"配列番号1で示されるアミノ酸配列からなるセルラーゼについて、配列番号1のa10位、b16位、c22位、e39位、f76位、g109位、i263位、k462位、l466位、m468位、n552位、o564位又はp608位の位置のアミノ酸残基が、a位置:グルタミンb位置:アスパラギンc位置:プロリンe位置:アラニンf位置:ヒスチジンg位置:ロイシンi位置:イソロイシンk位置:スレオニンl位置:ロイシンm位置:アラニンn位置:メチオニンo位置:バリンp位置:イソロイシンから選ばれたアミノ酸残基に置換された、親アルカリセルラーゼに比して分泌量が向上した変異アルカリセルラーゼ。配列番号1で示されるアミノ酸配列と98以上の相同性を有するセルラーゼについて、配列番号1のa10位、b16位、c22位、e39位、f76位、g109位、i263位、k462位、l466位、m468位、n552位、o564位又はp608位に相当する位置のアミノ酸残基が、a位置:グルタミンb位置:アスパラギンc位置:プロリンe位置:アラニンf位置:ヒスチジンg位置:ロイシンi位置:イソロイシンk位置:スレオニンl位置:ロイシンm位置:アラニンn位置:メチオニンo位置:バリンp位置:イソロイシンから選ばれたアミノ酸残基に置換された、親アルカリセルラーゼに比して分泌量が向上した変異アルカリセルラーゼ。配列番号1におけるアミノ酸残基の置換が、Leu10Gln、Ile16Asn、Ser22Pro、Phe39Ala、Ile76His、Met109Leu、Phe263Ile、Asn462Thr、Lys466Leu、Val468Ala、Ile552Met、Ile564Val、Ser608Ile、Leu10GlnSer22Pro、Asn33HisPhe39Ala、Leu10GlnSer22ProIle76HisLys466Leuである請求項1又は2記載の変異アルカリセルラーゼ。請求項1~3記載の変異アルカリセルラーゼをコードする遺伝子。請求項4記載の遺伝子を含有する組換えベクター。請求項5記載の組換えベクターを含有する形質転換体。宿主が微生物である請求項6記載の形質転換体。請求項1~3記載の変異アルカリセルラーゼを配合する洗浄剤組成物。本発明は、アルカリ性領域で良好に作用し、且つ分泌能が高く、または比活性が向上することで容易に大量生産が可能なアルカリセルラーゼを提供することを目的とする。本発明者らは、アルカリセルラーゼの特性を保持しつつ、効率良く培地中に生産できる新たな酵素の探索を行ったところ、配列番号1で示されるアミノ酸配列と90以上の相同性を有するアミノ酸配列中の特定位置のアミノ酸残基を他のアミノ酸残基に置換した変異アルカリセルラーゼが高い分泌能を有する、あるいは比活性が向上することにより大量生産が可能であることを見出した。すなわち本発明は、配列番号1で示されるアミノ酸配列と90以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるセルラーゼについて、配列番号1のa10位、b16位、c22位、d33位、e39位、f76位、g109位、h242位、i263位、j308位、k462位、l466位、m468位、n552位、o564位又はp608位又はこれに相当する位置のアミノ酸残基を他のアミノ酸残基に置換した変異アルカリセルラーゼ、及びそれをコードする遺伝子を提供するものである。また本発明は、該遺伝子を含有するベクター、該ベクターを含有する形質転換体を提供するものである。更に本発明は、上記変異アルカリセルラーゼを配合する洗浄剤組成物を提供するものである。本発明の変異アルカリセルラーゼを用いれば、これまでに比べ高活性の培養液を得ることができるため、洗剤等工業用用途に必要なアルカリセルラーゼを大量に供給可能である。また、一定の酵素量を生産する場合においては培養回数を減少させることで、培養に要するエネルギー、培地成分量、培養中に生成される二酸化炭素量、並びに排水量を減少させることが可能となる。本発明の変異アルカリセルラーゼは、配列番号1で示されるアミノ酸配列と90以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるセルラーゼを変異の対象となるセルラーゼ以下、親アルカリセルラーゼともいうとし、当該配列番号1の上記a~p位又はこれに相当する位置のアミノ酸残基を他のアミノ酸残基に置換してなるものであり、これらは野生型の変異体或いは人為的に変異を施した変異体であってもよい。親アルカリセルラーゼである配列番号1で示されるアミノ酸配列と90以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるアルカリセルラーゼには、配列番号1で示されるアミノ酸配列からなるアルカリセルラーゼ及び当該アミノ酸配列と90以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるアルカリセルラーゼが包含され、これらは野生型又は野生型の変異体であってもよく、その性質としては、ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動SDS-PAGE法あるいはゲル濾過法により得られる分子量が86000±2,000であることが好ましく、カルボキシメチルセルロースを基質とした場合の最適反応pHは7.5~9.5の間にあることが好ましく、最適反応温度が40~50°Cの範囲にあることが好ましい。また、カルボキシメチルセルロースのほかにリケナンを良好に分解することが好ましく、pH9で50°C、10分間の処理においても充分に安定であることが好ましい。特に好ましくは、分子量が86,000±2,000SDS-PAGEあるいはSephacrylS200カラムによるゲル濾過法、最適反応pHはpH8.6~9.0、最適反応温度が50°C、カルボキシメチルセルロースのほかにリケナンを良好に分解し、pH9、5mM塩化カルシウム存在下で50°C、10分間の処理を行った場合95以上30°C、10分間処理時の残存活性を100とするの残存活性を認めるようなセルラーゼである。配列番号1で示されるアミノ酸配列からなるアルカリセルラーゼとしては、例えばEgl-237[バチルスエスピーKSM-S237FERMBP-7875由来、Hakamadaら,BiosciBiotechnolBiochem64228122892000]が挙げられる。また、配列番号1で示されるアミノ酸配列と90以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるアルカリセルラーゼとしては、配列番号1で示されるアミノ酸配列と好ましくは95以上、より好ましくは98以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるアルカリセルラーゼが挙げられ、例えば、バチルスエスピー1139株由来のアルカリセルラーゼEgl-1139Fukumoriら,JGenMicrobiol13223292335相同性91.4、バチルスエスピーKSM-64株由来のアルカリセルラーゼEgl-64Sumitomoら,BiosciBiotechnolBiochem568728771992相同性91.9、バチルスエスピーKSM-N131株由来のセルラーゼEgl-N131b特願2000-47237号相同性95.0が挙げられる。尚、アミノ酸配列の相同性はGENETYX-WINのマキシマムマッチングやサーチホモロジー等のプログラムソフトウェア開発を用いて計算することができる。上記配列番号1で示されるアミノ酸配列からなる親アルカリセルラーゼのa~p位置におけるアミノ酸残基は、a10位:ロイシン、b16位:イソロイシン、c22位:セリン、d33位:アスパラギン、e39位:フェニルアラニン、f76位:イソロイシン、g109位:メチオニン、h242位:グルタミン、i263位:フェニルアラニン、j308位:スレオニン、k462位:アスパラギン、l466位:リジン、m468位:バリン、n552位:イソロイシン、o564位:イソロイシン、p608位:セリンである。また、配列番号1で示されるアミノ酸配列と90以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる親アルカリセルラーゼにおいては、配列番号1の上記a~p位に相当する位置のアミノ酸残基は、それぞれa位:ロイシン、e位:フェニルアラニン、f位:イソロイシン、h位:グルタミン、i位:フェニルアラニン、k位:アスパラギン、l位:リジン、m位:バリン、n位:イソロイシンであるものが好ましく、更にこれに加えてb位:イソロイシン、c位:セリンであるものが好ましく、更にこれに加えてd位:アスパラギン、g位:メチオニン、j位:スレオニン、o位:イソロイシン、p位:セリンであるものが好ましい。従って、配列番号1で示されるアミノ酸配列と90以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる親アルカリセルラーゼの中で好ましいものとしては、上述した酵素学的性質を有するもの段落0012及び/又は配列番号1で示されるアミノ酸配列と好ましくは95以上、より好ましくは98以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるものであって、更に配列番号1のa~p位に相当する位置のアミノ酸残基が上記段落0015のものであるセルラーゼが挙げられ、特に当該酵素学的性質を有し段落0012、配列番号1に示すアミノ酸配列と好ましくは95以上、より好ましくは98以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、且つ配列番号1のa~p位に相当する位置のアミノ酸残基が上記段落0015のものであるセルラーゼが好ましい。そして、本発明の変異アルカリセルラーゼは、配列番号1で示されるアミノ酸配列からなるセルラーゼを親アルカリセルラーゼとする場合には、当該a~p位置のいずれかのアミノ酸残基を他のアミノ酸に置換したものであり、配列番号1で示されるアミノ酸配列と90以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるセルラーゼ配列番号1で示されるアルカリセルラーゼを除くを親アルカリセルラーゼとする場合には、配列番号1の上記a~p位に相当する位置のいずれかのアミノ酸残基を他のアミノ酸に置換したものである。斯かる他のアミノ酸残基としては、a位置については、グルタミン、アラニン、プロリン又はメチオニン、特にグルタミンであるのが好ましく、b位置については、アスパラギン又はアルギニン、特にアスパラギンであるのが好ましく、c位置についてはプロリンであるのが好ましく、d位置についてはヒスチジンであるのが好ましく、e位置については、アラニン、スレオニン又はチロシン、特にアラニンであるのが好ましく、f位置については、ヒスチジン、メチオニン、バリン、スレオニン又はアラニン、特にヒスチジンであるのが好ましく、g位置については、イソロイシン、ロイシン、セリン又はバリン、特にイソロイシンであるのが好ましく、h位置についてアラニン、フェニルアラニン、バリン、セリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ロイシン、イソロイシン、チロシン、スレオニン、メチオニン又はグリシン、特にアラニン、フェニルアラニン、セリンであるのが好ましく、i位置についてはイソロイシン、ロイシン、プロリン又はバリン、特にイソロイシンであるのが好ましく、j位置については、アラニン、セリン、グリシン又はバリン、特にアラニンであるのが好ましく、k位置については、スレオニン、ロイシン、フェニルアラニン又はアルギニン、特にスレオニンであるのが好ましく、l位置については、ロイシン、アラニン又はセリン、特にロイシンであるのが好ましく、m位置については、アラニン、アスパラギン酸、グリシン又はリジン、特にアラニンであるのが好ましく、n位置については、メチオニンであるのが好ましく、o位置については、バリン、スレオニン又はロイシン、特にバリンであるのが好ましく、p位置については、イソロイシン又はアルギニン、特にイソロイシンであるのが好ましい。また、相当する位置のアミノ酸残基を特定する方法としては、例えばリップマン-パーソン法等の公知のアルゴリズムを用いてアミノ酸配列を比較し、各アルカリセルラーゼのアミノ酸配列中に存在する保存アミノ酸残基に最大の相同性を与えることにより行うことができる。セルラーゼのアミノ酸配列をこのような方法で整列させることにより、アミノ酸配列中にある挿入、欠失にかかわらず、相同アミノ酸残基の各セルラーゼにおける配列中の位置を決めることが可能である図1。相同位置は、三次元構造中で同位置に存在すると考えられ、対象のセルラーゼの特異的機能に関して類似した効果を有することが推定できる。配列番号1に示すアルカリセルラーゼEgl-237のa10位、b16位、c22位、d33位、e39位、f76位、g109位、h242位、i263位、j308位、k462位、l466位、m468位、n552位、o564位、p608位に相当する位置及びアミノ酸番号の具体例を配列番号1と90以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる他のアルカリセルラーゼについて示す。斯かるアミノ酸残基の置換は、酵素活性及び酵素特性が変化しない限り2個所以上が同時になされていてもよい。2個所以上が同時になされた場合の好ましい具体例を以下に示す。尚、以下の表記ではアミノ酸を3文字表記とし、は一ヶ所の置換に対し付加された置換を表し、/については表記したいずれのアミノ酸を使用しても良いことを示している。例えば、2重置換体の例としては、Leu10Gln/Ala/Pro/MetIle16Asn/Arg、Ile16Asn/ArgSer22Pro、Leu10Gln/Ala/Pro/MetSer22Pro、Asn33HisPhe39Thr/Tyr/Ala、Leu10Gln/Ala/Pro/MetGln242Ser/Ala/Phe/Val/Asp/Glu/Gly、Ile16Arg/AsnSer22Pro、Ser22ProGln242Ala/Ser/Phe/Val/Ile/Gly/Glu/Asp/Thr/Leu/Met/Tyr、Gln242Ala/Ser/Phe/Val/Ile/Gly/Glu/Asp/Thr/Leu/Met/TyrPhe263Ile/Leu/Pro/Val、Leu10Gln/Ala/Pro/MetThr308Ala/Ser/Gly/Val、Ile16Asn/ArgAsn462Thr/Leu/Phe/Arg、Ser22ProVal468Ala/Asp/Gly/Lys、Asn33HisIle552Met、Asn33HisIle564Val/Thr/Leu、Gln242Ala/Ser/Phe/Val/Ile/Gly/Glu/Asp/Thr/Leu/Met/TyrSer608Ile/Arg等が好ましく、Leu10GlnSer22Pro、Asn33HisPhe39Ala、Ser22ProGln242Ala、Ser22ProGln242Phe、Ser22ProGln242Serが特に好ましい。3重置換体の例としては、Leu10Gln/Ala/Pro/MetSer22ProGln242Ala/Ser/Phe/Val/Ile/Gly/Glu/Asp/Thr/Leu/Met/Tyr、Ile16Asn/ArgSer22ProGln242Ala/Ser/Phe/Val/Ile/Gly/Glu/Asp/Thr/Leu/Met/Tyr、Ile76His/Met/Val/Thr/AlaGln242Ala/Ser/Phe/Val/Ile/Gly/Glu/Asp/Thr/Leu/Met/TyrLys466Leu/Ala/Ser等が好ましく、Leu10GlnSer22ProGln242Ala、Ile16AsnSer22ProGln242Ser、Ile16AsnSer22ProGln242Pheが特に好ましい。4重置換体の例としては、Leu10Gln/Ala/Pro/MetSer22ProIle76His/Met/Val/Thr/AlaLys466Leu/Ala/Ser、Leu10Gln/Ala/Pro/MetIle16Asn/ArgIle76His/Met/Val/Thr/AlaLys466Leu/Ala/Ser、Ile16Asn/ArgMet109Ile/Leu/Ser/ValGln242Ala/Ser/Phe/Val/Ile/Gly/Glu/Asp/Thr/Leu/Met/TyrIle564Val/Thr/Leu等が好ましく、Leu10GlnSer22ProIle76HisLys466Leu、Leu10GlnSer22ProGln242AlaLys466Leu、Leu10GlnSer22ProGln242SerLys466Leuが特に好ましい。5重置換体の例としては、Leu10Gln/Ala/Pro/MetIle16Asn/ArgSer22ProIle76His/Met/Val/Thr/AlaLys466Leu/Ala/Ser、Ile16Asn/ArgGln242Ala/Ser/Phe/Val/Ile/Gly/Glu/Asp/Thr/Leu/Met/TyrThr308Ala/Ser/Gly/ValIle552MetSer608Ile/Arg等が好ましく、Leu10GlnIle16AsnIle76HisGln242SerLys466Leu、Leu10GlnIle16AsnIle76HisGln242AlaLys466Leuが特に好ましい。また、更にそれ以上の多重置換、例えば6~16置換体でもよい。また、本発明の変異アルカリセルラーゼには、上記a~p位置に相当する位置のいずれかのアミノ酸残基を他のアミノ酸に置換したもののみならず、アルカリセルラーゼ活性を失わない限り、該アミノ酸配列中の他の位置において1~数個のアミノ酸残基が欠失、置換又は付加されたものも包含する。本発明の変異アルカリセルラーゼは、例えば以下の方法により得ることができる。すなわち、クローニングされた親アルカリセルラーゼ例えば配列番号1で示されるアミノ酸配列を有するアルカリセルラーゼをコードする遺伝子配列番号2に対して置換以下、変異ともいうを施し、得られた変異遺伝子を用いて適当な宿主を形質転換し、当該組換え宿主を培養し、培養物から採取することにより得られる。親アルカリセルラーゼをコードする遺伝子のクローニングは、一般的な遺伝子組換え技術を用いればよく、例えばBacillussp.KSM-S237の染色体より、ショットガン法やPCR法により取得できる。親アルカリセルラーゼをコードする遺伝子の変異手段としては、一般的に行われているランダム変異や部異特異的変異の方法がいずれも採用できる。より具体的には、例えばのSiteDirectedMutagenesisSystemMutanSuperExpressKmキット等を用いて行うことができる。また、リコンビナントPCRpolymerasechainreaction法PCRprotocolsAcademicpressNewYork1990を用いることによって、遺伝子の任意の配列を他の遺伝子の該任意の配列に相当する配列と置換することが可能である。得られた変異遺伝子を用いた本発明変異アルカリセルラーゼの生産は、宿主菌体内で複製維持が可能であり、該酵素を安定に発現させることができ、該遺伝子を安定に保持できるベクターに当該遺伝子を組込み、得られた組換えベクターを用いて宿主菌を形質転換することにより行えばよい。斯かるベクターとしては大腸菌を宿主とする場合、pUC18、pBR322、pHY300PLKヤクルト本社製等が挙げられ、枯草菌を宿主にする場合、pUB110、pHSP64Sumitomoら、BiosciBiotechnolBiocem59217221751995あるいはpHY300PLK等が挙げられる。宿主菌を形質転換するには、プロトプラスト法、コンピテントセル法、エレクトロポレーション法等を用いればよく、宿主菌としては、例えばバチルス属枯草菌等のグラム陽性菌、大腸菌等のグラム陰性菌、ストレプトマイセス属等の放線菌、サッカロマイセス属等の酵母あるいはアスペルギルス属等のカビが挙げられる。得られた形質転換体は、資化しうる炭素源、窒素源、金属塩、ビタミン等を含む培地を用いて適当な条件下で培養すればよく、得られた培養液から、一般的な方法によって酵素の分取や精製を行い、凍結乾燥、噴霧乾燥、結晶化により必要な酵素形態を得ることができる。かくして得られる本発明の変異アルカリセルラーゼは、親アルカリセルラーゼの性質を保持しつつ、且つ形質転換体での酵素の分泌能が向上している、あるいは酵素自体の比活性の向上をもたらすものである。ここで酵素の分泌の向上とは、親アルカリセルラーゼと同一の条件下において例えば3w/vポリペプトンS日本製薬製、0.5魚肉エキス和光純薬製、0.05酵母エキス、0.1リン酸1カリウム、0.02硫酸マグネシウム7水塩、テトラサイクリン15μg/mL及び5マルトースを含んだ培地PSM培地を用いて、30°Cで72時間振とう培養する生産した変異アルカリセルラーゼについて培養上清中の酵素活性量、タンパク質量を測定した場合、親アルカリセルラーゼのそれに対し、一定量以上の活性量、タンパク質量を示すこと、例えば親アルカリセルラーゼの5以上、望ましくは10以上、さらに望ましくは20以上の活性量またはタンパク質量の増大が認められるものとすることができる。特に、比活性などの変化が認められなければ活性量とタンパク量の比は親アルカリセルラーゼと変異アルカリセルラーゼでは一定の値をとると考えられることから、活性量またはタンパク質量のどちらか一方を測定しても構わない。従って、本発明の変異アルカリセルラーゼは、各種洗剤組成物配合用酵素として有用である。洗浄剤組成物中への本発明変異アルカリセルラーゼの配合量は、当該セルラーゼが活性を示す量であれば特に制限されないが、洗浄剤組成物あたり、0.0001~5質量であるのが好ましく、0.00005~2.5質量がより好ましく、0.001~2質量が更に好ましい。また、酵素造粒物として用いる場合の造粒物中での含有量は、0.01~50質量であるのが好ましく、0.05~25質量がより好ましく、0.1~20質量が更に好ましい。本発明の洗浄剤組成物は、上記アルカリセルラーゼ造粒物の他に、界面活性剤及びビルダーを含有するのが好ましい。界面活性剤としては、陰イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、両性界面活性剤及び陽イオン性界面活性剤の1種又は組み合わせを挙げることができるが、好ましくは陰イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤である。陰イオン性界面活性剤としては、炭素数10~18のアルコールの硫酸エステル塩、炭素数8~20のアルコールのアルコキシル化物の硫酸エステル塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキル硫酸エステル塩、パラフィンスルホン酸塩、α-オレフィンスルホン酸塩、α-スルホ脂肪酸塩、α-スルホ脂肪酸アルキルエステル塩又は脂肪酸塩が好ましい。本発明では特に、アルキル鎖の炭素数が10~14、より好ましくは12~14の直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩が好ましい。これらの塩の対イオンとしては、アルカリ金属塩やアミン類が好ましく、特にナトリウム及び/又はカリウム、モノエタノールアミン、ジエタノールアミンが好ましい。非イオン性界面活性剤としては、ポリオキシアルキレンアルキル炭素数8~20エーテル、アルキルポリグリコシド、ポリオキシアルキレンアルキル炭素数8~20フェニルエーテル、ポリオキシアルキレンソルビタン脂肪酸炭素数8~22エステル、ポリオキシアルキレングリコール脂肪酸炭素数8~22エステル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックポリマーが好ましい。特に、非イオン性界面活性剤としては、炭素数10~18のアルコールにエチレンオキシドやプロピレンオキシド等のアルキレンオキシドを4~20モル付加したHLB値グリフィン法で算出が10.5~15.0、好ましくは11.0~14.5であるようなポリオキシアルキレンアルキルエーテルが好ましい。界面活性剤の合計量は、洗浄力及び溶解性の点から、洗浄剤組成物中10~60質量であるのが好ましく、15~50質量がより好ましく、20~45質量が更に好ましい。陰イオン性界面活性剤は、特に粉末洗浄剤組成物中1~60質量であるのが好ましく、1~50質量がより好ましく、3~40質量が特に好ましい。非イオン性界面活性剤は、特に粉末洗浄剤組成物中0.5~45質量であるのが好ましく、1~35質量がより好ましく、3~25質量が特に好ましい。陰イオン性界面活性剤と非イオン性界面活性剤は、単独で用いることもできるが、好ましくは混合して用いるのが良い。また、両性界面活性剤や陽イオン性界面活性剤を目的に合わせ併用することもできる。ビルダーとしては、そのもの自身では洗浄力がないか、又はあってもそれ程著しくないが、洗浄剤組成物に配合されると著しく洗浄性能を向上させ、特に洗浄剤の主要成分である界面活性剤の洗浄能力を向上させるものが挙げられ、作用として、多価金属陽イオンの捕捉作用、汚れ分散作用及びアルカリ緩衝作用の少なくとも1つの作用を有するものである。斯かるビルダーとしては、例えば水溶性無機化合物、水不溶性無機化合物、有機化合物等が挙げられる。水溶性無機化合物としては、リン酸塩トリポリリン酸塩、ピロリン酸塩、メタリン酸塩、リン酸三ナトリウム等、ケイ酸塩、炭酸塩、硫酸塩等が挙げられる。中でも3つの作用を全て有する点でリン酸塩が好ましい。水不溶性無機化合物としては、アルミノケイ酸塩A型ゼオライト、P型ゼオライト、X型ゼオライト、非晶質アルミノケイ酸塩等、結晶性ケイ酸塩等が挙げられる。中でも粒子径3μm以下より好ましくは1μm以下のA型ゼオライトが好ましい。有機化合物としては、カルボン酸塩アミノカルボン酸塩、ヒドロキシアミノカルボン酸塩、ヒドロキシカルボン酸塩、シクロカルボン酸塩、マレイン酸誘導体、シュウ酸塩等、有機カルボン酸塩ポリマーアクリル酸重合体及び共重合体、多価カルボン酸重合体及び共重合体、グリオキシル酸重合体、多糖類及びこれらの塩等等が挙げられる。中でも有機カルボン酸塩ポリマーが好ましい。前記ビルダーの塩において、対イオンとしては、アルカリ金属塩、アミン類が好ましく、特にナトリウム及び/又はカリウム、モノエタノールアミン、ジエタノールアミンが好ましい。これらのビルダーは、単独で又は2種以上を併用することができるが、水溶性無機化合物を含有するのが好ましく、水溶性無機化合物及び有機化合物を併用するのがより好ましく、水溶性無機化合物、有機化合物及び水不溶性無機化合物を併用するのが更に好ましい。ビルダーの合計量は、洗浄性能の点から、洗浄剤組成物中20~80質量であるのが好ましく、30~70質量がより好ましく、35~60質量が更に好ましい。また、水溶性無機化合物ビルダーは、特に粉末洗浄剤組成物中10~50質量であるのが好ましく、15~45質量がより好ましく、20~40質量が更に好ましい。水不溶性無機化合物ビルダーは、特に粉末洗浄剤組成物中5~50質量であるのが好ましく、10~45質量がより好ましく、15~40質量が更に好ましい。有機化合物ビルダーは、特に粉末洗浄剤組成物中0.1~20質量であるのが好ましく、0.3~15質量がより好ましく、0.5~10質量が更に好ましい。本発明の洗浄剤組成物には、上記成分の他に、漂白剤過炭酸塩、過ホウ酸塩、漂白活性化剤等、再汚染防止剤カルボキシメチルセルロース等、柔軟化剤ジアルキル型第四級アンモニウム塩、粘土鉱物等、還元剤亜硫酸塩等、蛍光増白剤ビフェニル型、アミノスチルベン型等、泡コントロール剤シリコーン等、香料等の添加剤を含有させることができる。また、本発明の洗浄剤組成物には、本発明のアルカリセルラーゼ以外に様々な酵素を併用することもできる。例えば、加水分解酵素、酸化酵素、還元酵素、トランスフェラーゼ、リアーゼ、イソメラーゼ、リガーゼ、シンテターゼ等である。このうち、本発明以外のセルラーゼ、プロテアーゼ、ケラチナーゼ、エステラーゼ、クチナーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、プルラナーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、グルコシダーゼ、グルカナーゼ、コレステロールオキシダーゼ、ペルオキシダーゼ、ラッカーゼ等が好ましく、特にプロテアーゼ、セルラーゼ、アミラーゼ、リパーゼが好ましい。本発明の洗浄剤組成物は、上記方法で得られた本発明変異アルカリセルラーゼ及び上記公知の洗浄成分を組み合わせて常法に従い製造することができる。洗剤の形態は用途に応じて選択することができ、例えば液体、粉体、顆粒、ペースト、固形等にすることができる。かくして得られる本洗浄剤組成物は、衣料用粉末洗浄剤、衣料用液体洗浄剤、自動食器洗浄機用洗剤、木綿繊維改質用洗浄剤等として使用することができる。実施例1アルカリセルラーゼ遺伝子の変異体作製アルカリセルラーゼの生産量を向上させる変異体取得のため、先ずアルカリセルラーゼ遺伝子領域内の変異PCR法によるランダム変異を行い、変異体のライブラリーを構築した。得られた変異体の中からアルカリセルラーゼの生産量向上に有効な変異体を選別し、変異箇所を塩基配列解析で決定した後、混合プライマーを用いて変異箇所のランダム変異及び部位特異的変異により多重変異体を構築して生産量の向上を試みた。鋳型DNAとして大腸菌-枯草菌のシャトルベクターpHY300PLK中に組換えられたBacillussp.KSM-S237株由来のアルカリセルラーゼ遺伝子を用いた。ランダム変異の混合プライマーには、Ile16Xプライマー1、配列番号3、Xは他のアミノ酸、Phe39Xプライマー2、配列番号4、Ile76Xプライマー3、配列番号5、Met109Xプライマー4、配列番号6、Phe263Xプライマー5、配列番号7、Thr308Xプライマー6、配列番号8、Asn462Xプライマー7、配列番号9、Lys466Xプライマー8、配列番号10、Val468Xプライマー9、配列番号11、Ile552Xプライマー10、配列番号12、Ile564Xプライマー11、配列番号13及びSer608Xプライマー12、配列番号14を用いた。また、部位特異的変異Leu10Gln、Ser22Pro、Asn33His、Phe39Ala、Met109Ile、Gln242Ser、Gln242Ala、Gln242Phe、Gln242Val、Gln242Asp、Gln242Glu、Gln242Gly、Gln242Ile、Gln242Leu、Gln242Met、Gln242Tyr、Phe263Ile、Thr308Ala及びIle552Metを導入する為の変異導入用プライマーLeu10Glnプライマー13、配列番号15、Ser22Proプライマー14、配列番号16、Asn33Hisプライマー15、配列番号17、Phe39Alaプライマー16、配列番号18、Met109Ileプライマー17、配列番号19、Gln242Serプライマー18、配列番号20、Gln242Alaプライマー19、配列番号21、Gln242Pheプライマー20、配列番号22、Gln242Valプライマー21、配列番号23、Gln242Aspプライマー22、配列番号24又はGln242Gluプライマー22、配列番号24、Gln242Glyプライマー23、配列番号25、Gln242Ileプライマー20、配列番号22、Gln242Thrプライマー24、配列番号26、Gln242Leuプライマー25、配列番号27、Gln242Metプライマー26、配列番号28、Gln242Tyrプライマー27、配列番号29、Phe263Ileプライマー28、配列番号30、Thr308Alaプライマー29、配列番号31及びIle552Metプライマー30、配列番号32を用い、アルカリセルラーゼ遺伝子内に存在する適当な対向プライマーを構築して鋳型DNAと共に変異導入を行なった。即ち、鋳型DNAプラスミド0.5μL、変異導入用プライマー20μL1μM、対向プライマー20μL1μM、10倍濃度のPCR用緩衝液10μL、10mMデオキシヌクレオチド3リン酸混液8μL、PyrobestDNAポリメラーゼ0.5μL及び脱イオン水39.5μLを混合した後、geneampPCRsystem9700Amesham-PharmaciaでPCRを行った。反応条件は、94°C2分間の熱変性後、94°C1分間、56°C1分間、72°C30秒間30サイクル及び72°C1分間で行った。得られたPCR産物をGFXPCRDNAandgelbandpurificationkitAmesham-Pharmaciaで精製後43.5μL、5.5μLの10倍濃度のリン酸化用緩衝液及びポリヌクレオチドキナーゼ1μLを加え、37°Cで1時間リン酸化反応を行ない精製50μLした。リン酸化されたPCR産物25μLに、鋳型プラスミドを2μL、10倍濃度のPCR用緩衝液10μL、10mMdNTP混液8μL、PyrobestDNAポリメラー1μL及び脱イオン水54μLを混合した後、PCRを行った。反応条件は、94°C、2分間の熱変性後、94°C1分間、60°C1分間、72°C6分間30サイクル及び72°C12分間で行った。得られたPCR産物を精製後43.5μL、5.5μLの10倍濃度のリン酸化用緩衝液及びポリヌクレオチドキナーゼ1μLを加え、37°Cで1時間リン酸化反応を行った後、エタノール沈澱10μLした。回収された10μLのDNA溶液をligationkitver.2Takaraを用いて16°C、18時間ライゲーション反応を行い、自己閉環した後、再度エタノール沈殿して、DNA混液を回収した。実施例2形質転換法実施例1で得られたDNA混液5μLを用いてChangandCohenMolGenGent1681111151979によりBacillussubtilisISW1214株に導入して形質転換体を取得した。即ち、宿主菌B.subtilisISW1214株を50mLのLB培地中で37°Cで、約2時間振とう培養後、室温で遠心分離により菌体を集め、5mLのSMMP0.5Mシュークロース、20mMマレイン酸二ナトリウム、20mM塩化マグネシウム6水塩、35w/vantibioticmedium3Difco]に懸濁後、SMMP溶液に溶解した500μLのリゾチーム溶液を加え、37°Cで1時間保温した。保温終了後、室温で遠心分離によりプロトプラストを集め、5mLのSMMPに懸濁しプロトプラスト溶液を調製した。0.5mLのプロトプラスト溶液に10μLのプラスミド溶液と1.5mLの40w/vポリエチレングリコールPEG8000、Sigmaを加え、緩やかに攪拌後、室温で2分間放置した後、直ちに5mLのSMMP溶液を混和し、室温で遠心分離によりプロトプラストを集め、1mLのSMMP溶液に再懸濁した。プロトプラスト懸濁液を37°Cで90分間振盪した後、テトラサイクリン15μg/mL、Sigmaを含むDM3再生寒天培地0.8w/v寒天和光純薬、0.5コハク酸2ナトリウム6水塩、0.5カザミノ酸テクニカルDifco、0.5酵母エキス、0.35リン酸1カリウム、0.15リン酸2カリウム、0.5グルコース、0.4塩化マグネシウム6水塩、0.01牛血清アルブミンSigma、0.5カルボキメチルセルロース、0.005トリパンブルーMerck及びアミノ酸混液上に塗布し、30°Cで72時間培養して形質転換体を得た。DM3再生寒天平板培地上で、ハローを形成した形質転換体をテトラサイクリン15μg/mLを含んだポリペプトン培地で、30°Cで15時間振とう培養を行い、集菌後、microprepplasmidpurificationkitAmesham-Pharmaciaによりプラスミドを回収、精製した。実施例3塩基配列の決定実施例2で取得したプラスミド中に挿入されたセルラーゼ遺伝子の塩基配列の確認は、377DNAシークエンサーAppliedBiosystemsを用いて行なった。実施例4セルラーゼ変異体の生産評価宿主菌B.subtilisISW1214株の培養は、3w/vポリペプトンS日本製薬、0.5魚肉エキス和光純薬、0.05酵母エキス、0.1リン酸1カリウム、0.02硫酸マグネシウム7水塩、テトラサイクリン15μg/mL及び5マルトースを含んだ培地PSM培地を用いて、30°Cで72時間行った。各セルラーゼ変異体の培養上清中の活性を測定し、組換え野性型セルラーゼの培養液あたりの生産量を100とした時、Leu10Glnは120、Ile16Asnは139、Ser22Proは140、Asn33Hisは105、Phe39Alaは113、Ile76Hisは112、Met109Leuは112、Gln242Serは125、Phe263Ileは137、Thr308Alaは102、Asn462Thrは116、Lys466Leuは110、Val468Alaは122、Ile552Metは132、Ile564Valは113、Ser608Ileは110であった。2重変異体Leu10GlnSer22Proは117、Asn33HisPhe39Alaは118、Ser22ProGln242Alaは207、Ser22ProGln242Pheは196、Ser22ProGln242Valは187、Ser22ProGln242Serは175、Ser22ProGln242Ileは174、Ser22ProGln242Glyは160、Ser22ProGln242Gluは158、Ser22ProGln242Aspは145、Ser22ProGln242Thrは134、Ser22ProGln242Leuは128、Ser22ProGln242Metは125及び、Ser22ProGln242Tyrは115であった。3重変異体Leu10GlnSer22ProGln242Serは162、Ile16AsnSer22ProGln242Serは107、4重変異体Leu10GlnSer22ProIle76HisLys466Leuは113、5重変異体Leu10GlnIle16AsnIle76HisGln242SerLys466Leuは163と生産向上が認められた。解析の結果、殆どの変異体における生産向上はタンパク質の分泌量の増加であることが明かとなった。その中において242位の置換体については基質であるカルボキメチルセルロースCMCの分解反応に対する比活性の向上が認められた。即ち、野生型酵素の比活性を100とした場合、Gln242Alaは、147、Gln242Valは、150、Gln242Serは、125、Gln242Pheは、128、Gln242Aspは、107、Gln242Gluは、106、Gln242Glyは、105とそれぞれ相対比活性の向上を認めた。さらに0.1Mリン酸緩衝液pH8中における比活性も向上しており、Gln242Alaは、150、Gln242Serは、110、Gln242Valは、123、Gln242Pheは、110、Gln242Aspは108、Gln242Gluは114と相対比活性の向上が認められた。尚、タンパク質量は、標準タンパク質として牛血清アルブミンを用い、プロテインアッセイキットBio―Radにて定量した。<セルラーゼ活性測定法3,5-ジニトロサリチル酸DNS法>0.2mLの0.5Mグリシン-水酸化ナトリウム緩衝液pH9.0、0.4mLの2.5w/vカルボキシメチルセルロースA01MC;日本製紙、0.3mLの脱イオン水から成る反応液に0.1mLの適当に希釈した酵素液を加え40°Cで20分間反応させた後、1mLのジニトロサリチル酸試薬0.5ジニトロサリチル酸、30ロッシェル塩、1.6水酸化ナトリウム水溶液を添加し、沸水中で5分間還元糖の発色を行った。氷水中で急冷し、4mLの脱イオン水を加え535nmにおける吸光度を測定し還元糖の生成量を求めた。尚、ブランクは酵素液を加えずに処理した反応液にジニトロサリチル酸試薬を加えた後、酵素液を添加し、同様に発色させたものを用意した。酵素1単位1Uは、上記反応条件下において1分間に1μmolのグルコース相当の還元糖を生成する量とした。実施例5特開2002-265999号公報に記載のA-1粒子、C-1粒子、及び香料からなる下記組成の粉末洗剤を調製し、これに本発明の変異アルカリセルラーゼを1350000U/kgとなるように配合して、その洗浄力を調べた。<洗浄力測定方法>人工汚染布特開2002-265999号公報に記載の洗浄力評価用人工汚染布を用いた。洗浄条件、洗浄方法及び評価法30°Cの硬水CaCl2:5542mgL、MgCl26H2O:4351mgLに洗剤を溶解し、0.0667質量洗剤水溶液1Lを調製する。人工汚染布5枚を洗剤水溶液に添加し、30°Cにて1時間浸して置く。次いでターゴトメーターにて100rpm、30°Cで10分間攪拌洗浄する。人工汚染布を流水下で濯いだ後、アイロンプレスし、反射率測定に供した。汚染前の原布及び洗浄前後の人工汚染布の550nmにおける反射率を自記色彩計島津製作所製にて測定し、次式によって洗浄率を求め、5枚の測定平均値にて洗浄力を評価した。評価結果この結果、本発明の変異アルカリセルラーゼを配合した洗剤による洗浄率は71であり、セルラーゼ無添加の洗剤の64に比べて7ポイント向上した。"