"以下の式、MayO-A-により表される誘導体化されたマイタンシノールもしくはマイタンシノール類似体の残基に化学的に結合する細胞結合剤を含む細胞結合剤コンジュゲート、または薬学的に許容可能なその塩もしくは溶媒和物であって;式中、MayOは、MayOHにより表されるマイタンシノールもしくはマイタンシノール類似体の残基であり;Aは、C=O、C=ONR’、およびC=OOから選択される任意の基であり;R’はH、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニル、もしくはアルキニル、および置換または非置換アリールから選択され、但し、前記コンジュゲートは、以下の式により表されるN-メチルアラニンもしくはN-メチルシステイン部分を含まず;直接MayOに接続している;細胞結合剤コンジュゲート。前記誘導体化されたマイタンシノールもしくはマイタンシノール類似体の残基が以下の式MayO-A-Y-により表され;式中、Yは、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換複素環式基、置換もしくは非置換アリールアルキル、置換もしくは非置換ヘテロシクリルアルキル基、アジリジン基およびエポキシ基から選択される任意の基であり、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリールアルキル基、およびヘテロシクリルアルキル基はそれぞれ、ポリエチレングリコールユニットOCH2CH2n式中、nは1~200の整数である、アジリジン基、エポキシ基、アミノ基、アミド基、エステル基、アリール基、複素環式基から選択される一つまたは複数の基、アミノ酸およびペプチドにより任意選択的に遮断される、請求項1に記載の細胞結合剤コンジュゲート。Yが、C1~6アルキル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、ハロC1~6アルキル、二つの隣接する炭素原子上にハロゲン基およびヒドロキシル基を有するC1~6アルキル-C2~6アルケニル-Ar、-Ar-C2~6アルケニル-、-C2~6アルキニル-Ar-、-Ar-C2~6アルキニル-、C1~6アルキルの二つの隣接する炭素原子上にハロゲン基およびヒドロキシル基を有する-C1~6アルキル-Ar-、および二つの隣接する炭素原子上にハロゲン基およびヒドロキシル基を有する-Ar-C1~6アルキルから選択される任意の基であって、Arは任意に置換されたアリールまたは任意に置換されたヘテロシクリルであり、およびYにより表される基中のアルケニル基、アルキニル基、アルキル基が任意に置換されている、請求項2に記載の細胞結合剤コンジュゲート。ArがC1~4アルキル、C1~4アルコキシ、ヒドロキシC1~4アルキル、ハロC1~4アルキル、-OH、-OC=O-C1~4アルキル、-OC=O-C1~4アルキル-NRaRb、-C1~4アルキル-COOH、-NRaRb、-C1~4アルキルNRaRb、-NO2-およびハロゲンと任意に置換されたフェニル基であり、式中、RaおよびRbは、それぞれ独立して、H、C1~4アルキルもしくはアミノ保護基であるか、またはRaおよびRbは、窒素原子と共に、一つまたは複数のヘテロ原子を有する複素環式環を形成する、請求項3に記載の細胞結合剤コンジュゲート。-A-Yが以下の式のうちの一つにより表され、nおよびn’は、それぞれ独立して、0、1、2または3であり;nは1、2または3、および各出現のRcは、H、ハロゲン、-NO2、C1~4アルキル、C1~4アルコキシ、ヒドロキシC1~4アルキル、ハロC1~4アルキル、-OH、-OC=O-C1~4アルキル、-OC=O-C1~4アルキル-NRaRb、C1~4アルキル-COOHであり、式中、RaおよびRbは、それぞれ独立して、H、C1~4アルキル、アミノC1~4アルキルもしくはアミノ保護基であるか、またはRaおよびRbは、窒素原子と共に、一つまたは複数のヘテロ原子を有する複素環式環を形成する、請求項2に記載の細胞結合剤コンジュゲート。RaおよびRbは、窒素原子と共に、任意に置換されたピペラジニルまたは任意に置換された保護化ピペラジニル、または任意に置換された4-ピペリジノピペリジニルを形成する、請求項5に記載の細胞結合剤コンジュゲート。nは1または2、RcはH、メチル、エチル、ハロゲン、-CF3、-NO2、-OMe、-CO2Me、-OH、-CH2OH、-CH2OCOCH2NH2、-CH2OCOCCH32CH2NH2、-CH2NH2、-CH2NCH32、-CH2COOHおよび-CH2-ピペラジニルである、請求項5に記載の細胞結合剤コンジュゲート。Yが以下の式-[Ar’]j-C1~10アルキル-;により表され、式中、Ar’は任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたC1~4アルキルアリールまたは任意に置換されたC1~4アルキルヘテロシクリルであり;およびjは0または1である、請求項2に記載の細胞結合剤コンジュゲート。Yが以下の式[Ar]0~1-CR1R2x-B-W-D-CR1R2w¬;により表され、式中、Arは、アルキル、アルコキシル、ハロ、ハロアルキル、アルコキシ-ハロアルキルニトリルおよびニトロから選択される1~4個の基で任意に置換されたフェニル、-CH2-フェニル、ヘテロシクリル、または-CH2-ヘテロシクリルであり;R1およびR2は、それぞれ独立して、水素またはC1~4アルキルであり;Bは、NR、Oまたは非存在であり;Wは、アミノ酸もしくは2~8個のアミノ酸を含むペプチド、OCH2CH2n、または非存在であり;Dは、CO、NRまたは非存在であり;Rは、H、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、および置換もしくは非置換アリールから選択され;xは1~10の整数であり;wは0、または1~10の整数であり;ならびにnは1~200の整数である、請求項2に記載の細胞結合剤コンジュゲート。RがHまたはC1~4アルキルである、請求項9に記載の細胞結合剤コンジュゲート。Yが-CR1R2xであり、xが1~6の整数である、請求項2に記載の細胞結合剤コンジュゲート。R1およびR2は、それぞれ独立して、水素またはメチルである、請求項11に記載の細胞結合剤コンジュゲート。Yが以下の式の一つにより表される、請求項2に記載の細胞結合剤コンジュゲート。前記コンジュゲートが、式MayO-A-Y-L’m-CB;により表され、または薬学的に許容可能なその塩もしくは溶媒和物であり;式中、L’はリンカーであり;mは1~20の整数であり;およびCBは細胞結合剤を表している;請求項2~13のいずれか一項に記載の細胞結合剤コンジュゲート。式MayO-A-Y-L’-CBにより表される細胞結合剤コンジュゲート、または薬学的に許容可能なその塩もしくは溶媒和物であって;式中、CBは細胞結合剤を表し;MayOは、MayOHで表されるマイタンシノールの残基であり;Aは、C=O、C=ONR’およびC=OOから選択される任意の基であり;R’はH、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、および置換もしくは非置換アリールから選択され;Yは、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、置換もしくは非置換アリール、または置換もしくは非置換複素環式基から選択される任意の基であり、各基は、任意のポリエチレングリコールユニットOCH2CH2nnは1~200の整数、およびペプチドを担持し;L’はリンカーであり;但し、AはC=O、YはAと共に、N-メチルアラニンまたはN-メチルシステイン部分ではない;細胞結合剤コンジュゲート。R’はHまたはC1~4アルキルである、請求項1~15のいずれか一項に記載の細胞結合剤コンジュゲート。MayOが、式により表され、式中、X’4=X’5またはOX’5であり;およびX’、X’1、X’2、X’3、およびX’5は同じまたは異なり、R、C=OR、C=ONR2またはC=OORから選択され、式中、Rはそれぞれ独立して、H、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、および置換もしくは非置換アリールから選択され;Qは、OまたはSから選択され;但し、X’、X’1、X’2、X’3、X’5のうち少なくとも一つがMayOとAまたはAYとの間の共有結合を示している;請求項1~16のいずれか一項に記載の細胞結合剤コンジュゲート。Rがそれぞれ独立してHまたはC1~4アルキルである、請求項17に記載の細胞結合剤コンジュゲート。MayOが式により表される、請求項17または18に記載の細胞結合剤コンジュゲート。前記コンジュゲートが、式MayO-A-Y-M’-BFCGm-CBにより表され、または薬学的に許容可能なその塩もしくは溶媒和化合物であり;式中、BFCGは非存在であるか、または二つの連結基を含む二官能性架橋試薬の残基であり、連結基のうち一つはM’と反応したものであり、もう一つの連結基は細胞結合剤と反応したものであり;M’は、BFCGの反応した連結基の一つと共にチオエーテル、ジスルフィド、チオエステル、アミド、イミン、-Oイミンまたはヒドラゾン部分を形成する連結基の残基であり;ならびにBFCGは、チオエーテル、ジスルフィド、チオエステル、アミド、イミン、Oイミンまたはヒドラゾン部分を介してCBと連結する;請求項2~19のいずれか一項に記載の細胞結合剤コンジュゲート。BFCGが、M’に接続されたM部分およびCBに接続されたZ部分を含み、式中、MおよびZは、それぞれ独立して、-C=O-、-C=O-NRe-、-C=O-O-、-O-C=O-、-C=NH-、-C=NH-NRe-、-S-、-NRe-、-NH-NRe-、-C=NRe-、=NNRe-、-CH2-C=O-、および-CH2-C=O-NReから成る群から選択され、Reは、H、アルキル、アルケニルまたはアルキニルである、請求項20に記載の細胞結合剤コンジュゲート。MおよびZが、それぞれ独立して、-C=O-、-S-、-CH2-C=O-、-CH2-C=O-NH-および-O-C=O-から成る群から選択される、請求項21に記載の細胞結合剤コンジュゲート。M’-Mが、から選択される構造式により表される、請求項21または22に記載の細胞結合剤コンジュゲート。-BFCG-が、式-M-CR3R4y-[Cy]0または1-CO-により表され、または薬学的に許容可能なその塩もしくは溶媒和化合物であり;式中、Mはであり;R3およびR4は、それぞれ独立して、水素メチルまたは-SO3-Mであり、Mは、Hもしくは薬学的に許容可能な陽イオンであり;Cyは、アルキル、アルコキシル、ハロ、ハロアルキル、アルコキシハロアルキル、ニトリルおよびニトロから選択される1~4個の基で任意に置換されたシクロアルキルまたはフェニルであり;ならびにyは0、または1~10の整数である、請求項20に記載の細胞結合剤コンジュゲート。BFCGがであり;およびM’が-S-である、請求項24に記載の細胞結合剤コンジュゲート。BFCGがである、請求項25に記載の細胞結合剤コンジュゲート。-BFCG-が、式-S-CR3R4y’-COにより表され;式中、R3およびR4は、それぞれ独立して、水素メチルまたは-SO3-Mであり、Mは、Hもしくは薬学的に許容可能な陽イオンであり;y’は1~10の整数である、請求項20に記載の細胞結合剤コンジュゲート。BFCGが自己犠牲部分を含む、請求項20に記載の細胞結合剤コンジュゲート。BFCGが、以下の式により表され;式中、AAは、アミノ酸または2~8個のアミノ酸を含むペプチドであり、R100はHまたはアルキルである、請求項21に記載の細胞結合剤コンジュゲート。AAは、Val-Cit、Val-Lys、Phe-Lys、Lys-Lys、Ala-Lys、Phe-Cit、Leu-Cit、Lle-Cit、Trp、Cit、Phe-Ala、Phe-N9-トシル-Arg、Phe-N9-ニトロ-Arg、Phe-Phe-Lys、D-Phe-Phe-Lys、Gly-Phe-Lys、Leu-Ala-Leu、Ile-Ala-Leu、Val-Ala-Val、Ala-Leu-Ala-Leu配列番号1、β-Ala-Leu-Ala-Leu配列番号2およびGly-Phe-Leu-Gly配列番号3、Gly-Gly-Gly配列番号4、Val-Arg、Arg-Val、Arg-Arg、Val-D-Cit、Val-D-Lys、Val-D-Arg、D-Val-Cit、D-Val-Lys、D-Val-Arg、D-Val-D-Cit、D-Val-D-Lys、D-Val-D-Arg、およびD-Arg-D-Argから選択される、請求項29に記載の細胞結合剤コンジュゲート。AAがGly-Gly-Gly、Val-Cit、Phe-LysまたはVal-Lysである、請求項30に記載の細胞結合剤コンジュゲート。前記BFCGが、から選択され、式中、AAは、Val-Cit、Phe-LysまたはVal-Lysであり;qは1~5の整数であり;nは1~20の整数であり;ならびにMは、Hまたは薬学的に許容可能な陽イオンである、請求項20に記載の細胞結合剤コンジュゲート。細胞結合剤が、腫瘍細胞、ウイルス感染細胞、微生物感染細胞、寄生虫感染細胞、自己免疫細胞、活性化細胞、骨髄細胞、活性化されたT細胞、B細胞もしくはメラノサイト;CD4、CD6、CD19,CD20、CD22、CD30、CD33、CD37、CD38、CD40、CD44、CD56、EpCAM、CanAg、CALLA、STEAP、TENB2、MUC16、IRTA1、IRTA2、IRTA3、IRTA4、IRTA5、c-MET、5T4、もしくはHer-2抗原;Her-3抗原を発現する細胞;またはインスリン成長因子受容体、表皮成長因子受容体、および葉酸受容体を発現する細胞から選択される標的細胞に結合する、請求項1~22のいずれか一項に記載の細胞結合剤コンジュゲート。前記細胞結合剤が、標的細胞に特異的に結合する抗体、単鎖抗体、抗体断片;標的細胞に特異的に結合するモノクロナール抗体、単鎖モノクロナール抗体、またはモノクロナール抗体断片;標的細胞に特異的に結合するキメラ抗体、キメラ抗体断片;標的細胞に特異的に結合するドメイン抗体、ドメイン抗体断片;二重特異性抗体diabody、ナノ抗体、プロ抗体probody、Darpin、リンホカイン、ホルモン、ビタミン、増殖因子、コロニー刺激因子、または栄養素輸送分子である、請求項1~32のいずれか一項に記載の細胞結合剤コンジュゲート。前記抗体が、表面再構成resurfaced抗体、表面再構成単鎖抗体、または表面再構成抗体断片である、請求項34に記載の細胞結合剤コンジュゲート。前記抗体が、モノクロナール抗体、単鎖モノクロナール抗体、またはそのモノクロナール抗体断片である、請求項34に記載の細胞結合剤コンジュゲート。前記抗体が、ヒト化抗体、ヒト化単鎖抗体、またはヒト化抗体断片である、請求項34に記載の細胞結合剤コンジュゲート。請求項1~37のいずれか一項に記載のコンジュゲートおよび薬学的に許容可能な担体を含む医薬組成物。式MayO-A-により表される誘導体化されたマイタンシノールまたはマイタンシノール類似体の残基、および、細胞結合剤または二官能性架橋試薬と化学的結合を形成し得る連結基を含む化合物、または薬学的に許容可能なその塩もしくは溶媒和物であって;式中、MayOは、MayOHにより表されるマイタンシノールもしくはマイタンシノール類似体の残基であり;Aは、C=O、C=ONR’、およびC=OOから選択される任意の基であり;およびR’は、H、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、および置換もしくは非置換アリールから選択され;但し、前記化合物は、以下の式により表されるN-メチルアラニンまたはN-メチルシステイン部分を含まず;直接MayO-に接続する、化合物。前記誘導体化されたマイタンシノールもしくはマイタンシノール類似体が、以下の式MayO-A-Y;により表され、式中、Yは置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換複素環式基、置換もしくは非置換アリールアルキル、置換もしくは非置換ヘテロシクリルアルキル基、アジリジン基、およびエポキシ基から選択される任意の基であり、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリールアルキル基およびヘテロシクリルアルキル基はそれぞれ、ポリエチレングリコールユニットOCH2CH2nnは1~200の整数、アジリジン基、エポキシ基、アミノ基、アミド基、エステル基、アリール基および複素環式基から選択される一つまたは複数の基、アミノ酸およびペプチドにより任意選択的に遮断される、請求項39に記載の化合物。Yは、C1~6アルキル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、ハロC1~6アルキル、二つの隣接する炭素原子上にハロゲン基およびヒドロキシル基を有するC1~6アルキル、-C2~6アルケニル-Ar-、-Ar-C2~6アルケニル、-C2~6アルキニル-Ar-、-Ar-C2~6アルキニル-、-C1~6のアルキル二つの隣接する炭素原子上にハロゲン基およびヒドロキシル基を有する-C1~6アルキル-Ar-、二つの隣接する炭素原子上にハロゲン基およびヒドロキシル基を有する-Ar-C1~6アルキルから選択される任意の基であり、Arは、任意に置換されたアリールまたは任意に置換されたヘテロシクリルであり、およびYにより表されるアルケニル基、アルキニル基およびアルキル基が任意に置換された、請求項40に記載の化合物。Arが、C1~4アルキル、C1~4アルコキシ、ヒドロキシC1~4アルキル、ハロC1~4アルキル、-OH、-OC=O-C1~4アルキル、-OC=O-C1~4アルキル-NRaRb、-C1~4アルキル-COOH、-NRaRb、-C1~4アルキルNRaRb、-NO2およびハロゲンと任意に置換されたフェニル基であり、RaおよびRbがそれぞれ独立してH、C1~4アルキルもしくはアミノ保護基であるか、または、RaおよびRbが窒素原子と共に一つまたは複数のヘテロ原子を有する複素環式環を形成する、請求項41に記載の化合物。-A-Y-が、以下の式の一つで表され、式中、nおよびn’は、それぞれ独立して、0、1、2もしくは3であり;nは1、2もしくは3であり、および各出現のRcはH、-NO2、ハロゲン、C1~4アルキル、C1~4アルコキシ、ヒドロキシC1~4アルキル、ハロC1~4アルキル、-OH、-OC=O-C1~4アルキル、-OC=O-C1~4アルキル-NRaRb、C1~4アルキル-COOHであり、RaおよびRbは、それぞれ独立して、H、C1~4アルキル、アミノC1~4アルキルもしくはアミノ保護基であるか、またはRaおよびRbは、窒素原子と共に、一つまたは複数のヘテロ原子を有する複素環式環を形成する、請求項40に記載の化合物。RaおよびRbは、窒素原子と共に、任意に置換されたピペラジニル、任意に置換された保護化ピペラジニルまたは任意に置換された4-ピペリジノピペリジニルを形成する、請求項43に記載の化合物。nが1または2であり、RcがH、メチル、エチル、ハロゲン、-CF3、-NO2、-OMe、-CO2Me、-OH、-CH2OH、-CH2OCOCH2NH2、-CH2OCOCCH32CH2NH2、-CH2NH2、-CH2NCH32、-CH2COOH、および-CH2-ピペラジニルである、請求項43に記載の化合物。Yが、式-[Ar’]j-C1~10アルキル-により表され、または薬学的に許容可能なその塩もしくは溶媒和物であって、式中、Ar’が、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたC1~4アルキルアリール、または任意に置換されたC1~4アルキルヘテロシクリルであり;およびjが0または1である、請求項40に記載の化合物。Yが、式[Ar]0~1-CR1R2x-B-W-D-CR1R2w¬により表され、式中、Arは、アルキル、アルコキシル、ハロ,ハロアルキル、アルコキシ-ハロアルキル、ニトリルおよびニトロから選択される1~4個の基で任意に置換されたフェニル、-CH2-フェニル、ヘテロシクリル、または-CH2-ヘテロシクリルであり;R1およびR2は、それぞれ独立して水素またはC1~4アルキルであり;BはNR、Oまたは非存在であり;Wは、アミノ酸または2~8個のアミノ酸を含むペプチド、OCH2CH2n、または非存在であり;DはCO、NRまたは非存在であり;Rは、H、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、および置換もしくは非置換アリールから選択され;xは1~10の整数であり;wは0、または1~10の整数であり;およびnは1~200の整数である、請求項46に記載の化合物。RがHまたはC1~4アルキルである、請求項47に記載の化合物。Yが-CR1R2x-であり、xが1~6の整数である、請求項47に記載の化合物。R1およびR2が、それぞれ独立して、水素またはメチルである、請求項49に記載の化合物。Yが、以下の式、の一つにより表される、請求項46に記載の化合物。前記化合物が、式MayO-A-Y-Lにより表され、または薬学的に許容可能なその塩もしくは溶媒和物であり;式中、Lは、細胞結合剤または二官能性架橋試薬に化学的結合を形成し得る連結基である、請求項40~51のいずれか一項に記載の化合物。以下の式、MayO-A-Y-Lにより表され;式中、MayOは、MayOHにより表されるマイタンシノールの残基であり;Aは、C=O、C=ONR’およびC=OOから選択される任意の基であり;R’は、H、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、および置換もしくは非置換アリールから選択され;Yは、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換複素環式基から選択される任意の基であり、それぞれは任意のポリエチレングリコールユニットOCH2CH2nnは1~200の整数、およびペプチドを担持し;ならびにLは、ジスルフィド結合、チオエーテル結合、ペプチド結合、アミド結合、エステル結合またはヒドラゾン結合を介して、細胞結合剤と化学結合を形成し得る官能基、または薬学的に許容可能な本化合物の塩もしくは溶媒和物であり;但し、AはC=Oであり、YはAと共にN-メチルアラニンまたはN-メメチルシステイン部分ではない、請求項39に記載の化合物。R’がHまたはC1~4アルキルである、請求項40~53のいずれか一項に記載の化合物。MayOが、式により表され、式中X’4=X’5またはOX’5であり;およびX’、X’1、X’2、X’3、およびX’5は同じまたは異なり、R、C=OR、C=ONR2またはC=OORから選択され、式中、Rはそれぞれ独立して、H、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、および置換もしくは非置換アリールから選択され;QはOまたはSから選択され;但し、X’、X’1、X’2、X’3、およびX’5の少なくとも一つが、MayOとAまたはAYとの間の共有結合を表している、請求項40~54のいずれか一項に記載の化合物。Rがそれぞれ独立してHまたはC1~4アルキルである、請求項54に記載の化合物。MayOが、式により表される、請求項55または56に記載の化合物。Lが、マレイミド、ハロアセタミド、-SH、-SSRd、-CH2SH、-CHMeSH、-CMe2SH、-NHRf、-CH2NHRf、-NRfNH2、-COOH、および-COEから選択される構造式により表され、式中、COEは反応性エステルを表し、Rdは任意に置換されたフェニルまたは任意に置換されたピリジルであり、RfはHまたはアルキルである、請求項52~57のいずれか一項に記載の化合物。-COEにより表される前記反応性エステルが、N-ヒドロキシスクシンイミドエステル、N-ヒドロキシスルホスクシンイミドエステル、ニトロフェニル例えば、2または4-ニトロフェニルエステル、ジニトロフェニル例えば、2,4-ジニトロフェニルエステル、スルホ-テトラフルオロフェニル例えば、4-スルホ-2,3,5,6-テトラフルオロフェニルエステル、およびペンタフルオロフェニルエステルから選択され、およびRdは、フェニル、ニトロフェニル例えば、2または4-ニトロフェニル、ジニトロフェニル例えば、2または4-ニトロフェニル、カルボキシニトロフェニル例えば、3-カルボキシ-4-ニトロフェニル、ピリジルまたはニトロピリジル例えば、4-ニトロピリジルから選択される、請求項58に記載の化合物。前記化合物が、化合物6~26のいずれか一つにより表され、または薬学的に許容可能なその塩もしくは溶媒和物である、請求項39に記載の化合物。式MayO-A-により表される誘導体化されたマイタンシノールもしくはマイタンシノール類似体の残基に連結する二官能性架橋試薬を含む化合物、または、薬学的に許容可能なその塩もしくは溶媒和物であって;式中、MayOは、MayOHにより表されるマイタンシノールもしくはマイタンシノール類似体の残基であり;Aは、C=O、C=ONR’、およびC=OOから選択される任意の基であり;R’は、H、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、および置換もしくは非置換アリールから選択され;但し、前記化合物には、以下の式により表されるN-メチルアラニンもしくはN-メチルシステイン部分が含まれず;直接MayO-に接続される、化合物。誘導体化されたマイタンシノールもしくはマイタンシノール類似体の残基が、以下の式、MayO-A-Y-により表され;式中、Yは、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換複素環式基、置換もしくは非置換アリールアルキル、置換もしくは非置換ヘテロシクリルアルキル基、アジリジン基、およびエポキシ基から選択される任意の基であり、アルキルアルケニルアルキニルアリールアルキルおよびヘテロシクリルアルキル基のそれぞれは、ポリエチレングリコールユニットOCH2CH2nnは1~200の整数、アジリジン基、エポキシ基、アミノ基、アミド基、エステル基、アリール基および複素環式基から選択される一つまたは複数の基、アミノ酸、およびペプチドにより任意選択的に遮断される、請求項61に記載の化合物。Yが、C1~6アルキル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、ハロC1~6アルキル、二つの隣接する炭素原子上にハロゲン基およびヒドロキシル基を有するC1~6アルキル-C2~6アルケニル-Ar-、-Ar-C2~6アルケニル-、-C2~6アルキニル-Ar-、-Ar-C2~6アルキニル、C1~6アルキルの二つの隣接する炭素原子上にハロゲン基およびヒドロキシル基を有する-C1~6アルキル-Ar-、および二つの隣接する炭素原子上にハロゲン基およびヒドロキシル基を有する-Ar-C1~6アルキルから選択される任意の基であり、Arが任意に置換されたアリールもしくは任意に置換されたヘテロシクリルであり、Yにより表される基のアルケニル、アルキニル、アルキルが任意に置換されている、請求項61に記載の化合物。Arが、C1~4アルキル、C1~4アルコキシ、ヒドロキシC1~4アルキル、ハロC1~4アルキル、-OH、-OC=O-C1~4アルキル、-OC=O-C1~4アルキル-NRaRb、-C1~4アルキル-COOH、-NRaRb、-C1~4アルキルNRaRb、-NO2およびハロゲンで任意に置換されたフェニル基であり、RaおよびRbは、それぞれ独立して、H、C1~4アルキルまたはアミノ保護基であるか、または、RaおよびRbは、窒素原子と共に、一つまたは複数のヘテロ原子を有する複素環式環を形成する、請求項63に記載の化合物。-A-Y-が、以下の式の一つにより表され、式中、nおよびn’は、それぞれ独立して、0、1、2または3;nは、1、2または3であり、各出現のRcはH、-NO2、ハロゲン、C1~4アルキル、C1~4アルコキシ、ヒドロキシC1~4アルキル、ハロC1~4アルキル、-OH、-OC=O-C1~4アルキル、-OC=O-C1~4アルキル-NRaRb、-C1~4アルキル-COOHであり、RaおよびRbは、それぞれ独立して、H、C1~4アルキル、アミノC1~4アルキルもしくはアミノ保護基であるか、またはRaおよびRbは、窒素原子と共に、一つまたは複数のヘテロ原子を有する複素環式環を形成する、請求項62に記載の化合物。RaおよびRbが、窒素原子と共に、任意に置換されたピペラジニル、任意に置換された保護化ピペラジニルまたは任意に置換された4-ピペリジノピペリジニルを形成する、請求項65に記載の化合物。nが1または2であり、RcがH、メチル、エチル、-NO2、-CF3、ハロゲン、-OMe、-CO2Me、-OH、-CH2OH、-CH2OCOCH2NH2、-CH2OCOCCH32CH2NH2、-CH2NH2、-CH2NCH32、-CH2COOH、および-CH2-ピペリジニルである、請求項65に記載の化合物。Yが、-[Ar’]j-C1~10アルキル-により表され、式中、Ar’は任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたC1~4アルキルアリール、または任意に置換されたC1~4アルキルヘテロシクリル;およびjは0または1である、請求項62に記載の化合物。Yが、式-[Ar]0~1-CR1R2x-B-W-D-CR1R2w¬により表され、または薬学的に許容可能なその塩もしくは溶媒和物であり;式中、Arは、アルキル、アルコキシル、ハロ、ハロアルキル、アルコキシ-ハロアルキル、ニトリルおよびニトロから選択される1~4個の基で任意に置換されるCH2-フェニル、フェニル、CH2-ヘテロシクリルまたはヘテロシクリルであり;R1およびR2は、それぞれ独立して、水素またはC1~4アルキルであり;BはNR、Oまたは非存在であり;Wは、アミノ酸、2~10個のアミノ酸を含むペプチド、OCH2CH2n、または非存在であり;Dは、CO、NRまたは非存在であり;Rは、H、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、および置換もしくは非置換アリールから選択され;xは1~10の整数であり;wは0、または1~10の整数であり;ならびにnは1~200の整数である、請求項68に記載の化合物。RはHまたはC1~4アルキルである、請求項69に記載の化合物。Yが-CR1R2x-であり、xが1~6の整数である、請求項69に記載の化合物。R1およびR2は、それぞれ独立して、水素またはメチルである、請求項71に記載の化合物。Yが、以下の式の一つにより表される、請求項69に記載の化合物。前記化合物が、式MayO-A-Y-M’-BFCG’-Z’により表され、または薬学的に許容可能なその塩もしくは溶媒和物であり;式中、BFCG’-Z’が二つの連結基を含む二官能性架橋試薬の残基であり、前記連結基の一つがZ’で表され、もう一つがM’と反応したものであり;Z’は、チオエーテル、ジスルフィド、チオエステル、アミド、チオエステル、イミン、-O-イミンまたはヒドラゾン部分を介して、細胞結合剤と連結し得る連結基であり;M’は、BFCG’の反応した基の一つと共に、チオエーテル、ジスルフィド、チオエステル、アミド、イミン、O-イミン、ヒドラゾン部分を形成する連結基の残基である;請求項58~69のいずれか一項に記載の化合物。Yが、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニルから選択される任意の基であり、各基は、ポリエチレングリコールユニットOCH2CH2nnは1~200の整数およびペプチドにより任意選択的に遮断される、請求項74に記載の化合物。MayOが、式により表され、式中、X’4=X’5またはOX’5;およびX’、X’1、X’2、X’3、およびX’5は、同じまたは異なり、R、C=OR、C=ONR2またはC=OORから選択され、Rは、それぞれ独立してH、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、および置換もしくは非置換アリールから選択され;ならびにQは、OまたはSから選択され;但し、X’、X’1、X’2、X’3、およびX’5のうち少なくとも1つがMayOとAまたはAYとの間の共有結合を表している、請求項61~75のいずれか一項に記載の化合物。本発明は、細胞結合剤に連結することを可能にする官能基を担持する新規のアンサマイトシン誘導体を開示する。さらに、本発明は、これら新規アンサマイトシン誘導体を細胞結合剤とコンジュゲートする調製法を開示する。本発明の別の態様は、有効量の任意の上記アンサマイトシン誘導体-細胞結合剤コンジュゲート、薬学的に許容可能なその塩または溶媒和物、および薬学的に許容可能な担体、希釈剤または付形剤を含む医薬組成物である。アンサマイトシン誘導体を含む上記の医薬組成物にはさらに抗体が含まれてもよい。本発明のさらに別の態様は、標的細胞または標的細胞を含有する組織を、有効量の任意の上記アンサマイトシン誘導体-細胞結合剤、その塩または溶媒和物と接触させることを含む、選択細胞集団における細胞死誘発の方法である。細胞傷害性の効能を低下させることなく、既存の薬剤を修飾することは極めて困難であることは、当技術分野で明らかにされている。本開示の発明は、官能基を担持する新規のアンサマイトシン誘導体を合成する方法を教授することにより、この問題を克服する。本開示の新規アンサマイトシン誘導体は、先行文献で記載されたアンサマイトシンの細胞傷害性効能を保持し、さらにそれを高めることさえある。アンサマイトシン誘導体-細胞結合剤コンジュゲートにより、アンサマイトシン誘導体の細胞傷害性活動が十二分に、不要な細胞のみを標的として適用され、よって、非標的の健康な細胞を傷害することによる副作用を回避することができる。従って、本発明は、殺傷または溶解するべき疾患細胞または異常細胞、例えば、腫瘍細胞特に、固形腫瘍細胞、ウイルス感染細胞、微生物感染細胞、寄生虫感染細胞、自己免疫細胞自己抗体を産生する細胞活性化細胞移植片拒絶もしくは移植片対宿主病に関与するもの、またはその他任意の種類の疾患細胞もしくは異常細胞などを、副作用を最小限に留めつつ除去するため、有用な薬剤および同薬剤の新規製造方法を提供する。本発明で使用され得るアンサマイトシン前駆体は、細胞結合剤に連結できるアンサマイトシン誘導体を産生するが、当技術分野では周知であり、既知の方法に従って天然のソースから単離することができ、または既知の方法に従って合成により調製することもできる米国特許第6,790,954号;第7,192,750号;第7,432,088号を参照。好適なアンサマイトシン前駆体の例として、マイタンシノールおよびマイタンシノール類似体が挙げられる。好適なマイタンシノール類似体の例として、修飾された芳香族環を有するものおよび他の位置が修飾されたものが挙げられる。修飾された芳香族環を有するマイタンシノールの好適な類似体の具体的な例として、1C-19-ジクロロ米国特許第4,256,746号アンサマイトシンP2のLAH還元により調製2C-20-ヒドロキシまたは、C-20-デメチル/-C-19-ジクロロ米国特許第4,361,650号および第4,307,016号ストレプトマイシンもしくは放線菌を用いて脱メチル化、またはLAHを用いて脱塩素により調製;ならびに3C-20-デメトキシ、C-20-アシルオキシ-OCOR、/-C-19-ジクロロ米国特許第4,294,757号塩化アシルを用いてアシル化により調製;が挙げられる。他の位置が修飾されたマイタンシノールの好適な類似体の具体的な例として、1C9-SH米国特許第4,424,219号マイタンシノールをH2SまたはP2S5と反応させることにより調製2C14-アルコキシメチルデメトキシ/CH2OR米国特許第4,331,598号;3C14-ヒドロキシメチルまたはアシルオキシメチルCH2OHまたはCH2OAc米国特許第4,450,254号ノルカジアNocardiaから調製;4C15-ヒドロキシ/アシルオキシ米国特許第4,364,866号ストレプトマイシンによりマイタンシノールを変換することにより調製;5C15-メトキシ米国特許第4,313,946号および第4,315,929号Trewianudifloraから単離;6C18-N-デメチル米国特許第4,362,663号および第4,322,348号ストレプトマイシンによるマイタンシノールのデメチル化により調製;ならびに74,5-デオキシ米国特許第4,371,533号三塩化チタン/マイタンシノールのLAH還元により調製;が挙げられる。マイタンシノール上には、連結部分に化学的に連結し得る位置がたくさんある。例えば、ヒドロキシル基を有するC-3位置、ヒドロキシメチルで修飾されたC-14位置、ヒドロキシで修飾されたC-15位置、およびヒドロキシ基を有するC-20位置はすべて有益である。しかし、好ましいのはC-3およびC20であり、マイタンシノールのC-3位置は特に好ましい。連結部分を有するマイタンシノールのエステル合成に関しては、C-3位置におけるいくつかの例示的連結部分について以下に記載しており、当業者であれば、上記の通り、他の化学結合を有する連結部分もまた、上記の他のアンサマイトシンおよび他の連結位置と同様、本発明で使用することができると理解するであろう。本明細書に記載の構造式例えば、第一~第十二の実施形態の式I~XIIにおける変数の代替値は、以下に提供されている。第1番目1の代替実施形態では、構造式II~V、VII~IX、XIおよびXIIのYは、C1~6アルキル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、ハロC1~6アルキル、二つの隣接する炭素原子上のハロゲンおよびヒドロキシ基を有するC1~6アルキル、-C2~6アルケニル-Ar-、-Ar-C2~6アルケニル-、-C2~6アルキニルAr-、-Ar-C2~6アルキニル、C1~6アルキルの二つの隣接する炭素原子上にハロゲンおよびヒドロキシル基を有する-C1~6アルキル-Ar-、および二つの隣接する炭素原子上にハロゲンおよびヒドロキシル基を有する-Ar-C1~6アルキルから選択される任意の基であり、式中、Arは任意に置換されたアリールまたは任意に置換されたヘテロシクリルであり、Yにより表されるアルケニル基、アルキニル基、アルキル基は任意に置換される。第2番目2の代替実施形態では、第1代替実施形態のArは、C1~4アルキル、C1~4アルコキシ、ヒドロキシC1~4アルキル、ハロC1~4アルキル、-OH、-OC=O-C1~4アルキル、-OC=O-C1~4アルキル-NRaRb、-C1~4アルキル-COOH、-NRaRb、-C1~4アルキルNRaRb、-NO2およびハロゲンで任意に置換されるフェニル基であり、式中、RaおよびRbは、それぞれ独立して、H、C1~4アルキルまたはアミノ保護基であり、またはRaおよびRbは、窒素原子と共に、一つまたは複数のヘテロ原子を有する複素環式環を形成する。第3番目3の代替実施形態では、構造式II~V、VII~IX、XIおよびXIIの-A-Y-は、以下の式の一つにより表され;式中、nおよびn’は、それぞれ独立して、0、1、2または3であり、nは1、2または3であり、および各出現のRcは、H、C1~4アルキル、C1~4アルコキシ、ヒドロキシC1~4アルキル、ハロC1~4アルキル、-OH、-OC=O-C1~4アルキル、-OC=O-C1~4アルキル-NRaRb、-C1~4アルキル-COOH、-NO2およびハロゲンであり、式中、RaおよびRbは、それぞれ独立して、H、C1~4アルキル、アミノC1~4アルキルもしくはアミノ保護基であり、RaおよびRbは、窒素原子と共に、一つまたは複数のヘテロ原子を有する複素環式環を形成する。第4番目4の代替実施形態では、第2および第3の代替実施形態のRaおよびRbは、窒素原子と共に、任意に置換されたピペラジニル、任意に置換された保護ピペラジニル、または任意に置換された4-ピペリジノピペリジニル例えば、を形成する。第5番目5の代替実施形態では、nは1または2であり、Rcは、H、メチル、エチル、ハロゲン、-CF3、-NO2、-OMe、-CO2Me、-OH、-CH2OH、-CH2OCOCH2NH2、-CH2OCOCCH32CH2NH2、-CH2NH2、-CH2NCH32、-CH2COOH、および代替実施形態2~4の-CH2-ピペラジニルである。第6番目6の代替実施形態では、構造式II~V、VII~IX、XIおよびXIIのYは、式IA-[Ar’]j-C1~10アルキル-IA;により表され;式中、Ar’は、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたC1~4アルキルアリール、または任意に置換されたC1~4アルキルヘテロシクリルであり;jは0または1である。第7番目7の代替実施形態では、構造式II~V、VII~IX、XIおよびXIIのYは、式IIA[Ar]0-1-CR1R2x-B-W-D-CR1R2w-IIA;により表され;式中、Arは、アルキル、アルコキシル、ハロ、ハロアルキル、アルコキシ-ハロアルキル、ニトリルおよびニトロから選択される1~4個の基で任意に置換されるフェニル、-CH2-フェニル、ヘテロシクリル、または-CH2-ヘテロシクリルであり;R1およびR2は、それぞれ独立して、水素またはC1~4アルキルであり;BはNR、Oまたは非存在であり;Wは2~8個のアミノ酸を含むペプチド、OCH2CH2nまたは非存在であり;DはCO、NRまたは非存在であり;RはH、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルもしくはアルキニル、および置換もしくは非置換アリールであり;xは1~10の整数であり;wは0または1~10の整数であり;ならびに、nは1~200の整数である。第8番目8の代替実施形態では、構造式IIAのRはHまたはC1~4アルキルである。第9番目9の代替実施形態では、構造式II~V、VII~IX、XIおよびXIIならびに代替実施形態1~8のYは、CR1R2x-であり、xは1~6の整数である。第10番目10の代替実施形態では、構造式II~XIIおよび代替実施形態1~9のR1およびR2は、それぞれ独立して、水素またはメチルである。第11番目11の代替実施形態では、構造式II~V、VII~IX、XIおよびXIIのYは、以下の式の一つにより表される。第12番目12の代替実施形態では、式I~XIIおよび代替実施形態1~11のR’は、HまたはC1~4アルキルである。第13番目13の代替実施形態では、式I~XIIおよび代替実施形態1~12のMayOは、式により表され;式中、X’4=X’5であり、またはOX’5およびX’、X’1、X’2、X’3、およびX’5は同じかまたは異なり、R、C=OR、C=ONR2またはC=OORから選択され、式中、Rはそれぞれ独立して、H、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルもしくはアルキニル、および置換もしくは非置換アリールから選択され;QはOまたはSから選択され;但し、X’、X’1、X’2、X’3、X’5のうち少なくとも一つはMayOとAまたはAYとの間の共有結合を表している。第14番目14の代替実施形態では、第13の代替実施形態のRは、独立して、HまたはC1~4アルキルである。第15番目15の代替実施形態では、式IからXIIおよび代替実施形態1~14のMayOは、式により表される。第16番目16の代替実施形態では、式VのBFCGは、M’に接続されたM部分およびCBに接続されたZ部分を含み、式中、MおよびZは、それぞれ独立して、-C=O-、-C=O-NRe-、-C=O-O-、-O-C=O-、-C=NH-、-C=NH-NRe-、-S-、-NRe-、-NH-NRe-、-C=NRe-、=NNRe、-CH2-C=O-、および-CH2-C=O-NReから成る群から選択され、式中、Reは、H、アルキル、アルケニルまたはアルキルニルであり、残りの変数に関しては、代替実施形態1~15に記載の通りである。第17番目17の代替実施形態では、第16の代替実施形態のMおよびZは、それぞれ独立して、-C=O-、-S-、-CH2-C=O、-CH2-C=O-NH-および-O-C=O-から成る群から選択され、変数の残りは代替実施形態1~15に記載の通りである。第18番目18代替実施形態では、第16の代替実施形態のM’-Mは、から選択される構造式により表され、残りの変数は代替実施形態1~17に記載の通りである。第19番目19の代替実施形態では、式Vの-BFCGは、式IIIA-M-CR3R4y-[Cy]0または1-CO-IIIA;により表され、または薬学的に許容可能なその塩もしくは溶媒和物であり;式中、Mはであり、R3およびR4は、それぞれ独立して、水素、メチルまたは-SO3-Mであり、Mは、Hまたは薬学的に許容可能な陽イオンであり;Cyは、シクロアルキル、またはアルキル、アルコキシル、ハロ、ハロアルキル、アルコキシハロアルキル、ニトリルおよびニトロから選択される1~4個の基で任意に置換されるフェニルであり、yは0または1~10の整数であり、残りの変数は代替実施形態1~18に記載の通りである。第20番目20の代替実施形態では、式VのBFCGは、であり;および、M’は-S-であり、残りの変数は代替実施形態1~19に記載の通りであり、残りの変数は代替実施形態1~19に記載の通りである。第21番目21の代替実施形態では、式VのBFCGは、であり;および残りの変数は代替実施形態1~20に記載の通りである。第22番目22の代替実施形態では、式Vの-BFCG-は、式IVAS-CR3R4y’-COIVA;により表され;式中、R3R4は、それぞれ独立して、水素、メチルまたは-SO3-Mであり、MはHまたは薬学的に許容可能な陽イオン、y’は1~10の整数、残りの変数は代替実施形態1~18に記載の通りである。第23番目23の代替実施形態では、本発明は、BFCGが自己犠牲部分を含み、残りの変数は代替実施形態1~22に記載の通りである、細胞結合剤コンジュゲートに関連する。第24番目24の代替実施形態では、式VのBFCGは以下の式により表され;式中、AAは、アミノ酸または2~8個のアミノ酸を含むペプチドであり、R100はHまたはアルキルであり、残りの変数は代替実施形態1~18に記載の通りである。代替的に、式VのBFCGは以下の式により表され;式中、AAは、アミノ酸または2~8個のアミノ酸を含むペプチドであり、アミノ酸側鎖の一つは、本明細書に記載の、細胞結合剤と共有結合する連結部分Z例えば、-NH-、-C=O-を有し、R100はHまたはアルキルである。別の代替では、式VのBFCGは、-AA-C=O0~1-C0~6アルキル-Z-であり、式中、AAはアミノ酸または2~8個のアミノ酸を含むペプチドであり、Zは連結基であり;または式VのBFCGは、であり、式中、AAはアミノ酸または2~8個のアミノ酸を含むペプチドであり、アミノ酸側鎖の一つは、本明細書に記載の、細胞結合剤と共有結合する連結部分Z例えば、-NH-、-C=O-を有する。第25番目25の代替実施形態では、代替実施形態24のAAは、Val-Cit、Val-Lys、Phe-Lys、Lys-Lys、Ala-Lys、Phe-Cit、Leu-Cit、Lle-Cit、Trp、Cit、Phe-Ala、Phe-N9-トシル-Arg、Phe-N9-ニトロ-Arg、Phe-Phe-Lys、D-Phe-Phe-Lys、Gly-Phe-Lys、Leu-Ala-Leu、Ile-Ala-Leu、Val-Ala-Val、Ala-Leu-Ala-Leu配列番号1、β-Ala-Leu-Ala-Leu配列番号2およびGly-Phe-Leu-Gly配列番号3、Gly-Gly-Gly配列番号4、Val-Arg、Arg-Val、Arg-Arg、Val-D-Cit、Val-D-Lys、Val-D-Arg、D-Val-Cit、D-Val-Lys、D-Val-Arg、D-Val-D-Cit、D-Val-D-Lys、D-Val-D-Arg、およびD-Arg-D-Argから成る群から選択され、残りの変数は代替実施形態1~18に記載の通りである。第26番目26の代替実施形態では、代替実施形態24~25のAAは、Gly-Gly-Gly、Val-Cit、Phe-LysまたはVal-Lysであり、残りの変数は代替実施形態1~18に記載の通りである。第27番目27の代替実施形態では、式VのBFCGは、から選択され;式中、AAはVal-Cit、Phe-LysまたはVal-Lysであり、qは1~5の整数、nは1~20の整数であり;MはHまたは薬学的に許容可能な陽イオンであり、残りの変数は代替実施形態1~18に記載の通りである。第28番目28の代替実施形態では、式III~Vの細胞結合剤は、腫瘍細胞、ウイルス感染細胞、微生物感染細胞、寄生虫感染細胞、自己免疫細胞、活性化細胞、骨髄細胞は、活性化T細胞、B細胞、またはメラノサイト;CD4、CD6、CD19、CD20、CD22、CD30、CD33、CD37、CD38、CD40、CD44、CD56、EpCAM、CanAg、CALLA、STEAP、TENB2、MUC16、IRTA1、IRTA2、IRTA3、IRTA4、IRTA5、c-MET、5T4、またはHer-2抗原/Her-3抗原を発現する細胞;またはインスリン成長因子受容体、上皮成長因子受容体、および葉酸受容体を発現する細胞から選択される標的細胞と結合し、残りの変数は、代替実施形態1~27に記載の通りである。第29番目29の代替実施形態では、式III~Vの細胞結合剤は、抗体、単鎖抗体、標的細胞と特異的に結合する抗体断片、モノクロナール抗体、単鎖モノクロナール抗体、または標的細胞と特異的に結合するモノクロナール抗体断片、キメラ抗体、標的細胞と特異的に結合するキメラ抗体、ドメイン抗体、標的細胞と特異的に結合するドメイン抗体、二重特異性抗体diabody、ナノ抗体、probody、Darpin、リンホカイン、ホルモン、ビタミン、増殖因子、コロニー刺激因子、または栄養素輸送分子であり、残りの変数は、代替実施形態1~27に記載の通りである。第30番目30の代替実施形態では、代替実施形態29の抗体は、表面再構成resurfaced抗体、表面再構成単鎖抗体、または表面再構成抗体断片であり、残りの変数は、代替実施形態1~27に記載の通りである。第31番目31の代替実施形態では、代替実施形態29の抗体は、モノクロナール抗体、単鎖モノクロナール抗体、またはそのモノクロナール抗体断片であり、残りの変数は、代替実施形態1~27に記載の通りである。第32番目32の代替実施形態では、代替実施形態29の抗体は、ヒト化抗体、ヒト化単鎖抗体、またはヒト化抗体断片であり、残りの変数は、代替実施形態1~27に記載の通りである。第33番目33の代替実施形態では、式I~Vおよび例示的実施形態1~32の細胞結合剤コンジュゲートは、薬学的に許容可能な担体を有する医薬組成物として処方される。第34番目34の代替実施形態では、式VI~IXの化合物は、構造式2~5により表され;式中、R’は、H、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、および置換もしくは非置換アリールから選択され;Yは、置換もしくは非置換直鎖状、分岐状、もしくは環状アルキル、アルケニルまたはアルキニル、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換複素環式基から選択される任意の基であり、それぞれは任意のポリエチレングリコールユニットOCH2CH2nnは1~200の整数およびペプチドを担持し;Lは、ジスルフィド結合、チオエーテル結合、ペプチド結合、アミド結合、エステル結合もしくはヒドラゾン結合を介して細胞結合剤との連結を形成する官能基、または薬学的に許容可能なアンサマイトシン誘導体の塩もしくは溶媒和物であり、残りの変数は、代替実施形態1~15に記載の通りである。第35番目35の代替実施形態では、式VIII~IXおよび代替実施形態34のLは、マレイミド、ハロアセタミド、-SH、-SSRd、-CH2SH、-CHMeSH、-CMe2SH、-NHRf、-CH2NHRf、-NRfNH2、-COOH、および-COEから選択される構造式により表され、式中、COEは反応性エステルを表し、Rdは、任意に置換されたフェニルまたは任意に置換されたピリジルであり、RfはHまたはアルキルであり、残りの変数は代替実施形態1~15で定められた通りである。第36番目36の代替実施形態では、代替実施形態35の-COEにより表される反応性エステルは、N-ヒドロキシスクシンイミドエステル、N-ヒドロキシスルホスクシンイミドエステル、ニトロフェニル例えば、2または4-ニトロフェニルエステル、ジニトロフェニル例えば、2,4-ジニトロフェニルエステル、スルホ-テトラフルオロフェニル例えば、4-スルホ-2,3,5,6-テトラフルオロフェニルエステル、およびペンタフルオロフェニルエステルから選択され、Rdは、フェニル、ニトロフェニル例えば、2または4-ニトロフェニル、ジニトロフェニル例えば、2または4-ニトロフェニル、カルボキシニトロフェニル例えば、3-カルボキシ-4-ニトロフェニル、ピリジルまたはニトロピリジル例えば、4-ニトロピリジルから選択され、残りの変数は、代替実施形態1~15で定められた通りである。第37番目37の代替実施形態では、式VI~IXおよび例示的実施形態34~36の化合物は、化合物6~26の任意の一つ、または薬学的に許容可能なその塩もしくは溶媒和物により表され;式中、xは1~6の整数であり;RfはHまたはアルキルである。第38番目38の代替実施形態では、式XIIのBFCG’には、M’に接続する連結基Mが含まれ、Mは、C=O-、-C=O-NRe-、-C=O-O、-OC=O-、-C=NH-、-C=NH-NRe-、-S-、-NRe-、-NH-NRe-、-C=NRe-、-=NNRe-、-CH2-C=O-、および-CH2-C=O-NRe-から成る群から選択され、式中、Reは、H、アルキル、アルケニルまたはアルキルニルであり、残りの変数は、代替実施形態1~15で定められた通りである。第39番目39の代替実施形態では、代替実施形態38のMは、C=O-、-S-、-CH2-C=O、-CH2-C=ONHおよび-O-C=O-から成る群から選択され、残りの変数は、代替実施形態1~15で定められた通りである。第40番目40の代替実施形態では、代替実施形態38のM’-Mは、から選択される構造式により表され、残りの変数は、代替実施形態1~15で定められた通りである。第41番目41の代替実施形態では、式XIIのBFCG’は、式IIIC-M-CR3R4y-[Cy]0または1-IIIC;により表され、または、薬学的に許容可能なその塩もしくは溶媒和物であり;式中Mはであり;R3およびR4は、それぞれ独立して、水素、メチルまたは-SO3-Mであり、Mは、Hまたは薬学的に許容可能な陽イオンであり、Cyは、シクロアルキル、またはアルキル、アルコキシル、ハロ、ハロアルキル、アルコキシハロアルキル、ニトリル、およびニトリルから選択される1~4個の基で任意に置換されたフェニルであり;yは0または1~10の整数であり、残りの変数は、代替実施形態1~15で定められた通りである。第42番目42の代替実施形態では、式XIIおよび代替実施形態38~41のBFCG’は、であり;およびM’は-S-であり、残りの変数は、代替実施形態1~15で定められた通りである。第43番目43の代替実施形態では、式XIIIおよび代替実施形態38~42のBFCG’は、であり、残りの変数は、代替実施形態1~15に定められた通りである。第44番目44の代替実施形態では、式XIIの-BFCG’は、式IVCS-CR3R4yIVC;により表され;式中、R3およびR4は、それぞれ独立して、水素、メチル、-SO3-Mであり、MはHまたは薬学的に許容可能な陽イオンであり、y’は1~10の整数であり、残りの変数は、代替実施形態1~15で定められた通りである。第45番目45の代替実施形態では、式XIIのBFCG’には自己犠牲部分が含まれ、残りの変数は、代替実施形態1~15で定められた通りである。第46番目46の代替実施形態では、式XIIのBFCG’は、以下の式により表され:式中、AAはアミノ酸または2~8個のアミノ酸を含むペプチドであり、R100はHまたはアルキルであり、残りの変数は、代替実施形態1~15で定められた通りである。代替的に、式XIIのBFCG’-Z’は、以下の式により表され:式中、AAはアミノ酸または2~8個のアミノ酸を含むペプチドであり、アミノ酸側鎖の一つは、細胞結合剤と共有結合することができる上記の連結基Z’例えば、-NH2、-COOHまたは-COEを有し、R100はHまたはアルキルである。別の代替では、式VのBFCG’は-AA-C=O0~1-C0~6アルキル-であり、AAは、アミノ酸または2~8個のアミノ酸を有するペプチドであり;式VのBFCG’-Z’は、であり、式中、AAはアミノ酸または2~8個のアミノ酸を有するペプチドであり、アミノ酸側鎖の一つは、細胞結合剤と共有結合することができる上記の連結基Z’例えば、-NH2、または-COEを有する。第47番目47の代替実施形態では、代替実施形態46のAAは、Val-Cit、Val-Lys、Phe-Lys、Lys-Lys、Ala-Lys、Phe-Cit、Leu-Cit、Lle-Cit、Trp、Cit、Phe-Ala、Phe-N9-トシル-Arg、Phe-N9-ニトロ-Arg、Phe-Phe-Lys、D-Phe-Phe-Lys、Gly-Phe-Lys、Leu-Ala-Leu、Ile-Ala-Leu、Val-Ala-Val、Ala-Leu-Ala-Leu配列番号1、β-Ala-Leu-Ala-Leu配列番号2およびGly-Phe-Leu-Gly配列番号3、Gly-Gly-Gly配列番号4、Val-Arg、Arg-Val、Arg-Arg、Val-D-Cit、Val-D-Lys、Val-D-Arg、D-Val-Cit、D-Val-Lys、D-Val-Arg、D-Val-D-Cit、D-Val-D-Lys、D-Val-D-Arg、およびD-Arg-D-Argから成る群から選択され、残りの変数は、代替実施形態1~15で定められた通りである。第48番目48の代替実施形態では、代替実施形態46~47のAAは、Gly-Gly-Gly、Val-Cit、Phe-LysまたはVal-Lysであり、残りの変数は、代替実施形態1~15で定められた通りである。第49番目49の代替実施形態では、式XIIのBFCG’は、から選択され;式中、AAは、Val-Cit、Phe-LysまたはVal-Lysであり、qは1~5の整数、nは1~20の整数であり;MはHまたは薬学的に許容可能な陽イオンであり、残りの変数は、代替実施形態1~15に定められた通りである。第50番目50の代替実施形態では、式XIIのZ’は、マレイミド、ハロアセタミド-SH、-SSRd、-CH2SH、-CHMeSH、-CMe2SH、-NHRc、-CH2NHRc、-NRcNH2、-COOH、および-COEから成る群から選択され、COEは反応性エステルを表し、Rdは、任意に置換されたフェニルまたは任意に置換されたピリジルであり、RfはHまたはアルキルであり、残りの変数は、代替実施形態1~49で定められた通りである。第51番目51の代替実施形態では、代替実施形態50のCOEは、N-ヒドロキシスクシンイミドエステル、N-ヒドロキシスルホスクシンイミドエステル、ニトロフェニル例えば、2または4-ニトロフェニルエステル、ジニトロフェニル例えば、2,4-ジニトロフェニルエステル、スルホ-テトラフルオロフェニル例えば、4-スルホ-2,3,5,6-テトラフルオロフェニルエステル、およびペンタフルオロフェニルエステルから選択され、Rdは、フェニル、ニトロフェニル例えば、2または4-ニトロフェニル、ジニトロフェニル例えば、2または4-ニトロフェニル、カルボキシニトロフェニル例えば、3-カルボキシ-4-ニトロフェニル、ピリジルまたはニトロピリジル例えば、4-ニトロピリジルから選択され、残りの変数は、代替実施形態1~49で定められた通りである。第52番目52の代替実施形態では、第13代替実施形態の化学療法薬は、経時的または連続的に前記哺乳動物に投与される。第53番目53の代替実施形態では、第13代替実施形態および代替実施形態52は、癌、関節リウマチ、多発性硬化症、移植片対宿主病GVHD、移植片拒絶反応、狼瘡、筋炎、感染症、および免疫不全から選択される病態を治療するためのものである。第54番目54の代替実施形態では、第13代替実施形態および代替実施形態52の方法は、癌治療のためである。第55番目55の代替実施形態では、第13代替実施形態ならびに代替実施形態52および54は、癌治療のためであって、癌は、乳癌、結腸癌、脳腫瘍、前立腺癌、腎臓癌、膵臓癌、卵巣癌、頭頸部癌、黒色腫、結腸直腸癌、胃癌、扁平上皮癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、精巣癌、メルケル細胞癌、神経膠芽腫、神経芽細胞腫、およびリンパ器官の癌から選択される。別の実施形態では、式VのMayO-A-Y-M’-BFCGは、以下の式で表され;式中、RfはHまたはアルキルであり;Qは-O-または-NR100であり;R100はHまたはアルキルであり;R1およびR2は、それぞれ独立して、アミノ酸側鎖である。本明細書で使用する二官能性架橋試薬という用語は、二つの反応性基を所有している試薬を指しており:そのうちの一つは、細胞結合剤と反応することができ、もう一つは、細胞傷害性剤と反応して、細胞結合剤と細胞傷害性剤とを連結することができ例えば、式VI-IXの化合物、よってコンジュゲートを形成する。任意の好適な二官能性架橋試薬は、連結試薬が細胞傷害性などの治療効果の保持性を提供し、過度の傷害性を示すことなく、細胞傷害性および細胞結合性それぞれの目標特性を提供する限りにおいて、本発明との関連で使用され得る。連結分子は、上記の化学結合を介して、細胞傷害性剤を細胞結合剤と連結させ、細胞傷害性剤および細胞結合剤を互いに化学的にカップリング例えば、共有結合させることが好ましい。本発明の薬剤連結化合物を作成するために使用され得る二官能性架橋試薬にはまた、その全体が参照により本明細書に援用される、ThermoScientificPierceCrosslinkingTechnicalHおよびbookに記載のものも含まれる。一つの実施形態では、二官能性架橋試薬には、非開裂性リンカーが含まれる。非開裂性リンカーは、細胞傷害性剤例えば、式VI~IXの化合物を細胞結合剤に、安定的かつ共有結合的に連結することができる任意の化学的部分である。よって、細胞傷害性剤または細胞結合剤が活性状態のままである条件下では、非開裂性リンカーは、酸誘導開裂、光誘導開裂、ペプチダーゼ誘導開裂、エステラーゼ誘導開裂、およびジスルフィド結合開裂に対し、実質上抵抗性を示す。細胞傷害性剤と細胞結合剤との間に非開裂性リンカーを形成する好適な架橋試薬は、当技術分野で周知である。一つの実施形態では、細胞傷害性剤は、チオエーテル結合を介して、細胞結合剤と連結する。非開裂性リンカーの例として、細胞傷害性剤と反応するためのマレイミドまたはハロアセタミド部分を有するリンカーが含まれる。かかる二官能性架橋試薬は、当技術分野で周知であり米国特許出願第2010/0129314号、第2009/0274713号、第2008/0050310号、第2005/0169933号、第2009/0274713号、第2010/0129314号、およびPierceBiotechnology社POBox117RocklおよびIL61105USAから市販されている製品、N-スクシンイミジル4-マレイミドメチルシクロヘキサンカルボキシレートSMCC、N-スクシンイミジル-4-N-マレイミドメチル-シクロヘキサン-1-カルボキシ-6-カプロン酸アミドSMCCLC-SMCCの長鎖類似体、κ-マレイミドウンデカン酸N-スクシンイミジルエステルKMUA、γ-マレイミド酪酸N-スクシンイミジルエステルGMBS、ε-マレイミドカプロン酸N-ヒドロキシスクシンイミドエステルEMCS、m-マレイミドベンゾイル-N-ヒドロキシスクシンイミドエステルMBS、N-α-マレイミドアセトキシ-スクシンイミドエステルAMAS、スクシンイミジル-6-β-マレイミドプロパンアミドヘキサノエートSMPH、N-スクシンイミジル4-p-マレイミドフェニル-ブチレートSMPB、およびN-p-マレイミドフェニルイソシアネートPMPIが含まれるが、これらに限定されない。ハロアセチルベースの部分を含む架橋試薬には、N-スクシンイミジル-4-ヨードアセチル-アミノベンゾエートSIAB、N-スクシンイミジルヨード酢酸SIA、N-スクシンイミジルブロモ酢酸SBA、およびN-スクシンイミジル3-ブロモアセトアミドプロピオネートSBAP、ビス-マレイミドポリエチレングリコールBMPEO、BMPEO2、BMPEO3、N-β-マレイミドプロピロキシスクシンイミドエステルBMPS、5-マレイミド吉草酸NHS、HBVS、4-4-N-マレイミドフェニル-酪酸ヒドラジドHClMPBH、スクシンイミジル-4-ビニルスルホニルベンゾエートSVSB、ジチオビス-マレイミドエタンDTME、1,4-ビス-マレイミドブタンBMB、1,4-ビスマレイミディビスマレイミジル-2,3-ジヒドロキシブタンBMDB、ビス-マレイミドヘキサンBMH、ビス-マレイミドエタンBMOE、スルホスクシンイミジル4-N-マレイミド-メチルシクロヘキサン-1-カルボキシレートスルホ-SMCC、スルホスクシンイミジル4-ヨードアセチルアミノベンゾエートスルホ-SIAB、m-マレイミドベンゾイル-N-ヒドロキシスルホスクシンイミドエステルスルホ-MBS、N-γ-マレイミドブチルオキシスルホスクシンイミドエステルスルホ-GMBS、N-ε-マレイミドカプロイルオキシスルホスクシンイミドエステルスルホ-EMCS、N-κ-マレイミドウンデカノイルオキシスルホスクシンイミドエステルスルホ-KMUS、スルホスクシンイミジル4-p-マレイミドフェニルブチレートスルホ-SMPB、CX1-1、スルホ-MalおよびPEGn-Malが含まれる。二官能性架橋試薬はSMCCであることが好ましい。一つの実施形態では、連結試薬は開裂性リンカーである。好適な開裂性リンカーの例として、ジスルフィドリンカー、酸不安定性リンカー、感光性リンカー、ペプチダーゼ不安定性リンカー、およびエステラーゼ不安定性リンカーが含まれる。リンカーを含有するジスルフィドは、ジスルフィド交換を介して開裂可能なリンカーであり、生理学的条件下で発生し得る。酸不安定性リンカーは、酸性pHで開裂可能なリンカーである。例えば、エンドソームやリソソームなど、特定の細胞内区画は、酸性pHpH4~5を有し、酸不安定性リンカーを開裂するのに好適な状況を提供する。感光性リンカーは、体表面および光にアクセス可能な体腔において有益である。さらに、赤外線は組織に浸透する。ペプチダーゼ不安定性リンカーは、細胞内または細胞外の特定のペプチドを開裂するのに使用することができるTrouetetalProcNatlAcadSciUSA79626629およびUmemotoetalIntJCancer43677684。一つの実施形態では、開裂可能なリンカーは、例えば、細胞傷害性剤の活動に影響が及ばない細胞内の条件下など、穏やかな条件下で開裂される。別の実施形態では、細胞傷害性剤は、ジスルフィド結合を介して細胞結合剤と連結する。連結分子には、細胞結合剤と反応し得る化学反応性基が含まれる。細胞結合剤と反応する好ましい化学反応性基は、N-スクシンイミジルエステルおよびN-スルホスクシンイミジルエステルである。さらに、リンカー分子には、細胞傷害性剤と反応してジスルフィド結合を形成し得る反応性化学基、好ましくはジチオピリジル基が含まれる。ジスルフィド結合を介して細胞結合剤を細胞傷害性剤と連結することができる二官能性架橋試薬は、当技術分野で既知であり、例えば、N-スクシンイミジル3-2-ピリジルジチオプロピオネートSPDP例えば、CarlssonetalBiochemJ173723737を参照、N-スクシンイミジル4-2-ピリジルジチオブタノエートSPDB例えば、米国特許第4,563,304号を参照、N-スクシンイミジル4-2-ピリジルジチオペタノエートSPP例えば、CASRegistrynumber341498086を参照、およびN-スクシンイミジル-4-2-ピリジルジチオ2-スルホブタノエートスルホ-SPDB例えば、米国特許出願第2009/0274713号を参照がある。ジスルフィド基を導入するのに使用され得るその他の二官能性架橋試薬は、当技術分野で既知であり、その全体が参照により本明細書に援用される米国特許第6,913,748号、第6,716,821号および米国特許出願公開第2009/0274713号および第2010/0129314号に記載されている。非開裂性リンカーを形成する、硫黄原子を含まないその他の架橋試薬もまた、本発明の方法で使用され得る。かかるリンカーは、ジカルボン酸ベースの部分から派生され得る。好適なジカルボン酸ベースの部分には、一般式IXHOOC-Xl-Yn-Zm-COOHIXのα,ω-ジカルボン酸が含まれるが、これに限定されず、式中、Xは、2~20個の炭素原子を有する直鎖状もしくは分岐状アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基であり、Yは、3~10個の炭素原子を担持するシクロアルキル基またはシクロアルケニル基であり、Zは、6~10個の炭素原子を担持する置換もしくは非置換芳香族基、または置換もしくは非置換複素環式基であり、ヘテロ原子はN、O,またはSから選択され、l、m、およびnは0または1であり、但し、l、m、nがすべて同時に0ゼロになることはない。本明細書の非開裂性リンカーの多くは、米国特許出願公開第2005/0169933A1号明細書に詳細が記載されている。一つの実施形態では、式VIIのBFCG’-Z’は、以下の構造式により表され:式中、qは1~5の整数であり;nは2~6の整数であり;DはHまたはSO3Mであり;MはHまたはNaまたはKなどの陽イオンである。BFCG’-Z’は、式a1、a4、a8、a9およびa10により表されることがさらに好ましい。連結基は、二官能性架橋試薬と反応し得る化合物、誘導体化されたマイタンシノールもしくはマイタンシノール類似体例えば、式VI~IXの化合物を含む化合物、または化学的結合を形成し得る細胞結合剤を含む化合物上の官能基である。二つの部分、例えば、細胞結合剤または誘導体化されたマイタンシノールもしくはマイタンシノール類似体例えば、式VI~IXの化合物を含む化合物などの生物活性部分、または連結基などの反応性部分は、生物活性および/または反応性が実質上維持されるよう、化学結合もしくはその他の基により接続する時連結される。例えば、MayO-A-および細胞結合剤は、構造式IIIのY-M’-BFCGにより連結される。前記二つの部分を接続する基は、本明細書ではリンカーと称され、構造式VのY-M’-BFCGのことである。残基は、化合物の反応性官能基が第2の化合物と反応および結合した後に化合物内に残った原子のことである。同様に、反応後に残った第2の化合物の原子は、第2化合物の残基である。自己犠牲部分という用語は、二つの化学的部分を、通常は安定している三分裂分子に共有結合的に連結することができる二官能性化学的部分を指している。自己犠牲的部分は、第1の部分への結合が開裂されれば、第2の部分から自発的に分離することができる。自己犠牲部分には、米国特許第7,750,116号および第7,705,045号ならびに米国特許出願第2010/0062008号に記載されているそのような部分が含まれるが、これに限定されない。一つの実施形態では、自己犠牲部分は、p-アミノベンジルオキシカルボニルPABCである。代替的に、自己犠牲部分は、カルボニル基を含む構造p-NH-Ph-CH=CCH2O2を有する、p-アミノ-ビスヒドロキシメチルスチレンBHMSであり、構造はp-NH-Ph-CH=CCH2OCO2である。遮断されるinterruptedと担持するbearingは、本明細書では同義に使用される。これらの用語は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキルおよびヘテロシクリルアルキル基の一つまたは複数のメチレン基が、ポリエチレンユニット、アジリジン基、エポキシ基、アミノ基、アミド基、エステル基、アリール基およびヘテロシクリル基など、特異的な基により置換されるという意味である。直鎖状または分岐状アルキルは、飽和直鎖または分岐鎖の一価炭化水素ラジカルであり、好ましくは1~10個の炭素原子を有している。好適な直鎖アルキルの例として、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、およびヘキシルが含まれる。好適な分岐アルキルの例として、イソプロピル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、イソペンチル、および1-エチル-プロピルが含まれる。直鎖および分岐アルキル基は、以下に記載の通り、一つまたは複数の置換基で置換されてもよい。直鎖状または分岐状アルケニルは、直鎖または分岐鎖の一価炭化水素ラジカルであり、好ましくは、少なくとも一つの不飽和部位、すなわち、炭素-炭素、二重結合を持つ2~10個の炭素原子を有し、アルケニル基には、cis配置およびtrans配置、または、E配置およびZ配置を有するラジカルが含まれる。好適な直鎖アルケニルの例として、エチレニルまたはビニル-CH=CH2、アリル-CH2CH=CH2、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ペンタジエニルおよびヘキサジエニルが含まれる。好適な分岐アルケニルの例として、イソブチル、イソペンテニルおよびイソヘキセニルである。好ましいアルケニル基は、ビニル基、アリル基およびイソブテニル基である。直鎖および分岐アルケニル基は、以下に記載の通り、一つまたは複数の置換基で置換されてもよい。直鎖状または分岐状アルケニルは、直鎖状または分岐状の一価炭化水素ラジカルであり、好ましくは、少なくとも一つの不飽和部位、すなわち、炭素-炭素、三重結合を持つ2~10個の炭素原子を有する。好適なアルキニルの例として、エチニル、プロピニル、1-ブチニル、2-ブチニル、1-ペンチニル、2-ペンチニル、3-ペンチニル、ヘキシニルなどが含まれる。直鎖および分岐アルキニル基は、以下に記載の通り、一つまたは複数の置換基で置換されてもよい。環状アルキル、環状アルケニルおよび環状アルキニルは、一価非芳香族の飽和または一部不飽和の環であり、好ましくは、単環式環として3~12個の炭素原子を有し、または二環式環として7~12個の炭素原子を有する。環状アルキル、アルケニルおよびアルキニルの例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロへキセニル、シクロヘキサジエニル、シクロブチニル、シクロペンチニルおよびシクロヘキシニルが含まれる。好ましい環状アルキル、アルケニル、アルキニル基には、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロペンテニル、シクロへキセニル、シクロヘキサジエニルおよびシクロヘキシニルおよびシクロオクチニルが含まれる。環状アルキル基、アルケニル基およびアルキニル基は、以下に記載の通り、一つまたは複数の置換基で置換されてもよい。RおよびR’により表されるアルキル、アルケニルおよびアルキニルの好ましい置換基には、スルホン酸基、ホスホン酸、カルボキシル基、カルボキシルエステル、例えば、メチルまたはエチルエステルなど、および第一アミン、第二アミン、第三アミンまたは第四アミンから選択される一つまたは複数が含まれる。好ましいのは、メチル基、エチル基、プロピル基およびイソプロピル基である。YおよびY’で表されるアルキル、アルケニルおよびアルキニルのための好ましい置換基には、ハロゲン、メトキシ基、エトキシ基もしくはフェノキシ基などのアルコキシ基またはアリールオキシ基、S-メチル、S-エチルおよびS-フェニルなどの硫化物、S-アセチルなどのチオエステル、メチルスルホキシドまたはフェニルスルホキシドなどのスルホキシド、メチルスルホンまたはフェニルスルホンなどのスルホン、スルホンアミド、アルデヒド、アセチルまたはベンゾイルなどのケトン、エチレンオキシドなどのエポキシド、エピスルフィド、アセトアミドまたはベンゾアミドなどのアミド部分、第一アミノ基、第二アミノ基、第三アミノ基もしくは第四アミノ基またはアルキルアミノ基もしくはアリールアミノ基、例えば、メチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノもしくはトリエチルアミノなど、ヒドラジノ、スルホン酸、カルボキシル基、メチルエステルまたはエチルエステルなどのカルボキシエステル、カルボキサミド、ウレイド基、リン酸基、ニトロ基、アジド基、シアノ基、およびシアネートから選択される一つまたは複数が含まれる。アリール基または芳香族基は、一価の芳香族炭化水素ラジカルであり、好ましくは、6~18個の炭素原子を有する。アリール基または芳香族基には、飽和環、部分不飽和環、または芳香族炭素環式環または複素環式環と融合する芳香族環を含む二環式ラジカルが含まれる。置換アリールの例として、フェニル、ナフチルおよびアントラセニルが含まれる。アリール基または芳香族基は、置換されてもよい。RおよびR’で表されるアリール基または芳香族基は、1~4個の炭素原子を含有する少なくとも一つのアルキル基またはアルケニル基、メトキシもしくはエトキシなどのアルコキシ基、ハロゲン、ニトロ基、スルホン酸基、ホスホン酸、カルボキシル、メチルエステルもしくはエチルエステルなどのカルボキシエステル、第一アミン、第二アミン、第三アミンもしくは第四アミン、またはメトキシもしくはエトキシなどのアルコキシで置換されることが好ましい。YまたはY’で表されるアリール基または芳香族基は、少なくとも一つのハロゲン、メトキシ、エトキシもしくはフェノキシなどのアルコキシ基またはアリールオキシ基、S-メチル、S-エチルおよびS-フェニルなどの硫化物、S-アセチルなどのチオエステル、メチルスルホキシドまたはフェニルスルホキシドなどのスルホキシド、メチルスルホンまたはフェニルスルホンなどのスルホン、スルホンアミド、アルデヒド、アセチルまたはベンゾイルなどのケトン、エチレンオキシドなどのエポキシド、エピスルフィド、アセトアミドまたはベンゾアミドなどのアミド部分、メチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノもしくはトリエチルアミノなど、第一アミノ基、第二アミノ基、第三アミノ基もしくは第四アミノ基またはアルキルアミノ基もしくはアリールアミノ基、ヒドラジノ、スルホン酸、カルボキシル基、メチルエステルまたはエチルエステルなどのカルボキシエステル、カルボキサミド、ウレイド基、リン酸基、ニトロ基、アジド基、シアノ基、またはシアネートで置換されることが好ましい。置換アリール基または芳香族基の好ましい例として、ニトロフェニル、ジニトロフェニル、クロロフェニル、およびメトキシフェニル、トルイル、およびアニリンが含まれる。複素環式基またはヘテロシクリルは、飽和、一部不飽和または芳香族の炭素環式ラジカルで、好ましくは3~18個の環原子を有し、少なくとも一つの環原子は、窒素、酸素、リンおよび硫黄から選択されるヘテロ原子であり、一つまたは複数の環原子は、以下に記載の一つまたは複数の置換基と、独立して、任意に置換されるものを指している。複素環式基は、単環基でもよく、好ましくは3~7員環2~6個の炭素原子およびN、O、PおよびSから選択される1~4個のヘテロ原子であるか、または二環基であり、好ましくは7~10員環4~9個の炭素原子およびN、O、PおよびSから選択される1~6個のヘテロ原子である。複素環式環に関しては、PaquetteLeoAPrinciplesofModernHeterocyclicChemistry特に、第1章、3章、4章、6章、7章および9章;TheChemistryofHeterocyclicCompoundsAseriesofMonographs特に、Vol.13、14、16、19および28;ならびにJAmChemSoc825566に記載されている。最も好ましくは、複素環式環は、N、OまたはSから選択される一つまたは複数のヘテロ原子を含有する、3~10員環系を有する環状化合物である。複素環式基の例として、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、ピペリジノ、モルホリノ、ピペラジニル、オキセタニル、チエタニル、ピロリニル、インドリニル、2H-ピラニル、4H-ピラニル、ジオキサニル、ピラゾリニル、ジチアニル、ピペリジノピペリジニル、複素環芳香族基、例えば、ピペリジニル、イミダゾリル、ピリミジニル、ピラゾリル、トリアゾリル、ピラジニル、テトラゾリル、フリル、チエニル、イソオキサゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、キノリニル、イソキノリニル、インドリル、ベンゾイミダゾリルおよびベンゾフラニルが含まれる。一つの実施形態では、ヘテロシクリル基は、任意に置換されたピペラジニル基または任意に置換されたピペリジノピペリジニル例えば、4-ピペリジノピペリジニル基である。複素環式基は、1~4個の炭素原子を含有するアルキルもしくはアルケニル、または、メトキシもしくはエトキシなどのアルコキシから選択される一つまたは複数の置換基で、あるいはハロゲン、S-メチル、S-エチルおよびS-フェニルなどの硫化物、S-アセチルなどのチオエステル、メチルスルホキシドまたはフェニルスルホキシドなどのスルホキシド、メチルスルホンまたはフェニルスルホンなどのスルホン、スルホンアミド、アルデヒド、アセチルまたはベンゾイルなどのケトン、エチレンオキシドなどのエポキシド、エピスルフィド、アセトアミドまたはベンゾアミドなどのアミド部分、第一アミノ基、第二アミノ基、第三アミノ基もしくは第四アミノ基またはアルキルアミノ基もしくはアリールアミノ基、例えば、メチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノもしくはトリエチルアミノなど、ヒドラジノ、スルホン酸、カルボキシル基、メチルエステルまたはエチルエステルなどのカルボキシエステル、カルボキサミド、ウレイド基、リン酸基、ニトロ基、アジド基、シアノ基、またはシアネートで任意に置換されてもよい。本発明に有益なペプチド類は、短いアミノ酸ユニットであり、好ましくは、N-アルキルアミノ酸、例えば、N-メチルアミノ酸を含む天然または非天然のアミノ酸で構成される2~10個のアミノ酸ユニットであり、またL-異性体、D-異性体またはそのラセミアミノ酸である。好適なペプチド類の例として、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチドおよびペンタペプチドが含まれる。好ましいペプチド類には、バリン-シトルリン、ala-phe、gly-gly-gly、ala-leu-ala-leu、ala-leu-ala-leu-β-alaが含まれる。好適なハロゲン類には、F、Cl、BrまたはIが含まれる。薬学的に許容可能な塩は、本発明の化合物の、薬学的に許容可能なな有機または無機塩である。例示的塩には、硫酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシネートgentisinate、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸、ギ酸、ベンゾエート、グルタミン酸、メタンスルホネートメシル酸、エタンスルホネート、ベンゼンスルホネート、p-トルエンスルホン酸塩、塩、アルカリ金属例えば、ナトリウムおよびカリウム塩、アルカリ土類金属例えば、マグネシウム塩、およびアンモニウム塩が含まれるが、これらに限定されない。薬学的に許容可能なな塩として、酢酸イオン、コハク酸イオンまたは他の対イオンなど、別の分子を含有してもよい。対イオンは、親化合物上で電荷を安定させる、任意の有機または無機部分であってもよい。さらに、薬学的に許容可能なな塩は、その構造に複数の荷電原子を有してもよい。複数の荷電原子が薬学的に許容可能なな塩の一部である場合には、複数の対イオンを有することができる。よって、薬学的に許容可能な塩は、一つもしくは複数の荷電原子および/または一つもしくは複数の対イオンを有することができる。本発明の化合物が塩基である場合、薬学的に許容される所望の塩は、当技術分野で利用可能な任意の適切な方法、例えば、遊離塩基の無機酸塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、メタンスルホン酸、リン酸などによる処理、あるいは有機酸酢酸、マレイン酸、コハク酸、マンデル酸、フマル酸、マロン酸、ピルビン酸、シュウ酸、グリコール酸、サリチル酸など、ピラノシジル酸グルクロン酸またはガラクツロン酸など、αヒドロキシ酸クエン酸または酒石酸など、アミノ酸アスパラギン酸またはグルタミン酸など、芳香族酸安息香酸またはケイ皮酸など、スルホン酸p-トルエンスルホン酸またはエタンスルホン酸など、あるいは同様のものなどによる処理によって調製してもよい。本発明の化合物が酸である場合、薬学的に許容される所望の塩は、任意の適切な方法、例えば、遊離酸の無機または有機塩基アミン第一級、第二級もしくは第三級、アルカリ金属水酸化物もしくはアルカリ土類金属水酸化物、または同様のものなどによる処理によって調製してもよい。適切な塩の実例として、アミノ酸由来の有機塩グリシンおよびアルギニンなど、アンモニア、第一級、第二級、および第三級アミン、ならびに環状アミンピペリジン、モルホリンおよびピペラジンなど、ならびにナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、マンガン、鉄、銅、亜鉛、アルミニウムおよびリチウム由来の無機塩が挙げられるが、これらに限定されない。溶媒和物とは、水、イソプロパノール、アセトン、エタノール、メタノール、ヘキサン、ヘプタン、ジメチルアセトアミド、酢酸エチル、酢酸、エタノールアミン、ジクロロエタン、2-プロパノールなど、非共有結合性の分子間力によって結合された、化学量論的または非化学量論的な量の溶媒をさらに含む化合物である。本化合物の溶媒和物または水和物は、メタノール、エタノール、l-プロパノール、2-プロパノールなどのヒドロキシ溶媒または水を前記化合物に、少なくとも1モル当量加えることで容易に調製できる。アンサマイトシン誘導体の合成本発明は、C3ヒドロキシル、C14ヒドロキシメチル、C15ヒドロキシ、またはC20デスメチルが、官能基を担持するエステル、カルバマート、炭酸塩またはエーテルに変換し、細胞結合剤と反応してコンジュゲートを生じさせるアンサマイトシン誘導体を産生する方法を提供する。好適な官能基は、ジスルフィド、チオール、アルコール、カルボキシル、カルボニル、アミン、ヒドラジド、マレイミド、アジド、ハロゲン、メタンスルホン酸などのスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸およびパラトルエンスルホン酸、ビニルピリジン、ビニルスルホン、ビニルスルホンアミド、スルホン酸、スルホニルクロリド、N-ヒドロキシスクシンイミジル、ニトロまたはジニトロフェニルなどの反応性カルボキシエステル、ペンタフルオロフェニル、スルホテトラフルオロフェニル、フタルイミジルである。これらの官能基は、ジスルフィド結合、チオエーテル結合、ペプチド結合、アミド結合、エステル結合またはヒドラゾン結合を介して細胞結合剤と連結を形成する。アンサマイトシンエステル誘導体は、マイタンシノールを、細胞結合剤に連結するのに好適な官能基をも担持するカルボン酸化合物でエステル化することにより調製する。かかる側鎖の合成を図4に示す。エステル化反応は、1-ヒドロキシベンゾトリアゾールHOBt、4,4-ジメチルアミノピリジンDMAPまたはZnCl2などの触媒の存在下でのジシクロヘキシルカルボジイミドDCCまたは1-[3-ジメチルアミノプロピル]-3-エチルカルボジイミドEDCなど、当技術分野で既知のカップリング剤を利用する。異なる連結基を担持するアンサマイトシンエステルの合成を図5~13に示す。鎖の長さが様々であるエステルを担持するチオール-含有アンサマイトシン誘導体6図5、55図13aおよび58図13bが、以下のように合成された。異なるカルボン鎖長および分岐を有するメルカプト-カルボン酸を調製し、対応するメチルジスルフィドに変換した。これらのカルボン酸によるマイタンシノールのエステル化は、DCC/DMAPの存在下でスムーズに行われ、メチルジチオアンサマイトシンを提供した。ジスルフィドをジチオトレイトールDTTで還元すると、チオール含有アンサマイトシン6、55および58が提供された。細胞結合剤と連結させるためにN-ヒドロキシスクシンイミジルエステルまたはN-ヒドロキシスクシンイミジルエステルを担持するアンサマイトシン誘導体13a,bを、図11に示すとおりに調製した。ヘキサン-1,6-ジオイック酸は、TEOCを有する二つのカルボキシル基の一つで部分的に保護された。マイタンシノールのエステル化により、保護されたカルボキシル基を担持するアンサマイトシンエステル誘導体が提供された。フッ化テトラブチルアンモニウムでTEOC基を脱保護化すると、カルボキシアンサマイトシン誘導体14bが提供された。NヒドロキシスクシンイミドまたはN-ヒドロキシスルホスクシンイミドで濃縮すると、細胞結合剤と連結させるための反応性エステルを担持するアサトマイシン誘導体13a,bが提供された。アンサマイトシンカルバマート誘導体は、マイタンシノールを4-ニトロフェニルクロロ炭酸塩などのクロロ炭酸塩と反応させ、その後、ジスルフィド部分など、細胞結合剤と反応する官能基をも担持するアミノ化合物と反応させることにより調製される。代替方法を図12bに示す。アンサマイトシン炭酸塩誘導体は、マイタンシノールをボスゲンと反応させ、その後、ジスルフィド部分など、細胞結合剤と反応する官能基をも担持するヒドロキシ化合物と反応させることにより調製される。代替方法を図12bに示す。アンサマイトシンエーテル誘導体を、図12aに示す通りに調製する。マイタンシノールを、水素化ナトリウム、n-ブチルリチウム、亜鉛トリフレート/ジイソプロピルエチルアミン、またはリチウムヘキサメチルジシラジドなどの塩基好適な塩基に関しては、明示的に参照により本明細書に援用される米国特許第7,598,375号および第7,301,019号を参照で処理し、その後、細胞結合剤との反応のための官能基をも担持する、ハロゲンまたはスルホン酸塩例えば、メタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、またはパラトルエンスルホン酸塩含有化合物と反応させる。エステル、カルバマート、炭酸塩を調製する別の一般的方法は、当技術分野で既知である例えば、明示的に参照により本明細書に援用される、March’sAdvancedOrganicChemistryJerryMarchMichaelBSmithWiley2007を参照。アンサマイトシン誘導体のinvitro細胞傷害性本発明のアンサマイトシン誘導体のInvitro細胞傷害性は、先行開示された方法米国特許第7,276,497号、およびWiddisonetalJMedChem4943922006、両者とも明示的に参照により本明細書に援用されるにより測定できる。例えば、ヒト乳癌細胞株SK-Br-3またはヒト類表皮癌細胞株KBなどの細胞株を使用して、これら新規アンサマイトシン誘導体の細胞傷害性の評価をする。評価対象の細胞を72時間、前記化合物に曝露し、生き残った細胞断片を既知の方法によるダイレクトアッセイで測定した。アッセイの結果からIC50値を計算する。細胞結合剤本発明のそのアンサマイトシン誘導体またはそのコンジュゲートの治療剤としての効果は、適切な細胞結合剤を慎重に選択することに依る。細胞結合剤は、現在知られている任意の種類でもよく、または既知のものでペプチドおよび非ペプチドを含むものでもよい。一般に、これらは抗体特に、モノクロナール抗体、リンホカイン、ホルモン、成長因子、ビタミン、栄養素輸送分子トランスフェリンなど、または任意の他の細胞結合分子もしくは物質であり得る。使用され得る細胞結合剤のより具体的な例として、ポリクロナール抗体;モノクロナール抗体;Fab、Fab’、およびFab’2、FvParhamJImmunol13128952902SpringetalJImmunol113470478NisonoffetalArchBiochemBiophys89230244;ミニ抗体minibody、二重特異性抗体diabody、三重特異性抗体tribody、四重特異性抗体tetrabody、プロ抗体probody、ドメイン抗体domainbody、ユニ抗体unibody、ミニ抗体minibodyKimetalMolCancerTher724862497CarterNatureRevs6343357RKontermannSDubel2001AntibodyEngineeringSpringerVerlagHeidelbergNewYorkを参照などの抗体断片;二重特異性抗体MorrisonSLNaturebiotechnology2512334アンキリン反復タンパク質DARPinsZahndetalJBiolChem281463516735175BinzHKAmstutzPPluckthunANatureBiotechnology2312571268、または、例えば米国特許出願公開第2007/0238667号、米国特許第7,101,675号および国際公開第2007147213号および第2007062466号に記載のアンキリン様反復タンパク質または合成ペプチド;インターフェロン例えば、α、β、γIL-2、IL-3、IL-4、IL-6などのリンホカイン;インスリン、TRH甲状腺刺激ホルモン放出ホルモンが、MSHメラニン細胞刺激ホルモン、ステロイドホルモンアンドロゲンおよびエストロゲンなどなどのホルモン;EGF、TGF-α、FGF、VEGF、G-CSF、M-CSFおよびGM-CSFなどの成長因子およびコロニー刺激因子BurgessImmunologyToday5155158;トランスフェリンOKeefeetalJBiolChem260932937;ならびに葉酸塩などのビタミン;が含まれる。モノクロナール抗体技術により、特異性モノクロナール抗体の形態で極端に特異的な細胞結合剤の製造が可能となる。特に、マウス、ラット、ハムスターまたはその他の哺乳動物を、インタクトな標的細胞など、対象の抗原、すなわち、全ウイルス、弱毒化ウイルス全体、およびウイルスコートタンパク質などのウイルスタンパク質から単離された抗原で免役することにより産生されるモノクロナール抗体の作製技術は、当技術分野で周知である。感作ヒト細胞も使用できる。モノクロナール抗体の別の作製方法は、scFv単鎖変数領域のファージライブラリー、具体的にヒトscFvの利用である例えば、Griffithsら、米国特許第5,885,793号および第5,969,108号;McCaffertyら、国際公開第92/01047号;Limingら、国際公開第99/06587号を参照。さらに、米国特許第5,639,641号に開示されている表面再構成抗体も、キメラ抗体およびヒト化抗体と同様、使用してもよい。適切な細胞結合剤の選択は、標的とする特定の細胞集団により異なるが、もし適切なものがあれば、一般的なヒトモノクロナール抗体が好ましい。例えば、モノクロナール抗体MY9は、CD33抗体に特異的に結合するネズミIgG1抗体でありJDGriffinetal8LeukemiaRes521、もし標的細胞が、急性骨髄性白血病AMLの疾患と同様にCD33を発現するなら、使用することができる。同様に、モノクロナール抗体の抗-B4は、B細胞のCD19抗体に結合するネズミIgG1でありNadleretal131JImmunol244250、標的細胞が、非ホジキンリンパ腫または慢性リンパ芽球性白血病などのように、本抗原を発現するB細胞または疾患細胞であれば、使用することができる。Hu-B4は、ネズミ抗B-4抗体から派生した表面再構成抗体であるRoguskaetal1994ProcNatlAcadSci91pg969973。HuN901は、肺小細胞癌、多発性骨髄腫、卵巣癌、および神経内分泌癌を含む他の固形腫瘍に発現するCD56抗原に結合するヒト化抗体であるRoguskaetal1994ProcNatlAcadSci91pg969973。B38.1は、EpCAMを標的とするキメラ抗体である。いくつかの固形腫瘍に発現するEGF受容体を標的とするパニツムマブなどの完全ヒト抗体を使用してもよいVanCutsemetalJClinOncol20072516581664。トラスツズマブおよびペルツズマブなどの抗-erbB抗体もまた使用できるNahtaetal2004CancerResearch6423432346。細胞結合剤が抗体である場合、ポリペプチドである抗原と結合し、膜貫通分子例えば、受容体か、または成長因子などのリガンドであってもよい。例示的抗原には、レニンなどの分子;ヒト成長ホルモンおよびウシ成長ホルモンなどの成長ホルモン;成長ホルモン放出因子;副甲状腺ホルモン;甲状腺刺激ホルモン;リポタンパク質;α-1-アンチトリプシン;インスリンA鎖;インスリンB鎖;プロインスリン;卵胞刺激ホルモン;カルシトニン;黄体形成ホルモン;グルカゴン;要因vmc、第IX因子、組織因子TF、およびフォンウィルブランド因子などの凝固因子;プロテインCなどの抗凝固因子;心房性ナトリウム利尿因子;肺界面活性剤;ウロキナーゼまたはヒト尿または組織型プラスミノーゲン活性化因子t-PAなどのプラスミノーゲン活性化因子;ボンベシン;トロンビン;造血成長因子;腫瘍壊死因子-αおよび-β;エンケファリナーゼ;RANTES正常T細胞発現と分泌の活性化制御;ヒトマクロファージ炎症性タンパク質MIP-1-α;ヒト血清アルブミンなどの血清アルブミン;ミューラー阻害物質;リラキシンA鎖;リラキシンB鎖;プロレラキシン;マウス性腺刺激ホルモン関連ペプチド;β-ラクタマーゼなどの微生物タンパク質;DNアーゼ;IgE;CTLA-4などの細胞傷害性Tリンパ球関連抗原CTLA;インヒビン;アクチビン;血管内皮増殖因子VEGF;ホルモンまたは成長因子に対する受容体;タンパク質AまたはD;リウマチ因子;骨由来神経栄養因子BDNF、ニューロトロフィン-3、-4、-5または-6NT-3、NT4、NT-5、またはNT-6などの神経栄養因子;または、NGF-βなどの神経成長因子;血小板由来増殖因子PDGF;aFGFおよびbFGFなどの線維芽細胞増殖因子;線維芽細胞増殖因子受容体2FGFR2、上皮成長因子EGF;TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGF-β4、またはTGF-β5を含む、TGF-αおよびTGFベータなどのトランスフォーミング増殖因子TGF;インスリン様成長因子-IおよびIIIGF-IおよびIGF-II;des1-3-IGF-I脳IGF-I、インスリン様成長因子結合タンパク質、EpCAM、GD3、FLT3、PSMA、PSCA、MUC1、MUC16、STEAP、CEA、TENB2、EphA受容体、EphB受容体、葉酸受容体、FOLR1、メンセリン、クリプトcripto、αvβ6、インテグリン、VEGF、VEGFR、EGFR、トランスフェリン受容体、IRTA1、IRTA2、IRTA3、IRTA4、IRTA5;CD2、CD3、CD4、CD5、CD6、CD8、CD11、CD14、CD19、CD20、CD21、CD22、CD25、CD26、CD28、CD30、CD33、CD36、CD37、CD38、CD40、CD44、CD52、CD55、CD56、CD59、CD70、CD79、CD80、CD81、CD103、CD105、CD134、CD137、CD138、CD152などのCDタンパク質、または、その全体が参照により本明細書に援用される、米国特許出願公開第2008/0171040号もしくは米国特許出願公開第20080305044号に開示されている、一つもしくは複数の腫瘍関連抗原もしくは細胞表面受容体に結合する抗体;エリスロポエチン骨誘導因子;イムノトキシン;骨形成タンパク質BMP;インターフェロン-α、-β、および-γなどのインターフェロン;例えば、M-CSF、GM-CSFおよびG-CSFなどのコロニー刺激因子CSFs;IL-1~IL-10などのインターロイキンILs;スーパーオキシドジスムターゼ;T細胞受容体;表面膜タンパク質;崩壊促進因子;例えば、HIVエンベロープの一部などのウイルス抗原;輸送タンパク質;ホーミング受容体;アドレシン;調節タンパク質;CD11a、CD11bを、CD11cは、CD18、ICAM、VLA-4およびVCAMなどのインテグリン;HER2、HER3またはHER4受容体などの腫瘍関連抗原;エンドグリン、c-Met、c-kit、1GF1R、PSGR、NGEP、PSMA、PSCA、LGR5、B7H4、TAG72腫瘍関連糖タンパク質72、5T4、および上記に挙げた任意のポリペプチド類の断片が含まれる。さらに、骨髄細胞に結合するGM-CSFを、急性骨髄性白血病由来の疾患細胞に対する細胞結合剤として使用することもできる。活性化T細胞に結合するIL-2は、移植片拒絶の予防のため、移植片対宿主病の治療および予防のため、ならびに急性T細胞白血病の治療のために使用することができる。メラノサイトに結合するMSHは、メラノーマの治療のために使用することができる。葉酸は、卵巣癌および他の腫瘍上に発現する葉酸受容体の標的化に使用することができる。上皮成長因子は、肺および頭頸部扁平上皮癌などを標的とするために使用することができる。ソマトスタチンは、神経芽細胞腫、その他の腫瘍型を標的とするために使用することができる。乳癌および精巣癌は、それぞれエストロゲンもしくはエストロゲン類似体またはアンドロゲンもしくはアンドロゲン類似体を細胞結合剤として、うまく標的化することができる。別の実施形態では、細胞結合剤は、huN901、huMy9-6、huB4、huC242、トラスツズマブ、ビバツズマブ、シブロツズマブ、リツキシマブ、CNTO95、huDS6、国際公開第2010/124797号に記載の抗メソテリン抗体MF-Tなど、米国特許出願公開第2010/0093980号に記載の抗-クリプト抗体huB3F6など、米国特許出願公開第2007/0183971号に記載の抗CD138抗体huB-B4など、米国特許第7,736,644号および第7,628,986号ならびに米国特許出願公開第2010/0111979号、第2009/0240038号、2009/0175887号、第2009/0156790号および第2009/0155282号に記載の抗-EGFRvIII抗体、国際出願PCT/IB2010/054417号および国際出願PCT/IB2010/054422号に記載のヒト化EphA2抗体2H11R35R74など;国際公開第2008/047242号に記載の抗CD38抗体hu38SB19など、米国特許仮出願公開第61/307,797号、第61/346,595号および第61/413,172号ならびに米国特許出願公開第13/033,723号に記載の抗葉酸受容体抗体である。これら全出願の明細書にある教示は、その全体が参照により本明細書に援用される。細胞結合剤コンジュゲートの産生本発明はまた、ジスルフィドリンカー、チオエーテルリンカー、アミド結合リンカー、ペプチダーゼ不安定性リンカー、酸不安定性リンカー、エステラーゼ不安定性リンカーを含むが、これらに限定されない、様々なリンカーを介して、一つまたは複数の細胞傷害性アンサマイトシン誘導体に連結する細胞結合剤を含む、アンサマイトシン誘導体-細胞結合剤コンジュゲートを提供する。リンカーは、多くの方法で細胞傷害性剤を標的に送達するため、腫瘍細胞/不要な増殖細胞の部位で開裂され得る。リンカーは、例えば、低pHヒドラゾン、還元環境ジスルフィド、タンパク質分解アミド/ペプチドリンクにより、または酵素反応エステルase/グリコシダーゼを介して開裂され得る。本発明の代表的な細胞傷害性コンジュゲートは、抗体/アンサマイトシン誘導体、抗体断片-アンサマイトシン誘導体、成長因子EGF/アンサマイトシン誘導体、メラノサイト刺激性ホルモンMSH/アンサマイトシン誘導体、甲状腺刺激ホルモンTSH/アンサマイトシン誘導体、成長ホルモン分泌抑制ホルモン/アンサマイトシン誘導体、葉酸/アンサマイトシン誘導体、エストロゲン/アンサマイトシン誘導体、エストロゲン類似体/アンサマイトシン誘導体、前立腺特異的膜抗原PSMA阻害剤/アンサマイトシン誘導体、マトリプターゼ阻害剤/アンサマイトシン誘導体、設計されたアンキリン反復タンパク質DARPins/アンサマイトシン誘導体、アンドロゲン/アンサマイトシン誘導体、およびアンドロゲン類似体/アンサマイトシン誘導体である。本発明のコンジュゲートは、当技術分野で既知の任意の方法に従って調製され得る。例えば、国際公開第2009/134977号、米国特許第7,811,572号、第6,441,163号、米国特許出願第2006/0182750号、およびWiddisonWCetalSemisyntheticmaytansineanaloguesforthetargetedtreatmentofcancerJMedChem20064943924408を参照されたし。一つの実施形態では、本発明のコンジュゲートは、a細胞結合剤を二官能性架橋試薬と反応させて、それと共有結合するリンカーを有する修飾細胞結合剤を形成させ;b前記の修飾された細胞結合剤を任意選択的に精製し;c細胞傷害性剤すなわち、式VI~IXの化合物など、本明細書に記載のアンサマイトシン誘導体を前記の修飾された細胞結合剤とコンジュゲートして、細胞結合剤-細胞傷害性剤コンジュゲートを形成し;およびd前記の細胞結合剤-細胞傷害性剤コンジュゲートを精製することにより調製され得る。別の実施形態では、本発明のコンジュゲートは、細胞結合剤を、細胞結合剤と共有結合を形成し、細胞結合剤-細胞傷害性剤コンジュゲートを形成することができるリンカー基を有する薬剤連結化合物例えば、式X~XIIの化合物と反応させることにより調製され得る。その後、コンジュゲートを精製することができる。薬剤連結化合物をinsituで生成し、精製せずに抗体との反応に使用することができる。チオール部分を持つアンサマイトシン誘導体は、まず細胞結合剤を市販のSMCCなどの二官能性リンカーと反応させた後に、抗体のFabユニットなどの細胞結合剤とカップリングすることができる。例えば、Fab断片の複数のリシン残基をSMCCと反応させてマレイミド基を担持する修飾Fabを生じさせ、その後、チオール含有アンサマイトシンを修飾Fabと反応させてコンジュゲートを生じさせることができる。マレイミド基を担持するアンサマイトシン誘導体は、一つまたは複数のチオール部分を含有する細胞結合剤と反応させることができる。例えば、抗体をジチオトレイトールと反応させて、複数の抗体内部ジスルフィド結合を還元させることができる。ジチオトレイトールを、サイズ排除クロマトグラフィにより除去し、その後、マレイミド担持アンサマイトシン誘導体を遊離チオール基とカップリングし、コンジュゲートを生じさせることができる。N-ヒドロキシスクシンイミドエステルなどの活性化エステルを担持するアンサマイトシン誘導体は、一つまたは複数のアミン部分を担持する細胞結合剤と反応し得る。例えば、一つまたは複数のリシン残基を含有する二重特異性抗体は、ペンタフルオロフェニルエステルを担持するアンサマイトシン誘導体と反応してコンジュゲートを生じさせることができる。上記の方法で調整された細胞結合剤コンジュゲートは、本明細書に記載の任意の方法で精製され得る。ジスルフィド含有細胞傷害性コンジュゲートは、チオール含有アンサマイトシン誘導体を、適切に修飾された細胞結合剤と反応させることにより作成される図14、25を参照。これらのコンジュゲートを、ゲル濾過、イオン交換クロマトグラフィー、セラミックヒドロキシアパタイトCHTクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィーCHT、タンジェンシャルフローろ過TFF、またはHPLCを用いて精製し、非連結性細胞傷害性剤を除去する。水性緩衝液の抗体溶液は、N-スクシンイミジル-3-2-ピリジルジチオプロピオネートSPDPまたはN-スクシンイミジル-4-2-ピリジルジチオブタノエートSPDBなどのモル過剰の抗体修飾剤で培養し、ジチオピリジル基を導入する。その後、修飾抗体を、化合物17、18、19または46などのチオール含有細胞傷害性剤と反応させて、ジスルフィド連結抗体-アンサマイトシン誘導体コンジュゲートを産生させる。次に、傷害性細胞結合コンジュゲートを、上記の任意の方法を使用して精製する。ジスルフィド基を導入するのに使用されるその他の架橋剤は、当技術分野で既知であり、米国特許第6,913,748号、第6,716,821号および米国特許出願公開第2009/0274713号および第2010/0129314号に開示されている。代替的に、2-イミノチオラン、L-ホモシステインチオラクトンもしくは誘導体、またはN-スクシンイミジル-S-アセチルチオアセテートSATAなど、モル過剰の抗体修飾剤で抗体を培養し、スルフヒドリル基を導入する。その後、修飾された抗体を、適切なジスルフィド含有アンサマイトシン誘導体と反応させて、ジスルフィド連結抗体-細胞傷害性剤コンジュゲートを産生する。次に、抗体-細胞傷害性剤コンジュゲートを、ゲル濾過または上記のその他の方法により精製する。抗体分子毎の細胞傷害性分子結合の数は、280nmおよび252nmで吸光度を測定することにより、分光測定で決定する。平均して、抗体分子毎に1~10個の細胞傷害性分子が本方法により連結される。連結された細胞傷害性分子の平均数は、好ましい平均値は、抗体分子毎に2~5個であり、最も好ましいのは3~4.5である。代替的に、コンジュゲートは、アンサマイトシン誘導体が非開裂性リンカーを介して細胞結合剤と連結することにより調製され得る図15、16、26を参照。水性緩衝液の抗体溶液を、N-スクシンイミジル-4-N-マレイミドメチル-シクロヘキサン-1-カルボキシレートSMCCなど、モル過剰の抗体修飾剤で培養し培養してマレイミド基を導入するか、またはN-スクシンイミジル-4-ヨードアセチル-アミノベンゾエートSIABで培養してヨードアセチル基を導入する。その後、修飾抗体をチオール含有アンサマイトシン誘導体と反応させて、チオール連結抗体-細胞傷害性剤コンジュゲートを産生させる。次に、抗体-細胞傷害性コンジュゲートをゲル濾過もしくは上記のその他の方法により、または当業者に既知の方法により精製する。マレイミド基またはハロアセチル基を細胞結合剤に導入するその他の架橋剤は、当技術分野に周知であり米国特許出願第2008/0050310号、第2005/0169933号を参照、PierceBiotechnologyIncPOBox117RocklおよびIL61105USAから市販、BMPEO、BMPS、GMBS、EMCS、5-マレイミド吉草酸NHS、HBVS、LC-SMCC、MBS、MPBH、SBAP、SIA、KMUA、SMPB、SMPH、SVSB、DTME、BMB、BMDB、BMH、BMOE、BMPEO3、BMPEO3、スルホ-SMCC、スルホ-SIAB、スルホ-MBS、スルホ-GMBS、スルホ-EMCS、スルホ-KMUS、およびスルホ-SMPBを含むが、これらに限定されない。N-ヒドロキシスクシンイミジルNHSエステルなど、アミン反応性基を担持するアンサマイトシン誘導体を細胞結合剤と反応させて、ダイレクトアミド連結コンジュゲートを産生させる図20、24、27を参照。抗体-細胞傷害性剤コンジュゲートを、ゲル濾過または上記のその他の方法により精製する。ペプチド開裂性リンカーを含む細胞結合剤-アンサマイトシン誘導体コンジュゲートは、対応するペプチド含有アンサマイトシン誘導体から調製する図17、18、19を参照。N末端-ヒドロキシスクシンイミドエステルを担持するペプチド含有アンサマイトシン誘導体を、細胞結合剤と直接反応させて、ペプチド開裂性コンジュゲートを提供させる。前記コンジュゲートをゲル濾過、分離または当技術分野既知のその他の方法により精製する。例示的ペプチドには、バリン-シトルリンval-cit、アラニン-フェニルアラニンなどのジペプチド;gly-gly-gly、gly-val-cit、ala-val-citなどのトリペプチド;leu-leu-leu-leu、ala-lys-ala-lys、ala-leu-ala-leuなどのテトラペプチド;ペンタペプチドまたはヘキサペプチドが含まれる。使用され得るその他のペプチドは、当技術分野で開示されている米国特許出願公開第2008/0050310号、第2009/0047296号、第2008/0280937号、第2009/0203889号を参照。酸不安定性リンカーを含むアンサマイトシン誘導体の細胞結合剤コンジュゲートは、図21、22に示される通りに調製される。ヒドラゾンなど、酸不安定性リンカーを有するコンジュゲートは、アルキル、アリールケトンを含有するアンサマイトシン誘導体をヒドラジド修飾細胞結合剤で濃縮して調製される。代替的に、当技術分野に記載のように米国特許第5,773,001号、第5,767,285号、第5,877,296号を参照、細胞結合剤を修飾してカルボニル部分を導入し、その後、ヒドラゾン部分を担持するアンサマイトシン誘導体と反応させる。本発明のアンサマイトシン誘導体と細胞結合剤とのコンジュゲートは、Invitroで様々な不必要細胞株の増殖を抑制する能力があるとして評価される。例えば、これらコンジュゲートの細胞傷害性評価に、ヒト結腸癌細胞株COLO205、ヒトメラノーマ細胞株A-375およびヒト骨髄白血病細胞株HL60などの細胞株を使用することができる。評価対象の細胞を、24時間、72時間またはそれよりも長い期間、前記化合物に曝露し、既知の方法により、生き残った細胞断片をダイレクトアッセイで測定することができる。その後、前記アッセイの結果からIC50値を計算することができる。アンサマイトシン誘導体と細胞結合剤とのコンジュゲートのinvivo抗腫瘍効能は、先行開示された方法により評価する参照により本明細書に援用される米国特許第7,473,796号。化合物および使用方法本発明は、本発明の任意のアンサマイトシン誘導体-細胞結合剤コンジュゲートを有効量含む医薬組成物、薬学的に許容可能なその塩もしくは溶媒和物、および薬学的に許容可能な担体、希釈剤または付形剤を提供する。本発明はまた、上記の任意のコンジュゲートを有効量、必要とする対象に投与することを含む治療方法を提供する。同様に、本発明は、標的細胞または標的細胞を含有する組織を、本発明の任意のアンサマイトシン誘導体-細胞結合剤コンジュゲートを含む有効量の細胞傷害性剤、その塩または溶媒和物と接触させることを含む、選択された細胞集団における細胞死を導入する方法を提供する。標的細胞は、細胞結合剤の結合先の細胞のことである。所望であれば、その他の抗腫瘍剤など、その他の活性剤をコンジュゲートと共に投与してもよい。薬学的に許容可能かつ好適な担体、希釈剤、および付形剤は周知であり、臨床状況が許す範囲で当業者により決定され得る。好適な担体、希釈剤および/または付形剤には、1約1mg/ml~25mg/mlのヒト血清アルブミンを含有するまたは含有しないダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水、pH約7.4、20.9生理食塩水0.9w/vNaCl、および35W/Vブドウ糖が含まれ、トリプタミンなどの抗酸化物質、Tween20などの安定剤を含んでもよい。選択された細胞集団において細胞死を導入する方法は、invitro、invivo、またはexvivoで行うことができる。invitroでの利用例として、疾患細胞または悪性細胞を殺傷するために、自家骨髄を同じ患者に移植する前に自家骨髄を処置すること;コンピテントなT細胞を殺傷し、移植片対宿主病GVHDを防ぐために自家骨髄移植前に骨髄を処置すること;標的抗原を発現しない所望のバリアントを除く全ての細胞を殺傷し、所望でない抗原を発現するバリアントを殺傷するために細胞培養を処置することが含まれる。invitroで非臨床利用する場合の条件は、当業者により容易に決定される。exvivoで臨床利用する例として、腫瘍治療または自己免疫疾患の治療において、自家骨髄移植前に骨髄から腫瘍細胞もしくはリンパ球様細胞を除去すること、または、GVHDを防ぐために、移植前に自家もしくは同種の骨髄もしくは組織からT細胞およびその他のリンパ球様細胞を除去することが挙げられる。治療は以下のように行われる。骨髄を、患者またはその他の個体から収穫し、次に、本発明の細胞傷害性剤を加えた、血清含有媒体中で、約10μM~1pMの濃度で、約30分~約48時間、37°Cで培養する。濃度と培養時間の正確な条件、すなわち、用量は、当業者により容易に決定される。培養後、骨髄細胞を血清含有媒体で洗浄し、既知の方法により患者の静脈内に戻す。患者が、骨髄収穫と処理された細胞の再注入との間に、破壊的化学療法ablativechemotherapyまたは全身照射のコースなど、その他の治療を受けている場合、処置した骨髄細胞を、標準的な医学装置を用いて液体窒素中に凍結保存する。臨床的なinvivo利用では、本発明の細胞傷害性剤は、無菌性およびエンドトキシンレベルについて検査された溶液または凍結乾燥粉末として提供される。コンジュゲート投与の好適なプロトコルの例は以下の通りである。コンジュゲートは、毎週、静脈内ボーラス投与し、それを4週間続ける。ボーララス投与量は、50~1000mlの通常の生理食塩水で、それに5~10mlのヒト血清アルブミンを添加し得る。1回当たりのボーラス投与量は、静脈内へ10μg~2000mg1日当たり100ngから20mgkgとする。4週間の治療後、患者は週単位で治療を継続して受けることができる。投与経路、付形剤、希釈剤、投与量、時間などに関する具体的な臨床プロトコル、は、臨床的状況が許す範囲で当業者により決定され得る。選択された細胞集団への細胞死導入のinvivoまたはexvivoの方法に従って治療可能な病態の例として、例えば、肺癌、乳癌、結腸癌、前立腺癌、腎臓癌、膵臓癌、卵巣癌、およびリンパ器官の癌などを含む任意の種類の悪性腫瘍;全身紅はん性、関節リウマチ、および多発性硬化症などの自己免疫疾患;腎移植拒絶、肝移植拒絶、肺移植拒絶、心臓移植拒絶、および骨髄移植拒絶などの移植片拒絶、移植片対宿主病;CMV感染、HIV感染、AIDSなどのウイルス感染;ならびに、ランブル鞭毛虫症、アメーバ症、住血吸虫症などの寄生虫感染症、ならびに当業者が決定するその他のものが含まれる。本明細書に記載の全刊行物、特許文献および非特許文献は、その全体が参照により明示的に本明細書に援用される。本発明を、非制限的実施例を参照としてここに例示する。特段の指定がない限り、全てのパーセント、割合、部分などは重量ベースとする。試薬はすべて、AldrichChemical社ニュージャージーまたはその他の商業的ソースから購入した。マイタンシノール11は、先に記載の通りに調製した米国特許第6,333,410号。核磁気共嗚1HNMRスペクトルは、Bruker400MHz装置で獲得し、マススペクトルは、エレクトロスプレイイオン化を用いて、BrukerDaltonicsEsquire3000装置で獲得した。invitro細胞傷害性アッセイは、先行文献に記載の通りに行う米国特許第7,276,497号およびWCWiddisonetalJMedChem20064943924408を参照。KBATCCCCl-17細胞株は、ヒト上皮由来である。SK-BR-3ATCCHTB-30細胞株は、ヒト乳腺癌から確立したものである。ヒト結腸腫瘍細胞株COLO205ATCCCCL-222およびHT-29ATCCHTB38、ヒトメラノーマ細胞株A-375ATCCCRL1619、ヒトバーキットリンパ腫細胞株RamosATCCCRL-1596およびヒト骨髄白血病細胞株HL-60ATCCCCL-240はすべてATCCメリーランドから得た。細胞株は、Dulbecco’smodifiedEaglesMediumDMEM、Biowhittaker社、メリーランド州ウォーカーズビルの中で、10ウシ胎児血清Hyclone社、ユタ州ローガンおよび50μg/mLの硫酸ゲンタマイシンLifeTechnologies社、メリーランド州ロックビルを供給したL-グルタミンで生育した。細胞は、6CO2を含有する加湿雰囲気の中で、36~37.5°Cで維持された。実施例1:invitro細胞傷害性細胞傷害性の研究は、クローン原性アッセイを用いて行った。試験細胞株KBおよびSK-Br-3を、ウェル毎に1000個の細胞を定数として、6ウェル培養皿に配置した。様々なアンサマイトシンまたはマイタンシンの様々な濃度0~3nMで、72時間細胞を培養した。その後、媒体をプレートから吸引し、新鮮な媒体と取り替えた。プレーティング後、培養物は合計7~10間で成長し、コロニーを形成した。その後、培養物を固定して、10ホルマリン/PBS中0.2クリスタルバイオレットで染色し、コロニーを数えた。コロニー数を数えて得られた数字をプレーティングされた細胞数で割り、非処理細胞媒体のみのプレーティング効率を決定した。薬剤に曝露した細胞の生存率は、薬剤に曝露したウェル中のコロニー数を対照ウェル中のコロニー数で割ることにより決定した。様々なアンサマイトシンのinvitro細胞傷害性測定をマイタンシンと比較した結果を図3に示した。結果によると、試験された3つのアンサマイトシンエステルはすべて、試験された両方の細胞株KBおよびSK-Br-3に対し、マイタンシンよりも効能があった。例えば、C3ペタノイルを担持するアンサマイトシンP4’、およびイソブタノイルエステルを担持するアンサマイトシンP3は共に、SK-Br-3細胞に対し、C3N-アセチル-N-メチルアラニルエステル、マイタンシンIC50=3.4×10-11Mよりも17倍の効能があるIC50=2×10-12M。同様に、アンサマイトシンP3エステル,P4エステルおよびP4’エステルは、KB細胞に対し、マイタンシンよりも3.7倍~6倍の効能がある。実施例2:誘導体化されたカルボン酸の調製化合物28:先行文献で記載の通りWiddisonWCetalJMedChem200644392408、3-メルカプトプロパン酸をエタノール中のS-メチルメタンチオスルホン酸塩と反応させて28を生じさせた。化合物30:化合物30は、S-メチルメタンチオスルホン酸塩を4-メルカプト-1-ブタノールと反応させることにより作成する。化合物32:化合物32は、S-メチルメタンチオスルホン酸塩を1-アミノ-ブタン-4-チオールと反応させることにより作成するReinekeTMetalBioconjugateChem200314247254。化合物34:フラン担持カルボン酸34は、以下のように調製する。メチル5-ヒドロキシメチル-2-フロ酸33MooreJAetalJournalofPolymerSciencePolymerChemistryEdition228634をメタンスルホニルクロリドと反応させ、続いて、チオ尿素と反応させ、加水分解をして33を生じさせる。その後、33をメタンチオスルホン酸塩と反応させる。化合物37:化合物37は、2,2’-ジチジピリジンを4-メルカプトメチル安息香酸36と反応させることにより調製する。化合物39:化合物39は、2,2’-ジチジピリジンをチオPFG4カルボン酸38と反応させることにより調製する。化合物42:ペプチド担持カルボン酸42を以下のように調製する。ジペプチドFMoc-Val-Cit-OH40およびブライン5mLで連続して洗浄し、その後、無水Na2SO4で乾燥し、真空で濃縮した。産物をC18HPLCにより水性の0.1ギ酸中のアセトニトリルの直線勾配で溶出して単離した。留分を含有する産物を混ぜ合わせて真空で濃縮し、8.53mg収率3.3の所望の産物を生じさせた。1HNMRCDCl3、ref.7.26ppmδ0.8213H、s、1.2883H、d、J=6.4Hz、1.4551H、m、1.6501H、d、J=4Hz、1.6793H、d、J=3.2Hz、1.6933H、s、1.7821H、d、J=7.2Hz、2.2451H、dd、J=11.6、J=2.4Hz、2.4943H、s、2.5731H、dd、J=11.6、J=2Hz、2.8771H、m、3.1863H、s、3.3593H、s、3.5113H、m、3.6451H、m、3.9873H、s、4.2651H、m、4.9141H、dd、J=9.2、J=3.2Hz、5.5391H、dd、J=11.6、J=6.4Hz、6.1581H、d、J=11.2、6.3081H、s、6.4221H、dd、J=10.8、J=4.4Hz、6.8341H、sおよび6.9051H、d、J=1.6Hz。MS計算値MNa、721.2;実測値、721.2。MS計算値MCl-、733.2;実測値、735.1。マイタンシノールの2-チオプロパン酸エステル581,2-ジメトキシエタン1mL中にマイタンシノールの2-メチルジチオプロパン酸エステル8mg、0.011mmolを溶かした溶液に、100mMのリン酸カリウム、2mMのEDTA、pH7.5緩衝液1.000mL中にD,L-ジチオトレイトール5.29mg、0.034mmolを溶かした溶液を雰囲気温度で加えた。90分後に、反応物の容積を真空で減らして乾燥し、C18HPLCにより水性の0.1ギ酸中のアセトニトリルの直線勾配で溶出して精製した。留分を含有する産物をすぐに冷凍し、凍結乾燥して1.6mg収率18の所望の産物を生じさせた。MS計算値MNa、675.2;実測値、676.2。MS計算値M-H-、651.1;実測値、651.2。実施例18:アンサマイトシン誘導体13aは、37をN-ヒドロキシスクシンイミドにDCCカップリングすることにより調製される。実施例19アンサマイトシン13bは、37をスルホ-N-ヒドロキシスクシンイミドとDCCカップリングすることにより調製する。実施例20アンサマイトシン誘導体22を以下のように調製する。30のヒドロキシル部分をメタンスルホニルクロリドと反応させて、メシレート52を生じさせる。マイタンシノールのテトラヒドロフラン溶液を、換算温度で、ブチルリチウムで脱プロトン化し、52の溶液にカニューレ挿入してエーテル結合を形成させ、その後、ジスルフィド部分をDTTで開裂する。実施例21:ジスルフィドリンカーによる抗体とスルフィドリル担持アンサマイトシン誘導体とのコンジュゲーション抗体を、本明細書に記載の先行文献WCWiddisonetalJMedChem20064943924408に記載の方法により、本発明のスルフィドリル担持アンサマイトシン誘導体の複数の分子とコンジュゲートする。ヒト化抗体をまず、アミン反応性N-ヒドロキシスクシンイミド基NHS基とチオール反応性2-ピリジルジチオ基-SSPy基の両方を含有するヘテロ二官能性リンカーSPDB、SPP、SPDPで修飾し、1個の抗体分子に複数のリンカー分子例えば、1~10個を取り込む。この後、反応性チオール基を担持するアンサマイトシン誘導体を、リンカー修飾抗体に加え、ジスルフィド結合によりアンサマイトシン誘導体を抗体にコンジュゲートする。具体的な実施例では、ヒト化抗体を、濃度5~10mg/mlで、pH6.5~8の水性緩衝液中、0.25~3時間、雰囲気温度で、SPDB、SPP、およびSPDPなどのヘテロ二官能性リンカーを3~15倍モル過剰用いて修飾し、ゲル濾過例えば、セファデックスG25クロマトグラフィーを用いてにより精製し、抗体分子当たり平均3~15個のリンカー基で修飾された抗体を得る。リンカー基は、過剰な1,4-ジチオトレイトールDTT試薬をリンカー修飾抗体サンプルの小さなアリコートに添加すると同時に、2-チオピリドンの放出を、343nmε343nm=8080M-1cm-1におけるその吸光度に基づいて測定することにより評価する。抗体上の連結された反応性基の数を測定後、リンカー修飾抗体を、過剰のチオール含有アンサマイトシン誘導体典型的には、反応性連結基当たり、1.0~2.5倍モル過剰のチオール担持アンサマイトシン誘導体と、抗体濃度約2.5mg/mL、pH6.5~8で、反応時間を2~24時間としてコンジュゲートする。抗体-アンサマイトシン誘導体コンジュゲートを、ゲル濾過または分解により精製し、不反応のアンサマイトシン誘導体を除去する。精製されたコンジュゲートにおける抗体分子1個当たりの連結アンサマイトシン誘導体の数は、252nmおよび280nmにおける吸光度測定、およびア252nmおよび280nmにおけるアンサマイトシン誘導体と抗体の減衰係数を用いて決定される図13、m=1~10。実施例22:非開裂性チオエーテルリンカーにより、抗体分子1個につき複数のスルフィドリル担持アンサマイトシン誘導体分子を連結させる、抗体とのコンジュゲーションチオエーテル連結抗体-アンサマイトシン誘導体コンジュゲートは、二段階過程で調製され得る。ヒト化抗体は、アミン-反応性N-ヒドロキシスクシンイミド基NHS基を担持するヘテロ二官能性架橋剤、およびチオール反応性マレイミド、ビニルピリジン、ビニルスルホン、ビニルスルホンアミドまたはハロアセチルベースの基で修飾して、抗体分子に複数のリンカー分子を取り込む。マレイミドベースの部分を含む架橋試薬には、N-スクシンイミジル4-マレイミドメチルシクロヘキサンカルボキシレートSMCC、SMCCLC-SMCCの長鎖類似体であるN-スクシンイミジル-4-N-マレイミドメチル-シクロヘキサン-1-カルボキシ-6-カプロン酸アミド、κ-マレイミドウンデカン酸N-スクシンイミジルエステルKMUA、γ-マレイミド酪酸N-スクシンイミジルエステルGMBS、ε-マレイミドカプロン酸N-ヒドロキシスクシンイミドエステルEMCSm-マレイミドベンゾイル-N-ヒドロキシスクシンイミドエステルMBS、N-α-マレイミドアセトキシ-スクシンイミドエステルAMAS、スクシンイミジル-6-β-マレイミドプロパンアミドヘキサノエートSMPH、N-スクシンイミジル4-p-マレイミドフェニル-ブチレートSMPB、およびN-p-マレイミドフェニルイソシアネートPMPIが含まれる。ビニルピリジンを含有する、チオール反応性化合物に関しては、記載があるFriedmanMetAlIntJPeptideProteinRes19746183185MakAetAlAnalBiochem197884432440。ビニルスルホン部分を含有する反応性化合物も記載があるMasriMSJProteinChem198874954MorpurgoMetAlBioconjugateChem19967363368。ハロアセチルベースの部分を含む架橋試薬には、N-スクシンイミジル-4-ヨードアセチル-アミノベンゾエートSIAB、N-スクシンイミジルヨード酢酸SIA、N-スクシンイミジルブロモ酢酸SBA、およびN-スクシンイミジル3-ブロモアセトアミドプロピオネートSBAPが含まれる。抗体を、pH6.5~8の水性緩衝液中5~10mg/mLの過剰ヘテロ二官能性架橋剤で、0.25~3時間、雰囲気温度で修飾し、続いて、G25クロマトグラフィで精製する。修飾抗体上の連結マレイミド基またはハロアセチル基の数は、リンカー-修飾抗体の小さなアリコートを用い、またマレイミドまたはハロアセチル濃度に対し既知の過剰チオール2-メルカプトエタノールなどを加えることで決定される。チオールを、修飾抗体上に導入されたマレイミド基またはハロアセチル基と反応させ、過剰チオールをDTNB試薬412nm=14150M-1cm-1におけるTNBチオール酸の減衰係数;RiddlesPWetalMethodsEnzymol1983914960SinghRBioconjugateChem19945348351を用いてEllmanアッセイにより測定する。抗体上の連結された反応性基の数を測定した後、リンカー修飾抗体を過剰チオール担持アンサマイトシン誘導体反応性リンカー基当たり1.0~2.5倍モル過剰チオール担持アンサマイトシン誘導体と、抗体濃度約2.5mg/mL、pH6.5~8、反応時間を2~24時間としてコンジュゲートする。非開裂性抗体-アンサマイトシン誘導体コンジュゲートを、ゲル濾過または分解により精製し、不反応の任意のアンサマイトシン誘導体を除去する。精製されたコンジュゲートにおいて、抗体分子1個当たりに連結した非開裂性アンサマイトシン誘導体分子の数は、252nmおよび280nmにおける吸光度測定、ならびに252nmおよび280nmにおけるアンサマイトシン誘導体および抗体の減衰係数を用いて決定する図14,15、m=1~10。実施例23:抗体分子1個につき複数のアミン反応性アンサマイトシン誘導体分子を連結させる、抗体とのコンジュゲーション抗体-アンサマイトシン誘導体コンジュゲートは、ヒト化抗体上のリシン残基を、本発明のアミン反応性アンサマイトシン誘導体で修飾することにより、単一段階過程で調製され得る。N-ヒドロキシスクシンイミド基NHS基などのアミン反応性基を担持するアンサマイトシン誘導体は、本明細書に記載の通りに調製する。最初、複数の過剰アミン反応性アンサマイトシン誘導体で抗体の滴定を行い、アンサマイトシン誘導体と抗体の望ましい割合を決定する。典型的には、ヒト化抗体の6~10倍モル過剰の範囲である。単一段階過程で、ヒト化抗体を、アミン反応性NHS基を担持する過剰アンサマイトシン誘導体と、水性緩衝液中5~10mg/mLの濃度で、pH6.0~8.0、雰囲気温度で1~24時間反応させる。抗体-アンサマイトシン誘導体コンジュゲートをゲルクロマトグラフィーで精製し、その後分解する。最終的なコンジュゲートにおいて、抗体分子1個当たりのアンサマイトシン誘導体分子の連結数は、252および280nmにおけるコンジュゲートの吸光度を測定し、これら二つの波長におけるアンサマイトシン誘導体と抗体の減衰係数を用いて決定する図19、m=1~10。実施例24:酸不安定性リンカーと用いて、抗体分子1個につき複数のアンサマイトシン誘導体分子を連結させる、抗体とのコンジュゲート抗体を、本発明のカルボニル担持アンサマイトシン誘導体の複数の分子とコンジュゲートする二段階過程において、まずヒト化抗体を、アミン反応性N-ヒドロキシスクシンイミド基NHS基とカルボニル反応性ヒドラジン基の両方を含有する市販の過剰ヘテロ二官能性リンカーで修飾し、複数のリンカー分子を抗体分子に取り込む。かかる市販の架橋剤の例として、スクシンイミジル6-ヒドラジノニコチンアミドアセトンヒドラゾンSANH、スクシンイミジル4-ヒドラジドテレフタレート塩酸塩SHTHおよびスクシンイミジルヒドラジニウムニコチネート塩酸塩SHNHが含まれる。その後、修飾抗体を過剰ケトンまたはアルデヒド担持アンサマイトシン誘導体と反応させて、酸不安定性連結を介してアンサマイトシン誘導体を抗体とコンジュゲートさせる。酸不安定性連結を担持するコンジュゲートも、本発明のヒドラジン担持アンサマイトシン誘導体を用いて調製する。上記の二段階過程と同様に、ヒト化抗体を、アミン反応性N-ヒドロキシスクシンイミド基とヒドラジン反応性カルボニル基を担持する市販のヘテロ二官能性架橋剤で修飾する。かかる架橋剤の例として、スクシンイミジル-p-ホルミルベンゾエートSFBおよびスクシンイミジル-p-ホルミルフェにキシアセテートSFPAが含まれる。その後、リンカー修飾抗体を、過剰ヒドラジド担持アンサマイトシン誘導体と反応させて、酸不安定性連結を介して連結した抗体-アンサマイトシン誘導体コンジュゲートを生じさせる図20~22、m=1~10。実施例25:アミン反応性アンサマイトシン誘導体13aを以下のように調製した図11を参照マイタンシノールのヘキサンジオイック酸-1-[トリメチルシリルエチル]エステル14a反応フラスコに、6-オキソ-6-2-トリメチルシリルエトキシヘキサン酸523mg、2.124mmol、N,N’-ジシクロヘキシルカルボジイミド438mg、2.124mmolおよび塩化メチレン2.5mLを入れた。4-ジメチルアミノピリジン86mg、0.708mmolを加えて溶液を攪拌し、続いて、マイタンシノール200mg、0.354mmolを加えた。反応物を室温で4時間攪拌した。4時間攪拌した後、粗反応混合物を遠心分離し、真空で濃縮した。得られた原油をセミ分取C18HPLCで精製して、32mgの14aを収率11.4で生じさせた。HRMSMNa実測値:815.3299、計算値:815.33121HNMR400MHz、CDCl3δ6.84s、1H、6.77s、1H、6.43dd、J=15.3、11.0Hz、1H、6.32s、1H、6.17d、J=10.9Hz、1H、5.52dd、J=15.4、8.9Hz、1H、4.89dd、J=11.9、2.8Hz、1H、4.24t、J=10.5Hz、1H、4.15m、2H、3.99s、3H、3.52m、2H、3.37s、3H、3.22s、2H、3.17m、1H、3.16s、3H、2.87d、J=9.7Hz、1H、2.49m、2H、2.34m、2H、2.18dd、J=13.9、2.7Hz、1H、2.00s、3H、1.68s、3H、1.63d、J=13.6Hz、1H、1.46m、1H、1.27d、J=6.3Hz、3H、1.22m、1H、0.97m、2H、0.83s、3H、0.03s、9H。マイタンシノールのヘキサンジオイック酸エステルofマイタンシノール14bトリメチルシリル保護化アンサマイトシン誘導体14a30mg、0.038mmolをテトラヒドロフラン0.38mLに溶解し、0°Cまで冷却した。いったん冷却すると、反応物をテトラヒドロフラン0.045mL、0.045mmol中の1Mのテトラブチルアンモニウムフッ化物で処理した。冷却槽を除去し、反応物を室温に温め、6時間攪拌した。その後、飽和塩化アンモニウムで反応を消し、酢酸エチルに抽出して、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、真空で濃縮した。粗産物をセミ分取C18HPLCで精製し、5.4mgの所望のカルボン酸アンサマイトシン誘導体14bを20.6収率で生じさせた。HRMSMNa実測値:715.2593、計算値:715.26041HNMR400MHz、CDCl3δ6.84s、1H、6.79s、1H、6.63s、1H、6.42dd、J=15.3、10.9Hz、1H、6.16d、J=10.6Hz、1H、5.53dd、J=15.5、8.8Hz、1H、4.88d、J=9.1Hz、1H、4.26t、J=10.9Hz、1H、3.99s、3H、3.72m、2H、3.51m、1H、3.37s、3H、3.19s、3H、2.91d、J=9.7Hz、1H、2.71m、1H、2.53m、1H、2.41m、3H、2.20d、1H、2.01s、3H、1.73m、2H、1.68s、3H、1.61d、J=13.7Hz、1H、1.46m、1H、1.26m、3H、0.82s、3H。マイタンシノールのヘキサンジオイック酸エステルのN-ヒドロキシスクシンイミドエステル13a反応フラスコに14b5mg、0.007mmolおよび塩化メチレン1mLを入れた。連続して、N-ヒドロキシスクシンイミド4.15mg、0.036mmolおよび1-エチル-3-3-diメチルアミノプロピルカルボジイミド6.91mg、0.036mmolを攪拌する混合物に加えた。一晩、室温で反応を行った。完了後、反応容積を真空で減らし、産物をセミ分取C18HPLCで精製した。留分を含有する産物を回収し、冷凍し、凍結乾燥して、N-ヒドロキシスクシンイミジルエステル基を担持する、0.91mgの所望のアンサマイトシン誘導体13aを、収率15.9で生じさせた。HRMSMNa実測値:812.2763、計算値:812.2768。実施例26:チオール含有アンサマイトシン誘導体6を以下のように調製した図5を参照マイタンシノールの3-メチルジチオプロパン酸エステル45反応フラスコに、3-メルカプトプロパン酸28、318mg、2.088mmol、N,N’-ジシクロヘキシルカルボジイミド431mg、2.088mmolおよび塩化メチレン2.0mLを入れた。4-ジメチルアミノピリジン85mg、0.696mmolおよびマイタンシノール197mg、0.348mmolを連続して加えながら、溶液を攪拌した。反応物を2時間室温で攪拌した。2時間後、反応物を濾過して沈殿物を除去し、真空で濃縮した。産物をセミ分取C18HPLCで単離した。留分を含有する産物を混ぜ合わせ、濃縮して乾燥させ、93mg収率38.4の化合物45を生じさせた。HRMSMNa実測値:763.2448、計算値:763.2460.1HNMR400MHz、CDCl3δ6.84s、1H、6.82s、1H、6.45dd、J=15.4、11.1Hz、1H、6.32s、1H、6.19d、J=11.0Hz、1H、5.54dd、J=15.4、8.8Hz、1H、4.98dd、J=11.9、2.6Hz、1H、4.23t、J=11.2Hz、1H、3.99s、3H、3.52t、J=12.1Hz、2H、3.37s、3H、3.20m、2H、3.16s、3H、2.89m、2H、2.83d、J=9.7Hz、1H、2.70m、2H、2.52m、1H、2.20dd、J=13.9、2.4Hz、1H、1.72m、1H、1.68s、3H、1.62d、J=13.5Hz、2H、1.48m、1H、1.28d、J=6.3Hz、3H、1.23d、J=13.5Hz、1H、0.84s、3H.13CNMR101MHz、CDCl3δ170.65、168.66、152.46、149.47、142.65、140.20、128.24、124.63、122.42、119.58、113.16、88.22、81.24、74.46、66.32、60.48、56.86、56.73、47.29、38.48、35.83、34.38、33.55、32.93、31.39、24.86、22.87、22.31、15.90、14.76、14.65、12.22。マイタンシノールの3-チオプロパン酸エステル610mLの攪拌棒付き丸底フラスコで、1,2-ジメトキシエタン3mLに4545mg、0.064mmolを溶かし、溶液を調製した。その後、リン酸塩緩衝液pH7.53mL、100mMのリン酸カリウム、2mMのEDTA中のD,L-ジチオトレイトール49.6mg、0.322mmolを加えた。反応フラスコには隔壁を設け、アルゴン雰囲気下で反応完了まで攪拌しながら、室温で反応を進めた。反応容積を真空で減少させ、産物をセミ分取C18精製で単離した。留分を含有する産物を化合物溶出後に冷凍し、凍結乾燥して4mg収率9.5の化合物6を白色固体として生じさせた。HRMSMNa実測値:675.2092、計算値:675.21141HNMR400MHz、CDCl3δ6.84s、1H、6.77s、1H、6.43dd、J=15.3、11.0Hz、1H、6.32s、1H、6.17d、J=10.9Hz、1H、5.52dd、J=15.4、8.9Hz、1H、4.89dd、J=11.9、2.8Hz、1H、4.24t、J=10.5Hz、1H、4.15m、2H、3.99s、3H、3.52dd、J=16.5、11.0Hz、1H、3.37s、3H、3.20m、2H、3.16s、3H、2.87d、J=9.7Hz、1H、2.51m、1H、2.34m、2H、2.18dd、J=13.9、2.7Hz、1H、1.68s、3H、1.63d、J=13.6Hz、1H、1.46m、1H、1.27d、J=6.3Hz、2H、1.22m、1H、0.97m、1H、0.83s、3H。13CNMR101MHz、CDCl3δ170.35、168.71、156.18、152.32、142.66、140.37、140.14、132.55、128.14、124.48、122.33、119.61、113.15、88.26、81.21、77.30、74.42、66.16、60.49、56.88、56.72、47.31、38.67、38.48、35.85、35.81、32.95、19.84、15.93、14.65、12.27。チオール含有アンサマイトシン58を以下のように調製した図13Bを参照2-メチルジチオプロパン酸56攪拌棒付き丸底フラスコに、2-メルカプトプロパン酸1.99mL、2.39g、22.55mmolおよび水50.0mLを入れた。炭酸ナトリウム4.77g、45.00mmolを反応フラスコにゆっくりと加えながら、反応物を攪拌した。それとは別に、エタノール50.0mLにメチルメタンチオールスルホン酸塩2.77mL、29.3mmolを溶かして溶液を調製し、ゆっくりと攪拌反応溶液に加えた。室温で2時間、アルゴン雰囲気下で反応を行った。反応終了後、反応容積を真空で元の容積の2分の1に減少させた。残りの水性溶液を、1MのHClを用いてpH2に酸化し、酢酸エチル2×250mLで抽出した。有機抽出物を混合し、ブラインで洗浄し、真空で濃縮して、原油を生じさせた。産物を、シリカクロマトグラフィーにより、ヘキサン:酢酸エチル:酢酸50:49:1の混合物で溶出して精製した。留分を含有する産物を混ぜ合わせて真空で濃縮し、2.3gの精製された無色の56を、収率67で生じさせた。1HNMRCDCl3δ1.5203H、d、J=7.2Hz、2.4463H、s、3.5591H、m。マイタンシノールの2-メチルジチオプロパン酸エステル57丸底フラスコに、2-メチルジチオプロパン酸56、303.3mg、1.992mmol、塩化メチレン2mLを入れ、攪拌棒を挿入した。溶液を攪拌しながら、N,N’-ジシクロヘキシルカルボジイミド438mg、2.124mmolを加え、その後、4-ジメチルアミノピリジン86mg、0.708mmolおよびマイタンシノール200.0mg、0.354mmolを連続して加えた。フラスコには隔壁を設け、室温で攪拌しながら反応を進めた。1時間後、反応物を酢酸エチル20mLで希釈し、濾過し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液10mLとブライン5mLで連続して洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空で濃縮した。産物をセミ分取C18HPLCにより水性の0.1ギ酸中のアセトニトリルの直線勾配で溶出して単離した。留分を含有する産物を回収し、混合し、真空で濃縮して、8.53mgの化合物57を3.3収率で生じさせた。HRMSMNa実測値:721.1998、計算値:721.19911HNMR400MHz、CDCl3δ6.91d、J=1.4Hz、1H、6.83s、1H、6.42dd、J=15.4、11.0Hz、1H、6.31s、1H、6.16d、J=10.9Hz、1H、5.54dd、J=15.5、9.0Hz、1H、4.91dd、J=12.0、3.0Hz、1H、4.26t、J=11.0Hz、1H、3.99s、3H、3.65dd、J=14.5、7.2Hz、1H、3.51dd、J=10.6、7.9Hz、1H、3.36d、J=3.6Hz、3H、3.19s、3H、2.86m、1H、2.57dd、J=14.1、12.0Hz、1H、2.49s、3H、2.24m、1H、1.89m、1H、1.78d、J=7.1Hz、1H、1.69s、3H、1.68d、J=3.1Hz、3H、1.65d、J=4.1Hz、1H、1.47m、1H、1.29d、J=6.2Hz、3H、1.25s、1H、0.82s、3H。マイタンシノールの2-チオプロパン酸エステル58丸底フラスコに578mg、0.011mmol、1,2-ジメトキエタン1mLを入れ、攪拌棒を挿入した。それとは別に、リン酸塩緩衝液pH7.53mL、100mMのリン酸カリウム、2mMのEDTAにD,L-ジチオトレイトール5.29mg、0.034mmolを溶かして溶液を調製し、反応フラスコに加えた。アルゴン雰囲気下で、反応終了まで室温で攪拌しながら反応を進めた。反応完了90分に伴い、反応混合物を蒸発させ、真空で乾燥し、セミ分取C18HPLCで精製した。産物を回収し、冷凍し、凍結乾燥させて、1.6mgの化合物58を、97.1精度、18.2収率で単離し、生じさせた。MS計算値MNa675.2;実測値676.2、MS計算値M-H-651.1;実測値651.2。実施例28:チオール含有アンサマイトシン55を以下のように調製した図13A参照6-メチルジスルファニルヘキサン酸53反応フラスコを氷浴で冷却し、6-メルカプトヘキサン酸500mg、3.37mmolと水2mLを入れた。エタノール1mLに溶かしたメチルメタンチオールスルホン酸塩468mg、3.71mmolを加え、溶液を攪拌した。反応物を室温で一晩中、アルゴン雰囲気下で攪拌した。その後、反応混合物を飽和塩化ナトリウム400mLで希釈し、エーテル3×150mLで抽出した。混合抽出物を塩化ナトリウム溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、真空で濃縮した。産物をシリカフラッシュクロマトグラフィーを介して、ヘキサン:酢酸エチル:酢酸1:0.9:0.1の混合物で溶出して単離し、482mg収率73.5の化合物53を生じさせた。1HNMRCDCl3、ref.7.26ppmδ1.4732H、m、1.7024H、m、2.3592H、t、2.4053H、s、2.7082H、t。マイタンシノールの6-メチルジチオヘキサン酸エステル54反応フラスコに6-メチルジスルファニルヘキサン酸53、413mg、2.124mmolと塩化メチレン2.0mLを入れた。攪拌した溶液を、N,N’-ジシクロヘキシルカルボジイミド438mg、2.124mmol、4-ジメチルアミノピリジン86mg、0.708mmolおよびマイタンシノール200mg、0.354mmolで連続処理した。室温で一晩中攪拌しながら反応を進めた。反応混合物を濾過し、真空で濃縮し、セミ分取C18HPLCで精製して36.7mgの54を収率13.9で生じさせた。HRMSMNa実測値:763.2448、計算値:763.24601HNMR400MHz、CDCl3δ6.83s、1H、6.77s、1H、6.44m、1H、6.39s、1H、6.15d、J=11.2Hz、1H、5.49m、1H、4.89dd、J=11.8、2.6Hz、1H、4.24t、J=10.5Hz、1H、3.98s、3H、3.51m、1H、3.36s、3H、3.20d、1H、3.17s、3H、2.87m、1H、2.69m、2H、2.50m、2H、2.42s、3H、2.39s、1H、2.39s、1H、2.34m、1H、2.17d、1H、2.00s、3H、1.72m、6H、1.45m、2H、1.27d、J=6.3Hz、3H、0.82s、3H。13CNMR101MHz、CDCl3δ172.04、168.97、159.49、156.21、152.51、151.65、142.70、140.17、132.50、128.19、124.60、122.23、113.13、88.32、81.14、74.47、66.44、60.49、56.72、47.35、44.03、38.60、38.03、35.76、34.05、32.91、28.93、27.90、25.37、24.36、23.30、22.30、15.92、14.67、12.23。マイタンシノール6-メルカプトヘキサン酸エステル55ジスルフィド担持アンサマイトシン誘導体5430.0mg、0.040mmolを、攪拌棒を備えた10mLの丸底フラスコの中で、1,2-ジメトキシエタン3mLに溶解した。リン酸塩緩衝液pH7.53mL、100mMリン酸カリウム、2mMのEDTA中のD,L-ジチオトレイトール31.2mg、0.202mmolを加えた。反応フラスコに隔壁を設け、アルゴン雰囲気下で3.5時間攪拌しながら、室温で反応を行った。産物をセミ分取C18HPLC精製で単離した。産物を溶出後に冷凍し、凍結乾燥し、12.5mg収率44.6の55を生じさせた。HRMSMNa実測値:717.2563、計算値:717.25831HNMR400MHzCDCl3δ6.84d、J=1.5Hz、1H6.77d、J=1.5Hz1H6.44dd、J=15.411.0Hz1H6.34s1H6.16d、J=11.2Hz1H5.49dd、J=15.48.9Hz1H4.89dd、J=11.92.8Hz1H4.25t、J=10.5Hz1H3.99s、3H3.72q、J=7.0Hz1H3.51m、1H3.37s、3H3.21d、J=12.8Hz1H3.17s、3H2.88m、1H2.52m、6H2.35m、1H2.19dd、J=13.72.7Hz1H1.66d、J=7.3Hz3H1.61m、2H1.46m、4H1.36m、1H1.26m、3H0.83s3、H。13CNMR101MHzCDCl3δ172.04168.82156.22152.41142.72140.19132.51128.17124.58122.22119.67113.1288.3481.1474.4566.4760.4656.7347.3744.0338.6135.7534.0733.6632.9129.8529.4328.7028.3227.8124.4115.9214.6712.23。実施例29:チオール含有アンサマイトシン誘導体19を以下のように調製した図6B4-メチルジスルファニルメチル安息香酸37b4-メルカプトメチル安息香酸36、500mg、2.97mmolを水10mLに溶かし、冷浴で冷却した。エタノール5.00mLに溶かしたメチルメタンチオールスルホン酸塩413mg、3.27mmolを加えながら、冷却した溶液を攪拌した。加えた後に、冷却槽を取り除き、反応物を一晩中室温で攪拌した。一晩中反応を行った後、反応物を飽和塩化ナトリウムで希釈し、エーテルで抽出した。混合抽出物を塩化ナトリウムで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、真空で濃縮した。産物をシリカフラッシュクロマトグラフィーを用いて、1酢酸を含有するヘキサン中の40~60の酢酸エチル勾配で20分間溶出して単離し、482mgの所望の産物4-メチルジスルファニルメチル安息香酸37bを73.5の収率で生じさせた。1HNMRCDCl3δ2.1213H、s、3.9382H、s、7.4572H、d、J=8.4Hz、8.0682H、d、J=8Hz。マイタンシノールの4-メチルジスルファニルメチル安息香酸エステル59塩化メチレン2.0mLに4-メチルジスルファニルメチル安息香酸37b、228mg、1.062mmolを溶かした溶液を、N,N’-ジシクロヘキシルカルボジイミド219mg、1.062mmol、4-ジメチルアミノピリジン43.2mg、0.354mmolおよびマイタンシノール100mg、0.177mmolで連続処理した。72時間攪拌しながら反応を行い、その後、反応混合物を濾過し、真空で濃縮し、セミ分取C18HPLCで精製し、3.4mgの化合物59収率2.5を生じさせた。HRMSMNa実測値:783.2155、計算値:783.21471HNMR400MHz、CDCl3δ8.03d、J=8.2Hz、2H、7.49d、J=8.2Hz、2H、7.05d、J=1.5Hz、1H、6.85d、J=1.5Hz、1H、6.28dd、J=15.4、10.9Hz、1H、6.12s、1H、5.88d、J=10.8Hz、1H、5.02dd、J=12.0、3.3Hz、1H、4.78dd、J=15.4、9.1Hz、1H、4.27t、J=10.4Hz、1H、4.00s、3H、3.97s、2H、3.48d、J=12.9Hz、1H、3.34d、J=9.1Hz、1H、3.23s、3H、3.19s、3H、3.14d、J=9.6Hz、1H、2.75t、J=13.2Hz、1H、2.33dd、J=14.3、3.2Hz、1H、2.23s、3H、1.66s、3H、1.59d、J=13.3Hz、1H、1.53~1.36m、1H、1.31d、J=6.3Hz、3H、1.14t、J=12.9Hz、2H、0.84s、3H。マイタンシノールの4-メルカプトメチル安息香酸エステル1910mLの丸底フラスコに593mg、0.004mmol、1,2-ジメトキシエタン3mLを入れ、攪拌棒を挿入した。それとは別に、リン酸塩緩衝液pH7.53mL、100mMのリン酸カリウム、2mMのEDTAに溶かしたD,L-ジチオトレイトール3.04mg、0.020mmolの溶液を調製し、反応フラスコに加えた。反応フラスコに隔壁を設け、アルゴン雰囲気下で3.5時間攪拌しながら、室温で反応を行った。その後、反応容積を真空で濃縮し、産物をセミ分取C18精製で単離した。留分を含有する産物を溶出後に冷凍し、凍結乾燥して1.4mg収率35.5の化合物19を白色固体として生じさせた。HRMSMNa実測値:737.2269、計算値:737.2270。実施例30:ペグ化された、チオール反応性アンサマイトシン60を以下のように調製した図7Bを参照マイタンシノールのPEG4-SPDPエステル6010mLの丸底フラスコに、SPDP-dPEG4-酸QuantaBiodesign社、カタログ番号10373、100mg、0.216mmolおよび塩化メチレン2mLを入れた。フラスコに攪拌棒を挿入し、N,N’-ジシクロヘキシルカルボジイミド134mg、0.648mmolを加えながら、溶液を攪拌した。その後、マイタンシノール61.0mg、0.108mmolおよび4-ジメチルアミノピリジン26.4mg、0.216mmolを連続して加えた。フラスコに隔壁を設け、室温で攪拌しながら反応を行った。2.5時間後、粗反応混合物を濾過し、真空で濃縮し、セミ分取C18HPLCで精製した。留分を含有する産物を混ぜ合わせて真空で濃縮し、30mgの化合物60を収率27で生じさせた。MS計算値MNa1031.3;実測値1031.3;MS計算値MCl-1043.3;実測値1043.21HNMR400MHz、CDCl3δ8.43d、J=4.1Hz,1H、7.67m、2H、7.08m、1H、6.82s、1H、6.76d、J=1.3Hz、1H、6.65s、1H、6.42dd、J=15.4、11.0Hz、1H、6.20d、J=11.0Hz、1H、5.61dd、J=15.5、8.9Hz、1H、4.93dd、J=11.8、2.5Hz、1H、4.55s、1H、4.24t、J=11.2Hz、1H、3.97s、3H、3.87m、1H、3.63m、8H、3.50m、3H、3.32s、3H、3.15s、3H、3.07m、2H、2.81d、J=9.5Hz、2H、2.70m、1H、2.62m、2H、2.48m、1H、2.16dd、J=13.9、2.4Hz、1H、1.91m、1H、1.69m、2H、1.65s、3H、1.59m、2H、1.47m、1H、1.32m、2H、1.26d、J=6.4Hz、3H、1.10m、4H、0.84s、3H。13CNMR101MHz、CDCl3δ171.03、170.01、168.76、160.03、156.94、156.09、152.88、149.71、142.59、140.33、139.72、137.28、132.21、128.87、124.74、122.27、120.91、119.91、119.46、113.15、88.79、80.87、74.44、70.92、70.57、70.47、70.34、70.13、69.91、66.38、66.17、60.60、56.80、56.69、49.24、47.20、39.41、38.39、35.72、35.55、34.62、34.08、25.76、25.08、15.82、14.68、12.19。実施例31:アンサマイトシン誘導体64aおよび64bを以下のように調製した図13C参照3,7-ジメチルオキセパン-2-オン61250mLの丸底フラスコに、2,6-ジメチルシクロヘキサノン2.162mL、2.0g、15.85mmolおよび126mLのメタノールl/水1:1混合物を入れた。モノペルオキシフタル酸マグネシウム六水和物MMPP、15.68g、31.7mmolおよび炭酸水素ナトリウム2.66g、31.7mmolを加えながら、溶液を攪拌した。一晩中、室温で攪拌しながら反応を行った。翌日、粗産物を酢酸エチルで抽出し、飽和炭酸水素ナトリウムとブラインで連続して洗浄し、真空で濃縮する前に無水硫酸ナトリウムで乾燥して、1.07g収率47.5の3,7-ジメチルオキセパン-2-オン61を透明無色油として生じさせた。6-メルカプト-2-メチルヘプタン酸6210mLの攪拌棒付き丸底フラスコに3,7-ジメチルオキセパン-2-オン61、0.729g、5.13mmol、よう化水素酸2.029ml、15.38mmolおよびチオ尿素2.73g、35.91mmolを入れた。フラスコに水冷の水コンデンサを備え、窒素雰囲気下に配置し、加熱環流した。一晩中、環流しながら反応を行った。その後、水5mLに溶かした水酸化ナトリウム3.69g、92mmol溶液を反応フラスコに加えた。一晩中反応を環流した。反応混合物を熱から取り出し、室温に冷却して、フラスコの内容物を別の漏斗へ移した。水層を酢酸エチルで抽出し、抽出物を取り分けた。水槽をHClでpH2に酸化し、酢酸エチル2×100mLおよび塩化メチレン1×100mLで抽出した。有機抽出物を混合し、30mLのブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、真空で濃縮して823mgの粗6-メルカプト-2-メチルヘプタン酸62、収率92を淡褐色の油として生じさせた。2-メチル-6-メチルジスルファニルヘプタン酸63100mLの丸底フラスコに、粗6-メルカプト-2-メチルヘプタン酸62、832.3mg、4.72mmolおよび水30mLを入れた。炭酸ナトリウム1.001g、9.44mmolを攪拌溶液に加えた。それとは別に、エタノール30mLにメチルメタンチオールスルホン酸塩0.668mL、7.08mmolを溶かして溶液を調製し、攪拌反応混合物にゆっくりと加えた。添加終了後、反応フラスコに隔壁を設け、アルゴン雰囲気下に配置した。反応混合物を室温で3時間攪拌した。3時間後、反応容積を真空で半分に減少させた。残りの水槽を別の漏斗に移し、酢酸エチル2×40mLで2回抽出した。水槽を濃縮HClでpH2に酸化し、有機抽出物を取り分けた。酸化後、水槽を酢酸エチル3×70mLで抽出した。有機抽出物を混ぜ合わせ、産物を抽出して飽和炭酸水素ナトリウム3×100mLに戻した。水性抽出物を混ぜ合わせ、濃縮HClでpH2に酸化した。酸化水層を別の漏斗に移し、産物を酢酸エチル3×100mLで抽出した。有機抽出物を混合し、50mLブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、真空で濃縮して黄色の原油を生じさせた。産物をシリカゲルクロマトグラフィーにより、ヘキサン:酢酸エチル:酢酸66:33:1の混合物で溶出して精製した。留分を含有する産物を混ぜ合わせて真空で濃縮し、292mgの化合物63を収率28で生じさせた。1HNMRCDCl3δ1.1893H、d、J=7.2Hz、1.3173H、d、J=6.4Hz、1.442~1.7066H、m、2.3923H、s、2.4751H、m、2.8401H、m。マイタンシノールの2-メチル-6-メチルジスルファニルヘプタン酸エステル64aおよび64b10mLの丸底フラスコにマイタンシノール29.6mg、0.052mmol、塩化メチレン3mLを入れ、攪拌棒を挿入した。2-メチル-6-メチルジスルファニルヘプタン酸63、69.9mg、0.314mmolを加えながら溶液を攪拌し、続いて、N,N’-ジシクロヘキシルカルボジイミド64.8mg、0.314mmolおよび4-ジメチルアミノピリジン12.8mg、0.105mmolを連続して加えた。反応フラスコに隔壁を設け、室温で4時間反応を行った。粗反応混合物を別の漏斗に移し、酢酸エチルで希釈した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウムで2回、ブラインで1回洗浄し、真空で濃縮して黄色の原油を生じさせた。産物をセミ分取C18HPLCで精製した。産物のラセミ体に対応する2つのピークを別々に回収して、真空で濃縮し、全部で合わせて4.7mgの所望の化合物を生じさせた64a:2.1mgおよび64b:2.6mg。MSMNa実測値64a:791.0、計測値:791.3;MCl-実測値64a:802.9、計測値:803.2。MSMNa実測値64b:791.1、計測値:791.3;MCl-実測値64b:802.9、計測値:803.2。実施例32:アンサマイトシン誘導体66を以下のように調製した図10Bマイタンシノールのジメチルアミノ酪酸エステル66反応フラスコに4-ジメチルアミノ-酪酸HCl93.5mg、0.558mmol、N,N-ジイソプロピルエチルアミン15.45μL、0.088mmolおよび塩化メチレン0.2mLを入れた。その後、N,N’-ジシクロヘキシルカルボジイミド110mg、0.531mmol、4-ジメチルアミノピリジン21.62mg、0.177mmolおよびマイタンシノール50mg、0.088mmolを連続して加えた。反応フラスコに隔壁を設け、72時間攪拌しながら室温で反応を行った。粗反応混合物を濾過し、真空で濃縮しセミ分取C18HPLCで精製した。留分を含有する産物を回収して混ぜ合わせ、真空で濃縮し、8.2mg収率13.7の化合物66を生じさせた。MS計算値MH;678.3;実測値678.2。実施例23:アンサマイトシン誘導体のinvitro活性図28~30は、本発明の様々なアンサマイトシン誘導体の、KB、COLO205およびCOLO205-MDR細胞株に対する細胞傷害性活性を示している。ジスルフィド担持アンサマイトシン誘導体45、54、57、59、64aおよび64bは、IC50値が0.27nM~4nMの範囲で、KB細胞株に対し効能があった図28a~d。ヒト結腸腫瘍細胞株COLO205に対し試験をすると、ジスルフィド担持アンサマイトシン誘導体54および59は、IC50値がそれぞれ0.31nMと0.53nMで、同様の効能を示した。化合物13aの合成前駆体、アミン反応性の連結可能なアンサマイトシン誘導体を、KB、COLO205およびCOLO205-MDR細胞株に対し評価した。3つの細胞株に対するTMS保護化前駆体14aの活性は、COLO205細胞に対する0.40nMから、COLO205MDR細胞株に対する0.48nMの範囲であった。TMS保護基を除去した後、端末カルボン酸14bを担持するアンサマイトシン誘導体を単離し、KB細胞株に対しinvitroで評価した。14bに関しては、KB細胞株に対するTMS保護前駆体と比較して、15倍の活性低下が認められた。効能低下の一番の原因は、荷電アンサマイトシンカルボキシレートの細胞浸透生が低いことが挙げられる。しかし、細胞内送達は、効能を高めるためにモノクロナール抗体などの細胞結合剤をコンジュゲートすることにより達成し得る。ジメチルアミノ酪酸アンサマイトシン誘導体66は、3つの細胞株に対し試験された化合物の中で一番効能が低かった。この化合物の非MDR細胞株に対するIC50測定値は、11~12nMであり、COLO205MDR細胞株に対しては20nM超であった図30。実施例34:ジスルフィドリンカーによる抗体とスルフィドリル担持アンサマイトシン誘導体とのコンジュゲーションスルフィドリル担持アンサマイトシン誘導体55の溶液8.4mMのストック、w/vをDMAで調製した。ストック溶液をエタノールで希釈し、エタノールおよびDMAの試薬ブランクに対し、280nmでの吸光度を測定した。ストック55の濃度を280nmにおける5,456M-1の減衰係数を用いて計算した。それは、同波長におけるマイタンシノイドの減衰係数として実験により決定される。DMA5、v/vを含有する、pH7.5、20mMリン酸ナトリウム、150mM塩化ナトリウム緩衝液中の抗EpCam抗体5mg/mLを、8倍モル過剰SPPDMA中に10mMと3時間、室温で反応させた。その後、修飾抗体をpH6.5、20mMのリン酸ナトリウム、50mMの塩化ナトリウム、2mMのEDTA緩衝液で2.5mg/mLに希釈し、修飾反応で使用されるモル過剰SPP当たり、2倍モル過剰の55で処理された。コンジュゲーション反応は、pH6.5緩衝液中で、DMA7.5、v/vと、室温で20時間行った。その後、このコンジュゲートを、10mMのヒスタジン、250mMのグリシン、1のショ糖、pH5.5から成る緩衝液で均衡させたNAP-25セファデックスG25カラム上で精製し、分解し、濾過した。分解後、コンジュゲートでは、抗体分子1個当たり3.8個のアンサマイトシン分子が連結した。最終的コンジュゲートにおける抗体分子1個当たりのアンサマイトシン分子の数は、252nmおよび280nmにおけるコンジュゲートの吸光度測定、ならびにこれら二つの波長におけるマイタンシノイドと抗体の既知の減衰係数を用いて決定された。SECHPLCをコンジュゲート上で行い、コンジュゲーション後には86が単量体であることが示された。実施例34:抗体とアミン反応性アンサマイトシン誘導体のコンジュゲーションアミン反応性アンサマイトシン誘導体13aの5mMのストックw/vをDMAで調製した。ストック溶液をエタノールで希釈し、エタノールとDMAの試薬ブランクに対する280nmでの吸光度を測定した。ストック13aの濃度を、280nmにおける5,456M-1の減衰係数を用いて計算した。それは、同波長におけるマイタンシノイドの減衰係数として実験により決定される。抗-EpCam抗体を、DMA10、v/vを含む、pH7.5の20mMリン酸ナトリウム、150mM塩化ナトリウム緩衝液中の12倍モル過剰13a2.5mg/mLと、室温で4.5時間コンジュゲートした。その後、このコンジュゲートを、10mMのヒスタジン、250mMのグリシン、1のショ糖、pH5.5から成る緩衝液で均衡させたNAP-10セファデックスG25カラム上で精製し、分解し、濾過した。分解後、コンジュゲートでは、抗体分子1個当たり3.3個のアンサマイトシン分子が連結し、コンジュゲートには検出可能な遊離薬剤は存在しなかった。最終的コンジュゲートにおける抗体分子1個当たりのアンサマイトシン分子の数は、252nmおよび280nmにおけるコンジュゲートの吸光度測定、ならびにこれら二つの波長におけるマイタンシノイドと抗体の既知の減衰係数を用いて決定された図20。SECHPLCをコンジュゲート上で行い、コンジュゲーション後には91が単量体であることが示された。実施例35:アンサマイトシン誘導体およびマイタンシノイドで調製されたコンジュゲートのinvitro細胞傷害性連結可能なアンサマイトシン誘導体55および13aで調製したEpCam抗原を標的とするコンジュゲートを、細胞株COLO205を発現するEpCamに対する効能をinvitroで評価した。ジスルフィド連結mAb-SPP-55コンジュゲートは効能がありかつ特異的で、活性の測定値は0.23nMであった図31。非開裂性アンサマイトシンコンジュゲート、mAb-13a、は、ジスルフィドコンジュゲートより僅かに活性であり、IC50値は0.14nMであった図31。抗-EpCammAb-アンサマイトシンコンジュゲートで培養する前に、過剰の非コンジュゲート抗-EpCam抗体で事前処理されたCOLO205に対しコンジュゲートを試験すると、活性が失われたことから、試験対象のコンジュゲートは共に標的細胞株に対して特異的であることが示された図31。"