"以下の工程を含むことを特徴とする、一般式1のオリゴ糖又はその塩を精製、分離、及び/又は単離する方法。式中、R1はフコシル又はHを表し、R2はフコシル又はHを表し、R3はH、シアリル基、N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基から選択され、該N-アセチル-ラクトサミニル基は、1以上のN-アセチル-ラクトサミニル基及び/又は1以上のラクト-N-ビオシル基を含むグリコシル残基を有してもよく、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、R4はH、シアリル基及びN-アセチル-ラクトサミニル基から選択され、該N-アセチル-ラクトサミニル基は、1以上のN-アセチル-ラクトサミニル基及び/又は1以上のラクト-N-ビオシル基を含むグリコシル残基で任意に置換されており、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、前記R1、R2、R3又はR4基のうち少なくとも1つはHとは異なるaR-Xの存在下、1以上の一般式1の化合物に対してアノマーO-アルキル化反応を行い、1以上の一般式2の化合物を含む混合物又はその塩を得る工程、式中、Xはハロゲン、アルキル-又はアリールスルホニルオキシから選択される脱離基であり、Rは水素化分解によって除去可能な基であり、R1、R2、R3及びR4は上記規定の通りであり、前記R1、R2、R3又はR4基のうち少なくとも1つはHと異なるb前記工程aで得た1以上の一般式2の化合物を含む混合物に対してクロマトグラフィー及び/又は結晶化を行い、それぞれが実質的に高い純度を有する1以上の一般式2の個別化合物を得る工程、c前記工程bで得たそれぞれが実質的に高い純度を有する一般式2の個別化合物に対して接触水素化分解を行い、一般式1の化合物を得る工程。前記R-X化合物及び一般式2の化合物のR基が、フェニル、アルキル又はハロゲンから選択される1以上の基で任意に置換されたベンジル又は1-若しくは2-ナフチルメチルであることを特徴とする、請求項1に記載の方法。前記クロマトグラフィーが、逆相又はサイズ排除クロマトグラフィーであることを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。前記一般式1の化合物が、一般式1a、1b又は1cで表され、前記一般式2の化合物が一般式2a、2b又は2cで表されることを特徴とする、請求項1乃至3のいずれか一項に記載の方法。式中、R、R1及びR2は請求項1に規定されているものと同様であり、R3aは、1つのN-アセチル-ラクトサミニル基及び/又は1つのラクト-N-ビオシル基を含むグリコシル残基で任意に置換されたN-アセチル-ラクトサミニル基であり、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、R4aはH又は任意にラクト-N-ビオシル基で置換されたN-アセチル-ラクトサミニル基であり、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、R3bは任意に1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されたラクト-N-ビオシル基であり、R4bはH又は任意に1又は2つのN-アセチル-ラクトサミニル基及び/又は1つのラクト-N-ビオシル基で置換されたN-アセチル-ラクトサミニル基であり、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基は1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、R5は独立してH又はシアリルであり、前記R1、R2又はR5のうち少なくとも1つはHと異なる前記一般式1a又は2aの化合物が、ラクト-N-ネオテトラオース、パラ-ラクト-N-ヘキサオース、パラ-ラクト-N-ネオヘキサオース、ラクト-N-ネオヘキサオース、パラ-ラクト-N-オクタオース及びラクト-N-ネオオクタオースの誘導体又はそれらの塩からなる群より選択され、該誘導体は任意に1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されており、一般式1b又は2bの化合物が、ラクト-N-テトラオース、ラクト-N-ヘキサオース、ラクト-N-オクタオース、イソ-ラクト-N-オクタオース、ラクト-N-デカオース及びラクト-N-ネオデカオースの誘導体又はそれらの塩からなる群より選択され、該誘導体は任意に1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されていることを特徴とする、請求項1乃至4のいずれか一項に記載の方法。前記一般式1a、1b、1c、2a、2b又は2cの化合物が、一般式1a、1b又は1cについては2’-O-フコシルラクトース、3-O-フコシルラクトース、2’,3-ジ-O-フコシルラクトース、3’-O-シアリルラクトース、6’-O-シアリルラクトース、3’-O-シアリル-3-O-フコシルラクトース、ラクト-N-テトラオース、ラクト-N-ネオテトラオース、Fucα12Galβ13GlcNAcβ13Galβ14GlcLNFPI、Galβ13Fucα14GlcNAcβ13Galβ14GlcLNFPII、Galβ14Fucα13GlcNAcβ13Galβ14GlcLNFPIII、Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Fucα14GlcLNFPV、Neu5Acα23Galβ13GlcNAcβ13Galβ14GlcLSTa、Galβ13Neu5Acα26GlcNAcβ13Galβ14GlcLSTb、Neu5Acα26Galβ14GlcNAcβ13Galβ14GlcLSTc、Neu5Acα23Galβ13Fucα14GlcNAcβ13Galβ14GlcFLSTa、Fucα12Galβ13Neu5Acα26GlcNAcβ13Galβ14GlcFLSTb、Neu5Acα26Galβ14GlcNAcβ13Galβ14Fucα13GlcFLSTc、Fucα12Galβ13Fucα14GlcNAcβ13Galβ14Fucα13GlcLNDFHI、Galβ13Fucα14GlcNAcβ13Galβ14Fucα13GlcLNDFHII、Galβ14Fucα13GlcNAcβ13Galβ14Fucα13GlcLNDFHIII、Neu5Acα23Galβ13Neu5Acα26GlcNAcβ13Galβ14GlcDSLNT、Neu5Acα23Galβ13Neu5Acα26Fucα14GlcNAcβ13Galβ14GlcFDSLNTI及びNeu5Acα23Galβ13Neu5Acα26GlcNAcβ13Galβ14Fucα13GlcFDSLNTII又はそれらの塩、一般式2a、2b又は2cについてはそれらのR-配糖体又はそれらの塩からなる群より選択されることを特徴とする、請求項4及び5のいずれか一項に記載の方法。一般式2’で表される化合物及びその塩。式中、Rは水素化分解により除去可能な基であり、R1はフコシル又はHであり、R2はフコシル又はHであり、R3はH、シアリル基、N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基から選択され、該N-アセチル-ラクトサミニル基は、1以上のN-アセチル-ラクトサミニル基及び/又は1以上のラクト-N-ビオシル基を含むグリコシル残基を有してもよく、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、R4はH、シアリル基及びN-アセチル-ラクトサミニル基から選択され、1以上のN-アセチル-ラクトサミニル基及び/又は1以上のラクト-N-ビオシル基を含むグリコシル残基で任意に置換されており、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、前記R1、R2、R3又はR4基のうち少なくとも1つはHと異なる。但し、以下の化合物を除く:LNnT、1-O-β-ベンジル-LNTのR-配糖体、6’-O-シアリル-ラクトース及びその塩、1-O-β-ベンジル-3’-O-シアリル-ラクトースナトリウム塩、1-O-β-4,5-ジメトキシ-2-ニトロ-ベンジル-3’-O-シアリル-ラクトースナトリウム塩のR-配糖体。前記一般式2’で表される化合物が、一般式2’a、2’b又は2’c又はその塩であることを特徴とする、請求項7に記載の化合物。式中、R、R1及びR2は請求項7に規定されているものと同様であり、R3aは1つのN-アセチル-ラクトサミニル基及び/又は1つのラクト-N-ビオシル基を含むグリコシル残基で任意に置換されたN-アセチル-ラクトサミニル基であり、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、R4aはH又は任意にラクト-N-ビオシル基で置換されたN-アセチル-ラクトサミニル基であり、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、R3bは任意に1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されたラクト-N-ビオシル基であり、R4bはH又は任意に1又は2つのN-アセチル-ラクトサミニル基及び/又は1つのラクト-N-ビオシル基で置換されたN-アセチル-ラクトサミニル基であり、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、R5は独立してH又はシアリルであり、前記R1、R2又はR5のうち少なくとも1つはHとは異なる前記一般式2’aが、任意に1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されたラクト-N-ネオテトラオース、パラ-ラクト-N-ヘキサオース、パラ-ラクト-N-ネオヘキサオース、ラクト-N-ネオヘキサオース、パラ-ラクト-N-オクタオース及びラクト-N-ネオオクタオースのR-配糖体又はそれらの塩からなる群より選択された化合物を表し、前記一般式2’bが、任意に1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されたラクト-N-テトラオース、ラクト-N-ヘキサオース、ラクト-N-オクタオース、イソ-ラクト-N-オクタオース、ラクト-N-デカオース及びラクト-N-ネオデカオースのR-配糖体又はそれらの塩からなる群より選択された化合物を表すことを特徴とする、請求項7又は8に記載の化合物。2’-O-フコシルラクトース、3-O-フコシルラクトース、2’,3-ジ-O-フコシルラクトース、3’-O-シアリルラクトース、6’-O-シアリルラクトース、3’-O-シアリル-3-O-フコシルラクトース、ラクト-N-テトラオース、ラクト-N-ネオテトラオース、Fucα12Galβ13GlcNAcβ13Galβ14GlcLNFPI、Galβ13Fucα14GlcNAcβ13Galβ14GlcLNFPII、Galβ14Fucα13GlcNAcβ13Galβ14GlcLNFPIII、Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Fucα14GlcLNFPV、Neu5Acα23Galβ13GlcNAcβ13Galβ14GlcLSTa、Galβ13Neu5Acα26GlcNAcβ13Galβ14GlcLSTb、Neu5Acα26Galβ14GlcNAcβ13Galβ14GlcLSTc、Neu5Acα23Galβ13Fucα14GlcNAcβ13Galβ14GlcFLSTa、Fucα12Galβ13Neu5Acα26GlcNAcβ13Galβ14GlcFLSTb、Neu5Acα26Galβ14GlcNAcβ13Galβ14Fucα13GlcFLSTc、Fucα12Galβ13Fucα14GlcNAcβ13Galβ14Fucα13GlcLNDFHI、Galβ13Fucα14GlcNAcβ13Galβ14Fucα13GlcLNDFHII、Galβ14Fucα13GlcNAcβ13Galβ14Fucα13GlcLNDFHIII、Neu5Acα23Galβ13Neu5Acα26GlcNAcβ13Galβ14GlcDSLNT、Neu5Acα23Galβ13Neu5Acα26Fucα14GlcNAcβ13Galβ14GlcFDSLNTI及びNeu5Acα23Galβ13Neu5Acα26GlcNAcβ13Galβ14Fucα13GlcFDSLNTII、又はその塩からなる群より選択された化合物のR-配糖体であることを特徴とする、請求項7乃至9のいずれか一項に記載の化合物。本発明はヒト乳オリゴ糖の誘導体化に適した手法を提供するものである。本発明は選択的アノマーアルキル化反応におけるアノマーO-ベンジル/置換O-ベンジル誘導体の形成に基づいている。従って、本発明は、以下の工程を含むことを特徴とする、一般式1のオリゴ糖又はその塩を精製、分離、及び/又は単離する方法に関する。式中、R1はフコシル又はHを表し、R2はフコシル又はHを表し、R3はH、シアリル基、N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基から選択され、該N-アセチル-ラクトサミニル基は、1以上のN-アセチル-ラクトサミニル基及び/又は1以上のラクト-N-ビオシル基を含むグリコシル残基を有してもよく、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、R4はH、又はシアリル基及びN-アセチル-ラクトサミニル基から選択され、1以上のN-アセチル-ラクトサミニル基及び/又は1以上のラクト-N-ビオシル基を含むグリコシル残基で任意に置換されており、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、前記R1、R2、R3又はR4基のうち少なくとも1つはHとは異なるaR-Xの存在下、1以上の一般式1の化合物に対してアノマーO-アルキル化反応を行い、1以上の一般式2の化合物を含む混合物又はその塩を得る工程、式中、Xはハロゲン、アルキル-又はアリールスルホニルオキシ等の脱離基であり、Rは水素化分解によって除去可能な基であり、R1、R2、R3及びR4は上記規定の通りであり、前記R1、R2、R3又はR4基のうち少なくとも1つはHと異なるb前記工程aで得た1以上の一般式2の化合物を含む前記混合物に対してクロマトグラフィー及び/又は結晶化を行い、それぞれが実質的に高い純度を有する1以上の一般式2の個別化合物を得る工程、c前記工程bで得た、それぞれが実質的に高い純度を有する一般式2の個別化合物に対して接触水素化分解を行い、一般式1の化合物を得る工程。本願において、用語水素化分解によって除去可能な保護基又は水素化分解によって除去可能な基は、水素を触媒量のパラジウム、ラネーニッケル、又は水素化分解で用いられるその他の適切な金属触媒の存在下で添加することにより、1-酸素と結合した炭素-酸素結合が切断でき、その結果OH基を再生できる基を意味する。そのような保護基は当業者によく知られており、ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,PGMWutsandTWGreene,JohnWileySons2007において述べられている。好ましい保護基としてはベンジル、ジフェニルメチルベンズヒドリル、1-ナフチルメチル、2-ナフチルメチル又はトリフェニルメチルトリチル基が挙げられ、それらは、アルキル、アルコキシ、フェニル、アミノ、アシルアミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ニトロ、カルボキシル、アルコキシカルボニル、カルバモイル、N-アルキルカルバモイル、N,N-ジアルキルカルバモイル、アジド、ハロゲンアルキル又はハロゲンから選択される1以上の基で任意に置換されてもよい。そのような置換基が存在する場合、1または複数の芳香環上にあることが好ましい。特に好ましい保護基は、任意にフェニル、アルキル又はハロゲンから選択された1以上の基で置換されたベンジル又は1-若しくは2-ナフチルメチル基である。更に、該保護基は非置換ベンジル、非置換1-ナフチルメチル、非置換2-ナフチルメチル、4-クロロベンジル、3-フェニルベンジル、4-メチルベンジル及び4-ニトロベンジルから選択されることがより好ましい。一般式2の化合物を指す場合、実質的に高い純度を有する化合物は該化合物が5重量/重量ww未満の不純物を含むことを意味し、好ましくは3重量/重量未満の不純物であり、より好ましくは1重量/重量未満の不純物であり、最も好ましくは0.5重量/重量未満の不純物であり、特に0.1重量/重量未満の不純物を含むことを意味する。この場合、不純物は該化合物とは異なるあらゆる物理的実体を指し、例えば、一般式2の化合物合成から残った未反応の中間体、副生成物、分解産物、無機塩、及び/又は有機溶媒及び/又は水以外のその他の混入物質等があげられる。本明細書において、用語アルキルは炭素数1~6の直鎖又は分岐鎖飽和炭化水素基を意味し、例えば、メチル、エチル、n-プロピル、i-プロピル、n-ブチル、i-ブチル、s-ブチル、t-ブチル、n-ヘキシル等が挙げられる。用語アリールはホモ芳香族基を指し、フェニル又はナフチル等が挙げられる。本明細書において、用語アシルはR’-C=O-基であって、R’がH、アルキル上記参照又はアリール上記参照であるものを意味する例えば、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、ピバロイル、ベンゾイル等。前記アルキル又はアリール残基は非置換でも、あるいは、アルキルアリール残基のみ、ハロゲン、ニトロ、アリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルボキシル、アルコキシカルボニル、カルバモイル、N-アルキルカルバモイル、N,N-ジアルキルカルバモイル、アジド、ハロゲンアルキル又はヒドロキシアルキルから選択される1以上の基で置換されていてもよい。これらの基はクロロアセチル、トリクロロアセチル、4-クロロベンゾイル、4-ニトロベンゾイル、4-フェニルベンゾイル、4-ベンズアミドベンゾイル、4-フェニルカルバモイル-ベンゾイル等のアシル基を生じる。用語アルキルオキシ又はアルコキシは、酸素原子を介して親分子部分に結合したアルキル基上記参照を意味し、例えば、メトキシ、エトキシ、t-ブトキシ等が挙げられる。ハロゲンはフルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードを意味する。アミノは-NH2基を指す。アルキルアミノは、-NH-基を介して親分子部分に結合したアルキル基上記参照を意味し、例えば、メチルアミノ、エチルアミノ等が挙げられる。ジアルキルアミノは、窒素原子を介して親分子部分に結合した同一の又は異なる二つのアルキル基上記参照を意味し、例えば、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ等が挙げられる。アシルアミノは、-NH-基を介して親分子部分に結合したアシル基上記参照を指し、例えば、アセチルアミノアセトアミド、ベンゾイルアミノベンズアミド等が挙げられる。カルボキシルは-COOH基を意味する。アルキルオキシカルボニルは、-C=O-基を介して、親分子部分に結合したアルキルオキシ基上記参照を意味し、例えば、メトキシカルボニル、t-ブトキシカルボニル等が挙げられる。カルバモイルはH2N-C=O-基である。N-アルキルカルバモイルは、-HN-C=O-基を介して親分子部分に結合したアルキル基上記参照を意味し、例えば、N-メチルカルバモイル等が挙げられる。N,N-ジアルキルカルバモイルは、>N-C=O-基を介して親分子部分に結合した同一の又は異なる二つのアルキル基上記参照を意味し、例えば、N,N-メチルカルバモイル等が挙げられる。本明細書において、少なくとも1つのシアリル残基を含んだ一般式1及び2の化合物に関連した塩の用語は、化学量論比にある負電荷を有する酸残基及び1以上のカチオンからなる結合イオン対を意味し、この比はいかなる化学量論比であってもよい。本明細書の文脈で用いられているカチオンは、正電荷を有する原子又は分子である。該カチオンは無機カチオンでも有機カチオンでもよい。好ましい無機カチオンにはアンモニウムイオン、アルカリ金属、アルカリ土類金属及び遷移金属イオンがある。より好ましくはNa、K、Ca2、Mg2、Ba2、Fe2、Zn2、Mn2及びCu2であり、最も好ましくはK、Ca2、Mg2、Ba2、Fe2及びZn2である。正に帯電した塩基性有機化合物は関連性のある有機カチオンであってもよい。このような正電荷を帯びたカウンターパートは、好ましくはジエチルアミン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、イミダゾール、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、ベンジルアミン、エチレンジアミン、メグルミン、ピロリジン、コリン、トリス-ヒドロキシメチル-メチルアミン、N-2-ヒドロキシエチル-ピロリジン、N-2-ヒドロキシエチル-ピペリジン、N-2-ヒドロキシエチル-ピペラジン、N-2-ヒドロキシエチル-モルホリン、L-アルギニン、L-リジン、L-アルギニン又はL-リジン単位を有するオリゴペプチド、又はN末端上に遊離アミノ基を有するオリゴペプチド等が挙げられ、これらはすべてプロトン化されたものである。このような塩の形成は安定性、添加剤との適合性、溶解性及び結晶形性能等の複合分子全般の性質の改変に用いることができる。さらに、本発明中の用語フコシルについては、α-グリコシド間結合でコアオリゴ糖に結合しているL-フコピラノシル基を意味する。本発明中のN-アセチル-ラクトサミニル基は、β結合で結合したN-アセチル-ラクトサミンLacNAc、Galpβ14GlcNAcpのグリコシル残基を意味する。さらに、本発明中の用語ラクト-N-ビオシルは、β結合で結合したラクト-N-二炭糖LNB、Galpβ13GlcNAcpのグリコシル残基を意味する。本発明中の用語シアリルは、α結合で結合したシアル酸N-アセチル-ノイラミン酸、Neu5Acのグリコシル残基を意味する。さらに、本発明中の用語1以上のN-アセチル-ラクトサミニル及び/又は1以上のラクト-N-ビオシル単位を含むグリコシル残基は、好ましくはグリコシド間結合で互いに結合した前記単位を含む直鎖又は分岐鎖構造を意味する。本発明中の用語アノマーO-アルキル化は、出発化合物が有する非保護の第1級及び第2級OHの存在下で、アノマーOH基を選択的にアルキル化することを意味する。具体的には、本発明で用いられるアノマーO-アルキル化に関し、二つの基本的方法が挙げられる。一般式1の化合物がいかなるシアリル残基中性オリゴ糖も有していない場合、アルキル化反応は、強塩基及びR-Xの存在下Xはハロゲン、メシルやトリフリル等のアルキルスルホニルオキシ、並びにベンゼンスルホニルやトシル等のアリールスルホニルから選択された脱離基である、双極性非プロトン性溶媒中DMF、DMSO、N-メチルピロリドン、ヘキサメチルホスホアミドHMPA、N,N’-ジメチルヘキサヒドロピリミジン-2-オンDMPU、THF、ジオキサン、アセトニトリル等、又はその混合物で行われる。好ましいアルキル化剤は、フェニル、アルキル又はハロゲンから選択される1以上の基で任意に置換されたベンジル又は1-若しくは2-ナフチルメチルハロゲン化物である。前記強塩基は、そのより酸性な性質から、同等量の又はやや多い量1~1.5当量の塩基が用いられた場合、前記アノマーOHを化学選択的に脱プロトン化することが可能である。一般的に、アノマーOHの活性化に適した強塩基は、アルカリ金属水素化物又はアルカリ土類金属水素化物、又はアルカリ金属アルコキシド又はアルカリ土類金属アルコキシドからなる群より選択され、例えば、NaH、KH、CaH2、NaOMe、NaOtBu、KOtBu、無機水酸化物、炭酸カリウム等が挙げられる。アルキル化剤は同等量で又はやや多い量1~1.5当量で添加する。反応は-10~80°Cで実施し、反応の全過程中は低い温度、又は試薬/反応剤の添加中は低い温度、及び反応の後半では昇温して反応を行うことが好ましい。一般式2の中性のオリゴ糖ベンジル/置換ベンジル配糖体は通常の工程後に得ることができる。酸性オリゴ糖の場合、すなわち、少なくとも1つのシアリル残基が存在する場合は、出発物質のセシウム塩酸性化合物を炭酸セシウムで処理して予め形成したものは、アノマーO-アルキル化以前にメチルエステル状態のカルボキシレート基をマスキングするのに用いられる。メチルエステルの形成には、セシウム塩を双極性非プロトン性溶媒に溶解する。該溶媒としては、例えば、DMF、DMSO、N-メチルピロリドン、ヘキサメチルホスホアミドHMPA、N,N’-ジメチルヘキサヒドロピリミジン-2-オンDMPU、THF、ジオキサン、アセトニトリル等、又はその混合物が挙げられる。そして、前記セシウム塩に対し、メチル化剤ヨウ化メチル、メチルトリフレート又は硫酸ジメチル等を同等量またはやや多い量1~1.5当量添加する。一般的に、反応は4~24時間続く。続いて、得られたメチルエステル化合物に上記のアノマーO-アルキル化を行う。反応の最後に、塩基性水性条件下で、混合物を水で希釈する。該条件の下において、メチルエステルは切断され、一般式2の酸性オリゴ糖ベンジル/置換ベンジル配糖体が形成される。前記工程aにおいて、一般式1の化合物は、通常、粗生成物として得られ、該粗生成物は未反応前駆体、試薬、副生成物、及び、化学合成、酵素合成又は化学酵素合成に由来するその他の不純物を伴う。一般式1の化合物が天然源から得られたものである場合、該化合物に、例えば、アミノ酸、オリゴ-及びポリペプチド、脂質、ラクトース、単糖類、ビタミン類等の有機分子が混入している場合がある。その混入は一般式1の化合物を得た天然プールに起因したものである場合がある。工程bにおいて、前記工程aで得られた1以上の一般式2の化合物を含み、上記不純物及びその誘導体ならびにアノマーO-アルキル化で用いられた試薬の痕跡を伴う前記粗混合物は、クロマトグラフィー及び/又は結晶化により分離され、それぞれが実質的に高い純度を有する1以上の一般式2の個別化合物が得られる。すなわち、工程bで1よりも多くの一般式2の化合物を得た場合、それらの化合物はそれぞれ、同ステップで得られたその他の一般式2の化合物のいずれとも別々に且つ実質的にそれらを含有せずに得られる。クロマトグラフの手段は、適切とされるいかなる分離技術でもよく、例えば、炭水化物の分離、単離及び/又は精製に一般的に用いられる、カラムクロマトグラフィー、HPLC、逆相クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー又はイオン交換クロマトグラフィーが挙げられる。前記工程cにおいて、接触水素化分解とは、通常、プロトン性溶媒又はプロトン性溶媒の混合物中に発生する、R基の除去を意味する。工程cは、前記工程bで得られた一般式2の単一化合物に対して行われる。プロトン性溶媒は、水、酢酸またはC1-C6アルコールからなる群より選択することができる。1以上のプロトン性溶媒と、該プロトン性溶媒と部分的あるいは完全な混和性を有する1以上の適切な非プロトン性有機溶媒の混合液も使用することができる例えば、THF、ジオキサン、酢酸エチル、アセトン等。水、1以上のC1-C6アルコール、又はそれらの混合液は、溶媒系として好ましく用いられる。炭水化物誘導体を含有する溶液は適切ないかなる濃度であってもよく、炭水化物誘導体と選択した溶媒との懸濁液もまた使用することができる。反応混合液は10~100°Cの温度範囲内、好ましくは20~70°Cで、1~50バールの水素雰囲気下、触媒の存在下で反応が完了するまで撹拌する。該触媒としては、例えば、パラジウム、ラネーニッケル、又はその他の適切な金属触媒が挙げられ、好ましくはチャコール担持パラジウム又はパラジウムブラックが挙げられる。通常、触媒金属濃度は炭水化物の重量に対して0.1~10の範囲である。好ましくは、触媒濃度は0.15~5の範囲であり、より好ましくは0.25~2.25の範囲である。また、水素がシクロヘキサン、シクロヘキサジエン、ギ酸又はギ酸アンモニウムからその場insituで発生する場合は、水素移動反応も行うことができる。また、有機又は無機塩基又は酸及び/又は塩基性又は酸性イオン交換樹脂を添加し、水素化分解の速度を向上することも可能である。ハロゲン置換基が前駆体の置換ベンジル部分上に存在する場合、塩基性物質を用いることが特に好ましい。好ましい有機塩基としてはトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、アンモニア、カルバミン酸アンモニウム、ジエチルアミン等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。好ましい有機/無機酸としてはギ酸、酢酸、プロピオン酸、クロロ酢酸、ジクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、HCl、HBr等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。上記条件は、溶媒の簡単、便利且つ精巧な除去を可能にし、これにより一般式1の純度の高い化合物を得るものである。一般式1の化合物は、結晶状、非晶質固体状、シロップ状又は濃縮された水溶液において従来の作業工程を行うことで、反応混合液から単離することができる。強調点としては、一般式2の化合物の単離、分離及び/又は精製に対し、R基の導入が、一般式2の化合物に数多くの有利な特徴をもたらすことが挙げられる。最初に挙げられる点は、非極性部分としてのR基が分子全体の極性を変え、これにより、最善の結果を得るための最も適切な条件の選択のために当業者が有するカラムパッキング及び溶出系のレパートリーを拡大することである。例えば、存在する化合物のより異なる極性ゆえに、水を使えば逆相クロマトグラフ分離を容易に行うことができる。これは、一般式2の化合物が、反応混合物中に存在する非常に極性の大きい化合物よりはるかにゆっくりと移動し、それにより、該極性化合物が円滑に溶出できるからである。その後、カラムから一般式2の化合物は、例えばアルコールで洗浄することができる。二番目に挙げられる点は、R基が芳香族部分であるため、発色団として機能し、目的物の特定を容易にする紫外線検出の可能性を提供する点である。三番目に挙げられる点は、R基の選択を慎重に行うことで、一般式2の結晶性物質が得られる可能性があることである。結晶化又は再結晶化は反応混合液から生成物を単離し、それを不純物から分離し、純物質を得るのに最も簡単且つ安価な方法の1つである。結晶化を用いた単離又は精製は、技術プロセス全体を頑健かつ費用対効果に優れたものとするため、他の手順と比べて有利かつ魅力的なものとなる。四番目に挙げられる点は、一般式2の化合物からのR基の除去が、デリケートな状況下で、副生成物形成の恐れが無く、ほぼ定量的に行われる点である。ベンジル/置換ベンジル保護基等のR基は、水素化分解条件下で、トルエン/置換トルエンのみに変換され、蒸発及び/又は抽出工程を経て、水溶性オリゴ糖産物から、数トンの規模で容易に除去することができる。その結果、一般式1の化合物の化学的/立体化学的純度は一般式2の化合物のそれと直結するものとなる。好ましい方法において、1以上の一般式1a、1b又は1cの化合物又はその塩これらは全て一般式1の化合物の範囲に包含されるものであるを含む粗混合物は、前記工程aにおいて誘導体化され、1以上の一般式2a、2b又は2cの化合物又はその塩これらは全てそれぞれ一般式2の化合物の範囲に包含されるものであるを含む粗混合物を生じ、式中、R、R1及びR2は上記に記載の通りであり、R3aは、1つのN-アセチル-ラクトサミニル基及び/又は1つのラクト-N-ビオシル基を含むグリコシル残基で任意に置換されたN-アセチル-ラクトサミニル基であり、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、R4aはH又は任意にラクト-N-ビオシル基で置換されたN-アセチル-ラクトサミニル基であり、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基と置換されてもよく、R3bは任意に1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されたラクト-N-ビオシル基であり、R4bはH又は任意に1又は2つのN-アセチル-ラクトサミニル基及び/又は1つのラクト-N-ビオシル基で置換されたN-アセチル-ラクトサミニル基であり、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基は1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、R5は独立してH又はシアリルであり、前記R1、R2又はR5のうち少なくとも1つはHとは異なる一般式2a、2b又は2cの個別化合物を、前記工程bでクロマトグラフィー及び/又は結晶化を行うことで、実質的に高い純度を有するものとして単離し、前記工程cにおいて、一般式2a、2b又は2cの個別化合物を、一般式1a、1b又は1cの個別化合物に変換する。特に好ましくは、上記本発明の方法に基づいて使用及び得られた化合物は、その結合及び修飾で特徴づけられる。一般式1a、1b、2a又は2bで定義される、本発明の方法の工程aで使用及び得られた化合物、ならびに工程cで得られた化合物が以下の特徴を有することが好ましい。一般式1a又は2aのR3aのグリコシル残基におけるN-アセチル-ラクトサミニル基が、1-3グリコシド間結合で、その他のN-アセチル-ラクトサミニル基と結合している、一般式1a又は2aのR3aのグリコシル残基におけるラクト-N-ビオシル基が、1-3グリコシド間結合で、N-アセチル-ラクトサミニル基に結合している、一般式1a又は2aのR4aのグリコシル残基におけるラクト-N-ビオシル基が、1-3グリコシド間結合で、N-アセチル-ラクトサミニル基に結合している、一般式1b又は2bのR4bのグリコシル残基におけるN-アセチル-ラクトサミニル基が、1-3又は1-6グリコシド間結合で、他のN-アセチル-ラクトサミニル基に結合している、一般式1b又は2bのR4bのグリコシル残基におけるラクト-N-ビオシル基が、1-3グリコシド間結合で、N-アセチル-ラクトサミニル基に結合している。本発明の方法に関わる化合物においては、以下を特徴とすることが好ましい。一般式1a又は2aはラクト-N-ネオテトラオース、パラ-ラクト-N-ヘキサオース、パラ-ラクト-N-ネオヘキサオース、ラクト-N-ネオヘキサオース、パラ-ラクト-N-オクタオース及びラクト-N-ネオオクタオース誘導体任意に1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換される及びそれらの塩を表し、一般式1b又は2bはラクト-N-テトラオース、ラクト-N-ヘキサオース、ラクト-N-オクタオース、イソ-ラクト-N-オクタオース、ラクト-N-デカオース及びラクト-N-ネオデカオース誘導体任意に1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換される又はそれらの塩を表す。上記本発明の方法に関与した化合物は以下の特徴を有することがより好ましい。N-アセチル-ラクトサミニル及び/又はラクト-N-ビオシル基に結合しているフコシル残基は、1-2グリコシド間結合でラクト-N-ビオシル基のガラクトースに結合、及び/又は1-4グリコシド間結合でラクト-N-ビオシル基のN-アセチル-グルコサミンに結合、及び/又は1-3グリコシド間結合でN-アセチル-ラクトサミニル基のN-アセチル-グルコサミンに結合。N-アセチル-ラクトサミニル及び/又はラクト-N-ビオシル基に結合しているシアリル残基は、2-3グリコシド間結合でラクト-N-ビオシル基のガラクトースに結合、及び/又は2-6グリコシド間結合でラクト-N-ビオシル基のN-アセチル-グルコサミンに結合、及び/又は2-6グリコシド間結合でN-アセチル-ラクトサミニル基のガラクトースに結合。また、以下のヒト乳オリゴ糖を本発明の方法で誘導体化できることが最も好ましい。2’-O-フコシルラクトース、3-O-フコシルラクトース、2’,3-ジ-O-フコシルラクトース、3’-O-シアリルラクトース、6’-O-シアリルラクトース、3’-O-シアリル-3-O-フコシルラクトース、ラクト-N-テトラオース、ラクト-N-ネオテトラオース、Fucα12Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Galβ14GlcNAcβ13Galβ14Glc、Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Neu5Acα23Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Neu5Acα26Galβ14GlcNAcβ13Galβ14Glc、Neu5Acα23Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Fucα12Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Neu5Acα26Galβ14GlcNAcβ13Galβ14Glc、Fucα12Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Galβ14GlcNAcβ13Galβ14Glc、Neu5Acα23Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Neu5Acα23Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc及びNeu5Acα23Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、又はその塩。R配糖体はα-又はβ-アノマーであってもよい。該R配糖体はβ-アノマーであることが好ましい。本発明の第二のアスペクトは、ヒト乳オリゴ糖又は類似体のベンジル又は置換ベンジル配糖体を提供するものである。これらは上記本発明の方法の工程aに基づき、一般式1で表される1以上のヒト乳オリゴ糖又はその類似体を含む粗反応混合物から調製することができる。そして、本発明は一般式2’の化合物又はその塩を提供する。式中、Rは水素化分解により除去可能な基であり、R1はフコシル又はHであり、R2はフコシル又はHであり、R3はH、シアリル基、N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基から選択され、該N-アセチル-ラクトサミニル基は、1以上のN-アセチル-ラクトサミニル基及び/又は1以上のラクト-N-ビオシル基を含むグリコシル残基を有してもよく、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、R4はH、シアリル基及びN-アセチル-ラクトサミニル基から選択され、1以上のN-アセチル-ラクトサミニル基及び/又は1以上のラクト-N-ビオシル基を含むグリコシル残基で任意に置換されており、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、前記R1、R2、R3又はR4基のうち少なくとも1つはHと異なる。但し、以下の化合物を除く:LNnT、1-O-β-ベンジル-LNTのR-配糖体、6’-O-シアリル-ラクトース及びその塩、1-O-β-ベンジル-3’-O-シアリル-ラクトースナトリウム塩、1-O-β-4,5-ジメトキシ-2-ニトロ-ベンジル-3’-O-シアリル-ラクトースナトリウム塩のR-配糖体。好ましい実施形態においては、一般式2’の化合物は一般式2’a、2’b又は2’c又はその塩であることを特徴とする。式中、R、R1及びR2は上記に記載の通りであり、R3aは任意に1つのN-アセチル-ラクトサミニル基及び/又は1つのラクト-N-ビオシル基を含むグリコシル残基で置換されたN-アセチル-ラクトサミニル基であり、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、R4aはH又は任意にラクト-N-ビオシル基で置換されたN-アセチル-ラクトサミニル基であり、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、R3bは任意に1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されたラクト-N-ビオシル基であり、R4bはH又は任意に1又は2つのN-アセチル-ラクトサミニル基及び/又は1つのラクト-N-ビオシル基で置換されたN-アセチル-ラクトサミニル基であり、該N-アセチル-ラクトサミニル基及びラクト-N-ビオシル基はそれぞれ1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されてもよく、R5は独立してH又はシアリルであり、前記R1、R2又はR5のうち少なくとも1つはHとは異なる上記一般式2’a又は2’bの化合物は、さらに、その結合ならびに修飾を特徴とすることが特に好ましい。一般式2’a又は2’bの化合物は以下の特徴を有することが好ましい。一般式1’a又は2’aのR3aのグリコシル残基におけるN-アセチル-ラクトサミニル基が、1-3グリコシド間結合で、他のN-アセチル-ラクトサミニル基に結合している、一般式1’a又は2’aのR3aのグリコシル残基におけるラクト-N-ビオシル基が、1-3グリコシド間結合で、N-アセチル-ラクトサミニル基に結合している、一般式1’a又は2’aのR4aのグリコシル残基におけるラクト-N-ビオシル基が、1-3グリコシド間結合で、N-アセチル-ラクトサミニル基に結合している、一般式1’a又は1’bのR4bのグリコシル残基におけるN-アセチル-ラクトサミニル基が、1-3又は1-6グリコシド間結合で、他のN-アセチル-ラクトサミニル基に結合している、一般式1’a又は1’bのR4bグリコシル残基におけるラクト-N-ビオシル基が、1-3グリコシド間結合で、N-アセチル-ラクトサミニル基に結合している。本発明の方法に関わる化合物においては、以下を特徴とすることが好ましい。一般式2’aはラクト-N-ネオテトラオース、パラ-ラクト-N-ヘキサオース、パラ-ラクト-N-ネオヘキサオース、ラクト-N-ネオヘキサオース、パラ-ラクト-N-オクタオース及びラクト-N-ネオオクタオースのR-配糖体又はそれらの塩を表し、該R-配糖体は任意に1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されており、一般式2’bは、ラクト-N-テトラオース、ラクト-N-ヘキサオース、ラクト-N-オクタオース、イソ-ラクト-N-オクタオース、ラクト-N-デカオース及びラクト-N-ネオデカオースのR-配糖体又はそれらの塩を表し、該R-配糖体は任意に1以上のシアリル残基及び/又はフコシル残基で置換されている。上記関与した化合物は、さらに、以下の特徴を有することがより好ましい。N-アセチル-ラクトサミニル及び/又はラクト-N-ビオシル基に結合するフコシル残基は、1-2グリコシド間結合でラクト-N-ビオシル基のガラクトースに結合、及び/又は1-4グリコシド間結合でラクト-N-ビオシル基のN-アセチル-グルコサミンに結合、及び/又は1-3グリコシド間結合でN-アセチル-ラクトサミニル基のN-アセチル-グルコサミンに結合。N-アセチル-ラクトサミニル及び/又はラクト-N-ビオシル基に結合するシアリル残基は、2-3グリコシド間結合でラクト-N-ビオシル基のガラクトースに結合、及び/又は2-6グリコシド間結合でラクト-N-ビオシル基のN-アセチル-グルコサミンに結合、及び/又は2-6グリコシド間結合でN-アセチル-ラクトサミニル基のガラクトースに結合。また、以下のヒト乳オリゴ糖のR-配糖体を得ることが最も好ましい。2’-O-フコシルラクトース、3-O-フコシルラクトース、2’,3-ジ-O-フコシルラクトース、3’-O-シアリルラクトース、6’-O-シアリルラクトース、3’-O-シアリル-3-O-フコシルラクトース、ラクト-N-テトラオース、ラクト-N-ネオテトラオース、Fucα12Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Galβ14GlcNAcβ13Galβ14Glc、Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Neu5Acα23Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Neu5Acα26Galβ14GlcNAcβ13Galβ14Glc、Neu5Acα23Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Fucα12Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Neu5Acα26Galβ14GlcNAcβ13Galβ14Glc、Fucα12Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Galβ14GlcNAcβ13Galβ14Glc、Neu5Acα23Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、Neu5Acα23Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc及びNeu5Acα23Galβ13GlcNAcβ13Galβ14Glc、又はその塩。強調されるべき点は、一般式2’の化合物が単一の化学物質であるとみなすことができることであり、該化学物質としては、例えば、α又はβアノマーのいずれか、又はα及びβアイソマー異性体のアノマー混合物も挙げることができる。好ましくはβ-アノマーである。一般式2’の化合物は、結晶性固体、オイル、シロップ状、沈降非晶質物質又は噴霧乾燥物であってもよい。結晶性の場合、一般式2’の化合物は、1又は複数の水の分子をその結晶構造に組み込むことで、無水または含水結晶状態のうちいずれかの状態で存在することができる。同様に、一般式2’の化合物は、その結晶構造にリガンドを組み入れた結晶性物質として存在することができ、該リガンドとしては、例えば、有機分子及び/又はイオンが挙げられる。本発明のその他の特徴は、以下実施例の説明において明らかにされるものである。該実施例は例証のみを目的としているものであり、本発明を限定するものではない。1.一般式2の化合物の調製の一般的な手順a中性ヒト乳オリゴ糖ベンジル/置換ベンジル配糖体の調製の一般的な手順選んだ中性ヒト乳オリゴ糖1当量を1~10の体積volumeg/mLのDMF、DMSO又はその混合物に溶解/懸濁させた。得られた反応混合液を0°Cに冷却し、臭化ベンジル/置換臭化ベンジル1.2~1.4当量を加えた。強塩基1.2~1.4当量を0~40°Cで添加した。強塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水素化カルシウム、カリウムt-ブトキシド、ナトリウムt-ブトキシドが挙げられる。反応混合液を0~60°Cで6~24時間撹拌した。続いて、水を加え、過剰な塩基を急冷し、反応混合液を室温で30分間撹拌した。その結果得られた反応混合液を濃縮し、逆相クロマトグラフィー、シリカゲルクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー等で精製するか、又は結晶化し、目的のベンジル化/置換ベンジル化中性ヒト乳オリゴ糖化合物を得た。収率は70~80であった。b酸性ヒト乳オリゴ糖ベンジル/置換ベンジル配糖体の調製の一般的な手順選んだ酸性ヒト乳オリゴ糖を水に溶解し、H型の酸性イオン交換樹脂で処理して酸性ヒト乳オリゴ糖が塩の形態にならないようにした。該酸性イオン交換樹脂としては、例えば、AmberliteIR120やDowexIL50等が挙げられる。このイオン交換樹脂を濾過して取り出し、炭酸セシウムを塩基性pHになるまで、好ましくはpH9~10になるまで加えた。得られた溶液を凍結乾燥し、1~10体積volumeg/mLのDMF、DMSO又はその混合物に溶解/懸濁させた。炭酸セシウムの使用に関連した量0.2~0.5当量過剰のメチル化剤を添加し、得られた反応混合物を0~60°Cで4~24時間撹拌した。該メチル化剤としては、例えば、ヨウ化メチルやメチルトリフレート等が挙げられる。反応混合物を0°Cに冷却し、必要量1.2~1.5当量の臭化ベンジル/置換臭化ベンジルを加えた。使用したベンジル化/置換ベンジル化剤と同等量の強塩基を0~40°Cで添加した。該強塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水素化カルシウム、カリウムt-ブトキシド、ナトリウムt-ブトキシド等が挙げられる。反応混合物を0~60°Cで6~24時間撹拌した。続いて、水を加えて有機溶媒と水の比有機溶媒:水を1:10から2:5とし、反応混合物を20~80°Cで4~24時間撹拌した。その結果得られた反応混合物を濃縮し、逆相クロマトグラフィー、シリカゲルクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー等で精製するか、又は結晶化するか、又は任意に塩の形態に変換し、目的のベンジル化/置換ベンジル化酸性ヒト乳オリゴ糖化合物を得た。収率は60~70であった。c少なくとも1種類の酸性ヒト乳オリゴ糖を含む混合物からの、ヒト乳オリゴ糖ベンジル/置換ベンジル配糖体の混合物の調製の一般的な手順複数のヒト乳オリゴ糖混合物の化学組成をLC-MS又はその他の適切な定量的分析法で分析した。続いて、このヒト乳オリゴ糖混合物を水に溶解し、H型の酸性イオン交換樹脂で処理して酸性ヒト乳オリゴ糖が塩の形態にならないようにした。該酸性イオン交換樹脂としては、AmberliteIR120やDowexIL50等が挙げられる。このイオン交換樹脂を濾過して取り出し、炭酸セシウムを塩基性pHになるまで、好ましくはpH9~10になるまで加えた。得られた溶液を凍結乾燥し、1~10体積volumeg/mLのDMF、DMSO又はその混合物に溶解/懸濁させた。炭酸セシウムの使用に関連した量0.2~0.5当量過剰のメチル化剤を添加し、得られた反応混合液を0~60°Cで4~24時間撹拌した。該メチル化剤としては、例えば、ヨウ化メチルやメチルトリフレート等が挙げられる。反応混合液を0°Cに冷却し、必要量の臭化ベンジル/置換臭化ベンジル0.2~0.5当量過剰のヒト乳オリゴ糖混合物のLC-MS組成に基づいて計算を加えた。使用したベンジル化/置換ベンジル化剤と同等量の強塩基を0~40°Cで添加した。該強塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水素化カルシウム、カリウムt-ブトキシド、ナトリウムt-ブトキシド等が挙げられる。反応混合液を0~60°Cで6~24時間撹拌した。続いて、水を加えて有機溶媒と水の比有機溶媒:水を1:10から2:5とし、反応混合液を20~80°Cで4~24時間撹拌した。その結果得られた反応混合液を濃縮し、逆相クロマトグラフィー、シリカゲルクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー等で精製し、個別ベンジル化/置換ベンジル化合物を得た。収率はそれぞれ60~70であった。1-O-β-ベンジル-LNnT13CNMRΔ小文字のデルタを表わす、以下同様1056,1055,1054,1036アノマー炭素融点:284~286°C1-O-β-4-メチルベンジル-LNnT1HNMR73,488,47,454,448,442,434,4035,33413CNMR1842,1776,1737,1415,1361,1319,1314,1056,1055,1054,1036,932,847,815,810,808,780,776,774,771,755,752,748,740,736,729,637,628,589,564,259,2291-O-β-4-クロロベンジル-LNnT1HNMR74,49,472,452,48,442,416,4035213CNMR1389,1776,1383,1379,1362,1313,1056,1055,1054,1037,932,861,847,815,810,808,780,775,774,772,771,755,752,749,637,589,578,564,2481-O-β-ベンジル-LNT1HNMRΔ203,335,349,353,365,357,358,359,362,363,371,371,373,376,376,380,380,382,390,390,392,398,415,444,445,456,473,476,494,74075013CNMRΔ249,574,628,632,637,637,710,712,713,727,734,742,752,755,771,775,776,779,780,811,847,848,1037,1053,1056,1062,1311,1314,1315,1392,1777融点:245°C分解αD221031-O-β-4-メチルベンジル-LNT1HNMRΔ197,229,327,339387,392,409,437,438,447,465,467,483,722,73013CNMRΔ231,250,577,628,632,637,638,710,711,713,727,734,741,752,755,771,775,776,779,780,811,847,848,1036,1053,1057,1062,1317,1320,1362,1415,17771-O-β-ベンジル-6’-O-シアリル-ラクトース1HNMRΔ16320027832834935037938039740243544246672273773874613CNMRΔ2155,4126,5270,6081,6321,6342,6856,6901,6930,7066,7115,7212,7308,7355,7378,7447,7528,7532,8003,10029,10189,10336,12736,12787,12801,12812,13772,17336,173881-O-β-ベンジル-6’-O-シアリル-ラクトースナトリウム塩1HNMRΔ16320228233334534636136239740243746673174113CNMRΔ2110,4060,5204,6022,6278,6790,6851,6869,7011,7061,7064,7144,7244,7283,7317,7392,7450,7470,7982,9976,10123,10352,12700,12744,12756,13721,17268,173281-O-β-ベンジル-6’-O-シアリル-ラクトース亜鉛塩1HNMRΔ17120027832834935037938039740243544246672273773874613CNMRΔ2177,4109,5278,6087,6132,6306,6364,6321,6826,6911,7067,7122,7136,7201,7300,7337,7358,7366,7439,7519,7532,7587,7940,8035,9992,10186,10194,10386,10400,12755,12799,12813,13783,17403,174081-O-β-ベンジル-6’-O-シアリル-ラクトースエタノールアンモニウム塩1HNMRΔ16320027829233334734635735837837839039340243544246672273773874613CNMRΔ2155,4126,4483,5270,5885,6081,6321,6342,6856,6901,6930,7066,7115,7212,7308,7355,7378,7447,7528,7532,8003,9998,10089,10236,12736,12787,12801,12812,13772,17336,173881-O-β-ベンジル-6’-O-シアリル-ラクトーストリス-ヒドロキシメチル-メチルアンモニウム塩1HNMRΔ16320027833334834837939340243544246672273773874613CNMRΔ2160,4122,5271,5962,6089,6138,6323,6339,6864,6897,6925,7064,7126,7368,7524,7527,8016,10039,10187,10394,12752,12797,12800,12811,13785,17340,173901-O-β-ベンジル-6’-O-シアリル-ラクトースジエチルアンモニウム塩1HNMRΔ12816520027930033335735737737838939340043544246672273773874613CNMRΔ1064,2157,4129,4229,5274,6089,6323,6343,6863,6895,6930,7062,7125,7204,7306,7341,7373,7447,7526,7528,8015,10041,10190,10395,12751,12797,12799,12810,13788,17335,173851-O-β-ベンジル-6’-O-シアリル-ラクトースコリン塩1HNMRΔ16319828031933335635637737839439540443443946672273674013CNMRΔ2156,4095,4134,5275,5348,5353,5359,5592,6096,6315,6350,6384,6785,6865,6890,6931,6947,7061,7128,7205,7305,7341,7372,7445,7529,7689,8017,10042,10192,10397,1099812752,12797,12811,13790,13829,17326,173851-O-β-4-クロロベンジル-6’-O-シアリル-ラクトース1HNMRΔ16220027732834935037938039740243544246672473213CNMRΔ2152,4123,5272,6079,6323,6342,6861,6903,6931,7056,7114,7213,7311,7356,7379,7448,7523,7531,8009,10017,10191,10321,12736,12789,13301,13676,17329,173781-O-β-4-メチルベンジル-6’-O-シアリル-ラクトース1HNMRΔ16320023227832834935037938039740243544246672113CNMRΔ2002,2155,4126,5270,6081,6321,6342,6856,6901,6930,7066,7115,7212,7308,7355,7378,7447,7528,7532,8003,9998,10089,10236,12736,12787,12801,12812,13326,13772,17336,173881-O-β-1-ナフチルメチル-6’-O-シアリル-ラクトース1HΔ1622002783283493503793803974024354424687327547779513CΔ2154,4128,5272,6081,6320,6344,6853,6906,6938,7064,7112,7214,7305,7354,7365,7445,7524,7533,8002,10025,10187,10321,12291,12482,12525,12593,12706,12872,12916,13280,13312,13597,13688,17336,173881-O-β-ベンジル-3’-O-シアリル-ラクトース1HNMRΔppm746742arom491474455452411276204181JBn118J2’,3’99J3’,4’29J3’’ax,3’’eq124J3’’ax,4’’121J3’’eq,4’’45Hz13CNMRΔppm1352,133513021286102610115173962201-O-β-4-メチルベンジル-3’-O-シアリル-ラクトース1HNMRΔppm736728489472454452412276235204,181Jarom79JBn115J2’,3’99J3’,4’30J3’’ax,3’’eq125J3’’,4’’122J3’’eq,4’’46Hz13CNMRΔppm1388,13341293129010261009998,5173962202021-O-β-2-ナフチルメチル-3’-O-シアリル-ラクトース1HNMRΔppm799797762759510495460453412277204181JBn119J1,280J1’,2’79J2’,3’99J3’,4’30J3’’ax,3’’eq125J3’’ax,4’’121J3’’eq,4’’46Hz13CNMRΔppm1283,1279,1277,1276,1266,1265102610115172201-O-β-3-フェニルベンジル-3’-O-シアリル-ラクトース1HNMRΔppm775744499482457453413278205182JBn118J1,280J1’,2’79J2’,3’99J3’,4’31J3’’ax,3’’eq125J3’’ax,4’’120J3’’eq,4’’46Hz13CNMRΔppm1409,1403,13751294,1292,1279,1278,1271,1270,1269,102710129965183972211-O-β-ベンジル-2’-O-フコシル-ラクトース特徴的な1HNMRピークΔ741725,520,482及び459,432,428,10513CNMRΔ13797,12815,12815,12758,12758及び12743,10186,10094及び10020,7768,7678,7536,7533,7470,7379,7345,7160,6972,6969,6874,6820,6638,6023及び5981,16471-O-β-4-ニトロベンジル-2’-O-フコシル-ラクトース特徴的な1HNMRピークΔ820及び768,504,497及び476,440,432,10413CNMRΔ:16238,14768,12795,12795,12333及び12333,10218,10095及び10018,7762,7674,7536,7536,7461,7378,7345,7159,6967,6874,6867,6821,6638,6022及び5977,16452.一般式2の化合物の水素化分解a40g50.1mmolの1-O-β-ベンジル-LNnTを200mlの水に溶解し、1.6のPd-Cと400μlの酢酸を加えた。得られた混合物をH2雰囲気下約40バール、室温で2日間撹拌した。触媒を濾過して取り除き、濾塊を水で洗浄し、ろ液を1.6Lのアセトンに滴下し、冷やし、その後濾過した。回収した固形物を真空乾燥し、収量が31.5gのLNnTの白い粉末を得た44.5mmol、89。b1-O-ベンジル-β-LNT5g、6.27mmolを水20mLに懸濁させ、1MのHCl水溶液を加えてそのpHを5.8に調整した。チャコール担持パラジウム0.5g、10を加えて反応フラスコを真空排気し、次にH24バールで飽和した。反応温度は50°Cとした。1.5時間撹拌した後、温度を室温にし、触媒を濾過して取り除き、水で洗浄した10mL。ろ液を濃縮乾固し、3.46g78の白い固形LNTを得た。cメタノールと水250mL300mLの混合液中の40gの1-O-β-ベンジル-6’-O-シアリル-ラクトースの溶液に、4gのPd/C10を加えた。得られた反応混合液をH2圧力下バルーン、室温で2日間撹拌した。その後、この混合液をセライトパッドで濾過し、溶媒を真空で蒸発させた。残留物を80mLのH2Oに溶解し、1200mLのEtOHに滴下した。得られたスラリーを濾過して得た固形物をEtOH、アセトン、そしてアセトン/Et2O混合液アセトン/Et2O=1/1で洗浄した。得られた固形物を乾燥して35gの6’-O-シアリルラクトースを得た。d1-O-β-ベンジル-2’-O-フコシル-ラクトース5.0gのメタノール50ml溶液に、100mgの10パラジウム担持チャコールを加えた。得られた懸濁液を水素雰囲気下、室温で4時間撹拌した。触媒を濾過して取り出し、水で洗浄した。ろ液を蒸発させ、2’-O-フコシル-ラクトース非晶質白色固体、4.2gを得た。"