清澄化DAS含有発酵培地からSAを生産する方法であって、a水とアンモニアとを含む上部overhead、並びに、SAと、少なくとも約20wtの水とを含む液体底部liquidbottomsを形成するために、培地を、加圧下、100°C超~約300°Cの温度で蒸留し、b底部を液体部分と、実質的に純粋なSAである固体部分とに分離させるのに十分な温度及び組成を達成するために、底部を冷却及び/又はエバポレートし、c液体部分から固体部分を分離することを含む方法。前記液体底部が少なくとも幾らかのMASを含有し、及び又は前記固体部分が実質的にスクシンアミド酸、スクシンアミド及びスクシンイミドを含まない、請求項1に記載の方法。更に、液体底部から、SA及び水、並びに任意でMASを再利用して清澄した培地に戻すことを含む、請求項1に記載の方法。更に、液体下部中のSAの濃度を増大させるために、液体下部から水を除去することを含む、請求項1に記載の方法。前記培地の蒸留が、ジグリム、トリグリム、テトラグリム、スルホキシド、アミド、スルホン、ポリエチレングリコールPEG、ガンマブチロラクトン、ブトキシトリグリコール、N-メチルピロリドンNMP、エーテル、及びメチルエチルケトンMEKからなる群から選択される少なくとも1のアンモニア分離溶媒の存在下、又はトルエン、キシレン、メチルシクロヘキサン、メチルイソブチルケトン、ヘキサン、シクロヘキサン及びヘプタンからなる群から選択される少なくとも1の水共沸溶媒の存在下行われる、請求項1に記載の方法。清澄化DAS含有発酵培地からSAを製造する方法であって、aアンモニア分離及びまたは水共沸azeotroping溶媒を前記培地に添加し、b水及びアンモニアを含む上部overhead、並びに、SA及び少なくとも約20wtの水とを含む液体底部liquidbottomsを形成するのに十分な温度及び圧力で培地を蒸留し、c底部を液体部分と、実質的に純粋なSAである固体部分とに分離させるのに十分な温度及び組成を達成するために、底部を冷却及び/又はエバポレートし、d液体部分から固体部分を分離し、e固体部分を回収することを含む方法。前記液体底部が少なくとも幾らかのMASを含有し、及びまたは前記固体部分が実質的にスクシンアミド酸、スクシンアミド及びスクシンイミドを含有しない、請求項6に記載の方法。更に、液体底部から、SA、水、及び溶媒並びに任意でMASを再利用して、清澄化した培地に戻すことを含む、請求項6に記載の方法。前記培地及び/又は前記MAS溶液の蒸留が、ジグリム、トリグリム、テトラグリム、スルホキシド、アミド、スルホン、ポリエチレングリコールPEG、ガンマブチロラクトン、ブトキシトリグリコール、N-メチルピロリドンNMP、エーテル、及びメチルエチルケトンMEKからなる群から選択される少なくとも1のアンモニア分離溶媒の存在下、又はトルエン、キシレン、メチルシクロヘキサン、メチルイソブチルケトン、ヘキサン、シクロヘキサン及びヘプタンからなる群から選択される少なくとも1の水共沸溶媒の存在下行われる、請求項6に記載の方法。更に、液体下部中のSAの濃度を増大させるために、液体下部から水を除去することを含む、請求項6に記載の方法。清澄化MAS含有発酵培地からSAを生産する方法であり、a水とアンモニアとを含む上部overhead、並びに、SAと、少なくとも約20wtの水とを含む液体底部liquidbottomsを形成するために、培地を、加圧下、100°C超~約300°Cの温度で蒸留し、b底部を液体部分と、実質的に純粋なSAである固体部分とに分離させるのに十分な温度及び組成を達成するために、底部を冷却及び/又はエバポレートし、c液体部分から固体部分を分離することを含む方法。前記液体底部が、少なくとも幾らかのMASを含有し、及び又は前記固体部分が実質的にスクシンアミド酸、スクシンアミド及びスクシンイミドを含まない、請求項11に記載の方法。更に、液体底部から、SA及び水、並びに任意でMASを再利用して、清澄化した培地に戻すことを含む、請求項11に記載の方法。更に、液体下部中のSAの濃度を増大させるために、液体下部から水を除去することを含む、請求項11に記載の方法。前記培地の蒸留が、ジグリム、トリグリム、テトラグリム、スルホキシド、アミド、スルホン、ポリエチレングリコールPEG、ガンマブチロラクトン、ブトキシトリグリコール、N-メチルピロリドンNMP、エーテル、及びメチルエチルケトンMEKからなる群から選択される少なくとも1のアンモニア分離溶媒の存在下、又はトルエン、キシレン、メチルシクロヘキサン、メチルイソブチルケトン、ヘキサン、シクロヘキサン及びヘプタンからなる群から選択される少なくとも1の水共沸溶媒の存在下行われる、請求項11に記載の方法。清澄化MAS含有発酵培地からSAを製造する方法であって、aアンモニア分離及びまたは水共沸azeotroping溶媒を前記培地に添加し、b水及びアンモニアを含む上部overhead、並びに、SA及び少なくとも約20wtの水とを含む液体底部liquidbottomsを形成するのに十分な温度及び圧力で培地を蒸留し、c底部を液体部分と、実質的に純粋なSAである固体部分とに分離させるのに十分な温度及び組成を達成するために、底部を冷却及び/又はエバポレートし、d液体部分から固体部分を分離することを含む方法。前記液体底部が、少なくとも幾らかのMASを含有し、及び又は前記固体部分が実質的にスクシンアミド酸、スクシンアミド及びスクシンイミドを含まない、請求項16に記載の方法。更に、液体底部からSA、水、及び溶媒、並びに任意でMASを再利用して、清澄化した培地に戻すことを含む、請求項16に記載の方法。前記培地の蒸留が、ジグリム、トリグリム、テトラグリム、スルホキシド、アミド、スルホン、ポリエチレングリコールPEG、ガンマブチロラクトン、ブトキシトリグリコール、N-メチルピロリドンNMP、エーテル、及びメチルエチルケトンMEKからなる群から選択される少なくとも1のアンモニア分離溶媒の存在下、又はトルエン、キシレン、メチルシクロヘキサン、メチルイソブチルケトン、ヘキサン、シクロヘキサン及びヘプタンからなる群から選択される少なくとも1の水共沸溶媒の存在下行われる、請求項16に記載の方法。更に、液体下部中のMASの濃度を増大させるために、液体下部から水を除去することを含む、請求項11に記載の方法。DAS、MAS、及び/又はSAを含む発酵培地から、実質的に純粋なSAを直接製造する方法を提供することが望まれている。本発明者等は、清澄化DAS含有発酵培地から、SAを製造するための方法を提供する。この方法は、a水とアンモニアとを含む上部overhead、並びに、SAと、少なくとも約20wtの水とを含む液体底部liquidbottomsを形成するために、培地を、加圧下、100°C超~約300°Cの温度で蒸留し、b底部を液体部分と、実質的に純粋なSAである固体部分とに分離させるのに十分な温度及び組成を達成するために、底部を冷却及び/又はエバポレートし、c液体部分から固体部分を分離することを含む。本発明者等は、また、清澄化DAS含有発酵培地から、SAを製造するための方法を提供する。この方法は、aアンモニア分離及びまたは水共沸azeotroping溶媒を前記培地に添加し、b水及びアンモニアを含む上部overhead、並びに、SA及び少なくとも約20wtの水とを含む液体底部liquidbottomsを形成するのに十分な温度及び圧力で培地を蒸留し、c底部を液体部分と、実質的に純粋なSAである固体部分とに分離させるのに十分な温度及び組成を達成するために、底部を冷却及び/又はエバポレートし、d液体部分から固体部分を分離することを含む。本発明者等は、更に、清澄化MAS含有発酵培地から、SAを製造するための方法を提供する。この方法は、a水とアンモニアとを含む上部overhead、並びに、SAと、少なくとも約20wtの水とを含む液体底部liquidbottomsを形成するために、培地を、加圧下、100°C超~約300°Cの温度で蒸留し、b底部を液体部分と、実質的に純粋なSAである固体部分とに分離させるのに十分な温度及び組成を達成するために、底部を冷却及び/又はエバポレートし、c液体部分から固体部分を分離することを含む。本発明者等は、更に、清澄化MAS含有発酵培地から、SAを製造するための方法を提供する。この方法は、aアンモニア分離及びまたは水共沸azeotroping溶媒を前記培地に添加し、b水及びアンモニアを含む上部overhead、並びに、SA及び少なくとも約20wtの水とを含む液体底部liquidbottomsを形成するのに十分な温度及び圧力で培地を蒸留し、c底部を液体部分と、実質的に純粋なSAである固体部分とに分離させるのに十分な温度及び組成を達成するために、底部を冷却及び/又はエバポレートし、d液体部分から固体部分を分離することを含む。当然のことではあるが、以下の説明のうち少なくとも一部は、図における例示のために選択された方法の代表例を指すことを意図したものであり、添付の特許請求の範囲を除いて、本開示発明を定義又は限定することを意図したものではない。本発明の方法は、例えば図1を参照することにより理解される。図1は、本発明の方法の代表例10をブロック図として表したものである。生育槽12は、通常は備え付けの蒸気滅菌可能な発酵槽であって、DAS、MAS、及び/又はSA含有発酵培地の製造に用いられる微生物培養物未記載の培養に使用し得る。そのような生育槽は本技術分野で公知であり、更に言及しない。この微生物培養物は、炭水化物糖等の発酵性炭素源からSAを産生し得る微生物を含んでいてもよい。微生物の代表例としては、これらに限定される訳ではないが、大腸菌Escherichiacoli、アスペルギルスニガーAspergillusniger、コリネバクテリウムグルタミカムCorynebacteriumglutamicumまた、ブレビバクテリウムフラバムBrevibacteriumflavum、エンテロコッカスフェカリスEnterococcusfaecalis、ベイヨネラパルビュラVeillonellaparvula、アクチノバチルススクシノゲネスAtinobacillussuccinogenes、マンヘイミアスクシニシプロデューセンスMannheimiasucciniciproducens、アネロビオスピリルムスクシニシプロデューセンスAnaerobiospirillumsucciniciproducens、ペシロマイセスバリオッティPaecilomycesVarioti、サッカロマイセスセレビシエSaccharomycescerevisiae、バクテロイデスフラジリスBacteroidesfragilis、バクテロイデスルミニコラBacteroidesruminicola、バクテロイデスアミロフィラスBacteroidesamylophilus、アルカリゲネスユートロファスAlcaligeneseutrophus、ブレビバクテリウムアンモニアゲネスBrevibacteriumammoniagenes、ブレビバクテリウムラクトファーメンタムBrevibacteriumlactofermentum、カンジダブルンプチイCandidabrumptii、カンジダカテヌラタCandidacatenulate、カンジダミコデルマCandidamycoderma、カンジダゼイラノイデスCandidazeylanoides、カンジダパルディゲナCandidapaludigena、カンジダソノレンシスCandidasonorensis、カンジダユチリスCandidautilis、デバリオマイセスハンセニイDebaryomyceshansenii、フサリウムオキシスポルムFusariumoxysporum、ヒュミコララヌギノサHumicolalanuginosa、クロエケラアピキュラータKloeckeraapiculata、クルイベロマイセスラクティスKluyveromyceslactis、クルイベロマイセスウィッケルハミKluyveromyceswickerhamii、ペニシリウムシンプリシシマムPenicilliumsimplicissimum、ピキアアノマーラPichiaanomala、ピキアベッセイPichiabesseyi、ピキアメディアPichiamedia、ピキアギリエルモンディPichiaguilliermondii、ピキアイノシトヴォラPichiainositovora、ピキアスティピディスPichiastipidis、サッカロミセスバヤヌスSaccharomycesbayanus、シゾサッカロミセスポンベSchizosaccharomycespombe、トルロプシスカンジダTorulopsiscandida、ヤロウィアリポリティカYarrowialipolytica、それらの混合物等が挙げられる。好ましい微生物は、受託番号PTA-5132としてATCCに供託された大腸菌株である。より好ましくは、この株から3つの抗生物質耐性遺伝子cat、amphl、tetAを除去したものである。抗生物質耐性遺伝子catクロラムフェニコール耐性をコードする及びamphlカナマイシン耐性をコードするの除去は、DatsenkoKAandWannerBLetalProcNatlAcadSciUSA2000Jun69766405に記載のいわゆるラムダ-レッドLamdared法により行うことができる。本文献の主題は引用により本明細書に組み込まれる。テトラサイクリン耐性遺伝子tetAは、BochneralJBacteriol1980August143926933により初めて報告された方法を用いて除去することができる。本文献の主題は引用により本明細書に組み込まれる。グルコースが本微生物の発酵性炭素源として好ましい。発酵性炭素源例えば炭水化物及び糖を、任意により窒素源及び複合栄養素例えばコーンスティープリカー、ビタミン、塩、細胞成長及び/又は産物生成を改善し得る他の材料等の追加培地成分、並びに水と共に、微生物培養物の生育及び維持のために生育槽12に供給してもよい。一般的には、微生物培養物は、酸素富化ガス例えば空気の散布により提供される好気性条件下で培養される。一般的には、微生物培養物の培養の間、pH調節のために酸例えば硫酸及び水酸化アンモニウムを供給する。ある例未記載によれば、酸素富化ガスを酸素欠乏ガス例えば、CO2等に変えることにより、生育槽12内の酸素富化ガス散布により提供される好気性条件を、嫌気性条件に変更する。嫌気性環境により、生育槽12ではインサイチュinsituで、発酵性炭素源からコハク酸への生物変換が生じる。発酵性炭素源からSAへの生物変換の間、pH調節のために、水酸化アンモニウムを供給してもよい。水酸化アンモニウムの存在により、産生されたSAの少なくとも一部は中和されてDASとなり、DASを含有する培地が産生される。CO2は、SA産生のための更なる炭素源を提供する。他の例によれば、生育槽12の内容物を、ストリームstream14を経由して、炭水化物源からSAへの生物変換用の別の生物変換槽16に移送してもよい。SA産生を生じさせる嫌気性条件を提供するために、生物変換槽16には酸素欠乏ガス例えばCO2を散布する。炭水化物源からSAへの生物変換の間、pH調節のために水酸化アンモニウムを供給する。水酸化アンモニウムの存在により、産生されたSAの少なくとも一部は中和されてDASとなり、DASを含有する培地が産生される。CO2は、SA産生のための更なる炭素源を提供する。他の例によれば、生物変換を比較的低いpH例えば3~6で行ってもよい。炭水化物源からSAへの生物変換の間、pH調節のために塩基水酸化アンモニウム又はアンモニアを供給してもよい。所望のpHに応じて、水酸化アンモニウムの存在又は不在により、SAが産生されるか、或いは産生されたSAの少なくとも一部が中和されて、MAS、DAS、又はSA、MAS及び/又はDASを含む混合物となる。即ち、生物変換時に産生されたSAは、任意により追加工程としてアンモニア又は水酸化アンモニウムを供給することにより、その後に中和されて、DASを含有する培地が産生される。従って、DAS含有発酵培地とは通常、発酵培地がDASと共に、添加及び/又は生物変換等により産生された任意の数の他の成分、例えばMAS及び/又はSAを含むことを意味する。同様に、MAS含有発酵培地とは通常、発酵培地がMASと共に、添加及び/又は生物変換等により産生された任意の数の他の成分、例えばDAS及び/又はSAを含むことを意味する。発酵性炭素源の生物変換の結果として生物変換を行う場所に応じて槽12又は槽16で生じる培地は、通常は不溶性固体、例えば細胞性バイオマスや他の懸濁物等を含む。そこで、蒸留前にストリーム18を経由して清澄化装置20に移送し、不溶性固体を除去して培地を清澄化する。これによって後の蒸留装置の汚損を低減し又は予防する。不溶性固体の除去は、数種の固液分離技術の何れかを単独又は組合せで用いて行うことができる。固液分離技術としては、限定されるものではないが、遠心分離や濾過限定されるものではないが、限外濾過、精密濾過又は深層濾過が挙げられる。が挙げられる。濾過技術は公知技術に基づいて選択し得る。可溶性無機化合物は、複数の公知の方法により除去することができる。例としては、限定されるものではないが、イオン交換、物理吸着等が挙げられる。遠心分離の例として、連続ディスクスタック遠心分離が挙げられる。場合によっては、遠心分離後に、デッドエンド濾過やクロスフロー濾過等の研磨濾過polishingfiltration工程を追加すると有益である。斯かる濾過には、珪藻土等の濾過助剤を使用してもよい。研磨濾過として、より好ましくは限外濾過又は精密濾過である。限外濾過及び精密濾過膜は、例えばセラミックやポリマー等からなる。ポリマー膜の一例として、KochMembraneSystem850MainStreetWilmingtonMAUSA製SelROMPSU20PpH安定限外濾過膜が挙げられる。これは分子量カットオフ25000ダルトンの市販ポリエーテルスルホン膜であって、通常は圧力0.35~1.38MPa最大圧力1.55Mpa、最高温度50°Cで使用できる。遠心分離と研磨濾過とを組み合わせて使用する代わりに、限外又は精密濾過膜を用いたクロスフロー濾過を単独で実施してもよい。こうして清澄化された、実質的に微生物培養物や他の固体を含まないDAS含有培地又はMAS含有培地を、ストリーム22を経由して蒸留装置24に移送する。清澄化培地は、DAS及び/又はMASを、培地中の全ジカルボン酸アンモニウム塩の少なくとも大部分、好ましくは少なくとも約70wt、より好ましくは80wt、最も好ましくは少なくとも約90wtの量で含むべきである。DAS及び/又はMASの濃度は、発酵培地中の全ジカルボン酸塩に対する重量パーセントwtとして、高圧液体クロマトグラフィーHPLCやその他の公知法により容易に決定できる。蒸留装置24から水及びアンモニアが上部overheadとして除去されるとともに、任意により、少なくとも一部がストリーム26を経由して生物変換槽16或いは嫌気性モードで操作の場合、生育槽12で再利用recycleされる。蒸留温度及び圧力は重要ではなく、少なくとも蒸留上部が水及びアンモニアを含み、蒸留底部bottomsが好ましくは少なくとも幾らかのDASと少なくとも約20wtとの水を含むように、蒸留を実施すればよい。水の量は少なくとも約30wtがより好ましく、少なくとも約40wtが更に好ましい。蒸留工程からのアンモニア除去率は、温度を上昇させるに従って増加し、また、蒸留時に蒸気を注入することにより未記載増加させることができる。蒸留時のアンモニア除去率は、真空下、加圧下で蒸留を行い、或いは蒸留装置に空気、窒素等の不活性ガスを散布することによっても増加させることができる。蒸留工程時の水の除去は、底部が少なくとも約20の水を含む限りにおいて、トルエン、キシレン、メチルシクロヘキサン、メチルイソブチルケトン、シクロヘキサン、ヘプタン等の有機共沸剤の使用により促進することができる。水と共沸混合物を形成し得る有機剤の存在下で蒸留を行うと、蒸留によって水相及び有機相を含む二相性底部が生じる。この場合、水相を有機相から分離し、蒸留底部として使用することができる。底部における水のレベルを少なくとも約30wtに維持すれば、コハク酸アミドやコハク酸イミド等の副生物を実質的に避けることができる。蒸留工程の好ましい温度は、圧力にもよるが、約50~約300°Cの範囲である。より好ましい温度範囲は、圧力にもよるが、約150~約240°Cである。約170~約230°Cの蒸留温度が好適である。蒸留温度とは底部の温度を指すバッチ蒸留の場合は、最終的に所望量の上部が得られた時点の温度でもよい。。水混和性有機溶媒又はアンモニア分離溶媒を添加することにより、上述した範囲の蒸留温度及び圧力において、脱アンモニアが容易になる場合がある。斯かる溶媒としては、受動的水素結合を形成し得る非プロトン性、双極性、酸素含有溶媒が挙げられる。例としては、限定されるものではないが、ジグリム、トリグリム、テトラグリム、ジメチルスルホキシドDMSO等のスルホキシド、ジメチルホルムアミドDMF及びジメチルアセトアミド等のアミド、ジメチルスルホン、ガンマブチロラクトン、スルホラン、ポリエチレングリコールPEG、ブトキシトリグリコール、N-メチルピロリドンNMP等のスルホン、ジオキサン、メチルエチルケトンMEK等のエーテル等が挙げられる。そのような溶媒は、清澄化培地中のDAS又はMASからアンモニアの除去に役立つ。蒸留法によらず、蒸留は、底部に少なくとも幾らかのMASと、少なくとも約20wt、より有利には少なくとも約30wtの水とが保持されるように行うことが好ましい。蒸留は、常圧下、減圧下又は加圧下で行うことができる。蒸留が共沸剤又はアンモニア分離溶媒の非存在下で実施される場合等の他の条件において、当該蒸留は、水とアンモニアとを含む上部overhead、並びに、SAと、少なくとも約20wtの水とを含む液体底部liquidbottomsを形成するために、加圧下、100°C超~約300°Cの温度で実施される。与圧とは、典型的には、大気圧超~約25気圧である。有利な水の量は、約30wtである。蒸留としては、一段フラッシュonestageflash、多段式蒸留即ち、多段式カラム蒸留、複式カラム等が挙げられる。一段フラッシュは、任意の種類のフラッシャー例えば塗膜エバポレーター、薄膜エバポレーター、サーモサイフォンフラッシャー、強制循環フラッシャー等で行うことができる。多段蒸留カラムは、トレー、充填物packing等を用いて達成することができる。充填物は、不規則充填物例えばラシヒRaschigリング、ポールPallリング、バールBerlサドル等でも、規則充填物例えばコークスルザーKochSulzer充填物、インタロックスIntalox充填物、メラパックMellapak等でもよい。トレーは、任意のデザイン例えばシーブトレー、バルブトレー、バブルカップトレー等でもよい。蒸留は任意の理論段数で行うことができる。蒸留装置がカラムの場合、その構成は特に重要ではなく、周知の基準に基づいて設計することができる。カラムは、ストリッピングモード、精留rectifyingモード、又は分留fractionationモードの何れかで操作することができる。蒸留は、バッチモード、半連続モード、又は連続モードで行ってもよい。連続モードでは、培地を蒸留装置に連続的に注入してもよく、また、上部及び底部の形成に伴いこれらを連続的に装置から除去してもよい。蒸留により得られる蒸留物はアンモニア水溶液であり、蒸留底部はMAS及びSAの液体状の水溶液である。これらは更に、他の発酵副生物の塩即ち、酢酸アンモニウム、ギ酸アンモニウム、乳酸アンモニウム等や、色素体を含んでもよい。蒸留底部を、ストリーム28を経由して冷却装置30に移送し、常法により冷却してもよい。冷却法は重要ではないが、好ましい技術を以下に記載する。熱交換機熱回収型を使用することができる。フラッシュ気化冷却器を用いて底部を約15°Cまで冷却してもよい。0°Cまでの冷却には、通常は冷蔵冷却剤を用いる。例としてはグリコール溶液や、それほど好ましくはないが、塩水等が挙げられる。収量の更なる増大を図る目的で、冷却の前に濃縮工程を組み入れてもよい。更に、公知の方法、例えば、真空エバポレーションと共に、一体型冷却ジャケット及び/又は外部熱交換器を用いた徐熱等を用いて、濃縮及び冷却の両方を組み合わせてもよい。本発明者等は、液体底部に幾らかのMASが存在することで、液体状の水溶液たるMAS含有底部に対するSAの溶解性が低下し、これによって底部が容易に、少なくともSAから実質的になるconsistingessentiallyof固体部分が少なくとも実質的に純粋な結晶SAであることを意味する固体部分と、これに接する液体部分とに冷却誘導分離されることを見出した。図2は、5~45°Cの範囲内の様々な温度における、20wtMAS水溶液に対するSAの溶解性の低下を示す。本発明者等は、SA水溶液に幾らかのMASが含まれている方が、水溶液からSAをより完全に結晶化できることを見出した。斯かる溶液中のMASの好ましい濃度は、約20wtまでの範囲である。これによって、MASが存在しない場合に必要な温度よりも高い温度で、SAを結晶化する即ち、蒸留底部の固体部分を形成することが可能となる。蒸留底部を冷却した後、固体部分を液体部分から分離するために、ストリーム32を経由して分離器34に導入する。分離は、加圧濾過例えば、Nutsche又はRosenmond型加圧濾過器、遠心分離等により達成できる。生じた固体産物を産物36として回収し、所望により標準法で乾燥してもよい。分離後、固体部分の1又は2以上の表面に液体部分が残存することのないように、固体部分を処理することが望ましい。固体部分の表面に残る液体部分の量を最小化するための一つの方法は、分離した固体部分を水洗し、洗浄後の固体部分を乾燥することである未記載。固体部分を洗浄するための簡便な方法としては、いわゆるバスケット遠心分離の使用が挙げられる未記載。適切なバスケット遠心分離機は、TheWesternStatesMachineCompanyHamiltonOHUSAから入手できる。分離器34の液体部分即ち母液は、残存する溶解SA、任意の非変換MAS、酢酸アンモニウム、乳酸類lactate、ギ酸類formate等の任意の発酵副生物、その他の微量不純物を含む場合がある。この液体部分を、ストリーム38を経由して下流装置40に導入する。一例によれば、装置40は、混合物を適量の水酸化カリウムで処理することにより、例えばアンモニウム塩をカリウム塩に変換し、解氷剤deicerを作製する手段であってもよい。この反応で生じたアンモニアを回収し、生物変換槽16又は嫌気性モードで操作する生育槽12で再利用してもよい。得られたカリウム塩混合物は、解氷剤及び防氷剤antiicerとして有用である。SAの回収を促進し、更にはMASからSAへの変換を推進するために、固体分離工程34由来の母液を、ストリーム42を経由して、蒸留装置24で再利用又はその一部を再利用してもよい。冷却誘導結晶化の固体部分は、実質的に純粋なSAであり、ひいてはSAの公知用途に有用である。HPLCを用いて、コハク酸アミドやコハク酸イミド等の窒素含有不純物の存在を検出してもよい。SAの純度は元素炭素及び窒素分析により決定できる。アンモニア電極を用いてSA純度の粗近似値を決定することも可能である。状況や種々の操作入力によっては、発酵培地が清澄化MAS含有発酵培地又は清澄化SA含有発酵培地である場合がある。斯かる状況では、実質的に純粋なSAの産生を容易にするために、これらの発酵培地にMAS、DAS、及び/又はSA、及び任意でアンモニアを添加するのが有利な場合もある。例えば、培地がMAS含有培地又はSA含有培地となるような方向に、発酵培地のpHを操作してもよい。上述した実質的に純粋なMASの製造を容易にするために、任意によりこれらの発酵培地にMAS、DAS、SA、アンモニア及び/又は水酸化アンモニウムを添加し、培地のpHを好ましくは<6に調整してもよい。また、所望により、他の物質由来のMAS、DAS及び/又はSAを添加してもよい。ある特定の形態によれば、蒸留工程24で得られる液体底部、及び/又は、分離器34由来の固体部分から、SA、MAS及び水を発酵培地及び/又は清澄した発酵培地に再導入recycleするのが特に有利である。MAS含有培地については、そのような培地は通常、発酵培地がMASと共に、添加及び/又は生物変換等により産生された任意の数の他の成分、例えばDAS及び/又はSA等を含むことを意味する。本発明の方法を、以下の非限定的な代表例により説明する。最初の2つの例においては、実際の清澄化DAS含有発酵培地の代わりに、合成DAS水溶液を使用した。他の例では実際の清澄化DAS含有発酵培地を使用した。実際の培地に見られる典型的な発酵副生物の溶解性ゆえに、合成DAS溶液の使用は、最初の2つの例における実際の培地の挙動を表す良いモデルであると考えられる。発酵時に産生される主な副生物は、酢酸アンモニウム、乳酸アンモニウム及びギ酸アンモニウムである。酢酸アンモニウム、乳酸アンモニウム、及びギ酸アンモニウムは、SAよりも有意に高い水溶性を示し、各々の培地中の濃度はDAS濃度の10未満である。加えて、たとえ蒸留工程時に酸酢酸、ギ酸及び乳酸が形成されたとしても、これらは水と混和性であり、水から結晶化しないであろう。これは、母液即ち液体部分に溶解した酸不純物を残したまま、SAが飽和に達し、溶液から結晶化する即ち固体部分を形成することを意味する。実施例1本実施例は、水性溶媒中でのDASからSAへの変換を示す。実験は、151.0M合成DAS溶液を使用して、300mlHastelloyC攪拌Parr反応器中で実施された。当該反応器に200gの溶液を導入し、200psigに与圧した。内容物を加熱して蒸留を開始し、温度を約200°Cまで上げた。アンモニア及び水蒸気は冷却水を用いて上部に濃縮され、リザーバーに回収された。新鮮な水が、定常的なコハク酸塩濃度及び材料の体積を維持する速度約2g分と等しい速度で系に引き戻された。当該反応は、7時間続行された。反応の最後に、母液の解析により、59がSAに変換され、2.4がスクシンアミド酸に変換され、そして2.9がスクシンイミドに変換されたことが判明した。母液の冷却は、液体部分と、実質的に純粋なSAである固体部分をもたらす。実施例2本実施例は、DAS水溶液からのアンモニア生成に対する溶媒の影響を示す。実験10は、溶媒を使用しない対照実験である。3つ口1L丸底フラスコの外側の口に、温度計及びストッパーを取り付けた。中央の口に、5トレー1オールダーショウOldershawセクションを取り付けた。オールダーショウセクションに、蒸留ヘッドを装着した。氷冷500mL丸底フラスコを、蒸留ヘッド用のレシーバとして使用した。1L丸底フラスコに、蒸留水、試験対象溶媒、SA及び濃縮水酸化アンモニウム溶液を入れた。内容物をマグネチックスターラーで攪拌し、すべての固体を溶解させた。固体が溶解した後、内容物を加熱マントルで加熱し、蒸留物350gを蒸留した。蒸留物を氷冷500ml丸底フラスコに採取した。蒸留物の最後の液滴を採取した時に、ポットの温度を記録した。ポットの内容物を室温まで冷却し、残留物の量及び蒸留物の量を記録した。その後、蒸留物のアンモニア含量を滴定により決定した。結果を表1及び2に記録した。実施例3本実施例は、Ecoli株ATCCPTA5132を含む発酵培地に由来する、DAS含有清澄化発酵培地を使用した。最初の発酵培地が清澄化されて、~4.5のコハク酸二アンモニウムDASを含有する清澄発酵培地を得た。当該清澄化培地は、以下の結晶SAの生産に使用された。前記培地は、RO膜を使用して最初に約9まで濃縮され、更に40程度まで濃縮するように、大気圧下で蒸留された。前記濃縮された培地を出発材料として、300mlParr反応器中で、DASをSAに変換する反応を行った。200gの前記溶液を、200°C200psigで11時間反応させた。反応の進行につれて、DASから解離したアンモニア及び水蒸気が濃縮され、上部に回収された。濃縮物は約2g分で回収され、同程度の速度で水が系に引き戻された。この実験を通して、複数の試料が得られた。反応の早期に得られた試料は、スクシンアミド、スクシンアミド酸及びスクシンイミドの存在を示唆した。しかしながら、これらの窒素含有産物は、実験を通じて減少した。SAへの変換は55に上り、底部に観察された。最終的な溶液は、蒸留により濃縮され、4°Cに冷却された。得られた結晶の固体を真空濾過により単離し、氷水で洗浄し、真空下で乾燥させた。産物7gは、HPLCで判定したところ、実質的に純粋なSAであった。実施例4500mL丸底フラスコに、80gの36DAS水溶液及びトリグリム80gを充填した。フラスコに、蒸留ヘッドを装着した5トレー1ガラスオールダーショウカラムセクションを取り付けた。また、水3300gを含む滴下ロートをフラスコに連結した。フラスコをマグネチックスターラーで攪拌し、加熱マントルで加熱した。蒸留物を氷冷レシーバに採取した。蒸留物が変化し始めたところで、蒸留物を取得するのと同じ速度で、滴下ロートの水をフラスコに添加した。合計3313gの蒸留物を取得した。滴定により決定したところ、蒸留物はアンモニア4.4gを含んでいた。DASからSAへの変換率に換算するとから37となる。残りはMASに変換された。その後、フラスコの残留物を三角フラスコに移し、攪拌しつつ-5°Cまで冷却した。30分間攪拌後、スラリーを冷たいうちに濾過し、固体15.3gを回収した。固体を熱水7.1gに溶解した後、攪拌しながらアイスバスで冷却した。冷却スラリーを濾過し、固体を100°Cで2時間、真空オーブンで乾燥し、コハク酸3.9gを回収した。HPLC分析によれば、この固体は、0.099スクシンアミド酸を含むSAであることが分かった。実施例5316SSPropak充填物を充填した長さ8フィートの1.5316SSスケジュール40管を用いて圧力蒸留カラムを作製した。カラムの底部にはリボイラーとして投入電熱器を設けた。ニードル弁を介して窒素をリボイラー内に注入し、加圧した。カラムの上部は全除去ラインを設け、これをレシーバ付の316SS多管冷却器shellandtubecondenserに連結した。レシーバには圧力計及び背圧調整弁を装着した。上部レシーバからの物質の除去は、ニードル弁を通じて、ブローケースを介して行った。予熱したフィードを、0.4水酸化ナトリウム希釈剤と共に、ポンプを介して充填物の上部からカラムに注入した。また、予熱した水を、ポンプを介してリボイラーに注入した。このカラムを最初50psigで操作した。カラム温度は150°Cとなった。カラム上部に、8mL/分の速度で4.7DAS含有培地を、そして015ml分の速度で0.4水酸化ナトリウム溶液を注入した。水は、4ml分の速度でリボイラーに注入された。上部の蒸留物は8mL分の速度で取られ、残留物は4mL分の速度で取られた。全部で2565gの培地と53gの04水酸化ナトリウム溶液がカラムに注入された。実験の過程で、全部で2750gの蒸留物が取られ、1269gの残留物が取られた。蒸留物の滴定は、DAS中に含有される全アンモニアの~71が除去されたすなわち残留物は、SAMASの4258混合物であった。この複合残留物を、圧力100psg、温度173°Cの条件で翌日同じカラムに戻した。当該複合残留物を、4mL分の速度で、015mL分の04水酸化ナトリウム溶液と共に、カラムの上部に注入した。リボイラーに、02mL分で水を注入した。前日から全部で1240gの残留物が、58gの水酸化ナトリウム溶液及び2890gの水と共にカラムに注入された。実験の過程で、全部で3183gの蒸留物が、1132gの残留物と共に回収された。蒸留物の滴定により、更に~14のアンモニアが除去され、蒸留物中、SAMASの7030の混合物が取得されることが明らかになった。その他本発明の方法をその具体的な工程及び態様に即して記載したが、添付の特許請求の範囲に記載した本開示発明の精神及び範囲から逸脱しない限り、本明細書に記載の具体的な要素及び工程に代えて、広範な範囲から選択される均等物を用いてもよい。