"一般式I式中、R1は、ヒドロキシ基、C1-10アルコキシ基および式:-CH2CH2On-X式中、nは1~10の整数を表し、Xはハロゲン原子を表す。からなる群から選択される、R2は、式:-NRaRb式中、RaおよびRbは、それぞれ独立して水素原子及びC1-3アルキル基のいずれかを表す。で示される基である、R3、R4、R5、R6、R7及びR8は、各々独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、C1-4アルキル基、およびC1-4アルコキシ基からなる群から選択されるで表される化合物またはその薬学的に受容可能な塩。一般式II式中、R1は、ヒドロキシ基、C1-10アルコキシ基および式:-CH2CH2On-X式中、nは1~10の整数を表し、Xはハロゲン原子を表す。からなる群から選択される、R2は、式:-NRaRb式中、RaおよびRbは、それぞれ独立して水素原子及びC1-3アルキル基のいずれかを表す。で示される基であるで表される、請求項1記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。R1が、ヒドロキシ基、C1-3アルコキシ基および式:-CH2CH2On-X式中、nは1~10の整数を表し、Xはハロゲン原子を表す。からなる群から選択される、請求項2記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。R1が、-CH2CH2On-X式中、nは1~10の整数を表し、Xはハロゲン原子を表す。である、請求項1または2記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。nが1~5の整数である、請求項4記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。XがFである、請求項4記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。化合物が下記の式のものである、請求項1記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。化合物が下記の式のものである、請求項1記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。R1がC1-10アルコキシ基である、請求項1または2記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。R1がC1-3アルコキシ基である、請求項1または2記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。放射性核種で標識されている、請求項1~10いずれかに記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。放射性核種が、11C、18F、123I、124I、125I、64Cu、67Ga、68Ga、又は99mTc、である請求項11記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。18Fにて標識されている、請求項12記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。下記の式で表される、請求項13記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。下記の式で表される、請求項13記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。99mTcにて標識されている、請求項12記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。下記の式で表される、請求項16記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。下記の式で表される、請求項16記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩。請求項11~18のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩を含有する、アミロイド関連疾患診断用組成物。アミロイド関連疾患が、アルツハイマー病、地中海熱、マックル-ウェルズ症候群、突発性骨髄腫、アミロイド多発性神経障害、アミロイド心筋症、全身性老年性アミロイドーシス、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血、ダウン症候群、スクラピー、クロイツフェルト-ヤーコプ病、クールー、ゲルストマン-シュトロイスラー-シャインカー症候群、甲状腺の髄様癌、孤立心房性アミロイド、透析患者におけるβ2-ミクログロブリンアミロイド、封入体筋炎、筋消耗病におけるβ2-アミロイド沈着、およびランゲルハンス島II型糖尿病インスリノーマからなる群から選択される、請求項19記載の組成物。請求項11~18のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩を含む、アミロイドプラークの画像化剤。以下:a.請求項11~18のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に受容可能な塩の検出可能な量を哺乳動物に導入する工程;b.該化合物がアミロイドプラークに結合するのに十分な時間放置する工程;およびc.1つ以上のアミロイドプラークに結合した化合物を検出する工程、を包含する、アミロイドプラークを画像化するための方法。本発明は、インビボにおけるβアミロイドプラークの画像化に適する、ピリジルベンゾフラン誘導体を提供することを目的とする。本発明者らは、フェニルベンゾフランのフェニル基をピリジル基と置換することにより、親油性の低い新規なフッ化ピリジルベンゾフラン誘導体を開発することを試みた。18Fにより誘導体を標識するためのコア構造のフルオロ-ペグ化FPEGという新しいアプローチが、Kungらにより開発されている非特許文献25。このアプローチは、親油性を大幅に増大させることなく標的に18Fを組み込む単純かつ簡便な方法を提供することから、本発明者らはピリジルベンゾフラン誘導体の標識のためにFPEGを選択した。本発明者らは、フルオロポリエチレングリコール側鎖とジメチルアミノピリジル基を有する新規なフッ化リガンドである5-5-2-2-2-フルオロエトキシエトキシエトキシベンゾフラン-2-イル-N,N-ジメチルピリジン-2-アミンFPYBF-1図2をはじめとして、数種のピリジルベンゾフラン誘導体を合成した。そして、初めてピリジルベンゾフラン誘導体の放射性標識に成功し、インビボでのβ-アミロイドプラークの画像化について評価を行い、本発明を完成した。すなわち、本発明は、一般式I式中、R1は、ヒドロキシ基、C1-10アルコキシ基および式:-CH2CH2On-X式中、nは1~10の整数を表し、Xはハロゲン原子を表す。からなる群から選択される、R2は、式:-NRaRb式中、RaおよびRbは、それぞれ独立して水素原子及びC1-3アルキル基のいずれかを表す。で示される基である、R3、R4、R5、R6、R7及びR8は、各々独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、C1-4アルキル基、およびC1-4アルコキシ基からなる群から選択されるで表される化合物またはその薬学的に受容可能な塩を提供する。本発明はまた、一般式II式中、R1は、ヒドロキシ基、C1-10アルコキシ基および式:-CH2CH2On-X式中、nは1~10の整数を表し、Xはハロゲン原子を表す。からなる群から選択される、R2は、式:-NRaRb式中、RaおよびRbは、それぞれ独立して水素原子及びC1-3アルキル基のいずれかを表す。で示される基であるで表される前記化合物またはその薬学的に受容可能な塩を提供する。本発明はまた、放射性核種で標識されている、前記いずれかの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を提供する。本発明はまた、放射性核種で標識されている前記いずれかの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を含有する、アミロイド関連疾患診断用組成物を提供する。本発明はまた、放射性核種で標識されている前記いずれかの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を含む、アミロイドプラークの画像化剤を提供する。本発明はまた、以下:a.放射性核種で標識されている前記いずれかの化合物またはその薬学的に受容可能な塩の検出可能な量を哺乳動物に導入する工程;b.該化合物がアミロイドプラークに結合するのに十分な時間放置する工程;およびc.1つ以上のアミロイドプラークに結合した化合物を検出する工程、を包含する、アミロイドプラークを画像化するための方法を提供する。本発明により、脳組織中のアミロイドプラークを画像化すること、およびアルツハイマー病をはじめとするアミロイドタンパク質凝集体の存在を特徴とする疾患を診断することが可能となった。本発明の化合物は、一般式I式中、R1は、ヒドロキシ基、C1-10アルコキシ基および式:-CH2CH2On-X式中、nは1~10の整数を表し、Xはハロゲン原子を表す。からなる群から選択される、R2は、式:-NRaRb式中、RaおよびRbは、それぞれ独立して水素原子及びC1-3アルキル基のいずれかを表す。で示される基である、R3、R4、R5、R6、R7及びR8は、各々独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、C1-4アルキル基、およびC1-4アルコキシ基からなる群から選択されるで表される。好ましい態様において、本発明の化合物は一般式II式中、R1は、ヒドロキシ基、C1-10アルコキシ基および式:-CH2CH2On-X式中、nは1~10の整数を表し、Xはハロゲン原子を表す。からなる群から選択される、R2は、式:-NRaRb式中、RaおよびRbは、それぞれ独立して水素原子及びC1-3アルキル基のいずれかを表す。で示される基であるである。C1-10アルコキシ基としては、例えば、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、sec-ブトキシ基、tert-ブトキシ基、ペンチル基などが挙げられる。C1-4アルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、sec-ブチル基、tert-ブチル基が挙げられる。ハロゲン原子としては、F、Cl、Br、Iが挙げられる。好ましい態様において、XはFである。好ましい態様において、-NRaRbは、-NH2、-NHCH3または-NCH32である。ある態様において、R1は、-CH2CH2On-X式中、nは1~10の整数を表し、Xはハロゲン原子を表す。である。nは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、および10から選択される整数である。好ましい態様において、nは1~3、1~4、または1~5の整数を表す。本発明の好ましい化合物は、下記式で表されるFPYBF-1またはFPYBF-2である。FPYBF-1FPYBF-2別の態様において、R1は、C1-10アルコキシ基、好ましくはC1-5アルコキシ基である。この態様の別の局面において、R1は、C1-3アルコキシ基である。本発明の化合物は、以下の実施例の記載、またはChengetalBioorgMedChemLett206141442010およびOnoetalJMedChem54297129792011の記載にしたがって合成することができる。本発明において、化合物が放射性核種で標識されているとは、化合物中の1以上の原子が同じ原子番号を有するが質量数の異なるその放射性同位体と置換されているか、あるいは化合物に放射性核種が結合されていることを意味する。化合物中の原子の放射性同位体としては、H、C、N、O、F、Cl、Br、Iの放射性同位体である2H、3H、11C、13C、14C、15C、15O、18F、36Cl、75Br、76Br、77Br、123I、124I、125I、が挙げられ、中でも11Cおよび18Fが好ましい。本発明の化合物に結合される放射性核種としては、64Cu、67Ga、68Ga、又は99mTcが挙げられ、中でも99mTcが好ましい。これら放射性核種は、各放射性核種について一般的に用いられている方法により、本発明の化合物中の原子と置換することができ、また本発明の化合物に結合させることができる。99mTcは通常、錯体の形で非標識化合物に結合される。99mTcを含む錯体としては、2-ヒドラジノピリジンを含む錯体LiuSetalBioconjugChem1996JanFeb76371、N-2-メルカプトエチル-2-2-メルカプトエチルアミノ-アセトアミドを含む錯体ZhenWetalJMedChem1999Jul2942280515、2,2’-1,2-エタンジイルジイミノビスエタンチオールを含む錯体OyaSetalNuclMedBiol1998Feb2513540、トリカルボニル錯体SchibliRetalBioconjugChem2000MayJun1134551などが挙げられるこれら文献は引用により本明細書に含まれる。本発明の好ましい標識化合物は、以下である。[18F]FPYBF-1[18F]FPYBF-2[99mTc]BAT-Bp[99mTc]BAT-Bp-5薬学的に受容可能な塩としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、硫酸塩、塩酸塩、硝酸塩、リン酸塩などが挙げられるが、これらに限定されない。本発明はまた、放射性核種で標識されている本発明の化合物またはその薬学的に受容可能な塩を含む、アミロイド関連疾患診断用組成物に関する。本発明におけるアミロイド関連疾患とは、アミロイドタンパク質凝集体の存在が観察される疾患を意味する。本発明の化合物はβシート構造をとるタンパク質に結合することから、本発明におけるアミロイド関連疾患には、β-アミロイドの他、タウ、αシヌクレイン、プリオンなどの、βシート構造をとるアミロイドタンパク質の凝集体の存在が観察される疾患が含まれる。具体的には、本発明におけるアミロイド関連疾患としては、アルツハイマー病、地中海熱、マックル-ウェルズ症候群、突発性骨髄腫、アミロイド多発性神経障害、アミロイド心筋症、全身性老年性アミロイドーシス、アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血オランダ型またはアイスランド型アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血を含む、ダウン症候群、スクラピー、クロイツフェルト-ヤコプ病、クールー、ゲルストマン-シュトロイスラー-シャインカー症候群、甲状腺の髄様癌、孤立心房性アミロイド、透析患者におけるβ2-ミクログロブリンアミロイド、封入体筋炎、筋消耗病におけるβ2-アミロイド沈着、およびランゲルハンス島II型糖尿病インスリノーマが挙げられる。中でも、本発明の診断用組成物は、β-アミロイドAβ凝集体の存在が観察される疾患、例えばアルツハイマー病、オランダ型アミロイドーシスを伴う遺伝性脳出血、およびダウン症候群に特に好適である。また、一般には疾患と認識されない疾患の前駆症状も、本発明におけるアミロイド関連疾患に含まれる。このような疾患の前駆症状としては、アルツハイマー病の発症前にみられる軽度認知障害MCIなどを例示できる。本発明の組成物によるアミロイド関連疾患の診断は、通常、本発明の組成物を診断対象者又は実験動物などに投与し、その後、脳の画像を撮影し、画像における本発明の化合物の状態量、分布等を観察することにより行う。本発明の組成物は、コンピューター断層撮影法SPECTにより診断を行う場合、123I、67Ga、または99mTcなどのγ線放出核種で標識された化合物を含んでいればよく、また陽電子断層撮影法PETにより診断を行う場合、11C、13N、15O、18F、62Cu、68Ga、または76Brなどの陽電子放出核種で標識された化合物を含んでいればよい。本発明の組成物の投与方法は特に限定されず、化合物および放射性核種の種類や、対象者の状態に応じて適宜決定されるが、通常、皮内、腹腔内、静脈、動脈、又は脊髄液への注射又は点滴によって投与する。本発明の組成物の投与量もまた、化合物および放射性核種の種類や対象者の状態に応じて適宜決定されるが、例えば成人の場合、本発明の化合物を1日当たり10-10~10-3mg、好ましくは10-8~10-5mg投与すればよい。本発明の組成物は、通常注射又は点滴によって投与されるので、本発明の化合物またはその薬学的に受容可能な塩に加えて、注射液や点滴液に通常含まれる成分を含んでいてもよい。このような成分としては、液体担体例えば、リン酸カリウム緩衝液、生理食塩水、リンゲル液、蒸留水、ポリエチレングリコール、植物性油脂、エタノール、グリセリン、ジメチルスルホキサイド、プロピレングリコール、抗菌剤、局所麻酔剤例えば、塩酸プロカイン、塩酸ジブカイン、緩衝液例えば、トリス-塩酸緩衝液、ヘペス緩衝液、浸透圧調節剤例えば、グルコース、ソルビトール、塩化ナトリウムを例示できる。本発明はまた、放射性核種で標識されている本発明の化合物またはその薬学的に受容可能な塩を含む、アミロイドプラークの画像化剤に関する。アミロイドプラークは、βシート構造をとるアミロイドタンパク質が凝集して形成される。アミロイドタンパク質としては、β-アミロイド、タウ、αシヌクレイン、プリオンが挙げられるが、本発明の画像化剤はβ-アミロイドにより形成されるアミロイドプラークの画像化に特に好適である。本発明のアミロイドプラークの画像化剤は、アミロイド関連疾患診断用組成物と同様に調製し、使用することができる。本発明はまた、a.放射性核種で標識されている本発明の化合物またはその薬学的に受容可能な塩の検出可能な量を哺乳動物に導入する工程;b.該化合物がアミロイドプラークに結合するのに十分な時間放置する工程;およびc.1つ以上のアミロイドプラークに結合した化合物を検出する工程、を包含する、アミロイドプラークを画像化するための方法に関する。哺乳動物としては、ヒト、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、サルが挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、哺乳動物はヒトである。放射性核種による標識および標識化合物の検出は、前述のとおり行えばよい。すなわち、検出にはSPECTおよびPETを利用することができ、放射性核種は検出方法に応じて選択すればよい。また、哺乳動物への導入も、アミロイド関連疾患診断用組成物について記載のとおり行えばよい。放射性核種で標識されている本発明の化合物またはその薬学的に受容可能な塩の検出可能な量および該化合物がアミロイドプラークに結合するのに十分な時間は、対象とする哺乳動物、並びに使用する化合物および検出方法に応じて当業者が適宜決定可能である。例えば、対象とする哺乳動物に様々な濃度の標識化合物を導入し、導入後の様々な時点でこの標識化合物を選択した検出方法で検出することによって、これらの量および時間を決定することができる。以下、実施例により本発明をさらに説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。[実施例1]FPYBF11.FPYBF1の合成FPYBF1の合成をスキーム1に示す。スキーム1試薬および条件:Pd4Na2CO3ジオキサン還流パラホルムアルデヒドシアノ水素化ホウ素ナトリウム酢酸室温BBr3CH2Cl2室温22エトキシエトキシK2CO3DMF100°CDASTDME0°C塩化トシルピリジン室温。5ピリジン2アミン5メトキシベンゾフラン2ボロン酸、2アミノ5ヨードピリジン、およびPd42MNa2CO3ジオキサン中の溶液を還流下で一晩撹拌した。混合物を室温まで冷却し、1MNaOHを添加した。酢酸エチルで抽出後、有機層をNa2SO4で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、374mgの化合物1を得た。1HNMRδ385467659676682707736786867MSmz2415NNジメチルピリジン2アミン化合物1、パラホルムアルデヒド、およびシアノ水素化ホウ素ナトリウム酢酸中の混合物を室温で一晩撹拌し、次いで100mLの水に注いだ。炭酸水素ナトリウムを添加して、pHを89に調節した。酢酸エチルによる抽出操作の後、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、249mgの化合物2を得た。1HNMRδ315385659676682707736786867MSmz2692ピリジン3イルベンゾフラン5オールBBr3を化合物2CH2Cl2中の溶液に氷浴中で滴下した。混合物を室温まで温め、1時間撹拌した。反応混合物を氷浴中で冷却しながら水を添加した。酢酸エチルで抽出後、有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、234mgの化合物3を得た。1HNMRδ315489659676682707736786867MSmz2552ピリジン3イルベンゾフラン5イルオキシエトキシエトキシエタノール化合物3および22エトキシエタノールDMF中の溶液に無水K2CO3を添加した。反応混合物を18時間100°Cで撹拌し、水中に注いだ。クロロホルムで抽出後、有機層をあわせてNa2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させて残渣を得て、これをシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、204mgの化合物4を得た。1HNMRδ315360364369372385389416419659676682707736786867MSmz3875エトキシエトキシベンゾフラン2イルNNジメチルピリジン2アミン化合物412ジメトキシエタン中の溶液にDASTを乾燥氷-アセトン浴中で添加した。反応混合物を1時間室温で撹拌し、飽和NaHSO3溶液に注いだ。クロロホルムで抽出後、有機層を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濾過した。残渣を予備的TLCにより精製して、62mgの化合物5を得た。1HNMRδ315369372385389416420449452460463659676682707736786867HRMSmzcalcdforC21H25FN2O43881798found38717902ピリジン3イルベンゾフラン5イルオキシエトキシエトキシエチル4メチルベンゼンスルホナート化合物4ピリジン中の溶液に塩化トシルを添加した。反応混合物を3時間室温で撹拌した。酢酸エチルで抽出後。有機層をNa2SO4で乾燥させた。溶媒を蒸発させ残渣を得て、これを予備的TLCにより精製して、233mgの化合物6を得た。1HNMRδ241315371385389416420659676682707736786867HRMSmzcalcdforC28H32N2O7S5401930found54019272.インビトロにおけるAβ凝集体に対する結合試験FPYBF1のAβ凝集体に対する親和性を評価するため、常法にしたがい非特許文献29,30、125IIMPYをリガンドとして用いて溶液中で結合試験を行った。Aβは、株式会社ペプチド研究所から購入した。このペプチドを、10mMリン酸ナトリウムおよび1mMEDTAを含む緩衝液に穏やかに溶解することにより凝集させた。この溶液を、37°Cで42時間穏やかに持続的に振盪しながらインキュベートした。50μLのFPYBF1、50μLの002nM125IIMPY、50μLのAβ凝集体、および850μLの10EtOHを含む混合物を室温で3時間インキュベートした。次いで、この混合物をWhatmanGFB濾紙によりBrandelM24cellharvesterを用いて濾過し、結合した125Iリガンドを含む濾紙の放射能をγカウンターにより測定した。50阻害濃度の値を、3つの独立した実験の置換曲線からGraphPadPrism50を用いて決定し、阻害定数の値をChengPrusoff式KiIC50式中、Lは試験に使用した125IIMPYの濃度であり、KdはIMPYの解離定数であるにより計算した。FPYBF1は125IIMPYの結合を用量依存的にKi値09nMにて阻害した。これは、FPYBF1がAβ凝集体に対して優れた親和性を有することを示唆する。FPYBF1のKi値は、既報のフェニルベンゾフラン誘導体のKi値非特許文献21と同様であり、ピリジルベンゾフラン誘導体のAβ凝集体に対する親和性はフェニル基をピリジル基で置換しても依然として高かった。この結果はまた、ベンゾフラン骨格が高度の構造改変に耐えうることを示す非特許文献21,22,31。3.18F標識FPYBF1の製造試薬および条件:Kryptofix222K2CO3アセトニトリル120°C。18Fフッ化物は、サイクロトロンにより18O18F反応を介して製造し、18Oに富む水における水溶液としてSepPakLightQMAカートリッジに通した。このカートリッジをN2により乾燥させ、18F活性を10mLのKryptofix222K2CO3溶液中に含むにより溶出した。溶媒を120°Cでアルゴンガス流下除去した。残渣を、1mLの無水アセトニトリルを用いて共沸により120°Cにおいて窒素ガス流下で2回乾燥させた。トシル前駆体6アセトニトリル中の溶液を、18F活性を含む反応容器に添加した。この混合物を120°Cで10分間加熱した。水を添加し、混合物を調整済みのOasisHLBカートリッジに通した。このカートリッジを10mLの水で洗浄し、標識化合物を2mLのアセトニトリルで溶出した。溶出された化合物を予備的HPLCYMCPackProC18カラムアセトニトリル水流速30mL分により精製した。所望の18F標識産物の保持時間は100分である。放射化学的純度および特異的活性を、分析用HPLCYMCPackProC18カラムアセトニトリル水流速10mL分で測定し、18FFPYBF1を放射化学的純度>99、特異的活性242GBqμmolで得た。特異的活性は、精製18F標識化合物のUVピーク強度を既知の濃度の参照用非放射性化合物と比較することにより評価した。4.正常マウスにおける生体内分布脳における18FFPYBF1の取り込みを評価するため、正常マウスにおいて生体内分布実験を行った。動物実験は、施設ガイドラインに沿って実施し、京都大学動物実験委員会に許可された。イソフルレンでの麻酔下、ddYマウスの尾静脈に直接、100μLの18FFPYBF1含有01BSA溶液を注射した。これらマウスを、注射後2、10、30、および60分の時点で殺した。対象の臓器を取り出し、重量を計測し、放射能を自動ガンマカウンターにより測定した。サンプルの放射線量gは、サンプルのカウントを希釈した初期放射線量と比較することで計算した。結果を表1に示す。18FFPYBF1は、注射2分後にPETに十分な高い取り込みを示し、脳における放射能は時間とともに消失した。正常な脳組織は18FFPYBF1を捕捉するβ-アミロイドプラークを有さないことから、放射能は非常に迅速に排出されるべきである。それゆえ、正常な脳からの18FFPYBF1の迅速なクリアランスは、FPYBF1がAD脳におけるβ-アミロイドプラークの検出に適することを示している。インビボで適切な動態を有するリガンドを選択する一つの方法は、排出率の比較のため脳2分脳60分比brain2minbrain60minratioを指標として使用することである非特許文献32。18FFPYBF1の脳2分脳60分比は、18FBAY949172非特許文献14や18FAV45非特許文献16よりも低いが、既報の18FFPHBF1の値非特許文献21と比較して改善されていた。この18FFPYBF1の好ましいインビボの薬物動態は、18FFPHBF1のフェニル基をピリジル基に変更することにより達成された。HPLC解析において、18FFPYBF1と18FFPHBF1の保持時間はそれぞれ148分と365分であり、これは18FFPYBF1の親油性が18FFPHBF1よりも低いことを示唆する。親油性は化合物の脳内への取り込みに影響する因子の一つに過ぎないが非特許文献4、脳における18FFPYBF1の好ましい薬物動態を説明しうる。60分の時点での骨への取り込みは減少しており、これはインビボでの脱フッ素化が殆どなく、画像化への干渉が比較的小さいと期待されることを示唆する。5.インビトロオートラジオグラフィー次に、ADおよび対照の被験者由来の脳組織切片を用いて、18FFPYBF1のβアミロイドプラークへの特異的結合を確認した。AD患者および対照被験者の死後脳切片を18FFPYBF1と1時間室温でインキュベートした。次いで、切片を飽和Li2CO340EtOH中に浸漬し、40EtOHで洗浄し、そして水で30秒すすいだ。乾燥後、18F標識切片をBAS画像化プレートに一晩暴露した。オートラジオグラフィーの画像をBAS5000スキャナーシステムにより得た。結果を図4に示す。オートラジオグラフィーの画像から、ADの脳ではβ-アミロイドプラークが広範囲にわたり標識される図4Aが、対照の脳では標識されない図4Bことがわかった。この結果は、18FFPYBF1が、合成のAβ凝集体に加えて、β-アミロイドプラークにも親和性を示すことを示唆する。6.18FFPYBF1によるインビボプラーク標識生体脳組織におけるβ-アミロイドプラークの画像化のためのプローブとしての18FFPYBF1の可能性をさらに明らかにするため、Tg2576マウスと年齢適合対照としての野生型マウスとにおいて、エクスビボでオートラジオグラフィーを行った。Tg2576トランスジェニックマウスは、帯状皮質、歯状回、海馬CA1野に1113月齢までに顕著なAβ沈着を示し非特許文献33、β-アミロイドプラークの特異的結合を評価するためにインビトロおよびインビボの実験で頻繁に使用されている非特許文献28,34,35。Tg2576トランスジェニックマウスと野生型マウスとをそれぞれアルツハイマー病モデルと年齢適合対照として使用した。1イソフルレンで麻酔後、111MBqの18FFPYBF1200μLの01BSA溶液中を尾静脈から注射した。これら動物を30分間回復させ、次いで断頭により殺した。脳を直ちに取り出し、ドライアイスヘキサン浴中で凍結した。20μmの切片を切断し、BAS画像化プレートに一晩暴露した。このようにしてエクスビボのフィルムオートラジオグラムを得た。オートラジオグラフィー実験の後、同じ切片をチオフラビンSで染色し、β-アミロイドプラークの存在を確認した。チオフラビンSの染色のため、切片を0125チオフラビンS溶液50EtOH含有に3分間浸漬し、50EtOH中で洗浄した。乾燥後、次いでB2Aフィルターセットを備える顕微鏡により切片を調べた。結果を図5に示す。オートラジオグラフィーにより、Tg2576マウスの脳においてβ-アミロイドプラークの鮮明な標識が見られた図5A。野性型マウスの脳では、かかる標識は見られなかった図5B。β-アミロイドプラークの染色に一般的に使用される病理学的色素であるチオフラビンSにより切片を共染色することによって、β-アミロイドプラークが存在することを確認した図5C。この結果はインビトロの結果と一致し、18FFPYBF1が脳内のβ-アミロイドに対する結合において非常に選択的であることを示す。以上のとおり、FPYBF1は、インビトロのAβ凝集体および剖検AD脳の切片におけるβ-アミロイドプラークに高い親和性を示した。また、FPYBF1は脳における良好な取り込みを示し、かつトランスジェニックマウスにおいてエクスビボでβ-アミロイドプラークに対して優れた結合を示した。[実施例2]FPYBF21.FPYBF2の合成FPYBF2の合成をスキーム2に示す。スキーム2a試薬Pd42MNa2CO3ジオキサン1NaOMeMeOHn2NaBH4BBr3CH2Cl2K2CO3DMFTBDMSCIイミダゾールDCMTBAFTHF2OTHFMsCIEt3NDCMTBAFTHFTFADCM。5ピリジン2アミン5メトキシベンゾフラン2イルボロン酸、5ヨードピリジン2アミン、およびPd42MNa2CO3ジオキサン中の溶液を還流下で一晩撹拌した。混合物を室温まで冷却した後、1MNaOHを添加し、酢酸エチルで抽出した。有機層をNa2SO4で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、374mgの化合物1を得た。1HNMRδ385467659676682707736786867MSmz2415Nメチルピリジン2アミンナトリウムメトキシドをメタノール中の化合物1に添加し、続いてパラホルムアルデヒドを添加した。この溶液を加熱して2時間還流し、氷浴により0°Cまで冷却した。水素化ホウ素ナトリウムを添加した。混合物を再び1時間還流に供しし、砕いた氷上に注いだ。酢酸エチルによる抽出操作の後、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、234mgの化合物1を得た。1HNMRδ298384478647676684700736787859MSmz2552ピリジン3イルベンゾフラン5オールBBr3を化合物2中の溶液に氷浴中で滴下した。混合物を室温まで温め、1時間撹拌した。反応混合物を氷浴中で冷却しながら水を添加した。混合物を酢酸エチルで抽出し、有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、218mgの化合物3を得た。1HNMRδ298478647676684700736787859MSmz2412ピリジン3イルベンゾフラン5イルオキシエタノール化合物3および22エトキシエタノールDMF中の溶液に無水K2CO3を添加した。反応混合物を18時間100°Cで撹拌し、水中に注ぎ、クロロホルムで抽出した。有機層をあわせ、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発させ残渣を得て、これをシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、2243mgの化合物4を得た。1HNMRδ298362370374384411518647676684700736787859MSmz3735エトキシベンゾフラン2イルNメチルピリジン2アミン化合物4およびTBDMSClをジクロロメタンに溶解し、続いてイミダゾールを加えた。この溶液を室温で2時間撹拌した。酢酸エチルによる抽出操作の後、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、725mgの化合物5を得た。1HNMRδ008090298362370374384411518647676684700736787859MSmz487tertブチル5エトキシエトキシエトキシベンゾフラン2イルピリジン2イルカルバメート化合物5を無水THFに溶解し、続いてBoc無水物を加えた。この溶液を一晩還流した。酢酸エチルによる抽出操作の後、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、374mgの化合物6を得た。1HNMRδ003086150337362368382388409412686688698733776795875MSmz587tertブチル5エトキシエトキシベンゾフラン2イルピリジン2イルカルバメートTBAF030mLを注射器により化合物6THF中の溶液に添加した。この溶液を室温で5時間撹拌した。酢酸エチルによる抽出操作の後、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、305mgの化合物7を得た。1HNMRδ157345362365370378383393407418687694706740782802883MSmz4732ピリジン3イルベンゾフラン5イルオキシエトキシエトキシエチルメタンスルホネート化合物7をジクロロメタンに溶解し、続いてトリエチルアミンを加えた。次いで、塩化メタンスルホニルを注射器により添加した。この溶液を室温で3時間撹拌した。酢酸エチルによる抽出操作の後、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、246mgの化合物8を得た。1HNMRδ154306344369372379388411417437439690695705740783802883HRMS5501985found5501989tertブチル5エトキシエトキシベンゾフラン2イルピリジン2イルカルバメートTBAF020mLを化合物8無水THF中の溶液に添加した。混合物を4時間還流した。室温まで冷却した後、酢酸エチルの抽出操作に供し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、223mgの化合物9を得た。1HNMRδ157344371383388391422451461463691694705738781802882MSmz4755エトキシエトキシベンゾフラン2イルNメチルピリジン2アミントリフルオロ酢酸をゆっくりと化合物9ジクロロメタン中の溶液に添加した。次いで、混合物を室温で1時間撹拌した。酢酸エチルによる抽出操作の後、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、89mgの化合物10を得た。1HNMRδ298371380379388411418449451461463480645675685701736786859HRMS3741642found37416502.インビトロにおけるAβ凝集体に対する結合試験実施例1に記載ように、FPYBF2のAβ凝集体に対する親和性を評価した。結果を図6に示す。FPYBY2の阻害定数は、Ki241±011nMであった。3.18F標識FPYBF2の製造試薬および条件:Kryptofix222K2CO318FMeCN120°C5分10HCl120°C5分。18Fフッ化物は、サイクロトロンにより18O18F反応を介して製造し、18Oに富む水における水溶液としてSepPakLightQMAカートリッジに通した。このカートリッジをN2により乾燥させ、18F活性を10mLのKryptofix222K2CO3溶液中に含むにより溶出した。溶媒を120°Cでアルゴンガス流下除去した。残渣を、1mLの無水アセトニトリルを用いて共沸により120°Cにおいて窒素ガス流下で2回乾燥させた。メシラート前駆体8アセトニトリル中の溶液を、18F活性を含む反応容器に添加した。この混合物を120°Cで5分間加熱し、1分間冷却した。次いで、HClを添加し、混合物を再び120°Cで5分間加熱した。NaOH水溶液を添加して、pHを塩基性に調節した。混合物を酢酸エチルにより抽出し、溶媒を窒素ガス下除去した。残渣を予備的HPLCYMCPackProC18カラムアセトニトリル水流速40mL分により精製した。所望の18F標識産物の保持時間は133分である。放射化学的純度および特異的活性を、分析用HPLCYMCPackProC18カラムアセトニトリル水流速10mL分で測定し、18FFPYBF2を放射化学的純度>99、特異的活性242GBqμmolで得た。特異的活性は、精製18F標識化合物のUVピーク強度を既知の濃度の参照用非放射性化合物と比較することにより評価した。4.正常マウスにおける生体内分布実施例1に記載のように、18FFPYBF2の生体内分布を評価した。胃および腸については、各臓器の放射線量の割合を、組織のカウントを適切に希釈した注射材料のアリコートと比較することで計算した。結果を表2に示す。5.インビトロオートラジオグラフィー実施例1に記載のように、18FFPYBF2のβアミロイドプラークへの特異的結合を確認した。結果を図7に示す。6.18FFPYBF2によるインビボプラーク標識実施例1に記載のように、Tg2576トランスジェニックマウスにおいて18FFPYBF2のβ-アミロイドプラークへの結合を確認した。結果を図8に示す。[実施例3]99mTcReBATBpM99mTcRe1.ReBATBpの合成ReBATBpの合成をスキーム3に示す。スキーム3試薬:Pd42MNa2CO3ジオキサンパラホルムアルデヒドシアノ水素化ホウ素ナトリウム酢酸BBr3CH2Cl213ジブロモプロパンCH3CNK2CO3TrBocBATCH3CNDIPEAトリエチルシランTFA2ReOCl3AcONaCH2Cl2MeOH。5ピリジン2アミン5メトキシベンゾフラン2ボロン酸、2アミノ5ヨードピリジン、およびPd42MNa2CO3ジオキサン中の溶液を還流下で一晩撹拌した。混合物を室温まで冷却し、1MNaOHを添加した。酢酸エチルで抽出した後、有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、374mgの化合物1を得た。1HNMRδ385467659676682707736786867MSmz2415NNジメチルピリジン2アミン化合物1、パラホルムアルデヒド、およびシアノ水素化ホウ素ナトリウム酢酸中の混合物を室温で一晩撹拌し、次いで100mLの水に注いだ。炭酸ナトリウムを添加して、pHを89に調節した。酢酸エチルによる抽出操作の後、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、249mgの化合物2を得た。1HNMRδ315385659676682707736786867MSmz2692ピリジン3イルベンゾフラン5オールBBr3を化合物2CH2Cl2中の溶液に氷浴中で滴下した。混合物を室温まで温め、1時間撹拌した。反応混合物を氷浴中で冷却しながら水を添加した。酢酸エチルで抽出した後、有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、234mgの化合物3を得た。1HNMRδ315489659676682707736786867MSmz2555ベンゾフラン2イルNNジメチルピリジン2アミン化合物3CH3CN中の溶液にK2CO3および13ジブロモプロパンを添加した。混合物を加熱して18時間還流し、室温まで冷却した後、蒸発乾固した。残渣をCHCl3に溶解し、塩水で洗浄した。有機層をNa2SO4で乾燥し、蒸発乾固した。未精製産物をシリカゲルクロマトグラフィーにかけ、275mgの化合物4を得た。1HNMRδ209309360408648668680696733779864MSmz375tertブチル2ピリジン3イルベンゾフラン6イルオキシプロピルエチルアミノエチルエチルカルバメート化合物4およびtertブチル2エチルエチルアミノエチルカルバメートアセトニトリル中の溶液にDIPEAを添加した。反応混合物を加熱して、12時間還流した。溶媒が蒸発したところで飽和NaCl溶液を添加し、CHCl3で抽出後、有機層をあわせてNa2SO4で乾燥し、蒸発乾固した。未精製産物をシリカゲルクロマトグラフィーにかけ、3436mgの化合物5を得た。1HNMRδ126161216230277287297381640655666684703720721731771855HRMSmzcalcdforC67H71N4O4S210594917found10594910ReBATBp化合物5TFA中の溶液にトリエチルシランを添加し、10分間撹拌し、次いで溶媒を窒素ガス流下で除去した。残渣を10mLCH2Cl2に溶解し、2ReOCl3および1M酢酸ナトリウムメタノール中を添加した。反応混合物を加熱して4時間還流し、次いで室温まで冷却した。酢酸エチルを添加し、混合物を濾過した。溶媒を蒸発させ残渣を得て、これをシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、29mgの化合物6を得た。1HNMRδ227234298306316328347378393407433656675680698736786865HRMSmzcalcdforC24H32N4O3ReS26751471found67514692.ReBATBpの精製HPLCの結果を図9に示す。3.インビトロにおけるAβ凝集体に対する結合試験実施例1に記載のように、50μLのReBATBpを用いて結合試験を行った。結果を図10に示す。ReBATBpのIC50は136±030であった。4.99mT標識反応およびRPHPLCによる分析1TFAEt3SiH2CH3CN01NHCl99mTcGHヘプタン酸ナトリウム二水和物ナノピュア水中の溶液に075mLのSnCl22H2O溶液12mgの塩化Tin二水和物を15mLの01MHClに溶解を添加した。この溶液のpHを少量の01MNaOHによりpH8590に調節し、次いで凍結乾燥してSnグルコヘプトン酸を得た。SnGHをNa99mTcO4溶液に添加し、室温で10分間反応させ、99mTcGH溶液を得た。化合物5TFA中の溶液にトリエチルシランを混和後、溶媒を窒素ガス流下で除去した。残渣をアセトニトリルに溶解し、01MHClおよび99mTcGH溶液を添加した。反応混合物を8090°Cまで10分間加熱した。室温まで冷却した後、混合物をRPHPLCで精製し、99mTcBATBpを得た。99mTcBATBpを、分析用RPHPLCにより、CosmosilC18カラムを用いて、溶媒をH2Oアセトニトリル32→300037とし、流速10mL分で分析した。複合体の吸収を254nmにて測定し、99mTc標識型の放射能を60分間記録した。5.正常マウスにおける生体内分布実施例1に記載のように、ddYマウスの尾静脈に100μLの99mTcBATBp含有生理食塩水を注射した。結果を表3に示す。6.インビトロオートラジオグラフィーTg2576マウスおよび対照の野生型マウスの脳切片を、99mTcBATBpと1時間室温でインキュベートした。次いで、切片を50EtOHで洗浄し、水で30秒間すすいだ。乾燥後、99mTc標識切片をBAS画像化プレートに一晩暴露した。オートラジオグラフィーの画像をBAS5000スキャナーシステムにより得た。結果を図11に示す。99mTcBATBpにより、Tg2576マウス脳切片のβ-アミロイドプラークは標識されたが、野生型マウスの脳切片は標識されなかった。[実施例4]99mTcReBATBp5M99mTcRe1.ReBATBp5の合成ReBATBp5の合成をスキーム4に示す。スキーム4試薬:Pd42MNa2CO3ジオキサンパラホルムアルデヒドシアノ水素化ホウ素ナトリウム酢酸BBr3CH2Cl215ジブロモプロパンCH3CNK2CO3TrBocBATCH3CNDIPEAトリエチルシランTFA2ReOCl3AcONaCH2Cl2MeOH。5ベンゾフラン2イルNNジメチルピリジン2アミン実施例3に記載のとおり、化合物1~3を合成した。化合物3CH3CN中の溶液にK2CO3および13ジブロモプロパンおよび15ジブロモペンタンを添加した。混合物を加熱して18時間還流し、室温まで冷却した後、蒸発乾固した。残渣をCHCl3に溶解し、塩水で洗浄した。有機層をNa2SO4で乾燥し、蒸発乾固した。未精製産物をシリカゲルクロマトグラフィーにかけ、275mgの化合物4を得た。1HNMRδ148156167172179186301330334384387640661670685724771854MSmz404tertブチル2ピリジン3イルベンゾフラン5イルオキシペンチルエチルアミノエチルエチルカルバメート化合物4およびtertブチル2エチルエチルアミノエチルカルバメートアセトニトリル中の溶液にDIPEAを添加した。反応混合物を加熱して、12時間還流した。溶媒が蒸発したところで飽和NaCl溶液を添加し、CHCl3で抽出後、有機層をあわせてNa2SO4で乾燥し、蒸発乾固した。未精製産物をシリカゲルクロマトグラフィーにかけ、3436mgの化合物5を得た。1HNMRδ128165217288303385645662672688710715775856HRMSmzcalcdforC69H74N4O4S210875230found10875238ReBATBp5化合物5TFA中の溶液にトリエチルシランを添加し、10分間撹拌し、次いで溶媒を窒素ガス流下で除去した。残渣を10mLCH2Cl2に溶解し、2ReOCl3および1M酢酸ナトリウムメタノール中を添加した。反応混合物を加熱して4時間還流し、次いで室温まで冷却した。酢酸エチルを添加し、混合物を濾過した。溶媒を蒸発させ残渣を得て、これをシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、17mgの化合物6を得た。1HNMRδ156163175194296303316322339376386401404409415658675682699736699736788865HRMSmzcalcdforC26H35N4O3ReS27031784found70317812.ReBATBp5の精製HPLCの結果を図12に示す。3.99mT標識反応およびRPHPLCによる分析1TFAEt3SiH2CH3CN01NHCl99mTcGH実施例3に記載のようにして、99mTcBATBp5を得て、RPHPLCにより分析した。4.正常マウスにおける生体内分布実施例1に記載のように、ddYマウスの尾静脈に100μLの99mTcBATBp5含有生理食塩水を注射した。結果を表4に示す。5.インビトロオートラジオグラフィー実施例3に記載のように、99mTcBATBp5がTg2567トランスジェニックマウスのβ-アミロイドプラークに結合することを確認した図13。[先行技術文献][非特許文献]1HardyJAHigginsGAScience19922561842SelkoeDJPhysiolRev2001817413SelkoeDJNatBiotechnol2000188234MathisCAWangYKlunkWECurrPharmDes20041014695NordbergALancetNeurol200435196OnoMWilsonANobregaJWestawayDVerhoeffPZhuangZPKungMPKungHFNuclMedBiol2003305657VerhoeffNPWilsonAATakeshitaSTropLHusseyDSinghKKungHFKungMPHouleSAmJGeriatrPsychiatry2004125848MathisCAWangYHoltDPHuangGFDebnathMLKlunkWEJMedChem20034627409KlunkWEEnglerHNordbergAWangYBlomqvistGHoltDPBergstromMSavitchevaIHuangGFEstradaSAusenBDebnathMLBarlettaJPriceJCSandellJLoprestiBJWallAKoivistoPAntoniGMathisCALangstromBAnnNeurol20045530610KudoYOkamuraNFurumotoSTashiroMFurukawaKMaruyamaMItohMIwataRYanaiKAraiHJNuclMed20074855311JohnsonAEJeppssonFSandellJWensboDNeelissenJAJureusAStromPNormanHFardeLSvenssonSPJNeurochem2009108117712AgdeppaEDKepeVLiuJFloresTorresSSatyamurthyNPetricAColeGMSmallGWHuangSCBarrioJRJNeurosci200121RC18913ShoghiJadidKSmallGWAgdeppaEDKepeVErcoliLMSiddarthPReadSSatyamurthyNPetricAHuangSCBarrioJRAmJGeriatrPsychiatry2002102414ZhangWOyaSKungMPHouCMaierDLKungHFNuclMedBiol20053279915RoweCCAckermanUBrowneWMulliganRPikeKLOKeefeGTochonDanguyHChanGBerlangieriSUJonesGDickinsonRoweKLKungHPZhangWKungMPSkovronskyDDyrksTHollGKrauseSFriebeMLehmanLLindemannSDinkelborgLMMastersCLVillemagneVLLancetNeurol2008712916ZhangWKungMPOyaSHouCKungHFNuclMedBiol2007348917ChoiSRGoldingGZhuangZZhangWLimNHeftiFBenedumTEKilbournMRSkovronskyDKungHFJNuclMed200950188718WongDFRosenbergPBZhouYKumarARaymontVRavertHTDannalsRFNandiABrasicJRYeWHiltonJLyketsosCKungHFJoshiADSkovronskyDMPontecorvoMJJNuclMed20105191319KooleMLewisDMBuckleyCNelissenNVandenbulckeMBrooksDJVandenbergheRVanLaereKJNuclMed20095081820KungHFChoiSRQuWZhangWSkovronskyDJMedChem20105393321ChengYOnoMKimuraHKagawaSNishiiRKawashimaHSajiHACSMedChemLett2010inpress22OnoMKawashimaHNonakaAKawaiTHaratakeMMoriHKungMPKungHFSajiHNakayamaMJMedChem200649272523OnoMYoshidaNIshibashiKHaratakeMAranoYMoriHNakayamaMJMedChem200548725324OnoMHaratakeMMoriHNakayamaMBioorgMedChem200715680225StephensonKAChandraRZhuangZPHouCOyaSKungMPKungHFBioconjugChem20071823826JureusASwahnBMSandellJJeppssonFJohnsonAEJohnstromPNeelissenJASunnemarkDFardeLSvenssonSPJNeurochem201027MiyauraNYamadaKSuzukiATetrahedronLett197936343728OnoMWatanabeRKawashimaHChengYKimuraHWatanabeHHaratakeMSajiHNakayamaMJMedChem200952639429OnoMHaratakeMSajiHNakayamaMBioorgMedChem200816686730WatanabeHOnoMIkeokaRHaratakeMSajiHNakayamaMBioorgMedChem200917640231OnoMKungMPHouCKungHFNuclMedBiol20022963332MayaYOnoMWatanabeHHaratakeMSajiHNakayamaMBioconjugChem2009209533HsiaoKChapmanPNilsenSEckmanCHarigayaYYounkinSYangFColeGScience19962749934OnoMHayashiSKimuraHKawashimaHNakayamaMSajiHBioorgMedChem200917700235OnoMWatanabeRKawashimaHKawaiTWatanabeHHaratakeMSajiHNakayamaMBioorgMedChem2009172069"