"対象における癌の存在を検出するための方法であって:前記対象から採取した生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現のレベルを検出すること;および前記生物学的サンプル中の前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの前記発現のレベルを前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の正常レベルと比較することを含み、前記生物学的サンプル中の前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の正常より高いレベルが前記対象における前記癌の存在を示すことを特徴とし、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の前記正常レベルが事前に決定された数値であるかまたは前記生物学的サンプルと同じ起源または種類の既知の正常非癌性細胞の対照サンプルから得られることを特徴とし、かつ前記癌が芽腫、癌腫、白血病、リンパ腫、黒色腫、骨髄腫、肉腫または胚細胞腫瘍であることを特徴とし、かつ前記1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者を含むことを特徴とする前記方法。請求項1に記載の前記方法であって、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーがCXCL13またはCXCR5またはCXCL13およびCXCR5の両者をさらに含むことを特徴とする前記方法。請求項2に記載の前記方法であって、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーがCXCL16またはCXCR6またはCXCL16およびCXCR6の両者をさらに含むことを特徴とする前記方法。請求項1に記載の前記方法であって、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーがCXCL16またはCXCR6またはCXCL16およびCXCR6の両者をさらに含むことを特徴とする前記方法。請求項1に記載の前記方法であって、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーがCXCL13、CXCR5、CXCL16CXCR6、CCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CCL27、CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL7、CXCL8、CXCL12、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR4、CXCR7およびCX3CR1からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーをさらに含むことを特徴とする前記方法。請求項1に記載の前記方法であって、前記癌が癌腫であることを特徴とする前記方法。請求項6に記載の前記方法であって、前記癌腫が乳癌であることを特徴としかつ1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CXCL13、CXCL16、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CXCR4、CXCR5、CXCR6CX3CR1、HER2、RBM3およびCEAからなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーをさらに含むことを特徴とする前記方法。請求項6に記載の前記方法であって、前記癌腫が前立腺癌であることを特徴としかつ1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CXCL13、CXCL16、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CXCR4、CXCR5、CXCR6およびCX3CR1からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーをさらに含むことを特徴とする前記方法。請求項6に記載の前記方法であって、前記癌腫が脳癌、下垂体癌または骨癌であることを特徴としかつ1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CXCL13、CXCL16、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CXCR4、CXCR5、CXCR6およびCX3CR1からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーをさらに含むことを特徴とする前記方法。請求項6に記載の前記方法であって、前記癌腫が結腸直腸癌であることを特徴としかつ1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CXCL13、CXCL16、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CXCR4、CXCR5、CXCR6、CX3CR1、セプラーゼポリペプチド、抗p53、オステオポンチンおよびフェリチンからなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーをさらに含むことを特徴とする前記方法。請求項6に記載の前記方法であって、前記癌腫が卵巣癌であることを特徴としかつ1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CXCL13、CXCL16、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CXCR4、CXCR5、CXCR6、CX3CR1、癌抗原125CA-125、HE-4、OVX-1マクロファージコロニー刺激因子M-CSFおよびリゾフォスファチジルコリンからなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーをさらに含むことを特徴とする前記方法。請求項6に記載の前記方法であって、前記癌腫が肺癌であることを特徴としかつ1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CCL25、CXCL12、CXCL13、CXCL16、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CCR9、CXCR4、CXCR5、CXCR6、CX3CR1キネシンファミリー構成要素4AKIF4A、神経ペントラキシンINPTX1、線維芽細胞成長因子受容体1癌遺伝子パートナーFGFR1OPタンパク質およびCEAからなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーをさらに含むことを特徴とする前記方法。請求項6に記載の前記方法であって、前記癌腫が膵臓癌または胃癌であることを特徴としかつ1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CCL25、CXCL12、CXCL13、CXCL16、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CCR9、CXCR4、CXCR5、CXCR6、CX3CR1およびCEAからなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーをさらに含むことを特徴とする前記方法。請求項1に記載の前記方法であって、前記生物学的サンプルが血漿、唾液または尿であることを特徴とする前記方法。癌を有する対象の予後を評価するための方法であって:前記対象に由来する生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現レベルを判定すること、および前記生物学的サンプル中の前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの前記発現のレベルを前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の対照レベルと比較することを含み、前記生物学的サンプル中の前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の前記対照レベルに対してより高いレベルが前記対象の予後が不良であることを示すことを特徴とし、前記生物学的サンプル中の前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の前記対照レベルに対してより低いかまたは同様のレベルが前記対象の予後が良好であることを示すことを特徴とし、不良な予後が前記癌が侵襲型または浸潤型であることを示すことを特徴とし、前記癌が芽腫、癌腫、白血病、リンパ腫、黒色腫、骨髄腫、肉腫または胚細胞腫瘍であることを特徴とし、かつ前記1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者を含むことを特徴とする前記方法。請求項15に記載の前記方法であって、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーが1CXCL13またはCXCR5またはCXCL13およびCXCR5の両者、および/または2CXCL16またはCXCR6またはCXCL16およびCXCR6の両者をさらに含むことを特徴とする前記方法。請求項15に記載の前記方法であって、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーがCXCL13、CXCR5、CXCL16CXCR6、CCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CCL27、CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL7、CXCL8、CXCL12、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR4、CXCR7およびCX3CR1からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーをさらに含むことを特徴とする前記方法。請求項15に記載の前記方法であって、前記生物学的サンプルが血漿、唾液または尿であることを特徴とする前記方法。対象における癌治療の経過をモニタリングするための方法であって:前記治療中または治療後に前記対象から採取した1つまたはそれ以上の生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現レベルを判定すること、および前記1つまたはそれ以上の生物学的サンプル中の前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの前記発現のレベルを前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の対照レベルと比較することを含み、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの前記対照レベルが前記対象における前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの治療前レベルまたは事前に定められた参照レベルであることを特徴とし、前記1つまたはそれ以上の生物学的サンプル中の前記1つまたはそれ以上の癌マーカーが前記対照レベルと同様であるかまたはこれより低い場合に前記治療が有効であると考えられることを特徴とし、前記癌が芽腫、癌腫、白血病、リンパ腫、黒色腫、骨髄腫、肉腫または胚細胞腫瘍であることを特徴とし、かつ前記1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者を含むことを特徴とする前記方法。請求項19に記載の前記方法であって、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーが1CXCL13またはCXCR5またはCXCL13およびCXCR5の両者、および/または2CXCL16またはCXCR6またはCXCL16およびCXCR6の両者をさらに含むことを特徴とする前記方法。請求項19に記載の前記方法であって、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーがCXCL13、CXCR5、CXCL16CXCR6、CCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CCL27、CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL7、CXCL8、CXCL12、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR4、CXCR7およびCX3CR1からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーをさらに含むことを特徴とする前記方法。請求項19に記載の前記方法であって、前記生物学的サンプルが血漿、唾液または尿であることを特徴とする前記方法。癌を検出するためのキットであって:生物学的サンプル中のCCL25および/またはCCR9の発現を判定するための試薬;および前記試薬を用いる方法の指示を含み、前記試薬が抗CCL25抗体、抗CCR9抗体または両者を含むことを特徴とする前記キット。請求項23に記載の前記キットであって:1生物学的サンプル中のCXCL13および/またはCXCR5の発現を判定するための試薬;および前記試薬を用いる方法の指示をさらに含み、前記試薬が抗CXCL13抗体、抗CXCR5抗体または両者を含むことを特徴とする前記キット。請求項24に記載の前記キットであって:生物学的サンプル中のCXCL16および/またはCXCR6の発現を判定するための試薬;および前記試薬を用いる方法の指示をさらに含み、前記試薬が抗CXCL16抗体、抗CXCR6抗体または両者を含むことを特徴とする前記キット。請求項23に記載の前記キットであって:生物学的サンプル中のCXCL16および/またはCXCR6の発現を判定するための試薬;および前記試薬を用いる方法の指示をさらに含み、前記試薬が抗CXCL16抗体、抗CXCR6抗体または両者を含むことを特徴とする前記キット。本発明の1つの態様は、対象における癌を検出するための方法に関する。方法は、対象から採取した生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現のレベルを検出すること;および生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現のレベルを1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の正常レベルと比較することを含み、生物学的サンプル中の前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の正常よりも高いレベルが対象における癌の存在を示すことを特徴とし、1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の正常レベルが事前に決定された数値であるかまたは生物学的サンプルと同じ起源または種類の既知の正常非癌性細胞の対照サンプルから得られることを特徴とし、癌が芽腫、癌腫、白血病、リンパ腫、黒色腫、骨髄腫、肉腫または胚細胞腫瘍であることを特徴とし、かつ1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL25またはCCL9またはCCL25およびCCR9の両者を含むことを特徴とする。本発明の他の態様は、対象における癌を検出するための方法に関する。方法は、対象から採取した生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現のレベルを検出すること;および生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現のレベルを1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の正常レベルと比較することを含み、生物学的サンプル中の前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の正常よりも高いレベルが対象における癌の存在を示すことを特徴とし、1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の正常レベルが事前に決定された数値であるかまたは生物学的サンプルと同じ起源または種類の既知の正常非癌性細胞の対照サンプルから得られることを特徴とし、癌が芽腫、癌腫、白血病、リンパ腫、黒色腫、骨髄腫、肉腫または胚細胞腫瘍であることを特徴とし、かつ1つまたはそれ以上の癌マーカーが:1CCL25およびCCL9からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカー;および2CXCL13およびCXCR5からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーおよび/またはCXCL16およびCXCR6からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーを含むことを特徴とする。本発明の他の態様は、癌を有する対象の予後を評価するための方法に関する。方法は、対象に由来する生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現レベルを判定すること、および生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現のレベルを1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の対照レベルと比較することを含み、生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの対照レベルに対してより高い発現のレベルが対象の予後が不良であることを示すことを特徴とし、かつ生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの対照レベルに対してより低いかまたは同様の発現のレベルが対象の予後が良好であることを示すことを特徴とし、不良である予後は癌が侵襲型または浸潤型であることを示すことを特徴とし、芽腫、癌腫、白血病、リンパ腫、黒色腫、骨髄腫、肉腫または胚細胞腫瘍を特徴とし、かつ1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者を含むことを特徴とする。本発明の他の態様は、癌を有する対象の予後を評価するための方法に関する。方法は、対象に由来する生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現レベルを判定すること、および生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現のレベルを1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の対照レベルと比較することを含み、生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの対照レベルに対してより高い発現のレベルが対象の予後が不良であることを示すことを特徴とし、かつ生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの対照レベルに対してより低いかまたは同様の発現のレベルが対象の予後が良好であることを示すことを特徴とし、不良である予後は癌が侵襲型または浸潤型であることを示すことを特徴とし、癌が芽腫、癌腫、白血病、リンパ腫、黒色腫、骨髄腫、肉腫または胚細胞腫瘍であることを特徴とし、かつ1つまたはそれ以上の癌マーカーが:1CCL25およびCCL9からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカー;および2CXCL13およびCXCR5からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーおよび/またはCXCL16およびCXCR6からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーを含むことを特徴とする。本発明の他の態様は、対象における癌治療の経過をモニタリングするための方法に関する。方法は、治療中または治療後に対象から採取した1つまたはそれ以上の生物学的サンプル中の1つまたそれ以上の癌マーカーの発現レベルを判定すること、および1つまたはそれ以上の生物学的サンプル中の1つまたそれ以上の癌マーカーの発現のレベルを1つまたそれ以上の癌マーカーの発現の対照レベルと比較することを含み、1つまたはそれ以上の癌マーカーの対照レベルが対象における1つまたはそれ以上の癌マーカーの治療前レベルまたは事前に決定された参照レベルであることを特徴とし、1つまたはそれ以上の生物学的サンプル中の1つまたそれ以上の癌マーカーが対照レベルと同様であるかまたはこれよりも低い場合は治療が有効であると考えられることを特徴とし、癌が芽腫、癌腫、白血病、リンパ腫、黒色腫、骨髄腫、肉腫または胚細胞腫瘍であることを特徴とし、かつ1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者を含むことを特徴とする。本発明の他の態様は、対象における癌治療の経過をモニタリングするための方法に関する。方法は、治療中または治療後に対象から採取した1つまたはそれ以上の生物学的サンプル中の1つまたそれ以上の癌マーカーの発現レベルを判定すること、および1つまたはそれ以上の生物学的サンプル中の1つまたそれ以上の癌マーカーの発現のレベルを1つまたそれ以上の癌マーカーの発現の対照レベルと比較することを含み、1つまたはそれ以上の癌マーカーの対照レベルが対象における1つまたはそれ以上の癌マーカーの治療前レベルまたは事前に決定された参照レベルであることを特徴とし、1つまたはそれ以上の生物学的サンプル中の1つまたそれ以上の癌マーカーが対照レベルと同様であるかまたはこれよりも低い場合は治療が有効であると考えられることを特徴とし、癌が芽腫、癌腫、白血病、リンパ腫、黒色腫、骨髄腫、肉腫または胚細胞腫瘍であることを特徴とし、かつ1つまたはそれ以上の癌マーカーが:1CCL25およびCCL9からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカー;および2CXCL13およびCXCR5からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーおよび/またはCXCL16およびCXCR6からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーを含むことを特徴とする。本発明の他の態様は、癌を検出するためのキットに関する。キットは、生物学的サンプル中のCCL25および/またはCCR9の発現を判定するための試薬;および試薬を使用する方法についての指示を含み、試薬が抗CCL25抗体、抗CCR9抗体または両者を含むことを特徴とする。以下の詳細な説明は、任意の当業者に本発明を作製しかつ使用することを可能とするために提示する。説明を目的として、本発明の完全な理解を提供するために具体的な用語が述べられている。しかし、これらの具体的な詳細は本発明を実施する上で必要とされないことが当業者に明らかとなるであろう。具体的な施用の説明は典型的な例としてのみ提供される。本発明は提示した実施例に限定されることを意図しないが、本願に開示される原則および特性と一致する可能な限り最も広い範囲に適合することとする。別途定義しない限り、本発明に関連して用いられる科学的および技術的用語は当業者が共通して理解する意味を有する。さらに、文脈が別途必要としない限り、単数形の語句は複数形を含みかつ複数形の語句は単数形を含む。本願で用いられる以下の用語は以下の意味を有する:本願で用いられる用語抗体は、免疫グロブリン分子および免疫グロブリンIg分子の免疫学的活性部分、すなわち抗原と特異的に結合する免疫反応する抗原結合部位を含む分子を意味する。用語抗体は、最も広い意味で用いられ、かつ具体的には、所望の生物学的活性を示す限り、モノクローナル抗体全長モノクローナル抗体を含む、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体例:二重特異性抗体など、および抗体フラグメントを包含する。特異的に結合するまたは免疫反応するによって、抗体が所望の抗原の1つまたはそれ以上の抗原決定基と反応しかつ他のポリペプチドとは反応すなわち結合しないか、または他のポリペプチドとさらにより低い親和性で結合することが意味される。用語抗体は、一般的には全長抗体の抗原結合領域または可変領域である、全長抗体の一部を含む抗体フラグメントも含む。抗体フラグメントの例はFab、Fab’、Fab’2、およびFvフラグメント;二重特異性抗体;線形抗体;単鎖抗体scFv;および抗体フラグメントより形成される多重特異性抗体を含む。本発明の一定の実施形態においては、たとえば腫瘍浸透性を高めるために、無傷の抗体よりもむしろ抗体フラグメントを用いることが望ましいこともある。この場合、その血清半減期を延長するために、技術上既知である任意の手段で修飾されている抗体フラグメントを用いることが望ましいこともある。本願で用いられる用語モノクローナル抗体は相当均一な抗体の母集団から得られる抗体を意味し、すなわち母集団を構成する個々の抗体は少量存在しうる天然に発生する可能性のある変異を除いて同一である。本願のモノクローナル抗体は、具体的には、H鎖および/またはL鎖の一部が特定の種に由来するかまたは特定の抗体クラスまたはサブクラスに属する抗体の対応する配列と同一または相同である一方で、分子鎖の残りの部分が他の種に由来するかまたは他の抗体クラスまたはサブクラスに属する抗体の対応する配列と同一または相同であるキメラ抗体、および所望の生物学的活性を示す限りそのような抗体のフラグメントを含む米国特許第4,816,567号;およびMorrison他、ProcNatlAcadSciUSA81685168551984。非ヒト抗体のヒト化型は、最小限の非ヒト免疫グロブリン由来配列を含むキメラ抗体である。ヒト化抗体は、ほとんどの場合、所望の特異性、親和性および/または能力を有するマウス、ラット、ウサギまたは非ヒト霊長類などの非ヒト種ドナー抗体の超可変領域由来の残基によってレシピエントの超可変領域に由来する残基が置換されている、ヒト免疫グロブリンレシピエント抗体である。ヒト化および他のキメラ抗体を作製するための方法は技術上既知である。二重特異性抗体は、少なくとも2つの異なる抗原に対して結合特異性を有する抗体である。本例においては、結合特異性のうち一方はCXCL16またはCXCR6に対するものである。第2の結合標的は他の任意の抗原であり、細胞表面タンパク質または受容体または受容体サブユニットであることが好都合である。二重特異性抗体を作製するための方法は技術上既知である。ヘテロ複合体抗体の使用も本発明の範囲内である。ヘテロ複合体抗体は共有結合で連結される2つの抗体より構成される。このような抗体は、たとえば免疫系細胞を望ましくない細胞に標的化することが提唱されている米国特許第No.4,676,980号。架橋剤を包含するものを含むタンパク質合成化学における既知の方法を用いて、インビトロで抗体を調製できることが意図されている。本願で用いる用語腫瘍は、新生物または細胞の異常増殖によって形成される固形病変を意味する。腫瘍は、良性であることも、前悪性であることも、あるいは悪性であることもある。原発性腫瘍は、対象の体内の最初の部位に出現する腫瘍であり、かつ対象の体内で原発性腫瘍より遠隔の部位に出現する転移性腫瘍と識別することができる。本願で用いられる用語癌は、調節されない細胞増殖によって典型的に特徴付けられる、哺乳類における生理学的状態を意味するか、または記述する。典型的な癌は:癌腫、黒色腫、肉腫、リンパ腫、白血病、胚細胞腫瘍、および芽腫を含む。このような癌のより具体的な例は扁平上皮癌例:上皮性扁平上皮癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌および肺扁平上皮癌を含む肺癌、腹膜癌、肝細胞癌、消化器癌を含む胃癌または胃癌、膵臓癌、膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、尿道癌、肝癌、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌または子宮体癌、唾液腺癌、腎臓または腎臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、黒色腫、多発性骨髄腫およびB細胞性リンパ腫、脳、および頭頸部癌、および随伴する転移を含む。本願で用いられる用語癌腫は、形質転換上皮細胞、または組織発生が不明であるがサイトケラチンまたは細胞間橋の生成などの上皮細胞と関連する特異的な分子的または組織学的特性を有する形質転換細胞からなる浸潤性悪性腫瘍を意味する。本願の典型的な癌腫は卵巣癌、膣癌、子宮頸癌、子宮体癌、前立腺癌、肛門癌、直腸癌、結腸癌、胃癌、膵臓癌、インスリノーマ、腺癌、線扁平上皮癌、神経内分泌腫瘍、乳癌、肺癌、食道癌、口腔癌、脳癌、髄芽腫、神経外胚葉性腫瘍、神経膠腫、下垂体癌および骨癌を含む。本願で用いられる用語リンパ腫は、免疫系のリンパ細胞の癌である。リンパ腫は、典型的には固形腫瘍として存在する。典型的なリンパ腫は:小リンパ球性リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、ヴァルデンストロームマクログロブリン血症、脾辺縁帯リンパ腫、形質細胞腫、節外性辺縁帯B細胞リンパ腫、MALTリンパ腫、節性辺縁帯B細胞リンパ腫NMZL、濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫、縦隔胸腺大細胞型B細胞リンパ腫、血管内大細胞型B細胞リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、バーキットリンパ腫、B細胞性慢性リンパ性リンパ腫、古典的ホジキンリンパ腫、結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫、成人T細胞リンパ腫、鼻型節外性NK/T細胞リンパ腫、腸症型T細胞リンパ腫、肝脾T細胞リンパ腫、芽球型NK細胞リンパ腫、菌状息肉症、セザリー症候群、皮膚原発CD30陽性Tリンパ球増殖性疾患、原発性皮膚未分化大細胞リンパ腫、リンパ腫様丘疹症、血管免疫芽球性T細胞リンパ腫、不特定末梢T細胞リンパ腫、および未分化大細胞リンパ腫を含む。典型的な形態の古典的ホジキンリンパ腫は:結節硬化型、混合細胞型、リンパ球豊富型、およびリンパ球減少または非減少型を含む。本願で用いられる用語肉腫は、胚体中胚葉から発生した数多くの組織の1つにおける形質転換細胞から発生する癌である。したがって、肉腫は骨、軟骨、脂肪、筋肉、血管、および造血組織の腫瘍を含む。たとえば、骨肉腫は骨から発生し、軟骨肉腫は軟骨から発生し、脂肪肉腫は脂肪から発生し、かつ平滑筋肉腫は平滑筋から発生する。典型的な肉腫は:Askin腫瘍、ボトリオディーズブドウ肉腫、軟骨肉腫、EwingのPNET、悪性血管内皮腫、悪性シュワン腫、骨肉腫、軟部組織肉腫を含む。軟部組織肉腫のサブクラスは:胞巣状軟部肉腫、血管肉腫、葉状嚢肉腫、皮膚線維肉腫、類腱腫、線維形成性小円形細胞性腫瘍、類上皮肉腫、骨外性軟骨肉腫、骨外性骨肉腫、線維肉腫、血管周皮細胞腫、血管肉腫、カポジ肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、リンパンジオサルコマルリンパ管肉腫、リンパ肉腫、悪性線維性組織球腫、神経線維肉腫、横紋筋肉腫、および滑膜肉腫を含む。本願で用いる用語白血病は、白血球の異常な増加を特徴とする血液または骨髄の癌である。白血病は一連の疾患を包含する幅広い用語である。さらには、血液腫瘍と呼ばれるさらにより幅広い群の一部である。白血病は種々の大分類に細分され;第1の分類は急性型白血病と慢性型白血病の分類である。急性白血病は幼若血液細胞数の急速な増加を特徴とする。そのような細胞による密集によって骨髄は健常な血液細胞を産生できなくなる。慢性白血病は、比較的成熟しているがやはり異常な白血球の過剰な蓄積を特徴とする。典型的には進行に数ヶ月から数年かかり、細胞は正常細胞よりもさらに高い率で生成され、血液中の異常な白血球が増加する。白血病は罹患する血液細胞によっても細別される。この分類により白血病はリンパ芽球性またはリンパ球性白血病と骨髄性または骨髄原性白血病に分類される。リンパ芽球性またはリンパ球性白血病では、癌性変化は、通常では続いてリンパ球を形成する種類の骨髄細胞に発生する。骨髄性または骨髄原性白血病では、癌性変化は、通常では続いて赤血球、他の一部の種類の白血球および血小板を形成する種類の骨髄細胞に発生する。これら2種類の分類の複合により、合計4つの主要カテゴリーが提供される。典型的には、これら4つの主要カテゴリーのそれぞれの中に数種類のサブカテゴリーがある。これらの分類スキームから外れた希少種もある。典型的な白血病は:急性リンパ芽球性白血病ALL、慢性リンパ球性白血病CLL、急性骨髄原性白血病AML、慢性骨髄原性白血病CML、ヘアリーセル白血病HCL、T細胞性前リンパ球性白血病、大顆粒リンパ球性白血病、若年性骨髄単球性白血病、B細胞性前リンパ球性白血病、バーキット白血病、および成人性T細胞白血病を含む。本願で用いられる用語黒色腫は、メラニン細胞の癌または悪性腫瘍である。メラニン細胞は、皮膚の色をもたらす暗色色素メラニンを産生する細胞である。主として皮膚に発生するが、腸および眼を含む身体の他の部分にも認められる。黒色腫は以下の定型およびサブタイプに分類される:悪性黒子、悪性黒子型黒色腫、表在拡大型黒色腫、末端黒子型黒色腫、粘膜黒色腫、結節型黒色腫、ポリープ状黒色腫、線維形成性黒色腫、無色素性黒色腫、軟部組織黒色腫、小母斑様細胞を伴う黒色腫、スピッツ母斑の特性を有する黒色腫、およびぶどう膜黒色腫。本願で用いられる用語胚細胞腫瘍GCTは胚細胞に由来する新生物である。胚細胞腫瘍は癌性腫瘍であることも、または非癌性腫瘍であることもある。正常の場合、胚細胞は性腺卵巣および精巣の内部に発生する。性腺の外部に由来する胚細胞腫瘍は、胚の発達中の錯誤により発生した先天性欠損でありうる。胚細胞腫瘍は:ジャーミノーマまたはセミノーマ胚細胞腫瘍と非ジャーミノーマまたは非セミノーマ胚細胞腫瘍の2分類に大別される。典型的なジャーミノーマまたはセミノーマ胚細胞腫瘍は:ジャーミノーマ、未分化胚細胞腫およびセミノーマを含む。典型的な非ジャーミノーマ胚細胞腫瘍または非セミノーマ胚細胞腫瘍は:胎児性癌、内胚葉洞腫瘍または卵黄嚢腫瘍EST、YST、絨毛癌、成熟型奇形腫、類皮嚢胞、未熟型奇形腫、悪性トランスフォーメーションを伴う奇形腫、多胚腫、性腺芽細胞腫、および混合GCTを含む。本願で用いられる用語転移は、1つの器官または部分から隣接しない他の器官または部分への癌または癌腫の拡散を意味する。用語生物学的サンプルは、組織、組織サンプル、細胞サンプル、腫瘍サンプル、糞便サンプル、および、たとえば血液、血漿、血清、唾液、尿、脳または脊髄液、リンパ液、および乳頭吸引物などの生体液を含む、哺乳類対象、好ましくはヒト対象から採取された生物学的材料のサンプルを意味する。生物学的サンプルは、たとえば、吸引生検、ブラシ生検、表面生検、針生検、穿孔生検、切除生検、開放生検、切開生検、および内視鏡的生検などの組織生検の形態で採取しうる。1つの実施形態においては、生物学的サンプルは血液、血清または血漿サンプルである。他の実施形態においては、生物学的サンプルは唾液サンプルである。さらに他の実施形態においては、生物学的サンプルは尿サンプルである。生物学的サンプルの分離物例:組織または腫瘍サンプルの分離物は、サンプルより分別、誘導、抽出、精製または分離された材料または組成物例:生物学的材料または組成物を意味し、かつ好ましくは生物学的サンプルに付随する望ましくない組成物および/または不純物または汚染物をほとんど含まない。組織サンプルは、対象、好ましくはヒト対象の無傷の組織より採取または切除された組織の一部、断片、部分、セグメント、または分画を含む。腫瘍サンプルは、たとえば対象、好ましくはヒト対象から採取または切除された腫瘍例:対象の組織から切除または摘出などの、腫瘍の一部、断片、部分、セグメント、または分画を含む。腫瘍サンプルは、原発性腫瘍または転移性腫瘍から採取しうる。治療を目的とした哺乳類は、ヒト、非ヒト霊長類、イヌ、ウマ、ネコ、ウシなどの家畜および畜産動物、および動物園、スポーツまたは愛玩用動物を含む、哺乳類に分類される任意の動物を意味する。好ましくは、哺乳類はヒトである。用語上昇レベルは、関連技術において習慣的に定義されるかまたは用いられる正常または対照レベルよりも高いレベルを意味する。たとえば、組織の免疫染色の上昇レベルは、当業者であれば対照組織の免疫染色のレベルよりも高いとみなす免疫染色のレベルである。本願において、範囲はおおよその1つの特定の数値から、かつ/またはおおよその他の特定の数値までとして表示することがある。そのような範囲が表示される場合、他の実施形態は1つの特定の数値からかつ/または他の特定の数値までを含む。同様に、先行するおおよその使用によって数値が近似として表示される場合、当該の特定の数値が他の実施形態を形成することが理解されるであろう。さらに、各範囲の端点は、もう一方の端点に関しても、もう一方の端点と無関係でも重要であることが理解されるであろう。本願には数多くの数値が開示されており、かつ本願において各数値はその具体的な数値自体に付け加えておおよそのその数値として開示されることも理解される。たとえば、数値10が開示される場合、約10も開示される。ある数値が開示される場合、当業者が適切に理解するように、その数値よりも小さいかまたはこれと等しい、その数値よりも大きいかまたはこれと等しい、および数値間の可能な範囲も開示されることも理解される。たとえば、数値10が開示される場合、10より小さいかまたはこれと等しい、および10より大きいかまたはこれと等しいも開示される。本願で用いられる用語抗体は、免疫グロブリン分子および免疫グロブリンIg分子の免疫学的活性部分、すなわち抗原と特異的に結合する免疫反応する抗原結合部位を含む分子を意味する。CCL25および/またはCCR9の発現または活性を測定することにより癌を検出するための方法CCL25はCCR9ケモカイン受容体のリガンドである。ケモカインも受容体も、癌の転移および浸潤の調節において1つの役割を果たすと見られる。CCL25もCCR9も、卵巣癌、肺癌、乳癌、前立腺癌、結腸癌、骨癌および膵臓癌を含めた複数の癌腫組織の種類において、正常組織と比較して局所的にアップレギュレートされる。CCL25レベルは、それらの癌を有する患者の血清においても上昇する。さらに、可溶性CCL25ケモカインは、癌細胞のインビボおよびインビトロ増殖および遊走を促進する。CCR9は、推定上化学療法剤に対する保護を支援する、癌細胞生存における多様な役割を有しうる、Gタンパク質共役受容体GPCRのケモカイン受容体ファミリーの構成要素である。我々は、CCR9のCCL25との相互作用はマトリクスメタロプロテアーゼMMP発現をモジュレートし、かつ癌腫細胞の遊走および潜在的浸潤能力を増強することを示す。このことは、CCR9-CCL25相互作用が癌腫細胞遊走および浸潤に寄与することを示唆する。従って、この軸を遮断することは癌腫細胞転移を阻害する可能性を有する。本願の1つの態様は、対象における癌の存在を検出するための方法であって:前記対象から採取した生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現のレベルを検出すること;および前記生物学的サンプル中の前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現のレベルを前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の正常レベルと比較することを含み、前記生物学的サンプル中の前記の1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の正常よりも高いレベルが前記対象における癌の存在を示すことを特徴とし、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の前記正常レベルが事前に決定された数値であるかまたは前記生物学的サンプルと同じ起源または種類の既知の正常非癌性細胞の対照サンプルから得られることを特徴とし、かつ前記癌が芽腫、癌腫、白血病、リンパ腫、黒色腫、骨髄腫、肉腫または胚細胞腫瘍であることを特徴とし、かつ前記1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL25またはCCL9またはCCL25およびCCR9の両者を含むことを特徴とする方法に関する。1つの実施形態においては、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーは1CCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者、および2CXCL13またはCXCR5またはCXCL13およびCXCR5の両者を含む。他の実施形態においては、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーは1CCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者、および2CXCL16またはCXCR6またはCXCL16およびCXCR6の両者を含む。他の実施形態においては、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーは1CCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者、2CXCL13またはCXCR5またはCXCL13およびCXCR5の両者、および3CXCL16またはCXCR6またはCXCL16およびCXCR6の両者を含む。他の実施形態においては、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーは1CCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者、および/または2CXCL13またはCXCR5またはCXCL13およびCXCR5の両者、および/または3CXCL16またはCXCR6またはCXCL16およびCXCR6の両者’および41つまたはそれ以上の他の癌マーカーを含む。さらに他の実施形態においては、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーは1CCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者、および2CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL4、CXCL6、CXCL7、CXCL8、CXCL9、CXCL10、CXCL11、CXCL12、CXCL13、CXCL14、CXCL15、CXCL16、CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4、CXCR5、CXCR6、CXCR7、CCL1、CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCL6、CCL7、CCL8、CCL9、CCL10、CCL11、CCL12、CCL13、CCL14、CCL15、CCL16、CCL17、CCL18、CCL19、CCL20、CCL21、CCL22、CCL24、CCL25、CCL25-1、CCL25-2、CCL27、CCL28、CCR1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CCR9、CCR10、CCR11、XCL1、XCL2、XCR1、CX3CR1、CX3CL1、HER2、RNA結合モチーフ3RBM3、癌胎児性抗原CEA、前立腺特異抗原PSA、クロムグラニンACGA、デヒドロエピアンドロステロンDHEA、神経特異的エノラーゼNSE、前立腺酸性ホスファターゼPAP、プロラクチン、B7-H3、セプラーゼポリペプチド、抗p53、オステオポンチン、フェリチン、リゾフォスファチジルコリン、キネシンファミリー構成要素4AKIF4A、神経ペントラキシンINPTX1および線維芽細胞増殖因子受容体1癌遺伝子パートナーFGFR1OPタンパク質からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーを含む。他の実施形態においては、前記癌は乳癌でありかつ1つまたはそれ以上の癌マーカーは1CCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者、および2CCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CXCL13、CXCL16、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CXCR4、CXCR5、CXCR6CX3CR1、HER2、RBM3およびCEAからなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーを含むことを特徴とする。他の実施形態においては、前記癌腫は前立腺癌でありかつ1つまたはそれ以上の癌マーカーは1CCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者、および2CCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CXCL13、CXCL16、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CXCR4、CXCR5、CXCR6、CX3CR1、PSA、CEA、CGA、DHEA、NSE、PAP、プロラクチンおよびB7-H3からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーを含むことを特徴とする。他のさらなる実施形態においては、前記癌腫は結腸直腸癌でありかつ1つまたはそれ以上の癌マーカーは1CCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者、および2CCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CXCL13、CXCL16、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CXCR4、CXCR5、CXCR6、CX3CR1、セプラーゼポリペプチド、抗p53、オステオポンチンおよびフェリチンからなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーを含むことを特徴とする。他のさらなる実施形態においては、前記癌腫は卵巣癌でありかつ1つまたはそれ以上の癌マーカーは1CCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者、および2CCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CXCL13、CXCL16、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CXCR4、CXCR5、CXCR6、CX3CR1、癌抗原125CA-125、HE-4、OVX-1マクロファージコロニー刺激因子M-CSFおよびリゾフォスファチジルコリンからなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーを含むことを特徴とする。他のさらなる実施形態においては、前記癌腫は肺癌でありかつ1つまたはそれ以上の癌マーカーは1CCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者、および2CCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CCL25、CXCL12、CXCL13、CXCL16、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CCR9、CXCR4、CXCR5、CXCR6、CX3CR1、キネシンファミリー構成要素4AKIF4A、神経ペントラキシンINPTX1、線維芽細胞受容体1癌遺伝子パートナーFGFR1OPタンパク質およびCEAからなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーを含むことを特徴とする。他のさらなる実施形態においては、前記癌腫は膵臓癌または胃癌でありかつ1つまたはそれ以上の癌マーカーは1CCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者、および2CCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CXCL13、CXCL16、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CXCR4、CXCR5、CXCR6、CX3CR1およびCEAからなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーを含むことを特徴とする。他の実施形態においては、癌腫は脳癌、下垂体癌または骨癌でありかつ1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CXCL13、CXCL16、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CXCR4、CXCR5、CXCR6およびCX3CR1からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーをさらに含むことを特徴とする。他の一部の実施形態においては、生物学的サンプルは血漿サンプル、唾液サンプルまたは尿サンプルである。本願の文脈においては、用語検出することは予測および可能性分析を包含することを意図している。本方法は、治療的介入、病期などの診断基準、および疾患モニタリングおよび癌のサーベイランスを含めて、治療様式に関する決定を下す際に臨床的に用いられることを意図している。本願に従って対象の状態を検討するための中間的な結果が提供されうる。そのような中間的な結果は、追加的な情報と複合され、医師、看護師、または他の実践者に対し、対象が疾患に罹患していると診断することを支援する。代替的に、本発明を用いて対象に由来する組織中の癌性細胞を検出し、さらに対象が癌に罹患していると診断するための有用な情報を医師に提供しうる。対象は好ましくはヒトであるが、非ヒト霊長類、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウマおよびウシなどの他の哺乳類も含みうる。癌を有する対象の予後を評価するための方法癌を検出するための本方法は、患者由来の生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現レベルを参照サンプルのそれと比較することにより、癌患者の予後を評価するために施用しうる。したがって、本願の他の態様は癌を有する対象の予後を評価するための方法であって:前記対象に由来する生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現レベルを判定すること、および前記生物学的サンプル中の前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現のレベルを前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現の対照レベルと比較することを含み、生物学的サンプル中の前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの前記対照レベルに対してより高い発現のレベルが前記対象の予後が不良であることを示すことを特徴とし、前記生物学的サンプル中の前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの前記対照レベルに対してより低いかまたは同様の発現のレベルが前記対象の予後が良好であることを示すことを特徴とし、不良である予後は前記癌が侵襲型または浸潤型であることを示すことを特徴とし、前記癌が芽腫、癌腫、白血病、リンパ腫、黒色腫、骨髄腫、肉腫または胚細胞腫瘍であることを特徴とし、かつ前記1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者を含むことを特徴とする方法に関する。1つの実施形態においては、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーはCXCL13またはCXCR5またはCXCL13およびCXCR5の両者をさらに含む。他の実施形態においては、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーはCXCL16またはCXCR6またはCXCL16およびCXCR6の両者をさらに含む。他の実施形態においては、前記の1つまたはそれ以上の癌マーカーは1CXCL13またはCXCR5またはCXCL13およびCXCR5の両者、および2CXCL16またはCXCR6またはCXCL16およびCXCR6の両者をさらに含む。さらに他の実施形態においては、前記の1つまたはそれ以上の癌マーカーはCXCL13、CXCR5、CXCL16、CXCR6、CCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CCL27、CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL5、CXCL6、CXCL7、CXCL8、CXCL12、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR4、CXCR7およびCX3CR1からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーをさらに含む。代替的に、生物学的サンプル中の1つまたはそれ以上の癌マーカーのレベルは、患者の予後を評価するために一連の病期に渡って測定されうる。1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現レベルの正常な対照レベルと比較した上昇は、より好ましくない予後を示す。正常な対照レベルと比較した1つまたはそれ以上の癌マーカーの発現レベルの類似は、患者のより好ましい予後を示す。他の一部の実施形態においては、生物学的サンプルは血漿サンプル、唾液サンプルまたは尿サンプルである。癌治療の経過をモニタリングするための方法一定の実施形態においては、1つまたはそれ以上の癌マーカーのレベルを用いて癌の治療の経過をモニタリングする。この方法においては、被験生物学的サンプルは癌に対する治療を受けている対象から提供される。好ましくは、治療前、治療中または治療後の様々な時点において対象より複数の被験生物学的サンプルを採取する。次に、治療後サンプル中の癌マーカーの発現レベルを治療前サンプルの中の癌マーカーのレベル、または、その代わりに参照サンプル例:正常対照レベルと比較してもよい。たとえば、治療後マーカーレベルが治療前マーカーレベルより低い場合、治療が有効であると結論づけることができる。同様に、治療後マーカーレベルが正常対照マーカーレベルと同様、または同じである場合も、治療が有効であると結論づけることができる。有効な治療とは、対象における癌マーカーのレベルまたは癌のサイズ、有病率または転移の可能性の低下につながるものである。治療が予防的に施用される場合、有効なは治療が癌の発生を遅延または予防するかまたは癌の臨床症状を緩和することを意味する。癌の評価は、標準的な臨床プロトコルを用いて行うことができる。さらに、治療の有効性は、癌を診断または治療するための任意の既知の方法と関連して判定することができる。癌は、たとえば病理組織学的に、または体重減少または食欲減退などの病的な異常によって特定することにより常用的に診断することができる。したがって、本願の他の態様は、対象における癌治療の経過をモニタリングする方法であって:前記治療中または治療後に前記対象から採取した1つまたはそれ以上の生物学的サンプル中の1つまたそれ以上の癌マーカーの発現レベルを判定すること、および前記1つまたはそれ以上の生物学的サンプル中の前記1つまたそれ以上の癌マーカーの発現のレベルを前記1つまたそれ以上の癌マーカーの発現の対照レベルと比較することを含み、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの前記対照レベルが前記対象における前記1つまたはそれ以上の癌マーカーの治療前レベルまたは事前に決定された参照レベルであることを特徴とし、前記1つまたはそれ以上の生物学的サンプル中の前記1つまたそれ以上の癌マーカーが前記対照レベルと同様であるかまたはこれよりも低い場合は前記治療が有効であると考えられることを特徴とし、前記癌が芽腫、癌腫、白血病、リンパ腫、黒色腫、骨髄腫、肉腫または胚細胞腫瘍であることを特徴とし、かつ前記1つまたはそれ以上の癌マーカーがCCL25またはCCR9またはCCL25およびCCR9の両者を含むことを特徴とする方法に関する。1つの実施形態においては、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーはCXCL13またはCXCR5またはCXCL13およびCXCR5の両者をさらに含む。他の実施形態においては、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーはCXCL16またはCXCR6またはCXCL16およびCXCR6の両者をさらに含む。他の実施形態においては、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーは1CXCL13またはCXCR5またはCXCL13およびCXCR5の両者、および2CXCL16またはCXCR6またはCXCL16およびCXCR6の両者をさらに含む。さらに他の実施形態においては、前記1つまたはそれ以上の癌マーカーはCXCL13、CXCR5、CXCL16、CXCR6、CCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CCL27、CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL5、CXCL6、CXCL7、CXCL8、CXCL12、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR4、CXCR7およびCX3CR1からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーをさらに含む。癌マーカー本願で用いる用語癌マーカーは、単独の、または他のポリペプチドまたはポリヌクレオチドと複合したその発現レベルが癌または癌の予後と相関するポリペプチドまたはポリヌクレオチドを意味するか、または記述する。相関は、ポリペプチドまたはポリヌクレオチドの発現上昇または発現減少のいずれかと関連することができる。たとえば、ポリペプチドまたはポリヌクレオチドの発現が癌を示してもよく、またはポリペプチドまたはポリヌクレオチドの発現の欠落が癌患者の予後の不良と相関してもよい。用語癌マーカーの発現レベルは、その場合はポリヌクレオチドの存在および/または量を判定する転写レベルか、またはその場合はポリペプチドの存在および/または量を判定する、翻訳レベルで測定することができる。癌マーカー発現は、任意の適切な方法を用いて特性分析することができる。癌マーカーの例はCCL25、CCR9およびCXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL4、CXCL6、CXCL7、CXCL8、CXCL9、CXCL10、CXCL11、CXCL12、CXCL13、CXCL14、CXCL15、CXCL16、CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4、CXCR5、CXCR6、CXCR7、CCL1、CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCL6、CCL7、CCL8、CCL9、CCL10、CCL11、CCL12、CCL13、CCL14、CCL15、CCL16、CCL17、CCL18、CCL19、CCL20、CCL21、CCL22、CCL24、CCL27、CCL28、CCR1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CCR10、CCR11、XCL1、XCL2、XCR1、CX3CR1、CX3CL1、RNA結合モチーフ3RBM3、癌胎児性抗原CEA、前立腺特異抗原PSA、クロムグラニンACGA、デヒドロエピアンドロステロンDHEA、神経特異的エノラーゼNSE、前立腺酸性ホスファターゼPAP、プロラクチン、B7-H3、セプラーゼポリペプチド、抗p53、オステオポンチン、フェリチン、リゾフォスファチジルコリン、キネシンファミリー構成要素4AKIF4A、神経ペントラキシンINPTX1および線維芽細胞増殖因子受容体1癌遺伝子パートナーFGFR1OPタンパク質などの他のケモカイン、およびケモカイン受容体を含む。1つの実施形態においては、本発明で用いられる癌マーカーはCCL25、CCR9、CXCL13、CXCR5、CXCL16、CXCR6、CCL27、CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL5、CXCL6、CXCL7、CXCL8、CXCL12、CX3CL1、CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR4、およびCX3CR1を含む黒色腫マーカーパネルから選択される。黒色腫パネル中のマーカーは黒色腫を検出するために用いても、または黒色腫を有する対象の予後を予測するために用いてもよい。1つの実施形態においては、上記の癌マーカーはCCL25、CCR9、CXCL13、CXCR5、CCL1、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CXCL16、CCR7、CCR8、CXCR4、CXCR6およびCX3CR1を含む癌腫マーカーパネルから選択される。癌腫パネル中のマーカーは癌腫を検出するために用いても、または癌腫を有する対象の予後を予測するために用いてもよい。他の実施形態においては、上記の癌マーカーはCCL25、CCR9、CXCL13、CXCR5、CCL1、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CXCL16、CCR7、CCR8、CXCR4、CXCR6、CX3CR1、HER2、RNA結合モチーフ3RBM3および癌胎児抗原CEAを含む乳癌マーカーパネルから選択される。乳癌パネル中のマーカーは乳癌を検出するために用いても、または乳癌を有する対象の予後を予測するために用いてもよい。他の実施形態においては、上記の癌マーカーはCCL25、CCR9、CXCL13、CXCR5、CXCL16、CXCR6、CCL1、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CCR7、CCR8、CXCR4、CX3CR1、PSA、CEA、CGA、DHEA、NSE、PAP、プロラクチンおよびB7-H3を含む前立腺癌マーカーパネルから選択される。乳癌パネル中のマーカーは前立腺癌を検出するために用いても、または前立腺癌を有する対象の予後を予測するために用いてもよい。他の実施形態においては、上記の1つまたはそれ以上の癌マーカーはCCL25、CCR9、CXCL13、CXCR5、CXCL16、CXCR6、CCL1、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CCR7、CCR8、CXCR4、CX3CR1、セプラーゼポリペプチド、抗p53、オステオポンチンおよびフェリチンを含む結腸直腸癌パネルから選択される。結腸直腸癌パネル中のマーカーは結腸直腸癌を検出するために用いても、または結腸直腸癌を有する対象の予後を予測するために用いてもよい。他の実施形態においては、上記の癌マーカーはCCL25、CCR9、CXCL13、CXCR5、CXCL16、CXCR6、CCL1、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CCR7、CCR8、CXCR4、CX3CR1、癌抗原125CA-125、HE-4、OVX-1マクロファージコロニー刺激因子M-CSFおよびリゾフォスファチジルコリンを含む卵巣癌マーカーパネルから選択される。卵巣癌パネル中のマーカーは卵巣癌を検出するために用いても、または卵巣癌を有する対象の予後を予測するために用いてもよい。他の実施形態においては、上記の癌マーカーはCCL25、CCR9、CXCL13、CXCR5、CXCL16、CXCR6、CCL1、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CCR7、CCR8、CXCR4、CX3CR1、キネシンファミリー構成要素4AKIF4A、神経ペントラキシンINPTX1、線維芽細胞成長因子受容体1癌遺伝子パートナーFGFR1OPタンパク質およびCEAを含む肺癌マーカーパネルから選択される。肺癌パネル中のマーカーは肺癌を検出するために用いても、または肺癌を有する対象の予後を予測するために用いてもよい。他の実施形態においては、上記の1つまたはそれ以上の癌マーカーはCCL25、CCR9、CXCL13、CXCR5、CXCL16、CXCR6、CCL1、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CCR7、CCR8、CXCR4、CX3CR1およびCEAを含む膵臓癌または胃癌マーカーパネルから選択される。膵臓癌パネル中のマーカーは膵臓癌または胃癌を検出するために用いても、または膵臓癌を有する対象の予後を予測するために用いてもよい。他の実施形態においては、上記の1つまたはそれ以上の癌マーカーはCCL1、CCL2、CCL4、CCL17、CCL19、CCL21、CCL22、CXCL12、CXCL13、CXCL16、CX3CL1、CCR2、CCR7、CCR8、CXCR4、CXCR5、CXCR6およびCX3CR1からなる群から選択される1つまたはそれ以上の癌マーカーを含む脳癌、下垂体癌、骨癌、膵臓癌または胃癌パネルから選択される。検出方法癌マーカーの発現は、転写レベルすなわちmRNAの量または翻訳レベルすなわちタンパク質の量で判定することができる。一定の実施形態においては、癌マーカーの発現は定量的RT-PCR、ノーザンブロットまたは当業者に既知の他の方法によってmRNAレベルで判定される。他の実施形態においては、癌マーカーの発現はELISA、ウェスタンブロット、または抗CCL25および抗CCR9抗体、抗CXCL13および抗CXCR5抗体、および抗CXCL16および抗CXCR6抗体などの抗癌マーカー抗体を用いた他の種類の免疫検出法によってタンパク質レベルで判定される。一定の実施形態においては、抗CCL25および/または抗CCR9抗体はCCL25ペプチドまたはCCR9ペプチドと特異的に結合する抗体を含む。CCL25ペプチドの例はLAYHYPIGWAVLKRHRKVCGNPKSREVQRAMKLLDARNKVFAKLHHFEDCCLAYHYPIGWAVLRRAIQEVSGSCNLPAAIFYLPKRHRKVCGNAMKLLDARKVFAKLHHNQAGPHAVKKLFYLPKRHRKVCGNPYLPKRHRKVCGNPKLPKRHRKVCGNPKSPKRHRKVCGNPKSRCGNPKSREVQRAMKGNPKSREVQRAMKLKFSNPISSSKRNVSPKSREVLHHNTQTandSSSKRNからなる群から選択される1つまたはそれ以上の配列からなるか、またはこれを含むペプチドを含むが、これに限定されない。CCR9ペプチドの例はQFASHFLPPAAADQWKFQTFMCKVVNSMIAICTMVYPSandVQTIDAYAMFISNCAVSTNIDICFQからなる群から選択される1つまたはそれ以上の配列からなるか、またはこれを含むペプチドを含むが、これに限定されない。他の実施形態においては、抗CXCL13および/または抗CXCR5抗体はCXCL13ペプチドまたはCXCR5ペプチドと特異的に結合する抗体を含む。CXCL13ペプチドの例はRSSSTLPVPVFKRKIPPRGNGCPRKEIIVWKKLPRGNGCPRKEIIVWKQILPRGNGCPRKEIIVILPRGNGCPRKEIIVWRIQILPRGNGCPRKEIRGNGCPRKEIIVWKKNKRSSSTLPVPVFKRKIIQILPRGNGCPRKEIIDRIQILPRGNGCPRKERKRSSSTLPVPVFKRKRCRCVQESSVFIPRRFGNGCPRKEIIVWKKNKCVQESSVFIPRRFIDRIDRIQILPRGNGCPRKLRCRCVQESSVFIPRRFIDRIQILPRGNGCPRRCVQESSVFIPRRFIDCRCVQESSVFIPRRFIQESSVFIPRRFIDRIQRFIDRIQILPRGNGCPVQESSVFIPRRFIDRIESSVFIPRRFIDRIQISLRCRCVQESSVFIPRNGCPRKEIIVWKKNKSPQAEWIQRMMEVLRKRRRFIDRIQILPRGNGCLRKRSSSTLPVPVFKRVQESSVFIPRRKKNKRKRSSSRGNGCPVYYTSLRCRCVQESSVFIPRRDRIQILPRKEIIVWandKSIVCVDPQからなる群から選択される1つまたはこれ以上の配列からなるか、またはこれを含むペプチドを含むが、これに限定されない。CXCR5ペプチドの例はTSLVENHLCPATEEGSVGWVLGTFLCKTLPRCTFSLARLKAVDNTandMASFKAVFVPからなる群から選択される1つまたはこれ以上の配列からなるか、またはこれを含むペプチドを含むが、これに限定されない。抗CXCL16および/または抗CXCR6抗体はCXCL16ペプチドまたはCXCR6ペプチドと特異的に結合する抗体を含む。CXCL16ペプチドの例はAAGPEAGENQKQPEKNSQASEGASSDIHTPAQSTLQSTQRPTLPVGSLSWSVCGGNKDPWVQELGPTARTSATVPVLCLLSGIVAHQKHLLPTSPPRLRKHLLQSTQRPSSDKELTRPNETTAGENQKQPEKNANEGSVTISSDSPPSVCGGNKDPWLLPTSPPISQASEGASSDIHTSTQRPTLPVGSLSSDKELTRPNETTIHTSLAAGPEAGENQKQPEKNAGPTARTSATGSCYCGKRDSPPSVQRKHLRAYHRCLYYTRFQLLSWSVCGGWVQELMSCLDLKECGHAYSGIVAHQKHLLPTSPPISQSDIHTPAQMLLSTLQRPTLPVGSLTAGHSLAAGGKRISSDSPPSVQandKDPWVQELMSCLDLKECGHAYSGIVAHQKHからなる群から選択される1つまたはこれ以上の配列からなるか、またはこれを含むペプチドを含むが、これに限定されない。CXCR6ペプチドの例は、HQDFLQFSKVAGIHEWVFGQVMCKPQIIYGNVFNLDKLICGYHDEAIandYYAMTSFHYTIMVTEAからなる群から選択される1つまたはそれ以上の配列からなるか、またはこれを含むペプチドを含むが、これに限定されない。1つの実施形態においては、抗体は固形支持体に複合体化される。固形支持体により、本発明の抗体がそこに付着または結合することのできる非水性マトリクスが意味される。本願に包含される固相の例は、ガラスによって部分的にまたは全体的に形成されるもの例:空隙率調節ガラス、多糖類例:アガロース、ポリアクリルアミド、シリコン、およびポリスチレン、ポリプロピレンおよびポリビニルアルコールなどのプラスチックを含む。酵素免疫測定法ELISA一定の実施形態においては、癌マーカーは、典型的には抗体コーティングした分析プレートまたはウェルを用いて遂行される酵素免疫測定法ELISAを用いて検出される。一般的に使用されるELISA測定は、サンドイッチイムノアッセイまたは競合結合イムノアッセイのいずれかを用いる。簡潔に述べると、サンドイッチイムノアッセイは、抗原またはリガンド上の異なる部位と結合する2種類の抗体を用いる方法である。抗原に対する特異性の高い一次抗体を、固形表面に結合させる。次に抗原を添加し、その後検出抗体と呼ばれる二次抗体を添加する。検出抗体は、一次抗体とは異なるエピトープで抗原と結合する。その結果、抗原は2種類の抗体によってサンドイッチされる。通常、抗原に対する抗体結合親和性はイムノアッセイの感度の主要な決定因子である。抗原濃度が上昇すると検出抗体の量が増加し、測定される応答がより高くなる。サンドイッチ結合測定の標準曲線は正の勾配を有する。結合の程度を定量するために種々のレポーターを用いることができる。典型的には、一次抗体と異なる種で生成されなければならない二次抗体すなわち、一次抗体がウサギ抗体である場合、二次抗体はヤギ、ニワトリなどに由来するがウサギには由来しない抗ウサギ抗体であるに酵素を結合する。酵素に対する基質を、検出シグナルとして比色読み出しを形成する反応物に添加する。生成したシグナルは、サンプル中に存在する標的抗原の量に比例する。結合事象を測定するために用いる抗体と結合したレポーターは、検出様式を決定する。比色検出には分光測定プレートリーダーを用いることができる。最近、イムノアッセイの感度を高めるために数種類のレポーターが開発されている。たとえば、さらにシグナルを増幅しかつ発光プレートリーダー上で読み取ることのできる化学発光基質が開発されている。また、測定の酵素段階が蛍光体タグ抗体に置き換えられた蛍光読み出しが非常に普及している。この読み出しは次に蛍光プレートリーダーで測定する。競合結合測定法は、限られた数の抗体結合部位に対する標識化リガンドと非標識化リガンドの競合に基づいている。競合的阻害測定法は、しばしば小さな分析物に対して用いられる。これらの測定法は、分析物と適合化させた抗体対が存在しない場合にも用いられる。競合結合ELISAにおいては1種類の抗体のみを用いる。これは、2種類の抗体が非常に小さな分子と結合しようとする場合に起こる立体障害によるものである。不変量の標識リガンドトレーサーおよび可変量の非標識リガンドを抗体と共にインキュベートする。質量作用の法則によれば、標識リガンドの量は標識および非標識リガンドの総濃度の関数である。非標識リガンドの濃度が上昇すると、抗体と結合することのできる標識リガンドが少なくなり、また測定される反応が減少する。したがって、シグナルが低下すればするほどサンプル中にある標識分析物は多くなる。競合結合測定の標準曲線は負の勾配を有する。マイクロビーズ他の一定の実施形態においては、癌マーカーは抗体コーティングされたマイクロビーズを用いて検出される。一定の実施形態においては、マイクロビーズは磁気ビーズである。他の実施形態においては、ビーズは蛍光色素で内部的にカラーコードが付与され、またビーズの表面は、被験サンプル中の癌マーカーに結合することのできる抗癌マーカー抗体例:抗CCL25または抗CCR9抗体でタグ付けされる。癌マーカーの方は、蛍光タグで直接標識されるか、または蛍光タグと複合体化された抗マーカー抗体を用いて間接的に標識される。したがって、一方はビーズ、もう一方は蛍光タグからの2つの色の発生源がある。代替的に、ビーズには種々のサイズによって内部的にコード付与することもできる。測定法は、2種類の色素による異なる蛍光強度の混合、および種々のサイズのビーズを用いて、数百種類までの癌マーカーを測定することができる。測定中、色/サイズコードを付与したビーズ、蛍光標識抗マーカー抗体、およびサンプルを含む混合物を合わせ、精密流体工学を用いてビーズを整列する機器に注入する。次に、レーザー中にビーズを通過させ、またその色またはサイズに基づき、整列するかまたは色の強度を測定し、これを処理して各反応の定量的データとする。サンプルを蛍光体で直接標識する場合、システムは溶液中の未結合蛍光体を除去せずにビーズ上の蛍光のみを読み取りかつ定量することができる。測定は、多様に着色するかまたは多様なサイズとしたビーズを識別することにより多重化することができる。非標識サンプルに対するサンプルが直接必要とされる場合、リアルタイム測定の実現が可能である。標準的な測定段階は、サンプルの、抗マーカー抗体でコーティングしたビーズとのインキュベーション、ビオチンまたは蛍光体標識二次抗体とのインキュベーション、および蛍光シグナルの検出を含む。蛍光シグナルは、ビオチニル化二次抗体用にストレプトアビジン-蛍光体複合体を添加することによりビーズ上で発生させてビーズアナライザーで読み出すことができる。ビーズ表面に固定した抗マーカーに応じて、ビーズイムノアッセイをサンドイッチ型または競合型イムノアッセイとすることができる。検査スティック一部の実施形態においては、液状生体サンプル中の癌マーカーは検査スティックを用いて検出される。検査スティックは、典型的には液状物不浸透性ハウジングおよび1つまたはそれ以上の検出ゾーンを有する液状物浸透性スティックを含む。1つの実施形態においては、各検出ゾーンは生体サンプル中の癌マーカーと結合する乾燥結合試薬を含む。他の実施形態においては、乾燥結合試薬は標識結合試薬である。他の実施形態においては、検査スティックは、測定検査が成功裏に遂行されていること、すなわち検査スティック中に試薬が存在すること、および試薬が検査の実行中に可動化されかつ流路に沿って運ばれることを示す対照ゾーンをさらに含みうる。対照ゾーンは、装置内の試薬が免疫化学的相互作用を実施可能であることを示し、装置の化学的完全性を確認することもできる。一定の温度範囲内の乾燥条件下での装置の保管および輸送を考慮する場合、これは重要である。対照ゾーンは、典型的には検出ゾーンよりも下流に位置し、かつたとえば標識結合試薬に対する固定された結合試薬を含みうる。標識結合試薬は、対照ゾーンおよび検出ゾーンより上流に可動的な形態で存在しうる。標識結合試薬は、癌マーカーに対する標識結合試薬と同一であっても異なっていてもよい。1つの実施形態においては、検査スティックは1つまたはそれ以上の流路と流動接続しかつその上流にある多孔性サンプル受容部を含む。多孔性サンプル受容部は全ての測定に共通でありうる。したがって、装置の共通サンプル施用領域に施用された液状サンプルは、1つまたはそれ以上の流路に沿ってそれぞれの検出ゾーンに移動することができる。多孔性サンプル受容部は、ハウジングの内部に提供されることも、または前記ハウジングの外部に少なくとも部分的に延伸しかつたとえば体液を採取する役割を果たすこともありうる。多孔性サンプル受容部は液状物レザバーとして作用することもある。多孔性サンプル受容部材は、液状物を迅速に吸収することのできる任意の吸収性、多孔性または線維性材料から作製することができる。材料の多孔性は一方向性すなわち細孔または線維が部材の軸に完全にまたはおおむね平行に走るでも、または多方向性部材が非晶質の海面状構造を有するような全方向性でもありうる。ポリプロピレン、ポリエチレン好ましくは超高分子量、ポリフッ化ビニリデン、エチレン酢酸ビニル共重合体、アクリロニトリルおよびポリテトラフルオロ-エチレンなどの多孔性プラスチック材料を用いることができる。他の適切な材料はグラスファイバーを含む。所望する場合、吸収剤シンクを担体材料の遠位末端に提供することができる。吸収剤シンクは、たとえばワットマン3MMクロマトグラフィーペーパーなどを含んでもよく、かつあらゆる未結合標識結合試薬を検出ゾーンより洗い出せるよう十分な吸収能力を提供しなければならない。そのようなシンクの代替物として、多孔性固相材料を検出ゾーンの先まで延伸する長さとすることが十分となり得る。結合試薬の検出ゾーンへの施用後、多孔質固相材料の残余を処理して残る結合部位を全てブロックすることがある。ブロッキングは、たとえばタンパク質例:ウシ血清アルブミンまたは牛乳タンパク質、またはポリビニルアルコールまたはエタノールアミン、またはその組み合わせによる処理で達成することができる。多孔性担体をサンプルで湿らせた時に標識結合試薬の自由な運動性を助けるために、多孔性担体はショ糖または乳糖などの糖類、および/またはポリビニルアルコールPVAまたはポリビニルピロリドンPVPなどの他の物質をさらに含むこともある。そのような材料は、標識結合試薬を施用しようとする領域にたとえば水溶液として付着させてもよい。そのような材料を第1の施用として多孔質担体に施用した後標識を施用することも可能であり;代替的に、そのような材料を標識と混合し、さらに担体に施用することも可能であり、あるいは両者の組み合わせも可能である。そのような材料は、標識結合領域の上流に付着させても、または標識結合領域に付着させてもよい。代替的に、製造時点では多孔質担体をブロックせず;その替わりに多孔質担体をブロックするための手段を多孔質担体の上流の材料に含めてもよい。テストストリップを湿らせた直後に多孔質担体をブロッキングするための手段が可動化し、またブロッキング手段は流動の進行につれてブロッキングしながら多孔質担体に流入および通過する。ブロッキング手段は、BSAおよびカゼインなどのタンパク質、さらにはPVP、PVAなどのポリマー、さらには糖類およびTriton-X100などの界面活性剤を含む。ブロッキング手段は、マクロ孔質担体材料内に存在することも可能である。乾燥させた結合試薬は、検出ゾーンを含む多孔質担体材料より上流に提供された多孔質担体材料上に提供してもよい。上流の多孔質担体材料はマクロ孔質であってもよい。マクロ孔質担体材料は、非特異的結合を最小化し、かつ液状サンプルがマクロ孔質体を湿らせた後の標識試薬の自由な動きを促進するために、低タンパク結合性または非タンパク結合性でなければならないか、またはBSAまたはPVAなどの試薬によって容易にブロックできなければならない。マクロ孔質担体材料は、必要であれば界面活性剤または溶媒によって前処理してより親水性とし、液状サンプルの迅速な取り込みを促進することができる。マクロ孔質担体に適した材料は、ポリエチレンおよびポリプロピレンなどのプラスチック材料、または紙またはグラスファイバーなどの他の材料を含む。標識結合試薬が検出可能な粒子によって標識されている場合、マクロ孔質体は粒子ラベルの最大粒径よりも少なくとも10倍大きな孔径を有しうる。孔径が大きいほど標識試薬の放出は良好となる。マクロ孔質担体の代替物として、検出ゾーンよりも上流に提供された非孔質基板であって、前記非孔質基板が流路の一部を形成する非孔質基板上に標識結合試薬が提供されてもよい。他の実施形態においては、検査スティックは液状サンプルを受容するためのサンプル受容部材をさらに含みうる。サンプル受容部材は、ハウジングより延伸しうる。ハウジングは、液体不透過性材料で構築しうる。ハウジングは、望ましくは環境光線を排除もするであろう。ハウジングは、装置の外部の可視光線入射の10未満、好ましくは5未満、また最も好ましくは1未満が装置の内部に透過する場合、環境光線を相当排除するとみなされるであろう。ポリカーボネート、ABS、ポリスチレン、ポリスチロール、高密度ポリエチレン、または適切な遮光性色素を含有するポリプロピレンなどの光不透過性合成プラスチック材料は、ハウジングの製作における使用に適した選択である。ハウジングの外部に、ハウジング内の内部空間内に提供された測定と連絡する開口部が提供されてもよい。代替的に、開口部は多孔質サンプル受容部がハウジングからハウジング外部の位置まで延伸することを可能とする役割を果たしてもよい。マイクロアレイ他の実施形態においては、癌マーカーはその表面上に固定された癌マーカー特異性抗体を含むタンパク質マイクロアレイによって検出される。マイクロアレイは、マイクロアレイ上の抗体が被験サンプルの癌マーカーを捕捉し、かつ捕捉されたマーカーが、捕捉されたマーカーと特異的に結合する標識二次抗体によって検出されるサンドイッチ測定法で用いることができる。好ましい実施形態においては、二次抗体はビオチニル化または酵素標識される。検出は、その後のストレプトアビジン-蛍光体複合体蛍光検出用または酵素基質比色検出用とのインキュベーションにより達成される。典型的には、マイクロアレイ測定法は、サンプルとのインキュベーションおよび多様な試薬例:一次抗体、二次抗体、レポーティング試薬などとのインキュベーションを含む複数のインキュベーション段階を含む。インキュベーション段階の間の反復的な洗浄も必要とされる。1つの実施形態においては、マイクロアレイ測定法は1回または2回のインキュベーションのみを必要とする迅速測定様式で実施される。タンパク質マイクロアレイをサンプルと必要な全ての試薬の混合物に曝露することにより、検出可能な免疫複合体例:捕捉された癌マーカー/抗マーカー抗体/標識複合体の形成を1回のインキュベーション段階で達成することも想定される。1つの実施形態においては、一次および二次抗体は同一の抗体である。他の実施形態においては、タンパク質マイクロアレイは競合イムノアッセイを提供する。簡潔に述べると、固定抗マーカー抗体を含むマイクロアレイを、標識癌マーカー標準品の存在下で被験サンプルとインキュベートする。標識癌マーカーは、固定抗原特異性抗体との結合について被験サンプル中の非標識癌マーカーと競合する。このような競合的条件においては、被験サンプル中の特異的癌マーカーの濃度の上昇は標識癌マーカー標準品の固定抗体との結合の減少、およびこれによる標識からのシグナル強度の低下につながるであろう。マイクロアレイは手動、半自動または自動モードで処理することができる。手動モードは、試薬およびサンプルのマイクロアレイへの送達、サンプルインキュベーションおよびマイクロアレイの洗浄を含む全ての測定段階についての手動操作を意味する。半自動モードは、インキュベーションおよび洗浄段階が自動的に作動する一方での、サンプルおよび試薬のマイクロアレイへの送達についての手動操作を意味する。自動モードにおいては、3つの段階サンプル/試薬送達、インキュベーションおよび洗浄はコンピュータまたはキーパッドを有する一体型ブレッドボードによって制御することができる。たとえば、マイクロアレイはProteinArrayWorkstationパーキンエルマーライフサイエンス、マサチューセッツ州ボストンまたはAssay1200登録商標.WorkstationZyomyx、カリフォルニア州ヘイワードを用いて処理することができる。蛍光、比色および化学発光によるスキャナーを用いて、マイクロアレイシグナルを検出しかつマイクロアレイ画像をキャプチャすることができる。マイクロアレイ測定の定量は、質量分析法および表面プラズマ共鳴などの他の手段によって達成することもできる。キャプチャされたマイクロアレイ画像は、スタンドアローン型画像分析ソフトウェアによってか、または画像取得および分析ソフトウェアパッケージを用いて分析することができる。たとえば、抗原マイクロアレイの定量は蛍光PMTベーススキャナー―ScanArray3000ジェネラルスキャニング、マサチューセッツ州ウォータータウンまたは比色CCDベーススキャナー―VisionSpotAlliedBiotech、メリーランド州イジャムズビルを用いて実現することができる。典型的には、画像分析はデータ取得および別のソフトウェアパッケージによる測定レポートの作成を含むであろう。画像のキャプチャから測定レポートの生成までの測定プロセス全体を迅速化するために、画像キャプチャ、画像分析、およびレポート生成を含む全ての分析段階を、1つのソフトウェアパッケージに限定および/またはこれにより制御することができる。そのような一体化制御システムは、画像分析および測定レポートの生成をユーザーフレンドリーな様式で提供するであろう。埋め込み式バイオセンサー他の実施形態においては、癌マーカーは埋め込み式バイオセンサーを用いて検出される。バイオセンサーは、生物学的相互作用の結果として電子的信号を生成する電子装置である。1つの実施形態においては、バイオセンサーは、典型的には結合ペアのもう一方の構成要素である、癌マーカーと結合する抗体、受容体、核酸、またはその他の結合ペアの構成要素を用いる。バイオセンサーは血液サンプルと共に用いられて、自動化イムノアッセイシステムにおいて典型的に必要とされるサンプル調製および/または分離段階を必要とせずに癌マーカーの存在を判定する。1つの実施形態においては、センサーはナノスケール装置である。センサーシステムは、ナノワイヤに着接する生物学的認識素子およびナノワイヤと関連する性質を判定することのできる検出器を含む。生物学的認識素子は、測定する癌マーカーが結合ペアの一方の構成要素である、結合ペアのもう一方の構成要素である例:癌マーカーの受容体または抗癌マーカー抗体。好ましくは、ナノワイヤセンサーは、その上に外面を形成してゲート電極を形成する半導体ナノワイヤ、および導体と電気的に接触してソース電極を形成する第1の末端、および導体と接触してドレイン電極を形成する第2の末端を含む。1つの実施形態においては、センサーは、絶縁材料で形成される基板、ソース電極、ドレイン電極、およびその間に排置される、生物学的認識素子がナノワイヤの表面に着接された半導体ナノワイヤを含む電界効果トランジスターである。生物学的認識素子とその特異的結合パートナーの間に結合事象が発生すると、電界効果トランジスターの電流-電圧特性に検出可能な変化が発生する。他の実施形態においては、センサーシステムはセンサーのアレイを含む。アレイ中の1つまたはそれ以上のセンサーは、付属のセンサーが周辺環境と相互作用するのを防ぐ保護部材を伴う。選択された時点で保護部材を不能とすることによってセンサーが作動を開始し、周辺の液状物または組織と相互作用するので、その結合ペアの構成要素が存在すれば生物学的認識素子がそのペアのもう一方の構成要素と相互作用することができる。他の実施形態においては、保護部材は、酸化することが可能で、生体適合性、生体吸収性であり、かつ電位が印可されると血液などの溶液に溶解しうる伝導性材料で形成される。たとえば、生体適合性金属または電気腐食性ポリマーなどの伝導性材料によって被覆される基板のウェル内でセンサーを形成することができる。他の実施形態においては、保護部材は事前に決定された時間で溶解する材料を用いて形成される。質量分析他の実施形態においては、癌マーカーはMALDI/TOF飛行時間、SELDI/TOF、液体クロマトグラフィー-質量分析LC-MS、ガスクロマトグラフィー-質量分析GC-MS、高速液体クロマトグラフィー-質量分析HPLC-MS、キャピラリー電気泳動-質量分析、核磁気共鳴分析、またはタンデム質量分析例:MS/MS、MS/MS/MS、ESI-MS/MSなどなどの質量分析MSを用いて検出される。質量分析法は技術上周知であり、かつタンパク質などの生体分子を定量および/または同定するために用いられてきた。さらに、分離したタンパク質の新規シークエンシングを少なくとも部分的に可能である、質量分析技術が開発されている。一定の実施形態においては、気相イオン分光光度計が用いられる。他の実施形態においては、レーザー脱離/イオン化質量分析を用いてサンプルを分析する。モデムレーザー脱離/イオン化質量分析LDI-MSは、2つの主要な変法:マトリクス支援レーザー脱離/イオン化MALDI質量分析および表面増強レーザー脱離/イオン化SELDIで実践することができる。MALDIにおいては、分析物はマトリクスを含有する溶液と混合され、さらに液状物の滴を基板の表面に付置する。次に、マトリクス溶液を生物学的分子と共結晶化させる。基板を質量分析計に挿入する。レーザーエネルギーを基板表面の方向に誘導し、そこで生物学的分子を有意に断片化することなく脱離させかつイオン化する。SELDIにおいては、基板表面が脱離プロセスに能動的に関与するよう基板表面を修飾する。1つの実施形態においては、表面は吸着剤および/または目的のタンパク質と選択的に結合する捕捉試薬によって誘導体化される。他の実施形態においては、表面はレーザーで攻撃するとき脱離しないエネルギー吸収分子によって誘導体化される。他の実施形態においては、表面は、目的のタンパク質と結合しかつレーザー施用時に切断される光分解性結合を含む分子によって誘導体化される。これらの方法のそれぞれにおいて、誘導体化剤は、一般的に、サンプルが施用される基板表面の特定の位置に局在する。2つの方法は、たとえば、SELDIアフィニティ表面を用いて分析物を捕捉しかつマトリクス含有液状物を捕捉した分析物に添加してエネルギー吸収材料を提供することによって組み合わせることができる。癌マーカーの存在の検出は、典型的にはシグナル強度の検出を包含するであろう。これはさらに基板とのポリペプチド結合の量および特性を反映することができる。たとえば、一定の実施形態においては、第1のサンプルと第2のサンプルのスペクトルのピーク値のシグナル強度を例:肉眼、コンピュータ分析などにより比較し、特定の生体分子の相対的な量を判定することができる。BiomarkerWizardプログラムサイファージェンバイオシステムズ社、カリフォルニア州フレモントなどのソフトウェアプログラムを用いて質量スペクトルの分析を支援することができる。質量分析計およびその技術は、当業者に周知である。当業者は、質量分析計の任意の構成要素例:脱離ソース、質量分析装置、検出などおよび多様なサンプル調製を、本願に記載されるか、または技術上周知の他の適切な構成要素または調製と組み合わせることができることを理解する。たとえば、一部の実施形態においては、対照サンプルは重分子例:13Cを含むことがあり、これにより同じ質量分析の実行において被験サンプルを既知の対照サンプルと混合することが可能となる。1つの実施形態においては、レーザー脱離飛行時間TOF質量分析計を用いる。レーザー脱離質量分析においては、結合マーカーを有する基板をインレットシステムに導入する。マーカーはイオン化ソースからのレーザーによって脱離およびイオン化されて気相となる。生成されたイオンはイオン光学アセンブリに、次に飛行時間質量分析装置に捕集され、イオンは短い高電圧場を経て加速され高真空チャンバー中で浮動させられる。高真空チャンバーの末端で、加速されたイオンは異なる時間に高感度検出器表面を攻撃する。飛行時間はイオンの質量の関数であるので、イオン形成とイオン検出器衝突の間の経過時間を用いて特定の質量電荷比の分子の有無を鑑別することができる。一部の実施形態においては、第1または第2のサンプルに存在する1つまたはそれ以上の癌マーカーの相対量が、部分的に、コンピュータを用いたアルゴリズムの実行によって判定される。アルゴリズムは、第1の質量スペクトルおよび第2の質量スペクトルにおいて少なくとも1つのピーク値を同定する。次にアルゴリズムは、質量スペクトルの第1の質量スペクトルのピーク値のシグナル強度と第2の質量スペクトルのピーク値のシグナル強度を比較する。相対シグナル強度は、第1および第2のサンプルに存在する癌マーカーの量の指標である。既知の量の癌マーカーを含有する標準品を第2のサンプルとして分析し、第1のサンプル中に存在する生体分子の量をより良好に定量することができる。一定の実施形態においては、第1および第2のサンプル中の癌マーカーの同一性も判定することができる。標準値、特異度および感度の判定本発明においては、CCL25の血中濃度などの癌マーカーの標準発現レベルは、統計的に決定することができる。たとえば、健常者のCCL25の血中濃度を測定してCCL25の標準血中濃度を統計的に決定することができる。統計的に十分な母集団を集めることができる場合、平均値から標準偏差S.D.の2から3倍の範囲の数値がしばしば標準値として用いられる。したがって、平均値2×S.D.または平均値3×S.D.に対応する数値を標準値として用いうる。記載された通りに設定した標準値は、理論的にはそれぞれ健常者の90および99.7を含む。代替的に、標準値は癌患者における実際の発現レベル例:CCL25の血中レベルに基づいて設定することもできる。一般的に、この方式で設定される標準値は偽陽性百分率を最小化し、かつ検出感度を最大化することのできる条件を満足する数値の範囲から選択される。本願において、偽陽性百分率は、健常者のうち、そのCCL25血中濃度が標準値よりも高いと判断される患者の百分率を意味する。対照的に、健常者のうち、そのCCL25血中濃度が標準値よりも低いと判断される患者の百分率は特異度を示す。すなわち、偽陽性百分率と特異度の和は常に1である。検出感度は、癌の存在が判定されている者の母集団内の全癌患者のうち、その血中CCL25濃度が標準値よりも高いと判断される患者の百分率を意味する。本願で用いられる用語検査の感度は、スクリーニング検査が真の疾患を特定する能力であり、高感度検査であることを特徴とし低い偽陰性率を示し、さらに検査は疾患の有病率とは無関係である。検査の感度は、検査を受けた罹患患者総数に対する検査真陽性として算出され、百分率として表示される。用語検査の特異性は、疾患の非存在下で正しく陰性であるスクリーニング検査であり、高い特異度および低い偽陽性を有し、疾患の有病率とは無関係である。検査の特異度は、検査を受けた非罹患者数に対する検査真陰性として算出され、百分率として表示される。用語PPV陽性的中度は疾患を有する検査陽性患者の百分率であり、またしたがって検査陽性の信頼性を評価する。計算法:1.PPV=真陽性/真陽性偽陽性。用語NPV陰性的中度は疾患のない検査陰性患者を意味し、かつ検査陰性の信頼性を評価する。計算法:2.NPV=真陰性/真陰性および偽陰性。上に示す関係が指摘するように、検出正確度を評価するための指標である感度、特異度、陽性的中度および陰性的中度についての各数値は、CCL25の血中濃度のレベルを判断するための標準値に応じて変化する。標準値は、通常偽陽性比が低くかつ感度が高くなるように設定する。しかし、上に示す関係より明らかであるように、偽陽性比率と感度の間にはトレードオフが存在する。すなわち、標準値を低くすると、検出感度が上昇する。しかし、偽陽性比率も上昇するため、低い偽陽性比率を有するという条件を満足することは難しい。この状況を考慮すると、たとえば、本発明においては以下の予測結果をもたらす数値を好ましい標準値として選択しうる:1その偽陽性比率が50またはそれ以下である標準値すなわち、その特異度が50未満でない標準値および2その感度が20未満でない標準値。標準値は、受信者動作特性ROC曲線を用いて設定することができる。ROC曲線は、縦軸に検出感度および横軸に偽陽性比すなわち1-特異度を示すグラフである。ROC曲線は、CCL25などの癌マーカーの血中濃度の高い/低い度合いを判定するための標準値を連続的に変化させた後で得られた感度と偽陽性比率の変化をプロットすることによって得ることができる。ROC曲線を得るための標準値は、統計分析を行うために一時的に用いられる数値である。ROC曲線を得るための標準値は、一般的に、選択可能な全ての標準値を包含することを可能とする範囲内で連続的に変化させることができる。たとえば、標準値は分析母集団において測定された最小および最大血中CCL25値の間で変化させることができる。得られたROC曲線に基づき、本発明において用いる好ましい標準値を上記の条件を満たす範囲から選択することができる。代替的に、標準値は、血中CCL25測定値の大半を含む範囲から標準値を変化させることにより生成したROC曲線に基づいて選択することができる。癌を検出するためのキット本願の他の態様は、癌を検出するためのキットであって:生物学的サンプル中のCCL25および/またはCCR9の発現を判定するための試薬;および前記試薬を使用する方法についての指示を含み、前記試薬が抗CCL25抗体、抗CCR9抗体または両者を含むことを特徴とするキットに関する。具体的な実施形態においては、前記キットは、生物学的サンプル中のCXCL13および/またはCXCR5の発現を判定するための試薬;および前記試薬を使用する方法についての指示をさらに含み、前記試薬が抗CXCL13抗体、抗CXCR5抗体または両者を含むことを特徴とする。さらなる具体的な実施形態においては、前記キットは、生物学的サンプル中のCXCL16および/またはCXCR6の発現を判定するための試薬;および前記試薬を使用する方法についての指示をさらに含み、前記試薬が抗CXCL16抗体、抗CXCR6抗体または両者を含むことを特徴とする。他の具体的な実施形態においては、前記キットは、生物学的サンプル中のCXCL16および/またはCXCR6の発現を判定するための試薬;および前記試薬を使用する方法についての指示をさらに含み、前記試薬が抗CXCL16抗体、抗CXCR6抗体または両者を含むことを特徴とする。本発明は、制限的と解釈すべきでない以下の実施例によってさらに例示される。本願の全体に引用された全ての参照文献、特許および公開特許明細の内容、さらには図面および表は、本願に参照文献として組み入れられる。多様な癌腫におけるCCL25およびCCR9発現および活性のインビトロ分析図1に示すように、CCL25は乳癌組織によって発現される。乳癌組織をアイソタイプ対照または抗CCL25抗体で染色した。マゼンタ色はCCL25染色を示す。40×対物レンズを搭載したAperioScanScopeCSシステムでデジタル画像をキャプチャした。示された乳癌の代表的な症例およびCCL25の免疫強度。図2は、乳癌細胞株増殖におけるCCL25のシスプラチン誘導性減少の阻害が証明されることを証明する。MDA-MB-231細胞を、シスプラチン濃度を上昇させながら、0または100ng/mLCCL25アイソタイプ対照または抗CCR9Abで24時間培養した。細胞増殖はBrdU取り込みで判定し、測定は3回ずつ実施して3回繰り返した。アスタリクスはCCL25処理BrCa細胞と未処理BrCa細胞の間の統計的有意差p<0.01を示す。図3A~Bは、CCL25が乳癌細胞をシスプラチン誘導性アポトーシスから保護することを示す。MDA-MB-231細胞を、5mg/mLシスプラチン単独または0または100ng/mLCCL251mg/mL抗ヒトCCR9またはアイソタイプ対照とともに24時間培養したA。細胞を回収し、アネキシンVおよびポピドンヨウ素PIで染色した。染色細胞のフローサイトメトリーによる分析ではアポトーシスアネキシンV陽性細胞を生存非蛍光および壊死PI陽性細胞と識別した。アスタリクスはCCL25処理乳癌細胞と未処理乳癌細胞の間の統計的有意差p<0.01を示す。MDA-MB-231細胞株を、5mg/mLシスプラチンまたは0または100ng/mLCCL25抗ヒトCCR9または1mg/mLアイソタイプ対照Abとともに24時間培養したB。アポトーシス細胞の検出は、末端デオキシヌクレオチドトランスフェラーゼ媒介dUTPニック末端標識TUNEL法で遂行した。アポトーシス細胞は、標準的な蛍光フィルターセット520±20nmにより核緑色蛍光を示した。アスタリクスはシスプラチンCCL25処理乳癌細胞株と未処理乳癌細胞株の間の統計的有意差p<0.01を示す。図4A~Bは、乳癌細胞株におけるCCL25-CC9相互作用によるPI3K活性化およびAkt活性化を示す。MDA-MB-231細胞を、CCL25、シスプラチンおよび特異的キナーゼ阻害剤ワートマニンおよびPF-573,228による処理後にPI3KおよびAktを活性化するその能力について試験した。原位置での総PI3KおよびAktレベルおよびリン酸化PI3KおよびAktレベルを、シスプラチンおよびキナーゼ阻害剤の存在下でCCL25刺激の前0分または刺激後5または10分にFastActivatedCellベースのELISAで定量した。3回ずつ測定した3回の独立した実験から総PI3KまたはAktに対する活性化PI3KAまたはAktBの比率±SEMを示す。アスタリクスは未処理細胞とCCL25処理細胞とCCL25シスプラチン処理細胞の間の統計的有意差を示す。図5A~Bは、乳癌細胞株のCCL25処理後のGSK-3βおよびFKHRリン酸化を示す。MDA-MB-231細胞を、CCL25、シスプラチンおよび特異的キナーゼ阻害剤ワートマニンおよびPF-573,228による処理後にGSD-3bおよびFKHRをリン酸化するその能力について試験した。原位置での総GSK-3βおよびFKHRレベルおよびリン酸化GSK-3βおよびFKHRレベルを、シスプラチンおよびキナーゼ阻害剤の存在下でCCL25刺激の前0分または刺激後5または10分にFastActivatedCellベースのELISAで定量した。3回ずつ測定した3回の独立した実験から総GSK-3βまたはFKHRに対するリン酸化GSK-3βAまたはFKHRBの比率±SEMを示す。アスタリクスは未処理細胞とCCL25処理細胞とCCL25シスプラチン処理細胞の間の統計的有意差p<0.01を示す。図6は卵巣癌組織によるCCR9およびCCL25発現を示す。非腫瘍性n=8、漿液性腺癌n=9、漿液性乳頭状嚢腺腫n=1、類子宮内膜腺癌n=5、粘液性腺癌n=2、嚢腺腫n=3、粘液性ボーダーライン腺癌n=1、明細胞癌n=5、顆粒膜細胞腫瘍n=3、未分化胚細胞腫n=3、移行上皮癌n=3、ブレンネル腫瘍n=1、卵黄嚢腫瘍n=4、腺癌n=1および線維腫n=2に由来する卵巣癌組織をアイソタイプ対照または抗CCR9およびCCL25抗体で染色した。茶色DABはCCR6染色をし、かつマゼンタ色の染色はCCL25を示す。40×対物レンズを搭載したAperioScanScopeCSシステムで各スライドのデジタル画像をキャプチャした。典型的な症例はCCR9およびCCL25の免疫強度を示す。図7A~Bは卵巣癌組織によるCCL25発現の分析を示す。CCL25発現を分析し、変形ボックスプロットで示したA。ボックス内の下、中央および上の線は、それぞれ第1四分位Q1、中央値Q2および第3四分位Q3を示す。上と下のひげは中央値±1.5Q3-Q1を表す。非腫瘍との有意差を下のパネルに示す。表Bは、非腫瘍性組織NNと、漿液性腺癌SA、類子宮内膜腺癌EC、粘液性腺癌MA、嚢腺腫C、粘液性ボーダーライン腺癌MBA、明細胞癌CCC、顆粒膜細胞腫瘍GCT、未分化胚細胞腫D、移行上皮癌TCC、ブレンネル腫瘍BT、卵黄嚢腫瘍YST、腺癌Aおよび線維腫Fとのそれぞれのp値または有意差を示す。図8A~Bは卵巣癌組織によるCCR9発現の分析を示す。CCR9発現を分析し、変形ボックスプロットで示したA。ボックス内の下、中央および上の線は、それぞれ第1四分位Q1、中央値Q2および第3四分位Q3を示す。上と下のひげは中央値±1.5Q3-Q1を表し非腫瘍との有意差を下のパネルに示す。表Bは、非腫瘍性組織NNと、漿液性腺癌SA、類子宮内膜腺癌EC、粘液性腺癌MA、嚢腺腫C、粘液性ボーダーライン腺癌MBA、明細胞癌CCC、顆粒膜細胞腫瘍GCT、未分化胚細胞腫D、移行上皮癌TCC、ブレンネル腫瘍BT、卵黄嚢腫瘍YST、腺癌Aおよび線維腫Fとのそれぞれのp値または有意差を示す。図9A~Bは卵巣癌細胞株によるCCR9およびCCL25発現を示す。卵巣癌細胞をフルオレセインFITC複合体化抗CCR9抗体またはFITC複合体化アイソタイプ対照抗体で染色しさらにFACSで分析したA。卵巣癌細胞をFITC複合体化抗CCR9で染色し、細胞内CCL25をフィコエリスリンPE複合体化CCL25抗体で染色し、さらに核はDraq-5で染色したB。融合データは、表面上のCCR9発現および核内のCCL25発現を示す。図10A~Bは卵巣癌細胞による低酸素調節CCR9mRNAおよび表面タンパク質発現を示す。正常酸素条件および低酸素条件下のSKOV-3細胞株または正常一次卵巣組織から総RNAを分離した。CCR9mRNAの定量的RT-PCR分析を3回ずつ実施した。転写物のコピーは、18SrRNAコピーの実数に対してSEで表示するA。正常酸素下および低酸素下のSKOV-3細胞をPE複合体化アイソタイプ対照抗体Ab塗りつぶしたヒストグラムまたはPE複合体化抗CCR9モノクローナルAb白抜きヒストグラムで染色し、さらにフローサイトメトリーで定量したB。PE陽性細胞の平均蛍光強度の平均を示す。記号は、正常組織またはアイソタイプ対照とOvCa細胞の間または正常酸素と低酸素細胞間のCCR9発現の統計的に有意なp<0.01差を示す。図11A~BはSKOV-3細胞の低酸素媒介性およびCCL25媒介性遊走および浸潤を示す。SKOV-3細胞を、CCL25の走化性勾配に向かって遊走するその能力について試験したA。遊走測定中、正常酸素または低酸素条件下で100ng/mLCCL25を用いて、1.0μg/mLマウス抗CCR9抗体Abまたはアイソタイプ対照Abと共に細胞を共培養した。またSKOV-3細胞は、低酸素条件下または正常酸素条件下で100ng/mLCCL25に応答してMatrigel登録商標マトリクスに浸潤するかまたはこれを横切ってトランスロケーションするその能力についても試験したB。浸潤測定中、正常酸素または低酸素条件下で100ng/mLCCL25を用いて、CCR9に対するモノクローナル抗体1.0μg/mLと共に細胞を共培養した。遊走または浸潤した細胞の個数SEは、CCL25処理正常酸素細胞と未処理正常酸素細胞の間、CCL25処理低酸素細胞と未処理低酸素細胞の間、または同様に処理した正常酸素細胞と低酸素細胞の間の有意なp<0.01差を示す記号と共に示す。図12A~BはSKOV-3細胞によるCCL25誘導性コラゲナーゼ発現を示す。細胞を、コラゲナーゼMMP-1、MMP-8、およびMMP-13mRNAおよび活性タンパク質を発現するその能力について試験した。SKOV-3細胞は、正常酸素または低酸素条件下で、単独、100ng/mLCCL251μg/mLアイソタイプ対照抗体Ab、またはCCL251μg/mLマウス抗CCR9Abと共に24時間培養した。総RNAを分離し、コラゲナーゼのmRNA発現について定量的RT-PCR分析を実施し、さらに転写コピーを実際の18SrRNAコピーに対して表示するA。調製培地において活性コラゲナーゼをFluorokineandBiotrak測定で定量したB。記号は、CCL25処理正常酸素細胞と未処理正常酸素細胞の間、CCL25処理低酸素細胞と未処理低酸素細胞の間、または同様に処理した正常酸素細胞と低酸素細胞の間の有意なp<0.01差を示す。図13A~BはSKOV-3細胞によるCCL25誘導性ゼラチナーゼ発現を示す。細胞を、ゼラチナーゼMMP-2およびMMP-9mRNAおよび活性タンパク質を発現するその能力について試験した。SKOV-3細胞は、正常酸素または低酸素条件下で、単独、100ng/mLCCL251μg/mLアイソタイプ対照抗体Ab、またはCCL251μg/mLマウス抗CCR9Abと共に24時間培養した。総RNAを分離し、ゼラチナーゼのmRNA発現について定量的RT-PCR分析を実施し、さらに転写コピーを実際の18SrRNAコピーに対して表示するA。調製培地中の活性ゼラチナーゼをFluorokineandBiotrak測定で定量したB。記号は、CCL25処理正常酸素細胞と未処理正常酸素細胞の間、CCL25処理低酸素細胞と未処理低酸素細胞の間、または同様に処理した正常酸素細胞と低酸素細胞の間の有意なp<0.01差を示す。図14A~BはSKOV-3細胞によるCCL25誘導性ストロメライシン発現を示す。細胞を、ストロメライシンMMP-3、MMP-10、およびMMP-11mRNAおよび活性タンパク質を発現するその能力について試験した。SKOV-3細胞は、正常酸素または低酸素条件下で、単独、100ng/mLCCL251μg/mLアイソタイプ対照抗体Ab、またはCCL251μg/mLマウス抗CCR9Abと共に24時間培養した。総RNAを分離し、ストロメライシンのmRNA発現について定量的RT-PCR分析を実施し、さらに転写コピーを実際の18SrRNAコピーに対して表示するA。調製培地において活性ストロメライシンをFluorokineandBiotrak測定で定量したB。記号は、CCL25処理正常酸素細胞と未処理正常酸素細胞の間、CCL25処理低酸素細胞と未処理低酸素細胞の間、または同様に処理した正常酸素細胞と低酸素細胞の間の有意なp<0.01差を示す。図15は前立腺癌細胞株によるCCR9発現を示す。前立腺細胞株C4-2B、LNCaP、およびPC3および正常前立腺細胞RWPE-1をFITC複合体化抗ヒトCCR9緑および7AAD核染色;赤で染色した。陽性染色細胞をAmnisImagestreamで撮像および定量した。右のパネルはCCR9染色の平均蛍光強度を示す。図16A~Dは前立腺組織によるCCR9発現を示す。国立衛生研究所NIH、国立癌研究所NCIおよびアラバマ州立大学バーミンガムより組織マイクロアレイTMAを入手し、CCR9について染色した。40×対物レンズを搭載したAperioScanScopeシステムで各スライドのデジタル画像をキャプチャした。前立腺癌CaPA、マッチングした良性前立腺組織MBBおよび陰性対照の典型的な例を示し、スキャンして分析した全ての組織のCCR9強度をImageScopeソフトウェアv.6.25で定量した。図27DはMBと、良性前立腺肥大BHP、前立腺癌PCaの間のCCR9免疫強度を示す。アスタリクスは、MBと、BPH、PCa組織間のCCR9免疫強度の有意なp<0.01差を示す。図17A~Dは前立腺癌組織によるCCL25発現を示す。エンドクリン-パラクリン細胞表現型の神経内分泌分化は、前立腺悪性腫瘍で頻繁に発生し、かつ転帰および治療上の潜在的重大性を有する。パラクリン細胞表現型は、前立腺および前立腺癌におけるアンドロゲン非感受性、分裂終了部分母集団と見なすことができる。図17Aは、前立腺上皮間新生物内のパラクリンパターンにおけるCCL25の発現を示す。双頭矢印はCCL25を産生する複数のパラクリン細胞を指し示し赤、茶色の矢印はCCR9を発現する細胞を指し示す茶。図17BはCCL25について赤く染色された細胞を示す。茶色の矢印は細胞NSEを指し示す。図17AおよびCは、それぞれ図17DおよびBよりも高い倍率を示す。図18は健常ドナーまたは前立腺疾患患者における血清CCL25レベルを示す。ELISAを用いて、健常ドナー、前立腺癌PCa、前立腺上皮間新生物PIN、および良性前立腺肥大BPH由来の血清中のCCL25を定量した。アスタリクスは、健常対照と比較したCCL25レベルの有意差p<0.05を示す。図19A~Cはマウス骨髄細胞によるCCL25発現を示す。非腫瘍担持Aおよび腫瘍担持Bマウス由来の骨髄細胞を吸引し、FITC複合体化抗CCL25抗体で染色した。陽性染色細胞CをAmnisImageStreamで定量した。IDEASソフトウェアを用いて画像ベース分析を実施したところ、前立腺腫瘍細胞攻撃後の骨髄によるCCL25発現の1.6倍の増加を示した。図20A~BはCCR9媒介性前立腺癌細胞遊走Aおよび浸潤Bを示す。LNCaP、PC3、およびC4-2b細胞を、無添加白抜き棒グラフ、100ng/mLCCL25斜線棒グラフ、または100ng/mLCCL251μg/mL抗CCL25塗りつぶし棒グラフに向かって遊走するその能力について試験した。遊走および浸潤チャンバーに播種するために最初に用いた104個の細胞からCCL25に応答して遊走および浸潤した細胞の個数±SEMは、遊走がCCL25依存的でありかつ抗CCL25抗体遮断によって阻害されることを示す。アスタリクスは、無添加とCCL25処理細胞の間の有意差p<0.01を示す。図21は、LNCaP、PC3、およびC4-2b前立腺細胞株によるCCL25誘導性活性マトリクスメタロプロテアーゼMMP発現を示す。細胞は、無添加白抜き棒グラフまたは100ng/mLCCL25添加塗りつぶし棒グラフで24時間培養した。培養上清中のMMP-1、MMP-2、MMP-13、MMP-9、MMP-10、およびMMP-11タンパク質レベルをMMP活性分析により判定した。アスタリスクは、未処理細胞株と比較したCCL25処理細胞株のMMP分泌の有意なp<0.05上昇または低下を示す。図22A~FはCCR9ノックダウンによるPC3前立腺癌細胞株の骨転移の阻害を示す。マウスを、ルシフェラーゼおよびドセタキセルの誘導によるCCR9特異性shRNA発現PC3細胞株で攻撃したA、D。マウスはこの細胞株で腹腔内注射により攻撃した。その後、マウスは21日間飲用物中に何も添加しないかまたはドキシサイクリン0.2mg/mLを投与された。CaliperXenogen100インビボ撮像システムにより転移と腫瘍増殖を毎週モニタリングした。攻撃より24時間後には変化がなかったがB、E、攻撃の3週間後には、骨転移としてのCCR9ノックダウンPC3F細胞の増殖はCCR陽性PC3細胞Cと比較してより少なかった。図23は肺癌患者の血清CCL25レベルを示す。CCL25ELISAを実施して、腺癌AdenoCa;n=14、扁平上皮癌SSC;n=17と診断された患者、および健常ドナーcontrol;n=9に由来する血清中のCCL25レベルを定量した。ELISAはCCL25>5pg/mLを検出することができた。塗りつぶした円は個々の血清CCL25レベルを示し、線は各群の濃度の中央値を示す。アスタリクスは、対照群と肺癌群の間の有意差p<0.01を示す。図24A~Cは非腫瘍性肺組織および肺癌組織によるCCR9発現を示す。非腫瘍性n=8A、腺癌n=24B、および扁平上皮癌n=54C由来の肺組織をアイソタイプ対照または抗CCR9抗体で染色した。茶色DABはCCR9染色を示す。40×対物レンズを搭載したAperioScanScopeCSシステムで各スライドのデジタル画像をキャプチャした。図25A~Dは結腸癌組織によるCCR9-CCL25発現を示す。非腫瘍性n=8および腺癌n=16由来の結腸組織をAアイソタイプ対照、B抗CCR9、またはC抗CCL25抗体で染色した。茶色DAB染色はCCR9陽性を示し、かつマゼンタ色の染色はCCL25陽性を示す。40×対物レンズを搭載したAperioScanScopeCSシステムでデジタル画像をキャプチャした。リアルタイムPCR分析によりケモカイン発現レベルを検出することプライマー設計NIH-NCBI遺伝子バンクデータベースよりCXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL4、CXCL5、CXCL6、CXCL7、CXCL8、CXCL9、CXCL10、CXCL11、CXCL12、CXCL13、CXCL14、CXCL15、CXCL16、CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4、CXCR5、CXCR5a、CXCR5b、CXCR6、CXCR7、CCL1、CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCL6、CCL7、CCL8、CCL9、CCL10、CCL11、CCL12、CCL13、CCL14、CCL15、CCL16、CCL17、CCL18、CCL19、CCL20、CCL21、CCL22、CCL24、CCL25、CCL25-1、CCL25-2、CCL27、CCL28、CCR1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CCR9、CCR10、CCR11、XCL1、XCL2、XCR1、CX3CR1、またはCX3CL1についてのメッセンジャーRNA配列を取得した。プライマーはBeaconJ2.0コンピュータプログラムを用いて設計した。コンピュータプログラム:PrimerPremierJおよびMITPrimer3を用いてプライマーの熱力学分析を実施した。生成したプライマーセットをヒトゲノム全体と比較して特異性を確認した。リアルタイムPCR分析癌細胞株ATCC、メリーランド州ロックヴィルを、非必須アミノ酸L-グルタミン酸、およびピルビン酸ナトリウムを添加した10ウシ胎児血清を含有するRMPI-1640完全培地中で培養した。臨床切除組織より原発性腫瘍および正常ペアマッチング組織ClinomicsBiosciences、メリーランド州フレデリックおよびUABTissueProcurement、アラバマ州バーミンガムを採取した。メーカーのプロトコルに従ってTriReagentMolecularResearchCenter、オハイオ州シンシナティを用い、106個の細胞からメッセンジャーRNAmRNAを分離した。RNアーゼ非含有DNアーゼインビトロジェン、カリフォルニア州サンディエゴ10U/Flを用いて37°Cで15分間処理することで、これらのサンプルより潜在的なゲノムDNA汚染を除去した。その後、RNAを沈殿させ、RNASecureAmbion、テキサス州オースチンに再懸濁した。メーカーのプロトコルにしたがってTaqman7逆転写試薬アプライドバイオシステムズ、カリフォルニア州フォスターシティを用い、総RNA約2μgを逆転写することによりcDNAを生成した。その後、メーカーのプロトコルにしたがってSYBR7GreenPCRマスターミックス試薬アプライドバイオシステムズを用い、cDNAをCXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL4、CXCL5、CXCL6、CXCL7、CXCL8、CXCL9、CXCL10、CXCL11、CXCL12、CXCL13、CXCL14、CXCL15、CXCL16、CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4、CXCR5、CXCR5a、CXCR5b、CXCR6、CXCR7、CCL1、CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCL6、CCL7、CCL8、CCL9、CCL10、CCL11、CCL12、CCL13、CCL14、CCL15、CCL16、CCL17、CCL18、CCL19、CCL20、CCL21、CCL22、CCL24、CCL25、CCL25-1、CCL25-2、CCL27、CCL28、CCR1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CCR9、CCR10、CCR11、XCL1、XCL2、XCR1、CX3CR1、またはCX3CL1に対する特異的ヒトcDNAプライマーにより増幅した。これらの標的のmRNAのコピーレベルを、BioRadIncyclerおよびソフトウェアカリフォルニア州ハーキュリーズを用いたリアルタイムPCR分析により評価した。CXCL1-、CXCL2-、CXCL3-、CXCL4-、CXCL5-、CXCL6-、CXCL7-、CXCL8-、CXCL9-、CXCL10-、CXCL11-、CXCL12-、CXCL13-、CXCL14-、CXCL15-、CXCL16-、CXCR1-、CXCR2-、CXCR3-、CXCR4-、CXCR5-、CXCR5a-、CXCR5b-、CXCR6-、CXCR7-、CCL1-、CCL2-、CCL3-、CCL4-、CCL5-、CCL6-、CCL7-、CCL8-、CCL9-、CCL10-、CCL11-、CCL12-、CCL13-、CCL14-、CCL15-、CCL16-、CCL17-、CCL18-、CCL19-、CCL20-、CCL21-、CCL22-、CCL24-、CCL25-、CCL25-1-、CCL25-2-、CCL27-、CCL28-、CCR1-、CCR2-、CCR3-、CCR4-、CCR5-、CCR6-、CCR7-、CCR8-、CCR9-、CCR10-、CCR11-、XCL1-、XCL2-、XCR1-、CX3CR1-、またはCX3CL1特異性プライマーセットを用いて得られたRT-PCR生成物は、宿主配列にアニーリングしたプライマーNIH-NCBI遺伝子バンクを排除したので、他の遺伝子標的と交差反応しなかった。プライマーは、CXCR5a対CXCR5bおよびCCL25、CCL25-1対CCL25-2をもたらす多型に対して、種々のサイズのアンプリコン生成物を生成した。この目的に向けて、腺腫、癌腫、白血病、リンパ腫、黒色腫、および/または骨髄腫細胞株および腫瘍組織のRT-PCR分析により、ケモカインおよびケモカイン受容体は癌細胞により識別的に発現されることが明らかとなった。抗ケモカインおよび抗ケモカイン受容体抗体はインビトロおよびインビボで腫瘍細胞増殖を阻害する抗血清の調製CXCR1、CXCR2、CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL5、CXCL6、CXCL7、CXCL8、CXCL12、CXCR5a、CXCR5b、CXCL13、CXCR6、CXCL16、CCL16、CCL25、CCL25-1、CCL25-2、CCR9、CX3CR1、およびCX3CL1配列番号1-21から15アミノ酸ペプチドを合成しシグマジェノシス、テキサス州ザ/ウッドランド、さらにその後の抗血清調製またはモノクローナル抗体生成のための免疫用に、鶏卵リゾチームPierce、イリノイ州ロックフォードと複合体化して抗原を生成した。発色性リムルスアメーバ様細胞溶解物測定CapeCod社、ミシシッピー州ファルマスによりケモカインペプチド複合体のエンドトキシンレベルを定量したところ<5EU/mgであることが示された。初回免疫用に、抗原100μgを免疫原としてフロイントの完全アジュバントRibiAdjuvantシステムRASと共に最終体積1.0mLで用いた。この混合物の100mL分取をウサギの背部の2部位に皮下投与し、また各後脚の筋肉に400mLずつ筋肉内投与した。3から4週間後、ウサギに、フロイントの不完全アジュバントに加えて抗原100μgを投与してその後3回免疫した。抗-CXCR1、-CXCR2、-CXCL1、-CXCL2、-CXCL3、-CXCL5、-CXCL6-CXCL7、-CXCL8、-CXCL12、-CXCR5a、-CXCR5b、-CXCL13、-CXCR6、-CXCL16、-CCL16、-CCL25、-CCL25-1、-CCL25-2、-CCR9、-CX3CR1、および-CX3CL1抗体価が1:1,000,000に達したときに抗血清を採取した。続いて、正常血清または抗血清を熱不活化しさらにPBSで1:50希釈した。モノクローナル抗体の調製CXCR1、CXCR2、CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL5、CXCL6、CXCL7、CXCL8、CXCL12、CXCR5a、CXCR5b、CXCL13、CXCR6、CXCL16、CCL16、CCL25、CCL25-1、CCL25-2、CCR9、CX3CR1、およびCX3CL1から15アミノ酸ペプチドを合成しシグマジェノシス、さらにその後の抗血清調製またはモノクローナル抗体生成のための免疫用に、鶏卵リゾチームPierceと複合体化して抗原を生成した。発色性リムルスアメーバ様細胞溶解物測定CapeCod社、ミシシッピー州ファルマスによりケモカインペプチド複合体のエンドトキシンレベルを定量したところ<5EU/mgであることが示された。初回免疫用に、抗原100μgを免疫原としてフロイントの完全アジュバントRibiAdjuvantシステムRASと共に最終体積200μLで用いた。その後、この混合物の100μL分取をラット、マウス、または免疫グロブリンヒト化マウスの背部の2部位に投与した。2週間後、動物にはフロイントの不完全アジュバントに加えて抗原100μgを投与してその後3回免疫した。血清を採取し、かつ抗-CXCR1、-CXCR2、-CXCL1、-CXCL2、-CXCL3、-CXCL5、-CXCL6-CXCL7、-CXCL8、-CXCL12、-CXCR5a、-CXCR5b、-CXCL13、-CXCR6、-CXCL16、-CCL16、-CCL25、-CCL25-1、-CCL25-2、-CCR9、-CX3CR1、または-CX3CL1抗体価が1:2,000,000に達したとき、宿主を屠殺しかつ脾細胞を分離してハイブリドーマを生成した。簡潔に述べると、免疫した宿主の脾臓またはリンパ節に由来するB細胞を不死骨髄腫細胞株例:YB2/0などと融合させた。次に、選択培養条件すなわちHAT添加培地およびハイブリドーマクローニングの限定希釈法後にハイブリドーマを分離した。ELISAを用いて所望の特異性を有する抗体を産生する細胞を選択した。正常ラットまたはマウスに由来するハイブリドーマを、一般的に用いられる分子生物学的技術を用いてヒト化した。高親和性および増殖性ハイブリドーマをクローニングした後、腹水または培養上清から抗体を分離し、力価1:2,000,000に調節しさらにPBSで1:50希釈した。抗血清またはモノクローナル抗体投与T、B、およびNK細胞を欠く免疫不全ヌードNIH-IIIマウス週齢8から12週、チャールズリバーラボラトリー、マサチューセッツ州ウィルミントンに1×106個の癌細胞を皮下に与えて腫瘍を確立した。確立された固形腫瘍は、その後宿主から切除して速やかに移植するか、または後日移植するために液体窒素に保存した。用時切除したかまたは液体窒素で凍結した腫瘍組織1gを、腸脂肪組織に外科的に移植して腫瘍を生成した。一旦異種移植腫瘍の増殖がサイズ5mmに達したならば、NIH-IIIマウスに抗血清またはモノクローナル抗体のいずれかの200μL腹腔内注射を3日毎に実施し、さらに腫瘍増殖の進行または退縮についてモニタリングした。データ分析SigmaStat2000イリノイ州シカゴソフトウェアを用いて、データの統計的有意性を分析および確認した。その後、2因子不対検定を用いたスチューデントのt-検定でデータを分析した。この分析においては、投与サンプルを非投与サンプルと比較した。有意水準はp<0.05に設定した。インビトロ増殖試験腺腫、癌腫、白血病、リンパ腫、黒色腫、および/または骨髄腫細胞株をCXCR1、CXCR2、CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL5、CXCL6CXCL7、CXCL8、CXCR4、CXCL12、CXCR5a、CXCR5b、CXCL13、CXCR6、CXCL16、CCL16、CCR9、CCL25、CCL25-1、CCL25-2、CX3CR1、またはCX3CL1に対して特異的な抗体の存在するまたは存在しない完全培地内で増殖させた。CXCR1および/またはCXCR2を発現する癌細胞株の増殖は、CXCR1、CXCR2、CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL5、CXCL6、CXCL7、またはCXCL8に対する抗体によって阻害された。同様に、CXCR4を発現する癌細胞株の増殖はCXCR4またはCXCL12に対する抗体によって阻害された。CXCR5aまたはCXCR5aを発現する癌細胞株の増殖はCXCR5a、CXCR5b、またはCXCL13に対する抗体によって阻害された。CXCR6を発現する癌細胞株の増殖はCXCR6またはCXCL16に対する抗体によって阻害された。CCR9を発現する癌細胞株の増殖はCCR9、CCL25、CCL25-1、またはCCL25-2に対する抗体によって阻害された。CX3CR1を発現する癌細胞株の増殖はCX3CR1またはCXC3L1に対する抗体によって阻害された。興味深いことに、可溶性リガンドCXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL5、CXCL6、CXCL7、CXCL8、CXCL12、CXCL13、CXCL16、CCL16、CCL25、CCL25-1、CCL25-2、またはCX3CL1に対する抗体は、膜受容体に向けられたものよりも、増殖阻害において効果的である。インビトロ血管新生試験微小血管内膜細胞CellSystems、ワシントン州カークランドを供給者のプロトコルにしたがって増殖させ、さらにCXCR1、CXCR2、CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL5、CXCL6、CXCL7、CXCL8、CXCR4、CXCL12、CXCR5a、CXCR5b、CXCL13、CXCR6、CXCL16、CCL16、CCR9、CCL25、CCL25-1、CCL25-2、CX3CR1、またはCX3CL1に特異的な抗体の存在下または非存在下で、血管新生についてのインビトロ測定BD-Biocoat、カリフォルニア州ハーキュリーズにおいて微細血管細静脈を形成させた。血管新生は、CXCR1、CXCR2、CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL5、CXCL6、CXCL7、CXCL8、CXCR4、CXCL12、CXCR6またはCXCL16に対する抗体によって阻害された。インビボ増殖試験癌細胞株または原発性腫瘍組織をNIH-IIIマウスに養子移入し、さらに目的の異種移植腫瘍を形成させた。CXCR1、CXCR2、CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL5、CXCL6、CXCL7、CXCL8、CXCR4、CXCL12、CXCR5a、CXCR5b、CXCL13、CXCR6、CXCL16、CCL16、CCR9、CCL25、CCL25-1、CCL25-2;CX3CR1、またはCX3CLlに対する抗体は、腫瘍サイズの進行および退縮に識別的に影響した。一定の場合において、CXCR1、CXCR2、CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL5、CXCL6、CXCL7、CXCL8、CXCR4、CXCL12、CXCR6またはCXCL16に向けられた抗体は、効果的に腫瘍増殖の退縮にも進行の阻害にもつながる。CXCR4、CXCL12、CXCR5a、CXCR5b、CXCL13、CCL16、CCR9、CCL25、CCL25-1、CCL25-2、CX3CR1、またはCX3CL1に向けられた抗体は、腫瘍サイズの進行の阻害において効果的である。本願で用いられるケモカインのタンパク質配列はNIH-NCBIGenBankに以下のように記録される:CXCR1SEQIDNO1CXCR2SEQIDNO2CXCL1SEQIDNO3CXCL2SEQIDNO4CXCL3SEQIDNO5CXCL5SEQIDNO6CXCL6SEQIDNO7CXCL7SEQIDNO8CXCL8SEQIDNO9CXCR4SEQIDNO10CXCL12SEQIDNO11CXCR5ASEQIDNO12CXCR5BSEQIDNO13CXCL13SEQIDNO14CXCR6SEQIDNO15CXCL16SEQIDNO16CCL16SEQIDNO17CCL25SEQIDNO18CCL251SEQIDNO19CCL252SEQIDNO20CX3CR1SEQIDNO21andCX3CL1SEQIDNO22cDNA配列は既知でありかつNIH-NCBIGenBankにおいて以下の受入番号の下で利用可能である:CXCR1SEQIDNO23CXCR2SEQIDNO24CXCL1SEQIDNO25CXCL2SEQIDNO26CXCL3SEQIDNO27CXCL5SEQIDNO28CXCL6SEQIDNO29CXCL7SEQIDNO30CXCL8SEQIDNO31CXCR4SEQIDNO32CXCL12SEQIDNO33CXCR5ASEQIDNO34CXCR5BSEQIDNO35CXCL13SEQIDNO36CXCR6SEQIDNO37CXCL16SEQIDNO38CCL16SEQIDNO39CCL25SEQIDNO40CCL251SEQIDNO41CCL252SEQIDNO42CX3CR1SEQIDNO43andCX3CL1SEQIDNO44以下の表に示すように、大半が何らかの腫瘍が発現する個別のケモカインは変動しうる。本願の方法は、個別の患者に対し、患者自身の腫瘍において過剰発現されるケモカインに応じてカスタマイズしうる。本願の方法を用いて、腫瘍において過剰発現される個別のケモカインを同定し、かつその過剰発現されたケモカインに対する抗体を投与することが可能である。癌患者に合わせた治療の調節は新規であり、かつ本願の特に有益な態様である。表1は、検討した個別の腫瘍において過剰発現された個別のケモカインの種々の量を示す。PCa化学療法抵抗性に関与するCCR9-CCL25誘発性抗アポトーシスおよび/または生存シグナルLNCaPホルモン反応性、野生型p53発現、PC3ホルモン抵抗性、p53完全欠損、およびDU145ホルモン抵抗性、p53変異細胞株を、CCL25を添加または無添加で、かつドキソルビシン1μM/2μM/4μM、エトポシド20μM/40μM、エストラムスチン4μM/10μM、またはドセタキセル10nM/20nM/40nMを添加または無添加で4、8、12、および24時間増殖させる。細胞生存、プロアポトーシスおよび抗アポトーシスシグナルAkt、Src、CamKII、FAK、FKHR、FOXO、CREB、NF-κB、Myc、Fos、JunApaf1、Bax、Bcl2、BclXL、BaK、Bad、Bik、Bim、TP53、カスパーゼ-3、-6、-8、-9、サバイビン、ビトロネクチン、β-カテニン、および薬剤耐性または代謝を担う分子Twist-1、Snail-1、グルタチオン-S-トランスフェラーゼ-πGST-π、p53、トポイソメラーゼI、IIα、IIβ、およびABC薬物輸送体の発現および活性化を、リアルタイムPCRおよびウェスタンブロッティングで評価する。簡潔に述べると、細胞処理後にリアルタイムPCRを用いて遺伝子発現の変化を試験する。シグナリング分子の活性化も、リン酸化特異性抗体すなわちウェスタンブロット分析によって試験する。活性化シグナリング分子の役割をさらに確認するため、CCL25処理後に、化学的阻害物質またはsiRNAを用いて候補分子の発現または活性を阻害し、また標的遺伝子をリアルタイムPCRおよびウェスタンブロット分析で分析する。その後、化学療法剤に対する処理細胞の反応をVybrantアポトーシス測定Molecularprobesキットで評価する。RNA分離およびリアルタイムPCRTRIZOL登録商標インビトロジェン法で総RNAを分離し、紫外線分光測定によって定量する。電気泳動法によりRNAの品質を分析する。ISCRIPT登録商標cDNA合成キットBioRadをメーカーの記載する通りに用いてcDNA合成を完遂する。IQ登録商標SYBRグリーンスーパーミックスBioRadをメーカーの記載する通りに用い、さらにFAK、FKHR、FOXO、Apaf1、Bax、Bcl2、BclXL、BaK、Bad、Bid、XIAP、Bik、Bim、TP53、チトクロームC、カスパーゼ-3、-6、-8、-9、サバイビン、ラミン、CamKII、ビトロネクチン、β-カテニン、カドヘリン、Twist-1、Snail-1、CREB、NF-κB、Myc、Fos、Jun、β-アクチンおよびGAPDHに対して設計された特異的プライマーを用いてリアルタイムPCRを実施する。結果をΔΔCt法によって算出し、非処理群に対するmRNA変化が何倍かを定量する。ウェスタンブロッティング細胞を回収し、溶解緩衝液に再懸濁して総タンパク質を抽出する。溶解緩衝液は、50mMTris-HCl、pH7.4、150mMNaCl、1TritonX-100、1デオキシコール酸、0.1SDS、5mMEDTAを含有し、プロテアーゼ阻害剤、1mMフッ化フェニルメチルスルフォニル、1mMベンズアミジン、10μg/mL大豆トリプシン阻害剤、50μg/mLロイペプチン、1μg/mLペプスタチンおよび20μg/mLアプロチニンを添加する。細胞溶解液を氷上で30分間保存し、4°Cで20分間遠心分離し14000×g、さらに上清をmRNAレベルの有意なモジュレーションを示す遺伝子のウェスタンブロット分析に用いる。同様に、蛍光体特異性抗体を用いてAkt1/2/3、mTOR、FAK、FKHR、FOXO、およびGSK-3βのリン酸化のレベルの変化を試験する。さらに、特異抗体を用いて開裂後のカスパーゼおよびPARPの活性化を評価する。ECLプラス試薬PharmeciaによるX線フィルム上でのタンパク質バンドの化学発光検出後に得られた結果を、ImageJ画像分析ソフトウェアNIHを用いてβアクチンおよび/またはGAPDHに対して正規化する。チトクロームC放出の検出細胞を採取し、さらにPBSで洗浄し、さらに220mMマンニトール、68mMショ糖、50mMPIPES-KOH、pH7.4、50mMKCl、5mMEGTA、2mMMgCl2、1mMDTT、およびプロテアーゼ阻害剤を含有する抽出緩衝液に再懸濁する。氷上で30分間インキュベートした後、Glass-Teflonホモジナイザーを用いて細胞をホモジナイズし、さらにホモジネートを14,000gで15分間遠心分離する。サイトゾルの抽出物を、抗チトクロームCモノクローナル抗体PharMingenを用いたウェスタンブロット分析に用いる。siRNAトランスフェクション、化学的阻害剤、およびアポトーシス検出前立腺癌細胞株を、LipofectAMINE2000インビトロジェンを用いて遺伝子特異性および非特異性対照siRNADharmaconによってトランスフェクトする。至適な遺伝子ノックダウン時間およびsiRNA濃度をウェスタンブロット分析で確認し、またCXCL16、対照抗体、および/または抗CXCR6抗体を用いて、または用いずに薬剤処理した後の細胞の生存についてさらに評価する。生存、アポトーシス、および壊死細胞の変化の検出は以下のように評価する:細胞の生存は、FACScanフローサイトメーターおよびCellQuest登録商標ソフトウェアBDPharmingenを用い、VybrantapoptosisによってメーカーMolecularprobeの記載通りに試験する。遺伝子ノックダウン後の下流遺伝子発現の変化は、リアルタイムPCRおよびウェスタンブロッティングを用いて試験する。CCL25で処理した細胞は細胞生存および薬物輸送体タンパク質の発現の亢進を示し、これはホルモン反応性および非反応性細胞においてその発現パターンの差を示す。抗CCL25AbはPCa細胞においてCCL25の効果を有効に反転させる。ドキソルビシン、エストラムスチン、エトポシドおよびドセタキセルは、CCL25処理またはCCR9遮断していないPCa細胞においてアポトーシスを誘導する。ABC薬物輸送体におけるCCR9-CCL25誘導性変化LNCaP、PC3、およびDU145細胞を、CCL25、抗CCL25抗体、対照抗体、および/または抗-CCR9抗体を添加または無添加で、ドキソルビシン、エストラムスチン、エトポシド、またはドセタキセルと共にまたはこれを加えずに、前述の通りに4、8、12または16時間増殖させる。処理後、ABC輸送体およびTwist-1のmRNA発現の変化を、ABCおよびTwist-1cDNAに向けられた特異的プライマーを用いて、上述の通りにリアルタイムPCRで定量する。mRNA発現の有意な変化を示す遺伝子をウェスタンブロット分析でさらに試験する。処理細胞に由来する核抽出物をクロマチン免疫沈降ChIP測定によって評価し、CXCL16結合によって誘導される転写因子がABC輸送体およびTwist-1のプロモーター領域と結合するか判定する。クロマチン免疫沈降ChIP実施例4の結果は、調節される遺伝子、さらにはCCR9-CCL25相互作用によって活性化される転写因子をモジュレートしうる遺伝子についての情報を提供する。これらの結果に基づき、標的転写因子および遺伝子を選択する。特異的PCRプライマーを、転写因子の結合部位を含むこれらの遺伝子のプロモーター領域に対して設計する。PCRプライマーを用いて、転写因子と共に沈殿するDNAを増幅する。20mM酪酸塩の存在下で細胞をトリプシン処理により回収する。50,000個の細胞をPBS/酪酸500μLに再懸濁する。1ホルムアルデヒドを用いてタンパク質とDNAを室温で8分間架橋し、さらに125mMグリシンを5分間用いて架橋を停止する。細胞をソフト減速条件のスイングアウトローターで4°C、470gで10分間遠心分離し、氷冷PBS/酪酸0.5mL中でボルテックス振盪したのち遠心分離して2回洗う。溶解緩衝液50mMTrisHCl、pH8、10mMEDTA、1SDS、プロテアーゼ阻害剤カクテルシグマアルドリッチ、1mMPMSF、20mM酪酸塩を添加し、ボルテックスで振盪し、またその後遠心分離することにより細胞を溶解する。この手順は、500bpのクロマチンフラグメントを生成することが知られている。超音波処理した溶解物を、プロテアーゼ阻害剤カクテル、1mMPMSFおよび20mM酪酸塩を含有するRIPA緩衝液RIPAChIP緩衝液で8倍希釈する。RIPAChIP緩衝液330μLをペレットに添加し、ボルテックスで混合する。ChIP材料の免疫沈降および洗浄は、特異的転写因子に向けられた抗体の使用によって実現される。抗体ビーズ複合体を収容するチューブにクロマチンを分取する。投入サンプルを、フェノール-クロロホルムイソアミルアルコール分離用チューブに入れる。免疫沈降材料を3回洗い、TE中にある間に新しいチューブに移す。1SDSでのDNA溶離、架橋の逆転およびプロテイナーゼK消化は、68°Cで2時間1段階で実施する。アクリルアミド担体シグマアルドリッチの存在下でフェノール-クロロホルムイソアミルアルコール、およびエタノール沈降によりDNAを抽出し、TEに溶解する。3~4つの独立したChIPから免疫沈降したDNAをリアルタイムPCRで分析する。リアルタイムPCRデータは、3回の独立した再現ChIP分析において、投入DNAに対する沈殿抗体結合DNAの百分率±SDで表示する。CCR9-CCL25シグナリングを介したCREB、Fos、Jun、およびNFkBなどの転写因子のリン酸化および活性化は、その後ABC輸送体およびTwist-1の発現の増大につながる。同じプロモーターに負の調節要素が存在する場合、遺伝子発現の低下が認められる。ホルモン依存性および抵抗性PCa細胞はこれらの細胞内シグナリング分子の発現に差があるので、ホルモン依存性および抵抗性条件によってモジュレートされる遺伝子に多様性を示す。遺伝子発現におけるモジュレーションは、CCL25の存在下とCCL25投与の非存在下で薬物投与による差を示す。CCL25指向的治療法のインビボ評価雄性ヌードマウスを、ルシフェラーゼ発現アンドロゲン反応性LNCaP-Lucおよび非反応性PC3-Luc細胞で皮下攻撃する。インビボ撮像システムを用いて腫瘍の発達を非侵襲的に測定する。測定可能な腫瘍の確立後、マウスを投与群A、B、C、DおよびEと対照群F、G、H、I、JおよびKに分ける。A群にはCCL25中和抗体12.5mg/kg/日を1日おきに投与し、また対照F群にはアイソタイプ対照抗体を投与する12.5mg/kg/日。B、C、DおよびE群にはCCL25中和抗体12.5mg/kg/日を、それぞれドキソルビシン腹腔内注射1から3日目、その後15日目から17日目に5mg/kg/日投与、エトポシド静脈内注射10mg/kg/日;1、5、9、14、19および24日目、エストラムスチン静脈内注射1~5日目および26~31日目に4mg/kg/日投与、またはドセタキセル腹腔内注射8mg/kg/日で週2回4週間と共に投与する。これらの投与群の対照それぞれG、H、IおよびJには、これらの薬剤を同様の濃度および注射プロトコルを用いてアイソタイプ対照抗体12.5mg/kg/日と共に投与する。K群にはPBSを投与し、プラセボとなる。投与および対照の腫瘍進行および退縮をインビボ撮像で非侵襲的に評価する。投与群および非投与群から腫瘍を切除し、免疫組織化学検査によって細胞生存および薬剤抵抗性タンパク質の変化について評価する。本願で用いられる文脈においては、用語CCL25中和抗体は抗CCL25抗体および/または抗CCR9抗体を意味する。統計有意性およびサンプルサイズサンプルサイズまたは検定力の算出は予備試験の設計および提案された実験の要件を判定することにとって重要である。我々の結果を解釈するためには、有意性検定および統計分析も重要である。従来のα値、すなわちp=0.01を用いて本試験の統計的有意性を評価する。提案された実験は、各群最小10匹のマウスを必要とするであろう。データは平均±SEMで表示され、かつ正規分布サンプルについては両側対または非対スチューデントt-検定を、または正規分布しないサンプルについてはノンパラメトリック検定として非対マンホイットニーU検定により比較する。結果は、SYSTATSystatsoftware社統計プログラムを用いて分析する。一因子および二因子分散ANOVA分析を用いて、それぞれ群およびサブグループを評価する。したがって、結果はp値が<0.05である場合に統計的に有意とみなす。動物週齢6から8週間の雄性ヌードマウスにPCa細胞を皮下注射する。簡潔に述べると、5×106個のルシフェラーゼ発現PC3細胞を無菌PBS100μLに再懸濁し、イソフルラン麻酔下でヌードマウスの側腹部に注射する。ルシフェラーゼ発現LNCaP細胞5×106個を50Matrigelベクトンディッキンソンと混合し、イソフルラン麻酔下でヌードマウスの側腹部に注射する。インビボ腫瘍増殖の分析腫瘍担持ヌードマウスに、撮像の15分前に25×5/8ゲージ針を用いた腹腔内注射によりD-ルシフェリンXenogen150mg/kgを投与する。マウスはIVIS100インビボ撮像システムを用いて撮像し、結果を光子/秒/cm2/srで表示する。腫瘍体積はノギスを用いて測定し、式長径×短径2×0.5で算出する。細胞生存、アポトーシスおよび薬剤耐性遺伝子発現分析投与プロトコル完了の3日後に全群から腫瘍を切除する。腫瘍を4PFAで固定し、さらにパラフィン包埋する。パラフィン切片厚さ7μmをガラススライドに載置し、脱パラフィンし、さらに再水和するキシレンで5分、無水エタノール、95エタノールおよび70エタノールで1分ずつ。再水和した切片を用いて、薬物輸送体、PI3K、Akt、FAK、FKHR、FOXO、Apaf1、Bax、Bcl2、BclXL、BaK、Bad、Bid、XIAP、Bik、Bim、TP53、チトクロームC、カスパーゼ-3、-6、-8、-9、サバイビン、ラミン、CamKII、ビトロネクチン、β-カテニン、カドヘリン、Twist-1、CREB、NF-κB、Myc、Fos、Jun、CCR9およびCCL25について、ペルオキシダーゼベースで免疫組織化学染色する。染色後、スライドをAperioスキャンスコープAperioシステムによりスキャンおよび分析する。CXCL13中和は、薬剤に反応した細胞生存の低下による腫瘍体積の減少につながる。しかし、形成される腫瘍の間でも反応はホルモン感受性LNCaPおよびホルモン抵抗性PC3細胞によって異なる。さらに、化学療法剤は機能的CCR9-CCL25軸を有する腫瘍においては効果が低く、これによりこれらの薬剤を細胞外に輸送することが知られているABCタンパク質の発現が亢進しうる。上の記述は、当業者に対して本発明を実践する方法を教示することを目的とし、かつ記述を読めば当業者に対してすぐに明らかになるそれら全ての明白な変更およびその変法を詳述することを意図していない。しかし、そうした全ての明白な変更および変法が本発明の範囲に含まれることが意図され、それは以下の請求項によって定義される。請求項は、文脈が具体的にそうでないと示さなければ、そこで意図される目的に合致するために効果的な要素および段階を任意の順番で包含することを意図する。本明細書に引用された全ての参照文献は、その全文を本願に参照文献として援用する。"