"iタバコ植物中において組み換えで生産されるインフルエンザのヘマグルチニンhemagglutininHA抗原、及びii脂質二重層を含む、合成的に生産されるビロソーム粒子であって、ここで前記脂質二重層が、前記脂質二重層に固定された少なくとも1つのビスアシルオキシプロピルシステイン複合体を含む、前記ビロソーム粒子。前記インフルエンザのヘマグルチニンHA抗原が、前記ビロソーム粒子の脂質二重層中に存在する、請求項1に記載のビロソーム粒子。前記ビスアシルオキシプロピルシステイン複合体が、MALP-2、ペグ化ビスアシルオキシプロピルシステイン、及び4-ARM-ビスアシルオキシプロピルシステインからなる群から選択され、特にBPP-Glyc-Cys-4-arm-PEGである、請求項1又は2に記載のビロソーム粒子。前記ビスアシルオキシプロピルシステイン複合体が、MALP-2及びS-[2,3-ビスアシルオキシ-2R-プロピル]-L-システイニル-カルボキシポリエチレングリコールからなる群から選択される、請求項3に記載のビロソーム粒子。前記ビスアシルオキシプロピルシステイン複合体が、S-[2,3-ビスパルミトイルオキシ-2R-プロピル]-L-システイニル-カルボキシポリエチレングリコールである、請求項4に記載のビロソーム粒子。適切な薬理学的に許容される物質希釈剤と場合により組み合わされる、請求項1~5のいずれか1項に記載のビロソーム粒子を含む、ワクチン。適切な薬理学的に許容される物質アジュバントと組み合わされる、請求項6に記載のワクチン。経鼻投与用の、請求項6又は7に記載のワクチン。ビロソーム粒子の生産方法であって、以下のステップ:a植物中において組み換えでインフルエンザのヘマグルチニンHA抗原を生産し;b少なくとも1つのビスアシルオキシプロピルシステイン複合体を含む、リン脂質混合物を生産し;そしてc前記ウィルス抗原を前記リン脂質混合物と共に再構成して前記ビロソーム粒子を生産することを含む、前記生産方法。請求項1~5のいずれか1項に記載のビロソーム粒子、請求項6~8のいずれか1項に記載のワクチン、又は請求項9に記載の方法によって生産されるビロソーム粒子の、インフルエンザの予防のための使用。請求項1~5のいずれか1項に記載のビロソーム粒子、請求項6~8のいずれか1項に記載のワクチン、又は請求項9に記載の方法によって生産されるビロソーム粒子を、それを必要とする患者へ適切な用量で投与することを含む、請求項10に記載の使用。本発明の一態様は、i植物中において組み換えで生産されるウィルス抗原、及びii脂質二重層を含むビロソーム粒子に関し、ここで前記脂質二重層は、次の特徴の少なくとも1つにより特徴づけられる:a脂質二重層に固定された少なくとも1つのビスアシルオキシプロピルシステイン複合体;b脂質二重層に固定された植物ステロールが存在しないこと;c脂質二重層に固定された少なくとも1つの動物ステロール;d前記ウィルスの宿主細胞の細胞膜で見られるものと同じ、脂質二重層の細胞膜組成;e脂質二重層に固定された植物由来のスフィンゴ脂質が存在しないこと。用語ビロソーム粒子virosomeparticleとは、本明細書において使用される場合、リン脂質の混合物を含む脂質二重層を有する粒子のことであり、したがってそれは、本質的に再構成された機能性ウィルスエンベロープに類似する。特定の実施形態において、当該脂質二重層は、ユニラメラ二重層unilamellarbilayerの形で存在する。用語ウィルス抗原virusantigenとは、本明細書において使用される場合、抗体の生成を促進し、免疫応答を引き起こすことができる全てのウィルス抗原であり得る。1つの実施形態において、そのようなウィルス抗原は、オルトミクソウィルス科Orthomyxoviridaeに由来する抗原である。特定のかかる実施形態において、抗原はインフルエンザ由来の抗原であり、いくつかの実施形態において、インフルエンザA、B又はC由来の抗原である。いくつかの実施形態において、抗原はインフルエンザ糖タンパク質から選択される。いくつかの実施形態において、インフルエンザ抗原は、ヘマグルチニンHA、ノイラミダーゼNA、核タンパク質NP、M1-タンパク質、M2-タンパク質、NS1-タンパク質、NS2NEP-タンパク質、PA-タンパク質、PB1-タンパク質、FB1-F2-タンパク質及びPB2-タンパク質から成る群の1又は2以上のメンバーから選択される。特定の実施形態において、ウィルス抗原はヘマグルチニンHAである。さらなる実施形態において、インフルエンザヘマグルチニンは、H1、H2、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H9、H10、H11、H12、H13、H14、H15及びH16から成る群から選択され、特にH1である。さらなる実施形態において、そのようなウィルス抗原の挿入又は付加変異体すなわち、欠失され、挿入され、又は付加されたアミノ酸又はアミノ酸配列を有するタンパク質が包含される。また、キメラすなわち、異なった起源の融合タンパク質又はタンパク質複合体、化学的に修飾されたタンパク質例えば、ペグ化タンパク質及び修飾されたタンパク質例えば、追加の非天然アミノ酸が包含される。1つの実施形態において、植物由来の抗原は、インフルエンザヘマグルチニンに由来する。さらなる実施形態において、ウィルス抗原は、H1、H2、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H9、H10、H11、H12、H13、H14、H15及びH16からなる群から選択されるインフルエンザヘマグルチニンに由来し、特にH1に由来する。特定の実施形態において、ウィルス抗原、例えばヘマグルチニンHAは、膜貫通領域又はその誘導体を含む。本発明の特定の実施形態において、ウィルス抗原はビロソーム粒子の脂質二重層中に位置する。特定の実施形態において、ヘマグルチニンHAは、生物学的に活性である。用語生物学的に活性biologicallyactiveとは、本明細書において使用される場合、実質的に生来のHAの完全な生物学的活性を示し、したがって、標的細胞へのシアル酸含有受容体経由での、本発明のビロソーム粒子の吸着を媒介することができる、HA又は誘導体に関する。さらに、そのようなHA成分は、循環する抗インフルエンザ抗体により認識され得る。この生物学的活性は、本発明のビロソーム粒子の必須の特徴である。理論には縛られないが、本発明のビロソーム粒子のHA成分の機能は次のように説明され得る:1それは、標的細胞上のシアル酸N-アセチルノイラミン含有受容体に結合し、ビロソーム粒子-細胞相互作用を引き起こし;2それは、膜融合現象により細胞質中へのビロソーム粒子の侵入を媒介し、最終的にその放出を導き;そして3大部分のヒトは、疾病又はワクチン接種を通しての事前の曝露によって、HAで予備刺激されるprimedと考えられ得るため、認識抗原recognitionantigenとして機能する。したがって、そのようなビロソーム粒子の本質的特徴は、それらの表面上に生物学的に活性であるウィルス糖タンパク質HA又はその誘導体を担持し、HA抗原が非特異的に分解され得る内細胞質体endocytosome中において、HA抗原の望ましくない長期の滞在を回避することである。抗原がマクロファージ及び他の補助細胞に受け入れられるべきであるという事実は非常に重要である。この目的のために、ビロソーム粒子の微粒子の性質は有利である。それが微生物の微粒子体を模倣するからである。さらにすべての人間は、以前のインフルエンザ感染又はワクチン接種のいずれか由来のインフルエンザ抗原HAに対する抗体を有するので、抗体-抗原複合体免疫複合体は速やかに形成される。しかしながら、これらの免疫複合体は、マクロファージ中へのみならず、リンパ濾胞この中で、抗原は濾胞樹状細胞の表面上の細胞外位置に長期保持される中への認識された抗原の侵入を促進する。かかる長期細胞外提示はもちろん、その多機能免疫刺激効果免疫原性のために、ワクチンの好ましい特徴である。マクロファージ及びリンパ濾胞のこの侵入工程は、オプソニン作用と呼ばれている。さらに、抗体による結合は、抗原の免疫原性のための別の結果を有する。溶液中、所定の抗原Aは、それらの表面上で抗A特異性の抗体分子を示すB細胞に単に結合するが、免疫複合体はFc受容体を介して任意のB細胞に付着することができる。リンパ節のB細胞領域へ侵入する、求心性リンパ管中のB細胞の能力のために、Fc受容体を介してのこの非特異的結合はおそらく、自然感染における1つの経路であり、それにより、前記抗原はリンパ濾胞に、そしてリンパ組織の他の部分に輸送されるNossalGJVNewGenerationVaccinesMarcelDekkerInc85。この機構は単球による輸送に付随するであろう。したがって、ビロソーム粒子の表面上におけるインフルエンザ抗原の存在は、オプソニン作用の免疫学的機構を支持する。1つの実施形態において、本発明のビロソーム粒子は、植物において550個のアミノ酸の単一ポリペプチド鎖として合成される完全HAを含む。前記鎖はその後、アルギニン329HA[インフルエンザAウィルスA/TW/36/04H3N2]、GenBank:ABD59855.1のアルギニン345に対応するの除去により、2本の鎖HA136,334ダルトン及びHA225,750ダルトンに切断される。これらの鎖は、HA1の位置14のシステインと、HA2の位置137のシステインを含むジスルフィド結合により場合により共有結合され、そして当該二本鎖モノマーは非共有結合され、IRIVの表面上で三量体を形成する。これらのHA1又はHA2ペプチドは、天然から又は合成源から、又は遺伝子工学により得られる。さらに、大量の純粋タンパク質抗原の突然の適用は、特に静脈内経路が使用される場合、免疫応答におけるサプレッサー経路の活性化の危険性を包含するNossalGJVNewGenerationVaccinesMarcelDekkerIncNewYorkBasle85を参照のこと。他方では、徐放により、広く拡散された樹状細胞及びマクロファージへの抗原の広範なアクセスが可能となり、そしてそれはまた、クローン増殖の初期出現の後、まだ利用可能であることを保証し、それにより、二次応答のいくらかの面を可能にする。したがって、ビロソーム粒子により示される抗原の徐放は、ワクチンの別の好ましい特徴である。用語植物中において組み換えで生産されるproducedrecombinantlyinplantsとは、本明細書において使用される場合、植物宿主での発現による、糖化タンパク質を包含するタンパク質の組み換えでの生産のことである。本発明において、用語植物宿主planthostとは、異種タンパク質の組み換え発現のために適切である、任意の植物のことである。特定の実施形態において、植物発現宿主は、タバコ植物、特にニコチアナベンタミアナNicotianabentamianaである。本発明の特定の実施形態において、植物中において組み換えで生産されるウィルス抗原は、植物発現宿主特有の炭水化物プロフィールを有する。植物において完全なウィルス様粒子virus-likeparticleVLPを生産する従来技術に反して、ウィルス抗原例えば、HAタンパク質のみが植物において生産され、そして精製される。その後、植物中で生産されなかったリン脂質の混合物と共に、当該抗原は再構成される。前述のように、従来技術の方法は通常、植物において完全なVLPを生産する。すなわち、抗原及びリン脂質混合物並びにタンパク質は植物由来である。その後、VLPは植物生産物から単離され、そして自発的凝集により形成される。そのような一段階one-stepの手法は、単純であるという利点を有するが、いくつかの欠点を有する。第一に、当該手法によって、汚染のないVLPを生産することは実質的に不可能である。しかしながら、植物物質による汚染は、アレルギー又は他の有害な身体反応の危険な原因である。したがって、そのようなVLP含有ワクチンについて医薬品承認を得ることは困難である。第二に、自発的凝集及び粒子形成のために、任意の追加のプロセス制御を行うことができない。これは、サイズ及び組成の不均一な粒子をもたらす。第三に、VLPの一部となるアジュバントと一緒に製剤化することができない。代わりに、アジュバントは、粒子形成が行われた後に添加され得るのみである。本発明は、これらの欠点のすべてを克服する。第一に、それは非常に純粋なビロソーム粒子をもたらすという利点を有する。ウィルス抗原例えば、HAタンパク質のみが植物において生産され、一方でリン脂質及び粒子の他の成分は、非植物源からの化学的又は生化学的手段により生産されるからである。驚くべきことに、本発明の純粋なビロソーム粒子は、従来技術のVLPに比較して、増強された免疫原性を示す。理論に縛られるものではないが、純粋なビロソーム粒子は、植物糖脂質を含まず、そしてより天然のnativeビロソームの構造に類似するため、抗原例えば、HAタンパク質の重要なエピトープがマスクされず、したがって本発明のビロソーム粒子は、より強力な免疫応答を誘発できると考えられる。第二に、ウィルス抗原例えば、HAタンパク質へのリン脂質及び他の成分の制御された添加により、粒子組成の制御が可能となる。それは、粒子のサイズ及びそれらの組成が正確に管理され、そして個々の要求に応じて調節され得ることを意味する。さらに、免疫原性が、粒子の組成を微調整することにより改善され得る。用語リン脂質の混合物mixtureofphospholipidsとは、本明細書において使用される場合、天然又は合成のリン脂質又はそれらの混合物を含む。少なくとも、それは、ホスファチジルコリン又はホスファチジルエタノールアミンのようなグリセロリン脂質、及びコレステロールからなる群から選択される1又は2以上の化合物を含み、特にホスファチジルコリン及び/又はホスファチジルエタールアミンを含む。粒子の制御された凝集により、粒子自体の脂質二重層中へのアジュバントの組込みすなわち、埋包embedding又は固定anchoringが可能となる。免疫原性を増強するために、いくつかの実施形態において、前記脂質二重層は、少なくとも1つのビスアシルオキシプロピルシステイン複合体を含む。当該複合体は、脂質二重層中に固定されており、その結果、ワクチン接種の準備ができている安定した粒子をもたらす。ビロソーム粒子の脂質二重層中にビスアシルオキシプロピルシステイン複合体を組込む利点は、ビロソーム粒子表面、抗原分布及びアジュバント分布間の理想的割合が安定して維持され得ることである。本発明において、用語ビスアシルオキシプロピルシステイン複合体bisacyloxypropylcysteineconjugateとは、一般式I:[式中、R1及びR2は、アルキル又はアルケニル基から独立して選択され、それらは、それらが結合している-C=O-基と一緒になってアシル基、例えばパルミトイル基を形成し;Yは、-O-、-NH-、-S-及び-O-CO-から選択され、特に-NH-であり;そしてR3は、脂質二重層中への組込みのために適切なポリマー部位、特にポリペプチド、又は下記一般式:{式中、mは、5~700、特に100~500から選択される整数であり;Xは、-O-R4、-NR42、-S-R4及び-COOR4から選択され、ここでR4は、-H、-ベンジル、C16アルキルから選択され、そして-NR42において、2つの残基R4は同一であっても又は異なっていても良い}で表されるポリエチレングリコール部位である]で表される分子のことである。追加の実施形態において、ビロソーム粒子は、下記式II:[式中、-R1及びR2は、同一であっても又は異なっていても良く、それらが結合する-OC-部位と一緒になってアシル部位を形成し;-Lは、NH、O、S及びOCOからなる群から選択されるリンカー部位であり;-R3は、下記式:{式中、-X1は、水素又は炭化水素であり、当該炭化水素は1又は2以上のヘテロ原子を含んでもよく;-R4は、独立して、水素、OH、R5、OR5又はCO-R6のいずれか1つであり;-R5は、独立して、水素又はC1-C6アルキルのいずれか1つであり;-R6は、独立して、水素、OH、OR5又はNR7R8のいずれか1つであり;-R7及びR8は、独立して、水素又は炭化水素のいずれか1つであり、前記炭化水素は1又は2以上のヘテロ原子を含み、そして環を形成してもよく、-nは、1~100の整数であり;-xは、独立して1~10の整数であり;-yは、0~10の整数である}で表される、同一であっても又は異なっていても良い、少なくとも2つのポリアルキレングリコール単位を含む、共有結合された複合体である]で表されるビスアシルオキシプロピルシステイン複合体を含む。したがって、本発明のいくつかの実施形態において、新規ビロソーム粒子は、MALP-2例えば、国際公開第98/27110号及び第2003/084568号を参照のこと、ペグ化ビスアシルオキシプロピルシステイン例えば、国際公開第2004/009125号を参照のこと、4-ARM-ビスアシルオキシプロピルシステイン特に、BPP-Glyc-Cys-4-arm-PEG;例えば国際公開第2007/059931号を参照のこと及び他のビスアシルオキシプロピルシステイン複合体を包含する群から選択される、少なくとも1つのビスアシルオキシプロピルシステイン複合体を含み、特にMALP-2及びS-[2,3-ビスアシルオキシ-2R-プロピル]-L-システイニル-カルボキシポリエチレングリコールを含む群から選択される、少なくとも1つのビスアシルオキシプロピルシステイン複合体を含み、特にS-[2、3-ビスパルミトイルオキシ-2R-プロピル]-L-システイニル-カルボキシポリエチレングリコールを含む。MALP-2分子及びそのビスアシルオキシプロピルシステイン複合体、例えばビスパルミトイルオキシプロピルシステイン-PEG分子は、マクロファージに対する強力な刺激剤として知られている。アジュバントとしてのMALP-2の有用性はこれまで示されている例えば、国際公開第98/27110号及び第2003/084568号を参照のこと。アジュバントとしてのビスパルミトイルオキシプロピルシステイン-PEG分子の有用性はこれまで示されている例えば、国際公開第2004/009125号を参照のこと。特に、MALP-2及びビスパルミトイルオキシプロピルシステイン-PEG分子は、粘膜免疫応答を増強する例えば抗原-特異的IgA抗体の増強された発現を促進する効果的粘膜アジュバントとして作用し得ることが実証された。さらに、MALP-2は、樹状細胞及びB-細胞両細胞は特定の体液性免疫応答の誘導に重要な役割を果たすを活性化できることが示された。したがって、1つの実施形態において、ビロソーム粒子は経鼻intranasal投与用である。用語植物ステロールphytosterolとは、植物由来のステロールのことである。植物ステロールが、特に感受性個体においてアテローム硬化症を促進し得るいくつかの証拠が存在する。したがって、さらなる実施形態において、前記脂質二重層は植物ステロールを含まない。本発明のビロソーム粒子の脂質二重層は、カンペステロールcampesterol、シトステロールsitosterol及びスチグマステロールstigmasterolを特に有さない。用語動物ステロールzoosterolとは、動物由来のステロール、例えばコレステロールのことである。コレステロールは、哺乳類細胞膜の必須成分であり、それは、適切な膜透過性及び流動性を確立するために必要とされる。したがって、別の実施形態において、脂質二重層は、少なくとも1つの動物ステロール、例えばコレステロールを含んでもよい。用語前記ウィルスの宿主細胞の細胞膜で見られるものと同じ、脂質二重層の細胞膜組成thesameplasmamembranecompositionofthelipidbilayerasitisfoundintheplasmamembraneofhostcellsforsaidvirusとは、本明細書において使用される場合、異なる界動物界、植物界、菌界、原生生物界、古細菌において、それらの細胞膜組成は異なるという事実に関する。さらに、タンパク質機能及び特定のエピトープの免疫認識は、特定の脂質二重層組成により影響され得るという示唆が存在する。脂質二重層の物理学的特性すなわち、流動性、極性、浸透性、安定性等は、それらの組成にかなり依存するからである。したがって、いくつかの実施形態において、本発明のビロソーム粒子の特定の脂質二重層組成は、動物又はヒト脂質二重層の組成に類似する。いくつかの実施形態において、膜組成は、天然のインフルエンザビロソームの膜組成に類似するか又は同じである。スフィンゴ脂質sphingolipidsとは、本明細書において使用される場合、脂肪族アミノアルコールスフィンゴシンに由来する脂質の一種のことであり、スフィンゴ糖脂質を含む。これらの化合物は、シグナル伝達及び細胞認識において重要な役割を果たす。植物由来のスフィンゴ脂質は、植物細胞の細胞膜、液胞膜及び他の内膜の主要成分である。植物由来のスフィンゴ脂質と宿主免疫系との間の望ましくない交差反応を排除するために、いくつかの実施形態において、脂質二重層は植物由来のスフィンゴ脂質を含まない。特定の複雑な哺乳類スフィンゴ糖脂質は、特定の機能、例えば細胞認識及びシグナル伝達に関与することが見出された。前記シグナル伝達は、隣接する細胞上に存在する類似する脂質と、又はタンパク質と、スフィンゴ糖脂質のグリコン構造体との特異的相互作用を包含する。したがって、いくつかの実施形態において、特定の哺乳類スフィンゴ脂質が、本発明のビロソーム粒子に存在してもよい。他の哺乳類スフィンゴ脂質は通常、機械的に安定であって、化学耐性のある、細胞膜脂質二重層の外層を形成することにより、有害な環境因子に対して細胞表面を保護すると考えられている。しかしながら、そのような保護表面は、免疫原性のために必要である、宿主免疫系へエピトープを曝露する機会を減じる。したがって、いくつかの実施形態において、本発明のビロソーム粒子の脂質二重層は、いずれのスフィンゴ脂質もまったく含まない。本発明のビロソーム粒子の上述の特徴すなわち、ビスアシルオキシプロピルシステイン複合体を含むこと、植物ステロールを含まないこと、いくつかの動物ステロールを含むこと、特定の膜組成を有すること、及び/又は特定のスフィンゴ脂質を含むことは、状況、ワクチン接種されるべき疾患、及び使用される抗原にしたがって、当業者によって組み合わされてもよい。すなわち、例えば高免疫原性の抗原はホスファチジルコリン脂質二重層を含むビロソーム粒子において単に再構成され得るが、一方で低免疫原性の抗原はビスアシルオキシプロピルシステイン複合体、動物ステロール又は特定のスフィンゴ脂質のような免疫原性増強物質と共に再構成され得る。ほとんどの実施形態において、植物由来の物質は、本発明のビロソーム粒子に存在すべきではなく、したがって植物ステロール及び植物由来のスフィンゴ脂質は回避されるべきである。本発明の特定の実施形態において、ビロソーム粒子は合成的に生産される。したがって、特定の実施形態において、本発明は、iタバコ植物中において組み換えで生産されるインフルエンザのヘマグルチニンHA抗原、及びii脂質二重層を含む、合成的に生産されるビロソーム粒子に関し、ここで前記脂質二重層は、前記脂質二重層に固定された少なくとも1つのビスアシルオキシプロピルシステイン複合体を含む。特定の実施形態において、ビロソーム粒子は、1又は2以上の追加のアジュバント限定されないが、リポ多糖類を含むをさらに含む。本発明において、用語リポ多糖類lipopolysaccharidesとは、リポグリカンとしても知られる分子のことであり、共有結合でつながった脂質及び多糖からなる大分子であり;それらは、グラム陰性細菌の外膜に見出され、エンドトキシンとして作用し、そして動物において強い免疫応答を誘発する。したがって、いくつかの実施形態において、脂質二重層ビロソーム粒子は、追加の免疫刺激剤としてLPSを含んでもよい。LPSは、本発明により想定される場合、次の3種の部分を含む:1.O抗原又はO多糖2.コア-オリゴ糖3.リピドALipidA。リピドAは通常、複数の脂肪酸が取り付けられた、リン酸化グルコサミン二糖である。これらの疎水性脂肪酸鎖は、LPSを細菌の膜へと固定化し、そしてLPSの残りの部分は細胞表面から突き出ている。リピドAドメインは、グラム陰性細菌の多くの毒性に関与する。細菌細胞が免疫系により溶解されると、リピドA含有膜の断片が循環中に放出され、発熱、下痢及び可能性のある致命的な内毒素ショックまた、敗血症性ショックとも呼ばれるを引き起こす。コアオリゴ糖は、リピドAに直接結合し、そして通常、糖、例えばヘプトース及び3-デオキシ-D-マンノオクツロソン酸mannooctulosonicacidまた、KDO、ケトデオキシオクツロソネートketo-deoxyoctulosonateとしても知られているを含む。LPSが反復性グリカンポリマーを含む場合、これは、O抗原、O多糖又は細菌のO鎖と呼ばれる。O抗原は、コアオリゴ糖と結合し、そしてLPS分子の最も外側のドメインを含む。O鎖の組成は株ごとに変化し、例えば、異なるE.コリ株により生産される160個以上の異なるO抗原構造体が存在する。O抗原は、細菌細胞の最外面上に曝露され、そして結果的に、宿主抗体による認識のための標的である。本発明の追加の態様において、本発明は、本発明のビロソーム粒子を含むワクチンに関し、それは場合により、薬理学的に許容される適切な物質希釈剤と組み合わせられる。本発明のビロソーム粒子は、有効なワクチン例えば、インフルエンザワクチンにおける強力な活性成分として使用され得、それは所望の抗原例えば、HAタンパク質を、APC、例えばマクロファージ、DC、B細胞へと能動的に輸送する。当該APCは、前記抗原を免疫系に提示し、強力で防御性のある免疫応答を誘導する。特定の実施形態において、ワクチンは薬理学的に許容される適切な物質アジュバントsubstanceadjuvantと組み合わされる。特定の他のかかる実施形態において、薬理学的に許容される適切な物質アジュバントは、ビロソーム粒子と一緒に製剤化される。特定のかかる実施形態において、薬理学的に許容される適切な物質アジュバントは、ビロソーム粒子に添加される。用語物質アジュバントsubstanceadjuvantとは、本明細書において使用される場合、活性抗原に対する体液性及び/又は細胞介在性細胞性免疫応答を増強するか、誘発するか、又は調節するために、活性抗原と一緒に製剤化される物質、及び/又は免疫付与時に活性抗原へ添加される物質、すなわち、所望する免疫応答を引き起こす物質を意味する。特に、本発明のアジュバントはまた、先天性免疫応答を増強するか又は誘発することができる。新規ビロソーム粒子の免疫原性をさらに増強するために、広範囲の従来のアジュバントが使用され得る。最も有効な方法例えば、フロイントFreund完全アジュバントと一緒に免疫原を投与する方法は、以下の節において説明される多くの別の原理を組み合わせる:A化学的免疫強化Chemicalimmunopotentiation:死滅させたマイコバクテリウムツベルクローシスMycobacteriumtuberculosis菌又は有毒な微生物抽出物、例えばE.コリLPSにより達成され得る、全免疫応答の強化を模倣する、純粋、安全、且つ効果的な非毒性有機小分子の研究には、長い研究の歴史が根底にある。Bインターロイキンとの同時投与:例えば、IL-2と抗原との同時投与が、抗原及びインターロイキンの別々の投与よりも強い免疫応答の増強をもたらすいくつかの証拠が存在するStaruchMJandWoodDDJImmunol1302191を参照のこと。C高い免疫原性剤と抗原との同時表示:特定のワクチンが高度に免疫原性である場合、このワクチンのアジュバント効果、及びそれが特定の免疫学的経路への応答を誘導するために有し得る特徴は、それと同時投与される抗原に対する応答に波及するspilloverことができる。例えば、死滅させた百日咳菌Bordetellapertussis又はコリネバクテリウムパルバムCorynebacteriumparvum菌は、強力な免疫原である。純粋なタンパク質が同じ注射で投与される場合、それに対する応答は増強される。理由が不明である特定の免疫原は、特定の方向にその応答を誘導する。例えば、寄生虫、例えばニポストロンジラスブラシリエンシスNippostrongylusbrasiliensisの抽出物は、強力なIgE応答を誘発する。寄生虫抽出物と同時投与される純粋なタンパク質はまた、IgE応答を引き起こすであろうNossalGJVNewGenerationVaccinesMarcelDekkerIncNewYorkBasle85を参照のこと。おそらくこの効果は、特定の薬剤により誘発される特定のリンホカインの生産に幾分関連する。前記リンホカイン、例えばIL-4は、イソタイプスイッチパターンisotypeswitchpatternsを誘導する。リンホカインのポリクローナル活性化特性はまた、一般的に免疫応答の増強のための基礎を形成することができる。D疎水性アンカー及び免疫刺激複合体:免疫刺激複合体における界面活性剤、例えばサポニン又はQuilAは、多くの実験用及び動物用ワクチンに使用されてきた。それらは、いくつかの抗原、特にウィルス膜タンパク質の免疫原性を改善した。特定の実施形態において、物質アジュバントは、ビスアシルオキシプロピルシステイン複合体及びLPSからなる群から選択される。特定の実施形態において、ビロソーム粒子含有ワクチンは経鼻投与用である。本発明のさらに別の態様は、ビロソーム粒子の生産方法であって、以下のステップ:a植物中において組み換えでウィルス抗原を生産し;b以下の特徴:i少なくとも1つのビスアシルオキシプロピルシステイン複合体;ii植物ステロールが存在しないこと;iii少なくとも1つの動物ステロール;iv前記ウィルスの宿主細胞の細胞膜で見られるものと同じ細胞膜組成;及び/又はvスフィンゴ脂質が存在しないことの少なくとも1つにより特徴づけられる、リン脂質の混合物を生産し;c前記インフルエンザウィルス抗原を前記リン脂質混合物と共に再構成し、前記ビロソーム粒子を形成することを含む、前記方法に関する。さらに別の態様において、本発明は、本発明のビロソーム粒子、本発明のワクチン、又は本発明の方法により生産されるビロソーム粒子の、感染性疾病の予防のための使用に関する。特定の実施形態において、本発明の使用は、適切な用量の本発明のビロソーム粒子、本発明のワクチン又は本発明の方法により生産されるビロソーム粒子を、それを必要とする患者に投与することを含む、感染性疾病の予防のための使用である。実施例は本発明を例示する。実施例1:ビロソーム粒子の調製:PBSに溶解されたニコチアナベンタミアナNicotianabentamianaから発現され、そして精製されたインフルエンザヘマグルチニンを、粉末状の卵由来の脂質レシチン、例えば卵ホスファチジルコリンと混合し、界面活性剤として100mMのOEGを含むPBSに溶解する。脂質:タンパク質の比率は、20:1~1:10の間で変化してもよい。本発明において、最適比率は6:1である。脂質:タンパク質の比率は、他の脂質合成又はステロイドタイプが使用されたとしも、変化することができる。脂質及びインフルエンザHAは、場合により超音波パルスに供される。その後、当該混合物を0.22mmフィルターに通し、そして界面活性剤を、SM-2Bio-Beadsの一連の異なる経路に通して除去する。界面活性剤の除去は、ビロソーム粒子集団中の溶解された構成成分混合物の自発的会合を駆動する。SM-2Bio-Beadsの最後の通過の後、ビロソーム粒子集団を再び、0.22mフィルターに通す。最終生産物は、正確な組成に応じて、平均直径80~150nmのサイズを有する均質ビロソーム粒子集団である。実施例2:ビロソーム粒子生成の代替的改良:脂質混合物、例えば卵由来のホスファチジルコリン及びホスファチジルエタノールアミンの粉末を、界面活性剤として100mMのOEGを含むPBSに溶解する。脂質比率は、20:1~1:10の間で変化し得る。本発明において、最適範囲は5:1である。脂質:タンパク質比率は、20:1~1:10の間で変化し得る。本発明において、最適比率は7:1である。脂質タンパク質比率は、他の脂質合成又はステロイドタイプが使用されるか、又は異なる脂質の組み合わせが使用される場合、さらに変化し得る。脂質及びインフルエンザHAは、場合により超音波パルスに供され得る。その後、PBSに溶解された、ニコチアナベンダミアナから発現され、そして精製されたインフルエンザヘマグルチニンを前記溶液と混合する。脂質及びインフルエンザHAは、場合により超音波パルスに供することができる。その後、当該混合物を、0.22mmフィルターに通して、そして界面活性剤を、SM-2Bio-Beadsへの一連の異なる経路に通して除去する。最後の段階において、界面活性剤を、SM-2Bio-Beadsを用いるバッチクロマトグラフィーにより除去する。前記除去は、正確な組成に応じて、平均直径80~150nmのビロソーム粒子の均質な集団中の構成成分の自発的会合を駆動する。脂質及びタンパク質を溶解するために、選択される界面活性剤は、50mMの最終濃度である、OEGのPBS液である。しかしながら、20~100mMの濃度が使用されてもよい。非イオン性、イオン性又は両性イオン性の、OEG以外の界面活性剤が使用されてもよい。実施例3:ショ糖グラジエント及び銀染色:ショ糖グラジエント:不連続ショ糖グラジエントかけた超遠心分離を、個々の構成成分の固有濃度に基づく、ビロソーム粒子中への抗原の組み込みを評価するための分析方法として適用した。PBS中のビロソーム粒子製剤のアリコートを、PBS中、10~60w/v不連続ショ糖グラジエントの上部に適用し、そして100,000gで4°Cにて24時間、遠心分離した。その後集められた画分を、密度に関して分析し、その後SDSPAGE及び銀染色を行い、HA含有画分を決定した。銀染色:SDSPAGEを、供給者の指示Invitrogenに従って実施した。ゲルの銀染色を、供給者の指示Bio-Radに従って実施した。実施例4:粒度測定:光子相関分光法:出発材料として植物系から精製されたHA、及び製剤化されたビロソーム粒子の流体力学直径、多分散指数及び統計学的粒子サイズ分布を、光子相関分光法又は動的光散乱により決定した。この方法は、経時的な光散乱の変動として測定されるブラウン運動のサイズ依存性速度に依存する。生データ、すなわち光強度の変化からのパラメーター計算のためのソフトウェアを含む、MalvernZetasizerNanoがこの目的のために使用された。測定用にサンプルを0.9NaClで適切に希釈し、そしてその希釈溶液1mlを、25°Cにて標準条件下で分析した。図3は、実施例1に従って生産されたビロソーム粒子の分析を示す。実施例5:マウスにおけるビロソーム粒子の免疫原性:ワクチン:遊離の植物由来HA抗原を有する、実施例1に従って調製された2種の異なるビロソーム粒子製剤の比較:前記製剤の免疫原性を、マウスモデルにおいて試験した。遊離抗原と比較して、ビロソーム粒子製剤を用いて実験を実施した。0日目及び7日目における2回の筋肉内注射によってマウスを免疫化した。2回目の免疫化から3週間後、採血し、そして血清抗体を分析した。幾何平均抗体力価として表現される結果を図4に要約する。縦列の数字は、抗HA抗体力価の範囲を表す。28日目での遊離抗原及びビロソーム粒子ワクチン製剤についての幾何平均抗体力価範囲は、それぞれ1393800~3200及び36763200~6400であった。したがって、本発明のビロソーム粒子調製物は、遊離抗原ワクチンよりもすぐれている。"