"下記の式Iの化合物、またはその塩上記の式中、R’は存在しないか、水素またはアルキル例えば炭素数1~4のアルキルであり、R1およびR2に関しては、iR1およびR2はそれぞれ独立して、任意で置換されているアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、または複素環であるか、iiR1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体になって、任意で置換されている複素環を形成するか、iiiR1およびR2のうちの一方は、任意で置換されているアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、または複素環であり、もう一方は、a隣接する窒素原子、およびbその窒素原子に隣接するRa基とともに、4~10員の複素環またはヘテロアリールを形成し、Rの各存在は独立して、-CR3R4-であり、R3およびR4の各存在は独立して、H、OH、アルキル、アルコキシ、-NH2、アルキルアミノ、またはジアルキルアミノであるか、R3およびR4は、それらが直接結合している炭素原子と一体になって、シクロアルキル基を形成し、その際、炭素Cに結合している各鎖中の3個以下のR基はシクロアルキル例えばシクロプロピルであり、Qまでの点線は存在しないか、または結合であり、Qまでの点線が存在しないときには、Qは存在しないか、-O-、-S-、-COO-、-OCO-、-CONR4-、-NR5CO-、-S-S-、-OCOO-、-O-N=CR5-、-CR5=N-O-、-OCONR5-、-NR5CONR5-、-NR5COO-、-COS-、-CSO-、または-CR5=N-O-CO-であるか、Qまでの点線が結合のときには、bは0であり、Q、およびその点線に隣接する第3炭素Cは、5~10個の環原子を有する置換または非置換の単環または二環式複素環基を形成し、Q1およびQ2はそれぞれ独立して、存在しないか、-O-、-S-、-OCO-、-COO-、-SCO-、-COS-、-OCS-、-CSO-、-S-S-、-CONR5-、-NR5CO-、-CSNR5-、-NR5CO-、-NR5CONR5-、または-OCOO-であり、Q3およびQ4はそれぞれ独立して、H、-CR3R4-、アリール、またはコレステロール部分であり、A1、A2、A3、およびA4の各存在は独立して、-CR5R5-CR5=CR5-であり、R5の各存在は独立して、Hまたはアルキルであり、M1およびM2はそれぞれ独立して、生分解性基であり、Zは存在しないか、アルキレン、または-O-POOH-O-であり、Zに結合している各------は任意の結合で、Zが存在しないときには、Q3およびQ4が直接共有結合しないようになっており、aは1、2、3、4、5、または6であり、bは0、1、2、または3であり、c、d、e、f、i、j、m、n、q、およびrはそれぞれ独立して、0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10であり、gおよびhはそれぞれ独立して、0、1、または2であり、kおよびlはそれぞれ独立して0または1であり、kおよびlのうちの少なくとも1つは1であり、oおよびpはそれぞれ独立して、0、1、または2であり、i上記の化合物は、下記の部分を含まず、この式中、----は任意の結合であり、iiQ3およびQ4はそれぞれ独立して、アスタリスクの付された第3炭素原子から8個以上の原子の鎖分、離れている。請求項1に記載の化合物であって、M1およびM2がそれぞれ独立して、-OCO-、-COO-、-SCO-、-COS-、-OCS-、-CSO-、-S-S-、-CR5=N-、-N=CR5-、-CR5=N-O-、-O-N=CR5-、-CONR5-、-NR5CO-、-CSNR5-、-NR5CO-、-NR5CONR5-、-OCOO-、-OSiR52O-、-COCR3R4COO-、または-OCOCR3R4CO-である化合物。請求項2に記載の化合物であって、M1およびM2がそれぞれ独立して、-CO-O-、-OCO-、-CR5=N-、-CR5=N-O-、-O-COO-、-CONR5-、-COS-、-CSO-、-OSiR52O-、-COCR3R4COO-、または-OCOCR3R4CO-である化合物。請求項2および3のいずれかに記載の化合物であって、M1およびM2がそれぞれ-COO-である化合物。請求項1~4のいずれかに記載の化合物であって、R1およびR2がそれぞれアルキルである化合物。請求項5に記載の化合物であって、R1およびR2がそれぞれメチルである化合物。請求項1~6のいずれかに記載の化合物であって、Qが存在しないか、-COO-、-OCO-、-CONR4-、-NR5CO-、-S-S-、-OCOO-、-CR5=N-O-、-OCONR5-、-NR5CONR5-、-NR5COO-、-COS-、-CSO-、または-CR5=N-O-CO-である化合物。請求項1~7に記載の化合物であって、Qが存在しない化合物。請求項1~8のいずれかに記載の化合物であって、Rの各ケースが独立して、-CH2-、-CCH32-、または-CHiPr-である化合物。請求項1~9のいずれかに記載の化合物であって、Q1およびQ2がそれぞれ独立して、存在しないか、-O-である化合物。請求項1~10のいずれかに記載の化合物であって、aが2、3、または4であり、bが0である化合物。請求項1~11のいずれかに記載の化合物であって、生分解性基に結合している炭素原子αまたはβが、1つもしくは2つのアルキル基またはスピロ環基で置換されている化合物。請求項1に記載の化合物であって、下記のうちの1つ以上が適用される化合物。iQ1およびQ2は存在しないiiM1およびM2はいずれも-COO-であるiiigおよびhはいずれも1であるivgおよびhはいずれも0であるvcおよびeの和は7であるvidおよびfの和は7であるviic、e、およびiの和は7であるviiid、f、およびjの和は7であるixiおよびjはそれぞれ7であるxkおよびlはいずれも1であるximおよびnはいずれも0であるxiimおよびqの和は1であるか、mおよびqの和は2であるxiiimおよびlの和は6であるxivrおよびnの和は6であるxvpおよびoはいずれも0であるxvinおよびrの和は2であるか、nおよびrの和は1であるxviiQ3はHである請求項1に記載の化合物であって、またはこれらの塩から選択される化合物。下記の式IA-1の化合物、またはその塩上記の式中、R1およびR2はそれぞれ独立して、任意で置換されているアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、または複素環であるか、R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体になって、任意で置換されている複素環を形成し、Rの各存在は独立して、-CR3R4-であり、R3およびR4の各存在は独立して、H、OH、アルキル、アルコキシ、-NH2、アルキルアミノ、またはジアルキルアミノであるか1つの好ましい実施形態では、R3およびR4の各存在は独立して、Hまたは炭素数1~4のアルキルである、R3およびR4は、それらが直接結合している炭素原子と一体になって、シクロアルキル基を形成し、その際、R9およびR10のそれぞれにおける3個以下のR基はシクロアルキルであり、Qは存在しないか、-O-、-NH-、-S-、-COO-、-OCO-、-CONR4-、-NR5CO-、-S-S-、-OCOO-、-O-N=CR5-、-CR5=N-O-、-OCONR5-、-NR5CONR5-、-NR5COO-、-COS-、-CSO-、または-CR5=N-O-CO-であり、aは1、2、3、4、5、または6であり、bは0、1、2、または3であり、R’は存在しないか、水素またはアルキル例えば炭素数1~4のアルキルであり、R9およびR10のそれぞれは独立して、1つ以上の生分解性基を有する炭素数12~24のアルキル、炭素数12~24のアルケニル、または炭素数12~24のアルコキシであり、各生分解性基は独立して、上記の炭素数12~24のアルキル基、アルケニル基、またはアルコキシ基に割り込んでいるか、炭素数12~24のアルキル基、アルケニル基、またはアルコキシ基の末端で置換されており、i上記の化合物は、下記の部分を含まず、この式中、----は任意の結合であり、iiR9およびR10の末端は、アスタリスクの付された第3炭素原子から8個以上の原子の鎖分、離れている。請求項15に記載の化合物であって、qが存在せず、R’R1R2N-Ra-Q-Rb-基がCH32N-CH23-COO-、CH32N-CH22-NH-COO-、CH32N-CH22-OCO-NH-、またはCH32N-CH23-CCH3=N-O-である化合物。下記の式IA-2の化合物、またはその塩上記の式中、R’は存在しないか、水素またはアルキルであり、R1およびR2はそれぞれ独立して、任意で置換されている炭素数1~4のアルキル、炭素数2~4のアルケニル、炭素数2~4のアルキニル、炭素数3~6のシクロアルキル、炭素数3~6のシクロアルキル炭素数1~4のアルキル、または単環式複素環であるか、R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体になって、任意で置換されている5または6員の複素環を形成し、Rの各存在は独立して、-CR3R4-であり、R3およびR4の各存在は独立して、H、OH、アルキル、アルコキシ、-NH2、アルキルアミノ、またはジアルキルアミノであるか、R3およびR4は、それらが直接結合している炭素原子と一体になって、炭素数3~6のシクロアルキル基を形成し、その際、炭素Cに結合している各鎖中の3個以下のR基はシクロアルキルであり、Qまでの点線は存在しないか、結合であり、Qまでの点線が存在しないときには、Qは存在しないか、-O-、-NH-、-S-、-COO-、-OCO-、-CONR4-、-NR5CO-、-S-S-、-OCOO-、-O-N=CR5-、-CR5=N-O-、-OCONR5-、-NR5CONR5-、-NR5COO-、-COS-、-CSO-、または-CR5=N-O-CO-であるか、Qまでの点線が結合であるときには、bは0であり、Q、およびその点線に隣接する第3炭素Cは、5~10個の環原子を有する置換または非置換の単環または二環式複素環基を形成し、Q3およびQ4はそれぞれ独立して、H、-CR3R4-、アリール、またはコレステロール部分であり、A1、A2、A3、およびA4の各存在は独立して、-CR5R5-CR5=CR5-であり、R5の各存在は独立して、Hまたはアルキルであり、M1およびM2はそれぞれ独立して、-CO-O-、-OCO-、-CR5=N-、-CR5=N-O-、-O-COO-、-CONR5-、-COS-、-CSO-、-OSiR52O-、-COCR3R4COO-、または-OCOCR3R4CO-であり、Zは存在しないか、アルキレン、または-O-POOH-O-であり、Zに結合している各------は任意の結合で、Zが存在しないときには、Q3およびQ4が直接共有結合しないようになっており、aは1、2、3、4、5、または6であり、bは0、1、2、または3であり、d、e、i、j、m、n、q、およびrはそれぞれ独立して、0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10であり、gおよびhはそれぞれ独立して、0、1、または2であり、d3hの和は少なくとも4であり、e3gの和は少なくとも4であり、kおよびlはそれぞれ独立して、0または1であり、その際、kおよびlのうちの少なくとも1つは1であり、oおよびpはそれぞれ独立して、0、1、または2であり、Q3およびQ4はそれぞれ独立して、アスタリスクの付された第3炭素原子から、8個以上の原子の鎖分、離れている。請求項17に記載の化合物であって、R’が存在しないか、アルキルである化合物。請求項17または18に記載の化合物であって、R1およびR2がそれぞれ独立して、炭素数1~4のアルキルである化合物。請求項17~19のいずれか一項に記載の化合物であって、Rの各存在が独立して、-CH2-、または-CHCH3-である化合物。請求項17~20のいずれか一項に記載の化合物であって、Q3およびQ4がそれぞれ独立して、H、アリール、またはコレステロール部分である化合物。請求項17~21のいずれか一項に記載の化合物であって、M1およびM2がそれぞれ--CO-O-である化合物。請求項17~22のいずれか一項に記載の化合物であって、e3gim3oqの和が約8~約20である化合物。請求項17~22のいずれか一項に記載の化合物であって、d3hjn3prの和が約8~約20である化合物。下記の式IBの化合物上記の式中、R1およびR2はそれぞれ独立して、任意で置換されているアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、または複素環であるか、R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体になって、任意で置換されている複素環を形成し、Rの各存在は独立して、-CR3R4-であり、R3およびR4の各存在は独立して、H、OH、アルキル、アルコキシ、-NH2、アルキルアミノ、またはジアルキルアミノであるか1つの好ましい実施形態では、R3およびR4の各存在は独立して、Hまたは炭素数1~4のアルキルである、R3およびR4は、それらが直接結合している炭素原子と一体になって、シクロアルキル基を形成し、その際、炭素Cに結合している各鎖中の3個以下のR基はシクロアルキル例えばシクロプロピルであり、Qは存在しないか、-O-、-NH-、-S-、-COO-、-OCO-、-CONR4-、-NR5CO-、-S-S-、-OCOO-、-O-N=CR5-、-CR5=N-O-、-OCONR5-、-NR5CONR5-、-NR5COO-、-COS-、-CSO-、または-CR5=N-O-CO-であり、aは1、2、3、4、5、または6であり、bは0、1、2、または3であり、R’は存在しないか、水素またはアルキル例えば炭素数1~4のアルキルであり、M1およびM2はそれぞれ独立して生分解性基であり、R9およびR10のそれぞれは独立して、アルキレンまたはアルケニレンであり、R11およびR12のそれぞれは独立して、任意でCOOR13を末端とするアルキルまたはアルケニルであり、その際、各R13は独立してアルキルであり、ただし、R9、M1、およびR11が一体になって、少なくとも8個の炭素原子の長さであることと、R10、M2、およびR12が一体になって、少なくとも8個の炭素原子の長さであることを条件とする。請求項25に記載の化合物であって、R9およびR10がそれぞれ独立して、炭素数4~12のアルキレンまたは炭素数4~12のアルケニレンであり、M1およびM2が-COO-であり、R11およびR12が炭素数4~12のアルキレンまたは炭素数4~12のアルケニレンである化合物。請求項25または26に記載の化合物であって、R9、M1、およびR11が一体になって、12~24個の炭素原子の長さである化合物。請求項25または26に記載の化合物であって、R10、M2、およびR12が一体になって、12~24個の炭素原子の長さである化合物。請求項25~28のいずれか一項に記載の化合物であって、R’R1R2N-Ra-Q-Rb-基がCH32N-CH23-COO-、CH32N-CH22-NH-COO-、CH32N-CH22-OCO-NH-、またはCH32N-CH23-CCH3=N-O-である化合物。下記の式ICの化合物上記の式中、R1およびR2はそれぞれ独立して、任意で置換されているアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、または複素環であるか、R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体になって、任意で置換されている複素環を形成し、Rの各存在は独立して、-CR3R4-であり、R3およびR4の各存在は独立して、H、OH、アルキル、アルコキシ、-NH2、アルキルアミノ、またはジアルキルアミノであるか1つの好ましい実施形態では、R3およびR4の各存在は独立して、Hまたは炭素数1~4のアルキルである、R3およびR4は、それらが直接結合している炭素原子と一体になって、シクロアルキル基を形成し、その際、炭素Cに結合している各鎖中の3個以下のR基はシクロアルキル例えばシクロプロピルであり、Qは存在しないか、-O-、-NH-、-S-、-COO-、-OCO-、-CONR4-、-NR5CO-、-S-S-、-OCOO-、-O-N=CR5-、-CR5=N-O-、-OCONR5-、-NR5CONR5-、-NR5COO-、-COS-、-CSO-、または-CR5=N-O-CO-であり、aは1、2、3、4、5、または6であり、bは0、1、2、または3であり、R’は存在しないか、水素またはアルキル例えば炭素数1~4のアルキルであり、R9およびR10のそれぞれは独立して、その末端が生分解性基で置換されている炭素数12~24のアルキルまたはアルケニルである。請求項30に記載の化合物であって、生分解性基のそれぞれが-COOR13であり、この各R13が独立してアルキルである化合物。請求項30または31に記載の化合物であって、R’R1R2N-Ra-Q-Rb-基がCH32N-CH23-COO-、CH32N-CH22-NH-COO-、CH32N-CH22-OCO-NH-、またはCH32N-CH23-CCH3=N-O-である化合物。下記の式IDの化合物、またはその塩上記の式中、R’は存在しないか、水素またはアルキルであり、R1およびR2はそれぞれ独立して、任意で置換されているアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、または複素環であるか、R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体になって、任意で置換されている複素環を形成し、Rの各存在は独立して、-CR3R4-であり、R3およびR4の各存在は独立して、H、OH、アルキル、アルコキシ、-NH2、アルキルアミノ、またはジアルキルアミノであるか1つの好ましい実施形態では、R3およびR4の各存在は独立して、Hまたはアルキルである、R3およびR4は、それらが直接結合している炭素原子と一体になって、シクロアルキル基を形成し、その際、炭素Cに結合している各鎖中の3個以下のR基はシクロアルキル例えばシクロプロピルであり、Qまでの点線は存在しないか、結合であり、Qまでの点線が存在しないときには、Qは存在しないか、-O-、-NH-、-S-、-COO-、-OCO-、-CONR4-、-NR5CO-、-S-S-、-OCOO-、-O-N=CR5-、-CR5=N-O-、-OCONR5-、-NR5CONR5-、-NR5COO-、-COS-、-CSO-、または-CR5=N-O-CO-であるか、Qまでの点線が結合であるときには、bは0であり、Q、およびその点線に隣接する第3炭素Cは、5~10個の環原子を有する置換または非置換の単環または二環式複素環基を形成し例えば、この複素環基中のヘテロ原子は、OおよびSから選択し、好ましくはOである、Q1およびQ2はそれぞれ独立して、存在しないか、-O-、-S-、-OCO-、-COO-、-SCO-、-COS-、-OCS-、-CSO-、-S-S-、-CONR5-、-NR5CO-、-CSNR5-、-NR5CO-、-NR5CONR5-、または-OCOO-であり、Q3およびQ4はそれぞれ独立して、H、-CR3R4-、アリール、-OH、またはコレステロール部分であり、A1、A2、A3、およびA4の各存在は独立して、-CR5R5-CR5=CR5-であり、R5の各存在は独立して、Hまたはアルキルであり、M1およびM2はそれぞれ独立して、生分解性基例えば-OCO-、-COO-、-SCO-、-COS-、-OCS-、-CSO-、-S-S-、-CR5=N-、-N=CR5-、-CR5=N-O-、-O-N=CR5-、-CONR5-、-NR5CO-、-CSNR5-、-NR5CO-、-NR5CONR5-、-OCOO-、-OSiR52O-、-COCR3R4COO-、または-OCOCR3R4CO-であり、Zは存在しないか、アルキレンまたは-O-POOH-O-であり、Zに結合している各------は任意の結合で、Zが存在しないときには、Q3およびQ4が直接共有結合しないようになっており、aは1、2、3、4、5、または6であり、bは0、1、2、または3であり、c、d、e、f、i、j、m、n、q、およびrはそれぞれ独立して、0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10であり、gおよびhはそれぞれ独立して、0、1、または2であり、kおよびlはそれぞれ独立して、0または1であり、oおよびpはそれぞれ独立して、0、1、または2であり、j上記の化合物は、下記の部分を含まず、この式中、----は任意の結合であり、Q3およびQ4はそれぞれ独立して、アスタリスクの付された第3炭素原子から8個以上の原子の鎖分、離れている。下記の式II~XXIIIの化合物、およびこれらの塩から選択した化合物上記の式中、m、n、o、およびpはそれぞれ個別に1~25であり、ただし、i式II、IV、VI、およびVIIでは、mおよびpのいずれも4以上であること、ii式VIII、X、XII、XIV、XVI、XVIII、XXI、およびXXIIIでは、mが4以上であること、iii式VIII、IX、XII、およびXIIIでは、pが8以上であること、を条件とする化合物。i中心炭素原子と、ii前記中心原子に結合している窒素含有頭部基と、iii前記中心炭素原子に直接結合している2つの疎水性テイル各疎水性テイルは、前記中心炭素原子に結合している炭素数8以上の脂肪族基を含み、この脂肪族基は、a生分解性基に割り込まれて、その生分解性基と前記中心炭素原子との間に、少なくとも4つの炭素原子の鎖が存在するようになっているか、b疎水性テイルの末端に、生分解性基を含むと、を有する化合物。請求項35に記載の化合物であって、生分解性基が、-OCO-、-COO-、-SCO-、-COS-、-OCS-、-CSO-、-S-S-、-CR5=N-、-N=CR5-、-CR5=N-O-、-O-N=CR5-、-CONR5-、-NR5CO-、-CSNR5-、-NR5CO-、-NR5CONR5-、-OCOO-、-OSiR52O-、-COCR3R4COO-、および-OCOCR3R4CO-から選択される化合物。請求項35および36のいずれかに記載の化合物であって、カチオン性脂質の疎水性テイルの1つまたは両方の中の脂肪族基が、少なくとも1つの炭素-炭素二重結合を含む化合物。請求項1~37のいずれかに記載の化合物であって、製薬学的に許容可能な塩の形態である化合物。請求項1~38のいずれかに記載の化合物であって、カチオン性脂質の形態である化合物。中性脂質と、凝集を低減できる脂質と、請求項39に記載のカチオン性脂質とを含む脂質粒子。請求項20に記載の脂質粒子であって、中性脂質が、DSPC、DPPC、POPC、DOPE、またはSMから選択され、凝集を低減できる脂質がPEG脂質であり、ステロールをさらに含む脂質粒子。請求項40および41のいずれか一項に記載の脂質粒子であって、カチオン性脂質が約20および約60のモルパーセントで存在し、中性脂質が約5~約25のモルパーセントで存在し、ステロールが約25~約55のモルパーセントで存在し、PEG脂質がPEG-DMA、PEG-DMG、またはこれらの組み合わせであるとともに、約0.5~約15のモルパーセントで存在する脂質粒子。請求項40~42のいずれかに記載の脂質粒子であって、活性剤をさらに含む脂質粒子。請求項43に記載の脂質粒子であって、活性剤が、プラスミド、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、siRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、マイクロRNA、アンタゴmir、アプタマー、およびリボザイムから選択した核酸である脂質粒子。請求項40~44のいずれか一項に記載の脂質粒子であって、インビボ半減期t1/2が約3時間未満である脂質粒子。請求項40~44のいずれか一項に記載の脂質粒子であって、インビボ半減期t1/2が、生分解性基を含まない同じカチオン性脂質を含む脂質粒子のインビボ半減期の約10未満である脂質粒子。請求項40~46のいずれか一項に記載の脂質粒子と、製薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物。細胞内で標的遺伝子の発現を調節する方法であって、その細胞に、請求項40~46のいずれか一項に記載の脂質粒子を供給することを含む方法。請求項48に記載の方法であって、活性剤が、プラスミド、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、siRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、マイクロRNA、アンタゴmir、アプタマー、およびリボザイムから選択した核酸である方法。被検体におけるポリペプチドの過剰発現によって特徴付けられる疾患または障害を治療する方法であって、被検体に、請求項47に記載の医薬組成物を投与することを含み、その活性剤が、siRNA、マイクロRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチドからなる群から選択した核酸であり、このsiRNA、マイクロRNA、またはアンチセンスオリゴヌクレオチドが、前記ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、またはその相補体に特異的に結合するポリヌクレオチドを含む方法。被検体におけるポリペプチドの過小発現によって特徴付けられる疾患または障害を治療する方法であって、被検体に、請求項47に記載の医薬組成物を投与することを含み、その活性剤が、前記ポリペプチド、またはその機能的変異体もしくは断片をコードするプラスミドである方法。被検体において免疫反応を誘発する方法であって、被検体に、請求項47に記載の医薬組成物を投与することを含み、その活性剤が免疫刺激性オリゴヌクレオチドである方法。請求項52に記載の方法であって、標的遺伝子が、第VII因子、Eg5、PCSK9、TPX2、apoB、SAA、TTR、RSV、RDGFベータ遺伝子、Erb-B遺伝子、Src遺伝子、CRK遺伝子、GRB2遺伝子、RAS遺伝子、MEKK遺伝子、JNK遺伝子、RAF遺伝子、Erk1/2遺伝子、PCNAp21遺伝子、MYB遺伝子、JUN遺伝子、FOS遺伝子、BCL-2遺伝子、サイクリンD遺伝子、VEGF遺伝子、EGFR遺伝子、サイクリンA遺伝子、サイクリンE遺伝子、WNT-1遺伝子、ベータカテニン遺伝子、c-MET遺伝子、PKC遺伝子、NFKB遺伝子、STAT3遺伝子、サーバイビン遺伝子、Her2/Neu遺伝子、SORT1遺伝子、XBP1遺伝子、トポイソメラーゼI遺伝子、トポイソメラーゼIIアルファ遺伝子、p73遺伝子、p21WAF1/CIP1遺伝子、p27KIP1遺伝子、PPM1D遺伝子、RAS遺伝子、カベオリンI遺伝子、MIBI遺伝子、MTAI遺伝子、M68遺伝子、腫瘍抑制遺伝子、およびp53腫瘍抑制遺伝子からなる群から選択される方法。請求項53に記載の方法であって、標的遺伝子が1つ以上の突然変異を含む方法。核酸分子を送達する方法であって、その核酸分子とカチオン性脂質とを含む核脂質粒子であって、そのカチオン性脂質が、i中心炭素原子と、ii前記中心原子に直接結合している窒素含有頭部基と、iii前記中心炭素原子に直接結合している2つの疎水性テイル各疎水性テイルは、前記中心原子に結合している炭素数14以上の脂肪族基を含み、この脂肪族基は、a生分解性基に割り込まれて、その生分解性基と前記中心炭素原子との間に、少なくとも4つの炭素原子の鎖が存在するようになっているか、b疎水性テイルの末端に、生分解性基を含み、前記核酸分子が送達されるまでカチオン性脂質が無傷のままであり、送達後、疎水性テイルがインビボで切断されるようになっていると、を有する核脂質粒子を投与することを含む方法。本発明は、そのカチオン性脂質の脂質部分例えば疎水性鎖の中心部分または遠位部分に位置する1つ以上の生分解性基を有するカチオン性脂質に関する。これらのカチオン性脂質は、核酸例えばsiRNAのような活性剤を送達するための脂質粒子に組み込んでよい。生分解性基1つまたは複数をカチオン性脂質に組み込むと、代謝が加速し、身体からカチオン性脂質が除去された後、活性剤が標的区域に送達される。その結果、上記のカチオン性脂質の毒性は、生分解性基を含まない類似のカチオン性脂質よりも実質的に低い。1つの実施形態では、カチオン性脂質は、下記の式の化合物、またはその塩例えばその製薬学的に許容可能な塩であり、上記の式中、R’は存在しないか、水素またはアルキル例えば炭素数1~4のアルキルであり、R1およびR2に関しては、iR1およびR2はそれぞれ独立して、任意で置換されているアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、または複素環であるか、iiR1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体になって、任意で置換されている複素環を形成するか、iiiR1およびR2のうちの一方は、任意で置換されているアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、または複素環であり、もう一方は、a隣接する窒素原子、およびbその窒素原子に隣接するRa基とともに、4~10員の複素環またはヘテロアリール例えば6員環を形成し、Rの各存在は独立して、-CR3R4-であり、R3およびR4の各存在は独立して、H、OH、アルキル、アルコキシ、-NH2、アルキルアミノ、またはジアルキルアミノであるか1つの好ましい実施形態では、R3およびR4の各存在は独立して、Hまたは炭素数1~4のアルキルである、R3およびR4は、それらが直接結合している炭素原子と一体になって、シクロアルキル基を形成し、その際、炭素Cに結合している各鎖中の3個以下のR基はシクロアルキル例えばシクロプロピルであり、Qまでの点線は存在しないか、または結合であり、Qまでの点線が存在しないときには、Qは存在しないか、-O-、-NH-、-S-、-COO-、-OCO-、-CONR4-、-NR5CO-、-S-S-、-OCOO-、-O-N=CR5-、-CR5=N-O-、-OCONR5-、-NR5CONR5-、-NR5COO-、-COS-、-CSO-、または-CR5=N-O-CO-であるか、Qまでの点線が結合のときには、ibは0であり、iiQ、およびその点線に隣接する第3炭素Cは、5~10個の環原子を有する置換または非置換の単環または二環式複素環基を形成し例えば、この複素環基中のヘテロ原子は、OおよびSから選択し、好ましくはOである、Q1およびQ2はそれぞれ独立して、存在しないか、-O-、-S-、-OCO-、-COO-、-SCO-、-COS-、-OCS-、-CSO-、-S-S-、-CONR5-、-NR5CO-、-CSNR5-、-NR5CO-、-NR5CONR5-、または-OCOO-であり、Q3およびQ4はそれぞれ独立して、H、-CR3R4-、アリール、またはコレステロール部分であり、A1、A2、A3、およびA4の各存在は独立して、-CR5R5-CR5=CR5-であり、R5の各存在は独立して、Hまたはアルキルであり、M1およびM2はそれぞれ独立して、生分解性基例えば、-OCO-、-COO-、-SCO-、-COS-、-OCS-、-CSO-、-S-S-、-CR5=N-、-N=CR5-、-CR5=N-O-、-O-N=CR5-、-CONR5-、-NR5CO-、-CSNR5-、-NR5CO-、-NR5CONR5-、-OCOO-、-OSiR52O-、-COCR3R4CO-、または-OCOCR3R4CO-であり、Zは存在しないか、アルキレン、または-O-POOH-O-であり、Zに結合している各------は任意の結合で、Zが存在しないときには、Q3およびQ4が直接共有結合しないようになっており、aは1、2、3、4、5、または6であり、bは0、1、2、または3であり、c、d、e、f、i、j、m、n、q、およびrはそれぞれ独立して、0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10であり、gおよびhはそれぞれ独立して、0、1、または2であり、kおよびlはそれぞれ独立して0または1であり、kおよびlのうちの少なくとも1つは1であり、oおよびpはそれぞれ独立して、0、1、または2であり、i上記の化合物は、下記の部分を含まず、この式中、----は任意の結合であり、iiQ3およびQ4はそれぞれ独立して、アスタリスクの付された第3炭素原子から8個以上の原子例えば12または14個以上の原子の鎖分、離れている。1つの実施形態では、iR1およびR2はそれぞれ独立して、任意で置換されているアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、または複素環であるか、iiR1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体になって、任意で置換されている複素環を形成する。式Iの化合物の好ましい実施形態では、aQ1が生分解性基例えば-COO-であるときには、cは少なくとも4であり、bQ2が生分解性基であるときには、dは少なくとも4であり、cQ3およびQ4はそれぞれ独立して、アスタリスクの付された第3炭素原子から10個以上の原子例えば12または14個以上の原子の鎖分、離れている。別の好ましい実施形態では、式Iにおいて生分解性基例えば-COO-に結合している炭素原子αまたはβは、1つまたは2つのアルキル基例えば、-CH3置換基のような1つの炭素数1~4のアルキル基、または、2つの-CH3置換基のような2つの炭素数1~4のアルキル基で置換されていても、スピロ環基例えば、炭素数3のシクロアルキルのような炭素数3~5のシクロアルキルを有してもよい。例えば、生分解性基に結合している炭素原子αまたはβは独立して、下記から選択できる。式中、nは4~6である。1つの実施形態では、M1またはM2基、および隣接する可変基1つまたは複数は、下記の基を形成する。式中、nは4~6である。さらに別の実施形態は、下記の式のカチオン性脂質、またはその塩例えばその製薬学的に許容可能な塩であり、上記の式中、R1、R2、R、a、およびbは、式Iに関しての定義と同じであり、Qは存在しないか、-O-、-NH-、-S-、-COO-、-OCO-、-CONR4-、-NR5CO-、-S-S-、-OCOO-、-O-N=CR5-、-CR5=N-O-、-OCONR5-、-NR5CONR5-、-NR5COO-、-COS-、-CSO-、または-CR5=N-O-CO-であり、R’は存在しないか、水素またはアルキル例えば炭素数1~4のアルキルであり、R9およびR10のそれぞれは独立して、1つ以上の生分解性基を有する炭素数12~24のアルキル例えば炭素数12~20のアルキル、炭素数12~24のアルケニル例えば炭素数12~20のアルケニル、または炭素数12~24のアルコキシ例えば炭素数12~20のアルコキシであり、各生分解性基は独立して、上記の炭素数12~24のアルキル基、アルケニル基、またはアルコキシ基に割り込んでいるか、上記の炭素数12~24のアルキル基、アルケニル基、またはアルコキシ基の末端で置換されており、i上記の化合物は、下記の部分を含まず、この式中、----は任意の結合であり、iiR9およびR10の末端は、アスタリスクの付された第3炭素原子から8個以上の原子例えば12または14個以上の原子の鎖分、離れている。別の実施形態では、カチオン性脂質は、下記の式の化合物、またはその塩例えばその製薬学的に許容可能な塩であり、上記の式中、R’は存在しないか、水素またはアルキル例えば炭素数1~4のアルキルであり、R1およびR2はそれぞれ独立して、任意で置換されている炭素数1~4のアルキル、炭素数2~4のアルケニル、炭素数2~4のアルキニル、炭素数3~6のシクロアルキル、炭素数3~6のシクロアルキル炭素数1~4のアルキル、または単環式複素環であるか、R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体になって、任意で置換されている5または6員の複素環例えば炭素数5または6の複素環を形成し、Rの各存在は独立して、-CR3R4-であり、R3およびR4の各存在は独立して、H、OH、アルキル、アルコキシ、-NH2、アルキルアミノ、またはジアルキルアミノであるか1つの好ましい実施形態では、R3およびR4の各存在は独立して、Hまたは炭素数1~4のアルキルである、R3およびR4は、それらが直接結合している炭素原子と一体になって、炭素数3~6のシクロアルキル基を形成し、その際、炭素Cに結合している各鎖中の3個以下のR基は、シクロアルキル例えばシクロプロピルであり、Qまでの点線は存在しないか、または結合であり、Qまでの点線が存在しないときには、Qは存在しないか、-O-、-NH-、-S-、-COO-、-OCO-、-CONR4-、-NR5CO-、-S-S-、-OCOO-、-O-N=CR5-、-CR5=N-O-、-OCONR5-、-NR5CONR5-、-NR5COO-、COS-、-CSO-、または-CR5=N-O-CO-であるか、Qまでの点線が結合であるときには、bは0であり、Q、およびその点線に隣接する第3炭素Cは、5~10個の環原子を有する置換または非置換の単環または二環式複素環基例えば、この複素環基中のヘテロ原子は、OおよびSから選択し、好ましくはOであるを形成し、Q3およびQ4はそれぞれ独立して、H、-CR3R4-、アリール、またはコレステロール部分であり、A1、A2、A3、およびA4の各存在は独立して、-CR5R5-CR5=CR5-であり、R5の各存在は独立して、Hまたはアルキルであり、M1およびM2はそれぞれ独立して、-COO-、-OCO-、-CR5=N-、-CR5=N-O-、-O-COO-、-CONR5-、-COS-、-CSO-、-OSiR52O-、-COCR3R4COO-、または-OCOCR3R4CO-であり、Zは存在しないか、アルキレン、または-O-POOH-O-であり、Zに結合している各------は任意の結合で、Zが存在しないときには、Q3およびQ4が直接共有結合しないようになっており、aは1、2、3、4、5、または6であり、bは0、1、2、または3であり、d、e、i、j、m、n、q、およびrはそれぞれ独立して、0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10であり、gおよびhはそれぞれ独立して、0、1、または2であり、d3hの和は少なくとも4であり、e3gの和は少なくとも4であり、kおよびlはそれぞれ独立して、0または1であり、kおよびlのうちの少なくとも1つは1であり、oおよびpはそれぞれ独立して、0、1、または2であり、Q3およびQ4はそれぞれ独立して、アスタリスクの付された第3炭素原子から8個以上の原子例えば12または14個以上の原子の鎖分、離れている。1つの実施形態では、式IA-2のR’は存在しないか、水素である。1つの実施形態では、式IA-2中のR’は存在しないか、アルキル例えばメチルである。1つの実施形態では、式IA-2のR1およびR2はそれぞれ独立して、炭素数1~4のアルキル例えばメチルまたはエチルである。1つの実施形態では、式IA-2のRの各存在は独立して、-CH2-、または-CHCH3-である。1つの実施形態では、式IA-2のQ3およびQ4はそれぞれ独立して、H、アリール、またはコレステロール部分である。1つの実施形態では、式IA-2のA1、A2、A3、およびA4の各存在は独立して、-CH2-CH=CH-である。1つの実施形態では、式IA-2のM1およびM2はそれぞれ-CO-O-である。式IA-2の化合物の1つの実施形態では、Zは存在せず、各------は存在しないすなわち、Q3およびQ4は直接共有結合していない。1つの実施形態では、式IA-2のe3gim3oqの和は、約8~約20である。別の実施形態では、式IA-2のe3gim3oqの和は、約12~約20である。1つの実施形態では、式IA-2のd3hjn3prの和は、約8~約20である。別の実施形態では、式IA-2のd3hjn3prの和は、約12~約20である。別の実施形態では、カチオン性脂質は、下記の式の化合物であり、上記の式中、R1、R2、R、a、b、M1、およびM2は、式Iに関しての定義と同じであり、Qは存在しないか、-O-、-NH-、-S-、-COO-、-OCO-、-CONR4-、-NR5CO-、-S-S-、-OCOO-、-O-N=CR5-、-CR5=N-O-、-OCONR5-、-NR5CONR5-、-NR5COO-、COS-、-CSO-、または-CR5=N-O-CO-であり、R’は存在しないか、水素またはアルキル例えば炭素数1~4のアルキルであり、R9およびR10のそれぞれは独立して、アルキレンまたはアルケニレンであり、R11およびR12のそれぞれは独立して、任意でCOOR13を末端とするアルキルまたはアルケニルであり、その際、各R13は独立して、アルキル例えば、メチルまたはエチルのような炭素数1~4のアルキルであり、R9、M1、およびR11は一体になって、少なくとも8個の炭素原子の長さ例えば12または14個の炭素原子、またはそれを超える長さであり、R10、M2、およびR12は一体になって、少なくとも8個の炭素原子の長さ例えば12または14個の炭素原子、またはそれを超える長さである。式IBの化合物の好ましい実施形態では、R9およびR10はそれぞれ独立して、炭素数4~12のアルキレン、または炭素数4~12のアルケニレンであり、M1およびM2は-COO-であり、R11およびR12は、炭素数4~12のアルキレン、または炭素数4~12のアルケニレンである。1つの実施形態では、R9、M1、およびR11は一体になって、12~24個の炭素原子の長さである。別の実施形態では、R9、M1、およびR11は一体になって、14~18個の炭素原子の長さである。1つの実施形態では、R10、M2、およびR12は一体になって、12~24個の炭素原子の長さである。別の実施形態では、R10、M2、およびR12は一体になって、14~18個の炭素原子の長さである。R’R1R2N-Ra-Q-Rb-基は、後掲の表1に示されている頭部基を含め、本明細書に記載されている頭部基、およびそれらの塩のいずれであることもできる。1つの好ましい実施形態では、R’R1R2N-Ra-Q-Rb-は、CH32N-CH23-COO-、CH32N-CH22-NH-COO-、CH32N-CH22-OCO-NH-、またはCH32N-CH23-CCH3=N-O-である。さらに別の実施形態では、本発明のカチオン性脂質は、下記の式の化合物であり、上記の式中、R1、R2、R、a、およびbは、式Iに関しての定義と同じであり、Qは存在しないか、-O-、-NH-、-S-、-COO-、-OCO-、-CONR4-、-NR5CO-、-S-S-、-OCOO-、-O-N=CR5-、-CR5=N-O-、-OCONR5-、-NR5CONR5-、-NR5COO-、-COS-、-CSO-、または-CR5=N-O-CO-であり、R’は存在しないか、水素またはアルキル例えば炭素数1~4のアルキルであり、R9およびR10のそれぞれは独立して、その末端が-COOR13のような生分解性基で置換されている炭素数12~24のアルキルまたはアルケニルであり、各R13は独立して、アルキル好ましくは、メチルまたはエチルのような炭素数1~4のアルキルである。式ICの化合物の好ましい実施形態では、R9およびR10はそれぞれ独立して、炭素数14~18のアルキレン、または炭素数14~18のアルケニレンである。別の好ましい実施形態では、上記の生分解性基は-COOR13であり、R13は炭素数1~4のアルキルメチルまたはエチルなどである。R’R1R2N-Ra-Q-Rb-基は、後掲の表1に示されている頭部基を含め、本明細書に記載されている頭部基のいずれであることもできる。1つの好ましい実施形態では、R’R1R2N-Ra-Q-Rb-は、CH32N-CH23-COO-、CH32N-CH22-NH-COO-、CH32N-CH22-OCO-NH-、またはCH32N-CH23-CCH3=N-O-である。さらに別の実施形態は、下記の式の中間体、またはその塩例えばその製薬学的に許容可能な塩であり、上記の式中、R’は存在しないか、水素またはアルキル例えば炭素数1~4のアルキルであり、R1およびR2はそれぞれ独立して、任意で置換されているアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、または複素環であるか、R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体になって、任意で置換されている複素環を形成し、Rの各存在は独立して、-CR3R4-であり、R3およびR4の各存在は独立して、H、OH、アルキル、アルコキシ、-NH2、アルキルアミノ、またはジアルキルアミノであるか1つの好ましい実施形態では、R3およびR4の各存在は独立してHまたはアルキルであるか、R3およびR4は、それらが直接結合している炭素原子と一体になって、シクロアルキル基を形成し、その際、炭素Cに結合している各鎖中の3個以下のR基は、シクロアルキル例えばシクロプロピルであり、Qまでの点線は存在しないか、または結合であり、Qまでの点線が存在しないときには、Qは存在しないか、-O-、-NH-、-S-、-COO-、-OCO-、-CONR4-、-NR5CO-、-S-S-、-OCOO-、-O-N=CR5-、-CR5=N-O-、-OCONR5-、-NR5CONR5-、-NR5COO-、-COS-、-CSO-、または-CR5=N-O-CO-であるか、Qまでの点線が結合であるときには、bは0であり、Q、およびその点線に隣接する第3炭素Cは、5~10個の環原子を有する置換または非置換の単環または二環式複素環基を形成し例えば、この複素環基中のヘテロ原子は、OおよびSから選択し、好ましくはOである、Q1およびQ2はそれぞれ独立して、存在しないか、-O-、-S-、-OCO-、-COO-、-SCO-、-COS-、-OCS-、-CSO-、-S-S-、-CONR5-、-NR5CO-、-CSNR5-、-NR5CO-、-NR5CONR5-、または-OCOO-であり、Q3およびQ4はそれぞれ独立して、H、-CR3R4-、アリール、-OH、またはコレステロール部分であり、A1、A2、A3、およびA4の各存在は独立して、-CR5R5-CR5=CR5-であり、R5の各存在は独立して、Hまたはアルキルであり、M1およびM2はそれぞれ独立して、生分解性基例えば、-OCO-、-COO-、-SCO-、-COS-、-OCS-、-CSO-、-S-S-、-CR5=N-、-N=CR5-、-CR5=N-O-、-O-N=CR5-、-CONR5-、-NR5CO-、-CSNR5-、-NR5CO-、-NR5CONR5-、-OCOO-、-OSiR52O-、-COCR3R4COO-、または-OCOCR3R4CO-であり、Zは存在しないか、アルキレン、または-O-POOH-O-であり、Zに結合している各------は任意の結合で、Zが存在しないときには、Q3およびQ4が直接共有結合しないようになっており、aは1、2、3、4、5、または6であり、bは0、1、2、または3であり、c、d、e、f、i、j、m、n、q、およびrはそれぞれ独立して、0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10であり、gおよびhはそれぞれ独立して、0、1、または2であり、kおよびlはそれぞれ独立して、0または1であり、oおよびpはそれぞれ独立して、0、1、または2であり、i上記の化合物は、下記の部分を含まず、この式中、----は任意の結合であり、iiQ3およびQ4はそれぞれ独立して、アスタリスクの付された第3炭素原子から8個以上の原子例えば12または14個以上の原子の鎖分、離れている。さらなる実施形態では、カチオン性脂質は、下記の式IEの化合物、またはその塩例えばその製薬学的に許容可能な塩であり、上記の式中、R1は、-L1a-CR1aR1bα-[L1b-CR1aR1bβ]γ-L1c-R1cという式を有する炭素数10~30の基であり、この式中、L1aは結合、-CR1aR1b-、-O-、-CO-、-NR1d-、-S-、またはこれらの組み合わせであり、各R1aおよび各R1bは独立して、Hか、ハロか、ヒドロキシか、シアノか、ハロ、ヒドロキシ、もしくはアルコキシによって任意で置換されている炭素数1~6のアルキルか、ハロ、ヒドロキシ、もしくはアルコキシによって任意で置換されている炭素数3~8のシクロアルキルか、-OR1cか、-NR1cR1dか、アリールか、ヘテロアリールか、またはヘテロシクリルであり、各L1bは独立して、結合、-CR1aR1b1-2-、-O-、-CO-、-NR1d-、-S-、またはこれらの組み合わせであるか、下記の式を有することができ、この式中、j、k、およびlはそれぞれ独立して、0、1、2、または3でありただし、j、k、およびlの和が少なくとも1、かつ8以下であることを条件とする、R1fおよびR1gはそれぞれ独立して、R1bであるか、隣接するR1fおよびR1gは一体になって、任意で結合であるか、下記の式を有することができ、この式中、jおよびkはそれぞれ独立して、0、1、2、3、または4でありただし、jおよびkの和が少なくとも1であることを条件とする、R1fおよびR1gはそれぞれ独立して、R1bであるか、隣接するR1fおよびR1gは一体になって、任意で結合であるか、下記の式を有することができ、この式中、-Ar-は、0~6個の独立したR1a基によって任意で置換されている6~14員のアリーレン基であるか、下記の式を有することができ、この式中、-Het-は、0~6個の独立したR1a基によって任意で置換されている3~14員のヘテロシクリレンまたはヘテロアリーレン基であり、L1cは、-CR1aR1b1-2-、-O-、-CO-、-NR1d-、-S-、またはこれらの組み合わせであり、R1cはHか、ハロか、ヒドロキシか、シアノか、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、もしくはアリールによって任意で置換されている炭素数1~6のアルキルか、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、もしくはアリールによって任意で置換されている炭素数3~8のシクロアルキルか、アリールか、ヘテロアリールか、またはヘテロシクリルであるか、R1cは、下記の式を有し、R1dはHか、ハロか、ヒドロキシか、シアノか、ハロ、ヒドロキシ、もしくはアルコキシによって任意で置換されている炭素数1~6のアルキルか、ハロ、ヒドロキシ、もしくはアルコキシによって任意で置換されている炭素数3~8のシクロアルキルか、アリールか、ヘテロアリールか、またはヘテロシクリルであり、αは0以上6以下であり、各βは独立して、0以上6以下であり、γは0以上6以下であり、R2は、-L2a-CR2aR2bδ-[L2b-CR2aR2bεζ-L2c-R2cという式を有する炭素数10~30の基であり、この式中、L2aは結合、-CR2aR2b-、-O-、-CO-、-NR2d-、-S-、またはこれらの組み合わせであり、各R2aおよび各R2bは独立して、Hか、ハロか、ヒドロキシか、シアノか、ハロ、ヒドロキシ、もしくはアルコキシによって任意で置換されている炭素数1~6のアルキルか、ハロ、ヒドロキシ、もしくはアルコキシによって任意で置換されている炭素数3~8のシクロアルキルか、-OR2cか、-NR2cR2dか、アリールか、ヘテロアリールか、またはヘテロシクリルであることができ、各L2bは独立して、結合、-CR2aR2b1-2-、-O-、-CO-、-NR2d-、-S-、またはこれらの組み合わせであることができるか、下記の式を有することができ、この式中、j、k、およびlはそれぞれ独立して、0、1、2、または3でありただし、j、k、およびlの和が少なくとも1、かつ8以下であることを条件とする、R2fおよびR2gはそれぞれ独立して、R2bであるか、隣接するR2fおよびR2gは一体になって、任意で結合であるか、下記の式を有することができ、この式中、jおよびkはそれぞれ独立して、0、1、2、3、または4でありただし、jおよびkの和が少なくとも1であることを条件とする、R2fおよびR2gはそれぞれ独立して、R2bであるか、隣接するR2fおよびR2gは一体になって、任意で結合であるか、下記の式を有することができ、この式中、-Ar-は、0~6個の独立したR2a基によって任意で置換されている6~14員のアリーレン基であるか、下記の式を有することができ、この式中、-Het-は、0~6個の独立したR2a基によって任意で置換されている3~14員のヘテロシクリレンまたはヘテロアリーレン基であり、L2cは、-CR2aR2b1-2-、-O-、-CO-、-NR2d-、-S-、またはこれらの組み合わせであり、R2cはHか、ハロか、ヒドロキシか、シアノか、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、もしくはアリールによって任意で置換されている炭素数1~6のアルキルか、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、もしくはアリールによって任意で置換されている炭素数3~8のシクロアルキルか、アリールか、ヘテロアリールか、またはヘテロシクリルであるか、R2cは下記の式を有し、R2dはHか、ハロか、ヒドロキシか、シアノか、ハロ、ヒドロキシ、もしくはアルコキシによって任意で置換されている炭素数1~6のアルキルか、ハロ、ヒドロキシ、もしくはアルコキシによって任意で置換されている炭素数3~8のシクロアルキルか、アリールか、ヘテロアリールか、またはヘテロシクリルであり、δは0以上6以下であり、各εは独立して、0以上6以下であり、ζは0以上6以下であり、L1はCRa、-CR5R6xCRa-、またはPQ2であり、RaはH、アルキル、アルコキシ、-OH、-NQQ、または-SQであり、L2は-CR5R6x-、-CO-CR5R6x-、-CR5R6x-CO-、-CR5R6x-CR5=CR5-CR5R6y-、-CO-CR5R6x-CR5=CR5-CR5R6y-、-CR5R6x-CR5=CR5-CR5R6y-CO-、-O-、-S-、-NQ-、-COO-、-OCO-、-CO-、-NQCO-、-CONQ-、-NQCOO-、-OCONQ-、SO、-NQSO2NQ-、-SO2-、-NQSO2、-SS-、-O-N=、=N-O-、-CO-NQ-N=、-NQ-N=、-NQ-O-、-COS-、アリーレン、ヘテロアリーレン、シクロアルキレン、またはヘテロシクリレンであり、各xは独立して、0以上6以下であることができ、各yは独立して、0以上6以下であることができ、R3は下記の式の基であり、Y1はアルキル、シクロアルキル、アリール、アラルキル、またはアルキニルであり、Y1は、0~6個の独立したRnによって任意で置換されており、Y2はアルキル、シクロアルキル、アリール、アラルキル、またはアルキニルであり、Y2は、0~6個の独立したRnによって任意で置換されており、Y3は存在しないか、存在する場合には、アルキル、シクロアルキル、アリール、アラルキル、またはアルキニルであり、Y3は、0~6個の独立したRnによって任意で置換されており、Y4は存在しないか、存在する場合には、アルキル、シクロアルキル、アリール、アラルキル、またはアルキニルであり、Y4は、0~6個の独立したRnによって任意で置換されているか、Y1、Y2、およびY3のうちのいずれか2つは、それらが結合しているN原子と一体になって、0~6個の独立したRnによって任意で置換されている3~8員の複素環を形成するか、Y1、Y2、およびY3のすべてが、それらが結合しているN原子と一体になって、0~6個の独立したRnによって任意で置換されている二環式の5~12員の複素環を形成し、各Rnは独立して、H、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、アルキル、アルコキシ、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルであることができ、L3は結合、-NQ-、-O-、-S-、-CR7R8a-、-CO-、またはこれらのうちのいずれか2つの組み合わせであり、L4は結合、-NQ-、-O-、-S-、-CR7R8a-、-CO-、またはこれらのうちのいずれか2つの組み合わせであり、L4は結合、-NQ-、-O-、-S-、-CR7R8a-、-CO-、またはこれらのうちのいずれか2つの組み合わせであり、R7およびR8の各存在は独立して、H、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、アルキル、アルコキシ、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルであるか、隣接する炭素原子上の2つのR7基は一体になって、それぞれの炭素原子間で二重結合を形成できるか、隣接する炭素原子上の2つのR7基、および同じ隣接する炭素原子上の2つのR8基は一体になって、それぞれの炭素原子間で三重結合を形成できるか、L3、L4、またはL5のいずれかのR7またはR8置換基は任意で、L3、L4、またはL5のいずれかのR7またはR8置換基と一体になって、3~8員のシクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、またはヘテロアリール基を形成できるか、Y1、Y2、またはY3のいずれか1つは任意で、L3、L4、およびL5のいずれかのR7またはR8基、ならびに、それらが結合している原子と一体になって、3~8員のヘテロシクリル基を形成でき、各aは独立して、0、1、2、または3であることができ、R5およびR6の各存在は独立して、H、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、アミノ、アルキル、アルコキシ、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルであることができ、各Qは独立して、H、アルキル、アシル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルであり、各Q2は独立して、O、S、NQQ、アルキル、またはアルコキシである。いくつかの実施形態では、L1は-CR5R6xCRa-であることができるか、L1は-CH2CRa-であることができる。L2は-COO-、-OCO-、-NQCO-、-CONQ-、-NQCOO-、-OCONQ-、-SS-、-O-N=、または=N-O-であることができる。L2は-COO-、-OCO-、-SS-、または=N-O-であることができる。いくつかの実施形態では、-L1a-CR1aR1bαは-CH28-であることができる。-L2a-CR2aR2bδは-CH28-であることができる。L1b-CR1aR1bβはCH2CH2CH2、CH=CH-CH2、またはであることができ、βは1、2、または3である。L2b-CR2aR2bεはCH2CH2CH2、CH=CH-CH2、またはであることができ、εは1、2、または3である。式IEの化合物の1つの実施形態では、その化合物に存在する少なくとも1つのL1a、L1b、L1c、L2a、L2b、またはL2cは、エステル-COO-、-OCO-、ジスルフィド-S-S-、-CR5=N-、-O-COO-、-CONR5、-NR5CO-、-NR5CONR5-、-COS-、-SCO-、-COCR1aR1bCOO-、または-OCOCR1aR1bCO-のような生分解性基である。式IEの化合物の別の実施形態では、その化合物に存在する少なくとも1つのL1a、L1b、およびL1cは生分解性基であり、化合物に存在する少なくとも1つのL2a、L2b、またはL2cは生分解性基上述の生分解性基などである。式IEの化合物のさらに別の実施形態では、R1のαは少なくとも4であり、R2のδは少なくとも4であり、化合物に存在する少なくとも1つのL1a、L1b、およびL1cは生分解性基であり、化合物に存在する少なくとも1つのL2a、L2b、またはL2cは生分解性基上述の生分解性基などである。別の実施形態では、R1および/またはR2の炭素鎖は飽和している。さらに別の実施形態では、R1および/またはR2の炭素鎖は、1つまたは2つの二重結合を含む。さらに別の実施形態では、カチオン性脂質は、下記の式II~XXIIIの化合物から選択した化合物、およびそれらの塩例えばそれらの製薬学的に許容可能な塩であり、上記の式中、m、n、o、およびpはそれぞれ個別に1~25であり、ただし、i式II、IV、VI、およびVIIでは、mおよびpがいずれも4以上であること、ii式VIII、X、XII、XIV、XVI、XVIII、XXI、およびXXIIIでは、mが4以上であること、iii式VIII、IX、XII、およびXIIIでは、pが8以上例えば12もしくは14、またはそれらを超える値であることを条件とする。別の実施形態では、本発明は、i中心炭素原子と、ii上記の中心炭素原子に直接結合している窒素含有頭部基と、iii上記の中心炭素原子に直接結合している2つの疎水性テイル各疎水性テイルは、上記の中心炭素原子に結合している炭素数8以上の脂肪族基好ましくは炭素数14以上の脂肪族基を含み、この脂肪族基の1つまたは両方は、a生分解性基に割り込まれて、その生分解性基と上記の中心炭素原子との間に、少なくとも4つの炭素原子の鎖が存在するようになっているか、b疎水性テイルの末端に、生分解性基を含むと、を有するカチオン性脂質またはその塩に関する。例えば、上記の生分解性基は、-OCO-、-COO-、-SCO-、-COS-、-OCS-、-CSO-、-S-S-、-CONR5-、-NR5CO-、-CSNR5-、-NR5CO-、-NR5CONR5-、および-OCOO-から選択する。さらに別の実施形態は、本発明のカチオン性脂質を含む脂質粒子である。1つの実施形態では、この脂質粒子は、本明細書に記載されているような式II~XXIIIのいずれかの化合物を含む。別の実施形態では、上記の脂質粒子は、本明細書に記載されているような式Iの化合物を含む。別の実施形態では、上記の脂質粒子は、本明細書に記載されているような式IA-1、IA-2、IB、IC、ID、またはIEの化合物を含む。好ましい実施形態では、上記の脂質粒子は、中性脂質と、凝集を低減できる脂質できる脂質と、カチオン性脂質と、任意でステロール例えばコレステロールとを含む。好適な中性脂質としては、ジステアロイルホスファチジルコリンDSPC、ジパルミトイルホスファチジルコリンDPPC、POPC、DOPE、およびSMが挙げられるが、これらに限らない。凝集を低減できる好適な脂質としては、PEG-DMA、PEG-DMG、またはこれらの組み合わせのようなPEG脂質が挙げられるが、これらに限らない。上記の脂質粒子は、活性剤例えば治療剤をさらに含んでもよい。この活性剤は、プラスミド、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、siRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、マイクロRNA、アンタゴmir、アプタマー、またはリボザイムのような核酸であることができる。別の実施形態では、上記の脂質粒子は、本発明のカチオン性脂質と、中性脂質と、ステロールとを含む。上記の脂質粒子は、核酸のような活性剤をさらに含んでもよい。本発明のさらに別の実施形態は、本発明の脂質粒子と、製薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物である。さらに別の実施形態は、被検体において核酸分子を送達する方法であって、その核酸分子とカチオン性脂質またはその塩とを含む脂質粒子を被検体に投与することを含み、上記のカチオン性脂質が、i中心炭素原子と、ii上記の中心炭素原子に直接結合している窒素含有頭部基と、iii上記の中心炭素原子に直接結合している2つの疎水性テイル各疎水性テイルは、上記の中心炭素原子に結合している炭素数8以上の脂肪族基好ましくは炭素数14以上の脂肪族基を含み、この脂肪族基の1つまたは両方は、a生分解性基に割り込まれて、その生分解性基と上記の中心炭素原子との間に、少なくとも4つの炭素原子の鎖が存在するようになっているか、b疎水性テイルの末端に、生分解性基を含むとを有する方法である。1つの実施形態では、上記のカチオン性脂質は、核酸分子が送達されるまで無傷のままであり、送達後、疎水性テイルがインビボで切断される。さらに別の態様は、細胞に本発明の脂質粒子を供給することによって、その細胞内で標的遺伝子の発現を調節する方法である。活性剤は、プラスミド、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、siRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、マイクロRNA、アンタゴmir、アプタマー、およびリボザイムから選択した核酸であることができる。さらに別の態様は、被検体に本発明の医薬組成物を投与することによって、その被検体におけるポリペプチドの過剰発現によって特徴付けられる疾患または障害を治療する方法であり、その活性剤は、siRNA、マイクロRNA、およびアンチセンスオリゴヌクレオチドから選択した核酸であり、このsiRNA、マイクロRNA、またはアンチセンスオリゴヌクレオチドは、上記のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、またはその相補体に特異的に結合するポリヌクレオチドを含む。さらに別の態様は、被検体に本発明の医薬組成物を投与することによって、被検体におけるポリペプチドの過小発現によって特徴付けられる疾患または障害を治療する方法であり、その活性剤は、上記のポリペプチド、またはその機能的変異体もしくは断片をコードするプラスミドである。さらに別の態様は、被検体に医薬組成物を投与することによって、被検体において免疫反応を誘発する方法であり、その活性剤は免疫刺激性オリゴヌクレオチドである。さらに別の態様は、上記の組成物または脂質粒子を含む転写剤であり、その組成物または脂質粒子は核酸を含む。この転写剤は、細胞と接触させると、核酸をその細胞に効率的に送達できる。さらに別の態様は、上記の組成物または脂質粒子を得るか、または形成するかして、その組成物または脂質粒子を細胞と接触させることによって、核酸を細胞の内部に送達する方法である。その他の特徴および態様は、本明細書および特許請求の範囲から明らかであろう。1つの態様では、本発明は、中性脂質と、凝集を低減できる脂質と、カチオン性脂質と、任意でステロールとを含む脂質粒子に関する。特定の実施形態では、この脂質粒子は、活性剤例えば治療剤をさらに含む。これらの脂質、脂質粒子、およびそれらを含む組成物、ならびに、治療剤を送達する目的、遺伝子およびタンパクの発現を調節する目的でそれらを用いることのさまざまな例示的な実施形態について、以下でさらに詳細に説明する。カチオン性脂質1つの実施形態では、カチオン性脂質は、式I~XXIIIの化合物である。別の実施形態では、カチオン性脂質は、式II~XXIIIのうちの1つの化合物である。1つの実施形態では、カチオン性脂質は式Iの化合物である。別の実施形態では、カチオン性脂質は、式IA-1、IA-2、IB、IC、またはIDの化合物である。下記の開示内容は、式Iの化合物のさまざまな実施形態を表している。1つの実施形態では、M1およびM2はそれぞれ独立して、-OCO-、-COO-、-SCO-、-COS-、-OCS-、-CSO-、-S-S-、-CR5=N-、-N=CR5-、-CR5=N-O-、-O-N=CR5-、-CONR5-、-NR5CO-、-CSNR5-、-NR5CO-、-NR5CONR5-、-OCOO-、-OSiR52O-、-COCR3R4COO-、または-OCOCR3R4CO-である。別の実施形態では、M1およびM2はそれぞれ独立して、-OCO-、-CO-O-、-CR5=N-、-N=CR5-、-CR5=N-O-、-O-N=CR5-、-O-COO-、-CONR5-、-NR5CO-、-COS-、-SCO-、-CSO-、-OCS-、-OSiR52O-、-COCR3R4COO-、または-OCOCR3R4CO-である。さらに別の実施形態では、M1およびM2はそれぞれ独立して、-COO-、-OCO-、-CR5=N-、-CR5=N-O-、-O-COO-、-CONR5-、-COS-、-CSO-、-OSiR52O-、-COCR3R4COO-、または-OCOCR3R4CO-である。別の実施形態では、M1およびM2はそれぞれ-COO-である。1つの実施形態では、R1およびR2はそれぞれ個別に、任意で置換されているアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、または複素環である。1つの実施形態では、R1はアルキルであり、R2はアルキル、シクロアルキル、またはシクロアルキルアルキルである。1つの実施形態では、R1およびR2はそれぞれ個別に、アルキル例えば、メチル、エチル、またはイソプロピルのような炭素数1~4のアルキルである。1つの実施形態では、R1およびR2はいずれもメチルである。別の実施形態では、R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体になって、任意で置換されている複素環例えばN-メチルピペラジニルを形成する。別の実施形態では、R1およびR2のうちの1つは、である例えば、R1は、上記の2つの基のうちの1つであり、R2は水素である。1つの実施形態では、R’は水素またはアルキルである。別の実施形態では、R’は水素またはメチルである。1つの実施形態では、R’は存在しない。1つの実施形態では、R’は存在しないか、メチルである。R’が存在しない化合物では、R’が結合している窒素原子は正電荷を有しており、その化合物も負荷電対イオンを含む。この対イオンは、有機または無機アニオンのようないずれかのアニオンであることができる。アニオンの好適な例としては、トシレート、メタンスルホネート、アセテート、シトレート、マロネート、タートレート、サクシネート、ベンゾエート、アスコルベート、α-ケトグルタレート、α-グリセロフォスフェート、ハロゲン化物例えばクロリド、サルフェート、ニトレート、バイカーボネート、およびカーボネートが挙げられるが、これらに限らない。1つの実施形態では、上記の対イオンはハロゲン化物例えばClである。1つの実施形態では、各Rは独立して、-CR3R4-であり、このR3およびR4はそれぞれ独立して、Hまたはアルキル例えば炭素数1~4のアルキルである。例えば、1つの実施形態では、各Rは独立して、-CHR4-であり、この各R4は独立して、Hまたはアルキル例えば炭素数1~4のアルキルである。別の実施形態では、各Rは独立して、-CH2-、-CCH32-、または-CHiPr-iPrはイソプロピルであるである。別の実施形態では、各Rは-CH2-である。別の実施形態では、R5は、各ケースにおいて、水素またはメチルである。例えば、R5は、各ケースにおいて、水素であることができる。1つの実施形態では、Qは存在しないか、-COO-、-OCO-、-CONR4-、-NR5CO-、-S-S-、-OCOO-、-CR5=N-O-、-OCONR5-、-NR5CONR5-、-NR5COO-、COS-、-CSO-、または-CR5=N-O-CO-である。1つの実施形態では、Qは-COO-である。1つの実施形態では、Q1およびQ2はそれぞれ独立して、存在しないか、-O-である。例えば、1つの実施形態では、Q1およびQ2はそれぞれ存在しない。別の実施形態では、Q1およびQ2はそれぞれ-O-である。1つの実施形態では、Qまでの点線は存在せず、bは0であり、R’R1R2N-Ra-Q-、およびそれに隣接する第3炭素Cは下記の基を形成し、この式中、nは1~4である例えば、nは2である。1つの実施形態では、Qまでの点線は存在せず、bは0であり、R’R1R2N-Ra-Q-、およびそれに隣接する第3炭素は下記の基を形成し、この式中、nは1~4であり例えば、nは2である、R1、R2、R、a、およびbは、式Iに関しての定義と同じである。1つの実施形態では、aは3である。1つの実施形態では、Qまでの点線は存在せず、bは0であり、R’R1R2N-Ra-Q-、およびそれに隣接する第3炭素は下記の基を形成し、この式中、nは1~4であり例えば、nは2である、R1、R2、R、a、およびbは、式Iに関しての定義と同じである。1つの実施形態では、aは0である。例えば、この基は、下記の基であることができる。1つの実施形態では、bは0である。別の実施形態では、aは2、3、または4であり、bは0である。例えば、1つの実施形態では、aは3であり、bは0である。別の実施形態では、aは3であり、bは0であり、Qは-COO-である。1つの実施形態では、式Iの化合物は、下記のサブ式のものであり、この式中、R、R’、R1、R2、A1、A2、A3、A4、Q1、Q2、Q3、Q4、c、d、e、f、g、h、i、j、k、l、m、n、o、p、q、およびrは、本明細書に記載されている実施形態のいずれかにおいて定義されているとおりである。式IFの化合物の追加の実施形態では、下記のうちの1つ以上が適用される。iQ1およびQ2は存在しないiiM1およびM2はいずれも-COO-であるiiigおよびhはいずれも1であるivgおよびhはいずれも0であるvcおよびeの和は7であるvidおよびfの和は7であるviic、e、およびiの和は7であるviiid、f、およびjの和は7であるixiおよびjはそれぞれ7であるxkおよびlはいずれも1であるximおよびnはいずれも0であるxiimおよびqの和は1であるか、mおよびqの和は2であるxiiimおよびlの和は6であるxivrおよびnの和は6であるxvpおよびoはいずれも0であるxvinおよびrの和は2であるか、nおよびrの和は1であるxviiQ3はHである特定の実施形態では、本発明のカチオン性脂質に存在する生分解性基は、エステル例えば-COO-もしくは-OCO-、ジスルフィド-S-S-、オキシム例えば-CH=N-O-もしくは-O-N=CH-、-CO-O-、-OCO-、-CR5=N-、-N=CR5-、-CR5=N-O-、-O-N=CR5-、-O-COO-、-CONR5-、-NR5CO-、-CSNR5-、-NR5CS-、-NR5CONR5-、-COS-、-SCO-、-CSO-、-OCS-、-OSiR52O-、-COCR3R4COO-、または-OCOCR3R4CO-から選択する。1つの実施形態では、カチオン性脂質の疎水性テイルの1つまたは両方の脂肪族基は、少なくとも1つの炭素-炭素二重結合を含む。本発明のカチオン性脂質式I、IA-2、ID、IE、およびIFの化合物を含むに適したコレステロール部分は、下記の式を有する。追加の実施形態としては、頭部基と、1つ以上の疎水性テイルと、その頭部基と1つ以上のテイルとの間のリンカーとを有するカチオン性脂質が挙げられる。この頭部基は、アミン、例えば、所望のpKaを有するアミンを含むことができる。このpKaは、カチオン性脂質の構造、特に頭部基の性質、例えば、アニオン性官能基、水素結合ドナー官能基、水素結合アクセプター基、疎水性基例えば脂肪族基、親水性基例えばヒドロキシルもしくはメトキシ、またはアリール基のような官能基の有無および位置による影響を受け得る。上記の頭部基アミンは、カチオン性アミン、一級、二級、または三級アミンであることができ、上記の頭部基は、1つのアミン基モノアミン、2つのアミン基ジアミン、3つのアミン基トリアミン、または、オリゴアミンまたはポリアミンのように4個以上のアミン基を含むことができる。上記の頭部基は、例えばイミダゾール基、ピリジン基、またはグアニジニウム基など、アミンよりも塩基性の強さが弱い官能基を含むことができる。上記の頭部基は双性イオン性であることができる。他の頭部基も好適である。上記の1つ以上の疎水性テイルは、2つの疎水性鎖を含むことができ、これらの鎖は同じであっても異なっていてもよい。上記のテイルは、脂肪族であることができ、例えば、炭素および水素から構成されていることができる飽和または不飽和のいずれかであるが、芳香環を有さない。上記のテイルは脂肪酸テイルであることができる。いくつかのこのような基としては、オクタニル、ノナニル、デシル、ラウリル、ミリスチル、パルミチル、ステアリル、α-リノレイル、ステアリドニル、リノレイル、γ-リノレニル、アラカドニル、およびオレイルが挙げられる。他の疎水性テイルも好適である。上記のリンカーとしては、例えば、グリセリドリンカー、非環式グリセリドアナログリンカー、または環状リンカースピロリンカー、二環式リンカー、および多環式リンカーを含むを挙げることができる。上記のリンカーは、エーテル、エステル、フォスフェート、ホスホネート、ホスホロチオエート、スルホネート、ジスルフィド、アセタール、ケタール、イミン、ヒドラゾン、またはオキシムのような官能基を含むことができる。他のリンカーおよび官能基も好適である。1つの実施形態では、カチオン性脂質はラセミ混合物である。別の実施形態では、カチオン性脂質では、1つのジアステレオマーが多くなっている。例えば、そのようなカチオン性脂質のジアステレオマー過剰率は、少なくとも95、少なくとも90、少なくとも80、または少なくとも70である。さらに別の実施形態では、カチオン性脂質では、1つの鏡像異性体の方が多くなっている。例えば、そのような脂質の鏡像異性体過剰率は、少なくとも95、少なくとも90、少なくとも80、または少なくとも70である。さらに別の実施形態では、カチオン性脂質はキラル純であり、例えば単一の光学異性体である。さらに別の実施形態では、カチオン性脂質では、1つの光学異性体が多くなっている。二重結合例えば、炭素-炭素二重結合、または炭素-窒素二重結合が存在する場合、その二重結合の立体配置で異性すなわちシス/トランス、またはE/Zの異性が存在し得る。二重結合の立体配置が化学構造中に示されている場合には、対応する異性体も存在し得ることが分かる。存在する異性体の量は、異性体の相対的安定性、および異性体間の変換に要するエネルギーに応じて変化し得る。したがって、実際上は、単一の立体配置のみに存在する二重結合もあれば、立体配置の非分離性平衡混合物として存在できる二重結合もある例えば、異性体の相対的安定性が同程度であり、変換のエネルギーが低い場合。いくつかのケースでは、不飽和二重結合は、不飽和環に置き換えることができる。この不飽和環は、不飽和脂環、例えば、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、またはシクロオクチル基であることができる。いくつかのケースでは、この環状基は、多環式基、例えば、二環式基または三環式基であることができる。二環式基は、架橋環であることも、縮合環であることも、スピロ構造を有することもできる。いくつかのケースでは、二重結合部分は、シクロプロピル部分に置き換えることができ、例えば、に置換できる。例えば、下記の部分は、2つの炭素-炭素二重結合を有し、そのそれぞれは独立して、環状部分、例えばシクロプロピル部分に置き換えることができる。したがって、に換わるものとしては、を挙げることができる。さらなる例として、に換わるものとしては、を挙げることができる。さらなる例として、に換わるものとしては、を挙げることができる。さらなる例として、に換わるものとしては、を挙げることができる。カチオン性脂質は1つ以上の生分解性基を含む。この生分解性基は、生物環境内、例えば、生体、器官、組織、細胞、または細胞小器官内で結合破壊反応を起こすことのできる1つ以上の結合を含む。生分解性結合を含む官能基としては、例えば、エステル、ジチオール、およびオキシムが挙げられる。生分解は、被検体に投与したときに、身体からの化合物の浄化に影響を及ぼす要因であり得る。生分解は、細胞ベースのアッセイで測定でき、このアッセイでは、カチオン性脂質を含む調合物を細胞に暴露させ、さまざまな時点でサンプルを採る。その脂質分画を上記の細胞から抽出し、分離して、LC-MSによって解析できる。LC-MSデータから、生分解の速度例えばt1/2の値としてを測定できる。例えば、下記の化合物は、各脂肪族鎖中にエステル結合を含み、生物環境内で、例えば、リパーゼまたはエステラーゼに例えば暴露されると、加水分解を起こし得る。上記の化合物の構造は、当然ながら、その化合物が生分解を起こす速度に影響を及ぼす。したがって、のような関連の化合物は、異なる生分解速度を示すと思われる。加水分解部位で上記の化合物の構造を変化させるほど、生分解速度への影響は大きくなると思われる。加水分解速度に影響を及ぼすことができるとともに、それによって、生分解速度と、被検体の身体からの浄化速度に影響を及ぼすことのできる修飾法の1つは、加水分解反応の脱離基が、二級アルコールではなく一級アルコールを有するようにすることである。例えば、理論に束縛されるものではないが、上記の化合物1および2は、図2に示されているように、代謝され得る。1つの実施形態では、本明細書に記載されている実施形態のうちのいずれかのカチオン性脂質のインビボ半減期t1/2例えば肝臓中、脾臓中、または血漿中は、約3時間未満約2.5時間未満、約2時間未満、約1.5時間未満、約1時間未満、約0.5時間未満、または約0.25時間未満などである。別の実施形態では、本明細書に記載されている実施形態のうちのいずれかのカチオン性脂質であって、生分解性基1つまたは複数を含むカチオン性脂質のインビボ半減期t1/2例えば肝臓中、脾臓中、または血漿中は、生分解性基1つまたは複数を含まない同じカチオン性脂質のインビボ半減期の約10未満例えば、約7.5未満、約5未満、約2.5未満である。いくつかのカチオン性脂質は好都合なことに、頭部基と組み合わせた疎水性基として表すことができる。例えば、下記の化合物は、下記のように、頭部基と疎水性基との組み合わせと考えることができる。したがって、いくつかの好適な頭部基としては、下記の表1に示されているものが挙げられる。いくつかの好適な疎水性テイル基としては、下記の表2に示されているものが挙げられる。別の態様では、本発明は、式I~XXIIIのいずれかの化合物を調製する方法に関する。好適な例示的合成法は、下記のスキームA~Gに示されている。下記のスキーム中の可変基は、上記の式I~XXIII中の同じ位置の可変基と同じである。スキームAにおける脂質鎖の長さ、およびリンカーの長さは変更できる。加えて、エステル官能基中のR基、および窒素原子上の置換基は、誘導体化できる。スキームBに示されているように、銅を媒介とするカップリングによって、末端官能基Rを有する脂質鎖を含むジ-インが得られ、これを還元して、脂質鎖を含むジ-エンを生成できる。リンカーおよび脂質鎖の長さは変更でき、官能置換基R、R1、R2は誘導体化できる。上記の式中、Rxはアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、または置換アリールであり、頭部基は、表1に定義されている。スキームCの頭部基は、本明細書に記載されているいずれの頭部基例えば表1を参照されたいであることもできる。本発明のカチオン性脂質の例としては、下記の表3~13に示されているもの、およびそれらの塩それらの製薬学的に許容可能な塩を含むが挙げられる。表14下記の化合物は、本発明によるカチオン性脂質の合成において、中間体として用いてよい。1つの実施形態では、本発明のカチオン性脂質は、下記の化合物、およびそれらの塩それらの製薬学的に許容可能な塩を含むから選択する。カチオン性脂質としては、代替的な脂肪酸基、および、アルキル置換基が異なるジアルキルアミノ基を含む例えば、N-エチル-N-メチルアミノ-、N-プロピル-N-エチルアミノ-などその他のジアルキルアミノ基を有するものが挙げられる。R1およびR2がいずれも長鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、またはシクロアルキルアルキル基である実施形態では、それらは同じであることも、異なることもできる。一般に、特に、ろ過滅菌の目的で、その複合体の大きさを約0.3マイクロメートル未満にするときには、飽和度の低いアシル鎖を有する脂質例えばカチオン性脂質の方が、サイズ調節が容易である。炭素鎖の長さが炭素数10~20の範囲である、不飽和脂肪酸を含むカチオン性脂質が典型的である。その他の足場を用いて、アミノ基例えば、カチオン性脂質のアミノ基と、カチオン性脂質の脂肪酸または脂肪アルキル部分を分離することもできる。好適な足場は当業者に知られている。特定の実施形態では、カチオン性脂質は、少なくとも1つのプロトン化可能または脱プロトン化可能基を有し、その脂質が、生理的pH以下のpH例えばpH7.4においては正電荷を有し、第2のpH、好ましくは生理的pH以上のpHにおいては中性であるようになっている。このような脂質もカチオン性脂質と称される。当然ながら、pHに応じてプロトンを付加または除去することが平衡プロセスであること、および、荷電または中性脂質への言及が、主流をなす種の性質を指すとともに、すべての脂質が、荷電または中性形態で存在する必要は必ずしもないことが分かるであろう。脂質は、1つ超のプロトン化可能または脱プロトン化可能基を有することも、双性イオン性であることもできる。特定の実施形態では、プロトン化可能な脂質すなわちカチオン性脂質では、プロトン化可能基のpKaは約4~約11の範囲である。典型的には、脂質のpKaは約4~約7であり、例えば、脂質粒子に組み込んだときには約5~7約5.5、および6.8である。このような脂質は、低pHの調合段階ではカチオン性となる一方で、粒子は概して完全というわけではない、pH7.4前後の生理的pHで表面中和されることになる。約4~7の範囲のpKaの利点の1つは、脂質粒子の外面に付随する少なくとも一部の核酸が、生理的pHでその静電相互作用を喪失し、単純な透析によって除去されることになり、その結果、その粒子の浄化に対する感受性が大きく低減される点である。脂質粒子内の脂質のpKaの測定は、例えば、Cullisetal.,1986ChemPhysLipids40,127-144参照によりその全体が組み込まれるに記載されている方法を用いて、蛍光プローブ2-p-トルイジノ-6-ナフタレンスルホン酸TNSを用いることによって、行うことができる。特定的な実施形態では、脂質は荷電脂質である。本明細書で使用する場合、荷電脂質という用語は、1つまたは2つの脂肪酸アシルまたは脂肪酸アルキル鎖と、四級アミノ頭部基とを有する脂質を含むことを意味する。この四級アミンは、恒久的な正電荷を有する。上記の頭部基は任意で、生理的pHでプロトン化できる一級、二級、または三級アミンのようなイオン化基を含むことができる。四級アミンの存在によって、四級アミンを含まない例えば、四級アミンが三級アミンに置き換えられている構造的に類似の化合物中の基のpKaに対し、イオン化基のpKaを変えることができる。いくつかの実施形態では、荷電脂質は、アミノ脂質と称されている。例えば、2009年12月7日に提出された米国特許仮出願第61/267,419号参照によりその全体が組み込まれるを参照されたい。上で具体的に説明したものに加えて、生理的pH前後で正味の正電荷を有する1つ以上の追加のカチオン性脂質も、本明細書に記載されている脂質粒子および組成物に含めてもよい。このようなカチオン性脂質としては、N,N-ジオレイル-N,N-ジメチルアンモニウムクロリドDODAC、N-2,3-ジオレイルオキシプロピル-N,N-N-トリエチルアンモニウムクロリドDOTMA、N,N-ジステアリル-N,N-ジメチルアンモニウムブロミドDDAB、N-2,3-ジオレオイルオキシプロピル-N,N,N-トリメチルアンモニウムクロリドDOTAP、1,2-ジオレイルオキシ-3-トリメチルアミノプロパンクロリド塩DOTAP.Cl、3β-N-N’,N’-ジメチルアミノエタン-カルバモイルコレステロールDC-Chol、N-1-2,3-ジオレイルオキシプロピル-N-2-スペルミンカルボキサミドエチル-N,N-ジメチルアンモニウムトリフルオロアセテートDOSPA、ジオクタデシルアミドグリシルカルボキシスペルミンDOGS、1,2-ジオレオイル-sn-3-ホスホエタノールアミンDOPE、1,2-ジオレオイル-3-ジメチルアンモニウムプロパンDODAP、N,N-ジメチル-2,3-ジオレイルオキシプロピルアミンDODMA、およびN-1,2-ジミリスチルオキシプロプ-3-イル-N,N-ジメチル-N-ヒドロキシエチルアンモニウムブロミドDMRIEが挙げられるが、これらに限らない。加えて、例えばLIPOFECTINDOTMAおよびDOPEを含む。GIBCO/BRLから入手可能、およびLIPOFECTAMINEDOSPAおよびDOPEを含む。GIBCO/BRLから入手可能のようなカチオン性脂質の多数の市販の調製物を用いることができる。特定的な実施形態では、カチオン性脂質はアミノ脂質である。中性脂質本明細書に記載されている脂質粒子および組成物は、1つ以上の中性脂質も含んでもよい。中性脂質は、存在するときには、生理的pHにおいて非荷電または中性双性イオン性形態のいずれかで存在する多数の脂質種のうちのいずれであることができる。このような脂質としては例えば、ジアシルホスファチジルコリン、ジアシルホスファチジルエタノールアミン、セラミド、スフィンゴミエリン、ジヒドロスフィンゴミエリン、ケファリン、およびセレブロシドが挙げられる。本明細書に記載されている粒子中で用いる中性脂質の選択は一般に、例えばリポソームのサイズ、および血流中におけるリポソームの安定性を検討することによって導き出す。好ましくは、中性脂質構成成分は、2つのアシル基を有する脂質すなわち、ジアシルホスファチジルコリン、およびジアシルホスファチジルエタノールアミンである。さまざまな鎖長および飽和度のさまざまなアシル鎖基を有する脂質は入手可能であり、あるいは、周知の技法によって単離または合成してよい。1つの実施形態群では、炭素鎖長が炭素数10~20の範囲である飽和脂肪酸を含む脂質が好ましい。別の実施形態群では、炭素鎖長が炭素数10~20の範囲であるモノまたはジ不飽和脂肪酸を有する脂質を用いる。加えて、飽和脂肪酸鎖と不飽和脂肪酸鎖との混合物を有する脂質を用いることができる。好ましくは、用いる中性脂質は、DOPE、DSPC、POPC、DPPC、またはいずれかの関連するホスファチジルコリンである。これらの中性脂質は、スフィンゴミエリン、ジヒドロスフィンゴミエリン、または、セリンおよびイノシトールのような他の頭部基を有するリン脂質から構成されていてもよい。凝集を低減できる脂質本明細書に記載されている脂質粒子および組成物は、凝集を低減できる脂質も1つ以上含んでよい。形成中に粒子の凝集を低減する脂質の例としては、ポリエチレングリコールPEG修飾脂質、モノシアロガングリオシドGm1、およびポリアミドオリゴマーPAO米国特許第6,320,017号参照によりその全体が組み込まれるに記載されているものなどが挙げられる。PEG、Gm1、またはATTAのように、非荷電、親水性、立体障害部分を有する他の化合物のうち、調合中に凝集を防ぐ化合物も脂質にカップリングできる。ATTA-脂質は、例えば米国特許第6,320,017号に記載されており、PEG-脂質コンジュゲートは、例えば米国特許第5,820,873号、同第5,534,499号、および同第5,885,613号に記載されており、これらの特許のそれぞれは、参照によりその全体が組み込まれる。典型的には、凝集を低減する目的で選択する脂質構成成分の濃度は、約1~15脂質のモルパーセントである。PEG部分を脂質ベシクルの表面に固定するさまざまなアンカリング脂質部分を有することができるPEG修飾脂質または脂質-ポリオキシエチレンコンジュゲートの具体例としては、PEG修飾ホスファチジルエタノールアミンおよびホスファチジン酸、米国特許第5,820,873号参照により本明細書に組み込まれるに記載されているPEG-セラミドコンジュゲート例えば、PEG-CerC14またはPEG-CerC20、PEG修飾ジアルキルアミン、ならびに、PEG修飾1,2-ジアシルオキシプロパン-3-アミンが挙げられる。特に好ましいのは、PEG修飾ジアシルグリセロールおよびジアルキルグリセロールである。PEGまたはATTAのような立体的に大きい部分を脂質アンカーにコンジュゲートさせる実施形態では、脂質アンカーの選択は、そのコンジュゲートにおける脂質粒子との結合がどのようなタイプのものであるかに左右される。粒子が、おそらく約数日で、循環血液から浄化されるまでは、mPEGmw2000-ジステアロイルホスファチジルエタノールアミンPEG-DSPEは、リポソームと結合したままとなることは周知である。PEG-CerC20のようなその他のコンジュゲートも、同様の滞留能力を有する。しかしながら、PEG-CerC14は、血清に暴露されると、いくつかのアッセイでは60分未満のt1/2で、調合物外に急速に交換される。米国特許第5,820,873号に示されているように、アシル鎖の長さ、アシル鎖の飽和度、および立体障害頭部基のサイズという少なくとも3つの特徴が、交換速度に影響を及ぼす。これらの特徴の好適な変形形態を有する化合物が有用である場合がある。いくつかの治療用途では、PEG修飾脂質をインビボで核酸-脂質粒子から急速に喪失させること、すなわち、PEG修飾脂質が比較的短い脂質アンカーを有することになるのが好ましい場合がある。別の治療用途では、核酸-脂質粒子が、より長い循環血漿中滞留時間を示すこと、すなわち、PEG修飾脂質が、比較的長い脂質アンカーを有することになるのが好ましい場合がある。なお、凝集を防ぐ化合物は、適正に機能することを目的とする脂質のコンジュゲーションを必ずしも必要としない。溶液中の遊離PEGまたは遊離ATTAが、凝集を防ぐのに十分である場合もある。調合後、粒子が安定である場合、被検体への投与前に、PEGまたはATTAを透析することができる。脂質粒子さらなる態様では、本発明は、本明細書に記載されているカチオン性脂質を1つ以上含む脂質粒子に関する。1つの実施形態では、この脂質粒子は、式I~XXIIIの1つ以上の化合物を含む。別の実施形態では、脂質粒子は、式II~XXIIIの1つ以上の化合物を含む。別の実施形態では、脂質粒子は、式Iの1つ以上の化合物を含む。別の実施形態では、脂質粒子は、式IA-1、IA-2、IB、IC、ID、またはIEの化合物を含む。脂質粒子としてはリポソームが挙げられるが、これらに限らない。本明細書で使用する場合、リポソームは、水性の内部を取り囲む脂質含有膜を有する構造体である。リポソームは1つ以上の脂質膜を有してよい。リポソームは、一層であることも単層リポソームと称される、多層であることも多重膜リポソームと称されるできる。核酸と複合するときには、脂質粒子はリポプレックスであってよく、このリポプレックスは、DNA層の間に挟まれたカチオン性脂質二重層から構成されている。上記の脂質粒子は、1つ以上の追加の脂質、および/またはコレステロールのようなその他の構成要素をさらに含んでもよい。その他の脂質は、脂質の酸化を防ぐ目的、またはリガンドをリポソーム表面に結合させる目的のようなさまざまな目的で、リポソーム組成物に含めてよい。両親媒性、中性、カチオン性、およびアニオン性脂質を含め、多数の脂質のうちのいずれも、リポソームに存在してよい。このような脂質は単独で用いることも、組み合わせて用いることもできる。脂質粒子に存在してもよい追加の構成成分としては、ポリアミドオリゴマー例えば米国特許第6,320,017号参照によりその全体が組み込まれるを参照されたい、ペプチド、タンパク、洗浄剤、脂質-誘導体ホスファチジルエタノールアミンにカップリングしているPEG、およびセラミドにコンジュゲートしているPEGなどのような二層安定化構成成分米国特許第5,885,613号参照によりその全体が組み込まれるを参照されたいが挙げられる。1つの実施形態では、脂質粒子は、第2のアミノ脂質またはカチオン性脂質、中性脂質、ステロール、および、形成中に脂質粒子の凝集を低減する目的で選択した脂質のうちの1つ以上を含む。形成中における脂質粒子の凝集の低減は、形成中に電荷によって誘発される凝集を防ぐ粒子の立体安定化によってもたらすことができる。脂質粒子は2つ以上のカチオン性脂質を含むことができる。これらの脂質は、異なる有益な特性を付与する目的で選択することができる。例えば、アミンpKa、化学的安定性、循環血液における半減期、組織における半減期、組織内への正味蓄積量、または毒性のような特性が異なるカチオン性脂質を脂質粒子中で用いることができる。具体的には、混合脂質粒子の特性が、個々の脂質のうちの単一の脂質粒子の特性よりも望ましくなるように、カチオン性脂質を選択することができる。カチオン性脂質の正味組織蓄積量、および長期毒性存在する場合は、所定の調合物において単一のカチオン性脂質を選択する代わりに、カチオン性脂質の混合物を選択することによって、好都合な形で調節できる。このような混合物は、薬物の封入および/または放出の改善も提供することができる。カチオン性脂質の組み合わせは、調合物中の単一のカチオン性脂質と比べると、全身的安定性に影響を及ぼし得る。1つの例では、構造的に類似する一連の化合物は、例えば1pKa未満の単位、1~2pKaの単位の範囲、または2pKaを超える単位の範囲に及ぶさまざまなpKa値を有し得る。その群の中では、その範囲の中間のpKaは、その範囲の終端の方のpKa値を有する化合物との比較における、有益な特性の増強効率の向上、または不利益な特性の低減例えば毒性の低下と関係があることが明らかになる場合もある。このようなケースでは、脂質粒子中で併せて用いるものとして、その範囲の上限および下限の方のpKa値を有する2つまたは2つ超の異なる化合物を選択することができる。このようにして、脂質粒子の正味の特性例えば、局所pHの関数としての電荷は、pKa値範囲の中央の単一の脂質を含む粒子の特性により近づけることができる。構造的に異なるカチオン性脂質例えば、上記の構造的に類似する一連の化合物の一部ではないものも混合脂質粒子中で用いることができる。いくつかのケースでは、2つ以上の異なるカチオン性脂質は、大きく異なるpKa値、例えば3以上のpKa単位分異なる値を有してよい。このケースでは、混合脂質粒子の正味の挙動は、中間のpKaを有する単一の脂質粒子の挙動に必ずしも似ることにはならない。むしろ、正味の挙動は、pKa値の異なる2つの別個のプロトン化可能または、場合の応じて脱プロトン化可能部位を有する粒子の挙動となる場合がある。単一の脂質のケースでは、pHがpKa未満からpKa超に動くのに応じて、実際にプロトン化されるプロトン化可能部位の部分は、大幅に変化するpHがpKa値に等しいときには、プロトン化可能部位の50がプロトン化される。2つ以上の異なるカチオン性脂質が、大幅に異なるpKa値を有し得る例えば3以上のpKa単位分異なるとともに、脂質粒子中で組み合わされているときには、その脂質粒子は、pHが変化するのに応じて、非プロトン化状態からプロトン化状態への、よりなだらかな遷移を見せることができる。別の例では、他の検討事項に基づき、2つ以上の脂質を選択してよい。例えば、1つの脂質自体が極めて有効であるが、中程度の毒性である場合、その脂質よりも有効性は低いが、毒性も弱い脂質と組み合わせてよい。いくつかのケースでは、この組み合わせは、中程度の有効性しか有さず、毒性の低減もほんのわずかであると予測される場合でも、高い有効性を保つが、毒性が大きく低減されることもある。この選択は、実験によって割り出すことのできる特徴、例えば、実験結果から数値を割り当てることのできる特徴の測定値によって導き出すことができる。実験によって割り出すことのできる特徴としては、安全性の測定値、効能の測定値、所定の生分子との相互作用の測定、またはpKaを挙げることができる。安全性の測定値としては、残存率、LD50、または、組織損傷例えば肝臓の肝臓酵素、筋肉のCPK、腎臓のイオンバランスと関連するバイオマーカー血清バイオマーカーなどのレベルを挙げてよい。効能の測定値は、治療剤が効果をもたらしているか、特には、治療剤が所望の効果をもたらしているか、および/または、治療剤がどの程度、所望の効果をもたらしているか、例えば、疾患、障害、またはその他の病態を治療、予防、改善、またはその他の形で好転させているかを示すいずれかの測定値であることができる。効能の測定値は、間接的な測定値であることができ、例えば、治療剤が、細胞レベルで特定の効果をもたらすように意図されている場合、細胞培養物に対するその効果の測定値が、効能の測定値であることができる。所定の生分子との相互作用の測定値としては、特定のタンパクへの結合のKd、または、その特徴の測定値、細胞膜、エンドソーム膜、核膜などの細胞サブ構造体を含む他の脂質との相互作用の度合いまたは程度などを挙げることができる。カチオン性脂質は、作用機構、例えば、どのような状況下で、またはどの程度まで、その脂質が所定の生分子と相互作用するかに基づき選択することができる。例えば、第1のカチオン性脂質は、部分的には、ApoEに依存する機構と関連するという理由から選択することができ、第2のカチオン性脂質は、部分的には、ApoEと独立した機構と関連するという理由から選択することができる。例えば、脂質粒子は、例えば国際公開第2009/086558号、および2008年10月9日に提出された米国特許仮出願第61/104,219号これらの特許のそれぞれは、参照によりその全体が組み込まれるに記載されているカチオン性脂質とそれらのエステルアナログの混合物も含むことができる。別の例では、脂質粒子は、脂質、例えば、2010年1月29日に提出されたPCT/US10/22614号に記載されている脂質A、および、2009年5月5日に提出された米国特許仮出願第61/175,770号に記載されている脂質、例えば式Vまたは式VIの脂質の混合物を含むことができる。特定の実施形態では、ある細胞型または組織に特異的な標的化部分を用いて、上記の脂質粒子を標的にするのが望ましい。リガンド、細胞表面受容体、糖タンパク、ビタミン例えばリボフラビン、およびモノクローナル抗体のようなさまざまな標的化部分を用いて、脂質粒子を標的にすることは、既に説明されてきている例えば米国特許第4,957,773号、および同第4,603,044号これらの特許のそれぞはれ、参照によりその全体が組み込まれるを参照されたい。この標的化部分は、タンパク全体またはその断片を含むことができる。標的化機構では一般に、標的部分が、標的、例えば細胞表面受容体との相互作用で利用可能であるような形で、脂質粒子の表面上に標的化作用物質を配置する必要がある。例えばSapra,P.andAllen,TM、Prog.LipidRes.425:439-622003、およびAbra,RMetal.,J.LiposomeRes.12:1-3,2002に記載されているものを含め、多種多様な標的化作用物質および方法が当該技術分野において知られているとともに、利用可能である。ポリエチレングリコールPEG鎖のような親水性ポリマー鎖の表面コーティングを有する脂質粒子、すなわちリポソームを標的化で用いることが提案されているAllen,etal.,BiochimicaetBiophysicaActa1237:99-1081995、DeFrees,etal.,JournaloftheAmericanChemistrySociety118:6101-61041996、Blume,etal.,BiochimicaetBiophysicaActa1149:180-1841993、Klibanov,etal.,JournalofLiposomeResearch2:321-3341992、米国特許第5,013556号、Zalipsky,BioconjugateChemistry4:296-2991993、Zalipsky,FEBSLetters353:71-741994、Zalipsky,inStealthLiposomesChapter9LasicandMartin,EdsCRCPress,BocaRatonFl1995。1つのアプローチでは、脂質粒子を標的とする、抗体のようなリガンドは、脂質粒子を形成する、脂質の極性頭部基に結合させる。別のアプローチでは、標的化リガンドは、親水性ポリマーコーティングを形成するPEG鎖の遠位端に結合させるKlibanov,etal.,JournalofLiposomeResearch2:321-3341992、Kirpotinetal.,FEBSLetters388:115-1181996。標的作用物質をカップリングする標準的な方法を用いることができる。例えば、標的作用物質の結合のために活性化できるホスファチジルエタノールアミン、または、脂質-誘導体化ブレオマイシンのような誘導体化脂肪親和性化合物を用いることができる。抗体標的リポソームは、例えば、プロテインAを組み込むリポソームを用いて構築できるRenneisen,etal.,J.Bio.Chem.,265:16337-163421990、およびLeonetti,etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,87:2448-24511990を参照されたい。抗体コンジュゲーションのその他の例は、米国特許第6,027,726号に開示されており、その教示内容は、参照により本明細書に組み込まれる。標的化部分の例としては、新生物または腫瘍と関連する抗原を含め、細胞構成成分に特異的なその他のタンパクも挙げることができる。標的化部分として用いるタンパクは、共有結合を介してリポソームに結合させることができるHeath,CovalentAttachmentofProteinstoLiposomes,149MethodsinEnzymology111-119AcademicPress,Inc.1987を参照されたい。その他の標的化法としては、ビオチン-アビジン系が挙げられる。いくつかの実施形態では、脂質粒子は、カチオン性脂質と融合促進脂質との混合物を含む。脂質粒子は、中性脂質、ステロール、PEG修飾脂質、またはこれらの組み合わせをさらに含むことができる。例えば、脂質粒子は、カチオン性脂質、融合促進脂質例えばDPPC、および中性脂質を含むが、ステロール、またはPEG修飾脂質を含まないことができる。脂質粒子は、カチオン性脂質、融合促進脂質、および中性脂質を含むが、ステロールまたはPEG修飾脂質を含まないことができる。脂質粒子は、カチオン性脂質、融合促進脂質、およびPEG修飾脂質を含むが、ステロールまたは中性脂質を含まないことができる。脂質粒子は、カチオン性脂質、融合促進脂質、ステロール、および中性脂質を含むが、PEG修飾脂質を含まないことができる。脂質粒子は、カチオン性脂質、融合促進脂質、ステロール、およびPEG修飾脂質を含むが、中性脂質を含まないことができる。脂質粒子は、カチオン性脂質、融合促進脂質、中性脂質、およびPEG修飾脂質を含むが、ステロールを含まないことができる。脂質粒子は、カチオン性脂質、融合促進脂質、ステロール、中性脂質、およびPEG修飾脂質を含むことができる。1つの例示的な実施形態では、脂質粒子は、カチオン性脂質と、融合促進脂質と、中性脂質カチオン性脂質以外と、ステロール例えばコレステロールと、PEG修飾脂質例えばPEG-DMGまたはPEG-DMAとの混合物を含む。特定の実施形態では、脂質混合物は、カチオン性脂質、融合促進脂質、中性脂質、コレステロール、およびPEG修飾脂質からなるか、本質的にこれらからなる。さらに好ましい実施形態では、脂質粒子は、約20~70のカチオン性脂質:0.1~50の融合促進脂質:5~45の中性脂質:20~55のコレステロール:0.5~15のPEG修飾脂質というモル比の上記脂質混合物を含む。いくつかの実施形態では、融合促進脂質は、0.1~50、0.5~50、1~50、5~45、10~40、または15~35のモル比で存在することができる。いくつかの実施形態では、融合促進脂質は、0.1~50、0.5~50、1~50、5~45、10~40、または15~35のモル比で存在することができる。いくつかの実施形態では、融合促進脂質は、0.1~50、10~50、20~50、または30~50のモル比で存在することができる。いくつかの実施形態では、融合促進脂質は、0.1~50、0.5~45、1~40、1~35、1~30、または1~20のモル比で存在することができる。さらに好ましい実施形態では、本発明の脂質粒子は、約20~70のカチオン性脂質:0.1~50の融合促進脂質:5~45の中性脂質:20~55のコレステロール:0.5~15のPEG修飾脂質というモル比の上記脂質混合物からなるか、このような脂質混合物から本質的になる。特定的な実施形態では、脂質モル比単位:モル、カチオン性脂質/DSPC/コレステロール/PEG-DMGまたはPEG-DMAは、約40/10/40/10、35/15/40/10、または52/13/30/5であり、この混合物は、0.1~50、0.1~50、0.5~50、1~50、5~45、10~40、または15~35のモル比の融合促進脂質とさらに組み合わされており、換言すると、脂質/DSPC/コレステロール/PEG-DMGまたはPEG-DMAが40/10/40/10の混合物は、50のモル比の融合促進ペプチドと組み合わされており、得られた脂質粒子の総モル比単位:モル、カチオン性脂質/DSPC/コレステロール/PEG-DMGまたはPEG-DMA/融合促進ペプチドは20/5/20/5/50であることができる。別の実施形態群では、これらの組成物中の中性脂質DSPCは、POPC、DPPC、DOPE、またはSMに置き換えられている。本明細書に記載されている脂質粒子は、1つ以上の治療剤をさらに含んでもよい。したがって、脂質粒子および活性剤を含む組成物であって、その活性剤が脂質粒子と結合している組成物を提供する。特定的な実施形態では、この活性剤が治療剤である。特定的な実施形態では、この活性剤は、脂質粒子の水性の内部に封入されている。別の実施形態では、上記の活性剤は、脂質粒子の1つ以上の脂質層内に存在する。別の実施形態では、活性剤は、脂質粒子の外側または内側の脂質表面に結合している。本明細書で使用する場合、完全封入とは、遊離核酸を有意に分解するものである血清またはヌクレアーゼアッセイへの暴露後に、その粒子中の核酸が有意には分解されないことを示す。完全封入系では、遊離核酸の100を通常分解するものである処理において、好ましくは25未満の粒子核酸が分解され、より好ましくは10未満、最も好ましくは5未満の粒子核酸が分解される。あるいは、完全封入は、Oligreen登録商標アッセイによって判断してもよい。Oligreen登録商標は、溶液中のオリゴヌクレオチドおよび一本鎖DNAを定量するための超高感度蛍光核酸染色法であるカリフォルニア州カールズバッドのInvitrogenCorporationから入手可能。完全封入は、粒子が血清安定性を有すること、すなわち、インビボ投与しても、粒子が急速には、その粒子の構成成分部分に分解しないことも暗に示す。1つの実施形態では、脂質粒子は、本発明のカチオン性脂質、中性脂質、ステロール、およびPEG修飾脂質を含む。1つの実施形態では、脂質粒子はカチオン性脂質をモルベースで約25~約75、例えば、モルベースで約35~約65、約45~約65、約60、約57.5、約57.1、約50、または約40含む。1つの実施形態では、脂質粒子は中性脂質をモルベースで約0~約15、例えば、モルベースで約3~約12、約5~約10、約15、約10、約7.5、約7.1、または約0含む。1つの実施形態では、中性脂質はDPPCである。1つの実施形態では、中性脂質はDSPCである。1つの実施形態では、調合物は、ステロールをモルベースで約5~約50、例えば、モルベースで約15~約45、約20~約40、約48、約40、約38.5、約35、約34.4、約31.5、または約31含む。1つの実施形態では、ステロールはコレステロールである。1つの実施形態では、脂質粒子は、PEG修飾脂質をモルベースで約0.1~約20、例えば、モルベースで約0.5~約10、約0.5~約5、約10、約5、約3.5、約1.5、約0.5、または約0.3含む。1つの実施形態では、PEG修飾脂質はPEG-DMGである。1つの実施形態では、PEG修飾脂質はPEG-c-DMAである。1つの実施形態では、本発明の脂質粒子は、モルベースで25~75のカチオン性脂質、0.5~15の中性脂質、5~50のステロール、および0.5~20のPEG修飾脂質を含む。1つの実施形態では、本発明の脂質粒子は、モルベースで35~65のカチオン性脂質、3~12の中性脂質、15~45のステロール、および0.5~10のPEG修飾脂質を含む。1つの実施形態では、本発明の脂質粒子は、モルベースで45~65のカチオン性脂質、5~10の中性脂質、25~40のステロール、および0.5~5のPEG修飾脂質を含む。1つの実施形態では、PEG修飾脂質は、平均分子量2,000DaのPEG分子を含む。1つの実施形態では、PEG修飾脂質はPEG-ジスチリルグリセロールPEG-DSGである。1つの実施形態では、脂質:siRNA比は少なくとも約0.5:1、少なくとも約1:1、少なくとも約2:1、少なくとも約3:1、少なくとも約4:1、少なくとも約5:1、少なくとも約6:1、少なくとも約7:1、少なくとも約11:1、または少なくとも約33:1である。1つの実施形態では、脂質:siRNA比は約1:1~約35:1、約3:1~約15:1、約4:1~約15:1、または約5:1~約13:1である。1つの実施形態では、脂質:siRNA比は約0.5:1~約12:1である。1つの実施形態では、本発明の脂質粒子はナノ粒子である。追加の実施形態では、本発明の脂質粒子の平均径サイズは約50nm~約300nm約50nm~約250nm、例えば約50nm~約200nmなどである。1つの実施形態では、本明細書に記載されている実施形態のうちのいずれかのカチオン性脂質を含む脂質粒子のインビボ半減期t1/2例えば肝臓中、脾臓中、または血漿中の半減期は、約3時間未満約2.5時間未満、約2時間未満、約1.5時間未満、約1時間未満、約0.5時間未満、または約0.25時間未満などである。別の実施形態では、本明細書に記載されている実施形態のうちのいずれかのカチオン性脂質を含む脂質粒子のインビボ半減期t1/2例えば肝臓中、脾臓中、または血漿中の半減期は、生分解性基1つまたは複数を含まない同じカチオン性脂質のインビボ半減期の約10未満例えば約7.5未満、約5未満、約2.5未満である。追加の構成成分本明細書に記載されている脂質粒子および組成物は、アポリポタンパクをさらに含むことができる。本明細書で使用する場合、アポリポタンパクまたはリポタンパクという用語は、当業者に知られているアポリポタンパク、ならびに、それらの変異体およびそれらの断片と、下記のアポリポタンパクアゴニスト、そのアナログまたは断片を指す。好適なアポリポタンパクとしては、ApoA-I、ApoA-II、ApoA-IV、ApoA-V、およびApoE、ならびに、それらの活性多型、アイソフォーム、変異体、突然変異体、および、断片またはトランケート型が挙げられるが、これらに限らない。特定の実施形態では、アポリポタンパクは、チオール含有アポリポタンパクである。チオール含有アポリポタンパクとは、少なくとも1つのシステイン残基を含むアポリポタンパク、変異体、断片、またはアイソフォームを指す。最も一般的なチオール含有アポリポタンパクは、1つのシステイン残基を含むApoA-IMilanoApoA-IMおよびApoA-IParisApoA-IPであるJiaetal.,2002,Biochem.Biopyhs.Res.Comm.297:206-13、BielickiandOda,2002,Biochemistry41:2089-96。ApoA-II、ApoE2、およびApoE3もチオール含有アポリポタンパクである。単離ApoE、ならびに/または、その活性断片およびポリペプチドアナログは、その、組み換え技術によって作製した形態を含め、米国特許第5,672,685号、同第5,525,472号、同第5,473,039号、同第5,182,364号、同第5,177,189号、同第5,168,045号、同第5,116,739号これらの開示内容は、参照により本明細書に組み込まれるに記載されている。ApoE3は、Weisgraber,etal.,HumanEapoproteinheterogeneity:cysteine-arginineinterchangesintheaminoacidsequenceoftheapo-Eisoforms,J.Biol.Chem.1981256:9077-9083、およびRall,etal.,StructuralbasisforreceptorbindingheterogeneityofapolipoproteinEfromtypeIIIhyperlipoproteinemicsubjects,Proc.Nat.Acad.Sci.198279:4696-4700に開示されている。GenBank受託番号K00396も参照されたい。特定の実施形態では、アポリポタンパクは、その成熟型、そのプレプロアポリポタンパク形態、またはそのプロアポリポタンパク形態であることができる。前駆物質および成熟形態のApoA-IDuergeretal.,1996,Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.1612:1424-29、ApoA-IMilanoKlonetal.,2000,Biophys.J.79:31679-87、Franceschinietal.,1985,J.Biol.Chem.260:1632-35、ApoA-IParisDaumetal.,1999,J.Mol.Med.77:614-22、ApoA-IIShelnessetal.,1985,J.Biol.Chem.26014:8637-46、Shelnessetal.,1984,J.Biol.Chem.25915:9929-35、ApoA-IVDuvergeretal.,1991,Euro.J.Biochem.2012:373-83、およびApoEMcLeanetal.,1983,J.Biol.Chem.25814:8993-9000のホモおよびヘテロダイマー実現可能な場合も用いることができる。特定の実施形態では、アポリポタンパクは、そのアポリポタンパクの断片、変異体、またはアイソフォームであることができる。断片という用語は、天然アポリポタンパクのアミノ酸配列よりも短いアミノ酸配列を有するとともに、その断片が、天然アポリポタンパクの活性脂質結合特性を含むを保持するいずれかのアポリポタンパクを指す。変異体とは、そのアポリポタンパクのアミノ酸配列を置換または変更したものであって、その置換または変更、例えばアミノ酸残基の付加および欠失によって、天然アポリポタンパクの活性脂質結合特性を含むが失われないものを意味する。したがって、変異体は、本明細書に示されている天然アポリポタンパクと実質的に同一のアミノ酸配列を有するタンパクまたはペプチドであって、1つ以上のアミノ酸残基が化学的に類似のアミノ酸で保存的に置換されたタンパクまたはペプチドを含むことができる。保存的置換の例としては、少なくとも1つの疎水性残基イソロイシン、バリン、ロイシン、またはメチオニンなどを別の疎水性残基に置換することが挙げられる。同様に、例えば少なくとも1つ親水性残基の置換、例えば、アルギニンおよびリシン間の置換、グルタミンおよびアスパラギン間の置換、ならびに、グリシンおよびセリン間の置換米国特許第6,004,925号、同第6,037,323号、および同第6,046,166号を参照されたいなどが保存的置換である。アイソフォームという用語は、同じ機能、より高い機能、または部分的な機能と、類似の配列、同一の配列、または部分的な配列とを有するタンパクを指し、同じ遺伝子の産物であってもなくてもよく、通常は組織特異的であるWeisgraber1990,J.LipidRes.318:1503-11、HixsonandPowers1991,J.LipidRes.329:1529-35、Lackneretal.,1985,J.Biol.Chem.2602:703-6、Hoegetal.,1986,J.Biol.Chem.2619:3911-4、Gordonetal.,1984,J.Biol.Chem.2591:468-74、Powelletal.,1987,Cell506:831-40、Avirametal.,1998,Arterioscler.Thromb.Vase.Biol.1810:1617-24、Avirametal.,1998,J.Clin.Invest.1018:1581-90、Billeckeetal.,2000,DrugMetab.Dispos.2811:1335-42、Draganovetal.,2000,J.Biol.Chem.27543:33435-42、SteinmetzandUtermann1985,J.Biol.Chem.2604:2258-64、Widleretal.,1980,J.Biol.Chem.25521:10464-71、Dyeretal.,1995,J.LipidRes.361:80-8、Sacreetal.,2003,FEBSLett.5401-3:181-7、Weers,etal.,2003,Biophys.Chem.1001-3:481-92、Gongetal.,2002,J.Biol.Chem.27733:29919-26、Ohtaetal.,1984,J.Biol.Chem.25923:14888-93、および米国特許第6,372,886号を参照されたい。特定の実施形態では、本明細書に記載されている脂質粒子および組成物は、アポリポタンパクのキメラ構造を含む。例えば、アポリポタンパクのキメラ構造は、虚血再灌流保護特性を有するアポリポタンパクドメインと結合している脂質結合能力の高いアポリポタンパクドメインからなることができる。アポリポタンパクのキメラ構造は、1つのアポリポタンパク中に別個の領域を含む構造すなわち同種構造であることができ、あるいは、キメラ構造は、異なるアポリポタンパク間の別個の領域を含む構造すなわち異種構造であることができる。キメラ構造を含む組成物は、アポリポタンパク変異体であるセグメント、または、特有の特徴例えば、脂質結合特性、受容体結合特性、酵素特性、酵素活性化特性、抗酸化特性、または酸化還元特性を有するように設計したセグメントも含むことができるWeisgraber1990,J.LipidRes.318:1503-11、HixsonandPowers1991,J.LipidRes.329:1529-35、Lackneretal.,1985,J.Biol.Chem.2602:703-6、Hoegetal,1986,J.Biol.Chem.2619:3911-4、Gordonetal.,1984,J.Biol.Chem.2591:468-74、Powelletal.,1987,Cell506:831-40、Avirametal.,1998,Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.1810:1617-24、Avirametal.,1998,J.Clin.Invest.1018:1581-90、Billeckeetal.,2000,DrugMetab.Dispos.2811:1335-42、Draganovetal.,2000,J.Biol.Chem.27543:33435-42、SteinmetzandUtermann1985,J.Biol.Chem.2604:2258-64、Widleretal.,1980,J.Biol.Chem.25521:10464-71、Dyeretal.,1995,J.LipidRes.361:80-8、Sorensonetal.,1999,Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.199:2214-25、Palgunachari1996,Arterioscler.Throb.Vasc.Biol.162:328-38、Thurbergetal.,J.Biol.Chem.27111:6062-70、Dyer1991,J.Biol.Chem.26623:150009-15、Hill1998,J.Biol.Chem.27347:30979-84を参照されたい。用いるアポリポタンパクは、組み換えアポリポタンパク、合成アポリポタンパク、半合成アポリポタンパク、または精製アポリポタンパクも含む。アポリポタンパクまたはその等価物を得る方法は、当該技術分野において周知である。例えば、アポリポタンパクは、例えば密度勾配遠心または免疫アフィニティークロマトグラフィーによって、血漿または天然産物から分離することも、合成的に作製することも、半合成的に作製することも、当業者にとって既知の組み換えDNA技法を用いて作製することもできる例えば、Mulugetaetal.,1998,J.Chtomatogr.7981-2:83-90、Chungetal.,1980,J.LipidRes.213:284-91、Cheungetal.,1987,J.LipidRes.288:913-29、Persson,etal.,1998,J.Chromatogr.711:97-109、米国特許第第5,059,528号、同第5,834,596号、同第5,876,968、および同第5,721,114号、ならびに、国際公開第86/04920号、および国際公開第87/02062号を参照されたい。アポリポタンパクは、ApoA-I、ApoA-IMilanoApoA-IM、ApoA-IParisApoA-IP、ApoA-II、ApoA-IV、およびApoEの活性を模倣するペプチドおよびペプチドアナログのようなアポリポタンパクアゴニストをさらに含む。例えば、アポリポタンパクは、米国特許第6,004,925号、同第6,037,323号、同第6,046,166、および同第5,840,688号これらの内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれるに記載されているもののいずれであることもできる。アポリポタンパクアゴニストペプチドまたはペプチドアナログは、例えば、米国特許第6,004,925号、同第6,037,323号、および6,046,166号に記載されている技法を含め、当該技術分野において既知のペプチド合成のためのいずれかの技法を用いて、合成または製造できる。例えば、このようなペプチドは、Merrifieldが初めて説明した固相合成法1963,J.Am.Chem.Soc.85:2149-2154を用いて調製してよい。その他のペプチド合成法は、Bodanszkyetal.,PeptideSynthesis,JohnWileySons,2dEd.,1976、および当業者には容易に入手可能なその他の文献で見ることができる。ポリペプチド合成法の概要は、StuartandYoung,SolidPhasePeptide.Synthesis,PierceChemicalCompany,Rockford,Ill.,1984で見ることができる。ペプチドは、TheProteins,Vol.II,3dEd.,Neurathetal.,Eds.,p.105-237,AcademicPress,NewYork,N.Y.1976に記載されているような溶液法によって合成してもよい。さまざまなペプチド合成で用いるのに適した保護基は、上記の文献とともに、McOmie,ProtectiveGroupsinOrganicChemistry,PlenumPress,NewYork,N.Y.1973に記載されている。ペプチドは、例えばアポリポタンパクA-Iの大部分から化学的または酵素的に切断することによって調製してもよい。特定の実施形態では、アポリポタンパクは、アポリポタンパクの混合物であることができる。1つの実施形態では、アポリポタンパクは、同種混合物、すなわち、単一種のアポリポタンパクであることができる。別の実施形態では、アポリポタンパクは、アポリポタンパクの異種混合物、すなわち、2つ以上の異なるアポリポタンパクの混合物であることができる。アポリポタンパクの異種混合物の実施形態は、例えば、動物供給源由来のアポリポタンパクと半合成供給源由来のアポリポタンパクとの混合物を含むことができる。特定の実施形態では、異種混合物は、例えば、ApoA-IとApoA-IMilanoとの混合物を含むことができる。特定の実施形態では、異種混合物は例えば、ApoA-IMilanoとApoA-IParisとの混合物を含むことができる。本明細書に記載されている方法および組成物で用いるのに適した混合物は、当業者には明らかであろう。アポリポタンパクを天然供給源から得る場合には、植物または動物供給源から得ることができる。アポリポタンパクを動物供給源から得る場合には、アポリポタンパクは、いずれの種に由来するものであることもできる。特定の実施形態では、アポリポタンパクは、動物供給源から得ることができる。特定の実施形態では、アポリポタンパクは、ヒト供給源から得ることができる。好ましい実施形態では、アポリポタンパクは、そのアポリポタンパクの投与対象である個体と同じ種に由来する。本明細書に記載されている脂質粒子および組成物は、脂質混合物のステロール構成成分をさらに含んでよい。ステロールは、存在する場合、リポソーム、脂質ベシクル、または脂質粒子の調製の分野で従来用いられてきたステロールのいずれであることもできる。1つの実施形態では、ステロールはコレステロールである。本明細書に記載されている脂質粒子および組成物は、アニオン性脂質をさらに含んでもよい。脂質粒子で用いるのに適したアニオン性脂質としては、ホスファチジルグリセロール、カルジオリピン、ジアシルホスファチジルセリン、ジアシルホスファチジン酸、N-ドデカノイルホスファチジルエタノールアミン、N-スクシニルホスファチジルエタノールアミン、N-グルタリルホスファチジルエタノールアミン、リシルホスファチジルグリセロール、および中性脂質に結合したその他のアニオン性修飾基が挙げられるが、これらに限らない。追加の実施形態では、両親媒性脂質も、本明細書に記載されている脂質粒子および組成物に含まれている。両親媒性脂質とは、その脂質材の疎水性部分が疎水性相の中まで配向しており、親水性部分が水相の方に配向しているいずれかの好適な物質を指す。このような化合物としては、リン脂質、アミノ脂質、およびスフィンゴ脂質が挙げられるが、これらに限らない。代表的なリン脂質としては、スフィンゴミエリン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン、リゾホスファチジルコリン、リゾホスファチジルエタノールアミン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジオレオイルホスファチジルコリン、ジステアロイルホスファチジルコリン、またはジリノレオイルホスファチジルコリンが挙げられる。スフィンゴ脂質、グリコスフィンゴ脂質ファミリー、ジアシルグリセロール、およびβ-アシルオキシ酸のようなその他の無リン化合物も用いることができる。加えて、このような両親媒性脂質は、トリグリセリドおよびステロールのようなその他の脂質と容易に混合できる。プログラム可能な融合脂質または融合促進脂質も、本明細書に記載されている脂質粒子および組成物に含めるのに適している。このような脂質粒子は、細胞膜と融合する傾向がほとんどなく、所定のシグナルイベントが生じるまではそのペイロードを送達する。これによって、その脂質粒子は、細胞との融合を始める前に、生体または疾患部位に注入した後、より均一に分配可能となる。上記のシグナルイベントは、例えば、pH、温度、イオン環境、または時間の変化であることができる。融合促進脂質は、例えば、上記のような式Iの化合物であることができる。いくつかのケースでは、上記のシグナルイベントは、pHの変化、例えば、細胞外環境と細胞内環境との間、または、細胞内環境とエンドソーム環境との間のpH差であることができる。時間がシグナルイベントであるときには、ATTA-脂質コンジュゲートまたはPEG-脂質コンジュゲートのような融合遅延または隠蔽cloaking構成成分は単に、時間の経過とともに交換されて、脂質粒子膜から出ることができる。脂質粒子が体内で好適に分配されるまでには、融合性となるのに十分な隠蔽作用物質は喪失されている。その他のシグナルイベントにおいては、炎症部位における温度上昇など、疾患部位または標的細胞と関連するシグナルを選択するのが望ましいことがある。活性治療剤本明細書に記載されている脂質粒子および組成物は、1つ以上の活性剤例えば治療剤をさらに含んでよい。本明細書で使用する場合、活性剤には、細胞、組織、器官、または被検体に所望の効果を及ぼすことのできるいずれかの分子または化合物が含まれる。このような効果は、例えば、生物学的、生理学的、または美容的効果であってよい。本発明の脂質粒子および組成物を用いて、さまざまな活性剤のいずれかを送達できる。この活性剤は、核酸、ペプチド、ポリペプチド例えば抗体、サイトカイン、増殖因子、アポトーシス因子、分化誘発因子、細胞表面受容体およびそのリガンド、ホルモン、ならびに小分子であることができる。好適な治療剤としては、抗炎症化合物、抗うつ薬、興奮薬、鎮痛薬、抗生物質、避妊薬、解熱剤、血管拡張薬、血管新生阻害剤、細胞血管作動薬cytovascularagents、シグナル伝達阻害剤、心臓血管薬、例えば、抗不整脈剤、血管収縮薬、ホルモン、およびステロイドも挙げられる。本発明の脂質粒子は、アプタマーを送達することもできる。特定の実施形態では、治療剤はオンコロジー薬であり、このオンコロジー薬は、抗腫瘍薬、抗癌薬、腫瘍薬、抗腫瘍剤などとも称される場合もある。用いてよいオンコロジー薬の例としては、アドリアマイシン、アルケラン、アロプリノール、アルトレタミン、アミホスチン、アナストロゾール、araC、三酸化ヒ素、アザチオプリン、ベキサロテン、biCNU、ブレオマイシン、静注ブスルファン、経口ブスルファン、カペシタビンXeloda、カルボプラチン、カルムスチン、CCNU、セレコキシブ、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、シクロスポリンA、シタラビン、シトシンアラビノシド、ダウノルビシン、シトキサン、ダウノルビシン、デキサメタゾン、デクスラゾキサン、ドデタキセル、ドキソルビシン、ドキソルビシン、DTIC、エピルビシン、エストラムスチン、エトポシドフォスフェート、エトポシドおよびVP-16、エキセメスタン、FK506、フルダラビン、フルオロウラシル、5-FU、ゲムシタビンGemzar、ゲムツズマブ-オゾガミシン、ゴセレリンアセテート、ハイドレア、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イホスファミド、イマチニブメシレート、インターフェロン、イリノテカンCamptostar、CPT-111、レトロゾール、ロイコボリン、ロイスタチン、ロイプロリド、レバミゾール、アリトレチノイン、メゲストロール、メルファラン、L-PAM、メスナ、メトトレキセート、メトキサレン、ミトラマイシン、マイトマイシン、ミトキサントロン、ナイトロジェンマスタード、パクリタキセル、パミドロネート、ペガデマーゼ、ペントスタチン、ポルフィマーナトリウム、プレドニゾン、リツキサン、ストレプトゾシン、STI-571、タモキシフェン、タキソテール、テモゾロミド、テニポシド、VM-26、トポテカンHycamtin、トレミフェン、トレチノイン、ATRA、バルルビシン、ベルバン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、VP16、およびビノレルビンが挙げられるが、これらに限らない。用いてよいオンコロジー薬の他の例は、エリプチシンおよびエリプチシンアナログまたは誘導体、エポチロン、細胞内キナーゼインヒビター、ならびにカンプトテシンである。好ましい実施形態では、活性剤は、siRNAのような核酸である。例えば、活性剤は、目的の産物によってコードされる核酸であることができ、RNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、アンタゴmir、aDNA、プラスミド、リボソームRNArRNA、マイクロRNAmiRNA例えば、一本鎖であるとともに、17~25個のヌクレオチドの長さであるmiRNA、トランスファーRNAtRNA、低分子干渉RNAsiRNA、核内低分子RNAsnRNA、抗原、その断片、タンパク、ペプチド、ワクチン、および小分子、またはこれらの混合物が挙げられるが、これらに限らない。1つのより好ましい実施形態では、核酸はオリゴヌクレオチド例えば15~50個のヌクレオチドの長さまたは、15~30もしくは20~30個のヌクレオチドの長さである。siRNAは、例えば、16~30個のヌクレオチドの長さである二本鎖領域を有することができる。別の実施形態では、核酸は、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、デコイオリゴヌクレオチド、スーパーmir、miRNA模倣体、またはmiRNAインヒビターである。スーパーmirとは、リボ核酸RNAもしくはデオキシリボ核酸DNA、またはこれらの両方、あるいは、これらの変性体の一本鎖、二本鎖、または部分的に二本鎖のオリゴマーまたはポリマーであって、miRNAと実質的に同一のヌクレオチド配列を有するとともに、その標的に対してアンチセンスであるオリゴマーまたはポリマーを指す。miRNA模倣体は、1つ以上のmiRNAの遺伝子サイレンシング能を模倣する目的で用いることのできる分子群を表す。したがって、マイクロRNA模倣体という用語は、RNAi経路に入れるとともに、遺伝子発現を調節することができる合成非コードRNAを指すすなわち、miRNAは、内在性miRNAの供給源から精製することによっては得られない。脂質-核酸粒子中に存在する核酸は、いずれの形態であることもできる。この核酸は、例えば、一本鎖DNAもしくはRNA、二本鎖DNAもしくはRNA、または、DNA-RNAハイブリッドであることができる。二本鎖RNAの非限定例としてはsiRNAが挙げられる。一本鎖核酸としては、例えば、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロRNA、および三本鎖形成オリゴヌクレオチドが挙げられる。本発明の脂質粒子は、1つ以上のリガンドにコンジュゲートされている核酸を送達することもできる。医薬組成物脂質粒子は、特に治療剤と結合させるときには、例えば、投与経路および標準的な薬務に従って選択した製薬学的に許容可能な希釈剤、賦形剤、または担体生理的食塩水またはフォスフェート緩衝液などをさらに含む医薬組成物として調合してよい。特定の実施形態では、siRNA分子の送達のための組成物が説明されている。これらの組成物は、標的タンパクのタンパクレベルおよび/またはmRNAレベルをダウンレギュレートするのに有効である。これらの組成物の活性は、調合物にカチオン性脂質が存在すること、および調合物中のカチオン性脂質のモル比の影響を受け得る。特定的な実施形態では、脂質-核酸粒子を含む医薬組成物は、標準的な技法に従って調製するとともに、製薬学的に許容可能な担体をさらに含む。一般に、生理食塩水が製薬学的に許容可能な担体として採用されることになる。その他の好適な担体としては例えば、水、緩衝水、0.9食塩水、0.3グリシンなど安定性向上のための糖タンパク、例えばアルブミン、リポタンパク、グロブリンなどを含むが挙げられる。食塩水またはその他の塩含有担体を含む組成物中では、担体は好ましくは、脂質粒子の形成の後に加える。したがって、脂質-核酸組成物を形成した後に、その組成物を生理食塩水のような製薬学的に許容可能な担体で希釈することができる。得られた医薬調製物は、従来の周知の滅菌技法によって滅菌してよい。続いて、その水溶液を使用状態で包装することも、無菌条件下でろ過し、凍結乾燥し、その凍結乾燥した調合物を投与前に滅菌水溶液と組み合わせることもできる。この組成物は、生理的状態に近づけるために、必要に応じて製薬学的に許容可能な補助剤pH調整剤、緩衝化剤、張度調整剤など、例えば、ナトリウムアセテート、ナトリウムラクテート、ナトリウムクロリド、カリウムクロリド、カルシウムクロリドなどを含んでもよい。加えて、その脂質懸濁液は、脂質を保管状態におけるフリーラジカルおよび脂質過酸化損傷から保護する脂質保護剤を含んでもよい。α-トコフェロールのような脂肪親和性フリーラジカルクエンチャー、および、フェリオキサミンのような水溶性鉄特異的キレーターが好適である。医薬製剤中の脂質粒子または脂質-核酸粒子の濃度は、非常に様々であることができる。すなわち、約0.01重量未満、通常は約0.05~5重量または少なくとも約0.05~5重量から、10~30重量ほどであることができ、この濃度は、選択した特定的な投与方法に従って、主に流体体積、粘度などによって選択することになる。例えば、上記の濃度は、処置に伴う流体負荷を下げる目的で上昇させてもよい。これは、アテローム動脈硬化性うっ血性心不全または重症高血圧症の患者の場合、特に望ましい場合がある。あるいは、刺激性脂質から構成される複合体は、投与部位の炎症を低減させる目的で、低濃度まで希釈してもよい。1つの実施形態群では、核酸は、結合させた標識を有することになるとともに、相補的核酸の存在を示すことによって診断で用いられることになる。このケースでは、投与する複合体の量は、用いる具体的な標識、診断している病状、および臨床医の判断によって決まることになるが、一般には、体重1キログラム当たり約0.01~約50mg、好ましくは体重1キログラム当たり約0.1~約5mgとなる。上記のとおり、脂質-治療剤例えば核酸粒子は、ポリエチレングリコールPEG修飾リン脂質、PEG-セラミド、またはガングリオシドGM1修飾脂質、または、凝集を防ぐか、または抑えるのに有効なその他の脂質を含んでよい。このような構成成分の追加によって、複合体の凝集が防がれるのみではない。それどころか、循環血液中滞留時間を延長させるとともに、脂質-核酸組成物の標的組織への送達を向上させる手段ももたらす場合もある。脂質-治療剤組成物は、キット形態で提供することもできる。このキットは典型的には、そのキットのさまざまな要素を保持するように仕切られている容器から構成されることになる。このキットは、粒子または医薬組成物を好ましくは脱水形態または濃縮形態で、再水和または希釈、および投与についての説明書とともに含むことになる。特定の実施形態では、上記の粒子は活性剤を含む一方で、別の実施形態では、活性剤を含まない。製造法カチオン性脂質、そのカチオン性脂質を含む脂質粒子、ならびに、そのカチオン性脂質および/または脂質粒子を含む医薬組成物を作製する方法は、例えば国際公開第2010/054406号、国際公開第2010/054401号、国際公開第2010/054405号、および国際公開第2010/054384号、国際公開第2010/042877号、国際公開第2010/129709号、国際公開第2009/086558号、および国際公開第2008/042973号これらの特許のそれぞれは、参照によりその全体が組み込まれるに記載されている。脂質粒子、およびその脂質粒子を含む医薬組成物を作製する方法は、例えば、米国特許出願公開第2004/0142025号、同第2006/0051405号、および同第2007/0042031号これらの特許のそれぞれは、参照によりその全体が組み込まれるにも記載されている。加えて、治療剤、例えば核酸と結合されている脂質粒子をを含め、脂質粒子を調製する方法も記載されている。本明細書に記載されている方法では、脂質の混合物を核酸の緩衝化水溶液と組み合わせて、脂質粒子中に封入された核酸を含む中間体混合物を作製する。1つの実施形態では、封入された核酸は、核酸/脂質比率約3重量~約25重量、好ましくは5~15重量で存在する。その脂質部分が、好ましくは直径30~150nm、より好ましくは約40~90nmの単層ベシクルである脂質封入核酸粒子を得る目的で、上記の中間体混合物を任意でサイズ調節してよい。続いてpHを上昇させて、脂質-核酸粒子上の表面電荷の少なくとも一部を中和し、それによって、少なくとも部分的に表面が中和された脂質-封入核酸組成物をもたらす。例えば、1つの実施形態では、1つ以上の脂質本明細書に記載されている実施形態のうちのいずれかのカチオン性脂質を含むを有機溶液例えばエタノールに溶解させた溶液を調製する。同様に、1つ以上の活性治療剤例えば1種類のsiRNA分子、または2種類のsiRNA分子の1:1モル混合物などを水性緩衝化例えばシトレート緩衝液溶液に溶解させた溶液を調製する。この2つの溶液を混合し、希釈して、siRNA脂質粒子のコロイド懸濁液を形成させる。1つの実施形態では、上記のsiRNA脂質粒子の平均粒径は約80~90nmである。さらなる実施形態では、この分散体を0.45/2マイクロメートルのフィルターに通してろ過し、濃縮し、タンジェンシャルフローろ過によってダイアフィルトレーションにかけてもよい。さらなる実施形態では、得られた生成物の濃度を約2mg/mLに調節する。さらなる実施形態では、この生成物を滅菌ろ過し、無菌ろ過し、包装する。上記のとおり、これらのカチオン性脂質のいくつかは、アミノ基のpKa未満のpHでは帯電しており、アミノ基のpKaを超えるpHでは実質的に中性であるアミノ脂質である。これらのカチオン性脂質は、滴定可能なカチオン性脂質と称され、2つの工程からなるプロセスを用いて、調合物中で用いることができる。第1に、低いpHで、滴定可能なカチオン性脂質、およびその他のベシクル構成成分によって、核酸の存在下で、脂質ベシクルを形成できる。この方式では、ベシクルが核酸を被包して取り込む。第2に、存在する滴定可能なカチオン性脂質のpKaを超えるレベルまで、すなわち、生理的pH以上まで培地のpHを上昇させることによって、新たに形成されたベシクルの表面電荷を中和することができる。このプロセスの特に有益な側面としては、いずれの表面吸着した核酸も容易に除去されること、および、中性表面を有する核酸送達ビヒクルが得られることの両方が挙げられる。中性表面を有するリポソームまたは脂質粒子は、循環血液からの急速な浄化を回避するとともに、カチオン性リポソーム調製物と関連する特定の毒性を回避すると思われる。上記のような滴定可能なカチオン性脂質を核酸-脂質粒子の調合で上記のように用いることに関するさらなる詳細は、米国特許第6,287,591号、および米国特許第6,858,225号参照により本明細書に組み込まれるに示されている。このようにして形成されるベシクルは、核酸含有量の多い、均一なベシクルサイズの調合物をもたらすこともさらに注目される。加えて、このベシクルのサイズは、約30~約150nm、より好ましくは約30~約90nmの範囲であってよい。いずれの特定の理論に束縛されるものではないが、非常に高い効率の核酸封入は、低pHでの静電相互作用によるものと考えられる。酸性pH例えばpH4.0では、ベシクル表面は帯電しており、静電相互作用を通じて核酸の一部を結合させる。外部酸性緩衝液を、より中性の緩衝液例えばpH7.5に換えると、脂質粒子またはリポソームの表面が中和され、いずれの外部核酸も除去できるようになる。この調合プロセスに関するより詳細な情報は、さまざまな公報例えば米国特許第6,287,591号、および米国特許第6,858,225に示されている。上記に鑑み、脂質/核酸調合物を調製する方法を説明する。本明細書に記載されている方法では、脂質の混合物を核酸の緩衝化水溶液と組み合わせて、脂質粒子中に封入された核酸を含む中間体混合物を作製するが、例えば、その際には、封入された核酸は、核酸/脂質比率約10重量~約20重量で存在する。その脂質部分が、好ましくは直径30~150nm、より好ましくは約40~90nmの単層ベシクルである脂質封入核酸粒子を得る目的で、上記の中間体混合物を任意でサイズ調節してよい。続いてpHを上昇させて、脂質-核酸粒子上の表面電荷の少なくとも一部を中和し、それによって、少なくとも部分的に表面が中和された脂質-封入核酸組成物をもたらす。特定の実施形態では、脂質の混合物は、その脂質が、そのpKaを下回るpHではカチオン性となり、そのpKaを上回るpHでは中性となるようなpKaを有する脂質の中から選択する第1の脂質構成成分と、脂質核酸粒子の形成中に粒子の凝集を防ぐ脂質の中から選択する第2の脂質構成成分という少なくとも2つの脂質構成成分を含む。特定的な実施形態では、アミノ脂質はカチオン性脂質である。核酸-脂質粒子を調製する際には、脂質の混合物は典型的には、脂質を有機溶媒に溶解させた溶液である。続いて、この脂質の混合物を乾燥して、薄膜を形成させることも、凍結乾燥して、粉末を形成させてから、水性緩衝液で水和して、リポソームを形成させることもできる。あるいは、好ましい方法では、脂質混合物をエタノールのような水混和性アルコールに可溶化でき、このエタノール溶液を水性緩衝液に加え、その結果、自然発生的にリポソームが形成される。大半の実施形態では、上記のアルコールは、市販されている形状で用いる。例えば、エタノールは、無水エタノール100として、または、95エタノール残部は水であるとして用いることができる。この方法は、米国特許第5,976,567号で、より詳細に説明されている。1つの例示的な実施形態では、脂質の混合物は、アルコール溶媒中のカチオン性脂質、中性脂質カチオン性脂質以外のもの、ステロール例えばコレステロール、およびPEG修飾脂質例えばPEG-DMGまたはPEG-DMAの混合物である。好ましい実施形態では、脂質混合物は、アルコール、より好ましくはエタノール中のカチオン性脂質、中性脂質、コレステロール、およびPEG修飾脂質から本質的になる。さらに好ましい実施形態では、第1の溶液は、約20~70のカチオン性脂質、5~45の中性脂質、20~55のコレステロール、0.5~15のPEG修飾脂質というモル比の上記の脂質混合物からなる。さらに好ましい実施形態では、第1の溶液は、表1~5に記載されている脂質から選択したカチオン性脂質、DSPC、コレステロール、およびPEG-DMGまたはPEG-DMAの混合物より好ましくは、約20~60のカチオン性脂質、5~25のDSPC、25~55のコレステロール、0.5~15のPEG-DMGまたはPEG-DMAというモル比から本質的になる。特定的な実施形態では、脂質のモル比は、おおよそ40/10/40/10単位:モル、カチオン性脂質/DSPC/コレステロール/PEG-DMGもしくはPEG-DMA、35/15/40/10単位:モル、カチオン性脂質/DSPC/コレステロール/PEG-DMGもしくはPEG-DMA、または52/13/30/5単位:モル、カチオン性脂質/DSPC/コレステロール/PEG-DMGもしくはPEG-DMAである。別の好ましい実施形態群では、上記の組成物中の中性脂質は、POPC、DPPC、DOPE、またはSMに置き換えられている。脂質混合物は、核酸を含んでよい緩衝化水溶液と組み合わせる。この緩衝化水溶液は典型的には、緩衝液のpHが、脂質混合物中のプロトン化可能な脂質のpKa未満である溶液である。好適な緩衝液の例としては、シトレート、フォスフェート、アセテート、およびMESが挙げられる。特に好ましい緩衝液はシトレート緩衝液である。好ましい緩衝液は、封入されている核酸の化学的性質に応じて、アニオンが1~1000mMの範囲であり、高い負荷レベルを得るには、緩衝液濃度の最適化が重要である場合がある例えば、米国特許第6,287,591号、および米国特許第6,858,225号それぞれ、参照によりその全体が組み込まれるを参照されたい。あるいは、クロリド、サルフェートなどでpH5~6に酸性化した純水も有用である場合がある。このケースでは、粒子を透析してエタノールを除去するか、pHを上昇させるか、または生理食塩水のような製薬学的に許容可能な担体と混合すると、粒子膜内外の浸透ポテンシャルを平衡化する5グルコースまたは別の非イオン性溶質を加えるのが好適である場合がある。緩衝液中の核酸の量はさまざまであることができるが、典型的には約0.01mg/mL~約200mg/mL、より好ましくは約0.5mg/mL~約50mg/mLとなる。脂質の混合物と、治療用核酸の緩衝化水溶液を組み合わせて、中間体混合物をもたらす。この中間体混合物は典型的には、封入させた核酸を有する脂質粒子の混合物である。加えて、上記の中間体混合物は、脂質粒子表面上の負荷電核酸と正荷電脂質とのイオン引力によって、脂質粒子リポソームまたは脂質ベシクルの表面に結合される核酸の一部も含んでよいアミノ脂質またはプロトン化可能な第1の脂質構成成分を構成するその他の脂質は、pHが、その脂質上のプロトン化可能基のpKa未満である緩衝液中で正電荷を有する。好ましい実施形態群では、脂質の混合物は、脂質のアルコール溶液であり、各溶液を組み合わせたときに、得られるアルコール含有率が約20体積~約45体積になるように、各溶液の体積を調節する。これらの混合物を組み合わせる方法は、多くの場合、作製する調合物の規模に応じて、さまざまなプロセスのいずれかを含むことができる。例えば、総体積が約10~20mL以下であるときには、溶液を試験管で組み合わせて、ボルテックスミキサーを用いて攪拌することができる。大規模プロセスは、好適な生成規模のガラス器具で行うことができる。任意により、脂質混合物と治療剤核酸の緩衝化水溶液を組み合わせることによって作製した脂質-封入治療剤例えば核酸複合体をサイズ調節して、所望のサイズ範囲と、比較的狭い脂質粒径分布を得ることができる。好ましくは、本明細書で提供する組成物は、平均径約70~約200nm、より好ましくは約90~約130nmにサイズ調節することになる。リポソームを所望のサイズに調節するためのいくつかの技法が利用可能である。1つのサイズ調節法は、米国特許第4,737,323号参照により本明細書に組み込まれるに記載されている。バス超音波処理またはプローブ超音波処理のいずれかによってリポソーム懸濁液を超音波処理すると、約0.05マイクロメートル未満のサイズの小単層ベシクルSUVまで徐々にサイズが小さくなる。ホモジナイズは、剪断エネルギーに依存して大きなリポソームを小さなリポソームに断片化する別の方法である。典型的なホモジナイズ手順では、選択されたリポソームサイズ、典型的には約0.1~0.5マイクロメートルが観察されるまで、多重膜層ベシクルを標準的なエマルジョンホモジナイザーに繰り返し循環させる。いずれの方法においても、従来のレーザービームによる粒径測定法によって、粒径分布をモニタリングできる。本明細書における特定の方法では、押出法を用いて、均一なベシクルサイズを得る。リポソーム組成物を細孔のポリカーボネート膜または非対称セラミック膜に通して押し出すことによって、比較的明確なサイズ分布を得られる。典型的には、所望のリポソーム複合体サイズ分布が得られるまで、懸濁液を膜に1回以上循環させる。リポソームは、徐々に細孔の小さくなる膜に通して押し出して、リポソームサイズを徐々に小さくするようにしてもよい。いくつかのケースでは、形成される脂質-核酸組成物は、いずれのサイズ調節もせずに用いることもできる。特定的な実施形態では、製造法は、脂質-核酸組成物の脂質部分の少なくとも一部の表面電荷を中和する工程をさらに含む。この表面電荷を少なくとも部分的に中和することによって、封入されなかった核酸が脂質粒子表面から遊離され、従来の技法を用いて、その核酸を組成物から除去できる。好ましくは、封入されずに表面吸着した核酸を得られた組成物から、緩衝液溶液の交換を通じて除去する。例えば、シトレート緩衝液pH約4.0、組成物の形成のために用いるをHEPES-緩衝化食塩水HBSのpH約7.5溶液に置き換えると、リポソーム表面が中和され、その表面から核酸が放出される。続いて、標準的な方法を用いるクロマトグラフィーによって、放出された核酸を除去してから、用いた脂質のpKaを超えるpHの緩衝液に換えることができる。任意により、水性緩衝液で水和させて脂質ベシクルすなわち脂質粒子を形成し、核酸を加える前に、上記の方法のいずれかを用いて、サイズ調節するができる。上記のとおり、水性緩衝液のpHは、アミノ脂質のpKa未満である必要がある。続いて、サイズ調節して予形成した上記のベシクルに、核酸の溶液を加えることができる。このような予形成ベシクルに核酸を封入させるには、その混合物は、エタノールのようなアルコールを含む必要がある。エタノールのケースでは、エタノールは、約20w/w~約45w/wの濃度で存在する必要がある。加えて、脂質ベシクルの組成と、核酸の性質に応じて、水性緩衝液-エタノール混合物中の予形成ベシクルと核酸との混合物を約25°C~約50°Cの温度まで加温する必要がある場合もある。脂質ベシクルの核酸のレベルを所望のものにするために、封入プロセスを最適化するには、エタノール濃度および温度のような変数の操作が必要であることは当業者には明らかであろう。核酸の封入に適した条件の例は、実施例に示されている。予形成ベシクルに核酸を封入したら、外部pHを上昇させて、表面電荷を少なくとも部分的に中和することができる。続いて、封入されずに表面吸着した核酸を上記のように除去することができる。治療法本明細書に記載されている脂質粒子および組成物は、インビトロおよびインビボの両方で、結合または封入させた治療剤を細胞に送達することを含むさまざまな目的で利用してよい。したがって、疾患または障害の治療を必要とする被検体の疾患または障害を治療する方法は、好適な治療剤と結合している脂質粒子と被検体を接触させることを含むことができる。本明細書に記載されているように、脂質粒子は、例えばsiRNA分子およびプラスミドを含む核酸の送達に特に有用である。このため、脂質粒子および組成物を用いて、標的遺伝子の発現を低減する核酸例えばsiRNA、または所望のタンパクの発現を増加させる目的で用いることができる核酸例えば、所望のタンパクをコードするプラスミドと結合している脂質粒子と細胞を接触させることによって、インビトロおよびインビボの両方で、標的遺伝子およびタンパクの発現を調節してよい。脂質粒子を用いて、インビトロまたはインビボで、治療剤を細胞に送達してよい。特定的な実施形態では、この治療剤は核酸であり、この核酸は核酸-脂質粒子を用いて、細胞に送達する。脂質粒子、および関連する医薬組成物を用いるさまざまな方法の下記の説明は、核酸-脂質粒子に関する説明によって例示されているが、これらの方法および組成物は、治療剤の送達による治療が有効であると思われるいずれかの疾患または障害の治療を目的とするいずれの治療剤の送達にも容易に適応させることができることを理解されたい。特定の実施形態では、核酸を細胞に導入する方法が説明されている。細胞に導入するのに好ましい核酸は、siRNA、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、プラスミド、アンチセンス、およびリボザイムである。これらの方法は、細胞内送達を行うのに十分な期間にわたって、粒子または組成物を細胞と接触させることによって行ってよい。組成物は、ほぼすべての細胞型に吸着できる。吸着すると、核酸-脂質粒子は、その細胞の一部に取り込まれ得るか、脂質を細胞膜と交換し得るか、または、その細胞と融合し得るかのいずれかである。上記の複合体の核酸部分の転移または組み込みは、これらの経路のいずれか1つによって行うことができる。限定されるものではないが、エンドサイトーシスによって細胞に取り込まれる粒子のケースでは、その粒子は、エンドソーム膜と相互作用し、その結果、おそらく非二重層相の形成によってエンドソーム膜が不安定化し、その結果、封入核酸が細胞質に導入されると考えられる。同様に、脂質粒子が細胞血漿膜と直接融合するケースでは、融合が起きると、リポソーム膜が細胞膜に統合され、リポソームの内容物が細胞内液と組み合わされる。細胞と脂質-核酸組成物との接触は、インビトロで行うときには、生物学的に適合する培地中で行うことになる。組成物の濃度は、具体的な用途に応じて非常にさまざまであり得るが、一般には約1μモル~約10ミリモルである。特定の実施形態では、細胞の脂質-核酸組成物による処理は一般に、生理学的温度約37°Cで、約1~24時間、好ましくは約2~8時間の期間で行うことになる。インビトロ用途では、核酸の送達は、植物由来であるか動物由来であるか、脊椎動物であるか脊椎動物でないか、いずれの組織または型であるかを問わず、培養液中で増殖させたいずれかの細胞に対するものであることができる。好ましい実施形態では、細胞は動物細胞、より好ましくは哺乳類細胞、最も好ましくはヒト細胞となる。1つの実施形態群では、細胞密度が約103~約105個/mL、より好ましくは約2×104個/mLの60~80コンフルエントな播種細胞に、脂質-核酸粒子懸濁液を加える。上記の細胞に加える懸濁液の濃度は、好ましくは約0.01~20μg/mL、よ好ましくは約1μg/mLである。別の実施形態では、脂質粒子を用いて、核酸を細胞または細胞株例えば腫瘍細胞株に送達できる。このような細胞株の非限定例としては、HELAATCCCatN:CCL-2、KBATCCCatN:CCL-17、HEP3BATCCCatN:HB-8064、SKOV-3ATCCCatN:HTB-77、HCT-116ATCCCatN:CCL-247、HT-29ATCCCatN:HTB-38、PC-3ATCCCatN:CRL-1435、A549ATCCCatN:CCL-185、MDA-MB-231ATCCCatN:HTB-26が挙げられる。典型的な用途としては、siRNAを細胞内送達させるための周知の手順を用いて、特定の細胞標的をノックダウンまたはサイレンシングすることが挙げられる。あるいは、用途としては、治療上有用なポリペプチドをコードするDNAまたはmRNA配列の送達が含まれる。このようにして、欠損または不存在遺伝子産物を供給することによって、遺伝病に対して治療を提供するすなわち、デュシェンヌ型ジストロフィーについては、Kunkel,etal.,Brit.Med.Bull.453:630-6431989を、嚢胞性線維症については、Goodfellow,Nature341:102-1031989を参照されたい。組成物の他の用途としては、細胞にアンチセンスオリゴヌクレオチドを導入することが挙げられるBennett,etal.,Mol.Pharm.41:1023-10331992を参照されたい。あるいは、組成物は、当業者にとって既知である方法を使用して、インビボで核酸を細胞に送達する目的で用いることもできる。DNAまたはmRNA配列の送達に関しては、Zhu,etal.,Science261:209-2111993参照により本明細書に組み込まれるに、DOTMA-DOPE複合体を用いて、サイトメガロウイルスCMV-クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼCAT発現プラスミドを静脈内送達することについて記載されている。Hyde,etal.,Nature362:250-2561993参照により本明細書に組み込まれるには、リポソームを用いて、マウスの肺の気道上皮と肺胞に嚢胞性線維症膜貫通コンダクタンス調節因子CFTR遺伝子を送達することが記載されている。Brigham,etal.,Am.J.Med.Sci.298:278-2811989参照により本明細書に組み込まれるには、細胞内酵素であるクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼCATをコードする機能性原核生物遺伝子によるマウス肺のインビボトランスフェクションが記載されている。したがって、組成物は、感染症の治療に使用することができる。インビボ投与では、医薬組成物は、好ましくは非経口投与、すなわち、関節内投与、静脈内投与、腹腔内投与、皮下投与、または筋肉内投与する。特定的な実施形態では、医薬組成物は、ボーラス注入によって静脈内投与または腹腔内投与する。1つの例としては、Stadlerらの米国特許第5,286,634号参照により本明細書に組み込まれるを参照されたい。細胞内核酸送達は、Straubringer,etal.,MethodsinEnzymology,AcademicPress,NewYork.101:512-5271983、Mannino,etal.,Biotechniques6:682-6901988、Nicolau,etal.,Crit.Rev.Ther.DrugCarrierSyst.6:239-2711989、およびBehr,Acc.Chem.Res.26:274-2781993でも論じられている。脂質系治療薬を投与するさらに別の方法は、例えば、Rahmanらの米国特許第3,993,754号、Searsの米国特許第4,145,410号、Papahadjopoulosらの米国特許第4,235,871号、Schneiderの米国特許第4,224,179号、Lenkらの米国特許第4,522,803号、およびFountainらの米国特許第4,588,578号に記載されている。別の方法では、医薬調製物を標的組織に直接塗布することによって、医薬調製物を標的組織と接触させてもよい。この塗布は、局所的な開口または閉鎖法によって行ってよい。局所的とは、皮膚、中咽頭部、外耳道などのように、環境に暴露されている組織に、医薬調製物を直接塗布することを意味する。開口法は、患者の皮膚を切開し、医薬調製物を塗布する下層組織を直接可視化することを含む処置法である。この処置法は一般に、肺に達するようにする開胸術、腹部内臓に達するようにする腹式開腹術、または標的組織に達するようにするその他の直接的な外科的アプローチのような外科的処置によって行う。閉鎖法は、内部の標的組織を直接可視化はしないが、皮膚の小さな創傷から器具を挿入することによって到達するようにする侵襲的処置である。例えば、医薬調製物は、針洗浄により腹膜に投与してよい。同様に、本発明の医薬調製物は、脊髄麻酔または脊髄のメトリザマイドイメージングで一般的に実施されるように、腰椎穿刺してから、患者に適切な体位を取らせた状態で、点滴によって髄膜または脊髄に投与してよい。あるいは、本発明の医薬調製物は、内視鏡器具によって投与してもよい。脂質-核酸組成物は、肺に吸入させるエアロゾルでBrigham,etal.,Am.J.Sci.2984:278-2811989を参照されたい、または、疾患部位への直接注射によってCulver,HumanGeneTherapy,MaryAnnLiebert,Inc.,Publishers,NewYork.pp.70-711994投与することもできる。本発明の脂質-治療剤粒子の用量は、治療剤の脂質に対する比率、および、患者の年齢、体重、状態に基づく投薬医師の見解によって決まることになる。1つの実施形態では、標的ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの発現を調節する方法が記載されている。これらの方法は一般に、標的ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの発現を調節できる核酸と結合している脂質粒子と細胞を接触させることを含む。本明細書で使用する場合、調節するという用語は、標的ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの発現を変化させることを指す。異なる実施形態では、調節は、上昇または増強を意味することも、低下または低減を意味することもできる。標的ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの発現レベルを測定する方法は、当該技術分野において既知かつ利用可能であり、その方法としては、例えば、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応RT-PCRおよび免疫組織化学的技法を用いる方法が挙げられる。特定的な実施形態では、標的ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの発現レベルは、適切なコントロール値と比べて、少なくとも10、20、30、40、50、または50超上昇するか、または低減される。例えば、ポリペプチドの発現の上昇が望ましい場合、核酸は、所望のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターであってよい。その一方で、ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの発現の低減が望ましい場合、核酸は、例えば、標的ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドと特異的にハイブリダイズし、それによって、標的ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの発現を妨害するポリヌクレオチド配列を含むアンチセンスオリゴヌクレオチド、siRNA、またはマイクロRNAであってよい。あるいは、核酸は、上記のようなアンチセンスオリゴヌクレオチド、siRNA、またはマイクロRNAを発現するプラスミドであってもよい。特定的な実施形態では、治療剤は、siRNA、マイクロRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、および、siRNA、マイクロRNA、またはアンチセンスオリゴヌクレオチドを発現できるプラスミドから選択し、このsiRNA、マイクロRNA、またはアンチセンスRNAは、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、またはその相補体に特異的に結合して、そのポリペプチドの発現が低減されるようにするポリヌクレオチドを含む。別の実施形態では、核酸は、ポリペプチド、またはその機能的変異体もしくは断片をコードして、そのポリペプチド、またはその機能的変異体もしくは断片の発現が上昇するようにするプラスミドである。関連する実施形態では、被検体の体内でのポリペプチドの過剰発現によって特徴付けられる疾患または障害を治療する方法は、その被検体に医薬組成物を投与することを含み、この治療剤は、siRNA、マイクロRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、および、siRNA、マイクロRNA、またはアンチセンスオリゴヌクレオチドを発現できるプラスミドから選択し、このsiRNA、マイクロRNA、またはアンチセンスRNAは、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、またはその相補体に特異的に結合するポリヌクレオチドを含む。1つの実施形態では、医薬組成物は、表1~5に記載されている脂質から選択したカチオン性脂質と、DSPCと、コレステロールと、PEG-DMGまたはPEG-DMAとの混合物例えば約20~60のカチオン性脂質:5~25のDSPC:25~55のコレステロール:0.5~15のPEG-DMGまたはPEG-DMAというモル比の混合物からなるか、またはこのような混合物から本質的になる脂質粒子であって、治療用核酸と結合している脂質粒子を含む。特定的な実施形態では、脂質のモル比は、おおよそ40/10/40/10単位:モル、カチオン性脂質/DSPC/コレステロール/PEG-DMGもしくはPEG-DMA、35/15/40/10単位:モル、カチオン性脂質/DSPC/コレステロール/PEG-DMGもしくはPEG-DMA、または52/13/30/5単位:モル、カチオン性脂質/DSPC/コレステロール/PEG-DMGもしくはPEG-DMAである。別の実施形態群では、これらの組成物中の中性脂質は、POPC、DPPC、DOPE、またはSMに置き換えられている。別の関連する実施形態では、被検体におけるポリペプチドの過小発現によって特徴付けられる疾患または障害を治療する方法は、被検体に医薬組成物を投与することを含み、この治療剤は、ポリペプチド、またはその機能的変異体もしくは断片をコードするプラスミドである。被検体の体内で免疫反応を誘発する方法は、被検体に医薬組成物を投与することを含むことができ、この治療剤は免疫刺激性オリゴヌクレオチドである。特定の実施形態では、上記の免疫反応は、体液性免疫反応または粘膜免疫反応である。さらなる実施形態では、本発明の医薬組成物は、ワクチンまたは抗原と併せて被検体に投与する。したがって、ワクチンは、免疫刺激性オリゴヌクレオチドを含み、免疫反応が所望される抗原と結合もしている脂質粒子を含むことができる。特定的な実施形態では、この抗原は腫瘍抗原であるか、例えばウイルス、細菌、または寄生虫のような感染体と関連するものである。さまざまな腫瘍抗原、感染体抗原、およびその他の疾患と関連する抗原は、当該技術分野において周知であり、これらの例は、本明細書で引用されている参考文献に記載されている。好適な抗原の例としては、ポリペプチド抗原およびDNA抗原がが挙げられるが、これらに限らない。抗原の具体例は、A型肝炎抗原、B型肝炎抗原、天然痘抗原、ポリオ抗原、炭疽菌抗原、インフルエンザ抗原、チフス抗原、破傷風抗原、麻疹抗原、ロタウイルス抗原、ジフテリア抗原、百日咳抗原、結核抗原、および風疹抗原である。好ましい実施形態では、抗原はB型肝炎組み換え抗原である。別の態様では、抗原はA型肝炎組み換え抗原である。別の態様では、抗原は腫瘍抗原である。このような腫瘍関連抗原の例は、MUC-1、EBV抗原、およびバーキットリンパ腫と関連する抗原である。さらなる態様では、抗原は、チロシナーゼ関連タンパク腫瘍抗原組み換え抗原である。当業者であれば、用いるのに適する他の抗原を知っているであろう。用いるのに適する腫瘍関連抗原には、単一の腫瘍型を示す場合があったり、いくつかの型の腫瘍に共有されている場合があったり、および/または、正常細胞と比べて腫瘍細胞で排他的に発現されるか、もしくは過剰表現される場合があったりする突然変異分子および非突然変異分子の両方が含まれる。タンパクおよび糖タンパクに加えて、炭水化物、ガングリオシド、糖脂質、およびムチンの発現の腫瘍特異的パターンも説明されている。本主題の癌ワクチンで用いられる例示的な腫瘍関連抗原としては、腫瘍細胞に特有の突然変異または再配列を有する癌遺伝子、腫瘍抑制遺伝子、およびその他の遺伝子のタンパク産物、再活性化胚性遺伝子産物、腫瘍胎児抗原、組織特異的ただし腫瘍特異的ではない分化抗原、増殖因子受容体、細胞表面炭水化物残基、外来ウイルスタンパク、および多数のその他の自己タンパクが挙げられる。腫瘍関連抗原の具体的な実施形態としては、例えば、Rasp21癌原遺伝子、腫瘍抑制因子p53、およびBCR-abl癌遺伝子のタンパク産物、ならびにCDK4、MUM1、カスパーゼ8、およびベータカテニンのような突然変異抗原と、ガレクチン4、ガレクチン9、炭酸脱水酵素、アルドラーゼA、PRAME、Her2/neu、ErbB-2、およびKSAのような過剰発現抗原と、アルファフェトプロテインAFP、ヒト絨毛膜性生殖腺刺激ホルモンhCGのような腫瘍胎児抗原と、癌胎児抗原CEA、ならびに、Mart1/MelanA、gp100、gp75、チロシナーゼ、TRP1、およびTRP2のようなメラノサイト分化抗原のような自己抗原と、PSA、PAP、PSMA、PSM-P1、およびPSM-P2のような前立腺関連抗原と、MAGE1、MAGE3、MAGE4、GAGE1、GAGE2、BAGE、RAGE、ならびに、NY-ESO1、SSX2、およびSCP1のような他の癌精巣抗原のような再活性化胚性遺伝子産物と、Muc-1およびMuc-2のようなムチンと、GM2、GD2、およびGD3のようなガングリオシド、Lewisyおよびglobo-Hのような中性糖脂質および糖タンパクと、Tn、トンプソンフリーデンライヒ抗原TF、およびsTnのような糖タンパクとが挙げられる。また、本明細書における腫瘍関連抗原としては、全細胞および腫瘍細胞溶解物、ならびに、その免疫原性部分と、B細胞リンパ腫に対して用いられる、Bリンパ球の単クローン性増殖で発現される免疫グロブリンイディオタイプも挙げられる。病原体としては、哺乳類、より具体的にはヒトに感染する感染体、例えばウイルスが挙げられるが、これらに限らない。感染性ウイルスの例としては、レトロウイルス科例えば、HIV-1のようなヒト免疫不全ウイルスHTLV-III、LAV、HTLV-III/LAV、またはHIV-IIIとも称される、およびHIV-LPなどの他の単離体、ピコルナウイルス科例えば、ポリオウイルス、A型肝炎ウイルス、エンテロウイルス、ヒトコクサッキーウイルス、ライノウイルス、エコーウイルス、カルシウイルス科例えば、胃腸炎を引き起こす菌株、トガウイルス科例えば、ウマ脳炎ウイルス、風疹ウイルス、フラビウイルス科例えば、デング熱ウイルス、脳炎ウイルス、黄熱病ウイルス、コロナウイルス科例えばコロナウイルス、ラブドウイルス科例えば、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、コロナウイルス科例えば、コロナウイルス、ラブドウイルス科例えば、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、フィロウイルス科例えば、エボラウイルス、パラミクソウイルス科例えば、パラインフルエンザウイルス、おたふくかぜウイルス、はしかウイルス、RSウイルス、オルトミクソウイルス科例えば、インフルエンザウイルス、ブニヤウイルス科例えば、ハンタウイルス、ブンガウイルス、フレボウイルス、およびナイロウイルス、アレナウイルス科出血熱ウイルス、レオウイルス科例えば、レオウイルス、オルビウイルス、およびロタウイルス、ビルナウイルス科、ヘパドナウイルス科B型肝炎ウイルス、パルボウイルス科パルボウイルス、パポバウイルス科パピローマウイルス、ポリオーマウイルス、アデノウイルス科大半のアデノウイルス、ヘルペスウイルス科単純ヘルペスウイルスHSV1および2、帯状疱疹ウイルス、サイトメガロウイルスCMV、ヘルペスウイルス、ポックスウイルス科痘瘡ウイルス、ワクシニアウイルス、ポックスウイルス、イリドウイルス科例えば、アフリカブタコレラウイルス、ならびに、未分類ウイルス例えば、海綿状脳症の原因菌、デルタ肝炎の原因菌B型肝炎ウイルスの欠損付随体であると考えられる、非A型、非B型肝炎の原因菌クラスI=内部的に伝染、クラス2=非経口的に伝染すなわちC型肝炎、ノーウォークおよび関連ウイルス、ならびにアストロウイルスが挙げられるが、これらに限らない。また、グラム陰性菌およびグラム陽性菌は、脊椎動物の抗原としての機能を果たす。このようなグラム陽性菌としては、パスツレラ菌、ブドウ球菌、および連鎖球菌が挙げられるが、これらに限らない。グラム陰性菌としては、大腸菌、シュードモナス菌、およびサルモネラ菌が挙げられるが、これらに限らない。感染性細菌の具体例としては、ヘリコバクターピロリ、ボレリアブルグドルフェリ、レジュネラニューモフィラ、ミコバクテリア例えば、ヒト型結核菌、トリ型結核菌、バテー杆菌、M.カンサシ、M.ゴルドネ、黄色ブドウ球菌、淋菌、髄膜炎菌、リステリア菌、化膿連鎖球菌A群連鎖球菌、StreptococcusagalactiaeB群連鎖球菌、連鎖球菌ヴィリダンス型、Streptococcusfaecalis、Streptococcusbovis、連鎖球菌嫌気性、肺炎連鎖球菌、病原性カンピロバクター菌、腸球菌、インフルエンザ菌、炭疽菌、ジフテリア菌、コリネバクテリウム属菌、豚丹毒菌、ウェルシュ菌、破傷風菌、Enterobacteraerogenes、肺炎杆菌、Pasturellamultocida、バクテロイデス属菌、Fusobacteriumnucleatum、Streptobacillusmoniliformis、梅毒トレポネーマ、フランベジアトレポネーマ、レプトスピラ属菌、リケッチア属菌、およびイスラエル放線菌が挙げられるが、これらに限らない。病原体の追加の例としては、哺乳類、より具体的にはヒトに感染する感染性真菌が挙げられるが、これらに限らない。感染性真菌の例としては、Cryptococcusneoformans、Histoplasmacapsulatum、Coccidioidsimmitis、Blastomycesdermatitidis、トラコーマクラミジア、Candidaalbicansが挙げられるが、これらに限らない。感染性寄生虫の例としては、熱帯熱マラリア原虫、四日熱マラリア原虫、卵形マラリア原虫、および三日熱マラリア原虫のようなPlasmodiumが挙げられる。その他の感染性生体すなわち原生生物としては、トキソプラスマが挙げられる。1つの実施形態では、本発明の調合物を用いて、FVII、Eg5、PCSK9、TPX2、apoB、SAA、TTR、RSV、PDGFベータ遺伝子、Erb-B遺伝子、Src遺伝子、CRK遺伝子、GRB2遺伝子、RAS遺伝子、MEKK遺伝子、JNK遺伝子、RAF遺伝子、Erk1/2遺伝子、PCNAp21遺伝子、MYB遺伝子、JUN遺伝子、FOS遺伝子、BCL-2遺伝子、サイクリンD遺伝子、VEGF遺伝子、EGFR遺伝子、サイクリンA遺伝子、サイクリンE遺伝子、WNT-1遺伝子、ベータ-カテニン遺伝子、c-Met遺伝子、PKC遺伝子、NFKB遺伝子、STAT3遺伝子、サーバイビン遺伝子、Her2/Neu遺伝子、SORT1遺伝子、XBP1遺伝子、トポイソメラーゼI遺伝子、トポイソメラーゼIIアルファ遺伝子、p73遺伝子、p21WAF1/CIP1遺伝子、p27KIP1遺伝子、PPM1D遺伝子、RAS遺伝子、カベオリンI遺伝子、MIBI遺伝子、MTAI遺伝子、M68遺伝子、腫瘍抑制遺伝子、p53腫瘍抑制遺伝子、p53ファミリーメンバーDN-p63、pRb腫瘍抑制遺伝子、APC1腫瘍抑制遺伝子、BRCA1腫瘍抑制遺伝子、PTEN腫瘍抑制遺伝子、mLL融合遺伝子、BCR/ABL融合遺伝子、TEL/AML1融合遺伝子、EWS/FLI1融合遺伝子、TLS/FUS1融合遺伝子、PAX3/FKHR融合遺伝子、AML1/ETO融合遺伝子、アルファv-インテグリン遺伝子、Flt-1受容体遺伝子、チューブリン遺伝子、ヒトパピローマウイルス遺伝子、ヒトパピローマウイルスの複製に必要な遺伝子、ヒト免疫不全ウイルス遺伝子、ヒト免疫不全ウイルスの複製に必要な遺伝子、A型肝炎ウイルス遺伝子、A型肝炎ウイルスの複製に必要な遺伝子、B型肝炎ウイルス遺伝子、B型肝炎ウイルスの複製に必要な遺伝子、C型肝炎ウイルス遺伝子、C型肝炎ウイルスの複製に必要な遺伝子、D型肝炎ウイルス遺伝子、D型肝炎ウイルスの複製に必要な遺伝子、E型肝炎ウイルス遺伝子、E型肝炎ウイルスの複製に必要な遺伝子、F型肝炎ウイルス遺伝子、F型肝炎ウイルスの複製に必要な遺伝子、G型肝炎ウイルス遺伝子、G型肝炎ウイルスの複製に必要な遺伝子、H型肝炎ウイルス遺伝子、H型肝炎ウイルスの複製に必要な遺伝子、RSウイルス遺伝子、RSウイルスの複製に必要な遺伝子、単純ヘルペスウイルス遺伝子、単純ヘルペスウイルスの複製に必要な遺伝子、ヘルペスサイトメガロウイルス遺伝子、ヘルペスサイトメガロウイルスの複製に必要な遺伝子、ヘルペスエプスタインバーウイルス遺伝子、ヘルペスエプスタインバーウイルスの複製に必要な遺伝子、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス遺伝子、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルスの複製に必要な遺伝子、JCウイルス遺伝子、JCウイルスの複製に必要なヒト遺伝子、ミクソウイルス遺伝子、ミクソウイルス遺伝子の複製に必要な遺伝子、ライノウイルス遺伝子、ライノウイルスの複製に必要な遺伝子、コロナウイルス遺伝子、コロナウイルスの複製に必要な遺伝子、西ナイルウイルス遺伝子、西ナイルウイルスの複製に必要な遺伝子、セントルイス脳炎遺伝子、セントルイス脳炎の複製に必要な遺伝子、ダニ媒介脳炎ウイルス遺伝子、ダニ媒介脳炎ウイルスの複製に必要な遺伝子、マリーバレー脳炎ウイルス遺伝子、マリーバレー脳炎ウイルスの複製に必要な遺伝子、デング熱ウイルス遺伝子、デング熱ウイルス遺伝子の複製に必要な遺伝子、シミアンウイルス40遺伝子、シミアンウイルス40の複製に必要な遺伝子、ヒトT細胞リンパ球向性ウイルス遺伝子、ヒトT細胞リンパ球向性ウイルスの複製に必要な遺伝子、モロニーマウス白血病ウイルス遺伝子、モロニーマウス白血病ウイルスの複製に必要な遺伝子、脳心筋炎ウイルス遺伝子、脳心筋炎ウイルスの複製に必要な遺伝子、はしかウイルス遺伝子、はしかウイルスの複製に必要な遺伝子、水痘帯状疱疹ウイルス遺伝子、水痘帯状疱疹ウイルスの複製に必要な遺伝子、アデノウイルス遺伝子、アデノウイルスの複製に必要な遺伝子、黄熱病ウイルス遺伝子、黄熱病ウイルスの複製に必要な遺伝子、ポリオウイルス遺伝子、ポリオウイルスの複製に必要な遺伝子、ポックスウイルス遺伝子、ポックスウイルスの複製に必要な遺伝子、プラスモジウム遺伝子、プラスモジウム遺伝子の複製に必要な遺伝子、Mycobacteriumulcerans遺伝子、Mycobacteriumulceransの複製に必要な遺伝子、結核菌遺伝子、結核菌遺伝子の複製に必要な遺伝子、癩菌遺伝子、癩菌の複製に必要な遺伝子、黄色ブドウ球菌遺伝子、黄色ブドウ球菌の複製に必要な遺伝子、肺炎連鎖球菌遺伝子、肺炎連鎖球菌の複製に必要な遺伝子、化膿連鎖球菌遺伝子、化膿連鎖球菌の複製に必要な遺伝子、クラミジア肺炎病原体遺伝子、クラミジア肺炎病原体の複製に必要な遺伝子、肺炎ミコプラズマ遺伝子、肺炎ミコプラズマの複製に必要な遺伝子、インテグリン遺伝子、セレクチン遺伝子、補体系遺伝子、ケモカイン遺伝子、ケモカイン受容体遺伝子、GCSF遺伝子、Gro1遺伝子、Gro2遺伝子、Gro3遺伝子、PF4遺伝子、MIG遺伝子、前血小板塩基性タンパク遺伝子、MIP-1I遺伝子、MIP-1J遺伝子、RANTES遺伝子、MCP-1遺伝子、MCP-2遺伝子、MCP-3遺伝子、CMBKR1遺伝子、CMBKR2遺伝子、CMBKR3遺伝子、CMBKR5v、AIF-1遺伝子、I-309遺伝子、イオンチャネルの構成要素の遺伝子、神経伝達物質受容体の遺伝子、神経伝達物質リガンドの遺伝子、アミロイドファミリー遺伝子、プレセニリン遺伝子、HD遺伝子、DRPLA遺伝子、SCA1遺伝子、SCA2遺伝子、MJD1遺伝子、CACNL1A4遺伝子、SCA7遺伝子、SCA8遺伝子、LOH細胞に見られる対立遺伝子、または多形型遺伝子の1つの対立遺伝子のようなこれらに限らない標的遺伝子をサイレンシングまたは調節できる。別の実施形態では、本発明は、核酸分子を送達する方法であって、核酸分子とカチオン性脂質とを含む核脂質粒子を投与することを含み、このカチオン性脂質が、i中心炭素原子と、ii上記の中心原子に直接結合している頭部基と、iii上記の中心炭素原子に直接結合している2つの疎水性テイル各疎水性テイルは、上記の中心原子に結合している炭素数14以上の脂肪族基を含み、この脂肪族基は、a生分解性基に割り込まれて、その生分解性基と上記の中心炭素原子との間に、少なくとも4つの炭素原子の鎖が存在するようになっているか、b疎水性テイルの末端に、生分解性基を含み、上記の核酸分子が送達されるまでカチオン性脂質が無傷のままであり、送達後、疎水性テイルがインビボで切断されるようになっていると、を有する方法に関する。定義本明細書で使用する場合、カチオン性脂質という用語には、1つまたは2つの脂肪酸または脂肪族鎖と、プロトン化すると、生理的pHでカチオン性脂質を形成できるアミノ頭部基アルキルアミノまたはジアルキルアミノ基を含むとを有する脂質が含まれる。いくつかの実施形態では、カチオン性脂質は、アミノ脂質と称される。複合体の投与が疾患または障害の有効な治療レジメンである検体または患者は、好ましくはヒトであるが、臨床試験、またはスクリーニング、または活性実験と関連する実験動物を含め、いずれの動物であることもできる。したがって、当業者であれば容易に分かるように、本発明の方法、化合物、および組成物は特に、いずれの動物、特には哺乳類ヒト、ネコ科またはイヌ科の被検体のような家庭用動物、ウシ、ウマ、ヤギ、ヒツジ、およびブタの被検体これらに限らないのような家畜、野生動物自然にいるものか、動物園にいるものかは問わない、マウス、ラット、ウサギ、ヤギ、ヒツジ、ブタ、イヌ、およびネコのような研究動物、鶏、七面鳥、および鳴き鳥のような鳥類、すなわち獣医学用途の動物が挙げられるが、これらに限らないに投与するのに適している。上記の一般式中に示されている化学基の多くは、特定の順番で書かれている例えば-OCO-。別段の指示のない限り、示されている順番でその化学基を一般式に組み込むことが意図されている。例えば、-Ri-M1k-Rm-式中のM1は-COO-であり、kは1であるという形の一般式は、別段の定めのない限り、-Ri-COO-Rm-を指す。化学基が特定の順番で書かれているときには、別段の定めのない限り、逆の順番も考えられることを理解されたい。例えば、-Ri-M1k-Rm-式中のM1は、-CONH-であるという一般式すなわち-Ri-CO-NH-Rm-では、別段の定めのない限り、M1が-NHCO-である化合物すなわち-Ri-NHCO-Rm-も考えられる。本明細書で使用する場合、生分解性基という用語は、生物環境内、例えば、生体、器官、組織、細胞、または細胞小器官内で、結合破壊反応を起こし得る結合を1つ以上含む基を指す。例えば、生分解性基は、ヒトのような哺乳類の身体によって例えば加水分解によって代謝可能であり得る。生分解性結合を含むいくつかの基としては例えば、エステル、ジチオール、およびオキシムが挙げられるが、これらに限らない。生分解性基の非限定例は、-OCO-、-COO-、-SCO-、-COS-、-OCS-、-CSO-、-S-S-、-CR5=N-、-N=CR5-、-CR5=N-O-、-O-N=CR5-、-CONR5-、-NR5CO-、-CSNR5-、-NR5CO-、-NR5CONR5-、-OCOO-、-OSiR52O-、-COCR3R4COO-、または-OCOCR3R4CO-である。本明細書で使用する場合、脂肪族基は、炭素原子が鎖状に結合している非芳香族基であり、飽和または不飽和のいずれかである。アルキルおよびアルキレンという用語は、直鎖または分岐鎖の飽和炭化水素部分を指す。1つの実施形態では、アルキル基は直鎖の飽和炭化水素である。別段の定めのない限り、アルキルまたはアルキレン基は1~24個の炭素原子を含む。代表的な飽和直鎖アルキル基としては、メチル、エチル、n-プロピル、n-ブチル、n-ペンチル、およびn-ヘキシルが挙げられる。代表的な飽和分岐アルキル基としては、イソプロピル、sec-ブチル、イソブチル、tert-ブチル、およびイソペンチルが挙げられる。アルケニルという用語は、炭素-炭素二重結合を1つ以上有する直鎖または分岐鎖の炭化水素部分を指す。1つの実施形態では、アルケニル基は、1つ、2つ、または3つの二重結合を含み、さもなければ飽和されている。別段の定めのない限り、アルケニル基は2~24個の炭素原子を含む。アルケニル基には、シス異性体およびトランス異性体の両方が含まれる。代表的な直鎖および分岐アルケニル基としては、エチレニル、プロピレニル、1-ブテニル、2-ブテニル、イソブチレニル、1-ペンテニル、2-ペンテニル、3-メチル-1-ブテニル、2-メチル-2-ブテニル、および2,3-ジメチル-2-ブテニルが挙げられる。アルキニルという用語は、炭素-炭素三重結合を1つ以上有する直鎖または分岐鎖の炭化水素部分を指す。別段の定めのない限り、アルキニル基は2~24個の炭素原子を含む。代表的な直鎖および分岐アルキニル基としては、アセチレニル、プロピニル、1-ブチニル、2-ブチニル、1-ペンチニル、2-ペンチニル、および3-メチル-1-ブチニルが挙げられる。アシルという用語は、水素、アルキル、部分飽和もしくは完全飽和シクロアルキル、部分飽和もしくは完全飽和複素環、アリール、またはヘテロアリールで置換されたカルボニル基を指す。例えば、アシル基としては、炭素数1~20のアルカノイル例えばホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、バレリル、カプロイル、およびt-ブチルアセチル、炭素数3~20のシクロアルキルカルボニル例えばシクロプロピルカルボニル、シクロブチルカルボニル、シクロペンチルカルボニル、およびシクロヘキシルカルボニル、複素環式カルボニル例えばピロリジニルカルボニル、ピロリド-2-オン-5-カルボニル、ピペリジニルカルボニル、ピペラジニルカルボニル、およびテトラヒドロフラニルカルボニル、アロイル例えばベンゾイル、ならびにヘテロアロイル例えばチオフェニル-2-カルボニル、チオフェニル-3-カルボニル、フラニル-2-カルボニル、フラニル-3-カルボニル、1H-ピロイル-2-カルボニル、1H-ピロイル-3-カルボニル、およびベンゾ[b]チオフェニル-2-カルボニルのような基が挙げられる。アリールという用語は、芳香族の単環式、二環式、または三環式炭化水素環系を指す。別段の定めのない限り、アリール基は6~14個の炭素原子を含む。アリール部分の例としては、フェニル、ナフチル、アントラセニル、およびピレニルが挙げられるが、これらに限らない。シクロアルキルおよびシクロアルキレンという用語は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルのような飽和単環式または二環式炭化水素部分を指す。別段の定めのない限り、シクロアルキルまたはシクロアルキレン基は3~10個の炭素原子を含む。シクロアルキルアルキルという用語は、アルキル基に結合しているシクロアルキル基であって、そのアルキル基が、その分子の残部に結合している基を指す。複素環またはヘテロシクリルという用語は、飽和または不飽和のいずれかである非芳香族の5~8員の単環式環系、または7~12員の二環式環系、または11~14員の三環式環系であって、単環式の場合には、窒素、酸素、および硫黄から独立して選択した1~3個のヘテロ原子を含み、二環式の場合には、窒素、酸素、および硫黄から独立して選択した1~6個のヘテロ原子を含み、三環式の場合には、窒素、酸素、および硫黄から独立して選択した1~9個のヘテロ原子を含み、上記の窒素および硫黄ヘテロ原子が任意で酸化されていてもよく、窒素ヘテロ原子が任意で四級化されていてもよい環系を指す。例えば、複素環はシクロアルコキシ基であってよい。複素環は、その複素環中のいずれかのヘテロ原子または炭素原子を介して、その分子の残部に結合していてもよい。複素環としては、モルホリニル、ピロリジノニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、ヒダントイニル、バレロラクタミル、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロチオフェニル、およびテトラヒドロチオピラニルが挙げられるが、これらに限らない。ヘテロアリールという用語は、芳香族の5~8員の単環式環系、7~12員の二環式環系、または11~14員の三環式環系であって、単環式の場合には1~3個のヘテロ原子を有し、二環式の場合には1~6個のヘテロ原子を有し、三環式の場合には1~9個のヘテロ原子を有し、これらのヘテロ原子をO、N、またはSから選択する環系を指す例えば、単環式の場合には、炭素原子とN、O、またはSのうちの1~3個のヘテロ原子を有し、二環式の場合には、炭素原子とN、O、またはSのうちの1~6個のヘテロ原子を有し、三環式の場合には、炭素原子とN、O、またはSのうちの1~9個のヘテロ原子を有する。本明細書に記載されているヘテロアリール基は、1つの共通の炭素-炭素結合を共有する融合環も含んでよい。置換という用語は、別段の指示のない限り、所定の構造体中の1つ以上の水素ラジカルを指定の置換基のラジカルと置き換えることを指し、この置換基としては、ハロ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロシクリル、チオール、アルキルチオ、オキソ、チオキシ、アリールチオ、アルキルチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルスルホニル、アルキルスルホニルアルキル、アリールスルホニルアルキル、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ハロアルキル、アミノ、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルキルアミノアルキル、アリールアミノアルキル、アミノアルキルアミノ、ヒドロキシ、アルコキシアルキル、カルボキシアルキル、アルコキシカルボニルアルキル、アミノカルボニルアルキル、アシル、アラルコキシカルボニル、カルボン酸、スルホン酸、スルホニル、ホスホン酸、アリール、ヘテロアリール、複素環、および脂肪族基が挙げられるが、これらに限らない。上記の置換基は、さらに置換されていてもよいことが分かる。例示的な置換基としては、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、および環状アミノ化合物が挙げられる。ハロゲンまたはハロという用語は、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードを指す。アルキルアミンという用語は-NHアルキルラジカルを指し、ジアルキルアミンという用語は-Nアルキル2ラジカルを指す。アルキルフォスフェートという用語は、-O-PQ’Q-O-R式中のQ’およびQはそれぞれ独立してO、S、NR2、任意で置換されているアルキル、またはアルコキシであり、Rは、任意で置換されているアルキル、ω-アミノアルキル、またはω-置換アミノアルキルであるを指す。アルキルホスホロチオエートという用語は、Q’またはQの少なくとも1つがSであるアルキルフォスフェートを指す。アルキルホスホネートという用語は、Q’またはQの少なくとも1つがアルキルであるアルキルフォスフェートを指す。ヒドロキシアルキルという用語は、-O-アルキルラジカルを指す。アルキル複素環という用語は、少なくとも1つのメチレンが複素環に置き換えられているアルキルを指す。ω-アミノアルキルという用語は、-アルキル-NH2ラジカルを指す。ω-置換アミノアルキルという用語は、N上のHのうちの少なくとも1つがアルキルと置き換えられているω-アミノアルキルを指す。ω-ホスホアルキルという用語は、-アルキル-O-PQ’Q-O-R式中のQ’およびQはそれぞれ独立して、OまたはSであり、Rは、任意で置換されているアルキルであるを指す。ω-チオホスホアルキルという用語は、Q’またはQの少なくとも1つがSであるω-ホスホアルキルを指す。本願では、下記の略語を用いる。DSPCはジステアロイルホスファチジルコリンである。DPPCは1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリンである。POPCは1-パルミトイル-2-オレオイル-sn-ホスファチジルコリンである。DOPEは1,2-ジオレオイル-sn-3-ホスホエタノールアミンである。PEG-DMGは一般には、1,2-ジミリストイル-sn-グリセロール-メトキシポリエチレングリコール例えばPEG2000を指す。TBDPSClはtert-ブチルクロロジフェニルシランである。DMAPはジメチルアミノピリジンである。NMOはN-メチルモルホリン-N-オキシドである。LiHDMSはリチウムビストリメチルシリルアミドである。HMPAはヘキサメチルホスホラミドである。EDCは1-エチル-3-3-ジメチルアミノプロピルカルボジイミドである。DIPEAはジイソプロピルエチルアミンである。DCMはジクロロメタンである。TEAはトリエチルアミンである。TBAFはテトラブチルアンモニウムフルオリドである。いくつかの実施形態では、本発明の方法では、保護基を用いる必要がある場合がある。保護基法は、当業者には周知である例えばProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,Green,T.W.etal.,Wiley-Interscience,NewYorkCity,1999を参照されたい。簡潔に言うと、保護基は、官能基の無用の反応性を低減または排除するいずれかの基である。保護基を官能基に付加して、特定の反応中にその官能基の反応性を隠し、その後、保護基を除去して、元の官能基を暴露させることができる。いくつかの実施形態では、アルコール保護基を用いる。アルコール保護基は、アルコール官能基の無用の反応性を低下または排除するいずれかの基である。保護基は、当該技術分野において周知の技法を用いて付加および除去することができる。化合物は、本明細書に記載されている技法、または既知の有機合成法のうちの少なくとも1つによって調製してよい。実施例実施例1化合物2:化合物110.0g、18.8ミリモル、国際公開第2010/054406号参照をCH2Cl280mLに溶解させた溶液に、トリエチルアミン7.86mL、56.4ミリモル、DMAP459mg、3.76ミリモル、およびtert-ブチルクロロジフェニルシラン9.62mL、37.6ミリモルを加えた。この反応混合物を24時間攪拌した。続いて、その混合物をCH2Cl2で希釈し、飽和NaHCO3水溶液で洗浄した。有機層を分離し、無水Na2SO4で乾燥した。ろ過および濃縮後、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン中0~5EtOAcによって精製して、化合物2を得た12.4g、16.1ミリモル、86、ヘキサンを用いた場合のRf=0.24。1HNMR400MHz、CDCl3δ7.66-7.68m、4H、7.33-7.42m、6H、5.30-5.39m、4H、3.67-3.72m、1H、1.97-2.04m、8H、1.07-1.42m、52H、1.05s、9H、0.88t、J=6.8Hz、6H化合物3:化合物212.4g、16.1ミリモルをtert-ブタノール100mL、THF30mL、およびH2O10mLに溶解させた溶液に、4-メチルモルホリンN-オキシド4.15g、35.4ミリモルおよびオスミウムテトロキシド41mg、0.161mgを加えた。この反応混合物を16時間攪拌してから、重硫酸ナトリウムを加えることによってクエンチした。蒸発によって溶媒を除去した後、残渣をEt2O500mLおよびH2O300mLで抽出した。有機層を分離し、無水Na2SO4で乾燥した。ろ過および濃縮後、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン:EtOAc=1:1、Rf=0.49によって精製して、化合物3を得た12.7g、15.1ミリモル、94。1HNMR400MHz、CDCl3δ7.66-7.68m、4H、7.33-7.43m、6H、3.67-3.73m、1H、3.57-3.62m、4H、1.82t、J=5.0Hz、4H、1.10-1.51m、60H、1.04s、9H、0.88t、J=6.8Hz、6H化合物4:化合物312.6g、15.0ミリモルを1,4-ジオキサン220mL、CH2Cl270mL、MeOH55mL、およびH2O55mLに溶解させた溶液に、NaIO47.70g、36.0ミリモルを加えた。この反応混合物を16時間、室温で攪拌した。この混合物をEt2O500mLおよびH2O300mLで抽出した。有機層を分離し、無水Na2SO4で乾燥した。ろ過および濃縮後、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン:EtOAc=9:1、Rf=0.30によって精製して、化合物4を得た7.98g、14.5ミリモル、97、C35H54NaO3SiMNaの分子量計算値:573.3740、実測値:573.3化合物7:化合物5Tetrahedron,63,1140-1145,2006参照、1.09g、2.18ミリモルをTHF20mLおよびHMPA4mLに溶解させた溶液に、LiHMDS1MTHF溶液、4.36mL、4.36ミリモルを-20°Cで加えた。得られた混合物を20分間、-20°Cで攪拌してから、-78°Cまで冷却した。化合物4500mg、0.908ミリモルをTHF4mLに溶解させた溶液を加えた。この混合物を攪拌し、一晩で室温まで温めた。MS解析によって、二酸の形成が示された化合物6、C53H85O5SiM-H-の計算値:829.6166、観察値:829.5。この混合物に、NaHCO31.10g、13.1ミリモルおよびジメチルサルフェート1.24mL、13.1ミリモルを加え、2時間、室温で攪拌した。飽和NH4Cl水溶液50mLを加えることによって、この反応物をクエンチしてから、Et2O2×100mLで抽出した。有機層を分離し、無水Na2SO4で乾燥した。ろ過および濃縮後、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン:EtOAc=9:1、Rf=0.35によって精製して、化合物7を得た270mg、0.314ミリモル、35。C55H90NaO5SiMNaの分子量計算値:881.6455、実測値:881.6484化合物8:化合物7265mg、0.308ミリモルをTHF2.5mLに溶解させた溶液に、n-TBAF1MTHF溶液、0.555mL、0.555ミリモルを加えた。この反応混合物を14時間、45°Cで攪拌した。濃縮後、この混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン:EtOAc=3:1、Rf=0.52によって精製して、化合物8を得た155mg、0.250ミリモル、81。C39H72NaO5MNaの分子量計算値:643.5277、実測値643.5273化合物9:化合物8150mg、0.242ミリモルおよび4-ジメチルアミノ酪酸ヒドロクロリド49mg、0.290ミリモルをCH2Cl25mLに溶解させた溶液に、ジイソプロピルエチルアミン0.126mL、0.726ミリモル、N-3-ジメチルアミノプロピル-N’-エチルカルボジイミドヒドロクロリド56mg、0.290ミリモル、およびDMAP6mg、0.0484ミリモルを加えた。この反応混合物を室温で14時間攪拌した。続いて、この反応混合物をCH2Cl2100mLで希釈し、飽和NaHCO3水溶液50mLで洗浄した。有機層をMgSO4で乾燥し、ろ過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーCH2Cl2中の0~5MeOHによって精製して、化合物9を得た121mg、0.165ミリモル、68、Rf=0.25CH2Cl2中の5MeOHで展開。C45H84NO6MHの分子量計算値734.6299、実測値734.5化合物10:化合物9をCH3CNおよびCHCl3中のCH3Clで処理することによって、化合物10を得ることができる。実施例2化合物12:化合物11J.Med.Chem.,38,636-46,1995参照、1.25g、2.58ミリモルをTHF20mLおよびHMPA4mLに溶解させた溶液に、LiHMDS1MTHF溶液、2.58mL、2.58ミリモルを-20°Cで加えた。この混合物を20分間、-20°Cで攪拌してから、-78°Cまで冷却した。化合物4500mg、0.908ミリモルをTHF9mLおよびHMPA0.9mLに溶解させた溶液を加えた。この混合物を攪拌し、一晩で室温まで温めた。H2O40mLを加えることによって、この反応物をクエンチしてから、Et2O150mL×3で抽出した。有機層を分離し、無水Na2SO4で乾燥した。ろ過および濃縮後、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン:EtOAc=9:1、Rf=0.35によって精製して、化合物12を得た136mg、0.169ミリモル、19。C51H82NaO5SiMNaの分子量計算値:825.5829、実測値825.5化合物5の代わりに化合物13を用いて、化合物7に関して記載した手順と同様の手順に従って、化合物12を得た135mg、0.168ミリモル、46。化合物15/化合物16:化合物12800mg、0.996ミリモルをTHF5mLに溶解させた溶液に、n-TBAF1MTHF溶液、5mL、5.00ミリモルを加えた。この反応混合物を16時間、45°Cで攪拌した。濃縮後、この混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物15ヘキサン:EtOAc=3:1、Rf=0.46、372mg、0.659ミリモル、66および化合物16CH2Cl2:MeOH=95:5、Rf=0.36、135mg、0.251ミリモル、25を得た。化合物15の分子量C35H64NaO5MNa計算値:587.4651、実測値:587.4652、化合物16の分子量C33H61O5MH計算値:537.4519、実測値:537.5化合物17:化合物15164mg、0.290ミリモルおよび4-ジメチルアミノ酪酸ヒドロクロリド58mg、0.348ミリモルをCH2Cl25mLに溶解させた溶液に、ジイソプロピルエチルアミン0.152mL、0.870ミリモル、N-3-ジメチルアミノプロピル-N’-エチルカルボジイミドヒドロクロリド67mg、0.348ミリモル、およびDMAP7mg、0.058ミリモルを加えた。この反応混合物を室温で14時間攪拌した。この反応混合物をCH2Cl2100mLで希釈し、飽和NaHCO3水溶液50mLで洗浄した。有機層をMgSO4で乾燥し、ろ過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーCH2Cl2中の0~5MeOHによって精製して、化合物17を得た158mg、0.233ミリモル、80、Rf=0.24CH2Cl2中の5MeOHで展開。C45H84NO6MHの分子量計算値:734.6299、実測値734.5化合物18:化合物17をCH3CNおよびCHCl3中のCH3Clで処理することによって、化合物18を得ることができる。.化合物19:化合物16130mg、0.242ミリモルをTHF2mLおよびMeOH2mLに溶解させた溶液に、トリメチルシリルジアゾメタン2MEt2O溶液、0.158mL、0.315ミリモルを加えた。この反応混合物を14時間攪拌した。蒸発後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン:EtOAc=3:1、Rf=0.50によって精製して、化合物19を得た99mg、0.180ミリモル、74。1HNMR400MHz、CDCl3δ5.29-5.40m、4H、4.12q、J=7.1Hz、2H、3.66s、3H、3.55-3.59m、1H、2.30dd、J=14.7、7.2Hz、4H、1.98-2.07m、8H、1.60-1.68m、4H、1.23-1.43m、37H化合物20:化合物1995mg、0.168ミリモル、および4-ジメチルアミノ酪酸ヒドロクロリド42mg、0.252ミリモルをCH2Cl23mLに溶解させた溶液に、ジイソプロピルエチルアミン0.088mL、0.504ミリモル、N-3-ジメチルアミノプロピル-N’-エチルカルボジイミドヒドロクロリド48mg、0.504ミリモル、およびDMAP4mg、0.034ミリモルを加えた。この反応混合物を室温で14時間攪拌した。この反応混合物をCH2Cl2100mLで希釈し、飽和NaHCO3水溶液50mLで洗浄した。有機層をMgSO4で乾燥し、ろ過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーCH2Cl2中の0~5MeOHによって精製して、化合物20を得た103mg、0.155ミリモル、92、Rf=0.19CH2Cl2中の5MeOHで展開。1HNMR400MHz、CDCl3δ5.29-5.40m、4H、4.83-4.89m、1H、4.12q、J=7.1Hz、2H、3.67s、3H、2.28-2.34m、8H、2.23s、6H、1.98-2.07m、8H、1.76-1.83m、2H、1.60-1.68m、4H、1.23-1.51m、35H化合物21:化合物20をCH3CNおよびCHCl3中のCH3Clで処理することによって、化合物21を得ることができる。実施例3:ジ-アルデヒド中間体4の代替的な合成法ジ-アルデヒド4は、スキーム3に示されているように、1-ブロモ-9-デセンを用いて合成できる。頭部基27を含むジ-アルデヒドは、例えばウィッティング反応を用いて、末端エステル置換脂質を合成するのに有用であり得る。オゾン分解によってジ-アルデヒド4および頭部基27を得ることができる。実施例4:化合物8の代替的な合成法化合物8は、スキーム4に示されているように合成することができる。化合物29:NaH油中60、82g、1.7096モルを500mLの無水DMFに攪拌懸濁させた液に、滴下漏斗を用いて、化合物28250g、1.7096モルを1.5LのDMFに溶解させた溶液を0°Cでゆっくり加えた。この反応混合物を30分間攪拌してから、ベンジルブロミド208.86mL、1.7096モルを窒素雰囲気下でゆっくり加えた。続いて、この反応物を周囲温度まで温め、10時間攪拌した。続いて、砕いた氷約2kgでこの混合物をクエンチし、エチルアセテート2×1Lで抽出した。有機層を水1Lで洗浄して無用のDMFを除去し、Na2SO4で乾燥し、真空で蒸発乾固させた。粗化合物を60~120のシリカゲルで精製し、DCM中の0~5MeOHで溶出して、化合物29を黄白色の液体として得た220g、54。1HNMR400MHz、CDCl3:δ=7.33-7.24m、5H、4.49s、2H、3.63-3.60m、2H、3.47-3.43m、2H、1.63-1.51m、4H、1.39-1.23m、8H化合物30:化合物29133g、0.5635モルを1.5LのDCMに溶解させ、この攪拌溶液にCBr4280.35g、0.8456モルを加え、その反応混合物を0°Cまで不活性雰囲気下で冷却した。続いて、温度を20°C未満に保ちながら、PPh3251.03g、0.9571モルを少しずつ加えた。完全に加えた後、この反応混合物を3時間、室温で攪拌した。反応の完了後、反応混合物から沈殿した固体PPh3Oをろ過によって除去し、砕いた氷約1.5kgでろ液を希釈し、DCM3×750mLで抽出した。有機層を分離し、無水Na2SO4で乾燥し、真空下で蒸留した。ヘキサン中の0~5エチルアセテートを溶出系として用いて、得られた粗化合物を60~120メッシュのシリカゲルカラムでクロマトグラフィーにかけて、化合物30を黄白色の液体として得た150g、89。1HNMR400MHz、CDCl3:δ=7.33-7.25m、5H、4.49s、2H、3.47-3.41m、2H、3.41-3.37m、2H、1.86-1.80m、4H、1.62-1.56m、2H、1.42-1.29m、8H化合物31:新たに活性化した削り状Mg24.08g、1.003モルに、200mLの無水THFを加えてから、この混合物に少量のヨウ素を不活性雰囲気下で加えた。発熱反応を制御しながら、化合物30150g、0.5016モルを1Lの乾燥THFに入れた溶液をゆっくり加えた。続いて、この反応物を1時間加熱還流してから、室温まで冷却した。続いて、メチルフォーメート60.24g、1.0033モルをゆっくり加え、その反応を2時間継続させた。完了後、10HCl、続いて水1Lをゆっくり加えることによって、その反応物をクエンチし、エチルアセテート3×1Lで抽出した。有機層を5リットルのビーカーに取り、500mLのメタノールで希釈し、0°Cまで冷却した。この溶液に、過剰のNaBH4約5当量を少しずつ加え、HClを加えても切断されなかったフォーメートエステルを加水分解させるようにした。得られた溶液を1時間攪拌してから、揮発性物質を真空下で除去した。残渣を水1L中に取り、10HCl溶液によって酸性化したpH4。続いて、この生成物をエチルアセテート3×1Lで抽出した。続いて、有機相をロータリーエバポレーターで乾燥および抽出濃縮して、所望の化合物31を固体として得た57g、24。1HNMR400MHz、CDCl3:δ=7.35-7.32m、8H、7.29-7.24m、2H、4.49s、4H、3.56m、1H、3.46-3.43m、4H、1.63-1.56m、4H、1.44-1.34m、28H、13CNMR100MHz、CDCl3:δ=138.56、128.21、127.49、127.34、72.72、71.76、70.37、37.37、29.64、29.56、29.47、29.33、26.07、25.54化合物32:化合物3156g、0.1196モルを700mLの乾燥THFに溶解させ、0°Cまで冷却した。TBSCl36.06g、0.2396モルをゆっくり加えてから、イミダゾール32.55g、0.4786モルを不活性雰囲気下で加えた。続いて、この反応物を室温で18時間攪拌した。完了したら、その反応物を氷約1kgでクエンチし、エチルアセテート3×500mLで抽出した。有機層を分離し、飽和NaHCO3溶液で洗浄して酸性不純物を除去し、Na2SO4で乾燥し、減圧下で蒸発させて粗化合物を得て、この粗化合物をシリカゲル60~120メッシュによって精製し、0~10エチルアセテートヘキサンで溶出して、化合物32を黄色っぽい油として得た60g、82。1HNMR400MHz、CDCl3:δ=7.33-7.24m、10H、4.49s、4H、3.60-3.57m、1H、3.46-3.43m、4H、1.61-1.54m、4H、1.41-1.26m、28H、0.87s、9H、0.02s、6H化合物33:化合物3260g、0.1030モルを500mLのエチルアセテートに溶解させ、N2で20分間脱気した。パラジウム炭素Pd10重量12gを加え、その反応物を水素雰囲気下で18時間攪拌した。完了後、その混合物をセライト床でろ過し、エチルアセテートで洗浄した。このろ液を真空下で蒸発させて、次の合成手順で用いるのに十分な純度である化合物33を得た19g、46。1HNMR400MHz、CDCl3:δ=3.64-3.58m、5H、1.59br、2H、1.57-1.51m、4H、1.38-1.22m、28H、0.87s、9H、0.02s、6H化合物34:化合物338.2g、0.0199モルを100mLの乾燥DCMに溶解させ、0°Cまで冷却した。TEA22.14mL、0.1592モルを不活性雰囲気下で加えた。この混合物を5分間攪拌後、メシルクロリド4.6mL、0.059モルを滴下し、その反応物をさらに3時間攪拌した。反応の完了後、その混合物を氷約200gでクエンチし、DCM3×75mLで抽出した。有機層を無水ナトリウムサルフェートで乾燥し、蒸発させ、粗化合物を得て、ヘキサン中の0~30エチルアセテートを溶出系として用いて、この粗化合物を60~120メッシュのシリカゲルカラムで精製して、化合物34を黄白色の液体として得た8.2g、73。1HNMR400MHz、CDCl3:δ=4.22-4.19m、4H、3.60-3.58m、1H、2.99s、6H、1.75-1.69m、4H、1.38-1.28m、28H、0.86s、9H、0.02s、6H化合物35:化合物348.2g、0.0146モルを400mLの乾燥エーテルに溶解させた溶液に、MgBr2Et2O22.74g、0.08817モルを0°Cで窒素雰囲気下にて少しずつ加えた。加え終わった後、この反応混合物を28時間加熱還流した。反応の完了後、この反応で形成された無機物質をろ過によって除去した。このろ液を蒸発させ、ヘキサン中の0~3エチルアセテートを溶出系として用いて、得られた粗化合物を60~120メッシュのシリカゲルカラムで精製して、化合物35を無色の液体として得た6.6g、85。1HNMR400MHz、CDCl3:δ=3.61-3.58m、1H、3.41-3.37t、4H、J=6.8Hz、1.87-1.80m、4H、1.42-1~25m、24H、0.87s、9H、0.012s、6H化合物36:エチニルトリメチルシラン5.3mL、0.0378モルを60mLの乾燥THFに溶解させた溶液を-78°Cまで冷却し、ヘキサン中の1.4Mn-BuLi23mL、0.03405モルを不活性雰囲気下でゆっくり加えた。この反応物を10分間攪拌してから、HMPA2.3g、0.01324モルを加え、続いて、得られた混合物を2時間、0°Cで攪拌してから、-78°Cまで冷却した。これに、化合物355g、0.0094モルを60mLの乾燥THFに溶解させた溶液をゆっくり加え、加え終わった後に、その反応物を室温まで温め、18時間置いた。反応の進行を1HNMRによってモニタリングした。完了後、この反応混合物を0°Cまで冷却し、飽和NH4Cl溶液50mLに続いて水200mLを慎重に加えることによってクエンチした。水相をヘキサン3×250mLで抽出した。有機層を乾燥し、溶媒を真空下で除去して、化合物36を得た5g、94化合物36は、さらなる精製なしに使用した。1HNMR400MHz、CDCl3:δ=3.62-3.56m、1H、2.21-2.17m、4H、1.49-1.47m、4H、1.37-1.26m、24H、0.87s、9H、0.13s、18H、0.021s、6H化合物37:化合物365g、0.0088モルを50mLメタノールに攪拌溶解させた液に、K2CO36.1g、0.044モルを一度に加えてから、得られた混合物を18時間、周囲温度で攪拌した。続いて、揮発性物質をロータリーエバポレーターで除去し、その粗混合物を100mLの水で希釈し、ヘキサン3×100mLで抽出した。有機層をNa2SO4で乾燥し、真空下で蒸発させて、化合物37を得た3.5g、97化合物37は、さらなる精製なしに使用した。1HNMR400MHz、CDCl3:δ=3.60-3.58m、1H、2.19-2.14m、4H、1.93-1.92m、2H、1.54-1.49m、4H、1.37-1.27m、24H、0.87s、9H、0.02s、6H化合物39:化合物372.5g、0.00598モルを25mLの乾燥THFに溶解させ、-40°Cまで冷却した。n-BuLiヘキサン12.9mL中1.4M、0.01794モルをゆっくり加え、10分間隔を置いた後に、HMPA25mLをゆっくり加えた。得られた混合物を窒素雰囲気下で30分間、-40°Cに保った。続いて、冷却した反応混合物に、化合物383.5g、1.01196モルを25mLの乾燥THFに溶解させた溶液を滴下した。得られた混合物を室温まで2時間かけて温めてから、室温で18時間攪拌した。続いて、飽和NH4Cl溶液約50mLを加えることによって、混合物をクエンチし、その生成物をエチルアセテート3×50mLで抽出した。溶媒をロータリーエバポレーターで除去し、ジクロロメタン中の0~3エチルアセテートを溶出系として用いて、得られた粗生成物を100~200メッシュのシリカゲルカラムによって精製して、化合物39を黄色油として得た0.9g、18。1HNMR400MHz、CDCl3:δ=4.56-4.55m、2H、3.87-3.83m、2H、3.74-3.68m、2H、3.59-3.57m、1H、3.49-3.46m、2H、3.39-3.33m、2H、2.13-2.10m、8H、1.87-1.75m、2H、1.74-1.66m、2H、1.57-1.42m、20H、1.40-1.19m、40H、0.87s、9H、0.02s、6H化合物40:化合物39504mg、0.598ミリモルを10mLの乾燥エーテルに溶解させた溶液に、MgBR2Et2O926mg、3.59ミリモルを加えた。この反応混合物を14時間攪拌してから、飽和NaHCO3水溶液を加えることによってクエンチした。この生成物をCH2Cl2で抽出した。有機層をNa2SO4で乾燥し、ろ過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物40を得た307mg、0.455ミリモル、76、Rf=0.36ヘキサン:EtOAc=2:1で展開。1HNMR400MHz、CDCl3δ3.59-3.66m、5H、2.14t、J=6.6Hz、8H、1.21-1.59m、52H、0.88s、9H、0.03s、6H化合物41:化合物40180mg、0.267ミリモルを無水DMF5mLに攪拌溶解させた液に、ピリジニウムジクロメート603mg、1.60ミリモルを加えた。この反応混合物を48時間攪拌した。水20mLで希釈後、この混合物をEt2O3×40mLで抽出した。有機層をNa2SO4で乾燥し、ろ過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物41を得た53mg、0.075ミリモル、28、Rf=0.25CH2Cl2:MeOH:AcOH=95:4.5:0.5で展開。C43H77O5SiM-H-の分子量計算値:701.5540、実測値:701.5。この化合物は、TEMPO酸化によって合成することができる。化合物42:化合物19に関して記載した手順と同様の手順によって化合物42を得た23mg、0.032ミリモル、化合物40から21。1HNMR400MHz、CDCl3δ3.67s、6H、3.59-3.62m、1H、2.30t、J=7.5Hz、4H、2.13t、J=6.8Hz、8H、1.27-1.64m、48H、0.88s、9H、0.03s、6HP-2ニッケル条件を用いる還元によって、化合物43を得ることができ、続いて、TBAFによる脱保護によって、化合物8を得ることができる。実施例5:化合物8の代替的な合成法化合物8は、スキーム5に示されているように合成することができる。ブロミド51をグリニャール試薬に変換してから、エチルフォーメートとカップリングさせて、化合物52を得ることができる。続いて酸処理、酸化、および還元を行うことによって、化合物8を得ることができる。実施例6:化合物8の代替的な合成法化合物8は、スキーム6に示されているように合成することができる。化合物58、60、または62のいずれかのブロミドをエチルフォーメートと反応させて、末端官能化ジオレフィン鎖を生成させることができる。続いて、標準的な化学反応を用いて、このジオレフィン鎖化合物から化合物8を調製することができる。実施例7スキーム7:8-ベンジルオキシ-オクタン-1-オール2の合成:NaH油中60、82g、1.7096モルを500mLの無水DMFに攪拌懸濁させた液に、滴下漏斗を用いて、化合物1250g、1.7096モルを1.5LのDMFに溶解させた溶液を0°Cでゆっくり加えた。この反応混合物を30分間攪拌してから、ベンジルブロミド208.86mL、1.7096モルを窒素雰囲気下でゆっくり加えた。続いて、この反応物を周囲温度まで温め、10時間攪拌した。反応の完了後、混合物を、砕いた氷約2kgでクエンチし、エチルアセテート2×1Lで抽出した。有機層を水1Lで洗浄して無用のDMFを除去し、Na2SO4で乾燥し、真空下で蒸発乾固した。この粗化合物を60~120のシリカゲルで精製し、DCM中の0~5MeOHで溶出して、化合物2を黄白色の液体として得た220g、54。H1NMR400MHz、CDCl3:δ=7.33-7.24m、5H、4.49s、2H、3.63-3.60m、2H、3.47-3.43m、2H、1.63-1.51m、4H、1.39-1.23m、8H8-ブロモ-オクチルオキシメチル-ベンゼン3の合成:化合物2133g、0.5635モルを1.5LのDCMに溶解させ、この攪拌溶液にCBr4280.35g、0.8456モルを加え、その反応混合物を0°Cまで不活性雰囲気下で冷却した。続いて、温度を20°C未満に保ちながら、PPh3251.03g、0.9571モルを少しずつ加え、加え終わった後、その反応混合物を3時間、室温で攪拌した。反応の完了後、この反応混合物から沈殿した固体PPh3Oをろ過によって単離し、このろ液を、砕いた氷約1.5kgで希釈し、DCM3×750mLで抽出した。有機層を分離し、無水Na2SO4で乾燥し、真空下で蒸留した。ヘキサン中の0~5エチルアセテートを溶出系として用いて、得られた粗化合物を60~120メッシュのシリカゲルカラムでマトグラフィーにかけて、化合物3を黄白色の液体として得た150g、89。1HNMR400MHz、CDCl3:δ=7.33-7.25m、5H、4.49s、2H、3.47-3.41m、2H、3.41-3.37m、2H、1.86-1.80m、4H、1.62-1.56m、2H、1.42-1.29m、8H1,17-ビス-ベンジルオキシ-ヘプタデカン-9-オール4の合成:新たに活性化した削り状Mg24.08g、1.003モルを200mLの無水THFに加えてから、その混合物に少量のヨウ素を不活性雰囲気下で加えた。グリニャール形成の開始後、発熱反応を制御しながら、化合物3150g、0.5016モルを1Lの乾燥THFに溶解させた溶液をゆっくり加えた。加え終わった後、その反応物を1時間加熱還流してから、室温まで冷却した。続いて、メチルフォーメート60.24g、1.0033モルをゆっくり加え、反応を2時間継続させた。完了後、10HClに続いて水1Lをゆっくり加えることによって、その反応物をクエンチし、エチルアセテート3×1Lで抽出した。有機層を5リットルのビーカーに取り、500mLのメタノールで希釈し、0°Cまで冷却した。この溶液に、過剰のNaBH4約5当量を少しずつ加えて、HClを加えても切断されなかったフォーメートエステルを加水分解させるようにした。得られた溶液を1時間攪拌してから、揮発性物質を真空下で除去した。残渣を水1L中に取り、10HCl溶液によって酸性化したPH4。続いて、この生成物をエチルアセテート3×1Lで抽出した。続いて、有機相をロータリーエバポレーターで乾燥および濃縮して、化合物4を固体として得た57g、24。1HNMR400MHz、CDCl3:δ=7.35-7.32m、8H、7.29-7.24m、2H、4.49s、4H、3.56m、1H、3.46-3.43m、4H、1.63-1.56m、4H、1.44-1.34m、28H。C13NMR100MHz、CDCl3:δ=138.56、128.21、127.49、127.34、72.72、71.76、70.37、37.37、29.64、29.56、29.47、29.33、26.07、25.54[9-ベンジルオキシ-1-8-ベンジルオキシ-オクチル-ノニルオキシ-tert-ブチル-ジメチルシラン5の合成:化合物456g、0.1196モルを700mLの無水THFに溶解させ、0°Cまで冷却した。TBMS-Cl36.06g、0.2396モルをゆっくり加えてから、イミダゾール32.55g、0.4786モルを不活性雰囲気下で加えた。続いて、この反応物を室温で18時間攪拌してから、氷約1kgでクエンチした。この生成物をエチルアセテート3×500mLで抽出した。有機層を分離し、飽和NaHCO3溶液で洗浄して酸性不純物を除去し、Na2SO4で乾燥し、減圧下で蒸発させ粗化合物を得て、この粗化合物をシリカゲル60~120メッシュによって精製し、0~10エチルアセテートヘキサンで溶出して、化合物5を黄色っぽい油として得た60g、82。H1NMR400MHz、CDCl3:δ=7.33-7.24m、10H、4.49s、4H、3.60-3.57m、1H、3.46-3.43m、4H、1.61-1.54m、4H、1.41-1.26m、28H、0.87s、9H、0.02s、6H9-tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ-ヘプタデカン-1,17-ジオール6の合成:化合物560g、0.1030モルを500mLのエチルアセテートに溶解させ、N2で20分間脱気した。パラジウム炭素Pd10重量12gを加え、反応物を水素雰囲気下で18時間攪拌した。完了後、この混合物をセライト床でろ過し、エチルアセテートで洗浄した。ろ液を真空下で蒸発させた。このようにして得られた化合物619g、46は、次の反応を行うのに十分な純度であった。1HNMR400MHz、CDCl3:δ=3.64-3.58m、5H、1.59br、2H、1.57-1.51m、4H、1.38-1.22m、28H、0.87s、9H、0.02s、6H9-tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ-ヘプタデカン二酸7の合成:化合物62g、0.0049モルを無水DMF40mLに攪拌溶解させた液に、ピリジニウムジクロメート2.7g、0.0074モルを0°Cにて不活性雰囲気下で加えた。続いて、この反応混合物を10~15分間かけて室温まで温め、24時間置いた。続いて、この反応物を水100mLで希釈した。DCM3×40mLを用いて水相を抽出した。有機相をブライン1×25mLで洗浄し、真空下で濃縮し粗酸を得て、続いて、ヘキサン系中の0~30エチルアセテートを用いて、この酸を100~200メッシュのシリカゲルカラムによって精製した。純粋な生成物化合物7を黄白色の油として得た0.7g、33。1HNMR400MHz、CDCl3:δ=3.61-3.56m、1H、2.35-2.32m、4H、1.64-1.59m、4H、1.40-1.19m、24H、0.86s、9H、0.017s、6H、LC-MSMH-431.00、HPLCELSD純度-96.94ジZ-ノン-2-エン-1-イル9-tert-ブチルジメチルシリルオキシヘプタデカンジオエート8の合成二酸70.42g、0.97ミリモルを20mLのジクロロメタンに溶解させ、これに、シス-2-ノネン-1-オール0.35g、2.44ミリモルを加えてから、ヒューニッヒ塩基0.68g、4.9ミリモルおよびDMAP12mgを加えた。この混合物に、EDCI0.47g、2.44ミリモルを加え、その反応混合物を室温にて一晩攪拌した。続いて、この反応混合物をCH2Cl240mLで希釈し、飽和NaHCO350mL、水60mL、およびブライン60mLで洗浄した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、溶媒を真空で除去した。このようにして得た粗生成物をCombiflashRfの精製系40gシリカゲル、CH2Cl2中の0~10MeOHによって精製して、純粋な生成物8を無色の油として得た0.35g、53。1HNMR400MHz、CDCl3:δ1HNMR400MHz、CDCl3δ5.64dt、J=10.9、7.4Hz、2H、5.58-5.43m、2H、4.61d、J=6.8Hz、4H、3.71-3.48m、1H、2.30t、J=7.6Hz、4H、2.20-1.98m、4H、1.71-1.53m、4H、1.31ddd、J=8.3、7.0、3.7Hz、34H、1.07-0.68m、14H、0.02s、5H、13CNMR101MHz、CDCl3δ178.18、139.81、127.78、81.73、81.42、81.10、76.72、64.59、41.52、41.32、38.76、36.09、34.10、33.93、33.80、33.70、33.59、33.55、33.26、31.95、30.34、29.69、29.58、29.39、27.01、22.56、18.48、0.01ジZ-ノン-2-エン-1-イル9-ヒドロキシヘプタデカンジオエート9の合成シリル保護ジエステル80.3g、0.44ミリモルをTBAFの1MTHF溶液6mLに溶解させ、この溶液を40°Cで2日間置いた。この反応混合物を水60mLで希釈し、エーテル2×50mLで抽出した。合わせた有機層を濃縮し、このようにして得た粗生成物をカラムによって精製して、純粋な生成物を単離した0.097g、39。1HNMR400MHz、CDCl3δ5.64dt、J=10.9、7.4Hz、2H、5.52dt、J=11.0、6.8Hz、2H、4.61d、J=6.8Hz、4H、3.57s、1H、2.30t、J=7.5Hz、4H、2.09q、J=7.1Hz、4H、1.75-1.53m、4H、1.53-1.06m、36H、0.88t、J=6.8Hz、6H、13CNMR101MHz、CDCl3δ173.98、135.64、123.57、77.54、77.22、76.91、72.14、60.41、37.69、34.54、31.89、29.70、29.60、29.44、29.29、29.07、27.76、25.80、25.15、22.82、14.29ジZ-ノン-2-エン-1-イル9-4-ジメチルアミノブタノイルオキシヘプタデカンジオエートの合成アルコール90.083g、0.147ミリモルを20mLのジクロロメタンに溶解させ、これに、ジメチルアミノ酪酸ヒドロクロリド0.030g、0.176ミリモルを加えてから、ヒューニッヒ塩基0.045g、0.44ミリモルおよびDMAP2mgを加えた。この混合物に、EDCI0.034g、0.176ミリモルを加え、その反応混合物を室温にて一晩攪拌し、TLCシリカゲル、CH2Cl2中の10MeOHによって、出発物質のアルコールが完全に消失したことが示された。この反応混合物をCH2Cl240mLで希釈し、飽和NaHCO350mL、水60mL、およびブライン60mLで洗浄した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥し、溶媒を真空で除去した。このようにして得られた粗生成物をCombiflashRfの精製系40gシリカゲル、CH2Cl2中の0~10MeOHによって精製して、純粋な生成物を無色の油として単離した0.062g、62。1HNMR400MHz、CDCl3δ5.74-5.58m、2H、5.51dtt、J=9.7、6.8、1.3Hz、2H、4.95-4.75m、1H、4.61d、J=6.8Hz、4H、2.35-2.24m、8H、2.22d、J=7.9Hz、6H、2.09q、J=6.9Hz、4H、1.83-1.72m、2H、1.60dd、J=14.4、7.2Hz、4H、1.49d、J=5.7Hz、4H、1.41-1.13m、30H、0.88t、J=6.9Hz、6H、13CNMR101MHz、CDCl3δ173.72、173.36、135.40、123.35、74.12、60.18、58.95、45.46、34.30、34.11、32.45、31.67、29.38、29.35、29.17、29.07、28.84、27.53、25.28、24.93、23.16、22.59、14.06、C41H75NO6MHの分子量計算値:678.04、実測値:678.5実施例8本発明の化合物1の合成には、下記のさらに短いルートを用いてもよい。市販の9-ブロモノン-1-エン10をマグネシウムで処理して、対応するグリニャール試薬を形成させ、この試薬をエチルフォーメートと反応させ、対応する付加体11を得て、この付加体をブロモブチリルクロリドで処理して、ブロモエステル12を得た。このブロモエステル12をRuO4で処理して、二酸13を得た。このブロモ二酸13をジメチルアミンで処理して、アミノ二酸14を得た。このアミノ二酸14をアルコール15とカップリングして、目的の生成物を良好な収量で得た。スキーム8ノナデカ-1,18-ジエン-10-オール11の合成火力乾燥した500mLの丸底フラスコに、新たに活性化した削り状Mg9gを加え、そのフラスコにマグネチックスターバー、滴下漏斗、および還流冷却器を取り付けた。この装置を脱気し、アルゴン置換し、シリンジを介して100mLの無水エーテルをフラスコに加えた。ブロミド351.3g、250ミリモルを無水エーテル100mLに溶解させ、上記の滴下漏斗に加えた。勢いよく攪拌しながら、このエーテル溶液約5mLを上記の削り状Mgに加えた。発熱反応が確認されグリニャール試薬の形成の確認/促進を行うために、5mgのヨウ素を加え、急速な脱色が確認され、グリニャール試薬の形成が確認された、エーテルの還流を開始した。フラスコを水中で冷やすことによって、穏やかな還流下で反応を維持しながら、ブロミド溶液の残りを滴下した。加え終わった後に、その反応混合物を35°Cに1時間保ってから、氷浴で冷やした。エチルフォーメート9g、121ミリモルを無水エーテル100mLに溶解させ、上記の滴下漏斗に移し、攪拌しながら上記の反応混合物に滴下した。発熱反応が観察され、上記の反応混合物の還流を開始した。反応の開始後、フォーメートのエーテル溶液の残りを液流として素早く加え、その反応混合物をさらに1時間、周囲温度で攪拌した。10mLのアセトンに続いて、氷冷水60mLを滴下することによって、上記の反応物をクエンチした。溶液が均一になるまで、上記の反応混合物をH2SO4水溶液10体積、300mLで処理し、層を分離した。水相をエーテル2×200mLで抽出した。合わせたエーテル層を乾燥しNa2SO4、濃縮し粗生成物を得て、この粗生成物をカラムシリカゲル、ヘキサン中の0~10エーテルクロマトグラフィーによって精製した。この生成画分を蒸発させて、純粋な生成物11を白色固体として得た30.6g、90。1HNMR400MHz、CDCl3δ7.26s、1H、5.81ddt、J=16.9、10.2、6.7Hz、8H、5.04-4.88m、16H、3.57dd、J=7.6、3.3Hz、4H、2.04q、J=6.9Hz、16H、1.59s、1H、1.45d、J=7.5Hz、8H、1.43-1.12m、94H、0.88t、J=6.8Hz、2H、13CNMR101MHz、cdcl3δ139.40、114.33、77.54、77.22、76.90、72.21、37.70、34.00、29.86、29.67、29.29、29.12、25.85ノナデカ-1,18-ジエン-10-イル4-ブロモブタノエート12の合成アルコール115.6g、20モルを無水DCM300mLに溶解させた溶液に、ブロモブチルクロリド20ミリモルを0°Cにて不活性雰囲気下でゆっくり慎重に加えた。この反応混合物を室温まで温め、20時間攪拌し、TLCシリカゲル、ヘキサン中の10エチルアセテートによってモニタリングした。反応が完了したら、混合物を水400mLで希釈し、有機層を分離した。続いて、有機相をNaHCO3飽和溶液1×400mLに続いてブライン1×100mLで洗浄し、真空下で濃縮した。続いて、粗生成物をシリカゲル100~200メッシュカラムによって精製し、ヘキサン中の2~3エチルアセテート溶液で溶出して、6g90の所望の生成物12を無色の液体として得た。1HNMR400MHz、CDCl3δ5.80ddt、J=16.9、10.2、6.7Hz、2H、5.05-4.81m、5H、3.46t、J=6.5Hz、2H、2.48t、J=7.2Hz、2H、2.17p、J=6.8Hz、2H、2.11-1.93m、4H、1.65-1.44m、4H、1.43-1.17m、19H、13CNMR101MHz、cdcl3δ172.51、139.37、114.35、77.54、77.23、76.91、74.86、34.31、33.99、33.01、32.96、29.65、29.56、29.24、29.09、28.11、25.52.9-4-ブロモブタノイルオキシヘプタデカン二酸13の合成ブロモエステル1212.1g、28.2ミリモルのジクロロメタン300mLおよびアセトニトリル300mL溶液に、RuCl31.16g、5モルを加え、その混合物を10°Cまで冷却し、水400mL中のナトリウムメタペリオデート60gを滴下した。これを10°Cで20時間攪拌した。この反応混合物を水で希釈した。その層を分離し、有機層に、飽和ブライン溶液を攪拌しながら加え、続いて、脱色濃緑色から黄白色への脱色のために、3ナトリウムスルフィド溶液を滴下した。層を分離し、有機層をナトリウムサルフェートで乾燥し、減圧で蒸発させ、純粋な生成物を得た。C20H35BrO7の分子量計算値:467.39、実測値:465.4M-2H9-4-ジメチルアミノブタノイルオキシヘプタデカン二酸14の合成ジメチルアミンの2MTHF溶液20mLに、ブロモ酸132ミリモルを溶解させ、これに、1gの無水K2CO3を加え、この混合物を耐圧瓶中で50°Cにて一晩加熱した。TLCによって、反応の完了が示された。この反応混合物を酢酸で酸性化し、水100mLで希釈し、ジクロロメタン2×60mLで抽出した。合わせた有機層を濃縮乾燥し、そのままの状態で次の反応で用いた。C23H43NO6の分子量計算値:429.59、実測値:430.6MHジZ-ノン-2-エン-1-イル9-4-ジメチルアミノブタノイルオキシヘプタデカンジオエートの合成化合物8の合成に関して記載したように、二酸14を対応するジエステルに変換したところ、解析データとスペクトルデータは、上記の生成物のデータと整合していた。実施例9別のアプローチでは、本発明の化合物1の合成には、下記の合成アプローチを用いる。スキーム9実施例10:本発明のカチオン性脂質由来のリポソームを用いたFVIIのインビボ評価C57BL/6マウスマサチューセッツ州のCharlesRiverLabsに、食塩水または所望の調合物中のsiRNAのいずれかを尾静脈注射によって、0.01mL/gの体積で接種する。投与後さまざまな時点に、イソフルレン吸入によってマウスに麻酔し、眼窩後部採血によって血液を血清分離管中に採取した。発色アッセイオハイオ州DiaPharmaGroupのCoasetFactorVII、または、オハイオ州AniaraCorporationのBiophenFVIIをメーカーのプロトコールに従って用いて、サンプルにおいて、第VII因子タンパクの血清レベルを測定する。食塩水で処理したマウスから採取した血清を用いて、検量線を作成した。肝臓中mRNAレベルを評価する実験では、投与後のさまざまな時点で、マウスを殺処分し、肝臓を回収し、液体窒素で急速冷凍する。冷凍した肝臓組織は粉砕する。組織溶解物を調製し、分岐DNAアッセイカリフォルニア州のPanomicsのQuantiGeneAssayを用いて、第VII因子およびapoBの肝臓中mRNAレベルを測定する。実施例11:インビボのげっ歯類第VII因子サイレンシングモデルによる、さまざまなカチオン性脂質を含む脂質粒子調合物の効能の測定第VII因子FVII凝固カスケードにおける顕著なタンパクは肝臓肝細胞で合成され、血漿に分泌される。血漿中のFVIIレベルは、簡単なプレートベースの比色アッセイによって測定することができる。したがって、FVIIは、肝細胞由来タンパクのsiRNA媒介性ダウンレギュレーションを割り出すとともに、核酸脂質粒子およびsiRNA表19に示されているsiRNAなどの血漿中濃度および組織分布をモニタリングするための利便的なモデルの代表的なものである。本明細書に記載されているカチオン性脂質を用いて、国際公開第2010/088537号参照によりその全体が組み込まれるに記載されているように、インライン混合法を用いて、AD-1661の二本鎖を含むリポソームを調合する。脂質粒子は、50のカチオン性脂質/10のジステアロイルホスファチジルコリンDSPC/38.5のコレステロール/1.5のPEG-DMG1-モノメトキシ-ポリエチレングリコール-2,3-ジミリストイルグリセロール、平均PEG分子量:2000というモル比を用いて調合する。C57BL/6マウスマサチューセッツ州のCharlesRiverLabsに、尾静脈注射によって、食塩水、または調合したsiRNAのいずれかを接種する。投与後のさまざまな時点に、眼窩後部採血によって血清サンプルを採取する。発色アッセイオハイオ州のAniaraCorporationのBiophenFVIIを用いて、サンプルにおいて、第VII因子タンパクの血清レベルを測定する。第VII因子の肝臓中mRNAレベルを測定するために、マウスを殺処分し、肝臓を回収し、液体窒素で急速冷凍した。冷凍した組織から組織溶解物を調製し、分岐DNAアッセイカリフォルニア州のPanomicsのQuantiGeneAssayを用いて、第VII因子の肝臓中mRNAレベルを定量化する。FVII活性は、FVIIsiRNAで処理したマウスで、C57BL/6マウスへの静脈内ボラス注射後48時間の時点に評価する。血清または組織中のタンパクレベルを測定するための市販のキットをメーカーの指示に従ってマイクロプレート規模で用いて、FVIIを測定する。FVIIの減少は、未処理のコントロールマウスを対照として測定し、その結果は、残存FVIIの割合として表す。それぞれの新規リポソーム組成物のスクリーニングでは、2つの投与レベル0.05および0.005mg/kgのFVIIsiRNAを用いる。実施例12:予形成ベシクルを用いる、siRNAの調合予形成ベシクル法を用いて、カチオン性脂質含有粒子を作製する。カチオン性脂質、DSPC、コレステロール、およびPEG-脂質をそれぞれ40/10/40/10というモル比で、エタノールに可溶化する。この脂質混合物を混合しながら水性緩衝液50mMシトレート、pH4に加え、最終的なエタノール濃度がが30体積/体積、最終的な脂質濃度が6.1mg/mLになるようにし、室温で2分間平衡化してから押し出す。ベシクルの直径Nicomp解析によって割り出すが70~90nmになるまで、LipexExtruderブリティッシュコロンビア州バンクーバーのNorthernLipidsを用いて、22°Cで、ポアサイズ80nmのフィルターNucleporeを2枚積み重ねたものに水和脂質を通して押し出す。このためには一般に、1~3回通す必要がある。小ベシクルを形成しないいくつかのカチオン性脂質混合物では、その脂質混合物を低pH緩衝液50mMシトレート、pH3で水和させて、DSPC頭部基上のフォスフェート基をプロトン化することによって、安定的な70~90nmのベシクルの形成を助ける。FVIIsiRNA50mMシトレートに可溶化したもの、30エタノールを含むpH4の水溶液を混合しながら、35°Cに予め平衡化したベシクルに、約5mL/分の速度で加える。最終的な標的siRNA/脂質比0.06wt/wtになったら、その混合物をさらに30分間、35°Cでインキュベートして、ベシクルの再構成とFVIIsiRNAの封入を行う。続いて、エタノールを除去し、透析、またはタンジェンシャルフローダイアフィルトレーションにかけるかのいずれかによって、外部緩衝液をPBS155mMNaCl、3mMNa2HPO4、1mMKH2PO4、pH7.5と置き換える。サイズ排除スピンカラムまたはイオン交換スピンカラムを用いて、非封入siRNAの除去後、封入siRNAの脂質に対する最終的な比率を割り出す。実施例13:脂質調合物の効能のインビボ測定最初に、雌7~9週齢、15~25gの雌C57BL/6マウスで、0.1mg/kg、0.3mg/kg、1.0mg/kg、および5.0mg/kg処理グループ当たり3匹のマウスにて、試験調合物のFVIIノックダウンを評価する。すべての調査には、フォスフェート緩衝化食塩水PBS、コントロールグループまたはベンチマーク調合物のいずれかを接種したマウスが含まれている。調合物は、試験直前に、PBS中における適切な濃度まで希釈する。マウスの体重を測定し、適切な投与量を計算する体重1g当たり10μl。試験およびベンチマーク調合物、ならびにPBSコントロールマウス用を外側尾静脈によって静脈内投与する。24時間後、ケタミン/キシラジンの腹腔内注射によってマウスに麻酔し、心臓穿刺によって、血清分離管BDMicrotainerに500~700μlの血液を採取する。血液を2,000×gで10分間、15°Cで遠心分離し、血清を回収し、解析まで-70°Cで保管する。血清サンプルを37°Cで30分間解凍し、PBSで希釈し、96ウェルのアッセイプレートに分注する。発色アッセイHyphenBioMedのBiophenFVIIキットをメーカーの指示に従って用いて、第VII因子レベルを評価し、405nm波長フィルターを備えたマイクロプレートリーダーで吸光度を測定する。血漿中FVIIレベルを定量化し、コントロールマウスから採取した血清のプールサンプルから作成した検量線を用いて、ED50コントロールマウスのFVIIレベルと比べて、血漿中FVIIレベルを50低下させる投与量を計算する。高レベルのFVIIノックダウンED50<<0.1mg/kgを示した当該調合物を、さらに低い投与量範囲の別個の実験で再試験して、効力を確認するとともに、ED50レベルを定める。実施例14:マウスにおける脂質プロファイルと組織浄化を割り出すための調査本発明によるカチオン性脂質の、マウスにおける脂質プロファイルと組織浄化を割り出す目的で調査を行った。雄マウスC57BL、20~30gを4つのグループに分け、下記の表20に示されているように、本発明の化合物1、2、もしくは3、または対照脂質のいずれかを静脈内投与した。マウスは絶食させなかった。投与後0.17時間、8時間、24時間、72時間、168時間、336時間、および672時間に、血液、肝臓、および脾臓のサンプルグループ当たりタイムポイントごとに2つのサンプルを回収した。図1は、グループI~IVのそれぞれのマウスの経時肝臓中脂質濃度を示している。肝臓中薬物動態データを下記の表21に示す。化合物1および3の予想代謝経路が図2に示されている。これらの代謝産物の濃度は、肝臓で測定した。その結果は下記の表22に示されている。24時間後のすべての測定値は、投与後72時間、168時間、336時間、および672時間の測定値を含め、定量化レベルを下回っていたBLQ。図3は、グループI~IVのそれぞれのマウスの経時脾臓中脂質濃度を示している。脾臓中薬物動態データを下記の表23に示す。脾臓中の化合物1~3の代謝産物の濃度を測定し、その結果は下記の表24に示されている。図4は、グループI~IVのそれぞれのマウスの経時血漿中脂質濃度を示している。血漿中薬物動態データを下記の表25に示す。血漿中の化合物1~3の代謝産物の濃度を測定し、その結果は下記の表26に示されている。24時間後のすべての測定値は、投与後72時間、168時間、336時間、および672時間の測定値を含め、定量化レベルを下回っていたBLQ。図1、3、および4、ならびに表22、24、および26から分かるように、本発明の化合物1、2、および3は、対照脂質と比べると、組織浄化性と活性が大幅に向上している。上記の詳述に鑑み、実施形態に対して上記およびその他の変更を行うことができる。一般に、下記の特許請求の範囲では、用いられている用語は、特許請求の範囲を、本明細書および特許請求の範囲に開示されている具体的な実施形態に限定するものと解釈すべきではなく、本発明の特許請求に付与されるすべての範囲の均等物とともに、考え得るあらゆる実施形態を含むものと解釈すべきである。したがって、特許請求の範囲は、本開示によって限定されない。"