L-システイン生産能を有し、かつ、ygaZH遺伝子およびychE遺伝子からなる群より選ばれる遺伝子の発現が非改変株と比べて増大するように改変された腸内細菌科に属する細菌を培地で培養し、該培地からL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を採取することを特徴とする、L-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物の製造方法。前記細菌は、L-システインの生合成系が強化されるよう改変されている、請求項1に記載の方法。前記細菌は、L-システインによるフィードバック阻害が低減または解除された変異型セリンアセチルトランスフェラーゼを保持する、請求項1または2に記載の方法。前記ygaZH遺伝子が、それぞれ下記AおよびBからなる群より選ばれるタンパク質、並びに下記CおよびDからなる群より選ばれるタンパク質をコードする、請求項1~3のいずれか1項に記載の方法:A配列番号8に示すアミノ酸配列を有するタンパク質;B配列番号8に示すアミノ酸配列において、1~10個のアミノ酸の置換、欠失、挿入、または付加を含むアミノ酸配列を有し、かつ、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質;C配列番号10に示すアミノ酸配列を有するタンパク質;D配列番号10に示すアミノ酸配列において、1~10個のアミノ酸の置換、欠失、挿入、または付加を含むアミノ酸配列を有し、かつ、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質。前記ychE遺伝子が、下記EおよびFからなる群より選ばれるタンパク質をコードする、請求項1~4のいずれか1項に記載の方法:E配列番号13または15に示すアミノ酸配列を有するタンパク質;F配列番号13または15に示すアミノ酸配列において、1~10個のアミノ酸の置換、欠失、挿入、または付加を含むアミノ酸配列を有し、かつ、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質。前記ygaZH遺伝子が、それぞれ下記aおよびbからなる群より選ばれるDNA、並びに下記cおよびdからなる群より選ばれるDNAである、請求項1~5のいずれか1項に記載の方法:a配列番号7に示す塩基配列を有する遺伝子;b配列番号7に示す塩基配列に相補的な配列、又は同塩基配列から調製され得るプローブとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質をコードするDNA;c配列番号9に示す塩基配列を有する遺伝子;d配列番号9に示す塩基配列に相補的な配列、又は同塩基配列から調製され得るプローブとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質をコードするDNA。前記ychE遺伝子が、下記aおよびbからなる群より選ばれるDNAである、請求項1~6のいずれか1項に記載の方法:a配列番号12または14に示す塩基配列を有する遺伝子;b配列番号12または14に示す塩基配列に相補的な配列、又は同塩基配列から調製され得るプローブとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質をコードするDNA。前記細菌がパントエア属に属する細菌である、請求項1~7のいずれか1項に記載の方法。前記細菌がパントエアアナナティスである、請求項8に記載の方法。前記細菌がエシェリヒア属に属する細菌である、請求項1~7のいずれか1項に記載の方法。前記細菌がエシェリヒアコリである、請求項10に記載の方法。前記関連物質がL-シスチンまたはチアゾリジン誘導体である、請求項1~11のいずれか1項に記載の方法。前記関連物質がO-アセチルセリンである、請求項1~11のいずれか1項に記載の方法。本発明は、細菌のL-システイン生産能を向上させる新規な技術を開発し、L-システイン生産菌、及び同細菌を用いたL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物の製造法を提供することを課題とする。本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意検討を行った結果、ygaZH遺伝子またはychE遺伝子の発現量を上昇させることによって、L-システイン生産能を向上できることを見出し、本発明を完成させるに至った。すなわち本発明は、以下のとおりである。1L-システイン生産能を有し、かつ、ygaZH遺伝子およびychE遺伝子からなる群より選ばれる遺伝子の発現が非改変株と比べて増大するように改変された腸内細菌科に属する細菌を培地で培養し、該培地からL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を採取することを特徴とする、L-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物の製造方法。2前記細菌は、L-システインの生合成系が強化されるよう改変されている、前記方法。3前記細菌は、L-システインによるフィードバック阻害が低減または解除された変異型セリンアセチルトランスフェラーゼを保持する、前記方法。4前記ygaZH遺伝子が、それぞれ下記AおよびBからなる群より選ばれるタンパク質、並びに下記CおよびDからなる群より選ばれるタンパク質をコードする、前記方法:A配列番号8に示すアミノ酸配列を有するタンパク質;B配列番号8に示すアミノ酸配列において、1~10個のアミノ酸の置換、欠失、挿入、または付加を含むアミノ酸配列を有し、かつ、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質;C配列番号10に示すアミノ酸配列を有するタンパク質;D配列番号10に示すアミノ酸配列において、1~10個のアミノ酸の置換、欠失、挿入、または付加を含むアミノ酸配列を有し、かつ、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質。5前記ychE遺伝子が、下記EおよびFからなる群より選ばれるタンパク質をコードする、前記方法:E配列番号13または15に示すアミノ酸配列を有するタンパク質;F配列番号13または15に示すアミノ酸配列において、1~10個のアミノ酸の置換、欠失、挿入、または付加を含むアミノ酸配列を有し、かつ、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質。6前記ygaZH遺伝子が、それぞれ下記aおよびbからなる群より選ばれるDNA、並びに下記cおよびdからなる群より選ばれるDNAである、前記方法:a配列番号7に示す塩基配列を有する遺伝子;b配列番号7に示す塩基配列に相補的な配列、又は同塩基配列から調製され得るプローブとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質をコードするDNA;c配列番号9に示す塩基配列を有する遺伝子;d配列番号9に示す塩基配列に相補的な配列、又は同塩基配列から調製され得るプローブとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質をコードするDNA。7前記ychE遺伝子が、下記aおよびbからなる群より選ばれるDNAである、前記方法:a配列番号12または14に示す塩基配列を有する遺伝子;b配列番号12または14に示す塩基配列に相補的な配列、又は同塩基配列から調製され得るプローブとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質をコードするDNA。8前記細菌がパントエア属に属する細菌である、前記方法。9前記細菌がパントエアアナナティスである、前記方法。10前記細菌がエシェリヒア属に属する細菌である、前記方法。11前記細菌がエシェリヒアコリである、前記方法。12前記関連物質がL-シスチンまたはチアゾリジン誘導体である、前記方法。13前記関連物質がO-アセチルセリンである、前記方法。本発明により、腸内細菌科に属する細菌のL-システイン生産能を向上させることが出来る。また、本発明の細菌を使用することにより、L-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を効率よく発酵生産することが出来る。<1>本発明の方法に用いられる細菌本発明の方法に用いられる細菌以下、本発明の細菌ともいうは、L-システイン生産能を有し、かつ、ygaZH遺伝子およびychE遺伝子からなる群より選ばれる1またはそれ以上の遺伝子の発現が増大するように改変された、腸内細菌科に属する細菌である。本発明において、L-システインとは、フリー体のL-システインもしくはその塩、またはそれらの混合物であってもよい。また、本発明において、O-アセチルセリンとは、フリー体のO-アセチルセリンもしくはその塩、またはそれらの混合物であってもよい。後述するその他のL-システイン関連物質についても同様である。塩としては、例えば硫酸塩、塩酸塩、炭酸塩、アンモニウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩が挙げられる。本発明において、L-システイン生産能とは、本発明の細菌を培地中で培養したときに、培地中または菌体内にL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を生成し、培地中または菌体から回収できる程度に蓄積する能力をいう。また、L-システイン生産能を有する細菌とは、野生株または親株よりも多い量のL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を生産し培地に蓄積することができる細菌を意味し、好ましくは、0.2g/L以上、より好ましくは0.3g/L以上、特に好ましくは0.4g/L以上の量のL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を生産し培地に蓄積することができる細菌を意味する。細菌が産生したL-システインは、培地中で、ジスルフィド結合によって一部がL-シスチンに変換することがある。また、L-システインと培地に含まれるチオ硫酸との反応によってSスルホシステインが生成することがあるSzczepkowskiTWNaturevol182。さらに、細菌の細胞内で生成したL-システインは、細胞中に存在するケトン又はアルデヒド、例えばピルビン酸と縮合し、ヘミチオケタールを中間体としてチアゾリジン誘導体が生成することがある特許第2992010参照。これらのチアゾリジン誘導体及びヘミチオケタールは、平衡混合物として存在することがある。また、本発明の細菌を培地中で培養したときに、L-システインの前駆体が生成することがある。L-システインの前駆体としては、O-アセチルセリンや、その異性体であるN-アセチルセリンが挙げられる。したがって、L-システイン生産能とは、L-システインのみを培地中又は菌体内に蓄積する能力に限られず、L-システイン、L-シスチン、前記のようなL-システインの誘導体、もしくは前記のようなL-システインの前駆体、又はこれらの混合物を培地中に蓄積する能力を含むものとする。なお、本発明において、L-シスチン、前記のようなL-システインの誘導体、および前記のようなL-システインの前駆体を総称してL-システインの関連物質ともいう。L-システイン生産能を有する細菌は、本来的にL-システイン生産能を有するものであってもよいが、下記のような細菌を、変異法や組換えDNA技術を利用して、L-システイン生産能を有するように改変したものであってもよい。本発明に用いる細菌としては、エシェリヒア属、エンテロバクター属、パントエア属、クレブシエラ属、セラチア属、エルビニア属、サルモネラ属、モルガネラ属など、腸内細菌科に属する細菌であって、L-システインを生産する能力を有するものであれば、特に限定されない。具体的にはNCBINationalCenterforBiotechnologyInformationデータベースに記載されている分類により腸内細菌科に属するものが利用できるhttpwwwncbinlmnihgovTaxonomyBrowserwwwtaxcgiid91347。改変に用いる腸内細菌科に属する細菌の親株としては、中でもエシェリヒア属細菌、エンテロバクター属細菌、パントエア属細菌、エルビニア属細菌、エンテロバクター属細菌、又はクレブシエラ属細菌を用いることが望ましい。エシェリヒア属細菌としては、特に限定されないが、具体的にはNeidhardtらの著書BackmannBJ1996DerivationsandGenotypesofsomemutantderivativesofEscherichiacoliK12p24602488Table1InFDNeidhardtEscherichiacoliandSalmonellaCellularandMolecularBiologySecondEditionAmericanSocietyforMicrobiologyPressWashingtonDCに挙げられるものが利用できる。その中では、例えばエシェリヒアコリが挙げられる。エシェリヒアコリとしては具体的には、プロトタイプの野生株K12株由来のエシェリヒアコリW3110ATCC27325、エシェリヒアコリMG1655等が挙げられる。これらを入手するには、例えばアメリカンタイプカルチャーコレクション住所12301ParklawnDriveRockvilleMaryland20852POBox1549ManassasVA20108UnitedStatesofAmericaより分譲を受けることが出来る。すなわち各菌株に対応する登録番号が付与されており、この登録番号を利用して分譲を受けることが出来るhttpwwwatccorg参照。各菌株に対応する登録番号は、アメリカンタイプカルチャーコレクションのカタログに記載されている。エンテロバクター属細菌としては、エンテロバクターアグロメランスEnterobacteragglomerans、エンテロバクターアエロゲネスが挙げられる。エンテロバクター属細菌の代表的な株としては、エンテロバクターアグロメランスATCC12287株が挙げられる。また、具体的には、欧州特許出願公開952221号明細書に例示された菌株を使用することが出来る。パントエア属細菌としては、パントエアアナナティスPantoeaananatis、パントエアスチューアルティPantoeastewartii、パントエアアグロメランスPantoeaagglomerans、パントエアシトレアPantoeacitreaが挙げられる。パントエアアナナティスとして、具体的には、パントエアアナナティスAJ13355株FERMBP6614、SC17株FERMBP11091、及びSC17株VKPMB9246が挙げられる。AJ13355株は、静岡県磐田市の土壌から、低pHでL-グルタミン酸及び炭素源を含む培地で増殖できる株として分離された株である。SC17株は、AJ13355株から、粘液質低生産変異株として選択された株である米国特許第6596517号。SC17株は、パントエアアナナティスにおいて遺伝子破壊を行うために、λRed遺伝子産物に耐性な菌株として構築された株であるWO2008075483。SC17株は、平成21年2月4日に、産業技術総合研究所特許生物寄託センター住所郵便番号3058566茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に寄託され、受託番号FERMBP11091が付与されている。また、SC17株は、2005年9月21にロシアンナショナルコレクションオブインダストリアルマイクロオーガニズムRussianNationalCollectionofIndustrialMicroorganismsGNIIGenetika住所:Russia117545Moscow1Dorozhnyproezd1に受託番号VKPMB9246のもとに寄託されている。また、AJ13355株は、平成10年2月19日に、通産省工業技術院生命工学工業技術研究所現名称、産業技術総合研究所特許生物寄託センター、住所郵便番号3058566茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に、受託番号FERMP16644として寄託され、平成11年1月11日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、受託番号FERMBP6614が付与されている。尚、AJ13355株は、分離された当時はエンテロバクターアグロメランスEnterobacteragglomeransと同定され、エンテロバクターアグロメランスAJ13355として寄託されたが、近年16SrRNAの塩基配列解析などにより、パントエアアナナティスPantoeaananatisに再分類されている。エルビニア属細菌としては、エルビニアアミロボーラErwiniaamylovora、エルビニアカロトボーラErwiniacarotovoraが挙げられ、クレブシエラ属細菌としては、クレブシエラプランティコーラKlebsiellaplanticolaが挙げられる。なお、特に、パントエア属細菌、エルビニア属細菌、エンテロバクター属細菌は、γプロテオバクテリアに分類される細菌であり、分類学的に非常に近縁であるJGenApplMicrobiol1997Dec43355361InternationalJournalofSystematicBacteriologyOct1997p10611067。近年、DNADNAハイブリダイゼーション実験等により、エンテロバクター属に属する細菌には、パントエアアグロメランスPantoeaagglomerans又はパントエアディスパーサPantoeadispersa等に再分類されているものがあるInternationalJournalofSystematicBacteriologyJuly198939p337345。例えば、エンテロバクターアグロメランスには、16SrRNAの塩基配列解析などにより、パントエアアグロメランス、パントエアアナナティス、又はパントエアスチューアルティに再分類されているものがある。また、エルビニア属に属する細菌にはパントエアアナナスPantoeaananas、パントエアスチューアルティに再分類されているものがあるInternationalJournalofSystematicBacteriologyJan199343p162173参照。本発明の細菌は、腸内細菌科に分類されるものであれば、エンテロバクター属、パントエア属、及びエルビニア属等のいずれに属するものであってもよい。L-システイン生産能の付与又は増強、及びL-システイン生産菌細菌にL-システイン生産能を付与するには、栄養要求性変異株、アナログ耐性株又は代謝制御変異株の取得や、L-システインの生合成系酵素の発現が増強された組換え株の創製等、従来、コリネ型細菌又はエシェリヒア属細菌等の育種に採用されてきた方法を適用することができるアミノ酸発酵、株学会出版センター、1986年5月30日初版発行、第77100頁参照。ここで、L-システイン生産菌の育種において、付与される栄養要求性、アナログ耐性、代謝制御変異等の性質は、単独であってもよく、2種又はそれ以上であってもよい。また、発現が増強されるL-システイン生合成系酵素も、単独であっても、2種又はそれ以上であってもよい。さらに、栄養要求性、アナログ耐性、代謝制御変異等の性質の付与と、生合成系酵素の増強が組み合わされてもよい。以下、腸内細菌科に属する細菌にL-システイン生産能を付与する方法、又はこれらの細菌のL-システイン生産能を増強する方法、及びL-システイン生産能を有する細菌について具体的に例示する。L-システイン生産能を有する栄養要求性変異株、L-システインのアナログ耐性株、又は代謝制御変異株は、親株又は野生株を通常の変異処理、すなわちX線や紫外線の照射、またはNメチルNニトロNニトロソグアニジンもしくはエチルメタンスルフォネートEMS等の変異剤処理などによって処理し、得られた変異株の中から、栄養要求性、アナログ耐性、又は代謝制御変異を示し、かつL-システイン生産能を有するものを選択することによって得ることができる。細菌のL-システイン生産能は、L-システインの生合成系を強化することにより付与又は増強することができる。L-システインの生合成系を強化するとは、例えば、L-システインの生合成に関与する酵素の活性を増強することをいう。L-システインの生合成に関与する酵素としては、L-システイン生合成経路の酵素、およびL-システイン生合成経路の基質となる化合物、例えばL-セリン、の生成に関与する酵素が挙げられ、具体的には、セリンアセチルトランスフェラーゼSATや3-ホスホグリセレートデヒドロゲナーゼPGDが挙げられる。酵素活性の増強は、後述するように、目的の酵素をコードする遺伝子の発現を増強することや、目的の酵素の比活性を増強することにより達成できる。例えば、SATをコードする遺伝子を好適なベクターに組み込み細菌に導入することや、SATをコードする遺伝子を細菌の染色体上に組み込むことにより、SATをコードする遺伝子の発現を増強することができる。SATをコードする遺伝子としては、エシェリヒア属細菌由来の遺伝子および他の生物由来の遺伝子のいずれも使用することができる。エシェリヒアコリのSATをコードする遺伝子として、cysEが野生株及びL-システイン分泌変異株よりクローニングされ、塩基配列が明らかになっているDenkDandBoeckAJGeneralMicrobiol133515525。したがって、その塩基配列配列番号16に基づいて作製したプライマーを用いて、エシェリヒア属細菌の染色体DNAを鋳型とするPCRによって、SATをコードする遺伝子を取得することができる特開平11155571号参照。他の生物のSATをコードする遺伝子も、同様にして取得される。また、セリンアセチルトランスフェラーゼはL-システインによるフィードバック阻害を受けるため、特に、このフィードバック阻害が低減又は解除されたセリンアセチルトランスフェラーゼをコードする変異型cysE遺伝子を細菌に保持させることによって、同酵素活性を増強することができる。また、3-ホスホグリセレートデヒドロゲナーゼはセリンによるフィードバック阻害を受けるため、特に、このフィードバック阻害が低減又は解除された変異型3-ホスホグリセレートデヒドロゲナーゼをコードする変異型serA遺伝子を細菌に保持させることによって、同酵素活性を増強することができる。本発明において、L-システインによるフィードバック阻害が低減又は解除されたSATを変異型SATともいう。変異型SATとしては、エシェリヒアコリの野生型SAT配列番号17の256位のメチオニン残基に相当するアミノ酸残基をリジン残基及びロイシン残基以外のアミノ酸残基に置換する変異、又は256位のメチオニン残基に相当するアミノ酸残基からC末端側の領域を欠失させる変異を有するSATが挙げられる特開平11155571。前記リジン残基及びロイシン残基以外のアミノ酸残基としては、通常のタンパク質を構成するアミノ酸のうち、メチオニン残基、リジン残基、及びロイシン残基を除く17種類のアミノ酸残基が挙げられる。前記リジン残基及びロイシン残基以外のアミノ酸残基としては、好ましくはイソロイシン残基またはグルタミン酸残基が挙げられる。また、変異型SATとしては、野生型SATの89~96位に相当するアミノ酸配列において1又は複数の変異を有する変異型SAT米国特許公開第20050112731、野生型SATの95位のバリン残基及び96位のアスパラギン酸残基が、各々アルギニン残基及びプロリン残基に置換された変異型SAT変異型遺伝子名cysE5、米国特許公開第20050112731、及び、野生型SATの167位のスレオニン残基がアラニン残基に置換された変異型SAT米国特許第6218168号、米国特許公開第20050112731等が知られている。野生型SAT遺伝子に所望の変異を導入する方法としては、部位特異的変異やオーバーラップエクステンション法が挙げられる。変異後のコドンは、目的のアミノ酸をコードするものであれば特に制限されないが、目的の腸内細菌で使用頻度の高いコドンを使用することが好ましい。256位のメチオニン残基をグルタミン酸残基に置換した変異型SATをコードする変異型cysEを含むプラスミドpCEM256Eを保持するエシェリヒアコリJM398株EcoliJM398、プライベートナンバー:AJ13391は、平成9年11月20日より通産省工業技術院生命工学工業技術研究所現名称、産業技術総合研究所特許生物寄託センター、住所郵便番号3058566茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に、FERMP16527の受託番号のもとで寄託され、2002年7月8日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、受託番号FERMBP8112が付与されている。また、変異型SATは、上記のようにL-システインによるフィードバック阻害に非感受性になるように改変されたものであってもよいが、元来フィードバック阻害を受けないものであってもよい。例えば、シロイヌナズナのSATは、L-システインによるフィードバック阻害を受けないことが知られており、本発明に好適に用いることができる。シロイヌナズナ由来のSAT遺伝子を含むプラスミドとして、pEASmFEMSMicrobiolLett179453459が知られている。また、セリンによるフィードバック阻害耐性の変異型PGDをコードする遺伝子としては、serA5遺伝子米国特許第6180373号が知られている。また、細菌のL-システイン生産能は、L-システイン排出系を強化することによっても向上させることができる。L-システイン排出系は、L-システインの排出に関与するタンパク質の活性を増強することにより強化することができる。L-システインの排出に関与するタンパク質としては、ydeD遺伝子にコードされるタンパク質特開2002233384、yfiK遺伝子にコードされるタンパク質特開200449237、emrAB、emrKY、yojIH、acrEF、bcr、およびcusAの各遺伝子にコードされる各タンパク質特開2005287333、yeaS遺伝子にコードされるタンパク質特開2010187552が知られている。よって、これらの遺伝子から選択される1またはそれ以上の遺伝子の発現を増強することにより、L-システイン排出系を強化することができ、L-システイン生産能を高めることができる。また、YeaSタンパク質の28位のスレオニン残基、137位のフェニルアラニン残基、および/または188位のロイシン残基に変異を導入することによっても、L-システイン排出系が強化されL-システイン生産能を高めることができる欧州特許出願公開第2218729号明細書。具体的には、YeaSタンパク質の28位のスレオニン残基をアスパラギンに置換する変異、137位のフェニルアラニン残基をセリン、グルタミン、アラニン、ヒスチジン、システイン、及びグリシンのいずれかに置換する変異、および/または188位のロイシン残基をグルタミンに置換する変異が好ましい欧州特許出願公開第2218729号明細書。また、硫酸塩/チオ硫酸塩輸送系タンパク質群をコードするcysPTWAMクラスター遺伝子の発現を増強することによっても、L-システイン生産能を高めることができる特開2005137369号公報、EP1528108号明細書。また、硫化物は、cysK遺伝子およびcysM遺伝子それぞれによりコードされるO-アセチルセリンチオール-リアーゼ-AおよびBにより触媒される反応を介してO-アセチル-L-セリンに取り込まれ、L-システインが産生する。したがって、これらの酵素はL-システイン生合成経路の酵素に含まれ、これらの酵素をコードする遺伝子の発現を増強することによっても、L-システイン生産能を高めることができる。また、細菌のL-システイン生産能は、L-システイン分解系を抑制することにより向上させることができる。L-システイン分解系を抑制するとは、細胞内のL-システイン分解活性が、野生株又は親株等の非改変株に対して低下していることを意味する。L-システイン分解を担うタンパク質としては、metC遺伝子にコードされるシスタチオニン-β-リアーゼ特開平11155571号、ChandraetalBiochemistry2130643069、tnaA遺伝子にコードされるトリプトファナーゼ特開2003169668、AustinNewtonetalJBiolChem24012111218、cysM遺伝子にコードされるO-アセチルセリンスルフヒドリラーゼBcysM遺伝子産物、特開2005245311、及び、malY遺伝子にコードされるMalY特開2005245311が知られている。また、システインデスルフヒドラーゼ活性を有するタンパク質をコードする遺伝子として、パントエアアナナティスのd0191遺伝子が知られている特開2009232844。これらのタンパク質の活性を低下させることにより、L-システイン生産能が向上する。酵素活性の低下は、後述する手法により達成できる。また、本発明において、特に、O-アセチルセリンを培地中又は菌体内に蓄積する能力をO-アセチルセリン生産能という場合がある。なお、O-アセチルセリンは、中性~アルカリ性のpH領域において自然反応によって容易にN-アセチルセリンに変換される。しかし、例えば、培養液のpHを酸性に保つことによりN-アセチルセリンへの変換を防ぐことができるUS20020146783A1。こうした技術を組み込むことが可能であるため、発酵による生産においては、N-アセチルセリンを培地中に蓄積する能力も含めてO-アセチルセリン生産能と考えてよい。O-アセチルセリンはL-システインの前駆体であり、よってO-アセチルセリンの生合成経路はL-システインの生合成経路と共通する。そのため、細菌のO-アセチルセリン生産能は、L-システイン生合成経路を強化することにより付与又は増強することができる。すなわち、例えば、システインによるフィードバック阻害が低減又は解除された変異型セリンアセチルトランスフェラーゼまたはセリンによるフィードバック阻害が低減又は解除された変異型3-ホスホグリセレートデヒドロゲナーゼの利用や、その他L-システイン生合成経路を強化するような改変がO-アセチルセリンの生産に有効である。O-アセチルセリンは、硫黄源と反応し、L-システインに変換される。よって、O-アセチルセリンを高生産するためには、O-アセチルセリンからL-システインへの反応が過剰に進行しないよう、O-アセチルセリンからL-システインへの反応を触媒するO-アセチルセリンチオール-リアーゼ-A及びBcysK遺伝子およびcysM遺伝子にそれぞれコードされるや、当該反応の基質である硫黄源の供給に関与する経路をあえて強化しないほうが好ましい。また、O-アセチルセリンからL-システインへの反応を抑制するため、当該反応の基質である硫黄源の供給を制限してもよい。例えば、チオ硫酸を硫黄源として添加する発酵においてはチオ硫酸の添加を制限することによって、硫酸塩を硫黄源として添加する発酵においては硫酸塩の添加を制限することによって、O-アセチルセリンを効率的に生産することができる。O-アセチルセリン生産能は、O-アセチルセリン排出能を強化することによっても向上させることができる。上述したようなL-システイン排出因子にはO-アセチルセリンも排出することができるものが知られている。よって、例えば、YdeDタンパク質をコードするydeD遺伝子DassleretalMolMicrobiol3611011112、またはYfiKタンパク質をコードするyfiK遺伝子FrankeIetalJBacteriol2003Feb18511616の発現を強化することでO-アセチルセリン生産能を向上させることができる。L-システイン生産菌は、上記のようなL-システイン生産能が向上する性質を単独で有していてもよく、任意の組み合わせで有していてもよい。本発明で用いるL-システイン生産菌は、上記のようなL-システイン生産能が向上する性質の内、少なくともL-システインの生合成系が強化されているのが好ましく、変異型SATを保持しているのがより好ましい。L-システイン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、具体的には、フィードバック阻害耐性のセリンアセチルトランスフェラーゼSATをコードする複数種のcysEアレルで形質転換されたEcoliJM15、細胞に毒性の物質を排出するのに適したタンパク質をコードする遺伝子の発現が増強されたEcoliW3110、システインデスルフヒドラーゼ活性が低下したEcoli、cysB遺伝子によりコードされるシステインレギュロンの正の転写制御因子の活性が上昇したEcoliW3110、ydeD遺伝子、変異型cysE遺伝子、および変異型serA5遺伝子を含むプラスミドpACYCDES、EP1528108を保持するEcoliなどのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。なお、pACYCDESは、上記3遺伝子をpACYC184に挿入することによって得られたプラスミドであり、各遺伝子はompAプロモーターPompAにより制御される。以下、SAT等のタンパク質の活性を増大させる手法、およびシステインデスルフヒドラーゼ等のタンパク質の活性を低下させる手法について例示する。<タンパク質の活性を増大させる手法>本発明において、タンパク質の活性が増大するとは、目的のタンパク質の活性が野生株又は親株等の非改変株に対して増大していることを意味する。タンパク質の活性は、非改変株と比較して増大していれば特に制限されないが、非改変株と比較して好ましくは1.5倍以上、より好ましくは2倍以上、さらに好ましくは3倍以上に増大する。また、タンパク質の活性が増大するとは、もともと目的のタンパク質の活性を有する菌株において同タンパク質の活性を増大させることだけでなく、もともと目的のタンパク質の活性が存在しない菌株に同タンパク質の活性を付与することを含む。タンパク質の活性が増大するような改変は、例えば、同タンパク質をコードする遺伝子の発現を増強することによって達成される。遺伝子の発現の増強は、例えば、遺伝子のコピー数を増加させることにより達成できる。遺伝子のコピー数の増加は、宿主微生物への染色体上へ目的の遺伝子を導入することにより達成できる。染色体への目的遺伝子の導入は、トランスポゾンやMiniMuを用いて染色体上にランダムに導入する方法特開平2109985号公報、US5882888EP805867B1や、染色体DNA上に多コピー存在する配列を標的に利用して相同組換えを行うことにより達成できる。染色体DNA上に多コピー存在する配列としては、レペティティブDNA、トランスポゾンの両端に存在するインバーテッドリピートが利用できる。あるいは、Redドリブンインテグレーション法を使用することにより、目的遺伝子を染色体上に導入することも可能である。また、P1ファージ等のファージを用いたtransductionや、接合伝達ベクターにより、目的遺伝子を染色体上に導入することも可能である。また、WO03040373に記載されているように、染色体上の目的物質生産に不要な遺伝子を標的にして目的遺伝子を導入することも可能である。このような方法で標的配列に、目的遺伝子を1コピー又は多コピー導入することができる。染色体上に目的遺伝子が導入されたことの確認は、目的遺伝子の全部又は一部と相補的な配列を持つプローブを用いたサザンハイブリダイゼーション、又は目的遺伝子の配列に基づいて作成したプライマーを用いたPCR等によって確認出来る。また、遺伝子のコピー数の増加は、目的遺伝子を含むベクターを宿主細菌に導入することによっても達成できる。例えば、目的遺伝子を含むDNA断片を、宿主細菌で機能するベクターと連結して目的遺伝子の発現ベクターを構築し、当該発現ベクターで宿主細菌を形質転換することにより、目的遺伝子のコピー数を増加させることができる。ベクターとしては、宿主細菌の細胞内において自律複製可能なベクターを用いることができる。ベクターは、マルチコピーベクターであるのが好ましい。また、形質転換体を選択するために、ベクターは抗生物質耐性遺伝子などのマーカーを有することが好ましい。腸内細菌科に属する微生物の中で自律複製可能なプラスミドとして、pUC19、pUC18、pBR322、RSF1010、pHSG299、pHSG298、pHSG399、pHSG398、pSTV28、pSTV29、pTWV228、pTWV229pHSG、pSTV、pTWVはタカラバイオ社より入手可能、pMW119、pMW118、pMW219、pMW218pMWはニッポンジーン社より入手可能、pTrc99Aファルマシア社、pPROK系ベクタークロンテック社、pKK233‐2クロンテック社製、pET系ベクターノバジェン社、pQE系ベクターキアゲン社、広宿主域ベクターRSF1010等が挙げられる。また、遺伝子の発現の増強は、遺伝子の転写効率を向上させることにより達成できる。遺伝子の転写効率の向上は、例えば、染色体上の遺伝子のプロモーターをより強力なプロモーターに置換することにより達成できる。より強力なプロモーターとは、遺伝子の転写が、もともと存在している野生型のプロモーターよりも向上するプロモーターを意味する。より強力なプロモーターとしては、例えば、公知の高発現プロモーターであるT7プロモーター、trpプロモーター、lacプロモーター、tacプロモーター、およびPLプロモーター等を用いることができる。また、より強力なプロモーターとしては、各種レポーター遺伝子を用いることにより、在来のプロモーターの高活性型のものを取得してもよい。例えば、プロモーター領域内の-35、-10領域をコンセンサス配列に近づけることにより、プロモーターの活性を高めることができる国際公開第00/18935号。プロモーターの強度の評価法および強力なプロモーターの例は、Goldsteinらの論文ProkaryoticpromotersinbiotechnologyBiotechnolAnnuRev1105128等に記載されている。また、遺伝子の発現の増強は、遺伝子の翻訳効率を向上させることにより達成できる。遺伝子の翻訳効率の向上は、例えば、染色体上の遺伝子のシャインダルガノSD配列リボソーム結合部位RBSともいうをより強力なSD配列に置換することにより達成できる。より強力なSD配列とは、mRNAの翻訳が、もともと存在している野生型のSD配列よりも向上するSD配列を意味する。より強力なSD配列としては、例えば、ファージT7由来の遺伝子10のRBSが挙げられる。さらに、RBSと開始コドンとの間のスペーサー領域、特に開始コドンのすぐ上流の配列における数個のヌクレオチドの置換がmRNAの翻訳効率に非常に影響を及ぼすことが知られており、これらを改変することによっても遺伝子の翻訳効率を向上させることができる。本発明においては、プロモーター、SD配列、およびRBSと開始コドンとの間のスペーサー領域等の遺伝子の発現に影響する部位を総称して発現調節領域ともいう。発現調節領域は、プロモーター検索ベクターやGENETYX等の遺伝子解析ソフトを用いて決定することができる。これら発現調節領域の改変は、例えば、温度感受性ベクターを用いた方法や、Redドリブンインテグレーション法WO2005010175により行うことができる。また、遺伝子の発現の増強は、目的遺伝子の発現を上昇させるようなレギュレーターを増幅すること、または、目的遺伝子の発現を低下させるようなレギュレーターを欠失または弱化させることによっても達成できる。目的遺伝子の発現を低下させるようなレギュレーターとしては、Lrpファミリーに属するタンパク質などが知られているKutukovaetalFEBSLett57946294634。また、レギュレーターは、データベースEcoCychttpecocycorg等を利用して見出すことができる。レギュレーターの改変は、目的のタンパク質の活性の増大、目的の遺伝子の転写量の増大、または目的のタンパク質の量の増大を指標として行えばよい。上記のような遺伝子の発現を増強させる手法は、単独で用いてもよく、任意に組み合わせて用いてもよい。また、タンパク質の活性が増大するような改変は、例えば、目的のタンパク質の比活性を増強することによっても達成できる。比活性が増強されたタンパク質は、例えば、種々の細菌を探索し取得することができる。また、在来のタンパク質に変異を導入することで高活性型のものを取得してもよい。比活性の増強は、単独で用いてもよく、上記のような遺伝子の発現を増強させる手法と任意に組み合わせて用いてもよい。形質転換の方法は特に限定されず、従来知られた方法を用いることができる。例えば、エシェリヒアコリK12について報告されているような、受容菌細胞を塩化カルシウムで処理してDNAの透過性を増す方法MandelMandHigaAJMolBiol197053159162や、バチルスズブチリスについて報告されているような、増殖段階の細胞からコンピテントセルを調製してDNAを導入する方法DuncanCHWilsonGAandYoungFE1997Gene1153167を用いることができる。あるいは、バチルスズブチリス、放線菌類、及び酵母について知られているような、DNA受容菌の細胞を、組換えDNAを容易に取り込むプロトプラストまたはスフェロプラストの状態にして組換えDNAをDNA受容菌に導入する方法ChangSandChoenSN1979MolGenGenet168111115BibbMJWardJMandHopwoodOA1978Nature274398400HinnenAHicksJBandFinkGR1978ProcNatlAcadSciUSA7519291933も応用できる。また、電気パルス法特開平2207791号公報によっても、微生物の形質転換を行うこともできる。目的のタンパク質の活性が増大したことは、同タンパク質の活性を測定することにより確認できる。目的の遺伝子の発現が増大したことは、目的の遺伝子の転写量が増大したことを確認することや、目的のタンパク質の量が増大したことを確認することにより確認できる。目的の遺伝子の転写量が増大したことの確認は、同遺伝子から転写されるmRNAの量を野生株または親株等の非改変株と比較することによって行うことができる。mRNAの量を評価する方法としてはノーザンハイブリダイゼーション、RTPCR等が挙げられる2001。mRNAの量は、非改変株と比較して、例えば、1.5倍以上、2倍以上、または3倍以上に増大しているのが好ましい。目的のタンパク質の量が増大したことの確認は、抗体を用いてウェスタンブロットによって行うことができるMolecularcloning2001。目的のタンパク質の量は、非改変株と比較して、例えば、1.5倍以上、2倍以上、または3倍以上に増大しているのが好ましい。<タンパク質の活性を低下させる手法>本発明において、タンパク質の活性が低下するとは、目的のタンパク質の活性が野性株や親株等の非改変株と比較して減少していることを意味し、活性が完全に消失している場合を含む。タンパク質の活性は、非改変株と比較して低下していれば特に制限されないが、例えば非改変株と比較して75以下、50以下、25以下、又は10以下に低下していることが好ましく、活性が完全に消失しているのが特に好ましい。なお、タンパク質によっては、活性を完全に消失させないのが好ましい場合もある。タンパク質の活性が低下するような改変は、例えば、同タンパク質をコードする遺伝子の発現を低下させることにより達成される。遺伝子の発現の低下は、例えば、遺伝子のプロモーターやシャインダルガノSD配列等の発現調節配列を改変することにより達成できる。発現調節配列を改変する場合には、発現調節配列は、好ましくは1塩基以上、より好ましくは2塩基以上、特に好ましくは3塩基以上が改変される。また、発現調節配列の一部または全部を欠失させてもよい。また、遺伝子の発現の低下は、アンチセンスRNAを発現させることによっても達成できる。また、タンパク質の活性が低下するような改変は、例えば、染色体上の同タンパク質をコードする遺伝子のコード領域の一部又は全部を欠損させることにより達成できる。さらには、染色体上の遺伝子の前後の配列を含めて、遺伝子全体を欠失させてもよい。さらには、染色体上の遺伝子の前後の配列を含めて、遺伝子全体を欠失させてもよい。タンパク質の活性の低下が達成できる限り、欠失させる領域は、N末端領域、内部領域、C末端領域等のいずれの領域であってもよい。通常、欠失させる領域は長い方が確実に遺伝子を不活化することができる。また、欠失させる領域の前後の配列は、リーディングフレームが一致しないことが好ましい。また、タンパク質の活性が低下するような改変は、例えば、染色体上の同タンパク質をコードする遺伝子のコード領域にアミノ酸置換ミスセンス変異を導入すること、終始コドンを導入することナンセンス変異、あるいは1~2塩基を付加または欠失するフレームシフト変異を導入すること等によっても達成できるJournalofBiologicalChemistry272861186171997ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesUSA9555115515JournalofBiologicalChemistry261162083320839。また、タンパク質の活性が低下するような改変は、例えば、染色体上の同タンパク質をコードする遺伝子のコード領域に他の配列を挿入することによっても達成できる。挿入部位は遺伝子のいずれの領域であってもよいが、挿入する配列は長い方が確実に遺伝子を不活化することができる。また、挿入部位の前後の配列は、リーディングフレームが一致しないことが好ましい。他の配列としては、コードされるタンパク質の活性を低下又は消失させるものであれば特に制限されないが、例えば、抗生物質耐性遺伝子等のマーカー遺伝子やL-システイン生産に有用な遺伝子が挙げられる。染色体上の遺伝子を上記のように改変することは、例えば、遺伝子の部分配列を欠失し、正常に機能するタンパク質を産生しないように改変した欠失型遺伝子を作製し、該欠失型遺伝子を含む組換えDNAで細菌を形質転換して、欠失型遺伝子と染色体上の遺伝子とで相同組換えを起こさせることにより、染色体上の遺伝子を欠失型遺伝子に置換することによって達成できる。その際、組換えDNAには、宿主の栄養要求性等の形質にしたがって、マーカー遺伝子を含ませておくと操作がしやすい。欠失型遺伝子によってコードされるタンパク質は、生成したとしても、野生型タンパク質とは異なる立体構造を有し、機能が低下又は消失する。このような相同組換えを利用した遺伝子置換による遺伝子破壊は既に確立しており、Redドリブンインテグレーションと呼ばれる方法DatsenkoKAandWannerBLProcNatlAcadSciUSA9766406645、Redドリブンインテグレーション法とλファージ由来の切り出しシステムChoEHGumportRIGardnerJFJBacteriol18452005203とを組み合わせた方法WO2005010175号参照等の直鎖状DNAを用いる方法や、温度感受性複製起点を含むプラスミドを用いる方法、接合伝達可能なプラスミドを用いる方法、宿主内で複製起点を持たないスイサイドベクターを用いる方法などがある米国特許第6303383号、特開平05007491号。また、タンパク質の活性が低下するような改変は、例えば、突然変異処理により行ってもよい。突然変異処理としては、X線もしくは紫外線の照射、またはN-メチル-N-ニトロ-N-ニトロソグアニジンMNNG、エチルメタンスルフォネートEMS、メチルメタンスルフォネートMMS等の変異剤による通常の変異処理が挙げられる。目的のタンパク質の活性が低下したことは、同タンパク質の活性を測定することにより確認できる。システインデスルフヒドラーゼ活性は、特開2002233384号公報に記載された手法により測定することができる。目的の遺伝子の発現が低下したことは、目的の遺伝子の転写量が低下したことを確認することや、目的のタンパク質の量が低下したことを確認することにより確認できる。目的の遺伝子の転写量が低下したことの確認は、同遺伝子から転写されるmRNAの量を非改変株と比較することによって行うことが出来る。mRNAの量を評価する方法としては、ノーザンハイブリダイゼーション、RT-PCR等が挙げられるMolecularcloningColdspringHarborLaboratoryPressColdspringHarbor2001。mRNAの量は、非改変株と比較して、例えば、50以下、20以下、10以下、5以下、または0に低下しているのが好ましい。目的のタンパク質の量が低下したことの確認は、抗体を用いてウェスタンブロットによって行うことが出来るMolecularcloningColdspringHarborLaboratoryPressColdspringHarbor2001。目的のタンパク質の量は、非改変株と比較して、例えば、50以下、20以下、10以下、5以下、または0に低下しているのが好ましい。ygaZH遺伝子およびychE遺伝子本発明の細菌は、上述したようなL-システイン生産能を有する腸内細菌科に属する細菌を、ygaZH遺伝子およびychE遺伝子から選択される1またはそれ以上の遺伝子の発現が増大するように改変することによって得ることができる。また、本発明の細菌は、ygaZH遺伝子およびychE遺伝子から選択される1またはそれ以上の遺伝子の発現が増大するように腸内細菌科に属する細菌を改変した後に、L-システイン生産能を付与することによっても得ることができる。以下に、ygaZH遺伝子およびychE遺伝子について説明する。エシェリヒアコリK12MG1655株のygaZ遺伝子は、NCBIデータベースにGenBankaccessionNC000913として登録されているゲノム配列中、2807639~2808376位の配列に相当する。エシェリヒアコリK12MG1655株のygaZ遺伝子は、ECK2676、JW2657と同義である。また、エシェリヒアコリK12MG1655株のYgaZタンパク質は、GenBankaccessionNP417167として登録されている。エシェリヒアコリK12MG1655株のygaH遺伝子は、NCBIデータベースにGenBankaccessionNC000913として登録されているゲノム配列中、2808366~2808701位の配列に相当する。エシェリヒアコリK12MG1655株のygaH遺伝子は、ECK2677、JW2658と同義である。また、エシェリヒアコリK12MG1655株のYgaHタンパク質は、GenBankaccessionNP417168として登録されている。エシェリヒアコリK12MG1655株のychE遺伝子は、NCBIデータベースにGenBankaccessionNC000913として登録されているゲノム配列中、1297821~1298468位の配列に相当する。エシェリヒアコリK12MG1655株のychE遺伝子は、ECK1236、JW1229と同義である。また、エシェリヒアコリK12MG1655株のYchEタンパク質は、GenBankaccessionNP415758として登録されている。エシェリヒアコリのygaZ遺伝子の塩基配列および同遺伝子がコードするタンパク質のアミノ酸配列をそれぞれ配列番号7、8に示す。エシェリヒアコリのygaH遺伝子の塩基配列および同遺伝子がコードするタンパク質のアミノ酸配列をそれぞれ配列番号9、10に示す。また、ygaZ遺伝子およびygaH遺伝子はオペロンを形成していることが知られている。エシェリヒアコリのygaZHオペロンの塩基配列を配列番号11に示す。なお、エシェリヒアコリのYgaZタンパク質とYgaHタンパク質は複合体を形成して機能することが知られている。よって、ygaZH遺伝子の発現を増大させる場合、ygaZ遺伝子およびygaH遺伝子の両方の発現を増大させる。ygaZ遺伝子およびygaH遺伝子は、ygaZHオペロンとしてまとめて発現を増大させてもよく、結果として両方の発現が増大する限りそれぞれ別個に発現を増大させてもよい。エシェリヒアコリのychE遺伝子の塩基配列および同遺伝子がコードするタンパク質のアミノ酸配列をそれぞれ配列番号12、13に示す。パントエアアナナティスのychE遺伝子の塩基配列および同遺伝子がコードするタンパク質のアミノ酸配列をそれぞれ配列番号14、15に示す。ygaZH遺伝子およびychE遺伝子がコードするタンパク質は、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質であり、L-システインおよびO-アセチルセリンを細胞外に排出する活性を有すると推定される。腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性とは、腸内細菌で発現を上昇させたときに非改変株、例えば野生株または親株よりも多い量のL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を生産し、培地に蓄積する能力を付与する活性を意味し、非改変株と比較して好ましくは01gL以上、より好ましくは02gL以上、特に好ましくは03gL以上多い量のL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を培地に蓄積する能力を付与する活性を意味する。腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するかどうかは、腸内細菌に属する菌株を基にその遺伝子の発現が上昇するよう改変された株を作製し、該改変株を培地で培養した際に培地中に蓄積するL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物の量を定量し、改変前の株非改変株を培地で培養した際に培地中に蓄積するL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物の量と比較することで確認することができる。ここでいう非改変株としては、L-システイン生産能を有する腸内細菌科に属する細菌を用いることができ、具体的には、EcoliMG1655株にフィードバック阻害が解除された変異型SATをコードする遺伝子を増強した株が挙げられる。また、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するかどうかは、O-アセチルセリン耐性またはL-システイン耐性を調べることによっても容易に確認することができる。すなわち、その遺伝子の発現が上昇した細菌において、所定の濃度のO-アセチルセリンまたはL-システインを含有する培地での生育が非改変株よりも良好になっている場合に、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有すると判断できる。具体的には、01~10mM程度のO-アセチルセリンまたはL-システインを含む培地に、その遺伝子の発現が上昇した細菌を接種し、10時間後~120時間後の適当な時間にコロニーの直径を測定し、同様に培養した非改変株のコロニーの直径よりも大きいことを確認すればよい。細菌が属する属、種、又は菌株によって、ygaZH遺伝子およびychE遺伝子の塩基配列に差異が存在することがあるため、発現が増大するygaZH遺伝子およびychE遺伝子は、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質をコードする限り、それぞれ上記塩基配列のバリアントであってもよい。なお、ygaZH遺伝子およびychE遺伝子のバリアントには、同遺伝子のホモログが含まれる。ygaZH遺伝子およびychE遺伝子のホモログは、上記のエシェリヒアコリの野生型ygaZH遺伝子およびychE遺伝子やパントエアアナナティスのychE遺伝子を問い合わせ配列として用いたBLAST検索やFASTA検索によって公開データベースから容易に取得することができ、また、腸内細菌科に属する細菌やコリネ型細菌等の微生物の染色体を鋳型にして、これら公知の遺伝子配列に基づいて作製したオリゴヌクレオチドをプライマーとして用いたPCRにより取得することができる。ygaZH遺伝子およびychE遺伝子は、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質をコードする限りにおいて、上記アミノ酸配列において、1若しくは数個の位置での1又は数個のアミノ酸が置換、欠失、挿入又は付加されたアミノ酸配列を有するタンパク質をコードする遺伝子であっても良い。この場合、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性は、1又は数個の置換、欠失、挿入又は付加される前のタンパク質に対して、通常70以上、好ましくは80以上、より好ましくは90以上が維持される。なお上記1又は数個とは、アミノ酸残基のタンパク質の立体構造における位置やアミノ酸残基の種類によっても異なるが、具体的には好ましくは1~20個、より好ましくは1~10個、さらに好ましくは1~5個を意味する。上記の1若しくは数個のアミノ酸の置換、欠失、挿入、または付加は、タンパク質の機能が正常に維持される保存的変異である。保存的変異の代表的なものは、保存的置換である。保存的置換とは、置換部位が芳香族アミノ酸である場合には、Phe、Trp、Tyr間で、置換部位が疎水性アミノ酸である場合には、Leu、Ile、Val間で、極性アミノ酸である場合には、Gln、Asn間で、塩基性アミノ酸である場合には、Lys、Arg、His間で、酸性アミノ酸である場合には、Asp、Glu間で、ヒドロキシル基を持つアミノ酸である場合には、Ser、Thr間でお互いに置換する変異である。保存的置換とみなされる置換としては、具体的には、AlaからSer又はThrへの置換、ArgからGln、His又はLysへの置換、AsnからGlu、Gln、Lys、His又はAspへの置換、AspからAsn、Glu又はGlnへの置換、CysからSer又はAlaへの置換、GlnからAsn、Glu、Lys、His、Asp又はArgへの置換、GluからGly、Asn、Gln、Lys又はAspへの置換、GlyからProへの置換、HisからAsn、Lys、Gln、Arg又はTyrへの置換、IleからLeu、Met、Val又はPheへの置換、LeuからIle、Met、Val又はPheへの置換、LysからAsn、Glu、Gln、His又はArgへの置換、MetからIle、Leu、Val又はPheへの置換、PheからTrp、Tyr、Met、Ile又はLeuへの置換、SerからThr又はAlaへの置換、ThrからSer又はAlaへの置換、TrpからPhe又はTyrへの置換、TyrからHis、Phe又はTrpへの置換、及び、ValからMet、Ile又はLeuへの置換が挙げられる。また、上記のようなアミノ酸の置換、欠失、挿入、付加、または逆位等には、遺伝子が由来する細菌の個体差、種の違いに基づく場合などの天然に生じる変異mutant又はvariantによって生じるものも含まれる。さらに、上記のような保存的変異を有する遺伝子は、コードされるアミノ酸配列全体に対して、80以上、好ましくは90以上、より好ましくは95以上、さらに好ましくは97以上、特に好ましくは99以上の相同性を有し、かつ、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質をコードする遺伝子であってもよい。尚、本明細書において、相同性homologyは、同一性identityを指すことがある。また、ygaZH遺伝子およびychE遺伝子は、公知の遺伝子配列から調製され得るプローブ、例えば上記塩基配列の全体または一部に対する相補配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、腸内細菌で発現を上昇させたときにL-システイン生産能を非改変株と比べて向上させる活性を有するタンパク質をコードするDNAであってもよい。ストリンジェントな条件とは、いわゆる特異的なハイブリッドが形成され、非特異的なハイブリッドが形成されない条件をいう。一例を示せば、相同性が高いDNA同士、例えば80以上、好ましくは90以上、より好ましくは95以上、より好ましくは97以上、特に好ましくは99以上の相同性を有するDNA同士がハイブリダイズし、それより相同性が低いDNA同士がハイブリダイズしない条件、あるいは通常のサザンハイブリダイゼーションの洗いの条件である60°C、1×SSC、0.1SDS、好ましくは60°C、0.1×SSC、0.1SDS、より好ましくは、68°C、0.1×SSC、0.1SDSに相当する塩濃度で、1回、好ましくは2~3回洗浄する条件を挙げることができる。上述の通り、上記ハイブリダイゼーションに用いるプローブは、遺伝子の相補配列の一部であってもよい。そのようなプローブは、公知の遺伝子配列に基づいて作製したオリゴヌクレオチドをプライマーとし、これらの塩基配列を含むDNA断片を鋳型とするPCRによって作製することができる。例えば、プローブとして、300bp程度の長さのDNA断片を用いる場合には、ハイブリダイゼーションの洗いの条件としては、50°C、2×SSC、01SDSが挙げられる。なお、上記の遺伝子やタンパク質のバリアントに関する記載は、セリンアセチルトランスフェラーゼや3-ホスホグリセレートデヒドロゲナーゼ等の酵素、およびYdeDタンパク質等のトランスポーターを含む任意のタンパク質、並びにそれらをコードする遺伝子にも準用される。本発明において、遺伝子の発現が増大するとは、目的の遺伝子の発現量が野生株又は親株等の非改変株に対して増大していることを意味する。遺伝子の発現量は、非改変株と比較して増大していれば特に制限されないが、非改変株と比較して好ましくは1.5倍以上、より好ましくは2倍以上、さらに好ましくは3倍以上に増大する。また、遺伝子の発現が増大するとは、もともと目的の遺伝子が発現している菌株において発現量を増大させることだけでなく、もともと同遺伝子が発現していない菌株において、同遺伝子を発現させることを含む。すなわち、例えば、目的の遺伝子を保持しない菌株に同遺伝子を導入し、同遺伝子を発現させることを含む。遺伝子の発現が増大するような改変は、上述の<タンパク質の活性を増大させる手法>において例示した遺伝子の発現を増大させる手法により達成できる。遺伝子の発現が増大したことは、例えば、上述したように、ノーザンハイブリダイゼーションやRT-PCRにより遺伝子の転写量が増大したことを確認することで、あるいは、ウェスタンブロットによりタンパク質の量が増大したことを確認することで、確認することができる。また、L-システイン生産能、O-アセチルセリン耐性、またはL-システイン耐性が向上したことを確認することによっても確認することができる。<2>本発明のL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物の製造法上記のようにして得られる本発明の細菌を培地中で培養することで、該培地にはL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物が蓄積する。よって、該培地からL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を採取することにより、L-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を製造することができる。L-システインの関連物質としては、上述したように、L-シスチン、L-システインの誘導体、およびL-システインの前駆体が挙げられる。例えば、後述するように、上記のようにして得られる本発明の細菌を培地中で培養することで、該培地にはO-アセチルセリンが蓄積する場合がある。その場合、該培地からO-アセチルセリンを採取することによりO-アセチルセリンを製造することができる。O-アセチルセリンはアミノ酸の一種であり、L-システイン生合成の前駆物質である。O-アセチルセリンはキラル中心を有し、よって、特に有用物質の合成のための構成要素等として使用でき、有用である。O-アセチルセリンは単独で製造されてもよく、L-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物との任意の組み合わせで製造されてもよい。なお、O-アセチルセリンは、中性~アルカリ性のpH領域において自然反応によって容易にN-アセチルセリンに変換される。よって、O-アセチルセリンを製造する場合には、このようなN-アセチルセリンへの変換を防止するのが好ましい。このようなN-アセチルセリンへの変換は、例えば、培養液のpHを酸性に保つことにより防ぐことができるUS20020146783A1。使用する培地としては、炭素源、窒素源、硫黄源、無機イオン、及び必要に応じその他の有機成分を含有する通常の培地が挙げられる。炭素源としては、グルコース、フラクトース、シュクロース、グリセロール、糖蜜やでんぷんの加水分解物などの糖類、フマール酸、クエン酸、コハク酸等の有機酸類を用いることができる。窒素源としては、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム等の無機アンモニウム塩、大豆加水分解物などの有機窒素、アンモニアガス、アンモニア水等を用いることができる。硫黄源としては、硫酸塩、亜硫酸塩、硫化物、次亜硫酸塩、チオ硫酸塩等の無機硫黄化合物が挙げられる。その他の有機成分としては、有機微量栄養素が挙げられる。有機微量栄養素としては、ビタミンB1などの要求物質または酵母エキス等を適量含有させることが望ましい。また、これらの他に、必要に応じてリン酸カリウム、硫酸マグネシウム、鉄イオン、マンガンイオン等が少量添加される。培養は好気的条件下で30~90時間実施するのがよく、培養温度は25°C~37°Cに、培養中pHは5~8に制御することが好ましい。尚、pH調整には無機あるいは有機の酸性あるいはアルカリ性物質、更にアンモニアガス等を使用することができる。培養終了後の培地からの産物、すなわちL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物の採取は、イオン交換樹脂法NagaiHetalSeparationScienceandTechnology3936913710、膜分離法特開平9164323号、特開平9173792号、晶析法、その他の公知の方法を組み合わせることにより実施できる。本発明において採取される産物は、目的とする物質以外に微生物菌体、培地成分、水分、及び微生物の代謝副産物を含んでいてもよい。採取された産物の純度は、通常50以上、好ましくは85以上、特に好ましくは95以上である。上記のようにして得られるL-システインは、L-システイン誘導体の製造に用いることができる。L-システイン誘導体としては、メチルシステイン、エチルシステイン、カルボシステイン、スルホシステイン、アセチルシステイン等が含まれる。また、L-システインのチアゾリジン誘導体が培地に蓄積した場合は、培地からチアゾリジン誘導体を採取し、チアゾリジン誘導体とL-システインとの間の反応平衡をL-システイン側に移動させることによって、L-システインを製造することができる。また、培地にSスルホシステインが蓄積した場合、例えばジチオスライトール等の還元剤を用いて還元することによってL-システインに変換することができる。以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明する。実施例ygaZH遺伝子またはychE遺伝子の発現強化によるL-システイン生産増加効果Escherichiacoli、およびPantoeaananatisにおいてygaZH遺伝子またはychE遺伝子の発現を増強することがL-システイン生産に及ぼす効果を調べるために、L-システインによるフィードバック阻害が解除された変異型SATをコードする遺伝子cysE5米国特許出願公開第20050112731号が導入され、かつ、ygaZH遺伝子またはychE遺伝子の発現が強化された株を構築し、L-システイン生産培養を行った。手順を以下に示す。1発現プラスミドの構築ygaZH遺伝子またはychE遺伝子の発現を増強するための発現ベクターとしては、pMIV5JS特開200899668を基に構築したpMIVPnlp23ter以下、pMIVPnlp23ともいう、およびpMIVPnlp8YeaS7以下、pMIVPnlp8ともいうを用いた。pMIVPnlp8およびpMIVPnlp23の構築方法は特開2010187552に開示されている。また対照としては、空ベクターであるpMIV5JS特開200899668を使用した。pMIVPnlp23は、強力なプロモーターであるPnlp23とrrnBターミネーターを有し、Pnlp23とrrnBターミネーターの間にはSalIとXbaI部位が存在する。よって、目的の遺伝子の5’側に制限酵素サイトSalIを、3’側に制限酵素サイトXbaIをデザインしておくことで、目的の遺伝子をプロモーターとターミネーターの間にクローニングし、目的の遺伝子の発現プラスミドを構築することができる。pMIVPnlp8は、強力なプロモーターであるPnlp8とrrnBターミネーターを有し、さらに、EcoliK12株由来のyeaS遺伝子がSalIとXbaI部位を介してPnlp8とrrnBターミネーターの間にクローニングされている。よって、目的の遺伝子の5’側に制限酵素サイトSalIを、3’側に制限酵素サイトXbaIをデザインしておくことで、当該ベクター上のyeaS遺伝子断片を目的の遺伝子断片に置換し、目的の遺伝子の発現プラスミドを構築することができる。Pnlp23およびPnlp8は、EcoliK12株由来の野生型nlpD遺伝子のプロモーターであるPnlp0を基に、発現強度を調節するために構築された変異型プロモーターである。Pnlp8とPnlp23では発現強度が異なりPnlp8>Pnlp23、発現させる遺伝子に応じて適した強度のプロモーターを選択することができる。ygaZHEcoli由来、ychEEcoli由来、およびychEPananatis由来を、それぞれ上記発現ベクターにクローニングした。なお、ygaZHは2つの遺伝子ygaZおよびygaHがオペロンを形成しているため、両遺伝子を含むオペロンを発現ベクターにクローニングした。各遺伝子のクローニングは、EcoliMG1655株またはPananatisSC17株のゲノムDNAをテンプレートとしたPCRによって行った。使用したプライマーを以下に示す。ygaZHEcoli由来:ygaZHSalIF/ygaZHXbaIR配列番号1、2、ychEEcoli由来:ychESalIF/ychEXbaIR配列番号3、4、ychEPananatis由来:ychESalIF/ychEXbaIR配列番号5、6。遺伝子上流側の各プライマーには制限酵素サイトSalIが、遺伝子下流側の各プライマーには制限酵素サイトXbaIがデザインされており、SalIとXbaIによりPCR産物を発現プラスミドpMIVPnlp8、pMIVPnlp23にクローニングすることができる。なお、ychEEcoli由来とychEPananatis由来の開始コドンGTGをそれぞれATGに変更するよう、プライマーをデザインした。PCRにはPrimeSTARHSDNAPolymeraseTakara社製を用い、PCRサイクル94°C5分の後、98°C5秒、55°C5秒、72°C90秒を30サイクル、最後に4°C保温で行った。PCR産物をSalIとXbaIにより処理し、同じくSalIとXbaIにより処理したpMIVPnlp8とpMIVPnlp23にそれぞれライゲーションし、各目的遺伝子の発現プラスミドを作製した。2L-システイン生産菌の構築L-システインによるフィードバック阻害が低減された変異型セリンアセチルトランスフェラーゼをコードする変異型cysEcysE5;US20050112731A1を導入することで著量のL-システイン及びO-アセチルセリンOASを生産するL-システイン生産菌を構築することができる。そこで、cysE5が搭載されたプラスミドpACYCE1特開2010207194をEscherichiacoliMG1655株ATCCNo47076及びPantoeaananatisSC17株FERMBP11091にそれぞれ導入することでEcoliシステイン生産菌及びPananatisシステイン生産菌を構築した。3L-システイン生産培養上記で構築したEcoliシステイン生産菌及びPananatisシステイン生産菌に各目的遺伝子の発現プラスミドを導入し、L-システインの発酵生産培養を行いL-システインの生産量を比較した。培養には下記組成の生産培地を用いた。L-システイン生産培地各成分の濃度は最終濃度成分1:2SO415gLKH2PO415gLMgSO47H2O1gLチアミン塩酸塩01mgL成分2:FeSO47H2O17mgLNa2MoO42H2O015mgLCoCl26H2O07mgLMnCl4H2O16mgLZnSO47H2O03mgLCuSO45H2O025mgL成分3:トリプトン06gLイーストエクストラクト03gLNaCl06gL成分4:炭酸カルシウム20gL成分5:L-ヒスチジン塩酸塩一水和物135mgL成分6:チオ硫酸ナトリウム6gL成分7:ピリドキシン塩酸塩2mgL成分8:グルコース40gL各成分について、各々10倍成分1、1000倍成分2、100/6倍成分3、100倍成分5、3506倍成分6、1000倍成分7、10倍成分8のストック溶液を作製しておき、使用時に混合し滅菌水で規定の量までメスアップして最終濃度となるように調製した。滅菌は、110°C、30分のオートクレーブ成分1、2、3、5、8、180°C、5時間以上の乾熱滅菌成分4、及びフィルター滅菌成分6、7により行った。プラスミドを保持させるため125mgLテトラサイクリン、25mgLクロラムフェニコールを添加した。なお、Ecoliの培養には上記培地を用い、Pananatisの培養には上記培地に以下の変更を加えて用いた。すなわち、Pananatisの培養用には、窒素源として成分1の2SO4の代わりにアンモニウムイオンが同モル濃度となるようNH4Clを使用し、硫黄源として成分6のチオ硫酸ナトリウムを8gLに変更した。L-システインの生産培養は以下の手順で行った。各生産菌をLB寒天培地に塗り広げ、34°Cで一晩前培養を行った後、10マイクロリッターサイズの植菌用ループNUNC社ブルーループでプレート上約7cm分の菌体を1回掻き取り、大試験管内径23mm、長さ20cmに2ml張りこんだ生産培地中に植菌し、培養開始時点での菌体量がほぼ同じになるよう調製した。32°Cにて振とう培養を行い、23時間後Ecoliの場合もしくは30時間後Pananatisの場合に培養を終了した。培地中に生産されたL-システインL-シスチンやL-システインの誘導体を含むの定量は、GaitondeMKBiochemJ1967Aug10462733に記載の方法で行った。また、L-システイン排出因子はO-アセチルセリンも排出することができることが知られているため、培地中に生産されたO-アセチルセリンの定量も行った。O-アセチルセリンの定量は以下の方法で行った。O-アセチルセリンはアルカリ条件下でN-アセチルセリンNASに変換されるため、まず、培養終了後の培養液を200mMTrisHClを用いて20倍に希釈し室温に置くことで、生産されたO-アセチルセリンを全てN-アセチルセリンNASに変換した。こうして調製されたサンプルをHPLCカラム:InertsilODS3GLscience製、流速:10mlmin、カラム温度:40oC、ディテクター:UV210mm、サンプル量:10μl、バッファー:01MK2PO4H3PO45mMsodium1octanesulfonateによって分析し、標品と比較することでO-アセチルセリンN-アセチルセリンを含む濃度を算出した。各株とも4連で実験を行った。培地中に生産されたL-システインおよびO-アセチルセリンの濃度の平均値と標準偏差を表1~表4に示す。表中、cysteinはL-システインL-シスチンやL-システインの誘導体を含むの濃度を、OASはO-アセチルセリンN-アセチルセリンを含むの濃度を示す。また、表中、genesは発現を強化した遺伝子を示し、vectorは対照として用いた空ベクターpMIV5JSを意味する。また、Ecoliシステイン生産菌及びPananatisシステイン生産菌について、発現を強化した遺伝子と用いたプロモーターの組み合わせを表5に示す。Ecoli生産菌においてはygaZHEcoli由来、ychEEcoli由来、またはychEPananatis由来の発現強化によりL-システイン、およびO-アセチルセリンの蓄積量が増加することが明らかとなった。Pananatis生産菌においても同様に、ygaZHEcoli由来、ychEEcoli由来、またはychEPananatis由来の発現強化によりL-システイン、およびO-アセチルセリンの蓄積量が増加することが明らかとなった。以上よりygaZH、またはychEの発現強化はL-システインL-シスチンやL-システインの誘導体を含む、およびO-アセチルセリンN-アセチルセリンを含むの生産に有効であることが明らかとなった。配列表の説明配列番号1~6:プライマー配列番号7:EcoliygaZ遺伝子の塩基配列配列番号8:EcoliYgaZのアミノ酸配列配列番号9:EcoliygaH遺伝子の塩基配列配列番号10:EcoliYgaHのアミノ酸配列配列番号11:EcoliygaZHオペロンの塩基配列配列番号12:EcoliychE遺伝子の塩基配列配列番号13:EcoliYchEのアミノ酸配列配列番号14:PananatisychE遺伝子の塩基配列配列番号15:PananatisYchEのアミノ酸配列配列番号16:Ecoli野生型cysEの塩基配列配列番号17:Ecoli野生型CysEのアミノ酸配列