"筋廃用期間に生じた筋萎縮をもつ個人に対して、有効量のβ-ヒドロキシ-β-メチルブチレートを含む組成物を筋廃用期間及び筋肉回復期間中投与することを含む、前記個人における筋肉回復を促進させるための方法。個人にβ-ヒドロキシ-β-メチルブチレートを筋廃用期間及び筋肉回復期間の両期間中毎日投与する、請求項1に記載の方法。個人にβ-ヒドロキシ-β-メチルブチレートを筋廃用後少なくとも1ヶ月間投与する、請求項2に記載の方法。個人にβ-ヒドロキシ-β-メチルブチレートを筋廃用後1ヶ月~6ヶ月間投与する、請求項2に記載の方法。個人にβ-ヒドロキシ-β-メチルブチレートを約1年間投与する、請求項2に記載の方法。個人に約0.1g/日~約10g/日のβ-ヒドロキシ-β-メチルブチレートを筋廃用期間及び筋肉回復期間の両期間中投与する、請求項1に記載の方法。筋廃用期間に曝されている筋肉をもつ個人に対して、有効量のβ-ヒドロキシ-β-メチルブチレートを含む組成物を筋廃用期間及び筋肉回復期間中投与することを含む、前記個人における筋萎縮を最小限に抑えるための方法。筋肉が、1週間以上廃用の状態にある、請求項7に記載の方法。筋肉が、1週間~1年間廃用の状態にある、請求項7に記載の方法。個人にβ-ヒドロキシ-β-メチルブチレートを筋廃用期間及び筋肉回復期間の両期間中毎日投与する、請求項7に記載の方法。個人にβ-ヒドロキシ-β-メチルブチレートを筋廃用期間後少なくとも1ヶ月間投与する、請求項10に記載の方法。個人にβ-ヒドロキシ-β-メチルブチレートを筋廃用期間後1ヶ月~6ヶ月間投与する、請求項10に記載の方法。個人に約0.1g/日~約10g/日のβ-ヒドロキシ-β-メチルブチレートを筋廃用期間及び筋肉回復期間の両期間中投与する、請求項7に記載の方法。筋廃用期間に生じた筋萎縮をもつ高齢者に対して、有効量のβ-ヒドロキシ-β-メチルブチレートを含む組成物を筋廃用期間及び筋肉回復期間中投与することを含む、前記高齢者において筋肉回復を促進させるための方法。高齢者にβ-ヒドロキシ-β-メチルブチレートを筋廃用期間及び筋肉回復期間の両期間中毎日投与する、請求項14に記載の方法。本発明の筋廃用期間後に筋肉回復させるための方法は、筋廃用に生じた筋萎縮を患っている個人において筋肉回復を促進させるためにβ-ヒドロキシ-β-メチルブチレートHMBを利用する。この方法の特徴、並びに多くの任意の変更及び付加の幾つかを以下に詳細に記載する。本明細書中で使用されている用語カルシウムHMBは、別段の定めがない限り、β-ヒドロキシ-β-メチルブチレートβ-ヒドロキシル-3-メチル酪酸、β-ヒドロキシ-β-メチル酪酸、β-ヒドロキシイソ吉草酸、またはHMBとも称されるのカルシウム塩を指し、最も典型的には一水和物形態である。カルシウムHMBの特性を決定するために本明細書中で使用されているすべての重量、パーセンテージ及び濃度は、別段の定めがない限り、カルシウムHMB一水和物の重量に基づく。本明細書中で使用されている用語栄養製品は、別段の定めがない限り、栄養液体、栄養粉末、栄養半固体及び栄養半液体を指し、そのうちの幾つかは栄養液を形成するように再構成することができ、ヒトが経口消費するのに適している。本明細書中で使用されている用語筋肉回復は、別段の定めがない限り、筋肉量及び/または筋力の増加を指す。本明細書中で使用されている用語筋廃用期間は、別段の定めがない限り、長期間の筋肉無活動を含めた筋肉無活動、或いはベッドでの安静、入院、ギブス固定等により生ずる体筋の完全または部分的不動の期間を指す。1つの具体的な実施形態では、筋廃用期間は長期間の廃用を含めた廃用を患った腕または足の筋肉を含む。本明細書中で使用されている長期間の無活動または長期間の廃用を言うときの用語長期間は、別段の定めがない限り、少なくとも1週間、例えば少なくとも4週間、少なくとも6週間、少なくとも2ヶ月間、少なくとも6ヶ月間、および1年以上の期間のベッドでの安静、入院、ギブス固定等により生ずる体筋の無活動、或いは完全または部分的不動を指す。本明細書中で使用されている用語筋肉回復期間は、別段の定めがない限り、筋廃用が終わった後の筋肉の使用及び回復が始まる期間を指す。本明細書中で使用されている用語促進させるは、別段の定めがない限り、筋肉回復を促進させるが筋肉回復を援助する、筋肉回復を補佐する、または筋肉回復を助けることを指すように援助する、補佐する、または助けることを指す。本明細書中で使用されている用語期間は、別段の定めがない限り、筋廃用期間は筋廃用が生じた時間の単位を指すような時間の単位を指す。本明細書中で使用されている用語高齢者は、別段の定めがない限り、少なくとも55才の年齢、例えば55~約85才の年齢の成人を指す。本明細書中で使用されているすべてのパーセンテージ、部及び比は、別段の定めがない限り全製品の重量による。リストされている成分にかかわるすべての重量は活性レベルに基づいており、従って別段の定めがない限り市販されている材料中に含まれているかもしれない溶媒または副生成物を含めない。本発明の1つの特徴または限定に対する言及は、別段の定めがない限り、または言及している内容により反対のことがはっきり暗示されていない限り、対応する複数の特徴または限定並びにその逆を包含する。本明細書中で使用されている方法またはプロセスステップのすべての組合せは、別段の定めがない限り、または組合せが言及されている内容により反対のことがはっきり暗示されていない限り、任意の順序で実施される。本発明の方法で使用される栄養製品の各種実施形態は、残りの組成物が本明細書に記載されている必要な成分または特徴のすべてを含んでいるならば、本明細書に記載されている任意のまたは特定の必須成分または特徴を実質的に含んでいなくてもよい。これに関連して、別段の定めがない限り、用語実質的に含んでいないは、選択した製品が任意成分を有効量未満、典型的には任意のまたは選択した必須成分の約1重量未満、例えば約0.5重量未満、約0.1重量未満、0重量しか含有していないことを意味する。栄養製品及び方法は、本明細書に記載されている製品の必須要素、及び本明細書に記載されているかまたは栄養製品分野で有用な追加または任意の要素を含み、これらから構成され、または本質的にこれらから構成されてもよい。製品形態本発明の方法において有用なHMBを含む栄養製品は、経口または非経口投与のための公知のまたはそれ以外に適切な製品の形態で製剤化することができる。経口製品形態が通常好ましく、かかる製剤化により、選択した製品形態から必須成分及び他の選択成分を安全且つ効果的に経口デリバリーできるならば、その中には本発明で使用するのに適した固体、半固体、液体、半液体または粉末製剤が含まれる。本発明の方法において使用するのに適した固体栄養製品形態の非限定例には、スナック及びミールリプレースメント製品、例えばバー、スティック、クッキーまたはパン、ケーキまたは他のオーブンで焼いた食べ物、冷凍液体、キャンディー、朝食用シリアル、粉末または顆粒化固体、或いは他の粒子、成形または圧縮粉末、スナックチップまたはバイト、冷凍またはレトルト前菜等として製剤化されるものが含まれる。本発明の方法において使用するのに適した液体製品の非限定例には、スナック及びミールリプレースメント製品、温かいまたは冷たい飲料、炭酸または非炭酸飲料、ジュースまたは他の酸っぱい飲料、牛乳または大豆を主成分とする飲料、シェイク、コーヒー、ティー、経腸栄養組成物等が含まれる。これらの液体組成物は、最も典型的には懸濁液またはエマルジョンとして製剤化されるが、透明な液体、実質的に透明な液体、溶液等のような他の適切な形態でも製剤化することができる。先に言及したように、栄養製品は半固体の形態である場合があり、その中には特性例えば、硬さの点で固体と液体の中間である形態が含まれる。幾つかの半固体例には、プディング、ゼラチン及びパン生地が含まれる。加えて言及したように、栄養製品は半液体の形態である場合があり、その中には特性例えば、流動特性の点で固体と液体の中間である形態が含まれる。半液体の例には、濃厚シェイク及び液体ゲルが含まれる。適切な経口製品形態の他の非限定例には、慣用の製品形態、例えばカプセル、錠剤、カプセル様錠剤、ピル等が含まれる。対象使用者に対して有効量のHMBを与えるための栄養製品の量は、1日あたり1回以上で投与することができる1個以上の個別の投与形態中に含めることができる。HMBを含む栄養製品は、唯一、主要または補助の栄養ソースを与えるために、或いは特定の疾患または状態を患っている個人において使用するためのまたは目標とする栄養効果を有する特殊化栄養製品を提供するために、十分な種類及び量の栄養素を用いて製剤化することができる。多くの実施形態では、栄養製品はHMBに加えてタンパク質、脂肪及び炭水化物を含む。β-ヒドロキシ-β-メチルブチレートHMB栄養製品はHMBを含み、このことは製品がHMBを最も典型的にはカルシウム一水和物として添加して製剤化されるかまたは最終製品中にHMBが含有されるように他の方法で製造されることを意味する。最終製品がHMBを含有するならば任意のHMB源が本発明で使用するために適しているが、HMB源は好ましくはカルシウムHMBであり、最も典型的には製剤化中栄養製品にそのまま添加される。カルシウムHMB一水和物が本発明で使用するためのHMBの好ましい源であるが、他の適切な源には遊離酸、塩、無水塩、エステル、ラクトン、または栄養製品からバイオアベイラブルな形態のHMBを与える他の製品形態としてのHMBが含まれ得る。本発明で使用するためのHMBの適切な塩の非限定例には、水和または無水のナトリウム、カリウム、マグネシウム、クロム、カルシウム、または他の非毒性塩形態のHMBの塩が含まれる。カルシウムHMB一水和物が好ましく、ユタ州ソルトレークシティーのTechnicalSourcingInternationalTSI及びLonzaGroupLtd.スイス国バーゼルから市販されている。栄養製品が液体の場合、液体中のHMBの有効濃度は栄養液体の最高約10重量、例えば約0.01重量~約10重量、約0.1重量~約5.0重量、約0.3重量~約2重量、約0.4重量~約1.5重量、約0.3重量~約0.6重量の範囲であってもよい。栄養製品が固体の場合、固体中のHMBの有効濃度は栄養粉末の最高約10重量、例えば約0.1重量~約8重量、約0.2重量~約5.0重量、約0.3重量~約3重量、約0.3重量~約1.5重量、約0.3重量~約0.6重量の範囲であってもよい。栄養製品は、本明細書に記載されている方法に従って約0.1~約10g/日のHMBを与えることができる。従って、栄養製品は1サービスあたり約0.1~約10g、例えば約0.5~約5.0g、約0.5~約2.5g、約1.0~約1.7g、約1.5gのHMBを与え、例示的サービスは約240mlのすぐに摂食できる栄養液体または約240mlの再構成される栄養固体である。個人は、1回サービス/日、2回サービス/日、3回サービス/日、または4回以上のサービス/日で投与されて、栄養製品から所望量のHMBを受け取る。主要栄養素栄養製品は更に、本明細書に記載されているHMBに加えて1つ以上の任意主要栄養素を含むことができる。任意の主要栄養素には、タンパク質、脂質、炭水化物及びその組合せが含まれる。幾つかの実施形態では、栄養製品をHMBに加えて3つすべての主要栄養素を含有している栄養液体として製剤化することが望ましい。本発明で使用するのに適した主要栄養素には、任意の主要栄養素が経口投与のために安全且つ有効であり、栄養製品中の他の成分と相容性であるならば、経口栄養製品中に使用することが公知でありまたは適したタンパク質、脂質または炭水化物、またはその源が含まれる。栄養製品中の任意の脂質、炭水化物及びタンパク質の濃度または量は製品の特定栄養用途に応じて大きく変更する場合がある。これらの任意の主要栄養素は、最も典型的には下表に記載されている具体的範囲の範囲内で製剤化される。炭水化物栄養製品中に使用するのに適した任意の炭水化物は単純、複合、或いはその変形物または組合せであり、いずれも本明細書に記載されているHMBに加えて場合により存在する。適切な炭水化物の非限定例には、加水分解または加工デンプンまたはコーンスターチ、マルトデキストリン、イソマルツロース、スクロマルト、グルコースポリマー、スクロース、コーンシロップ、コーンシロップ固体、コメ由来炭水化物、グルコース、フルクトース、ラクトース、異性化糖、蜂蜜、糖アルコール例えば、マルチトール、エリトリトール、ソルビトール及びその組合せが含まれる。栄養製品中に使用するのに適した任意の炭水化物には可溶性食物繊維も含まれ、その非限定例にはアラビアガム、フルクトオリゴ糖FOS、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、グアーガム、シトラスペクチン、低及び高メトキシペクチン、オート麦及び大麦グルカン、カラギーナン、オオバコ及びその組合せが含まれる。不溶性食物繊維も本発明における炭水化物源として適切であり、その非限定例にはオート麦外皮繊維、エンドウ豆外皮繊維、大豆外皮繊維、大豆子葉繊維、甜菜繊維、セルロース、トウモロコシふすま及びその組合せが含まれる。1つの具体的な実施形態では、炭水化物系にはマルトデキストリン場合により、低DEマルトデキストリン及びスクロース含む炭水化物源の組合せが含まれる。幾つかの具体的な実施形態では、栄養液体実施形態中の炭水化物の濃度は、栄養液体の約5.0重量~約40重量、例えば約7.0重量~約30重量、約10重量~約25重量、約10.2重量の範囲であってもよい。他の具体的な実施形態では、粉末実施形態中の炭水化物の濃度は、栄養粉末の約10重量~約90重量、例えば約20重量~約80重量、約40重量~約60重量の範囲であってもよい。1つの具体的な実施形態では、炭水化物は栄養粉末中に約58重量の量で存在している。タンパク質栄養製品中に使用するのに適した任意のタンパク質には、加水分解した、部分加水分解した、または加水分解されていないタンパク質またはタンパク質源が含まれ、乳例えば、カゼイン、乳清、動物例えば、肉、魚、卵白、穀物例えば、米、トウモロコシ、野菜例えば、大豆、エンドウ豆、ジャガイモ、またはその組合せのような、公知でありまたは適切な源から誘導することができる。本発明で使用するタンパク質には栄養製品中に使用することが公知の遊離アミノ酸も含まれ、或いはこれらにより完全にまたは部分的に置換してもよい。前記アミノ酸の非限定例には、L-トリプトファン、L-グルタミン、L-チロシン、L-メチオニン、L-システイン、タウリン、L-アルギニン、L-カルニチン及びその組合せが含まれる。幾つかの具体的な実施形態では、栄養液体実施形態中のタンパク質の濃度は、栄養液体の約1.0重量~約30重量、例えば約1.0重量~約15重量、約1.0重量~約10重量、約1.0重量~約7.0重量の範囲であってもよい。他の具体的な実施形態では、粉末実施形態中のタンパク質の濃度は、栄養粉末の約1.0重量~約50重量、例えば約10重量~約50重量、約10重量~約30重量の範囲であってもよい。1つの具体的な実施形態では、タンパク質系にはカゼインカルシウムまたは、ナトリウム及び大豆タンパク質単離物を含むタンパク質源の組合せが含まれる。別の具体的な実施形態では、タンパク質系にはカゼインナトリウムまたは、カルシウム、乳タンパク質濃厚物、大豆タンパク質単離物及び乳清タンパク質濃厚物を含むタンパク質源の組合せが含まれる。脂質栄養製品中に使用するのに適した任意の脂質には、ヤシ油、分留ヤシ油、大豆油、コーン油、オリーブ油、サフラワー油、高オレインサフラワー油、高GLAサフラワー油、MCT油中鎖トリグリセリド、サンフラワー油、高オレインサンフラワー油、パーム及びパーム核油、パームオレイン、カノーラ油、アマ種子油、ボリジ油、大豆油、綿実油、月見草油、ブラックカラント種油、トランスジェニック油源、真菌油、魚油例えば、マグロ、イワシ等が含まれる。1つの具体的な実施形態では、脂肪系には高オレインサフラワー油、カノーラ油及び大豆油を含む脂肪源の組合せが含まれる。幾つかの具体的な実施形態では、栄養液体実施形態中の脂質の濃度は、栄養液体の約1.0重量~約30重量、例えば約1.0重量~約20重量、約1.0重量~約15重量、約1.5重量~約5.0重量の範囲であってもよい。1つの具体的な実施形態では、栄養液体は脂質を栄養液体の約1.6重量の量含んでいる。他の具体的な実施形態では、粉末実施形態中の脂質の濃度は、栄養粉末の約1.0重量~約30重量、例えば約1.0重量~約20重量、約1.0重量~約15重量、約5.0重量~約10重量の範囲であってもよい。Iつの具体的な実施形態では、栄養粉末は脂質を栄養粉末の約7.5重量の量含んでいる。任意成分HMB及び場合により1つ以上の主要栄養素を含む栄養製品は、更に製品の物理的、栄養的、化学的、快楽的または加工特性を修飾し、または対象集団に使用したときに医薬または追加の栄養成分として役立ち得る他の任意成分を含んでよい。前記任意成分が経口投与のために安全且つ有効であり、選択した製品形態中の必須成分及び他の成分と相容性であるならば、他の栄養製品中に使用することが公知のまたは適した多くの前記任意成分が本明細書に記載されている栄養製品中にも使用され得る。前記任意成分の非限定例には、保存剤、抗酸化物、β-アラニン、乳化剤、緩衝剤、医薬活性成分、本明細書に記載されている追加の栄養素、着色料、着香料、増粘剤及び安定化剤等が含まれる。栄養製品は更にビタミンまたは関連栄養素を含み、その非限定例にはビタミンA、ビタミンD、ビタミンE、ビタミンK、チアミン、リボフラビン、ピリドキシン、ビタミンB12、カロテノイド、ナイアシン、葉酸、パントテン酸、ビオチン、ビタミンC、コリン、イノシトール、その塩及び誘導体、及びその組合せが含まれる。栄養製品は更に追加のミネラルを含み、その非限定例にはリン、マグネシウム、カルシウム、ナトリウム、カリウム、モリブデン、クロム、セレン、クロリド及びその組合せが含まれる。栄養製品は1つ以上の着香料またはマスキング剤をも含んでよい。適切な着香料またはマスキング剤には、天然及び人工甘味料、ナトリウム源例えば、塩化ナトリウム、親水コロイド例えば、グアーガム、キサンタンガム、カラギーナン、ジェランガム、アカシアガム及びその組合せが含まれる。製造方法栄養製品は、エマルジョンのような栄養液体を含めた栄養製品を製造するための公知のまたは適した方法により製造することができる。1つの適切な製造方法では、栄養液体は脂肪中タンパク質PIFスラリー、炭水化物-ミネラルCHO-MINスラリー及び水中タンパク質PIWスラリーを含めた少なくとも3つの別々のスラリーを用いて製造される。PIFスラリーは、選択した油例えば、カノーラ油、コーン油、魚油等を加熱し、混合した後、乳化剤例えば、レシチン、脂溶性ビタミン及び全タンパク質の一部例えば、乳タンパク質濃厚物等を連続加熱及び撹拌しながら添加することにより形成する。CHO-MINスラリーは、水にミネラル例えば、クエン酸カリウム、リン酸二カリウム、クエン酸ナトリウム等、微量及び超微量ミネラルTM/UTMプレミックス、増粘剤または懸濁剤例えば、ジェランガム、カラギナン等、及び典型的にはカルシウムHMBとしてのHMBを加熱撹拌しなから添加することにより形成する。生じたCHO-MINスラリーを連続加熱及び撹拌しながら10分間保持した後、追加のミネラル例えば、塩化カリウム、炭酸マグネシウム、ヨウ化カリウム等及び/または炭水化物例えば、フルクトオリゴ糖、スクロース、コーンシロップ等を添加する。次いで、PIWスラリーは、水に残りのタンパク質例えば、カゼインナトリウム、大豆タンパク質濃厚物等を加熱及び撹拌しながら混合することにより形成する。次いで、生じた複数のスラリーを加熱撹拌しながら混合し、pHを所望の範囲、典型的には6.6~7.0に調節し、その後組成物を高温短時間HTSTプロセッシングにかける。その間に、組成物は加熱処理され、乳化され、均質化された後放冷される。水溶性ビタミン及びアスコルビン酸を添加し、必要に応じてpHを再び所望範囲に調節し、着香料を添加し、所望の全固体レベルに達するように水を添加する。次いで、組成物を無菌包装して、無菌包装した栄養エマルジョンを形成する。或いは、組成物をレトルト安定な容器に添加した後、レトルト殺菌にかけて、レトルト殺菌した栄養エマルジョンを形成する。栄養液体のための製造方法は、本発明の趣旨及び範囲を逸脱することなく本明細書中に記載されている以外の方法で実施することができる。従って、本発明の実施形態はすべての点で非限定的例示であり、すべての変化及び均等物が本明細書の記載の範囲に入ると見なされる。噴霧乾燥した栄養粉末、乾式混合した栄養粉末またはその組合せのような栄養固体は、栄養粉末を作成し、製剤化するのに適した公知のまたは有効な技術の集合により製造することができる。例えば、栄養粉末が噴霧乾燥した栄養粉末の場合、噴霧乾燥ステップは栄養粉末の製造において使用することが公知のまたは適した噴霧乾燥技術をも含む。多くの各種噴霧乾燥方法及び技術が栄養分野で使用することが公知であり、そのすべてが本発明の噴霧乾燥した栄養粉末の製造において使用するのに適している。噴霧乾燥した栄養粉末を製造する1つの方法は、HMB、典型的にはカルシウムHMB、及び場合によりタンパク質、炭水化物及び脂肪を含む水性スラリーまたは液体を形成し、均質化した後、そのスラリーまたは液体を噴霧乾燥して、噴霧乾燥した栄養粉末を生成することを含む。この方法は、更に噴霧乾燥する、乾式混合する、または噴霧乾燥した栄養粉末に1つ以上の本明細書に記載されている成分を含めた追加栄養成分を添加するステップを含む。言及したように、製造方法は、この方法において使用するためのHMB源として、最も典型的にはカルシウムHMB一水和物として製剤化されるカルシウムHMBを利用することが望ましい。HMBを用いる筋肉回復の促進方法HMBを含む栄養製品を筋廃用または不動後の筋肉回復を促進させるために必要とされる個人に対して本発明に従って経口投与する。不動は、先に言及したように例えばベッドでの安静、入院、ギブス固定、無重力、無活動等を含めた多数の理由に起因している。HMB含有栄養製品を、高齢者を含めた個人に対して筋廃用期間だけまたは筋肉回復期間だけ投与してもよいが、筋肉回復をより十分に促進させるために、通常HMB含有栄養製品を個人に対して筋廃用期間及び筋肉回復期間の両期間の少なくとも一部の間投与することが望ましい。望ましい実施形態では、HMB含有栄養製品を個人に対して筋廃用の全期間または実質的に全期間、及び筋肉回復の全期間または実質的に全期間投与する。個人は、筋廃用または不動のために筋萎縮を受けやすい、筋廃用または不動のために筋萎縮のリスクがある、または筋廃用または不動のために実際筋萎縮を患っている成人または高齢者である。本明細書に記載されている幾つかの実施形態では、個人は筋廃用または不動後に筋肉回復の促進の助けを必要としている。よって、幾つかの実施形態では、すべての個人が筋廃用または不動後の筋肉回復を必要としていないので、すべての個人が本発明の栄養製品及び方法の恩恵を受けないことがある。筋廃用期間が過ぎたら、HMB含有栄養製品を、筋肉回復を促進させるために筋肉回復期間中少なくとも1週間、例えば少なくとも1ヶ月間、少なくとも6ヶ月間、1年以上投与してもよい。1つの具体的な実施形態では、HMB含有栄養製品を筋廃用期間後1週間~6ヶ月間、例えば1ヶ月~6ヶ月間連続投与する。先に言及したように、HMB含有栄養製品を筋廃用の一部の期間または全期間中投与してもよい。本発明の方法は更に、筋廃用期間に生じた筋萎縮を患っている成人及び高齢者を含めた個人における筋肉回復の促進に関する。当業者は、個人の筋萎縮の速度が例えば年齢により異なる場合があることを認識している。すなわち、高齢者は、青年または十代の若者に比してより急速な筋萎縮を経験する成人に比してより急速な筋萎縮を経験する場合がある。本発明の方法は、筋廃用期間中に個人が経験する筋萎縮の速度に関係なく、これらの年齢カテゴリーのすべてに対して使用するのに適している。本明細書に記載されている方法は、個人の筋肉量を増加させるために使用することができ、典型的には個人における長期の筋廃用期間後の筋肉再荷重に関係する更なる筋萎縮を予防するためにも使用することができる。これらの方法は、1タンパク質合成を刺激し、筋肉を作る;2筋肉タンパク質分解を予防することにより筋喪失を減少または減衰させる;3長期の筋廃用期間後に筋力を増加させる;4筋廃用により誘発される筋核アポトーシスを減衰させる;5筋廃用期間に曝された筋肉をもつ個人において筋萎縮を最小限に抑える;5筋廃用期間に生じた筋萎縮を患っている高齢者において筋肉回復を促進させる;及び6随伴細胞を活性化して、筋肉再生及び/または回復を促進させる;という方法のためにHMB含有栄養製品を投与することをも含む。以下の実施例により、本発明の具体的な実施形態及び/または特徴を例示する。これらの実施例は例示の目的のみで挙げられており、本発明の趣旨及び範囲を逸脱することなく多くの改変が可能であるので本発明の限定と解釈されるべきでない。例示されているすべての量は、別段の定めがない限り製品の全重量に基づく重量である。例示されている製品は、栄養エマルジョン及び粉末を製造するために栄養業界で公知であり、本発明の方法において使用するのに適している製造方法に従って製造されるカルシウムHMB含有栄養製品である。[実施例1]本実施例では、高齢動物における筋廃用後の筋萎縮を減らし、筋肉回復を促進させるHMBの効果を評価する。64匹の高齢34ヶ月齢Fischer344xBrownNorwayラットを後肢懸垂HS群または再荷重R群にランダムに割り当てる。各試験群のラットには、経管栄養により1日あたり11mlのCa-HMB170mg/ml-蒸留水または21mlの蒸留水を与える。1週間後、32匹のラットCa-HMBを投与されたHS群から8匹のラット;Ca-HMBを投与されたR群から8匹のラット;水を投与されたHS群から8匹のラット;及び水を投与されたR群から8匹のラットを対照群HS対照群16匹のラットまたはR対照群16匹のラットの部分として指名する。対照群は試験期間を通して正常の可動性を維持しており、ケージの周囲を自由に動き回ることができる。データをHS対照群から研究の開始から14日後に、屠殺前と後に集める。データをR対照群から研究の開始から28日後に、屠殺前と後に集める。残りの32匹のラットHS群の16匹のラット及びR群の16匹のラットにはCa-HMBまたは水のいずれかを与え続け、後肢懸垂を14日間施す。後肢懸垂のために、テープを尾の1/3近くに沿って貼った後、特別に設計された後肢懸垂ケージの上部の魚様スイベルに取り付けたワイヤハーネスを用いて付ける。懸垂により、ラットはケージの周りを360°動ける。テープの周りを滅菌ガーゼでくるみ、その後熱可塑性材料で覆う。尾の露出先端をモニターして、懸垂が尾への血流を邪魔していないことを示すピンク色のままであることを確かめる。懸垂高さをモニターし、後肢がケージの支持面と接触しないように調整する。更に、懸垂角度は30°を超えない。前肢はグリッド床と接触し続けており、動物は動いたり、身繕いしたり、餌及び水を自由に摂取することができる。14日間の後肢懸垂した後、後肢を開放する。データをHS群から屠殺前と後に集める。R群には正常なケージ歩行を更に14日間させた後、データを屠殺前と後に集める。データをすべての試験群から集めて、1試験期間にわたる筋力の変化、2試験期間にわたる体重変化;3試験期間の終了時の筋肉量、4試験期間の終了時のアポトーシスシグナルタンパク質の存在、及び5試験期間の終了時の筋線維断面の変化を分析する。実験手順力測定:すべて動物に98酸素及び2イソフルランガスで麻酔をかけながら力測定を実施する。特注ラット動力計を用いて加熱したX-Y位置決めテーブル上に動物を仰向けに置き、左足は90°の足首角度で足板に固定した。垂直方向力を足板上のロードセル取付具でロードセル変換器に移す。白金刺激電極GrassMedicalInstruments,マサチューセッツ州クインシーを皮下に挿入し、膝窩の脛骨神経に架ける。足底屈筋群の最大等尺力を、脛骨神経を4V、100Hzである過最大矩形波パルスを用いてSD9刺激装置GrassMedicalInstruments,マツチューセッツ州クインシーを用いて3秒間刺激することにより評価する。最大力をLabviewベースのソフトウェアを用いて測定する。3等尺性収縮の最大力をデータポイント毎に平均化する。最大等尺力は14日間の後肢懸垂の前0日目、14日間の後肢懸垂の直後、及び14日間の後肢懸垂後の後肢の14日間の再荷重回復後に測定する。体重及び組織作成:各動物の体重を実験開始時、14日間の後肢懸垂後、及び14日間の再荷重後に測定する。動物に深く麻酔をかけて、ヒラメ筋及び足底筋を両肢から外した後、ブロットし、重量を測定する。この手順後動物を安楽死させる。筋肉の中腹から得たブロックを最適切削温度OCT化合物Tissue-Tek;AndwinScientific,イリノイ州アディスン中に包埋し、液体窒素で冷却したイソペンタンを用いて瞬間凍結し、-80°Cで保存する。残りの筋肉を液体窒素で瞬間凍結し、その後の分析のために必要となるまで-80°Cで保存する。アポトーシス核の同定:ヒラメ筋及び足底筋由来の10μm厚の凍結横断切片を帯電スライドガラスFisherScientific,ペンシルベニア州ピッツバーグに載せる。切片を末端dUTPニック末端標識TUNEL11684795910;RocheAppliedScience,インディアナ州インディアナポリス及びラミナの蛍光標識で標識することによりアポトーシス核を同定する。簡単に説明すると、組織切片をリン酸緩衝食塩液PBS中の4パラホルムアルデヒドで固定し、PBS中0.1トリトンX-100で透過処理する。次いで、組織をラット抗ラミナモノクローナル抗体MAB1914,Millipore,マサチューセッツ州ビレリカと4°Cで一晩インキュベートして、各筋線維の基底膜を可視化する。次いで、切片を湿潤チャンバーにおいてロバ抗ラットローダミンコンジュゲートした二次抗体712-025-150,JacksonImmunoResearchLaboratories,ペンシルベニア州ウェストグローブ及びTUNEL反応混合物と暗所、37°Cで1時間インキュベートする。各スライド上の組織切片の1つのTUNEL反応混合物中のTdT酵素を省いたものをネガティブ対照として含める。すべての核を可視化するために切片を4’,6-ジアミジノ-2-フェニルインドールDAPIと一緒に載せVectashieldマンティングメディウム;VectorLaboratories,カリフォルニア州バーリンゲーム、ZeissLSM510Meta共焦点顕微鏡CarlZeissMicroimagingInc.,ニューヨーク州ソーンウッドを用いて見る。基底膜の真隣または真下にあるTUNEL及びDAPIポジティブ核の数をカウントする。データは、核の全数すなわち、DAPIポジティブ核で割ったTUNELポジティブ核の数をカウントすることにより計算したアポトーシス指数として表示する。アポトーシス指数は各組織断面の4つの非重複領域から得た~1200線維から求める。線維形態:ラミナについて染色した各組織断面の4つの非重複領域から得た750~1200線維から面積測量により筋線維断面積CSAを求める。線維CSAをImageJソフトウェアを用いて計算する。ウェスタン免疫ブロット:約75μgの筋肉をプロテアーゼ阻害剤P8340,Sigma-Aldrich,ミズーリ州セントルイス及びホスファターゼ阻害剤P2850;P5726,Sigma-Aldrichを含有している氷冷RIPA緩衝液1トリトンx-100,150mMNaCl,5mMEDTA,10mMトリス;pH7.4中でホモジナイズする。筋肉ホモジネートを4°C、1000×gで5分間遠心し、上清のタンパク質含量を測定する500-0116;BioRad,カリフォルニア州ハーキュリーズ。40μgのタンパク質を4~12勾配のポリアクリルアミドゲルNP0335BOX;Invitrogen,カリフォルニア州カールスバッドの各ウェルに充填し、ルーチンのドデシル硫酸ナトリウム-ポリアクリルアミド電気泳動SDS-PAGEにより120Vで1時間分離する。タンパク質を25Vでニトロセルロース膜に1.5時間移す。0.05Tween20TBSTを含有しているトリス緩衝食塩液中5脱脂乳中で膜を室温でインキュベートすることにより非特異的タンパク質結合を阻止する。膜をBcl-22876、CellSignalingTechnology,マサチューセッツ州ボストン、Bax2772,CellSignaling、切断型カスパーゼ-39664,CellSignaling及び切断型カスパーゼ-99509,CellSignalingに対する一次抗体と4°Cで一晩インキュベートする1:1000。膜をTBSTで洗浄し、ホースラディッシュペルオキシダーゼSigma-Aldrich,ミズーリ州セントルイスにコンジュゲートした二次抗体の適切な希釈物5脱脂乳で希釈中でインキュベートする。シグナルを化学発光基質LumigenTMA-6;Lumigen,ミズーリ州サウスフィールドを用いて発生させ、膜をX線フィルムBioMaxMS-1;EastmanKodakに露出させることにより可視化する。デジタル記録をKodak290カメラを用いて捕捉し、タンパク質バンドを1D分析ソフトウェアを用いて定量する。バンドを光学密度Xバンド面積として定量し、任意単位で表示する。BrdU投与:再荷重時点で皮下持効性ブロモデオキシウリジンBrdUペレット21日間放出,0.22μgのBrdU/g-体重/日,InnovativeResearch,フロリダ州サラソタを各ラットに埋め込んだ。動物に2イソフルランで麻酔をかけ、BrdUペレットを上位胸椎上の背部に皮下挿入した。BrdUはチミジンアナログであり、DNA合成中核中に取り込まれるので、筋肉再荷重の期間中の活性化随伴細胞/筋肉前駆体細胞を同定するためにBrdUを使用する。免疫蛍光染色:既に記載されているようにSiu2005、BrdU及びラミニンを免疫蛍光染色することにより活性化増殖随伴細胞/筋肉前駆体細胞を同定した。検出のために抗BrdUマウスモノクローナル抗体及び抗マウスIgGCy3コンジュゲートFab’2断片を使用した。線維基底膜を可視化するために、抗ラットラミニンマウスモノクローナル、次いで抗マウスIgGビオチンコンジュゲート抗体を使用した。最後に、切片を4’,6-ジアミジノ-2-フェニルインドールDAPIで染色し、DAPI青色蛍光に対して330~380nm、Cy3赤色蛍光に対して485~585nm、フルオレセイン緑色蛍光に対して450~490nmの励起波長を用いて蛍光顕微鏡で調べた。像をSPOTRTカメラ及びソフトウェアを用いて得た。BrdU及びDAPIポジティブ核の数を6つの無作為の非重複フィールドから40倍の対物レンズの倍率でカウントした。切片中の非筋肉核を排除するためにラミニン染色された標識核のみをカウントした。統計分析:結果を平均±SEとして報告する。群間の平均の差は多変量分散分析MANOVA及びホッテリングのT二乗検定により調べる。有意平均間でボンフェローニポストホック分析を実施する。線維面積-頻度データについては実験群間でカイ二乗分析を実施する。P値≦0.05が有意と見なされる。結果体重:研究の開始時、実験群間で動物の体重に差はない。通常、HMB及び水治療群の両方において14日間の後肢懸垂により体重は治療後劇的に約15低下した。両群において動物の体重は再荷重期間中減り続ける。水治療ラットの体重は、それぞれ実験プロトコルで3週間1週間の前治療及び14日間の後肢懸垂後1.6、5週間前治療、後肢懸垂及び14日間の再荷重後9.3減少した。HMBでそれぞれ3週間及び5週間治療した対照ラットでは、動物の体重が実験1日目に比して1.3及び7減少する。HMB及び水治療ラットの両方で動物の体重は2週間の再荷重後減り続ける。全体として、14日間の再荷重後、HMB治療ラットの体重は対照動物の体重と比較して4減少し、水治療ラットの体重は6減少する図1を参照されたい。最大等尺力:HMBは後肢懸垂及び再荷重での力の低下を減衰させるようである。最大等尺力は後肢懸垂前には群間で差はない。後肢懸垂は最大インビボ足底屈等尺力を水治療ラットにおいて34.3、HMB治療ラットにおいて23.7低下させる。対照動物における等尺力と比較して、再荷重後の水治療ラット42.4の最大等尺底底屈力がHMB治療動物27.3よりも大きく低下するP<0.01,図2を参照されたい。筋湿重量:HMBはHS誘発の萎縮の程度を有意に低下させなかったが、再荷重群の足底筋の筋湿重量をビヒクル対照動物に比して向上させた。HSはHMB及びビヒクル治療動物n=16/群の両方の足底筋19及びヒラメ筋15の湿重量を有意に減少させたP<0.001。14日間のHS後の実験群間で筋喪失の程度に有意な差はなかった。再荷重はヒラメ筋及び足底筋湿重量の更なる低下を防止しが、HSによる誘発される筋喪失を逆転させなかった。HMB治療は14日間の再荷重後の足底筋重量をビヒクル治療動物n=8/群に比して有意に改善した図3A。HMBは、ビヒクル治療動物図3Bに比してヒラメ筋におけるHS誘発低下に対して保護効果を与えなかったし、14日間の再荷重後のヒラメ筋湿重量回復も改善させなかった。筋線維CSAの変化:HMBはHSまたは再荷重後に生じたヒラメ筋及び足底筋の両方の線維萎縮の程度を低下させた。HSは足底図4A及びヒラメ図4B後肢筋中の平均線維CSAを劇的に低下させた。しかしながら、ビヒクル治療動物のHS誘発による線維CSAの減少は、HMB治療動物の場合よりも足底筋48.8対26.4、p<0.05及びヒラメ筋45.6対32.5、p<0.05で大きい。HMBは、HSと比較して14日間の再荷重後の足底筋図4Aまたはヒラメ筋図4Bのいずれでも線維CSAを更に改善させなかった。足底筋図4C及びヒラメ筋図4Dの線維面積-線維頻度分布を回復群について示す。14日間の回復後、足底筋及びヒラメ筋中の筋線維の線維面積-頻度分布は対照筋肉の分布と比較して左にシフトしていた。カイ二乗分析は、ビヒクル治療動物の足底筋及びヒラメ筋の線維<1500μm2の頻度はHS後14日間回復させたHMB治療動物と比較して有意に高かったことを示した。HS後の線維面積-頻度分布の分布図4C、図4Dは回復データを示さずについて示したものと同様であった。TUNEL標識により同定したアポトーシス筋核:TUNELポジティブ筋核の頻度により示されるアポトーシス指数はHS及び再荷重により大きく上昇し、HMBはアポトーシス指数を減衰させた。HSは足底筋及びヒラメ筋の両方中のTUNELポジティブ核を有意に増加させた。組織切片内で幾つかの領域差があったが、HS後の足底筋及びヒラメ筋から得た各組織断面切片全体でTUNELポジティブ核が生じた。アポトーシス指数は、歩行対照動物と比較してビヒクル治療動物の足底筋9.9倍,p<0.05及びヒラメ筋3.2倍,p<0.05において有意に上昇した。HMB治療は筋核アポトーシスを抑制したが、完全には排除しなかった。HSは、歩行対照動物と比較してHMB治療動物の足底筋3.0倍,p<0.05及びヒラメ筋1.8倍,p<0.05の両方のアポトーシス指数を上昇させた。アポトーシス指数は、HMB治療動物と比較してビヒクルの足底筋図5及びヒラメ筋の両方で有意に高かったp<0.001図6。TUNEL標識により同定されるアポトーシスは再荷重中、特にビヒクル治療筋肉では高いままであった。HS後の結果と同様に、HMBは再荷重した足底筋図5及びヒラメ筋図6における筋核のTUNEL標識を抑制し続けた。にもかかわらず、水またはHMB治療群のいずれでも再荷重状態と比較してHS後の筋肉のアポトーシス指数間で有意な差はなかった。アポトーシスシグナルタンパク質:HMB治療は、水治療ラットと比較して後肢懸垂及び再荷重後の後肢懸垂誘発のプロアポトーシスタンパク質の増加を抑制する。ミトコンドリアアポトーシスシグナルに関係するプロアポトーシスタンパク質は、後肢懸垂後の後肢筋肉の存在量を増加させ、再荷重中高いままである。Bax図7、切断型カスパーゼ-9図8及び切断型カスパーゼ-3図9を含めたプロアポトーシスタンパク質は後肢懸垂及び再荷重後増加する。HMBは、後肢懸垂及び再荷重状態後の足底筋及びヒラメ筋中のBax図7、切断型カスパーゼ-9図8及び切断型カスパーゼ-3図9のタンパク質存在量を抑制する。プロアポトーシスシグナルタンパク質の存在量は後肢懸垂及び再荷重後の足底筋図7A、8A、9A及びヒラメ筋図7B、8B、9B中と同様であり、これはHMBにより変化しない。HMBは歩行動物の対照筋肉HSCon及びRCon中のBax図7B及び切断型カスパーゼ-3図9Bのタンパク質存在量を減少させる。後肢懸垂も再荷重も足底筋図10A及びヒラメ筋図10B中の抗アポトーシスタンパク質Bcl-2を約100P<0.05増加させるが、後肢懸垂または再荷重のいずれの後もHMB及び水治療筋肉間に有意な差はないようである。HMB治療により、筋肉修復及び再生のために必要な筋肉前駆体細胞である随伴細胞が活性化された。BrdU標識により、通常活性化分化された随伴細胞の存在する筋線維への融合により得られる新しい筋核が既存の筋線維内に同定される。これは筋肉修復及び再生の自然なプロセスである。筋廃用からの回復中、HMB治療群はビヒクル治療ラットよりもほぼ2倍のBrdUポジティブ核の数を有していたHMB=8.1±2、対照=4.2±1.7p=0.001。図11は、活性化/増幅筋肉随伴細胞核の推定値としてヒラメ筋中のBrdUポジティブ核を同定するために使用したBrdU及びラミニンの免疫蛍光標識の結果を示す。BrdUを二次フルオレセインで染色した二次Cy3ラミニン及びDAPIで標識した核で染色した。全核に対するBrdUポジティブ核の数をとして表示した。1群あたり2500個以上の核を評価した。先に言及したように、HMB群では、14日間の回復期間でほぼ2倍のBrdUポジティブ核の数を示したが、これは治療群中の随伴細胞の活性化による筋肉肥大の早期兆候を示す。結果の分析上のデータが示すように、HMBは後肢懸垂及び続く再荷重後の筋肉回復を改善させる。更に、HMBは、1非荷重不動後再荷重回復中の更なる筋力低下を予防する;2再荷重した筋肉の足底中の筋肉量を改善する;3非荷重及び再荷重に応答して速骨格筋及び遅骨格筋の両方の線維萎縮の程度を弱める;4HSにより誘発される筋核アポトーシスを有意に減衰させる;5足底筋及びヒラメ筋の両方において再荷重後のアポトーシス指数を低下させる;及び6再荷重した足底筋及びヒラメ筋中の切断型カスパーゼ-3、切断型カスパーゼ-9及びBaxタンパク質存在量のより低いレベルにより示されるようにミトコンドリアアポトーシスシグナルを抑える。これらの結果は、HMBが筋廃用期間後の筋肉回復の促進において非常に有効であることを示している。[実施例2~6]実施例2~6は、本発明の方法において使用するのに適したHMB含有栄養粉末を例示し、これらの成分を下表にリストする。これらの製品は、別々のバッチで噴霧乾燥方法により製造し、使用直前に所望の目標成分濃度まで水で再構成される。すべての成分量は、別段の定めがない限り製品の1000kgバッチあたりのkgとしてリストされている。[実施例7~11]実施例7~11は、本発明の方法において使用するのに適したHMB含有栄養液体を例示し、これらの成分を下表にリストする。すべての量は、別段の定めがない限り製品の1000kgバッチあたりのkgとしてリストされている。"