CD122に特に結合して、CD122及びCD132を含む受容体に対するIL2及びIL15の結合を阻害するモノクローナル抗体。CD122に対する結合は、配列番号73における残基の番号である、残基42、43及び又は133をアラニンで置換及び又は残基65をスレオニンで置換及び又は残基70をリジンで置換することによって阻害される、請求項1に記載のモノクローナル抗体。CD122に対する結合は、配列番号73における残基の番号である、残基42及び若しくは43をアラニンで置換並びに又は残基65をスレオニンで置換することによって阻害される、請求項1に記載のモノクローナル抗体。配列番号73における残基の番号である、残基65をスレオニンで置換及び又は残基70をリジンで置換及び又は残基133をアラニンで置換することによって阻害される請求項1に記載のモノクローナル抗体。配列番号73における番号である残基42を含むエピトープに対して特に結合する請求項1に記載のモノクローナル抗体。配列番号73における番号である残基65を含むエピトープに対して特に結合する請求項1に記載のモノクローナル抗体。配列番号73の残基133を含むCD122のエピトープに特に結合する請求項1に記載のモノクローナル抗体。配列番号73の残基42、43、65、70及び又は133を含むCD122のエピトープに特に結合する請求項1に記載のモノクローナル抗体。配列番号73の残基42、43及び65を含むCD122のエピトープに特に結合する請求項1に記載のモノクローナル抗体。配列番号73の残基65、70及び133を含むCD122のエピトープに特に結合する請求項1に記載のモノクローナル抗体。配列番号73のフィブロネクチンタイプIIIドメイン1中のCD122のエピトープに特に結合する請求項1に記載のモノクローナル抗体。配列番号73のフィブロネクチンタイプIIIドメイン1及び2中のCD122のエピトープに特に結合する請求項1に記載のモノクローナル抗体。CD122に対する結合は、配列番号73における番号である残基39又は41をアラニンで置換することによっては検出可能なレベルで阻害されない、請求項1から12のいずれかに記載のモノクローナル抗体。CD122、CD132及びCD25を含む受容体に対するIL2の結合を阻害する、請求項1から13に記載のモノクローナル抗体。IL15Rα又はその断片に結合してトランス提示されているIL15がCD122及びCD132を含む受容体に結合することを阻害する、請求項1から14のいずれかに記載のモノクローナル抗体。CD122、CD132及びIL15Rαを含む受容体に対するIL15の結合を阻害する、請求項1から15のいずれかに記載のモノクローナル抗体。抗体がIL2又はIL15に対して100倍以下のモル過剰で存在する場合、結合阻害は少なくとも30阻害である、請求項1から16のいずれかに記載のモノクローナル抗体。配列番号30の成熟軽鎖可変領域及び配列番号25の成熟重鎖可変領域によって特徴づけられる抗体ABC2、又は配列番号40の成熟軽鎖可変領域及び配列番号35の成熟重鎖可変領域によって特徴づけられる抗体ABC101、CD122に対する特異的結合に関して競合する、請求項1に記載のモノクローナル抗体。ABC2又はABC101と同じ、CD122上のエピトープに結合する、請求項1に記載のモノクローナル抗体。ABC2又はABC101の対応するCDRと少なくとも90の配列同一性を有する、3つの軽鎖CDR及び3つの重鎖CDRを含む、請求項1に記載のモノクローナル抗体。ABC2又はABC101の3つの軽鎖CDR及び3つの重鎖CDRを含む、請求項1に記載のモノクローナル抗体。キメラ型か、ヒト化か、ベニア化か、ヒト型である、請求項1から21のいずれかに記載のモノクローナル抗体。ヒトIgG1カッパアイソタイプを有する、請求項1から22のいずれかに記載のモノクローナル抗体。完全な抗体である、請求項1から23のいずれかに記載のモノクローナル抗体。単鎖抗体、Fab又はFab2断片である、請求項1から23のいずれかに記載のモノクローナル抗体。CD122に特に結合する、ヒト化かキメラABC2抗体であって、ABC2は、配列番号30の成熟軽鎖可変領域及び配列番号25の成熟重鎖可変領域によって特徴づけられるマウス抗体である、ヒト化かキメラABC2抗体。ABC2軽鎖の3つのCDRを含むヒト化軽鎖及びABC2重鎖の3つのCDRを含むヒト化重鎖を含む、請求項26に記載のヒト化抗体。配列番号42と少なくとも90同一性があるヒト化成熟軽鎖可変領域及び配列番号41と少なくとも90同一性があるアミノ酸配列を有するヒト化成熟重鎖可変領域を含む、請求項26に記載のヒト化抗体。カバット番号付けによる位置H28、H48、H49、H68、H93及びL71がそれぞれ残基T、I、A、I、A及びYによって占められている、請求項26に記載のヒト化抗体。更に、カバット番号付けによる位置H42がGによって占められている、請求項29に記載のヒト化抗体。軽鎖CDRは配列番号2729であり、重鎖CDRは配列番号2224である、請求項26に記載のヒト化抗体。CD122に特に結合するヒト化かキメラABC101抗体であって、ABC101は、配列番号40の成熟軽鎖可変領域及び配列番号35の成熟重鎖可変領域によって特徴づけられる、ヒト化かキメラABC101抗体。配列番号40の3つのCDRを含むヒト化軽鎖及び配列番号35の3つのCDRを含むヒト化重鎖を含む、請求項32に記載のヒト化抗体。配列番号44と少なくとも90同一性があるヒト化成熟軽鎖可変領域及び配列番号43と少なくとも90同一性があるアミノ酸配列を有するヒト化成熟重鎖可変領域を含む、請求項32に記載のヒト化抗体。カバット番号付けによる位置H27、H30、H48、H66、H67、H71及びL49がそれぞれ残基Y、T、M、Q、I、R及びKによって占められ、請求項32に記載のヒト化抗体。軽鎖CDRは配列番号3739であり、重鎖CDRは配列番号3234である、請求項32に記載のヒト化抗体。請求項1から36のいずれかに規定される抗体と医薬的に許容可能な担体とを含む医薬組成物。請求項1から37のいずれかの抗体に関する効果的な投与計画を患者に施すことを含む、患者における望ましくない免疫応答を抑制する方法。患者は、自己免疫疾患に罹患している、請求項38に記載の方法。疾患は、多発性硬化症、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、糖尿病、乾癬、小児脂肪便病又はブドウ膜炎である、請求項38に記載の方法。患者は、喘息又はアレルギーに罹患している、請求項38に記載の方法。患者は、移植片対宿主疾患に罹患している、請求項38に記載の方法。患者は、宿主対移植疾患に罹患している、請求項38に記載の方法。請求項1から43のいずれかの抗体に関する効果的な投与計画を患者に施すことを含む、患者の癌を治療する方法。癌は、検出可能なCD122を発現している、請求項44に記載の方法。残基43、65及び133の1又は複数を含む、配列番号73の100個以下の連続した残基の単離された断片。配列番号73の残基43及び65を含む、請求項の単離された断片。配列番号73の残基65及び133を含む、請求項の単離された断片。配列番号73の10個又は10個より少ない連続した残基を含む、請求項の単離された断片。断片に対する抗体反応の誘発を補助する担体に連結した、及び又は断片に対する抗体反応の誘発を補助するアジュバントを有する組成物のコンポーネントとしてである、請求項の単離された断片。下記実施例は、ヒトCD122に対するモノクローナル抗体の製造、特性評価及びヒト化について述べており、本願に記載の抗体を決定できる結合性特性による例示的な方法も提供する。実施例1マウス抗ヒトCD122モノクローナル抗体の単離2つの形態の免疫原を用いて、マウスの抗CD122反応を誘発したヒトIgG1Fc領域に融合した単離されたヒトCD122細胞外領域と、完全長ヒトCD122及びヒトCD132を細胞表面上に安定して発現しているマウス骨髄腫細胞形質導入体。CD122Fcをコードしている遺伝子は、ヒトCD122細胞外領域コード配列5にヒトIgG1Fcコード配列を融合することによって作成した。CD122Fc遺伝子は、ヒトCMV初期プロモーター制御下の発現ベクターにクローニングした。発現ベクターは、選択のためのgptマーカーも含んでいる。そして、CD122Fc発現ベクターは、エレクトロポレーションによってマウス骨髄腫細胞株NS0へ導入し、形質導入体は、gptマーカーを用いて選択した。形質導入体の使用済み培地をELISAでCD122Fcの分泌物についてスクリーニングし、無血清細胞増殖培養液を使用したハイブリドーマSFMに高生産性細胞株を展開した。CD122Fcは、使用済み無血清培地からプロテインAセファロースアフィニティークロマトグラフィーによって精製した。NS0βγ安定形質導入体は、完全長ヒトCD122及びCD132コード配列の両方を含んでいる発現ベクターをNS0細胞にトランスフェクションすることによって、同様に作成した。細胞表面上に両遺伝子産物を発現している形質導入体は、市販の抗ヒトCD122及びCD132抗体を用いたフローサイトメトリーによって同定された。マウスハイブリドーマの作製は、標準的な手順を用いて行われた。ハイブリドーマ培養液上清を、ELISAによってヒトCD122に対する反応性についてまず初めにスクリーニングした。マイクロタイタープレートをCD122Fc又は無関係なFc融合タンパクで被覆した。マウスハイブリドーマの使用済み培地をマイクロタイタープレートの各ウェルに加えた。インキュベーション後、プレートをPBSによって洗浄し、ペルオキシダーゼ共役ヤギ抗マウスカッパポリクローナル抗体を用いてインキュベーションし、再び洗浄して、ペルオキシダーゼ担体ABTSによって検出した。無関係なFc融合タンパクに対してではなくCD122Fcに対して反応性を示す上清は、CD122に特異的であるとして、そのハイブリドーマを展開した。細胞表面に発現したネイティブヒトCD122に対する反応性は、これらの上清がトランスフェクションしていないNS0ではなく、NS0βγ及びヒトT細胞と反応することがフローサイトメトリーにより示されることによって確認した。ネイティブヒトCD122に対して特異的結合を示す抗体を分泌しているマウスハイブリドーマを個々にサブクローニングし、アイソタイプ化し、そしてモノクローナル抗体精製用無血清培地を用いたハイブリドーマSFMに展開した。マウスIgG2a及びIgG2b抗体は、プロテインAセファロースアフィニティークロマトグラフィーを使用して精製し、マウスIgG1は、プロテインGを使用して精製した。精製されたマウス抗ヒトCD122モノクローナル抗体は、フローサイトメトリーによって通常の細胞及びトランスフェクションした細胞の表面に発現したヒトCD122に対する結合を確認することによってまず初めに特徴付けた。2つの抗CD122抗体、ABC2及びABC101は、CD122結合及び機能アッセイにおいて、それらの初期性能に基づいて選別した。ABC2及びABC101の両方は、ヒト及びカニクイザルCD122に対して特異的に結合し、イヌ及びマウスCD122に対する結合性は著しく欠いていた。実施例2IL15媒介増殖の阻害ヒト赤白血病細胞株TF1の成長は、外因的に供給されるサイトカインに、完全に依存している。TF1は、共通γ鎖及びIL15受容体α鎖を発現するが、IL2IL15受容体β鎖は発現しないため、IL15は、TF1の成長を支えることができない。TF1におけるCD122遺伝子の発現によって、中及び高親和性IL15受容体の発現が可能になり、ヒトIL15が形質導入体の成長を支えることができる。TF1βは、ヒトCD122をコードする遺伝子とピューロマイシン耐性遺伝子を載せた哺乳類発現ベクターによるTF1の安定トランスフェクションによって作製した。TF1βは、ヒトIL15が存在し、ヒトIL15Rαの細胞外領域の一部に結合したヒトIL15の可溶性複合体が供給されると成長する。scIL15IL15Rαは、IL15IL15Rα複合体結合細胞の代わりであり、IL15のトランス提示を表す。IL15IL15Rα断片複合体は、ヒトIL15RαスシドメインをペプチドリンカーでヒトIL15に接続して、6つのヒスチジン残基をカルボキシル末端に加えることによる報告に従うによって構成されたものであり、IL15トランス提示のモデルとなる。トランス提示のIL15によって媒介される細胞増殖を阻害する抗CD122モノクローナル抗体の能力は、TF1β細胞及びscIL15IL15Rαを使用して実験した。典型的実験において、6x104TF1β細胞を、様々な量の精製マウス抗CD122モノクローナル抗体で37°C10分間インキュベートした。そして、10ngmlのscIL15IL15Rαを加えて、細胞を更に72時間37°Cでインキュベートし、その後、テトラゾリウム塩WST8を加えた。WST8での3時間37°Cのインキュベーション後、450nmでの吸光度を測定することによって細胞増殖を推定した。450nmでの吸光度は、デヒドロゲナーゼ活性を示すものであり、生細胞の数に正比例する。試験抗体存在下の増殖レベルを抗体非存在下のものと比較して、阻害活性を決定した。図1に示すように、ABC2及びABC101は、IL15のトランス提示によって媒介されるTF1β細胞の成長を実質的に抑制した。このことから、濃度10μgmlのABC2及び05μgmlのABC101でおよそ50の阻害が示された。シス提示のIL15によって媒介される細胞増殖を阻害する抗CD122モノクローナル抗体の能力も、TF1βを使用して実験した。典型的実験において、6x104TF1β細胞を、様々な量の精製抗CD122抗体で37°C10分間インキュベートした。そして、IL15を10ngml加え、細胞を更に72時間37°Cでインキュベートした。細胞増殖のレベルは、上記の通り、テトラゾリウム塩WST8を使用して測定し、試験抗体がないものと比較した。ABC2及びABC101は、TF1β増殖を、370ngmlの濃度でそれぞれ約75及び40実質的に阻害した。実施例3中親和性及び高親和性IL2受容体を介するIL2媒介増殖の阻害TF1β細胞を使用して、中親和性IL2受容体を介するIL2媒介細胞増殖を阻害する能力についてABC2及びABC101を分析した。典型的実験において、6x104TF1β細胞を、様々な量の精製抗CD122抗体で37°C10分間インキュベートした。そして、IL2を200ngml加え、細胞を更に72時間37°Cでインキュベートした。細胞増殖のレベルは、上記の通り、テトラゾリウム塩WST8を使用して測定し、試験抗体のないものと比較した。ABC2及びABC101の両方とも、TF1β細胞のIL2媒介成長を、80ngmlの濃度で50以上の阻害を示して、実質的にIL2活性を中和した。高親和性IL2受容体を介してIL2媒介細胞増殖を阻害する能力について、ABC2及びABC101を更に実験した。ヒトCD25及びCD122をコードする哺乳類の発現ベクターを用いるTF1の安定トランスフェクションによってTF1αβを作製して、これによって高親和性IL2受容体を発現させた。典型的実験において、6x104TF1β細胞を、様々な量の精製抗CD122抗体で37°C10分間インキュベートした。そして、IL2を10ngml加え、細胞を更に72時間37°Cでインキュベートした。細胞増殖のレベルは、上記の通り、テトラゾリウム塩WST8を使用して測定し、試験抗体のないものと比較した。図2に示すように、ABC2及びABC101は、IL2の存在下で、TF1αβ細胞の成長を実質的に阻害した。10μgmlで、ABC2及びABC101は、TF1β増殖を、それぞれ49及び46阻害した。実施例4重鎖及び軽鎖可変領域の配列決定TRIzol試薬を使用して、およそ107のハイブリドーマ細胞から全RNAを抽出した。5RACE用oligodT付きcDNAをGeneRacerキット、又は、SMARTerRACEcDNAAmplificationキットを使用して供給元の手順に従って合成した。重鎖及び軽鎖用可変領域cDNAは、マウスγ1及びカッパ鎖定常領域に対してそれぞれアニールする3プライマーと、GeneRacerキット又はSMARTerRACEcDNAAmplificationキットにて提供される5RACEプライマーを使用して、ポリメラーゼ連鎖反応法によって増幅した。重鎖可変領域のPCR増幅のために、3プライマーは、配列5GCCAGTGGATAGACAGATGG3、5GCCAGTGGATAGACCGATGG3又は5GCCAGTGGATAGACTGATGG3を有する。軽鎖可変領域のために、3プライマーは、配列5GATGGATACAGTTGGTGCAGC3を有する。増幅されたVH及びVLcDNAは、配列決定のためにpCR4BluntTOPOベクターにサブクローニングした。いくつかの重鎖及び軽鎖クローンを配列決定し、典型的なマウス重鎖及び軽鎖可変領域に対して特有の配列ホモログが同定された。ABC2VHのコンセンサスcDNA及び推定アミノ酸配列は、図3に示される。シグナルペプチド配列は、イタリックである。成熟ポリペプチドのN末端アミノ酸残基は、二重下線を引いている。カバットらの定義に従うCDR配列は、下線を引いている。ABCVHのCDR1、CDR2及びCDR3配列は、それぞれDFYME、ASRNKANDYTTEYSASVKG及びSYYRYDGMDYである。成熟ABC2VHのアミノ酸配列は、EVKLVESGGGLVQPGGSLRLSCATSGFTFSDFYMEWVRQPPGKRLEWIAASRNKANDYTTEYSASVKGRFIVSRDTSQSILYLQMNALRAEDTAIYYCARSYYRYDGMDYWGQGTSVTVSSである。ABC2VLのコンセンサスcDNA及び推定アミノ酸配列は、図4に示される。シグナルペプチド配列は、イタリックである。成熟ポリペプチドのN末端アミノ酸残基は、二重下線を引いている。カバットらの定義に従うCDR配列は、下線を引いている。ABC2VLのCDR1、CDR2及びCDR3配列は、それぞれSAISSVSYMY、DTSNLVS及びQQWNTYPYTである。成熟ABC2VLのアミノ酸配列は、QVVLTQSPVIMSASPGEKVTMTCSAISSVSYMYWYQQKPGSSPRLLIYDTSNLVSGVPVRFSGSGSGTSYSLTISRMEAEDAATYYCQQWNTYPYTFGGGTKLEIKである。ABC101VHのコンセンサスcDNA及び推定アミノ酸配列は、図5に示される。シグナルペプチド配列は、イタリックである。成熟ポリペプチドのN末端アミノ酸残基は、二重下線を引いている。カバットらの定義に従うCDR配列は、下線を引いている。ABC101VHのCDR1、CDR2及びCDR3配列は、それぞれNDNHWWN、YIDSSGSSDNNPSLKS及びGGGRDYYGMDYである。成熟ABC101VHのアミノ酸配列は、DVQLQESGPGLVKPSQTVSLTCTVTGYSITNDNHWWNWIRQVSGSKLEWMGYIDSSGSSDNNPSLKSQISITRDTSKNQLFLQLNSVTIEDIGTYYCARGGGRDYYGMDYWGQGTSVTVSSである。ABC101VLのコンセンサスcDNA及び推定アミノ酸配列は、図6に示される。シグナルペプチド配列は、イタリックである。成熟ポリペプチドのN末端アミノ酸残基は、二重下線を引いている。カバットらの定義に従うCDR配列は、下線を引いている。ABC101VLのCDR1、CDR2及びCDR3配列は、それぞれRASQSVSTSSYSYVH、YASNLES及びQHSWDIPFTである。成熟ABC101VLのアミノ酸配列は、DIVLTQSPASLAVSLGQRATISCRASQSVSTSSYSYVHWYQQKPGQPPKLLIKYASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLNIHPVEEEDTATYYCQHSWDIPFTFGGGTKLEIKである。実施例5ABC2VH及びVLのヒト化ヒト化VH及びVL遺伝子の設計及び構造は、以前から述べられている通りに実行した。マウスABC2VHフレームワークに対するヒトVH配列ホモログは、GenBankデータベース内で検索され、ヒトDA430129cDNAによりコードされているVH配列をヒト化用アクセプターとして選択した。成熟ABC2VH、ヒト化ABC2VH及びヒトアクセプターDA430129VH領域のアミノ酸配列のアライメントは、図7に示されている。配列より上の数字は、カバットらに従う位置を示す。カバットらによって定義されたCDR配列は、ABC2VHアミノ酸配列に下線を引いている。HuABC2VHアミノ酸配列を設計するために、まず初めにマウスABC2VHのCDR配列をDA430129VHの対応する位置へ移した。次に、マウスABC2可変領域の3次元モデルがCDRとの著しい接触を示唆したフレームワークの位置において、マウスABC2VHのアミノ酸残基で対応するヒト残基を置換した。これらの置換は、位置28、48、49、68及び93で実行した。加えて、DA430129VHにおけるヒトフレームワークアミノ酸残基は、対応するV領域サブグループにおいて非定型であることがわかり、典型的残基に置換して潜在的免疫原性を減少させた。この種の置換は、位置42で実行した。HuABC2VHをコードする遺伝子は、シグナルペプチド、スプライスドナーシグナル及び哺乳類の発現ベクターへのクローニングのための適切な限定酵素サイトを含んでいるエクソンとして設計された。HuABC2VH遺伝子のシグナルペプチド配列は、マウスABC2VH遺伝子から誘導した。HuABC2VHエクソンのスプライスドナーシグナルは、ヒト生殖細胞系JH1部分を由来とした。SpeI及びHindIIIサイトが両脇に並んでいる設計HuABC2VH遺伝子のヌクレオチド及び推定アミノ酸配列は、図8に示されている。シグナルペプチド配列は、イタリックで示している。成熟ポリペプチドのN末端アミノ酸残基は、二重下線を引いている。カバットらの定義に従うCDR配列は、下線を引いている。成熟HuABC2VHのアミノ酸配列は、EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDFYMEWVRQAPGKGLEWIAASRNKANDYTTEYSASVKGRFIVSRDDSKNSLYLQMNSLKTEDTAVYYCARSYYRYDGMDYWGQGTTVTVSSである。。マウスABC2VLフレームワークに対するヒトVk配列ホモログは、GenBankデータベースで検索し、ヒトM29469cDNAにコードされているVk配列をヒト化用アクセプターとして選択した。成熟ABC2VL、ヒト化ABC2VL及びヒトアクセプターM29469VL領域のアミノ酸配列のアライメントを図9に示す。配列より上の数字は、カバットらに従う位置を示す。カバットらによって定義されたCDR配列は、ABC2VLアミノ酸配列に下線を引いている。HuABC2VLアミノ酸配列を設計するために、まず初めにマウスABC2VLのCDR配列をM29469VLの対応する位置へ移した。次に、マウスABC2可変領域の3次元モデルから著しいCDR接触が示唆された単一のフレームワークの位置において、位置71におけるマウスABC2VLのアミノ酸で対応するヒト残基を置換した。HuABC2VLをコードする遺伝子は、マウスABC2VL遺伝子のシグナルペプチド配列と、マウス生殖細胞系Jk1部分由来のスプライスドナーシグナルを含むエクソンとして設計された。NheI及びEcoRIサイトが両脇に並んでいる設計HuABC2VL遺伝子のヌクレオチド及び推定アミノ酸配列は、図10に示される。シグナルペプチド配列は、イタリックで示している。成熟ポリペプチドのN末端アミノ酸残基は、二重下線を引いている。カバットらの定義に従うCDR配列は、下線を引いている。成熟HuABC2VLのアミノ酸配列は、EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCSAISSVSYMYWYQQKPGQAPRLLIYDTSNLVSGVPARFSGSGSGTDYTLTISSLEPEDFAVYYCQQWNTYPYTFGGGTKVEIKである。実施例6ABC101VH及びVLのヒト化マウスABC101VHフレームワークに対するヒトVH配列ホモログは、GenBankデータベースで検索し、ヒトDA936142cDNAにコードされているVH配列をヒト化用アクセプターとして選択した。成熟ABC101VH、ヒト化ABC101VH及びヒトアクセプターDA936142VH領域のアミノ酸配列のアライメントを図11に示す。配列より上の数字は、カバットらに従う位置を示す。カバットらによって定義されたCDR配列は、ABC101VHアミノ酸配列に下線を引いている。HuABC101VHアミノ酸配列を設計するために、まず始めにマウスABC101VHのCDR配列をDA936142VHの対応する位置へ移した。次に、位置27、30、48、66、67及び71におけるマウスアミノ酸は、マウスABC101可変領域の3次元モデルがCDRとの著しい接触を示唆したものであり、これらで対応するヒトフレームワーク残基を置換した。これらの位置のアミノ酸残基は、HuABC101VH配列において下線を引いている。HuABC101VHをコードする遺伝子は、マウスABC101VH遺伝子のシグナルペプチド配列と、ヒト生殖細胞系JH6部分由来のスプライスドナーシグナルを含むエクソンとして設計された。SpeI及びHindIIIサイトが両脇に並んでいる設計HuABC101VH遺伝子のヌクレオチド及び推定アミノ酸配列は、図12に示される。シグナルペプチド配列は、イタリックで示している。成熟ポリペプチドのN末端アミノ酸残基は、二重下線を引いている。カバットらの定義に従うCDR配列は、下線を引いている。成熟HuABC101VHのアミノ酸配列は、QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGYSITNDNHWWNWIRQHPGKGLEWMGYIDSSGSSDNNPSLKSQITISRDTSKNQLSLKLSSVTAADTAVYYCARGGGRDYYGMDYWGQGTTVTVSSである。マウスABC101VLのヒト化のために、ヒトZ46622cDNAにコードされているVk配列をアクセプターとして選択した。成熟ABC101VL、ヒト化ABC101VL及びヒトアクセプターZ46622VL領域のアミノ酸配列のアライメントを図13に示す。配列より上の数字は、カバットらに従う位置を示す。カバットらによって定義されたCDR配列は、ABC101VLアミノ酸配列に下線を引いている。HuABC101VLアミノ酸配列を設計するために、まず初めにマウスABC101VLのCDR配列をZ46622VLの対応する位置へ移した。次に、位置49のマウスアミノ酸は、マウスABC101可変領域の3次元モデルから著しいCDR接触が示唆されたものであり、これで対応するヒトフレームワーク残基を置換した。この位置のアミノ酸残基は、HuABC101VL配列において下線を引いている。HuABC101VLをコードする遺伝子は、マウスABC101VL遺伝子のシグナルペプチド配列と、マウス生殖細胞系Jk2部分由来のスプライスドナーシグナルを含むエクソンとして設計された。NheI及びEcoRIサイトが両脇に並んでいる設計HuABC101VL遺伝子のヌクレオチド及び推定アミノ酸配列は、図14に示される。シグナルペプチド配列は、イタリックで示している。成熟ポリペプチドのN末端アミノ酸残基は、二重下線を引いている。カバットらの定義に従うCDR配列は、下線を引いている。成熟HuABC101VLのアミノ酸配列は、DIVMTQSPDSLGVSLGERATINCRASQSVSTSSYSYVHWYQQKPGQPPKLLIKYASNLESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQHSWDIPFTFGQGTKLEIKである。実施例7HuABC2及びHuABC101IgG1κ抗体の発現SpeI及びHindIIIによって消化したHuABC2VH遺伝子と、NheI及びEcoRIによって消化したHuABC2VL遺伝子を哺乳類の発現ベクターの対応するサイトに挿入し、pHuABC2を作製した。SpeI及びHindIIIによって消化したHuABC101VH遺伝子と、NheI及びEcoRIによって消化したHuABC101VL遺伝子は、哺乳類の発現ベクターの対応するサイトに挿入し、pHuABC101を作製した。pHuABC2及びpHuABC101の構築物は、図15に示されている。上部のSalIサイトから時計回りに向かって、発現ベクターは、抗体重鎖遺伝子の転写を開始するためのヒトサイトメガロウイルス主要前初期プロモーター及びエンハンサーから始まる重鎖転写ユニットを含む。CMVプロモーターの後には、VHエクソンと、介在イントロンを有するCH1、ヒンジ、CH2及びCH3エクソンを含むヒトガンマ1重鎖定常領域を含むゲノム配列と、CH3の次にくるmRNA処理のためのガンマ1遺伝子のポリアデニル化サイトが続く。重鎖遺伝子配列の後、軽鎖転写ユニットがCMVプロモーターから始まり、VLエクソンと、ヒトカッパ鎖定常領域エクソン及びその前のイントロン部分を含むゲノム配列、そしてカッパ遺伝子のポリAシグナルが続く。そして、軽鎖遺伝子の後には、SV40初期プロモーターと、大腸菌キサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ遺伝子と、SV40ポリアデニル化サイトサイトを含む部分が続いている。最後に、発現ベクターは、細菌性複製開始点及びベータラクタマーゼ遺伝子を含むプラスミドpUC19の一部を含んでいる。HuABC2及びHuABC101IgG1κ抗体を安定して生産する細胞株を得るために、発現ベクターpHuABC2及びpHuABC101をそれぞれマウス骨髄腫細胞株NS0の染色体に導入した。NS0への安定トランスフェクションは、Bebbingtonらに記載されている通り、エレクトロポレーションによって実行した。トランスフェクションの前に、発現ベクターは、FspIを使用して線形化した。およそ、107細胞に10μg線形化プラスミドをトランスフェクトして、10FBSを含むDME培地に懸濁し、いくつかの96穴プレートに平板培養した。24時間後は、選択培地、025mgmlキサンチン、及び1μgmlミコフェノール酸を含むDME培地を適用した。選択開始の約10日後、選択を生き残った形質導入体由来の培養上清を抗体産生のために評価した。HuABC2及びHuABC101の発現は、標準的な手法に従うサンドイッチELISAより、捕獲用ヤギ抗ヒトIgGFcポリクローナル抗体と、捕獲したヒト化抗体を検出するためのHRP共役ヤギ抗ヒトカッパ鎖ポリクローナル抗体を使用して典型的に測定した。適切なヒトIgG1κ抗体の量を変化させて、標準曲線を作成し、定量化を可能にした。HuABC2及びHuABC101の各々を高レベルに生産しているNS0安定形質導入体は、ハイブリドーマSFMを使用する無血清培地に順応させて増加させた。HuABC2及びHuABC101は、プロテインAアフィニティークロマトグラフィーによって培養上清から精製した。実施例8ヒト化抗CD122抗体の特性評価精製されたHuABC2及びHuABC101は、可溶性IL15IL15Rα複合体によって媒介されるTF1βの増殖を阻害する能力について特徴付けた。HuABC2及びHuABC101の両方とも、TF1βの成長を実質的に阻害した一方で、マウス抗CD122モノクローナル抗体Mikβ1のヒト化バージョンは、試験した最高濃度で、わずかな阻害だけを示した。IL15のトランス提示によって媒介されるTF1β細胞の増殖を50阻害するのに必要とされる抗体濃度は、HuABC2は07μgml、HuABC101は05μgml、そしてHuMikβ1はおよそ10μgmlであった。精製されたHuABC2及びHuABC101は、上述の通り、IL2存在下で、高親和性IL2受容体を発現するTF1βの増殖を阻害する能力について更に特徴付けた。HuABC2及びHuABC101の両方とも、TF1αβの成長を実質的に阻害した一方で、HuMikβ1は、活性を示さず、試験した最高の抗体濃度のアイソタイプコントロールで見られたものと等しい阻害レベルが示された。IL2媒介TF1αβ増殖を50阻害するのに必要とされる抗体濃度は、HuABC2は14μgml、そしてHuABC101は42μgmlであった。実施例9異物移植片対宿主疾患の進行に対するヒト化抗CD122抗体のインビボ分析移植片対宿主疾患の進行に対するHuABC2治療の効果は、ヒト免疫適格細胞を移植された免疫不全マウスを用いる異物移植モデルにおいて確立された。異種移植片対宿主疾患は、文献に記載されているように、ヒト末しょう血液単核細胞を移すことによってNODShiscid、IL2Rγnullマウスにおいて誘導した。特に、1×107のヒトPBMCを静脈内へ注入してPBMCを移す前に、810週齢のNOGマウスを1日で25Gy照射した。マウスを毎日モニターして、週2回体重を測定し、疾患の進行を追跡した。XGVHDを発病しているマウスは、PBMCを移した後の23日で体重が減り、背中を丸めた姿勢、乱れた毛皮、運動性の低下、頻呼吸及び貧血を示し始める。照射を受けた被移植体に1×107のヒトPBMCを移した10~14日後に一般的には死亡する。ヒト化抗CD122抗体でのマウス治療がXGVHDの経過を変化させることを明らかにするために、PBMCを移す1日前、PBMCを移した日、PBMCを移した3、7及び10日後に10mgkgのコントロールヒトIgG1抗体又はHuABC2の腹腔内注射でNOGマウスを処置した。マウスは、各抗体の投与前に体重を測定し、死亡するかIACUC指針に従って屠殺するまで、上記の通りにXGVHDの徴候をモニターした。PBMCを移した10日後に、フローサイトメトリーによって各マウスの血液に存在するヒトCD45細胞のパーセンテージを決定することによって、ヒト細胞移植をモニターした。PBMCを移した10日後、コントロール抗体で処置されたマウスは、それらの体重が平均して20±28減少した一方で、HuABC2で処置されたマウスは、それらの体重が平均して10±23減少するだけであった。コントロール抗体で処置されたマウスは、PBMCを移した10日後、それらの血液に平均892±42のヒトCD45細胞があった一方で、HuABC2で処置されたマウスは、PBMCを移した10日後、それらの血液に649±116のヒトCD45細胞があった。コントロール抗体で処置された6匹のマウスの全ては、PBMCを移した10日後までに死亡した一方で、HuABC2で処置された6匹のマウスのうちのわずか2匹だけがその日までに死亡した。従って、3つの別々のパラメーター、体重損失のパーセンテージ、ヒト細胞移植のパーセンテージ及び死亡率によって、HuABC2で処置されたマウスは、GVHDがコントロール抗体で処置されたマウスが示したものよりも深刻ではないことが示された。実施例10乾癬のモデルにおけるヒト化抗CD122抗体の分析ヒト乾癬の皮膚が重症複合免疫不全マウスに移植されると、乾癬の表現型の特徴は維持される。このモデルは、乾癬に対する候補薬の有効性の研究に使用されVilladsenetalJClinInvest11215711580BhagavathulaetalAmJPathol16610091016、このモデルの陽性効果は、通常、ヒトの有効性に対応する。この実施例では、ヒト乾癬の皮膚SCIDマウス移植モデルにおけるHuABC2の有効性を示すインビボ実験を記載する。典型的実験において、ヒト乾癬プラーク皮膚をいくつかのSCIDマウス上に移植する。組織が回復できた後、21日間、3日毎に動物当たり10mgkgのHuABC2又はコントロール抗体を腹腔内注射によってマウスを処置した。動物は、治療期間の最後に殺す。周辺マウス皮膚を少量有する移植済みヒト皮膚を取り除き、10緩衝ホルマリンにて固定する。ヘマトキシリン及びエオシンによる染色後、組織切片を光学顕微鏡によって組織学的に調べた。各組織切片の表皮領域は、同程度の部分を捕らえ、表皮厚は、盲検下で決定される。10緩衝ホルマリンにて固定した移植前の乾癬ドナー皮膚の小断片が、表皮厚のゼロ時間評価に使用される。表皮厚は、HuABC2とコントロールグループ間を比較して、乾癬に対するHuABC2の治療的有効性を評価する。HuABC2の効果は、乾癬の特長について皮膚移植を組織学的に分析すること、及びヒトCD3又は他の細胞表面マーカーに対する抗体で組織切片を着色して浸潤細胞を同定すること、によって更に評価される。実施例11エピトープマッピングCD122の細胞外領域は、D1及びD2と称される2つのフィブロネクチンタイプIIIドメインで構成される。ABC2及びABC101によって認識されるCD122分子のエピトープの位置を特定するために、JNBiosciencesで得られた全てのマウス抗ヒトCD122抗体、CD122の様々なマウスヒトキメラ分子に対するそれらの結合性のパターン及びHEK293細胞の表面に発現するヒトCD122分子の単離されたドメインをフローサイトメトリーによって決定した。加えて、マウス抗CD122モノクローナル抗体Mikβ1を分析に含めた。それは、本出願人によって作製された更なるマウス抗CD122抗体、ABC116であった。ABC116は、ABC2及びABC101と比較してIL2及びIL15とのCD122相互作用を阻害する能力が弱い。図18において表される6つの異なる組換えCD122構築物を分析に使用した。HuD1HuD2は、ヒトCD122D1、及び、D2ドメインを含む。位置1のAlaは、ヒトCD122コード領域のN末端Metから数えた第27番目のアミノ酸に対応する。MoD1MoD2は、マウスCD122D1、及び、D2ドメインを含む。HuD1MoD2は、ヒトD1及びマウスD2ドメインを含む。MoD1HuD2は、マウスD1及びヒトD2ドメインを含む。HuD1は、単離されたヒトD1ドメインを含み、HuD2は単離されたヒトD2ドメインを含む。6つの構築物の全ては、カルボキシル末端にFLAGペプチドと、その次にヒトCD55遺伝子由来のGPIアンカーシグナルを融合させた。これらの構築物は、HEK293細胞の表面発現に適切な発現用プラスミドベクターにクローンした。6つのCD122構築物の各々を発現している形質導入体に対するABC2、ABC101、ABC116及びMikβ1の結合性は、標準的な手法を使用してフローサイトメトリーによって調べた。細胞表面上のこれらの構築物の発現は、ラット抗FLAGペプチド抗体L5を使用して確認した。6つのCD122構築物のそれぞれを一過性発現しているHEK293細胞は、試験抗体の1つとまず初めにインキュベートした。そして、結合したマウス抗体は、PE標識ヤギ抗マウスIgG抗体によって検出した。これらのCD122構築物に対するABC2、ABC101、ABC116及びMikβ1の結合パターンは、図18にまとめられている。図のシンボルは、試験抗体でのMCF値が、各形質導入体に対するL5でのMCF値の少なくとも50であったことを示す。シンボルは、試験抗体でのMCF値が、L5での値の10未満であったことを示す。単独ヒトCD122のD1ドメインは、ABC2及びMikβ1の結合に充分であった。同様に、単独ヒトCD122のD2ドメインは、ABC116の結合に充分であった。ABC101の結合には、ヒトD1ドメインと、ヒト又はマウスD2ドメインとの両方が必要であったことから、ABC101のエピトープがD1及びD2ドメイン由来のアミノ酸残基を必要とすることが示された。より詳しくは、CD122分子において認識されるエピトープの場所をABC2、ABC101及びMikβ1の各々によって特定するために、標準的な手法を使用して部位特異的変異によりHuD1HuD2構築物に単一アミノ酸置換変異を発生させた。そして、各変異HuD1HuD2構築物は、それぞれが、HEK293細胞の表面上での検出及び発現のために、カルボキシル末端にFLAGペプチドと、それに続くヒトCD55遺伝子由来のGPIアンカーシグナルを融合させた。分析に使用するHuD1HuD2変異体は、図19にリストされている。各変異体の名前における、左の文字、中央の数、そして右の文字は、それぞれ野生型CD122のアミノ酸、CD122の位置、そして変異体におけるアミノ酸を意味する。図中のシンボル、、そして、は、試験抗体を100ngmlで用いたときに、試験抗体でのMCF値が、各形質導入体に対するラット抗FLAGペプチド抗体L5により得られたMCF値の少なくとも50、10と20の間、そして10以下であったことをそれぞれ示している。ヒトCD122の位置39及び41のアミノ酸残基が、細胞表面に発現されたCD122に対するMikβ1の結合に重要であることを確認した。Dionyssopoulouらは、固相ペプチド走査を用いて、Mikβ1がD2ドメインの2つの領域に位置するアミノ酸によって形成された不連続なエピトープを認識すると以前に報告している。CD122が発現した細胞表面を調べた我々の結果からは、D2ドメインは、CD122に対するMikβ1の結合に重要ではなく、Mikβ1によって認識される決定要素は、D1ドメインに唯一存在していることが示唆される。D1ドメインの位置42、43及び65のアミノ酸残基が、ヒトCD122に対するABC2の結合性に重要であることがわかった。ABC101の結合については、D1ドメインの位置65及び70のアミノ酸残基及びD2ドメインの位置133の残基が、重要であった。従って、特有のアミノ酸残基セットが、ヒトCD122に対するABC2及びABC101のそれぞれの結合に関係している。図19に示されるヒトCD122の単一アミノ酸置換変異体18個に対するHuABC2及びHuABC101の結合も、結合したヒト化抗体をPE標識ヤギ抗ヒトIgG抗体によって検出した点を除いた上述の手法に従うFACSによって調べた。HuABC2及びABC2は、これら18個のCD122変異体に対する結合パターンが同じであることが示された。同様に、これらのCD122変異体に対するHuABC101の結合パターンは、ABC101のそれと同じであった。ヒトCD122のD1及びD2ドメインにおける別の単一アミノ酸置換変異体29個は、CD122に対するHuABC2又はHuABC101の結合性を実質的には減少させなかった。IL2及びIL15媒介シグナル伝達を伝達するヒトCD122の機能的能力における位置42、43、65及び133のアミノ酸残基の重要性は、次の方法により評価した。完全長ヒトCD122の発現ベクターは、実施例2のTF1β細胞の発生に使用されたものであり、これに位置42、43、65及び133で部位特異的変異を受けさせた。FR42A、FR43A、FG65T及びFH133Aと称される得られた変異CD122遺伝子は、それぞれ、位置42のArgをAlaに、位置43のArgをAlaに、位置65のGlyをThrに、そして位置133のHisをAlaに単一アミノ酸置換する。TF1安定形質導入体は、実施例2にて説明したように、これら4つの変異CD122遺伝子の各々から生み出された。10FCSを含むRPMI1640培地を基本培地として使用した場合、TF1は、2ngmlGMCSF存在下で健康的に生育したが、GMCSF非存在下では全く生育しなかった。TF1は、200ngmlIL2又は10ngmlIL15IL15Rα複合体存在下でも生育しなかった。TF1βは、中親和性IL2IL15受容体を発現するものであり、GMCSF、IL2又はIL15IL15Rα複合体の存在下で健康的に生育した。ヒトCD122のFR42A、FG65T又はFH133A変異体を発現しているTF1細胞は、IL2又はIL15IL15Rα複合体存在下で生育する能力を失ったが、それでも、GMCSF存在下では、それらはまだ生育可能であった。FR43A変異体発現TF1細胞は、IL2、IL15IL15Rα複合体又はGMCSF存在下で生育する能力を維持していた。