公称孔径15±2nmから23±2nmのナノメーターフィルターを通して濾過する工程、フォンビルブラント因子の10量体およびより高次の多量体を解析する工程、およびvWF10量体およびより高次の多量体の含有量が15以下である第VIII因子溶液を選択することを含む、ウイルスについて安全な第VIII因子溶液を製造する方法。vWF10量体およびより高次の多量体の含有量が15以下であることが、サイズ27±3nmのウイルスの力価減少が4log倍以上であることを示すことを特徴とする、請求項1記載の方法。vWF10量体およびより高次の多量体の含有量が15以下であることが、サイズ27±3nmのウイルスの力価減少が5log倍以上であることを示すことを特徴とする、請求項1記載の方法。vWF10量体およびより高次の多量体の含有量が15以下であることが、サイズ27±3nmのウイルスの力価減少が6log倍以上であることを示すことを特徴とする、請求項1記載の方法。15nmのナノメートルフィルターでの濾過による安全なFVIIIの製造方法および>10多量体化vWF含量の実証試験するウイルスは、直径27±3nmのエンベロープ非含有PhiX174バクテリオファージである。ウイルスの培養およびアッセイはAFNORnormNFT72181により行う。FVIIIをToyopearlDEAEカラム上に残すことにより集め、pH6にする;CaCl2濃度を035モルとする。溶液とフィルターの温度を35°Cに調節し、濾過の圧力を100mbarより低く調節する。これらの条件下で流量はm2当たり12lhである。FVIII:Cの収量は濾過前のFVIII:Cに対して約70である。以下の表1はvWF多量体の分布を示す。10量体/15量体における顕著な減少が見られる:分布は15から9に減少する。16量体以上については減少はさらに顕著である:11から4。PhiX174ウイルスのアッセイにより、濾過すると6log減少することが示される。20nmkナノメートルフィルターでの濾過による安全なFVIIIの製造方法および>10多量体化vWF含量の実証濾過は、同じ種類だが多孔率が異なるフィルターにより行い、実施例1で得られたFVIII溶液をpH6に調整し、045MのCaCl2を添加する。圧力を17mbarに調整し、溶液およびフィルターアセンブリーを35°Cに調節する。これらの条件下で流量はm2当たり12lhであり、FVIIIの収量は最初のFVIIIに対して80である。以下の表2はvWF多量体の組成を示す。10量体-15量体は13から10へと顕著に減少する。16量体は11から2へと劇的に減少する。ウイルス力価の減少倍率は43logである。約20nmの多孔率での高圧濾過より高圧の条件下および室温でのPlanova21フィルターの性能を調べる目的で、FVIII溶液をpH6に調整し、CaCl2濃度を035Mにする。温度は22°Cであり、圧力を400mbarに調整する。これらの条件下で濾過流量はm2当たり5lhであり、FVIIIの収量は出発製品に対して64である。表3はvWF多量体の組成を示す。10量体-15量体は13から8へと減少する。16量体以上はは10から7へと減少する。ウイルス力価の減少倍率は61logである。高圧での20nmポリスルホン型のフィルターでの試験別の種類のフィルターの検証の目的で、FVIIIフィルター試験をポリスルホンDV20型のフィルターで行った。この種のフィルターはcuprophaneフィルターよりも高圧に耐える。従って、実施例3は同様の条件下での観察結果を集めるためにより高圧でのcuprophaneフィルターの性能を評価するために計画した。FVIII溶液を035MCaCl2の存在下でpH6に調整する。溶液およびフィルターは35°Cに温度調節する。フィルターの作動に必要な圧力は950mbarである。これらの条件下で平均流量はm2当たり7lhである。第VIII因子の収量は最初のFVIIIに対して70である。表4はvWF多量体の組成を示す。16量体が10から6へと劇的に減少する。しかし、ウイルス力価の減少は21logにすぎす、これはヒト血漿由来製品の可能なウイルス含量を減少させる目的のウイルス除去法の効果を実証するために指導的権威者により確定された基準よりずっと低い。結論表5は10量体以上の多量体の値の合計をまとめている。vWF10量体およびより高次の多量体の合計が15以下である場合、ウイルス力価の減少は常に4logより大きいことが分かる。他方、この合計が16を越えると、ウイルス力価の減少は4logより低い。10のオーダーより大きいvWF多量体とウイルスの存在との間のこの関係は、濾過条件、多孔率、濾過材の種類、フィルター組織、細孔の幾何的構造によるフィルター通過現象におそらく関連する。これらのパラメーターはすべてウイルスの保持または非保持に影響を有する。使用後フィルターに対して行う試験は、その効果を示すが、濾過された製品であるFVIII多量体を伴う第VIII因子が、多量体化の程度によりウイルス保持のための有効な濾過が保証されることを特徴とするのは本発明の場合のみである。従って、4logより大きいウイルス保持効果は、濾液中の、10以上多量体化した多量体が15以下のvWF多量体の分布に関連する。これらのデータは表5にまとめられる。