式のコンジュゲート、並びにその塩及び溶媒和物式中、点線は、C1とC2との間又はC2とC3との間の二重結合の任意の存在を示し、R2は、H、OH、O、CH2、CN、R、OR、CHRD、C2、OSO2R、CO2R及びCORから独立して選択され、ハロ又はジハロからさらに選択されてもよく、ここで、RDは、R、CO2R、COR、CHO、CO2H及びハロから独立して選択され、R6及びR9は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R7は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R8は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R10は、細胞結合剤に接続されているリンカーであり、Qは、O、S及びNHから独立して選択され、R11は、H若しくはRのいずれかであるか、又はQがOである場合にはSO3Mであり、ここで、Mは金属カチオンであり、R及びRは、置換されていてもよいC1~12アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基及びC5~20アリール基からそれぞれ独立して選択され、場合によりNRR基に関連して、R及びRは、それらが結合している窒素原子と一緒に、置換されていてもよい4員、5員、6員又は7員の複素環を形成し、又はR6からR9の隣接基の任意のペアは一緒に、OpO基を形成し、ここで、pは1又は2であり、又は前記化合物は、各単量体が式であるか、又は一方の単量体が式であり、他方が式である二量体でありの化合物に従って定義されている通りであり、各単量体のR7基又はR8基は、単量体を連結する式XRXを有する二量体架橋を一緒に形成し、ここで、RはC3~12アルキレン基であり、その鎖は1個又は複数のヘテロ原子、例えばO、S、N、NMe、及び又は環がNH2によって置換されていてもよい芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてよく、各XはO、S又はNである、ここで、前記化合物が、各単量体が式である二量体である場合、単量体の一方のR10基はキャッピング基RCであるか、若しくは細胞結合剤に接続されているリンカーであるかのいずれかである。R10が、N10C11イミン結合を残すようにN10位から除去可能である、請求項1に記載のコンジュゲート。R10が以下の基である、請求項1又は請求項2のいずれか一項に記載のコンジュゲート式中、アスタリスクはN10位への結合点を示し、CBAは細胞結合剤であり、L1は切断可能なリンカーであり、AはL1を細胞結合剤に接続する接続基であり、L2は共有結合であるか、又はOCと一緒に自己犠牲リンカーを形成する。L1が酵素で切断可能である、請求項5に記載のコンジュゲート。L1がアミノ酸の連続配列を含む、請求項3又は請求項4に記載のコンジュゲート。L1がジペプチドを含み、ジペプチドNHX1X2CO中のX1X2基が、PheLys、ValAla、ValLys、AlaLys、ValCit、PheCit、LeuCit、IleCit、PheArg、TrpCitから選択される、請求項5に記載のコンジュゲート。ジペプチドNHX1X2CO中のX1X2基が、PheLys、ValAla、ValLys、AlaLys、ValCitから選択される、請求項6に記載のコンジュゲート。ジペプチドNHX1X2CO中のX1X2基が、PheLys、ValAla又はValCitである、請求項7に記載のコンジュゲート。X2CO基がL2に接続されている、請求項6から8のいずれか一項に記載のコンジュゲート。NHX1基がAに接続されている、請求項6から9のいずれか一項に記載のコンジュゲート。L2がOCと一緒に自己犠牲リンカーを形成する、請求項6から10のいずれか一項に記載のコンジュゲート。CO及びL2が一緒に以下の基を形成する、請求項11に記載のコンジュゲート式中、アスタリスクはN10位への結合点を示し、波線はリンカーL1への結合点を示し、YはNH、O、CNH又はCOであり、nは0から3である。YがNHである、請求項12に記載のコンジュゲート。nが0である、請求項12又は請求項13に記載のコンジュゲート。L1及びL2がOCと一緒に、式中、アスタリスクはN10位への結合点を示し、波線はリンカーL1の残りの部分への結合点又はAへの結合点を示すから選択される基を含む、請求項3に記載のコンジュゲート。波線がAへの結合点を示す、請求項15に記載のコンジュゲート。Aが、式中、アスタリスクはL1への結合点を示し、波線は細胞結合剤への結合点を示し、nは0から6である、又は式中、アスタリスクはL1への結合点を示し、波線は細胞結合剤への結合点を示し、nは0又は1であり、mは0から30であるである、請求項3から16のいずれか一項に記載のコンジュゲート。細胞結合剤が、細胞結合剤のシステインチオール残基及びAのマレミド基から形成されるチオエーテル結合を介してAに接続されている、請求項3から17のいずれか一項に記載のコンジュゲート。R10の細胞結合剤が抗体又はその活性断片である、請求項1から18のいずれか一項に記載のコンジュゲート。抗体又は抗体断片が腫瘍関連抗原に対する抗体又は抗体断片である、請求項19に記載のコンジュゲート。R9が独立してHである、請求項1から20のいずれか一項に記載のコンジュゲート。R6が独立してHである、請求項1から21のいずれか一項に記載のコンジュゲート。R7が独立してOR7Aであり、ここでR7Aが独立して、置換されていてもよいC1~4アルキルである、請求項1から22のいずれか一項に記載のコンジュゲート。R7AがMeである、請求項23に記載のコンジュゲート。XがOである、請求項1から24のいずれか一項に記載のコンジュゲート。R11がHである、請求項1から25のいずれか一項に記載のコンジュゲート。点線がC2とC3との間の二重結合の任意の存在を示す、請求項1から26のいずれか一項に記載のコンジュゲート。R2がH、O、CH2、R、CHRD及びC2から独立して選択される、請求項1から27のいずれか一項に記載のコンジュゲート。R2が独立してCH2である、請求項28のいずれか一項に記載のコンジュゲート。R2が独立してRである、請求項28のいずれか一項に記載のコンジュゲート。R2が独立して、置換されていてもよいC5~20アリールである、請求項30のいずれか一項に記載のコンジュゲート。コンジュゲートが二量体であり、各単量体のR8基が二量体架橋を一緒に形成する、請求項1から31のいずれか一項に記載のコンジュゲート。RがC3アルキレン基又はC5アルキレン基である、請求項32に記載のコンジュゲート。コンジュゲートが、一方の単量体が式であり、他方が式である二量体であり、前記化合物が下記に示される構造を有する、請求項32又は請求項33に記載のコンジュゲート式中、R2、R6、R7、R9、X及びR11は、それぞれR2、R6、R7、R9、X及びR11に従って定義されている通りである。コンジュゲートが、各単量体が式である二量体であり、前記化合物が下記に示される構造を有する、請求項32又は請求項33に記載のコンジュゲート式中、R2、R6、R7、R9、R10、X、Q及びR11は、それぞれR2、R6、R7、R9、R10、X及びR11に従って定義されている通りである。コンジュゲートが、各単量体が式である二量体であり、前記化合物が下記に示される構造を有する、請求項32又は請求項33に記載のコンジュゲート式中、R2、R6、R7、R9、X、Q及びR11は、それぞれR2、R6、R7、R9、X、及びR11に従って定義されている通りであり、RCはキャッピング基である。RCが、N10C11イミン結合を残すようにN10位から除去可能である、請求項36に記載のコンジュゲート。RCがAllocFmocBocTrocTeocPsecCbzPNZから選択されるカルバメート保護基である、請求項37に記載のコンジュゲート。RCが以下の基である、請求項37に記載のコンジュゲート式中、アスタリスクはN10位への結合点を示し、G2は終端基であり、L3は共有結合又は切断可能なリンカーL1であり、L2は共有結合であるか、又はOCと一緒に自己犠牲リンカーを形成する。L3が切断可能なリンカーL1であり、請求項4から9のいずれか一項で定義されている、請求項39に記載のコンジュゲート。L2がOCと一緒に自己犠牲リンカーを形成し、自己犠牲リンカーが請求項12から14のいずれか一項で定義されている通りである、請求項39又は請求項40に記載のコンジュゲート。G2がAc又はMocであるか、又はAllocFmocBocTrocTeocPsecCbzPNZから選択されるカルバメート保護基である、請求項39から41のいずれか一項に記載のコンジュゲート。治療における使用のための、請求項1から42のいずれか一項に記載のコンジュゲート。対象における増殖性疾患の治療における使用のための、請求項1から42のいずれか一項に記載のコンジュゲート。前記疾患が癌である、請求項44に記載のコンジュゲート。式Abp式中、Abは、リンカー部分によって式PBD薬物部分に結合されている抗体であり、pは1から約8の整数であるを有する、請求項1から45のいずれか一項に記載のコンジュゲート。Abが、以下の~から選択される一つ又は複数の腫瘍関連抗原又は細胞表面受容体に結合する抗体である、請求項46に記載のコンジュゲートBMPR1B、E16、STEAP1、0772P、MPF、Napi3b、メンバー2、II型ナトリウム依存性リン酸輸送体3b、Sema5b、膜貫通ドメイン及び短い細胞質ドメイン、5B、PSCAhlg、ETBR、MSG783、STEAP2、TrpM4、CRIPTO、CD21又はC3DR又はHs73792、CD79b、B29、FcRH2、SPAP1B、SPAP1C、HER2、NCA、MDP、IL20Rα、ブレビカン、EphB2R、ASLG659、PSCA、GEDA、BAFFR、CD22、CD79a、CXCR5、HLADOB、P2X5、CD72、LY64、ロイシンリッチリピートファミリーのI型膜タンパク質、FcRH1、IRTA2、及びTENB2。Abがシステイン操作抗体である、請求項46に記載のコンジュゲート。AbがErbB受容体に結合する抗体である、請求項46又は請求項47のいずれかに記載のコンジュゲート。Abがトラスツズマブである、請求項49に記載のコンジュゲート。Abが抗HER2、抗Steap1又は抗CD22抗体である、請求項46又は請求項47のいずれかに記載のコンジュゲート。pが1、2、3又は4である、請求項46から51のいずれか一項に記載のコンジュゲート。抗体薬物コンジュゲート化合物の混合物を含み、前記抗体薬物コンジュゲート化合物の混合物中の1抗体当たりの平均薬物負荷が約2から約5である、請求項46から52のいずれか一項に記載のコンジュゲート。以下から選択される式を有する、請求項46から53のいずれか一項に記載のコンジュゲート式中、nは1から24の整数である。nが1から12の整数である、請求項54に記載のコンジュゲート。nが4又は8である、請求項55に記載のコンジュゲート。請求項1から56のいずれか一項に記載のコンジュゲート、薬学的に許容される希釈剤、担体又は賦形剤を含む医薬組成物。治療有効量の化学療法剤をさらに含む、請求項57に記載の医薬組成物。対象における増殖性疾患の治療に使用するための薬物の調製における、請求項1から56のいずれか一項に記載のコンジュゲートの使用。請求項57に記載の医薬組成物を患者に投与するステップを含む、癌を治療する方法。患者が、前記コンジュゲートと組み合わせて化学療法剤を投与される、請求項60に記載の方法。標的位置で式の化合物を提供するための、請求項1から56のいずれか一項に記載のコンジュゲート並びにその塩及び溶媒和物の使用式中、点線は、C1とC2との間又はC2とC3との間の二重結合の任意の存在を示し、R2は、H、OH、O、CH2、CN、R、OR、CHRD、C2、OSO2R、CO2R及びCORから独立して選択され、ハロ又はジハロからさらに選択されてもよく、ここで、RDは、R、CO2R、COR、CHO、CO2H及びハロから独立して選択され、R6及びR9は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R7は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R8は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R及びRは、置換されていてもよいC1~12アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基及びC5~20アリール基からそれぞれ独立して選択され、場合によりNRR基に関連して、R及びRはそれらが結合している窒素原子と一緒に、置換されていてもよい4員、5員、6員又は7員の複素環を形成し、又はR6からR9の隣接基の任意のペアは一緒に、OpO基を形成し、ここで、pは1又は2であり、又は前記化合物は、各単量体が式である二量体であり、各単量体のR7基又はR8基は、単量体を連結する式XRXを有する二量体架橋を一緒に形成し、ここで、RはC3~12アルキレン基であり、この鎖は1個又は複数のヘテロ原子、例えばO、S、N、NMe、及び又は環がNH2によって置換されていてもよい芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてよく、各XはO、S又はNである。標的位置が増殖性細胞集団である、請求項62に記載の使用。標的位置で式の化合物を提供する、請求項1から56のいずれか一項に記載のコンジュゲート並びにその塩及び溶媒和物の使用式中、点線は、C1とC2との間又はC2とC3との間の二重結合の任意の存在を示し、R2は、H、OH、O、CH2、CN、R、OR、CHRD、C2、OSO2R、CO2R及びCORから独立して選択され、ハロ又はジハロからさらに選択されてもよく、ここで、RDは、R、CO2R、COR、CHO、CO2H及びハロから独立して選択され、R6及びR9は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R7は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R8は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、Qは、O、S及びNHから独立して選択され、R11はH若しくはRのいずれかであるか、又はQがOである場合にはR11はSO3Mであり、ここで、Mは金属カチオンであり、R及びRは、置換されていてもよいC1~12アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基及びC5~20アリール基からそれぞれ独立して選択され、場合によりNRR基に関連して、R及びRは、それらが結合している窒素原子と一緒に、置換されていてもよい4員、5員、6員又は7員の複素環を形成し、又は化合物は、各単量体が式であるか、又は一方の単量体が式であり、他方が式である二量体であり、各単量体のR7基又はR8基は、単量体を連結する式XRXを有する二量体架橋を一緒に形成し、ここで、RはC3~12アルキレン基であり、その鎖は1個又は複数のヘテロ原子、例えばO、S、N、NMe、及び又は環がNH2によって置換されていてもよい芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてよく、各XはO、S又はNであり、又はR6からR9の隣接基の任意のペアは一緒に、OpO基を形成し、ここで、pは1又は2であり、ここで、式の単量体単位は、請求項58で定義されている通りである。式の化合物、並びにその塩及び溶媒和物式中、点線は、C1とC2との間又はC2とC3との間の二重結合の任意の存在を示し、R2は、H、OH、O、CH2、CN、R、OR、CHRD、C2、OSO2R、CO2R及びCORから独立して選択され、ハロ又はジハロからさらに選択されてもよく、ここで、RDは、R、CO2R、COR、CHO、CO2H及びハロから独立して選択され、R6及びR9は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R7は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R8は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、RLは、細胞結合剤への接続のためのリンカーであり、Qは、O、S及びNHから独立して選択され、R11はH若しくはRのいずれかであるか、又はQがOである場合にはR11はSO3Mであり、ここで、Mは金属カチオンであり、R及びRは、置換されていてもよいC1~12アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基及びC5~20アリール基からそれぞれ独立して選択され、場合によりNRR基に関連して、R及びRは、それらが結合している窒素原子と一緒に、置換されていてもよい4員、5員、6員又は7員の複素環を形成し、又はR6からR9の隣接基の任意のペアは一緒に、OpO基を形成し、ここで、pは1又は2であり、又は前記化合物は、各単量体が式であるか、又は一方の単量体が式であり、他方が式である二量体でありの化合物に従って定義されている通りであり、各単量体のR7基又はR8基は、単量体を連結する式XRXを有する二量体架橋を一緒に形成し、ここで、RはC3~12アルキレン基であり、この鎖は1個又は複数のヘテロ原子、例えばO、S、N、NMe、及び又は環がNH2によって置換されていてもよい芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてよく、各XはO、S又はNである、ここで、前記化合物が、各単量体が式である二量体である場合、単量体の一方のRL基はキャッピング基RCであるか、又は細胞結合剤への接続のためのリンカーであるかのいずれかである。以下の構造を有する請求項65に記載の化合物式中、nは1から24の整数である。nが1から12の整数である、請求項66に記載の化合物。nが4又は8である、請求項67に記載の化合物。以下の構造を有する、請求項65に記載の化合物式中、nは1から24の整数である。nが1から12の整数である、請求項69に記載の化合物。nが4又は8である、請求項70に記載の化合物。以下の構造を有する、請求項65に記載の化合物式中、nは1から24の整数である。nが1から12の整数である、請求項72に記載の化合物。nが4又は8である、請求項73に記載の化合物。以下から選択される、請求項65に記載の化合物。細胞結合剤を、請求項65から75のいずれか一項に記載の化合物と反応させるステップを含む、請求項1から56のいずれか一項に記載のコンジュゲートを調製する方法。請求項57に記載の医薬組成物、容器、及び前記医薬組成物が癌を治療するために使用され得ることを示す添付文書又はラベルを含む製造品。本発明者らは、細胞結合剤とのPBDコンジュゲート、及び特にPBD抗体コンジュゲートを形成するための新規な手法を開発した。一般の態様において、本発明は、N10位を通りリンカーを介して細胞結合剤に接続されているPBD化合物を含むコンジュゲートを提供する。該リンカーは不安定リンカーであり、酵素不安定リンカーであり得る。該細胞結合剤は、好ましくは抗体である。一実施形態において、コンジュゲートは、スペーサーに接続されている細胞結合剤、トリガーに接続されているスペーサー、自己犠牲リンカーに接続されているトリガー、及びPBD化合物のN10位に接続されている自己犠牲リンカーを含む。第一態様において、本発明は、以下の式の新規なコンジュゲート化合物並びにそれらの塩及び溶媒和物を提供し、式中、点線は、C1とC2との間又はC2とC3との間の二重結合の任意の存在を示し、R2は、H、OH、O、CH2、CN、R、OR、CHRD、C2、OSO2R、CO2R及びCORから独立して選択され、ハロ又はジハロからさらに選択されていてもよく、ここで、RDは、R、CO2R、COR、CHO、CO2H及びハロから独立して選択され、R6及びR9は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R7は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R8は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R10は、細胞結合剤に接続されているリンカーであり、Qは、O、S及びNHから独立して選択され、R11は、H若しくはRのいずれかであるか、又はQがOである場合にはSO3Mであり、ここで、Mは金属カチオンであり、R及びRは、置換されていてもよいC1~12アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基及びC5~20アリール基からそれぞれ独立して選択され、任意選択によりNRR基に関連して、R及びRは、それらが結合している窒素原子と一緒に、置換されていてもよい4員、5員、6員又は7員の複素環を形成し、又はR6からR9の隣接基の任意のペアは一緒に、OpO基を形成し、ここで、pは1又は2であり、又は前記化合物は、各単量体が式であるか、又は一方の単量体が式であり、他方が式である二量体でありの化合物に従って定義されている通りであり、各単量体のR7基又はR8基は、単量体を連結する式XRXを有する二量体架橋を一緒に形成し、ここで、RはC3~12アルキレン基であり、その鎖は1個又は複数のヘテロ原子、例えばO、S、N、NMe、及び又は環が置換されていてもよい芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてよく、各XはO、S又はNである、ここで、前記化合物が、各単量体が式である二量体である場合、単量体の一方のR10基はキャッピング基RCであるか、又は細胞結合剤に接続されているリンカーであるかのいずれかである。誤解を回避するため、該細胞結合剤はR10基の一部である。本発明は、標的位置における、以下の式の化合物並びにその塩及び溶媒和物を提供するためのコンジュゲートの使用にも関し、式中、点線は、C1とC2との間又はC2とC3との間の二重結合の任意の存在を示し、R2は、H、OH、O、CH2、CN、R、OR、CHRD、C2、OSO2R、CO2R及びCORから独立して選択され、ハロ又はジハロからさらに選択されていてもよく、ここで、RDは、R、CO2R、COR、CHO、CO2H及びハロから独立して選択され、R6及びR9は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R7は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R8は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R及びRは、置換されていてもよいC1~12アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基及びC5~20アリール基から独立して選択され、任意選択によりNRR基に関連して、R及びRはそれらが結合している窒素原子と一緒に、置換されていてもよい4員、5員、6員又は7員の複素環を形成し、又はR6からR9の隣接基の任意のペアは一緒に、OpO基を形成し、ここで、pは1又は2であり、又は前記化合物は、各単量体が式である二量体であり、各単量体のR7基又はR8基が、単量体を連結する式XRXを有する二量体架橋を一緒に形成し、ここで、RはC3~12アルキレン基であり、この鎖は1個又は複数のヘテロ原子、例えばO、S、N、NMe、及び又は環がNH2によって置換されていてもよい芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてよく、各XはO、S又はNである。本発明は、標的位置における、以下の式の化合物並びにその塩及び溶媒和物を提供するためのコンジュゲートの使用にも関し、式中、点線は、C1とC2との間又はC2とC3との間の二重結合の任意の存在を示し、R2は、H、OH、O、CH2、CN、R、OR、CHRD、C2、OSO2R、CO2R及びCORから独立して選択され、ハロ又はジハロからさらに選択されていてもよく、ここで、RDは、R、CO2R、COR、CHO、CO2H及びハロから独立して選択され、R6及びR9は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R7は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R8は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、Qは、O、S及びNHから独立して選択され、R11はH若しくはRのいずれかであるか、又はQがOである場合にはR11はSO3Mであり、ここで、Mは金属カチオンであり、R及びRは、置換されていてもよいC1~12アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基及びC5~20アリール基からそれぞれ独立して選択され、任意選択によりNRR基に関連して、R及びRは、それらが結合している窒素原子と一緒に、置換されていてもよい4員、5員、6員又は7員の複素環を形成し、又はR6からR9の隣接基の任意のペアは一緒に、OpO基を形成し、ここで、pは1又は2であり、又は前記化合物は、各単量体が式であるか、又は一方の単量体が式であり、他方が式である二量体であり、各単量体のR7基又はR8基は、単量体を連結する式XRXを有する二量体架橋を一緒に形成し、ここで、RはC3~12アルキレン基であり、その鎖は1個又は複数のヘテロ原子、例えばO、S、N、NMe、及び又は環がNH2によって置換されていてもよい芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてよく、各XはO、S又はNであり、ここで、式の単量体単位は、上記で定義されている通りである。本発明は、本発明のコンジュゲート化合物の調製における使用のための、以下の式の化合物並びにそれらの塩及び溶媒和物にも関し、式中、点線は、C1とC2との間又はC2とC3との間の二重結合の任意の存在を示し、R2は、H、OH、O、CH2、CN、R、OR、CHRD、C2、OSO2R、CO2R及びCORから独立して選択され、ハロ又はジハロからさらに選択されていてもよく、ここで、RDは、R、CO2R、COR、CHO、CO2H及びハロから独立して選択され、R6及びR9は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R7は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R8は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、RLは、細胞結合剤への接続のためのリンカーであり、Qは、O、S及びNHから独立して選択され、R11はH若しくはRのいずれかであるか、又はQがOである場合にはR11はSO3Mであり、ここで、Mは金属カチオンであり、R及びRは、置換されていてもよいC1~12アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基及びC5~20アリール基からそれぞれ独立して選択され、任意選択によりNRR基に関連して、R及びRは、それらが結合している窒素原子と一緒に、置換されていてもよい4員、5員、6員又は7員の複素環を形成し、又はR6からR9の隣接基の任意のペアは一緒に、OpO基を形成し、ここで、pは1又は2であり、又は前記化合物は、各単量体が式であるか、又は一方の単量体が式であり、他方が式である二量体でありの化合物に従って定義されている通りであり、各単量体のR7基又はR8基は、単量体を連結する式XRXを有する二量体架橋を一緒に形成し、ここで、RはC3~12アルキレン基であり、この鎖は1個又は複数のヘテロ原子、例えばO、S、N、NMe、及び又は環がNH2によって置換されていてもよい芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてよく、各XはO、S又はNである、ここで、前記化合物が、各単量体が式である二量体である場合、単量体の一方のRL基がキャッピング基RCであるか、又は細胞結合剤への接続のためのリンカーであるかのいずれかである。別法として、一実施形態において、RはC3~12アルキレン基であり、この鎖は、1個又は複数のヘテロ原子、例えばO、S、N、NMe、及び又は環がNH2によって置換されていてもよい芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてよい。別法として、新規なコンジュゲート化合物は、上記した通りの式及びの化合物から選択することができ、ここで、は、以下の及び並びにそれらの塩及び溶媒和物から選択され、式中、R6、R9、R10、Q、R11、R及びRは、式の化合物に従って定義されている通りであり、R7は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R8は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、或いはR6からR9の隣接基の任意のペアは、一緒にOpO基を形成し、ここで、pは1又は2であり、R1又はR3のいずれかと一緒のR2は、それらが結合しているC環の炭素原子と一緒に、置換されていてもよいベンゼン環を形成し、V及びWは、n、O、S、NR、CHR、及びCRRからそれぞれ選択され、ここで、nは1、2又は3であり、ただし、R1及びR2が、それらが結合しているC環の炭素原子と一緒に、置換されていてもよいベンゼン環を形成する場合にはVがCであることを除き、並びにR3及びR2が、それらが結合しているC環の炭素原子と一緒に、置換されていてもよいベンゼン環を形成する場合にはWがCであることを除き、Tは、CH2、NR、CO、BH、SO及びSO2から選択され、Uは、CH2、NR、O及びSから選択され、Yはnであり、ここで、nは1、2、3又は4であり、ただし、T、U及びYが全てCH2でないことを除き、又は該化合物は、各単量体が式であるか、各単量体が式であるか、一方の単量体が式であり、他方が上記した通りの式若しくはであるか、又は一方の単量体が式であり、他方が式又はであり、が、以下の及びから選択される二量体であり、式中、R1、R2、R3、R6、R9、R7及びR8は、式の化合物に従って定義されている通りであり、各単量体のR7基又はR8基は、該単量体を連結する式XRXを有する二量体架橋を一緒に形成し、ここで、RはC3~12アルキレン基であり、この鎖は、1個又は複数のヘテロ原子、例えばO、S、N、NMe、及び又は環がNH2によって置換されていてもよい芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてよく、各XはO、S又はNであり、ここで、該化合物が、各単量体が式及び又は式である二量体である場合、該単量体の一方におけるR10基は、キャッピング基RCであるか、又は細胞結合剤に接続されているリンカーであるかのいずれかである。便宜上、Aに対する全ての言及は、AIに適用することができ、Bに対する全ての言及は、BIに適用することができる。C、D及びEに対する同様の言及も、必要に応じて、、及びに関する。別法として、コンジュゲートを使用することで、標的位置に化合物を提供することができ、ここで、該化合物は、上記した通りの式、又はの化合物であり、ここで、は、以下の及び並びにその塩及び溶媒和物から選択され、式中、R6、R9、R及びRは、式の化合物に従って定義されている通りであり、R7は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R8は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、又はR6からR9の隣接基の任意のペアは、一緒にOpO基を形成し、ここで、pは1又は2であり、R1又はR3のいずれかと一緒のR2は、それらが結合しているC環の炭素原子と一緒に、置換されていてもよいベンゼン環を形成し、V及びWは、n、O、S、NR、CHR、及びCRRからそれぞれ選択され、ここで、nは1、2又は3であり、ただし、R1及びR2が、それらが結合しているC環の炭素原子と一緒に、置換されていてもよいベンゼン環を形成する場合にはVがCであることを除き、並びにR3及びR2が、それらが結合しているC環の炭素原子と一緒に、置換されていてもよいベンゼン環を形成する場合にはWがCであることを除き、Tは、CH2、NR、CO、BH、SO及びSO2から選択され、Uは、CH2、NR、O及びSから選択され、Yはnであり、ここで、nは1、2、3又は4であり、ただし、T、U及びYが全てCH2でないことを除き、又は該化合物は、各単量体が式であるか、各単量体が式であるか、又は一方の単量体が式であり、他方が式である二量体であり、各単量体のR7基又はR8基は、単量体を連結する式XRXを有する二量体架橋を一緒に形成し、ここで、RはC3~12アルキレン基であり、この鎖は、1個又は複数のヘテロ原子、例えばO、S、N、NMe、及び又は環がNH2によって置換されていてもよい芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてよく、各Xは、O、S又はNである。本発明は、標的位置に化合物を提供するためのコンジュゲートの使用にも関し、ここで、該化合物は、上記した通りの式、又は式の化合物であり、ここで、は、以下の及び並びにその塩及び溶媒和物から選択され、式中、R6、R9、R及びRは、式の化合物に従って定義されている通りであり、R7は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R8は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、又はR6からR9の隣接基の任意のペアは、一緒にOpO基を形成し、ここで、pは1又は2であり、Qは、O、S及びNHから独立して選択され、R11は、H若しくはRのいずれかであるか、又はQがOである場合にはSO3Mであり、ここで、Mは金属カチオンであり、R1又はR3のいずれかと一緒のR2は、それらが結合しているC環の炭素原子と一緒に、置換されていてもよいベンゼン環を形成し、V及びWは、n、O、S、NR、CHR、及びCRRからそれぞれ選択され、ここで、nは1、2又は3であり、ただし、R1及びR2が、それらが結合しているC環の炭素原子と一緒に、置換されていてもよいベンゼン環を形成する場合にはVがCであることを除き、並びにR3及びR2が、それらが結合しているC環の炭素原子と一緒に、置換されていてもよいベンゼン環を形成する場合にはWがCであることを除き、Tは、CH2、NR、CO、BH、SO及びSO2から選択され、Uは、CH2、NR、O及びSから選択され、Yはnであり、ここで、nは1、2、3又は4であり、ただし、T、U及びYが全てCH2でないことを除き、又は前記化合物は、各単量体が式であるか、各単量体が式であるか、又は一方の単量体が式であり、他方が式である二量体であり、各単量体のR7基又はR8基は、該単量体を連結する式XRXを有する二量体架橋を一緒に形成し、ここで、RはC3~12アルキレン基であり、この鎖は、1個又は複数のヘテロ原子、例えばO、S、N、NMe、及び又は環がNH2によって置換されていてもよい芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてよく、各XはO、S又はNである。別法として、本発明は、本発明のコンジュゲート化合物の調製に使用するための、上記した通りの式、及びの化合物も提供し、ここで、は、以下の及び並びにそれらの塩及び溶媒和物から選択され、式中、R6、R9、R及びRは、式の化合物に従って定義されている通りであり、R7は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、R8は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択され、又はR6からR9の隣接基の任意のペアは、一緒にOpO基を形成し、ここで、pは1又は2であり、RLは、細胞結合剤への接続のためのリンカーであり、Qは、O、S及びNHから独立して選択され、R11はH若しくはRのいずれかであるか、又はQがOである場合にはSO3Mであり、ここで、Mは金属カチオンであり、R1又はR3のいずれかと一緒のR2は、それらが結合しているC環の炭素原子と一緒に、置換されていてもよいベンゼン環を形成し、V及びWは、n、O、S、NR、CHR、及びCRRからそれぞれ選択され、ここで、nは1、2又は3であり、ただし、R1及びR2が、それらが結合しているC環の炭素原子と一緒に、置換されていてもよいベンゼン環を形成する場合にはVがCであることを除き、並びにR3及びR2が、それらが結合しているC環の炭素原子と一緒に、置換されていてもよいベンゼン環を形成する場合にはWがCであることを除き、Tは、CH2、NR、CO、BH、SO及びSO2から選択され、Uは、CH2、NR、O及びSから選択され、Yはnであり、ここで、nは1、2、3又は4であり、ただし、T、U及びYが全てCH2でないことを除き、又は前記化合物は、各単量体が式であるか、各単量体が式であるか、又は一方の単量体が式又はであり、他方が式、、又はである二量体であり、各単量体のR7基又はR8基は、該単量体を連結する式XRXを有する二量体架橋を一緒に形成し、ここで、RはC3~12アルキレン基であり、この鎖は、1個又は複数のヘテロ原子、例えばO、S、N、NMe、及び又は環がNH2によって置換されていてもよい芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてよく、各XはO、S又はNである。本発明は、N10位を通りリンカーを介して細胞結合剤に接続されているPBD化合物を含むコンジュゲートを提供する。一実施形態において、コンジュゲートは、スペーサー接続基に接続されている細胞結合剤、トリガーに接続されているスペーサー、自己犠牲リンカーに接続されているトリガー、及びPBD化合物のN10位に接続されている自己犠牲リンカーを含む。こうしたコンジュゲートを下記に例示する。ここで、本明細書に記載されている場合、CBAは細胞結合剤であり、PBDはピロロベンゾジアゼピン化合物である。該例示は、本発明の特定の実施形態におけるR10、A、L1及びL2に対応する部分を示す。本発明は、対象における好ましい部位にPBD化合物を提供する際の使用に適当である。好ましい実施形態において、コンジュゲートは、リンカーのいかなる部分も保持しない活性PBD化合物の放出を可能にする。PBD化合物の反応性に影響し得る切り残りの部分は存在しない。特定の実施形態において、本発明は、細胞結合剤に接続されているリンカーを有するPBD二量体基を含むコンジュゲートを提供する。本発明者らは、こうした二量体コンジュゲートが新規なPBD非対称化技術の使用によって調製されることを可能にする方法を本明細書に記載している。優先以下の優先は、上記した通りの本発明の全ての態様に当てはまり得るか、又は単一の態様に関連し得る。該優先は、任意の組合せにおいて、一緒に組み合わせることができる。二重結合一実施形態において、C1とC2との間及びC2とC3との間に二重結合は存在しない。一実施形態において、点線は、下記に示されている通り、C2とC3との間における二重結合の任意の存在を示す。一実施形態において、二重結合は、R2がC5~20アリール又はC1~12アルキルである場合、C2とC3との間に存在する。一実施形態において、点線は、下記に示されている通り、C1とC2との間における二重結合の任意の存在を示す。一実施形態において、二重結合は、R2がC5~20アリール又はC1~12アルキルである場合、C1とC2との間に存在する。R2一実施形態において、R2は、H、OH、O、CH2、CN、R、OR、CHRD、C2、OSO2R、CO2R及びCORから独立して選択され、さらにハロ又はジハロから選択されていてもよい。一実施形態において、R2は、H、OH、O、CH2、CN、R、OR、CHRD、C2、OSO2R、CO2R及びCORから独立して選択される。一実施形態において、R2は、H、O、CH2、R、CHRD及びC2から独立して選択される。一実施形態において、R2は独立してHである。一実施形態において、R2は独立してOである。一実施形態において、R2は独立してCH2である。一実施形態において、R2は独立してCHRDである。PBD化合物中において、CHRD基は、下記に示されているいずれかの配置を有することができる。一実施形態において、該配置は配置である。一実施形態において、R2は独立してC2である。一実施形態において、R2は独立してCF2である。一実施形態において、R2は独立してRである。一実施形態において、R2は独立して、置換されていてもよいC5~20アリールである。一実施形態において、R2は独立して、置換されていてもよいC1~12アルキルである。一実施形態において、R2は独立して、置換されていてもよいC5~20アリールである。一実施形態において、R2は独立して、置換されていてもよいC5~7アリールである。一実施形態において、R2は独立して、置換されていてもよいC8~10アリールである。一実施形態において、R2は独立して、置換されていてもよいフェニルである。一実施形態において、R2は独立して、置換されていてもよいナフチルである。一実施形態において、R2は独立して、置換されていてもよいピリジルである。一実施形態において、R2は独立して、置換されていてもよいキノリニル又はイソキノリニルである。一実施形態において、R2は1個から3個の置換基を保有し、1個及び2個がより好ましく、単置換されている基が最も好ましい。置換基は、任意の位置であってよい。R2がC5~7アリール基である場合、単一置換基は、好ましくは、化合物の残部への結合に隣接していない環原子にあり、即ちそれは、好ましくは、化合物の残部への結合に対してβ又はγである。したがって、C5~7アリール基がフェニルである場合、置換基は、好ましくはメタ位又はパラ位にあり、より好ましくはパラ位にある。一実施形態において、R2は以下から選択され、ここで、アスタリスクは結合点を示す。R2がC8~10アリール基、例えばキノリニル又はイソキノリニルである場合、それは、キノリン環又はイソキノリン環の任意の位置で任意の数の置換基を保有してよい。一部の実施形態において、それは1個、2個又は3個の置換基を保有し、これらは、近位環及び遠位環のいずれか又は両方の上にあってよい。一実施形態において、R2が置換されていてもよい場合、置換基は、下記の置換基の項に示されている置換基から選択される。Rが置換されていてもよい場合、置換基は、好ましくは以下から選択される。ハロ、ヒドロキシル、エーテル、ホルミル、アシル、カルボキシ、エステル、アシルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、ウレイド、ニトロ、シアノ及びチオエーテル。一実施形態において、R又はR2が置換されていてもよい場合、置換基は、R、OR、SR、NRR、NO2、ハロ、CO2R、COR、CONH2、CONHR及びCONRRからなる群から選択される。R2がC1~12アルキルである場合、任意の置換基には、追加として、C3~20ヘテロシクリル基及びC5~20アリール基が含まれることができる。R2がC3~20ヘテロシクリルである場合、任意の置換基には、追加として、C1~12アルキル基及びC5~20アリール基が含まれることができる。R2がC5~20アリール基である場合、任意の置換基には、追加として、C3~20ヘテロシクリル基及びC1~12アルキル基が含まれることができる。アルキルという用語は、下位部類のアルケニル及びアルキニル、並びにシクロアルキルを包含すると理解される。したがって、R2が置換されていてもよいC1~12アルキルである場合、アルキル基は、共役系の一部を形成することができる1個又は複数の炭素炭素二重結合又は三重結合を含有していてもよいと理解される。一実施形態において、置換されていてもよいC1~12アルキル基は、少なくとも1個の炭素炭素二重結合又は三重結合を含有し、この結合は、C1とC2との間又はC2とC3との間に存在する二重結合と共役されている。一実施形態において、C1~12アルキル基は、飽和されているC1~12アルキル、C2~12アルケニル、C2~12アルキニル及びC3~12シクロアルキルから選択される基である。R2上の置換基がハロである場合、それは好ましくはF又はClであり、より好ましくはClである。R2上の置換基がエーテルである場合、それは一部の実施形態においてアルコキシ基、例えば、C1~7アルコキシ基であってよいか、又はそれは一部の実施形態においてC5~7アリールオキシ基であってよい。R2上の置換基がC1~7アルキルである場合、それは好ましくはC1~4アルキル基であってよい。R2上の置換基がC3~7ヘテロシクリルである場合、それは一部の実施形態においてヘテロシクリル基、例えばモルホリノ、チオモルホリノ、ピペリジニル、ピペラジニルを含有するC6窒素であってよい。これらの基は、窒素原子を介してPBD部分の残部に結合されていてよい。これらの基は、例えばC1~4アルキル基によってさらに置換されていてよい。R2上の置換基がビスオキシC1~3アルキレンである場合、これは、好ましくはビスオキシメチレン又はビスオキシエチレンである。R2のための特に好ましい置換基には、メトキシ、エトキシ、フルオロ、クロロ、シアノ、ビスオキシメチレン、メチルピペラジニル、モルホリノ及びメチルチエニルが含まれる。特に好ましいR2置換基には、これらに限定されないが、4メトキシフェニル、3メトキシフェニル、4エトキシフェニル、3エトキシフェニル、4フルオロフェニル、4クロロフェニル、34ビスオキシメチレンフェニル、4メチルチエニル、4シアノフェニル、4フェノキシフェニル、キノリン3イル及びキノリン6イル、イソキノリン3イル及びイソキノリン6イル、2チエニル、2フラニル、メトキシナフチル並びにナフチルが含まれる。一実施形態において、R2はハロ又はジハロである。一実施形態において、R2はF又はF2であり、この置換基を、それぞれ及びとして、下記に例示する。RD一実施形態において、RDは、R、CO2R、COR、CHO、CO2H及びハロから独立して選択される。一実施形態において、RDは独立してRである。一実施形態において、RDは独立してハロである。R6一実施形態において、R6は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択される。一実施形態において、R6は、H、OH、OR、SH、NH2、NO2及びハロから独立して選択される。一実施形態において、R6は、H及びハロから独立して選択される。一実施形態において、R6は、独立してHである。一実施形態において、R6及びR7は一緒にOpO基を形成し、ここで、pは1又は2である。R7R7は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択される。一実施形態において、R7は独立してORである。一実施形態において、R7は独立してOR7Aであり、ここで、R7Aは独立して、置換されていてもよいC1~6アルキルである。一実施形態において、R7Aは独立して、置換されていてもよい飽和C1~6アルキルである。一実施形態において、R7Aは独立して、置換されていてもよいC2~4アルケニルである。一実施形態において、R7Aは独立してMeである。一実施形態において、R7Aは独立してCH2Phである。一実施形態において、R7Aは独立してアリルである。一実施形態において、該化合物は、各単量体のR7基が単量体を連結する式XRXを有する二量体架橋を一緒に形成する二量体である。R8一実施形態において、該化合物は、各単量体のR8基が単量体を連結する式XRXを有する二量体架橋を一緒に形成する二量体である。一実施形態において、R8は独立してOR8Aであり、ここで、R8Aは独立して、置換されていてもよいC1~4アルキルである。一実施形態において、R8Aは独立して、置換されていてもよい飽和C1~6アルキル又は置換されていてもよい飽和C2~4アルケニルである。一実施形態において、R8Aは独立してMeである。一実施形態において、R8Aは独立してCH2Phである。一実施形態において、R8Aは独立してアリルである。一実施形態において、R8及びR7は一緒にOpO基を形成し、ここで、pは1又は2である。一実施形態において、R8及びR9は一緒にOpO基を形成し、ここで、pは1又は2である。R9一実施形態において、R9は、H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから独立して選択される。一実施形態において、R9は独立してHである。一実施形態において、R9は独立してR又はORである。R10誤解を回避するため、R10が細胞結合剤に接続されているリンカーである場合、細胞結合剤はR10基の一部である。本発明の特定の実施形態において、コンジュゲートが二個の単量体Aを含む二量体である場合、一方の単量体は、細胞結合剤に接続されているリンカーであるR10基を有し、他方の単量体は、細胞結合剤又はキャッピング基RCに接続されているリンカーである基R10を有する。好ましくは、他方の単量体は、キャッピング基RCであるR10基を有する。したがって、この好ましい実施形態において、細胞結合剤への単一連結だけがある。一実施形態において、R10基は、下記に例示されている通りのN10C11イミン結合、カルビノールアミン、置換カルビノールアミン、QR11がOSO3Mである場合の亜硫酸水素塩付加物、チオカルビノールアミン、置換チオカルビノールアミン又は置換カルビナールアミンを残すように、PBD部分のN10位から除去可能である。ここで、R及びMは、本発明のコンジュゲートに関して定義されている通りである。一実施形態において、R10基が、N10C11イミン結合を残すように、PBD部分のN10位から除去可能である。一部の実施形態において、本発明のコンジュゲートは、式の単量体及び式の単量体を含む二量体化合物である。この実施形態において、単量体が生物活性のためN10位及びC11位において適当な官能性を有するので、R10基がN10位から除去可能である必要がない。しかし、R10基が除去可能であり、それによって、両方の単量体単位のN10位及びC11位において適当な官能性を有する二量体を提供するのが好ましい。こうした官能性は、PBD二量体の架橋活性を可能にするために必要であると考えられる。この出願は特に、N10位へのカルバメート連結を有するR10基に関する。該リンカーは、細胞結合剤、例えば抗体を、共有結合を介してPBD薬物部分Dに結合する。該リンカーは、一つ又は複数の薬物部分及び抗体単位を連結することで抗体薬物コンジュゲートを形成するために使用することができる二官能性又は多官能性の部分である。リンカーは細胞の外側、即ち細胞外で安定であり得るか、又はそれは酵素活性、加水分解若しくは他の代謝条件によって切断可能であり得る。抗体薬物コンジュゲートは、好都合にも、薬物部分及び抗体に結合するための反応性官能性を有するリンカーを使用して調製することができる。抗体のシステインチオール、又はアミン、例えばN末端又はリシンなどのアミノ酸側鎖は、リンカー又はスペーサー試薬、PBD薬物部分又は薬物リンカー試薬の官能基と結合を形成することができる。PBD部分のN10位に結合されているリンカー上の多くの官能基は、細胞結合剤と反応するのに有用であり得る。例えば、エステル、チオエステル、アミド、チオアミド、カルバメート、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、エーテル、チオエーテル又はジスルフィドの連結は、リンカーPBD薬物中間体及び細胞結合剤の反応から形成することができる。ADCのリンカーは、好ましくはADC分子の凝集を防止し、水性媒体中及び単量体状態でADCを溶けやすい状態に保つ。ADCのリンカーは、好ましくは細胞外で安定である。細胞中に輸送又は送達する前に、抗体薬物コンジュゲートは、好ましくは安定であり、無傷のままであり、即ち該抗体は薬物部分に連結されているままである。該リンカーは標的細胞の外側で安定であり、特定の効果的割合にて細胞の内側で切断することができる。有効なリンカーは、抗体の特異的結合特性を維持し、コンジュゲート又は薬物部分の細胞内送達を可能にし、コンジュゲートがその標的化部位に送達又は輸送されるまで、安定及び無傷のままであり、即ち切断されてなく、PBD薬物部分の細胞毒性細胞死滅効果又は細胞分裂停止効果を維持する。ADCの安定性は、質量分析、HPLC、及び分離分析技術LCMSなどの標準的な分析技術によって測定することができる。抗体及び薬物部分の共有結合は、リンカーが二個の反応性官能基を有すること、即ち反応性の意味において二価性を有することを必要とする。ペプチド、核酸、薬物、毒素、抗体、ハプテン、及びレポーター基など二つ以上の官能性又は生物活性のある部分を結合するのに有用である二価のリンカー試薬は知られており、それらの結果として生じるコンジュゲートに関する方法は記載されているBioconjugateTechniquesAcademicPressNewYork、234~242頁。別の実施形態において、該リンカーは、凝集、溶解性又は反応性をモジュレートする基で置換されていてよい。例えば、スルホネート置換基は、試薬の水溶性を増加させることができ、リンカー試薬と抗体若しくは薬物部分とのカップリング反応を促進させるか、又はADCを調製するのに用いられる合成経路に依存して、AbLとDとの、若しくはDLとAbとのカップリング反応を促進させることができる。一実施形態において、R10は以下の基であり、ここで、アスタリスクはN10位への結合点を示し、CBAは細胞結合剤であり、L1はリンカーであり、AはL1を細胞結合剤に接続させる接続基であり、L2は共有結合であるか、又はOCと一緒に自己犠牲リンカーを形成し、L1又はL2は切断可能なリンカーである。L1は、好ましくは切断可能なリンカーであり、切断用リンカーの活性化用トリガーと称することがある。L1及びL2の性質は、存在する場合、非常に異なることがある。これらの基は、コンジュゲートが送達される部位での条件によって定められ得るそれらの切断特徴に基づいて選択される。酵素の作用によって切断されるリンカーが好ましいが、pH、温度における変化により又は照射時に切断可能であるリンカーも使用することができる。還元条件又は酸化条件下で切断可能であるリンカーも本発明に使用され得る。L1は、アミノ酸の連続配列を含むことができる。該アミノ酸配列は、酵素的切断のための標的基質であることがあり、それによってN10位からのR10の放出が可能となる。一実施形態において、L1は酵素の作用によって切断可能である。一実施形態において、該酵素はエステラーゼ又はペプチダーゼである。一実施形態において、L2が存在し、COと一緒に自己犠牲リンカーを形成する。一実施形態において、L2は酵素活性のための基質であり、それによってN10位からのR10の放出が可能となる。一実施形態において、L1が酵素の作用によって切断可能であり、L2が存在する場合、酵素がL1とL2との間の結合を切断する。L1及びL2は、存在する場合、CNH、CO、NHC、OC、OCO、NHCO、OCNH、及びNHCNHから選択される結合によって接続されていてよい。L2に接続するL1のアミノ基はアミノ酸のN末端であってよいか、又はアミノ酸側鎖、例えばリシンアミノ酸側鎖のアミノ基から誘導することができる。L2に接続するL1のカルボキシル基はアミノ酸のC末端であってよいか、又はアミノ酸側鎖、例えばグルタミン酸アミノ酸側鎖のカルボキシル基から誘導することができる。L2に接続するL1のヒドロキシル基は、アミノ酸側鎖、例えばセリンアミノ酸側鎖のヒドロキシル基から誘導することができる。アミノ酸側鎖という用語には、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン及びバリンなどの天然アミノ酸、オルニチン及びシトルリンなどの主要でないアミノ酸、非天然アミノ酸、ベータアミノ酸、天然アミノ酸の合成類似体及び誘導体、並びにそれらの全てのエナンチオマー、ジアステレオマー、異性体濃縮形態、同位体標識形態、保護形態、及びラセミ混合物に見られる基が含まれる。一実施形態において、CO及びL2は一緒に以下の基を形成し、ここで、アスタリスクはN10位への結合点を示し、波線はリンカーL1への結合点を示し、YはN、O、CN又はCOであり、nは0から3である。フェニレン環は、本明細書に記載されている通りの1個、2個又は3個の置換基で置換されていてもよい。一実施形態において、フェニレン基は、ハロ、NO2、R又はORで置換されていてもよい。一実施形態において、YはNHである。一実施形態において、nは0又は1である。好ましくは、nは0である。YがNHであり、nが0である場合、自己犠牲リンカーをpアミノベンジルカルボニルリンカーと称することがある。自己犠牲リンカーは、遠隔部位が活性化されると、下記に示される線図に沿って進行し、保護化合物の放出を可能にし、ここで、Lは、リンカーの残りの部分の活性化形態である。これらの基は、保護されている化合物から活性化の部位を分離させる利点を有する。上記した通り、該フェニレン基は置換されていていてもよい。本明細書に記載されている一実施形態において、L基は、本明細書に記載されている通りのリンカーL1であり、これにはジペプチド基が含まれることができる。別の実施形態において、CO及びL2は一緒に、以下から選択される基を形成し、ここで、アスタリスク、波線、Y及びnは、上記で定義されている通りである。各フェニレン環は、本明細書に記載されている通りの1個、2個又は3個の置換基で置換されていてもよい。一実施形態において、Y置換基を有するフェニレン環は置換されていてもよく、Y置換基を有していないフェニレン環は非置換である。一実施形態において、Y置換基を有するフェニレン環は非置換であり、Y置換基を有していないフェニレン環は置換されていてもよい。別の実施形態において、CO及びL2は一緒に、以下から選択される基を形成し、ここで、アスタリスク、波線、Y、及びnは、上記で定義されている通りであり、EはO、S又はNRであり、DはN、CH又はCRであり、FはN、CH又はCRである。一実施形態において、DはNである。一実施形態において、DはCHである。一実施形態において、EはO又はSである。一実施形態において、FはCHである。好ましい実施形態において、リンカーはカテプシン不安定リンカーである。一実施形態において、L1はジペプチドを含む。ジペプチドはNHX1X2COとして表すことができ、ここで、NH及びCOは、それぞれアミノ酸基X1及びX2のN末端及びC末端を表す。ジペプチドにおけるアミノ酸は、天然アミノ酸の任意の組合せであってよい。リンカーがカテプシン不安定リンカーである場合、ジペプチドはカテプシン媒介切断のための作用部位であり得る。追加として、カルボキシル又はアミノ側鎖官能性を有するアミノ酸基、例えばそれぞれGlu及びLysに関して、CO及びNHが、その側鎖官能性を表すことがある。一実施形態において、ジペプチドであるNHX1X2COにおけるX1X2基は、PheLys、ValAla、ValLys、AlaLys、ValCit、PheCit、LeuCit、IleCit、PheArg、TrpCitから選択され、ここで、Citはシトルリンである。好ましくは、ジペプチドであるNHX1X2COにおけるX1X2基は、PheLys、ValAla、ValLys、AlaLys、ValCitから選択される。最も好ましくは、ジペプチドであるNHX1X2COにおけるX1X2基は、PheLys又はValAlaである。参照により本明細書に組み込まれるDubowchikら、BioconjugateChemistry、2002、13855~869によって記載されているものを含めて、他のジペプチド組合せを使用することができる。一実施形態において、アミノ酸側鎖は、適切な場合には誘導体化される。例えば、アミノ酸側鎖のアミノ基又はカルボキシ基は、誘導体化することができる。一実施形態において、リシンなどの側鎖アミノ酸のアミノ基NH2は、NHR及びNRRからなる群から選択される誘導体化形態である。一実施形態において、アスパラギン酸などの側鎖アミノ酸のカルボキシ基COOHは、COOR、CONH2、CONHR及びCONRRからなる群から選択される誘導体化形態である。一実施形態において、アミノ酸側鎖は、適切な場合には化学的に保護される。側鎖保護基は、RL基に関連して下記に考察されている通りの基であってよい。本発明者らは、保護アミノ酸配列が酵素によって切断可能であることを確証した。例えば、Boc側鎖保護Lys残基を含むジペプチド配列がカテプシンによって切断可能であることを確証した。アミノ酸の側鎖のための保護基は当技術分野においてよく知られており、NovabiochemCatalogに記載されている。追加の保護基戦略は、ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis、Greene及びWutsに提示されている。反応性側鎖官能性を有するアミノ酸のための可能な側鎖保護基を下記に示す。ArgZ、Mtr、Tos、AsnTrt、Xan、AspBzl、tBu、CysAcm、Bzl、BzlOMe、BzlMe、Trt、GluBzl、tBu、GlnTrt、Xan、HisBoc、Dnp、Tos、Trt、LysBoc、ZCl、Fmoc、Z、Alloc、SerBzl、TBDMS、TBDPS、ThrBz、TrpBoc、TyrBzl、Z、ZBr一実施形態において、側鎖保護は、存在する場合のキャッピング基として又はその一部として提供される基に直交であるように選択される。したがって、側鎖保護基の除去は、キャッピング基、又はキャッピング基の一部である任意の保護基官能性を除去しない。本発明の他の実施形態において、選択されるアミノ酸は、反応性側鎖官能性を有していないものである。例えば、アミノ酸は、Ala、Gly、Ile、Leu、Met、Phe、Pro及びValから選択することができる。一実施形態において、ジペプチドは、自己犠牲リンカーと組み合わせて使用される。自己犠牲リンカーはX2に接続されていてよい。自己犠牲リンカーが存在する場合、X2は自己犠牲リンカーに直接接続されている。好ましくは、X2CO基は、YがNHである場合、Yに接続されており、それによってX2CONH基を形成する。NHX1は、Aに直接接続されている。Aは、官能性COを含むことで、それによってアミド連結をX1と形成することができる。一実施形態において、L1及びL2はOCと一緒に、NHX1X2COPABC基を含む。PABC基はN10位に直接接続されている。好ましくは、自己犠牲リンカー及びジペプチドは一緒に、下記に例示されるNHPheLysCONHPABC基を形成し、ここで、アスタリスクはN10位への結合点を示し、波線はリンカーL1の残りの部分への結合点、又はAへの結合点を示す。好ましくは、波線はAへの結合点を示す。Lysアミノ酸の側鎖は、例えば、上記した通りBoc、Fmoc又はAllocで保護することができる。別法として、自己犠牲リンカー及びジペプチドは一緒に、下記に例示されているNHValAlaCONHPABC基を形成し、ここで、アスタリスク及び波線は、上記で定義されている通りである。別法として、自己犠牲リンカー及びジペプチドは一緒に、下記に例示されているNHValCitCONHPABC基を形成し、ここで、アスタリスク及び波線は、上記で定義されている通りである。本発明の一部の実施形態において、PBD薬物部分が非保護イミン結合を含有するならば、例えばB部分が存在するならば、リンカーは遊離アミノ基を含有しないのが好ましいことがある。したがってリンカーがAL1L2構造を有する場合は、これは、好ましくは遊離アミノ基を含有しない。この優先度は、リンカーが例えばL1としてジペプチドを含有する場合に特に関係する。この実施形態において、二種のアミノ酸の一種がリシンから選択されていないことが好ましい。理論によって束縛されることを望むことなく、本発明者らは、薬物部分中の非保護イミン結合及びリンカー中の遊離アミノ基の組合せが、こうした薬物リンカー部分と抗体とのコンジュゲーションを干渉し得る薬物リンカー部分の二量化を引き起こすことができることを見出した。これらの基の交差反応は、強酸が遊離アミノ基を脱保護するために使用された場合など、遊離アミノ基がアンモニウムイオンとして存在する場合に加速することができる。一実施形態において、Aは共有結合である。したがって、L1及び細胞結合剤は直接接続されている。例えば、L1が近接のアミノ酸配列を含む場合、配列のN末端は細胞結合剤に直接接続し得る。したがって、Aが共有結合である場合、細胞結合剤とL1との間の接続は、CNH、CO、NHC、OC、OCO、NHCO、OCNH、NHCNH、CNHC、S、SS、CH2C、及びNNHから選択することができる。細胞結合剤に接続するL1のアミノ基は、アミノ酸のN末端であってよいか、又はアミノ酸側鎖、例えばリシンアミノ酸側鎖のアミノ基から誘導することができる。細胞結合剤に接続するL1のカルボキシル基は、アミノ酸のC末端であってよいか、又はアミノ酸側鎖、例えばグルタミン酸アミノ酸側鎖のカルボキシル基から誘導することができる。細胞結合剤に接続するL1のヒドロキシル基は、アミノ酸側鎖、例えばセリンアミノ酸側鎖のヒドロキシル基から誘導することができる。細胞結合剤に接続するL1のチオール基は、アミノ酸側鎖、例えばセリンアミノ酸側鎖のチオール基から誘導することができる。L1のアミノ基、カルボキシル基、ヒドロキシル基及びチオール基に関連する上記の注釈は、細胞結合剤にも当てはまる。一実施形態において、L2はOCと一緒にを表し、ここで、アスタリスクはN10位への結合点を示し、波線はL1への結合点を示し、nは0から3であり、Yは共有結合又は官能基であり、Eは例えば酵素作用又は光によって活性化可能な基であり、それによって自己犠牲の単位を発生させる。フェニレン環は、本明細書に記載されている通りの1個、2個又は3個の置換基でさらに置換されていてもよい。一実施形態において、フェニレン基は、ハロ、NO2、R又はORでさらに置換されていてもよい。好ましくはnは0又は1、最も好ましくは0である。Eは、該基が例えば光による又は酵素の作用による活性化を受けやすいように選択される。EはNO2又はグルクロン酸であってよい。前者はニトロレダクターゼの作用を受けやすいことがあり、後者はβグルコロニダーゼの作用を受けやすいことがある。この実施形態において、自己犠牲リンカーは、Eが活性化されると、下記に示される線図に沿って進行し、保護化合物の放出を可能にさせ、、ここで、アスタリスクはN10位への結合点を示し、EはEの活性化形態であり、Yは上記した通りである。これらの基は、保護されている化合物から活性化の部位を分離させる利点を有する。上記した通り、フェニレン基はさらに置換されていてもよい。Y基は、L1への共有結合であってよい。Y基は、CNHOCNHCO、NHC、OC、OCO、NHCO、OCNH、NHCNH、NHCNH、CNHC、及びSから選択される官能基であってよい。L1がジペプチドである場合、YはNH又はCであり、それによってL1とYとの間にアミド結合を形成することが好ましい。この実施形態において、ジペプチド配列は、酵素活性のための基質である必要はない。別の実施形態において、Aはスペーサー基である。したがって、L1及び細胞結合剤は間接的に接続されている。L1及びAは、CNH、CO、NHC、OC、OCO、NHCO、OCNH、及びNHCNHから選択される結合によって接続されていてよい。好ましくは、該リンカーは、細胞結合剤上の求核性官能基との反応のための求電子性官能基を含有する。抗体上の求核基には、これらに限定されないが、N末端アミン基、側鎖アミン基、例えばリシン、側鎖チオール基、例えばシステイン、及び抗体がグリコシル化される場合の糖ヒドロキシル基又は糖アミノ基が含まれる。アミン基、チオール基及びヒドロキシル基は求核性であり、反応することで、マレイミド基、活性化ジスルフィド、NHSエステル、HOBtエステルなどの活性エステル、ハロホルメート及び酸ハロゲン化物、ハロアセトアミドなどのアルキル及びベンジルのハロゲン化物、並びにアルデヒド、ケトン、カルボキシルを含めて、リンカー部分及びリンカー試薬上の求電子基と共有結合を形成する能力があり、それらの一部を以下の通りに例示する。特定の抗体は、還元可能な鎖間ジスルフィド、即ちシステイン架橋を有する。抗体は、DTTなどの還元剤を用いる処理によってリンカー試薬とのコンジュゲーション用に反応性とすることができる。各システイン架橋は、したがって、理論的に二種の反応性チオール求核試薬を形成する。追加の求核基は、リシンと2イミノチオランとの反応を介して抗体に導入することができ、チオールへのアミンの変換をもたらす。反応性チオール基は、1個、2個、3個、4個又はそれより多いシステイン残基を導入することによって、抗体に導入することができる。US7521541は、反応性システインアミノ酸の導入によって抗体を操作することを教示している。一部の実施形態において、リンカーは、抗体上に存在する求電子基と反応性である反応性求核基を有する。抗体上の有用な求電子基には、これらに限定されないが、アルデヒド基及びケトンカルボニル基が含まれる。リンカーの求核基のヘテロ原子は、抗体上の求電子基と反応し、抗体単位上に共有結合を形成することができる。リンカー上の有用な求核基には、これらに限定されないが、ヒドラジド、オキシム、アミノ、ヒドロキシル、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレート及びアリールヒドラジドが含まれる。抗体上の求電子基は、リンカーへの結合のための好都合な部位を提供する。一実施形態において、A基は、であり、ここで、アスタリスクはL1への結合点を示し、波線は細胞結合剤への結合点を示し、nは0から6である。一実施形態において、nは5である。一実施形態において、A基は、であり、ここで、アスタリスクはL1への結合点を示し、波線は細胞結合剤への結合点を示し、nは0から6である。一実施形態において、nは5である。一実施形態において、A基は、であり、ここで、アスタリスクはL1への結合点を示し、波線は細胞結合剤への結合点を示し、nは0又は1であり、mは0から30である。好ましい実施形態において、nは1であり、mは0から10、1から8、好ましくは4から8、及び最も好ましくは4又は8である。別の実施形態において、mは10から30、及び好ましくは20から30である。別法として、mは0から50である。この実施形態において、mは好ましくは10~40であり、nは1である。一実施形態において、A基は、であり、ここで、アスタリスクはL1への結合点を示し、波線は細胞結合剤への結合点を示し、nは0又は1であり、mは0から30である。好ましい実施形態において、nは1であり、mは0から10、1から8、好ましくは4から8、及び最も好ましくは4又は8である。別の実施形態において、mは10から30、及び好ましくは20から30である。別法として、mは0から50である。この実施形態において、mは好ましくは10~40であり、nは1である。一実施形態において、細胞結合剤とAとの間の接続は、細胞結合剤のチオール残基及びAのマレイミド基を介する。一実施形態において、細胞結合剤とAとの間の接続は、であり、ここで、アスタリスクはAの残りの部分への結合点を示し、波線は細胞結合剤の残りの部分への結合点を示す。この実施形態において、S原子は通常細胞結合剤から誘導される。上記実施形態のそれぞれにおいて、下記に示されるマレイミド誘導基の代わりに代替官能性基を使用することができ、ここで、波線は前の通りに細胞結合剤への結合点を示し、アスタリスクはA基の残りの部分への結合を示す。一実施形態において、マレイミド誘導基は、以下の基と置き換えられ、ここで、波線は細胞結合剤への結合点を示し、アスタリスクはA基の残りの部分への結合を示す。一実施形態において、マレイミド誘導基は、任意選択により細胞結合剤と一緒にCNH、CO、NHC、OC、OCO、NHCO、OCNH、NHCNH、NHCNH、CNHC、S、SS、CH2CCCH2、NNH、及びNHNから選択される基と置き換えられる。一実施形態において、マレイミド誘導基は、任意選択により細胞結合剤と一緒にから選択される基と置き換えられ、ここで、波線は、細胞結合剤への結合点又はA基の残りの部分への結合のいずれかを示し、アスタリスクは、細胞結合剤への結合点又はA基の残りの部分の他方への結合を示す。L1を細胞結合剤に接続するのに適当な他の基は、WO2005082023に記載されている。R10基はRL基から誘導可能である。RL基は、細胞結合剤をRLの官能基に接続することによってR10基に変換することができる。RLをR10に変換するために他のステップをとることができる。これらのステップには、存在する場合に保護基の除去、又は適切な官能基を設けることが含まれ得る。Q一実施形態において、Qは、O、S又はNから選択される。好ましくは、QはOである。R11一実施形態において、R11は、H若しくはR、又はQがOである場合にはSO3Mのいずれかであり、ここで、Mは金属カチオンである。一実施形態において、R11はHである。一実施形態において、R11はRである。一実施形態において、QがOである場合、R11はSO3Mであり、ここで、Mは金属カチオンである。該カチオンはNaであってよい。RL一実施形態において、RLは、細胞結合剤に接続するためのリンカーである。一実施形態において、リンカーには、細胞結合剤への接続を形成するための官能基が備わっている。この出願は、特に、N10位へのカルバメート連結を有するRL基に関する。上記のR10における連結基の考察は、本明細書におけるそれらの直前の前駆体にも関係する。RLは、細胞結合剤との反応に適当でないRCと異なる。しかし、一部の実施形態において、RCは、例えば保護基、及びRcであるか又はその一部を形成する他の官能性基を適切に操作することによって、RL基に変換することができる。一実施形態において、RLは以下の基であり、ここで、アスタリスクはN10位への結合点を示し、G1は細胞結合剤への接続を形成するための官能基であり、L1はリンカーであり、L2は共有結合であるか、又はOCと一緒に自己犠牲リンカーを形成し、L1又はL2は切断可能なリンカーである。L1及びL2は、R10に関連して上記で定義されている通りである。Aへの接続に対する言及は、本明細書において、G1への接続に対する言及の通りであると解釈することができる。一実施形態において、L1がアミノ酸を含む場合、そのアミノ酸の側鎖は保護することができる。任意の適当な保護基を使用することができる。一実施形態において、側鎖保護基は、存在する場合、該化合物の他の保護基を用いて除去可能である。他の実施形態において、該保護基は、存在する場合、該分子における他の保護基と直交であってよい。アミノ酸側鎖に適当な保護基には、NovabiochemCatalog20062007に記載されている基が含まれる。カテプシン不安定リンカーに使用するための保護基は、Dubowchikらにおいても考察されている。本発明の特定の実施形態において、L1基には、Lysアミノ酸残基が含まれる。このアミノ酸の側鎖は、Boc又はAlloc保護基で保護することができる。Boc保護基が最も好ましい。官能基G1は、細胞結合剤と反応すると直ぐに接続基Aを形成する。一実施形態において、官能基G1は細胞結合剤上の適切な基と反応するためのアミノ基、カルボン酸基、ヒドロキシル基、チオール基又はマレイミド基であるか、又はこれらを含む。好ましい実施形態において、G1はマレイミド基を含む。一実施形態において、G1基はアルキルマレイミド基である。この基は、細胞結合剤中、例えば抗体中に存在するチオール基、特にシステインチオール基との反応に適当である。一実施形態において、G1基は、であり、ここで、アスタリスクはL1への結合点を示し、nは0から6である。一実施形態において、nは5である。一実施形態において、G1基は、であり、ここで、アスタリスクはL1への結合点を示し、nは0から6である。一実施形態において、nは5である。一実施形態において、G1基は、であり、ここで、アスタリスクはL1への結合点を示し、nは0又は1であり、mは0から30である。好ましい実施形態において、nは1であり、mは0から10、1から2、好ましくは4から8、及び最も好ましくは4又は8である。別法として、mは0から50である。この実施形態において、mは好ましくは10~40であり、nは1である。一実施形態において、G1基は、であり、ここで、アスタリスクはL1への結合点を示し、nは0又は1であり、mは0から30である。好ましい実施形態において、nは1であり、mは0から10、1から8、好ましくは4から8、及び最も好ましくは4又は8である。別法として、mは0から50である。この実施形態において、mは好ましくは10~40であり、nは1である。上記実施形態のそれぞれにおいて、下記に示されるマレイミド基の代わりに、代替官能性基を使用することができ、ここで、アスタリスクは、G基の残りの部分への結合を示す。一実施形態において、マレイミド誘導基は、以下の基と置き換えられ、ここで、アスタリスクはG基の残りの部分への結合を示す。一実施形態において、マレイミド基は、COH、OH、NH2、SH、CCH2D、ここで、DはCl、Br又はIであり、CHO、NHNH2C≡CH、及びN3から選択される基と置き換えられる。一実施形態において、L1が存在する場合、G1はNH2、NHMe、COOH、OH又はSHである。一実施形態において、L1が存在する場合、G1はNH2又はNHMeである。いずれか一方の基は、L1アミノ酸配列のN末端であってよい。一実施形態において、L1が存在する場合、G1はNH2であり、L1は、R10に関連して上記で定義されている通り、アミノ酸配列X1X2である。一実施形態において、L1が存在する場合、G1はCOOHである。この基は、L1アミノ酸配列のC末端であってよい。一実施形態において、L1が存在する場合、G1はOHである。一実施形態において、L1が存在する場合、G1はSHである。G1基は、一種の官能基から別の官能基に変換可能であり得る。一実施形態において、L1が存在する場合、G1はNH2である。この基は、マレイミド基を含む別のG1基に変換可能である。例えば、NH2基は、上記に示されているマレイミドを含むG1基の酸又は活性酸と反応させることができる。G1基はしたがって、細胞結合剤との反応により適切な官能基に変換することができる。他の実施形態において、RLは、官能基が提供されているリンカーへの前駆体である基である。上記で留意されている通り、一実施形態において、L1が存在する場合、G1はNH2、NHMe、COOH、OH又はSHである。さらなる実施形態において、これらの基は、化学的に保護されている形態で提供される。化学的に保護されている形態は、したがって、官能基が提供されているリンカーへの前駆体である。一実施形態において、G1は、化学的に保護されている形態におけるNH2である。該基は、カルバメート保護基で保護することができる。カルバメート保護基は、Alloc、Fmoc、Boc、Troc、Teoc、Cbz及びPNZからなる群から選択することができる。好ましくは、G1がNH2である場合、それはAlloc基又はFmoc基で保護されている。一実施形態において、G1がNH2である場合、それはFmoc基で保護されている。一実施形態において、保護基はキャッピング基のカルバメート保護基と同じである。一実施形態において、保護基は、キャッピング基のカルバメート保護基と同じではない。この実施形態において、保護基は、キャッピング基のカルバメート保護基を除去しない条件下において除去可能であることが好ましい。化学的保護基を除去することで、細胞結合剤への接続を形成するための官能基を提供することができる。任意選択により、この官能基は次いで、上記した通り別の官能基に変換することができる。一実施形態において、活性基はアミンである。このアミンは、好ましくはペプチドのN末端アミンであり、本発明の好ましいジペプチドのN末端アミンであり得る。該活性基を反応させることで、細胞結合剤への接続を形成することを意図されている官能基を得ることができる。他の実施形態において、リンカーは活性基を有するリンカーへの前駆体である。この実施形態において、リンカーは、保護基を手段として保護されている活性基を含む。該保護基を除去することで、活性基を有するリンカーを提供することができる。活性基がアミンである場合、保護基は、Green及びWutsに記載されているものなどのアミン保護基であってよい。保護基は、RL基において、存在する場合の他の保護基と直交であるのが好ましい。一実施形態において、保護基は、キャッピング基と直交である。したがって、該活性基保護基は、キャッピング基を保持しながら除去可能である。他の実施形態において、保護基及びキャッピング基は、キャッピング基を除去するために使用されるものと同じ条件下において除去可能である。一実施形態において、RLは、であり、ここで、アスタリスクはN10位への結合点を示し、波線はリンカーL1の残りの部分への結合点又はG1への結合点を示す。好ましくは、波線はG1への結合点を示す。一実施形態において、RLは、であり、ここで、アスタリスク及び波線は、上記で定義されている通りである。一実施形態において、RLは、であり、ここで、アスタリスク及び波線は、上記で定義されている通りである。L1と細胞結合剤との間の接続を形成するための使用に適当な他の官能基は、WO2005082023に記載されている。リンカーには、一種又は複数のアミノ酸単位を含むプロテアーゼ切断可能なペプチド性部分が含まれ得る。ペプチドリンカー試薬は、tBOC化学及びFmocHBTU化学Solidphasepeptidesynthesisutilizing9fluoroenylmethoxycarbonylaminoacids、IntJPeptideProteinRes35161~214を含めたペプチド化学の分野においてよく知られている固相又は液相合成方法AcademicPressによって、RaininSymphonyPeptideSynthesizerなどの自動合成機、又はModel433上で調製することができる。例示的なアミノ酸リンカーには、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド又はペンタペプチドが含まれる。例示的なジペプチドには、バリンシトルリン、アラニンフェニルアラニンが含まれる。例示的なトリペプチドには、グリシンバリンシトルリン及びグリシングリシングリシンが含まれる。アミノ酸リンカー構成成分を含むアミノ酸残基には、自然に発生するもの、並びに主要でないアミノ酸、及びシトルリンなどの非天然アミノ酸類似体が含まれる。アミノ酸リンカー構成成分は、特定の酵素、例えば、腫瘍関連プロテアーゼ、カテプシンB、C及びD、又はプラスミンプロテアーゼによる酵素的切断に対するそれらの選択性において設計及び最適化することができる。アミノ酸側鎖には、自然に発生するもの、並びに主要でないアミノ酸、及びシトルリンなどの非天然アミノ酸類似体が含まれる。アミノ酸側鎖には、水素、メチル、イソプロピル、イソブチル、secブチル、ベンジル、pヒドロキシベンジル、CH2OH、CHCH3、CH2CH2SCH3、CH2CONH2、CH2COOH、CH2CH2CONH2、CH2CH2COOH、3NHCNH2、3NH2、3NHCOCH3、3NHCHO、4NHCNH2、4NH2、4NHCOCH3、4NHCHO、3NHCONH2、4NHCONH2、CH2CH2CHCH2NH2、2ピリジルメチル、3ピリジルメチル、4ピリジルメチル、フェニル、シクロヘキシル、並びに以下の構造が含まれる。アミノ酸側鎖に水素以外が含まれる場合、アミノ酸側鎖が結合されている炭素原子はキラルである。アミノ酸側鎖が結合されている各炭素原子は独立して、若しくは配置であるか、又はラセミ混合物である。薬物リンカー試薬は、したがって、エナンチオマー的に純粋、ラセミ又はジアステレオマーであってよい。例示的な実施形態において、アミノ酸側鎖は、アラニン、2アミノ2シクロヘキシル酢酸、2アミノ2フェニル酢酸、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、ノルロイシン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、γアミノ酪酸、ααジメチルγアミノ酪酸、ββジメチルγアミノ酪酸、オルニチン、及びシトルリンを含めて、天然及び非天然アミノ酸のものから選択される。パラアミノベンジルカルバモイル自己犠牲スペーサーを有する細胞結合剤、例えば抗体へのコンジュゲーションのためのリンカーPBD薬物部分中間体を構成するのに有用な例示的なバリンシトルリンジペプチドリンカー試薬は、以下の構造を有し、ここで、QはC1~C8アルキル、O、ハロゲン、NO2又はCNであり、mは、0~4の範囲である整数である。pアミノベンジル基を有する例示的なphelysジペプチドリンカー試薬は、Dubowchikら、TetrahedronLetters、385257~60に従って調製することができ、以下の構造を有し、ここで、Mtrはモノ4メトキシトリチルであり、QはC1~C8アルキル、O、ハロゲン、NO2又はCNであり、mは、0~4の範囲である整数である。自己犠牲リンカーPABは、抗体薬物コンジュゲートにおける抗体に薬物部分を結合するJMedChem24479~480Chakravartyら、JMedChem26638~644US6214345US20030130189US20030096743US6759509US20040052793US6218519US6835807US6268488US20040018194WO9813059US20040052793US6677435US5621002US20040121940WO2004032828。PAB以外の自己犠牲スペーサーの他の例には、これらに限定されないが、2アミノイミダゾール5メタノール誘導体BioorgMedChemLett92237、チアゾール、複数の伸長PAB単位JOrgChem668815~8830などのPAB基と電子工学的に同様である芳香族化合物及びオルト又はパラアミノベンジルアセタール、並びに承認されているスチリルPAB類似体が含まれる。置換及び非置換の4アミノ酪酸アミドChemistryBiology2223、適切に置換されているビシクロ221及びビシクロ222環系JAmerChemSoc945815及び2アミノフェニルプロピオン酸アミドJOrgChem555867など、アミド結合加水分解時に環化を受けるスペーサーを使用することができる。グリシンで置換されているアミン含有薬物JMedChem271447の排除も、ADCにおいて有用な自己犠牲スペーサーの例である。一実施形態において、バリンシトルリンジペプチドPAB類似体試薬は、26ジメチルフェニル基を有し、以下の構造を有する。本発明の抗体薬物コンジュゲートに有用なリンカー試薬には、これらに限定されないが、BMPEO、BMPS、EMCS、GMBS、HBVS、LCSMCC、MBS、MPBH、SBAP、SIA、SIAB、SMCC、SMPB、SMPH、スルホEMCS、スルホGMBS、スルホKMUS、スルホMBS、スルホSIAB、スルホSMCC、及びスルホSMPB、及びSVSBベンゾエート、並びにビスマレイミド試薬DTME、BMB、BMDB、BMH、BMOE、18ビスマレイミドジエチレングリコール2、及び111ビスマレイミドトリエチレングリコール3が含まれ、これらは、PierceBiotechnology、Inc、ThermoScientific、Rockford、IL及び他の試薬供給者から市販されている。ビスマレイミド試薬は、抗体のシステイン残基の遊離チオール基が、チオール含有の薬物部分、標識又はリンカー中間体に、順次式又は同時式で結合するのを可能にする。抗体、PBD薬物部分又はリンカー中間体のチオール基と反応性である、マレイミド以外の他の官能基には、ヨードアセトアミド、ブロモアセトアミド、ビニルピリジン、ジスルフィド、ピリジルジスルフィド、イソシアネート及びイソチオシアネートが含まれる。リンカー試薬の他の実施形態は、Nスクシンイミジル4ペンタノエート、Nスクシンイミジル3プロピオネートBiochemJ173723~737、スクシンイミジル4シクロヘキサン1カルボキシレート、イミノチオラン、イミドエステルの二官能性誘導体、活性エステル、アルデヒド、ビスアジド化合物ヘキサンジアミンなど、ビスジアゾニウム誘導体エチレンジアミン、ジイソシアネート、及びビス活性フッ素化合物である。有用なリンカー試薬は、MolecularBiosciencesIncなど他の市販供給源を介して得るか、又はTokiら、JOrgChem671866~1872US6214345WO02088172US2003130189US2003096743WO03026577WO03043583及びWO04032828に記載されている手順に従って合成することもできる。リンカーは、枝分れの多官能性リンカー部分を介して一つより多い薬物部分を抗体へ共有結合させるための樹状型リンカーであってよいAngewChemIntEd424490~4494Amirら、AngewChemIntEd424494~4499Shamisら、JAmChemSoc1261726~1731Sunら、BioorganicMedicinalChemistryLetters122213~2215Sunら、BioorganicMedicinalChemistry111761~1768Kingら、TetrahedronLetters431987~1990。樹状リンカーは、抗体に対する薬物のモル比、即ち負荷を増加することができ、これはADCの効力に関連する。したがって、抗体が1個だけの反応性システインチオール基を保有する場合、多数の薬物部分が樹状又は分枝リンカーを介して結合され得る。樹状型リンカーの一つの例示的な実施形態は、以下の構造を有し、ここで、アスタリスクは、PBD部分のN10位への結合点を示す。細胞結合剤細胞結合剤は任意の種類であってよく、ペプチド及び非ペプチドが含まれる。これらには、抗体又は少なくとも一つの結合部位を含有する抗体の断片、リンホカイン、ホルモン、成長因子、栄養素輸送分子、又は任意の他の細胞結合性分子又は物質が含まれることができる。本明細書において抗体という用語は、それらが所望の生物活性を呈している限り、最も広範な意味で使用され、具体的には単クローン抗体、多クローン抗体、二量体、多量体、多特異性抗体及び抗体断片を包含するJourofImmunology1704854~4861。抗体は、マウス、ヒト、ヒト化、キメラであってよく、又は他の種から誘導されてよい。抗体は、特異的抗原を認識及び結合する能力がある免疫系によって産生されるタンパク質である。ImmunoBiology、第5版、GarlandPublishing、NewYork。標的抗原は、一般に、複数の抗体上でCDRによって認識されるエピトープとも呼ばれている多数の結合部位を有する。異なるエピトープに特異的に結合する各抗体は、異なる構造を有する。したがって、一種の抗原は、一つより多い対応する抗体を有することがある。抗体には、全長免疫グロブリン分子又は全長免疫グロブリン分子の免疫学的活性部分、即ち、対象とする標的の抗原又はその一部を免疫特異的に結合させる抗原結合部位を含有する分子が含まれ、こうした標的には、これらに限定されないが、癌細胞、又は自己免疫疾患と関連する自己免疫抗体を産生する細胞が含まれる。免疫グロブリンは、任意の型、クラス、又は免疫グロブリン分子のサブクラスであり得る。免疫グロブリンは、ヒト、マウス又はウサギの由来を含めて、任意の種から誘導することができる。抗体断片は、全長抗体の一部、一般にその抗原結合又は可変領域を含む。抗体断片の例には、Fab、Fab、F2及びFvの断片二特異性抗体直鎖抗体Fab発現ライブラリーによって産生される断片、抗イディオタイプ抗体、CDR、及び癌細胞抗原、ウイルス性抗原又は微生物抗原、単鎖抗体分子に免疫特異的に結合する上記の任意のエピトープ結合断片並びに抗体断片から形成される多特異性抗体が含まれる。単クローン抗体という用語は、本明細書で使用される場合、実質的に均一の抗体の集団から得られる抗体を指し、即ち該集団を含む個々の抗体は、少量で存在し得る可能な自然発生突然変異を除いて同一である。単クローン抗体は高特異的であり、単一の抗原部位を対象とする。さらに、異なる決定因子を対象とする異なる抗体が含まれるポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各単クローン抗体は、抗原上の単一の決定因子を対象とする。それらの特異性に加えて、単クローン抗体は、他の抗体によって汚染されずに合成することができる点において有利である。修飾因子単クローンのは、抗体の実質的に均一の集団から得られた場合の抗体の特徴を示し、任意の特別な方法によって抗体の産生を必要とすると解釈されるべきではない。例えば、本発明に従って使用されるべき単クローン抗体は、Kohlerら、Nature256495によって最初に記載されたハイブリドーマ方法によって作製することができるか、又は組換えDNA方法によって作製することができる。単クローン抗体は、Clacksonら、Nature、352624~628Marksら、JMolBiol、222581~597に記載されている技術を使用してファージ抗体ライブラリーから単離することもできる。本明細書における単クローン抗体には、具体的には、重鎖及び又は軽鎖の一部が、特別の種から誘導された抗体又は特別の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体において対応する配列と同一又は同族である一方、鎖の残部が、別の種から誘導された抗体又は別の抗体のクラス若しくはサブクラスに属する抗体において対応する配列と同一又は同族であるキメラ抗体、並びにそれらが所望の生物活性を呈するかぎりこうした抗体の断片が含まれるProcNatlAcadSciUSA、816851~6855。キメラ抗体には、非ヒト霊長類から誘導される可変ドメイン抗原結合配列、及びヒト不変領域配列を含む霊長類化抗体が含まれる。本明細書における無傷の抗体は、VL及びVHのドメイン、並びに軽鎖不変ドメイン及び重鎖不変ドメイン、CH1、CH2及びCH3を含むものである。不変ドメインは、天然配列不変ドメイン、又はそれらのアミノ酸配列変異体であってよい。無傷の抗体は、抗体のFc領域に起因しうる生物学的活性を指す一つ又は複数のエフェクター機能を有することがある。抗体エフェクター機能の例には、C1q結合、補体依存性細胞傷害、Fc受容体結合、抗体依存性細胞媒介細胞毒性、ファゴサイトーシス、並びにB細胞受容体及びBCRなどの細胞表面受容体の下方調節が含まれる。無傷の抗体は、それらの重鎖の不変ドメインのアミノ酸配列に依存して、異なるクラスに帰属させることができる。無傷の抗体の五つの主要なクラスIgA、IgD、IgE、IgG及びIgMがあり、これらのいくつかは、さらに、サブクラス、例えば、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA及びIgA2に分けることができる。異なるクラスの抗体に対応する重鎖不変ドメインは、それぞれα、δ、ε、γ及びμと呼ばれる。免疫グロブリンの異なるクラスのサブユニット構造及び三次元立体配置がよく知られている。細胞結合剤の例には、WO2007085930における使用のために記載されている薬剤が含まれ、これを本明細書に組み込む。細胞結合剤は、ポリペプチドであるか、又はこれを含むことができる。ポリペプチドは環式ポリペプチドであってよい。細胞結合剤は抗体であってよい。したがって、一実施形態において、本発明は抗体薬物コンジュゲートを提供する。薬物負荷薬物負荷は、抗体当たりPBD薬物の平均数である。薬物負荷は、1抗体当たり1個から8個の薬物の範囲であってよく、即ちここで、1、2、3、4、5、6、7及び8個の薬物部分が抗体に共有結合している。ADCの組成物には、1個から8個の薬物の範囲でコンジュゲートされる抗体の集まりが含まれる。コンジュゲーション反応からのADCの調製における1抗体当たりの薬物の平均数は、質量分析、ELISAアッセイ、電気泳動法及びHPLCなどの常法によって特徴づけることができる。pに関するADCの量的分布も決定することができる。ELISAによって、ADCの特定の調製物におけるpの平均値を決定することができるClinCancerRes107063~7070Sandersonら、ClinCancerRes11843~852。しかし、p値の分布は、抗体抗原結合及びELISAの検出限界によって識別不可能である。その上、抗体薬物コンジュゲートの検出のためのELISAアッセイは、薬物部分が重鎖若しくは軽鎖の断片、又は特別なアミノ酸残基などの抗体に結合されている場合には決定されない。一部の例において、他の薬物負荷とともにpがADCからの特定の値である均一のADCの分離、精製及び特徴づけは、逆相HPLC又は電気泳動法などの手段によって達成することができる。一部の抗体薬物コンジュゲートに関し、pは、抗体上の付加部位の数によって限定されることがある。例えば、抗体は、1個だけ若しくはいくつかのシステインチオール基を有することがあるか、リンカーが結合され得る1個だけ若しくはいくつかの充分な反応性のチオール基を有することがある。より高い薬物負荷、例えばp5は、特定の抗体薬物コンジュゲートの凝集、不溶性、毒性、又は細胞透過性の損失を引き起こすことがある。通常、理論的最大より少ない薬物部分が、コンジュゲーション反応中に抗体にコンジュゲートされる。抗体は、例えば薬物リンカー中間体又はリンカー試薬と反応しない多くのリシン残基を含有することがある。最も反応性のリシン基だけが、アミン反応性リンカー試薬と反応することができる。その上、最も反応性のシステインチオール基だけが、チオール反応性リンカー試薬と反応することができる。一般に、抗体は、薬物部分に連結され得る遊離及び反応性システインチオール基を含有するとしても、多くを含有することはない。該化合物の抗体中の最も多いシステインチオール残基はジスルフィド架橋として存在し、部分的又は全体的な還元条件下にてジチオスレイトール又はTCEPなどの還元剤で還元しなければならない。ADCの負荷は、抗体に対する薬物リンカー中間体又はリンカー試薬のモル過剰を制限すること、コンジュゲーション反応の時間又は温度を限定すること、及びシステインチオール修飾のための部分的又は限定的な還元的条件を含めて、いくつかの異なる方法において制御することができる。システインアミノ酸は、抗体中の反応性部位で操作することができ、これは、鎖内又は分子間のジスルフィド連結を形成しない925~932Dornanら、Blood1142721~2729US7521541US7723485WO2009052249。操作されたシステインチオールは、リンカー試薬、又はマレイミド若しくはアルファハロアミドなどのチオール反応性求電子基を有する本発明の薬物リンカー試薬と反応することで、システインを操作された抗体及びPBD薬物部分を有するADCを形成することができる。薬物部分の位置は、したがって、設計、制御、及び知ることができる。操作されたシステインチオール基が通常、チオール反応性リンカー試薬又は薬物リンカー試薬と高収率で反応するため、薬物負荷を制御することができる。重鎖又は軽鎖上の単一部位での置換によってシステインアミノ酸を導入するためにIgG抗体を操作することで、対称抗体上に二個の新規のシステインを与える。2に近く、コンジュゲーション生成物ADCの均一性に近い薬物負荷を達成することができる。抗体の1個より多い求核性基又は求電子基が、薬物リンカー中間体又はリンカー試薬、続いて薬物部分試薬と反応する場合、生じる生成物は、例えば1、2、3など、抗体に結合されている薬物部分の分布を有するADC化合物の混合物である。ポリマー逆相及び疎水性相互作用などの液体クロマトグラフィー法は、薬物負荷値によって混合物中の化合物を分離することができる。単一の薬物負荷値を有するADCの調製物は単離することができるが、しかし、これらの単一負荷値ADCは、薬物部分がリンカーを介して抗体上の異なる部位で結合されていることがあるため、未だ不均一混合物であり得る。したがって本発明の抗体薬物コンジュゲート組成物には、抗体が一つ又は複数のPBD薬物部分を有し、薬物部分が様々なアミノ酸残基で抗体に結合されていることがある抗体薬物コンジュゲート化合物の混合物が含まれる。一実施形態において、1細胞結合剤当たりの単量体又は二量体ピロロベンゾジアゼピン基の平均数は、1から20の範囲である。一部の実施形態において、該範囲は1から8、2から8、2から6、2から4、及び4から8から選択される。一部の実施形態において、1細胞結合剤当たり1個の単量体又は二量体ピロロベンゾジアゼピン基がある。ペプチド一実施形態において、細胞結合剤は、4~20個、好ましくは6~20個の近接アミノ酸残基を含む直鎖又は環式ペプチドである。この実施形態において、1個の細胞結合剤が1個の単量体又は二量体ピロロベンゾジアゼピン化合物に連結されていることが好ましい一実施形態において、細胞結合剤は、インテグリンανβ6を結合するペプチドを含む。該ペプチドは、XYS上のανβ6に対して選択性であり得る。一実施形態において、細胞結合剤はA20FMDVCysポリペプチドを含む。A20FMDVCysは、配列NAVPNLRGDLQVLAQKVARTCを有する。別法として、A20FMDVCys配列の変異体は、1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個又は10個のアミノ酸残基が別のアミノ酸残基で置換されている場合に使用することができる。一実施形態において、抗体は単クローン抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、全ヒト抗体又は単鎖抗体である。一実施形態において、抗体は、生物活性を有するこれらの抗体の一種の断片である。こうした断片の例には、Fab、Fab、F2及びFvの断片が含まれる。これらの実施形態において、各抗体は、1個又はいくつかの単量体又は二量体ピロロベンゾジアゼピン基に連結されていてよい。細胞結合剤に対するピロロベンゾジアゼピンの好ましい比率は上記に示されている。該抗体はドメイン抗体であってよい。一実施形態において、抗体は単クローン抗体である。本発明における使用のための抗体には、本明細書に組み込まれるWO2005082023に記載されている抗体が含まれる。特に好ましいのは、腫瘍関連抗原に対する抗体である。当技術分野において知られている抗原の例には、これらに限定されないが、WO2005082023に提示されている腫瘍関連抗原が含まれる。例えば、41~55頁を参照されたい。本発明のコンジュゲートは、腫瘍細胞を、それらの細胞表面抗原を介して標的とするように設計されている。抗原は、通例、過剰発現されるか、又は異常回数で発現される正常細胞表面抗原である。理想的には、標的抗原は、増殖性細胞上でのみ発現されるが、これは実際、観察されるのが稀である。結果として、標的抗原は、通例、増殖性組織と健常組織との間での示差的発現に基づいて選択される。抗体は、Cripto、CD30、CD19、CD33、糖タンパク質NMB、CanAg、Her2、CD56、CD22、CD33、CD79、CD138、PSCA、PSMA、BCMA、CD20、CD70、Eセレクチン、EphB2、メラノトランスフェリン、Muc16及びTMEFF2を含めて、特異的腫瘍関連抗原を標的とするために産出されてきた。腫瘍関連抗原は当技術分野において知られており、当技術分野においてよく知られている方法及び情報を使用して、抗体を発生させる際の使用のために調製することができる。癌の診断及び治療法に対する有効な細胞性標的を発見する試みにおいて、研究者らは、一種又は複数の正常な非癌性細胞上と比較して、癌細胞の一つ又は複数の特別な型の表面上で特異的に発現される膜貫通ポリペプチド、又はそれ以外では腫瘍関連ポリペプチドを同定することを探求した。しばしば、こうした腫瘍関連ポリペプチドは、非癌性細胞の表面上と比較して、癌細胞の表面上の方が豊富に発現される。こうした腫瘍関連細胞表面抗原ポリペプチドの同定は、抗体ベースの治療法を介して破壊するための癌細胞を特異的に標的とする能力を引き起こした。TAAの例には、これらに限定されないが、下記に列挙されているTAA~が含まれる。便宜上、全てが当技術分野において知られているこれらの抗原に関連する情報は下記に列挙されており、国立バイオテクノロジー情報センターの核酸及びタンパク質配列同定規約に従った名称、代替名、Genbank受入番号及び主要文献が含まれる。TAA~に対応する核酸及びタンパク質配列は、GenBankなどの公開データベースにおいて入手可能である。抗体によって標的とされる腫瘍関連抗原には、引用文献において同定されている配列に対して少なくとも約70、80、85、90又は95の配列同一性を処理するか、又は引用文献において見出される配列を有するTAAと同じ生物学的特性若しくは特徴を実質的に呈する全てのアミノ酸配列変異体及びアイソフォームが含まれる。例えば、変異体配列を有するTAAは、一般に、列挙されている対応配列を有するTAAに特異的に結合する抗体に特異的に結合することができる。本明細書において具体的に挙げられている文献における配列及び開示内容は、参照により明確に組み込む。腫瘍関連抗原~BMPR1BtenDijkePら、Science264101~104、Oncogene141377~1382WO2004063362WO2003042661US2003134790A1WO2002102235WO2003055443WO200299122WO2003029421WO2003024392WO200298358WO200254940WO200259377WO200230268WO200148204NP001194骨形成タンパク質受容体、IB型pidNP0011941。相互参照MIM603248NP0011941AY065994E16BiochemBiophysResCommun255、283~288、Nature395288~291、Gaugitsch、HWら、JBiolChem26711267~11273WO2004048938WO2004032842WO2003042661WO2003016475WO200278524WO200299074WO200286443WO2003003906WO200264798WO200014228US2003224454WO2003025138NP003477溶質担体ファミリー7、メンバー5pidNP0034773ヒト相互参照MIM600182NP0034773NM015923NM0034861STEAP1CancerRes61、5857~5860、Hubert、RSら、ProcNatlAcadSciUSA9614523~14528WO2004065577WO2004027049EP1394274WO2004016225WO2003042661US2003157089US2003185830US2003064397WO200289747WO2003022995NP036581前立腺の6膜貫通上皮抗原相互参照MIM604415NP0365811NM01244910772PJBiolChem27627371~27375WO2004045553WO200292836WO200283866US2003124140相互参照GI34501467AAK741203AF3614861MPFYamaguchi、Nら、BiolChem269、805~808、ProcNatlAcadSciUSA9611531~11536、ProcNatlAcadSciUSA93136~140、JBiolChem27021984~21990WO2003101283WO2002101075WO200271928WO9410312相互参照MIM601051NP0058142NM0058231Napi3b、メンバー2、II型ナトリウム依存性リン酸輸送体3b、Genbank受入番号NM006424JBiolChem27719665~19672、Genomics62281~284、Feild、JAら、BiochemBiophysResCommun258578~582WO2004022778EP1394274WO2002102235EP0875569WO200157188WO2004032842WO200175177相互参照MIM604217NP0064151NM0064241Sema5b、膜貫通ドメイン及び短い細胞質ドメイン、5B、Genbank受入番号AB040878NagaseTら、DNARes7143~150WO2004000997WO2003003984WO200206339WO200188133WO2003054152WO2003101400受入Q9P283EMBLAB040878BAA959691GenewHGNC10737PSCAhlgRossら、CancerRes622546~2553US2003129192US2004044180US2004044179US2003096961US2003232056WO2003105758US2003206918EP1347046WO2003025148相互参照GI37182378AAQ889911AY3586281ETBRNakamutaMら、BiochemBiophysResCommun177、34~39、1991OgawaYら、BiochemBiophysResCommun178、248~255、1991AraiHら、JpnCircJ56、1303~1307、1992AraiHら、JBiolChem268、3463~3470、1993SakamotoA、YanagisawaMら、BiochemBiophysResCommun178、656~663、1991ElshourbagyNAら、JBiolChem268、3873~3879、1993HaendlerBら、JCardiovascPharmacol20、s1S4、1992TsutsumiMら、Gene228、43~49、1999StrausbergRLら、ProcNatlAcadSciUSA99、16899~16903、2002BourgeoisCら、JClinEndocrinolMetab82、3116~3123、1997OkamotoYら、BiolChem272、21589~21596、1997VerheijJBら、AmJMedGenet108、223~225、2002HofstraRMWら、EurJHumGenet5、180~185、1997PuffenbergerEGら、Cell79、1257~1266、1994AttieTら、HumMolGenet4、2407~2409、1995AuricchioAら、HumMolGenet5351~354、1996AmielJら、HumMolGenet5、355~357、1996HofstraRMWら、NatGenet12、445~447、1996SvenssonPJら、HumGenet103、145~148、1998FuchsSら、MolMed7、115~124、2001PingaultVら、HumGenet111、198~206WO2004045516WO2004048938WO2004040000WO2003087768WO2003016475WO2003016475WO200261087WO2003016494WO2003025138WO200198351EP0522868WO200177172US2003109676US6518404US5773223WO2004001004MSG783WO2003104275WO2004046342WO2003042661WO2003083074WO2003018621WO2003024392WO200166689相互参照LocusID54894NP0602332NM0177631STEAP2LabInvest821573~1582WO2003087306US2003064397WO200272596WO200172962WO2003104270WO2003104270US2004005598WO2003042661US2003060612WO200226822WO200216429相互参照GI22655488AAN040801AF4551381TrpM4Xu、XZら、ProcNatlAcadSciUSA9810692~10697、Cell109397~407、JBiolChem27830813~30820US2003143557WO200040614WO200210382WO2003042661WO200230268US2003219806WO200162794相互参照MIM606936NP0601062NM0176361CRIPTOCiccodicola、Aら、EMBOJ81987~1991、AmJHumGenet49555~565US2003224411WO2003083041WO2003034984WO200288170WO2003024392WO200216413WO200222808US5854399US5792616相互参照MIM187395NP0032031NM0032121CD21又はC3DR又はHs73792Genbank受入番号M26004Fujisakuら、JBiolChem2642118~2125WeisJJら、JExpMed167、1047~1066、1988MooreMら、ProcNatlAcadSciUSA84、9194~9198、1987BarelMら、MolImmunol35、1025~1031、1998WeisJJら、ProcNatlAcadSciUSA83、5639~5643、1986SinhaSKら、JImmunol150、5311~5320WO2004045520US2004005538WO2003062401WO2004045520WO9102536WO2004020595受入P20023Q13866Q14212EMBLM26004AAA357861CD79b、B29、Genbank受入番号NM000626又は11038674ProcNatlAcadSciUSA1004126~4131、Blood1003068~3076、Mullerら、EurJImmunol221621~1625WO2004016225WO2003087768、US2004101874WO2003062401WO200278524US2002150573US5644033WO2003048202WO9958658、US6534482WO200055351相互参照MIM147245NP0006171NM0006261FcRH2、SPAP1B、SPAP1C、Genbank受入番号NM030764、AY358130GenomeRes132265~2270、Immunogenetics5487~95、Blood992662~2669、ProcNatlAcadSciUSA989772~9777、Xu、MJら、BiochemBiophysResCommun280768~775WO2004016225WO2003077836WO200138490WO2003097803WO2003089624相互参照MIM606509NP1103912NM0307641HER2CoussensLら、Science2301132~1139YamamotoTら、Nature319、230~234、1986SembaKら、ProcNatlAcadSciUSA82、6497~6501、1985SwierczJMら、JCellBiol165、869~880、2004KuhnsJJら、JBiolChem274、36422~36427、1999ChoHSら、Nature421、756~760、2003EhsaniAら、Genomics15、426~429WO2004048938WO2004027049WO2004009622WO2003081210WO2003089904WO2003016475US2003118592WO2003008537WO2003055439WO2003025228WO200222636WO200212341WO200213847WO200214503WO200153463WO200141787WO200044899WO200020579US5869445WO9630514EP1439393WO2004043361WO2004022709WO200100244受入P04626EMBLM11767AAA358081EMBLM11761AAA358081NCABarnettTら、Genomics3、59~66、1988TawaragiYら、BiochemBiophysResCommun150、89~96、1988StrausbergRLら、ProcNatlAcadSciUSA9916899~16903、2002WO2004063709EP1439393WO2004044178WO2004031238WO2003042661WO200278524WO200286443WO200260317受入P40199Q14920EMBLM29541AAA599151EMBLM18728MDPProcNatlAcadSciUSA9916899~16903WO2003016475WO200264798JP05003790WO9946284相互参照MIM179780AAH170231BC0170231IL20RαClarkHFら、GenomeRes13、2265~2270、2003MungallAJら、Nature425、805~811、2003BlumbergHら、Cell104、9~19、2001DumoutierLら、JImmunol167、3545~3549、2001ParrishNovakJら、JBiolChem277、47517~47523、2002PletnevSら、Biochemistry4212617~12624SheikhFら、JImmunol172、2006~2010EP1394274US2004005320WO2003029262WO2003002717WO200222153US2002042366WO200146261WO200146232WO9837193受入Q9UHF4Q6UWA9Q96SH8EMBLAF184971AAF013201ブレビカンGarySCら、Gene256、139~147、2000ClarkHFら、GenomeRes13、2265~2270、2003StrausbergRLら、ProcNatlAcadSciUSA99、16899~16903、2002US2003186372US2003186373US2003119131US2003119122US2003119126US2003119121US2003119129US2003119130US2003119128US2003119125WO2003016475WO200202634EphB2RChanJ及びWatt、VM、Oncogene6、1057~1061Oncogene10897~905、AnnuRevNeurosci21309~345、IntRevCytol196177~244WO2003042661WO200053216WO2004065576WO2004020583WO2003004529WO200053216相互参照MIM600997NP0044332NM0044421ASLG659US20040101899WO2003104399WO2004000221US2003165504US2003124140US2003065143WO2002102235US2003091580WO200210187WO200194641WO200202624US2002034749WO200206317WO200271928WO200202587WO200140269WO200036107WO2004053079WO2003004989WO200271928WO0116318PSCAReiterREら、ProcNatlAcadSciUSA95、1735~1740、1998GuZら、Oncogene19、1288~1296、2000BiochemBiophysResCommun275783~788WO2004022709EP1394274US2004018553WO2003008537WO200281646WO2003003906WO200140309US2001055751WO200032752WO9851805WO9851824WO9840403受入O43653EMBLAF043498AAC396071GEDAAAP14954脂肪腫HMGIC融合パートナー様タンパク質pidAAP149541ヒトWO2003054152WO2003000842WO2003023013US2003194704相互参照GI30102449AAP149541AY2607631BAFFRBAFF受容体pidNP4431771ヒトThompson、JSら、Science293、2108~2111WO2004058309WO2004011611WO2003045422WO2003014294WO2003035846WO200294852WO200238766WO200224909相互参照MIM606269NP4431771NM0529451AF132600CD22Wilsonら、JExpMed173137~146WO2003072036相互参照MIM107266NP0017621NM0017711CD79aと共有結合的に相互作用して表面でIgM分子とともに錯体を形成し、B細胞分化に関与するシグナルを形質導入するB細胞特異的タンパク質、pI484、MW25028TM2PGeneChromosome19q132、Genbank受入番号NP00177410WO2003088808、US20030228319WO2003062401US2002150573WO9958658WO9207574US5644033Haら、JImmunol1481526~1531Mullerら、EurJImmunol221621~1625Hashimotoら、Immunogenetics40287~295Preudhommeら、ClinExpImmunol90141~146Yuら、JImmunol148633~637Sakaguchiら、EMBOJ73457~3464CXCR5372aa、pI854MW41959TM7PGeneChromosome11q233、Genbank受入番号NP0017071WO2004040000WO2004015426US2003105292US6555339WO200261087WO200157188WO200172830WO200022129WO9928468US5440021WO9428931WO9217497Dobnerら、EurJImmunol222795~2799Barellaら、BiochemJ309773~779HLADOBのベータサブユニット273aa、pI656、MW30820TM1PGeneChromosome6p213、Genbank受入番号NP0021111Tonnelleら、EMBOJ42839~2847Jonssonら、Immunogenetics29411~413Beckら、JMolBiol228433~441Strausbergら、ProcNatlAcadSciUSA9916899~16903Serveniusら、JBiolChem2628759~8766Beckら、JMolBiol2551~13Naruseら、TissueAntigens59512~519WO9958658US6153408US5976551US6011146Kasaharaら、Immunogenetics3066~68Larhammarら、JBiolChem26014111~14119P2X5422aa、pI763、MW47206TM1PGeneChromosome17p133、Genbank受入番号NP0025522Leら、FEBSLett418195~199WO2004047749WO2003072035Touchmanら、GenomeRes10165~173WO200222660WO2003093444WO2003087768WO2003029277CD72359aa、pI866、MW40225、TM1PGeneChromosome9p133、Genbank受入番号NP0017731WO2004042346WO2003026493WO200075655VonHoegenら、JImmunol1444870~4877Strausbergら、ProcNatlAcadSciUSA9916899~16903LY64、ロイシンリッチリピートファミリーのI型膜タンパク質は、B細胞活性化及びアポトーシスを調節し、機能の損失は全身性紅斑性狼瘡を有する患者における疾患活性の増加を伴う661aa、pI620、MW74147TM1PGeneChromosome5q12、Genbank受入番号NP0055731US2002193567WO9707198Miuraら、Genomics38299~304Miuraら、Blood922815~2822WO2003083047WO9744452WO200012130FcRH1429aa、pI528、MW46925TM1PGeneChromosome1q21~1q22、Genbank受入番号NP4431701WO2003077836WO200138490Davisら、ProcNatlAcadSciUSA989772~9777WO2003089624EP1347046WO2003089624IRTA2977aa、pI688、MW106468、TM1PGeneChromosome1q21、Genbank受入番号HumanAF343662、AF343663、AF343664、AF343665、AF369794、AF397453、AK090423、AK090475、AL834187、AY358085MouseAK089756、AY158090、AY506558NP1125711WO2003024392Nakayamaら、BiochemBiophysResCommun277124~127WO2003077836WO200138490TENB2、TPEF、HPP1、TR、推定膜貫通プロテオグリカン、成長因子及びフォリスタチンのEGFヘレグリンファミリー関連374aa、NCBI受入AAD55776、AAF91397、AAG49451、NCBIRefSeqNP057276NCBIGene23671OMIM605734SwissProtQ9UIK5Genbank受入番号AF179274AY358907、CAF85723、CQ782436WO2004074320JP2004113151WO2003042661WO2003009814EP1295944WO200230268WO200190304US2004249130US2004022727WO2004063355US2004197325US2003232350US2004005563US2003124579Horieら、Genomics67146~152Uchidaら、BiochemBiophysResCommun266593~602Liangら、CancerRes604907~12GlynneJonesら、IntJCancer10月15日94178~84。親抗体は、アルブミン結合ペプチド配列を含む融合タンパク質であってもよいAlbuminBindingAsAGeneralStrategyForImprovingThePharmacokineticsOfProteinsJBiolChem27735035~35043WO0145746。本発明の抗体には、Dennisら、JBiolChem27735035~35043の表III及びIV、35038頁US20040001827の0076並びにWO0145746の12~13頁によって教示されているABP配列を有する融合タンパク質が含まれ、これらの全てを参照により本明細書に組み込む。一実施形態において、抗体は、腫瘍関連抗原ανβ6を特異的に標的とするように産生させた。細胞結合剤はリンカーに接続されている。一実施形態において、細胞結合剤は、存在する場合のリンカーのAに接続されている一実施形態において、細胞結合剤とリンカーとの間の接続は、チオエーテル結合を介する。一実施形態において、細胞結合剤とリンカーとの間の接続は、ジスルフィド結合を介する。一実施形態において、細胞結合剤とリンカーとの間の接続は、アミド結合を介する。一実施形態において、細胞結合剤とリンカーとの間の接続は、エステル結合を介する。一実施形態において、細胞結合剤とリンカーとの間の接続は、細胞結合剤のシステイン残基のチオール基とリンカーのマレイミド基との間で形成される。細胞結合剤のシステイン残基は、接続を形成するためのRLの官能基との反応に利用可能であり得る。他の実施形態において、例えば細胞結合剤が抗体である場合、抗体のチオール基は、鎖間ジスルフィド結合に関与することができる。これらの鎖間結合は、例えばRLの官能基との反応前にDTTを用いる抗体の処理によって、遊離チオール基に変換することができる。細胞結合剤を標識することで、例えばコンジュゲート又はコンジュゲートの一部のいずれかとして取り込む前に、薬剤の検出又は精製を補助することができる。標識はビオチン標識であってよい。別の実施形態において、細胞結合剤は、放射性同位体で標識することができる。R及びR一実施形態において、Rは、置換されていてもよいC1~12アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基及びC5~20アリール基から独立して選択される。これらの基は、下記置換基の項においてそれぞれ定義されている。一実施形態において、Rは独立して、置換されていてもよいC1~12アルキルである。一実施形態において、Rは独立して、置換されていてもよいC3~20ヘテロシクリルである。一実施形態において、Rは独立して、置換されていてもよいC5~20アリールである。一実施形態において、Rは独立して、置換されていてもよいC1~12アルキルである。R2に関連して上に記載されているのは、好ましいアルキル基及びアリール基に関連する各種実施形態、並びに任意の置換基の同一性及び数である。Rに適用する場合のR2に関して提示されている優先は、適切な場合、例えばR6、R7、R8又はR9がRである場合の全ての他のR基に適用可能である。Rに関する優先はRにも適用する。本発明の一部の実施形態において、NRR置換基を有する化合物が提供される。一実施形態において、R及びRは、それらが結合している窒素原子と一緒に、置換されていてもよい4員、5員、6員又は7員の複素環を形成する。該環は、さらなるヘテロ原子、例えばN、O又はSを含有することができる。一実施形態において、複素環は、それ自体がR基で置換されている。さらなるNヘテロ原子が存在する場合、置換基はNヘテロ原子上であってよい。RRはC3~12アルキレン基であり、この鎖は1個又は複数のヘテロ原子、例えばO、S、N、NMe、及び又は環が置換されていてもよい芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてよい。一実施形態において、RはC3~12アルキレン基であり、この鎖は1個又は複数のヘテロ原子、及び又は芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてよい。一実施形態において、該アルキレン基は、O、S及びNMeから選択される1個又は複数のヘテロ原子、並びに又は環が置換されていてもよい芳香環によって、中断されていてもよい。一実施形態において、芳香環はC5~20アリーレン基であり、ここでアリーレンは、芳香族化合物の二個の芳香環原子から二個の水素原子を除去することによって得られる2価の部分に付随し、この部分は5個から20個の環原子を有する。一実施形態において、RはC3~12アルキレン基であり、この鎖は、1個又は複数のヘテロ原子、例えばO、S、N、NMe、及び又はNH2によって置換されていてもよい芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてよい。一実施形態において、RはC3~12アルキレン基である。一実施形態において、RはC3、C5、C7、C9及びC11のアルキレン基から選択される。一実施形態において、RはC3、C5及びC7のアルキレン基から選択される。一実施形態において、RはC3及びC5のアルキレン基から選択される。一実施形態において、RはC3アルキレン基である。一実施形態において、RはC5アルキレン基である。上記に列挙されているアルキレン基は、1個又は複数のヘテロ原子、及び又は環が置換されていてもよい芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって、中断されていてもよい。上記に列挙されているアルキレン基は、1個又は複数のヘテロ原子、及び又は芳香環、例えばベンゼン又はピリジンによって中断されていてもよい。上記に列挙されているアルキレン基は、非置換の直鎖脂肪族アルキレン基であってよい。X一実施形態において、XはO、S又はNから選択される。好ましくは、XはOである。AA、BA、CA、DA及びEA式AA、BA、CA、DA及びEAの化合物はR2基を有し、これはR1又はR3のいずれかとともに、それらが結合しているC環の炭素原子と一緒に、置換されていてもよいベンゼン環を形成する。置換されていてもよいベンゼン環は、ピロロベンゾジアゼピンのC環に縮合されていると見なすことができる。縮合ベンゼン環はD環と称することができる。該縮合環の構造を下記に例示し、ここで、D1、D2、D3及びD4のそれぞれは、H又は置換基を表す。一実施形態において、ベンゼン環は非置換である。一実施形態において、ベンゼン環は、OH、CN、R、OR、OSO2R、CO2R、COR、SH、SR、NH2、NHR、NRR、NO2、Me3Sn及びハロから選択される1個、2個、3個、4個の基で置換されていてもよい。一実施形態において、ベンゼン環はモノ置換されている。モノ置換基は、D1、D2、D3又はD4のいずれか1個であってよい。一実施形態において、ベンゼン環はD2において置換されており、D1、D3及びD4はそれぞれHである。一実施形態において、ベンゼン環はD3において置換されており、D1、D2及びD4はそれぞれHである。一実施形態において、R2はR1とともに、それらが結合しているC環の炭素原子と一緒に、置換されていてもよいベンゼン環を形成する。V及びWに関する優先を下記に提示する。AB、BB、CB、DB及びEB一実施形態において、Uは、TがNR、BH、SO又はSO2である場合、CH2である。一実施形態において、Tは、UがNR、O又はSである場合、CH2又はCOである。一実施形態において、Tは、CH2及びCOから選択される。一実施形態において、Uは、NR、O及びSから選択される。一実施形態において、Yはnであり、ここでnは1又は2である。一実施形態において、化合物ABのC環は、下記に示されるものから選択される構造を有する。V及びWV及びWは、n、O、S、NR、CHR、及びCRRからそれぞれ選択され、ここでnは2、3又は4であり、ただし、R1及びR2が、それらが結合しているC環の炭素原子と一緒に、置換されていてもよいベンゼン環を形成する場合には、VがCであることを除き、R3及びR2が、それらが結合しているC環の炭素原子と一緒に、置換されていてもよいベンゼン環を形成する場合には、WがCであることを除く。一実施形態において、V及びWの一方がCである場合、V及びWの他方はCH2及びNRから選択される。一実施形態において、V及びWの一方がCである場合、V及びWの他方はCH2である。二量体化合物一実施形態において、本発明の第一態様のコンジュゲート、化合物C、化合物D及び化合物Eは、それぞれ二量体である。コンジュゲート一実施形態において、コンジュゲートは、各単量体が式である二量体である。一実施形態において、二量体化合物は、各単量体が式であり、化合物が下記に示される構造を有する二量体であり、ここで、R2、R6、R7、R9、R10、X、Q及びR11は、それぞれR2、R6、R7、R9、R10、X及びR11に従って定義されている通りである。一実施形態において、コンジュゲートは、各単量体が式であり、化合物が下記に示される構造を有する二量体であり、ここで、R2、R6、R7、R9、X、Q及びR11は、それぞれR2、R6、R7、R9、X及びR11に従って定義されている通りであり、RCはキャッピング基である。この実施形態において、各R10基は細胞結合剤に接続されているリンカーである。一実施形態において、コンジュゲートは、一方の単量体が式であり、他方が式である二量体である。一実施形態において、コンジュゲートは、一方の単量体が式であり、他方が式であり、化合物が下記に示される構造を有する二量体であり、ここで、R2、R6、R7、R9、X及びR11は、それぞれR2、R6、R7、R9、X、及びR11に従って定義されている通りである。一実施形態において、コンジュゲートは、各単量体が式であり、R2基、R6基、R9基、X基、R11基及びR7基及びR8基が、適切な場合には同じである二量体である。一実施形態において、該化合物は、各単量体が式であり、R2基、R6基、R9基、X基、R11基、R10基及びR7基及びR8基が、適切な場合には同じである二量体である。こうした化合物は対称二量体と称することができる。一実施形態において、コンジュゲートは、一方の単量体が式であり、他方が式であり、のR2基、R6基、R9基及びR7基及びR8基が、適切な場合には化合物のそれらの基と同じである二量体である。上記の二量体化合物のそれぞれに関し、式又はの単量体は、本明細書に記載されている通りの式又はの単量体と置き換えることができる。化合物C一実施形態において、化合物Cは二量体である。一実施形態において、化合物Cは、下記に示される構造を有し、ここで、R2、R6、R7、R9及びXは、それぞれR2、R6、R7、R9及びXに従って定義されている通りである。化合物D一実施形態において、化合物Dは二量体である。一実施形態において、化合物Dは、下記に示される構造を有し、ここで、R2、R6、R7、R9、Q、R11及びXは、それぞれR2、R6、R7、R9、Q、R11及びXに従って定義されている通りである。化合物E一実施形態において、化合物Eは二量体である。一実施形態において、化合物Eは、下記に示される構造を有し、ここで、R2、R6、R7、R9、R11、RL、Q及びXは、それぞれR2、R6、R7、R9、R11、RL及びXに従って定義されている通りである。一実施形態において、化合物Eは、下記に示される構造を有し、ここで、R2、R6、R7、R9、R11、Q及びXは、それぞれR2、R6、R7、R9、R11、及びXに従って定義されている通りである。RCはキャッピング基である。一実施形態において、化合物Eは、下記に示される構造を有し、ここで、R2、R6、R7、R9、及びXは、それぞれR2、R6、R7、R9、及びXに従って定義されている通りである。単量体化合物一実施形態において、本発明の第一態様のコンジュゲート、化合物C、化合物D及び化合物Eは単量体である。一実施形態において、コンジュゲート、又は式、又はの化合物は、本明細書に記載されている通りの式、、又はの単量体で置き換えることができる。Rc、キャッピング基本発明の第一態様のコンジュゲートは、N10位にキャッピング基RCを有する。化合物Eはキャッピング基RCを有することができる。一実施形態において、コンジュゲートが、各単量体が式である二量体である場合、単量体単位の一つにおけるR10基はキャッピング基RCであるか、又はR10基である。一実施形態において、コンジュゲートが、各単量体が式である二量体である場合、単量体単位の一つにおけるR10基はキャッピング基RCである。一実施形態において、化合物Eが、各単量体が式である二量体である場合、単量体単位の一つにおけるRL基はキャッピング基RCであるか、又は細胞結合剤への接続のためのリンカーである。一実施形態において、化合物Eが、各単量体が式である二量体である場合、単量体単位の一方におけるRL基は、キャッピング基RCである。RC基は、N10C11イミン結合、カルビノールアミン、置換カルビノールアミン、QR11がOSO3Mである場合の亜硫酸水素塩付加物、チオカルビノールアミン、置換チオカルビノールアミン又は置換カルビナールアミンを残すように、PBD部分のN10位から除去可能である。一実施形態において、RCは、N10C11イミン結合、カルビノールアミン、置換カルビノールアミンから、又はQR11がOSO3Mである場合には亜硫酸水素塩付加物を残すように、除去可能である保護基である。一実施形態において、RCは、N10C11イミン結合を残すように、除去可能である保護基である。RC基は、例えばN10C11イミン結合、カルビノールアミンなどを得るために、R10基の除去に必要とされるものと同じ条件下で除去可能であることが意図されている。キャッピング基は、N10位における目的の官能性のための保護基として働く。キャッピング基は、細胞結合剤に対して反応性でないことが意図されている。例えば、RCはRLと同じではない。キャッピング基を有する化合物は、イミン単量体を有する二量体の合成における中間体として使用することができる。別法として、キャッピング基を有する化合物は、コンジュゲートとして使用することができ、ここで、キャッピング基が標的位置で除去されることで、イミン、カルビノールアミン、置換カルビノールアミンなどが得られる。したがって、この実施形態において、キャッピング基は、本発明者らの先の出願WO0012507において定義されている通り、治療的に除去可能な窒素保護基と称することができる。一実施形態において、RC基は、R10基のリンカーRLを切断する条件下で除去可能である。したがって、一実施形態において、キャッピング基は、酵素の作用によって切断可能である。代替実施形態において、キャッピング基は、リンカーRLを細胞結合剤に接続する前に除去可能である。この実施形態において、キャッピング基は、リンカーRLを切断しない条件下で除去可能である。化合物に、細胞結合剤への接続を形成するための官能基G1が含まれる場合、キャッピング基は、G1の添加又はアンマスキングの前に除去可能である。キャッピング基は、二量体における単量体単位の一方だけが細胞結合剤に接続されることを確実にするための保護基戦略の一部として使用することができる。キャッピング基は、N10C11イミン結合のためのマスクとして使用することができる。キャッピング基は、イミン官能性が化合物において必要とされるような時点で除去することができる。キャッピング基は、カルビノールアミン、置換カルビノールアミン、及び上記した通りの亜硫酸水素塩付加物のためのマスクであってもよい。RCは、本発明者らの先の出願、WO0012507に記載されている基などのN10保護基であってよい。一実施形態において、RCは、本発明者らの先の出願WO0012507に定義されている通りの治療的に除去可能な窒素保護基である。一実施形態において、RCは、カルバメート保護基である。一実施形態において、カルバメート保護基は、Alloc、Fmoc、Boc、Troc、Teoc、Psec、Cbz及びPNZから選択される。任意選択により、カルバメート保護基は、Mocからさらに選択される。一実施形態において、RCは、細胞結合剤への接続のための官能基が欠けているリンカー基RLである。この出願は、特に、カルバメートであるRC基に関する。一実施形態において、RCは以下の基であり、ここで、アスタリスクはN10位への結合点を示し、G2は終端基であり、L3は共有結合又は切断可能なリンカーL1であり、L2は共有結合であるか、又はOCと一緒に自己犠牲リンカーを形成する。L3及びL2がともに共有結合である場合、G2及びOCは一緒に、上記で定義されている通りのカルバメート保護基を形成する。L1は、R10に関連して上記で定義されている通りである。L2は、R10に関連して上記で定義されている通りである。様々な終端基は、よく知られている保護基に基づくものを含めて、下記に記載されている。一実施形態において、L3は切断可能なリンカーL1であり、L2は、OCと一緒に、自己犠牲リンカーを形成する。この実施形態において、G2はAc若しくはMoc、又はAlloc、Fmoc、Boc、Troc、Teoc、Psec、Cbz及びPNZから選択されるカルバメート保護基である。任意選択により、カルバメート保護基はMocからさらに選択される。別の実施形態において、G2はアシル基CG3であり、ここで、G3は、アルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクリル及びアリールを含めるから選択される。これらの基は置換されていてもよい。アシル基はL3又はL2のアミノ基と一緒に、適切な場合、アミド結合を形成することができる。アシル基はL3又はL2のヒドロキシ基と一緒に、適切な場合、エステル結合を形成することができる。一実施形態において、G3はヘテロアルキルである。ヘテロアルキル基はポリエチレングリコールを含むことができる。ヘテロアルキル基は、アシル基に隣接するO又はNなどのヘテロ原子を有することができ、それによって、適切な場合にはL3基又はL2基に存在するヘテロ原子とともに、適切な場合にはカルバメート基又はカーボネート基を形成する。一実施形態において、G3は、NH2、NHR及びNRRから選択される。好ましくは、G3はNRRである。一実施形態において、G2は以下の基であり、ここで、アスタリスクはL3への結合点を示し、nは0から6であり、G4は、OH、OR、SH、SR、COOR、CONH2、CONHR、CONRR、NH2、NHR、NRR、NO2及びハロから選択される。OH基、SH基、NH2基及びNHR基は保護されている。一実施形態において、nは1から6であり、好ましくはnは5である。一実施形態において、G4はOR、SR、COOR、CONH2、CONHR、CONRR及びNRRである。一実施形態において、G4はOR、SR及びNRRである。好ましくはG4は、OR及びNRRから選択され、最も好ましくはG4はORである。最も好ましくはG4はOMeである。一実施形態において、G2基は、であり、ここで、アスタリスクはL3への結合点を示し、n及びG4は上記で定義されている通りである。一実施形態において、G2基は、であり、ここで、アスタリスクはL3への結合点を示し、nは0又は1であり、mは0から50であり、G4は、OH、OR、SH、SR、COOR、CONH2、CONHR、CONRR、NH2、NHR、NRR、NO2及びハロから選択される。好ましい実施形態において、nは1であり、mは0から10、1から2、好ましくは4から8、及び最も好ましくは4又は8である。別の実施形態において、nは1であり、mは10から50、好ましくは20から40である。OH基、SH基、NH2基及びNHR基は保護されている。一実施形態において、G4はOR、SR、COOR、CONH2、CONHR、CONRR及びNRRである。一実施形態において、G4はOR、SR及びNRRである。好ましくはG4は、OR及びNRRから選択され、最も好ましくはG4はORである。好ましくはG4はOMeである。一実施形態において、G2基は、であり、ここで、アスタリスクはL3への結合点を示し、n、m及びG4は上記で定義されている通りである。一実施形態において、G2基は、であり、ここで、nは1~20であり、mは0~6であり、G4は、OH、OR、SH、SR、COOR、CONH2、CONHR、CONRR、NH2、NHR、NRR、NO2及びハロから選択される。一実施形態において、nは1~10である。別の実施形態において、nは10から50、好ましくは20から40である。一実施形態において、nは1である。一実施形態において、mは1である。OH基、SH基、NH2基及びNHR基は保護されている。一実施形態において、G4はOR、SR、COOR、CONH2、CONHR、CONRR及びNRRである。一実施形態において、G4はOR、SR及びNRRである。好ましくはG4は、OR及びNRRから選択され、最も好ましくはG4はORである。好ましくはG4はOMeである。一実施形態において、G2基は、であり、ここで、アスタリスクはL3への結合点を示し、n、m及びG4は上記で定義されている通りである。上記実施形態のそれぞれにおいて、G4はOH、SH、NH2及びNHRであってよい。これらの基は、好ましくは保護されている。一実施形態において、OHは、Bzl、TBDMS、又はTBDPSで保護されている。一実施形態において、SHは、Acm、Bzl、BzlOMe、BzlMe又はTrtで保護されている。一実施形態において、NH2又はNHRは、Boc、Moc、ZCl、Fmoc、Z又はAllocで保護されている。一実施形態において、G2基は、ジペプチドであるL3基との組合せで存在する。キャッピング基は、細胞結合剤への接続を意図されていない。したがって、二量体に存在する他方の単量体は、リンカーを介する細胞結合剤への接続点として働く。すなわち、キャッピング基に存在する官能性が、細胞結合剤との反応に利用可能でないことが好ましい。したがって、OH、SH、NH2、COOHなどの反応性官能基は、避けることが好ましい。しかし、こうした官能性は、上記した通りに保護されているならば、キャッピング基に存在することができる。本発明の化合物の調製において、キャッピング基を使用することで、リンカーRLを調製することができる。抗体薬物コンジュゲート化合物の例示的な実施形態は、抗体、及び抗体がリンカー部分によってPBDに結合されているPBD薬物部分を含み、該組成物は下記式を有し、Abpここで、pは1から約8の整数であり、薬物負荷を表す。Abがシステイン操作抗体であるならば、チオール反応性リンカー部分を介して抗体分子にコンジュゲートすることができる薬物部分の数は、本明細書に記載されている方法によって導入されるシステイン残基の数によって限定される。例示的なADCは、したがって、1種、2種、3種又は4種の操作システインアミノ酸を有する抗体を含む。好ましい化合物一実施形態において、コンジュゲートは、単量体のそれぞれがC2メチレン基を有し、即ち各R2がCH2である二量体である。細胞結合剤は抗体であることが好ましい。別の実施形態において、コンジュゲートは、単量体のそれぞれがC2アリール基を有し、即ち各R2が、置換されていてもよいC5~20アリールである二量体である。細胞結合剤は抗体であることが好ましい。C2アルキレン一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、nは0又は1である。L1及びL2はすでに定義されている通りであり、RE及びREは、H又はRDからそれぞれ独立して選択される。一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、nは0又は1である。L1、L2及びG2はすでに定義されている通りであり、RE及びREは、H又はRDからそれぞれ独立して選択される。一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、nは0又は1である。L1はすでに定義されている通りであり、RE及びREは、H又はRDからそれぞれ独立して選択される。一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、nは0又は1である。L1はすでに定義されている通りであり、RE及びREは、H又はRDからそれぞれ独立して選択される。一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、nは0又は1である。L1はすでに定義されている通りであり、RE及びREは、H又はRDからそれぞれ独立して選択される。一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、nは0又は1である。L1はすでに定義されている通りであり、RE及びREは、H又はRDからそれぞれ独立して選択される。上記化合物のそれぞれに関し、以下の優先は、適切な場合に適用される。nは0であり、nは1であり、REはHであり、REはRDであり、ここでRDは、置換されていてもよいアルキルであり、REはRDであり、ここでRDはメチルであり、CBAは抗体であり、CBAは環式ペプチドであり、L1はジペプチドであるか、又はこれを含み、L1はValAla又はPheLysであり、ここで及びは、それぞれのN末端及びC末端を示し、L2はpアミノベンジレンであり、G2は、Alloc、Fmoc、Boc、Troc、Teoc、Psec、Cbz及びPNZから選択される。以下の優先も、上記の優先に加えて適用することができる。G2は、であり、ここで、アスタリスクはL1のN末端への結合点を示し、Aは、であり、ここで、アスタリスクはL1のN末端への結合点を示し、波線は細胞結合剤への結合点を示し、mは4又は8であり、Aは、であり、ここで、アスタリスクはL1のN末端への結合点を示し、波線は細胞結合剤への結合点を示し、mは4又は8である。特に好ましい実施形態において、nは1であり、REはHであり、CBAは抗体であり、L1はValAla又はPheLysであり、ここで及びはそれぞれのN末端及びC末端を示し、L2はpアミノベンジレンであり、G2は、であり、ここで、アスタリスクはL1のN末端への結合点を示し、Aは、であり、ここで、アスタリスクはL1のN末端への結合点を示し、波線は細胞結合剤への結合点を示す。C2アリール一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、ここで、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、L1及びL2はすでに定義されている通りであり、Ar1及びAr2は、それぞれ独立して置換されていてもよいC5~20アリールであり、nは0又は1である。Ar1及びAr2は同じであるか、又は異なっていてよい。一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、L1、L2及びG2はすでに定義されている通りであり、Ar1及びAr2は、それぞれ独立して置換されていてもよいC5~20アリールであり、nは0又は1である。一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、L1はすでに定義されている通りであり、Ar1及びAr2は、それぞれ独立して置換されていてもよいC5~20アリールであり、nは0又は1である。一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、L1はすでに定義されている通りであり、Ar1及びAr2は、それぞれ独立して置換されていてもよいC5~20アリールであり、nは0又は1である。一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、nは0又は1である。L1はすでに定義されている通りであり、Ar1及びAr2は、それぞれ独立して置換されていてもよいC5~20アリールであり、nは0又は1である。一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、nは0又は1である。L1はすでに定義されている通りであり、Ar1及びAr2は、それぞれ独立して置換されていてもよいC5~20アリールであり、nは0又は1である。一実施形態において、上記実施形態のそれぞれにおけるAr1及びAr2は、置換されていてもよいフェニル、フラニル、チオフェニル及びピリジルからそれぞれ独立して選択される。一実施形態において、上記実施形態のそれぞれにおけるAr1及びAr2は、置換されていてもよいフェニルである。一実施形態において、上記実施形態のそれぞれにおけるAr1及びAr2は、置換されていてもよいチオフェン2イル又はチオフェン3イルである。一実施形態において、上記実施形態のそれぞれにおけるAr1及びAr2は、置換されていてもよいキノリニル又はイソキノリニルである。キノリニル基又はイソキノリニル基は、任意の利用可能な環位置を介してPBD核に結合されていてよい。例えば、キノリニルは、キノリン2イル、キノリン3イル、キノリン4イル、キノリン5イル、キノリン6イル、キノリン7イル及びキノリン8イルであってよい。これらのうち、キノリン3イル及びキノリン6イルが好ましいことがある。イソキノリニルは、イソキノリン1イル、イソキノリン3イル、イソキノリン4イル、イソキノリン5イル、イソキノリン6イル、イソキノリン7イル及びイソキノリン8イルであってよい。これらのうち、イソキノリン3イル及びイソキノリン6イルが好ましいことがある。C2ビニル一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、L1及びL2はすでに定義されている通りであり、RV1及びRV2は、H、メチル、エチル及びフェニル並びにC5~6ヘテロシクリルから独立して選択され、nは0又は1である。RV1及びRV2は同じであるか、又は異なっていてよい。一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、L1、L2及びG2はすでに定義されている通りであり、RV1及びRV2は、H、メチル、エチル及びフェニル並びにC5~6ヘテロシクリルから独立して選択され、nは0又は1である。RV1及びRV2は同じであるか、又は異なっていてよい。一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、L1はすでに定義されている通りであり、RV1及びRV2は、H、メチル、エチル及びフェニル並びにC5~6ヘテロシクリルから独立して選択され、nは0又は1である。RV1及びRV2は同じであるか、又は異なっていてよい。一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、L1はすでに定義されている通りであり、RV1及びRV2は、H、メチル、エチル及びフェニル並びにC5~6ヘテロシクリルから独立して選択され、nは0又は1である。RV1及びRV2は同じであるか、又は異なっていてよい。一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、nは0又は1である。L1はすでに定義されている通りであり、RV1及びRV2は、H、メチル、エチル及びフェニル並びにC5~6ヘテロシクリルから独立して選択され、nは0又は1である。RV1及びRV2は同じであるか、又は異なっていてよい。一実施形態において、コンジュゲートは以下の化合物であり、式中、CBAは、抗体又は環式若しくは直鎖のペプチドなどの細胞結合剤であり、nは0又は1である。L1はすでに定義されている通りであり、RV1及びRV2は、H、メチル、エチル及びフェニル並びにC5~6ヘテロシクリルから独立して選択され、nは0又は1である。RV1及びRV2は同じであるか、又は異なっていてよい。上記実施形態の一部において、RV1及びRV2は、H、フェニル及び4フルオロフェニルから独立して選択することができる。好ましい中間体本発明は、本明細書に記載されているコンジュゲート化合物の調製における使用のための中間体も提供する。好ましい中間体は下に記載されており、上に記載されている好ましいコンジュゲートに密接に対応する。一実施形態において、中間体は以下の化合物であり、式中、nは0又は1であり、G1、L1及びL2はすでに定義されている通りであり、RE及びREは、H又はRDからそれぞれ独立して選択される。一実施形態において、中間体は以下の化合物であり、式中、G1、L1及びL2はすでに定義されている通りであり、Ar1及びAr2は、それぞれ独立して置換されていてもよいC5~20アリールであり、nは0又は1である。Ar1及びAr2は同じであるか、又は異なっていてよい。一実施形態において、中間体は以下の化合物であり、式中、G1、L1及びL2はすでに定義されている通りであり、RV1及びRV2は、H、メチル、エチル及びフェニル並びにC5~6ヘテロシクリルから独立して選択され、nは0又は1である。RV1及びRV2は同じであるか、又は異なっていてよい。一実施形態において、中間体は以下の化合物であり、式中、nは0又は1であり、L1はすでに定義されている通りであり、RE及びREは、H又はRDからそれぞれ独立して選択される。一実施形態において、中間体は以下の化合物であり、式中、L1はすでに定義されている通りであり、Ar1及びAr2は、それぞれ独立して置換されていてもよいC5~20アリールであり、nは0又は1である。一実施形態において、中間体は以下の化合物であり、式中、L1はすでに定義されている通りであり、RV1及びRV2は、H、メチル、エチル及びフェニル並びにC5~6ヘテロシクリルから独立して選択され、nは0又は1である。RV1及びRV2は同じであるか、又は異なっていてよい。一実施形態において、中間体は以下の化合物であり、式中、nは0又は1であり、L1はすでに定義されている通りであり、RE及びREは、H又はRDからそれぞれ独立して選択される。一実施形態において、中間体は以下の化合物であり、式中、nは0又は1であり、L1はすでに定義されている通りであり、Ar1及びAr2は、それぞれ独立して置換されていてもよいC5~20アリールであり、nは0又は1である。一実施形態において、中間体は以下の化合物であり、式中、L1はすでに定義されている通りであり、RV1及びRV2は、H、メチル、エチル及びフェニル並びにC5~6ヘテロシクリルから独立して選択され、nは0又は1である。RV1及びRV2は同じであるか、又は異なっていてよい。置換基置換されていてもよいという成句は、本明細書で使用される場合、非置換であってよいか又は置換されていてよい親基に関する。別段の指定がない限り、置換されているという用語は、本明細書で使用される場合、1個又は複数の置換基を保有する親基に関する。置換基という用語は、本明細書において従来の意味で使用され、共有結合されているか又は適切な場合には親基に縮合されている化学成分を指す。多種多様な置換基がよく知られており、それらの形成及び様々な親基への導入のための方法もよく知られている。好ましい実施形態において、本明細書に記載されている置換基は、細胞結合剤に反応性でない基に限定される。本事例における細胞結合剤への連結は、PBD化合物のN10位からリンカー基を介して細胞結合剤に形成される。PBD構造の他の部分に位置される反応性官能基は、細胞結合剤への追加の結合を形成する能力があり得る。これらの追加の結合は、コンジュゲートの輸送及び生物活性を変更することができる。したがって、一部の実施形態において、追加の置換基は、反応性官能性を欠くものに限定される。一実施形態において、置換基は、R、OR、SR、NRR、NO2、ハロ、CO2R、COR、CONH2、CONHR及びCONRRからなる群から選択される。一実施形態において、置換基は、R、OR、SR、NRR、NO2、CO2R、COR、CONH2、CONHR及びCONRRからなる群から選択される。一実施形態において、置換基は、R、OR、SR、NRR、NO2及びハロからなる群から選択される。一実施形態において、置換基は、R、OR、SR、NRR及びNO2からなる群から選択される。上述されている実施形態の任意の一つは、本明細書に記載されている置換基の任意の一つに適用することができる。別法として、置換基は、下記に列挙されている基の一つ又は複数から選択することができる。置換基の例は、より詳細に下に記載されている。C1~12アルキルC1~12アルキルという用語は、本明細書で使用される場合、脂肪族又は脂環式であってよく、飽和又は不飽和であってよい1個から12個の炭素原子を有する炭化水素化合物の炭素原子から水素原子を除去することによって得られる一価の部分に関する。したがって、アルキルという用語には、下記で考察されている下位部類のアルケニル、アルキニル、シクロアルキルなどが含まれる。飽和アルキル基の例には、これらに限定されないが、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びヘプチルが含まれる。飽和直鎖アルキル基の例には、これらに限定されないが、メチル、エチル、nプロピル、nブチル、nペンチル、nヘキシル及びnヘプチルが含まれる。飽和分枝アルキル基の例には、イソプロピル、イソブチル、secブチル、tertブチル、イソペンチル、及びネオペンチルが含まれる。アルキル基は、O、N及びSから選択される1個又は複数のヘテロ原子によって、中断されていてもよい。こうした基は、ヘテロアルキルと称することができる。C2~20ヘテロアルキルC2~12ヘテロアルキルという用語は、本明細書で使用される場合、2個から12個の炭素原子、及びO、N及びS、好ましくはO及びSから選択される1個又は複数のヘテロ原子を有する炭化水素化合物の炭素原子から水素原子を除去することによって得られる一価の部分に関する。ヘテロアルキル基の例には、これらに限定されないが、型の一種又は複数のエチレングリコール単位を含むものが含まれる。ヘテロアルキル基の末端は、ヘテロ原子の主要形態、例えばOH、SH又はNH2であってよい。好ましい実施形態において、末端はCH3である。C2~12アルケニルC2~12アルケニルという用語は、本明細書で使用される場合、1個又は複数の炭素炭素二重結合を有するアルキル基に関する。不飽和アルケニル基の例には、これらに限定されないが、エテニル、1プロペニル、2プロペニル、イソプロペニルCH2、ブテニル、ペンテニル及びヘキセニルが含まれる。C2~12アルキニルC2~12アルキニルという用語は、本明細書で使用される場合、1個又は複数の炭素炭素三重結合を有するアルキル基に関する。不飽和アルキニル基の例には、これらに限定されないが、エチニル及び2プロピニルが含まれる。C3~12シクロアルキルC3~12シクロアルキルという用語は、本明細書で使用される場合、シクリル基でもあるアルキル基に関し、それは、環式炭化水素化合物の芳香族環原子から水素原子を除去することによって得られる一価の部分であり、この部分は、3個から7個の環原子を含めて、3個から7個の炭素原子を有する。シクロアルキル基の例には、これらに限定されないが、飽和単環式炭化水素化合物シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロヘプタン、メチルシクロプロパン、ジメチルシクロプロパン、メチルシクロブタン、ジメチルシクロブタン、メチルシクロペンタン、ジメチルシクロペンタン及びメチルシクロヘキサン、不飽和単環式炭化水素化合物シクロプロペン、シクロブテン、シクロペンテン、シクロヘキセン、メチルシクロプロペン、ジメチルシクロプロペン、メチルシクロブテン、ジメチルシクロブテン、メチルシクロペンテン、ジメチルシクロペンテン及びメチルシクロヘキセン、並びに飽和多環式炭化水素化合物ノルカラン、ノルピナン、ノルボルナンから誘導されるものが含まれる。C3~20ヘテロシクリルC3~20ヘテロシクリルという用語は、本明細書で使用される場合、複素環式化合物の環原子から水素原子を除去することによって得られる一価の部分に関し、この部分は、1個から10個が環ヘテロ原子である3個から20個の環原子を有する。好ましくは、各環は、1個から4個が環ヘテロ原子である3個から7個の環原子を有する。この文脈において、接頭辞は、炭素原子又はヘテロ原子のいずれであっても、環原子の数又は環原子の数の範囲を表す。例えば、C5~6ヘテロシクリルという用語は、本明細書で使用される場合、5個又は6個の環原子を有するヘテロシクリル基に関する。単環式ヘテロシクリル基の例には、これらに限定されないが、N1アジリジン、アゼチジン、ピロリジン、ピロリン、2Hピロール又は3Hピロール、ピペリジン、ジヒドロピリジン、テトラヒドロピリジン、アゼピン、O1オキシラン、オキセタン、オキソラン、オキソール、オキサン、ジヒドロピラン、ピラン、オキセピン、S1チイラン、チエタン、チオラン、チアン、チエパン、O2ジオキソラン、ジオキサン、及びジオキセパン、O3トリオキサン、N2イミダゾリジン、ピラゾリジン、イミダゾリン、ピラゾリン、ピペラジン、N1O1テトラヒドロオキサゾール、ジヒドロオキサゾール、テトラヒドロイソキサゾール、ジヒドロイソキサゾール、モルホリン、テトラヒドロオキサジン、ジヒドロオキサジン、オキサジン、N1S1チアゾリン、チアゾリジン、チオモルホリン、N2O1オキサジアジン、O1S1オキサチオール及びオキサチアン、及びN1O1S1オキサチアジンから誘導されるものが含まれる。置換単環式ヘテロシクリル基の例には、環状形態における糖類、例えば、アラビノフラノース、リキソフラノース、リボフラノース及びキシロフラノースなどのフラノース、並びにアロピラノース、アルトロピラノース、グルコピラノース、マンノピラノース、グロピラノース、イドピラノース、ガラクトピラノース及びタロピラノースなどのピラノースから誘導されるものが含まれる。C5~20アリールC5~20アリールという用語は、本明細書で使用される場合、芳香族化合物の芳香環原子から水素原子を除去することによって得られる一価の部分に関し、この部分は3個から20個の環原子を有する。好ましくは、各環は5個から7個の環原子を有する。この文脈において、接頭辞は、炭素原子又はヘテロ原子のいずれであっても、環原子の数又は環原子の数の範囲を表す。例えば、C5~6アリールという用語は、本明細書で使用される場合、5個又は6個の環原子を有するアリール基に関する。環原子は、カルボアリール基におけるように、全て炭素原子であってよい。カルボアリール基の例には、これらに限定されないが、ベンゼン、ナフタレン、アズレン、アントラセン、フェナントレン、ナフタセン及びピレンから誘導されるものが含まれる。少なくとも1個が芳香環である縮合環を含むアリール基の例には、これらに限定されないが、インダン、インデン、イソインデン、テトラリン、アセナフテン、フルオレン、フェナレン、アセフェナントレン、及びアセアントレンから誘導される基が含まれる。別法として、環原子には、ヘテロアリール基におけるように、1個又は複数のヘテロ原子が含まれる。単環式ヘテロアリール基の例には、これらに限定されないが、N1ピロール、ピリジン、O1フラン、S1チオフェン、N1O1オキサゾール、イソオキサゾール、イソキサジン、N2O1オキサジアゾール、N3O1オキサトリアゾール、N1S1チアゾール、イソチアゾール、N2イミダゾール、ピラゾール、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、N3トリアゾール、トリアジン、及びN4テトラゾールから誘導されるものが含まれる。縮合環を含むヘテロアリールの例には、これらに限定されないが、ベンゾフラン、イソベンゾフラン、インドール、イソインドール、インドリジン、インドリン、イソインドリン、プリン、ベンズイミダゾール、インダゾール、ベンゾオキサゾール、ベンゾイソオキサゾール、ベンゾジオキソール、ベンゾフラザン、ベンゾトリアゾール、ベンゾチオフラン、ベンゾチアゾール、ベンゾチアジアゾールから誘導されるC9クロメン、イソクロメン、クロマン、イソクロマン、ベンゾジオキサン、キノリン、イソキノリン、キノリジン、ベンズオキサジン、ベンゾジアジン、ピリドピリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、フタラジン、ナフチリジン、プテリジンから誘導されるC10ベンゾジアゼピンから誘導されるC11カルバゾール、ジベンゾフラン、ジベンゾチオフェン、カルボリン、ペリミジン、ピリドインドールから誘導されるC13及びアクリジン、キサンテン、チオキサンテン、オキサントレン、フェノキサチイン、フェナジン、フェノキサジン、フェノチアジン、チアントレン、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジンから誘導されるC14が含まれる。上記の基は、単独又は別の置換基の一部のいずれであっても、それら自体及び下記に列挙されている追加の置換基から選択される1個又は複数の基でそれら自体が置換されていてもよい。ハロF、Cl、Br及びI。ヒドロキシOH。エーテルOR、式中、Rはエーテル置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基、又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。アルコキシOR、式中、Rはアルキル基、例えば、C1~7アルキル基である。C1~7アルコキシ基の例には、これらに限定されないが、OMe、OEt、O、O、O、O、O及びOが含まれる。アセタールCH、式中、R1及びR2は独立して、アセタール置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基若しくはC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基であるか、又は環式アセタール基の場合、R1及びR2は、それらが結合している二個の酸素原子及びそれらが結合している炭素原子と一緒になって、4個から8個の環原子を有する複素環を形成する。アセタール基の例には、これらに限定されないが、CH2、CH2及びCHが含まれる。ヘミアセタールCH、式中、R1はヘミアセタール置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。ヘミアセタール基の例には、これらに限定されないが、CH及びCHが含まれる。ケタールCR、ここで、R1及びR2は、アセタールに関して定義されている通りであり、Rは、水素以外のケタール置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。ケタール基の例には、これらに限定されないが、C2、C2、C、C2、C2及びCが含まれる。ヘミケタールCR、ここで、R1は、ヘミアセタールに関して定義されている通りであり、Rは、水素以外のヘミケタール置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。ヘミアセタール基の例には、これらに限定されないが、C、C、C及びCが含まれる。オキソO。チオンS。イミノNR、式中、Rはイミノ置換基、例えば、水素、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくは水素又はC1~7アルキル基である。エステル基の例には、これらに限定されないが、NH、NMe、NEt及びNPhが含まれる。ホルミルCH。アシルCR、式中、Rはアシル置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。アシル基の例には、これらに限定されないが、CCH3、CCH2CH3、CC3及びCPHが含まれる。カルボキシCOH。チオカルボキシCSH。チオロカルボキシCSH。チオノカルボキシCOH。イミド酸COH。ヒドロキサム酸COH。エステルCOR、式中、Rはエステル置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。エステル基の例には、これらに限定されないが、COCH3、COCH2CH3、COC3及びCOPhが含まれる。アシルオキシOCR、式中、Rはアシルオキシ置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。アシルオキシ基の例には、これらに限定されないが、OCCH3、OCCH2CH3、OCC3、OCPh及びOCCH2Phが含まれる。オキシカルボイルオキシOCOR、式中、Rはエステル置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。エステル基の例には、これらに限定されないが、OCOCH3、OCOCH2CH3、OCOC3及びOCOPhが含まれる。アミノNR1R2、式中、R1及びR2は独立して、アミノ置換基、例えば、水素、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基若しくはC5~20アリール基、好ましくはH又はC1~7アルキル基であるか、又は環式アミノ基の場合、R1及びR2は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、4個から8個の環原子を有する複素環を形成する。アミノ基は一級、二級又は三級であってよく、カチオン形態において四級であってよい。アミノ基の例には、これらに限定されないが、NH2、NHCH3、NHC2、N2、N2及びNHPhが含まれる。環式アミノ基の例には、これらに限定されないが、アジリジノ、アゼチジノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ、モルホリノ及びチオモルホリノが含まれる。アミドCNR1R2、式中、R1及びR2は独立して、アミノ基に関して定義されている通りのアミノ置換基である。アミド基の例には、これらに限定されないが、CNH2、CNHCH3、CN2、CNHCH2CH3及びCN2、並びにR1及びR2が、それらが結合している窒素原子と一緒に、例えばピペリジノカルボニル、モルホリノカルボニル、チオモルホリノカルボニル及びピペラジノカルボニルにおけるようなヘテロ環構造を形成するアミド基が含まれる。チオアミドCNR1R2、式中、R1及びR2は独立して、アミノ基に関して定義されている通りのアミノ置換基である。アミド基の例には、これらに限定されないが、CNH2、CNHCH3、CN2及びCNHCH2CH3が含まれる。アシルアミドNR1CR2、式中、R1はアミド置換基、例えば、水素、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくは水素又はC1~7アルキル基であり、R2はアシル置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくは水素又はC1~7アルキル基である。アシルアミド基の例には、これらに限定されないが、NHCCH3、NHCCH2CH3及びNHCPhが含まれる。R1及びR2は一緒に、例えば、スクシンイミジル、マレイミジル及びフタルイミジルにおけるような環構造を形成することができる。アミノカルボニルオキシOCNR1R2、式中、R1及びR2は独立して、アミノ基に関して定義されている通りのアミノ置換基である。アミノカルボニルオキシ基の例には、これらに限定されないが、OCNH2、OCNHMe、OCNMe2及びOCNEt2が含まれる。ウレイドNCONR2R3、式中、R2及びR3は独立して、アミノ基に関して定義されている通りのアミノ置換基であり、R1はウレイド置換基、例えば、水素、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくは水素又はC1~7アルキル基である。ウレイド基の例には、これらに限定されないが、NHCONH2、NHCONHMe、NHCONHEt、NHCONMe2、NHCONEt2、NMeCONH2、NMeCONHMe、NMeCONHEt、NMeCONMe2及びNMeCONEt2が含まれる。グアニジノNHCNH2。テトラゾリル四個の窒素原子及び1個の炭素原子を有する五員芳香環。イミノNR、式中、Rはイミノ置換基、例えば、水素、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはH又はC1~7アルキル基である。イミノ基の例には、これらに限定されないが、NH、NMe及びNEtが含まれる。アミジンCNR2、式中、各Rはアミジン置換基、例えば、水素、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはH又はC1~7アルキル基である。アミジン基の例には、これらに限定されないが、CNH2、CNMe2及びCNMe2が含まれる。ニトロNO2。ニトロソNO。アジドN3。シアノCN。イソシアノNC。シアナトOCN。イソシアナートNCO。チオシアノSCN。イソチオシアノNCS。スルフヒドリルSH。チオエーテルSR、式中、Rはチオエーテル置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。C1~7アルキルチオ基の例には、これらに限定されないが、SCH3及びSCH2CH3が含まれる。ジスルフィドSSR、式中、Rはジスルフィド置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。C1~7アルキルジスルフィド基の例には、これらに限定されないが、SSCH3及びSSCH2CH3が含まれる。スルフィンSR、式中、Rはスルフィン置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。スルフィン基の例には、これらに限定されないが、SCH3及びSCH2CH3が含まれる。スルホンS2R、式中、Rはスルホン置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくは例えばフッ化又は過フッ素化C1~7アルキル基を含めてC1~7アルキル基である。スルホン基の例には、これらに限定されないが、S2CH3、S2CF3、S2CH2CH3、S2C4F9、S2CH2CF3、S2CH2CH2NH2、S2Ph、4メチルフェニルスルホニル、4クロロフェニルスルホニル、4ブロモフェニルスルホニル、4ニトロフェニル、2ナフタレンスルホネート及び5ジメチルアミノナフタレン1イルスルホネートが含まれる。スルフィン酸SOH、SO2H。スルホン酸S2OH、SO3H。スルフィネートSOR、式中、Rはスルフィネート置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。スルフィネート基の例には、これらに限定されないが、SOCH3及びSOCH2CH3が含まれる。スルホネートS2OR、式中、Rはスルホネート置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。スルホネート基の例には、これらに限定されないが、S2OCH3及びS2OCH2CH3が含まれる。スルフィニルオキシOSR、式中、Rはスルフィニルオキシ置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。スルフィニルオキシ基の例には、これらに限定されないが、OSCH3及びOSCH2CH3が含まれる。スルホニルオキシOS2R、式中、Rはスルホニルオキシ置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。スルホニルオキシ基の例には、これらに限定されないが、OS2CH3及びOS2CH2CH3が含まれる。サルフェートOS2OR、式中、Rはサルフェート置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。サルフェート基の例には、これらに限定されないが、OS2OCH3及びSO2OCH2CH3が含まれる。スルファミルSNR1R2、式中、R1及びR2は独立して、アミノ基に関して定義されている通りのアミノ置換基である。スルファミル基の例には、これらに限定されないが、SNH2、SNH、SN2、SNH、SN2及びSNHPhが含まれる。スルホンアミドS2NR1R2、式中、R1及びR2は独立して、アミノ基に関して定義されている通りのアミノ置換基である。スルホアミド基の例には、これらに限定されないが、S2NH2、S2NH、S2N2、S2NH、S2N2及びS2NHPhが含まれる。スルファミノNR1S2OH、式中、R1は、アミノ基に関して定義されている通りのアミノ置換基である。スルファミノ基の例には、これらに限定されないが、NHS2OH及びNS2OHが含まれる。スルホンアミノNR1S2R、式中、R1は、アミノ基に関して定義されている通りのアミノ置換基であり、Rはスルホンアミノ置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。スルホンアミノ基の例には、これらに限定されないが、NHS2CH3及びNS2C6H5が含まれる。スルフィンアミノNR1SR、式中、R1は、アミノ基に関して定義されている通りのアミノ置換基であり、Rはスルフィンアミノ置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基である。スルフィンアミノ基の例には、これらに限定されないが、NHSCH3及びNSC6H5が含まれる。ホスフィノPR2、式中、Rはホスフィノ置換基、例えば、H、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはH、C1~7アルキル基又はC5~20アリール基である。ホスフィノ基の例には、これらに限定されないが、PH2、P2、P2、P2及びP2が含まれる。ホスホP2。ホスフィニルPR2、式中、Rはホスフィニル置換基、例えば、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはC1~7アルキル基又はC5~20アリール基である。ホスフィニル基の例には、これらに限定されないが、P2、P2、P2及びP2が含まれる。ホスホン酸P2。ホスホネートP2、ここで、Rはホスホネート置換基、例えば、H、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはH、C1~7アルキル基又はC5~20アリール基である。ホスホネート基の例には、これらに限定されないが、P2、P2、P2及びP2が含まれる。リン酸OP2。ホスフェートOP2、ここで、Rはホスフェート置換基、例えば、H、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはH、C1~7アルキル基又はC5~20アリール基である。ホスフェート基の例には、これらに限定されないが、OP2、OP2、OP2及びOP2が含まれる。亜リン酸OP2。ホスファイトOP2、ここで、Rはホスファイト置換基、例えば、H、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはH、C1~7アルキル基又はC5~20アリール基である。ホスファイト基の例には、これらに限定されないが、OP2、OP2、OP2及びOP2が含まれる。ホスホラミダイトOPNR22、ここで、R1及びR2はホスホラミダイト置換基、例えば、H、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはH、C1~7アルキル基、又はC5~20アリール基である。ホスホラミダイト基の例には、これらに限定されないが、OPN2、OPN2及びOPN2が含まれる。ホスホルアミデートOPNR22、ここで、R1及びR2はホスホルアミデート置換基、例えば、H、C1~7アルキル基、C3~20ヘテロシクリル基又はC5~20アリール基、好ましくはH、C1~7アルキル基又はC5~20アリール基である。ホスホルアミデート基の例には、これらに限定されないが、OPN2、OPN2及びOPN2が含まれる。アルキレンC3~12アルキレンC3~12アルキレンという用語は、本明細書で使用される場合、脂肪族又は脂環式であってよく、飽和、部分不飽和又は完全不飽和であってよい3個から12個の炭素原子を有する炭化水素化合物の二個の水素原子を、両方が同じ炭素原子から又は一方ずつが二個の異なる炭素原子のそれぞれから除去することによって得られる二座部分に関する。したがって、アルキレンという用語には、下記で考察されている下位部類のアルケニレン、アルキニレン、シクロアルキレンなどが含まれる。直鎖の飽和C3~12アルキレン基の例には、これらに限定されないが、nが3から12の整数であるn、例えば、CH2CH2CH2、CH2CH2CH2CH2、CH2CH2CH2CH2CH2及びCH2CH2CH2Ch2CH2CH2CH2が含まれる。分枝飽和C3~12アルキレン基の例には、これらに限定されないが、CHCH2、CHCH2CH2、CHCH2CH2CH2、CH2CHCH2、CH2CHCH2CH2、CH、CHCH2及びCH2CHCH2が含まれる。直鎖の部分不飽和C3~12アルキレン基の例には、これらに限定されないが、CHCHCH2、CH2CHCH2、CHCHCH2CH2、CHCHCH2CH2CH2、CHCHCHCH、CHCHCHCHCH2、CHCHCHCHCH2CH2、CHCHCH2CHCH、CHCHCH2CH2CHCH及びCH2C≡CCH2が含まれる。分枝の部分不飽和C3~12アルキレン基の例には、これらに限定されないが、CCH、CCHCH2、CHCHCH及びC≡CCHが含まれる。脂環式の飽和C3~12アルキレン基の例には、これらに限定されないが、シクロペンチレン及びシクロヘキシレンが含まれる。脂環式の部分不飽和C3~12アルキレン基の例には、これらに限定されないが、シクロペンテニレン、シクロヘキセニレンが含まれる。他の形態が含まれる別段の指定がない限り、上記に含まれるのは、これらの置換基のよく知られているイオン性形態、塩形態、溶媒和物形態及び保護形態である。例えば、カルボン酸への言及には、そのアニオン性形態、塩又は溶媒和物、並びに従来の保護形態も含まれる。同様に、アミノ基への言及には、アミノ基のプロトン化形態、塩又は溶媒和物、例えば塩酸塩、並びにアミノ基の従来の保護形態が含まれる。同様に、ヒドロキシル基への言及には、そのアニオン性形態、塩又は溶媒和物、並びに従来の保護形態も含まれる。塩該活性化合物の対応する塩、例えば、薬学的に許容される塩を調製、精製及び又は取り扱うことは好都合又は望ましくあり得る。薬学的に許容される塩の例は、Bergeら、JPharmSci、66、1~19において考察されている。例えば、化合物がアニオン性であるか、又はアニオン性であり得る官能基を有するならば、適当なカチオンと塩を形成することができる。適当な無機カチオンの例には、これらに限定されないが、Na及びKなどのアルカリ金属イオン、Ca2及びMg2などのアルカリ土類カチオン、並びにAl3などの他のカチオンが含まれる。適当な有機カチオンの例には、これらに限定されないが、アンモニウムイオン及び置換アンモニウムイオンが含まれる。一部の適当な置換アンモニウムイオンの例は、エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミン及びトロメタミン、並びにリシン及びアルギニンなどのアミノ酸から誘導されるものである。通常の第4級アンモニウムイオンの一例はN4である。化合物がカチオン性であるか、又はカチオン性であり得る官能基を有するならば、適当なアニオンと塩を形成することができる。適当な無機アニオンの例には、これらに限定されないが、以下の有機酸塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、亜硫酸、硝酸、亜硝酸、リン酸及び亜リン酸から誘導されるものが含まれる。適当な有機アニオンの例には、これらに限定されないが、以下の有機酸2アセチオキシ安息香酸、酢酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、桂皮酸、クエン酸、エデト酸、エタンジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプタン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシナフタレンカルボン酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、粘液酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモン酸、パントテン酸、フェニル酢酸、フェニルスルホン酸、プロピオン酸、ピルビン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、酒石酸、トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸及び吉草酸から誘導されるものが含まれる。適当なポリマー有機アニオンの例には、これらに限定されないが、以下のポリマー酸タンニン酸、カルボキシメチルセルロースから誘導されるものが含まれる。溶媒和物該活性化合物の対応する溶媒和物を調製、精製及び又は取り扱うことは好都合又は望ましくあり得る。溶媒和物という用語は、本明細書において、溶質及び溶媒の複合体を指す従来の意味で使用される。溶媒が水であるならば、溶媒和物は、好都合には水和物、例えば一水和物、二水和物、三水和物などと称することもできる。本発明には、溶媒がPBD部分のイミン結合を横切って加わる化合物が含まれ、これを下記に例示するが、ここで、溶媒は水又はアルコールである。これらの形態は、PBDのカルビノールアミン形態及びカルビノールアミンエーテル形態と呼ぶことができる。これらの平衡のバランスは、化合物が見出される条件、並びに該部分自体の性質に依存する。これらの特別な化合物は、例えば凍結乾燥によって、固体形態に単離することができる。異性体本発明の特定の化合物は、これらに限定されないが、以下異性体と称される、シス及びトランス形態、E及びZ形態、c、t及びr形態、エンド及びエキソ形態、R、S及びメソ形態、D及びL形態、d及びl形態、及び形態、ケト、エノール及びエノラート形態、syn及びanti形態、向斜及び背斜形態、α及びβ形態、アキシアル及びエクアトリアル形態、舟、椅子、ねじれ、エンベロープ及び半椅子形態、並びにそれらの組合せを含めて、一種又は複数の特別な幾何形態、光学形態、エナンチオマー形態、ジアステレオマー形態、エピマー形態、アトロプ形態、立体異性体形態、互変異性体形態、立体配座形態又はアノマー形態で存在することができる。キラルという用語は、鏡像パートナーの重ねることができない特性を有する分子を指し、一方アキラルという用語は、鏡像パートナー上に重ねられる分子を指す。立体異性体という用語は、同一の化学構成を有するが、空間における原子又は基の配列に関して異なる化合物を指す。ジアステレオマーは、二つ以上のキラリティー中心を有し、この分子が互いの鏡像ではない立体異性体を指す。ジアステレオマーは、異なる物性、例えば融点、沸点、スペクトル特性及び反応性を有する。ジアステレオマーの混合物は、電気泳動法及びクロマトグラフィーなどの高分解能分析手順の下で分離することができる。エナンチオマーは、互いに重ねることができない鏡像化合物の二個の立体異性体を指す。本明細書において使用される立体化学的な定義及び慣例は、一般に、SPParker、編集、McGrawHillDictionaryofChemicalTermsMcGrawHillBookCompany、NewYork並びにEliel、E及びWilen、S、StereochemistryofOrganicCompounds、JohnWileySons、Inc、NewYork、1994に従う。本発明の化合物は、不斉中心又はキラル中心を含有し、したがって異なる立体異性体形態で存在することができる。これらに限定されないが、ジアステレオマー、エナンチオマー及びアトロプ異性体、並びにラセミ混合物などのそれらの混合物を含めて、本発明の化合物の全ての立体異性体形態は、本発明の一部を形成することが意図されている。多くの有機化合物は光学活性形態で存在し、即ち、それらは平面偏光の平面を回転させる能力を有する。光学活性化合物を表す際、D及びL、又はR及びSという接頭辞は、そのキラル中心について分子の絶対配置を表すために使用される。d及びl、又は及びという接頭辞は、化合物が左旋性であることを意味する又はlで、該化合物による平面偏光の回転の徴候を指定するために用いられる。又はdを接頭辞として付けられた化合物は右旋性である。所与の化学構造に関し、これらの立体異性体は、互いの鏡像であることを除いて同一である。特異的立体異性体はエナンチオマーと称されることもあり、こうした異性体の混合物はしばしばエナンチオマー混合物と呼ばれる。エナンチオマーの5050の混合物は、ラセミ混合物又はラセミ体と称され、これは、化学反応又は化学プロセスにおいて立体選択又は立体特異性がなかった場合に生じ得る。ラセミ混合物及びラセミ体という用語は、光学活性を欠いている二つのエナンチオマー種の等モル混合物を指す。互変異性体形態に関して下記で考察されている場合を除き、本明細書で使用される通りの異性体という用語から特に除外されるのは、構造異性体であることに留意されたい。例えば、メトキシ基、OCH3への言及は、その構造異性体、ヒドロキシメチル基、CH2OHへの言及と解釈されるべきではない。同様に、オルトクロロフェニルへの言及は、その構造異性体、メタクロロフェニルへの言及と解釈されるべきではない。しかし、構造のクラスへの言及は、そのクラス内に入る構造異性体形態が当然含まれる。上記の除外は、例えば以下の互変異性対ケトエノール、イミンエナミン、アミドイミノアルコール、アミジンアミジン、ニトロソオキシム、チオケトンエンチオール、Nニトロソヒドロキシアゾ、及びニトロaciニトロにおけるような、互変異性体形態、例えばケト形態、エノール形態及びエノラート形態に関するものではない。互変異性体又は互変異性体形態という用語は、低エネルギー障壁を介して相互変換可能である異なるエネルギーの構造異性体を指す。例えば、プロトン互変異性体互変異性体としても知られているには、ケトエノール及びイミンエナミン異性化などプロトンの移動を介する相互変換が含まれる。原子価互変異性体には、結合性電子の一部の再編成による相互変換が含まれる。異性体という用語に特に含まれるのは、一つ又は複数の同位体置換を有する化合物であることに留意されたい。例えば、Hは、1H、2H及び3Hを含めて、任意の同位体形態であってよく、Cは、12C、13C及び14Cを含めて、任意の同位体形態であってよく、Oは、16O及び18Oを含めて、任意の同位体形態であってよい、などである。本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例には、これらに限定されないが、2H、3H、11C、13C、14C、15N、18F、31P、32P、35S、36Cl及び125Iなど、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素及び塩素の同位体が含まれる。本発明の様々な同位体標識化合物、例えば3H、13C及び14Cなどの放射性同位元素が組み込まれているもの。こうした同位体標識化合物は、薬物若しくは基質組織分布アッセイを含めて、陽電子放射断層撮影法若しくは単光子放射型コンピューター断層撮影法など、代謝研究、反応動態研究、検出技術若しくは造影技術において、又は患者の放射性治療において有用であり得る。本発明の重水素標識又は重水素置換された治療的化合物は、分布、代謝及び排出に関連する改善されたDMPK特性を有することができる。重水素など、より重い同位体での置換は、より大きな代謝的安定性、例えばインビボ半減期の増加又は投与量要求の低減から生じる特定の治療的利点を得ることができる。18F標識化合物は、PET又はSPECTの研究に有用であり得る。本発明の同位体標識化合物及びそれらのプロドラッグは、一般に、非同位体標識試薬の代わりに容易に利用可能な同位体標識試薬を代用することによる、下に記載されているスキーム、又は実施例及び調製において開示されている手順を実施することによって調製することができる。さらに、より重い同位体、特に重水素での置換で、より大きな代謝的安定性、例えばインビボ半減期の増加又は投与量要求の低減又は治療指数の向上から生じる特定の治療的利点が得られることがある。重水素は、この文脈において、置換基とみなされると理解される。こうしたより重い同位体、特に重水素の濃度は、同位体濃縮因子によって定義することができる。本発明の化合物において、特定の同位体として特に指定されていない任意の原子は、その原子の任意の安定同位体を表すと意味される。別段の指定がない限り、特定の化合物への言及には、そのラセミ混合物及び他の混合物を含めて、全てのこうした異性体形態が含まれる。こうした異性体形態の調製及び分離のための方法は、当技術分野において知られているか、又は本明細書において教示されている方法、若しくは公知の様式における公知の方法を適応することによって容易に得られるかのいずれかである。生物活性インビトロ細胞増殖アッセイ一般に、抗体薬物コンジュゲートの細胞毒性活性又は細胞分裂停止活性は、受容体タンパク質、例えばHER2を有する哺乳動物細胞を、細胞培養培地におけるADCの抗体に曝露し、細胞を約6時間から約5日の期間培養し、細胞生存能を測定することによって測定される。細胞ベースのインビトロアッセイを使用することで、本発明のADCの生存能、細胞毒性、及びアポトーシスの誘発を測定する。抗体薬物コンジュゲートのインビトロ効力は、細胞増殖アッセイによって測定することができる。CellTiterGloLuminescentCellViabilityAssayは、鞘翅目ルシフェラーゼの組換え発現に基づく市販の均一アッセイ方法である。この細胞増殖アッセイは、存在するATPの定量化に基づく培養液中の生細胞の数、代謝的に活性な細胞の指標を決定するJImmunolMeth16081~88US6602677。CellTiterGloAssayは、96ウェルのフォーマット中で行い、それを自動ハイスループットスクリーニングに受け入れ可能にするAntiCancerDrugs6398~404。均一アッセイ手順は、単一試薬Reagentを、血清補充培地中で培養された細胞に直接添加することを伴う。細胞洗浄、培地の除去及び複数のピペッティングステップは必要とされない。該系は、試薬を添加し、混合した後10分で384ウェルのフォーマット中にわずか15細胞ウェルを検出する。該細胞はADCで連続的に処理することができるか、又はそれらは処理され、ADCから分離することができる。一般には、簡潔に、即ち3時間処理された細胞は、連続的に処理された細胞と同じ効力効果を示した。均一添加混合測定フォーマットは、細胞溶解、及び存在するATPの量に比例した発光シグナルの発生をもたらす。ATPの量は、培養液中に存在する細胞の数に直接比例する。CellTiterGloアッセイは、ルシフェラーゼ反応によって生成されるグロー型発光シグナルを発生させ、これは、細胞型及び使用培地に依存して一般に五時間を超える半減期を有する。生細胞は相対発光単位において反映される。該基質カブトムシルシフェリンは、AMPへのATPの同時変換及び光子の発生とともに、組換えホタルルシフェラーゼによって酸化的に脱炭酸される。インビボ効力本発明の抗体薬物コンジュゲートのインビボ効力は、マウスにおける腫瘍異種移植研究によって測定することができる。例えば、本発明の抗HER2ADCのインビボ効力は、高発現性HER2トランスジェニック外植マウスモデルによって測定することができる。同種移植は、HERCEPTIN治療法に応答しないか、又は不十分に応答するFo5mmtvトランスジェニックマウスから増殖させる。対象を、特定の用量レベルでのADC、及びPBD薬物曝露、並びにプラセボ緩衝剤対照で一度治療し、二週間以上モニタリングすることで、腫瘍倍増、対数細胞死滅及び腫瘍収縮への時間を測定した。使用発明のコンジュゲートは、PBD化合物を標的位置で提供するために使用することができる。標的位置は、好ましくは増殖性細胞集団である。抗体は増殖性細胞集団に存在する抗原に対する抗体である。一実施形態において、抗原は存在しないか、又は増殖性細胞集団、例えば腫瘍細胞集団に存在する抗原の量と比較して、非増殖性細胞集団における低減されたレベルで存在する。標的位置において、リンカーを切断することで、式の化合物を放出することができる。したがって、コンジュゲートを使用することで、式の化合物を標的位置に選択的に提供することができる。リンカーは、標的位置に存在する酵素によって切断することができる。標的位置はインビトロ、インビボで又はエックスビボであってよい。本発明の抗体薬物コンジュゲート化合物には、抗癌活性に有用性を持つものが含まれる。特に、該化合物には、リンカーによってPBD薬物部分、即ち毒素にコンジュゲートされており、即ち共有結合されている抗体が含まれる。薬物が抗体にコンジュゲートされていない場合、PBD薬物は細胞毒性効果を有する。PBD薬物部分の生物活性は、したがって、抗体へのコンジュゲーションによってモジュレートされる。本発明の抗体薬物コンジュゲートは、細胞毒性剤の有効量を腫瘍組織に選択的に送達し、それによって、より大きな選択性、即ちより低い有効用量を達成することができる。したがって、一態様において、本発明は、治療中に使用するための、本明細書に記載されている通りのコンジュゲート化合物を提供する。さらなる態様において、増殖性疾患の治療において使用するための、本明細書に記載されている通りのコンジュゲート化合物を提供する。本発明の第二態様は、増殖性疾患を治療するための薬物の製造におけるコンジュゲート化合物の使用を提供する。当業者は、候補コンジュゲートが任意の特定の細胞型に対する増殖状態を治療するか否かを容易に決定できる。例えば、特定の化合物によって提供された活性を評価するために好都合に使用することができるアッセイが、下記の実施例に記載されている。増殖性疾患という用語は、インビトロ又はインビボにかかわらず、腫瘍性又は過形成性の成長など所望されない過剰又は異常な細胞の望まれない又は未制御の細胞増殖に関する。増殖状態の例には、これらに限定されないが、新生物及び腫瘍、癌、白血病、乾癬、骨疾患、線維増殖性障害及びアテローム性動脈硬化を含めて、これらに限定されないが、良性、前悪性及び悪性の細胞増殖が含まれる。特に対象とする癌には、これらに限定されないが、白血病及び卵巣癌が含まれる。これらに限定されないが、肺、胃腸管、乳房、卵巣、前立腺、肝臓、腎臓、膀胱、膵臓、脳及び皮膚を含めて、任意の型の細胞を治療することができる。一実施形態において、治療は膵癌である。一実施形態において、治療は、細胞の表面上にανβ6インテグリンを有する腫瘍である。本発明の抗体薬物コンジュゲートは、例えば腫瘍抗原の過剰発現を特徴とする様々な疾患又は障害を治療するために使用することができると企図される。例示的状態又は過剰増殖性障害には、良性又は悪性の腫瘍白血病、血液系腫瘍及びリンパ系悪性腫瘍が含まれる。他には、ニューロン、グリア、星状細胞、視床下部、腺性、マクロファージ、上皮、ストロマ、胞胚腔、炎症性、血管新生、及び自己免疫性を含めた免疫性の障害が含まれる。一般に、治療される疾患又は障害は、癌などの過剰増殖性疾患である。本発明において治療される癌の例には、これらに限定されないが、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、及び白血病又はリンパ系悪性腫瘍が含まれる。こうした癌の、より特別な例には、扁平細胞癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌及び肺の扁平癌腫を含めた肺癌、腹膜の癌、肝細胞癌、消化管癌を含めた胃性癌又は胃癌、膵癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞腫、乳癌、大腸癌、直腸癌、直腸結腸癌、子宮内膜癌腫又は子宮癌腫、唾液腺癌腫、腎臓癌又は腎性癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝臓癌腫、肛門癌腫、陰茎癌腫、並びに頭頸部癌が含まれる。ADC化合物が治療に使用され得る自己免疫疾患には、リウマチ障害、骨関節炎、自己免疫性の胃腸及び肝臓障害、自己免疫性の胃炎及び悪性貧血、自己免疫性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎及びセリアック病など、血管炎、自己免疫性神経障害、腎臓障害、自己免疫性皮膚科障害、じん麻疹、尋常性天疱瘡、水疱性類天疱瘡及び皮膚ループスエリテマトーデスなど、血液障害、アテローム性動脈硬化、ぶどう膜炎、自己免疫性聴覚疾患、ベーチェット病、レイノー症候群、臓器移植、並びに自己免疫性内分泌障害などの糖尿病関連自己免疫疾患、アジソン病及び自己免疫性甲状腺疾患などが含まれる。より優先されるこうした疾患には、例えば、関節リウマチ、潰瘍性大腸炎、ANCA関連血管炎、ループス、多発性硬化症、シェーグレン症候群、グレーブス病、IDDM、悪性貧血、甲状腺炎、及び糸球体腎炎が含まれる。治療の方法本発明のコンジュゲートは、治療法の方法に使用することができる。治療の必要がある対象に治療有効量の本発明のコンジュゲート化合物を投与することを含む、治療の方法も提供される。治療有効量という用語は、患者に利益を示すのに十分な量である。こうした利益は、少なくとも一つの症状の少なくとも寛解であり得る。投与される実際の量並びに投与の速度及び時間経過は、治療されているものの性質及び重症度に依存する。治療の処方、例えば投与量の決定は、一般の開業医及び他の医師の責任の範囲内である。本発明の化合物は、単独で又は他の治療と組み合わせて、治療される状態に依存して同時又は逐次のいずれかで投与することができる。治療及び治療法の例には、これらに限定されないが、化学療法、外科手術及び放射線療法が含まれる。化学療法剤は、作用機序にかかわらず癌の治療に有用な化合物である。化学療法剤のクラスには、これらに限定されないが、アルキル化試薬、代謝拮抗剤、紡錘体毒植物アルカロイド、細胞毒性抗腫瘍性抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、抗体、光感受性物質及びキナーゼ阻害剤が含まれる。化学療法剤には、標的とされる治療法及び従来の化学療法に使用されている化合物が含まれる。化学療法剤の例には、エルロチニブ、GenentechOSIPharm、ドセタキセル、SanofiAventis、5FU、ゲムシタビン、Lilly、PD0325901、シスプラチン、CAS番号15663271、カルボプラチン、パクリタキセル、BristolMyersSquibbOncology、Princeton、NJ、トラスツズマブ、Genentech、テモゾロマイド、TEMODAL、ScheringPlough、タモキシフェン24フェノキシNNジメチルエタンアミン、NOLVADEX、ISTUBAL、VALODEX、及びドキソルビシン、Akti12、HPPD、及びラパマイシンが含まれる。化学療法剤のさらなる例には、オキサリプラチン、Sanofi、ボルテゾミブ、MillenniumPharm、スーテント、SU11248、Pfizer、レトロゾール、Novartis、イマチニブメシレート、Novartis、XL518、ARRY886、SF1126、BEZ235、XL147、PTK787ZK222584、フルベストラント、AstraZeneca、ロイコボリン、ラパマイシン、Wyeth、ラパチニブ、GSK572016、GlaxoSmithKline、ロナファーニブ、SCH66336、ScheringPlough、ソラフェニブ、BAY439006、BayerLabs、ゲフィチニブ、AstraZeneca、イリノテカン、CPT11、Pfizer、チピファルニブ、JohnsonJohnson、ABRAXANE、パクリタキセルのアルブミン操作ナノ粒子処方物、バンデタニブ、AstraZeneca、クロラムブシル、AG1478、AG1571、テムシロリムス、Wyeth、パゾパニブ、カンフォスファミド、Telik、チオテパ及びシクロスホスファミド、NEOSARブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファンなどのアルキルスルホネートベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ及びウレドーパなどのアジリジンアルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド及びトリメチロメラミンを含めて、エチレンイミン及びメチルアメラミンアセトゲニンカンプトテシンブリオスタチンカリスタチンCC1065クリプトフィシンドラスタチンデュオカルマイシンエリュテロビンパンクラチスタチンサルコジクチンスポンギスタチンクロランブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシドヒドロクロライド、メルファラン、ノブエンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタードカルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロリムスチン、ニムスチン及びラニムスチンなどのニトロソ尿素エンジイン抗生物質33183~186ジネミシン、ジネミシンAクロドロネートなどのビスフォスフォネートエスペラマイシン並びにネオカルチノスタチン発色団及び関連する色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オートラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシニス、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、6ジアゾ5オキソLノルロイシン、モルホリノドキソルビシン、シアノモルホリノドキソルビシン、2ピロリノドキソルビシン及びデオキシドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、ネモルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンCなどのマイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシンなどの抗生物質メトトレキセート及び5フルオロウラシルなどの抗代謝物デノプテリン、メトトレキセート、プテロプテリン、トリメトレキセートなどの葉酸類似体フルダラビン、6メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリン類似体アンシタビン、アザシチジン、6アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクシウリジンなどのピリミジン類似体カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲンアミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎剤フォリン酸などの葉酸補充液アセグラトンアルドホスファミドグリコシドアミノレブリン酸エニルウラシルアムサクリンベストラブシルビスアントレンエダトラキセートデフォファミンデメコルシンジアジクォンエルフォルニチ酢酸エリプチニウムエポチロンエトグルシド硝酸ガリウムヒドロキシ尿素レンチナンロイダイニンメイタンシン及びアンサマイトシンなどのメイタンシノイドミトグアゾンミトキサントロンモピダンモールニトラエリンペントスタチンフェナメットピラルビシンロソキサントロンポドフィリン酸2エチルヒドラジドプロカルバジンPSK多糖類複合体ラゾキサンリゾキシンシゾフィランスピロゲルマニウムテヌアゾン酸トリアジクオン222トリクロロトリエチルアミントリコテセンA、ロリジンA及びアングイジンウレタンビンデシンダカルバジンマンノムスチンミトブロニトールミトラクトールピポブロマンガシトシンアラビノシドシクロホスファミドチオテパ6チオグアニンメルカプトプリンメトトレキセートシスプラチン及びカルボプラチンなどの白金類似体ビンブラスチンエトポシドイホスファミドミトキサントロンビンクリスチンビノレルビンノバントロンテニポシドエダトレキセートダウノマイシンアミノプテリンカペシタビン、RocheイバンドロネートCPT11トポイソメラーゼ阻害剤RFS2000ジフロロメチルオルニチンレチノイン酸などのレチノイド並びに上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸及び誘導体が含まれる。化学療法剤の定義にさらに含まれるのは、例えばタモキシフェンクエン酸タモキシフェンを含める、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、4ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、LY117018、オナプリストン、及びFARESTONを含めて、抗エストロゲン及び選択的エストロゲン受容体モジュレーターなど、腫瘍に対するホルモン作用を調節又は阻害する作用をする抗ホルモン剤、例えば4イミダゾール、アミノグルテチミド、MEGASE、AROMASIN、ホルメスタニー、ファドロゾール、RIVISOR、FEMARA及びARIMIDEXなど、副腎におけるエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、リュープロリド及びゴセレリン並びにトロキサシタビンなどの抗アンドロゲン、MEK阻害剤などのタンパク質キナーゼ阻害剤、脂質キナーゼ阻害剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に、異所性細胞増殖に関係するシグナル伝達経路における遺伝子の発現を阻害するもの、例えば、オブリメルセン、GentaIncなどのPKCアルファ、Raf及びHRas、VEGF発現阻害剤及びHER2発現阻害剤などのリボザイム、遺伝子治療ワクチンなどのワクチン、例えば、ALLOVECTIN、LEUVECTIN及びVAXIDPROLEUKINrIL2ラルトテカンなどのトポイソメラーゼ1阻害剤アバレリクスrmRH、ベバシズマブ、Genentechなどの血管新生抑制物質並びに上記の任意の薬学的に許容される塩、酸及び誘導体である。化学療法剤の定義にさらに含まれるのは、アレムツズマブ、ベバシズマブ、Genentechセツキシマブ、Imcloneパニツムマブ、Amgen、リツキシマブ、GenentechBiogenIdec、ペルツズマブ、2C4、Genentech、トラスツズマブ、Genentech、トシツモマブ及び抗体薬物コンジュゲート、ゲムツズマブオゾガマイシン、Wyethなどの治療的抗体である。本発明のコンジュゲートと組み合わせた化学療法剤として治療的可能性を有するヒト化単クローン抗体には、アレムツズマブ、アポリズマブ、アセリズマブ、アトリズマブ、バピネオズマブ、ベバシズマブ、ビバツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ、セルトリズマブペゴール、シドフシツズマブ、シドツズマブ、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エピラツズマブ、エルリズマブ、フェルビズマブ、フォントリズマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、モトビズマブ、ナタリズマブ、ニモツズマブ、ノロビズマブ、ヌマビズマブ、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリズマブ、ペクフシツズマブ、ペルツズマブ、ペルツズマブ、パキセリズマブ、ラリビズマブ、ラニビズマブ、レスリビズマブ、レスリズマブ、レシビズマブ、ロベリズマブ、ルプリズマブ、シブロツズマブ、シプリズマブ、ソンツズマブ、タカツズマブテトラキセタン、タドシズマブ、タリズマブ、テフィバズマブ、トシリズマブ、トラリズマブ、トラスツズマブ、ツコツズマブセルモロイキン、ツクシツズマブ、ウマビズマブ、ウルトキサズマブ及びビシリズマブが含まれる。本発明による、及び本発明に従った使用のための医薬組成物は、該活性成分、即ちコンジュゲート化合物に加えて、薬学的に許容される賦形剤、担体、緩衝剤、安定剤、又は当業者によく知られている他の材料を含むことができる。こうした材料は非毒性であるべきであり、活性成分の効力を妨げるべきではない。担体又は他の材料の正確な性質は投与の経路に依存し、これは経口であるか、又は例えば皮膚、皮下若しくは静脈内の注入によるものであってよい。経口投与のための医薬組成物は、錠剤、カプセル、粉末又は液状の形態であってよい。錠剤は固体担体又はアジュバントを含むことができる。液体医薬組成物は、一般に、水、石油、動物油又は植物油、鉱油又は合成油などの液体担体を含む。生理的食塩水溶液、デキストロース若しくは他の多糖類溶液、又はエチレングリコール、プロピレングリコール若しくはポリエチレングリコールなどのグリコールが含まれ得る。カプセルは、ゼラチンなどの固体担体を含むことができる。静脈内、皮膚若しくは皮下の注入、又は苦痛部位での注入のために、該活性成分は、ピロゲンフリーであり、適当なpH、等張性及び安定性を有する非経口的に許容可能な水溶液の形態であってよい。当分野における関連技術者は、例えば塩化ナトリウム注入液、リンゲル注入液、乳酸リンゲル注入液などの等張ビヒクルを使用して適当な溶液を調製することが十分にできる。保存料、安定剤、緩衝剤、抗酸化剤及び又は他の添加剤が、必要とされる場合には含まれることができる。処方物コンジュゲート化合物を単独で使用することが可能である場合、それを組成物又は処方物として提供することがしばしば好ましい。一実施形態において、該組成物は、本明細書に記載されている通りのコンジュゲート化合物、及び薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤を含む医薬組成物である。一実施形態において、該組成物は、これらに限定されないが、薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤、アジュバント、充填剤、緩衝剤、保存料、酸化防止剤、潤滑剤、安定剤、可溶化剤、界面活性剤、マスキング剤、着色剤、香味剤及び甘味剤を含めて、当業者によく知られている一種又は複数の他の薬学的に許容される成分と一緒に、本明細書に記載されている通りの少なくとも一種のコンジュゲート化合物を含む医薬組成物である。一実施形態において、該組成物は、他の活性薬剤、例えば他の治療的薬剤又は予防剤をさらに含む。適当な担体、希釈剤、賦形剤などは、標準的な医薬品テキストで見つけることができる。例えば、HandbookofPharmaceuticalAdditives、第2版、2001、RemingtonsPharmaceuticalSciences、第20版、出版Lippincott、WilliamsWilkins、2000及びHandbookofPharmaceuticalExcipients、第2版、1994を参照されたい。本発明の別の態様は、本明細書において定義されている通りの少なくとも一種の11C放射標識コンジュゲート又はコンジュゲート様化合物を、当業者によく知られている一種又は複数の他の薬学的に許容される成分、例えば担体、希釈剤、賦形剤などと一緒に添加混合することを含む、医薬組成物を製造する方法に関する。個別の単位として処方される場合、各単位は、該活性化合物の所定量を含有する。薬学的に許容されるという用語は、本明細書で使用される場合、過剰な毒性、刺激、アレルギー応答、又は妥当な利益リスク比に相応する他の問題若しくは合併症がない、当該の対象の組織と接触して使用するのに健全な医学的判断の範囲内において適当である、化合物、成分、材料、組成物、剤形などに関する。それぞれの担体、希釈剤、賦形剤なども、処方物の他方の成分と相容性があるという意味において、許容されなければならない。該処方物は、製薬の当技術分野においてよく知られている任意の方法によって調製することができる。こうした方法には、一種又は複数の副成分を構成する担体と該活性化合物を会合させるステップが含まれる。一般に、該処方物は、該活性化合物を担体と均一及び密接に会合させ、次いで必要であれば該生成物を成形することによって調製される。該処方物は、急速放出若しくは緩徐放出即時放出、遅延放出、時限放出若しくは持続放出、又はそれらの組合せを提供するように調製することができる。非経口投与に適当な処方物には、水性又は非水性の等張のピロゲンフリー無菌液体が含まれ、この中には、活性成分が溶解、懸濁、又はそれ以外では提供されている。こうした液体は、酸化防止剤、緩衝剤、保存料、安定剤、静菌薬、懸濁剤、増粘剤、及び目的とするレシピエントの血液と処方物を等張にする溶質など、他の薬学的に許容される成分を追加として含有することができる。賦形剤の例には、例えば水、アルコール、ポリオール、グリセロール及び植物油などが含まれる。こうした処方物中に使用するための適当な等張担体の例には、塩化ナトリウム注入液、リンゲル液又は乳酸リンゲル注入液が含まれる。通常、該液体における活性成分の濃度は、約1ngmlから約10μgml、例えば約10ngmlから約1μgmlである。該処方物は、単位用量又は多用量の密閉容器、例えばアンプル及びバイアル中に提供することができ、使用の直前に注入用の滅菌液体担体、例えば水の添加だけを必要とする凍結乾燥した状態で貯蔵することができる。即座の注入溶液及び懸濁液は、滅菌粉末、顆粒及び錠剤から調製することができる。投与量コンジュゲート化合物及びコンジュゲート化合物を含む組成物の適切な投与量が患者によって様々であり得ることは、当分野の技術者によって理解されよう。最適な投与量を決定することは、一般に任意のリスク又は有害な副作用に対する治療的利益のレベルのバランスをとることを伴う。選択された投与量は、これらに限定されないが、特定の化合物の活性、投与の経路、投与の時間、化合物の排出速度、治療の持続期間、組み合わせて使用される他の薬物、化合物及び又は材料、状態の重症度、並びに患者の種、性別、年齢、重量、状態、全般的な健康及び前病歴を含めて、様々な因子に依存する。一般に投与量は、実質的に危険又は有害な副作用を引き起こすことなく所望の効果を達成する局所濃度を作用の部位で達成するように選択されるが、化合物の量及び投与の経路は、最終的に、医師、獣医又は臨床医の裁量による。投与は、治療の過程を通して、一用量にて連続的又は断続的に実行することができる。投与の最も有効な手段及び投与量を決定する方法は当業者によく知られており、治療法に使用される処方物、治療法の目的、治療される標的細胞、及び治療される対象によって変動する。単一又は複数の投与は、治療する医師、獣医又は臨床医によって選択される用量レベル及びパターンで実施することができる。一般に、活性化合物の適当な用量は、1日当たり、対象の1キログラム体重当たり約100ngから約25mgの範囲である。活性化合物が塩、エステル、アミド又はプロドラッグなどである場合、投与される量は親化合物に基づいて算出され、それで、使用される実際の重量が比例して増加される。一実施形態において、活性化合物は、以下の投与量計画に従ってヒト患者に投与される。約100mg、一日3回。一実施形態において、活性化合物は、以下の投与量計画に従ってヒト患者に投与される。約150mg、一日2回。一実施形態において、活性化合物は、以下の投与量計画に従ってヒト患者に投与される。約200mg、一日2回。しかし一実施形態において、コンジュゲート化合物は、以下の投与量計画に従ってヒト患者に投与される。約50mg又は約75mg、一日3回又は4回。一実施形態において、コンジュゲート化合物は、以下の投与量計画に従ってヒト患者に投与される。約100mg又は約125mg、一日2回。上に記載されている投与量は、コンジュゲート、又は提供されるPBD化合物の有効量、例えばリンカーの切断後に放出可能な化合物量に当てはまる。疾患の予防又は治療に関し、本発明のADCの適切な投与量は、上記で定義されている通りの治療される疾患の型、疾患の重症度及び過程、該分子が予防的目的のために投与されるのか又は治療的目的のために投与されるのか、以前の治療法、患者の臨床歴及び抗体に対する応答、並びに主治医の裁量に依存する。該分子は、一回で又は一連の治療にわたって患者に適切に投与される。疾患の型及び重症度に依存して約1μgkgから15mgkgの分子が、患者に投与するための初期候補投与量であり、例えば、一回又は複数の分離した投与によるか、又は持続注入によるかにかかわらない。典型的な一日投与量は、上述されている因子に依存して約1μgkgから100mgkg以上の範囲であり得る。患者に投与されるADCの例示的な投与量は、患者体重の約01mgkgから約10mgkgの範囲である。状態に依存して数日以上にわたる反復投与には、疾患症状の所望の抑制が生じるまで治療は持続される。例示的な投薬計画は、ADCの約4mgkgの初期負荷用量、続いて追加の用量を毎週、二週間毎又は三週間毎に投与する過程を含む。他の投与量計画も有用であり得る。治療法の進行は、従来技術及びアッセイによって容易にモニタリングされる。治療治療という用語は、状態を治療するという文脈において本明細書で使用される場合、一般に、一部の所望の治療的効果、例えば状態の進行の阻害が達成され、進行の速度における低減、進行の速度の停止、状態の後退、状態の寛解及び状態の治癒が含まれる、ヒト又は動物にかかわらない治療及び治療法に関する。予防的処置としての治療も含まれる。治療有効量という用語は、本明細書で使用される場合、所望の治療計画に従って投与される場合に妥当な利益リスク比に相応する一部の所望の治療的効果を生み出すのに有効である、活性化合物又は活性化合物を含む材料、組成物若しくは剤形のその量に関する。同様に、予防有効量という用語は、本明細書で使用される場合、所望の治療計画に従って投与される場合に妥当な利益リスク比に相応する一部の所望の予防的効果を生み出すのに有効である、活性化合物又は活性化合物を含む材料、組成物若しくは剤形のその量に関する。抗体薬物コンジュゲートの調製抗体薬物コンジュゲートは、共有結合を介して抗体リンカー中間体AbLを形成するための抗体の求核基又は求電子基と二価のリンカー試薬との反応、続いて活性化薬物部分試薬との反応、及び共有結合を介して薬物リンカー試薬DLを形成するための薬物部分試薬とリンカー試薬との反応、続いて抗体の求核基又は求電子基との反応を含めて、当業者に知られている有機化学反応、条件及び試薬を用いるいくつかの経路によって調製することができる。コンジュゲーション方法及びを様々な抗体及びリンカーとともに用いることで、本発明の抗体薬物コンジュゲートを調製することができる。抗体上の求核基には、これらに限定されないが、N末端アミン基、側鎖アミン基、例えばリシン、側鎖チオール基、例えばシステイン、及び抗体がグリコシル化されている糖ヒドロキシル基又はアミノ基が含まれる。アミン基、チオール基及びヒドロキシル基は求核性であり、反応することで、NHSエステル、HOBtエステル、ハロホルメート及び酸ハロゲン化物などの活性エステル、ハロアセトアミドなどアルキル及びベンジルのハロゲン化物、アルデヒド基、ケトン基、カルボキシル基及びマレイミド基を含めて、リンカー部分及びリンカー試薬上の求電子基と、共有結合を形成する能力がある。特定の抗体は、還元可能な鎖間ジスルフィド、即ちシステイン架橋を有する。抗体は、DTT又はTCEPホスフィン塩酸塩などの還元剤を用いる処理によって、リンカー試薬とのコンジュゲーションのために反応性にすることができるGetzら、AnalBiochem273巻73~80SoltecVentures、Beverly、MA。各システインジスルフィド架橋はしたがって理論的に、二種の反応性チオール求核試薬を形成する。チオールへのアミンの変換を生じるリシンと2イミノチオランとの反応を介して、追加の求核基を抗体に導入することができる。抗体薬物コンジュゲートは、リンカー試薬上の求核性置換基と反応することができる求電子性部分を導入するための抗体の修飾によっても生成することができる。グリコシル化抗体の糖類は、例えばペリオデート酸化試薬で酸化されることで、リンカー試薬又は薬物部分のアミン基と反応することができるアルデヒド基又はケトン基を形成することができる。生じるイミンシッフ塩基基は、安定な連鎖を形成することができるか、又は例えば水素化ホウ素試薬によって還元されることで、安定なアミン連結を形成することができる。一実施形態において、グリコシル化抗体の炭水化物部分とガラクトースオキシダーゼ又はメタ過ヨウ素酸ナトリウムのいずれかとの反応で、薬物上の適切な基と反応することができるタンパク質中のカルボニル基を得ることができるBioconjugateTechniquesAcademicPressNewYork、234~242頁。別の実施形態において、N末端セリン残基又はトレオニン残基を含有するタンパク質は、メタ過ヨウ素酸ナトリウムと反応することができ、第一アミノ酸の代わりにアルデヒドの生成をもたらすBioconjugateChem3138~146US5362852。こうしたアルデヒドは、薬物部分又はリンカー求核剤と反応することができる。同様に、薬物部分上の求核基には、これらに限定されないが、NHSエステル、HOBtエステル、ハロホルメート及び酸ハロゲン化物などの活性エステル、ハロアセトアミドなどアルキル及びベンジルのハロゲン化物、アルデヒド、ケトン、カルボキシル基及びマレイミド基を含めて、リンカー部分及びリンカー試薬の求電子基と共有結合を形成するために反応する能力があるアミン基、チオール基、ヒドロキシル基、ヒドラジド基、オキシム基、ヒドラジン基、チオセミカルバゾン基、ヒドラジンカルボキシレート基及びアリールヒドラジド基が含まれる。反応性求核基は、標準的な官能基相互変換によってアントラサイクリン誘導体化合物上に導入することができる。例えば、ヒドロキシル基は、光延型反応によってチオール基に変換することで、チオール修飾薬物化合物を形成することができる。対象患者対象患者は、動物、哺乳動物、胎盤哺乳動物、有袋類、単孔類、げっ歯類、ネズミ類、ウサギ類、トリ類、イヌ類、ネコ類、ウマ類、ブタ類、ヒツジ類、ウシ類、霊長類、サル類、サル、類人猿、又はヒトであってよい。さらに、対象患者は、その発生形態のいずれか、例えば、胎児であってよい。一つの好ましい実施形態において、対象患者はヒトである。一実施形態において、患者は、各患者が細胞の表面上にανβ6インテグリンを有する腫瘍を有する集団である。合成一実施形態において、式VIIIの二量体コンジュゲートは、スキーム1に示されている通り、化合物I及びIIから調製することができる。一般に、非対称二量体は、分子の対称を壊すために、一当量の市販されているクロロホルメート試薬で式IVのビスアミノ化合物を処理することによって調製することができる。残留遊離アミンを次いで独立して官能化することで、必要とされる治療的に不安定なプログループを導入することができる。PBDB環を閉じ、保護基及びキャッピング基を除去し、抗体連結官能基、例えばG1を導入するためのさらなる官能基操作で、標的分子が得られる。式IVの化合物は、通常、適切に官能化されたC環断片を、式IIの二量体核を含有するA環にカップリングすることによって調製される。C環断片は、公知のカルバメート保護メチル4オキソプロリネート構築ブロックから調製することができる。ウィッティヒ又はホーナーエモンズ条件下でのオレフィン化を用いることで、エンド又はエキソ不飽和アルケンを備えることができる。別法として、タンデムトリフル化反応及び鈴木カップリング反応を使用することで、4アリール置換34又は45不飽和C環断片を得ることができる。C環及びA環の断片は、標準条件下にてトリエチルアミンの存在下でA環断片の酸塩化物誘導体を使用してカップリングすることで、式IIIの分子を得ることができる。III型の化合物を、エンド又はエキソC環不飽和結合に影響することなく酢酸中の亜鉛で還元することで、式IVの分子を得ることができる。VI型の非対称カルバメートは、単一当量の市販されているクロロホルメートを用いて、ピリジン又はトリエチルアミンの存在下でIV型のビスアミンを処理することによって調製することができる。クロロホルメートが選択されることで、プログループ中に使用されるものと直交又は同一のいずれかであるカルバメートキャッピング単位を得ることができる。同一のカルバメートは両方の保護基の同時除去を可能にし、合成ステップを省く。しかし、キャッピングカルバメートの除去は、感受性なN10C11イミン又はカルビノールアミンの部分の存在下で行われる抗体連結官能性の付加を必要とする。必要であれば、この状況は、N10C11カルビノールアミン部分を保護されている状態に保持しながら抗体連結部分の付加を可能にする直交のカルバメート保護基の使用によって回避することができる。この戦略において、N10C11部分は、抗体連結部分の存在下でアンマスクしなければならず、使用される試薬は、この部分と相容性でなければならない。例えば、N10C11イミンがマレイミド基の存在下でアンマスクすることになるならば、脱保護剤のCdPbカップル及びTBAFはマレイミド基に影響するべきではないので、Troc及びTeocが適当なRC基である。ピロリジンなどのπアリルスカベンジャーが14様式でマレイミド基に付加することができるので、他方では、Alloc基は回避されるべきである。RLカルバメートは、残留アミノ基をイソシアネートに変換すること及びそれをRLアルコールでクエンチすることによって導入することができる。別法として、RLアルコールは、クロロホルメート又は官能性等価物に変換することができる。最終的に、残留アミノ基は、反応性のpニトロカルバメート、ペンタフルオロカルバメート又はヒドロキシベンゾトリアゾールカルバメートに変換することができ、これをRLアルコールと取り替えることで、式VIの分子を得ることができる。式VIIの分子は、メタノール水溶液中の炭酸カリウムを用いて、又はRL中のFmoc基の存在下にて水素化トリエチルホウ素リチウムを用いてアセテート保護基を除去することによって、式VIの分子から調製することができる。デスマーチンペルヨージナンでの酸化で、閉環生成物が得られる。式Vのコンジュゲートは、キャッピング基RCの除去、抗体などの細胞結合剤に標準条件下でコンジュゲートすることができる抗体連結部分を含めるためのRLの緻密化によって式VIIの分子から調製することができる。RLの緻密化には、細胞結合剤に接続するために次いで使用することができるG1基などのスペーサー成分を含めるために、該基を伸長するステップが含まれる。単量体化合物及び対称二量体は、上記の非対称二量体と同様の様式にて調製することができる。別の実施形態において、式XVIIIのコンジュゲートは、スキーム2に示されている通り、化合物IXから調製することができる。化合物II式の化合物の合成は、本出願人の以前の出願WO2006111759に記載されており、Gregsonらによっても記載されている。そこに記載されている通りの化合物の調製を、参照により本明細書に明確に組み込む。化合物は3個の炭素のリンカーを有する。化合物は五個の炭素のリンカーを有する。このスキームにおいて、R2基はC5~20アリール基である。式IXの化合物はWO2004043963に記載されている。式Xの化合物は、例えばTCCA及びTEMPOBAIB及びTEMPO、TPAP、デスマーチン条件、又はスワン条件を使用する酸化によって式IXの化合物から合成することができる。式IXの化合物は、式B及びCの適切な化合物、又はそれらの活性化誘導体をカップリングすることによって合成することができる。式B及びCの化合物は一般に市販されているか、又は容易に合成可能である。化合物Bが二量体ならば、これは、WO0012508に記載されている通りに合成することができる。式XIの化合物は、適切な無水物及び無水26ルチジン又は無水26tBuピリジンを用いて、35°C以下の温度で乾燥有機溶媒中にて不活性雰囲気下でXを処理することを含む方法で、式Xの化合物から調製することができる。XIには、C1~C2二重結合を有する化合物が実質的にない。C1~C2二重結合を有する化合物の調製は、Kangら、ChemCommun、2003、1680~1689によって記載されていることに留意されたい。式XIの化合物は、式XIIの化合物に変換することができる。変換は、XIと適切なアリールホウ素誘導体とのパラジウム触媒クロスカップリングによって実施される。パラジウム触媒は、任意の適当な触媒、例えばPd4、Pd2、PdCl2、Pd3であってよい。式XIIの化合物は、化合物XIIIを介して式XIVの化合物に変換することができる。変換は、最初にエステルの還元、及びアセテートとしての再保護によって達成される。還元は、標準的手段によって、例えばLiAlH4又はNaBH4を用いて達成することができる。アセテートとしての再保護は、例えば、塩化アセチルとの反応によって達成することができる。ニトロ基の還元は、次いで、例えば酢酸中の亜鉛を使用して実施される。式XIVの化合物は、式XVの化合物に変換することができる。この変換は、通例、イソシアネートを得るためのXIVとトリホスゲンとの反応、続いてRLOHとの反応によって達成される。この手法は、WO2005023814に記載されている。別法として、単純な窒素保護基も、クロロホルメート、フルオロホルメート又はアジドホルメートとして導入することができる。より複雑な窒素保護基、並びに単純な窒素保護基は、Oスクシンアミドカーボネート、Oペンタフルロフェニルカーボネート及びOニトロフェニルカーボネートとして導入することができる。XVからXVIIへの変換は、メタノール水溶液中の炭酸カリウムを用いるか、又は水素化トリエチルホウ素リチウムを用いる、アセテート保護基の初期除去によって達成することができる。デスマーチンペルヨージナンでの酸化で、閉環生成物が得られる。シリルエーテルがアセテートの代わりに使用されるならば、XVからXVIIへの変換は、例えばTHF中のTBAF、THF水溶液中の酢酸、DMF中のCsF、又はピリジン中のHFを使用するシリルエーテル保護基の初期除去、続いて上記した通りの酸化によって達成することができる。化合物XVIIIは、次いで、細胞結合剤に結合される。ステップの順序又はXVIIからXVIIIへのステップは、RLの性質に依存する。この基を修飾し、次いで細胞結合剤に結合することで、本発明のコンジュゲートを形成することができる。例えば、保護基キャップを除去することで、細胞結合剤との反応に適当な官能性基を提供することができる。他のステップにおいて、この同じ官能性基を使用することで、G1基などのさらなるスペーサー成分に接続することができ、そのスペーサー成分は次いで、順じて細胞結合剤に接続することができる。本発明の一部の実施形態において、式AA及びABの化合物を含めて、式AIの化合物が提供される。この型の化合物は、WO2010091150に記載されているものと同様の方法を使用して調製することができる。WO2010091150に記載されている中間体化合物も、上に記載されている方法に用いることができる。例えば、段落164に示されている二量体化合物は、上記スキームIにおける化合物として使用することができる。この型の単量体化合物は化合物、及びとして示されている。この適応物及びさらなる適応物は、当分野の技術者には明らかである。好ましい合成一実施形態において、コンジュゲートは化合物14であり、スキーム3に示されている通りに調製される。ジペプチド7ab及び8は、下記の実験項に記載されている通りに調製される。そのスキームにおいて、リンカー部分L1及びL2は、以下の構造を有する。ジペプチドがL2に対応する化合物13cは、類似の方法によって12cから調製することができる。一実施形態において、コンジュゲートは化合物16a又は16bであり、該化合物は下記スキーム4に示されている通りに調製され、ここで、化合物12aは上記した通りに調製することができる。本発明をここで、以下の非限定的な例を参照にしてさらに記載する。当業者には、これらの観点における本発明の他の実施形態が考えられる。本明細書において引用されている全ての文献の開示内容は、本発明を実施するために当業者がそれを使用することができるように、本明細書によって相互参照により本明細書に明確に組み込む。一般的情報反応の進行は、アルミニウムプレート上に蛍光指標を乗せたMerckKieselgel60F254シリカゲルを使用する薄層クロマトグラフィーによってモニタリングした。TLCの可視化は、別段の記述がない限り、UV光又はヨウ素蒸気で達成した。フラッシュクロマトグラフィーは、MerckKieselgel60F254シリカゲルを使用して行った。抽出及びクロマトグラフィーの溶媒は、FisherScientific、UKから購買し、さらに精製することなく使用した。全ての化学薬品は、Aldrich、Lancaster又はBDHから購入した。LCMS条件は以下の通りであった。HPLCは、水及びアセトニトリルの移動相を使用して実行した。勾配初期組成10分かけて5B、次いで3分以内で5Bから95B。該組成を05分間95Bで保持し、次いで03分で5Bに戻った。合計の勾配実行時間は5分に相当する。流量30mLmin、400μLは、質量分析計に入るゼロデッド体積のT字片を介してスプリットした。波長検出範囲220nmから400nm。関数型ダイオードアレイ。カラムPhenomeneOnyxMonolithicC1850×460mm。以下のセミ分取用HPLC方法が使用された。逆相高速液体クロマトグラフィーは、以下の寸法分析には150×46mm、及び分取作業には250×94mmのZorbaxEclipseXDBC18カラム上で実施した。全てのHPLC実験は、勾配条件初期固定組成20分かけて5Bから50B、5分間50Bで保持、次いで2分以内に50Bから100B、3分間100Bで保持、2分で5Bに戻り、3分間保持で行った。勾配実行の全持続期間は35分であった。使用された溶出液は、溶媒A及び溶媒Bであった。使用された流量は、分析には120mlmin、及び分取用HPLCには500mlminであった。化合物224メチレンピロリジニウムクロライド化合物2は、PBD化合物の調製においてWO2007085930での使用に関しても記載されている化合物2は、本明細書によって参照により組み込むWO2007085930に記載されている通り、トランス4ヒドロキシプロリンから調製することができる。特に、化合物2のTFA塩の調製を記載している実施例13が特に関連している。別法として、化合物2は、下に記載されている通りの化合物1から調製することができる。1tertブチル2メチル4メチレンピロリジン12ジカルボキシレート炭酸カリウムを、DMF中の化合物1の撹拌溶液に添加した。生じた白色懸濁液を室温で30分間撹拌し、この時点でヨードメタンを添加した。反応混合物を室温で3日間撹拌するままにした。DMFを減圧下での回転蒸発によって除去することで、黄色残渣が得られ、これを酢酸エチルと水との間で分配した。有機層を分離し、水性相を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。酢酸エチルを減圧下での回転蒸発によって除去することで、粗生成物を黄色の油として得た。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー85nヘキサン15酢酸エチルによって精製することで、該生成物が無色の油として得られた。24メチレンピロリジニウムクロライドジオキサン中の塩酸の溶液を、1tertブチル2メチル4メチレンピロリジン12ジカルボキシレートに室温で添加した。CO2の遊離及びBoc基の除去を示す泡立ちが観察された。該生成物が白色の固体として沈殿し、追加のジオキサンを添加することで撹拌を促進し、反応混合物を1時間撹拌するままにし、次いでエーテルで希釈した。沈殿した生成物を真空濾過によって回収し、追加のエーテルで洗浄した。空気乾燥で、所望の生成物2が白色の粉末として得られた。化合物3化合物3は、WO2006111759及びGregsonらに記載されている通りに調製することができる。化合物4化合物4は、化合物3及び化合物2から調製することができる。触媒的量の無水DMFを、無水DCM中の塩化オキサリル及び化合物3の撹拌懸濁液に、室温で添加した。激しい泡立ちがDMFの添加後に観察され、反応混合物を、塩化カルシウム乾燥管が取り付けられている丸底フラスコ中で18時間撹拌するままにした。生じた澄明な液を減圧下で蒸発させ、固体をエーテルで粉砕した。固体生成物を真空濾過によって回収し、追加のエーテルで洗浄し、真空中にて40°Cで15時間乾燥させた。この固体を次いで、TEA及び乾燥DCM中の化合物2の懸濁液に少量ずつ添加し、温度を40から50°Cの間にドライアイスアセトニトリル浴を用いて維持した。反応混合物を40°Cで1時間撹拌するままにし、次いで室温に温まるままにし、この時点で、LCMSは出発原料の完全な消費を示した。反応混合物を追加のDCMで希釈し、塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水、ブラインで順次洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。DCMを減圧下での回転蒸発によって除去することで、該生成物が黄色の気泡体として得られた。分析データRT395分MSmz741。化合物5化合物5は、ビスアルコール及びビスアセテートを介する三つのステップにおいて化合物4から調製することができる。ビスアルコール固体水素化ホウ素リチウムを、一度に、乾燥THF中のエステル4の溶液に、窒素雰囲気下にて0°Cで添加した。反応混合物を0°Cで30分間撹拌するままにし、次いで室温に温まるままにし、この時点で、オレンジのガムの沈殿物が観察された。反応混合物を室温でさらに2時間撹拌するままにし、次いで氷浴中で冷却し、水で処理することで、黄色懸濁液を得た。泡立ちが止まるまで、塩酸を慎重に添加した。反応混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。酢酸エチルを減圧下での回転蒸発によって除去することで、ビスアルコール生成物を黄色の気泡体として得た。該反応を124gスケールで反復することで、1106gの該生成物を得た。分析データRT337分MSmz685。ビスアセテート乾燥DCM中の塩化アセチルの溶液を、滴下により、乾燥DCM中のビスアルコール及びトリエチルアミンの撹拌溶液に、0°Cで窒素雰囲気下にて添加した。反応混合物を室温に温まるままにし、撹拌を一時間続けた。TLC及びLCMSは、反応が完了したことを明らかにした。反応混合物をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。減圧下での回転蒸発によるDCMの除去で粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィー20nヘキサン80酢酸エチルから10nヘキサン90酢酸エチルの勾配溶出で、純粋なビスアセテートを黄色の気泡体として得た。分析データRT335分MSmz769。化合物5亜鉛粉末を、エタノール及び酢酸中のビスアセテートの溶液に添加した。撹拌した反応混合物を還流で加熱し、黄色の溶液が無色になった。反応を一時間続くままにし、この時点でLCMSは、反応が完了したことを示した。反応混合物を冷却するままにし、セライトに通して濾過し、フィルターパッドをDCMで洗浄した。濾液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。減圧下での回転蒸発で、生成物5をオフホワイト気泡体として得た。分析データRT333分MSmz709。化合物6化合物6は、三つのステップにおいて化合物5から調製することができる。モノAlloc生成物乾燥DCM中のクロロギ酸アリルの溶液を、滴下により、乾燥DCM中の化合物5及びピリジンの溶液に、78°Cで添加した。反応混合物を78°Cで1時間撹拌し、次いで室温に達するままにした。反応混合物を飽和硫酸銅水溶液、水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。減圧下での回転蒸発で、粗生成物が暗い気泡体として得られた。フラッシュクロマトグラフィー40nヘキサン60酢酸エチルから5メタノール95酢酸エチルによる精製で、ビスalloc生成物、所望のモノalloc生成物及び回収ビスアニリンを得た。分析データRT332分MSmz793MSmz791、100。イソシアネートトリエチルアミンを、乾燥トルエン中のモノalloc生成物及びトリホスゲンの撹拌溶液に、窒素雰囲気下にて10°Cで添加した。1時間後、IR分光法はイソシアネートの伸展を2268cm1で明らかにし、反応混合物を室温に達するままにした。化合物6乾燥THF中のアルコール6a及びトリエチルアミンの溶液を、滴下により、新たに調製したイソシアネートに添加した。反応混合物を還流で4時間加熱し、この時、TLCが新規の生成物の形成を明らかにした。反応混合物を蒸発乾固させ、DCMと水との間で分配した。水層を分離し、有機相をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。減圧下での回転蒸発で、粗生成物が黄色の油として得られ、これをフラッシュクロマトグラフィー40nヘキサン60酢酸エチルから20nヘキサン80酢酸エチル、酢酸エチル中5ずつ増加の勾配溶出によって精製することで、所望の生成物が白色の気泡体として得られた。分析データRT405分MSmz15401557、50MSmz1585、50。化合物7化合物7は、二つのステップにおいて化合物6から調製することができる。ビス脱アセチル化生成物THF中のsuperhydrideの溶液を、シリンジを介する滴下により、乾燥THF中のアセテート6の撹拌溶液に、78°Cで添加した。反応混合物を78°Cで一時間撹拌するままにし、この時、LCMSは出発原料が無いこと、並びにモノ及びビス脱アセチル化生成物に対応する二種の新規の化合物の形成を明らかにした。superhydrideのさらなるアリコットを反応混合物に添加し、撹拌をさらに一時間続けた。この時点でのLCMSは、ビス脱アセチル化生成物への完全な変換を明らかにした。クエン酸を反応混合物に添加し、これを次いで室温に達するままにし、この時点で、クエン酸のさらなるアリコットを添加した。溶媒を減圧下での回転蒸発によって除去し、生じた残渣を酢酸エチルと水との間で分配した。水性相を分離し、酢酸エチル層を水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。減圧下での回転蒸発による溶媒の除去で、粗生成物が黄色の油として得られ、これを、フラッシュクロマトグラフィー酢酸エチル→1メタノール99酢酸エチルから2メタノール98酢酸エチルの勾配溶出にかけることで、純粋な生成物が無色のガラスとして得られた。分析データRT378分MSmz1456。化合物7デスマーチンペルヨージナンを、一度に、乾燥DCM中のビス脱アセチル化生成物の溶液に、窒素雰囲気下で添加した。溶液を室温で4時間撹拌し、この時LCMSは、反応が完了したことを示した。濁った懸濁液を、DCMで洗浄しながら濾過した。濾液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。溶媒を減圧下での回転蒸発によって除去することで、生成物7をオフホワイト気泡体として得た。分析データRT370分MSmz1451。化合物14化合物14a又は14bは、化合物8を介して化合物7から調製することができる。化合物7中のAlloc保護基は、適切な条件、例えばテトラキスパラジウム下にてピロリジンの存在下で除去することができる。これらの条件下で、Fmoc保護基も除去される。別法として、Fmoc基は、別のステップにおいて、Alloc基の除去の前又は後のいずれかで、DMF中のピペリジンを使用して除去することができる。脱保護ステップの生成物は、一方のPBD単量体のN10C11位にイミン官能性、及び他方の単量体のN10C11位にカルビノールアミン官能性基を有するイミンカルビノールアミン生成物であり、ここで、カルビノールアミンはN10位にリンカーCL1NH2を有する。該イミンカルビノールアミンを塩基の存在下でMCOSuと反応させることで、化合物8を生成することができる。例えば、Dubowchikら、BioconjugateChem2002、13、855~869を参照されたい。該アミノ酸側鎖保護基は、例えば酸性条件下で化合物8から除去することができる。生じた生成物を次いで、チオール官能性を保有する適切な抗体にコンジュゲートすることで、化合物9を得ることができる。一例において、抗体をDTTで処理することで、鎖間ジスルフィド結合を還元することができる。遊離チオール基を保有する生じた抗体を次いで、化合物8から誘導されるマレイミド含有化合物と反応させることで、化合物9を生成することができる。化合物9は、例えばダイアフィルトレーションによって精製することができる。例えば、Dubowchikら、BioconjugateChem2002、13、855~869を参照のこと。化合物18ジシクロヘキシルカルボジイミドを、乾燥DCM中のNヒドロキシスクシンイミド及びNallocフェニルアラニンの懸濁液に、0°Cで添加した。混合物を0°Cで30分間、次いで室温で16時間撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を減圧下で蒸発させた。残渣をDCM中に再溶解し、1時間静置するままにし、濾過することで、沈殿したジシクロヘキシル尿素を除去した。減圧下での蒸発で、該生成物を白色の固体として得た。分析データRT293分MSmz369。化合物20THF中のスクシンイミドの溶液を、THF及びH2O中のHLysOH及びNaHCO3の溶液に添加した。混合物を室温で72時間撹拌し、THFを減圧下で蒸発させた。pHをクエン酸でpH3~4に調節することで、白色ガムを沈殿させた。これを酢酸エチルで抽出し、合わせた抽出物をH2O、ブラインで洗浄し、乾燥させ、減圧下で蒸発させることで、該生成物を白色の気泡体として得た。分析データRT303分MSmz478、80。化合物7bEEDQを、乾燥THF中のpアミノベンジルアルコール及びAllocPheLysOHの溶液に添加した。混合物を室温で18時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させることで、淡茶色の固体を得た。固体をジエチルエーテルで粉砕し、過剰なジエチルエーテルで洗浄しながら濾過した。これで、該生成物が白色の固体として得られた。分析データRT308分MSmz5838。7bの合成は、スキーム12において下に記載されている。化合物9bトリエチルアミンを、乾燥THF中のモノalloc保護ビスアニリン及びトリホスゲンの撹拌溶液に、窒素雰囲気下にて10°Cで添加した。反応混合物を室温に達するままにし、試料をメタノールで処理し、LCMSによってカルバミン酸メチルとして分析した。乾燥THF中のベンジルアルコール及びトリエチルアミンの溶液を、滴下により、新たに調製したイソシアネートに添加した。反応混合物を60~65°Cで4時間加熱し、次いで18時間室温で撹拌するままにし、この時、LCMSは新規の生成物の形成を明らかにした。反応混合物を蒸発乾固させることで、粗生成物が黄色の油として得られ、これをフラッシュクロマトグラフィー50nヘキサン50酢酸エチルから10nヘキサン90酢酸エチルまで10ずつ増加の勾配溶出によって精製することで、所望の生成物を白色の気泡体として得た。分析データRT378分MSmz14028。化合物10bH2O中のK2CO3の溶液を、メタノール中のアセテートの溶液に添加した。反応混合物を室温で30分間撹拌した。メタノールを減圧下で蒸発させ、残渣をH2Oで希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物をH2O、ブラインで洗浄し、乾燥させ、減圧下で蒸発させることで、該生成物を白色の気泡体として得た。分析データRT352分MSmz13186。化合物11bデスマーチンペルヨージナンを、一度に、乾燥DCM中のビス脱アセチル化生成物の溶液に、窒素雰囲気下で添加した。溶液を室温で35時間撹拌し、この時LCMSは、反応が完了したことを示した。反応混合物をDCMで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。溶媒を減圧下での回転蒸発によって除去することで、粗生成物を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー80酢酸エチル20nヘキサンから100酢酸エチルまで5ずつ増加の勾配溶出による精製で、生成物11bを黄色の気泡体として得た。分析データRT342分MSmz13148。化合物12aPd4を、乾燥DCM中のビスalloc化合物及びピロリジンの溶液に、窒素雰囲気下で添加した。溶液を室温で3時間撹拌し、この時点で、LCMSは未反応のが残っていることを示した。さらなる当量のピロリジン及びPd4を添加し、反応物を室温でさらに18時間撹拌した。LCMSは、反応が完了したことを示した。反応混合物をDCMで希釈し、飽和塩化アンモニウム水溶液、水、ブラインで洗浄し、乾燥させ、減圧下で蒸発させることで、黄色の気泡体を得た。これをジエチルエーテルで粉砕することで該生成物が得られ、これを、さらに精製することなく使用した。分析データRT280分MSmz11285。化合物23THF中のAllocValOSumz3214、化合物を調製するための方法に従って調製されたの溶液を、THF及びH2O中のHAlaOH及びNaHCO3の溶液に添加した。混合物を室温で72時間撹拌し、THFを減圧下で蒸発させた。pHをクエン酸でpH3~4に調節することで、白色ガムを沈殿させた。これを酢酸エチルで抽出し、合わせた抽出物をH2O、ブラインで洗浄し、乾燥させ、減圧下で蒸発させることで、白色の固体を得た。ジエチルエーテルを用いる倍散で、純粋な生成物23が白色の粉末として得られた。分析データRT217分MSmz295、273。化合物8EEDQを、乾燥THF中のpアミノベンジルアルコール及びAllocValAlaOHの溶液に添加した。混合物を室温で72時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させることで、淡茶色の固体を得た。固体をジエチルエーテルで粉砕し、過剰なジエチルエーテルで洗浄しながら濾過した。これで、該生成物が白色の固体として得られた。分析データRT250分MSmz4006、3786。8の合成はスキーム13において下記に示される。化合物9cトリエチルアミンを、乾燥THF中のモノalloc保護ビスアニリン及びトリホスゲンの撹拌溶液に、窒素雰囲気下にて室温で添加した。反応混合物を40°Cに加熱し、試料をメタノールで処理し、LCMSによってカルバミン酸メチルとして分析した。乾燥THF中のベンジルアルコール及びトリエチルアミンの溶液を、滴下により、新たに調製したイソシアネートに添加した。反応混合物をLCMSによって30分間隔でモニタリングした。3時間後、LCMSは生成物への変換、カルバミン酸メチル及びモノalloc保護ビスアニリンの存在を示した。さらなる分量のトリホスゲンを添加し、反応を40°Cでさらに18時間続けた。反応混合物を蒸発乾固させることで、粗生成物が黄色の油として得られ、これをフラッシュクロマトグラフィー100クロロホルムから97クロロホルムメタノール3まで05ずつ増加の勾配溶出によって精製することで、所望の生成物を白色の気泡体として得た。分析データRT358分MSmz1197。化合物10cH2O中のK2CO3の溶液を、メタノール中のアセテートの溶液に添加した。反応混合物を室温で30分間撹拌した。メタノールを減圧下で蒸発させ、残渣をH2Oで希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物をH2O、ブラインで洗浄し、乾燥させ、減圧下で蒸発させることで、生成物を白色の気泡体として得た。分析データRT328分MSmz1113。化合物11cデスマーチンペルヨージナンを、一度に、乾燥DCM中のビス脱アセチル化生成物の溶液に、窒素雰囲気下で添加した。溶液を室温で35時間撹拌し、この時LCMSは、反応が完了したことを示した。反応混合物をDCMで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水、ブラインで洗浄し、乾燥させた。溶媒を減圧下での回転蒸発によって除去することで、粗生成物を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー100クロロホルムから97クロロホルム3メタノールまで1ずつ増加の勾配溶出による精製で、該生成物を白色の固体として得た。分析データRT315分MSmz1109、MSmz1107。化合物12cPd4を、乾燥DCM中のビスalloc化合物及びピロリジンの溶液に、窒素雰囲気下で添加した。溶液を室温で3時間撹拌することで、濁った懸濁液を得た。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣を酢酸エチルで粉砕することで、オフホワイトの固体が得られ、これを濾過によって回収することで、該生成物が得られ、これを、さらに精製することなく使用した。分析データRT255分MSmz922。化合物13aEEDQを、DCM及びメタノール中のアミンジペプチド及びマレイミドカプロン酸の溶液に添加した。溶液を40°Cで72時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をDCM中に溶解し、飽和NaHCO3水溶液、H2O、ブラインで洗浄し、乾燥させ、減圧下で蒸発させることで、白色の気泡体を得た。これをジエチルエーテルで粉砕し、過剰なジエチルエーテルで洗浄しながら濾過することで、該生成物が白色の固体として得られた。分析データRT327分MSmz1320。化合物13b冷トリフルオロ酢酸を、マレイミド誘導体に0°Cで添加した。溶液をこの温度で30分間撹拌し、トリフルオロ酢酸を減圧下で蒸発させた。残渣を無水DCM中に再溶解した。溶媒を蒸発させ、残渣をジエチルエーテルで粉砕し、結果として生じた黄色の固体を濾過によって回収し、真空下で乾燥させた。分析データRT283分MSmz1222。マレイミドPEGスクシンイミド試薬と12a又は12bとのカップリングで、PBD薬物リンカー15を生成する。図1aは、PBD薬物リンカーMPPEG4PheLysPABPBD15ba、MPPEG8PheLysPABPBD15bb及びMPPEG8ValAlaPABPBD15dの構造を示し、ここで、PEGはエチレンオキシであり、PABはパラアミノベンジルオキシカルボニルである。化合物15aaアミンジペプチドを、乾燥10DMFDCMの混合物中に溶解し、マレイミド4Pegスクシンイミド、続いてNNジイソプロピルエチルアミンを添加した。溶液を室温で72時間、窒素雰囲気下で撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させた。フラッシュカラムクロマトグラフィー100クロロホルムから92クロロホルム8メタノールまで1ずつ増加の勾配溶出による精製で、該生成物が黄色の気泡体として得られた。分析データRT313分MSmz1526。化合物15abアミンジペプチドを、乾燥10DMFDCMの混合物中に溶解し、マレイミド8Pegスクシンイミド、続いてNNジイソプロピルエチルアミンを添加した。溶液を室温で72時間、窒素雰囲気下で撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させた。フラッシュカラムクロマトグラフィー100クロロホルムから92クロロホルム8メタノールまで1ずつ増加の勾配溶出による精製で、該生成物が茶色の気泡体として得られた。分析データRT320分MSmz1703。化合物15ba425ベンジル254723トリオキソ10131619テトラオキサ3622トリアザペンタコサンアミドベンジル11ヒドロキシ7メトキシ87メトキシ2メチレン5オキソ23511aテトラヒドロピロロ21c14ベンゾジアゼピン8イルオキシペンチルオキシ2メチレン5オキソ231111aテトラヒドロピロロ21c14ベンゾジアゼピン10カルボキシレート冷トリフルオロ酢酸を、マレイミド誘導体に0°Cで添加した。溶液をこの温度で30分間撹拌し、トリフルオロ酢酸を減圧下で蒸発させた。残渣を無水DCM中に再溶解した。溶媒を蒸発させ、残渣をジエチルエーテルで粉砕し、結果として生じた黄色の固体を濾過によって回収し、真空下で乾燥させた。分析データRT278分MSmz1444。化合物15bb425ベンジル374735トリオキソ1013161922252831オクタオキサ3634トリアザヘプタトリアコンタンアミドベンジル11ヒドロキシ7メトキシ87メトキシ2メチレン5オキソ23511aテトラヒドロピロロ21c14ベンゾジアゼピン8イルオキシペンチルオキシ2メチレン5オキソ231111aテトラヒドロピロロ21c14ベンゾジアゼピン10カルボキシレート冷トリフルオロ酢酸を、マレイミド誘導体に0°Cで添加した。溶液をこの温度で30分間撹拌し、トリフルオロ酢酸を減圧下で蒸発させた。残渣を無水DCM中に再溶解した。溶媒を蒸発させ、残渣をジエチルエーテルで粉砕し、結果として生じた黄色の固体を濾過によって回収し、真空下で乾燥させた。分析データRT280分MSmz1603。化合物15d4375イソプロピル2メチル4735トリオキソ1013161922252831オクタオキサ3634トリアザヘプタトリアコンタンアミドベンジル11ヒドロキシ7メトキシ87メトキシ2メチレン5オキソ23511aテトラヒドロピロロ21c14ベンゾジアゼピン8イルオキシペンチルオキシ2メチレン5オキソ231111aテトラヒドロピロロ21c14ベンゾジアゼピン10カルボキシレートEEDQを、乾燥DCM中のアミンジペプチド及びマレイミド8Peg酸の懸濁液に添加した。乾燥ジメチルアセトアミドを添加することで、淡黄色の溶液が得られ、これを室温で18時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をジエチルエーテルで粉砕した。結果として生じた固体生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。分析データRT290分MSmz1496。化合物15eNNジイソプロピルジエチルアミンを、乾燥DCM中のアミンジペプチド及びマレイミドdPeg24NHSエステルの溶液に添加した。溶液を室温で96時間撹拌した。反応混合物をDCMで希釈し、飽和NaHCO3、ブラインで洗浄し、乾燥させ、減圧下で蒸発させることで、淡黄色のガラスを得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー100クロロホルムから91クロロホルム9メタノールまで1ずつ増加の勾配溶出による精製で、該生成物を粘稠な黄色のガムとして得た。化合物16d多くの癌によって有意に上方調節されるインテグリンανβ6に対して高選択的であるペプチドビオチンA20FMDVCysを、PBDリンカー誘導体のコンジュゲーションのために選択した。11のアセトニトリル水中のペプチドの溶液を、11のアセトニトリル水中のの溶液に添加した。溶液を室温で96時間撹拌した。アセトニトリルを減圧下で蒸発させ、水を凍結乾燥によって除去することで、白色の気泡体を得た。セミ分取用HPLCの精製、続いて凍結乾燥で、該生成物を白色の気泡体として得た。分析データMSmz39911。化合物24a化合物24aは、WO2004043963の化合物3として開示されている。化合物24b固体TCCAを、少量ずつ、DCM中のTEMPO及びアルコール24aの溶液に、0°Cで添加した。わずかな発熱が観察された。反応は、30分後に、TLC及びLCMSmz35334によって、完了したと見なされた。懸濁液をセライトに通して濾過し、DCMで洗浄した。濾液を亜硫酸水素ナトリウム水溶液、続いて飽和NaHCO3、ブラインで洗浄し、乾燥させた。真空中での溶媒の濾過及び蒸発で、粗生成物が得られ、フラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製することで、ケトン24bが白色の固体として得られた。分析データα26D15°MSmz35334IR1748、1642、1518、1425、1335、1222、1176、1063、1032、986、857、785、756cm1。化合物25無水26ルチジンを、一度に、乾燥DCM中のケトン24bの激しく撹拌した溶液に、45°Cで窒素雰囲気下にて注入した。新たに開封したアンプルから取り出した無水のトリフル酸無水物を、40°C以下で温度を維持しながら、急速に滴下により注入した。反応混合物を45°Cで1時間撹拌するままにし、この時点で、TLCは出発原料の完全な消費を明らかにした。冷反応混合物を即時にDCMで希釈し、激しく振盪し、水、5クエン酸溶液、飽和NaHCO3、ブラインで洗浄し、乾燥させた。真空中での溶媒の濾過及び蒸発で粗生成物が得られ、これをフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製することで、トリフレート25が黄色の気泡体として得られた。対応する12不飽和化合物は全く、NMRによって見ることができなかった。分析データα28D55°1HNMRδ775692625519403390350302IR17481653157715221415133512761205113010611024933908820783757663cm1MSmz48545。化合物26Pd4を、エノールトリフレート25、4メトキシフェニルボロン酸、Na2CO3、EtOH、トルエン及び水の撹拌混合物に添加した。反応混合物を窒素雰囲気下にて終夜撹拌するままにし、この後、出発原料の完全な消費がTLC及びLCMSmz44338によって観察された。反応混合物をEtOAcで希釈し、H2O、ブラインで洗浄し、乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させることで、粗生成物を生成した。フラッシュクロマトグラフィーによる精製で、C2アリール化合物26がオレンジの固体として得られた。分析データα25D122°1HNMRδ77873069568768350339539337637334834329929313CNMRδ170716251584153914911379126312561253122912231138110031076597579565562551549522339207140IR1736162415751516142413261253117810691031863820803786757653617cm1MSmz44338を、少量ずつ、無水THF及びEtOH中のエステル26の撹拌溶液に添加した。激しい泡立ちを伴う発熱が観察され、温度を、冷却浴を用いて15°Cから25°Cの間に保持した。反応混合物を1時間撹拌するままにし、この後、出発原料の完全な変換がTLCによって直接観察された。反応混合物を酢酸エチルで慎重に希釈し、過剰の水素化ホウ素を冷クエン酸水溶液で破壊した。有機層を1NのHCl水溶液、続いて飽和NaHCO3水溶液、ブラインで洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて35°Cで蒸発させることで、中間体アルコールを生成し、これを即時に無水DCM中に再溶解した。溶液を0°Cに冷却し、TEA、続いて無水DCM中の塩化アセチルの溶液を添加した。反応混合物を最大室温まで温まるままにし、1時間反応するままにした。完全な反応がTLCによって観察された。溶液を2Nのクエン酸水溶液、飽和NaHCO3水溶液、ブラインで洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製することで、265gの純粋な生成物をオレンジの固体として得た。分析データα24D130°1HNMRδ77471269168061550450046144240137833532528527920613CNMRδ1711159114951261126011411072568566553335209IR17311643162315771517142113331278124812221183107610591032864821802787756644619cm1MSmz45681を、エタノール及び酢酸中の化合物27の溶液に添加した。混合物を激しく撹拌し、加熱還流した。TLCモニタリング及びLCMSmz42757は、5分後に反応が完了したことを明らかにした。反応物を冷却するままにし、セライトに通して濾過し、DCMで洗浄した。濾液を水、飽和NaHCO3、ブラインで洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製することで、140mgの純粋な生成物を白色の気泡体として得た。分析データα24D108°1HNMRδ72268968668062950249645044038938238133032528527920613CNMRδ194617111710170416401608155114951462143613051292125811551141107610541009635604569563374210206142IR17331589151213961209117611131031823791762cm1MSmz42757。化合物29乾燥THF中のアミン28及びTEAの溶液を、滴下により、乾燥THF中のトリホスゲンの新たに調製した溶液に、0°Cで添加した。白色の懸濁液を0°Cで10分間撹拌するままにした。乾燥THF中のアルコール7bPABOH、546mg、093mmol、1当量及びTEAの溶液を急速に添加した。白色の懸濁液を室温で15分間撹拌するままにし、次いで65°Cで2時間加熱し、次いで室温で終夜撹拌するままにした。白色のTEA塩を脱脂綿に通す濾過によって除去した。濾液を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって精製することで、700mgの所望のカルバメートを得た。分析データα24D302°1HNMRδ85484377474572371670667867264658257353051950650349348746344742838737637231630930729527226719518316015114313913512811913CNMRδ1715171116921658159115621538151614411378135813221319129112901289127312621259123512341199118211421113665662640565561553538331309294284226208IR16971652160415161456141812451225117711151033824750cm1MSmz103625。化合物30炭酸カリウムの水溶液を、メタノール中のアセテートエステル29の溶液に添加した。反応混合物を室温で50分間撹拌するままにし、この時点でTLCは完了を示した。混合物を水とジクロロメタンとの間で分配した。有機相を1Nのクエン酸、続いてブラインで洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させることで、所望のアルコール30を得た。分析データα24D61°1HNMRδ8608517647427247187170568366658157154351850849947546944842538638237637437231931230529226225718517515915113813412811813CNMRδ1717169516701592156315391516144413781359132313191292128812721260124512331201118111421113666661616565561553538399336311294284226MSmz9947。化合物31アルコール30を、無水DCM中に室温で溶解した。固体デスマーチンペルヨージナンを混合物に添加し、続いてさらに75mgを1時間で、続いてさらに57mgを2時間で、及び31mgを5時間で添加し、デスマーチンペルヨージナンの総質量を463mgにした。反応をTLCによって連続的にモニタリングした。65時間後、反応混合物をDCMと飽和NaHSO3水溶液との間で分配することによって反応の後処理をした。有機層を次いで、飽和NaHCO3水溶液、続いてブラインで洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製することで、259mgの純粋な生成物31を得た。分析データα24D106°1HNMRδ86875474673673171668967566158958454552850848447645844742840239539238337434133231630220318316816115513913612813CNMRδ1717169516321591156315111486138013591323129212881272126312621217120011821142112711078627936766625955645615561553538399381351310294284227IR33132935235616911603151214311253117711191033824750698cm1MSmz99241。化合物32固体Pd4を、乾燥DCM中の出発原料31及びピロリジンの新たに調製した溶液に、不活性雰囲気下にて室温で添加した。TLC及びLCMSmz90809によって示された通り、反応は45分後に完了した。揮発性物質を減圧下での蒸発によって除去した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製することで、298mgの純粋な生成物32を得た。分析データ1HNMRδ88778675173671168965858553248346544740339739438437436933933332631630332620519617814914814214212413CNMRδ1754516321591156214861373129312881270126212621217119811421126562553407351305284228MSmz90809。化合物33固体EEDQを、DCM及びメタノールの混合物中のアミン32及びマレイミドヘキサン酸の溶液に添加した。溶液を室温で24時間撹拌するままにした。LCMSmz110178によって、反応が完了していることがわかった。揮発性物質を減圧下での蒸発によって除去した。残渣をDCMと飽和NaHCO3水溶液との間で分配し、ブラインで洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製することで、165mgの純粋な生成物33を得た。分析データα24D94°1HNMRδ86274673972772270667967565765262857752147546044039338638337336533633032330829020919317516213113010413CNMRδ17351709170316961632159115631511148613611340129112871272126312621249123312171200114211271107861793676595562561553546539534378375367352310294285282262248227MSmz110178。化合物34DCM中の10TFAの冷蔵溶液を、33の冷蔵試料に添加した。反応をLCMSmz100113によってモニタリングした。副反応なく、温度が10°Cの高さに達した。反応は4時間後に完了に達した。反応混合物を脱イオン化水中に注ぎ、終夜凍結乾燥させることで、純粋なTFA塩34を得た。分析データ1HNMRδ9057877627357247167117106966926826666636425755155034774744684564393973843803723653333213042692041979164163145144112107095MSmz100113。化合物35アミン32を、無水DCM及びDMFの混合物中のNHSPEG4マレイミド及びTEAの溶液に添加した。反応物を室温で終夜撹拌するままにし、この時点で、LCMSmz130755によって、それがほぼ完了していることがわかった。揮発性物質を減圧下での蒸発によって除去した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製することで、71mgの純粋な生成物35を得た。分析データ1HNMRδ858750728725720718701689679659651577525483464463449443438418396385384376356357334334320315307289248229197190161139135129112MSmz130755。化合物36DCM中の10TFAの冷蔵溶液を、35の冷蔵試料に添加した。反応をLCMSmz120694によってモニタリングした。反応は18時間後に25°Cで完了に達した。反応混合物を脱イオン化水中に注ぎ、終夜凍結乾燥させることで、純粋なTFA塩36を得た。化合物37メタノール中の33の溶液を、メタノール及び水の混合物中の環式チオペプチドcの溶液に添加した。反応混合物を1時間撹拌するままにした。生じた沈殿物を濾過によって回収し、メタノール及び水の混合物で濯ぎ、真空吸引によって乾燥させることで、LCMSmz168119、79085によって示された通りの8mgの純粋な生成物を得た。化合物38化合物37を、DCM中の10TFAを用いて0°Cで2時間処理した。LCMSmz791442、100によって示された通り、反応が完了していることがわかった。反応混合物を脱イオン化水中に注ぎ、終夜凍結乾燥させることで、純粋なTFA塩38を得た。化合物39a化合物39a及びその合成は、WO00012508及びWO2006111759に開示されている。化合物39b方法I触媒的量のDMFを、乾燥THF中のニトロ酸39a及び塩化オキサリルの撹拌溶液に添加した。反応混合物を16時間室温で撹拌するままにし、溶媒を真空中での蒸発によって除去した。生じた残渣を乾燥THF中に再溶解し、酸塩化物溶液を、滴下により、THF中のメチル4ヒドロキシピロリジン2カルボキシレート塩酸塩及びTEAの撹拌混合物に、30°Cで窒素雰囲気下にて添加した。反応混合物を室温に温まるままにし、さらに3時間撹拌し、この後、TLC及びLCMSmz721は、生成物の形成を明らかにした。過剰のTHFを回転蒸発によって除去し、生じた残渣をDCM中に溶解した。有機層を1NのHCl、飽和NaHCO3、H2O、ブラインで洗浄し、乾燥させた。溶媒の濾過及び蒸発で、粗生成物を暗色の油として得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製で、純粋なアミド39bをオレンジ色のガラスとして単離した。方法II塩化オキサリルを、無水DCM中のニトロ酸39a及びDMFの撹拌懸濁液に添加した。初期泡立ちに続き、反応懸濁液は溶液になり、混合物を室温で16時間撹拌するままにした。酸塩化物の変換は、反応混合物の試料をMeOHで処理することによって確認し、生じたビスメチルエステルをLCMSによって観察した。溶媒の大部分を真空中での蒸発によって除去し、生じた濃縮溶液を最小量の乾燥DCM中に再溶解し、ジエチルエーテルで粉砕した。生じた黄色の沈殿物を濾過によって回収し、冷ジエチルエーテルで洗浄し、1時間真空炉内にて40°Cで乾燥させた。固体酸塩化物を、少量ずつ25分の時間をかけて、DCM中のメチル4ヒドロキシピロリジン2カルボキシレート塩酸塩及びTEAの撹拌懸濁液に、40°Cで添加した。即時に、LCMSmz721によって判断された通り、反応が完了した。混合物をDCMで希釈し、1NのHCl、飽和NaHCO3、ブラインで洗浄し、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させることで、純粋な生成物39bをオレンジの固体として得た。分析データα22D461°1HNMRδ76368247947244942839637934633830224823022920413CNMRδ17241667154614841372127010971082697651574570567524378290IR3410301029531741162215771519145514291334127412111177107210501008871cm1MSmz721388HRMSMH理論値C31H36N4O16mz7212199実測値mz7212227。化合物39c固体TCCAを、少量ずつ、規定DCM中のTEMPO及びビスアルコール18の溶液に、0°Cで添加した。わずかな発熱が観察された。反応は、30分後に、TLC及びLCMSmz71810によって、完了したと見なされた。懸濁液をセライトに通して濾過し、DCMで洗浄した。濾液を、亜硫酸水素ナトリウム水溶液、続いて飽和NaHCO3、ブラインで洗浄し、乾燥させた。真空中での溶媒の濾過及び蒸発で粗生成物が得られ、これをフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製することで、ケトン39cが白色の固体として得られた。分析データα21D18°MSmz718101HNMR回転異性体混合物δ77067952744443039338137536335830928927425324013CNMR回転異性体混合物δ206520642060205917121711170616701667155015451488137713731264125410981091108610841084657656655604579567567551536529529516412401287286210141IR176416501578151814151333127412171060870824759cm1。化合物40無水26ルチジンを、乾燥DCM中のビスケトン39cの激しく撹拌した溶液に、45°Cで窒素雰囲気下にて注入した。新たに開封したアンプルから取り出した無水トリフル酸無水物を、40°C以下に温度を維持しながら、急速に滴下により注入した。反応混合物を45°Cで1時間撹拌するままにし、この時点で、TLCは、出発原料の完全な消費を明らかにした。冷反応混合物を即時にDCMで希釈し、激しく振盪し、水、5クエン酸溶液、飽和NaHCO3、ブラインで洗浄し、乾燥させた。真空中での溶媒の濾過及び蒸発で粗生成物が得られ、これをフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製することで、ビストリフレート40が黄色の気泡体として得られた。分析データα25D68°1HNMRδ77368562051343339538434329624413CNMRδ169416411547149213801352124412111200116811001084657656570568531333286IR17491654157615221418133712771207113110611023910821757cm1MSmz98186。化合物41Pd4を、ビスエノールトリフレート40、4フルオロフェニルボロン酸、Na2CO3、EtOH、トルエン及び水の撹拌混合物に添加した。反応混合物を窒素雰囲気下にて終夜撹拌するままにし、この後、出発原料の完全な消費が、TLC及びLCMSmz87390によって観察された。反応混合物をEtOAcで希釈し、H2O、ブラインで洗浄し、乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させることで、粗生成物を生成した。フラッシュクロマトグラフィーによる精製で、ビスC2アリール化合物41がオレンジの固体として得られた。分析データα22D107°1HNMRδ77671470469768763151843639738435333930024613CNMRδ17101633148913801281126312621258123112261157115511031085657583568347287IR1738165015781512141613331275121210641023869808758654613cm1MSmz87390。化合物42LiBH4を、一度に、無水THF中のエステル41の撹拌溶液に、0°Cで添加した。反応混合物を最大室温まで温まるままにし、1時間撹拌するままにし、この後、出発原料の完全な変換が、LCMSmz81835によって直接観察された。反応混合物を酢酸エチルで慎重に希釈し、過剰の水素化ホウ素を冷クエン酸水溶液で破壊した。有機層を1NのHCl水溶液、続いて飽和NaHCO3水溶液、ブラインで洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて35°Cで蒸発させることで、中間体アルコールを生成し、これを即時に、無水DCM中に再溶解した。溶液を0°Cに冷却し、イミダゾール、続いてTBDMSClを添加した。反応混合物を最大RTまで温まるままにし、2時間反応するままにした。完全な反応がTLC及びLCMSmz104599によって観察された。溶液を2Nのクエン酸水溶液、飽和NaHCO3水溶液、ブラインで洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製することで、245gの純粋な生成物をオレンジの固体として得た。分析データα22D123°1HNMRδ77671770669668768161748447243539332530730329124508400713CNMRδ163216071545148613791301130012671263126212431230115611541100108565760459256733228725825721018214253IR29531742165015761512141713341274121410631023869808759654612cm1MSmz104599。化合物43エタノール中のギ酸の溶液を、エタノール中のビスニトロ化合物42及び亜鉛粉塵の懸濁液に添加した。反応混合物を室温で25分間撹拌するままにし、この時点で、TLC及びLCMSmz9863、49392、100は、完全な反応を明らかにした。懸濁液を濾過し、濾液を酢酸エチルと飽和NaHCO3水溶液との間で分配した。有機物をブラインで洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させることで、純粋なビスアミンが得られ、これを直接次のステップに移した。化合物44乾燥DCM中のクロロギ酸アリルの溶液を、滴下により、乾燥DCM中のビスアニリノ化合物43及びピリジンの溶液に、78°Cで添加した。反応混合物を78°Cで2時間撹拌するままにし、最大室温まで温まるままにした。溶液を飽和硫酸銅水溶液、水、ブラインで洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製することで、LCMSmz115432によって示された通りの668mgのビスAlloc保護化合物、及びわずかに汚染されている800mgの所望のモノalloc保護化合物mz107058を得た。この化合物をさらに、フラッシュクロマトグラフィーによって精製することで、700mgの所望の純粋なモノalloc化合物を得た。分析データα22D41°1HNMRδ872788725718702693693683680636600584532521485471460446431425398386381376319305305293241084005IR2952235917321652160115071472140612251119836777668cm1MSmz107058。化合物45乾燥THF中のアミン44及びTEAの溶液を、滴下により、乾燥THF中のトリホスゲンの新たに調製した溶液に、0°Cで添加した。白色の懸濁液を0°Cで10分間撹拌するままにした。乾燥THF中のアルコール及びTEAの溶液を急速に添加した。白色の懸濁液を室温で15分間撹拌するままにし、次いで65°Cで2時間加熱し、次いで室温で終夜撹拌するままにした。白色のTEA塩を脱脂綿に通す濾過によって除去した。濾液を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって精製することで、220mgの所望のカルバメートを得た。分析データα24D461°1HNMRδ87084678375073172571570369369267765159958153851551350347746645343842240839439338137932030530529424122220814509408401400213CNMRδ171716981659163115361510144313781324132313201302129212621261125312331232119811821180115711551120106066566265865462560459556649630828925719218218117717314254IR2950235617251691160215121408120111091023832774668cm1MSmz147343。化合物I2乾燥酢酸エチル中の1ベンジル1947101316ペンタオキサノナデカン119ジオエートを、30psiで10炭素担持パラジウム上にて45分間水素化した。反応混合物を乾燥酢酸エチルで洗浄しながらセライトに通して濾過した。減圧下での蒸発で、生成物I2を無色の油として得た。分析データRTMSmz458、436。化合物I3NNジイソプロピルジエチルアミンを、乾燥DCM中のアミンジペプチド及び酸dPeg5NHSエステルの溶液に添加した。溶液を室温で24時間撹拌した。反応混合物を減圧下で蒸発させることで、淡黄色の油がえられた。フラッシュカラムクロマトグラフィー96クロロホルム4メタノールから92クロロホルム8メタノールまで05ずつ増加の勾配溶出による精製で、生成物I3を黄色のガラスとして得た。分析データRT278分MSmz1242。化合物491エチル3カルボジイミドを、乾燥DCM中のNヒドロキシスクシンイミド及び酸の溶液に、窒素雰囲気下で添加した。反応混合物を室温で48時間撹拌した。溶液をDCMで洗浄しながら濾過した。DCM溶液を水、ブラインで洗浄し、乾燥させ、減圧下で蒸発させた。生成物49を、さらに精製することなく使用した。分析データRT288分MSmz1339。化合物50Pd4を、乾燥DCM中のalloc化合物及びピロリジンの溶液に、窒素雰囲気下で添加した。溶液を室温で16時間撹拌した。LCMSは、未反応のalloc化合物の存在を示した。さらなる分量のピロリジン及びPd4を添加し、反応をさらに30分間続けた。溶媒を減圧下で蒸発させた。フラッシュカラムクロマトグラフィー100クロロホルム、次いで98クロロホルム2メタノールから90クロロホルム10メタノールまで1ずつ増加の勾配溶出による精製で、生成物50を白色の粉末として得た。分析データRT033分MSmz294、MSmz292。化合物51EEDQを、乾燥THF中のアミンジペプチド及びmdPeg2酸の溶液に添加した。溶液を室温で5日間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー100クロロホルムから95クロロホルム5メタノールまで1ずつによって精製することで、生成物51を白色の固体として得た。分析データRT222分MSmz446、424、MSmz422。51の合成は、スキーム14において下記に示される。化合物52トリエチルアミンを、乾燥THF中のモノalloc保護ビスアニリン及びトリホスゲンの撹拌溶液に、窒素雰囲気下にて室温で添加した。反応混合物を40°Cに加熱し、試料をメタノールで処理し、LCMSによってカルバミン酸メチルとして分析した。乾燥THF中のdPeg2ベンジルアルコール及びトリエチルアミンの溶液を、滴下により、新たに調製したイソシアネートに添加した。反応混合物をLCMSによって30分間隔でモニタリングした。3時間後、LCMSは、生成物の変換、カルバミン酸メチル及びモノalloc保護ビスアニリンの存在を示した。さらなる分量のトリホスゲンを添加し、反応を40°Cでさらに3時間続けた。反応混合物を蒸発乾固させることで、粗生成物が黄色の油として得られ、これをフラッシュクロマトグラフィー100クロロホルムから95クロロホルム5メタノールまで1ずつ増加の勾配溶出によって精製することで、所望の生成物52を黄色の気泡体として得た。分析データRT分342分MSmz1243、MSmz1241、100。化合物53Pd4を、乾燥DCM中のalloc化合物及びピロリジンの溶液に、窒素雰囲気下で添加した。溶液を室温で4時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させ、生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー100クロロホルムから95クロロホルム5メタノールまで1ずつ増加の勾配溶出によって精製することで、生成物53の黄色の気泡体を得た。分析データRT分317分MSmz1159。化合物54トリエチルアミンを、乾燥THF中のモノ保護ビスアニリン及びトリホスゲンの撹拌溶液に、窒素雰囲気下にて室温で添加した。反応混合物を40°Cに加熱し、試料をメタノールで処理し、LCMSによってカルバミン酸メチルとして分析し、完全なイソシアネート形成を示した。乾燥THF中のベンジルアルコール及びトリエチルアミンの溶液を、滴下により、新たに調製したイソシアネートに添加した。反応混合物をLCMSによってモニタリングし、18時間後40°Cで完了した。反応混合物を蒸発乾固させることで黄色の油が得られ、これをフラッシュクロマトグラフィー95酢酸エチル5メタノールから93酢酸エチル7メタノールまで1ずつ増加の勾配溶出によって精製することで、所望の生成物54を白色の気泡体として得た。分析データRT分342分MSmz1562。化合物55H2O中のK2CO3の溶液を、メタノール中のアセテートの溶液に添加した。反応混合物を室温で2時間撹拌した。メタノールを減圧下で蒸発させ、残渣をH2Oで希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物をH2O、ブラインで洗浄し、乾燥させ、減圧下で蒸発させることで、生成物55を白色の気泡体として得た。分析データRT分315分MSmz1478、MSmz1477、100。化合物56デスマーチンペルヨージナンを、一度に、乾燥DCM中のビス脱アセチル化生成物の溶液に、窒素雰囲気下で添加した。溶液を室温で2時間撹拌し、この時LCMSは、反応が完了したこと示した。反応混合物をDCMで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水、ブラインで洗浄し、乾燥させた。溶媒を減圧下での回転蒸発によって除去することで、粗生成物を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー100クロロホルムから92クロロホルム8メタノールまで1ずつ増加の勾配溶出による精製で、生成物56を白色の気泡体として得た。分析データRT分617分MSmz1474、MSmz1472、100。化合物57Pd4を、乾燥DCM中のalloc化合物及びDCM中05Mピロリジン溶液の溶液に、窒素雰囲気下で添加した。溶液を室温で30分間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させた。フラッシュカラムクロマトグラフィー100クロロホルムから91クロロホルム9メタノールまで1ずつ増加の勾配溶出による精製で、生成物57を白色の粉末として得た。分析データRT分260分MSmz1390。マレイミドPEGスクシンイミド試薬と57とのカップリングで、PBD薬物リンカー58を生成する。図1bは、PBD薬物リンカーMPPEG8ValAlaPABPBD58の構造を示しており、ここで、MPはマレイミドプロパンアミドであり、PEGはエチレンオキシであり、PABはパラアミノベンジルオキシカルボニルであり、impはN10イミン保護基3プロパノエートValAlaPABである。化合物58PBD4375イソプロピル2メチル4735トリオキソ1013161922252831オクタオキサ3634トリアザヘプタトリアコンタンアミドベンジル11ヒドロキシ811ヒドロキシ1010イソプロピル13メチル811ジオキソ25ジオキサ912ジアザテトラデカンアミドベンジルオキシカルボニル7メトキシ2メチレン5オキソ235101111aヘキサヒドロピロロベンゾ21c14ジアゼピン8イルオキシペンチルオキシ7メトキシ2メチレン5オキソ231111aテトラヒドロピロロベンゾ21c14ジアゼピン10カルボキシレート乾燥DCM中のNNジイソプロピルジエチルアミンの05M溶液を、乾燥DCM中のアミンジペプチド及びマレイミドdPeg8NHSエステルの溶液に添加した。溶液を室温で24時間撹拌した。反応混合物を減圧下で蒸発させ、残渣をDCM中に再溶解した。DCM溶液を飽和炭酸水素ナトリウム、水、ブラインで抽出し、乾燥させ、減圧下で蒸発させることで、黄色のガムを得た。フラッシュカラムクロマトグラフィークロロホルムから91クロロホルム9メタノールまで1ずつ増加の勾配溶出による精製で、生成物58を白色の気泡体として得た。分析データRT分58分。MSmz19879。コンジュゲート60多くの癌によって有意に上方調節される、インテグリンανβ6に対して高選択的であるペプチドビオチンA20FMDVCysを、PBDリンカー誘導体のコンジュゲーションのために選択した。11のアセトニトリル水中のペプチドの溶液を、11のアセトニトリル水中のの溶液に添加した。溶液を室温で24時間撹拌した。アセトニトリルを減圧下で蒸発させ、水を凍結乾燥によって除去することで、生成物60の白色の気泡体を得た。セミ分取用HPLC、続いて凍結乾燥による精製で、生成物を白色の気泡体として得た。分析データMSmz44583。化合物61PBD4165イソプロピル2メチル4714トリオキソ10オキサ3613トリアザヘキサデカンアミドベンジル11ヒドロキシ811ヒドロキシ1010イソプロピル13メチル811ジオキソ25ジオキサ912ジアザテトラデカンアミドベンジルオキシカルボニル7メトキシ2メチレン5オキソ235101111aヘキサヒドロ1Hピロロ21c14ベンゾジアゼピン8イルオキシペンチルオキシ7メトキシ2メチレン5オキソ231111aテトラヒドロ1Hピロロ21c14ベンゾジアゼピン10カルボキシレートNNジイソプロピルジエチルアミンを、乾燥DCM中のアミンジペプチド及びマレイミドdPeg24NHSエステルの溶液に添加した。溶液を室温で24時間撹拌した。反応混合物を減圧下で蒸発させ、残渣をDCM中に再溶解した。DCM溶液を飽和炭酸水素ナトリウム、水、ブラインで抽出し、乾燥させ、減圧下で蒸発させることで、黄色のガムを得た。フラッシュカラムクロマトグラフィークロロホルムから91クロロホルム9メタノールまで1ずつ増加の勾配溶出による精製で、生成物を無色のガムとして得た。分析データMSmz26918。ジメチル11ビスビスプロパ1エン1イル23ジヒドロ1Hピロール2カルボキシレートテトラキスパラジウムを、トルエン、エタノール及び水の混合物中のトリフレート40、トランスプロペニルボロン酸及び炭酸ナトリウムに添加した。反応混合物を3時間アルゴン雰囲気下にて32°Cで撹拌するままにした。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。濾過後、過剰の酢酸エチルを減圧下での回転蒸発によって除去した。粗製カップリング生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製した。純粋な画分を合わせ、過剰の溶出液の除去で、純粋な生成物71がオレンジの固体として得られた。反応を、より大きなスケールで反復することで、721gの鈴木カップリング生成物が得られた。1HNMRδ778692598589546555510437393400386319326280245251177。ビスビス24プロパ1エン1イル23ジヒドロ1Hピロール1イルメタノンビスエステル71を、固体として一度に、乾燥テトラヒドロフラン中の水素化ホウ素リチウムの溶液に、0°Cで添加した。氷浴を除去し、反応混合物を室温に達するままにした。1時間後、TLCは、反応が完了していないことを明らかにしたので、追加の水素化ホウ素リチウムを添加した。反応混合物をさらに25時間撹拌するままにし、この時、TLCは、反応が完了していることを明らかにした。残留水素化ホウ素リチウムを大過剰の酢酸エチルでクエンチし、反応混合物を50分間撹拌するままにした。有機相を水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。硫酸マグネシウムを真空濾過によって除去し、酢酸エチルを減圧下での回転蒸発によって除去することで、ジオール72が得られ、これを、さらに精製することなく次の反応に使用した。1HNMRδ778685597577561553475482438389400301308246251177。11ビスビスプロパ1エン1イル23ジヒドロ1Hピロール21ジイルビスジアセテート乾燥ジクロロメタン中の塩化アセチルの溶液を、滴下により、ジクロロメタン中のビスアルコール72の溶液に、トリエチルアミンの存在下にて0°Cで添加した。反応混合物を室温に温まるままにし、反応をTLC及びLCMSによってモニタリングした。反応が完了した時、有機相を水、クエン酸、飽和炭酸水素ナトリウム及びブラインで順次に洗浄した。有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、過剰ジクロロメタンを減圧下での回転蒸発によって除去した。残渣をカラムクロマトグラフィーにかけた。純粋な画分を合わせ、過剰の溶出液の除去で、ビスアセテート73が得られた。1HNMRδ777689599578565545502486457437400310292260252243210178。11ビスビスプロパ1エン1イル23ジヒドロ1Hピロール21ジイルビスジアセテート亜鉛粉末を、エタノール及び酢酸エチル中のビスニトロ化合物73の溶液、続いてエタノール中のギ酸の溶液に添加した。反応は発熱性であり、温度が33°Cまで上昇し、温度を15°Cに氷浴で下げ、TLC及びLCMSによって密接にモニタリングしながら、反応混合物を撹拌するままにした。30分後、痕跡量の出発原料が無いか、又は中間体が検出されたので、反応を完了したと見なした。混合物をデカントし、脱脂綿に通して濾過した。濾液を酢酸エチルと飽和NaHCO3水溶液との間で分配した。有機層をさらにブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。過剰の溶媒を減圧下での回転蒸発によって除去することで、生成物74が得られた。1HNMRδ676645633612554490448442433423379295255242232207181。124プロパ1エン1イル23ジヒドロ1Hピロール1カルボニル5カルボニルアミノ2メトキシフェノキシプロポキシ2アミノ5メトキシベンゾイル4プロパ1エン1イル23ジヒドロ1Hピロール2イルメチル乾燥ジクロロメタン中のクロロギ酸アリルの溶液を、滴下により、乾燥ジクロロメタン中のビスアニリン74及びピリジンの溶液に、78°Cで添加した。反応混合物を78°Cで2時間撹拌するままにし、次いで室温に戻るままにした。反応混合物を硫酸銅II水溶液、水、飽和炭酸水素ナトリウム及びブラインで順次に洗浄した。有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、真空下で濾過し、過剰のジクロロメタンを減圧下での回転蒸発によって除去した。TLC及びLCMSは、所望のモノAlloc生成物75及びビスAlloc生成物の両方の存在を明らかにした。生成混合物をカラムクロマトグラフィーにかけた。所望のモノAlloc生成物75を含有する純粋な画分を回収して合わせ、過剰の溶出液を減圧下での回転蒸発によって除去することで、生成物が得られた。LCMS358分、ES817021HNMRδ860785680672642637633608600587562544534523488467457450425422382376300285258247237206181173。124プロパ1エン1イル23ジヒドロ1Hピロール1カルボニル5カルボニルアミノ3メチルブタンアミドプロパンアミドベンジルオキシカルボニルアミノ2メトキシフェノキシプロポキシ2カルボニルアミノ5メトキシベンゾイル4プロパ1エン1イル23ジヒドロ1Hピロール2イルメチルアセテート乾燥トリエチルアミンを、乾燥テトラヒドロフラン中のモノalloc保護ビスアニリン75及びトリホスゲンの撹拌溶液に、不活性雰囲気下で添加した。反応混合物を40°Cで加熱し、試料を除去し、メタノールで処理した。LCMSは、遊離アミン基が反応性イソシアネート中間体に変換されるのが成功したことを示す、カルバミン酸メチルへの完全な変換を明らかにした。乾燥テトラヒドロフラン中のallocvalalaPABOH及びトリエチルアミンの溶液を、反応槽中に40°Cで急速に注入した。反応混合物を室温で終夜撹拌するままにし、この後、試料を除去し、メタノールで処理した。LCMSは、全てのイソシアネートが消費されたことを示す、痕跡量のカルバミン酸メチルが無いことを明らかにした。反応混合物を蒸発乾固させることで、粗生成物が得られ、これをカラムクロマトグラフィーによって精製した。純粋な画分を回収して合わせ、減圧下での回転蒸発による過剰の溶出液の除去で、純粋な生成物76が得られた。LCMS373分、ES122021。アリル4カルボニルアミノ3メチルブタンアミドプロパンアミドベンジルビス24プロパ1エン1イル23ジヒドロ1Hピロール1カルボニル4メトキシ51フェニレンジカルバメート炭酸カリウムの水溶液を、メタノール中のビスアセテート76の溶液に、室温で添加した。脱アセチル化は、LCMSによってモニタリングされた通り、30分以内に完了した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、有機相をクエン酸、水及びブラインで順次に洗浄した。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、懸濁液を濾過し、過剰の溶媒を減圧下での回転蒸発によって除去した。残渣をカラムクロマトグラフィーにかけた。純粋な画分を合わせ、減圧下での回転蒸発による過剰の溶出液の除去で、ジオール77が得られた。LCMS340分、ES113649。アリル81022カルボニルアミノ3メチルブタンアミドプロパンアミドベンジルオキシカルボニル11ヒドロキシ7メトキシ5オキソ2プロパ1エン1イル5101111aテトラヒドロピロロ21c14ベンゾジアゼピン8イルオキシプロポキシ11ヒドロキシ7メトキシ5オキソ2プロパ1エン1イル1111aジヒドロピロロ21c14ベンゾジアゼピン10カルボキシレートデスマーチンペルヨージナンを、一度に、乾燥ジクロロメタン中の77及びピリジンの溶液に、室温で添加した。TLCによる綿密なモニタリングは、30分後に出発原料の消失を明らかにした。反応物を、メタ重亜硫酸ナトリウム及び炭酸水素ナトリウムの溶液、続いてブラインで後処理した。ジクロロメタン層を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、真空濾過した。ジクロロメタン溶液を次いで、触媒的量のDMAPで処理し、TLCLCMSによって観察されるように主な生成物スポットを一つに合体させた。溶液を蒸発によって濾過し、ジクロロメタンを減圧下での回転によって除去した。生じた残渣をカラムクロマトグラフィーにかけた。純粋な画分を回収し、減圧下での回転蒸発による溶出液の除去で、所望の環化生成物78が得られた。LCMS335分、ES113219、ES113025。422アミノ3メチルブタンアミドプロパンアミドベンジル11ヒドロキシ7メトキシ87メトキシ5オキソ2プロパ1エン1イル511aジヒドロピロロ21c14dベンゾイアゼピン8イルオキシプロポキシ5オキソ2プロパ1エン1イル1111aジヒドロピロロ21c14ベンゾジアゼピン10カルボキシレートPd4を、乾燥DCM中のalloc化合物及びピロリジンの溶液に、アルゴン雰囲気下で添加した。溶液を室温で15時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させた。フラッシュカラムクロマトグラフィー3メタノール97クロロホルムから90クロロホルム10メタノールの勾配溶出による精製で、生成物を白色の粉末として得た。LCMSRT270分MS94617。4255イソプロピル2メチル4723トリオキソ10131619テトラオキサ3622トリアザペンタコサンアミドベンジル11ヒドロキシ7メトキシ87メトキシ5オキソ2プロパ1エン1イル511aジヒドロピロロ21c14ベンゾジアゼピン8イルオキシプロポキシ5オキソ2プロパ1エン1イル1111aジヒドロピロロベンゾ21c14ジアゼピン10カルボキシレートNNジイソプロピルジエチルアミンiの溶液を、乾燥DCM中のアミンジペプチド79及びマレイミドdPeg4NHSエステルの溶液に添加した。溶液を室温で24時間撹拌した。反応混合物を減圧下で蒸発させ、残渣をセミ分取用TLCにかけることで、所望のマレイミド14の純粋な試料が得られた。LCMS保持時間287分ES134429。BocValCitPABOHTHF中のBocValOSuの溶液を、THF及びH2O中のHCitOH及びNaHCO3の溶液に添加した。混合物を室温で72時間撹拌し、THFを減圧下で蒸発させた。pHを3にクエン酸で調節することで、白色のガムを沈殿させた。これを10IPA酢酸エチルで抽出し、合わせた抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させた。減圧下での蒸発で白色の気泡体が得られ、これを減圧下で18時間乾燥させた。気泡体をエーテル中に超音波処理で懸濁し、続いて濾過することで、該生成物を微粒の白色粉末として得た。DCMMeOH中の、一分量のこの材料、pアミノベンジルアルコール及びEEDQを、室温で24時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させ、残留ガムをエーテルを用いて超音波処理で粉砕し、生じた生成物を濾過によって回収し、減圧下で乾燥させることで、生成物82を白色の固体として得た。分析データRT242分MSmz4798、MSmz4776、90。化合物82の合成を下記スキーム16に示す。124メチレンピロリジン1カルボニル522アミノ3メチルブタンアミド5ウレイドペンタンアミドベンジルオキシカルボニルアミノ2メトキシフェノキシペンチルオキシ2カルボニルアミノ5メトキシベンゾイル4メチレンピロリジン2イルメチルアセテートトリエチルアミンを、乾燥THF中のモノalloc保護ビスアニリン及びトリホスゲンの撹拌溶液に、アルゴン雰囲気下にて室温で添加した。反応混合物を40°Cに加熱し、試料をメタノールで処理し、LCMSによってカルバミン酸メチルとして分析した。乾燥THFDMF中のベンジルアルコール及びトリエチルアミンの溶液を、滴下により、新たに調製したイソシアネートに添加した。反応混合物をLCMSによってモニタリングし、2時間後に40°Cで完了した。反応混合物を蒸発乾固させ、残渣を10IPADCMと水との間で分配した。有機部分を分離し、水、ブラインで洗浄し、乾燥させ、減圧下で蒸発させることで、茶色の気泡体を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィークロロホルムから93クロロホルム7メタノールまで1ずつ増加の勾配溶出による精製で、生成物を白色の固体として得た。分析データRT342分MSmz1298。アリル422アミノ3メチルブタンアミド5ウレイドペンタンアミドベンジルビス24メチレンピロリジン1カルボニル4メトキシ51フェニレンジカルバメートH2O中のK2CO3の溶液を、メタノール中のアセテートの溶液に添加した。反応混合物を室温で2時間撹拌した。メタノールを減圧下で蒸発させ、残渣をH2Oで希釈し、pH3に1Mクエン酸で酸性化した。混合物をDCMで抽出し、合わせた抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ、減圧下で蒸発させることで、生成物を白色の気泡体として得た。分析データRT312分MSmz1214、MSmz1212、100。アリル81022アミノ3メチルブタンアミド5ウレイドペンタンアミドフェニルプロパノイル11ヒドロキシ7メトキシ2メチレン5オキソ235101111aヘキサヒドロ1Hピロロ21c14ベンゾジアゼピン8イルオキシペンチルオキシ11ヒドロキシ7メトキシ2メチレン5オキソ231111aテトラヒドロ1Hピロロ21c14ベンゾジアゼピン10カルボキシレート安定化させた45wtの2ヨードキシ安息香酸を、一度に、乾燥DMSO中のビス脱アセチル化生成物の溶液に、窒素雰囲気下で添加した。溶液を室温で26時間撹拌した。さらに一分量のIBXを添加し、反応をさらに18時間続けた。反応混合物をH2Oで希釈し、10MeOHDCMで抽出し、合わせた抽出物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水、ブラインで洗浄し、乾燥させた。溶媒を減圧下での回転蒸発によって除去することで、粗生成物を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー100ジクロロメタンから94ジクロロメタン6メタノールまで1ずつ増加の勾配溶出による精製で、生成物85を白色の固体として得た。分析データRT298分MSmz1210、MSmz1208、100。アリル81022アミノ3メチルブタンアミド5ウレイドペンタンアミドベンジルオキシカルボニル11ヒドロキシ7メトキシ2メチレン5オキソ235101111aヘキサヒドロ1Hピロロ21c14ベンゾジアゼピン8イルオキシペンチルオキシ11ヒドロキシ7メトキシ2メチレン5オキソ231111aテトラヒドロ1Hピロロ21c14ベンゾジアゼピン10カルボキシレート冷トリフルオロ酢酸を、Boc保護化合物に0°Cで添加した。溶液をこの温度で15分間撹拌した。反応混合物を氷上に注ぎ、pHを飽和NaHCO3溶液でpH8に調節した。溶液をDCMで抽出し、合わせた抽出物を飽和ブラインで洗浄し、乾燥させ、減圧下で蒸発させることで、生成物を白色の固体として得た。分析データRT253分MSmz1110、MSmz1108、100。422アミノ3メチルブタンアミド5ウレイドペンタンアミドベンジル11ヒドロキシ7メトキシ87メトキシ2メチレン5オキソ23511aテトラヒドロ1Hピロロ21c14ベンゾジアゼピン8イルオキシペンチルオキシ2メチレン5オキソ231111aテトラヒドロ1Hピロロ21c14ベンゾジアゼピン10カルボキシレートPd4を、乾燥DCM中のalloc化合物及びピロリジンの溶液に、窒素雰囲気下で添加した。溶液を室温で2時間撹拌し、溶媒を減圧下で蒸発させた。フラッシュカラムクロマトグラフィー90クロロホルム10メタノールから76クロロホルム24メタノールの勾配溶出による精製で、生成物を白色の粉末として得た。分析データRT245分MSmz1008。422ヘキサンアミド3メチルブタンアミド5ウレイドペンタンアミドベンジル11ヒドロキシ7メトキシ87メトキシ2メチレン5オキソ23511aテトラヒドロ1Hピロロ21c14ベンゾジアゼピン8イルオキシペンチルオキシ2メチレン5オキソ231111aテトラヒドロ1Hピロロ21c14ベンゾジアゼピン10カルボキシレートNNジイソプロピルジエチルアミンを、乾燥DCMDMA中のアミンジペプチド及び6マレイミドヘキサン酸NHSエステルの溶液に、アルゴン雰囲気下で添加した。溶液を室温で72時間撹拌した。反応混合物を減圧下で蒸発させ、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィークロロホルムから93クロロホルム7メタノールまで1ずつ増加の勾配溶出によって精製することで、該生成物をオフホワイトの気泡体として得た。分析データRT283分MSmz1201。コンジュゲーションのためのThioMabの還元酸化CHO細胞中に発現させた全長の、システイン操作した単クローン抗体を、約20~40倍過剰のTCEPホスフィン塩酸塩、又は2mMのEDTAとともに50mMのトリスpH75中のDTTを用いて、3時間37°Cで、又は終夜室温で還元した。AnalBiochemVol27373~80SoltecVentures、Beverly、MA。還元したThioMabを希釈し、10mMの酢酸ナトリウム、pH5、中のHiTrapSカラム上に負荷し、03Mの塩化ナトリウムを含有するPBSで溶出した。別法として、120の体積の10酢酸を添加することによって抗体を酸性化し、10mMのスクシネートpH5で希釈し、カラム上に負荷し、次いで10カラム体積のスクシネート緩衝剤で洗浄した。カラムを50mMトリスpH75、2mMのEDTAで溶出した。溶出した還元化ThioMabを、200nMの硫酸銅水溶液又は15倍モル過剰のDHAAで処理した。鎖間ジスルフィド結合の酸化は、約三時間以上で完了した。周囲空気酸化も有効であった。再酸化した抗体を、20mMのコハク酸ナトリウムpH5、150mMのNaCl、2mMのEDTAに透析分離し、20°Cで冷凍保存した。抗体薬物コンジュゲートを調製するためのThioMabと薬物リンカー化合物とのコンジュゲーション上記した通りの再酸化ThioMabを、混合した25から10倍過剰の薬物リンカー中間体と合わせ、約一時間室温で静置させることで、コンジュゲーションを遂行し、表1のThioMab抗体薬物コンジュゲート101~115を形成した。コンジュゲーション混合物をゲル濾過、カチオン交換クロマトグラフィー又は透析によって精製することで、過剰の薬物リンカー中間体及び他の不純物を除去した。特に、薬物リンカー中間体15dを、20mMの濃度までDMAに可溶化した。再酸化したシステイン操作H118Cトラスツズマブ抗体を解凍し、3倍モル過剰の15dを添加した。実験が、より高いpHで抗体凝集の増加を示した後、反応をpH5で実施した。薬物コンジュゲーションの程度をLCMS分析によってモニタリングした。追加の1倍当量の15dを3時間後に添加し、反応を終夜4°Cで進行するままにすることで、粗製ADC114を得た。抗体薬物コンジュゲート、トラスツズマブMPPEG8ValAlaPABPBD114を次いで、スクシネートで希釈した後にカチオン交換カラムに適用し、少なくとも10カラム体積のスクシネートで洗浄し、PBS溶出した。抗体薬物コンジュゲート114を、ゲル濾過カラムを使用して20mMのHisアセテートpH5、240mMのスクロース中に処方した。抗体薬物コンジュゲート114を、タンパク質濃度を決定するためのUV分光法、凝集分析用の分析用SEC、及び薬物負荷を決定するための還元の前後にLCMSによって特徴づけた。サイズ排除クロマトグラフィーを、02Mのリン酸カリウムpH62中のShodexKW8025カラムを使用し、025mMの塩化カリウム及び15IPAを用いて、075mlminの流量で行った。コンジュゲートの凝集状態を、280nmにおける溶出ピーク面積吸光度の積分によって決定した。SEC分析は、808分での積分面積による41の凝集ADC及び899分での959の単量体ADC11を示した。LCMS分析を、AgilentQTOF6520ESI機器を使用して行った。一例として、114トラスツズマブMPPEG8ValAlaPABPBDをDTTで還元し、80°Cに加熱し、5分で30Bから40Bの勾配を用いて溶出される1000Å、8μmのPLRPSカラム上に負荷した。移動相Aは、005TFAとのH2Oであり、移動相Bは、004TFAとのアセトニトリルであった。流量は05mlminであった。タンパク質溶出を、UV吸光度検出によってA280nmで、エレクトロスプレーイオン化法及びTOF分析の前にモニタリングした。裸の軽鎖、残留性の裸の重鎖、及び薬物を入れた重鎖の基線クロマトグラフィー分離を達成した。得られたmzスペクトルを、AgilentMassHunterソフトウェアを使用して脱回旋することで、低減した抗体断片の質量を算出した。MPPEG8ValAlaPABPBD58の分子量1964ダルトン観察された脱回旋質量23440ダルトンは、裸のLCのMWに対応する。50627ダルトンは、裸のHCのMWに対応する。52591ダルトンは、薬物を入れたHCのMWに対応する。したがって、52591ダルトンで観察されたピークは、一つの薬物部分、薬物リンカー中間体58を保有する予想の重鎖断片に対応する。PBD薬物リンカー中間体へのコンジュゲーションのための抗体がシステイン操作抗体でない場合、鎖間ジスルフィド結合は、2時間37°CでホスフェートpH75中の約22モル過剰のTCEPを添加することによって部分的に低減される。各当量のTCEPは、理論的に2種の反応性システインをもたらす。通常、約35の標的薬物抗体比のためには、18~2モル過剰のTCEPが添加される。還元に続く精製ステップは通常必要とされない。反応性システインに対してわずかに過剰の薬物リンカー中間体、抗体に対して約8モル当量の薬物リンカー中間体を添加し、反応を約1時間室温で実施する。精製は、ダイアフィルトレーション、イオン交換又はゲル濾過によって行うことができる。DARは、UVA280面積積分を使用して、低減コンジュゲートの疎水性相互作用クロマトグラフィー、又はLCMSによって決定することができる。インビトロ細胞増殖アッセイADCの効力を、以下のプロトコルCancerRes625485~5488を用いる細胞増殖アッセイによって測定した。1培地中の約104細胞BritJourCancer79707~717、SKBR3、BT474、MCF7又はMDAMB468を含有する細胞培養100μlのアリコットを、96ウェルの不透明な壁付きプレートの各ウェル中に沈着させた。2培地を含有し、細胞が無い対照ウェルを調製した。3ADCを実験ウェルに添加し、3~5日間インキュベートした。4プレートを室温におよそ30分間平衡化した。5各ウェルに存在する細胞培養培地の体積と同等の体積のCellTiterGlo試薬を添加した。6含有物を2分間オービタルシェーカー上で混合することで、細胞溶解を誘発した。7プレートを室温で10分間インキュベートすることで、発光シグナルを安定化した。8発光をRLU関連発光単位としてグラフ中で記録及び報告した。特定の細胞を96ウェルプレート中に1000~2000ウェル又は2000~3000ウェル、50uLウェルで播種する。一日又は二日後、ADCを50μLの体積で、9000、3000、1000、333、111、37、124、41又は14ngmLの最終濃度まで添加し、ADCが無い対照ウェルは培地単独を受ける。条件は二通り又は三通りである。3~5日後、100μLウェルの細胞TiterGloIIを添加し、細胞数をルミノメーターを使用して決定する。データを標準偏差エラーバーで、同型の各セットに対する発光の平均値としてプロットする。該プロトコルは、以下のCellTiterGloLuminescentCellViabilityAssayの変更である。1FBSグルタミン培地の50μLウェル中に1000細胞ウェルを平板培養する。細胞を終夜結合させる。2ADCを、作業濃度18μgmlで始めて、培地中13に連続して希釈する。50μLの希釈ADCを、既にウェル中にある50μLの細胞及び培地に添加する。372~96時間インキュベートする。4100μLウェルのPromegaCellTiterGlo試薬を添加し、3分振盪し、ルミノメーター上で読み取る。結果図2は、5日でのSKBR3インビトロ細胞生存能対、TrMPPEG8PheLysPABPBD101、抗CD22MPPEG8PheLysPABPBD102、TrMPPEG4PheLysPABPBD103及び抗CD22MPPEG4PheLysPABPBD104の濃度のプロットを示しており、ここで、Trは抗HER2チオトラスツズマブ4D5HCA118Cであり、重鎖システイン操作された抗体の突然変異体は、連続番号付け体系によって番号付けされている。HER2発現SKBR3細胞の増殖は、抗HER2抗体薬物コンジュゲート101及び103によって選択的に阻害されるが、抗CD22抗体薬物コンジュゲート102及び104によって選択的に阻害されない。これらの結果は、PBD抗体薬物コンジュゲートの、インビトロにおける標的依存性の選択的死滅効果を確認した。図3は、5日でのKPL4インビトロ細胞生存能対、TrMPPEG8PheLysPABPBD101、抗CD22MPPEG8PheLysPABPBD102、TrMPPEG4PheLysPABPBD103及び抗CD22MPPEG4PheLysPABPBD104の濃度のプロットを示しており、ここで、Trは抗HER2チオトラスツズマブ4D5HCA118Cであり、重鎖システイン操作された抗体の突然変異体は、連続番号付け体系によって番号付けされている。抗体薬物コンジュゲート、トラスツズマブMPPEG8ValAlaPABPBD114及びトラスツズマブMPPEG8ValAlaPABPBD115を、SKBR3、KPL4及びMCF7CancerRes573071~3078の細胞に対して試験するすることで、五日間の研究におけるインビトロ細胞生存能を測定した。SKBR3に対する114のIC50値は172であり、KPL4に対しては681であった。SKBR3に対する115のIC50値は123であり、KPL4に対しては507であった。114及び115の両方は、ヒト乳腺癌細胞株を発現しないHER2であるMCF7に対して有効に不活性であった。したがって、コンジュゲート114及び115は、標的化細胞死滅効力を実証している。高発現性HER2トランスジェニック外植マウスにおける腫瘍成長阻害インビボ効力トランスジェニック実験に適当な動物は、Taconicなどの標準的な市販供給源から得ることができる。多くの系統が適当であるが、FVB雌性マウスが好ましいのは、腫瘍形成に対するそれらの高感受性による。FVB雄を交配のために使用し、精管切除されたCD1繁殖用を使用することで偽妊娠を刺激した。精管切除されたマウスは、任意の市販供給者から得ることができきる。FVBマウス又は129BL6×FVBp53ヘテロ接合体マウスのいずれかを用いて、初代を繁殖させた。腫瘍形成を潜在的に増加させるため、p53対立遺伝子にヘテロ接合性を有するマウスを使用した。しかし、これは必要ないと判明した。したがって、一部のF1腫瘍は混合株である。初代腫瘍はFVBだけである。六つの初代が得られ、一部が同腹仔を有することなく腫瘍を発生させた。を有する動物を、単一回又は複数回用量でADCのIV注入によって治療した。腫瘍体積を注入後の様々な時点で評価した。腫瘍は、HER2のラット相同体であるneuの変異的に活性化した形態を発現するトランスジェニックマウスにおいて容易に生じるが、ヒト乳癌において過剰発現されるHER2は突然変異せず、腫瘍形成は、非突然変異HER2SeminCancerBiol569~76を過剰発現させるトランスジェニックマウスにおいてずっと弱い。非突然変異HER2で腫瘍形成を改善するため、トランスジェニックマウスは、上流ATGを欠失させることで、こうした上流ATGコドンで翻訳の開始を妨げ、それ以外では、HER2の下流真正開始コドンからの翻訳開始の頻度を低減させるHER2cDNAプラスミドを使用して産生したJBiolChem27424335~24341を参照のこと。追加として、キメライントロンを5末端に付加し、これは、前に報告された通り、発現のレベルも増強するはずであるNucleicAcidsRes166713BuchmanandBergMolCellBiol84395Brinsterら、ProcNatlAcadSciUSA85836。キメライントロンを、Promegaベクター、Pcineo哺乳動物発現ベクターから誘導した。cDNA3末端は、ヒト成長ホルモンエクソン4及び5、並びにポリアデニル化配列によって隣接されている。さらに、FVBマウスを使用したのは、この系統が腫瘍発生に対してより感受性であるからである。MMTVLTRからのプロモーターを使用することで、乳腺における組織特異的HER2発現を確実にした。腫瘍形成に対する感受性を増加させるため、動物にAIN76A食餌を与えたBreastCancerResandTreatment45149~158。Fo5マウス乳腺腫瘍モデルFo5モデルは、ヒトHER2遺伝子が、マウス乳腺腫瘍ウイルスプロモーターの転写制御下で、乳腺上皮において過剰発現されるトランスジェニックマウスモデルである。過剰発現は、ヒトHER2受容体を過剰発現する乳腺腫瘍の自発的発生を引き起こす。初代動物の一つの乳腺腫瘍を、腫瘍断片の連続移植によってFVBマウスの後続世代で増殖した。インビボ効力研究のために使用する前に、MMTVHER2Fo5トランスジェニック乳腺腫瘍を、およそ2×2mmと測定した断片におけるnunuマウスの23番乳腺脂肪パッド中に外科的に移植した。腫瘍が所望の体積に達した時、腫瘍保有マウスをランダム化し、単回用量をADCのIV注入によって与えた。結果図4は、ビヒクル20mMのヒスチジンアセテート、pH55、240mMのスクロース、10mgkgで抗Steap1MPPEG8PheLysPABPBD107、10mgkgで抗Steap1MPPEG4PheLysPABPBD108、10mgkgでTrMPPEG8PheLysPABPBD101、及び10mgkgでTrMPPEG4PheLysPABPBD103を、0日目に単回iv投薬した後の、CRLnunuマウス中に接種された乳癌モデルMMTVHER2Fo5乳腺同種移植片腫瘍における、時間の経過によるインビボでの平均腫瘍体積変化のプロットを示す。該図における系統を以下の記号とともに示す。抗HER2コンジュゲート101及び103は、標的特異性腫瘍成長阻害を示した。コンジュゲート101で治療された10匹の動物のうち、二匹が部分的応答を示した。コンジュゲート103で治療された10匹の動物のうち、三匹が部分的応答を示した。非標的対照ADC107及び108は、腫瘍成長に対する効果が無かった。別の例示的な研究において、CRLnunuマウス中に接種された乳癌モデルMMTVHER2Fo5乳腺同種移植片腫瘍における、時間の経過によるインビボでの平均腫瘍体積変化を、ビヒクル20mMのヒスチジンアセテート、pH55、240mMのスクロース、5mgkg、300μgm2で112gD5B60MPPEG8ValAlaPABPBD、10mgkg、600μgm2で112gD5B60MPPEG8ValAlaPABPBD、5mgkg、284μgm2で114トラスツズマブMPPEG8ValAlaPABPBD、10mgkg、569μgm2で114トラスツズマブMPPEG8ValAlaPABPBD、10mgkg、807μgm2で113gD5B60MPPEG8ValAlaPABPBD、及び10mgkg、790μgm2で115トラスツズマブMPPEG8ValAlaPABPBDを、0日目に単回iv投薬した後で測定した。腫瘍サイズを0日、3日、7日及び10日に測定した。10日後、ビヒクルを投薬された動物は、10匹の動物群において、腫瘍サイズの増加を示し、腫瘍阻害を示さず、112は、10匹の動物群において、部分的又は完全な応答を示さず、112は、10匹の動物群において、部分的又は完全な応答を示さず、114は、10匹の動物群において、九個の部分的応答を示し、114は、10匹の動物群において、十個の部分的応答を示し、113は、10匹の動物群において、部分的又は完全な応答を示さず、115は、10匹の動物群において、十個の部分的応答を示した。したがって、抗HER2標的化ADC114及び115が標的化腫瘍阻害を示す一方で、陰性対照ビヒクル及び非標的化ADC112及び113は示さなかった。LuCap35Vヒト前立腺腫瘍モデルUniversityofWashingtonから得られたLuCap35Vは、LuCap35ヒト前立腺外植腫瘍モデルのアンドロゲン非依存性変異体である。。LuCap35を樹立するために使用された組織を、転移性前立腺癌を含有する鼠径リンパ節の生検から単離し、引き続いてマウスの側腹部に移植した。LuCap35V外植モデルを、UniversityofWashingtonで38継代のための去勢雄性CB17FoxChaseSCIDマウスにおける、引き続いてGenentechで連続継代のための、CharlesRiverLaboratoriesからの去勢雄性CB17SCIDベージュマウスにおける連続移植によって保持した。インビボ効力研究のために使用する前に、LuCap35V腫瘍片を、去勢雄性CB17SCIDベージュマウスの右側腹部に皮下移植した。動物を腫瘍移植の2週間前に去勢することで、残留テストステロン濃度がゼロに達するための時間を持たせた。腫瘍が所望の体積に達した時、腫瘍保有マウスをランダム化し、ADCのIV注入によって単回用量を与えた。結果図5は、ビヒクル20mMのヒスチジンアセテート、pH55、240mMのスクロース、5mgkgで抗CD22MPPEG8ValAlaPABPBD110、及び5mgkgで抗Steap1MPPEG8ValAlaPABPBD109を、0日目に単回iv投薬した後の、去勢雄性SCIDベージュマウス中の前立腺癌モデルLuCap35V異種移植腫瘍における時間の経過によるインビボでの平均腫瘍体積変化のプロットを示す。図6は、ビヒクル20mMのヒスチジンアセテート、pH55、240mMのスクロース、107抗Steap1MPPEG8PheLysPABPBD、98mgkg、60μgm2、107抗Steap1MPPEG8PheLysPABPBD、195mgkg、120μgm2、108抗Steap1MPPEG4PheLysPABPBD、33mgkg、60μgm2、108抗Steap1MPPEG4PheLysPABPBD、65mgkg、120μgm2、105トラスツズマブMPPEG8PheLysPABPBD94mgkg、120μgm2、及び106トラスツズマブMPPEG4PheLysPABPBD、86mgkg、120μgm2を、0日目に単回iv投薬した後の、去勢雄性SCIDベージュマウス中の前立腺癌モデルLuCap35V異種移植腫瘍における時間の経過によるインビボでの平均腫瘍体積変化のプロットを示す。別の例示的な研究において、去勢雄性SCIDベージュマウス中の前立腺癌モデルLuCap35V異種移植腫瘍における時間の経過によるインビボでの平均腫瘍体積変化を、ビヒクル20mMヒスチジンアセテート、pH55、240mMスクロース、112gD5B60MPPEG8ValAlaPABPBD、3mgkg、683μgm2、111抗Steap1MPPEG8ValAlaPABPBD、1mgkg、2215μgm2、111抗Steap1MPPEG8ValAlaPABPBD、3mgkg、664μgm2、113gD5B60MPPEG8ValAlaPABPBD、3mgkg、701μgm2、及び109抗Steap1MPPEG8ValAlaPABPBD3mgkg、646μgm2を、0日目に単回iv投薬した後に測定した。腫瘍サイズを4日毎に測定した。27日後、ビヒクルを投薬された動物は、8匹の動物群において、腫瘍サイズの増加を示し、腫瘍阻害を示さず、112は、8匹の動物群から1個の部分的応答を示し、111は、6匹の動物群において四個の部分的応答及び四個の完全な応答を示し、111は、5匹の動物群において五個の部分的応答及び3個の完全な応答を示し、113は、8匹の動物群において部分的又は完全な応答を示さず、109は、7匹の動物群において七個の部分的応答及び1個の完全な応答を示した。抗Steap1標的化ADC109及び111が標的化腫瘍阻害を示す一方で、陰性対照ビヒクル及び非標的化ADC112及び113は示さなかった。略語AcアセチルAcmアセトアミドメチルAllocアリルオキシカルボニルBocジtertブチルジカーボネートtButertブチルBzlベンジル、ここで、BzlOMeはメトキシベンジルであり、BzlMeはメチルベンゼンであるCbz又はZベンジルオキシカルボニル、ここで、ZCl及びZBrは、それぞれクロロ及びブロモベンジルオキシカルボニルであるDMFNNジメチルホルムアミドDnpジニトロフェニルDTTジチオスレイトールFmoc9Hフルオレン9イルメトキシカルボニルimpN10イミン保護基3プロパノエートValAlaPABMCOSuマレイミドカプロイルONスクシンイミドMocメトキシカルボニルMPマレイミドプロパンアミドMtr4メトキシ236トリメチルベンゼンスルホニルPABパラアミノベンジルオキシカルボニルPEGエチレンオキシPNZpニトロベンジルカルバメートPsec2エトキシカルボニルTBDMStertブチルジメチルシリルTBDPStertブチルジフェニルシリルTeoc2エトキシカルボニルTosトシルTroc222トリクロルエトキシカルボニルクロライドTrtトリチルXanキサンチル参考文献以下の文献は参照により、それらの全体を組み込む。