"L-システイン生産能を有し、かつ、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性が増大するように改変された腸内細菌科に属する細菌。panD遺伝子の発現量を増大させることにより、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性が増大した、請求項1に記載の細菌。panD遺伝子のコピー数を高めること、又は、同遺伝子の発現調節配列を改変することにより、panD遺伝子の発現量が増大した、請求項2に記載の細菌。前記panD遺伝子が、下記AまたはBに記載のタンパク質をコードするDNAである、請求項2または3に記載の細菌。A配列番号8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、または60に示すアミノ酸配列を含むタンパク質。B配列番号8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、または60に示すアミノ酸配列において、1若しくは数個のアミノ酸の置換、欠失、挿入、又は付加を含むアミノ酸配列を含み、かつ、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を有するタンパク質。前記panD遺伝子が、下記aまたはbに記載のDNAである、請求項2~4のいずれか1項に記載の細菌。a配列番号7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、または59に示す塩基配列を含むDNA。b配列番号7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、または59に示す塩基配列と相補的な塩基配列又は該塩基配列から調製され得るプローブとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を有するタンパク質をコードするDNA。前記L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を有するタンパク質が、下記1および2の特徴を有する、請求項4または5に記載の細菌。124位のグリシンおよび25位のセリンが保存されている。29位のリジン、11位のヒスチジン、57位のスレオニン、および58位のチロシンが保存されている。前記L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を有するタンパク質が、さらに下記3の特徴を有する、請求項6に記載の細菌。315位のバリン、16位のスレオニン、20位のロイシン、22位のチロシン、29位のアスパラギン酸、42位のグルタミン酸、51位のアスパラギン、52位のグリシン、54位のアルギニン、60位のイソロイシン、72位のアスパラギン、73位のグリシン、74位のアラニン、75位のアラニン、76位のアラニン、83位のアスパラギン酸、および86位のイソロイシンが保存されている。さらに、下記の性質1~3の1またはそれ以上を有する請求項1~5のいずれか1項に記載の細菌。1セリンアセチルトランスフェラーゼ活性が上昇するように改変されている。2L-システイン排出系が強化されている。33-ホスホグリセレートデヒドロゲナーゼ活性が上昇するように改変されている。前記細菌がエシェリヒア属細菌である、請求項1~8のいずれか1項に記載の細菌。前記細菌がエシェリヒアコリである、請求項9に記載の細菌。前記細菌がパントエア属細菌である、請求項1~8のいずれか1項に記載の細菌。前記細菌がパントエアアナナティスである、請求項11記載の細菌。請求項1~12のいずれか1項に記載の細菌を培地中で培養し、該培地からL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を採取することを特徴とする、L-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物の製造法。前記培地がパントテン酸を含有する、請求項13に記載の方法。L-システイン生産能を有する腸内細菌科に属する細菌を、パントテン酸を含有する培地中で培養し、該培地からL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を採取することを特徴とする、L-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物の製造法。前記培地におけるパントテン酸の含有量が1mg/L以上である、請求項14または15に記載の方法。前記関連物質がL-シスチン、チアゾリジン誘導体、またはL-メチオニンである、請求項13~16のいずれか1項に記載の方法。本発明は、細菌のL-システイン生産能を向上させる新規な技術を開発し、L-システイン生産菌、及び同細菌を用いたL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物の製造法を提供することを課題とする。本発明者は、上記課題を解決するために鋭意研究を行った結果、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼの活性が増大するように細菌を改変することによってL-システイン生産能を向上させることができることを見出した。本発明者は、さらに、L-システイン生産に用いる培地にパントテン酸を添加することによりL-システイン生産能を向上させることができることを見出した。以上に基づき、本発明は完成された。すなわち本発明は以下のとおり例示できる。1L-システイン生産能を有し、かつ、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性が増大するように改変された腸内細菌科に属する細菌。2panD遺伝子の発現量を増大させることにより、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性が増大した、前記細菌。3panD遺伝子のコピー数を高めること、又は、同遺伝子の発現調節配列を改変することにより、panD遺伝子の発現量が増大した、前記細菌。4前記panD遺伝子が、下記AまたはBに記載のタンパク質をコードするDNAである、前記細菌。A配列番号8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、または60に示すアミノ酸配列を含むタンパク質。B配列番号8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、または60に示すアミノ酸配列において、1若しくは数個のアミノ酸の置換、欠失、挿入、又は付加を含むアミノ酸配列を含み、かつ、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を有するタンパク質。5前記panD遺伝子が、下記aまたはbに記載のDNAである、前記細菌。a配列番号7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、または59に示す塩基配列を含むDNA。b配列番号7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、または59に示す塩基配列と相補的な塩基配列又は該塩基配列から調製され得るプローブとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を有するタンパク質をコードするDNA。6前記L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を有するタンパク質が、下記1および2の特徴を有する、前記細菌。124位のグリシンおよび25位のセリンが保存されている。29位のリジン、11位のヒスチジン、57位のスレオニン、および58位のチロシンが保存されている。7前記L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を有するタンパク質が、さらに下記3の特徴を有する、前記細菌。315位のバリン、16位のスレオニン、20位のロイシン、22位のチロシン、29位のアスパラギン酸、42位のグルタミン酸、51位のアスパラギン、52位のグリシン、54位のアルギニン、60位のイソロイシン、72位のアスパラギン、73位のグリシン、74位のアラニン、75位のアラニン、76位のアラニン、83位のアスパラギン酸、および86位のイソロイシンが保存されている。8さらに、下記の性質1~3の1またはそれ以上を有する前記細菌。1セリンアセチルトランスフェラーゼ活性が上昇するように改変されている。2L-システイン排出系が強化されている。33-ホスホグリセレートデヒドロゲナーゼ活性が上昇するように改変されている。9前記細菌がエシェリヒア属細菌である、前記細菌。10前記細菌がエシェリヒアコリである、前記細菌。11前記細菌がパントエア属細菌である、前記細菌。12前記細菌がパントエアアナナティスである、前記細菌。13前記細菌を培地中で培養し、該培地からL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を採取することを特徴とする、L-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物の製造法。14前記培地がパントテン酸を含有する、前記方法。15L-システイン生産能を有する腸内細菌科に属する細菌を、パントテン酸を含有する培地中で培養し、該培地からL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を採取することを特徴とする、L-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物の製造法。16前記培地におけるパントテン酸の含有量が1mg/L以上である、前記方法。17前記関連物質がL-シスチン、チアゾリジン誘導体、またはL-メチオニンである、前記方法。本発明により、細菌のL-システイン生産能を向上させることができる。また、本発明によれば、L-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を効率よく製造することができる。<1>本発明の細菌本発明の細菌は、L-システイン生産能を有し、かつ、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼの活性が増大するように改変された、腸内細菌科に属する細菌である。本発明において、L-システインとは、フリー体のL-システインもしくはその塩、又はそれらの混合物であってもよい。塩としては、例えば硫酸塩、塩酸塩、炭酸塩、アンモニウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩が挙げられる。本発明において、L-システイン生産能とは、細菌を培地中で培養したときに、培地中または菌体内にL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を生成し、培地中または菌体から回収できる程度に蓄積する能力をいう。L-システイン生産能を有する細菌とは、野生株または親株よりも多い量のL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を生産し培地中または菌体内に蓄積することができる細菌を意味する。L-システイン生産能を有する細菌とは、好ましくは、0.05g/L以上、より好ましくは0.1g/L以上、特に好ましくは0.2g/L以上の量のL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を生産し培地に蓄積することができる細菌を意味する。細菌が産生したL-システインは、培地中で、ジスルフィド結合によって一部がL-シスチンに変換されることがある。また、L-システインと培地に含まれるチオ硫酸との反応によってS-スルホシステインが生成することがあるSzczepkowskiTWNaturevol182。さらに、細菌の細胞内で生成したL-システインは、細胞内に存在するケトン又はアルデヒド、例えばピルビン酸と縮合し、ヘミチオケタールを中間体としてチアゾリジン誘導体が生成することがある特許第2992010号。これらチアゾリジン誘導体及びヘミチオケタールは、平衡混合物として存在することがある。また、L-システインは、γ-グルタミルシステイン、グルタチオン、シスタチオニン、ホモシステイン、L-メチオニン、S-アデノシルメチオニン等の生合成の出発物質として用いられる。したがって、L-システイン生産能に加えて、これらL-システインを経由して生産される化合物を産生する能力を有する細菌を用いることによって、これらの化合物を製造することができる。したがって、本発明において、L-システイン生産能とは、L-システインのみを培地中又は菌体内に蓄積する能力に限られず、L-シスチン、前記のようなL-システインの誘導体、もしくは前記のようなL-システインを経由して生産される他の化合物、又はこれらの混合物を培地中又は菌体内に蓄積する能力も含まれるものとする。なお、本発明において、L-シスチン、前記のようなL-システインの誘導体、及び前記のようなL-システインを経由して生産される他の化合物をまとめてL-システインの関連物質という。L-システイン生産能を有する細菌としては、本来的にL-システイン生産能を有するものであってもよいが、下記のような細菌を、変異法や組換えDNA技術を利用して、L-システイン生産能を有するように改変したものであってもよい。本発明に用いる細菌としては、エシェリヒア属、エンテロバクター属、パントエア属、クレブシエラ属、セラチア属、エルビニア属、サルモネラ属、モルガネラ属など、腸内細菌科に属する細菌であって、L-システインを生産する能力を有するものであれば、特に限定されない。具体的にはNCBINationalCenterforBiotechnologyInformationデータベースに記載されている分類により腸内細菌科に属するものが利用できるhttpwwwncbinlmnihgovTaxonomyBrowserwwwtaxcgiid91347。改変に用いる腸内細菌科の親株としては、中でもエシェリヒア属細菌、エンテロバクター属細菌、パントエア属細菌、エルビニア属細菌、エンテロバクター属細菌、又はクレブシエラ属細菌を用いることが望ましい。エシェリヒア属細菌としては、特に限定されないが、具体的にはNeidhardtらの著書BackmannBJ1996DerivationsandGenotypesofsomemutantderivativesofEscherichiacoliK12p24602488Table1InFDNeidhardtEscherichiacoliandSalmonellaCellularandMolecularBiologySecondEditionAmericanSocietyforMicrobiologyPressWashingtonDCに挙げられるものが利用できる。エシェリヒア属細菌としては、例えば、エシェリヒアコリが挙げられる。エシェリヒアコリとしては具体的には、プロトタイプの野生株K12株由来のエシェリヒアコリW3110株ATCC27325、エシェリヒアコリMG1655株ATCC47076等が挙げられる。これらを入手するには、例えばアメリカンタイプカルチャーコレクション住所12301ParklawnDriveRockvilleMaryland20852POBox1549ManassasVA20108UnitedStatesofAmericaより分譲を受けることが出来る。すなわち各菌株に対応する登録番号が付与されており、この登録番号を利用して分譲を受けることが出来るhttpwwwatccorg参照。各菌株に対応する登録番号は、アメリカンタイプカルチャーコレクションのカタログに記載されている。エンテロバクター属細菌としては、例えば、エンテロバクターアグロメランスEnterobacteragglomerans、エンテロバクターアエロゲネスEnterobacteraerogenesが挙げられる。エンテロバクター属の代表的な株としては、エンテロバクターアグロメランスATCC12287株が挙げられる。また、具体的には、欧州特許出願公開952221号明細書に例示された菌株を使用することが出来る。パントエア属細菌としては、例えば、パントエアアナナティスPantoeaananatis、パントエアスチューアルティPantoeastewartiiパントエアアグロメランスPantoeaagglomerans、パントエアシトレアPantoeacitreaが挙げられる。パントエアアナナティスとしては、具体的には、パントエアアナナティスAJ13355株FERMBP-6614、SC17株FERMBP-11091が挙げられる。AJ13355株は、静岡県磐田市の土壌から、低pHでL-グルタミン酸及び炭素源を含む培地で増殖できる株として分離された株である。SC17株は、AJ13355株から、粘液質低生産変異株として選択された株である米国特許第6,596,517号。パントエアアナナティスAJ13355株は、平成10年2月19日に、通産省工業技術院生命工学工業技術研究所現名称、産業技術総合研究所特許生物寄託センター、住所郵便番号305-8566茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に、受託番号FERMP-16644として寄託され、平成11年1月11日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、受託番号FERMBP-6614が付与されている。また、パントエアアナナティスSC17株は、平成21年2月4日に、産業技術総合研究所特許生物寄託センター住所郵便番号305-8566茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に寄託され、受託番号FERMBP-11091が付与されている。尚、パントエアアナナティスAJ13355株は、分離された当時はエンテロバクターアグロメランスと同定され、エンテロバクターアグロメランスAJ13355株として寄託されたが、近年16SrRNAの塩基配列解析などにより、パントエアアナナティスに再分類されている。エルビニア属細菌としては、エルビニアアミロボーラErwiniaamylovora、エルビニアカロトボーラErwiniacarotovoraが挙げられ、クレブシエラ属細菌としては、クレブシエラプランティコーラKlebsiellaplanticolaが挙げられる。なお、特に、パントエア属細菌、エルビニア属細菌、エンテロバクター属細菌は、γ-プロテオバクテリアに分類される細菌であり、分類学的に非常に近縁であるJGenApplMicrobiol1997Dec43355361InternationalJournalofSystematicBacteriologyOct1997p10611067。よって、エンテロバクター属に属する細菌には、DNA-DNAハイブリダイゼーション実験等により、パントエアアグロメランス又はパントエアディスパーサPantoeadispersa等に再分類されているものがあるInternationalJournalofSystematicBacteriologyJuly198939p337345。例えば、エンテロバクターアグロメランスには、16SrRNAの塩基配列解析などにより、パントエアアグロメランス、パントエアアナナティス、又はパントエアスチューアルティに再分類されているものがある。また、エルビニア属に属する細菌には、パントエアアナナスPantoeaananas、パントエアスチューアルティに再分類されているものがあるInternationalJournalofSystematicBacteriologyJan199343p162173参照。本発明においては、腸内細菌科に分類されるものであれば、エンテロバクター属、パントエア属、及びエルビニア属等のいずれに属するものであってもよい。以下、腸内細菌科に属する細菌にL-システイン生産能を付与する方法、又はこれらの細菌のL-システイン生産能を増強する方法について述べる。細菌にL-システイン生産能を付与するには、栄養要求性変異株、アナログ耐性株又は代謝制御変異株の取得や、L-システインの生合成系酵素の発現が増強された組換え株の創製等、従来、コリネ型細菌又はエシェリヒア属細菌等の育種に採用されてきた方法を適用することができるアミノ酸発酵、株学会出版センター、1986年5月30日初版発行、第77-100頁参照。ここで、L-システイン生産菌の育種において、付与される栄養要求性、アナログ耐性、代謝制御変異等の性質は、単独であってもよく、2種又はそれ以上であってもよい。また、発現が増強されるL-システイン生合成系酵素も、単独であってもよく、2種又はそれ以上であってもよい。さらに、栄養要求性、アナログ耐性、代謝制御変異等の性質の付与と、生合成系酵素の増強が組み合わされてもよい。L-システイン生産能を有する栄養要求性変異株、L-システインのアナログ耐性株、又は代謝制御変異株を取得するには、親株又は野生株を通常の変異処理、すなわちX線や紫外線の照射、またはNメチルNニトロNニトロソグアニジンMNNGもしくはエチルメタンスルフォネートEMS等の変異剤処理などによって処理し、得られた変異株の中から、栄養要求性、アナログ耐性、又は代謝制御変異を示し、かつL-システイン生産能を有するものを選択することによって得ることができる。以下、腸内細菌科に属する細菌にL-システイン生産能を付与する方法、又はこれらの細菌のL-システイン生産能を増強する方法、及びL-システイン生産能を有する細菌について具体的に例示する。L-システイン生産能の付与又は増強、及びL-システイン生産菌細菌のL-システイン生産能は、L-システイン生合成経路の酵素、又はL-セリン等、同経路の基質となる化合物の生成に関与する酵素の活性を増強することにより向上させることができる。そのような酵素としては、例えば、セリンアセチルトランスフェラーゼSATや3-ホスホグリセレートデヒドロゲナーゼPGDが挙げられる。酵素活性の増強は、後述するように、目的の酵素をコードする遺伝子の発現を増強することや、目的の酵素の非活性を増強することにより達成できる。セリンアセチルトランスフェラーゼは、L-システインによるフィードバック阻害を受けるため、特に、このフィードバック阻害が低減又は解除されたセリンアセチルトランスフェラーゼをコードする変異型cysE遺伝子を細菌に保持させることによって、同酵素活性を増強することができる。また、3-ホスホグリセレートデヒドロゲナーゼは、セリンによるフィードバック阻害を受けるため、特に、このフィードバック阻害が低減又は解除された変異型3-ホスホグリセレートデヒドロゲナーゼをコードする変異型serA遺伝子を細菌に保持させることによって、同酵素活性を増強することができる。エシェリヒアコリに由来する、フィードバック阻害耐性の変異型SATとして具体的には、256位のメチオニン残基がグルタミン酸残基に置換された変異型SAT特開平11155571、256位のメチオニン残基がイソロイシン残基に置換された変異型SATDenkDandBoeckAJGeneralMicrobiol133515525、97位のアミノ酸残基から273位のアミノ酸残基までの領域における変異、又は227位のアミノ酸残基からC末端領域の欠失を有する変異型SATWO9715673、米国特許第6218168号、野生型SATの89~96位に相当するアミノ酸配列において1又は複数の変異を含み、かつ、L-システインによるフィードバック阻害が脱感作されている、変異型SAT米国特許公開第20050112731、95位及び96位のVal残基及びAsp残基が、各々Arg残基及びPro残基に置換された変異型SAT変異型遺伝子名cysE5、米国特許公開第20050112731、及び、167位のスレオニン残基がアラニン残基に置換された変異型SAT米国特許第6218168号、米国特許公開第20050112731等が知られている。SATをコードする遺伝子としては、エシェリヒアコリの遺伝子に限られず、SAT活性を有するタンパク質をコードするものであれば、使用することができる。また、L-システインによるフィードバック阻害を受けないシロイヌナズナ由来のSATアイソザイムが知られており、これをコードする遺伝子を用いることもできるFEMSMicrobiolLett179453459。また、セリンによるフィードバック阻害耐性の変異型PGDをコードする遺伝子としては、serA5遺伝子米国特許第6180373号が知られている。また、細菌のL-システイン生産能は、L-システイン排出系を強化することによっても向上させることができる。L-システイン排出系は、L-システインの排出に関与するタンパク質をコードする遺伝子の発現を増強することにより強化することができる。L-システインの排出に関与するタンパク質としては、ydeD遺伝子にコードされるYdeDタンパク質、yfiK遺伝子にコードされるYfiKタンパク質、yeaS遺伝子にコードされるYeaSタンパク質が挙げられる。よって、ydeD遺伝子DassleretalMolMicrobiol3611011112、yfiK遺伝子特開2004-49237、又はyeaS遺伝子欧州特許出願公開第1016710号明細書の発現を増強することにより、L-システイン生産能を高めることができる。また、YeaSタンパク質の28位のスレオニン残基、137位のフェニルアラニン残基、および/または188位のロイシン残基に変異を導入することによっても、L-システイン排出系が強化されL-システイン生産能を高めることができる欧州特許出願公開第2218729号明細書。具体的には、YeaSタンパク質の28位のスレオニン残基をアスパラギンに置換する変異、137位のフェニルアラニン残基をセリン、グルタミン、アラニン、ヒスチジン、システイン、及びグリシンのいずれかに置換する変異、および/または188位のロイシン残基をグルタミンに置換する変異が好ましい欧州特許出願公開第2218729号明細書。また、細胞に毒性を示す物質を排出するのに適したタンパク質の中には、L-システインの排出に関与するものがある。よって、それらをコードする遺伝子の発現を増強することによりL-システイン排出系を強化することができる。例えば、細胞に毒性を示す物質を排出するのに適したタンパク質をコードする遺伝子であるmar遺伝子座、emr遺伝子座、acr遺伝子座、cmr遺伝子座、mex遺伝子、bmr遺伝子、若しくはqacA遺伝子米国特許第5972663号、又はemrAB、emrKY、yojIH、acrEF、bcr、若しくはcusA遺伝子特開2005-287333号公報の発現を上昇させることにより、L-システイン生産能を高めることができる。また、硫酸塩/チオ硫酸塩輸送系を増強することによっても、L-システイン生産能を向上させることができる。硫酸塩/チオ硫酸塩輸送系タンパク質群は、cysPTWAM遺伝子クラスターによってコードされている特開2005-137369号公報、EP1528108号明細書。また、細菌のL-システイン生産能は、L-システインの分解に寄与するシステインデスルフヒドラーゼの活性を低下させることにより向上させることができる。エシェリヒアコリでは、システインデスルフヒドラーゼ活性を有するタンパク質として、metC遺伝子にコードされるシスタチオニン-β-リアーゼ特開平11-155571号、ChandraetalBiochemistry2130643069、tnaA遺伝子にコードされるトリプトファナーゼ特開2003-169668、AustinNewtonetalJBiolChem24012111218、cysM遺伝子にコードされるO-アセチルセリンスルフヒドリラーゼB特開2005-245311、及び、malY遺伝子にコードされるMalY特開2005-245311が知られている。酵素活性の低下は、後述する手法により達成できる。L-システイン生産菌は、下記の性質1~3の1またはそれ以上を有するのが好ましい。1セリンアセチルトランスフェラーゼ活性が上昇するように改変されている。2L-システイン排出系が強化されている。33-ホスホグリセレートデヒドロゲナーゼ活性が上昇するように改変されている。L-システイン生産菌としては、具体的には、フィードバック阻害耐性のセリンアセチルトランスフェラーゼSATをコードする複数種のcysEアレルで形質転換されたエシェリヒアコリJM15株米国特許第6,218,168号、細胞に毒性を示す物質を排出するのに適したタンパク質をコードする過剰発現遺伝子を有するエシェリヒアコリW3110株米国特許第5,972,663号、システインデスルフヒドラーゼ活性が低下したエシェリヒアコリ特開平11-155571号公報、cysB遺伝子によりコードされるシステインレギュロンの正の転写制御因子の活性が上昇したエシェリヒアコリW3110株WO01/27307などのエシェリヒア属に属する株、ydeD遺伝子、変異型cysE遺伝子および変異型serA5遺伝子を保持するプラスミドpACYC-DES特開2005-137369US20050124049A1、EP1528108A1を有するエシェリヒアコリ等が挙げられるが、これらに限定されない。pACYC-DESは、前記3遺伝子をpACYC184に挿入することによって得られたプラスミドであり、各遺伝子はPompAプロモーターにより制御される。L-システインを出発物質として生合成されるγ-グルタミルシステイン、グルタチオン、シスタチオニン、ホモシステイン、L-メチオニン、及びS-アデノシルメチオニン等の化合物の生産能も、目的の化合物の生合成系路の酵素活性を増強するか、その生合成系路から分岐する経路の酵素又は目的化合物を分解する酵素の活性を低下させることによって、付与又は増強することができる。例えば、γ-グルタミルシステイン生産能は、γ-グルタミルシステイン合成酵素活性の増強及び/又はグルタチオン合成酵素活性の低下によって、増強することができる。また、グルタチオン生産能はγ-グルタミルシステイン合成酵素活性及び/又はグルタチオン合成酵素活性の増強によって、付与又は増強することができる。また、グルタチオンによるフィードバック阻害に対して耐性をもつ変異型γ-グルタミルシステイン合成酵素を用いることでもγ-グルタミルシステインやグルタチオンの生産能を増強させることができる。グルタチオンの生産についてはLiらの総説YinLiGongyuanWeiJianChenApplMicrobiolBiotechnol66233242に詳しく記載されている。L-メチオニン生産能は、L-スレオニン要求性、ノルロイシン耐性を付与することによって、付与又は増強することができる特開2000139471号。Ecoliにおいては、L-スレオニンの生合成に関与する酵素の遺伝子は、スレオニンオペロンthrABCとして存在し、例えば、thrBC部分を欠失させることによってL-ホモセリン以降の生合成能を失ったL-スレオニン要求株を取得することができる。ノルロイシン耐性株では、S-アデノシルメチオニンシンセターゼ活性が弱化され、L-メチオニン生産能が付与又は増強される。Ecoliにおいては、S-アデノシルメチオニンシンセターゼはmetK遺伝子にコードされている。また、L-メチオニン生産能は、メチオニンリプレッサーの欠損、ホモセリントランスサクシニラーゼ、シスタチオニンγ-シンテース、及びアスパルトキナーゼ-ホモセリンデヒドロゲナーゼIIなどのL-メチオニン生合成に関与する酵素の活性の増強によっても、付与又は増強することができる特開2000139471号。Ecoliにおいては、メチオニンリプレッサーはmetJ遺伝子に、ホモセリントランスサクシニラーゼはmetA遺伝子に、シスタチオニンγ-シンテースはmetB遺伝子に、アスパルトキナーゼ-ホモセリンデヒドロゲナーゼIIはmetL遺伝子にそれぞれコードされている。また、L-メチオニンによるフィードバック阻害に対して耐性をもつ変異型ホモセリントランスサクシニラーゼを用いることでもL-メチオニンの生産能を付与又は増強することができる特開2000139471号、US20090029424。なお、L-メチオニンはL-システインを中間体として生合成されるため、L-システインの生産能の向上によりL-メチオニンの生産能も向上させることができる特開2000139471号、US20080311632。よって、L-メチオニン生産能を付与又は増強するためには、L-システイン生産能を付与又は増強させることも有効である。L-メチオニン生産菌としては、具体的には、AJ11539、AJ11540、AJ11541、AJ11542、L-メチオニンのアナログであるノルロイシン耐性を有する218株や73株等のEcoli株が挙げられる。また、L-メチオニン生産菌としては、EcoliW3110由来のAJ13425特開2000139471号を用いることもできる。AJ13425は、メチオニンリプレッサーを欠損し、細胞内のS-アデノシルメチオニンシンセターゼ活性が弱化し、細胞内のホモセリントランスサクシニラーゼ活性、シスタチオニンγ-シンターゼ活性、及びアスパルトキナーゼ-ホモセリンデヒドロゲナーゼII活性が増強されたL-スレオニン要求株である。AJ13425は、平成10年5月14日より、通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所現名称、産業技術総合研究所特許生物寄託センター、住所郵便番号3058566茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に寄託され、受託番号FERMP16808が付与されている。シスタチオニン、ホモシステインはL-メチオニン生合成経路の中間体であるため、これら物質の生産能を増強するためには、上記のL-メチオニンの生産能を増強させる方法を一部利用することが有効である。シスタチオニン生産能を増強させる具体的方法として、メチオニン要求性変異株を用いる方法特願2003-010654や、発酵培地にシステインまたはその生合成原料及び/又はホモセリンまたはその生合成原料を添加する方法特開2005-168422が知られている。ホモシステインはシスタチオニンを前駆体とするため、ホモシステイン生産能を増強するためには、シスタチオニン生産能を増強させる上記方法も有効である。また、L-メチオニンを出発物質として生合成されるS-アデノシルメチオニン等の化合物の生産能も、目的の化合物の生合成系路の酵素活性を増強するか、その生合成系路から分岐する経路の酵素又は目的化合物を分解する酵素の活性を低下させることによって、付与又は増強することができる。例えば、S-アデノシルメチオニン生産能は、メチオニンアデノシルトランスフェラーゼ活性を強化することやEP0647712、EP1457569、mdfA遺伝子にコードされる排出因子MdfAを強化することUS7410789で付与又は増強することができる。以下、システインデスルフヒドラーゼ等の酵素活性を低下させる手法について記載する。本発明において、酵素の活性が低下するとは、目的の酵素活性が野性株や親株等の非改変株と比較して減少していることを意味し、活性が完全に消失している場合を含む。酵素活性は、例えば非改変株と比較して75以下、50以下、25以下、又は10以下に低下していることが好ましく、活性が完全に消失しているのが特に好ましい。なお、酵素によっては、活性を完全に消失させないのが好ましい場合もある。酵素活性が低下するような改変は、例えば、目的の酵素をコードする遺伝子の発現を低下させることにより達成できる。遺伝子の発現の低下は、例えば、遺伝子のプロモーターやSD配列等の発現調節配列を改変することにより達成できる。発現調節配列を改変する場合には、発現調節配列は、好ましくは1塩基以上、より好ましくは2塩基以上、特に好ましくは3塩基以上が改変される。また、発現調節配列の一部または全部を欠失させてもよい。また、遺伝子の発現の低下は、アンチセンスRNAを発現させることによっても達成できる。また、酵素活性が低下するような改変は、例えば、染色体上の目的の酵素をコードする遺伝子のコード領域の一部または全部を欠失させることにより達成できる。さらには、染色体上の遺伝子の前後の配列を含めて、遺伝子全体を欠失させてもよい。酵素活性の低下が達成できる限り、欠失させる領域は、N末端領域、内部領域、C末端領域等のいずれの領域であってもよい。通常、欠失させる領域は長い方が確実に遺伝子を不活化することができる。また、欠失させる領域の前後の配列は、リーディングフレームが一致しないことが好ましい。また、酵素活性が低下するような改変は、例えば、染色体上の目的の酵素をコードする遺伝子のコード領域にアミノ酸置換ミスセンス変異を導入すること、終始コドンを導入することナンセンス変異、あるいは1~2塩基を付加または欠失するフレームシフト変異を導入すること等によっても達成できるJournalofBiologicalChemistry272861186171997ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesUSA9555115515JournalofBiologicalChemistry2662083320839。また、酵素活性が低下するような改変は、例えば、染色体上の目的の酵素をコードする遺伝子のコード領域に他の配列を挿入することによっても達成できる。挿入部位は、遺伝子のいずれの領域であってもよいが、挿入する配列は長い方が確実に遺伝子を不活化することができる。また、挿入部位の前後の配列は、リーディングフレームが一致しないことが好ましい。他の配列としては、コードされるタンパク質の機能を低下又は消失させるものであれば特に制限されないが、例えば、抗生物質耐性等のマーカー遺伝子やL-システイン生産に有用な遺伝子が挙げられる。染色体上の遺伝子を上記のように改変することは、例えば、遺伝子の部分配列を欠失し、正常に機能するタンパク質を産生しないように改変した欠失型遺伝子を作製し、該欠失型遺伝子を含む組換えDNAで細菌を形質転換して、欠失型遺伝子と染色体上の遺伝子とで相同組換えを起こさせることにより、染色体上の遺伝子を欠失型遺伝子に置換することによって達成できる。その際、組換えDNAには、宿主の栄養要求性等の形質にしたがって、マーカー遺伝子を含ませておくと操作がしやすい。欠失型遺伝子によってコードされるタンパク質は、生成したとしても、野生型タンパク質とは異なる立体構造を有し、機能が低下又は消失する。このような相同組換えを利用した遺伝子置換による遺伝子破壊は既に確立しており、Redドリブンインテグレーションと呼ばれる方法DatsenkoKAandWannerBLProcNatlAcadSciUSA9766406645、Redドリブンインテグレーション法とλファージ由来の切り出しシステムChoEHGumportRIGardnerJFJBacteriol18452005203とを組み合わせた方法WO2005010175号参照等の直鎖状DNAを用いる方法や、温度感受性複製起点を含むプラスミドを用いる方法、接合伝達可能なプラスミドを用いる方法、宿主内で複製起点を持たないスイサイドベクターを用いる方法などがある米国特許第6303383号、特開平05007491号。また、酵素活性が低下するような改変は、例えば、突然変異処理により行ってもよい。突然変異処理としては、紫外線照射、または、NメチルNニトロNニトロソグアニジンMNNG、エチルメタンスルフォネートEMS、メチルメタンスルフォネートMMS等の通常変異処理に用いられている変異剤による処理が挙げられる。酵素活性が低下したことは、同酵素活性を測定することにより確認できる。システインデスルフヒドラーゼ活性は、特開2002-233384公報に記載された手法により測定することができる。標的遺伝子の転写量が低下したことの確認は、同遺伝子から転写されるmRNAの量を非改変株と比較することによって行うことが出来る。mRNAの量を評価する方法としては、ノーザンハイブリダイゼーション、RT-PCR等が挙げられるMolecularcloningColdspringHarborLaboratoryPressColdspringHarbor2001。標的タンパク質の量が低下したことの確認は、抗体を用いてウェスタンブロットによって行うことが出来るMolecularcloningColdspringHarborLaboratoryPressColdspringHarbor2001。L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性の増大本発明の細菌は、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性が増大するように改変されている。本発明の細菌は、上述したようなL-システイン生産能を有する腸内細菌科に属する細菌を、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性が増大するように改変することによって得ることができる。ただし、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性が増大するように改変を行った後に、L-システイン生産能を付与又は増強してもよい。本発明において、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性とは、L-アスパラギン酸を脱炭酸しβ-アラニンを生成する反応を触媒する活性をいう。また、本発明において、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を有するタンパク質をL-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼという。L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性が増大することで、β-アラニンを中間代謝産物して生合成されるパントテン酸の生産量が増大すると予想される。L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性が増大するとは、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性が野生株又は親株等の非改変株に対して増大していることを意味する。L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性は、非改変株と比較して増大していれば特に制限されないが、非改変株と比較して好ましくは150以上、より好ましくは200以上、さらに好ましくは300以上に向上している。また、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性が増大するとは、もともとL-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を有する菌株においてL-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を増大させることだけでなく、もともとL-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性が存在しない菌株にL-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を付与することを含む。また、結果としてL-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性が増大する限り、細菌が本来有するL-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼを弱化および/または欠損させた上で、好適なL-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼを導入してもよい。L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を増大させるような改変は、例えば、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼをコードする遺伝子の発現を増強させることによって達成される。遺伝子の発現の増強は、例えば、遺伝子のコピー数を増加させることにより達成できる。遺伝子のコピー数の増加は、染色体に目的の遺伝子を導入することにより達成できる。染色体への遺伝子の導入は、例えば相同的組み換えを利用して行うことができる。例えば、染色体上に多数のコピーが存在する配列を標的として相同的組み換えを行うことで、染色体へ遺伝子の多数のコピーを導入することができる。染色体上に多数のコピーが存在する配列としては、反復DNA配列や、トランスポゾンの両端に存在するインバーテッドリピート等が挙げられるが、これらに限定されない。また、染色体上に存在するL-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ遺伝子の横にタンデムに連結させてもよいし、染色体上の不要な遺伝子上に重複して組み込んでもよい。このような遺伝子導入は、温度感受性ベクターを用いて、あるいはインテグレーションベクターを用いて達成することが出来る。また、米国特許第5,595,889号に開示されるように、トランスポゾンに遺伝子を組み込み、それを染色体へ遺伝子の多数のコピーを導入するよう転移させることも可能である。トランスポゾンとしては、例えば、Mu、Tn10、Tn5が利用できる。染色体に遺伝子が導入されたことは、遺伝子の一部をプローブとしてサザンハイブリダイゼーションを行うことによって確認できる。また、遺伝子のコピー数の増加は、目的遺伝子を含むベクターを宿主細菌に導入することによっても達成できる。例えば、目的遺伝子を含むDNA断片を、宿主細菌で機能するベクターと連結して目的遺伝子の発現ベクターを構築し、当該発現ベクターで宿主細菌を形質転換することにより、目的遺伝子のコピー数を増加させることができる。ベクターとしては、宿主細菌の細胞内において自律複製可能なベクターを用いることができる。ベクターは、マルチコピーベクターであるのが好ましい。また、形質転換体を選択するために、ベクターは抗生物質耐性遺伝子などのマーカーを有することが好ましい。エシェリヒアコリ細胞内において自律複製可能なベクターとしては、pUC19、pUC18、pHSG299、pHSG399、pHSG398、pACYC184、pBR322、pSTV29いずれもタカラバイオ社より入手可、pMW219ニッポンジーン社、pTrc99Aファルマシア社、pPROK系ベクタークロンテック社、pKK233‐2クロンテック社製、pET系ベクターノバジェン社、pQE系ベクターキアゲン社、広宿主域ベクターRSF1010等が挙げられる。また、遺伝子の発現の増強は、遺伝子の転写効率を向上させることにより達成できる。遺伝子の転写効率の向上は、例えば、染色体上の遺伝子のプロモーターをより強力なプロモーターに置換することにより達成できる。より強力なプロモーターとは、遺伝子の転写が、もともと存在している野生型のプロモーターよりも向上するプロモーターを意味する。より強力なプロモーターとしては、例えば、公知の高発現プロモーターであるT7プロモーター、trpプロモーター、lacプロモーター、tacプロモーター、およびPLプロモーター等を用いることができる。また、より強力なプロモーターとしては、各種レポーター遺伝子を用いることにより、在来のプロモーターの高活性型のものを取得してもよい。例えば、プロモーター領域内の-35、-10領域をコンセンサス配列に近づけることにより、プロモーターの活性を高めることができる国際公開第00/18935号。プロモーターの強度の評価法および強力なプロモーターの例は、Goldsteinらの論文ProkaryoticpromotersinbiotechnologyBiotechnolAnnuRev1105128等に記載されている。また、遺伝子の発現の増強は、遺伝子の翻訳効率を向上させることにより達成できる。遺伝子の翻訳効率の向上は、例えば、染色体上の遺伝子のSD配列リボソーム結合部位RBSともいうをより強力なSD配列に置換することにより達成できる。より強力なSD配列とは、mRNAの翻訳が、もともと存在している野生型のSD配列よりも向上するSD配列を意味する。より強力なSD配列としては、例えば、ファージT7由来の遺伝子10のRBSが挙げられる。さらに、RBSと開始コドンとの間のスペーサー領域、特に開始コドンのすぐ上流の配列における数個のヌクレオチドの置換がmRNAの翻訳効率に非常に影響を及ぼすことが知られており、これらを改変することによっても遺伝子の翻訳効率を向上させることができる。本発明においては、プロモーター、SD配列、およびRBSと開始コドンとの間のスペーサー領域等の遺伝子の発現に影響する部位を総称して発現調節領域ともいう。発現調節領域は、プロモーター検索ベクターやGENETYX等の遺伝子解析ソフトを用いて決定することができる。これら発現調節領域の改変は、例えば、温度感受性ベクターを用いた方法や、Redドリブンインテグレーション法WO2005/010175により行うことができる。また、遺伝子の発現の増強は、目的の遺伝子の発現を上昇させるようなレギュレーターを増幅すること、又は、目的の遺伝子の発現を低下させるようなレギュレーターを欠失または弱化させることによっても達成される。レギュレーターとしては、例えばLysRファミリーなどに属するものが挙げられ、データベースEcoCychttpecocycorg等を利用して見出すことができる。目的の遺伝子の転写量の増大や目的のタンパク質の量の増大を指標として、レギュレーターの改変を行えばよい。上記のような遺伝子の発現を増強させる手法は、単独で用いてもよく、任意に組み合わせて用いてもよい。また、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を増大させるような改変は、例えば、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼの非活性を増強することによっても達成できる。非活性が増強されたL-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼは、例えば、種々の細菌を探索し取得することができる。また、在来のL-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼに変異を導入することで高活性型のものを取得してもよい。非活性の増強は、単独で用いてもよく、上記のような遺伝子の発現を増強させる手法と任意に組み合わせて用いてもよい。形質転換の方法は特に限定されず、従来知られた方法を用いることができる。例えば、エシェリヒアコリK-12株について報告されているような、受容菌細胞を塩化カルシウムで処理してDNAの透過性を増す方法MandelMandHigaAJMolBiol53159や、バチルスズブチリスについて報告されているような、増殖段階の細胞からコンピテントセルを調製してDNAを導入する方法DuncanCHWilsonGAandYoungFEGene1153を用いることができる。あるいは、バチルスズブチリス、放線菌類、及び酵母について知られているような、DNA受容菌の細胞を、組換えDNAを容易に取り込むプロトプラストまたはスフェロプラストの状態にして組換えDNAをDNA受容菌に導入する方法ChangSandChoenSNMolecGenGenet168111BibbMJWardJMandHopwoodOANature274398HinnenAHicksJBandFinkGRProcNatlAcadSciUSA751929も応用できる。目的の酵素活性が増大したことは、同酵素活性を測定することにより確認できる。L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性は、非特許文献4DuschNetalApplEnvironMicrobiol1999Apr6515309に記載された手法により測定することができる。目的の遺伝子の転写量が増大したことの確認は、同遺伝子から転写されるmRNAの量を野生株、あるいは非改変株と比較することによって行うことが出来る。mRNAの量を評価する方法としては、ノーザンハイブリダイゼーション、RT-PCR等が挙げられるMolecularcloning2001。目的のタンパク質の量が増大したことの確認は、抗体を用いてウェスタンブロットによって行うことが出来るMolecularcloning2001。なお、上記のような遺伝子の発現や酵素の非活性を増強する手法は、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼやそれをコードする遺伝子に限られず、SAT等の任意の酵素やそれらをコードする遺伝子等についても同様に適用できる。L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼは、通常、panD遺伝子によりコードされる。panD遺伝子がコードするタンパク質をPanDタンパク質ともいう。エシェリヒアコリK12MG1655株のpanD遺伝子は、NCBIデータベースに、GenBankaccessionNC000913として登録されているゲノム配列中、146314~146694位の配列の相補配列に相当する。エシェリヒアコリK12MG1655株のpanD遺伝子は、ECK0130、JW0127と同義である。また、エシェリヒアコリK12MG1655株のPanDタンパク質は、GenBankaccessionNP414673として登録されている。前記MG1655株のpanD遺伝子の塩基配列、及び同遺伝子がコードするタンパク質のアミノ酸配列を、それぞれ配列番号7及び8に示す。また、パントエアアナナティスSC17株のpanD遺伝子の塩基配列、及び同遺伝子がコードするタンパク質のアミノ酸配列を、それぞれ配列番号9及び10に示す。また、コリネバクテリウムグルタミカム2256株のpanD遺伝子の塩基配列、及び同遺伝子がコードするタンパク質のアミノ酸配列を、それぞれ配列番号11及び12に示す。バチラスサブチリス168株のpanD遺伝子の塩基配列、及び同遺伝子がコードするタンパク質のアミノ酸配列を、それぞれ配列番号13及び14に示す。細菌が属する種又は菌株によって、panD遺伝子の塩基配列に差異が存在することがあるため、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を増大させるような改変を受けるpanD遺伝子は、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を有するタンパク質をコードする限り、配列番号7、9、11、または13に示す塩基配列のバリアントであってもよい。panD遺伝子のバリアントは、例えば配列番号7、9、11、または13の塩基配列を参考にして、BLAST等によって検索出来る。また、panD遺伝子のバリアントは、同遺伝子のホモログ、例えば腸内細菌科に属する細菌やコリネ型細菌等の微生物の染色体を鋳型にして、例えば配列番号7、9、11、または13の塩基配列に基づいて調製される合成オリゴヌクレオチドを用いてPCRで増幅可能な遺伝子を含む。また、上記以外の細菌のpanD遺伝子ホモログの例として、以下の細菌のpanD遺伝子が挙げられる。カッコ内は、エシェリヒアコリK12株のPanDタンパク質配列番号8と、各細菌のpanD遺伝子ホモログがコードするPanDタンパク質との、BLASTによる同一性を示す。これらの遺伝子の塩基配列及びそれらがコードするアミノ酸配列を、配列番号15~60に示す。なお、panD遺伝子は、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を有するタンパク質をコードする限り、これらホモログのバリアントであってもよい。ArthrobacteraurescensATCCBAA138654BacteroidesfragilisATCC2528544BacteroidesvulgatusATCC848248BrevibacteriumlactofermentumATCC1386943ChlorobiumtepidumATCC4965247CitrobacterkoseriATCCBAA89596ClavibactermichiganensisNCPPB38251CorynebacteriumjeikeiumNCTC1191548CytophagahutchinsoniiATCC3340644EnterobactersakazakiiATCCBAA89490FlavobacteriumjohnsoniaeATCC1706145FlavobacteriumpsychrophilumATCC4951144KlebsiellapneumoniaesubsppneumoniaeMGH78578ATCC70072189MethylophilusmethylotrophusATCC5352853MycobacteriumaviumsubspparatuberculosisATCC1985150ParabacteroidesdistasonisATCC850348PorphyromonasgingivalisATCC5397845Rhodococcussp49SaccharopolysporaerythraeaATCC1163551SalinibacterruberATCCBAA60544Salmonellaentericasubsparizonaeserovar62ATCCBAA73196StreptomycescoelicolorATCC1014751ThermobifidafuscaATCC2773049panD遺伝子は、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を有するタンパク質をコードする限り、上記のようなPanDタンパク質のアミノ酸配列、例えば配列番号8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、または60に示すアミノ酸配列において、1若しくは数個の位置での1若しくは数個のアミノ酸の置換、欠失、挿入又は付加等を含む配列を有するタンパク質をコードする遺伝子であってもよい。前記1若しくは数個とは、アミノ酸残基のタンパク質の立体構造における位置やアミノ酸残基の種類によっても異なるが、具体的には好ましくは1~20個、より好ましくは1~10個、さらに好ましくは1~5個を意味する。上記の1若しくは数個のアミノ酸の置換、欠失、挿入、または付加は、タンパク質の機能が正常に維持される保存的変異である。保存的変異の代表的なものは、保存的置換である。保存的置換とは、例えば、置換部位が芳香族アミノ酸である場合には、Phe、Trp、Tyr間で、置換部位が疎水性アミノ酸である場合には、Leu、Ile、Val間で、極性アミノ酸である場合には、Gln、Asn間で、塩基性アミノ酸である場合には、Lys、Arg、His間で、酸性アミノ酸である場合には、Asp、Glu間で、ヒドロキシル基を持つアミノ酸である場合には、Ser、Thr間でお互いに置換する変異である。保存的置換とみなされる置換としては、具体的には、AlaからSer又はThrへの置換、ArgからGln、His又はLysへの置換、AsnからGlu、Gln、Lys、His又はAspへの置換、AspからAsn、Glu又はGlnへの置換、CysからSer又はAlaへの置換、GlnからAsn、Glu、Lys、His、Asp又はArgへの置換、GluからGly、Asn、Gln、Lys又はAspへの置換、GlyからProへの置換、HisからAsn、Lys、Gln、Arg又はTyrへの置換、IleからLeu、Met、Val又はPheへの置換、LeuからIle、Met、Val又はPheへの置換、LysからAsn、Glu、Gln、His又はArgへの置換、MetからIle、Leu、Val又はPheへの置換、PheからTrp、Tyr、Met、Ile又はLeuへの置換、SerからThr又はAlaへの置換、ThrからSer又はAlaへの置換、TrpからPhe又はTyrへの置換、TyrからHis、Phe又はTrpへの置換、及び、ValからMet、Ile又はLeuへの置換が挙げられる。また、上記のようなアミノ酸の置換、欠失、挿入、付加、または逆位等には、遺伝子が由来する微生物の個体差、種の違いに基づく場合などの天然に生じる変異によって生じるものも含まれる。さらに、上記のような保存的変異を有する遺伝子は、上記のようなPanDタンパク質のアミノ酸配列全体、例えば配列番号8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、または60に示すアミノ酸配列全体に対して、80以上、好ましくは90以上、より好ましくは95以上、より好ましくは97以上、特に好ましくは99以上の相同性を有し、かつ、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を有するタンパク質をコードする遺伝子であってもよい。尚、本明細書において、相同性homologyは、同一性identityを指すことがある。また、panD遺伝子は、公知の遺伝子配列から調製され得るプローブ、例えば配列番号7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、または59に示す塩基配列の相補配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を有するタンパク質をコードするDNAであってもよい。ここで、ストリンジェントな条件とは、いわゆる特異的なハイブリッドが形成され、非特異的なハイブリッドが形成されない条件をいう。一例を示せば、相同性が高いDNA同士、例えば80以上、好ましくは90以上、より好ましくは95以上、より好ましくは97以上、特に好ましくは99以上の相同性を有するDNA同士がハイブリダイズし、それより相同性が低いDNA同士がハイブリダイズしない条件、あるいは通常のサザンハイブリダイゼーションの洗いの条件である60°C、1×SSC、0.1SDS、好ましくは、60°C、0.1×SSC、0.1SDS、さらに好ましくは、68°C、0.1×SSC、0.1SDSに相当する塩濃度、温度で、1回、より好ましくは2~3回洗浄する条件が挙げられる。プローブは、遺伝子の相補配列の一部であってもよい。そのようなプローブは、公知の遺伝子配列に基づいて作製したオリゴヌクレオチドをプライマーとし、これらの塩基配列を含むDNA断片を鋳型とするPCRによって作製することができる。例えば、プローブとして、300bp程度の長さのDNA断片を用いる場合には、ハイブリダイゼーションの洗いの条件としては、50°C、2×SSC、0.1SDSが挙げられる。なお、上記の遺伝子やタンパク質のバリアントに関する記載は、セリンアセチルトランスフェラーゼ、3-ホスホグリセレートデヒドロゲナーゼ等の酵素、およびYdeDタンパク質、並びにそれらをコードする遺伝子にも同様に適用される。各細菌由来PanDタンパク質のアミノ酸配列のアラインメントを図1に示す。これまでに報告されているように、PanDタンパク質には共通して保存されている領域が存在するArmandoAlbertetalNaturestructuralbiologyvolume5number4289293。したがって、PanDタンパク質においては、それらの保存領域が保存されているのが好ましい。具体的には、PanDタンパク質において、24位のグリシンおよび25位のセリンが保存されているのが好ましい。PanDタンパク質はαサブユニットとβサブユニットに分割されるが、24位のグリシンおよび25位のセリンはその分割場所である。これらのアミノ酸残基は、前記アラインメント図1において、どの種のPanDタンパク質においても共通して保存されていた。また、9位のリジン、11位のヒスチジン、57位のスレオニン、および58位のチロシンが保存されているのが好ましい。これらのアミノ酸残基は立体構造からポケットと推測され、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性に寄与すると考えられる。これらのアミノ酸残基は、前記アラインメント図1において、どの種のPanDタンパク質においても共通して保存されていた。また、15位のバリン、16位のスレオニン、20位のロイシン、22位のチロシン、29位のアスパラギン酸、42位のグルタミン酸、51位のアスパラギン、52位のグリシン、54位のアルギニン、60位のイソロイシン、72位のアスパラギン、73位のグリシン、74位のアラニン、75位のアラニン、76位のアラニン、83位のアスパラギン酸、および86位のイソロイシンから選択される1またはそれ以上の残基が保存されているのが好ましく、これら全ての残基が保存されているのがより好ましい。これらのアミノ酸残基は、前記アラインメント図1において、ほぼ共通して保存されていた。なお、上記各アミノ酸残基は、配列番号8における各位置に相当するアミノ酸残基を意味する。すなわち、上記各アミノ酸残基の位置は相対的な位置を示すものであって、アミノ酸の欠失、挿入、付加などによってその位置は前後することがある。例えば、25位のセリン残基とは、配列番号8における25位に相当するセリン残基を意味し、25位よりもN末端側の1アミノ酸残基が欠失している場合は、N末端から24番目開始コドンによってコードされるメチニオン残基を含むのセリン残基が25位のセリン残基であるものとする。また、25位よりもN末端側に1アミノ酸残基挿入されている場合は、N末端から26番目のセリン残基が25位のセリン残基であるものとする。また、例えば、PanDタンパク質において25位のセリン残基が保存されているとは、当該PanDタンパク質において配列番号8における25位に相当するアミノ酸残基がセリンであることを意味する。その他のアミノ酸残基についても同様である。<2>本発明のL-システイン、もしくはその関連物質、又はこれらの混合物の製造法上記のようにして得られる本発明の細菌を培地中で培養し、該培地からL-システイン、もしくはその関連物質、又はこれらの混合物を採取することにより、これらの化合物を製造することができる。L-システインの関連物質としては、先述したS-スルホシステイン、チアゾリジン誘導体、同チアゾリジン誘導体に相当するヘミチオケタール、L-メチオニン、S-アデノシルメチオニン等が挙げられる。使用する培地としては、炭素源、窒素源、硫黄源、無機イオン及び必要に応じその他の有機成分を含有する通常の培地が挙げられる。炭素源としては、グルコース、フラクトース、シュクロース、糖蜜やでんぷんの加水分解物などの糖類、フマル酸、クエン酸、コハク酸等の有機酸類を用いることができる。窒素源としては、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム等の無機アンモニウム塩、大豆加水分解物などの有機窒素、アンモニアガス、アンモニア水等を用いることができる。硫黄源としては、硫酸塩、亜硫酸塩、次亜硫酸塩、チオ硫酸塩、硫化物等の無機硫黄化合物が挙げられる。有機微量栄養源としては、ビタミンB1などの要求物質または酵母エキス等を適量含有させることが望ましい。これらの他に、必要に応じてリン酸カリウム、硫酸マグネシウム、鉄イオン、マンガンイオン等が少量添加される。培養は好気的条件下で30~90時間実施するのがよく、培養温度は25°C~37°Cに、培養中pHは5~8に制御することが好ましい。尚、pH調整には無機あるいは有機の酸性あるいはアルカリ性物質、更にアンモニアガス等を使用することができる。培養物からのL-システイン、もしくはその関連物質、又はこれらの混合物の採取は通常のイオン交換樹脂法、沈澱法その他の公知の方法を組み合わせることにより実施できる。上記のようにして得られるL-システインは、L-システイン誘導体の製造に用いることができる。システイン誘導体としては、メチルシステイン、エチルシステイン、カルボシステイン、スルホシステイン、アセチルシステイン等が挙げられる。また、L-システインのチアゾリジン誘導体が培地に蓄積した場合は、培地からチアゾリジン誘導体を採取し、チアゾリジン誘導体とL-システインとの間の反応平衡をL-システイン側に移動させることによって、L-システインを製造することができる。また、培地にS-スルホシステインが蓄積した場合、例えばジチオスレイトール等の還元剤を用いて還元することによってL-システインに変換することができる。また、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性が増大するようL-システイン生産菌を改変することに代えて、パントテン酸を培地に添加することによってもL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を製造することができる。すなわち、本発明の方法のさらなる態様以下、本発明の第2の方法ともいうは、L-システイン生産能を有する細菌を、パントテン酸を含有する培地中で培養し、該培地からL-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物を採取することを特徴とする、L-システインもしくはその関連物質、又はこれらの混合物の製造法、である。なお、本発明の第2の方法に用いるL-システイン生産能を有する細菌は、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性が増大するよう改変されていてもよく、そうでなくともよい。すなわち、L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性が増大するようL-システイン生産菌を改変することと、パントテン酸を培地に添加することとを組み合わせてもよい。培地におけるパントテン酸の含有量は、1mg/L以上であるのが好ましく、2mg/L以上であるのがより好ましく、5mg/L以上であるのがさらに好ましく、10mg/L以上であるのが特に好ましい。パントテン酸の含有量の上限は特に制限されないが、例えば、10g/L以下であってもよく、1g/L以下であってもよい。パントテン酸は、フリー体であってもよく、パントテン酸塩であってもよく、それらの任意の混合物であってもよい。パントテン酸塩としては、特に制限されず、カルシウム塩、ナトリウム塩等が挙げられる。パントテン酸は、培養の全期間において培地に含有されていてもよく、培養の一部の期間においてのみ培地に含有されていてもよい。例えば、本発明の方法が、L-システイン生産菌を増殖させる段階と、L-システインを生産蓄積させる段階を含む場合、少なくともL-システインを生産蓄積させる段階においてパントテン酸を培地に含有させればよく、L-システイン生産菌を増殖させる段階においては、パントテン酸を培地に含有させてもよく、含有させなくてもよい。また、L-システインを生産蓄積させる段階においても、パントテン酸は、その全期間において培地に含有されていてもよく、その一部の期間においてのみ培地に含有されていてもよい。例えば、パントテン酸の含有量は、L-システインを生産蓄積させる段階の全期間において前記の範囲である必要はなく、同段階の初期に含有量が前記の範囲となるようにパントテン酸を培地に含有させ、培養時間の経過に伴いパントテン酸含有量が減少してもよい。また、パントテン酸を連続的あるいは間欠的に追加添加してもよい。本発明の第2の方法においては、パントテン酸を含有する培地を用いる限り、上述した本発明の細菌を用いる方法と同様の培地成分および同様の培養条件を用いることができる。以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明する。なお、以下の実施例において、システインはL-システインを意味する。<実施例>1Cglutamicum2256株、EcoliMG1655株、PananatisSC17株、Bsubtilis168株由来panD遺伝子を搭載したプラスミドの構築L-アスパルテート-α-デカルボキシラーゼ活性を増強するため、各種panD遺伝子を搭載したpanD遺伝子の発現用プラスミドを以下の手順で構築した。Cglutamicum2256株ATCC13869のゲノムDNAをテンプレートとして、プライマーpanDFWCCAAGCTTATGGCATTCCAATAGTCAGG:配列番号1およびpanDRVCGAAGCTTGGGAAAAAGACGGCTCTACC:配列番号2を用いたPCRにより、panD遺伝子の上流約300bpから下流約200bpまでを含む約900bpのpanD遺伝子断片を増幅した。上記プライマーは、5末端に制限酵素HindIIIのサイトを有するようデザインされている。PCRは、Pyrobestポリメラーゼタカラバイオ社を用いてプロトコールに記載の標準的な組成で行い、反応条件は94°C5分の後、98°C5秒、55°C5秒、72°C1分を30サイクルとした。得られた断片をHindIIIで処理し、pSTV29Takara社のHindIIIサイトに挿入してサブクローニングを行い、シークエンスが正しいことを確認した。そこから再度HindIIIにて切り出した断片を、同酵素で消化したpMW218Takara社にベクター上のlacZ遺伝子と同じ向きに挿入し、Cglutamicum2256株のpanD遺伝子がクローニングされたプラスミドpMW218panDカナマイシン耐性マーカーを取得した。同様に、EcoliMG1655株ATCC47076のゲノムDNAをテンプレートとして、プライマーpanDFWATGATTCGCACGATGCTGCAGG:配列番号3およびpanDRVTCAAGCAACCTGTACCGGAATCG:配列番号4を用いたPCRにより、panD遺伝子断片を取得した。PCRは、上記と同一の条件で行った。pMW218をSmaI消化した後、得られた断片をベクター上のlacZ遺伝子と同じ向きに挿入し、EcoliMG1655株のpanD遺伝子がクローニングされたプラスミドpMW218panDカナマイシン耐性マーカーを取得した。クローニングされたpanD遺伝子は、ベクター上のlacプロモーターのリードスルーにて発現する。同様に、PananatisSC17株FERMBP11091のゲノムDNAを鋳型とし、プライマーpanDFWGTAAAGGCTGCAGGTCGTATTTTTGGCTGT:配列番号5およびpanDRWGTTCTATATCGCGGTCTACTTCCTGATTCA:配列番号6を用いたPCRにより、panD遺伝子断片を取得した。PCRは、Pyrobestポリメラーゼタカラバイオ社を用いてプロトコールに記載の標準的な組成で行い、反応条件は94°C1分の後、94°C30秒、60°C30秒、72°C1分を30サイクルとした。pSTV29をsmaI消化した後、得られた断片をベクター上のlacZ遺伝子と同じ向きに挿入し、PananatisSC17株のpanD遺伝子がクローニングされたプラスミドpSTV29panDクロラムフェニコール耐性マーカーを取得した。クローニングされたpanD遺伝子は、ベクター上のlacプロモーターのリードスルーにて発現する。プラスミドpCRpanDBsは、Bsubtilis168株ATCC23857のpanD遺伝子を含む領域が搭載されたプラスミドである。pCRpanDBsは、pMW218ベクターNipponGene社のBamHIサイトにBsubtilis168株のゲノムの2350947bp~2353681bpの領域ゲノムデータベースSubtiListによる;httpgenolistpasteurfrSubtiListが両端のSau3AIで挿入された構造を有する。PCR等の定法によりBsubtilis168株のpanD遺伝子およびその周辺領域を容易に取得でき、本実験の目的に合致するpCRpanDBsと同様の構造のプラスミドを構築できる。2Pananatisシステイン生産菌SC17intE5112の構築各種panD遺伝子の発現強化がシステイン生産に及ぼす効果を調べるため、PananatisSC17株の染色体に阻害解除型SATをコードする遺伝子を挿入し、システイン生産能を有するSC17intE5112株を以下の手順で構築した。プラスミドpMIVCysE5特開2009232844には、L-システインによるフィードバック阻害が解除された変異型SATであるCysE5US20050112731をコードする遺伝子cysE5およびクロラムフェニコール耐性遺伝子を含むCysE5カセットが搭載されている。プラスミドpACYC184からEco88IXbaIで切り出したテトラサイクリン耐性遺伝子を平滑末端化し、同じく平滑末端化した前記pMIVCysE5のPvuIサイトに挿入し、pMTCysE5を構築した。得られたpMTCysE5を利用し、ヘルパーとしてpMH10を用いる定法に従ったminiMuファージシステムEP1149911により、CysE5カセットをPananatis野生株であるSC17株の染色体に導入した。形質転換体の選択は、クロラムフェニコール耐性をマーカーとして行った。CysE5カセットが染色体に導入された形質転換体を約50個ピックアップし、システインの生産培養を行ったところ、大部分のクローンが02~03gLのシステインを生産した。その中で、1クローンがシステインを約07gL生産し、このクローンをSC17intE511と名づけた。SC17intE511のゲノムDNAを抽出し、得られたゲノムDNAをエレクトロポレーションにてSC17に導入し、CysE5カセットが染色体に導入された株を改めて作製した。形質転換体の選択は、クロラムフェニコール耐性をマーカーとして行った。約20個の形質転換体をピックアップし、システインの生産培養を行ったところ、ほぼすべてのクローンが02~03gLのシステインを生産した。このうちいくつかのクローンのSAT活性を定法US20050112731により測定し、親株であるSC17intE511と同程度のSAT活性を有するクローンを選択してSC17intE5112と名づけた。3Pananatisシステイン生産菌における各種panD遺伝子の発現強化およびパントテン酸添加のシステイン生産への効果各種panD遺伝子の発現強化がシステイン生産に及ぼす効果を調べるため、Pananatisシステイン生産菌SC17intE5112を上記のように構築されたプラスミドpMW218panD、pSTV28panDPa、pCRpanDBsで形質転換した。Pananatisの形質転換は定法に従ってエレクトロポレーションにより行い、形質転換体のセレクションはプラスミドの抗生物質耐性マーカーに対応した抗生物質25mgLクロラムフェニコール、または20mgLカナマイシンを含むLB寒天培地5gLイーストエクストラクト、10gLトリプトン、10gL塩化ナトリウム、15gLアガーにて行った。また対照株として、それぞれ空ベクターを形質転換したものも取得した。以上のようにして得られたSC17intE5112pMW218panD株、SC17intE5112pMW218株、SC17intE5112pSTV28panDPa株、SC17intE5112pSTV29株、SC17intE5112pCRpanDBs株、SC17intE5112pCR株を用いてシステイン生産培養を行い、生産されるシステインの量を比較した。また、SC17intE5112pSTV29株を用い、パントテン酸カルシウムを20mgL添加してシステイン生産培養を行い、パントテン酸添加がシステイン生産に及ぼす効果を調べた。培養には、下記組成のシステイン生産培地にプラスミドの抗生物質耐性マーカーに対応した抗生物質25mgLクロラムフェニコール、または20mgLカナマイシンを添加して用いた。<システイン生産培地組成>硫酸アンモニウム15gLリン酸二水素カリウム15gL硫酸マグネシウム七水和物1gLチアミン塩酸塩01mgL硫酸第一鉄七水和物17mgLモリブデン酸ナトリウム二水和物015mgL塩化コバルト六水和物07mgL塩化マンガン四水和物16mgL硫酸亜鉛七水和物03mgL硫酸銅五水和物025mgLトリプトン06gLイーストエクストラクト03gL塩化ナトリウム06gL炭酸カルシウム20gLLヒスチジン塩酸塩一水和物135mgLチオ硫酸ナトリウム4gLピリドキシン塩酸塩2mgLグルコース60gLシステイン生産培養は以下の手順で行った。システイン生産菌各株をクロラムフェニコールまたはカナマイシンを含有するLB寒天培地に塗り広げ、34°Cで一晩前培養を行った。10マイクロリッターサイズの植菌用ループNUNC社ブルーループでプレート上約7cm分の菌体を掻き取り、大試験管内径23mm、長さ20cmに入れた2mlのシステイン生産培地中に植菌し、培養開始時点での菌体量がほぼ同じになるよう調製した。32°Cにて振とう培養を行い、グルコースが完全に消費された時点で培養を終了約13~16時間し、培地中に生産されたシステイン量を定量した。培養は、各株とも4連で行った。システインの定量はGaitondeMKBiochemJ1967Aug10462733に記載の方法で行った。システイン生産量の平均値と標準偏差を表1に示す。表1に示したとおり、各種panD遺伝子の発現強化およびパントテン酸添加はいずれもシステイン生産量を増加させることが明らかとなった。4阻害解除型SAT遺伝子搭載プラスミドpACYCE1の構築システイン生産菌を構築するために用いる、阻害解除型SATをコードする遺伝子を搭載するプラスミドpACYCE1を以下の手順で構築した。プラスミドpACYCDE1には、L-システインによるフィードバック阻害が解除された変異型SATをコードするcysEX遺伝子US5972663A、並びに、システインおよびアセチルセリンの排出因子をコードするydeD遺伝子が搭載されており、これを導入することでシステインを著量生産するシステイン生産菌を作製できる。pACYCDE1は、EP1528108B1に記載されているpACYCDESの構築方法と概ね同じ方法により構築することができる。pACYCDESとの違いは、pACYCDE1では、serA5遺伝子が搭載されておらず、cysEX遺伝子とydeD遺伝子の2遺伝子のみがpACYC184ベクターに搭載されている点である。pACYCDE1において、cysEX遺伝子とydeD遺伝子はいずれもompAプロモーターに連結されている。このpACYCDE1をMnuIで切断してセルフライゲーションさせ、ydeDの内側約330bpを欠損させた。こうして構築した、cysEX遺伝子を搭載し、ydeD遺伝子の機能が消失したプラスミドをpACYCE1とし、以下の実験に使用した。5Ecoliシステイン生産菌における各種panD遺伝子の発現強化およびパントテン酸添加のシステイン生産への効果panD遺伝子の発現強化およびパントテン酸添加の効果がPananatis以外の細菌においても得られるかどうか、Ecoliシステイン生産菌を用いて検討した。Ecoliシステイン生産菌としては、EcoliMG1655株に前記pACYCE1テトラサイクリン耐性マーカーをエレクトロポレーション法により導入して得られた形質転換体MG1655pACYCE1を用いた。このEcoliシステイン生産菌MG1655pACYCE1を、pMW218panD、pMW218panDEcで形質転換した。Ecoliの形質転換は定法に従ってエレクトロポレーションにより行い、形質転換体のセレクションはプラスミドの抗生物質耐性マーカーに対応した抗生物質25mgLクロラムフェニコール、または20mgLカナマイシンを含むLB寒天培地にて行った。また対照株として、空ベクターpMW218を形質転換した株も取得した。以上のようにして得られた、MG1655pACYCE1pMWpanD株、MG1655pACYCE1pMWpanD株、MG1655pACYCE1pMW218株を用いてシステイン生産培養を行い、生産されるシステインの量を比較した。また、MG1655pACYCE1pMW218株を用い、パントテン酸カルシウムを10mgL添加してシステイン生産培養を行い、パントテン酸添加がシステイン生産に及ぼす効果を調べた。用いたシステイン生産培地の組成は、グルコース濃度を40gLとしたこと以外は上記の通りである。上記と同様の方法で、グルコースが完全に消費されるまで19~22時間培養し、培地中に生産されたシステイン量を定量した。培養は、各株とも4連で行った。システイン生産量の平均値と標準偏差を表2に示す。表2に示したとおり、Ecoliにおいても、各種panD遺伝子の発現強化およびパントテン酸添加はいずれもシステイン生産量を増加させることが明らかとなった。6パントテン酸添加濃度の検討パントテン酸を添加することによりシステイン生産が増加することが今回明らかとなったため、次に、効果が得られるために必要なパントテン酸濃度の検討を行った。PananatisSC17intE5112pSTV29株を、10mg~100mgLの濃度域でパントテン酸カルシウムを添加したシステイン生産培地にて培養し、システイン生産量を測定した。用いたシステイン生産培地の組成は上記の通りであり、グルコース濃度は60gLとした。各濃度とも4連で、約16~20時間培養を行った。システイン生産量の平均値と標準偏差を図2に示す。パントテン酸カルシウムを1mgL以上添加した場合に、パントテン酸濃度依存的にシステイン生産量が増加することが明らかとなった。7各種panD遺伝子の発現強化株によるシステイン生産各種PanDタンパク質をコードする遺伝子の塩基配列、例えば配列番号7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、または59に示す塩基配列のうち先頭20bpをフォワードFwプライマーに、末端20bpの相補配列をリバースRvプライマーに設定し、94°C5分の後、98°C5秒、55°C5秒、72°C1分を30サイクルからなるPCRにより各種PanD断片を増幅する。得られた断片を適当なプロモーター制御下に配置する、例えばpSTV28TaKaRa社のSmaIサイトへ導入してlacプロモーター制御下に配置することで、PanD遺伝子の発現ベクターを作製する。得られたPanD遺伝子の発現ベクターをシステイン生産菌、例えばPananatisSC17intE5112へエレクトロポレーション法にて導入し、上記の方法にてシステイン生産培養を行うことで、効率的にシステインを生産できる。配列表の説明配列番号1:Cglutamicum2256のpanD遺伝子増幅用プライマー配列番号2:Cglutamicum2256のpanD遺伝子増幅用プライマー配列番号3:EcoliMG1655のpanD遺伝子増幅用プライマー配列番号4:EcoliMG1655のpanD遺伝子増幅用プライマー配列番号5:PananatisSC17のpanD遺伝子増幅用プライマー配列番号6:PananatisSC17のpanD遺伝子増幅用プライマー配列番号7:EcoliMG1655のpanD遺伝子の塩基配列配列番号8:EcoliMG1655のPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号9:PananatisSC17のpanD遺伝子の塩基配列配列番号10:PananatisSC17のPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号11:Cglutamicum2256のpanD遺伝子の塩基配列配列番号12:Cglutamicum2256のPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号13:Bsubtilis168のpanD遺伝子の塩基配列配列番号14:Bsubtilis168のPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号15:ArthrobacteraurescensのpanD遺伝子の塩基配列配列番号16:ArthrobacteraurescensのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号17:BacteroidesfragilisのpanD遺伝子の塩基配列配列番号18:BacteroidesfragilisのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号19:BacteroidesvulgatusのpanD遺伝子の塩基配列配列番号20:BacteroidesvulgatusのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号21:BrevibacteriumlactofermentumのpanD遺伝子の塩基配列配列番号22:BrevibacteriumlactofermentumのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号23:ChlorobiumtepidumのpanD遺伝子の塩基配列配列番号24:ChlorobiumtepidumのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号25:CitrobacterkoseriのpanD遺伝子の塩基配列配列番号26:CitrobacterkoseriのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号27:ClavibactermichiganensisのpanD遺伝子の塩基配列配列番号28:ClavibactermichiganensisのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号29:CorynebacteriumjeikeiumのpanD遺伝子の塩基配列配列番号30:CorynebacteriumjeikeiumのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号31:CytophagahutchinsoniiのpanD遺伝子の塩基配列配列番号32:CytophagahutchinsoniiのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号33:EnterobactersakazakiiのpanD遺伝子の塩基配列配列番号34:EnterobactersakazakiiのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号35:FlavobacteriumjohnsoniaeのpanD遺伝子の塩基配列配列番号36:FlavobacteriumjohnsoniaeのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号37:FlavobacteriumpsychrophilumのpanD遺伝子の塩基配列配列番号38:FlavobacteriumpsychrophilumのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号39:KlebsiellapneumoniaeのpanD遺伝子の塩基配列配列番号40:KlebsiellapneumoniaeのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号41:MethylophilusmethylotrophusのpanD遺伝子の塩基配列配列番号42:MethylophilusmethylotrophusのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号43:MycobacteriumaviumのpanD遺伝子の塩基配列配列番号44:MycobacteriumaviumのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号45:ParabacteroidesdistasonisのpanD遺伝子の塩基配列配列番号46:ParabacteroidesdistasonisのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号47:PorphyromonasgingivalisのpanD遺伝子の塩基配列配列番号48:PorphyromonasgingivalisのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号49:Rhodococcus属細菌のpanD遺伝子の塩基配列配列番号50:Rhodococcus属細菌のPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号51:SaccharopolysporaerythraeaのpanD遺伝子の塩基配列配列番号52:SaccharopolysporaerythraeaのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号53:SalinibacterruberのpanD遺伝子の塩基配列配列番号54:SalinibacterruberのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号55:SalmonellaentericaのpanD遺伝子の塩基配列配列番号56:SalmonellaentericaのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号57:StreptomycescoelicolorのpanD遺伝子の塩基配列配列番号58:StreptomycescoelicolorのPanDタンパク質のアミノ酸配列配列番号59:ThermobifidafuscaのpanD遺伝子の塩基配列配列番号60:ThermobifidafuscaのPanDタンパク質のアミノ酸配列"