"薬学的に受容可能なビヒクルおよび式:RQArSO2NH2ここで、Rはアリール、ヘタリル、アルキル又はシクロアルキル基でありQはLnであり、ここで、n0、1又は2、ならびに、LはNHCXNH、NHCSNH、NHCONHCSNH、又はSO2NHであり、ここで、XはOまたはSであり及び、Arは、酸素、窒素又は硫黄の少なくとも1つのヘテロ原子を含んでいるC6C10芳香族またはヘテロ芳香族基でありただし、式の化合物は:4アミノベンゼンスルホンアミド、4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド又は4フェニルアミノカルボニルアミノベンゼンスルホンアミドではない:で表される化合物を含んでなる医薬組成物。QはNHCONHであり、Arはフェニルであり、そして、Rは、PhCH2、Ph2CH、4FC6H4、4ClC6H5、4ClC6H4、4BrC6H4、C6F5、2MeOC6H4、4AcC6H4、2iPrC6H4、4iPrC6H4、4nBuC6H4、4nBuOC6H4、4nオクチルC6H4、4NCC6H4、2NCC6H4、4PhOC6H4、2PhC6H4、3O2NC6H4、4MeO2MeC6H3、シクロペンチル、インダン5イル、35Me2C6H3、4CF3C6H4、又は352C6H3のうちの1つである、請求項1に記載の医薬組成物。式の化合物が、4カルボニルアミノベンゼンスルホンアミド4カルボニルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4アミノベンゼンスルホンアミド4アミノカルボニルアミノベンゼンスルホンアミド4ベンゼンスルホンアミド4フェニルアミノカルボニルアミノベンゼンスルホンアミド3ウレイドベンゼンスルホンアミド3ウレイドベンゼンスルホンアミド3ウレイドベンゼンスルホンアミド3ウレイドベンゼンスルホンアミド3ウレイドベンゼンスルホンアミド3ウレイドベンゼンスルホンアミド4ウレイドベンゼンスルホンアミド4ウレイドベンゼンスルホンアミド4ウレイドベンゼンスルホンアミド4ウレイドベンゼンスルホンアミド4フェニルウレイドベンゼンスルホンアミド4フェニルウレイドベンゼンスルホンアミド4ウレイドベンゼンスルホンアミド4ウレイドベンゼンスルホンアミド4ウレイドベンゼンスルホンアミド4ウレイドベンゼンスルホンアミド4ウレイドベンゼンスルホンアミド4ウレイドベンゼンスルホンアミド4フェニルウレイドベンゼンスルホンアミド4ウレイドベンゼンスルホンアミド又は4ウレイドベンゼンスルホンアミドである、請求項1に記載の医薬組成物。組成物は4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミドである、請求項3に記載の医薬組成物。組成物は4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミドである、請求項3に記載の医薬組成物。原文に記載なし組成物は3ウレイドベンゼンスルホンアミドである、請求項3に記載の医薬組成物。組成物は、それがCAI及びCAIIの活性を生体外で抑制するよりかなりの程度に腫瘍関連CAIXの活性を抑制する、請求項17のいずれか1つに記載の組成物。組成物は、それがCAI及びCAIIの活性を生体外で抑制するよりかなりの程度に腫瘍関連CAXIIの活性を抑制する、請求項18のいずれか1つに記載の組成物。請求項1~7のいずれか1つに記載の医薬組成物を哺乳動物に投与することを含んでなる、哺乳動物中での腫瘍成長を抑制する方法。請求項1~7のいずれか1つに記載の医薬組成物を哺乳動物に投与することを含んでなる、哺乳動物中での腫瘍転移を抑制する方法。請求項1~7のいずれか1つに記載の医薬組成物を哺乳動物に投与することを含んでなる、哺乳動物中での乳癌細胞の数又は質量を減少させる方法。請求項1~7のいずれか1つに記載の医薬組成物を哺乳動物に投与することからなる、その必要のある哺乳動物の哺乳類癌幹細胞集団中の癌幹細胞を激減させる方法。請求項1~7のいずれか1つに記載の医薬組成物を哺乳動物に投与することからなる、その必要のある哺乳動物の低酸素症癌細胞の細胞死を誘発する方法。哺乳動物が追加的な抗癌剤で治療される、請求項1014のいずれか1つに記載の方法。1つ以上の追加的な抗癌剤を投与することをさらに含む、請求項11に記載の方法。1つ以上の追加的な抗癌剤を投与することをさらに含む、請求項12に記載の方法。1つ以上の抗癌剤を投与することをさらに含む、請求項13に記載の方法。1つ以上の抗癌剤を投与することをさらに含む、請求項14に記載の方法。前記腫瘍はCAIXを過剰に発現する、請求項1011のいずれか1つに記載の方法。前記腫瘍はCAXIIを過剰に発現する、請求項1011のいずれか1つに記載の方法。前記腫瘍は乳癌である、請求項1011のいずれか1つに記載の方法。前記癌が前記哺乳動物の胸組織に起因する、請求項1214のいずれか1つに記載の方法。請求項17のいずれか1つに記載の医薬組成物を乳癌がある哺乳動物へ投与することからなる、乳癌を治療して転移を防ぐか減じる方法。請求項17のいずれか1つに記載の医薬組成物を肺癌がある哺乳動物へ投与することからなる、肺癌を治療して転移を防ぐか減じる方法。請求項17のいずれか1つに記載の医薬組成物を膵癌がある哺乳動物へ投与することからなる、膵臓癌を治療して転移を防ぐか減じる方法。17のいずれか1つに記載の医薬組成物を腎癌がある哺乳動物へ投与することからなる、腎臓癌を治療して転移を防ぐか減じる方法。請求項17のいずれか1つに記載の医薬組成物を卵巣、前立腺又は子宮頚部癌がある哺乳動物へ投与することからなる、卵巣、前立腺又は子宮頚部癌を治療して転移を防ぐか減じる方法。請求項17のいずれか1つに記載の医薬組成物を膠芽腫がある哺乳動物へ投与することからなる、膠芽腫癌を治療して転移を防ぐか減じる方法。請求項17のいずれか1つに記載の医薬組成物を結腸直腸癌がある哺乳動物へ投与することからなる、結腸直腸癌を治療して転移を防ぐか減じる方法。哺乳動物中の腫瘍および転移の治療に対する、請求項17のいずれか1つに記載の組成物の使用。哺乳類はヒトである、請求項1030のいずれか1つに記載の方法。式RQArSO2NH2、ここで、Rがアリール、ヘタリル、アルキル又はシクロアルキル基でありQはLnであり、ここで、n0、1又は2であり、LはNHCXNH、NHCSNH、NHCONHCSNH、又はSO2NHであり、ここで、XはOまたはSであり及び、Arは、酸素、窒素又は硫黄の少なくとも1つのヘテロ原子を含んでいるC6C10芳香族又はヘテロ芳香族基である化合物、但し、該化合物は:4アミノベンゼンスルホンアミド、カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4カルバモイルアミノベンゼンスルホンアミド4フェニルアミノカルボニルアミノベンゼンスルホンアミド3ウレイドベンゼンスルホンアミド3ウレイドベンゼンスルホンアミド3ウレイドベンゼンスルホンアミド3ウレイドベンゼンスルホンアミド3ウレイドベンゼンスルホンアミド又は3ウレイドベンゼンスルホンアミドではない。QはNHCONHであり、Arはフェニルであり、及びRはPhCH2、Ph2CH、4FC6H4、4ClC6H4、4BrC6H4、C6F5、2MeOC6H4、4AcC6H4、2iPrC6H4、4iPrC6H4、4nBuC6H4、4nBuOC6H4、4nオクチルC6H4、4NCC6H4、2NCC6H4、4PhOC6H4、2PhC6H4、3O2NC6H4、4MeO2MeC6H3、シクロペンチル、インダン5イル、35Me2C6H3、4CF3C6H4、又は352C6H3である、請求項33に記載の化合物。ここに記述されるように、転移癌の治療に適しているウレイドスルホンアミド組成物は合成され利用される。それらは式Iを含んでなる:R-Q-Ar-SO2NH2ここで、Rは電荷を持ち又は持たないアリール、ヘタリル、アルキル又はシクロアルキル基であってよく;Qは-LCH2n-であってよく;ここで、n=0、1又は2、ならびにLは-NHCXNH-、-NHCSSNH-、-NHCONHCSNH-、又は-SO2NH-基であり、ここで、XはOまたはSであってよく;及び、Arは、酸素、窒素又は硫黄の少なくとも1つのヘテロ原子を含んでいるC6-C10芳香族またはヘテロ芳香族基であってよい。式1、ここで、Qは-NHCONH-の基でよく、Arはフェニルであってよく、Rは本発明の方法に有用なPhCH2、Ph2CH、4-FC6H4、4-ClC6H5、4-BrC6H4、C6F5、2-MeOC6H4、4-AcC6H4、2-i-PrC6H4、4-i-PrC6H4、4-n-BuC6H4、4-n-BuOC6H4、4-n-オクチル-C6H4、4-NCC6H4、2-NCC6H4、4-PhOC6H4、2-PhC6H4、3-O2NC6H4、4-MeO-2-MeC6H3、シクロペンチル、インダン-5-イル、3,5-Me2C6H3、4-CF3C6H4、3,5-CF32C6H3であってよい。本発明の代表的な化合物は次のとおりである:4-{[ベンジルアミノカルボニル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-102;4-{[ベンズヒドリドアミノカルボニル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-103;4-{[4’-フルオロロフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-104;4-{[4’-ブロモフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-105;4-{[ペンタフルオロフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-107;4-{[2’-メトキシフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-108;4-{[4’-アセチルフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-109;4-{[2’-イソプロピルフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-110;4-{[4’-イソプロピルフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-111;4-{[4’-n-ブチルフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-112;4-{[4’-ブトキシフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-113;4-{[4’-n-オクチルフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-114;4-{[4’-シアノフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-115;4-{[2’-シアノフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-116;4-{[4’-フェノキシフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-117;4-{[ビフェニル-2’-イルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-118;4-{[3’-ニトロフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-119;4-{[4’-メトキシの-2’-メチルフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-1204-[シクロペンチルカルバモイルアミノ]ベンゼンスルホンアミドMST-122、4-{[3’,5’-ジメチルフェニルアミノ]カルボニルアミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-123;4-{[4’-クロロフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-124;4-{[2’,3’-ジヒドロ-1H-インデン-5’-イルアミノ]カルボニルアミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-125;4-{[[4’-トリフルオロメチルフェニル]アミノカルボニルアミノ]}ベンゼンスルホンアミドMST-126;4-{[[3’,5’-ビストリフルオロメチルフェニル]アミノカルボニルアミノ]}ベンゼンスルホンアミドMST-127;3-3-4’-ヨードフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-128;3-3-4’-フルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-129;3-3-3’-ニトロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-130;3-3-4’-アセチルフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-131;3-3-2’-イソプロピルフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-132;3-3-パーフルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-133;4-3-4’-クロロ-2-フルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-134;4-3-4’-ブロモ-2’-フルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-135;4-3-2’-フルオロ-5’-ニトロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-136;4-3-2’,4’,5’-トリフルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-137;4-3-2’-フルオロ-5’-トリフルオロメチルフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-138;4-3-2’-フルオロ-3’-トリフルオロメチルフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-139;4-3-2’,4’,5’-トリフルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-140;4-3-2’-フルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-141;4-3-2’,4’-ジフルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-142;4-3-3’-クロロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-143;4-3-2’,5’-ジクロロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-144;4-3-2’-クロロ-5’-ニトロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-145;4-3-2’-クロロ-4’-トリフルオロメチルフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-146;4-3-2’,6’-ジフルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-147;又は4-3-パークロロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-148;明瞭さのために、C6-C10芳香族基は、フェニル又は1-,若しくは2-ナフチルを意味し、ヘテロ芳香族基は、酸素、窒素又は硫黄の少なくとも1つの異種原子を含んでいるC2-C12のヘテロ環式芳香族化合物を意味する。更に、1,3,4-チアチアゾールは好ましい複素環である。式Iの化合物がさらに提供され、ここで、該化合物は、生体外で測定されて、CAIおよびCAIIの活性を阻害するより強く腫瘍関連のCAIXおよびCAXIIの活性を阻害する。本発明の第更なる目的は、式Iの化合物の調製方法である。好ましい1つの反応は、式R-NCXの化合物ここでR及びXは上記と同義である及び式NH2-Ar-SO2NH2又はNH2-CSNH-Ar-SO2NH2の化合物の間で実施されるここで、Arは上記と同義である。別の好ましい反応は式NH2-Y-SO2NH2の化合物のナトリウム/カリウムN,N-ジメチル-/ジエチルジチオカルバメートとの酸化的チオカルバミレーションであり、ここで、Yは-CH2nAr-基であり、n=0、1、2であり、ArはC6-C10芳香族、又は酸素、窒素若しくは硫黄の少なくとも1つの異種原子を含有するヘテロ芳香族基である。反応条件は当業者に知られたものである、例えば以下を参照せよ:A.ScozzafavaandC.T.SupuranBioorg.Med.Chem.Lett.2000,10,1117-1120;C.T.Supuran;F.Briganti;S.Tilli;W.R.Chegwidden;A.ScozzafavaBioorg.Med.Chem.2001,9,703-714;C.T.Supuran;A.Scozzafava;B.C.Jurca;M.A.IliesEur.J.Med.Chem.1998,33,83-93。次のスキームは、本発明による化合物を調製するために使用されてもよい方法の例を示す。本発明による化合物は選択的なCAIXおよびCAXIIインヒビターである。かくして、式Iの化合物がさらに提供される、ここで、該化合物は、生体外で測定されて、CAIおよびCAIIの活性を阻害するよりかなりの程度に腫瘍関連のCAIXおよびCAXIIの活性を阻害する。これらの化合物は、ヒト乳癌の生長を減じて、固形腫瘍において典型的な低酸素の条件の下の乳癌細胞による浸潤を阻害し、低酸素下でヒト乳癌細胞を殺し、癌幹細胞集団を枯渇させる方法に役立つ。癌幹細胞CSCは、自己更新可能性の特性、非CSC子孫を生じさせる能力、および腫瘍内の他の癌細胞に関する非常に増強された腫瘍を引き起こす可能性がある癌細胞の部分母集団として定義されるChafferandWeinberg,2011Science331:1559-1564;Clevers,2011Nat.Med.17:313-319;HanahanandWeinberg,2011Cell.144:646-674。CSCは、適切な動物宿主へ移植されたとき、新しい腫瘍の種付けする能力を有する細胞として実験的に定義されるChafferandWeinberg,2011;HanahanandWeinberg,2011。CSCは癌治療抵抗性成分であると考えられる。表1:hCAI、hCAII細胞質ゾルのアイソフォームおよびhCAIXの抑制およびウレイドスルホンアミドでhCAXII膜貫通性の、腫瘍関連酵素。MST-101~MST-127。本発明の化合物は、高度に過剰発現したCAIX又はCAXIIを有する低酸素性腫瘍の治療に対して、治療方法と同様に医薬の調製にも有用である。過剰発現は、通常その効果又は生成物を過度に生成することによる遺伝子の過度の発現を意味する。薬物は、CAIXへの抑止的な作用をしており、低酸素の腫瘍およびその周辺環境の酸性化を逆転することに特に有効である。さらに、本発明の化合物は癌幹細胞を減じ及び/または根絶することができ。癌幹細胞は、従来の治療薬又は技術化学療法または放射線に対する腫瘍による抵抗の根拠であると思われる。ほとんどの癌治療中で、作用の相補的な物理療法を持った多数の剤は、化学療法カクテルの一部として典型的に使用される。治療されている癌の性質に依存する1つ以上の追加的な抗腫瘍薬を含んでいるかもしれないカクテルに本発明の組成物が使用されてもよいことが予想される。他の化学療法剤代謝拮抗物質、すなわち、5-フルオロウラシル、フロクスウリジン、チオグアニン、シタラビン、フルダラビン、6-メルカプトプリン、メトトレキセート、ゲムシタビン、カペシタビン、ペントスタチン、トリメトキサレート又はクラドリビン;DNA架橋およびアルキル化薬すなわち、シスプラチン、カルボプラチン、ストレプタゾイン、メルファラン、クロラムブチル、カルマスティン、methclorethamineメトクロレタミン、ロムスチン、ビスルファン、チオテパ、イフォスファミド又はシクロホスファミド;ホルモン剤すなわちタモキシフェン、ラロキシフェン、トレミフェン、アナストロゾール又はレトロゾール;抗生物質すなわち、プリカマイシン、ブレオマイシン、ミトキサントロン、イダルビシン、ダクチノマイシン、マイトマイシン、ドキソルビシン又はダウノルビシン;免疫調節薬すなわち、インターフェロン、IL-2又はBCG;抗有糸分裂剤すなわち、エストラムスチン、パクリタキセル、ドセタセル、ビンブラスチン、ビンクリスチン又はビノレルビン;トポイソメラーゼインヒビターすなわち、トポテカン、イリノテカン、エトポシド又はテニポシド。;及び、他の剤すなわち、ヒドロキシ尿素、トラスツズマブ、アルトレタミン、リツキシマブ、L-アスパラギナーゼ又はジェムツツマブオゾガミシンは、本発明の組成物と組合せて使用されてもよい。注射、局所適用又は食物摂取に適している処方に到着するために、分子は、既知の薬学上の添加剤塩類、水、脂質およびまたは単糖と調合されてもよい。医薬製剤はヒト使用に対して安定で受容可能な化合物の製剤を開発することを含んでいる。化合物の処方は、薬物がいかなる可溶化剤、安定化剤、凍結乾燥化剤又は水和化剤とも両立することを保証するために試験されているであろう。いかなる処方のデザインも、製剤中に他のどの成分を使用しなければならないか決めるために、薬物の物理的、化学的および機械的性質キャラクタリゼーションを含んでいる。粒度、多形性、pHおよび溶解度、これらがすべてバイオアベイラビリティ、そしてその結果薬物の活性に影響を及ぼす場合があるからである。薬物は、存在する薬物量が各用量ユニット例えば各錠剤に於いて一致していることを保証する方法によって不活性添加物と組み合わなければならない。処方設計が、臨床試験が始まる時までに完成することはありそうもない。これは、単純な製剤がフェーズI治験で使用するために最初に開発されていることを意味する。これらの処方の長期安定性の保証は、そらが数日で使用されるテストされるので、必要ではない。フェーズIII治験に到達する迄には、薬物の処方が市場で究極的に使用される製剤に近づく様に開発されるべきであった。安定試験は温度、湿度、酸化又は光分解紫外線光または可視光が何らかの影響があるかどうかテストするために実施される。そして、製剤は何らかの分解産物が形成されたかどうかを確認するために分析される。一つの実施態様において、本発明の化合物はエタノール及び食塩水と共にポリエチレングリコール中で処方される。1つの特別の実施態様において、処方は、37.5のPEG400、12.5のエタノールおよび50の食塩水から成る。この文書中に使用されるように、腫瘍は、いかなる原発性又は転移性の癌、低酸素の腫瘍組織又は悪性腫瘍をも意味するために用いられてよい。低酸素およびまたは転移特に胸、肺、腎臓癌に弱いいかなる膵臓で、頚部の腫瘍、結腸直腸、膠芽腫、前立腺および卵巣癌は本発明の実施態様により治療され得る。本発明の組成物での治療にふさわしい追加的な癌タイプを決定する方法は利用可能である、すなわち、該方法は、低酸素組織の検知のために当業者に利用可能であり、知られている。例えば、低酸素症又は低酸素の組織を検知する方法を開示しているU.S.Pat.Nos.5,401,490及び5,843,404を参照せよ。これらの技術または当業者に知られている他の技術のいずれも、低酸素組織を識別するために使用されてよい。治療に敏感な腫瘍は、正常組織に関してCAIXまたはCAXIIの高いレベルを有するであろう。アイソザイムCAIXおよびCAXIIは、腫瘍細胞中に主に見いだされ、正常組織で制限された発現を示す。二酸化炭素を効率的に水和してプロトン及び重炭酸ソーダとすることによって、これらのCAが固形腫瘍の細胞外の酸性化に著しく寄与すること、一方、それらの抑制がある程度までこの現象を逆転することが、最近証明された。CAIX及びCAXIIは低酸素誘導可能な因子HIF経路に応じて多くのそのような腫瘍中に過剰発現される。データで実証されるように、CAIX及びCAXIIは低酸素及び転移に関係している。したがって、低酸素性および転移性腫瘍は、既にデータが推測をサポートしているが故に、本発明の化合物を使用して治療を指示する為にCAIX及びCAXIIの高いレベルを証明するためのテストは必要ないであろう。しかしながら、USPatentNo.7378091byGudasetal.は検知及び診断に役立つCAIX抗体を開示している。RNAプローブと同様にCAXIIに対する抗体もバイオプシーを実施された腫瘍サンプル中のCAXII過剰発現を評価するために使用することができる。CAXIIもBattkeetal.,2011CancerImmunolImmunother.May;605:649-58中で評価されている。腫瘍成長、存続およびまたは展開は、本発明化合物の使用によって、又は、その様に苦しんでいる哺乳動物を治療する際の本発明化合物の使用によって、抑制されると言ってもよい。本願における抑制は、特に、これらの用語が哺乳動物特にヒトが罹患した腫瘍及び癌に関連した際には、退行の誘導、生長の抑制および展開の抑制を意味してもよい。ドセタセル、ビンカアルカロイド、ミトキサントロン、シスプラチン、パクリタキセル、5-FU、ハーセプチン、アバスチン、グリーベクを含み、これらに限定されない典型的な化学療法剤は、本発明の化合物と組合わせて使用されてもよい。同様に、放射線治療は本発明の化合物を含む投与スケジュールと組み合わせてもよい。外科的介入が行なわれるとき、本発明の化合物および組成物は手術前に、手術時に又は手術後に使用されてもよい。用量は、最初の投薬を決定するために患者の体表面積それは血液量と関連するを計算するために患者のサイズおよび体重を使用する投薬スキームによって典型的に決定される。スタートする用量は通常、治療化合物の臨床実験の間に案出される。腫瘍治療に対する臨床的研究のためのバックグラウンドおよび現在のアプローチは、TakimotoCH,CalvoE.PrinciplesofOncologicPharmacotherapyinPazdurR,WagmanLD,CamphausenKA,HoskinsWJEdsCancerManagement:AMultidisciplinaryApproach.11ed.2008中に見いだされ得る。それはhttp://www.cancernetwork.com/cancer-management-11/chapter03/article/10165/1402628で自由に利用可能である。次の実施例は本発明の態様を示すために使用される。しかし、実施態様は、これらの実例によって制限されることを意図しない。実施例1本発明の具体的な実施態様の製造化合物MST-101からMST-127を包括する[式Iの化合物製造のための基本手順]化学の方法:1H、13Cおよび19FスペクトルはBrukerAdvanceIII400MHz分光計を使用して記録した。ケミカルシフトはppmppmで報告し、結合定数JはヘルツHzで表示する。赤外線スペクトルはKBrプレート上の固体としてPerkinElmerSpectrumRXI分光計に記録した。融点m.p.は、他に述べない限り、BuchiMeltingPointB-540融点測定装置を使用して、開いた毛管中で測定し未訂正のままである。薄層クロマトグラフィーTLCはMerckシリカゲル60F254アルミニウム支持プレート上で実施した。プレートの溶出は溶出系として酢酸エチル-石油エーテルを使用して実施した。可視化は、ニンヒドリンTLC染色液へ浸漬しホットエアーガンで加熱することにより、254nmのUV光で達成した。フラッシュカラムクロマトグラフィーは、吸着剤としてシリカゲルAldrichケミカル社Milan、Italyから入手を使用して実施した。粗生成物は同一の溶出溶剤系中の溶液としてカラムへ導入した。溶媒及び化学薬品は、AldrichChemicalCo.,Milan,Italyから供給されるままに使用した。4-アミノベンゼンスルホンアミド2.9mmoleは、アセトニトリル20-30mL中に溶解し、次に、イソシアニドの化学量論量で処理した。その混合物は完了までr.t.で攪拌したか、又は50°Cで2時間加熱したTLCモニタリング。形成された重い沈殿は、ジエチルエーテルで洗浄し、ろ過分離し、真空下で乾燥した。4-[アニリノカルボニルアミノ]ベンゼンスルホンアミドMST-101:4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolをイソシアン酸フェニル0.23g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1日間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、43.7の収率で白色固形物としてMST-101を得た。m.p.233-235°CLit1;シリカゲルTLCRf0.63酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3340N-H尿素,1656C=O尿素,1595芳香族;δH400MHz,DMSO-d67.001H,tt,J7.4,0.8,4’-H,7.202H,s,SO2NH2,7.292H,dd,J8.2,0.8,2x3’-H,7.472H,dd,J8.2,1.2,2x2’-H,7.612H,d,J9.0,2x3-H,7.732H,d,J9.0,2x2-H,8.821H,s,NH,9.091H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6153.2C=O尿素,143.8,140.2,137.8,129.8,127.7,123.1,119.4,118.4。4-{[ベンジルアミノカルボニル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-102;4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolをベンジルイソシアナート0.39g;2.90mmolで処理し、反応を室温で4間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、42.3の収率で白色固形物としてMST-102を得た。m.p.194-196°C;シリカゲルTLCRf0.58酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3313N-H尿素,1674C=O尿素,1591芳香族;δH400MHz,DMSO-d64.352H,d,J6.0,1’-H2,6.811H,t,J6.0,NH,7.192H,s,SO2NH2,7.281H,tt,J6.82.0,5’-H,7.354H,m,2x3’-H,2x4’-H,7.592H,d,J9.0,2x3-H,7.712H,d,J9.0,2x2-H,9.01H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6155.8C=O尿素,144.5,141.0,137.1,129.3,128.1,127.8,127.7,117.8,43.7C-1’。4-{[ベンズヒドリドアミノカルボニル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-103;4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolをベンズヒドリルイソシアナート0.61g;2.90mmolで処理し、反応を室温で2間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、42.4の収率で白色固形物としてMST-103を得た。m.p.235-236°C;シリカゲルTLCRf0.76酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3338N-H尿素,1696C=O尿素,1592芳香族;δH400MHz,DMSO-d66.01H,d,J7.6,NH,7.192H,s,SO2NH2,7.292H,tt,J7.21.6,2x4’-H,7.389H,m,1’-H,4x3’-H,4x4’-H7.562H,d,J8.8,2x3-H,7.702H,d,J8.8,2x2-H,8.91H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6154.9C=O尿素,144.2,143.8,137.2,129.5,127.9,127.8,127.7,117.7,57.8C-1’。4-{[4’-フルオロロフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-104;4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを4-フルオロフェニルイソシアナート0.40g;2.90mmolで処理し、反応を室温で2日間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、55.5の収率で白色固形物としてMST-104を得た。m.p.242-243°C;シリカゲルTLCRf0.53酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3338N-H尿素,1697C=O尿素,1593芳香族;δH400MHz,DMSO-d67.172H,t,J9.0,2x2’-H,7.242H,s,SO2NH2,7.512H,dd,J9.04.8,2x3’-H,7.642H,d,J8.8,2x3-H,7.762H,d,J8.8,2x2-H,8.861H,s,NH,9.091H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6158.5d,JC-F237,C-4’,153.3C=O尿素,143.7,137.8,136.6d,4JC-F3,C-1’,127.7,121.2d,3JC-F7,C-2’,118.4,116.3d,2JC-F22,C-3’;δF376.5MHz,DMSO-d6-121.01F,s。4-{[4’-ブロモフェニルアミノ]カルボニル}アミノベンゼンスルホンアミドMST-105;4-アミノ-ベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを4-ブロモフェニルイソシアナート0.57g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1日間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、43.1の収率で白色固形物としてMST-105を得た。m.p.269-271°C;シリカゲルTLCRf0.38酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3328N-H尿素,1652C=O尿素,1590芳香族;δH400MHz,DMSO-d67.242H,s,SO2NH2,7.492H,d,J9.2,2x2’-H,7.512H,d,J9.2,2x3’-H,7.642H,d,J8.8,2x3-H,7.762H,d,J8.8,2x2-H,8.991H,s,NH,9.151H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6152.6C=O尿素,143.1,139.3,137.5,132.0,127.3,120.9,118.1,114.1。4-{[4’-ヨードフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-106;4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを4-ヨードフェニルイソシアナート0.71g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1晩攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、46.5の収率で白色固形物としてMST-106を得た。m.p.275-277°C;シリカゲルTLCRf0.55酢酸エチル/石油エーテル33νmaxKBrcm-1,3325N-H尿素,1652C=O尿素,1586芳香族;δH400MHz,DMSO-d67.242H,s,SO2NH2,7.362H,d,J8.8,2x2’-H,7.632H,d,J6.8,2x3-H,7.662H,d,J6.8,2x2-H,7.772H,d,J8.8,2x3’-H,8.971H,s,NH,9.151H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6,153.2C=O尿素,143.7,140.3,138.5,138.1,127.9,121.7,118.6,86.2C-4’。4-{[ペンタフルオロフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-107;4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolをペンタフルオロフェニルイソシアナート0.60g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1日間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、97.7の収率で白色固形物としてMST-107を得た。m.p.251-253°C;シリカゲルTLCRf0.49酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3329N-H尿素,1656C=O尿素,1597芳香族;δH400MHz,DMSO-d67.232H,s,SO2NH2,7.612H,d,J8.8,2x3-H,7.742H,d,J8.8,2x2-H,8.651H,s,NH,9.481H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6152.9C=O尿素,144.0m,JC-F239,C-2’,143.3,139.6m,JC-F248,C-4’,138.5,138.2m,JC-F249,C-3’,127.8,118.8,114.7ddd,2JC-F23,3JC-F14,4JC-F4,C-1’;δF376.5MHz,DMSO-d6-146.22F,dd,3J24,4J5.1,2x2’-F,-159.22F,t,3J23,2x4’-F,-164.01F,dd,3J23.3,4J5.0,2x3’-F。4-{[2’-メトキシフェニルアミノ]カルボニル}アミノベンゼンスルホンアミドMST-108;4-アミノ-ベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを2-メトキシフェニルイソシアナート0.43g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1晩攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、40.4の収率で白色固形物としてMST-108を得た。m.p.234-236°C;シリカゲルTLCRf0.47酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3362N-H尿素,2838C-Haliphatic,1684C=O尿素,1592芳香族;δH400MHz,DMSO-d63.923H,s,CH3,6.941H,ddd,J8.27.41.4,4’-H,7.011H,ddd,J8.07.41.6,5’-H,7.071H,dd,J8.21.2,3’-H,7.232H,s,SO2NH2,7.642H,d,J8.8,2x2-H,7.772H,d,J8.8,2x3-H,8.161H,dd,J8.01.6,6’-H,8.381H,s,NH,9.731H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6153.0C=O,尿素,148.7,143.8,137.7,129.2,127.8,123.2,121.5,119.4,118.1,111.7,56.7CH3。4-{[4’-アセチルフェニルアミノ]カルボニルアミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-109:4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを4-アセチルフェニルイソシアナート0.46g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1日間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、46.6の収率で白色固形物としてMST-109を得た。m.p.258-260°C;シリカゲルTLCRf0.27酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3300N-H尿素,1659C=O尿素,1590芳香族;δH400MHz,DMSO-d62.563H,s,CH3,7.262H,s,SO2NH2,7.642H,d,J8.8,2x2’-H,7.672H,d,J8.8,2x3-H,7.792H,d,J8.8,2x2-H,7.962H,d,J8.8,2x3’-H,9.221H,s,NH,9.251H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6197.3C=O,152.9C=O尿素,144.9,143.4,138.2,131.7,130.6,127.8,118.7,118.4,27.3CH3。4-{[2’-イソプロピルフェニルアミノ]カルボニルアミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-110:4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを2-イソプロピルフェニルイソシアナート0.47g;2.90mmolで処理し、反応を室温で6時間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、48.7の収率で白色固形物としてMST-110を得た。m.p.226-227°C;シリカゲルTLCRf0.65酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3361N-H尿素,2966C_Haliphatic,1676C=O尿素,1592芳香族;δH400MHz,DMSO-d61.246H,d,J6.8,2xCH3,3.191H,sept,J6.8,CH,7.141H,ddd,J7.97.61.6,4’-H,7.19ddd,J7.96.81.2,5’-H,7.232H,s,SO2NH2,7.341H,dd,J7.61.6,3’-H,7.652H,d,J8.8,2x3-H,7.681H,dd,J6.81.2,6’-H,7.762H,d,J8.8,2x2-H,8.111H,s,NH,9.371H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6153.8C=O尿素,144.0,140.8,137.6,136.0,127.8,126.7,126.3,125.3,124.8,118.2,27.8CH,24.12xCH3。4-{[4’-イソプロピルフェニルアミノ]カルボニルアミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-111:4-アミノ-ベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを4-イソプロピルフェニルフェニルイソシアナート0.47g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、58.5の収率で白色固形物としてMST-111を得た。m.p.226-227°C;シリカゲルTLCRf0.50酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3351N-H尿素,2964C_Haliphatic,1647C=O尿素,1590芳香族;δH400MHz,DMSO-d61.226H,d,J6.8,2xCH3,2.871H,sept,J6.8,CH,7.202H,d,J8.4,2x3’-H,7.232H,s,SO2NH2,7.402H,d,J8.4,2x2’-H,7.642H,d,J9.0,2x3-H,7.762H,d,J9.0,2x2-H,8.721H,s,NH,9.041H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6153.2C=O尿素,143.9,143.2,137.9,137.6,127.7,127.5,119.5,118.3,33.7CH,24.9CH3。4-{[4’-ブチルフェニルアミノ]カルボニル}アミノベンゼンスルホンアミドMST-112;4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを4-ブチルフェニルイソシアナート0.51g;2.90mmolで処理し、反応を室温で3時間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、48.6の収率で白色固形物としてMST-112を得た。m.p.243-245°C;シリカゲルTLCRf0.54酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3333N-H尿素,2929C_Haliphatic,1653C=O尿素,1592芳香族;δH400MHz,DMSO-d60.933H,t,J7.2,CH3,1.332H,six,J7.4,CH2,1.572H,sept,J7.4,CH2,2.562H,t,J7.6,CH2,7.142H,d,J8.6,2x3’-H,7.232H,s,SO2NH2,7.392H,d,J8.6,2x2’-H,7.632H,d,J9.0,2x3-H,7.762H,d,J9.0,2x2-H,8.711H,s,NH,9.041H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6153.2C=O尿素,143.9,137.8,137.6,137.1,129.5,127.3,119.5,118.3,35.1CH2,34.2CH2,22.6CH2,14.7CH3。4-{[4’-ブトキシフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-113;4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを4-ブトキシフェニルイソシアナート0.55g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1日間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、46.0の収率で白色固形物としてMST-113を得た。m.p.236-239°C;シリカゲルTLCRf0.60酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3361N-H尿素,2957C-Haliphatic,1646C=O尿素,1592芳香族;δH400MHzDMSO-d60.973H,t,J7.6,CH3,1.482H,six,J7.2,CH2,1.712H,six,J6.8,CH2,3.962H,t,J6.4,CH2,6.902H,d,J9.2,2x3’-H,7.222H,s,SO2NH2,7.382H,d,J9.2,2x2’-H,7.632H,d,J8.8,2x3-H,7.752H,d,J8.8,2x2-H,8.621H,s,NH,9.021H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6155.1C=O尿素,153.3,144.0,137.5,133.1,127.7,121.2,118.2,115.5,68.2OCH2,31.7CH2,19.7CH2,14.6CH3。4-{[4-オクチルフェニルアミノ]カルボニルアミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-114:4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを4-オクチルフェニルイソシアナート0.67g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1日間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、41.4の収率で白色固形物としてMST-114を得た。m.p.282-283°C;シリカゲルTLCRf0.59酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3332N-H尿素,2924C_Haliphatic,1653C=O尿素,1592芳香族;δH400MHz,DMSO-d60.893H,t,J6.8,CH3,1.3012H,m,CH2,1.572H,t,J7.6,CH2,7.142H,d,J8.6,2x3’-H,7.232H,s,SO2NH2,7.392H,d,J8.6,2x2’-H,7.632H,d,J9.0,2x3-H,7.762H,d,J9.0,2x2-H,8.721H,s,NH,9.051H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6,153.2C=O尿素,143.9,137.8,137.6,137.1,129.5,127.7,119.5,118.2,35.4CH2,32.2CH2,32.0CH2,29.7CH2,29.6CH2,29.5CH2,23.0CH2,14.9CH3。4-{[4’-シアノフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-115;4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを4-シアノフェニルイソシアナート0.42g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1日間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、60.6の収率で白色固形物としてMST-115を得た。m.p.265-267°C;シリカゲルTLCRf0.37酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3355N-H尿素,2221C≡N,1695C=O尿素,1594芳香族;δH400MHz,DMSO-d67.262H,s,SO2NH2,7.662H,d,J8.8,7.682H,d,J9.2,7.782H,d,J8.8,overlapping,7.792H,d,J8.8,overlapping,9.281H,s,NH,9.351H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6152.8C=O尿素,144.8,143.2,138.3,134.2,127.8,120.1,119.2,118.8,104.6C≡N。4-{[2’-シアノフェニルアミノ]カルボニルアミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-116:2-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを4-シアノフェニルイソシアナート0.41g;2.90mmolで処理し、沈殿が生じるまで反応を室温で1日間攪拌した。得られた粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて酢酸エチル/石油エーテル1/1で溶出することにより精製して、白色固形物としてMST-116を得た。m.p.256-258°C;シリカゲルTLCRf0.73酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3310N-H尿素,2231C≡N,1696C=O尿素,1587芳香族;δH400MHz,DMSO-d67.261H,ddd,J7.67.20.8,4’-H,7.272H,s,SO2NH2,7.672H,d,J9.0,2x3-H,7.701H,ddd,J8.47.21.6,5’-H,7.802H,d,J9.0,2x2-H,7.821H,dd,7.61.6,3’-H,8.11H,dd,J8.40.4,6’-H,8.901H,s,NH,9.781H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6152.8C=O尿素,143.2,142.4,138.4,135.0,134.1,127.8,124.5,122.6,118.7,117.8,103.6C≡N。4-{[4’-フェノキシフェニルアミノ]カルボニル}アミノベンゼンスルホンアミドMST-117;4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを4-フェノキシフェニルイソシアナート0.61g;2.90mmolで処理し、反応を室温で5時間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、46.8の収率で白色固形物としてMST-117を得た。m.p.236-237°C;シリカゲルTLCRf0.41酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3328N-H尿素,1653C=O尿素,1595芳香族;δH400MHz,DMSO-d67.002H,dd,J8.81.2,3’-H,7.032H,d,J9.0,6’-H,7.131H,dt,J7.50.8,8’-H,7.242H,s,SO2NH2,7.402H,dd,J9.07.5,7’-H,7.522H,d,J8.8,2’-H,7.652H,d,J9.2,3-H,7.762H,d,J9.2,2-H,8.841H,s,NH,9.081H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6158.5C=O尿素,153.3,151.9,143.8,137.7,136.2,130.9,127.7,123.8,121.2,120.7,118.7,118.4。4-[ビフェニル-2’-イルカルバモイルlアミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-118;4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolをビフェニル-2-イルイソシアナート0.57g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1日間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、40.0の収率で白色固形物としてMST-118を得た。m.p.229-231°C;シリカゲルTLCRf0.75酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3365N-H尿素,1675C=O尿素,1584芳香族;δH400MHz,DMSO-d67.201H,d,J7.4,7.222H,s,SO2NH2,7.271H,dd,J7.41.6,7.391H,dt,J8.41.6,10’-H,7.462H,dt,J6.81.6,7.541H,d,J7.6,6’-H,7.582H,d,J9.2,2x3-H,7.742H,d,J9.2,2x2-H,7.831H,s,NH,7.951H,d,J8.0,3’-H,9.411H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6153.6C=O尿素,144.0,139.5,137.8,136.4,134.2,131.5,130.2,129.9,128.9,128.6,127.9,124.8,124.0,118.3。4-{[3’-ニトロフェニルカルバモイル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-119;3-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50mg;2.90mmolを4-ニトロフェニルイソシアナート0.47g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1日間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、44.3の収率で黄色固形物としてMST-119を得た。m.p.246-248°C;シリカゲルTLCRf0.39酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3370N-H尿素,1709C=O尿素,1592芳香族;δH400MHz,DMSO-d67.232H,s,SO2NH2,7.591H,dd,J8.48.0,5’-H,7.652H,d,J9.0,2x3-H,7.731H,ddd,J8.42.0,0.8,6’-H,7.762H,d,J9.0,2x2-H,7.861H,ddd,J8.02.40.8,4’-H,8.581H,appt,J2.2,2’-H,9.251H,s,NH,9.351H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6153.2C=O尿素,149.1,143.3,141.6,138.3,131.1,127.7,125.5,118.8,117.6,113.3。4-{[4’-メトキシの-2’-メチルフェニルアミノ]カルボニルアミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-120;4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを4-メトキシ-2-メチルフェニルイソシアナート0.47g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1晩攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、40.1の収率で白色固形物としてMST-120を得た。m.p.240-241°C;シリカゲルTLCRf0.35酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3313N-H尿素,2835C_Haliphatic,1647C=O尿素,1591芳香族;δH400MHz,DMSO-d62.253H,s,CH3,3.763H,s,OCH3,6.781H,dd,J8.82.8,5’-H,6.841H,d,J2.8,3’-H,7.222H,s,SO2NH2,7.551H,d,J8.8,6’-H,7.632H,d,J8.8,2x3-H,7.752H,d,J8.8,2x2-H,7.961H,s,NH,9.261H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6156.6C=O尿素,153.7,144.2,137.4,132.3,130.7,127.8,125.3,118.1,116.4,112.2,56.1OCH3,19.0CH3。4-{[9H-フルオレン-2-イルアミノカルボニル]アミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-121;4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolのアセトニトリル溶液20mlに、10mlのアセトニトリル中に溶解した9H-フルオレン-2-イルイソシアナート0.59g;2.90mmolを滴加した。反応を室温で1時間撹拌し、先に報告した基本手順に記載されているように処理して、62.0の収率で白色固形物としてMST-121を得た。m.p.280-285°C;シリカゲルTLCRf0.52酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3329N-H尿素,1648C=O尿素,1591芳香族;δH400MHz,DMSO-d63.942H,s,CH2,7.242H,s,SO2NH2,7.291H,appt,J7.2,4’-H,7.391H,appt,J7.2,5’-H,7.461H,d,J7.2,3’-H,7.581H,d,J7.2,6’-H,7.671H,d,J8.4,2x3-H,7.781H,d,J8.4,2x2-H,7.833H,m,2’-H,7’-H,8’-H,8.941H,s,NH,9.141H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6153.2C=O尿素,144.9,143.8,143.5,142.0,139.3,137.7,136.4,127.8,127.6,126.8,125.9,121.2,120.2,118.4,118.2,116.2,37.4CH2。4-[シクロペンチルカルバモイルアミノ]ベンゼンスルホンアミドMST-122:4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolをシクロペンチルイソシアナート0.32g;2.90mmolで処理し、反応を50°Cで2時間攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、68.8の収率で白色固形物としてMST-122を得た。m.p.224-226°C;シリカゲルTLCRf0.57酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3328N-H尿素,3055C-Haliphatic,1684C=O尿素,1591芳香族;δH400MHz,DMSO-d61.412H,m,2x3’-Hax,1.582H,m,2x2’-Hax,1.672H,m,2x2’-Heq,1.882H,m,2x3’-Heq,3.981H,six,J6.8,1’-H,6.351H,d,J6.8,NH,7.182H,s,SO2NH2,7.552H,d,J8.8,2x3-H,7.702H,d,J8.8,2x2-H,8.681H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6155.3C=O尿素,144.6,136.8,127.7,117.6,51.8C-1’,33.7C-2’,24.1C-3’。4-{[3,5-ジメチルフェニルアミノ]カルボニルアミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-123:3-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを3,5-ジメチルフェニルイソシアナート0.43g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1晩攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、60.6の収率で白色固形物としてMST-123を得た。m.p235-236°C;シリカゲルTLCRf0.58酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3343N-H尿素,2860C-Haliphatic,1686C=O尿素,1595芳香族;δH400MHz,DMSO-d62.276H,s,2xCH3,6.681H,s,4’-H,7.122H,s,2’-H,7.232H,s,SO2NH2,7.642H,d,J8.8,2x3-H,7.762H,d,J8.8,2x2-H,8.671H,s,NH,9.061H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6153.1C=O,尿素,143.8,140.1,138.7,137.7,127.7,124.7,118.3,117.1,22.02xCH3。4-{[4’-クロロフェニルアミノ]カルボニルアミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-124:4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを4-クロロフェニルイソシアナート0.44g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1晩攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、89.4の収率で白色固形物としてMST-124を得た。m.p239-240°C;シリカゲルTLCRf0.44酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3327N-H尿素,1652C=O尿素,1592芳香族;δH400MHz,DMSO-d67.242H,s,SO2NH2,7.382H,d,J8.8,2x2’-H,7.532H,d,J8.8,2x3’-H,7.642H,d,J8.8,2x3-H,7.762H,d,J8.8,2x2-H,8.971H,s,NH,9.131H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6153.1C=O,尿素,143.6,139.2,137.9,129.6,127.7,126.6,120.9,118.5。4-{[2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イルアミノ]カルボニルアミノ}ベンゼンスルホンアミドMST-125:5-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを5-インダニルイソシアナート0.46g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1晩攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、60.6の収率で白色固形物としてMST-125を得た。m.p233-235°C;シリカゲルTLCRf0.61酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3333N-H尿素,2844C-Haliphatic,1653C=O尿素,1592芳香族;δH400MHz,DMSO-d62.042H,appqt,J7.4,2’-H,2.854H,appqt,J7.4,2x1’-H,2x3’-H,7.161H,appd,J8.2,6’-H,7.191H,appdd,J8.21.6,7’-H,7.252H,s,SO2NH2,7.421H,s,4’-H,7.632H,d,J8.8,2x3-H,7.752H,d,J8.8,2x2-H,8.701H,s,NH,9.061H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6153.2C=O,尿素,145.2,143.9,138.4,137.6,127.8,125.2,118.3,117.7,115.7,onecarbonoverlappingsignal,33.48,32.64,26.153xCH2。4-{[[4-トリフルオロメチルフェニル]アミノ}カルボニルアミノ]ベンゼンスルホンアミドMST-126;4-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを4-トリフルオロメチル-フェニルイソシアナート0.54g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1晩攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、96.1の収率で白色固形物としてMST-126を得た。m.p281-283°C;シリカゲルTLCRf0.49酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3334N-H尿素,1657C=O尿素,1592芳香族;δH400MHz,DMSO-d67.272H,s,SO2NH2,7.662H,d,J8.8,2x3-H,7.724H,m,2x2’-H,2x3’-H7.782H,d,J8.8,2x2-H,9.241H,s,NH,9.261H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6153.0C=O,尿素,144.0m,C-1’,143.4C-4,138.2C-1,127.72xC-2,127.0q,3JC-F3.8,C-3’,125.4q,JC-F269,CF3,123.0q,2JC-F32,C-4’,119.02xC-2’,118.72xC-3;δF376.5MHz,DMSO-d6-60.13F,s。4-{[[3,5-ビストリフルオロメチルフェニル]アミノカルボニルアミノ]}ベンゼンスルホンアミドMST-127;3-アミノベンゼンスルファニルアミド0.50g;2.90mmolを3,5-ビストリフルオロメチルフェニルイソシアナート0.74g;2.90mmolで処理し、反応を室温で1晩攪拌し、先に報告した基本手順に記載したように処理して、81.4の収率で白色固形物としてMST-127を得た。m.p228-229°C;シリカゲルTLCRf0.62酢酸エチル/石油エーテル33;νmaxKBrcm-1,3374N-H尿素,1653C=O尿素,1596芳香族;δH400MHz,DMSO-d6H,7.272H,s,SO2NH2,7.692H,d,J9.0,3-H,7.711H,s,4’-H,7.792H,d,J9.0,2-H,8.162H,s,2x2’-H,9.431H,s,NH,9.541H,s,NH;δC100MHz,DMSO-d6153.2C=O,尿素,143.1,142.5,138.5,131.7q,2JC-F32,2xC-3’,127.72xC-2,124.2q,JC-F272,2xCF3,119.2m,2xC-2’,119.12xC-3,115.7m,C-4’;δF376.5MHz,DMSO-d6-61.76F,s。ウレイド置換された化合物MST-128-133材料及び方法無水溶媒およびすべての試薬はSigma-Aldrich,AlfaAesar及びTCIから購入した。空気または湿気敏感な化合物を含む反応はすべて乾燥したガラス容器、および溶液を移送するためのシリンジ技術を使用して窒素雰囲気下で行なった。赤外線IRスペクトルはKBrプレートで記録され、nhyd-1で表示した。核磁気共鳴1HNMR、13CNMR、DEPT、HSQC、HMBCスペクトルは、MeOH-d4又はDMSO-d6中でBrukerAdvanceIII400MHz分光計を使用して記録した。ケミカルシフトはppmppmで報告し、結合定数JはヘルツHzで表示する。スプリッティングパターンは以下のように示す:s、シングレット;d、ダブレット;sept、セプテット;t、トリプレット;q、カルテット;m、マルチプレット;brs、幅広シングレット;dd、二重のダブレット;appt、見掛け上のトリプレット;appq、見掛け上のカルテット。交換可能なプロトンOH及びNHの帰属はD2Oの添加によって確認した。分析的な薄層クロマトグラフィーTLCはMerckシリカゲルF-254プレート上で実施した。フラッシュクロマトグラフィー精製は、固定相としてMerckシリカゲル60230-400メッシュASTM上で、及び酢酸エチル/nヘキサン、又は、MeOH/DCMを溶離液に用いて行った。融点m.p.は開放系のキャピラリー中で測定し、未訂正である。3-3-4’-ヨードフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1283-3-4’-ヨードフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドA:m.p.256-258°C;νmaxKBrcm-1,3165,3265,1643,1589;δH400MHz,DMSO-d67.34-7.669H,m,Ar-H,SO2NH2,D2Oと交換,8.101H,d,J,2.1,2-H,8.791H,s,NH,D2Oと交換,9.081H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6153.1C=O,145.6,140.9,140.3,138.3,130.3,122.1,121.6,119.9,116.1,85.9;Elem.Anal.Calc.[C,37.42;H,2.90;N,10.07];Found[C,37.06;H,2.79;N,9.82];m/zESI418MNa。3-3-4’-フルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1293-3-4’-フルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドB:m.p.233-235°C;νmaxKBrcm-1,3377,3352,1685,1557;δH400MHz,DMSO-d67.171H,dd,J8.8,Ar-H,7.452H,s,SO2NH2,D2Oと交換,7.47-7.605H,m,Ar-H,8.101H,d,J,2.1,2-H,8.781H,s,NH,D2Oと交換,9.041H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6158.4d,JC-F237,C-4’,153.4C=O,145.6,141.1,136.6,130.3,122.0,121.2,119.8,116.3,116.1;δF376MHz,DMSO-d6-121.14;Elem.Anal.Calc.[C,50.48;H,3.91;N,13.58];Found[C,49.98;H,3.79;N,13.49];m/zESI311MNa。3-3-3’-ニトロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1303-3-3’-ニトロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドC:m.p.252-255°C;νmaxKBrcm-1,3380,3350,1689,1550;δH400MHz,DMSO-d67.412H,s,SO2NH2,D2Oと交換,7.48-7.644H,m,Ar-H,7.771H,dd,J7.2,2.1,Ar-H,7.871H,dd,J7.2,2.1,Ar-H,8.141H,d,J,2.1,2-H,8.631H,d,J,2.1,2’-H,9.231H,s,NH,D2Oと交換,9.311H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6153.3C=O,149.1,145.7,141.7,140.6,131.0,130.3,125.4,122.4,120.2,117.4,116.4,113.2;Elem.Anal.Calc.[C,46.43;H,3.60;N,16.66];Found[C,46.91;H,3.55;N,16.94];m/zESI337MNa。3-3-4’-アセチルフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1313-3-4’-アセトフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドD:m.p.267-269°C;νmaxKBrcm-1,3402,3351,2014,1933,1912,1593;δH400MHz,DMSO-d62.563H,s,CH3,7.412H,s,SO2NH2,D2Oと交換,7.48-7.553H,m,4-H,5-H,6-H,7.602H,d,J7.2,2x2’-H,7.972H,d,J7.2,2x3’-H,8.131H,t,J2.0,2-H,9.181H,s,NH,D2Oと交換,9.191H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6197.2CH3C=O,153.0C=O,145.7,145.0,140.7,131.6,130.5,130.4,122.2,120.2,118.2,116.2,27.2;Elem.Anal.Calc.[C,54.04;H,4.54;N,12.60];Found[C,54.31;H,4.47;N,12.96];m/zESI334MNa。3-3-2’-イソプロピルフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1323-3-2’-イソプロピルフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドE:m.p.175-176°C;νmaxKBrcm-1,3328,3300,1690,1556;δH400MHz,DMSO-d61.236H,d,J6.2,2x8’-H3,3.191H,sept,J6.2,7’-H,7.142H,m,Ar-H,7.351H,d,J7.2,Ar-H,7.372H,s,SO2NH2,D2Oと交換,7.59-7.704H,m,Ar-H,8.001H,s,NH,D2Oと交換,8.101H,t,J2.0,2-H,9.301H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6153.9C=O,145.6,141.3,140.7,136.1,130.3,126.7,126.2,125.2,124.7,121.7,119.5,115.8,27.8,24.0;Elem.Anal.Calc.[C,57.64;H,5.74;N,12.60];Found[C,58.14;H,5.73;N,12.70];m/zESI334MNa。3-3-パーフルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1333-3-パーフルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドF:m.p.224-227°C;νmaxKBrcm-1,3390,3287,1785,1560;δH400MHz,DMSO-d67.382H,s,SO2NH2,D2Oと交換,7.502H,m,Ar-H,7.631H,d,J7.2,Ar-H,8.091H,s,2-H,8.631H,s,ArNHCONH,D2Oと交換,9.471H,s,ArNHCONH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6152.9C=O,145.6,144.1d,J1C-F245,140.7,139.6d,J1C-F253,138.2d,J1C-F245,130.4,122.3,120.4,116.4,114.7t,JC-F12;δF376MHz,DMSO-d6-146.32F,dd,J19.24.8,2x2’-F,-159.21F,t,J22.9,4’-F,-164.02F,dt,J22.64.8,2x3’-F;Elem.Anal.Calc.[C,40.95;H,2.11;N,11.02];Found[C,40.68;H,1.74;N,11.00];m/zESI382MNa。表2:メタ-ウレイド置換されたスルホンアミドMST-128から133までのCAコントロールデータ。MST-134-148に対応するウレイドスルホンアミドの合成4-3-4’-クロロ-2-フルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1344-3-4’-クロロ-2-フルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミド:νmaxKBrcm-1,3166,3270,1640,1592;δH400MHz,DMSO-d67.26-7.303H,brs,SO2NH2,D2Oと交換,5’/6’-H,7.521H,dd,J,8.2,2.1,5’/6’-H,7.642H,d,J8.2,2x2/3-H,7.782H,d,J8.2,2x2/3-H,8.191H,dd,J9.0,8.23’-H,8.791H,s,NH,D2Oと交換,9.471H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6152.8d,J1C-F245,C-2’,152.7C=O,143.2,138.2,127.8,127.4,d,JC-F10,126.7d,JC-F10,125.6,122.5,118.4,116.6d,JC-F23;δF376MHz,DMSO-d6-126.38。4-3-4’-ブロモ-2’-フルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1354-3-4’-ブロモ-2’-フルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミド:νmaxKBrcm-1,3166,3270,1640,1592;δH400MHz,DMSO-d67.272H,s,SO2NH2,D2Oと交換,7.401H,d,J,9.25’/6’-H,7.643H,m,2x2/3-H,5’/6’-H,7.782H,d,J9.2,2x2/3-H,8.161H,t,J8.83’-H,8.791H,s,NH,D2Oと交換,9.481H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6152.8d,J1C-F245,C-2’,152.7C=O,143.2,138.2,128.5,127.9,127.7d,JC-F6,122.8,119.2d,JC-F22,118.4,114.0d,JC-F9;δF376MHz,DMSO-d6-126.38。4-3-2’-フルオロ-5’-ニトロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1364-3-2’-フルオロ-5’-ニトロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミド:νmaxKBrcm-1,3166,3270,1640,1592;δH400MHz,DMSO-d67.282H,s,SO2NH2,D2Oと交換,7.601H,dd,J,9.26.8,6’-H,7.702H,d,J9.2,2x2/3-H,7.802H,d,J9.2,2x2/3-H,7.961H,m,4’-H,9.131H,s,NH,D2Oと交換,9.181H,m,6’-H,9.571H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6156.0d,J1C-F251,C-2’,154.8C=O,144.9,142.9,138.6,129.3d,JC-F12,127.9,119.0d,JC-F9,118.7,117.0d,JC-F22,115.7;δF376MHz,DMSO-d6-119.43。4-3-2’,4’,5’-トリフルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1374-3-2’,4’,5’-トリフルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミド:νmaxKBrcm-1,3166,3270,1640,1592;δH400MHz,DMSO-d67.272H,s,SO2NH2,D2Oと交換,7.683H,m,2x2/3-H,3’-H,7.782H,d,J9.2,2x2/3-H,8.221H,m,6’-H,8.581H,s,NH,D2Oと交換,9.471H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6152.7C=O,148.2dd,J1C-F240,12.2,146.4d,J1C-F237,15.8,144.4dd,J1C-F250,12.0,143.3,138.3,127.8,125.0m,118.5,109.5dd,JC-F24.5,2.9,106.4dd,JC-F25.6,22.0;δF376MHz,DMSO-d6-130.64d,JF-F13.9,-141.75m,-143.06d,JF-F24.4。4-3-2’-フルオロ-5’-トリフルオロメチルフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1384-3-2’-フルオロ-5’-トリフルオロメチルフェニルウレイドベンゼンスルホンアミド:νmaxKBrcm-1,3166,3270,1640,1592;δH400MHz,DMSO-d67.282H,s,SO2NH2,D2Oと交換,7.471H,m,4’-H,7.551H,dd,J10.88.8,3’-H,7.672H,d,J8.8,2x2/3-H,7.792H,d,J8.8,2x2/3-H,8.631H,m,6’-H,9.031H,s,NH,D2Oと交換,9.561H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6154.0d,J1C-F247,C-2’,152.8C=O,143.0,138.5,129.30d,JC-F11.3,127.9,126.2dd,JC-F31.8,3.3,123.5,120.7m,118.6,117.7,117.0d,JC-F20.5;δF376MHz,DMSO-d6-60.73F,C-F3,-123.81F,2’-F。4-3-2’-フルオロ-3’-トリフルオロメチルフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1394-3-2’-フルオロ-3’-トリフルオロメチルフェニルウレイドベンゼンスルホンアミド:νmaxKBrcm-1,3166,3270,1640,1592;δH400MHz,DMSO-d67.272H,s,SO2NH2,D2Oと交換,7.432H,m,5’-H,6’-H,7.652H,d,J8.8,2x2/3-H,7.792H,d,J8.8,2x2/3-H,8.461H,m,4’-H,8.961H,s,NH,D2Oと交換,9.531H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6152.7C=O,150.0d,J1C-F250,C-2’,143.1,138.3,129.4d,JC-F9,127.8,125.9d,JC-F43.9,124.9,122.2,120.4,118.7,117.5dd,JC-F32.1,3.2;δF376MHz,DMSO-d6-59.83F,d,JF-F13.2,C-F3,-132.21F,q,J13.2,2’-F。4-3-2’,3’,4’-トリフルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1404-3-2’,3’,4’-トリフルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミド:νmaxKBrcm-1,3166,3270,1640,1592;δH400MHz,DMSO-d67.272H,s,SO2NH2,D2Oと交換,7.342H,m,5’/6’-H,7.652H,d,J8.8,2x2/3-H,7.772H,d,J8.8,2x2/3-H,7.881H,m,5’/6’-H,8.821H,s,NH,D2Oと交換,9.451H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6152.9C=O,146.6d,J1C-F237,143.2,141.8d,J1C-F240,139.6d,J1C-F242,138.3,127.8,126.0m,118.5,116.7m,112.6dd,JC-F18,4;δF376MHz,DMSO-d6-143.11F,d,JF-F21.7,2’/4’-F,-148.41F,d,JF-F21.7,2’/4’-F,-161.11F,t,JF-F21.7,3’-F。4-3-2’-フルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1414-3-2’-フルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミド:νmaxKBrcm-1,3166,3270,1640,1592;δH400MHz,DMSO-d67.071H,m,3’-H,7.201H,m,4’-H,7.263H,brs,SO2NH2,D2Oと交換,5’-H,7.642H,d,J8.8,2x2/3-H,7.802H,d,J8.8,2x2/3-H,8.201H,m,6’-H8.701H,s,NH,D2Oと交換,9.461H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6153.1d,J1C-F240,152.9C=O,143.4,138.1,128.1,127.8,125.4,123.8,121.7,118.3,116.6d,JC-F19;δF376MHz,DMSO-d6-129.59。4-3-2’,4’-ジフルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1424-3-2’,4’-ジフルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミド:νmaxKBrcm-1,3166,3270,1640,1592;δH400MHz,DMSO-d67.081H,m,3’/5’-H,7.252H,s,SO2NH2,D2Oと交換,7.361H,m,3’/5’-H,7.642H,d,J8.8,2x2/3-H,7.782H,d,J8.8,2x2/3-H,8.111H,m,6’-H,8.641H,s,NH,D2Oと交換,9.411H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6158.1dd,JC-F243,13,153.4dd,JC-F244,12,153.0C=O,143.4,138.1,128.1,127.8,124.5d,JC-F9,123.2d,JC-F8,118.4,112.0d,JC-F21,104.8t,JC-F25;δF376MHz,DMSO-d6-117.52,-124.3。4-3-3’-クロロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1434-3-3’-クロロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミド:νmaxKBrcm-1,3166,3270,1640,1592;δH400MHz,DMSO-d67.071H,d,J8.8,4’-H,7.252H,s,SO2NH2,D2Oと交換,7.332H,m,5’-H,6’-H,7.642H,d,J8.8,2x2/3-H,7.773H,m,J8.8,2x2/3-H,2’-H,9.041H,s,NH,D2Oと交換,9.171H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6153.1C=O,143.5,141.8,138.0,134.1,131.3,127.7,122.7,118.7,118.6,117.8。4-3-2’,5’-ジクロロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1444-3-2’,5’-ジクロロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミド:νmaxKBrcm-1,3166,3270,1640,1592;δH400MHz,DMSO-d67.151H,dd,J8.82.8,4’-H,7.282H,s,SO2NH2,D2Oと交換,7.551H,dd,J8.82.8,3’-H,7.642H,d,J8.8,2x2/3-H,7.792H,d,J8.8,2x2/3-H,8.351H,d,J2.8,6’-H,8.601H,s,NH,D2Oと交換,9.901H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6152.7C=O,143.1,138.4,137.8,132.9,131.5,127.9,124.0,121.3,121.1,118.7。4-3-2’-クロロ-5’-ニトロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1454-3-2’-クロロ-5’-ニトロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミド:νmaxKBrcm-1,3164,3271,1641,1592;δH400MHz,DMSO-d67.292H,s,SO2NH2,D2Oと交換,7.702H,d,J8.8,2x2/3-H,7.823H,m,2x2/3-H,3’-H,7.931H,dd,J8.92.2,4’-H,8.841H,s,NH,D2Oと交換,9.201H,d,J2.2,6’-H,9.991H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6152.7C=O,147.5.142.9,138.6,137.7,131.3,128.9,127.9,118.8,118.5,115.6。4-3-2’-クロロ-4’-トリフルオロメチルフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1464-3-2’-クロロ-4’-トリフルオロメチルフェニルウレイドベンゼンスルホンアミド:νmaxKBrcm-1,3169,,1639,1560;δH400MHz,DMSO-d67.292H,s,SO2NH2,D2Oと交換,7.692H,d,J8.8,2x2/3-H,7.741H,dd,J8.84.0,5’-H,7.802H,d,J8.8,2x2/3-H,7.921H,dd,J4.0,3’-H,8.501H,d,J8.8,6’-H,8.761H,s,NH,D2Oと交換,10.01H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6152.5,143.0,140.4,138.5,128.7,127.9,127.2m,125.8m,124.0d,JC-F33.0,13.2,122.7,121.4;δF376MHz,DMSO-d6-60.42。4-3-2’,6’-ジフルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1474-3-2’,4’-ジフルオロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミド:νmaxKBrcm-1,3164,3270,1641,1590;δH400MHz,DMSO-d67.334H,m,SO2NH2,D2Oと交換,2x5’-H,7.371H,m,4’-H,7.642H,d,J8.8,2x2/3-H,7.762H,d,J8.8,2x2/3-H,8.301H,s,NH,D2Oと交換,9.381H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6158d,J1C-F247,C-2’,C-6’,153.27C=O,143.7,138.0,128.3m,127.7,118.5,115.9t,JC-F16,C-4’,112.6d,JC-F23,2xC-3’;δF376MHz,DMSO-d6-118.73。4-3-パークロロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミドMST-1484-3-パークロロフェニルウレイドベンゼンスルホンアミド:νmaxKBrcm-1,3168,3275,1641,1590;δH400MHz,DMSO-d67.242H,m,SO2NH2,D2Oと交換,7.642H,d,J8.8,2x2/3-H,7.752H,d,J8.8,2x2/3-H,8.291H,s,NH,D2Oと交換,9.381H,s,NH,D2Oと交換;δC100MHz,DMSO-d6153.2C=O,142.0,139.2,130.1overlappingsignals,127.4,125.5。表3:ウレイド置換されたスルホンアミドMST-134-148でのCA抑制データ残りの実施例については、以下の方法および追加情報は有用な参照になる。細胞培養および低酸素暴露マウス乳癌細胞株4T1、66cl4および67NR、並びにヒト乳癌細胞株MDA-231およびMDA-231LM2-4を発現させるルシフェラーゼの習得、生成および培養が以前に記述されたLouetal,2008DevDyn237:2755-2768;Louetal,2011CancerRes,71:3364-3376。低酸素内培養については、細胞を、密封した嫌気性ワークステーション中の調湿されたインキュベータ中で、N2でバランスされた1O2および5CO2の中で37°Cに維持した。安定した細胞の発生マウスCAIXおよび非サイレンシング配列開放生物システムをターゲットとするshRNAmirベクターを、メーカーの指示によるLipofectAMINEPLUSTMInvitrogenLifeTechnologiesを使用して、90コンフルエントな細胞へトランスフェクトした。プロマイシンの以前の利用により、トランスフェクトされた細胞を、ヒグロマイシンを使用して選抜した。安定したshCAIXクローンを、限定的希釈クローニングによって誘導した。細胞の中への再CAIXの導入については、ヒトCAIXDr.JacquesPouyssegur,UniversityofNiceからの贈り物を、同一の手順に従って4T1細胞へトランスフェクトし、そして、Zeocinを選抜に用いた。細胞外pHの測定溶液pHの変化は、以前に公表された29、42、43手順を使用して評価した。簡単に言えば、細胞は、60mmの皿中で適切な密度4T1細胞およびそのトランスフェクトされた誘導体については1x104細胞/cm2、66cl4細胞については2x104細胞/cm2、67NR細胞およびそのトランスフェクトされた誘導体については1x104細胞/cm2で平板培養し、一晩回復させた。次に、3mlの新鮮な媒体/皿の基準容積を添加した。そして、細胞を、酸素正常状態空気5のCO2又は低酸素窒素でバランスされた1のO2および5のCO2中で72時間培養した。酸素正常状態及び低酸素中で育てられた培養物が同様のコンフルエンスにあって媒体収集のときに同様の菌体数を含んでいることを確認する点に注意した。集めた使用済みの媒体は37°Cに維持し、pHは直ちにディジタルpH計を使用して測定した。与えられた細胞株用菌体数が両方の環境要因において比較可能であったことを保証するために細胞計数を行なった。qRT-PCRおよびウエスタンプロット解析のために、細胞を氷の上で収穫した。薬理学的インヒビタースルホンアミドMST-017の化学的特性は、以前に、称呼CAI17の下で記述されたSupuran,C.2008,Nature,Vol7:168-181。ウレイドスルホンアミドは新しい。生体外の試験のために、化合物は、DMSO中に溶解し、-80°Cで保管し、適用直前に培地へ希釈した。サブコンフルエントな細胞は酸素正常状態または低酸素中で72時間MST-017で培養し、PBS中で3回洗浄し、ZeissAxioplanTM落射蛍光顕微鏡を使用して画像化した。生体内の試験のために、MST-017インヒビターを腹腔注射で最初の2回分は静脈注射で75mg/kgおよび150mg/kgの用量を週3回、2週間に亙り投与した。他のインヒビターのための投与濃度および計画は、以下の適切な実施例において示される。化合物は注射に先立ってPEG400/エタノール/食塩水中で可溶化した。インヒビター濃度が変えられるように、ビヒクル成分は一定に維持された。mRNAおよびタンパク質発現の分析定量的リアルタイムPCRqRT-PCRは、RocheUniversalProbeLibraryUPLを使用して、メーカーの指示に従って、AppliedBiosystems器機上の384穴ウエルプレート中で実施した。簡単に云えば、サブコンフルエントな細胞又は凍結した組織切片のいずれかからのRNA合計の1μgを、cDNAを作成するために使用した。100nMのUPLプローブ、200nMの各プライマーInvitrogenおよびTaqManTMPCRマスターミックスAppliedBiosystemsを含んでいるqRT-PCR混合物の10μlを、PCR44の40サイクルに対する各ウエルにロードした。相対的な遺伝子発現定量化データは、ABIプリズム7900HT配列検出体SequenceDetectionSystemおよびハウスキーピング遺伝子としてのアクチン-βを使用する標準2-ΔΔct法を使用して、取得し分析した。免疫ブロット法のために、細胞又はフラッシュ凍結した腫瘍組織を、適切なインヒビターで補足した1トリトンX-100のバッファー50mMのHepes、pH=7.5、150mMのNaCl、10のグリセリン、1mMのEGTAおよび2mMのEDTA中に溶解した。等しい量のタンパク質をSDA-PAGEゲル剤にロードした。分解の前にHIF-1αの検出を強化するために、等密度における細胞を低酸素中で4xSDSローディングバッファー中に直接溶解した。ウェスタンブロットは、マウスCAIX1:500、HIF-1α1:250およびヒトCAIX1:1000全て、RDSystemsから入手およびβ-アクチン抗体1:10,000、Sigmaを使用して行なった。マウス腫瘍モデル動物試験および手順はすべて、BCCancerResearchCentreのInstitutionAnimalCareCommitteeおよびUniversityofBritishColumbiaVancouver,BC,Canadaによって承認されたプロトコルに従って行った。先天性の同所性の腫瘍および自然発生的転移以前に記述されたようにLouetal,2011CancerRes71:3364-3376;Louetal,2008DevDyn237:2755-2768、4T1細胞1x106又は67NR細胞2x106を、7-9週齢の雌BALB/cマウスの第4乳房状脂肪パッドへ同所性的に移植した。この大きさの菌体数の注射はこれらの腫瘍の繁殖には標準で、よく腫瘍成長の他のモデル中に使用される数未満であるErler,JT.Bennewith,KL,.Icolau,M.Nature440:1222-1226。原発腫瘍成長速度は修正楕円体の式LxW2/2を使用して、キャリパ測定から計算した。腫瘍生成及び転移の進行は以前に記述されたような生物発光の画像化を使用して、モニターし定量したEbosetal.,2009CancerCell15:232-239.;Louetal.,2008DevDyn237:2755-2768。実験的な転移アッセイCAIXの遺伝的消耗を含む試験のために、4T1または67NRの細胞5x105を、7-9週齢の雌BALB/cマウスの尾静脈に直接注入した。マウスは、転移の生長をフォローアップするために1週間に1回、画像処理した。マウスを注射後20日に安楽死させ、肺は、詳しい分析のために切除した。肺中の全腫瘍組織量は肺表面上に見える小結節を手作業で数えることにより定量した。試験のために、4T1細胞1-5x105は、スルホンアミドインヒビターを使用して、上記の様に注入したPacchianoetal,2011JMedChem54:1896-1902。ヒト異種移植腫瘍CAIX消耗を含む試験のために、50Matrigel/PBS溶液中に懸濁した1x107MDA-MB-231細胞を、6-8週齢雌のNOD.CB17-prkdcscid/Jマウスに皮下移植した。原発性の胸壁腫瘍異種移植のために、2x106細胞は、MDA-MB-231のLM2-4Luc変種Ebosetal,2009CancerCell15:232-239を使用して、上述したようにマウスに同所性的に移植した。腫瘍が200mmの3に達したとき、療法を始めた。両方のモデルに対して、腫瘍成長はキャリパ測定によってモニターした。3DMatrigel浸潤アッセイ以前に記述されたようにLeeetal,2007NatMethods4:359-365、3Dオントップマトリゲルmatrigel培養物アッセイを行なった。簡単に云えば、MDA-231LM2-4Luc細胞1.5x104細胞/cm2を、2xインヒビターの終末濃度を含んでいる100μl/ウエル増殖培地中に再懸濁し、そしてマトリゲルであらかじめコーティングされた8ウエルチェンバースライドの中へ平板培養した。ウエルの中心での細胞群生を防ぐために、細胞を10-15分ごとに横方向の攪拌に45分間付した。10のマトリゲルを含んでいる追加的な100のμl/ウエル媒体を細胞に添加して、培養物を4日間低酸素中で培養した。像を取得し、培養物は、Leeetal,2007NatMethods4:359-365中に概説された全体の培養物固着法を使用して、TUNEL用に固定した。腫瘍球体培養物4T1細胞は、5のウシ胎仔血清FBSSigmaを含むDMEMGibco中で、毎週2回のサブ培養で単層として育成した。続いて、shNSおよびshCAIX4T1は、メーカーの指示に従って、マモカルトmammocult媒体StemCellTechnologies,Vancouver,B.C.,Canada中で腫瘍球体tumorspheresとして培養した。Tumorspheresは、腫瘍細胞が特定の増殖条件FillmoreandKuperwasser,2008BreastCancerRes.10:R25の下、生体外で培養されるときに、生ずる被着剤癌細胞からできている3-次元構造多くの場合形において球状である。腫瘍球体は、通常浮遊培養中で成長し、生体内の腫瘍に対する生体外の代理と考えられる。細胞数測定分析フロー4T1腫瘍球体は、トリプシンで培養し、HFバッファー2のウシ胎仔血清を含むHBSS中で一度洗浄し、次に100ulHF中の106個の細胞について抗体の抗-CD24-APCおよび抗-CD44-PECy7を使用する0.3μlで染色し、氷の上で10分間培養した。培養に続いて、細胞をHFバッファーで一度洗浄し、4’,6-ジアミジノ-2-フェニルインドールDAPI;終濃度、1μg/mlを含む300ulHF緩衝剤中に再懸濁した。細胞は、アリアセルソータBDBiosciences,SanJose,CA,USA上で分離した。実際の細胞は前方および側面散乱に基づきゲート制御し、単離細胞は前方散乱およびパルス幅に基づきゲート制御した。ゲートは、未染色の細胞、アイソタイプ特有のコントロール、及び単回染色、の分析によって決定した。CD44CD24-/low又はCD44CD24細胞は、得られた細胞数が少なかったため、純度評価はしなかった。フローサイトメーターの細胞カウンターを、菌体数決定のために使用した。細胞を、DMEM媒体又はHFバッファーに集めた。免疫組織化学腫瘍切除の2時間前に、マウスに、1500mg/kgのBrdUrdSigmaおよび60mg/kgのピモニダゾールChemiconを含む食塩水を腹腔内注射し、及び、5分前にDiOC7370μl、0.6mg/ml;MolecularProbesを静脈注射した。連続する腫瘍低温切片10μmは、CryostarTMHM560MicromInternationalでカットし、24時間空気乾燥し、血流を視覚化するためにDiOC73のための組織蛍光を画像化した。切片は、50v/vのアセトン/メタノール中で室温で10分間固定した。染色は、脈管構造については抗PECAM/CD31抗体1:2000クローン、2H8,BDPharmingenおよびAlexa647抗ハムスター第二紀1:200,Invitrogenを使用して、低酸素症については多クローンのラビット-抗-ピモニダゾール1:2000,HydroxyprobeInc.およびAlexa488抗ラビット第二紀1:200,MolecularProbesを使用して、アポプトーシスについてはTMRレッドのタグ付けしたdUTPを持ったTUNELRoche診断法RocheDiagnosticsを使用して、それぞれ行った。螢光画像化スライドを蒸留水に10分間転送した後、引き続き、2MのHClで1hの処理および0.1Mのホウ酸ナトリウムで5分の中和を行った。DNAを組み込まれたBrdUrdを、単クローンのラット抗BrdUrd1:500、クローンBU1/75、Sigmaおよび抗マウスペルオキシダーゼ接合体抗体1:200,Sigma並びに金属で強められたDAB基質1:10,Pierceを使用して、検出した。ヘマトキシリンで逆染色されたスライドは画像化の前に脱水し、PermountFisherScientificを使用してマウントした。以前に記述されたようにKyle,AH.,Huxham,LA.,Yeoman,DM.,etal2007.ClinCancerRes13:2804-2810、画像習得および分析を行った。以前に記述された如くLuoetal.、パラフィンに包埋された腫瘍切片を、CAIX用原発腫瘍用に1:100、肺転移用に1:50、SantaCruzBiotechnologyに、およびHIF-1α用1:100、RDSystems用に、染色した。リンパ脈管新生lymphangiogenesis試験のために、凍結組織切片を、2のPFAで20分間固定し、及び、湿潤容器中において、10のウシ血清アルブミンおよび2のヤギ血清を含むPBS中に溶解したラビット抗-LYVE-11:100,RDSystemsおよびラット抗CD311:100,BDPharmigenにより室温で1時間染色した。Alexa488抗ラビットおよびAlexa546抗ラット抗体を、二次的な抗体として1時間使用し、マウンティング用のDAPI核逆染色を含むVectashield封入剤VectorLaboratoriesをそれに続けた。[細胞増殖アッセイ]細胞増殖は、メーカーの指示によるMTT細胞増殖キットRocheAppliedScienceを使用して測定した。簡単に言えば、細胞を5x103細胞/cm2の密度で96穴プレート中で平板培養し、一晩回復させた。次に、パラレルサンプルは、アッセイを行なう前に48~72h間酸素正常状態及び低酸素中で培養した。[アポプトーシスアッセイ]TUNEL標識化RocheAppliedScienceを、ほとんどメーカーの指示に従って、アポプトーシス分析アッセイのために採用した。簡単に云えば、カバーガラス上で育てたサブコンフルエントな細胞を、1の血清中で、酸素正常状態又は低酸素下で48時間培養し、4のパラホルムアルデヒド中で60分間固定し、空気乾燥し、室温で、PBSおよび0.1のトリトン-X-100中で10分間透過処理した。細胞層は、次に、TUNEL試薬で37°Cで60分間培養し、PBS中で洗浄し、H33342の1:10,000稀釈液で逆染色して、27であった。[歴史上の臨床分析]1986年から1992年までのBritishColumbia州の侵襲性の乳癌の新しい診断を受けた4,444人の患者の組織マイクロアレイは、中央のエストロゲン受容体研究所に提出された腫瘍標本から生み出された。TMAを生み出すために使用された方法が記述されているCheang,MD.,Chia,SK.,Vodu,Detal.2009.JNatlCancerInst101:736-750。TMAコホートcohortが発現しているのは、この間に分析されたすべての乳癌事例のおよそ70であって、全てがBritishColumbiaCancerAgencyに関係していた。3,630のケースは、全てのバイオマーカーのアセスメントにとって、適切な腫瘍および染色結果を有していた。以前に記述されたようにCheangMDら、ER、PR、HER2、CK5/6、EGFRおよびKi67に対する免疫組織化学が連続切片上で同時に実施され、スコア付けされた。CAIX発現は、ネズミ科の単クローン抗体M75;1:50を使用して評価されたChoi,SW.,Kim,JY.,Park,JY.2008HumPathol39:1317-1322。CAIX発現のスコア付けは、0:染色なし又は1:染色ありのいずれかであり、2人の病理学者によって独立に、ブラインド的に実施された。試験の事前認可はBritishColumbia大学の倫理委員会から得られた。[統計分析]結果は、Excelソフトウェア中でデータ分析ToolPackDataAnalysisToolPackTMを使用して、統計分析にかけた。両側のp値は、学生のt検定を使用して計算した。データは、p<0.05に対して重要な意義を持つと考えられた.臨床的転帰に対して、統計分析は、SPSS13.0Chicago,IL,S-Plus6.2Seattle,WAおよびR2.1.1http://www.r-project.orgを使用して行なった。単変量解析中で、BCSS原発性又は根本的な原因としての乳癌での死亡日に対する原発性乳癌の診断の日付およびRFS局所的か、局地的か、遠方の再発日付に対する原発性乳癌の診断の日付および遠方のRFS遠方の再発日付に対する原発性乳癌の診断の日付を、Kaplan-Meierカーブによって推測した。Log-ランク試験を、生存差を推測するために使用した。多変量解析のために、Cox比例ハザードモデルを、調整された危険比率および有意を推測するために使用した。比例ハザードモデルの妨害を評価するために、重みが加えられたSchoenfeld残余の平滑化されたプロットを使用した。実施例2CAIXは、乳癌患者の大きな集団cohort中の予後マーカーである。乳癌を含むいくつかのタイプの癌中のCAIX発現が、以前に記述されたような患者の予後不良と関連すると従来の試験は報告したが、標本数は比較的小さく、均一でない補助的な治療であった。標準化された治療に付した多くのサンプル集団中で重要な予後マーカーとしてCAIXを検証するために、我々は、10.5年の中間フォローアップを持った3992の患者サンプルを含む原発性の胸壁腫瘍組織マイクロアレイTMA中のCAIX発現を解析した。TMAを生み出すために使用された方法が記述されているCheang,MD.,Chia,SK.,Vodu,Detal.2009.JNatlCancerInst101:736-750。TMAコホートcohortが発現しているのは、この間に分析されたすべての乳癌事例のおよそ70であって、全てがBritishColumbiaCancerAgencyに関係していた。CAIX発現は、ネズミ科の単クローン抗体M75;1:50を使用して評価したChoi,SW.,Kim,JY.,Park,JY.2008HumPathol39:1317-1322。CAIX発現のスコア付けは、0:染色なし又は1:染色ありのいずれかであり、2人の病理学者によって独立に、ブラインド的に実施された。試験の事前認可はBritishColumbia大学の倫理委員会から得られた。[統計分析]結果は、Excelソフトウェア中でデータ分析ToolPackDataAnalysisToolPackTMを使用して、統計分析にかけた。両側のp値は、学生のt検定を使用して計算した。データは、p<0.05に対して重要な意義を持つと考えられた.臨床的転帰に対して、統計分析は、SPSS13.0Chicago,IL,S-Plus6.2Seattle,WAおよびR2.1.1http://www.r-project.orgを使用して行なった。単変量解析中で、BCSS原発性又は根本的な原因としての乳癌での死亡日に対する原発性乳癌の診断の日付およびRFS局所的か、局地的か、遠方の再発日付に対する原発性乳癌の診断の日付および遠方のRFS遠方の再発日付に対する原発性乳癌の診断の日付を、Kaplan-Meierカーブによって推測した。Log-ランク試験を、生存差を推測するために使用した。多変量解析のために、Cox比例ハザードモデルを、調整された危険比率および有意を推測するために使用した。比例ハザードモデルの妨害を評価するために、重みが加えられたSchoenfeld残余の平滑化されたプロットを使用した。CAIX発現は評価可能な腫瘍の15.6で見られた。そして、CAIXは、基礎の乳癌で最も高い相関51および管腔のAサブタイプ中で低い割合8となり、生物学的なサブタイプ中に差別的に発現した下記の表5。Kapla-Meier分析中で、CAIX発現は無再発性生存期間図1A、遠隔無再発性生存期間図1Bおよび乳房癌特有の生存期間図1Cと深く関係し、統計的有意性の非常な高水準を達成したそれぞれ、p<10-17,p<10-16,andp<10-13,respectively。10年の遠隔無再発性生存期間および乳癌特有の生存期間の、CAIXネガティブの群に対するCAIXポジティブの群おける具体的な割合が、それぞれ、73に対して57、および78に対して62であった。標準的予後変数および生物学的なサブタイプをすべて含む多変量解析中で、CAIX発現は、1.4の危険比率で強い独立した貧弱な予後因子のままであった。これらのデータは、CAIXが多くの乳癌患者中の予後のマーカーであることを示した従来の試験の結果を確認し拡張する。この実施例は、本発明の化合物が、転移に敏感ないかなる癌に対しても、又はCAIX患者の減少した生存と関連する大きな患者データバンク中で示される標的を過剰発現している癌に対してもに対しても、治療になるという証拠を提供する。表4.生物学的なサブタイプによるCAIX発現上記で、LumAは管腔Aである;LumBは管腔Bである;ERはエストロゲン受容体である;PRはプロゲステロン受容体である;EGFRは上皮の成長因子レセプターである;及び、veはポジティブである。実施例3転移性4T1腫瘍は低酸素症およびCAIX発現によって特徴付けられる。図2は細胞培養、生物発光の標識化を持ったマウスモデル及び3つの腫瘍細胞株についての低酸素誘発された遺伝子発現表を示す。簡単に云えば、安定してルシフェラーゼを発現する転移性4T1、66cl4及び、非転移性67NRマウス乳房腫瘍細胞株を、マウスの乳房状脂肪パッドに接種した。腫瘍生成および転移の進行を生物発光画像化によってモニターした。原発腫瘍細胞をレーザー顕微解剖によって分離した。そして、識別的遺伝子発現分析は、分離された腫瘍細胞について行なった。B各細胞モデルからの3匹のマウスからの腫瘍組織は、低酸素症に誘発された遺伝子発現高発現、暗;低発現、明を解析した。非転移性の67NR腫瘍は高い脈管密度を示し、低酸素症が大部分は欠けていて、アポトーシスの細胞の数は低かった。対照的に、転移細胞株から誘導された原発腫瘍特に4T1細胞株は貧弱に導管化され、アポトーシス細胞数を多く持った低酸素症および壊死の広い領域を有していた図2。これらの腫瘍中で確認された低酸素で誘導可能な遺伝子の中で、CAIXの発現は特に、両方の転移性変種中で上昇した図2および2。我々は、転移性腫瘍中の原形質膜に頑丈なレベルのCAIXタンパク質が局在化されることを観察したが、一方、CAIX発現は非転移性67NR腫瘍には不在であった。原発腫瘍中のCAIX過剰発現を示すウェスタンブロットが、図3に再現されている。NMG=正常な乳腺。ベータアクチンはローディング管理の役を務めた。これらのデータは、低酸素症に誘発されたCAIX発現が原発性の胸壁腫瘍の転移の可能性の増加にとって重要であり得ることを示す。実施例4低酸素症中のCAIX発現、pH調節および細胞生存に関しての4T1モデルの検証これらの実験のために、4T1細胞を、酸素正常状態または低酸素の中に48時間培養した。そして、CAIX発現のレベルは、ベータアクチンをコントロールとし、qRT-PCRおよびウェスタンブロットを使用して解析した。データは平均±s.e.mとして表わされる。n=3、P<0.005、P<10-3。第二ステップとして、非サイレンシングshRNAshNS又はCAIXshCAIXをターゲットとするshRNAを発現する4T1細胞Bを72時間培養した。shCAIXを発現する独立した2つのクローンC2、C5を解析した。データは平均±s.e.mとして表わされる。n=3.P<0.0005、酸素正常状態中で培養された細胞と比べて。4T1細胞のCAIX遺伝子発現はマウスCAIXをターゲットとする構成物を安定して発現することにより沈黙silencedさせられ、CAIXの低酸素症に誘発されたCAIX発現を阻害するshRNAの効能を決定するために低酸素中で細胞を培養した。このように、転移性細胞株特に4T1細胞株が低酸素に応じてCAIX発現を誘発した図4A。対照的に、低酸素中の培養は、非転移の細胞株67NR中のCAIX発現を誘発しなかった。非サイレンシングコントロールshRNAshNSを発現する4T1細胞は、低酸素中のCAIXの発現を劇的にアップレギュレートした図4B。しかし、低酸素に誘発されたCAIX発現は、CAIXshCAIX;図4BをターゲットとするshRNAを発現する、2つの独立したクローンC2、C5中で著しく減じられた。CAIXは、細胞内および細胞外pHの調節を通じて腫瘍pHの制御に機能的に連結される。低酸素に誘発された細胞外のアシドーシスはCAIXの生物学的活性の指標である。低酸素中の細胞外の媒体の酸性化は、親及びshNS発現する4T1細胞に呼応して、shCAIXを発現する4T1クローン中で遮断される。このことは、CAIX遺伝子発現を沈黙させることsilencingが転移性4T1細胞のpH調節の機能的な抑制を誘発することを示唆している。CAIXを失った4T1細胞は低酸素で培養されたとき、非サイレンシングコントロール細胞と比較して、増加した細胞死を示した図5。これは、CAIXが低酸素環境中の転移の乳癌細胞の生存にとって重要であることを示唆する。実施例5[生体内検証]4T1マウス胸壁腫瘍モデル中のCAIXの安定した消耗は、図6中で示される様に、原発腫瘍生長及び転移を阻害する。具体的には、4T1腫瘍モデルを使用する自然発生的な転移の代表的な生物発光の画像が、この発見を実証するために使用される。疑似カラーヒートマップ明、最も強くはない;暗、最も強いを階調スケール身体イメージに被せて示す。これらの試験のために、shNS又はshCAIXを発現している4T1細胞及び親の4T1細胞を、BALB/cマウスの乳腺へ接種した。動物を腫瘍成長のためにモニターした。各群に対してn=10.結果は平均±s.e.mとして表わされる。は、対照群からの原発腫瘍切除の完了を示す。shNS基と比較した、両側スチューデントt検定を有するP<10-11。結果は、CAIXに消耗した細胞から確立された腫瘍が最初の腫瘍成長の後に著しく逆行した一方、4T1細胞が、30日間しっかりと成長する腫瘍を容易に形成することを示す。図6A。試験の終わりごろに、原発腫瘍再発を有する2匹のマウス現われるだけなので、腫瘍の退行は安定しているように見えた図6B。このように、CAIX発現の消滅はマウスの粗生存率の上に劇的効果を有している。CAIXを発現する腫瘍を持つ動物は累進的な転移性の疾病のために死ななければならないが、CAIXを枯渇させた4T1細胞を接種した動物の生存率は、100のままであった。CAIX発現は、CAIXを枯渇させた4T1細胞から誘導された腫瘍中でダウンレギュレートされる。このモデル中の腫瘍成長抑制がCAXIIが存在する状態で生じており、CAIXが低酸素症の胸壁腫瘍の生存および生長については重大な酵素であることを示唆しており、shCAIX4T1腫瘍及びコントロール腫瘍の間のCAXIIの発現レベルで差はない。実施例6胸壁腫瘍モデル4T1マウス胸壁腫瘍モデル中のCAIXの安定した消耗は、原発腫瘍生長及び転移を阻害する。図6Aでは、4T1腫瘍モデルを使用する自然発生的転移が、階調スケールの本体画像に被せた生物発光ヒートマップより明るい、最も極度でない;より暗い、最も極度を使用して視覚化されている。BshNS又はshCAIXを発現している4T1細胞及び親の4T1細胞を、BALB/cマウスの乳腺へ接種した。10動物を腫瘍成長のためにモニターした。矢印は、動物数の変化を示す。そして、訂正された値が示されている。結果は平均±s.e.mとして表わされる。は、対照群からの原発腫瘍切除の完了を示す。shNS基と比較された両側スチューデントt検定を有するP<10-11。CAIXshRNAを持ったヒト乳癌MDA-MB-231細胞株中のCAIX消耗は、親及び非サイレンシングコントロール細胞に比べてこれらの細胞中で低酸素症に誘発されたCAIX発現の著しい抑制を示す図7。さらに、CAIXの消耗は、MDA-MB-231異種移植片の腫瘍成長を劇的に減ずる。図7は、ヒト胸壁腫瘍モデル中のCAIXの安定した消耗が原発腫瘍生長を阻害するという証拠を示す。shNSまたはshCAIXを発現するMDA-MB-231細胞、および親のMDA-MB-231細胞を、NOD.CB17-prkdcscid/Jマウスの側腹部に皮下接種し、該動物の腫瘍成長をモニターした各群について、n=7。shNS対照腫瘍と比較された両側のスチューデントt検定を有するP<0.01。図7挿入図におて、ヒトCAIXshCAIX又は非サイレンシング対照シーケンスshNSをターゲットとするshRNAmirを発現するMDA-MB-231細胞は、正常酸素状態normoxia:ノルモキシアまたは低酸素hypoxia:ハイポキシアにおいて72時間培養されて、低酸素状態で誘発されたCAIX発現が解析された。ウェスタンブロットが示される。β-アクチンはローディング管理の役を務めた。実施例7転移モデル細胞株4T1は、転移の進行により注射後頑丈な肺転移および被検マウスの内に3週安楽死させなければならなかった型を静脈内で注入した。しかし、転移は、CAIX枯渇細胞で接種されたマウス中で観察されなかった図8A。CAIXを失った腫瘍細胞は、肺にほとんど目に見える転移を示さず、完全に健康なままである図8B。ネガティブの対照67NR細胞それらは自然な転移ではないは、細胞が注射後24時間で肺に濃縮した事実にもかかわらず、注射後3週間の後、転移の証拠をほとんど示さない。CAIXを発現する細胞を注射した動物からの肺の検査は多くの肺表面小結節を示した。一方、CAIXを失った細胞を注射したマウスからの肺は本質的に正常であった図8C。CAIXの安定した消耗は、4T1モデル中の肺転移の確立を阻害する。細胞膜局所的なCAIX発現は、CAIXが枯渇した細胞を持つマウスではなく、対照動物からの肺の組織学の切片中で明らかであった図8D。実施例8MST-017CAI17の選択性細胞は、10μMのMST-017の存在下で72時間培養した。表示された状態で細胞株に結合したFITCタグ付きインヒビターの代表的な画像が図9中に示される。C細胞を、MST-0174T1、66cl4および67NRの細胞についてそれぞれ、400、600および400μMで、又はMSTなしで72時間培養した。n=3。細胞外pH±s.e.mの平均的変化が示される。各細胞株にとって、低酸素中の細胞外pHの変化は、酸素正常状態中で育てられたパラレル培養中で測定されたベースライン細胞外pHに関連があると評価された。インヒビターなしで培養された細胞と比較された両側のスチューデントt検定を有するP<0.001。細胞外pHは、CAIXを発現する66cl4および4T1転移細胞株中の低酸素において劇的に減少したが、CAIXを発現しない67NR培養においては変わらなかった。MST-017を持った細胞の処置は、66cl4及び4T1細胞培養における低酸素下の細胞外媒体の酸性化を逆転した図9C。実施例9スルホンアミド化合物MST-017を使用する生体内腫瘍抑制特有の小分子インヒビターを持った標的化CAIX活性は、4T1原発腫瘍の生長を減ずる図10。図10Aにおいて、4Y1細胞をノルモキシア正常酸素またはハイポキシア低酸素において培養した。CAIX発現のレベルはウェスタンブロットによって解析した。動物を4T1細胞で同所的に接種した。腫瘍を14日間確立させた。マウスに、2週間にわたり1週当たり3回、MST-017の表示された用量を注射した。左側のパネル、腫瘍成長をキャリパに基づいた測定によってモニターした。治療開始および終了を矢印によって示す図10B。ビヒクルで治療され又は治療されていない動物を、コントロールとして用いた。P<0.02、P<0.01:2-側スチューデントt検定を使用し、ビヒクルコントロールと比較して。治療された動物の体重を一般的なインヒビター毒性の基準としてモニターした。マウスは、CAIXインヒビターの各服用の直前に検量した。様々な処置およびコントロールアーム中の体重における有意差は注目されなかった図10C。このように、確立した4T1腫瘍を抱えるマウスのMST-017での治療は、ビヒクルコントロールと比較して、治療されたマウス中で腫瘍成長の著しい抑制を示した。治療されたマウス中で著しい体重減少が示されなかったので、インヒビター濃度および服薬スケジュールは忍容性が良好であった。MST-017の同一濃度で治療された確立している67NR誘導腫瘍を抱えるマウスは、ビヒクル剤コントロールに関するインヒビターの著しい効果を示さず図11、著しい体重減少は観察されなかった。実施例10新規なスルホンアミドMST-104およびMST-119での生体内転移抑制新規なCAIXインヒビターMST-119は、4T1乳房腫瘍細胞による転移形成を減じる。CAIXインヒビターMST-119の化学構造を図12Aで示す。4T1細胞の静脈内注射およびMST-119での治療に引き続いて確立された転移の代表的な生物発光の画像は、12B中に示される。動物は細胞の接種の24時間後に治療された。3回分を6日間腹腔内注射によって投与した。そして、マウスは、インヒビターの第3の服用量の24時間後に画像化した。MST-119を、37.5のPEG400、12.5のエタノールおよび50の食塩水で構成されたビヒクル中で送達した。腫瘍誘導生物発光の定量化を12Cに示す。関心領域を転移の焦点近くで配置した。そして、マウス表面での全フラックス光子/秒を計算した。データは平均±s.e.mとして報告する。1群当たり、N=4。P<0.05。新規なCAIXインヒビターMST-104は、4T1乳房腫瘍細胞による転移形成を減じる図13。4T1細胞を、BALB/cマウスの尾静脈に直接注射した。5日間の、ビヒクル又はMST-104での毎日の治療を、細胞の接種後24時間で開始した。そして、マウスは、最終用量の24時間後に画像化した。ビヒクル及びインヒビターは腹腔内注射によって投与した。腫瘍細胞誘導した生物発光の代表的な画像がコントロールおよびインヒビターで処置された動物で示される。Bグラフは、腫瘍誘発生物発光の定量化を示す。1群当たり、N=6。P<0.01。生物発光信号の定量化は、治療されたマウス中での転移形成の、統計的に著しい減少を明らかにした。これらのデータは、新規なスルホンアミドを使用して、CAIXのターゲットとされた抑制に応じて乳癌細胞による肺転移形成の抑制の更なる実例を提供する。実施例11新規なスルホンアミドによるヒト原発性胸壁腫瘍生長の抑制新規なCAIXインヒビターMST-104は、ヒト原発性乳癌異種移植片の生長を減じる。転移性MDA-MB-231LM2-4Luc細胞を、NOD/スキッドマウスへ同所的に移植した。腫瘍が200mm3の平均に達したとき、動物に腹腔内投与によってMST-104の指示された用量を日々与え、そして、腫瘍成長はキャリパー測定を使って定量化した。インヒビター治療の開始および終了を指示する。各群当たり、N=8。P<0.03、P<0.001。挿入図、ノルモキシア酸素正常状態Nおよびハイポキシア低酸素状態H中で培養されたLM2-4Luc細胞によるCAIX発現を示すウェスタンブロット。CAIX活性の薬理学的抑制効果を生体内で評価するために、我々は、確立しているMDA-231LM2-4腫瘍Ebos、2009年らを抱えるマウスをMST-104で治療した。これらの細胞は、低酸素中のCAIXを強く誘発することが観察された図14、挿入図。我々は、ビヒクルコントロールと比較して、インヒビターで治療されたマウス中の腫瘍成長の著しく用量依存的な抑制を観察した図14。これらのデータは、スルホンアミドに基づいたCAIXインヒビターがCAIXを発現するヒト胸壁腫瘍を特異的にターゲットとする能力を示す。実施例12新規なスルホンアミドによる、低酸素で誘発された浸潤の抑制、および3DMatrigelTM培養中で育成されたヒト乳癌細胞の生存3DMatrigelTM培養中で育成されたMDA-MB-231LM2-4Luc細胞は、低酸素において侵襲性である図15。細胞を、酸素正常状態及び低酸素の中で4日間、3DオントップMatrigelTMアッセイにおいて、該方法中で記載されているように培養した。3D培養の代表的な位相コントラスト画像を示す。低酸素は、親のMDA-231細胞ではなくLM2-4変種による浸潤を誘発した。CAIXの新規なスルホンアミドインヒビターでの治療は、3DMatrigelTM培養中で育成されたヒト乳癌細胞の低酸素誘発浸潤を減ずる図16。細胞を、インヒビター存在下において低酸素で4日間、3DオントップMatrigelTMアッセイ中で培養した。DMSO処理された細胞培養は、コントロールとして寄与した。DMSOのパーセンテージ濃度およびインヒビターのモル濃度を示す。代表的な位相コントラスト画像を示す。これらのデータは、スルホンアミドが低酸素中の転移性ヒト乳癌細胞の浸潤を阻害することを示す。CAIXのウレイドスルホンアミドインヒビターは、低酸素でヒト乳癌細胞の細胞死に特異的効果を示す図17。細胞を、3DオントップMatrigelTMアッセイ中で培養した。細胞は低酸素で4日間、インヒビターが存在する状態での生長であった。DMSO処理された細胞培養は、コントロールとして寄与した。A上段は、TUNELポジティブ細胞矢印の代表的なイメージ画像。B1条件当たり5つのランダム視野を数えることによるTUNELve細胞の定量化を示すグラフ。データは、TUNELポジティブ細胞/20x視野FOVの平均数として表現される。これらのデータは、CAIXのスルホンアミドインヒビターが、低酸素中でヒト乳癌細胞の死を誘発することができることを示す。実施例13乳癌細胞のCAIX発現の遺伝消耗は、低酸素中で癌幹細胞集団を減じる。血清フリー条件下の懸濁液中での非接着性腫瘍球体としての生体外増殖は、乳癌幹細胞の特徴である。乳癌幹細胞集団は、CD44CD24-/low用法指示の表示として以前に特徴付けられたAl-Hajjetal,2003ProcNatlAcadSciUSA100:3983-3988;Pontietal,2005CancerRes65:5506-5511。図18は、CAIX発現が腫瘍球体が惹起する集団生長及び低酸素中での腫瘍球体形成の効率に対して必要であることを示す。A4T1shNSおよびshCAIX細胞を倍加希釈で接種し、酸素正常状態または低酸素中の腫瘍球体生成条件下で培養した。腫瘍球体生長を惹起するのに必要な細胞数を評価した。3つの独立した実験の平均±SEMを示す。P<0.03,P<0.006。B4T1shNSおよびshCAIX細胞を酸素正常状態または低酸素中の腫瘍球体として培養し、分解し、そして、CD44CD24-/low集団をFACS分析によって評価した。示されたデータは、3つの独立した実験から、CD44CD24-/low細胞±SEMの平均の変化である。P<0.004,P<0.025。CIAXが正常な酸素レベルでいずれかの細胞株中で誘発されないので、腫瘍球体を形成するのに必要な細胞数中の有意差は酸素正常状態中の4T1shNS及びshCAIXの間で観察されなかった図18A。腫瘍球体を形成するのに必要な4T1-shNS細胞の数は、酸素正常状態コントロールと比較して、低酸素中で顕著に減少し、癌幹細胞CSCの割合が低酸素中での培養において著しく高いことを示唆している図18A。重要なことは、CIAX発現のRNAiを媒介としたノックダウンは、低酸素中の腫瘍球体を形成するのに必要な種を生ずる細胞数を著しく増加させた。このことは、そのCAIX発現が、shNS-4T1コントロール細胞で低酸素中において観察されたCSC類似の展開に対して必要であることを示している。図18B中で、4T1shNSおよびshCAIX細胞は酸素正常状態または低酸素中において腫瘍球体生成条件下で培養されて、CD44CD24-/lowとして分類された推定上のCSC類似の集団を定量化するためにFACSによって解析した。shNSコントロール中で、CD44CD24-/low集団は、酸素正常状態のコントロールと比較して、低酸素下の培養状態中で著しく増加する図18B。しかしながら、CAIXのRNAiを媒介としたノックダウンは、著しく低酸素中のこの集団を枯渇させる、このことは、低酸素中のCD44CD24-/lowのCSC類似の展開に対してCAIXが必要なことを示している図18B。実施例14MST-104は、同所性のヒト胸壁腫瘍中の癌幹細胞集団を生体内で枯渇させることができる。図19は、CAIXインヒビターMST-104によるヒト原発性乳癌異種移植片の治療が、癌幹細胞集団を生体内でターゲットとすることを示す。MDA-MB-231LM2-4Lucを、NOD/SCIDマウスへ同所的に移植した。腫瘍が平均200mm2に達したとき、動物に腹腔内注射によって、38mg/kgのMST-104又はビヒクルを日々投入した。A原発腫瘍を分離し、除去し、そして、ESA細胞集団をFACS分析によって評価した。ESA細胞の割合を実証する代表的なFACSプロットを示す。B示されたデータは、3匹のマウスから、ESA細胞±SEMの平均変化である。P<0.0224。ビヒクルに治療された腫瘍は平均10のESA細胞集団を含有していた。それに比べて、スルホンアミドCAIXインヒビターMST-104で治療された腫瘍は、ビヒクルに治療されたコントロール腫瘍と比較して著しく減少したESA細胞集団を示した。これらのデータは、スルホンアミドがヒト乳癌幹細胞集団を生体内で枯渇させることができることを示す。本発明特有の実施態様が記述され示された一方、そのような実施態様は、同伴する請求項に従って解釈されるような本発明の制限としてではなく、本発明の例証のみとなると考えられるべきである。"