ATCCCCL‐34として寄託されたMDCK細胞から誘導され、細胞成長のために血清を要さず、付着のための担体なしに浮遊培養が可能なMDCK細胞株。前記MDCK細胞株は、腫瘍形成能が元のMDCK細胞株に比べて低いか全くないことを特徴とする請求項1に記載のMDCK細胞株。前記細胞株は、MDCKSky1023DSMACC3112、MDCKSky10234DSMACC3114、またはMDCKSky3851DSMACC3113であることを特徴とする請求項1に記載のMDCK細胞株。請求項1から3のうち何れか1項に記載の細胞株を利用してワクチン用ウイルスを製造する方法。前記ウイルスは、インフルエンザウイルス、麻疹ウイルス、日本脳炎ウイルス、耳下腺炎ウイルス、風疹ウイルス、ポリオウイルス、HSV‐1、HSV‐2、狂犬病ウイルス、RSウイルス、レオウイルス3型、黄熱ウイルス、パルボウイルス、コクサッキーウイルス、アデノウイルス1型ないし47型、ラッサウイルス、ワクシニアウイルスから構成された群から選択されることを特徴とする請求項4に記載の方法。前記ウイルスは、インフルエンザウイルスであることを特徴とする請求項5に記載の方法。a請求項1から3のうち何れか1項に記載のMDCK細胞を利用して1×104個ないし1×106個cells/mlの接種濃度で無血清細胞培養培地を接種するステップと、b40~100rpmの撹拌速度、6.5~7.5のpH、及び35~100の溶存酸素量DOからなる群から選択される1つ以上の培養条件を維持しながら前記細胞を培養するステップを含み、使い捨て生物反応器システムで前記MDCK細胞を5×106個以上cells/mlの細胞密度に増殖させるステップと、c前記増殖されたMDCK細胞をインフルエンザウイルスで感染させるステップと、dインフルエンザウイルスの複製を許容する条件の下で前記感染された増殖MDCK細胞を培養するステップと、e細胞培養組成物からインフルエンザウイルスを分離するステップとを含むことを特徴とする細胞培養物でインフルエンザウイルスを生産する方法。前記ステップbでは、前記細胞培養物に新鮮な培地の追加または培地を一部除去して新鮮な培地に交換する請求項7に記載の方法。請求項7または8に記載の方法に従って製造されたウイルスまたはウイルス抗原。aATCCCCL‐34として寄託されたMDCK細胞を用意するステップと、b前記MDCK細胞を無血清培地で生長するように適応させるステップと、cステップbで適応された付着性である前記MDCK細胞を無血清培地の中で担体を要さずに浮遊状態で生長するように適応させたMDCK細胞を得るステップとを含む、細胞成長のために血清を要さずに、付着のための担体なしに浮遊培養が可能な細胞株を製造する方法。本発明が解決しようとする課題は、無血清培養及び浮遊培養が可能であるという長所があり、ワクチン用ウイルス増殖に使用可能な元のMDCK細胞株に比べて腫瘍形成能が顕著に低いか全くないMDCK細胞株を提供することである。また本発明は、前記細胞株を利用してウイルス、特にインフルエンザウイルスを生産する方法を提供することである。関連出願の相互参照本出願は、2010年9月6日出願の国際出願PCT/KR2010/006041、及び2011年8月26日出願の韓国特許出願第10‐2011‐0085902号に基づく優先権を主張し、該当出願の明細書および図面に開示された内容は、すべて本出願に援用される。技術的解決手段上記課題を解決するために、本発明は、ATCCCCL‐34として寄託されたMDCKMadinDarbyCanineKidney細胞から誘導され、細胞成長のために血清を要さず、付着のための担体なしに浮遊培養が可能な特定のMDCK細胞株を提供する。前記望ましい特性である無血清培養及び浮遊培養が可能なMDCK細胞株は、以下のようなステップを経て製造できる。具体的に、S1MDCK細胞株を無血清培地に適応させて無血清培養が可能な細胞株を製造し、S2無血清培養が可能な細胞株を担体適応ステップなしに浮遊培養に適応させることで担体なしに浮遊培養が可能な細胞株を選別する方法で製造できる。さらに詳しくは、aATCCCCL‐34として寄託されたMDCK細胞を用意するステップと、b前記MDCK細胞を、化学的に定義された無血清培地で生長するように適応させるステップと、cステップbで適応された付着性である前記MDCK細胞を、化学的に定義された無血清培地の中で担体適応ステップを経ずに浮遊培養適応を誘導することで担体なしに浮遊状態で生長するように適応させたMDCK細胞を製造する方法、及び、このような方法を通じて得られた無血清培養及び浮遊培養が可能なMDCK細胞株を提供する。望ましくは、前記方法を通じて新規で確立された無血清培養及び浮遊培養が可能なMDCK細胞株は、MDCKSky1023DSMACC3112、MDCKSky10234DSMACC3114、及びMDCKSky3851DSMACC3113であり、Braunschweig、Germanyに所在する寄託機関であるDSMZDeutscheSammlungvonMikroorganismenundZellkulturenに2011年1月27日付でそれぞれの寄託番号で寄託した。本発明において、無血清培地という用語は、血清が実質的に添加されていない、本発明による確立細胞株が培養可能な培地を意味し、実質的に添加されていないという用語は、血清を0.5v/v以下含むことを意味し、望ましくは、0.1v/v以下、さらに望ましくは、0.01v/v以下、最も望ましくは、全く含まないことを意味する。特許文献1は、二通りの接近法を使用して無血清培地でMDCK細胞株の浮遊培養を試みた。第1接近法は、スピナーフラスコで直接浮遊培養を試み、この場合、細胞密度が産業化に必要なレベルである10×106cells/mlに逹しなかった。第2接近法の場合、担体培養ステップを経た後、担体不在下で増殖できる細胞株を得た。しかし、本発明では、担体適応ステップを経ずにスピナーフラスコで直接培養を試みて無血清培地で浮遊培養が可能な新規細胞株を確立した。また、特許文献1で確立されたB‐702細胞株の場合、約1週間内に1.0×106cells/mlに逹したが、本発明で確立された細胞株の場合、約3日内に1.0×106cells/ml以上に達しているので、増殖能が遥かに優れている。既存に知られたMDCK細胞株の場合、腫瘍原性に対する多くの報告がある。しかし、本発明では、既存のMDCK細胞株に比べて腫瘍形成能が顕著に減少するか、腫瘍形成能が全く観察されない細胞株を確立した。具体的に、細胞株、細胞破砕物、及び細胞DNAを利用したヌードマウスにおける腫瘍形成能の確認試験結果、本発明で新規で確立されたMDCK細胞株は、既存MDCK細胞株に比べて腫瘍形成能が低いか全くないと示され、このような検証を通じてワクチン生産に使用可能な安全性に優れた細胞株、さらに望ましくは、無血清及び浮遊培養が可能なMDCK細胞株が確立できた。また本発明は、本発明による細胞株を利用してワクチン用ウイルスを製造する方法を提供する。本発明による細胞株を利用して増殖可能なウイルスは、例えば、インフルエンザウイルス、麻疹ウイルス、日本脳炎ウイルス、耳下腺炎ウイルス、風疹ウイルス、ポリオウイルス、HSV‐1、HSV‐2、狂犬病ウイルス、RSウイルス、レオウイルス3型、黄熱ウイルス、パルボウイルス、コクサッキーウイルス、アデノウイルス1型ないし47型、ラッサウイルス、ワクシニアウイルスなどがあり、本発明による細胞株は、このようなウイルスのうちインフルエンザウイルスの生産にさらに適合している。さらに具体的に、本発明は、a本発明によるMDCK細胞を利用して約1×104個ないし約1×106個cells/mlの接種濃度で無血清細胞培養培地を接種するステップと、b約40~100rpmの撹拌速度、約6.5~7.5のpH、及び約35~100の溶存酸素量DOからなる群から選択される1つ以上の培養条件を維持しながら前記細胞を培養するステップを含み、使い捨て生物反応器システムで前記MDCK細胞を約5×106個以上cells/mlの細胞密度に増殖させるステップと、c前記増殖されたMDCK細胞をインフルエンザウイルスで感染させるステップと、dインフルエンザウイルスの複製を許容する条件の下で前記感染された増殖MDCK細胞を培養するステップと、e細胞培養組成物からインフルエンザウイルスを分離するステップとを含むことを特徴とする細胞培養物でインフルエンザウイルスを生産する方法を提供し、望ましくは、本発明のこのような方法は、前記ステップbでは、前記細胞培養物に新鮮な培地の追加または培地を一部除去して新鮮な培地に交換するステップをさらに含む。また本発明は、本発明による方法に従って製造されたウイルスまたはウイルス抗原を提供し、このようなウイルス抗原を含む免疫原性薬学組成物を提供する。本発明は、無血清培養及び浮遊培養が可能であり、腫瘍形成能が低いか全くないという長所のある、ウイルス増殖に効率的に使用可能な新規MDCK細胞株を提供する。また本発明は、このような細胞株を利用してウイルス、特にインフルエンザウイルスを生産する方法を提供する。以下、本発明の理解を助けるために実施例などを挙げて詳しく説明する。しかし、本発明による実施例は多様な形態に変形され得、本発明の範囲が下記実施例に限定されると解釈されてはいけない。本発明の実施例は当業界で平均的な知識を持つ者に本発明をより完全に説明するために提供されるのである。実施例1無血清浮遊培養によるMDCK細胞株の用意MDCK細胞株CCL‐34は、ATCCから分譲を受けた。T‐25フラスコ内の10血清を含むEMEM培地で培養温度37°C、5CO2の条件で培養した。前記細胞を拡張した後、前記培地に無血清培地を50含む培地に培養し、細胞の異常可否を確認した。細胞の成長に異常がない場合、無血清培地を75含む培地で培養し、前記方法を繰り返して100の無血清培地に適応された細胞株を確保した。無血清培養に使われた培地は、例えばEX‐CELLMDCKSigma、UltraMDCKLonza、VP‐SFMInvitrogenなどが挙げられる。無血清培地に適応された細胞株をT‐フラスコで十分拡張した後、スピナーフラスコCorningで浮遊培養適応を始めた。撹拌速度は40~80rpmであり、培養温度37°C、5CO2の条件で培養した。培養培地のpHが低くなるか、細胞が一定レベル以上に成長した場合、培地交換をするか、継代培養をした。3~6ヶ月の浮遊培養適応を経た後の細胞濃度が2×106cells/ml以上となった。細胞の生存率は95以上であり、単一細胞で浮遊培養されることを確認した。浮遊培養に使われた培地は、例えばEX‐CELL302CHOSigma、UltraCHOLonza、SMIF‐6Invitrogenなどが挙げられる。前記方法によって無血清培養及び浮遊培養が可能なMDCK細胞株3種を確保し、それぞれMDCKSky1023、MDCKSky10234、及びMDCKSky3851と命名した。実施例2細胞株の増殖性の評価無血清培養MDCK細胞株を、以下の表1の条件の下で培養し、その増殖性を評価した。対照群としては、10血清を含む培地で成長するMDCK細胞ATCCCCL‐34を使用した。培養開始当時の細胞濃度は、約1.0×105cells/mlであり、継代条件は、細胞濃度が約1×106cells/mlに達したとき、或いは、培養してから3日ないし4日経過後に継代培養を行い、開始細胞濃度は、再び1×105cells/mlに調整した。本発明で作られた無血清MDCK細胞株は、血清培地で成長したMDCK細胞株と比べたとき、同等なレベルの細胞成長率を見せた。実施例3細胞株の増殖形態及び継代安定性の評価無血清培養及び浮遊培養に適応された細胞株3種に対して、スピナーフラスコで連続的に培養し、細胞増殖形態及び継代による安定性を確認した。培養開始細胞濃度は約4×105cells/mlにし、培養してから約3日ないし4日経過後の細胞濃度は約2×106cells/ml以上まで到逹した。培養条件は以下のようである。その結果を図1に示した。開始細胞濃度:4×105cells/ml培養規模:50mlスピナーフラスコスピナーの回転数:60rpm培養条件:37°C、5CO2、湿潤下継代条件:培養してから3~4日経過後実施例4ウイルス増殖評価本発明の前記MDCK細胞を用いて浮遊培養条件でウイルスを増殖させた。本実験に使用されたウイルスは2010/2011年のインフルエンザワクチン株であり、培養条件は以下のようである。細胞濃度:2×106cells/ml培養規模:1000mlスピナーフラスコスピナーの回転数:60rpm培養条件:34°C、5CO2、湿潤下培養期間:3日通常、インフルエンザウイルスを培養するとき、37°Cよりは34°Cでよく増殖されると知られており、これを実験を通じて確認した。また、細胞株を用いたウイルスの培養時、感染のためにトリプシンを培養培地に含ませた。インフルエンザウイルスの力価測定は、血球凝集反応アッセイhemagglutinationassayを施して測定した。3日間培養後、ほとんどの細胞が死滅し、培養上澄液を回収してウイルス力価を測定した。測定結果を下記表2に示した。表2に示すように、ほとんど1024以上のHA力価を示した。このようなウイルスの増殖は、発育中の鶏卵または10血清で培養されたMDCK細胞に似たレベルであった。従って、本発明のMDCK細胞株を用いて無血清及び浮遊培養の状態でウイルスを効率的に製造できることが判明された。実施例5増殖されたウイルスの抗体形成能の確認本発明の前記MDCK細胞で増殖されたインフルエンザウイルスの抗体形成能を確認するために、培養液からウイルスを精製した後マウスに接種して抗体値を確認した。精製工程の流れ図を図2に示し、大枠の精製工程は以下のようである。まず、ウイルス培養液を遠心分離して細胞残存物を除去し、0.45μmサイズのフィルターを利用して濾過した。300kDacut‐offサイズの限外濾過フィルターを利用して濃縮した後、ホルマリンでウイルスを不活化した。その後、ウイルス培養液を、ショ糖密度勾配を利用した超遠心分離を利用してウイルスを分離し、TritonX‐100を処理してウイルスを粉碎した後、限外濾過を通じて濃縮及び洗浄剤を除去し、0.2μmサイズのフィルターで除菌及び濾過することでワクチン原液を獲得した。効力を確認するための動物実験は、本発明のMDCK細胞株であるMDCKSky1023、MDCKSky10234、及びMDCKSky3851の3つの細胞株を利用して増殖されたA/California/07/2009H1N1ウイルス株の精製原液を使用し、対照群としては、08/09年度IVR‐148、NYMCX‐175C、B/Florida/4/2006のインフルエンザワクチンを使用した。試験群は総6群にし、一つの試料当たりにマウス5匹ずつ接種し、抗体値は5匹の血清を合わせてHI試験Hemagglutinationinhibitiontestを施して測定した。試料をマウスに注射する前に、毛細管を利用して眼窩静脈叢から0週次血清を得るために採血した。採血後、マウスの後足にそれぞれ100μlずつ総200μlをIM経路で注射し、2週後、2週次血清を得るために眼窩静脈叢から同一の方法で採血し、0週次に注射した試料を同量で再接種してブースティングさせた。2週後、4週次血清を得るために眼窩静脈叢から採血した。HI試験を施すために、以下のような方法で血清を処理した。マウスから採血して合わせた血清から30μlずつ別途で血清を取ってRDE90μlを入れ、37°Cで18時間以上放置した。RDEを不活化させるために56°Cで30分以上放置した。次いで、0.85の生理食塩水120μlを入れ、ニワトリ赤血球を総量の1/20体積である15μlずつ入れよく浮遊させた後4°Cで1時間放置し、このとき30分おきに沈んだ血球を再浮遊させた。その後、1200rpmで10分間遠心分離した後血清のみを別途分離し、このように得られた血清でHI試験を施して抗体値を測定した。その測定結果を表3に示した。すべての実験群でHI力価が40以上と測定された。すなわち、本発明のMDCK細胞から培養されたウイルスを、既存のワクチンのように動物に注射したとき、ウイルスに対する抗体が形成されることが確認できた。この結果から、本発明のMDCK細胞株がウイルスワクチンの製造に使用可能であることが確認できる。実施例6細胞株に対するヌードマウスにおける腫瘍形成能の確認本発明のMDCKSky1023及びMDCKSky3851細胞株に対する腫瘍形成能を評価するために、細胞株及び細胞来由物質をヌードマウスの皮下に移植した後、12週間にわたって腫瘍の形成を観察した。試験動物としては、BALB/c‐nu/nu系統のマウスを使った。接種サンプルは、細胞細胞数101、103、105、及び107、細胞溶解物細胞数105及び107、細胞DNA細胞数105及び107であり、各群当たり5~10匹ずつ接種した。実験結果は、表4に示し、本発明のMDCKSky1023及びMDCKSky3851細胞株の場合、内部対照群である元のMDCKATCC細胞株に比べて、腫瘍形成能が低いか全くないと確認された。