"配列番号9に示すアミノ酸配列を含むポリペプチド。IMet-X-tag、IIMet-X、IIIX-tag、IVMet-tag-X、Vtag-X、VItag-X-tag、VIIX、およびVIIIMet-tag-X-tag式中、Xは配列番号9に示すアミノ酸配列であり、Metはメチオニンであり、tagはペプチドタグ配列であるからなる群から選択される構造を含む請求項1に記載のポリペプチド。前記X-tag構造からなる請求項2に記載のポリペプチド。前記タグが配列番号11に示すアミノ酸配列からなることを特徴とする請求項2または3に記載のポリペプチド。配列番号7に示すアミノ酸配列を含む請求項1~4のいずれか1項に記載のポリペプチド。配列番号7に示すアミノ酸配列からなる請求項5に記載のポリペプチド。野生型Derp2よりもアレルゲン活性が低いことを特徴とする請求項1~6のいずれか1項に記載のポリペプチド。アレルギー性疾患の治療または予防に使用するための請求項1~7のいずれか1項に記載のポリペプチド。前記アレルギー性疾患がチリダニに対するアレルギーであることを特徴とする請求項8に記載のポリペプチド。請求項1~7のいずれか1項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。配列番号8または10に示す核酸配列を有する請求項10に記載のポリヌクレオチド。請求項10または11に記載のポリヌクレオチドを含むベクターまたはプラスミド。請求項1~7のいずれか1項に記載のポリペプチド、請求項10もしくは11に記載のポリヌクレオチド、または請求項12に記載のベクターもしくはプラスミドと、薬学的に許容される希釈剤または賦形剤とを含む医薬組成物。請求項1~7のいずれか1項に記載のポリペプチド、請求項10もしくは11に記載のポリヌクレオチド、または請求項12に記載のベクターもしくはプラスミドと、必要に応じてアジュバントとを含むワクチン。請求項10もしくは11に記載のポリヌクレオチド、または請求項12に記載のベクターもしくはプラスミドを含む宿主細胞。本願発明者らは、ハイブリッド技術を用いてHDMアレルギー免疫療法用の低アレルゲン性混合ワクチンを構築した。構築された2種のモザイクタンパク質はそれぞれ、Derp1由来フラグメントとDerp2由来フラグメントとからなる。一方の構築物は、2種の野生型アレルゲンが元来有するアミノ酸配列を含むものであったDerp2/1C、本明細書においてDp2/1Cとも呼ぶ。他方の構築物は、システイン残基がセリン残基で置換されたものであったDerp2/1S、本明細書においてDp2/1Sとも呼ぶ。これら2種のモザイクタンパク質は、IgE反応性およびアレルゲン活性がほとんど完全に欠失していることを特徴とする点で、Asturiasにより記載されたQM1やBussieresにより記載された誘導体とは異なるものである。これら2種の誘導体すなわち、Derp2/1CおよびDerp2/1Sはいずれも、Derp1配列要素をすべて含む点でChenにより記載された誘導体とは異なるものである。これら2種の誘導体すなわち、Derp2/1C、Derp2/1Sそれぞれによって誘導されたIgG抗体は、2種のアレルゲンDerp1またはDerp2とアレルギー患者IgEとの結合を阻害したが表1、このような阻害作用はAsturiasによって作製されたQM2により誘導されたIgGでは示されていない。予想外にも、システイン残基がセリン残基に置換された点のみにおいて異なるDerp2/1Sによって誘導されたIgG抗体は、Derp1とアレルギー患者IgEとの結合を、Derp2/1Cを用いた免疫化により誘導されたIgG抗体の2倍を超える程度で阻害した実施例6および表1のデータを参照。したがって、本発明は、Derp2/1Sのアミノ酸配列を含むポリペプチド、またはDerp2/1Sのアミノ酸配列と実質的に同じアミノ酸配列を含むポリペプチドに特に関する。本発明の第1の態様は、配列番号9または7に示すアミノ酸配列を有するポリペプチドである。本発明の別の態様は、本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドである。本発明のさらなる別の態様は、本発明のポリヌクレオチドを含むベクターまたはプラスミドである。本発明のさらなる別の態様は、本発明のポリペプチド、本発明のポリヌクレオチド、または本発明のベクターもしくはプラスミドと、薬学的に許容される希釈剤または賦形剤とを含む医薬組成物である。本発明のさらなる別の態様は、アレルギー、好ましくはチリダニアレルギーの予防および/または治療のための本発明のポリペプチドの使用である。また、本発明は、アレルギー、好ましくはチリダニアレルギーの予防用および/または治療用薬剤の製造のための本発明のポリペプチドの使用にも関する。本発明のさらなる別の態様は、アレルギー性疾患の治療および/または予防が必要な個体に治療有効量の本発明のポリペプチドまたはポリヌクレオチドを投与することを含む、アレルギー性疾患の治療および/または予防方法である。本発明のさらなる別の態様は、アレルギー性疾患の治療および/または予防が必要な個体に治療有効量の本発明の医薬組成物またはワクチンを投与することを含む、アレルギー性疾患の治療および/または予防方法である。表1は、ウサギ抗Derp1抗血清、ウサギ抗Derp2抗血清、またはウサギ抗Derp2/1抗血清による、nDerp1またはrDerp2とアレルギー患者のIgEとの結合阻害を示す。結果はIgE結合阻害率で示す。本発明のポリペプチド本発明のポリペプチドは、配列番号9に示すアミノ酸配列を含むか、または配列番号9に示すアミノ酸配列と実質的に同じアミノ酸配列を含む。実質的に同じとは、配列番号9において1~5個のアミノ酸が置換されているが、実質的に同じ生物学的活性を有する変異体を指す。本発明のポリペプチドは、必ずしも上記アレルゲン由来のアミノ酸配列のみからなる必要はない。フラグメント間Derp1またはDerp2由来の連続したアミノ酸配列のフラグメントに外来配列例えばスペーサー配列を挿入することが可能である。また、本発明のポリペプチドは、宿主細胞において発現させたポリペプチドの精製を容易にするタグ配列を含んでいてもよい。本明細書においてタグとは、提供される上記のポリペプチドの検出または精製に用いることができる特徴的なアミノ酸配列を指し、タグ配列は本発明の組成物の本質的な機能に寄与することはない。タグ配列としては、FLAGタグ、ヘマグルチニンHAタグ、mycタグ、およびポリヒスチジンタグが挙げられるが、これらに限定されない。他のタグも当業者には公知である。タグとしては、Ni2キレートクロマトグラフィーによる精製を可能とするヘキサヒスチジンタグが好ましい。さらに、宿主細胞において発現させた本発明のポリペプチドの1位のアミノ酸に外来メチオニン残基が含まれていてもよい。このようなメチオニン残基は、ポリペプチドのN末端部分が内部アレルゲンフラグメントまたはC末端アレルゲンフラグメントである場合に存在することが多い。さらに、提供される上記のポリペプチドにおいて、ポリペプチドの本質的な活性に寄与しないN末端アミノ酸、C末端アミノ酸、または中間アミノ酸が欠失していてもよい。本発明の低アレルゲン性ポリペプチドは、N末端からC末端の方向に記載された以下の構造I~VIII:IMet-X-tag、IIMet-X、IIIX-tag、IVMet-tag-X、Vtag-X、VItag-X-tag、VIIX、およびVIIIMet-tag-X-tag式中、MetはN末端メチオニン残基、Xは配列番号9に示すアミノ酸配列、tagはペプチドタグ配列例えばHis6であるのいずれか1つを含むか、またはこれらの構造のいずれか1つからなっていてもよい。上記タグ配列は、通常5~15アミノ酸長である。本発明のポリペプチドは、配列番号7および9からなる群から選択されるアミノ酸配列からなっていてもよい。IgE反応性の測定本発明のポリペプチドは、Derp1および/またはDerp2よりもIgE反応性が低減されていることが好ましい。広義においてIgE反応性とは、物質がIgE抗体と結合する能力を意味する。より具体的には、本明細書においてIgE反応性は、本発明のポリペプチドのフラグメントが由来するアレルゲンの1つ以上に対してアレルギーを有する個体から得られたIgE抗体に本発明のポリペプチドが結合する能力を指す。IgE反応性は、1Derp1およびDerp2の1つ以上に対してアレルギーを有する個体の血清IgEと、2本発明のポリペプチドとの結合の程度を求めることにより測定してもよい。この測定は参考文献26に記載された方法によって行ってもよい。あるいは、Derp1およびDerp2の1つ以上に対してアレルギーを有する個体から単離したヒト好塩基球におけるCD203cの発現を分析することにより、IgE反応性およびアレルゲン活性を求めてもよい。実施例4および参考文献32を参照されたい。T細胞反応性の測定本発明のポリペプチドはT細胞反応性を有することが好ましい。本明細書においてT細胞反応性は、物質がT細胞レセプターに特異的に結合する能力を指す。より具体的には、T細胞反応性は、本発明のポリペプチドがT細胞の増殖を誘導する能力を意味する。本発明のポリペプチドのT細胞反応性は、1本発明のポリペプチドのフラグメントが由来するアレルゲンの1つ以上に対してアレルギーを有する個体から単離した末梢血単核球PBMCを提供し、2PBMCに含まれるT細胞の増殖の程度を求めることにより測定することができる。BallらAllegry6456980を参照されたい。防御IgG応答の誘導本発明のポリペプチドは、本発明のポリペプチドのフラグメントが由来するアレルゲンの1つ以上に対してIgG応答を誘導する能力を有することが好ましい。IgG応答は、1非ヒト哺乳類例えば、マウス、ラット、またはウサギを本発明のポリペプチドで免疫化し、2本発明のポリペプチドのフラグメントが由来するアレルゲンの1つ以上に特異的なIgG抗体の非ヒト哺乳類における産生量を測定することにより求めてもよい。測定されるIgG抗体はIgG1抗体であることが好ましい。工程2はELISAアッセイを用いて行うことが好ましい。実施例5を参照されたい。本発明のポリペプチドは、防御性IgG応答を誘導する能力を有することが好ましい。防御性IgG応答は、1本発明のポリペプチドを用いて非ヒト哺乳類例えば、マウス、ラット、またはウサギを免疫化することにより得られたIgG抗体を含む組成物を提供し、2本発明のポリペプチドのフラグメントが由来するアレルゲンの1つ以上に対してアレルギーを有する個体から得られたIgE抗体を含む組成物を提供し、3上記IgG抗体含有組成物が上記アレルゲンの1つ以上と上記IgE抗体との結合を阻害することができるか否か、および/またはその阻害の程度を測定することにより求めてもよい。上記の測定はELISAアッセイを用いて行うことが好ましい。例えば、本発明のポリペプチドのフラグメントが由来する野生型アレルゲンをELISAプレートに固相化してもよい。次いで、前処理したELISAプレートと上記IgG抗体含有組成物とを接触させ、IgG抗体を固相化アレルゲンに結合させてもよい。洗浄後、上記IgE抗体含有組成物をELISAプレートに接触させる。洗浄後、IgE抗体量を求める。実施例6を参照されたい。本発明のさらなる態様本発明はさらに、本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに関する。遺伝コードの縮重のため、単一のポリペプチドが多数の異なるポリヌクレオチド分子によってコードされうる。本発明のポリヌクレオチドは、宿主細胞における発現によりポリペプチドを得るための発現構築物であることが好ましい。この発現構築物は当該技術分野で一般に知られている構成成分をさらに含んでもよく、このような構成成分として、プロモーター配列、抗生物質耐性因子をコードする遺伝子、複製起点などが挙げられる。本発明のポリヌクレオチドは配列番号10に示す核酸配列を含むことが好ましい。本発明のポリヌクレオチドは配列番号8に示す核酸配列を含むことがより好ましい。本発明はさらに、本発明のポリヌクレオチドでトランスフェクトまたは形質転換した細胞に関する。好適な細胞としては、真核細胞および原核細胞が挙げられる。真核細胞のトランスフェクションは当該技術分野において公知の方法により行ってもよく、このような方法としては、リン酸カルシウムによるトランスフェクション、エレクトロポレーション、リポフェクションなどが挙げられる。本発明はさらに、本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、または細胞を含む医薬組成物またはワクチンに関する。本発明の医薬組成物は、緩衝剤や塩類溶液などの薬学的に許容される担体または希釈剤の1以上をさらに含んでいてもよい。本発明の医薬組成物はワクチン組成物であることが好ましい。特定の実施形態においては、本発明の医薬組成物は水酸化アルミニウムなどのアジュバントをさらに含んでいてもよい。本発明はまた、本発明のポリペプチドの調製方法に関する。本発明の調製方法は、本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを提供すること、該ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入すること、得られた宿主細胞を本発明のハイブリッドポリペプチドの発現条件下において培養すること、および宿主細胞から発現産物を回収することを含む。本発明のポリヌクレオチドは当該技術分野で公知の方法により調製してもよい。本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドをPCR技術を使用して調製することが好ましい。本発明はさらに、アレルギー性疾患、好ましくはチリダニアレルギーの治療用および/または予防用薬剤を調製するための、本明細書に記載のポリペプチド、ポリヌクレオチド、または細胞の使用に関する。このような薬剤は、I型アレルギーに対するDNAベースワクチン接種に直接用いることができるワクチンをコードするポリヌクレオチドから構成されていてもよい。免疫療法において現在日常的に用いられているような、I型アレルギー性疾患を治療するための経口製剤、舌下製剤、または非経口製剤を調製するために、本発明の組換えポリペプチドまたは合成ポリペプチドを使用してもよい。このような製剤としては、舌下免疫療法用製剤、および注射免疫療法用のアジュバント結合ハイブリッドポリペプチドが挙げられる。可能な適用としては、細胞をベースとした免疫療法なども挙げられ、この療法に用いられる細胞は、例えば樹状細胞または他の抗原提示細胞であってもよい。これらの細胞はインビボにおいて形質転換されて抗原を発現する。好適なベクターで形質転換したオルソロガスな細胞を用いることが好ましい。適用の一態様は、アジュバント結合ポリペプチドの皮下注射であってもよい。別の可能性として、本発明のポリペプチドを経口投与または経鼻投与して、該ポリペプチドの構成成分に対する免疫寛容またはアネルギーを誘導することができる。上述した用途に適用可能な製剤はすべて、当業者に公知の基準アジュバントの用量および用法に従って調製することができる。本発明はさらに、ワクチン予防接種または寛容誘導に用いる薬剤を調製するための、本明細書に記載のポリペプチド、ポリペプチド、または細胞の使用に関する。ハイブリッドポリペプチドの予防的投与とは、個体、好ましくはI型アレルギーに罹患したことのない子供にハイブリッドポリペプチドを投与し、このハイブリッドワクチンの構成成分に対する免疫寛容、アネルギー、もしくは不応答状態、または防御免疫を誘導することを意味する。このような状態への誘導は、確定診断されたアレルギー性疾患の治療を目的とした様々なプロトコルによって達成してもよい。この予防的な治療は、本明細書に記載のポリペプチドまたはポリヌクレオチドを用いて行ってもよい。さらなる別の実施形態において、本発明は、試料中のアレルゲン性タンパク質に対する抗体を検出するための、本明細書に記載のポリペプチドの使用に関する。この抗体は、IgM抗体、IgE抗体、IgG抗体、またはIgA抗体であってもよい。抗体の濃度は体液から得られた試料を用いて測定してもよい。試料は動物由来またはヒト由来であってもよい。このような試験は、固相に固定化されたポリペプチドまたは液相に存在するポリペプチドに基づいて行ってもよい。このような試験として、ELISA、ウエスタンブロッティング、固相化ポリペプチドを試料中の特異的抗体に結合させる他の試験などが挙げられる。あるいは、抗体を含有する液体にポリペプチドを直接加え、例えば競合免疫アッセイなどにおいて特異的抗体を吸着させてもよい。本発明のポリペプチドは、T細胞増殖試験などの細胞試験に使用してもよい。以下の実施例により本発明をさらに説明するが、本発明の範囲はこれらの実施例に限定されない。実施例1:Derp2/1モザイクタンパク質の構築Derp2/1モザイクタンパク質を構築するため、Derp1由来の3つのフラグメント1.1aa1~84;1.2aa85~143;1.3aa144~222と、Derp2由来の2つのフラグメント2.1aa1~53;2.2aa54~129とを、1.3、2.2、1.2、2.1、1.1の順序で再構築した図1A。2種のDerp2/1モザイクタンパク質をそれぞれコードする2種の合成遺伝子は、C末端にヘキサヒスチジンタグを付加し、かつ大腸菌ATGbiosynthetics、ドイツ、メルツハウゼンにおける発現のためにコドンを最適化して合成した。一方の遺伝子は、Derp1およびDerp2元来のアミノ酸配列をコードするDNAを含み、この配列は12個のシステイン残基を有していたDp2/1C図1B。他方の遺伝子は、システイン残基をセリン残基で置換したDp2/1S図1C。これらの合成遺伝子を発現ベクターpET17bのマルチクローニング部位のNdeI/EcoRIフラグメントにクローン化し、DNA配列をシークエンシングATGbiosyntheticsにより決定した。実施例2:Derp2/1モザイクタンパク質の発現および精製Derp2/1構築物を含有する発現ベクターを大腸菌株BL21DE3に導入して形質転換させた。培養液250ml中において、OD600=0.8、37°C、4時間の条件下で0.5mMイソプロピル-β-チオガラクトピラノシドIPTGで誘導することによりタンパク質を発現させ、4°C下で4000×g、15分間遠心分離を行い、細胞を採取した。250mlの培養液から得られた細菌ペレットを、25mMイミダゾールおよび0.1v/vトリトンX-100を含む溶液pH7.410ml中に再懸濁した。凍結融解サイクル-70°C/50°Cを3回繰り返して細胞を溶解し、DNaseI1μgとともに室温で10分間インキュベーションすることによりDNAを分解し、細胞残渣を遠心分離4°C、10,000×g、30分間にて除去した。6M塩酸グアニジン、100mMNaH2PO4、10mMTris-Cl、pH8において室温で4時間可溶化した封入体画分のペレットからDp2/1Cモザイクタンパク質およびDp2/1Sモザイクタンパク質を得た。不溶性残渣を遠心分離4°C、10,000×g、15分間にて除去し、変性条件下で2種のモザイクタンパク質をNi-NTA樹脂アフィニティーカラムキアゲン、ドイツ、ヒルデンで精製した。上記2種の組換えタンパク質を90を超える純度で含有する複数の画分を、10mMNaH2PO4pH4.7に対して透析し、タンパク質の終濃度をBCAタンパク質アッセイキットノバジェン、メルク、ドイツ、ダルムシュタットで測定した。実施例3:Derp2/1モザイクタンパク質の特性解析純度および分子質量を図2Aに示すSDS-PAGEによって調整した。2種のモザイクタンパク質のいずれにおいても、約37kDaにはっきりとしたバンドが認められた。これらのモザイクタンパク質の重合挙動に関する情報を得るために、還元条件下および非還元条件下でSDS-PAGEを行った図2Bに示す。還元条件下においては、β-メルカプトエタノールを含有する試料緩衝液を使用し、試料を95°Cで5分間煮沸した。非還元条件下においては、β-メルカプトエタノールを含有しない試料緩衝液を使用した。還元条件下では、2種のDerp2/1モザイクタンパク質は単量体タンパク質として出現した図2B、レーンr。これに対して、非還元条件では2種のDerp2/1モザイクタンパク質は凝集体を形成したが、Derp2/1SよりもDerp2/1Cにおいてより多くの凝集体の形成が見られた図2B、レーンnr。タンパク質のフォールディングを分析するため、10mMNaH2PO4pH4.7中のnDerp1、rDerp2、Derp2/1C、およびDerp2/1Sタンパク質濃度:0.1mg/mlについて、光路長0.2cmの長方形石英キュベットを用いて円偏光二色性CD測定を行った。分解能0.5nmおよび走査速度50nm/分の条件下で190~260nmにおいてスペクトルを記録し、3回の走査により得られた値を平均した。対応する緩衝液10mMNaH2PO4、pH4.7を用いて同一条件下で得られたベースラインスペクトルを差し引くことにより、最終的に得られたスペクトルを補正した。結果を所定の波長における平均残基楕円率θとして表す。nDerp1のCDスペクトルにおいては、最小値が208nmおよび222nmに見られたことから、nDerp1はα-ヘリックスを多く含むことが示された図3。rDerp2のCDスペクトルにおいては、β-シート構造に典型的な最小値215nmおよび最大値197nmのCDスペクトルが示された図3。Derp2/1CのCDスペクトルとDerp2/1SのCDスペクトルは非常に類似しており、最小値が215nmにブロードに出現し、最大値が195nmに示され、典型的な混合α/β-フォールドのCDスペクトルを示している図3。実施例4:Derp2/1モザイクタンパク質のIgE反応性およびアレルゲン活性Derp2/1モザイクタンパク質に対するダニアレルギー患者のIgE反応性を図4に示すドットブロット分析によって試験した。2μlのnDerp1、rDerp2、および2種のモザイクタンパク質Derp2/1CおよびDerp2/1S、ならびに対照としてBSA各0.1mg/mlをニトロセルロース膜ストリップにドットブロットした。ドットブロットしたタンパク質に対する21名のダニアレルギー患者および2種の対照NC:非アレルギー者、BC:緩衝液対照のIgE反応性を文献26の記載に従い測定した。すべてのアレルギー患者がnDerp1およびrDerp2に対してIgE反応陽性を示したが、そのうちの3名の患者のみ患者1、8、および19がDerp2/1Cに対してIgE反応性を示し、2名の患者患者1および8がDerp2/1Sに対して弱いIgE反応性を示した。それ以外の患者はすべてDerp2/1CおよびDerp2/1Sのいずれに対しても検出可能なIgE反応性を示さなかった。非アレルギー者NCの血清または血清非含有緩衝液BCを用いた場合、ドットブロットしたいずれのタンパク質に対しても反応性は見られなかった図4、レーンNCおよびBC。いずれの患者も対照タンパク質であるBSAに対してIgE反応性を示さなかった図4。8名のHDMアレルギー患者から得られた好塩基球を上記2種の野生型アレルゲンまたは2種のDerp2/1モザイクタンパク質で刺激し、好塩基球におけるCD203cの発現を測定することにより、2種のDerp2/1モザイクタンパク質のアレルゲン活性と上記2種の野生型アレルゲンnDerp1およびrDerp2のアレルゲン活性とを比較した図5に示す。インフォームドコンセントを行った後、8名のダニアレルギー患者からヘパリン添加血液試料を採取した。様々な濃度0.04~400nMのnDerp1、rDerp2、Derp2/1CおよびDerp2/1S、ならびに対照としてモノクローナル抗IgE抗体1μg/mlまたはPBSを使用して、好塩基球を15分間刺激した37°C。CD203cの発現を文献32の記載に従って測定した。この分析から、0.4nM~400nMの濃度の野生型アレルゲンnDerp1およびrDerp2はいずれも、試験したすべてのHDMアレルギー患者においてCD203cの発現の強力なアップレギュレーションを誘導したが、400nMまでの濃度のDerp2/1Cモザイクタンパク質およびDerp2/1Sモザイクタンパク質では関連性のあるアップレギュレーションは見られなかったことが示された。抗ヒトIgE抗体を陽性対照として用いたところ、いずれの患者から得られた好塩基球においてもCD203c発現のアップレギュレーションが誘導されたが、緩衝液のみではこのようなアップレギュレーションは見られなかったデータ示さず。実施例5:2種のDerp2/1モザイクタンパク質によるウサギの免疫化上記2種のモザイクタンパク質が特異的Derp1抗体および特異的Derp2IgG抗体を誘導できるか否かを示すため、ウサギをDerp2/1CまたはDerp2/1Sで5回免疫化した200μg/注射。最初の免疫化においてはCFAをアジュバントとして用い、残りの4回の免疫化にはIFAをアジュバントとして用いた。これとは別に、完全フロイントアジュバントCFAを1回使用し、残りの2回には不完全フロイントアジュバントIFAを使用して、ウサギをnDerp1またはrDerp2で3回免疫化し200μg/注射、2種の野生型アレルゲンに対して特異的なIgG抗体を産生させた。いずれのDerp2/1モザイクタンパク質も、Derp1またはDerp2に特異的なIgG抗体を誘導することができた図6。対照として、抗Derp1ウサギ血清および抗Derp2ウサギ血清を用いた。抗Derp1ウサギ血清は、ドットブロットしたnDerp1のみに陽性反応を示したが、抗Derp2ウサギ血清はrDerp2および上記2種のDerp2/1モザイクタンパク質のいずれにも陽性反応を示した図6。ウサギ血清はいずれも、対照タンパク質であるBSAには反応性を示さなかった図6。実施例6:ウサギ抗Derp2/1C抗体およびウサギ抗Derp2/1S抗体による、nDerp1またはrDerp2とアレルギー患者IgEとの結合阻害ELISA競合実験において、モザイクタンパク質Derp2/1によって誘導されたIgG抗体を用いることにより、nDerp1またはrDerp2とHDMアレルギー患者IgEとの結合を阻害できるか否かを調査した。マキシソープELISAプレートNuncをnDerp1またはrDerp2PBS中0.5μg/ウェルを用いて4°Cで一晩かけてコーティングした。次いで、PBST0.05[v/v]Tween20含有PBSで2回洗浄し、ブロッキング緩衝液1[w/v]BSA含有PBSTを用いて室温で3時間かけてブロッキングした。ウサギ抗nDerp1抗血清、ウサギ抗rDerp2抗血清、ウサギ抗Derp2/1C抗血清、およびウサギ抗Derp2/1S抗血清0.5w/vBSA含有PBSTで1:20に希釈ならびにこれらに対応する免疫化前の血清0.5w/vBSA含有PBSTで1:20に希釈を上記プレートに添加し、4°Cで一晩インキュベートした。洗浄後、ダニアレルギー患者血清0.5w/vBSA含有PBSTで1:10に希釈とともにプレートを4°Cで一晩インキュベートした。文献33の記載に従い、0.5w/vBSA含有PBSTで1:2500に希釈したHRP結合ヤギ抗ヒトIgE抗体KPL、米国メリーランド州ゲイザースバーグを用いて結合したヒトIgE抗体を検出した。IgE結合阻害率は、100-ODs/ODp×100より求めた。ODsはウサギ免疫血清とともにプレインキュベーションした後の吸光度を表し、ODpは免疫化前の血清とともにプレインキュベーションした後の吸光度を表す。ウサギ抗Derp1抗体による患者IgEとnDerp1との結合阻害率は、49.1~91.8平均74.9であった。ウサギ抗Derp2/1CによるnDerp1結合阻害率すなわち、0~48.7;平均24.1およびウサギ抗Derp2/1SによるnDerp1結合阻害率すなわち、31.9~66.0;平均49.9は、ウサギ抗Derp1による結合阻害率よりも低かった。ウサギ抗Derp2抗体を用いた場合、患者IgEとrDerp2との結合阻害率は50.3~92.9平均73.9であった。ウサギ抗Derp2/1Cによる阻害率すなわち、56.9~93.4;平均78.1およびウサギ抗Derp2/1Sによる阻害率すなわち、73~93.3;平均86.1は、ウサギ抗Derp2抗体による阻害率とほぼ同等であった表1。実施例7当業者であれば、実施例1~6において上述したものに相当する低アレルゲン性ポリペプチドをDerp1の変異体およびDerp2の変異体から調製できることは明らかであろう。種々のDerp1イソアレルゲンおよびDerp2イソアレルゲンの受託番号を以下の表に示す。これらのアイソフォームのアミノ酸配列および核酸配列は、配列番号1~4に示したものとわずかな置換により異なる。したがって、当業者であれば列記したイソアレルゲンに基づいて構築物を容易に提供することができる。参考文献1VoorhorstRMISpieksmaBoezemanandFTSpieksma1964IsAMiteTheProducerOfTheHouseDustAllergenAllergAsthma103293342PlattsMillsTAandMDChapman1987DustmitesimmunologyallergicdiseaseandenvironmentalcontrolJAllergyClinImmunol807557753BouletLPHTurcotteCLapriseCLavertuPMBedardALavoieandJHebert1997ComparativedegreeandtypeofsensitizationtocommonindoorandoutdoorallergensinsubjectswithallergicrhinitisandorasthmaClinExpAllergy2752594ThomasWRWASmithBJHalesKLMillsandRMO’Brien2002CharacterizationandimmunobiologyofhousedustmiteallergensIntArchAllergyImmunol1291185WeghoferMYDall’AntoniaMGroteAStocklingerMKneidingerNBalicMTKrauthEFernandezCaldasWRThomasMvanHageSViethsSSpitzauerFHorakDISvergunPVKonarevPValentJThalhamerWKellerRValentaandSVrtala2008CharacterizationofDerp21anewimportantallergenderivedfromthegutofhousedustmitesAllergy637587676PittnerGSVrtalaWRThomasMWeghoferMKundiFHorakDKraftandRValenta2004ComponentresolveddiagnosisofhousedustmiteallergywithpurifiednaturalandrecombinantmiteallergensClinExpAllergy345976037HalesBJACMartinLJPearceIALaingCMHaydenJGoldblattPNLeSouefandWRThomas2006IgEandIgGantihousedustmitespecificitiesinallergicdiseaseJAllergyClinImmunol1183613678ChapmanMDandTAPlattsMills1980PurificationandcharacterizationofthemajorallergenfromDermatophagoidespteronyssinusantigenP1JImmunol1255875929MeyerCHJFBondMSChenandMTKasaian1994ComparisonofthelevelsofthemajorallergensDerpIandDerpIIinstandardizedextractsofthehousedustmiteDermatophagoidespteronyssinusClinExpAllergy241041104810ToveyERMDChapmanandTAPlattsMills1981MitefaecesareamajorsourceofhousedustallergensNature28959259311PeakeHLAJCurrieGAStewartandASMcWilliam2003NitricoxideproductionbyalveolarmacrophagesinresponsetohousedustmitefecalpelletsandthemiteallergensDerp1andDerp2JAllergyClinImmunol11253153712DurhamSRSMWalkerEMVargaMRJacobsonFO’BrienWNobleSJTillQAHamidandKTNouriAria1999LongtermclinicalefficacyofgrasspollenimmunotherapyNEnglJMed34146847513LarcheMCAAkdisandRValenta2006ImmunologicalmechanismsofallergenspecificimmunotherapyNatRevImmunol676177114ValentaR2002ThefutureofantigenspecificimmunotherapyofallergyNatRevImmunol244645315ValentaRFFerreiraMFockeTejklBLinhartVNiederbergerISwobodaandSVrtala2010FromallergengenestoallergyvaccinesAnnuRevImmunol2821124116AkdisMandCAAkdis2009TherapeuticmanipulationofimmunetoleranceinallergicdiseaseNatRevDrugDiscov864566017FockeMKMarthSFlickerandRValenta2008HeterogeneityofcommercialtimothygrasspollenextractsClinExpAllergy381400140818FockeMKMarthandRValenta2009MolecularcompositionandbiologicalactivityofcommercialbirchpollenallergenextractsEurJClinInvest3942943619BrunettoBRTinghinoMCBraschiLAntonicelliCPiniandPIacovacciCharacterizationandcomparisonofcommerciallyavailablemiteextractsforinvivodiagnosisAllergy6518419020KorematsuSYTanakaSHosoiSKoyanagiTYokotaBMikamiandNMinato2000C8119SmutationofmajormiteallergenDerf2leadstodegeneratesecondarystructureandmolecularpolymerizationandinducespotentandexclusiveTh1celldifferentiationJImmunol1652895290221NakazawaTTTakaiHHatanakaEMizuuchiTNagamuneKOkumuraandHOgawa2005MultiplemutationatapotentialligandbindingregiondecreasedallergenicityofamiteallergenDerf2withoutdisruptingglobalstructureFEBSLett5791988199422SmithAMandMDChapman1996ReductioninIgEbindingtoallergenvariantsgeneratedbysitedirectedmutagenesiscontributionofdisulfidebondstotheantigenicstructureofthemajorhousedustmiteallergenDerp2MolImmunol3339940523TakaiTSIchikawaHHatanakaFInagakiandYOkumura2000EffectsofprolinemutationsinthemajorhousedustmiteallergenDerf2onIgEbindingandhistaminereleasingactivityEurJBiochem2676650665624TakaiTAMoriTYuukiHOkudairaandYOkumura1999NonanaphylacticcombinationofpartiallydeletedfragmentsofthemajorhousedustmiteallergenDerf2forallergenspecificimmunotherapyMolImmunol361055106525TakaiTTYokotaMYasueCNishiyamaTYuukiAMoriHOkudairaandYOkumura1997EngineeringofthemajorhousedustmiteallergenDerf2forallergenspecificimmunotherapyNatBiotechnol1575475826ChenKGFuchsKSonneckAGierasISwobodaNDouladirisBLinhartMJankovicTPavkovWKellerNGPapadopoulosPValentRValentaandSVrtala2008ReductionoftheinvivoallergenicityofDerp2themajorhousedustmiteallergenbygeneticengineeringMolImmunol452486249827WalgraffeDCMatteottiMElBakkouryLGarciaCMarchandDBullensMVandenbrandenandAJacquet2009AhypoallergenicvariantofDerp1asacandidateformiteallergyvaccinesJAllergyClinImmunol1231150115628SuzukiKOKaminumaLYangYMotoiTTakaiSIchikawaKOkumuraHOgawaAMoriFTakaiwaandTHiroi2009DevelopmentoftransgenicriceexpressingmiteantigenforanewconceptofimmunotherapyIntArchAllergyImmunol149Suppl1212429TaketomiEADASilvaMCSopeleteAMGervasioRAlvesandSJSung2006DifferentialIgEreactivitytoDerp1andDerp2allergensofDermatophagoidespteronyssinusinmitesensitizedpatientsJInvestigAllergolClinImmunol1610410930LinhartBBJahnSchmidPVerdinoWKellerCEbnerDKraftandRValenta2002CombinationvaccinesforthetreatmentofgrasspollenallergyconsistingofgeneticallyengineeredhybridmoleculeswithincreasedimmunogenicityFasebJ161301130331LinhartBAHartlBJahnSchmidPVerdinoWKellerMTKrauthPValentFHorakUWiedermannJThalhamerCEbnerDKraftandRValenta2005AhybridmoleculeresemblingtheepitopespectrumofgrasspollenforallergyvaccinationJAllergyClinImmunol1151010101632HauswirthAWSNatterMGhannadanYMajlesiGHSchernthanerWRSperrHJBuhringRValentaandPValent2002RecombinantallergenspromoteexpressionofCD203conbasophilsinsensitizedindividualsJAllergyClinImmunol11010210933SwobodaIABugajskaSchretterPVerdinoWKellerWRSperrPValentRValentaandSSpitzauer2002RecombinantcarpparvalbuminthemajorcrossreactivefishallergenatoolfordiagnosisandtherapyoffishallergyJImmunol16845764584"