"配列番号1のアミノ酸残基61~78からなるペプチドへの結合が6E6HMGB1mAbによって阻害され得る、単離されたモノクローナル抗体または抗原結合断片。配列番号1のアミノ酸残基67~78からなるペプチドへの結合が6E6HMGB1mAbによって阻害され得る、単離されたモノクローナル抗体または抗原結合断片。本発明の課題は、HMGBに結合する抗体を提供することである。即ち、本発明の要旨は、1配列番号1のアミノ酸残基61~78からなるペプチドへの結合が6E6HMGB1mAbによって阻害され得る、単離されたモノクローナル抗体または抗原結合断片、2配列番号1のアミノ酸残基67~78からなるペプチドへの結合が6E6HMGB1mAbによって阻害され得る、単離されたモノクローナル抗体または抗原結合断片に関する。本発明により、HMGBに結合する抗体が提供される。発明の概要種々の態様において、本発明は、脊椎動物高移動度グループボックスHMGBポリペプチドに結合する抗体またはその抗原結合断片、HMGBポリペプチドに結合する薬剤を検出し、および/または同定する方法、炎症性サイトカインカスケードの活性化によって特徴付けられる被験体における状態を治療する方法、および試料中のHMGBポリペプチドを検出する方法に向けられる。1つの態様において、本発明は、脊椎動物HMGBAボックスに特異的に結合するが、HMGBの非Aボックスエピトープには特異的には結合しない抗体またはその抗原結合断片であり、ここに、該抗体または抗原結合断片は、HMGBタンパク質で処理した脊椎動物細胞からのプロ炎症性サイトカインの放出を阻害する。ある態様において、本発明は、マウスハイブリドーマ6E6HMGB1mAb、マウスハイブリドーマ6H9HMGB1mAb、マウスハイブリドーマ2G7HMGB1mAb、マウスハイブリドーマ2E11HMGB1mAb、またはマウスハイブリドーマ10D4HMGB1mAbによって生産された抗体である。他の態様において、本発明は抗体またはその抗原結合断片であり、ここに、該抗体または抗原結合断片の脊椎動物HMGBポリペプチドへの結合は6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、2E11HMGB1mAbおよび/または10D4HMGB1mAbによって阻害され得る。さらに他の態様において、本発明は抗体またはその抗原結合断片であり、ここに、該抗体または抗原結合断片は6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、2E11HMGB1mAbおよび/または10D4HMGB1mAbのエピトープ特異性を有する。ある態様において、本発明は、配列番号1のアミノ酸残基46~63、配列番号1のアミノ酸残基61~78および/または配列番号1のアミノ酸残基151~168よりなるペプチドに結合する抗体または抗原結合断片である。1つの態様において、本発明は抗体または抗原結合断片であり、ここに、該抗体または抗原結合断片の、配列番号1のアミノ酸残基46~63よりなるペプチドへの結合は2G7HMGB1mAbによって阻害され得る。別の態様において、本発明は抗体または抗原結合断片であり、ここに、該抗体または抗原結合断片の、配列番号1のアミノ酸残基61~78よりなるペプチドへの結合は、6E6HMGB1mAbおよび/または6H9HMGB1mAbによって阻害され得る。なお別の態様において、本発明は抗体または抗原結合断片であり、ここに、該抗体または抗原結合断片の、配列番号1のアミノ酸残基151~168よりなるペプチドへの結合は2E11HMGB1mAbによって阻害され得る。ある態様において、本発明は、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび2G7HMGB1mAbよりなる群から選択される抗体の軽鎖CDRCDR1、CDR2およびCDR3ならびに重鎖CDRCDR1、CDR2およびCDR3を含む抗体または抗原結合断片である。他の態様において、本発明はマウスハイブリドーマ6E6HMGB1mAb、マウスハイブリドーマ6H9HMGB1mAb、マウスハイブリドーマ2G7HMGB1mAb、マウスハイブリドーマ2E11HMGB1mAbまたはマウスハイブリドーマ10D4HMGB1mAbである。別の態様において、本発明は、脊椎動物HMGBAボックスに特異的に結合するが、HMGBの非Aボックスエピトープに特異的に結合しない抗体または抗原結合断片を生産する単離された細胞である。他の態様において、本発明は6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、2E11HMGB1mAbまたは10D4HMGB1mAbを生産する単離された細胞である。なお他の態様において、本発明は抗体またはその抗原結合断片を生産する単離された細胞であり、ここに、該抗体または抗原結合断片の脊椎動物HMGBポリペプチドへの結合は6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、2E11HMGB1mAbおよび/または10D4HMGB1mAbによって阻害され得る。なお他の態様において、本発明は6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、2E11HMGB1mAbおよび/または10D4HMGB1mAbのエピトープ特異性を有する抗体または抗原結合断片を生産する単離された細胞である。他の態様において、本発明は、本発明の抗体または抗原結合断片、および薬学的に許容され得る賦形剤を含む組成物である。別の態様において、本発明は、本発明の抗体または抗原結合断片、被験薬剤、および脊椎動物HMGBポリペプチドを含む組成物を合わせることを特徴とする、脊椎動物HMGBポリペプチドに結合する薬剤を検出し、および/または同定する方法である。該方法において、抗体または抗原結合断片およびHMGBポリペプチドの間の複合体の形成が検出または測定され、適当な対照と比較した、複合体形成の減少は、該験薬剤がHMGBポリペプチドに結合することを示す。別の態様において、本発明は、本発明の抗体または抗原結合断片を被験体に投与することを特徴とする炎症性サイトカインカスケードの活性化によって特徴付けられる被験体における状態を治療する方法である。ある態様において、該状態は敗血症、関節炎または狼瘡である。別の態様において、本発明は試料中の脊椎動物HMGBポリペプチドを検出する方法である。該方法において、該抗体または断片が試料中に存在するHMGBポリペプチドに結合するのに適した条件下で、本発明の抗体または抗原結合断片と試料とを接触させる。もし抗体-HMGB複合体または抗原結合断片-HMGB複合体が検出されれば、それらの存在は試料中のHMGBポリペプチドを示す。別の態様において、本発明は、試料中の脊椎動物HMGBポリペプチドまたはその一部の存在を検出するのに用いられる試験キットである。該試験キットは本発明の抗体または抗原結合断片、および該抗体または抗原結合断片とHMGBポリペプチドとの複合体の存在を検出するのに適した1以上の補助的試薬を含む。発明の詳細な説明種々の態様において、本発明は、脊椎動物高移動度グループボックスHMGBポリペプチドに結合する抗体またはその抗原結合断片HMGBポリペプチドに結合する薬剤を検出しおよび/または同定する方法、炎症性サイトカインカスケードの活性化によって特徴付けられる被験体における状態を治療する方法、および試料中のHMGBポリペプチドを検出する方法に関する。抗体および抗体産生細胞1つの態様において、本発明は、HMGBポリペプチドに結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。本発明の抗体はポリクローナルまたはモノクローナルであり得、用語抗体はポリクローナル抗体もモノクローナル抗体も含むことを意図する。用語ポリクローナルおよびモノクローナルとは、抗体調製の均一性の程度をいい、特別な生産方法に限定することを意図しない。1つの態様において、抗体または抗原結合断片はモノクローナル抗体またはその抗原結合断片である。本明細書中で用いる用語モノクローナル抗体またはモノクローナル抗体組成物とは、本発明のポリペプチドの特定のエピトープと免疫反応できるただ一種類の抗原結合部位を含有する抗体分子の集団をいう。かくして、モノクローナル抗体組成物は、通常、それと免疫反応する本発明の特定のポリペプチドに対する単一結合親和性を呈する。本明細書中で用いる用語抗体は、キメラ、ヒト化、霊長類化、ベニヤードまたは単一鎖抗体の断片を含めた、抗体の機能的断片をも含む。機能的断片はHMGBポリペプチド例えば、哺乳動物HMGBポリペプチド例えば、哺乳動物HMGB1ポリペプチドに結合する抗体の抗原結合断片を含む。例えば、HMGBポリペプチドまたはその部分に結合し得る抗体断片は、限定されるものではないが、Fv、Fab、Fab’およびFab’2断片を含む。そのような断片は酵素切断によって、または組換え技術によって生産できる。例えば、パパインまたはペプシン切断は、各々、FabまたはFab’2断片を生産し得る。必要な基質特異性を持つ他のプロテアーゼを用いて、FabまたはFab’2断片を生産することができる。また、1以上の停止コドンが天然停止部位の上流に導入されている抗体遺伝子を用いて種々の切形形態で抗体を生産することもできる。例えば、Fab’2重鎖部分をコードするキメラ遺伝子を、重鎖のCH1ドメインおよびヒンジ領域をコードするDNA配列を含むように設計することができる。単一鎖抗体、およびキメラ、ヒト化または霊長類化CDR-移植、またはベニヤード抗体、ならびに異なる種に由来する部分を含むキメラ、CDR-移植またはベニヤード単一鎖抗体などもまた本発明、および用語抗体に包含される。これらの抗体の種々の部分は慣用的な技術によって化学的に一緒に連結することができるか、あるいは遺伝子工学技術を用いて連続的タンパク質として調製することができる。例えば、キメラまたはヒト化鎖をコードする核酸は連続タンパク質を生産するように発現させることができる。例えば、Cabillyら米国特許第4816567号;Cabillyら欧州特許第0125023B1号;Bossら,米国特許第4816397号;Bossら,欧州特許第0120694B1号;NeubergerMSらWO86/01533;NeubergerMSら欧州特許第0194276B1号Winter米国特許第5225539号;Winter欧州特許第0239400B1号;Queenら欧州特許第0451216B1号;およびPadlanEAら欧州特許公開公報第0519596A1号参照。また、霊長類化抗体についてはNewmanRらBioTechnology10145514601992、および単一鎖抗体に関してはLadnerら米国特許第4946778号およびBirdREらScience2424234261988参照。ヒト化抗体は標準的な方法または他の適当な技術を用いる合成または組換えDNA技術を用いて生産することができる。また、PCR突然変異誘発方法を用いてヒト化可変領域をコードする核酸例えば、cDNA配列を構築して、先にヒト化された可変領域からのDNA鋳型のようなヒトまたはヒト化鎖をコードするDNA配列を改変することもできる例えば、KammanMらNuclAcidsRes1754041989;SatoKらCancerResearch538518561993;DaughertyBLらNucleicAcidsRes199247124761991ならびにLewisAPおよびJSCroweGene1012973021991参照。これらまたは他の適当な方法を用い、変種を容易に生産することもできる。1つの態様において、クローン化可変領域を突然変異させることができ、および所望の特異性を持つ変種をコードする配列を例えば、ファージライブラリーから選択することができる例えば、Krebberら米国特許第5514548号;HoogenboomらWO93/06213参照。該抗体は1以上の免疫グロブリン鎖を含むヒト化抗体例えば、非ヒト起源のCDR例えば、非ヒト起源の抗体に由来する1以上のCDRおよびヒト起源の軽鎖および/または重鎖に由来するフレームワーク領域を含む抗体例えば、フレームワーク変化を含むかまたは含まないCDR-移植抗体であり得る。1つの態様において、該抗体またはその抗原結合断片は特定の免疫グロブリンの軽鎖CDRCDR1,CDR2およびCDR3および重鎖CDRCDR1,CDR2およびCDR3を含む。別の態様において、該抗体または抗原結合断片は、さらに、ヒトフレームワーク領域を含む。本明細書中に記載された抗体は薬剤に結合することもできる。1つの態様において、該薬剤は標識、例えば、放射性同位体、エピトープ標識タグ、アフィニティー標識例えば、ビオチン、アビジン、スピン標識、酵素、蛍光基または化学発光基である。本発明の標識された抗体または抗原結合断片は、例えば、本明細書中に記載された診断および/または予測方法で用いることができる。別の態様において、該抗体は薬物、トキシンまたは抗炎症剤に結合される。薬物、トキシンまたは抗炎症剤の本発明の抗HMGB抗体および抗原結合断片への結合は、これらの薬剤の、HMGB発現および/または活性の部位への標的化を可能とする。本発明の抗体に結合することができる薬物およびトキシンは、例えば、化学療法剤例えば、マイトマイシンC、パクリタキセルpaxlitaxol、メトトレキセート、5フルオロウラシル、シスプラチン、シクロヘキサミド、トキシン例えば、リシン、ゲロニンおよび本明細書中に記載された他の薬剤例えば、併用療法につき記載された薬剤を含む。結合することができる抗炎症剤は、例えば、本明細書中に記載されたものを含む。HMGBポリペプチド例えば、哺乳動物HMGBポリペプチドに特異的な抗体は、合成ペプチドのような合成分子を含めた単離されたおよび/または組換えHMGBポリペプチドまたはその部分のような適当な免疫原に対して生起させることができる。また、抗体は、GH3下垂体細胞、マクロファージ細胞例えば、RAW2467細胞、ヒトマクロファージ細胞、末梢血液単核細胞PBMC例えば、ヒトPBMC、一次T細胞例えば、ヒト一次T細胞、副腎細胞例えば、ラット副腎PC12細胞、ヒト副腎細胞、および腎臓細胞例えば、ラット一次腎臓細胞、ヒト一次腎臓細胞のような、HMGBポリペプチドを発現する細胞で適当な宿主例えば、マウスを免役化することによって生起させることもできる。加えて、トランスフェクトされた細胞のような、組換えHMGBポリペプチド例えば、哺乳動物HMGBポリペプチドを発現する細胞を、免疫原として、またはそれに結合する抗体用のスクリーニングにおいて用いることができる例えば、ChuntharapaiらJImmunol152178317891994Chuntharapaiら米国特許第5440021号参照。免疫化抗原の調製、ならびにポリクローナルおよびモノクローナル抗体の生産はいずれかの適当な技術を用いて行うことができる。種々の方法が記載されている例えば、KohlerらNature2564954971975およびEurJImmunol65115191976MilsteinらNature2665505521977Koprowskiら米国特許第4172124号;HarlowEおよびDLane1988AntibodiesALaboratoryManualColdSpringHarborLaboratoryColdSpringHarborNYCurrentProtocolsInMolecularBiologyVol2’94夏増刊号27AusubelFMら編JohnWileySonsNewYorkNY第11章,1991参照。一般には、本明細書中に例示したように、ハイブリドーマは適当な不滅細胞系例えば、SP2/0、P3X63Ag8653またはヘテロミエローマのような骨髄腫細胞系を抗体産生細胞と融合させることによって生産される。抗体産生細胞はヒト、または注目する抗原で免疫化した他の適当な動物の末梢血液または、好ましくは、脾臓またはリンパ節から得ることができる。融合細胞ハイブリドーマは、選択的培養条件を用いて単離することができ、および限界希釈によってクローン化することができる。所望の特異性を持つ抗体を生産する細胞は、適当なアッセイ例えば、ELISAによって選択することができる。必要な特異性の抗体例えば、ヒト抗体または抗原結合断片を生産し、または単離する他の適当な方法を用いることができ、これは例えば、ライブラリー例えば、ファージディスプレイライブラリーからの組換え抗体を選択する方法を含む。ヒト抗体のレパートリー例えば、Xenomouse登録商標AbgenixFremontCAを生産することができるトランスジェニック動物は、適当な方法を用いて生産することができる例えば、JakobovitsらProcNatlAcadSciUSA90255125551993;JakobovitsらNature3622552581993参照。ヒト抗体のレパートリーを生産することができるトランスジェニック動物の生産に適したさらなる方法が記載されている例えば、Lonbergら米国特許第5545806号;Suraniら米国特許第5545807号;LonbergらWO97/13852。1つの態様において、該抗体またはその抗原結合断片はHMGBポリペプチド例えば、哺乳動物HMGBポリペプチドに対する特異性を有する。特定の態様において、該抗体またはその抗原結合断片はHMGB1ポリペプチド例えば、配列番号1および/または配列番号74に示されたようなヒトHMGB1ポリペプチドに対する特異性を有する。別の態様において、該抗体またはその抗原結合断片はIgGまたはIgGの抗原結合断片である。別の態様において、該抗体またはその抗原結合断片はIgG1またはIgG1の抗原結合断片である。なお他の態様において、該抗体またはその抗原結合断片はIgG2a、IgG2b、IgG3抗体、または前記のいずれかの抗原結合断片である。別の態様において、該抗体または抗原結合断片はHMGBポリペプチドに結合し、かつHMGBポリペプチドの1以上の機能を阻害低下または防止することができる。そのようなHMGB機能は、例えば、炎症の増加例えば、国際公開第02/092004号パンフレット参照、細胞からのプロ炎症性サイトカインの放出の増加例えば、国際公開第02/092004号パンフレット参照、RAGEへの結合、TLR2への結合、化学誘引例えば、DegryseらJCellBiol1526119712062001参照;その全教示を本明細書中に参考として援用する、および抗原提示細胞の活性化例えば、国際公開第03/026691号パンフレット参照;その全教示を本明細書中に参考として援用するを含む。1つの態様において、該抗体はヒト抗体またはその抗原結合断片である。別の態様において、該抗体はヒト化抗体またはその抗原結合断片である。なお別の態様において、該抗体または抗原結合断片はHMGBポリペプチドへのポリペプチド例えば、RAGE、TLR2の結合を阻害し、および/またはHMGBポリペプチドおよび他のポリペプチドの結合によって媒介される1以上の機能を阻害することができる。ある態様において、該抗体またはその抗原結合断片はHMGBエピトープまたは抗原決定基例えば、HMGBエピトープ、HMGBAボックスエピトープ、HMGBBボックスエピトープに特異的に結合する。本明細書中に記載するように、抗体またはその抗原結合断片は、標準的な方法を用いて、プロ炎症性サイトカインの放出を阻害する能力につき過度な実験無くしてスクリーニングすることができる。プロ炎症性サイトカインの生産および/または細胞からのプロ炎症性サイトカインの放出を阻害し、および/または炎症性サイトカインカスケードの活性化によって特徴付けられる状態を阻害することができる抗HMGBAボックス抗体および抗HMGBBボックス抗体は本発明の範囲内のものである。1つの態様において、本発明の抗体または抗原結合断片はTNF、IL1β、および/またはIL6の生産を阻害することができる。別の態様において、本発明の抗体または抗原結合断片はTNF例えば、TNF-αの生産を阻害することができる。本明細書中で記載されるように、6E6HMGB1mAb、2E11HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび2G7HMGB1mAbと称されるモノクローナル抗体全て、HMGB1に結合するが作製された。加えて、9G2HMGB1mAb、1A9HMGB1mAb、3G8HMGB1mAb、2G5HMGB1mAb、4H11HMGB1mAb、7H3HMGB1mAb、35A6HMGB1mAb、9G1HMGB1mAb、4C9HMGB1mAb、9H3HMGB1mAb、1C3HMGB1mAb、5C12HMGB1mAb、3E10HMGB1mAb、7G8HMGB1mAbおよび4A10HMGB1mAbと称される他のモノクローナル抗体は生産されている。9G2HMGB1mAbおよび1A9HMGB1mAbを除く全てはHMGB1に結合することが示されている。9G2HMGB1mAbおよび1A9HMGB1mAbは小数割合の免疫原においては切断されない免疫原のCBP領域に結合するようである。6E6711または6E6ともいわれる6E6HMGB1mAbは、受託番号PTA5433の下で、CriticalTherapeuticsInc675MassachusettsAvenue14thFloorCambridgeMA02139USAを代表してAmericanTypeCultureCollection10801UniversityBoulevardManassasVirginia20110USAに2003年9月3日に寄託されたマウスハイブリドーマ6E6HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ6E6HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。2E11112または2E11ともいわれる2E11HMGB1mAbは、受託番号PTA5431の下で、CriticalTherapeuticsInc675MassachusettsAvenue14thFloorCambridgeMA02139USAを代表してAmericanTypeCultureCollection10801UniversityBoulevardManassasVirginia20110USAに2003年9月3日に寄託されたマウスハイブリドーマ2E11HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ2E11HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。6H9112または6H9ともいわれる6H9HMGB1mAbは受託番号PTA5434の下で、CriticalTherapeuticsInc675MassachusettsAvenue14thFloorCambridgeMA02139USAを代表してAmericanTypeCultureCollection10801UniversityBoulevardManassasVirginia20110USAに2003年9月3日に寄託されたマウスハイブリドーマ6H9HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ6H9HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。10D41112または10D4ともいわれる10D4HMGB1mAbは受託番号PTA5435の下で、CriticalTherapeuticsInc675MassachusettsAvenue14thFloorCambridgeMA02139USAを代表してAmericanTypeCultureCollection10801UniversityBoulevardManassasVirginia20110USAに2003年9月3日に寄託されたマウスハイブリドーマ10D4HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ10D4HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。32G7111または2G7ともいわれる2G7HMGB1mAbは受託番号PTA5432の下で、CriticalTherapeuticsInc675MassachusettsAvenue14thFloorCambridgeMA02139USAを代表してAmericanTypeCultureCollection10801UniversityBoulevardManassasVirginia20110USAに2003年9月3日に寄託されたマウスハイブリドーマ2G7HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ2G7HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。前記で確認されたマウスハイブリドーマ例えば、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、2G7HMGB1mAbの培養については、DMEM、10FCS、1IL6、1Lグルタミンおよび1PenStrepを加えるべきである。9G27111または9G2ともいわれる9G2HMGB1mAbはマウスハイブリドーマ9G2HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ9G2HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。1A91214または1A9ともいわれる1A9HMGB1mAbはマウスハイブリドーマ1A9HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ1A9HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。3G87215または3G8ともいわれる3G8HMGB1mAbはマウスハイブリドーマ3G8HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ3G8HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。32G5412または2G5ともいわれる2G5HMGB1mAbはマウスハイブリドーマ2G5HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ2G5HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。4H11ともいわれる4H11HMGB1mAbはマウスハイブリドーマ4H11HMGBmAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ4H11HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。7H3ともいわれる7H3HMGB1mAbはマウスハイブリドーマ7H3HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ7H3HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。35A6または5A6ともいわれる35A6HMGB1mAbはマウスハイブリドーマ35A6HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ35A6HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。9G1ともいわれる9G1HMGB1mAbはマウスハイブリドーマ9G1HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ9G1HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。4C9ともいわれる4C9HMGB1mAbはマウスハイブリドーマ4C9HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ4C9HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。9H3ともいわれる9H3HMGB1mAbはマウスハイブリドーマ9H3HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ9H3HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。1C31111または1C3ともいわれる1C3HMGB1mAbはマウスハイブリドーマ1C3HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ1C3HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。5C121111または5C12ともいわれる5C12HMGB1mAbはマウスハイブリドーマ5C12HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ5C12HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。3E105411または3E10ともいわれる3E10HMGB1mAbはマウスハイブリドーマ3E10HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ3E10HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。7G8ともいわれる7G8HMGB1mAbはマウスハイブリドーマ7G8HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ7G8HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。4A101311または4A10ともいわれる4A10HMGB1mAbはマウスハイブリドーマ4A10HMGB1mAbによって生産することができる。本発明は、マウスハイブリドーマ4A10HMGB1mAb、それが生産する抗体、および該抗体をコードする核酸に関する。1つの態様において、該抗体またはその抗原結合断片は6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、2E11HMGB1mAbおよび前記のいずれかの抗原結合断片よりなる群から選択される。別の態様において、該抗体または抗原結合断片は、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、2E11HMGB1mAbおよび/または前記のいずれかの抗原結合断片よりなる群から選択される抗体または抗原結合断片の同一または類似のエピトープ特異性を有する。6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbのそれと同一または類似のエピトープ特異性を持つ抗体または抗原結合断片は種々の適当な方法によって同定することができる。例えば、例えば6E6HMGB1mAbと同一または類似のエピトープ特異性を持つ抗体は、HMGBポリペプチド例えば、哺乳動物HMGBポリペプチド例えば、哺乳動物HMGB1ポリペプチドに対する結合につき6E6HMGB1mAbと競合する能力に基づいて同定することができる。別の例において、例えば、6E6HMGB1mAbの結合、およびHMGBポリペプチドに対する同一または類似のエピトープ特異性を持つ抗体の結合を単一ペプチド例えば、天然ペプチド、合成ペプチドによって阻害することができる。種々の態様において、該ペプチドは、例えば、9~約50アミノ酸、9~約40アミノ酸、9~約30アミノ酸、9~約25アミノ酸、または9~約20アミノ酸を含むことができる。本明細書中に例示するように、ヒトHMGB1ポリペプチドの特定の領域に対応する18アミノ酸ペプチドは種々のHMGB1モノクローナル抗体に結合することが示された。本明細書中に記載される研究は、特定のHMGB1抗体に結合するHMGB1内のエピトープを位置づけた。例えば、2E11HMGB1mAbはヒトHMGB1のアミノ酸151~168配列番号1のアミノ酸残基151~168;すなわち、LKEKYEKDIAAYRAKGKP配列番号30に対応するペプチドに結合することが示された。さらなる研究は、2E11HMGB1mAbは、HMGB1のアミノ酸残基156~161、155~161、155~162、156~162および/または156~163内に存在するエピトープを認識することを示唆する実施例14参照。6E6HMGB1mAbおよび6H9HMGB1mAbはヒトHMGB1のアミノ酸61~78配列番号1のアミノ酸残基61~78;すなわち、EDMAKADKARYEREMKTY配列番号24に対応するペプチドに結合することが示された。さらなる研究は、6E6HMGB1mAbがHMGB1のアミノ酸残基67~78内に存在するエピトープを認識することを示した実施例13参照。2G7HMGB1mAbはヒトHMGB1のアミノ酸46~63配列番号1のアミノ酸残基46~63;すなわち、SERWKTMSAKEKGKFEDM配列番号23に対応するペプチドに結合することが示された実施例10参照。さらなる研究は、2G7HMGB1mAbがHMGB1のアミノ酸残基53~63内に存在するエピトープを認識することを示した実施例12参照。加えて、2G7HMGB1mAbは、HMGB146~63ペプチドおよびHMGB246~63ペプチドの間の単一のアミノ酸の差に過ぎないのにもかかわらず、HMGB2のアミノ酸残基46~63配列番号48に結合しない実施例12参照。かくして、1つの態様において、本発明の抗体または抗原結合断片はHMGB1に結合するが、HMGB2には結合しない。他の態様において、本発明の抗体または抗原結合断片はHMGB1およびHMGB2双方に結合する。これらの18アミノ酸ペプチド、またはHMGB1の特定の領域に対応する他のペプチドをエピトープ研究で用いて、抗体または抗原結合断片がそのペプチドに結合することが知られている抗体例えば、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、2E11HMGB1mAb、本明細書中に記載された他の抗体へのペプチドの結合を阻害したかを測定することができるであろう。かくして、例えば、そのエピトープ特異性につき試験すべき抗体または抗原結合断片は、例えば、2E11HMGB1mAbおよび2E11HMGB1mAbが結合することが知られているヒトHMGB1のアミノ酸151~168に対応するペプチドでアッセイすることができるであろう。別の例において、本発明の抗体例えば、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbと同一または類似のエピトープ特異性を持つ抗体は、キメラHMGBポリペプチドを用いて同定することができる例えば、BanksGCらJBiolChem2742316536165441999参照。1つの態様において、該抗体または抗原結合断片は、HMGBポリペプチド例えば、哺乳動物HMGBポリペプチド例えば、哺乳動物HMGB1ポリペプチドに対する結合につき、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、2E11HMGB1mAbおよび/または前記のいずれかの抗原結合断片と競合し得る。結合のそのような阻害は例えば、抗体が重複するエピトープまたは隣接するエピトープに結合する場合同一または類似のエピトープに対する競合または立体干渉の結果であり得る。6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、2E11HMGB1mAb、および/または前記のいずれかの抗原結合断片による阻害は、HMGBポリペプチドへの抗体結合に際して誘導されるHMGBポリペプチドの立体配座の変化のためでもあり得る。別の態様において、該抗体またはその抗原結合断片は3G8HMGB1mAb、2G5HMGB1mAb、4H11HMGB1mAb、7H3HMGB1mAb、35A6HMGB1mAb、9G1HMGB1mAb、4C9HMGB1mAb、9H3HMGB1mAb、1C3HMGB1mAb、5C12HMGB1mAb、3E10HMGB1mAb、7G8HMGB1mAb、4A10HMGB1mAb、および前記のいずれかの抗原結合断片よりなる群から選択される。1つの態様において、該抗体または抗原結合断片は、3G8HMGB1mAb、2G5HMGB1mAb、4H11HMGB1mAb、7H3HMGB1mAb、35A6HMGB1mAb、9G1HMGB1mAb、4C9HMGB1mAb、9H3HMGB1mAb、1C3HMGB1mAb、5C12HMGB1mAb、3E10HMGB1mAb、7G8HMGB1mAb、4A10HMGB1mAb、および前記のいずれかの抗原結合断片よりなる群から選択される抗体または抗原結合断片のエピトープ特異性を有する。前記したように、これらの抗体または抗原結合断片の1つ以上と同一または類似のエピトープ特異性を持つ抗体または抗原結合断片は例えば、本明細書中に記載されたおよび/または当該分野で公知の方法を用いて種々の適切な方法によって同定し得る。別の態様において、該抗体または抗原結合断片は、HMGBポリペプチド例えば、哺乳動物HMGBポリペプチドに対する結合につき、3G8HMGB1mAb、2G5HMGB1mAb、4H11HMGB1mAb、7H3HMGB1mAb、35A6HMGB1mAb、9G1HMGB1mAb、4C9HMGB1mAb、9H3HMGB1mAb、1C3HMGB1mAb、5C12HMGB1mAb、3E10HMGB1mAb、7G8HMGB1mAb、4A10HMGB1mAb、および/または前記のいずれかの抗原結合断片と競合し得る。前記したように、結合の阻害は例えば、抗体が重複するエピトープまたは隣接エピトープに結合する場合同一もしくは類似のエピトープに対する競合または立体干渉の結果であり得る。また、阻害は、該抗体または抗原結合断片がHMGBポリペプチドへ結合する際に誘導されるHMGBポリペプチドの立体配座の変化のためであり得る。1つの態様において、該抗体またはその抗原結合断片は6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび2E11HMGB1mAbよりなる群から選択される抗体の6つのCDR軽鎖CDRCDR1、CDR2およびCDR3ならびに重鎖CDRCDR1、CDR2およびCDR3を含む。別の態様において、該抗体は6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび2E11HMGB1mAbよりなる群から選択される抗体の軽鎖CDRCDR1、CDR2およびCDR3ならびに重鎖CDRCDR1、CDR2およびCDR3を含むヒト化抗体である。他の態様において、該抗体またはその抗原結合断片は本明細書中に記載されたいずれかの他の抗体の6つのCDR軽鎖CDRCDR1、CDR2およびCDR3ならびに重鎖CDRCDR1、CDR2およびCDR3を含む。別の態様において、該抗体またはその抗原結合断片は本発明の抗体の軽鎖および重鎖CDRの1~6を含む例えば、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、2E11HMGB1mAb。例えば、該抗体または抗原結合断片は軽鎖および重鎖CDRの1、2、3、4、5または6を含み得る。別の態様において、該抗体またはその抗原結合断片は本発明の1つの抗体からの少なくとも1つの軽鎖CDRまたは重鎖CDR、および本発明の異なる抗体からの少なくとも1つの軽鎖CDRまたは重鎖CDRを含む例えば、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、2E11HMGB1mAb。例えば、抗体または抗原結合断片は6E6HMGB1mAbからの1つ以上のCDR、および6H9HMGB1mAbからの1つ以上のCDRを含み得る。本発明の異なる抗体からのCDRの他の組合せを組み合わせる抗体および抗原結合断片もまた含まれる。別の態様において、該抗体またはその抗原結合断片は、3G8HMGB1mAb、2G5HMGB1mAb、4H11HMGB1mAb、7H3HMGB1mAb、35A6HMGB1mAb、9G1HMGB1mAb4C9HMGB1mAb、9H3HMGB1mAb、1C3HMGB1mAb、5C12HMGB1mAb、3E10HMGB1mAb、7G8HMGB1mAbおよび4A10HMGB1mAbよりなる群から選択される抗体の6つのCDR軽鎖CDRCDR1、CDR2およびCDR3ならびに重鎖CDRCDR1、CDR2およびCDR3を含む。別の態様において、該抗体またはその抗原結合断片は、これらの抗体の1つの軽鎖および重鎖CDRの1~6を含む。ある態様において、該抗体または抗原結合断片は、本発明の抗体例えば、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、2E11HMGB1mAbのCDRに対して、少なくとも80同一、少なくとも90同一、または少なくとも95同一である1つ以上のCDRを含む。他の態様において、該抗体または抗原結合断片は、本発明の抗体のCDRに対して少なくとも80類似、少なくとも90類似、または少なくとも95類似である1つ以上のCDRを含む。2つのポリペプチドの配列同一性および類似性を決定する方法は本明細書中に記載されており、および/または当該分野で周知である。また、本発明は、HMGBポリペプチドおよび少なくとも1つの他の抗原例えば、腫瘍抗原、ウイルス抗原に結合する二重特異性抗体、またはその機能的断片例えば、Fab’2に関する。特定の態様において、該二重特異性抗体、またはその機能的断片は、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAb、および少なくとも1つの他の抗体と同一または類似のエピトープ特異性を有する。二重特異性抗体は、トリオーマおよびハイブリッドハイブリドーマによって分泌され得る。一般に、トリオーマはハイブリドーマおよびリンパ球例えば、抗体分泌B細胞の融合によって形成され、ハイブリッドハイブリドーマは2つのハイブリドーマの融合によって形成される。融合された細胞すなわち、ハイブリドーマ、リンパ球の各々は単一特異的抗体を生じ得る。しかしながら、トリオーマおよびハイブリッドハイブリドーマは、異なる抗原を認識する抗原結合部位を含有する抗体を生じ得る。トリオーマおよびハイブリッドハイブリドーマの上清は、適切なアッセイ例えば、ELISAを用いて二重特異性抗体につきアッセイし得、二重特異性抗体は従来の方法を用いて精製し得る例えば、米国特許第5959084号Ringら、米国特許第5141736号Iwasaら、米国特許第4444878号、同第5292668号、同第5523210号全てPaulusらに対するおよび米国特許第5496549号Yamazakiら参照。1つの態様において、本発明は、本発明の抗体または抗原結合断片を生じる単離された細胞に関する。特定の態様において、本発明の単離された抗体産生細胞は、ハイブリドーマ、ヘテロハイブリドーマ、リンパ芽球細胞または組換え細胞等の不死化細胞である。本発明の抗体産生細胞は、抗体の産生以外の用途を有する。例えば、本発明の細胞は適切に薬物標識したヒト骨髄腫、マウス骨髄腫、ヒト-マウスヘテロ骨髄腫またはヒトリンパ芽球細胞等の他の細胞と融合させて、例えば、さらなるハイブリドーマを生じ得、かくして、抗体をコードする遺伝子の導入を提供し得る。さらに、該細胞は、例えば、任意の適切な技術例えば、Cabillyら米国特許第4816567号、Winter米国特許第5225539号参照を用いる他の細胞への導入に際して単離され得、かつ発現させ得る抗HMGB免疫グロブリン鎖をコードする核酸の源として用いられ得る。例えば、配置された抗HMGB軽鎖および/または重鎖をコードする配列を含むクローンを例えば、PCRによって単離し得る。さらに、cDNAライブラリーは適正な細胞系から単離されたmRNAから調製され得、抗HMGB免疫グロブリン鎖をコードするcDNAクローンを単離し得る。かくして、抗体の重鎖および/もしくは軽鎖、またはその部分をコードする核酸を得、種々の宿主細胞またはインビトロ翻訳系において、特異的免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、またはその変種例えば、ヒト化免疫グロブリンの産生のために用いられ得る。例えば、cDNAを含む核酸、またはヒト化免疫グロブリンもしくは免疫グロブリン鎖等の変種をコードするその誘導体を適切な原核生物または真核生物ベクター例えば、発現ベクターの中に取り入れ、核酸を例えば、ベクター中のまたは宿主細胞ゲノムに組み込まれた1つ以上の発現制御エレメントに対して操作可能に連結させることで、適正な方法例えば、形質転換、トランスフェクション、エレクトロポレーション、感染によって適切な宿主細胞に導入し得、組換え抗体産生細胞を生じるようにする。かくして、ある態様において、本発明は、本発明の抗体または抗原結合断片をコードする核酸である。他の態様において、本発明は、本発明の抗体または抗原結合断片をコードする核酸を含むベクターである。HMGBポリペプチド、HMGBAボックスおよびHMGBBボックス記載されたように、1つの態様において、本発明は、HMGBポリペプチドに結合する抗体またはその抗原結合断片である。本明細書中で用いる場合、HMGBポリペプチドは、例えば、本明細書中に記載されたBLASTプログラムおよびパラメータを用いて決定された配列番号1、配列番号18および配列番号74よりなる群より選択される配列に対して、少なくとも60、より好ましくは、少なくとも70、75、80、85、または90、最も好ましくは少なくとも95配列同一性を有するポリペプチドである。1つの態様において、HMGBポリペプチドは、炎症を増大させ、および/または細胞からのプロ炎症性サイトカインの放出を増加させる。別の態様において、HMGBポリペプチドは前記生物学的活性の1つを有する。典型的に、HMGBポリペプチドは前記生物学的活性の双方を有する。用語ポリペプチドとはアミノ酸のポリマーをいい、特定の長さを言わない;かくして、ペプチド、オリゴペプチドおよびタンパク質はポリペプチドの定義内に含まれる。1つの態様において、HMGBポリペプチドは哺乳動物HMGBポリペプチド、例えば、哺乳動物HMGBポリペプチド例えば、ヒトHMGB1ポリペプチドである。別の態様において、HMGBポリペプチドは、本明細書中に記載されたBボックスDNA結合ドメインおよび/もしくはAボックスDNA結合ドメインおよび/または酸性カルボキシル末端を含有する。HMGBポリペプチドの他の例は、GenBank受託番号AAA64970、AAB08987、P07155、AAA20508、S29857、P09429、NP002119、CAA31110、S02826、U00431、X67668、NP005333、NM016957、およびJ04179に記載されており、その全教示は本明細書中に参考として援用される。HMGBポリペプチドのさらなる例は、限定されるものではないが、哺乳動物HMG1例えば、GenBank受託番号U51677に記載されたHMGB1、HMG2例えば、GenBank受託番号M83665に記載されたHMGB2、HMG2A例えば、GenBank受託番号NM005342およびNP005333に記載されたHMGB3、HMG4、HMG14例えば、GenBank受託番号P05114に記載、HMG17例えば、GenBank受託番号X13546に記載、HMGI例えば、GenBank受託番号L17131に記載、およびHMGY例えば、GenBank受託番号M23618に記載;非哺乳動物HMGT1例えば、GenBank受託番号X02666に記載およびHMGT2例えば、GenBank受託番号L32859に記載ニジマス;HMGX例えば、GenBank受託番号D30765に記載カエル;HMGD例えば、GenBank受託番号X71138に記載およびHMGZ例えばGenBank受託番号X71139に記載ハエNHP10タンパク質HMGタンパク質ホモログNHP1例えば、GenBank受託番号Z48008に記載酵母;非ヒストン染色体タンパク質例えば、GenBank受託番号O00479に記載酵母;HMG1/2様タンパク質例えば、GenBank受託番号Z11540に記載小麦、トウモロコシ、ダイズ;上流結合因子UBF1例えば、GenBank受託番号X53390に記載;PMS1タンパク質ホモログ1例えば、GenBank受託番号U13695に記載;一本鎖認識タンパク質SSRP構造特異性認識タンパク質例えば、GenBank受託番号M86737に記載;HMGホモログTDP-1例えば、GenBank受託番号M74017に記載;哺乳動物性決定領域Yタンパク質SRY,精巣決定因子例えば、GenBank受託番号X53772に記載;真菌類タンパク質:mat1例えば、GenBank受託番号AB009451に記載、ste11例えば、GenBank受託番号X53431に記載およびMc1;SOX14例えば、GenBank受託番号AF107043に記載並びにSOX1例えば、GenBank受託番号Y13436に記載、SOX2例えば、GenBank受託番号Z31560に記載、SOX3例えば、GenBank受託番号X71135に記載、SOX6例えば、GenBank受託番号AF309034に記載、SOX8例えば、GenBank受託番号AF226675に記載、SOX10例えば、GenBank受託番号AJ001183に記載、SOX12例えば、GenBank受託番号X73039に記載およびSOX21例えば、GenBank受託番号AF107044に記載;リンパ系特異性因子LEF1例えば、GenBank受託番号X58636に記載;T細胞特異性転写因子TCF1例えば、GenBank受託番号X59869に記載;MTT1例えば、GenBank受託番号M62810に記載;およびSP100HMG核自己抗原例えば、GenBank受託番号U36501に記載を含む。HMGBタンパク質の他の例は、GenBank受託番号NG000897HMG1L10特に、NG000897のヌクレオチド658~1305による;AF076674HMG1L1特に、AF076674のヌクレオチド1~633による;AF076676HMG1L4特に、AF076676のヌクレオチド1~564による;AC010149BACクローンRP11395A23からのHMG配列特に、AC010149のヌクレオチド75503~76117による;AF165168HMG1L9特に、AF165168のヌクレオチド729~968による;XM063129LOC122441特に、XM063129のヌクレオチド319~558による;XM066789LOC139603特に、XM066789のヌクレオチド1~258による;およびAF165167HMG1L8特に、AF165167のヌクレオチド456~666によるを有するHMGB核酸配列によってコードされるポリペプチドである。本発明の抗体および抗原結合断片はHMGBポリペプチド例えば、前記リストのHMGBポリペプドの1つ以上に結合する。1つの態様において、該抗体またはその抗原結合断片は脊椎動物HMGBポリペプチドに結合する。別の態様において、該抗体またはその抗原結合断片は哺乳動物HMGBポリペプチド例えば、ラットHMGB、マウスHMGB、ヒトHMGBに結合する。さらなる別の態様において、該抗体またはその抗原結合断片は哺乳動物HMGB1ポリペプチド例えば、ラットHMGB1、マウスHMGB1、ヒトHMGB1に結合する。特定の態様において、該抗体またはその抗原結合断片はヒトHMGB1ポリペプチド例えば、配列番号1または配列番号74として示されたヒトHMGB1ポリペプチドに結合する。本発明の組成物および方法はまた、高移動度グループBHMGBAボックスに対する抗体を特徴とする。1つの態様において、該抗体またはその抗原結合断片はHMGBAボックスに結合するが、HMGBの非Aボックスエピトープには特異的に結合しない。別の態様において、該抗体またはその抗原結合断片は脊椎動物HMGBAボックスに結合するが、HMGBの非Aボックスエピトープには特異的に結合しない。別の態様において、該抗体またはその抗原結合断片は哺乳動物例えば、ヒト、ラット、マウスHMGBAボックスに結合するが、HMGBの非Aボックスエピトープには特異的に結合しない。さらなる別の態様において、該抗体またはその抗原結合断片はHMGB1ポリペプチド例えば、哺乳動物HMGB1ポリペプチド例えば、ヒトHMGB1、ラットHMGB1、マウスHMGB1のAボックスに結合するが、HMGB1の非Aボックスエピトープには特異的に結合しない。本明細書中で用いる場合、ここではAボックスまたはHMGAボックスともいうHMGBAボックスは、HMGBAボックス例えば、本明細書中に記載するHMGBAボックスに対して少なくとも50、60、70、75、80、85、90または95配列同一性を有するタンパク質またはポリペプチドである。1つの態様において、HMGBAボックスは以下の生物学的活性HMGBによって媒介される炎症の阻害および/または細胞からのプロ炎症性サイトカインの放出の阻害の1つ以上を有する例えば、PCT公開第WO02/092004号参照;その全教示を本明細書中に参考として援用する。1つの態様において、HMGBAボックスポリペプチドは前記生物学的活性の1つを有する。典型的には、HMGBAボックスポリペプチドは前記生物学的活性の双方を有する。1つの態様において、Aボックスは図2A配列番号2の残基9~85または図31B配列番号75に示したAボックスに対して少なくとも50、60、70、75、80、85、90または95配列同一性を有する。別の態様において、該Aボックスは哺乳動物におけるHMGBタンパク質の対応する領域におけるアミノ酸配列を含むか、またはそれよりなる。HMGBAボックスはまた、本明細書中に記載されたAボックス配列と同一のアミノ酸配列を有する組換えにより生じたポリペプチドである。HMGBAボックスは、好ましくは、脊椎動物HMGBAボックス、例えば、哺乳動物HMGBAボックス、より好ましくは、哺乳動物HMGB1Aボックス、例えば、ヒトHMGB1Aボックス、最も好ましくは、図2A配列番号2の残基9~85または図31B配列番号75に示されたAボックスの配列を含むか、またはそれよりなるHMGB1Aボックスである。HMGBAボックスは、多くの場合、約85以下のアミノ酸かつ約4以上のアミノ酸を有する。他の態様において、HMGBAボックスは10~85アミノ酸、20~85アミノ酸、30~85アミノ酸または40~85アミノ酸を含み得る。内部にAボックス配列を有するポリペプチドの例は、限定されるものではないが、前記したHMGBポリペプチドを含む。かかるHMGBポリペプチド内のAボックス配列は、本明細書中に記載された方法を用いて、例えば、本明細書中に記載したAボックスに対する配列比較、および本明細書中に記載した方法ならびに/または当該分野で公知の他の方法を用いた生物学的活性についての試験によって決定され得、単離され得る。HMGBAボックスポリペプチド配列のさらなる例は以下の配列PDASVNFSEFSKKCSERWKTMSAKEKGKFEDMAKADKARYEREMKTYIPPKGETヒトHMGB1配列番号55;DSSVNFAEFSKKCSERWKTMSAKEKSKFEDMAKSDKARYDREMKNYVPPKGDKヒトHMGB2配列番号56PEVPVNFAEFSKKCSERWKTVSGKEKSKFDEMAKADKVRYDREMKDYGPAKGGKヒトHMGB3配列番号57PDASVNFSEFSKKCSERWKTMSAKEKGKFEDMAKADKARYEREMKTYIPPKGETHMG1L10配列番号58SDASVNFSEFSNKCSERWKMSAKEKGKFEDMAKADKTHYERQMKTYIPPKGETHMG1L1配列番号59PDASVNFSEFSKKCSERWKAMSAKDKGKFEDMAKVDKADYEREMKTYIPPKGETHMG1L4配列番号60PDASVKFSEFLKKCSETWKTIFAKEKGKFEDMAKADKAHYEREMKTYIPPKGEKBACクローンRP11395A23からのHMG配列配列番号61PDASINFSEFSQKCPETWKTTIAKEKGKFEDMAKADKAHYEREMKTYIPPKGETHMG1L9配列番号62PDASVNSSEFSKKCSERWKTMPTKQGKFEDMAKADRAHHMG1L8配列番号63PDASVNFSEFSKKCLVRGKTMSAKEKGQFEAMARADKARYEREMKTYIPPKGETLOC122441配列番号64LDASVSFSEFSNKCSERWKTMSVKEKGKFEDMAKADKACYEREMKIYPYLKGRQLOC139603配列番号65およびGKGDPKKPRGKMSSYAFFVQTCREEHKKKHPDASVNFSEFSKKCSERWKTMSAKEKGKFEDMAKADKARYEREMKTYIPPKGETヒトHMGB1Aボックス配列番号66を含む。また、本発明の組成物および方法は高移動度グループBHMGBBボックスに対する抗体を特徴とする。1つの態様において、該抗体またはその抗原結合断片はHMGBBボックスに結合するが、HMGBの非Bボックスエピトープに特異的に結合しない。別の態様において、該抗体またはその抗原結合断片は脊椎動物HMGBBボックスに結合するが、HMGBの非Bボックスエピトープに特異的に結合しない。別の態様において、該抗体またはその抗原結合断片は哺乳動物例えば、ヒト、ラット、マウスHMGBBボックスに結合するが、HMGBの非Bボックスエピトープに特異的に結合しない。さらなる別の態様において、該抗体またはその抗原結合断片はHMGB1ポリペプチド例えば、哺乳動物HMGB1ポリペプチド例えば、ヒトHMGB1、ラットHMGB1、マウスHMGB1のBボックスに結合するが、HMGB1の非Bボックスエピトープには特異的に結合しない。本明細書中で用いる場合、ここではBボックスまたはHMGBボックスともいうHMGBBボックスは、HMGB1ポリペプチド例えば、本明細書中に記載されたHMGBBボックスに対して少なくとも60、65、70、75、80、85、90または95配列同一性を有するポリペプチドである。1つの態様において、HMGB1ボックスは、以下の生物学的活性炎症の増大および/または細胞からのプロ炎症性サイトカインの放出の増加の1つ以上を有する例えば、PCT公開第WO02/092004号参照。1つの態様において、HMGBBボックスポリペプチドは前記生物学的活性の1つを有する。典型的に、HMGBBボックスポリペプチドは前記生物学的活性の双方を有する。1つの態様において、HMGBBボックスは図2B配列番号3または図31C配列番号76に示されたBボックスに対して少なくとも50、60、70、75、80、85、90または95配列同一性を有する。別の態様において、該Bボックスは哺乳動物におけるHMGBタンパク質の対応する領域におけるアミノ酸配列を含むか、またはそれよりなる。HMGBBボックスはまた、本明細書中に記載されたBボックス配列と同一のアミノ酸配列を有する組換えにより生じたポリペプチドである。HMGBBボックスは、好ましくは、脊椎動物HMGBBボックス、例えば、哺乳動物HMGBBボックス、より好ましくは哺乳動物HMGB1Bボックス、例えば、ヒトHMGB1Bボックス、最も好ましくは、図2B配列番号3もしくは図31C配列番号76に示されたBボックスの配列を含むか、またはそれよりなるHMGB1Bボックスである。HMGBBボックスは、多くの場合、約85以下のアミノ酸かつ約4以上のアミノ酸を有する。内部にBボックス配列を有するポリペプチドの例は、限定されるものではないが、前記したHMGBポリペプチドを含む。かかるポリペプチド内のBボックス配列は、本明細書中に記載された方法を用いて、例えば、本明細書中に記載されたBボックスに対する配列比較、および生物学的活性についての試験によって決定され得、単離され得る。さらなるHMGBBボックスポリペプチド配列の例は、以下の配列FKDPNAPKRPPSAFFLFCSEYRPKIKGEHPGLSIGDVAKKLGEMWNNTAADDKQPYEKKAAKLKEKYEKDIAAYヒトHMGB1配列番号67KKDPNAPKRPPSAFFLFCSEHRPKIKSEHPGLSIGDTAKKLGEMWSEQSAKDKQPYEQKAAKLKEKYEKDIAAYヒトHMGB2;配列番号68FKDPNAPKRLPSAFFLFCSEYRPKIKGEHPGLSIGDVAKKLGEMWNNTAADDKQPYEKKAAKLKEKYEKDIAAYHMG1L10;配列番号69FKDPNAPKRPPSAFFLFCSEYHPKIKGEHPGLSIGDVAKKLGEMWNNTAADDKQPGEKKAAKLKEKYEKDIAAYHMG1L1;配列番号70FKDSNAPKRPPSAFLLFCSEYCPKIKGEHPGLPISDVAKKLVEMWNNTFADDKQLCEKKAAKLKEKYKKDTATYHMG1L4;配列番号71FKDPNAPKRPPSAFFLFCSEYRPKIKGEHPGLSIGDVVKKLAGMWNNTAAADKQFYEKKAAKLKEKYKKDIAAYBACクローンRP11359A23からのHMG配列配列番号72およびFKDPNAPKRPPSAFFLFCSEYRPKIKGEHPGLSIGDVAKKLGEMWNNTAADDKQPYEKKAAKLKEKYEKDIAAYRAKGKPDAAKKGVVKAEKヒトHMGB1ボックス配列番号73を含む。本明細書中に記載されたように、HMGBポリペプチド、HMGBAボックス、およびHMGBBボックスは、天然由来かまたは非天然由来のどちらかであり、本明細書中に記載した、HMGBポリペプチド、HMGBAボックスおよび/またはHMGBBボックスに対する配列同一性を有するポリペプチドを包含する。本明細書中で用いる場合、2つのポリペプチドまたは該ポリペプチドの領域は、アミノ酸配列が少なくとも約60、70、75、80、85、90、または95以上相同または同一である場合に実質的に相同または同一である。2つのアミノ酸配列または2つの核酸配列のパーセント同一性は、最適な比較目的のために配列を整列されることによって決定され得る例えば、ギャップを第一配列の配列中に導入し得る。次いで、対応する位置におけるアミノ酸またはヌクレオチドを比較し、2つの配列の間のパーセント同一性は、配列によって共有される同一の位置の数の関数となるすなわち、同一性同一な位置の数/位置の合計数×100。ある態様において、比較目的で整列させた、HMGBポリペプチド、HMGBAボックスポリペプチド、またはHMGBBボックスポリペプチドの長さは、参照配列、例えば、HMGBポリペプチド例えば、配列番号1配列番号18、配列番号74、HMGBAボックスポリペプチド例えば、配列番号2の残基9~85、配列番号75またはHMGBBボックスポリペプチド例えば、配列番号3、配列番号76に対応する本明細書中に記載された配列の長さの少なくとも30、好ましくは少なくとも40、より好ましくは少なくとも60、なおより好ましくは少なくとも70、80、90または100である。2つの配列の実際の比較は、例えば、数学的アルゴリズムを用いた周知の方法によって達成され得る。かかる数学的アルゴリズムの好ましい非限定的例はKarlinらに記載されているProcNatlAcadSciUSA90587358771993。かかるアルゴリズムはSchafferらNucleicAcidsRes29299430052001に記載されたBLASTNおよびBLASTXプログラムバージョン22に取り込まれる。BLASTおよびギャップトBLASTプログラムを利用する場合、各プログラム例えば、BLASTNNationalCenterforBiotechnologyInformationのインターネットサイトで利用可能のデフォルトパラメーターが用いられ得る。1つの態様において、検索されたデータベースは非冗長NRデータベースであり、配列比較用のパラメータはフィルター無し10の期待値3のワードサイズマトリックスはBLOSUM62である;およびギャップコストは11の存在および1の延長を有するに設定し得る。配列の比較で利用される数学的アルゴリズムの別の非限定的例はMyersおよびMillerCABIOS1989のアルゴリズムである。かかるアルゴリズムはALIGNプログラムバージョン20に取り込まれ、GCGAccelrysSanDiegoCalifornia配列アラインメントソフトフェアパッケージの一部となる。アミノ酸配列を比較するためにALIGNプログラムを利用する場合、PAM120重量残基表、12のギャップ長さペナルティ、および4のギャップペナルティが用いられ得る。配列解析用のさらなるアルゴリズムは当該分野で公知であり、TorellisおよびRobottiに記載されたADVANCEおよびADAMComputApplBiosci10351994ならびにPearsonおよびLipmanに記載されたFASTAProcNatlAcadSciUSA85244424481988を含む。別の態様において、2つのアミノ酸配列の間のパーセント同一性は、Blossom63マトリックスまたはPAM250マトリックスのいずれか、および12、10、8、6または4のギャップ重量、ならびに2、3または4の長さ重量を用いたGCGソフトウェアパッケージAccelrysSanDiegoCaliforniaにおけるGAPプログラムを用いて達成し得る。さらなる別の態様において、2つの核酸配列の間のパーセント同一性は、50のギャップ重量および3の長さ重量を用いた、GCGソフトウェアパッケージAccelrysSanDiegoCaliforniaにおけるGAPプログラムを用いて達成し得る。プロ炎症性サイトカインの放出の阻害および処置方法1つの態様において、本発明は哺乳動物細胞からのプロ炎症性サイトカインの放出を阻害する方法である。1つの態様において、該方法は本発明の抗体または抗原結合断片で細胞を処置することを含む。適切な抗体または抗原結合断片は本明細書中に記載されたものであり、例えば、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、2E11HMGB1mAb、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbのエピトープ特異性を有する抗体、脊椎動物高移動度グループボックスHMGBポリペプチドに対する結合につき6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbと競合し得る抗体、ならびに前記のいずれかの抗原結合断片を含む。本明細書中で用いる場合、サイトカインは哺乳動物細胞によって天然に産生され、免疫反応を調節し、細胞-細胞相互作用を媒介する可溶性タンパク質またはペプチドである。サイトカインは、正常または病理学的状態のいずれかの下で、個々の細胞および組織の機能的活性を調整する。プロ炎症性サイトカインは炎症または炎症性状態に関連する以下の生理学的反応血管拡張、充血、浮腫に関連する血管の増大した透過性、顆粒球および一核食細胞の蓄積、およびフィブリンの沈着の1つ以上の原因となり得るサイトカインである。いくつかの場合において、プロ炎症性サイトカインはアポトーシスの原因にもなり得る。例えば、慢性心不全において、TNFは心筋細胞アポトーシスを刺激することが示されているPulkkiAnnMed293393431997およびTsutsuiらImmunolRev.1741922092000。プロ炎症性サイトカインの非限定的例は腫瘍壊死因子TNF、インターロイキンIL1α、IL1β、IL6、IL8、IL18、インターフェロンγ、HMG1、血小板活性化因子PAF、およびマクロファージ遊走阻止因子MIFである。別の態様において、本発明は被験体における状態の処置方法であり、ここで該状態は、本発明の抗体または抗原結合断片を被験体に投与することを含む炎症性サイトカインカスケードの活性化によって特徴付けられる。適切な抗体または抗原結合断片は本明細書中に記載されたものであり、例えば、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、2E11HMGB1mAb、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、および/または2E11HMGB1mAbのエピトープ特異性を有する抗体、脊椎動物高移動度グループボックスHMGBポリペプチドに対する結合につき6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbと競合し得る抗体、ならびに前記のいずれかの抗原結合断片を含む。1つの態様において、該処置方法は、本発明の抗体または抗原結合断片の有効量を被験体に投与することを含む。本明細書中で用いる場合、有効量または治療有効量は、炎症反応を妨げるか、もしくは減少させ、および/または炎症反応に関連する症状の長さを軽減しおよび/もしくは減少させるのに十分な量である。特定の状態の処置、予防または治療技術において効果のある本発明の組成物の量は、例えば、本明細書で開示したおよび/または当業者に公知の動物モデル等の動物モデルに組成物を投与することによって決定し得る。さらにインビトロアッセイを、最適用量範囲の同定のために任意に使用し得る。好ましい有効用量の選択を、当業者に公知であるいくつかの因子の考慮に基づいて、当業者が例えば、臨床試験を介して決定し得る。かかる因子は、例えば、処置される状態または複数の状態、被験体の症状の重篤度、投与される抗体または抗原結合断片の選択、被験体の年齢、被験体の体重、被験体の免疫現状、個々の被験体の反応、および投与される医薬組成物の精度を反映するための当業者に公知の他の因子を含む。製剤に使用される正確な用量は、投与の経路、および状態の重症度にも依存するので、実行者および各被験体の状況の判断に従って決定されるべきある。有効用量は、インビトロまたは動物モデル試験系に由来する用量応答曲線から推定され得る。例えば、本明細書中で例示するように、インビボ盲腸結紮および穿刺CLPアッセイを用いて、1マウスあたり1μg、1マウスあたり10μgまたは1マウスあたり100μgの用量で抗HMGB1モノクローナル抗体6E6HMGB1mAbにおける用量応答アッセイを行った図16。抗体について、被験体例えば、ヒト患者に投与される用量は、典型的に、被験体の体重1kgにつき01mg~100mgである。好ましくは、被験体に投与される用量は被験体の体重1kgにつき01mgおよび20mgの間、より好ましくは被験体の体重1kgにつき1mg~10mgである。本発明のある態様において、用量は被験体の体重1kgにつき少なくとも1mg、または少なくとも5mg、または少なくとも10mg、または少なくとも50mg、または少なくとも100mg、または少なくとも150mgである。一般にヒトおよびヒト化抗体は、異種ポリペプチドに対する免疫反応のため、他の種からの抗体よりも人体内でより長い半減期を有する。かくして、ヒト抗体のより低い用量およびより低い頻度の投与が多くの場合可能である。例えば、毎日、1週間、2週間、または1ヶ月に投与される抗体の有効量は、被験体の体重1kgにつき約001mg~約5または10mgの範囲となり得る。抗体または抗原結合断片が炎症性状態を阻害するか否かを決定する方法は当業者において公知である。例えば、細胞からのプロ炎症性サイトカインの放出の阻害は当業者に公知の方法に従って測定され得る。例えば、本明細書中に記載し、例示したように、細胞からのTNF放出は、30pg/mlの最小検出可能濃度にて、標準的なマウス線維芽細胞L929ATCCAmericanTypeCultureCollectionRockvilleMaryland細胞傷害性バイオアッセイBianchiらJournalofExperimentalMedicine1839279361996を用いて測定され得る。L929細胞傷害性バイオアッセイは以下のように行われる。RAW2647細胞を、10胎児ウシ血清GeminiCatabasasCalifornia、およびペニシリンならびにストレプトマイシンLifeTechnologiesを補足したRPMI1640培地LifeTechnologiesGrandIslandNewYork中で培養する。ポリミキシンSigmaStLouisMissouriを100単位/mlで加え、任意の汚染性LPSの活性を抑制する。細胞をOptiMEMI培地中で8時間、本明細書中に記載された抗体と共にインキュベートし、細胞から放出されたTNFを含有する条件付の上清を収集する。細胞から放出されたTNFは、30pg/mlの最小検出可能濃度にて、標準的マウス線維芽細胞L929ATCC細胞傷害性バイオアッセイBianchiら前掲によって測定される。組換えマウスTNFはRDSystemsIncMinneapolisMinnesotaから入手され得、これらの実験において対照として用いられ得る。細胞からの他のサイトカインの放出を測定する方法もまた当該分野で公知である。本明細書中に記載された処置方法に適した炎症性状態は、炎症性サイトカインカスケードが活性化されるものであり得る。1つの態様において、炎症性サイトカインカスケードはエンドトキシンショック等の全身反応を引き起こす。別の態様において、炎症性状態は、慢性関節リウマチにおけるように、局所化された炎症性サイトカインカスケードによって媒介される。本発明の抗体および抗原結合断片を用いて有用に処置し得る炎症性状態の非限定的例としては、例えば、腸閉塞、虫垂炎、消化性、胃および十二指腸潰瘍、腹膜炎、膵臓炎、潰瘍性、偽膜性、急性および虚血性結腸炎、憩室炎、咽頭蓋炎、アカラシア、胆管炎、胆嚢炎、セリアック病、肝炎、クローン病、腸炎、およびホウィップル病等の胃腸管および関連組織に関する疾患;喘息、アレルギー、アナフィラキシーショック、免疫複合体病、器官虚血症organischemia、再灌流障害、器管壊死organnecrosis、枯草熱、敗血症sepsis、敗血症septicemia、エンドトキシンショック、悪液質、超高熱、好酸球性肉芽腫、肉芽腫症、およびサルコイドーシス等の全身性または局所的炎症性疾患および状態;敗血性流産、精巣上体炎、膣炎、前立腺炎、および尿道炎等の尿生殖系および関連組織に関する疾患;気管支炎、気腫、鼻炎、嚢胞性線維症、肺炎、成人呼吸窮迫症候群、塵肺症、肺胞炎alvealitis、細気管支炎、咽頭炎、胸膜炎、および静脈洞炎等の呼吸器系および関連組織に関する疾患;インフルエンザ、RSウイルス、HIV、B型肝炎ウイルス、C型肝炎ウイルスおよびヘルペス等の種々のウイルス感染から発生する疾患、播種性菌血症、デング熱等の細菌、カンジダ症等の真菌、ならびにマラリア、フィラリア症、アメーバ症、および包虫等の原生動物および多細胞寄生虫;火傷、皮膚炎、皮膚筋炎、日焼け、蕁麻疹いぼ、および膨疹等の皮膚科学的疾患および皮膚の状態;狭窄症、再狭窄症、脈管炎vasulitis、血管炎、心内膜炎、動脈炎、アテローム性動脈硬化症、血栓性静脈炎、心膜炎、うっ血性心不全、心筋炎、心筋虚血症、結節性動脈周囲炎およびリウマチ熱等の心血管系および関連組織に関する疾患;アルツハイマー病、髄膜炎、脳炎、多発性硬化症、脳梗塞、脳塞栓症、ギアンバレー症候群、神経炎、神経痛、脊髄損傷、麻痺およびブドウ膜炎等の中枢または末梢神経系および関連組織に関する疾患;種々の関節炎および関節痛、骨髄炎、筋膜炎、パジェット病、痛風、歯周疾患、慢性関節リウマチおよび滑膜炎等の骨、関節、筋肉および結合組織の疾患;重症筋無力症、甲状腺炎thryoiditis、全身性エリテマトーデス、グッドパスチャー症候群、ベーチェット症候群、同種移植拒絶、対宿主性移植片病、I型糖尿病、強直性脊椎炎、バージャー病、およびライター症候群Retier’ssyndrome等の他の自己免疫および炎症性疾患;ならびにホジキン病のような種々の癌、腫瘍および増殖性障害;および、いずれの場合における、任意の原発性疾患に対する炎症性または免疫性の宿主の反応が挙げられる。1つの態様において、該状態は敗血症、同種移植拒絶、関節炎例えば、慢性関節リウマチ、喘息、アテローム性動脈硬化症、再狭窄、狼瘡、成人呼吸窮迫症候群、慢性閉塞性肺疾患、乾癬、膵臓炎、腹膜炎、火傷、心筋虚血症、器官虚血症、再灌流虚血症、ベーチェット病、対宿主性移植片病、クローン病、潰瘍性結腸炎、腸閉塞、多発性硬化症および悪液質よりなる群から選択される。別の態様において、該状態は敗血症、関節炎例えば、慢性関節リウマチ、喘息、狼瘡、乾癬、炎症性腸疾患およびクローン病よりなる群から選択される。好ましくは、抗体および抗原結合断片は、それを必要とする患者に細胞からのプロ炎症性サイトカインの放出を阻害し、および/または炎症性状態を処置するのに十分な量にて投与される。1つの態様において、プロ炎症性サイトカインの放出は、本明細書中に記載された方法または当該分野で公知の他の方法を用いて評価して、少なくとも10、20、25、50、75、80、90または95阻害される。本明細書中で用いる場合、用語治療、治療的および処置とは、疾患または状態、例えば、炎症性疾患または炎症性状態に関連する症状を改善することをいい、疾患症状を妨げ、もしくはその開始を遅らせる、および/または疾患もしくは状態の症状の重篤度もしくは頻度を低下させることを含む。本明細書中において、用語被験体および個体は、限定されるものではないが、霊長類、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、モルモット、ラット、マウスまたは他のウシ亜科、ヒツジ、ウマ科、イヌ科、ネコ科、げっ歯類、またはマウス種を含む哺乳動物等の動物を含むよう定義される。1つの態様において、動物はヒトである。1つの態様において、本発明の抗体および抗原結合断片と共に賦形剤を含み得る。賦形剤は治療適用における抗体または抗原結合断片の投与の予測される経路に基づいて選択され得る。組成物の投与経路は処置される状態に依存する。例えば、静脈内注射はエンドトキシンショック等の全身障害の処置で好ましくあり得、また経口投与は胃潰瘍等の胃腸障害の処置で好ましくあり得る。前記したように、投与される抗体または抗原結合断片の用量は、標準的な用量応答実験と関連する必要以上の実験なしで当業者によって決定され得る。状態に応じて、抗体または抗原結合断片を患者に経口、非経口、鼻腔内、膣内、直腸、舌、舌下、口腔内、口内および経皮投与し得る。従って、経口、舌、舌下、口腔内および口内投与用に設計された抗体または抗原結合断片は、例えば、不活性な希釈剤および/または可食性担体と共に、当該野で周知の手段によって必要以上の実験なしで作成され得る。抗体または抗原結合断片はゼラチンカプセル中に包み込められ得るか、または圧縮して錠剤となり得る。経口治療投与の目的のために、本発明の抗体または抗原結合断片は賦形剤に一体化させられ得、錠剤、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ剤、ウエハー剤、チューインガム等の形態で用いられ得る。錠剤、丸剤、カプセル、トローチ等はまた、結合剤、受容器、崩壊剤、潤滑剤、甘味剤、および矯味矯臭剤を含有し得る。結合剤の一例としては微結晶性セルロース、トラガカントガム、およびゼラチンが挙げられる。賦形剤の例としてはデンプンおよびラクトースが挙げられる。崩壊剤の一例としてはアルギン酸、コーンスターチ等が挙げられる。滑沢剤の例としてはステアリン酸マグネシウム、およびステアリン酸カリウムが挙げられる。流動促進剤の例はコロイド二酸化ケイ素である。甘味剤の一例としてはショ糖、サッカリン等が挙げられる。矯味矯臭剤の例としてはペパーミント、サリチル酸メチル、オレンジフレーバー等が挙げられる。これらの種々の組成物を調製するのに用いられる物質は、用いられる量において薬学的に純粋かつ非毒性であるべきである。本発明の抗体および抗原結合断片は、例えば、静脈内、筋肉内、クモ膜下または皮下注射等によって、非経口的に投与され得る。非経口投与は、本発明の抗体および抗原結合断片を溶液または懸濁液に配合することによって達成され得る。かかる溶液または懸濁液は注射用水、生理食塩水、静菌食塩水約09mg/mlのベンジルアルコールを含有する食塩水、リン酸緩衝化食塩水ここではPBSという、ハンクス溶液、リンゲル溶液、不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、および他の合成溶媒等の滅菌希釈剤を含み得る。非経口製剤はまた抗菌剤例えば、ベンジルアルコール、メチルパラベン、抗酸化剤例えば、アスコルビン酸、二亜硫酸ナトリウム、およびキレート剤例えば、EDTAを含み得る。酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩等の緩衝液、ならびに塩化ナトリウムおよびデキストロース等の緊張を調整するための薬剤もまた添加し得る。非経口調製物はアンプル、使い捨て注射器またはガラスもしくはプラスチックでできた複数用量バイアルに入れられ得る。直腸投与は、直腸または大腸への抗体および抗原結合断片の投与を含む。これは坐薬または浣腸を用いることによって達成され得る。坐薬製剤は当該分野で公知の方法によって作成され得る。例えば、坐薬製剤はグリセリンを約120°Cまで加熱し、抗体または抗原結合断片をグリセリンに溶解させ、加熱したグリセリンを混合し、その後精製水が加えられ得、熱い混合物を坐薬鋳型に注ぐことによって調製され得る。経皮投与は、抗体または抗原結合断片の皮膚を通しての経皮吸収を含む。経皮製剤はパッチ、軟膏、クリーム、ゲル、膏薬等を含む。本発明の抗体および抗原結合断片は、被験体に対し鼻腔投与され得る。本明細書中で用いる場合、鼻腔的に投与することまたは鼻腔投与は、抗体または抗原結合断片を被験体の鼻道または鼻腔の粘膜へ投与することを含む。抗体または抗原結合断片の鼻腔投与用の医薬組成物は、治療上有効量の抗体または抗原結合断片を含む。鼻腔投与の周知の方法として、例えば、鼻腔スプレー、点鼻剤、懸濁液、ゲル、軟膏、クリームまたは粉末が挙げられる。抗体または抗原結合断片の投与にはまた、鼻腔タンポンまたは鼻腔スポンジが用いられ得る。前記したように、例えば、経口、ダイエット、局所、経皮、直腸、非経口例えば、静脈内、動脈内、筋肉内、皮下、皮内注射、および吸入例えば、気管支内、鼻腔内、経口吸入、鼻腔内点剤を含めた種々の投与経路が可能である。投与は、示されたように局所的または全身性であり得る。好ましい投与様式は、投与される抗体または抗原結合断片、および処置を受ける特定の状態例えば、疾患に応じて変化し得るが、経口または非経口が一般的には好ましい。所望により、本明細書中に記載された抗体または抗原結合断片は1つ以上のさらなる薬剤例えば、炎症性状態を処置するのに用いられる薬剤と共に投与され得る。抗体もしくはその抗原結合断片およびさらなる薬剤単数か複数は、単一組成物に存在し得るか、または別々の組成物として投与され得る。別々の組成物として投与する場合、抗体もしくはその抗原結合断片およびさらなる薬剤単数か複数は同時投与され得るか、または別々に投与され得る。1つの態様において、本発明の抗体または抗原結合断片は抗炎症性剤と共に投与される。かかる薬剤は当業者に公知である。1つの態様において、該薬剤は初期敗血症メディエイタのアンタゴニストである。本明細書中で用いる場合、初期敗血症メディエイタは、炎症性サイトカインカスケードが誘導例えば、LPSへの暴露された後すぐにすなわち、30~60分以内に細胞から放出されるプロ炎症性サイトカインである。これらのサイトカインの非限定的例はIL1α、IL1β、IL6、PAFおよびMIFである。また、初期敗血症メディエイタとして、これらのサイトカインに対する受容体例えば、腫瘍壊死因子受容体1型、およびこれらのサイトカインを生じるのに必要な酵素、例えば、インターロイキン-1β変換酵素が含まれる。現在公知であるか、または後に発見される、任意の初期敗血症メディエイタのアンタゴニストは、炎症性サイトカインカスケードをさらに阻害することでこれらの態様において有用であり得る。初期敗血症メディエイタのアンタゴニストの非限定的例は、初期敗血症メディエイタのmRNAに結合しその発現を妨げるアンチセンス化合物例えば、OjwangらBiochemistry36603360451997;PampferらBiolReprod52131613261995;米国特許第6228642号;YahataらAntisenseNucleicAcidDrugDev655611996;およびTaylorらAntisenseNucleicAcidDrugDev81992051998参照、初期敗血症メディエイタのmRNAを特異的に切断するリボザイム例えば、LeavittらAntisenseNucleicAcidDrugDev104094142000;KisichらJImmunol1634200820161999;およびHendrixらBiochemJ314Pt26556611996参照、および初期敗血症メディエイタに結合し、それらの作用を阻害する抗体例えば、KamおよびTarganExpertOpinPharmacother16156222000NagahiraらJImmunolMethods22283921999LavineらJCerebBloodFlowMetab1852581998;ならびにHolmesらHybridoma193633672000参照である。現在公知であるか、または後に発見される初期敗血症メディエイタのアンタゴニストは、本発明の範囲内と考えられる。当業者であれば、決まりきった手順での用量応答実験にて、必要以上の実験なしでいずれかの特定の炎症性サイトカインカスケードを阻害するために用いる初期敗血症メディエイタの量を決定し得る。本発明の抗体および抗原結合断片と共に投与し得る他の薬剤は、例えば、VitaxinTMおよび他の抗体標的化αvβ3インテグリン例えば、米国特許第5753230号、PCT公開第WO00/78815号および同第WO02/070007号参照;その全教示の全てを本明細書中に参考として援用する、ならびに抗IL9抗体例えば、PCT公開第WO97/08321号参照;その全教示を本明細書中に参考として援用するを含む。1つの態様において、本発明の抗体および抗原結合断片はTNF生物学的活性の阻害剤、例えば、TNFα生物学的活性の阻害剤と共に投与される。かかるTNF活性の阻害剤は、例えば、ペプチド、タンパク質、合成分子、例えば、合成有機分子、天然由来分子、例えば、天然由来有機分子、核酸分子、およびそれらの成分を含む。TNF生物学的活性を阻害する薬剤の好ましい例は、インフリキシマブRemicadeCentocorIncMalvernPennsylvania、エタネルセプトImmunexSeattleWashington、アダリムマブD2E7AbbotLaboratoriesAbbotParkIllinois、CDP870PharmaciaCorporationBridgewaterNewJersey、CDP571CelltechGroupplcUnitedKingdom、レネルセプトLenerceptRocheSwitzerland、およびサリドマイドを含む。ある態様において、本発明は、薬学的に許容され得る賦形剤中の、本明細書中に記載された抗体または抗原結合断片を含む組成物に指向される。前記したように、これらの組成物中に抗体または抗原結合断片と共に含まれる賦形剤は、組成物の投与の予期される経路に基づいて選択される。適切な薬学的に許容され得る賦形剤は前記したものを含み、当業者において公知である。1つの態様において、本発明はHMGBのアプタマー例えば、HMGB1のアプタマーに指向される。当該分野で公知のように、アプタマーは特定の分子標的例えば、本明細書中に記載されたHMGBタンパク質、HMGBボックス例えば、HMGBAボックス、HMGBBボックス、HMGBポリペプチドおよび/またはHMGBエピトープに密接に結合する核酸例えば、RNA、DNAから構成されるマクロ分子である。特定のアプタマーは線状ヌクレオチド配列によって記載され得、典型的には長さが約15~60ヌクレオチドである。アプタマーにおけるヌクレオチド鎖は複雑な三次元形状に分子を折り畳む分子内相互作用を形成し、この三次元形状によってアプタマーがその標的分子の表面に密接に結合することを可能とする。全ての可能なヌクレオチド配列の範囲内に存在する分子形状の異常な多様性を考慮して、タンパク質および小分子を含めた広いアレイの分子標的につきアプタマーが得られ得る。高度の特異性に加え、アプタマーはその標的に対して非常に高い親和性例えば、タンパク質に対してピコモル~低いナノモルの範囲における親和性を有する。アプタマーは化学的に安定であって、活性度を失うことなく沸騰または凍結され得る。それらは合成分子であるので、種々の修飾に使用でき、これにより特定の適用に対するその機能を最適化し得る。例えば、アプタマーを修飾してインビボ適用で使用される血液中の酵素による分解に対し、その感性度を劇的に低下させ得る。さらに、アプタマーを修飾して、それらの生体内分布または血漿滞留時間を変更し得る。HMGBまたはその断片例えば、HMGB1またはその断片に結合することができるアプタマーの選択は、当該分野で公知の方法を介して達成することができる。例えば、アプタマーはSELEXSystematicEvolutionofLigandsbyExponentialEnrichment指数関数的豊富化によるリガンドの系統的進化方法TuerkCおよびGoldLScience2495055101990を用いて選択することができる。SELEX方法において、核酸分子例えば、1015の異なる分子の大きなライブラリーを生産し、および/または標的分子例えば、HMGBタンパク質、HMGBボックス例えば、HMFBAボックス、HMGBBボックス、本明細書中に記載されたHMGBポリペプチドおよび/またはHMGBエピトープでスクリーニングされる。標的分子はヌクレオチド配列のライブラリーと共に一定時間インキュベートされる。次いで、当該分野で公知のいくつかの方法を用いて、捨てることができる、混合物中の未結合分子からのアプタマー標的分子を物理的に単離することができる。次いで、標的分子に対して最高の親和性を持つアプタマーを標的分子から精製することができ、酵素的に増幅させて、分子の新しいライブラリーを生産することができ、これは、標的分子に結合することができるアプタマーについて実質的に豊富化されている。次いで、豊富化されたライブラリーを用いて選択、分配、および増幅の新しいサイクルを開始させることができる。この反復的選択、分配および増幅プロセスの5~15サイクルの後、ライブラリーは、標的分子に密接に結合する少数のアプタマーに減少される。次いで、混合物中の個々の分子を単離し、それらのヌクレオチド配列を決定し、次いで、結合親和性および特異性に関するそれらの特性を測定し、比較し得る。次いで、単離されたアプタマーをさらに精錬して標的結合および/またはアプタマー構造に寄与しないいずれのヌクレオチドも排除し、それにより、それらのコア結合ドメインに切形されたアプタマーを生産することができる。アプタマー技術の概説については、その全教示を本明細書中に参考として援用するJayasenaSDClinChem45162816501999参照。特定の態様において、本発明のアプタマーは、本発明の抗体について本明細書中で記載した結合特異性および/または機能的活性を有する。かくして、例えば、ある態様においては、本発明は、本発明の抗体につき本明細書中で記載したのと同一のまたは類似の結合特異性例えば、脊椎動物HMGBポリペプチド、脊椎動物HMGBポリペプチドの断片例えば、HMGBAボックス、HMGBBボックス、脊椎動物HMGBポリペプチドのエピトープ領域例えば、本発明の抗体の1以上によって結合されるHMGB1のエピトープ領域を有するアプタマーがもたらされる。特定の態様において、本発明のアプタマーはHMGBポリペプチドまたはその断片に結合することができ、HMGBポリペプチドの1以上の機能を阻害することができる。本明細書中に記載するように、HMGBポリペプチドの機能は、例えば、炎症の増加、細胞からのプロ炎症性サイトカインの放出の増加、RAGEへの結合、TLR2への結合、化学的誘引を含む。特定の態様において、アプタマーはHMGB1例えば、ヒトHMGB1例えば、配列番号1または配列番号74に示されたものまたはその断片例えば、Aボックス例えば、配列番号2、配列番号75の残基9~85、Bボックス例えば、配列番号3、配列番号76、本明細書中に記載されたHMGB1抗体結合エピトープに結合し、HMGBポリペプチドの1以上の機能を阻害する例えば、HMGBで処理された脊椎動物細胞からのプロ炎症性サイトカインの放出を阻害する。診断および/または予測の方法別の態様において、本発明は、さらに、試料中の脊椎動物高移動度グループボックスHMGBポリペプチドを検出する診断および/または予測の方法を提供する。該方法の1つの態様において、試料を、本発明の抗体または抗原結合断片と、試料に存在するHMGBポリペプチドへの該抗体または断片の結合に適した条件下で接触させる。該方法は、さらに、抗体-HMGB複合体または抗原結合断片-HMGB複合体を検出することを含み、ここに、抗体-HMGB複合体または抗原結合断片-HMGB複合体の検出は試料中のHMGBポリペプチドの存在を示す。これらの方法で用いられる適当な抗体または抗原結合断片は本明細書中に記載されたもの、例えば、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、前記のいずれかの抗原結合断片を含む。別の態様において、該抗体または抗原結合断片は検出可能な標識を含む。HMGBポリペプチド例えば、哺乳動物HMGBポリペプチドおよび抗体または抗原結合断片の間の複合体の検出で用いるのに適した標識としては、例えば、放射性同位体、エピトープ標識タグ、親和性標識例えば、ビオチン、アビジン、スピン標識、酵素,蛍光基、または化学発光基が挙げられる。記載されたように、本明細書中に記載された抗体および抗原結合断片を用いて、HMGBポリペプチドの発現を検出し、または測定することができる。例えば、本発明の抗体を用いて、生物学的試料例えば、血液、血清、白血球例えば、活性化されたTリンパ球、気管支肺胞洗浄流体、唾液、腸流体、滑液、生検材料のような個体からの細胞、組織または体液中のHMGBポリペプチドを検出または測定するのに用いることができる。1つの態様において、試料は血液または血清である。例えば、試料例えば、組織および/または流体は個体から得ることができ、適当なアッセイを用いて、HMGBポリペプチドの存在または量を評価することができる。適当なアッセイはフローサイトメトリー例えば、FACS解析、および酵素結合イムノソルベント検定法ELISA、ラジオイムノアッセイRIA、ケミルミネセンスアッセイ、イムノブロット例えば、ウェスタンブロット、免疫細胞化学および免疫組織学を含めたイムノソルベントアッセイのような免疫学的および免疫化学的方法を含む。一般には、試料、および本発明の抗体または抗原結合断片を、HMGBポリペプチドおよびその抗体または抗原結合断片の間の複合体の形成に適した条件下で合わせ、該複合体の形成を直接的にまたは間接的に評価する。1つの態様において、診断および/または予測はELISAおよび/またはウェスタンブロット解析を用いてなされる。当該分野で知られているように、個体から得られた試料例えば、組織試料中の増大したレベルのHMGBポリペプチド例えば、HMGB1の存在は、炎症カスケードの活性化によって特徴付けられる疾患に関連する兆候を呈する被験体についての敗血症の重症度をモニターし、該敗血症のありそうな臨床過程を予測するための診断および/または予測インジケーターであり得るその全教示を本明細書中に参考として援用する米国特許第6303321号参照。かくして、1つの態様において、本発明の抗体および抗原結合断片は、HMGB発現に関連する炎症性疾患例えば、本明細書中で記載した疾患の重症度をモニターし、および/または該疾患のありそうな臨床過程を予測する診断および予測で用いることができる。ある態様において、該診断および/または予測の方法は試料、好ましくは、血清試料中のHMGBの濃度を測定し、次いで、その濃度を、同様な試料中の正常な濃度範囲のHMGBを表すHMGBに対する標準のその濃度と比較することを含み、それにより、より高いレベルのHMGBは毒性反応の不充分な予測または尤度の指標である。該診断方法は、脳脊髄液または尿のような他の組織または流体区画に適用することもできる。別の態様において、本発明は、試料中の脊椎動物高移動度グループボックスHMGBポリペプチドまたはその部分の存在を検出するのに用いる試験キットである。そのような試験キットは、例えば、本発明の抗体または抗原結合断片、および該抗体または抗原結合断片およびHMGBポリペプチドまたはその部分の間の複合体の存在を検出するのに適する1以上の補助的試薬を含むことができる。本発明の抗体および抗原結合断片は、単独で、あるいは他のエピトープに対して特異的なさらなる抗体と組み合わせて、凍結乾燥形態で供することができる。標識されたまたはされていない抗体またはその抗原結合断片を、補助的成分例えば、トリストリスヒドロキシメチルアミノメタンのような緩衝液、リン酸塩および炭酸塩、安定化剤、賦形剤、殺生物剤および/または不活性なタンパク質、例えば、ウシ血清アルブミンのような緩衝液と共にキットに含めることができる。例えば、抗体または抗原結合断片は補助的成分と共に凍結乾燥混合物として供することができ、あるいは補助的成分を使用者が組み合わせるために別々に供することができる。一般に、これらの補助的材料は活性抗体の量に基づいて約5重量未満で存在させ、通常、抗体濃度に基づいて少なくとも約0001重量の合計量で存在させることができる。抗HMGB抗体または抗原結合断片に結合することができる第二の抗体または抗原-特異的断片を使用する場合、そのような抗体または断片は、例えば、別々のバイアルまたは容器中のキットにて提供することができる。第二の抗体または抗原結合断片は、もし存在すれば、典型的には標識され、前記した抗体製剤と同様にして製剤化することができる。キットの抗体、抗原結合断片および/または補助的試薬は、別々に、または適当な格納手段例えば、ビン、ボックス、包み、チューブと共にパッケージすることができる。キットが複数の個々にパッケージングされた成分を含む場合、個々のパッケージは単一のより大きな容器手段例えば、ビン、ボックス、包み、チューブ内に含有させることができる。スクリーニングの方法別の態様において、本発明は、HMGBポリペプチド例えば、哺乳動物HMGBポリペプチド例えば、HMGB1ポリペプチドに結合する剤を検出または同定する方法である。1つの態様において、HMGBポリペプチドに結合する剤を検出または同定する方法は競合結合アッセイであり、そこでは、本発明の抗体または抗原結合断片の結合を阻害する被験剤の能力が評価される。例えば、該抗体または抗原結合断片は本明細書中に記載したように適当な標識で標識することができ、アッセイで存在するHMGBポリペプチドを飽和するのに必要な標識された抗体または抗原結合断片の量を測定することができる。例えば、飽和量の標識された抗体または抗原結合断片および種々の量の被験剤を結合に適した条件下でHMGBポリペプチドと接触させることができ、複合体形成を測定することができる。このタイプのアッセイにおいては、標識された抗体または抗原結合断片およびHMGBポリペプチドの間で形成された複合体の量の減少は、被験剤がHMGBポリペプチドに結合することを示す。別の態様においてHMGBポリペプチドを標識することができる。抗体、抗原結合断片および/またはHMGBポリペプチドを標識するための適当な標識は前記したものを含む。タンパク質例えば、抗体、ペプチド、ペプチドミメティックス、小さな有機分子、核酸等のような種々の剤を、HMGBポリペプチド例えば、哺乳動物HMGBポリペプチド例えば、HMGB1ポリペプチドに対する結合につき試験することができる。本発明の方法によると、剤を個々にスクリーニングすることができ、あるいは1以上の剤を同時に試験することができる。化合物の混合物を試験する場合、記載された方法によって選択される化合物を分離し適切な場合、適当な方法例えば、配列決定、クロマトグラフィーを用いて同定する。試験試料中の1以上の化合物例えば、リガンド、阻害剤、プロモーターの存在もまたこれらの方法に従って決定することができる。HMGBポリペプチドに結合し、本明細書中に記載された治療方法で有用な剤は、例えば、本明細書中に記載されたアッセイにおいて、ChemicalRepositoryoftheNationalCancerInstituteのような、分子のライブラリーまたはコレクションをスクリーニングすることによって、あるいは他の適切な方法を用いて同定することができる。コンビナトーリアル化学合成または他の方法によって生産された化合物例えば、有機化合物、組換えまたは合成ペプチド、ペプトイド、核酸のコンビナトーリアルライブラリーのようなライブラリーを試験することができる例えば、ZuckermanRNらJMedChem37267826851994およびそこに引用された文献参照;また、標識化合物に関連する、OhlmeyerMHJらProcNatlAcadSciUSA9010922109261993およびDeWittSHらProcNatlAcadSciUSA90690969131993参照;RutterWJら米国特許第5010175号;HuebnerWDら米国特許第5182366号;およびGeysenHM米国特許第4833092号を参照のこと。ライブラリーから選択された化合物が特有のタグを担持する場合、クロマトグラフィー方法による個々の化合物の同定が可能である。次に、本発明を、なんら限定的なことを意図しない以下の実施例によって説明する。参考として明示的には援用しなかった全ての本明細書中に引用された刊行物の関連教示は、その全体を本明細書中に参考として援用する。実施例1:材料および方法HMGB1に対するモノクローナル抗体の作製BALB/cマウスを、フロイントのアジュバントと混合した20μgの組換えCBPラットHMGB1ラットHMGB1のアミノ酸1~215に連結したCBPCBPラットHMGB1のヌクレオチド配列は配列番号4に示し、アミノ酸配列は配列番号5に示す図3Aおよび3B参照で2週間間隔で6週間、腹腔内免疫化した。PBS中のCBPラットHMGB1の最終ブーストを8週間後に静脈内投与した。最終ブーストから4日後に、マウスからの脾臓を摘出し、融合で用いた。融合は標準的なハイブリドーマ技術を用いて行った。細胞ストレイナーを通じて脾臓を穏やかに押して、単細胞懸濁液を得た。しっかりと洗浄した後、脾臓細胞をSP2/0骨髄腫細胞と混合した。ポリエチレングリコールPEGをゆっくりと加え、続いて、5分間にわたって培地を加えた。細胞を洗浄し、20FCSおよびHATを含有するDMEMに再懸濁させ、96ウェルプレートに移し、10CO2にて37°Cで10~14日間インキュベートした。他の実験において、ヒトHMGB1Bボックスポリペプチド配列番号3図2Bを免疫原として用いた。5匹のメスBALB/cマウスを、フロイントのアジュバントと混合したHMGB1Bボックスの10μg/注射で3週間間隔で腹腔内免疫化した。各ブーストから1週間後にマウスから血液を得た。第三のブーストから3週間後に、ラットHMGB1Bボックスの最終静脈内注射10μg/マウスを与えた。最終ブーストから72時間後に、ハイブリドーマ融合を前記したように行った。ハイブリドーマを20FBS、HAT、CondiMedおよび1ペニシリン/ストレプトマイシンを含むDMEM中で培養した。光学的に読み取り、次いで、バックグラウンドのそれの5倍の読みを持つものを同定することによって、陽性クローンを同定した。CBPラットHMGB1およびヒトHMGB1Bボックスに対する抗体を、限界希釈およびELISAによってスクリーニングした。ELISAプレートを3μg/mlにて組換えHMGB1で一晩コートし、1ウシ血清アルブミンBSAを補足したリン酸緩衝化生理食塩水PBSでブロックした。ハイブリドーマからの上清をELISAプレートに加え、室温にて30分間インキュベートした。次いで、プレートを洗浄し、西洋ワサビペルオキシダーゼとコンジュゲートした抗マウスIgを加えた。室温でのインキュベーションの30分後に、プレートを洗浄し、発色させた。陽性細胞からの細胞を24ウェルプレートに移し、限界希釈によってクローン化した。HMGB1はTNF放出を刺激したAmericanTypeCultureCollectionATCCManassasVAから入手可能なマウスマクロファージ細胞系RAW2647を、無血清OptiMEMInvitrogenCarlsbadCA中で種々の濃度のHMGB1と共に37°Cにて4時間インキュベートした。上清を回収し、ELISAキットRDSystemsMinneapolisMNを用いてTNFレベルを測定した。また、アッセイはヘパリン加全血を用いても行った。この場合、HMGB1をOptiMEM中に希釈し、100μlの全血に加えて、200μlの最終容量を得、U型底96ウェルプレートに入れた。次いで、プレートを37°Cにて4時間インキュベートし、血漿をELISA解析のために回収した。HMGB1に対するmAbのブロックについてスクリーニングするために、精製されたmAbをOptiMEMに希釈し、室温にてラットHMGB1と混合した。5分後に、混合物を、RAW2647細胞を含有する組織培養ウェルに移した。次いで、プレートを37°Cにて4時間インキュベートし、上清をELISA解析のために回収した。HMGB1モノクローナル抗体のSDSポリアクリルアミドゲル電気泳動、ウェスタンブロット解析および選択性HMGB1mAbでのHMGB1の検出のために、試料を4×NuPAGELDS試料緩衝液、10×NuPAGE試料還元剤InvitrogenCarlsbadCAと混合した。試料を沸騰水中で5分間加熱し、氷上で直ちに冷却し、SDSポリアクリルアミドゲルに負荷した。ウェスタンブロット解析を標準的な技術を用いて行った。HMGB1モノクローナル抗体の選択性すなわち、HMGB1および/またはHMGB2に対する選択性を決定するための実験では、チャイニーズハムスター卵巣CHO細胞からの非組換えすなわち、天然HMGB1図11CHOHMGB1配列番号36として標識を含有する試料、またはチャイニーズハムスター卵巣CHO細胞からの非組換えすなわち、天然HMGB2、およびいくつかの検出可能な組換えヒトHMGB1His6図11CHOHMGB2、recHMGB1His6として標識含有する試料につきウェスタンブロット解析を行った。図18Aおよび18Bはヌクレオチド、および5’6HISタグを含有するヒト組換えHMGB1ポリペプチドrecHMGB1His6配列番号39および40のコードされたアミノ酸配列を示す。CHOHMGB1を含有する試料では、試料はチャイニーズハムスター卵巣CHO細胞からの約25~5ng/μlの非組換えすなわち、天然HMGB1を含有した。20μlの試料すなわち約50~100ngのHMGB1をゲルに負荷し、SDSPAGEに付した。CHOHMGB1ポリペプチドを単離するために、CHO細胞を溶解させ、引き続いて、遠心によって清澄化した。次いで、アニオン交換クロマトグラフィーおよびヘパリンアフィニティークロマトグラフィーを行い、ピークHMGB1免疫反応性を含むが検出可能なHMGB2免疫反応性を含まない画分をプールし、CHOHMGB1の源として用いた。チャイニーズハムスター卵巣CHO細胞からの非組換えすなわち、天然HMGB2、およびいくつかの検出可能な組換えHMGB1His6図11CHOHMGB2、recHMGB1His6と表示を含有する試料では、組換えHIGB1His6発現プラスミドでトランスフェクトしたCHO細胞を利用した。CHOHIGB2ポリペプチドを単離するために、CHO細胞を溶解させ、引き続いて、遠心によって清澄化した。次いで、アニオン交換クロマトグラフィーおよびヘパリンアフィニティークロマトグラフィーを行い、ピークHMGB2免疫反応性を含有するが検出可能な天然HMGB1免疫反応性を含まない画分をプールし、CHOHMGB2の源として用いた。いくつかの場合において、プールされたCHOHMGB2画分は検出可能な量の組換えHMG1His6ポリペプチドを含有したが、この組換えHMGB1-His6ポリペプチドは、SDSPAGEに付した場合のその低下した移動度および見掛けのより高い分子量に基づいて容易にHMGB2から区別することができた。図11に示されるウェスタンブロットを生じさせたゲルシステムを用い、非組換えCHOHMGB2は約27000の見掛けの分子量を有し、非組換えCHOHMGB1は約29000の見掛けの分子量を有し、組換えHMGB1His6は約31000の見掛けの分子量を有する。CHOHMGB2、recHMGB1His6試料については、20μlの試料すなわち、約10~20ngのHMGB2を負荷し、SDSPAGEに付した。図11に示したウェスタンブロットでは、抗HisTag抗体SantaCluzCA2μg/ml、抗HMGB2抗体PharmingenSanDiegoCA2μg/ml、抗HMGB1/2mAbMBLInternationalWatertownMA2μg/mlまたは特定の抗HMGB1モノクローナル抗体例えば、2E11HMGB1mAbCT32E11、1G3HMGB1mAbCT31G3、6H9HMGB1mAbCT36H9、2G7HMGB1mAbCT32G7、2G5HMGB1mAbCT32G5および6E6HMGB1mAbCT36E6;各々につき2μg/mlのいずれかを用いた。モノクローナル抗体の配列決定キットプロトコルに記載したように、RNeasyMiniKitQiagenValenciaCAを用いて全RNAをハイブリドーマ細胞から単離した。cDNAの第1鎖の合成はキットプロトコルにおいて設計されたように、第1鎖cDNA合成キットProtoScriptFirstStrandcDNASynthesiskitNewEnglandBiolabsカタログ番号E6500Sを用いて行った。重鎖についてMuIgGVH5’-A、MuIgGVH5’-B、MuIgGVH5’-C、MuIgGVH5’-D、MuIgGVH5’-E、MuIgGVH5’-F、および軽鎖についてはMuIgGVL5’-A、MuIgGVL5’-B、MuIgGVL5’-C、MuIgGVL5’-D、MuIgGVL5’-E、MuIgGVL5’-F、およびMuIgGVL5’-GとしてNovagenIgプライマー組プロトコルに記載された25ピコモルの適当な5’プライマーおよび重鎖についてのMuIgGVH3’-2および軽鎖についてのMuIgGVL3’-2としてNovagenIgプライマー組プロトコルに記載された3’プライマーを含有するマウスIgプライマー組、カタログ番号698313NovagenMadisonWIにつきプロトコルで記載されたPCR反応に5μlのcDNAを加えた。PCR反応条件は35サイクルでの94°Cにおける1分、50°Cにおける1分、および72°Cにおける2分、続いての、72°Cにおける6分間の延長であった。PCR産物をベクターTOPOInvitrogenSanDiegoCAにクローン化した。DNA配列解析はGenaissancePharmaceuticalsNewHavenCTによって行った。HMGB1ペプチド結合実験反応結合ストレプトアビジンコートプレートPierceRockfordILカタログ番号15501に結合したビオチン化ペプチド、およびポリ-D-リシンコートELISAプレートに結合した非ビオチン化ペプチドを抗ペプチドELISAで用いた。ヒトHMGB1の特定の18アミノ酸領域に対応するビオチン化ペプチド、ならびにヒトHMGB1のアミノ酸残基9~85に対応するより長いペプチドを調製し、ELISAによって、特定の抗HMGB1モノクローナル抗体への結合につき解析した。これらのペプチド、およびそれらの各配列を図13Aに示す。ポリ-D-リシンコートプレートは、水中のポリ-D-リシンの01mg/ml溶液の60~100μl/ウェルを加えることによって調製した。次いで、プレートを室温にて5分間インキュベートし、水で濯いで溶液を除去した。簡単には、各ペプチドの分子量を用い、1mMペプチド溶液をパイロジェン-フリー水中で調製し、1×リン酸緩衝化生理食塩水中で希釈した。プレートウェルを200μlのPBSで3回洗浄し、100μlの種々のペプチド溶液を指定されたウェルに加えた。次いで、プレートをコートし、室温にて60分間インキュベートした。次いで、100μlよりも大きな容量を用い、ウェルをPBS、ここではTween20TMという005ポリオキシエチレンソルビタンで3回洗浄した。200μlのブロッキング緩衝液PBS005Tween20TM中の5脱脂粉乳をウェルの各々に加えた。プレートをコートし、室温にて60分間インキュベートした。次いで、PBS、005Tween20TMを100μlよりも大きな容量で用いて、ウェルを3回洗浄した。100μlの一次抗体例えば、2E11HMGB1mAb、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb;ブロッキング緩衝液中2μg/mlを指定したウェルに加え、プレートをコートし、室温にて30分間インキュベートした。次いで、PBS、005Tween20TMを100μlよりも大きな容量で用いて、ウェルを3回洗浄した。100μlのヤギ抗マウス西洋ワサビペルオキシダーゼHRP結合二次抗体JacksonImmunoResearchLaboratoriesWestGrovePAカタログ番号115-035071;12000希釈で使用をウェルの各々に加えた。プレートをコートし、室温にて30分間インキュベートし、引き続いて100μlよりも大きな容量を用いてPBS、005Tween20TMで3回洗浄した。プレートは、50μlの1×TMBSigmaStLouisMOを各ウェルに加え、室温にて10分間インキュベートし、Microplate/ManagerソフトウェアおよびBioRadモデル680プレートリーダーを用いて655nmで吸光度を読むことによって、プレートを発色させた。平均バックグラウンドシグナルを試料のシグナルの各々から差し引いた。盲腸結紮および穿刺盲腸結紮および穿刺CLPは従前に記載されているように行ったFinkおよびHeardJSurgRes491861961990;WichmannらCritCareMed26207820861998およびRemickらShock489951995。簡単には、BALB/cマウスを75mg/kgケタミンFortDodgeFortDodgeIowaおよび20mg/kgのキシラジンBoehringerIngelheimStJosephMOの筋肉内投与により麻酔した。中線切開を行い、盲腸を摘出した。60プロレン縫合結紮を回盲腸弁から遠いほうの盲腸先端から50mmのところに置いた。次いで、結紮した盲腸断端を、糞を直接的に押し出すことなく22-ゲージ針で1回穿刺した。次いで、盲腸をその正常な腹部内位置に戻した。次いで、腹部を2層、腹膜および筋膜にて60プロレンのランニング縫合で別々に閉じて、流体の漏れを防いだ。全ての動物を、20ml/kg体重にて皮下投与された規定生理食塩水で蘇生させた。各マウスには外科的処置から30分後にイミペネム05mg/マウスPrimaxinMerkaCoIncWestPointPAの皮下注射を受けさせた。次いで、動物を回復させた。該手法から1週間後までの間死亡率を記録した;生存動物を2週間追跡して、後の死亡が起こらないことを確認した。CLP手法後の日から、100μgの特定の抗HMGB1モノクローナル抗体すなわち、6E6HMGB1mAbmAB6E6;2E11HMGB1mAbmAB2E11;9G2HMGB1mAbmAB9G2および対照IgG抗体を、合計5つの処理にて1日に1回または2回マウスに腹腔内投与した。図16に示したデータでは、種々の容量1μg/マウス、10μg/マウス、100μg/マウスの6E6HMGB1mAbまたは対照IgG抗体を腹腔内投与した。HMGB1ELISA種々のHMGB1モノクローナル抗体を用いて2つのELISA方法を行った。モノクローナル捕捉ポリクローナル検出抗体対でのHMGB1ELISA第一の方法では、ELISAプレートを多数の精製された抗HMGB1mAb例えば、2E11HMGB1mAb、2G5HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、6E6HMGB1mAbでコートし、4°Cにて一晩インキュベートした。次いで、プレートをPBS、1BSAで37°Cにて1時間ブロックした。洗浄の後、組換えラットHMGB1を示した濃度で加え、プレートを室温にて1時間インキュベートした。次いで、プレートを洗浄し、2μg/mlのHMGB1に対するウサギポリクローナル抗体と共にインキュベートした米国特許第6303321号、同第6448223号、同第6468533号参照。室温での1時間後、プレートを洗浄し、PBS中に11000希釈したヤギ抗ウサギIgHPRJacksonImmunoResearchLaboratoriesWestGrovePAと共に30分間インキュベートした。洗浄の後、プレートをTMBInvitrogenSanDiegoCAで発色させ、プレートリーダーを用いて655nmにおける吸光度を測定した。モノクローナル抗体対でのHMGB1ELISA6E6HMGB1mAbでの検出ELISAプレートをコートし、ブロックし、組換えラットHMGB1を引き続いて前記したように加えた。非結合HMGB1ポリペプチドを洗浄除去した後、ビオチン化6E6HMGB1mAbを2μg/mlで加え、室温にて1時間インキュベートした。ストレプトアビジン-HRPを用いて、結合した6E6HMGB1mAbを検出し、プレートを前記したようにTMBで発色させた。実施例2:抗HMGB1モノクローナル抗体の同定および特徴付け多数の新規な抗HMGB1モノクローナル抗体を単離し、組換え全長ラットHMGB1配列番号4;図3Aおよび3BまたはヒトHMGB1配列番号3;図2BのBボックスポリペプチドいずれかでの免疫化から精製した。これらの抗体の特徴クローン名称、免疫原、イソタイプ、精製された抗体結合ドメイン、およびインビボCLPアッセイの結果をまとめる表を図7に示す。実施例3:抗HMGB1モノクローナル抗体の選択性の決定HMGB1モノクローナル抗体の選択性を決定する実験例えば、ELISA、ウェスタンブロット解析により、特定の抗HMGB1モノクローナル抗体がHMGB1のAボックス部分、HMGB1のBボックス部分および/または全HMGB1タンパク質に結合できることが明らかとなった。例えば、図7に示すように、HMGB1例えば、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、2G5HMGB1mAb、4H11HMGB1mAb、7H3HMGB1mAb、9H3HMGB1mAbのAボックスに結合できる抗HMGB1モノクローナル抗体が同定された。HMGB1例えば、2E11HMGB1mAb、3G8HMGB1mAb、35A6HMGB1mAb、9G1HMGB1mAb、4C9HMGB1mAb、1C3HMGB1mAb、5C12HMGB1mAb、3E10HMGB1mAb、7G8HMGB1mAb、4A10HMGB1mAbのBボックスに結合する他のモノクローナル抗体が同定された。実施例4:抗HMGB1モノクローナル抗体のヌクレオチドおよびアミノ酸配列の決定特定のHMGB1モノクローナル抗体6E6HMGB1mAb、2E11HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、2G7HMGB1mAbでは、CDRを含めた、VHドメインおよびVKドメインの核酸およびコードされたアミノ酸配列も得られた図4A~4D、5A~5D、6A~6Dおよび19A~19D。実施例5:抗HMGB1モノクローナル抗体によるTNF放出の阻害TNF放出を阻害する特定のHMGB1モノクローナル抗体の能力を評価した。この実験の結果を図8および9に示し、これはHMGB1のみ、HMGB1特定のHMGB1モノクローナル抗体、または対照IgG抗体を投与したRAW2647細胞によって放出されたTNFを示すヒストグラムである。図8は6E6HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、2E11HMGB1mAb、9G2HMGB1mAb、および対照IgG抗体についてのHMGB1媒介TNF放出の阻害の結果を示す。図9は3G8HMGB1mAb、1A9HMGB1mAb、9G2HMGB1mAb、6E6HMGB1mAb、2E11HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、または対照IgG抗体についてのHMGB1媒介TNF放出の阻害の結果を示す。図8および9に示すように、特定のHMGB1モノクローナル抗体例えば、6E6HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbはTNF放出を阻害し、これは、そのような抗体を例えば、本明細書中に記載したような1以上のHMGB機能を変調するのに用いることができることを示す。例えば、これらのブロッキング抗体を用いて、HMGB1の生物学的活性例えば、サイトカインカスケードのHMGB1媒介活性化を中和し得る。実施例6:抗HMGB1モノクローナル抗体での敗血症マウスの処理はマウスの生存を高めるマウスを盲腸結紮および穿刺CLPに付し、これは複数菌腹膜炎および敗血症FinkおよびHeard前掲;Wichmannら前掲;およびRemichら前掲に導く、外科的に作製された盲腸憩室を行うことによって引き起こされた敗血症のよく特徴付けられたモデルであり、特定の抗HMGB1モノクローナル抗体6E6HMGB1mAb、2E11HMGB1mAbまたは9G2HMGB1または対照IgG抗体を投与した1日当たり100μgの抗体を2回投与。生存を7日間モニターした。この研究の結果を図10に示し、これは、対照抗体または特定の抗HMGB1モノクローナル抗体いずれかで処置した敗血症マウスの生存のグラフである。該結果は、盲腸開口の開始から24時間後からマウスに投与された抗HMGB1モノクローナル抗体が、IgG対照抗体の投与と比較して、動物を死亡から救済することを示す。6E6HMGB1mAbでは、救済は7日において有意であった対照に対してp003、Fisherの直接確率検定。6E6HMGB1mAbで処置した敗血症マウスの生存についての用量応答曲線も作成した。図16に示したように、1、10および100μgの用量の6E6HMGB1mAbをマウスに投与した。結果は、10μgの6E6HMGB1の用量の結果、敗血症マウスの最大救済が得られたことを示す。実施例7:抗HMGB1モノクローナル抗体の選択性前記したように、特定の抗HMGB1モノクローナル抗体を用いてウェスタンブロット解析を行った。図11は、CHOHMGB1またはCHOHMGB2のいずれか、および恐らくは組換えHMGB1-His6CHOHMGB2、recHMGB1His6で表すを含有する試料の個々のウェスタンブロットを示し、これは、抗Hisタグ抗体、抗HMGB2抗体、抗HMGB1/2モノクローナル抗体、または特定の抗HMGB1モノクローナル抗体例えば、2E11HMGB1mAb、1G3HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、2G5HMGB1mAbおよび6E6HMGB1mAbいずれかでプローブした。これらの実験の結果は、2G7HMGB1mAbがHMGB1に結合するが、HMGB2には検出可能に結合せず、他方、2E11HMGB1mAb、1G3HMGB1mAbおよび6H9HMGB1mAbがHMGB1に加えてHMGB2を検出することを示す。実施例8:HMGB1ペプチド結合実験ヒトHMGB1の特定の18アミノ酸領域に対応するビオチン化ペプチド、およびヒトHMGB1のアミノ酸残基9~85に対応するより長いペプチドを調製し、ELISAによって、特定の抗HMGB1モノクローナル抗体への結合につき解析した。これらのペプチドおよびそれらのそれぞれの配列を図13Aに示す。これらのペプチド結合実験の結果を図13Bに示す。図13Bに示すように、2E11HMGB1mAbはヒトHMGB1のアミノ酸残基151~168すなわち、アミノ酸残基151~168配列番号1に対応するペプチドに結合した。6E6HMGB1mAbおよび6H9はヒトHMGB1のアミノ酸残基61~78すなわち、アミノ酸残基61~78配列番号1に対応するペプチドに結合した。2G7HMGB1mAbはヒトHMGB1のアミノ酸残基46~63すなわち、配列番号1のアミノ酸残基46~63に対応するペプチドに結合した。加えて、2G7HMGB1mAbおよび6E6HMGB1mAbは、ヒトHMGB1のアミノ酸残基9~85に対応するより長いペプチドにも結合した。これらの実験は、特定の抗HMGB1モノクローナル抗体がHMGB1ポリペプチド内の異なるエピトープを認識することを示す。例えば、HMGB1媒介TNF放出を阻害することが示された6E6HMGB1mAbがHMGB1のアミノ酸61~78内に含まれるエピトープに結合する。HMGB1のこの特定の領域内のブロッキングエピトープの発見を用いて、さらなるブロッキング剤例えば、HMGB1機能例えば、サイトカインカスケードのHMGB1媒介活性化を阻害する剤につきスクリーニングし得る。実施例9:HMGB1ELISA図14および15に示すように、2つの異なるELISA方法を用いて、特定の抗HMGB1モノクローナル抗体の特性を調べた。1つの方法において、HMGB1モノクローナル抗体2E11HMGB1mAb、2G5HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、および6E6HMGB1mAbを捕捉抗体として用い、ポリクローナルHMGB1抗体を検出抗体として用いた。他のELISA方法においては、HMGB1モノクローナル抗体2E11HMGB1mAb、2G5HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、および6E6HMGB1mAbを捕捉抗体として用い、6E6HMGB1mAbを検出抗体として用いた。ELISA方法の双方からの結果は、モノクローナルHMGB1抗体がHMGB1を検出でき、本明細書中に記載された診断および/または予測の方法に適していることを示す。実施例10:HMGB1への2G7HMGB1mAbの結合はHMGB1のアミノ酸残基46~63に対応するペプチドによって阻害される2G7HMGB1mAbを用いるHMGB1ペプチド結合実験を行った。記載したように、ヒトHMGB1のアミノ酸残基46~63またはヒトHMGB1のアミノ酸残基61~78いずれかに対応するビオチン化合成ペプチドを調製し、ELISAによって、2G7HMGB1mAb2G7への結合につき解析した。簡単には、2μg/mlの2G7HMGB1mAbを、示した濃度0、033、1、3、9、27、81および243μMペプチドの各々にて、HMGB146~63ペプチドまたはHMGB161~78ペプチドいずれかを含有するプレートウェルに25°Cにて1時間で加えて、抗体-ペプチド試料を調製した。ELISAプレートを10μg/mlの組換えラットHMGB1でコートし、4°Cにて一晩インキュベートした。次いで、プレートを還元乳で37°Cで1時間ブロックした。次いで、抗体-ペプチド試料を前記でリストした濃度で加え、室温にて1時間インキュベートした。次いで、プレートを洗浄し、ストレプトアビジン-HRPと共にインキュベートした。洗浄の後、プレートをTMBInvitrogenSanDiegoCAで発色させ、プレートリーダーを用いて655nmにおける吸光度を測定した。図20は最大シグナルのパーセントとしての結果を示すY軸。図20が示すように、HMGB146~63ペプチドは最大シグナルので表した減少として示した全ての濃度におけるHMGB1に結合した2G7HMGB1mAbの結合を阻害した。対照的に、HMGB16178ペプチドは、HMGB1への2G7HMGB1mAbの結合を阻害しなかった。これらの実験は、2G7HMGB1mAbが、HMGB1のアミノ酸46~63に存在するエピトープに結合することをさらに確認する。実施例11:HMGB1への2E11HMGB1mAbの結合は、HMGB1のアミノ酸残基151~168に対応するペプチドのより高い濃度によって阻害される2E11HMGB1mAb、およびヒトHMGB1配列番号23のアミノ酸残基46~63またはヒトHMGB1配列番号30のアミノ酸残基151~168いずれかに対応するビオチン化合成ペプチドを用いるHMGB1ペプチド結合実験を本明細書中に記載するように行った。これらの実験の結果を最大シグナルのパーセントとしてY軸図21に示す。図21が示すように、HMGB1151~168ペプチドは、9μM以上の濃度においてHMGB1に結合した2E11HMGB1mAbの結合を有意に阻害した。HMGB1151~168ペプチドは、3μM以下の濃度においてHMGB1への2E11HMGB1mAbの結合を有意に阻害しなかった図21。加えて、HMGB146~63ペプチドは、HMGB1への2E11HMGB1mAbの結合を阻害しなかった。これらの実験は、2E11HMGB1mAbがHMGB1のアミノ酸151~168に存在するエピトープに結合することを確認する。実施例12:2G7HMGB1mAbはHMGB1のアミノ酸53~63に存在するエピトープを認識する種々の合成ペプチドを調製した。これらの合成ペプチドは、ヒトHMGB1のアミノ酸残基46~63に対応するビオチン化ペプチド配列番号23;huHMGB14663BまたはヒトHMGB14663Bと命名、ヒトHMGB2のアミノ酸残基46~63に対応するビオチン化ペプチド配列番号48;huHMGB24663BまたはヒトHMGB24663Bと命名、ヒトHMGB1のアミノ酸残基53~70に対応する非ビオチン化ペプチド配列番号47;huHMGB15370またはヒトHMGB15370と命名、ヒトHMGB1のアミノ酸残基61~78に対応するビオチン化ペプチド配列番号24;huHMGB16178Bと命名、ヒトHMGB1のアミノ酸残基40~57に対応する非ビオチン化ペプチド配列番号46;ヒトHMGB14057と命名およびスクランブルアミノ酸配列よりなる非ビオチン化ペプチドここに、スクランブルされたアミノ酸残基はヒトHMGB1のアミノ酸残基46~63のものであった配列番号45;ヒトHMGB14663scrと命名を含む。本明細書中で用いるように、ELISAによって、これらの重複するペプチドへの2G7HMGB1mAbの結合を解析して、2G7HMGB1mAbに結合するHMGB1内のエピトープをより特異的に確認した。これらのペプチドおよびそれらの各配列を図23に示す。ペプチド結合実験の結果を図22および23に示す。図22および23に示すように、2G7HMGB1mAbはHMGB146~63ペプチドすなわち、配列番号1または配列番号23のアミノ酸残基46~63に結合したが、ヒトHMGB2すなわち、HMGB246~63ペプチド;配列番号54または配列番号48のアミノ酸残基46~63の対応するアミノ酸領域に結合しなかった。加えて、2G7HMGB1mAbはHMGB153~70ペプチドに結合したが、HMGB140~75ペプチドに結合しなかった。2G7HMGB1mAbはHMGB1のアミノ酸残基46~63のスクランブル配列よりなるペプチドにも結合しなかった。種々の合成ペプチドへの2G7HMGB1mAbの結合を示すことに加え、図22はこれらの合成ペプチドへのアビジンの結合も示す。実施例8においては、2G7HMGB1mAbがHMGB1のアミノ酸残基46~63内に含まれるエピトープに結合することが示された。2G7HMGB1mAbがHMGB146~63ペプチドおよびHMGB153~63ペプチドに結合すると仮定すれば、これらの実験は、2G7HMGB1mAbがHMGB1のアミノ酸残基53~63よりなるアミノ酸領域に存在するエピトープを認識することを示す。これらの実験は、さらに、HMGB146~63ペプチドおよびHMGB246~63ペプチドの間の唯一の単一アミノ酸の差にもかかわらず、2G7HMGB1mAbがHMGB246~63ペプチドに結合しないことを示す。それ自体、HMGB2における対応するセリン残基である、HMGB1の位置58におけるグリシン残基Gly58は、2G7HMGB1mAbによって認識されるHMGB1エピトープにおける重要なアミノ酸残基である図23。実施例13:6E6HMGB1mAbはHMGB1のアミノ酸67~78に存在するエピトープを認識する種々のペプチドを調製した。これらの合成ペプチドはヒトHMGB1のアミノ酸残基53~70に対応する非ビオチン化ペプチド配列番号47;ヒトHMGB15370Bと命名;前記、ヒトHMGB1のアミノ酸残基67~84に対応する非ビオチン化ペプチド配列番号50;ヒトHMGB16784と命名、ヒトHMGB1のアミノ酸残基61~78に対応するビオチン化ペプチド配列番号24;ヒトHMGB16178Bと命名、およびスクランブルアミノ酸配列よりなる非ビオチン化ペプチドここに、スクランブルされたアミノ酸残基はヒトHMGB1のアミノ酸残基6178のものである配列番号49;ヒトHMGB16178scrと命名を含んだ。ELISAによって、本明細書中に記載するように、これらの重複ペプチドへの6E6HMGB1mAbの結合を解析して、6E6HMGB1mAbに結合するHMGB1内のエピトープをより特異的に確認した。これらのペプチド、それらの各配列、およびペプチドのいずれが6E6HMGB1mAbに結合されたかを図24に示す。これらのペプチド結合実験の結果を図24に示す。図24に示したように、6E6HMGB1mAbはHMGB161~78ペプチド配列番号24に結合した。さらに、6E6HMGB1mAbはHMGB167~84ペプチド配列番号50に結合したが、HMGB153~70ペプチド配列番号47に結合しなかった図24。6E6HMGB1mAbはやはりHMGB1のアミノ酸残基61~78のスクランブル配列よりなるペプチド配列番号49にも結合しなかった図24。実施例8においては、6E6HMGB1mAbはHMGB1のアミノ酸残基61~78内に含まれるエピトープに結合することが示された。6E6HMGB1mAbがHMGB161~78ペプチドおよびHMGB167~84ペプチドに結合すると仮定すれば、これらの実験は、6E6HMGB1mAbがHMGB1のアミノ酸残基67~78よりなるアミノ酸領域に存在するエピトープを認識することを示す。実施例14:2E11HMGB1mAbでのHMGB1ペプチド結合実験種々の合成ペプチドを調製した。これらの合成ペプチドはヒトHMGB1のアミノ酸残基151~168に対応するビオチン化ペプチド配列番号30;ヒトHMGB1151168Bと命名、ヒトHMGB1のアミノ酸残基143~160に対応する非ビオチン化ペプチド配列番号52;ヒトHMGB1143160と命名、ヒトHMGB1のアミノ酸残基157~174に対応する非ビオチン化ペプチド配列番号53;ヒトHMGB1157174と命名、およびスクランブルアミノ酸配列に対応する非ビオチン化ペプチドここに、スクランブルされた該アミノ酸残基はヒトHMGB1のアミノ酸残基151~168のものであった配列番号51;ヒトHMGB1151168scrと命名を含んだ。ELISAによって、本明細書中に記載するように、これらの重複するペプチドへの2E11HMGB1mAbの結合を解析して、2E11HMGB1mAbに結合するHMGB1内のエピトープをより特異的に確認した。これらのペプチド、それらの各配列、およびペプチドのいずれが2E11HMGB1mAbによって結合されたかを図25に示す。図25に示すように、2E11HMGB1mAbはHMGB1151~168ペプチド配列番号30に結合したが、HMGB1143~160ペプチド配列番号52またはHMGB1157~174ペプチド配列番号53いずれにも結合しなかった。当該分野で知られているように、2つのタイプ:線状、順次または連続エピトープおよび非線状の立体配座または不連続エピトープのエピトープまたは抗原性決定基がある。典型的な抗体エピトープの寸法は、しばしば、サイズが6アミノ酸残基として与えられるが、可変サイズとすることができる。これらの実験は、2E11HMGB1mAbによって認識されるエピトープがHMGB1のアミノ酸残基156~161を含むようであることを示唆する。しかしながら、2E11HMGB1mAbは、この領域に対するフランキングアミノ酸、例えば、HMGB1のアミノ酸残基155~161、155~162、156~162および/または156~163を含むエピトープをやはり認識することができる。種々のHMGB1mAb例えば、2G7HMGB1mAb、6E6HMGB1mAb、2G5HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2E11HMGB1mAbによって認識されるHMGB1のマッピングされたエピトープを示すペプチド結合結果のまとめを図26に示す。実施例15:6E6HMGB1mAbの質量解析6E6HMGB1mAbの質量は質量解析によって測定した。6E6HMGB1mAbをLC/MS解析のためにNovatia、LLCPrincetonNJに送った。簡単には、インタクトまたは重鎖および軽鎖を分離するためにDTTで処理した後のいずれかの抗体を、PLRPs4000A逆相HPLCカラムHPLC/ESIMSシステムおよび質量解析FinniganTSQ7000マススペクトロメーターを用いる解析に付した。タンパク質についての質量精度は一般に±001であり、この精度は6E6軽鎖の質量の測定において達成された例えば、2Da/23917Da×1000008。この解析の結果を図27A~27Dに示し、これは質量スペクトルプロットを示す。6E6HMGB1mAbの全質量は1465kDaであった図27Aインタクト6E6HMGB1mAbについての質量スペクトルを示す。6E6HMGB1mAbの軽鎖および重鎖の質量は、各々、239kDa図27Bおよび27Cおよび494kDa図27Bおよび27Dであると決定された。アミノ酸の分子量を用いて計算された軽鎖および重鎖についての予測される質量は、各々、239kDaおよび479kDaである。実施例16:2G7HMGB1mAbは単一用量の投与後における敗血症マウスでの生存を増加させるマウスを前記したように盲腸結紮および穿刺CLPに付した。1つの実験においては、外科的処置から24時間後に、マウスに0004mg/kg、004mg/kgまたは04mg/kgの2G7HMGB1mAb2G7いずれかを1日当たり1回腹腔内投与した。第二の実験において、外科的処置から24時間後に、マウスに、004mg/kgの2G7HMGB1mAbまたは04mg/kgの対照IgGIgG対照のいずれかを1日当たり1回投与した。生存を双方の実験で14日間モニターした。2つの実験の結果を合わせ、図28に示す。04mg/kgの2G7HMGB1mAbの投与の結果、CLP後14日にIgG対照を投与したマウスのほぼ40生存に過ぎないのと比較して、CLPから14日後におけるほぼ85生存がもたらされた図28。さらに、図28に示すように、004mg/kgおよび0004mg/kgの2G7HMGB1mAbの投与の結果、各々、CLP後14日において、ほぼ60および50生存がもたらされた。図29は、種々の用量4mg/kg、04mg/kg、004mg/kgまたは0004mg/kgいずれかの6E6HMGB1mAb、2G7HMGB1mAbまたは対照IgGを投与したマウスにおけるCLP生存パーセンテージを比較する表である。図29に示すように、マウスには1日4回抗体を腹腔内投与した。結果は、6E6HMGB1mAbまたは2G7HMGB1mAbいずれかの04mg/kgの用量の投与の結果、対照IgGを投与した場合の、CLP後14日まで生存する敗血症マウスのほぼ40に過ぎないのに比較して、CLP後14日まで生存する敗血症マウスは80を超えた。実施例17:抗HMGB1モノクローナル抗体によるTNF放出の阻害実施例5におけるように、TNF放出を阻害する特定のHMGB1モノクローナル抗体の能力を評価した。この研究の結果を図32および33に示すが、これはHMGB1のみ黒いバーまたはHMGB1特定のHMGB1モノクローナル抗体を投与したRAW2647細胞によって放出されたTNFを示すヒストグラムである。図32は、1A9HMGB1mAb1A92E11HMGB1mAb2E11;2G5HMGB1mAb2G52G7HMGB1mAb2G73G8HMGB1mAb3G8;4H11HMGB1mAb4H11;5A6HMGB1mAb5A66E6HMGB1mAb6E6;9G2HMGB1mAb9G24C9HMGB1mAb4C9および6H9HMGB1mAb6H9についてのHMGB1媒介TNF放出の阻害の結果を示す。図33は、7H3HMGB1mAb7H3;9H3HMGB1mAb9H3;10D4HMGB1mAb10D4;1C3HMGB1mAb1C3;3E10HMGB1mAb3E10;4A10HMGB1mAb4A105C12HMGB1mAb5C12;および7G8HMGB1mAb7G8についてのHMGB1媒介TNF放出の阻害の結果を示す。図32および33に示すように、さらに、実施例5に記載した結果に対し、特定のHMGB1モノクローナル抗体例えば、2E11HMGB1mAb、4H11HMGB1mAb、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAbおよび10D4HMGB1mAbはTNF放出を阻害し、これは、そのような抗体を用いて、例えば、本明細書中に記載したような1以上のHMGB機能を変調できることを示す。例えば、これらのブロッキング抗体を用いて、HMGB1の生物学的活性例えば、サイトカインカスケードのHMGB1媒介活性化を中和し得る。本発明をその好ましい態様を参照して具体的に示し、記載してきたが、添付の請求の範囲に含まれる発明の範囲を逸脱することなく、形態および詳細の種々の変形がなされ得るのは当業者に理解されよう。本発明の態様として、以下のものが挙げられる。[1]脊椎動物高移動度グループAボックスに特異的に結合するが、HMGBの非Aボックスエピトープには特異的に結合しない抗体またはその抗原結合性断片であって、高速移動群タンパク質で処理した脊椎動物細胞からのプロ炎症性サイトカインの放出を阻害する抗体またはその抗原結合性断片。[2]前記脊椎動物高移動度グループAボックスが哺乳動物HMGBAボックスである、[1]記載の抗体または抗原結合性断片。[3]前記哺乳動物高移動度グループAボックスがヒトHMGBAボックスである、[2]記載の抗体または抗原結合性断片。[4]前記哺乳動物高移動度グループAボックスがHMGB1Aボックスである、[2]記載の抗体または抗原結合性断片。[5]Fab断片、Fab断片、F2断片およびFv断片からなる群より選択される抗原結合性断片である、[4]記載の抗体または抗原結合性断片。[6]モノクローナル抗体またはその抗原結合性断片である、[4]記載の抗体または抗原結合性断片。[7]6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAbおよび10D4HMGB1mAbからなる群より選択される、[4]記載のモノクローナル抗体または抗原結合性断片。[8]前記高移動度グループAボックスへの結合が、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAbおよび10D4HMGB1mAbからなる群より選択される抗体により阻害され得る、[4]記載の抗体または抗原結合性断片。[9]6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAbおよび/または10D4HMGB1mAbのエピトープ特異性を有する、[4]記載の抗体または抗原結合性断片。[10]6H9HMGB1mAbのエピトープ特異性を有する、[4]記載の抗体または抗原結合性断片。[11]ATCC受託番号PTA5433で寄託されているマウスハイブリドーマ6E6HMGB1mAbにより産生される抗体、またはその抗原結合性断片。[12]ATCC受託番号PTA5434で寄託されているマウスハイブリドーマ6H9HMGB1mAbにより産生される抗体、またはその抗原結合性断片。[13]ATCC受託番号PTA5435で寄託されているマウスハイブリドーマ10D4HMGB1mAbにより産生される抗体、またはその抗原結合性断片。[14]ATCC受託番号PTA5433で寄託されているマウスハイブリドーマ6E6HMGB1mAb。[15]ATCC受託番号PTA5434で寄託されているマウスハイブリドーマ6H9HMGB1mAb。[16]ATCC受託番号PTA5435で寄託されているマウスハイブリドーマ10D4HMGB1mAb。[17]ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体および前記いずれかの抗原結合性断片からなる群より選択される、[4]記載の抗体または抗原結合性断片。[18]脊椎動物高移動度グループAボックスに特異的に結合するが、HMGBの非Aボックスエピトープには特異的に結合しない抗体またはその抗原結合性断片を産生する、単離された細胞。[19]前記脊椎動物高移動度グループAボックスが哺乳動物HMGBAボックスである、[18]記載の単離された細胞。[20]前記哺乳動物高移動度グループAボックスがヒトHMGBAボックスである、[19]記載の単離された細胞。[21]前記哺乳動物高移動度グループAボックスが哺乳動物HMGB1Aボックスである、[19]記載の単離された細胞。[22]前記抗体またはその抗原結合性断片をコードする1種類以上の外因性核酸分子を含有する不死化B細胞、ハイブリドーマおよび組換え細胞からなる群より選択される、[18]記載の単離された細胞。[23]前記抗体または抗原結合性断片がモノクローナル抗体またはその抗原結合性断片である、[18]記載の単離された細胞。[24]前記抗体または抗原結合性断片が、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAbおよび10D4HMGB1mAbからなる群より選択される、[18]記載の単離された細胞。[25]前記高移動度グループAボックスへの結合が、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAbおよび10D4HMGB1mAbからなる群より選択される抗体により阻害され得る抗体またはその抗原結合性断片を産生する、[18]記載の単離された細胞。[26]6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAbおよび10D4HMGB1mAbからなる群より選択される抗体のエピトープ特異性を有する抗体またはその抗原結合性断片を産生する、[18]記載の単離された細胞。[27]ATCC受託番号PTA5431で寄託されているマウスハイブリドーマ2E11HMGB1mAbにより産生される抗体、またはその抗原結合性断片。[28]脊椎動物高移動度グループポリペプチドへの結合が、2E11HMGB1mAbにより阻害され得る、抗体またはその抗原結合性断片。[29]2E11HMGB1mAbエピトープ特異性を有する抗体またはその抗原結合性断片。[30]ATCC受託番号PTA5431で寄託されているマウスハイブリドーマ2E11HMGB1mAb。[31]2E11HMGB1mAbを生産する単離された細胞。[32]該単離された細胞が、抗体またはその抗原結合断片をコードする1種類以上の外因性核酸分子を含む不死化B細胞、ハイブリドーマ、および組換え細胞からなる群より選択される、[31]記載の単離された細胞。[33]脊椎動物高移動度グループポリペプチドへの結合が2E11HMGB1mAbによって阻害され得る、抗体またはその抗原結合断片を生産する単離された細胞。[34]該単離された細胞が、抗体またはその抗原結合断片をコードする1種類以上の外因性核酸分子を含む不死化B細胞、ハイブリドーマ、および組換え細胞からなる群より選択される、[33]記載の単離された細胞。[35]抗体または抗原結合断片が2E11HMGB1mAbのエピトープ特異性を有する、抗体またはその抗原結合断片を生産する単離された細胞。[36]該単離された細胞が、抗体またはその抗原結合断片をコードする1種類以上の外因性核酸分子を含む不死化B細胞、ハイブリドーマ、および組換え細胞からなる群より選択される、[35]記載の単離された細胞。[37]ATCC受託番号PTA5432として寄託されたネズミハイブリドーマ2G7HMGB1mAbによって生産される抗体、またはその抗原結合断片。[38]脊椎動物高移動度グループポリペプチドへの結合が2G7HMGB1mAbによって阻害され得る、抗体またはその抗原結合断片。[39]抗体または抗原結合断片が2G7HMGB1mAbのエピトープ特異性を有する抗体またはその抗原結合断片。[40]ATCC受託番号PTA5432として寄託された、ネズミハイブリドーマ2G7HMGB1mAb。[41]2G7HMGB1mAbを生産する単離された細胞。[42]該単離された細胞が、抗体またはその抗原結合断片をコードする1種類以上の外因性核酸分子を含む不死化B細胞、ハイブリドーマ、および組換え細胞からなる群より選択される、[41]記載の単離された細胞。[43]脊椎動物高移動度グループポリペプチドへの結合が2G7HMGB1mAbによって阻害され得る、抗体またはその抗原結合断片を生産する単離された細胞。[44]該単離された細胞が、抗体またはその抗原結合断片をコードする1種類以上の外因性核酸分子を含む不死化B細胞、ハイブリドーマ、および組換え細胞からなる群より選択される、[43]記載の単離された細胞。[45]抗体または抗原結合断片が2G7HMGB1mAbのエピトープ特異性を有する、抗体またはその抗原結合断片を生産する単離された細胞。[46]該単離された細胞が、抗体またはその抗原結合断片をコードする1種類以上の外因性核酸分子を含む不死化B細胞、ハイブリドーマ、および組換え細胞からなる群より選択される、[45]記載の単離された細胞。[47]配列番号1のアミノ酸残基151~168からなるペプチドと結合する抗体または抗原結合断片。[48]抗体または抗原結合断片がモノクローナル抗体またはその抗原結合断片である、[47]記載の抗体または抗原結合断片。[49]配列番号1のアミノ酸残基156~161からなるペプチドと結合する抗体または抗原結合断片。[50]配列番号1のアミノ酸残基155~161からなるペプチド;配列番号1のアミノ酸残基155~162からなるペプチド;配列番号1のアミノ酸残基156~162からなるペプチド;および配列番号1のアミノ酸残基156~163からなるペプチドからなる群より選択されるペプチドに結合する抗体または抗原結合断片。[51]配列番号1のアミノ酸残基151~168からなるペプチドへの結合が2E11HMGB1mAbによって阻害され得る、抗体または抗原結合断片。[52]配列番号1のアミノ酸残基61~78からなるペプチドと結合する抗体または抗原結合断片。[53]抗体または抗原結合断片がモノクローナル抗体またはその抗原結合断片である、[52]記載の抗体または抗原結合断片。[54]配列番号1のアミノ酸残基67~78からなるペプチドと結合する抗体または抗原結合断片。[55]配列番号1のアミノ酸残基61~78からなるペプチドへの結合が6E6HMGB1mAbおよび6H9HMGB1mAbからなる群より選択される抗体によって阻害され得る、抗体または抗原結合断片。[56]配列番号1のアミノ酸残基67~78からなるペプチドへの結合が6E6HMGB1mAbによって阻害され得る、抗体または抗原結合断片。[57]配列番号1のアミノ酸残基46~63からなるペプチドと結合する抗体または抗原結合断片。[58]抗体が配列番号54のアミノ酸残基46~63からなるペプチドと結合しない、[57]記載の抗体または抗原結合断片。[59]抗体または抗原結合断片がモノクローナル抗体またはその抗原結合断片である、[57]記載の抗体または抗原結合断片。[60]配列番号:1のアミノ酸残基46~63からなるペプチドへの結合が2G7HMGB1mAbによって阻害され得る、抗体または抗原結合性断片。[61]6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび2G7HMGB1mAbからなる群より選択される抗体の軽鎖CDRならびに重鎖CDRを含有する、抗体またはその抗原結合性断片。[62]ヒトフレームワーク領域をさらに含有する、[61]記載の抗体または抗原結合性断片。[63]Fab断片、Fab断片、F2断片およびFv断片からなる群より選択される抗原結合性断片である、[1]記載の抗体または抗原結合性断片。[64][1]記載の抗体または抗原結合性断片および薬学的に許容され得る賦形剤を含有してなる組成物。[65]6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、2E11HMGB1mAbおよび前記いずれかの抗原結合性断片からなる群より選択される抗体またはその抗原結合性断片ならびに薬学的に許容され得る賦形剤を含有してなる組成物。[66]ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体および前記いずれかの抗原結合性断片からなる群より選択される、[1]記載の抗体または抗原結合性断片。[67]a6E6HMGB1mAb;b6H9HMGB1mAb;c2G7HMGB1mAb;d10D4HMGB1mAb;e2E11HMGB1mAb;f6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbのエピトープ特異性を有する抗体;g6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbと、脊椎動物高移動度グループポリペプチドへの結合に関して競合し得る抗体;およびha、b、c、d、e、fまたはgの抗原結合性断片からなる群より選択される抗体またはその抗原結合性断片。[68]ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体および前記いずれかの抗原結合性断片からなる群より選択される、[67]記載の抗体または抗原結合性断片。[69]iHMGBに結合する抗体または抗原結合性断片;ii試験薬剤;およびiii脊椎動物HMGBポリペプチドを含有してなる組成物を合わせること;および前記抗体または抗原結合性断片と前記HMGBポリペプチドとの複合体の形成を検出または測定することを含み、ここで、適当な対照と比べた前記複合体の形成の減少は、前記試験薬剤が前記HMGBポリペプチドに結合することを示し、前記抗体または抗原結合性断片が、a6E6HMGB1mAb;b6H9HMGB1mAb;c2G7HMGB1mAb;d10D4HMGB1mAb;e2E11HMGB1mAb;f6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbのエピトープ特異性を有する抗体;g6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbと、脊椎動物高移動度グループポリペプチドへの結合に関して競合し得る抗体;およびha、b、c、d、e、fまたはgの抗原結合性断片からなる群より選択される、脊椎動物高移動度グループポリペプチドに結合する薬剤の検出および/または同定方法。[70]a6E6HMGB1mAb;b6H9HMGB1mAb;c2G7HMGB1mAb;d10D4HMGB1mAb;e2E11HMGB1mAb;f6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbのエピトープ特異性を有する抗体;g6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbと、脊椎動物高移動度グループポリペプチドへの結合に関して競合し得る抗体;およびha、b、c、d、e、fまたはgの抗原結合性断片からなる群より選択される抗体またはその抗原結合性断片を被験体に投与することを含む、被験体において、炎症性サイトカインカスケードの活性化を特徴とする状態を処置する方法。[71]前記状態が、敗血症、同種移植拒絶、関節炎、喘息、狼瘡、成人呼吸促進症候群、慢性閉塞性肺疾患、乾癬、膵臓炎、腹膜炎、熱傷、虚血、ベーチェット病、対宿主性移植片病、炎症性腸疾患、多発性硬化症および悪液質からなる群より選択される、[70]記載の方法。[72]a6E6HMGB1mAb;b6H9HMGB1mAb;c2G7HMGB1mAb;d10D4HMGB1mAb;e2E11HMGB1mAb;f6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbのエピトープ特異性を有する抗体;g6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbと、脊椎動物高移動度グループポリペプチドへの結合に関して競合し得る抗体;およびha、b、c、d、e、fまたはgの抗原結合性断片からなる群より選択される抗体またはその抗原結合性断片を被験体に投与することを含む、敗血症の被験体の処置方法。[73]a6E6HMGB1mAb;b6H9HMGB1mAb;c2G7HMGB1mAb;d10D4HMGB1mAb;e2E11HMGB1mAb;f6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbのエピトープ特異性を有する抗体;g6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbと、脊椎動物高移動度グループポリペプチドへの結合に関して競合し得る抗体;およびha、b、c、d、e、fまたはgの抗原結合性断片からなる群より選択される抗体またはその抗原結合性断片を被験体に投与することを含む、関節炎の被験体の処置方法。[74]a6E6HMGB1mAb;b6H9HMGB1mAb;c2G7HMGB1mAb;d10D4HMGB1mAb;e2E11HMGB1mAb;f6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbのエピトープ特異性を有する抗体;g6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAbおよび/または2E11HMGB1mAbと、脊椎動物高移動度グループポリペプチドへの結合に関して競合し得る抗体;およびha、b、c、d、e、fまたはgの抗原結合性断片からなる群より選択される抗体またはその抗原結合性断片を被験体に投与することを含む、狼瘡の被験体の処置方法。[75]a試料を、[62]記載の抗体または抗原結合性断片と、前記試料中に存在する前記HMGBポリペプチドへの前記抗体または断片の結合に適した条件下で接触させること;およびb抗体HMGB複合体または抗原結合性断片HMGB複合体を検出することを含み、ここで、前記抗体HMGB複合体または抗原結合性断片HMGB複合体の検出は、前記試料中のHMGBポリペプチドの存在を示す、試料中の脊椎動物高移動度グループポリペプチドの検出方法。[76]前記抗体または抗原結合性断片が、6E6HMGB1mAb、6H9HMGB1mAb、2G7HMGB1mAb、10D4HMGB1mAb、2E11HMGB1mAbおよび前記いずれかの抗原結合性断片からなる群より選択される、[75]記載の方法。[77]前記抗体または抗原結合性断片が検出可能な標識を含有する、[75]記載の方法。[78]前記抗体HMGB複合体または抗原結合性断片HMGB複合体の検出が、イムノアッセイによるものである、[75]記載の方法。[79]前記イムノアッセイがELISAである、[78]記載の方法。[80]a[62]記載の抗体または抗原結合性断片;およびb前記抗体または抗原結合性断片と前記HMGBポリペプチドまたはその部分との複合体の存在の検出に適した1種類以上の補助試薬を含む、試料中の脊椎動物高移動度グループポリペプチドまたはその部分の検出における使用のための試験キット。"