"親水性架橋重合体粒子からなる液体クロマトグラフィー用カラム充填剤であって、前記親水性架橋重合体粒子は、架橋性単量体及び親水性単量体が水性分散媒に分散してなる分散液を、前記架橋性単量体の融点以上、かつ、実質的に重合反応が進行しない温度で1時間以上撹拌した後に重合反応を行って得られるものである液体クロマトグラフィー用カラム充填剤。請求項1記載の液体クロマトグラフィー用カラム充填剤を製造する方法であって、架橋性単量体及び親水性単量体が水性分散媒に分散してなる分散液を、前記架橋性単量体の融点以上、かつ、実質的に重合反応が進行しない温度で1時間以上撹拌する工程1と、前記工程1を行った後に重合反応を行う工程2を有する液体クロマトグラフィー用カラム充填剤の製造方法。架橋性単量体の融点以上、かつ、実質的に重合が進行しない温度が、5~40°Cである請求項2記載の液体クロマトグラフィー用カラム充填剤の製造方法。親水性架橋重合体粒子からなる液体クロマトグラフィー用カラム充填剤であって、前記親水性架橋重合体粒子は、架橋性単量体が水性分散媒に分散してなる分散液を、前記架橋性単量体の融点以上、かつ、実質的に重合反応が進行しない温度で1時間以上撹拌した後に重合反応を行って得られた架橋重合体粒子の表面に、親水性単量体を重合して得られるものである液体クロマトグラフィー用カラム充填剤。請求項4記載の液体クロマトグラフィー用カラム充填剤を製造する方法であって、架橋性単量体が水性分散媒に分散してなる分散液を、前記架橋性単量体の融点以上、かつ、実質的に重合反応が進行しない温度で1時間以上撹拌する工程1と、前記工程1を行った後に第1の重合反応を行い、架橋重合体粒子を得る工程2と、前記第1の重合反応が完了する前に親水性単量体を添加して第2の重合反応を行い、前記架橋重合体粒子の表面に親水性単量体を重合する工程3を有する液体クロマトグラフィー用カラム充填剤の製造方法。架橋性単量体の融点以上、かつ、実質的に重合が進行しない温度が、5~40°Cである請求項5記載の液体クロマトグラフィー用カラム充填剤の製造方法。請求項1又は4記載の液体クロマトグラフィー用カラム充填剤を用いる液体クロマトグラフィーによるヘモグロビン類の測定方法。本発明は、性能の再現性が良好なカラム充填剤を提供することを目的とする。また、本発明は、該カラム充填剤の製造方法、及び、該カラム充填剤を用いるヘモグロビン類の測定方法を提供することを目的とする。本発明1は、親水性架橋重合体粒子からなる液体クロマトグラフィー用カラム充填剤であって、上記親水性架橋重合体粒子は、架橋性単量体及び親水性単量体が水性分散媒に分散してなる分散液を、上記架橋性単量体の融点以上、かつ、実質的に重合反応が進行しない温度で1時間以上撹拌した後に重合反応を行って得られるものである液体クロマトグラフィー用カラム充填剤である。本発明2は、親水性架橋重合体粒子からなる液体クロマトグラフィー用カラム充填剤であって、上記親水性架橋重合体粒子は、架橋性単量体が水性分散媒に分散してなる分散液を、上記架橋性単量体の融点以上、かつ、実質的に重合反応が進行しない温度で1時間以上撹拌した後に重合反応を行って得られた架橋重合体粒子の表面に、親水性単量体を重合して得られるものである液体クロマトグラフィー用カラム充填剤である。以下に本発明を詳述する。本発明者は、従来の液体クロマトグラフィー用カラム充填剤の性能の再現性が不良となる要因は、粒度分布の再現性が低いこと、及び、分離性能に大きな影響を及ぼす親水基の導入量の再現性が低いことであると考えた。そこで本発明者は、重合反応の精密制御ではなく、従来省みられなかった、重合反応を行う前の工程において攪拌条件を規定することにより、カラム充填剤の性能の再現性が向上することを見出し、本発明を完成させるに至った。本発明1のカラム充填剤は、架橋性単量体及び親水性単量体が水性分散媒に分散してなる分散液を、上記架橋性単量体の融点以上、かつ、実質的に重合反応が進行しない温度で1時間以上撹拌した後に重合反応を行って得られる親水性架橋重合体粒子からなる。本発明1のカラム充填剤は、架橋性単量体及び親水性単量体が水性分散媒に分散してなる分散液を、上記架橋性単量体の融点以上、かつ、実質的に重合反応が進行しない温度で1時間以上撹拌する工程1と、上記工程1を行った後に重合反応を行う工程2を有する方法により、製造することができる。このような液体クロマトグラフィー用カラム充填剤の製造方法もまた、本発明の1つである。架橋性単量体は、1分子中にビニル基を2個以上有する単量体であることが好ましい。また、架橋性単量体は、イオン交換基を有さない、又は、イオン交換基を有していても微量である架橋性単量体が好ましい。更に架橋性単量体は、アクリル系の架橋性単量体がより好ましい。なお、本明細書において上記アクリル系とは、アクリル基又はメタクリル基を有することを意味する。また、メタアクリレートとは、アクリルレート又はメタクリレートを意味し、メタアクリル酸とは、アクリル酸又はメタクリル酸を意味する。架橋性単量体としては、例えば、ポリエチレングリコールジメタアクリレート類、ポリプロピレングリコールジメタアクリレート類、アルキレングリコールジメタアクリレート類、ヒドロキシアルキルジメタアクリレート類、分子内に少なくとも2個のメタアクリル基を有するアルキロールアルカンメタアクリレート類等が挙げられる。ポリエチレングリコールジメタアクリレート類としては、例えば、エチレングリコールジメタアクリレート、ジエチレングリコールジメタアクリレート、トリエチレングリコールジメタアクリレート、テトラエチレングリコールジメタアクリレート、ポリエチレングリコールジメタアクリレート等が挙げられる。ポリプロピレングリコールジメタアクリレート類としては、例えば、プロピレングリコールジメタアクリレート、ジプロピレングリコールジメタアクリレート、トリプロピレングリコールジメタアクリレート、テトラプロピレングリコールジメタアクリレート、ポリプロピレングリコールジメタアクリレート等が挙げられる。アルキレングリコールジメタアクリレート類としては、例えば、ポリテトラメチレングリコールジメタアクリレート、ポリプロピレングリコール-テトラメチレングリコール-ジメタアクリレート、ポリエチレングリコールポリプロピレングリコールポリエチレングリコール-ジメタアクリレート、1,3-ブチレングリコールジメタアクリレート、1,4-ブチレングリコールジメタアクリレート、1,6-ヘキサグリコールジメタアクリレート、1,9-ノナンジオールジメタアクリレート、ネオペンチルグリコールジメタアクリレート等が挙げられる。ヒドロキシアルキルジメタアクリレート類としては、例えば、2-ヒドロキシ-1,3-ジメタアクリロキシプロパン、2-ヒドロキシ-1-メタアクリロキシ-3-メタアクリロキシプロパン、2-ヒドロキシ-3-メタアクリロイルオキシプロピルメタアクリレート、グリセロールジメタアクリレート、グリセロールアクリレートメタクリレート、ウレタンメタジアクリレート、イソシアヌル酸ジメタアクリレート、イソシアヌル酸トリメタアクリレート、1,10-ジメタアクリロキシ-4,7-ジオキサデカン-2,9-ジオール、1,10-ジメタアクリロキシ-5-メチル-4,7-ジオキサデカン-2,9-ジオール、1,11-ジメタアクリロキシ-4,8-ジオキサウンデガン-2,6,10-トリオール等が挙げられる。分子内に少なくとも2個のメタアクリル基を有するアルキロールアルカンメタアクリレート類としては、例えば、トリメチロールプロパントリメタアクリレート、テトラメチロールプロパントリメタアクリレート、ジトリメチロールプロパンテトラメタアクリレート、テトラメチロールメタントリメタアクリレート、テトラメチロールメタンテトラメタアクリレート、トリメチロールエタントリメタアクリレート等が挙げられる。これらの架橋性単量体は単独で用いてもよく、2種以上を併用してもよい。分散液は、架橋性単量体以外に、必要に応じて非架橋性単量体を含有してもよい。非架橋性単量体は、アクリル系単量体が好ましく、具体的には例えば、メタアクリル酸アルキル類、水酸基を有する非架橋性アクリル系単量体等が挙げられる。メタアクリル酸アルキル類としては、例えば、メタアクリル酸メチル、メタアクリル酸エチル、メタアクリル酸プロピル、メタアクリル酸イソプロピル、メタアクリル酸ブチル、メタアクリル酸2-エチルヘキシル等が挙げられる。水酸基を有する非架橋性アクリル系単量体としては、例えば、ポリエチレングリコールモノメタアクリレート類、ポリプロピレングリコールモノメタアクリレート類、アルキレングリコールモノメタアクリレート類、その他の水酸基を有するメタアクリレート類等が挙げられる。ポリエチレングリコールモノメタアクリレート類としては、例えば、エチレングリコールモノメタアクリレート、ジエチレングリコールモノメタアクリレート、トリエチレングリコールモノメタアクリレート、テトラエチレングリコールモノメタアクリレート、ポリエチレングリコールモノメタアクリレート、メトキシトリポリエチレングリコールモノメタアクリレート、メトキシポリエチレングリコールモノメタアクリレート等が挙げられる。ポリプロピレングリコールモノメタアクリレート類としては、例えば、プロピレングリコールモノメタアクリレート、ジプロピレングリコールモノメタアクリレート、トリプロピレングリコールモノメタアクリレート、テトラプロピレングリコールモノメタアクリレート、ポリプロピレングリコールモノメタアクリレート等が挙げられる。アルキレングリコールモノメタアクリレート類としては、例えば、ポリエチレングリコールプロピレングリコールモノメタアクリレート、ポリエチレングリコールテトラメチレングリコールモノメタアクリレート、ポリプロピレングリコールテトラメチレングリコールモノメタアクリレート、オクトキシポリエチレングリコールポリプロピレングリコール-モノメタアクリレート等が挙げられる。その他の水酸基を有するメタアクリレート類としては、例えば、グリセリンモノメタアクリレート、2-ヒドロキシエチルメタアクリレート、2-ヒドロキシプロピルメタアクリレート、2,3-ジヒドロキシルエチルメタアクリレート、2,3-ジヒドロキシルプロピルメタアクリレート等が挙げられる。これらの非架橋性単量体は単独で用いてもよく、2種以上を併用してもよい。非架橋性単量体を用いる場合、非架橋性単量体の含有量は、架橋性単量体100重量部に対して100重量部以下であることが好ましい。非架橋性単量体の含有量が100重量部を超えると、得られる架橋重合体粒子の架橋度が低下してカラム充填剤が耐圧性に劣るものとなり、膨潤や収縮が起きて分離精度が低下しやすくなる。分散液は、架橋性単量体及び非架橋性単量体以外に、親水性官能基を有する親水性単量体を含有する。親水性官能基は、重合後に得られる架橋重合体粒子に親水性を付与し、かつ、液体クロマトグラフィーによる測定の際に、試料中の各成分との相互作用により分離を行う役割を担う。従って、親水性単量体は、カラム充填剤として適用する測定モードによって、適宜選択できる。例えば、本発明1のカラム充填剤を、イオン交換クロマトグラフィーに用いる場合に使用する親水性単量体は、1分子中に1個以上のイオン交換基を有する親水性単量体以下、イオン交換性単量体ともいうであることが好ましい。イオン交換基としては、例えば、カルボキシル基、スルホン酸基、リン酸基等のカチオン交換基、3級アミノ基、4級アンモニウム基等のアニオン交換基等が挙げられる。なお、本明細書において、イオン交換基には、イオン交換基に付随する構造は問わないため、イオン交換基を末端に有する全ての官能基を含む。例えば、カルボキシル基とは、カルボキシルエチル基、カルボキシルプロピル基等、カルボキシル基が結合する官能基類全てを含む以下、官能基を記載する場合は同様の構造を意味する。カルボキシル基を有する単量体としては、例えば、メタアクリル酸、2-メタアクリロイルオキシエチルサクシネート、2-メタアクリロイルオキシエチルフタル酸等のメタアクリル酸誘導体類や、クロトン酸、イタコン酸、シトラコン酸、メサコン酸、マレイン酸、フマル酸及びこれらの誘導体等が挙げられる。スルホン酸基を有する有単量体としては、例えば、2-メタアクリルアミド-2-メチルプロパンスルホン酸、2-スルホエチルメタアクリレート、3-スルホプロピルメタアクリル酸等のメタアクリル酸誘導体類や、スチレンスルホン酸、アリルスルホン酸、3-スルホプロピル-イタコン酸及びこれらの誘導体等が挙げられる。リン酸基を有する単量体としては、例えば、メタアクリロイルオキシエチルアシッドホスフェート、2-メタアクリロイルオキシエチルアシッドホスフェート、3-メタアクリロイルオキシプロピルアシッドホスフェート及びこれらの誘導体等が挙げられる。3級アミノ基を有する単量体としては、例えば、ジメチルアミノエチルメタアクリレート、ジエチルアミノエチルメタアクリレート、2-ヒドロキシ-3-ジメチルアミノプロピルメタアクリレート、N,N-ジメチルメタアクリルアミド、及びこれらの誘導体等が挙げられる。4級アンモニウム基を有する単量体としては、例えば、2-メタアクリロイルオキシエチルトリメチルアンモニウムクロライド、2-メタアクリロイルオキシエチルトリエチルアンモニウムクロライド、2-ヒドロキシ-3-メタアクロリイルオキシプロピルトリメチルアンモニウムクロライド及びこれらの誘導体等が挙げられる。本発明1のカラム充填剤を、イオン交換クロマトグラフィーに用いるための他の方法としては、イオン交換性単量体を用いる代わりに、イオン交換基を有する化合物以下、イオン交換性化合物ともいうと反応可能な官能基以下、反応性基ともいうを有する親水性単量体以下、反応性単量体ともいうを上記架橋重合体粒子の表面に重合し、その後に、該反応性基にイオン交換性化合物を反応させる方法が挙げられる。反応性基は、非イオン性の親水性基であることが好ましい。非イオン性の親水性基としては、例えば、水酸基、グリコール基、エポキシ基、グリシジル基、1級アミノ基、2級アミノ基、シアノ基、アルデヒド基等が挙げられ、なかでも、水酸基、エポキシ基、グリシジル基、1級アミノ基、2級アミノ基が好ましく、水酸基、エポキシ基、グリシジル基がより好ましい。反応性単量体は、メタアクリル酸エステル類が好ましく、例えば、ポリエチレングリコールモノメタアクリレート類、ポリプロピレングリコールメタアクリレート類、アルキレングリコールモノメタアクリレート類、エポキシ化又はヒドロキシル化メタアクリレート類、アミノ化メタアクリレート類、アルデヒド化又はシアノ化メタアクリレート類等が挙げられる。ポリエチレングリコールモノメタアクリレート類としては、例えば、エチレングリコールモノメタアクリレート、ジエチレングリコールモノメタアクリレート、トリエチレングリコールモノメタアクリレート、テトラエチレングリコールモノメタアクリレート、ポリエチレングリコールモノメタアクリレート、メトキシトリポリエチレングリコールモノメタアクリレート、メトキシポリエチレングリコールモノメタアクリレート等が挙げられる。ポリプロピレングリコールメタアクリレート類としては、例えば、プロピレングリコールモノメタアクリレート、ジプロピレングリコールモノメタアクリレート、トリプロピレングリコールモノメタアクリレート、テトラプロピレングリコールモノメタアクリレート、ポリプロピレングリコールモノメタアクリレート等が挙げられる。アルキレングリコールモノメタアクリレート類としては、例えば、ポリエチレングリコールプロピレングリコールモノメタアクリレート、ポリエチレングリコールテトラメチレングリコールモノメタアクリレート、ポリプロピレングリコールテトラメチレングリコールモノメタアクリレート、オクトキシポリエチレングリコールポリプロピレングリコール-モノメタアクリレート等が挙げられる。エポキシ化又はヒドロキシル化メタアクリレート類としては、例えば、グリシジルメタアクリレート、グリセリンモノメタアクリレート、2-ヒドロキシエチルメタアクリレート、2-ヒドロキシプロピルメタアクリレート、2,3-ジヒドロキシルエチルメタアクリレート、2,3-ジヒドロキシルプロピルメタアクリレート等が挙げられる。アミノ化メタアクリレート類としては、例えば、2-アミノエチルメタアクリレート、2,3-ジアミノエチルメタアクリレート、2-アミノプロピルメタアクリレート、2,3-ジアミノプロピルメタアクリレート、メタアクリルアミド等が挙げられる。アルデヒド化又はシアノ化メタアクリレート類としては、例えば、メタアクロレイン、シアノメタアクリレート、メチルシアノアクリレート、エチルシアノアクリレート、ブチルシアノアクリレート、メタアクリロニトリル、等が挙げられる。これらの反応性単量体は、単独で用いてもよいし、二種以上を組み合わせて用いてもよい。反応性基にイオン交換性化合物を反応させる方法は、公知の化学反応を用いることができる。架橋重合体粒子の分解等の反応を伴わない条件であれば、これらの公知の化学反応を限定なく用いることができる。反応性基が水酸基の場合、例えば、ブロムエタンスルホン酸ナトリウム等のハロゲン化エタンスルホン酸類やクロロ酢酸ナトリウム等のハロゲン化酢酸類をイオン交換性化合物として用いる。これらのイオン交換性化合物と、表面に水酸基を有する架橋重合体粒子とを水酸化アルカリ水溶液中で反応させることにより、イオン交換基を導入できる。また、イオン交換基を有するアルデヒド化合物を、酸触媒下にてアセタール化反応により、表面に水酸基を有する架橋重合体粒子と反応させることにより、イオン交換基を導入できる。更に、例えば、トリカルバニル酸、ブタンテトラカルボン酸等の多官能カルボン化合物と水酸基との脱水反応によるエステル化により、上記架橋重合体粒子の表面にカルボキシル基を導入できる。加えて、1,3-プロパンスルトン、1,4-ブタンスルトン等を、水酸化アルカリの水溶液中又は有機溶媒溶液中で、表面に水酸基を有する架橋重合体粒子と反応させることによっても架橋重合体粒子の表面にスルホン酸基を導入できる。反応性基がエポキシ基又はグリシジル基の場合、表面にエポキシ基又はグリシジル基を有する架橋重合体粒子と硫酸ナトリウムやタウリン、グリコール酸等のイオン交換性化合物とを反応させる方法、表面にエポキシ基又はグリシジル基を有する架橋重合体粒子と三フッ化ホウ素エーテラートとを結合した後、亜硫酸ナトリウム水溶液中で加熱処理する方法等によりイオン交換基を導入できる。反応性基がアミノ基の場合、エピクロルヒドリンやトリグリシジルエーテルのようなエポキシ化合物を水酸化アルカリの水溶液中又は有機溶媒溶液中で反応させてエポキシ化した後、上記のエポキシ基又はグリシジル基の場合と同様の処理を行うことによりイオン交換基を導入できる。本発明1のカラム充填剤を、ゲル浸透クロマトグラフィーに用いる場合に使用する親水性単量体は、水酸基、又はエポキシ基のような非イオン性親水基を1分子中に1個以上有する親水性単量体であることが好ましい。例えば、上記のポリエチレングリコールモノメタアクリレート類、ポリプロピレングリコールジメタアクリレート類、アルキレングリコールモノメタアクリレート類、エポキシ化又はヒドロキシル化メタアクリレート類等の単量体類が挙げられる。本発明1のカラム充填剤を、順相クロマトグラフィーに用いる場合に使用する親水性単量体は、1級アミノ基、2級アミノ基、シアノ基、水酸基のような非イオン性親水基を1分子中に1個以上有する親水性単量体であることが好ましい。例えば、ポリエチレングリコールモノメタアクリレート類、ポリプロピレングリコールジメタアクリレート類、アルキレングリコールモノメタアクリレート類、アミノ化メタアクリレート類、アルデヒド化又はシアノ化メタアクリレート類を有する単量体の他に、メタアクリルアミド、N-メチルメタアクリルアミド、N-エチルメタアクリルアミド、N-イソプロピルメタアクリルアミド、等のアクリルアミド類及びこれらの誘導体等の単量体類が挙げられる。親水性単量体は、アクリル系単量体であることが好ましい。また、親水性単量体は、ナトリウム塩、カリウム塩等の塩類、塩化物等でもよい。親水性単量体は、2種類以上を混合して用いてもよく、上述した各測定モードに限定されず、他の測定モードに使用したり、他の測定モードに挙げた単量体と混合して用いたりしてもよい。また、親水性単量体として、1分子中に同一の複数の官能基を有する単量体を用いてもよく、1分子中に異なる種類の官能基を有する単量体を用いてもよい。分散液における親水性単量体の含有量は、架橋性単量体、又は、架橋性単量体と非架橋性単量体との混合物以下、両者を合わせて単量体混合物ともいう100重量部に対して、好ましい下限は10重量部、好ましい上限は200重量部である。上記親水性単量体の含有量が10重量部未満であると、得られるカラム充填剤を用いた場合の分離性能が低下することがある。親水性単量体の含有量が200重量部を超えると、親水性が大きくなり、耐圧性や耐膨潤性が低下することがある。また、複数の溶離液を用いて測定を行う場合に、溶離液の切り替え時における平衡化に長時間を要し、測定時間が延長することがある。水性分散媒としては、水、水溶性有機溶媒、水と水溶性有機溶媒との混合物等が挙げられる。水溶性有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類、アセトン、アセトニトリル等が挙げられる。水溶性有機溶媒を水との混合物として用いる場合、上記水溶性有機溶媒の濃度の好ましい上限は20重量である。水性分散媒の使用量は、上記単量体混合物及び上記親水性単量体以下、単量体類ともいう100重量部に対して、好ましい下限は200重量部、好ましい上限は1万重量部である。分散液は、必要に応じて、界面活性効果を有する物質以下、分散剤ともいうを含有してもよい。分散剤としては、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、デンプン、ヒドロキシセルロース、ポリビニルエーテル等の水溶性高分子化合物や、リン酸カルシウム等の無機塩類や、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルベンゼンスルホン酸ナトリウム、ポリオキシエチレンラウリル硫酸ナトリウム、ジアルキルスルホコハク酸ナトリウム等のイオン性界面活性剤や、ポリオキシエチレンノニルフェニールエーテル、ポリエチレングリコールモノステアリレート、ソルビタンモノステアリレート等の非イオン性界面活性剤等が挙げられる。分散液中の分散剤の含有量の好ましい下限は0.01重量、好ましい上限は20重量である。上記分散剤の含有量が0.01重量未満であると、添加した単量体が分散しにくくなり、凝集物が発生しやすくなる。分散剤の含有量が20重量を超えると、得られる親水性架橋重合体粒子の粒径が小さくなり、重合中に凝集物が発生しやすくなる。分散剤の含有量のより好ましい下限は0.1重量、より好ましい上限は10重量である。分散液は、その他に公知の各種添加剤を含有してもよい。添加剤としては、例えば、pH調節剤、消泡剤、得られる親水性架橋重合体粒子にマクロポアを形成させるための多孔質化剤、重合反応を制御するための各種連鎖移動剤、単量体混合物の溶解度を調節するための有機化合物又は無機化合物等が挙げられる。架橋性単量体の融点以上とは、複数の架橋性単量体を使用する場合は、全ての架橋性単量体の融点以上であることを意味し、上記非架橋性単量体を併用する場合は、全ての架橋性単量体、及び、非架橋性単量体の融点以上であることを意味する。実質的に重合反応が進行しない温度とは、その温度で少なくとも1時間撹拌を行った場合に生じる重合物が、単量体類全量の10重量以下となる温度を意味する。具体的には、単量体類として上記例示したものを用い、重合開始剤として下記例示するものを用いる場合、5~40°Cであることが好ましい。分散液を攪拌する際の温度が5°C未満であると、単量体類の一部が凍結して均一に撹拌することが困難となる。分散液を攪拌する際の温度が40°Cを超えると、撹拌中に単量体類の一部が重合し、得られるカラム充填剤の性能の再現性が低下することがある。分散液を攪拌する際の温度のより好ましい下限は10°C、より好ましい上限は30°Cである。架橋性単量体の融点以上、かつ、実質的に重合反応が進行しない温度にて分散液を攪拌する際の撹拌時間の下限は1時間である。撹拌時間が1時間未満であると、分散液の単量体類が安定せず、得られる親水性架橋重合体粒子の粒径の再現性が悪くなる。撹拌時間の好ましい下限は3時間、より好ましい下限は5時間である。撹拌時間は長時間行っても操作時間が延長するのみで再現性や分離性能を向上する効果は得られない。また、反応系が上述した実質的に重合反応が進行しない温度であっても、重合が進行してしまう可能性があるため、実質的には、撹拌時間の好ましい上限は48時間である。重合反応としては、公知の重合方法を用いることができる。例えば、ラジカル反応による重合反応を行う場合、ラジカル発生源である重合開始剤の存在下において、重合開始剤がラジカルを発生するための開始反応を行うことにより実施する。開始反応は、重合開始剤の添加操作、加温、エネルギー線照射など公知の技術により行うことができる。重合開始剤を添加した後に加温する方法が好ましく、重合開始剤を溶解した単量体類を水性分散媒中に添加し、加温する方法がより好ましい。重合開始剤としては、水溶性又は油溶性の公知のラジカル重合開始剤を用いることが好ましく、例えば、過硫酸カリウム、過硫酸ナトリウム、過硫酸アンモニウム等の過硫酸塩や、クメンハイドロパーオキサイド、ベンゾイルパーオキサイド、ラウロイルパーオキサイド、オクタノイルパーオキサイド、o-クロロベンゾイルパーオキサイド、アセチルパーオキサイド、t-ブチルハイドロパーオキサイド、t-ブチルパーオキシアセテート、t-ブチルパーオキシイソブチレート、3,5,5-トリメチルヘキサノイルパーオキサイド、t-ブチルパーオキシ-2-エチルヘキサノエート、ジ-t-ブチルパーオキサイド等の有機過酸化物や、2,2’-アゾビスイソブチロニトリル、2,2’-アゾビス2,4-ジメチルバレロニトリル、4,4’-アゾビス4-シアノペンタン酸、2,2’-アゾビス2-メチルブチロニトリル、アゾビスシクロヘキサンカルボニトリル等のアゾ化合物や、これらの誘導体類等が挙げられる。重合開始剤の使用量は、単量体類100重量部に対して、好ましい下限は0.05重量部、好ましい上限は5重量部である。重合開始剤の使用量が0.05重量部未満であると、重合反応が充分に進行せず、未反応の単量体が反応系に残存する可能性がある。また、重合反応を完了させるために長時間を要し、作業効率が低下する。重合開始剤の使用量が5重量部を超えると、急激な反応の進行により、凝集物が発生しやすくなる。重合反応を加温により行う場合、反応温度の好ましい下限は40°C、好ましい上限は100°Cである。反応温度が40°C未満であると、温度を制御することが困難であり、反応に長時間を要する場合がある。反応温度が100°Cを超えると、凝集物が発生しやすくなる。また、重合反応における反応時間の好ましい下限は0.3時間、好ましい上限は48時間である。反応時間が0.3時間未満であると、単量体類の重合が不充分となり、得られるカラム充填剤の性能の再現性が低下することがある。反応時間が48時間を超えると、凝集物が発生しやすくなる。重合反応を行った後、得られた重合物を反応系より取り出し、必要に応じて、水、有機溶媒、水と有機溶媒との混合物等で洗浄することにより、架橋重合体粒子の表面に親水性重合体を有する親水性架橋重合体粒子を得ることができる。また、得られた親水性架橋重合体粒子に、必要に応じて、公知の技術による親水化処理を行ってもよい。親水化処理は、例えば、特開2001-91505号公報に開示されている、ヘモグロビン、アルブミン、グロブリン等の蛋白質、糖類、ノニオン系界面活性剤等の親水基を有する化合物を吸着させる方法や、特開2004-295368号公報に記載の方法によるオゾン処理を行う方法等が好ましい。本発明2のカラム充填剤は、本発明1のカラム充填剤において、架橋性単量体の融点以上、かつ、実質的に重合反応が進行しない温度で1時間以上撹拌する攪拌工程の前に単量体混合物とともに親水性単量体を水性分散媒に添加せず、単量体混合物の重合反応を進行させた後、得られた架橋重合体粒子の表面に親水性単量体を重合させること以外は、本発明1と同様の条件により得られる親水性架橋重合体粒子からなる。本発明2のカラム充填剤において、測定試料に相互作用を及ぼす親水性官能基は、架橋重合体の表面付近にのみ存在するため、より高い分離性能を得ることができる。本発明2のカラム充填剤における架橋重合体粒子を構成する単量体混合物は、本発明1のカラム充填剤の場合と同様の単量体混合物であることが好ましく、用いる水性分散媒や重合開始剤も、本発明1のカラム充填剤の場合と同様のものを用いることが好ましい。本発明2のカラム充填剤における親水性単量体としては、本発明1のカラム充填剤の場合と同様に、カラム充填剤を適用する測定モードによって選択することができ、本発明1のカラム充填剤の場合と同様の親水性単量体が挙げられる。本発明2のカラム充填剤において、実質的に重合反応が進行しない温度とは、その温度で少なくとも1時間撹拌を行った場合に生じる重合物が、単量体混合物全量の10重量以下となる温度を意味する。具体的には、単量体混合物として上記例示したものを用い、重合開始剤として上記例示するものを用いる場合、5~40°Cであることが好ましい。分散液を攪拌する際の温度が5°C未満であると、単量体混合物の一部が凍結して均一に撹拌することが困難となる。分散液を攪拌する際の温度が40°Cを超えると、撹拌中に単量体混合物の一部が重合し、得られるカラム充填剤の性能の再現性が低下することがある。分散液を攪拌する際の温度のより好ましい下限は10°C、より好ましい上限は30°Cである。以下に、本発明2の液体クロマトグラフィー用カラム充填剤の製造する方法を示す。まず、単量体混合物を分散してなる分散液を、本発明1のカラム充填剤の場合と同様にして攪拌した後、単量体混合物を、重合反応が完了するまで重合して得られた架橋重合体が水性分散媒に分散してなる分散液に、親水性単量体を添加する。その後、架橋重合体粒子及び親水性単量体を含有する分散液を用いて、重合開始剤の存在下で重合反応を行うことにより、架橋重合体粒子の表面において親水性単量体を重合させることができる。架橋重合体粒子の表面で効率よく親水性単量体を重合させるには、予め架橋重合体粒子内に重合開始剤を含有させておくことが好ましい。架橋重合体粒子に重合開始剤を含有させる方法としては、例えば、架橋重合体粒子を膨潤させることができ、かつ重合開始剤を溶解できる有機溶媒に重合開始剤を溶解し、更に架橋重合体粒子をこの有機溶媒に含浸させる方法等が挙げられる。加温により親水性単量体の重合反応を行う場合、反応温度の好ましい下限は40°C、好ましい上限は100°Cである。親水性単量体の重合反応の反応温度が40°C未満であると、反応に長時間を要する場合がある。親水性単量体の重合反応の反応温度が100°Cを超えると、凝集物が発生しやすくなる。親水性単量体の重合反応における反応時間の好ましい下限は0.3時間、好ましい上限は12時間である。親水性単量体の重合反応における反応時間が0.3時間未満であると、親水性単量体の重合が不充分となり、得られるカラム充填剤の性能の再現性が低下することがある。親水性単量体の重合反応における反応時間が12時間を超えると、凝集物が発生しやすくなる。親水性単量体の重合反応における反応時間のより好ましい下限は1時間、より好ましい上限は6時間である。親水性単量体の重合反応を行った後、得られた重合物を反応系より取り出し、必要に応じて、水、有機溶媒、水と有機溶媒との混合物等で洗浄することにより、架橋重合体粒子の表面に親水性重合体を有する親水性架橋重合体粒子を得ることができる。また、本発明1のカラム充填剤の場合と同様に、得られた親水性架橋重合体粒子に、必要に応じて、公知の技術による親水化処理を行ってもよい。本発明2のカラム充填剤の製造する別の方法としては、単量体混合物の重合反応によって架橋重合体粒子を調製する際の重合反応が完了する前、即ち、重合開始剤が完全に消費される前に、親水性単量体を添加して架橋重合体粒子の表面において親水性単量体を重合させる方法が挙げられ、この方法によれば、最初に添加した重合開始剤を利用して、架橋重合体粒子の表面に効率よく親水性単量体を重合させることができる。本発明2のカラム充填剤を製造する方法であって、架橋性単量体が水性分散媒に分散してなる分散液を、上記架橋性単量体の融点以上、かつ、実質的に重合反応が進行しない温度で1時間以上撹拌する工程1と、上記工程1を行った後に第1の重合反応を行い、架橋重合体粒子を得る工程2と、上記第1の重合反応が完了する前に親水性単量体を添加して第2の重合反応を行い、上記架橋重合体粒子の表面に親水性単量体を重合する工程3を有するカラム充填剤の製造方法もまた、本発明の1つである。第1の重合反応を加温により行う場合、第1の重合反応の反応温度は、使用する単量体の種類、及び、重合開始剤の種類により異なるが、好ましい下限は40°C、好ましい上限は100°Cである。第1の重合反応の反応温度が40°C未満であると、反応に長時間を要することがある。第1の重合反応の反応温度が100°Cを超えると、凝集物が発生しやすくなる。第1の重合反応における反応時間の好ましい下限は0.3時間、好ましい上限は12時間である。第1の重合反応における反応時間が0.3時間未満の場合、単量体混合物の重合が不充分となり、得られるカラム充填剤の性能の再現性が低下することがある。第1の重合反応における反応時間が12時間を超えると、重合開始剤が消費され、第2の重合反応の反応率が低下することがある。第1の重合反応における反応時間のより好ましい下限は1時間、より好ましい上限は6時間である。第1の重合反応が完了する前に、反応系に親水性単量体を添加する際の親水性単量体の添加方法は、使用する親水性単量体の種類、及び、添加量に応じて最適な手法を選択することができる。例えば、親水性単量体の全量を一括して添加する方法、その一部を分割して添加する方法、数分~数時間かけて添加する方法等が挙げられる。また、親水性単量体の添加時に反応系の温度を変化させてもよい。第2の重合反応を加温により行う場合、第2の重合反応の反応温度は、使用する単量体の種類、及び、重合開始剤の種類により異なるが、好ましい下限は40°C、好ましい上限は100°Cである。第2の重合反応の反応温度が40°C未満であると、温度を制御することが困難であり、反応に長時間を要する場合がある。第2の重合反応の反応温度が100°Cを超えると、凝集物が発生しやすくなる。第2の重合反応における反応時間の好ましい下限は0.3時間、好ましい上限は12時間である。第2の重合反応における反応時間が0.3時間未満であると、親水性単量体の重合が不充分となり、得られるカラム充填剤の性能の再現性が低下することがある。第2の重合反応における反応時間が12時間を超えると、主に親水性単量体の単独重合物による凝集物が発生しやすくなる。第2の重合反応における反応時間のより好ましい下限は1時間、より好ましい上限は6時間である。第2の重合反応を行った後、得られた重合物を反応系より取り出し、必要に応じて、水、有機溶媒、水と有機溶媒との混合物等で洗浄することにより、架橋重合体粒子の表面に親水性重合体を有する親水性架橋重合体粒子を得ることができる。また、本発明1のカラム充填剤の場合と同様に、得られた親水性架橋重合体粒子に、必要に応じて、公知の技術による親水化処理を行ってもよい。本発明1のカラム充填剤及び本発明2のカラム充填剤以下、本発明のカラム充填剤ともいうは、カラムに充填することにより、液体クロマトグラフィーに適用することができる。本発明のカラム充填剤を用いる液体クロマトグラフィーでは、公知の構成による液体クロマトグラフ、及び、公知の組成による溶離液を用いることができる。本発明のカラム充填剤は、特にヘモグロビン類の測定において有効である。本発明1のカラム充填剤又は本発明2のカラム充填剤を用いる液体クロマトグラフィーによるヘモグロビン類の測定方法もまた、本発明の1つである。本発明のヘモグロビン類の測定方法は、健常人血に含まれるヘモグロビン類、例えば、ヘモグロビンA0、ヘモグロビンA1c、ヘモグロビンF胎児性ヘモグロビンやヘモグロビンA2を短時間で高精度に測定することができる。更に、異常ヘモグロビン類、例えば、ヘモグロビンS、ヘモグロビンC、ヘモグロビンD、ヘモグロビンE等を測定することができる。本発明によれば、性能の再現性が良好なカラム充填剤を提供することができる。また、本発明によれば、該カラム充填剤の製造方法、及び、該カラム充填剤を用いるヘモグロビン類の測定方法を提供することができる。以下に実施例を掲げて本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例のみに限定されない。実施例1実施例1では、カチオン交換クロマトグラフィー用のカラム充填剤として本発明1のカラム充填剤を調製し、性能を確認した。1カラム充填剤の調製架橋性単量体として、テトラエチレングリコールジメタクリレート新中村化学工業社製150g、及び、ジエチレングリコールジメタクリレート新中村化学工業社製150g、並びに、親水性単量体として2-アクリルアミド-2-メチルプロパンスルホン酸東亞合成社製100g、並びに、重合開始剤として過酸化ベンゾイルキシダ化学社製1.0gを混合して溶解し、分散剤として5重量のポリビニルアルコール日本合成化学社製、ゴーセノールGH-20水溶液2000mLに分散させた。得られた分散液を、25°Cで8時間撹拌した撹拌工程。次に反応系を窒素雰囲気下で80°Cに加温して24時間重合反応を行った。得られた重合物を洗浄して、カラム充填剤を得た。粒度分布測定装置ナイコンプ社製、アキュサイザー780により、得られたカラム充填剤の粒度分布を測定した結果、平均粒子径は8.2μmであった。2カラムへの充填1カラム充填剤の調製で得られたカラム充填剤0.8gを、50mmol/Lリン酸緩衝液pH6.030mLに分散して撹拌し、スラリー化した。5分間超音波処理した後、スラリー全量を、ステンレス製空カラム4.6φ×35mmを接続したパッカーアズワン社製に注入した。パッカーに送液ポンプGLサイエンス社製、PU-614を接続し、圧力20MPaで送液して、定圧充填した。3液体クロマトグラフィーによる性能評価12カラムへの充填で得られたカラムを用いて、タンパク質類の標準物質混合物を測定した。測定条件を以下に示す。システム:LC-10Aシステム島津製作所社製検出波長:280nm溶離液A:100mmol/Lリン酸緩衝液pH6.9溶離液B:溶離液A500mmol/LNaClpH6.9溶出条件:溶離液A100から溶離液B100へのリニアグラジエント流速:1.5mL/分測定試料:トリプシノーゲン、α-キモトリプシノーゲン、リボヌクレアーゼA、リゾチーム以上、いずれもSigma-Aldrich社製の混合物得られたクロマトグラムを図1に示す。図1において、ピーク1はトリプシノーゲン、ピーク2はα-キモトリプシノーゲン、ピーク3はリボヌクレアーゼA、ピーク4はリゾチームを示す。図1より、各ピークが短時間で良好に分離できることを確認した。また、同様の測定を10回連続して繰り返した際の、リゾチームの保持時間の再現性を表1に示す。10回連続して測定した際のリゾチームの保持時間のCV値は3.2となり、再現性は良好であった。4液体クロマトグラフィーによる性能評価22カラムへの充填で得られたカラムを用いて、健常人血中のヘモグロビンA1cを含むヘモグロビン類の測定を行った。測定条件を以下に示す。システム:LC-10Aシステム島津製作所社製検出波長:415nm溶離液C:30mmol/Lリン酸緩衝液pH5.8溶離液D:220mmol/Lリン酸緩衝液pH8.1溶出条件:溶離液C100から溶離液D100へのステップグラジエント流速:1.5mL/分測定試料:フッ化ナトリウム採血した健常人血を、0.05のTritonX-100Sigma-Aldrich社製を含むリン酸緩衝液pH6.7により180倍に溶血希釈したもの得られたクロマトグラムを図2に示す。図2において、ピーク11はヘモグロビンF、ピーク12はヘモグロビンA1c、ピーク13はヘモグロビンA0を示す。図2より、各ピークが短時間で良好に分離できることを確認した。また、同様の測定を10回連続して繰り返した際の、ヘモグロビンA1cの保持時間の再現性を表1に示す。10回連続して測定した際のヘモグロビンA1cの保持時間のCV値は2.4となり、再現性は良好であった。5重合再現性の評価1カラム充填剤の調製と同様の条件により、カラム充填剤を20回20ロット調製した。各ロットについて、4液体クロマトグラフィーによる性能評価2を行い、ヘモグロビンA1cの保持時間の再現性を確認した。なお、各ロットの測定を3回実施した際の平均値を該当ロットの測定値とした。得られた結果を表1に示す。20ロット測定した際のヘモグロビンA1cの保持時間のCV値は3.8となり、再現性は良好であった。実施例2実施例2では、アニオン交換クロマトグラフィー用のカラム充填剤として本発明1のカラム充填剤を調製し、性能を確認した。1カラム充填剤の調製架橋性単量体としてトリエチレングリコールジメタクリレート新中村化学工業社製300g、親水性単量体としてジエチルアミノエチルメタクリレート和光純薬工業社製100g、及び、重合開始剤としてベンゾイルパーオキサイド1.5gを混合して溶解し、2000mLの5重量ポリビニルアルコール水溶液に分散させた。得られた分散液を20°Cで20時間撹拌した撹拌工程。次に反応系を窒素雰囲気下で80°Cに加温して24時間重合反応を行った。得られた重合物を洗浄して、カラム充填剤を得た。実施例1と同様にして、得られたカラム充填剤の粒度分布を測定した結果、平均粒子径は6.7μmであった。2カラムへの充填実施例1と同様に操作して、得られたカラム充填剤1.4gをステンレス製空カラム4.6φ×50mmに充填した。3液体クロマトグラフィーによる性能評価2カラムへの充填で得られたカラムを用いてタンパク質類の標準物質混合物を測定した。測定条件を以下に示す。システム:LC-10Aシステム島津製作所社製検出波長:280nm溶離液E:50mmol/Lトリス塩酸緩衝液pH8.2溶離液F:溶離液E500mmol/LNaClpH8.2溶出条件:溶離液E100から溶離液F100へのリニアグラジエント流速:1.5mL/分測定試料:コンアルブミン、オブアルブミン、トリプシンインヒビターの混合物得られたクロマトグラムを図3に示す。図3において、ピーク21はコンアルブミン、ピーク22はオブアルブミン、ピーク23はトリプシンインヒビターを示す。図3より、各ピークが短時間で良好に分離できることを確認した。また、同様の測定を10回連続して繰り返した際の、トリプシンインヒビターの保持時間の再現性を表1に示す。10回連続して測定した際のトリプシンインヒビターの保持時間のCV値は3.4となり、再現性は良好であった。4重合再現性の評価1カラム充填剤の調製と同様の条件により、カラム充填剤を20回20ロット調製した。各ロットについて、3液体クロマトグラフィーによる性能評価を行い、トリプシンインヒビターの保持時間の再現性を確認した。得られた結果を表1に示す。20ロット測定した際のトリプシンインヒビターの保持時間のCV値は4.7となり、再現性は良好であった。実施例3実施例3では、水系ゲル浸透クロマトグラフィー用のカラム充填剤として本発明1のカラム充填剤を調製し、性能を確認した。1カラム充填剤の調製架橋性単量体としてテトラエチレングリコールジメタクリレート新中村化学工業社製300g、親水性単量体として2-ヒドロキシエチルメタクリレート和光純薬工業社製100g、非架橋性単量体としてポリエチレングリコールモノメタクリレート日油社製100g、及び、トルエン400g、並びに、重合開始剤としてベンゾイルパーオキサイド1.5gを混合して溶解し、2500mLの6重量ポリビニルアルコール水溶液に分散させた。得られた分散液を、15°Cで10時間撹拌した撹拌工程。次に反応系を窒素雰囲気下で80°Cに加温して24時間重合反応を行った。得られた重合物を洗浄して、カラム充填剤を得た。実施例1と同様にして、得られたカラム充填剤の粒度分布を測定した結果、平均粒子径は10.5μmであった。2カラムへの充填実施例1と同様に操作して、得られたカラム充填剤3.2gをステンレス製空カラム6.0φ×100mmに充填した。3液体クロマトグラフィーによる性能評価2カラムへの充填で得られたカラムを用いて分子量標準物質の混合物を測定した。測定条件を以下に示す。システム:LC-10Aシステム島津製作所社製検出器:示差屈折計SE-51昭和電工社製溶離液G:60mmol/L硫酸ナトリウムを含む80mmol/Lリン酸緩衝液pH6.5流速:1.2mL/分測定試料:チログロブリン分子量64万、γ-グロブリン分子量155000、オブアルブミン分子量47000、リボヌクレアーゼ分子量13700以上、いずれも和光純薬工業社製の混合物得られたクロマトグラムを図4に示す。図4において、ピーク31はチログロブリン、ピーク32はγ-グロブリン、ピーク33はオブアルブミン、ピーク34はリボヌクレアーゼを示す。図4より、各ピークが短時間で良好に分離できることを確認した。また同様の測定を10回連続して繰り返した際の、リボヌクレアーゼの保持時間の再現性を表1に示す。10回連続して測定した際のリボヌクレアーゼの保持時間のCV値は4.3となり、再現性は良好であった。4重合再現性の評価1カラム充填剤の調製と同様の条件により、カラム充填剤を20回20ロット調製した。各ロットについて、3液体クロマトグラフィーによる性能評価を行い、リボヌクレアーゼの保持時間の再現性を確認した。得られた結果を表1に示す。20ロット測定した際のリボヌクレアーゼの保持時間のCV値は4.9となり、再現性は良好であった。実施例4実施例4では、順相クロマトグラフィー用のカラム充填剤として本発明1のカラム充填剤を調製し、性能を確認した。1カラム充填剤の調製架橋性単量体として1,10-ジメタクリロキシ-4,7-ジオキサデカン-2,9-ジオール共栄社化学社製100g、及び、テトラエチレングリコールジメタクリレート新中村化学工業社製300g、親水性単量体として2-アミノエチルメタクリレート日油社製100g、並びに、重合開始剤としてベンゾイルパーオキサイド1.5gを混合して溶解し、2000mLの4重量ポリビニルアルコール水溶液に分散させた。得られた分散液を、30°Cで5時間撹拌した撹拌工程。次に反応系を窒素雰囲気下で80°Cに加温して24時間重合反応を行った。得られた重合物を洗浄して、カラム充填剤を得た。実施例1と同様にして、得られたカラム充填剤の粒度分布を測定した結果、平均粒子径は5.5μmであった。2カラムへの充填実施例1と同様に操作して、得られたカラム充填剤1.4gをステンレス製空カラム4.6φ×50mmに充填した。3液体クロマトグラフィーによる性能評価2カラムへの充填で得られたカラムを用いて糖類の標準物質混合物を測定した。測定条件を以下に示す。システム:LC-10Aシステム島津製作所社製検出波長:280nm溶離液H:アセトニトリル:水=75:25の混合水溶液流速:1.0mL/分測定試料:フルクトース、グルコース、シュクロース、マルトース以上、いずれも和光純薬工業社製の混合物得られたクロマトグラムを図5に示す。図5において、ピーク41はフルクトース、ピーク42はグルコース、ピーク43はシュクロース、ピーク44はマルトースを示す。図5より、各ピークが短時間で良好に分離できることを確認した。また同様の測定を10回連続して繰り返した際の、マルトースの保持時間の再現性を表1に示す。10回連続して測定した際のマルトースの保持時間のCV値は3.2となり、再現性は良好であった。4重合再現性の評価1カラム充填剤の調製と同様の条件により、カラム充填剤を20回20ロット調製した。各ロットについて、3液体クロマトグラフィーによる性能評価を行い、マルトースの保持時間の再現性を確認した。得られた結果を表1に示す。20ロット測定した際のマルトースの保持時間のCV値は3.9となり、再現性は良好であった。実施例5実施例5では、カチオン交換クロマトグラフィー用のカラム充填剤として本発明2のカラム充填剤を調製し、性能を確認した。1カラム充填剤の調製架橋性単量体として、テトラエチレングリコールジメタクリレート新中村化学工業社製120g、トリエチレングリコールジメタクリレート新中村化学工業社製200g、及び、2-ヒドロキシ-1,3-ジメタクリロキシプロパン新中村化学工業社製60gを混合して得られた単量体混合物に、重合開始剤として過酸化ベンゾイル1.0gを混合して溶解し、5重量のポリビニルアルコール水溶液2000mLに分散させた。得られた分散液を、25°Cで15時間撹拌した撹拌工程。次に反応系を窒素雰囲気下で80°Cに加温して1.2時間重合反応を行った。次に、親水性単量体として2-アクリルアミド-2-メチルプロパンスルホン酸東亞合成社製200g、及び、ポリエチレングリコールモノメタクリレート日油社製50gを、メタノール100g、及び、イオン交換水200mLの混合液に溶解して得られた混合物を添加し、撹拌しながら窒素雰囲気下で、更に80°Cで2時間重合反応を行った。得られた重合物を洗浄して、カラム充填剤を得た。実施例1と同様にして、得られたカラム充填剤の粒度分布を測定した結果、平均粒子径は7.5μmであった。2カラムへの充填実施例1と同様に操作して、得られたカラム充填剤0.7gをステンレス製空カラム4.6φ×25mmに充填した。3液体クロマトグラフィーによる性能評価12カラムへの充填で得られたカラムを用いて、タンパク質類の標準物質混合物を測定した。測定条件を以下に示す。システム:LC-10Aシステム島津製作所社製検出波長:280nm溶離液A:100mmol/Lリン酸緩衝液pH5.7溶離液B:溶離液A500mmol/LNaClpH5.7溶出条件:溶離液A100から溶離液B100へのリニアグラジエント流速:1.5mL/分測定試料:トリプシノーゲン、α-キモトリプシノーゲン、リボヌクレアーゼA、リゾチーム以上、いずれもSigma-Aldrich社製の混合物得られたクロマトグラムを図6に示す。図6より、各ピークが短時間で良好に分離できることを確認した。また、同様の測定を10回連続して繰り返した際の、リゾチームの保持時間の再現性を表1に示す。10回連続して測定した際のリゾチームの保持時間のCV値は0.9となり、再現性は良好であった。4液体クロマトグラフィーによる性能評価22カラムへの充填で得られたカラムを用いて、健常人血中のヘモグロビンA1cを含むヘモグロビン類の測定を行った。測定条件を以下に示す。システム:LC-10Aシステム島津製作所社製検出波長:415nm溶離液I:100mmol/Lリン酸緩衝液pH5.3溶離液J:320mmol/Lリン酸緩衝液pH8.2溶出条件:溶離液I100から溶離液J100へのステップグラジエント流速:1.2mL/分測定試料:フッ化ナトリウム採血した健常人血を、0.05のTritonX-100Sigma-Aldrich社製を含むリン酸緩衝液pH6.7により180倍に溶血希釈したもの得られたクロマトグラムを図7に示す。図7より、各ピークが短時間で良好に分離できることを確認した。また、同様の測定を10回連続して繰り返した際の、ヘモグロビンA1cの保持時間の再現性を表1に示す。10回連続して測定した際のヘモグロビンA1cの保持時間のCV値は0.8となり、再現性は良好であった。5重合再現性の評価1カラム充填剤の調製と同様の条件により、カラム充填剤を20回20ロット調製した。各ロットについて、4液体クロマトグラフィーによる性能評価2を行い、ヘモグロビンA1cの保持時間の再現性を確認した。得られた結果を表1に示す。20ロット測定した際のヘモグロビンA1cの保持時間のCV値は2.1となり、再現性は良好であった。実施例6実施例6では、アニオン交換クロマトグラフィー用のカラム充填剤として本発明2のカラム充填剤を調製し、性能を確認した。1カラム充填剤の調製架橋性単量体としてテトラメチロールプロパントリアクリレート新中村化学工業社製100g、及び、トリエチレングリコールジメタクリレート新中村化学工業社製300g、並びに、重合開始剤としてベンゾイルパーオキサイド1.5gを混合して溶解し、2000mLの5重量ポリビニルアルコール水溶液に分散させた。得られた分散液を、15°Cで10時間撹拌した撹拌工程。次に反応系を窒素雰囲気下で80°Cに加温して2時間重合反応を行った。次に、親水性単量体としてジエチルアミノエチルメタクリレート和光純薬工業社製200gを溶解した50重量のメタノール水溶液300mLを添加し、撹拌しながら窒素雰囲気下で、更に80°Cで1.5時間重合反応を行った。得られた重合物を洗浄して、カラム充填剤を得た。実施例1と同様にして、得られたカラム充填剤の粒度分布を測定した結果、平均粒子径は7.9μmであった。2カラムへの充填実施例1と同様に操作して、得られたカラム充填剤1.4gをステンレス製空カラム4.6φ×50mmに充填した。3液体クロマトグラフィーによる性能評価2カラムへの充填で得られたカラムを用い、実施例2と同様の条件で、タンパク質類の標準物質混合物を測定した。得られたクロマトグラムを図8に示す。図8より、各ピークが短時間で良好に分離できることを確認した。また、同様の測定を10回連続して繰り返した際の、トリプシンインヒビターの保持時間の再現性を表1に示す。10回連続して測定した際のトリプシンインヒビターの保持時間のCV値は1.0となり、再現性は良好であった。4重合再現性の評価実施例2と同様の条件により、カラム充填剤を20回20ロット調製した。各ロットについて、3液体クロマトグラフィーによる性能評価を行い、トリプシンインヒビターの保持時間の再現性を確認した。得られた結果を表1に示す。20ロット測定した際のトリプシンインヒビターの保持時間のCV値は1.5となり、再現性は良好であった。実施例7実施例7では、水系ゲル浸透クロマトグラフィー用のカラム充填剤として本発明2のカラム充填剤を調製し、性能を確認した。1カラム充填剤の調製架橋性単量体としてテトラエチレングリコールジメタクリレート新中村化学工業社製300g、非架橋性単量体としてポリエチレングリコールモノメタクリレート日油社製100g、及び、トルエン300g、並びに、ベンゾイルパーオキサイド1.5gを混合して溶解し、2500mLの6重量ポリビニルアルコール水溶液に分散させた。得られた分散液を、10°Cで18時間撹拌した撹拌工程。次に反応系を窒素雰囲気下で80°Cに加温して0.8時間重合反応を行った。次に、親水性単量体として2,3-ジヒドロキシルエチルメタクリレート日油社製200gを溶解した40重量のメタノール水溶液300mLを添加し、撹拌しながら窒素雰囲気下で、更に80°Cで2.2時間重合反応を行った。得られた重合物を洗浄して、カラム充填剤を得た。実施例1と同様にして、得られたカラム充填剤の粒度分布を測定した結果、平均粒子径は10.3μmであった。2カラムへの充填実施例1と同様に操作して、得られたカラム充填剤3.2gをステンレス製空カラム6.0φ×100mmに充填した。3液体クロマトグラフィーによる性能評価2カラムへの充填で得られたカラムを用い、実施例3と同様の条件で、タンパク質類を測定した。得られたクロマトグラムを図9に示す。図9より、各ピークが短時間で良好に分離できることを確認した。また同様の測定を10回連続して繰り返した際の、リボヌクレアーゼの保持時間の再現性を表1に示す。10回連続して測定した際のリボヌクレアーゼの保持時間のCV値は1.9となり、再現性は良好であった。4重合再現性の評価実施例3と同様の条件により、カラム充填剤を20回20ロット調製した。各ロットについて、3液体クロマトグラフィーによる性能評価を行い、リボヌクレアーゼの保持時間の再現性を確認した。得られた結果を表1に示す。20ロット測定した際のリボヌクレアーゼの保持時間のCV値は2.3となり、再現性は良好であった。実施例8実施例8では、順相クロマトグラフィー用のカラム充填剤として本発明2のカラム充填剤を調製し、性能を確認した。1カラム充填剤の調製架橋性単量体としてテトラメチロールプロパントリアクリレート新中村化学工業社製100g、及び、テトラエチレングリコールジメタクリレート新中村化学工業社製300g、並びに、重合開始剤としてベンゾイルパーオキサイド1.5gを混合して溶解し、2000mLの4重量ポリビニルアルコール水溶液に分散させた。得られた分散液を、20°Cで15時間撹拌した撹拌工程。次に反応系を窒素雰囲気下で80°Cに加温して24時間重合反応を行った。次に、親水性単量体として2-アミノエチルメタクリレート日油社製220gを溶解した40重量のメタノール水溶液300mLを添加し、撹拌しながら窒素雰囲気下で、更に80°Cで2.2時間重合反応を行った。得られた重合物を洗浄して、カラム充填剤を得た。実施例1と同様にして得られたカラム充填剤の粒度分布を測定した結果、平均粒子径は6.3μmであった。2カラムへの充填実施例1と同様に操作して、得られたカラム充填剤1.4gをステンレス製空カラム4.6φ×50mmに充填した。3液体クロマトグラフィーによる性能評価2カラムへの充填で得られたカラムを用い、実施例3と同様の条件で糖類を測定した。得られたクロマトグラムを図10に示す。図10より、各ピークが短時間で良好に分離できることを確認した。また同様の測定を10回連続して繰り返した際の、マルトースの保持時間の再現性を表1に示す。10回連続して測定した際のマルトースの保持時間のCV値は1.4となり、再現性は良好であった。4重合再現性の評価実施例4と同様の条件により、カラム充填剤を20回20ロット調製した。各ロットについて、3液体クロマトグラフィーによる性能評価を行い、マルトースの保持時間の再現性を確認した。得られた結果を表1に示す。20ロット測定した際のマルトースの保持時間のCV値は2.5となり、再現性は良好であった。比較例1~8比較例では、本発明における撹拌工程の条件を満たさないカラム充填剤を調製した。比較例1~8における撹拌工程の条件を表1に示す。撹拌工程以外の条件は、比較例1は実施例1、比較例2は実施例2、比較例3は実施例3、比較例4は実施例4、比較例5は実施例5、比較例6は実施例6、比較例7は実施例7、比較例8は実施例8と同様に操作してカラム充填剤を調製した。比較例4及び比較例6では、攪拌工程において、分散液中の単量体類や単量体混合物の一部が凍結して均一に撹拌することができなかった。比較例における、保持時間による重合再現性n=20の評価結果を表1に示す。実施例に比較してCV値が大きな値となった。分離性能の性能評価撹拌工程の条件を規定したことによる、カラム充填剤の分離性能への影響を確認するため、実施例及び比較例のカチオン交換クロマトグラフィー用カラム充填剤を用いて、種々のヘモグロビン類を測定し、分離性能を評価した。1修飾ヘモグロビン類の測定実施例1、実施例5、比較例1、及び、比較例5のカチオン交換クロマトグラフィー用カラム充填剤を用いて、人為的に調製した修飾ヘモグロビン類の測定を行った。修飾ヘモグロビン類を含む試料として、不安定型ヘモグロビンA1c含有試料試料L、アセチル化ヘモグロビン含有試料試料A、カルバミル化ヘモグロビン含有試料試料Cの3種類を、公知の方法により調製した。試料Lは、健常人血に、グルコースを2000mg/dLとなるように添加し、37°Cで3時間加温して調製した。試料Aは、健常人血に、アセトアルデヒドを50mg/dLとなるように添加し、37°Cで2時間加温して調製した。試料Cは、健常人血に、シアン酸ナトリウムを50mg/dLとなるように添加し、37°Cで2時間加温して調製した。分離性能は、修飾ヘモグロビン類を含む試料のヘモグロビンA1c値から、修飾ヘモグロビン類を含む試料の調製に用いた健常人血非修飾品のヘモグロビンA1c値を差し引いた値Δ値を算出し、両者を比較して評価した。結果を表2に示す。表2より、実施例1、実施例5のカラム充填剤を用いた場合のΔ値は0.2以下と小さく、修飾ヘモグロビン類が含まれる試料においても、正確にヘモグロビンA1cが測定できた。一方、比較例1、比較例5のカラム充填剤を用いた場合はΔ値が大きく、ヘモグロビンA1c値が、修飾ヘモグロビン類の影響を受けた。2異常ヘモグロビン類の測定実施例5及び比較例5のカチオン交換クロマトグラフィー用カラム充填剤を用いて、異常ヘモグロビンであるヘモグロビンS及びヘモグロビンCを含む試料ヘレナ研究所社製、AFSCヘモコントロールを測定した。実施例5のカラム充填剤を用いて測定した結果、得られたクロマトグラムを図11に示す。図11において、ピーク14はヘモグロビンS、ピーク15はヘモグロビンCを示す。図11より、実施例5で得られたカラム充填剤を用いた場合は、異常ヘモグロビン類を良好に分離できた。比較例5で得られたカラム充填剤を用いた場合は、図12に示すように、異常ヘモグロビン類の分離性能は悪かった。3ヘモグロビンA2の測定実施例5及び比較例5のカチオン交換クロマトグラフィー用カラム充填剤を用いて、ヘモグロビンA2を含む試料バイオラッド社製、A2コントロールレベル2を測定した。実施例5の充填剤を用いて測定して得られたクロマトグラムを図13に示す。図13において、ピーク16はヘモグロビンA2を示す。図13より、実施例5で得られたカラム充填剤を用いた場合は、ヘモグロビンA2を良好に分離できた。比較例5ので得られたカラム充填剤を用いた場合は、図14に示すようにヘモグロビンA2を分離できなかった。上記のヘモグロビン類の測定性能評価から、撹拌工程の条件を規定したことにより、カラム充填剤の重合再現性だけでなく、分離性能も向上した。"