"メトキシエチルアクリレートaの重合体Aと、水膨潤性粘土鉱物及びシリカから選択される1種以上の無機材料Bとを含有する細胞培養基材の上で、フィーダー細胞を使用せずに、胚性幹細胞を、未分化状態を保持したまま培養することを特徴とする胚性幹細胞の培養方法。前記重合体Aと無機材料Bとの質量比B/Aが、0.03~1.0の範囲にある請求項1に記載の胚性幹細胞の培養方法。請求項1または2に記載の培養法で製造された胚性幹細胞。本発明が解決しようとする課題は、フィーダー細胞及び成長因子を使用せずに、ES細胞を、未分化状態を保持したまま培養する方法、及び培養ES細胞を提供することにある。本発明者等は、上記課題を解決すべく鋭意研究した結果、メトキシエチルアクリレートaの重合体Aと、水膨潤性粘土鉱物及びシリカから選択される1種以上の無機材料Bとを含有する細胞培養基材の上で、フィーダー細胞及び成長因子を使用せずに、ES細胞を、未分化状態を保持したまま増殖させることができる、ES細胞の培養方法を見出し、本発明を完成するに至った。即ち、本発明は、メトキシエチルアクリレートaの重合体Aと、水膨潤性粘土鉱物及びシリカから選択される1種以上の無機材料Bとを含有する細胞培養基材の上で、フィーダー細胞を使用せずに、ES細胞を、未分化状態を保持したまま培養することを特徴とするES細胞の培養方法を提供する。また、本発明は、前記培養法で製造されたES細胞を提供する。本発明の細胞培養基材の最大の特徴は、上記無機材料Bの構成部分がES細胞の増殖を担い、メトキシエチルアクリレートa重合体Aは、ES細胞との間の弱い接着性の維持を担うことにある。この二つの部分をES細胞の未分化能の維持状態、増殖状況に応じてそれぞれ単独に調節できることにある。例えば、無機材料Bの含有量が増すと、細胞の増殖速度が速くなり、培養細胞数が多くなる。また、無機材料Bの種類を変えることにより、細胞の増殖速度を調整することができる。ここでいうES細胞とは、ヒト胚性幹細胞またはヒト以外の動物胚性幹細胞のことをいう。重合体Aは主にイオン結合や水素結合などにより無機材料Bと相互作用し結合している。この結合力は強く、容易にポリマーと無機材料Bを引き離すことはできない。本発明のES細胞の培養方法は、フィーダー細胞及び成長因子を使用せずに、ES細胞を、未分化状態を保持したまま増殖させることができる特徴を有する。また、本培養方法に用いられる培養基材は、γ線や電子線などの放射線滅菌が可能である特徴を有する。本発明に用いる無機材料Bは、水膨潤性粘土鉱物及びシリカから選択される1種以上の無機材料である。水膨潤性粘土鉱物としては、層状に剥離可能な水膨潤性粘土鉱物が挙げられ、好ましくは水または水と有機溶剤との混合溶液中で膨潤し均一に分散可能な粘土鉱物、特に好ましくは水中で分子状単一層またはそれに近いレベルで均一分散可能な無機粘土鉱物が用いられる。具体的にはナトリウムを層間イオンとして含む水膨潤性ヘクトライト、水膨潤性モンモリライト、水膨潤性サポナイト、水膨潤性合成雲母、等が挙げられる。これらの粘土鉱物を混合して用いても良い。本発明に用いるシリカSiO2としては、コロイダルシリカが挙げられ、好ましくは水溶液中で均一に分散可能で、粒径が10nm~500nmのコロイダルシリカ、特に好ましくは粒径が10~50nmのコロイダルシリカが用いられる。また、本発明の細胞培養基材において、重合体Aと無機材料Bとの質量比B/Aが、0.03~1.0であることが好ましく、0.05~0.5がより好ましく、0.05~0.3が特に好ましい。質量比B/Aがこの範囲であると、ES細胞に対し良好な培養性と未分化能の維持を兼ね備えることができ、好ましい。また、細胞と培養基材表面の接着性や、培養性と未分化能維持の調整、及び/または培養した細胞を、トリプシンなどのタンパク質分解酵素を使用せず、30°C以下の低温処理のみで、細胞を培養基材表面から剥離、回収する場合は、その他の重合体、例えばポリエチレングリコール、ジメチルアクリルアミドの重合体、ポリグルタミン酸、N-イソプロピルアクリルアミドの重合体を重合体Aと併用することができる。例えば、重合体1gに対し、N-イソプロピルアクリルアミドの重合体を0.03~0.3gを併用する培養基材を用いることにより、培養した細胞を、培地温度を30°C以下に下げ、以下に列挙した物理的外部刺激により、細胞を容易に剥離させることができる。1ピペットで培地を吸ったり出したりするピペッティング操作で剥離させる方法2ガラス棒、ピペットの先や、ゴムヘラ等を細胞と培養基材間に差し込んで、細胞を剥離させる方法、3ピンセット等を用いて直接細胞の周りを挟んで持ち上げる方法等がある。上記低温処理で剥離回収したES細胞は、トリプシンなどのタンパク分解酵素を使用しないため、細胞の基底タンパクがダメージを受けず、生体内の細胞形態により近い状態にあり、細胞活性も高く、移植後の定着性や治癒性が高いと考えられる。本発明の培養基材の形態は、ES細胞の培養性と未分化能の維持を兼ね備えるものであれば、特に限定されない。例えば、ディッシュ状、シート状、円筒状、球状、薄いフィル状で他の樹脂と積層して一体化したものであってもよい。本発明の培養基材の製造方法は、メトキシエチルアクリレートaの重合体Aが無機材料Bと相互作用し、有機無機複合体を形成できるものであれば、特に限定されない。例えば、前記メトキシエチルアクリレートaと前記無機材料Bおよび重合開始剤Dとを混合した水媒体Cを支持体に塗布して、前記メトキシエチルアクリレートaを重合させることにより、重合体Aと前記無機材料Bとの複合体Xの薄層を形成する製造方法が挙げられる。前記製造方法に用いる水媒体Cは、モノマーaや無機材料Bなどを含むことができ、重合によって、物性のよい有機無機複合体が得られれば良く、特に限定されない。例えば水、または水と混和性を有する溶剤及び/またはその他の化合物を含む水溶液であってよく、その中には更に、必要に応じて防腐剤や抗菌剤、抗生物質、着色料、香料、酵素、たんぱく質、コラーゲン、糖類、アミノ酸類、ペプチド類、DNA類、塩類、水溶性有機溶剤類、界面活性剤、高分子化合物、レベリング剤などを含むことができる。本発明に用いられる重合開始剤Dとしては、公知のラジカル重合開始剤を適時選択して用いることができる。好ましくは水溶性または水分散性を有し、系全体に均一に含まれるものが好ましく用いられる。具体的には、重合開始剤として、水溶性の過酸化物、例えばペルオキソ二硫酸カリウムやペルオキソ二硫酸アンモニウム、水溶性のアゾ化合物、例えばVA-044、V-50、V-501いずれも和光純薬工業株式会社製の他、Fe2と過酸化水素との混合物などが例示される。触媒としては、3級アミン化合物であるN,N,N’,N’-テトラメチルエチレンジアミンなどは好ましく用いられる。但し、触媒は必ずしも用いなくてもよい。重合温度は、重合触媒や開始剤の種類に合わせて例えば0°C~100°Cが用いられる。重合時間も数十秒~数十時間の間で行うことが出来る。一方、光重合開始剤は、酸素阻害の影響を受けにくく、重合速度が速いため、重合開始剤Dとして好適に用いられる。具体的には、p-tert-ブチルトリクロロアセトフェノンなどのアセトフェノン類、4,4’-ビスジメチルアミノベンゾフェノンなどのベンゾフェノン類、2-メチルチオキサントンなどのケトン類、ベンゾインメチルエーテルなどのベンゾインエーテル類、ヒドロキシシクロヘキシルフェニルケトンなどのα-ヒドロキシケトン類、メチルベンゾイルホルメートなどのフェニルグリオキシレート類、メタロセン類などが挙げられる。本工程に用いられる光としては、電子線、γ線、X線、紫外線、可視光などを用いることができるが、中でも装置や取り扱いの簡便さやモノマーbの重合と同時に架橋を起こさせない観点から紫外線を用いることが好ましい。照射する紫外線の強度は10~500mW/cm2が好ましく、照射時間は一般に0.1秒~200秒程度である。通常の加熱によるラジカル重合においては、酸素が重合の阻害因子として働くが、本発明では、必ずしも酸素を遮断した雰囲気で溶液の調製および紫外線照射による重合を行う必要がなく、空気雰囲気でこれらを行うことが可能である。但し、紫外線照射を不活性ガス雰囲気下で行うことによって、更に重合速度を速めることが可能で、望ましい場合がある。また、本発明の培養基材の第二の製造例としては、水媒体C中の前記無機材料Bの濃度が下記式1又は式2で表される範囲となるように、前記モノマーaと前記無機材料Bと重合開始剤Dとを水媒体Cに混合した後、前記モノマーaを重合させることにより重合体Aと前記無機材料Bとの複合体Xの分散液Lを製造する第1工程、前記分散液Lを基材に塗布し、その後乾燥することにより前記複合体Xの薄層を形成する第2工程を順次行なうことを特徴とする細胞培養基材の製造方法が挙げられる。式1Ra<0.19のとき無機材料Bの濃度質量<12.4Ra0.05式2Ra≧0.19のとき無機材料Bの濃度質量<0.87Ra2.17式中、無機材料Bの濃度質量は、無機材料Bの質量を水媒体Cと無機材料Bの合計質量で除して100を掛けた数値、Raは無機材料Bと重合体Aとの質量比B/Aである。無機材料Bの水媒体に対する濃度質量は式1又は式2で表される範囲内であると、良好な複合体Xの分散液Lが得られ、支持体への塗布が容易で、平滑で均一な薄い塗膜が得られ、好ましい。本発明の製造方法で製造される分散液Lは、そのまま使用してもよいし、水洗などによる精製工程を経てから使用してもよい。また該分散液Lに更にレベリング剤や界面活性剤、ペプチド、たんぱく質、コラーゲン、アミノ酸類、高分子化合物などを添加して使用してもよい。以下、実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明の範囲がこれらの実施例にのみ限定されるものではない。[アルカリホスファターゼ染色]培養したES細胞が未分化能を保っているかどうかを判定するため、下記の方法でLeukocyteAlkalinePhosphataseKitを用いて細胞のアルカリホスファターゼ活性を測定した。先ずES細胞を下記実施例1に示す方法で二日間培養した後、培地を除いてPBSで1回洗浄し、FixativeSolutionCitrateConcentrationSolution78μL、超純水3.92ml、アセトン6mlを加えて細胞を固定する30秒。次いで、超純水で2回洗浄し、染色液DiazoniumSaltSolution4.8ml、NaphthilASMXphosphateAlkalineSolution200μLを加えて、室温で1時間静置する遮光。次いで、再び超純水で2回洗浄し、封入剤を滴下しカバーガラスで覆って顕微鏡で観察する。細胞の未分化能が保っている場合、高いアルカリホスファターゼ活性を示し、赤く染色される。逆に分化ES細胞では、アルカリホスファターゼ活性を示さず、染色されない。参考例EF細胞フィーダー細胞上でのES細胞培養例直径35mmのポリスチレン製ディッシュFALCON35-3002の底面を覆うようにゼラチン溶液を添加し、37°Cのインキュベーター内で30分以上静置した後、Dishからゼラチン溶液を除去し、EF細胞Balb/c由来胎児線維芽細胞用培地で懸濁したEF細胞フィーダー細胞を播種して、5二酸化炭素中、37°Cで一晩培養を行った。次いで、DishからEF細胞用培地を除去し、予めES細胞用培地で懸濁したES細胞を05×106cellDish播種し、5二酸化炭素中、37°Cで二日間培養を行った。次いで、DPBSで培地を洗浄後、0.25Trypsin-EDTAを用いて、ES細胞をDishから剥離回収し、ES用培地で細胞を懸濁しながら洗浄した後、再び予めEF細胞を培養したDish上に播種し、5二酸化炭素中、37°Cで培養を行った。上記操作培養回収を15回繰り返してES細胞を培養した。各回二日間培養した細胞について、顕微鏡観察したところ、細胞が盛り上がって増殖し島状のコロニーとなり、輪郭が丸くはっきりしており、細胞の未分化能が保っていることが分かる。更に、アルカリホスファターゼ染色により、細胞が濃く染色され、高いアルカリホスファターゼ活性を示し、未分化能が保っていることが確認された。また、各回二日間培養した細胞数の累計を図1に示した。増殖した細胞の数はほぼ直線的に増加し、15回繰り返し培養した結果、細胞数は約3×1018個オーダーであった。実施例1[メトキシエチルアクリレートa、無機材料B、水媒体Cを含む反応溶液の調製]メトキシエチルアクリレートa3.2g、無機材料Bとして水膨潤性粘土鉱物LaponiteXLGRockwoodAdditivesLtd社製0.2g、水媒体Cとして水100g、を均一に混合して反応溶液1を調製した。[重合開始剤Dを溶媒Eに溶解させた溶液の調整]溶媒Eとして、メタノール9.8g、重合開始剤Dとして1-ヒドロキシシクロヘキシルフェニルケトンイルガキュアー184チバガイギー社製0.2gを、均一に混合して溶液2を調製した。[複合体Xの分散液Lの調製第1工程]上記反応溶液1全量に、溶液2を250μl入れ、均一に分散させた後、365nmにおける紫外線強度が40mW/cm2の紫外線を180秒照射し乳白色の複合体Xの分散液L1を作製した。この反応系のRa=0.06、無機材料Bの濃度質量=0.20<12.4Ra0.05=0.79[培養基材複合体Xの薄層の調製第2工程]直径35mmのポリスチレン製シャーレIWAKIティッシュカルチャデイッシュ3000-035に、上記複合体Xの分散液L1を入れ、スピンコーターを用いて3000回転で該分散液をシャーレの表面に薄く塗布した後、80°Cの熱風乾燥器中で10分間乾燥させ、次いで、滅菌水によりシャーレを洗浄した後、滅菌袋中でシャーレを40°C、5時間乾燥させて、細胞培養基材1を得た。[ES細胞の培養]イES細胞の継代準備直径35mmのポリスチレン製ディッシュFALCON35-3001の底面を覆うようにゼラチン溶液を添加し、37°Cのインキュベーター内で30分以上静置した後、Dishからゼラチン溶液を除去し、EF細胞Balb/c由来胎児線維芽細胞用培地Dulbecco’sModifiedEagle’sMediumHighGlucose,10FetalBovineSerumで懸濁したEF細胞フィーダー細胞を播種して、5二酸化炭素中、37°Cで一晩培養を行った。次いで、DishからEF細胞用培地を除去し、予めES細胞用培地Dulbecco’sModifiedEagle’sMediumHighGlucose,MEMNonEssentialAminoAcid104M2Mercaptoethanol1000U/mLESGROmLIFMediumSupplementLGlutamine15EScellFBSで懸濁したES細胞を05×106cell/Dish播種し、5二酸化炭素中、37°Cで二日間培養を行った。次いで、DPBSで培地を洗浄後、025TrypsinEDTAを用いて、ES細胞をDishから剥離回収し、ES用培地で細胞を懸濁しながら洗浄した後、再び予めEF細胞を培養したDish上に播種し、5二酸化炭素中、37°Cで培養を行った。上記操作培養回収を3回繰り返して継代したES細胞を培養した。この細胞について、顕微鏡観察、アルカリホスファターゼ染色により、細胞の未分化能が保っていることを確認した。ロフィーダー細胞を使用しないES細胞の培養試験前記得られた細胞培養基材1を照射線量10kGyの電子線で滅菌した日本照射サービス株式会社後、前記3回継代した未分化のES細胞を05×106cellDish播種し、5二酸化炭素中、37°Cで二日間培養を行った。次いで、イと同様にして、培養細胞を基材1から剥離回収し、細胞数計測と顕微鏡観察及びアルカリホスファターゼ染色測定を行った後、再び電子線滅菌済みの細胞培養基材1に05×106cellDish播種して、二日間培養を行う。この操作を11回計22日間培養繰り返した。各回二日間培養した細胞について、顕微鏡観察したところ、細胞が盛り上がって増殖し島状のコロニーとなり、輪郭が丸くはっきりしており、細胞の未分化能が保っていることが分かる。更に、アルカリホスファターゼ染色により、細胞が濃く染色され、高いアルカリホスファターゼ活性を示し、未分化能が保っていることが確認された。また、各回二日間培養した細胞数の累計を図1に示した。増殖した細胞の数はほぼ直線的に増加し、11回繰り返し培養した結果、細胞数は約2×1015個オーダーであった。実施例2無機材料Bとして水膨潤性粘土鉱物LaponiteXLG0.8gを用いたこと以外は、実施例1と同様にして、細胞培養基材2を製造した。この反応系のRa=0.25、無機材料Bの濃度質量=0.79<0.87Ra2.17=2.39[ES細胞の培養]実施例1と同様に、予めEF細胞フィーダー細胞上で3回継代したES細胞を用いて、10kGyの電子線滅菌済みの細胞培養基材2に05×106cellDish播種して、繰り返し培養を行った。各回二日間培養した細胞について、顕微鏡観察したところ、細胞が盛り上がって増殖し島状のコロニーとなり、はっきりとした丸い輪郭が観察され、細胞の未分化能が保っていることが分かる。更に、アルカリホスファターゼ染色により、細胞が濃く染色され、高いアルカリホスファターゼ活性を示し、未分化能が保っていることが確認された。また、各回二日間培養した細胞数の累計を図1に示した。増殖した細胞の数はほぼ直線的に増加し、11回繰り返し培養した結果、細胞数は約8×1015個オーダーであった。以上の実施例1、2より、細胞培養基材中の無機材料含有量が増えるにつれ、細胞の培養性増殖した細胞数が増加することが理解できる。実施例3[メトキシエチルアクリレートa、無機材料B、水媒体Cを含む反応溶液の調製]メトキシエチルアクリレートa3.2g、無機材料Bとして水膨潤性粘土鉱物LaponiteXLGRockwoodAdditivesLtd社製0.4g、γポリグルタミン酸日本ポリグル株式会社製1g、水媒体Cとして水100g、を均一に混合して反応溶液3を調製した。[複合体Xの分散液Lの調製第1工程]上記反応溶液3全量に、溶液2を250μl入れ、均一に分散させた後、365nmにおける紫外線強度が40mW/cm2の紫外線を180秒照射し乳白色の複合体Xの分散液L3を作製した。この反応系のRa=0.10、無機材料Bの濃度質量=0.40<12.4Ra0.05=1.29[培養基材複合体Xの薄層の調製第2工程]直径35mmのポリスチレン製シャーレIWAKIティッシュカルチャデイッシュ3000-035に、上記複合体Xの分散液L3を入れ、スピンコーターを用いて3000回転で該分散液をシャーレの表面に薄く塗布した後、80°Cの熱風乾燥器中で10分間乾燥させ、次いで、滅菌水によりシャーレを洗浄した後、滅菌袋中でシャーレを40°C、5時間乾燥させて、細胞培養基材3を得た。[ES細胞の培養]実施例1と同様に、予めEF細胞フィーダー細胞上で3回継代したES細胞を用いて、10kGyの電子線滅菌済みの細胞培養基材3に05×106cellDish播種して、繰り返し培養を行った。各回二日間培養した細胞について、顕微鏡観察したところ、細胞が盛り上がって増殖し島状のコロニーとなり、はっきりとした丸い輪郭が観察され、細胞の未分化能が保っていることが分かる。更に、アルカリホスファターゼ染色により、細胞が濃く染色され、高いアルカリホスファターゼ活性を示し、未分化能が保っていることが確認された。また、各回二日間培養した細胞数の累計を図1に示した。増殖した細胞の数はほぼ直線的に増加し、11回繰り返し培養した結果、細胞数は約1×1015個オーダーであった。実施例4[メトキシエチルアクリレートa、無機材料B、水媒体Cを含む反応溶液の調製]メトキシエチルアクリレートa3.2g、無機材料Bとしてコロイダルシリカ20質量水溶液商品名スノーテックス20、日産化学工業株式会社製1gSiO2=0.2g水媒体Cとして水100g、を均一に混合して反応溶液4を調製した。[複合体Xの分散液Lの調製第1工程]上記反応溶液4全量に、溶液2を250μl入れ、均一に分散させた後、365nmにおける紫外線強度が40mW/cm2の紫外線を180秒照射し乳白色の複合体Xの分散液L4を作製した。この反応系のRa=0.06、無機材料Bの濃度質量=0.20<12.4Ra0.05=0.79[培養基材複合体Xの薄層の調製第2工程]直径35mmのポリスチレン製シャーレIWAKIティッシュカルチャデイッシュ3000-035に、上記複合体Xの分散液L4を入れ、スピンコーターを用いて3000回転で該分散液をシャーレの表面に薄く塗布した後、80°Cの熱風乾燥器中で10分間乾燥させ、次いで、滅菌水によりシャーレを洗浄した後、滅菌袋中でシャーレを40°C、5時間乾燥させて、細胞培養基材4を得た。[ES細胞の培養]実施例1と同様に、予めEF細胞フィーダー細胞上で3回継代したES細胞を用いて、10kGyの電子線滅菌済みの細胞培養基材4に05×106cellDish播種して、繰り返し培養を行った。各回二日間培養した細胞について、顕微鏡観察したところ、細胞が盛り上がって増殖し島状のコロニーとなり、はっきりとした丸い輪郭が観察され、細胞の未分化能が保っていることが分かる。更に、アルカリホスファターゼ染色により、細胞が濃く染色され、高いアルカリホスファターゼ活性を示し、未分化能が保っていることが確認された。また、各回二日間培養した細胞数の累計を図1に示した。増殖した細胞の数はほぼ直線的に増加し、11回繰り返し培養した結果、細胞数は約5×1013個オーダーであった。実施例5[N-イソプロピルアクリルアミドの重合体水溶液の調製]N―イソプロピルアクリルアミド株式会社興人製1.7g、水10g、溶液2140μl、を混合した後、該溶液を入れるガラス容器の周りを冷却しながら約10°C、365nmにおける紫外線強度が40mW/cm2の紫外線を180秒照射し、Nイソプロピルアクリルアミドの重合体水溶液PNIPA5を調製した。この溶液に更に水を5g添加し、均一に混合した後、DIGITALVISCOMATE粘度計MODELVM100A、山一電機株式会社製を用いてこの溶液の粘度を測定して、粘度は368mPasであった。測定時の溶液温度は24.2°Cであった。また、ShodexGPCSystem-21装置昭和電工株式会社製で測定した結果、このポリN―イソプロピルアクリルアミドの重量平均分子量Mwは3.40×106であった。測定時の溶媒として10mmol/LのLiBrを含有するN,N-ジメチルホルムアミドDMF溶液を使用した。分子量の計算に使用したポリスチレン標準物質としては、STANDARDSH-75とSM-105キット昭和電工株式会社製を使用した。[メトキシエチルアクリレートa、無機材料B、水媒体Cを含む反応溶液の調製]メトキシエチルアクリレートa3.2g、無機材料Bとしてコロイダルシリカ20質量水溶液商品名スノーテックス20、日産化学工業株式会社製1gSiO2=0.2g水膨潤性粘土鉱物LaponiteXLGRockwoodAdditivesLtd社製0.2g、水媒体Cとして水100g、を均一に混合して反応溶液5を調製した。[複合体Xの分散液Lの調製第1工程]上記反応溶液5全量に、溶液2を250μl入れ、均一に分散させた後、365nmにおける紫外線強度が40mW/cm2の紫外線を180秒照射し乳白色の複合体Xの分散液L5を作製した。この反応系のRa=0.06、無機材料Bの濃度質量=0.20<12.4Ra0.05=0.79[培養基材複合体Xの薄層の調製第2工程]上記分散液L5全量に、Nイソプロピルアクリルアミドの重合体水溶液PNIPA5を5g添加し、均一に混合した後、直径35mmのポリスチレン製シャーレIWAKIティッシュカルチャデイッシュ3000-035に入れ、スピンコーターを用いて3000回転で該分散液をシャーレの表面に薄く塗布した後、80°Cの熱風乾燥器中で10分間乾燥させ、次いで、滅菌水によりシャーレを洗浄した後、滅菌袋中でシャーレを40°C、5時間乾燥させて、細胞培養基材5を得た。[ES細胞の培養]実施例1と同様に、予めEF細胞フィーダー細胞上で3回継代したES細胞を用いて、10kGyの電子線滅菌済みの細胞培養基材5に05×106cellDish播種して、繰り返し培養を行った。各回二日間培養した細胞について、顕微鏡観察したところ、細胞が盛り上がって増殖し島状のコロニーとなり、はっきりとした丸い輪郭が観察され、細胞の未分化能が保っていることが分かる。更に、アルカリホスファターゼ染色により、細胞が濃く染色され、高いアルカリホスファターゼ活性を示し、未分化能が保っていることが確認された。また、各回二日間培養した細胞数の累計を図1に示した。増殖した細胞の数はほぼ直線的に増加し、11回繰り返し培養した結果、細胞数は約9×1012個オーダーであった。[ES細胞の剥離回収]上記ES細胞培養において、最初の二日間、及び第11回目の二日間培養を行ったディッシュ中の培地を除いて、予め冷蔵庫で冷やした冷培地を入れ、10分間静置した後、ピペットで培地を吸ったり出したりするピペッティング操作を10回程行ったところ、大部分の細胞が培養基材5の表面から剥離されたことが観察された。剥離された細胞を回収し、更にD-PBSと0.25Trypsin-EDTAを用いて、ディッシュに残ったES細胞を剥離回収して、それぞれ回収された細胞の数を計測し、下記式3により低温処理による細胞の回収率を求めたところ、細胞回収率はそれぞれ94と96であった。式3細胞回収率={低温処理で回収された細胞の数/低温処理で回収された細胞の数Trypsin処理で回収された細胞の数}×100比較例1市販のコラーゲンIコートディッシュ商品名:CollagenICellware、BectonDickinsonLabware社製を用いて、実施例1と同様にして、予めEF細胞フィーダー細胞上で3回継代したES細胞を用いて、05×106cellDish播種して、二日間の培養した後、剥離回収し、再び播種、培養の操作を計11回繰り返した。各回培養した細胞について、顕微鏡観察したところ、細胞が境界のはっきりした扁平な上皮様形態になり、分化してしまったことが分かる。更に、アルカリホスファターゼ染色により、細胞が殆ど染色されず、アルカリホスファターゼ活性を示さない、分化した状態であることが確認された。また、各回二日間培養した細胞数の累計を図1に示した。増殖した細胞の数はほぼ直線的に増加し、11回繰り返し培養した結果、細胞数は約6×1016個オーダーであった。この比較例より、コラーゲンコートディッシュでは、ES細胞を未分化状態を保持したまま増殖させることはできないことが理解できる。比較例2[メトキシエチルアクリレートa、水媒体Cを含む反応溶液の調製]メトキシエチルアクリレートa3.2g、水媒体Cとして水100g、を均一に混合して反応溶液2’を調製した。[複合体Xの分散液Lの調製第1工程]上記反応溶液2’全量に、溶液2を250μl入れ、均一に分散させた後、365nmにおける紫外線強度が40mW/cm2の紫外線を180秒照射し乳白色の複合体Xの分散液L2’を作製した。この反応系のRa=0、無機材料Bの濃度質量=0<12.4Ra0.05=0.05[培養基材複合体Xの薄層の調製第2工程]直径35mmのポリスチレン製シャーレIWAKIティッシュカルチャデイッシュ3000-035に、上記複合体Xの分散液L2’を入れ、スピンコーターを用いて3000回転で該分散液をシャーレの表面に薄く塗布した後、80°Cの熱風乾燥器中で10分間乾燥させ、次いで、滅菌水によりシャーレを洗浄した後、滅菌袋中でシャーレを40°C、5時間乾燥させて、細胞培養基材2’を得た。[ES細胞の培養]実施例1と同様に、予めEF細胞フィーダー細胞上で3回継代したES細胞を用いて、10kGyの電子線滅菌済みの細胞培養基材2’に05×106cellDish播種して、二日間培養したところ、細胞は殆ど増殖しなかった。比較例3市販の直径35mmポリスチレン製ディッシュFALCON35-3001を用いて、実施例1と同様にして、予めEF細胞フィーダー細胞上で3回継代したES細胞を用いて、05×106cellDish播種して、二日間培養したところ、細胞が境界のはっきりした扁平な上皮様形態になり、分化してしまったことが分かる。更に、アルカリホスファターゼ染色により、細胞が殆ど染色されず、アルカリホスファターゼ活性を示さない、分化した状態であることが確認された。"