下記の一般式I又はII式中、R1、R2、R3、及びR4は同一または異なって、水素原子、ハロゲン原子、又は低級アルキル基を表し、R5は水素原子、ハロゲン原子、置換基を有してもよいアリール基、置換基を有してもよいアリールオキシ基、置換基を有してもよいアリールカルボニルオキシ基、置換基を有してもよいヘテロアリール基、又は置換基を有してもよいヘテロアリールカルボニルオキシ基を表し、X1及びX2は同一又は異なって、単結合又は-CH2-を表す。で表される化合物又はその塩。一般式I及びIIにおいてR1及びR3が水素原子又はハロゲン原子であり、R2及びR4が水素原子であることを特徴とする請求項1に記載の化合物又はその塩。一般式IにおいてR5が、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、置換基を有してもよいフェニル基、置換基を有してもよいフェノキシ基、置換基を有してもよいピリジニル基、置換基を有してもよいピリミジニル基、置換基を有してもよいフラニル基、置換基を有してもよいチエニル基、又は置換基を有してもよいキノリニル基であることを特徴とする請求項1又は2に記載の化合物又はその塩。一般式IにおいてR5が、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、4-クロロフェニル基、3-クロロフェニル基、フェノキシ基、ピリジン-3-イル基、4-クロロピリジン-3-イル基、ピリジン-4-イル基、ピリミジン-5-イル基、フラン-3-イル基、チオフェン-3-イル基、又はキノリン-3-イル基であることを特徴とする請求項1又は2に記載の化合物又はその塩。一般式I及びIIにおいてX1及びX2が単結合であることを特徴とする請求項1乃至4のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。請求項1乃至5のいずれか一項に記載の化合物又はその塩を有効成分として含有することを特徴とする医薬組成物。請求項1乃至5のいずれか一項に記載の化合物又はその塩を有効成分として含有することを特徴とする癌の治療薬。請求項1乃至5のいずれか一項に記載の化合物又はその塩を、非ヒト動物に投与することを特徴とする癌の治療方法。本発明の目的は、強いTDP1阻害活性を持ち、医薬品として利用可能な化合物を提供することにある。生理活性天然物のように三次元的に多様な構造を持つ化合物は標的生体高分子に対して、特異的に強く作用する化合物が多い。そこで、本発明者らは、ここ数十年、製薬会社でのスクリーニングで主に用いられていた平面性の高い分子では、優れた阻害剤の同定は困難であり、天然物ライブラリーの中からのリード探索とこれを基盤とする類縁体ライブラリー構築が最も強力な手段となると考えた。その結果、下記の一般式で表されるスピロママコンが、TDP1に対して強い阻害活性をもつことを見出した。スピロママコンのTDP1に対するIC50は10μM程度であったが、同アッセイ条件で既知のTDP1阻害剤であるATA及びMethyl34dephostatinのIC50は活性が弱すぎて算出できなかった。スピロママコンについては、マウス白血病細胞に対する弱い細胞毒性を示すことが報告されているがOrgLett200682059、TDP1阻害活性を持つという報告はない。このように強いTDP1阻害活性を持つスピロママコンであるが、構造が複雑で多様な類縁体を創出するのは困難であった。そこで、本発明者らは、スピロママコン類似化合物の中から、TDP1阻害活性が強く、構造改変が容易な母核を持つ化合物の探索を行った。その結果、後述する一般式Iで表される化合物を見出し、本発明を完成するに至った。即ち、本発明は、以下の1~8を提供するものである。1下記の一般式I又はII式中、R1、R2、R3、及びR4は同一または異なって、水素原子、ハロゲン原子、又は低級アルキル基を表し、R5は水素原子、ハロゲン原子、置換基を有してもよいアリール基、置換基を有してもよいアリールオキシ基、置換基を有してもよいアリールカルボニルオキシ基、置換基を有してもよいヘテロアリール基、又は置換基を有してもよいヘテロアリールカルボニルオキシ基を表し、X1及びX2は同一又は異なって、単結合又は-CH2-を表す。で表される化合物又はその塩。2一般式I及びIIにおいてR1及びR3が水素原子又はハロゲン原子であり、R2及びR4が水素原子であることを特徴とする1に記載の化合物又はその塩。3一般式IにおいてR5が、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、置換基を有してもよいフェニル基、置換基を有してもよいフェノキシ基、置換基を有してもよいピリジニル基、置換基を有してもよいピリミジニル基、置換基を有してもよいフラニル基、置換基を有してもよいチエニル基、又は置換基を有してもよいキノリニル基であることを特徴とする1又は2に記載の化合物又はその塩。4一般式IにおいてR5が、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、4-クロロフェニル基、3-クロロフェニル基、フェノキシ基、ピリジン-3-イル基、4-クロロピリジン-3-イル基、ピリジン-4-イル基、ピリミジン-5-イル基、フラン-3-イル基、チオフェン-3-イル基、又はキノリン-3-イル基であることを特徴とする1又は2に記載の化合物又はその塩。5一般式I及びIIにおいてX1及びX2が単結合であることを特徴とする1乃至4のいずれかに記載の化合物又はその塩。61乃至5のいずれかに記載の化合物又はその塩を有効成分として含有することを特徴とする医薬組成物。71乃至5のいずれかに記載の化合物又はその塩を有効成分として含有することを特徴とする癌の治療薬。81乃至5のいずれかに記載の化合物又はその塩を、非ヒト動物に投与することを特徴とする癌の治療方法。本発明の化合物は、これまでに同定されたTDP1阻害剤と比べて顕著に強い阻害活性を有しており、また、構造改変が容易な母核を持つことから類縁体合成展開が極めて容易である。以下、本発明を詳細に説明する。本発明において、ハロゲン原子とは、例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子である。本発明において、低級アルキル基とは、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基である。本発明において、アリール基とは、例えば、フェニル基、ナフタレン-1-イル基、ナフタレン-2-イル基である。本発明において、ヘテロアリール基とは、例えば、ピリジニル基ピリジン-2-イル基、ピリジン-3-イル基、ピリジン-4-イル基、ピリミジニル基ピリミジン-2-イル基、ピリミジン-4-イル基、ピリミジン-5-イル基、フラニル基フラン-2-イル基、フラン-3-イル基、チエニル基チオフェン-2-イル基、チオフェン-3-イル基、キノリニル基キノリン-2-イル基、キノリン-3-イル基、キノリン-4-イル基、キノリン-5-イル基、キノリン-6-イル基である。本発明において、アリールオキシ基とは、例えば、前記アリール基が酸素原子と結合した基である。本発明において、アリールカルボニルオキシ基とは、例えば、前記アリール基がカルボニルオキシ基と結合した基である。本発明において、ヘテロアリールカルボニルオキシ基とは、例えば、前記ヘテロアリール基がカルボニルオキシ基と結合した基である。本発明において、置換基を有してもよいアリール基とは、例えば、ハロゲン原子、ハロアルキル基、カルボキシル基、エステル基、スルホン酸エステル基、ニトロ基、置換基を有してもよいアミノ基、ボロニル基、及びボロナートエステル基からなる群より選択される1又は複数の置換基を有してもよいアリール基である。ここで、ハロアルキル基とは、例えば、フルオロメチル基、ジフルオロメチル基、トリフルオロメチル基、クロロメチル基、ジクロロメチル基、トリクロロメチル基、ブロモメチル基、ジブロモメチル基、トリブロモメチル基、2-フルオロエチル基、2-クロロエチル基、2-ブロモエチル基であり、エステル基とは、例えば、メチルエステル基、エチルエステル基、プロピルエステル基であり、置換基を有してもよいアミノ基とは、例えば、アセチルアミノ基、トシルアミノ基、メチルアミノ基、ジメチルアミノ基、エチルアミノ基、ジエチルアミノ基であり、スルホン酸エステル基とは、例えば、メチルスルホニルエステル基、エチルスルホニルエステル基、プロピルスルホニルエステル基であり、ボロナートエステル基とは、例えば、2-ジメチル-1、3-プロパンジオールボロナートエステル基である。本発明において、置換基を有してもよいアリールオキシ基とは、例えば、1又は複数のハロゲン原子を有してもよいアリールオキシ基である。本発明において、置換基を有してもよいアリールカルボニルオキシ基とは、例えば、ハロゲン原子、アルキル基、及びアルコキシ基からなる群より選択される1又は複数の置換基を有してもよいアリールカルボニルオキシ基である。ここで、アルキル基とは、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基であり、アルコキシ基とは、例えば、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基である。本発明において、置換基を有してもよいヘテロアリール基とは、例えば、1又は複数のハロゲン原子を有してもよいヘテロアリール基である。本発明において、置換基を有してもよいヘテロアリールカルボニルオキシ基とは、例えば、1又は複数のアルキル基を有してもよいアリールカルボニルオキシ基である。ここで、アルキル基とは、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基である。一般式IにおけるR5の結合位置は、一般式Iのフェニル基上のオルト位、メタ位、パラ位のいずれでもよいが、好適には、パラ位である。一般式IIにおけるフェニル基同士の結合位置は特に限定されないが、好適には、メタ位同士の結合又はパラ位同士の結合である。一般式I及びIIにおいてR1は、好適には、水素原子又はハロゲン原子であり、より好適には、水素原子又は塩素原子である。一般式I及びIIにおいてR2は、好適には、水素原子である。一般式I及びIIにおいてR3は、好適には、水素原子又はハロゲン原子であり、より好適には、水素原子又は塩素原子である。一般式I及びIIにおいてR4は、好適には、水素原子である。一般式IにおいてR5は、好適には、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、置換基を有してもよいフェニル基、置換基を有してもよいフェノキシ基、置換基を有してもよいピリジニル基、置換基を有してもよいピリミジニル基、置換基を有してもよいフラニル基、置換基を有してもよいチエニル基、又は置換基を有してもよいキノリニル基であり、より好適には、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、4-クロロフェニル基、3-クロロフェニル基、フェノキシ基、ピリジン-3-イル基、4-クロロピリジン-3-イル基、ピリジン-4-イル基、ピリミジン-5-イル基、フラン-3-イル基、チオフェン-3-イル基、又はキノリン-3-イル基である。一般式I及びIIにおいてX1は、好適には、単結合である。一般式IIにおいてX2は、好適には、単結合である。なお、ここで単結合とは、一般式I及びIIにおいてX1又はX2に隣接する酸素原子と炭素原子が直接結合していることをいう。一般式IにおけるX1が単結合であり、R1及びR2の一方がハロゲン原子で他方が水素原子である場合、一般式Iで表される化合物には、ハロゲン原子とフェニル基が同じ側に位置するジアステレオマーとハロゲン原子とフェニル基が逆側に位置するジアステレオマーが存在する。この二種類のジアステレオマーでは、ハロゲン原子とフェニル基が逆側に位置するジアステレオマーの方が好ましい。一般式Iで表される化合物のうち代表的なものを下表に示す。上記化合物のうちで、好ましい化合物としてI6化合物4e、I22化合物3i、I42化合物3a、I45化合物4c、I49化合物6、I54化合物4g、I55化合物4i、I58化合物4m、I59化合物4k、I60化合物4q、I61化合物3g、I62化合物3h、I63化合物3j、I76化合物4f、I77化合物4hを挙げることができ、より好ましい化合物としてI63を挙げることができる。一般式IIで表される化合物のうち代表的なものを下表に示す。上記化合物のうちで、好ましい化合物としてII1化合物5b、II2化合物5aを挙げることができる。一般式I及びIIで表される化合物の代わりに、これらの化合物の塩を使用することもできる。このような塩としては、薬理学的に許容される塩が好ましく、例えば、アルカリ金属塩ナトリウム塩、カリウム塩、アルカリ土類金属塩カルシウム塩、マグネシウム塩、硫酸塩、塩酸塩、硝酸塩などを例示できる。一般式Iで表される化合物のうち、X1が単結合でR5がハロゲン原子である化合物は、例えば、以下の工程1及び工程2によって製造することができる。上記式中、R1及びR2は前記と同意義を示し、Xはハロゲン原子を表す。工程1は、4-メトキシフェノール誘導体化合物1をジメチルアセタール誘導体化合物2に変換する工程である。この工程は、例えば、以下のように行うことができる参考文献:ChemEurJ2001723492369。化合物1のメタノール溶液に炭酸カリウムを添加し、続いてPhI2のアセトニトリル溶液を0°Cで加える。その後反応溶液を室温で19時間撹拌後、飽和炭酸ナトリウム水を注ぎ、反応を停止する。生成物を塩化メチレンを用いて抽出し、合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムにより乾燥させて、ろ過し、減圧下濃縮する。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、目的物の化合物2を得る。工程2は、ジメチルアセタール誘導体化合物2からハロゲン原子を有する環状エノン化合物化合物3を合成する工程である。この工程は、例えば、以下のように行うことができる。化合物2のトルエン溶液にジオールとPPTSのトルエン溶液を40°Cで加える。反応溶液を18時間撹拌後、飽和重曹水中に注ぎ、反応を停止する。生成物を酢酸エチルを用いて三回抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄する。無水硫酸マグネシウムにより有機層を乾燥させて、ろ過し、減圧下濃縮する。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、目的物の化合物3を得る。一般式Iで表される化合物のうち、X1が単結合でR5がアリール基又はヘテロアリール基である化合物は、例えば、以下の工程3によって製造することができる。上記式中、R1及びR2は前記と同意義を示し、Xはハロゲン原子を表し、Arはアリール基又はヘテロアリール基を表す。工程3は、ハロゲン原子を有する環状エノン化合物化合物3からアリール基等を有する環状エノン化合物化合物4を合成する工程である。この工程は、例えば、以下のように行うことができる。化合物3のDMF溶液にPdCl22と炭酸セシウムとアリールボロン酸の水溶液を80°Cで加える。反応溶液を18時間撹拌後、水に注ぎ、反応を停止する。生成物をジエチルエーテルを用いて三回抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄する。無水硫酸マグネシウムにより有機層を乾燥させて、ろ過し、減圧下濃縮する。得られた粗生成物をPTLCにより精製し、目的物の化合物4を得る。一般式IIで表される化合物のうち、X1及びX2が単結合である化合物は、例えば、以下の工程4によって製造することができる。上記式中、R1、R2、R3及びR4は前記と同意義を示し、Xはハロゲン原子を表す。工程4は、ハロゲン原子を有する環状エノン化合物化合物3から、その二量体化合物5を得る工程である。この工程は、例えば、以下のように行うことができる参考文献:WO2005030731。化合物3とビスジボロンのDMSO溶液にPdCl22と酢酸カリウムを加え、60°Cで20時間撹拌後、反応液を飽和塩化アンモニウム水に注ぎ、反応を停止する。生成物を酢酸エチルを用いて三回抽出し、合わせた有機層を飽和重曹水と食塩水で洗浄する。無水硫酸ナトリウムにより有機層を乾燥させて、ろ過し、減圧下濃縮する。得られた粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーおよびGPCにより精製し、目的物の化合物5を得る。一般式I及びIIで表される化合物は、TDP1阻害活性及び癌細胞に対する細胞毒性を示すので、癌の治療に有効である。治療対象とする癌は、ヒトの癌でもよく、ヒト以外の動物例えば、ラット、マウス、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギなどの癌であってもよい。一般式I及びIIで表される化合物は単独で癌の治療に用いてもよいが、トポイソメラーゼI阻害剤である抗癌剤例えば、カンプトテシン、イリノテカン、ノギテカンと併用してもよい。一般式I及びIIで表される化合物を癌の治療に使用する場合、これらの化合物は公知の方法に従い薬学的に許容される担体あるいは希釈剤と混合することにより製剤化することができる。剤型は特に限定されず、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤、注射剤、坐剤、徐放剤などとすることができる。投与方法も特に限定されず、経口的又は非経口的局所、直腸、静脈投与に投与することができる。投与量は、投与対象、投与方法、疾患の種類などにより異なるが、例えば、成人に対して、経口的に投与する場合、1回当たり、一般式I又はIIで表される化合物の量が50~500mgとなるように1日1~数回に分けて投与することができる。以下、実施例により本発明を更に詳細に説明する。合成例14メトキシフェノール誘導体化合物1のジメチルアセタール誘導体化合物2への変換1化合物2aの合成上記構造式で表される化合物2aを前述した工程1に従って合成した。収率は68であった。1HNMRスペクトルデータは文献と一致した。2化合物2bの合成上記構造式で表される化合物2bを前述した工程1に従って合成した。収率は52であった。1HNMRスペクトルデータは、以下の通りであった。1HNMRδ702686637339合成例2アセタール交換反応による環状エノン化合物化合物3の合成1化合物3aの合成上記構造式で表される化合物3aを前述した工程2に従って合成した。収率は46であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ75472766967961962652545138713CNMRδ185114321427136113201294128912781226993720784LRMScalcdforC14H11BrO3H30699found306982化合物3ga及び化合物3gbの合成上記構造式で表され、ジアステレオマーである化合物3gaと化合物3gbを前述した工程2に従って合成した。化合物3gaの収率は29であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ73973268867463352745238913CNMRδ1780143913901353134813351292128512761008721786化合物3gbの収率は17であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ74073268967963152645238613CNMRδ17801433139413501348133812911278127510077877203化合物3ha及び化合物3hbの合成上記構造式で表され、ジアステレオマーである化合物3haと化合物3hbを前述した工程2に従って合成した。化合物3haの収率は20であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ75572668867963152545238613CNMRδ1784143813981366134313251282128212331012792724化合物3hbの収率は19であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ75472669567463352645238813CNMRδ1784144213941362133913251288128212331012179007254化合物3ia及び化合物3ibの合成上記構造式で表され、ジアステレオマーである化合物3iaと化合物3ibを前述した工程2に従って合成した。化合物3iaの収率は29であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ75374975372672969567563452645339013CNMRδ177914371391138813341319130412911284124712301008773720FTIR168616531615147713341277121311311020968824787698HRMScalcdforC14H10O3ClBrH3409580found3409579化合物3ibの収率は39であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ75374975372973068967863152445138913CNMRδ177914321393138813381319130412911278124612301007784720FTIR1685165316151477143113321277121411311020969823786697HRMScalcdforC14H10O3ClBrH3409580found34095805化合物3ja及びの化合物3jbの合成上記構造式で表され、ジアステレオマーである化合物3jaと化合物3jbを前述した工程2に従って合成した。化合物3jaの収率は20であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。なお、相対立体化学はX線結晶構造解析により決定した。1HNMRδ77571368867863152345238613CNMRδ177914331393138013621338127912781007944787719LRMScalcdforC14H10ClO3H38894found38891化合物3jbの収率は13であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ77571269367363152345138813CNMRδ177914371389138013641334128312791007944786719LRMScalcdforC14H10ClO3H38894found38891合成例3鈴木宮浦カップリング反応によるアリール基又はヘテロアリール基を有する環状エノン化合物化合物4の合成1化合物4cの合成上記構造式で表される化合物4cを前述した工程3に従って合成した。収率は12であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ73476367568362162752545639613CNMRδ721788992125312671273127512761289129413011348136614291434LRMScalcdforC20H15ClO3H33907found339072化合物4eの合成上記構造式で表される化合物4eを前述した工程3に従って合成した。収率は43であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ73775567568262162653545639613CNMRδ18511434142914071391137813381294129012891284127312521247992790721FTIR30532886169316771637161414991480144013841306123811791119109210711013975853834767761704HRMScalcdforC20H15O3ClH3390788found33907893化合物4fの合成上記構造式で表される化合物4fを前述した工程3に従って合成した。収率は43であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ3974575366346786987487507688684化合物4gの合成上記構造式で表される化合物4gを前述した工程3に従って合成した。収率は41であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ396456536615630670685738751762788861885LRMScalcdforC19H15NO3H30611found306095化合物4hの合成上記構造式で表される化合物4hを前述した工程3に従って合成した。収率は44であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ397458537635678698754763896923LRMScalcdforC18H13ClN2O3H34106found341076化合物4iの合成上記構造式で表される化合物4iを前述した工程3に従って合成した。収率は34であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ86178575975174267468362162853545739313CNMRδ185214801433142813751370134912951290127512701243993787721LRMScalcdforC19H14ClNO3H34007found340057化合物4kの合成上記構造式で表される化合物4kを前述した工程3に従って合成した。収率は32であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ394453536619626675683738749761762765LRMScalcdforC18H14O3SH31107found311088化合物4mの合成上記構造式で表される化合物4mを前述した工程3に従って合成した。収率は14であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ3934525306206266496686746827407497709化合物4qの合成上記構造式で表される化合物4qを前述した工程3に従って合成した。収率は16であった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ399457531622629677685756776760775790816832920LRMScalcdforC23H17NO3H35612found35610合成例4パラジウムカップリング反応による環状エノン化合物の二量体化合物5の合成1化合物5aの合成上記構造式で表される化合物5aを前述した工程4に従って合成した。収率は9であり、融点は188190°Cであった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ76274867668362162653445639713CNMRδ185214341429140913631294128912751267992789721FTIR29221675163716151500130612391177111810711014974855820763HRMScalcdforC28H22O3H4551495found45514962化合物5bの合成上記構造式で表される化合物5bを前述した工程4に従って合成した。収率は9であり、融点は6264°Cであった。1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ75675875074067568362262653745739813CNMRδ1851143414291414137812941289127612531250992790722FTIR2889169316771637161514761384130612391179112010711014973853820793754707HRMScalcdforC28H22O3H4551495found4551495合成例5Buchwaldカップリング反応によるフェノキシ基を有する環状エノン化合物化合物6の合成JAmChemSoc199912143694378記載の方法を参考に、以下のBuchwaldカップリング反応により化合物6を合成した。化合物3cのトルエン溶液にPd2とJohnPhos、K3PO4、フェノールを添加し、100°Cで反応溶液を15時間撹拌後、ジエチルエーテルを加えて希釈し、1MNaOHと飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムにより有機層を乾燥させて、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、目的物の化合物6を得た。化合物6の1HNMRスペクトルデータ等は、以下の通りであった。1HNMRδ735745713695708670685617625527450392試験例1TDP1酵素阻害試験1方法ヒトTDP1たんぱく質とその蛍光基質については下記の論文の従って調製した。TDP1たんぱく質溶液を、384wellプレートに75μlずつ分注し、次にDMSOに溶解した各化合物を05μl添加した。さらに、100μMの基質溶液を2μl添加し、3時間、室温で反応した。反応終了後、酵素反応により生じる蛍光を励起波長340nm、蛍光波長450nmで測定した。RideoutMCRaymondACBurginABJrNucleicAcidsRes20043246574664RaymondACRideoutMCStakerBHjerrildKBurginABJrJMolBiol20043388959062結果スピロママコンの阻害活性を100とし、各化合物のTDP1阻害活性を相対値で表した表4。表4に示すように、ほとんどの化合物がスピロママコンよりも強いTDP1阻害活性を示した。特に化合物4cは強い活性を示した。試験例2細胞毒性試験1方法Hela細胞をウシ胎児血清10、ペニシリン100Uml、ストレプトマイシン100μgmLを含むRPMI1640培地を用いて、37度、5二酸化炭素内で培養した。384wellプレートに、1x103cellsmlに調製した細胞溶液を20μlずつ分注して一晩培養した。DMSOに溶解した各化合物を添加後、さらに48時間培養した。その後、細胞増殖アッセイキットCellCountingKit8同仁化学を用いて細胞数を測定した。キットの試薬を添加後、37度で1時間処理し、吸光度を450nmで測定した。2結果化合物で処理していない場合の値を100とし、各化合物のIC50値μMを算出した表5。表5に示すように、多くの化合物がスピロママコンよりも強い細胞毒性を示した。特に化合物3jはスピロママコンの10倍ほどの強い毒性を示した。試験例3マウスモデルを用いた抗腫瘍試験1方法マウスは雌性KSNSlcヌードマウス生後56週齢を使用した。HT29大腸癌細胞5×106個/01mlりん酸緩衝生理食塩水をヌードマウス67週齡の背部に皮下移植を行い、皮下移植後7日目から、2mgkgになるように各化合物を、1日におきに、10回、腹腔内に投与した。腫瘍体積はノギスによって測定した。楕円体の腫瘍体積を推定するための式は、L×W2/2とした。ここでLは腫瘍の長径であり、Wは短径である。2結果腫瘍体積の推移を図1に示す。図1に示すように化合物3jはスピロママコンとほぼ同等の抗腫瘍活性を示した。