"測定対象である目的物質が含まれる試料に混合され、前記目的物質をゲル粒子化する上で使用されるゲル粒子測定試薬であって、前記目的物質との間でゲル化反応する試薬基剤と、この試薬基剤に添加され、前記試料に対して可溶性を有し且つ0.002ないし1の濃度で溶解すると共に、所定範囲の粒子サイズに集中したゲル粒子の生成を促進する生物的に不活性な粒子形成促進因子とを含むことを特徴とするゲル粒子測定試薬。請求項1記載のゲル粒子測定試薬において、前記粒子形成促進因子は、可溶性の熱変性蛋白質であることを特徴とするゲル粒子測定試薬。請求項1記載のゲル粒子測定試薬において、前記粒子形成促進因子は、可溶性で不活性な生物由来の高分子又は石油高分子化学成分由来の多孔質微粒子であることを特徴とするゲル粒子測定試薬。請求項1ないし3いずれかに記載のゲル粒子測定試薬において、測定対象である目的物質はエンドトキシン又はβ-D-グルカンであり、試薬基剤はリムルス試薬であることを特徴とするゲル粒子測定試薬。ゲル化反応によって試料中の目的物質を粒子化して測定するゲル粒子測定方法であって、少なくとも一部に光が入射される入射部及び出射される出射部を有する試料セルに、測定対象である目的物質が含まれる試料及び前記目的物質のゲル化を生ずる請求項1ないし4いずれかに記載のゲル粒子測定試薬が含まれる溶液を収容する収容工程と、この試料セル内の試料及び試薬溶液からなる混合溶液全体がゲル化するのを抑制するように撹拌手段にて前記混合溶液を撹拌する撹拌工程と、前記試料セルの入射部の外部に設けられた入射光源から、前記試料セル内の試料及び試薬溶液からなる混合溶液に対してコヒーレントな光を照射する光照射工程と、前記試料セルの出射部の外部に設けられた検出手段にて、前記試料セル内の試料及び試薬溶液からなる混合溶液中で前記混合溶液がゾル相からゲル相へ相変化する時点に生成されるゲル粒子に対し散乱若しくは透過した光成分を検出する検出工程と、この検出工程にて得られた検出出力に基づいて混合溶液内の前記ゲル粒子の生成開始時点を判別するゲル粒子生成判別工程と、を備えたことを特徴とするゲル粒子測定方法。しかしながら、従来のゲル化法、比濁時間分析法及び発色合成基質法にあっては、次のような不具合がある。ゲル化法及び比濁時間分析法は、いずれもゲルが生成するのに低濃度では約90分以上という長時間を要する。すなわち、反応溶液のゲル化時間は、測定対象の試料中の目的物質の濃度に比例するが、ゲル化法及び比濁時間分析法は共に感度の点から正確なゲル化開始時間などが検出できないため、ある程度のゲル化が進行するまでの時間から反応量を算出してゲル化時間の目安としている。例えば比濁時間分析法を例に挙げると、比濁時間分析法は、同一条件下での試薬の調製により変化の始まる最初の濃度レベルの濁度と変化の行き着く濃度レベルの濁度については分かるが、夫々のシグモイド曲線的に変化する濁度の変化の始まる時間や終わりの時間が分かり難く、最初と最後のレベルの間の一定レベルの変化到達濁度の増加を測ることで、ゲル化全体の変化観察に換えるということで定量法として確立されたものである。しかし、低濃度のエンドトキシンになると、系全体のゲル化が遷延し、それにつれて観測する濁度変化も遅延することから一定レベルへの変化到達が測り難くなり、その分、感度が必然的に鈍くなってしまう。従って、ゲル化法及び比濁時間分析法は共に救急を要する場合や多数の検体を測定するのに適した方法とは言い難い。更に、比濁時間分析法ではエンドトキシンとは無関係の非特異的濁りが生ずることがあり、測定精度に欠ける懸念がある。また、ゲル化法の測定限界濃度は3pgml、比濁時間分析法の測定限界濃度は1pgml程度である。尚、ゲル化反応測定装置に適用される比濁時間分析法として、仮に例えば特許文献1に示す散乱測光法を適用したとしても、溶液全体のゲル化の変化観察に換えた定量法である以上、上述した問題は解決し得ない。一方、発色合成基質法はゲル化法及び比濁時間分析法に比べて測定時間が約30分程度と短時間であるが、臨床試料など天然物における測定では、人工基質を用いる弊害として混在する非特異的蛋白分解酵素による偽陽性反応が生ずる場合があり、臨床試料などにおいては特に特異度の高い測定を行うことが難しく、測定の信頼性を失うという問題を起こしている。また、測定準備が煩雑であり、測定限界濃度も3pgmlと比濁時間分析法に劣る。また、特許文献1,2にあっては、いずれもエンドトキシンに対して長時間の測定を前提し、水溶液中のエンドトキシンを安定化したり、あるいは、エンドトキシンの活性化を抑制する方法を提供しているに過ぎない。また、特許文献3,4は比濁時間分析法を前提としたものであるため、エンドトキシンの量を求めるには、溶液全体のゲル化を起こさせ、そのゲル化速度を濁度で図り、エンドキシンの濃度を演算することが必要になってしまう。この点、特許文献5は本件出願人が先に出願した方式であり、例えばエンドトキシンを含む試料に試薬を混合し、混合溶液全体のゲル化を抑制しながら、ゲル粒子出現させるようにし、このゲル粒子の出現タイミングを光学的な検出手段によって検出しようとするものである。この方式は、例えば特許文献3,4の方式による検出対象が混合溶液全体のゲル化した状態であるのに対し、混合溶液がゾル相からゲル相へ相変化する時点に相当するゲル粒子の生成開始時点を検出対象とするものであるから、特許文献3,4の方式に比べて、短時間で混合溶液のゲル化への移行現象を高感度に捉えることが可能である点で優れている。本件出願人は、このような方式を更に快適に使用するために、ゾル相からゲル相への安定な相変化を制御する新規なゲル粒子測定試薬を見出し、本発明を案出するに至ったものである。本発明は、ゲル粒子の生成開始時点を早期に測定する上で有効なゲル粒子測定試薬及びこれを用いた測定方法を提供するものである。請求項1に係る発明は、測定対象である目的物質が含まれる試料に混合され、前記目的物質をゲル粒子化する上で使用されるゲル粒子測定試薬であって、前記目的物質との間でゲル化反応する試薬基剤と、この試薬基剤に添加され、前記試料に対して可溶性を有し且つ0.002ないし1の濃度で溶解すると共に、所定範囲の粒子サイズに集中したゲル粒子の生成を促進する生物的に不活性な粒子形成促進因子とを含むことを特徴とするゲル粒子測定試薬である。請求項2に係る発明は、請求項1に係るゲル粒子測定試薬において、前記粒子形成促進因子は、可溶性の熱変性蛋白質であることを特徴とするゲル粒子測定試薬である。請求項3に係る発明は、請求項1に係るゲル粒子測定試薬において、前記粒子形成促進因子は、可溶性で不活性な生物由来の高分子又は石油高分子化学成分由来の多孔質微粒子であることを特徴とするゲル粒子測定試薬である。請求項4に係る発明は、請求項1ないし3いずれかに係るゲル粒子測定試薬において、測定対象である目的物質はエンドトキシン又はβ-D-グルカンであり、試薬基剤はリムルス試薬であることを特徴とするゲル粒子測定試薬である。請求項5に係る発明は、ゲル化反応によって試料中の目的物質を粒子化して測定するゲル粒子測定方法であって、少なくとも一部に光が入射される入射部及び出射される出射部を有する試料セルに、測定対象である目的物質が含まれる試料及び前記目的物質のゲル化を生ずる請求項1ないし4いずれかに係るゲル粒子測定試薬が含まれる溶液を収容する収容工程と、この試料セル内の試料及び試薬溶液からなる混合溶液全体がゲル化するのを抑制するように撹拌手段にて前記混合溶液を撹拌する撹拌工程と、前記試料セルの入射部の外部に設けられた入射光源から、前記試料セル内の試料及び試薬溶液からなる混合溶液に対してコヒーレントな光を照射する光照射工程と、前記試料セルの出射部の外部に設けられた検出手段にて、前記試料セル内の試料及び試薬溶液からなる混合溶液中で前記混合溶液がゾル相からゲル相へ相変化する時点に生成されるゲル粒子に対し散乱若しくは透過した光成分を検出する検出工程と、この検出工程にて得られた検出出力に基づいて混合溶液内の前記ゲル粒子の生成開始時点を判別するゲル粒子生成判別工程と、を備えたことを特徴とするゲル粒子測定方法である。請求項1に係る発明によれば、ゲル粒子の生成開始時点を早期に測定する上で有効なゲル粒子測定試薬を提供することができる。請求項2又は3に係る発明によれば、代表的な粒子形成促進因子を用い、ゲル粒子測定試薬を簡単に製造することができる。請求項4に係る発明によれば、測定対象の目的物質としてエンドトキシン又はβ-D-グルカンの定量に適用することができる。請求項5に係る発明によれば、ゲル粒子の生成開始時点を早期に測定することができる。◎実施の形態の概要図1aは本発明が適用された実施の形態に係るゲル粒子測定試薬の概要を示す説明図である。同図において、ゲル粒子測定試薬Rは、測定対象である目的物質Stが含まれる試料S図1b参照に混合され、前記目的物質Stをゲル粒子化する上で使用されるものであって、前記目的物質Stとの間でゲル化反応する試薬基剤1と、この試薬基剤1に添加され、前記試料Sに対して可溶性を有し且つ0.002ないし1の濃度で溶解すると共に、所定範囲の粒子サイズに集中したゲル粒子Gの生成を促進する生物的に不活性な粒子形成促進因子2とを含むものである。尚、本願における粒子形成促進因子2の濃度値は容量パーセントv/vで表記したものである。同図において、試料Sの目的物質Stに対し特異的に反応する試薬Rが存在すると、試料S中の目的物質Stの濃度に依存した割合にて、その目的物質Stが試薬Rと特異的に反応する現象が起こる。この反応過程において、試薬Rは、目的物質Stの刺激を受けて所定の因子が活性化し、これに起因して所定の酵素が活性化するタイミングで例えば水溶性のタンパク質が酵素による分解反応にて不溶性のタンパク質に転換し、ゲル粒子Gの出現に至ることが起こる。本実施の形態において、前記目的物質Stは、測定試薬Rとの間でゲル化反応し、ゲル粒子Gが生成されるものであれば広く含む。例えばエンドトキシンやβ-D-グルカンが挙げられる。また、試薬基剤1は、目的物質Stとゲル化反応する因子酵素等を含んでいればよい。例えば目的物質Stがエンドトキシンやβ-D-グルカンであれば代表的にはリムルス試薬が挙げられるが、リムルス試薬に限定されるものではなく、アメリカカブトガニLimulus以外のカブトガニ類のアメーバ状血球成分に含まれる因子群がエンドトキシンやβ-D-グルカンに特異的に反応するものであれば、当該アメーバ状血球水解物を利用して試薬基剤Stを作製するようにしてもよいことは勿論である。更に、粒子形成促進因子2は、試料Sに対して可溶性であることを要する。仮に、不溶性である場合には、ゲル粒子の生成開始時点を正確に把握する点で邪魔になる懸念があるからである。また、粒子形成促進因子2は、ゲル粒子Gに至る産物例えば酵素の産物の凝集を促進させる凝集因子として働き、ゲル粒子Gの形成を促進する作用を奏するものであればよい。この場合、粒子形成促進因子2としては、ゲル粒子G形成に至るリムルス反応最終産物コアグリンを一定サイズに集積させる作用を奏するものと推測される。ここで、粒子形成促進因子2を加えると、図2aに模式的に示すように、時間の経過に伴って、無制限、無定型な大きさの様々な粒子サイズを生成するのではなく、所定範囲の粒子サイズ図2では粒子サイズ1~32のレベルに対し小さいSサイズに偏った範囲に集中したゲル粒子Gに至る産物を生成し、これが凝集してゲル粒子Gに早期に至るものである。ここでいう‘所定範囲の粒子サイズ’とは凝集し易い比較的小サイズのものであればよく、ある範囲内に含まれていれはよい。尚、参考までに、粒子形成促進因子2を加えない場合のゲル化反応におけるゲル粒子Gの生成過程では、図2bに模式的に示すように、粒子サイズが所定範囲に集中しない状態でゲル粒子Gに至る産物を生成しており、その産物の生成タイミングも、粒子形成促進因子2を加えた場合に比べて遅いことが理解される。そして、粒子形成促進因子2は、0.002~1の濃度であることを要する。この場合、0.002未満である場合には、ゲル粒子Gの形成を促進するには不十分であり、一方、1を超えると、過剰な粒子形成促進因子2が加わり、逆に凝集反応が抑制される傾向が見られる。これは、粒子形成促進因子2が多すぎるとコアグリン分子が分散して相互の作用が却って干渉し合う結果につながるものと推測される。更に、粒子形成促進因子2は生物的に不活性であることを要する。これは、例えば生物的に活性がある因子では、因子の特性が活性に伴って変化するため、因子としての作用が不安定になるばかりか、試薬基剤1による反応自体にも影響する懸念がある。ここで、粒子形成促進因子2の代表的態様としては、例えば可溶性の熱変性蛋白質が挙げられる。この熱変性蛋白質としては、血漿蛋白質類、酵素類、植物蛋白質類、卵白アルブミンなどを含む。例えば血漿蛋白質は希釈溶液を熱処理例えば120°C20分高圧滅菌処理することで可溶性の熱変性蛋白質として得られる。また、粒子形成促進因子2としては、粒子形成という微小なゲル化の核となる物質であればよいため、必ずしも熱変性蛋白質である必要はなく、粒子形成促進因子2としての別の代表的態様としては、生物由来の高分子又は石油高分子化学成分由来の多孔質微粒子が挙げられる。但し、これらについても、可溶性で且つ生物的に不活性であることを要する。前記生物由来の高分子には、例えばセルロース、多糖類、糖蛋白質などが含まれ、また、石油高分子化学成分由来の多孔質微粒子には例えばナノパーティクル樹脂などが挙げられる。次に、本実施の形態において、上述したゲル粒子測定試薬Rを用いたゲル粒子測定方法の概要について説明する。本実施の形態において、ゲル粒子測定方法は、図1bに示すように、ゲル化反応によって試料S中の目的物質Stを粒子化して測定するゲル粒子測定方法であって、少なくとも一部に光が入射される入射部及び出射される出射部を有する試料セル3に、測定対象である目的物質Stが含まれる試料S及び前記目的物質Stのゲル化を生ずる上述したゲル粒子測定試薬Rが含まれる溶液を収容する収容工程と、この試料セル3内の試料S及び試薬R溶液からなる混合溶液W全体がゲル化するのを抑制するように撹拌手段4にて前記混合溶液Wを撹拌する撹拌工程と、前記試料セル3の入射部の外部に設けられた入射光源5から、前記試料セル3内の試料S及び試薬R溶液からなる混合溶液Wに対してコヒーレントな光を照射する光照射工程と、前記試料セル3の出射部の外部に設けられた検出手段6にて、前記試料セル3内の試料S及び試薬R溶液からなる混合溶液W中で前記混合溶液Wがゾル相からゲル相へ相変化する時点に生成されるゲル粒子Gに対し散乱若しくは透過した光成分を検出する検出工程と、この検出工程にて得られた検出出力に基づいて混合溶液W内の前記ゲル粒子Gの生成開始時点を判別するゲル粒子生成判別工程と、を備える。このようなゲル粒子測定方法においては、試料セル3、撹拌手段4、入射光源5、検出手段6、更には図示外の制御装置例えばコンピュータが用いられる。ここで、試料セル3は、少なくとも一部に光が入射される入射部及び出射される出射部を有するものであればよく、その形状は円筒状周壁を有するものに限られず、多角形状周壁を有するものでもよい。また、酵素反応であるリムルス反応の測定条件を一定に保つという観点からすれば、この試料セル3は図示外の恒温槽内に設けられる態様が好ましい。更に、撹拌手段4としては、試料S及び試薬R溶液からなる混合溶液Wに対して撹拌作用を与えるものであれば広く含み、内蔵して直接的に撹拌する態様は勿論のこと、エアによる撹拌作用を与えたり、振盪による撹拌作用を与えるなど適宜選定して差し支えない。そして、撹拌手段4の撹拌の程度は、試料セル3内の試料S及び試薬R溶液からなる混合溶液W全体がゲル化するのを抑制するものであることを要する。特に、撹拌手段4による撹拌動作を確実に行うという観点からすれば、試料セル3は、セル容器内に試料S及び試薬R溶液からなる混合溶液Wが直接撹拌可能な撹拌手段4を内蔵したものであることが好ましい。更にまた、入射光源5はコヒーレントな光を照射するものであればレーザ光源によるレーザ光に限られず、例えばナトリウムランプの光のような単色光をピンホールに通すことによっても作成可能であるほか、高輝度LEDとフィルタとを用いて構成してもよい。また、検出手段6としては、入射光源5とは異なる部位に設けて散乱光又は透過光を検出してもよいし、あるいは、入射光源5と同じ側に設けて入射光源の後方に戻る散乱光成分を検出するようにしてもよい。例えば検出手段6が入射光源5とは異なる部位に設けられる態様では、透過光又は散乱光のいずれかを検出してもよいが、例えば検出手段6の配設部位が透過光及び散乱光が混在するような態様で、透過光検出方式を採用する場合には、検出手段6と試料セル3との間に、ゲル粒子Gで散乱した位相のずれた散乱光のうち検出手段6に向かう成分が除去される散乱光除去手段を備えた態様が好ましい。この散乱光除去手段としては、散乱光成分をカットして透過光成分のみを透過させる偏向フィルタが挙げられる。尚、逆に散乱光を検出する方式では、同様な原理で透過光除去手段にて透過光を除去する態様が好ましい。一方、例えば検出手段6が後方散乱光を検出する場合には、入射光源5からの入射光の周りで前記後方散乱光成分を直接検出する態様でもよいし、あるいは、入射光源5からの入射光の周りの光を集め、グラスファイバ等の導光部材にて任意の場所まで導いて検出する態様でもよい。また、入射光源5から入射された光で混合溶液W中にて入射光源5側の方向に戻らない透過光又は散乱光成分が迷光として後方散乱光の検出手段6に検出されないように、迷光成分を除去する迷光除去手段試料セル3の周壁内又は外部に光吸収材を設けたり、試料乱反射させる構造を採用することが好ましい。更に、演算装置としては、上述したゲル粒子生成判別工程を具現化するものであればよく、代表的には、前記検出手段6の検出結果に基づいて検出出力の変動成分を計測し、この計測結果に基づいて前記混合溶液W内のゲル粒子Gの生成開始時点を判別するという手法が採用されている。ここで、検出光の変動成分の計測手法としては、例えば検出出力を平均化又はスムージングすると共にフィルタリング化する手法が挙げられる。また、演算装置としては、ゲル粒子Gの生成開始時点を判別するものであるが、これに限られずに、広くゲル粒子Gの生成状態を判別するようにしてもよい。この場合のゲル粒子の生成状態を判別するとは、ゲル粒子の生成状態に関する情報を直接判別することは勿論、ゲル粒子の生成状態に基づいて判別可能な情報例えば目的物質の定量情報を判別することをも含むものである。ここで、ゲル粒子Gの生成状態とは、ゲル粒子の生成開始出現時点、生成過程の変化、生成終了時点、生成量などを広く含むものであるため、本実施の形態では、前記混合溶液Wがゾル相からゲル相へ相変化するタイミングが少なくとも含まれていれば、他の事項を含んでいても差し支えない。次に、図1bに示すゲル粒子測定方法例えば散乱光検出方式を採用によるゲル粒子Gの生成開始時点の測定原理について図1cに基づいて説明する。本実施の形態において、図1bに示すように、試料S及び試薬R溶液の混合溶液Wにゲル粒子Gがない場合混合溶液Wがゾル相である場合に相当には、入射光源5から照射光Bmはゲル粒子によって遮られることがないため、その照射光Bmがゲル粒子Bによって散乱することはなく、検出手段6に検出される散乱光成分はない。このため、検出手段6にて検出される散乱光強度は略0に保たれる図1cP1参照。そして、図1bに示すように、試料S及び試薬R溶液の混合溶液Wにゲル粒子Gが生成開始し始めた場合混合溶液Wがゾル相からゲル相へ相変化し始めた場合に相当、入射光源5から照射光Bmはゲル粒子Gの存在によって一部遮られるため、その照射光Bmが散乱することになり、その散乱光成分が検出手段6に検出されることになる。このため、検出手段6による検出出力が安定領域である0レベルから立ち上がり変化しようとする図1cP2参照。この後、図1bに示すように、試料S及び試薬R溶液の混合溶液Wにゲル粒子Gの生成が次第に進行していく場合には、入射光源5から照射光Bmは順次生成される多くのゲル粒子Gの存在によって散乱度合が次第に増加することになり、検出手段6に検出される散乱光成分も次第に増加する。このため、検出手段6による検出出力が順次増加していき、検出手段6にて検出される散乱光強度は変化点P2を境に順次立ち上がり変化していく図1cP3参照。上述した実施の形態では、混合溶液W中に照射された照射光Bmの散乱光の変動成分に基づいて、混合溶液Wがゾル相からゲル相へ相変化するタイミングにつながるゲル粒子の生成開始時点図1cP2に相当を判別する態様が示されている。次に、エンドトキシンを例に挙げて、エンドトキシンのゲル化反応過程を模式的に示すと、図3の通りである。同図において、1に示すエンドトキシンの刺激がリムルス試薬に伝わると、先ず2に示すように、因子CFactorCが活性化されて活性化因子CActivatedFactorCとなり、次いで、活性化因子Cの作用により、3に示すように、因子BFactorBが活性化されて活性化因子BActivatedFactorBになる。この後、活性化因子Bの作用により、4に示すように、ProClotting酵素がClotting酵素になり、5に示すように、このClotting酵素がCoagulogen水溶性タンパク質を分解してCoagulin不溶性タンパク質に生成する。このCoagulin不溶性タンパク質は、この条件下で攪拌が行われると全体のゲル化が阻害されるに伴ってゲル粒子Gとして出現し、一方ここで静置すると6に示すように、溶液系全体が重合化ゲル化を起こす。つまり、試料Sの目的物質Stがエンドトキシンである場合には、混合溶液Wに対して一定の撹拌状態を与えることで混合溶液W全体のゲル化を阻害しつつ、この状態で、リムルス試薬Rにエンドトキシンの刺激が伝わると、Clotting酵素の周りにCoagulin不溶性タンパク質のゲル粒子Gを産出させることが可能であり、Coagulin不溶性タンパク質がゲル粒子Gとして生成された後に、ゲル粒子Gが順次生成される反応過程を経ることが理解される。また、リムルス試薬Rの反応の流れカスケードにエンドトキシンの刺激が伝わる速度リムルス反応速度はエンドトキシン濃度に依存的であり、エンドトキシン濃度が高い程リムルス反応速度が速く、Coagulin不溶性タンパク質からなるゲル粒子Gの出現タイミングが早いことが見出された。よって、混合溶液内で散乱光又は透過光変化を精度良く検出するようにすれば、ゲル粒子Gの生成開始時点として前記Coagulin不溶性タンパク質からなるゲル粒子Gの出現タイミングを把握することは可能であり、本実施の形態に係るゲル粒子測定方法の基本である。このようなゲル粒子測定方法は、例えば従前のゲル化法や比濁時間分析法の測定原理リムルス試薬Rによる反応過程において、静置した条件下、活性化されたClotting酵素の影響で最終的に反応系の溶液全体がゲル化するに至り、この系全体が均一にゲル化する過程を濁度により定量測定する態様とは全く相違するものである。一般に、臨床試料におけるエンドトキシン測定の要請は、特に救命救急という目的の下では、簡便で早く測れることが第一に求められるゆえんである。従来法の比濁時間法で問題になっていた事項である‘感度の悪さによる測り落とし’と、‘測定時間の長さによる不便さ’は、上述した測定方法でより確実に解消される。つまり、本実施の形態に係るゲル粒子測定方法は、原理的に、均一に試料及びリムルス試薬からなる混合溶液Wを攪拌することで、均一な反応の下、混合溶液系全体としてではなく、局所での微小なゲル粒子を発生させ、それをレーザ光のようなコヒーレントな均一の光を当てることで散乱を起こさせ、それを検出することにより、エンドトキシンが加わったことによるゲル粒子の出現というゾル相からゲル相への相変化につながる相変化点を検出し、その相変化点に至るまでの時間を測ることにより、リムルス試薬におけるエンドトキシンの量を推量することが可能になるものである。要約すれば、本実施の形態に係るゲル粒子測定方法は、混合溶液系全体の変化ゲル化を追うことなく、相変化を起こすまでのタイミングゲル粒子の生成開始時点がエンドトキシン濃度に依存的な反応であることに着眼して構成されたものであり、これにより、従来法の比濁時間法に比べて、エンドトキシンを早く検出することができるゆえんである。以下、添付図面に示す実施の形態に基づいてこの発明をより詳細に説明する。◎実施の形態1本実施の形態1に係るゲル粒子測定装置は、エンドトキシンを含む試料が注入される試料セル100を有し、例えば試料の目的物質としてのエンドトキシンの濃度をリムルス試薬を用いたゲル化反応にて測定するものである。-ゲル粒子測定装置-本実施の形態において、ゲル粒子測定装置は図4に示すように構成されている。同図において、試料セル100は、予め決められた測定ステージに設置されるが、本実施の形態では、恒温槽115内に配置されて試料S及び試薬Rからなる混合溶液Wを一定の恒温環境例えば37°C下におき、測定条件を一定にするようになっている。本実施の形態では、試料Sは目的物質としてエンドトキシンを含むものを対象としている。一方、試薬Rは、試薬基剤として前記エンドトキシンとゲル化反応を起こすリムルス試薬と、このリムルス試薬に添加される粒子形成促進因子とを含む。ここで、粒子形成促進因子としては、試料Sに対して可溶性の熱変性蛋白質例えば血漿蛋白質、卵白アルブミンなどが用いられ、試料Sに対し0.002~1の濃度になる程度に調整されている。ここで、粒子形成促進因子は、リムルス試薬と一緒に提供されるものであってもよいし、あるいは、リムルス試薬とは別に提供されるようにしてもよい。前者の代表的態様としては、リムルス試薬に粒子形成促進因子が予め添加したものを例えば凍結乾燥粉末状に構成するようにしたものが挙げられ、また、後者の代表的態様としては、測定のための血液などの試料Rは希釈されるため、例えば凍結乾燥粉末状のリムルス試薬とは別に、粒子形成促進因子入りの希釈液という形態が挙げられる。但し、後者の態様では、粒子形成促進因子がゲル化反応時にリムルス試薬と共存するようにゲル化反応前にリムルス試薬と十分に撹拌されていることを要する。また、符号120は試料セル100内の混合溶液Wを撹拌するために試料セル100内の磁性撹拌子121を駆動する撹拌駆動装置であり、例えば混合溶液Wに対して一定の撹拌状態を与え、混合溶液Wを均一に撹拌しながら混合溶液W全体がゲル化するのを抑制するようになっている。特に、本例では、撹拌駆動装置120は、試料セル100内の底壁に内蔵された磁性体からなる撹拌子スターラーバー121に対して磁力による撹拌力を作用させる撹拌駆動源マグネチックスターラーとして構成されている。更に、符号130は試料セル100の側周壁の外側に設けられ且つコヒーレントな光を照射するレーザ光源である。本例において、レーザ光源130からのコヒーレントな光Bmは、図5abに示すように、試料セル100の略直径部分を横切る経路に沿って照射されており、その光径dは生成されるゲル粒子径例えば02~2μm程度に対して十分に大きい値例えば5~20μm程度に設定される。更にまた、符号140は試料セル100の外部でレーザ光源130と同じ側に設けられ、レーザ光源130からの照射光Bmが試料セル100内の混合溶液中に生じたゲル粒子にて散乱した光のうちレーザ光源130側の方向に戻る後方散乱光成分を検出する後方散乱光検出器である。本例では、後方散乱光検出器140は、中央部に通孔142が開設された筒状の検出器本体141を有し、この検出器本体141の通孔142にはレーザ光源130から試料セル100内に照射された照射光を通過させるようにすると共に、この検出器本体141の試料セル100の側周壁外面に対向してリング状検出面143を設け、更に、この検出器本体141内の一部にはリング状検出面143にて検出された散乱光が感知可能なフォトダイオードなどの受光素子図示せずを組み込むようにしたものである。ここで、後方散乱光検出器140の検出精度は、レーザ光源130からの照射光Bmの通過面積内に1ないし数個のゲル粒子の有無による後方散乱光量変化を検出可能な程度に設定されている。尚、後方散乱光検出器140のリング状検出面143は試料セル100の側周壁外面に対して接触又は非接触配置されてもよいが、後方散乱光成分の検出性を良好に保つという観点からすれば、接触配置する態様が好ましい。更に、本実施の形態では、試料セル100の外部で試料セル100を挟んで前記レーザ光源130の反対側には迷光除去部材150が設けられている。この迷光除去部材150は、レーザ光源130から試料セル100内に照射された照射光Bmがそのまま透過して試料セル100の反対側周壁に到達した領域及びその周辺領域に対応して光吸収材を配設したものである。このように試料セル100の一部に迷光除去部材150を設けた理由は以下のようである。つまり、レーザ光源130からの照射光が例えばゲル粒子にて散乱した光のうちレーザ光源130側に戻る後方散乱光成分以外の散乱光成分、あるいは、発生したゲル粒子の周囲をそのまま透過する透過光成分は、試料セル100内壁などで反射されて後方散乱光検出器140に向かう迷光成分になり得るが、これらの中で、特に指向性の高い迷光成分が透過光成分及び透過光成分と同じ方向に向かう散乱光成分であることから、これらに対応した箇所に迷光除去部材150を設けるようにしたものである。符号160は後方散乱光検出器140からの検出出力を取り込み、例えば図8に示すデータ解析処理を実行するデータ解析装置、170はデータ解析装置160で解析された解析結果を表示するディスプレイである。このデータ解析装置160はCPU、ROM、RAM、I/Oインターフェースなどを含むコンピュータシステムにて構成されており、例えばROM内に図8に示すデータ解析処理プログラムを予め格納しておき、後方散乱光検出器140からの検出出力に基づいてCPUにてデータ解析処理プログラムを実行するものである。尚、後方散乱光検出器140からの検出出力は例えば図示外の増幅器により電流電圧変換された後、AD変換器によりAD変換され、データ解析装置160に取り込まれる。<試料セルの構成例>次に、本実施の形態で用いられる試料セル100の構成例、及び、試料セル100への撹拌子121、試料Sの導入例を図6abに基づいて詳述する。同図において、試料セル100は、例えばガラス材料にて一体的に成形され且つ上部が開口した横断面円形の有底の筒状容器101からなり、その上部にフランジ部102を形成すると共に、このフランジ部102の下部にくびれ部103を形成し、フランジ部102及びくびれ部103には小径孔部104を形成し、この小径孔部104より大径の大径空間部105を内部に形成したものである。そして、この試料セル100内には、エンドトキシンを含む試料とゲル化反応を生ずる試薬106が例えば凍結乾燥粉末状にて予め無菌的かつ無エンドトキシン的エンドトキシンフリーあるいはパイロジェンフリーと一般的にはいわれているに収容されると共に、磁性材料を用いた撹拌子121が予め収容される。更に、この試料セル100の小径孔部104にはゴム等の弾性材料からなる密封栓108が嵌め込まれている。この密封栓108は断面略T字状に成形されており、その頭部108aが試料セル100のフランジ部102に載置され、その脚部108bが小径孔部104に密接した状態で挿入されている。尚、密封栓108の脚部108bの一部には切欠108cが設けられている。更にまた、試料セル100のフランジ部102及び密封栓108の頭部108aは例えばアルミニウム製のキャップ状の保持カバー109で覆われ、この保持カバー109は試料セル100のフランジ部102の周壁に嵌り込み、密封栓108を外側から抱き込み保持するようになっている。そして、この保持カバー109の例えば中央には密封栓108の頭部108aに面して孔部109aが形成されている。また、試料セル100は、図6abに示すように、筒状容器101の小径孔部104を開放した状態で試薬106及び撹拌子121を収容し、この状態で、筒状容器101の小径孔部104を密封栓108で密封すると共に、この密封栓108を保持カバー109で覆うようにしたものである。このような試料セル100は、ゲル粒子測定装置の付属品や測定キットとしてユーザーに供給される。そして、本態様の試料セル100の筒状容器101への試料Sの導入法としては、例えば保持カバー109の孔部109aを利用して密封栓108に注射針のような穿孔具図示せずにて穿孔し、この穿孔を通じて注入器図示せずにて試料Sを注入するようにしたものが挙げられる。更に、試料Sの導入を容易に行うため、筒状容器101内が大気圧に対して所定の負圧レベルを保つように密封栓108の密封仕様を設定してもよい。次に、本実施の形態に係るゲル粒子測定装置の作動について説明する。本実施の形態において、図4に示すように、試料セル100にエンドトキシンを含む試料Sを注入した後、図示外のスタートスイッチをオン操作すると、ゲル粒子測定装置による測定シーケンスが開始される。この測定シーケンスは、撹拌駆動装置120にて撹拌子121が回転され、試料セル100内の試料S及びリムルス試薬からなる混合溶液Wを撹拌する。このため、混合溶液W全体が均一に撹拌されると共に、混合溶液W全体としてはゲル化することが抑制される。更に、測定シーケンスは、レーザ光源130からコヒーレントな光Bmを試料セル100内の混合溶液Wに照射し、混合溶液W中で散乱した光のうちレーザ光源130側の方向に向かう後方散乱光成分を後方散乱光検出器140にて検出すると共に、後方散乱光検出器140の検出出力をデータ解析装置160に取り込む。一方、試料セル100内の混合溶液W中では、リムルス試薬にエンドトキシンの刺激が伝わり、図3に示すようなリムルス反応が起こり、混合溶液W全体のゲル化が抑制された状態で、ゲル粒子Gが順次生成されていく。本実施の形態では、レーザ光源130からのコヒーレントな光Bmの通過面積内にゲル粒子Gが例えば1個生成されたときに、混合溶液Wがゾル相からゲル相に変化する相変化点のタイミングにつながるゲル粒子Gの生成開始時点として把握されるものである。このような反応過程において、データ解析装置160は、例えば図8に示すように、後方散乱光検出器140からの検出出力を散乱光量データデジタルデータとして読み込んだ後、平均化フィルタリング化処理を行って散乱光量データの変動成分を計測する。次いで、散乱光量データの変動成分に基づいて、後方散乱光検出器140にて検出された散乱光量データの増加変化点図1cP2に相当を抽出し、予め規定されている検量線を参照することによって試料Sのエンドトキシン濃度ETX濃度を決定し、ディスプレイ170に表示する。本例では、検量線は、エンドトキシン濃度ETX濃度と散乱光量データの増加変化点に至るまでの時間閾値との関係を示すものであり、散乱光量データの増加変化点に至る時間と検量線との相関に基づいてエンドトキシン濃度ETX濃度が決定される。また、ディスプレイ170にはエンドトキシン濃度ETX濃度以外に、散乱光量データの時系列データ、散乱光量データの変動成分の時系列計測データなどのデータが切り換え表示されるようになっている。特に、本実施の形態では、試薬Rを工夫することにより、ゲル粒子Gの生成開始時点をより促進することが可能になっている。この点については後述する実施例にて裏付けられる。<検量線の作成例>ここで、本実施の形態で採用された検量線の作成例について説明する。本実施の形態1に係るゲル粒子測定装置を用い、予め決められた実験条件を例えば以下のように定め、様々なエンドトキシン濃度例えば1010.1pgmlのサンプル試料を添加したときのリムルス試薬に対して、ゲル粒子測定装置で後方散乱光検出器140による散乱光度散乱光量データの変化を調べたものである。本例で用いられる実験条件は以下の通りである。レーザ光源130:赤色光又は青色光後方散乱光検出器140:フォトダイオード撹拌子スターラーバー121の回転数:1000rpm恒温条件:37°C図9aは、エンドトキシン濃度10pgml、1pgml、0.1pgmlのサンプル試料に対する散乱光強度につき夫々の時間経過を追ってプロットしたものである。尚、図9aの縦軸は散乱光強度グラフ中の最大散乱光強度スケールをUyで表記、横軸は反応時間グラフ中の最大反応時間スケールをtx[例えば100min]で表記を示す。同図において、各条件の散乱光強度の変化は、いずれも略0の一定のレベルを維持する部分がある時間になって増加する傾向を示している。この散乱光強度の増加変化点はゲル粒子の生成開始時点エンドトキシンを含むサンプル試料がゾル相からゲル相へと相変化するタイミングに相当し、ゲル化開始時による増光を意味するものと想定される。このゲル化開始時を求めるために、本実施の形態では、図9aのグラフにおいて、マニュアルで、一定散乱光度の部分を近似した直線通常は0と散乱光強度が増加傾斜していく変化部分を近似した直線との交点を求め、夫々ゲル化開始時間反応時間t10、t1、t01を求めた。更に、本実施の形態では、図9aのグラフから求めたゲル化開始時間t10、t1、t01の値を用いて検量線を作成するようにした図9b参照。図9bにおいて、検量線は、X軸をエンドトキシン濃度であるETX濃度log変換、Y軸をゲル化開始時間として各ゲル化開始時間の値をプロットし、これらの値に対して最小自乗法による直線を描くことで求められるものである。このとき、各エンドトキシン濃度のサンプル試料に対するゲル化開始時間の値には直線関係が得られ、相関係数の高い相関が示される。ちなみに、本実施の形態で求めた検量線の一例を示すと、以下の通りである。エンドトキシン濃度pgmlゲル化開始時間min10pgml:t10=12min1pgml:t1=20min0.1pgml:t01=70minこれに対し、和光純薬工業株式会社製の比濁時間分析法を採用したエンドトキシンキットゲル化反応測定装置を用い、エンドトキシン濃度とゲル化時間とを調べたところ、以下のような結果が得られた。エンドトキシン濃度pgmlゲル化時間min10.018.01.041.80.556.30.1123.7このように、本実施の形態においては、ゲル粒子測定装置は、試料S及びリムルス試薬からなる混合溶液Wを所定の恒温環境下で撹拌し、混合溶液W中に産生するCoagulin粒子からなるゲル粒子Gの出現によって照射光Bmが一部遮られて散乱する光のうちレーザ光源130側の後方に戻る後方散乱光成分を検出し、ゲル化の開始時期を捉えようとするものである。つまり、本実施の形態では、後方散乱光成分を検出する方式を採用しているが、他の散乱光成分を検出する方式に比べて、ゲル粒子の生成開始時点を把握する上で有効である。本実施の形態において、散乱光のうち入射光源側の後方に戻る後方散乱光成分に着眼した理由は以下の通りである。一般に、図7aに示すように、粒子に例えばレーザ光等のコヒーレントな均一の光コヒーレント光が照射されたモデルを想定すると、コヒーレント光は粒子の存在によって散乱することは広く知られている。このような散乱現象において、粒子の大きさと散乱光の関係とについて調べたところ、単一光の入射によって生じる散乱光の強さ及び方向性は例えば図7bに示すような関係が見られる。同図において、散乱現象としては、粒子に対して入射した光と同方向に発生する前方散乱、入射した光と直角方向に発生する側方散乱、そして入射光と反対の方向に発生する後方散乱がある。このような散乱現象においては、発生するエネルギはさておき、粒子の大きさと散乱の方向を考えると、粒子が大きくなるほど前方散乱が主になり、粒子が小さいと後方散乱を含めた全方位への散乱が観察される。このような観察結果からすれば、大きな粒子を捉えるには前方散乱が有利と言える。一方、無の状態から発生し、成長するという現象の下、最初に発生する小さな粒子を早く捉えるためには、どの方向でもよいとはいえるが、エネルギが小さいことを考えると、粒子の存在する溶媒中における散乱光の減衰を考慮したときには、その減衰の少ない溶媒の影響による吸収の少ない後方散乱が適していると考えられる。とりわけ、本実施の形態でのゲル粒子測定装置は、無から生成する粒子ゲル化という相変位を捉えるため、なるべく早く発生する微小な粒子を検出するという目的に、試料セル直後での後方散乱によるゲル粒子検出は他のいかなる方向の散乱検出よりも優っているものと推測される。このように、リムルス試薬による相変化によって出現する微小粒子を、早く感度よく検出することを目的として、後方散乱による検出方式を採用することで前記相変化のタイミングをより測ろうとするものである。要するに、微小粒子出現により発生する散乱光のうち後方散乱光成分を検出する方式は、小さな粒子を早く検出できることと、粒子の浮遊する溶媒による減衰無く散乱光を検出することができることの2つが優れている点である。また、入射光源からの入射光が通過する光路を基本的に設定する必要のないことから、装置の機構もより簡単なものにすることが出来ることも優れている点の1つである。また、本例では、後方散乱光検出器140の検出精度を高感度にするため、レーザ光というコヒーレントで強い光を利用し、また、微細な変化を検出するために、低濃度での変化では特に散乱した光のうち、後方散乱光以外の散乱光とゲル粒子の周囲をそのまま透過した透過光が迷光として後方散乱光検出器140側に向かわないように、迷光除去部材150にて迷光が除去されることから、後方散乱光検出器140にはレーザ光源130からの照射光Bmのうちゲル粒子で散乱した後方散乱光成分だけが入射することになり、その分、後方散乱光変化が正確に検出される。実際に、実施の形態1に係るゲル粒子測定装置を具現化したモデル装置を用いて後方散乱検出による後方散乱光変化を測定したところ、以下のような結果が得られた。◎実施の形態1についての測定例実施の形態1に係るゲル粒子装置は、水に標準品エンドトキシン10pg/mlを添加した試料サンプルを用意し、この試料サンプルに対し後方散乱光の変化を時系列で測定したものである。結果については図10aに示す。尚、同図の縦軸は相対散乱光強度、横軸は時間secである。◎比較の形態1についての測定例比較の形態1に係るゲル粒子測定装置後方散乱光とは反対側の前方に向かう前方散乱光を検出する前方散乱検出器を使用した態様は、実施の形態1で用いられる試料サンプルと同様な試料サンプルに対し、後方散乱光とは反対側の前方に向かう前方散乱光の変化を時系列で測定したものである。結果については図10bに示す。尚、同図の縦軸は相対散乱光強度、横軸は時間secである。◎比較の形態2についての測定例比較の形態2に係るゲル粒子測定装置後方散乱光とは反対側の前方に向かう透過光を検出する透過光検出器を使用した態様は、実施の形態1で用いられる試料サンプルに対し、後方散乱光とは反対側の前方に向かう透過光本例では前方散乱光を含むの変化を時系列で測定したものである。結果については図10cに示す。尚、同図の縦軸は透過光強度、横軸は時間secである。<実施の形態1と比較の形態1,2との対比>実施の形態1と比較の形態1とを対比してみるに、どれも、比較の形態2における透過光減少からみた試料サンプルの相変化のタイミングと比較して、比較の形態1に係る前方散乱光による試料サンプルの相変化のタイミングに相当するゲル化開始時点散乱光度の増加変化点は、実施の形態1に係る後方散乱光による試料サンプルの相変化のタイミングに相当するゲル化開始時点散乱光度の増加変化点よりも検出開始が遅れている傾向約10~40秒が見られる。このように、後方散乱検出での優位性迅速性は、低濃度のエンドトキシンにおいて顕著に見られる。◎変形形態本実施の形態では、試料セル100の外部で当該試料セル100を挟んでレーザ光源130と反対側に迷光除去部材150を配設するようにしているが、これに限られるものではなく、例えば図11aに示すように、試料セル100の周囲を囲繞するように筒状カバー151を設置し、この筒状カバー151の内面を例えば黒色の光吸収材で覆うと共に、筒状カバー151の一部には後方散乱光検出器140を装着するための取付孔152を開設し、この取付孔152に後方散乱光検出器140を装着し、後方散乱光検出器140の通孔142を通じてレーザ光源130からの照射光Bmを通過させるようにしてもよい。また、本実施の形態では、試料セル100は透過性のある材料にて構成されているが、試料セル100内の混合溶液W中での光の透過をほとんど求めないため、試料セル100のうちレーザ光源130及び後方散乱光検出器140の設置箇所に対応した一部だけ透過性を有する入射部としておけば、試料セル100の他の部位については非透過性の材料で構成してもよいし、非透過性の塗料を塗布するようにしてもよい。更に、本実施の形態では、レーザ光源130と後方散乱光検出器140とを別ユニットとして構成しているが、例えば図11bに示すように、レーザ光源130の周囲を囲繞するように導光部材としての多数の光透過性グラスファイバ145を束ね、各グラスファイバ145の試料セル100側の一端部を光導入面146として機能させると共に、各グラスファイバ145の他端部に対向して検出面が配置されるように後方散乱光検出器140を設け、レーザ光源130、後方散乱光検出器140及び導光部材としてのグラスファイバ145を用いて光学検出ユニットを一体的に構成するようにしてもよい。更にまた、迷光除去部材150は試料セル100の外部に設ける態様に限られるものではなく、例えば図11bに示すように、試料セル100の内壁周面に迷光除去部材150として微小粗面155を形成し、この微小粗面155にてレーザ光源130から照射された照射光のうち迷光成分を乱反射させることで減衰させるようにしてもよい。尚、本実施の形態では、迷光除去部材150を設けているが、必ずしも迷光除去部材150を用いる必要はなく、例えば予め迷光成分がどの程度影響するかを既知のエンドトキシン濃度のサンプル試料を用いて実測し、この実測値に基づいて例えば後方散乱光検出器140による検出出力から実測した迷光成分を補正するようにしてもよい。また、本実施の形態では、一検体試料S分の試料セル100に対するゲル粒子測定装置を示しているが、複数の検体試料を同時に処理するという要請下では、例えば複数の試料セル100を一体化したマルチ試料セルを用意し、各試料セルに対応して夫々レーザ光源130、後方散乱光検出器140を配置し、複数の検体試料を同時に測定できるようにすればよい。更に、実施の形態1では、測定対象の物質をエンドトキシンとするものが開示されているが、これに限られるものではなく、例えば同じ測定ハードウェアで、かつ、同様ないしは類似のリムルス試薬を用い、測定対象の物質をβ-D-グルカンとすることも可能である。◎実施の形態2図12は本発明が適用されたゲル粒子測定装置の実施の形態2の要部を示す。尚、実施の形態1と同様な構成要素については、実施の形態1と同様な符号を付し、その詳細な説明は省略する。同図において、ゲル粒子測定装置は、実施の形態1と略同様に、試料セル100の外部にレーザ光源130を有し、このレーザ光源130と同じ側に前記後方散乱光検出器140を設置したものであるが、実施の形態1と異なり、試料セル100の外部で例えば試料セル100を挟んでレーザ光源130とは反対側に例えば透過光検出器180を設置し、この透過光検出器180の検出出力をデータ解析装置160に取込み、透過光検出器180による検出出力に基づいて実施の形態1と同様にゲル粒子の生成開始時点を判別するようにしたものである。本例では、透過光検出器180は、レーザ光源Bmからの光束領域を検出可能な検出面を有し、この透過光検出器180の検出精度は、透過光Bmの通過面積に存在する1ないし数個のゲル粒子Gの有無による透過光量変化を検出可能な程度に設定される。更に、本実施の形態では、試料セル100と透過光検出器180との間に偏向フィルタ190が配設されている。この偏光フィルタ190は、レーザ光源130からの照射光Bmのうち混合溶液Wにて生成されたゲル粒子Gによって散乱した散乱光で透過光検出器180に向かう成分の迷光を除去するものである。この偏光フィルタ190による迷光除去原理は、レーザ光源130からのコヒーレントな光Bmがゲル粒子Gで散乱すると、その散乱光の位相がずれることを利用し、透過光Bmの位相以外の位相成分の迷光成分をカットするようにしたものである。また、このような偏向フィルタ190を用いない場合には、透過光検出器180は散乱光成分が含まれた透過光成分を検出することになるが、データ解析装置160側で散乱光成分が含まれることを考慮して透過光成分を解析するようにしてもよいし、あるいは、データ解析装置160側で散乱光成分を除去するように補正した後に透過光成分を解析するようにしてもよい。尚、本実施の形態では、透過光検出器180にて透過光を検出する方式を採用しているが、透過光検出器180に代えて散乱光検出器を用いるようにしてもよいし、更に、散乱光検出器の設置箇所についてはレーザ光源130に対して試料セル100の反対側に限られるものではなく、レーザ光源130と異なる部位であれば任意の部位に設置して差し支えない。例えばレーザ光源130に対して試料セル100の周囲方向に90°偏倚した部位に設置するようにすれば、側方散乱光を検出することが可能である。次に、本実施の形態に係るゲル粒子測定装置の作動について説明する。本実施の形態において、図12abに示すように、試薬R本例ではリムルス試薬に実施の形態1と同様な粒子形成促進因子を添加したものが予め収容されている試料セル100にエンドトキシンを含む試料Sを注入した後、図示外のスタートスイッチをオン操作すると、ゲル粒子測定装置による測定シーケンスが開始される。この測定シーケンスは、撹拌駆動装置120にて撹拌棒107が回転され、試料セル100内の試料S及び試薬Rからなる混合溶液Wを撹拌する。このため、混合溶液W全体が均一に撹拌されると共に、混合溶液W全体としてはゲル化することが抑制される。更に、測定シーケンスは、レーザ光源130から照射光Bmを照射し、試料セル100内の混合溶液Wを通過した透過光Bmを透過光検出器180にて検出すると共に、透過光検出器180の検出出力をデータ解析装置160に取り込む。一方、試料セル100内では、このリムルス試薬にエンドトキシンの刺激が伝わり、図3に示すようなリムルス反応が起こり、混合溶液W全体のゲル化が抑制された状態で、ゲル粒子Gが順次生成されていく。本実施の形態では、レーザ光源130からの照射光Bmの通過面積内にゲル粒子Gが例えば1個生成されたタイミングがゲル粒子Gの生成開始点として把握されており、透過光Bmの減衰変化点又は散乱光の出現のタイミングになるものである。このような反応過程において、データ解析装置160は、例えば図13に示すように、透過光検出器180からの検出出力を透過光量データデジタルデータとして読み込んだ後、平均化フィルタリング化処理を行って透過光量データの変動成分を計測する。次いで、透過光量データの変動成分に基づいて透過光Bmの減衰変化点図1cのP2に相当を抽出し、予め規定されている検量線を参照することによって試料Sのエンドトキシン濃度ETX濃度を決定し、ディスプレイ170に表示する。本例では、検量線は、エンドトキシン濃度ETX濃度と透過光Bmの減衰変化点に至るまでの時間閾値との関係を示すものであり、透過光Bmの減衰変化点の時間と検量線との相関に基づいてエンドトキシン濃度ETX濃度が決定される。また、ディスプレイ170にはエンドトキシン濃度ETX濃度以外に、透過光量データの時系列データ、透過光量データの変動成分の時系列計測データなどのデータが切り換え表示されるようになっている。尚、検量線の作成法については後述する。このように、本実施の形態においては、ゲル粒子測定装置は、試料S及び試薬Rリムルス試薬粒子形成促進因子からなる混合溶液Wを所定の恒温環境下で撹拌し、混合溶液W中に産生するCoagulin粒子からなるゲル粒子Gの出現によって透過光Bmが一部遮られて減光することまたは散乱光を検出し、ゲル化の開始時期を捉えようとするものである。特に、本例では、透過光検出器180の検出精度を高感度にするため、レーザ光というコヒーレントで強い光を利用し、また、微細な変化を検出するために、低濃度での変化では特に散乱した迷光がCoagulin粒子からなるゲル粒子Gに当たって位相がずれることを利用し、偏光フィルタ190にて迷光成分が除去されることから、透過光検出器180にはレーザ光源130からの透過光成分だけが入射することになり、その分、透過光変化が正確に検出される。本実施の形態で採用された検量線の作成例について説明する。本例での実施条件は以下の通りである。レーザ光源130:赤色光又は青色光透過光検出器180:フォトダイオード撹拌棒スターラーバー107の回転数:1000rpm恒温条件:37°C本例では、様々なエンドトキシン濃度1010.1pgmlを添加したときの試薬Rリムルス試薬粒子形成促進因子に対して、ゲル粒子測定装置で透過光度の変化を調べたものである。図14aは、10pgmlは2回、1pgml、0.1pgmlの夫々の時間経過を追った透過光度をプロットしたものである。同図において、各条件の透過光度の変化は、いずれも略一定のレベルを維持する部分がある時間になって減衰低下する傾向を示している。この透過光度の減衰変化点はゲル粒子の生成開始点ゲル化開始時間に相当し、ゲル化開始時による減光を意味するものと想定される。このゲル化開始時を求めるため、本例では、図14aのグラフにおいて、マニュアルで、一定透過光度の部分を近似した直線と透過光度が減衰傾斜していく変化部分を近似した直線との交点を求め、夫々ゲル化開始時間反応時間t1、t2、t、tを求めた。本例では、10pgml:t1=16mint2=19min1pgml:t=28min0.1pgml:t=70minであった。そして、本例では、図14aのグラフから求めたゲル化開始時間t1、t2、t、tの値を用いて検量線を作成するようにした図14b参照。本例の検量線は、X軸をエンドトキシン濃度であるETX濃度log変換、Y軸をゲル化開始時間log変換とすると、直線関係が得られ、相関係数-0.9804という高い相関が示され、この検量線の有用性が証明される。◎実施例1図15~図18実施例1は、ゲル粒子測定試薬の粒子形成促進因子として不活性血漿蛋白質の影響を調べたものである。具体的には、エンドトキシン活性を持たない血漿を用いて、サンプル試料のエンドトキシンを希釈した。本例では、100~1血漿で10pg/mlのエンドトキシンを含む溶液を作り、それを0.02のTriton-X100水で10倍希釈し、加熱処理70°C10分した。更に、測定時には10倍希釈した。そして、最終血漿濃度が0.2、0.1、0、10、5、1、0.5の条件のものを用いて、実施の形態1に係るゲル粒子測定装置による測定を行ってゲル粒子の生成開始時点を判別すると共に、夫々の条件におけるゲル粒子の生成過程におけるゲル粒子に至る産物の粒子サイズ毎の分布を粒子分布測定装置にて測定した。ここで、粒子分布測定装置としては、側方散乱で粒子検出を行う血小板凝集計興和社製を用いた。結果を図15~図17に示す。同図において、各図の左側列の三次元グラフは、粒子サイズを1~32のレベルに分け、各レベルに対応した粒子数を時間経過毎にカウントしたものであり、各図の右側例のグラフは左側列の三次元グラフの粒子数を小サイズレベル1~15、中サイズレベル15~23、大サイズレベル24~32毎に合算し、時間経過と共に表したもの及び経時的な濁度変化-X-である。また、図15~図17に示す各条件での血漿濃度とゲル粒子の生成開始時点までの反応時間との関係を図18に示す。図15~図17及び図18によれば、以下の結果が把握される。1本来同一のエンドトキシンであるから、ゲル粒子の生成開始時点に至るまでの反応時間は同一になるものと想定されていたが、共存する血漿濃度によって実施例1のゲル化反応が異なることが確認された。このことから、血漿濃度が反応時間に影響を与えることが理解される。2本例では、同じエンドトキシン濃度のサンプル試料に対し、最終血漿濃度1の場合に、ゲル粒子の生成開始時点に至るまでの反応時間が最速になり、10の場合の方が反応が阻害されることが確認された。3図15~図17によれば、血漿のない試料では、粒子形成が微小あるいは不揃いになっているのに対し、加熱処理した血漿は、一定の大きさの粒子を形成することを促進している傾向が見られる。本例では、血漿濃度が10~1の場合にこの傾向が確認された。また、同一エンドトキシン濃度に対し、最終濃度1加熱変性血漿が一番早くゲル粒子出現を検出した図18。この加熱変性血漿成分のうち、何かがこの粒子形成促進をしていると考えられる。尚、有効成分の濃度は血漿蛋白質の濃度と100倍希釈を考えると、血漿1といっても有効濃度はその十~数十分の一と思われる。◎実施例2図19,図20実施例1では熱変性血漿の影響を見たが、血漿成分中の何が有効であるか明らかにするため検討し、その結果アルブミン他の幾つかの成分を検討した。実施例2は、ゲル粒子測定試薬の粒子形成促進因子として変性蛋白質熱変性蛋白質を用いたものであり、比較例は、前記変性蛋白質に代えて、未変性蛋白質を用いたものである。実施の形態1に係るゲル粒子測定装置を用いて、所定濃度のエンドトキシンを含む試料に対し、実施例2、比較例のゲル粒子測定試薬によるゲル粒子測定を行った。このとき、試料に対する変性蛋白質、未変性蛋白質の濃度を2、0.02、0.0002に変化しながら、夫々の条件で同一のエンドトキシン濃度の試料に対してリムルス試薬による反応を行わせた。結果を図19、図20に示す。図19は、各条件でのゲル粒子の生成過程におけるゲル粒子に至る産物の粒子サイズ毎の分布を粒子分布測定装置にて測定した。ここで、粒子分布測定装置としては、実施例1と同様なものを用いた。また、図20は、各条件での試料に対する変性蛋白質、未変性蛋白質の濃度とゲル粒子の生成開始に至るまでの反応時間縦軸は1/反応時間の関係を示すグラフである。実施例1において、血漿試料を100倍希釈して反応させると、ゲル粒子の生成開始に至るまでの反応時間が最短になり、ゲル粒子の形成が促進されることから、その因子探索を行ったところ、試料処理として加熱処理を行っていることから、生物学的な蛋白質の活性はあまり考えられず、変性蛋白質の可能性について実験した。図20によれば、未変性蛋白質では、添加による粒子形成促進効果はなく、変性蛋白質だけにその効果が見られた。また、濃度範囲は、濃すぎても2、薄すぎても0又は0.0002でもだめで、一定の効果を得るには、ある濃度範囲1~0.002が必要であることが確認される。また、変性蛋白質濃度が0.02である場合のゲル粒子の生成過程では、図18に示すように、一定の大きさの粒子に集中した状態でゲル粒子が生成されていることが確認される。この点、変性蛋白質濃度が2である場合にはゲル粒子形成が阻害され、また、0.0002である場合には、0.02の場合に比べて生成される粒子の大きさが不揃いであることが確認される。◎実施例3図21~図24この現象を検討した試薬は国産和光純薬工業製、LAL-ESで、様々な加工をしてあるため、リムルス試薬の原液に近い試薬チャールスリバー社CR、Endosafeを用いて、粒子形成に関する効果を再検討した。実施例3は、このCRのゲル粒子測定試薬に一定量のエンドトキシンを加え、粒子形成促進因子として変性アルブミンDA:DenaturedAlbuminの影響を調べたものである。熱変性処理した精製アルブミン溶液図24中、De-A2、De-A1、DeN-A1を用いて様々な濃度1、0.8、0.4、0.2、0.1、0.5、0.02、0.01、0.001、0.0001のDAを作成し、夫々の条件で同一のエンドトキシン濃度の試料に対してリムルス試薬による反応を行わせ、ゲル粒子の生成開始までの反応時間を測定すると共に、夫々の条件におけるゲル粒子の生成過程におけるゲル粒子に至る産物の粒子サイズ毎の分布を粒子分布測定装置にて測定した。ここで、粒子分布測定装置としては、実施例1と同様なものを用いた。図21~図23の上の3次元グラフは、時間軸に沿って様々な大きさの粒子レベル1~32が生成される状況を示し、その下のグラフは、上の三次元グラフの粒子数を小サイズレベル1~15、中サイズレベル15~23、大サイズレベル24~32毎に合算し、時間経過と共に表したもの及び経時的な濁度変化-X-である。図24は、DA濃度とゲル粒子の生成開始に至るまでの反応時間との関係を示す。図21ないし図23において、1図21aの場合と、0.0001図23d場合、濃度が低すぎても高すぎても反応がうまくいかず、0.02から0.2付近の濃度で、一定の大きさの粒子が集中していることが示されている。すなわち、DA1~0.8では粒子の形成が不全で、非特異的な濁度上昇が発生した。一方、DA0.01以下では、粒子形成は制御されず、様々サイズが形成された。しかし、DA0.2~0.02前後では一定のサイズの粒子が効率よく形成されることが分かった。これらの出現時間ゲル粒子の生成開始時間をプロットしたものが図24であり、0.02付近がゲル粒子の生成開始時間に至る反応時間が早いことが理解される。尚、図24において、右の下がり部分は、高濃度の添加変性アルブミンによる非特異的な沈殿によるもので、この部分でゲル粒子が生成されたものでないことは例えば図21aからも明らかである。この結果、リムルス試薬がエンドトキシンによって反応し、不溶性のコアグリン分子ができたとしても、粒子として一定の濃度に至るまで形成しない状態であるところに、この変性アルブミンが存在することで、一定の大きさに集中して粒子が形成されることが示されている。またこの因子が存在しないと、自然発生的に様々なサイズの粒子が形成されることを示している。すなわち、本例のゲル粒子測定方法の基本であるゲル粒子の検出については、コアグリン分子が凝集する条件で一定にし、試薬基剤に粒子形成促進因子を添加することで、粒子形成を一定条件に保ち、その条件に至るコアグリン分子の産生の検出を一定にし、これにより、エンドトキシンの定量性を確保することが可能になるのである。また、血漿試料では1前後の濃度至適を示したが、血液中の血漿蛋白質濃度、さらにはその有効成分の濃度を考えると、実効濃度はその十~十数分の一以下であり、純粋な蛋白質を用いたこの検証実験から得られた濃度0.2~0.02とほぼ一致すると考えられる。しかし、血漿試料の蛋白質濃度は患者の状態などにより変わり、また、エンドトキシンなどの測定対象には人工透析に使う透析液のように蛋白質を含有しない試料も存在する。このゲル粒子形成が、この測定法の基本原理である以上、これらの試料において安定な定量条件を確保する意味では、その至適濃度範囲に当たる特定の粒子形成促進因子をあらかじめ加えるリムルス試薬を作ることは、必要不可欠な条件である。<変性アルブミンの構造>実施例3において、粒子形成促進因子として用いた変性アルブミンの構造を調べるために、可溶性の変性アルブミン原液1v/vのネガティブ染色による透過型電子顕微鏡の写真を図25に示す。同図によれば、熱変性を受けて変性したアルブミンが複数集まって細い繊維状の構造を作っていることが確認された。その大きさは径寸法が約10nmで50ないし数100nmの長さの繊維構造を呈していた。尚、未変性のアルブミンは分子量約50,000の蛋白質でネガティブ染色を用いても、球状塊の構造は観察されるものの、繊維状の構造を観察することは出来ない。<変性アルブミンの役割>図25に示す観察結果と、粒子形成促進因子の至適濃度が0.002ないし1の範囲が存在することとを勘案すると、ゲル粒子の生成に当たってコアグリン分子が凝集する条件として、この繊維状の変性アルブミンの果たす役割は、コアグリン分子がまとわりつく核又は種子になるものと推測される。つまり、図26aに示すように、変性アルブミンDAが至適濃度範囲であれば、臨界に達したコアグリン分子CGは適当に凝集し適正な大きさに成長した凝集塊観察しているゲル粒子Gに相当として形成されるが、核となる変性アルブミンDAが多すぎると、図26bに示すように、コアグリン分子CGは分散し大きな凝集塊を形成できない。また、核となる変性アルブミンDAが少なすぎる場合には、図26cに示すように、一定サイズの凝集塊を形成できず、観察可能なゲル粒子Gに至るまでに余分な時間を要することにつながる懸念がある。◎実施例4本実施例は、実施例3で用いた粒子形成促進因子としての変性蛋白質とは異なるものを用い、実施例3と略同様な実験を行ったものである。本例では粒子形成促進因子として以下のものを用いた。変性アルブミン以外の他の変性蛋白質セルロース多糖類糖蛋白質リムルス試薬の原液に近い試薬チャールスリバー社CR、Endosafeに対し夫々の粒子形成促進因子を予め決められた濃度で添加し、エンドトキシンを含む溶液に撹拌混合した状態で、粒子形成の効果について検討したところ、実施例3と略同様な傾向0.002ないし1の濃度の粒子形成促進因子を添加するものに対し良好な結果が確認された。尚、その他の粒子形成促進因子としてのナノパーティクル樹脂については、例えばフラーレン籠状炭素繊維を用いて同様の実験を行ったところ、前述した他の粒子形成促進因子と略同様な傾向が確認された。このことは、粒子形成促進因子として、変性アルブミンを始めとする変性蛋白質に限られるものではなく、セルロース、多糖類、糖蛋白質などの生物由来の高分子微粒子や、ナノパーティクル樹脂などの石油高分子化学成分由来の多孔質微粒子も略同様に作用することを裏付けるものである。"