"下記式1で表されるビタミンD3誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物。ここで、R1は水素原子、炭素数1~6のアルキル基、アルキルカルボニルオキシアルキル基それぞれのアルキルの炭素数は1~6である、またはアリールカルボニルオキシアルキル基アリールの炭素数は6~10であり、アルキルの炭素数は1~6であるを表す。R2は水素原子もしくは炭素数1~6のアルキル基を表すか、または他方のR2およびそれらが結合する炭素原子とともに炭素数3~6の環状アルキル基を形成してもよい。R3は、炭素数1~6のアルキル基を表すか、または他方のR3およびそれらが結合する炭素原子とともに炭素数3~6の環状アルキル基を形成してもよい。Xは酸素原子またはメチレン基を表し、nは1または2の整数を表す。Xが酸素原子を表す、請求項1に記載のビタミンD3誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物。Xがメチレン基を表す、請求項1に記載のビタミンD3誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物。nが1である、請求項1から請求項3のいずれか1項に記載のビタミンD3誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物。R2が水素原子を表す、請求項1から請求項4のいずれか1項に記載のビタミンD3誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物。R1が水素原子、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、t-ブチル基、t-ブチルカルボニルオキシメチル基、またはフェニルカルボニルオキシメチル基を表す、請求項1から請求項5のいずれか1項に記載のビタミンD3誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物。R2が水素原子を表し、nが1である、請求項1から請求項6のいずれか1項に記載のビタミンD3誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物。R1が水素原子、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、t-ブチル基、t-ブチルカルボニルオキシメチル基、またはフェニルカルボニルオキシメチル基を表し、R2が水素原子を表すか、または他方のR2およびそれらが結合する炭素原子とでシクロプロピル基を形成し、R3がメチル基、エチル基を表すか、または他方のR3およびそれらが結合する炭素原子とでシクロプロピル基を形成し、Xが酸素原子またはメチレン基を表し、n=1である、請求項1に記載のビタミンD3誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物。下記いずれかのビタミンD3誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物:5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-カルボキシエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-メトキシカルボニルエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-エトキシカルボニルエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-プロポキシカルボニルエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-1-メチルエトキシカルボニルエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-1,1-ジメチルエトキシカルボニルエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-t-ブチルカルボニルオキシメトキシカルボニルエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-フェニルカルボニルオキシメトキシカルボニルエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1S,2S,3R,20R-2-2-カルボキシプロピル-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1S,2S,3R,20R-2-2-メトキシカルボニルプロピル-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1S,2S,3R,20R-2-2-エトキシカルボニルプロピル-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1S,2S,3R,20R-2-2-プロポキシカルボニルプロピル-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1S,2S,3R,20R-2-2-1-メチルエトキシカルボニルプロピル-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1S,2S,3R,20R-2-2-1,1-ジメチルエトキシカルボニルプロピル-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-カルボキシー2,2―エタノエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-カルボキシー2,2―ジメチルエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-カルボキシエトキシ-26,27-ジメチル-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-カルボキシエトキシ-26,27-ノル-25-シクロペンチル-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール。請求項1から請求項9のいずれか1項に記載のビタミンD3誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物と、製薬学的に許容される担体とからなる医薬組成物。請求項1から請求項10のいずれか1項に記載のビタミンD3誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する、骨粗鬆症、悪性腫瘍、乾癬症、副甲状腺機能亢進症、炎症性呼吸器疾患、関節リウマチ、真性糖尿病、高血圧症、脱毛症、アクネ、および皮膚炎からなる群から選ばれる一つ以上の疾患の治療剤。疾患が、骨粗鬆症である請求項11に記載の疾患の治療剤。下記式2で表される化合物。ここで、R2、Xおよびnは、上記式1と同一である。またR4は上記式1におけるR1、メトキシメチル基、メトキシエトキシメチル基、テトラヒドロフラニル基、テトラヒドロピラニル基、またはベンジルオキシメチル基を表す。R5は水酸基の保護基を表す。本発明における用語の定義は以下の通りである。アルキル基とは、直鎖、分岐鎖、あるいは環状の脂肪族炭化水素基をいう。炭素数1~6のアルキル基としては、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、t-ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ヘキシル基、シクロプロピル基、シクロプロピルメチル基、シクロヘキシル基を具体的な基として挙げることができる。アルキルカルボニルオキシアルキル基としては、t-ブチルカルボニルオキシメチル基が具体的な基として挙げることができる。アリールカルボニルオキシアルキル基としては、フェニルカルボニルオキシメチル基をあげることができる。上記式1中、R1は水素原子、炭素数1~6のアルキル基、アルキルカルボニルオキシアルキル基それぞれのアルキルの炭素数は1~6である、またはアリールカルボニルオキシアルキル基アリールの炭素数は6~10であり、アルキルの炭素数は1~6であるを表す。この中でも水素原子、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基またはt-ブチル基が好ましく、特に水素原子またはイソプロピル基が好ましい。アルキルカルボニルオキシアルキル基としては、tブチルカルボニルオキシメチル基が好ましい。またアリールカルボニルオキシアルキル基としては、フェニルカルボニルオキシアルキル基が好ましい。上記式1中、R2は水素原子もしくは炭素数1~6のアルキル基を表すか、または他方のR2およびそれらが結合する炭素原子とともに炭素数3~6の環状アルキル基を形成してもよい。この中でも、R2は水素原子かメチル基、または他方のR2およびそれらが結合する炭素原子と環状アルキル基を形成する場合には、シクロプロピル基が好ましい。上記式1中、R3は炭素数1~6のアルキル基を表すか、または他方のR3およびそれらが結合する炭素原子とともに環状アルキル基を形成してもよい。炭素数1~6のアルキル基としては、メチル基、エチル基が好ましい。また、他方のR3およびそれらが結合する炭素原子とともに環状アルキル基を形成する場合には、シクロペンチル基が好ましい。また、上記式1中、Xは酸素原子またはメチレン基を表す。また、上記式1中、nは1または2の整数を表すが、特にn=1が好ましい。本発明の式1で表されるビタミンD3誘導体の好適な具体例としては次表に示される化合物を挙げることができる。本発明のビタミンD3誘導体は必要に応じてその医薬上許容される溶媒和物に変換することができる。そのような溶媒としては、水、メタノ-ル、エタノ-ル、1-プロパノール、2-プロパノール、ブタノ-ル、t-ブタノ-ル、アセトニトリル、アセトン、メチルエチルケトン、クロロホルム、酢酸エチル、ジエチルエ-テル、t-ブチルメチルエ-テル、ベンゼン、トルエン、DMF、DMSO等を挙げることができる。特に、水、メタノ-ル、エタノ-ル、1-プロパノール、2-プロパノール、アセトニトリル、アセトン、メチルエチルケトン、酢酸エチルを好ましいものとして挙げることができる。また、上記式2におけるR5は、水酸基の保護基を表す。水酸基の保護基としては、メトキシメチル基、炭素数1~3のアシル基炭素数にはカルボニル炭素を含む、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、t-ブチルジメチルシリル基、t-ブチルジフェニルシリル基などが挙げられる。このうちトリエチルシリル基、t-ブチルジメチルシリル基が好ましい例として挙げられる。また、上記式2におけるR4は、上記式1における、R1を表すか、メトキシメチル基、メトキシエトキシメチル基、テトラヒドロフラニル基、テトラヒドロピラニル基、またはベンジルオキシメチル基を表す。この中でもメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基またはt-ブチル基、tブチルカルボニルオキシメチル基、フェニルカルボニルオキシアルキル基、またはベンジルオキシメチル基が好ましい。また上記式2中、nは1もしくは2の整数を表し、特にn=1が好ましい。上記式1で表されるビタミンD3誘導体の合成はいかなる方法で行ってもよいが、例えば下記スキーム1のように行うことができる。すなわち、化合物2と化合物3をカップリングさせた後、水酸基の保護基を脱保護、および必要に応じてエステル基を加水分解することで目的物1を得ることができる。上記式中の化合物1、化合物2におけるR1からR5は、上記式1、上記式2と同様である。また上記式中化合物3のR3は、上記式1のR3と同様である。また化合物3におけるOPGは、保護された水酸基を表す。具体的には、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、メトキシメチル基をあげることができる。上記スキーム1中、R2が水素原子の場合、化合物2は、例えば、文献高山ら、ビタミンDアナログインキャンサープリベンションアンドテラピー、リーセントリザルツインキャンサーリサーチVitaminDAnaloginCancerPreventionandTherapy、RecentResultsinCancerResearch、164巻、スプリンガー社Springer、289-317頁、2003年などに記載のエンイン化合物4から下記スキーム2に従って合成することができる。すなわち4の1級水酸基の保護基t-ブチルジメチルシリル基;TBS基を選択的に脱保護して化合物5を得、これの水酸基を酸化してカルボキシル基とし、次いでエステル化することで、目的とする2R2=TBSを得ることができる。一方、上記スキーム1中、R3がメチル基の場合、化合物3は以下のスキーム3のように合成することができる。すなわち、文献記載例えば、米国特許第4804502号明細書に記載の化合物6をブロモメチレン化することで得ることができる。また、上記式1で表されるビタミンD3誘導体のうち、R2が水素原子の化合物は、上記スキーム1以外に下記スキーム4に示す方法でも合成することができる。すなわち、スキーム2中の化合物5をピバロイル基で保護し化合物7を得、これをスキーム1中の化合物3とカップリングとA環2位置換基末端の水酸基の脱保護を行うことで化合物8を得る。得られた化合物の水酸基をカルボン酸に酸化し、最後にすべての水酸基保護基を脱保護することで得ることができる。また上記スキーム1中、R2が置換されている場合、化合物2において、例えばR2が他方のR2およびそれらが結合する炭素原子とシクロアルキル基を形成している場合、文献高山ら、ビタミンDアナログインキャンサープリベンションアンドテラピー、リーセントリザルツインキャンサーリサーチVitaminDAnaloginCancerPreventionandTherapy、RecentResultsinCancerResearch、164巻、スプリンガー社Springer、289-317頁、2003年などに記載のエンイン化合物4と同様に、市販の4,6-O-ベンジリデンーアルファーD-メチルーグルコピラノシド9を出発物質とし、エポキシ化した後に、塩基条件下、エポキシドの開環を行い、化合物10を得る。水酸基の保護で化合物11を得た後、ベンジリデン環の開環、さらにグルコース1位の還元を行い、化合物12を得る。続いて、ジオールよりエポキシドを形成し化合物13を得、エポキシドとアセチレンの反応で3重結合部位を導入した化合物14を得る。水酸基の適切な保護を行うことで、化合物15を取得することができる。化合物15と上記式スキーム1に記載のCD環中間体3とのカップリングと選択的脱保護により化合物16を得、さらに1級水酸基を酸化しカルボン酸とした後に、脱保護することで、目的の化合物1を取得することができる。本発明のビタミンD3誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物を有効成分として含有する骨粗鬆症等の治療剤は、通常製剤化に用いられる担体や賦形剤、その他の添加剤を用いて調製される。製剤用の担体や賦形剤としては、固体または液体いずれでもよく、例えば乳糖、ステアリン酸マグネシウム、スターチ、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアゴム、オリーブ油、ゴマ油、カカオバター、エチレングリコール等やその他常用のものが挙げられる。投与は錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤等による経口投与、あるいは静注、筋注等の注射剤、坐剤、経皮等による非経口投与のいずれの形態であってもよい。本発明の治療剤における有効成分の治療有効量は、投与経路、患者の年齢、性別、疾患の程度によって異なるが、通常0.01~10μg/日程度であり、投与回数は通常1~3回/日ないし1~3回/週であり、このような条件を満足するように製剤を調製するのが好ましい。以下、実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれによって限定されるものではない。また、本発明における略号は以下の通りである。TBS=tブチルジメチルシリル基TES=トリエチルシリル基TESCl=クロロトリエチルシランTMS=トリメチルシリル基TMSCl=クロロトリメチルシランPiv=ピバロイル基PivCl=ピバロイルクロリドTBAF=テトラブチルアンモニウムフルオリドCSA=/--カンファー-10-スルホン酸PDC=ピリジニウムジクロメートTBSOTf=tブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネートDIBAL=水素化ジブチルアルミニウムDMF=N,N-ジメチルホルムアミドTHF=テトラヒドロフランTsCl=p-トルエンスルホニルクロリドTs=p-トルエンスルホニル[実施例1]5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-カルボキシエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール化合物C-1の製造1文献例えば、Kittakaら、ザジャーナルオブオーガニックケミストリーJ.Org.Chem.、2004年、69巻、7463-7471頁に既知の化合物A-1229g411mmolをエタノール20mLに溶解し、氷冷下で/--カンファー-10-スルホン酸954mg411mmolを加え、0°Cで1時間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて反応を停止し、反応液を酢酸エチルで希釈した。これを水、飽和食塩水で洗浄して無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル91で精製して化合物A-2164g収率90を得た。1HNMRδ59658852752142938837234530025024623823320118516809109101000721で得られた化合物A-210g226mmolをピリジン10mLに溶解し、0°Cでピバロイルクロリド069mL565mmolを加えた後、室温で攪拌した。無水メタノール3mLを加えて、室温でさらに30分間攪拌した。トルエンを加えて減圧濃縮した。得られた残渣に酢酸エチルを加えて、飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル91で精製して化合物A-31072g収率90を得た。1HNMRδ5955215144324284184103863813743683603392492351961871190900890100080070033ブロモメチルトリフェニルホスホニウムブロミド125g287mmolをテトラヒドロフラン7mLに溶解し、窒素雰囲気下、0°Cに冷却した。ここに、ナトリウムビストリメチルシリルアミド10Mテトラヒドロフラン溶液290mL287mmolを加え、氷冷下で30分間攪拌した。反応液を-78°Cまで冷却し、文献例えば、Uskokovicら、米国特許第4804502号明細書既知の化合物B-1200mg0574mmolをテトラヒドロフラン15mLに溶解して加えた。-78°Cで1時間攪拌後、0°Cでさらに1時間攪拌した。反応液にシリカゲル25gを加え、室温で10分間激しく攪拌した後、セライトろ過した。得られたろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル91で精製して化合物B-2161mg収率67を得た。1HNMRδ56529028622812410805801843で得られた化合物B-212g282mmolをテトラヒドロフラン10mLに溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオロリド1Mテトラヒドロフラン溶液423mL423mmolを加えて、50°Cで30分間攪拌した。酢酸エチルを加えて水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル=191で精製した。精製物を無水ピリジン10mLに溶解し、窒素雰囲気下、0°Cに冷却した。ここに、クロロトリエチルシラン0944mL570mmolを加え、室温まで昇温し、2.5時間攪拌した。反応液を0°Cに冷却し、飽和塩化アンモニウム水溶液、水を加え、トルエンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル=991で精製し、化合物B-3783mg収率88を得た。1HNMRδ56529228522320712410809606605754で得られた化合物B-3783mg167mmolおよび2で得られた化合物A-3733mg139mmolを無水トルエントリエチルアミン11111mLに溶解し、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム289mg025mmolを加え、窒素雰囲気下、105°Cで2時間攪拌した。室温に冷却後、ジアミンシリカゲル富士シリシア社製6g、n-ヘキサン20mLを加え、室温で1時間撹拌した後に、酢酸エチルを用いてろ過した。得られたろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル=1000→955で精製した。得られた精製物を無水テトラヒドロフラン55mL、無水メタノール46mLに溶解し、ナトリウムメトキシド、メタノール溶液091mL546mmolを加えて、1時間還流した。飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、減圧濃縮した。得られた残渣に酢酸エチルを加えて、飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル=1000→5050で精製し、化合物AB-1609mg収率67を得た。1HNMRδ61860253050044640538836933629428327726225622421020612110709609308706705501001000800765で得られた化合物AB-1427mg0514mmolを無水ジクロロメタン52mLに溶解し、0°Cに冷却した後、デスマーチン試薬523mg123mmolを加え、氷冷下で2時間撹拌した後、室温に昇温し1時間攪拌した。飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、ジクロロメタンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧濃縮した。得られた残渣をt-ブタノール21mLに溶解し、テトラヒドロフラン37mLと2-メチルー2-ブテン647mLを加えて氷冷した。次亜塩素酸ナトリウム純度80580mg514mmolとリン酸2水素ナトリウム2水和物400mg257mmolの水溶液73mLを加えて、氷冷下で45分攪拌した。飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル=1000→8020で精製し、化合物AB-2341mg収率78を得た。1HNMRδ62260052749944540739133628427726426025322421320712110709609008706705500900900776で得られた化合物AB-2140mg0165mmolをアセトン165mLに溶解し、0°Cに冷却した後、塩酸6規定、0332mLのアセトン希釈液165mLを加え、室温で4時間攪拌した。n-ヘキサン33mLを加えて、シリカゲルクロマトグラフィーn-ヘキサンアセトン=11、薄層シリカゲルクロマトグラフィーn-ヘキサンアセトン=45で粗精製し、さらに逆相HPLCA01ギ酸1メタノール4アセトニトリル水B01ギ酸5水19メタノールアセトニトリル02minB20220minB20→982025minB982530minB20で精製することにより、化合物C-1349mg収率42を得た。1HNMRδ642600539509450436358335286279272257229219204120106054[実施例2]5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-メトキシカルボニルエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール化合物C-2の製造1実施例11で得られた化合物A-2145g327mmolを無水ジメチルホルムアミド15mLに溶解し、ピリジニウムジクロメート617g164mmolを加えて、12時間攪拌した。水を加え、ジエチルエーテルで抽出し、得られた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー20酢酸エチルn-ヘキサンで精製して化合物A-4082g収率55を得た。1HNMRδ59053052043339638537535526325023220209109001101000900821で得られた化合物A-4082g179mmolを無水メタノール8mLに溶解し、濃硫酸74μL15mmolを加え、2.5時間攪拌した。室温に冷却後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧濃縮した残渣を無水ジクロロメタンに溶解し、氷冷下で2,6-ルチジン101mL9mmol、t-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート165mL72mmolを加えた後、室温で1時間攪拌した。無水メタノール15mLを加え、室温でさらに10分間攪拌した。n-ヘキサン/酢酸エチル9/1を加えて水で洗浄し、得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧濃縮した残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー3酢酸エチルn-ヘキサンで精製して化合物A-56834mg収率81を得た。1HNMRδ59452151443040039738838236834025724823519609008900900800700332で得られた化合物A-5470mg01mmolおよび実施例13で得られた化合物B-2462mg011mmolをトルエントリエチルアミン112mLに溶解し、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム125mg00108mmolを加え、窒素雰囲気下、110°Cで3時間攪拌した。室温に冷却後、減圧濃縮した。残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル=191で粗精製した。得られた粗精製物を無水ジクロロメタンアセトニトリル111mLに溶解し、窒素雰囲気下、0°Cでリチウムテトラフルオロボレート78mg08mmol、硫酸1Mアセトニトリル溶液008mL008mmolを加えて30分間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、これを酢酸エチルで抽出して得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧濃縮して得られた残渣を、薄層シリカゲルクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル=12で粗精製し、さらに逆相HPLCA95水アセトニトリルB05水40メタノールアセトニトリルB75で精製することにより、化合物C-268mg13を得た。1HNMRδ642603540509445406379373336285260224202196189182172154151147124106054MSmz53725233[実施例3]5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-プロポキシカルボニルエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール化合物C-4の製造1実施例21で得られた化合物A-4240mg0525mmolを原料として、実施例22と同様の方法でメタノールをプロパノールに替えて行い、化合物A-6185mg収率27を得た。21で得られた化合物A-6405mg0081mmolと実施例13で得られた化合物B-247mg011mmolを原料にして、実施例23と同様の方法により、化合物C-468mg15を得た。1HNMRδ642603539509445408406395385377336285282279270262226222203198190180170164158153151148145140120106094054[実施例4]5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-1-メチルエトキシカルボニルエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール化合物C-5の製造1実施例21で得られた化合物A-4240mg0525mmolを原料として、実施例22と同様の方法でメタノールをイソプロパノールに替えて行い、化合物A-71574mg収率60を得た。21で得られた化合物A-735mg007mmolと実施例13で得られた化合物B-244mg011mmolを原料にして、実施例23と同様の方法により、化合物C-568mg17を得た。1HNMRδ642603539509502445405378335285258228153151146130126124106054[実施例5]5Z,7E-1S,2S,3R,20R-2-2-カルボキシプロピル-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール化合物D-1の製造1文献例えば、Saitoら、テトラへドロンTetrahedron、2004年、60巻、7951-7961頁既知の化合物3R,4R,5S-3,5-Bis[t-butyldimethylsilyloxy]-4-[3-{t-butyldimethylsilyloxy}propyl]oct-1-ene-7-yneから実施例11と同様の方法で得られる化合物A-8072g169mmolをジクロロメタン68mLに溶解し、0°Cでトリエチルアミン047mL337mmol、塩酸トリメチルアミン16mg0169mmol、p-トルエンスルホニルクロリド048g253mmolを加えて、室温で1時間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られる残渣をジメチルホルムアミド3mLに溶解し、シアン化ナトリウム199mg406mmol、ヨウ化ナトリウム380mg253mmolを加えて、50°Cで2時間攪拌した。水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮して、粗体の化合物A-9を得た。これをテトラヒドロフラン5mLに溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオロリド1Mテトラヒドロフラン溶液507mL507mmolを加え、60°Cで1時間攪拌した。酢酸エチルを加え、水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣をジメチルホルムアミド5mLに溶解し、0°Cでイミダゾール460mg676mmol、ジメチルアミノピリジン21mg0169mmol、クロロトリエチルシラン0851mL507mmolを加えて50°Cで40分攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー1酢酸エチルn-ヘキサン→2酢酸エチルn-ヘキサン→5酢酸エチルn-ヘキサン→10酢酸エチルn-ヘキサンで精製して化合物A-105313mg収率72を得た。1HNMRδ58251751140039524223723219718516514312912608900900600600321で得られた化合物A-104494mg103mmolをジクロロメタン5mLに溶解し、-78°Cで冷却下、水素化ジイソブチルアルミニウム1Mトルエン溶液208mL208mmolを加えて-78度で50分間攪拌した。無水メタノール03mLを加えて室温で20分間攪拌し、さらに飽和酒石酸ナトリウムカリウム水溶液を加えて、10分間攪拌した。酢酸エチルを加えて、飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣をテトラヒドロフラン69mLに溶解し、t-ブタノール69mLと2-メチルー2ブテン45gを加えて氷冷した。次亜塩素酸ナトリウム931mg103mmolとリン酸2水素ナトリウム803mg515mmolの水溶液69mLを加えて、1時間攪拌した。飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液を加え、さらに飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル=1001→501→201→101→51→21で精製し、化合物A-11220mg47を得た。1HNMRδ58251751140039524223723219718516514312912608900900600600332で得られた化合物A-111266mg0278mmolをジメチルホルムアミド12mLに溶解し、0°Cで冷却下、トリエチルアミン0126mL09mmolを加えて40分間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル=955で精製し、化合物A-121265mg79を得た。1HNMRδ58251751140039524223723219718516514312912608900900600600343で得られた化合物A-1246mg008mmolおよび実施例13で得られた化合物B-247mg01mmolをトルエントリエチルアミン112mLに溶解し、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム12mg001mmolを加え、窒素雰囲気下、110°Cで3時間攪拌した。室温に冷却後、減圧濃縮した。残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル=191で粗精製した。得られた粗精製物をアセトンに溶解し、塩酸6N01mL06mmolを加えて0°Cで50分攪拌し、さらに塩酸6N02mL12mmolを加えて室温で40分攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣をボンドエリュートSIバリアン製n-ヘキサン酢酸エチル=12→酢酸エチル→酢酸エチル酢酸=991で粗精製した。さらに粗精製物を、逆相HPLCA95水アセトニトリルB05酢酸5水アセトニトリルB65で精製することにより、化合物D-1146mg36を得た。1HNMRδ640600527499439392384286279265230220205196188181164156151149146145140124106054054[実施例6]5Z,7E-1S,2S,3R,20R-2-2-1,1-ジメチルエトキシカルボニルプロピル-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール化合物D-6の製造1実施例51で得られた化合物A-9565mg129mmolをジクロロメタンに溶解し、-78°Cで冷却下、水素化ジイソブチルアルミニウム1Mトルエン溶液2mL2mmolを加えて-78度2時間で攪拌した。無水メタノール1mLを加えて室温で20分間攪拌し、さらに飽和酒石酸ナトリウムカリウム水溶液を加えて、10分間攪拌した。酢酸エチルを加えて、飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣をテトラヒドロフラン183mLに溶解し、t-ブタノール183mLと2-メチルー2ブテン6mLを加えて氷冷した。次亜塩素酸ナトリウム147g13mmolとリン酸2水素ナトリウム101g65mmolの水溶液5mLを加えて、1時間攪拌した。飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液を加え、さらに飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル=91→71→51で精製し、化合物A-132337mg38を得た。1HNMRδ58251751140039524223723219718516514312912608900900600600321で得られた化合物A-132284mg05mmolにトルエン5mLを加え、N,N-ジメチルホルムアミドジt-ブチルアセタール11mL4mmolを加えて、80°Cで1時間攪拌した。酢酸エチルを加えて、飽和食塩水で洗浄し、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー3酢酸エチルn-ヘキサンで精製し、化合物A-141185mg46を得た。1HNMRδ58351551041240023921717916314414012008900900600500332で得られた化合物A-14596mg012mmolおよび実施例13で得られた化合物B-260mg014mmolをトルエントリエチルアミン112mLに溶解し、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム17mg00147mmolを加え、窒素雰囲気下、110°Cで3.5時間攪拌した。室温に冷却後、減圧濃縮した。残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル=191で粗精製した。得られた粗精製物をテトラヒドロフランに溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオロリド1Mテトラヒドロフラン溶液084mL084mmolを加え、60°Cで2時間攪拌した。酢酸エチルでを加え、水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を、薄層シリカゲルクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル=11で粗精製し、さらに逆相HPLCA95水アセトニトリルB05水40メタノールアセトニトリルB85で精製することにより、化合物D-650mg7を得た。1HNMRδ640600527499439392384286279265230220205196188181164156151149146145140124106054054[実施例7]5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-t-ブチルカルボニルオキシメトキシカルボニルエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール化合物C-7の製造1実施例21で得られた化合物A-41643mg0360mmolを無水N,N-ジメチルホルムアミド12mLに溶解し、0°Cに冷却し、トリエチルアミン015mL108mmol、ピバロイルオキシメチルクロリド0104mL0719mmolを加えて、室温で1時間攪拌した。1時間後、ヨウ化ナトリウム150mg1008mmol炭酸カリウム140mg1008mmolを加えて、50°Cでさらに30分間加熱撹拌した。室温まで冷却し、水で希釈後、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーn-ヘキサン酢酸エチル=51で精製し、化合物A-151580mg収率77を得た。1HNMRδ59859057652151443040238234226224723419612109008900900800700321で得られた化合物A-1540mg007mmolと実施例13で得られた化合物B-236mg0085mmolを原料にして、実施例23と同様の方法により、化合物C-778mg18を得た。1HNMRδ642602581576539509444404395385380336285257228181159124123106054[実施例8]5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-フェニルカルボニルオキシメトキシカルボニルエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール化合物C-8の製造実施例21で得られた化合物A-4175mg0383mmolを原料として、実施例71におけるピバロイルオキシメチルクロリドをベンゾイルオキシメチルクロリドに替えて、実施例71と同様に行い化合物A-16を得たのちに、化合物A-16413mg007mmolと実施例13で得られた化合物B-234mg008mmolを出発物質として、実施例72と同様にして、化合物C-849mg11を得た。1HNMRδ809807762744641605601538507444405397387382336285264232218205153149124106055[実施例9]5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-カルボキシー2,2―エタノエトキシ-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール化合物E-1の製造1文献例えば、Kittakaら、ザジャーナルオブオーガニックケミストリーJ.Org.Chem.、2004年、69巻、7463-7471頁に記載の化合物A-17603g228mmolをN-メチルピロリドン60mLに溶解し、カリウムt-ブトキシド1188g114mmolを加えて、130度で4時間、加熱撹拌した。室温まで冷却し、水240mLを加え、ダイヤイオンHP-20SS三菱化学製、30g乾燥重量を加えて、室温で一晩撹拌した。ろ過し、固体を飽和塩化アンモニウム水溶液100mL、水200mLで洗浄し、アセトン500mLで溶出した。溶出液を減圧濃縮し、酢酸エチルで希釈後、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーn-ヘキサン/酢酸エチル=1/4で精製し、化合物A-18178g21を得た。1HNMRCDCl3δ75173655446144042940840139338337536035034105904121で得られた化合物A-18297g810mmolを無水ピリジン30mLに溶解して0°Cに冷却し、ピバロイルクロリド115mL932mmolを加えて同温で1時間攪拌した。無水メタノール3mLを加え、室温で5分間撹拌し、減圧濃縮した。トルエンに溶解して飽和食塩水で洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を減圧濃縮、乾燥した。この粗体を無水ジクロロメタン20mLに溶解して0°Cに冷却し、2,6-ルチジン13mL116mmol、t-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート214mL932mmolを加えた後、室温で1時間攪拌した。無水メタノール5mLを加えた後、減圧濃縮した。トルエンに溶解し、水で洗浄後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧濃縮した残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー5酢酸エチルn-ヘキサン→10酢酸エチルn-ヘキサンで精製して化合物A-19319g収率69を得た。1HNMRCDCl3δ74973455644542942541839839237536535633511909106105101001032で得られたA-19317g561mmolをシクロヘキサン63mLに溶解し、炭酸バリウム775mg392mmol、過酸化ベンゾイル136mg056mmol、N-ブロモスクシンイミド121g673mmolを加えて、1時間加熱還流した。冷却後、セライトろ過し、有機層を飽和重曹水、飽和食塩水の順に洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を減圧濃縮して、粗体40gを得た。この粗体を1―プロパノール36mLと水4mLの混合溶媒に溶解し、活性化させた亜鉛738g1122mmolとシアノ水素化ホウ素ナトリウム142g224mmolを加えて1時間加熱還流した。冷却後、セライトろ過し、固体を1-プロパノールで洗浄後、液体を減圧濃縮した。得られた残渣を酢酸エチルで希釈し、飽和食塩水で洗浄、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン酢酸エチル=9010→8020で精製し、化合物A-20150g収率50を得た。1HNMRCDCl3δ80580275974361157857554153041739639338137336836435011809005500900743で得られたA-20241g45mmolをアセトニトリル25mLに溶解させ、トリエチルアミン126mL9mmol、トリメチルアミン塩酸塩86mg09mmol、p-トルエンスルホニルクロリド130g68mmolの順に加えて室温で1時間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて減圧濃縮し、酢酸エチルで希釈後、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。この粗体331gをテトラヒドロフラン18mLに溶解し、テトラブチルアンモニウムフロリド1Mテトラヒドロフラン溶液135mL135mmolを加えて、15時間加熱還流した。冷却後、減圧濃縮した後にトルエンで希釈し、飽和食塩水で洗浄、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン酢酸エチル=9010で精製し、化合物A-21851mg収率47を得た。1HNMRCDCl3δ8068027617446106015675645425324043653533173103062752601190555トリメチルシリルアセチレン162mL115mmolのテトラヒドロフラン溶液3mLを窒素雰囲気下にし、溶液をドライアイスーアセトンで冷却した。ここに、n-ブチルリチウムヘキサン溶液264M397mL105mmolを加えて45分撹拌した。ここに、4で得られた化合物A-21846mg21mmolのテトラヒドロフラン溶液6mL、トリフルオロボランージエチルエーテル錯体0343mL273mmolを加え、ドライアイスーアセトン冷却下で2時間、0°Cで1時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて室温に戻し、酢酸エチルで希釈した。溶液を飽和炭酸水素ナトリウム、飽和食塩水の順で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を減圧濃縮した。得られた残渣を無水メタノール10mLに溶解し、ナトリウムメトキシド870mg63mmolを加えて、50°Cで1時間加熱撹拌した。冷却後、減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルで希釈後、飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン酢酸エチル=6040→5050→3565で精製し、化合物A-223115mg収率62を得た。1HNMRCDCl3δ55748847338538135131630528521219218565で得られた化合物A-225344mg226mmolを無水ピリジン75mLに溶解し、0°Cでピバロイルクロリド0276mL226mmolを加えて、同温で45分間撹拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた。トルエンで希釈し、飽和食塩水で洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。得られた残渣を無水ジクロロメタン10mLに溶解し、0°Cで2,6-ルチジン11mL922mmol、t-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート17mL755mmolを加えて同温で1.5時間撹拌した。酢酸エチルを加えて飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン酢酸エチル=991→8515で精製し、化合物A-23108g収率91を得た。1HNMRδ6005915215134324033943643453392512361951190900880550483Hm01100900600376で得られた化合物A-2370mg015mmolと実施例14で得られた化合物B-369mg016mmolを出発物質として、実施例15と同様に反応させることで、化合物AB-3481mg374を得た。1HNMRδ61860253250144740339135834633933232128026122421020518416614914313010709808308208107006405705405103601101000800787で得られた化合物AB-3481mg0056mmolを原料として、実施例16と同様の方法で、処理した。この反応物285mg00327mmolを無水ジクロロメタンアセトニトリル111mLの混合溶媒に溶解して0°Cに冷却した後、トシル酸一水和物31mg0163mmol、リチウムテトラフルオロボレート30mg0327mmolを加えて30分間同温で撹拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて酢酸エチルで抽出し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー酢酸エチルアセトン=9105酢酸で粗精製し、さらに逆相HPLCA95水アセトニトリルB05水40メタノールアセトニトリルB85で精製することにより、化合物E-149mg166を得た。1HNMRδ641601537508448406382355325288260228154142120110108106091054[実施例10]5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-カルボキシエトキシ-26,27-ジメチル-23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール化合物F-1の製造1トリメチルシリルアセチレン184mL130mmolを1,4-ジオキサン15mLに溶解し、アルゴン雰囲気下、氷浴で冷却しながらn-ブチルリチウム159Mnヘキサン溶液818mL130mmolを10分間で滴下した。ここにTanakaらの方法国際公開WO9858909明細書により合成される化合物B4191g433mmolを1,4-ジオキサン10mLに溶解して加え、110°Cで24時間加熱還流した。室温に冷却後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて攪拌した後、n-ヘキサンで抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、これを減圧濃縮した。残渣をテトラヒドロフラン-メタノール1120mLに溶解し、炭酸カリウム718mg520mmolを加えて室温で一晩攪拌した。反応液に水を加えた後にnヘキサンで抽出し、得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーnヘキサンで精製して化合物B-5114g収率89を得た。1HNMRδ565290286225210188172125111058ppm21で得られた化合物B-5301mg102mmolをテトラヒドロフラン10mLに溶解し、アルゴン雰囲気下、-78°Cに冷却しながらn-ブチルリチウム159Mnヘキサン溶液0673mL102mmolを滴下し、30分間攪拌した。ここに3-ペンタノン0216mL204mmolを加え、-78°Cのまま1時間攪拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて室温に昇温した。反応液を酢酸エチルで抽出し、得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーnヘキサン酢酸エチル91で精製して化合物B-6205mg収率53を得た。1HNMRδ642602539510444411407384381375368339284281268252229220215183170122108101055ppm32で得られた化合物B-6396mg104mmolを無水N,N-ジメチルホルムアミド4mLに溶解し、クロロトリエチルシラン0283mL168mmol、イミダゾール152mg223mmol、4-ジメチルアミノピリジン27mg022mmolを加えて、50°Cで1時間加熱撹拌した。室温まで冷却し、無水メタノール1mLを加え、30分間撹拌した。トルエンで希釈し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーnヘキサン酢酸エチル9010で精製して化合物B-74548mg収率88を得た。1HNMRδ5652912852242102021881711581541241080980910730640580524実施例21で得られた化合物A-4457mg1mmolを無水N,N-ジメチルホルムアミド5mLに溶解し、トリエチルアミン0421mL3mmol、クロロメチルベンジルエーテル0276mL2mmolを加えて、0°Cで1時間45分撹拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、酢酸エチルで抽出し、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後に、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーnヘキサン酢酸エチル955で精製し、化合物A-24485mg収率84を得た。53で得られた化合物B-744mg009mmolと4で得られた化合物A-2443mg0075mmolを出発原料として、実施例54記載の方法に準じて、カップリング反応と脱保護反応を行った。得られた反応粗体は薄層シリカゲルクロマトグラフィー酢酸エチルアセトン=41酢酸15vvで粗精製した後に、さらに逆相HPLCA95水アセトニトリルB05水40メタノールアセトニトリルB75で精製することにより、化合物F-147mg12を得た。1HNMRδ642600537508447408394382374333283269260230220198191180172124107103054[実施例11]5Z,7E-1R,2S,3R,20R-2-2-カルボキシエトキシ-26,27-ノル-25-シクロペンチルー23-イン-9,10-セコ-5,7,1019-コレスタトリエン-1325-トリオール化合物F-2の製造1実施例101で得られた化合物B-5442mg15mmolを出発物質として、実施例102と同様の方法に従って、化合物B-8とシクロペンタノンの混合物4272mgを得た。この粗体を出発物質とし、無水N,N-ジメチルホルムアミド45mL、クロロトリエチルシラン0283mL168mmol、イミダゾール152mg223mmol、4-ジメチルアミノピリジン27mg022mmolを用い、実施例103と同様の方法により、化合物B-95062mg収率68を得た。1HNMRδ56529228522420820215715412610709809107306305705221で得られた化合物B-944mg009mmolと実施例104で得られた化合物A-2443mg0075mmolを出発物質として、実施例105と同様の方法により、化合物F-220mg収率5を得た。1HNMRδ641600536507446410393378330307262230219205124106054[実施例12]VDR親和性評価VDRの評価は市販の測定評価キット、例えばインビトロジェン社が販売するポーラースクリーンビタミンDレセプターコンペティターアッセイレッドPOLARSCREENVITAMINDRECEPTORCOMPETITORASSAY,REDinvitrogenCat.No.PV4569を用いて、以下の手順で、評価を行った。384ウェルブラックプレートに2ウェルずつ、化合物溶液を10μLずつ加えた。キットに含まれているVDRFluoromoneVDRComplexを各ウェルに10μLずつ加え、室温で2時間反応させた。2時間後、蛍光偏光を測定し、親和性を評価した。なお、親和性は、1,25-OH2ビタミンD3の親和性を1とした場合の相対値1/Xで評価した。本発明で得られた化合物は、強いVDR親和性を有することが確認された。特に、化合物C-1、化合物D-1は非常に強いVDR親和性を有することが判明した。[実施例13]ヒト骨芽細胞HOS細胞におけるVDR転写活性1レポーターベクターはpGL3ベクターpromega社を用い、ルシフェラーゼ遺伝子の上流に、文献既知の方法Ozonoら、ザジャーナルオブバイオロジカルケミストリーTheJournalofBiologicalChemistry、265巻、21881-21888頁、1990年で得られるヒトオステオカルシン遺伝子プロモーター部分の配列を、HOS細胞ATCCより入手から取得したcDNAよりクローニングし、組み込んで構築した。発現ベクターはpCDNA3ベクターInvitrogen社にヒトVDRおよびヒトRXRをコードするDNA配列を挿入して構築した。HOS細胞は10FBSを含むDMEM培地で37°C、5CO2の条件で培養し、2日あるいは3日ごとに継代した。2継代培養していた細胞を遠心回収し、無血清、フェノールレッド不含のDMEM培地に4×105cells/mlの密度で分散させ、96ウェルプレートに0.1mL/ウェルで播種した。この系に、1に記載した各種ベクターをLipofectamine2000Invitrogen社試薬を用いてウェルあたり0.05mL添加した。37°Cで3時間インキュベートした後、各ウェルに各種濃度の被験化合物エタノール溶液あるいはコントロールとしてエタノールを2μLずつ添加した。37°Cで24時間インキュベートした後、培地を取り除き、PBS-で一度洗浄した後、DualGlo-LuciferaseAssaykitPromega社を用いて、ルミノメータベルトールド社によりルシフェラーゼ活性を測定した。その結果、本発明の化合物は、いずれもEC50値が20nM以下の転写活性を有することが判明した。さらに、化合物C-1、C-2、D-1、E-1、F-1、F-2については、EC50値が0.2nM以下の転写活性を有することが判明した。特に、化合物D-1、F-1、F-2については、EC50値が0.02nM以下の転写活性を有することが判明した。[実施例14]骨粗鬆症モデル卵巣摘出ラットにおける骨密度増強作用比較試験12週齢のSD系雌性ラットチャールズリバージャパンの両側卵巣を摘出し、4週間放置後、本発明の化合物、並びに国際公開WO01/62723号パンフレットに記載されている2α-3-ヒドロキシプロピルオキシー1α,25-ジヒドロキシビタミンD3を、週5回、4週間、それぞれ経口投与した。最終投与24時間後、エーテル麻酔下で採血を行い、安楽死させた。麻酔下において、第4第5腰椎の骨密度を二重X線骨塩量測定装置QDR-2000,HOLOGICを用いて測定した。比較のために、偽手術sham群開腹手術をするが卵巣摘出せず、試験化合物の投与を行わないと卵巣摘出OVX群卵巣摘出するが試験化合物の投与を行わないについても解剖時において腰椎の骨密度の測定を行った。また、各群における血清中のカルシウム濃度の測定も行った。手術を施すことにより、OVX群の骨密度は、偽手術群sham群に比べて低下することが確認された。ビタミンD誘導体を投与することによって、骨密度の回復が確認された。しかしながら、国際公開WO01/62723号パンフレットに記載されている2α-3-ヒドロキシプロピルオキシー1α,25-ジヒドロキシビタミンD3投与群は、骨密度の増加にあわせて血中カルシウム値が上昇し、骨密度がsham群以上になるために必要な投与量に25ng/kgおいては、血清カルシウム値上昇幅が1mg/dL以上と大きく上昇してしまうことが判明した。一方で本発明の化合物は、血清カルシウム値の上昇範囲がOVXの血清カルシウム値より1mg/dL以下の範囲内で、sham群と同等以上の骨密度にまで、骨密度を増強させることが判明した。以上の結果から、本発明のビタミンD3誘導体またはその医薬上許容される溶媒和物は、従来報告されているビタミンD3誘導体よりも優れた骨への作用を有していることが判明した。"