対象におけるネフローゼ症候群の治療または予防のための方法であって、Angptl4ポリペプチド、Angptl4ポリペプチド誘導体、または前述の組み合わせを該対象に投与する工程を含む該方法。前記ネフローゼ症候群は、微小変化群、巣状分節性糸球体硬化症、膜性腎症/膜性糸球体腎炎、膜性増殖性糸球体腎炎、または糖尿病性容態として特徴づけられる、請求項1に記載の方法。前記方法は、Angptl4ポリペプチドを投与する工程を含む、請求項1に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチドは、配列番号1または3の配列を含む、請求項1に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチドは、配列番号5または7の配列を含む、請求項1に記載の方法。前記方法は、Angptl4ポリペプチド誘導体を投与する工程を含む、請求項1に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、低下したリポタンパク質リパーゼ阻害活性を有し、開裂に対して耐性があり、または前述の組み合わせである、請求項6に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、低下したリポタンパク質リパーゼ阻害活性を有する、請求項6に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、野生型Angptl4ポリペプチドに関して位置40でのアミノ酸置換を含有する、請求項8に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、およびE40K置換を含有する、請求項8に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、およびE40A置換を含有する、請求項8に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチド誘導体はさらに、D39KまたはD39A置換を含有する、請求項10または11に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、開裂に対して耐性がある、請求項6に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、位置161、162、163、または164のうちの1以上でのアミノ酸置換を含有する、請求項13に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、少なくとも1のアミノ酸置換を含有し、この中で、位置163での1つの中性アミノ酸と置換された位置161、162、および164のうちの1以上でのアルギニン残基ならびに位置163でのリシン残基は、1つの中性アミノ酸と置換される、請求項13に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、少なくとも1のアミノ酸置換を含有し、この中で、D、R、K、G、A、V、またはSと置換された位置161、162、および164のうちの1以上でのアルギニン残基ならびに位置163でのリシン残基は、D、R、K、G、A、V、またはSと置換される、請求項13に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、R161RKR164からG161SGS164への置換を含有する、請求項13に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、配列番号9または10の配列を有し、この中で、X39はDであり、X40はAまたはKであり、X76およびX80はCであり、かつX161、X162、X163、およびX164は独立して、D、R、K、G、A、V、またはSと置換され、但し任意に、X161、X162、X163、およびX164のうちの少なくとも1は、配列番号1または3において認められないアミノ酸であるという条件付きである、請求項6に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、配列番号9または10の配列を有し、この中で、X39はDであり、X40はAまたはKであり、X76およびX80のうちの1はAまたはSであり、かつX76およびX80のうちのその他はCであり、かつX161、X162、X163、X163、およびX164は独立して、D、R、K、G、A、V、またはSと置換され、但し任意に、X161、X162、X163、およびX164のうちの少なくとも1は、配列番号1または3において認められないアミノ酸であるという条件付きである、請求項6に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、配列番号9または10の配列を有し、この中で、X39はAまたはKであり、X40はEであり、X76およびX80はCであり、かつX161、X162、X163、X163、およびX164は独立して、D、R、K、G、A、V、またはSと置換され、但し任意に、X161、X162、X163、およびX164のうちの少なくとも1は、配列番号1または3において認められないアミノ酸であるという条件付きである、請求項6に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、配列番号9または10の配列を有し、この中で、X39はDであり、X40はKであり、X76およびX80はCであり、かつX161、X162、X163、X163、およびX164は独立して、D、R、K、G、A、V、またはSと置換され、但し任意に、X161、X162、X163、およびX164のうちの少なくとも1は、配列番号1または3において認められないアミノ酸であるという条件付きである、請求項6に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、配列番号9または10に記載の配列を有し、この中で、X39はDであり、X40はKであり、X76およびX80のうちの1はAまたはSであり、かつX76およびX80のうちのその他はCであり、かつX161、X162、X163、X163、およびX164は独立して、D、R、K、G、A、V、またはSと置換され、但し任意に、X161、X162、X163、およびX164のうちの少なくとも1は、配列番号1または3において認められないアミノ酸であるという条件付きである、請求項6に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチドまたは前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、治療的有効量で投与される、請求項1に記載の方法。前記投与することは、水腫を低下させ、タンパク尿を低下させ、血漿アルブミンレベルを増加させ、高コレステロール血症を低下させ、高トリグリセリド血症を低下させ、または前記の組み合わせである、請求項1に記載の方法。前記Angptl4ポリペプチドまたは前記Angptl4ポリペプチド誘導体は、シアル酸付加されている、請求項1に記載の方法。前記ネフローゼ性容態は、微小変化群である、請求項1に記載の方法。前記糖尿病性容態は、糖尿病性腎症、糖尿病、ループス腎炎、または原発性糸球体疾患である、請求項2に記載の方法。多くの容態は、微小変化群MCD、巣状分節性糸球体硬化症FSCS、膜性腎症MN膜性糸球体腎炎MGNとも呼ばれる。、および膜性増殖性糸球体腎炎MPGNを含むネフローゼ症候群として分類される。何年もの間、病理学者は、光学顕微鏡の下で標本を観察すると、MCDにおける変化を何ら認めなかったので、微小変化群という名称となった。電子顕微鏡の出現とともに、該疾患についての証明として今や公知の変化には、被蓋細胞足状突起の瀰漫性損失、被蓋細胞足状突起の空胞形成、および内臓上皮細胞上での微絨毛の増殖が挙げられる。糖尿病性腎症は、ネフローゼ症候群の最も普遍的な原因である。高トリグリセリド血症は、リポタンパク質リパーゼLPL等の、トリグリセリドを分解する酵素の活性の変化によって生じ得る2~4。アンギオポエチン様4Angptl4等の、ネフローゼ症候群およびタンパク尿の病因に包含される特定のタンパク質は、LPLの活性を阻害する。ネフローゼ症候群の分子的基礎は、公知ではない。Angptl4の上昇したレベルは、MCD、MN/MGN、およびMPGN等のネフローゼ症候群において特筆されてきたが、Angptl4の上昇した循環レベルは、ネフローゼ症候群におけるタンパク尿の因果関係と関連付けられていない。しかしながら、MCD、FSGS、MN/MGN、およびMPGN等だがこれらに限定されないネフローゼ症候群ならびにタンパク尿等だがこれに限定されない関連容態におけるAngptl4の役割は、これまで報告されていない。さらに、ネフローゼ症候群の2つの鍵となる構成要素である、ネフローゼ症候群におけるタンパク尿とグルココルチコイドの関連付け、およびタンパク尿と高トリグリセリド血症の間の連関は、いまだに確立されていない。タンパク尿を低下させるよう設計された療法はさらに、疾患機序の研究を複雑にしている。例えば、MCDにおけるタンパク尿を治療するのに用いられるグルココルチコイドは、血漿トリグリセリドレベルを独立して上昇させ5、血漿トリグリセリドレベルの標準化は、MCD等の特定の形態のネフローゼ症候群におけるグルココルチコイドに対するタンパク尿の応答に後れる6。本開示は、Angptl4の上昇した循環レベルが、ネフローゼ症候群およびタンパク尿等だがこれに限定されない関連容態の重症度を低下させることを示す。結果として、本開示は、MCD、FSGS、MN/MGN、MPGN、および糖尿病性腎症等だがこれらに限定されないネフローゼ症候群を治療および/または予防するための方法、ならびにタンパク尿および水腫を含むがこれらに限定されないネフローゼ症候群と関連した症状を緩和する方法を提供する。本開示はさらに、タンパク尿および水腫を低下させるための方法を提供する。本開示の要約第一の態様において、本開示は、ネフローゼ症候群の治療および/または予防の方法を提供する。一実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCD、FSGS、MN/MGN、MPGN、または糖尿病性腎症として特徴づけられる。別の実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCDとして特徴づけられる。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、MSGSとして特徴づけられる。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、糖尿病性容態によって発症する。一実施態様において、糖尿病性容態とは、糖尿病性腎症、糖尿病、ループス腎炎、または原発性糸球体疾患である。該方法は、対象に、Angptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体を投与する工程を含む。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、9、または10の配列を含む。代替において、該アミノ酸配列は、野生型Angptl4またはAngptl4ポリペプチド誘導体に匹敵する活性を有する前述の配列のうちのいずれかの断片である。なおもさらなる実施態様において、Angptl4ポリペプチド誘導体は、本明細書に説明される誘導体であり、低下したLPL阻害活性を有し、開裂に対して耐性があり、または前述の組み合わせであるよう修飾されている。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、シアル酸付加されている。このような誘導体は、本明細書に説明されるAngptl4ポリペプチドのうちのいずれかに基づいていてもよい。Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、単独で、医薬組成物の一部として、または第二の薬剤との組み合わせのいずれかで、治療的有効用量で投与されてもよい。一実施態様において、このような投与は、Angptl4機能を提供することによってネフローゼ症候群を治療する。代替的な実施態様において、このような投与は、低下したLPL阻害を示しまたは開裂に対して耐性のあるAngptl4機能等だがこれに限定されない修飾されたAngptl4機能を提供することによって、ネフローゼ症候群を治療する。第二の態様において、本開示は、MCDの治療および/または予防の方法を提供する。該方法は、対象に、Angptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体を投与する工程を含む。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、9、または10の配列を含む。代替において、該アミノ酸配列は、野生型Angptl4に匹敵する活性を有する前述の配列のうちのいずれかの断片である。なおもさらなる実施態様において、Angptl4ポリペプチド誘導体は、本明細書に説明される誘導体であり、低下したLPL阻害活性を有し、開裂に対して耐性があり、または前述の組み合わせであるよう修飾されている。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、シアル酸付加されている。このような誘導体は、本明細書に説明されるAngptl4ポリペプチドのうちのいずれかに基づいていてもよい。Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、単独で、医薬組成物の一部として、または第二の薬剤との組み合わせでのいずれかで、治療的有効用量で投与されてもよい。一実施態様において、このような投与は、Angptl4機能を提供することによってMCDを治療する。代替実施態様において、このような投与は、低下したLPL阻害を示しまたは開裂に対して耐性のあるAngptl4機能等だがこれに限定されない修飾されたAngptl4機能を提供することによって、MCDを治療する。第三の態様において、本開示は、タンパク尿、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、および水腫等だがこれらに限定されないネフローゼ症候群の1以上の症状を緩和する方法を提供する。一実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCD、FSGS、MN/MGN、MPGN、および糖尿病性腎症として特徴づけられる。別の実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCDとして特徴づけられる。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、FSGSによって発症する。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、糖尿病性容態によって発症する。一実施態様において、糖尿病性容態とは、糖尿病性腎症、糖尿病、ループス腎炎、または原発性糸球体疾患である。該方法は、対象に、Angptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体を投与する工程を含む。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、9、または10の配列を含む。代替において、該アミノ酸配列は、野生型Angptl4に匹敵する活性を有する前述の配列のうちのいずれかの断片である。なおもさらなる実施態様において、Angptl4ポリペプチド誘導体は、本明細書に説明される誘導体であり、低下したLPL阻害活性を有し、開裂に対して耐性があり、または前述の組み合わせであるよう修飾されている。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、シアル酸付加されている。このような誘導体は、本明細書に説明されるAngptl4ポリペプチドのうちのいずれかに基づいていてもよい。Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、単独で、医薬組成物の一部として、または第二の薬剤との組み合わせでのいずれかで、治療的有効用量で投与されてもよい。一実施態様において、このような投与は、Angptl4機能を提供することによってネフローゼ症候群の1以上の症状を緩和する。代替実施態様において、このような投与は、低下したLPL阻害を示しまたは開裂に対して耐性のあるAngptl4機能等だがこれに限定されない修飾されたAngptl4機能を提供することによって、ネフローゼ症候群の1以上の症状を緩和する。第四の態様において、対象におけるタンパク尿を低下させるための方法を提供する。一実施態様において、対象は、ネフローゼ症候群に苦しんでいる。一実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCD、FSGS、MN/MGN、MPGN、および糖尿病性腎症として特徴づけられる。別の実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCDとして特徴づけられる。別の実施態様において、対象は、タンパク尿を特徴とする障害に苦しんでいる。別の実施態様において、対象は、糖尿病性容態に苦しんでいる。さらなる実施態様において、タンパク尿はFSGSによって発症する。一実施態様において、糖尿病性容態とは、糖尿病性腎症、糖尿病、ループス腎炎、または原発性糸球体疾患である。該方法は、対象に、Angptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体を投与する工程を含む。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、9、または10の配列を含む。代替において、該アミノ酸配列は、野生型Angptl4に匹敵する活性を有する前述の配列のうちのいずれかの断片である。なおもさらなる実施態様において、Angptl4ポリペプチド誘導体は、本明細書に説明される誘導体であり、低下したLPL阻害活性を有し、開裂に対して耐性があり、または前述の組み合わせであるよう修飾されている。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、シアル酸付加されている。このような誘導体は、本明細書に説明されるAngptl4ポリペプチドのうちのいずれかに基づいていてもよい。Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、単独で、医薬組成物の一部として、または第二の薬剤との組み合わせでのいずれかで、治療的有効用量で投与されてもよい。一実施態様において、このような投与は、Angptl4機能を提供することによってタンパク尿を低下させる。代替実施態様において、このような投与は、低下したLPL阻害を示しまたは開裂に対して耐性のあるAngptl4機能等だがこれに限定されない修飾されたAngptl4機能を提供することによって、タンパク尿を低下させる。第五の態様において、本開示は、対象における水腫を低下させる方法を提供する。一実施態様において、対象は、ネフローゼ症候群に苦しんでいる。一実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCD、FSGS、MN/MGN、MPGN、および糖尿病性腎症として特徴づけられる。別の実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCDとして特徴づけられる。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、FSGSによって発症する。具体的な実施態様において、水腫は、アルブミン等の血漿タンパク質の低下した循環レベルによって発症する。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、糖尿病性容態によって発症する。一実施態様において、糖尿病性容態とは、糖尿病性腎症、糖尿病、ループス腎炎、または原発性糸球体疾患である。Angptl4ポリペプチド誘導体のAngptl4ポリペプチドの投与を通じてのタンパク尿の低下は、タンパク尿を低下させ、血漿タンパク質レベルを上昇させ、それにより水腫を低下させる。該方法は、対象に、Angptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体を投与する工程を含む。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、9、または10の配列を含む。代替において、該アミノ酸配列は、野生型Angptl4に匹敵する活性を有する前述の配列のうちのいずれかの断片である。なおもさらなる実施態様において、Angptl4ポリペプチド誘導体は、本明細書に説明される誘導体であり、低下したLPL阻害活性を有し、開裂に対して耐性があり、または前述の組み合わせであるよう修飾されている。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、シアル酸付加されている。このような誘導体は、本明細書に説明されるAngptl4ポリペプチドのうちのいずれかに基づいていてもよい。Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、単独で、医薬組成物の一部として、または第二の薬剤との組み合わせでのいずれかで、治療的有効用量で投与されてもよい。一実施態様において、このような投与は、Angptl4機能を提供することによって水腫を低下させる。代替実施態様において、このような投与は、低下したLPL阻害を示しまたは開裂に対して耐性のあるAngptl4機能等だがこれに限定されない修飾されたAngptl4機能を提供することによって、水腫を低下させる。第六の態様において、本開示は、対象における高コレステロール血症および/または高トリグリセリド血症を低下させる方法を提供する。一実施態様において、対象は、ネフローゼ症候群に苦しんでいる。一実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCD、FSGS、MN/MGN、MPGN、および糖尿病性腎症として特徴づけられる。別の実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCDとして特徴づけられる。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、糖尿病性容態によって発症する。一実施態様において、糖尿病性容態とは、糖尿病性腎症、糖尿病、ループス腎炎、または原発性糸球体疾患である。該方法は、対象に、Angptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体を投与する工程を含む。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、9、または10の配列を含む。代替において、該アミノ酸配列は、野生型Angptl4に匹敵する活性を有する前述の配列のうちのいずれかの断片である。なおもさらなる実施態様において、Angptl4ポリペプチド誘導体は、本明細書に説明される誘導体であり、低下したLPL阻害活性を有し、開裂に対して耐性があり、または前述の組み合わせであるよう修飾されている。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、シアル酸付加されている。このような誘導体は、本明細書に説明されるAngptl4ポリペプチドのうちのいずれかに基づいていてもよい。Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、単独で、医薬組成物の一部として、または第二の薬剤との組み合わせでのいずれかで、治療的有効用量で投与されてもよい。一実施態様において、このような投与は、Angptl4機能を提供することによって高コレステロール血症および/または高トリグリセリド血症を低下させる。代替実施態様において、このような投与は、低下したLPL阻害を示しまたは開裂に対して耐性のあるAngptl4機能等だがこれに限定されない修飾されたAngptl4機能を提供することによって、高コレステロール血症および/または高トリグリセリド血症を低下させる。第七の態様において、本開示は、糖尿病性容態の治療および/または予防の方法を提供する。一実施態様において、糖尿病性容態とは、糖尿病性腎症、糖尿病、ループス腎炎、または原発性糸球体疾患である。該方法は、対象に、Angptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体を投与する工程を含む。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、9、または10の配列を含む。代替において、該アミノ酸配列は、野生型Angptl4に匹敵する活性を有する前述の配列のうちのいずれかの断片である。なおもさらなる実施態様において、Angptl4ポリペプチド誘導体は、本明細書に説明される誘導体であり、低下したLPL阻害活性を有し、開裂に対して耐性があり、または前述の組み合わせであるよう修飾されている。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、シアル酸付加されている。このような誘導体は、本明細書に説明されるAngptl4ポリペプチドのうちのいずれかに基づいていてもよい。Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、単独で、医薬組成物の一部として、または第二の薬剤との組み合わせでのいずれかで、治療的有効用量で投与されてもよい。一実施態様において、このような投与は、Angptl4機能を提供することによって前述の容態を治療する。代替実施態様において、このような投与は、低下したLPL阻害を示しまたは開裂に対して耐性のあるAngptl4機能等だがこれに限定されない修飾されたAngptl4機能を提供することによって、前述の容態を治療する。第八の態様において、本開示は、第一~第六の態様の方法において使用するための医薬組成物を提供する。該組成物は、1以上のAngptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体を含む。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、9、または10の配列を含む。代替において、該アミノ酸配列は、野生型Angptl4に匹敵する活性を有する前述の配列のうちのいずれかの断片である。なおもさらなる実施態様において、Angptl4ポリペプチド誘導体は、本明細書に説明される誘導体であり、低下したLPL阻害活性を有し、開裂に対して耐性があり、または前述の組み合わせであるよう修飾されている。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、シアル酸付加されている。このような誘導体は、本明細書に説明されるAngptl4ポリペプチドのうちのいずれかに基づいていてもよい。詳細な説明以下の論議において、特定の物品および方法が、背景および導入目的のために説明される。本明細書に含有されるいずれもが、先行技術の承認として解釈されるべきではない。出願人は、適宜、本明細書で言及される物品および方法が、適用可能な条項の下で、先行技術を構成しないことを示すための権利を明確に留保する。ネフローゼ症候群を研究している間、被蓋細胞から分泌されるAngptl4がタンパク尿を誘導することが特記された。より重要なことに、本明細書で説明されるように、循環Angptl4は、トランスジェニック動物モデルにおけるタンパク尿を低下させた。Angptl4の上昇したレベルは、MCDおよびMN等のネフローゼ症候群において特記されているが、Angptl4の上昇した循環レベルは、ネフローゼ症候群の因果関係と関連付けられていない。上昇したAngptl4レベルは、ネフローゼ症候群を治療し、関連するタンパク尿を低下させることが示されているが、循環における上昇したAngptl4は、LPLの阻害を通じてなどだがこれに限定されずに、高脂血症高トリグリセリド血症を誘導することが観察された。高脂血症の負の結果を伴わずに循環Angptl4の上昇したレベルの利点を提供することが有利であろう。このようなアプローチは、本明細書に開示されるようなAngptl4ポリペプチド誘導体を用いることで可能である。アンギオポエチン様タンパク質は、高トリグリセリド血症および腫瘍転移の発達に関与しており、アンギオポエチンとは機能的に異なる。Angptl4は、肝臓および脂肪組織において高度に発現するPPARγ8およびPPARα9標的遺伝子であり、白色脂肪組織および肝臓における飢餓によって強く誘導され、正常酸素圧条件下での血管内皮細胞についてのアポトーシス生存因子である10。Angptl4は、LPLの強力な阻害剤であり11、静脈内注射またはアデノウイルス仲介性発現の後に、有意な高トリグリセリド血症を誘導する12、13。他の研究は、心筋細胞および骨格筋においてはAngptl4のより低い発現を、ならびに全腎においては低レベルの発現をノザンブロット分析において示した8。ANGPTL4遺伝子の近年の集団ベースの研究は、ヒトにおけるトリグリセリドレベルに影響するバリアントを明らかにしている14、15。本開示は、MCD、FSGS、MN、MPGN、および糖尿病性腎症等だがこれらに限定されないネフローゼ症候群において観察されるタンパク尿の低下における循環Angptl4の決定的役割を示す。定義用語予防、予防する、予防すること、抑制、抑制する、および抑制することは、本明細書で使用する場合、疾患または容態の症状、局面、または特徴の発症の前に惹起され、それによりこのような症状、局面、または特徴を予防または低下させる化合物または医薬組成物を投与することなどの作用の経過を指す。このような予防することおよび抑制することは、有用であることが絶対的である必要ではない。用語治療、治療する、および治療することは、本明細書で使用する場合、疾患または容態の症状、局面、または特徴の発症の後に惹起され、それによりこのような症状、局面、または特徴を除去または低下させる化合物または医薬組成物を投与することなどの作用の経過を指す。このような治療することは、有用であることが絶対的である必要ではない。用語治療を必要とするは、本明細書で使用する場合、患者が治療を必要としまたは治療からの利益を得る、介護者によってなされる判断を指す。この判断は、介護者の専門的技術の領域内にある種々の因子基づいてだが、本開示の方法または化合物によって治療可能な疾患または容態の結果として患者が病気でありまたは病気になる知識を含む種々の因子に基づいてなされる。用語予防の必要性にあるは、本明細書で使用する場合、患者が予防を必要としまたは予防からの利益を得る、介護者によってなされる判断を指す。この判断は、介護者の専門的技術の領域内にある種々の因子に基づいてだが、本開示の方法または化合物によって予防可能な疾患または容態の結果として患者が病気でありまたは病気になる知識を含む種々の因子に基づいてなされる。用語個体、対象、または患者は、本明細書で使用する場合、マウス、ラット、他の齧歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ヒツジ、ウマ、または霊長類等の哺乳類を含むいずれかの動物、およびヒトを指す。該用語は、雄または雌またはその両方を明示してもよいし、あるいは雄または雌を除外してもよい。用語治療的有効量は、本明細書で使用する場合、疾患または容態のいずれかの症状、局面、または特徴に何らかの検出可能な正の効果を有することのできる、単独でまたは医薬組成物の一部としてのいずれかでの、化合物の量を指す。このような効果は、有益であることが絶対的である必要はない。Angptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体に関する場合、用語治療的有効量は、対象におけるタンパク尿を低下させるのに十分な該ポリペプチドの量を指す。用語医薬として許容し得る誘導体は、対象への投与の際に、野生型Angptl4の機能を直接的にまたは間接的に提供できる本開示のAngptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体のいずれかの医薬として許容し得る塩、エステル、エステルの塩、溶媒和化合物、または他の誘導体を意味し、ある実施態様において、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、開裂に対する耐性に関する低下したLPL阻害活性を示す。特に好ましい誘導体は、このようなポリペプチドが対象に例えば、経口投与される化合物を血中により容易に吸収させることによって投与されると、本開示のAngptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体の生物学的利用能を上昇させ、所定の生物学的区画への該ポリペプチドの送達を亢進し、注射による投与を可能にするよう溶解度を上昇させ、代謝を変化させ、あるいは排泄率を変化させる。一実施態様において、該誘導体はプロドラッグである。用語医薬として許容し得る塩は、別段の記載がない限り、本開示のAngptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体中に存在し得る酸性基または塩基性基の塩を含む。用語約およびおよそは、所定の測定の性質または精確さを測定された量についての誤差または変量の許容し得る程度を一般的に意味することになっている。誤差または変量の典型的な例示的程度は、所定の値または値の範囲の20以内であり、好ましくは10以内であり、より好ましくは5以内である。生物学的系について、用語約は、好ましくは所定の値の2倍以下の誤差の許容し得る標準偏差を指し、用語約またはおよそが、明確に記載されていない場合に推測できることを意味する。治療および予防の方法本開示は、ネフローゼ症候群の治療および/または予防の方法を提供する。本開示はさらに、MCD、FSGS、および/または糖尿病等の糸球体間隙損傷を伴う容態の治療および/または予防の方法を提供する。本開示はさらに、糖尿病性容態の治療および/または予防の方法を提供する。一実施態様において、糖尿病性容態とは、糖尿病性腎症、糖尿病、ループス腎炎、または原発性糸球体疾患である。本開示は追加的に、タンパク尿、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、および水腫等だがこれらに限定されないネフローゼ症候群の1以上の症状を緩和する方法を提供する。なおもさらに、本開示は、タンパク尿を低下させる方法を提供する。さらになお、本開示は、水腫を低下させる方法を提供する。本開示は追加的に、Angptl4ポリペプチド誘導体の1以上のAngptl4ポリペプチドを含む医薬組成物を提供する。一実施態様において、本開示の教示は、ネフローゼ症候群の治療または予防を必要とする対象において、該治療および/または予防を提供する。一実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCD、FSGS、MN/MGN、およびMPGNとして特徴づけられる。別の実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCDとして特徴づけられる。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、FSGSによって発症する。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、糖尿病性容態によって発症する。一実施態様において、糖尿病性容態とは、糖尿病性腎症、糖尿病、ループス腎炎、または原発性糸球体疾患である。該方法は、対象に、Angptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体を投与する工程を含む。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、9、または10の配列を含む。代替において、該アミノ酸配列は、野生型Angptl4に匹敵する活性を有する前述の配列のうちのいずれかの断片である。なおもさらなる実施態様において、Angptl4ポリペプチド誘導体は、本明細書に説明される誘導体であり、低下したLPL阻害活性を有し、開裂に対して耐性があり、または前述の組み合わせであるよう修飾されている。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、シアル酸付加されている。このような誘導体は、本明細書に説明されるAngptl4ポリペプチドのうちのいずれかに基づいていてもよい。Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、単独で、医薬組成物の一部として、または第二の薬剤との組み合わせでのいずれかで、治療的有効用量で投与されてもよい。一実施態様において、このような投与は、Angptl4機能を提供することによってネフローゼ症候群を治療する。代替実施態様において、このような投与は、低下したLPL阻害を示しまたは開裂に対して耐性のあるAngptl4機能等だがこれに限定されない修飾されたAngptl4機能を提供することによって、ネフローゼ症候群を治療する。このような方法は、このような治療および/または予防を必要とする対象を同定することをさらに含んでもよい。代替実施態様において、本開示の教示は、MCDの治療または予防を必要とする対象における、該治療および/または予防を提供する。該方法は、対象にAngptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体を投与する工程を含む。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、9、または10の配列を含む。代替において、該アミノ酸配列は、野生型Angptl4に匹敵する活性を有する前述の配列のうちのいずれかの断片である。なおもさらなる実施態様において、Angptl4ポリペプチド誘導体は、本明細書に説明される誘導体であり、低下したLPL阻害活性を有し、開裂に対して耐性があり、または前述の組み合わせであるよう修飾されている。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、シアル酸付加されている。このような誘導体は、本明細書に説明されるAngptl4ポリペプチドのうちのいずれかに基づいていてもよい。Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、単独で、医薬組成物の一部として、または第二の薬剤との組み合わせでのいずれかで、治療的有効用量で投与されてもよい。一実施態様において、このような投与は、Angptl4機能を提供することによってMCDを治療する。代替実施態様において、このような投与は、低下したLPL阻害を示しまたは開裂に対して耐性のあるAngptl4機能等だがこれに限定されない修飾されたAngptl4機能を提供することによって、MCDを治療する。このような方法は、このような治療および/または予防を必要とする対象を同定することをさらに含んでもよい。さらなる実施態様において、本開示の教示は、タンパク尿、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、および水腫等だがこれらに限定されないネフローゼ症候群の1以上の症状を緩和する方法を提供する。一実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCD、FSGS、MN/MGN、MPGN、および糖尿病性腎症として特徴づけられる。別の実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCDとして特徴づけられる。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、FSGSによって発症する。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、糖尿病性容態によって発症する。一実施態様において、糖尿病性容態とは、糖尿病性腎症、糖尿病、ループス腎炎、または原発性糸球体疾患である。該方法は、対象に、Angptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体を投与する工程を含む。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、9、または10の配列を含む。代替において、該アミノ酸配列は、野生型Angptl4に匹敵する活性を有する前述の配列のうちのいずれかの断片である。なおもさらなる実施態様において、Angptl4ポリペプチド誘導体は、本明細書に説明される誘導体であり、低下したLPL阻害活性を有し、開裂に対して耐性があり、または前述の組み合わせであるよう修飾されている。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、シアル酸付加されている。このような誘導体は、本明細書に説明されるAngptl4ポリペプチドのうちのいずれかに基づいていてもよい。Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、単独で、医薬組成物の一部として、または第二の薬剤との組み合わせでのいずれかで、治療的有効用量で投与されてもよい。一実施態様において、このような投与は、Angptl4機能を提供することによってネフローゼ症候群の1以上の症状を緩和する。代替実施態様において、このような投与は、低下したLPL阻害を示しまたは開裂に対して耐性のあるAngptl4機能等だがこれに限定されない修飾されたAngptl4機能を提供することによって、ネフローゼ症候群の1以上の症状を緩和する。このような方法は、このような治療および/または予防を必要とする対象を同定することをさらに含んでもよい。なおもさらなる代替実施態様において、本開示の教示は、対象におけるタンパク尿を低下させるための方法を提供する。一実施態様において、該対象は、ネフローゼ症候群に苦しんでいる。一実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCD、FSGS、MN/MGN、MPGN、および糖尿病性腎症として特徴づけられる。別の実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCDとして特徴づけられる。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、FSGSによって発症する。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、糖尿病性容態によって発症する。一実施態様において、糖尿病性容態とは、糖尿病性腎症、糖尿病、ループス腎炎、または原発性糸球体疾患である。該方法は、対象に、Angptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体を投与する工程を含む。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、9、または10の配列を含む。代替において、該アミノ酸配列は、野生型Angptl4に匹敵する活性を有する前述の配列のうちのいずれかの断片である。なおもさらなる実施態様において、Angptl4ポリペプチド誘導体は、本明細書に説明される誘導体であり、低下したLPL阻害活性を有し、開裂に対して耐性があり、または前述の組み合わせであるよう修飾されている。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、シアル酸付加されている。このような誘導体は、本明細書に説明されるAngptl4ポリペプチドのうちのいずれかに基づいていてもよい。Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、単独で、医薬組成物の一部として、または第二の薬剤との組み合わせでのいずれかで、治療的有効用量で投与されてもよい。一実施態様において、このような投与は、Angptl4機能を提供することによってタンパク尿を低下させる。代替実施態様において、このような投与は、低下したLPL阻害を示しまたは開裂に対して耐性のあるAngptl4機能等だがこれに限定されない修飾されたAngptl4機能を提供することによって、タンパク尿を低下させる。このような方法は、このような治療および/または予防を必要とする対象を同定することをさらに含んでもよい。さらにさらなる代替実施態様において、本開示の教示は、対象における水腫を低下させるための方法を提供する。一実施態様において、該対象は、ネフローゼ症候群に苦しんでいる。一実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCD、FSGS、MN/MGN、MPGN、および糖尿病性腎症として特徴づけられる。別の実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCDとして特徴づけられる。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、FSGSによって発症する。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、糖尿病性容態によって発症する。一実施態様において、糖尿病性容態とは、糖尿病性腎症、糖尿病、ループス腎炎、または原発性糸球体疾患である。具体的な実施態様において、水腫は、アルブミン等の血漿タンパク質の低下した循環レベルによって発症する。Angptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体の投与を通じてのタンパク尿の低下は、タンパク尿低下を上昇させ、血漿タンパク質レベルを上昇させ、それにより水腫を低下させる。該方法は、対象に、Angptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体を投与する工程を含む。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、9、または10の配列を含む。代替において、該アミノ酸配列は、野生型Angptl4に匹敵する活性を有する前述の配列のうちのいずれかの断片である。なおもさらなる実施態様において、Angptl4ポリペプチド誘導体は、本明細書に説明される誘導体であり、低下したLPL阻害活性を有し、開裂に対して耐性があり、または前述の組み合わせであるよう修飾されている。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、シアル酸付加されている。このような誘導体は、本明細書に説明されるAngptl4ポリペプチドのうちのいずれかに基づいていてもよい。Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、単独で、医薬組成物の一部として、または第二の薬剤との組み合わせでのいずれかで、治療的有効用量で投与されてもよい。一実施態様において、このような投与は、Angptl4機能を提供することによって水腫を低下させる。代替実施態様において、このような投与は、低下したLPL阻害を示しまたは開裂に対して耐性のあるAngptl4機能等だがこれに限定されない修飾されたAngptl4機能を提供することによって、水腫を低下させる。このような方法は、このような治療および/または予防を必要とする対象を同定することをさらに含んでもよい。なおもさらなる実施態様において、本開示の教示は、対象における高コレステロール血症および/または高トリグリセリド血症を低下させるための方法を提供する。一実施態様において、該対象は、ネフローゼ症候群に苦しんでいる。一実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCD、FSGS、MN/MGN、およびMPGNとして特徴づけられる。別の実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCDとして特徴づけられる。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、FSGSによって発症する。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、糖尿病性容態によって発症する。一実施態様において、糖尿病性容態とは、糖尿病性腎症、糖尿病、ループス腎炎、または原発性糸球体疾患である。該方法は、対象に、Angptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体を投与する工程を含む。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、9、または10の配列を含む。代替において、該アミノ酸配列は、野生型Angptl4に匹敵する活性を有する前述の配列のうちのいずれかの断片である。なおもさらなる実施態様において、Angptl4ポリペプチド誘導体は、本明細書に説明される誘導体であり、低下したLPL阻害活性を有し、開裂に対して耐性があり、または前述の組み合わせであるよう修飾されている。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、シアル酸付加されている。このような誘導体は、本明細書に説明されるAngptl4ポリペプチドのうちのいずれかに基づいていてもよい。Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、単独で、医薬組成物の一部として、または第二の薬剤との組み合わせでのいずれかで、治療的有効用量で投与されてもよい。一実施態様において、このような投与は、Angptl4機能を提供することによってタンパク尿を低下させる。代替実施態様において、このような投与は、低下したLPL阻害を示しまたは開裂に対して耐性のあるAngptl4機能等だがこれに限定されない修飾されたAngptl4機能を提供することによって、タンパク尿を低下させる。このような方法は、このような治療および/または予防を必要とする対象を同定することをさらに含んでもよい。なおもさらなる実施態様において、本開示の教示は、糖尿病性容態によって発症するn低下させるための方法を提供する。一実施態様において、ネフローゼ症候群の治療および/または予防のための方法を提供する。一実施態様において、糖尿病性容態とは、糖尿病性腎症、糖尿病、ループス腎炎、または原発性糸球体疾患である。該方法は、対象に、Angptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体を投与する工程を含む。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、9、または10の配列を含む。代替において、該アミノ酸配列は、野生型Angptl4に匹敵する活性を有する前述の配列のうちのいずれかの断片である。なおもさらなる実施態様において、Angptl4ポリペプチド誘導体は、本明細書に説明される誘導体であり、低下したLPL阻害活性を有し、開裂に対して耐性があり、または前述の組み合わせであるよう修飾されている。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、シアル酸付加されている。このような誘導体は、本明細書に説明されるAngptl4ポリペプチドのうちのいずれかに基づいていてもよい。Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体は、単独で、医薬組成物の一部として、または第二の薬剤との組み合わせでのいずれかで、治療的有効用量で投与されてもよい。一実施態様において、このような投与は、Angptl4機能を提供することによって前述の容態を治療する。代替実施態様において、このような投与は、低下したLPL阻害を示しまたは開裂に対して耐性のあるAngptl4機能等だがこれに限定されない修飾されたAngptl4機能を提供することによって、前述の容態を治療する。スクリーニング方法本開示は、ネフローゼ症候群あるいは、タンパク尿、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、または水腫等だがこれらに限定されない、ネフローゼ症候群と関連する容態を治療または予防するのに有効な化合物を同定するための方法にも関する。一実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCDまたはMNとして特徴づけられる。別の実施態様において、ネフローゼ症候群は、MCDとして特徴づけられる。別の実施態様において、ネフローゼ症候群は、FSGSによって特徴づけられる。さらなる実施態様において、ネフローゼ症候群は、糖尿病性容態によって発症する。一実施態様において、糖尿病性容態とは、糖尿病性腎症、糖尿病、ループス腎炎、または原発性糸球体疾患である。このような化合物は、医薬組成物中に含まれる活性成分として、または単独での投与に有用であり得る。一実施態様において、該方法には、Angptl4等だがこれに限定されない、ネフローゼ症候群の病因に関与するポリペプチドのレベルを決定することが含まれる。一般に、このようなスクリーニング方法は、Angptl4等だがこれに限定されない、ネフローゼ症候群の病因に関与するポリペプチドを発現するアッセイ系下記により詳細に説明を提供する工程、該アッセイ系に、試験されるべき試験化合物を導入する工程、およびポリペプチドのレベルに及ぼす試験化合物の効果を決定する工程を含む。該方法は、ポリペプチドのシアル酸付加のレベルに影響する候補化合物もしくは試験化合物または薬剤ポリペプチド、機能的核酸、炭水化物、抗体、低分子、または他の分子の同定を包含する。このような化合物は次に、本明細書に説明される動物モデルの系等だがこれに限定されない適切な系において試験され、同定された化合物の活性を決定してもよい。候補化合物は、Angptl4等だがこれに限定されないネフローゼ症候群の病因に、または単離されたポリペプチドを用いるアッセイに関与するポリペプチドを発現する細胞を採用するアッセイ等だがこれらに限定されない種々のアッセイを用いて同定される。種々のアッセイは、このようなポリペプチドの種々のバリアントを採用することができる例えば、完全長、生物活性断片、所望のポリペプチドの全部または一部を含む融合タンパク質。その上、このようなポリペプチドは、任意の好適な哺乳類種例えば、ヒト、ラット、またはマウスに由来し得、具体的な実施態様において、該ポリペプチドは、ヒトに由来する。前記アッセイが、細胞全体の使用を包含する場合、細胞は、Angptl4等だがこれに限定されないネフローゼ症候群の病因に関与するポリペプチドを天然に発現し得、または該ポリペプチドを発現するよう修飾され得る。後者の場合、細胞は、このようなポリペプチドを含むウイルスを細胞に感染させることなどによる従来の分子生物学技術を通じて、所望のポリペプチドを発現するよう修飾されることができる。細胞は、このようなポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を形質移入した原核細胞または真核細胞でもあり得る。前述において、完全長ポリペプチド、断片、またはこのようなポリペプチドの少なくとも一部を含有する融合タンパク質を用いてもよい。例示的なアッセイ系は、最新の明細書に説明されている。種々のスクリーニングアッセイは、本明細書で論議される疾患状態および容態の症状に及ぼす試験化合物の効果を測定することを必要とするインビボアッセイと組み合わされてもよい。このような実施態様において、該化合物は、タンパク尿または水腫等だがこれらに限定されないネフローゼ症候群またはそれに関連する容態と関係したパラメータに影響するかどうかを決定するよう評価され得る。このようなパラメータには、1Angptl4等だがこれに限定されないネフローゼ症候群および関連容態の病因に関与するポリペプチドのレベルを決定すること、ならびに2全成分または特定の成分に関してのいずれかで、タンパク質分泌のレベルを決定することが含まれる。一実施態様において、このようなスクリーニングアッセイは、例えば、Angptl4等だがこれに限定されないポリペプチドのレベルを決定すること、および試験化合物の不在下と比較して存在下でのこのようなポリペプチドのレベルの差異を検出することによって実施されることができる。このようなスクリーニングアッセイは、インビトロ、インビボ、またはエクスビボであり得、細胞全体または溶解物のいずれかを用いる細胞培養系であり得、あるいは動物モデルに基づき得る。本開示の任意のアッセイは、前述の方法において用いられてもよい。スクリーニング方法において使用するのに好適な試験化合物は、従来の化合物ライブラリー等の任意の好適な源から得られることができる。該試験化合物は、当該技術分野で公知の組み合わせライブラリー方法における数多くのアプローチのうちのいずれかを用いて得られることもでき、該アプローチには、生物学的ライブラリー、空間的にアドレス指定可能な並列固相または液相ライブラリー、デコンボルーションを必要とする合成ライブラリー法、1ビーズ1化合物ライブラリー法、およびアフィニティクロマトグラフィー選択を用いる合成ライブラリー法が含まれる。生物学的ライブラリーアプローチは、ペプチドライブラリーに限定されるのに対し、その他の4つのアプローチは、ペプチド、非ペプチドオリゴマー、または化合物の低分子ライブラリーに適用可能である。分子ライブラリーの合成についての方法の例は、当該技術分野で見いだされることができる。化合物のライブラリーは、溶液中に、またはビーズ、細菌、芽胞、プラスミド、もしくはファージ上に呈され得る。本開示は、本開示のいずれかの方法を実施するためのキットも提供し、該キットは、本明細書に開示される化合物および/または組成物のいずれかを含有することができ、あるいはそれに代わるものとして、本開示の方法を実施するのに有用であり得る。Angptl4ポリペプチド誘導体の作製および選択アンギオポエチン関連タンパク質4は、ヒトにおいてANGPTL4遺伝子によってコードされるポリペプチドである。この遺伝子は、アンギオポエチン/アンギオポエチン様遺伝子ファミリーの一員であり、N末端シグナル配列配列番号1のアミノ酸残基1~22、多重コイルドメイン配列番号1のアミノ酸残基23~170、リンカー領域配列番号1のアミノ酸残基171~185、およびフィブリノーゲンC末端ドメイン配列番号1のアミノ酸残基186~406を有するグリコシル化された分泌型タンパク質をコードする。この遺伝子は、内皮細胞において低酸素条件下で誘導され、ペルオキシソーム増殖活性化因子の標的である。該コードされたタンパク質は、グルコースホメオスタシス、脂質代謝、およびインスリン感度を調節することに直接関与する血清ホルモンであり、血管内皮細胞のためのアポトーシス生存因子としても作用する。あるいは、異なるイソ型をコードするスプライスされた転写産物バリアントが説明されている。この遺伝子は、ANGPTL2としてすでに呼ばれているが、ANGPTL4と改名された。Angptl4は、LPL二量体分子を破壊することによってLPLを阻害する。Angptl4は、血漿トリグリセリドTGクリアランスの極力な阻害剤として明確に確立されており、血漿TGレベルの上昇を生じる。近年の証拠は、Angptl4ポリペプチドの配列における変化が、トリグリセリドに及ぼす効果に影響し、それとともに、一定の突然変異が、LPLの低下した阻害を暗示する低下したトリグリセリドレベルを与えることを示している33および34、これらの各々は、Angptl4バリアントの教示についての引用により組み込まれている。。さらに、Angptl4ポリペプチドがオリゴマー形態で存在し、かつオリゴマー化がLPL活性の阻害に必要であることが報告されている。一旦細胞から分泌されると、オリゴマー形態は、開裂部位で開裂し配列番号1および3のR161RKR164、単量体C末端形態およびオリゴマーN末端形態を提供する34。Angptl4ペプチドのN末端残基1~187は、LPLを阻害するのに十分であることが見いだされた33。ヒト、ラット、およびマウスのアミノ酸配列およびcDNA配列を図5に提供し、配列番号1~8と命名する。本開示は、治療および予防の方法等だがこれらに限定されない本明細書に開示される方法における、Angptl4ポリペプチドおよびポリペプチド誘導体の使用を意図する。本明細書で定義する場合、Angptl4ポリペプチド誘導体は、配列番号1もしくは3に示されるヒトポリペプチドまたは配列番号5もしくは7に示されるポリペプチドのアミノ酸配列から決定された1以上の挿入、欠失、および/または置換を含むAngptl4ポリペプチドを指す。一実施態様において、野生型Angptl4ポリペプチドのアミノ酸残基は除去され、異なるアミノ酸残基と置換される。該バリアントは、本明細書に説明されるように、または当該技術分野で公知のように構築されてもよい。そのように構築されたバリアントは、活性についてスクリーニングするために、本明細書で説明される方法およびアッセイを用いて評価されてもよい。本明細書で使用する場合、アミノ酸を指すために用いられる場合の一文字は、以下の意味を有する。一実施態様において、前記バリアントは、LPLを阻害するまたは開裂に対して耐性があるAngptl4の能力を低下させるAngptl4ポリペプチドのアミノ酸配列の変化を含む。該変化は、この領域における1以上の残基の更換、欠失、および/または置換であり得る。このような変化は、当該技術分野において説明されているこのような教示についての引用により本明細書に組み込まれている参考文献33および34を参照されたい。。一実施態様において、このような変化は、配列番号1に関する残基1~187または配列番号3の残基1~182において生じる。代替実施態様において、このような変化は、配列番号1、3、5、もしくは7または配列番号1もしくは3に関する位置40において生じる。一実施態様において、位置40におけるアミノ酸野生型Angptl4における負に帯電したグルタミン酸残基は、中性アミノ酸または正に帯電したアミノ酸と更換される。特定の実施態様において、該変化は、E40K置換である。別の特定の実施態様において、該変化は、E40A置換である。E40KおよびE40A置換は、Angptl4によるLPL阻害を低下させるが、該ポリペプチドの発現、分泌、プロセシング、および他の機能に干渉しないことが示されている。さらなる特定の実施態様において、配列番号1および3の位置40における変化は、下記の表1に示されるものから選択される。さらにさらなる実施態様において、位置39におけるアミノ酸野生型Angptl4における負に帯電したアスパラギン酸残基は、中性または正に帯電したアミノ酸と更換される。一実施態様において、該置換は、D39A置換のD38K置換である。さらなる特定の実施態様において、配列番号1および3の位置39における変化は、下記の表1に示されるものから選択される。ある実施態様において、ポリペプチドバリアントは、位置40における上記の変化のうちの1つ、位置39における上記の変化のうちの1つ、または前述の組み合わせを含有してもよい。特定の実施態様において、該ポリペプチドは、D39K置換およびE40K置換、D39A置換およびE40K置換、またはD39K置換およびE40A置換を含有する。表1別の実施態様において、前記バリアントは、Angptl4ポリペプチドの開裂の原因である該ポリペプチドの一領域における1以上の変化を含む。一実施態様において、この領域は、Angptl4のR161RKR164領域である。該変化は、この領域における1以上の残基の更換、欠失、および/または置換であってもよい。R161RKR164領域は、N末端配列のオリゴマーおよびC末端配列の単量体を放出するAngptl4のオリゴマー形態の開裂の原因であることが示されている。突然変異した開裂部位を有するAngptl4の形態は、野生型ポリペプチドよりも循環における高いレベルで蓄積することが示された。さらに、Angptl4ポリペプチドの開裂を防止することは、本開示において効果的であることが観察されたAngptl4のオリゴマー形態を安定化させる。一実施態様において、R161RKR164領域の4つのアミノ酸残基すべてが変化し、代替実施態様において、R161RKR164領域の1、2、または3つのアミノ酸残基が変化する。さらなる実施態様において、位置161、162、または164におけるアルギニン残基は独立して、グリシン、アラニン、バリン、またはセリンと置換され、位置163におけるリシン残基は、グリシン、アラニン、バリン、またはセリンと置換される。具体的な実施態様において、配列番号1または3のR161RKR164アミノ酸配列は、G161AAG164と更換され、さらなる具体的な実施態様において、配列番号1または3のR161RKR164アミノ酸配列は、G161SGS164と更換される。配列番号1または3の完全R161RKR164領域は、下記の表2に提供される。表2さらなる実施態様において、配列番号1または3のR161RKR164アミノ酸配列におけるアミノ酸のうちの1以上は、Angptl4を開裂することのできる酵素の共通結合部位を除去するよう変化したことにより、Angptl4は開裂に対して耐性がある。一実施態様において、該酵素はプロタンパク質転換酵素であり、該共通結合部位は、RXKR、RXRR、RR、またはKRであり、式中、Xは任意のアミノ酸である。このような変化をなす上で、1以上のアミノ酸は、欠失し得、あるいはグリシン、アラニン、バリン、もしくはセリンと、または本明細書で論議されるその他の置換基のうちのいずれかと置換され得る。なおもさらなる実施態様において、前記バリアントは、Angptl4ポリペプチドのオリゴマー化の原因である該ポリペプチドの一領域における1以上の変化を含む。一実施態様において、この領域は、Angptl4のC76および/またはC80領域である。C76および/またはC80領域は、Angptl4ポリペプチドのオリゴマー化に関与することが示されているこのような教示についてその参考文献が本明細書に組み込まれている34。該変化は、この領域における1以上の残基の更換、欠失、および/または置換であり得る。特定の実施態様において、位置76および80におけるシステイン残基のうちの唯一が置換され、代替実施態様において、位置76および80における両システイン残基は、両方とも置換される。一実施態様において、位置76および80におけるシステイン残基のうちの少なくとも1は独立して、アラニンまたはセリンと置換され、別の実施態様において、両システイン残基は、アラニンまたはセリンと置換される。さらなる実施態様において、該バリアントは、Angptl4ポリペプチドオリゴマーの開裂を阻害するAngptl4のR161RKR164領域における1以上の変化、およびAngptl4によるLPL活性の阻害を低下させる位置40における変化を含む。本明細書で論議される変化のうちのいずれかが含まれる。一実施態様において、本開示は、配列番号9または10のアミノ酸配列を有するAngptl4ポリペプチドバリアントを提供する。配列番号9は図4に示されており、配列番号1由来のAngptl4の野生型配列を含むが、例外は、それぞれX39、X40、X76、X80、X161、X162、X163、およびX164によってそれぞれ示される位置39、40、76、80、および161~164における置換である。配列番号10は、図4に示されており、配列番号3由来のAngptl4の野生型配列を含むが、例外は、それぞれX39、X40、X76、X80、X161、X162、X163、およびX164によって示される位置39、40、76、80、および161~164における置換である。配列番号9および10において、X39は、A、G、P、V、L、I、M、C、F、Y、W、H、R、Q、N、S、T、またはKであってもよい。一実施態様において、X39は、中性のまたは正に帯電したアミノ酸である。さらなる実施態様において、X39は、AまたはKであってもよい。なおもさらなる実施態様において、X39はDであってもよい。配列番号9および10において、X40は、A、G、P、V、L、I、M、C、F、Y、W、H、R、Q、N、S、T、またはKであってもよい。一実施態様において、X40は、中性のまたは正に帯電したアミノ酸である。さらなる実施態様において、X40は、AまたはKであってもよい。なおもさらなる実施態様において、X40はEであってもよい。さらにさらなる実施態様において、X39がDではない場合、X40はEであってもよく、X40がEではない場合、X39はDであってもよい。配列番号9および10において、X76およびX80のうちの少なくとも1は、置換されていてもよい。一実施態様において、X76およびX80は独立して、AまたはSまたはCである。一実施態様において、X76およびX80のうちの1つは、AまたはSであってもよく、かつX76およびX80のうちのもう1つはCである。さらなる実施態様において、X76およびX80の両方は独立して、AまたはSであってもよい。なおもさらなる実施態様において、X76およびX80の両方はCであってもよい。配列番号9および10において、X161、X162、X163、およびX164のうちの少なくとも1は置換されていてもよい。一実施態様において、X161、X162、X163、およびX164の4つすべては置換されており、代替実施態様において、X161、X162、X163、およびX164のうちの1、2、または3は置換されている。さらなる実施態様において、X161、X162、X163、およびX164は独立して、D、R、K、G、A、V、またはSである。なおもさらなる実施態様において、のうちの4つすべては、表2に引用されている組み合わせと置換されている。本開示は、いずれかの形態における前述の組み合わせを意図する。さらに、配列番号9および10における指定された残基は、表3において指定されるような保存的アミノ酸置換と、または±1以下の疎水性親水性指標の差異を有する残基と、または±1以下の親水性値の差異を有する残基と置換されてもよい。一実施態様において、X39はDであり、X40はAまたはKであり、X76およびX80はCであり、かつX161、X162、X163、およびX164は独立して、D、R、K、G、A、V、またはSと置換され、但し任意で、X161、X162、X163、およびX164のうちの少なくとも1は、配列番号1または3において見出されないアミノ酸であるという条件付きである。別の実施態様において、X39はDであり、X40はAまたはKであり、X76およびX80はCであり、かつX161、X162、X163、およびX164は、表2に示される組み合わせから選択される。なおも別の実施態様において、X39はDであり、X40はAまたはKであり、X76およびX80はCであり、かつX161、X162、X163、およびX164は、GSGSまたはGAAGである。追加的な実施態様において、X39はDであり、X40はAまたはKであり、X76およびX80のうちの1つはAまたはSであり、かつX76およびX80のうちのもう1つはCであり、かつX161、X162、X163、およびX164は独立して、D、R、K、G、A、V、またはSと置換され、但し任意で、X161、X162、X163、およびX164のうちの少なくとも1は、配列番号1または3において見出されないアミノ酸であるという条件付きである。さらなる実施態様において、X38はDであり、X40はAまたはKであり、X76およびX80のうちの1つはAまたはSでありかつX76およびX80のうちのもう1つはCであり、かつX161、X162、X163、およびX164は、表2に示される組み合わせから選択される。なおもさらなる実施態様において、X39はDであり、X40はAまたはKであり、X76およびX80のうちの1つはAまたはSであり、かつX76およびX80のうちのもう1つはCであり、かつX161、X162、X163、およびX164はGSGSまたはGAAGである。一実施態様において、X39はAまたはKであり、X40はEであり、X76およびX80はCであり、かつX161、X162、X163、およびX164は独立して、D、R、K、G、A、V、またはSと置換され、但し任意で、X161、X162、X163、およびX164のうちの少なくとも1は、配列番号1または3において見出されないアミノ酸であるという条件付きである。別の実施態様において、X39はAまたはKであり、X40はEであり、X76およびX80はCであり、かつX161、X162、X163、およびX164は、表2に示される組み合わせから選択される。なおも別の実施態様において、X39はAまたはKであり、X40はEであり、X76およびX80はCであり、かつX161、X162、X163、およびX164はGSGSまたはGAAGである。一実施態様において、X39はDであり、X40はKであり、X76およびX80はCであり、かつX161、X162、X163、およびX164は独立して、D、R、K、G、A、V、またはSと置換され、但し任意で、X161、X162、X163、およびX164のうちの少なくとも1は、配列番号1または3において見出されないアミノ酸である。別の実施態様において、X39はDであり、X40はKであり、X76およびX80はCであり、かつX161、X162、X163、およびX164は、表2に示される組み合わせから選択される。なおも別の実施態様において、X39はDであり、X40はKであり、X76およびX80はCであり、かつX161、X162、X163、およびX164はGSGSまたはGAAGである。一実施態様において、X39はDであり、X40はKであり、X76およびX80のうちの1つはAまたはSであり、かつX76およびX80のうちのもう1つはCであり、かつX161、X162、X163、およびX164は独立して、D、R、K、G、A、V、またはSと置換され、但し任意で、X161、X162、X163、およびX164のうちの少なくとも1は、配列番号1または3において見出されないアミノ酸であるという条件付きである。別の実施態様において、X38はDであり、X40はKであり、X76およびX80のうちの1つはAまたはSでありかつX76およびX80のうちのもう1つはCであり、かつX161、X162、X163、およびX164は、表2に示される組み合わせから選択される。なおも別の実施態様において、X39はDであり、X40はKであり、X76およびX80のうちの1つはAまたはSであり、かつX76およびX80のうちのもう1つはCであり、かつX161、X162、X163、およびX164はGSGSまたはGAAGである。一実施態様において、Angptl4誘導体は、Angptl4の断片に基づいている。好適な断片には、野生型Angptl4の活性を保有する任意の断片、または100以上の連続するアミノ酸の任意の断片が含まれる。一実施態様において、このような断片は、配列番号1のアミノ酸1~187または配列番号3のアミノ酸1~182に基づいている。このような断片は、先行段落において説明されるアミノ酸置換を有していてもよい。Angptl4ポリペプチド鵜動態は、野生型Angptl4ポリペプチド活性に匹敵するまたは野生型Angptl4ポリペプチド活性と比較して上昇した活性一実施態様においては50以上を有していてもよく、あるいは、Angptl4ポリペプチド誘導体は、野生型Angptl4ポリペプチド活性と比較して低下した活性一実施態様においては50未満を有していてもよい。具体的な実施態様において、Angptl4ポリペプチド誘導体は、LPLを阻害する低下した能力を有し、開裂に対する増大した耐性を示す。欠失、付加、および置換は、当業者に公知であろうように選択され、所望のAngptl4ポリペプチド誘導体を作製することができる。例えば、保存的置換または類似の特性を有するアミノ酸の置換は、許容的であると期待される。加えて、具体的な欠失、挿入、および置換は、特定のAngptl4ポリペプチド活性に正にまたは負に影響し得るが、異なるAngptl4ポリペプチド活性に影響し得ない。配列番号1または3または5または7のいずれかのアミノ酸配列に対する保存的修飾は、それらの組み合わせおよびコードヌクレオチドに対する対応する修飾を含め、LPL阻害活性等の望ましくない特性を最小化しながら、天然のAngptl4ポリペプチドのものと類似の機能的および化学的特徴を有するAngptl4ポリペプチド誘導体を生じる。対照的に、Angptl4ポリペプチドの機能的および/または化学的特徴における実質的な修飾は、置換の領域における分子骨格の構造を維持することに及ぼす効果において有意に異なる、配列番号1または3または5または7のうちのいずれかのアミノ酸配列の組み合わせを含む該アミノ酸配列における置換を選択することによって達成され得る。例えば、保存的アミノ酸置換は、未変性のアミノ酸残基の非未変性残基との置換を包含し、それによりその位置におけるアミノ酸残基の極性または帯電に及ぼす効果がほとんどまたは全くないようにし得る。さらに、前記ポリペプチドにおける任意の未変性残基は、アラニンとも置換され得る。保存的アミノ酸置換は、生物系における合成によるよりもむしろ化学的ペプチド合成によって典型的に組み込まれる非天然アミノ酸残基も包含する。これらには、ペプチド模倣薬、およびアミノ酸部分の他の方向転換したまたは逆位の形態が含まれる。本明細書に説明される核酸分子およびポリペプチド分子が、化学的に合成され得、および組換え手段によって作製され得ることは、当業者によって認識される。天然の残基は、共通の側鎖特性に基づいて以下のクラスに分類され得る:1疎水性:ノルロイシン、Met、Ala、Val、Leu、Ile、2中性親水性:Cys、Ser、Thr、Asn、Gln、3酸性:Asp、Glu、4塩基性:His、Lys、Arg、5鎖の向きに影響する残基:Gly、Pro、および6芳香性:Trp、Tyr、Phe。例えば、非保存的置換は、これらのクラスのうちの1つのメンバーを別のクラス由来のメンバーと交換することを包含し得る。このような置換された残基は、非ヒトAngptl4ポリペプチドオルトログと相同的であるAngptl4ポリペプチド誘導体の領域へと、または該分子の非相同的領域へと導入されてもよい。このような変化をなす上で、アミノ酸の疎水性親水性指標が考慮されてもよい。各アミノ酸は、それらの疎水性および帯電特徴を基に疎水性親水性指標が割り当てられ、これらは以下のとおりである:イソロイシン45、バリン42、ロイシン38、フェニルアラニン28、システイン/シスチン25、メチオニン19、アラニン18、グリシン04、トレオニン07、セリン08、トリプトファン09、チロシン13、プロリン16、ヒスチジン32、グルタミン酸35、グルタミン35、アスパラギン酸35、アスパラギン35、リシン39、およびアルギニン45。1つのタンパク質に関する相互作用的生物学的機能を与える上での疎水性親水性アミノ酸指標の重要性は、当該技術分野で理解されているKyteetalJMolBiol1571051311982。特定のアミノ酸が、類似の疎水性親水性指標またはスコアを有する他のアミノ酸と置換され得、かつ類似の生物活性をなおも保有することは公知である。疎水性親水性指標に基づいて変化をなす上で、疎水性親水性指標が±2以内であるアミノ酸の置換が用いられてもよく、代替実施態様において、疎水性親水性指標は±1以内であり、なおも別の代替実施態様において、疎水性親水性指標は±05以内である。類似のアミノ酸の置換が親水性を基に効果的になされることができることも、当該技術分野で理解されている。1つのポリペプチドの隣接するアミノ酸の親水性によって支配されるような該ポリペプチドの最大局所平均親水性は、該タンパク質の生物学的特性と相関する。以下の親水性値がアミノ酸残基に割り当てられている:アルギニン30、リシン30、アスパラギン酸301、グルタミン酸301、セリン03、アスパラギン02、グルタミン02、グリシン0、トレオニン04、プロリン051、アラニン05、ヒスチジン05、システイン10、メチオニン13、バリン15、ロイシン18、イソロイシン18、チロシン23、フェニルアラニン25、トリプトファン34。類似の親水性値に基づいて変化をなす上で、親水性値が±2以内のアミノ酸の置換が用いられてもよく、代替実施態様において、親水性値は±1以内であり、なおも別の代替実施態様において、親水性値は±05以内である。所望のアミノ酸置換保存的であろうと非保存的であろうとは、このような置換が望ましい時点で当業者によって決定されることができる。例えば、アミノ酸置換は、Angptl4ポリペプチドの重要な残基を同定するために、またはAngptl4ポリペプチド活性を上昇または低下させるために特定の結合標的とのAngptl4ポリペプチドの親和性を上昇または低下させるために用いられることができる。例示的なアミノ酸置換を表3に示す。当業者は、周知の技術を用いて、配列番号1または3または5または7のいずれかに示されるポリペプチドの好適なバリアントを、それらの組み合わせを含め、決定することができる。活性を破壊せずに変化し得る分子の好適な領域を同定するために、当業者は、活性に重要であると考えられない領域を標的にしてもよい。例えば、同じ種由来のまたは他の州以来の類似の活性を有する類似のポリペプチドが公知である場合、当業者は、Angptl4ポリペプチドのアミノ酸配列を、このような類似のポリペプチドと比較してもよい。このような比較とともに、当業者は、類似のポリペプチド間で保存されている分子の残基および部分を同定することができる。このような類似のポリペプチドに関して保存されていないAngptl4ポリペプチドの領域における変化が、Angptl4ポリペプチドの生物活性および/または構造に不利に影響することがほとんどなさそうであることは認識される。当業者は、比較的保存された領域においてでさえ、活性を保有しながら、化学的に類似のアミノ酸を天然の残基と置換してもよいことも知っているであろう。それゆえ、生物活性にとってまたは構造にとって重要であるかもしれない領域でさえ、生物活性を破壊せずに、またはポリペプチド構造に不利に影響せずに、保存的アミノ酸置換に供され得る。加えて、当業者は、活性または構造にとって重要な類似のポリペプチドにおける残基を同定する構造機能研究を顧みることができる。このような比較の点で、当業者は、類似のポリペプチドにおける活性または構造に重要なアミノ酸残基に対応するAngptl4ポリペプチドにおけるアミノ酸残基の重要性を予測することができる。当業者は、Angptl4ポリペプチドのこのような予測された重要なアミノ酸残基への化学的に類似のアミノ酸置換を選択してもよい。当業者は、その3次元構造および、類似のポリペプチドにおける3次元構造に関するアミノ酸構造も分析することができる。その情報の点で、当業者は、Angptl4ポリペプチドの3次元構造に関して、該ポリペプチドのアミノ酸残基の整列を予測してもよい。当業者は、タンパク質表面にあると予測されるアミノ酸残基への過激な変化をなさないよう選択してもよく、その理由は、このような残基が、他の分子との重要な相互作用に関与するかもしれないからである。その上、当業者は、所望の各アミノ酸残基における単一のアミノ酸置換を含有する試験Angptl4ポリペプチド誘導体を作製してもよい。次に、誘導体は、当業者に公知の、および本明細書に開示されるような活性アッセイを用いてスクリーニングされることができる。このような誘導体は、好適な置換についての情報を集めるために用いられ得る。例えば、特定のアミノ酸残基への変化が、破壊された、望ましくなく低下した、または非好適な活性を結果として生じることが発見された場合、このような変化を有する誘導体は回避されるである。換言すれば、このような常規的実験から集められた情報に基づいて、当業者は、さらなる置換が、単独でまたは他の突然変異との組み合わせで回避されるべきであるアミノ酸を容易に決定することができる。幾多の科学的刊行物は、アミノ酸配列の分析からの二次構造の推定に充てられてきたChouetalBiochemistry132222451974、ChouetalBiochemistry1132112221974、ChouetalAdvEnzymolRelatAreasMolBiol47451481978、ChouetalAnnRevBiochem472512761979、およびChouetalBiophysJ263673841979を参照されたい。。その上、コンピュータプログラムは、ポリペプチドの二次構造を推定するのを支援するために現在、入手可能である。例として、JamesonWolf分析JamesonetalComputApplBiosci41811861998、およびWolfetalComputApplBiosci41871911988、PepPlotRTMプログラムBrutlagetalCABS62372451990、およびWeinbergeretalScience22874082097421985、およびタンパク質の三次元構造推定のための他の新たなプログラムFetrowEtalBiotechnology114794831993その上、コンピュータプログラムは、二次構造を予測することを支援するために現在、入手可能である。二次構造を予測する1つの方法は、相同性モデリングに基づいている。例えば、30超の配列同一性または40超の類似性を有する2つのポリペプチドまたはタンパク質はしばしば、類似の構造トポロジーを有する。タンパク質構造データベースPDBの近年の成長は、ポリペプチドのまたはタンパク質の構造内での折り畳みの潜在的な数を含む、二次構造の増強した予測可能性を提供してきたHolmetalNuciAcidRes272442471999を参照されたい。。二次構造を予測する追加的な方法には、スレッディングJonesDCurrOpinStructBiol7377871997、SuppletalStructure41591996、特性分析BowieetalScience2531641701991、GribskovetalMethEnzym18314682091591990、およびGribskovetalProcNatAcadSci84435543581987、および進化的連関Home上述およびBrenner上述を参照されたい。が含まれる。本明細書で論議されるポリペプチドの形態のいずれかは、該ポリペプチドの同定または精製において有用な配列も含有してもよく、このような配列の一例は、C末端V5タグである。前述には、本明細書で説明されるようなポリペプチド誘導体を含む、このようなポリペプチドをコードするcDNA配列等だがこれに限定されない核酸配列も含まれる。組成物本開示の有用な組成物は、本開示の治療方法および予防方法において有用な、本開示の1以上のポリペプチドを含み得、有用な組成物には、本開示の治療方法および予防方法において有用な、本開示の1以上のポリペプチドをコードする1以上の核酸も含まれる。開示される組成物は、このような化合物のうちの1以上を、医薬として許容し得る担体との組み合わせで含み得る。このような担体および製剤方法の例は、RemingtonTheScienceandPracticeofPharmacyにおいて見出され得る。投与に好適な医薬として許容し得る組成物を形成するために、このような組成物は、治療的有効量の化合物を含有する。本開示の医薬組成物は、本開示の治療方法および予防方法において用いられ得る。このような組成物は、本明細書に開示される治療方法および予防方法において有効であるよう、治療的有効量の化合物を送達するのに十分な量で、対象に投与される。治療的有効量は、対象の容態、体重、性別、および齢等だがこれらに限定されない種々の因子に従って変動し得る。他の因子として、投与の様式および部位が挙げられる。医薬組成物は、当該技術分野で公知の任意の方法において対象に提供され得る。投与の例示的な経路として、皮下、静脈内、局所的、皮膚上、経口、骨内、および筋肉内が挙げられるが、これらに限定されない。本開示の組成物は、1回のみ対象へ、または2回以上対象へ投与され得る。さらに、該組成物が対象へ2回以上投与される場合、1日1回、1週間に1回、または1か月に1回等だがこれらに限定されない、種々の治療方式が用いられ得る。該組成物はまた、対象へ1日当たり2回以上投与され得る。治療的有効量および適切な投薬治療方式は、いずれの潜在的な副作用も最小化しながら、最適な活性を得るために常規の試験によって同定され得る。加えて、他の薬剤との同時投与または連続投与が望ましくあり得る。本開示の組成物は、静脈内投与等によって全身的に、あるいは皮下注射等によってまたはペーストもしくはクリームの塗布等によって局所的に投与され得る。一実施態様において、本開示のAngptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチドバリアントをコードする、好適なプラスミドまたはベクターの形態にあり得る核酸が提供される。このような核酸は、対象から得られ得る細胞へと、当該技術分野で公知の好適な方法例えば、電気穿孔法によって導入される。一実施態様において、該細胞は脂肪細胞である。該細胞は、Angptl4ポリペプチドまたはポリペプチド誘導体の発現についてアッセイされ得る一実施態様において、該ポリペプチドの発現は、本明細書で論議されるようなポリペプチド上でのタグの存在によって決定されることができる。。ポリペプチド誘導体のAngptl4ポリペプチドを発現する細胞は次に、対象へと導入され得る。一実施態様において、該細胞は、対象へ皮下注射によって投与され、本明細書で論議されるものを含む他の投与方法も用いられ得る。次に、細胞は、Angptl4ポリペプチドまたはAngptl4ポリペプチド誘導体を発現し、循環へと取り込まれる。本開示の組成物はさらに、該化合物の溶解度、半減期、吸収等を改良する薬剤を含んでもよい。さらに、本開示の組成物は、望ましくない副作用を減衰させ、および/または化合物の毒性を低下させる薬剤を含んでもよい。このような薬剤は、RemingtonTheScienceandPracticeofPharmacy等だがこれに限定されない種々の教科書において説明されている。本開示の組成物は、投与のための広範な種々の剤形で投与されることができる。例えば、該組成物は、錠剤、カプセル剤、サシェ剤、ロゼンジ剤、トローチ剤、丸剤、散剤、顆粒剤、エリキシル剤、チンキ剤、液剤、懸濁剤、エリキシル剤、シロップ剤、軟膏、クリーム、ペースト、エマルション、または静脈内投与もしくは注射のための液剤等だがこれらに限定されない形態で投与されることができる。前述のいずれかは、徐放性製剤および/または持続性放出製剤を提供するよう改変されてもよい。本開示において、前記医薬組成物はさらに、医薬として許容し得る担体を含んでもよく、これには、ビヒクル、アジュバント、界面活性剤、懸濁剤、乳化剤、不活性充填剤、希釈剤、賦形剤、湿潤剤、結合剤、潤滑剤、緩衝剤、崩壊剤、および担体、ならびに着色料および着香料等だがこれらに限定されない補助剤が含まれるが、それらに限定されない本明細書では集約的に担体と呼ぶ。。典型的には、医薬として許容し得る担体は、活性化合物に対して化学的に不活性であり、かつ使用条件下で有害な副作用も毒性も有さない。医薬として許容し得る担体には、ポリマーおよびポリマーマトリックスを含むことができる。医薬として許容し得る担体の性質は、採用される特定の剤形および組成物の他の特徴に応じて異なってもよい。例えば、錠剤、カプセル剤、サシェ剤、ロゼンジ剤、トローチ剤、丸剤、散剤、または顆粒剤等だがこれらに限定されない固体形態での経口投与のために、前記化合物は、不活性充填剤、好適な結合剤、潤滑剤、崩壊剤、および補助剤等だがこれらに限定されない非毒性の医薬として許容し得る経口不活性担体と組み合わされてもよい。好適な結合剤として、デンプン、ゼラチン、グルコースもしくはベータラクトース等の天然糖、トウモロコシ甘味料、アカシア、トラガカント、もしくはアルギン酸ナトリウム等の天然ゴムおよび合成ゴム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、蝋、およびこれらに類するものが挙げられるが、限定されない。これらの剤形において用いられる潤滑剤として、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、およびこれらに類するものが挙げられるが、限定されない。崩壊剤として、デンプン、メチルセルロース、アガー、ベントナイト、キサンタンゴム、およびこれらに類するものが挙げられるが、限定されない。錠剤形態には、以下のうちの1以上を含むことができる:ラクトース、スクロース、マンニトール、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、アルギン酸、微結晶セルロース、アカシア、ゼラチン、グアーゴム、コロイド状二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、滑石、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸、および本明細書に説明される他の担体。ロゼンジ形態は、着香料において活性成分、通常、スクロースおよびアカシアまたはトラガカントを含むことができ、ならびに香錠は、不活性基剤においてゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアカシア等の活性成分を含むことができ、エマルションおよびゲルは、活性成分に加えて、当該技術分野で公知のような担体を含有することができる。チンキ剤、液剤、懸濁剤、エリキシル剤、シロップ剤等だがこれらに限定されない経口液状形態のために、本開示の核酸分子は、水、塩類溶液、またはアルコール等の希釈剤中に溶解することができる。さらに、経口液状形態は、合成ゴムおよび天然ゴム、例えばトラガカント、アカシア、メチルセルロース、およびこれらに類するもの等の好適に着香された懸濁剤または分散剤を含んでもよい。その上、所望のまたは必要な場合、好適な着香料または他の補助剤も混合物中に組み込まれることができる。採用されてもよい他の分散剤には、グリセリンおよびこれに類するものが含まれる。非経口投与に好適な製剤には、患者の血液と等張性の製剤にする抗酸化物質、緩衝剤、静菌薬、および溶質を含有することができる水性および非水性の等張性滅菌済み注射溶液、ならびに懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定剤、および保存料を含むことのできる水性および非水性の滅菌済み懸濁剤が含まれる。該化合物は、水、塩類溶液、水性デキストロースおよび関連する糖溶液、エタノール、イソプロパノール、もしくはヘキサデシルアルコール等のアルコール、プロピレングリコール等のグリコール、もしくはポリ400等のポリエチレングリコール、22ジメチル13ジオキソラン4メタノール等のグリセロールケタール、エーテル、油、脂肪酸、脂肪酸エステルもしくはグリセリド、または石鹸、油、もしくは洗剤等だがこれらに限定されない医薬として許容し得る界面活性剤の添加を伴うもしくは伴わないアセチル化脂肪酸グリセリド、ペクチン、カルボマー、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、もしくはカルボキシメチルセルロース等だがこれらに限定されない懸濁剤、または乳化剤および他の医薬アジュバントを含む、滅菌液体または液体の混合物等の、生理学的に許容し得る希釈剤中に投与されてもよい。非経口製剤において用いられることのできる油には、石油、動物油、植物油、または合成油が含まれる。油の具体的な例として、ピーナツ、ダイズ、ゴマ、綿実、トウモロコシ、オリーブ、ワセリン、およびミネラルが挙げられる。非経口製剤において使用するのに好適な脂肪酸には、モノオレイン酸ソルビタン等のポリエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ならびにプロピレングリコール、オレイン酸、ステアリン酸、およびイソステアリン酸による酸化プロピレンの縮合によって形成される、疎水性塩基による酸化エチレンの高分子量付加体が挙げられる。非経口製剤において使用するのに好適な石鹸には、脂肪性アルカリ金属、アンモニウム、およびトリエタノールアミン塩が挙げられ、好適な洗剤には、a例えば、ハロゲン化ジメチルジアルキルアンモニウムおよびハロゲン化アルキルピリジニウム等の陽イオン洗剤、b例えば、アルキル、アリール、およびスルホン酸オレフィン、アルキル、オレフィン、エーテル、および硫酸モノグリセリド、および、スルホスクシナート等の陰イオン洗剤、c例えば、酸化脂肪アミン、脂肪酸アルカノールアミド、およびポリオキシエチレンポリプロピレンコポリマー等の陰イオン洗剤、d例えば、アルキルベータアミノプロピオナートおよび2アルキルイミダゾリン第四級アンモニウム塩等の両親媒性洗剤、ならびにeこれらの混合物が挙げられる。好適な保存料および緩衝剤は、このような製剤において用いられることができる。注射の部位での刺激を最小化または除去するために、このような組成物は、約12~約17の親水性親油性平衡HLBを有する1以上の非イオン性界面活性剤を含有してもよい。このような製剤中の界面活性剤の量は、約5重量~約15重量にわたる。本開示の核酸分子を含有する軟膏、クリーム、ペースト、エマルション等だがこれらに限定されない局所剤形は、例えばアルコール、アロエベラゲル、アラントイン、グリセリン、ビタミンAおよびE油、ミネラルオイル、PPG2ミリスチルプロピオナート、ならびにこれらに類するもの等の、当該技術分野で周知の種々の担体材料と混合され、アルコール溶液、局所クレンザー、クレンジングクリーム、皮膚ゲル、皮膚ローション、およびクリーム製剤またはゲル製剤中のシャンプーを形成することができる。皮膚剥脱剤または皮膚研磨調製物を含むことも用いられてもよい。このような局所調製物は、経皮送達のために、パッチ、絆創膏、または包帯に適用されてもよく、あるいは、創傷または皮膚損傷の部位に直接送達するための絆創膏または包帯に適用されてもよい。本開示の化合物は、小単層ベシクル、大単層ベシクル、および多層ベシクル等の、リポソーム送達系の形態で投与されることもできる。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミン、またはホスファチジルコリンも含有してもよい。このようなリポソームはまた、モノクローナル抗体を含有して、特定の細胞種類または細胞種類の群へのリポソームの送達を配向してもよい。本開示の化合物はまた、標的となり得る薬剤担体として可溶性ポリマーと共役してもよい。このようなポリマーとして、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルタミドフェノール、またはパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシデポリリシンが挙げられることができるが、これらに限定されない。さらに、本発明の化合物は、薬剤の徐放を達成する上で有用なあるクラスの生分解性ポリマー、例えば、ポリ乳酸、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリラート、および架橋されたまたは両親媒性のヒドロゲルブロックコポリマーと共役してもよい。結果以下の結果において、使用される方法は、本開示の方法セクションおよびそこに引用される参考文献において明示された方法であった。以下の結果のうちのいくつかは、ClementLCetalPodocytesecretedAngiopoietinlike4mediatesproteinuriainglucocorticoidsensitivenephroticsyndromeNatureMedicineJanuary2011に説明されているこの参考文献は、Angptl4ポリペプチドの使用に関してそこに含有される開示についての引用により、本明細書により組み込まれる。。ネフローゼ症候群患者は、循環Angptl4の上昇したレベルを有するネフローゼ症候群患者は、Angptl4ポリペプチドの上昇した循環レベルを有する。MCDおよびMNと診断された患者ならびにMCD再発患者に由来する200μgのヒト血漿を2次元ゲル電気泳動によって分析し、抗Angptl4抗体を用いてウェスタンブロットを調製した図1のA。図1のAは、MCD再発患者およびMN患者のみがAngptl4の上昇したレベルを有していた矢印によって示される。。この形態のAngptl4は、中性pI型として存在し、単量体およびオリゴマーとして存在する。aP2Angptl4TGラットは、Angptl4の上昇した循環レベルを有する脂肪細胞特異的Angptl4の過剰発現についてのトランスジェニックラットモデルを開発し、図1のBに示すaP2Angptl4TG。Angptl4を正常に発現する臓器におけるmRNA発現の分析は、発現の特異性を確認し、それとともに、Angptl4は、褐色脂肪組織BATおよび白色脂肪組織WATにおいて検出された図1のC。200μgの血漿の2次元ゲル電気泳動後の抗Angptl4抗体を用いたウェスタンブロッティングは、異型接合aP2Angptl4TGラットが、野生型ラットよりも高い循環Angptl4レベルを有することを明らかにした3か月齢、n=3ブロット/群。図1のEは、200μg血漿の2次元ゲル電気泳動後の抗Angptl4および抗V5抗体が、aP2Angptl4TGラットの血漿における脂肪組織分泌型のV5タグ付け済みAngptl4の存在を示すことを示す。Angptl4のN末端に特異的な抗体を用いてaP2Angptl4TGラット血漿から免疫沈降させたAngptl4の2次元ゲル電気泳動後に、抗Angptl4または抗レクチンを用いてウェスタンブロッティングした。SNAI抗体は、循環中のシアル酸付加されたAngptl4ポリペプチドの存在を明らかにした。aP2Angptl4TGラットは、光学顕微鏡図1のGおよび電子顕微鏡非表示によって形態学的に正常な糸球体を有しており、糸球体Angptl4発現は変わらなかった。このことは、Angptl4の被蓋細胞特異的発現とは対照的であり、被蓋細胞においては、このような発現は、1~5か月齢での足突起の展退の進行性発達を含む、糸球体欠陥を結果として生じたこのような教示について引用により本明細書により組み込まれる米国仮出願第61/351865号2010年6月5日出願を参照されたい。。3か月齢の異種接合aP2Angptl4TG雄ラットにおいて導入遺伝子により発現したタンパク質を特異的に検出する抗V5抗体を用いる免疫金電子顕微鏡は、内皮表面において選択的に検出することを示し、循環Angptl4の中程度および高程度のオーダーのオリゴマーがGBMに入らず、内皮表面上に受容体を有することを示した。循環Angptl4の効果は、ヒトおよび実験的ネフローゼ症候群の両方に対して関連性があり、その理由は、タンパク尿が低下にある場合、Angptl4の脂肪組織上向き調節が、ネフローゼ症候群のより後期において特筆されるからである。Angptl4の上昇した循環レベルとタンパク尿およびアルブミン尿の関係アルブミン尿を含むAngptl4タンパク尿の循環レベル間の関係を検討するために、タンパク尿をaP2Angptl4TGラットにおいて分析した。図2のAは、aP2Angptl4TGが、尿タンパクの分析によって決定されるように、タンパク尿を呈しないことを示す。図2のAにおいて、尿タンパクをGelCodeブルーで染色したSDSPAGE3μg/レーン、MCD寛解を除く。によって分析したデンシトメトリー読み取りは、各レーンの下に提供されている。。無傷のアルブミンバンドは、70kDaにおいて観察される矢印によって表示。見られることができるように、WTラット、aP2Angptl4TGラット、および寛解中のMCD患者は、分析された尿試料中に無傷のアルブミンをほとんどまたは全く示さず、この中で、NPHS2Angptl4TGラット被蓋細胞特異的Angptl4発現を有しかつタンパク尿を有するMCDを発達させることが示されたラットトランスジェニックモデル、このような教示についての引用により本明細書により組み込まれる米国仮出願第号を参照されたい。、MCD再発、MN再発、およびPANラットネフローゼ症候群のラットモデルは、アルブミン尿を示す強いアルブミン染色を示した。図2のBは、雌異種接合aP2Angptl4雌TGラットが、WT同腹仔対照と比較して低下したアルブミン尿を有していたことを示す。図2のCは、aP2Angptl4異種接合雄TGラットについての同じ結果を示す。図2のDは、aP2Angptl4TGラットが、WT同腹仔と比較してピューロマイシンネフローゼPANモデルネフローゼ症候群のラットモデルにおいて低下したタンパク尿を呈したことを示す。先に示したように、aP2Angptl4TGラットは、中性またはほぼ中性の等電点に移動しシアル酸付加されている、より高い循環Angptl4レベルを有する。糸球体内皮に結合した脂肪組織分泌型Angptl4の内皮結合のため、このラットモデルにおけるより低い基線アルブミン尿およびより低いPAN誘導型タンパク尿が、糸球体内皮保護によって仲介されるかどうかを研究するために、糸球体内皮細胞GEnCに及ぼす組換えAngptl4の効果を決定するよう実験を実施した。過酸化水素の培地への添加によるGEnCを酸化的損傷に供し、対照安定細胞株、Angptl4HEK293細胞株高等電点pIの低シアル酸付加Angptl4を分泌、またはManNAcとともにインキュベートしたAngptl4HEK293細胞株中性pI、正常にシアル酸付加されたAngptl4由来の濃縮された上清600μg/ウェルとともにインキュベートした。Angptl4の高pI型がMCDにおける被蓋細胞から多量に分泌されることは特筆されるべきである。LDHの放出を細胞損傷のマーカーとして評価した。過酸化水素損傷を伴わない対照細胞に、1の相対スコアを与えた。高pIのAngptl4はGEnC損傷を増大したのに対し、循環Angptl4のほとんどを含む中性pIのAngptl4は、測定されたすべての時点で有意に保護的であったn=3読み取り/条件。PAN6日後における野生型ラットにおけるAngptl4の上向き調節は、専ら糸球体性であったのに対し、脂肪組織における上向き調節は、タンパク尿および糸球体Angptl4発現が低下する10日後に特筆されたn=3個体/試料図2のF。それゆえ、循環Angptl4レベルの上昇は、ネフローゼ症候群における循環Angptl4の保護効果およびタンパク尿の低下と同時である。循環Angptl4の効果は、ヒトMCDおよび実験的MCDの両方に関連しているようであり、その理由として、タンパク尿が低下している場合、Angptl4の脂肪組織上向き調節が、PANのより後期に特筆されるからである。さらに、aP2Angptl4TGラットにおける基線でのおよびPANの誘導後の上昇した循環Angptl4レベルは、野生型ラットと比較して、上昇した血漿トリグリセリドレベル図2のGおよび低下したヘパリン処理後リポタンパク質リパーゼ活性図2のHを結果的に生じた。Angptl4の循環への治療的送達の有効性を示すために、野生型Angptl4または対照タンパク質を、FSGSのモデルであるバッファロー/Mnaラットに、または糸球体間質損傷の短期モデルであるThy11腎炎が誘導されたウィスターラットに投与した図4のAおよびB。野生型組換えAngptl4ポリペプチドは、組換えタンパク質の収集によって作製した。Angptl4HEK293安定細胞株またはpcDNA31HEK293対照安定細胞株を15cm皿において交会するまで増殖させ、温PBSで2回洗浄し、フェノールレッドを有さない、25mMManNAcを有する、または有さない無血清DMEMとともに48時間インキュベートした。細胞を収集し、上清を濃縮した。1枚の15cm皿から濃縮した上清を、各注射時点で用いた。バッファロー/Mnaラットは、約2か月齢で、光学顕微鏡下での足および分節の病変、電子顕微鏡下での被蓋細胞足突起の展退、ならびにタンパク尿を含むヒトFSGSを模倣する病変を自発的に発達させる。該ラットは、加齢するにつれ、タンパク尿の進行性上昇を発達させる。先の研究において用いられたラットは、雄であり5か月齢であった。抗Thy11腎炎を、異なる群の雄ウィスターラット100~125g、n=4個体/群への150μgの抗Thy11Ox7ハイブリドーマまたは対照IgGの静脈内注射によって誘導した。バッファロー/Mnaラットモデルにおいて、基線タンパク尿の評価を0日後に実施した。Angptl4または対照タンパク質を連続した2日間1日後および2日後、矢印バッファローMnaラットに腹腔内注射したn=4個体/群。タンパク尿を隔日で評価し、基線値の百分率として表した。タンパク尿における有意な低下は、組換えAngptl4で処理されたラットにおいて特筆された。Thy11腎炎モデルにおいて、タンパク尿を1日後に確認した。ラットに組換えAngptl4または対照タンパク質のいずれかを連続した2日間1日後および2日後、矢印静脈内注射した。次に、タンパク尿を評価した。図4のBに示すように、タンパク尿は、Angptl4で処理されたラットにおいて終始より低く、5日後において統計的に有意であった。これらの結果は、循環へのAngptl4の治療的送達が、微小変化群、巣状分節性糸球体硬化症、膜性腎症/膜性糸球体腎炎、膜性増殖性糸球体腎炎、または、糖尿病性腎症、糖尿病、ループス腎炎、もしくは原発性糸球体疾患等だがこれらに限定されない糖尿病性容態等だがこれらに限定されないネフローゼ症候群に有効な治療であることを示す。さらに、これらの結果は、循環へのAngptl4の治療的送達が、ネフローゼ症候群、ならびにタンパク尿、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、および水腫等だがこれらに限定されないネフローゼ症候群関連容態に有効な治療であることを示す。一実施態様において、Angptl4ポリペプチドは、低下したLPL阻害活性、開裂に対する耐性を有する誘導体、または本明細書に説明される誘導体である。このような誘導体の投与は、上昇した血漿トリグリセリドレベル等の、LPL活性の阻害と関連した負の効果を伴わずに、Angptl4治療の有益な効果を保有するであろう。方法完全長のラットAngptl4のクローニング、および完全長組換えAngptl4に対する抗体の作製終止コドンを含まない、本発明者らの先行実験7に由来する1218bpの完全長のラットAngptl4翻訳領域を、真核細胞発現のためにpcDNA31/V5HisBへと、原核細胞発現のためにpET28aへとクローニングした。大腸菌により発現した精製された完全長タンパク質を用いて、ウサギにおけるポリクローナル抗体を作製しProteintechgroupIncChicagoILUSA、該抗体をELISAおよびウェスタンブロットによって試験した。抗体反応性バンドをGelCodeブルーで染色したゲルから切り出し、トリプシンで消化し、Angptl4ペプチド配列の存在をMALDITOF/TOFによって確認した。抗血清の一部を抗原へとアフィニティ精製した。別段の指定がない限り、説明されるすべての研究はこの抗体を用いた。ラットAngptl4のN末端部分シグナルペプチドを排除するアミノ酸7~86に対する追加的なポリクローナル抗体をウサギにおいて同様に産生した。ヒト糸球体疾患の動物モデルにおけるタンパク尿の誘導すべての動物研究は、研究所のIACUCによって認可された。WTラットにおけるタンパク尿の動物モデルの誘導n=4個体/群は、括弧内の先行刊行物において説明されている:PAN7、PHN7、グルココルチコイドを用いるPAN20、非HIV崩壊性糸球体症18、腎毒性血清誘発性異種相タンパク尿7。200μgの抗hy11Ox7ハイブリドーマまたは対照IgGを異なる群の雄ウィスターラット100~125g、n=4個体/群へと静脈内注射することによって、抗Thy11腎炎を誘導し、ラットを24時間後および72時間後に安楽死させた。以下の技術は、先行刊行物において説明されている:TaqmanリアルタイムPCR26、共焦点画像法7、インサイツハイブリダイゼーション27、免疫金電子顕微鏡26、糸球体抽出およびウェスタンブロットのための加工26、PEI法による電荷の評価28。アルシアンブルー染色のために、酢酸を用いて染色溶液のpHを25に調整し、01核ファストレッド溶液を対比染色として用いた。糸球体基底膜のアルシアンブルー染色のデンシトメトリー20個/個体、3個体/群を、ImageProソフトウェアMediaCyberneticsIncBethesdaMDUSAを用いて評価した。2次元ゲルウェスタンブロットのデンシトメトリーを、GelProAnalyzerソフトウェアMediaCyberneticsIncを用いて評価した。TaqmanリアルタイムPCRのプライマーおよびプローブを図3に列挙する。インサイツハイブリダイゼーションのために、ラットAngptl4のためのジゴキシゲニン標識したプローブは、翻訳領域の塩基対1~548を含んでいた。ヘパリン処理後LPL活性のための試料を得るために、ラットに10単位/体重100gのブタヘパリンを静脈内注射し、15分後に安楽死させ、RoarBiomedicalIncNewYorkNY製のアッセイを用いて活性を測定した。血清トリグリセリドを飢餓状態において測定した。Angptl4マウスへのNTSの注射Angptl4マウスをSanderKerstenに、EliLilyCorporationIndianapolisINUSAからの親切な贈呈品として提供した。研究プロトコールは、WageningenUniversityの動物研究委員会によって認可された。11週齢の雄Angptl4またはマウスn=4個体/群に15mgのγ2NTSまたは正常ヒツジ血清SigmaAldrichStLouisMOUSAを静脈内注射し、スポット尿試料を48時間時に収集し、マウスを72時間時に安楽死させ、生化学的測定のために血漿を収集し、組織学的分析のために腎臓を保存した。尿アルブミンをELISABethyllaboratoriesMontgomeryTXUSAによって評価し、尿クレアチンを質量分析によって測定した。足突起展退を評価するために、足突起の平均幅をまず、対照で処理したAngptl4マウスの透過型電子顕微鏡図において測定した10の等間隔の読み取り/ループ、3ループ/糸球体、3糸球体/腎、3腎/群。展退を、平均幅における25倍超の増加として説明した。足突起全体および展退した足突起を、NTSで処理したまたは対照で処理したAngptl4マウスにおいて計数した。保存されたヒト試料を用いた研究保存されたヒト腎生検n=5生検/条件の免疫染色を、InstitutoNacionaldeCardiologiaMexicoCityのIRB認可プロトコールを介して得られた試料に関して実施した。これらの研究に用いられた対照腎生検は、性別および齢の対応したプロトコール移植前生検であった。2次元ゲル電気泳動およびウェスタンブロットのための保存ヒト血清n=4試料/条件を、すでに公開された研究29から得た。トランスジェニックラットの作出ラットAngptl4cDNAシグナル配列を含む。をポリA尾部のちょうど上流のNotI部位のC末端V5タグでクローニングすることによって、aP2Angptl4TGラット脂肪組織特異的コンストラクトを、54kbのマウスaP2プロモーターコンストラクトを含有するベクターAddgeneIncCambridgeMAUSAから購入において作製した。消化したDNAコンストラクトをスプラーグドーリー受精卵UniversityofMichiganで実施に微量注入し、偽妊娠宿主スプラーグドーリー雌へと移植することによって、トランスジェニックラットを作出し、結果として生じる子孫を、コンストラクト特異的および対照ゲノムプロラクチンプライマーおよびプローブの組み合わせを用いた常規のPCRおよびTaqManゲノムDNAリアルタイムPCR戦略によって遺伝子型決定した図3。脂肪組織特異的発現のための3つの創始系統を作出した。いずれも4世代を超えて安定しているaP2Angptl4TGラット系統375からのデータ3コピーを呈する。尿全タンパク質をブラッドフォード法BioradlaboratoriesHerculesCAUSAを用いて評価し、アルブミン尿をELISABethyllaboratoriesMontgomeryTXUSAによって評価した。GEnCを用いたインビトロ研究GEnC研究のために、培養されたラットGEnC32を6ウェルプレートにおいて75培養密度まで増殖させn=3ウェル/条件、温PBSで2回洗浄し、200μMH2O2を含有する無血清RPMIを600μg/ウェルの対照安定細胞株上清、またはAngptl4HEK293安定細胞株上清、またはManNAcで処理したAngptl4HEK293細胞株由来の上清とともに。ウェルを24、36、および48時間時に試料採取した。LDH放出を細胞毒性検出キットRocheDiagnosticsMannheimGermanyを用いて測定した。OD492値を、H2O2も安定細胞株上清も添加していないウェルからの読み取りの比として表した。統計分析3以上の群を包含するタンパク尿または遺伝子発現における差異の分析を、GraphPadInStatソフトウェア第305版を用いて、分析後検定を用いるANOVAによって実施した。2群の比較のために、MicrosoftExcel2003におけるスチューデント独立t検定を用いた。参考文献1JennetteCNachmanPHPrimaryglomerulardiseaseInTheKidneyBrennerBMeditor6thedition126313492GutmanAShafrirEAdiposetissueinexperimentalnephroticsyndromeAmJPhysiol2057027063VaziriNDMolecularmechanismsoflipiddisordersinnephroticsyndromeKidneyInt63196419764ShearerGCKaysenGAEndothelialboundlipoproteinlipasedepletioninhypoalbuminemiaresultsfromdecreasedendothelialbindingnotdecreasedsecretionKidneyInt706476535ReavenEPKoltermanOGReavenGMUltrastructuralandphysiologicalevidenceforcorticosteroidinducedalterationsinhepaticproductionofverylowdensitylipoproteinparticlesJLipidRes1574836TsukamotoYKokuboTHoriiAMoriyaRKobayashiYLipoproteinderangementduringsteroidtreatmentinminimalchangenephroticsyndromeNephron736066127LiuGClementLKanwarYSAvilaCasadoCChughSSZHXproteinsregulatepodocytegeneexpressionduringthedevelopmentofnephroticsyndromeJBiolChem28139681396928YoonJCetalPeroxisomeproliferatoractivatedreceptorgammatargetgeneencodinganovelangiopoietinrelatedproteinassociatedwithadiposedifferentiationMotCellBiol20534353499KerstenSetalCharacterizationofthefastinginducedadiposefactorFIAFanovelperoxisomeproliferatoractivatedreceptortargetgeneJBiolChem275284882849310KimIetalHepaticexpressionsynthesisandsecretionofanovelfibrinogenangiopoietinrelatedproteinthatpreventsendothelialcellapoptosisBiochemJ34660361011YoshidaKShimizugawaTOnoMFurukawaHAngiopoietinlikeprotein4isapotenthyperlipidemiainducingfactorinmiceandinhibitoroflipoproteinlipaseJLipidRes431770177212GeHetalOligomerizationandregulatedproteolyticprocessingofangiopoietinlikeprotein4JBiolChem2792038204513GeHYangGYuXPourbahramiTLiCOligomerizationstatedependenthyperlipidemiceffectofangiopoietinlikeprotein4JLipidRes452071207914RomeoSetalPopulationbasedresequencingofANGPTL4uncoversvariationsthatreducetriglyceridesandincreaseHDLNatGenet3951351615RomeoSetalRarelossoffunctionmutationsinANGPTLfamilymemberscontributetoplasmatriglyceridelevelsinhumansJClinInvest119707916EreminaVetalVEGFinhibitionandrenalthromboticmicroangiopathyNEnglJMed3581129113617DavisBetalPodocytespecificexpressionofangiopoietin2causesproteinuriaandapoptosisofglomerularendotheliaJAmSocNephrol182320232918AvilaCasadoCetalProteinuriainratsinducedbyserumfrompatientswithcollapsingglomerulopathyKidneyInt6613314319MandardSetalThefastinginducedadiposefactorangiopoietinlikeprotein4isphysicallyassociatedwithlipoproteinsandgovernsplasmalipidlevelsandadiposityJBiolChem28193494420ClementLetalEarlychangesingeneexpressionthatinfluencethecourseofprimaryglomerulardiseaseKidneyInt7233734721CazesAetalExtracellularmatrixboundangiopoietinlike4inhibitsendothelialcelladhesionmigrationandsproutingandaltersactincytoskeletonCircRes9912078209121522MalicdanMCNoguchiSHayashiYKNonakaINishinoIProphylactictreatmentwithsialicacidmetabolitesprecludesthedevelopmentofthemyopathicphenotypeintheDMRVhIBMmousemodelNatMed1569069523GaleanoBetalMutationinthekeyenzymeofsialicacidbiosynthesiscausessevereglomerularproteinuriaandisrescuedbyNacetylmannosamineJClinInvest1171585159424RugeTetalLipoproteinlipaseinthekidneyactivityvarieswidelyamonganimalspeciesAmJPhysiolRenalPhysiol287F1131F113925KoliwadSKetalAngiopoietinlike4isadirectglucocorticoidreceptortargetandparticipatesinglucocorticoidregulatedtriglyceridemetabolismJBiolChem284255932560126LiuGatalNephlandnephrininteractionintheslitdiaphragmisanimportantdeterminantofglomerularpermeabilityJClinInvest11220922127DijkmanHBPMMentzelSdeJongASAssmannKJMRNAinsituhybridizationusingdigoxigeninlabeledcRNAprobesBiochemica2232728IsogaiSMogamiKShiinaNYoshinoGInitialultrastructuralchangesinporesizeandanionicsitesoftheglomerularbasementmembraneinstreptozotocininduceddiabeticratsandtheirpreventionbyinsulintreatmentNephron83535829BakkerWWetalAlteredactivityofplasmahemopexininpatientswithminimalchangediseaseinrelapsePediatrNephrol201410141530GravesRATontonozPPlattKARossSRSpiegelmanBMIdentificationofafatcellenhanceranalysisofrequirementsforadiposetissuespecificgeneexpressionJCellBiochem4921922431YoshidaKOnoMKoishiRFurukawaHCharacterizationofthe5’regulatoryregionofthemouseangiopoietinlikeprotein4VetResCommun2829930532ZengLetalHMGCoAreductaseinhibitionmodulatesVEGFinducedendothelialcellhyperpermeabilitybypreventingRhoAactivationandmyosinregulatorylightchainphosphorylationFASEBJ191845184733RomeoSetalPopulationbasedresequencingofANGPTL4uncoversvariationsthatreducetriglycerideandincreaseHDLNatureGenetics3951351734YinWuetalGeneticvariationinAngptl4providesinsightintoproteinprocessingAndfunctionJBiolChem2841321313222