配列番号17のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたは前記ポリペプチド配列と95以上の相同性を有するポリペプチドの開始メチオニンから111番目のアミノ酸が、グルタミン酸に置換されたホモセリンО-アセチルトランスフェラーゼ活性を有する、変異型ポリペプチド。前記ポリペプチドが、さらに、112番目のアミノ酸がスレオニンまたはヒスチジンに置換されたものである、請求項1に記載の変異型ポリペプチド。前記変異型ポリペプチドが、配列番号18乃至20のアミノ酸配列のいずれか一つのアミノ酸配列を有するものである、請求項1または2に記載の変異型ポリペプチド。前記ポリペプチドのアミノ酸を置換し、メチオニンに対するフィードバック調節が解除されたものである、請求項1に記載の変異型ポリペプチド。前記アミノ酸の置換が、29番目のアミノ酸がプロリンに置換、114番目のアミノ酸がグリシンに置換、140番目のアミノ酸がセリンに置換、または前記3種のアミノ酸置換のうち、1種以上を組み合わせたものである、請求項4に記載の変異型ポリペプチド。前記ポリペプチドが、さらに、112番目のアミノ酸がスレオニンまたはヒスチジンに置換されたものである、請求項5に記載の変異型ポリペプチド。前記変異型ポリペプチドが、配列番号21乃至23のアミノ酸配列のいずれか一つのアミノ酸配列を有するものである、請求項5または6に記載の変異型ポリペプチド。請求項1に記載の変異型ポリペプチドをコードする、ポリヌクレオチド。前記ポリヌクレオチドが、配列番号24乃至29の塩基配列のいずれか一つの塩基配列を有するものである、請求項8に記載のポリヌクレオチド。請求項8に記載のポリヌクレオチドが作動可能に連結された、組み換えベクター。請求項8に記載のポリヌクレオチドを含む、微生物。さらに、アセチル-CoAシンテターゼacetylCoAsynthetaseの活性が内在的アセチル-CoAシンテターゼの活性に比べ強化され、またはパントテン酸キナーゼpantothenatekinaseの活性がCoAの蓄積によるフィードバック阻害が解除されるように変形されたものである、請求項11に記載の微生物。さらに、ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼコード遺伝子ppc、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼコード遺伝子aspC、及びアスパラギン酸セミアルデヒドデヒドロゲナーゼコード遺伝子asdからなる群から選ばれる一つ以上の遺伝子のコピー数が増加され、または前記遺伝子のプロモーターの活性が増進されたプロモーターに置換されるか、または活性が増進されるように変異された、請求項11に記載の微生物。請求項10に記載の組み換えベクターに形質変換された、微生物。前記微生物が、エシェリキアEscherichia属である、請求項14に記載の微生物。前記微生物が、大腸菌である、請求項15に記載の微生物。前記微生物が、受託番号KCCM11145P、KCCM11146P、KCCM11147P、KCCM11228P、KCCM11229P、またはKCCM11230Pである、請求項16に記載の微生物。請求項11乃至17のいずれか一項に記載の微生物を培養する段階、及び前記微生物培養過程において生成したО-アセチルホモセリンを得る段階を含む、О-アセチルホモセリンの生産方法。そこで、本発明等は、メチオニン生産収率の側面において有利なО-アセチルホモセリンを、外来遺伝子を導入することなく生産するエシェリキアEscherichia属菌株を作製するために研究した結果、大腸菌Ecoli由来のO-スクシニルホモセリントランスフェラーゼの111番目のアミノ酸をグルタミン酸に置換した変異型ポリペプチドの場合、ホモセリンスクシニルトランスフェラーゼ活性が、ホモセリンアセチルトランスフェラーゼ活性に変換されたことが確認され、本発明を完成するに至った。本発明の目的は、ホモセリンスクシニルトランスフェラーゼHomoserineOSuccinyltransferase活性を有するポリペプチドを、ホモセリンアセチルトランスフェラーゼ活性を有するように変形させた変異型ポリペプチドを提供することにある。また、本発明の他の目的は、前記変異型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを提供することにある。また、本発明のさらに他の目的は、前記ポリヌクレオチドが作動可能に連結された組み換えベクターを提供することにある。また、本発明のさらに他の目的は、前記ポリヌクレオチドを含む微生物を提供することにある。また、本発明のさらに他の目的は、前記ポリヌクレオチドが作動可能に連結された組み換えベクターに形質転換された微生物を提供することにある。また、本発明のさらに他の目的は、ホモセリンアセチルトランスフェラーゼ活性を有する変異型ポリペプチドを発現する微細物を用いて、О-アセチルホモセリンを生産する方法を提供することにある。本発明によると、ホモセリンをО-スクシニルホモセリンに転換する酵素を発現する微細物に、外来遺伝子を導入しなくても、ホモセリンからО-スクシニルホモセリンを生産することができ、前記О-アセチルホモセリンは、メチオニン生産のための前駆体として用いられる。したがって、食品用として用いられるメチオニン製品を生産するために、本発明を適用すると、外来遺伝子の導入に対する消費者の不安、誤った認識、及び外来遺伝子の導入に対する安定性を証明しなければならないという問題点を解決することができるというメリットがある。上述した目的を達成するための一つの態様として、本発明は、配列番号17のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたは前記ポリペプチド配列と95以上の相同性を有するポリペプチドの開始メチオニンから111番目のアミノ酸が、グルタミン酸に置換されたホモセリンО-アセチルトランスフェラーゼ活性を有する変異型ポリペプチドを提供する。本発明において、ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドは、下記の反応式のとおり、メチオニン生合成経路に存在するホモセリンとスクシニル-CoAを用いて、О-スクシニルホモセリンを合成する活性を有するポリペプチドを意味する。HomoserineSuccinyl-CoA→O-Succinyl-Homoserine前記ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドは、エンテロバクター属、サルモネラ属、シュードモナス属、バシラス属、エシェリキア属の微細物に由来するポリペプチドであってもよく、好ましくは、エシェリキア属微生物由来のホモセリンスクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドであってもよく、より好ましくは、大腸菌Ecoli由来のホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドであってもよい。本発明において、前記ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドは、前記反応式に示した活性を有するポリペプチドであれば、ホモセリンスクシニルトランスフェラーゼ活性を有する配列番号17のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそれと95以上の相同性を有するポリペプチドを含んでもよい。本発明の実施例において、数種の大腸菌のホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼアミノ酸配列の相同性を比較した結果、数種の大腸菌に存在するホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼポリペプチドは、5未満の変異を含む変異体が存在するがすなわち、相互間に95以上の相同性を有する、ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼ活性では、大きな差がないことが認められる図2。このような結果は、本発明の配列番号17のポリペプチドと95以上の相同性を有するポリペプチドも、同一のホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼ活性を有することができることを示唆するものであり、これは、当業者にとって自明なことであり、本出願人は、これを視覚化したものである。本発明における用語の変異型ポリペプチドは、ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドのアミノ酸配列の一部が置換されることにより、野生型とは異なり、ホモセリンО-アセチルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドを意味する。すなわち、本発明の変異型ポリペプチドは、ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドの一部のアミノ酸を置換することにより、基質特異性がスクシニルCoAからアセチルCoAに変換された、すなわち、下記の反応式と同一の活性を示す変異型ポリペプチドを意味する。HomoserineAcetyl-CoA→O-AcetylHomoserine本発明において、前記変異型ポリペプチドは、配列番号17で表われるポリペプチドまたは前記ポリペプチド配列と95以上の相同性を有するポリペプチドの開始メチオニンから111番目のアミノ酸がグルタミン酸に置換され配列番号18、さらに112番目のアミノ酸がスレオニン配列番号19またはヒスチジン配列番号20に置換された変異型ポリペプチドであってもよい。上記のように、さらに112番目のアミノ酸であるロイシンをスレオニンまたはヒスチジンに変換させた場合、ホモセリンアセチルトランスフェラーゼ活性が強化されることが確認できる表2及び表3。好適な一具現例によると、前記変異型ポリペプチドは、配列番号18乃至20のアミノ酸配列のいずれか一つのアミノ酸配列を有するポリペプチドであってもよい。本発明の実施例では、配列番号39で表わされる塩基配列からなる大腸菌由来のmetA遺伝子によりコードされたホモセリンスクシニルトランスフェラーゼの111番のグリシンをグルタミン酸に置換したポリペプチドを発現することができるプラスミド、及び前記置換に加えて、112番のアミノ酸をスレオニンまたはヒスチジンに置換したポリペプチドを発現することができるプラスミドを作製した実施例2。また、本発明の実験例を通じて、野生型metA遺伝子配列番号39を含むプラスミドにより形質転換された菌株のCJM2pCL_Pcj1_metAwt及びCJM3pCL_Pcj1_metAwtによっては、О-スクシニルホモセリンのみが生成することが確認された。これに対して、本発明の変異型ポリペプチドをコードする遺伝子を含むプラスミドにより形質転換された菌株によっては、О-アセチルホモセリンのみが蓄積されることが確認された実験例2、表2及び表3。これにより、本発明の変異型ポリペプチドを発現する微生物は、ホモセリンアセチルトランスフェラーゼ活性を示すための外来遺伝子を導入しなくても、メチオニン前駆体として、生産収率の高いО-アセチルホモセリンを生産することができるという利点がある。本発明において、前記変異型ポリペプチドは、ホモセリンスクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドの一部のアミノ酸が置換され、メチオニンに対するフィードバック調節が解除された変異型ポリペプチドであってもよい。すなわち、ホモセリンスクシニルトランスフェラーゼは、培地に添加される微量のメチオニンによってフィードバック調節され、大部分の活性が抑制される特性を示すので、本発明の変異型ポリペプチドは、О-アセチルホモセリンの過量生産のために、メチオニンに対するフィードバック調節が解除された変異型ポリペプチドであってもよい。本発明において、前記メチオニンに対するフィードバック調節を解除するためのアミノ酸置換は、特許文献3に開示された方法により行うことができ、具体的に、ホモセリンスクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドの29番アミノ酸をプロリンに置換、114番アミノ酸をグリシンに置換、140番アミノ酸をセリンに置換または前記3種のアミノ酸置換の1種以上が組み合わせられたアミノ酸置換によって、メチオニンに対するフィードバック調節を解除することができる。好ましくは2種以上、最も好ましくは3種の全てのアミノ酸が置換されてもよい。好適な一具現例によると、前記メチオニンに対するフィードバック調節が解除された変異型ポリペプチドは、配列番号21乃至23のアミノ酸配列のいずれか一つのアミノ酸配列を有する変異型ポリペプチドであってもよい。本発明の実施例では、大腸菌由来のmetA遺伝子によりコードされたホモセリンスクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドの29、114番、及び140番のアミノ酸を、それぞれプロリン、グリシン、及びセリンに置換し、メチオニンに対するフィードバック調節を解除し、111番アミノ酸がグルタミン酸に置換された[pCL_Pcj1_metA11EL]、111番及び112番アミノ酸が、それぞれグルタミン酸及びスレオニンに置換された[pCL_Pcj1_metA11ET]、111番及び112番アミノ酸が、それぞれグルタミン酸及びヒスチジンに置換された[pCL_Pcj1_metA11EH]のホモセリンアセチルトランスフェラーゼ活性を有する変異型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含むプラスミドを作製した実施例3。また、本発明の実験例をみると、メチオニンに対するフィードバック調節が解除された変異型ポリペプチドを発現する菌株のうち、111番及び112番のアミノ酸が、それぞれグルタミン酸及びヒスチジンに置換されたCJM2pCL_Pcj1_metA11EH菌株及びCJM3pCL_Pcj1_metAEH菌株のО-アセチルホモセリンの生産量が11.1g/L及び24.8g/Lと高いО-アセチルホモセリンの生産量を示し、外来のホモセリンアセチルトランスフェラーゼ遺伝子を導入した菌株と類似した水準に、О-アセチルホモセリンが蓄積されることが確認された実験例2、表他の一態様として、本発明は、前記変異型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、または前記ポリヌクレオチドが作動可能に連結された組み換えベクターを提供する。本発明において、前記ポリヌクレオチドは、ヌクレオチド単量体が共有結合により長鎖状に連なったポリヌクレオチドの重合体であり、一定の長さ以上のDNAまたはRNA鎖であって、前記変異型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドである。本発明において、前記ポリヌクレオチドは、配列番号24乃至29の塩基配列のいずれか一つの塩基配列を有するポリヌクレオチドであってもよい。本発明において、前記組み換えベクターは、本発明の変異型ポリペプチドを発現させる微生物を作るために、宿主細胞にDNAを導入し、変異型ポリペプチドを発現させるための手段であって、プラスミドベクター、コスミドベクター、バクテリオファージベクター等の公知の発現ベクターを用いることができ、ベクターは、DNA組み換え技術を用いた任意の公知の方法により、当業者が容易に製造することができる。本発明において、前記組み換えベクターは、pACYC177、pACYC184、pCL1920、pECCG117、pUC19、pBR322、pMW118ベクターを用いることができ、好ましくはpCL1920ベクターが用いることができる。前記作動可能に連結されたは、発現調節配列が、変異型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列の転写及び翻訳を調節するように連結されたものをいい、発現調節配列プロモータを含むの調節下で、ポリヌクレオチド配列が発現され、ポリヌクレオチド配列によりコードされる変異型ポリペプチドが生成するように正確な読み枠を維持させることを含む。また他の一態様として、本発明は、前記変異型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む微生物及び前記変異型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが作動可能に連結された組み換えベクターに形質転換された微生物を提供する。本発明における用語の形質転換とは、遺伝子を宿主細胞内に導入し、宿主細胞内において発現させるようにすることを意味し、形質転換された遺伝子は、宿主細胞内において発現されるものであれば、宿主細胞の染色体内に挿入されまたは染色体外に位置するもののいずれであってもよく、制限されずに含まれる。また、前記遺伝子は、ポリペプチドをコード可能なポリヌクレオチドであり、DNA及びRNAを含む。前記遺伝子は、宿主細胞内に導入され、発現され得るものであれば、どんな形態で導入されたものであっても構わない。例えば、前記遺伝子は、それ自体内に発現するのに必要な全ての要素を含むポリヌクレオチド構造体である発現カセットの形態で宿主細胞に導入され得る。前記発現カセットは、通常、前記遺伝子に作動可能に連結されているプロモータ、転写終結シグナル、リボソーム結合部位及び翻訳終結シグナルを含む。前記発現カセットは、自己複製が可能な発現ベクターの形態であってもよい。また、前記遺伝子は、それ自体またはポリヌクレオチド構造体の形態で宿主細胞に導入され、宿主細胞における発現に必要な配列と作動可能に連結されているものであってもよい。前記微生物は、変異型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含むか、または変異型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが作動可能に連結された組み換えベクターに形質転換され、変異型ポリペプチドを発現することができる原核微生物または真核微生物として、例えば、エシェリキアEscherichia属、バシラスBacillus属、アエロバクターAerobacter属、セラチアSerratia属、プロビデンシアProvidencia属、エルウィニアErwinia属、シゾサッカロミセスSchizosaccharomyces属、エンテロバクターenterobacteria属、チゴサッカロミセスzygosaccharomyces属、レプトスピラLeptospira属、デイノコッカスDeinococcus属、ピチアPichia属、クルイベロマイセスKluyveromyces属、カンジダCandida属、ハンゼヌラHansenula属、デバリオマイセスDebaryomyces属、ムコールMucor属、トルロプシスTorulopsis属、メチロバクターMethylobacter属、サルモネラsalmonellar属、ストレプトマイセスstreptomyces属、シュードモナス属、ブレビバクテリウムbrevibacterium属、またはコリネバクテリウムCorynebacterium属の微生物であってもよい。本発明において、前記微生物は、ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドを発現する微生物として、例えば、バシラス属、エシェリキア属、エンテロバクター属、サルモネラ属の微生物であってもよく、好ましくはエシェリキア属微生物であってもよく、より好ましくは大腸菌であってもよい。本発明の実施例では、本発明の変異型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む組み換えベクターに形質転換された大腸菌のCJM2pCL_Pcj1_metAEL、CJM2pCL_Pcj1_metAET、CJM2pCL_Pcj1_metAEH菌株実施例2及び実験例2、及びメチオニンに対するフィードバック調節が解除された変異型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む組み換えベクターに形質転換された大腸菌のCJM2pCL_Pcj1_metAEL、CJM2pCL_Pcj1_metAET、CJM2pCL_Pcj1_metAEH菌株を作製した実施例3及び実験例2。前記菌株のうち、CJM2pCL_Pcj1_metAEL、CJM2pCL_Pcj1_metAET、CJM2pCL_Pcj1_metAEH菌株を、それぞれCA05-0546、CA05-0547及びCA05-0548と命名し、2010年12月14日に韓国微生物保存センターに寄託し、それぞれ寄託番号KCCM11145P、KCCM11146P及びKCCM11147Pを付与された。本発明は、ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドの一部のアミノ酸が置換されたホモセリンО-アセチルトランスフェラーゼ活性を有する変異型ポリペプチドを提供するので、ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドのみを発現する微生物に、本発明の変異型ポリペプチドを発現させると、ホモセリンО-アセチルトランスフェラーゼをコードするmetX等の外来遺伝子の導入無しに、ホモセリンО-アセチルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドを発現させることができるという利点を有する。本発明において、前記微生物は、О-アセチルホモセリンを過量生産するために、さらに、アセチル-CoAシンテターゼacetylCoAsynthetaseの活性が強化されたり、またはパントテン酸キナーゼpantothenatekinaseの活性がCoAの蓄積によるフィードバック阻害が解除されるように変形された微生物であってもよい。本発明において、アセチル-CoAシンテターゼ、パントテン酸キナーゼは、多様な微生物から由来し、この活性を有したタンパク質をコードする遺伝子は、それぞれacs、coaAと称する。本発明において、アセチル-CoAシンテターゼの活性強化は、前記アセチル-CoAシンテターゼをコードするacs遺伝子のプロモーター領域及び5’-UTR部位の塩基配列を変形させることにより、遺伝子発現を増化させ、当該遺伝子のORF部位に変異を導入することにより、タンパク質の活性を増化させ、当該遺伝子を染色体上にさらに導入することにより、タンパク質の発現量を強化させ、当該遺伝子を自家プロモーターまたは活性が増進された別個のプロモーターと一緒に導入し、菌株に形質転換させることにより、タンパク質の発現量を増化させることができる。より具体的に、本発明は、活性が増進されたプロモーターへの置換、活性が増進されるようにプロモーターの変異誘発、または遺伝子コピー数の増加により、アセチル-CoAシンテターゼ活性を強化させることができ、これにより、О-アセチルホモセリンの生産能を向上させる方法、及びこのような方法を用いて作製された大腸菌を提供することができる。前記活性が増進されたプロモーターに置換するために、活性が増進されたプロモーターと知られたpTac、pTrc、pPro、pR、pL等のプロモーターが用いられる。好適な一具現例によると、本発明は、アセチル-CoA生合成に関与するacs遺伝子のプロモーターが、構成的発現プロモーターであるproプロモーターに置換され、前記acs遺伝子が過発現された、О-アセチルホモセリン生産菌株を提供することができる。前記proプロモーターは、配列番号30の全体または一部が用いられる。本発明は、さらに、CoA生合成経路上において、CoA蓄積によるフィードバック阻害が解除されたパントテン酸キナーゼ変異体が導入された微生物を提供することができる。より具体的に、前記パントテン酸キナーゼのアミノ酸配列において106番目の位置のアルギニンがアラニンに置換され配列番号40、CoA蓄積によるフィードバック阻害が解除されることにより、О-アセチルホモセリン生産能を向上させることができる。本発明において、前記微生物は、さらに、ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼ暗号化遺伝子ppc、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ暗号化遺伝子aspC、及びアスパラギン酸セミアルデヒドデヒドロゲナーゼ暗号化遺伝子asdからなる群から選ばれる一つ以上の遺伝子のコピー数が増加され、または前記遺伝子のプロモーターが活性が増進されたプロモーターに置換され、または活性が増進されるように変異された微生物であってもよい。本発明において、前記一連の酵素は、下記の反応式に示すように、ホスホエノールピルビン酸塩からО-アセチルホモセリンを合成する活性を有している。したがって、このような一連の活性を有する遺伝子の発現を強化する場合、細胞内にО-アセチルホモセリンの蓄積を誘導することができる。ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼppcPhosphoenolpyruvateH2OCO2⇔OxaloaxetatePhosphateアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼaspCOxaloacetateGlutamate⇔Aspartatea-ketoglutarateアスパラギン酸キナーゼthrAAspartateATP⇔Aspartyl-4-phosphateADPアスパラギン酸セミアルデヒドデヒドロゲナーゼasdAspartyl-4-phosphateNADPH⇔Aspartate-semialdehydePhosphateNADPホモセリンデヒドロゲナーゼthrAAspartate-semialdehydeNADPH⇔Homoserine前記反応式において、アスパラギン酸キナーゼとホモセリンデヒドロゲナーゼの二つの役割をする酵素をコードするthrA遺伝子は、実験例2に示すCJM2菌株にフィードバック解除を通じた強化が既に行われた状態であり、残りの三つの酵素は、遺伝子のコピー数が増加されたり、または前記遺伝子のプロモーターを活性が増進されたプロモーターに置換したり、または活性が増進されるように変異させる方法で活性を強化させることができる。本発明における用語のコピー数増加は、目的遺伝子を染色体上にさらに導入し、または当該酵素の遺伝子を有するプラスミド導入する方法で行うことができる。本発明の実施例では、metA及びmetBの遺伝子が欠損した菌株であるCJM2菌株のacsプロモーターを欠損させ、proプロモーターに交替したCJM2-AP菌株を作製し、CJM2-AP菌株においてfeedbackresistantcoaA形質を有するように形質を転換し、アセチル-coApoolが過量増加されているCJM2-APCO菌株を作製した後、ppc、aspC、asdの三つの遺伝子のコピー数が2コピー増幅したCJM3菌株を作製した。以降、本発明では、pCL_Pcj1_metA11EL、pCL_Pcj1_metA11EH、及びpCL_Pcj1_metA11ETが導入されたCJM3菌株を、それぞれCA05-0578、CA05-0579、及びCA05-0580と命名し、2011年12月12日に韓国微生物保存センターに寄託し、それぞれ寄託番号KCCM11228P、KCCM11229P、及びKCCM11230Pを付与された実験例2また他の一態様として、本発明は、前記変異型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む微生物、または変異型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが作動可能に連結された組み換えベクターに形質転換された微生物を培養する段階、及び前記微生物培養過程において生成されたО-アセチルホモセリンを得る段階を含むО-アセチルホモセリンの生産方法を提供する。本発明において、変異型ポリペプチドを発現する前記微生物を用いてО-アセチルホモセリンを生産することは、当業界において公知の適当な培地と培養条件によって行われる。このような培養過程は、当業者であれば、選択される菌株に応じて容易に調整して用いることができる。培養方法の例として、バッチ式、連続式、及び流加培養が挙げられるが、これに限定されるものではなく、培養に用いられる培地は、特定の菌株の要求条件を適宜満足させることができる。本発明において用いられる培地は、スクロース、ブドウ糖、グリセロール、酢酸のいずれか一つの炭素源、またはこれらの炭素源を複合的に用いることができ、用いられる窒素源は、ペプトン、酵母抽出物、肉汁、麦芽抽出物、とうもろこし浸漬液、及び大豆のような有機窒素源、及び要素、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム、炭酸アンモニウム、及び硝酸アンモニウムのような無機窒素源が含まれる。これらの窒素源は、単独または組み合わされて用いられる。前記培地には、リンP源として、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二カリウム、及び対応するソジウム含有塩が含まれてもよい。また、硫酸マグネシウムまたは硫酸鉄のような金属塩を含んでもよい。これ以外に、アミノ酸、ビタミン、及び適切な前駆体等が含まれてもよく、これらの培地または前駆体は、培養物にバッチ式または連続式で加えられてもよい。また、培養中に水酸化アンモニウム、水酸化カリウム、アンモニア、リン酸、及び硫酸のような化合物を培養物に適切な方式で添加し、培養物のpHを調整することができ、脂肪酸ポリグリコールエステルのような消泡剤を用いて気泡生成を抑制することができる。また、培養物の好気状態を維持するために、培養物内に酸素または酸素含有気体を注入したり、または嫌気及び未好気状態を維持するために、気体の注入無しに、または窒素、水素、または二酸化炭素ガスを注入することができる。培養物の温度は、27°C乃至37°C、好ましくは30°C乃至35°Cであってもよい。培養期間は、所望の有用物質が生成される間は、続けて培養することができ、好ましくは10乃至100時間培養してもよい。以下、本発明を実施例及び実験例によりさらに詳述する。但し、下記の実施例は、本発明の例示に過ぎず、本発明の内容が下記の実施例に限定されるものではない。実施例1ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼ及びホモセリンО-アセチルトランスフェラーゼを含むプラスミドの作製米国生物資源センターAmericanTypeCultureCollectionから購買した大腸菌W3110菌株寄託番号ATCC9637の染色体を鋳型とし、配列番号1及び配列番号2のプライマーを用いてPCRを行うことにより、ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼをコードするmetA遺伝子を増幅した。PCRに用いたプライマーは、米国立衛生研究所ジーンバンクNIHGeneBankに登録されているNC_000913の大腸菌の染色体の塩基番号に基づいて作製したので、配列番号1及び配列番号2のプライマーは、それぞれ制限酵素EcoRV部位及びHindIII部位を有している。<配列番号1>5’AATTGATATCATGCCGATTCGTGTGCCGG3’<配列番号2>5’AATTAAGCTTTTAATCCAGCGTTGGATTCATGTG3’デイノコッカスラジオデュランスDeinococcusradioduransの染色体を鋳型とし、配列番号3及び配列番号4のプライマーを用いてPCRを行うことにより、ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼをコードするmetA遺伝子配列番号44を増幅した。配列番号3及び配列番号4のプライマーは、それぞれ制限酵素EcoRV部位及びHindIII部位を有している。<配列番号3>5’AATTGATATCATGACCGCCGTGCTCGC3’<配列番号4>5’AATTAAGCTTTCAACTCCTGAGAAACGCCCC3’PCR条件は、94°Cで3分間変性後、94°Cで30秒間変性、56°Cで30秒間アニーリング、72°Cで5分間重合を25回繰り返した後、72°Cで7分間重合反応を行った。このように得られたPCR産物及びcj1プロモーター特許文献5が入っているpCL1920プラスミドに、それぞれEcoRV及びHindIIIの制限酵素を処理してクローニングした。クローニングされたプラスミドを用いて大腸菌のDH5αを形質転換した後、スペクチノマイシン50μg/mlを含むLBプレートにおいて形質転換された大腸菌のDH5αを選別してプラスミドを得た。得られたプラスミドをそれぞれpCL_Pcj1_metA及びpCL_Pcj1_metXdrと命名した。実施例2ホモセリンО-アセチルトランスフェラーゼ活性を有する変異型ポリペプチドの作製sitedirectedmutagenesiskitStratagene、米国を用いて、前記実施例1において作製したpCL_Pcj1_metAのプラスミドを鋳型とし、О-スクシニルトランスフェラーゼの111番のアミノ酸であるグリシンGlyをグルタミン酸Gluに置換した。使用したプライマー配列は、以下のとおりである。<配列番号5>5’ttgtaactggtgcgccgctggaactggtggggtttaatgatgtc3’<配列番号6>5’gacatcattaaaccccaccagttccagcggcgcaccagttacaa3’作製された変異のG111EmetAの遺伝子を含むプラスミドをpCL_Pcj1_metAELと命名した。また、前記О-スクシニルトランスフェラーゼの111番のアミノ酸をグリシンからグルタミン酸に置換し、さらに112番のアミノ酸をロイシンからスレオニンL112TまたはヒスチジンL112Hに置換した。このとき、使用したプライマー配列は、以下のとおりである。ロイシンをスレオニンに置換<配列番号7>5’tgtaactggtgcgccgctggaaaccgtggggtttaatgatgtcg3’<配列番号8>5’cgacatcattaaaccccacggtttccagcggcgcaccagttaca3’ロイシンをヒスチジンに置換<配列番号9>5’tgtaactggtgcgccgctggaacatgtggggtttaatgatgtcg3’<配列番号10>5’cgacatcattaaaccccacatgttccagcggcgcaccagttaca3’作製されたプラスミドのうち、111番のアミノ酸がグリシンからグルタミン酸に、112番のアミノ酸がロイシンからスレオニンに置換されたmetA遺伝子を含むプラスミドをpCL_Pcj1_metAETと命名した。同様に、111番のアミノ酸がグリシンからグルタミン酸に、112番のアミノ酸がロイシンからヒスチジンに置換されたmetA遺伝子を含むプラスミドをpCL_Pcj1_metAEHと命名した。実施例3フィードバック調節解除feedbackresistanceされたホモセリンアセチルトランスフェラーゼ活性を有する変異型ポリペプチドの作製前記実施例1において作製されたpCL_Pcj1_metAのプラスミドを鋳型とし、前記実施例2と同様の方法を用いてメチオニンに対するフィードバック調節が解除された特性を有するmetA遺伝子metA♯11を作製した。具体的に、特許文献3に開示された内容によって、О-スクシニルトランスフェラーゼの29番のアミノ酸をセリンからフロリンにS29P、114番のアミノ酸をグルタミン酸からグリシンにE114G、140番のアミノ酸をフェニルアラニンからセリンに置換F140Sした。このとき、使用したプライマー配列は、以下のとおりである。セリンをプロリンに置換<配列番号11>5’ATGACAACTTCTCGTGCGCCTGGTCAGGAAATTCG3’<配列番号12>5’CGAATTTCCTGACCAGGCGCACGAGAAGTTGTCAT3’グルタミン酸をグリシンに置換<配列番号75>5’CGCCGCTGGGCCTGGTGGGGTTTAATGATGTCGCT3’<配列番号14>5’AGCGACATCATTAAACCCCACCAGGCCCAGCGGCG3’フェニルアラニンをセリンに置換<配列番号15>5’CACGTCACCTCGACGCTGAGTGTCTGCTGGGCGGT3’<配列番号16>5’ACCGCCCAGCAGACACTCAGCGTCGAGGTGACGTG3’それぞれの前記変異を順次導入し、3種の変異を全て導入したmetA11遺伝子を含有したプラスミドを製造した後、pCL_Pcj1_metA11と命名した。以降、前記作製されたpCL_Pcj1_metA11のプラスミドを鋳型とし、前記実施例2のホモセリンО-アセチルトランスフェラーゼ活性を有する変異型ポリペプチドの変異を同様に有するポリペプチドを発現させるためのプラスミドを作製した。作製されたプラスミドのうち、111番のアミノ酸がグリシンからグルタミン酸に置換されたmetA11遺伝子を含んだプラスミドをpCL_Pcj1_metA11ELに、111番のアミノ酸がグリシンからグルタミン酸に、112番のアミノ酸がロイシンからスレオニンに置換されたmetA11遺伝子を含んだプラスミドをpCL_Pcj1_metA11ETに、111番のアミノ酸がグリシンからグルタミン酸に、112番のアミノ酸がロイシンからヒスチジンに置換されたmetA11遺伝子を含むプラスミドをpCL_Pcj1_metA11EHと命名した。実験例1:大腸菌のホモセリンスクシニルトランスフェラーゼ及びフィードバック調節解除された大腸菌のホモセリンスクシニルトランスフェラーゼの相同性の比較大腸菌の変異体variantsEcoliO9:H4strainHS、EcoliO139:H28strainE24377A、及びEcoliO157:H7、EcolistrainATCC8739において示されるホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼのアミノ酸の一次配列[順に、配列番号41、配列番号42、配列番号43]をCLCMainWorkbenchCLCbio、デンマークプログラムを用いて比較してみた。比較の結果、図2に示すように、大腸菌の変異体において示されるホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼのアミノ酸の一次配列は5未満の変異が現れることが分かった図2。また、メチオニンに対するフィードバック調節が解除された変異ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼのアミノ酸の一次配列も、前記プログラムを用いて比較してみた。比較した一次配列は、野生型ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼ、特許文献3に開示されたフィードバック調節解除された変異ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼmet10A、met11A、及び特許文献4に開示されたフィードバック調節解除された変異ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼである。比較の結果、図3及び図4に示すように、メチオニンに対するフィードバック調節が解除された変異ホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼのアミノ酸の一次配列は5未満の変異が存在することが分かった図3及び図4。このような結果は、大腸菌に存在するホモセリンО-スクシニルトランスフェラーゼのポリペプチドは、相互間に95以上の相同性を有しており、5未満の配列差にもかかわらず、ホモセリンスクシニルトランスフェラーゼの活性には、大きな差がないことが示される。実験例2:ホモセリンアセチルトランスフェラーゼ活性を有する変異型ポリペプチドの基質特異性及び活性比較試験2-1:実験菌株の作製2-1-1metA及びmetA遺伝子の欠損О-アセチルホモセリンを過量生産する変異型ポリペプチドの活性を比較するために、ホモセリンを蓄積し、生産されたО-アセチルホモセリンの利用性が欠損した菌株を作製した。前記菌株の作製は、特許文献7に明記されたスレオニン生産菌株であるFTR2533KCCM10541菌株に基づいて、特許文献8に開示された実施例1-1乃至1-4の方法で、metA及びmetA遺伝子が欠損した菌株を作製し、CJM2と命名した。CJM2は、菌株内にホモセリンが過量蓄積され、導入される遺伝子により、О-アセチルホモセリンまたはО-スクシニルホモセリンを生産可能な菌株である。2-1-2acspromoterの交替О-アセチルホモセリンを過量生産するために、大腸菌内にホモセリンとアセチルCoAの生成が円滑でなければならない。第一に、アセチルCoAの供給を円滑にするために、acsacetyl-coAsynthetase遺伝子のプロモータを配列番号30の構成的発現プロモータconstitutivepromoterであるproに置換し、目的遺伝子の常時過剰発現を誘導した。前記プロモータの交替のために、FRT-one-stepPCRの変形された方法を用いた非特許文献5。図5に示すようなカセットを作製するために、配列番号31と配列番号33を用いて、pKD3PNASvol9766406645由来のクロラムフェニコール耐性遺伝子FRTカセットをPCRし、配列番号32と配列番号34を用いたproプロモーター領域をPCRし、両PCRの結果物をOverlappingPCR法を用いて、一つのカセットacsプロモータ欠損-proプロモータ交替カセットとして作製した非特許文献6。変性段階は94°Cで30秒、アニーリング段階は55°Cで30秒、延長段階は72°Cで1分間実施し、これを30回行った。<配列番号31>5’AGGGGCTTCATCCGAATTGCGCCATTGTTGCAATGGCGGTGCTGGAGCTGCTTCGAAGTTC3’<配列番号32>5’GATATTCATATGGACCATGGCTCGAGCATAGCATTTTTATCC3’<配列番号33>5’GGATAAAAATGCTATGCTCGAGCCATGGTCCATATGAATATC3’<配列番号34>5’CGATGTTGGCAGGAATGGTGTGTTTGTGAATTTGGCTCATATGTACCTTTCTCCTCTTTA3’その結果、得られたPCR産物を1.0アガロースゲルにおいて電気泳動した後、約1.2kbpサイズのバンドからDNAを精製した。回収されたDNA切片は、pKD46ベクター非特許文献5に予め形質転換させたCJM2菌株にエレクトロポレーションした。エレクトロポレーションのために、pKD46に形質転換されたCJM2菌株は、100μg/Lのアンピシリンと5mMのアラビノースl-arabinoseが含まれたLB培地を用いて、30°CでОD600=0.6まで培養させた後、滅菌蒸留水で1回、10グリセロールで2回洗浄して使用した。エレクトロポレーションは、2500Vで加えた。回収された菌株を25μg/Lのクロラムフェニコールを含んだLB平板培地に塗抹し、37°Cで一晩培養した後、耐性を示す菌株を選別した。選別された菌株を鋳型とし、同一のプライマーを用いて同じ条件でPCRした後、1.0アガロースゲル上において、遺伝子のサイズが1.2Kbであることを確認し、これにより、acsプロモーターの欠損及びproプロモーターへの交替を確認した。確認された菌株は、さらにpCP20ベクター非特許文献5に形質転換させ、LB培地で培養し、さらに同様の条件のPCRによって、1.0アガロースゲル上において、遺伝子のサイズが150bpと小さくなった最終のacsプロモーターの欠損及びproプロモーターへの交替菌株を作製し、クロラムフェニコールマーカーが除去されたことが確認された。作製された菌株をCJM2-APと命名した。2-1-3フィードバック抵抗性coaA代替前記CJM2-AP菌株において、feedbackresistantcoaA形質を有するようにするために、w3110gDNAを鋳型とし、制限酵素EcoRIが含まれた配列番号35及び配列番号36のプライマーを用いたPCRを行い、パントテン酸キナーゼをコードするcoaA遺伝子を確保した。重合酵素は、PfuUltraTMの信頼性の高いDNAポリマラーゼStratageneを使用し、PCR条件は、変性96°C、30秒;アニーリング50°C、30秒;及び重合反応72°C、2分を30回繰り返した。前記の方法で得られたcoaA遺伝子及びpSG76CプラスミドJOURNALOFBACTERIOLOGYJuly199744264428にそれぞれEcoRI制限酵素を処理した後、連結した。前記方法で作製されたプラスミドを用いて、大腸菌のDH5αに形質転換した後、クロラムフェニコール25μg/mlを含むLBプレートにおいて、形質転換された大腸菌のDH5αを選別し、pSG-76C-coaAを得た。<配列番号35>5’ATGAGTATAAAAGAGCAAAC3’<配列番号36>5’TTATTTGCGTAGTCTGACC3’前記で得られたpSG-76C-coaAを用いてsitedirectedmutagenesisStratagene、米国法で、配列番号37及び配列番号38のプライマーを用いてpSG-76C-coaAR106Aを作製した。<配列番号37>5’GGAAAAGTACAACCGCCgccGTATTGCAGGCGCTATT3’<配列番号38>5’AATAGCGCCTGCAATACggcGGCGGTTGTACTTTTCC3’CJM2-AP菌株に前記pSG76C-coaAR106Aプラスミドを形質転換し、LB-CmYeastextract10gL、NaCl5gL、Tryptone10gL、クロラムフェニコール25μgL培地において培養した後、クロラムフェニコール耐性を有するコロニーを選抜した。選抜された形質転換体は、pSG76c-coaAR106Aが遺伝体内のcoaA部分に1次で挿入された菌株である。確保されたcoaAR106A遺伝子が挿入された菌株をpSG76c内に存在するI-SceI部分を切断する制限酵素I-SceIを発現するベクターであるpASceP非特許文献3に形質転換し、LB-ApYeastextract10g/L、NaCl5g/L、Tryptone10g/L、Ampicilline100μg/Lにおいて生長する菌株を選別した。選別された菌株において配列番号35及び配列番号36のプライマーを用いてcoaA遺伝子を増幅し、増幅された遺伝子は、マクロジェン韓国シークエンスサービスを通じて、coaAR106に交替されたことが確認された非特許文献4。このように作製された菌株は、CJM2-APCOと命名した。CJM2-APCO菌株は、ホモセリンだけでなく、Acetyl-coApoolが過量増加されている特性を示す菌株である。2-1-4ホモセリン生合成経路のkey遺伝子コピー数CJM2またはCJM2-APCO菌株は、ホモセリンが過量生産される菌株であるが、ホモセリンの生産性をより向上させるために、ppc、aspC、asdの三つの遺伝子のコピー数の増幅を試みた。特許文献6の実施例<1-1>乃至<1-3>に開示された方法であり、pSG76c-2ppc、pSG76c-2aspC、pSG76c-2asdのプラスミドを作製し、CJM2-APCO菌株に前記プラスミドを作製し、実施例<1-5>の方法で、前記三つの遺伝子を順次に2コピー増幅された菌株を作製した。このように作製された菌株は、CJM3と命名した。CJM3は、菌株内にホモセリンがCJM2菌株に比べてさらに過量蓄積され、導入されるプラスミドにより、О-アセチルホモセリンまたはО-スクシニルホモセリンを生産することができる菌株である。2-2:実験方法及び実験結果CJM2とCJM3の2種の菌株をコンピテント細胞で作製し、コンピテント細胞に電気穿孔法electroporationで、pCL_Pcj1_metX、pCL_Pcj1_metA、pCL_Pcj1_metAEL、pCL_Pcj1_metAEH、pCL_Pcj1_metAET、pCL_Pcj1_metA11、pCL_Pcj1_metA11EL、pCL_Pcj1_metA11EH、pCL_Pcj1_metA11ETの9種のプラスミドをそれぞれ導入した。このうち、pCL_Pcj1_metA11EL、pCL_Pcj1_metA11EH、及びpCL_Pcj1_metA11ETが導入されたCJM2菌株を、それぞれCA05-0546、CA05-0547及びCA05-0548と命名し、2010年12月14日に韓国微生物保存センターに寄託し、それぞれ寄託番号KCCM11145P、KCCM11146P、及びKCCM11147Pを付与された。また、pCL_Pcj1_metA11EL、pCL_Pcj1_metA11EH、及びpCL_Pcj1_metA11ETが導入されたCJM3菌株を、それぞれCA05-0578、CA05-0579及びCA05-0580と命名し、2011年12月12日に韓国微生物保存センターに寄託し、それぞれ寄託番号KCCM11228P、KCCM11229P、及びKCCM11230Pを付与された。以降、9種のプラスミドが導入されたそれぞれの菌株が生産するメチオニン前駆体の種類と生産量を比較するために、フラスコテストを行った。フラスコテストは、それぞれの菌株をLBプレートにおいて線条接種streakingし、31°Cの培養器に16時間の間培養してから、単一コロニーをLB培地の3mlに接種した後、200rpm/31°Cま培養器において16時間の間培養することにより行った。250mlフラスコに、表1のメチオニン前駆体の生産培地25mlを入れ、予め培養した培養液を500μlずつ投入した。以降、フラスコを200rpm/31°Cの培養器において40時間の間培養した後、HPLCを用いて、それぞれのプラスミドが導入された菌株から得られるメチオニン前駆体の種類及び量を比較し、その結果を表2CJM2系菌株についての結果及び表3CJM3系菌株についての結果に示した。その結果、表2及び表3に示すように、野生型metA遺伝子を含むpCL_Pcj1_metAwtによっては、О-スクシニルホモセリンのみが生産されたが、本発明による3種の変異metA遺伝子を含む菌株によっては、О-アセチルホモセリンのみが蓄積されることが確認された。すなわち、ホモセリンスクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドのアミノ酸を置換することにより、ポリペプチドの活性がホモセリンアセチルトランスフェラーゼに変更されたことが確認された。また、CJM3系菌株において、前記3種の変異のうち、アミノ酸配列111番がグルタミン酸に置換された場合ELは、О-アセチルホモセリンの生産量が2.1g/Lであったが、さらに、112番のアミノ酸がヒスチジンに置換された場合EHは、3.2g/LのО-アセチルホモセリンが生産され、最も多量のО-アセチルホモセリンが生産されたことが確認された。メチオニンに対するフィードバック調節が解除されたホモセリンアセチルトランスフェラーゼ活性を有する変異型ポリペプチドを発現する菌株でも、同一の傾向性を示した。具体的に、メチオニンに対するフィードバック調節が解除され、111番及び112番のアミノ酸がそれぞれグルタミン酸及びヒスチジンに置換されたmetA♯11EH遺伝子を導入した菌株において、24.8g/Lの最も多量のО-アセチルホモセリンが生産されており、これにより、外来遺伝子としてホモセリンアセチルトランスフェラーゼを導入した場合CJM3pCL_Pcj1_metX、23.7gLに類似した水準にО-アセチルホモセリンが蓄積されることを確認することができた。