"被験者におけるエストロゲン受容体α陽性ガンを診断するための方法であって:a被験者のサンプル中の、前記エストロゲン受容体αの内因性分解ペプチドの濃度を検出する工程であって、前記内因性分解ペプチドは、配列番号2~29、または32~225によって定義される配列のいずれか1つからなり、配列番号29のフラグメントは、303番目位置のリジンK303がメチル化リジンである;及びb前記被験者のサンプルで得られた前記ペプチド濃度と、健常者における前記ペプチドのコントロール濃度とを比較し、前記被験者のペプチドの濃度が増大していれば、前記被験者は、ERα陽性ガンである可能性があることを示しているとする工程を含む方法。ERαの前記内因性分解ペプチドは、P295LMIKRSKK303NSLALSLT311であり、303番目位置のリジンK303はメチル化リジンである配列番号29、請求項1に記載の方法。前記内因性分解ペプチドが、配列番号2の配列からなる請求項1または2に記載の方法。前記内因性分解ペプチドは、K268R269、K303のメチル化、およびまたはM286の酸化、及び/又はS282のリン酸化で表される翻訳後修飾の1つ以上を有する請求項1~3のいずれか1項に記載の方法。前記ERα陽性ガンは、好ましくは乳ガン、子宮内膜ガン、子宮頸ガン、卵巣ガン、及びヒト乳ガンからなる群より選択され、最も好ましくはヒト乳ガンである請求項1~4のいずれか1項に記載の方法。前記サンプルは、好ましくは全血、血漿、血清、乳頭吸引、乳管洗浄、腫瘍の滲出液、腫瘍空洞液、胸水、腹水、腫瘍またはガン細胞周囲の流体、リンパ、及び腫瘍またはガンと接触している他の体液からなる群より選択される、請求項1~5のいずれか1項に記載の方法。配列番号2~29又は32~225により定義される配列ここで、配列番号29のフラグメントは303番目位置のリジンK303がメチル化リジンであるのいずれかからなる、単離されたエストロゲン受容体αペプチド。翻訳後修飾:K268、R269、K303のメチル化、およびまたはM286の酸化、および/またはS282のリン酸化の1つ以上を有している、請求項7に記載の単離されたポリペプチド。請求項7又は8に記載の単離されたERαポリペプチドを含む組成物であって、前記ペプチドは、ウシ血清アルブミン若しくはキーホールリンペットヘモシアニンなどの担体分子に結合している、又は脂質粒子、ナノカプセル、リポソーム、若しくは脂質小胞のような脂質組成物内に含まれていて、さらに必要に応じてさらに医薬賦形剤を含んでもよい組成物。さらにアジュバントを含む、請求項9に記載の組成物。ERα陽性ガン、好ましくは乳ガン、子宮内膜ガン、子宮頸ガン、卵巣ガン、最も好ましくはヒト乳ガンの治療、又はワクチン接種に用いられる、請求項7若しくは8に記載のポリペプチド、又は請求項9に記載の組成物の使用。請求項7に記載のポリペプチドをコードする核酸。配列番号1と少なくとも90の一致性を有するポリヌクレオチド配列からなり、より好ましくは配列番号1のポリヌクレオチド配列からなる請求項12に記載の核酸。ERα陽性ガン、好ましくは乳ガン、子宮内膜ガン、子宮頸ガン、卵巣ガン、最も好ましくはヒト乳ガンの治療、又はワクチン接種において使用される、請求項12または請求項13に記載の核酸分子。請求項7に記載のペプチドを発現する、または請求項12または13に記載の核酸分子を含む組換えベクター。ERα陽性ガン、好ましくは乳ガン、子宮内膜ガン、子宮頸ガン、卵巣ガン、最も好ましくはヒト乳ガンの治療、またはワクチン接種のための、請求項15に記載の組換えベクター。請求項7若しくは8に記載のポリペプチド、請求項9若しくは10に記載の組成物、請求項12若しくは13に記載の核酸分子、又は請求項14に記載の組換えベクターを含む宿主細胞であって、前記細胞は、好ましくはほ乳類細胞例えば、ヒト細胞、酵母細胞、細菌細胞例えば大腸菌、サルモネラ属、又はシュードモナス細胞である宿主細胞。ERα関連疾患、好ましくは乳ガン、子宮内膜ガン、子宮頚ガン、卵巣ガン、最も好ましくはヒト乳ガンに対する、治療又はワクチン接種のための請求項17に記載の宿主細胞。請求項7又は8に記載のポリペプチドに特異的に結合する精製された結合分子であって、好ましくは抗体、モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体、ナノボディ、アフィボディ、抗体フラグメント、アプタマー、フォトアプタマー、オリゴヌクレオチド、リポカリン、特異的に相互作用する小分子、分子インプリンティングポリマーMIPs、DARPins、アンキリン、特異的に相互作用するタンパク質、ペプチドミメティックス、バイオミメティックス、又はペプチド、及び前記ポリペプチドに特異的に結合するその他の分子。a請求項19に記載の結合分子;b健常者における、前記結合分子が特異的に結合する対応ペプチド量の参照値;及びc前記被験者がERα陽性ガンであるか否かを結論付けるために、被験者のサンプル中の前記ペプチド量と、健常者のサンプルにおける前記ペプチド量とを比較する手順書を含む免疫検出キット。ERα陽性のガン、好ましくは乳ガン、子宮内膜ガン、子宮頸ガン、卵巣ガン、最も好ましくはヒト乳ガンの診断、予測、予後予測、およびまたはモニタするためのバイオマーカーとしての、請求項7または8に記載のペプチドの使用。治療有効量の請求項7若しくは8に記載のペプチド、または治療有効量の請求項9若しくは10に記載の組成物を、前記被験者に投与する工程を含む、ERα陽性ガンを有する被験者を治療する方法。治療有効量の請求項7もしくは8に記載のペプチド、又は治療有効量の請求項9もしくは10に記載の組成物を、前記被験者に投与する工程を含む、ERα陽性ガンの発生に対する被験者へのワクチン接種方法。本明細書において明示がなければ、本明細書で用いる用語、1つのa、an、およびそのtheは、単数及び複数の双方を包含する。本明細書で使用する含む備えるからなるcomprisescomprisingcomprisedofは、包含するincludingincludescontainingcontainsと同義であり、包括的またはオープンエンドであり、追加的、非限定的要素、要件、又は工程を排除するものではない。エンドポイントによる数値範囲の限定は、それぞれの範囲内での全ての数や分割された部分、及び限定しているエンドポイントを包含する。本明細書で用いられる約という用語は、パラメータ、量、時間的継続時間などの、測定可能な値を参照するときは、バリエーションが開示された発明内で適切に実行できる限りは、特定された値及び特定された値からのバリエーション、特に、特定された値の±10以下、好ましくは±5以下、より好ましくは±1以下、さらに好ましくは±0.1以下に、拡大されることを意味する。修飾された約が参照する値は、特定的な開示そのもの、及び好ましい開示でもあることを理解すべきである。本明細書において引用した全ての文書は、その全体が本明細書中で参考として組み入れられる。特に指定しない限り、技術的および科学的用語を含む、本発明の開示に使用されるすべての用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解される意味を持つ。更なるガイダンスによって、用語の定義は、本発明の教示をより正しく理解するために含まれてもよい。用語予測するpredictingまたは予測prediction、診断diagnosingまたは診断diagnosis、及び予後予測するprognosticating又は予後予測prognosisは、医療や臨床の現場で一般的であり、よく理解されている。例のみで、限定しないが、予測するまたは予測は、一般に、被験者が疾患または症状をまだ有しておらず、疾患または症状の事前の宣言、表示、または予告をいう。例えば、被験者における疾患または症状の予測は、例えば、ある期間内又はある年齢までに、被験者が前記疾患又は症状を発症するだろう可能性、見込み、リスクを示すことができる。前記可能性、見込み、リスクは、とりわけ、絶対値、範囲、または統計として示されてもよいし、または適切なコントロール被験者または被験者集団に対して相対的に例えば、一般的な正常または健康な対象や対象集団に対する相対値のように示してもよい。したがって、被験者が疾患または症状を発症する前記可能性、見込み、リスクは、適切なコントロールである対象又は対象集団に対して、増加又は減少、あるいは何倍かの増加、何倍かの減少として、便宜的に示すことができる。用語診断するまたは診断は、症状及び徴候、及び/又は様々な診断手順の結果例えば、診断された疾患または症状の存在、不存在およびまたは量、1以上のバイオマーカー特徴を知ることなどに基づいて、被験者における疾患または症状について、認識、決定、又は結論づけるプロセスや行為をいう。用語予後予測するや予後は、一般に、疾患または症状の回復と見通し例えば、可能性、期間、及び又は程度についての予測をいう。本明細書で使用する用語被験者または患者patientは、典型的にはヒトを意味するが、非ヒト動物、好ましくは温血動物、より好ましくは、例えば、非ヒト霊長類、げっ歯類、イヌ、ネコ、ウマ、ヒツジ、ブタなどの哺乳類に拡大してもよい。本明細書において使用される用語サンプルまたは生物学的サンプルには、被験者から得られる任意の生物標本が含まれている。サンプルとしては、特に限定しないが、全血、血漿、血清、赤血球、白血球例えば、末梢血単核細胞、唾液、尿、便すなわち、糞便、涙、汗、皮脂、乳頭吸引、管洗浄液ductallavage、腫瘍の滲出液、腫瘍空洞液、胸膜滲出液、滑液、髄液、リンパ液、細針吸引液、羊水、他の体液、細胞ライセート、細胞分泌物、炎症液、精液や膣分泌物が含まれる。好ましいサンプルとしては、検出可能な量の本発明の分泌されたERαのポリペプチドを含むもので、例えば、血液、腹水、腫瘍やガン細胞周囲の流体などである。好ましい実施形態では、前記サンプルは、全血または例えば、血漿、血清、または細胞ペレットなどの血液の一部の成分であってもよい。好ましくは、前記サンプルは、低侵襲の方法により容易に得ることができるものである。あるいは、サンプルは、組織サンプルおよび生検、組織ホモジネートなどであってもよい。用語量quantity、amount、レベルは同義であり、当該技術分野において一般的によく理解されている。本明細書で使用する用語は、特に、サンプル中の分子又は分析物の絶対量化、あるいはサンプル内の分子又は分析物のある値に対する相対量化、すなわちここで示されている参照値に対するような、ある値に対する相対的量をいう。サンプル中の分子又は分析物の絶対量は、重量又はモル量として、またはより一般的に濃度例えば、基準体積に対する重量、又は基準体積に対するモルとして便宜的に表される。サンプル中の分子又は分析物の相対量は、ここで示されている参照値に対してのように、ある値に対して増大又は減少、または何倍かの増大、何倍かの減少というように便宜的に表示してもよい。第1のパラメータと第2のパラメータ例えば、第1の量と第2の量との間での相対的比較を行うが、前記第1及び第2のパラメータの絶対値をまず決定することを要求するものではない。測定方法は、例えば、前記第1及び第2パラメータ用に、量で表すことができる読み出し情報例えば、シグナル強度などを作出してもよい。ここで、前記読み出し情報は、前記パラメータの関数値であり、前記読み出し情報は、第1パラメータ対第2パラメータの相対値を作出するために、読み出し情報を、それぞれのパラメータの絶対値に実際に変換せずに、直接的に比較することができる。また、ここで教示されるような、ERαポリペプチドに特異的に結合することができる結合分子を提供する。好ましくは配列番号2、又はK268、R269、K303のメチル化、およびまたはM286の酸化、およびまたはS282のリン酸化といった翻訳後修飾の1つ以上を含む具体的なフォームに特異的に結合することができる結合分子を提供する。このような結合分子は、とりわけ抗体、アプタマー、フォトアプタマー、タンパク質、ペプチド、ペプチドミメティックスまたは低分子を含むことができる。本明細書を通して使用される用語特異的に結合するとは、ある物質agentここでは、特定結合分子又は特異的結合分子とも示されるが、対象とする1以上のタンパク質、ポリペプチド、又はペプチド、又はこれらのフラグメントのような1以上の所望な分子又は分析物に結合することを意味し、実質的には、ランダム又は関係ない他の分子を除外して、ときには実質的に構造的に関係する他の分子を除外して、結合することを意味する。用語特異的に結合するは、分子が意図された標的単数又は複数に対して、必ずしも独占的に結合することを必要としない。もしそのような意図した標的に対する親和性が、結合の条件下で、標的でないポリペプチド又は分子に対する親和性よりも、少なくとも2倍以上大きい、好ましくは少なくとも約5倍以上、より好ましくは少なくとも約10倍以上、さらにより好ましくは少なくとも約25倍以上、さらにより好ましくは少なくとも約50倍以上、さらにより好ましくは少なくとも約100倍以上大きいのであれば、例えば、分子が、本発明の1又は複数の標的ポリペプチド、1又は複数のペプチド、及び/又はそのフラグメント、またはそれらの翻訳後修飾されたフォームに特異的に結合されることもあり得るといえる。好ましくは、結合分子は、意図する標的複数可に、親和性定数KAがKA≧1×106M1、より好ましくはKA≧1×107M1、より好ましくはKA≧1×108M1、さらに好ましくは、KA≧1×109M1、より更に好ましくは、KA≧1×1010M1またはKA≧1×1011M1で結合することができる。ここで、KASBMT/SBMTであり、SBAは特異的結合分子を表し、Tは意図した標的を表す。KAの判定は、例えば、平衡透析とScatchardプロット解析を用いてのように、当該技術分野で公知の方法によって行うことができる。本明細書を通して使用されるような特異的結合分子としては、とりわけ抗体、アプタマー、フォトアプタマー、タンパク質、ペプチド、ペプチドミメティックスまたは低分子が挙げられる。本明細書において用いられるように、用語抗体は、最も広い意味で用いられ、ここで示されるようなERαポリペプチド又はここで定義されている1つ以上の前記ポリペプチドの翻訳後修飾フォームなどの標的分子に特異的に結合する任意の免疫学的結合分子を一般にいう。この用語は、無傷のモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多価例えば、2価、3価以上、及び/又は少なくとも2つの無傷モノクローナル抗体から形成されるマルチ特異的抗体例えば、二つ以上の特異的抗体、及び所望の生物学的活性特に、目的の抗原に特異的に結合する能力を示す限りは抗体フラグメント、さらにはこのようなフラグメントの多価およびまたは多重特異的複合体にまで拡張する。用語抗体は、免疫感作を含む方法によって生成される抗体を含むだけでなく、例えば、目的の抗原上のエピトープに特異的に結合することができる少なくとも1つの相補性決定領域CDRで拡張される、組み替えられた発現ポリペプチドのようないずれのポリペプチドも含む。したがって、この用語は、それらが、invitroまたはinvivoで産生されているかどうかにかかわらず、そのような分子に適用される。実施形態において、抗体は、IgA、IgD、IgE、IgGおよびIgMクラスのいずれであってもよく、好ましくはIgGクラスの抗体である。治療目的のためには、IgG抗体が好ましく、特に被験者において、低い自己免疫応答を誘導するIgG2又はIgG4型が好ましい。実施形態では、抗体は、ポリクローナル抗体であってもよく、例えば、そこから精製例えば、アフィニティー精製された抗血清または免疫グロブリンであってもよい。別の好ましい実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体またはモノクローナル抗体の混合物であってもよい。モノクローナル抗体は、特定の抗原、またはより大きな選択性と再現性を有する抗原内の特定のエピトープを標的とすることができる。たとえば、限定しないが、モノクローナル抗体は、Kohlerらによって1975年に最初に説明されたハイブリドーマ法ネイチャー256495によって作製してもよいし、組換えDNA法例えば、米国4816567などによって製造してもよい。また、モノクローナル抗体は、Clacksonらによって1991年に説明されたような技術ネイチャー352:624から628や1991年にMarksらにより説明された技術JMolBiol222:581597を用いてファージ抗体ライブラリーから単離することができる。さらなる実施形態では、抗体結合分子は、抗体フラグメントであってもよい。抗体フラグメントは、完全な抗体の一部を含み、その抗原結合領域または可変領域を含んでいる。抗体フラグメントとしては、例えば、Fab、Fab、F2は、FvおよびscFvフラグメント;ジアボディdidbodies;直鎖状抗体;単鎖抗体分子;抗体フラグメント例えば2つのボディ、3つのボディ、及びマルチボディから形成された多価およびまたは多重特異的抗体が挙げられる。上記名称Fab、Fab、F2、Fv、scFvなどは、それらの分野で確立された意味を有するものとする。抗体という用語は、あらゆる動物種、好ましくは脊椎動物種例えば、鳥類、哺乳類に由来する、又はこれらに由来する1つ以上の部分を含む抗体を包含する。特に限定しないが、前記抗体は、ニワトリ、七面鳥、ガチョウ、カモ、ホロホロ鳥、ウズラやキジなどに由来してもよい。また、特に限定しないが、前記抗体は、ヒト、マウス例えば、マウス、ラットなど、ロバ、ウサギ、ヤギ、ヒツジ、モルモット、ラクダ属例えば、フタコブラクダ及びアラブラクダCamelusdromaderius、ラマ属llama例えば、飼育ラマlamapaccos、リャマやビクーニャラマまたは馬などに由来してもよい。当業者は、抗体は1つまたは複数のアミノ酸の欠失、付加およびまたは置換例えば、保存的置換がそれぞれの抗原との結合を維持しているのであれば、これらの変更を含むことができることと理解するであろう。抗体はまた、それを構成するアミノ酸残基の1つまたは複数の自然のまたは人工の修飾例えば、グリコシル化等を含んでもよい。組換え抗体またはそのフラグメントの産生方法として、ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体ならびにそのフラグメントを産生する方法は、当技術分野でよく知られている例えば、HarlowおよびLane、抗体:実験室マニュアル、コールドスプリングハーバーラボラトリー、ニューヨーク、1988HarlowおよびLane、抗体を用いた:実験室マニュアル、コールドスプリングハーバーラボラトリー、ニューヨーク、1999年、ISBN0879695447;ゾラ編モノクローナル抗体:技術のマニュアル、CRCプレス、1987年、ISBN0849364760;ディーンシェパード編、モノクローナル抗体:実践的アプローチオックスフォード大学出版、2000年、ISBN0199637229;LO編、MethodsinMolecularBiology、vol248、抗体工学:方法とプロトコルヒューマンプレス、2004年、ISBN1588290921。用語アプタマーとは、本明細書に示すERαポリペプチドのような標的分子に特異的に結合することができる一本鎖または二本鎖オリゴDNA、オリゴRNAまたはoligoDNARNAもしくはその類似体、あるいは本明細書で定義されるような、その翻訳後修飾されたフォームの1つ以上をいう。有利には、アプタマーは、それらの標的に対して、かなり高い特異性と親和性例えば、1×109M1オーダーのKAを示すことができる。アプタマーの製造は、とりわけ、米国5270163号特許;EllingtonSzostak1990年Nature346:818822;TuerkGold、1990年Science249:505-510;またはKlussmann編、アプタマーハンドブック-機能性オリゴヌクレオチドとその応用、Wiley-VCH、2006年、ISBN3527310592に説明されている。これらは、参考として、本明細書に組み込まれる。用語フォトアプタマーは、標的分子に共有結合又は架橋結合することができる1つ以上の光反応性官能基を含有するアプタマーをいう。用語ペプチドミメティックスは、対応するペプチドのトポロジー類似体である非ペプチド薬剤をいう。合理的にペプチドのペプチドミメティックスを設計する方法は、当技術分野で知られている。たとえば、硫酸化8量体ペプチドCCK2633に基づく3つのペプチドミメティックスと11量体のサブスタンスPに基づく2つのペプチドミメティックスの合理的設計、並びに関連するペプチドミメティックスの設計原理は、Horwell1995年TrendsBiotechnol13:132-134に記載されている。用語低分子とは、一般に医薬品で使用されている有機分子に匹敵するサイズの化合物、好ましくは有機化合物をいう。この用語は、生体高分子例えば、タンパク質、核酸などを除外している。好ましい低分子有機化合物の範囲は、約5000Da程度まで、例えば、約4000まで、好ましくは2000まで、さらに好ましくは1000Da、例えば、約900、800、700、600、または最大約500Daまでである。好ましい低分子は、本明細書に示すERαポリペプチドのような標的分子または本明細書で定義する、その翻訳後修飾されたフォームの一つ以上の標的分子に特異的に結合するものである。また、動物を免疫することにより、本発明のペプチド配列番号2に対して特異的な抗体を調製するための方法を提供する。当該方法は、本明細書で示すERαポリペプチド例えば、配列番号2又は本明細書で定義される翻訳後修飾されたフォームの1つ以上参照:図2を用いてすなわち、免疫感作抗原として使用して、所望により、存在しているキャリアに付着させて、動物、例えば非ヒト動物を免疫することにより、調製する方法である。あるいは、DNAまたはRNA免疫感作は、本明細書において定義されるヌクレオチド例えば、配列番号1を使用して適用することができる。免疫感作及び免疫血清からの抗体試薬の調製は、それ自体はよく知られている。免疫される動物は、任意の動物種、好ましくは温血種、より好ましくは、例えば、鳥類、哺乳類等の脊椎動物種である。特に限定しないが、前記抗体は、ニワトリ、七面鳥、ガチョウ、カモ、ホロホロ鳥、ウズラやキジであってもよい。また、限定しないが、抗体は、ヒト、マウス例えば、マウス、ラットなど、ロバ、ウサギ、ヤギ、ヒツジ、モルモット、ラクダ、ラマや馬であってもよい。用語提示キャリアpresentingcarrierやキャリアとは、一般に、第二の分子に結合するとき、後者、通常、追加のT細胞エピトープを提供することを通じて、増強した免疫応答をする免疫原性分子を表す。提示キャリアは、ポリペプチド構造や非ペプチド構造であってもよく、とりわけ、糖鎖、ポリエチレングリコール、ペプチドミメティックス、合成ポリマーなどが挙げられる。限定しないが、例えば、キャリアには、ヒトのB型肝炎ウイルスコアタンパク質、複数C3D、破傷風毒素フラグメントCや酵母Tyの粒子が挙げられる。本明細書で示す免疫感作により得られる又は得られ得る免疫血清は、特に、ここに示すERαポリペプチド、または本明細書に定義するようなその翻訳後修飾されたフォームの1つ以上に特異的に結合する抗体試薬を生成するのに、有用である。また、本発明は、ここに示すERαポリペプチドに特異的、または本明細書に定義するようなその翻訳後修飾されたフォームの1以上に結合する特異的結合分子を選択する方法を教示する。都合よいことに、このような方法は、所望しない分子と交差反応又は交差結合する結合分子を減少させたり、取り除くことに基づいている。アフィニティークロマトグラフィー、アフィニティー固相抽出、アフィニティー磁気抽出などの種々のアフィニティー分離法により、当該分野で公知の方法により、所望でない結合分子を容易に低減することができる。既存の利用可能な、または従来の分離、検出および定量方法のいずれも、ここに示すERαポリペプチドに特異的、または本明細書に定義するような翻訳後修飾されたフォームの1以上の存在又は不存在の測定例えば、存在vs不存在;検出可能な量vs検出不可能な量とした読み出し及び/又は定量例えば、絶対濃度又は相対濃度などの絶対量または相対量である読み出しに用いられることができる。例えば、このような方法は、イムノアッセイ法、質量分析法、またはクロマトグラフィー法、またはこれらの組み合わせであってもよい。用語免疫学的検定は、一般的にサンプル中の目的とする1以上の分子または分析物を検出するためのような公知の方法をいう。ここで、目的とする分子又は分析物の免疫学的測定の特定は、特異的結合性分子、一般的な抗体、及び目的とする分子又は分析物の間で、特異的に結合することによって、与えられる。イムノアッセイ技術は、特に限定しないが、直接ELISA酵素結合免疫吸着検定法、間接ELISA、サンドイッチELISA、競合ELISA、多重ELISA、ラジオイムノアッセイRIA、ELISPOT技術、FPIA蛍光偏光免疫測定法および当該分野で公知の他の同様の技術を含む。これらのイムノアッセイ法は、当該分野で、例えば、ジョンRクラウザー、ELISA法ガイドブック第1編、ヒューマンプレス2000年、ISBN0896037282で知られている。限定しないが、更に説明する手段により、直接ELISAは、マイクロウェルプレートのような固体支持体上に固定化されたサンプル中の標的抗原に結合する、標識された一次抗体を採用し、これにより、前記標的抗原を定量する。間接ELISA法は、標的抗原に結合する非標識一次抗体と、抗原が結合した一時抗体を認識し、定量する二次標識抗体を用いる。サンドイッチELISAでは、抗原内の1つの抗原部位に結合する、固定化された捕捉用抗体を用いて、サンプルから、標的抗原が捕捉され、結合していない分析物の除去後に、捕捉された抗原が、前記抗原の別の抗原部位と結合する検出用抗体を用いて検出される。ここで前記検出抗体は、上記のように直接的又は間接的に検出されることができる。競合ELISAは、一次抗体または標的抗原のいずれか一方であればよい標識された競合物competitorを使用している。この例では、非標識の固定化された一次抗体が、サンプルと共にインキュベートされ、この反応は平衡になるまで行われ、ついで標識された標的抗原が追加される。後者は、その結合部位がサンプルからの非標識標的抗原によって占有されていない限り、一次抗体に結合するであろう。このように、結合した標識抗原の検出量は、サンプル中の非標識抗原の量に反比例の関係にある。マルチプレックスELISA法により、通常の複数の配列アドレスで、単一のコンパートメント例えば、マイクロプレートウェル内での、2つ以上の検体を同時検出する例えば、NielsenGeierstanger2004年、JImmunolMethods290:107-20、及びさらなるガイダンスとして、Lingら、2007年、ExpertRevMolDiagn7:87-98参照。理解されるように、ELISA技術での標識は、通常、酵素例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼなどの結合により、その端部は、通常、化学発光、比色または蛍光性としている。ラジオイムノアッセイは、競合をベースとする技術であり、既知量の放射性標識例えば、125Iまたは131I標識された標的抗原を、前記抗原に対する抗原と混合し、ついで、サンプルからの非標識すなわちコールド抗原を添加し、入れ替わった標識抗原の量を測定する例えば、ラジオイムノアッセイおよび関連技術の概要、ChardT編、ガイダンスのためのElsevierSciense1995年、ISBN0444821198参照。また、質量分析法は、バイオマーカーを測定するのに適している。一般に、ぺプチド、好ましくはフラグメンテーション及び/又は選択されたペプチドの部分的アミノ酸配列の質量に関する正確な情報を得るための任意の質量分析MSnnはゼロより大きい整数;ESI3Dまたはリニア2DイオントラップMS;ESIトリプル四重極MS;ESIの四重極直交TOFQTOF;ESIフーリエ変換MSシステム;シリコン上での脱離/イオン化DIOS;二次イオン質量分析法SIMS;大気圧化学イオン化質量分析法APCIMS;APCIMSMS;APCI-n;大気圧光イオン化質量分析法APPIMS;APPIMS/MS;およびAPPI-nが挙げられる。タンデムMSにおけるペプチドイオンフラグメンテーションMS/MSによる取り決めは、例えば、衝突誘起解離CIDのような、当該技術分野において確立された技術を用いて達成することができる。実施形態では、質量分析法によるバイオマーカーの検出および定量は、とりわけ上記のような、Kuhnら2004年、Proteomics4:1175-86によって、マルチプルリアクションモニタリングMRMを伴ってもよい。実施形態では、ペプチドのMS分析法は、有利には、例えば、クロマトグラフィー及び下記の明細書中に記載のその他の方法との組み合わせのように、上流のペプチドまたはタンパク質の分離または分別方法と組み合わせて、用いることができる。クロマトグラフィーは、また、バイオマーカーを測定するために使用することができる。用語クロマトグラフィーは、当該分野で本明細書において用いられるように、また大変有効であるといわれている、化学物質を分離するための方法に拡張する。好ましいアプローチでは、クロマトグラフィーは、液体または気体の移動ストリーム移動相によって運ばれる化学物質の混合物検体が、静止液体または固体の相固定相上又は周囲を、移動相と固定相stationaryphaseとの間で流れるので、検体の差の分布の結果としての成分に分離されるプロセスをいう。前記固定相は、通常、微細に分解された固体、フィルター材料のシート、又は固体表面にある液体の薄層などであってもよい。クロマトグラフィーは、例えば、アミノ酸、タンパク質、タンパク質又はペプチドのフラグメントなどのような、生物由来の化学的化合物の分離のためにも広く適用可能である。本明細書で使用するクロマトグラフィーは、好ましくは、カラムすなわち、前記固定相がカラムに堆積または充填されている、好ましくは、液体クロマトグラフィーであり、さらに好ましくはHPLCであってもよい。クロマトグラフィーの細目は、当技術分野でよく知られている。例えば、さらなるガイダンスとして、例えば、Mマイヤー、1998年、ISBNコード:047198373X、及び実践のHPLC方法論と応用、BidlingmeyerBA、JohnWhileySons社、1993年を参照。クロマトグラフィーの代表的な種類は、限定しないが、高速液体クロマトグラフィーHPLC、順相HPLCNPHPLC、逆相HPLCRPHPLC、陽イオンまたは陰イオン交換クロマトグラフィー等のイオン交換クロマトグラフィーIEC、親水性相互作用クロマトグラフィーHILIC、疎水性相互作用クロマトグラフィーHIC、ゲルろ過クロマトグラフィーやゲルパーミエーションクロマトグラフィー等のサイズ排除クロマトグラフィーSEC、クロマトフォーカシング、免疫親和性、固定化金属アフィニティークロマトグラフィー等のアフィニティークロマトグラフィーなどが挙げられる。シングル、二次元以上の次元クロマトグラフィーを含む実施形態では、さらなるペプチド分析方法と組み合わせたペプチド分画法、例えば、本明細書の他の箇所で説明されている、ダウンストリーム質量分析と組み合わせて用いてもよい。さらに、ペプチドまたはポリペプチドの分離、同定または定量方法は本明細書の開示において、バイオマーカーを測定するために、必要に応じて、上記の分析方法のいずれかと組み合わせて使用することができる。このような方法は、限定されないが、化学的抽出の分割、キャピラリー等電点電気泳動CIEF、キャピラリー等速電気泳動CITP、キャピラリー電気クロマトグラフィーCECなどの等電点電気泳動IEF、一次元ポリアクリルアミドゲル電気泳動PAGE、二次元ポリアクリルアミドゲル電気泳動2DPAGE、キャピラリーゲル電気泳動CGE、キャピラリーゾーン電気泳動CZE、ミセル動電クロマトグラフィーMEKC、フリーフロー電気泳動FFEなどを含む。本明細書に示す様々な態様および実施形態は、さらに、サンプル中で測定された、ここに示すERαポリペプチドまたはここで定義される翻訳後修飾された1つ以上のフォームの量を、前記ポリペプチド量の参照値と比較することに依拠する。ここで前記参照値は、ERα関連ガン、より具体的には、ERα陽性乳ガンの既知の予測、診断およびまたは予後予測を表す。例えば、個別の参照値は、ERα関連ガン、より具体的には、ERα陽性乳ガンのリスクがない又は正常であることに対する、ERα関連ガン、より具体的には、ERα陽性乳ガンのリスクの予測例えば、異常に高いリスクを表すことができる。他の例では、個別の参照値は、ERα関連ガン、より具体的には、ERα陽性乳ガンを有するリスクの度合いが異なることの予測を表してもよい。別の例では、個別の参照値は、ERα関連ガンより具体的にはERα陽性乳ガンであるとの診断に対して、ERα関連ガンより具体的にはERα陽性乳ガンでないとする診断例えば、健康であるとの診断、またはERα関連ガンより具体的にはERα陽性乳ガンから回復したとする診断などを表すことができる。他の例では、個別の参照値は、ERα関連ガン、より具体的にはERα陽性乳ガンの重症度の変化の診断を表してもよい。さらに別の例では、個別の参照値は、ERα関連ガンより具体的にはERα陽性乳ガンの予後不良に対して、ERα関連ガンより具体的にはERα陽性乳ガンの予後良好であることを表してもよい。さらなる例では、ERα関連ガンより具体的にはERα陽性乳ガンの様々な好ましい又は好ましくない予後を表してもよい。このような比較は、一般に、少なくとも1つの差異の有無、必要に応じて、比較される値またはプロファイル間での異なるサイズの有無を決定するためのいかなる手段を含んでもよい。比較は、目視検査、測定値の算術統計比較を含んでもよい。このような統計的な比較は、限定しないが、ルールの適用を含む。もし、値又はバイオマーカープロファイルが、少なくとも一つの標準を含む場合、前記値又はバイオマーカープロファイルにおける差異を決めるための比較は、バイオマーカーの測定が、内部標準の測定に相関するように、これらの標準の測定を含んでもよい。本明細書に示すERαポリペプチド又はその翻訳後修飾されたフォームの一つ以上のフォームの量に関する参照値は、他のバイオマーカーに以前採用されていた公知の手順に従って確立されることができる。例えば、ERα関連ガン、特に具体的にはERα陽性乳ガンの特定の予測、診断およびまたは予後予測のために、本明細書中で示すERαポリペプチド又はその翻訳後修飾されたフォームの一つ以上のフォームの量の参照値は、ERα関連ガン、特に具体的にはERα陽性乳ガンの特定の予測、診断およびまたは予後予測で特徴づけられるすなわち、ERα関連ガン、特に具体的にはERα陽性乳ガンの前記予測、診断およびまたは予後予測される1個体又は個体集団から採取されたサンプル中の、ERαポリペプチド又はその翻訳後修飾されたフォームの一つ以上のフォームの量のために確立されることができる。そのような集団には、限定しないが、≧2、≧10、≧100、あるいは数百人以上含まれ得る。したがって、例示的な例により、ERα関連ガンより具体的にはERα陽性乳ガンであるか、ガンでないかを診断するための、本明細書中で示すERαポリペプチドの量又はその翻訳後修飾されたフォームの一つ以上の量の参照値は、例示的な例の手段を用いて、診断される1個体又は個体の集団からのサンプル中の、ERαポリペプチド又はその翻訳後修飾されたフォームの一つ以上の量を、例えば、臨床徴候と症状、イメージング、マンモグラフィ等のような他の適切な決定手段に基づきそれぞれERα関連ガンを有しているか否かとして決定することにより、確立することができる。ある実施形態では、本明細書中で意図された参照値は、本明細書に示すERαポリペプチド又はその翻訳後修飾されたフォームの一つ以上のフォームの絶対量を示すことができる。別の実施形態において、テストされる被験者から採取されるサンプル中のERαポリペプチド又はその翻訳後修飾されたフォームの一つ以上のフォームの量は、参照値に対して直接的に決めることができる例えば、増加又は減少として、あるいは何倍かの増大又は何倍かの減少として。ここでは、被験者のサンプル中のERαポリペプチド又はその翻訳後修飾されたフォームの一つ以上のフォームの量を、ERαポリペプチド又はその翻訳後修飾されたフォームの一つ以上についてそれぞれの絶対量をまず測定する必要なしに、参照値と比較させる換言すれば、被験者のサンプル中のERαポリペプチド又はその翻訳後修飾されたフォームの一つ以上のフォームvs参照値の相対量を測定するという利点がある。実施形態では、本方法は、参照値1つ又は複数を確立するステップを含んでもよい。実施形態では、本キット及びデバイスは、ERα関連ガン、より具体的には、ERα陽性乳ガンの特定の予測、診断、及び/又は予後予測のために、本明細書中で示すERαポリペプチド又はその翻訳後修飾されたフォームの一つ以上のフォームの量の参照値を作成する手段を含んでもよい。このような手段は、例えば、ERα関連ガン、より具体的には、ERα陽性乳ガンの特定の予測、診断、及び/又は予後予測によって特徴づけられる1以上の個体からの1つのサンプル例えば、分離またはプールされたサンプルを含んでもよい。本明細書に示す様々な態様及び実施形態は、さらに、与えられた参照値と、測定された個体のサンプル中の、本明細書中で示すERαポリペプチド又はその翻訳後修飾されたフォームの少なくとも1つの量との間で、偏差の有無を発見することを伴ってもよい。第2の値からの第1の値の偏差deviationは、いずれかの方向づけ例えば、第1の値>第2の値のときは増大、第1の値<第2の値のときは減少及び任意の換算にまで、一般に、拡張される。例えば、特に限定しないが、偏差は、比較される第2の値に対して第1の値が、少なくとも約10約09倍以下、又は少なくとも約20約08倍以下、又は少なくとも約30約07倍以下、又は少なくとも約40約06倍以下、又は少なくとも約50約05倍以下、又は少なくとも約60約04倍以下、又は少なくとも約70約03倍以下、又は少なくとも約80約02倍以下、又は少なくとも90約01倍以下減少していることに拡張してもよい。例えば、特に限定しないが、偏差は、比較される第2の値に対して第1の値が、少なくとも約10約11倍以上、又は少なくとも約20約12倍以上、又は少なくとも約30約13倍以上、又は少なくとも約40約14倍以上、又は少なくとも約50約15倍以上、又は少なくとも約60約16倍以上、又は少なくとも約70約17倍以上、又は少なくとも約80約18倍以上、又は少なくとも90約19倍以上、又は少なくとも約100約2倍以上、又は少なくとも約150約25倍以上、又は少なくとも約200約3倍以上、または少なくとも約500約6倍以上、または少なくとも約700約8倍以上等、増大していることに拡張してもよい。好ましくは、偏差は、統計的に有意に観察される変化をいい得る。たとえば、偏差は、与えられた集団における参照値について、誤差の許容範囲外となる、観察される変化例えば、標準偏差や標準誤差によって、または所定の倍数、例えば、±1xSDまたは±2xSD、又は±1xSEまたは±2xSEをいい得る。また、偏差は、与えられた集団における値により定義される参照範囲外の値例えば、前記集団の値の≧40、≧50、≧60、≧70、≧75又は≧80又は≧85または≧90、≧95以上であってもよく、さらには≧100もいい得る。さらなる態様において、偏差は、観察される変化が所定の閾値又はカットオフ値を超えるかどうかを結論づけることができる。かかる閾値又はカットオフ値は、一般に、当該分野で知られており、予測、診断および/または予後予測の方法の選ばれた感度及び/又は特異性、例えば、少なくとも50又は少なくとも60または少なくとも70または少なくとも80または少なくとも85または少なくとも90または少なくとも95の感度およびまたは特異性として、提供される。例えば、一実施形態では、被験者からのサンプル中の、本明細書中で示すERαポリペプチド又はその翻訳後修飾されたフォームの一つ以上のフォームの量の増大した量が、ERα関連ガン、具体的にはERα陽性乳ガンでないという予測又は診断を示す、あるいはERα関連ガン、具体的にはERα陽性乳ガンの良好な予後を示す参照値と比べて、約11倍から3倍の上昇、又は15倍から2倍の上昇、好ましくは少なくとも11倍の上昇、または少なくとも約12倍の上昇、より好ましくは少なくとも約13倍の上昇、さらにより好ましくは少なくとも14倍の上昇、さらにより好ましくは少なくとも約15倍の上昇のときには、被験者はERα関連ガン、具体的にはERα陽性乳ガンを有している又は有しているリスクがあること、あるいは被験者におけるERα関連ガン、具体的にはERα陽性乳ガンの予後がよくないことを示す。被験者からのサンプル中の、本明細書中で示すERαポリペプチド又はその翻訳後修飾されたフォームの一つ以上のフォームの量と、ERα関連ガン、具体的にはERα陽性乳ガンについてのある予測、診断及び/又は予後予測を表す参照値との間で、偏差が見出されるとき、その偏差は、前記被験者におけるERα関連ガン、具体的にはERα陽性乳ガンについての予測、診断及び/又は予後予測が参照値によって表されるものと異なるとの結論を示す、あるいは当該結論に帰することができる。被験者からのサンプル中の、本明細書中で示すERαポリペプチド又はその翻訳後修飾されたフォームの一つ以上のフォームの量と、ERα関連ガン、具体的にはERα陽性乳ガンについてのある予測、診断及び/又は予後予測を表す参照値との間で、偏差が見出されないときには、かかる偏差がないことは、前記被験者におけるERα関連ガン、具体的には前記被験者におけるERα陽性乳ガンについての予測、診断及び/又は予後予測が参照値によって表されるものと実質的に同じであるとの結論を示す、あるいは当該結論に帰することができる。以前に報告されたERαの合成ペプチドフラグメントP295T311は、前記レセプターの活性のための調節因子であるらしいギャロら、2007年、MolCellEndocrinol268:3749;ギャロら、2007年、LettersinDrugDesignDiscovery4:346355。我々の研究は、それが実際に受容体の自己阻害剤autoinhibitorモチーフであり、ERαレセプターにおいて当該モチーフが欠失すると、恒常的な転写活性を生じることを示したギャロら、2007年、MolCellEndocrinol268:3749;ギャロら、268:3749;ギャロら、2007年、LettersinDrugDesignDiscovery4:346355。したがって、受容体が活性になるためには、このモチーフによって表される抑圧のスイッチをオフにしなければならないようだギャロら、2007年、LettersinDrugDesignDiscovery4:346355;Jacquotら、2008年、JSteroidBiochemMolBiol104:110。この原理に一致して、我々は、合成ERα17pペプチドで誘導される競合が、ERαレセプターの転写活性を増大させることを示したギャロら、2007年、MolCellEndocrinol268:3749;ギャロら、2007年、LettersinDrugDesignDiscovery4:346355。同様に、ERα陽性である乳ガン細胞細胞株の細胞増殖においても増大するが、ERα陰性の細胞株では増大しないギャロら、2007年、MolCellEndocrinol268:3749;ギャロら、2008年、JSteroidBiochemMolBiol109:138149。エストラジオールにさらされると、ERα受容体は急速に、ユビキチン化され、プロテアソームによって分解されるNawazら、1999年、ProcNatlAcadSciUSA96:18581862;EIKissiinら、1999年、FEBSLett448:160166。例えば、MG132、ラクタシスチン等を用いるプロテアソームの阻害がERα依存性の転写を減少させるという観察は、前記転写の減少が、最適な転写の確保のために必要であることを提案しているNawazら、1999年、ProcNatlAcadSciUSA96:18581862;EIKissiinら、1999年、FEBSLett448:160166;Laiosら、2005年、JSteroidBiochemMolBiol94:347359;ギャロら、2008年、NuclReceptSignal6:e007。本発明は、前記仮説のプロセスを調整するための役割をになっている内因性ペプチドを同定した。エストラジオールで処理したMCF7ヒト乳ガン細胞株の馴化培地から、ERαの分解産物ポリペプチド配列番号2:K268RQRDDGEGRGEVGSAGDMRAANLWPSPLMIKRSKKNSLALSLT311を本発明において同定した。全長のERαタンパク質配列番号3によりコードされ、配列番号4であらわされるの分解産物である。さらに、本発明者らは、前記内因性の分泌されたタンパク質は、K268、R269、K303のメチル化、M286の酸化、S282のリン酸化といった翻訳後修飾を含んでいてもよいことを示すことができた。303番目位置のリジンは、高度の乳ガンで変異していることが知られているFuquaら、2000年、CancerRes60:40264029;Herynkら、2004年、EndocrRev25:869898;Conwayら2005年、BrestCancerRes:R871R880。本発明者らは、これらの修飾は、プロテアソームによるERα受容体の分解の前に正しく起こると仮定している。そこで我々は、これらの修飾が受容体の機能に大きな影響を及ぼし、乳ガンの診断に重要であるかもしれないと信じる。ERαの分泌されたポリペプチドは、当初、以下の実施例で示すように、エストラジオールで処理したMCF7細胞の馴化培地について実施された質量分析により同定した。結果は、ERα結合抗体G20、サンタクルス社を用いた免疫沈降後に、MCF7細胞の馴化培地のウェスタンブロット分析によって確認した。図3に示すように、この実験の結果は、エラストジオールが、ここで同定された内因性ペプチドの生産を増大させる一方、4OHタモキシフェン及びフルベストラントは、その生産を減少させることを示している。また驚くべきことに、ジエチルスチルベストロールは、わずかにポリペプチド産生を減少させる。従って、本発明は、前記ERα受容体の内因性分泌物ペプチド、およびその翻訳後修飾に特異的な抗体を同定するための道を開いた。本発明は、本明細書で発見されたメカニズムを用いることにより、プロテアソームの阻害剤の効果の研究を想定している。この観点での典型的なアッセイは、以下の工程を含む:aプロテアソーム候補モジュレーターの存在下または不在下で、ERα陽性細胞株及び/またはその馴化培地中での、本発明で同定されたERαポリペプチドの存在を検出する工程であって、ERαポリペプチドの量が変化していたら、その薬剤はプロテアソームモジュレーターであることを示す工程。典型的には、用語モジュレートmodulatingには、約5,10,15,20,25,30,35,40,45,50,55,60,65,70,75,80,85,90,95あるいは100の変化さえも含まれる。ERαポリペプチドの量を減少させるモジュレーターは、ERα陽性ガン、好ましくは乳ガン、子宮内膜ガン、子宮ガン、卵巣ガンなどのERα関連疾患の治療のために使用することができる。本発明では、MCF7乳ガン細胞株を用いたが、これは当然のことながら、本発明の範囲を限定するものではない。本明細書で定義されるように、ERα陽性または、コントロール実験のための陰性である他の細胞株は、それぞれのアッセイおよび方法で使用することができる。これらは、上市されている細胞株であってもよいし、又は単離されることもできるし、既存のヒト乳ガンの生検から樹立することもできる。特に限定しないが、aERα陽性細胞株:MCF7、T47D、BT20など、およびbERα陰性細胞株:MDAMB231、SKBR3、HS578Tなどが挙げられる。本発明は、本明細書において同定された内因性ペプチドに対応する合成ペプチドを提供し、必要に応じて、翻訳後修飾の1以上も併せて提供する。本発明は、さらに、以下の工程を含む、ERα受容体の阻害剤を同定するための方法を提供する:a候補阻害剤の存在下および不在下で、本発明によるペプチドと、ERα陽性細胞を接触させる工程;及びb候補阻害剤の存在下および不在下で、エストラジオールが存在するときの前記細胞株のエストラジオール応答性およびまたは増殖率を分析する工程であって、前記応答及び/又は増殖が減少していると、その候補阻害剤は、実際に阻害剤であることを示しているとする工程。本発明はまた、ERα依存性遺伝子の内因性転写に対するERαポリペプチドの効果の研究をも想定している。この点での典型的なアッセイは、以下の工程を含む:aERαポリペプチドを用いて、MCF7細胞などのERα発現細胞を処理する工程;b前記ERαポリペプチドに対する応答における、E2、代表的には、プロゲステロン受容体またはTFF1によって調節されることが知られている遺伝子の発現のウェスタンブロット、ノーザンブロット、RTPCR法による分析工程。また、本発明は、レポータ遺伝子のERα依存性転写に対するERαポリペプチドの効果の研究を想定している。この点で典型的なアッセイは、以下の工程を含む:aERαを発現する天然または異所性発現細胞モデル酵母または哺乳動物細胞株でのERE作動性レポータ遺伝子の安定的または一過性のトランスフェクション;bERαポリペプチドを用いる前記モデルの処理;cERαポリペプチドの存在下でのレポータ遺伝子の発現の評価蛍光法luminometryまたは比色法。本発明はまた、ERαポリペプチドに対して産生された抗体の、ERα依存性転写についての効果の研究も想定している。この点で典型的なアッセイは、以下の工程を含む:aERαポリペプチドに対して惹起された抗体を用いて、MCF7細胞などのERα発現細胞を処理する工程;b前記抗体の存在又は不在下で、E2、典型的にはプロゲステロン受容体またはTFF1により調節されることが知られている遺伝子の発現の差異のウェスタンブロット、ノーザンブロットまたはRTPCR法による評価工程。本発明はまた、本発明で同定されたERαポリペプチドを発現することができるプラスミドの研究も想定している。この点で典型的なアッセイは、以下の工程を含む:aこのポリペプチドをコードするプラスミドを設計する工程;b細菌細胞内で該プラスミドを形質転換し、増殖させる工程;c前記プラスミドを、ヒトガン細胞株にトランスフェクションし、ERα依存性転写の減少又は細胞増殖の基底の減少およびまたはE2誘導型の細胞増殖の減少により反映されることができるERα活性の調節を評価する工程。典型的には、用語調節するmodulatingには、約5,10,15,20,25,30,35,40,45,50,55,60,65,70,75,80,85,90,95あるいは100の変化でさえ、含むことができる。ERαの分解は、ホルモン刺激を増大させることができるエストロゲン様ペプチドの出現を誘発し、これにより、例えば乳ガン細胞のようなERα関連のガン細胞の増殖を誘発することができるので、本発明は、ERα関連ガンまたは疾患好ましくは乳ガン、卵巣ガン、子宮内膜ガンや子宮頸ガンに罹患している患者の診断のための新たな手法やツールを提供する。本発明の臨床結果は、非常に重要である。なぜなら、それは、ERα受容体の活性化経路に直接作用することができるからである。ERα受容体およびまたはそのダウンストリーム因子との相互作用から、本発明で定義されるペプチドをブロックすることにより、ホルモン応答性の腫瘍細胞の増殖につながる、ERα活性化経路を抑制することができる。阻害剤、抗体またはワクチン接種により、前記ERαペプチドを捕捉することは、ERα陽性のガンなどのホルモン依存性のガンの新しい有望な治療戦略を構成する。本発明は、ERα関連疾患、そして、いくつかの好ましい実施形態では、ERα陽性乳ガンを対象とする方法および組成物を提供する。このようなERα関連疾患としては、例えば、卵巣ガン、子宮内膜、子宮頸ガン、肺ガン、頭頸部ガン、黒色腫、髄膜腫、胸腺腫およびリンパ腫を含む。いくつかの特定の実施形態において、本発明は、乳ガン発症のリスクを有する個体、あるいは乳ガンの治療をすでに受けた又は受けていない個体における、ERα陽性乳ガンの予防、治療、または予防兼治療に関する。先に述べたガン治療は、手術、化学療法、ホルモン療法、放射線、またはこれらの組み合わせを含むことができる。特定の実施形態では、ERα陽性ガンのために既に治療を受けた個体は、寛解期のガンを持っている。当業者は、再発は、発生元で認められたものと同じタイプのガンであるとは限らないと認識している。よって、特定の実施形態では、ガンを有していたすべての個体は、元の病因にかかわらず、本明細書に記載の方法及び組成物を用いる予防及び治療の候補となる。さらに、ガン発症のリスクがある個体又は乳ガンの再発リスクを有する個体は、特に、本明細書に記載の方法および組成物を用いて治療を受けることに適している。当業者は、ライフスタイルや環境要因、遺伝的要因などのガン発症の複数の危険因子を、それぞれの個体について認識する。さらに、当業者は、ガン発症の増大したリスク、特に前ガン的疾病を伴うことを示す、病理組織学及び特定の変異を認識している。通常、ガンは、手術、放射線療法、化学療法、及びホルモン療法の様々な組み合わせによって治療される。予後予測、さらには治療の選択は、患者の年齢、閉経状態、疾患の病期、原発腫瘍の組織学的および核グレード、エストロゲン受容体APHAERαとプロゲステロン受容体PRの状態、増殖能の測定、およびHER2neu遺伝子増幅の影響を受けることがあるシンプソンら、2000年。本発明は、配列番号2のアミノ酸配列、好ましくは配列番号2のアミノ酸配列からなるERαペプチド、最も好ましくはK268、R269、K303のメチル化、およびまたはS282のリン酸化といった翻訳後修飾の1以上を含む、単離されたERαp44ペプチドを含む組成物を、さらに提供する。このペプチドは、内因性タンパク質材料から単離することができ、または宿主細胞における組換え発現を経て合成または製造することができる。本発明の組成物中のポリペプチドは、BSAまたはKLHのようなキャリア分子に結合させることができ、または、脂質粒子、ナノカプセル、リポソーム、または脂質小胞などの脂質組成物内に含まれることができる。好ましくは、前記組成物は、薬学的賦形剤を含むことを特徴とする。本発明はさらに、配列番号2のアミノ酸配列によって定義されるERαp44ペプチドをコードする、例えば、配列番号1によって定義された単離された核酸分子を含む、好ましくは前記核酸分子からなる組成物を提供する。前記核酸分子またはポリヌクレオチドは、さらに、細菌、酵母、哺乳動物またはヒト細胞などの宿主細胞において、cDNA、DNA、RNA、mRNAの形態で、または組換え発現のための適当なベクター中で、存在することができる。本発明に係る組成物は、腫瘍およびまたはガンに対するワクチン接種に使用することができる。従って、本発明は、ワクチンとしての使用およびまたはワクチン接種での使用のための、本発明の組成物の使用を提供する。好ましい実施形態では、前記ワクチン接種は、ヒトER陽性ガン、より好ましくは乳ガン、卵巣ガン、子宮内膜ガン、または子宮頸ガンに対する。本発明による組成物は、腫瘍およびまたはガンを予防または治療するためのワクチンの製造、あるいはガン阻害剤の製造のために使用することができる。本発明は、さらに、腫瘍およびまたはガン、好ましくは乳ガンの治療に使用するための薬剤またはワクチンの製造における、本発明による組成物の使用を提供する。本発明はさらに、ワクチン接種で使用するための本発明に係る核酸又はペプチドの使用を提供する。ポリペプチドを用いたワクチン接種は、当技術分野でよく知られている。一般に、ペプチドは、典型的には、例えばBSAまたはKLHのようなキャリア分子に連結又は融合させて、免疫応答を誘発するために1つ以上のアジュバントと組み合わせられる。ポリヌクレオチドが用いられる場合には、前記核酸は、本発明のペプチド例えば、配列番号2を発現する宿主細胞の中へ、あるいは例えば、ガン増殖を減少させるために、免疫応答が誘発される宿主細胞へ、あるいは前記宿主細胞がアポトーシス作用に代えて、そのペプチドを送達するところへ、導入される。前記核酸の送達は、DNA分子の直接投与により、あるいは遺伝子治療の技術分野で知られている細菌やウイルス発現系を介して行うことができる。DNAワクチン接種の一般的な方法論は、当技術分野でよく知られている。最近では、リンパ節又は樹状細胞への直接のRNA注入は、抗原特異的抗体産生細胞を産生することが示された。従って、本発明は、本発明によるペプチドをコードする単離された核酸を提供する。好ましい実施形態では、前記核酸は、配列番号2で定義されるペプチドをコードし、配列番号1で同定される。したがって、本発明は、腫瘍およびまたはガンを治療するための薬剤またはワクチンの製造における本発明の核酸の使用、あるいは腫瘍およびまたはガンの治療に用いる医薬やワクチンの製造における前記核酸の使用を提供する。さらに、本発明は、本明細書で定義されるERαp44ペプチドを発現する組換えベクターを提供する。かかる組換えベクターは、遺伝子治療に使用することができ、これにより前記核酸が宿主に導入され、前記宿主中でエンコードしているペプチドを発現させるために用いられる。発現したペプチドは、その後おそらく、ER陽性腫瘍細胞を標的とされている宿主において免疫応答を誘発することができる。前記組換えベクターは、ガンを治療するための薬剤またはワクチンの製造に使用することができ、あるいはガンの治療に使用するための薬剤やワクチンの調製に使用することができる。ワクチン接種のための、本発明のポリペプチドをコードするRNAまたはDNAのウイルス送達は、既知の方法論を用いて想定されている。さらに、本明細書において定義された核酸、ポリペプチドまたは組換えベクターを発現する組換え宿主細胞は、本発明により想定されており、同様に、ガンを治療するための医薬やワクチンを製造するためのその使用も想定される。好ましくは、前記組換え宿主細胞は、ヒト細胞、ガン細胞、またはガン細胞株などの哺乳動物細胞または細胞株、あるいは、前記組換え宿主細胞は、例えば、大腸菌、サルモネラ属、又はシュードモナス細胞などの細菌細胞であってもよい。本発明は、さらに、細胞内でのエストロゲン受容体活性を低下させる方法を提供する。かかる方法は、本明細書で定義される阻害剤組成物の有効阻害量を、前記細胞に提供する方法である。好ましい実施態様では、前記細胞は、動物内に含まれ、前記組成物は前記動物に投与される。好ましくは、前記細胞は動物細胞であり、より好ましくは前記細胞は、ガン好ましくは乳ガンを有する動物内に含有される。本発明はさらに、ガン細胞の増殖を抑制する方法を提供する。かかる方法は、治療有効量の、本明細書で定義したERα受容体の阻害剤を、前記ガン細胞に提供する工程を含む。さらに、本発明は、本明細書で定義されるポリペプチド、本明細書で定義される核酸、本明細書で定義される組換えベクター、本明細書で定義される宿主細胞を、前記被験者に提供する工程を含む方法を提供する。さらに、本発明は、動物内のガン及び/又は腫瘍を治療する方法を提供する。かかる方法は、本発明のワクチンすなわち、本発明の核酸又はポリペプチドを含んでいるの治療有効量を前記動物に投与する工程を含む。好ましくは、前記組成物を、静脈内、経口、非経口、局所、又は吸入剤、エアロゾルまたはスプレーとしての投与のための薬学的賦形剤に配合される。好ましくは、前記動物はヒトである。代替的な実施形態では、動物のERα陽性ガンを治療する方法は、さらに、少なくとも第二の抗ガン剤、例えばシクロホスファミド、メトトレキサート、フルオロウラシル、アドリアマイシン、タモキシフェン、ドキソルビシン、エトポシド、ベラパミル、ポドフィロトキシン及びこれらの類似体又は塩を、前記動物に投与する工程を含む。本発明は、さらに、配列番号2のアミノ酸配列からなるポリペプチドに結合する結合分子を提供する。好ましくは、前記結合分子は、配列番号2で定義されるポリペプチド、すなわちK268、R269、K303のメチル化、および/またはS282のリン酸化といった1つ以上の翻訳後修飾を含んでいるポリペプチドに特異的に結合する。前記結合分子としては、ここでは、抗体、モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体、ナノボディ、アフィボディ、抗体フラグメント、アプタマー、フォトアプタマー、オリゴヌクレオチド、リポカリン、特異的に相互作用する低分子、分子インプリンティングポリマーMIPs、DARPins、アンキリンス、特異的に相互作用するタンパク質、ペプチドミメティックス、バイオミメティクスまたはペプチド、及び前記ペプチドに特異的に結合するその他の分子が想定される。本発明のバイオマーカーの1つと結合するモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体または単鎖抗体またはそのフラグメントの双方が、本発明の方法及びキットに有用である。このような結合分子はまた、ERα機能の阻害剤として作用することができる。従って、本発明はまた、ガンを治療するための、又はガンを治療するための医薬の製造に用いるためのERαの阻害剤を含む医薬組成物を提供する。好ましくは、前記阻害剤は、配列番号2によって定義される本発明のポリペプチドに特異的に結合する結合分子、必要に応じて、K268、R269、K303のメチル化、およびまたはS282のリン酸化の1つ以上の翻訳後修飾を含む配列番号2によって定義される本発明のポリペプチドに特異的に結合する結合分子である。好ましい実施形態では、前記結合分子は、抗体またはそのフラグメントである。あるいは、本発明の抗体に、検出可能な標識を結合してもよい。上記で示すような阻害剤は、独立的に用いることができる。すなわち、例えば、本発明の前記ポリペプチドの検出のためだけに、医薬組成物内で用いられるものではない。したがって、本発明は、本明細書で定義されるポリペプチドに特異的に結合する能力により定義されるような、ERα受容体タンパク質の阻害剤、好ましくは配列番号2によって定義され、必要に応じてK268、R269、K303のメチル化、およびまたはS282のリン酸化の1つ以上の翻訳後修飾を含む配列番号2により定義される本発明のポリペプチドに特異的に結合する能力により定義されるような、ERα受容体タンパク質の阻害剤を提供する。好ましい実施形態では、前記結合分子は、抗体またはそのフラグメントである。さらに、乳ガンを発症するリスク、又は乳ガンの再発リスクにさらされている個体は、特に本明細書に記載の方法および組成物を用いる治療を受けるのに好適である。当業者は、ライフスタイルや環境要因、遺伝的要因などを含めて、乳ガン発症の複数のリスク要因を、それぞれの個体について認識する。さらに、当業者は、乳ガン発症、特に前ガン病変を有する増大したリスクを示す病理組織学及び特異的変異を認識する。乳ガンは、一般に、手術、放射線療法、化学療法、及びホルモン療法の様々な組み合わせによって治療される。予後予測さらには治療の選択は、患者の年齢、閉経状態、疾患の病期、原発腫瘍の組織学的および核グレード、エストロゲン受容体ERおよびプロゲステロン受容体PR状態、増殖性の測定、およびHER2neu遺伝子増幅により影響を受けることがあるシンプソンら、2000年。従って、本発明の目的には、個体内の1つ以上のガン細胞の発症や増殖を防止する方法がある。当該方法は、本発明のERα44pペプチド、ERα44pペプチドをコードする核酸分子を含み、必要に応じて、アジュバントと組み合わせた、ワクチンまたは組成物を、個体に投与する工程を含む。本質的には、本明細書で定義した組成物またはワクチンは、ガン細胞上のERαタンパク質またはそのフラグメントの増殖誘導活性を阻害する意図をもって、本明細書で定義されるERαタンパク質またはそのフラグメントの分解産物ペプチドに対する免疫応答を、治療中の個体において誘発させるように用いられる。実施例で示すように、短い合成ERα17pペプチド配列番号29及び長い自然発生のERα44pポリペプチド配列番号2の双方が、ガン細胞の増殖を誘導することができる。したがって、本発明は、44アミノ酸ポリペプチド及び当該ポリペプチドの少なくとも17pペプチド配列を含むフラグメントのいずれも標的とすることを想定するようにみるべきである。これらのフラグメントはいずれも、少なくとも17p活性フラグメントを含むポリペプチドに対する免疫応答を生じるだろう。本発明は、エストロゲン受容体α関連ガンまたは疾患に罹患している患者の診断のための新規な方法及びツールを提供する。ERαの分解は、ホルモンの刺激を増幅することができるエストロゲン様ペプチドの出現を引き起こし、これにより、例えばER陽性乳ガン、卵巣ガン、子宮内膜や子宮頸ガン細胞のようなエストロゲン受容体α関連ガン細胞が増殖するからである。本発明の臨床結果は、非常に重要である。それは、我々が、ERα受容体の活性化経路に直接作用するようにできるからである。ERα受容体及び/又はそのダウンストリーム因子群との相互作用から本発明により定義されるペプチドをブロックすることで、ホルモン応答性の腫瘍細胞の増殖につながる、ERα活性化経路を抑制することができる。阻害剤、抗体による、又はワクチン接種による前記ERαペプチドの捕捉は、ERα陽性乳ガンなどのホルモン依存性ガンのための新しい有望な治療戦略を構成する。本発明は、エストロゲン受容体α陽性ERα陽性ガンに向けての診断方法を提供し、いくつかの好ましい実施形態では、ERα陽性乳ガンを対象とする診断方法を提供する。このような、ERα陽性ガンは、例えば:卵巣ガン、子宮内膜、子宮頸ガン、肺ガン、頭頸部ガン、黒色腫、髄膜腫、胸腺腫およびリンパ腫を含む。いくつかの特定の実施形態においては、本発明は、乳ガン発症のリスクを有する個体、または乳ガンの治療をすでに受けている又は受けていない個体におけるERα陽性乳ガンの診断に関する。前述の乳ガン治療は、手術、化学療法、放射線、またはそれらの組み合わせを含むことができた。特定の実施形態では、ERα陽性乳ガンに対する治療をすでに受けている個体は、寛解期のガンを有している。再発する乳ガンが、発生元で認められたものと同じタイプのガンであるとは限らないことを当業者は認識している。したがって、特定の実施形態では、乳ガンを有しているすべての個体が、元の病因にかかわらず、本明細書に記載の組成物及び方法を用いる予防及び治療のための候補となる。本発明のさらなる目的は、下記工程を含む、抗ガン剤または化合物をスクリーニングする方法にある:aガン細胞を、本発明で同定されたERαポリペプチドと接触させる工程;b前記細胞を、抗ガン剤候補の物質又は化合物と接触させ、前記候補の物質又は化合物の存在下および不在下で、前記細胞の増殖を測定する工程を含み、前記候物質又は化合物の存在下で細胞増殖が減少していると、それが抗ガン剤であることを示し、前記ガンはERα依存型である。特定の実施形態では、細胞は、例えば、マウス、ラット、ウサギ等の非ヒト動物であることができる。特定の実施形態において、本方法は、薬理学的に許容される賦形剤の中に、前記化合物を含有させる工程を、さらに含んでもよい。特定の実施形態では、試験動物は、誘導又は非誘導性のエストロゲン受容体α陽性乳ガンを有することができる。ERα受容体の分解は、ホルモン刺激を伝達することができるペプチドを生成し、これにより、ホルモン依存性のガン細胞の増殖を促進する。患者の血清中でそのようなペプチドを検出することは、前記患者についてホルモン依存性ガン、例えば、乳ガン、子宮内膜、子宮頸部および卵巣ガンなどのエストロゲン依存性疾患が存在することを簡単かつ迅速に評価できるようにする。抗体のような任意の種類のターゲティング手段を用いて、又はワクチン接種を通じて、前記ペプチドの標的化、あるいは前記ペプチドの作用モードの終結化determiningは、前記疾患の新しい治療法の開発を可能にするだろう。本発明の別の目的は、下記工程を含む抗ガン物質又は化合物をスクリーニングする方法がある:aエストロゲン受容体α陽性乳ガン細胞を、本発明で同定されたERαポリペプチドと接触させる工程;b前記細胞を、抗ガン剤の候補物質又は化合物と接触させ、前記抗がん剤の候補物質又は化合物の存在下又は不在下で前記細胞の増殖を測定する工程を含み、前記抗ガン剤の候補物質又は化合物の存在下で、前記細胞増殖が減少するときは、当該物質又は化合物が抗ガン剤であることを示し、前記ガンはERα依存型である。特定の実施形態では、前記細胞は、例えば、マウス、ラット、ウサギ等の非ヒト動物であってもよい。特定の実施形態において、本方法はさらに、薬理学的に許容される賦形剤中に、当該化合物を含有させる工程をさらに含む。特定の実施形態では、試験動物は、誘導され又は誘導されないエストロゲン受容体α陽性乳ガンを有することができる。本明細書で定義した組成物の使用は、他の既知の化学療法治療、抗ガン治療と組み合わせることができる。併用化学療法としては、例えば、シスプラチンCDDP、カルボプラチン、プロカルバジン、メクロエタミン、シクロホスファミド、カンプトテシン、イホスファミド、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、ニトロソウレア、ダクチノマイシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、プリカマイシン、マイトマイシン、エトポシドVP16、タモキシフェン、ラロキシフェン、エストロゲン受容体結合分子、タキソール、ゲムシタビン、ナベルビン、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、トランスプラチナ、5フルオロウラシル、ビンクリスチン、ビンブラスチンおよびメトトレキサート、またはこれらの任意のアナログまたは誘導体、上記のバリアントが挙げられる。化学療法としては、直接DNAを架橋連結する薬剤、DNAへのインターカレート剤、及び核酸合成に影響を与えることによって染色体異常や細胞分裂異常を引き起こす薬剤が挙げられる。核酸、特にDNAを直接架橋連結する薬剤は、相乗的な抗腫瘍の組み合わせをもたらすDNA損傷に帰着することが想定され、本明細書に示される。シスプラチン、および他のDNAアルキル化剤などの薬剤が用いられることができる。DNAを損傷する薬剤には、また、DNA複製、細胞分裂、染色体分離に干渉する化合物も含まれる。これらの化合物としては、例えば、アドリアマイシンドキソルビシンとしても知られている、VP16エトポシドとしても知られている、ベラパミル、ポドフィロトキシンなどが挙げられる。腫瘍の治療のために臨床の現場で広く使用され、これらの化合物は、静脈内ボーラス注射を介して投与され、投与量の範囲は、アドリアマイシンの場合、21日間隔で25~75mgm2、エトポシドの場合、35~100mgm2の静脈内又は経口投与である。ERα受容体の分解は、ホルモン刺激を伝達することができるペプチドを生成し、それによって、ホルモン依存性のガン細胞の増殖を促進する。患者の血清中において、このようなペプチドを検出することは、前記患者についてホルモン依存性ガン、例えば乳ガンなどのエストロゲン依存性疾患が存在することを簡単かつ迅速に評価できるようにする。抗体などの任意の種類のターゲティング手段を用いて、またはワクチン接種を通じての前記ペプチドの標的化、あるいは前記ペプチドの作用モードの終結化determiningは、前記疾患の新しい治療法の開発を可能にするであろう。二つの核酸またはアミノ酸配列のコンテクストにおいて、本明細書で用いられる用語配列の一致性sequenceidentity又は一致性は、特定領域にわたって最大に一致するように並べたときに、2つの配列の残基が同一であることをいう。同類置換conservativesubstitutionにおいて配列が異なるところでは、配列一致性パーセントは、置換の同類特性conservativenatureのために、上方調整して修正することができる。このような同類置換によって異なる配列は、配列類似性sequencesimilarityまたは類似性を有していると言われる。この調整手段は、当業者によく知られている。本明細書で用いられる場合、配列一致性の割合は、比較ウィンドウを介して2つの最適に整列された配列を比較することによって決定される値を意味し、ここで比較ウィンドウにおける配列の一部は2つの最適に整列された配列について参照配列付加又は欠失は含まないと比較して付加または欠失すなわちギャップを含んでいてもよい。この割合は、同一の核酸塩基またはアミノ酸残基が両方の配列中で現れて一致した位置の数となるように、一致した位置の数を決め、比較ウィンドウの位置の総数で一致した数を割り算し、その結果に100を乗じて配列一致性の割合を得ることにより計算される。配列一致性は、当該分野で認識されている意味を有し、公開された技術を用いて計算することができる。ComputationalMolecularBiology、Lesk編オックスフォード大学出版、1988年;Biocomputing:インフォマティクスとゲノムプロジェクト、スミス編アカデミックプレス、1993年、シーケンスデータのコンピュータ解析、パートI、グリフィングリフィン編、ヒューマナプレス、1994年;分子生物学における配列解析、VonHeinje編アカデミックプレス社1987年、配列解析入門、GribskovDevereux編マクミランストックトンプレス、1991年;及びCarilloLipton、SIAMJAppliedMath48:10731988参照。一般的に2つの配列間の一致性または類似性を決定するために用いられる方法としては、限定しないが、GuideToHugeComputers、Bishop編アカデミックプレス、1994年及びCarilloLipton前掲に開示されている。一致性および類似性を決定する方法は、コンピュータープログラムに集成されている。2つの配列間の一致性と類似性を決定するための好ましいコンピュータープログラム法としては、限定しないが、GCGプログラムパッケージDevereuxら、NucleicAcidsResearch12:3871984;BLASTN、FASTAAtschulら、J.Mol.Biol215:4031990;及びFASTDBBrutlagら、Comp.App.Biosci6:2371990が挙げられる。本発明の製品、キット又は方法のいずれにより提供され、用いられるヌクレオチドは、好ましくは、少なくとも約80の配列一致性、又は約85の配列一致性、または約90の配列一致性、または約95の配列一致性、または約96の配列一致性、または約97の配列一致性、または約98の配列一致性、または約99の配列一致性、あるいは配列番号1で定義されたヌクレオチドと約100の配列一致性を有する。本発明の製品、キット又は方法のいずれかにより提供され、用いられるポリペプチドは、好ましくは、少なくとも約80の配列一致性、又は約85の配列一致性、または約90の配列一致性、または約95の配列一致性、または約96の配列一致性、または約97の配列一致性、または約98の配列一致性、または約99の配列一致性、あるいは配列番号2で定義されたアミノ酸配列と約100の配列一致性でさえも有する。本発明の実施形態は、さらに以下の非限定的な実施例によって説明される。実施例1:分泌されたERαタンパク質の内因性の分解産物ペプチドのinvitroでの検出本例では、本発明者らは、E2で処理された乳ガン細胞株MCF7の培地で、ERα受容体の内因性分解フラグメントを検出し、特徴づけることができた。いずれも質量分析図1及び図2、表1及び表2とウェスタンブロッティング図3による。配列番号30及び配列番号31で定義されている全長アイソフォーム1ヌクレオチド及びタンパク質配列図7及び図8参照に基づくと、検出されるペプチドは、ERαタンパク質配列のK268T311部に対応している。分解産物/ペプチドは、図2及び図8太字下線部分のペプチドで表されるように、配列番号2K268RQRDDGEGRGEVGSAGDMRAANLWPSPLMIKRSKKNSLALSLT311で定義されている。これは、プロテアソーム分解産物ペプチドとしては比較的長い44残基タンパク質であり、予期されないことである。活性ERα受容体すなわち、その標的遺伝子の転写を誘導する受容体は、主に細胞核に存在するので、本明細書において定義されるポリペプチドが、MCF7細胞の培地中に分泌されているという事実は意外であった。したがって、核内受容体の分解産物ペプチドが実際に培地中で検出できることは、興味深い発見である。この発見は、もちろん、分析される被験者の特定のサンプル、すなわち腫瘍またはガン組織に近接または直接接触しているそれらのサンプルについての診断テストへの道を開く。この時点で、E2で処理又は処理しなかったコントロール細胞の馴化培地中に、前記ペプチドは存在し得るけれども、我々は当該ペプチドを質量分析によって検出しなかった。いずれの場合においても、本発明のポリペプチドは、正常すなわち腫瘍でない細胞において検出されない乃至は大変少ないという事実が、乳ガンのようなガン診断における本発明のERαポリペプチドの有用性を示している。本明細書で定義される、ERαポリペプチドで発見された特定の翻訳後修飾も予期しなかったことであり、ERαの活性化及び分解のためのユビキチン化をトリガーするシグナル伝達カスケードの一部であるかもしれない。検出されたペプチドは、天然受容体図2として、以前に報告されていなかった翻訳後修飾を有している。268番目および303番目のリジンは、アセチル化されると以前に説明されポポフら、2007、ステロイド72221230、内因性ペプチド内でのメチル化は、269番目のアルギニンでも同様に見られる。他方、282番目のセリンはリン酸化される。材料および方法馴化培地の調製:2mMグルタミン、100Umlのペニシリン、及び100μgmlのストレプトマイシンを含み、10ステロイドフリーのウシ胎児血清が添加され、フェノールレッドを含まないEMEM中で、48時間、MCF7乳ガン細胞株を培養した。フェノールレッド不含血清抗生物質不含のEMEMで3回洗浄した後、フェノールレッド不含血清抗生物質不含で、2mMのグルタミンだけを含有するEMEM中に溶解したE2リガンドの存在下または不在で、4時間培養した。ペプチドの抽出:遠心分離後、馴化培地に、アセトニトリルACN及びトリフルオロ酢酸酢酸TFAを添加した最終濃度はそれぞれ5及び05。続いて、試料は、その後C18マイクロカラムPierce及びペプチドを通過しており、ペプチドは、H2OACNTFA:307001VVVの溶液を用いて溶出される。このようにして得られたペプチドは、凍結乾燥後、20°Cで保存された。LCMSMS分析:凍結乾燥されたサンプルは、1ギ酸FA容量中に再溶解され、前記ペプチドは、質量分析法によって分析される前に、ジップ先端C18マイクロカラムミリポア社製クロマトグラフィーで再精製される。Ultimate3000デュアルクロマトグラフシステムダイオネクス社を用いて分離された。ペプチドを、プレカラムC18PepMap100、5μm、100Å、300μmdi、長さ5mm、ダイオネクス社にロードし、15分間、15μlminの流量で溶剤Aを用いて脱塩、濃縮した。その後、逆相の極性を備えた分析用カラムC18PepMap100、3μm、100Å、75μmdi、15cm、ダイオネクス社に、220nLminの流量で溶出した。用いたグラデーションは、溶媒BACNH2OAF901001、vvvの0~50の直線濃度勾配であり、続いて、100の溶媒Bで15分間のアイソクラティック勾配とし、最終的に溶媒A中で、15分でカラムが再平衡化するようにした。負荷回路loadingcircuitによって生成することができたポリマーは精製カートリッジC18PepMap100、5μm、100Å、1mmdi、長さ15mm、ダイオネクスにより取り除かれる。溶出されたペプチドは、ガラスイオン化キャピラリーNewObjective社を備えたナノスプレー源装備タイプのハイブリッド質量分析計LTQFTMSLTQFTICR質量分析、ThermoFischerで、その場で検出される。その器具は、モードMSで400~2000Thの質量ガンマ上での、陽性モードにおいて用いられる。結果として得られるデータは、LTQにおける3回のMSMSと並列に、ICRモジュールのMSモードにおけるフルスキャンとモジュールICRにおける3回のSIMスキャン前駆体の±5番目とが交互であるモード高ダイナミックで自動的に取得された。すべてのサイクルが完了した後、最も強い3つのペプチドが、35のエネルギーで、トラップ内にフラグメント化しているために選択される第4の選択ウィンドウ。結果同定されたペプチドの結果を図1に示す。本発明によって同定されたERα分解産物ペプチドの内因性ペプチド配列を、図2に示す。例2:免疫沈降とウェスタンブロット本発明の内因性のERα分解産物ペプチドの高速かつ信頼性の高い検出方法を確立するための原理を証明するために、エストラジオール又は他の関連薬剤で処理した、又は処理していない、MCF7乳ガン細胞株の馴化培地のウェスタンブロット分析で、我々は、本明細書に開示される内因性ペプチドと重なる部分において、ERα受容体の一部を認識することが知られているG20の抗体をテストした図3。アガロースビーズ上に固定化したプロテインGUltraLink登録商標、Pierce100μlで、前洗浄4°Cで2時間した後、馴化培地又はネガティブコントロール用のEMEMは、抗体G20サンタクルスと共にネガティブコントロールを除く、4°Cで一晩、培養された。100μlで固定化タンパクG内で抗体を捕捉した後、樹脂を、着色剤なしで、レムリLaemmliバッファ内で5分間85°Cに加熱する。タンパク質サンプルは、続いて、トリス-トリジン10Invitrogen社製ゲル上で分離され、そのペプチドは、ニトロセルロース膜15メタノール;半乾燥トランスファーBioRad社製装置;24V;015mAで15分に移された。5ミルクで30分間ブロッキングした後、タンパク質は化学発光一次抗体:G201500、2時間、二次抗体:抗ウサギ抗体ピアース、16000;1時間を用いて検出された。実際、これらの予備的な結果は、抗ERαG20抗体サンタクルス社のような抗体は、本明細書に開示されるようなERα受容体の分解生成物ペプチドのウェスタンブロット検出に使用可能であることを示している。捕捉用と検出用の双方について、同じG20の抗体を使用することは、実験において、あるバイアスとなったけれども、我々の予備的な結果は、E2を添加することで、分解産物ペプチドの産生が増加する一方で、4OHタモキシフェンまたはフルベストラントのいずれか一方を添加することにより、分解産物ペプチドの産生が減少することを示している図3。興味深いことに、ジエチルスチルベストロールを添加すると、同様に本発明のペプチドの産生を減少させるように思われる。これらの結果は図3に示されている。当該ペプチドは、エストラジオール108M、ジエチルスチルベストロール108M、4OHタモキシフェン107M又はフルベストラント107Mで、MCF7細胞を処理又は処理しないコントロール馴化培地から抽出された。例3:MCF7乳ガン細胞株における本発明のペプチド例えば、配列番号2のinvitroでの増殖効果本明細書に説明するERαの分解産物ペプチドの分泌が、ERα陽性細胞の増殖に対するエストラジオールの効果をリレー又は増幅できたという原理を証明するために、我々は、この配列配列番号2に対応し、且つ翻訳後修飾を含んでいる合成ペプチドを用いて、MCF7細胞を処理した図4。ERα陽性MCF7乳ガン細胞株を96ウェルプレートに播種した3000細胞ウェル。次いで、105MのERα17pまたは105Mの配列番号2のペプチドで、72時間、細胞を処理又は処理しなかったコントロール。細胞増殖は、クリスタルバイオレット染色によって測定した。簡潔に言えば、細胞培養物をPBSで、穏やかに一回洗浄し、PBS中1グルタルアルデヒドで固定し15分、室温、01クリスタルバイオレットで染色したddH2Oでwv、30分、室温。余分な染料を、流水水道水でそっとすすぎながら除去した後、細胞に結合したクリスタルバイオレットを1トリトンX100ddH2O中のvv、室温、撹拌下で抽出し、550nmで分光分析により測定した。木炭ストリッピング血清10を含むEMEM中で、105Mの配列番号2のペプチドで、MCF7細胞を72時間処理すると、コントロール及びERα17pペプチドよりも高く、顕著に増殖増大を誘導することを示している図4。この結果は、配列番号2のペプチドのエストロゲン活性を証明している。例4:MCF7乳ガン細胞株についての本発明のペプチドに対する抗体のinvitroでの抗増殖効果ここでは、ERαポリペプチドの産生が、ERα陽性の乳ガン細胞に関与していることを証明するために、我々はE2及び/又はこのペプチドペプチドのERα17pのC末端部に対して形成された抗体の存在下または不在下でのMCF7細胞の増殖を評価している図5。ERα陽性MCF7乳ガン細胞株を96ウェルプレートに播種した3000細胞ウェル。次いで、1011Mまたは1012MのE2を含み、ウサギポリクローナル抗ERα17p抗体Gentaurからを含んで又は含まずに、1100に希釈した培地で、72時間、細胞を培養した。細胞増殖は、クリスタルバイオレット染色によって測定した。簡単に言えば、細胞培養物は、PBSで1回、そっと洗浄し、PBS中の1グルタルアルデヒド15分、室温で固定し、01クリスタルバイオレットddH2Oでwv、30分、室温により染色した。流水水道水でそっとすすぐことにより余分な染料を除去した後、細胞に結合したクリスタルバイオレットを、1トリトンX100ddH2Oでvv;室温、撹拌下で抽出し、550nmで分光法により測定した。これらの予備的な結果は、本明細書で説明されているERαポリペプチドに対して形成された抗体は、E2が誘導したMCF7細胞の増殖を低下させ得ることを示している図5。例5:ERαの転写活性に対する本発明のペプチド例えば、配列番号2のinvitro効果本明細書で示されているERαの分解産物ペプチドの分泌は、ERαの転写活性に向けて、エストラジオールの効果を伝える又は増強できたという原理を証明するために、我々はMVLN細胞ERE作動型ルシフェラーゼレポーター遺伝子で安定的にトランスフェクトされているMCF7;Ponsら、バイオ技術19909450459を、この配列配列番号2に対応し且つその翻訳後修飾を含んでいる合成ペプチドを用いて、無血清条件で処理した図6。MVLN細胞は、1010MのE2又は105MのERα17p又は105Mの配列番号2のペプチドとともに、10木炭ストリッピング血清処理前を含むEMEMで48時間培養した。無血清条件で6時間処理した後、細胞をPBSで2回洗浄した。ルシフェラーゼ活性は、製造元の指示に従ってルシフェラーゼアッセイシステムPromegaを用いて蛍光法luminometryにより、細胞ライセート中で測定した。予備的な結果は、105Mのペプチド配列番号2でMVLN細胞を6時間処理すると、ERαの転写活性の有意な増加を誘導し、当該ERα転写活性は、コントロール及びERα17pペプチドよりも高い図6。例6:同定された内因性のERα分解ペプチドのフラグメントの免疫原性の解析。具体的には、本発明に従って同定された内因性ペプチドまたはそのフラグメントを特定的に検出できる抗体を開発するために、ペプチドの前記親水性、アクセシビリティ、及び抗原性を評価した。いくつかの興味深い可能なエピトープは、以下の表にリストされ、同定されている。したがって、immuneepitopeorgウェブサイトで利用可能抗体エピトープ予測ツールを用いて行われたコンピュータによる解析によるKRQRDDGEGRGEVGSAGDMRAANLWPSPLMIKRSKKNSLALSLTペプチドの免疫原性フラグメントのいくつかの例を、以下に示す。親水性Parker親水性アルゴリズムによる:7アミノ酸ペプチド:8アミノ酸ペプチド:9アミノ酸ペプチド:10アミノ酸ペプチド:アクセシビリティEmini表面アクセシビリティ予測による:抗原性KolaskarTongaonkar抗原アルゴリズムによるこれらのペプチドに対する抗体は、標準的な技術によって開発される。"