配列番号2のアミノ酸配列からなるポリペプチド。1配列番号2のアミノ酸配列において1または数個のアミノ酸が欠失、置換または付加されたアミノ酸配列からなるポリペプチド、または、2配列番号2のアミノ酸配列に対して90以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるポリペプチドであって、配列番号2のアミノ酸配列からなるポリペプチドと同じ抗原性を有するポリペプチド。タグが付加された、請求項1または2のポリペプチド請求項1~3のいずれかのポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。1配列番号1の塩基配列、または2配列番号1の塩基配列と縮重の関係にある塩基配列からなる、請求項4のポリヌクレオチド。1配列番号1の塩基配列からなるポリヌクレオチドにストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド、または2配列番号1の塩基配列と90以上の相同性を有する塩基配列からなるポリヌクレオチド、であって、配列番号2のアミノ酸配列からなるポリペプチドと同じ抗原性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。請求項4~6のいずれかのポリヌクレオチドを含むベクター。請求項1または2のポリペプチドを特異的に認識する抗体またはその抗原結合断片。抗体が、aポリクローナル抗体;bモノクローナル抗体;cヒト型化抗体;およびdヒトモノクローナル抗体からなる群から選択される請求項8に記載の抗体または抗原結合断片。請求項8または請求項9に記載の抗体または抗原結合断片に特異的に結合する抗イディオタイプ抗体。マラリア原虫に特異的に結合する、請求項8または9に記載の抗体または抗原結合断片。請求項8、9または11に記載の抗体または抗原結合断片を含む、マラリア原虫増殖抑制用組成物。請求項8、9または11に記載の抗体または抗原結合断片を含む、マラリア原虫検出用組成物。本発明者らは、熱帯熱マラリア治療薬の標的として、ヒトに対応遺伝子が存在しない熱帯熱マラリア原虫のDNAジャイレースに注目した。DNAジャイレースは、DNA複製に関与するDNAトポイソメラーゼII型の酵素であり、ジャイレースAおよびBの2種類のサブユニットからなっている。ジャイレースBにはいくつかのドメインが存在するが、そのうちジャイレースBドメインは、DNA複製時の二本鎖DNAの切断および再結合に関与すると考えられている。ジャイレースBの本ドメインに相当する部分ポリペプチドは、本ドメインを標的とするDNAジャイレースの阻害剤の探索に有用である。よって本発明は、熱帯熱マラリア原虫のジャイレースBドメインポリペプチドを提供することを目的とする。本発明は、配列番号2のアミノ酸配列からなるポリペプチド、前記ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、および前記ポリペプチドに対する抗体を提供する。本発明のポリペプチドは、ジャイレースBドメインの結晶化および構造解析に用いることができ、本ドメインに対する阻害剤の探索に有用である。本発明は、配列番号2のアミノ酸配列からなるポリペプチドに関する。配列番号2のアミノ酸配列は、熱帯熱マラリア原虫DNAジャイレースのジャイレースBドメインに相当する。ジャイレースBの塩基配列およびアミノ酸配列は、DNAデータバンクXM001350753、GI124806667および論文GardneretalNature419498511に開示されている配列番号3および4。配列番号2のアミノ酸配列は、配列番号4のアミノ酸配列の465642位に相当する。本発明はまた、配列番号2のアミノ酸配列からなるポリペプチドの変異体に関し、具体的には、1配列番号2のアミノ酸配列において1または数個のアミノ酸が欠失、置換または付加されたアミノ酸配列からなるポリペプチド、または、2配列番号2のアミノ酸配列に対して90以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるポリペプチドであって、配列番号2のアミノ酸配列からなるポリペプチドと同じ抗原性を有するポリペプチドに関する。アミノ酸の欠失、置換、または付加の数は、ポリペプチドの機能が維持されるかぎり限定されないが、好ましくは1~20個、より好ましくは1~10個、より一層好ましくは1~5個、例えば1、2、3、4または5個である。かかる変異は、天然に存在する変異であってもよく、部位特異的突然変異誘発など公知の方法により人為的に導入したものであってもよい。アミノ酸配列の相同性は、VectorNTI、BLASTなど当業者に周知の配列比較プログラムにより決定することができ、90以上、より好ましくは95以上である。アミノ酸の置換は、以下の1~6のそれぞれの群内での置換である保存的アミノ酸置換であってもよい:1グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、およびイソロイシン、2フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファン、3セリンおよびトレオニン、4アスパラギン酸およびグルタミン酸、5グルタミンおよびアスパラギン、および6リジン、アルギニン、およびヒスチジン。配列番号2のアミノ酸配列からなるポリペプチドと同じ抗原性を有するとは、配列番号2のアミノ酸配列からなるポリペプチドを特異的に認識する抗体により認識されることを意味する。かかる抗体は、配列番号2のアミノ酸配列からなるポリペプチドを免疫原として動物を免疫することにより得ることができる。抗体の作成方法は当業界にて周知である。本発明はまた、タグが付加されたジャイレースBドメインポリペプチドに関する。本発明においてタグとは、ポリペプチドの精製、検出等のためポリペプチドに付加される部分を意味し、ヒスチジンHis、グルタチオンSトランスフェラーゼGST、マルトース結合タンパク質MBP、myc、FLAGタグなどが例示される。タグが付加された本発明のポリペプチドは、例えば、pET30aNovagen社製Hisタグ用、pGEXGEヘルスケアバイオサイエンス株式会社製GSTタグ用などの発現ベクターにジャイレースBドメインポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを挿入し、適当な宿主細胞で発現させることで得られる。本発明はまた、本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに関する。ある態様において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号2のアミノ酸配列からなるポリペプチドをコードし、具体的には、1配列番号1の塩基配列、または2配列番号1の塩基配列と縮重の関係にある塩基配列を有するポリヌクレオチドである。縮重の関係にある塩基配列とは、もとの塩基配列中の1以上のコドンが同じアミノ酸をコードする別のコドンと置換されている塩基配列を意味する。本発明はまた、1配列番号1の塩基配列からなるポリヌクレオチドにストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド、または2配列番号1の塩基配列と90以上の相同性を有する塩基配列からなるポリヌクレオチド、であって、配列番号2のアミノ酸配列からなるポリペプチドと同じ抗原性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、に関する。ストリンジェントな条件とは、ポリヌクレオチド間の非特異的なハイブリダイセーションがおこらない条件を意味し、MolecularCloningALaboratoryManual3rdeditionなどに基づき当業者が適宜決定しうるものであるが、例えば02xSSC、01SDS、65°Cなどが挙げられる。塩基配列の相同性は、90以上、好ましくは95以上であり、VectorNTI、BLASTなど当業者に周知の配列比較プログラムにより決定することができる。本発明のポリペプチドおよびポリヌクレオチドは、MolecularCloningALaboratoryManual3rdeditionなどに記載の公知の方法にて作製することができる。本発明はまた、本発明のポリヌクレオチドを含むベクターに関する。ある態様において、本発明のベクターは、適当な宿主細胞における本発明のポリペプチドの発現を可能とするものである。ベクターの種類は当業者が目的に応じて適宜決定しうるが、例えば、サブクローニング用ベクターとしてpBluescriptTakarabio社製、pGEMTPromega社製など、発現用ベクターとしてpET30aNovagen社製、pGEXGEヘルスケアバイオサイエンス株式会社製などが挙げられる。本発明はまた、本発明のポリペプチドを特異的に認識する抗体、またはその抗原結合断片に関する。抗体には、ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体が含まれ、またキメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体も含まれる。抗原結合断片には、F2断片、Fv断片、および一本鎖抗体が含まれる。本発明の抗体およびその抗原結合断片は、当業界にて周知の方法により調製可能である例えば、AntibodiesALaboratoryManualColdSpringHarberLaboratoryPress1988、httpwwwgenemieuacjpProtocolOriginalAntibodyhtml、米国特許第6331415号、米国特許第5693761号、米国特許第5225539号、米国特許第5981175号、米国特許第5612205号、米国特許第5814318号、米国特許第5545806号、米国特許第7145056号、米国特許第6492160号、米国特許第5871907号、米国特許第5733743号などを参照。本発明のポリペプチドを特異的に認識する抗体は、本発明のポリペプチドおよび熱帯熱マラリア原虫由来タンパク質に特異的に結合する。特異的に結合するとは、もし当該抗体が、106M1かそれより大きい、好ましくは107M1かそれより大きい、さらに好ましくは108M1かそれより大きい、および最も好ましくは109M1かそれより大きい結合親和性Kaで本発明のポリペプチドまたはエピトープに結合すれば、特異的に結合するとみなされる。抗体の結合親和性は、たとえばスキャッチャード分析Scatchard、AnnNYAcadSci51660、1949により、当業者によって容易に測定されることができる。本発明のポリペプチドを特異的に認識する抗体は、本発明のポリペプチドを抗原として作成することができる。また、本発明のポリペプチドを特異的に認識する抗体は、配列番号2のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはその部分からなるエピトープペプチドを用いて作成してもよい。エピトープペプチドは、配列番号2に含まれている、少なくとも5個、8~10個または15から30個までの間のアミノ酸配列からなる。本発明は、また、一態様として、本発明のポリペプチドを特異的に認識する抗体に、特異的に結合する抗イディオタイプ抗体を提供する。抗イディオタイプ抗体は、当業界にて周知の方法により調製可能である例えば、米国特許第5208146号、米国特許第5637677号、およびVarthakaviMinocha、JGenVirol771875、1996参照。本発明は、マウス細胞由来の抗体を提供するものであるが、さらに、各種動物由来抗体とのキメラ抗体、ヒト型化抗体などを提供する。本発明は、また、一態様として、本発明のポリペプチドを特異的に認識する抗体または抗原結合断片を含むマラリア原虫増殖抑制用組成物を提供する。マラリア原虫増殖抑制は、輪状体の形成、栄養型原虫の形成、分裂体の形成の抑制を含んでもよい。よって、上記本発明のポリペプチドを特異的に認識する抗体または抗原結合断片を含むマラリア原虫増殖抑制用組成物は、マラリア原虫の増殖および/または分裂抑制用組成物であり得、または、マラリア原虫の輪状体の形成、栄養型原虫の形成および/または分裂体の形成の抑制用組成物であり得る。上記組成物は、医薬品であり得るので、医薬品として許容できる担体添加剤も含むと共に製剤化することができる。医薬品として許容できる担体としては、例えば、賦形剤例えば、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン等、崩壊剤例えば、カルボキシメチルセルロース等、滑沢剤例えば、ステアリン酸マグネシウム等、界面活性剤例えば、ラウリル硫酸ナトリウム等、溶剤例えば、水、食塩水、大豆油等、保存剤例えば、p-ヒドロキシ安息香酸エステル等などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。上記組成物の摂取または投与方法は、投与対象の年齢、体重、健康状態によって、当業者により適宜選択され得る。例えば、上記組成物は静脈内投与され得る。上記組成物の投与対象は、マラリア原虫の増殖抑制を必要とする動物であれば特に限定されないが、例えば、ヒト、イヌ、ネコ、ニワトリ等が含まれる。よって、本発明は、上記組成物をヒトに投与するための医薬品の提供に加えて、イヌ、ネコ、ニワトリ等の動物の動物薬の提供も包含する。上記組成物に含まれる本発明のポリペプチドを特異的に認識する抗体または抗原結合断片の量は、本発明の効果を奏する限り、特に限定されるものではない。例えば、ヒト体重1kg当たり003~300mg、1~100mgまたは1~10mgを1回の投与量とし点滴静注とすることができる。上記組成物の投与方法および投与頻度も当業者が適宜設定できる。例えば、マウス由来細胞が産生したマウス型抗体をヒト化キメラ抗体とすることで、ヒトに何回でも投与することが可能になる。製剤の用量単位1製剤当たりの本発明のポリペプチドを特異的に認識する抗体の用量は、当業者が適宜設定できる。本発明は、また、一態様として、本発明のポリペプチドを特異的に認識する抗体または抗原結合断片を含む、マラリア原虫検出用組成物を提供する。本発明のマラリア原虫検出用組成物を用いて、動物例えば、ヒト由来の生物試料例えば、血液から、マラリア原虫を検出することができる。マラリア原虫の検出には、本発明のポリペプチドを特異的に認識する抗体を用いた酵素抗体法ELISA、イムノブロッティング法、組織染色等を利用することができる。検出に際し必要な試薬例えば、発色基質を、本発明のマラリア原虫検出用組成物と別個に包装し、マラリア原虫検出用検出キットとして提供してもよい。本発明のマラリア原虫検出用組成物に含まれる本発明のポリペプチドを特異的に認識する抗体の量は、対象となる生物試料、測定条件等により適宜設定できるが、例えば、001~100μgml、01~10μgml、または1~10μgmlであり得る。本発明は、また、一態様として、本発明のポリペプチドを特異的に認識する抗体または抗原結合断片を生物試料と接触させることを含む、生物試料においてマラリア原虫を検出する方法を提供する。以下、実施例により本発明をさらに説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。1熱帯熱マラリア原虫の培養及びDNAの抽出熱帯熱マラリア原虫FVO株、FUP株以上、大阪大学より分与、SO株、NN株以上、発明者が患者より分離を、改良型RPMI1640培地25mMHEPES、238mM炭酸水素ナトリウム、21mMグルタミン、0267mMヒポキサンチンおよび10不活化ウマ血清をそれぞれ添加したRPMI1640培地で、5ヒト赤血球O型を用いて培養した。この原虫から、DNA抽出キットQIAampDNABloodMiniKit、Qiagen社製を使用してDNAを抽出した。抽出したDNAをエタノール沈殿によって10倍に濃縮し、PCRに使用した。2PCRプライマーの設計DNAデータバンクおよび参考論文に開示される熱帯熱マラリア原虫のジャイレースBのDNA配列に基づき、以下の3種類のプライマーを設計した。1:GyrBpGEXBamHIFwにて精製した。[PCR条件]プライマー:前述配列番号5~10反応条件:10xExTaqバッファー5μl25mMdNTPミックス2μl10μMフォワードFWプライマー25μl10μMリバースRvプライマー25μlTaKaRaExTaq1μlDNA1μldH2O36μl温度条件:94°C3分94°C05分55°C1分72°C1分94°C→55°C→72°C35サイクル72°C7分4°C∞4TAクローニング上記のDNA増幅産物をTAベクターであるpBluescriptTakarabio社製またはpGEMT。増菌した大腸菌からプラスミドをQIAprepSpinMiniprepKitQiagen社製にて精製するとともに、インサートの確認のためPCRを行い、このPCR増幅産物を精製してシークエンスしたところ、A33、A314は点変異が見られた。よって、次の実験にはA13、A31のプラスミドを使用した。[コロニーPCR条件]プライマー:pBluescriptFW5’gtaatacgactcactatagggc3’配列番号11pBluescriptRv5’ggaaacagctatgaccatg3’配列番号12反応条件:10xExTaqバッファー15μl25mMdNTPミックス15μlDMSO075μl10μMFWプライマー15μl10μMRvプライマー15μlTaKaRaExTaq015μlコロニー菌体少々dH2O81μl温度条件:94°C1分94°C05分55°C05分72°C15分94°C→55°C→72°C35サイクル72°C2分4°C∞[インサート確認用PCR条件]プライマー:前述配列番号5~10反応条件10xExTaqバッファー5μl25mMdNTPミックス2μl10μMFWプライマー25μl10μMRvプライマー25μlTaKaRaExTaq1μlDNA1μldH2O36μl温度条件:94°C3分94°C05分55°C1分72°C1分94°C→55°C→72°C35サイクル72°C7分4°C∞5発現ベクターの構築候補のプラスミドA13、A31を制限酵素A13用BamHIおよびEcoRI、あるいはA31用NdeIおよびEcoRIで切断し、同時に同じ制限酵素で処理したpGEX6p2ベクターA13用、GEヘルスケアバイオサイエンス株式会社製あるいはpET30aベクターA31用、Novagen社製にライゲーションした。ライゲーション後、DNA断片を挿入したプラスミドで大腸菌をトランスフォームしサブクローニングを行った。出現したコロニーについてコロニーPCR前述を行ったところ、A31由来DNA断片をライゲーションしたpET30aベクターGyraseBNHispET30aで14個のコロニーのうち1個に目的のDNA配列が含まれることを確認した。この大腸菌を増菌後、プラスミドをQIAprepSpinMiniprepKitQiagen社製で精製し保存した。再度、インサート確認のためのPCR前述を行い、PCR増幅産物を精製し、シークエンスして、目的遺伝子と同一の配列であることを確認した配列番号1。6ポリペプチドの発現および精製上記5で得られた発現ベクターで大腸菌BL21、Takarabio社製をトランスフォームし、培養した。培養液を遠心分離して集菌し、沈査菌体を超音波で粉砕した後、さらに遠心分離し、上清をNi2アフィニティカラムクロマトグラフィーHiTrapChelatingHP、GEヘルスケアバイオサイエンス社製にかけた。培養温度条件として37°Cおよび16°C、IPTG処理条件として03mM、1mM、および3mMを検討したところ、温度16°C、IPTG1mMで36時間培養すると、効率よくポリペプチドが発現することがわかり、ポリペプチドを大量に作製することに成功した図1。また、Ni2アフィニティカラムクロマトグラフィーでの精製条件を検討したところ、イミダゾール100~250mMで溶出されることが分かった図2。[培養条件]発現ベクターGyraseBNHispET30aを大腸菌BL21、Takarabio社製にトランスフオームして作製したグリセロールストックをLBKanカナマイシン30μgml寒天プレートに植菌。↓37°Cで一晩培養。↓コロニーをピックアップして、LBKan培地カナマイシン30μgml、5mlに植菌し、37°Cで一晩培養。↓500mlのTBKan培地カナマイシン50μgmlに前培養分5mlを全量添加。↓37°Cで培養約3時間。↓OD600~08でシェイキングを中断し、16°Cまたは37°Cに設定後、30分間静置。↓IPTGを最終濃度で03mM、1mM、または3mMとなるように添加。↓16°Cまたは37°Cでさらに36時間培養。↓培養を終え、集菌。↓菌体を80°Cに保存。[Ni2アフィニティカラムクロマトグラフィーによるポリペプチドの精製方法]HiTrapChelatingHPGEヘルスケアバイオサイエンス製、5ml容量を平衡化バッファーで平衡化ペリスタポンプおよびフラクションコレクターGEヘルスケアバイオサイエンス製使用、流速1ml分。平衡化バッファーの組成:20mMTrisHClpH80、500mMNaCl、10mMイミダゾール↓上清をカラムに通液し、フロースルーを回収流速1ml分FT画分とする。↓平衡化バッファーで洗浄25ml、流速1ml分Wash画分とする。↓100mMイミダゾールを含む溶出バッファーで溶出3mlX10本、流速1ml分。溶出バッファーの組成:20mMTrisHClpH80、500mMNaCl、100mMイミダゾール↓250mMイミダゾールを含む溶出バッファ-で溶出3mlX10本、流速1ml分。溶出バッファーの組成:20mMTrisHClpH80、500mMNaCl、250mMイミダゾール↓500mMイミダゾールを含む溶出バッファ-で溶出3mlX10本、流速1ml分。溶出バッファーの組成:20mMTrisHClpH80、500mMNaCl、500mMイミダゾール↓SDSPAGE後、溶出画分を回収。↓脱塩バッファーで透析2Lのバッファーで、4°C、一晩。脱塩バッファーの組成:20mMTrisHClpH80、500mMNaCl、1mMDTT図1の各レーンのサンプルは以下のとおりである。図1ポリペプチドの大量発現時における発現量の培養温度依存性37°Cでの培養後の菌体を用いたポリアクリルアミド電気泳動像レーンの番号1M2破砕超音波による菌体の破砕粗画分3沈殿遠心後沈殿画分4上清遠心後上清画分5FTNi2アフィニティカラムクロマトグラフィーに吸着しなかった画分6WashNiカラムの洗浄画分7溶出1Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分1本目8溶出2Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分2本目9溶出3Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分3本目10溶出4Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分4本目11溶出5Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分5本目12溶出1Niカラムの500mMイミダゾール添加液での溶出画分1本目13溶出2Niカラムの500mMイミダゾール添加液での溶出画分2本目14溶出3Niカラムの500mMイミダゾール添加液での溶出画分3本目16°Cでの培養後の菌体を用いたポリアクリルアミド電気泳動像レーンの番号1M2破砕超音波による菌体の破砕粗画分3沈殿遠心後沈殿画分4上清遠心後上清画分5FTNi2アフィニティカラムクロマトグラフィーに吸着しなかった画分6WashNiカラムの洗浄画分7溶出1Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分1本目8溶出2Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分2本目9溶出3Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分3本目10溶出4Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分4本目11溶出5Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分5本目12溶出1Niカラムの500mMイミダゾール添加液での溶出画分1本目13溶出2Niカラムの500mMイミダゾール添加液での溶出画分2本目14溶出3Niカラムの500mMイミダゾール添加液での溶出画分3本目図2の各レーンのサンプルは以下のとおりである。図2Ni2アフィニティカラムクロマトグラフィーの溶出結果レーンの番号1Mマーカー2破砕超音波による菌体の破砕粗画分3上清遠心後上清画分4沈殿遠心後沈殿画分5FTNi2アフィニティカラムクロマトグラフィーに吸着しなかった画分6WashNiカラムの洗浄画分7溶出1Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分1本目8溶出2Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分2本目9溶出3Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分3本目10溶出4Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分4本目11溶出5Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分5本目12溶出6Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分6本目13溶出7Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分7本目14溶出8Niカラムの100mMイミダゾール添加液での溶出画分8本目レーンの番号1Mマーカー2溶出1Niカラムの250mMイミダゾール添加液での溶出画分1本目3溶出2Niカラムの250mMイミダゾール添加液での溶出画分2本目4溶出3Niカラムの250mMイミダゾール添加液での溶出画分3本目5溶出4Niカラムの250mMイミダゾール添加液での溶出画分4本目6溶出5Niカラムの250mMイミダゾール添加液での溶出画分5本目7溶出6Niカラムの250mMイミダゾール添加液での溶出画分6本目8溶出1Niカラムの500mMイミダゾール添加液での溶出画分1本目9溶出2Niカラムの500mMイミダゾール添加液での溶出画分2本目10溶出3Niカラムの500mMイミダゾール添加液での溶出画分3本目11溶出4Niカラムの500mMイミダゾール添加液での溶出画分4本目12溶出5Niカラムの500mMイミダゾール添加液での溶出画分5本目13溶出6Niカラムの500mMイミダゾール添加液での溶出画分6本目14溶出7Niカラムの500mMイミダゾール添加液での溶出画分7本目また、陰イオンカラムクロマトグラフィーGEヘルスケアバイオサイエンス製、5ml容量での溶出条件の検討をしたところ、目的のポリペプチドがフロースルー画分に溶出され、不純物を除去できることがわかった図3。[陰イオン交換カラムクロマトグラフィーによるポリペプチドの精製方法]HiTrapQFFカラムGEヘルスケアバイオサイエンス製、5ml容量を平衡化バッファーで平衡化ペリスタポンプおよびフラクションコレクターGEヘルスケアバイオサイエンス製使用、流速1ml分。平衡化バッファーの組成:20mMTrisHClpH80、500mMNaCl、5mMDTT↓上清をカラムに通液;フロースルーを回収流速1ml分FT画分とする。↓平衡化バッファーで洗浄25ml、流速1ml分Wash画分とする。↓溶出バッファーで溶出流速1ml分。溶出バッファーの組成:20mMTrisHClpH80、1000mMNaCl、5mMDTT↓SDSPAGE後、FTおよびWash画分を回収。↓YM10Amicon製で約2mlまで濃縮後、フイルタリングPALL製NANOCEP02/m。図3の各レーンのサンプルは以下のとおりである。図3陰イオン交換カラムクロマトグラフィーの溶出結果レーンの番号1Mマーカー2脱塩後超音波による菌体の破砕粗画分3FT陰イオン交換カラムクロマトグラフィーに吸着しなかった画分4Wash陰イオン交換カラムクロマトグラフィーの洗浄画分さらに、ゲル濾過カラムクロマトグラフィーを用いることで、より純度の高いポリペプチドを得ることが出来た。[ゲルろ過カラムクロマトグラフィーによるポリペプチドの精製方法]HiLoad1660Superdex200カラムを用いウエスタンブロッティングを行った。その結果、モノクローナル抗体がジャイレースBドメインに結合し、ジャイレースBドメインを検出することが確認された図6。Lane1MarkerLane2ジャイレースBドメイント精製物5μgのCBB染色像Lane3ジャイレースBドメイント精製物5μgのモノクローナル抗体による免疫染色像1次抗体:抗ジャイレースBドメインモノクローナル抗体02C122次抗体:HRP標識抗マウスIgG抗体発色液:ジアミノベンジジンDBBg熱帯熱マラリア原虫の蛍光抗体を用いた免疫染色熱帯熱マラリア原虫を、上記で得られたモノクローナル抗体を1次抗体、FITC標識抗マウスIgG抗体を2次抗体として用いて免疫染色した。その結果、モノクローナル抗体はマラリア原虫の栄養型原虫を染色し、マラリア原虫内で、モノクローナル抗体によるジャイレースBドメインの染色像とDNAの染色像が重なった。これは、ジャイレースBドメインがDNA複製時の二本鎖DNAレベルの切断および再結合に関与するという知見と一致する結果である図7。EPI:透過光DAPI:原虫の核のDNAのDAPIによる染色FITC:抗ジャイレースBドメインモノクローナル抗体との反応熱帯熱マラリア原虫栄養型原虫抗ジャイレースBドメインモノクローナル抗体1次抗体FITC標識抗マウスIgG抗体2次抗体MERGE:EPIDAPIFITCの重ね合わせ8モノクローナル抗体による熱帯熱マラリア原虫の増殖抑制熱帯熱マラリア原虫を培養し、モノクローナル抗体が感染赤血球率に及ぼす影響を検討した。モノクローナル抗体産生細胞の培養上清02C12などを原虫培地の110量添加して2日間培養した。その結果、モノクローナル抗体産生細胞の培養上清により熱帯熱マラリア原虫の感染赤血球率が減少し、原虫の増殖および分裂が抑制された表1および図8。すなわち、未処置群controlでは、2日間の培養で原虫が増殖し分裂し、輪状体、栄養型及び分裂体が増加したのに対して、モノクローナル抗体を含む培養上清を用いた処置群antigyraseBでは原虫数の増加が認められなかった。