"高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれる第1アミン及び第2アミンの一部又は全部をN-アシル化すると共に、該分子中に含まれるカルボキシル基の一部又は全部をアミノ酸のアルキルエステルのアミノ基とカップリングさせて得られる化学修飾水溶性エラスチン。高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれる第1アミン及び第2アミンの一部又は全部をN-アシル化すると共に、該分子中に含まれるカルボキシル基の一部又は全部をアミノ酸のアルキルエステルのアミノ基とカップリングさせて得られる化学修飾水溶性エラスチンと、コラーゲンを混合して得られる化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲル。化学修飾水溶性エラスチンとコラーゲンとの重量比化学修飾水溶性エラスチン/コラーゲンが、1/200~200/1である請求項2記載の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲル。化学修飾水溶性エラスチンと、ほぼ同重量のコラーゲンを混合して得られる請求項2又は3記載の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲル。化学修飾水溶性エラスチンとコラーゲンを混合して得られる混合ゲルに、放射線を照射したことを特徴とする請求項2~4のいずれか1項記載の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲル。1高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれる第1アミン及び第2アミンの一部又は全部をN-アシル化する工程、2該高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれるカルボキシル基の一部又は全部をアミノ酸の低級アルキルエステルのアミノ基とカップリングさせる工程、及び、3前記1と2の工程を経て得られた化学修飾水溶性エラスチンを、コラーゲンと溶液状態で混合して混合ゲルを調製する工程からなる化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルの製造方法。化学修飾水溶性エラスチンとコラーゲンとの重量比化学修飾水溶性エラスチン/コラーゲンが、1/200~200/1である請求項6記載の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルの製造方法。化学修飾水溶性エラスチンと、ほぼ同重量のコラーゲンを混合することからなる請求項6又は7記載の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルの製造方法。1高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれる第1アミン及び第2アミンの一部又は全部をN-アシル化する工程、2該高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれるカルボキシル基の一部又は全部をアミノ酸の低級アルキルエステルのアミノ基とカップリングさせる工程、3前記1と2の工程を経て得られた化学修飾水溶性エラスチンを、コラーゲンと溶液状態で混合して混合ゲルを調製する工程、及び、4前記3で得られた混合ゲルに放射線を照射する工程からなる化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルの製造方法。化学修飾水溶性エラスチンと、ほぼ同重量のコラーゲンを混合して放射線照射することからなる請求項9記載の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルの製造方法。化学修飾水溶性エラスチンをコラーゲンよりも少量又は多量に混合して放射線照射することからなる請求項9記載の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルの製造方法。請求項1に記載の化学修飾水溶性エラスチンの医療用材料としての使用。請求項2~5のいずれか1つに記載の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲル又は請求項6~11のいずれか1つに記載の製造方法により製造された化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルの医療用材料としての使用。医療用材料が人工血管材料である、請求項13に記載の使用。本発明の課題は、水溶性エラスチンとコラーゲンを利用して、生体適合性に優れ、かつ、十分な強度、弾性、及び伸展性を有する人工血管等の医療用材料を提供することにある。上記課題は、下記のような本発明の各態様によって達成される。本発明の態様の1つは、高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれる第1アミン及び第2アミンの一部又は全部をN-アシル化すると共に、該分子中に含まれるカルボキシル基の一部又は全部をアミノ酸のアルキルエステルのアミノ基とカップリングさせて得られる化学修飾水溶性エラスチンである。N-アシル化にはN-ホルミル化、N-アセチル化、N-ベンゾイル化などがあるが、N-アセチル化が好ましい。また、N-アシル化にはウレタン型やアルキル型を用いてもよい。前記エラスチンのカルボキシル基のアミノ酸アルキルエステルによる酸アミド化に用いるアミノ酸はタンパク質を構成するグリシン、バリン、フェニルアラニンなどの約20種類の中から選ばれる。本発明において高分子量水溶性エラスチンとは、分子量が約1万以上、好ましくは約3~30万のものを意味する。本発明の他の態様は、高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれる第1アミン及び第2アミンの一部又は全部をN-アシル化すると共に、該分子中に含まれるカルボキシル基の一部又は全部をアミノ酸のアルキルエステルのアミノ基とカップリングさせて得られる化学修飾水溶性エラスチンと、コラーゲンを混合して得られる化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルである。この態様においては、化学修飾水溶性エラスチンと、ほぼ同重量のコラーゲンを混合して得られる化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルが好ましい。また、化学修飾水溶性エラスチンと、それよりも少量又は多量のコラーゲンを混合して得られる化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルも好ましい。ほぼ同重量とは、化学修飾水溶性エラスチンとコラーゲンとの重量比が95~105重量以内であることをいう。本発明の更に他の態様は、前記化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルの製造方法であって、1高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれる第1アミン及び第2アミンの一部又は全部をN-アシル化する工程、2該高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれるカルボキシル基の一部又は全部をアミノ酸の低級アルキルエステルのアミノ基とカップリングさせる工程、及び、3前記1と2の工程を経て得られた化学修飾水溶性エラスチンを、コラーゲンと溶液状態で混合して混合ゲルを調製する工程からなる化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルの製造方法である。この態様においても、化学修飾水溶性エラスチンと、ほぼ同重量のコラーゲンを混合する方法が好ましい。また、化学修飾水溶性エラスチンと、それよりも少量又は多量のコラーゲンを混合する方法も好ましい。本発明の更なる態様は、1高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれる第1アミン及び第2アミンの一部又は全部をN-アシル化する工程、2該高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれるカルボキシル基の一部又は全部をアミノ酸の低級アルキルエステルのアミノ基とカップリングさせる工程、3前記1と2の工程を経て得られた化学修飾水溶性エラスチンを、コラーゲンと溶液状態で混合して混合ゲルを調製する工程、及び、4前記3で得られた混合ゲルに放射線を照射する工程からなる化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルの製造方法である。この態様においても、化学修飾水溶性エラスチンと、ほぼ同重量のコラーゲンを混合する方法が好ましい。また、化学修飾水溶性エラスチンと、それよりも少量又は多量のコラーゲンを混合する方法も好ましい。本発明の更に他の態様は、上記の化学修飾水溶性エラスチンの医療用材料としての使用である。また、本発明の更に他の態様は、上記の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲル、又は、上記の製造方法により製造された化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルの医療用材料としての使用である。ここで、医療用材料には人工血管材料等が含まれる。本発明の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルから得られた材料は、エラスチン又はコラーゲン単独、あるいはそれらの混合物に比べ、強度、弾性及び伸展性が大幅に改善されるので、人工血管等の医療用材料として利用できる可能性が高い。化学修飾に用いるアミノ酸として疎水度の大きいアミノ酸を用いた場合や、疎水性の大きいペプチドを化学修飾に用いた場合には、ブタやイヌの大動脈の応力と同程度あるいはそれよりも強度、弾性及び伸展性のある人工血管材料等が作製できる。本発明の水溶性エラスチンは、哺乳動物及び鳥類由来の場合には、エラスチンを構成するアミノ酸の約78~85がプロリン、グリシン、アラニン、バリンからなり、約2~4がアスパラギン酸とグルタミン酸からなり、約1~2がリジン、ヒスチジン、アルギニンからなり、約0.1~0.4がデスモシンとイソデスモシンからなる、分子量約1万~30万、好ましくは約3万~30万の高分子量水溶性エラスチンである。また本発明の水溶性エラスチンは、魚類由来の場合には、エラスチンを構成するアミノ酸の約67~77がプロリン、グリシン、アラニン、バリンからなり、約4~6がアスパラギン酸とグルタミン酸からなり、約2~4がリジン、ヒスチジン、アルギニンからなり、約0.1~0.4がデスモシンとイソデスモシンからなる、分子量約1万~30万、好ましくは約3万~30万の高分子量水溶性エラスチンである。本発明の化学修飾水溶性エラスチンは、高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれる第1アミン及び第2アミンの一部又は全部をN-アシル化すると共に、該分子中に含まれるカルボキシル基の一部又は全部をアミノ酸のアルキルエステルのアミノ基とカップリングさせて得られる化学修飾水溶性エラスチンである。N-アシル化には、N-ホルミル化、N-アセチル化、N-ベンゾイル化などがあるが、N-アセチル化が好ましい。また、N-アシル化にはウレタン型やアルキル型を用いてもよい。前記エラスチンのカルボキシル基のアミノ酸アルキルエステルによる酸アミド化に用いるアミノ酸は、タンパク質を構成するグリシン、バリン、フェニルアラニンなどの約20種類のうちのいずれでもよい。本発明の他の態様である化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルは、先ず、高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれる第1アミン及び第2アミンの一部又は全部をN-アシル化する工程第1工程、次いで、得られたN-アシル化水溶性エラスチン分子中に含まれるカルボキシル基の一部又は全部をアミノ酸の低級アルキルエステルのアミノ基とカップリングさせ化学修飾する工程第2工程、その後、得られた化学修飾水溶性エラスチンを、ほぼ同重量の、あるいはそれよりも少量又は多量のコラーゲンと溶液状態で混合して混合ゲルを調製する工程第3工程によって製造される。本発明の更なる態様である放射線照射した化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルは、先ず高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれる第1アミン及び第2アミンの一部又は全部をN-アシル化し第1工程、次いで得られたN-アシル化水溶性エラスチン分子中に含まれるカルボキシル基の一部又は全部をアミノ酸の低級アルキルエステルのアミノ基とカップリングさせ化学修飾し第2工程、さらに第1工程と第2工程を経て得られた化学修飾水溶性エラスチンを、コラーゲンと溶液状態で混合して混合ゲルを調製し第3工程、その後に、得られた混合ゲルに放射線を照射することによって得られる第4工程。この態様においても、化学修飾水溶性エラスチンを、ほぼ同重量の、あるいはそれよりも少量又は多量のコラーゲンと溶液状態で混合して混合ゲルを調製する工程によって製造される。化学修飾水溶性エラスチンとコラーゲンとの重量比化学修飾水溶性エラスチン/コラーゲンは、好ましくは1/200~200/1であり、より好ましくは1/100~50/1であり、さらに好ましくは1/50~5/1であり、特に好ましくは1/3~3/1である。例えば、本発明の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルを使用して生体組織の代替としての人工靭帯、人工皮膚、人工腱、人工血管等を作製する場合は、前記重量比が1/50~5/1であることが好ましく、生体組織の代替ではなく人工の線維、人工癒着防止膜、人工縫合糸あるいは人工膜等を作製する場合には、エラスチン重量/コラーゲン重量の範囲が広い方がよく、前記重量比が1/100~50/1であることが好ましく、また、生体以外の例えば合成繊維や合成膜等に応用していく場合は、エラスチン重量/コラーゲン重量の範囲がさらに広い方がよく、前記重量比が1/200~200/1であることが好ましい。本発明においては、水溶性エラスチンのN末端及びリジン、アルギニン等のアミノ酸残基側鎖のアミノ基等をアシル化し、引き続き、C末端及びアスパラギン酸、グルタミン酸等のアミノ酸残基側鎖のカルボキシル基等とアミノ酸アルキルエステルのアミノ基をカップリングさせて化学修飾水溶性エラスチンが得られる。化学修飾によってアミノ基等とカルボキシル基等が保護されることにより、エラスチンの荷電が消失し、その結果、エラスチン分子間の疎水的相互作用が増し、得られた化学修飾水溶性エラスチンは、未修飾エラスチンに比べて高い自己集合性を有するようになるものと考えられる。水溶性エラスチンを得る方法手段は色々と提案されている。好ましいのは、本発明者が提案した下記の方法である特許文献4参照。第1の方法は、動物性生体組織からコラーゲンやその他の不要タンパク質の除去処理を行って不溶性エラスチンを得、次いでこの不溶性エラスチンをシュウ酸や水酸化ナトリウム等の可溶化液に浸漬溶解させ、水溶性エラスチンを製造する。コラーゲンやその他の不要タンパク質の除去処理は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化バリウムの少なくともいずれか一つを含むアルカリ性溶液であって、このアルカリ性溶液中に添加した水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化バリウムの総量を、1Lあたり0.05~0.5mol、好ましくは0.05~0.3molで90~105°Cとしたアルカリ性溶液中に、動物性生体組織を5~60分間、好ましくは10~20分間浸漬して行うのが好ましい。また、コラーゲンやその他の不要タンパク質の除去処理に際しては、アルカリ性溶液による処理の前に、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化バリウムの少なくともいずれか一つを含む塩溶液に、動物性生体組織を浸漬させる浸漬処理前処理を行うのも好ましい。動物性生体組織としては、特に制限はないが、エラスチンの含量が多い点で、豚、馬、牛、羊などの哺乳動物から得られた項靱帯や大動脈血管を使用することが好ましい。また鳥類の大動脈血管やエラスチン含量の多い魚類の動脈球心臓などを使用してもよい。動物性生体組織は、先ず、ホモジナイザーを用いてホモジナイズするのが良い。ホモジナイズはミキサー、ミートチョッパーなど動物性生体組織を細断できれば良く、好ましくは3ミリメートル角以下、さらに好ましくはペースト状に細断できる器具を用いると良い。細断した動物性生体組織の粒が小さいほど、コラーゲンやその他の不要なタンパク質の除去効率を上げることができるので好ましい。ホモジナイズした動物性生体組織は、例えば、熱水又は熱希薄アルカリ水溶液で煮沸するか、もしくは有機溶媒で処理することによって脱脂処理を行っても良い。前記可溶化液としては、シュウ酸、蟻酸、酢酸、コハク酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ベタイン、ジフルオロ酢酸、トリフルオロ酢酸、リン酸、スルファミン酸、過塩素酸、トリクロロ酢酸の少なくともいずれか一つを含む酸性溶液が用いられる。そして、この酸性溶液の酸の総量は、1Lあたり0.05~5mol、好ましくは0.1~2molとし、かつ、液温を90~105°Cとするのが好ましい。前記可溶化液は、また、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化バリウムの少なくともいずれか一つを含むアルカリ性溶液であっても良い。このアルカリ性溶液中に添加した水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化バリウムの総量を、1Lあたり0.05~5mol、好ましくは0.05~2molとし、かつ、液温が90~105°Cのアルカリ性溶液とするのが好ましい。第2の方法は、動物性生体組織の不要部分の除去処理、動物性生体組織の細断処理、動物性生体組織の脱脂処理と塩処理の少なくともいずれか一つを含む前処理工程と、前処理された動物性生体組織をアルカリ性溶液に浸漬してコラーゲンやその他の不要タンパク質を濾別するアルカリ抽出工程と、アルカリ抽出工程後の残渣をアルカリで溶解するアルカリ溶解工程を所定回数繰り返し、濾別により水溶性エラスチンを含む濾液を得る濾液回収工程と、濾液から水溶性エラスチンを生成する水溶性エラスチン生成工程とを順次行って水溶性エラスチンを製造する方法である。前記アルカリ溶解工程で用いるアルカリとしては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化バリウムのいずれか一つ又は混合物が好ましい。この操作は、前記の、組織からコラーゲンやその他の不要タンパク質を除去して不溶性エラスチンを得て、次いで、この不溶性エラスチンを可溶化して水溶性エラスチンを得る第1の方法とは異なり、組織から不溶性エラスチンを得ることなく、直接水溶性エラスチンを得る方法である。即ち、1Lあたり0.05~0.5mol、好ましくは0.05~0.3molで90~105°Cとしたアルカリ性溶液中に、細断、脱脂、塩処理した動物性生体組織を5~60分間、好ましくは10~20分間浸漬し、エラスチン以外のコラーゲンや不要タンパク質を除去した処理組織を得、次いで、この処理組織を1Lあたり0.05~5mol、好ましくは0.05~2molアルカリ液の濃度がより高濃度で90~105°Cのアルカリ性溶液中に5~420分間、好ましくは10~240分間時間がより長い浸漬して溶解し、水溶性エラスチンを得る方法である。前記のごとく第1又は第2の方法で得られた水溶性エラスチンは水溶性エラスチンを含む水溶液を中和し、次いで、その中和溶液を、例えば、透析処理することによって又はナノフィルトレートNF膜等を用いた膜処理によって脱塩し、及び低分子量のものを除去して、本発明で用いられる高分子量水溶性エラスチンが得られる。本発明で用いられるコラーゲンは、医療用途として知られているどのようなものでも用いることができる。通常、医療用途に適したコラーゲンは、主として原料である動物から、酸、アルカリ、中性等の条件下で酵素などにより抽出し、粘調なコラーゲン溶液又はこの溶液を乾燥させた固体の状態として得る方法が一般的に用いられている。また、更に、ペプシン処理を施すことによって抗原性発現部位を除去し、体内又は体表面に移植した際に抗原性が無い、より医療基材に好適なコラーゲンアテロコラーゲンを得ることもできる。本発明で用いられる代表的なコラーゲンとしては、酸可溶化コラーゲン、アルカリ可溶化コラーゲン、酵素可溶化コラーゲン、中性可溶化コラーゲン等の可溶化コラーゲンが挙げられ、特に、可溶化処理と同時にコラーゲンの抗原決定基であるテロペプタイドの除去処理が施されている、アテロコラーゲンが好適である。本発明の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルの製造においては、先ず、高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれる第1アミン及び第2アミンの一部又は全部をN-アシル化、好ましくは、N-アセチル化してN-アセチル化水溶性エラスチンを得る。エラスチンを構成するアミノ酸残基の中で、反応性の第1アミン又は第2アミンを有するアミノ酸塩基性アミノ酸としては、リシン、アルギニン及びヒスチジンが挙げられるが、高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれる第1アミンとしては、末端アミノ基も含まれる。本発明においては、高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれる第1アミン及び第2アミンの一部又は全部が、好ましくは、無水酢酸等のアセチル化試薬によってN-アセチル化されるが、N-アセチル化の程度は、下記式で表される修飾率で95以上であるものが好ましい。修飾率=1-B/A×100Aは、水溶性エラスチンの吸光度波長345nmの平均値からブランクの吸光度の平均値を引いた値を表す。Bは、N-アセチル化水溶性エラスチンの吸光度波長345nmの平均値からブランクの吸光度の平均値を引いた値を表す。本発明においては、次いで、得られたN-アシル化、好ましくは、N-アセチル化水溶性エラスチン分子中に含まれるカルボキシル基の一部又は全部をアミノ酸のアルキルエステルのアミノ基とカップリングさせ化学修飾し化学修飾水溶性エラスチンを得る。本発明においては炭素数1~4の低級アルキルエステルが好ましいが、特にメチルエステルが好ましい。またベンジルエステルなどのようなものを用いてもよい。エラスチンを構成するアミノ酸残基の中で、カルボキシル基を有するアミノ酸酸性アミノ酸としては、アスパラギン酸とグルタミン酸があるが、高分子量水溶性エラスチンの分子中に含まれるカルボキシル基としては、末端カルボキシル基も含まれる。本発明においては、N-アシル化、好ましくは、N-アセチル化水溶性エラスチン分子中に含まれるカルボキシル基のほぼ全部が、アミノ酸のアルキルエステルのアミノ基とカップリングしているものが好ましい。カップリング反応に際しては、カルボジイミド等のカップリング剤又は縮合剤を用いるのが便利である。次いで、本発明においては、前記のごとくして得られた化学修飾水溶性エラスチンと前述したコラーゲンの各水溶液を作成し、それぞれをほぼ同重量含む水溶液状態、あるいはコラーゲンに対して化学修飾水溶性エラスチンを増量あるいは減量した水溶液状態で混合して混合ゲルを調製する。かかる方法で本発明の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルが得られる。そして、得られた混合ゲルは、そのままあるいは適当な加工を経て、人工血管等医療用材料の基盤として用いることができる。本発明の更なる態様においては、前記のごとくして得られた化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルに、溶液で膨潤した状態あるいは乾燥状態で、電子線やγ線等の放射線を照射して、放射線照射化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルが得られる。放射線としてはγ線が好ましく、混合ゲルのヤング率を好ましくは2倍以上上昇させるために必要な線量照射する。γ線等で照射することによって、混合ゲルは滅菌架橋され、更に材料の強度の増強が図られる。照射条件は特に限定されるものではないが、例えば、Co-60γ線の場合、20~50°C、好ましくは30~40°Cで0.5~50kGy程度、好ましくは5~40kGy程度の照射が適当である。以下、実施例により本発明を詳述する。各種測定法は以下のとおりである。[N-アセチル化の修飾率]N-アセチル化の修飾率は、TNBS2,4,6-トリニトロベンゼンスルホン酸法より以下のようにして測定し計算される。1mg/mlのN-アセチル化水溶性エラスチンNAcEla水溶液に、4の炭酸水素ナトリウム溶液、0.1のTNBS水溶液を、それぞれ1ml加えた。4の炭酸水素ナトリウム溶液、0.1のTNBS水溶液をそれぞれ1ml加えただけのものを、ブランクとしたn=3。作製した溶液をアルミホイルで遮光し、40°Cで2時間反応させた。反応終了後、作製した溶液0.17mlに10SDS1ml、1NHClを0.5ml加え、345nmにおける吸光度をそれぞれ測定した。また、修飾率は以下の式より求めた。エラスチン水溶液の吸光度の平均値からブランクの吸光度の平均値を引いたものをA、NAcEla水溶液の吸光度の平均値からブランクの吸光度の平均値を引いたものをBとする。修飾率は、修飾率=1-B/A×100で表される。[濁度測定]水溶性エラスチンEla、3種類の化学修飾水溶性エラスチンCmEla、I型コラーゲンColの各々をPBSリン酸緩衝生理食塩水、pH74又はpH50、74、90の溶液に溶解した。これらの各溶液をEla単独、3種CmEla単独、Col単独、ElaとCol共存状態、3種CmElaとCol共存状態で波長400nm、温度範囲5°Cから65°C、温度上昇0.5°C/min、窒素気流下の条件で濁度測定を行った。溶媒は超純水又は生理的条件下を考慮してPBSを用い、測定機器はペルチェ式温度コントローラー付分光光度計日本分光株製Ubest50を用いた。[ブタ由来水溶性エラスチンの作製]1ブタ由来不溶性エラスチンの単離以下の手順に従ってブタ大動脈脱脂組織からNaCl可溶及びNaOH可溶のエラスチン以外の不要タンパク質やコラーゲンを抽出、除去した。ブタ大動脈脱脂組織生体組織を用い、前処理として付着している脂肪や筋肉などエラスチン含量の低い部分を、刃物などを用いて削ぎ落とすことで不要部分の除去処理を行い、次いで、生体組織をホモジナイザーを用いてホモジナイズすることで細断処理を行った。ホモジナイズした生体組織を熱水、熱希薄アルカリ水溶液又はアセトン等の有機溶媒で処理して脱脂処理を行った後に乾燥させた。ついで脱脂乾燥組織重量の約10倍容量の1M塩化ナトリウムを加え、室温で1時間撹拌してNaCl可溶の不要タンパク質を抽出、除去した。この操作を5回繰り返し、その後蒸留水で洗浄し、遠心分離3,000rpm、5分により水切りした。上記のようにして脱脂及び塩処理した生体組織の重量に対して約10倍容量重量1g当たり10mlの0.1N水酸化ナトリウム水溶液を加え、100°Cで15分間撹拌し、エラスチン以外のコラーゲンや不要タンパク質を除去する工程を行った。そして、生体組織とアルカリ性溶液とを分離した。分離したアルカリ性溶液を、例えば、ビューレット法にて総タンパク質の定量を行い、アルカリ性溶液中に含まれる総タンパク質量が0.1mg/mL以下になるまで、この操作を繰返した。その後、冷却して遠心分離5,000rpm、20分により洗浄し、残渣を乾燥して不溶性エラスチンを得た。2高分子量ブタ由来水溶性エラスチンの調製ブタ由来不溶性エラスチンにその乾燥重量の10倍容量の0.5Nの水酸化ナトリウムを加え、100°Cで30分撹拌した。反応後、溶液を速やかに氷冷し酢酸又は塩酸で中和した。その後、分子量6,000~8,000以上を分画する透析膜を用いて1週間透析した。その後、凍結乾燥し高分子量ブタ由来水溶性エラスチンを得た。[化学修飾水溶性エラスチンの作製]下記のとおり、高分子量ブタ由来水溶性エラスチンをN-アセチル化及びO-アミノ酸メチルエステルのカップリングによる化学修飾を行った。1N-アセチル水溶性エラスチンの作製前記で得られたブタ由来水溶性エラスチンを、少量のトリフルオロエタノールTFEに溶解したものに、ピリジン100eqと無水酢酸100eqを加え、1晩撹拌した。ニンヒドリン試験によってアセチル化が定量的に進行したことを確認した後、反応液をエバポレーターにより減圧濃縮した。このN-アセチル化は、TNBS法よりアミノ基等の修飾率が95以上になるまで、数回繰り返し行った。その後、この溶液を1週間透析して溶媒や未反応試薬を除去し、凍結乾燥してN-アセチル水溶性エラスチンを得た。なお、本発明において、N-アセチル水溶性エラスチンの平均分子量から求めた使用原料のモル数1モル当量を基準にして、試薬のモル当量数eqを表示した。図面の簡単な説明においても同様である。2アミノ酸メチルエステルのカップリング反応前記で得られたN-アセチル水溶性エラスチンNAcElaを、少量のジメチルホルムアミドDMFに溶解したものに、水溶性カルボジイミドWSCIを加えた。15分撹拌後、3種類のアミノ酸メチルエステル、即ち、グリシンGのメチルエステルHGOMe、バリンVのメチルエステルHVOMe、フェニルアラニンFのメチルエステルHFOMeの各々と、トリエチルアミンを溶かした少量のDMF溶液を加えた。一昼夜撹拌後、この溶液を1週間透析し、溶媒や未反応試薬等を除去し、凍結乾燥して3種類の化学修飾水溶性エラスチン、即ち、N-アセチル-O-G-メチルエステル水溶性エラスチンCmEla、N-アセチル-O-V-メチルエステル水溶性エラスチンCmEla、N-アセチル-O-F-メチルエステル水溶性エラスチンCmElaを得た。未修飾Elaの結果を図1に、NAcElaにアミノ酸メチルエステルをWSCIを用いてカップリングした結果を、図2~4に示した。図1は、未修飾ElaのpH50、74及び90における温度と濁度の関係を示す曲線濁度曲線、図2は、NAcElaとグリシンGメチルエステルをWSCI100eqを用いてカップリングさせて作製したCmElaのpH50、74及び90における濁度曲線である。図1より、Elaは生理条件である37°C、pH7.4では自己集合していない。自己集合しない理由としては、Elaは等電点が酸性側pH5.5付近にあるからである。そこで、等電点をpH7.4付近に持ってくるために、本発明では、アミノ基をNアセチル化、カルボキシル基をアミノ酸メチルエステルのカップリングによる化学修飾を行うものである。その結果、得られた化学修飾水溶性エラスチンCmElaの自己集合開始温度は、図2に示したように、Elaの自己集合開始温度に対して低温側にシフトし、生理条件pH7.4付近において十分な濁度強度を示していることが分かる。また、濁度強度が上昇していること、更に、異なるpHでもほぼ同じ濁度曲線が得られたことから、アミノ酸メチルエステのカップリングによるカルボキシル基等の修飾率は、ほぼ完全であることが分かる。図3と図4とは、NAcElaとアミノ酸メチルエステルのカップリング反応に際しての、カップリング剤WSCIの添加量と濁度曲線との関連を示す図である。図3はWSCIが10eq、図4はWSCIが50eqの場合である。添加するWSCIの量が修飾率に大きく影響していることが分かるが、図2のWSCIが100eqであることを考慮すると、100eqの使用でカップリング反応はほぼ完全に進行していることが分かる。図5には、3種類の異なる化学修飾水溶性エラスチンであるCmEla、CmEla、CmElaの濁度曲線を示した。用いたアミノ酸であるグリシンG、バリンV、フェニルアラニンFの疎水度が高くなるにつれ、自己集合開始温度は早くなり、濁度強度も増加していることが分かる。これはElaの自己集合は、分子の疎水性が高いほど促進されるということを示唆している。[水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲル及び化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルの作製]コラーゲンと水溶性エラスチン、又は、コラーゲンと化学修飾水溶性エラスチンが各々1.5mg/ml:1.5mg/mlとなるように、またコラーゲンと化学修飾水溶性エラスチンが1.5mg/ml:4.5mg/mlとなるように、総量2mlの溶液を調製した。溶媒はPBSpH7.4を用いた。これを37°Cで1時間静置しゲル化させた。その後、乾燥させてガラス化し、ついでPBSpH7.4を2ml加えて48時間静置することで膨潤させて本発明の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルを得た。[化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルの各種性能の測定][濁度曲線]図6はCol単独溶液の濁度曲線を示す。図7には、ColとEla混合溶液及びColと3種CmEla混合溶液の濁度曲線を示した。ElaとCol混合溶液において濁度曲線はCol単独と同型であり、濁度強度はCol単独時より低下した。このことから、未修飾Elaでは自己集合開始時には周囲の分子を取り込むColのゲル化の特性により、Ela分子は自己集合しない状態でColに取り込まれていると考えられる。濁度強度の低下については、Col単独でゲル化するよりも、自己集合していないEla分子の取り込みによるものと考えられる。3種CmElaとCol混合溶液では、それらの自己集合開始温度は3種CmElaの各々の単独の場合と同様な自己集合開始温度を示したが、濁度強度は上昇した。これは、CmElaとCol混合溶液の自己集合開始温度が、Col単独時の自己集合開始温度ゲル化温度より早かったことから、その自己集合開始時に、CmElaの自己集合が大きく影響を与えているためであると考えられる。[引張試験]ElaとColの混合ゲル及びCmElaとColの混合ゲルの、各々の初期長が5mmになるように両端をネジ式材料試験機オートグラフAG-S-J、株島津製作所に固定した後、各ゲルの厚みと幅を測定し、それぞれ横断面積を求めた。ついで各ゲルを変位速度0.05mm/sで3mmひずみ60だけ伸展したときの応力とひずみの関係を測定した。さらに各ゲルを変位速度0.05mm/sで破断まで引張り、破断応力を測定し、破断まで引っ張ったときの応力とひずみの関係を測定した。Col単独ゲル、ElaとCol混合ゲル、CmElaとCol混合ゲルの応力-ひずみ曲線を図8に示した。図8より、Col単独ゲルの破断応力は89kPa、最大ひずみは84であった。ElaCol混合ゲルの破断応力は87kPa、最大ひずみは101であり、これはCol単独ゲルと同程度の破断応力を示し、最大ひずみはCol単独ゲルで増加した。またCmElaCol混合ゲルの破断応力は106kPa、最大ひずみは109であり、これは破断応力、最大ひずみともにElaCol混合ゲルよりも増加した。これらの結果はColにElaを加えることによりゲルに弾性が付加され、さらに自己集合能の高いCmElaを加えることにより、剛性とさらに大きな弾性が付加されたためであると考えられる。Colに対してCmElaの混合比が異なるCmElaとCol混合ゲルの応力-ひずみ曲線を図9に示した。図9より、CmElaCol混合ゲル混合比15mg/ml:15mg/mlの破断応力106kPa、最大ひずみ109に比べて、CmElaCol混合ゲル混合比45mg/ml:15mg/mlの破断応力は114kPa、最大ひずみは130であり、破断応力、最大ひずみともに増加した。これはCmElaの添加量を増やすことにより、さらに大きな弾性と剛性が付加されたためであると考えられる。また破断応力の増加率8よりも最大ひずみの増加率20が大きかったことから、Elaの剛性よりも弾性向上への寄与がより大きいことが考えられる。CmElaとCol混合ゲル、CmElaとCol混合ゲル、CmElaとCol混合ゲル、及びブタ大動脈の応力-ひずみ曲線を図10に示した。図10より、60ひずみに対する応力はCmElaCol混合ゲル混合比15mg/ml:15mg/mlで43kPa、CmElaCol混合ゲル混合比15mg/ml:15mg/mlで63kPa、CmElaCol混合ゲル混合比15mg/ml:15mg/mlで78kPaであった。すなわち疎水性の大きいアミノ酸メチルエステルでカップリングした化学修飾水溶性エラスチンとコラーゲンの混合ゲルほど応力は大きかった。これより、Elaの混合ゲルにおける応力向上への寄与の大きさは、Elaの自己集合能の大きさに依存することが考えられる。表1には、本発明の3種の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルであるCmElaCol混合ゲル混合比15mgml15mgml、CmElaCol混合ゲル混合比15mgml15mgml、CmElaCol混合ゲル混合比15mgml15mgml及びCmElaCol混合ゲルに15kGy、30kGyのγ線照射した15kGyγ線照射CmElaCol混合ゲル混合比15mgml15mgml、30kGyγ線照射CmElaCol混合ゲル混合比15mgml15mgmlの50ひずみに対する応力を、ブタ大動脈やイヌ腹部大動脈と比較した値を示した。表1より、疎水度の大きいアミノ酸メチルエステルでカップリングした、化学修飾水溶性エラスチンとコラーゲンとの混合ゲルCmElaCol混合ゲルの50ひずみに対する応力は、ブタ大動脈及びイヌ腹部大動脈の応力に近い強度を示した。さらにγ線照射したCmElaCol混合ゲルの応力はブタ大動脈及びイヌ腹部大動脈の応力よりも大きな強度を示した。このことから、本発明の混合ゲル及びγ線照射混合ゲルは、生体組織の血管と同等あるいはそれ以上の強度、弾性、伸展性を示すことより、ヒトの血管に十分使用できる可能性が示唆された。そして、化学修飾水溶性エラスチンの添加量を増加させることにより、また、アミノ酸よりももっと疎水度の大きいペプチド例えば、F-F、F-F-Fのアルキルエステルをカップリングさせた化学修飾水溶性エラスチンを作製し、コラーゲンとの混合ゲルを作製すれば、更に大きな強度の人工血管用材料が得られる可能も示唆される。[TEM観察]グリッド作製において、2コロジオン処理したグリッドはSuperHighCleanVacuumCoaterSVC700Turboサンユー電子株製を用いて、カーボンを約200Åの厚さで蒸着され、試料を吸着させる前にQuickCoaterSC701サンユー電子株製を用いて、ベンジルアミンをカーボン膜状に薄く散布する処理を行った。試料は凍結乾燥したゲルを剃刀で薄く切り、その切片を作製したグリッドにそのまま置き、倍率×6400でTEMによる観察を行った。その結果、Colは分子量30万程度だが、ゲル化すると三次元網目構造を持つCol線維を形成していた。そして、このCol線維の間に分子量20万程度のCmElaが入り込み自己集合することで、コラーゲン線維に絡み合い、より丈夫な構造が形成されている状態が観察された。[人工血管の作製]低温下でPBSpH7.4を用いて調製したCmElaCol混合溶液混合比1.5mg/ml:1.5mg/mlを径8mmの管内に注入し、次いで径5mmの中棒を挿入することにより径8mmと径5mmの間に混合溶液を管状に形成させた。その後、混合溶液を37°Cで約1時間静置してゲル化させ、さらに37°Cで乾燥した後にPBSを加えて48時間静置して膨潤させ、中棒を抜いて人工血管を作製した図11。[化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルに対する放射線の照射]ElaCol混合溶液混合比1.5mg/ml:1.5mg/ml、CmElaCol混合溶液混合比1.5mg/ml:1.5mg/mlを37°C、1時間でゲル化させて、凍結乾燥し、PBS2mlを加えて48時間膨潤させた。その後、γ線照射を、照射量15kGy及び30kGy、照射温度は40~50°Cで行った。そして、放射線照射された本発明の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルを得た。[放射線照射された本発明の化学修飾水溶性エラスチンコラーゲン混合ゲルの引張試験]上記で得られた放射線照射混合ゲルを、初期長が5mmとなるようにネジ式材料試験機オートグラフAG-S-J、株島津製作所製に固定した。ゲルの厚みと幅を測定し、断面積を求めた。混合ゲルを0.05mm/sの変位速度で伸展したときの応力とひずみの関係を測定し、また2.5mmひずみ50だけ伸長したときの応力とひずみの関係を測定した。さらに各ゲルを変位速度0.05mm/sで破断まで引張り、破断応力を測定し、破断まで引っ張ったときの応力とひずみの関係を測定した。未照射とγ線照射時の比較のために、ElaCol混合ゲルとγ線照射ElaCol混合ゲルの応力-ひずみ曲線を図12に示した。γ線照射ElaCol混合ゲルは、非照射ElaCol混合ゲルより大きな破断強度を示した。CmElaCol混合ゲルとγ線照射CmElaCol混合ゲルの応力ひずみ曲線を図13に示した。γ線照射CmElaCol混合ゲルの破断強度は、非照射CmElaCol混合ゲルよりも大きく、また、γ線照射ElaCol混合ゲル図12参照よりも大きかった。ElaCol混合ゲル、γ線照射ElaCol混合ゲル、CmElaCol混合ゲル、γ線照射CmElaCol混合ゲル、ブタ大動脈の応力ひずみ曲線を図14、ひずみ50までの応力-ひずみ曲線を図15に示した。図12から明らかなように、ElaCol混合ゲルに対してγ線照射ElaCol混合ゲルの最大応力は約1.5倍、最大ひずみは約0.5倍であった図12。また、CmElaCol混合ゲルに対して、γ線照射CmElaCol混合ゲルの最大応力は測定機器の限界値を超えるほど高かった図13。これはγ線照射により混合ゲルが架橋されたためと考えられる。また、γ線の照射に関わらず、ElaCol混合ゲルに対してCmElaCol混合ゲルの最大応力が高かったことから、Elaの自己集合能は、混合ゲルの強度に寄与していると考えられる。実際に各混合ゲルとブタ大動脈の応力ひずみ曲線を比較すると、γ線照射CmElaCol混合ゲルは、ブタ大動脈よりも強度が大きかった図14及び図15。γ線照射ElaCol混合ゲルでは、最大ひずみが小さくなる結果となったが、強度が大きくなっているので、γ線照射ElaColゲルのひずみでも素材として十分である。また、γ線照射CmElaCol混合ゲルでは、測定機器の限界値に達したため、最大応力と最大ひずみが測定できないほど強度が増加していた。このことからγ線照射は人工血管用素材作製のための有用な手段であり、γ線照射混合ゲルは人工血管用素材として使用できるということが示唆された。"