眼球乾燥症、膣乾燥及び口腔灼熱症候群から選択される疾患の治療用又は予防用医薬品を製造するためのTRPM8アゴニスト又はその組み合わせの使用。前記疾患が眼球乾燥症である、請求項1に記載の使用。前記アゴニストがTRPM8活性化により冷感受性線維による涙液分泌の刺激を増加させる、請求項2に記載の使用。前記TRPM8アゴニストが表1に記載されたアゴニストから選択される、請求項1~3のいずれか1項に記載の使用。前記TRPM8アゴニストがWS-5エチル3-、CPS369、CPS368、CPS125、フレスコラートMGA-2異性体、クーリングエージェント10、-イソプレゴールクールアクトP、比率約62:38の-シス及び-トランスp-メンタン-38-ジオールクールアクト38D、-クベボール、ハセガワ製冷却化合物、IFF製新GRAS冷却物質、イシリン、5-メチル-4--3-2H-フラノン、45-ジメチル-3--25H-フラノン、4-メチル-3--25H-フラノン、N-エチル-p-メンタン-3-カルボキサミド、WS-112-イソプロピル-5-メチル-シクロヘキサンカルボン酸-アミド、WS-122-イソプロピル-5-メチル-シクロヘキサンカルボン酸-アミド、WS-142-イソプロピル-5-メチル-シクロヘキサンカルボン酸tert-ブチルアミド、WS-232-イソプロピル-N-23-トリメチルブチルアミド、WS-302-イソプロピル-5-メチル-シクロヘキサンカルボン酸エステル23-ジヒドロキシ-プロピル、WS-1481--へプタン、メントール、ゲラニオール、リナロール、ユーカリプトール、ヒドロキシル-シトロネラール、PMD-38p-メンタン-38-ジオール、TRPM8特異的アゴニスト抗体、及び構成的に活性なTRPM8変異体から選択される、請求項4に記載の使用。少なくとも1種のTRPM8アゴニストと、眼球乾燥症、膣乾燥及び口腔灼熱症候群から選択される1又は2以上の疾患の治療に有用な少なくとも1種の薬物と、必要に応じ、医薬として許容されるビヒクルと、を含む組成物。眼球乾燥症、膣乾燥及び口腔灼熱症候群から選択される1又は2以上の疾患の治療用医薬品を製造するための請求項6に記載の組成物の使用。前記TRPM8アゴニストが表1に示すTRPM8アゴニストから選択される、請求項6又は7に記載の組成物又は使用。前記TRPM8アゴニストがTRPM8アゴニスト及び/又はメントール若しくはその誘導体でないアゴニストから選択される、請求項6に記載の組成物又は請求項7若しくは8に記載の使用。前記TRPM8アゴニストがWS-5エチル3-、CPS369、CPS368、CPS125、フレスコラートMGA-2異性体、クーリングエージェント10、-イソプレゴールクールアクトP、比率約62:38の-シス及び-トランスp-メンタン-38-ジオールクールアクト38D、-クベボール、ハセガワ製冷却化合物、IFF製新GRAS冷却物質、イシリン、5-メチル-4--3-2H-フラノン、45-ジメチル-3--25H-フラノン、4-メチル-3--25H-フラノン、N-エチル-p-メンタン-3-カルボキサミド、WS-112-イソプロピル-5-メチル-シクロヘキサンカルボン酸-アミド、WS-122-イソプロピル-5-メチル-シクロヘキサンカルボン酸-アミド、WS-142-イソプロピル-5-メチル-シクロヘキサンカルボン酸tert-ブチルアミド、WS-232-イソプロピル-N-23-トリメチルブチルアミド、WS-302-イソプロピル-5-メチル-シクロヘキサンカルボン酸エステル23-ジヒドロキシ-プロピル、WS-1481--へプタン、メントール、ゲラニオール、リナロール、ユーカリプトール、ヒドロキシル-シトロネラール、PMD-38p-メンタン-38-ジオール、TRPM8に特異的なアゴニスト抗体、及び構成的に活性なTRPM8変異体から選択される、請求項9に記載の使用又は組成物。流涙症の治療用医薬品を製造するためのTRPM8アンタゴニストの使用。前記流涙症が、グレーブス-バセドウ病、角膜腫瘍、アッカーマン症候群、アレルギー動物、花粉等、細菌性結膜炎、眼瞼炎、顔面神経麻痺、外反症、又は鼻涙管若しくは涙嚢の障害から選択される疾患と関連する、請求項11に記載の使用。前記アンタゴニストがTRPM8不活性化によって冷感受性線維による涙液分泌の刺激を低減する、請求項11又は12に記載の使用。前記TRPM8アンタゴニストが表3に示すTRPM8アンタゴニストから選択される、請求項11~13のいずれか1項に記載の使用。前記TRPM8アンタゴニストが、TRPM8をコードする遺伝子の配列に特異的なアンチセンスオリゴヌクレオチド、TRPM8配列に特異的なDNA酵素、TRPM8をコードする遺伝子に特異的なマイクロRNA、TRPM8をコードする遺伝子の配列に特異的なリボザイム、TRPM8をコードする遺伝子の配列に特異的な干渉RNA、TRPM8に特異的に結合してその活性を阻害する能力を有するペプチド、TRPM8に特異的に結合してこのチャネルの活性を阻害する能力を有する抗体、BCTCN--4-テトラヒドロピラジン-1-カルボキサミド、CTPC-4--2-メチル-N-4-フェニル-1-ピペラジン-カルボキサミド、チオ-BCTCN-4-テトラヒドロピラジン-1-カルボキサミド、SB-452533N--N’-アミノエチルウレア、SKF963651-2--2-3-プロポキシエチル-1H-イミダゾール、エコナゾール1-2-メトキシ-2-エチル-1H-イミダゾール、クロトリマゾール1-ジフェニルメチル-1H-イミダゾール、ACAN-アントラニル酸、AMTBN--2-メチルオキシ-N--ベンズアミド、カプサゼピンN-2-エチル-1345-テトラヒドロ-78-ジヒドロキシ-2H-2-ベンズアゼピン-2-カルボチオアミド、フェナントロリン、MAD1dN--2-イソプロピル-5-メチルシクロヘキシルビフェニル-4-カルボキサミド、MAD2e4-tert-ブチルフェニル-2-イソプロピル-5-メチルシクロヘキシルカルバメートからなる群より選択される、請求項14に記載の使用。少なくとも1種のTRPM8アンタゴニストと、流涙症の治療に有用な少なくとも1種の薬物と、必要に応じ、医薬として許容されるビヒクルと、を含む組成物。流涙症の治療用医薬品を製造するための請求項16に記載の組成物の使用。前記流涙症が、グレーブス-バセドウ病、角膜腫瘍、アッカーマン症候群、アレルギー動物、花粉等、細菌性結膜炎、眼瞼炎、顔面神経麻痺、外反症、又は鼻涙管若しくは涙嚢の障害から選択される疾患と関連する、請求項17に記載の使用。前記TRPM8アンタゴニストが表3に示すTRPM8アンタゴニストから選択される、請求項16に記載の組成物又は請求項17若しくは18に記載の使用。前記TRPM8アンタゴニストが、TRPM8をコードする遺伝子の配列に特異的なアンチセンスオリゴヌクレオチド、TRPM8配列に特異的なDNA酵素、TRPM8をコードする遺伝子に特異的なマイクロRNA、TRPM8をコードする遺伝子の配列に特異的なリボザイム、TRPM8をコードする遺伝子の配列に特異的な干渉RNA、TRPM8に特異的に結合してその活性を阻害する能力を有するペプチド、TRPM8に特異的に結合してこのチャネルの活性を阻害する能力を有する抗体、BCTCN--4-テトラヒドロピラジン-1-カルボキサミド、CTPC-4--2-メチル-N-4-フェニル-1-ピペラジン-カルボキサミド、チオ-BCTCN-4-テトラヒドロピラジン-1-カルボキサミド、SB-452533N--N’-アミノエチルウレア、SKF963651-2--2-3-プロポキシエチル-1H-イミダゾール、エコナゾール1-2-メトキシ-2-エチル-1H-イミダゾール、クロトリマゾール1-ジフェニルメチル-1H-イミダゾール、ACAN-アントラニル酸、AMTBN--2-メチルオキシ-N--ベンズアミド、カプサゼピンN-2-エチル-1345-テトラヒドロ-78-ジヒドロキシ-2H-2-ベンズアゼピン-2-カルボチオアミド、フェナントロリン、MAD1dN--2-イソプロピル-5-メチルシクロヘキシルビフェニル-4-カルボキサミド、MAD2e4-tert-ブチルフェニル-2-イソプロピル-5-メチルシクロヘキシルカルバメートからなる群より選択される、請求項19に記載の組成物又は使用。第一態様では、本発明は、眼球乾燥症、膣乾燥及び口腔灼熱症候群から選択される疾患の治療用又は予防用医薬品を製造するためのTRPM8アゴニスト又はそれらの組み合わせの使用に関する。第二態様では、本発明は、少なくとも1種のTRPM8アゴニストと、眼球乾燥症、膣乾燥及び口腔灼熱症候群から選択される疾患の1又は2以上の治療に有用な少なくとも1種の薬物と、必要に応じて医薬として許容されるビヒクルとを含む組成物に関する。第三態様では、本発明は、流涙症の治療用医薬品を製造するためのTRPM8アンタゴニストの使用に関する。別の態様では、本発明は、少なくとも1種のTRPM8アンタゴニストと、流涙症の治療に有用な少なくとも1種の薬物と、必要に応じ、医薬として許容されるビヒクルとを含む組成物に関する。驚くべきことに、本発明の発明者らは、TRPM8受容体が流涙の制御に関与し、それらのアゴニストを用いたTRPM8受容体の活性化が流涙の増加を生じることを発見した。具体的には、本発明の発明者らは、哺乳動物において角膜を神経支配する低温受容器が、通常の角膜温度で持続性発火活動を維持し、瞬きと乾燥環境への曝露の間との間隔に生じる角膜前涙液層の蒸発に起因するもののような眼表面における小さな熱変化に著しく敏感であることを報告している。この著しい冷感受性は、自発的定常活動及び寒冷に応答する発火の頻度の増加を臨界的に決定するTRPM8チャネルの高発現の結果である。更に、本発明者らは、遺伝子技術を用いたTRPM8チャネルの除去がマウスにおける涙液分泌を半減させることを示している。角膜加熱による部分的サイレンシングもヒトにおける涙液分泌を低減する。従って、TRPM8は、陸生動物の露出した眼表面の神経支配する低温受容器神経線維における水分の検出のための分子候補である。本願で与えるデータ実施例1を参照のことは、温度感受性角膜神経終末において、TEPM8が涙の生成をもたらす自発活動及び低温誘発活動の双方の発達にとって重要であることを示す。従って、TRPM8の刺激は、TRPM8の活性化によって冷感受性繊維による涙液分泌の刺激を増加させる。従って、本発明は、様々な治療薬の使用による眼球乾燥症、膣乾燥及び口腔灼熱症候群の治療に関する。更に、本発明の発明者らによって得られた結果は、TRPM8受容体を阻害する様々な薬剤の使用による過剰な流涙流涙症の治療への道を開く。[TRPM8アゴニストの治療的使用]このように、本発明は、眼球乾燥症、膣乾燥及び口腔灼熱症候群から選択される疾患の治療用又は予防用医薬品を製造するためのTRPM8アゴニスト又はそれらの組み合わせの使用に関する。寒冷及びメントール受容体1すなわちCMR1としても知られるTRPM8受容体すなわち一過性受容器電位カチオンチャネルサブファミリーMメンバー8は、ヒトのTROM8遺伝子によってコードされるタンパク質であるClaphamDEら著、2005年、PharmacologicalReviews57:42750。TRPM8は、活性化された後にナトリウムイオンNa及びカルシウムイオンCa2を細胞内に侵入させることができ、よってその細胞の脱分極を引き起こし、膜電位に変化をもたらすイオンチャネルである。TRPM8タンパク質は、感覚ニューロンで発現され、低温およそ26°Cより下により、メントールのような化学物質により、また電位により活性化される。TRPM8は前立腺、肺、膀胱でも発現される;これらの器官におけるその機能は知られていない。ヒトTRPM8遺伝子は第2染色体の2p37.1領域に位置し;1104アミノ酸のタンパク質NP_076985.4、配列番号1のコードはヌクレオチドNM_024080.4配列番号2の配列によってコードされる。TRPM8遺伝子はC末端及びN末端が細胞質側にある6個の膜貫通セグメントを有する。4個のサブユニットは四量体化して活性なチャネルを形成する。本明細書中で用いるTRPM9という用語は、ヒトの遺伝子及びタンパク質だけに関するわけではなく、イヌXP_543296.2、マウスNP_599013.1、ラットNP_599198.2等のような他の種のオーソログにも関する。治療するtreating又は治療treatmentという単語は、その目標が眼、膣又は口の乾燥のような望ましくない生理学的変化又は障害を予防する又は止める軽減することである、治療的及び予防的な治療手段又は予防手段の双方を示す。本発明の目的について、有益な又は望ましい臨床成果としては、限定しないが、検出可能及び検出不可能双方の、症状緩和、疾患の程度の軽減、安定した病態具体的には、悪化しない、疾患の進行の遅延又は停止、病態の改善又は緩和、及び寛解部分的及び全体的の両方が挙げられる。治療を必要としている対象者は、既に前記疾患若しくは傷害を患っている対象者だけでなく、前記疾患若しくは傷害を患う疑いのある対象者又は疾患若しくは傷害を予防すべき対象者も含む。治療方法は、この治療を必要としている対象者に対する本発明のTRPM8アゴニストを含む医薬組成物の投与として定義される。眼球乾燥症すなわちドライアイ症候群は、本発明において、結膜の持続的乾燥及び角膜の混濁によって特徴付けられる疾患として定義される。数多くの原因が眼球乾燥症を引き起こし、これは年配の人々に多くみられる。中でも、眼球乾燥症を引き起こす原因及び疾患は、次の通りである:ビタミンA欠乏、シェーグレン症候群、関節リウマチ及び他のリウマチ様疾患、化学火傷又は熱傷、アテノロール、クロロフェニラミン、ヒドロクロロチアジド、イソトレチノイン、ケトロラック、ケトチフェン、レボカバスチン、レボフロキサシン、オキシブチニン、トルテロジンのような薬物。従って、特定の実施形態では、眼球乾燥症は、ビタミンA欠乏、シェーグレン症候群、関節リウマチ及び他のリウマチ様疾患、化学火傷又は熱傷、アテノロール、クロロフェニラミン、ヒドロクロロチアジド、イソトレチノイン、ケトロラック、ケトチフェン、レボカバスチン、レボフロキサシン、オキシブチニン、トルテロジンのような薬物に関連する。膣乾燥は、膣で生成される体液量の減少として定義される。この乾燥は、性交渉の間の痛みに加え、生殖器領域における痒み、刺激及び灼熱感のような不快感を引き起こし得る。この潤滑の欠如は、器質的原因又は精神的原因により得る。器質的原因の中でも、最も一般的なのは、例えば、更年期の間のエストロゲン量の不足である。膣乾燥をもたらす他の原因は、膣組織の感染症である膣炎、又は糖尿病である。膣の潤滑が減少し得る糖尿病の女性の場合、特に血糖の制御が不完全な女性の場合、この潤滑の欠如は2つの合併症:性的刺激への応答を減少させ得る神経症;及び膣壁における血流を制限し潤滑流の量を減少させる血管損傷に関連し得る。考えられる別の要因はストレスであり、これが血液中のコルチゾールの放出の増加を引き起こし、次に他のホルモンの不均衡を引き起こす。喫煙もエストロゲンの機能を妨げ、よって、膣の潤滑を減少させ得る。同様の影響がアルコール及び大麻の作用によって起こり得る。避妊ピル又は乳癌、卵巣癌若しくは子宮癌の治療に用いられる薬物のような幾つかのホルモン薬は、膣乾燥を引き起こし得る。三環系抗うつ薬、幾つかの抗潰瘍薬又は幾つかの降圧剤は、膣分泌物の減少を副作用として有し得る。また、この問題を引き起こしうる他の薬物は抗ヒスタミン剤である。従って、好ましい実施形態では、膣乾燥が、エストロゲン量の不足、糖尿病、ストレス又はアルコール摂取に関連し、大麻又は乳癌、卵巣癌若しくは子宮癌の治療に用いられる薬物のような薬物は膣乾燥を引き起こし得る。三環系抗うつ薬、抗潰瘍薬、降圧剤又は抗ヒスタミン剤もそうである。本発明において口腔灼熱症候群は、口腔痛と呼ばれる疾患を意味する。この疾患は、複数の原因による。鉄、葉酸又はビタミンB12を供給する幾つかの野菜又は肉の不適切な摂取は、この口腔灼熱症候群をもたらす鉄欠乏性貧血の一因となり得る。更に、甲状腺機能低下症若しくは糖尿病のような幾つかの内分泌疾患、又は胃食道逆流のような消火器疾患も口腔灼熱症候群の一因となる。この疾患の発生に影響する別の問題は、βブロッカー、降圧剤及び抗糖尿病薬のような幾つかの薬物の慢性使用である。好ましい特定の実施形態では、疾患が眼球乾燥症である。本発明では、TRPM8受容体アゴニストは、TRPM8受容体に特異的に結合し、結合すると、TRPM8チャネルの活動の増加を引き起こし得る、すなわち、細胞の脱分極を引き起こす前記チャネルによるナトリウム及びカルシウム流量を増加させるいずれかの分子として定義される。これらアゴニストは、冷感受性線維による涙液分泌の刺激を増加させる。本発明の実施例で述べられる全細胞パッチクランプ電気生理学的検査実施例1を参照のこと、カルシウム顕微鏡法Boddingら著、2007年、CellCalcium42618―628並びに蛍光定量イメージングプレートリーダーアッセイBehrendtら著、2004年、JPharmacol141737―745等のような、TRPM8受容体アゴニストの活性を検出するのに利用可能な多種多様の研究が存在する。本発明での使用に適当なTRPM8受容体アゴニストの例としては、限定しないが、表1に記載する分子が挙げられる。特定の実施形態では、本発明の第一の使用に用いるアゴニストが、WS-5エチル3-、CPS369、CPS368、CPS125、フレスコラートMGA-2異性体、クーリングエージェント10、-イソプレゴールクールアクトP、比率約62:38の-シス及び-トランスp-メンタン-38-ジオールクールアクト38D、-クベボール、ハセガワ製冷却化合物、IFF製新GRAS冷却物質、イシリン、5-メチル-4--3-2H-フラノン、45-ジメチル-3--25H-フラノン、4-メチル-3--25H-フラノン、N-エチル-p-メンタン-3-カルボキサミド、WS-112-イソプロピル-5-メチル-シクロヘキサンカルボン酸-アミド、WS-122-イソプロピル-5-メチル-シクロヘキサンカルボン酸-アミド、WS-142-イソプロピル-5-メチル-シクロヘキサンカルボン酸tert-ブチルアミド、WS-232-イソプロピル-N-23-トリメチルブチルアミド、WS-302-イソプロピル-5-メチル-シクロヘキサンカルボン酸エステル23-ジヒドロキシ-プロピル、WS-1481--へプタン、メントール、ゲラニオール、リナロール、ユーカリプトール、ヒドロキシル-シトロネラール、PMD-38p-メンタン-38-ジオール、TRPM8特異的アゴニスト抗体、及び構成的に活性なTRPM8変異体、又はそれらの組み合わせから選択されるアゴニストである。好ましい実施形態では、本発明の第一の使用に用いるアゴニストがメントール又はその誘導体と異なるアゴニストである。従って、好ましい実施形態では、TRPM8アゴニストが、イシリン、AG3-5、WS-23、WS-148、ヒドロキシル-シトロネラール、5-メチル-4--3-2H-フラノン、45-ジメチル-3--25H-フラノン及び4-メチル-3--25H-フラノンから選択される。より好ましい実施形態では、本発明の第一の使用に用いるアゴニストが表1の化合物1~4WS-5、CPS369、CPS368、CPS125、化合物19WS-12、BeckaB著、2007年、CellCalcium41:285―294及びTRPM8アゴニスト抗体から選択される特異的TRPM8アゴニストである。別の好ましい実施形態では、前記アゴニストが、クーリングエージェント10、フレスコラートMGA、フレスコラートML、CPS-369、CPS-113、WS-23、WS-11、WS-30、WS-148、WS-3、WS-12及びイシリンのような7より低いEC50を有するもの表2を参照のことから選択される。特異的アゴニストは、本発明において、同一ファミリーの他のチャネルを活性化することなくTRPM8を活性化するか、又は同一ファミリーの他のチャネルの少なくとも50倍、100倍、1000倍、2000倍の効力でTRPM8を活性化するアゴニストとして定義される。TRPM8アゴニストの特異性を測定するのに用いることができる方法は、電気生理学的方法、カルシウム顕微鏡法等のような、化合物のアゴニスト活性を測定するため先に説明した方法と同様である。TRPM8受容体アゴニスト抗体本発明で用いるTRPM8アゴニストは、TRPM8アゴニスト抗体、又はTRPM8受容体、より具体的にはTRPM8受容体の細胞外ドメインに特異的に結合してその活性化を誘導することができるTRPM8アゴニスト抗体の断片とすることができる。アゴニスト抗体は、ヒトTRPM8受容体又は相同なTRPM8受容体のオーソログに特異的に結合して活性化することができる。従って、特定の実施形態では、TRPM8受容体アゴニストは、IgG、IgM、IgA、IgD及びIgEのようないずれかのクラス又はサブクラスのものであり得るTRPM8抗受容体アゴニスト抗体である。特定の実施形態では、これらTRPM8抗受容体アゴニスト抗体の少なくとも一つがIgG-2A型免疫グロブリンである。本発明では、抗体という単語を、幅広く解釈しなければならず、関連抗原を認識することができ、TRPM8受容体若しくはこの受容体の細胞外ドメインに特異的に結合することができることを条件として、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、多選択性抗体、及びそれらの断片F2、Fabを包含する。本発明内で用いることができる抗体の例は、例えば、限定されないが、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、組み換え抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、完全なヒト抗体等である。本発明では、TRPM8受容体アゴニスト抗体を、TRPM8受容体又はこの受容体の細胞外ドメインに特異的に結合して、チャネルによるナトリウム及びカルシウム流量の増加を生じるようにチャネルの活性化を誘導することができる抗体として定義する。アゴニスト抗体の検出に適する方法は、上で詳細に説明したようなTRPM8を活性化する能力に基づき、本発明によるアゴニストの治療的使用の範囲内である。ポリクローナル抗体は、本来は、抗体で免疫した動物の血清中に生成した抗体分子の異種混合物である。これらは、例えば、関連抗原の単一エピトープのペプチドを用いたカラムクロマトグラフィーによって、前記異種混合物から得られる単一特異性ポリクローナル抗体も含む。モノクローナル抗体は、抗体の単一エピトープに特異的な抗原の相同な集団である。これらモノクローナル抗体は、例えば、Koehler及びMilsteinの論文[Nature1975年、256:495―397]又はHarlow及びLaneの著書[UsingAntibodiesALaboratoryManualfromEHarlowandDLaneEditor:ColdSpringHarborLaboratoryPressColdSpringHarborNewYork;1998年]で既に報告された従来技術によって調製することができる。キメラ抗体は、異なる動物種由来の抗体のクローン化又は組み換えによって構築したモノクローナル抗体である。本発明の典型的であるが限定しない構成において、キメラ抗体は、抗原を認識し結合する部位を含むモノクローナル抗体の一部分、一般には可変領域Fvと、ヒト抗体に対応する他の部分、一般には、定常領域及び定常領域隣接領域を含む部分とを含む。完全ヒト抗体は、ヒト免疫系を有するトランスジェニック動物で、又はヒト免疫細胞の生体外免疫によってアジュバントを使用して若しくは不使用で、純粋な抗原若しくは純粋でない抗原による、遺伝的及び伝統的な免疫の両方を含むか;又は、免疫系への抗原曝露のいずれかの方法によって、又はヒト免疫細胞から作製した天然/合成ライブラリによって作製される1種又は複数種の抗体である。これら抗体を、ヒト免疫グロブリンの遺伝子をクローン化して標的抗原で本発明では、TRPM8受容体で免疫したトランスジェニック動物例えば、マウスから得て、選択することができる。これら抗体は、ファージディスプレイで与えられた一本鎖scFv若しくは抗原結合Fab可変ヒト領域の選択とそれに続くクローン化及びヒト抗体でのグラフト化によって、又は当業者に既知のいずれかの、両鎖の可変領域のクローン化及びそれに続く抗体ライブラリを形成するための前記両鎖の可変領域の組み合わせ/変異によって形成されたライブラリの生成及びディスプレイ法によって、得ることができる。ヒト化抗体は、マウスモノクローナル抗体の相補性決定超可変領域CDRのクローン化及びヒト抗体におけるそれ自体のCDR超可変領域に代えたグラフト化によって構築されるモノクローナル抗体である。従って、本発明の組成物の特定の実施形態では、少なくとも1種のTRPM8抗受容体抗体がヒト化抗体である。TRPM8受容体に特異的なアゴニスト抗体の例は、MahieuFら2007年、JBiolChem282:3325―36及びObataKら2005年、JClinInvest115:23932401によって報告されている。加えて、本発明の文脈上、抗体という用語は、国際公開第2006088447号で開示されるような弱められたグリコシル化パターンを有する変異体の他に、タンパク質から又は組み換え技術によって得られた糖化又は非糖化抗体断片であって、i結合ペプチドにより互いに結合した抗体の可変領域scFv、iiシステインにより若しくはペプチドとジスルフィド結合とを結合することにより軽鎖と結合した重鎖FdのCH1定常領域と一緒になった前記可変領域scFab、iii重鎖単独のような、新たな変異体、又はivそれらをより類似させる若しくは免疫原性をより少なくする若しくは体液中でより安定にする目的で前記抗体断片からなりTRPM8受容体の活性化を引き起こす能力を有する変異型、を含むものも含む。本発明で開示するTRPM8受容体アゴニスト抗体は、通常の遺伝子工学若しくは組み換え工学技術によって、通常の抗体産生技術によって、通常の体液若しくは生物組織からの抽出及び精製技術によって、又はタンパク質及び抗体を得るための当業者に広く知られた他の通常の技術によって得ることができる。TRPM8受容体アゴニストが抗体である場合、それらの作製に特に次のものを用いることができるが、これはいかなる限定も伴わない:ヒト免疫グロブリン遺伝子に対するトランスジェニック動物、ハイブリドーマによるモノクローナル抗体の産生、天然の、合成の若しくは関連抗原に対して免疫した生物に由来し得る抗体ライブラリであって、非常に異なるディスプレイ法ファージディスプレイ、リボソームディスプレイ等とそれに続く再設計し得る遺伝子工学技術によって選択され、異なるサイズ、構成及び構造の組み換え抗体の産生用に設計されたベクターで発現される抗体ライブラリによる産生を含む、動物における免疫技術。抗体の産生及び精製のための主な方法の概説は、例えば、次のものに見出すことができる:SDuebel著治療用抗体のハンドブックHandbookofTherapeuticAntibodies、出版社:Wiley-VCH、2007年、Vol:IaIII;G.Subramanian編抗体:第1巻:産生及び精製Antibodies:Volume1:ProductionandPurification、出版社:Springer、第1版、2004年;G.Subramanian編抗体:第2巻:新規な技術及び治療的使用Antibodies:Volume2:NovelTechnologiesandTherapeuticUse、出版社:Springer、第1版、2004年;J.Sambrook及びD.W.Russel編分子クローニング:実験室マニュアルMolecularCloning:aLaboratorymanual、出版社:ColdSpringHarborLaboratoryPress、第3版、2001年。より具体的には、TRPM8受容体に特異的に結合する抗体を産生する及び得るために、国際公開第98/16249号公報、国際公開第2004/010947号公報、米国特許出願公開第2004/0109847号公報及び米国特許出願公開第2005/0013811号公報に開示された方法のいずれかを用いることができ、その内容は参考として完全に援用される。TRPM8の構成的に活性な変異体本発明において、TRPM8アゴニストは、TRPM8受容体の構成的に活性な変異体又はそれらの機能的に等価な変異体も包含する。TRPM8受容体の構成的に活性な変異体は、細胞内で発現された場合、天然TRPM8のサブユニットと継続的に活性化したチャネルをもたらすこの構成的に活性な変異体のサブユニットとから形成される混合TRPM8チャネルを生じる、TRPM8配列由来のペプチド配列として定義される。TRPM8受容体の構成的に活性な変異体の機能的に同等な変異体は、本発明において、配列が、TRPM8受容体の構成的に活性な変異体の配列の1又は複数個のアミノ酸の挿入、置換又は欠失によって得ることができ、構成的に活性化されたチャネルを形成する能力の少なくとも一部を維持するペプチドとして定義される。チャネルが構成的に活性であるか否かを証明するため、上述したような電気生理学的技術を用いることができる。好ましくは、4-1BBの天然リガンドの変異体は、このリガンドとの少なくとも50、少なくとも60、少なくとも70、少なくとも80、少なくとも90、少なくとも91、少なくとも92、少なくとも93、少なくとも94、少なくとも95、少なくとも96、少なくとも97、少なくとも98又は少なくとも99の配列同一性を有する。変異体と天然リガンドとの間の同一性の度合いの決定は、当業者に周知の方法及びコンピュータアルゴリズムを用いて行う。好ましくは、2つのアミノ酸配列の間の同一性は、BLASTPアルゴリズムBLASTManual、AltschulSら、NCBINLMNIHBethesdaMd20894;AltschulSら著、JMoIBiol、215:403―4101990年を用いて決定される。タンパク質の機能性にとって重要でない位置のアミノ酸の保存的置換をもたらすTRPM8受容体の構成的に活性な変異体の機能的に等価な変異体のヌクレオチド配列における変異は、その全体的な構造又はその機能性に影響を及ぼさない進化的な中立突然変異であることを、当業者は理解するであろう。本発明の第一組成物当業者により理解されるように、TRPM8アゴニストを、眼球乾燥症、膣乾燥及び口腔灼熱症候群の治療に有用な他の薬物と組み合わせて用いることができる。従って、別の態様では、本発明は、少なくとも1種のTRPM8アゴニストと、眼球乾燥症、膣乾燥及び口腔灼熱症候群から選択される1つ以上の疾患の治療に有用な少なくとも1種の薬物と、必要に応じ、医薬として許容されるビヒクルと、を含む組成物に関する。本発明の組成物での使用に適するTRPM8アゴニスト及び医薬として許容されるビヒクルは、これまでに報告されている。眼球乾燥症の治療に有用な薬剤は、特に、コルチコイド、ビタミンA、ピロカルピン、ヒプロメセルロース溶液、カルボマーゲル、シクロスポリン、並びにグリセロール、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、ヒアルロン酸、ひまし油又はミネラルオイルを含有する潤いを与えるための点眼薬である。膣乾燥の治療に有用な薬剤としては、特に、水性基剤の潤滑剤、ビタミンE、エストロゲン、アグリコン型イソフラボン、ヒアルロン酸、ラロキシフェンのようなエストロゲン受容体の選択的モジュレータ等が挙げられる。口腔灼熱症候群の治療に有用な薬剤としては、特に、カプサイシン、ナイスタチンマイコスタチン又はフルコナゾールジフルカン、ガバペンチンニューロンチンのような抗痙攣薬、クロナゼパムクロノピンのようなベンゾジアゼピン類の系統の鎮痛薬、アミトリプチン、メキシレチン、ラモトリジン、フェニトイン、N-フェニルエチルアミトリプチリン、デシプラミン、ガバペンチン又はノルトリプチリンパメロール、アベンチルのような、抗うつ薬、抗てんかん薬及び抗痙攣薬が挙げられる。本明細書で用いるように、医薬として許容されるビヒクルは、保存剤、賦形剤、担体、湿潤剤、結合剤、崩壊剤、緩衝剤のような本発明の組成物中に存在することができる添加剤を包含する。これら添加剤は、例えば、炭酸マグネシウム、炭酸カルシウム、カルボキシメチルセルロース、デンプン類、糖類、ガム類、ステアリン酸マグネシウム若しくはステアリン酸カルシウム、着色物質、又は着香剤とすることができる。医薬剤形について医薬として許容される多種多様な添加剤が存在し、適当な添加剤の選択は医薬製剤の分野の当業者にとって通例の事柄である。別の実施形態では、本発明は、眼球乾燥症、膣乾燥及び口腔灼熱症候群から選択される1又は2以上の疾患の治療用医薬品を製造するための本発明の第一組成物の使用に関する。別の実施形態では、本発明は、眼球乾燥症、膣乾燥及び口腔灼熱症候群から選択される1又は2以上の疾患の治療のための本発明の第一組成物に関する。別の実施形態では、本発明は、本発明の第一組成物の対象者への投与を含む、この対象者における眼球乾燥症、膣乾燥及び口腔灼熱症候群から選択される1又は2以上の疾患の治療法に関する。本発明の前記組成物の投与は、例えば、静脈内、腹腔内、皮下、筋肉内、局所、皮内、鼻腔内又は気管支内といった様々な経路で行うことができ、標的部位に対して局所的に又は全身的に又は直接的に投与することができる。活性物質の様々な投与経路、用いられる賦形剤及び製造手法の概説は、TratadodeFarmaciaGale ́nicaCFaulli ́iTrilloLuza ́n5SAdeEdiciones、1993年及びRemington’sPharmaceuticalSciences20版、WilliamsWilkinsPAUSAに見出すことができる。投与計画は、医師によって、臨床学的因子により定められるであろう。医学で周知のように、用量は、患者の身体的特徴年齢、背格好、性別、用いる投与経路、疾患の重症度、用いる個々の化合物、及び対象の薬物動態特性等の数多くの要因に左右される。本発明の前記組成物は、広範であるが常に治療上有効量である範囲内で異なり得る量のTRPM8アゴニスト薬剤を含有することができる。本発明において、治療上有効量は、患者において流涙、膣分泌又は唾液分泌の増加を引き起こすのに充分な量のTRPM8受容体アゴニストとして定義される。従って、本発明の前記組成物は、0.1~2000mg、好ましくは0.5~500mg、より一層好ましくは1~200mgの範囲である量のTRPM8受容体アゴニストを含有することができる。前記組成物の適当な用量は、体重1kgあたり0.01~100mg、好ましくは体重1kgあたり0.1~50mg、より好ましくは体重1kgあたり0.5~20mgの範囲であり得る。前記組成物を1日に可変の回数、特に1日1~4回服用で投与することができる。当業者が理解するように、TRPM8アゴニストと眼球乾燥症、膣乾燥及び口腔灼熱症候群から選択される1つ以上の疾患の治療に有用な薬物との双方は、医薬として許容されるビヒクル中に存在することができる。本発明での使用に好ましい賦形剤又はビヒクルとしては、糖類、デンプン類、セルロース類、ガム類及びタンパク質類が挙げられる。特定の実施形態では、本発明の医薬組成物は、固体例えば、錠剤、カプセル剤、ロゼンジ剤、顆粒剤、坐剤、再構成して液体形態等として提供することができる無菌結晶性若しくは無定形固体、液体例えば、液剤、懸濁剤、エマルション、エリキシル剤、ローション剤、軟膏剤等又は半固体ゲル、軟膏剤、クリーム及び同様のものの医薬剤形に製剤化されるであろう。本発明の医薬組成物は、限定しないが、経口、静脈内、筋肉内、動脈内、脊髄内、髄腔内、脳室内、経皮、皮下、腹腔内、鼻腔内、腸内、局所、舌下又は直腸内等のいずれかの経路によって投与することができる。活性物質の様々な投与経路、用いられる賦形剤及び製造手法の概説は、TratadodeFarmaciaGale ́nicaCFaulli ́iTrilloLuza ́n5SAdeEdiciones1993年及びRemington’sPharmaceuticalSciences、20版、WilliamsWilkinsPAUSAに見出すことができる。当業者が理解するように、少なくとも1種のTRPM8受容体アゴニストを含む本発明の組成物は、用いる投与経路に従って製剤化されるであろう。従って、特定の実施形態において、少なくとも1種のTRPM8受容体アゴニストを含む本発明の組成物は、眼内投与に対して適切に製剤化されるであろう。別の特定の実施形態では、少なくとも1種のTRPM8受容体アゴニストを含む本発明の組成物は、膣内投与に対して適切に製剤化されるであろう。別の特定の実施形態では、少なくとも1種のTRPM8受容体アゴニストを含む本発明の組成物は、口内投与に対して適切に製剤化されるであろう。特定の実施形態では、本発明の第一の使用に用いられるアゴニストが、クールアクト38D、-クベボール、ハセガワ製冷却化合物、IFF製新GRAS冷却物質、イシリン、5-メチル-4--3-2H-フラノン、45-ジメチル-3--25H-フラノン、4-メチル-3--25H-フラノン、N-エチル-p-メンタン-3-カルボキサミド、WS-112-イソプロピル-5-メチル-シクロヘキサンカルボン酸-アミド、WS-122-イソプロピル-5-メチル-シクロヘキサンカルボン酸-アミド、WS-142-イソプロピル-5-メチル-シクロヘキサンカルボン酸tert-ブチルアミド、WS-232-イソプロピル-N-23-トリメチルブチルアミド、WS-302-イソプロピル-5-メチル-シクロヘキサンカルボン酸エステル23-ジヒドロキシ-プロピル、WS-1481--へプタン、メントール、ゲラニオール、リナロール、ユーカリプトール、ヒドロキシル-シトロネラール、PMD-38p-メンタン-38-ジオール、TRPM8特異的アゴニスト抗体、及び構成的に活性なTRPM8変異体、又はそれらの組み合わせである。好ましい実施形態では、本発明の第一の使用に用いられるアゴニストがメントール又はその誘導体でない。従って、好ましい実施形態では、TRPM8アゴニストが、イシリン、AG3-5、WS-23、WS-148、ヒドロキシル-シトロネラール、5-メチル-4--32H-フラノン;45-ジメチル-3--2-5H-フラノン及び4-メチル-3--2-5H-フラノンから選択される。より好ましい実施形態では、本発明の第一の使用に用いられるアゴニストが、表1の化合物1~4WS-5、CPS369、CPS368、CPS125、化合物20WS-12、BeckaB著、2007年、CellCalcium413:285―294、TRPM8アゴニスト抗体から選択される特異的TRPM8アゴニストである。別の好ましい実施形態では、前記アゴニストが、クーリングエージェント10、フレスコラートMGA、フレスコラートML、CPS-369、CPS-113、WS-23、WS-11、WS-30、WS-148、WS-3、WS-12及びイシリンのような、7より低いEC50を有するもの表2を参照から選択される。当業者によって理解されるように、TRPM8アゴニストが抗体又はTRPM8の構成的に活性な変異体である場合、本発明を実施する別の方法は、これらTRPM8受容体アゴニストをコードするヌクレオチド配列を含むベクターの投与である。これらアゴニストをコードするヌクレオチド配列を、クローン化し、発現の制御配列を先行させて、それらに機能可能に結合させることができる。本明細書中で用いるように、機能可能に結合させるとは、ヌクレオチド配列が、これら制御配列の制御下での発現に適した読み枠内に存在することを意味する。本発明にとって価値のある制御配列は、核内プロモーター配列、あるいは、エンハンサー配列及び/若しくは異種配列の核酸の発現を増加する他の制御配列であり得る。プロモーターは常時発現性又は誘導性とすることができる。異種配列の核酸の定常的発現が必要とされる場合、そのときには構成性プロモーターを用いる。周知の構成性プロモーターの例としては、サイトメガロウイルスCMVの最初期プロモーター、ラウス肉腫のプロモーター、及び同様なものが挙げられる。構成性プロモーターの他の多数の例は、本分野で周知であり、本発明の実施に用いることができる。異種配列の核酸の制御された発現が必要とされる場合、そのときには誘導性プロモーターを用いなければならない。非誘導体では、誘導性プロモーターはサイレントである。サイレントであるとは、誘導物質の不存在下では、異種配列の核酸の低発現が検出されるか又は発現が検出されず;しかしながら、誘導物質の存在下では、核酸異種配列の発現が起こることを意味する。発現レベルは、多くの場合、誘導物質の濃度を調節することによって制御することができる。発現を制御すると、例えば、誘導性プロモーターをより強く又はより弱く刺激するように誘導物質の濃度を調節すると、核酸異種配列の転写産物の濃度は影響を受け得る。核酸異種配列が遺伝子をコードする場合、合成されるタンパク質の量を制御することができる。従って、治療薬の濃度を調節することができる。周知の誘導性プロモーターの例は、エストロゲン若しくはアンドロゲンのプロモーター、メタロチオネインのプロモーター、又はエクジソンに応答するプロモーターである。他の多数の例は、本分野で周知であり、本発明の実施に用いることができる。構成性プロモーター及び誘導性プロモーター大抵、多数の種類の細胞又は組織で働くに加えて、組織特異的プロモーターを用いて、細胞又は組織に特異的な核酸の異種配列の発現を達成することができる。組織特異的プロモーターの良く知られた例としては、骨格筋αアクチンのプロモーター、心筋アクチンのプロモーター、骨格筋トロポニンCのプロモーター、収縮の遅い心筋のトロポニンCのプロモーター、及びクレアチンキナーゼのプロモーター/エンハンサー等の様々な筋肉特異的プロモーターが挙げられる。本分野で周知の多数の筋肉特異的プロモーターが存在し、本発明の実施に用いることができる筋肉特異的プロモーターの概説については、Millerら著Bioessays15:191―196を参照のこと。特定の実施形態では、TRPM8アゴニスト抗体がIgG-2A型の免疫グロブリンである。別の特定の実施形態では、TRPM8アゴニスト抗体がヒト化抗体である。更に、ベクターがTRPM8受容体の構成的に活性な変異体をコードするポリヌクレオチドを含有する可能性が考えられる。従って、ベクターが生物受容体で発現する場合、眼球乾燥症、膣乾燥及び口腔灼熱症候群のような疾患の治療について議論した上述の治療効果を引き起こし得る関連タンパク質を産生するであろう。本発明の範囲において、好ましくは、用いられるベクターが遺伝子治療での使用に適するウイルスベクター又は非ウイルスベクターである;例として、限定しないが、これらベクターを、レトロウイルス、アデノウイルス等に基づくウイルスベクターとすることができ、又は非ウイルスベクターの場合は、DNA-リポソーム、DNA-ポリマー、DNA-ポリマー-リポソーム等の複合体とすることができるNonviralVectorsforGeneTherapyHuangHung及びWagner著、AcademicPressを参照のこと。TRPM8アゴニストをコードする配列を含有するこれらウイルスベクター及び非ウイルスベクターを通常の方法によってヒト又は動物の体に直接的に投与することができる。あるいは、これらベクターを用いて、細胞、例えば、ヒト等の哺乳動物の細胞に生体外で形質転換、形質移入又は感染させ、続いてそれら細胞をヒト又は動物の体内に埋め込み、意図した治療効果を得ることができる。対象者への投与のため、これら細胞は、その生存可能性に悪影響を及ぼさない適当な媒体中に製剤化されるであろう。[本発明の第二の治療的使用]別の態様では、本発明は、流涙症の治療用又は予防用医薬品を製造するためのTRPM8アンタゴニスト又はそれらの組み合わせの使用に関する。別の態様では、本発明は、流涙症の治療用又は予防用のTRPM8アンタゴニスト又はそれらの組み合わせに関する。別の態様では、本発明は、TRPM8アンタゴニスト又はそれらの組み合わせの対象者への投与を含む、対象者における流涙症の治療方法に関する。TRPM8、治療及び予防という単語は、本発明の第一の使用に関連して既に説明されている。本発明において、流涙症は、連続的で過剰な流涙の存在として定義される。この過剰な涙の生成は、例えば、寒冷、汚染された環境又は化学物質への曝露、角膜中の異物又は潰瘍といった刺激原として作用する外部刺激によって引き起こされ得る。流涙症は、例えば、急性結膜炎といった眼表面の炎症を引き起こす条件によっても引き起こされ得る。あるときは、原因が、瞼の異常な位置眼瞼外反又は鼻涙管若しくは涙嚢における障害による、涙の排出系における欠陥である。誕生時から存在するのであれば、涙器系の障害が先天性であり得、この場合、鼻涙膜の無孔状態によるのが最も一般的である。これが成人で起こる場合は、涙嚢の感染症又は涙嚢炎により得る。時に、流涙症の原因は、瞼の輪筋の衰弱を引き起こす顔面神経麻痺である。流涙症の他の原因は、グレーブス-バセドウ病、アッカーマン症候群、動物、花粉等に対するアレルギー、細菌性結膜炎、及び眼瞼炎である。従って、特定の実施形態では、流涙症は、グレーブス-バセドウ病、角膜腫瘍、アッカーマン症候群、アレルギー動物、花粉等、細菌性結膜炎、眼瞼炎、顔面神経麻痺、外反症、又は鼻涙管若しくは涙嚢の障害に関連する。特定の実施形態では、この医薬品は、TRPM8不活性化によって、冷感受性線維による涙液分泌の刺激を低減させる。本発明では、TRPM8受容体アンタゴニストは、TRPM8受容体に対して特異的に結合する分子として定義され、それが結合すると、TRPM8チャネルの活性の低下を引き起こす、すなわち、細胞再分極を引き起こすチャネルを通るナトリウム及びカルシウムを減少させる。与えられた化合物がTRPM8アンタゴニストであるか否かを決定する適切な方法は、本発明の第一の使用との関連で説明したTRPM8受容体アゴニストの活性を検出するために説明した方法と一致する。表3は、本発明で用いることができるTRPM8アンタゴニストの例示的で非限定的な説明を示す。加えて、国際公開第2010/021882号公報の国際特許出願に記載された化合物を用いることができる。[アンチセンスオリゴヌクレオチド]特定の実施形態では、例えば、その活性を阻害することを目的としてTRPM8をコードする核酸の転写及び/又は翻訳の阻害といった、TRPM8をコードする遺伝子の発現の阻害に特異的なアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いる。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、通常の塩基相補性によるか、又は、例えば、二本鎖DNAに結合する場合は、二重らせんの主溝における特異的相互作用を介して、その潜在的標的に結合することができる。本発明での使用のため、アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む構築物を、例えば、細胞内で転写された場合に、TRPM8をコードする細胞mRNAの一部分に少なくとも相補性であるRNAを生成する発現プラスミドとして分布させることができる。あるいは、アンチセンス構築物が、生体外で形成され、細胞内に配置された場合に、標的核酸のmRNA及び/又はゲノム配列とハイブリダイズすることによって遺伝子発現の阻害を引き起こす、オリゴヌクレオチドのプローブである。これらオリゴヌクレオチドプローブは、好ましくは、内因性ヌクレアーゼ、例えば、エキソヌクレアーゼ及び/又はエンドヌクレアーゼに抵抗性であり、従って、生体内で安定な、修飾オリゴヌクレオチドである。アンチセンスオリゴヌクレオチド用の例示的な核酸分子としては、ホスホロアミデート、ホスホチオネート及びメチルホスホネートのDNA類似体が挙げられる例えば、米国特許第5176966号、米国特許第5264564号及び米国特許第5256775号を参照のこと。加えて、アンチセンス療法で有用なオリゴマーを構築するための一般的な手法の概説については、例えば、VanderKrolら著、BioTechniques6:958-976、1988年及びSteinら著、CancerRes48:2659-2668、1988年を参照されたい。アンチセンスオリゴヌクレオチドに関して、例えば、標的遺伝子の-10~10といった、翻訳の開始部位に由来するオリゴデオキシリボヌクレオチド領域が好ましい。アンチセンス手法は、標的ポリペプチドをコードするmRNAに相補的なオリゴヌクレオチドの設計DNAかRNAのどちらかを伴う。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、mRNA転写産物に結合して、翻訳を避け得る。また、アンチセンス手法において遺伝子の非翻訳非コード5’又は3’領域に相補的なオリゴヌクレオチドを用いて、該mRNAの翻訳を阻害し得るであろう。mRNAの非翻訳5’領域に相補的なオリゴヌクレオチドは、AUG開始コドンの相補体を含むべきである。mRNAコード領域に相補的なオリゴヌクレオチドは、効果の弱い翻訳阻害剤であるが、本発明に従って用いることもできる。それらをmRNAの5’領域、3’領域又はコード領域とハイブリダイズするように設計する場合、アンチセンス核酸は、少なくとも6ヌクレオチドの長さを有するべきであり、好ましくは約100ヌクレオチド未満の長さ、より好ましくは約50、25、17又は10ヌクレオチド未満の長さを有する。好ましくは、試験管内での研究を行って、アンチセンスオリゴヌクレオチドが遺伝子発現を阻害する能力を測定するべきである。有利なことに、これらの研究は、オリゴヌクレオチドのアンチセンス遺伝子阻害と非特異的生物学的効果とを識別するコントロールを用い得る。また、これらの研究が、標的のRNA又はタンパク質のレベルを体内コントロールのRNA又はタンパク質のレベルと比較することも好ましい。アンチセンスオリゴヌクレオチドを用いて得られた結果は、コントロールオリゴヌクレオチドを用いて得られた結果と比較することができる。コントロールオリゴヌクレオチドは被験オリゴヌクレオチドとほぼ同じ長さを有すること、及びオリゴヌクレオチド配列は標的配列への特異的ハイブリダイゼーションを妨げるのに必要であるだけアンチセンス配列と異なること、が好ましい。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、一本鎖又は二本鎖のDNA又はRNA又はキメラ混合物又はそれらの誘導体又は修飾型とすることができる。オリゴヌクレオチドを塩基、糖又はリン酸骨格を修飾して、例えば、分子の安定性、そのハイブリダイゼーション能力等を向上させることができる。オリゴヌクレオチドは、ペプチド例えば、それらに宿主細胞受容体を標的とさせるため又は細胞膜通過を助ける薬剤Letsingerら著、ProcNatlAcadSciUSA86:6553-6556、1989年;Lemaitreら著、ProcNatlAcadSci84:648-652、1987年;WO8809810若しくは血液脳関門通過を助ける薬剤国際公開第8910134号又は挿入剤Zon著、PharmRes1988年、5:539-549のような他の結合基を含むことができる。この目的のため、オリゴヌクレオチドを別の分子、例えば、ペプチド、担体物質、ハイブリダイゼーションにより誘発される切断剤等と共役結合させることができる。幾つかの事例では、内因性mRNAの翻訳を抑制するのに充分なアンチセンスオリゴヌクレオチドの細胞内濃度を達成するのが困難なことがあり得る。従って、好ましい手法は、アンチセンスオリゴヌクレオチドがpolIII又はpolIIの強力なプロモーターの制御下に配置される組み換えDNA構築物を用いる。あるいは、遺伝子の調節領域すなわち、プロモーター及び/又はエンハンサーに相補的なデオキシリボヌクレオチド配列を標的とし、体内の標的細胞において遺伝子の転写を妨げる3重ヘリックス構造を形成してHeleneら著、AnticancerDrugDes6:569-84、1991年、標的遺伝子の発現を減少させることができる。幾つかの実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドがアンチセンスモルフォリンである。[DNA酵素]別の特定の実施形態では、特異的なDNA酵素を用いてTRPM8をコードする遺伝子の発現を阻害する。DNA酵素は、アンチセンスオリゴヌクレオチド技術とリボザイム技術の両方のメカニズム特徴の幾つかを含有する。DNA酵素を、アンチセンスオリゴヌクレオチドと同様に、特定の核酸配列本事例では、TRPM8をコードする配列の標的配列を認識するように設計する;しかしながら、リボザイムと同様に、DNA酵素は、触媒的であり、標的核酸を特異的に切断する。[リボザイム]別の特定の実施形態では、標的mRNAの転写産物を触媒的に切断して、活性を阻害することが意図されるTRPM8をコードするmRNAの翻訳を妨げるように設計された、特異的なリボザイムを用いる。リボザイムは、特異的なRNA切断概説のため、Rossi著、1994年、CurrentBiology4:469-471を参照のことを触媒することができるRNA酵素分子である。リボザイム分子の配列は、好ましくは、標的mRNAに相補的な1個又は2個以上の配列と、mRNA切断に関与する周知の配列又は機能的に等価な配列[例えば、米国特許第5093246号を参照のこと]とを含む。本発明で用いるリボザイムとしては、ハンマーヘッド型リボザイム、エンドリボヌクレオアーゼRNA等が挙げられる[Zaugら著、1984年、Science224:574-578]。リボザイムは、修飾オリゴヌクレオチドで構成することができ例えば、安定性、指向性等を高めるため、生体内で標的遺伝子を発現する細胞に分布させるべきである。好ましい分布方法は、リボザイムをコードするDNA構築物をpolIII又はpolIIの強力な構成性プロモーターの制御下で用いることを伴い、形質転換された細胞は、内因性標的メッセンジャーを破壊するのに充分な量のリボザイムを産生して、翻訳を阻害するであろう。他のアンチセンス分子と対照的に、リボザイムは触媒的であるため、より低い細胞内濃度で効果があることを必要とする。[マイクロRNA]別の特定の実施形態では、TRPM8をコードする配列に特異的なマイクロRNAを用いる。知られているように、マイクロRNAmiRNAは、21~25ヌクレオチドの長さの一本鎖RNAであり、RNA干渉経路を用いた複数過程によって、他の遺伝子の発現を調節する能力を有する。[iRNA]別の特定の実施形態では、活性を阻害することを意図されるTRPM8をコードする配列に特異的な小型干渉RNAsiRNAのような干渉RNAiRNAを用いる。小型干渉RNA、すなわちsiRNAは、RNA干渉によって標的遺伝子の発現を阻害することができる薬剤である。siRNAは、化学的に合成することができるか、又あるいは、試験管内転写によって得ることができるか若しくは標的細胞において生体内で合成することができる。siRNAは、典型的に、長さが15~40ヌクレオチドの二本鎖のRNAからなり、1~6ヌクレオチドの3’及び/又は5’突出領域を含有し得る。突出領域の長さは、siRNA分子の全長とは無関係である。siRNAは標的メッセンジャーの分解又は転写後サイレンシングによって作用する。siRNAは、いわゆるshRNA短ヘアピンRNAと呼ぶことができ、siRNAを形成している反平行鎖がループ又はヘアピン領域により接続されることを特徴とする。shRNAは、RNAポリメラーゼIIIのプロモーターU6のようなプロモーターの制御下で、プラスミド又はウイルス、具体的にはレトロウイルスのよってコードすることができる。特定の実施形態では、本発明で用いることができるsiRNAがTRPM8をコードする遺伝子又はこのタンパク質をコードするゲノム配列のmRNAに実質的に相同である。実質的に相同は、標的mRNAに充分に相補的又は類似する配列を有し、該siRNAがRNA干渉によって標的mRNAの分解を引き起こすことができるものとして定義する。この干渉を引き起こすのに適するsiRNAとしては、RNAにより形成されたsiRNAの他に、下記のような、様々な化学修飾を含有するsiRNAも含む:ヌクレオチド間の結合が、ホスホロチオエート結合のような、天然に存在するものと異なるsiRNA;フルオロフォアのような、機能性試薬を有するRNA鎖のコンジュゲート;2’位のヒドロキシルの異なる官能基での修飾により、RNA鎖の末端における、特に3’末端における修飾;2’-O-メチルリボース又は2’-O-フルオロリボースといった、2’位におけるO-アルキル化残基のような、修飾した糖を有するヌクレオチド;ハロゲン塩基例えば、5-ブロモウラシル及び5-ヨードウラシル、アルキル化塩基例えば、7-メチルグアノシンのような、修飾した塩基を有するヌクレオチド。本発明で用いることができるsiRNA及びshRNAは、当業者に既知の幾つかの技術を用いて得ることができる。siRNAを設計するための基礎とされるTRPM8をコードするヌクレオチド配列の領域は、限定せず、コード配列の領域開始コドンと終止コドンとの間を含有することができ、あるいは、5’又は3’非翻訳領域、好ましくは長さが25~50ヌクレオチドであって開始コドンから3’センス位置のいずれかの位置におけるものを含有することができる。siRNAを設計する方法は、NがTRPM8をコードする配列のいずれかのヌクレオチドであり得るモチーフAATTの同定と、高いG/C含量を有するそれらの選択とを伴う。このモチーフが見つからない場合、Nがいずれかのヌクレオチドであり得るモチーフNAを同定し得る。特定の実施形態では、TRPM8阻害剤が、表35[配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9]に示す特異的iRNAによって形成される群から選択される特異的iRNAのような、TRPM8に特異的なiRNAである。[阻害性ペプチド]別の特定の実施形態では、TRPM8阻害剤ペプチドを用いて、このタンパク質がそのいずれかの機能、特に、ナトリウムイオン及びカルシウムイオンのチャネル通過を果たすのを妨げる。阻害性ペプチドという用語は、ここで用いるように、TRPM8に結合してその活性を上述するように阻害することができる、すなわち、ナトリウムイオン及びカルシウムイオンがTRPM8チャネルを通過するのを阻害することができるペプチドを指す。[阻害性抗体]別の特定の実施形態では、TRPM8阻害剤抗体を用いて、このタンパク質がそのいずれかの機能、特に、ナトリウムイオン及びカルシウムイオンのチャネル通過を果たすのを妨げる。従って、TRPM8阻害剤抗体は、ここで用いるように、TRPM8に特異的に結合してナトリウムイオン及びカルシウムイオンのチャネル通過を阻害することができる抗体を指す。前記抗体は、当業者に既知のいずれかの方法を用いて調製することができる。TRPM8に結合する能力を有する抗体を同定すれば、阻害剤の同定のためのアッセイを用いて、このタンパク質の活性を阻害することができる抗体を選択できるであろう[例えば、MetzSら著、2008年、JBiolChem283:5985-5995を参照のこと]。[化合物]別の特定の実施形態では、TRPM8と接触するときにこのタンパク質の活性を減少させる化合物を用いる。実例としては、これら化合物に限定しないが、BCTC、CTPC、チオ-BCTC、SB-452533、SKF96365、エコナゾール、クロトリマゾール、ACA、AMTB、カプサゼピン、フェナントロリン、MAD1d及びMAD2e等の表3化合物8~20に示す化合物が挙げられる。特定の実施形態では、本発明の第二の使用に用いるTRPM8アンタゴニストが、TRPM8をコードする遺伝子の配列に特異的なアンチセンスオリゴヌクレオチド、TRPM8配列に特異的なDNA酵素、TRPM8をコードする遺伝子に特異的なマイクロRNA、TRPM8をコードする遺伝子の配列に特異的なリボザイム、TRPM8をコードする遺伝子の配列に特異的な干渉RNA、TRPM8に特異的に結合してその活性を阻害する能力を有するペプチド、TRPM8に特異的に結合してこのチャネルの活性を阻害する能力を有する抗体、BCTCN--4-テトラヒドロピラジン-1-カルボキサミド、CTPC-4--2-メチル-N-4-フェニル-1-ピペラジン-カルボキサミド、チオ-BCTCN-4-テトラヒドロピラジン-1-カルボキサミド、SB-452533N--N’-アミノエチルウレア、SKF963651-2--2-3-プロポキシエチル-1H-イミダゾール、エコナゾール1-2-メトキシ-2-エチル-1H-イミダゾール、クロトリマゾール1-ジフェニルメチル-1H-イミダゾール、ACAN-アントラニル酸、AMTBN--2-メチルオキシ-N--ベンズアミド、カプサゼピンN-2-エチル-1345-テトラヒドロ-78-ジヒドロキシ-2H-2-ベンズアゼピン-2-カルボチオアミド、フェナントロリン、MAD1dN--2-イソプロピル-5-メチルシクロヘキシルビフェニル-4-カルボキサミド、MAD2e4-tert-ブチルフェニル-2-イソプロピル-5-メチルシクロヘキシルカルバメートから選択されるアンタゴニストである。別の特定の実施形態では、TRPM8アンタゴニストがTRPM8に特異的なアンタゴニストである。[本発明の第二組成物]別の態様では、本発明は、少なくとも1種のTRPM8アンタゴニストと流涙症の治療に有用な少なくとも1種の薬物と、必要に応じ、医薬として許容されるビヒクルと、を含む組成物これ以降は、本発明の第二組成物に関する。TRPM8アンタゴニストという用語は、既に説明しており、本発明の第二組成物に関連して同様に用いる。医薬として許容されるビヒクルという用語及び組成物の投与経路は、本発明の第一組成物に関連して既に説明している。流涙症という用語は、既に詳細に説明しており、本組成物に関連して同様に用いる、従って、グレーブス-バセドウ病、角膜腫瘍、アッカーマン症候群、アレルギー動物、花粉等、細菌性結膜炎、眼瞼炎、顔面神経麻痺、外反症、又は鼻涙管若しくは涙嚢の障害のような様々な障害における症状として起こる流涙症を指す。特定の実施形態では、本発明の第二組成物に用いるTRPM8アンタゴニストが、TRPM8をコードする遺伝子の配列に特異的なアンチセンスオリゴヌクレオチド、TRPM8配列に特異的なDNA酵素、TRPM8をコードする遺伝子に特異的なマイクロRNA、TRPM8をコードする遺伝子の配列に特異的なリボザイム、TRPM8をコードする遺伝子の配列に特異的な干渉RNA、TRPM8に特異的に結合してその活性を阻害する能力を有するペプチド、TRPM8に特異的に結合してこのチャネルの活性を阻害する能力を有する抗体、BCTCN--4-テトラヒドロピラジン-1-カルボキサミド、CTPC-4--2-メチル-N-4-フェニル-1-ピペラジン-カルボキサミド、チオ-BCTCN-4-テトラヒドロピラジン-1-カルボキサミド、SB-452533N--N’-アミノエチルウレア、SKF963651-2--2-3-プロポキシエチル-1H-イミダゾール、エコナゾール1-2-メトキシ-2-エチル-1H-イミダゾール、クロトリマゾール1-ジフェニルメチル-1H-イミダゾール、ACAN-アントラニル酸、AMTBN--2-メチルオキシ-N--ベンズアミド、カプサゼピンN-2-エチル-1345-テトラヒドロ-78-ジヒドロキシ-2H-2-ベンズアゼピン-2-カルボチオアミド、フェナントロリン、MAD1dN--2-イソプロピル-5-メチルシクロヘキシルビフェニル-4-カルボキサミド、MAD2e4-tert-ブチルフェニル-2-イソプロピル-5-メチルシクロヘキシルカルバメートから選択されるアンタゴニストである。抗生物質だけでなく中国特許出願公開第101612199号明細書、国際公開第08/066644号、ロシア特許第2305517号、中国特許出願公開第1775261号明細書、中国特許出願公開第1775263号明細書、中国特許出願公開第1565501号明細書、中国特許出願公開第1199617号明細書及び特開昭57-179121号明細書に記載された組成物のような、流涙症の治療に有用な薬物は、当業者に知られている。別の態様において、本発明は、流涙症の治療用医薬品を製造するための本発明の第二組成物の使用に関する。別の態様において、本発明は、流涙症の治療用の本発明の第二組成物に関する。第三態様において、本発明は、対象者への本発明の第二組成物の投与を含む、対象者における流涙症の治療方法に関する。下記実施例は、本発明を説明し、本発明の範囲を限定するものとして考えるべきでない。無処置の冷感受性神経終末の温度感受性及び符号化能を機能的に定義するため、野生型マウスの眼の角膜の神経終末インパルスNTI活動を試験管内で記録したBrockJAら著、1998年、JPhysiol512:211-217。低温受容器終末を、冷却で頻度が増加した34°Cでの自発的神経インパルスによって同定し、メントールの適用への応答に加えて、復温によって静めた図1ASchaferKら著、1986年、JGenPhysiol88:757-776。72の冷感受性終末は、加熱パルスに対しても応答し逆説的反応LongRR著、1977年、JNeurophysiol40:489-502、100nMカプサイシンに対しても応答した65。基礎体温34°Cでの冷感受性神経終末の自発的発火頻度は4.0±0.4インパルス/秒n=55であった。冷感受性神経終末は、時折、非常に規則的な間隔の2以上の活動電位のバーストにみられるような、多数のユニークな電位のいずれにも応答して、自発的に興奮した。34°Cから20°Cへの冷却パルスは、温度低下に伴って徐々に増加し、ピーク頻度に達し、より低い温度に達した後に抑制され又は静められるインパルス放電を誘発した図1A及び1B。冷却勾配の間、55個の冷感受性終末の全てについて記録した平均発火頻度及び温度低下の経時変化を図1Bに表す。冷却勾配に伴って頻度増加を誘発する温度閾値は、2°Cより小さかった平均値-1.5±0.2°C、図1C。温度が1°C以下低下したとき、約30の温度感受性ユニットは既にその発火頻度を著しく増加させていた。冷却勾配の間のピーク頻度の平均値は37.6±1.8インパルス/秒n=55であった。角膜低温受容器の温度感受性は、連続的な冷却勾配の間の温度低下の摂氏度あたりの発火頻度における変化として表現され、記録したユニット間で変化した。平均勾配は6.3±1.0インパルス/秒/°Cn=55であった図1Dの赤線。34°C~24°Cの間、-2.5°Cの冷却段階を施して、冷感受性終末が持続的温度を符号化する能力も評価した図1E。最初の温度降下は、新たな定常レベルに適応させられる発火頻度の一時的増加を生じた。角膜低温受容器は、広範な温度範囲にわたって静温度を符号化することができた。低温に対する応答は、発火頻度の増加によって特徴付けられた;発火パターンの際立った変化が多数の事例で突発するようになり図1E、表1、電位波形の一時的変形が表示されたBrockJAら著、1998年、JPhysiol512:211-217。図1Fは、10個の低温受容器についての発火頻度の静的変化及び動的変化をまとめており、温度の小さな変化に対する角膜受容器の顕著な温度感受性を示す。冷感受性求心性神経の周知の活性化物質であるメントール50μMSchaferK.ら著、1986年、JGenPhysiol88:757-776は、試験した終末の98において自発活動を増加させた図1A3.4±0.3インパルス/秒~18.4±1.4インパルス/秒;p<0.001、n=44、対応t検定。34°Cで突発的な発火パターンを有する終末の割合は、メントールを用いた灌流の間44、処理前5よりもほぼ10倍高かった。メントールは、冷却に対する終末の応答を鋭敏にした:メントールの存在下、冷却勾配は発火頻度の増加を誘発し、より高温でコントロール:26.7±0.5°C;メントール:28.6±0.5°C、n=44;p<0.001、対応t検定ピーク頻度に達し、より高温でコントロール:23.8±0.4°C;メントール:25.2±0.4°C;p<0.05、対応t検定静まった。BCTCは、試験管内においてTRPM8イオンチャネルの強力且つ可逆的な遮断薬であるMadridRら著、2006年、JNeurosci26:12512-12525;JordtSEら著、2004年、Nature427:260-265。感受性終末に対する飽和濃度のBCTC10μMの効果を研究した。低温誘発放電及びメントール誘発放電の自発活動及び発火頻度増加は徐々に低下し、90分間のBCTC灌流後にほぼ静まった。これらBCTCの効果はTRPA1マウスでも観察された。活動の低下は、BCTC除去に対して部分的に逆であり、薬物の不存在下では観察されなかった。これは、温度感受性神経終末の活動が主としてTRPM8チャネルに依存したことを示唆している。メントールの刺激効果と対照的に、28個の冷感受性神経終末で試験した特異的TRPA1アゴニストであるアリル-イソチオシアネートAITC、100μMBandellMら著、2004年、Neuron41:849-857は、それらのうちの24個において自発活動又は低温誘発活動の改変に失敗した。4個の神経終末のみが、基礎体温にてAITCで灌流したとき、発火頻度の有意な増加を示したデータは示さず。これは、冷感受性角膜終末の大部分においてTRPA1チャネルの発現が欠けているか又は少ないことを示唆している。要するに、これらの結果は、先に報告されているTRPM8及びTRPA1発現の限定的重複StoryGMら著、2003年、Cell112:819-829とも一致する。IKDは、温度低下による感覚ニューロンの活性化に対する興奮性ブレーキとして作用するshaker様電位依存型カリウム電流であり、温度受容器における熱閾値を決定するのに貢献するMadridRら著、2009年、JNeurosci29:3120-3131。電流IKD遮断薬である4-アミノピリジン4-AP、100μMを用いて、この電流が角膜の冷覚神経末端の温度感受性に影響を及ぼすか否かを調査した。実験した9個のユニットのうちの3個で、4-APの灌流後に自発活動が有意に増加したが、これら終末の冷覚閾値において並行する変化は認められなかった。対照的に、4-APで処理した全ての終末において、低温応答の平均ピーク頻度をコントロール値の39±6低下させたp<0.001、n=9。要するに、これらのデータは、マウス角膜の冷受容器神経終末の熱閾値が、少なくとも有意には、shaker様Kv1チャネルによって決定されないこと、これら終末が低閾値型の冷受容器ニューロンに属することBelmonteCら著、2009年、ExpBrainRes196:13-30を示唆する。続いて、TRPM8制御配列の制御下で強化黄色蛍光タンパク質EYFPを発現するように遺伝子操作したマウスTRPM8-EYFPマウス、図2を用いて、冷感受性チャネルTRPM8を発現していることが推定される神経線維の存在、形態及び密度をマウス角膜において分析した。推定TRPM8陽性神経線維は角膜全体のいたるところに均一に分布していた。角質実質神経束は角膜実質の外側3分の1に入り込んでいる図2A~C。9個の角質実質軸索のうちおよそ1個がTRPM8陽性であった図2C。角膜実質神経叢からの分枝は、角膜実質と角膜上皮との間に位置するボーマン層に侵入すると、基底上皮細胞の下で、互いから角膜の中心に向かって平行して走る幾つかの基底下神経線維線維綱へ分岐する図2D~H。幾つかのTRPM8陽性基底下繊維は、この基底下神経叢内部で既に一本の最終末端を生じた図2H、矢印。しかしながら、それらの大部分は、表面上皮層に向かって上がり、非対称な放射状の房として終わる側枝を生じる図2I~K。非蛍光知覚線維とは違って、おそらく、ポリモーダル線維及び機械侵害受容線維、TRPM8陽性終末軸索は、上皮内部でまばらに分枝して、最も外側の表面上皮細胞層で少数の毛筆状終末として終わった図2J~K。全ての事例において、基底下上皮繊維綱及び上皮内末端終末は数珠状の形態を示した図2H~K。緑色蛍光タンパク質GFP及び神経フィラメントに対する二重免疫蛍光染色を用いることによって、推定冷受容器線維が、基底下神経線維の総数のおよそ12及び表面上皮内神経終末の約10を占めると決定した方法の節も参照のこと;図2C、F、K、L。次に、TRPM8-EGFPkiマウスにおける低温誘発神経インパルス放電を調査してDhakaAら著、2007年、Neuron54:371-378、冷感受性に対するTRPM8チャネルの寄与を決定した。12個のTRPM8角膜における知覚終末応答の記録を試みた。しかしながら、完全な角膜表面を記録ピペットで繰り返し調査した数百回の試験図3A、点線のうち、14個の神経終末でのみ自発活動が検出された。これらの事例では、自発活動は低頻度のものであり0.6±0.2インパルス/秒、n=14、1個のTRPM8終末においてのみ、冷却勾配の間に発火頻度が増加し、28.4°Cの閾値温度と冷却勾配の間24.7°Cで3インパルス/秒のピーク頻度とを有した。メントールはTRPM8チャネルの強力な活性化物質であるMcKemyDDら著、2002年、Nature416:52-58。50μMメントールの灌流は、34°Cの基礎体温でも又は冷却勾配の間でも、発火頻度の増加を生じなかったn=6図3A、点線。この結果は、TRPM8の発現についての冷感受性終末における自発活動及び低温誘発活動の依存性の存在と一致する。カプサイシン100nMは、TRPM8角膜において検知した6個の活動性ユニットで試験して、2個の終末において少しのインパルスそれぞれ、5インパルス及び8インパルスを誘発し、他では30秒を超えて持続する力強い放電を誘発した。TRPM8マウスで観察された自発活動及び低温誘発活動の深刻な阻害と対照的に、TRPA1マウスの角膜神経終末KwanKYら著、2006年、Neuron50:277-289は、野生型動物のものと同様な発火頻度及び冷却への応答を示した図3B。要するに、これらの結果は、TRPA1チャネルが角膜冷感受性終末の冷感受性に対する重要な分子決定因子でないことを確認する。これらの結果は、培養三叉神経知覚ニューロンにおいて得られた我々の先の知見と一致するJNeurosci2009年、29:3120-3131。TRPM8の角膜の冷覚神経終末が存在しなかったか又は形態的に変化させられた可能性を排除するために、これら角膜をGFPに対する抗体で染色して、短縮型TRPM8チャネルを発現した神経線維の形態を可視化したDhakaAら著、2008年、JNeurosci28:566-57。角膜周囲の様々な領域における染色された神経線維の分布は、TRPM8動物の間で変動が大きかった。それにもかかわらず、上皮神経綱及び房状の上皮内神経終末の一般的形態は、全ての事例において、TRPM8EYFP陽性線維のものと類似した。更に、終末の総合密度において有意な相違は認められず、よって、電気生理学的検査において観察された活動及び低温応答の欠如は、記録ピペットが届かなかった終末のせいである可能性が排除された。加えて、TRPM8.30チャネルの低発現により低温への応答が低減することが予測されるTRPM8マウスで、低温誘発活動を調査した。これら動物では、30の神経終末は自発活動性であったが、自発活動を示す低温非感受性ユニットが例外的であった7野生型動物とは対照的に、低温及びメントール感受性を欠いた。活動性の神経終末の間で、34°Cでの平均自発活動はTRPM8動物よりも有意に低かった2.2±0.4インパルス/秒対4.4±0.9インパルス/秒、n=11;p=0.025、マン-ホイットニー検定一方、冷却勾配の間、発火頻度の増加を誘発するのに必要な温度である閾値温度は野生型マウスよりも低い温度であり30.6±0.5°C対32.7±0.4°C、p=0.004、マン-ホイットニー検定、冷却の間の平均ピーク頻度はTRPM8角膜において野生型マウスよりも有意に低い19.4±3.4インパルス/秒対33.8±3.5インパルス/秒、p=0.008、t検定ことが立証された図3A、実線。メントール50μMは、TRPM8マウスにおいて、TRPM8動物よりは有意に低かったが、基礎体温における発火頻度、冷覚閾値及びピーク頻度を高めた図3A、実線。次に、涙の生成が低温受容器線維の神経活動に関連するのであれば、自発活動を欠くTRPM8マウスでは基礎涙流量が減少するであろうと推論した。図4Aは、これが実際に事実であったことを示す。涙液量は、涙で湿ったときに色が変化するフェノールレッド糸が染色された長さとして表され、2分間収集され、基礎条件下TRPM8マウスで測定した涙液量1.5±0.2mm、n=23は、野生型動物3.7±0.4mm、n=35、p<0.001と比較して有意に低かった。対照的に、TRPA1マウスの基礎流涙量は、野生型動物と有意に相違しなかった図4A、黒色柱。一方で、ポリモーダル侵害受容器のTRPV1チャネル及びTRPA1チャネルの2つの周知の刺激剤であるカプサイシン1μM及びAITC500μMの局所適用は、TRPM8マウス及び野生型マウスの眼において涙流量を有意に増加させ、ビヒクルは増加させなかった図4B。次に、角膜温度と基礎流涙量との間の関係性がヒト対象者においても存在するか否かを確認することを試み、別々のセッションにおいて、32の一定湿度下で18°C、25°C及び43°Cの環境温度に10分間曝露した11人の若年のヒト28.9±1.8歳ボランティアの流涙量を測定した。これらの環境温度への曝露は、角膜温度をそれぞれ32.4±0.4°C、34.2±0.1°C及び36.0±0.2°Cにさせた。これらの値は有意に相違したp<0.001、反復測定ANOVA。対照的に、43°Cの環境でのみ、流涙量が有意に低下した:17.1±1.4mm対25°Cで22.8±1.2mm又は18°Cで23.2±2.3mm反復測定ANOVA、p=0.006図4C。43°Cへの曝露角膜温度36±0.1°Cを62.5の環境湿度水準で繰り返すと、32湿度環境よりも流涙流量の減少は変わらなかった17.6±2.4mm。これら実験を、ヒトでの実験で使用した同一環境条件に置くことによって、麻酔した野生型マウス及びTRPM8マウスで再現した、つまり、これらマウスを一定の湿度条件下で高度及び中程度の環境温度に曝露した。野生型マウスの平均角膜温度が36.4±0.2°Cn=11まで上昇させられたとき、流涙は1.8±0.4mmまで減少し図4A、一方、中程度の温度環境では、平均角膜温度は27.2±0.1°Cでありn=6、流涙値は4.6±0.8mmであったp=0.017、マン-ホイットニー検定。対照的に、同様の条件に曝露したTRPM8マウスでは、角膜表面温度が変化したとき、流涙流量が有意に相違しなかった図4A。