伝子異常を有する体細胞としては、家族性腫瘍を発症した哺乳動物の発がん組織以外から採取した体細胞や、前記哺乳動物の血縁関係にある個体の家族性腫瘍を引き起こす遺伝子異常を有する体細胞前がん細胞を例示することができる。これに対し、両側アリルに遺伝子変異を有する体細胞悪性細胞としては、家族性腫瘍を発症した哺乳動物のがん細胞を例示することができる。なお、組織中のがん細胞のみを採取することは困難であるため、実際には、実質的にがん細胞からなるがん組織の細胞が好ましく用いられる。その他にも、がん細胞を含む非がん組織の細胞も使用することができる。本発明の誘導がん幹細胞を製造する際に使用される原料体細胞の由来となる胚葉は特に制限されることはない。内胚葉系の本発明の誘導がん幹細胞を製造する場合には、内胚葉系の細胞である、肝臓、胃、大腸、結腸等由来の体細胞を原料体細胞として用いることができ、特に、胃や結腸由来の体細胞が好ましく用いられる。本発明の製造方法において使用される原料体細胞として、発がんした哺乳動物から採取した体細胞のがん細胞を使用してもよい。この様な細胞は、がん細胞特有のaがん抑制遺伝子の変異、遺伝子発現異常等の異常を有する細胞である。これらの体細胞は、発がんした哺乳動物のがん細胞および前がん細胞を含むがん組織又はがん細胞および前がん細胞を含む非がん組織から採取するが、がん細胞または前がん細胞のみを採取することは、実際には困難である。しかしながら、原料として使用した細胞が、がん細胞または前がん細胞であったか正常細胞または非がん細胞であったかは、最終的に得られた本発明の誘導がん幹細胞が、aがん抑制遺伝子の変異、遺伝子発現異常等の異常を有しているか否かを明らかにすることによって確認することができるただし、生殖系列変異は原料細胞でも変異が判別できる。これは、最終的に得られた本発明の誘導がん幹細胞が、aがん抑制遺伝子の変異、遺伝子発現上昇等の異常を有している場合には、それらの異常は、原料体細胞が有する異常を引き継いだものであると認められるからである。本発明の誘導がん幹細胞を製造する際に、原料体細胞の由来組織は特に制限されることはない。例えば、発がんした哺乳動物から採取した体細胞を用いる場合には、以下のような体細胞を使用することができる。誘導中内胚葉系悪性幹細胞、誘導内胚葉系悪性幹細胞を製造する場合には、それぞれ、中内胚葉系、内胚葉系の体細胞を用いることができる。従って、肝臓、胃、十二指腸、小腸、大腸、結腸、膵臓、肺等から採取された体細胞であれば、誘導中内胚葉系悪性幹細胞又は誘導内胚葉系悪性幹細胞へ誘導することができる。発がんした哺乳動物のがんの種類は特に制限されることはなく、悪性腫瘍、固形がん、癌種、肉腫、脳腫瘍、造血器がん、白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫等の、何れのがんであっても良い。より具体的には、口腔がん、咽頭がん、上気道がん、肺がん、肺細胞がん、食道がん、胃がん、十二指腸がん、膵がん、肝がん、胆のうがん、胆道がん、大腸がん、結腸がん、直腸がん、乳がん、甲状腺がん、子宮体がん、子宮けいがん、卵巣がん、精巣がん、腎がん、膀胱がん、前立腺がん、皮膚がん、悪性黒色腫、脳腫瘍、骨肉腫、血液のがん等が例として挙げられる。本発明の製造方法において用いられる原料体細胞は、哺乳動物から採取した後直ちに使用しても、公知の方法で保存、培養等した後使用することも可能である。培養する場合には、継代数は特に制限されるものではないPOU5F1遺伝子、KLF4遺伝子、及びSOX2遺伝子の各遺伝子シンボルに対するGenBankアクセッション番号は表31の通りである。本発明の誘導がん幹細胞の前記誘導工程においては、前記原料体細胞を、POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子、及びSOX2遺伝子の遺伝子産物が前記原料体細胞内に存在する状態におくことができればよく、その方法としては、例えば誘導多能性幹細胞の誘導技術として公知の方法などがあるが、これに制限されることはない。また本発明の誘導がん幹細胞の前記誘導工程においては、原料体細胞から本発明の誘導がん幹細胞への誘導時に、POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子、及びSOX2遺伝子の遺伝子産物が特定の比率で細胞内に存在するように調節することにより、所望とする誘導がん幹細胞を製造することもできる。より具体的には、POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子、及びSOX2遺伝子の遺伝子産物の前記原料体細胞内における存在比率が、POU5F1遺伝子>SOX2遺伝子とした場合には、胃、大腸、肝臓、肺、膵臓などの内胚葉系の誘導がん幹細胞が誘導される。また、内胚葉系の誘導がん幹細胞を誘導する場合には、POU5F1遺伝子>KLF4遺伝子>SOX2遺伝子となるようにすることが好ましく、所望とする本発明の誘導がん幹細胞を高効率に誘導する観点から好ましい。中でも、POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子、及び、SOX2遺伝子の使用比率を、421とすることが好ましい。Takahashiらの文献TakahashiKYamanakaSetalCell2007131861872;非特許文献3及びMasakiらの文献MasakiHIshikawaTetalStemCellRes20081105115;非特許文献4にある誘導多能性幹細胞の作製においては、各遺伝子は等量、すなわち、111で使用されており、標準プロトコルとして、京都大学iPS細胞研究所からも該遺伝子の等量使用の情報提供がなされている。本発明の誘導がん幹細胞の前記誘導工程において、POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子及びSOX2遺伝子の発現強度を上昇させることができる遺伝子としては、POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子及びSOX2遺伝子そのものを用いることができる。前記原料体細胞中における前記POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子又はSOX2遺伝子の発現が不十分である場合には、該細胞中に不足した遺伝子又は遺伝子産物を導入し、前記細胞中の前記POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子又はSOX2遺伝子が発現している場合には、それ以外の遺伝子又はその遺伝子産物を、前記POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子及びSOX2遺伝子の代わりに導入しても良い。既に、POU5F1遺伝子、KLF4遺伝子、又はSOX2遺伝子を強く発現している細胞であれば、誘導多能性幹細胞を誘導することが知られているその他の遺伝子、例えば、NANOG遺伝子、LIN28遺伝子、TBX3遺伝子、PRDM14遺伝子、LMYC遺伝子、cMYC遺伝子、NMYC遺伝子、SALL1遺伝子、SALL4遺伝子、UTF1遺伝子、ESRRB遺伝子、NR5A2遺伝子、REM2GTPase遺伝子、TCL1A遺伝子、YesassociatedproteinYAP遺伝子、Eカドヘリン遺伝子、p53ドミナントネガティブ変異体遺伝子、p53shRNA遺伝子等をの代わりに導入して、本発明の誘導がん幹細胞を誘導することも可能である。NANOG遺伝子、LIN28遺伝子、TBX3遺伝子、及びcMYC遺伝子の各遺伝子シンボルに対するGenBankアクセッション番号は表32に記載した通りである。前記のPOU5F1遺伝子、KLF4遺伝子及びSOX2遺伝子の遺伝子産物が原料体細胞内に存在する状態におくことにより、自己複製関連遺伝子群のクロマチン構造が変化し、細胞内に存在するPOU5F1遺伝子、KLF4遺伝子及びSOX2遺伝子の遺伝子産物が、内在性の自己複製関連遺伝子群の発現誘導を起こす結果、細胞が自己複製を開始すると考えられる。前記のPOU5F1遺伝子、KLF4遺伝子及びSOX2遺伝子及びこれらの遺伝子の代わりに使用される遺伝子の遺伝子産物であるタンパク質やmRNAなどを、前記原料体細胞中に導入する方法としては、誘導多能性幹細胞の誘導技術として公知の方法などを挙げることができるが、これに制限されることはない。例えば、これらの遺伝子の遺伝子産物である、タンパク質やmRNA等を培地に添加しても良い。前記誘導工程においては、更に、誘導がん幹細胞への誘導効率を上げるために、誘導多能性幹細胞を誘導することが知られている化合物、例えば、FGFreceptortyrosinekinase、MEKmitogenactivatedproteinkinaseERKextracellularsignalregulatedkinases1and2経路、GSKGlycogenSynthaseKinase3の三つの低分子阻害剤SU5402、PD184352及びCHIR99021、MEKERK経路及びGSK3の二つの低分子阻害剤PD0325901及びCHIR99021、ヒストンメチル化酵素G9aの阻害剤である低分子化合物BIX01294BIX、アザシチジン、トリコスタチンATSA、7hydroxyflavone、lysergicacidethylamide、kenpaullone、TGFβreceptorIkinaseactivinlikekinase5ALK5の阻害剤EMD616452、TGFβreceptor1TGFBR1kinaseの阻害剤E616452及びE616451、Srcfamilykinaseの阻害剤EI275、thiazovivin、PD0325901、CHIR99021、SU5402、PD184352、SB431542、抗TGFβ中和抗体、A8301、Nr5a2、p53阻害化合物、p53に対するsiRNA、p53経路の阻害剤等を、本発明の誘導がん幹細胞を誘導する際に用いられる培地中に添加することができる。更に、低酸素下で培養することにより、効率よく、本発明の誘導がん幹細胞を誘導することができる。上記したように前記のPOU5F1遺伝子、KLF4遺伝子及びSOX2遺伝子、これらの遺伝子産物に加え、更に、上記した本発明の誘導がん幹細胞の誘導効率を上げるために、前記したNANOG遺伝子、LIN28遺伝子、TBX3遺伝子、PRDM14遺伝子、LMYC遺伝子、cMYC遺伝子、NMYC遺伝子、SALL1遺伝子、SALL4遺伝子、UTF1遺伝子、ESRRB遺伝子、NR5A2遺伝子、REM2GTPase遺伝子、TCL1A遺伝子、YesassociatedproteinYAP遺伝子、Eカドヘリン遺伝子、p53ドミナントネガティブ変異体遺伝子、p53shRNA遺伝子等の遺伝子又はこれらの遺伝子産物、化合物、bFGF、ALK阻害剤A8301など、TGFbetaRI阻害剤、TGFbetaRIキナーゼ阻害剤などを使用することも可能である。前記原料体細胞から本発明の誘導がん幹細胞を製造するために、前記哺乳動物の細胞に遺伝子を導入する方法としては、公知の方法であれば特に制限されることはないが、ウイルスベクター、プラスミド、人工染色体HAC、エピソーマルベクターEBV、ミニサークルベクター、ポリシストロニック発現ベクター、CreloxPシステムを応用したベクター、ファージインテグラーゼを利用したベクター、ピギーバックなどのトランスポゾンなどのベクター等を用いることができる。前記原料体細胞に、遺伝子を導入するために使用可能なウイルスベクターとしては、公知のベクターであれば何れも使用することが可能である。例えば、レンチウイルスベクター、レトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、サル免疫不全ウイルスベクターディナベック株式会社、アデノ随伴ウイルスベクターディナベック株式会社、ゲノムに外来遺伝子が残存しないセンダイウイルスベクターディナベック株式会社、株式会社医学生物学研究所、センダイミニベクターディナベック株式会社、HVJ等が挙げられるが、これらに制限されることはない。レトロウイルスベクターは、モロニーマウス白血病ウイルス由来レトロウイルスベクターなどがある。ウイルスベクタープラスミドとしては、公知のウイルスベクタープラスミドであれば何れも使用することが可能である。例えば、レトロウイルス系としてpMXs、pMXsIB、pMXspuro、pMXsneo但し、pMXsIBはpMXspuroのピューロマイシン耐性遺伝子の代わりにブラストシジン耐性遺伝子を搭載したベクターであるToshioKitamuraetalRetrovirusmediatedgenetransferandexpressioncloningPowerfultoolsinfunctionalgenomicsExperimentalHematology200331100714が好ましく、他にも、MFGProcNatlAcadSciUSA9267336737、pBabePuroNucleicAcidsResearch1835873596、LLCG、CLCG、CSCG、CLGJournalofVirology7281508157等が挙げられる。また、アデノウイルス系としてはpAdex1NucleicAcidsRes2338163821等を用いることができる。誘導がん幹細胞の作製におけるさらなる工程本発明の製造方法は、前記工程に加え、更に、1ウェルに1細胞をソーティングして増殖させる工程を含むことができる。この工程は、抗ALB抗体、抗FABP1抗体、抗IGFII抗体、抗DLK1抗体、抗PDGFRα抗体、抗VEGFR2抗体、抗Eカドヘリン抗体、抗CXCR4抗体、抗PDGFRβ抗体、抗カドヘリン11抗体、抗CD34抗体、抗IGF-R1抗体から選択される何れか1つの抗体を使用した特異抗体染色を施した細胞、又は、未染色の細胞を、1ウェルに1細胞をソーティングする方法によって増殖させる工程である。例えば、前記したEカドヘリン等の特異抗体で本発明の誘導がん幹細胞を染色し、次いで、PERFLOWTMSort古河電気工業社製を用いて、1細胞ウェルとなるように、特異抗体染色を施した細胞を96ウェルプレート等にシングルソーテイングする方法が挙げられる。特殊抗体で染色した細胞の代わりに、未染色の細胞を用いることも可能である。本発明の製造方法は、更に、invitroで自己複製可能な誘導がん幹細胞の悪性の性質又は特異マーカーを同定して選別する選別工程を含むことができる。ここで、悪性の性質とは、がん細胞の無限増殖能、侵潤、転移、耐性、再発などに関わる性質のことを云う。また、特異マーカーとは、タンパク質分泌タンパク質など又はがん細胞の表面にある特異的なタンパク質や糖鎖抗原などがん細胞を識別可能な性質のことを云う。特異マーカーとしては、たとえばbがん関連遺伝子の発現上昇を利用することができる。bがん関連遺伝子としては、血管新生関連遺伝子群、がん関連パスウェイ遺伝子群、間質バリア関連遺伝子群、上皮間葉転換関連遺伝子群、胃がん関連遺伝子群、自律増殖関連遺伝子群、TGFβBMPシグナル関連遺伝子群、組織侵潤転移関連遺伝子群、Wntシグナル関連遺伝子群、シグナル伝達関連遺伝子群、Notchシグナル関連遺伝子群、乳がん及びエストロジェン受容体シグナル関連遺伝子群、結腸がん関連遺伝子群、低酸素シグナル関連遺伝子群、GPCRシグナル関連遺伝子群、薬剤耐性関連遺伝子群、Hedgehogシグナル関連遺伝子群、PI3KAKTシグナル関連遺伝子群、薬物代謝遺伝子群、がん分子メカニズム遺伝子群、SMADシグナルネットワーク関連遺伝子群、膵がん関連遺伝子群、前立腺がん関連遺伝子群、肝がん関連遺伝子群、肺がん関連遺伝子群に係る内在性がん関連遺伝子の発現上昇等を挙げることができる。前記選別工程は、aがん抑制遺伝子の変異を有する哺乳動物から採取した体細胞、並びに、発がんした哺乳動物から採取した、aがん抑制遺伝子の変異、またはbがん関連遺伝子の発現上昇のいずれかの異常を有する体細胞からなる群の中から選択された非胚性の原料体細胞を誘導処理した細胞と、比較対象となる哺乳動物から採取した体細胞から誘導した、誘導中内胚葉系幹細胞、誘導内胚葉系幹細胞、又は誘導多能性幹細胞、若しくは、胚性幹細胞とを比較する工程であってもよい。前記比較対象となる哺乳動物から採取した体細胞としては、様々な時期の哺乳動物の各組織から採取された体細胞であれば特に制限されることはない。このような哺乳動物の各組織としては、前記した本発明の誘導がん幹細胞を製造するための、原料体細胞として用いられる組織として例示された様々な組織を例示することができる。前記比較対象となる哺乳動物から採取した体細胞としては、本発明の原料体細胞としての異常を有しない正常細胞又は非がん細胞であれば、特に制限されることはないが、例えば、成体由来の体細胞、新生児由来の体細胞、新生児皮膚由来の体細胞、発がんした哺乳動物の体細胞であって、実質的に本発明の原料体細胞としての異常を有しない非がん細胞又は発がん個体の体細胞等を用いることができる。特に、体細胞の中でも、本発明の原料体細胞が有する様々な異常が少ないと考えられる成体由来の体細胞、新生児由来の体細胞、新生児皮膚由来の体細胞を用いることができる。なお、組織中の1個の正常細胞又は非がん細胞のみを選択して採取することは困難であるため、実際には、正常組織又は非がん組織と認められる細胞群が用いられる。原料体細胞として、発がんした哺乳動物のがん細胞を用いた場合には、前記比較対象となる哺乳動物から採取した体細胞として、前記発がんした哺乳動物と同一個体の正常細胞又は非がん細胞を用いることができる。特に、同一個体の同一臓器から採取した細胞を用いた場合には、個体又は臓器に特有の特徴が共通するため、両細胞の悪性度の違いが明確となる。従って、このような原料体細胞を採取した個体と同一の個体の組織を比較する工程は、誘導がん幹細胞の悪性の性質又は特異マーカーを同定するだけでなく、発がん機構の解明等の解析ツールとしても有用であり、後記する創薬標的のスクリーニング方法としても有用である。なお、前記したように、組織中の1個のがん細胞のみを採取することは困難であるため、実際には、発がんした哺乳動物のがん組織又は非がん組織の細胞群が用いられる。また、比較対象となる体細胞を採取する哺乳動物は、原料体細胞を採取した哺乳動物と同一であってもよく、特に、ヒトであることが好ましい。また、比較対象となる哺乳動物から採取した体細胞から誘導した、誘導中内胚葉系幹細胞、誘導内胚葉系幹細胞としては、前記の比較対象となる哺乳動物から採取した体細胞から誘導されたものであれば、特に制限されることはないが、本発明の誘導がん幹細胞の誘導方法と同様の方法で誘導して得られたものが好ましく用いられる。また、比較対象となる哺乳動物から採取した体細胞から誘導した誘導多能性幹細胞としては、公知の誘導多能性幹細胞誘導方法により作製されたものであれば、特に制限されることはないが、本発明の誘導がん幹細胞の誘導方法と同様の方法で誘導して得られたものが好ましく用いられる。その他、特許文献1及び2や、ヒトiPS細胞の樹立方法京都大学物質細胞統合システム拠点iPS細胞研究センター、CiRAMMp114200874に記載された方法で誘導された誘導多能性幹細胞、理化学研究所バイオリソースセンターや京都大学等の、公知のルートから入手できる誘導多能性幹細胞や、前記したGeneExpressionOmnibusGEOから誘導多能性幹細胞の公知の遺伝子発現データ等を用いることも可能である。更に、比較対象としては、胚性幹細胞を用いることも可能であり、公知の方法で作製されたものであれば、どのようなものであっても使用することができる。ThomsonJAetalEmbryonicstemcelllinesderivedfromhumanblastocystsScience1998Nov628211457ErratuminScience1998Dec42821827や、HirofumiSuemorietalEfficientestablishmentofhumanembryonicstemcelllinesandlongtermmaintenancewithstablekaryotypebyenzymaticbulkpassageBiochemicalandBiophysicalResearchCommunications34592632に記載された方法で得られた未分化の胚性幹細胞、理研バイオリソースセンター、京都大学再生医科学研究所等の、公知のルートから入手できる未分化の胚性幹細胞、hESH9GSM194390、hESBG03GSM194391、hESES01GSM194392等の公知の遺伝子発現データを用いることもできる。これらの遺伝子発現データは、前記したGeneExpressionOmnibusGEOから取得することが可能である。本発明の誘導がん幹細胞について、aがん抑制遺伝子に変異が確認され同定された場合には、本発明の誘導がん幹細胞として選別される。なお、本発明においては、aがん抑制遺伝子に変異が確認されれば良く、必ずしも全てのゲノムについて解析を行う必要はない。本発明の誘導がん幹細胞について、比較対象となる細胞と比較して、cがん関連遺伝子の発現上昇が確認され、同定された場合には、本発明の誘導がん幹細胞として選別することが可能である。トランスクリプトーム解析とは、特定の細胞生物学的な状況下において、1個あるいは増殖した、同様の分化状態にある生物の細胞中に存在する、全てのmRNA又は、一次転写産物、トランスクリプトを解析するものである。mRNAは、その細胞が発生の過程で受けた細胞外からの影響の積み重ねによって色々と変化するため、現在の細胞の性質を詳細に解析することが可能となる。具体的には、マイクロアレイ等を用いて解析が行われる。例えば、比較対象となる細胞と比較して、本発明の誘導がん幹細胞に、a変異したがん抑制遺伝子に対応するmRNA、bがん関連遺伝子に対するmRNAが多く存在する場合には、本発明の誘導がん幹細胞として選別することが可能である。本発明の好ましい一態様としては、トランスクリプトーム解析マイクロアレイの結果、bがん関連遺伝子の発現上昇を測定することによって、たとえば、血管新生関連遺伝子群、がん関連パスウェイ遺伝子群、間質バリア関連遺伝子群、上皮間葉転換関連遺伝子群、胃がん関連遺伝子群、自律増殖関連遺伝子群、TGFβBMPシグナル関連遺伝子群、組織侵潤転移関連遺伝子群、Wntシグナル関連遺伝子群、シグナル伝達関連遺伝子群、Notchシグナル関連遺伝子群、乳がん及びエストロジェン受容体シグナル関連遺伝子群、結腸がん関連遺伝子群、低酸素シグナル関連遺伝子群、GPCRシグナル関連遺伝子群、薬剤耐性関連遺伝子群、Hedgehogシグナル関連遺伝子群、PI3KAKTシグナル関連遺伝子群、薬物代謝遺伝子群、がん分子メカニズム遺伝子群、SMADシグナルネットワーク関連遺伝子群、膵がん関連遺伝子群、前立腺がん関連遺伝子群、肝がん関連遺伝子群、肺がん関連遺伝子群からなる群に含まれる遺伝子の群の中から選択される、少なくとも1種の遺伝子に係るがん関連遺伝子の発現上昇を測定することによって、特異マーカーを同定して選別することができる。これらの遺伝子に加え、ストレス及び毒性関連遺伝子群、エピジェネティクスクロマチン修飾酵素遺伝子群、幹細胞転写因子遺伝子群、肝細胞特異的遺伝子群からなる群に含まれる遺伝子の群の中から選択される、少なくとも1種の遺伝子に係る遺伝子の発現上昇によって、総合的に判断されることが好ましい。誘導がん幹細胞を用いるスクリーニング方法本発明の第3の態様において、本発明の誘導がん幹細胞を用いることを特徴とするスクリーニング方法であり、がん創薬標的のスクリーニング方法、がん治療薬のスクリーニング方法及びがん診断薬のスクリーニング方法として好適である。本発明のスクリーニング方法は、本発明の誘導がん幹細胞と、比較対象となる哺乳動物から採取した体細胞から誘導した、誘導中内胚葉系幹細胞、誘導内胚葉系幹細胞又は誘導多能性幹細胞、若しくは、胚性幹細胞に、それぞれ被検物質を接触させる工程を含むことが好ましい。がん創薬標的のスクリーニング方法として、本発明の誘導がん幹細胞と、比較対象となる哺乳動物から採取した体細胞から誘導した、誘導中内胚葉系幹細胞、誘導内胚葉系幹細胞又は誘導多能性幹細胞、若しくは、胚性幹細胞とを比較することにより、がん創薬標的となりうる遺伝子やタンパク質を探索することができる。探索の結果、創薬標的と推定される遺伝子の発現を抑制するアンチセンスRNA、siRNAや、その遺伝子の翻訳タンパク質酵素等の特異的阻害剤を、本発明の誘導がん幹細胞を培養したシャーレに添加し、添加後の細胞の性状等を確認することにより、創薬標的となりうるか否かを評価することが可能である。がん治療薬のスクリーニング方法としては、抗がん剤、ワクチンがんワクチンなどの候補となる医薬品を、本発明の誘導がん幹細胞を培養したシャーレに添加し、細胞の性状等を評価することにより、薬効を確認することができる。がん診断薬のスクリーニング方法としては、がん診断薬に、様々な種類の本発明の誘導がん幹細胞を添加し、正確にがんと診断されるかどうかを確認することにより、がん診断薬として有効であるかどうか評価することが可能である。誘導がん幹細胞を用いたがんワクチンの作製方法本発明の第4の態様において、本発明の誘導がん幹細胞を用いた、がんワクチンの作製方法である。より具体的には、CTL療法、樹状細胞療法、がんペプチドワクチン療法等に有用ながんワクチンを、本発明の誘導がん幹細胞を用いて作製することが可能である。CTL療法CytotoxicTlymphocyteTherapy:細胞傷害性Tリンパ球療法とは、患者から採取したリンパ球に、攻撃対象となるがんの特徴を人工的に学習させて活性化させ、細胞障害性を持った大量のTリンパ球CTL細胞:細胞障害性Tリンパ球を患者の体内に戻す治療方法である。一般的にCTL療法では、リンパ球に学習させるために、患者自身のがん細胞の抗原で行う方法と、人工抗原を用いる方法があり、患者自身のがん細胞の抗原で行った場合の方が、より効果があると言われている。しかしながら、患者自身のがん細胞を用いる場合には、患者のがん細胞を採取する必要があるため、患者の身体的負担が大きく、更に、得られたがん細胞をあらかじめ体外で十分な数に増やす必要があるものの、その培養が困難であるため、手術で比較的大きな腫瘍が摘出され、抗原の抽出に成功した場合に限られるという問題がある。本発明の誘導がん幹細胞は、invitroで自己複製可能であるため、必要な量の誘導がん幹細胞を準備することが可能であり、加えて、がん細胞の採取によるがん患者の身体的負担を軽減することができるため、非常に有用である。より具体的な製造方法としては、例えば、成分採血などにより、がん細胞を攻撃できるT細胞を患者の血液から抽出し、本発明の誘導がん幹細胞や、これらの細胞を溶解したライセート、更には、これらの細胞をもとに得られたがん抗原たんぱく質又はペプチドを加えることにより、がん抗原をT細胞に学習させる。次いで、抗CD3抗体等で活性化した後、インターロイキン2等で培養することにより、がんワクチンである細胞障害性を持った大量のTリンパ球が得られる。なお、誘導がん幹細胞や、これらの細胞を溶解したライセートをがん抗原として用いる場合には、治療を受ける患者から手術によって摘出されたがん組織、又は、前記患者の腹水等から採取したがん細胞から作製されたものが好ましく用いられる。樹状細胞療法とは、患者から採取した樹状細胞に、攻撃対象となるがんの特徴を学習させ、その樹状細胞を患者の体内に戻す治療方法であり、体内に戻された樹状細胞が、Tリンパ球を刺激し、刺激されたT細胞がキラーT細胞となって、がん細胞を攻撃することによりがんを治療するものである。この治療方法は、前記したCTL療法と同様に、手術で比較的大きな腫瘍が摘出され、抗原の抽出に成功した場合に限られるという問題があり、本発明の誘導がん幹細胞は、invitroで自己複製可能であるため、必要な量の誘導がん幹細胞を準備することが可能であり、加えて、がん細胞の採取によるがん患者の身体的負担を軽減することができるため、非常に有用である。より具体的な製造方法としては、例えば、成分採血等により抽出された樹状細胞に、誘導がん幹細胞や、これらの細胞を溶解したライセート、更には、これらの細胞をもとに得られたがん抗原たんぱく質又はペプチドを加えることにより、がん抗原を樹状細胞に学習させ、がんワクチンである樹状細胞が作製される。なお、誘導がん幹細胞や、これらの細胞を溶解したライセートをがん抗原として用いる場合には、治療を受ける患者から手術で摘出されたがん組織、前記患者の腹水等から採取したがん細胞から作製されたものが好ましく用いられる。前記した樹状細胞は、1個の樹状細胞で数百から数千のリンパ球を刺激することが可能であるため、樹状細胞にがんの特徴を学習させ、体内に戻す治療法は、非常に効率的であると考えられる。しかしながら、樹状細胞の数は白血球の01~05程度であるため、血液中に数多く存在する、樹状細胞に変化可能な単球を成分分離採血法で大量に獲得し、更に、サイトカイン等の、細胞を刺激する物質を用いて前記単球を樹状細胞へと培養し、これを用いることが可能である。がんペプチドワクチン療法とは、がん細胞が持つ特異的な抗原としてペプチドペプチドワクチンを注射することによって、患者の有する免疫力を高めてがんの増大を抑える治療方法である。具体的には、このペプチド9又は10個のアミノ酸がつながった小さいペプチドを体内に投与すると、ペプチドによって刺激を受けたキラーT細胞が活性化し、更に増殖してがん細胞を攻撃するようになるという性質を利用して、がんを排除退縮する治療方法である。本発明の誘導がん幹細胞は、invitroで自己複製可能であり、様々な誘導がん幹細胞を大量に増幅させることが可能であるため、様々ながん患者由来のがん組織等から作製された本発明の誘導がん幹細胞を大量に培養させ、目的とするがんワクチンを作製することが可能である。このようにして得られたがんワクチンは、CTL療法又は樹状細胞療法に用いることも可能である。前記したようながんワクチンは、がんの予防的治療や、化学療法、放射線療法、外科的療法等の、標準療法後の再発予防に非常に有効である。誘導がん幹細胞を用いたがんモデル動物の作製方法本発明の第5の態様において、本発明の誘導がん幹細胞を用いた、がんモデル動物の作製方法である。本発明のがんモデル動物の作製方法によれば、例えば、マウス等の実験動物に本発明の誘導がん幹細胞を移植することにより、胆がんマウスを作製することができる。この胆がんマウスに抗がん剤、抗体、ワクチン等を投与した後、胆がんマウスの血液検査、尿検査、剖検等を行うことにより、その薬効を確認することができる。本発明の誘導がん幹細胞は、前記したスクリーニング方法、がんワクチン作製方法、がんモデル動物の作製方法以外にも、様々な応用が可能である。例えば、誘導がん幹細胞の遺伝子情報の中から分泌タンパク質及び膜タンパク質を網羅的にスクリーニングし、がん診断マーカーとして有用な、本発明の誘導がん幹細胞に特異的な膜タンパク質及び分泌タンパク質を同定し、治療又は診断用抗体を作製することができる。分泌タンパク質及び膜たんぱく質を網羅的にスクリーニングする方法としては、膜たんぱく質及び分泌タンパク質に共通して存在するシグナルシークエンスをターゲットとする遺伝子同定を特徴とするシグナルシークエンスストラップ法特許第3229590号及び特許第3499528号等が挙げられる。以下、実施例によって本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。実施例1レトロウイルスベクターの調製POU5F1pMXs、KLF4pMXs、SOX2pMXsの3遺伝子のレトロウイルスベクタープラスミドを、FugeneHDロシュ社製;Catno4709691を用いて、パントロピックレトロウイルスベクター調製用パッケージング細胞であるPlatGP細胞に導入し、レトロウイルスベクター液を調製した。遺伝子POU5F1pMXs、KLF4pMXs、SOX2pMXsは順に421の比率で使用し、POU5F1>SOX2の関係になるようにした。詳細は、以下の通りである。<胃がん患者がん組織由来細胞の遺伝子導入用レトロウイルスベクター液の調製>POU5F1pMXs、KLF4pMXs、SOX2pMXsは構築したベクターである後記表33。各ベクターの量は、POU5F1pMXs5μg、KLF4pMXs25μg、SOX2pMXs125μg、VenuspCS2125μg、VSVGpCMV5μg、GFPpMXs125μgCellBiolab製、FuGENEHD45μlとした。<胃がん患者非がん組織由来細胞の遺伝子導入用レトロウイルスベクター液の調製>遺伝子POU5F1pMXs、KLF4pMXs、SOX2pMXsは構築したベクターである後記表33。各ベクターの量は、POU5F1pMXs5μg、KLF4pMXs25μg、SOX2pMXs125μg、VenuspCS2125μg、VSVGpCMV5μg、GFPpMXs125μg、FuGENEHD45μlとした。<結腸がん患者がん組織由来細胞の遺伝子導入用レトロウイルスベクター液の調製>遺伝子POU5F1pMXs、KLF4pMXs、SOX2pMXsは構築したベクターである後記表33。各ベクターの量は、POU5F1pMXs5μg、KLF4pMXs25μg、SOX2pMXs125μg、VenuspCS2125μg、VSVGpCMV5μg、GFPpMXs125μg、FuGENEHD45μlとした。レトロウイルスベクタープラスミドを導入したPlatGP細胞を、48時間以上培養した後、24時間毎に3回上清を回収し4°Cで保存した。ステリフリップHVフィルターユニット:045μm径のフィルターミリポア社製;CatnoSE1M003M00でろ過を行った。以上の手順により3遺伝子POU5F1、KLF4、SOX2の比率が順に421のパントロピックレトロウイルスベクター液を調製した。パントロピックレトロウイルスベクターは、様々な細胞に遺伝子導入することが可能であり、ヒト細胞へ高い効率で遺伝子導入することができる。実施例2胃がん患者のがん組織由来の細胞からの誘導悪性幹細胞の作製保存液に数時間保存運搬したヒト胃がん進行がん患者の新鮮がん組織から体細胞を単離した。得られた胃がん患者がん組織由来の細胞に、実施例1において調製したPOU5F1>KLF4>SOX2の関係を満たす3遺伝子POU5F1、KLF4、SOX2の比率が順に421レトロウイルスベクター液を添加し、遺伝子導入することで、ヒト誘導悪性幹細胞を作製した。詳細は以下の通りである。手術時に得られた新鮮胃がん進行がん:男性、67歳、日本人組織の一部を、ハンクス平衡液フェノールレッド不含インビトロジェン社製;Catno14175095で洗浄し、剪刀を用いて約01~1mm2に細断した。更に、ハンクス平衡液フェノールレッド不含で上清が透明になるまで洗浄し、上清を除去し、組織沈殿に対して5mlの01コラゲナーゼ和光純薬社製;Catno034105331×抗生物質抗真菌剤を加え、振盪器を用いて、37°Cで60分間攪拌した。組織沈殿が十分消化されたことを確認後、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地を35ml加えて、1000rpm、4°Cで5分間遠心分離した。次いで、上清を除去した後、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地を40ml加えて、1000rpm、4°Cで5分間再度遠心分離した。次いで、上清を除去した後、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地を5ml加え、コラーゲンコートディッシュ60mmイワキ社製;Catno11018004に播種し、初代培養した。24時間後に培地を除き、5mlの3遺伝子のレトロウイルスベクターを添加し、37°Cで1日間感染させた。ウイルス上清を除去し、マイトマイシン処理を行ったフィーダー細胞であるマウス胚性繊維芽細胞を、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地5mlに懸濁後、胃がん患者のがん組織由来の遺伝子導入細胞を培養したコラーゲンコートディッシュ60mmイワキ社製;Catno11018004に50×104cellcm2播種し、共培養した。その後3日毎にMEF馴化ES培地の交換を続け、遺伝子導入から15日後から、フィーダー細胞フリー用ヒトESiPS細胞用培地mTeSR1で毎日培地交換を行った。実施例を通じて使用するMEF馴化ES培地、及び、その調製方法は、以下の通りである。<MEF馴化ES培地>MEFマイトマイシンC処理初代マウス胚性繊維芽細胞DSファーマバイオメディカル社製CatnoRPMEFCFMEF馴化用ES培地ノックアウトDMEMインビトロジェン社製;Catno10829018500ml2mMGlutaMAX10ノックアウト血清リプレースメントインビトロジェン社製;Catno1082802850μgmlゲンタマイシンインビトロジェン社製;Catno15750060MEM非必須アミノ酸液インビトロジェン社製;Catno1114005010ngmlbFGFぺプロテック社製;Catno10018B<MEF馴化ES培地の調製>マイトマイシン処理を行ったマウス胚性繊維芽細胞DSファーマバイオメディカル社製;CatnoRPMEFCF5×106cellを、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地40mlに懸濁後、ゼラチンコートディッシュ100mmイワキ社製;Catno110200064枚に播種した。24時間後に培地を除き、MEF馴化用のES培地を10ml加えた。24時間毎に回収した上清へ新たに10ノックアウト血清リプレースメント、10ngmlbFGF、01mM2メルカプトエタノールを加え、MEF馴化ES培地として用いた。胃がん患者のがん組織由来ヒト誘導悪性幹細胞のinvitro自己複製培養3遺伝子導入から25日後に、誘導悪性幹細胞のコロニーを1クローンGC11、3遺伝子導入から32日後に、誘導悪性幹細胞のコロニーを1クローンGC13、3遺伝子導入から33日後に、誘導悪性幹細胞のコロニーを3クローンGC15、7、8ピックアップし、ゼラチンコート24ウェルプレート中のマイトマイシン処理を行ったフィーダー細胞上へ移した。なお、フィーダー細胞はマイトマイシン処理を行ったマウス胚性繊維芽細胞であり、誘導悪性幹細胞のピックアップ前日に50×104cellcm2でゼラチンコート24ウェルプレートに播種した。その後、GC11は遺伝導入から32日後に、24ウェルプレートで増殖したヒト誘導悪性幹細胞第1継代を、6ウェルプレートに継代第2継代した。遺伝導入から43日後に、6ウェルプレートで増殖したヒト誘導悪性幹細胞第2継代を、10cm培養皿に継代第3継代した。遺伝導入から50日後に、10cm培養皿で増殖したヒト誘導悪性幹細胞第3継代を、10cm培養皿に継代第4継代と凍結保存をした。遺伝導入後から55日後に、10cm培養皿で増殖したヒト誘導悪性幹細胞第4継代を、10cm培養皿に継代第5継代と凍結保存をした。遺伝導入から58日後に、10cm培養皿で増殖したヒト誘導悪性幹細胞第5継代をバッファーRLTRNA精製前の細胞溶解液に溶解処理した。GC11と同様に他のクローンに関しても下記に継代pとRNA回収用キットのバッファーRLTBufferへ溶解した日遺伝子導入後日数を簡略して示した。なお、本発明の実施例において行われる細胞凍結保存は、以下の通りである。細胞から培地を除き、PBSを用いて、10ml10cm約60cm2培養皿で細胞を洗浄した後、細胞剥離液を2~3ml10cm約60cm2培養皿に加えた。実施例を通じて、継代培養時の細胞剥離液としては、以下の2種類を用いた:i025トリプシン1mMEDTA溶液インビトロジェン社製;Catno25200056ii調製剥離液10mgmlタイプIVコラゲナーゼインビトロジェン社製;Catno1710401910ml、100mM塩化カルシウム溶液シグマ1ml、PBS59ml、25トリプシン溶液インビトロジェン社製;Catno1509004610ml、ノックアウト血清リプレースメントKSRインビトロジェン社Catno1082802820ml;これらを溶解後、022μmのフィルターで濾過滅菌したもの。37°C5分間静置したのち、細胞剥離液を除き、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地を20ml加えて、1000rpm、4°Cで5分間遠心分離した。次いで、上清を除去した後、凍結用保存液を1ml加えて、セラムチューブ2本に分注した。その後、セラムチューブを動物細胞凍結処理容器バイセル/BICELLに入れて、80°Cで一晩凍結させた後、液体窒素にて保管した。凍結用保存液としては以下の2種類を用いた:iセルバンカー3日本全薬工業CatnoBLC3Sii50mTeSR1、40KSR、10DMSOの混液。GC11遺伝子導入後日数3224ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数436ウェルプレート第2継代→10cm第3継代遺伝子導入後日数50継代と保存第4継代遺伝子導入後日数55継代と保存第5継代遺伝子導入後日数58バッファーRLTRNA精製前の細胞溶解液処理。GC13遺伝子導入後日数4424ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数486ウェルプレート第2継代→10cm第3継代遺伝子導入後日数53継代と保存第4継代遺伝子導入後日数58バッファーRLTRNA精製前の細胞溶解液処理。GC15遺伝子導入後日数4424ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数526ウェルプレート第2継代→10cm第3継代遺伝子導入後日数61継代と保存第4継代遺伝子導入後日数63保存とバッファーRLTRNA精製前の細胞溶解液処理。GC17遺伝子導入後日数4424ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数526ウェルプレート第2継代→10cm第3継代遺伝子導入後日数61継代と保存第4継代遺伝子導入後日数62保存とバッファーRLTRNA精製前の細胞溶解液処理。GC18遺伝子導入後日数4424ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数486ウェルプレート第2継代→10cm第3継代遺伝子導入後日数53継代と保存第4継代遺伝子導入後日数55継代と保存第5継代遺伝子導入後日数58バッファーRLTRNA精製前の細胞溶解液処理。以上のように、フィーダー細胞であるMEFと共にフィーダー細胞フリー用ヒトESiPS細胞用培地mTeSR1を用いて胃がん患者のがん組織由来の誘導悪性幹細胞をinvitroで自己複製させた。実施例3胃がん患者非がん組織由来の細胞からのヒト誘導悪性幹細胞の作製保存液に数時間保存運搬したヒト胃がん進行がん患者の新鮮非がん組織から細胞を単離し、初代培養した。得られた胃がん患者非がん組織由来の細胞に、実施例1において調製した3遺伝子POU5F1、KLF4、SOX2の比率が順に421レトロウイルスベクター液を添加し、遺伝子を導入することによって、ヒト誘導悪性幹細胞を作製した。詳細は以下の通りである。手術時に得られた胃がん進行がん:男性、67歳、日本人患者の非がん新鮮組織の一部を、ハンクス平衡液フェノールレッド不含で洗浄し、剪刀を用いて約01~1mm2に細断した。ハンクス平衡液フェノールレッド不含で上清が透明になるまで洗浄した後、上清を除去し、組織沈殿に対して5ml01コラゲナーゼ1×抗生物質抗真菌剤を加え、振盪器を用いて37°C、60分間で攪拌した。組織沈殿が十分消化されたことを確認した後、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地を35ml加えて、1000rpm、4°Cで5分間遠心分離した。次いで、上清を除去した後、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地を40ml加えて、1000rpm、4°Cで5分間再度遠心分離した。更に、上清を除去した後、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地を10ml加え、コラーゲンコートディッシュ100mmイワキ社製、Catno11018006に播種した。約24時間後、培地を除き、10mlの3遺伝子POU5F1、KLF4、SOX2の比率が順に421レトロウイルスベクターを添加し、37°Cで約24時間感染させた。ウイルス上清を除去し、マイトマイシン処理を行ったマウス胚性繊維芽細胞を、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地10mlに懸濁後、胃がん患者非がん組織由来の遺伝子導入された細胞が培養されたコラーゲンコートディッシュ100mmイワキ社製、Catno11018006へ50×104cellcm2で播種し、共培養された。胃がん患者非がん組織由来のヒト誘導悪性幹細胞のinvitro自己複製培養それ以降、3日毎にMEF馴化ES培地の交換を続け、3遺伝子導入から31日後、mTeSR1で毎日培地交換を行った。遺伝子導入から41日後にコロニーを1クローンNGC11、ピックアップし、ゼラチンコート24ウェルプレート中のマイトマイシン処理を行ったマウス胚性繊維芽細胞上に継代した。なお、フィーダー細胞はマイトマイシン処理を行ったマウス胚性繊維芽細胞であり、誘導悪性幹細胞のピックアップ前日に50×104cellcm2でゼラチンコート24ウェルプレートに播種した。下記に、胃がん患者非がん組織由来のヒト誘導悪性幹細胞に係る細胞を、継代pとRNA回収用キットのバッファーRLTBufferへ溶解した日遺伝子導入後日数を示した。NGC11遺伝子導入後日数5224ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数586ウェルプレート第2継代→10cm第3継代遺伝子導入後日数65継代、保存、バッファーRLTRNA精製前の細胞溶解液処理。以上のように、フィーダー細胞であるMEFと共にフィーダー細胞フリー用ヒトESiPS細胞用培地mTeSR1を用いて胃がん患者非がん組織由来の誘導悪性幹細胞をinvitroで自己複製させた。実施例4結腸がん患者のがん組織由来の細胞からヒト誘導悪性幹細胞の作製保存液に数時間保存運搬したヒト結腸がん患者の新鮮がん組織から細胞を単離した。得られたヒト結腸がん患者の新鮮がん組織由来の細胞に、実施例1において調製した3遺伝子POU5F1、KLF4、SOX2の比率が順に421レトロウイルスベクター液を添加し、遺伝子導入することで、ヒト誘導悪性幹細胞を作製した。詳細は以下の通りである。手術時に得られた結腸がんS状結腸がん:男性、55歳、日本人の一部をハンクス平衡液フェノールレッド不含で洗浄し、剪刀を用いて約01~1mm2に細断した。ハンクス平衡液フェノールレッド不含で上清が透明になるまで洗浄した。次いで、上清を除去し、組織沈殿に対して5ml01コラゲナーゼ1×抗生物質抗真菌剤を加え、振盪器を用いて、37°Cで60分間攪拌した。組織沈殿が十分消化されたことを確認した後、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地を35ml加えて1000rpm、4°Cで5分間遠心分離した。上清を除去した後、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地を40ml加えて、1000rpm、4°Cで5分間再度遠心分離した。上清を除去した後、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地を10ml加え、コラーゲンコートディッシュ100mmイワキ社製、Catno11018006に播種した。約24時間後に培地を除き、10mlの3遺伝子のレトロウイルスベクターを添加し、その5時間後、5mlのLucIRESGFPのレトロウイルスベクターを37°Cで約24時間感染させた。ウイルス上清を除去し、マイトマイシン処理を行ったMEFを1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地10mlに懸濁後、結腸がん患者のがん組織由来の遺伝子導入細胞が培養されたコラーゲンコートディッシュ100mmイワキ社製、Catno11018006へ50×104cellcm2で播種し、共培養された。結腸がん患者がん組織由来のヒト誘導悪性幹細胞のinvitro自己複製培養その後、3日毎にMEF馴化ES培地の交換を続け、遺伝子導入22日後から、mTeSR1で毎日培地交換を行った。遺伝子導入から31日後に、コロニーの1クローンCC110をピックアップし、ゼラチンコート24ウェルプレート中のマイトマイシン処理を行ったマウス胚性繊維芽細胞に継代した。なお、フィーダー細胞はマイトマイシン処理を行ったマウス胚性繊維芽細胞であり、誘導悪性幹細胞のピックアップ前日に50×104cellcm2でゼラチンコート24ウェルプレートに播種した。下記に結腸がん患者がん組織由来のヒト誘導悪性幹細胞の継代pとRNA回収用キットのバッファーBufferRLTへ溶解した日遺伝子導入後日数を示したCC110遺伝子導入後日数4924ウェル第1継代→6ウェル第2継代遺伝子導入後日数546ウェル第2継代→10cm第3継代遺伝子導入後日数59継代と保存第4継代遺伝子導入後日数63継代と保存第5継代遺伝子導入後日数68一部をバッファーRLTRNA精製前の細胞溶解液処理遺伝子導入後日数71一部をQiazolRNA精製前の細胞溶解液処理遺伝子導入後日数75一部をNODSCIDマウスへ移植。以上のように、フィーダー細胞であるMEFと共にフィーダー細胞フリー用ヒトESiPS細胞用培地mTeSR1を用いて結腸がん患者がん組織由来の誘導悪性幹細胞をinvitroで自己複製させた。実施例5マイクロアレイによる定量解析アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kにより、ゲノムワイドな遺伝子発現mRNAのトランスクリプトームを解析した。3種類のヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390、hESBG03GSM194391及びhESES01GSM194392と、誘導多能性幹細胞hiPS201B7GSM241846のマイクロアレイデーターは、GEOからダウンロードして使用した。<トータルRNAとゲノムDNAの調製>実施例2~4のヒト誘導悪性幹細胞GC11、GC13、GC15、GC17、GC18、NGC11、CC110のトータルRNAとゲノムDNAを、事前にバッファーRLTRNA精製前の細胞溶解液で処理した溶液から、AllPrepDNARNAMiniKit50キアゲン社製;Catno80204を用いて抽出した。<実験方法>iゲノムDNAのクオリティーチェックNanoDropND1000NanoDropTechnologiesで、DNA濃度及びDNAの純度の評価を行ったところ、何れのサンプルにおいても十分な濃度があり、純度も高いことが確認された。iiトータルRNAのクオリティーチェックRNA用LabChipアジレント社製の登録商標キットを用いて、Agilent2100Bioanalyzerアジレント社製でtotalRNAの品質のチェックを行ったところ、全てのRNAサンプルのクオリティーは良好であった。また、NanoDropND1000NanoDropTechnologiesで、RNA濃度及びRNAの純度の評価を行ったところ、何れのサンプルにおいてもcRNA合成に必要なtotalRNA量があることが確認され、純度も高いことが確認された。iiicRNAの合成各サンプルのtotalRNA500ngから、QuickAmpLabelingkitアジレント社製を用いて、アジレント社のプロトコールに従って、2本鎖cRNAを合成した。作製したcDNAから、invitrotranscriptionによりcRNAを合成した。この際、Cyanine色素で標識されたCTPCyanine3CTPを取り込ませ、蛍光標識を行った。ivハイブリダイゼーションGeneExpressionHybridizationKitアジレント社製を使用して、ハイブリダイゼーション標識cRNAをハイブリダイゼーションバッファーに加え、アジレント製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44K上で17時間ハイブリダイズし、洗浄後、アジレントマイクロアレイスキャナで、DNAマイクロアレイのイメージを読み取り、FeatureExtractionSoftwarev9531を用いて、各スポットの蛍光シグナルを数値化した。<遺伝子の定量解析結果>解析ソフトとしては、GeneSpringGX100アジレントテクノロジー株式会社を使用し、ノーマライゼーションは、50thpercentileで行った。全体の遺伝子発現の分布各プローブの蛍光値の分布の中央値を0として表記した。0を超えた値を示したプローブを、遺伝子発現を検出したプローブとし、遺伝子発現を有りとした。解析の結果、ヒト誘導悪性幹細胞GC11、GC13、GC15、GC17、GC18、NGC11、CC110は、ヒト誘導多能性幹細胞hiPS201B7と比較して内胚葉系遺伝子であるGSC遺伝子及びGATA4遺伝子、FOXA2遺伝子又はSOX17遺伝子の発現が上昇していた。特に、ヒト誘導悪性幹細胞GC12、GC15、GC17、NGC11は、ヒト誘導多能性幹細胞hiPS201B7やヒト胚性幹細胞と比較して内胚葉系遺伝子であるGSC遺伝子及びGATA4遺伝子、FOXA2遺伝子又はSOX17遺伝子の発現が2倍以上、上昇していた。1血管新生関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された血管新生関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞GC15がヒト胚性幹細胞hESBG03GSM194391と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表34hESBG03vsGC15に記載した。更に、2倍以上発現上昇している血管新生関連遺伝子のプローブをプロットした図を示す図1。GC15はがん患者の新鮮がん組織胃がん組織から調製した初代培養体非胚性細胞由来のヒト誘導悪性幹細胞であり、内在性のがん関連遺伝子である血管新生関連遺伝子MDK遺伝子、TIMP2遺伝子、FGFR3遺伝子、PLAU遺伝子、ID3遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。2がん関連パスウェイ遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載されたがん関連パスウェイ遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390及びヒト誘導多能性幹細胞hiPS201B7と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表35hESH9vsNGC11及び表36hiPS201B7vsNGC11にそれぞれ記載した。NGC11はがん患者の新鮮非がん組織胃の非がん組織から調製した初代培養体非胚性細胞由来のヒト誘導悪性幹細胞であり、内在性のがん関連パスウェイ遺伝子MMP2遺伝子、TIMP1遺伝子、TIMP3遺伝子、MMP1遺伝子、CDKN1A遺伝子、S100A4遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。3間質バリア細胞外マトリックスと接着分子関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された間質バリア関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞GC15がヒト胚性幹細胞hESBG03GSM194391と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表37hESBG03vsGC15に記載した。GC15はがん患者の新鮮がん組織胃がん組織から調製した初代培養体非胚性細胞由来のヒト誘導悪性幹細胞であり、内在性の間質バリア関連遺伝子COL4A2遺伝子、FN1遺伝子、COL1A1遺伝子、TGFB1遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。4上皮間葉転換関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された上皮間葉転換関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞GC15がヒト胚性幹細胞hESBG03GSM194391と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、プローブ及びGenBankアクセッションナンバーを、下記表38hESBG03vsGC15に記載した。更に、2倍以上発現上昇している上皮間葉転換関連遺伝子のプローブをプロットした図を示す図2。GC15はがん患者の新鮮がん組織胃がん組織から調製した初代培養体非胚性細胞由来のヒト誘導悪性幹細胞であり、内在性の上皮間葉転換関連遺伝子VIM遺伝子、COL3A1遺伝子、COL1A2遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。同様に、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11とヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390及びヒト誘導多能性幹細胞hiPS201B7、並びに、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞CC110とヒト誘導多能性幹細胞hiPS201B7を比較した結果を、表39hESH9vsNGC11、表40hiPS201B7vsNGC11、表41hiPS201B7vsCC110に示す。NGC11は、がん患者の新鮮非がん組織胃の非がん組織から調製した初代培養体細胞由来のヒト誘導悪性幹細胞であり、自己複製関連遺伝子POU5F1遺伝子、NANOG遺伝子、SOX2遺伝子、ZFP42遺伝子、LIN28遺伝子、TERT遺伝子を発現していることが明らかとなった。また、CC11は、がん患者の新鮮がん組織大腸がん組織から調製した初代培養体非胚性細胞由来のヒト誘導悪性幹細胞であり、自己複製関連遺伝子POU5F1遺伝子、NANOG遺伝子、SOX2遺伝子、ZFP42遺伝子、LIN28遺伝子、TERT遺伝子を発現していることが明らかとなった。5胃がん関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された胃がん関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表42hESH9vsNGC11に記載した。NGC11はがん患者の新鮮非がん組織胃の非がん組織から調製した初代培養体非胚性細胞由来のヒト誘導悪性幹細胞であり、内在性の胃がん関連遺伝子CCND2遺伝子、TIMP3遺伝子、LOX遺伝子、RASSF1遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。6自律増殖関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された自律増殖関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表43hESH9vsNGC11に記載した。NGC11はがん患者の新鮮非がん組織胃の非がん組織から調製した初代培養体非胚性細胞由来のヒト誘導悪性幹細胞であり、内在性の自律増殖関連遺伝子IGF2遺伝子、INHBA遺伝子、MDK遺伝子、INHBB遺伝子、BMP1遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。8TGFβBMPシグナル関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載されたTGFβBMPシグナル関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞GC15がヒト胚性幹細胞hESES01GSM194392及びヒト誘導多能性幹細胞hiPS201B7と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、それぞれ下記表44hESES01vsGC15及び表45hiPS201B7vsGC15に記載した。更に、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞GC15がヒト誘導多能性幹細胞hiPS201B7と比較して2倍以上発現上昇しているTGFβBMPシグナル関連遺伝子のプローブをプロットした図を示す図3。GC15はがん患者の新鮮がん組織胃がん組織から調製した初代培養体非胚性細胞由来のヒト誘導悪性幹細胞であり、内在性のTGFβBMPシグナル関連遺伝子TGFB1遺伝子、IGFBP3遺伝子、INHBA遺伝子、INHBB遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。同様に、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11とヒト胚性幹細胞hESES01GSM194392及びヒト誘導多能性幹細胞hiPS201B7、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞CC110とヒト胚性幹細胞hESES01GSM194392及びヒト誘導多能性幹細胞hiPS201B7を比較した結果を、下記表46hESES01vsNGC11、表47hiPS201B7vsNGC11、表48hESES01vsCC110、表49hiPS201B7vsCC110に示す。NGC11はがん患者の新鮮非がん組織胃の非がん組織から調製した初代培養体非胚性細胞由来のヒト誘導悪性幹細胞であり、内在性のTGFβBMPシグナル関連遺伝子TGFB1遺伝子、IGFBP3遺伝子、INHBA遺伝子、INHBB遺伝子を発現していることが明らかとなった。また、CC110はがん患者の新鮮がん組織大腸がん組織から調製した初代培養体非胚性細胞由来のヒト誘導悪性幹細胞であり、内在性のTGFβBMPシグナル関連遺伝子TGFB1遺伝子、IGFBP3遺伝子、INHBA遺伝子、INHBB遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。9組織侵潤転移関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された組織侵潤転移関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞GC15がヒト誘導多能性幹細胞hiPS201B7と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表50hiPS201B7vsGC15に記載した。GC15はがん患者の新鮮がん組織胃がん組織から調製した初代培養体非胚性細胞由来のヒト誘導悪性幹細胞であり、内在性の組織侵潤転移関連遺伝子FST遺伝子、BMP7遺伝子、TGFB1遺伝子、COL3A1遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。同様に、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11とヒト誘導多能性幹細胞hiPS201B7を比較した結果を、表51hiPS201B7vsNGC11に示す。更に、2倍以上発現上昇している組織侵潤転移関連遺伝子のプローブをプロットした図を示す図4。ヒト誘導悪性幹細胞はがん患者の新鮮非がん組織胃の非がん組織から調製した初代培養体非胚性細胞由来であり、内在性の組織侵潤転移関連遺伝子FST遺伝子、BMP7遺伝子、TGFB1遺伝子、COL3A1遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。10Wntシグナル関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載されたWntシグナル関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表52hESH9vsNGC11に記載した。更に、2倍以上発現上昇しているWntシグナル関連遺伝子のプローブをプロットした図を示す図5。誘導悪性幹細胞は内在性のWntシグナル関連遺伝子CCND2遺伝子、SLC9A3R1遺伝子、LEF1遺伝子、CTNNB1遺伝子、FRZB遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。11シグナル伝達関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載されたシグナル伝達関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞GC15がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表53hESH9vsGC15に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性のシグナル伝達関連遺伝子CCL2遺伝子、CDKN1A遺伝子、HSPB1遺伝子、RBP1遺伝子、CCND1遺伝子、LEF1遺伝子、GADD45A遺伝子、BAX遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。12Notchシグナル関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載されたNotchシグナル関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞GC15がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表54hESH9vsGC15に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性のNotchシグナル関連遺伝子CD44遺伝子、FZD2遺伝子、CCND1遺伝子、HES1遺伝子、CDKN1A遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。13乳がん及びエストロジェン受容体シグナル関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された乳がん及びエストロジェン受容体シグナル関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞GC15がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表55hESH9vsGC15に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性の乳がん及びエストロジェン受容体シグナル関連遺伝子KRT18遺伝子、KRT19遺伝子、GSN遺伝子、TFF1遺伝子、CTSB遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。14結腸がん関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された結腸がん関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞GC15がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表56hESH9vsGC15に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性の結腸がん関連遺伝子DKK3遺伝子、SPARC遺伝子、IGF2遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。15低酸素シグナル関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された低酸素シグナル関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表57hESH9vsNGC11に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性の低酸素シグナル関連遺伝子EPAS1遺伝子、TUBA4遺伝子、EEF1A1遺伝子、CDC42遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。16GPCRシグナル関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載されたGPCRシグナル関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表58hESH9vsNGC11に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性のGPCRシグナル関連遺伝子GNAS遺伝子、RGS2遺伝子、JUNB遺伝子、AGT遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。17薬剤耐性関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された薬剤耐性関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表59hESH9vsNGC11に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性の薬剤耐性関連遺伝子AQP1遺伝子、SLC16A3遺伝子、ATP6V0C遺伝子、MVP遺伝子、ABCG2遺伝子、ATP7B遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。18Hedgehogシグナル関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載されたHedgehogシグナル関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表60hESH9vsNGC11に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性のHedgehogシグナル関連遺伝子CTNNB1遺伝子、FGFR3遺伝子、ERBB4遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。19PI3KAKTシグナル関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載されたPI3KAKTシグナル関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表61hESH9vsNGC11に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性のPI3KAKTシグナル関連遺伝子HSPB1遺伝子、ITGB1遺伝子、CTNNB1遺伝子、PDGFRA遺伝子、FKBP1A遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。20薬物代謝遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された薬物代謝遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表62hESH9vsNGC11に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性の薬物代謝遺伝子PKM2遺伝子、GSTM3遺伝子、COMT遺伝子、ALDH1A1遺伝子、BLVRB遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。21がん分子メカニズム遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載されたがん分子メカニズム遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11がヒト誘導多能性幹細胞hiPS201B7と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表63hiPS201B7vsNGC11に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性のがん分子メカニズム遺伝子BAX遺伝子、NFKBIA遺伝子、BCL2遺伝子、CASP8遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。22SMADシグナルネットワーク関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載されたSMADシグナルネットワーク関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11がヒト胚性幹細胞hESES01GSM194392と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表64hESES01vsNGC11に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性のSMADシグナルネットワーク関連遺伝子PSMC3遺伝子、HDAC5遺伝子、UBB遺伝子、ACTA2遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。23膵がん関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された膵がん関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11がヒト誘導多能性幹細胞hiPS201B7と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表65hiPS201B7vsNGC11に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性の膵がん関連遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。24前立腺がん関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された前立腺がん関連遺伝子のプローブの内、本発明の本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11がヒト胚性幹細胞hESBG03GSM194391と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表66hESBG03vsNGC11に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性の前立腺がん関連遺伝子SFRP1遺伝子、TIMP2遺伝子、DKK3遺伝子、DLC1遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。26肝がん関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された肝がん関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞GC15がヒト胚性幹細胞hESBG03GSM194391と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表67hESBG03vsGC15に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性の肝がん関連遺伝子CCND2遺伝子、DLC1遺伝子、CDKN1A遺伝子、DAB2IP遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。27肺がん関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された肺がん関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞GC15がヒト胚性幹細胞hESBG03GSM194391と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表68hESBG03vsGC15に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性の肺がん関連遺伝子CDKN1C遺伝子、MGMT遺伝子、RASSF2遺伝子、CADM1遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。28ストレス及び毒性関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載されたストレス及び毒性関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞GC15がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表69hESH9vsGC15に記載した。誘導悪性幹細胞は内在性のストレス及び毒性関連遺伝子GDF15遺伝子、GSTM3遺伝子、HMOX1遺伝子、HSPA5遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。30エピジェネティクスクロマチン修飾酵素遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載されたエピジェネティクスクロマチン修飾酵素遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表70hESH9vsNGC11に記載した。誘導悪性幹細胞はエピジェネティクスクロマチン修飾酵素遺伝子HDAC5遺伝子、SMYD3遺伝子、HDAC10遺伝子、PRMT5遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。31幹細胞転写因子遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された幹細胞転写因子遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表71hESH9vsNGC11に記載した。誘導悪性幹細胞は幹細胞転写因子遺伝子NR2F2遺伝子、PITX2遺伝子、HAND1遺伝子、ZIC1遺伝子を相対的に高発現していることが明らかとなった。32肝細胞関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された肝細胞関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞GC15がヒト胚性幹細胞hESBG03GSM194391と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表72hESBG03vsGC15に記載した。誘導悪性幹細胞は1~31の何れかに加えて肝細胞関連遺伝子TTR遺伝子、DLK1遺伝子、AFP遺伝子、TF遺伝子がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較して相対的に高発現上昇していることが明らかとなった。33自己複製関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された自己複製関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞GC15がヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較してほぼ同程度12から2倍発現している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表73hESH9GC15に記載した。更に、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11とヒト胚性幹細胞hESBG03GSM194391を比較して、ほぼ同程度12から2倍発現している自己複製関連遺伝子のプローブをプロットしたグラフを図6示す。なお、表1の自己複製関連遺伝子の全てが、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞GC15とヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較してほぼ同程度18から8倍発現していた。同様に、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11とヒト胚性幹細胞hESBG03GSM194391、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞CC110とヒト胚性幹細胞hESBG03GSM194391、表74hESBG03NGC11、表75hESBG03CC110、に示す。なお、表1の自己複製関連遺伝子の全てが、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11、ヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞CC110、ヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較してほぼ同程度18から8倍発現していた。従って、誘導悪性幹細胞は1~31の遺伝子の何れか一つに加えて自己複製関連遺伝子POU5F1遺伝子、NANOG遺伝子、SOX2遺伝子、ZFP42遺伝子、LIN28遺伝子、TERT遺伝子を発現し、発現量はヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較してほぼ同程度18から8倍であることが明らかとなった。更に、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞NGC11とヒト胚性幹細胞hESBG03GSM194391を比較して、ほぼ同程度12から2倍発現している自己複製関連遺伝子のプローブをプロットしたグラフを図7、本発明のヒト誘導内胚葉系悪性幹細胞CC110とヒト胚性幹細胞hESBG03GSM194391を比較して、ほぼ同程度14から4倍発現している自己複製関連遺伝子のプローブをプロットした図図8を示す。従って、誘導悪性幹細胞は1~31の遺伝子の何れか一つに加えて自己複製関連遺伝子POU5F1遺伝子、NANOG遺伝子、SOX2遺伝子、ZFP42遺伝子、LIN28遺伝子、TERT遺伝子を発現し、発現量はヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較してほぼ同程度12から2倍であることが明らかとなった。また、誘導悪性幹細胞は1~31の遺伝子の何れか一つに加えて自己複製関連遺伝子POU5F1遺伝子、NANOG遺伝子、SOX2遺伝子、ZFP42遺伝子、LIN28遺伝子、TERT遺伝子を発現し、発現量はヒト胚性幹細胞hESH9GSM194390と比較してほぼ同程度14から4倍であることが明らかとなった。以上の結果より、ヒト誘導悪性幹細胞は、ヒト胚性幹細胞等に比較して、がんの性質である悪性のマーカー遺伝子がん関連遺伝子が発現上昇しているだけでなく、胚性幹細胞に特徴的な自己複製関連遺伝子POU5F1遺伝子、NANOG遺伝子、SOX2遺伝子、ZFP42遺伝子、LIN28遺伝子、TERT遺伝子が、ヒト胚性幹細胞と同程度に発現していることが実験的に検証された。実施例6バンド分染法とモード分析によるヒト誘導悪性幹細胞の核型の検査実施例3の誘導悪性幹細胞NGC11について、Gバンド分染法によって20細胞株、モード分析により50細胞株について、核型、染色体の本数を検査した。その結果、これら誘導悪性幹細胞は全て46XYの核型であり、正常であった。誘導悪性幹細胞NGC11:遺伝子導入後日数76は、MEFの上でmTeSR1などを用いて培養した細胞を解析した。誘導悪性幹細胞は核型が正常な細胞であった。実施例7マルチカラーFISHによるヒト誘導悪性幹細胞の染色体検査実施例3の誘導悪性幹細胞NGC11について、マルチカラーFISHによって10細胞株について、染色体の欠失、転座を検査した。その結果、これら誘導悪性幹細胞は全て染色体が正常であった異常が検出されなかった。誘導悪性幹細胞NGC11:遺伝子導入後日数76は、MEFの上でmTeSR1を用いて培養した細胞を解析した。誘導悪性幹細胞は染色体異常染色体の転座、欠失がない細胞であった。本発明の誘導悪性幹細胞NGC11の自己複製を長期少なくとも数カ月から1年以上にわたって維持できることが確認された。実施例8ヒト誘導悪性幹細胞培養上清中の腫瘍マーカー誘導悪性幹細胞NGC11の培養上清を臨床検査会社SRLに解析依頼した結果、誘導悪性幹細胞はTGFβ1、AFP、プロコラ-ゲンIIIペプチドPIIIP、IV型コラーゲン、アポリポタンパクCII、プレアルブミンTTR、IGFIタンパク質を産生していることが判明した。この結果から、誘導悪性幹細胞は、腫瘍マーカーを産生する細胞であることが判明した。実施例9ヒト誘導悪性幹細胞の実験動物での腫瘍形成担がんモデルの作製実施例3の誘導悪性幹細胞NGC11をマウスに移植して、悪性細胞から誘導されたがん細胞の組織像の観察と担がんモデルの作製のため以下の実験を行った。マウス誘導悪性幹細胞NGC11を免疫不全動物であるNODSCIDマウスに、各々、1匹当たり5×106細胞100μlで200μlのマトリゲルと共にマウス背部皮下に移植した。また、5×106細胞500μlでマウス腹腔に移植した。その結果、2~3ヶ月後に各々誘導悪性幹細胞NGC11を移植した担がんマウスに腫瘍が形成された。正常な多能性幹細胞から形成される通常のテラトーマ良性腫瘍とは異なり誘導悪性幹細胞NGC11から形成された腫瘍は上皮間葉転換を起こし、間質バリアを形成した組織であった。従って、誘導悪性幹細胞NGC11は間質バリアを形成するものもあることが判明した。マウスを安楽死させた後、悪性腫瘍組織をホルマリン固定し、パラフィン切片を作製し、ヘマトキシンエオジン染色を行い顕微鏡下で観察した。腸管様組織と共に細胞外マトリックスと間質細胞が豊富な間質バリアを形成したがん組織が観察された。従って、移植した細胞が上皮間葉転換を起こすヒト誘導悪性幹細胞であると確認された。実施例10ヒト誘導悪性幹細胞の1細胞ウェルのシングルソート未染色実施例3の誘導悪性幹細胞GC12、NGC11を古河電気工業製のPERFLOWTMSortにより、1細胞ウェルで96ウェルプレートにシングルソーテイングした。その結果、モノクローナルな誘導悪性幹細胞GC121、GC122、GC123、GC124、NGC111、NGC112、NGC113、NGC114が樹立された。実施例11ヒト誘導悪性幹細胞の1細胞ウェルのシングルソート特異抗体による染色CD34Alexafluor488conjugatedマウスモノクローナル抗体antihumanCD34;Biolegend社製;clone581;mouseIgG1、VEGFR2Alexafluor647conjugatedマウスモノクローナル抗体antihumanCD309;Biolegend社製;cloneHKDR1;mouseIgG1、PDGFRαPEconjugatedantihumanCD140a;Biolegend社製;clone16A1;mouseIgG1、DLK1マウスモノクローナル抗体antihumanPref1DLK1FA1;RD社製;cloneMAB1144;mouseIgG2B、CXCR4CarboxyfluoresceinCFSconjugatedマウスモノクローナル抗体antihumanCXCR4;RD社製;clone12G5;mouseIgG2A、EカドヘリンAPCconjugatedantihumanCD324;Biolegend社製;clone67A4;mouseIgG1、IGFR1マウスモノクローナル抗体antihumanIGFIR;RD社製;cloneMAB391;mouseIgG1、FABP1マウスモノクローナル抗体antihumanFABP1;RD社製;cloneMAB2964;mouseIgG2a、ALBマウスモノクローナル抗体antihumanserumalbumin;SIGMA社製;cloneHAS11;mouseIgG2aで染色し、実施例3の誘導悪性幹細胞NGC11を古河電気工業のPERFLOWTMSortにより、染色陽性率を計測した。陽性率が高い場合は、陽性画分を1細胞ウェルで96ウェルプレートにシングルソーテイングした。実施例12家族性腫瘍患者のがん組織由来の細胞へ遺伝子導入するレトロウイルスベクターの調製実施例1と同様に、POU5F1>SOX2の関係になるようレトロウイルスベクター液を調整した。詳細は、以下の通りである<家族性大腸ポリポーシスAPC患者皮膚組織由来の細胞へ遺伝子導入するレトロウイルスベクター液の調製>遺伝子POU5F1pMXs、KLF4pMXs、SOX2pMXsは、構築したベクターである前記表33。各ベクターの量は、POU5F1pMXs5μg、KLF4pMXs25μg、SOX2pMXs125μg、VenuspCS2125μg、VSVGpCMV5μg、GFPpMXsCellBiolab製125μg、FuGENEHD45μlとした。<網膜細胞芽腫RB患者皮膚組織由来の細胞へ遺伝子導入するレトロウイルスベクター液の調製>遺伝子POU5F1pMXs、KLF4pMXs、SOX2pMXsは、構築したベクターである前記表33。各ベクターの量は、POU5F1pMXs5μg、KLF4pMXs25μg、SOX2pMXs125μg、VenuspCS2125μg、VSVGpCMV5μg、GFPpMXsCellBiolab製125μg、FuGENEHD45μlとした。<網膜細胞芽腫RB患者がん組織由来の細胞へ遺伝子導入するレトロウイルスベクター液の調製>遺伝子POU5F1pMXs、KLF4pMXs、SOX2pMXsは、構築したベクターである前記表33。各ベクターの量は、POU5F1pMXs5μg、KLF4pMXs25μg、SOX2pMXs125μg、VenuspCS2125μg、VSVGpCMV5μg、GFPpMXsCellBiolab製125μg、FuGENEHD45μlとした。<網膜細胞芽腫RB患者皮膚組織由来の細胞へ遺伝子導入するレトロウイルスベクター液の調製>POU5F1KLF4SOX2pMXs84kbは、pCXOKS2A8478bpのEcoRIEcoRIインサート部分3700bpを切り出し、pMXs5871bpのEcoRIEcoRI部分1122bpと組み換えて構築したベクターである。さらに、5末端から3末端方向へ順向きであること確認した。下記表76。各ベクターの量は、POU5F1KLF4SOX2pMXs3μg、VenuspCS205μg、VSVGpCMV2μg、FuGENEHD15μlとした。POU5F1KLF4SOX2pMXsの使用はPOU5F1遺伝子、KLF4遺伝子、SOX2遺伝子は、順に111の比率で使用したことになる。111の比率は、パッケージング細胞に遺伝子を導入する時でもよく、また、別々にPOU5F1pMXs、KLF4pMXs、SOX2pMXsの3遺伝子のレトロウイルスベクター液を作製して、111の比率で混合してもよい。実施例13APC患者皮膚組織由来の細胞からヒト誘導前がん幹細胞の作製APC患者APC3223、25才、男性、白人、541番目のグルタミン541Gln、QCAAorCAGのC塩基がT塩基に置換して終止コドンになるの皮膚組織凍結した継代数2の体細胞から、内在性がん抑制遺伝子であるAPCの変異を有するヒト誘導内胚葉系前がん幹細胞を以下のように樹立した。凍結保存された家族性大腸腺腫症患者の、皮膚組織に由来する細胞のバイアル1本米国NPOCoriellInstituteforMedicalResearch;CatnoGM03223を、37°Cの恒温槽中で解凍し、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地に懸濁し、10mlの細胞懸濁液を得た。家族性大腸腺腫症APC患者の皮膚組織由来の細胞は、生殖系列遺伝的に片側アリルのAPCに変異541Gln→terC→Tをもつ、前がん細胞である。次いで、得られた細胞懸濁液を、1000rpm、4°Cで5分間遠心分離し、上清を除去した後、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地20mlに懸濁して、細胞懸濁液を得た。20μgcm2の濃度のマトリゲルで、底面を30分以上コーティングされた直径90ミリ細胞培養ペトリディッシュヌンク社製;Catno172958上に、得られた細胞懸濁液を10mlデッシュずつ加えて細胞を播種した。1日後に培地を除き、10mlの3遺伝子POU5F1、KLF4、SOX2の比率が順に421レトロウイルスベクター液を添加し、37°Cで24時間感染させた。ウイルス上清を除去し、MEF馴化ES培地を10ml加え、37°Cで一日培養した。その後2日毎にMEF馴化ES培地の交換を続けた。遺伝子導入から18日後から、フィーダー細胞フリー用ヒトESiPS細胞用培地mTeSR1で、毎日培地交換を行った。遺伝子導入から28日後から32日後までMEF馴化ES培地で、毎日培地交換を行った。遺伝子導入から33日後から、フィーダー細胞フリー用ヒトESiPS細胞用培地mTeSR1で、毎日新しい培地に交換した。遺伝子導入から36日後にコロニーを1クローン11、48日後にヒト誘導内胚葉系前がん幹細胞のコロニーを、3クローン12、13、14ピンセットでピックアップし、フィーダー細胞上に移した。なお、フィーダー細胞はマイトマイシン処理を行ったマウス胚性繊維芽細胞DSファーマバイオメディカル社製;CatnoRPMEFCFであり、誘導悪性幹細胞のピックアップ前日に、50×104cellcm2でゼラチンコート24ウェルプレートイワキ社製;Catno11020012に播種した。下記にそれぞれのクローンの継代pとRNA回収用キットのバッファーBufferRLTへ溶解した日dayを示した。<APC患者由来の皮膚組織由来のヒト誘導内胚葉系前がん幹細胞>APC322311遺伝子導入後日数5424ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数606ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数67継代第4継代と保存遺伝子導入後日数72バッファーRLTRNA精製前の細胞の溶解液処理と保存第5継代。APC322312遺伝子導入後日数5924ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数756ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数79保存。APC322313遺伝子導入後日数5924ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数756ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数79保存。APC322314遺伝子導入後日数5924ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数756ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数79保存。以上の様に、内在性がん抑制遺伝子に変異を有するヒト誘導前がん幹細胞を作製した。これらのクローンは内在性がん抑制遺伝子APCの片側アリルに生殖系列変異を有するヒト誘導内胚葉系前がん幹細胞であった。実施例14APC患者皮膚組織由来の細胞からヒト誘導前がん幹細胞の作製APC患者APC3946、22才、女性、白人、541番目のグルタミン541Gln、QCAAorCAGのC塩基がT塩基に置換して終止コドンになる。前述のAPC3223とは兄弟関係である。の皮膚組織凍結した継代数2から、ヒト誘導内胚葉系前がん幹細胞を以下のように樹立した。凍結保存された家族性大腸腺腫症患者の皮膚組織由来の細胞のバイアル1本CORIELL;CatnoGM03946を、37°Cの恒温槽中で解凍し、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地に懸濁し、10mlの細胞懸濁液を得た。次いで、得られた細胞懸濁液を、1000rpm、4°Cで5分間遠心分離し、上清を除去した後、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地20mlに懸濁して、細胞懸濁液を得た。20μgcm2の濃度のマトリゲルで、底面を30分以上コーティングされた90ミリ細胞培養ペトリディッシュ上に、得られた細胞懸濁液を10mlデッシュずつ加えて細胞を播種した。1日後に培地を除き、10mlの3遺伝子POU5F1、KLF4、SOX2の比率が順に421レトロウイルスベクター液を添加し、37°Cで24時間感染させた。ウイルス上清を除去し、MEF馴化ES培地を10ml加え、37°Cで一日培養した。その後2日毎にMEF馴化ES培地の交換を続けた。遺伝子導入から18日後から、フィーダー細胞フリー用ヒトESiPS細胞用培地mTeSR1で、毎日培地交換を行った。遺伝子導入から28日後から32日後までMEF馴化ES培地で、毎日培地交換を行った。遺伝子導入から33日後から、フィーダー細胞フリー用ヒトESiPS細胞用培地mTeSR1で、毎日培地交換を行った。遺伝子導入から36日後にコロニーを1クローン11、40日後にコロニーを1クローン12ピンセットでピックアップし、フィーダー細胞上に移してmTeSR1で培養した。なお、フィーダー細胞はマイトマイシン処理を行ったマウス胚性繊維芽細胞DSファーマバイオメディカル社製;CatnoRPMEFCFであり、誘導悪性幹細胞のピックアップ前日に、50×104cellcm2でゼラチンコート24ウェルプレートイワキ社製;Catno11020012に播種した。下記にそれぞれのクローンの継代pとRNA回収用キットのバッファーBufferへ溶解した日dayを示した。以上の様に、内在性がん抑制遺伝子に変異を有するヒト誘導前がん幹細胞を作製した。これらのクローンは内在性がん抑制遺伝子APCの片側アリルに生殖系列変異を有するヒト誘導内胚葉系前がん幹細胞であった。<APC患者の皮膚組織由来のヒト誘導内胚葉系前がん幹細胞>APC394611遺伝子導入後日数5424ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数616ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数72継代第4継代と保存遺伝子導入後日数77バッファーRLTRNA精製前の細胞の溶解液処理と保存第5継代。APC394612遺伝子導入後日数5924ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数616ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数72継代第4継代と保存遺伝子導入後日数77バッファーRLTRNA精製前の細胞の溶解液処理と保存第5継代。以上の様に、内在性がん抑制遺伝子に変異を有するヒト誘導前がん幹細胞を作製した。これらのクローンは内在性がん抑制遺伝子APCの片側アリルに生殖系列変異を有するヒト誘導内胚葉系前がん幹細胞であった。実施例15RB患者皮膚組織由来の細胞からヒト誘導前がん幹細胞の作製RB患者1才、男性、日本人、RB1の706番目のコドン706TGTのG塩基がA塩基に置換しているの皮膚組織継代数3から、内在性がん抑制遺伝子の変異を有するヒト誘導前がん幹細胞を以下のように樹立した。凍結保存された網膜芽腫患者の皮膚組織由来の細胞1本医薬基盤研究所;資源番号KURB2358ロット番号080786を、37°Cの恒温槽中で解凍し、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地に懸濁し、10mlの細胞懸濁液を得た。次いで、得られた細胞懸濁液を、1000rpm、4°Cで5分間遠心分離し、上清を除去した後、FGM2BulletKit20mlに懸濁して、細胞懸濁液を得た。20μgcm2の濃度のマトリゲルで、底面を30分以上コーティングされた90ミリ細胞培養ペトリディッシュ上に、得られた細胞懸濁液を10mlデッシュずつ加えて細胞を播種した。1日後に培地を除き、PBSで洗浄した後、025トリプシン1mMEDTA溶液インビトロジェン社製、Catno25200056を加えて37°C5分間静置したのち、025トリプシン1mMEDTA溶液を除き、次いで、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSインビトロジェン社製、Catno26140079を10含むDMEM高グルコース培地を20ml加えて1000rpm、4°Cで5分間遠心分離した。上清を除去した後、FGM2BulletKit80mlに懸濁して、細胞懸濁液を得た。20μgcm2の濃度のマトリゲルで、底面を30分以上コーティングされた90ミリ細胞培養ペトリディッシュ上に、得られた細胞懸濁液を10mlデッシュずつ加えて細胞を播種した。1日後に培地を除き、10mlの3遺伝子レトロウイルスベクター液を添加し、37°Cで24時間感染させた。ウイルス上清を除去し、MEF馴化ES培地を10ml加え、37°Cで一日培養した。その後2日毎にMEF馴化ES培地の交換を続けた。遺伝子導入から16日後から、フィーダー細胞フリー用ヒトESiPS細胞用培地mTeSR1で、毎日培地交換を行った。遺伝子導入から26日後にコロニーを4クローン14、17、18、19、33日後にコロニーを3クローン12、15、16ピンセットでピックアップし、フィーダー細胞上に移した。なお、フィーダー細胞はマイトマイシン処理を行ったマウス胚性繊維芽細胞DSファーマバイオメディカル社製;CatnoRPMEFCFであり、誘導悪性幹細胞のピックアップ前日に、50×104cellcm2でゼラチンコート24ウェルプレートイワキ社製;Catno11020012に播種した。下記にそれぞれのクローンの継代pとRNA回収用キットのバッファーBufferへ溶解した日dayを示した。<RB患者の皮膚組織由来ヒト誘導前がん幹細胞>RB20312遺伝子導入後日数4924ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数776ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数82保存。RB20314遺伝子導入後日数4924ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数776ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数82保存。RB20315遺伝子導入後日数5324ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数606ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数66継代第4継代と保存遺伝子導入後日数69バッファーRLTRNA精製前の細胞の溶解液処理と保存。RB20316遺伝子導入後日数5324ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数596ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数63継代第4継代と保存遺伝子導入後日数66バッファーRLTRNA精製前の細胞の溶解液処理と保存。RB20317遺伝子導入後日数5624ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数776ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数82保存。RB20318遺伝子導入後日数5624ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数776ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数82保存。RB20319遺伝子導入後日数5624ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数596ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数82保存。以上の様に、内在性がん抑制遺伝子に変異を有するヒト誘導前がん幹細胞を作製した。これらのクローンは内在性がん抑制遺伝子RB1の片側アリルに生殖系列変異を有するヒト誘導前がん幹細胞であった。実施例16RB患者がん組織由来の細胞からヒト誘導悪性幹細胞の作製家族性腫瘍患者であるRB患者1歳、男性、日本人、RB1遺伝子の706番目のコドン706TGTのG塩基がA塩基に置換しているのがん組織網膜芽細胞腫から、内在性がん抑制遺伝子の変異を有するヒト誘導悪性幹細胞を以下のように樹立した。凍結保存された網膜芽腫患者の網膜芽細胞腫の凍結バイアル1本医薬基盤研究所;資源番号KURB2359ロット番号091285を、37°Cの恒温槽中で解凍し、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地に懸濁し、10mlの細胞懸濁液を得た。次いで、得られた細胞懸濁液を、1000rpm、4°Cで5分間遠心分離し、上清を除去した後、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地を40ml加えて、1000rpm、4°Cで5分間、再度遠心分離した。次いで、上清を除去した後、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地を20ml加え、コラーゲンコートディッシュ100mmイワキ社製、Catno11018006に播種した。1日後に培地を除き、10mlの3遺伝子POU5F1、KLF4、SOX2の比率が順に421レトロウイルスベクター液を添加し、37°Cで48時間感染させた。ウイルス上清を除去し、マイトマイシン処理を行ったMEFDSファーマバイオメディカル社製;CatnoRPMEFCF50×104cellcm2を1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地10mlに懸濁後、RB患者のがん組織由来の遺伝子導入細胞が培養されたコラーゲンコートディッシュ100mmへ播種し、共培養した。その後3日毎にMEF馴化ES培地の交換を続け、遺伝子導入から21日後から、フィーダー細胞フリー用ヒトESiPS細胞用培地mTeSR1で毎日培地交換を行った。遺伝子導入から21日後から、フィーダー細胞フリー用ヒトESiPS細胞用培地mTeSR1で、毎日培地交換を行った。遺伝子導入から21日後にコロニーを5クローン11、12、13、14、16ピンセットでピックアップし、フィーダー細胞上に移した。なお、フィーダー細胞はマイトマイシン処理を行ったマウス胚性繊維芽細胞DSファーマバイオメディカル社製;CatnoRPMEFCFであり、誘導悪性幹細胞のピックアップ前日に、50×104cellcm2でゼラチンコート24ウェルプレートイワキ社製;Catno11020012に播種した。下記にそれぞれのクローンの継代pとRNA回収用キットのバッファーBufferへ溶解した日dayを示した。<RB患者のがん組織由来ヒト誘導悪性幹細胞>RBT20311遺伝子導入後日数2824ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数336ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数38バッファーRLTRNA精製前の細胞の溶解液処理と保存。RBT20312遺伝子導入後日数3224ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数566ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数61保存。RBT20313遺伝子導入後日数3224ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数566ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数61保存。RBT20314遺伝子導入後日数32ウェルプレート第1継代→ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数396ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数45継代と保存遺伝子導入後日数48バッファーRLTRNA精製前の細胞の溶解液処理と保存。RBT20316遺伝子導入後日数3224ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数396ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数45継代と保存遺伝子導入後日数48バッファーRLTRNA精製前の細胞の溶解液処理と保存。以上の様に、内在性がん抑制遺伝子に変異を有するヒト誘導悪性幹細胞を作製した。これらのクローンは内在性がん抑制遺伝子RB1の片側アリルに生殖系列変異を有するヒト誘導悪性幹細胞であった。実施例17RB患者皮膚組織由来の細胞からヒト誘導前がん幹細胞の作製RB患者2才、女性、日本人の皮膚組織継代数1から、ヒト誘導前がん幹細胞を以下のように樹立した。凍結保存された網膜芽腫患者の皮膚組織由来の体細胞1本医薬基盤研究所;資源番号KURB2435ロット番号080687を、37°Cの恒温槽中で解凍し、1×抗生物質抗真菌剤及びFBSを10含むDMEM高グルコース培地に懸濁し、20mlの細胞懸濁液を得た。次いで、得られた細胞懸濁液を、1000rpm、4°Cで5分間遠心分離し、上清を除去した後、FGM2BulletKit20mlに懸濁して、細胞懸濁液を得た。20μgcm2の濃度のマトリゲルで、底面を30分以上コーティングされた90ミリ細胞培養ペトリディッシュ上に、得られた細胞懸濁液を10mlデッシュずつ加えて細胞を播種した。2日後に培地を除き、10mlの3遺伝子レトロウイルスベクター液を添加し、37°Cで24時間感染させた。ウイルス上清を除去し、MEF馴化ES培地を10ml加え、37°Cで一日培養した。その後2日毎にMEF馴化ES培地の交換を続けた。遺伝子導入から14日後にフィーダー細胞フリー用ヒトESiPS細胞用培地mTeSR1で、培地交換を行った。遺伝子導入から18日後から再び2日毎にMEF馴化ES培地の交換を続けた。遺伝子導入から36日後にフィーダー細胞フリー用ヒトESiPS細胞用培地mTeSR1で、培地交換を行った。遺伝子導入から38日後にMEF馴化ES培地の交換を行い、51日後からフィーダー細胞フリー用ヒトESiPS細胞用培地mTeSR1で、毎日培地交換を行った。遺伝子導入から53日後にコロニーを2クローン11、12ピンセットでピックアップし、フィーダー細胞上に移した。なお、フィーダー細胞はマイトマイシン処理を行ったマウス胚性繊維芽細胞DSファーマバイオメディカル社製;CatnoRPMEFCFであり、誘導悪性幹細胞のピックアップ前日に、50×104cellcm2でゼラチンコート24ウェルプレートイワキ社製;Catno11020012に播種した。下記にそれぞれのクローンの継代pとRNA回収用キットのバッファーBufferへ溶解した日dayを示した。<RB患者の皮膚組織由来ヒト誘導前がん幹細胞>RB24311遺伝子導入後日数6124ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数656ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数74保存。RB24312遺伝子導入後日数6124ウェルプレート第1継代→6ウェルプレート第2継代遺伝子導入後日数656ウェルプレート第2継代→10cm培養皿第3継代遺伝子導入後日数74保存。以上の様に、内在性がん抑制遺伝子に変異を有するヒト誘導前がん幹細胞を作製した。これらのクローンは内在性がん抑制遺伝子RB1の片側アリルに生殖系列変異を有するヒト誘導前がん幹細胞であった。実施例18家族性腫瘍患者のがん組織由来の誘導悪性幹細胞のマイクロアレイによる定量解析アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kを用いて、ヒト誘導悪性幹細胞RBT20311の解析を行った。解析ソフトは、GeneSpringGX100を使用し、ノーマライゼーションは、50thpercentileで行った。実験手法は実施例5と同様である。<トータルRNAとゲノムDNAの調製>実施例16のヒト誘導悪性幹細胞RBT20311のトータルRNAとゲノムDNAを、事前にバッファーRLTRNA精製前の細胞溶解液で処理した溶液から、AllPrepDNARNAMiniKit50キアゲン社製;Catno80204を用いて抽出した。1ゲノムDNAのクオリティーチェックNanoDropND1000NanoDropTechnologiesで、DNA濃度及びDNAの純度の評価を行ったところ、何れのサンプルにおいても十分な濃度があり、純度も高いことが確認された。2トータルRNAのクオリティーチェックRNA用LabChipアジレント社製の登録商標キットを用いて、Agilent2100Bioanalyzerアジレント社製でtotalRNAの品質のチェックを行ったところ、全てのRNAサンプルのクオリティーは良好であった。また、NanoDropND1000NanoDropTechnologiesで、RNA濃度及びRNAの純度の評価を行ったところ、何れのサンプルにおいてもcRNA合成に必要なtotalRNA量があることが確認され、純度も高いことが確認された。1血管新生関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された血管新生関連遺伝子のプローブの内、本発明のヒト誘導悪性幹細胞RBT20311がヒト胚性幹細胞hESES01GSM194392と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表77hESES01vsRBT20311に記載した。更に、2倍以上発現上昇している血管新生関連遺伝子のプローブをプロットした図を示す図9。以上から、ヒト誘導悪性幹細胞は血管新生関連遺伝子を2倍以上発現上昇している細胞であることが明らかになった。2シグナル伝達関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載されたシグナル伝達関連遺伝子のプローブの内、ヒト誘導悪性幹細胞RBT20311がヒト誘導多能性幹細胞hiPS201B7と比較して2倍以上発現上昇している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表78hiPS201B7vsRBT20311に記載した。更に、2倍以上発現上昇しているシグナル伝達関連遺伝子のプローブをプロットした図を示す図10。以上から、ヒト誘導悪性幹細胞はシグナル伝達関連遺伝子を2倍以上発現上昇している細胞であることが明らかになった。3自己複製関連遺伝子アジレント社製WholeHumanGenomeオリゴDNAマイクロアレイ4X44Kに搭載された自己複製関連遺伝子のプローブの内、ヒト誘導悪性幹細胞RBT20311がヒト胚性幹細胞hESES01GSM194392と比較してほぼ同程度12から2倍発現している遺伝子の遺伝子シンボル、GenBankアクセッションナンバー及びプローブを、下記表79hESES01RBT20311に記載した。更に、ほぼ同程度12から2倍発現している自己複製関連遺伝子のプローブをプロットしたグラフを図11示す。以上から、ヒト誘導悪性幹細胞はPOU5F1遺伝子、NANOG遺伝子、SOX2遺伝子、ZFP42遺伝子、LIN28遺伝子及びTERT遺伝子の6遺伝子自己複製関連遺伝子を発現する細胞であることが明らかになった。以上の結果より、家族性腫瘍患者である網膜芽細胞種RB患者のがん組織由来のヒト誘導悪性幹細胞は、がん関連遺伝子が発現上昇しているだけでなく、胚性幹細胞に特徴的な遺伝子がヒト胚性幹細胞とほぼ同等に発現していることが実験的に検証された。