"大腸菌Escherichiacoliを検出するための配列番号1~6に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第一のプローブ群、リステリアListeria属を検出するための配列番号7~13に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第二のプローブ群、カンピロバクターCampylobacter属を検出するための配列番号14~19に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第三のプローブ群、腸炎ビブリオVibrioparahaemolyticusを検出するための配列番号20~24に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第四のプローブ群、黄色ブドウ球菌Staphylococcusaureusを検出するための配列番号25~29に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第五のプローブ群、サルモネラSalmonella属を検出するための配列番号30~40に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第六のプローブ群、及び、セレウスBacilluscereusを検出するための配列番号41~49に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第七のプローブ群のうち二群以上からそれぞれ一又は二以上選択されたプローブを固定化したことを特徴とする食中毒菌検出用担体。前記第一から第七のプローブ群の全ての群からそれぞれ一又は二以上選択されたプローブを固定化したことを特徴とする請求項1記載の食中毒菌検出用担体。配列番号1~49に示す塩基配列を有するプローブ及び/又はこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブを固定化したことを特徴とする請求項1又は2記載の食中毒菌検出用担体。前記プローブが、以下のa~gの基準に従って選択されたものであることを特徴とする請求項1~3のいずれかに記載の食中毒菌検出用担体。a大腸菌Escherichiacoliを検出するためのプローブは、当該食中毒菌のゲノムに含まれるヒートショックタンパク遺伝子dnaJ及び/又はウリジンモノリン酸キナーゼ遺伝子pyrHから選択する。bリステリアListeria属を検出するためのプローブは、当該食中毒菌のゲノムに含まれるヒートショックタンパク遺伝子dnaJから選択する。cカンピロバクターCampylobacter属を検出するためのプローブは、当該食中毒菌のゲノムに含まれるリボソーム遺伝子16srDNAから選択する。d腸炎ビブリオVibrioparahaemolyticusを検出するためのプローブは、当該食中毒菌のゲノムに含まれる耐熱性溶血毒素遺伝子tdhから選択する。e黄色ブドウ球菌Staphylococcusaureusを検出するためのプローブは、当該食中毒菌のゲノムに含まれるヒートショックタンパク遺伝子dnaJから選択する。fサルモネラSalmonella属を検出するためのプローブは、当該食中毒菌のゲノムに含まれる侵入性因子関連遺伝子invAから選択する。gセレウスBacilluscereusを検出するためのプローブは、当該食中毒菌のゲノムに含まれる溶血活性を示さないエンテロトキシン分泌遺伝子nhe及び/又はセレウリド合成酵素遺伝子cesBから選択する。前記第一から第七のプローブ群における少なくともいずれかのプローブが、以下の1~3のいずれかであることを特徴とする請求項1~4のいずれかに記載の食中毒菌検出用担体。1配列番号に示す塩基配列において、1又は数個の塩基が欠損、置換又は付加されたプローブ。2配列番号に示す塩基配列に対して相補的な塩基配列からなる核酸断片に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズできるプローブ。31又は2のプローブに対して相補的な塩基配列を有するプローブ。大腸菌EscherichiacoliのDNAを増幅するための配列番号50に示す塩基配列からなるプライマー及び配列番号51に示す塩基配列からなるプライマーを備えた第一のプライマーセットと、リステリアListeria属のDNAを増幅するための配列番号52に示す塩基配列からなるプライマー及び配列番号53に示す塩基配列からなるプライマーを備えた第二のプライマーセットと、カンピロバクターCampylobacter属のDNAを増幅するための配列番号54に示す塩基配列からなるプライマー及び配列番号55に示す塩基配列からなるプライマーを備えた第三のプライマーセットと、腸炎ビブリオVibrioparahaemolyticusのDNAを増幅するための配列番号56に示す塩基配列からなるプライマー及び配列番号57に示す塩基配列からなるプライマーを備えた第四のプライマーセットと、黄色ブドウ球菌StaphylococcusaureusのDNAを増幅するための配列番号58に示す塩基配列からなるプライマー及び配列番号59に示す塩基配列からなるプライマーを備えた第五のプライマーセットと、サルモネラSalmonella属のDNAを増幅するための配列番号60に示す塩基配列からなるプライマー及び配列番号61に示す塩基配列からなるプライマーを備えた第六のプライマーセットと、セレウスBacilluscereusのDNAを増幅するための配列番号62に示す塩基配列からなるプライマー及び配列番号63に示す塩基配列からなるプライマーを備えた第七のプライマーセットと、セレウスBacilluscereusのDNAを増幅するための配列番号64に示す塩基配列からなるプライマー及び配列番号65に示す塩基配列からなるプライマーを備えた第八のプライマーセットと、からなる群のうち、二以上のプライマーセットと、試料のゲノムDNAと、核酸合成酵素と、核酸合成基質とを含有するPCR用反応液を用いて、前記試料中に前記二以上のプライマーセットの少なくともいずれかに対応する食中毒菌のゲノムDNAが含まれている場合、PCR法により当該食中毒菌の核酸の増幅を行い、大腸菌を検出するための、配列番号1~6に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第一のプローブ群、リステリアを検出するための配列番号7~13に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第二のプローブ群、カンピロバクターを検出するための配列番号14~19に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第三のプローブ群、腸炎ビブリオを検出するための配列番号20~24に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第四のプローブ群、黄色ブドウ球菌を検出するための配列番号25~29に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第五のプローブ群、サルモネラを検出するための配列番号30~40に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第六のプローブ群、及び、セレウスを検出するための配列番号41~49に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第七のプローブ群のうち、前記二以上のプライマーセットに対応する食中毒菌に対応する二群以上からそれぞれ一又は二以上選択されたプローブを固定化した食中毒菌検出用担体に、前記増幅により得られた増幅産物を接触させ、前記固定化されたプローブにハイブリダイズさせることにより、食中毒菌を検出することを特徴とする食中毒菌の検出方法。配列番号50~65に示す塩基配列からなる各プライマーと、試料のゲノムDNAと、核酸合成酵素と、核酸合成基質とを含有するPCR用反応液を用いて、前記試料中に、少なくとも大腸菌、リステリア、カンピロバクター、腸炎ビブリオ、黄色ブドウ球菌、サルモネラ、及びセレウスのいずれかの食中毒菌が含まれている場合、PCR法により当該食中毒菌の核酸の増幅を行い、前記第一から第七のプローブ群の全ての群からそれぞれ一又は二以上選択されたプローブを固定化した食中毒菌検出用担体に、前記増幅により得られた増幅産物を接触させ、前記固定化されたプローブにハイブリダイズさせることにより、食中毒菌を検出することを特徴とする請求項6記載の食中毒菌の検出方法。配列番号1~49に示す塩基配列を有するプローブ及び/又はこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブを固定化した食中毒菌検出用担体に、前記増幅により得られた増幅産物を接触させ、前記固定化されたプローブにハイブリダイズさせることにより、食中毒菌を検出することを特徴とする請求項7記載の食中毒菌の検出方法。前記プライマーが、以下のA又はBであることを特徴とする請求項6~8のいずれかに記載の食中毒菌の検出方法。A配列番号50~65に示す塩基配列において1又は数個の塩基が欠損、置換又は付加されたプライマー。B配列番号50~65に示す塩基配列に対して相補的な塩基配列からなる核酸断片に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズできる核酸断片からなるプライマー。請求項6~9のいずれかのプライマーセットに対して、相補的な塩基配列を有するプライマーからなるプライマーセットを用いて、前記PCR法による核酸の増幅を行うことを特徴とする食中毒菌の検出方法。前記第一から第七のプローブ群における少なくともいずれかのプローブが、以下の1~3のいずれかであることを特徴とする請求項6~10のいずれかに記載の食中毒菌の検出方法。1配列番号に示す塩基配列において、1又は数個の塩基が欠損、置換又は付加されたプローブ。2配列番号に示す塩基配列に対して相補的な塩基配列からなる核酸断片に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズできるプローブ。31又は2のプローブに対して相補的な塩基配列を有するプローブ。ここで、大腸菌、リステリア、カンピロバクター、腸炎ビブリオ、黄色ブドウ球菌、サルモネラ、セレウスの七種類の食中毒菌は、細菌性食中毒の原因の90以上を占めている。したがって、これら七種類の食中毒菌が、食品や環境などに存在しているか否かを同時かつそれぞれ特異的に検出することができれば、大変有用である。ところが、これらの複数の食中毒菌を、それぞれ特異的に一括同時検出するためには、プローブに優れた特異性が必要である。そのようなプローブの設計は容易ではなく、これらの複数の食中毒菌を一括検出可能なプローブを固定化したDNAマイクロアレイなどは、従来見られなかった。そこで、本発明者らは鋭意研究し、数多くの実験を繰り返し行った結果、上記七菌種における八領域の毒素領域遺伝子又は生体内必須遺伝子を検出の対象とし、これら七菌種の食中毒菌をそれぞれ特異的に一括検出可能なプローブを開発することに成功し、本発明を完成させた。すなわち、本発明は、大腸菌Escherichiacoli、リステリアListeria属、カンピロバクターCampylobacter属、腸炎ビブリオVibrioparahaemolyticus、黄色ブドウ球菌Staphylococcusaureus、サルモネラSalmonella属、セレウスBacilluscereusのうちの二種以上の食中毒菌を同時に特異的に一括検出可能な食中毒菌検出用担体、及び食中毒菌の検出方法を提供することを目的とする。本発明の食中毒菌検出用担体は、大腸菌を検出するための配列番号1~6に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第一のプローブ群、リステリアを検出するための配列番号7~13に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第二のプローブ群、カンピロバクターを検出するための配列番号14~19に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第三のプローブ群、腸炎ビブリオを検出するための配列番号20~24に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第四のプローブ群、黄色ブドウ球菌を検出するための配列番号25~29に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第五のプローブ群、サルモネラを検出するための配列番号30~40に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第六のプローブ群、及び、セレウスを検出するための配列番号41~49に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第七のプローブ群のうち二群以上からそれぞれ一又は二以上選択されたプローブを固定化した構成としてある。また、本発明の食中毒菌の検出方法は、大腸菌のDNAを増幅するための配列番号50に示す塩基配列からなるプライマー及び配列番号51に示す塩基配列からなるプライマーを備えた第一のプライマーセットと、リステリアのDNAを増幅するための配列番号52に示す塩基配列からなるプライマー及び配列番号53に示す塩基配列からなるプライマーを備えた第二のプライマーセットと、カンピロバクターのDNAを増幅するための配列番号54に示す塩基配列からなるプライマー及び配列番号55に示す塩基配列からなるプライマーを備えた第三のプライマーセットと、腸炎ビブリオのDNAを増幅するための配列番号56に示す塩基配列からなるプライマー及び配列番号57に示す塩基配列からなるプライマーを備えた第四のプライマーセットと、黄色ブドウ球菌のDNAを増幅するための配列番号58に示す塩基配列からなるプライマー及び配列番号59に示す塩基配列からなるプライマーを備えた第五のプライマーセットと、サルモネラのDNAを増幅するための配列番号60に示す塩基配列からなるプライマー及び配列番号61に示す塩基配列からなるプライマーを備えた第六のプライマーセットと、セレウスのDNAを増幅するための配列番号62に示す塩基配列からなるプライマー及び配列番号63に示す塩基配列からなるプライマーを備えた第七のプライマーセットと、セレウスのDNAを増幅するための配列番号64に示す塩基配列からなるプライマー及び配列番号65に示す塩基配列からなるプライマーを備えた第八のプライマーセットと、からなる群のうち、二以上のプライマーセットと、試料のゲノムDNAと、核酸合成酵素と、核酸合成基質とを含有するPCR用反応液を用いて、試料中に二以上のプライマーセットの少なくともいずれかに対応する食中毒菌のゲノムDNAが含まれている場合、PCR法により当該食中毒菌の核酸の増幅を行い、大腸菌を検出するための、配列番号1~6に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第一のプローブ群、リステリアを検出するための配列番号7~13に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第二のプローブ群、カンピロバクターを検出するための配列番号14~19に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第三のプローブ群、腸炎ビブリオを検出するための配列番号20~24に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第四のプローブ群、黄色ブドウ球菌を検出するための配列番号25~29に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第五のプローブ群、サルモネラを検出するための配列番号30~40に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第六のプローブ群、及び、セレウスを検出するための配列番号41~49に示す塩基配列を有するプローブ及びこれらに対して相補的な塩基配列を有するプローブからなる第七のプローブ群のうち、二以上のプライマーセットに対応する食中毒菌に対応する二群以上からそれぞれ一又は二以上選択されたプローブを固定化した食中毒菌検出用担体に、増幅により得られた増幅産物を接触させ、固定化されたプローブにハイブリダイズさせることにより、食中毒菌を検出する方法としてある。本発明によれば、大腸菌、リステリア、カンピロバクター、腸炎ビブリオ、黄色ブドウ球菌、サルモネラ、セレウスのうちの二種以上の食中毒菌を同時に特異的に一括検出することが可能となる。以下、本発明の実施形態について具体的に説明する。[プローブ]まず、図1及び図2を参照して本実施形態の食中毒菌検出用担体、及び食中毒菌の検出方法において用いるプローブについて説明する。これらの図において、検出対象食中毒菌の欄には、プローブを用いて検出する対象の食中毒菌の和名及び学名を示している。対象領域の欄には、対応する食中毒菌における検出対象領域の遺伝子の名称を示している。配列番号及び塩基配列の欄には、配列表に記載の配列番号及び塩基配列を示している。この塩基配列には、対象領域の遺伝子から選択された新規プローブの塩基配列が示されている。配列番号1~4には、大腸菌Escherichiacoliのヒートショックタンパク遺伝子dnaJを検出するためのプローブの塩基配列を示している。配列番号5及び6には、大腸菌Escherichiacoliのウリジンモノリン酸キナーゼ遺伝子pyrHを検出するためのプローブの塩基配列を示している。配列番号7~13には、リステリアListeria属のヒートショックタンパク遺伝子dnaJを検出するためのプローブの塩基配列を示している。配列番号14~19には、カンピロバクターCampylobacter属のリボソーム遺伝子16SrDNAを検出するためのプローブの塩基配列を示している。配列番号20~24には、腸炎ビブリオVibrioparahaemolyticusの耐熱性溶血毒素遺伝子tdhを検出するためのプローブの塩基配列を示している。配列番号25~29には、黄色ブドウ球菌Staphylococcusaureusのヒートショックタンパク遺伝子dnaJを検出するためのプローブの塩基配列を示している。配列番号30~40には、サルモネラSalmonella属の侵入性因子関連遺伝子invAを検出するためのプローブの塩基配列を示している。配列番号41~45には、セレウスBacilluscereusの溶血活性を示さないエンテロトキシン分泌遺伝子nheを検出するためのプローブの塩基配列を示している。配列番号46~49には、セレウスBacilluscereusのセレウリド合成酵素遺伝子cesBを検出するためのプローブの塩基配列を示している。これらの配列番号に示される塩基配列は、5’末端から3’末端方向の配列を示している。本実施形態の食中毒菌検出用担体、及び食中毒菌の検出方法において用いるプローブは、上記の塩基配列そのものに限定されず、それぞれの塩基配列において1又は数個の塩基が欠損、置換又は付加されたものとすることができる。また、それぞれの塩基配列に対して相補的な塩基配列からなる核酸断片に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズできるものとすることもできる。さらに、このようなプローブや、配列番号1~49に示す塩基配列からなるプローブに対して相補的な塩基配列を有するプローブを用いることもできる。なお、ストリンジェントな条件とは、特異的なハイブリッドが形成され、非特異的なハイブリッドが形成されない条件をいう。例えば、配列番号1~49で表される配列からなるDNAに対し高い相同性相同性が90以上、好ましくは95以上を有するDNAが、それぞれ配列番号1~49で表される配列からなるDNAと相補的な塩基配列からなるDNAとハイブリダイズする条件が挙げられる。通常、完全ハイブリッドの溶解温度Tmより約5°C~約30°C、好ましくは約10°C~約25°C低い温度でハイブリダイゼーションが起こる場合をいう。ストリンジェントな条件については、J.Sambrookら,MolecularCloning,ALaboratoryMannual,SecondEdition,ColdSpringHarborLaboratoryPress1989、特に1145節ConditionsforHybridizationofOligonucleotideProbesに記載されている条件等を使用することができる。本実施形態の食中毒菌検出用担体、及び食中毒菌の検出方法において用いるプローブは、いずれも20~33mer塩基程度の長さであり、DNA合成装置により合成することができる。[食中毒菌検出用担体]本実施形態の食中毒菌検出用担体は、特定の食中毒菌を検出するための媒体装置であり、マイクロアレイなどを用いて構成することができる。この食中毒菌検出用担体は、検出対象の食中毒菌を検出するための上記プローブの少なくとも1つを固定化したものであれば、特に限定されるものではなく、例えばスポット型DNAマイクロアレイ、合成型DNAマイクロアレイなどを用いることができる。また、本実施形態の食中毒菌検出用担体は、配列番号1~49の配列を備えたプローブを用いて、既存の一般的な方法で製造することができる。例えば、本実施形態の食中毒菌検出用担体として、貼り付け型のDNAマイクロアレイを作成する場合は、DNAスポッターによりプローブをスライドガラス上に固定化することによって、作成することができる。また、合成型DNAマイクロアレイを作成する場合は、光リソグラフィ技術により、ガラス基板上で上記配列を備えた一本鎖オリゴDNAを合成することによってプローブを生成し、本実施形態の食中毒菌検出用担体を作成することができる。[PCR用プライマー]次に、図3を参照して本実施形態の食中毒菌の検出方法において用いるPCR用プライマーについて説明する。PCR用プライマーは、PCR法により試料中のゲノムDNAの一部を増幅するために用いられ、フォワードプライマー及びリバースプライマーの二種類のプライマーセットにより特定される領域を増幅する。PCR用プライマーセットは、PCR反応液に含有される。PCR反応液には、その他に核酸合成基質、核酸合成酵素、試料のゲノムDNA、標識成分、緩衝液などが含有される。そして、このPCR反応液を用いてサーマルサイクラーなどの核酸増幅装置により、試料中のゲノムDNAの一部が増幅され得る。すなわち、PCR用プライマーセットによる増幅対象領域を有するゲノムDNAが試料中に存在している場合、その対象領域が増幅される。本実施形態で使用するPCR用プライマーセットは、一般的なPCR法において使用することができる。図3において、増幅対象食中毒菌学名の欄には、PCR用プライマーセットにより増幅する対象の食中毒菌の和名及び学名を示している。対象領域の欄には、対応する食中毒菌における増幅対象領域の遺伝子の名称を示している。増幅産物の欄には、PCR用プライマーセットを用いて、対象領域を増幅した場合の増幅産物の塩基配列の長さbp:basepairを示している。配列番号の欄には、配列表に示される塩基配列の配列番号を示している。F/Rの欄には、フォワードプライマー及びリバースプライマーの区別を示しており、Fがフォワードプライマー、Rがリバースプライマーを示している。塩基配列の欄には、配列表に記載の塩基配列を示している。この塩基配列には、それぞれ対応する対象領域を特異的に増幅するために設計された新規プライマーセットの塩基配列が示されている。配列番号50及び51は、大腸菌EscherichiacoliのゲノムDNAに含まれる生体内必須領域のウリジンモノリン酸キナーゼ遺伝子pyrHを増幅するためのプライマーセットの塩基配列を示しており、増幅産物は157bpである。配列番号52及び53は、リステリアListeria属のゲノムDNAに含まれる生体内必須領域のヒートショックタンパク遺伝子dnaJを増幅するためのプライマーセットの塩基配列を示しており、増幅産物は176bpである。配列番号54及び55は、カンピロバクターCampylobacter属のゲノムDNAに含まれる生体内必須領域のリボソーム遺伝子16SrDNAを増幅するためのプライマーセットの塩基配列を示しており、増幅産物は263bpである。配列番号56及び57は、腸炎ビブリオVibrioparahaemolyticusのゲノムDNAに含まれる毒素領域の耐熱性溶血毒素遺伝子tdhを増幅するためのプライマーセットの塩基配列を示しており、増幅産物は380bpである。配列番号58及び59は、黄色ブドウ球菌StaphylococcusaureusのゲノムDNAに含まれる生体内必須領域のヒートショックタンパク遺伝子dnaJを増幅するためのプライマーセットの塩基配列を示しており、増幅産物は236bpである。配列番号60及び61は、サルモネラSalmonella属のゲノムDNAに含まれる毒素領域の侵入性因子関連遺伝子invAを増幅するためのプライマーセットの塩基配列を示しており、増幅産物は180bpである。配列番号62及び63は、セレウスBacilluscereusのゲノムDNAに含まれる毒素領域の溶血活性を示さないエンテロトキシン分泌遺伝子nheを増幅するためのプライマーセットの塩基配列を示しており、増幅産物は195bpである。配列番号64及び65は、セレウスBacilluscereusのゲノムDNAに含まれる毒素領域のセレウリド合成酵素遺伝子cesBを増幅するためのプライマーセットの塩基配列を示しており、増幅産物は238bpである。これらの配列番号に示される塩基配列は、5’末端から3’末端方向の配列を示している。また、本実施形態のPCR用プライマーセットにおける各プライマーは、上記の塩基配列そのものに限定されず、それぞれの塩基配列において1又は数個の塩基が欠損、置換又は付加されたものとすることができる。また、それぞれの塩基配列に対して相補的な塩基配列からなる核酸断片に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズできる核酸断片からなるものを用いることもできる。さらに、本実施形態のPCR用プライマーセットに対して、相補的な塩基配列を有するプライマーからなるPCR用プライマーセットを用いることもできる。上記八種類のPCR用プライマーセットをPCR反応液に含有させてPCR法による増幅反応を行った場合、PCR反応液に含有される試料中に、上記増幅対象の食中毒菌のゲノムDNAのいずれかが含まれていれば、そのゲノムDNAにおける増幅対象領域を特異的に増幅することができる。また、試料中に、上記増幅対象の食中毒菌のゲノムDNAが二種類以上含まれている場合、それぞれのゲノムDNAの増幅対象領域を同時かつ特異的に増幅することができる。さらに、試料中に、七種類の増幅対象の食中毒菌のゲノムDNAにおける八領域の遺伝子が全て含まれている場合でも、本実施形態の食中毒菌検出用担体、及び食中毒菌の検出方法によれば、各ゲノムDNAの増幅対象領域を同時かつ特異的に一括して増幅することが可能である。すなわち、本実施形態の食中毒菌の検出方法におけるPCR用プライマーセットによれば、それぞれの対象の食中毒菌以外のゲノムDNAによる増幅が行われない。また、複数のPCR用プライマーセットを同時に使用しても、異なるプライマーセットのプライマーの組み合わせによる非特異的な増幅も行われない。このため、このようなPCR用プライマーセットをPCR反応液に加えることで、試料に増幅対象領域をもつ食中毒菌のゲノムDNAが含まれている場合には、その領域を特異的に増幅することが可能である。また、試料に増幅対象の食中毒菌が複数種類含まれている場合でも、それぞれの増幅対象領域を同時かつ特異的に増幅することが可能である。勿論、PCR反応液に、上記八種類のPCR用プライマーセットの全てではなく、このうち一種類から七種類のPCR用プライマーセットが含まれている場合であっても、そのPCR用プライマーセットの増幅対象領域をもつ食中毒菌のゲノムDNAがPCR反応液に含まれている場合には、その対象領域を特異的に増幅することが可能である。[PCR用反応液]次に、本実施形態の食中毒菌の検出方法において用いるPCR用反応液について説明する。本実施形態のPCR反応液は、少なくとも上記八種類のPCR用プライマーセットのいずれかを含有し、好ましくはその二種類以上を含有し、より好ましくは、八種類全てのPCR用プライマーセットを含有するものである。PCR反応液におけるそれ以外の成分は、一般的なものを用いることができる。具体的には、例えば以下の組成からなるものを用いることができるが、これに限定されるものではない。特に、プライマー、試料のDNA、及び滅菌水の容量は、増幅対象とする食中毒菌の種類数によって相違する。緩衝液10容量核酸合成基質8容量フォワードプライマー10ng/μl、2容量~16容量リバースプライマー10ng/μl、2容量~16容量核酸合成酵素0.5容量標識成分Cy510pmolμl1~8容量試料のDNA5容量~35容量水71.5容量~6.5容量[食中毒菌の検出方法]次に、本実施形態の食中毒菌の検出方法について説明する。まず、上記のPCR反応液を用いて、PCR法により試料中に含まれるゲノムDNAを増幅する。なお、実用上、食中毒菌の検出を行う場合には、例えば食品や設備などからサンプルを採取して、そのサンプル中に含まれる菌の培養等が行われる。そして、培養された菌からゲノムDNAが抽出され、この抽出されたゲノムDNA等が、上記PCR反応液における試料として使用される。したがって、実用上は、試料中に増幅対象の食中毒菌が存在するか否かは不明であり、本実施形態の食中毒菌の検出方法は、試料中に増幅対象の食中毒菌が存在する場合に、これを検出することを可能とするものである。したがって、PCR反応液に上記八種類のPCR用プライマーセットが全て含有されている場合、試料中に上記七菌種八領域の遺伝子の少なくともいずれかが存在していれば、その増幅対象領域を特異的に増幅することが可能である。PCR法による遺伝子の増幅には、核酸増幅装置を使用する。この核酸増幅装置としては、一般的なサーマルサイクラーなどを用いることができる。PCRの反応条件は、例えば以下のようにすることができるが、これに限定されるものではない。195°C2分295°C10秒DNA鎖の乖離工程368°C30秒アニーリング工程472°C30秒DNA合成工程572°C2分2~4を40サイクル次に、得られたPCR増幅産物を、本実施形態の食中毒菌検出用担体上に滴下して、当該担体に固定化されたプローブにハイブリダイズしたPCR増幅産物の標識を検出する。具体的には、例えば次のように行うことができる。まず、PCR増幅産物に所定の緩衝液を混合し、食中毒菌検出用担体に滴下する。次に、食中毒菌検出用担体を45°Cで1時間静置し、その後、所定の緩衝液によりハイブリダイズしなかったPCR産物を食中毒菌検出用担体から洗い流す。そして、食中毒菌検出用担体を標識検出装置にかけて標識の検出を行い、試料中に対象の食中毒菌が存在するか否かを検出する。[プローブの設計]次に、本実施形態の食中毒菌検出用担体、及び食中毒菌の検出方法で使用するプローブの特異性を高めるために案出したプローブの設計方法について説明する。本実施形態で使用するプローブは、七菌種の食中毒菌の八領域を一括して特異的に検出するために使用される。このように多数の対象を特異的に検出可能にするため、本実施形態で使用するプローブには、高い特異性が求められる。そこで、本発明者らは、このようなプローブの特異性を向上させ得るプローブの設計方法を検討し、以下の基準に従えば、プローブの特異性を向上させ得ることを見いだした。1GC含量プローブの塩基配列におけるGC含量を40以下とする。このように、GC含量をAT含量よりも一定量少なくすることで、プローブをより乖離しやすくさせることができる。これにより、ハイブリダイゼーションにおける非特異結合を低減させることができ、プローブの特異性を向上させることが可能となる。なお、このGC含量の百分率は、プローブの塩基配列におけるGCの配列数の百分率を示している。2PCR増幅対象領域の3’末端側から選択センス鎖のプローブ増幅対象領域のセンス鎖から選択されるプローブは、検出対象であるPCR増幅産物の3’末端側半分の領域から選択して設計する。すなわち、プローブの検出対象の食中毒菌用のプライマーセットによる増幅対象領域の3’末端側半分の領域から選択して設計する。これによって、プローブを同5’末端側半分の領域から選択する場合に比較して、得られる蛍光強度をより大きくさせることが可能となる。一方、プローブのアンチセンス鎖増幅対象領域のアンチセンス鎖から選択されるプローブについては、上記センス鎖のプローブとは反対に、プローブの検出対象の食中毒菌用のプライマーセットによる増幅対象領域の相補的配列における5’末端側半分の領域から選択して設計することが好ましい。3非対象の塩基配列との連続マッチ数が12塩基以内プローブを、検出対象ではない非対象菌の遺伝子配列などとの連続マッチ数が12塩基以内となるように設計する。本実施形態の食中毒菌の検出方法では、七菌種の食中毒菌の八領域の増幅産物を対象としたハイブリダイズが行われる。このため、それぞれのプローブを、少なくとも検出対象の領域以外の七領域の配列に対し、連続マッチ数が12塩基以内となるように設計することが好ましい。本実施形態の食中毒菌検出用担体、及び食中毒菌の検出方法で使用するプローブは、当該基準にもとづき設計しており、七菌種の食中毒菌における八領域において、非特異的なハイブリダイズが行われないものになっている。このように1~3のいずれかの基準を用いてプローブ設計を行うことで、従来のプローブよりもその特異性、すなわち検出対象の遺伝子領域と特異的にハイブリダイズする性質を、より向上させることが可能になる。本実施形態の食中毒菌検出用担体、及び食中毒菌の検出方法は、これら全ての基準に適合するプローブを設計して用いることで、七菌種の食中毒菌の八領域を同時に特異的に検出することが可能な優れたものとなっている。4検出対象領域また、本実施形態で使用するプローブは、図1及び図2を用いて上述した通り、各食中毒菌の特定の領域から選択して設計している。すなわち、これらの食中毒菌の毒素領域の遺伝子、及び/又は、生体内必須領域の遺伝子を検出対象としている。具体的には、検出対象領域として、大腸菌についてはヒートショックタンパク遺伝子dnaJ、及びウリジンモノリン酸キナーゼ遺伝子pyrHを、リステリアについてはヒートショックタンパク遺伝子dnaJを、カンピロバクターについてはリボソーム遺伝子16SrDNAを、腸炎ビブリオについては耐熱性溶血毒素遺伝子tdhを、黄色ブドウ球菌についてはヒートショックタンパク遺伝子dnaJを、サルモネラについては侵入性因子関連遺伝子invAを、セレウスについては溶血活性を示さないエンテロトキシン分泌遺伝子nhe、及びセレウリド合成酵素遺伝子cesBを、それぞれ選択している。本実施形態の食中毒菌検出用担体、及び食中毒菌の検出方法で使用するプローブは、上記領域を検出対象領域とし、これらの領域から選択することにより、その特異性を向上させることが可能となっている。以上説明したように、本実施形態の食中毒菌検出用担体、及び食中毒菌の検出方法によれば、大腸菌、リステリア、カンピロバクター、腸炎ビブリオ、黄色ブドウ球菌、サルモネラ、セレウスの七種類の食中毒菌における八領域を、同時に特異的に検出することができる。また、本実施形態のプローブの設計方法によれば、特異性の高いプローブを設計することが可能である。まず、本実施形態の食中毒菌の検出方法において使用するPCR用プライマーセットにより、増幅対象領域が正しく増幅されるかを確認するための試験を行った。試験方法は、上記実施形態で説明した方法により、本実施形態におけるPCR用プライマーセットを含有するPCR反応液を用いてPCR法により増幅反応を行い、増幅産物を電気泳動することで、正しい増幅産物が得られることを、以下のように確認した。試験1PCR反応液は、以下の組成のものを使用した。これらの成分のうち、プライマーprimerFフォワード,primerRリバースは、ライフテクノロジージャパン株式会社により合成されたものを使用した。それ以外は、タカラバイオ株式会社製のものを使用した。緩衝液10×ExTaqbuffer20μl核酸合成基質dNTPMixture16μlprimerF04μlprimerR04μl核酸合成酵素EXTaq01μl標識成分Cy502μl試料のDNA1ngμl10μl滅菌水143μl全量20μlプライマーセットには、図3に示すものを増幅対象の食中毒菌ごとに個別に使用した。また、試料のDNAには、プライマーセットごとに対応する食中毒菌について、以下の菌株を使用した。そして、食中毒菌ごとに、PCRによる増幅反応を行った。1.セレウスBacilluscereusTIFT1140112.カンビロバクターCampylobacterjejuniATCC335603.大腸菌EscherichiacoliNBRC1022034.リステリアListeriamonocytogenesATCC153135.サルモネラSalmonellaentericaATCC92706.黄色ブドウ球菌StaphylococcusaureusNBRC1009107.腸炎ビブリオVibrioparahaemolyticusRIMD22210050これらの食中毒菌の菌株は、次の機関から分譲されたものである。TIFT東洋食品研究所ATCCAmericantypeculturecollectionNBRC独立行政法人製品評価基盤機構RIMD大阪大学微生物研究所PCR法による遺伝子の増幅は、epグラジエントエッペンドルフ株式会社製を使用して、上記試料ごとに個別に以下の条件で行った。195°C2分295°C10秒DNA鎖の乖離工程368°C30秒アニーリング工程472°C30秒DNA合成工程572°C2分2~4を40サイクル次に、PCRによる増幅産物を電気泳動により泳動させ、正しい増幅産物が得られているか否かを確認した。電気泳動は、MultiNA株式会社島津製作所製を用いて行った。その結果を、図4に示す。同図において、供試菌株1~7の列に示すバンドは、それぞれ対応する番号の食中毒菌のゲノムDNAを含有するPCR反応液を用いて行ったPCRによる増幅産物を、電気泳動した結果を示している。ここで、PCRによる増幅産物を電気泳動した場合、機械の測定誤差により、理論上の増幅産物の塩基配列と完全には一致せず、近似する値の結果が得られることがある。図4では、試料のDNAとしてセレウスのゲノムDNAを使用した供試菌株1において、200bp付近と250bp付近にバンドが見られる。この結果から、セレウスの溶血活性を示さないエンテロトキシン分泌遺伝子nheと、セレウリド合成酵素遺伝子cesBにおけるそれぞれの増幅対象領域が増幅されていると判断できる。また、試料のDNAとしてカンピロバクターのゲノムDNAを使用した供試菌株2において275bp付近にバンドが見られ、この結果から、カンピロバクターのリボソーム遺伝子16SrDNAにおける増幅対象領域が増幅されていると判断できる。また、試料のDNAとして大腸菌のゲノムDNAを使用した供試菌株3において160bp付近にバンドが見られ、この結果から、大腸菌のウリジンモノリン酸キナーゼ遺伝子pyrHにおける増幅対象領域が適切に増幅されていると判断できる。また、試料のDNAとしてリステリアのゲノムDNAを使用した供試菌株4において、200bp付近にバンドが見られ、この結果から、リステリアのヒートショックタンパク遺伝子dnaJおける増幅対象領域が増幅されていると判断できる。ここで、リステリアのヒートショックタンパク遺伝子の理論上の増幅産物の長さ176bpと、供試菌株4の増幅産物の長さには、20bp程度の差が見られる。これは、供試菌株4のヒートショックタンパク遺伝子dnaJにおいて、何らかの配列の挿入が起こったためであると推定される。また、試料のDNAとしてサルモネラのゲノムDNAを使用した供試菌株5において190bp付近にバンドが見られ、この結果から、サルモネラの侵入性因子関連遺伝子invAにおける増幅対象領域が適切に増幅されていると判断できる。また、試料のDNAとして黄色ブドウ球菌のゲノムDNAを使用した供試菌株6において240bp付近にバンドが見られ、この結果から、黄色ブドウ球菌のヒートショックタンパク遺伝子dnaJにおける増幅対象領域が適切に増幅されていると判断できる。また、試料のDNAとして腸炎ビブリオのゲノムDNAを使用した供試菌株7において400bp付近にバンドが見られ、この結果から、腸炎ビブリオの耐熱性溶血毒素遺伝子tdhにおける増幅対象領域が適切に増幅されていると判断できる。以上の通り、PCRによって、本実施形態の食中毒菌検出用担体、及び食中毒菌の検出方法におけるプローブの検出対象である食中毒菌の増幅対象領域が適切に増幅され、それぞれの領域に対応するPCR増幅産物が得られていることが確認された。実施例1次に、これらのPCR増幅産物を用いて、本実施形態の食中毒菌検出用担体に固定化されたプローブにより、検出対象の食中毒菌が検出できることを確認するための実験を行った。本実施形態の食中毒菌検出用担体は、図5に示すように、プローブを固定化したものを使用した。すなわち、スポット1~4には、配列番号1~4の大腸菌のヒートショックタンパク遺伝子検出用プローブを固定化した。スポット5,6には、配列番号5,6の大腸菌のウリジンモノリン酸キナーゼ遺伝子検出用プローブを固定化した。スポット7~13には、配列番号7~13のリステリアのヒートショックタンパク遺伝子検出用プローブを固定化した。スポット14~19には、配列番号14~19のカンピロバクターのリボソーム遺伝子検出用プローブを固定化した。スポット20~24には、配列番号20~24の腸炎ビブリオの耐熱性溶血毒素遺伝子検出用プローブを固定化した。スポット25~29には、配列番号25~29の黄色ブドウ球菌のヒートショックタンパク遺伝子検出用プローブを固定化した。スポット30~40には、配列番号30~40のサルモネラの侵入性因子関連遺伝子検出用プローブを固定化した。スポット41~45には、配列番号41~45のセレウスのゲノムに含まれる溶血活性を示さないエンテロトキシン分泌遺伝子検出用プローブを固定化した。スポット46~49には、配列番号46~49のセレウスのゲノムに含まれるセレウリド合成酵素遺伝子検出用プローブを固定化した。この食中毒菌検出用担体に、試験例1において得られたPCR増幅産物を、食中毒菌ごとに滴下し、当該担体に固定化されたプローブにハイブリダイズしたPCR増幅産物の標識を検出した。また、試料のDNAとして供試菌株3の大腸菌のゲノムDNAを使用するとともに、プライマーとして配列番号66及び67に示すプライマー対増幅対象領域:dnaJ,増幅産物の大きさ218bpを使用し、その他の条件は試験1と同様にして増幅して得られたPCR増幅産物も、同様に使用した。具体的には、次のように行った。まず、PCR増幅産物に、緩衝液3×SSCクエン酸-生理食塩水に0.3SDSドデシル硫酸ナトリウムを添加したものを混合し、マイクロアレイに滴下した。このマイクロアレイを45°Cで1時間静置した。次に、上記緩衝液を用いてハイブリダイズしなかったPCR産物をマイクロアレイから洗い流した。そして、マイクロアレイを標識検出装置BIOSHOT,東洋鋼鈑株式会社製にかけて蛍光強度を測定した。蛍光強度は、レーザー光で励起して標識成分Cy5を発光させ、その光量を検出器内に取り付けたCCDカメラにより検出し、これを撮影した。その結果を図6に示す。また、光量を電気信号に置換し、これを数値化して蛍光強度を得た。その結果を図7に示す。この蛍光強度は、当該装置での強度指標であり、単位はなく、バックグラウンドの数値が0になるように補正して算出される。図6及び図7において、大腸菌は供試菌株3大腸菌EscherichiacoliNBRC102203のPCR増幅産物dnaJ,pyrHの各増幅産物をそれぞれハイブリダイズさせた結果を、リステリアは供試菌株4リステリアListeriamonocytogenesATCC15313のPCR増幅産物をハイブリダイズさせた結果を、カンビロバクターは供試菌株2カンビロバクターCampylobacterjejuniATCC33560のPCR増幅産物をハイブリダイズさせた結果を、腸炎ビブリオは供試菌株7腸炎ビブリオVibrioparahaemolyticusRIMD22210050のPCR増幅産物をハイブリダイズさせた結果を、黄色ブドウ球菌は供試菌株6黄色ブドウ球菌StaphylococcusaureusNBRC100910のPCR増幅産物をハイブリダイズさせた結果を、サルモネラ菌は供試菌株5サルモネラSalmonellaentericaATCC9270のPCR増幅産物をハイブリダイズさせた結果を、セレウスは供試菌株1セレウスBacilluscereusTIFT114011のPCR増幅産物をハイブリダイズさせた結果を、それぞれ示している。大腸菌については、図6においてスポット2~4,6に蛍光が明瞭に検出されている。また、図7によりスポット1,5についても一定の蛍光強度数値が得られており、蛍光が検出されていることがわかる。よって、本実施形態の食中毒菌検出用担体によれば、PCR増幅産物に、大腸菌のヒートショックタンパク遺伝子又はウリジンモノリン酸キナーゼ遺伝子の増幅産物が含まれている場合に、大腸菌を検出し得ることが明らかとなった。なお、PCR増幅産物には、これらのプローブとハイブリダイズする核酸断片に対して相補的な塩基配列を有する核酸断片も含まれる。したがって、配列番号1~6に対して相補的な塩基配列からなるプローブは、このような相補的な塩基配列を有する核酸断片とハイブリダイズすることができる。よって、配列番号1~6に対して相補的な塩基配列からなるプローブを、本実施形態の食中毒菌検出用担体に固定化した場合も、同様にして大腸菌を検出することが可能である。これは、以下の食中毒菌についても同様である。リステリアについては、図6においてスポット7,9~13に蛍光が明瞭に検出されている。また、図7によりスポット8についても一定の蛍光強度数値が得られており、蛍光が検出されていることがわかる。よって、本実施形態の食中毒菌検出用担体によれば、PCR増幅産物に、リステリアのヒートショックタンパク遺伝子の増幅産物が含まれている場合に、リステリアを検出し得ることが明らかとなった。なお、スポット7に固定化したプローブは、アンチセンス鎖のもの配列番号7に示す塩基配列に対して相補的な塩基配列を有するプローブである。カンピロバクターについては、図6においてスポット14~19に蛍光が明瞭に検出され、図7においてもこれらのスポットに蛍光が検出されている。よって、本実施形態の食中毒菌検出用担体によれば、PCR増幅産物に、リステリアのヒートショックタンパク遺伝子の増幅産物が含まれている場合に、リステリアを検出し得ることが明らかとなった。なお、スポット14,15に固定化したプローブは、アンチセンス鎖のものそれぞれ配列番号14,15に示す塩基配列に対して相補的な塩基配列を有するプローブである。腸炎ビブリオについては、図6においてスポット20~24に蛍光が明瞭に検出され、図7においてもこれらのスポットに蛍光が検出されている。よって、本実施形態の食中毒菌検出用担体によれば、PCR増幅産物に、腸炎ビブリオの耐熱性溶血毒素遺伝子の増幅産物が含まれている場合に、腸炎ビブリオを検出し得ることが明らかとなった。黄色ブドウ球菌については、図6においてスポット25~29に蛍光が明瞭に蛍光が検出され、図7においてもこれらのスポットに蛍光が検出されている。よって、本実施形態の食中毒菌検出用担体によれば、PCR増幅産物に、黄色ブドウ球菌のヒートショックタンパク遺伝子の増幅産物が含まれている場合に、黄色ブドウ球菌を検出し得ることが明らかとなった。サルモネラについては、図6においてスポット30~35に蛍光が明瞭に検出されている。また、図7によりスポット36~40についても一定の蛍光強度数値が得られており、蛍光が検出されていることがわかる。よって、本実施形態の食中毒菌検出用担体によれば、PCR増幅産物に、サルモネラの侵入性因子関連遺伝子の増幅産物が含まれている場合に、サルモネラを検出し得ることが明らかとなった。セレウスについては、図6においてスポット41~45,48,49に蛍光が明瞭に検出されている。また、図7によりスポット46,47についても一定の蛍光強度数値が得られており、蛍光が検出されていることがわかる。よって、本実施形態の食中毒菌検出用担体によれば、PCR増幅産物に、セレウスの溶血活性を示さないエンテロトキシン分泌遺伝子又はセレウリド合成酵素遺伝子が含まれている場合に、セレウスを検出し得ることが明らかとなった。以上のように、本実施形態の食中毒菌検出用担体、及び食中毒菌の検出方法によれば、PCR増幅産物に、それぞれのプローブにハイブリダイズする食中毒菌のPCR増幅産物が含まれている場合に、これを適切に検出できることが確認された。<PCRによる増幅対象領域におけるプローブの位置と蛍光強度の関係>ここで、図8を参照して、PCRによる増幅対象領域におけるプローブの位置が、蛍光強度にどのような影響を与えるのかについて考察する。プローブの設計は、検出対象の食中毒菌の遺伝子の増幅対象領域プライマーセットにより増幅される領域から、当該食中毒菌を特異的に検出することができる塩基配列を選択することにより行われる。そこで、このような増幅対象領域におけるプローブの位置と、蛍光強度に関連性があるかどうかを調査するための試験を行った。試験2まず、リステリアのヒートショックタンパク遺伝子を増幅対象領域とし、この領域の様々な位置にそれぞれハイブリダイズする複数のプローブを作成した。そして、配列番号52及び53に示すプライマーセットを用いて、リステリアのゲノムDNAを増幅し、得られた増幅産物に上記作成したプローブをハイブリダイズさせて、それぞれの蛍光強度を実施例1と同様にして計測した。その結果を図8aに示す。図8において、縦軸は蛍光強度を、横軸は増幅対象領域におけるプローブの位置を示しており、横軸の左端0は増幅対象領域の5’末端を、右端図8aの場合、176は同3’末端の位置を表し、各プロットはこれにハイブリダイズするプローブの3’末端の位置を表している。また、各プローブの塩基配列の長さは21~31merである。図8aでは、横軸50のプロットはアンチセンス鎖のプローブによる蛍光強度を表し、横軸65~120における各プロットはセンス鎖のプローブによる蛍光強度を表している。この図から、センス鎖のプローブでは、プローブの位置が増幅対象領域の3’末端側であるほど蛍光強度が大きくなることがわかる。特に、増幅対象領域の3’末端側半分に位置する場合に、蛍光強度が大きくなっている。一方、アンチセンス鎖のプローブについては、横軸50の位置において、横軸65の位置のセンス鎖のプローブよりも大きな蛍光強度が得られている。アンチセンス鎖のプローブについては、試験4において、図8cを参照してさらに説明する。試験3次に、サルモネラの侵入性因子関連遺伝子を増幅対象領域とし、この領域の様々な位置にそれぞれハイブリダイズする複数のプローブを作成した。そして、配列番号60及び61に示すプライマーセットを用いて、サルモネラのゲノムDNAを増幅し、得られた増幅産物に上記作成したプローブをハイブリダイズさせて、それぞれの蛍光強度を実施例1と同様にして計測した。その結果を図8bに示す。図8bにおける各プロットはセンス鎖のプローブによる蛍光強度を表している。この図からも、センス鎖のプローブでは、プローブの位置が増幅対象領域の3’末端側であるほど蛍光強度が大きくなることがわかる。特に、増幅対象領域の3’末端側半分に位置する場合に、蛍光強度が大きくなっている。なお、横軸118の位置のプローブの蛍光強度は、横軸112の位置のプローブの蛍光強度よりもやや低くなっている。これは、蛍光強度が飽和しているためであると推測される。試験4次に、カンピロバクターのリボソーム遺伝子を増幅対象領域とし、この領域の様々な位置にそれぞれハイブリダイズする複数のプローブを作成した。そして、配列番号54及び55に示すプライマーセットを用いて、カンピロバクターのゲノムDNAを増幅し、得られた増幅産物に上記作成したプローブをハイブリダイズさせて、それぞれの蛍光強度を実施例1と同様にして計測した。その結果を図8cに示す。図8cにおける各プロットはアンチセンス鎖のプローブによる蛍光強度を表している。この図から、アンチセンス鎖のプローブについては、センス鎖とは逆に、プローブの位置が増幅対象領域の5’末端側であるほど蛍光強度が大きく、特に、増幅対象領域の5’末端側半分に位置する場合に、蛍光強度が大きくなっている。以上の通り、試験2~4の結果から、PCRによる増幅対象領域におけるプローブの位置と蛍光強度には、次の関係があることが明らかとなった。すなわち、センス鎖のプローブの場合、プローブの位置が、増幅対象領域の3’末端側になると蛍光強度が増加し、5’末端側になると蛍光強度が減少する。一方、アンチセンス鎖のプローブの場合、プローブの位置が、増幅対象領域の5’末端側になると蛍光強度が増加し、3’末端側になると蛍光強度が減少する。実施例2次に、本実施形態の食中毒菌検出用担体が、検出対象である七種類の食中毒菌を同時に検出可能であることを検証するための試験を行った。PCR反応液としては、以下の組成のものを使用した。プライマーは、ライフテクノロジージャパン株式会社により合成されたものを使用した。それ以外は、タカラバイオ株式会社製のものを使用した。緩衝液10×ExTaqbuffer20μl核酸合成基質dNTPMixture16μlprimerF02μl×7primerR02μl×7Vibrio検出用primerF04μlVibrio検出用primerR04μl核酸合成酵素EXTaq01μl標識成分Cy502μl試料のDNA10μl×7滅菌水55μl全量20μlPCR用プライマーセットには、図3に示す七菌種八領域を増幅する全てのプライマーセットを使用した。また、試料のDNAには、試験1と同様に以下のものを使用し、これら全てを一括してPCR反応液に含有させた。供試菌株1.セレウスBacilluscereusTIFT114011供試菌株2.カンビロバクターCampylobacterjejuniATCC33560供試菌株3.大腸菌EscherichiacoliNBRC102203供試菌株4.リステリアListeriamonocytogenesATCC15313供試菌株5.サルモネラSalmonellaentericaATCC9270供試菌株6.黄色ブドウ球菌StaphylococcusaureusNBRC100910供試菌株7.腸炎ビブリオVibrioparahaemolyticusRIMD22210050そして、epグラジエントエッペンドルフ株式会社製を使用して、以下の条件によりそれぞれの食中毒菌の対象領域の増幅を、PCR法を用いて一括して行った。195°C2分295°C10秒DNA鎖の乖離工程368°C30秒アニーリング工程472°C30秒DNA合成工程572°C2分2~4を40サイクル次に、PCRによる増幅産物を電気泳動により泳動させ、正しい増幅産物が得られているか否かを確認した。電気泳動は、MultiNA株式会社島津製作所製を用いて行った。その結果を、図9に示す。同図に示す通り、電気泳動の結果、増幅産物には次の8つのピークが存在していた。1168bp2172bp3187bp4201bp5224bp6243bp7273bp8387bp試験1の結果と照らし合わせると、これらのピークは、それぞれ以下の供試菌株の増幅産物を示していると考えられる。1供試菌株3.大腸菌EscherichiacoliNBRC1022032供試菌株5.サルモネラSalmonellaentericaATCC92703供試菌株4.リステリアListeriamonocytogenesATCC153134供試菌株1.セレウスBacilluscereusTIFT1140115供試菌株6.黄色ブドウ球菌StaphylococcusaureusNBRC1009106供試菌株1.セレウスBacilluscereusTIFT1140117供試菌株2.カンピロバクターCampylobacterjejuniATCC335608供試菌株7.腸炎ビブリオVibrioparahaemolyticusRIMD22210050よって、本実施例のPCR増幅産物には、図3に示す全てのプライマーセットによりそれぞれ得られた七菌種の食中毒菌の八領域の全ての増幅産物が含まれていると判断できる。次に、このPCR増幅産物を本実施形態の食中毒菌検出用担体に摘下し、実施例1と同様にして、当該担体に固定化されたプローブにハイブリダイズしたPCR増幅産物の標識を検出した。検出された蛍光を撮影した結果を図10に、蛍光強度を数値化したものを図11に示す。図10を参照すると、大腸菌については、スポット6に蛍光が明瞭に検出されている。リステリアについては、スポット9~13に蛍光が明瞭に検出されている。カンピロバクターについては、スポット14~19に蛍光が明瞭に検出されている。腸炎ビブリオについては、スポット20~24に蛍光が明瞭に検出されている。黄色ブドウ球菌については、スポット25~29に蛍光が明瞭に検出されている。サルモネラについては、スポット30~35に蛍光が明瞭に検出されている。セレウスについては、スポット41~45,48,49に蛍光が明瞭に検出されている。また、図11を参照すると、配列番号5~49に示す全てのプローブについて、蛍光が検出されている。図12に実施例1及び実施例2の結果をまとめたマトリックスを示す。この図に示される通り、本実施形態の食中毒菌検出用担体は、大腸菌、リステリア、カンピロバクター、腸炎ビブリオ、黄色ブドウ球菌、サルモネラ、セレウスをそれぞれ個別に検出できることがわかる。また、PCR増幅産物にこれら七菌種における八領域の増幅産物が混合している場合でも、それぞれを全て一括して検出することが可能となっている。以上の通り、本実施形態の食中毒菌検出用担体、及び食中毒菌の検出方法によれば、これら七菌種八領域のPCR増幅産物を同時に一括して検出できることが明らかとなった。実施例3次に、本実施形態の食中毒菌検出用担体に固定化されたプローブに、偽陽性反応が生じないことを確認するための実験を行った。本実施例では、実施例2のPCR反応液から一種類の食中毒菌のゲノムDNAを除いた、六種類の食中毒菌のゲノムDNAを含めたものを準備し、その他の点は実施例2と同様にして実験を行った。そして、PCR反応液にゲノムDNAが含まれていない一種類の食中毒菌用のプローブが固定化されたスポットに、蛍光が検出されないかどうかを確認した。蛍光写真の撮影結果を図13及び図14に、蛍光強度数値を図15及び図16に示す。図13及び図14において、各列1~7は個別に行った実験の番号を示し、PCR反応液にゲノムDNAを含有させた食中毒菌を○で、含有させなかった食中毒菌を×で表している。また、チップの結果において、蛍光写真の撮影結果を示し、含有させなかった食中毒菌のスポット部分を四角で囲んでいる。また、プローブ特異性において、含有させなかった食中毒菌のスポットに蛍光が検出されていない場合に○を表示している。これらの図に示される通り、いずれの実験においてもPCR反応液に含有させなかった一種類の食中毒菌のスポットには、蛍光が検出されなかった。また、図15及び図16における蛍光強度数値を参照しても、含有させなかった食中毒菌のスポットには、いずれも蛍光が検出されなかった。よって、以上の結果から、本実施形態の食中毒菌検出用担体、及び食中毒菌の検出方法で用いられるプローブは特異性に優れており、対象の七種類の食中毒菌を同時に特異的に検出できることが明らかとなった。本発明は、以上の実施形態や実施例に限定されるものではなく、本発明の範囲内において、種々の変更実施が可能であることは言うまでもない。例えば、PCR反応液の組成は、上記PCR用プライマーセットと試料を含有させ、同様の効果を得ることができるものであれば、その他の成分については上記実施形態及び実施例と異なるものにするなど、適宜変更することが可能である。また、本実施形態のプローブの設計方法を、その他の菌のゲノムDNAを検出するためのプローブ設計に適用することも可能である。"