"ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物。前記ヌクレオチド配列が配列番号3を含む、請求項1に記載のトランスジェニック齧歯動物。前記ヒトエンドシアリンが配列番号4のアミノ酸配列を含む、請求項1又は2のいずれか一項に記載のトランスジェニック齧歯動物。前記齧歯動物がマウスである、請求項1から3までのいずれか一項に記載のトランスジェニック齧歯動物。前記ヌクレオチド配列が前記齧歯動物の内因性エンドシアリン遺伝子座内に位置する、請求項1から4までのいずれか一項に記載のトランスジェニック齧歯動物。前記ヌクレオチド配列の組込みに起因して、前記齧歯動物の内因性エンドシアリン遺伝子が破壊され、それにより機能しない、請求項1から5までのいずれか一項に記載のトランスジェニック齧歯動物。前記ヌクレオチド配列が前記齧歯動物の内因性遺伝子発現調節配列の制御下にある、請求項1から6までのいずれか一項に記載のトランスジェニック齧歯動物。レポーター遺伝子又は選択可能なマーカーを更に含む、請求項1から7までのいずれか一項に記載のトランスジェニック齧歯動物。請求項1から8までのいずれか一項に記載のトランスジェニック齧歯動物から単離された細胞。正常組織、悪性組織、炎症組織又は罹患した眼から単離される、請求項9に記載の細胞。ヒトエンドシアリンについてのターゲティング薬剤を識別するために試験薬理作用剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物に試験薬理作用剤を投与する工程と、前記齧歯動物におけるヒトエンドシアリン活性を測定する工程と、前記ヒトエンドシアリン活性を対照と比較する工程とを含み、前記対照と比較したヒトエンドシアリン活性の増加又は減少がエンドシアリンについてのターゲティング薬剤の指標となる、上記方法。ヒトエンドシアリンについてのターゲティング薬剤を識別するために試験薬理作用剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物の細胞と試験薬理作用剤とを接触させる工程と、前記細胞におけるヒトエンドシアリン活性を測定する工程と、前記ヒトエンドシアリン活性を対照と比較する工程とを含み、前記対照と比較したヒトエンドシアリン活性の増加又は減少がエンドシアリンについてのターゲティング薬剤の指標となる、上記方法。ヒトエンドシアリンについての薬剤を検証する方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物に薬剤を投与する工程と、前記齧歯動物におけるヒトエンドシアリン活性を測定する工程と、前記ヒトエンドシアリン活性を対照と比較する工程とを含み、前記対照と比較したヒトエンドシアリン活性の増加又は減少により、エンドシアリンについての薬剤が検証される、上記方法。ヒトエンドシアリンについての薬剤を検証する方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物の細胞と薬剤とを接触させる工程と、前記細胞におけるヒトエンドシアリン活性を測定する工程と、前記ヒトエンドシアリン活性を対照と比較する工程とを含み、前記対照と比較したヒトエンドシアリン活性の増加又は減少により、エンドシアリンについての薬剤が検証される、上記方法。疾患を抑制できる試験薬剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれており、前記疾患を示しているトランスジェニック齧歯動物に試験薬剤を投与する工程と、前記トランスジェニック齧歯動物における前記疾患の存在を測定する工程と、前記トランスジェニック齧歯動物における前記疾患の存在を対照と比較する工程とを含み、前記対照と比較した前記疾患の減少が前記疾患を抑制できる薬剤の指標となる、上記方法。疾患を抑制できる試験薬剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれており、前記疾患を示しているトランスジェニック齧歯動物の細胞と試験薬剤とを接触させる工程と、前記細胞における前記疾患の存在を測定する工程と、前記細胞における前記疾患の存在を対照と比較する工程と、を含み、前記対照と比較した前記疾患の減少が前記疾患を抑制できる薬剤の指標となる、上記方法。疾患を抑制できる薬剤を検証する方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれており、前記疾患を示しているトランスジェニック齧歯動物に薬剤を投与する工程と、前記トランスジェニック齧歯動物における前記疾患の存在を測定する工程と、前記トランスジェニック齧歯動物における前記疾患の存在を対照と比較する工程と、を含み、前記対照と比較した前記疾患の減少により、前記疾患を抑制できる薬剤が検証される、上記方法。疾患を抑制できる薬剤を検証する方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれており、前記疾患を示しているトランスジェニック齧歯動物の細胞と薬剤とを接触させる工程と、前記細胞における前記疾患の存在を測定する工程と、前記細胞における前記疾患の存在を対照と比較する工程と、を含み、前記対照と比較した前記疾患の減少により、前記疾患を抑制できる薬剤が検証される、上記方法。前記薬剤が抗体又はその抗原結合断片である、請求項11から18までのいずれか一項に記載の方法。前記薬剤がヒトエンドシアリン活性を刺激できる、請求項11から18までのいずれか一項に記載の方法。前記薬剤がヒトエンドシアリン活性を抑制できる、請求項11から18までのいずれか一項に記載の方法。前記薬剤がエンドシアリン結合タンパク質である、請求項11から18までのいずれか一項に記載の方法。前記エンドシアリン結合タンパク質がヒトエンドシアリン活性を刺激できる、請求項22に記載の方法。前記エンドシアリン結合タンパク質がヒトエンドシアリン活性を抑制できる、請求項22に記載の方法。前記薬剤がヒトエンドシアリンmRNAに相補的に結合できる核酸である、請求項11から18までのいずれか一項に記載の方法。前記薬剤が小化学分子である、請求項11から18までのいずれか一項に記載の方法。前記疾患が癌である、請求項15から18までのいずれか一項に記載の方法。前記疾患が炎症性疾患、眼疾患又は低下した創傷治癒である、請求項15から18までのいずれか一項に記載の方法。前記トランスジェニック齧歯動物に腫瘍が移植される、請求項15又は17のいずれか一項に記載の方法。前記トランスジェニック齧歯動物が転移癌を有する、請求項15又は17のいずれか一項に記載の方法。invivoモデルは複雑な多細胞プロセスを研究するのに重要である。ヒトと他の種のエンドシアリン遺伝子産物との間の相同性の程度は異なり、齧歯動物種では80未満の相同性を共有するOpavskyら、JBiolChem.2001年10月19日、27642:38795-807、Carson-Walterら、CancerRes.2001年9月15日、6118:6649-55。したがって、ヒトエンドシアリン遺伝子産物を発現する動物モデルは、血管形成及び新生血管疾患におけるその生物学的役割並びに炎症、眼科疾患opthamalogicdisease、創傷治癒及び動物発生などの他の生物学的プロセスを試験するためにヒトエンドシアリンmRNA又はタンパク質に結合できる薬剤を識別し、開発するのに有益であろう。ヒトエンドシアリンを発現する動物モデルの使用はこれまで記載されていなかった。更に、ヒト遺伝子が天然の齧歯動物ゲノム内の齧歯動物ホモログと置き換えられ、ヒト遺伝子発現が内因性齧歯動物と同様に作用する、ヒトエンドシアリンを発現する齧歯動物の開発により、正常組織及び種々の病態並びにinvivoでヒト遺伝子産物に結合できる薬剤の開発におけるヒトエンドシアリン生物学の研究においてこれらの動物についての重要な使用が提供される。本明細書では、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列例えば配列番号3及び4を発現する齧歯動物が提供される。好適な実施形態において、齧歯動物はマウスである。マウスエンドシアリンのヌクレオチド及びアミノ酸配列はそれぞれ配列番号1及び2に示される。好適には、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列は天然又は内因性エンドシアリン遺伝子座中に組み込まれている。より好適には、内因性エンドシアリン遺伝子産物は、機能的に破壊されているか又はトランスジェニック齧歯動物において実質的に減少するか若しくは欠損している。好適には、トランスジェニック齧歯動物は、齧歯動物の内因性遺伝子発現調節配列の制御下にあるヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態において、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列を含有する構築物はまた、レポーター遺伝子又は選択可能なマーカー例えば陽性選択マーカー及び/又は陰性選択マーカーも含有する。ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列は好適には、親又は野生型齧歯動物における天然エンドシアリン遺伝子産物のものと同様の発生及び疾患応答パターンで発現される。この特徴により、これらの齧歯動物は、治療用途のためのエンドシアリン生物学に正又は負に影響を与える試験薬剤の効果を試験するのに有用となる。天然エンドシアリン遺伝子産物を欠失しているヒトエンドシアリンを発現する齧歯動物HUE齧歯動物の使用が、エンドシアリン経路に正又は負に影響を与えることができ、また、ヒト治療として有用であり得るこれらの薬剤を識別するためのスクリーニング手段としても役立ち得る薬剤を開発するための戦略として提案される。ヒトエンドシアリン配列が、種々の生理学的プロセスの間、齧歯動物エンドシアリン配列と同様に発現される、内因性エンドシアリン遺伝子座からヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列を発現する齧歯動物が提供される。ヒトエンドシアリンを発現するトランスジェニック齧歯動物の子孫が提供される。ヒトエンドシアリンを発現するトランスジェニック齧歯動物から単離された細胞が提供される。これらの細胞は、正常組織、悪性組織、炎症組織又は罹患した眼から単離できる。また、ヒトエンドシアリンの生物学的性質を研究し、主要な内皮細胞及び周皮細胞集団、悪性組織又は正常組織並びに他の疾患に関連するエンドシアリン生物学に影響を与えることができる薬剤を開発するために、HUE齧歯動物と称される、ヒトエンドシアリンを発現する齧歯動物を使用する方法も提供される。一部の実施形態において、本発明のマウスはマウス第19染色体の近位領域におけるマウスエンドシアリン遺伝子座内にノックインされているヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列を有する。一部の実施形態において、マウスはC57BL/6系を含み、ヒトエンドシアリンの研究はこれらのマウス又は当業者に公知の方法により一般に行われるようにヒトエンドシアリン遺伝子座が他のマウス系と交配されるマウスで実施され得る。ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物の器官、組織又は細胞におけるヒトエンドシアリンの発現レベルを測定する工程を含む、正常な発生におけるヒトエンドシアリンの役割を試験する方法が提供される。好適な実施形態において、ヒトエンドシアリンの発現レベルは、齧歯動物の特定の発生段階において測定する。また、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物の器官、組織又は細胞におけるヒトエンドシアリンの発現を位置決定する工程を含む、正常な発生におけるヒトエンドシアリン機能の役割を試験する方法も提供される。好適な実施形態において、ヌクレオチド配列はレポーター遺伝子又は選択可能なマーカーを含む。ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれており、疾患表現型を示しているトランスジェニック齧歯動物の細胞におけるヒトエンドシアリンの発現レベルを測定する工程を含む、疾患表現型を支持又は予防する際のヒトエンドシアリンの役割を試験する方法が提供される。好適な実施形態において表現型は癌である。一部の好適な実施形態において、表現型は炎症性疾患である。更に好適な実施形態において、表現型は眼疾患である。なお更に好適な実施形態において、表現型は低下した創傷治癒である。ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物に腫瘍を移植する工程と、齧歯動物の細胞におけるヒトエンドシアリンの発現レベルを測定する工程とを含む、異形成表現型を支持又は予防する際のヒトエンドシアリンの役割を試験する方法が提供される。また、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物に腫瘍を移植する工程と、齧歯動物の細胞におけるヒトエンドシアリンの発現を位置決定する工程とを含む、異形成表現型を支持又は予防する際のヒトエンドシアリンの役割を試験する方法も提供される。好適な実施形態において、ヌクレオチド配列はレポーター遺伝子又は選択可能なマーカーを含む。ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物及び免疫不全齧歯動物の子孫に腫瘍を移植する工程と、子孫の細胞におけるヒトエンドシアリンの発現レベルを測定する工程とを含む、異形成表現型を支持又は予防する際のヒトエンドシアリンの役割を試験する方法が提供される。好適な実施形態において、ヌクレオチド配列はレポーター遺伝子又は選択可能なマーカーを含む。また、ヒトエンドシアリンについてのターゲティング薬剤を識別するために試験薬理作用剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物に試験薬理作用剤を投与する工程と、齧歯動物におけるヒトエンドシアリン活性を測定する工程と、該ヒトエンドシアリン活性を対照と比較する工程とを含む、上記方法も提供される。対照と比較したヒトエンドシアリン活性の増加又は減少はエンドシアリンについてのターゲティング薬剤の指標となり得る。また、ヒトエンドシアリンについての薬剤を検証する方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物に薬剤を投与する工程と、齧歯動物におけるヒトエンドシアリン活性を測定する工程と、該ヒトエンドシアリン活性を対照と比較する工程とを含む、上記方法も提供される。対照と比較したヒトエンドシアリン活性の増加又は減少により、エンドシアリンについての薬剤を検証できる。本明細書に記載されている方法の好適な実施形態において、ターゲティング薬剤は抗体又はその抗原結合断片である。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。一部の好適な実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリン活性を刺激できる。更に好適な実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリン活性を抑制できる。なお更に好適な実施形態において、ターゲティング薬剤はエンドシアリン結合タンパク質である。一部の実施形態において、結合タンパク質はヒトエンドシアリン活性を刺激できる。一部の実施形態において、結合タンパク質はヒトエンドシアリン活性を抑制できる。一部の実施形態において、結合タンパク質はヒトエンドシアリン活性を刺激するか又は抑制する薬剤に結合する。一部の好適な実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンmRNAに相補的に結合できる核酸である。一部の好適な実施形態において、薬剤は小化学分子である。一部の実施形態において、試験薬剤は検出可能な標識に結合する。例示的な検出可能な標識には、限定されないが、化学発光化合物例えばアクリジニウムエステル化合物、リン光化合物、蛍光化合物、放射性標識、ビオチン又は酵素が含まれる。更に、ヒトエンドシアリンについてのターゲティング薬剤を識別するために試験薬理作用剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物の細胞と試験薬理作用剤とを接触させる工程と、細胞におけるヒトエンドシアリン活性を測定する工程と、該ヒトエンドシアリン活性を対照と比較する工程とを含む、上記方法が提供される。対照と比較したヒトエンドシアリン活性の増加又は減少はエンドシアリンについてのターゲティング薬剤の指標となり得る。また、ヒトエンドシアリンについての薬剤を検証する方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物の細胞と薬剤とを接触させる工程と、細胞におけるヒトエンドシアリン活性を測定する工程と、該ヒトエンドシアリン活性を対照と比較する工程とを含む、上記方法も提供される。対照と比較したヒトエンドシアリン活性の増加又は減少により、エンドシアリンについての薬剤を検証できる。本明細書に記載されている方法の好適な実施形態において、ターゲティング薬剤は抗体又はその抗原結合断片である。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。一部の好適な実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリン活性を刺激できる。更に好適な実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリン活性を抑制できる。なお更に好適な実施形態において、ターゲティング薬剤はエンドシアリン結合タンパク質である。一部の実施形態において、結合タンパク質はヒトエンドシアリン活性を刺激できる。一部の実施形態において、結合タンパク質はヒトエンドシアリン活性を抑制できる。一部の好適な実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンmRNAに相補的に結合できる核酸である。一部の好適な実施形態において、薬剤は小化学分子である。一部の実施形態において、試験薬剤は検出可能な標識に結合する。例示的な検出可能な標識には、限定されないが、化学発光化合物例えばアクリジニウムエステル化合物、リン光化合物、蛍光化合物、放射性標識、ビオチン又は酵素が含まれる。ヒトエンドシアリンについてのターゲティング薬剤を識別するために試験薬理作用剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物に試験薬理作用剤を投与する工程と、齧歯動物のエンドシアリン発現細胞においてヒトPDGFレセプター経路活性を測定する工程と、ヒトPDGFレセプター経路活性を対照と比較する工程とを含む、上記方法が提供される。一部の好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリン発現細胞においてPDGFレセプター経路を刺激する。一部の好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリン発現細胞においてPDGFレセプター経路を抑制する。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。ヒトエンドシアリンについてのターゲティング薬剤を識別するために試験薬理作用剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物の細胞と試験薬理作用剤とを接触させる工程と、細胞におけるヒトPDGFレセプター経路活性を測定する工程と、ヒトPDGFレセプター経路活性を対照と比較する工程とを含む、上記方法が提供される。一部の好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリン発現細胞においてPDGFレセプター経路を刺激する。一部の好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリン発現細胞においてPDGFレセプター経路を抑制する。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。また、疾患を抑制できる試験薬剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれており、疾患を示しているトランスジェニック齧歯動物に試験薬剤を投与する工程と、トランスジェニック齧歯動物における疾患の存在を測定する工程と、トランスジェニック齧歯動物における疾患の存在を対照と比較する工程とを含む、上記方法も提供される。対照と比較した疾患の減少は疾患を抑制できる薬剤の指標となり得る。また、疾患を抑制できる薬剤を検証する方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれており、疾患を示しているトランスジェニック齧歯動物に薬剤を投与する工程と、トランスジェニック齧歯動物における疾患の存在を測定する工程と、トランスジェニック齧歯動物における疾患の存在を対照と比較する工程とを含む、上記方法も提供される。対照と比較した疾患の減少により、薬剤が疾患を抑制できることが検証できる。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。好適な実施形態において、疾患は癌である。他の好適な実施形態において、疾患は炎症性疾患である。更に好適な実施形態において、疾患は眼疾患である。なお更に好適な実施形態において、疾患は低下した創傷治癒である。更に、疾患を抑制できる試験薬剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれており、疾患を示しているトランスジェニック齧歯動物の細胞と試験薬剤とを接触させる工程と、細胞における疾患の存在を測定する工程と、細胞における疾患の存在を対照と比較する工程とを含む、上記方法が提供される。対照と比較した疾患の減少は疾患を抑制できる薬剤の指標となり得る。また、疾患を抑制できる薬剤を検証する方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物の、疾患を示している細胞と薬剤とを接触させる工程と、細胞における疾患の存在を測定する工程と、細胞における疾患の存在を対照と比較する工程とを含む、上記方法も提供される。対照と比較した疾患の減少により、薬剤が疾患を抑制できることを検証できる。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。好適な実施形態において、疾患は癌である。他の好適な実施形態において、疾患は炎症性疾患である。更に好適な実施形態において、疾患は眼疾患である。なお更に好適な実施形態において、疾患は低下した創傷治癒である。また、任意選択にトランスジェニック齧歯動物に移植され得る腫瘍も提供される。また、任意選択に転移癌を有するトランスジェニック齧歯動物も提供される。腫瘍成長を抑制できる試験薬剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物に腫瘍を移植する工程と、トランスジェニック齧歯動物に試験薬剤を投与する工程と、トランスジェニック齧歯動物における腫瘍成長を測定する工程と、トランスジェニック齧歯動物における腫瘍成長を対照と比較する工程とを含む、上記方法が提供される。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。腫瘍成長を抑制できる試験薬剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物及び免疫不全齧歯動物の子孫に腫瘍を移植する工程と、トランスジェニック齧歯動物に試験薬剤を投与する工程と、トランスジェニック齧歯動物における腫瘍成長を測定する工程と、トランスジェニック齧歯動物における腫瘍成長を対照と比較する工程とを含む、上記方法が提供される。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。また、腫瘍成長を抑制できる試験薬剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物に腫瘍を移植する工程と、トランスジェニック齧歯動物に試験薬剤を投与する工程と、トランスジェニック齧歯動物において腫瘍細胞を位置決定する工程と、トランスジェニック齧歯動物における腫瘍細胞の位置決定を対照と比較する工程とを含む、上記方法も提供される。好適な実施形態において、ヌクレオチド配列はレポーター遺伝子を含む。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。腫瘍成長を抑制できる試験薬剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物及び免疫不全齧歯動物の子孫に腫瘍を移植する工程と、トランスジェニック子孫齧歯動物に試験薬剤を投与する工程と、トランスジェニック子孫齧歯動物において腫瘍細胞を位置決定する工程と、トランスジェニック子孫齧歯動物における腫瘍細胞の位置決定を対照と比較する工程とを含む、上記方法が提供される。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。また、疾患を治療する際の薬剤、例えば上記のスクリーニング方法のいずれかにより識別された薬剤の最適用量を決定する方法であって、異なる用量でトランスジェニック齧歯動物に薬剤を投与する工程と、トランスジェニック齧歯動物における疾患の存在を測定する工程と、トランスジェニック齧歯動物における疾患を抑制する薬剤の用量を決定する工程とを含む、上記方法も提供する。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。疾患を治療する際の抗エンドシアリン抗体又はその抗原結合断片の最適用量を決定する方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物に抗体又はその抗原結合断片を異なる用量で投与する工程と、トランスジェニック齧歯動物における疾患の存在を測定する工程と、トランスジェニック齧歯動物における疾患を抑制する薬剤の用量を決定する工程とを含む、上記方法が提供される。好適な実施形態において、疾患は癌、炎症性疾患、眼疾患又は低下した創傷治癒である。齧歯動物エンドシアリン遺伝子座に内在しているゲノム領域間にクローニングされたヒトエンドシアリンオープンリーディングフレームを含むベクターが提供される。また、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物から単離された細胞も提供される。好適な実施形態において、細胞は正常組織から単離される。他の好適な実施形態において、細胞は悪性組織から単離される。更に好適な実施形態において、細胞は炎症組織から単離される。なお更に好適な実施形態において、細胞は罹患した眼から単離される。ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物から単離された細胞を用いて遺伝子発現をスクリーニングする方法であって、細胞における発現プロファイルを測定する工程を含む上記方法が提供される。一部の実施形態において、遺伝子発現は試験薬剤の投与前、投与と同時及び/又は投与後に測定される。好適な実施形態において、発現プロファイルは細胞の単離直後に測定される。一部の好適な実施形態において、発現プロファイルは刺激剤又は栄養素の存在下で細胞を培養した後に測定される。更に好適な実施形態において、発現プロファイルは試験薬剤での治療後に測定される。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3の軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。一部の好適な実施形態において、細胞はRNAプロファイルについて分析される。更に好適な実施形態において、細胞はcDNAプロファイルについて分析される。なお更に好適な実施形態において、細胞はタンパク質プロファイルについて分析される。エンドシアリン発現細胞の成長及び/又は分化を阻害する試験薬剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物から単離された細胞に試験薬剤を投与する工程と、細胞の成長及び/又は分化を測定する工程と、該成長及び/又は分化を対照の未処理の細胞と比較する工程とを含み、該細胞の成長及び/又は分化のレベルが対照の未処理の細胞の成長及び/又は分化のレベルより低い場合、試験薬剤は該細胞の成長及び/又は分化を阻害する、上記方法が提供される。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。また、エンドシアリン発現細胞の成長及び/又は分化を刺激する試験薬剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物から単離された細胞に試験薬剤を投与する工程と、細胞の成長及び/又は分化を測定する工程と、該成長及び/又は分化を対照の未処理の細胞と比較する工程とを含み、細胞の成長及び/又は分化のレベルが対照の未処理の細胞の成長及び/又は分化のレベルより高い場合、試験薬剤は該細胞の成長及び/又は分化を刺激する、上記方法も提供される。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。エンドシアリン発現細胞の正常な生物活性を阻害する試験薬剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物から単離された細胞に試験薬剤を投与する工程と、細胞の生物活性を測定する工程と、該生物活性を対照の未処理の細胞と比較する工程とを含み、細胞の生物活性のレベルが対照の未処理の細胞の生物のレベルより低い場合、試験薬剤は該細胞の生物活性を阻害する、上記方法が提供される。一部の実施形態において、細胞の生物活性は、コラーゲンColI、ColIV又はフィブロネクチンとのエンドシアリンの結合を含む。一部の実施形態において、細胞の生物活性は細胞外マトリクスとの細胞接着を含む。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。上記の方法の好適な実施形態において、薬剤は抗体である。更に好適な実施形態において、抗体はモノクローナル抗体である。一部の好適な実施形態において、抗体はポリクローナル抗体である。一部の好適な実施形態において、抗体は、抗体の抗原結合断片である。更に好適な実施形態において、抗体はヒトエンドシアリンと結合できる1~6個のCDRを含有する。上記の方法の好適な実施形態において、薬剤はタンパク質である。更に好適な実施形態において、タンパク質は完全長タンパク質である。一部の好適な実施形態において、タンパク質はペプチドである。一部の好適な実施形態において、タンパク質は模倣剤である。上記の方法の好適な実施形態において、薬剤は化学物質である。更に好適な実施形態において、化学物質はエンドシアリン遺伝子発現を刺激する。一部の好適な実施形態において、化学物質はエンドシアリン遺伝子発現を抑制する。一部の好適な実施形態において、化学物質はエンドシアリンタンパク質機能を抑制する。更に好適な実施形態において、化学物質はエンドシアリンタンパク質機能を刺激する。上記の3つの方法の好適な実施形態において、薬剤はアンチセンスオリゴヌクレオチドである。更に好適な実施形態において、薬剤はRNAi分子である。invivoでヒトエンドシアリン発現細胞を検出するための薬剤を試験する方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物に薬剤を投与する工程と、薬剤によるトランスジェニック齧歯動物におけるヒトエンドシアリン発現細胞の検出レベルを測定する工程と、薬剤によるトランスジェニック齧歯動物におけるヒトエンドシアリン発現細胞の検出レベルを、対照によるトランスジェニック齧歯動物におけるヒトエンドシアリン発現細胞の検出レベルと比較する工程とを含む、上記方法が提供される。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。invivoで細胞においてヒトエンドシアリン発現を調節する薬剤を試験する方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物の細胞におけるヒトエンドシアリンの発現を測定する工程と、トランスジェニック齧歯動物に薬剤を投与する工程と、薬剤の投与後にトランスジェニック齧歯動物の細胞におけるヒトエンドシアリンの発現を測定する工程と、薬剤の投与後のトランスジェニック齧歯動物の細胞におけるヒトエンドシアリンの発現レベルを、薬剤の投与前のトランスジェニック齧歯動物の細胞におけるヒトエンドシアリンの発現レベルと比較する工程とを含む、上記方法が提供される。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3の重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。また、腫瘍成長を阻害する試験薬剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物に腫瘍を移植する工程と、トランスジェニック齧歯動物に試験薬剤又は対照薬剤を投与する工程と、トランスジェニック齧歯動物における腫瘍成長を測定する工程と、試験薬剤を用いて投与したトランスジェニック齧歯動物における腫瘍成長を、対照薬剤を用いて投与したトランスジェニック齧歯動物における腫瘍成長と比較する工程とを含み、試験薬剤を用いて投与されたトランスジェニック齧歯動物における腫瘍成長が、対照薬剤を用いて投与されたトランスジェニック齧歯動物における腫瘍成長と比較して減少する場合、試験薬剤は腫瘍成長を阻害する薬剤として選択される、上記方法も提供される。好適な実施形態において、腫瘍はトランスジェニック齧歯動物に対して同系である。一部の好適な実施形態において、腫瘍はトランスジェニック齧歯動物に対して同種又は異種である。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。また、腫瘍転移を阻害する試験薬剤をスクリーニングする方法であって、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列がゲノム中に組み込まれているトランスジェニック齧歯動物内に腫瘍細胞を導入する工程と、トランスジェニック齧歯動物に試験薬剤又は対照薬剤を投与する工程と、トランスジェニック齧歯動物における腫瘍転移を測定する工程と、試験薬剤を用いて投与したトランスジェニック齧歯動物における腫瘍転移を、対照薬剤を用いて投与したトランスジェニック齧歯動物における腫瘍転移と比較する工程とを含み、試験薬剤を用いて投与したトランスジェニック齧歯動物における腫瘍転移が対照薬剤を用いて投与したトランスジェニック齧歯動物における腫瘍転移と比較して減少する場合、試験薬剤は腫瘍転移を阻害する薬剤として選択される、上記方法も提供される。好適な実施形態において、腫瘍転移は、肺metモデルを利用する肺met細胞の生物発光をinvivoで定量することにより測定される。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤はエンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。本発明はまた、これらの齧歯動物内でのヒトエンドシアリンの発現及び/又はタンパク質機能に正又は負の影響を与えることができる薬剤を識別するために本明細書に記載されている齧歯動物を使用する方法も提供する。本発明は更に、これらの齧歯動物内での所与のヒトエンドシアリン生物活性を刺激又は抑制するためにそれらの曝露を最大化するための薬剤の使用を最適化するためにHUE齧歯動物を使用する方法も提供する。本明細書中で参照されているGenBankデータベースの配列に対する受託番号を含む、参考研究、特許、特許出願書類、及び科学文献は、当業者の知識を確立するものであり、各々が具体的且つ個別に参照として組み込まれていることを示すのと同程度まで、その全体が参照として本明細書に組み込まれる。本明細書に引用されている参照と本明細書の特定の教示の間に不一致があった場合、本明細書の特定の教示を優先して解決されるものとする。同様に、当業者に理解される単語又は表現の定義と、本明細書で具体的に教示されている単語又は表現の定義との間に不一致があった場合、本明細書の単語又は表現を優先して解決されるものとする。当業者に公知の組換えDNA技術に関する一般的原理を示した標準的な参照研究には、Ausubelら、CURRENTPROTOCOLSINMOLECULARBIOLOGY、JohnWileySons、NewYork1998、Sambrookら、MOLECULARCLONING:ALABORATORYMANUAL、2DED.、ColdSpringHarborLaboratoryPress、Plainview、NewYork1989、Kaufmanら、Eds.、HANDBOOKOFMOLECULARANDCELLULARMETHODSINBIOLOGYANDMEDICINE、CRCPress、BocaRaton1995、McPherson、Ed.、DIRECTEDMUTAGENESIS:APRACTICALAPPROACH、IRLPress、Oxford1991が含まれる。本明細書において、内因性エンドシアリン遺伝子が機能しない、ヒトエンドシアリンを発現する齧歯動物、好適にはマウスを生成する方法が提供される。HUE齧歯動物と称されるヒトエンドシアリン齧歯動物が、動物モデルにおけるヒトエンドシアリンの機能を試験するため、及びヒトエンドシアリン生物学的機能に影響を与え得る薬剤を開発するために使用され得る。この方法は、正常なエンドシアリン生理に対する薬剤の効果、又はエンドシアリン経路に関与する疾患モデルにおける薬剤の効果を試験するために使用され得る。作用のいかなる特定の理論にも束縛されるものではないが、ヒトエンドシアリン陽性細胞HEPCは、癌、炎症及び眼科疾患などの新血管形成及び新生血管疾患に関連する血管の形成に関与する細胞についての前駆体であると考えられる。したがって、HUE齧歯動物は、新生血管関連疾患におけるエンドシアリンの役割を試験するためにヒトエンドシアリンタンパク質又はmRNAに結合できる薬剤の効果を試験するのに有用であり得る。よって、HUE齧歯動物は、癌及び非悪性病理などの新生血管疾患を治療するためのヒトエンドシアリンターゲティング薬剤を識別し、開発するための理想的な動物モデルとして役立つ。反対に、HUE齧歯動物は、創傷治癒を促進するためのヒトエンドシアリンターゲティング薬剤を識別するための理想的な動物として役立つ。HUE齧歯動物はまた、ヒトエンドシアリンmRNA又は抗体、エンドシアリン結合タンパク質、ワクチン、アンチセンスオリゴデオキシヌクレオチド及び/又は阻害マイクロRNAを含む核酸ベースの薬剤、並びにウイルスベースの遺伝子治療剤を含むタンパク質に結合できる活性薬理作用剤をスクリーニングするのに有用である。本明細書で使用する場合、薬剤又はターゲティング薬剤という用語は、限定されないが、小化学物質、RNAi、アンチセンスオリゴヌクレオチド、アゴニスト、天然リガンド、抗体、抗体の抗原結合断片、エンドシアリン結合タンパク質、ワクチン及びエンドシアリン発現全細胞ワクチンを含む、ヒトエンドシアリンの活性を阻害又は刺激するために使用できる任意の分子を指す。ターゲティング薬剤又は薬剤という用語は、ヒトエンドシアリンの活性を刺激又は阻害する分子に結合するヒトエンドシアリンに結合する任意の分子を含む。本明細書で使用する場合、エンドシアリン陽性細胞EPC又はエンドシアリン発現細胞という用語は、エンドシアリンを発現する細胞を指す。一部の場合、EPCは、このような細胞のエンドシアリン又はエンドシアリン発現子孫に結合できる抗体又は結合タンパク質を使用して、一次組織又は内皮細胞から、例えば本明細書に記載しているHUE齧歯動物から単離される。EPCは血管を形成する能力を有し得る。本明細書で使用する場合、成長の阻害という用語は、培養物中の細胞数の約5、好適には10、より好適には20、より好適には30、より好適には40、より好適には50、より好適には60、より好適には70、より好適には80、より好適には90、最も好適には100の減少を意味する。細胞成長のinvivoでの阻害は当該技術分野において公知のアッセイにより測定できる。例えば、成長の阻害は、試験薬剤と接触したHUE齧歯動物における腫瘍成長が、試験薬剤の非存在下での腫瘍成長と比較して低下する場合を指すために使用され得る。本明細書で使用する場合、成長の刺激という用語は、培養物中の細胞数の約5、好適には10、より好適には20、より好適には30、より好適には40、より好適には50、より好適には60、より好適には70、より好適には80、より好適には90、最も好適には100の増加を意味する。細胞成長のinvivoでの刺激は当該技術分野において公知のアッセイにより測定できる。例えば、成長の刺激は、試験薬剤と接触したHUE齧歯動物における腫瘍成長が、試験薬剤の非存在下での腫瘍成長と比較して増加する場合を指すために使用され得る。分析という用語は、HUE齧歯動物由来のRNA、タンパク質又は細胞プロファイルを分析することを指す。分析は、限定されないが、マイクロアレイ、cDNAライブラリー、SAGE、減算、又はタンパク質アレイなどの差次的発現法などの当業者により使用される任意の方法を使用して実施できる。生物学的効果という用語は状態の阻害又は刺激を指す。生物学的効果は、異常状態の症状の1つ又は複数をある程度まで軽減する。異常状態の治療に関して、生物学的効果は以下のうちの1つ又は複数を指してもよい:a細胞の増殖、成長及び/又は分化の増加又は減少、binvivoでの腫瘍細胞の成長の阻害すなわち、遅延又は停止、c細胞死の促進、d変性の阻害、e異常状態に関連した症状のうちの1つ又は複数のある程度の軽減、並びにf細胞集団の機能の増強。本明細書に記載している薬理作用剤及びその誘導体は、単独で、又は本発明の組成物のコンジュゲート若しくは追加成分と併せて生物学的効果をもたらす。本明細書で使用する場合、約という用語は、許容可能な範囲内の示した値の近似値を指す。好適にはその範囲は示した値の/-5である。本明細書で使用する場合、正常組織という用語は、哺乳動物の胚、胎児又は成体源由来の非疾患組織を指す。本明細書で使用する場合、疾患組織という用語は、異形成である哺乳動物の胚、胎児又は成体源由来の組織を指す。組織は、限定されないが、悪性源、眼疾患、又は感染及び/若しくは炎症を有する組織からの疾患に由来してもよい。本明細書で使用する場合、エンドシアリンリガンドという用語は、細胞表面エンドシアリンに結合できる任意のタンパク質又は生化学物質を指す。本明細書で使用する場合、ターゲティング構築物又はターゲティングベクターという用語は、センス方向においてクローニングされたヒトエンドシアリンオープンリーディングフレームを含有する組換えDNA断片を有するベクターを指す。本明細書に記載されている方法によれば、ヒトエンドシアリンをコードするヌクレオチド配列は、天然の齧歯動物エンドシアリン遺伝子を含有するゲノム断片内に組み込まれ、好適には齧歯動物エンドシアリン遺伝子を機能的に破壊する。一部の実施形態において、ターゲティングベクターは、組換え細胞のスクリーニングを容易にするために選択マーカー例えばネオマイシン選択マーカーを含有してもよい。本明細書で使用する場合、分析的マウス又は分析的齧歯動物という用語は、細胞表面上のエンドシアリン発現を認識できるか、又は腫瘍成長若しくは転移を阻害できる抗体、その抗原結合断片又は結合タンパク質などの薬剤、すなわち細胞中のヒトエンドシアリンメッセージに結合できるアンチセンスデオキシヌクレオチド又は阻害RNAなどの薬剤を識別するために使用され得るHUEマウス又は齧歯動物を指し、それらの薬剤は、疾患に関連するエンドシアリン経路に影響を与える能力について試験でき、治療用途又は診断のための薬剤の使用を発見し、最適化し、及び/又は検証するために潜在的に使用できる。本明細書で使用する場合、機能的に破壊されているという用語は、遺伝子が、遺伝子の正常機能を妨げる、例えば対象産物の遺伝子の発現を妨げる、又は対象産物の正常量の遺伝子の発現を妨げる変異を有することを指す。機能的破壊を引き起こす変異は、内因性遺伝子内にコードされている内因性遺伝子産物のアミノ酸配列を変化させる挿入、欠失又は点変異であってもよい。機能的破壊を引き起こす変異はまた、内因性遺伝子の導入遺伝子との置換すなわち、ノックインであってもよい。実質的に減少した又は欠損しているという用語は、本質的に検出できない量の正常な内因性遺伝子産物が動物細胞中で産生されることを意味することを意図する。この種の変異はまた、当該技術分野においてヌル変異とも称され、このようなヌル変異を保有する動物はまた、ノックアウト動物とも称される。この種の変異はまた、内因性遺伝子が導入遺伝子と置換される場合、ノックインと称されてもよい。本明細書で使用する場合、トランスジェニック齧歯動物という用語は、導入遺伝子を含有する細胞を有する齧歯動物を指し、ここで、該導入遺伝子は、出生前、例えば胚形成期において齧歯動物又は齧歯動物の祖先内に導入された。導入遺伝子は、細胞のゲノム中に組み込まれるDNAであり、該細胞からトランスジェニック齧歯動物が発生し、該細胞は成熟動物のゲノム内に残り、それにより、トランスジェニック齧歯動物の1つ又は複数の細胞種類又は組織のコードされた遺伝子産物の発現を指示する。トランスジェニック齧歯動物の種類は、内因性遺伝子が導入遺伝子と置換されているノックインである。ヒトエンドシアリンを発現する齧歯動物ヒトエンドシアリン齧歯動物は、齧歯動物の内因性エンドシアリン遺伝子座からヒトエンドシアリン遺伝子を発現するように操作された齧歯動物である。HUE齧歯動物の内因性エンドシアリン遺伝子は好適には、機能的に破壊されているか又は実質的に減少するか若しくは欠損している。したがって、HUE齧歯動物は、発生及び/又は疾患に関連する生物学的経路を抑制又は促進する際にヒトエンドシアリンに対して直接効果を有し得る薬剤をスクリーニング、開発及び研究するために使用できる。これらの齧歯動物は、齧歯動物エンドシアリンをコードする遺伝子の機能領域内へのヒト遺伝子の導入によって齧歯動物エンドシアリンが機能的に破壊されているか又は実質的に減少するか若しくは欠損しているという事実を考慮してヒトエンドシアリンの機能を試験するために固有のモデルを提供する。この特徴は、病態又は発生プロセスを支持できる可能性がある齧歯動物エンドシアリンが存在する場合に起こり得るあらゆる可能な冗長性を回避する。ヒトエンドシアリン遺伝子及びインタクトな齧歯動物エンドシアリン遺伝子を含有する従来のトランスジェニックマウスは、病態を支持する際のヒトエンドシアリン遺伝子機能の抑制又は活性化についての薬剤の薬理学的活性を解明するためにヒトエンドシアリンに結合できる薬剤を明確に識別する能力を減少し得る。好適な実施形態において、齧歯動物はマウスである。本発明の好適なマウスは、種々のマウス系が疾患モデルのために使用されるものである。これらの系には、限定されないが、DBA2、C57BL/6及びSJ123株が含まれる。マウスは内因性マウスエンドシアリンを欠失した状態であるが、機能的ヒトエンドシアリン遺伝子産物を有する。本明細書に記載されている好適なトランスジェニック齧歯動物は、天然対立遺伝子を有する導入遺伝子の相同的組換えをもたらす隣接配列が隣接したヒトエンドシアリンをコードする配列を含む導入遺伝子を用いてエンドシアリンをコードする標的天然又は内因性対立遺伝子の相同的組換えにより作製され、ここで、ヒトエンドシアリンの発現は天然対立遺伝子の天然遺伝子発現調節配列の制御下にある。好適な実施形態において、天然エンドシアリン対立遺伝子の少なくとも一部は、ヒトエンドシアリン配列と置換される。HUE齧歯動物は、ヒトエンドシアリンを発現し、内因性エンドシアリン遺伝子産物を欠失するように操作される。一部の好適な実施形態において、全エンドシアリンオープンリーディングフレームORFをコードするヒト相補的cDNAは、齧歯動物エンドシアリン遺伝子座を含有する齧歯動物ゲノム断片内にクローニングされる。ターゲティング構築物は、構築物を取り込む細胞の選択に役立つように選択可能なマーカー例えばネオマイシン耐性遺伝子を含有してもよい。次いで得られた構築物を線形化し、齧歯動物胚幹細胞ESC系内に導入し、遺伝子ノックアウト又はトランスジェニック胚幹ES細胞を生成する当業者に公知の標準的な方法を使用することにより構築物を齧歯動物エンドシアリン遺伝子座中に組み込むためにポリメラーゼ連鎖反応PCRによりスクリーニングする。ターゲティング構築物が内因性齧歯動物エンドシアリン遺伝子座内に組み込まれていることが見出されるクローンを増殖させ、サザンブロットにより更に検証する。クローンを齧歯動物胚盤胞内に注入するために使用し、得られた齧歯動物の子を、ターゲティング構築物を含有するこれらの齧歯動物を識別するために尾クリッピングから抽出したDNAを使用するゲノムPCR又はサザンブロッティングを含む、当業者に公知の方法を使用してスクリーニングする。次いでこれらのキメラ齧歯動物を成長させ、非トランスジェニック齧歯動物と交配させて、ヘテロ接合体並びに最終的にゼロの齧歯動物エンドシアリン及び機能的ヒトエンドシアリン発現を含有するホモ接合体齧歯動物を生成する。また、単離した遺伝的ノックイン細胞も提供される。一部の実施形態において、単離したノックイン細胞は、上記のノックイン齧歯動物から得た遺伝的ノックイン一次細胞である。一部の実施形態において、単離したノックイン細胞は、上記のノックイン齧歯動物から得た遺伝的ノックイン一次細胞と遺伝的に同一であるか、クローンであるか、又は好適には子孫である。抗体、結合タンパク質、核酸薬剤本発明の抗体及び結合タンパク質は、HUE齧歯動物内又はそれらに由来する細胞表面上でエンドシアリンに特異的に結合する。一部の実施形態において、抗体及びタンパク質は正常組織内でヒトエンドシアリンを発現する細胞に結合する。他の実施形態において、抗体及びタンパク質は疾患組織内の細胞に結合する。更に他の実施形態において、抗体及びタンパク質はHUE齧歯動物由来の一次培養物中の細胞に結合する。一部の実施形態において、抗体又は結合タンパク質は、ヒトエンドシアリンを阻害若しくは刺激する分子又は検出可能な標識に結合する。本発明の方法における使用に適切な好適な抗体又はその抗原結合断片及びタンパク質には、例えば、組織又は培養物から細胞を単離できる、全ヒト抗体、ヒト抗体ホモログ、ヒト化抗体ホモログ、キメラ抗体ホモログ、Fab、Fab’、Fab’2及びFv抗体断片、一本鎖抗体及び抗体重鎖若しくは軽鎖の単量体若しくは二量体、エンドシアリンリガンド又はそれらの混合物が含まれる。抗体は、IgA、IgG、IgE、IgD、IgM型同様にそれらのサブタイプを含む任意のアイソタイプのインタクトな免疫グロブリンを含んでもよい。免疫グロブリンの軽鎖はカッパ又はラムダであってもよい。抗体の抗体結合断片は、抗原結合特異性、例えば、Fab断片、Fab’断片、Fab’2断片、Fv断片、重鎖単量体又は二量体、軽鎖単量体又は二量体、一本の重鎖及び一本の軽鎖を含む二量体などを保有するインタクトな抗体の部分を含む。よって、抗原結合断片及び上記の抗体由来の全長二量体又は三量体ポリペプチドはそれ自体で有用である。抗体、抗原結合断片、又はエンドシアリン結合タンパク質は、単独で、又はコンジュゲートとして使用されてもよい。抗体及び結合タンパク質のコンジュゲーションは文献において周知である。抗体及びその抗原結合断片は、例えば、共有結合により抗体がそのエピトープに結合することを防がないように、任意の種類の分子の抗体への共有結合により修飾される誘導体を含む。適切な誘導体の例には、限定されないが、グリコシル化抗体及び断片、アセチル化抗体及び断片、ペグ化抗体及び断片、リン酸化抗体及び断片、並びにアミド化抗体及び断片が含まれる。本発明の抗体及びその誘導体は、それ自体、公知の保護/遮断基、タンパク質分解的切断、細胞リガンド又は他のタンパク質との連結などにより誘導体化されてもよい。更に、本発明の抗体及びその誘導体は1つ又は複数の非古典的アミノ酸を含有してもよい。哺乳動物細胞宿主の末梢血由来のものなどのポリクローナル抗体もまた、使用されてもよい。そのような細胞は、例えば、invivoでヒトエンドシアリンに結合できる抗体を産生するハイブリドーマ細胞を形成するために骨髄腫細胞と融合されてもよい。作用のいかなる特定の理論にも束縛されることを望まずに、抗体又はその抗原結合断片は、抗体又はその抗原結合断片の細胞外エピトープとの結合に起因してHUE齧歯動物内でエンドシアリン発現組織及び細胞と結合するのに特に有用であると考えられる。これにより、抗体の解離Kdの減少が導かれる。これは、組織又は組織培養物から単離するための細胞をターゲティングするのに特に良好な特徴である。ヒトエンドシアリンに結合する抗体を記載している米国特許公開第2008-0248034号は本明細書に参照として組み込まれる。一部の実施形態において、薬剤はヒトエンドシアリンに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適な実施形態において、薬剤は、エンドシアリンに結合するヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。好適には、抗体又は抗原結合断片は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含む。最も好適には、薬剤は、それぞれ配列番号5、6及び7のCDR1、CDR2及びCDR3を含む重鎖並びにそれぞれ配列番号8、9及び10のCDR1、CDR2及びCDR3を含む軽鎖を含むヒト化モノクローナル抗体又はその抗原結合断片である。一実施形態において、薬剤はMORAb-004MorphotekInc.、Exton、PAである。本発明の核酸薬剤は、ヒトエンドシアリンのinvivoでの発現を阻害又は抑制するために静脈内、筋肉内、噴霧、局所又は経口経路により投与され得るものである。核酸には、アンチセンスデオキシヌクレオチド、siRNA及びmiRNA並びにそれらの誘導体が含まれる。しかしながら、使用を限定することを望まずに、invivoで作用する核酸薬剤の開発はinvitroベースのシステムを使用して明らかにされていない。したがって、核酸薬剤をスクリーニングするためのHUE齧歯動物の使用により、潜在的な薬理学的用途についての薬剤の開発が可能となる。核酸薬剤は、単独で、又はコンジュゲートとして使用されてもよい。核酸のコンジュゲーションは文献において周知である。核酸スクリーニングは陽性の正常又は疾患組織においてヒトエンドシアリン発現を抑制する際の薬剤の効果を含み、分析は、曝露されたHUE齧歯動物由来の定常状態mRNA、タンパク質及び/又はエンドシアリン発現細胞を測定することで行われる。本発明の分析的齧歯動物は、限定されないが、癌、炎症又は眼科疾患などの病態を示すように準備される齧歯動物を含み、ヒトエンドシアリン薬剤がそれらの病態を変化させることについて試験できる。反対に、分析的齧歯動物は、限定されないが、創傷治癒などの欠損した又は最適以下のエンドシアリン活性が存在するモデルにおいて使用でき、ヒトエンドシアリン活性により欠損した生物学的プロセスを刺激できるものを識別するために薬剤をスクリーニングできる。本発明はまた、疾患の存在又は非存在をスクリーニングするための診断プローブとして使用できる薬剤を識別するためにHUE齧歯動物の使用を包含する。診断プローブは、限定されないが、ヒトエンドシアリン遺伝子産物に対するモノクローナル抗体、結合タンパク質及び標識した相補的核酸を含む、当業者により使用される分子的実態を含む。HUE齧歯動物を用いてヒトエンドシアリン結合薬剤をスクリーニングする方法抗体又は結合タンパク質特異性についてのスクリーニングHUE齧歯動物又はそれら由来の細胞、組織又は流体内でヒトエンドシアリンを発現する細胞又は組織に特異的に結合する抗体、抗原結合断片又はエンドシアリン結合タンパク質についてのスクリーニングは、当該技術分野において公知の免疫学的検定技術、例えばエンドシアリンを発現する組織又は細胞における免疫組織化学IHC又は免疫細胞化学ICCを使用して成し遂げることができる。反対に、抗体、抗原結合断片又はエンドシアリン結合タンパク質は、検出可能な標識例えば放射性同位体、発色蛍光色素、化学発光化合物、リン光化合物、ビオチン又は酵素で標識されてもよく、例えばHUE齧歯動物又はその組織内のinvivoでの画像化においてエンドシアリン発現細胞の検出に使用されてもよい。分析的マウスから識別された陽性の結合抗体又は結合タンパク質は、HUE齧歯動物の組織由来のヒトエンドシアリン発現細胞に結合できる薬剤を識別するために細胞ELISAベースのアッセイにおいて反応性について更にスクリーニングできる。ヒトエンドシアリンに反応性のある抗体又は結合タンパク質を産生するクローンが更なる増殖及び発生のために選択される。本発明の抗体、その誘導体及び結合タンパク質は、1×10-2未満の解離定数Kdを含む結合親和性を有する。一部の実施形態において、Kdは1×10-3未満である。他の実施形態において、Kdは1×10-4未満である。一部の実施形態において、Kdは1×10-5未満である。更に他の実施形態において、Kdは1×10-6未満である。他の実施形態において、Kdは1×10-7未満である。他の実施形態において、Kdは1×10-8未満である。他の実施形態において、Kdは1×10-9未満である。他の実施形態において、Kdは1×10-10未満である。更に他の実施形態において、Kdは1×10-11未満である。一部の実施形態において、Kdは1×10-12未満である。他の実施形態において、Kdは1×10-13未満である。他の実施形態において、Kdは1×10-14未満である。更に他の実施形態において、Kdは1×10-15未満である。活性薬剤についてスクリーニングするためにHUE齧歯動物を利用する方法本発明の方法は疾患及び非疾患状態における使用に適切である。本発明は、正常組織と比較して疾患組織におけるヒトエンドシアリンの高い発現により特徴付けられる異形成障害を示すHUE齧歯動物における薬剤のスクリーニングに適切である。抗ヒトエンドシアリン活性について試験され得る悪性組織には、限定されないが、卵巣腫瘍、腎腫瘍、大腸腫瘍、膵臓腫瘍、前立腺腫瘍、肺腫瘍、卵管腫瘍、子宮腫瘍、及び脳腫瘍が含まれる。限定されないが、関節炎組織又は炎症を起こした気道由来の組織を含む、炎症の影響を受けている組織も試験されてもよい。マウスにおける抗エンドシアリン活性について、眼組織も試験されてもよい。反対に、向上したエンドシアリン活性から恩恵を受け得る病態が、エンドシアリン生物活性を向上させる活性薬剤についてスクリーニングするために使用されてもよい。それらは、エンドシアリンリガンドアゴニストとして作用する薬剤及びその内因性活性単数又は複数を向上させるためにエンドシアリンタンパク質構造を修飾する薬剤であってもよい。最近、エンドシアリン経路が、新血管形成に関連する生物活性を促進するために血小板由来増殖因子PDGFレセプター経路によりクロストークすることが実証されているTomkowicz,B.ら2010CancerBiol.Ther.9:1-8。PDGFレセプター経路の活性を促進できるエンドシアリン結合薬剤は、創傷治癒及び他の関連障害に対して利益を与えることができる。エンドシアリン結合タンパク質並びに抗エンドシアリン抗体及びその抗原結合断片が、HUE齧歯動物における薬理活性を試験するために使用されてもよい。それらの活性には、治療活性を最大化すること及び/又は毒性試験において薬剤の効果を試験することが含まれる。抗エンドシアリン抗体及び抗原結合断片が、抗エンドシアリン活性を最大化するための投薬効果及び薬物濃度を試験するために使用されてもよい。本発明はまた、HUE齧歯動物を使用して疾患を抑制できる薬剤をスクリーニングするのに適切である。これらの薬剤は、エンドシアリンタンパク質を調節する血管新生阻害分子を含んでもよい。この方法は、腫瘍を保有するHUE齧歯動物を試験分子と接触させる工程と、腫瘍成長の阻害を検出する工程とを含み、試験分子と接触したマウスにおける腫瘍成長が、試験分子と接触していないマウスにおける腫瘍成長と比較して低下する場合、該試験分子はエンドシアリンタンパク質又は活性を調節する血管新生阻害分子として識別される。任意の適切な腫瘍が、抗血管新生分子を試験するモデルを提供するために任意の適切な様式で注入されてもよい。腫瘍の齧歯動物レシピエントは任意の適切な系であってもよい。腫瘍はトランスジェニック齧歯動物に対して同系、異系又は異種であってもよい。レシピエントは、限定されないが、nu/nu、scid及びベージュマウスを含む、1つ又は複数の免疫関連機能において免疫応答性又は免疫不全性であってもよい。HUE齧歯動物に、同系腫瘍細胞、例えばB16黒色腫ATCCを接種できる。腫瘍成長に対する抗体又はその抗原結合断片投与の効果は、従来の方法を使用して原発性又は転移性腫瘍成長を定量することにより解明できる。種々の異なる試験抗血管新生分子は本明細書に提供した方法を使用して識別できる。抗血管新生分子は多数の化学的分類を包含できる。特定の実施形態において、それらは、有機分子、好適には50ダルトン超且つ約2,500ダルトン未満の分子量を有する小有機化合物である。抗血管新生分子は、タンパク質との構造的相互作用、特に水素結合に必要な官能基を含んでもよく、少なくともアミン、カルボニル、ヒドロキシル又はカルボキシル基、好適には官能化学基のうちの少なくとも2つを含んでもよい。抗血管新生分子は、環状炭素構造若しくは複素環構造及び/又は上記の官能基の1つ又は複数と置換された芳香族若しくは多環芳香族構造を含んでもよい。抗血管新生分子はまた、ペプチド、糖類、脂肪酸、ステロイド、プリン、ピリミジンなどの生体分子、それらの誘導体、構造的類似体又は組み合わせを含む。対象の試験抗血管新生分子はまた、抗体若しくは結合断片又はそれらの模倣物、例えばFv、Fab’2及びFabなどのペプチド及びタンパク質薬剤を含んでもよい。試験抗血管新生分子はまた、合成又は天然化合物のライブラリーを含む広範囲の源から得られ得る。例えば、多数の手段が、無作為化オリゴヌクレオチド及びオリゴペプチドの発現を含む、広範囲の有機化合物及び生体分子の無作為及び指向性合成に利用可能である。代替として、細菌、真菌、植物及び動物抽出物の形態の天然化合物のライブラリーが利用可能であるか又は容易に作製される。加えて、天然又は合成的に産生されたライブラリー及び化合物は、従来の化学、物理及び生化学手段により容易に修飾され、組み合わせライブラリーを作製するために使用されてもよい。公知の薬理作用剤が、構造的類似体を生成するために、アシル化、アルキル化、エステル化、アミド化amidificationなどの指向性又は無作為化学修飾に供されてもよい。試験抗血管新生分子は、それが、腫瘍の成長を少なくとも20、しばしば30、40、50、60、70、80又は90及び時々100、特異的に阻害できる場合、阻害剤として識別される。成長阻害は任意の簡便な測定方法を使用して定量できる。例えば、原発性腫瘍成長に関して、腫瘍体積を算出するために腫瘍塊の垂直測定が行われる。転移成長は必要に応じて顕微鏡分析又は巨視的分析により確認できる。腫瘍はトランスジェニック動物に対して同系、異系又は異種であってもよい。試験分子は、腫瘍接種の時点、霊長類の腫瘍成長の確立後、又は局所及び/若しくは遠隔転移の確立後に投与されてもよい。試験分子の単回又は複数回投与は、限定されないが、静脈内、腹腔内、腫瘍内、皮下及び皮内を含む、任意の簡便な投与様式を使用して与えられてもよい。以下の実施例は本発明を例示するために提供し、本発明の限定とみなされるべきではない。例1HUEマウスを、ヒトエンドシアリンを発現し、内因性エンドシアリン遺伝子産物を欠失するように操作した。全エンドシアリンオープンリーディングフレームORFをコードするヒト相補的cDNAを、マウスエンドシアリン遺伝子座を含有するマウスゲノム断片内にクローニングした。図1は遺伝子座をクローニングするための戦略を提供する。ターゲティング構築物は、その構築物を組み込んだ細胞の選択に役立つようにネオマイシン耐性遺伝子を含有する。マウス第19染色体配列n.t.5,038,078~5,100,640をアンサンブルデータベースから読み出し、参照として使用した。マウスRP23-410O10BACからPCRにより5’ホモロジーアーム5.0kb及び3’ホモロジーアーム2.8kbを生成した。以下のプライマー及び条件を使用するPCRによりターゲティングベクターのホモロジーアーム及びノックイン領域を作製した。大文字はアームに属する配列を表す。小文字は後のクローニング工程に加えられる制限エンドヌクレアーゼ部位を表す。PCRサイクル条件は以下の通りであった:94°C15秒、58°C15秒、68°C6分、25サイクル。ノックイン領域はヒトCD248cDNAプラスミドを含有した。これらの断片をLoxNwCD内でクローニングし、制限消化及びエンドシークエンシングend-sequencingにより確認した。最終ベクターは標準的な分子クローニングにより得た。ホモロジーアーム及びノックインヒトCD248断片とは別に、最終ベクターはまた、Neo発現カセットES細胞の陽性選択のため及びDTA発現カセットES細胞の陰性選択のために隣接するloxP配列を含有する。最終ベクターは制限消化及びエンドシークエンシング分析の両方により確認した。ヒトエンドシアリンターゲティング配列は以下の通りである配列番号11イタリックでホモロジーアーム、太字でノックイン領域、LoxP部位は下線、確認した配列は強調/影付き:エレクトロポレーション前に最終ベクターを線形化するためにKpnIを使用した。次いで得られた構築物を線形化し、マウス胚幹細胞ESC系に導入し、遺伝子ノックアウト又はトランスジェニック胚幹ES細胞を生成する当業者に公知の標準的な方法を使用することにより構築物をマウスエンドシアリン遺伝子座に組み込むためにポリメラーゼ連鎖反応PCRによりスクリーニングした。ターゲティング構築物が内因性マウスエンドシアリン遺伝子座中に組み込まれていることを見出したクローンを増殖させ、サザンブロットにより更に確認した。マウス胚盤胞内に注入するためにクローンAを使用し、ゲノムPCR又は尾クリッピングから抽出されたDNAを使用するサザンブロッティングを含む、当業者に公知の方法を使用して、得られたマウスの子をスクリーニングして、ターゲティング構築物を含有するそれらのマウスを識別した。次いでそれらのキメラマウスを成長させ、C57BL/6C57マウスとも称されるマウスと交配してヘテロ接合性及び最終的にゼロのマウスエンドシアリン及び機能的ヒトエンドシアリン発現を含有するホモ接合性マウスを生成した。図2はHUEレーン1~3及び野生型C57レーン4マウス由来のヒトエンドシアリンのタンパク質発現を示す。HUEマウスは、野生型対照C57マウスを使用して決定した場合、マウスエンドシアリン遺伝子のものと同様のヒトエンドシアリン発現パターンを有することを確認した。例2ヒトエンドシアリンに結合できる薬剤をスクリーニングするためのHUE分析的マウスの有用性を実証するために、2つの異なる癌モデルにおいてHUEマウスを利用した。1つのモデルSCモデルと名付けたは、HUE及び野生型C57対照マウスの脇腹内の皮下に埋め込まれる同系腫瘍を移植することを必要とし、その野生型C57対照マウスはインタクトなマウスエンドシアリンを有し、ヒトエンドシアリンを発現しない。他方のモデル肺Metモデルは、invivo生物発光画像法Min、JらNatMed.2010年3月16日3:286-294により腫瘍体積を測定するために使用できるルシフェラーゼを発現するように安定に形質導入される、C57同系転移Lewis肺癌細胞を使用した。HUE又はC57対照マウス内に導入した場合、これらの細胞は、宿主動物の肺に転移できることが以前に示されている。その全体が参照として本明細書に組み込まれる、Jenkinsら、ClinExpMetastasis.2003、208:733-44SCIDマウスに移植し、処置に応答して生物発光画像法BLIを使用して生物発光を測定されるルシフェラーゼを発現するように操作したヒト腫瘍細胞系も参照のこと。SCモデルにおいて、脇腹内への腫瘍細胞の首尾良い埋め込み後、マウスエンドシアリンを認識しないヒト化抗ヒトエンドシアリンMORAb-004抗体又は対照抗体でマウスを処置し、17日目に測定して腫瘍成長を抑制する能力を試験した。図3に示すように、抗ヒトエンドシアリン抗体で処置したHUEマウスは対照ヒトIgGで処置したマウスと比較して低下した腫瘍成長を示した。同じ実験において、抗ヒトエンドシアリン抗体MORAb-004又は対照ヒトIgGは、野生型C57マウスに埋め込んだ腫瘍の成長低下を示さず、その活性としてMORAb-004の特異性がヒトエンドシアリンに制限され、マウスエンドシアリンに制限されないことが実証される。HUE分析的マウスを使用する第2の例を肺Metモデルを利用して示す。癌細胞をHUEマウスに導入した。FB5、MORAb-004又はビヒクルリン酸緩衝溶液PBSでの処置を前日に開始し、3、5、7及び10日継続した。肺における転移性疾患の程度を、invivo生物発光画像法により14日まで一週間に3回定量した。図4に示すように、いずれかの抗ヒトエンドシアリン抗体で処置したマウスは、ビヒクルで処置したマウスと比較して低下した転移性疾患を示した。まとめると、上記のデータにより、発見、開発及び検証のためにヒトエンドシアリンをターゲティングすることができる薬剤を識別するための分析的マウスとして利用した場合、HUEマウスの有用性が実証される。例3例1に従って生成したHUEマウスに、脇腹の皮下にB16F10T1細胞を注入した。腫瘍細胞移植の3日後に開始して継続的に動物に40mg/kgのMORAb-004又はPBSの対照のみの5回の投与を与えた。処置後、腫瘍血管系を評価するために、X線マイクロ-CTを使用した。マイクロ-CTは全腫瘍における腫瘍血管系の全体的分析を提供するので、免疫組織化学などの一部の他のアプローチに固有の一部の制限を克服できる。移植の17日後、安楽死させる10分前に、腫瘍保有動物に50μlのヘパリンの腹腔内注射を与えた。胸腔を開口し、20G針を使用して小さな切り目を心臓の左心房に入れ、ポリエチレンカニューレ内径、0.58mm、外径、0.96mmを左心室に通し、手動で所定の位置に固定した。15~20mlのPBSを6mlmin-1の速度で手動で灌流して血液を除去した。MICROFILCarver、市販のクロム酸鉛ラテックスを製造業者により推奨されるように調製した。次いで2mlmin-1の速度で10mlのMICROFILをマウスに手動で灌流した。注入したラテックス混合物を60分間室温で重合させ、次いで対象の組織を解剖する前に動物を4~8°Cで一晩冷蔵した。解剖した腫瘍を10の中性緩衝ホルマリンに浸漬した。次いでNumiraBiosciencesにより実施されるX線マイクロ-CTシステムを用いて腫瘍を画像化し、画像分析ソフトウェアパッケージAltaview、Numiraを使用して分析した。その結果は図5に見られ得る。参考文献AsaharaTetalEndothelialprogenitorcellsforpostnatalvasculogenesisAmJPhysiolCellPhysiol2004287C572C579BagleyetalHumanendothelialprecursorcellsexpresstumorendothelialmarker1endosialinCD248MolCancerTher2008725362546BagleyetalEndosialinTEM1CD248isapericytemarkerofembryonicandtumorneovascularizationMicrovascRes200819BradyetalHumanendosialinisabundantlyexpressedinhighlymalignantandinvasivebraintumorsJNeuropatholgyandExpNeurology20046312741283BuhringHJSeiffertMBockTASchedingSThielAScheffoldAKanzLBruggerWExpressionofnovelsurfaceantigensonearlyhematopoieticcellsAnnNYAcadSci1999Apr308722538discussion389CarsonWalterEBWatkinsDNNandaAVogelsteinBKinzlerKWStCroixBCellsurfacetumorendothelialmarkersareconservedinmiceandhumansCancerRes2001Sep1561664955ChristianSAhornHKoehlerAEisenhaberFRodiHPGarinChesaPParkJERettigWJLenterMCMolecularcloningandcharacterizationofendosialinaCtypelectinlikecellsurfacereceptoroftumorendotheliumJBiolChem2001Mar9276740814ConejoGarciaJRBuckanovichRJBenenciaFCourregesMCRubinSCCarrollRGCoukosGVascularLeukocytesContributetoTumorVascularizationBlood2005Sep91056791DasAetalRetinalandchoroidalangiogenesispathophysiologyandstrategiesforinhibitionProgRetinEyeRes200322721748DhanabaletalAntiangiogenictherapyasacancertreatmentparadigmCurrMedChemAntiCancAgents20055115130FlorellSRetalPreservationofRNAforfunctionalgenomicstudiesamultidisciplinarytumorbankprotocolModPathol200114116128GalianoRDetalTopicalvascularendothelialgrowthfactoracceleratesdiabeticwoundhealingthroughincreasedangiogenesisandbymobilizingandrecruitingbonemarrowderivedcellsAmJPathol200416419351947KurosawaNKanemitsuYMatsuiTShimadaKIshihamaHMuramatsuTGenomicanalysisofamurinecellsurfacesialomucinMGC24CD164EurJBiochem1999Oct126546672KyriakosRJetalThefateofantibodiesboundtothesurfaceoftumorcellsinvitroCancerRes199252835842MacFadyenJRetalEndosialinisamarkerofstromalfibroblastsandisnotselectivelyexpressedontumourendotheliumFEBS200557925692575MartyetalIsolationandcharacterizationofascfvantibodyspecificfortumorendothelialmarker1anewreagentfortargetedtumortherapyCancerLetters2006235298308MinJZaslavskyAFedeleGMcLaughlinSKReczekEEetalAnoncogenetumorsuppressorcascadedrivesmetastaticprostatecancerbycoordinatelyactivatingRasandNFκBNatMed162862942010OpavskyRHaviernikPJurkovicovaDGarinMTCopelandNGGilbertDJJenkinsNABiesJGarfieldSPastorekovaSOueAWolffLMolecularcharacterizationofthemouseTem1endosialingeneregulatedbycelldensityinvitroandexpressedinnormaltissuesinvivoJBiolChem2001Oct1927638795807PaleologEMetalAngiogenesisinarthritisroleindiseasepathogenesisandasapotentialtherapeutictargetAngiogenesis19992295307PetersetalContributionofbonemarrowderivedendothelialcellstohumantumorvasculatureNatMed200511261262PrestaLGAntibodyengineeringCurrOpStructBiol19922593596QueenCetalAhumanizedantibodythatbindstotheinterleukin2receptorProcNatAcadSciUSA1989861002910033RettigWJGarinChesaPHealeyJHSuSLJaffeEAOldLJIdentificationofendosialinacellsurfaceglycoproteinofvascularendothelialcellsinhumancancerProcNatlAcadSciUSA1992Nov1589108326StCroixBRagoCVelculescuVTraversoGRomansKEMontgomeryELalARigginsGJLengauerCVogelsteinBKinzlerKWGenesexpressedinhumantumorendotheliumScience2000Aug1828911212TomkowiczBRybinskiKFoleyBEbelWKlineBRouthierESassPNicolaidesNCGrassoLandZhouYExpressionofHumanEndosialinPromotesCellularAdhesiontoFibronectinThroughDirectBindingandActivationofb1IntegrinsProcNatlAcadSci200710417965970TomkowiczBRybinskiKSebeckDSassPMNicolaidesNCGrassoLandZhouYEndosialinTEM1CD248RegulatesPericyteProliferationthroughPDGFReceptorSignalingCancerBiolTher2010918WattSMChanJYCD164anovelsialomucinonCD34cellsLeukLymphoma2000Mar37125WattSMBuhringHJRappoldIChanJYLeePrudhoeJJonesTZannettinoACSimmonsPJDoyonnasRSheerDButlerLHCD164anovelsialomucinonCD34anderythroidsubsetsislocatedonhumanchromosome6q21Blood1998Aug19284966WilkinsonBerkaJLetalVasoactivefactorsanddiabeticretinopathyvascularendothelialgrowthfactorcycoloxygenase2andnitricoxideCurrPharmDes20041033313348YancopoulosGDetalVascularspecificgrowthfactorsandbloodvesselformationNature2000407242248ZannettinoACBuhringHJNiuttaSWattSMBentonMASimmonsPJThesialomucinCD164isanadhesiveglycoproteinexpressedbyhumanhematopoieticprogenitorsandbonemarrowstromalcellsthatservesasapotentnegativeregulatorofhematopoiesisBlood1998Oct1592260912本発明の配列配列番号1マウスエンドシアリン又はTEM1cDNA受託番号_054042配列番号2マウスエンドシアリン又はTEM1タンパク質受託番号_054042配列番号3ヒトエンドシアリン又はTEM1cDNA受託番号_020404配列番号4ヒトエンドシアリン又はTEM1タンパク質受託番号_020404"