"本明細書に記載の発明。本発明の目的は、動物性タンパク質非含有培養培地を提供することである。この目的および他の目的を達成するにあたって、本発明の一局面に従って、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有細胞培養培地が提供される。このダイズ加水分解物は、少なくとも0.05w/vの濃度で存在し得、酵母加水分解物は、少なくとも0.05w/vの濃度で存在する。必要に応じて、このダイズ加水分解物は、1.0w/v未満の濃度で存在し得、酵母加水分解物は、0.3w/v未満の濃度で存在し得る。必要に応じて、このダイズ加水分解物は、約0.2w/v~約0.6w/vの間の濃度で存在し得、酵母加水分解物は、約0.05w/v~約0.2w/vの間の濃度で存在し得る。必要に応じて、ダイズ加水分解物は、約0.25w/v~約0.35w/vの間の濃度で存在し得、酵母加水分解物は、約0.05w/v~約0.15w/vの間の濃度で存在し得る。必要に応じて、このダイズ加水分解物は、約0.3w/vの濃度で存在し得、この酵母加水分解物は、約0.1w/vの濃度で存在し得る。必要に応じて、培地は、1重量部の酵母加水分解物に対して3重量部のダイズ加水分解物を含む。酵母加水分解物は、限外濾過で精製された酵母加水分解物であり得、ここで酵母加水分解物の少なくとも40は、500ダルトン以下の分子量を有する。同様に、ダイズ加水分解物は、限外濾過で精製されたダイズ加水分解物であり得、ここでダイズ加水分解物の少なくとも40は、500ダルトン以下の分子量を有する。本発明は、例えば以下の項目を提供する。項目1ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む、動物性タンパク質非含有細胞培養培地。項目2項目1に記載の動物性タンパク質非含有細胞培養培地であって、前記ダイズ加水分解物は、少なくとも0.05w/vの濃度で存在し、酵母加水分解物は、少なくとも0.05w/vの濃度で存在する、動物性タンパク質非含有細胞培養培地。項目3項目1に記載の動物性タンパク質非含有細胞培養培地であって、前記ダイズ加水分解物は、1.0w/v未満の濃度で存在し、前記酵母加水分解物は、0.3w/v未満の濃度で存在する、動物性タンパク質非含有細胞培養培地。項目4項目1に記載の動物性タンパク質非含有細胞培養培地であって、前記ダイズ加水分解物は、約0.2w/v~約0.6w/vの間の濃度で存在し、前記酵母加水分解物は、約0.05w/v~約0.2w/vの間の濃度で存在する、動物性タンパク質非含有細胞培養培地。項目5項目1に記載の動物性タンパク質非含有細胞培養培地であって、前記ダイズ加水分解物は、約0.25w/v~約0.35w/vの間の濃度で存在し、前記酵母加水分解物は、約0.05w/v~約0.15w/vの間の濃度で存在する、動物性タンパク質非含有細胞培養培地。項目6項目1に記載の動物性タンパク質非含有細胞培養培地であって、前記ダイズ加水分解物は、約0.3w/vの濃度で存在し、前記酵母加水分解物は、約0.1w/vの濃度で存在する、動物性タンパク質非含有細胞培養培地。項目7項目1に記載の動物性タンパク質非含有細胞培養培地であって、前記ダイズ加水分解物の3重量部が、前記酵母加水分解物の1重量部に対して存在する、動物性タンパク質非含有細胞培養培地。項目8項目1に記載の動物性タンパク質非含有細胞培養培地であって、前記酵母加水分解物は、限外濾過精製された酵母加水分解物であり、該酵母加水分解物の少なくとも40が、500ダルトン以下の分子量を有する、動物性タンパク質非含有細胞培養培地。項目9項目1に記載の動物性タンパク質非含有細胞培養培地であって、前記ダイズ加水分解物は、限外濾過精製されたダイズ加水分解物であり、該ダイズ加水分解物の少なくとも40が、500ダルトン以下の分子量を有する、動物性タンパク質非含有細胞培養培地。項目10動物性タンパク質非含有細胞培養培地を生成する方法であって、いかなる動物性タンパク質も含まない基本培地は、酵母加水分解物およびダイズ加水分解物が補充される、方法。項目11項目10に記載の方法であって、前記ダイズ加水分解物の濃度は、少なくとも0.05w/vであり、前記酵母加水分解物の濃度は、少なくとも0.05w/vである、方法。項目12項目10に記載の方法であって、前記ダイズ加水分解物の濃度は、1.0w/v未満であり、前記酵母加水分解物の濃度は、0.3w/v未満である、方法。項目13細胞の細胞培養物を培養する方法であって、該方法は、以下の工程:約0.05w/v~約1w/vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05w/v~約0.3w/vの濃度の酵母加水分解物を含む培地を提供する工程;ならびに該細胞を該培地中で増殖させて、該細胞培養物を形成する工程、を包含する、方法。項目14項目13に記載の方法であって、前記細胞は、昆虫細胞、鳥類細胞および哺乳動物細胞からなる群より選択される動物細胞である、方法。項目15項目13に記載の方法であって、前記細胞は組換え細胞である、方法。項目16項目13に記載の方法であって、前記細胞は、BSC-1細胞、LLC-MK細胞、CV-1細胞、COS-細胞、VERO細胞、MDBK細胞、MDCK細胞、CRFK細胞、RAF細胞、RK-細胞、TCMK-1細胞、LLC-PK細胞、PK15細胞、LLC-RK細胞、MDOK細胞、BHK-21細胞、CHO細胞、NS-1細胞、MRC-5細胞、WI-38細胞、BHK細胞、およびRK-細胞からなる群より選択される、方法。項目17動物性タンパク質非含有コンフルエント細胞培養プロセスであって、該プロセスは、以下の工程:ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地を提供する工程;該培地中で該細胞を増殖させる工程;ならびに非動物由来プロテアーゼと接触させながら該培地中で増殖させた細胞を継代および継代培養して、コンフルエントな細胞培養物を得る工程、を包含する、プロセス。項目18動物性タンパク質非含有培地中で培養された細胞の培養物であって、該培地は、約0.05w/v~約1w/vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05w/v~約0.3w/vの濃度の酵母加水分解物を含む、培養物。項目19項目18に記載の細胞の培養物であって、前記細胞は、昆虫細胞、鳥類細胞、および哺乳動物細胞からなる群より選択される動物細胞である、細胞の培養物。項目20項目18に記載の細胞の培養物であって、前記細胞は組換え細胞である、細胞の培養物。項目21項目18に記載の細胞の培養物であって、前記細胞は、ウイルスが感染している、細胞の培養物。項目22項目18に記載の細胞の培養物であって、前記細胞は、BSC-1細胞、LLC-MK細胞、CV-1細胞、COS-細胞、VERO細胞、MDBK細胞、MDCK細胞、CRFK細胞、RAF細胞、RK-細胞、TCMK-1細胞、LLC-PK細胞、PK15細胞、LLC-RK細胞、MDOK細胞、BHK-21細胞、CHO細胞、NS-1細胞、MRC-5細胞、WI-38細胞、BHK細胞、およびRK-細胞からなる群より選択される、細胞の培養物。項目23ウイルスを生成する方法であって、該方法は、以下の工程:約0.05w/v~約1w/vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05w/v~約0.3w/vの濃度の酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地中で増殖させた細胞の培養物を提供する工程;該細胞にウイルスを感染させる工程;ならびに該感染させた細胞をインキュベートして、該ウイルスを増殖させる工程、を包含する、方法。項目24項目21に記載の方法であって、前記細胞は、昆虫細胞、鳥類細胞および哺乳動物細胞からなる群より選択される動物細胞である、方法。項目25ワクシニアウイルスを生成する方法であって、該方法は、以下の工程:約0.05w/v~約1w/vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05w/v~約0.3w/vの濃度の酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地中で増殖させた細胞の培養物を提供する工程;該細胞にワクシニアウイルスを感染させる工程;ならびに該感染させた細胞をインキュベートして、ワクシニアウイルスを増殖させる工程、を包含する、方法。項目26コロナウイルスを生成するための方法であって、該方法は、以下の工程:約0.05w/v~約1w/vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05w/v~約0.3w/vの濃度の酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地中で増殖させた細胞の培養物を提供する工程;該細胞にコロナウイルスを感染させる工程;ならびに該感染させた細胞をインキュベートして、コロナウイルスを増殖させる工程;を包含する、方法。項目27オルソミクソウイルスを生成するための方法であって、該方法は、以下の工程:約0.05w/v~約1w/vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05w/v~約0.3w/vの濃度の酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地中で増殖させた細胞の培養物を提供する工程;該細胞に、オルソミクソウイルスを感染させる工程;ならびに該感染させた細胞をインキュベートして、オルソミクソウイルスを増殖させる工程、を包含する、方法。項目28項目27に記載の方法であって、前記オルソミクソウイルスは、インフルエンザA型ウイルス、インフルエンザB型ウイルスまたはインフルエンザC型ウイルスである、方法。項目29ロス川ウイルスを生成するための方法であって、該方法は、以下の工程:約0.05w/v~約1w/vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05w/v~約0.3w/vの濃度の酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地中で増殖させた細胞の培養物を提供する工程;該細胞にロス川ウイルスを感染させる工程;ならびに該感染させた細胞をインキュベートして、ロス川ウイルスを増殖させる工程、を包含する、方法。項目30フラビウイルスを生成するための方法であって、該方法は、以下の工程:約0.05w/v~約1w/vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05w/v~約0.3w/vの濃度の酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地中で増殖させた細胞の培養物を提供する工程;該細胞にフラビウイルスを感染させる工程;ならびに該感染させた細胞をインキュベートして、フラビウイルスを増殖させる工程、を包含する、方法。項目31項目30に記載の方法であって、前記フラビウイルスは、黄熱病ウイルス、日本脳炎ウイルス、ダニ媒介脳炎ウイルス、西ナイルウイルスおよびC型肝炎ウイルスからなる群より選択される、方法。項目32ピコルナウイルスを生成するための方法であって、該方法は、以下の工程:約0.05w/v~約1w/vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05w/v~約0.3w/vの濃度の酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地中で増殖させた細胞の培養物を提供する工程;該細胞にピコルナウイルスを感染させる工程;ならびに該感染させた細胞をインキュベートして、ピコルナウイルスを増殖させる工程、を包含する、方法。項目33項目32に記載の方法であって、前記ピコルナウイルスは、ポリオウイルスおよびA型肝炎ウイルスである、方法。項目34ウイルスまたはウイルス抗原を含む免疫原性組成物を生成する方法であって、該方法は、以下の工程:約0.05w/v~約1w/vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05w/v~約0.3w/vの濃度の酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地中で増殖させた細胞の培養物を提供する工程;該細胞にウイルスを感染させる工程;該感染させた細胞をインキュベートして、ウイルスを増殖させる工程;生成された該ウイルスまたはウイルス抗原を回収する工程;該回収されたウイルスまたはウイルス抗原から免疫原性組成物を調製する工程、を包含する、方法。項目35項目34に記載の方法であって、前記回収されたウイルスまたはウイルス抗原は、精製に供される、方法。項目36ウイルスまたはウイルス抗原を含む免疫原性組成物を生成する方法であって、該方法は、以下の工程:哺乳動物細胞の培養物を提供する工程であって、該細胞は、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培養培地中で増殖させた、サル腎臓細胞、ウシ腎臓細胞、イヌ腎臓細胞、ブタ腎臓細胞、マウス腎臓細胞、ラット腎臓細胞、ヒツジ腎臓細胞、ハムスター腎臓細胞およびヒト細胞の群から選択される、工程;該細胞に、オルソミクソウイルス、パラミクソウイルス、レオウイルス、ピコルナウイルス、フラビウイルス、アレナウイルス、ヘルペスウイルス、ポックスウイルス、コロナウイルスおよびアデノウイルスの群から選択されるウイルスを感染させる工程;該細胞の培養物をインキュベートして、該ウイルスを増殖させる工程;このように生成された該ウイルスまたはウイルス抗原を回収する工程;ならびに該回収されたウイルスまたはウイルス抗原から免疫原性組成物を調製する工程、を包含する、方法。項目37オルソミクソウイルスを感染させた細胞の培養物であって、該細胞は、動物性タンパク質非含有培地中で培養され、該培地は、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む、細胞の培養物。項目38項目37に記載の培養物であって、前記ダイズ加水分解物は、約0.05w/v~約1w/vの濃度であり、前記酵母加水分解物は、約0.05w/v~約0.3w/vの濃度である、培養物。項目39ポックスウイルスを感染させた細胞の培養物であって、該細胞は、動物性タンパク質非含有培地中で培養され、該培地は、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む、培養物。項目40項目39に記載の培養物であって、前記ダイズ加水分解物は、約0.05w/v~約1w/vの濃度であり、前記酵母加水分解物は、約0.05w/v~約0.3w/vの濃度である、培養物。項目41ヘルペスウイルスを感染させた細胞の培養物であって、該細胞は、動物性タンパク質非含有培地中で培養され、該培地は、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む、培養物。項目42項目41に記載の培養物であって、前記ダイズ加水分解物は、約0.05w/v~約1w/vの濃度であり、前記酵母加水分解物は、約0.05w/v~約0.3w/vの濃度である、培養物。項目43動物性タンパク質を含まないオルソミクソウイルス調製物であって、該調製物は、動物性タンパク質非含有培地中でインフルエンザウイルスに感染させた細胞を培養することによって得られ、該培地は、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む、調製物。項目44動物性タンパク質を含まないヘルペスウイルス調製物であって、該調製物は、動物性タンパク質非含有培地中でインフルエンザウイルスに感染させた細胞を培養することによって得られ、該培地は、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む、調製物。項目45動物性タンパク質を含まないポックスウイルス調製物であって、該調製物は、動物性タンパク質非含有培地中でインフルエンザウイルスに感染させた細胞を培養することによって得られ、該培地は、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む、調製物。本発明はまた、細胞の培養物を培養する方法を提供し、この方法は、約0.05w/v~約1w/vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05w/v~約0.3w/vの濃度の酵母加水分解物を含む培地を提供する工程;およびその細胞をこの場位置中で増殖させて、細胞培養物を形成する工程を包含する。上記で例示される加水分解物の他の濃度もまた、本発明に従って使用され得る。この細胞は、動物細胞例えば、昆虫細胞、鳥類細胞、哺乳動物細胞、幹細胞、および好ましくは、インビトロでのウイルス生成に使用される細胞であり得る。これらの細胞はまた、組換え細胞であり得る。例示的な細胞としては、BSC-1細胞、LLC-MK細胞、CV-1細胞、COS-細胞、VERO細胞、MDBK細胞、MDCK細胞、CRFK細胞、RAF細胞、RK-細胞、TCMK-1細胞、LLC-PK細胞、PK15細胞、LLC-RK細胞、MDOK細胞、BHK-21細胞、CHO細胞、NS-1細胞、MRC-5細胞、WI-38細胞、BHK細胞、293細胞およびRK-細胞からなる群より選択される細胞が挙げられる。本発明はまた、動物性タンパク質非含有コンフルエント細胞培養プロセスを提供し、このプロセスは、以下の工程を包含する:ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地を提供する工程;その細胞を培地中で増殖させる工程;ならびに非動物由来プロテアーゼと接触させながらその培地中で増殖させた細胞を継代および継代培養して、コンフルエントな細胞培養物を得る工程。その細胞は、動物細胞、組換え細胞および/またはウイルス感染細胞であり得る。本明細書中に記載される培地の特徴および細胞型は、ここでも適用可能である。さらに、本発明は、動物性タンパク質非含有培地中で培養される細部の培養物を提供し、ここでこの培地は、約0.05w/v~約1w/vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05w/v~約0.3w/vの濃度の酵母加水分解物を含む。上記で例示される加水分解物の他の濃度もまた、本発明に従って使用され得る。この細胞は、動物細胞、組換え細胞および/またはウイルス感染細胞であり得る。本明細書中に記載される培地の特徴および細胞型は、ここでも適用可能である。さらに、本発明は、ウイルスを生成するための方法を提供し、この方法は、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地中で増殖させた細胞の培養物を提供する工程;細胞にウイルスを感染させる工程;ならびに感染させた細胞をインキュベートして、ウイルスを増殖させる工程を包含する。この細胞は、動物細胞および/または組換え細胞、特に哺乳動物細胞であり得る。本明細書中に記載される培地の特徴および細胞型は、ここでも適用可能である。培養細胞で生成されるべきウイルスは、培養細胞型に感染することが公知のある範囲のウイルスから選択され得る。例えば、哺乳動物細胞培養物を利用する場合、ウイルスは、オルソミクソウイルス、パラミクソウイルス、レオウイルス、ピコルナウイルス、フラビウイルス、アレナウイルス、ヘルペスウイルス、ポックスウイルス、コロナウイルスおよびアデノウイルスの属から選択され得る。使用されるウイルスは、野生型ウイルス、弱毒化ウイルス、再集合体ウイルス、または組換えウイルスであり得る。さらに、ウイルスを細胞に感染させるために使用される実際のビリオンの代わりに、感染性核酸クローンが、ウイルス学の分野の当業者に公知の感染性クローントランスフェクション方法に従って利用され得る。本発明は、ポックスウイルスを生成するための方法をさらに提供し、この方法は、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地中で増殖させた細胞の培養物を提供する工程;細胞にポックスウイルスを感染させる工程;ならびに感染させた細胞をインキュベートして、ポックスウイルスを増殖させる工程を包含する。この細胞は、哺乳動物細胞および/または組換え細胞であり得る。本明細書中に記載される培地の特徴および細胞型は、ここでも適用可能である。さらに、本発明は、コロナウイルス重症急性呼吸器症候群関連コロナウイルスを含むを生成する方法をさらに提供し、この方法は、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地中で増殖させた細胞の培養物を提供する工程;細胞にコロナウイルスを感染させる工程;ならびに感染させた細胞をインキュベートして、コロナウイルスを増殖させる工程を包含する。この細胞は、哺乳動物細胞および/または組換え細胞であり得る。本明細書中に記載される培地の特徴および細胞型は、ここでも適用可能である。さらに、本発明は、オルソミクソウイルスを生成するための方法を提供し、この方法は、以下の工程を包含する。ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地中で増殖させた細胞の培養物を提供する工程;細胞にオルソミクソウイルスを感染させる工程;ならびに感染させた細胞をインキュベートして、オルソミクソウイルスを増殖させる工程を包含する。このオルソミクソウイルスは、インフルエンザA型ウイルス、インフルエンザB型ウイルスまたはインフルエンザC型ウイルスであり得る。この細胞は、哺乳動物細胞および/または組換え細胞であり得る。本明細書中に記載される培地の特徴および細胞型は、ここでも適用可能である。本発明はさらに、ロス川ウイルスを生成するための方法を提供し、この方法は、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地中で増殖させた細胞の培養物を提供する工程;細胞にロス川ウイルスを感染させる工程;ならびに感染させた細胞をインキュベートして、ロス川ウイルスを増殖させる工程を包含する。この細胞は、哺乳動物細胞および/または組換え細胞であり得る。本明細書中に記載される培地の特徴および細胞型は、ここでも適用可能である。本発明はまた、フラビウイルスを生成するための方法を提供し、この方法は、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地中で増殖させた細胞の培養物を提供する工程;細胞にフラビウイルスを感染させる工程;ならびに感染させた細胞をインキュベートして、フラビウイルスを増殖させる工程を包含する。このフラビウイルスは、黄熱病ウイルス、日本脳炎ウイルス、ダニ媒介脳炎ウイルス、西ナイルウイルスおよびC型肝炎ウイルスからなる群より選択され得る。この細胞は、哺乳動物細胞および/または組換え細胞であり得る。本明細書中に記載される培地の特徴および細胞型は、ここでも適用可能である。本発明はさらに、ウイルスまたはウイルス抗原を含む免疫原性組成物を生成する方法を提供し、この方法は、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地中で増殖させた細胞の培養物を提供する工程;細胞にウイルスを感染させる工程;感染させた細胞をインキュベートして、ウイルスを増殖させる工程;生成されたウイルスまたはウイルス抗原を回収する工程;回収されたウイルスまたはウイルス抗原から免疫原性組成物を調製する工程を包含する。この細胞は、動物細胞および/または組換え細胞であり得る。本明細書中に記載される培地の特徴および細胞型は、ここでも適用可能である。回収されたウイルスまたはウイルス抗原は、精製に供され得る。本発明はまた、ウイルスまたはウイルス抗原を含む免疫原性組成物を生成する方法を提供し、この方法は、哺乳動物細胞の培養物を提供する工程であって、この細胞が、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培養培地中で増殖させた、サル腎臓細胞、ウシ腎臓細胞、イヌ腎臓細胞、ブタ腎臓細胞、マウス腎臓細胞、ラット腎臓細胞、ヒツジ腎臓細胞、ハムスター腎臓細胞およびヒト細胞の群から選択される、工程;この細胞に、オルソミクソウイルス、パラミクソウイルス、レオウイルス、ピコルナウイルス、フラビウイルス、アレナウイルス、ヘルペスウイルス、ポックスウイルス、コロナウイルスおよびアデノウイルスの群から選択されるウイルスを感染させる工程;この細胞の培養物をインキュベートして、ウイルスを増殖させる工程;このように生成されたウイルスまたはウイルス抗原を回収する工程;ならびに回収されたウイルスまたはウイルス抗原から免疫原性組成物を調製する工程を包含する。さらに、本発明は、オルソミクソウイルス、ポックスウイルス、パラミクソウイルス、レオウイルス、ピコルナウイルス、フラビウイルス、アレナウイルス、ヘルペスウイルス、ポックスウイルスまたはアデノウイルスを感染させた細胞の培養物を提供し、この細胞は、動物性タンパク質非含有培地中で培養され、この培地は、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む。このダイズ加水分解物は、約0.05w/v~約1w/vの濃度であり得、酵母加水分解物は、約0.05w/v~約0.3w/vの濃度であり得る。上記で例示される加水分解物の他の濃度もまた、本発明に従って使用され得る。本発明はさらに、培地からの、動物性タンパク質を含まない、オルソミクソウイルス、パラミクソウイルス、レオウイルス、ピコルナウイルス、フラビウイルス、アレナウイルス、ヘルペスウイルス、ポックスウイルス、コロナウイルスまたはアデノウイルスこれらの組み換え的に生成されたバージョンを含むの調製物を提供し、この調製物は、動物性タンパク質非含有培地中で、インフルエンザウイルスを感染させた細胞を培養することによって得ることができ、ここで、この培地はダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含む。ダイズ加水分解物は、0.05w/v~1.0w/vの濃度であり得、そして酵母加水分解物は、0.05w/v~0.3w/vの濃度であり得る。上記で例示される加水分解物の他の濃度もまた、本発明に従って使用され得る。これらのウイルス調製物は、ウイルス抗原およびさらに処理した後にワクチンを作製するための使用に適切である。本発明のこれらおよび他の局面は、下記の説明およびデータを参照すれば、当業者に明らかである。発明の詳細な説明それらの種々の文法的形態にある用語動物性タンパク質非含有培地とは、高等の多細胞性非植物真核生物すなわち、脊椎動物に由来するタンパク質およびタンパク質成分を補充していない培地をいい、これらの培地は、天然に存在するとおりのそのタンパク質に特徴的な二次構造、三次構造および四次構造を有する。避けられる代表的なタンパク質は、血清および血清由来物質例えば、アルブミン、トランスフェリン、インスリンおよび他の増殖因子中に見出されるものである。組換え生成版の動物性タンパク質は、免疫原性の細菌成分を含み得、本発明によればやはり避けられ、本発明の動物性タンパク質非含有培地中に存在しない。動物性タンパク質およびタンパク質成分は、非動物性タンパク質、低分子ポリペプチドならびに植物例えば、ダイズおよび下等真核生物例えば、酵母から得られ得るオリゴペプチド通常、約10~30アミノ酸長から区別されなければならない。当然のことながら、一旦培地が細胞と接触し、増殖されるべき細胞に接種されると、その培地は、これらの細胞により流されるかもしくは分泌されるタンパク質このような細胞が培養される場合に、遺伝的に改変された細胞により発現される任意の組換えタンパク質を含むを含む。従って、用語、動物性タンパク質非含有培地、ならびに生物学的物質およびそれによって生成される調製物は、培地中で増殖させた細胞により流されるかまたは分泌されるタンパク質がないことを要すると解釈されるべきでないが、むしろ、動物性タンパク質および動物源から得られるタンパク質成分または組換え生成されるタンパク質もしくはタンパク質成分を培地に直接補充することはないということに言及する。種々の文法的形態にある用語基本培地とは、合成培地例えば、DMEM、HAM’sF12、Medium199もしくはRPMI、またはこれらの組み合わせおよび文献から公知の他の培地または市販の培地をいう。本発明に従って、あらゆる合成培地は、動物性タンパク質を含まず、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物の組み合わせとともに使用され得る。基本培地は、多くの成分アミノ酸、ビタミン、有機塩および無機塩、炭水化物源を含み、各成文は、インビトロで細胞の培養を指示する量で存在するを含み得る。例えば、基本培地として、DMEM/HAM’sF121:1培地が使用され得る。この培地は、機械的ストレスに対処するための補助物質例えば、炭酸水素ナトリウムのような緩衝物質、酸化安定化剤、安定化剤またはプロテアーゼインヒビターを含み得る。必要であれば、非イオン性界面活性剤例えば、ポリプロピレングリコールPLURONICF-61、PLURONICF-68、SYNPERONICF-68、PLURONICF-71またはPLURONICF-108が、消泡剤として培地に添加され得る。これらの薬剤は、一般に、細胞を通気の負の影響から保護するために使用される。なぜなら、界面活性剤を添加しない場合、上昇し、破裂する気泡は、これらの気泡の表面に位置する細胞に損傷を与え得るからであるスパージング。非イオン性界面活性剤の量は、好ましくは、約0.05g/Lと約10g/Lとの間、代表的には、約0.1g/Lと約5g/Lとの間である。さらに、この培地はまた代表的には、約0.001g/Lと約1g/Lとの間のシクロデキストリンまたはその誘導体を含み得る。本発明に従って、培地は、ダイズ加水分解物および酵母加水分解物を含み、これらは、基本培地に添加され得る。用語加水分解物とは、ダイズペプトンまたは酵母抽出物の酵素消化物を含む。この加水分解物は、それぞれ、複数のダイズペプトンまたは酵母抽出調製物から得られ得る。これらは、さらに酵素消化され得るか例えば、パパインにより、そして/または自己分解、熱分解および/もしくは原形質分解によって形成され得る。加水分解物例えば、Hy-Soy、Hy-Yeast412およびHi-Yeast444はまた、市場からQuestInternational,Norwich,NewYork,OrganoTechnie,S.A.France;またはDeutscheHefewerkeGmbH,Germanyのような供給源から得られ得る。酵母抽出物の供給源はまた、WO98/15614に開示される。酵母抽出物およびダイズ加水分解物の供給源はまた、WO00/03000に開示される。本発明の培地において使用される加水分解物は、好ましくは、粗分画により生成される。なぜなら、効率的な培養を妨害し得る不純物は、この精製の間に好ましくは排除され、それによって加水分解物の粘度を改善するからである。精製は、限外濾過またはセファデックスクロマトグラフィー例えば、セファデックスG25またはセファデックスG10またはその等価な物質を用いる、イオン交換クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィーまたは逆相クロマトグラフィーによってであり得る。これらのプロセスは、当該分野で公知である。これらの方法を使用すると、規定分子量好ましくは、1000ダルトン以下、より好ましくは、500ダルトン以下、なおより好ましくは、350ダルトン以下のダイズ加水分解物または酵母加水分解物を含む画分が選択される。これらの加水分解物の少なくとも90は、好ましくは、1000ダルトン以下の分子量である。ダイズ加水分解物または酵母加水分解物の平均分子量は、好ましくは、約220ダルトンと375ダルトンとの間である。ダイズ加水分解物および酵母加水分解物のpH値は、約6.5と7.5との間の範囲にあるべきである。総窒素含有量は、約8と11との間、好ましくは、9.0と10.0との間、灰分含有量は、18以下であるべきである。有利な加水分解物は、約5と30との間の遊離アミノ酸含有量を有するという特徴によって特徴付けられる。エンドトキシン含有量は、あるとすれば、500U/g未満であるべきである。本発明に従う1つの培地は、以下の構成要素を有する:合成最少培地DMEM/HAM’sF121:1培地1~25g/L、ダイズ加水分解物0.5~10g/Lおよび酵母加水分解物0.5~3g/L、L-グルタミン0.05~1g/L、NaHCO30.1~10g/L。培地のpHは、pH6.8と7.6とのあいだ、好ましくは、pH7.0と7.3との間である。当業者に明らかなように、用語約とは、数値および範囲の文脈において、記載された値または範囲に近似するまたは近い値をいい、その結果、本発明は、本明細書中に含まれる教示から明らかなように、示される所望される程度の細胞増殖を促進させるように実施され得、全ての値に適用される。従って、この用語は、系統的誤差から生じる値を超える値を含む。驚くべきことに、先行技術において記載された培地と比較して、本発明に従う範囲内の酵母加水分解物およびダイズ加水分解物を補充した動物性タンパク質非含有基本培地は、細胞増殖速度、細胞代謝活性、および最終的な細胞密度により好都合であることが見出された。このことは、高等植物ペプチド濃度が最適未満であることを示すWO98/15614の教示を鑑みても、なお驚くべきことであった。本明細書中に記載の酵母加水分解物およびダイズ加水分解物を含む本発明の動物性タンパク質非含有培地を用いると、細胞は、ダイズ加水分解物または酵母加水分解物単独いずれかを含む培地と比較すると、培地に単独で添加される酵母加水分解物またはダイズ加水分解物の最終濃度が組み合わされた加水分解物濃度の合計に等しいとしても、より高い増殖速度、バイオマスのより高い最終細胞密度、および増大した代謝活性酸素消費/分で表されるを示した。例えば、培地中単独で約0.4w/v酵母加水分解物の最終濃度は、細胞増殖および細胞密度に対して阻害効果を有した。0.4w/v以上のより高い濃度のダイズ加水分解物を含む培地は、せいぜい0.3w/vを含む培地の細胞密度にしか達しなかった。しかし、0.4w/vの最終総加水分解物濃度のダイズ加水分解物および酵母加水分解物の組み合わせを含む培地は、細胞代謝活性、細胞増殖および最終細胞密度において有意な増大を示した。本発明に従って、培地中のダイズ加水分解物および酵母加水分解物の量の合計は、酵母加水分解物と比較して培地中でより高い割合のダイズ加水分解物を有する、約0.2w/vと約0.6w/vとの間であるべきである。ダイズ加水分解物と酵母加水分解物との間の最適な比は、それぞれ、約3:1ダイズ/酵母であるはずである。本明細書中に記載されるように、本発明の培地は、細部培養するために特に有用である。本発明の範囲内において、用語細胞とは、一般的用語を意味し、個々の細胞、組織、器官、昆虫細胞、鳥類細胞、哺乳動物細胞、初代細胞、継続的な細胞株、幹細胞および/または遺伝子操作細胞例えば、異種ポリペプチドまたはタンパク質を発現する組換え細胞の培養物を含む。組換え細胞としては、例えば、異種ポリペプチドまたはタンパク質例えば、増殖因子または血液因子を発現するCHO細胞またはBHK細胞が挙げられる。ウイルスの増殖のためにしばしば使用される細胞としては、VERO細胞およびCV-1細胞が挙げられる。本発明の細胞培養培地中での培養に適した哺乳動物細胞としては、ヒト起源の細胞が挙げられ、これらの細胞は、組織サンプル由来の初代細胞、二倍体細胞株、形質転換細胞または樹立細胞株であってもよい。哺乳動物細胞は、ヒト細胞および非ヒト細胞などであり得る。非ヒト起源の哺乳動物細胞は、サル腎臓細胞、ウシ腎臓細胞、イヌ腎臓細胞、ブタ腎臓細胞、ウサギ腎臓細胞、マウス腎臓細胞、ラット腎臓細胞、ヒツジ腎臓細胞、ハムスター腎臓細胞、チャイニーズハムスター卵巣細胞または任意の組織由来の動物細胞であり得る。特に、培養培地中で培養され得る哺乳動物細胞は、BSC-1細胞、LLC-MK細胞、CV-1細胞、COS-細胞、COS-1細胞、COS-3細胞、COS-7細胞、VERO細胞、MDBK細胞、MDCK細胞、CRFK細胞、RAF細胞、RK-細胞、TCMK-1細胞、LLC-PK細胞、PK15細胞、LLC-RK細胞、MDOK細胞、BHK-21細胞、CHO細胞、293細胞、NS-1細胞、MRC-5細胞、WI-38細胞、BHK細胞、293細胞およびRK-細胞であり得る。組換え細胞の例としては、例えば、第VIII因子、第II因子、第IX因子、第X因子、フォンビルブラント因子を発現するCHO細胞が挙げられ、これらの因子は全て、当業者に公知である。種々の文法的な形態にある用語連続的な細胞または連続的な細胞株とは、無限に複製し、かつ懸濁培養またはバイオリアクタでの大規模培養において増殖し得る培養細胞を意味する。CCLの非制限的増殖は、標準化細胞基質からの長期間培養および低コストを可能にする。哺乳動物細胞株は、CHO細胞、COS細胞、VERO細胞、LLK-MK2細胞、NS-1細胞、MDBK細胞、MDCK細胞、MRC-5細胞、WI-38細胞、BHK細胞、CV-1細胞、ウサギ腎臓RK細胞およびButlerら.BIOSScientificPublisherp.1-241992これは、本明細書中に参考として援用されるに開示される他の細胞株の群から選択され得る。CCLは、好ましくは、外来因子例えば、細菌、真菌、マイコプラズマ、原生動物およびウイルスの非存在について試験される。種々の文法的形態にある用語細胞培養物とは、懸濁液、ローラーボトル、フラスコなどで増殖された細胞をいう。大規模アプローチ例えば、攪拌醗酵槽中のマイクロキャリに接着して増殖された接着性細胞を含むアバイオリアクタもまた、含まれる。さらに、表面依存性細胞を培養することのみならず、本発明の培地を用いて懸濁培養技術を利用することもまた、可能である。細胞がマイクロキャリア上で増殖される場合、このマイクロキャリアは、デキストラン、コラーゲン、プラスチック、ゼラチン、およびセルロースならびにButler,SpierGriffiths,AnimalcellBiotechnology3:283-3031988に記載されるような他のものに基づくマイクロキャリアの群から選択され得る。多孔性キャリア例えば、Cytoline登録商標またはCytopore登録商標、ならびにデキストランベースのキャリア例えば、DEAE-デキストランCytodex1登録商標、四級アミンコーティングデキストランCytodex2登録商標またはゼラチンベースのキャリア例えば、Cytodex3登録商標が適切である。これらのキャリアは、Pharmaciaから入手可能である。細胞は、好ましくは、アンプルから動物性タンパク質非含有培地中のバイオマスへと増殖され、細胞培養増殖および生成物生成プロセスの間に培養培地条件下で維持される。培地に既に適合された細胞が、好ましくは使用される。このような予め適合された細胞を用いて増大した収量が達成されるだけでなく、それらの培養の安定性もまた、本発明に従う培地を使用することによって明らかに改善されることが見出された。種々の文法的形態にある用語培養とは、増殖および連続した生存性が認められる条件下で細胞をインビトロで維持することをいう。哺乳動物細胞は、代表的には、約37°Cで細胞インキュベーター中で培養され、培養培地は、約6.8~7.6の範囲、好ましくは、7.0と7.3との間の範囲の指摘pHを有する。バッチ培養物中の細胞は、約2~3日毎に、または必要であれば多かれ少なかれより頻繁に完全に培地交換され得る。灌流培養例えば、バイオリアクタまたは醗酵槽中における細胞は、連続再循環を基本として新たな培地に交換され得る。培養アプローチは、状況および必要性に応じて、細胞の継代培養、継代および増殖を含み得る。本発明は、それ故、酵母加水分解物およびダイズ加水分解物を含む基本培地中で細胞を増殖する工程を包含する細胞を培養する方法を提供する。好ましくは、細胞は、0.05W/V~1.0W/Vの濃度のダイズ加水分解物および0.05W/V~0.3W/Vの濃度の酵母加水分解物を含む培地中で細胞を増殖する。本発明のこの局面によれば、細胞は、本発明の動物性タンパク質非含有培地中で小スケールから大スケールバイオマスに増殖する。細胞培養バイオマスを得るための細胞の継代および継代培養は、好ましくは、プロナーゼまたはその精製フラクションのような非動物由来のプロテアーゼとともに実施される。1つのプロテアーゼは、その全体が参考として本明細書中に援用される米国出願番号第10/006,223号に記載のようなStreptomycesgriseusSGTの精製されたトリプシン様フラクションである。細胞培養の培養の間、特に、キャリアに付着されて増殖する接着細胞の培養の間に動物由来の材料を避けるために、このキャリアは、好ましくは、合成キャリア、または非動物由来の材料でコートされたマイクロキャリアである。例えば、DEAE-デキストランまたは四級アミンでコートされたマイクロキャリアである。本発明はまた、動物性タンパク質非含有細胞培養プロセスを提供し、ここで、細胞は、動物性タンパク質のない条件下で培養、継代培養、および継代される。このプロセスは、酵母加水分解物およびダイズ加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地を提供する工程、この培地で細胞を増殖する工程、非動物由来プロテアーゼを用い、その培地中で増殖した上記細胞を継代および継代培養する工程、さらに、この継代培養された細胞を、コンフルエント細胞密度に到達するまで増殖する工程および所望の最終細胞培養バイオマスに到達するまで細胞の継代培養および増殖の工程を繰り返する工程を包含する。このプロセスは、動物性タンパク質非含有培地中の細胞の増殖、非動物由来のプロテアーゼ、好ましくは、StreptomycesgriseusSGTの精製されたトリプシン様フラクションを用いる細胞の継代培養および継代を含む。キャリアに付着されて増殖する接着細胞の培養の間、このキャリアは、好ましくは、合成キャリア、または非動物由来の材料でコートされたマイクロキャリアである。本発明の動物性タンパク質非含有培地中の増殖に適切な細胞は、制限されないで、BSC-1細胞、LLC-MK細胞、CV-1細胞、VERO細胞、MDBK細胞、MDCK細胞、CRFK細胞、RAF細胞、TCMK-1細胞、LLC-PK細胞、PK15細胞、LLC-RK細胞、MDOK細胞、RK-細胞、BHK-21細胞、WI-38細胞、293細胞および/またはMRC-5細胞を含む。これらの細胞は、オルソミクソウイルス、パラミクソウイルス、レオウイルス、ピコルナウイルス、フラビウイルス、アレナウイルス、ヘルペスウイルス、ポックスウイルス、コロナウイルスおよび当業者に公知のその他のウイルスで感染され得る。より詳細には、細胞培養物を感染するために用いられるウイルスは、インフルエンザウイルス、ワクシニアウイルスおよび痘瘡、鶏痘ウイルス、牛痘ウイルス、ダニ媒介脳炎ウイルスTBE、ポリオウイルス、A型肝炎ウイルス、ロス川ウイルス、黄熱病ウイルスおよびそれら由来のキメラウイルス、西ナイルウイルス、日本脳炎ウイルス、風疹ウイルス、C型肝炎ウイルスHCV、流行性耳下腺炎ウイルス、麻疹ウイルス、RSウイルスRSV、単純ヘルペスウイルスHSV、サイトメガロウイルスCMV、エプスタイン‐バーウイルスEBV、ロタウイルス、口蹄疫ウイルスFMDVであり得る。ウイルスおよびこのウイルスが増殖され得る細胞を選択することは当業者の知識内である。これら細胞は、本発明の培地中で培養され得、そして個々のウイルスでの感染前に最適細胞密度に到達するように増殖する。驚くべきことに、本発明の動物性タンパク質非含有培地中で増殖および増殖した細胞培養は、ウイルス収量生産性の有意な増加を示す。本発明の培地で培養かつ増殖された細胞で増殖した異なるウイルスの例は、単に酵母抽出物を含む培地と比較して2~5倍のウイルス収量の増加を示した。これは、このシステムを、先行技術に記載のシステムより、細胞増殖およびウイルス産生プロセスのために好適にする。本発明の実施形態によれば、細胞は、VERO細胞であり、そしてウイルスは、インフルエンザウイルス、TBEウイルス、ワクシニアウイルス、ポリオウイルス、A型肝炎ウイルス、ロス川ウイルス、黄熱病ウイルスおよびそれ由来のキメラウイルス、西ナイルウイルス、日本脳炎ウイルス、風疹ウイルス、HCV、流行性耳下腺炎ウイルス、麻疹ウイルス、RSウイルス、HSV、CMV、EBV、ロタウイルスからなる群から選択される。VERO細胞中で増殖することが知られるその他のウイルスもまた、用いられ得る。本発明はまた、酵母加水分解物およびダイズ加水分解物を含む動物性タンパク質非含有培地中で増殖および培養された細胞の培養を提供する工程、この細胞をワクシニアウイルスで感染する工程、およびこの細胞の培養をワクシニアウイルスを増殖するためにインキュベートする工程による、ワクシニアウイルスの産生を提供する。好ましくは、この細胞は、約0.05W/V~約1.0W/Vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05W/V~約0.3W/Vの濃度の酵母加水分解物を含む培地中で細胞を増殖する。本発明のこの局面によれば、細胞は、VERO細胞、CV-1細胞、RK細胞、BHK-21細胞、MRC-5細胞、またはワクシニアウイルスが増殖し得る任意の細胞である。ワクシニアウイルスは、天然に存在するワクシニアウイルス、痘瘡ウイルスワクチン株、毒性ワクシニア株、弱毒化ワクシニアウイルスおよび組換えワクシニアウイルスであり得る。また、酵母加水分解物およびダイズ加水分解物を含む基本培地から作製される動物性タンパク質非含有培地中で培養および増殖された細胞の培養を提供する工程、この細胞をオルソミクソウイルスで感染する工程、およびこの細胞の培養をオルソミクソウイルスを増殖するためにインキュベートする工程による、オルソミクソウイルスの産生を提供する。好ましくは、この細胞は、約0.05W/V~約1.0W/Vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05W/V~約0.3W/Vの濃度の酵母加水分解物を含む培地中で細胞を増殖する。本発明のこの局面によれば、細胞は、BSC-1細胞、CV-1細胞、VERO細胞、MDBK細胞、MDCK細胞、MDOK細胞、BHK-21細胞、WI-38細胞、MRC-5細胞、またはオルソミクソウイルスが増殖し得る任意の細胞である。オルソミクソウイルスは、インフルエンザA、BまたはCのようなインフルエンザウイルスであり得る。また、酵母加水分解物およびダイズ加水分解物を含む基本培地から作製される動物性タンパク質非含有培地中で培養および増殖された細胞の培養を提供する工程、この細胞をロス川ウイルスで感染する工程、およびこの細胞の培養をロス川ウイルスを増殖するためにインキュベートする工程による、ロス川ウイルスの産生を提供する。好ましくは、この細胞は、約0.05W/V~約1.0W/Vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05W/V~約0.3W/Vの濃度の酵母加水分解物を含む培地中で細胞を増殖する。細胞は、BSC-1細胞、CV-1細胞、VERO細胞、MDBK細胞、MDCK細胞、CRFK細胞、BHK-21細胞、WI-38細胞、MRC-5細胞、またはロス川ウイルスが増殖し得る任意の細胞である。さらに、酵母加水分解物およびダイズ加水分解物を含む基本培地から作製される動物性タンパク質非含有培地中で培養および増殖された細胞の培養を提供する工程、この細胞をフラビウイルスで感染する工程、およびこの細胞の培養をフラビウイルスを増殖するためにインキュベートする工程による、フラビウイルスの産生を提供する。好ましくは、この細胞は、約0.05W/V~約1.0W/Vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05W/V~約0.3W/Vの濃度の酵母加水分解物を含む培地中で細胞を増殖する。フラビウイルスは、黄熱病ウイルス、またはそのキメラ誘導体の組換え体、日本脳炎ウイルス、ダニ媒介脳炎ウイルス、西ナイルウイルス、およびC型肝炎ウイルスであり得る。酵母加水分解物およびダイズ加水分解物を含む基本培地から作製される動物性タンパク質非含有培地中で培養および増殖された細胞の培養を提供する工程、この細胞をピコルナウイルスで感染する工程、およびこの細胞の培養をピコルナウイルスを増殖するためにインキュベートする工程による、ピコルナウイルスの産生を提供する。好ましくは、この細胞は、約0.05W/V~約1.0W/Vの濃度のダイズ加水分解物および約0.05W/V~約0.3W/Vの濃度の酵母加水分解物を含む培地中で細胞を増殖する。ピコルナウイルスは、ポリオウイルスまたはA型肝炎ウイルスである。本明細書中で識別された細胞型は、ピコルナウイルスの増殖のために用いられ得る。本発明はまた、ウイルスまたはウイルス抗原を含む免疫原性組成物を生成する方法を提供し、この方法は、動物細胞の培養を提供する工程であって、ここで、この細胞は、本発明の培地で増殖された、サル腎臓細胞、ウシ腎臓細胞、イヌ腎臓細胞、ブタ腎臓細胞、マウス腎臓細胞、ラット腎臓細胞、ヒツジ腎臓細胞、ウサギ腎臓細胞、ハムスター腎臓細胞およびヒト細胞からなる群から選択される工程、この細胞を、オルソミクソウイルス、パラミクソウイルス、レオウイルス、ピコルナウイルス、フラビウイルス、アレナウイルス、ヘルペスウイルス、ポックスウイルス、コロナウイルスおよびアデノウイルスからなる群から選択されるウイルスで感染する工程、ウイルスを増殖するためにこの細胞の培養をインキュベートする工程、産生されたウイルスを回収する工程およびこの回収されたウイルスから免疫原性組成物を調製する工程を包含する。産生されたかつ回収されたウイルスは、イオン交換またはゲル濾過のような当該分野で公知の方法を用いて精製され得る。ここで、本発明を一般的に説明したが、本発明は、例示の目的であって、かついかなる様式においても制限的でない、以下の実施例を参照することによりさらに理解される。実施例1培養培地の処方動物性タンパク質非含有培地は、無機塩類、アミノ酸類、ビタミン類およびその他の成分が補充される基本DMEM/HAMF121:1培地を用いて調製される。また添加されるのは、重炭酸ナトリウム1~3g/L、L-グルタミン0.1~1g/Lおよび変化する濃度のダイズ加水分解物QuestTechnologies、NewYorkまたは酵母加水分解物DeutscheHefewerke、Germanyまたはその組み合わせである。実施例2動物性タンパク質非含有培地における細胞の増殖動物性タンパク質非含有培地におけるVERO細胞VERO細胞アフリカミドリザル、Cercopthecusaethiops、腎臓を細胞株として用いた。この細胞は、AmericanTypeCellCultureCollection、Rockville、Marylandから、命名ATCCCCL81の下、継代数124で得た。細胞を、本明細書に記載のように種々の培地で増殖した。作業細胞バンクの細胞を、分割比1:6~1:8でTフラスコおよびローラーボトルおよびマイクロキャリアシステム中で増殖した。細胞は、37°Cで6~8日増殖させた。酸素飽和20/-10およびpH7.1/-0.35の培養条件は、一定に保った。細胞がコンフルエント増殖に到達したときバイオマス生産の終期に、細胞密度および酸素消費速度を決定した。バイオマス産生の終期における、細胞培養物のバイオマスの細胞数を、Schcarfeら、BiotechnologieinLaborPraxis10:1096-11031988によって記載されるように、細胞のトリプシン処理およびCASY登録商標細胞カウンターを用いる計数法方法A、またはSanfordら、J.Nat’lCancerInst.11:773-7951951に記載されるように、クエン酸およびクリスタルバイオレット処理、その後の、ヘマトサイトメーターを用いる計数法方法Bを用いて、決定する。ベロ細胞を、酵母加水分解物0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5w/vの濃度またはダイズ加水分解物0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5w/vの濃度、あるいは、ダイズ加水分解物と酵母加水分解物酵母対ダイズの濃度酵母/ダイズが、0.05/0.05w/v、0.1/0.2w/v、0.1/0.3w/v、0.2/0.2w/v、0.3/0.2w/v、または0.2/1.0w/vを含む、動物性タンパク質非含有培地中で、成長させた。種々の濃度のダイズ加水分解物、酵母加水分解物またはそれらの組み合わせを含む、動物性タンパク質非含有培地中でのバイオマス産生の終期の細胞培養の細胞密度を、方法AおよびBによって、計算した。結果は、酵母加水分解物およびダイズ加水分解物単独で、細胞増殖を支持したことを実証する。0.1の酵母加水分解物の濃度において、約11.8×105細胞/mlの細胞密度が達成されたが、酵母加水分解物の0.3w/vを超える増加は、細胞増殖に対して、負の効果を有し、その結果、細胞密度に対して負の効果を有した。ダイズ加水分解物単独の濃度が0.1w/v~0.2w/vの間である場合、ダイズ加水分解物が0.3w/v~0.4w/vである場合よりも少ない細胞増殖および細胞密度を示した。そうであるにも関わらず、0.3w/v~0.4w/vのダイズ加水分解物を含む培地中の細胞培養物の細胞密度および酸素消費は顕著には異ならず、そして、約1w/vまでの高濃度のダイズ加水分解物は、細胞増殖に対して、正の効果を有さなかった。ダイズ加水分解物単独の最適な濃度を、0.2w/v~1.0w/vであると決定した。基本培地にダイズ加水分解物と酵母加水分解物との組み合わせを補充することによって、最終的な細胞密度が、ダイズ加水分解物単独または酵母加水分解物単独を含む培地と比較して、顕著に増加した。0.05w/vのダイズ加水分解物および0.05w/vの酵母加水分解物の濃度において達成された細胞密度は、約12.1×105細胞/mlであり、0.1w/vのダイズ加水分解物単独10×105細胞/mlまたは0.1w/vの酵母加水分解物単独11.8×105細胞/mlのいずれかを単独で含む培地中で増殖する細胞と比較して、より高い細胞培養細胞密度を有した。0.2w/vの酵母加水分解物および1.0w/vのダイズ加水分解を含む培地中での細胞培養増殖の細胞密度は、0.05w/vのダイズ加水分解物および0.05w/vの酵母加水分解物を含む培地において得られた密度と同様であった。細胞増殖に対する最も顕著な効果は、酵母加水分解物と比較した場合のダイズ加水分解物の濃度が約2~3倍高い場合であった。約0.3w/vの濃度のダイズ加水分解物および0.1w/vの酵母加水分解物を含む培地における細胞増殖は、約21.0×105細胞/mlの細胞密度に達し、そして、そのために、約0.4w/vのダイズ加水分解物単独での細胞増殖と比較して約2倍高い細胞密度を示し、約0.4w/vの酵母加水分解物単独での細胞増殖と比較して約2.5倍高い細胞密度を示した。酵母加水分解物およびダイズ加水分解物を含む培地中で培養した細胞の代謝活性はまた、酵母加水分解物単独またはダイズ加水分解物単独で含む培地中での細胞増殖と比較して、より高かった。0.1w/vの酵母加水分解物を含む培地中では、酸素消費速度は、1.5/分であり、0.4w/vの酵母加水分解物単独またはダイズ加水分解物単独を含む培地中では1.0/分未満であった。0.1w/vの酵母加水分解物および0.3w/vのダイズ加水分解物を含む培地中では、酸素消費は、約2.9/分であり、これは、ダイズ加水分解物単独または酵母加水分解物単独を含む培地中で培養した細胞よりも、約2倍高かった。さらに、細胞周期酵母加水分解物単独またはダイズ加水分解物単独を補充した動物性タンパク質非含有培地中では7日間が、加水分解物組み合わせダイズおよび酵母培地では、6日間である。実施例3組換え細胞の増殖組換え哺乳動物細胞の細胞培養物例えば、rFVIII-CHO細胞を、10Lの攪拌タンク中で、潅流しながら、培養した。実施例1の培地を、培養増殖培地として使用する。細胞を、多孔性マイクロキャリアCytopore登録商標,Pharmaciaに固定化して、少なくとも6週間培養した。灌流速度は、1日あたり4容量交換であり;pHは6.9~7.2であり;O2濃度は、約20~50であり、温度は37°Cである。細胞密度を決定する。実施例4酵母加水分解物およびダイズ加水分解物を補充した培地中でのベロ細胞増殖におけるウイルス抗原の産生の比較a.細胞培養バイオマスの産生規定された継代数を有するベロ細胞を、液体窒素から融解し、そしてルーおよびローラーボトル中で継代し、1.5リットルのバイオリアクターに接種するのに十分な細胞を産生した。実施例1および2に記載のように、細胞を、酵母加水分解物を補充した基本培地、または酵母加水分解物とダイズ加水分解物との組み合わせを補充した基本培地のいずれかにおいて、増殖させた。最終濃度1.5×106細胞/mlのコンフルエントに達した後、細胞を、米国特許出願第10/006,223号に記載されるように、プロナーゼS.griseusトリプシンSGTの精製画分を用いて、マイクロキャリアから放出し、そして、10リットルのバイオリアクターに移した。これを次に、3.0g/lのマイクロキャリア濃度を有する100リットルのバイオリアクターのための接種材料として用いた。107細胞を含む作業working細胞バンクのアンプルから開始して、最後の発酵容器中での最終的なコンフルエントのベロ細胞バイオマスに達するために、約30世代が必要であった。細胞を37°Cで増殖した。酸素飽和20/-10、およびpH7.1/-0.35の培養条件を、ウイルス増殖プロセスの間、一定に維持した。ベロ細胞の生きているworking細胞バンクの細胞を、1:6の分配比で、Tフラスコおよびローラーボトル中で拡大した。細胞のさらなる増殖を、Cytodex1登録商標マイクロキャリアを付着基材として使用するバイオリアクターとしての1.5、10および50リットルの攪拌した醗酵槽中で、行った。細胞を、37°Cで増殖した。酸素飽和20/-10、およびpH7.1/-0.35の培養条件を、ウイルス増殖プロセスの間、一定に維持した。b.インフルエンザウイルスの増殖ベロ細胞を、2つの異なるインフルエンザ株NewCaledoniaA/H1N1およびPanamaA/H3N2に感染させ、そしてそれぞれの培地中で増殖させた。ウイルス増殖プロセスの終期において、ウイルスを含む明澄化した上清を、超遠心にて精製した。酵母加水分解物を単独で含むか、または酵母加水分解物とダイズ加水分解物を含む、採取したベロ細胞培養物を、容量での抗原産生性総SRD、単純放射免疫拡散法、および培養の終期での上清の抗原含量密度勾配精製抗原を基礎に比較した。両方の培地組成での収量を比較して、表1にまとめた。酵母加水分解物とダイズ加水分解物との組み合わせは、酵母加水分解物単独と比較して、改善を示す。c.ポックスウイルスの産生ベロ細胞を、0.1~0.3の感染効率m.o.i.での何回かの継代による動物性タンパク質非含有ベロ細胞中での増殖に適合した、天然痘ワクチン産生株Dryvax,WyethVaccines,Acambis,Inc.より入手。永久細胞株における増殖に適合したウシリンパワクチン株で感染させた。2~4日、37°Cでの細胞のインキュベーションの後、細胞を、採取して、ウイルスを細胞から回収した。表2は、酵母加水分解物単独を補充したか、または酵母加水分解物およびダイズ加水分解物を補充した基本培地におおて増殖した細胞において得られたウイルスの収量の結果を示す。酵母加水分解物とダイズ加水分解物との組み合わせは、酵母加水分解物単独よりも顕著な改善を示す。d.ロス川ウイルスの産生本明細書に記載されるように得たベロ細胞培養物を、ロス川ウイルスに0.1~0.3の感染効率m.o.i.で感染させた。2~4日、37°Cでの細胞のインキュベーションの後、細胞を、採取して、ウイルスを細胞から回収した。表3は、酵母加水分解物単独を補充したか、または酵母加水分解物およびダイズ加水分解物を補充した基本培地におおて増殖した細胞において得られたウイルスの収量の結果を示す。酵母加水分解物とダイズ加水分解物との組み合わせは、酵母加水分解物単独よりも顕著な改善を示す。例示的な実施形態を示す、説明、具体的な実施例およびデータは、説明の目的で与えられ、そして本発明を限定することを意図しないことが、理解されるべきである。本発明内の種々の変更および改変が、本明細書に含まれる考察、開示およびデータから当業者によって明らかとなり、従って、そのような変更および改変は本発明の一部である。"