"ヒトCOMPと1つ又は複数の補体因子又はその断片との間の複合体の存在を検出することを含む、補体活性化をもたらす組織分解プロセスを判定する方法。以下のステップ、a試料を準備するステップ、baの試料を分析するステップ、cヒトCOMPと補体因子との間の複合体の存在を検出するステップを含む、請求項1に記載の方法。試料が臨床試料、好ましくは血清又は滑液由来の臨床試料である、請求項1又は2のいずれか一項に記載の方法。補体因子がヒトC3b又はその断片である、請求項1から3までのいずれか一項に記載の方法。補体因子がヒトC3b又はその断片である請求項1から4までのいずれか一項において定義される試料を、炎症成分を有し結合組織を冒す疾患における補体活性化を測定するため又はモニターするために使用する、アッセイ。試料を、疑われているRA及びOAにおける補体活性化を測定するために使用する、請求項5に記載のアッセイ。試料を、乾癬性関節炎、慢性若年性関節炎及び骨盤脊椎炎における補体活性化を測定するために使用する、請求項5に記載のアッセイ。試料を、RA及びOA、全身性硬化症、腱炎並びにアテローム性動脈硬化症を含む心血管疾患などの、炎症性成分を有し結合組織を冒す疾患における補体活性化を測定するために使用する、請求項5に記載のアッセイ。試料を、RA及びOA、全身性硬化症、腱炎並びにアテローム性動脈硬化症を含む心血管疾患などの炎症性成分を有し結合組織を冒す疾患に罹患した患者における疾患進行をモニターするために使用する、請求項5に記載のアッセイ。試料中のヒトCOMPと補体因子との間の複合体の存在を検出することを含む、補体活性化をもたらす組織分解プロセスを判定するためのキット。aCOMP-C3b複合体を形成する成分のうちの1つに結合する、1つ又は複数の抗体、又は別のリガンド、b前記複合体のその他の成分に結合する1つ又は複数の抗体の形態のディテクター、及びc1つ又は複数の抗体が上記の断片の1つ又は複数のエピトープと反応したかどうかを検出するための手段を含む、請求項10に記載のキット。臨床試料中の補体因子と複合体になっているヒトCOMPの存在を分析するための、請求項10又は11のいずれか一項に記載のキット。補体因子がヒトC3b又はその断片である、請求項10又は11のいずれか一項に記載のキット。a溶液である又は固相担体に結合している、ヒトCOMPに対する抗体、好ましくはモノクローナル抗体又は別のリガンド、bヒトCOMP-C3b断片複合体を含有することが疑われる試料であって、ステップaの第1の抗体に対し、得られた混合物を水溶液中でインキュベートする試料、cヒトC3b又はその断片に対する第2の抗体、好ましくはモノクローナル抗体又は別のリガンドであって、検出可能で定量できるシグナルを発する標識を含む第2の抗体、d標識由来のシグナルを定量する手段であって、前記シグナルが前記試料においてヒトCOMP-C3b複合体の濃度の測定値である手段を含む、請求項11に記載のキット。炎症は大半の疾患の特徴である。以前の発見では、組織から放出される分子は、炎症の重要な一部としての補体活性化に影響を与えうることが示されている。そのような分子は体液中で同定することが可能である。本発明は、組織破壊プロセスにより誘導される進行中の補体活性化を検出する新しい方法を示している。COMPだけではなく、血清中においてCOMP-C3b複合体を検出することにより、RAについて数倍より感度の高い特異的検出を得ることが可能である。関節疾患に罹患した患者の滑液中のそのような複合体を同定することにより、軟骨分解から生じる炎症の局所的活性化を同定することが可能である。たとえば、RA、OAなどの関節疾患並びに腱炎、全身性硬化症及び主要な血管を冒す心血管疾患アテローム性動脈硬化症を含むの潜在的なある種の段階に罹患した患者由来の血液及び滑液試料を、COMP-C3b複合体の内容物について分析することが可能である。本発明の主目的は、進行中の治療計画の成功を測定しモニターするために使用することができるアッセイを提供することであり、すなわち、COMP-C3bアッセイにおけるシグナルは患者の疾患活動性に従う。本発明の別の目的は、RAに罹患した患者を同定するための改良されたアッセイを提供することである。本発明の実施形態は、本発明の方法においてのように、臨床試料を、炎症性成分を有し結合組織を冒す疾患における補体活性化を測定するために使用するアッセイである。本発明の実施形態は、本発明の方法においてのように、試料を、疑われているRA及びOAにおける補体活性化を測定するために使用するアッセイである。本発明の実施形態は、本発明の方法においてのように、試料を、乾癬性関節炎、慢性若年性関節炎及び骨盤脊椎炎における補体活性化を測定するために使用するアッセイである。本発明の実施形態は、本発明の方法においてのように、試料を、RA及びOA、全身性硬化症、腱炎並びにアテローム性動脈硬化症を含む心血管疾患における補体活性化を測定するために使用するアッセイである。本発明の実施形態は、本発明の方法においてのように、RA及びOA、全身性硬化症、腱炎並びにアテローム性動脈硬化症を含む心血管疾患などの炎症性成分を有し結合組織を冒す疾患に罹患した患者において疾患進行をモニターするためのアッセイである。炎症は大半の疾患の構成要素である。以前の発見では、組織から放出される分子は、炎症の重要な一部としての補体活性化に影響を与えうることが示されている。COMPは、主にプロパージンとの相互作用を通じて補体系の第2の経路を活性化することができ、これにより補体攻撃をCOMPが露出している表面に向けられる可能性があることを我々は発見していた。COMPのペンタマー構造pCOMPはプロパージンの結合を促進するのに必要ではなく、血清中において切断されたCOMPの放出された断片は補体活性化特性を有するというインビボの知見を支持していた。興味深いことに、C3及びC3bはCOMPと直接相互作用することも見出された。これにより、COMPの効果は、C3bとプロパージン両方との相互作用を通じて代替C3コンバターゼを安定化することであるのか、又はもっと単純に、プロパージンを動員し、したがってコンバターゼ会合体にプラットホームを提供することにより補体活性化を標的にすることなのかどうかという疑問が生じる。本発明は、患者において炎症全般を検出するために使用することを目的とする。本発明は、たとえば、以下の成分、iWO0138876/AU9904236本明細書に組み込まれているに記載される手順に従ってCOMPに対する抗体により本出願において例示されている、COMP-C3b複合体を形成する成分のうちの1つを捕獲する1つ又は複数の抗体又は他のリガンドを含む第1の成分前記抗体は、COMPのリガンド、ファージディスプレイ法により同定される断片を含むFab若しくはFab’2などの抗体断片又はCOMPエピトープに結合する無傷の抗体であることが可能である、ii補体因子C3b若しくは天然の分解産物に対する抗体又はその断片により本出願において例示されている、前記複合体のその他の成分に結合する1つ又は複数の抗体の形態のディテクターを含む第2の成分、iii1つ又は複数の抗体が上記の断片の1つ又は複数のエピトープと反応したかどうかを検出するための手段を含む第3の成分これは、標識されたディテクター抗体又は前記ディテクター抗体に結合する標識されたリガンドを使用することにより実現することが可能である。典型的なアプローチでは、最終的な検出は、一般に使用されているアプローチ、たとえば、結合した酵素又は他の任意のプローブの活性を測定することを含むアプローチによるものであるを含む、本発明に従った方法により組織分解プロセスを判定するためのキットに関する。さらに、本発明は、以下の成分、i抗体、たとえば、溶液又はプレートのウェルなどの固相担体に結合している、ヒトCOMPに対するモノクローナル抗体又は他のリガンドを提供する第1の成分、iiヒトCOMP-C3b断片複合体を含有すると疑われている臨床試料をステップ1の第1の抗体に添加し、得られた混合物を水溶液中でインキュベートすること、iii第2の抗体、たとえば、ヒトC3bに対するモノクローナル抗体若しくは他のリガンド又はその断片をステップiiの混合物に添加し前記第2の抗体は検出可能であり定量できるシグナルを発する標識を含む、標識由来のシグナルを定量する前記シグナルは前記試料中のヒトCOMP-C3b複合体の濃度の測定値となることを含む、本発明に従った方法により組織分解プロセスを判定するためのキットにも関することが可能である。本発明の抗体は、試料中に存在するCOMP-C3b複合体に結合した抗体のレベルを測定するために、たとえば、酵素、放射性の、蛍光性の又は発光性の標識で随意に標識されている。サンドイッチアッセイでは、固相に結合している成分は、第1の成分でも第2の成分でもよい。上に与えられた例では、第1の成分は固相に結合している。サンドイッチアッセイの別の例では、本発明の抗体を含む第2の成分は、たとえば、プレートのウェルなどの固相に結合している。次に、試料中におけるCOMP-C3b断片の存在は、先ず試料をプレートのウェルに添加することにより検出することが可能である。COMP-C3b断片を含有する1つ又は複数の複合体が試料中に存在する場合には、断片は抗体を介して固相に結合しており、この抗体はCOMP-C3b複合体に結合する。次に、C3bエピトープを含有する断片の存在は、1つ又は複数の物質を含む第1の成分を添加することにより測定することが可能であり、この物質は1つ又は複数の断片に結合する。前記1つ又は複数の物質は、試料中に存在する断片に結合している物質のレベルを測定するために、たとえば、酵素又は放射性若しくは蛍光性標識で随意に標識されている。第2の抗体と反応する、抗体などの標識されたリガンドも検出のために使用することが可能である。本発明は、関節疾患における軟骨分解プロセスにより誘導される補体活性化の滑液レベルに関する情報を提供することになる。血清分析は、COMPの放出された断片により誘導される補体活性化のレベルに関する情報を提供し、RA及びOAに罹患している患者をさらにうまく同定することになる。特に、炎症を誘発する際の基質成分の役割に関する情報は、将来の治療努力を評価すること並びにそのような治療のために患者を選択することにも重要な成分を提供する。本発明は、活動性疾患に罹患したRA患者を明確にする新規の手段を提供し、前臨床段階において現在の診断を行うことができる前の患者を含むことになる。本発明は、組織破壊の強度が低すぎて従来からある現在のアッセイにより検出することができない場合でも、COMPについての疾患活動性を含む疾患活動性を明確にすることになる。本発明は、疾患進行が比較的激しい高リスク患者を明確にすることになる。本発明は、外傷後に変性関節疾患を発症する比較的高いリスクを有する患者を滑液の分析により明確にすることになる。本発明は、乾癬性関節炎、慢性若年性関節炎及び骨盤脊椎炎における補体活性化を明確にすることになる。本発明は、血清試料の分析により、背痛をもたらす脊椎におけるプロセスを同定することになる。その理論的根拠は、放出されるCOMP断片が補体を活性化して炎症プロセスを誘導し、今度は疼痛を生じるというものである。補体活性化を示す複合体は、前記プロセスの直接の評価基準を提供することになる。例1血液試料を、静脈穿刺により収集し、凝固させる。血清を遠心分離により分離する。次に、試料を、試料希釈液0.05MTris-HCl、pH7.5、0.90パーセントwtNaCl、1パーセントウシ血清アルブミン、0.05パーセントTween20、0.15パーセントKathoneCG、0.01パーセントタートラジン、0.001MCaCl2、0.01パーセントウシIgG、0.45マイクロmフィルターを使用して濾過されるで1対10で希釈する12μLマイクロリットル試料対108μLマイクロリットル試料希釈液。滑液は関節吸引により収集しれ、直ちに遠心分離して、細胞及びすべての粒子を除去する。滑液は、血清試料と同様に、試料希釈液で1対10で希釈する。各判定は、標準及び未知の試料では2通りに実施される。細胞系DSMACC2406により産生されるモノクローナル抗体がウェルに固定化されている、ポリスチレン96ウェルマイクロタイタープレートを使用する。50μLの未知の試料又は標準試料我々の場合は、標準として1.7U/lキャリブレーション対照を使用したをウェルに添加し、プレートを回転プレート上、室温で120分間インキュベートする。350μLの洗浄緩衝液0.14MNaCl、0.003MKCl、0.05Tween20、0.01Mリン酸緩衝液pH7.4を用いて4回洗浄した後、Sigma社製St.Louis、MO63178、米国のC3b認識抗体C7761を含有する50μLのコンジュゲート溶液希釈液0.05MTrisベースpH7.5、0.9パーセントwtNaCl、0.001MCaCl2×2H2O、1パーセントBSA、0.05パーセントTween20、0.15パーセントKathonCG、0.03パーセントパテントブルー、0.01パーセントウシIgG、0.005パーセントヘテロ親和性ブロッキング試薬-11対3000に希釈するをすべてのウェルに添加し、プレートを室温で60分間、回転板上でインキュベートする。プレートは洗浄緩衝液を用いて4回洗浄し、コンジュゲート溶液希釈液中のウサギ抗ヤギHRPDakoCytomation社製のP0449、1対2000に希釈される50μLを各ウェルに添加する。プレートを、回転板上、RT室温で60分間インキュベートし、その後、上記と同じように洗浄緩衝液を用いて4回洗浄する。200μLの3,3’,5,5’-テトラメチルベンジジン1mMを各ウェルに添加し、プレートを室温で3分30秒間インキュベートする。呈色反応は、各ウェルに50μLの0.5MH2SO4を添加することにより停止する。450nmの吸光度を測定する。標準試料の吸光度を1に設定し、患者試料の読み出しは標準に対して規準化する。例2例1と同じであるが、未知の試料におけるCOMP-C3bレベルの定量的評価基準を得るための直接的な標準参照としての1つ又は複数のレベルの複合体を表す血清の陽性プールも使用する。参考文献"