"a溶媒に溶解した過剰の初期ポリマーを分岐点分子と反応させて、少なくとも前記初期ポリマーと、各ポリマー分子が前記分岐点分子と結合した末端および少なくとも1つの未結合末端を有するように、前記分岐点分子と共有結合した少なくとも2つのポリマー分子を含むコンジュゲートとを含有するポリマー混合物を形成するステップと、b前記ポリマー混合物を、前記コンジュゲートに対する阻止率が前記初期ポリマーに対する阻止率より大きい半透膜と接触させて、保持液中の前記コンジュゲート濃度と前記初期ポリマー濃度との比を増加させるステップと、c前記コンジュゲートの前記分岐点分子から前記ポリマーを切断するステップとを含み、前記コンジュゲートの前記ポリマー分子の前記少なくとも1つの未結合末端を化学的に修飾して、前記ポリマーの前記未結合末端の官能基を修飾するか、または前記ポリマーに追加のモノマー単位またはポリマー単位を加え、前記修飾が、分岐点分子から切断された前記ポリマーが少なくとも1つの化学的に修飾された末端を有する前記初期ポリマーを含むように、ステップbの前か後のいずれかで生じる、ヘテロ二官能性ポリマーまたは単分散ポリマーを調製する方法。前記方法が、ヘテロ二官能性ポリマーを調製する方法であり、前記化学的修飾が、前記ポリマーの前記未結合末端に存在し得る任意の保護基を除去し、その後、前記未結合末端の官能基化を行うことを含む、請求項1に記載の方法。前記方法が、単分散ポリマーを調製する方法であり、前記化学的修飾が、前記未結合末端に存在し得る任意の保護基を除去し、その後、前記コンジュゲートに存在する前記ポリマーの前記未結合末端を別のポリマー単位またはモノマー単位と反応させることを含む、請求項1に記載の方法。前記ポリマーの前記化学的修飾がステップbの前に生じる、請求項1~3のいずれか1項に記載の方法。前記化学的修飾がステップbの後に生じる、請求項1~3のいずれか1項に記載の方法。前記コンジュゲートまたはその誘導体、前記初期ポリマー、試薬および副生成物を含有する混合物を、前記コンジュゲートまたはその誘導体に対する阻止率が、存在する前記初期ポリマー、試薬および副生成物の少なくとも1つに対する阻止率より大きい半透膜と接触させて、前記保持液中の前記コンジュゲートまたはその誘導体の1つの濃度と、前記初期ポリマー、試薬および副生成物の少なくとも1つの濃度との比を増加させることにより、前記コンジュゲートまたはその誘導体を前記初期ポリマー、試薬および副生成物から精製するために複数の膜ろ過ステップを用いる、請求項1~5のいずれか1項に記載の方法。追加の溶媒を前記保持液に添加し、前記膜に透過させて、ダイアフィルトレーションによってさらに初期ポリマー、副生成物または過剰の試薬を除去する、請求項1~6のいずれかに記載の方法。前記追加の溶媒が前記反応溶媒と同じである、請求項7に記載の方法。前記追加の溶媒が前記反応溶媒と同じではなく、前記ポリマー生成物が前記ダイアフィルトレーションの間中、前記溶媒に溶解されて保持される、請求項1~8のいずれかに記載の方法。前記初期ポリマーが、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリブチレンオキシド、およびこれらのいずれかのブロックコポリマー、ポリプロピレンオキシドとポリエチレングリコールのポリプロピレンオキシドブロックコポリマー、ポリジメチルシロキサンPMDS、ポリブタジエンおよびポリイソプレン、過剰の二酸で形成されたカルボン酸を末端とするポリマーを生成するためのナイロンおよびポリエステルまたは過剰のジアミン/ジオールで形成されたアミノ/ヒドロキシ基を末端とするポリマーを生成するためのナイロンおよびポリエステル、ならびにポリエチレン硫化物からなる群から選択される、請求項1~9のいずれかに記載の方法。前記初期ポリマーと前記分岐点分子との結合が、リン酸エステル、シリルエーテル、アセタール、オルトエステル、チオエーテルなどのエーテル結合、エステル結合およびアミド結合、ならびにオレフィン結合からなる群から選択される、請求項1~10のいずれか1項に記載の方法。前記膜が高分子膜である、請求項1~11のいずれか1項に記載の方法。前記膜がセラミック膜である、請求項1~11のいずれか1項に記載の方法。本発明の目的は、ヘテロ二官能性ポリマーを調製するための改善された方法を提供することである。さらに、本発明の目的は、単分散ポリマーまたは分子量分布が狭いポリマーを調製するための改善された方法を提供することである。本発明は、ヘテロ二官能性ポリマー、および分子量MW分布が狭く、単分散であるポリマーを調製する方法に関する。本発明によれば、ポリマー/分岐点分子branchpointmoleculeコンジュゲートを合成し、コンジュゲートのポリマー分子の遊離の未結合の末端を、反応溶媒中で行われる1つまたは複数の反応により、官能基化するか、追加のモノマー単位またはポリマー単位と反応させる。少なくとも1つの反応に対して、有機溶媒を用い、有機溶媒中で安定であり、かつコンジュゲートに対する阻止率が反応副生成物または過剰な試薬の少なくとも1つに対する阻止率よりも大きい膜を使用して、反応後の混合物をダイアフィルトレーションすることにより、反応間の反応副生成物および過剰な試薬からのコンジュゲートの分離が行われる。したがって、第1の態様では、本発明は、下記のステップ:a溶媒に溶解した過剰の初期ポリマーを分岐点分子と反応させて、少なくとも初期ポリマーと、各ポリマー分子が分岐点分子と結合した末端および少なくとも1つの未結合末端を有するように、分岐点分子と共有結合した少なくとも2つのポリマー分子を含むコンジュゲートとを含有するポリマー混合物を形成するステップと、bポリマー混合物を、コンジュゲートに対する阻止率が初期ポリマーに対する阻止率より大きい半透膜と接触させて、保持液中のコンジュゲート濃度と初期ポリマー濃度との比を増加させるステップと、c分岐点分子からコンジュゲートのポリマーを切断するステップとを含み、コンジュゲートのポリマー分子の少なくとも1つの未結合末端を化学的に修飾して、未結合末端の官能基を修飾するか、またはポリマーに追加のモノマー単位またはポリマー単位を加え、前記修飾が、ステップcで分岐点分子から切断されたポリマーが少なくとも1つの化学的に修飾された末端を有する初期ポリマーを含むように、ステップbの前か後のいずれかで生じる、ヘテロ二官能性ポリマーおよび/または分子量分布が狭く、単分散であるポリマーを調製する方法を提供する。特定の態様では、本発明は下記のステップ:a溶媒に溶解した過剰の初期ポリマーを分岐点分子と反応させて、少なくとも初期ポリマーと、各ポリマー分子が分岐点分子と結合した末端および少なくとも1つの未結合末端を有するように、分岐点分子と共有結合した少なくとも2つのポリマー分子を含むコンジュゲートとを含有するポリマー混合物を形成するステップと、bポリマー混合物を、コンジュゲートに対する阻止率が初期ポリマーに対する阻止率より大きい半透膜と接触させて、保持液中のコンジュゲート濃度と初期ポリマー濃度との比を増加させるステップと、cコンジュゲートの分岐点分子からポリマーを切断するステップとを含み、コンジュゲートのポリマー分子の少なくとも1つの未結合末端を反応させて、ポリマーの未結合末端の官能基を化学的に修飾し、前記修飾が、ステップcで分岐点分子から切断されたポリマーが官能基の異なる少なくとも1つの末端を有する初期ポリマーを含むように、ステップbの前か後のいずれかで生じる、ヘテロ二官能性ポリマーを調製する方法を提供する。さらに特定の態様では、本発明は、下記のステップ:a溶媒に溶解した過剰の初期ポリマーを分岐点分子と反応させて、少なくとも初期ポリマーと、各ポリマー分子が分岐点分子と結合した末端および少なくとも1つの未結合末端を有するように、分岐点分子と共有結合した少なくとも2つのポリマー分子を含むコンジュゲートとを含有するポリマー混合物を形成するステップと、bポリマー混合物を、コンジュゲートに対する阻止率が初期ポリマーに対する阻止率より大きい半透膜と接触させて、保持液中のコンジュゲート濃度と初期ポリマー濃度との比を増加させるステップと、cコンジュゲートの分岐点分子からポリマーを切断するステップとを含み、コンジュゲートのポリマー分子の少なくとも1つの未結合末端を、ポリマーの未結合末端にさらにモノマー単位またはポリマー単位を加えることによって化学的に修飾し、前記修飾が、ステップcで分岐点分子から切断されたポリマーが、単分散であるか、分子量分布が狭い修飾ポリマーを含むように、ステップbの前か後のいずれかで生じる、分子量分布が狭く、単分散であるポリマーを調製する方法を提供する。本明細書で用いられる用語ヘテロ二官能性は、1つの末端に1つの官能基と、少なくとももう1つの末端に異なる官能基を有する線状ポリマーまたは分岐ポリマーをいう。本明細書で用いられる用語単分散は、同等の分子量を有する線状ポリマーまたは分岐ポリマーをいう。本明細書で用いられる用語初期ポリマーは、線状であっても分岐していてもよいポリマー出発物質をいう。本明細書で用いられる用語分岐点分子は、少なくとも2つの反応性部分を有し、初期ポリマーの末端に共有結合できる多官能性有機分子をいう。本発明の1つの実施形態では、本発明の初期ポリマーは、ポリエチレングリコールPEG、ポリプロピレングリコール、ポリブチレンオキシド、およびそれらのブロックコポリマーから選択してもよい。さらなる実施形態では、初期ポリマーは、ポリプロピレンオキシドPPO、PPOとPEGのブロックコポリマー、ポリジメチルシロキサンPMDS、ポリブタジエンおよびポリイソプレン、過剰の二酸で形成されたカルボン酸を末端とするポリマーを生成するためのナイロンおよびポリエステルまたは過剰のジアミン/ジオールで形成されたアミノ/ヒドロキシ基を末端とするポリマーを生成するためのナイロンおよびポリエステル、ならびにポリ[エチレンスルフィド]の中から選択してもよい。初期ポリマーはまた、式X-ポリマー-Xの任意のポリマーであってもよい。式中、Xは、カルボキシレート、アミン、チオール、または任意の他の周知の反応性実体であり得る。特定の実施形態では、初期ポリマーはPEGである。本発明のさらなる実施形態では、図1に示すように、過剰の初期ポリマーを分岐点分子と反応させて、膜ろ過によって過剰の線状初期ポリマーから精製することができる分岐点分子と共有結合した少なくとも2つのポリマー分子を含むコンジュゲートの合成が可能となる。図1では、Rは、-H、メトキシ、ベンジルまたは任意の他のヒドロキシル保護基を表し、R1はヒドロキシル基または任意の他の反応性官能基を表し、Aは分岐点分子を表し、少なくとも2つの反応性部分を有し、初期ポリマーと共有結合することができる多官能性有機分子であり、2からnの値を有するcは分岐の数を表し、2は2アーム分枝分子2-armbranchedmoleculeを表し、3は3アーム分枝分子を表し、以下同様である。初期ポリマー分子を分岐点分子と共有結合させるために用いられる化学物質は、当業者に周知のものであり、アミド、エステル、エーテル、シリルエーテルなどを含む。本発明のための分岐点分子は、当技術分野において公知の多官能性有機分子の非常に大きな群から選択することができ、例として以下の構造を含むが、これらに制限されない。一実施形態では、方法は、ヘテロ二官能性ポリマーを調製する方法である。このような実施形態では、コンジュゲートのポリマーの未結合末端に存在する任意の保護基が除去される。任意の保護基が除去されたとき、または保護基が存在しない場合、ポリマーの未結合末端を反応させてその官能基を変化させ、修飾ポリマーが得られる。この修飾ポリマーは、分岐点分子から切断された場合、分岐点分子と結合した末端に存在する官能基とは異なる官能基を未結合末端に有するヘテロ二官能性ポリマーとなる。ポリマーは分岐点分子から切断されるとさらに修飾されて、ヘテロ二官能性ポリマー最終生成物とすることができる。さらなる実施形態では、方法は、単分散ポリマーまたは分子量分布が狭いポリマーを調製する方法である。このような実施形態では、コンジュゲートのポリマーの未結合末端を反応させ、存在し得る任意の保護基を除去してもよい。任意の保護基が除去されたとき、または保護基が存在しない場合、未結合末端を別のポリマー単位またはモノマー単位と反応させて、コンジュゲートのポリマー分子の長さを延長させる。過剰のポリマー単位またはモノマー単位を使用すると、反応が終了せざるを得なくなり、その結果、生成物コンジュゲートによって、出発物質の狭い分子量分布または単分散が維持される。一定の長さの初期ポリマーを用い、未結合末端にさらに一定の長さのポリマーをカップリングさせることによって、分岐点分子から切断する際に単分散ポリマーが形成される。一実施形態では、ポリマーの化学的修飾はステップbの前に生じる。代替的な実施形態では、化学修飾はステップbの後に生じる。官能基化されたコンジュゲートまたは脱保護されたコンジュゲートは、さらに膜分離、または液液抽出、クロマトグラフィーなど他の従来の公知の精製法を用いて精製してもよい。所望の生成物が得られるまで、合成戦略を繰り返してもよい。分岐点分子からポリマー鎖が切断されると、遊離した未結合末端の終端が修飾された初期ポリマーが実質的に生成される。分岐点分子からポリマーを切り離すために用いられる切断反応の選択は、合成したい生成物に依存し、都合に応じて、合成戦略の最後に、または任意の段階で行うことができる。さらなる実施形態では、HO-PEG44-NH2を調製する合成戦略を図2に示す。過剰のPEG平均分子量=約2,000ダルトン、n=44をベンゼン-1,3,5-トリカルボニルトリクロリドと反応させる。次いで、得られた高分子量の分岐したベンゼン-1,3,5-CO2-PEG44-OH3を、溶媒安定性のナノろ過膜を用いて、過剰のPEGから精製する。遊離ヒドロキシル末端の官能基化および分岐点分子からの切断は、既に報告され当業者に周知の化学反応によって達成される。本発明のさらなる実施形態を図3に示す。この実施形態の生成物として、単分散または狭い分子量分布を有する分岐ポリマー、線状ポリマー、およびヘテロ二官能性ポリマーが含まれるが、それらのすべては、タンパク質、薬物、他のポリマー、ペプチド、オリゴヌクレオチドなどの他の部分と結合していてもよい。図3では、Aは分岐点分子を表し、HZ-ポリマー-ZHは初期ポリマーを表し、また、1および2はそれぞれ、コンジュゲートおよび末端が官能基化された線状ポリマー生成物を表し、1は、c=nの場合のnアームポリマーであるがこれに限定されるものではない。XおよびYは、同時にまたは独立して、ヒドロキシル、メトキシ、アミン、アジド、カルボン酸などであってもよい官能基を表すが、これらに限定されない。他の適切なXおよび/またはY官能基には次のものが含まれる。弱酸性のpHおよび低濃度で一緒に反応して、オキシムエーテル例えば、PEG-ONH=CH-CH2-OPEGを生成することができるアミンオキシ例えば、PEG-ONH2またはアルデヒド例えば、PEG-OCH2CHO、CuI触媒の存在下でアジドと結合してトリアゾールを生成するアセチレン例えば、プロパルギルエーテル、PEG-OCH2-CCH、アジドとシュタウディンガー連結反応するホスフィン試薬、PEGを架橋するために用いられる非常に緊密な包接複合体を形成するアダマンチルエーテル小型で円形の炭化水素ケージまたはβシクロデキストリン油脂性の中心空洞を有する環式グルコースヘプタマー、PEG末端のOHまたはNH2と縮合することができる1つのカルボン酸を有する容易に入手可能な小分子であり、ストレプトアビジン/アビジンと非常に緊密な複合体を形成し、生体適合性の架橋に非常に一般的に用いられているビオチンビタミンH、例えばアクリレートと縮合するか、パラクロロメチルスチレンでエーテル化するポリマーモノマー。このような官能基は、受容体認識または生物物理的会合のための生体分子ペプチド、オリゴヌクレオチド、糖類、リン脂質との結合に、あるいは薬物とのカップリングのために用いることができる。さらなる実施形態では、XおよびYは以下の官能基から選択されてもよい。本発明のさらなる実施形態では、過剰の初期ポリマーを分岐点分子と反応させ、それによって膜ろ過により過剰の初期ポリマーから精製することができるコンジュゲートの合成が可能となる。続いて、初期ポリマーと同じまたは異なるポリマーを用いた一連のカップリング/脱保護反応によってポリマー鎖を延長することができる。反応の合間に、反応副生成物および過剰の試薬からの成長中のポリマーの分離を、ダイアフィルトレーションによって少なくとも1つの反応に対し行ってもよい。脱保護/カップリング反応のサイクルは所望のポリマー分子量を得るために行うことができる。鎖延長に用いられる化学物質は、報告され、当業者に公知のものであるFrenchら、2009、AngewandteChemieInt.Ed.48、1248~1252。都合に応じて例えば、生物分解性が増したポリマーを得ることや、pHが制御された縮合にスペーサーを導入すること、カルボキシルエステル結合またはリン酸エステル結合、アミン結合およびアセタール結合などの他の結合を鎖延長に用いることができる。鎖延長の後に、ポリマーを、分岐点分子から切断するか、またはヘテロ二官能性ポリマーを合成するために官能基化し得る。鎖延長に用いられるポリマーの少なくとも1つが初期ポリマーとは異なる場合、ブロックコポリマーが形成され得ることは明らかである。図4は、単分散のPEGを合成するための本実施形態を示しており、図中、RO-PEGn-R1は、開始PEG例えば、ヘキサゴールhexagolヘキサエチレングリコールなどの単分散のPEGを表し、Aは分岐点分子を表し、3はPEGコンジュゲート、5は鎖が延長された単分散PEG、4は官能基化PEGコンジュゲート、6は鎖が延長された官能基化PEGである。さらなる実施形態では、ダイアフィルトレーションに用いられる溶媒は、ダイアフィルトレーションの直前の反応に用いられる溶媒、またはダイアフィルトレーションの後の反応に必要な溶媒と異なっていてもよい。ダイアフィルトレーションに用いられる溶媒は、ポリマーおよび/または官能基化ポリマーを溶液中に保持すべきである。本発明での使用に好適な膜として、重合体膜およびセラミック膜、重合体/無機混合膜が挙げられる。膜阻止率Riは当業者に公知の一般用語であり、次のように定義される。式中、CP,i=膜を通過する液体である透過液中の化学種iの濃度であり、CR,i=膜を通過しない液体である保持液中の化学種iの濃度である。Rコンジュゲート>R少なくとも1つの反応副生成物または試薬の場合、膜が本発明に好適であることが理解されよう。本発明の膜は、少なくとも1つの反応副生成物または試薬からポリマー生成物を優先的に分離することができる分離層を提供する、任意のポリマー物質またはセラミック物質から形成されてもよい。好ましくは、膜は、精密ろ過膜、限外ろ過膜、ナノろ過膜、または逆浸透膜を製造するのに好適なポリマー物質から選択される物質から形成されるか、それを含み、ポリマー物質としては、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレンPTFE、ポリフッ化ビニリデンPVDF、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリアクリロニトリル、ポリアミド、ポリイミド、ポリエーテルイミド、酢酸セルロース、ポリアニリン、ポリピロール、ポリベンズイミダゾール、およびこれらの混合物が挙げられる。膜は、焼結、伸張、トラックエッチング、テンプレートリーチングtemplateleaching、界面重合または位相反転などの当技術分野において公知の任意の技術によって作製することができる。より好ましくは、膜は、反応溶媒中の安定性を向上させるために、架橋され、または処理されてもよい。PCT/GB2007/050218には、本発明での使用に好適であり得る膜が記載されている。好ましい態様では、膜は複合材料であり、その非多孔質の選択的透過層は、ポリジメチルシロキサンPDMSベースのエラストマーなどの修飾ポリシロキサンベースのエラストマー、エチレン-プロピレンジエンEPDMベースのエラストマー、ポリノルボルネンベースのエラストマー、ポリオクテナマーベースのエラストマー、ポリウレタンベースのエラストマー、ブタジエンおよびニトリルブタジエンゴムベースのエラストマー、天然ゴム、ブチルゴムベースのエラストマー、ポリクロロプレンネオプレンベースのエラストマー、エピクロロヒドリンエラストマー、ポリアクリレートエラストマー、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレンPTFE、二フッ化ポリビニリデンPVDFベースのエラストマー、ポリエーテルブロックアミドPEBAX、ポリウレタンエラストマー、架橋ポリエーテル、界面重合によって形成されたポリアミド、およびこれらの混合物から選択される物質から形成されるか、それを含む。さらにより好ましくは、膜は、焼結、リーチングまたはゾルゲル法などの当業者に公知の任意の技術を用いて、非限定的な例として炭化ケイ素、酸化シリコン、酸化ジルコニウム、酸化チタンまたはゼオライトなどの無機物質から調製される。ヘテロ二官能性生成物はすべて、TFA無水物による末端アシル化を用いて特徴付けた。約10mgのヘテロ二官能性生成物を、TFA無水物の0.5CDCl3溶液に溶解し、NMRによって分析したJoら、2001.Biomacromolecules.2、255~261。TFAでアシル化された末端の低磁場ピーク積分値と別の鎖末端からのシグナルの比によって、変換および純度未変換HO-PEG44-OHに対するモノ官能基化PEGのを評価することができる。表1にすべての実施例の結果をまとめる。[実施例1:HO-PEG44-Phthの合成]<ステップ1:Ph-Si-O-PEG44-OH3の合成>HO-PEG44-OH約2,000gmol-1、14.4g、7.2mmolを、乾燥トルエンTOL20ml×4回と共蒸発させ、乾燥ジクロロメタンDCM25mlに溶解した。イミダゾール0.230g、2.8mmolを溶液に添加し、室温の窒素雰囲気下で撹拌した。トリクロロフェニルシラン0.115ml、0.71mmolをゆっくり添加した。反応液を一晩撹拌し、過剰の脱イオン水3ml、15分で反応を停止した。次に、反応溶液をDCM100mlで希釈し、脱イオン水100mlで洗浄した。さらにDCM100mlで水層を抽出した。合わせた有機画分を、脱イオン水200mlで洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥し、ろ過し、蒸発乾固させて粗物質13.1gを得た。これを、OSN精製のためにDCMに再度溶解した。PCT/GB2007/050218に記載されるように調製した架橋ポリイミド膜を用いてOSN精製を行った。加圧セルに取り付けた51.4cm2の円板として膜を使用し、10バールでろ過を行ったOSN装置の概略図については図5を参照。新しいDCM溶媒を添加し、HPLCポンプを用いてダイアフィルトレーションを行った。生成物を12~15のダイアフィルトレーション容量で洗浄しp=7~8気圧、室温、Ph-Si-O-PEG4431.35g、31を得た。δH346389396736743768ppm。<ステップ2:Ph-Si-O-PEG44-OMs3の合成>Ph-Si-O-PEG44-OH30.300g、0.05mmolを、乾燥TOL10ml×3回と共蒸発させ、乾燥DCM3mlに溶解した。室温で撹拌溶液に、窒素雰囲気下で、まずトリエチルアミンEt3N0.045ml、0.30mmolを添加し、次にメタンスルホニルクロリドMsCl0.060ml、0.75mmolをゆっくり添加した。反応液を一晩撹拌し、30分かけて脱イオン水0.500mlで反応を停止した。次に、反応溶液をDCM50mlで希釈し、脱イオン水50ml×1回および飽和NaHCO3水溶液50mlで洗浄した。さらにDCM100mlで水層を抽出した。合わせた有機画分を、無水Na2SO4上で乾燥してろ過し、蒸発乾固させて、Ph-Si-O-PEG44-OMs30.192g、62を得た。δH302338376389431736743761ppm。<ステップ3:HO-PEG44-Phthの合成>Ph-Si-O-PEG44-OMs30.192g、0.03mmolを、乾燥TOL5ml×2回と共蒸発させ、乾燥ジメチルホルムアミドDMF20mlに溶解した。フタルイミドカリウムKPhth、0.187g、10mmolを窒素雰囲気下で撹拌溶液に添加し、温度を70°Cまで上げた。3時間後、溶液を冷却し、DCM100mlで希釈して、脱イオン水100mlで洗浄した。さらにDCM100mlで水層を抽出した。合わせた有機画分を、NaHCO3/Na2CO3水溶液200mlで洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮した。次に、これを氷浴で冷却し、ジエチルエーテル約15容量を撹拌溶液にゆっくり添加して粗物質を沈殿させ、この粗物質をCDCl32ml×3回から蒸発させたPh-Si-OPEG44-OHが酸性条件下で急速に加水分解されて、HO-PEG44-Phth0.098g、52が得られることが確認された。δH344382182HmCH2OH389771783ppm。図6は、HO-PEG44-Phthの得られた1H-NMRスペクトルを示す。CDCl3上図、およびCDCl35v/vTFA無水物下図。[実施例2:HO-PEG44-NH2の合成]<ステップ1:ベンゼン-1,3,5-CO2-PEG44-OH3の合成>HO-PEG44-OH31.1g、15mmolを乾燥TOL60ml×2回と共蒸発させ、乾燥DCM45mlに溶解した。撹拌溶液に、室温の窒素雰囲気下で、まずN-メチルイミダゾールNMI0.720ml、9mmolを添加し、次にDCM2mlに溶解したベンゼン-1,3,5-トリカルボニルトリクロリド0.420g、1.6mmolをゆっくり添加した。反応液を一晩反応させ、30分かけて過剰の脱イオン水で反応を停止した。次に、溶液をDCM400mlで希釈し、半飽和NaHCO3水溶液250mlで洗浄した。さらにDCM200mlで水層を抽出した。合わせた有機画分を、0.1MのHCl600mlで洗浄し、無水MgSO4上で乾燥して、ろ過し、蒸発乾固させた。粗物質28.8gは、OSN精製のためにDCMに再度溶解した。PCT/GB2007/050218に記載されるように調製した架橋ポリイミド膜を用いてOSN精製を行った。加圧セルに取り付けた54cm2の円板として膜を使用し、30バールでろ過を行った。新しいDCM溶媒を添加し、HPLCポンプを用いてダイアフィルトレーションを行った。生成物を12~15のダイアフィルトレーション容量で洗浄しp=8気圧、室温、ベンゼン-1,3,5-CO2-PEG44-OH34.63g、62を得た。δH345382386453886ppm。<ステップ2:ベンゼン-1,3,5-CO2-PEG44-OMs3の合成>ベンゼン-1,3,5-CO2-PEG44-OH31.028g、0.16mmolを、乾燥TOL15ml×3回と共蒸発させ、乾燥DCM6mlに溶解した。室温の窒素雰囲気下で撹拌溶液に、まずEt3N0.136ml、0.98mmolを添加し、次にMsCl0.190ml、2.44mmolをゆっくり添加した。7時間後、30分かけて脱イオン水0.500mlで反応を停止し、DCM150mlで希釈した。これを半飽和NaHCO3150ml×1回、脱イオン水150ml×1回で洗浄し、さらにDCM300mlで水層を抽出した。合わせた有機画分は、無水MgSO4上で乾燥してろ過し、蒸発乾固させて、粗ベンゼン-1,3,5-CO2-PEG44-OMs30.96g、93を得た。δH311347385378388440455888ppm。<ステップ3:ベンゼン-1,3,5-CO2-PEG44-Phth3の合成>ベンゼン-1,3,5-CO2-PEG44-OMs30.850g、0.13mmolを、乾燥アセトニトリルMeCN10ml×3回と共蒸発し、乾燥DMF60mlに溶解した。KPhth0.740g、4mmolを窒素雰囲気下で撹拌溶液に添加し、温度を70°Cまで上げた。15時間後、溶液を冷却し、DCM150mlで希釈して、脱イオン水150ml×1回で洗浄した。さらにDCM150mlで水層を抽出し、合わせた有機画分を無水MgSO4上で乾燥してろ過し、減圧下で濃縮した。撹拌粗溶液を氷浴で冷却し、約15容量のジエチルエーテルを添加して、ベンゼン-1,3,5-CO2-PEG44-Phth30.593g、68を沈殿させた。δH348385389393456773775786788889ppm。<ステップ4:HO-PEG44-NH2の合成>ベンゼン-1,3,5-CO2-PEG44-Phth30.593g、0.09mmolを、乾燥TOL5ml×2回と共蒸発させ、エタノール性ヒドラジン水和物6ml、10v/vに溶解した。溶液を12時間室温で撹拌し、次いでアセトン5mlの添加によって反応を停止し、15分間撹拌した。溶液をDCM100mlで希釈し、NaCl水溶液150ml、5w/vで洗浄した。さらにDCM100ml×2回で水層を抽出し、合わせた有機画分を無水MgSO4上で乾燥してろ過し、真空下で蒸発させた。得られた粗生成物を減圧下で脱イオン水2ml×3回と共蒸発させ、HO-PEG44-NH20.315g、58を得た。δH315341387。図7は、HO-PEG44-NH2の1H-NMRスペクトルを示す。DCl3上図、CDCl35v/vTFA無水物下図。純度は、上図のスペクトルにおけるCH2NH2ピークとOCH2の積分値の比が下図のスペクトルにおけるCH2OTFAピークとOCH2の積分値の比と同様のサイズであることにより評価され得る。[実施例3:HO-PEG44-N3の合成]<ステップ1およびステップ2>上記の実施例2と同様である。<ステップ3:ベンゼン-1,3,5-CO2-PEG44-N33の合成>ベンゼン-1,3,5-CO2-PEG44-OMs30.960g、0.15mmolを、乾燥MeCN10ml×3回と共蒸発し、DMF3mlに溶解した。脱イオン水0.250mlおよびNaHCO324mgを添加し、その後NaN359mgを添加した。溶液を窒素下の70°Cで撹拌し、20時間後、溶液を冷却した。これをEtOAc150mlで希釈し、半飽和NaHCO3120ml、脱イオン水120ml×3回、および塩水120mlで洗浄した。次に、DCM600ml×2回で水層を抽出し、合わせた有機相をMgSO4上で乾燥し、ろ過して真空下で蒸発させ、ベンゼン-1,3,5-CO2-PEG44-N330.368g、39を得た。δH341343348386389456889ppm。<ステップ4:HO-PEG44-N3の合成>ベンゼン-1,3,5-CO2-PEG44-N330.100g、0.016mmolを、NH3水溶液2.5ml、35v/vに溶解し、一晩撹拌した。溶液を真空下で蒸発させ、アンモニア臭が検知されなくなるまで水と共蒸発させた。残渣をDCM50mlに溶解し、脱イオン水50mlで洗浄した。さらにDCM50ml×2回で水層を抽出した。合わせた有機画分を、MgSO4上で乾燥し、ろ過して真空下で蒸発させ、HO-PEG44-N30.086g、88を得た。δH337343381ppm。図8は、HO-PEG44-N3の1H-NMRスペクトルを示す。CDCl3上図、CDCl35v/vTFA無水物下図。[実施例4:C6H3-1,3,5-CH2OPeg12OCH2Nph3の合成]<ステップ1:C6H3-1,3,5-CH2OPeg4OH3の合成>水素化ナトリウムの60鉱油分散体205mg、5mmol、5当量を、石油エーテル×3回で洗浄し、DMF7mLに懸濁させて、氷水浴で冷却した。テトラゴールHO-PEG44-OH、5.84g、30mmolをMeCN10mL×3回から蒸発し、DMF2mL中に採取し、素早く撹拌した水素化ナトリウム懸濁液に滴下して、穏やかな気泡を保持し、さらにDMF0.5mL×2回でフラスコをすすいだ。冷却浴を取り除き、反応液を室温で90分間撹拌した。この後、氷酢酸1mLを添加し、溶媒を除去したオイルポンプ。残渣をCHCl3中に採取して、10飽和NaHCO3×2回で洗浄し、合わせた水層をさらにCHCl3×2回で抽出した。合わせた有機層を10塩水で洗浄し、水層をCHCl3×2回で逆抽出した。合わせた有機層をNa2SO4上で乾燥させ、減圧下で蒸発乾固させた。残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーによって、MeOH-CHCl30:1~1:9のグラジエントで溶出して分画し、環式副生成物1-HOPeg4OCH2-C6H3-3,5-CH2OPeg4OCH249mg、4MeOHで溶出、8、および所望のホモスターhomostarC6H3-1,3,5-CH2OPeg4OH3375mg、6~10EtOHで溶出、52を得た。RfMeOH-CHCl3、1:9v/v生成物0.22、副生成物0.38。NMRδH722453371368300ppm。HRMSmzMNa7193824C33H60NaO15は7193825を必要とする。67535733のピークはMNaに相当し、テトラゴールのトリゴール混入からのC31H56NaO14は6753563を必要とする。<ステップ2:TsOPeg4OHの合成>テトラゴール2.0g、10.3mmol、10当量をMeCN5mL×3回から共蒸発させ、DCM5mLに溶解した。撹拌溶液に、p-トルエンスルホニルクロリド0.196g、1.03mmolを添加し、次いでトリエタイルアミン0.21mL、1.5mmol、1.5当量を添加した。翌日、溶液をDCMで希釈して、水×2回で洗浄し、次に20飽和NaHCO3で洗浄した。合わせた水層をさらにDCMで同様に逆抽出した。合わせた有機層をNa2SO4上で乾燥し、減圧下で蒸発させた。残渣を、シリカのパッドを通してEtOAc-DCM0:1~9:1のグラジエントで溶出して分画し、無色の油286mg、80として生成物を得た。RfEtOAc-DCM、2:3v/v0.34。NMRδH782737419374360247242ppm。HRMSmzMNa3711140C15H24NaO7Sは3711135を必要とする。<ステップ3:DmtrOPeg4OTsの合成>TsOPeg4OH0.336g、1.05mmolおよび4,4’-ジメトキシトリフェニルメタノールDmtrOH、0.332g、1.0mmolをDCM30mLに溶解し、このDCMに3Åの分子篩12.7gを添加した。混合液に、p-トルエンスルホン酸一水和物15mgを添加すると、最初、Dmtrカチオンの強いオレンジ色が観察されたが、30分後には大部分が消えた。2時間後、Et3N0.5mLを添加し、溶液を分子篩からデカントし、さらにDCMで洗浄した。溶液を飽和NaHCO3で分割し、Na2SO4上で乾燥し、減圧下で蒸発させた。残渣を、シリカのパッド100mLを通して、DCM-石油エーテルを導入し、EtOAc-石油エーテル0:1~1:1のグラジエントで溶出して分画した。この際、すべての溶媒が確実に0.5Et3Nを含有するようにし、淡黄色の油454mg、70として生成物を得た。RfEtOAc-石油エーテル、3:2v/v微量のEt3N0.42。NMRδH776745740732719688408373357343304240ppm。HRMSmzMNa6732416C36H42NaO9は6732442を必要とする。<ステップ4:C6H3-1,3,5-CH2OPeg8ODmtr3の合成>水素化ナトリウムの60鉱油分散体17mg、0.42mmol、6当量は、石油エーテル×3回で洗浄し、DMF0.2mLに懸濁させて、氷水浴で冷却した。C6H3-1,3,5-CH2OPeg4OH346mg、0.066mmolおよびDmtrOPeg4OTs444mg、0.68mmol、10当量をMeCN5mL×3回から共蒸発させ、次いでDMF1.0mLに溶解し、水素化ナトリウムに滴下し、さらにDMF0.25mL×2回でフラスコをすすいだ。翌日、飽和NH4Cl0.5mlを添加し、真空内で溶媒を除去したオイルポンプ。残渣をDCM中に採取し、10飽和NaHCO3で洗浄し、さらにDCMで水層を逆抽出した。合わせた有機層を10塩水で洗浄し、水層をさらにDCMで逆抽出した。合わせた有機層をNa2SO4上で乾燥させ、減圧下で蒸発乾固させた。残渣410mgを、シリカのパッド100mLを通して、DCM-石油エーテルを導入し、最初にEtOAc-石油エーテル0:1~1:0のグラジエントで溶出して分画した。この際、すべての溶媒が確実に0.5Et3Nを含有するようにした。過剰のDmtrOPeg4OTs268mg、50EtOAcまで溶出、予測した未反応物質の85を、残留水との反応からの少量のDmtrOPeg8ODmtr34mgと共に回収した。次に、シリカパッドをEtOH-DCM1:19、0.5Et3Nを含有で洗浄し、淡黄色の油として生成物127mg、90を得た。RfMeOH-CHCl3、1:9v/v微量のEt3N0.38。NMRδH747734728722720682456380371361323ppm。MSmzMNa2155C120H162NaO33は21555を必要とする。MDmtrHNH41848M2Dmtr2HNH41546MDmtrNaNH421087Dmtr303。<ステップ5:C6H3-1,3,5-CH2OPeg8OH3の合成>C6H3-1,3,5-CH2OPeg8ODmtr3120mg、0.056mmolをDCM2mLに溶解した。撹拌溶液がDmtrカチオンの濃いオレンジに変化すると、この溶液にジクロロ酢酸0.019mL、4当量を添加した。その後ピロール0.072mL、20当量を添加し、5分で色が完全に消えた。11分後、トリエチルアミン0.5mLを添加し、真空内で溶媒を除去したオイルポンプ。残渣をDCM中に採取し、30飽和塩水で洗浄し、さらにDCM×3回で水層を逆抽出した。合わせた有機層をNa2SO4上で乾燥させ、蒸発乾固させた。残渣を、シリカのパッドを通してEtOH-CHCl30:1~1:4のグラジエントで溶出して分画し、無色の油51mg、74として生成物を得た。RfMeOH-CHCl3、1:9v/v0.29。NMRδH721453372357297ppm。MSmzMNa12478C57H108NaO27は12477を必要とする。M2Na26354。11988のピークはMNH4に相当し、C55H108NO26は11987を必要とし、鎖延長の間に重要な基本的解重合がなかったことを示している。<ステップ6:NphCH2OPeg4OHの合成>60水素化ナトリウム120mg、3mmol、1.5当量は、石油エーテル×3回で洗浄し、DMF1mLに懸濁させて、氷水浴で冷却した。テトラゴール3.88g、20mmol、10当量をMeCN10mL×3回から共蒸発させ、DMF4mL中に採取し、素早く撹拌した水素化ナトリウムに滴下して、穏やかな気泡を保持した。次に、固体2-ブロモメチルナフタレン442mg、2mmolを添加し、冷却浴を取り除いて、1時間撹拌を継続した。その後、飽和NH4Cl0.5mlを添加し、真空内で溶媒を除去したオイルポンプ。残渣をCHCl3中に採取して、水×2回で洗浄し、水層をさらにCHCl3で逆抽出した。合わせた有機画分をNa2SO4上で乾燥し、減圧下で蒸発させた。粗生成物740mgをさらに精製することなく用いた。RfMeOH-DCM、1:19v/v0.50。NMRδH788779751744475375366361276ppm。HRMSmzMNa3571669C19H26NaO5は3571673を必要とする。<ステップ7:NphCH2OPeg4OTsの合成>粗Nph-Peg4-OH0.702g、2.1mmolをMeCN5mL×3回から共蒸発させ、DCM5mlに溶解した。この溶液に、p-トルエンスルホニルクロリド0.60g、3.2mmol、2当量を添加し、次にトリエチルアミン0.88mL、6.3mmol、3当量を添加し、反応液を4時間撹拌した。この後、飽和NaHCO35mLを添加し、20分間激しく撹拌し続けた。反応液をDCMで希釈し、水×2回で洗浄してから、20飽和NaHCO3で洗浄した。合わせた水層をDCMで逆抽出し、同様に洗浄した。合わせた有機画分をNa2SO4上で乾燥し、減圧下で蒸発させた。残渣を、シリカのパッドを通してEtOAc-石油エーテル0:1~3:2のグラジエントで溶出して分画した。RfEtOAc-DCM、2:3v/v0.62。NMRδH788779752747733476417372358345ppm。HRMSmzMNa5111768C26H32NaO7Sは5111761を必要とする。<ステップ8:C6H3-1,3,5-CH2OPeg12OCH2Nph3の合成>鉱油中60水素化ナトリウム11.6mg、0.29mmol、6当量は、石油エーテル×2回で洗浄し、DMF0.1mLに懸濁させて、水浴で冷却した。C6H3-1,3,5-CH2OPeg8OH351mg、0.042mmolおよびNphCH2OPeg4OTs206mg、0.42mmol、10当量をMeCN3mL×4回から共蒸発させ、次いでDMF0.5mLに溶解し、穏やかに撹拌した水素化ナトリウムに滴下し、さらにDMF0.2mL×2回でフラスコをすすいだ。翌日、飽和NH4Cl0.2mlを添加し、真空内で溶媒を除去したオイルポンプ。残渣をCHCl3中に採取して、10飽和NaHCO3洗浄し、水層をさらにCHCl3で逆抽出した。合わせた有機層を20塩水で洗浄し、水層をさらにCHCl3で逆抽出した。合わせた有機層をNa2SO4上で乾燥させ、減圧下で蒸発乾固させた。残渣219mgは、PCT/GB2007/050218に記載されるように調製した架橋ポリイミド膜を用いたダイアフィルトレーションによって分画し、淡黄色の油として生成物を得た。NMRδH787779752747723474455373358ppm。MSmzMNaNH4211077C114H184NNaO392は11076を必要とする。MNa2NH437441。PEG鎖が所望の単分散分子量にさらに延長され、続いて、分岐点分子トリメチルベンジル部分から切断され、単分散ポリマー生成物を提供し得ることは当業者に明らかである。"