"下記の式で表される化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物。式中、R1、R2及びR3は、それぞれ、独立に、水素原子又は酸性若しくは塩基性置換基を有するアシル基であるが、但し、R1、R2及びR3のすべてが水素原子であることはない酸性若しくは塩基性置換基を有するアシル基が、次式:B-CH2n-CO-式中、nは1~4の整数であり、Bは酸性若しくは塩基性置換基である。で表される基である請求項1記載の化合物。酸性若しくは塩基性置換基が、アルキル基で置換されていてもよいアミノ基、カルボキシル基又はヒドロキシカルバモイル基である請求項1又は2記載の化合物。下記のいずれかの式で表される請求項1~3のいずれかに記載の化合物。請求項1~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物を含むアデニル酸シクラーゼ活性調節剤。アデニル酸シクラーゼが心臓型アデニル酸シクラーゼである請求項5記載の薬剤。請求項1~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物を含む医薬組成物。ベータ遮断剤の適応症の予防及び又は治療に用いられる請求項7記載の医薬組成物。ベータ遮断剤の適応症が、心不全、心筋梗塞、不整脈、狭心症、高血圧症及びそれらに関連する病態および疾患から成る群より選択される請求項8記載の医薬組成物。請求項1~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物を含む食品組成物。アンチエイジングおよび長寿、それに関連する疾患および病態の予防又は健康維持のために用いられる請求項10記載の食品組成物。請求項1~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物の医薬的に有効な量を被験者に投与することを含む、ベータ遮断剤の適応症を予防及び又は治療する方法。ベータ遮断剤の適応症の予防及び又は治療のための請求項1~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物の使用。ベータ遮断剤の適応症を予防及び又は治療する方法に使用するための請求項1~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物。請求項1~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物の有効量を被験者に投与することを含む、アンチエイジングおよび長寿、それに関連する疾患および病態の予防又は健康維持方法。アンチエイジングおよび長寿、それに関連する疾患および病態の予防又は健康維持のための請求項1~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物の使用。アンチエイジングおよび長寿、それに関連する疾患および病態の予防又は健康維持方法に使用するための請求項1~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物。本発明は、これまでに公表されていない新規化合物で、心臓型アデニル酸シクラーゼを阻害できるものを提供することを目的とする。本発明者らは、既知の心臓型アデニル酸シクラーゼ阻害剤であるビダラビンから複数の誘導体を合成し、心臓型に対する抑制作用と、心不全予防効果を検討した。心不全予防効果に関しては、マウスモデルで実際に心不全を作製し、それに心臓型アデニル酸シクラーゼ阻害剤を投与した群における治療効果を比較検討した。その結果、心臓型アデニル酸シクラーゼを阻害する効果がある新規化合物を見出し、本発明を完成させるに至った。本発明の要旨は以下の通りである。1下記の式で表される化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物。式中、R1、R2及びR3は、それぞれ、独立に、水素原子又は酸性若しくは塩基性置換基を有するアシル基であるが、但し、R1、R2及びR3のすべてが水素原子であることはない2酸性若しくは塩基性置換基を有するアシル基が、次式:B-CH2n-CO-式中、nは1~4の整数であり、Bは酸性若しくは塩基性置換基である。で表される基である1記載の化合物。3酸性若しくは塩基性置換基が、アルキル基で置換されていてもよいアミノ基、カルボキシル基又はヒドロキシカルバモイル基である1又は2記載の化合物。4下記のいずれかの式で表される1~3のいずれかに記載の化合物。51~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物を含むアデニル酸シクラーゼ活性調節剤。6アデニル酸シクラーゼが心臓型アデニル酸シクラーゼである5記載の薬剤。71~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物を含む医薬組成物。8ベータ遮断剤の適応症の予防及び又は治療に用いられる7記載の医薬組成物。9ベータ遮断剤の適応症が、心不全、心筋梗塞、不整脈、狭心症、高血圧症及びそれらに関連する病態および疾患から成る群より選択される8記載の医薬組成物。101~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物を含む食品組成物。11アンチエイジングおよび長寿、それに関連する疾患および病態の予防又は健康維持のために用いられる10記載の食品組成物。121~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物の医薬的に有効な量を被験者に投与することを含む、ベータ遮断剤の適応症を予防及び又は治療する方法。13ベータ遮断剤の適応症の予防及び又は治療のための1~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物の使用。14ベータ遮断剤の適応症を予防及び又は治療する方法に使用するための1~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物。151~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物の有効量を被験者に投与することを含む、アンチエイジングおよび長寿、それに関連する疾患および病態の予防又は健康維持方法。16アンチエイジングおよび長寿、それに関連する疾患および病態の予防又は健康維持のための1~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物の使用。17アンチエイジングおよび長寿、それに関連する疾患および病態の予防又は健康維持方法に使用するための1~4のいずれかに記載の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物。ビダラビンは心臓型アデニル酸シクラーゼに対する阻害効果を持つが、水溶性が少ないため、体内分布として中枢組織への移行が多い。そのため中枢に対する副作用をしめす。本発明の新規化合物は水溶性がきわめて高いため、中枢への移行が極めて少なく、心臓に対する治療効果が高く得られると考えられる。本発明の新規化合物は、心臓型アデニル酸シクラーゼの活性阻害剤として有効である。本発明の新規化合物は、例えば、心不全、心筋梗塞、不整脈の治療薬として利用することができる。本明細書は、本願の優先権の基礎である日本国特許出願、特願2010‐240301の明細書および/または図面に記載される内容を包含する。以下、本発明の実施の形態についてより詳細に説明する。本発明は、下記の式で表される化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物を提供する。式中、R1、R2及びR3は、それぞれ、独立に、水素原子又は酸性若しくは塩基性置換基を有するアシル基であるが、但し、R1、R2及びR3のすべてが水素原子であることはない本発明の化合物には立体異性体が存在しうるが、本発明はこれらの異性体すべてを包含する。例えば、光学活性体、ジアステレオマー、ラセミ体などはすべて本発明に含まれる。本発明の化合物において、酸性若しくは塩基性置換基を有するアシル基は、次式:B-CH2n-CO-式中、nは1~4の整数であり、Bは酸性若しくは塩基性置換基である。で表される基であるとよい。Bの酸性若しくは塩基性置換基は、アルキル基で置換されていてもよいアミノ基、カルボキシル基又はヒドロキシカルバモイル基であるとよい。アミノ基に置換されるアルキル基は、炭素数1から4個の直鎖状または分枝状のアルキル基、より好ましくは、メチル基、エチル基、ノルマルプロピル基、イソプロピル基、ノルマルブチル基、イソブチル基、sec-ブチル基、tert-ブチル基などを挙げることができるが、これらに限定されることはない。本発明の化合物としては、下記のいずれかの式で表される化合物を例示することができる。本発明の化合物は、以下の反応スキームに従って、製造することができる。文献OMahonyGSundgrenASvenssonSGrotliMTetrahedron20076369016908に記載の方法に従いビダラビンIIからジシロキサニリデン保護した化合物IIIを合成した。化合物IIIとN,N-ジメチルグリシンに脱水縮合剤DCCを作用させることにより良好な収率でエステル化体Vが得られる。最後にテトラブチルアンモニウムフルオリドを作用させて、ジシロキサニリデン基を脱保護することにより目的の2位置換体Iaが得られる。また、化合物IIIと無水コハク酸を作用させることによりエステル化体Vが得られる。このエステル化体Vを1-プロピルりん酸環状無水物で活性化し、ヒドロキシルアミン塩酸塩を作用させることによりヒドロキサム酸VIが合成できる。最後にそれぞれにテトラブチルアンモニウムフルオリドを作用させて、ジシロキサニリデン基を脱保護することにより目的の2位置換体Ib、Icがそれぞれ得られる。N,N-ジメチルグリシンの代わりに他の酸性又は塩基性基を有するカルボン酸を、無水コハク酸の代わりに他の無水カルボン酸を用いてもよい。文献ShenWKimJSKishPEZhangJMitchellSGentryBGBreitenbachJMDrachJCHilfingerJBioMedChemLett200919792796に記載の方法を参考にビダラビンIIからシリル保護した化合物VIIを合成した。化合物VIIとN,N-ジメチルグリシンに脱水縮合剤DCCを作用させることにより良好な収率でエステル化体VIIIが得られる。最後にテトラブチルアンモニウムフルオリドを作用させて、シリル基を脱保護することにより目的の3位置換体Idが得られる。また、化合物VIIと無水コハク酸を作用させることにより良好な収率でエステル化体IXが得られる。このエステル化体IXを1-プロピルりん酸環状無水物で活性化し、ヒドロキシルアミン塩酸塩を作用させることによりヒドロキサム酸Xが合成できる。最後にそれぞれにテトラブチルアンモニウムフルオリドを作用させて、シリル基を脱保護することにより目的の3位置換体Ie、Ifがそれぞれ得られる。N,N-ジメチルグリシンの代わりに他の酸性又は塩基性基を有するカルボン酸を、無水コハク酸の代わりに他の無水カルボン酸を用いてもよい。文献ShenWKimJSKishPEZhangJMitchellSGentryBGBreitenbachJMDrachJCHilfingerJBioMedChemLett200919792796に記載の方法を参考にビダラビンIIからジエステル化合物XIIIを合成した。化合物XIIIとN,N-ジメチルグリシンに脱水縮合剤DCCを作用させることにより良好な収率でトリエステル化体XIVが得られる。最後にヒドラジン水和物を作用させて、脱保護することにより目的の5位置換体Igが得られる。また、化合物XIIIと無水コハク酸を作用させることにより良好な収率でエステル化体XVが得られる。このエステル化体XVを1-プロピルりん酸環状無水物で活性化し、ヒドロキシルアミン塩酸塩を作用させることによりヒドロキサム酸XVIが合成できる。最後にそれぞれにヒドラジン水和物を作用させて、脱保護することにより目的の5位置換体Ih、Iiがそれぞれ得られる。N,N-ジメチルグリシンの代わりに他の酸性又は塩基性基を有するカルボン酸を、無水コハク酸の代わりに他の無水カルボン酸を用いてもよい。本発明の化合物の医薬的に許容される塩としては、ナトリウムリン酸塩、ナトリウム塩、カリウム塩、塩酸塩、硫酸塩などの塩を例示することができるが、これらに限定されない。本発明の化合物の医薬的に許容されるエステルとしては、エチレングリコールエステル、ジエチレングリコールエステル、トリエチレングリコールエステル、ポリエチレングリコールエステル、リン酸エステルなどのエステルを例示することができるが、これらに限定されない。本発明の化合物の医薬的に許容される溶媒和物としては、水、メタノール、エタノール、ジメチルホルムアミド、酢酸エチルなどとの溶媒和物を例示することができるが、これらに限定されない。本発明の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル及び溶媒和物は、アデニル酸シクラーゼ活性調節剤として利用することができる。また、本発明の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル及び溶媒和物は、ベータ遮断剤の適応症例えば、心不全、心筋梗塞、不整脈、狭心症、高血圧症、それらに関連する病態および疾患例えば、振戦、乗り物酔い、時差ボケ、睡眠障害、バセドウ病、食道胃静脈瘤、偏頭痛、パーキンソン病などの予防及びまたは治療に用いることができる。心不全及び又は心筋梗塞に関連する病態および疾患としては、不整脈、浮腫、息切れ、狭心症などを例示することができるが、これらに限定されない。従って、本発明は、上記の式で表される化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物を含むアデニル酸シクラーゼ活性調節剤を提供する。本発明の薬剤は、心臓型アデニル酸シクラーゼに対して特に効果的である。また、本発明は、上記の式で表される化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物を含む医薬組成物を提供する。本発明の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物が医薬として用いられる場合には、常法により製剤化した医薬製剤例えば、注射剤、カプセル剤、錠剤、散剤、顆粒剤などとして、ヒト又は動物などの被験者に投与することができる。例えば、有効成分の量に換算して、1日あたり約10~50mgkg体重、好ましくは1日あたり約10~15mgkg体重の投与量で、1回または数回に分けて経口又は非経口投与するとよいが、その投与量や投与回数は、症状、年齢、投与方法などにより適宜変更しうる。注射剤に製剤化する場合には、蒸留水、生理食塩水などの担体を用いるとよく、カプセル剤、錠剤、散剤、顆粒剤に製剤化する場合には、デンプン、乳糖、白糖、炭酸カルシウムなどの賦形剤、デンプンのり液、アラビアゴム、ゼラチン、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなどの結合剤、ステアリン酸マグネシウム、タルクなどの滑沢剤など、デンプン、寒天、結晶セルロース、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、アルギン酸ナトリウムなどの崩壊剤などを用いるとよい。製剤中の有効成分の含有率は、1~99重量の間で変動させることができる。例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤などの形態をとる場合には、有効成分を5~80重量含有させるのが好ましく、注射剤の場合には、有効成分を1~10重量含有させるのが好ましい。本発明の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル及び溶媒和物は、アンチエイジングおよび長寿、それに関連する疾患および病態例えば、骨粗しょう症、皮膚のシワなどの老化現象、酸化ストレス過多、臓器機能低下などの予防又は健康維持のために用いることもできる。その場合、本発明の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル及び溶媒和物は、清涼飲料などの飲料、飴、ガム、パンなどの食品、粉末スープ、ふりかけなどの粉末製品等の飲食品に添加したり、適宜、賦形剤、香料、色素などとともに丸剤、顆粒、錠剤、カプセル剤などに成型して、健康食品あるいは栄養補助食品として供給することができる。従って、本発明は、本発明の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物を含む食品組成物を提供する。食品組成物における本発明の化合物、その医薬的に許容される塩、エステル又は溶媒和物の配合量は、有効成分を0.1~50重量含有させるのが好ましい。以下、実施例に基づいて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。実施例1当教室の先行研究において、心臓型サブタイプの5型アデニル酸シクラーゼを欠損させた動物モデルが作製されたCircRes933643712003ProcNatlAcadSciUSA1009986902003Cell130247582007Circulation1161776832007。本動物モデルを解析したところ、カテコラミン刺激に対する応答は低下するが定常状態の心機能は低下しないこと、慢性圧負荷やカテコラミンストレスによる心機能低下を予防することが明らかとなったCircRes933643712003ProcNatlAcadSciUSA1009986902003Circulation1161776832007。これらのことは、5型サブタイプの選択的抑制は心機能を低下させずに心不全時に心臓保護的に働くことを示す。一方、長年抗ヘルペス剤として臨床で用いられてきた薬剤ビダラビンが5型サブタイプ選択的な抑制効果を示すことが明らかになり、心不全モデル実験でも当該薬剤による心筋保護的な作用が示されたJBiolChem27940938409452004。また、85万種類の薬剤を独自に開発したコンピュータモデルにて解析した結果、5型サブタイプ選択的な抑制剤が複数同定された。一方、5型サブタイプ欠損マウスの脳線条体組織では野生型マウスに比べてアデニル酸シクラーゼ活性が2割程度まで低下していたJBiolChem27816936169402003。すなわち、野生型線条体組織のアデニル酸シクラーゼ活性はその大部分が5型サブタイプによるものであることから、当該組織が5型サブタイプの活性を選択的に抑制する薬剤のスクリーニングに適していると考えられた。本研究では、アデニル酸シクラーゼ5型サブタイプ選択的な心不全治療薬を新たに開発することを最終的な目標としている。今回、ビダラビンをベースに高い親水性を付与した3種類の化合物を新規に合成し、以下に示す実験によりそれら化合物の5型サブタイプへの抑制効果を検討した。親水性をたかめることにより、中枢の一部線条体に発現する5型サブタイプに対する刺激性を抑えることができると考えられる。方法<ビダラビン誘導体>ビダラビンの2位、3位、5位にそれぞれジメチルアミノ酢酸基を導入した新規化合物を合成した。<2-O-ビダラビンの合成>東京化成工業製ビダラビンを文献OMahonyGSundgrenASvenssonSGrotliMTetrahedron20076369016908の方法に従って、ヒドロキシ基をジシロキサニリデン保護し、化合物IIIを調製した。化合物III510mgとN,N-ジメチルグリシン113mgをジクロロメタン5mLに溶解し、ジシクロヘキシルカルボジイミドDCC248mgを加え、室温で6時間撹拌した。反応液に水を加え、ジクロロメタンを使って3回抽出操作を行い、抽出した有機層に硫酸ナトリウムを加えて乾燥した。ろ過をして、ろ液を濃縮し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィージクロロメタン/メタノール191にて精製し、化合物IV488mgを得た。この様にして得た化合物IVをテトラヒドロフラン5mLに溶解させ、テトラブチルアンモニウムフルオリド18mLを加え、12時間室温で撹拌を行った。反応液を濃縮した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィージクロロメタン/メタノール151にて精製し、白色粉末として目的物Iaを260mgで得た。1HNMRδ824811729645584532512446387361305253191<3-O-ビダラビンの合成>東京化成工業製ビダラビンを文献ShenWKimJSKishPEZhangJMitchellSGentryBGBreitenbachJMDrachJCHilfingerJBioMedChemLett200919792796の方法を参考に、二つのヒドロキシ基をシリル保護した。N,N-ジメチルホルムアミド20mLにビダラビンII20gを撹拌懸濁させ、そこへN,N-ジメチルアミノピリジン0114gとトリエチルアミン310mL加え、最後にtert-ブチルジメチルクロロシラン226gを加えた。室温で24時間反応させた後、溶媒を減圧下留去し、残渣に酢酸エチルを加え、飽和塩化アンモニウム水溶液で洗浄し、続いて水と飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去することにより化合物VIIを得た。化合物VII496mgとN,N-ジメチルグリシン113mgをジクロロメタン5mLに溶解し、ジシクロヘキシルカルボジイミドDCC248mgを加え、室温で6時間撹拌した。反応液に水を加え、ジクロロメタンを使って3回抽出操作を行い、抽出した有機層に硫酸ナトリウムを加えて乾燥した。ろ過をして、ろ液を濃縮し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィージクロロメタン/メタノール191にて精製し、化合物VIII465mgを得た。この様にして得た化合物をテトラヒドロフラン5mLに溶解させ、テトラブチルアンモニウムフルオリド18mLを加え、12時間室温で撹拌を行った。反応液を濃縮した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィージクロロメタン/メタノール151にて精製し、目的物Idを259mgで得た。1HNMRδ822814730627607528522431400396370329228<5-O-ビダラビンの合成>東京化成工業製ビダラビンを文献ShenWKimJSKishPEZhangJMitchellSGentryBGBreitenbachJMDrachJCHilfingerJBioMedChemLett200919792796の方法に従って、ヒドロキシ基をシリル保護し、続いてレブリン酸との縮合によりエステル化し、最後にシリル基を脱保護することにより化合物XIIIを調整した。化合物XIII463mgとN,N-ジメチルグリシン113mgをジクロロメタン5mLに溶解し、ジシクロヘキシルカルボジイミドDCC248mgを加え、室温で6時間撹拌した。反応液に水を加え、ジクロロメタンを使って3回抽出操作を行い、抽出した有機層に硫酸ナトリウムを加えて乾燥した。ろ過をして、ろ液を濃縮し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィージクロロメタン/メタノール191にて精製し、化合物XIV400mgを得た。この様にして得た化合物をピリジン-酢酸緩衝液に溶解させ、ヒドラジン一水和物0107mLを加え、1時間室温で撹拌を行った。反応液を濃縮した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィージクロロメタン/メタノール151にて精製し、白色粉末として目的物Igを167mgで得た。1HNMRδ814726630579572441430416398319223合成された2位置換体V2E、3位置換体V3Eおよび5位置換体V5Eは10mMとなるように純水でストック溶液を調製した。ビダラビンは100ジメチルスルホキシドに溶解して同様に10mMのストック溶液を調製した。<2-O-ビダラビンと2-O-ビダラビンの合成>東京化成工業製ビダラビンを文献OMahonyGSundgrenASvenssonSGrotliMTetrahedron20076369016908の方法に従って、ヒドロキシ基をジシロキサニリデン保護し、化合物IIIを調製した。化合物III510mgをピリジン5mLに溶解し、無水コハク酸120mgを加え、室温で6時間撹拌した。反応液に水を加え、ジクロロメタンを使って3回抽出操作を行い、抽出した有機層に硫酸ナトリウムを加えて乾燥した。ろ過をして、ろ液を濃縮し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィージクロロメタン/メタノール191にて精製し、化合物Vを580mg95収率で得た。1-プロピルりん酸環状無水物1M酢酸エチル溶液1mLをアセトニトリル3mLに加え、上記で得た化合物V610mgとトリエチルアミン050mLを加えた。30分室温で撹拌後、ヒドロキシルアミン塩酸塩208mgを加え、室温で12時間撹拌をした。反応液を酢酸エチルで薄めた後、飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。シリカゲルカラムクロマトグラフィージクロロメタン/メタノール101にて精製し、化合物VI386mgを得た。上記で得た化合物V610mgあるいはVI625mgをテトラヒドロフラン5mLに溶解させ、テトラブチルアンモニウムフルオリドを加え、12時間室温で撹拌を行った。反応液を濃縮した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィージクロロメタン/メタノール101にて精製し、それぞれ目的物Ib302mg、Ic310mgで得た。<3-O-ビダラビンと3-O-ビダラビンの合成>東京化成工業製ビダラビンを文献ShenWKimJSKishPEZhangJMitchellSGentryBGBreitenbachJMDrachJCHilfingerJBioMedChemLett200919792796の方法に従って、ヒドロキシ基をシリル保護し、化合物VIIを調製した。化合物VII496mgをピリジン5mLに溶解し、無水コハク酸120mgを加え、室温で6時間撹拌した。反応液に水を加え、ジクロロメタンを使って3回抽出操作を行い、抽出した有機層に硫酸ナトリウムを加えて乾燥した。ろ過をして、ろ液を濃縮し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィージクロロメタン/メタノール191にて精製し、化合物IXを572mg96収率で得た。1-プロピルりん酸環状無水物1M酢酸エチル溶液、1mLをアセトニトリル3mLに溶解させ、上記で得た化合物IX596mgとトリエチルアミン050mLを加えた。30分室温で撹拌後、ヒドロキシルアミン塩酸塩208mgを加え、室温で12時間撹拌をした。反応液を酢酸エチルで薄めた後、飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。シリカゲルカラムクロマトグラフィージクロロメタン/メタノール151にて精製し、化合物X403mgを得た。上記で得た化合物IX596mgあるいはX611mgをテトラヒドロフラン5mLに溶解させ、テトラブチルアンモニウムフルオリドを加え、12時間室温で撹拌を行った。反応液を濃縮した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィージクロロメタン/メタノール101にて精製し、白色粉末としてそれぞれ目的物Ie301mg82収率、If309mg81収率を得た。<5-O-ビダラビンと5-O-ビダラビンの合成>東京化成工業製ビダラビンを文献ShenWKimJSKishPEZhangJMitchellSGentryBGBreitenbachJMDrachJCHilfingerJBioMedChemLett200919792796の方法に従って、ヒドロキシ基をシリル保護し、続いてレブリン酸との縮合によりエステル化し、最後にシリル基を脱保護することにより化合物XIIIを調製した。化合物XIII463mgをピリジン5mLに溶解し、無水コハク酸120mgを加え、室温で6時間撹拌した。反応液に水を加え、ジクロロメタンを使って3回抽出操作を行い、抽出した有機層に硫酸ナトリウムを加えて乾燥した。ろ過をして、ろ液を濃縮し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィージクロロメタン/メタノール101にて精製し、化合物XV539mg96収率を得た。1-プロピルりん酸環状無水物1M酢酸エチル溶液、1mLをアセトニトリル3mLに溶解させ、上記で得た化合物XV564mgとトリエチルアミン050mLを加えた。30分室温で撹拌後、ヒドロキシルアミン塩酸塩208mgを加え、室温で12時間撹拌をした。反応液を酢酸エチルで薄めた後、飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。シリカゲルカラムクロマトグラフィージクロロメタン/メタノール101にて精製し、化合物XVI360mg62収率を得た。上記で得た化合物XV564mgあるいはXVI579mgをピリジン-酢酸緩衝液に溶解させ、ヒドラジン一水和物0107mLを加え、1時間室温で撹拌した。反応液を濃縮した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィージクロロメタン/メタノール101にて精製し、白色粉末としてそれぞれ目的物Ih310mg84収率、Ii305mg80収率を得た。<膜アデニル酸シクラーゼアッセイ>生後12~15週齢の野生型マウスC57BL日本チャールズリバー株式会社およびAC5ノックアウトKOマウスCircRes933643712003から線条体心臓肺組織を摘出し、それぞれの膜タンパク質画分を調製した。得られた膜タンパク質標品を用い、アデニル酸シクラーゼの活性化剤であるフォルスコリン50μM、SigmaCatNoF6886および各種化合物の存在下で30°Cにて反応液20mMHEPESpH8、5mMMgCl2、05mMEDTApH8、01mMATP、1mMphosphocreatine、8UmLcreatinephosphorkinase、200μMIBMXをインキュベートしcAMPを産生させた。線条体および肺では1μg、心臓では2μgの膜タンパク質をそれぞれ本アッセイに用いた。反応開始から15分線条体、肺、または30分心臓後にトリクロロ酢酸TCA溶液を終濃度5となるように添加して反応を終了させ、遠心分離13500xg、10分によりタンパク質を沈殿させた。<H9c2培養細胞>ラット心臓由来のH9c2細胞ATCCは、10vvのウシ胎児血清FBSを含むダルベッコ変法イーグル培地を用い、95空気5CO2存在下に37°Cで培養した。80~90コンフルエントのH9c2細胞を10FBSを含むDMEMに懸濁し、24穴プレートに1ウェルあたり細胞数が4万となるように細胞懸濁液を500μL添加し、37°Cで一晩インキュベートした。その後細胞を無血清DMEM500μLwell中で48時間インキュベートし、cAMPaccumulationアッセイに供した。<ラット成体心筋細胞>SpragueDawley雄ラット日本エスエルシーをペントバルビタールで麻酔後、へパリンを投与したのち、迅速に心臓を摘出し、すみやかにランゲンドルフ還流装置に摘出した心臓を装着する。006コラゲナーゼと002プロテアーゼを含むCa2freeTyrode溶液で還流を行った。KB溶液内で遊離してくる心筋細胞をフィルターろ過したのち10FBSを含むDMEMに懸濁した。24穴プレートに1ウェルあたり細胞数が4万となるように細胞懸濁液を500μL添加し、37°Cで一晩インキュベートした。その後細胞を無血清DMEM500μLwell中で4時間インキュベートし、cAMPaccumulationアッセイに供した。<cAMPaccumulationアッセイ>H9c2細胞を500μMのIBMX存在下、37°Cで20分間インキュベートした後、各種ビダラビン誘導体を50μMとなるように培養液に添加し、さらに10分間37°Cでインキュベートした。その後、フォルスコリンを100μMとなるように添加しcAMP産生反応を開始させた。反応開始20分後、培養液を吸引し、200μLの75vvTCA溶液を加えて反応を停止させ、さらに4°Cで一晩インキュベートした。また各種ビダラビン誘導体は10μM、フォルスコリンは5μM刺激条件下でラット成体培養心筋細胞をもちいても同様の実験を行った。膜アデニル酸シクラーゼアッセイ、cAMPaccumulationアッセイともにTCA溶液中に含まれるcAMPを125IcAMPを用いたラジオイムノアッセイにより測定した。<慢性カテコラミン負荷実験>イソプロテレノールを満たした浸透圧ミニポンプをマウス皮下に移植し、徐放性にイソプロテレノールを1週間連続投与をおこなった60mgkg。心臓超音波検査にて、心機能EFエジェクションフラクション、駆出率を測定し、イソプロテレノール投与前後で比較した。一般にイソプロテレノールをミニポンプを用いてマウスに投与すると、心機能EFが低下する心不全を発症することがしられている。<心筋細胞のTUNEL>ラット胎児培養心筋細胞妊娠ラットウイスターを日本エスエルシーより購入の培養液にイソプロテレノール、イソプロテレノールと同時にビダラビン、V2E、V3E、V5E105Mをそれぞれ併用刺激48時間した後細胞のアポトーシス陽性細胞をTUNEL染色で評価した。<毒性試験>野生型マウスにビダラビン、V2E、V3E,V5Eをオスモティックミニポンプを用いてに投与後採血を行い、BUNCreatinineGPTGOTを測定してコントロール群と比較した。<心筋組織のTUNEL>慢性カテコラミン負荷実験用いたマウスのアポトーシス陽性細胞をTUNEL染色で評価した。結果新規に合成した3種類のビダラビン誘導体図1は、いずれも純水により10mMのストック溶液を調製した。臨床において、抗ヘルペス治療薬としては約2mMのビダラビン点滴液を使用することからアラセナA点滴静注用、持田製薬、それと比較して5倍程度の濃度の溶液を調製することが可能であった。一方、今回ビダラビンは10mMのストック溶液を100DMSOを用いて調製した。野生型マウスの線条体膜のアデニル酸シクラーゼ活性は、50μMのフォルスコリン刺激で約15~20倍に上昇した。各種化合物を100μMの濃度で処理したところ、5型サブタイプの選択的抑制剤として既に報告されているビダラビンは、フォルスコリン存在下におけるアデニル酸シクラーゼ活性を約173まで抑制した。一方、フォルスコリンにより刺激されたアデニル酸シクラーゼ活性をV2Eは約245、V3Eは約251、V5Eは約249まで減少させた図2。続いて、各種ビダラビン誘導体について野生型マウスの線条体、心臓および肺のアデニル酸シクラーゼ活性に対する抑制効果を3種類の濃度10、50、100μMで解析した。その結果、線条体のアデニル酸シクラーゼ活性に対するIC50値はビダラビンが約60μM、V2Eが約131μM、V3Eが約130μM、およびV5Eが251μMと推定された。同様に、心臓における各種薬剤のIC50値はそれぞれ77μM、178μM、199μM、および429μMであった。これらのことは、線条体の全アデニル酸シクラーゼに占める5型サブタイプの発現比率が心臓のそれよりも圧倒的に高いためであると考えられた図3。さらに、AC5KOマウスの線条体のアデニル酸シクラーゼ活性に対するこれらの化合物の抑制効果は、野生型に比べて低いことが明らかになった図4。特に、線条体膜のアデニル酸シクラーゼ活性は50μMの阻害剤存在下でもコントロールの80程度に保持されていた。このことは、各種ビダラビン誘導体が高い5型アデニル酸シクラーゼ抑制作用を持つことを示す。また、V2Eは10μMの濃度において野生型心臓アデニル酸シクラーゼ活性を肺の約26倍強く抑制し、線条体は肺の約30倍強く抑制した。当該濃度におけるビダラビンの抑制効果の組織特異性は、肺と比較して心臓が約24倍、線条体が約28倍高いことから、V2Eはビダラビンと同等の5型選択的な抑制効果を有する親水性の高い化合物であることが示唆された図5。各種ビダラビン誘導体の5型アデニル酸シクラーゼノックアウトマウスに対する抑制効果を野生型マウスと比較したところ、心筋組織膜タンパク内のアデニル酸シクラーゼ活性に対する各種ビダラビン誘導体の抑制効果は野生型マウスのほうがAC5KOに比較して有意に高かった。この結果はビダラビン誘導体が5型サブタイプに選択的な抑制効果があることを示唆している図6。一方、膜標本としたアデニル酸シクラーゼではなく、インタクトな細胞内におけるアデニル酸シクラーゼによるcAMP産生に対する抑制作用の有無を確認することを目的に、フォルスコリンで刺激した細胞中に蓄積するcAMPレベルに与えるビダラビン誘導体の効果を調べた。今回は、予備的な実験としてラット心臓由来のH9c2培養細胞を材料として用いた。一般に化合物の中には細胞膜透過性の低いものもあり、そのような化合物は生体内での活性が極めて低くなるためである。その結果、各種阻害剤の存在下ではフォルスコリンにより蓄積したcAMPレベルがコントロールと比べて著明に低い値を示したビダラビン;約351、V2E;約571、V3E;約457、V5E;約825図7。同様の実験を成体ラット心筋細胞を用いて行ったが、H9C2細胞を用いた場合と同様の傾向が得られた図8。このことから、ビダラビンおよびビダラビン誘導体は、インタクト細胞に対してもアデニル酸シクラーゼ抑制剤としての効果を発揮することが期待された。つまり良好な膜透過性を有することがわかった。野生型マウスにオスモティックミニポンプをもちいてイソプロテレノールのみを1週間投与したマウス、イソプロテレノールと同時にビダラビン、V2E、V3E、V5Eをそれぞれ投与した。その結果イソプロテレノールのみを投与したマウスでは、投与前に比較して心機能の低下がみられたが、ビダラビンを同時に併用投与したマウスでは心機能低下が有意に抑制された図9。またビダラビンと同等の心機能抑制効果がV2E、V3E、V5Eを併用投与したマウスでも確認された図9。以上、本研究では新規に合成した3種類のビダラビン誘導体が高い親水性を有し、かつ5型アデニル酸シクラーゼを強く抑制することが明らかとなった。とりわけ2位置換体はビダラビンと同様の5型サブタイプ選択な抑制効果を持つことが示唆され、心不全の予防効果が示された。心筋細胞のTUNELでは、ラット胎児培養心筋細胞の培養液にイソプロテレノール、イソプロテレノールと同時にビダラビン、V2E、V3E、V5Eをそれぞれ併用刺激48時間した後細胞のアポトーシス陽性細胞をTUNEL染色で評価した。V2EV3EV5Eはビダラビンと同等のイソプロテレノール刺激によるアポトーシス抑制効果がみられた図10。毒性試験では、ビダラビン、V2E、V3E,V5Eをオスモティックミニポンプを用いて投与を投与後に採血を行い、BUNCreatinineGPTGOTを測定してコントロール群と比較した。コントロール群に比較して有意なBUNCreatinineGPTGOTの上昇は見られなかった図11。イソプロテレノールを用いた慢性カテコラミン負荷マウスの心筋組織のアポトーシス陽性心筋細胞の割合をTUNEL染色で評価した。慢性カテコラミン刺激により誘導される心筋細胞のアポトーシスをビダラビンとV2Eは同等に抑制した図12。ビダラビン、V2E、V3E、およびV5Eの中枢移行性を、ストリキニーネ投与によりマウスに惹起される強直伸展性痙攣および死亡に対する拮抗作用により評価した。生理食塩水に溶解したストリキニーネ硝酸塩をマウスC57BL6N:日本エスエルシー,雄,1012週齢の頚背部皮下に15mgkgとなるように投与し、強直伸展性痙攣を起こし死亡に至るまでの時間を計測した。ビダラビン、V2E、V3E、およびV5Eは生理食塩水に溶解または懸濁させ、ストリキニーネ投与の15分前に腹腔内に投与した。ビダラビンはヘルペス脳炎治療薬として臨床応用され中枢移行性が確認されているが150mgkg0525mmolkg、300mgkg105mmolkgで容量依存的にストリキニーネによる痙攣死までの時間を有意に延長させた。一方、V2E、V3E、およびV5Eはビダラビンと同様の投与量において、死亡までの時間を延長しなかった。すなわちV2EV3EV5Eはいずれの薬剤も、ストリキニーネによる死亡発現率には影響を与えず中枢移行性がきわめて低いことが示唆された。なおいずれの薬剤を用いた実験でも死亡率は100であったn410meansSE図13。イソフルレンを用いてマウスを吸入麻酔後、心内心電図を記録する目的で口腔内から心電図アンプに接続した電極カテーテルMillarModelEPR800、サイズ11F、長さ45cmをゆっくりと食道に挿入し、P波が最も大きく記録される部位で電極カテーテルを固定した。固定した電極カテーテルは位置が動かないよう慎重に電気刺激装置に接続し、以後は体表面心電図をII誘導で記録した。次に25mAの電圧刺激を30msec間隔で60秒間加えることで、その後心房細動が一過性に誘発される。体表面心電図上、基線からP波が消失するとともに、RR間隔が一定でなく脈が不整になることを確認できる時間を心房細動持続時間とした。オスモティックミニポンプを用いて正常野生型マウスにDMSOに溶解したビダラビン15mgkgday、V2E、V3E、およびV5E198mgkgday、またはDMSOのみを投与し、上記の条件で心房細動を誘発して正常洞リズムに戻るまでの心房細動持続時間を測定した図14。正常洞リズムが5分間以上持続し、心房細動の再発現がない事を確認して実験終了とした。なお、ヘルペス治療において、ヒトに対して認可されているビダラビンの最大投与量は15mgkgdayを10日間である。ビダラビン、V2E、V3E、ならびにV5Eはペーシングにより誘発された心房細動が正常洞リズムにもどるまでの時間を有意に短縮した。本明細書で引用した全ての刊行物、特許および特許出願をそのまま参考として本明細書にとり入れるものとする。"