"下記~のいずれかのDNAから成る遺伝子:配列番号1記載の塩基配列から成るDNA、配列番号2記載のアミノ酸配列をコードするDNA、配列番号1記載の塩基配列から成るDNA又はその相補配列から成るDNAと高ストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードするDNA、あるいは配列番号2記載のアミノ酸配列の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/又は付加されたアミノ酸配列から成り、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードする遺伝子。下記~のいずれかのDNAから成る遺伝子を更に含む、請求項1に記載の遺伝子:配列番号3記載の塩基配列から成るDNA、配列番号4記載のアミノ酸配列をコードするDNA、配列番号3記載の塩基配列から成るDNA又はその相補配列から成るDNAと高ストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードするDNA、あるいは配列番号4記載のアミノ酸配列の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/又は付加されたアミノ酸配列から成り、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードする遺伝子。前記フタル酸化合物がテレフタル酸及び/又はイソフタル酸である、請求項1又は2に記載の遺伝子。下記~のいずれかのDNAから成る遺伝子を更に含む、請求項1~3のいずれかの遺伝子:配列番号5記載の塩基配列から成るDNA、配列番号6記載のアミノ酸配列をコードするDNA、配列番号5記載の塩基配列から成るDNA又はその相補配列から成るDNAと高ストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、且つイソフタル酸の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードするDNA、あるいは配列番号6記載のアミノ酸配列の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/又は付加されたアミノ酸配列から成り、且つイソフタル酸の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードする遺伝子。下記~のいずれかのDNAから成る遺伝子を更に含む、請求項1~4のいずれかの遺伝子:配列番号7記載の塩基配列から成るDNA、配列番号8記載のアミノ酸配列をコードするDNA、配列番号7記載の塩基配列から成るDNA又はその相補配列から成るDNAと高ストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、且つテレフタル酸の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードするDNA、あるいは配列番号8記載のアミノ酸配列の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/又は付加されたアミノ酸配列から成り、且つテレフタル酸の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードする遺伝子。請求項1~5のいずれかの遺伝子を含むオペロン。請求項1~5のいずれかの遺伝子を含む組換えベクター。請求項7に記載の組換えベクターを含む形質転換体であって、フタル酸化合物の菌体内への取り込み能を有する形質転換体。請求項8に記載の形質転換体を、フタル酸化合物の存在下で培養し、当該培養物から2-ピロン-46-ジカルボン酸を採取することを特徴とする、当該フタル酸化合物の分解産物の製造方法。下記~のいずれかのタンパク質:配列番号2記載のアミノ酸配列から成るタンパク質、配列番号1記載の塩基配列から成るDNA又はその相補配列から成るDNAと高ストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードするDNAによってコードされるタンパク質、あるいは配列番号2記載のアミノ酸配列の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/又は付加されたアミノ酸配列から成り、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質。下記~のいずれかのタンパク質を更に含む、請求項10に記載のタンパク質:配列番号4記載のアミノ酸配列から成るタンパク質、配列番号3記載の塩基配列から成るDNA又はその相補配列から成るDNAと高ストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードするDNAによってコードされるタンパク質、あるいは配列番号4記載のアミノ酸配列の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/又は付加されたアミノ酸配列から成り、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質。微生物を用いてTPA等のフタル酸類から生分解性プラスチックの原料を発酵生産するためには、フタル酸類を菌体内へ効率良く取り込む機構の解明、そして、その取り込みに関与する遺伝子の同定が必要と考えられる。従って、本発明は、フタル酸の取り込みに関与する新規遺伝子を提供することを課題とする。ボルデテラペルツシスのbug遺伝子と相同な配列の1つに、サルモネラエンテリカSalmonellaentericaのTTTシステムを構成するtctCがある。本発明者は既に、TPA分解微生物の1つである上記E6株と近縁なコマモナステストステロニComamonastestosteroniKF1株以降、単にKF1株と称することもある中に、サルモネラエンテリカのTTTシステムを構成している遺伝子群と相同性のある2つの遺伝子群tctCBIAIとtctBIIAIIが存在していることを突き止めている。参考までに、tctBIの遺伝子配列及びそのアミノ酸配列を配列番号11及び12に、そしてtctAIの遺伝子配列及びそのアミノ酸配列を配列番号13及び14に、tctBIIの遺伝子配列及びそのアミノ酸配列を配列番号15及び16に、tctAIIの遺伝子配列及びそのアミノ酸配列を配列番号17及び18に示す。また、サルモネラエンテリカにおけるtctBの遺伝子配列及びそのアミノ酸配列を配列番号19及び20に、そしてtctAの遺伝子配列及びそのアミノ酸配列を配列番号21及び22にそれぞれ示す。本発明者がE6株中の上記tctAとtctBに対応すると考えられる遺伝子を単離し、その機能を検討した結果、これらの遺伝子がフタル酸化合物の取り込みに関与していることを見出し、本発明を完成させるに至った。E6株におけるフタル酸化合物の取り込みはTTTシステムと異なる機構であると考えられるため、後述のとおり、当該取り込み機構をTPIシステム、tctAIIをtpiA、そしてtctBIIをtpiBと命名したtpiA及びtpiBの命名はTPIシステムを説明して初めて理解可能なものになると思われます。従いまして、段落番号[0016]第2行でtpiAについて記載する必要があるため、削除された記載を復活させました。ご了承お願い致します。すなわち、本願は下記の発明を包含する:[1]下記~のいずれかのDNAから成る遺伝子tpiA:配列番号1記載の塩基配列から成るDNA、配列番号2記載のアミノ酸配列をコードするDNA、配列番号1記載の塩基配列から成るDNA又はその相補配列から成るDNAと高ストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードするDNA、あるいは配列番号2記載のアミノ酸配列の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/又は付加されたアミノ酸配列から成り、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードする遺伝子。[2]下記~のいずれかのDNAから成る遺伝子tpiBを更に含む、[1]の遺伝子:配列番号3記載の塩基配列から成るDNA、配列番号4記載のアミノ酸配列をコードするDNA、配列番号3記載の塩基配列から成るDNA又はその相補配列から成るDNAと高ストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードするDNA、あるいは配列番号4記載のアミノ酸配列の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/又は付加されたアミノ酸配列から成り、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードする遺伝子。[3]前記フタル酸化合物がテレフタル酸及び/又はイソフタル酸である、[1]又は[2]の遺伝子。[4]下記~のいずれかのDNAから成る遺伝子iphCを更に含む、[1]~[3]のいずれかの遺伝子:配列番号5記載の塩基配列から成るDNA、配列番号6記載のアミノ酸配列をコードするDNA、配列番号5記載の塩基配列から成るDNA又はその相補配列から成るDNAと高ストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、且つイソフタル酸の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードするDNA、あるいは配列番号6記載のアミノ酸配列の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/又は付加されたアミノ酸配列から成り、且つイソフタル酸の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードする遺伝子。[5]下記~のいずれかのDNAから成る遺伝子tphCIIを更に含む、[1]~[4]のいずれかの遺伝子:配列番号7記載の塩基配列から成るDNA、配列番号8記載のアミノ酸配列をコードするDNA、配列番号7記載の塩基配列から成るDNA又はその相補配列から成るDNAと高ストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、且つテレフタル酸の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードするDNA、あるいは配列番号8記載のアミノ酸配列の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/又は付加されたアミノ酸配列から成り、且つテレフタル酸の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードする遺伝子。[6][1]~[5]のいずれかの遺伝子を含むオペロン。[7][1]~[5]のいずれかの遺伝子を含む組換えベクター。[8][7]の組換えベクターを含む形質転換体であって、フタル酸化合物の菌体内への取り込み能を有する形質転換体。[9][8]の形質転換体を、フタル酸化合物の存在下で培養し、当該培養物からPDCを採取することを特徴とする、当該フタル酸化合物の分解産物の製造方法。[10]下記~のいずれかのタンパク質:配列番号2記載のアミノ酸配列から成るタンパク質、配列番号1記載の塩基配列から成るDNA又はその相補配列から成るDNAと高ストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードするDNAによってコードされるタンパク質、あるいは配列番号2記載のアミノ酸配列の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/又は付加されたアミノ酸配列から成り、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質。[11]下記~のいずれかのタンパク質を更に含む、[10]のタンパク質:配列番号4記載のアミノ酸配列から成るタンパク質、配列番号3記載の塩基配列から成るDNA又はその相補配列から成るDNAと高ストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードするDNAによってコードされるタンパク質、あるいは配列番号4記載のアミノ酸配列の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/又は付加されたアミノ酸配列から成り、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質。本発明によれば、ペットボトルの原料として広く工業的に使用されているフタル酸化合物の分解能を有する微生物に当該化合物を取り込む能力がないか、あるいは当該能力が低い場合であっても、本発明の遺伝子を当該微生物内で発現させることで、細胞内への取り込み能を獲得又は向上させることが可能になる。TPIシステムを構成する大膜タンパク質TpiA及び小膜タンパク質TpiBコマモナススピーシーズE6株は、プラスチック等の原材料であるテレフタル酸を菌体内に取り込み、且つ分解する能力を有する。他の微生物におけるTTTシステムとの相同性に基づき単離された同株のtpiBA遺伝子は、TTTシステムでは確認されていない、テレフタル酸等の芳香族化合物の菌体内への取り込みに関与する。従って、本明細書においては、tpiA遺伝子tripartitetransporterofphthalateisomersA塩基配列を配列番号1で示すと、tpiB遺伝子塩基配列を配列番号3で示すが関与するフタル酸化合物のトランスポーター機能をTPIシステムと称する。TTTシステムは、ペリプラズムに局在するSBPTctC、12回膜貫通α-ヘリックスを有する大膜タンパク質TctA及び4回膜貫通α-ヘリックスを持つ小膜タンパク質TctBにより構成されている。tpiA及びtpiBは、TctA及びTctBをコードする遺伝子と相同性があり、また、TMHMMServerv20httpwwwcbsdtudkservicesTMHMMでの膜貫通領域予測の解析結果結果は示さずから、それぞれtpiA及びtpiBと同様に大膜タンパク質及び小膜タンパク質を構成していると考えられる。事実、テレフタル酸の取り込み試験の結果図2は、tpiAが膜タンパク質をコードする遺伝子であることを示唆している。本明細書では、当該大膜タンパク質をTpiAアミノ酸配列を配列番号2で示すと、そして当該小膜タンパク質をTpiBアミノ酸配列を配列番号4で示すと称する。尚、TpiA及びTpiBはそれぞれ、全長アミノ酸配列の比較で、サルモネラエンテリカのTctAと39.5及びTctBと22.3一部では25.3、そしてKF1株のtctAIIと98.4及びtctBIIと93.9のアミノ酸同一性を有する。本発明のtpiA及びtpiBは、後述するように、E6株と近縁のKF1株中の遺伝子を参考にプライマーを作成し、当該プライマーを用いて全DNAからPCRにより増幅して得られた増幅産物の塩基配列を決定することで単離された。しかしながら、本発明の遺伝子の取得方法は特に限定されず、例えば、本明細書に開示されている当該遺伝子の塩基配列の情報に基づいて適当なプローブやライブラリーを調製し、それらを用いて、菌株のcDNAライブラリーやゲノムDNAライブラリーをスクリーニングすることで得ることができる。具体的には、本発明の遺伝子を発現する微生物、例えばコマモナススピーシーズE6株より、常法に従ってゲノムDNAライブラリーを調製し、当該ライブラリーから、本発明遺伝子に特有の適当なプローブ等を用いて所望クローンを選択することにより製造することができる。微生物株からの全RNAの分離、mRNAの分離及び精製、ゲノムDNAの取得及びそのクローニングなどは、いずれも常法に従って行うことができる。上記方法において用いられるプローブとしては、本発明の遺伝子の塩基配列に関する情報をもとにして化学合成されたDNAなどが一般的に使用できる。また、本発明の遺伝子の塩基配列情報に基づき設定したセンスプライマー及びアンチセンスプライマーを、スクリーニング用プローブとして用いることができる。本発明の遺伝子の取得に際しては、PCRScience,230,13501985によるDNA増幅法が好適に利用できる。増幅させたDNA断片の単離精製は、常法に従って行うことができる。例えば、ゲル電気泳動法などが挙げられる。上記方法に従って得られる本発明の遺伝子は、例えばジデオキシ法Proc.Natl.Acad.Sci,USA,74,54631977、マキサム-ギルバート法MethodsinEnzymology,65,4991980などの常法に従って、その塩基配列を決定することができる。また、簡便には、市販のシークエンスキットなどを用いて、その塩基配列を決定することができる。tpiA配列番号1及びtpiB配列番号3は、対応する配列番号によって特定されるDNA分子や、そのアミノ酸配列をコードするDNA分子の他に、そのDNA分子と相補的な塩基配列からなるDNAと高ストリンジェントな条件でハイブリダイズし、且つそのDNA分子と同一の活性を有するポリペプチドをコードするDNA分子も含まれる。ここで、本明細書で使用する場合、高ストリンジェントな条件とは、いわゆる特異的なハイブリッドが形成され、非特異的なハイブリッドが形成されない条件をいう。高ストリンジェントな条件としては、同一性が高いDNA同士がハイブリダイズし、それより同一性が低いDNA同士がハイブリダイズしない条件、例えば、MolecularcloningaLaboratorymanual2ndeditionSambrookら、1989に記載の条件が挙げられる。具体的には、通常のサザンハイブリダイゼーションにおける洗浄の条件である60°C、1×SSC、01SDS、好ましくは、01×SSC、01SDSで相当する塩濃度でハイブリダイズする条件が挙げられる。高ストリンジェントでハイブリダイズするDNAに加え、本発明の遺伝子tpiA及びtpiBは、それぞれ、TpiAのアミノ酸配列配列番号2の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/又は付加されたアミノ酸配列から成り、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードするDNA分子、及びTpiBのアミノ酸配列配列番号4の1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/又は付加されたアミノ酸配列から成り、且つフタル酸化合物の菌体内への取り込みに関与するタンパク質をコードするDNA分子、であってもよい。本明細書で使用する場合、フタル酸化合物とは、テレフタル酸やイソフタル酸等の芳香族カルボン酸を意味する。好ましい態様において、フタル酸化合物はテレフタル酸又はイソフタル酸である。中でも、テレフタル酸が特に好ましい。更に、1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/又は付加されたアミノ酸配列とは、各配列番号によって特定されるアミノ酸配列と比較して、所望の機能を失わない範囲の数のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加された変異アミノ酸配列を意味する。tpiA又はtpiBと高ストリンジェントな条件でハイブリダイズするDNAによってコードされるタンパク質、あるいはTpiA又はTpiBの上記変異アミノ酸配列に対応するタンパク質は、元の遺伝子配列によってコードされるタンパク質と同じ機能、すなわち、フタル酸化合物の輸送に関与するものでなくてはならない。例えば、本明細書の実施例に記載の基質取り込み実験において、TpiAやTpiBのフタル酸化合物取り込み能と同程度、例えば70以上、好ましくは80以上、更に好ましくは90以上、より好ましくは100以上の取り込み能を示すものは本発明の範囲内に含まれ得る。オペロン本発明の遺伝子は、フタル酸化合物の取り込みに関与する複数の遺伝子がポリシストロニックに転写されるオペロンとして存在していてもよい。本明細書で使用する場合、オペロンとは、機能的に関連した複数のタンパク質の合成に関与する一群が結合した遺伝子単位を意味する。オペロンは、本発明の遺伝子に加え、その調節遺伝子を含む。調節遺伝子は公知のものでよく、本発明の遺伝子の発現を調節するために、当業者により適宜選択され得る。ベクター本発明のベクターは、上記遺伝子を含む組換えベクターである。本発明のベクターにおいては、上記の遺伝子がすべて一つの発現ベクター内に含まれるように構成されていてもよく、あるいは、後述する遺伝子も含め、2グループ以上に分かれて、それぞれ別個の発現ベクターに含まれるように構成されていてもよい。発現ベクターにおいて、本発明の遺伝子は、プロモーターとターミネーターとの間に挿入することができる。しかしながら、本発明で使用する遺伝子の配置はこの位置に限定されない。本発明の遺伝子を挿入するためのベクターは、宿主中で複製可能なものであれば特に制限されず、例えば、プラスミドDNA、ファージDNAなどが挙げられる。プラスミドDNAとしては、pBR322、pBR325、pUC118、pUC119、pET21、pET28、pGEX4T、pQE30、pQE60などの大腸菌宿主用プラスミド、pUB110、pTP5などの枯草菌用プラスミド、YEp13、YEp24、YCp50などの酵母宿主用プラスミド、pBI221、pBI121などの植物細胞宿主用プラスミドなどが挙げられる。ファージDNAとしてはλファージなどが挙げられる。更に、レトロウイルス又はワクシニアウイルスなどの動物ウイルス、バキュロウイルスなどの昆虫ウイルスベクターを用いることもできる。本発明に係る遺伝子をベクターに挿入するには、まず、本発明に係る遺伝子を有する精製されたDNAを適当な制限酵素で切断し、適宜末端を平滑化、脱リン酸化等した後、適当なベクターDNAの制限酵素部位又はマルチクローニングサイトに挿入してベクターに連結する方法などが採用される。本発明のベクター内でのtpiA及びtpiB並びに後述するiphC及びtphCIIの配置は、適当なプロモーターの後である限り、特に限定されない。後述のとおり、実施例においては、本発明の遺伝子は各ORFの上流域、下流域を含むゲノム部分断片として連結されている図5。本発明の遺伝子は、各遺伝子の機能が発揮されるようにベクターに組み込むことができる。すなわち、ベクターは、本発明に係る各遺伝子、プロモーター、所望によりエンハンサーなどのシスエレメント、スプライシングシグナル、ポリA付加シグナル、選択マーカー、リボソーム結合配列シャインダルガノ配列などを含むように調製することができる。選択マーカーとしては、例えば、アンピシリン耐性遺伝子、ネオマイシン耐性遺伝子、ジヒドロ葉酸還元酵素遺伝子などを使用することができる。プロモーターとしては、大腸菌などの宿主中で発現できるものであればいずれを用いてもよい。例えばlacプロモーター、trpプロモーター、PLプロモーター、PRプロモーターなどの大腸菌由来のものやT7プロモーターなどのファージ由来のものが用いられる。更に、tacプロモーターなどのように人為的に設計改変されたプロモーターを用いてもよい。形質転換体tpiA、更にはtpiB、任意にiphC及び/又はtphCIIを含む組換えベクターを、これらの遺伝子が発現し得るように宿主中に導入することにより、宿主を形質転換することができる。形質転換の方法としては、プロトプラスト法、コンピテントセル法、エレクトロポレーション法等が挙げられる。宿主としては、本発明の遺伝子群を発現できるものであれば特に限定されるものではない。例えば、エッシェリヒアコリEscherichiacoliなどのエッシェリヒア属、バチルスズブチリスBacillussubtilisなどのバチルス属、シュードモナスプチダPseudomonasputidaなどのシュードモナス属、コマモナステストステロニComamonastestosteroniなどのコマモナス属、リゾビウムメリロティRhizobiummelilotiなどのリゾビウム属に属する細菌類の他に、サッカロマイセスセレビシエSaccharomycescerevisiae、シゾサッカロマイセスポンベSchizosaccharomycespombe、ピヒアパストリスPichiapastorisなどの酵母;シロイヌナズナ、タバコ、トウモロコシ、イネ、ニンジンなどから株化した植物細胞や該植物から調製したプロトプラスト;COS細胞、CHO細胞などの動物細胞;及び、Sf9、Sf21などの昆虫細胞が挙げられる。フタル酸化合物を分解する酵素を発現しているにも拘わらず、その取り込み能がないか又は低い宿主が好ましい。形質転換体の選択は、形質転換に使用するベクターの選択マーカー、例えば形質転換体のDNA組換えにより獲得する薬剤耐性を指標にすることができる。薬剤耐性マーカーとしては、例えば、カナマイシン耐性遺伝子、アンピシリン耐性遺伝子、テトラサイクリン耐性遺伝子等が挙げられる。これらの形質転換体の中から目的の組換えベクターを含有する形質転換体の選択は、例えば遺伝子の部分的なDNA断片をプローブとして用いたコロニーハイブリダイゼーション法により行うのが好ましい。プローブの標識としては、例えば放射性同位元素、ジゴキシゲニン、酵素等を用いることができる。フタル酸化合物の分解産物の製造方法上述のように得られた組換えベクターは、フタル酸化合物を分解する能力を本質的に有するか、あるいは形質転換等により獲得しているものの、フタル酸取り込み能がない、又は取り込み能が低い所望の細胞に導入することができる。それにより、当該細胞は、取り込み可能となったフタル酸化合物に加え、糖類、窒素源、金属塩、ミネラル、ビタミン等を含む培地を用いて、適当な条件下で培養することで、フタル酸化合物の分解産物、例えば12ジヒドロキシ35シクロヘキサジエン14ジカルボン酸DCD、プロトカテク酸PCA、更には2-ピロン-46-ジカルボン酸PDCを製造することができる。更に、フタル酸化合物を2-ピロン-46-ジカルボン酸PDCまで分解するのに適した酵素をコードしている組換えベクターを本発明の遺伝子を含む組換えベクターと併用することで、所望のフタル酸化合物分解産物の収率が増大し得る。培地のpHは、形質転換体が生育し得る範囲のpHであればよく、pH6~8程度に調整するのが好適である。培養は、好気的条件下で、15~40°C、好ましくは28~37°Cで基質を投入してから少なくとも6時間、典型的には1~7日間振盪又は通気攪拌培養すればよい。フタル酸化合物の取り込み能は、TTTファミリーのbug遺伝子と相同性のあるiphC遺伝子YukiFukuharaetalAppliedandEnvironmentalMicrobiologyJan2010pp519527やtphCII遺伝子を上記遺伝子とともに発現させることで更に向上し得る。これらの論文において、iphC遺伝子periplasmicsolutebindingreceptorgenes及びtphCII遺伝子periplasmicTPAbindingreceptorの破壊株がそれぞれ特定のpHにおいてイソフタル酸中及びテレフタル酸中で生育できなかったことから、各遺伝子がイソフタル酸及びテレフタル酸の取り込みに関与していることが示唆されている。iphC遺伝子及びtphCII遺伝子の塩基配列をそれぞれ配列番号5及び配列番号7で示し、そしてそれらの遺伝子によりコードされるタンパク質のアミノ酸配列をそれぞれ配列番号6及び配列番号8で示す。iphC遺伝子及びtphCII遺伝子は、本発明の遺伝子のみならず本発明のオペロンやベクター内に組み込まれ得る。その調製方法についても、本発明の遺伝子について詳述したように調製することができる。以下、具体例を挙げて、本発明を更に具体的に説明する。なお、本発明はこれにより限定されるものではない。実施例1tpiA遺伝子の単離AE6株の全DNAの単離E6株を10mlのLB培地で一晩培養して集菌した後、1mlのSTEバッファー10mMTrisHCl、1mMEDTA、100mMNaClで洗浄した。300μlのSTEバッファーに菌体を懸濁させ、当該懸濁液に1mgのリゾチーム生化学工業株式会社を溶解した100μlのSTEバッファーを加えて混合し、37°Cにて1時間反応させた。以降の操作はボルテックスミキサーによる撹拌、ピペッティング処理を経由せずに行った。上記反応液に対し、01mgのプロテインキナーゼK和光純薬工業株式会社を溶解した50μlのSTEバッファーを添加して混合した後、更に37°Cで1時間静置した。その後、終濃度05のSDSを添加して65°Cで1時間以上保温した。保温後の試料を複数回フェノール/クロロホルム抽出にかけた後、得られた上清に当量のイソプロピルアルコールを添加して穏やかに転倒混和した。混和された試料を遠心分離にかけ、得られたペレットを70エタノールにより洗浄した後、風乾して10μgmlのRNase和光純薬工業株式会社を含むTEバッファー10mMTrisHCl、1mMEDTAに溶解し、37°Cにて1時間以上RNA消化を行った。Bプローブの作製pT7tctAIIをBamHINdeIで消化したものを、08アガロースゲル電気泳動にかけ、ゲルからQIAEXIIGelExtractionKitを用いて増幅断片を切り出し、1μgのDNAを15μlの滅菌蒸留水に溶解した。溶液を沸騰水中で10分間熱変性させ、氷上で5分間急冷した。フラッシュ後、当該溶液に2μlのヘキサヌクレオチド混合液、2μlのジゴキシゲニン標識dUTPを含むdUTP標準混合液、1μlのKlenow酵素を添加し、37°Cで20時間静置した。その後、上記溶液に200μMのEDTAを2μl加えて酵素反応を停止させ、4M塩化リチウム溶液を25μl、エタノールを75μl加え、80°Cで30分間静置し、4°Cで15000rpmの遠心分離を10分間行った。得られたペレットを70エタノールで洗浄し、50μlのTEバッファーに溶解した。Cサザンハイブリダイゼーション解析本実施例における以下のサザンハイブリダイゼーションの基本的な実験操作は、DIGLabelingKit及び検出キットRocheDiagnostics社に従った。上述のようにして得られたE6株の全DNAを各制限酵素で消化した。各消化物を08アガロースゲル電気泳動で分離した後、ゲルを025N塩酸で30分間振盪した後、溶液を捨てゲルを蒸留水で2回洗浄し、ゲルを中和溶液中で30分間振盪した。トランスファーはナイロンメンブレンHybondNAmershamBioscience社を用いて、バキュームブロッダーにより5mHg、90分の条件で行った。トランスファー後のメンブレンを2xSSC03MNaCl、003Mクエン酸ナトリウム;pH70で洗浄、乾燥した後、5分間UV照射してメンブレンにDNAを固定した。上記メンブレンは、20mlのハイブリダイゼーションバッファー2xSSC、1ブロッキング試薬、1Nラウリルサルコシン、1SDSを含むハイブリダイゼーションボトル中、65°Cで1時間プレハイブリダイゼーションを行った。10分間煮沸後10分間急冷した前記プローブと、上記ハイブリダイゼーションバッファーのうちの3mlとを混合し、その溶液中、65°Cで6時間ハイブリダイゼーションを行った。ハイブリダイゼーションが終了したメンブレンを洗浄液2xSSC、01SDSで2回洗浄した後、洗浄液201xSSC、01SDSを用いて65°Cで1時間の洗浄を2回行った。酵素標識抗体AntiDigoxygeninAPconjugateを使用したELISA法によりメンブレン上のDNAを標識した後、発色基質1875mgmlニトロブルーテトラゾリウムクロリド及び94mgmlの5ブロモ4クロロ3インドリルホスフェートトルイジン塩67DMSOを添加してメンブレン上のシグナルを検出した。D推定tctA遺伝子の単離KF1株中のtctA遺伝子に相当する遺伝子をE6株から単離するべく、コロニーハイブリダイゼーションを試みた。E6株のEcoRI消化シャロミドライブラリーを含むEcoliDH5αの菌体液を希釈し、アンピシリンを含むLB寒天培地に200~300コロニー/プレートが生育するように37°Cで培養した。気泡が入らないようプレート上にHybondNメンブレンを軽く載せ、1分経過後、メンブレンをプレートから剥離させ、菌体接触面を上にして、10SDS、変性溶液、中和溶液、及び2xSSCで湿らせた3MM濾紙上にそれぞれ3分、7分、3分2回、及び5分浸した。2xSSCを含むビーカー中で、コロニーの破片が完全に取れるまで上記メンブレンを激しく洗浄後、コロニー側を上にしてメンブレンを風乾した。メンブレンをラップに包み、5分間UV処理してDNAの固定を行った。以降の操作は、上記Cサザンハイブリダイゼーション解析に記載のとおり行い、また、プローブは上記Bプローブの作製にて作製したもの405bpのPCR増幅断片を含むBamHINdeI断片。EtpiA遺伝子の増幅と増幅断片の塩基配列決定サルモネラエンテリカにおけるTTTシステムの膜タンパク質成分であるtctAと403の相同性が見られたKF1株のtctAIIの塩基配列に基づいて、tctAII遺伝子増幅プライマー4157F配列番号9と4157R5CGGTCAGCTCAGGAATATCG3配列番号10を設計した。かかるプライマーを用いて、上述のとおり調製したE6株の全DNAを鋳型としてPCRを行った結果、KF1株で予想される増幅サイズである約450bpの増幅断片が得られた。増幅されたDNA断片をpT7BlueにTAクローニングしたプラスミドpT7tctAIIを作製し、452bpの塩基配列を決定した。FtpiA遺伝子の単離上記Bプローブの作製に記載されている方法に従い、452bpのPCR増幅断片を含むプローブを作製し、全DNAの各制限酵素消化物に対し、上述のとおりサザンハイブリダイゼーション解析を行った。その結果、EcoRI消化物において約80kbにシグナルが見られた。そこで、E6株のEcoRI消化シャロミドライブラリーに対し、上述したようなコロニーハイブリダイゼーション解析を行い、1つのポジティブクローンを得た。GtpiA遺伝子及び周辺領域の塩基配列決定前記ポジティブクローンより抽出したプラスミドpCTC80より80kbのEcoRI断片を切り出し、pBluescriptIIKSのEcoRIサイトへ挿入したプラスミドpKSS80FとpKSS80Rを得た。単離した80kbのEcoRI断片の塩基配列を決定し、KF1株のtctBIIproteinofunknownfunctionと939の同一性を示したORFをtpiB、tctAIIproteinofunknownfunctionと984の同一性を示したORFをtpiAとした。実施例2tpiA遺伝子の機能解析AtpiA遺伝子破壊株の作製E6株中のtpiA遺伝子を破壊するために、相同組み換えによりtpiA中のApaIサイトにカナマイシン耐性遺伝子を挿入した。この株は、tpiA遺伝子およびカナマイシン耐性遺伝子をプローブに用いたサザンハイブリダイゼーション解析によりtpiA遺伝子の破壊を確認した図1。このtpiA遺伝子破壊株をDKTPA株とした。Bテレフタル酸TPAの取り込み能評価E6株及びDKTPA株を10mMのコハク酸を含む10mlのW培地で12時間前培養した後、5000rpm、10分、4°Cで集菌した。5mlのW培地で2回菌体を洗浄した後、3mlの同培地に懸濁した。10mMのコハク酸及び10mMのテレフタル酸TPAを含む10mlのW培地にOD600が02になるように植菌して4時間本培養を行った。培養後、5000rpm、10分、4°Cで集菌した。pH75に調整した50mMTrisMESバッファーを5ml用いて7000rpm、3分、4°Cで2回洗浄した後、OD600が約20になるように同培地に懸濁した。14Cで放射線ラベルされたテレフタル酸14CTPAを最終濃度が130μMになるように50mMTrisMESバッファーpH75に希釈しTPAWorksolutionとした。50mMTrisMESバッファーpH75485μlにOD600を約20に調整した菌体をOD600が約20になるように65μl加え、30°Cで3分インキュベートした後に、TPAWorksolutionを14CTPAが最終濃度20μMとなるように100μl加えて全量650μlとし反応を開始した。反応後10秒、30秒、1分、2分、及び3分で100μlのサンプルを回収し、マルチフィルターFLE712AAADVNTECを用いてニトロセルロースメンブレンフィルターADVANTECにトラップした。上記メンブレンフィルターを50mMTrisMESバッファーpH75で3回洗浄した後、液体シンチレーションカクテル溶液エコシンチHNationalDiagnosticsIncに菌体をフィルターごと溶解させ、液体シンチレーションカウンターALOKAAccuFLEXLSC7400で放射線量を測定した図2。またタンパク質量は、Lowly法を用いたBioRadのDCProteinAssayに従って測定した。結果、DKTPA株がテレフタル酸TPAを取り込まなかったことから、TpiAはテレフタル酸TPAの取り込みに関与することが明らかになった。また、その速度は約3nmolmgminであることが示された。実施例3tpiA遺伝子破壊株のフタル酸化合物取り込み能評価E6株を10mlのLB培地で、DKTPA株を50mgLのカナマイシンを含むLB培地でそれぞれ前培養した。E6株を10mMテレフタル酸TPA、もしくはイソフタル酸IPAを含むW培地に、DKTPA株を50mgLのカナマイシンを含む10mMテレフタル酸TPA、もしくはイソフタル酸IPAを含むW培地にそれぞれ濁度が01となるように植菌した。30°Cにて培養し、定期的に濁度の測定を行った結果、DKTPA株はテレフタル酸TPAおよびイソフタル酸IPAでの生育能を失っていた図3及び4。実施例4tpiA遺伝子を含む組換えプラスミドによる形質転換体の作製A組換えプラスミドpJBtpiAの作製1pBluescriptIIKSにtpiA遺伝子およびtpiB遺伝子を含む80kbEcoRI断片が挿入されたプラスミドpKSS80をNaeIで制限酵素消化し、tpiAB遺伝子を含む約26kbNaeI断片を得た。得られた断片をpBluescriptIIKSのSmaI部位に導入し、pKStpiABRを構築した。pKStpiABRをSacIおよびXhoIで制限酵素消化し、tpiAB遺伝子を含む約26kbSacIXhoI断片をpJB866のSacIXhoI部位に導入しpJBtpiABを構築した図5。pJBtpiABを鋳型にし、3’側にXhoIを付加したプライマーtpiAendRCTCGAGTATTTTGCCGCCCTAATCC配列番号11及びtpiAendFATGATGGAAGAAAACCTGCG配列番号12を用いてtpiAの3末端領域をExTaqポリメラーゼTaKaRaを用いてPCR増幅を行った。得られたPCR断片274bpをTAクローニングにてpT7Blueに導入し、pT7tpiAを構築した図5。シークエンス解析により増幅産物にエラーが無いことを確認した後、pT7tpiAをPstI及びXhoIで制限酵素消化し、tpiAの3末端領域を含む約01kbのPstIXhoI断片をpBluescriptIIKSのPstIXhoI部位に導入し、pKStAeを構築した。次にpJBtpiABをPstIで制限酵素消化し、tpiAを含む約15kbPstI断片をpKStAeのPstI部位に導入しpKStpiAを構築した。pKStpiAをNotI及びXhoIで制限酵素消化し、tpiA全長を含む約16kb断片をpJB866のNotIXhoI部位に導入し、tpiA組み換え用プラスミドpJBtpiAを構築した図5。BDKTPA株へのプラスミドの導入tpiAをもつプラスミドpJBtpiA、又はpJB866を大腸菌JM109株に形質転換し、25mgLのテトラサイクリンを含むLB培地10mlで、37°Cで18時間振とう培養し、増殖した培養細胞から組み換えプラスミドpJBtpiA、又はpJB866を抽出した。DKTPA株を、50mgLのカナマイシンを含むLB液体培地200mlで、30°C、24時間培養し氷中で30分冷却した。4°C、10分、10000rpmで遠心集菌し、200mlの3Mスクロース溶液で温和に洗浄後再び遠心集菌した。続いて5Mスクロース溶液に懸濁し0°Cにて保持した。上記プラスミドpJBtpiA、又はpJB866を約005μgを含む蒸留水4μlを02cmのキュベットに入れ、5Mスクロース溶液に懸濁した細胞液40μlを加え、エレクトロポレーションにかけた。上記処理した細胞全量を10mlのLB液体培地に接種し、30°Cで12時間培養した。培養後遠心によって菌体を集め25mgLのテトラサイクリンを含むLB平板に塗布し30°Cで48時間培養し、プラスミドpJBtpiA、又はpJB866を保持するテトラサイクリン耐性を示す形質転換株を得た。プラスミドpJBtpiAを保持する株をDKTPAtpiA株、プラスミドpJB866を保持する株をDKTPAnegative株とした。CtpiA遺伝子を有する形質転換体のフタル酸化合物中での生育DKTPA株を50mgLのカナマイシンを含むLB培地で、DKTPAnegative株を50mgLのカナマイシンと25mgLのテトラサイクリンを含むLB培地で、DKTPAtpiA株を50mgLのカナマイシンと25mgLのテトラサイクリンを含むLB培地でそれぞれ前培養した。DKTPA株を50mgLのカナマイシンを含む10mMテレフタル酸TPA、もしくはイソフタル酸IPAを含むW培地に、DKTPAnegative株を50mgLのカナマイシンと25mgLのテトラサイクリンを含む10mMテレフタル酸TPA、もしくはイソフタル酸IPAを含むW培地に、DKTPAtpiA株を50mgLのカナマイシンと25mgLのテトラサイクリンを含む10mMテレフタル酸TPA、もしくはイソフタル酸IPAを含むW培地に、それぞれ濁度が01となるように植菌した。上記培地を30°Cにて培養し、定期的に濁度の測定を行った結果、DKTPAtpiA株でのみテレフタル酸TPAおよびイソフタル酸IPAでの生育能を獲得した図6、図7。"