"明細書中に記載の発明。癌についての現在の処置は、多くの腫瘍型について、貧弱な効力、生存率に対する低い印象、重症副作用を生じる毒性、またはそれらの組み合わせに起因して不適切である。従って、重症副作用を誘導することなく、効力を提供し得る癌増殖を処置するためのさらなる方法を、同定および開発するための必要性が存在する。従って、抗APRILmAB、抗APRILレセプターmAb、可溶性APRILレセプター-Ig融合タンパク質、天然のアンタゴニスト、低分子アンタゴニスト、および化学的、薬学的または他のアンタゴニストを含む、APRIL経路のアンタゴニストは有用である。この目的のために、本発明者らは、APRILに対するレセプターとして、B細胞媒介性タンパク質BCMまたはBCMAを同定した。発明の要旨出願人は、BCMAが腫瘍壊死薬剤であるAPRILのレセプターであることを見出した。APRILは、WO99/12965において以前に記載されたのと同じ分子であり、これは、本明細書において参考として援用される。APRILレセプターは、本明細書において以後APRIL-Rと称される。本発明は、癌を有するかまたはその危険のある哺乳動物種の処置のための方法、およびそれにおいて使用するための薬学的調製物に関する。そのような被験体としてはすでに癌に罹患した被験体、または癌治療をすでに受けた被験体が挙げられる。本発明の方法および組成物は、癌治療薬剤である特定の薬剤本明細書においてAPRIL-Rアンタゴニスト例えば、抗APRIL-R抗体を含むと称されるが、本明細書において定義される癌を発生する危険があるか、または癌処置を必要とする被験体において使用され得るという発見を部分的に利用する。本発明の癌治療薬剤は、選択された薬剤に適合する任意の投与経路によって投与され得、そしてその投与経路に適切な任意の薬学的に受容可能なキャリアを用いて処方され得る。好ましい投与経路は、非経口であり、特に、静脈内、腹腔内および嚢内である。処置はまた、好ましくは、外来患者として長期にわたり行われる。この癌治療剤の一日投薬量は、0.01-1000μg/kg体重の範囲、およびより好ましくは約10-300μg/kg体重の範囲と予期されるが、正確な投薬量は、使用される特定の癌治療薬剤および特定の被験体の医学的状態および履歴に依存して、変動する。本発明の処置は、哺乳動物の身体から形質転換した細胞の実質的なクローン集団コロニーを消失させるにおいて、またはもっとも一般的に腫瘍と称される、コロニーの増殖を抑制もしくは弱毒化するために有用である。それ自体、それらは、寿命を延長するにおいて、および癌の危険にあるか、またはすでに癌に罹患した被験体の生命の品質を維持するにおいて有用である。本発明はまた、以下の項目を提供する。項目1所望されない細胞増殖に関連する状態について哺乳動物を処置する方法であって、該方法は、薬学的に受容可能な賦形剤と共にAPRIL-Rアンタゴニストを含む組成物の治療的な有効量を該哺乳動物に投与する工程を包含し、ここで、該APRIL-Rアンタゴニストが、APRILと該APRILのコグネイトレセプターとの間の相互作用を拮抗するポリペプチドを含む、方法。項目2項目1に記載の方法であって、ここで前記APRIL-Rアンタゴニストが、以下:a可溶性APRIL-Rポリペプチド;b異種アミノ酸配列と融合された可溶性APRIL-Rポリペプチドを含む可溶性キメラ分子;およびc抗APRIL-R抗体ホモログからなる群より選択される、方法。項目3項目2に記載の方法であって、ここで前記可溶性APRIL-Rポリペプチドが、以下:a配列番号8図3Aのアミノ酸残基1~アミノ酸残基184またはそれらのフラグメントを含むネイティブ配列APRIL-Rポリペプチドと、少なくとも80アミノ酸配列同一性を有する、単離されたAPRIL-Rポリペプチド変異体;b配列番号8図3Aのアミノ酸残基1~アミノ酸残基52またはそれらのフラグメントと少なくとも80アミノ酸配列同一性を有する、単離されたAPRIL-Rポリペプチド;およびc配列番号8図3Aのアミノ酸残基8~アミノ酸残基41またはそれらのフラグメントを含む、単離されたAPRIL-Rポリペプチドからなる群より選択される、方法。項目4項目2に記載の方法であって、ここで前記可溶性キメラ分子が、以下:a以下:i.配列番号8図3Aのアミノ酸残基1~アミノ酸残基184またはそれらのフラグメントを含むネイティブ配列APRIL-Rポリペプチドと少なくとも80アミノ酸配列同一性を有する、単離されたAPRIL-Rポリペプチド変異体;ii.配列番号8図3Aのアミノ酸残基1~アミノ酸残基52またはそれらのフラグメントと少なくとも80アミノ酸配列同一性を有する、単離されたAPRIL-Rポリペプチド変異体;およびiii.配列番号8図3Aのアミノ酸残基8~アミノ酸残基41またはそれらのフラグメントを含む、単離されたAPRIL-Rポリペプチド変異体、からなる群より選択される可溶性APRIL-Rポリペプチド、b異種アミノ酸配列と融合されたもの、を含む、方法。項目5前記異種アミノ酸配列が、免疫グロブリンのIgGFcドメイン由来である、項目4に記載の方法。項目6前記異種アミノ酸配列が、分泌タンパク質のシグナル配列由来である、項目4に記載の方法。項目7項目2に記載の方法であって、前記抗APRIL-R抗体ホモログが、以下:a配列番号8図3Aのアミノ酸残基1~アミノ酸残基184またはそれらのフラグメントを含むネイティブ配列APRIL-Rポリペプチドと、少なくとも80アミノ酸配列同一性を有する、単離されたAPRIL-Rポリペプチド変異体;b配列番号8図3Aのアミノ酸残基1~アミノ酸残基52またはそれらのフラグメントと少なくとも80アミノ酸配列同一性を有する、単離されたAPRIL-Rポリペプチド変異体;およびc配列番号8図3Aのアミノ酸残基8~アミノ酸残基41またはそれらのフラグメントを含む、単離されたAPRIL-Rポリペプチド、からなる群より選択されるAPRIL-Rポリペプチドに結合する抗体を含む、方法。項目8所望されない細胞増殖に関連する状態について哺乳動物を処置する方法であって、該方法は、2つ以上のアンタゴニストの治療的に有効な量を該哺乳動物に投与する工程を包含し、ここで、該アンタゴニストのうちの少なくとも2つが、APRILとBCMAとの間の相互作用を拮抗する第1のAPRIL-Rアンタゴニスト、およびAPRILとBCMA以外の別のコグネイトAPRILレセプターとの間の相互作用を拮抗する第2のAPRIL-Rアンタゴニストを含む、方法。項目9前記所望されない細胞増殖が癌である、項目1~8に記載の方法。項目10所望されない細胞増殖に関連する前記状態が癌である、項目1~8に記載の方法。項目11前記哺乳動物がヒトである、項目1~8に記載の方法。項目12癌増殖がAPRILによって調節される癌を有する患者を処置する方法であって、該方法は、APRIL-Rアンタゴニストを含む組成物の治療的に有効な量を該患者に投与する工程を包含し、ここで、該APRIL-Rアンタゴニストが、APRILとAPRIL-Rとの間の相互作用を拮抗するポリペプチドを含む、方法。項目13項目9に記載の方法であって、前記癌が、ヒト肺癌、結腸癌、乳癌、前立腺癌、および増殖がAPRILによって調節される他の癌からなる群より選択される、方法。詳細な説明定義請求される本発明の主題をより明確および簡潔に指摘するために、以下の定義を、以下の詳細な説明および添付の特許請求の範囲において使用される特定の用語について提供する。本発明は、今度は、以下の詳細な説明を参照して記載される。その中で以下の定義が包含される。用語APRILレセプターまたはAPRIL-Rとは、本明細書において使用されるとき、ネイティブ配列のAPRIL-RおよびAPRIL-R改変体を包含する。APRIL-Rは、種々の供給源例えば、マウスまたはヒトの組織型または別の供給源から単離され得るか、または組換えもしくは合成の方法によって調製され得る。用語APRIL-Rは、腫瘍壊死ファミリーメンバーAPRILまたはそのホモログもしくはフラグメントに結合し得るポリペプチドをさらにいう。APRIL-Rの例は、BCMAである。用語BCMAまたはBCMとは、以下に記載されるようなB細胞成熟のための新規タンパク質をいう:Grasetal.1995,InternationalImmunology,7:1093-1106,BCMAp:anintegralmembraneproteininthegolgiapparatusofhumanmatureBlymphocytes;Y.Laabietal.1992,EMBOJ.,11,3897-3904,AnewgeneBCMonChromosome16isfusedtotheinterleukin2genebyat4;16q26;pl3translocationinamalignantTcelllymphoma。ネイティブ配列APRIL-Rとは、天然に由来するAPRIL-Rと同じアミノ酸配列を有するポリペプチドを包含する。そのようなネイティブ配列APRIL-Rは、天然から単離され得るか、または組換えもしくは合成の手段によって生成され得る。ネイティブ配列APRIL-Rは、天然に存在する、短縮形態かまたは分泌形態のAPRIL-R例えば、例えば、細胞外ドメイン配列を含む可溶性形態、APRIL-Rの天然に存在する改変体形態例えば、選択的スプライシング形態および天然に存在する対立遺伝子変異体をいう。本発明の1つの実施形態において、ネイティブ配列APRIL-Rは、配列番号8のアミノ酸1~184を含む、成熟または全長のネイティブ配列APRIL-Rポリペプチド、あるいはそのフラグメントである。ARPIL-R細胞外ドメインまたはAPRIL-RECDとは、APRIL-Rの膜ドメインおよび細胞質ドメインを本質的に含まない形態のAPRIL-Rをいう。通常、APRIL-R細胞外ドメインは、1未満のそのような膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを有し、そして好ましくは、0.5未満のそのようなドメインを有する。必要に応じて、APRIL-RECDは、配列番号8のアミノ酸残基1~51または1~52または1~53を含む。好ましい実施形態において、APRIL-ECDは、配列番号8のアミノ酸残基4~51、またはより好ましくは、配列番号8のアミノ酸残基8~51を包含する。当業者には、本発明のAPRIL-Rポリペプチドの膜貫通ドメインは、その型の疎水性ドメインを同定するについて当該分野において慣用的に使用される基準に従って同定される。膜貫通ドメインの正確な境界は、変動し得るが、最もおそらく、本明細書において具体的に言及されたドメインのいずれかの末端の5アミノ酸以内である。APRIL-R改変体とは、全長ネイティブ配列APRIL-Rについて配列番号5に示される推定アミノ酸配列を有するか、またはAPRIL-RECD配列を有する、APRIL-Rと少なくとも約80のアミノ酸配列同一性を有すると以下に定義されるような活性APRIL-Rを意味する。そのようなAPRIL-R改変体としては、例えば、APRIL-Rポリペプチドであって、配列番号8の配列の末端またはC末端において1つ以上のアミノ酸残基が付加、または欠失されているものが挙げられる。通常、APRIL-R改変体は、少なくとも約80または85のアミノ酸配列同一性、より好ましくは少なくとも約90のアミノ酸配列同一性、そしてさらにより好ましくは、少なくとも約95のアミノ酸配列同一性を、配列番号8のアミノ酸配列に対して有する。百分率パーセントアミノ酸配列同一性とは、本明細書において同定される、APRIL-R配列に関して、配列を整列し、そして必要に応じてギャップを導入して、最大の百分率配列同一性を達成し、配列同一性の部分として任意の保存置換を考慮した後の、APRIL-Rにおけるアミノ酸残基と同一である候補配列におけるアミノ酸残基の百分率と定義される。百分率アミノ酸配列同一性を決定する目的のための整列は、例えば、公に利用可能なコンピュータソフトウェア例えば、BLAST、ALIGNまたはMegalignDNASTARソフトウェアを用いた、当該分野の技術範囲内にある、種々の方法において達成され得る。当業者は、比較される配列の全長にわたり最大の整列を達成するに必要な任意のアルゴリズムを含め、整列を測定するための適切なパラメータを決定し得る。用語エピトープタグ化とは、本明細書において使用されるとき、APRIL-Rを含むキメラポリペプチド、またはそのドメイン配列であって、タグポリペプチドに融合されたものをいう。タグポリペプチドは、抗体が作成され得るエピトープか、または何らかの他の薬剤によって同定され得るエピトープを提供するに十分であるが、APRIL-Rの活性には干渉しないように十分短い残基を有する。このタグポリペプチドは、好ましくはまた、その抗体が実質的に他のエピトープとは交叉反応しないようにかなり独特である。適切なタグポリペプチドは、概して、少なくとも6アミノ酸残基、そして通常約8アミノ酸残基と約50アミノ酸残基との間を有する好ましくは、約10残基~約20残基である。単離されたとは、本明細書において開示される種々のポリペプチドを記載するために使用され、その天然の環境の成分から同定され、そして分離され、そして/または回収されたポリペプチドを意味する。その天然の環境の夾雑成分は、そのポリペプチドについて診断または治療上の使用を代表的に妨害し、そして酵素、ホルモンおよび他のタンパク質性もしくは非タンパク質性の溶質を含み得る。好ましい実施形態において、そのポリペプチドは、以下にまで精製される:1N末端の少なくとも15残基を得るに十分な程度、またはスピンカップ配列決定機の使用によるアミノ酸配列決定するに十分な程度、あるいは2クーマシーブルーまたは好ましくは銀染色を用いて非還元または還元の条件下でSDS-PAGEでの均質の程度。単離されたポリペプチドとしては、組換え細胞内のインサイチュのポリペプチドが挙げられる。なぜなら、APRIL-Rの天然の環境の少なくとも1つの成分が存在しないからである。しかし、通常、単離されたポリペプチドは、少なくとも1つの精製工程によって調製される。用語抗体は、その最も広義な意味で使用され、そして具体的には単一のAPRIL-Rモノクローナル抗体アゴニスト、アンタゴニストおよび中和抗体を含むおよびポリエピトープ特異性を有する抗APRIL-R抗体組成物を包含する。用語モノクローナル抗体は、本明細書において使用され、実質的に均質な抗体すなわち、微量で存在し得る可能な天然に存在する変異体を除き、その集団を含む個々の抗体が同一であるの集団から得られる抗体をいう。ポリペプチドの精製された調製物または実質的に純粋な調製物とは、本明細書において使用され、天然においてはそれに付随する他のタンパク質、脂質および核酸から分離されたポリペプチドを意味する。好ましくは、そのポリペプチドはまた、それを精製するために使用される他の物質例えば、抗体、マトリクスなどからも分離されている。用語処置する、処置および治療とは、本明細書において使用され、治癒のための治療、予防prophylacticのための治療および予防preventativeのための治療をいう。用語ペプチド、タンパク質およびポリペプチドとは、本明細書において互換的に使用される。本明細書中に使用される場合生物学的に活性なは、直接または間接的に実行され得るインビボ活性またはインビトロ活性を有することを意味する。APRIL-Rの生物学的に活性なフラグメントは、例えば、レセプターの活性部位と70のアミノ酸相同性、より好ましくは少なくとも80の相同性、最も好ましくは少なくとも90の相同性を有し得る。レセプターに関する同一性または相同性は、本明細書において、配列番号8のAPRIL-R残基に対して同一である候補配列中のアミノ酸残基の百分率として規定される。本明細書中に使用される場合、用語哺乳動物は、ヒト、ウシ、ウマ、イヌ、マウスおよびネコを含む哺乳動物として分類される任意の動物をいう。本発明の好ましい実施形態において、哺乳動物は、ヒトである。本発明の実施には、他に示されない限り、細胞生物学、細胞培養、分子生物学、トランスジェニック生物学、微生物学、組換えDNA、および免疫学の従来技術を使用し、これらは当業者の範囲内である。このような技術は文献中に記載される。ここで詳細に、本発明の好ましい実施形態に対する参照がなされる。本発明は、B細胞および非B細胞の増殖および成熟をもたららす特にこれらが腫瘍細胞に関連する場合ためのAPRIL-RおよびAPRIL-R関連分子の使用に関する。本発明はまた、免疫関連障害に必要とされるような免疫系の応答をもたらすためのAPRIL-RおよびAPRIL-R関連分子の使用に関する。さらに、本発明は、遺伝子治療法を介するAPRIL-RまたはAPRIL-R関連遺伝子の使用を通じた癌および免疫障害の処置を含む。本発明の配列で形質転換された宿主によって産生されるAPRIL-Rおよびそのホモログ、または既知のアミノ酸配列から産生されるAPRIL-Rおよびそのホモログ、ならびに当該分野で公知のプロセスによって精製されるネイティブなAPRIL-Rは、抗癌、抗腫瘍および免疫調節適用に関する種々の方法において有用である。これらはまた、他の疾患に向けられる治療および方法において有用である。本発明の別の局面は、APRIL-Rをコードする単離された核酸によってコードされるポリペプチドのアンチセンス治療における使用に関する。本明細書中に使用される場合、アンチセンス治療は、コードされるタンパク質の発現を阻害するように例えば、転写および/または翻訳を阻害することによって、細胞状態の下で目的のリガンドをコードする細胞性mRNAおよび/またはDNAと特異的にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドまたはそれらの誘導体の、投与またはインサイチュ生成をいう。結合は、従来の塩基対相補性により得るか、または例えば、DNA二重鎖への結合の場合、二重らせんの主溝における特異的相互作用を介し得る。一般的に、アンチセンス治療は、当該分野で一般的に使用される技術範囲をいい、そしてオリゴヌクレオチド配列の特異的結合に依存する任意の治療が挙げられる。本発明のアンチセンス構築物は、例えば、発現プラスミドとして送達され得、この発現プラスミドは、細胞中で転写される場合、Kayリガンドをコードする細胞性mRNAの少なくとも一部に相補的であるRNAを産生する。あるいは、アンチセンス構築物は、エキソビボで生成されるオリゴヌクレオチドプローブであり得る。このようなオリゴヌクレオチドプローブは、好ましくは改変されたオリゴヌクレオチドであり、このオリゴヌクレオチドは、内因性ヌクレアーゼに耐性であり従ってインビボで安定である。アンチセンスオリゴヌとしての使用のための例示的な核酸分子は、ホスホラミデートアナログ、ホスホチオエートアナログ、およびメチルホスホネートアナログのDNAである例えば、第5,176,996号;第5,264,564号;および第5,256,775号を参照のこと。さらに、アンチセンス治療において有用なオリゴマーを構築するための一般的な手段は、例えば、VanDerKrolら1988Biotechniques6:958-976;およびSteinら1988CancerRes48:2659-2668これらは、詳細に本明細書中に参考として援用されるによって概説される。上記のように、本発明のAPRIL-RはTNFレセプターファミリーのメンバーである。タンパク質、そのフラグメントまたはホモログは、広範な治療適用および診断適用を有し得る。本発明のポリペプチドは、APRIL本明細書中に参考として援用されるWO99/12964中に以前記載されたポリペプチドと特異的に相互作用する。しかし、本明細書中に開示されるペプチドおよび方法は、APRIL-Rまたはそのフラグメントと特異的に相互作用する分子の同定を可能にする。特定の実施形態において、本願発明は、APRILへ結合する能力を有するAPRIL-R由来のペプチドを使用する方法を含む。APRIL-Rのフラグメントは、いくつかの方法例えば、組換え的にか、PCRによってか、タンパク質分解消化、または化学合成によってで産生され得る。ポリペプチドの内部フラグメントまたは末端フラグメントは、1つ以上のヌクレオチドを、このポリペプチドをコードする核酸の1つの末端または両末端から除去することによって作製され得る。変異誘発されたDNAの発現は、ポリペプチドフラグメントを産生する。ポリペプチドフラグメントはまた、従来のメリーフィールド固相f-mocまたはt-boc化学のような当該分野で公知の技術を用いて、化学合成され得る。例えば、本発明のペプチドおよびDNA配列は、フラグメントの重複を伴わずに所望の長さのフラグメントへ任意に分けられ得るか、または所望の長さの重複フラグメントへ分けられ得る。これらのような方法は、以下により詳細に記載される。可溶性形態のAPRIL-Rの作製可溶性形態のAPRIL-Rは、しばしば、効果的にシグナルを伝達し得、それ故に、天然の膜形態を目下模倣する薬物として投与され得る。本明細書中に主張されるAPRIL-Rは可溶性サイトカインとして自然に分泌されることは可能であるが、そうでない場合、分泌を強いるためにその遺伝子を再操作し得る。可溶性分泌形態のAPRIL-Rを作製するために、DNAレベルでN末端膜貫通領域、および軸領域のいくらかの部分を除去して、これらを選択された発現系において有効なタンパク質分解性切断を可能にするI型リーダー配列あるいはII型リーダー配列で置換する。当業者は、分泌発現構築物中に保持される軸領域の量を変更して、リガンド結合特性および分泌効率の両方を最適化し得る。例えば、全ての可能な軸の長さを含む構築物すなわち、N末端短縮が調製されて、その結果アミノ酸1~52で開始するタンパク質が生じ得る。最適な長さの軸配列は、この型の分析から生じる。APRIL-Rと反応性の抗体の作製本発明はまた、本願発明のAPRIL-Rまたはそのコレセプターと特異的に反応する抗体を含む。抗タンパク質/抗ペプチドの抗血清またはモノクローナル抗体は、標準的なプロトコール例えば、Antibodies:ALaboratoryManual、HarlowおよびLane編ColdSpringHarborPress:1988を参照のことによって作製され得る。マウス、ハムスターまたはウサギのような哺乳動物は、免疫原性形態のペプチドを用いて免疫され得る。タンパク質またはペプチドに免疫原性を与えるための技術としては、当該分野で周知のキャリアへの結合または他の技術が挙げられる。APRIL-Rまたはそのコレセプターの免疫原性部分は、アジュバントの存在下で投与され得る。免疫の進行は、血漿または血清中の抗体検出によってモニターされ得る。標準的なELISAまたは他のイムノアッセイを抗原としての免疫原を共に使用して、抗体レベルを評価し得る。好ましい実施形態において、本抗体は、APRIL-Rまたはそのコレセプターの抗原決定基例えば、配列番号8のポリペプチドの抗原決定基か、または密接に関連するヒト哺乳動物ホモログもしくは非ヒト哺乳動物ホモログ例えば、70、80、または90の相同性、より好ましくは少なくとも95の相同性に対して免疫特異的である。本発明のなおさらに好ましい実施形態において、抗APRIL-R抗体または抗APRILコレセプター抗体は、例えば、配列番号8と80未満の相同性であるタンパク質;好ましくは配列番号8と90未満の相同性であるタンパク質;および最も好ましくは配列番号8と95未満の相同性であるタンパク質と、実質的に交差反応しないすなわち、特異的に反応する。実質的に交差反応しないにより、抗体が、配列番号8のタンパク質に対する結合親和性の、10未満、より好ましくは5未満、なおより好ましくは1未満である、非相同性タンパク質に対する結合親和性を有することが意味される。本明細書中に使用される場合、用語、抗体は、APRIL-Rまたはそのレセプターともまた特異的に反応するそのフラグメントを含むことが意図される。抗体は、従来技術を用いて断片化され得、そしてこのフラグメントは、全抗体に関して上部に記載された様式と同じ様式で有用性に関してスクリーニングされ得る。例えば、Fab’2フラグメントは、抗体をペプシンで処理することによって作製され得る。生じるFab’2フラグメントは、ジスルフィド架橋を還元するために処置されて、Fab’フラグメントを生成し得る。本発明の抗体は、抗APRIL-R活性または抗APRILコレセプター活性を有する生物特異的分子およびキメラ分子を含むことがさらに意図される。従って、APRIL-Rおよびこれらのコレセプターに対するモノクローナル抗体およびポリクローナル抗体Abの両方、ならびにFab’およびFab’2のような抗体フラグメントは、APRIL-Rおよびその各コレセプターの作用をブロックするために使用され得る。種々の形態の抗体がまた、標準的な組換えDNA技術を使用して作製され得るWinterおよびMilstein、Nature349:293-2991991これらは、本明細書中に参考として詳細に援用される。例えば、動物抗体由来の抗原結合ドメインがヒト定常ドメインに連結されたキメラ抗体が構築され得る例えば、Cabillyら、米国4,816,567号これは、本明細書中に参考として援用される。キメラ抗体は、ヒト臨床処置に使用される場合、動物抗体によって誘発される観察される免疫原性応答を減少し得る。さらに、APRIL-Rまたはそのコレセプターを認識する組換えヒト化抗体が合成され得る。ヒト化抗体は、ほとんどヒトIgG配列これに、特定の抗原結合を担う領域が挿入されるを含むキメラである。動物は、所望の抗原を用いて免疫され、対応する抗体が単離され、そして特定の抗原結合を担う可変領域配列の部分が取り除かれる。次いで、動物由来の抗原結合領域が、抗原結合領域が欠失されているヒト抗体遺伝子の適切な位置へクローン化される。ヒト化抗体は、ヒト抗体中の異種すなわち、種間配列の使用を最小化し、従って、処置される被験体において免疫応答をおそらくほとんど誘発しない。異なるクラスの組換え抗体の構築はまた、可変ドメインおよび異なるクラスの免疫グロブリンから単離されたヒト定常ドメインCH1、CH2、CH3を含む、キメラ抗体またはヒト化抗体を作製することによって達成され得る。例えば、増加した抗原結合部位価を有する抗体は、抗原結合部位をベクターヒト:鎖定常領域を保有するへクローニングすることによって組換え産生され得るArulanandamら、J.Exp.Med.、177:1439-14501993これは、本明細書中に参考として援用される。さらに、標準的な組換えDNA技術を使用して、抗原結合部位の付近でアミノ酸残基を変更することによって、組換え抗体のその抗原との結合親和性を変化し得る。ヒト化抗体の抗原結合親和性は、分子モデリングに基づく変異誘発によって増加され得る。Queenら、Proc.Natl.Acad.Sci.86:10029-331989本明細書中に参考として援用される。アナログの作製:変更されたDNA配列およびペプチド配列の生成APRIL-Rのアナログは、アミノ酸配列においてかもしくは配列を含まない点において、またはこれら両方において、天然に存在するAPRIL-Rと異なり得る。非配列改変としては、インビボまたはインビトロのAPRIL-Rの化学誘導体化が挙げられる。非配列改変としては、アセチル化、メチル化、リン酸化、カルボキシル化、またはグリコシル化における変化が挙げられるが、これらに限定されない。好ましいアナログとしては、APRIL-Rの生物学的に活性なそのフラグメントが挙げられ、その配列は、APRIL-リガンドの活性を破壊しない、1つ以上の保存的アミノ酸置換によってか、1つ以上の非保存的アミノ酸置換によってか、欠失または挿入によって、配列番号8に提供される配列と異なる。保存的置換としては、代表的に、類似した特徴を伴う別のアミノ酸の代わりの1つのアミノ酸の置換例えば、以下の群内の置換:バリン、グリシン;グリシン、アラニン;バリン、イソロイシン、ロイシン;アスパラギン酸、グルタミン酸;アスパラギン、グルタミン;セリン、トレオニン;リジン、アルギニン;およびフェニルアラニン、チロシンが挙げられる。用途全長APRIL-R遺伝子配列番号8またはその部分は、例えば、配列番号6に開示されるAPRIL-R配列に対して所望の配列同一性を有するさらに別の遺伝子を単離するためにcDNAライブラリーのハイブリダイゼーションプローブとして使用され得る。APRIL-Rをコードするヌクレオチド配列がまた使用されて、APRIL-Rをコードする遺伝子をマッピングするためおよび遺伝的障害を有する個体の遺伝分析のためのハイブリダイゼーションプローブを構築し得る。スクリーニングアッセイが設計されて、APRIL-Rの生物学的活性を模倣するリード化合物を見出し得る。このようなスクリーニングアッセイは、化学ライブラリーの高スループットスクリーニングを受けやすいアッセイが挙げられ、小分子薬物候補物を同定することにこの化学ライブラリーを特に適切にする。意図される小分子としては、合成有機化合物または合成無機化合物が挙げられる。APRIL-Rまたはその改変形態をコードする核酸がまた使用されて、トランスジェニック動物またはノックアウト動物のいずれかを作製し得、これらは次には治療的に有用な試薬例えば、癌試薬を含むの開発およびスクリーニングにおいて有用である。本発明の配列を用いて形質転換された宿主によって産生されるかまたは公知のアミノ酸配列から産生されるAPRIL-Rおよびそのホモログ、ならびに当該分野で公知のプロセスによって精製されるネイティブなAPRIL-Rは、抗癌適用のための種々の方法において有用である。1つの実施形態において、本発明は、APRIL-Rアンタゴニストを含む治療有効量の組成物を薬学的に受容可能な賦形剤と共に哺乳動物に投与することによって、所望されない細胞増殖と関連する状態に対してその哺乳動物を処置する方法であり、ここで、APRIL-Rアンタゴニストは、APRILとそのコグネイトレセプターとの間の相互作用を拮抗するペプチドを含む。好ましい実施形態において、細胞表面上のAPRILのコグネイトレセプターは、BCMAである。この方法は、APRILとそのコグネイトレセプターとの間の相互作用を拮抗するポリペプチドを有する任意のAPRIL-Rアンタゴニストと共に使用され得る。APRIL-Rアンタゴニストの例としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない:可溶性APRIL-Rポリペプチド可溶性BCMAを含むが、これに限定されない;可溶性キメラAPRIL-R分子BCMA-IgG-Fcを含むが、これに限定されないおよび抗APRIL-R抗体ホモログ抗BCMAモノクローナル抗体を含むが、これに限定されない。本発明の方法は、所望されない細胞増殖と関連する任意の条件を用いて使用され得る。特に、本発明の方法は、APRILおよび/またはAPRIL-Rすなわち、BCMAを発現する腫瘍細胞を処置するために使用され得る。細胞増殖がAPRILによって調節される癌の例は、インビトロで腫瘍組織ライブラリー中で発現されるAPRILおよび/またはAPRIL-Rすなわち、BCMAメッセージのレベルを測定することによってスクリーニングされ得る。APRILおよび/またはAPRIL-Rすなわち、BCMAメッセージが高度に発現される腫瘍組織ライブラリーが、候補物である。あるいは、候補物検索に関して公のデータベースおよび私的なデータベースすなわち、Incyteデータベースを、例えば、全長ヒトAPRILcDNA配列を用いてスクリーニングし得る。これらの技術を適用することによって、例えば、APRILmRNA発現は大多数の腫瘍型以下の表1中に見出されるものを含むが、これらに限定されないで検出されたことが見出された。表1特定の腫瘍治療における所望されない細胞増殖に関連した状態を処置する際に使用される本発明のAPRIL-Rアンタゴニストは、10、20、30、または40を超える腫瘍細胞の増殖を有利に阻害し、そして最も有利には50を超える腫瘍細胞の増殖を阻害する。APRIL-Rアンタゴニストはスクリーニングにより得られる例えば、実施例6における考察を参照のこと。例えば、APRIL-Rアンタゴニストは、結腸腫瘍および肺腫瘍にそれぞれ由来するヒト結腸癌HT29またはヒト肺癌A549例えば、図15における考察を参照のことに対する増殖阻害活性つまり、10、20、30、40または50を超えるに基いて選択され得る。本発明の別の実施形態は、動物におけるB細胞および非B細胞の増殖、樹状細胞により誘導されるB細胞の増殖および成熟または免疫グロブリン産生をAPRIL-Rポリペプチドを使用して阻害する方法を提供する。別の実施形態において、本発明は、自己免疫疾患、高血圧症、心臓血管障害、腎障害、リンパB細胞増殖障害、免疫抑制性疾患、臓器移植、炎症、およびHIVの処置においてAPRIL-Rを使用する方法を提供する。APRIL-Rとそのリガンドとの間のシグナル経路を含む免疫応答を処置し、抑制し、または変化するための薬剤を使用する方法もまた含まれる。本発明はまた、APRIL-Rポリペプチドおよび薬学的に受容可能な賦形剤を含む薬学的組成物を提供する。例えば、APRIL-Rポリペプチドのための適切なキャリア、およびそれらの処方物は、Osloらにより編集されたRemington’PharmaceuticalSciences、第16版、1980、MackPublishingCo.に記載される。代表的には、適切な量の薬学的に受容可能な塩が、処方物に等張性を与えるために処方物中に使用される。キャリアの例として、生理食塩液、リンガー溶液およびデキストロース溶液などのバッファーが挙げられる。溶液のpHは、好ましくは約5~約8であり、そしてより好ましくは約7.4~約7.8である。さらなるキャリアは、さらに固形疎水性ポリマーの半透性マトリックスなどの徐放性製剤を含み、このマトリックスは、成形された物品の形態例えば、リポソーム、フィルム、またはミクロ粒子にある。例えば、投与経路および投与されるAPRIL-Rポリペプチドの濃度に依存して特定のキャリアが好ましいことが、当業者に明らかである。投与は、注射例えば、静脈、腹腔内、皮下、筋内または他の方法例えば、効果のある形態で血流への送達を確実にする注入により達成され得る。別に示さない限り、本発明の実行には、当該分野の技術範囲である細胞生物学、細胞培養、分子生物学、微生物学、組換えDNA、タンパク質化学、および免疫学の慣習的な方法を用いる。このような技術は、文献に記載される。例えば、MolecularCloning:ALaboratoryManual、第2版Sambrook、FritschおよびManiatis編、ColdSpringHarborLaboratoryPress、1989;DNACloning、VolumeIおよびIID.N.Glover編、1985;OligonucleotideSynthesis、M.J.Gait編、1984;米国特許第4,683,195号Mullisら;NucleicAcidHybridizationB.D.HamesおよびS.J.Higgins編、1984;TranscriptionandTranslationB.D.HamesおよびS.J.Higgins編、1984;CultureofAnimalCellsR.I.Freshney編、AlanR.Liss,Inc.、1987;ImmobilizedCellsandEnzymes、IRLPress、1986;APracticalGuidetoMolecularCloningB.Perbal、1984;MethodsinEnzymology、Volume154および155Wuら編、AcademicPress、NewYork;GeneTransferVectorforMammalianCellsJ.H.MillerおよびM.P.Calos編、1987、ColdSpringHarborLaboratory;ImmunochemicalMethodsinCellandMolecularBiologyMayerおよびWalker編、AcademicPress、London、1987;HandbookofExperimentImmunology、VolumeI~IVD.M.WeirおよびC.C.Blackwell編、1986;ManipulatingtheMouseEmbryo、ColdSpringHarborLaboratoryPress、1986を参照のこと。以下の実施例は、本発明を説明するために提供され、これらの限定として解釈されるべきではない。実施例以下に開示される実施例において以下の方法を使用した。方法:PichiapastorisにおけるmycタグマウスAPRILCCM776のクローニングおよび発現発現ベクターpCCM213.10を、PDR004FRAGエピトープタグと共にN末端に付加したスーパーFASリガンドストークを有するH98muAPRILを取得することおよびSacIからNot1までのmuAPRILコード配列を切り取ることにより構築した。合成オリゴヌクレオチドLTB-559およびLTB-560は、α接合因子リーダー配列、mycエピトープタグ、ならびにFASリガンド由来のKELモチーフを含むXho-1-Sac1リンカーを形成する。muAPRILフラグメントおよびmuAPRILリンカーの両方をPichiapastoris発現プラスミドであるpccm211のXho-1-Not1部位に連結した。PCCM213.10をStu1で直線化し、GS115株his4-にエレクトロポレートし、そしてデキストロースを含む最小培地にプレートした。リッチ培地BMGY:緩衝化グリセロール複合培地において代表的な単一コロニーを接種し、そしてそれを30°Cで48時間の密度まで増殖させることにより、HIS4形質転換体をタンパク質発現について分析した。培養物をスパンし、そして1.5メタノールを含む誘導リッチ培地BMMY:緩衝化メタノール複合培地に細胞ペレットを再懸濁1:5した。30°Cで2日間のインキュベーションの後、上清をSDS-PAGEで泳動し、muAPRILの存在を評価した。クーマシー染色およびウェスタンブロット抗mycmAb9E10を用いるは、1つの株CCM776が、十分な量のグリコシル化された形態のmycタグH98muAPRILタンパク質を産生することを示した。myc-mAPRILの精製アミノ酸149個のタンパク質であるmyc-mAprilをpichiaで発現した。このタンパク質は7.45の等電点を有する。175mlのpichia上清を透析し、そして一昼夜、緩衝液をpH6.8の10mMトリスに交換し、次に20mlのSPカラムを通した。カラムをpH6.8の10mMトリス-HClで十分に洗浄し、250nmMNaClのPBSで溶出した。精製工程の第2段階は、ゲル濾過カラムS300を使用して達成した。20mlのSPカラムからのmyc-Aprilを含むフラクションを遠心分離により7mlの容量まで濃縮した。ゲル濾過の後、ODおよびクーマシーゲルにより検出されたmyc-APRILの8mgを回収した。また、マウスモノクローナル9E10抗体抗mycを使用するウェスタンブロット分析を行い、mycタグが精製工程後に無傷であることを示した。精製されたタンパク質がmyc-mAprilと一致することをN末端配列で確かめた。FLAG-ヒトAprilの精製プラスミドps429後にp1448と名づけられたを使用してリポフェクタミン剤Gibco-Brlおよび無血清培地を使用して293T細胞を過渡的にトランスフェクトした。哺乳動物発現ベクターPCR3Invitrogenにおいて構築されたプラスミドは、細胞培養培地へのN末端タンパク質を伴うヒトAPRILのレセプター結合ドメインをコードする。製造者の説明書Kodakに従って、抗FLAGmAbM2カラムおよび過剰の精製されたFLAGペプチドを使用してFLAG-APRILタンパク質を無血清培地から精製した。HBMCA-Fcの精製HBMCA-Fcを293細胞に過渡的にトランスフェクトした。hBCM-Fcを過剰発現する293細胞由来の条件培地をプロテインAカラムに充填した。25mMリン酸100nMNaClpH2.8を使用してタンパク質を溶出し、続いて1/20容量の0.5MNaPO4pH8.6で中和した。OD280に基いて選択したフラクションを還元SDS-PAGEゲルならびに非還元SDS-PAGEゲルおよび精製したタンパク質を同定するためのウェスタンブロットに供した。3mgのタンパク質を500mlの条件培地から回収した。myc-mAPRILは、FACS分析において種々の細胞株と結合する450ng/mlの精製したmyc-mAPRILを100μlのPBS/2FBSFcブロッキング剤であるFcBlock20μg/mlPharmingenおよび精製したヒトIgG10μg/mlSandoz中で細胞株と氷上で1時間結合させた。陽性結合を特異的ウサギ抗マウスAPRIL抗血清1:500およびロバ抗ウサギIgG-FITCJacksonを使用して明らかにした。細胞株A20、Raji、NIH3T3、およびHT29を提供者ATCCBethesda、MDにより示唆された培地中で維持した。BJAB細胞を10FBSおよびL-グルタミンを補充したHEPES緩衝化RPMI中で培養した。競合アッセイにおいて、450ng/mlのmyc-マウスAPRILを1μg/mlの競合タンパク質と共に添加した。実施例1:プレートアッセイを使用するAPRIL-Rに対するAPRIL結合の検出本実施例において、AprilとのBCMA会合を試験した。BCMAがAprilと会合するか否かを試験するために、共免疫沈降実験を実施した。この実験において、hBCMA-Fcおよびmyc-mAprilの両可溶性タンパク質を使用した。異なるTNFリガンド:myc-mApril;myc-CD40Lおよびmyc-RANKLと共にHBCMA-FcおよびLYbR-Fcを10FBSを含む培地中に1/2時間室温で添加した。Fcタンパク質を1~2時間でプロテインAビーズと結合させ、1mlのPBSで3回洗浄し、マウスモノクローナル9E10抗myc抗体を用いて免疫ブロット法により分析し、そして増強した化学発光を使用して発色させた。発明者らは、hBCMA-Fc免疫沈降物においてmyc-APRILを検出した。このことは、他のTNFリガンド、myc-CD40Lおよびmyc-RANKLはBCMAと結合する能力を有さなかったため、BCMAが特異的な手段でAprilと相互作用することを示す。myc-Aprilは、LTbR-Fcと会合しない。同じ膜をはがし、そして抗hIG-HRPを用いて再ブロットしてBCMA-Fcと共に同量のLTbR-Fcが免疫沈降物において使用されたことを示す。実施例2:本実施例は、hBCMA-FCがFLAG-hAPRILと相互作用することを記載する。ELISA分析:pH9.6の炭酸塩中の1μg/mlのレセプター-Fc融合タンパク質hBCMA-Fc-739またはhTNFR2-Fc-492でプレートを一昼夜4°Cでコートする。PBS/5脱脂粉乳/0.5Tween-20を使用して室温で2時間ブロックする。リガンドの倍々希釈を100μlのブロッキング緩衝液中で行ったTNFa-197は1000ng/mlから、muBAFF-657は1000ng/mlから、hApril-507不活性は2000ng/mlから、hApril-429は5倍濃縮培地から。リガンドとインキュベーションした後、プレートをPBS0.5Tween-20中で洗浄し、そして希釈緩衝液中の0.5μg/mlの抗FLAGmAbM2でプローブした。次に、抗体を抗マウスPO1/2000を使用して酵素的発色OPDにより検出した。免疫沈降実験:293T細胞を9cmのプレートにおいて示された発現プラスミドRec-Fcまたはflagリガンドでトランスフェクトした。トランスフェクトした細胞を、8mlのOptimem培地Gibco-BRL中で5日間置いた。200μlの各レセプターの条件培地を200μlの各リガンドの条件培地400μlのPBS10μlのProtGセファロ-スと混合することにより免疫沈降を実施した。これらをホイール上で1時間回転し、1mlのPBSで4回洗浄し、次に50μlのサンプル緩衝液DTT中で煮沸した。20μlの各免疫沈降物をレーン毎にロードした。明らかなブロッティングを1μg/mlの抗FLAGM2mAbSigma、StLouisMOおよび抗マウスPO1/2000を用いて行った。また、抗ヒトPOを用いた再プローブのブロットをチェックした:100μlの条件培地をMeOH/CHCl3/リゾチームで沈降した。この混合物を50μlサンプル緩衝液DDT中で煮沸し、20μlをロードした。明らかなブロットを抗FLAGmAbM21μg/mlおよび抗マウスPO1/2000を用いて行った。実施例3:本実施例は、myc-mAPRIL;hKayL-440hBAFF;およびFlag-mBAFFのhBCMA-Ig、hLT-R-Tg、またはhp80TNFR-Igへの結合を記載する。すべての実験を、25°Cで10μl/ml/分の流速で行った。各実験をHBS緩衝液10mMHEPES、150mMNaCl、0.005のP20界面活性剤、pH7.4を使用して行った。同じ溶液を実施緩衝液およびサンプル希釈液の両方に使用した。最初に、CM5チップBIAcore,Inc.表面をN-ヒドロキシスクシンイミド/N-エチル-N’-3-ジエチルアミノプロピル-カルボジイミドヒドロクロライドBIAcoreを用いて活性化した。次いで、20μlのhBCMA-Ig;15μlのhLT-R05-Igおよび10μlのhp80-TNFR10mMの酢酸中30g/mlに希釈を30μlのエタノールアミン-HClpH8.5で1回、そして15μlのエタノールアミン-HClpH8.5で再度ブロックした。これにより1600~3700の共鳴単位RUの表面密度が生じた。チップを1mMの蟻酸20μlで再生した。これら廃棄を5回繰り返し、再現可能な、そして安定なベースラインを達成した。実験のために、100μlのmyc-mApril、hKayL-440、およびFLAG-mBAFFそれぞれを希釈緩衝液で30μg/mlまで希釈し、そしてチップの表面上に注入した。各注入後迅速に、そのチップを500μlの希釈緩衝液で洗浄した。1mMの蟻酸20μl;続いて別の15μlの注入蟻酸を注入することにより、実験の間にその表面を再生した。再生後、チップを希釈緩衝液で平衡化した。実施例4:可溶性レセプター形態の生成ヒトに使用するためのレセプターインヒビターを形成するために、細胞外ドメインのヒトレセプターcDNA配列が必要である。マウスの形態が既知の場合、マウスcDNA配列を使用してヒトcDNAライブラリーを容易にスクリーンし得、そしてこのような操作は当該分野において慣用的に行われる。ヒトcDNA配列を用いて、膜内外ドメインおよび細胞内ドメインを存在させずにレセプターの細胞外ドメインをPCR増幅するためのオリゴヌクレオチドプライマーを設計し得る。代表的には、アミノ酸のほとんどを、最後のジスルフィド結合TNFドメインと膜内外ドメインとの間に含む。結果物の可溶性レセプター力価を最適化するために、含まれるストークstalk領域の量を変化し得た。種々のC末端Ig融合キメラベクターへのクローニングを可能にするために、適切な制限部位を含むように、この増幅片を操作する。あるいは、3’末端に停止シグナルを挿入し、そしてIg融合キメラアプローチの使用に頼ることなく、レセプターの可溶性形態を作製し得る。その結果物であるベクターは、バイオテクノロジーで使用されるほとんどの系酵母、昆虫細胞、細菌細胞および哺乳動物細胞を含むで発現され得、そして全ての発現タイプに対して例が存在する。所望であれば、種々のヒトFcドメインをFcRおよび補体の相互作用を最適化または排除するために付着し得る。あるいは、これらのFcドメインの変異形態を使用し、FcRもしくは補体の相互作用または特定の利点を有するFcドメインへのN-結合糖の付着を選択的に除去し得る。実施例5:アゴニストまたはアンタゴニスト抗体の生成:上記可溶性レセプター形態を使用し、マウスを免疫化し、そして従来の方法によりモノクローナル抗体を作製し得る。ELISA法により同定したその結果物であるmAbsを、種々のインビトロでの細胞アッセイにおいて、可溶性抗体としてのアゴニスト活性またはプラスチック上に固定されたアゴニスト活性のいずれかに対してさらにスクリーニングし得る。しばしば、HT29細胞株の死が、多くのTNFレセプターを介するシグナル伝達に対して感受性のある簡便な系である。この株が目的のレセプターを有さない場合、全長レセプターをHT29株に安定にトランスフェクトして、ここで細胞傷害性アッセイを行うことが可能にし得る。あるいは、このような細胞を細胞センサーCytosensor装置で使用し、レセプターの活性化が、シグナル伝達事象を示すpH変化を誘発し得るか否かを評価し得る。TNFファミリーレセプターは、このような形式で良好にシグナル伝達し、そしてこの方法は、レセプターにより引き起こされる実際の生物学的事象を知ることを必要としない。アゴニストmAbを臨床的使用のためヒト化する。また、この手順を使用してアンタゴニストmAbを規定し得る。このようなmAbは、アゴニスト活性の欠如およびELISA、古典的結合またはBIAcore技術によりモニターされるレセプター-リガンド相互作用阻害能により規定される。最後に、アゴニスト抗体に応答した種々の細胞によるケモカイン分泌の誘導は、スクリーニングアッセイを形成し得る。実施例6:レセプター-リガンド相互作用のインヒビターについてのスクリーニングレセプターIg融合タンパク質を用いて、レセプターと直接的に結合し得る分子について、いずれの組み合わせライブラリーをもスクリーンし得る。次に、これらの分子を、レセプター-Ig融合タンパク質およびリガンドの可溶性形態を使用するELISA形式のアッセイにおいてレセプター-リガンド相互作用阻害能について試験し得る。このELISAを直接使用して、阻害化合物について種々の天然産物ライブラリーなどをスクリーニングし得る。レセプターをHT29株などの細胞株にトランスフェクトし、次いでスクリーニングアッセイを形成し得る生物学的アッセイこの場合、細胞傷害性を形成し得る。実施例7:インビボにおける腫瘍増殖阻害腫瘍増殖アンタゴニストとしてのBCMA-Igの有効性をインビボで増殖させた多数の異種腫瘍細胞株を使用して試験した。胸腺欠損Nu/Nu免疫不全マウスをこれらの研究のために使用し、そして腫瘍細胞を皮下に移植した。積極的に増殖するSW480腫瘍株については、100μlの無パイロジェン滅菌PBSに8×105個の細胞を移植した。1つのコントロール群を非処置のままn=5にし、一方、他の群には100μgのコントロール-Ign=6タンパク質または100μgのBCMA-Ign=6タンパク質を投薬した。移植の直前に投薬を開始し、その後続けて7日毎に投薬した。マイクロメーターを使用して腫瘍の直径を測定し、そしてその体積を式、体積=4/3πr3を使用して計算する。SW480結腸癌の腫瘍は、Nu/Nuマウスモデルを使用して非常に迅速に増殖し、そして明白な腫瘍が10日以内に検出された。24日後にコントロールの平均腫瘍体積は、0.3cm3であり、一方、BCMA-Ig処置した腫瘍の平均体積は、0.19cm3であり、腫瘍負荷において46の減少であった。結腸癌HT29もまた、Nu/Nuモデルにおいて積極的に増殖する。これらの実験のために、100μlの無パイロジェン滅菌PBS中1×106個の細胞を皮下に移植し、そして投薬レジメンはSW480について記載の通りであった。明らかな腫瘍が7日後に検出され、そしてコントロール群においては、ほとんどの腫瘍が非常に迅速に増殖した。42日後、コントロール群非処置およびコントロールIg処置、n=12における腫瘍の平均体積は、0.485cm3であり、一方、BCMA-Ig処置群n=5における平均腫瘍サイズは、0.095cm3であり、腫瘍負荷において80の減少であった。50日後、コントロール群におけるマウスの30を腫瘍サイズが1.5cmより大きくなったため終点として記録し、実験を中止した。コントロール群と比較して、BCMA-Ig処置群のマウスの0を終点として記録した。これらの結果を、表2に示す。これは、腫瘍の平均体積における70の減少およびBCMA-Ig処置を使用する腫瘍増殖のHT29モデルにおける死亡率への顕著な影響を示す。肺癌腫瘍株A549は上記した結腸癌株よりもゆっくりと増殖する。この細胞株について、100μlの無パイロジェン滅菌PBS中に1×106個の細胞を移植し、そして前述したレジメンを使用して処置した。明白な腫瘍が移植の約20日後に検出された。腫瘍移植50日後、コントロール群非処置およびコントロール-Ig処置;n=16における腫瘍の平均体積は0.2cm3であり、一方、BCMA-Ig処置群n=7における腫瘍の平均体積は0.1cm3であり、腫瘍の体積において50の減少であった。BCMA-Ig処置群では、50日後に57のマウスが0.1cm3より小さい腫瘍を有し、一方、コントロール処置マウスの6のみがこのような小さな腫瘍負荷を維持した。腫瘍移植60日後、コントロール群の腫瘍の平均体積は0.3cm3に増加した。一方、BCMA-Ig処置した群における腫瘍の平均体積は、まだ0.2cm3より小さかった0.188。結腸癌株よりもよりゆっくり増殖する、マウスNIH3T3株についてもまた、本発明者らは、100μl発熱物質のない滅菌PBS中の5×106細胞を移植して、上に記載されるように処置した。NITH3T3細胞は、Nu/Nuマウスにおいて皮下に移植された場合、線維肉腫を形成する。4週間後、明白な腫瘍が、検出され、そしてコントロール群n=11においては、これらの腫瘍は、容量が拡大し、次の10日後で0.136cm3の平均サイズに達した。対照的に、BCMA-Ig処置群n=5における腫瘍容量だけは、0.03cm3のサイズ腫瘍負加量において78減少に達した。腫瘍移植48日後、コントロール群における平均腫瘍容量は、1.6cm3に達したが、一方BCMA-Ig処置群おける平均腫瘍容量は、ほんの0.8cm3腫瘍容量の50減少であった。52日目で、まだ生存している18だけの動物を残して、コントロール群における動物の829/11を、1.5cm3より大きい腫瘍容量に基づいて末期としてスコア付けした。対照的に、まだ生存している60の動物を残して、BCMA-Ig処置群における402/5の動物は、屠殺されなければならないような容量の腫瘍を有した。これらの結果は、表3に表にされる。経時的なNIH3T3の増殖を示す結果を、図13に示す。経時的なSW480の増殖を示す結果を、図14に示す。経時的なHT29の増殖を示す結果、および腫瘍移植後42日の個々の動物を示す散布図を、図15Aに示す。腫瘍移植後50日後および60日後の個々の動物におけるA549腫瘍の増殖を示す結果を、図15Bに示す。NIH3T3腫瘍細胞株に対する腫瘍増殖阻害の結果を、図13に示す。SW480腫瘍細胞株に対する腫瘍増殖阻害の結果を、図14に示す。HT29腫瘍細胞株およびA549腫瘍細胞株に対する腫瘍増殖阻害の結果を、図15に示す。実施例8:BCMA-IgGは、正常マウスにおけるB細胞の数を減少する原因となる。8週齢雌BALB/cマウスを、TheJacksonLaboratoryBarHarbor,MEから購入した。マウス3/群は、8日前、5日前、1日前および2日後に、腹腔内へPBS、400μgのヒトBCMA-huIgG1hBCMA-Ig融合タンパク質TeresaCachero,Biogenによって提供される、または400μgの精製ヒトIgGHuIgGSandoz,Basel,Switzerlandのいずれかを受けた。マウスは、100μgの10ヒツジ赤血球細胞SRBCColoradoSerumCompany、Denver,COを0日目に受けた。屠殺時、血液を、心臓穿刺を介してEDTを含むチューブへ収集し、赤血球を低張緩衝液の中で溶解した。血液をまた、血清調製のためにEDTAなしで収集した。単一細胞の懸濁液を、脾臓および腸間膜リンパ節MLNから調製し、赤血球を、低張緩衝液の中で溶解した。フローサイトメトリ-を、PE結合体化抗CD45R/B220、PE結合体化抗シンデカンsyndecan/CD138、PE結合体化抗B7.2、ならびにFITC結合体化抗IgMおよびFITC結合体化抗CD45R/B220を使用して実施した。全てのmAbを、PharmingenSanDiego,CAから購入した。手短に言えば、Fcレセプターを、氷の上で15分間10μg/mlのFcBlockPharmingenでブロックし、次いでPE結合体化mAbおよびFITC結合体化mAbを添加し、そして氷の上で20~30分インキュベートした。細胞を、1回洗浄し、そして0.5のパラホルムアルデヒド内に懸濁した。細胞蛍光データを、FACSCaliburTMフローサイトメーターBectonDickinson,SanJose,CAで獲得し、そしてCELLQuestTMソフトウェアBectonDickinsonを使用して分析した。hBCMA-Igでの処置後、試験した末梢血中および末梢リンパ系器官中のB細胞の数が約50減少した。B220highIgMlowB細胞は、PBS処置およびHuIgG処置マウスにおいて、それぞれ23.4および21.5の細胞となったが、この集団は、hBCMA-Ig処置マウスにおいてはほんの9.9の細胞を示した。形質細胞シンデカン/CD138は、hBCMA-Ig処置マウスにおける3.9と比較して、PBS処置およびHuIgG処置マウスの血液中に、それぞれ同じように5.7および4.8存在で、わずかに減少されたようである。B7.2分子は、hBCMA-Ig処置マウスでの1.9と比較して、PBS処置およびHuIgG処置マウスではそれぞれ3.1および4.5のB220細胞で上流調節された。脾臓において、B220highB細胞は、PBS処置およびHuIgG処置マウスにおいてそれぞれ36.7および40と比較して、hBCMA-Ig処置マウスにおいて著しく減少し、18.8を示した。この減少は、IgMhighおよびIgMlowの分集団の両方において観察された表1を参照のこと。脾臓において新たに形成されたB細胞画分B220lowIgMhighにおいて観察される変化はなかったデータは示さず。形質細胞シンデカン/CD138は、hBCMA-Ig処置マウスにおける2.4と比較して、PBS処置およびHuIgG処置マウスの脾臓中に、それぞれ同じように3.3および3.4存在で、わずかに減少されたようである。MLNは、B220B細胞において、PBS処置およびHuIgG処置マウスではそれぞれ26.7および35.8と比較して、hBCMA-Ig処置マウスでは14.1存在と減少を示した。このデータを、表3に要約する。SRBCで免疫化された後の、血液中のB7.2B細胞ならびにhBCMA-Ig処置マウスの血液および脾臓中の形質細胞の減少パーセンテージは、B細胞活性化および/または成熟化の阻害、ならびに活性化B細胞の潜在的に増加した排出があることを示唆する。SRBCのこの場合において、非常に小さいパーセントの抗原特異的B細胞は、活性化され、そして任意の抗原に応答する。hBCMA-Ig処置は、試験された全ての組織中のB細胞のパーセント約50によってこのような劇的な減少を生じるので、hBCMA-Igの活性はまた、静止、成熟B細胞を標的とするようである。従って、BCMA融合タンパク質を、B細胞媒介疾患における臨床的適用で治療的薬物として使用し得ることを、熟考する。疾患としては、性質が自己免疫である疾患全身性エリテマトーデス、重症筋無力症、自己免疫溶血性貧血、特発性血小板減少性紫斑病、抗リン脂質症候群、シャーガス病、グレーヴズ病、ヴェーゲナー肉芽腫症、結節性多発動脈炎および急速進行性糸球体腎炎などが挙げられる。治療的薬剤はまた、形質細胞障害多発性骨髄腫、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、H鎖病、原発性または免疫担当細胞関連アミロイドーシス、および未定量有意性の単一クローン性高ガンマグロブリン血症MGUSにおける適用を有する。腫瘍学標的としては、B細胞癌、白血病、およびリンパ種が挙げられる。当業者にとって、本発明の趣旨および範囲から逸脱せずに本発明のポリペプチド、組成物および方法において種々の改変および変異がなされ得ることは、明白である。従って、本発明は、当業者が、本発明の添付される請求の範囲およびそれらと等価の範囲内に入ることを条件として、本発明の改変および変異を包含することを示す。[配列表]"