"以下の工程A~Cを具備する、抗原を検出する方法:前記抗原を含有すると予想される第1の緩衝液に担体を接触させる工程A、ここで、前記担体には抗体およびマルチ銅酸化酵素CueOが固定されており、当該担体は導電性であり、前記抗体は前記抗原に特異的に反応し、前記担体および第2の緩衝液を用いるポテンシオスタット法により電流を測定する工程B、ここで、前記第2の緩衝液は、前記マルチ銅酸化酵素CueOの基質を含有し、前記第2の緩衝液は、0.3mM以上1.0mM以下の範囲に収まるイオン強度を有し、および以下の不等式が充足されれば前記第1の緩衝液において前記抗原が存在することが決定される工程C工程Bにおいて測定された電流>=1.5×ブランク値ここで、前記ブランク値は、前記抗原は用いられないが、前記第2の緩衝液は用いられるポテンシオスタット法により測定された電流である。前記担体はカーボンから構成される、請求項1の方法。前記第2の緩衝液は、5.0以上6.0以下のpHを有する、請求項1の方法。前記第2の緩衝液は酸素およびプロトンを含有する、請求項1の方法。前記第1の緩衝液は、トリス-塩酸緩衝液、トリス緩衝生理食塩水、またはリン酸緩衝生理食塩水である、請求項1の方法。前記第2の緩衝液は、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、コハク酸緩衝液、フタル酸緩衝液、または2-モルホリノエタンスルホン酸緩衝液である、請求項1の方法。前記第2の緩衝液は、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、コハク酸緩衝液、フタル酸緩衝液、または2-モルホリノエタンスルホン酸緩衝液である、請求項5の方法。しかし、サンドイッチ法は、抗体108だけでなく、酵素110を具備しているラベル化抗体111をも必要とする。ラベル化抗体111は、抗体108と抗原109との間の特異的反応の後に供給されることを必要とする。さらに、未反応のラベル化抗体111は除去されることを必要とする。本発明の目的は、ラベル化抗体を用いずに抗原を検出する方法を提供することである。1以下の工程A~Cを具備する、抗原を検出する方法:前記抗原を含有すると予想される第1の緩衝液に担体を接触させる工程A、ここで、前記担体には抗体およびマルチ銅酸化酵素CueOが固定されており、当該担体は導電性であり、前記抗体は前記抗原に特異的に反応し、前記担体および第2の緩衝液を用いるポテンシオスタット法により電流を測定する工程B、ここで、前記第2の緩衝液は、前記マルチ銅酸化酵素CueOの基質を含有し、前記第2の緩衝液は、0.3mM以上1.0mM以下の範囲に収まるイオン強度を有し、および以下の不等式が充足されれば前記第1の緩衝液において前記抗原が存在することが決定される工程C工程Bにおいて測定された電流>=1.5×ブランク値ここで、前記ブランク値は、前記抗原は用いられないが、前記第2の緩衝液は用いられるポテンシオスタット法により測定された電流である。2前記担体はカーボンから構成される、1の方法。3前記第2の緩衝液は、5.0以上6.0以下のpHを有する、1の方法。4前記第2の緩衝液は酸素およびプロトンを含有する、1の方法。5前記第1の緩衝液は、トリス-塩酸緩衝液、トリス緩衝生理食塩水、またはリン酸緩衝生理食塩水である、1の方法。6前記第2の緩衝液は、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、コハク酸緩衝液、フタル酸緩衝液、または2-モルホリノエタンスルホン酸緩衝液である、1の方法。7前記第2の緩衝液は、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、コハク酸緩衝液、フタル酸緩衝液、または2-モルホリノエタンスルホン酸緩衝液である、5の方法。本発明は、ラベル化抗体を用いずに抗原を検出する方法を提供する。以下、図面を参照しながら、本発明の実施の形態が説明される。図1は、本発明による抗原検出方法の反応フローを示す。工程A工程Aでは、抗原104を含有すると予想される第1の緩衝液に担体101が接触される。本発明により検出される抗原104の例は、ウイルス、細菌、真菌、タンパク質、またはオリゴヌクレオチドである。ウイルス、細菌、または真菌が好ましい。第1の緩衝液の例は、トリス-塩酸緩衝液、トリス緩衝生理食塩水、またはリン酸緩衝生理食塩水である。好ましくは、当該第1の緩衝液は、中性付近のpHを有する。担体101は、マルチ銅酸化酵素102および抗体103を表面に具備する。担体101は、工程Bにおいて作用電極の一部を構成するため、電気的に導電性であることが必要とされる。担体101の材料の好適な例は、カーボンである。当該カーボンとして、カーボンナノチューブ、カーボンブラック、ケッチェンブラック、グラッシーカーボン、および高配向性結晶黒鉛HOPG、高配向熱分解黒鉛が好ましく用いられる。カーボンナノチューブがより好ましい。図1に示されるように、抗体103およびマルチ銅酸化酵素102が、担体101の表面に固定されている。抗体103は、抗原104と特異的に結合する。抗体103は、ポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体であり得る。Fc領域が人為的に除去されたFabフラグメント抗体およびFab’2フラグメント抗体も用いられ得る。マルチ銅酸化酵素102は、酸化還元反応を触媒する酵素の一種である。本明細書においては、マルチ銅酸化酵素102は、CueOと表記され得る。マルチ銅酸化酵素102は、分子状酸素からなる基質105を4電子還元し、生成物106として水が生成される反応を触媒する。マルチ銅酸化酵素102の活性中心は、タイプ1、タイプ2、タイプ3a、およびタイプ3bと呼ばれる性質の異なる4個の銅イオンから構成される。好ましいマルチ銅酸化酵素102は、ラッカーゼである。大腸菌由来のCueOが用いられることがより好ましい。抗体103及びマルチ銅酸化酵素102を担体101に固定する方法としては、以下の方法aおよび方法bが挙げられる。方法a:担体101と、抗体103またはマルチ銅酸化酵素102との間の疎水性相互作用による非特異的吸着を利用する方法。方法b:担体101を、抗体103またはマルチ銅酸化酵素102に化学的に結合させる方法。具体的なbの方法は、以下の通りである。担体101にカルボキシル基が導入される。そのカルボキシル基が1-エチル-3-3-ジメチルアミノプロピルカルボジイミド及びN-ヒドロキシスクシンイミドを用いて処理される。その後、抗体103及びマルチ銅酸化酵素102が添加される。抗体103の表面が有するリジン残基のアミノ基が、カルボキシル基と反応し、アミド結合を形成する。同様に、マルチ銅酸化酵素102の表面が有するリジン残基のアミノ基も、カルボキシル基と反応し、アミド結合を形成する。第1の緩衝液に担体101を接触させる方法としては、以下の2つの方法が挙げられる:第1の緩衝液で、担体101の表面を被覆する方法、および第1の緩衝液に、担体101を浸漬する方法。当該接触は、抗体103と抗原104との間の特異的結合をもたらす。その後、洗浄により、未反応の抗原104を含有する第1の緩衝液は、担体101の表面から除去される。本発明では、抗原104と抗体103との特異的結合が、マルチ銅酸化酵素102の酵素活性の上昇をもたらす。工程B工程Bでは、担体101および第2の緩衝液を用いるポテンシオスタット法により電流が測定される。第2の緩衝液は、前記マルチ銅酸化酵素CueOの基質105を含有する。基質105の例は、酸素およびプロトンである。これらは、市販されている一般的な緩衝液に含まれている。第2の緩衝液は、5.0以上6.0以下のpHを有することが好ましい。水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アンモニア、およびトリメチルアンモニウムが用いられて、pHを調整する。第2の緩衝液の例は、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、コハク酸緩衝液、フタル酸緩衝液、およびMES2-モルホリノエタンスルホン酸緩衝液である。酢酸緩衝液が好ましい。前記第2の緩衝液は、0.3mM以上1.0mM以下の範囲に収まるイオン強度を有することを必要とされる。0.3mM未満では、pHの安定性を確保することが困難である。1.0mMを超えると、後述する実施例からも明らかなように、第1の緩衝液に含有される抗体を検出することが困難となる。図3は、ポテンシオスタット法のために用いられる電気化学測定装置を示す。当該電気化学測定装置は、ポテンシオスタットから構成される測定器114、作用電極115、参照電極116、およびカウンター電極117を具備する。参照電極116の例は、飽和KCl銀/塩化銀電極である。カウンター電極117の例は、Pt電極である。作用電極115は、担体101を具備する。図5は、作用電極115の一例を示す。作用電極115は、グラッシーカーボン電極121の先端に取り付けられた担体101を具備する。グラッシーカーボン電極121の先端は、ネット122およびリング123をさらに具備する。ネット122およびリング123によって、担体101がグラッシーカーボン電極121の先端に固定される。好ましくは、ネット122の材料はナイロンである。図3に示されるように、測定器114に接続されたこれら3つの電極115~117は、反応槽118の内部に貯められた第2の緩衝液119に浸漬される。その後、ポテンシオスタット法により電流が測定される。ポテンシオスタット法では、開始電位0.6Vおよび終了電位0Vの間で掃引が行われ得る。マルチ銅酸化酵素102の酵素活性により生じる還元電流は、電位が0Vに近づくに従い増大する。後述する実施例1から明らかなように、開始電位0.6Vから電位0.45Vまでの期間では、電流はほとんど変化しない。これは、当該期間においては、マルチ銅酸化酵素102の反応がほとんど進行しないためである。3つの電極115~117が第2の緩衝液119に浸漬されることに代えて、図4に示されるように、第2の緩衝液119が、作用電極115、参照電極116、およびカウンター電極117を被覆し得る。図4に示される3つの電極115~117は、基板120の表面に配置されている。工程C工程Cでは、以下の不等式が充足されれば第1の緩衝液が抗原を含有することが決定される。工程Bにおいて測定された電流≧1.5×ブランク値ここで、ブランク値は、抗原は用いられないが、第2の緩衝液は用いられるポテンシオスタット法により測定された電流である。当該決定により、抗原が検出される。ブランク値は、工程Cと平行して算出され得る。または、ブランク値は、予め算出され得る。以下の実施例1を用いて、本発明はより詳細に説明される。実施例1抗体の調製抗BovineSerumAlbumin抗体抗BSA抗体:IgGfractionofanti-AlbuminBovineSerum[Rabbit];Rockland社製を含有する溶液が用いられた。当該抗体の溶媒が、限外ろ過ユニットAmiconUltra-4、MWCO:30,000;Millipore社製を用いて10mMトリスヒドロキシメチルアミノメタン-塩酸緩衝液トリス-塩酸緩衝液pH7.5に置換された。溶媒を置換した後、抗体の濃度は、BovineSerumAlbuminBSAをスタンダードとして用いて、Bradford法プロテインアッセイキットII;Bio-Rad社製に基づいて測定された。抗体は20mg/mLの濃度を有した。得られた抗BSA抗体は4°Cで保管された。CueO溶液の調製大腸菌由来K-12株のCueOは、以下に記述されるように、組換体CueOとして大腸菌内で生産され、精製された。CueOの遺伝子は、大腸菌ゲノムDNALAPCR用genomeDNASet;タカラバイオ社製を用いるPCR法により増幅された。当該PCRにおいては、ヒスチジンタグをコードする塩基配列がオリゴDNAプライマーに付加され、CueOのアミノ酸配列のカルボキシル末端側にヒスチジンタグを付加した。増幅されたDNA断片は、発現ベクターpRSFDuet-1Novagen社製にクローニングされたIn-FusionDry-DownPCRCloningKits;クロンテック社製。当該発現ベクターを用いて大腸菌BL21DE3;ストラタジーン社製が形質転換された。形質転換された大腸菌は、1mMの硫酸銅を含有するLB培地上で30°C、16時間培養された。回収した菌体よりペリプラズム画分が抽出され、ヒスチジンタグ精製カラムTALONCellThruResin;クロンテック社製および陰イオン交換カラムHiTrapQHP5mL;GEHealthcare社製を用いて、抽出液からCueOが精製された。脱塩カラムHiTrapdesalting;GEHealthcare社製を用いて、精製されたCueOを含有する溶液の溶媒が10mMトリス-塩酸緩衝液pH7.5に置換された。その後、限外ろ過ユニットAmiconUltra-4、MWCO:30,000;Millipore社製を用いてCueO溶液は濃縮された。濃縮後のCueO溶液は、4mg/mLの濃度を有していた。CueOの濃度は、BSAをスタンダードとして用いたBradford法により測定された。得られたCueO溶液は4°Cで保管された。担体の調製5mLのジメチルスルホキシドDMSOが5mgのカーボンナノチューブSWCNT;Aldrich社製に添加された。その後、当該DMSO溶液を超音波ホモジナイザーsonifier150;Branson社製を用いて、出力10WattsRMSで3分間かけて均質化し、SWCNT懸濁液を得た。2mmの厚みを有するカーボンフェルト日本カーボン社製から、6mmの直径を有するカーボンフェルトが切り抜かれた。当該カーボンフェルトは、プラスチック製カラムバイオスピンエンプティーカラム;Bio-Rad社製にセットされた。500μLのSWCNT懸濁液がカーボンフェルト上に滴下され、当該カーボンフェルトにカーボンナノチューブを吸着した。0.3mLのDMSOおよび3mLの超純水が当該カラムにこの順に流された。次に、当該カラムに1mLのトリス-塩酸緩衝液pH7.5、10mMが流され、当該カラムを洗浄した。当該カラム内で得られたカーボンフェルトが担体として用いられた。CueO溶液及び抗体の担体への固定上記の担体がセットされたカラムに、2mg/mLのCueO溶液、6mg/mLの抗BSA抗体を含有する0.1mLのトリス-塩酸緩衝液pH7.5、10mMが滴下された。25°Cで10分間のインキュベートにより、CueOおよび抗BSA抗体がカーボンフェルトから構成される担体に結合した。このようにして、CueOおよび抗BSA抗体が固定化された。当該カラムに、2mLの氷冷したトリス-塩酸緩衝液pH7.5、10mMが流された。得られた担体は4°Cで保管された。酢酸緩衝液の調製pHメータを用いてpHを測定しながら、酢酸に水酸化ナトリウムが加えられて、3のpHを有する1M酢酸緩衝液を調製した。当該酢酸緩衝液は0.1に希釈され、1.0mMの濃度を有する酢酸緩衝液pH:3を調製した。同様に、6のpHを有する1M酢酸緩衝液を調製した。さらに、1.0mMの濃度を有する酢酸緩衝液pH:6を調製した。pHメータを用いてpHを測定しながら、1.0mM酢酸緩衝液pH:6に1.0mM酢酸緩衝液pH:3が添加され、1.0mM酢酸緩衝液pH:5.5を調製した。pH調整時の温度は25°Cであった。同様に、0.5mM、5mM、及び10mMの濃度を有する酢酸緩衝液pH5.5がそれぞれ調製された。ポテンシオスタット法による電気化学測定測定装置CueOの酵素活性は、ポテンシオスタット法による電気化学測定により測定された。図3に示される電気化学測定装置が用いられた。測定器114は、ポテンシオスタットALS760CBAS社製であった。参照電極116は飽和KCl銀/塩化銀電極RE-1C;BAS社製であった。カウンター電極117はPt電極長さ23cm、BAS社製であった。図1及び図5に示されるように、抗体103及びマルチ銅酸化酵素102を具備する担体101が、ナイロンネット122およびリング123によってグラッシーカーボン電極121電極サイズID:3mm、BAS社製に固定され、作用電極115を得た。ブランク値の算出当該作用電極115を用いて測定が行なわれた。支持電解質として10mLの酢酸緩衝液pH5.5、1mMをセルに供給した。当該セルに、作用電極115、参照電極116、及びカウンター電極117が浸漬された。当該浸漬は、担体101に含有される10mMトリス-塩酸緩衝液pH7.5が1mM酢酸緩衝液に置換されることをもたらした。25°Cにおいてポテンシオスタット法により、20mV/secの掃引速度で、開始電位0.6Vから終了電位0Vまで掃引がなされ、電流値を測定した。図6の2は、測定結果を示す。CueOの酵素活性により生じる還元電流は電位が0.6Vから0Vに近づくに従い増大した。開始電位0.6Vから0.45Vまでの期間では、酵素反応がほとんど進行しなかったため、0.45Vの電位における電流値が基準値図6における符号1として定義された。以下の等式によってブランク値が定義された。ブランク値=測定された電流値2-当該基準値1抗原の検出CueOおよび抗体が固定された担体がプラスチック製カラムの一端にセットされた。カラムに1mLのトリス-塩酸緩衝液pH7.5、10mMが流された。次に、被覆されたシリカビーズ300nm、micromod社製を含有する1mLのトリス-塩酸緩衝液25mg/mL、pH7.5、10mMが当該カラムに流された。各シリカビーズは、抗原であるBSAによって被覆されていた。当該カラムの末端より流れ出てきた溶液が回収され、再度、当該カラムに流された。これが10回、繰り返された。最後に、2mLのトリス-塩酸緩衝液10mM、pH7.5がカラムに流された。カラムから担体が取り出された。図5に示されるように、グラッシーカーボン電極121の先端に、ナイロンネット122およびリング123を用いて担体101が取付けられ、作用電極115を得た。ブランク値の測定と同様に、10mLの酢酸緩衝液pH5.5、1.0mMを含有するセルに作用電極115が浸漬された。25°Cにおいてポテンシオスタット法により、20mV/secの掃引速度で、開始電位0.6Vから終了電位0Vまで掃引がなされ、電流値を測定した。図6の3は、測定結果を示す。測定値は以下の等式により定義された。測定値=測定された電流値3-基準値1増幅率が以下の等式のように定義された:増幅率=測定値/ブランク値。0.5mM、5mM、および10mMの酢酸緩衝液pH:5.5を用いて、上記の場合と同様に増幅率が求められた。表1は、掃引電位が0.0V、0.1V、0.2V、および0.3Vである場合におけるブランク値、測定値、および増幅率を示す。表1から理解されるように、酢酸緩衝液の濃度が0.5mMまたは1.0mMである場合には、1.5以上の増幅率が得られた。一方、酢酸緩衝液の濃度が5mM以上である場合には、増幅率が小さかった。従って、1.0mM以下の濃度を有する第2の緩衝液を用いるポテンシオスタット法によって測定された増幅率が1.5以上であれば、第1の緩衝液が抗原を含有することを当業者は表1に基づいて理解するであろう。このようにして、本発明では抗原が検出される。さらに、当業者は、本発明においてラベル化抗体111が用いられていないことを容易に理解し得るであろう。"