"高脂肪食を摂取させ、肝障害剤を4回以上投与することにより得られるNASHモデル動物。高脂肪食が、脂肪を40~60質量含むものである請求項1記載のNASHモデル動物。肝障害剤の投与量が0.05~0.5mL/kg体重/回である請求項1又は2記載のNASHモデル動物。肝障害剤の投与回数が4~8回である請求項1~3のいずれか1項記載のNASHモデル動物。肝障害剤の投与が皮下投与である請求項1~4のいずれか1項記載のNASHモデル動物。高脂肪食の摂取期間が、2週間以上である請求項1~5のいずれか1項記載のNASHモデル動物。肝障害剤が、四塩化炭素である請求項1~6のいずれか1項記載のNASHモデル動物。NASHモデル動物がマウスである請求項1~7のいずれか1項記載のNASHモデル動物。大滴性脂肪肝であり、肝臓の小葉内の中心静脈周囲に炎症があり、肝細胞が風船様に腫大している請求項1~8のいずれか1項に記載のNASHモデル動物。肝組織が線維化している請求項1~9のいずれか1項記載のNASHモデル動物。血清中のAST、ALT、遊離脂肪酸、中性脂肪から選ばれる1以上が、通常飼料で飼育された動物に比べて高いものである請求項1~10のいずれか1項記載のNASHモデル動物。血清中のASTが200U/L以上であり、ALTが300U/L以上であり、遊離脂肪酸が1000μEq/L以上であり、中性脂肪が20mg/dL以上である請求項1~11のいずれか1項記載のNASHモデル動物。高脂肪食を摂取させ、肝障害剤を4回以上投与することを特徴とするNASHモデル動物の作製方法。高脂肪食が、脂肪を40~60質量含むものである請求項13記載のNASHモデル動物の作製方法。肝障害剤の投与量が0.05~0.5mL/kg体重/回である請求項13又は14記載のNASHモデル動物の作製方法。肝障害剤の投与回数が4~8回である請求項13~15のいずれか1項記載のNASHモデル動物の作製方法。肝障害剤の投与が皮下投与である請求項13~16のいずれか1項記載のNASHモデル動物の作製方法。高脂肪食の摂取期間が、2週間以上である請求項13~17のいずれか1項記載のNASHモデル動物の作製方法。肝障害剤が、四塩化炭素である請求項13~18のいずれか1項記載のNASHモデル動物の作製方法。NASHモデル動物がマウスである請求項13~19のいずれか1項記載のNASHモデル動物の作製方法。請求項1~12のいずれか1項記載のNASHモデル動物を用いることを特徴とする、NASH予防治療剤のスクリーニング方法。請求項1~12のいずれか1項記載のNASHモデル動物を用いることを特徴とする、被験物質のNASH予防治療効果の評価方法。しかしながら、これらの動物モデルの病理所見では、大滴性脂肪肝のみが認められ、NASHに特有の肝細胞における小葉中心静脈周囲における炎症および肝細胞の風船様腫大は認められないことから、これらの動物モデルはヒトのNASHモデルとは言い難い。従って、本発明の課題は、ヒトのNASH特有の病態を生じるNASHモデル動物及びその作製方法を提供することにある。そこで本発明者は、ヒトのNASH特有の病態を呈するモデル動物を作製すべく種々検討したところ、全く意外にも、高脂肪食を摂取させて肥満にさせるとともに、肝障害を誘発する薬剤以下、肝障害剤というを4回以上投与することにより、大滴性脂肪肝であり、肝臓の小葉内の中心静脈周囲に炎症があり、肝細胞が風船様に腫大しているという、ヒトのNASH特有の病態を有するモデル動物が作製できること、さらに当該モデル動物を用いれば被験物質のNASH予防治療効果が評価でき、NASH予防治療剤がスクリーニングできることを見出し、本発明を完成した。従って、本発明は、高脂肪食を摂取させ、肝障害剤を4回以上投与することにより得られるNASHモデル動物を提供するものである。また、本発明は、高脂肪食を摂取させ、肝障害剤を4回以上投与することを特徴とするNASHモデル動物の作製方法を提供するものである。また、本発明は、前記NASHモデル動物を用いることを特徴とする、NASH予防治療剤のスクリーニング方法を提供するものである。さらに、本発明は、前記NASHモデル動物を用いることを特徴とする、被験物質のNASH予防治療効果の評価方法を提供するものである。本発明のNASHモデル動物は、大滴性脂肪肝であり、肝臓の小葉内の中心静脈周囲に炎症があり、肝細胞が風船様に腫大しているという、ヒトのNASH特有の症状を有することから、ヒトNASHモデルとして有用である。本発明のNASHモデル動物を用いれば、ヒトのNASHに有効な医薬や食品のスクリーニングが可能となる。また、被験物質のNASH予防治療効果の評価にも用いることができる。本発明のNASHモデル動物は、高脂肪食を摂取させ、肝障害剤を4回以上投与することにより作製できる。用いられる動物は、特に制限されるものではなく、例えばマウス、ラット、モルモット、ハムスター、ウサギ、サル等を挙げることができるが、マウスを用いることが好ましい。マウスを用いる場合は、通常のマウスであればよく、雑種でも系統種でもよいが、実験動物として用いられているマウス、例えばC57BL/6系マウス、C3H系マウス、ICR系マウス、BALB/c系マウス等が好ましい。高脂肪食としては、脂肪を20質量以上含有する食餌であればよく、さらに脂肪を30~80質量含有する食餌、特に脂肪を40~60質量含有する食餌が好ましい。ここで脂肪としては、動物性脂肪、植物性脂肪にかかわらず、あらゆる種類の脂肪を用いることができ、コーン油、大豆油、なたね油、牛脂、豚脂を例示することができるが、特に牛脂、豚脂が好ましい。また高脂肪食中の脂肪以外の成分は、通常の食餌成分であればよく、タンパク質、炭水化物、ミネラル等を含んでもよい。高脂肪食の摂取期間は、肥満が生じるのに必要な期間であればよく、特に制限されないが、2週間以上が好ましく、さらに4週間以上、特に8~16週間が好ましい。また高脂肪食摂取の開始時期は特に制限されないが、5週齢からが好ましい。また、高脂肪食は、動物に毎日自由摂取させればよい。用いられる肝障害剤は特に制限されるものではなく、例えば、四塩化炭素、ガラクトサミン、アセトアミノフェン、LPSリポ多糖等を挙げることができるが、特に四塩化炭素が好ましい。肝障害剤は、4回以上投与することが、動物にヒトNASH特有の症状を発症させる点で重要である。投与回数は4~10回が好ましく、4~8回がより好ましい。投与回数が4回未満の場合には、肝臓に炎症や線維化が生じず、ヒトのNASH特有の症状が発症しない。肝障害剤の投与手段は、腹腔投与、静脈投与、経口投与、皮下投与等、特に限定されるものではないが、皮下投与が好ましい。また投与量は、通常の肝障害を生じさせる量である1ml/kg体重/回よりも低用量であることが、ヒトNASH特有の症状を発症させるために重要であり、具体的には、0.05~0.5mL/kg体重/回が好ましく、0.1~0.25mL/kg体重/回がより好ましい。0.05mL/kg体重/回よりも少ないと、NASHの症状を呈しない場合があり、0.5mL/kg体重/回よりも多いと、ヒトNASH特有の症状を発症せず、通常の肝障害モデル動物となってしまう場合があるため好ましくない。肝障害剤の投与開始時期は、特に限定されるものではないが、高脂肪食摂取開始後2週間後からが好ましく、特に高脂肪食開始後4週間後からがより好ましく、さらに好ましくは8週間後からである。また、肝障害剤の投与間隔は、週に1~3回が好ましく、週に2回が特に好ましい。なお、肝障害剤投与期間中も高脂肪食は摂取し続けるのが好ましい。より好ましい高脂肪食の摂取と肝障害剤投与のスケジュールは高脂肪食を8週間以上摂取させた後、高脂肪食の摂取を続けつつ、週に2回、肝障害剤を0.1~0.25mL/kg体重/回、合計4回以上皮下投与するというものである。高脂肪食を摂取させ、肝障害剤を4回以上投与すれば、動物にヒトNASH特有の病理所見が現われる。その病態とは、大滴性脂肪肝であり、肝臓の小葉内の中心静脈周囲に炎症があり、風船様に腫大した肝細胞が認められることである。従来のNASHモデルでは、小葉内の中心静脈周囲における炎症及び風船様腫大と、大滴性脂肪肝との両方の病理所見が生じるものがなかった。従って、本発明のNASHモデル動物は、ヒトのNASHの病態モデルとして特に有用である。ここで、肝細胞の風船様腫大について、風船様腫大が生じる場所は特に限定されるものではないが、ヒトNASHの症状により類似しているという点から中心静脈周囲に生じていることが好ましい。また、脂肪肝とは、肝臓に大量の脂肪が沈着した状態のことをいい、より詳細には、大滴性脂肪肝沈着及び/又は小脂肪的蓄積沈着が認められる状態であるが、ヒトのNASHにより類似しているという点で、大滴性脂肪肝沈着が認められるものである必要がある。また、本発明のNASHモデル動物は、さらに肝組織が線維化するという症状も呈していることが好ましく、線維化まで生じているNASHモデル動物は、NASHの診断基準としてよく知られているMatteoniらの分類のNASHType4によく合致しており、より病態が進んだNASHのモデル動物となり得る。また、ヒトNASHの症状に類似しているという点から、線維化は中心静脈周囲に生じていることがより好ましい。さらに、本発明のNASHモデル動物は、血清中のアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼASTGOT、アラニンアミノトランスフェラーゼALTGPT、遊離脂肪酸NEFA、中性脂肪TGから選ばれる1以上が通常飼料で飼育された動物に比べて高いものである。好ましくは、ASTは、200U/L以上、より好ましくは500U/L以上であり、さらに好ましくは1000U/L以上である。ALTは300U/L以上、より好ましくは800U/L以上であり、さらに好ましくは1200U/L以上である。遊離脂肪酸NEFAは1000μEq/L以上、より好ましくは1200μEq/L以上である。中性脂肪は20mg/dL以上、より好ましくは30mg/dL以上である。ヒトNASH患者においても、上記の指標は健常人に比べて高いことが報告されており、本発明のNASHモデル動物は、ヒトNASHの症状に類似した病態を示すものである。本発明のNASHモデル動物は、ヒトのNASH特有の症状を呈しており、NASHの病態の研究用として有用であるとともに、NASH予防治療剤NASH予防治療薬、NASH予防治療用食品などのスクリーニングに有用である。また、被験物質のNASH予防治療効果の評価にも有用である。動物に高脂肪食を摂取させ、肝障害剤の投与前、投与の間及び/又は投与後に被験物質を投与し、肝障害剤を4回以上投与した後、肝障害の程度を観察することにより、該被験物質のNASH予防治療効果が評価でき、NASH予防治療剤のスクリーニングができる。ここで、肝障害の程度は、被験物質非投与群との対比、及び/又は正常動物群通常食群、肝障害剤非投与群などとの対比により行うことができる。次に実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明は何らこれに限定されるものではない。実施例11モデル動物の作製作製したNASHモデルマウスを以下に示した表1。高脂肪食牛脂40混餌飼料を自由摂取させて8週間飼育した雄のC57BL/6N系マウスに下記の条件で四塩化炭素0.1mL/kg体重を皮下投与し、四塩化炭素を最後に投与してから下記の時間が経過した後、エーテル麻酔下で放血屠殺した。また、各群5匹から肝臓を採取し、10中性緩衝ホルマリンで固定した。また表2に高脂肪食の組成を示した。Group1とGroup9については、放血屠殺する直前に、腹部大動脈から採血した。得られた血液を1時間以上氷上にて放置した後、3000rpmで15分間遠心分離を行い、血清を調製した。なお、四塩化炭素を2回以上投与する場合は、1週間の最大投与回数が2回となるようにした。2病理組織学的観察固定後の肝臓を常法により切り出し、パラフィン包埋後、パラフィンブロックを約4μmの厚さに薄切し、Hematoxylin-EosinH-E染色を施して、光学顕微鏡にて観察した。さらに膠原線維の有無を確認するためにパラフィン切片にMasson’strichromeM-T染色を実施した。3血液生化学性状の測定7170型自動分析装置日立製作所を用いて、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼASTGOT、アラニンアミノトランスフェラーゼALTGPT、遊離脂肪酸NEFA、中性脂肪TGを測定した。4NASHの診断基準現在、臨床におけるNASHの病理組織学的診断基準には、Matteoniらの分類Gastroenterology1999,116:1413-1419、Kleinerらの分類Hepatology2005,41:1313-1321、及びBruntらの分類AmericanJournalofGastroenterology1999,94:2467-2474がある。米国肝臓学会SingleTopicConference2002ではNASHの必須所見として大滴性脂肪肝、小葉内炎症、肝細胞の風船様腫大をあげ、NAFLDのType3Matteoniらの分類Gastroenterology1999,116:1413-1419以上をNASHと組織診断している表3。また、日本肝臓学会でも組織診断基準にMatteoniらの分類を奨励している。これらのことから今回、MatteoniらによるNAFLDの分類をNASHの診断基準として用いた。すなわち、NASHは大滴性脂肪肝、小葉内炎症および肝細胞の風船様腫大を必須とし表3のType3、これらの症状に加えて、マロリー小体又は線維化が認められる場合はType4に分類される。また、臨床でのヒトNASHでは小葉内炎症、風船様腫大及び/又は線維化が中心静脈周囲で生じていることが報告されていることから、上記の症状が中心静脈周囲で生じている場合に、ヒトNASHの症状により類似した病態ということができる。5結果a高脂肪食対照群Group2の病理組織的変化高脂肪食対照群Group2では中心静脈周囲から小葉中間帯において、肝細胞に小脂肪滴が認められた図1B。小脂肪滴は無処置対照群では観察されなかったことから高脂肪食の投与に起因した変化と考えられた。b高脂肪食四塩化炭素1回投与後の経時的な病理組織的変化Group3~5高脂肪食四塩化炭素の1回投与群Group3~5において、高脂肪食対照群Group2と同様に、小脂肪滴が中心静脈周囲から小葉中間帯において認められた図1C。しかし、これらの群においては、NAFLDに観察される大滴性脂肪肝、及びNASHに観察される肝細胞の風船様細胞や線維化などの所見は確認されなかった表4、5,図1C。c高脂肪食四塩化炭素の投与回数増加に伴う病理組織的変化Group6~9高脂肪食四塩化炭素の複数回投与群Group6~9では大滴性脂肪肝が認められた図1D。この大滴性脂肪肝は四塩化炭素の投与回数の増加に伴い、発生頻度が高く、かつ強くなる傾向が認められた表4、5。一方、中心静脈周囲における小脂肪滴は減少する傾向が認められた表4、5。これまでに大滴性脂肪肝及び小脂肪滴の相互関係についての報告はないが、大滴性脂肪肝は四塩化炭素の複数回投与に起因した変化であると考えられた。さらに四塩化炭素の複数回投与群Group6~9において肝細胞の風船様腫大が中心静脈周囲に5例中2~3例の割合で各群に認められた図1E。また、高脂肪食四塩化炭素を4回以上投与した群Group7~9では、中心静脈周囲においてリンパ球を主体とした炎症細胞浸潤炎症及び軽度の線維化が観察された図1F,図2D。炎症細胞浸潤炎症の発生頻度は、投与回数に比例して増加する傾向が認められた表4、5。線維化は中心静脈周辺かつ肝細胞を取り囲むように認められ図2D、5例中3~4例の割合で各群に認められた表4、5。しかし、ヒトの肝硬変で報告されているようなbridgingfibrosisまで進行した線維化像はすべての群において認められなかった。病理組織学的検査の結果、高脂肪食四塩化炭素を1回投与した群Group3~5においては、肝細胞内に小脂肪滴の蓄積のみ認められたが、高脂肪食四塩化炭素を4回以上投与した群においては、臨床でのヒトNASHで報告されている中心静脈周囲の炎症細胞浸潤炎症、中心静脈周囲の肝細胞の風船様腫大及び中心静脈周囲の線維化が観察された。高脂肪食四塩化炭素を4回以上投与した群のうち、高脂肪食四塩化炭素の4回投与群Group7及び高脂肪食四塩化炭素の6回投与群Group8では5例中1例、高脂肪食四塩化炭素の8回投与群Group9では5例中3例が、Matteoniらが分類したNASHの診断基準表3のType4に一致することが明らかになった。d血液生化学性状Group1、9血清中のAST、ALT、遊離脂肪酸、中性脂肪を測定したところ、高脂肪食四塩化炭素の8回投与群Group9で通常食群Group1に対して有意に高かった表6。AST、ALT、遊離脂肪酸、中性脂肪は、ヒトNASH患者でも健常人に比べて上昇していることが報告されており、ヒトNASHと同様の結果が得られた。今回の結果から、マウスでは高脂肪食の単独投与のみではNASH様病変は誘発されず、高脂肪食の給餌かつ四塩化炭素の単回投与及び2回投与の場合においても、NASH様病変は誘発されないことが明らかとなった。また、四塩化炭素を単回投与してから72時間経過させても、症状が進行することはなく、NASH様病変は誘発されないことが明らかとなった。一方、四塩化炭素を4回以上投与することでNASH様病変が誘発されること、さらに四塩化炭素の投与回数の増加によりNASH様病変が強くかつ高頻度に誘導されることが明らかとなった。また、四塩化炭素8回投与群では、血液生化学性状もヒトNASHと類似した結果を示すことが明らかとなった。NASHの発生機序については十分明らかにされておらず、複数回に渡って肝臓に障害を与えることでNASHが誘発されるとの報告もない。今回の結果から、肝障害剤を、通常、肝障害を生じさせる量である1ml/kg体重/回よりも低用量で、かつ4回以上投与することにより、NASH様病変が誘発されることが明らかとなった。NASHの発生機序が未だ不明確な点に鑑みると、NASH様病変が前記の方法により誘発される理由は、不明である。実施例2四塩化炭素の投与量を0.25mL/kg体重とした以外は、実施例1と同様に四塩化炭素皮下投与8回2回/週を行った。その結果、表7に示す病理組織所見、図3、4に示す肝臓症状を有するNASHモデルマウスを得た。このマウスは、中心静脈周囲に炎症を呈し、線維化を生じており、また、大滴性脂肪肝、肝細胞の風船様腫大を呈した。"