"ネズミペルオキシソーム増殖因子活性化受容体ガンマPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基のSer-273リン酸化を抑制する化合物の同定方法であって、以下の:a前記ネズミPPARガンマ2またはネズミPPAガンマ2相同体中の対応するセリン残基を含む試料を試験化合物と接触させること;そしてbネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基の前記Se-273リン酸化を抑制する試験化合物の能力を確定すること、それにより、ネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基の前記Ser-273リン酸化を選択的に抑制する化合物を同定することを包含する方法。試料がinvitro、exvivoおよびinvivo試料からなる群から選択される請求項1記載の方法。ネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基の前記Ser-273リン酸化の抑制が、総PPARガンマに比してSer-273リン酸化PPARガンマの量を分析し、そして対照に対する比率を比較することにより確定される請求項1記載の方法。対照が標準条件下でのロシグリタゾンによる処置からの比率である請求項3記載の方法。試験化合物が、前記ネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基と直接的に結合するか否かを確定するステップをさらに包含する請求項1記載の方法。PPARガンマを結合し、そして一細胞型における古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進する化合物の同定方法であって、以下の:a化合物がPPARガンマを結合するか否かを確定すること;そしてb試験化合物の存在下で保持される細胞型の第一試料中のマーカーこの場合、マーカーは、表1または2に列挙されたマーカーの群から選択されるの量および/または活性を、対照である第二試料中のマーカーの量および/または活性と比較することここで、第二試料に比して、第一試料中の表1で列挙されたマーカーの有意に高い量および/または活性は、試験化合物がその細胞型における古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進する、ということを示し;および/または第二試料に比して、第一試料中の表2で列挙されたマーカーの有意に低い量および/または活性は、試験化合物がその細胞型における古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進する、ということを示すを包含する方法。細胞型が、前脂肪細胞、成熟白色脂肪細胞、細胞、単球およびマクロファージからなる群から選択される請求項6記載の方法。第一および/または第二試料が、invitro、exvivoおよびinvivo試料からなる群から選択される請求項6記載の方法。第一および/または第二試料が代謝障害の動物モデルから得られる請求項6記載の方法。第一および/または第二試料が、組織、全血、血清、血漿、頬掻爬物、唾液、脳脊髄液、尿、糞便および骨髄からなる群から選択される請求項6記載の方法。第一および第二試料が一被験体から得られる単一試料の部分である請求項6記載の方法。第一および第二試料が一被験体から得られるプール試料の部分である請求項6記載の方法。第二試料が、試験化合物の非存在下で保持される第一試料と同じ細胞型の細胞を含む請求項6記載の方法。第二試料が、ロシグリタゾンで処置される第一試料と同じ細胞型の細胞を含む請求項6記載の方法。有意に高い量および/または活性が、表1に列挙されたマーカーの量および/または活性を第二試料に比して少なくとも25上方調節することを包含する請求項6記載の方法。有意に低い量および/または発現が、表2に列挙されたマーカーの量および/または活性を第二試料に比して少なくとも25下方調節することを包含する請求項6記載の方法。マーカーの量が比較される請求項6記載の方法。マーカーの量がマーカーのタンパク質発現のレベルを確定することにより確定される請求項17記載の方法。タンパク質の存在が、タンパク質と特異的に結合する試薬を用いて検出される請求項18記載の方法。試薬が、抗体、抗体誘導体および抗体断片からなる群から選択される請求項19記載の方法。試薬が、PPARガンマと結合する抗体、ならびにコンセンサスcdk5リン酸化部位を含むペプチドと結合する抗体を含む請求項19記載の方法。試料中のマーカーの発現のレベルが、転写ポリヌクレオチドまたはその部分の試料中の存在を検出することにより査定される請求項17記載の方法。転写ポリヌクレオチドがmRNAまたはcDNAである請求項22記載の方法。検出のステップが、転写ポリヌクレオチドを増幅することをさらに包含する請求項22記載の方法。試料中のマーカーの発現のレベルが、緊縮ハイブリダイゼーション条件下でマーカーとアニールするかまたはポリヌクレオチドの一部分とアニールする転写ポリヌクレオチドの試料中の存在を検出することにより査定される請求項17記載の方法。マーカーがネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基上のリン酸化Ser-273である請求項6記載の方法。代謝障害が、糖不耐性、インスリン抵抗性、高血圧症、異脂肪血症、肥満症、II型糖尿病、高血糖症、高インスリン血症、収縮期および拡張期血圧上昇、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症ならびに30より高い体格指数からなる群から選択される請求項6記載の方法。PPARガンマが配列番号1~7で記述されるアミノ酸配列を含む請求項6記載の方法。被験体における古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害を選択的に促進するためのPPARガンマを結合する化合物の効力の査定方法であって、以下の:aマーカーここで、マーカーは表1または2に列挙されたマーカーであるの量および/または活性を、第一の時点で被験体において検出すること;b化合物の投与後の少なくとも1つのその後の時点の間、ステップaを反復すること;そしてcステップaおよびbで検出された量および/または活性を比較することここで、少なくとも1つのその後の被験体試料に比して、第一被験体試料中の表1で列挙されたマーカーの有意に高い量および/または活性は、試験化合物がその被験体における古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進する、ということを示し;および/または少なくとも1つのその後の被験体試料に比して、第一被験体試料中の表2で列挙されたマーカーの有意に低い量および/または活性は、試験化合物がその被験体における古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進する、ということを示すを包含する方法。被験体が代謝障害のための処置を受け、代謝障害のための処置を完了し、および/または第一時点とその後の時点との間で代謝障害から寛解している請求項29記載の方法。細胞型が、前脂肪細胞、成熟白色脂肪細胞、細胞、単球およびマクロファージからなる群から選択される請求項29記載の方法。第一および/または少なくとも1つのその後の試料が、exvivoおよびinvivo試料からなる群から選択される請求項29記載の方法。第一および/または少なくとも1つのその後の試料が代謝障害の動物モデルから得られる請求項29記載の方法。第一および/または少なくとも1つのその後の試料が、組織、全血、血清、血漿、頬掻爬物、唾液、脳脊髄液、尿、糞便および骨髄からなる群から選択される請求項29記載の方法。第一および/または少なくとも1つのその後の試料がその被験体から得られる単一試料の一部分である請求項29記載の方法。第一および/または少なくとも1つのその後の試料がその被験体から得られるプール試料の一部分である請求項29記載の方法。ロシグリタゾンを用いるステップaおよびbをさらに包含する請求項29記載の方法。ロシグリタゾンによる処置の結果が試験化合物からの結果と比較される請求項37記載の方法。有意に高い量および/または活性が、表1に列挙されたマーカーの量および/または活性を第二試料に比して少なくとも25上方調節することを包含する請求項29記載の方法。有意に低い量および/または発現が、表2に列挙されたマーカーの量および/または活性を第二試料に比して少なくとも25下方調節することを包含する請求項29記載の方法。マーカーの量が比較される請求項29記載の方法。マーカーの量がマーカーのタンパク質発現のレベルを確定することにより確定される請求項41記載の方法。タンパク質の存在が、タンパク質と特異的に結合する試薬を用いて検出される請求項42記載の方法。試薬が、抗体、抗体誘導体および抗体断片からなる群から選択される請求項43記載の方法。試薬が、PPARガンマと結合する抗体、ならびにコンセンサスcdk5リン酸化部位を含むペプチドと結合する抗体を含む請求項43記載の方法。試料中のマーカーの発現のレベルが、転写ポリヌクレオチドまたはその部分の試料中の存在を検出することにより査定される請求項41記載の方法。転写ポリヌクレオチドがmRNAまたはcDNAである請求項46記載の方法。検出のステップが、転写ポリヌクレオチドを増幅することをさらに包含する請求項46記載の方法。試料中のマーカーの発現のレベルが、緊縮ハイブリダイゼーション条件下でマーカーとアニールするかまたはポリヌクレオチドの一部分とアニールする転写ポリヌクレオチドの試料中の存在を検出することにより査定される請求項41記載の方法。マーカーがネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基上のリン酸化Ser-273である請求項29記載の方法。代謝障害が、糖不耐性、インスリン抵抗性、高血圧症、異脂肪血症、肥満症、II型糖尿病、高血糖症、高インスリン血症、収縮期および拡張期血圧上昇、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症ならびに30より高い体格指数からなる群から選択される請求項29記載の方法。PPARガンマが配列番号1~7で記述されるアミノ酸配列を含む請求項29記載の方法。代謝性疾患に苦しむ被験体の治療方法であって、PPARガンマを結合し、抗糖尿病活性を選択的に促進する化合物を被験体に投与し、それにより代謝性疾患に苦しむ被験体を治療することを包含する方法。前記化合物が、ネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基のSer-273リン酸化を抑制する請求項53記載の方法。化合物が製薬上許容可能な処方物中で投与される請求項53記載の方法。製薬上許容可能な処方物が経口処方物である請求項55記載の方法。化合物が小分子である請求項53記載の方法。PPARガンマを結合し、そして一細胞型における抗代謝障害活性を選択的に促進することによる代謝障害の処置するための化合物であって、化合物がPPARガンマ上のSer-273のリン酸化を抑制する化合物。ロシグリタゾンのPPARガンマアゴニスト機能の30未満を有する請求項58記載の化合物。1~200nM未満のPPARガンマに関するEC50結合親和性を有する請求項58記載の化合物。同一条件下でロシグリタゾンに比して表1に列挙されたマーカーの発現を少なくとも30上方調節するか、および/または同一条件下でのロシグリタゾンに比して表2に列挙されたマーカーの発現を少なくとも30下方調節する請求項58記載の化合物。代謝障害が、糖不耐性、インスリン抵抗性、高血圧症、異脂肪血症、肥満症、II型糖尿病、高血糖症、高インスリン血症、収縮期および拡張期血圧上昇、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症ならびに30より高い体格指数からなる群から選択される請求項58記載の化合物。m-ベンジルインドール、MRL-20、MRL-24、nTZDpa、SR145、SR147、Mbx-102、MK-0533およびBVT.13からなる群から選択される請求項58記載の化合物。位置Ser-273に非リン酸化可能アミノ酸を有するネズミペルオキシソーム増殖因子活性化受容体ガンマ2ポリペプチド、あるいはネズミPPARガンマ2ポリペプチド中の対応するセリン残基位置に非リン酸化可能アミノ酸を有するその相同体をコードする単離核酸分子、またはその相補体。配列番号2または3で記述されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含み、さらに位置Ser-273の非リン酸化可能アミノ酸をコードする請求項64記載の単離核酸分子、またはその相補体。非相同ポリペプチドをさらにコードする請求項64または65記載の単離核酸分子。請求項64~66のいずれか一項に記載の核酸分子を含むベクター。発現ベクターである請求項67記載のベクター。請求項68のベクターを含む宿主細胞。タンパク質の産生方法であって、タンパク質が産生されるまで適切な培地中で請求項69記載の宿主細胞を培養することを包含する方法。培地または宿主細胞からタンパク質を単離することをさらに包含する請求項70記載の方法。位置Ser-273に非リン酸化可能アミノ酸を有するネズミペルオキシソーム増殖因子活性化受容体ガンマ2ポリペプチドまたはネズミPPARガンマ2ポリペプチド中の対応するセリン残基位置に非リン酸化可能アミノ酸を有するその相同体を含む単離タンパク質。配列番号2または3で記述されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含み、さらに位置Ser-273の非リン酸化可能アミノ酸をコードする請求項72記載の単離タンパク質。非相同ポリペプチドと操作可能的に連結される請求項72または73記載の単離タンパク質。Ser-273でリン酸化されるネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基と特異的に結合される抗体またはその断片を産生する単離ハイブリドーマの製造方法であって、以下の:aSer-273でリン酸化される前記ネズミPPARガンマ2あるいはネズミPPARガンマ2相同体またはその断片中の対応するセリン残基を含む組成物を用いて哺乳動物を免疫化すること、;b免疫化哺乳動物から脾細胞を単離すること;c単離脾細胞を不死化細胞株と融合して、ハイブリドーマを形成すること;そしてdその前記ポリペプチドと特異的に結合する抗体の産生のために個々のハイブリドーマをスクリーニングして、ハイブリドーマを単離することを包含する方法。請求項75記載の方法に従ったハイブリドーマにより産生される抗体。Ser-273でリン酸化されるネズミPPARガンマ2のアミノ酸配列あるいはネズミPPARガンマ2相同体またはその断片中の対応するセリン残基を含むポリペプチドと特異的に結合する単離抗体またはその抗原結合部分。アミノ酸配列:KTTDKpSPFVIYDCを有するエピトープを特異的に結合する請求項77記載の単離抗体またはその抗原結合部分。モノクローナル抗体である請求項77記載の抗体またはその抗原結合部分。ポリクローナル抗体である請求項77記載の抗体またはその抗原結合部分。キメラまたはヒト化抗体である請求項77記載の抗体またはその抗原結合部分。検出可能的に標識される請求項77記載の抗体またはその抗原結合部分。エフェクタードメインを含む請求項77記載の抗体またはその抗原結合部分。Fcドメインを含む請求項77記載の抗体またはその抗原結合部分。一本鎖抗体である請求項77記載の抗体またはその抗原結合部分。Fab断片である請求項77記載の抗体またはその抗原結合部分。Ser-273でリン酸化されるネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基を特異的に検出するための1つ以上の試薬を含むPPARガンマのリン酸化を抑制する化合物の能力を査定するためのキット。セリン273またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基でリン酸化され得ないタンパク質をコードする突然変異化PPARガンマ2遺伝子を含む非ヒト動物モデル。突然変異が非リン酸化可能アミノ酸への前記セリンの突然変異を含む請求項88記載の非ヒト動物モデル。前記動物が、セリン273またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基でリン酸化され得ないタンパク質をコードする突然変異化PPARガンマ2遺伝子に関してヘテロ接合性またはホモ接合性である特許請求の範囲88記載の非ヒト動物モデル。動物がノックインまたはトランスジェニック動物である請求項88記載の非ヒト動物モデル。動物が齧歯類および/またはマウスである請求項88記載の非ヒト動物モデル。被験体において調節される遺伝子の同定方法であって、以下の:aセリン273またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基でリン酸化され得ないタンパク質をコードする突然変異化PPARガンマ遺伝子を発現すること;b前記突然変異化PPARガンマ遺伝子の1つ以上の候補標的遺伝子の発現および/または活性のレベルを確定すること;そしてc対照に比して有意に変更された発現および/または活性を示す遺伝子を同定することを包含する方法。予測処置結果に従った試料の分類方法であって、以下の:a生物学的試料中の単数のマーカーまたは複数のマーカーの発現のレベル;ならびにb対照試料中の単数のマーカーまたは複数のマーカーの発現のレベルを比較することを包含する方法であり、この場合、単数のマーカーまたは複数のマーカーが表1および2に列挙されたマーカーからなる群から選択され、そして生物学的試料および対照試料中の単数のマーカーまたは複数のマーカーの発現のレベル間の差が予測処置結果に従った生物学的試料を分類する方法。予測処置結果を有すると思われる被験体の同定方法であって、以下の:a生物学的試料中の単数のマーカーまたは複数のマーカーの発現のレベル;ならびにb対照試料中の単数のマーカーまたは複数のマーカーの発現のレベルを比較することを包含する方法であり、この場合、単数のマーカーまたは複数のマーカーが表1および2に列挙されたマーカーからなる群から選択され、そして被験体からの生物学的試料および対照試料中の単数のマーカーまたは複数のマーカーの発現のレベル間の差が被験体における予測処置結果の見込みを予測する方法。予測処置結果が表1および2に列挙された処置結果から選択される請求項94または95記載の方法。予測処置結果がグルコース感受性増大の見込みである請求項94または95記載の方法。組織試料が、PPARガンマリガンドが被験体に投与された後に得られる請求項94記載の方法。生物学的試料が、PPARガンマリガンドが被験体に投与された後に得られる請求項95記載の方法。本発明は、少なくとも一部は、脂肪組織における脂質代謝の主要な調節因子であるペルオキシソーム増殖因子活性化受容体ガンマPPARガンマは、サイクリン依存性キナーゼ5cdk5例えば、PPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基のSer-273リン酸化により直接的にリン酸化されるという、ならびにこの共有的修飾が、本明細書中に記載されるような体重増加、肥満症、インスリン抵抗性およびその他の代謝障害と関連した遺伝子発現の病理学的パターンを引き起こすという発見を基礎にしている。さらに、本明細書中に記載されるように、PPARガンマのSer-273リン酸化を直接的に抑制するPPARガンマリガンドは、古典的PPARガンマアゴニスト活性化とは無関係に、このような代謝障害を逆転し得る。したがって、PPARガンマ上のホスホ-Ser-273の特異的抑制は、代謝障害の診断、予後および治療の状況で、古典的PPARガンマアゴニストを用いて観察される望ましくない副作用、例えば糖尿病および肥満症を排除し得る。本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明および特許請求の範囲から明らかになる。したがって、本発明は、ネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基のSer-273リン酸化を抑制する化合物の同定方法であって、前記ネズミPPARガンマ2またはネズミPPAガンマ2相同体中の対応するセリン残基を含む試料を試験化合物と接触させること;そしてネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基の前記Se-273リン酸化を抑制する試験化合物の能力を確定すること、それにより、ネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基の前記Ser-273リン酸化を選択的に抑制する化合物を同定することを包含する方法を提供する。一実施形態では、試料は、invitro、exvivoおよびinvivo試料からなる群から選択される。別の実施形態では、ネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基のSer-273リン酸化の抑制は、総PPARガンマに比してSer-273リン酸化PPARガンマの量を分析し、そして対照に対する比率例えば、標準条件下でのロシグリタゾンによる処置からの比率を比較することにより確定される。さらに別の実施形態では、当該方法は、試験化合物が、前記ネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基と直接的に結合するか否かを確定するステップをさらに包含する。別の態様では、PPARガンマを結合し、そして一細胞型における古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進する化合物の同定方法であって、化合物がPPARガンマを結合するか否かを確定すること;そして試験化合物の存在下で保持される細胞型の第一試料中のマーカーこの場合、マーカーは、表1または2に列挙されたマーカーの群から選択されるの量および/または活性を、対照である第二試料中のマーカーの量および/または活性と比較することここで、第二試料に比して、第一試料中の表1で列挙されたマーカーの有意に高い量および/または活性は、試験化合物がその細胞型における古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進するということを示し;および/または第二試料に比して、第一試料中の表2で列挙されたマーカーの有意に低い量および/または活性は、試験化合物がその細胞型における古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進するということを示すを包含する方法が提供される。一実施形態では、細胞型は、前脂肪細胞、成熟白色脂肪細胞、細胞、単球およびマクロファージからなる群から選択される。別の実施形態では、第一および/または第二試料は、invitro、exvivoおよびinvivo試料からなる群から選択される。さらに別の実施形態では、第一および/または第二試料は代謝障害の動物モデルから得られる。さらに別の実施形態では、第一および/または第二試料は、組織、全血、血清、血漿、頬掻爬物、唾液、脳脊髄液、尿、糞便および骨髄からなる群から選択される。別の実施形態では、第一および第二試料は一被験体から得られる単一試料の部分である。さらに別の実施形態では、第二試料は、試験化合物の非存在下で保持される第一試料と同じ細胞型の細胞を含む。さらに別の実施形態では、第二試料は、ロシグリタゾンで処置される第一試料と同じ細胞型の細胞を含む。別の実施形態では、有意に高い量および/または活性は、表1に列挙されたマーカーの量および/または活性を第二試料に比して少なくとも25上方調節することを包含する。さらに別の実施形態では、有意に低い量および/または発現は、表2に列挙されたマーカーの量および/または活性を第二試料に比して少なくとも25下方調節することを包含する。さらに別の実施形態では、マーカーの量は比較され、例えば、この場合、マーカーの量は、例えば、タンパク質と特異的に結合する試薬、例えば抗体、抗体誘導体および抗体断片、例えば、PPARガンマと結合する抗体、ならびにコンセンサスcdk5リン酸化部位を含むペプチドと結合する抗体を用いてマーカーのタンパク質発現のレベルを確定することにより確定される。さらに別の実施形態では、試料中のマーカーの発現のレベルは、転写ポリヌクレオチドまたはその部分例えばmRNAまたはcDNAの試料中の存在を検出することおよび/または転写ポリヌクレオチドを増幅することをさらに包含するにより査定されるか、あるいは緊縮ハイブリダイゼーション条件下でマーカーとアニールするかまたはポリヌクレオチドの一部分とアニールする転写ポリヌクレオチドの試料中の存在を検出することにより査定される。別の実施形態では、マーカーは、ネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基上のリン酸化Ser-273である。さらに別の実施形態では、代謝障害は、糖不耐性、インスリン抵抗性、高血圧症、異脂肪血症、肥満症、II型糖尿病、高血糖症、高インスリン血症、収縮期および拡張期血圧上昇、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症ならびに30より高い体格指数からなる群から選択される。さらに別の実施形態では、PPARガンマは配列番号1~7で記述されるアミノ酸配列を含む。さらに別の実施形態では、被験体における古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害を選択的に促進するためのPPARガンマを結合する化合物の効力の査定方法であって、aマーカーここで、マーカーは表1または2に列挙されたマーカーであるの量および/または活性を、第一の時点で被験体において検出すること;b化合物の投与後の少なくとも1つのその後の時点の間、ステップaを反復すること;そしてcステップaおよびbで検出された量および/または活性を比較することここで、少なくとも1つのその後の被験体試料に比して、第一被験体試料中の表1で列挙されたマーカーの有意に高い量および/または活性は、試験化合物がその被験体における古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進する、ということを示し;および/または少なくとも1つのその後の被験体試料に比して、第一被験体試料中の表2で列挙されたマーカーの有意に低い量および/または活性は、試験化合物がその被験体における古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進する、ということを示すを包含する方法が提供される。一実施形態では、被験体は、代謝障害のための処置を受け、代謝障害のための処置を完了し、および/または第一時点とその後の時点との間で代謝障害から寛解している。別の実施形態では、細胞型は、前脂肪細胞、成熟白色脂肪細胞、細胞、単球およびマクロファージからなる群から選択される。さらに別の実施形態では、第一および/または少なくとも1つのその後の試料は、exvivoおよびinvivo試料からなる群から選択される。さらに別の実施形態では、第一および/または少なくとも1つのその後の試料は、代謝障害の動物モデルから得られる。別の実施形態では、第一および/または少なくとも1つのその後の試料は、組織、全血、血清、血漿、頬掻爬物、唾液、脳脊髄液、尿、糞便および骨髄からなる群から選択される。さらに別の実施形態では、第一および/または少なくとも1つのその後の試料は、その被験体から得られる単一試料の一部分である。さらに別の実施形態では、第一および/または少なくとも1つのその後の試料は、その被験体から得られるプール試料の一部分である。別の実施形態では、当該方法はさらに、例えば、試験化合物からの結果と比較するためにロシグリタゾンによる処置を用いるために、ロシグリタゾンを用いてステップaおよびbを実施することを包含する。さらに別の実施形態では、有意に高い量および/または活性は、表1に列挙されたマーカーの量および/または活性を第二試料に比して少なくとも25上方調節することを包含する。さらに別の実施形態では、有意に低い量および/または発現は、表2に列挙されたマーカーの量および/または活性を第二試料に比して少なくとも25下方調節することを包含する。さらに別の実施形態では、マーカーの量が比較され、この場合、マーカーの量は、例えば、タンパク質と特異的に結合する試薬、例えば抗体、抗体誘導体および抗体断片、例えば、PPARガンマと結合する抗体、ならびにコンセンサスcdk5リン酸化部位を含むペプチドと結合する抗体を用いてマーカーのタンパク質発現のレベルを確定することにより確定される。さらに別の実施形態では、試料中のマーカーの発現のレベルは、転写ポリヌクレオチドまたはその部分例えばmRNAまたはcDNAの試料中の存在を検出することおよび/または転写ポリヌクレオチドを増幅することをさらに包含するにより査定されるか、あるいは緊縮ハイブリダイゼーション条件下でマーカーとアニールするかまたはポリヌクレオチドの一部分とアニールする転写ポリヌクレオチドの試料中の存在を検出することにより査定される。別の実施形態では、マーカーは、ネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基上のリン酸化Ser-273である。さらに別の実施形態では、代謝障害は、糖不耐性、インスリン抵抗性、高血圧症、異脂肪血症、肥満症、II型糖尿病、高血糖症、高インスリン血症、収縮期および拡張期血圧上昇、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症ならびに30より高い体格指数からなる群から選択される。さらに別の実施形態では、PPARガンマは、配列番号1~7で記述されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、被験体における古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害を選択的に促進するためのPPARガンマを結合する化合物の効力の査定方法は、対照を上回る抗代謝障害を促進するためのPPARガンマを結合する化合物の効力を査定するためにも用いられ得る。したがって、このような対照は、例えば、異なる用量、時間間隔および類似の変数で、対照に曝露されない、および/または化合物に曝露されない試料を包含し得る。このような方法により、薬剤療法を用いた、または他の療法を用いたモニタリングおよび/または治療介入のために、臨床医は所定の被験体を良好に層化することが可能になる。さらに別の実施形態では、代謝性疾患に苦しむ被験体の治療方法であって、PPARガンマを結合し、抗糖尿病活性を選択的に促進する化合物を被験体に投与し、それにより代謝性疾患に苦しむ被験体を治療することを包含する方法が提供される。一実施形態では、化合物は、ネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基のSer-273リン酸化を抑制する。別の実施形態では、化合物は製薬上許容可能な処方物中で投与される。さらに別の実施形態では、製薬上許容可能な処方物は経口処方物である。さらに別の実施形態では、化合物は小分子である。別の態様では、一細胞型における抗代謝障害活性を選択的に促進することにより代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症を処置するための化合物であって、PPARガンマ上のSer-273のリン酸化を抑制する化合物が提供される。一実施形態では、化合物は、ロシグリタゾンのPPARガンマアゴニスト機能の30未満を有する。別の実施形態では、化合物は、1~200nM未満のPPARガンマに関するEC50結合親和性を有する。さらに別の実施形態では、化合物は、同一条件下でロシグリタゾンに比して表1に列挙されたマーカーの発現を少なくとも30上方調節するか、および/または同一条件下でのロシグリタゾンに比して表2に列挙されたマーカーの発現を少なくとも30下方調節する。さらに別の実施形態では、代謝障害は、糖不耐性、インスリン抵抗性、高血圧症、異脂肪血症、肥満症、II型糖尿病、高血糖症、高インスリン血症、収縮期および拡張期血圧上昇、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症ならびに30より高い体格指数からなる群から選択される。さらに別の態様では、位置Ser-273に非リン酸化可能アミノ酸を有するネズミペルオキシソーム増殖因子活性化受容体ガンマ2ポリペプチド、あるいはネズミPPARガンマ2ポリペプチド中の対応するセリン残基位置に非リン酸化可能アミノ酸を有するその相同体をコードする単離核酸分子、またはその相補体が提供される。一実施形態では、単離核酸分子、またはその相補体は、配列番号2または3で記述されるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードし、さらに位置Ser-273の非リン酸化可能アミノ酸をコードする。別の実施形態では、別の実施形態では、単離核酸分子は非相同ポリペプチドをさらにコードする。さらに別の実施形態では、本発明の核酸分子を含むベクター例えば発現ベクターが提供され、そして本発明のベクターを含む宿主細胞も提供される。別の態様では、タンパク質の産生方法であって、タンパク質が産生されるまで適切な培地中で本発明の宿主細胞を培養することを包含する方法が提供される。一実施形態では、産生タンパク質はさらに、培地または宿主細胞から単離される。さらに別の実施形態では、位置Ser-273に非リン酸化可能アミノ酸を有するネズミペルオキシソーム増殖因子活性化受容体ガンマ2ポリペプチドまたはネズミPPARガンマ2ポリペプチド中の対応するセリン残基位置に非リン酸化可能アミノ酸を有するその相同体を含む単離タンパク質が提供される。一実施形態では、単離タンパク質は、配列番号2または3で記述されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含み、さらに位置Ser-273の非リン酸化可能アミノ酸をコードする。別の実施形態では、単離タンパク質は、非相同ポリペプチドと操作可能的に連結される。さらに別の態様では、Ser-273でリン酸化されるネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基と特異的に結合される抗体またはその断片を産生する単離ハイブリドーマの製造方法であって、Ser-273でリン酸化される前記ネズミPPARガンマ2あるいはネズミPPARガンマ2相同体またはその断片中の対応するセリン残基を含む組成物を用いて哺乳動物を免疫化すること;免疫化哺乳動物から脾細胞を単離すること;単離脾細胞を不死化細胞株と融合して、ハイブリドーマを形成すること;そしてその前記ポリペプチドと特異的に結合する抗体の産生のために個々のハイブリドーマをスクリーニングして、ハイブリドーマを単離することを包含する方法が提供される。別の態様では、本発明のハイブリドーマにより産生される抗体が提供される。さらに別の態様では、Ser-273でリン酸化されるネズミPPARガンマ2のアミノ酸配列あるいはネズミPPARガンマ2相同体またはその断片中の対応するセリン残基を含むポリペプチドと特異的に結合する単離抗体またはその抗原結合部分が提供される。一実施形態では、抗体またはその抗原結合部分は、アミノ酸配列:KTTDKpSPFVIYDCを有するエピトープを特異的に結合する。別の実施形態では、抗体またはその抗原結合部分は、モノクローナル、ポリクローナル、キメラまたはヒト化抗体である。さらに別の実施形態では、抗体またはその抗原結合部分は、検出可能的に標識される。さらに別の実施形態では、抗体またはその抗原結合部分は、エフェクタードメイン、Fcドメインを含み、一本鎖抗体であるかまたはFab断片である。さらに別の態様では、Ser-273でリン酸化されるネズミPPARガンマ2またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基を特異的に検出するための1つ以上の試薬を含むPPARガンマのリン酸化を抑制する化合物の能力を査定するためのキットが提供される。別の態様では、セリン273またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基でリン酸化され得ないタンパク質をコードする突然変異化PPARガンマ2遺伝子を含む非ヒト動物モデルが提供される。一実施形態では、突然変異は、非リン酸化可能アミノ酸、例えばアラニンへの前記セリンの突然変異を含む。別の実施形態では、非ヒト動物モデルは、セリン273またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基でリン酸化され得ないタンパク質をコードする突然変異化PPARガンマ2遺伝子に関してヘテロ接合性またはホモ接合性である。別の実施形態では、非ヒト動物モデルは、ノックインまたはトランスジェニック動物である。さらに別の実施形態では、非ヒト動物モデルは齧歯類および/またはマウスである。さらに別の態様では、被験体において調節される遺伝子の同定方法であって、セリン273またはネズミPPARガンマ2相同体中の対応するセリン残基でリン酸化され得ないタンパク質をコードする突然変異化PPARガンマ遺伝子を発現すること;前記突然変異化PPARガンマ遺伝子の1つ以上の候補標的遺伝子の発現および/または活性のレベルを確定すること;そして対照に比して有意に変更された発現および/または活性を示す遺伝子を同定することを包含する方法が提供される。さらに別の態様では、予測処置結果に従った試料の分類方法であって、生物学的試料中の単数のマーカーまたは複数のマーカーの発現のレベル;ならびに対照試料中の単数のマーカーまたは複数のマーカーの発現のレベルを比較することを包含する方法であり、この場合、単数のマーカーまたは複数のマーカーが表1および2に列挙されたマーカーからなる群から選択され例えば、リン酸化Ser-273-PPARガンマまたはその相同体、そして生物学的試料および対照試料中の単数のマーカーまたは複数のマーカーの発現のレベル間の差が予測処置結果に従った生物学的試料を分類する方法が提供される。一実施形態では、予測処置結果は、表1および2に列挙された処置結果、例えばインスリン感受性増大から選択される。別の実施形態では、生物学的試料は、生物学的試料が得られた被験体にPPARガンマリガンドが投与された後に得られる。別の態様では、予測処置結果を有すると思われる被験体の同定方法であって、生物学的試料中の単数のマーカーまたは複数のマーカーの発現のレベル;ならびに対照試料中の単数のマーカーまたは複数のマーカーの発現のレベルを比較することを包含する方法であり、この場合、単数のマーカーまたは複数のマーカーが表1および2に列挙されたマーカーからなる群から選択され、そして被験体からの生物学的試料および対照試料中の単数のマーカーまたは複数のマーカーの発現のレベル間の差が被験体における予測処置結果の見込みを予測する方法が提供される。一実施形態では、予測処置結果は、表1および2に列挙された処置結果、例えばインスリン感受性増大から選択される。別の実施形態では、生物学的試料は、PPARガンマリガンドが被験体に投与された後に得られる。本発明のある種の実施形態が、当業者に利用可能な知識に従って、本明細書中に記載される1つ以上の方法、組成物、キット等とともに用いられ得るということも、理解されるべきである。本発明をより容易に理解し得るために、一定の用8A9Eを先ず定義する。詳細な説明全体を通して、付加的な定義が記述される。1つのaおよび1つのanという冠詞は、本明細書中で用いる場合、冠詞の文法的対象のうちの1つまたは1つより多くすなわち、少なくとも1つを指す。例として、1つのan素子は、1つの素子または1つより多くの素子を意味する。変更された量のバイオマーカーまたは変更されたレベルのバイオマーカーという用語は、対照試料におけるものと比較した場合、ある試料中の少なくとも一部例えば、表1および2に記述したマーカーにおける本発明のバイオマーカーの、増大または低減された発現および/または活性を指す。変更された量のバイオマーカーという用語は、正常、対照試料中のバイオマーカーのタンパク質レベルと比較した場合、ある試料中のバイオマーカーの、増大または低減されたタンパク質レベルも包含する。少なくとも一部の例えば、表1および2に記述したバイオマーカー本発明のバイオマーカーの変更されたレベルの発現という用語は、試験試料、例えば代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症に罹患している被験体由来の試料中のバイオマーカーの発現レベルまたはコピー数を指し、これは、発現またはコピー数を査定するために用いられる検定の標準誤差より大きいかまたは小さく、そして、対照試料例えば、関連疾患を有さない健常被験体からの試料中の、少なくとも一部例えば、表1および2に記述したバイオマーカーの本発明のバイオマーカーの発現レベルまたはコピー数の、あるいはいくつかの対照試料中の少なくとも一部例えば、表1および2に記述したバイオマーカーの本発明のバイオマーカーの平均発現レベルまたはコピー数の、少なくとも2倍、少なくとも6倍、少なくとも8倍、少なくとも10倍または少なくとも20倍またはそれ以上である。発現の変更されたレベルは、発現またはコピー数を査定するために用いられる検定の標準誤差より大きいかまたは小さく、そして対照試料例えば、関連疾患を有さない健常被験体からの試料中の少なくとも一部例えば、表1および2に記述したバイオマーカーの本発明のバイオマーカーの発現レベルまたはコピー数、あるいはいくつかの対照試料中の少なくとも一部例えば、表1および2に記述したバイオマーカーの本発明のバイオマーカーの平均発現レベルまたはコピー数の、少なくとも2倍、少なくとも3倍、少なくとも4倍、少なくとも5倍、少なくとも10倍またはそれ以上である。バイオマーカーの変更された活性という用語は、正常、対照試料中のバイオマーカーの活性と比較して、疾患状態で、例えば代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症試料中で、増大されるかまたは低減されるバイオマーカーの活性を指す。バイオマーカーの変更された活性は、例えばバイオマーカーの変更された発現、バイオマーカーの変更されたタンパク質レベル、バイオマーカーの変更された構造、あるいは、例えばバイオマーカーと同一のまたは異なる経路に関与する他のタンパク質との変更された相互作用の結果であり得る。生物学的活性は、本明細書中で記載される場合、遺伝子発現変化および/または表1および2に列挙された検定により測定した場合、本出願中で記述されるような被験体応答を包含し得る。バイオマーカーの変更された構造という用語は、バイオマーカー遺伝子またはマーカータンパク質内の突然変異の存在または突然変異、例えば正常または野生型の遺伝子またはタンパク質と比較した場合に、バイオマーカーの発現または活性に影響を及ぼす突然変異を指す。例えば突然変異としては、染色体間および染色体内転位、置換、欠失および挿入突然変異が挙げられるが、これらに限定されない。突然変異は、バイオマーカーのコードまたは非コード領域に存在し得る。結合化合物は、結合組成物、例えば小分子、抗体、ペプチド、ペプチドまたは非ペプチドリガンド、タンパク質、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド類似体、例えばペプチド核酸、レクチン、あるいは標的タンパク質または分子と特異的に結合し得る任意のその他の分子存在物、あるいはタンパク質の複合体のような当該分析物との安定複合体形成を指す。結合部分は、分子タグが直接または間接的に結合され得る任意の分子であって、分析物と特異的に結合し得る分子を意味する。結合部分としては、抗体、抗体結合組成物、ペプチド、タンパク質、核酸、ならびに約1000ダルトンまでの分子量を有し、そして水素、炭素、酸素、窒素、イオウおよびリンからなる群から選択される原子を含有する有機分子が挙げられるが、これらに限定されない。バイオマーカーまたはマーカーは、変更され得る遺伝子、mRNAまたはタンパク質であって、この場合、上記変更は代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症に関連する。変更は、正常または健常組織または細胞例えば、対照におけるその量、構造および/または活性と比較した場合に、代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症組織または代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症細胞における量、構造および/または活性に認められ、疾患状態、例えば代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症と関連し得る。例えば、少なくとも一部が、代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症と関連するかまたは抗代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症療法に対する応答を予測する本発明のバイオマーカーは、正常、健常組織または細胞と比較して、代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症組織または代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症細胞における、変更されたヌクレオチド配列、アミノ酸配列、染色体転座、染色体内逆位、コピー数、発現レベル、タンパク質レベル、タンパク質活性またはメチル化状態を有し得る。さらに、バイオマーカーは、代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症のような疾患状態に関連した組織または細胞中に存在する場合、その構造が変更され、例えば突然変異化され突然変異を含有し、例えば、置換、欠失または挿入により、例えばヌクレオチドまたはアミノ酸レベルで野生型配列と異なる分子を包含する。いくつかの実施形態では、本発明のバイオマーカーは、少なくとも一部は、表1および2に列挙したバイオマーカーの群から選択される。相補的なは、2つの核酸鎖の領域間、または同一核酸鎖の2つの領域間の配列相補性という広範な概念を指す。第一核酸領域のアデニン残基は、残基がチミンまたはウラシルである場合、第一領域と逆平行である第二核酸の残基と特定の水素結合を形成し得る塩基対合、ということが知られている。同様に、第一核酸鎖のシトシン残基は、残基がグアニンである場合、第一領域と逆平行である第二核酸の残基と塩基対合し得る、ということが知られている。2つの領域が逆平行に整列される場合、第一領域の少なくとも1つのヌクレオチド残基が第二領域の残基と塩基対合し得るならば、核酸の第一領域は、同一のまたは異なる核酸の第二領域と相補的である。ある実施形態では、第一領域は第一部分を含み、そして第二領域は第二部分を含んで、それにより、第一および第二部分が逆平行に整列される場合、第一部分のヌクレオチド残基の少なくとも約50、少なくとも約75、少なくとも約90または少なくとも約95が第二部分のヌクレオチド残基と塩基対合し得る。他の実施形態では、第一部分のヌクレオチド残基はすべて、第二部分のヌクレオチド残基と塩基対合し得る。遺伝子のコピー数またはバイオマーカーのコピー数は、特定遺伝子産物をコードする細胞中のDNA配列の数を指す。一般的に、所定の遺伝子に関して、哺乳動物は各遺伝子の2つのコピーを有する。しかしながら、コピー数は、遺伝子増幅または重複により増大され、あるいは欠失により低減され得る。本明細書中で用いる場合、糖尿病という用語は、多数の周知の症状を指す。インスリン抵抗性は、グルコース負荷に対する正常応答を上回る循環インスリンレベルが、正常血糖状態を維持するために必要とされる状態と定義されるFordES,etal.JAMA.2002287:356-9。インスリン抵抗性、ならびに療法に対するインスリン抵抗性を有する被験体の応答は、インスリン抵抗性に対する恒常性モデル査定HOMA-IRスコアインスリン抵抗性の信頼できる指標であるを査定することにより定量され得るKatsukiA,etal.DiabetesCare2001;24:362-5。恒常性査定モデルHOMA-IRスコアによるインスリン抵抗性の概算は、式GalvinP,etal.DiabetMed1992;9:921-8:HOMA-IR=[絶食時血清インスリンμU/mL]×[絶食時血漿グルコースmmol/L/22.5]により算定される。グルコース許容値低下IGTまたは2型糖尿病の発症の素質を有する被験体は、正常血糖を有するものであり、高インスリン血症は、定義により、インスリン抵抗性である。インスリン抵抗性を有する典型的被験体は、通常は体重超過または肥満である。前糖尿病という用語は、個体が2型糖尿病を発症し易い状態である。前糖尿病は、グルコース許容値低下症の定義を拡大して、高い正常範囲100mg/dL以内の絶食時血糖値J.B.Meigs,etal.Diabetes2003;52:1475-1484および絶食時高インスリン血症血漿インスリン濃度上昇を有する個体を包含する。重篤な健康への脅威として前糖尿病を同定するための科学的および医学的基礎は、米国糖尿病学会と国立糖尿病、消化器および腎疾患研究所により共同で発行された2型糖尿病の防止または遅延DiabetesCare2002;25:742-749という表題の立場声明に割付されている。インスリン抵抗性を有すると思われる個体は、2つ以上の以下の属性を有する者である:1体重超過または肥満;2高血圧;3高脂血症;4IGTまたは2型糖尿病の診断に関する1以上の1.sup.st度。インスリン抵抗性は、HOMA-IRスコアを算定することにより、これらの個体で確証され得る。本発明の目的のために、インスリン抵抗性は、>4.0のHOMA-IRスコア、あるいはグルコースおよびインスリン検定を実施する研究室に関して定義される場合の正常の上限を上回るHOMA-IRスコアを個体が有する臨床症状と定義される。2型糖尿病は、125mg/dl6.94mmol/Lより大きい絶食時血糖または血清グルコース濃度を被験者が有する症状と定義される。基質から解離するバイオマーカーの実質的画分を伴わずに、基質が流体例えば、標準生理食塩水クエン酸塩、pH7.4ですすがれ得るよう、バイオマーカーは、基質と共有的にまたは非共有的に会合される場合、基質に固定される。ハザード比は、本明細書中で用いる場合、相対的危険に関する概算を得るために用いられる統計学的方法を指す。ハザード比は、ある群対別の群の予測される危険の間の比である。例えば、特にセリン273でのPPARガンマリン酸化状態に関しては、PPARガンマリガンドが代謝障害を処置するのに有効であるか否かに関して、PPARガンマリガンドで処置される被験体集団対PPARガンマリガンドなしで処置される被験体集団が査定され得る。相同性または同一性という用語は、本明細書中で互換的に用いる場合、2つのポリヌクレオチド配列間の、または2つのポリペプチド配列間の配列類似性を指し、同一性がより厳密な比較である。同一性または相同性パーセントおよび同一性または相同性は、2つ以上のポリヌクレオチド配列または2つ以上のポリペプチド配列の比較で見出される配列類似性のパーセンテージを指す。配列類似性は、2つ以上のポリヌクレオチド配列間の塩基対配列任意の適切な方法により確定した場合における類似性パーセントを指す。2つ以上の配列は、0~100類似の間のどこか、またはその間の任意の整数値であり得る。同一性または類似性は、比較の目的のために一列に並べられ得る各配列中の一位置を比較することにより確定され得る。比較される配列中の一位置が同一ヌクレオチド塩基またはアミノ酸により占有される場合には、分子はその位置で同一である。ポリヌクレオチド配列間の類似性または同一性の程度は、ポリヌクレオチド配列により共有される位置での同一または整合ヌクレオチドの数の一関数である。ポリペプチド配列の同一性の程度は、ポリペプチド配列により共有される位置での同一アミノ酸の数の一関数である。ポリペプチド配列の相同性または類似性の程度は、ポリペプチド配列により共有される位置でのアミノ酸の数の一関数である。実質的相同性という用語は、本明細書中で用いる場合、少なくとも50、少なくとも60、少なくとも65、少なくとも70、少なくとも75、少なくとも80、少なくとも85、少なくとも90、少なくとも95またはそれ以上の相同性を指す。ありそうに思われるは、本明細書中で用いる場合、事項、対象、事物または人が生じる確率増大、例えば、少なくとも5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200またはそれ以上あるいは任意の範囲を含めてを生じることを指す。したがって、一実施形態では、本発明のPPARガンマリガンドによる処置に応答すると思われる被験体は、少なくとも一部は、抗代謝障害活性が、参照被験体または被験体の群に比して、古典的PPARガンマ活性化を上回って選択的に抗代謝障害活性が選択的に促進されるよう、PPARガンマによる処置に対して応答する確率増大を示す。代謝障害および肥満関連障害という用語は、本明細書中では互換的に用いられ、被験体における異常代謝すなわち、それにより生命過程および活性のためにエネルギーが提供される生細胞中での化学変化により引き起こされるかまたは特性化される障害、疾患または症状を包含する。代謝障害は、異所性熱産生または異所性脂肪細胞例えば、褐色または白色脂肪細胞含量または機能に関連した疾患、障害または症状を包含する。代謝障害は、1つ以上のバイオマーカーその断片を含むの発現、構造および/または発現の誤調節例えば、下方調節または上方調節、および/または表1および2に列挙した検定により特性化され得る。代謝障害は、細胞機能、例えば細胞増殖、成長、分化または移動、恒常性の細胞性調節、細胞間または細胞内情報伝達;組織機能、例えば肝機能、筋肉機能または脂肪細胞機能;生物体における全身性応答、例えばホルモン性応答例えば、インスリン応答に有害に作用し得る。代謝障害の例としては、肥満症、例えばインスリン抵抗性肥満症、糖尿病、非インスリン依存性真性糖尿病NIDDMまたはH型糖尿病、II型糖尿病、インスリン抵抗性、例えばグルコース許容値低下、糖不耐性、アテローム硬化症、アテローム性疾患、心疾患、高血圧症、卒中、X症候群、過食症、内分泌異常、トリグリセリド貯蔵病、バルデービードル症候群、ローレンスムーン症候群、パラデーラブハートウィリ症候群、ウェルナー症候群、脂質生合成、脂質運搬、トリグリセリドレベル、血漿レベルおよび血漿コレステロールに関連した機能不全、高脂血症、遊離脂肪酸上昇、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、低密度リポタンパク質-LDL-コレステロール上昇、極低密度リポタンパク質-VLDL-コレステロール上昇、中密度リポタンパク質-IDL-コレステロール上昇、または高密度リポタンパク質-HDL-コレステロール低減に関連した異脂肪血症が挙げられる。代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症は、代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症の少なくとも1つの症候が軽減され、終結され、遅くされ、または防止されると、抑制される。本明細書中で用いる場合、代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症は、代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症の再発または転移が低減され、遅くされ、遅延され、または防止されても、抑制される。さらに、代謝障害は、1つ以上の別個の表現型と関連する。例えば、被験体の体格指数BMIは、体重kg÷身長mの二乗と定義され、したがって、BMIはkg/m2の単位を有する。体重超過は、個体が25kg/m2以上および30kg/m2未満のBMIを有する症状、と定義される。いくつかの実施形態では、肥満症は、個体が30kg/m2またはそれ以上のBMIを有する症状、と定義される。別の態様では、肥満症という用語は、いくつかの実施形態で、胴囲対腰囲比が男性1.0および女性0.8であると定義され、別の態様では、インスリン抵抗性および前糖尿病の発症の危険を定義する内臓型肥満を意味するために用いられる。正常血糖は、70mg/dl3.89mmol/Lより大きく、110mg/dl6.11mmol/L未満の正常範囲内の絶食時血糖濃度を被験体が有する状態と定義される。絶食時という語は、医学用語としての通常の意味を有する。グルコース許容値低下IGTは、110mg/dlより大きく、126mg/dl7.00mmol/L未満の絶食時血糖濃度または絶食時血清グルコース濃度、あるいは140mg/dl7.78mmol/Lより大きく、200mg/dl11.11mmol/L未満の食後2時間血糖または血清グルコース濃度を被験体が有する症状と定義される。グルコース許容値低下という用語は、絶食時グルコース減損の症状に適用することも意図される。高インスリン血症は、被験体がインスリン抵抗性を有し、正常血糖を有する場合も有さない場合もあり、絶食時または食後血清または血漿インスリン濃度が、インスリン抵抗性を示さず、<1.0男性または<0.8女性の胴囲対腰囲比を有する正常のやせた個体の値より上昇される症状と定義される。糖尿病、前糖尿病およびインスリン感作、インスリン抵抗性改善またはインスリン抵抗性低下本明細書中では互換的に用いられるという用語が、本明細書中で記載されている。本明細書中で用いる場合、代謝症候群は、これらの因子のうちの1つより多くが単一個体中に存在する場合に存在する症状を指す。因子としては、以下のものが挙げられる:中心性肥満腹部およびその周囲の不均衡脂肪組織、アテローム性異常脂質血症これらは、血中脂肪障害の一ファミリー、例えば高トリグリセリド、低HDLコレステロールおよび高LDLコレステロール血管系、例えば動脈壁におけるプラーク形成を促し得るを包含する、高血圧130/85mmHg以上、インスリン抵抗性または糖不耐性インスリンまたは血糖を適正に使用できないこと、慢性プロトロンビン状態例えば、血液中の高フィブリノーゲンまたはプラスミノーゲン活性因子阻害剤[-1]レベルにより特性化、ならびに慢性前炎症状態例えば、血液中の高感受性C反応性タンパク質の正常より高いレベルにより特性化。いくつかの実施形態では、成人高コレステロール血症の検出、評価および治療に関する米国コレステロール教育プログラムNCEP専門委員会の第三次報告成人治療パネルIIIは、代謝障害の診断に用いられ得る。NCEP判定基準下で、代謝症候群は、単一被験体における以下の構成成分のうちの3つ以上の存在により臨床的に同定され得る:1中心性肥満胴囲で測定女性:35インチより大きい胴囲;男性:40インチより大きい胴囲;2150mg/dL以上の絶食時血中トリグリセリド;3血中HDLコレステロール女性:50mg/dL未満;男性40mg/dL未満;4130/85mmHg以上の血圧;ならびに5110mg/dL以上の絶食時グルコース。他の特徴、例えばインスリン抵抗性例えば絶食時血中インシュリン増大、プロトロンビン状態または前炎症状態は、一般に臨床的診断のためには必要とされないが、しかしそれらは確実に代謝症候群も示し、これらの属性に関する追跡試験を用いて、代謝症候群の診断をさらに確証し得る。例えば、インスリン抵抗性は、NCEP判定基準の非存在下でさえ、しばしば代謝症候群を示す。バイオマーカー核酸は、少なくとも一部は、本発明のバイオマーカーによりコードされるかまたは対応する核酸例えばDNA、mRNA、cDNAである。例えば、このようなバイオマーカー核酸分子としては、表1および2で記述される核酸配列のいずれかの全体または一部配列、あるいはこのような配列の相補体またはハイブリダイズ断片を含むDNA例えば、ゲノムDNAおよびcDNAが挙げられる。バイオマーカー核酸分子は、表1および2で記述される核酸配列のいずれかの全体または一部配列、あるいはこのような配列の相補体を含むDNAも包含するが、この場合、チミジン残基はすべて、ウリジン残基と置換される。バイオマーカータンパク質は、少なくとも一部は、本発明のバイオマーカーによりコードされるかまたはそれに対応するタンパク質である。バイオマーカータンパク質は、表1および2で記述される配列またはその断片のいずれかによりコードされるタンパク質の全体または一部配列を含む。タンパク質およびポリペプチドという用語は、本明細書中で互換的に用いられる。特定のタンパク質のアミノ酸配列と、遺伝暗号以下に示すにより定義されるようなタンパク質をコードし得るヌクレオチド配列との間には、既知の且つ明確な対応が存在する。同様に、特定の核酸のヌクレオチド配列と、遺伝暗号により定義されるようなその核酸によりコードされるアミノ酸配列との間には、既知の且つ明確な対応が存在する。遺伝暗号の重要な且つ周知の特徴はその冗長性であり、それにより、タンパク質を作製するために用いられるアミノ酸のほとんどに関して、1つより多くのコード化ヌクレオチド三つ組が用いられ得る例えば、上記例証。したがって、多数の異なるヌクレオチド配列が、所定のアミノ酸配列をコードし得る。このようなヌクレオチド配列は、すべての生物体における同一アミノ酸配列の産生を引き起こすため、機能的に等価であるとみなされるしかし、ある種の生物体は、それらが別の方法で行なうより効率的にいくつかの配列を翻訳し得る。さらに、時として、プリンまたはピリミジンのメチル化変異体が所定のヌクレオチド配列中に見出され得る。このようなメチル化は、トリヌクレオチドコドンと対応するアミノ酸との間のコード化関係に影響を及ぼさない。さらに、関連コドン表に基づいてコード化アミノ酸を具体的に変更するために、特定コドンのヌクレオチドを如何に突然変異化するかを、当業者は理解している。バイオマーカーの正常コピー数、あるいはバイオマーカーの発現の正常レベルは、生物学的試料、例えば代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症に罹患していない被験体からの、例えばヒトからの組織、全血、血清、血漿、頬掻爬物、唾液、脳脊髄液、尿、糞便および骨髄を含有する試料中のバイオマーカーの発現レベル、コピー数である。本明細書中で用いる場合、肥満症は、30kg/m2以上の体格指数BMIを指す米国国立衛生研究所;成人における体重超過および肥満の同定、評価および治療に関する臨床ガイドライン1998。しかしながら、本発明は、少なくとも一部は、25kg/m2以上、26kg/m2以上、27kg/m2以上、28kg/m2以上、29kg/m2以上、29.5kg/m2以上、または29.9kg/m2以上これらはすべて、典型的には、体重超過として言及されるの体格指数BMIにより特性化される疾患、障害または症状を包含するようにも意図される米国国立衛生研究所;成人における体重超過および肥満の同定、評価および治療に関する臨床ガイドライン1998。本明細書中で記載される肥満は、遺伝的であれ、環境的であれ、任意の原因によるものであり得る。肥満を引き起こすかまたは肥満の原因であり得る障害の例としては、過食および過食症、多嚢胞性卵巣疾患、頭蓋咽頭腫、パラデーウィリ症候群、フローリッヒ症候群、II型糖尿病、GH欠損被験体、正常変異体低身長、ターナー症候群、ならびに代謝活性低減または総除脂肪体重のパーセンテージとしての安静時エネルギー消費の低減を示す他の病理学的状態、例えば急性リンパ芽球性白血病を有する小児が挙げられる。肥満の防止は、肥満症状の開始前に処置が施される場合に、肥満症または肥満関連障害が起きないようにすることを指す。さらに、肥満症または肥満関連障害にすでに罹患しているかまたはその症候を有する被験体で処置が開始される場合、このような処置は、肥満症または肥満関連障害、ならびに肥満の医学的続発症、例えばアテローム硬化症、II型糖尿病、多嚢胞性卵巣疾患、心臓血管性疾患、骨関節炎、皮膚科学的障害、高血圧症、インスリン抵抗性、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症および胆石症を防止するかまたはその進行を防止すると予測される。肥満症の治療は、哺乳動物のBMIを約25.9未満に低減すること、そしてある期間の間、例えば少なくとも約6ヶ月間、その体重を維持することを指す。治療は、代謝活性の増大を適切に生じる。本発明のバイオマーカーの過剰発現または有意に高レベルの発現、コピー数および/または活性は、少なくとも一部例えば、表1および2に記述したバイオマーカーは、発現またはコピー数を査定するために用いられる検定の標準誤差より大きい、そして対照試料例えば、代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症に罹患していない健常被験体からの試料中の少なくとも一部例えば、表1および2に記述したバイオマーカーの本発明のバイオマーカーの発現レベルまたはコピー数、あるいはいくつかの対照試料中の少なくとも一部例えば、表1および2に記述したバイオマーカーの本発明のバイオマーカーの平均発現レベルまたはコピー数の、少なくとも2倍、少なくとも3倍、少なくとも4倍、少なくとも5倍、少なくとも10倍またはそれ以上である試験試料中の発現レベル、コピー数および/または活性を指す。プローブという用語は、具体的に意図された標的分子、例えば少なくとも一部は本発明のバイオマーカーと選択的に結合し得る任意の分子を指す。プローブは、当業者により合成され得るし、あるいは適切な生物学的調製物から得られる。標的分子の検出の目的のために、プローブは、本明細書中に記載されるように標識されるよう具体的に設計され得る。プローブとして利用され得る分子の例としては、RNA、DNA、タンパク質、抗体および有機単量体が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書中で用いる場合、PPARガンマは、核内受容体の周知のファミリーの一成員を指す。さらにPPARガンマのSer-273またはリン酸化Ser-273は、N末端からのマウスPPARガンマポリペプチドのアミノ酸番号付けを指す。したがって、マウスPARガンマポリペプチドのセリン273は多数の種を通して保存され、そして本発明の組成物および方法が、上記セリン273に対応する他の種、例えばヒトにおけるアイソフォーム、相同体、オルソログのセリン残基に等しく良好に当てはまる、と当業者は容易に理解する。例えば代表的PPARガンマ種は、PPAR核内受容体スーパーファミリーの他の成員例えば、PPARアルファおよびPPARデルタと対照して、本明細書中で以下のように提示される:PPARガンマアゴニストは、本明細書中で用いる場合、任意の機序により、PPARガンマまたはRXRとの直接結合により、または遺伝子発現に影響を及ぼすPPARガンマまたはPPARガンマ-RXRへテロ二量体の能力に作用する任意の他の機序を介して間接的に、PPARガンマの、またはPPARガンマとレチノイドX受容体RXRとのヘテロ二量体の活性を増大するかまたは増大を引き起こす任意の化合物を指す。古典的PPARガンマアゴニストは、本明細書中で用いる場合、代謝障害を助長することと関連づけられるPPARガンマ媒介性遺伝子発現を促すPPARガンマリガンドを指す。古典的PPARガンマアゴニストは、脂肪生成遺伝子の発現を促進する例えば、以下の表2に記述した遺伝子、活性および検定を参照。PPARガンマアゴニスト、ロシグリタゾンにより調節される遺伝子は、一例である。古典的PPARガンマアゴニストに関連した副作用としては、例えば体重増加、白色脂肪細胞増加、体液停留、末梢性浮腫および肺浮腫が挙げられる。非典型的PPARガンマアゴニストまたは選択的PPARガンマアゴニストは、本明細書中で用いる場合、主におよび/または専ら、PPARガンマのcdk5媒介性リン酸化により調節される遺伝子の発現を調節するPPARガンマリガンドを指す。例としては、抗糖尿病、褐色脂肪および/または呼吸/酸素消費増大遺伝子が挙げられる例えば、表1参照。非典型的PPARガンマリガンドの一例は、例えばMRL24である。ある実施形態では、非典型的PPARガンマアゴニストは、古典的PPARガンマアゴニストに関連した副作用、例えば体重増加、白色脂肪細胞増加、体液停留、末梢性浮腫および肺浮腫のうちの1つ以上を伴うことなく、抗代謝障害活性を促進し得る。したがって、本発明の例示的非典型的PPARガンマリガンドは、少なくとも一部は、例えば、血糖低減作用、血中脂質低減作用、血中インスリン低減作用、インスリン感受性増強作用、インスリン抵抗性改善作用、体重低減作用、身体中心部周囲胴囲:腰囲比として測定低減作用、および/または体脂肪量低減作用を有する化合物または薬学的組成物を含む。PPARガンマリガンドとしては、チアゾリジンジオン例えば、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、MK-0533、MK767KRP-297、MCC-555、ネトグリタゾン、バラグリタゾン、リボグリタゾン、非-チアゾリジネジオン例えば、JTT-501、LSN862、DRF4832、LM4156、LY510929、LY519818、TY51501、X334、ある種のチロシンベースの誘導体例えば、GW1929、GW7845、フェニル酢酸ベースの誘導体、フェノキサジンフェニルプロパン酸誘導体例えば、DRF2725、DRF2189、桂皮酸およびジヒドロ桂皮酸ベースの誘導体例えば、テサグリタザールAZ242、ならびに3-フェニル-7-プロピルベンズイソキサゾールAdamsAD、etal.BioorgMedChemLett.200313:931-5、MRL-20、MRL-24、nTZDpa、SR145、SR147、Mbx-102およびBVT.13が挙げられるが、これらに限定されない。処置に対して応答するための応答性ならびにこの動詞の他の形態は、本明細書中で用いる場合、PPARガンマリガンドによる処置に対する被験体の反応を指す。一例として、被験体における抗代謝活性が約10、20、30、40、50、60、70、80、90またはそれ以上、遅延される場合、被験体はPPARガンマリガンドによる処置に応答する。別の例では、処置が施されない場合に予測される平均余命より約5、10、20、30、40、50またはそれ以上延長された平均余命を被験体が経験する場合、被験体は非典型的PPARガンマリガンドによる処置に応答する。別の例では、代謝障害なしの生存増大、総体的生存または代謝障害の進行までの時間増大を被験体が示す場合、被験体はPPARガンマリガンドによる処置に応答する。試料、組織試料、被験体試料、被験体細胞または組織試料あるいは検体は、各々、被験体の組織または被験体から得られる類似の細胞の収集物を指す。組織試料の供給源は、新鮮な、凍結された、および/または保存された器官、組織試料、生検または吸引物からのような固形組織;血液または任意の血液成分;体液、例えば脳脊髄液、羊水、腹水または間質液;あるいは被験体の妊娠または発生の任意の時期からの細胞であり得る。組織試料は、天然では実際に組織と混ぜ合わせられない化合物、例えば防腐剤、凝固防止剤、緩衝剤、固定剤、栄養素、抗生物質等を含有し得る。被験体におけるバイオマーカーの量、例えば本発明のバイオマーカーの、少なくとも一部の例えば表1および2に記述したバイオマーカー発現またはコピー数は、量を査定するために用いられる検定の標準誤差より大きい量だけ、あるいはその量の少なくとも2、3、4、5、10倍またはそれ以上、正常レベルよりバイオマーカーの量がそれぞれ大きいかまたは低い場合、バイオマーカーの正常量より有意に高いかまたは低い。代替的には、その量がバイオマーカーの正常量より、素それぞれ、少なくとも約2倍、少なくとも約3倍、少なくとも約4倍または少なくとも約5倍高いかまたは低い場合、被験体におけるバイオマーカーの量は、正常量より有意に高いかまたは低いと考えられ得る。本明細書中で用いる場合、被験体および患者という用語は互換的に用いられる。本明細書中で用いる場合、被験体およb被験体複数という用語は、動物、例えば哺乳動物、例えば非霊長類例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ロバ、ヤギ、ラクダ、ネコ、イヌ、モルモット、ラット、マウス、ヒツジならびに霊長類例えば、サル、例えばカニクイザル、ゴリラ、チンパンジーおよびヒトを指す。本明細書中で用いる場合、時間経過は、初期事象とその後の事象との間の時間の量を指す。例えば、被験体の代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症に関しては、時間経過は被験体の疾患に関連し得るし、疾患の経過における有意の事象を評価することにより測定され得るが、この場合、第一事象は診断であり、その後の事象は有意の体重損失、インスリン感受性等であり得る。進行までの時間またはTTPは、代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症の進行に対する処置あるいは検閲の開始から測定されるような時間を指す。検閲は、試験終了から、あるいは処置の変化から得られる。進行までの時間は、例えばカプリンメーヤープロット進行までの時間は特定時間に亘って進行していない確率を表し、その時間は処置の開始と進行またな検閲までの間の時間であるの場合と同じ確率を表し得る。転写ポリヌクレオチドは、少なくとも一部は本発明のバイオマーカーの転写、ならびに、もしあれば、転写物の正常転写後プロセシング例えば、スプライシング、および転写物の逆転写により作られる成熟RNAの全部または一部と相補的であるかまたは相同であるポリヌクレオチド例えば、RNA、cDNA、あるいはRNAまたはcDNAのうちの一方の類似体である。処置する、処置ならびにこの語の別の形態は、代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症の増大を遅らせ、代謝障害例えば、糖尿病および/または肥満症を改善させ、被験体の予測生存時間および/または代謝障害の進行までの時間を延長する等のためのPPARガンマリガンドの投与を指す。少なくとも一部例えば、表1および2に記述したバイオマーカーは本発明のバイオマーカーの低発現または有意に低レベルの発現、コピー数および/または活性は、発現またはコピー数を査定するために用いられる検定の標準誤差より大きい、例えば対照試料例えば、関連疾患を有さない健常被験体からの試料中の少なくとも一部例えば、表1および2に記述したバイオマーカーの本発明のバイオマーカーの発現レベルまたはコピー数、あるいはいくつかの対照試料中の少なくとも一部例えば、表1および2に記述したバイオマーカーの本発明のバイオマーカーの平均発現レベルまたはコピー数の、少なくとも2分の1、少なくとも3分の1、少なくとも4分の1、少なくとも5分の1または少なくとも10文の1またはそれ以下である試験試料における発現レベルまたはコピー数を指す。~がありそうにないは、事象、事項、対象、事物または人がある言及に関連して起こる確率低減を指す。したがって、PPARガンマリガンドによる処置に応答しそうにない被験体は、参照被験体または被験体の群に比して、PPARガンマリガンドによる処置に応答する確率の低減を示す例えば、少なくとも5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200またはそれ以上あるいは任意の範囲を含めての低減。I.本発明の核酸本発明の一態様は、マウスのセリン273でリン酸化され得ないPPARガンマポリペプチドまたはその生物学的活性部分をコードする単離核酸分子を利用する組成物および方法に、ならびに対応するセリン残基でリン酸化され得ない例えばヒトを含めた上記セリン273に対応する他の種における対応するアイソフォーム、相同体およびオルソログすなわち、本明細書中では以後、非リン酸化可能なPPARガンマと呼ぶ、ならびに非リン酸化可能PPARガンマポリペプチドまたはその生物学的活性部分をコードする核酸すなわちmRNAを同定するためのハイブリダイゼーションプローブとして用いるために十分な核酸断片に関する。本明細書中で用いる場合、核酸分子という用語は、DNA分子すなわち、cDNAまたはゲノムDNAおよびRNA分子すなわちmRNA、ならびにヌクレオチド類似体を用いて生成されるDNAまたはRNAの類似体を包含するよう意図される。核酸分子は、一本鎖または二本鎖DNAであり得る。単離核酸分子は、核酸の天然供給源中に存在する他の核酸分子から分離されるものである。単離核酸は、その核酸が由来する生物体のゲノムDNA中で核酸と天然に側面を接する配列すなわち、核酸の5’および3’末端に位置する配列を有さない。例えば、種々の実施形態では、単離非リン酸化可能PPARガンマ核酸分子は、核酸が由来する細胞すなわち、褐色脂肪細胞のゲノムDNA中の核酸分子と天然に側面を接するヌクレオチド配列約5kb、4kb、2kb、1kb、0.5kbまたは0.1kb未満を含有し得る。さらに、単離核酸分子、例えばcDNA分子は、他の細胞性物質を、または組換え技法により産生される場合は培地を、あるいは化学合成される場合は化学的前駆体または他の化学物質を実質的に含有し得ない。本発明の核酸分子、少なくとも一部すなわち、表1および2に列挙した核酸分子、あるいは表1および2に示したヌクレオチド配列またはその一部分すなわち、400、450、500またはそれ以上のヌクレオチドと少なくとも約50、少なくとも約60、少なくとも約70、少なくとも約80、少なくとも約90および少なくとも約95またはそれ以上例えば、約96、96.5、97、97.5、98、98.5、99、99.5、99.6、99.7、99.8、99.9またはそれ以上相同であるヌクレオチド配列が、標準分子生物学的技法ならびに本明細書中で提供される配列情報を用いて単離され得る。例えば、ヒト非リン酸化可能PPARガンマcDNAは、ハイブリダイゼーションプローブとして表1および2に示したヌクレオチド配列の全部または一部を、ならびに標準ハイブリダイゼーション技法すなわち、Sambrook,J.,Fritsh,E.F.,andManiatis,T.MolecularCloning:ALaboratoryManual.2nd,ed.,ColdSpringHarborLaboratory,ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,NY,1989に記載を用いて、Stratagene,LaJolla,CA,orClontech,PaloAlto,CAからのヒトの肝臓、心臓、腎臓または脳細胞株から単離され得る。さらに、表1および2に示したヌクレオチド配列、あるいは表1および2に示したヌクレオチド配列と少なくとも約50、少なくとも約60、少なくとも約70、少なくとも約80、少なくとも約90および少なくとも約95またはそれ以上相同であるヌクレオチド配列の全部または一部を包含する核酸分子は、表1および2に示したヌクレオチド配列または相同ヌクレオチド配列の配列を基礎にして設計されたオリゴヌクレオチドプライマーを用いて、ポリメラーゼ連鎖反応および/または部位特異的突然変異誘発により単離され得る。例えばmRNAは、肝臓細胞、心臓細胞、腎臓細胞、脳細胞または褐色脂肪細胞から単離されすなわち、Chirgwinetal.1979Biochemistry18:5294-5299のグアニジニウム-チオシアネート抽出手法により、そしてcDNAは、逆転写酵素すなわち、モロニーMLV逆転写酵素Gibco/BRL,Bethesda,MDから入手可能;またはAMV逆転写酵素SeikagakuAmerica,Inc.,St.Petersburg,FLから入手可能を用いて調製され得る。PCR増幅のための合成オリゴヌクレオチドプライマーは、表1および2に示したヌクレオチド配列または相同ヌクレオチド配列を基礎にして設計され得る。本発明の核酸は、標準PCR増幅技法に従って、鋳型としてcDNAまたは代替的にはゲノムDNA生殖系列および体細胞ゲノムDNAの両方を含めてを、ならびに適切なオリゴヌクレオチドプライマーを用いて増幅され得る。そのようにして増幅された核酸は、適切なベクター中にクローン化されて、DNA配列解析により特性化され得る。さらに、非リン酸化可能PPARガンマヌクレオチド配列に対応するオリゴヌクレオチドは、標準合成技法により、すなわち自動DNA合成機を用いて調製され得る。非リン酸化可能PPARガンマヌクレオチド配列を基礎にしたプローブを用いて、同一または相同のタンパク質をコードする転写物またはゲノム配列を検出し得る。ある実施形態では、プローブはさらに、それに結合される標識基を含み、すなわち、標識基は、放射性同位体、蛍光化合物、酵素または酵素補因子であり得る。このようなプローブは、例えば、被験体からの細胞の試料中のセリン273コード核酸でリン酸化され得ないPPARガンマポリペプチドまたはその生物学的活性部分のレベルを測定することにより、すなわち、非リン酸化可能PPARガンマmRNAレベルを検出することにより、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質を発現する細胞または組織を同定するための診断試験キットの一部として用いられ得る。他の非リン酸化可能PPARガンマファミリー成員をコードし、したがって表1および2に列挙した配列の野生型PPARガンマ配列と異なるヌクレオチド配列を有する核酸分子は、本発明の一部であるよう意図される。さらに、異なる種からの非リン酸化可能PPARガンマタンパク質をコードし、したがって表1および2に列挙した非リン酸化可能PPARガンマ配列と異なるヌクレオチド配列を有する核酸分子は、本発明の範囲内であるよう意図される。例えば、ラットまたはサルの非リン酸化可能PPARガンマcDNAは、ヒトおよび/またはマウス非リン酸化可能PPARガンマ核酸配列の既知のヌクレオチド配列および工学処理突然変異に基づいて同定されおよび/または合成され得る。一実施形態では、アラニンへのセリン273の突然変異例えば273番目のアミノ酸はリン酸化されるようにできないを有するマウスPPARガンマポリペプチドに関して本明細書中に記載される以下の生物学的活性のうちの1つ以上をタンパク質またはその部分が保持するよう、表1および2に列挙したアミノ酸配列と十分に相同であるアミノ酸配列を含むタンパク質またはその部分を、本発明の核酸分子はコードする。セリンまたはリン酸化可能アミノ酸残基、例えば、トレオニンまたはチロシンのコード化を防止する任意の核酸突然変異が意図される。当該種における遺伝暗号の縮重およびコドンアルゴリズムに基づいて、任意のおよびすべてのこのような突然変異は、当業者に容易に理解される。別の実施形態では、タンパク質は、表1および2に列挙した全アミノ酸配列と、少なくとも約50、少なくとも約60、少なくとも約70、少なくとも約80、少なくとも約90および少なくとも約95またはそれ以上相同である。本発明の非リン酸化可能PPARガンマ核酸分子によりコードされるタンパク質の部分は、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の生物学的活性部分である。本明細書中で用いる場合、非リン酸化可能PPARガンマの生物学的活性部分という用語は、本明細書中に記載されるような1つ以上の判定基準例えば、Ser-273で非リン酸化可能なコンセンサスcdk5リン酸化モチーフおよび/または突然変異化PPARガンマに従って、古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進する非リン酸化可能PPARガンマの一部分、例えばドメイン/モチーフを包含するよう意図される。本明細書中に記載されるような標準結合検定、例えば免疫沈降および酵母2-ハイブリッド検定を実施して、PPARガンマリガンド依存性または非依存性であり得る検定において当該標的と相互作用する非リン酸化可能PPARガンマタンパク質またはその生物学的活性部分の能力を確定し得る。本発明の非リン酸化可能PPARガンマファミリー成員が、少なくとも一部が、表1および2に列挙したバイオマーカーを調整するか否かを確定するために、invitro転写検定が実施され得る。このような検定を実施するために、当該遺伝子の全長プロモーター/エンハンサー領域が、レポーター遺伝子、例えばクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼCATまたはルシフェラーゼと連結されて、宿主細胞例えば、肝臓細胞、例えばFao肝癌細胞またはCOS細胞中に導入され得る。次いで、同一宿主細胞は、非リン酸化可能PPARガンマ分子をコードする核酸分子をトランスフェクトされ得る。CATまたはルシフェラーゼ活性を試験し、それを、非リン酸化可能PPARガンマ分子をコードする核酸を含有しない細胞中のCATまたはルシフェラーゼ活性と比較することにより、非リン酸化可能PPARガンマ分子の作用が測定され得る。CATまたはルシフェラーゼ活性の増大または低減は、当該遺伝子の発現の調整を示す。別の実施形態では、表1および2に列挙したバイオマーカーの発現が別個の生物学的経路に導く事象のカスケードにおける重要な構成成分であることが規定であるため、この検定は、このような経路、例えば脂肪酸取込み、組織学、遺伝子発現、非結合酸素消費、ミトコンドリア生合成等による褐色脂肪の誘導、酸素消費増大によるinvivoでのエネルギー消耗、発熱、食物摂取等の変化なし、血清脂肪酸レベル、血清アディポカイン例えばアディポネクチンレベル、白色脂肪貯留物、体脂肪量、除脂肪体重、絶食時グルコース、グルコース耐容性、インスリン耐容性、インスリン感受性、インスリン依存性グルコース摂取、TNF-アルファ分泌による肥満誘導性炎症の抑制、MCP1炎症遺伝子発現等を調整する非リン酸化可能PPARガンマ分子の能力も測定し得る。このような分析は、当該技術分野で周知である。本発明はさらに、遺伝暗号の縮重のために表1および2に示したヌクレオチド配列およびその部分と異なり、したがって当業者に容易に理解される多数の方法で非リン酸化可能PPARガンマタンパク質をコードする核酸分子を包含する。例えば、変化は、表1および2のヌクレオチド配列中への突然変異により導入され、それによりコード化非リン酸化可能PPARガンマタンパク質のアミノ酸配列に変化をもたらすが、実施例に記載されるS273A突然変異を有する非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の機能的能力を変更することはない、ということを当業者はさらに理解する。例えば、非必須アミノ酸残基でのアミノ酸置換をもたらすヌクレオチド置換は、配列中に作られ得る。非必須アミノ酸残基は、非リン酸化可能PPARガンマの活性を変更することなく、非リン酸化可能PPARガンマの野生型配列例えば、表1および2に列挙した配列から変更され得る残基であるが、一方、必須アミノ酸残基は、非リン酸化可能PPARガンマ活性に必要とされる。しかしながら、他のアミノ酸残基例えば、マウスおよびヒト間で保存されないかまたは半保存されるだけであるものは、活性に不可欠であるというわけではなく、したがって、非リン酸化可能PPARガンマ活性を変更することなく変更が容易であると思われる。さらに、発熱および/または脂肪生成に関連した非リン酸化可能PPARガンマ機能に不可欠であるが、しかし糖新生に関連した非リン酸化可能PPARガンマ機能に不可欠でないアミノ酸残基は、変更が容易であると思われる。したがって、本発明の別の態様は、非リン酸化可能PPARガンマ活性に不可欠でないアミノ酸残基における変化を含有する非リン酸化可能PPARガンマタンパク質をコードする核酸分子に関する。このような非リン酸化可能PPARガンマタンパク質は、本明細書中に記載される非利が活性のうちの少なくとも1つを未だ保持する表1および2と、アミノ酸配列が異なる。配列同一性または相同性は、本明細書中で用いる場合、2つのポリペプチド分子間の、あるいは2つの核酸分子間の配列類似性を指す。2つの比較配列の両方における位置が同一塩基またはアミノ酸単量体サブユニットにより占められる場合、例えば2つのDNA分子の各々における一位置がアデニンにより占有される場合には、分子はその位置で相同であるかまたは配列同一性である。2つの配列間の相同性または配列同一性のパーセントは、2つの配列により共有される整合または相同同一位置の数を比較される位置の数で割って100をかけた一関数である。例えば、2つの配列における10の位置のうちの6つが同一である場合には、2つの配列は60相同であるかまたは60の配列同一性を有する。例として、DNA配列ATTGCCおよびTATGGCは、50の相同性または配列同一性を共有する。一般的に、2つの配列が最大相同性を生じるよう一列に並べられる場合に、比較がなされる。別記しない限り、ループアウト領域、例えば配列のうちの1つにおける欠失または挿入から生じるものは、不整合とみなされる。2つの配列間の配列の比較ならびに相同性の確定は、数学的アルゴリズムを用いて成し遂げられ得る。アラインメントは、クラスタル法を用いて実施され得る。多重アラインメントパラメーターとしては、GAPペナルティー=10、ギャップ長ペナルティー=10が挙げられる。DNAアラインメントに関しては、ペアワイズアラインメントパラメーターは、Htuple=2、ギャップペナルティー=5、ウィンドウ=4および保存される対角線=4であり得る。タンパク質アラインメントに関しては、ペアワイズアラインメントパラメーターは、Ktuple=1、ギャップペナルティー=3、ウィンドウ=5および保存される対角線=5であり得る。ある実施形態では、2つのアミノ酸配列間の同一性は、ニードルマンブンシュアルゴリズムJ.Mol.Biol.48:444-4531970を用いて決定されるが、これは、GCGソフトウェアパッケージオンラインで入手可能のGAPプログラム中に組入れられており、Blossom62マトリックスまたはPAM250マトリックス、ならびにギャップ重量:16、14、12、10、8、6または4、および長さ重量:1、2、3、4、5または6を用いる。さらに別の実施形態では、2つのヌクレオチド配列間の同一性は、GCGソフトウェアパッケージオンラインで入手可能中のGAPプログラムを用いて決定され、NWSgapdna.CMPマトリックス、ならびにギャップ重量:40、50、60、70または80、および長さ重量:1、2、3、4、5または6を用いる。別の実施形態では、2つのアミノ酸またはヌクレオチド配列間の同一性は、E.マイヤーズW.ミラーアルゴリズムCABIOS、4:11-171989を用いて決定されるが、これは、ALIGNプログラムバージョン2.0オンラインで入手可能中に組入れられており、PAM120重量残基表、ギャップ長ペナルティー:12およびギャップペナルティー:4を用いる。表1および2に列挙したタンパク質と相同である非リン酸化可能PPARガンマタンパク質をコードする単離核酸分子は、1つ以上のアミノ酸置換、付加または欠失がコード化タンパク質中に導入されるよう、表1および2のヌクレオチド配列または相同ヌクレオチド配列中に1つ以上のヌクレオチド置換、付加または欠失を導入することにより作製され得る。突然変異は、標準技法、例えば部位特異的突然変異誘発およびPCR媒介性突然変異誘発により、表1および2または相同ヌクレオチド配列中に導入され得る。保存的アミノ酸置換は、1つ以上の予測される非必須アミノ酸残基でなされる。保存的アミノ酸置換は、アミノ酸残基が、類似の側鎖を有するアミノ酸残基と取り替えられるものである。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当該技術分野で限定されている。これらのファミリーとしては、塩基性側鎖を有するアミノ酸例えばリシン、アルギニン、ヒスチジン、酸性側鎖を有するアミノ酸例えばアスパラギン酸、グルタミン酸、非荷電極性側鎖を有するアミノ酸例えばグリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン、非極性側鎖を有するアミノ酸例えばアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、ベータ分枝鎖側鎖を有するアミノ酸例えばトレオニン、バリン、イソロイシン、ならびに芳香族側鎖を有するアミノ酸例えばチロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジンが挙げられる。したがって、非リン酸化可能PPARガンマ中の予測非必須アミノ酸残基は、同一側鎖ファミリーの別のアミノ酸残基と置き換えられる。代替的には、別の実施形態では、突然変異は、例えば飽和突然変異誘発により、非リン酸化可能PPARガンマコード配列の全部または一部に沿って無作為に導入され、その結果生じる突然変異体は、本明細書中に記載される非リン酸化可能PPARガンマ活性に関してスクリーニングされて、非リン酸化可能PPARガンマ活性を保有する突然変異体を同定し得る。表1および2から選択される配列の突然変異誘発後、コード化タンパク質が組換え的に発現され本明細書中にきさいされるように、そして例えば本明細書中に記載の検定を用いて、タンパク質の活性が確定され得る。非リン酸化可能PPARガンマレベルは、転写分子またはタンパク質の発現を検出するための広範な種々の周知の方法のいずれかにより査定され得る。このような方法の非限定例としては、タンパク質の検出のための免疫学的方法、タンパク質精製方法、タンパク質機能または活性検定、核酸ハイブリダイゼーション方法、核酸逆転写方法および核酸増幅方法が挙げられる。いくつかの実施形態では、非リン酸化可能PPARガンマレベルは、遺伝子転写物例えばmRNAを測定することにより、翻訳化タンパク質の量の測定により、または遺伝子産物活性の測定により確証される。発現レベルは、種々の方法で、例えば、mRNAレベル、タンパク質レベルまたはタンパク質活性を検出することによりモニタリングされ、そのいずれかは、標準技法を用いて測定され得る。検出は、遺伝子発現例えばゲノムDNA、cDNA、mRNA、タンパク質または酵素活性のレベルの定量を包含し得るし、代替的には、特に対照レベルと比較した場合の遺伝子発現のレベルの定性的査定であり得る。検出されているレベルの種類は、ブンミャクから明らかになる。特定の実施形態では、非リン酸化可能PPARガンマmRNA発現レベルは、当該技術分野で既知の方法を用いて、生物学的試料で、insituによりならびにinvivoフォーマットにより、確定され得る。生物学的試料という用語は、被験体から単離された組織、細胞、生物学的流体およびその単離物、ならびに被験体内に存在する組織、細胞および流体を包含するよう意図される。多数の発現検出方法が、単離RNAを用いる。invitro方法に関しては、mRNAの単離に対して選択しない任意のRNA単離技法が、細胞からのRNAの精製のために利用され得る例えば、Ausubeletal.,ed.,CurrentProtocolsinMolecularBiology,JohnWileySons,NewYork1987-1999参照。さらに、当業者に周知の技法、例えば単一段階RNA単離工程1989、米国特許第4,843,155号を用いて、多数の組織試料が容易に加工処理され得る。単離mRNAは、ハイブリダイゼーションまたは増幅検定で、例えばサザンまたはノーザン分析、ポリメラーゼ連鎖反応分析およびプローブアレイこれらに限定されないで用いられ得る。mRNAレベルの検出のための一診断方法は、単離mRNAを、検出されている遺伝子によりコードされるmRNAとハイブリダイズし得る核酸分子プローブと接触させることを包含する。核酸プローブは、例えば、全長cDNAまたはその一部分、例えば少なくとも7、15、30、50、100、250または500ヌクレオチド長のオリゴヌクレオチドであり、非リン酸化可能PPARガンマをコードするmRNAまたはゲノムDNAと、緊縮条件下で特異的にハイブリダイズするのに十分である。本発明の診断検定に用いるための他の適切なプローブは、本明細書中に記載されている。mRNAとプローブとのハイブリダイゼーションは、非リン酸化可能PPARガンマが発現されつつあることを示す。一フォーマットでは、mRNAは固体表面に固定され、そして例えば単離mRNAをアガロースゲル上で移動させて、mRNAをゲルから膜、例えばニトロセルロースに移すことにより、プローブと接触される。代替的フォーマットでは、プローブ単数または複数は、固体表面に固定され、そして例えば遺伝子チップアレイ、例えばAffymetrix商標遺伝子チップアレイで、mRNAがプローブ単数または複数と接触される。非リン酸化可能PPARガンマmRNA発現レベルのレベルを検出するのに用いるために、既知のmRNA検出方法を、当業者は容易に適合し得る。試料中の非リン酸化可能PPARガンマmRNA発現レベルを確定するための代替的方法は、例えばrtPCRMullis,1987,U.S.PatentNo.4,683,202に記述された実験的実施形態、リガーゼ連鎖反応Barany,1991,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,88:189-193、自己持続配列複製法Guatellietal.,1990,Proc.Natl.Acad.Sci.USA87:1874-1878、転写増幅系Kwohetal.,1989,Proc.Natl.Acad.Sci.USA86:1173-1177、Q-ベータレプリカーゼLizardietal.,1988,Bio/Technology6:1197、ローリングサークル型複製Lizardietal.,U.S.PatentNo.5,854,033または任意の他の核酸増幅方法による核酸増幅と、その後の、当業者に周知の技法を用いた増幅分子の検出の工程を包含する。これらの検出スキームは、このような分子が非常に少数で存在する場合、核酸分子の検出のために特に有用である。本明細書中で用いる場合、増幅プライマーは、遺伝子の5’または3’領域それぞれ、および-鎖、またはその逆とアニーリングし得る、そして間に短い領域を含有する一対の核酸分子であると定義される。概して、増幅プライマーは、約10~30ヌクレオチド長であり、約50~200ヌクレオチド長の領域の側面に位置する。適切な条件下で、適切な試薬を用いて、このようなプライマーは、プライマーが側面に位置するヌクレオチド配列を含む核酸分子の増幅を可能にする。insitu方法に関しては、mRNAは検出前に細胞から単離される必要がない。このような方法では、細胞または組織試料は、既知の組織学的方法を用いて調製/加工処理される。次いで試料は、支持体、典型的にはガラススライド上に固定され、次に、非リン酸化可能PPARガンマmRNAとハイブリダイズし得るプローブと接触される。絶対非リン酸化可能PPARガンマ発現レベルに基づいた決定の実行に代わるものとして、正規化非リン酸化可能PPARガンマ発現レベルに基づいて決定がなされ得る。非非リン酸化可能PPARガンマ遺伝子、例えば構成的に発現されるハウスキーピング遺伝子の発現と、その発現を比較することにより、絶対非リン酸化可能PPARガンマ発現レベルを補正することにより、発現レベルが正規化される。正規化のための適切な遺伝子としては、ハウスキーピング遺伝子、例えばアクチン遺伝子、または上皮細胞特異的遺伝子が挙げられる。この正規化は、ある試料、例えば一被験体試料中の発現レベルと、別の試料、例えば正常試料との比較、あるいは異なる供給源からの試料間の比較を可能にする。非リン酸化可能PPARガンマタンパク質のレベルまたは活性は、発現ポリペプチドを検出するかまたは定量することによっても検出および/または定量され得る。非リン酸化可能PPARガンマポリペプチドは、当業者に周知の多数の手段のいずれかにより検出され、定量され得る。これらの例としては、分析的生化学的方法、例えば電気泳動、高速液体クロマトグラフィーHPLC、薄層クロマトグラフィーTLC、高拡散クロマトグラフィー等、あるいは種々の免疫学的方法、例えば流体またはゲル沈降反応、免疫拡散法単一または二重、免疫電気泳動、ラジオイムノアッセイRIA、酵素結合免疫吸着検定法ELISA、免疫蛍光検定、ウエスタンブロッティング等が挙げられる。細胞が非リン酸化可能PPARガンマを発現するか否かを確定するのに用いるために既知のタンパク質/抗体検出方法を、当業者は容易に適合し得る。上記の非リン酸化可能PPARガンマタンパク質をコードする核酸分子のほかに、本発明の別の態様は、それに対してアンチセンスである単離核酸分子に関する。アンチセンス核酸は、タンパク質をコードするセンス核酸と相補的である、すなわち二本鎖cDNA分子のコード鎖と相補的であるかまたはmRNA配列と相補的であるヌクレオチド配列を含む。したがって、アンチセンス核酸は、センス核酸と水素結合し得る。アンチセンス核酸は、全非リン酸化可能PPARガンマコード鎖と、またはその一部分のみと相補的であり得る。一実施形態では、アンチセンス核酸分子は、非リン酸化可能PPARガンマをコードするヌクレオチド配列のコード鎖のコード領域に対してアンチセンスである。コード領域という用語は、アミノ酸残基に翻訳されるコドンを含むヌクレオチド配列の領域を指す。別の実施形態では、アンチセンス核酸分子は、非リン酸化可能PPARガンマをコードするヌクレオチド配列のコード鎖の非コード領域に対してアンチセンスである。非コード領域という用語は、アミノ酸に翻訳されないコード領域の側面に位置する5’および3’配列を指すすなわち、5’および3’非翻訳領域とも呼ばれる。II.組換え発現ベクターおよび宿主細胞本発明の別の態様は、非リン酸化可能PPARガンマまたはその一部分をコードする核酸を含有するベクターおよび発現ベクターの使用に関する。本明細書中で用いる場合、ベクターという用語は、それが連結された別の核酸を運搬し得る核酸分子を指す。ベクターの一型はプラスミドであって、これは、付加的DNAセグメントが結紮され得る環状二本鎖DNAループを指す。ベクターのほかの型はウイルスベクターであって、この場合、付加的DNAセグメントはウイルスゲノムに結紮され得る。ある種のベクターは、それらが導入される宿主細胞中での自律的複製が可能である例えば、細菌複製起点を有する細菌ベクターおよびエピソーム型哺乳動物ベクター。他のベクター例えば、非エピソーム型哺乳動物ベクターは、宿主細胞中への導入時に宿主細胞のゲノム中に組み込まれ、それにより宿主ゲノムと一緒に複製される。さらに、ある種のベクターは、それらが操作可能的に連結される遺伝子の発現を指図し得る。このようなベクターは、本明細書中では、発現ベクターと呼ばれる。概して、組換えDNA技術において有用性を有する発現ベクターは、しばしば、プラスミドの形態である。プラスミドは最も一般的に用いられる形態のベクターであるので、本明細書中では、プラスミドおよびベクターは互換的に用いられ得る。しかしながら、本発明は、等価の機能を供するこのような他の形態の発現ベクター、例えばウイルスベクター例えば、複製欠損性レトロウイルス、アデノウイルスおよびアデノ随伴ウイルスを包含するよう意図される。非リン酸化可能PPARガンマ核酸分子を含むアデノウイルスベクターは、ある実施形態において用いられる。本発明の組換え発現ベクターは、宿主細胞中での核酸の発現に適した形態で本発明の核酸を含むが、これは、発現されるべき核酸配列と操作可能的に連結される、発現のために用いられるべき宿主細胞を基礎にして選択される1つ以上の調節配列を、組換え発現ベクターが包含する、ということを意味する。組換え発現ベクター内で、操作可能的に連結されるとは、ヌクレオチド配列の発現を可能にするように例えばinvitro転写/翻訳系で、あるいはベクターが宿主細胞中に導入される場合には宿主細胞中で、当該ヌクレオチド配列が調節配列単数または複数と連結される、ということを意味するものである。調節配列という用語は、プロモーター、エンハンサーおよびその他の発現制御素子例えばポリアデニル化シグナルを包含するよう意図される。このような調節配列は、例えばGoeddel;GeneExpressionTechnology:MethodsinEnzymology185,AcademicPress,SanDiego,CA1990に記載されている。調節配列としては、多数の型の宿主細胞におけるヌクレオチド配列の構成的発現を指図するもの、ならびにある種の宿主細胞だけのヌクレオチド配列の発現を指図するもの例えば、組織特異的調節配列が挙げられる。発現ベクターの設計は、形質転換されるべき宿主細胞の選択、所望されるタンパク質の発現のレベル等といったような因子によって決まる、と当業者は理解する。本発明の発現ベクターは、宿主細胞中に導入され、それにより、本明細書中で記載されるような核酸によりコードされるタンパク質またはペプチド、例えば融合タンパク質またはペプチド例えば、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質、突然変異体型の非リン酸化可能PPARガンマ、融合タンパク質等を産生し得る。本発明の組換え発現ベクターは、原核生物または真核生物細胞における非リン酸化可能PPARガンマの発現のために設計され得る。例えば、非リン酸化可能PPARガンマは、細菌細胞、例えば大腸菌、昆虫細胞バキュロウイルス発現ベクターを用いる、酵母細胞または哺乳動物細胞中で発現され得る。適切な宿主細胞は、Goeddel,GeneExpressionTechnology:MethodsinEnzymology185,AcademicPress,SanDiego,CA1990でさらに考察されている。代替的には、組換え発現ベクターは、例えば、T7プロモーター調節配列およびT7ポリメラーゼを用いて、invitroで転写され、翻訳され得る。原核生物におけるタンパク質の発現は、融合または非融合タンパク質の発現を指図する構成性または誘導性プロモーターを含有するベクターを用いて大腸菌で、非常にしばしば実行される。融合ベクターは、多数のアミノ酸をその中でコードされるタンパク質に、通常は組換えタンパク質のアミノ末端に付加する。このような融合ベクターは、典型的には、以下の3つの目的に役立つ:1組換えタンパク質の発現を増大するため;2組換えタンパク質の溶解性を増大するため;ならびに3アフィニティー精製におけるリガンドとして作用することにより組換えタンパク質の精製を手助けするため。しばしば、融合発現ベクターでは、タンパク質分解的切断部位は、融合部分と組換えタンパク質との接合部に導入されて、融合部分からの組換えタンパク質の分離とその後の融合タンパク質の精製を可能にする。このような酵素、ならびにそれらのコグネイト認識配列は、因子Xa、トロンビンおよびエンテロキナーゼを包含する。典型的融合発現ベクターとしては、pGEXPharmaciaBiotechInc;Smith,D.B.andJohnson,K.S.1988Gene67:31-40、pMALNewEnglandBiolabs,Beverly,MAおよびpRIT5Pharmacia,Piscataway,NJが挙げられるが、これらは、それぞれ、グルタチオンS-トランスフェラーゼGST、マルトースE結合タンパク質またはプロテインAを標的組換えタンパク質と融合する。一実施形態では、非リン酸化可能PPARガンマのコード配列は、pGEX発現ベクター中でクローン化されて、N末端からC末端に、GST-トロンビン結合部位-非リン酸化可能PPARガンマを含む融合タンパク質をコードするベクターを作製する。融合タンパク質は、グルタチオン-アガロース樹脂を用いて、アフィニティークロマトグラフィーにより精製され得る。GSTと融合されない組換え非リン酸化可能PPARガンマは、タンパク質とトロンビンとの融合の切断により回収され得る。適切な誘導性非融合大腸菌発現ベクターの例としては、pTrcAmannetal.,1988Gene69:301-315およびpET11dStudieretal.,GeneExpressionTechnology:MethodsinEnzymology185,AcademicPress,SanDiego,California199060-89が挙げられる。pTrcベクターからの標的遺伝子発現は、ハイブリッドtrp-lac融合プロモーターからの宿主RNAポリメラーゼ転写に頼る。pET11dベクターからの標的遺伝子発現は、共発現ウイルスRNAポリメラーゼT7gn1により媒介されるT7gn10-lac融合プロモーターからの転写に頼る。このウイルスポリメラーゼは、lacUV5プロモーターの転写制御下で、T7gn1遺伝子を保有する常在性λプロファージから宿主株BL21DE3またはHMS174DE3により供給される。大腸菌における組換えタンパク質発現を最大にするための一戦略は、タンパク質分解的に組換えタンパク質を切断する能力を減損した宿主細菌中でタンパク質を発現することであるGottesman,S.,GeneExpressionTechnology:MethodsinEnzymology185,AcademicPress,SanDiego,California1990119-128。別の戦略は、各アミノ酸に関する個々のコドンが大腸菌で利用されるものであるよう、発現ベクター中に挿入されるべき核酸の核酸配列を変更することであるWadaetal.1992NucleicAcidsRes.20:2111-2118。本発明の核酸配列のこのような変更は、標準DNA合成技術により実行され得る。別の実施形態では、非リン酸化可能PPARガンマ発現ベクターは、酵母発現ベクターである。出芽酵母における発現のためのベクターの例としては、pYepSec1Baldari,etal.,1987EMBOJ.6:229-234、pMFaKurjanandHerskowitz,1982Cell30:933-943、pJRY88Schultzetal.,1987Gene54:113-123およびpYES2InvitrogenCorporation,SanDiego,CAが挙げられる。代替的には、非リン酸化可能PPARガンマは、バキュロウイルス発現ベクターを用いて昆虫細胞中で発現され得る。培養昆虫細胞例えば、Sf9細胞でのタンパク質の発現のために利用可能なバキュロウイルスベクターとしては、pAcシリーズSmithetal.1983Mol.CellBiol.3:2156-2165およびpVLシリーズLucklowandSummers1989Virology170:31-39が挙げられる。さらに別の実施形態では、本発明の核酸は、哺乳動物発現ベクターを用いて哺乳動物細胞中で発現される。哺乳動物発現ベクターの例としては、pCDM8Seed,B.1987Nature329:840およびpMT2PCKaufmanetal.1987EMBOJ.6:187-195が挙げられる。哺乳動物細胞で用いられる場合、発現ベクターの制御機能は、しばしば、ウイルス調節因子により提供される。例えば、一般に用いられるプロモーターは、ポリオーマ、アデノウイルス2、サイトメガロウイルスおよびシミアンウイルス40に由来する。原核生物および真核生物細胞の両方に関する他の適切な発現系に関しては、Sambrook,J.,Fritsh,E.F.,andManiatis,T.MolecularCloning:ALaboratoryManual.2nd,ed.,ColdSpringHarborLaboratory,ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,NY,1989の第16および17章を参照されたい。別の実施形態では、組換え哺乳動物発現ベクターは、特定細胞型における核酸の発現を指図し得る例えば、組織特異的調節因子は、核酸を発現するために用いられる。組織特異的調節因子は、当該技術分野で既知である。適切な組織特異的プロモーターの非限定例としては、アルブミンプロモーター肝臓特異的;Pinkertetal.1987GenesDev.1:268-277、リンパ系特異的プロモーターCalameandEaton1988Adv.Immunol.43:235-275、特に、T細胞受容体のプロモーターWinotoandBaltimore1989EMBOJ.8:729-733および免疫グロブリンBanerjietal.1983Cell33:729-740;QueenandBaltimore1983Cell33:741-748、ニューロン特異的プロモーター例えば、神経細繊維プロモーター;ByrneandRuddle1989Proc.Natl.Acad.Sci.USA86:5473-5477、膵臓特異的プロモーターEdlundetal.1985Science230:912-916および乳腺特異的プロモーター例えば、乳清プロモーター;米国特許第4,873,316号および欧州特許出願公開番号264,166が挙げられる。発生段階調節型プロモーター、例えばネズミhoxプロモーターKesselandGruss1990Science249:374-379およびα-フェトプロテインプロモーターCampesandTilghman1989GenesDev.3:537-546も、包含される。本発明はさらに、アンチセンス配向で発現ベクター中でクローン化される本発明のDNA分子を含む組換え発現ベクターを提供する。すなわち、DNA分子は、非リン酸化可能PPARガンマmRNAに対してアンチセンスであるRNA分子のDNA分子の転写による発現を可能にする方式で、調節配列と操作可能的に連結される。アンチセンス配向でクローン化される核酸と操作可能的に連結される調節配列が選択され得るが、これは、種々の細胞型においてアンチセンスRNA分子の連続的発現を指図し、例えば、アンチセンスRNAの構成的、組織特異的または細胞型特異的発現を指図するウイルスプロモーターおよび/またはエンハンサー、または調節配列が選択され得る。アンチセンス発現ベクターは、組換えプラスミド、ファージミドまたは弱毒化ウイルスの形態であり得るが、その中で、高効率性調節領域の制御下でアンチセンス核酸が産生され、その活性はベクターが導入される細胞型により決定され得る。本発明の別の態様は、本発明の組換え発現ベクターが導入されている宿主細胞に関する。宿主細胞および組換え宿主細胞という用語は、本明細書中では互換的に用いられる。このような用語は、特定の被験体だけでなく、このような細胞の子孫または潜在的子孫も指す、と理解される。突然変異または環境的影響により、ある種の修飾が後の世代に起こり得るため、このような子孫は、実際、親細胞と同一であるわけではないが、しかし本明細書中で用いられるような用語の範囲内に包含される。宿主細胞は、任意の原核生物または真核生物細胞であり得る。例えば、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質は、細菌細胞、例えば大腸菌、昆虫細胞、酵母または哺乳動物細胞例えば、Fao肝臓癌細胞、始原肝細胞、チャイニーズハムスター卵巣細胞CHOまたはCOS細胞中で発現され得る。他の適切な宿主細胞が当業者に既知である。ベクターDNAは、慣用的形質転換またはトランスフェクション技法により原核生物または真核生物細胞中に導入され得る。本明細書中で用いる場合、形質転換およびトランスフェクションは、宿主細胞中に外来核酸例えばDNAを導入するための種々の当該技術分野で認知された技法、例えばリン酸カルシウムまたは塩化カルシウム共沈降法、DEAE-デキストラン媒介性トランスフェクション、リポフェクションまたは電気穿孔を指すよう意図される。宿主細胞を形質転換またはトランスフェクトするための適切な方法は、Sambrook,etal.MolecularCloning:ALaboratoryManual.2nd,ed.,ColdSpringHarborLaboratory,ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,NY,1989ならびに他の実験室マニュアルに見出され得る。哺乳動物細胞の安定トランスフェクションに関しては、用いられる発現ベクターおよびトランスフェクション技法によって、細胞の小分画のみがそれらのゲノム中に外来DNAを組み込み得る、ということが知られている。これらの組込み物を同定し、選択するために、選択可能なバイオマーカー例えば抗生物質に対する耐性をコードする遺伝子は、一般的に、当該遺伝子とともに宿主細胞中に導入される。選択可能マーカーとしては、薬剤、例えばG418、ヒグロマイシンおよびメトトレキサートに対する耐性を付与するものが挙げられる。選択可能マーカーをコードする核酸は、非リン酸化可能PPARガンマをコードするものと同じベクター上で宿主細胞中に導入され得るし、あるいは別個のベクター上で導入され得る。導入核酸で安定的にトランスフェクトされた細胞は、薬剤選択により同定され得る例えば、選択可能バイオマーカー遺伝子を組入れた細胞は生き残るが、一方、他の細胞は死亡する。本発明の宿主細胞、例えば培養中の原核生物または真核生物宿主細胞は、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質を産生するすなわち、発現するために用いられ得る。したがって、本発明はさらに、本発明の宿主細胞を用いて非リン酸化可能PPARガンマタンパク質を賛成するための方法を提供する。一実施形態では、当該方法は、非リン酸化可能PPARガンマが産生されるまで、適切な培地中で本発明の宿主細胞その中に非リン酸化可能PPARガンマをコードする組換え発現ベクターが導入されているを培養することを包含する。別の実施形態では、当該方法はさらに、宿主細胞の培地から非リン酸化可能PPARガンマを単離することを包含する。本発明の宿主細胞は、非ヒトトランスジェニック動物例えば、ノックイン動物を産生するためにも用いられ得る。非ヒトトランスジェニック動物は、選定される障害、例えばグルコース恒常性障害、体重障害または不十分なインスリン活性に関連した障害の有害な症候を改善し得る作用物質または化合物、例えば薬剤、調合薬等を同定するために設計される検定をスクリーニングするのに用いられ得る。例えば、一実施形態では、本発明の宿主細胞は、非リン酸化可能PPARガンマコード配列例えば、ネズミPPARガンマコードアラニンまたはセリンというよりむしろ位置273での他の非リン酸化可能アミノ酸が導入された受精卵または胚性幹細胞である。次に、このような宿主細胞を用いて、外因性非リン酸化可能PPARガンマ配列がそれらのゲノム中に導入された非ヒトトランスジェニック動物、あるいは内因性非リン酸化可能PPARガンマ配列が変更された相同組換え動物を作製し得る。このような動物は、非リン酸化可能PPARガンマの機能および/または活性を試験するために、ならびに本明細書中に記載される方法および判定基準を用いて非リン酸化可能PPARガンマ活性の調節因子を同定しおよび/または評価するために、有用である。本明細書中で用いる場合、トランスジェニック動物は、非ヒト動物、哺乳動物、決死類、例えばラットまたはマウスであり、この場合、動物の細胞の1つ以上が導入遺伝子を含む。トランスジェニック動物の他の例としては、非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ウシ、ヤギ、ニワトリ、両生類等が挙げられる。導入遺伝子は、トランスジェニック動物が発生する細胞のゲノム中に組み込まれる、そして成熟動物のゲノム中に保持され、それによりトランスジェニック動物の1つ以上の細胞型または組織中でのコード遺伝子産物の発現を指図する外因性DNAである。本明細書中で用いる場合、相同組換え動物は、内因性非リン酸化可能PPARガンマ遺伝子が、内因性遺伝子と、動物の細胞中に、例えば動物の胚細胞中に、動物の発生前に導入された外因性DNA分子との間の相同組換えにより変更された非ヒト動物、哺乳動物、マウスである。本発明のトランスジェニック動物は、例えばマイクロインジェクション、レトロウイルス感染により、受精卵の雄性前核中に非リン酸化可能PPARガンマコード核酸を導入し、そして偽妊娠養母動物中で卵を発生させることにより、作製され得る。ヒト非リン酸化可能PPARガンマcDNA配列は、導入遺伝子として非ヒト動物のゲノム中に導入され得る。代替的には、ヒト非リン酸化可能PPARガンマ遺伝子の非ヒト相同体、例えばマウス非リン酸化可能PPARガンマ遺伝子が、導入遺伝子として用いられ得る。イントロン配列およびポリアデニル化シグナルも、導入遺伝子の発現の効率を増大するために、導入遺伝子中に含まれ得る。組織特異的調節配列単数または複数は、非リン酸化可能PPARガンマ導入遺伝子と操作可能的に連結されて、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の発現を特定細胞に向け得る。胚操作およびマイクロインジェクションによりトランスジェニック動物、特にマウスのような動物を生成するための方法は、当該技術分野では慣用的になっており、例えば米国特許第4,736,866号および第4,870,009号ともにLeder等、米国特許第4,873,191号Wagner等に、ならびにHogan,B.,ManipulatingtheMouseEmbryo,ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,N.Y.,1986に記載されている。他のトランスジェニック動物の産生のために、同様の方法が用いられる。初代遺伝子導入動物は、そのゲノム中の非リン酸化可能PPARガンマ導入遺伝子の存在、および/または動物の組織または細胞中の非リン酸化可能PPARガンマmRNAの発現に基づいて同定され得る。次いで、初代遺伝子導入動物は、導入遺伝子を保有する付加的動物を育種するために用いられ得る。さらに、非リン酸化可能PPARガンマをコードする導入遺伝子を保有するトランスジェニック動物は、さらに、他の導入遺伝子を保有する他のトランスジェニック動物と交配され得る。相同組換え動物を作製するために、それにより野生型のリン酸化可能PPARガンマ遺伝子を変更する、例えば置き換えるために欠失、付加または置換が導入された、非リン酸化可能PPARガンマ遺伝子の少なくとも一部分を含有するベクターが調製される。非リン酸化可能PPARガンマ遺伝子は、ヒト遺伝子例えば、表1および2に列挙した配列のcDNAでスクリーニングされたヒトゲノムライブラリーから単離されたヒトゲノムクローンからであり得るし、ヒト非リン酸化可能PPARガンマ遺伝子の非ヒト相同体でもあり得る。例えば、マウス非リン酸化可能PPARガンマ遺伝子を用いて、マウスゲノム中の内因性リン酸化可能PPARガンマ遺伝子を変更するのに適した相同組換えベクターを構築し得る。ある実施形態では、相同組換え時に、内因性リン酸化可能PPARガンマ遺伝子が機能的に崩壊されるように、ベクターは設計されるすなわち、リン酸化可能タンパク質をもはやコードしない;ノックインベクターとも呼ばれる。相同組換えベクターにおいて、非リン酸化可能PPARガンマ遺伝子の変更部分は、非リン酸化可能PPARガンマ遺伝子の付加的核酸がその5’および3’末端で側面に位置して、ベクターにより保有される外因性非リン酸化可能PPARガンマ遺伝子と胚性幹細胞中の内因性非リン酸化可能PPARガンマ遺伝子との間に相同組換えを起こさせる。付加的フランキング非リン酸化可能PPARガンマ核酸は、内因性遺伝子との上首尾の相同組換えのために十分な長さを有する。典型的には、数キロ塩基のフランキングDNA5’および3’末端の両方にが、ベクター中に含まれる例えば、相同組換えベクターの説明に関しては、Thomas,K.R.andCapecchi,M.R.1987Cell51:503参照。ベクターは、胚性幹細胞株中に導入され例えば、電気穿孔により、そして導入非リン酸化可能PPARガンマ遺伝子が内因性非リン酸化可能PPARガンマ遺伝子と相同的に組み替えられた細胞が選択される例えば、Li,E.etal.1992Cell69:915参照。次いで、選択細胞は、動物例えばマウスの胚盤胞中に注入されて、凝集キメラを形成する例えば、Bradley,A.inTeratocarcinomasandEmbryonicStemCells:APracticalApproach,E.J.Robertson,ed.IRL,Oxford,1987pp.113-152参照。次に、キメラ胚が適切な偽妊娠義母動物中に移植されて、胚が分娩される。その生殖細胞中に相同組換えDNAを保有する子孫を用いて、づ物の全細胞が、導入遺伝子の生殖系列伝搬により相同組換えDNAを含有する動物を育種し得る。相同組換えベクターおよび相同組換え動物の構築方法は、Bradley,A.1991CurrentOpinioninBiotechnology2:823-829に、ならびにPCT国際公開WO90/11354LeMouellec等;WO91/01140Smithies等;WO92/0968Zijlstra等;ならびにWO93/04169Berns等にさらに記載されている。別の実施形態では、導入遺伝子の調節発現を可能にする選択系を含有するトランスジェニック非ヒト動物が産生され得る。このような系の一例は、バクテリオファージP1のcre/loxPリコンビナーゼ系である。cre/loxPリコンビナーゼ系の説明に関しては、例えば、Laksoetal.1992Proc.Natl.Acad.Sci.USA89:6232-6236参照。リコンビナーゼ系の別の例は、出芽酵母のFLPリコンビナーゼ系であるO’Gormanetal.1991Science251:1351-1355。cre/loxPリコンビナーゼ系を用いて、導入遺伝子の発現を調節する場合には、Creリコンビナーゼおよび選択タンパク質の両方をコードする導入遺伝子を含有する動物が必要とされる。このような動物は、例えば一方が選択タンパク質をコードする導入遺伝子を含有し、他方がリコンビナーゼをコードする導入遺伝子を含有する2つのトランスジェニック動物を交配することによる二重トランスジェニック動物の構築により提供され得る。本明細書中に記載される非ヒトトランスジェニック動物のクローンは、Wilmut,I.etal.1997Nature385:810-813およびPCT国際公開WO97/07668およびWO97/07669に記載された方法によっても産生され得る。要するに、トランスジェニック動物からの細胞、例えば体細胞は、単離され、成長周期を出て、G0期に入るよう誘導される。次に、静止細胞は、例えば電気パルスの使用により、静止細胞が単離される同一種の動物からの除核卵細胞と融合される。次に、再構築卵細胞は、桑実胚または芽細胞に発生した後、偽妊娠養母動物に移されるよう、培養される。この養母動物から産まれる子孫は、細胞、例えば体細胞が単離される動物のクローンである。トランスジェニック動物、例えばS273APPARガンマ突然変異体ノックイン動物は、本明細書中にさらに記載されるように、多数の用途を有する。一実施形態では、例えばPPARガンマのS273A突然変異に関してホモ接合性であるノックイン動物を用いて、潜在的抗代謝障害治療薬の効力を試験し得る。cdk5によりセリン273でのPPARガンマのリン酸化を遮断するMRL-24および類似の化合物ホスホ-ブロッカーは、TZDのような古典的アゴニストの副作用を有することなく、代謝障害を改善すると考えられる。例えば、PPARガンマは、痩身および肥満個体の両方で活性である;しかしながら、これらの状態では、PPARガンマは、標的遺伝子のわずかに異なる転写を示す。転写活性におけるこの差は、Ser-273でのPPARガンマの抑制的リン酸化のためであると考えられる。アラニンまたは他の非リン酸化可能アミノ酸残基にSer-273で突然変異化されるPPARガンマの両コピーを有するマウスは、高脂肪餌の挑戦に直面した場合、正常グルコース耐性を保持するはずである。MRL-24のグルコース低下作用はPPARガンマアゴニストを必要とせず、その作用は、古典的PPARガンマアゴニストの投与時に観察される体重増加および体液停留に関与すると思われる。概して、このような古典的PPARガンマアゴニスト例えばロシグリタゾンは、WTマウスにおいてのみ陽性グルコース低下を示すが、S273Aマウスでは示さない、と考えられる。しかしながら、体重増加および体液停留のような副作用は、両方の系統において依然として起きると考えられる。それゆえ、理想的化合物はノックインマウスに全く影響を及ぼさず、これにより、薬剤のオフターゲット効果を試験するための良好なモデルになる。別の実施形態では、これらのノックインマウスから得られる細胞株は、考え得る化合物のinvitro試験に用いられ得る。特定の化学的存在物は、野生型細胞中の標的遺伝子を変更するだけで、ノックイン細胞では変更しないと考えられる。さらに別の実施形態では、野生型動物からS273Aノックイン動物へのその逆も骨髄移植を用いて、野生型宿主バックグラウンドにおける免疫系細胞例えばマクロファージおよび単球中のこのような突然変異体ポリペプチドの活性を分析し得るこの逆も。この使用の一例は、CD36依存性低減型脂質取込みによるアテローム硬化症の危険が免疫系細胞により媒介されるか否かを確定することである。III.単離非リン酸化可能PPARガンマタンパク質および抗非リン酸化可能PPARガンマ抗体本発明の別の態様は、抗非リン酸化可能PPARガンマ抗体を産生するための免疫原として用いるのに適した単離非リン酸化可能PPARガンマタンパク質およびその生物学的活性部分、ならびにペプチド断片の使用に関する。単離または精製タンパク質あるいはその生物学的活性部分は、組換えDNA技法により産生される場合、細胞性物質を実質的に含有せず、あるいは化学合成される場合には、化学的前駆体または他の化学物質を含有しない。細胞性物質を実質的に含有しないという語は、タンパク質が、天然にまたは組換え的に産生される細胞の細胞性構成成分から分離される非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の調製を包含する。一実施形態では、細胞性物質を実質的に含有しないという語は、約30乾燥重量未満の非非リン酸化可能PPARガンマタンパク質本明細書中では夾雑タンパク質とも呼ばれる、約20未満の非非リン酸化可能PPARガンマタンパク質、約10未満の非非リン酸化可能PPARガンマタンパク質、および約5未満の非非リン酸化可能PPARガンマタンパク質を有する非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の調製を包含する。非リン酸化可能PPARガンマタンパク質またはその生物学的活性部分が組換え的に産生される場合、それは、培地も実質的に含有せず、すなわち、培地は、約20未満、約10未満および約5未満の容積のタンパク質調製物を表す。化学的前駆体または他の化学物質を実質的に含有しないという語は、タンパク質の合成に関与する化学的前駆体または他の化学物質からタンパク質が分離される非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の調製を包含する。一実施形態では、化学的前駆体または他の化学物質を実質的に含有しないという語は、約30乾燥重量未満の化学的前駆体または非非リン酸化可能PPARガンマ化学物質、約20未満の化学的前駆体または非非リン酸化可能PPARガンマ化学物質、約10未満の化学的前駆体または非非リン酸化可能PPARガンマ化学物質、および約5未満の化学的前駆体または非非リン酸化可能PPARガンマ化学物質を有する非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の調製を包含する。ある実施形態では、単離タンパク質またはその生物学的活性部分は、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質が由来する同一動物からの夾雑タンパク質を欠く。典型的には、このようなタンパク質は、例えば非ヒト細胞におけるヒト非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の組換え発現により産生される。本発明の例示的単離非リン酸化可能PPARガンマタンパク質またはその一部分は、本明細書中に記載されるような1つ以上の判定基準に従って、古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進する。タンパク質の部分は、本明細書中に記載されるような生物学的活性部分であり得る。別の実施形態では、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質は、それぞれ表1および2に示したアミノ酸配列を、あるいは表1および2に示したアミノ酸配列と少なくとも約50、少なくとも約60、少なくとも約70、少なくとも約80、少なくとも約90および少なくとも約95、95.5、96、96.5、97、97.5、98、98.5、99、99.1、99.2、99.3、99.4、99.5、99.6、99.7、99.8、99.9またはそれ以上相同であるアミノ酸配列を有する。さらに別の実施形態では、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質は、例えば緊縮条件下で、表1および2に列挙したヌクレオチド配列、あるいは表1および2に示したヌクレオチド配列と少なくとも約50、少なくとも約60、少なくとも約70、少なくとも約80、少なくとも約90および少なくとも約95またはそれ以上相同であるヌクレオチド配列とハイブリダイズするヌクレオチドによりコードされるアミノ酸配列を有する。本発明の非リン酸化可能PPARガンマタンパク質は、少なくとも一部は、本明細書中に記載される非リン酸化可能PPARガンマ生物学的活性のうちの少なくとも1つも保有する。例えば、本発明の非リン酸化可能PPARガンマタンパク質は、少なくとも一部は、緊縮条件下で、表1および2に列挙したヌクレオチド配列とハイブリダイズし、本明細書中に記載されるような1つ以上の判定基準に従って古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進するヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列を包含する。本明細書中で用いる場合、20の慣用的アミノ酸およびそれらの略号は、慣用的用法に従う。Immunology--ASynthesis2.sup.ndEdition,E.S.GolubandD.R.Gren,Eds.,SinauerAssociates,Sunderland,Mass.1991この記載内容は参照により本明細書中で援用されるを参照されたい。アミノ酸またはアミノ酸残基という用語は、本明細書中で用いる場合、天然Lアミノ酸またはDアミノ酸を指す。アミノ酸に関して一般に用いられる一文字および三文字略号が、本明細書中で用いられるBruceAlbertsetal.,MolecularBiologyoftheCell,GarlandPublishing,Inc.,NewYork4thed.2002。20の慣用的アミノ酸、非天然アミノ酸、例えばアルファ、アルファ置換アミノ酸、N-アルキルアミノ酸、乳酸および他の非慣用的アミノ酸の立体異性体例えば、D-アミノ酸も、少なくとも一部は、本発明のポリペプチドに関する適切な構成成分であり得る。非慣用的アミノ酸の例としては、4-ヒドロキシプロリン、ガンマ-カルボキシグルタメート、イプシロン-N,N,N-トリメチルリシン、イプシロン-N-アセチルリシン、O-ホスホセリン、N-アセチルセリン、N-ホルミルメチオニン、3-メチルヒスチジン、5-ヒドロキシリシン、シグマ-N-メチルアルギニン、ならびにその他の類似のアミノ酸およびイミノ酸例えば、4-ヒドロキシプロリンが挙げられる。本明細書中で用いられるポリペプチド表記法では、標準用法および慣例に従って、左手方向はアミノ末端方向であり、右手方向はカルボキシ末端方向である。他の実施形態では、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質は、表1および2に列挙したアミノ酸配列と実質的に相同であり、表1および2に列挙したタンパク質の機能的活性を保持し、さらに、上記の小区分Iに詳述したように、天然対立遺伝子変異または突然変異誘発のために、アミノ酸配列が異なる。したがって、別の実施形態では、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質は、表1および2に列挙したアミノ酸配列と少なくとも約50、少なくとも約60、少なくとも約70、少なくとも約80、少なくとも約90および少なくとも約95またはそれ以上相同であるアミノ酸配列を含むタンパク質である。非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の生物学的活性部分は、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質のアミノ酸配列由来のアミノ酸配列、例えば表1または2に示したアミノ酸配列、あるいは非リン酸化可能PPARガンマタンパク質と相同なタンパク質のアミノ酸配列を包含し、これらは、全長非リン酸化可能PPARガンマタンパク質または非リン酸化可能PPARガンマタンパク質と相同である全長タンパク質より少ないアミノ酸を含み、そして非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の少なくとも1つの活性を示す。典型的には、生物学的活性部分ペプチド、例えば5、10、15、20、30、35、36、37、38、39、40、50、100またはそれ以上のアミノ酸長であるペプチドは、ドメインまたはモチーフ、例えばコンセンサスcdk5リン酸化モチーフおよび/またはSer-273で非リン酸化可能な突然変異化PPARガンマを含む。さらに、タンパク質の他の領域が欠失される他の生物学的活性部分は、組換え技法により調製され、本明細書中に記載される活性のうちの1つ以上に関して評価され得る。非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の生物学的活性部分としては、1つ以上の選択ドメイン/モチーフ、または生物学的活性を有するその部分が挙げられる。非リン酸化可能PPARガンマタンパク質は、組換えDNA技法により産生される。例えば、タンパク質をコードする核酸は、発現ベクター中でクローン化され上記、発現ベクターは宿主細胞中に導入され上記、そして非リン酸化可能PPARガンマタンパク質が宿主細胞中で発現される。次に、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質は、標準タンパク質精製技法を用いて、適切な精製スキームにより細胞から単離され得る。組換え発現に代わるものとして、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質、ポリペプチドまたはペプチドは、標準ペプチド合成技法を用いて化学的に合成され得る。さらに、ネイティブ非リン酸化可能PPARガンマタンパク質は、例えば抗非リン酸化可能PPARガンマ抗体以下にさらに記載を用いて、細胞例えば褐色脂肪細胞から単離され得る。本発明は、非リン酸化可能PPARガンマキメラまたは融合タンパク質も提供する。本明細書中で用いる場合、非リン酸化可能PPARガンマキメラタンパク質または融合タンパク質は、非非リン酸化可能PPARガンマポリペプチドと操作可能的に連結される非リン酸化可能PPARガンマポリペプチドを含む。非リン酸化可能PPARガンマポリペプチドは、非リン酸化可能PPARガンマに対応するアミノ酸配列を有するポリペプチドを指し、一方、非非リン酸化可能PPARガンマポリペプチドは、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質と実質的に相同でないタンパク質、例えば非リン酸化可能PPARガンマタンパク質と異なる、そして同一のまたは異なる生物体に由来するタンパク質に対応するアミノ酸配列を有するポリペプチドを指す。融合タンパク質内では、操作可能的に連結されるは、非リン酸化可能PPARガンマポリペプチドおよび非非リン酸化可能PPARガンマポリペプチドが互いにインフレームで融合されることを示すよう意図される。非非リン酸化可能PPARガンマポリペプチドは、非リン酸化可能PPARガンマのN末端またはC末端と融合され得る。例えば、一実施形態では、融合タンパク質は、非リン酸化可能PPARガンマ配列がGST配列のC末端と融合されるGST-非リン酸化可能PPARガンマ融合タンパク質である。このような融合タンパク質は、組換え非リン酸化可能PPARガンマの精製を促し得る。別の実施形態では、融合タンパク質は、そのN末端に非相同シグナル配列を含有する非リン酸化可能PPARガンマタンパク質である。ある種の宿主細胞例えば、哺乳動物宿主細胞では、非リン酸化可能PPARガンマの発現および/または分泌は、非相同シグナル配列の使用により増大され得る。本発明の非リン酸化可能PPARガンマキメラまたは融合タンパク質は、標準組換えDNA技法により産生される。例えば、異なるポリペプチド配列をコードするDNA断片は、慣用的技法に従って、例えば結紮のための平滑末端化または付着末端化終端、適切な終端を提供するための制限酵素消化、適切な場合は粘着末端の充填、望ましくない連結を避けるためのアルカリ性ホスファターゼ処理、ならびに酵素的結紮を用いることにより、インフレームで一緒に結紮される。別の実施形態では、融合遺伝子は、慣用的技法、例えば自動DNA合成機により合成され得る。代替的には、2つの連続遺伝子断片間に相補的オーバーハングを生じるアンカープライマーを用いて遺伝子断片のPCR増幅が実行され得るが、これはその後、アニーリングされ、再増幅されて、キメラ遺伝子配列を生成する例えば、CurrentProtocolsinMolecularBiology,eds.Ausubeletal.JohnWileySons:1992参照。さらに、既に融合部分例えば、GSTポリペプチドをコードしている多数の発現ベクターが市販されている。融合部分が非リン酸化可能PPARガンマタンパク質とインフレームで連結されるよう、非リン酸化可能PPARガンマコード核酸はこのような発現ベクター中でクローン化され得る。本発明は、少なくとも一部は、非リン酸化可能PPARガンマアゴニスト模倣または非リン酸化可能PPARガンマアンタゴニストとして機能する非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の相同体にも関する。ある実施形態では、非リン酸化可能PPARガンマアゴニストおよびアンタゴニストは、それぞれ、天然型の非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の生物学的活性のサブセットを刺激するかまたは抑制する。したがって、特異的生物学的作用は、限定機能を有する相同体で処置することにより引き出され得る。一実施形態では、天然型のタンパク質の生物学的活性のサブセットを有する相同体を用いた被験体の処置は、天然型の非リン酸化可能PPARガンマタンパク質による処置に比して、被験体におけるより少ない副作用を示す。非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の相同体は、突然変異誘発、例えば非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の離散的点突然変異または切頭化により生成され得る。本明細書中で用いる場合、相同体という用語は、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の活性のアゴニストまたはアンタゴニストとして作用する変異体型の非リン酸化可能PPARガンマタンパク質を指す。非リン酸化可能PPARガンマタンパク質のアゴニストは、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の実質的に同一のまたはサブセットの生物学的活性を保持し得る。代替的実施形態では、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の相同体は、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質アゴニストまたはアンタゴニスト活性に関して、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の変異体、例えば切頭化変異体の組合せライブラリーをスクリーニングすることにより同定され得る。一実施形態では、非リン酸化可能PPARガンマ変異体の多様化ライブラリーは、核酸レベルの組合せ突然変異誘発により生成され、そして多様化遺伝子ライブラリーによりコードされる。潜在的非リン酸化可能PPARガンマ配列が個々のポリペプチドとして発現可能であるか、代替的には、その中に非リン酸化可能PPARガンマ配列の組を含有する一組のより大きな融合タンパク質例えばファージ表示のためにとして発現可能であるよう、非リン酸化可能PPARガンマ変異体の多様化ライブラリーは、例えば構成オリゴヌクレオチドの混合物を遺伝子配列と酵素的に結紮することにより産生され得る。縮重オリゴヌクレオチド配列から非リン酸化可能PPARガンマ相同体のライブラリーを産生するために用いられる種々の方法がある。縮重遺伝子配列の化学合成は、自動DNA合成機で実施され、次いで、合成遺伝子が適切な発現ベクターと結紮され得る。縮重組の遺伝子の使用により、所望組の潜在的非リン酸化可能PPARガンマ配列をコードする配列のすべてが、一混合物中に提供される。縮重オリゴヌクレオチドの合成方法は、当該技術分野で既知である例えば、Narang,S.A.1983Tetrahedron39:3;Itakuraetal.1984Annu.Rev.Biochem.53:323;Itakuraetal.1984Science198:1056;Ikeetal.1983NucleicAcidRes.11:477参照。さらに、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質コード化の断片のライブラリーを用いて、スクリーニングのための非リン酸化可能PPARガンマ断片の多様化集団を生成し、その後、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の相同体を選択し得る。一実施形態では、コード配列断片のライブラリーは、ニッキングが分子当たり約1回だけ起こる条件下で、非リン酸化可能PPARガンマコード配列の二本鎖PCR断片をヌクレアーゼで処理し、二本鎖DNAを変性し、DNAを再生して、異なるニック化産物からのセンス/アンチセンス対を含み得る二本鎖DNAを生成し、S1ヌクレアーゼで処理して再生成二重鎖から1本鎖部分を除去し、そしてその結果生じた断片ライブラリーを発現ベクターに結紮することにより生成され得る。この方法により、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質のN待たん、C末端および種々のサイズの内部断片をコードする発現ライブラリーが得られる。点突然変異または切頭化により作製される組合せライブラリーの遺伝子産物をスクリーニングするための、ならびに選択特性を有する遺伝子産物に関してcDNAライブラリーをスクリーニングするための、いくつかの技法が当該技術分野で既知である。このような技法は、非リン酸化可能PPARガンマ相同体の組合せ突然変異誘発により生成される遺伝子ライブラリーの迅速なスクリーニングに適合可能である。大型遺伝子ライブラリーをスクリーニングするための最も広範に用いられる技法これは、高処理量分析が容易であるとしては、典型的には、遺伝子ライブラリーを複製可能発現ベクター中でクローニングすること、その結果生じたベクターのライブラリーで適切な細胞を形質転換すること、そして所望の活性の検出が、その生成物が検出される遺伝子をコードするベクターの単離を促すことが挙げられる。ライブラリー中の機能性突然変異体の頻度を増強する新規の技法である再帰的アンサンブル突然変異誘発REMは、スクリーニング検定と組合せて用いられて、非リン酸化可能PPARガンマ相同体を同定し得るArkinandYouvan1992Proc.Natl.Acad.Sci.USA89:7811-7815;Delagraveetal.1993ProteinEngineering63:327-331。一実施形態では、単離非リン酸化可能PPARガンマタンパク質あるいはその一部分または断片は、ポリクローナルおよびモノクローナル抗体調製のための標準技法を用いて非リン酸化可能PPARガンマを結合する抗体を生成するための免疫原として用いられ得る。例えば、配列KTTDKpSPFVIYDCを有するペプチドは、セリンリン酸化を伴うかまたは伴わずに、この目的のために用いられ得る。代替的には、全長非リン酸化可能PPARガンマタンパク質が用いられ得るし、代替的には、非リン酸化可能PPARガンマの抗原性ペプチド断片が免疫原として用いられ得る。非リン酸化可能PPARガンマ免疫原は、典型的には、免疫原で適切な被験体例えば、ウサギ、ヤギ、マウスまたは他の哺乳動物を免疫化することにより抗体を調製するために用いられる。適切な免疫原性調製物は、例えば、組換え発現非リン酸化可能PPARガンマタンパク質または化学合成非リン酸化可能PPARガンマペプチドを含有し得る。調製物は、アジュバント、例えばフロイントの完全または不完全アジュバント、あるいは類似の免疫刺激剤も含み得る。免疫原性非リン酸化可能PPARガンマ調製物による適切な被験体の免疫化としては、ポリクローナル抗非リン酸化可能PPARガンマ抗体応答が挙げられる。したがって、本発明の別の態様は、抗非リン酸化可能PPARガンマ抗体の使用に関する。抗体という用語は、本明細書中で用いる場合、免疫グロブリン分子、ならびに免疫グロブリン分子の免疫学的活性部分、すなわち非リン酸化可能PPARガンマのような抗原と特異的に結合する免疫反応する抗原結合部位を含有する分子を指す。免疫グロブリン分子の免疫学的活性部分の例としては、ペプシンのような酵素で抗体を処理することにより生成され得るFabおよびFab’2断片が挙げられる。本発明は、非リン酸化可能PPARガンマを結合するポリクローナルおよびモノクローナル抗体を提供する。モノクローナル抗体またはモノクローナル抗体組成物という用語は、本明細書中で用いる場合、非リン酸化可能PPARガンマの特定のエピトープと免疫反応し得る抗原結合部位の1つの種のみを含有する抗体分子の一集団を指す。したがって、モノクローナル抗体組成物は、典型的には、それが免疫反応する特定の非リン酸化可能PPARガンマタンパク質に関する単一結合親和性を表示する。ポリクローナル抗非リン酸化可能PPARガンマ抗体は、非リン酸化可能PPARガンマ免疫原で適切な被験体を免疫化することにより、上記と同様に調製され得る。免疫化被験体における抗非リン酸化可能PPARガンマ抗体力価は、例えば免疫化非リン酸化可能PPARガンマを用いて、標準技法により、例えば酵素結合免疫吸着検定ELISAで長時間モニタリングされ得る。所望により、非リン酸化可能PPARガンマに対して向けられる抗体分子は、哺乳動物から例えば、血液から単離され、さらに、周知の技法、例えばプロテインAクロマトグラフィーにより精製して、IgG分画を得る。免疫化後の適切な時間に、すなわち、抗非リン酸化可能PPARガンマ抗体力価が最高になったら、抗体産生細胞が被験体から得られ、これを用いて、標準技法により、例えばKohlerandMilstein1975Nature256:495-497により最初に記載されたハイブリドーマ技法Brownetal.1981J.Immunol.127:539-46;Brownetal.1980J.Biol.Chem.255:4980-83;Yehetal.1976Proc.Natl.Acad.Sci.USA76:2927-31;およびYehetal.1982Int.J.Cancer29:269-75も参照、さらに近年のヒトB細胞ハイブリドーマ技法Kozboretal.1983Immunol.Today4:72、EBV-ハイブリドーマ技法Coleetal.1985,MonoclonalAntibodiesandCancerTherapy,AlanR.Liss,Inc.,pp.77-96またはトリオーマ技法により、モノクローナル抗体を調製し得る。モノクローナル抗体ハイブリドーマを産生するための技法は、よく知られている一般的に、R.H.Kenneth,inMonoclonalAntibodies:ANewDimensionInBiologicalAnalyses,PlenumPublishingCorp.,NewYork,NewYork1980;E.A.Lerner1981YaleJ.Biol.Med.,54:387402;M.L.Gefteretal.1977SomaticCellGenet.3:23136参照。要するに、不死細胞株典型的には骨髄腫は、上記のような非リン酸化可能PPARガンマ免疫原で免疫化された哺乳動物からのリンパ球典型的には脾細胞と融合され、その結果生じたハイブリドーマ細胞の培養上清は、非リン酸化可能PPARガンマを結合するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマを同定するためにスクリーニングされる。リンパ球および不死化細胞株を融合するために用いられる多数の周知のプロトコールのうちのいずれかが、抗非リン酸化可能PPARガンマモノクローナル抗体を生成するという目的のために適用され得るすなわち、G.Galfreetal.1977Nature266:550-52;Gefteretal.SomaticCellGenet.上記;Lerner,YaleJ.Biol.Med.上記;Kenneth,MonoclonalAntibodies上記参照。さらに、このような方法の多数の変法があり、それらも有用である、と当業者は理解する。典型的には、不死細胞株例えば骨髄腫細胞株は、リンパ球と同一の哺乳動物種から得られる。例えば、ネズミハイブリドーマは、少なくとも一部は本発明の免疫原性調製物で免疫化されたマウスからのリンパ球を、不死化マウス細胞株と融合することにより作製され得る。いくつかの実施形態では、不死細胞株は、ヒポキサンチン、アミノプテリンおよびチミジンを含有する培地HAT培地に感受性であるマウス骨髄腫細胞株である。多数の骨髄腫細胞株のうちのいずれか、例えばP3-NS1/1-Ag4-1、P3-x63-Ag8.653またはSp2/O-Ag14骨髄腫株が、標準技法による融合相手として用いられ得る。これらの骨髄腫株は、ATCCから入手可能である。典型的には、HAT感受性マウス骨髄腫細胞は、ポリエチレングリコールPEGを用いてマウス脾細胞と融合される。次いで、融合に起因するハイブリドーマ細胞は、HAT培地これは、非融合および非産生的融合骨髄腫細胞を殺害するを用いて選択される非融合脾細胞は、形質転換されないため、数日後に死亡する。本発明のモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ細胞は、すなわち、標準ELISA検定を用いて、非リン酸化可能PPARガンマを結合する抗体に関してハイブリドーマ培養上清をスクリーニングすることにより検出される。モノクローナル抗体分泌ハイブリドーマの調製の代わりに、非リン酸化可能PPARガンマで組換え組合せ免疫グロブリンライブラリー例えば、抗体ファージ表示ライブラリーをスクリーニングし、それにより、非リン酸化可能PPARガンマを結合する免疫グロブリンライブラリー成員を単離することにより、モノクローナル抗非リン酸化可能PPARガンマ抗体が同定され、単離され得る。ファージ表示ライブラリーを生成し、スクリーニングするためのキットは、市販されている例えば、Pharmacia組換えファージ抗体系、カタログ番号27-9400-01;およびStratageneSurfZAP商標ファージ表示キット、カタログ番号240612。さらに、抗体表示ライブラリーを生成し、スクリーニングするのに特に容易に用い得る方法および試薬の例は、例えば、米国特許第5,223,409号Ladner等;PCT国際公開WO92/18619Kang等;PCT国際公開WO91/17271Dower等;PCT国際公開WO92/20791Winter等;PCT国際公開WO92/15679Markland等;PCT国際公開WO93/01288Breitling等;PCT国際公開WO92/01047McCafferty等;PCT国際公開WO92/09690Garrard等;PCT国際公開WO90/02809Ladner等;Fuchsetal.1991Bio/Technology9:1369-1372;Hayetal.1992Hum.Antibod.Hybridomas3:81-85;Huseetal.1989Science246:1275-1281;Griffithsetal.1993EMBOJ.12:725-734;Hawkinsetal.1992J.Mol.Biol.226:889-896;Clacksonetal.1991Nature352:624-628;Grametal.1992Proc.Natl.Acad.Sci.USA89:3576-3580;Garrardetal.1991Bio/Technology9:1373-1377;Hoogenboometal.1991NucleicAcidsRes.19:4133-4137;Barbasetal.1991Proc.Natl.Acad.Sci.USA88:7978-7982;およびMcCaffertyetal.Nature1990348:552-554に見出され得る。さらに、組換え抗非リン酸化可能PPARガンマ抗体、例えば、標準組換えDNA技術を用いて作製され得る、ヒトおよび非ヒト部分の両方を含むキメラおよびヒト化モノクローナル抗体は、本発明の範囲内である。このようなキメラおよびヒト化モノクローナル抗体は、当該技術分野で既知の組換えDNA技術により、例えば、国際出願PCT/US86/02269Robinson等;欧州特許出願第184,187号Akira等;欧州特許出願第171,496号Taniguchi,M.;欧州特許出願第173,494号Morrison等;PCT国際公開WO86/01533Neuberger等;米国特許第4,816,567号Cabilly等;欧州特許出願第125,023号Cabilly等;Betteretal.1988Science240:1041-1043;Liuetal.1987Proc.Natl.Acad.Sci.USA84:3439-3443;Liuetal.1987J.Immunol.139:3521-3526;Sunetal.1987Proc.Natl.Acad.Sci.USA84:214-218;Nishimuraetal.1987Canc.Res.47:999-1005;Woodetal.1985Nature314:446-449;およびShawetal.1988J.Natl.CancerInst.80:1553-1559;Morrison,S.L.1985Science229:1202-1207;Oietal.1986BioTechniques4:214;WinterU.S.Patent5,225,539;Jonesetal.1986Nature321:552-525;Verhoeyanetal.1988Science239:1534;およびBeidleretal.1988J.Immunol.141:4053-4060に記載された方法を用いて産生され得る。抗非リン酸化可能PPARガンマ抗体例えばモノクローナル抗体は、標準技法、例えばアフィニティークロマトグラフィーまたは免疫沈降により、非リン酸化可能PPARガンマを単離するために用いられ得る。抗非リン酸化可能PPARガンマ抗体は、細胞からの天然非リン酸化可能PPARガンマの、ならびに宿主細胞中で発現される組換え的産生性非リン酸化可能PPARガンマの精製を促し得る。さらに、抗非リン酸化可能PPARガンマ抗体は、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の発現の発生量およびパターンを評価するために、非リン酸化可能PPARガンマタンパク質例えば、細胞性溶解物または細胞懸濁液中を検出するために用いられ得る。抗非リン酸化可能PPARガンマ抗体は、例えば、非カップリング剤の安全投与量をモニタリングするために、臨床試験手順の一部として、細胞または組織、例えば脂肪細胞または組織中のタンパク質レベルをモニタリングするために用いられ得る。検出は、抗体を検出可能物質とカップリングする例えば、物理的に連結することにより促され得る。検出可能物質の例としては、種々の酵素、補欠分子族、蛍光性物質、発光性物質、生物発光性物質および放射性物質が挙げられる。適切な酵素の例としては、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、アルカリ性ホスファターゼ、β-ガラクトシダーゼまたはアセチルコリンエステラーゼが挙げられる;適切な補欠分子族複合体の例としては、ストレプトアビジン/ビオチンおよびアビジンビオチンが挙げられる;適切な蛍光性物質の例としては、ウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセイン、塩化ダンシルまたはフィコエリトリンが挙げられる;発光性物質の一例としては、ルミノールが挙げられる;生物発光性物質の例としては、ルシフェラーゼ、ルシフェリンおよびエクオリンが挙げられる;そして適切な放射性物質の例としては、125I、131I、35Sまたは3Hが挙げられる。非リン酸化可能PPARガンマタンパク質の検出のためのinvivo技法は、タンパク質に対して向けられる標識化抗体を被験体中に導入することを包含する。例えば、抗体は、被験体におけるその存在および位置が標準画像処理技法により検出され得る放射性バイオマーカーで標識され得る。IV.本発明の方法および化合物本発明の方法は、古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進するPPARガンマリガンドの同定および使用に関する。このようなリガンドは、本明細書中では非典型的として言及される。選択的に促進するという用語は、脂肪生成遺伝子例えば、古典的PPARガンマアゴニスト、ロシグリタゾンにより調節されるもののような代謝障害を促進することに対比して、主におよび/または専ら、PPARガンマのcdk5媒介性リン酸化により調節される遺伝子、例えば抗糖尿病および/または褐色脂肪および/または呼吸/酸素消費増大遺伝子例えば、非典型的PPARガンマリガンド、MRL24により選択的に促進されるものを促進し、活性化し、刺激し、増強し、または促進を生じるPPARガンマ活性の任意の示差的調節を包含するよう意図される。別の態様では、本発明は、主におよび/または専ら、PPARガンマのcdk5媒介性リン酸化により調節されるこのような遺伝子、例えば、抗糖尿病および/または褐色脂肪および/または呼吸/酸素消費増大遺伝子例えば、非典型的PPARガンマリガンド、MRL24により選択的に促進されるものを、例えば、PPARガンマリン酸化を選択的に抑制する試験化合物の存在下または非存在下で、あるいは非リン酸化可能PPARガンマの存在下または非存在下野生型PPRガンマで、試料の遺伝子発現プロフィールを検定することにより同定するための方法に関する。別の態様では、本発明は、被験体における代謝障害、例えば糖尿病および/または肥満症を治療するための方法であって、主におよび/または専ら、PPARガンマのcdk5媒介性リン酸化により、遺伝子、例えば抗糖尿病および/または褐色脂肪および/または呼吸/酸素消費増大遺伝子例えば、非典型的PPARガンマリガンド、MRL24により選択的に促進されるものを選択的に調節する作用物質を被験体に投与することを包含する方法に関する。本明細書中で用いる場合、作用物質および治療薬という用語は、肥満症または肥満症関連障害を有する被験体からの細胞が治療プロトコールに曝露され得るあらゆるものと広範に定義される。A.PPARガンマリガンドスクリーニング検定本発明は、非典型的PPARガンマリガンドのような、古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進し得る化合物または作用物質を同定するための方法を提供する。これらの方法は、本明細書中では、薬剤スクリーニング検定としても言及され、典型的には、PPARガンマタンパク質と相互作用し結合し、PPARガンマタンパク質および標的分子の相互作用を調整し、および/またはPPARガンマ核酸発現および/またはPPARガンマタンパク質活性を調整する能力に関して、候補/試験化合物または作用物質をスクリーニングするステップを包含する。これらの能力のうちの1つ以上を有する候補/試験化合物または作用物質は、異所性、異常および/または望ましくないPPARガンマ核酸発現および/またはPPARガンマタンパク質活性により特性化される障害を治療するための薬剤として用いられ得る。候補/試験化合物としては、例えば、小有機および無機分子例えば、組合せおよび天然生成物ライブラリーから得られる分子が挙げられる。本発明の試験化合物は、少なくとも一部は、当該技術分野で既知の組合せライブラリー方法、例えば生物学的ライブラリー;空間的にアドレス可能な平行固相または液相ライブラリー;逆重畳;一ビーズ一化合物ライブラリー法;ならびにアフィニティークロマトグラフィー選択を用いる合成ライブラリー法;における多数のアプローチのうちのいずれかを用いて得られる。生物学的ライブラリーアプローチはペプチドライブラリーに限定されるが、一方、他の4つのアプローチが、化合物のペプチド、非ペプチドオリゴマーまたは小分子ライブラリーに適用可能であるLam,K.S.1997AnticancerDrugDes.12:145。分子ライブラリーの合成のための方法の例は、当該技術分野で、例えば、DeWittetal.1993Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90:6909;Erbetal.1994Proc.Natl.Acad.Sci.USA91:11422;Zuckermannetal.1994.J.Med.Chem.37:2678;Choetal.1993Science261:1303;Carrelletal.1994Angew.Chem.Int.Ed.Engl.33:2059;Carelletal.1994Angew.Chem.Int.Ed.Engl.33:2061に、ならびにGallopetal.1994J.Med.Chem.37:1233に見出され得る。化合物のライブラリーは、溶液中で例えば、Houghten1992Biotechniques13:412-421、あるいはビーズLam1991Nature354:82-84、チップFodor1993Nature364:555-556、細菌LadnerUSP5,223,409、胞子LadnerUSP’409、プラスミドCulletal.1992ProcNatlAcadSciUSA89:1865-1869上に、またはファージScottandSmith1990Science249:386-390;Devlin1990Science249:404-406;Cwirlaetal.1990Proc.Natl.Acad.Sci.87:6378-6382;Felici1991J.Mol.Biol.222:301-310;Ladner、上記上に提示され得る。一実施形態では、本発明は、PPARガンマタンパク質と相互作用する例えば、結合する候補/試験化合物を巣にするための検定を提供する。典型的には、検定は細胞ベースの検定である。細胞は、例えば、哺乳動物起源のもの、例えば肝細胞、骨格筋細胞、免疫細胞、例えば単球またはマクロファージ、あるいは脂肪細胞、例えば前脂肪細胞、白色脂肪細胞および/または褐色脂肪細胞であり得る。他の実施形態では、細胞は、本明細書中に記載されるノックイン動物の場合のように、非リン酸化可能PPARガンマコード核酸配列を内因的に保有し得る。他の実施形態では、検定は、候補/試験化合物とPPARガンマタンパク質またはその部分の相互作用例えば結合を可能にして、複合体を形成する条件下で、PPARガンマタンパク質またはその生物学的活性部分および候補/試験化合物を組合せること、そして複合体の形成を検出することこの場合、PPARガンマポリペプチドまたはその断片と相互作用する例えば、結合する候補化合物の能力は、複合体中の候補化合物の存在により示される、といったステップを包含する無細胞検定である。PPARガンマタンパク質と候補化合物との間の複合体の形成は、例えば、標準イムノアッセイを用いて定量され得る。このような分析は、試験化合物をPPARガンマリガンドと同定する。別の実施形態では、本発明は、PPARガンマタンパク質と、PPARガンマタンパク質が常態では相互作用する分子標的分子との間の相互作用そして同様にほぼPPARガンマ活性を調整する例えば、刺激するかまたは抑制する候補/試験化合物を同定するためのスクリーニング検定を提供する。このような標的分子の例としては、古典的PPARガンマ活性化を上回るPPARガンマによる抗代謝障害活性を促進するシグナル伝達経路におけるタンパク質が挙げられる。典型的には、検定は、候補化合物の存在を別にして、既知の調節因子および/または補因子、例えばcdk5および/またはp35/p25と一緒に、標的分子を結合するかまたは調整する条件下で、PPARガンマタンパク質またはその生物学的活性部分、PPARガンマ標的分子および候補/試験化合物を組合せること、そしてPPARガンマタンパク質および標的分子を含む複合体の形成を検出すること、またはPPARガンマタンパク質および標的分子の相互作用/反応を検出すること、といったステップを包含する無細胞検定である。複合体形成の検出は、例えば、PPARガンマタンパク質の誘導性作用を測定することによる、複合体の直接的定量を包含し得る。候補化合物の非存在下で検出されるものと比較した場合の候補化合物の存在下での、PPARガンマおよび標的分子の相互作用における例えば、PPARガンマおよび標的分子間の複合体の形成における統計学的有意の変化、例えば低減は、PPARガンマタンパク質と標的分子との間の相互作用の調整例えば、刺激または抑制を示す。PPARガンマタンパク質および標的分子間の複合体の形成の調整は、例えば、イムノアッセイにより定量され得る。上記の薬剤スクリーニング検定を実施するためには、PPARガンマまたはその標的分子を固定して、タンパク質の一方または両方の非複合化形態からの複合体の分離を促し、同様に、検定の自動化に対応するのが望ましい。候補化合物の存在下および非存在下での、PPARガンマと標的分子との相互作用例えば、結合は、反応体を含有するのに適した任意の容器中で成し遂げられ得る。このような容器の例としては、微量滴定プレート、試験管および微量遠心分離管が挙げられる。一実施形態では、ポリペプチドをマトリックスと結合させるドメインを付加する融合ポリペプチドが提供され得る。例えば、グルタチオン-S-トランスフェラーゼ/PPARガンマ融合ポリペプチドは、グルタチオンセファロースビーズSigmaChemical,St.Louis,MOまたはグルタチオン誘導体化微量滴定プレート上に吸着され、これは次に、細胞溶解物例えば、35S標識化および候補化合物と併合されて、混合物が、複合体形成を促す条件下例えば、塩およびpHに関して生理学的条件ででインキュベートされる。インキュベーション後、ビーズは任意の非結合標識を除去するために洗浄され、そして複合体が解離された後、上清中で、マトリックスが固定され、放射性標識が直接的に確定される。代替的には、複合体はマトリックスから解離され、SDS-PAGEにより分離され、そしてビーズ分画中に見出されるPPARガンマ結合ポリペプチドのレベルが、標準電気泳動技法を用いてゲルから定量される。マトリックス上にポリペプチドを固定化するための他の技法も、本発明の例示的薬剤スクリーニング検定で用いられ得る。例えば、PPARガンマまたはその標的分子は、ビオチンおよびストレプトアビジンの共役を利用して固定化され得る。ビオチニル化PPARガンマ分子は、当該技術分野で周知の技法例えば、ビオチニル化キット、PierceChemicals,Rockford,Ill.を用いて、ビオチン-NHSN-ヒドロキシ-スクシンイミドから調製され、ストレプトアビジン被覆96ウェルプレートPierceChemicalのウェル中に固定化され得る。代替的には、PPARガンマと反応性の抗体、例えばphospher-Ser-273-特異的抗PPARガンマ抗体しかし、その標的分子とのポリペプチドの結合を妨げないは、プレートのウェルに誘導体化され、そしてPPARガンマが抗体共役によりウェル中に閉じ込められる。上記のように、PPARガンマ結合ポリペプチドおよび候補化合物の調製物は、プレートのPPARガンマ提示ウェル中でインキュベートされ、ウェル中に閉じ込められた複合体の量が定量され得る。このような複合体を検出するための方法は、GST固定化複合体に関して上記した方法のほかに、PPARガンマ標的分子と反応性である、あるいはPPARガンマポリペプチドと反応性で、標的分子堵競合する抗体を用いる複合体の免疫検出;ならびに標的分子に関連した酵素活性の検出に頼る酵素結合検定を包含する。さらに別の実施形態では、本発明は、古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進し得る化合物または作用物質を同定するための方法例えば、スクリーニング検定を提供する。このような化合物は、本明細書中でさらに記載されるように、代謝障害の治療のためにも有用である。PPARガンマ核酸の発現またはPPARガンマタンパク質の活性を調整する化合物または作用物質の能力を検定するための方法は、無細胞または細胞ベースの検定であり得る。したがって、試料は、invitro、exvivoおよび/またはinvivo試料を含み得る。このような試料は、代謝障害分析に関連した任意数の細胞型、例えば前脂肪細胞、白色脂肪細胞、褐色脂肪細胞、単球およびマクロファージからも選択され得る。さらに、本明細書中に記載される無細胞および/または細胞ベースの検定は、主におよび/または専ら、PPARガンマのcdk5媒介性リン酸化により調節される遺伝子、例えば抗糖尿病および/または褐色脂肪および/または呼吸/酸素消費増大遺伝子例えば、非典型的PPARガンマリガンド、MRL24により選択的に促進されるものを促進し、活性化し、刺激し、増強し、または促進を生じるPPARガンマ活性を示差的に調節する化合物または作用物質の作用を、脂肪生成遺伝子のような代謝障害を促進するもの、特に、古典的PPARガンマアゴニスト、ロシグリタゾンにより調節されるものと対比して確定するための、当業者に周知の方法に従って用いられ得る。これは、当該技術分野で周知の方法に従って、主におよび/または専ら、PPARガンマのcdk5媒介性リン酸化により調節される遺伝子、例えば、抗糖尿病および/または褐色脂肪および/または呼吸/酸素消費増大遺伝子を同定することを包含し得る。このような遺伝子は、内因性細胞性状況で分析され得るし、あるいは、多数の周知の遺伝子レポーター系のいずれかに従って、例えば、PPARガンマ応答性プロモーターと操作可能的に連結される転写検定、PPARガンマトランス活性化検定例えば、上流活性化部位UASプロモーター上のGAL4-PPARガンマ等を用いて、検定され得る。PPARガンマ依存性応答刺激または抑制における統計学的有意の変化を生じる候補化合物が、同定され得る。このような統計学的有意の変化は、多数の判定基準に従って、および/または多数の対照と比較して、測定され得る。例えば、遺伝子発現、検定変化等の有意の調整は、分析中の出力が、対照に比して、1.1-、1.2-、1.3-、1.4-、1.5-、1.6-、1.7-、1.8-、1.9-、2.0-、2.1-、2.2-、2.3-、2.4-、2.5-、2.6-、2.7-、2.8-、2.9-、3.0-、3.1-、3.2-、3.3-、3.4-、3.5-、3.6-、3.7-、3.8-、3.9-、4.0-、4.1-、4.2-、4.3-、4.4-、4.5-、4.6-、4.7-、4.8-、4.9-、5.0-、5.5-、6.0、6.5-、7.0-、7.5-、8.0-、8.5-、9.0-、9.5-、10-、11-、12-、13-、14-、15-、16-、17-、18-、19-、20倍またはそれ以上異なって任意の範囲を含めて大きいかまたは小さいかを査定され得る。一般的に、発現プロフィールの決定は、以下のステップを包含するアレイを用いて実施され得る:a被験体からRNA試料を得て、それから標識化核酸を調製すること標的核酸または標的;b標的核酸がアレイ上の対応するプローブと結合するのに十分な条件下で、例えば、ハイブリダイゼーションまたは特異的結合により、標的核酸をアレイと接触させること;c任意に、アレイから非結合標的を除去すること;d結合標的を検出すること;ならびにe結果を分析すること。本明細書中で用いる場合、核酸プローブまたはプローブはアレイと結合される核酸であり、一方、標的核酸は、アレイとハイブリダイズされる核酸である。これらのステップならびにそれらを実行するための方法および変法の各々は、当業者に周知である。ある実施形態では、数百または数千の遺伝子とは対照的に、相対的に少数の遺伝子例えば、1つまたは2~3つのみの遺伝子の発現を確定することで足りる。マイクロアレイがこれらの実施形態でもちられ得るが、しかし遺伝子発現の検出の種々の他の方法が利用可能である。アレイベースの検出、例えばRNA単離、標識化等とのある種の類似性は共通であり得るが、しかし以下の方法は、用い易さおよび時間制約に関して、利点を提供し得る。一実施形態では、試料から得られるRNAは、一次cDNA鎖に転写され、そしてPCR、例えばRT-PCRに付される。ハウスキーピング遺伝子、またはその発現が変わらない他の遺伝子は、内部対照および実験中の対照として用いられ得る。PCR反応後、増幅産物は電気泳動により分離され、検出され得る。定量的PCRを用いることにより、増幅産物のレベルは、試料中に存在したRNAのレベルと相関する。増幅試料は、アガロースまたはポリアクリルアミドゲル上でも分離され、フィルターに移されて、フィルターは、当該遺伝子に特異的なプローブとハイブリダイズされる。平行PCR増幅により、例えば多重PCRにより、多数の試料が同時に分析され得る。定量的PCR技法も、多数の技法、例えばそれぞれレポーターおよび消光剤蛍光染料を用いて5’および3’末端で標識されるTaqManまたはプローブFQプローブこれは、2つのPCRプライマー間をアニーリングするを基礎にして用いられ得る。プローブがプライマー間で結合されると、特定生成物のみが検出される。PCR増幅が進行すると、Taqポリメラーゼの5’ヌクレアーゼ活性は、最初に、プローブからのレポーター染料を切断する。レポーター染料が消光剤染料から物理的に分離される場合に生成されるシグナルは、取り付けられたCCDカメラでシグナルを測定することにより検出される。生成される各シグナルは、切断される一プローブと等しく、これは、一標的鎖の増幅に対応する。PCR反応は、供給される使用説明書に従って、PEAppliedBiosystemTaqManPCRコア試薬キットを用いて設定され得る。この技法はさらに、例えば米国特許第6,326,462号に記載されている。他の実施形態では、ドットブロット、サンドイッチハイブリダイゼーション、大量シーケンシング、SAGE、ノーザンブロッティング、insituハイブリダイゼーションおよびその他の同様の方法が、特に、例えばSambrooketal.,’’MolecularCloning:ALaboratoryManual’’NewYork,ColdSpringHarborLaboratory,1989にさらに記載されているように、用いられ得る。他の方法では、遺伝子の発現のレベルは、遺伝子によりコードされるタンパク質のレベルを測定することにより検出され得る。これは、遺伝子によりコードされるタンパク質を特定基に検出する作用物質、例えば抗体を用いて、例えば免疫沈降、ELISAまたは免疫組織化学により実行され得る。他の技法としては、ウエスタンブロット分析が挙げられる。イムノアッセイは、普通は、細胞試料中のタンパク質のレベルを定量するために用いられ、多数の他のイムノアッセイ技法が当該技術分野で既知である。本発明は、特定の検定手法に限定されず、したがって、相同的および非相同的手法の両方を包含するよう意図される。本発明に従って実行され得る例示的イムノアッセイとしては、蛍光偏光イムノアッセイFPIA、蛍光イムノアッセイFIA、酵素イムノアッセイEIA、比濁阻害イムノアッセイNIA、酵素結合免疫吸着検定法ELISAおよびラジオイムノアッセイRIAが挙げられ、ELISA等は、単独で、またはNMR、MALDI-TOF、LC-MS/MSと組合せて、あるいはそれらの代わりに用いられ得る。指示薬部分または標識基は、被験体抗体と結合され、検定設備および適合性イムノアッセイ手法の利用可能性によりしばしば指図される方法の種々の使用の要求を満たすよう、選択される。上記の種々のイムノアッセイを実施するのに用いられるべき一般的技法は、当業者に既知である。細胞から分泌されるポリペプチド、例えばアディポカイン、例えばアディポネクチン、または肥満症誘導性炎症タンパク質、例えばTNF-アルファの場合、これらのペプチドの発現のレベルは、生物学的流体中で測定され得る。このような遺伝子発現分析を補足して、代謝障害活性のマーカーを表現型で報告する検定も実施され得る。例えば、抗代謝障害活性の誘導、例えば抗肥満症、抗糖尿病、褐色脂肪誘導例えば、白色脂肪細胞におけるおよび/または前脂肪細胞からdenovoで等を報告する検定は、褐色脂肪特異的遺伝子、例えばUCP-1、cideaおよびPGC-1a、ならびにミトコンドリア生合成および非結合酸素消費に関与する遺伝子の発現によって査定され得る。他の実施形態では、褐色脂肪誘導に関する表現型検定は、例えば組織学、非結合酸素消費、ミトコンドリアによる非結合呼吸、脂肪酸ベータ酸化、発熱熱生成、呼吸測定、体重変化、流体停留、ミトコンドリア生合成、エネルギー消費、脂肪生成、血清脂肪酸レベル、血清アディポカインレベル、白色および/または褐色脂肪沈着物、脂肪量および/または除脂肪量例えば、二重エネルギーX線吸収測定DEXAスキャンにより査定される場合、グルコース耐性試験、インスリン耐容性試験、ならびに肥満誘導性炎症の調整を分析することによっても査定され得る。本発明のさらに別の態様では、PPARガンマタンパク質は、2-ハイブリッド、3-ハイブリッド等の検定におけるバイトタンパク質として用いて例えば、米国特許第5,283,317号;Zervosetal.1993Cell72:223-232;Maduraetal.1993J.Biol.Chem.268:12046-12054;Barteletal.1993Biotechniques14:920-924;Iwabuchietal.1993Oncogene8:1693-1696;およびWO94/10300Brent参照、PPARガンマと結合するかまたは相互作用する他のタンパク質PPARガンマ結合タンパク質またはPPARガンマ-bpを同定し、そして古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害を促進するPPARガンマ活性を選択的に調整し得る。これらの方法のすべてにおいて、適正な対象の使用が重要であり得る。一実施形態では、本発明の非典型的PPARガンマ調節因子は、少なくとも一部は、検定出力例えば、表1および2に列挙した遺伝子および検定が候補化合物の非存在下での細胞と比較されるよう、本明細書中に記載されるような方法で同定され得る。一実施形態では、比較は、既知のPPARガンマアゴニスト、例えば頑強な古典的PPARガンマアゴニスト、ロシグリタゾンと接触された細胞に対してなされ得る。別の実施形態では、比較は、非リン酸化可能PPARガンマポリペプチドをコードすることおよび/または発現することを包含する細胞に対してなされ得る例えば、S273A突然変異体。さらに別の実施形態では、比較は、遺伝子発現分析の比率、例えば表2に列挙した遺伝子に対する表1に列挙した遺伝子の発現の比率に対してなされ得る。B.化合物当該技術分野で既知であり、および/または本明細書中に記載される方法を用いて同定されるPPARガンマリガンド、ならびに本明細書中に記載される方法を用いて分析される終点は、多数の判定基準に従って記載され得る。例えば、化合物または作用物質は、別のPPARガンマアゴニスト、例えば頑強な古典的PPARガンマアゴニスト、ロシグリタゾンに比して、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50未満またはそれ以下または任意の範囲を含むの古典的PPARアゴニスト活性を有し得る。ロシグリタゾンのほかに、他の古典的PPARガンマアゴニスト、例えばピオグリタゾンが用いられ得る。いくつかの実施形態では、古典的PPARアゴニスト活性は、本明細書中に記載される方法例えば、表1および2に列挙したバイオマーカーの遺伝子発現を分析することを包含するに従って測定され得る。例えば、遺伝子発現、検定変化等の有意の調整は、分析中の出力が、対照に比して、1.1-、1.2-、1.3-、1.4-、1.5-、1.6-、1.7-、1.8-、1.9-、2.0-、2.1-、2.2-、2.3-、2.4-、2.5-、2.6-、2.7-、2.8-、2.9-、3.0-、3.1-、3.2-、3.3-、3.4-、3.5-、3.6-、3.7-、3.8-、3.9-、4.0-、4.1-、4.2-、4.3-、4.4-、4.5-、4.6-、4.7-、4.8-、4.9-、5.0-、5.5-、6.0、6.5-、7.0-、7.5-、8.0-、8.5-、9.0-、9.5-、10-、11-、12-、13-、14-、15-、16-、17-、18-、19-、20倍またはそれ以上異なって任意の範囲を含めて大きいかまたは小さいかを査定され得る。別の実施形態では、化合物または作用物質は、100μM、90μM、80μM、70μM、60μM、50μM、40μM、30μM、20μM、10μM、9μM、8μM、7μM、6μM、5μM、4.5μM、4μM、3.5μM、3μM、2.5μM、2μM、1.5μM、1μM、900nM、850nM、800nM、750nM、700nM、650nM、600nM、550nM、500nM、450nM、400nM、350nM、300nM、250nM、200nM、150nM、100nM、95nM、90nM、85nM、80nM、75nM、70nM、65nM、60nM、55nM、50nM、45nM、40nM、35nM、30nM、25nM、20nM、15nM、10nM、5nM、4nM、3nM、2nM、1nMまたはそれ以下あるいは任意範囲を含むの用量で、PPARガンマに対するEC50結合親和性を有し得る。EC50値は、比較目的のために確定され、用いられ得る。この値は、対照に比して、関連PPARガンマ機能を50抑制するのに必要とされる薬剤の濃度である。さらに別の実施形態では、化合物または作用物質は、例えば、HDX技法を用いて測定した場合、PPARガンマポリペプチドのある種のドメインを安定化し得る。理論に縛られずに考えると、らせん12は古典的PPARアゴニストにより安定化されるだけであるが強/全、一方、非典型的PPARアゴニストすなわち、部分/中等度、例えば、本明細書中に記載されるスクリーニング方法を用いて得られる化合物および作用物質は、らせん12の統計学的有意の安定化パターンを示さない。それに反して、一実施形態では、非典型的アゴニストは、ベータシートを安定化する。別の実施形態では、非典型的アゴニストはらせん3を安定化する。タンパク質ドメイン安定化を確定するための検定は、当該技術分野で周知であり、例えばBruningetal.2007Structure15:1258-1271この記載内容は参照により本明細書中で援用されるに記載されている。いくつかの実施形態では、化合物または作用物質は、対照例えば、既知の非典型的PPARガンマアゴニスト、例えばMRL24および/またはMRL-20に比して、少なくとも100、95、90、95、90、85、80、75、70、65、60、55、50、45、40、35、30、25、20または任意範囲を含む、ベータシートおよび/またはらせん3を安定化し得る。さらに別の実施形態では、化合物または作用物質は、化合物の構造クラスに、例えば小分子の一ファミリーに属する。強力なアゴニストとして作用する古典的PPARガンマリガンドの例としては、チゾリジンジオンTZDおよびチアゾリジン誘導体チアゾリジンジオンとして既知、例えばプログリタゾンAD-4833およびU-72107Eとしても既知、トログリタゾンCS-045としても既知SankyoおよびC1-991Parke-Davis、BRL49653、シグリタゾン、エングリタゾンならびにその化学的誘導体が挙げられる。これらの化合物は、糖尿病の治療に関して慣用的に知られている。このような化合物の例示的供給源に関しては、例えば、米国特許第4,812,570号;第4,775,687号;第4,725,610号;第4,582,839号;および第4,572,912号参照。米国特許第5,521,201号および欧州特許出願第0008203号、第0139421号、第0155845号、第0177353号、第0193256号、第0207581号および第0208420号、ならびにChem.Pharm.Bull30103580-3600は、チアゾリジンジオン誘導体に関し、そして種々のTZDおよびTZD様類似体少なくとも一部は、本発明の方法を実行するのに有用であり得るに関する商業的供給元/合成スキームを記載する。これに対して、古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進する非典型的PPARガンマリガンドの例としては、例えばBruningetal.2007Structure15:1258-1271この記載内容は参照により本明細書中で援用されるに記載されるようなMRL-20、MRL-24、nTZDpa、SR145、SR147、Mbx-102およびBVT.13が挙げられる。C.治療方法本発明の非典型的PPARガンマ調節因子は、少なくとも一部は、例えば本明細書中に記載される代謝障害、例えば体重障害、例えば、肥満症、ならびに不十分なインスリン活性に関連した障害、例えば糖尿病を治療するために用いられ得る。いくつかの実施形態では、このようなPPARガンマ調節因子は、このような作用物質による治療の効力、毒性または副作用を確定するためにも用いられ得る。これらの治療方法は、一般的に、以下の小区分Vで記載されるような薬学的組成物中の非典型的PPARガンマ調節因子を、このような治療を必要とする被験体、例えば本明細書中に記載される障害を有する被験体に投与するステップを包含する。投与することという用語は、非リン酸化可能PPARガンマ発現および/または活性を増大するというその意図された機能を作用物質に実施させる投与の経路を包含するよう意図される。用いられ得る投与経路の例としては、注射皮下、静脈内、腸管外、腹腔内、くも膜下腔内等、経口的、吸入および経皮的投与が挙げられる。注射は、大量瞬時注射であり得るし、あるいは連続注入であり得る。投与経路によって、作用物質は選択材料で被覆されるかまたはその中に配置されて、その意図された機能を実施するその能力に有害に作用し得る天然条件からそれを保護し得る。作用物質は、単独で、あるいは製薬上許容可能な担体と一緒に投与され得る。さらに、作用物質は、製薬上許容可能な担体と同時投与され得る。作用物質は、invivoでその活性形態に転換されるプロドラッグとしても投与され得る。非リン酸化可能PPARガンマ発現および/または活性を誘導する作用物質の有効量という用語は、被験体または被験体の集団における非リン酸化可能PPARガンマ発現および/または活性を促進するのに必要なまたは十分な量である。有効量は、用いられる治療薬単数または複数の種類、被験体のサイズまたは障害の重症度によって変わり得る。個々の投与量は、担当医の判断での被験体の用件、処置されている症状の重症度、および用いられている特定化合物によって変えられ得る、と理解される。治療的有効量または用量を決定するに際しては、多数の付加的因子が担当医により考察され、例としては、特定作用物質の薬力学的特質およびその投与方式および経路;治療の望ましい時間経過;哺乳動物の種;そのサイズ、年齢および全身健康状態;関与する具体的疾患;疾患の関連度または重症度;個々の被験体の応答;投与される特定化合物;投与方式;投与される調製物の生物学的利用能特質;選択される用量投与レジメン;併用治療の種類;ならびにその他の関連環境が挙げられるが、これらに限定されない。治療は、化合物の有効用量より少ない小投与量で開始され得る。その後、一実施形態では、投与量は、その環境下で最適効果が達成されるまで、小増分ずつ増大されるのが望ましい。便宜上、総1日投与量は分割されて、所望により、1日の間に分けて投与され得る。代謝障害を治療するための任意の特定作用物質の有効性は、抗代謝障害治療を受けている被験体から得られる1つ以上の試料を比較することにより、モニタリングされ得る。概して、第一試料は、療法開始前に被験体から得られ、治療中に1つ以上の試料が得られる。このような使用において、療法前に代謝障害を有する被験体からの細胞の発現の基線が確定され、次いで、代謝障害を有する被験体からの細胞の発現の基線状態における変化が、治療の経過の間、モニタリングされる。代替的には、治療中に得られる2つ以上の連続試料が用いられるが、治療前基線試料を必要としない。このような使用では、被験体から得られる第一試料は、代謝障害を有する被験体からの細胞の発現が増大しつつあるか低減しつつあるかを確定するための基線として用いられる。本発明の別の態様は、非リン酸化可能PPARガンマの発現および/または活性を誘導し得る化合物または作用物質例えば、ペプチド、ペプチド模倣物、小分子または他の薬剤を同定するための方法に関する。V.薬学的組成物別の態様では、本発明は、少なくとも一部は、1つ以上の製薬上許容可能な担体添加物および/または希釈剤と一緒に処方される治療的有効量の作用物質これは、古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進するを含む製薬上許容可能な組成物を提供する。以下で詳細に記載されるように、本発明の薬学的組成物は、少なくとも一部は、固体または液体形態で、例えば、以下の:1経口投与、例えば飲薬水性または非水性溶液または懸濁液、錠剤、ボーラス剤、粉末、顆粒、ペースト;2非経口投与例えば滅菌溶液または懸濁液として、皮下、筋肉内または静脈内注射により;3局所的適用例えば皮膚に塗布されるクリーム、軟膏またはスプレーとして;4膣内または直腸内例えばペッサリー、クリームまたは発泡体として;あるいは5エーロゾル例えば水性エーロゾル、リポソーム調製物または化合物を含有する固体粒子としてのために適合される形態で、投与のために具体的に処方され得る。治療的有効量という語句は、本明細書中で用いる場合、古典的PPARガンマ活性化を上回る抗代謝障害活性を選択的に促進する作用物質の量を意味し、これは、合理的利益/危険比率での何らかの所望の治療効果、例えば体重減少を生じるために有効である。製薬上許容可能なという語句は、健全な医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激アレルギー反応、あるいはその他の問題または合併症を伴わずに、ヒトおよび動物の組織と接触するのに用いるために適している合理的利益/危険比率と同等作用物質、材料、組成物および/または剤形に言及するために本明細書中で用いられる。製薬上許容可能な担体という語句は、本明細書中で用いる場合、一器官または身体の部分から、別の器官または身体の部分に対象化学物質を運搬するかまたは輸送するのに関与する製薬上許容可能な材料、組成物またはビヒクル、例えば液体または固体充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒または封入材料を意味する。各担体は、処方物の他の成分と相溶性であるという意味で許容可能でなければならない。製薬上許容可能な担体として役立ち得る材料のいくつかの例としては、以下のものが挙げられる:1糖、例えばラクトース、グルコースおよびスクロース;2デンプン、例えばコーンスターチおよびジャガイモデンプン;3セルロースおよびその誘導体、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロース;4トラガカント粉末;5麦芽;6ゼラチン;7タルク;8賦形剤、例えばココアバターおよび坐薬用蝋;9油、例えば落花生油、綿実油、紅花油,ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油およびダイズ油;10グリコール、例えばプロピレングリコール;11ポリオール、例えばグリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコール;12エステル、例えばエチルオレエートおよびエチルラウレート;13寒天;14緩衝剤、例えば水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム;15アルギン酸;16発熱性物質除去蒸留水;17等張生理食塩水;18リンガー溶液;19エチルアルコール;20リン酸塩緩衝溶液;ならびに21薬学的処方物中に用いられるその他の非毒性相溶性物質。製薬上許容可能な塩という用語は、本発明に包含される非リン酸化可能PPARガンマ発現および/または活性を誘導する作用物質の相対的に非毒性の無機および有機酸付加塩を指す。これらの塩は、作用物質の最終的単離および精製中にinsituで、あるいはその遊離塩基形態の精製作用物質を適切な有機または無機酸と別個に反応させ、そしてこのように生成された塩を単離することにより、調製され得る。代表的塩としては、臭化水素酸塩、塩化水素酸塩、硫酸塩、亜硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシラート、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩、メシラート、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩およびラウリルスルホン酸塩等が挙げられる例えば、Bergeetal.1977’’PharmaceuticalSalts’’,J.Pharm.Sci.66:1-19参照。他の場合には、本発明の方法に有用な作用物質は、少なくとも一部は、1つ以上の酸性官能基を含有し、したがって、製薬上許容可能な塩基と製薬上許容可能な塩を形成し得る。これらの場合における製薬上許容可能な塩という用語は、非リン酸化可能PPARガンマ発現および/または活性を誘導する作用物質の相対的に非毒性の無機および有機塩基付加塩を指す。これらの塩は、同様に、作用物質の最終的単離および精製中にinsituで、あるいはその遊離酸形態の精製作用物質を適切な塩基、例えば製薬上許容可能な金属陽イオンの水酸化物、炭酸塩または重炭酸塩と、アンモニアと、あるいは製薬上許容可能な有機第一、第二または第三級アミンと別個に反応させることにより、調製され得る。代表的アルカリまたはアルカリ土類塩としては、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩およびアルミニウム塩等が挙げられる。塩基付加塩の生成に有用な代表的有機アミンとしては、エチルアミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン等が挙げられる例えば、Bergeetal.上記参照。湿潤剤、乳化剤および滑剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム、ならびに着色剤、剥離剤、コーティング剤、甘味剤、風味剤および芳香剤、防腐剤および酸化防止剤も、組成物中に存在し得る。製薬上許容可能な酸か防止剤の例としては、以下のものが挙げられる:1水溶性酸化防止剤、例えばアスコルビン酸、塩酸システイン、硫酸水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム等;2油溶性酸化防止剤、例えばパルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソールBHA、ブチル化ヒドロキシトルエンBHT、レシチン、没食子酸プロピル、アルファ-トコフェロール等;ならびに3金属キレート化剤、例えばクエン酸、エチレンジアミン四酢酸EDTA、ソルビトール、酒石酸、リン酸等。本発明の方法に有用な処方物は、少なくとも一部は、経口、鼻、局所例えば頬および舌下、直腸、膣、エーロゾルおよび/または非経口投与に適したものを包含する。処方物は、単位剤形で提示されるのが便利であり、そして製薬業界で周知の任意の方法により調製され得る。単一剤形を生じるために担体材料と組合せられ得る活性成分の量は、治療されている宿主、特定の投与方式によって変わる。単一剤形を生じるために担体材料と組合せられ得る活性成分の量は、一般的に、治療効果を生じる化合物の量である。一般的に、100のうち、この量は、約1~約99の活性成分、例えば約5~約70、約10~約30の範囲である。処方物または組成物の調製方法は、非リン酸化可能PPARガンマ発現および/または活性を誘導する作用物質と担体との、ならびに任意に1つ以上の補助成分との会合をもたらすステップを包含する。概して、処方物は、作用物質と液体担体、または微粉砕担体、またはその両方とを均一且つ密に会合指せて、次に、必要な場合は、生成物を造形することにより調製される。本発明の化合物および組成物のために意図される特に有益な処方物は、少なくとも一部は、経口処方物を包含する。経口投与に適した処方物は、カプセル、カシェ剤、ピル、錠剤、ロゼンジ風味付け下、通常はスクロースおよびアラビアゴムまたはトラガカントを用いる、粉末、顆粒の形態であり得るし、あるいは水性または非水性液体中の溶液または懸濁液として、あるいは水中油型または油中水型液体エマルションとして、あるいはエリキシルまたはシロップとして、あるいは香錠不活性基剤、例えばゼラチンおよびグリセリンまたはスクロースおよびアラビアゴムを用いるとして、および/または口腔洗浄液等として存在し、各々が予定量の作用物質を活性成分として含有する。化合物は、ボーラス剤、舐剤またはペーストとしても投与され得る。経口投与のための固体剤形カプセル、錠剤、ピル、糖衣錠、粉末、顆粒等では、活性成分は、1つ以上の製薬上許容可能な担体、例えばクエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムと、および/または以下のうちのいずれかと混合される:1充填剤または増量剤、例えばデンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよび/またはケイ酸;2結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび/またはアラビアゴム;3保湿剤、例えばグリセロール;4崩壊剤、例えば寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のケイ酸塩、および炭酸ナトリウム;5溶解遅延剤、例えばパラフィン;6吸収促進剤、例えば第四級アンモニウム化合物;7湿潤剤、例えばアセチルアルコールおよびグリセロールモノステアレート;8吸収剤、例えばカオリンおよびベントナイト粘土;9滑剤、例えばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよびその混合物;ならびに10着色剤。カプセル、錠剤およびピルの場合は、薬学的組成物は緩衝剤も含み得る。同様の型の固体組成物は、ラクトースまたは乳糖のような賦形剤、ならびに高分子量ポリエチレングリコール等を用いて、軟質および硬質充填ゼラチンカプセル中の充填剤としても用いられ得る。錠剤は、任意に1つ以上の補助成分を用いて、圧縮または成型により製造され得る。圧縮錠剤は、結合剤例えばゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース、滑剤、不活性希釈剤、防腐剤、崩壊剤例えばデンプングリコール酸ナトリウムまたは架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム、界面活性剤または分散剤を用いて調製され得る。成型錠剤は、粉末ペプチドまたは不活性液体希釈剤で湿らせたペプチド模倣物の混合物を、適切な機械で成型することにより製造され得る。錠剤、ならびにその他の固体剤形、例えば糖衣錠、カプセル、ピルおよび顆粒は、任意に、刻み目を付けられるか、あるいはコーティングおよび外皮、例えば腸溶コーティング、および製薬業界で周知のその他のコーティングを用いて調製され得る。それらは、さらにまた、例えば所望の放出プロフィールを提供するための種々の割合のヒドロキシプロピルメチルセルロース、その他のポリマーマトリックス、リポソームおよび/または微小球を用いて、その中の活性成分の遅いまたは制御された放出を提供するように処方され得る。それらは、例えば、細菌保持フィルターを通した濾過により、または滅菌固体組成物の形態で滅菌剤を組入れられて、使用直前に滅菌水または何らかの他の滅菌注射可能媒質中で溶解されることにより、滅菌され得る。これらの組成物は、任意に不透明化剤も含有し得るし、そしてそれらが活性成分単数または複数のみを、または消化管のある部分で、任意に遅延方式で、放出する組成物を有し得る。用いられ得る包埋組成物の例としては、重合物質および蝋が挙げられる。活性成分は、マイクロカプセル封入形態でもあり得るし、適切な場合には、上記賦形剤の1つ以上を伴う。経口投与のための液体剤形としては、製薬上許容可能な乳濁液、マイクロエマルション、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシルが挙げられる。活性成分のほかに、液体剤形は、当該技術分野で一般に用いられる不活性希釈剤、例えば水またはその他の溶媒、可溶化剤、および乳化剤、例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、1,3-ブチレングリコール,油特に綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにその混合物を含有し得る。不活性希釈剤のほかに、経口組成物は、アジュバント、例えば湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味剤、風味剤、着色剤、芳香剤および防腐剤も含み得る。懸濁液は、活性成分のほかに、懸濁化剤、例えばエトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微晶質セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天およびトラガカント、ならびにその混合物を含有し得る。直腸または膣投与のための処方物は坐薬として提示され、これは、1つ以上の作用物質を、1つ以上の適切な非刺激性賦形剤または担体例えば、ココアバター、ポリエチレングリコール、坐薬用蝋またはサリチル酸塩と混合することにより調製され、室温では固体であるが、体温では液体で、したがって、直腸または膣腔中で融解して、活性物質を放出する。膣投与に適している処方物は、当該技術分野で適切であることが既知であるような担体を含有するペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、発泡体またはスプレー処方物も包含する。非リン酸化可能PPARガンマ発現および/または活性を誘導する作用物質の局所または経皮投与のための剤形としては、粉末、スプレー、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、溶液、パッチおよび吸入剤が挙げられる。活性構成成分は、滅菌条件下で製薬上許容可能な担体と、任意に、必要とされ得る防腐剤、緩衝剤または噴射剤と混合され得る。軟膏、ペースト、クリームおよびゲルは、作用物質のほかに、賦形剤、例えば動物および植物脂肪、油、蝋、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛、またはその混合物を含有し得る。粉末およびスプレーは、非リン酸化可能PPARガンマ発現および/または活性を誘導する作用物質のほかに、賦形剤、例えばラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミド粉末、またはこれらの物質の混合物を含有し得る。スプレーは、さらに、通例の噴射剤、例えばクロロフルオロ炭化水素および揮発性非置換炭化水素、例えばブタンおよびプロパンを含有し得る。非リン酸化可能PPARガンマ発現および/または活性を誘導する作用物質は、臍帯的には、エーロゾルにより投与され得る。これは、水性エーロゾル、化合物を含有するリポソーム調製物または固体粒子を調整することにより成し遂げられる。非水性例えばフルオロカーボン噴射剤懸濁液が用いられ得る。超音波ネブライザーは、作用物質が剪断されるのを最小限にし、これが、化合物の分解を生じ得る。普通は、水性エーロゾルは、作用物質の水性溶液または懸濁液を、慣用的な製薬上許容可能な担体および安定化剤と一緒に処方することにより作製される。担体および安定化剤は、特定化合物の要件に伴って変わるが、しかし典型的には、非イオン性界面活性剤トゥイーン、プルロニック、またはポリエチレングリコール、無害タンパク質、例えば血清アルブミン、ソルビタンエステル、オレイン酸、レシチン、アミノ酸、例えばグリシン、緩衝剤、塩、糖または糖アルコールを包含する。エーロゾルは、一般的に、等張溶液から調製される。経皮パッチは、身体への作用物質の制御送達を提供するという付加的利点を有する。このような剤形は、適正な媒質中に作用物質を溶解するかまたは分散することにより作製され得る。吸収増強剤も、皮膚を通したペプチド模倣物の流動を増大するために用いられ得る。このような流動の速度は、速度制御膜を提供することにより、またはポリマーマトリックスまたはゲル中にペプチド模倣物を分散することにより、制御され得る。眼用処方物、眼用軟膏、粉末、溶液等も、本発明の範囲内であるよう意図される。非蛍光投与に適した本発明の薬学的組成物は、1つ以上の作用物質を、1つ以上の製薬上許容可能な滅菌等張水性または非水性溶液、分散液、懸濁液または乳濁液と、あるいは使用直前に滅菌注射用溶液または分散液中で再構成され得る滅菌粉末と組合せて含み、これらは、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤、処方物を意図されたレシピエントの血液と等張にさせる溶質、あるいは懸濁化剤または濃化剤を含有し得る。本発明の薬学的組成物中に用いられ得る適切な水性および非水性担体の例としては、水、エタノール、ポリオール例えばグリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等およびその適切な混合物、植物油、例えばオリーブ油、ならびに注射用有機エステル、例えばオレイン酸エチルが挙げられる。適正な流動性は、例えば、コーティング材料、例えばレシチンの使用により、分散液の場合には必要とされる粒子サイズの保持により、そして界面活性剤の使用により保持され得る。これらの組成物は、アジュバント、例えば防腐剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤も含有し得る。微生物の作用の防止は、種々の抗細菌剤および抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸等の含入により保証され得る。等張剤、例えば糖、塩化ナトリウム等を組成物中に含入することも望ましい。さらに、注射用製剤形態の長期吸収は、アルミニウムモノステアレートおよびゼラチンのような吸収を遅延する作用物質の含入によりもたらされ得る。いくつかの場合には、薬剤の効果を延長するために、皮下または筋肉内注射からの薬剤の吸収をおそくすることが望ましい。これは、貧水溶性を有する結晶または非晶質材料の液体懸濁液を用いることにより成し遂げられ得る。その場合、薬剤の吸収速度は、その溶解速度によって決まり、順次、結晶サイズおよび結晶形態によって左右され得る。代替的には、非蛍光投与剤形の吸収遅延は、油ビヒクル中に薬剤を溶解するかまたは懸濁することにより成し遂げられる。注射用デポ剤形態は、ポリラクチド-ポリグリコリドのような生分解性ポリマーにおける非リン酸化可能PPARガンマ発現および/または活性を誘導する作用物質のマイクロカプセルマトリックスを生成することにより、作製される。薬剤対ポリマーの比率、ならびに用いられる特定のポリマーの性質によって、薬剤放出の速度は制御され得る。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリオルトエステルおよびポリ無水物が挙げられる。デポ剤注射用処方物は、身体組織と相溶性であるリポソームまたはマイクロエマルション中に薬剤を閉じ込めることによっても調製される。本発明の作用物質が、少なくとも一部が、ヒトおよび動物に調合薬として投与される場合、それらは、それ自体、または例えば0.1~99.5例えば0.5~90の活性成分を製薬上許容可能な担体と組合せて含有する薬学的組成物として投与され得る。本発明の薬学的組成物中の活性成分の実投与量レベルは、被験体に対する毒性を伴わずに、得照りの被験体、組成物および投与様式に対する所望の治療的応答を達成するのに有効である活性成分の量を得るよう、少なくとも一部は本発明の方法により確定され得る。本発明の核酸分子は、ベクター中に挿入され、遺伝子療法ベクターとして用いられ得る。遺伝子療法ベクターは、例えば静脈内注射、局所投与により米国特許第5,328,470号参照、または定位的注射により例えばChenetal.1994Proc.Natl.Acad.Sci.USA91:30543057参照、被験体に送達され得る。遺伝子療法ベクターの薬学的調製物は、許容可能な希釈剤中の遺伝子療法ベクターを包含し得るし、あるいは遺伝子送達ビヒクルが包埋される緩徐放出マトリックスを含み得る。代替的には、完全遺伝子送達ベクターが組換え細胞から無傷で酸性され得る場合例えばレトロウイルスベクター、薬学的調製物は、遺伝子送達系を生じる1つ以上の細胞を包含し得る。以下の実施例により本発明をさらに例証するが、それらは本発明を限定するものではない。実施例1:実施例1~10に関する材料および方法a.細胞培養3T3-L1およびHEK-293細胞は、ATCCから入手した。PPARガンマ-ヌルマウス胚性繊維芽細胞MEFReavenetal.,Diabetes37:1020-10241988を、ダルベッコ変法イーグル培地および10ウシ胎仔血清中で培養した。FLAG-PPARガンマおよびFLAG-PPARガンマS273Aを、pMSCV-puroレトロウイルスベクターStratagene中でサブクローニングした。レトロウイルス産生のために、Phoenixパッケージング細胞を10μgのレトロウイルスベクターでトランスフェクトしたKinsellaetal.,Hum.GeneTher.7:1405-14131996。48時間後、ウイルス上清を収集し、濾過した。細胞をレトロウイルスに感染させた後、2μg/mlのプロマイシンとともにインキュベートすることにより、異所性タンパク質を発現する細胞を選択した。1μMのデキサメタゾン、0.5mMのイソブチルメチルキサンチンおよび850mMのインスリンで48時間、細胞を処理することにより、3T3-L1またはMEFでの脂肪細胞分化を誘導し、細胞を、850nMのインスリンを含有する維持培地に切り替えた。細胞中の脂質蓄積を、オイルレッドO染色により検出した。細胞培地中への分泌アディポネクチンの量を、ELISAMilliporeにより分析した。細胞培養に関する化学物質はすべて、別記しない限り、Sigmaから入手した。b.DNA構築物およびCDK5のshRNAHA-WTCDK5、HA-KDCDK5およびMyc-p35を、Addgeneから入手した。ネズミPPARαまたはPPARδを、FLAG-pcDNA3.1Invitrogen中でサブクローニングした。CDK5を標的にするレンチウイルスshRNA発現ベクターpLKO.1;OpenBiosystemsに関して用いた配列は、5’-TGTAAGAGAATAAAGCGTGAA-3’であった。レンチウイルス産生のために、HEK-293T細胞ATCCを、10μgのレンチウイルスベクターでトランスフェクトしたKinsellaetal.,Hum.GeneTher.7:1405-14131996。細胞をレンチウイルスに感染させた後、2μg/mlのプロマイシンとともにインキュベートすることにより、細胞を選択した。c.invitroキナーゼ検定ATPの存在下で、キナーゼ緩衝液中の基質として活性cdk5/p35タンパク質および組換えPPARガンマタンパク質を用いて、キナーゼ検定を実施した。試料緩衝液を付加することにより、反応を停止した。次に、脂漏をSDS-PAGEに付して、CDK基質抗体により検出した。特に、活性cdk5/p35、cdk1/cdc2、cdk2/サイクリンA、cdk2/サイクリンEまたはcdk4/サイクリンD1キナーゼを、MilliporeorCellSignalingTechnologyから購入した。メーカーの使用説明書CellSignalingTechnologyに従って、invitroCDKキナーゼ検定を実施した。要するに、PPARガンマの免疫精製WTまたはS273A突然変異体1μgを、20μMのATPを含有するキナーゼ検定緩衝液25mMトリス-HCl、pH7.5、5mMベータ-グリセロホスフェート、2mMジチオトレイトールDTT、0.1mMNa3VO4、10mMMgCl2中の活性CDKキナーゼとともに、30°Cで15分間、インキュベートした。検定のための要請対照、精製ヒストンH1MilliporeまたはRbCellSignalingTechnologyを用いた。いくつかのPPARガンマリガンドを、基質とともに30分間予備インキュベートし、検定を実施した。SDSPAGE後の基質のリン酸化を、抗CDK基質抗体CellSignalingTechnologyを用いて分析した。d.細胞または組織溶解物の調製、免疫沈降および免疫ブロット法CDK5またはPPARガンマを発現するHEK-293細胞を、トランスフェクション後に収集した。総細胞溶解物を、FLAGM2アガロースSigmaとともに4°Cでインキュベートした。免疫沈降物または総細胞溶解物を、抗CDK基質、FLAGまたはHARoche抗体を用いて分析した。分化した3T3-L1脂肪細胞を、TNF-α50ng/ml、IL-650ng/ml、IL-1β50ng/mlまたはFFAs400μMパルミチン酸およびオレイン酸混合物で、指示時間の間処理し、細胞溶解物をリン酸化特異的またはPPARガンマ抗体を用いて分析した。3T3-L1脂肪細胞を、種々のPPARガンマリガンドで前処理し、TNF-αとともにインキュベートした。組織溶解物に関しては、マウスからのWATを、RIPA緩衝液50mMトリス、pH7.5、150mMNaCl、1NP-40、0.5デオキシコール酸ナトリウム、0.1SDSプロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤を有する中でホモジナイズした。ウエスタンブロッティングのために、PPARガンマのSer-273周囲の残基に対応する合成ホスホペプチドAc-KTTDKpSPFVIYDC-アミドを用いて、PPARガンマSer-273に対するウサギポリクローナルリン酸化特異的抗体をNewEnglandPeptidesが産生した。抗PPARガンマ、ホスホ-CDK5Y15、CDK5およびp35抗体SantaCruzを用いて、総組織溶解物を分析した。PhosphorylationofPPARgammaonSer112またはSer273におけるPPARガンマのリン酸化を、リン酸化特異的抗体Ser112、Millipore,MAB3632により検出した。e.レポーター遺伝子検定いくつかの実施例において、HEK-293細胞を、1.5×105細胞/ウェルで12-ウェルプレート中に播種した。HEK-293細胞を、リポフェクタミン2000Invitrogenを用いて、pDR-13X、UCP1PPARガンマ認識部位を基礎にして-ルシフェラーゼレポータープラスミド、PPARガンマ、RXRaおよびpRL-レニリンでトランスフェクトした。一晩トランスフェクション後、細胞を、ロシグリタゾンまたはMRL24で、24時間処理した。細胞を収穫し、二重ルシフェラーゼキットPromegaを用いてレポーター遺伝子検定を実行した。ルシフェラーゼ活性を、レニリン活性に対して正規化した。f.遺伝子発現分析トリゾール試薬Invitrogenを用いて、細胞または組織から総RNAを単離した。ABI逆転写キットを用いて、RNAを逆転写した。ABI9300PCR機を用いて、緑色蛍光染料により、定量的PCR反応を実施した。TATA結合タンパク質TBPレベルに正規化されるΔΔ-Ct法により、相対的mRNA発現を確定した。この試験で用いられるプライマーの配列は、表3に見出される。g.ヌードマウスにおける脂肪パッドの生成PPARガンマのWTまたはS273A突然変異体を安定的に発現するPPARガンマ-ヌル繊維芽細胞1×107を、従来の方法に従って、7~8週齢雄NCRヌードマウスTaconicに皮下移植したn=5匹/群Walkeyetal.,J.Biol.Chem.283:24290-242942008。注射の6週間後に、遺伝子発現の分析のために脂肪パッドを単離した。h.マイクロアレイ解析1μMのロシグリタゾンまたはMRL24で24時間処置したPPARガンマまたはWT細胞のWTまたはS273A突然変異体を発現するPPARガンマ-ヌル繊維芽細胞から、総RNAを単離した。アレイハイブリダイゼーションおよびスキャンは、確立された方法に従ってLockhartetal.,Nat.Biotechnol.14:1675-16801996、AffymetrixGeneChipマウスゲノム4302.0アレイを用いて、ダナファーバー癌研究所マイクロアレイ中心機関Dana-FarberCancerInstituteMicroarrayCoreFacilityが実施した。DNAチップ解析機dChipソフトウェアを用いて、アレイデータを解析したLietal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA98:31-362001。非対合t検定により、遺伝子発現における差の統計学的有意を査定したp<0.05。PPARガンマのcdk5リン酸化により調節される厳密な遺伝子組を作製するために、p値ならびにWT対S273A突然変異体細胞における遺伝子発現の倍変化を先ず算定し、そしてlogp値対log2倍変化をプロットした。遺伝子のこの一覧から、大きさ4倍差および統計学的有意p<0.05に変化を示した53個の遺伝子を選択した。qPCRにより、細胞または移植脂肪パッドにおいて選択遺伝子を実証し、その結果生じた遺伝子組17の遺伝子からなるを、qPCRを用いてマウスのWATで解析した。i.動物べスイスラエルディーコネスメディカルセンターの動物実験委員会BethIsraelDeaconessMedicalCenter’sInstitutionalAnimalCareandUseCommitteeにより認可された手法に従って、すべての動物実験を実施した。4~5週齢雄C57BL/6Jマウスを、JacksonLaboratoryから入手した。マウスに、通常餌10kcal脂肪、D12450B、ResearchDietsInc.または高脂肪餌60kcal脂肪、D12492、ResearchDietsInc.を指示時間に与えた。耐糖試験のために、1日10mg/kgのロシグリタゾンまたはMRL24を6日間、マウスに腹腔内i.p.注射し、一晩絶食させた後、2g/kgのD-グルコースを腹腔内注射した。Truetrack糖測定器を用いて、グルコース注射後、間隔を置いて、尾静脈血中でグルコースを測定した。ELISACrystalChemを用いて、血清インスリン濃度を確定した。実施例2:cdk5はマウスPPARガンマのセリン273を特異的にリン酸化する前炎症性サイトカインは、特に動物またはヒトが肥満になると、脂肪組織中に存在する脂肪細胞および免疫細胞の両方から分泌されるHotamisligiletal.,Science259:87-911993。PPARガンマは脂肪細胞における脂肪生成および遺伝子発現の主要調節因子であるため、分子の構造を解析し、PPARガンマの主なアミノ酸配列が、PPARγ2のセリン273でのプロテインキナーゼcdk5によるリン酸化のためのコンセンサス部位を含有する、ということが確定された図1A。このプロテインキナーゼは、cdk遺伝子ファミリーの一成員であるにもかかわらず、サイクリンにより調節されず、代わりに、多数のサイトカインおよび前炎症性シグナルの標的であるp35/25により活性化されるDhavanetal.,Nat.Rev.Mol.Cell.Biol.2:749-7592001。このcdk5部位は、すべてのシーケンシング化哺乳動物PPARガンマ中に保存されるが、しかしPPAR遺伝子ファミリーの他の成員には見出されない。ネズミPPARガンマにおけるcdk5部位は、cdk5およびその活性化補因子p35とともにinvitroでインキュベートした場合にリン酸化され得る。実際、PPARガンマは、cdk5/p35複合体の既知の基質であるヒストンH1と同様に効率的に、これらの条件下でリン酸化される図1B。アラニンへのセリン273の突然変異は、PPARガンマのリン酸化を完全に遮断し、これは、PPARガンマ上にはこのプロテインキナーゼに関する他の潜在性部位は存在しなかった、ということを示す図1B。cdkタンパク質ファミリーの他の成員は、PPARガンマをリン酸化しなかった。このキナーゼと野生型WTおよび突然変異体PPARガンマとの同時トランスフェクションにより示されるように、cdk5は細胞中のPPARガンマもリン酸化した図1C。細胞におけるこのリン酸化を、コンセンサスcdk5部位でリン酸化されるペプチドに対する抗体を用いて検出した。キナーゼ活性を不活性化する突然変異KDを有するcdk5のバージョンは、PPARガンマを修飾しなかった。さらに、これらの結果は、セリン112のリン酸化とは無関係であった。最後に、cdk5は細胞中のネズミPPARアルファまたはPPARデルタを修飾しなかった図1D。実施例3:Ser-273でのPPARガンマのリン酸化は脂肪生成を調節する肥満症は、前炎症性サイトカインおよび遊離脂肪酸の循環レベル上昇により特性化される。上記のように、cdk5は、サイトカイン例えばTNF-アルファにより活性化されることが既知であるDhavanetal.,Nat.Rev.Mol.Cell.Biol.2:749-7592001;Utreras.etal.,J.Biol.Chem.284:2275-22842009。図2Aは、セリン273でcdk5部位に由来するホスホペプチドに対して作製される特異的抗体により示されるように、TNF-αまたはIL-6による3T3-L1脂肪細胞の処置がcdk5部位でのPPARガンマのリン酸化を引き起こす、ということを示す。遊離脂肪酸FFAによるcdk5の活性化についての報告はないが、一方、これらは肥満症において増大されることが知られているReavenetal.,Diabetes37:1020-10241988。図2Aは、抗レベルのFFAによる脂肪細胞の処置時に、セリン273でのPPARガンマのリン酸化が起きる、ということも示す。サイトカインおよびFFA誘導性リン酸化は、実際、cdk5により起きているが、図2Bおよび2Cで示されるように、異なるキナーゼでは起きず、この場合、これらの修飾は、ネズミcdk5に対して指図されるshRNAで細胞を処理することにより除去される。PPARガンマのcdk5修飾が、脂肪生成、ならびに分化脂肪細胞内での遺伝子発現に影響を及ぼすこの受容体の能力を変更する方法を確定するために、試験を実施した。PPARガンマの野生型およびS273A突然変異体対立遺伝子は、PPARガンマを完全に欠く繊維芽細胞中で等しいRNAおよびタンパク質レベルで発現された図3aおよび3B;Rosenetal.,GenesDev.16:22-262002。これらの初期実験は、任意の他のリガンドを付加することなく、培養細胞中での考えられる基本レベルのcdk5媒介性リン酸化を利用した図2Bに示した曝露で目に見える。血清は、培養細胞中のcdk5を活性化することが示されているMusaetal.,J.Androl.21:392-4022000。cdk5のより頑強な活性化を誘導するサイトカインおよびFFAによる細胞の処理は、以前に示されているようにTorti.etal.,Science229:867-8691985、脂肪細胞の分化をもたらし、したがって、これらの実験においては用いられ得なかった。突然変異体および野生型PPARガンマ対立遺伝子はともに、PPARガンマ転写活性および脂肪生成を等効率で駆動した図3aおよび3B。ほとんどの古典的脂肪細胞遺伝子、例えばaP2およびC/EBPαは正確に等しいレベルに発現されたが、一方、ある種の遺伝子はPPARガンマcdk5部位における突然変異に感受性であった図3c。これらは、重要な脂肪酸運搬体、cd36、ならびにアディポカイン、アディポネクチン、アディプシンおよびレプチンを包含する。cdk5部位の突然変異は、培地中へのアディポネクチンの分泌の増大も引き起こした図3d。invivo状況での脂肪細胞遺伝子発現を変更するこのcdk5媒介性リン酸化の能力を調べるために、野生型および突然変異体細胞を、ヌードマウスの皮膚下に移植した図8A;Greenetal.,J.Cell.Physiol.101:169-1711979。6週間後、両細胞型が脂肪パッドを生成し、これは、単離され、遺伝子発現に関して解析され得る。さらにまた、アディポネクチンおよびアディプシンはともに、顕著に調節不全化され、突然変異体対wtPPARガンマを発現する細胞中で増大される図10B。これは、PPARガンマのcdk5媒介性リン酸化がこれらのアディポネクチンの両方の発現を低減した、ということを意味する。cd36およびレプチンはともに、突然変異体対wt細胞においてわずかに高いレベルで発現されたが、これは、これらの移植実験において統計学的有意に達しなかった。実施例4:Ser-273でのPPARガンマのリン酸化は肥満症において生じるPPARガンマにおけるcdk5突然変異によりその発現が調節不全にされるいくつかの遺伝子、例えばアディポネクチン、アディプシンおよびレプチンは、多数の型の動物およびヒト肥満症において不適切に調節されることが知られている、ということは注目に値する。実際、肥満症におけるアディポネクチンのレベル低減は、通常は肥満を伴うインスリン抵抗性に少なくとも部分的に関与することが示されているHuetal.,J.Biol.Chem.271:10697-107031996。この事実は、サイトカインによるcdk5の活性化および高脂肪酸レベルとともに、cdk5が肥満マウスの脂肪組織中で活性化されるか、ならびにPPARガンマが肥満症の状況で特異的にcdk5によりリン酸化されるか否かを試験するための実験を方向付けた。マウスを標準固形飼料または脂肪から60kcalを含有する高脂肪、高糖餌に配置して、このプロトコールの開始後いくつかの時点で脂肪組織を採取した。マウスは7週間でインスリン上昇傾向を発症したが、これはインスリン抵抗性を示す。明白な高インスリン血症が、この餌の開始後13週間で現れた図4B。図4Aに示したように、この高脂肪餌の3週間後に、cdk5の活性化ネズミcdk5のチロシン15での特異的リン酸化により検出可能は認められなかった。しかしながら、活性化cdk5は、高脂肪餌の7週間後に容易に観察された。この時点は、cdk4に関するこの活性化サブユニットのより安定な形態である切断p25タンパク質の出現増大も示した図4A;Dhavanetal.,Nat.Rev.Mol.Cell.Biol.2:749-7592001。固形飼料餌動物におけるセリン273に関する検出可能な基本レベルのリン酸化が認められ、そして高脂肪餌に関する3週間後のこの修飾の増大は認められなかった。しかしながら、この餌での7週間までに、精巣上体脂肪組織は、固形飼料餌対照と比較して、PPARガンマのこのリン酸化の明らかな増大を示した。固形飼料餌動物と高脂肪餌動物との間のリン酸化のこの差は、この餌での13週間後に明白であった。cdk5媒介性修飾は、2つの異なる白色脂肪沈着物:鼠径部脂肪皮下脂肪の一型および精巣上体脂肪内臓沈着物と考えられるでも観察されたCinti,S.,ProstaglandinsLeukotEssentFattyAcids73:9-152005。図4Cは、cdk5によるリン酸化のこの増大が両白色脂肪沈着物において起こり、精巣上体脂肪におけるS273でのリン酸化のほうが強度が大きい、ということを例証する。実施例5:PPARガンマリガンドはSer-273でのPPARガンマのリン酸化を抑制し得るチアゾリジンジオンTZDクラスの抗糖尿病薬、例えばロシグリタゾンは、PPARガンマと結合し、活性化して、マウスおよびヒトにおけるインスリン感受性を改善することが知られているWillsonetal.,Annu.Rev.Biochem.70:341-3672001。TZDおよび他の抗糖尿病PPARガンマリガンドがこの受容体のcdk5媒介性リン酸化を変更するか否かを問うために、野生型PPARガンマを発現する脂肪細胞を、TNFアルファ、ロシグリタゾンまたは2つの作用物質の組合せで処置した。図5Aは、ロシグリタゾンが、脂肪細胞における他のPPARガンマ媒介性活性に必要とされる用量と同様に、約1μMでこの修飾を抑制する、ということを示すLehmannetal.,J.Biol.Chem.270:12953-129561995。GW9662、PPARガンマアンタゴニストLeesnitzer.etal.,Biochemistry41:6640-66502002は、ロシグリタゾンのこの作用を完全に遮断する。任意の既知のリガンドをもはや直接的に結合し得ない受容体の天然突然変異体である、突然変異体形態のPPARガンマQ286P;Sarrafetal.Mol.Cell3:799-8041999のcdk5媒介性リン酸化に及ぼすこれらの化合物の作用も検査した。ロシグリタゾンは、この場合のcdk5リン酸化を妨げず、これは、リガンドの直接結合がこの抑制に必要とされることを意味する。このデータの最も分かり易い解釈は、PPARガンマアゴニストがプロテインキナーゼの発現を止めたか、あるいは受容体上で働く関連タンパク質ホスファターゼの発現を始めた、というものである。しかしながら、ロシグリタゾンおよび他のPPARガンマリガンドがinvitroでのcdk5リン酸化を直接的に抑制するよう働くか否かを確定するために、試験を実施した。これに取り組むために、精製PPARガンマおよびcdk5/p35を、適切な条件下でロシグリタゾンと混合するかまたは混合せずに、invitroで修飾を達成した。意外にも、図5Bは、ロシグリタゾンが、PPARガンマ結合に関するこの化合物のKdに近い約30nMの半最大有効用量で、このcdk5媒介性リン酸化をinvitroで遮断した、ということを示すLehmannetal.J.Biol.Chem.270:12953-129561995。ロシグリタゾンを伴うインキュベーションはRbタンパク質をリン酸化するcdk5の能力を抑制しないため、この抑制がcdk5活性の全体的抑制により引き起こされるわけではない、ということは重要である図5D。実施例6:非典型的PPARガンマアゴニストはPPARガンマ活性の古典的活性化を上回るSer-273でのPPARガンマのリン酸化を選択的に抑制するPPARガンマリガンドロシグリタゾンがDNA結合および直接転写受容体活性化作用の両方と関係なくPPARガンマのcdk5媒介性リン酸化を遮断する能力を有する、という事実は、不十分なアゴニスト特性を有するPPARガンマリガンドのいくつかが実質的抗糖尿病活性を有し得る方法に関する興味をそそる説明を示した。MRL24は、PPARガンマと強く結合し、マウスにおいて優れた抗糖尿病活性を有することが報告されている非TZD化合物であるActonetal.,Bioorg.Med.Chem.Lett.15:357-3622005。しかしながら、この化合物は、転写検定においてPPARガンマに対する不十分なアゴニストであり、その結果、PPARガンマアゴニストの古典的作用である脂肪生成を促進する能力を実際には有さない。前に報告されたようにActonetal.,Bioorg.Med.Chem.Lett.15:357-3622005、そして図5Dに示したように、MRL24は、ロシグリタゾンと比較して、PPAR転写応答素子に及ぼすアゴニスト活性が非常に弱い。他方で、MRL24は、PPARガンマのcdk5媒介性リン酸化を遮断するのに非常に有効であった図5B。例えば、30nMのMRL24は、invitroおよび細胞中の両方で、300nMのロシグリタゾンと同様にPPARガンマの修飾を抑制した図5Bおよび5E。さらにまた、このキナーゼはinvitroでのMRL24の存在下でRbをリン酸化する完全な能力を保持したため、この作用はcdk5それ自体の全体的抑制の結果ではなかった。MRL24は、試験したすべての用量で、ロシグリタゾンのアゴニスト活性の小画分のみを有した図5D。実際、PPARガンマのTNF-α-媒介性リン酸化を本質的に完全に遮断した30nMのMRL24図5Eは、同一細胞中のPPARガンマに及ぼす本質的に非検出可能なアゴニスト活性を有した図5D。さらに、cdk5媒介性リン酸化を抑制する不十分なアゴニスト特性を有する多数の付加的抗糖尿病PPARガンマリガンドの能力を、査定したGregoireetal.,Mol.Endocrinol.23:975-9882009;Bergeretal.,Mol.Endocrinol.17:662-6762003;Ostbergetal.,J.Biol.Chem.279:41124-411302004。図6に示したように、PPARガンマのcdk5媒介性リン酸化を抑制するのに、すべて有効であった。実施例7:非典型的PPARガンマアゴニストはPPARガンマ活性の古典的活性化を上回るインスリン感受性を選択的に改善するPPARガンマにおけるcdk5突然変異およびこれらのPPARガンマリガンドの両方により同一細胞中で引き起こされる遺伝子発現の変化の系統的見方をするために、野生型および突然変異体PPARガンマを発現する細胞、さらに、ロシグリタゾンまたはMRL24で処理した野生型細胞からのRNAを用いた遺伝子発現のAffimetrix解析を試験した。図5Fに示したように、これらのデータすべての非監視群化は、遺伝子発現のいくつかの顕著な群を生じた。PPARガンマにおけるcdk5突然変異Mutを含有する細胞から得られるデータを野生型対照からのデータと比較した場合、示差的発現を有する遺伝子を4つの主な群に分ける。一群aと標識は、その発現がこの突然変異により低減される遺伝子であって、したがって、これらの遺伝子がPPARガンマのcdk5リン酸化により活性化されることを意味する。この同一遺伝子群は、ロシグリタゾンおよびMRL24の両方により抑圧されたが、しかしPPARガンマの非リン酸化可能突然変異体と同様のこの抑圧において劇的であるようにはリガンドは機能しなかった。これは、これらのリガンドによる処理が突然変異体タンパク質に匹敵するPPARガンマの脱リン酸化を駆動し得るとは思われないという点で理解可能である。bと標識された非常に小さい群は、Ahnak核タンパク質およびプロテオリピドタンパク質plp1ともに髄鞘形成のために重要であるHakaketal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA98:4746-47512001;Salimetal.,Glia57:535-5492009、ならびにソーティングネキシン5Snx5これは、小胞輸送のために重要であるMerino-Trigoetal.,J.Cell.Sci.117:6413-64242004を含有した。cと標識されたより大きな群は、突然変異体細胞中で増大された遺伝子を表し、PPARガンマのcdk5媒介性リン酸化により低減されたものを表わす。肥満症において調節不全にされることが既知である遺伝子のいくつか、例えばアディポネクチンおよびアディプシンは、この群中に存在する。ロシグリタゾンは、さらにまた、これらの遺伝子の本質的にすべてを増大したが、しかし図5Fは、ロシグリタゾン作用により増大された非常に大きい遺伝子組の一部としてこれが起きた、ということを示す。実際、ロシグリタゾンによりほとんど劇的に誘導される遺伝子dと標識されるはcdk5突然変異誘導性遺伝子組に対応せず、大部分が、aP2およびリポタンパク質リパーゼLPlのように脂肪生成の古典的遺伝子であった。著しく異なって、MRL24により強力に増大される遺伝子群は、ロシグリタゾンにより誘導されるものより非常に小さく、そしてPPARガンマのcdk5部位における突然変異により誘導される遺伝子組と顕著に良好に対応した。これらのデータは、ロシグリタゾンおよびMRL24の両方が、PPARガンマのcdk5リン酸化による影響を受けるが、しかしMRL24により誘導される遺伝子とcdk5媒介性PPARガンマリン酸化の遺伝子的抑制により誘導されるものとの間の非常に密接な対応が認められる同一遺伝子のほとんどを制御する、ということを示す。合わせて考えると、図3~6に提示したデータは、PPARガンマのcdk5修飾が肥満症における遺伝子調節不全と脂肪組織の病変の大きな供給源である、ということを示す。連結をさらに分析するために、PPARガンマのcdk5修飾により調節される精製遺伝子組を、遺伝子発現データの主要構成成分解析の概念を用いて作製した。このために、細胞培養からの、ならびにinvivoでのこれらの細胞の移植からのデータを利用した。次に、これらの遺伝子の発現を、13週間固形飼料または高脂肪餌のマウスの脂肪組織で検査した。図7は、これらの遺伝子の大多数が、肥満症依存的に発現調節不全を有した。全体として、PPARガンマのcdk5リン酸化により最も有意に低減されることが判明した17の遺伝子のうち、少なくとも13のこれらの遺伝子が予測芳香で肥満症において定量的に変更された。肥満症において定量的に不全調節されることが周知の遺伝子、例えばアディポネクチンおよびアディプシンは、この群に入る。肥満症と関連することが知られていないいくつかの遺伝子、例えばレチノイン酸受容体応答物2Rarres2、瀬レニウム結合タンパク質1Slelnbp1およびカルボン酸アンヒドラーゼ3Car3もこの群に入る。PPARガンマリガンドがPPARガンマのcdk5媒介性リン酸化に如何に影響を及ぼすかについての構造的理解を明らかにするために、質量分光分析と結びつけた水素/重水素交換HDX技法を用いたMaieretal.,MethodsEnzymol.402:312-3602005。図8aに示したように、ロシグリタゾンは、古典的アゴニズムに関与する受容体のAF-2表面の一部を含むリガンド結合ドメイン中のらせんであるらせん12H12におけるH/D交換を劇的に低減したNolteetal.,Nature395:137-1431998;Bruningetal.,Structure15:1258-12712007。これに対して、MRL24はこのらせんの動力学に及ぼす統計学的に有意の作用を有さなかったBruningetal.,Structure15:1258-12712007。他方で、MRL24は、H3アミノ酸309~315、アミノ酸369~379でのβ-シートおよびPPARガンマにおけるセリン273でのcdk5部位それ自体を通してH/D交換動態により顕著な影響を及ぼした。ロシグリタゾンは、H3、βシート領域を通しての好感にも影響したが、しかしセリン273を通したH/D交換を如何なる有意程度にも変更しなかった。これらのHDXデータが、結合されたこれらのリガンドの各々とのPPARガンマの既知の共結晶構造上にマッピングされる場合、両PPARガンマリガンドがcdk5部位近くの領域におけるこの受容体の動力学的性質を低減したことは明白である。しかしながら、MRL24は、ロシグリタゾンより大きい程度に、これらの領域の動力学的性質を低減した図8b。したがって、これは、PPARガンマリガンド特にMRL24により誘導されたH3、βシートおよびcdk5部位それ自体における動力学的性質を低減し、cdk5リン酸化に余り好ましくはしくない、あるいは不適合でさえある立体配置にこの領域を凍結する、と考えられる。さらに、PPARガンマリガンドが、invitroで起きるcdk5媒介性リン酸化を変更し得るか、そしてこれらの作用物質がPPARガンマに及ぼすcdk5作用により制御される遺伝子を調節するか否かをさらに調べた。図9A~9Cに示したように、10mg/kgで7日間のロシグリタゾンまたはMRL24による処置は、高脂肪餌マウスの糖耐性を劇的に改善し、そして体重の変化を伴わずに絶食時インスリンレベルを低減した。重要なことは、これらの高糖尿病用量のこれらの化合物がともに、これらの作用物質で処置したすべてのマウスの脂肪組織におけるPPARガンマのcdk5媒介性リン酸化を低減したことである図9D。さらに、上記のようにPPARガンマに及ぼすcdk5作用により最も有意に制御される17の遺伝子のうち12が、一方または両方の作用物質の作用により変更された図9E。これらのデータは、これらの抗糖尿病性PPARガンマリガンドがinvivoでのPPARガンマのcdk5リン酸化を抑制し、その就職による遺伝子発現の変化を逆転した、ということを示す。実施例8:非典型的PPARガンマアゴニストは白色脂肪を選択的に褐色にし、全身エネルギー消費を増大する図10は、非典型的PPARガンマアゴニストが、典型的アゴニストであるロシグリタゾンと同様の作用強度で、マウスから単離された白色脂肪における褐色脂肪選択性遺伝子、UCP1およびPGC-1アルファの発現を選択的に誘導する、ということを示す。鼠径部脂肪沈着物を、生理食塩水対照、10mg/kgのロシグリタゾンまたは3mg/kgのMRL24で10日間処置したマウスから単離した。総RNAを、これらの試料から単離した。その後、UCP1およびPGC-1アルファの発現を、実時間PCRにより定量した。UCP1およびPGC-1アルファのmRNAレベルを、18Sのもので正規化した。図11は、非典型的PPARガンマアゴニストが、invivoでの全身酸素消費も選択的に増大する、ということを示す。包括的実験動物監視システムCLAMSを用いて、生理食塩水対照、10mg/kgのロシグリタゾンまたはMRL24で10日間処置したマウスで、酸素消費を測定した。実施例9:セリン273での非リン酸化可能なPPARガンマをコードするノックインマウス系統の生成および特性化PPARガンマセリン273は、PPARガンマの第5エキソン内に存在するEnsemblPPARガンマENSMUSG00000000440から得た参照配列。BAC細菌人工染色体クローンRP23-232H15PPARガンマゲノム遺伝子座を含有を、Invitrogenから購入した。PPARガンマの第5エキソン周囲を中心に置かれた11kbDNA断片を、BACから、クローニングプラスミドジフテリア毒素陰性選択マーカーを含有中に回収した。S273A突然変異および制限エンドヌクレアーゼ切断のための新規部位を含有する断片を、この親プラスミド中に導入した。最後に、loxP-Neo-loxP陽性選択カセットをコードするDNA配列を、標的プラスミド中に導入した図12A。このプラスミドを線状化して、ES細胞中に電気穿孔した。ES細胞を培養し、正しいターゲッティングに関してスクリーニングし、そしてマウスに移植した。子孫をZp3-Cre発現マウスに育種して、PPARガンマ遺伝子内からネオマイシンカセットを欠失させた。次に、これらのマウスを、Cre遺伝子の非存在下でホモ接合性に育種した図12B。ホモ接合性S273A突然変異体PPARガンマノックインマウスは、少なくとも一部は、潜在的治療薬の効力を試験するために用いられ得る。cdk5によりセリン273でのPPARガンマのリン酸化を遮断するMRL24および類似の化合物リン酸化遮断剤は、TZDのような古典的アゴニストの副作用を有さずに、代謝症候群を改善すると考えられる。例えば、PPARガンマは、痩身および肥満個体の両方で活性である;しかしながら、これらの状態では、PPARガンマは、標的遺伝子の有意に異なる転写を示す。理論に縛られずに考えると、転写活性におけるこの差は、Ser-273でのPPARガンマの抑制的リン酸化によるものである。アラニンまたは他の非リン酸化可能アミノ酸残基にSer-273で突然変異化されたPPARガンマの両コピーを有するマウスは、高脂肪餌という難題に直面した場合、正常糖耐性を保持する、と考えられる。古典的PPARガンマアゴニストの投与時に観察される体重増加および流体停留に関与すると思われる作用である、MRL24のグルコース低下作用は、PPARガンマアゴニズムを必要としない。理論に縛られずに考えると、このような古典的PPARガンマアゴニスト例えばロシグリタゾンは、WTマウスにおいてのみ陽性グルコース低下を示すが、S273Aマウスでは示さない。しかしながら、副作用、例えば体重増加および流体停留は、両方の系統で依然として起きる。それゆえ、理想的化合物は、ノックインマウスにおける作用を有さず、それを薬剤のオフターゲット効果を試験するための良好なモデルにする。これらのノックインマウスから採取した細胞株は、潜在的化合物のinvitro試験のために用いられ得る。特定の化学物質は、野生型細胞における標的遺伝子を変更するだけで、ノックイン細胞においては変更しないと考えられる。S273APPARガンマ突然変異体ノックイン動物は、骨髄移植検定にも用いられ得る。野生型動物からS273APPARガンマ突然変異体ノックイン動物へのその逆も骨髄移植を用いて、例えば野生型宿主バックグラウンドその逆もにおける免疫系細胞例えばマクロファージおよび単球中のこのような突然変異体PPARガンマポリペプチドの活性を分析して、CD36依存性低減脂質取込みのためのアテローム硬化症の危険が免疫系細胞により媒介されるか否かを確定し得る。本明細書中で提供されるデータのすべてに基づいて、図13は、理論に縛られずに考えると、Ser-273でのPPARガンマのリン酸化が抗代謝活性を如何に選択的に媒介するかについてのモデルを提供する。実施例10:PPARガンマのSer-273リン酸化状態はグルコース感受性増大を予測する2型糖尿病を有するヒト被験者9名を、4mg/日の用量で6ヶ月間、ロシグリタゾンで処置した。ロシグリタゾン処置レジメンの前および後に、CLAMP分析を実施した。図14は、ロシグリタゾン投与レジメンにより産生されるリン酸化Ser-273のレベル低減とインスリン感受性改善との間の高い相関を示すデータを提供する。リン酸化Ser-273レベルの有意の低減を示さなかった被験者は、ロシグリタゾンに対して代謝的に非応答性であったすなわち、インスリン感受性改善を示さなかった。参照による援用本出願全体を通して引用されたすべての参考文献、特許出願、特許および公開特許出願の記載内容、ならびに図面および配列表は、参照により本明細書中で援用される。等価物本明細書中に記載した本発明の具体的実施形態に対する多数の等価物を、わずかな実験を用いて、当業者は理解するであろう。このような等価物は、以下の特許請求の範囲に包含されるよう意図される。"