"バチルスズブチリスQST713NRRL受託番号B21661又はバチルスズブチリスQST713の変異体を含む組成物の有効量をヒトに投与する工程を包含する、ヒトの健康を向上させるための方法。前記組成物が、前記バチルスズブチリスQST713を含む、請求項1に記載の方法。前記組成物が、前記バチルスズブチリスQST713により生成された代謝産物をさらに含む、請求項2に記載の方法。前記組成物が、胃腸障害を予防又は処置するのに有効な量でヒトに投与される、請求項1に記載の方法。前記胃腸障害の少なくとも1つの症状が、軽減又は緩和される、請求項4に記載の方法。前記症状が、下痢である、請求項5に記載の方法。前記症状が、腹部痙攣である、請求項5に記載の方法。前記症状が、胃腸管の炎症である、請求項5に記載の方法。前記胃腸障害が、急性下痢、クロストリジウムディフィシル関連感染症、炎症性腸疾患、過敏性腸障害、及び抗生物質関連下痢からなる群から選択される、請求項4に記載の方法。前記組成物が、健全な腸微生物叢を維持するのに有効な量で投与される、請求項1に記載の方法。前記組成物が、ヒトにおける病原性細菌の増殖を減少させるのに有効な量で投与される、請求項1に記載の方法。前記病原性細菌が、クロストリジウム属種、カンピロバクター属種、リステリア属種及びエシェリキアコリからなる群から選択される、請求項11に記載の方法。前記組成物が、キャリアをさらに含む、請求項1に記載の方法。前記組成物が、他のプロバイオティクスと共に投与される、請求項1に記載の方法。前記他のプロバイオティクスが、サッカロミセスボウラディである、請求項14に記載の方法。前記組成物が、胃腸障害を予防又は処置するために使用される薬物と共に投与される、請求項4に記載の方法。前記薬物が、抗生物質又は抗炎症薬である、請求項16に記載の方法。前記組成物が、前記抗生物質の投与の完了後に投与される、請求項17に記載の方法。前記組成物が、1日に1キログラム当たり約1×104CFUのバチルスズブチリスQST713~1日に1キログラム当たり約1×1012CFUのバチルスズブチリスQST713の割合で、約3~約7日間経口投与される、請求項4に記載の方法。ヒトにおける胃腸障害の少なくとも1つの症状を軽減するための組成物であって、i前記障害の少なくとも1つの症状を軽減するのに有効な量のバチルスサブティルスQST713と、ii食料又は水以外の飲料とを含む、組成物。前記バチルスズブチリスQST713の前記有効な量が、約1×103CFU/g食料~約1×1010CFU/g食料である、請求項20に記載の組成物。0004本発明は、ヒトに投与された場合にそのヒトの健康を向上させるバチルスズブチリスの菌株を提供する。具体的には、本発明は、胃腸障害を処置又は予防するのに有効な量でバチルスズブチリスQST713若しくはその変異体、及び/又はバチルスズブチリスQST713若しくはその変異体の代謝産物をヒトに投与することによってヒトの健康を向上させる方法に関する。このような投与は、そうした障害例えば、下痢、腹部痙攣及び胃腸管の炎症の症状を軽減、緩和又は予防し得る。0005本発明の組成物は、キャリア例えば、腸溶コーティングと組み合わせて胃腸障害を処置又は予防するのに有効な量でバチルスズブチリスQST713若しくはその変異体及び/又はバチルスズブチリスQST713若しくはその変異体の代謝産物を含み得る。他の組成物は、バチルスズブチリスQST713若しくはその変異体、及び/又はバチルスズブチリスQST713若しくはその変異体の代謝産物と、i他のプロバイオティクス例えば、サッカロミセスボウラディ、ii胃腸障害を処置若しくは予防するために使用される薬物例えば、抗炎症薬又はインターフェロン、又はiii食料若しくは水以外の飲料例えば、牛乳、又はレモネード、ジュース若しくは茶などの水のみからなるのではない飲料若しくは粉ミルクとを含み得る。0006一部の実施形態において、本発明の組成物は、健康な腸微生物叢を維持するのに有効な量で投与される。他の実施形態において、本発明の組成物は、ヒトにおける病原性細菌の増殖を減少させるのに、又は病原体の毒性virulenceが減少するように病原性細菌の毒性因子を変化させるのに、有効な量で投与される。0007投与は、当該組成物のみ若しくは当該組成物を食料若しくは飲料と組み合わせて食べる若しくは飲むことによって、又は当該組成物を含む丸剤を飲みこむことによって、成し遂げられ得る。1つの実施形態において、この飲料は水ではない例えば牛乳であり得る又は水のみからなるのではない例えばレモネード又はジュース又は茶であり得る。当該組成物の投与は、ヒトが胃腸障害の症状に見舞われた後、そのような症状を緩和するために、比較的短い期間行われ得る。また、投与は、胃腸障害の症状が発生又は再発するのを防ぐために、毎日又は他の一定間隔で行われ得る。0016本発明は、プロバイオティクスとしてヒトの健康を向上させるのに有効な、バチルスズブチリス菌株QST713及び/又はその代謝産物の新規使用に関する。プロバイオティクスは、有害な細菌例えば、クロストリジウムディフィシルClostridiadificileの低減を含め健全な腸微生物叢を維持するために、及び胃腸障害の症状を緩和するために、ヒトの健康用途において使用される。0017本発明は、iバチルスズブチリスQST713、iiバチルスズブチリスQST713の変異体、iiii若しくはiiの無細胞調製物、又はivi若しくはiiの代謝産物を含む、組成物を患者に投与することによってヒトの健康を向上させる治療又は非治療的方法を包含する。0018バチルスズブチリスQST713、その変異体、その上清、及びその代謝産物、並びに植物病原体及び昆虫を制御するためのそれらの使用方法は、米国特許第6,060,051号明細書、同第6,103,228号明細書、同第6,291,426号明細書、同第6,417,163号明細書、及び同第6,638,910号明細書に、十分に記載されている。これらの特許においては、この菌株は、AQ713と呼ばれている。バチルスズブチリスQST713は、特許手続上の微生物の寄託の国際的承認に関するブダペスト条約の規定に基づき、1997年5月7日にNRRLに受託番号B21661で寄託された。本明細書におけるQST713への言及は、いずれもバチルスズブチリスQST713に言及するものである。0019バチルスズブチリスQST713株は、ある特定の特性を有しており、驚くべきことに、これが、この菌株をヒトの健康を向上させるのによく適したものとすることが見出された。QST713の胞子は、低いpHで生存可能であり、QST713の細胞は、促進栄養素条件conducivenutrientconditionが与えられて4.5もの低いpHで増殖する。QST713はまた、実施例2に示されるように、集合又はスウォーミングし、その結果、病原性細菌を競合排除outcompeteし減少させる能力を有している。いかなる特定の理論によっても限定されることを望むものではないが、バチルスズブチリスQST713は、i抗菌性代謝産物を生成すること、ii病原体よりも多くの栄養素及び/若しくは付着場所を使用することによって病原体と競合し、それにより腸内の病原性細菌の有効な定着を妨げること、iii免疫調節、並びに/又はiv病原体の毒性が減少することになるような細菌病原体の毒性因子の変更を含む、多岐にわたる作用様式によってヒトの健康を向上させると考えられる。0020本発明の1つの態様において、ヒトに投与される組成物は、バチルスズブチリスQST713の全ての同定特性を有するQST713の変異体を含む。そのような変異体は、QST713に対し、少なくとも約90、少なくとも約91、少なくとも約92、少なくとも約93、少なくとも約94、少なくとも約95、少なくとも約96、少なくとも約97、少なくとも約98、又は少なくとも約99のDNA配列同一性を有し得る。一部の実施形態において、変異体は、自然突然変異体である。自然突然変異体という用語は、変異原の意図的な使用なしに、QST713から生じる変異体をいう。そのような自然突然変異体は、典型的な方法例えば、親がそれに対して感受性のある特定の抗生物質の存在下でバチルスズブチリス菌株を培養し、生物活性の改善について、又は本出願においては、胃腸障害の症状を軽減することによるなどのヒトの健康を向上させる能力の改善について、任意の耐性変異体を試験することによって、得られ得る。自然突然変異体を同定するための他の方法は、当業者には知られているであろう。0021本出願におけるバチルスズブチリスQST713又はその変異体への言及は全て、自然から単離され、例えば実験室内又は工業条件下で、人によって培養されている細菌に言及するものである。0022バチルスズブチリスQST713細胞は、胞子休眠中であるとして、栄養細胞増殖中であるとして、移行状態細胞増殖期から胞子形成期に移行中であるとして、又はこれらの種類の細胞の全ての組み合わせとして、本発明の組成物中に存在し得る。一部の実施形態において、組成物は、主として胞子を含む。他の実施形態において、組成物は、胞子と、下記のように細胞が胞子を形成する前の発酵の間に細胞によって生成された、代謝産物とを含む。0023QST713又はその変異体の代謝産物としては、リポペプチド例えば、イツリン、サーファクチン、プリパスタチン、及びアグラスタチン及び抗菌特性を有する他の化合物が挙げられる。QST713のリポペプチド代謝産物は、米国特許第6,291,426号明細書及び同第6,638,910号明細書に詳細に記載されている。0024本発明の組成物は、米国特許第6,060,051号明細書に記載されている培地及び他の方法を使用することによるなどの、当該技術分野において周知の方法に従って、バチルスズブチリスQST713又はその変異体を培養することによって得られ得る。従来の大規模微生物培養方法としては、液内発酵、固体発酵、又は液体表面培養が挙げられる。発酵の終わり近くに、栄養素が枯渇すると、バチルスズブチリスQST713細胞は、増殖期から胞子形成期への移行を開始し、その結果、発酵の最終生成物は、主として胞子、代謝産物及び残留発酵培地となる。胞子形成は、このバチルスズブチリスの自然の生活環の一部であり、一般に、栄養素制限に応答して細胞により開始される。発酵は、バチルスズブチリスQST713の高レベルのコロニー形成単位を得るように、そして胞子形成を促進するように構成される。発酵の結果として生じる培養培地中の細菌細胞、胞子及び代謝産物は、直接使用されても、従来の工業的方法例えば、遠心分離、接線流濾過、深層濾過、及び蒸発によって濃縮されてもよい。一部の実施形態において、濃縮された発酵ブロスは、残留発酵ブロス及び代謝産物を除去するために、例えばダイアフィルトレーション工程によって、洗浄される。0025発酵ブロス又はブロス濃縮物は、キャリアを添加して又は添加せずに、従来の乾燥工程又は方法例えば、噴霧乾燥、凍結乾燥、トレー乾燥、流動床乾燥、ドラム乾燥、又は蒸発を用いて乾燥され得る。結果として生じる乾燥生成物は、例えば粉砕又は造粒によって、さらに処理されて、特定の粒径又は物理的形態を達成し得る。後述されるキャリアは、乾燥後にも添加され得る。0026QST713の発酵ブロスの無細胞調製物は、当該技術分野において公知の任意の手段例えば、抽出、遠心分離及び/又は発酵ブロスの濾過によって得られ得る。当業者は、いわゆる無細胞調製物が、細胞を除去するために使用される技術例えば、遠心分離の速度によっては、細胞が全くないわけではないことがあり得、ほぼ無細胞又は実質的に無細胞であることを理解するであろう。結果として生じる無細胞調製物は、乾燥され得、且つ/又はヒトへのその投与の助けとなる成分と共に製剤化され得る。発酵ブロスについて上で記載された濃縮方法及び乾燥技術が、無細胞調製物にも適用可能である。0027QST713の代謝産物は、米国特許第6.060,051号明細書に示されている方法に従って得られ得る。用語代謝産物は、本明細書で使用される場合、半純粋な代謝産物及び純粋若しくは実質的に純粋な代謝産物、又はバチルスズブチリスQST713から分離されていない代謝産物を指し得る。リポペプチド及びQST713の他の殺菌性代謝産物は、600キロダルトン~100ダルトンの間である。したがって、一部の実施形態においては、無細胞調製物がQST713の発酵ブロスの遠心分離によって作製された後、代謝産物は、分子量カットオフ例えば、600kDa未満、500kDa未満、400kDa未満などの分子量に基づき代謝産物を異なる画分に分類するサイズ排除濾過によって精製され得る。発酵ブロスの製剤化について上で記載された濃縮方法及び乾燥技術が、代謝産物にも適用可能である。0028本発明の組成物は、回収、有効性若しくは物性を改善するために、並びに/又は包装及び投与を助けるために、細胞、無細胞調製物又は代謝産物を含む組成物に添加される、不活性な製剤用成分であるキャリアを含み得る。そのようなキャリアは、個々に又は組み合せて添加され得る。一部の実施形態において、キャリアは、発酵ブロスを濃縮した後、並びに乾燥の間及び/又は乾燥の後に、添加される。従来の固体キャリアは、シリコン、デンプン、タルク、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、メチルセルロース、アルギナート、デキストラン、アラビアゴム及び当業者に周知の他の従来のキャリアである。他の製剤用成分例えば、希釈剤、結合剤、滑沢剤、色素及び矯味矯臭剤もまた、使用され得る。00291つの実施形態において、本発明の組成物は、固形製剤例えば、カプセル剤、錠剤、散剤、顆粒剤及びカシェ剤wafer又は液剤例えば、懸濁剤の形態であり得る。本発明の組成物はまた、食料又は飲料患者の特定の栄養要求に対して医師によって処方された医療食品、粉ミルク、健康食品、及び栄養補助食品を含むに組み込まれ得る。あるいは、組成物は、消費の直前に食料又は飲料例えば、水又は水以外の飲料すなわち、水を用いて製造されていない又は水のみからなるのではない飲料と混合するための粉末、顆粒又は液体の形態で調製され得る。0030組成物がQST713若しくはその変異体の代謝産物、又はQST713若しくはその変異体の栄養細胞、又はQST713若しくはその変異体の無細胞調製物を含む実施形態において、当該組成物は、胃の中ではそのままの状態であるが小腸又は大腸に到達すると溶解し、代謝産物例えば、バクテリオシン及び/又はリポペプチド及び/又は栄養細胞を放出する腸溶コーティングを用いて製剤化され得る。0031組成物が食料又は飲料と別個に処方される実施形態において、処方された組成物中のiバチルスズブチリスQST713若しくはその変異体、iiQST713若しくはその変異体の無細胞調製物、iiiQST713若しくはその変異体の代謝産物、又はiv細胞及び代謝産物の組み合わせの、重量/重量ベースw/wの濃度は、約0.5、約1、約2、約3、約4、約5、約6、約7、約8、約9、約10、約11、約12、約13、約14、約15、約16、約17、約18、約19、約20、約25、約30、約35、約40、約45、約50、約55、約60、約65、約70、約75、約80、約85、約90、又は約95であり得る。一部の実施形態、例えば、濃縮処方ブロスが洗浄され、加熱なしで例えば凍結乾燥により乾燥された実施形態においては、最終組成物中のバチルスズブチリスQST713又はその変異体の濃度は、約90~約100であり得る。0032本発明の組成物は、ヒトに投与/食物として供給されて、腸の健康又はそのようなヒトの総合的な全身状態を改善し得る。当該組成物は、治療用途及び非治療的用途の両方のために投与され得る。本発明の組成物の有効量は、ヒトの健康を、当該組成物は投与されていないがそれ以外は当該組成物を与えられたヒトと同じ食事を投与され且つ当該組成物を投与されたヒトと同じ障害若しくは症状を有するか又は同じ障害の同じ危険に曝されているヒトと比較して、向上させるのに有効な量である。あるいは、有効量は、胃腸障害の再発を防止する、又は胃腸障害の症状を軽減するのに必要とされる量である。00331つの実施形態において、組成物は、胃腸障害に罹患した又は胃腸障害の危険に曝されているヒトの健康を、そのような障害の症状を軽減すること又はそのような障害の発生率若しくは再発率を低下させることによって、向上させるために使用される。胃腸障害としては、急性下痢例えば、旅行者下痢又は食中毒若しくは風邪に起因する胃腸炎、炎症性腸疾患、過敏性腸障害、抗生物質関連下痢、及びクロストリジウムディフィシル関連下痢が挙げられる。過敏性腸疾患の主要形態は、クローン病及び潰瘍性大腸炎である。そのような胃腸障害の症状は周知であり、例えば、下痢、腹痛、体重減少、胃腸管の炎症及び嘔吐が挙げられる。0034したがって、上記のことに鑑みて、本出願の実施形態は、バチルスズブチリスQST713、バチルスズブチリスQST713の変異体、バチルスズブチリスQST713若しくはその変異体に由来する無細胞調製物、又はQST713若しくはその変異体の代謝産物を含む組成物をヒトに投与/食物として供給することによって、正常な体重増加を回復させる、健全な腸微生物叢を維持する、下痢を軽減する、及び胃腸管の炎症を減少させるというような、非治療的方法に関する。0035腸微生物叢の維持は、本発明の方法が適用されなかったヒトと比較して、公衆衛生上懸念される有害な病因性微生物を殺す又はその増殖を阻害することによって減少させること、及び/又は有益な細菌例えば、乳酸菌及びビフィズス菌を増加させること若しくはその健全なレベルを維持することをいう。いかなる特定の理論にも拘束されることを望むものではないが、有益な細菌の方の増加は、そのような細菌の増殖を刺激することによって、又は単に、病原性細菌を選択的に減少させ、それにより、増殖するため及び腸壁に付着するためのより多くの場所並びに/又は栄養素及び成長因子へのより効率的なアクセスを有益な細菌に与えることによって、もたらされ得ると考えられる。さらに、又はあるいは、有益な細菌は、病原性細菌の毒性因子を変化させ得、そうして、病原性細菌の毒性を低減させ得る。本発明の方法によって減少させ得る有害な病因性細菌としては、クロストリジウム属種例えば、パーフリンジェンス及びディフィシルdificile、リステリア属種例えば、モノサイトゲネス、ゼーリゲリ及びウェルシメリ、サルモネラ属種例えば、エンテリカ、アリゾナエ、チフィムリウム、エンテリティディス及びボンゴリ、エシェリキアコリ、エンテロコッカス属種例えば、フェカーリス及びフェシウム、カンピロバクター、アエロモナス属種、スタフィロコッカスアウレウス、シゲラディゼンテリエ及びビブリオ属種が挙げられる。一部の実施形態において、有害な病因性微生物は、約0.5log、約1log、約2log、約3log、約4log、又は約5log減少し得る。0036本発明の方法はまた、治療量の抗生物質の投与後に、病原性細菌の増殖を阻害することによって及び/又は有益な細菌の増殖を増大若しくは維持することによって正常な腸バランスを回復させるためにも使用され得る。用語治療量は、ヒトにおける病状を改善する又は逆転させるのに十分な量をいう。0037別の態様において、バチルスズブチリスQST713、その変異体、QST713及びその変異体の無細胞調製物、並びにQST713及びその変異体の代謝産物を含む本発明の組成物は、他のプロバイオティクス例えば、他の細菌胞子形成因子若しくはプレバイオティクスをさらに含み得る、又は他のプロバイオティクス例えば、他の細菌胞子形成因子若しくはプレバイオティクスと共に投与され得る。プロバイオティクスの例は、HongHA他TheuseofbacterialsporeformersasprobioticsFEMSMicrobiologyReviews29813835に示されている。プレバイオティクスは、腸でのバチルスズブチリスQST713若しくはその変異体の増殖及び/又は活性を刺激する化合物例えば、イヌリン、フルクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖及びダイズオリゴ糖を含むオリゴ糖、並びに遊離ヌクレオチドである。0038別の態様において、本発明の組成物は、止瀉薬、ガス抑制剤antigasagent、食物繊維、抗生物質例えば、メトトレキサート、抗炎症薬、アミノ酸、電解質、ビタミン及びミネラルを含み得る、又はそれらと共に同時に又は異なる時間に投与され得る。0039組成物がQST713又はその変異体を含む実施形態において、当該細菌は、ヒトの健康を向上させるのに有効な量で投与されるべきである。組成物が胃腸障害を処置又は予防するために投与されることになる実施形態において、それらは、そのような障害に罹患している又はそのような障害の危険に曝されている患者に対し、体重1キログラム当たり約1×13CFUのバチルスズブチリス~体重1キログラム当たり約1×1015のバチルスズブチリスの用量で投与されるべきである。別の実施形態においては、1キログラム当たり約1×104CFUのバチルスズブチリス~1キログラム当たり約1×1011のバチルスズブチリスが、投与されるべきである。さらに別の実施形態においては、1キログラム当たり約1×105CFUのバチルスズブチリス~1キログラム当たり約1×1010のバチルスズブチリスが、投与されるべきである。さらに別の実施形態においては、1キログラム当たり約1×106CFUのバチルスズブチリス~1キログラム当たり約1×109のバチルスズブチリスが、投与されるべきである。一部の実施形態において、この用量は、体重1キログラム当たり約1×103CFUのバチルスズブチリス、1キログラム当たり約1×104又は約1×105又は約1×106又は約1×107又は約1×108又は約1×109又は約1×1010又は約1×1011又は約1×1012CFUのバチルスズブチリスである。当該組成物は、典型的に、経口投与され、数日間毎日上記の用量で投与される。当該組成物は、最初に症状が緩和された後、最初に使用された用量よりも少ない用量でより長い期間にわたって投与され得る。予防目的のためには、当該組成物は、毎日又は他の一定間隔で投与され得る。0040本発明の組成物はまた、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて調合薬として経口投与され得る。最適な投与量レベルは、とりわけ組成物のi腸内の病原性細菌を阻害若しくは減少させる能力を様々な用量で、ii有益な細菌のレベルを増大若しくは維持する能力及び/又はiiヒトの健康を向上させる能力を様々な用量で、評価することによって、当業者により容易に決定され得る。0041以下の実施例は、純粋に本発明を説明する目的で示されており、本発明を限定する目的では示されていない。実施例1-病原体に対するQST713無細胞調製物の有効性についてのインビトロ調査0042QST713の無細胞調製物を、クロストリジウム属クロストリジウムパーフリンジェンスATCC13124及びクロストリジウムパーフリンジェンスの2つの環境分離株;リステリア属リステリアモノサイトゲネスATCC19116及び19111、リステリアゼーリゲリATCC35968及びリステリアウェルシメリATCC35897;サルモネラ属サルモネラエンテリカATCC10398、サルモネラアリゾナエATCC13314及びサルモネラボンゴリATCC43975;及びエシェリキアコリに対する抗菌活性について、キルビーバウアー及び最小発育阻止濃度MIC法を使用して、試験した。0043無細胞調製物は、下記の表1に示されるような標的病原体を培養した培地に対応する培地でQST713を培養し、その培養物を23°Cで15分間にわたり3000rpmで遠心分離機にかけ、それを0.45μmのNalgeneフィルターユニットに通して濾過することによって、調製した。熱安定性について試験するために、無細胞調製物の一部を、キルビーバウアー及びMICのそれぞれの試験の前1時間にわたり、50°Cに加熱した。0044キルビーバウアー試験においては、2mmの滅菌濾紙ディスクを、QST713上清に浸漬し、滅菌条件下で風乾した。次いで、これらのディスクを、標的病原体の菌叢上に置き、一晩インキュベートし、阻害ゾーンを測定した。阻害ゾーンは、クロストリジウム属標的及びリステリア属標的について認められた。0045MIC法においては、マイクロタイタープレートのウェルに、1×105に希釈した各標的病原体75μLを接種した。上記の無細胞調製物を、1:2、1:10及び1:50の最終希釈で、各ウェルに加えた。プレートを、37°C及びOD600で一晩インキュベートし、Wallachマイクロタイターリーダーで読み取った。無細胞調製物熱処理ありと熱処理なしの両方は、クロストリジウム属標的及びリステリア属標的に対して著しく有効であり、且つサルモネラ属及びエシェリキアコリの増殖を阻害した。ただし、これらの最後の2つの病原体については、キルビーバウアープレート上に、阻害ゾーンは認められなかった。クロストリジウム属、リステリア属及びサルモネラ属についてのデータを、図1~6に示す。実施例2-種々の細菌に対するQST713の有効性についてのインビトロ調査0046バチルスズブチリスQST713の粉末製剤を、次の細菌:クロストリジウムパーフリンジェンス、エシェリキアコリ、サルモネラエンテリティディス、カンピロバクタージェジュニ、及びリステリアモノサイトゲネスの、種々の環境分離株に対する有効性について試験した。この粉末製剤は、発明を実施するための形態において上で記載されたように、バチルスズブチリスQST713を発酵の終わり近くに、栄養素が枯渇すると、バチルスズブチリスQST713細胞が増殖期から胞子形成期への移行を開始し、その結果、発酵の最終生成物が主として胞子、代謝産物及び残留発酵培地となるように発酵させ、その発酵ブロスを濃縮し、乾燥させることによって、調製した。この粉末製剤は、14.6の濃縮乾燥ブロス及び85.4の上記の実行可能な手段から選択される製剤用不活性物質を有し、最低でおよそ7.3×109CFUのバチルスズブチリス/グラム、最高でおよそ1×1010CFUのバチルスズブチリス/グラムを含有していた。この製剤を、本明細書において組成物1と呼ぶことにする。組成物1の原液を、この溶液が1mL当たりおよそ1×109CFUのバチルスズブチリスを含有することになるように、0.2グラムの製剤化された粉末を1.8mLの滅菌蒸留水に添加することによって調製した。試験生物を、5羊血を含むトリプチカーゼソイ寒天に、4種までの生物が単一の寒天プレートに各々が寒天プレートを横切る単一の直線をなして画線された状態で、画線した。この生物を、一晩乾燥させた。次いで、この接種されたプレートに、上記の製剤化されたQST713の懸濁液を、試験生物に対して直角に交わるように、綿棒で画線塗布した。クロストリジウムパーフリンジェンス及びカンピロバクタージェジュニの分離株を、Campyガス雰囲気10CO2、5O2、8N2中、41±2°Cで一晩インキュベートした。好気性であるその他の分離株は、Campyガスなしで、36±2で一晩インキュベートした。QST713は、エシェリキアコリの阻害はもたらさなかったが、クロストリジウムパーフリンジェンス、サルモネラエンテリティディス、カンピロバクタージェジュニ及びリステリアモノサイトゲネスの分離株のうちのいくつかの阻害をもたらした。さらに、一部の例においては、バチルスズブチリスQST713は、病原性細菌の侵略的な競合的駆逐aggressivecompetitiveovergrowthを示した。結果を下記の表にまとめる。この表に報告された阻害ゾーンは、バチルス増殖物growthの端から試験生物の増殖物の始まりまでを測定したものである。さらに、クロストリジウムパーフリンジェンス及びカンピロバクタージェジュニのプレートの写真を、それぞれ図7及び図8に示す。実施例3-ラットヒトにおける大腸炎のモデルにおける誘導された大腸炎の処置における経口投与されたバチルスQST713の有効性の測定[予言的実施例PropheticExample]0047この試験では、2,4,5-トリニトロベンゼンスルホン酸TNBSの直腸投与によって誘導されたラットにおける大腸炎に対してQST713の有効性を調査する。調査計画:0048雄のWistar白ラットを、この調査全体を通して使用する。処置期間の開始時に、動物は10~12週齢である。動物に、それらが試験施設に到着するとすぐ、それらが良好な状態にあることを確実にするために、獣医の監督下で完全な臨床検査を行う。動物を、少なくとも7日間、調査条件に馴化させる。動物を無作為に選択し、ポリカーボネートケージ長さ421×幅290×高さ190mmに割り当てる。動物室及び試験室条件を、次のように設定する。温度:22±3°C、相対湿度:50±20、明/暗サイクル:12時間/12時間明07.00AM~19.00PM及び換気:濾過された再循環されない空気をおよそ7サイクル/時間。全ての動物は、ラット用ペレット餌及び精製水にTNBS投与前の一晩の絶食を除いて制約なしに自由にアクセスできる。0049反復試験において、大腸炎の誘導日を1日目として設定する。大腸炎は、一晩の絶食後に、肛門に対して近位側8cmのところへの100mg/Kg体重でのTNBSの単回直腸内投与を使用して誘導される。大腸炎陰性コントロール群には、1日目に生理食塩水動物1匹当たり0.5mLを1回を直腸内投与する。大腸炎陰性及び大腸炎陽性コントロール群には、1日目から7日目まで7日目を含む、4時間の投与間隔で1日3回、10mL/kgで蒸留水を経口投与する。0050反復試験において、TNBS誘導大腸炎の群を、1日目から7日目まで7日目を含む、4時間の投与間隔で1日3回、QST713それぞれ1.5×10E8CFU/Kg又は1.5×10E9CFU/Kgで;1日目から7日目まで7日目を含むメサラジン250mg/Kg/日で;1日目に単回用量としてインフリキシマブ3mg/Kgで、又は1日目から7日目まで7日目を含む、4時間の投与間隔で1日3回、サッカロミセスボウラディ1.5×10E8CFU/Kgで処置する。0051初回又は単回インフリキシマブの場合の処置用量を、TNBSの投与後2時間以内蒸留水、QST713、サッカロミセスボウラディ及びメサラジン又は3時間以内インフリキシマブに投与する。静脈内注入されたインフリキシマブ以外は、全ての処置薬を強制経口投与する。1日2回の観察を、臨床徴候及び死亡数について行う。動物の体重を、1日目、4日目及び7日目に記録する。8日目に動物を殺し、長さ5cmの結腸部分肛門に対して近位側10cmから5cmまでを切除する。これらの部分を、長手方向に切開する。生理食塩水で洗浄することによって内容物を除去し、次の尺度を使用して、肉眼的形態に評点をつける:0=潰瘍も炎症もなし、1=潰瘍はなく局所的な充血のみ、2=充血を伴わない潰瘍形成、3=1部位のみでの潰瘍形成及び炎症、4=2部位以上の潰瘍形成及び炎症、並びに5=2cmよりも大きく広がる潰瘍形成。それぞれの5cm結腸部分の重量もまた、炎症により誘発された水腫を評価するために記録する。試験調製物0052水中5w/vTNBSアメリカ合衆国カリフォルニア州セントルイスSigmaaldrichを、50エタノールで2.5溶液に希釈する。用量体積は、4mL/Kg体重である。マルト及びシクロデキストリンキャリア上で乾燥させたQST713アメリカ合衆国カリフォルニア州デイビスAgraQuestInc発酵ブロスを、1.5×10E7及び1.5×10E.8CFU/mLの濃度となるように、蒸留水中に懸濁させる。用量体積は、10mL/Kg体重である。サッカロミセスボウラディベルギー王国ブリュッセルEnterolRTMBiodipharを、1.5×10E7CFU/mLの濃度となるように、蒸留水中に懸濁させる。用量体積は、10mL/Kg体重である。メサラジンインド国ムンバイMesacolRTMSunPharmaceuticalIndLtd錠を、乳棒及び乳鉢を使用して粉砕し、1mL当たり25mgの5-アミノサリチル酸を含有する蒸留水中溶液を、調製する。用量体積は、10mL/Kg体重である。RemicadeRTMインフリキシマブオランダ国ライデン、セントコアビーブイを、まず10mLの注射用水で再構成し、2mg/mL濃度となるように生理食塩水を用いてさらに希釈する。使用される用量体積は、1.5mL/Kg体重である。全ての体重依存用量は、測定された最新の個体体重に基づいて投与する。新鮮な調製物を、それぞれの投与の前に作製する。調製物は、それぞれの投薬の前に、激しく攪拌する。予想される結果及び検討:0053一部の動物は、TNBSでの大腸炎の誘導後の下痢の軽度の徴候を示す。1日目から7日目まで7日目を含むに異なる処置群において記録された下痢の観測数及び冒された動物数を記録する。大腸炎陽性コントロール群は、大腸炎に伴う実質的な体重減少を示す。処置薬は全て大腸炎が体重増加に及ぼす負の影響を著しく抑制するのであるが、QST713処置薬は、下痢の統計的に有意な減少及び改善した体重増加を示すことが予想される。QST713及びメサラジンは、大腸炎陽性コントロール群のものと明確に区別され得る、結腸部分重量及び結腸壁についての肉眼的形態評点を、常にもたらすことが予想される。0054QST713及びMesacolで処置されたTNBS誘導大腸炎のラットにおける結腸壁の健康状態は、大腸炎に冒されていないラットにおける健康状態と肉眼的に同じであることが予想される。長手方向に切開した結腸部分の目視検査は、陽性コントロール群、サッカロミセスボウラディ及びインフリキシマブ処置群において存在する潰瘍形成及び壊死組織領域、並びにQST713群及びメサラジン群におけるそれらの不在を示すことが予想される。処置期間の終了時に、インフリキシマブで処置されたラットの平均体重増加及び結腸部分重量のデータは、両方の試験において大腸炎陰性コントロール群のデータ及び大腸炎陽性コントロール群のデータの中間にある。QST713で処置されたラットの結腸部分においては、潰瘍形成がなく、これらの部分の大多数で充血のみが観察されることが予想される。QST713は、TNBSの直腸内投与によって誘導されるようなラット結腸壁における炎症を明らかに和らげること、少なくともより高い投与割合については、この処置からのデータと大腸炎陰性コントロール群のデータとの差異が統計的に認められ得ないほどまでに、明らかに和らげることが予想される結論0055この調査は、ラットにおける2,4,6-トリニトロベンゼンスルホン酸TNBS誘導大腸炎に対するバチルスQST713の有効性を確認し、記録をとるため、且つその有効性をサッカロミセスボウラディプロバイオティクス、メサラジン及びインフリキシマブ標準薬の有効性と比較するために計画され、実施されるものである。このラットモデルは、十分に確立され、信頼性が高く、IBDの処置を目的とする薬物の有効性を調査するために広く使用されている。大腸炎の誘導後に何の処置もなければ、数匹のラットは、恐らく、下痢の軽度の徴候を示し、概して、残りの試験期間全体を通して体重を減らし続けるであろう。それらの結腸の腸壁の肉眼的形態は、恐らく、炎症、潰瘍形成及びさらには壊死によって特徴付けられるであろう。1.5×1.0E8CFU/Kgの用量で3回/日のQST713での、又は3回の1.5×10E9CFU/Kg/日での、一連の処置が、陰性コントロール群の結腸壁健康状態及び抗炎症薬の標準薬メサラジンで処置された群の結腸壁健康状態と統計的に同一の結腸壁健康状態をもたらすことが予想される。"