以下により作製される、創傷治療のための、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清ALCS:a活性化白血球を得ること、b前記活性化白血球をインキュベーション培地と接触させ、インキュベーション組成物を作製すること、c前記インキュベーション組成物を、前記インキュベーション組成物中の少なくとも1つのサイトカインまたは成長因子の濃度を増加させるのに十分な温度および時間にてインキュベートすること、およびd前記インキュベーション組成物から白血球を除去して、実質的に細胞を含まないALCS活性化白血球馴化上清ALCSを作製すること。組成物が、少なくとも約1000pg/mLのヒトIL-8、少なくとも約10~20pg/mLのヒトIL-6、および少なくとも約20pg/mLのヒトTNFαを含む、創傷治療のための、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清ALCS。以下により作製される、創傷治療のための、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清ALCS:aヒト白血球を、前記白血球を活性化させる時間および温度の条件下でインキュベートすること、b前記白血球を低浸透圧ショックに付すこと、cステップbの前記白血球に、等張性を回復する量で塩溶液を添加し、次いで得られた溶液から前記白血球を分離すること、dステップcの前記白血球を血清と混合して、インキュベーション組成物を作製すること、e前記組成物を、前記インキュベーション組成物中の少なくとも1つのサイトカインまたは成長因子の濃度を増加させる時間および温度の条件下でインキュベートすること、およびf実質的に細胞を含まないALCSを作製するために、eの前記インキュベーション組成物から、前記白血球および他の細胞物質を分離すること。前記創傷が、褥瘡性潰瘍、褥瘡性潰瘍、褥瘡、下肢潰瘍、腱炎、胸骨の深創傷、術後創傷、胴部の難治性術後創傷、大伏在静脈採取後の大伏在静脈の創傷、静脈性潰瘍、火傷、戦場での創傷、または裂肛である、請求項1、2、または3のいずれか1項に記載のALCS。前記下肢潰瘍が、糖尿病患者におけるものである、請求項4に記載のALCS。前記創傷が、静脈性潰瘍、褥瘡、または術後潰瘍である、請求項4に記載のALCS。以下により作製される、創傷における感染症発症を阻害するための、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清ALCS:a活性化白血球を得ること、b前記活性化白血球をインキュベーション培地と接触させ、インキュベーション組成物を作製すること、c前記インキュベーション組成物を、前記インキュベーション組成物中の少なくとも1つのサイトカインまたは成長因子の濃度を増加させるのに十分な温度および時間にてインキュベートすること、およびd前記インキュベーション組成物から白血球を除去して、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清ALCSを作製すること。少なくとも約1000pg/mLのヒトIL-8、少なくとも約10~20pg/mLのヒトIL-6、および少なくとも約20pg/mLのヒトTNFαを含む、創傷における感染症発症を阻害するための、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清ALCS。以下により作製される、創傷における感染症発症を阻害するための、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清ALCS:aヒト白血球を、前記白血球を活性化させる時間および温度の条件下でインキュベートすること、b前記白血球を低浸透圧ショックに付すこと、cステップbの前記白血球に、等張性を回復する量で塩溶液を添加し、次いで得られた溶液から前記白血球を分離すること、dステップcの前記白血球を血清と混合して、インキュベーション組成物を作製すること、e前記組成物を、前記インキュベーション組成物中の少なくとも1つのサイトカインまたは成長因子の濃度を増加させる時間および温度の条件下でインキュベートすること、およびf実質的に細胞を含まないALCSを作製するために、eの前記インキュベーション組成物から、前記白血球および他の細胞物質を分離すること。前記創傷が外傷を原因とする、請求項7、8、または9のいずれか1項に記載のALCS。前記外傷が手術を原因とする、請求項10に記載のALCS。創傷中に注入される、請求項1、2、3、7、8、または9のいずれか1項に記載のALCS。創傷周囲の組織中に注入される、請求項1、2、3、7、8、または9に記載のALCS。開放創中に適用される、請求項1、2、3、7、8、または9に記載のALCS。開放創に被覆材を介して適用される、請求項14に記載のALCS。前記被覆材が、乾燥被覆材、バリア被覆材、または生理活性被覆材である、請求項15に記載のALCS。自己の血液試料由来である、請求項1、2、3、7、8、または9のいずれか1項に記載のALCS。同種異系の血液試料由来である、請求項1、2、3、7、8、または9のいずれか1項に記載のALCS。創傷の治療方法であって、前記方法が、前記創傷に、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清ALCSを投与することを含み、前記ALCSが以下により作製される、方法:a活性化白血球を得ること、b前記活性化白血球をインキュベーション培地と接触させ、インキュベーション組成物を作製すること、c前記インキュベーション組成物を、前記インキュベーション組成物中の少なくとも1つのサイトカインまたは成長因子の濃度を増加させるのに十分な温度および時間にてインキュベートすること、およびd前記インキュベーション組成物から白血球を除去して、実質的に細胞を含まないALCS活性化白血球馴化上清ALCSを作製すること。創傷の治療方法であって、前記方法が、前記創傷に、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清ALCSを投与することを含み、前記組成物が、少なくとも約1000pg/mLのヒトIL-8、少なくとも約10~20pg/mLのヒトIL-6、および少なくとも約20pg/mLのヒトTNFαを含む、方法。創傷の治療方法であって、前記方法が、前記創傷に、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清ALCSを投与することを含み、前記ALCSが以下により作製される、方法:aヒト白血球を、前記白血球を活性化させる時間および温度の条件下でインキュベートすること、b前記白血球を低浸透圧ショックに付すこと、cステップbの前記白血球に、等張性を回復する量で塩溶液を添加し、次いで得られた溶液から前記白血球を分離すること、dステップcの前記白血球を血清と混合して、インキュベーション組成物を作製すること、e前記組成物を、前記インキュベーション組成物中の少なくとも1つのサイトカインまたは成長因子の濃度を増加させる時間および温度の条件下でインキュベートすること、およびf実質的に細胞を含まないALCSを作製するために、eの前記インキュベーション組成物から、前記白血球および他の細胞物質を分離すること。前記創傷が、褥瘡性潰瘍、褥瘡性潰瘍、褥瘡、下肢潰瘍、腱炎、胸骨の深創傷、術後創傷、胴部の難治性術後創傷、大伏在静脈採取後の大伏在静脈の創傷、静脈性潰瘍、火傷、戦場での創傷、または裂肛である、請求項19、20、または21のいずれか1項に記載の方法。前記下肢潰瘍が、糖尿病患者におけるものである、請求項22に記載の方法。前記創傷が、静脈性潰瘍、褥瘡、または術後潰瘍である、請求項22に記載の方法。創傷における感染症発症を阻害する方法であって、前記方法が、前記創傷に、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清ALCSを投与することを含み、前記ALCSが以下により作製される、方法:a活性化白血球を得ること、b前記活性化白血球をインキュベーション培地と接触させ、インキュベーション組成物を作製すること、c前記インキュベーション組成物を、前記インキュベーション組成物中の少なくとも1つのサイトカインまたは成長因子の濃度を増加させるのに十分な温度および時間にてインキュベートすること、およびd前記インキュベーション組成物から白血球を除去して、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清ALCSを作製すること。創傷における感染症発症を阻害する方法であって、前記方法が、前記創傷に、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清ALCSを投与することを含み、前記ALCSが、少なくとも約1000pg/mLのヒトIL-8、少なくとも約10-20pg/mLのヒトIL-6、および少なくとも約20pg/mLのヒトTNFαを含む、方法。創傷における感染症発症を阻害する方法であって、前記方法が、前記創傷に、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清ALCSを投与することを含み、前記ALCSが以下により作製される、方法:aヒト白血球を、前記白血球を活性化させる時間および温度の条件下でインキュベートすること、b前記白血球を低浸透圧ショックに付すこと、cステップbの前記白血球に、等張性を回復する量で塩溶液を添加し、次いで得られた溶液から前記白血球を分離すること、dステップcの前記白血球を血清と混合して、インキュベーション組成物を作製すること、e前記組成物を、前記インキュベーション組成物中の少なくとも1つのサイトカインまたは成長因子の濃度を増加させる時間および温度の条件下でインキュベートすること、およびf実質的に細胞を含まないALCSを作製するために、eの前記インキュベーション組成物から、前記白血球および他の細胞物質を分離すること。前記創傷が外傷を原因とする、請求項25、26、または27のいずれか1項に記載の方法。前記外傷が手術を原因とする、請求項28に記載の方法。前記ALCSが創傷中に注入される、請求項19、20、21、25、26、または27のいずれか1項に記載の方法。前記ALCSが創傷周辺の組織中に注入される、請求項19、20、21、25、26、または27に記載の方法。前記ALCSが開放創中に適用される、請求項19、20、21、25、26、または27に記載の方法。前記ALCSが被覆材を介して開放創に適用される、請求項32に記載の方法。前記被覆材が、乾燥被覆材、バリア被覆材、または生理活性被覆材である請求項33に記載の方法。前記ALCSが自己の血液試料由来である、請求項19、20、21、25、26、または27のいずれか1項に記載の方法。前記ALCSが同種異系の血液試料由来である、請求項19、20、21、25、26、または27のいずれか1項に記載の方法。以下を含む、実質的に細胞を含まないALCS活性化白血球馴化上清ALCSの作製方法:a活性化白血球を得ること、b前記活性化白血球をインキュベーション培地と接触させ、インキュベーション組成物を作製すること、c前記インキュベーション組成物を、前記インキュベーション組成物中の少なくとも1つのサイトカインまたは成長因子の濃度を増加させるのに十分な温度および時間にてインキュベートすること、およびd前記インキュベーション組成物から白血球を除去して、実質的に細胞を含まないALCS活性化白血球馴化上清ALCSを作製すること。以下のステップを含む、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清ALCSの作製方法:aヒト白血球を、前記白血球を活性化させる時間および温度の条件下でインキュベートすること、b前記白血球を低浸透圧ショックに付すこと、cステップbの前記白血球に、等張性を回復する量で塩溶液を添加し、次いで得られた溶液から前記白血球を分離すること、dステップcの前記白血球を血清と混合して、インキュベーション組成物を作製すること、e前記インキュベーション組成物を、前記インキュベーション組成物中の少なくとも1つのサイトカインまたは成長因子の濃度を増加させる時間および温度の条件下でインキュベートすること、およびf実質的に細胞を含まないALCSを作製するために、eの前記インキュベーション組成物から、前記白血球および他の細胞物質を分離すること。ステップaの前記インキュベーションを、約12°C~約28°Cの温度で、約8時間~約20時間の範囲の時間行う、請求項38に記載の方法。ステップaの前記インキュベーションを、約18°C~約24°Cの温度で、約8時間~約12時間の範囲の時間行う、請求項39に記載の方法。ステップaの前記インキュベーションを、12°C~約28°Cの温度で、約90分間から2時間、3時間、4時間、5時間、6時間、7時間、8時間、または12時間~約20時間の範囲の時間行う、請求項38に記載の方法。ステップaの前記インキュベーションを、最大約37°Cまでの温度で、5時間~約24時間の範囲の時間行う、請求項38に記載の方法。ステップaを、白血球が接着する容器、および/または白血球アゴニストもしくは接着分子を含む足場を含む容器中で行う、請求項38に記載の方法。ステップbが、約25秒~約45秒間、前記白血球を水または低張塩溶液に接触させることを含む、請求項38に記載の方法。aの前記白血球およびdの前記血清が、同一の提供者由来である、請求項38に記載の方法。aの前記白血球およびdの前記血清が、異なる提供者由来である、請求項38に記載の方法。dの前記血清を以下により得る、請求項38に記載の方法:g別個のヒト血漿試料を凝固剤と接触させることであって、ここで、aの前記血漿および前記白血球は、同一または異なる提供者由来であり得ること、およびh凝固した固体を除去することであって、ここで、gにおける前記接触は、aのインキュベーションと実質的に同時に行われること。gの前記血清を、白血球に接触させる前に凍結させる、請求項47に記載の方法。前記血漿がABの提供者由来である、請求項47に記載の方法。前記凝固剤がCaCl2である、請求項47に記載の方法。前記インキュベーション組成物を、室温で、約8時間~約18時間、最大72時間までの時間インキュベートする、請求項37または38に記載の方法。前記インキュベーション組成物を、約37°Cで、約1時間~約5時間インキュベートする、請求項37または38に記載の方法。前記ALCSを凍結、凍結乾燥またはフリーズドライすることをさらに含む、請求項37または38に記載の方法。以下をさらに含む、請求項38に記載の方法:iステップfの前記白血球を第2の血清と混合して、第2のインキュベーション組成物を作製すること、j前記第2のインキュベーション組成物を、前記インキュベーション組成物中の少なくとも1つのサイトカインまたは成長因子の濃度を増加させる時間および温度の条件下でインキュベートし、それにより、前記ALCSの第2の試料を作製すること、およびk前記実質的に細胞を含まないALCSの第2の試料を作製するために、前記白血球および他の細胞物質をjの第2のインキュベーション組成物から分離すること。請求項37または請求項38に記載の方法により作製される、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清。少なくとも約1000pg/mLのヒトIL-8、少なくとも約10~20pg/mLのヒトIL-6、および少なくとも約20pg/mLのヒトTNFαを含む、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清。請求項55または56に記載の、実質的に細胞を含まない活性化白血球馴化上清、および被覆材、足場、またはマトリックスを含む製品。前記被覆材が、ガーゼ、包帯、非癒着性メッシュ、膜、箔、泡、または組織接着剤である、請求項57に記載の製品。前記被覆材が、ペースト、クリーム、軟膏、非透過性もしくは半透過性の膜もしくは箔、親水コロイド、ハイドロゲル、またはそれらの組み合わせから選択される保湿性バリアである、請求項57に記載の製品。前記被覆材が抗菌性被覆材である、請求項57に記載の製品。前記足場またはマトリックスが、移植前に固体である、請求項57に記載の製品。前記足場またはマトリックスが、移植後に凝固するゲルである、請求項57に記載の製品。本明細書において、血液は、全血またはその構成部分例えば、血漿、白血球、血小板または赤血球細胞のいずれかとして定義される。本発明のALCS内に存在し得る可溶性因子の量は、全血中のものに比べ、少なくても多くてもよい。本明細書において約という用語は、/-0.5~/-20の偏差の許容範囲を有する任意の値およびその間にある値、例えば、±1、±1.5、±2、±2.5、±3、±3.5、±4、±4.5、±5、±5.5、±6、±6.5、±7、±7.5、±8、±8.5、±9、±9.5、±10、±10.5、±11、±11.5、±12、±12.5、±13、±13.5、±14、±14.5、±15、±15.5、±16、±16.5、±17、±17.5、±18、±18.5、±19、±19.5および±20として数値範囲の下限および上限を含むあらゆる値に関連して使用される。本明細書および添付の特許請求の範囲において使用される、単数形である不定冠詞a、an、またはおよび定冠詞theは、文脈上、他に指示されない限り複数形を含む。本発明を実施するための出発材料は、いくつかの供給源から得ることができる。全血または1つ以上のその成分例えば、白血球および血漿は、自己供給源または同種異系供給源から得られることができる。本発明の一実施形態において、血液試料は、最終的にALCSで治療される患者から採取され、これを本明細書において、自己血液試料または自己血液供給源と呼ぶ。いくつかの実施形態において、1つまたは複数の供給源、すなわち血液またはその成分が、対象のALCSレシピエント以外の個人から得られる場合、これを同種異系血液試料または同種異系供給源と呼び、これらの出発材料は、従来血液銀行から得られることができる。これらの試料に、血液銀行が赤血球細胞の抗原に対する不規則抗体および輸血伝達性疾患に関するスクリーニングを行うことができる。より具体的には、スクリーニングは、アボットPRISM計測器を使用して以下に対する抗体で行うことができる:B型肝炎、C型肝炎、HIV1/2、HTLVおよび梅毒-HCV、Hbs抗原、抗HIV1/2Oおよび抗HTLVI/II。試料に、分子法NAT-核酸試験によるHIV、HCVおよびHBVに関するスクリーニングも行うことができる。分子スクリーニングを市販の計測器、例えば、カイロン社のTIGRIS装置を使用して実行することができる。同種異系供給源が関与する実施形態において、試料を対象のALCSレシピエントと同じ血液型のドナーから得ることができる。他の実施形態において、試料を対象のALCSレシピエントと異なる血液型を含む任意の血液型のドナーから得ることができる。例えば、白血球は、実質的にALCSを調製する過程で除去されるので、血漿または血清を使用する場合、血漿および血清において万能ドナーであるAB型の血液のドナーなどの代替供給源から得られることができる。血漿および/または血清は新鮮であるか、例えば、1~6°Cにて24時間未満保存され、乾燥または前処理例えば、感染性因子低減化血漿および/または血清、ならびに溶剤/界面活性剤SD処理した血漿および/血清することができる。本発明のいくつかの実施形態を作製するために使用される血漿は新鮮であり得、または1~6°Cにて24時間未満で保存され得、または新鮮な凍結血漿もしくは乾燥血漿または感染性因子低減化血漿あるいは溶剤/界面活性剤SD処理した血漿であってもよい。白血球を任意の血液型の患者から得ることができる。供給源に関わらず、1つまたは複数の試料の全ての必要な加工を高度に専門化した機器を必要とせず実施することができる。次に、本発明のALCS組成物を作製する実施形態の例を、相互連結された2セットの滅菌バッグを含有するシステムを示した図1および2を参照して説明する。このシステムは外部の環境にさらされないように密封されている。具体的には、この2セットを連結するチューブは合わせて接合され、すなわち、滅菌連結デバイス例えば、テルモ社製TSCD登録商標-II品番ME-203AHを使用して1つのシステムを形成するように結合されている。より具体的には、滅菌基準にたいする準拠を確保するため、チューブの接合および切断を特殊なウェハーを典型的に約300°Cにて予熱することにより行うことができるしかし、より低い温度またはさらに高い温度で予熱することにより、滅菌を効果的に行うことができる。この高温により、接合手順の滅菌性が高められる。さらに滅菌性を確実にするため、接合をクラス100000の封じ込め施設内のクラス100の生物学的安全キャビネット内で行うことができる。これらの図に示されるように、このシステムは、2つの滅菌バッグのセットを含む。バッグA、BおよびCを含むセット1は、一般に輸血に使用される標準的な市販の3連のバッグのセットである。典型的に約400~約550mlの容量のヒトの血液試料が、静脈穿刺により血液銀行で採取され、バッグAに入れられた後、標準的な技法を使用し、バッグA、BおよびCにその成分毎に分画される。例えば、血液試料を含むバッグAを遠心分離する。遠心分離後、血液成分を、例えば、バクスター社により製造された血液成分抽出器を使用して分離する。白血球を含有するバフィーコートをバッグCに入れ、血漿をバッグBに入れ、赤血球はバッグAに残る。このようにして、このプロセスの結果として、バッグAは、充填された赤血球を含み、バッグBは血漿を含み、バッグCは白血球を含有するバフィーコートおよびおそらく残留血漿および残留赤血球を含む。別法として、血液成分を当技術分野で公知のアフェレーシス技法により全血から分離することができる。次いで、バッグAを3つのバッグのセットから切り離す。図2に示されるように、次いでバッグBおよびCを特注の輸血バッグ1~5セット2に接合し、活性化白血球懸濁液およびその後ALCSを作製するために使用するシステムを形成する。これらの実施形態に記載されるように、バッグ1~5は、それぞれ500ml、50ml、50ml、100mlおよび500mlの容量である。上記のように、接合を、滅菌連結デバイスを用いて行う。バッグ1は、白血球の第1のインキュベーションおよび第2のインキュベーション双方のために使用されるが、滅菌濾過された空気200mlを含有する。バッグ1がガス透過性である場合、空気のバッグを必要としない。ガス透過性のバッグも、白血球に接着性となるように処理または改変することができる。例えば、バッグは接着性ビーズなどの足場および/または補体タンパク質、インターフェロン-α、インターフェロン-γおよびインターロイキン-12などの白血球アゴニストを含有することができる。バッグ表面への白血球の接着は、可溶性アゴニストを放出する性質に有益となり得る。バッグは接着性プラスチックまたは接着性となるように処理コロナ放電、液体ガスプラズマなど、または細胞外マトリックスタンパク質で被覆あるいは化学修飾した通常のプラスチックから作製することができ得る。足場は様々な形状であってよく、具体的に、マクロビーズであってよく、生物分解性であってよく、または生物分解性でなくてよい。足場すなわちビーズは生物分解性であってよく、または生物分解性でなくてよく、例えば、コラーゲン、もしくはPLA、PGAポリ乳酸、ポリグリコール酸または類似の合成ポリマー、ヒアルロン酸、アルギン酸、あるいはフィブリンシーラー製であってよい。ビーズは合成ハイドロゲルビーズ、ゼラチンビーズ、刺激を活性し、もしくは抗体を刺激する接着性受容体で被覆したビーズであってよい。次いで足場すなわち接着細胞を有するビーズを、他の全ての細胞と合わせて遠心分離することができる。さらに、製品に特に所望されない刺激は足場すなわちビーズと合わせて排除される。バッグ2は、溶液例えば、20mlの塩化ナトリウム緩衝液8.91NaCl、USPまたは無機イオンを含有する任意の他の生理学的に許容される溶液、ショ糖などの有機オスモライト、あるいは乳酸加リンゲルハルトマン液などのそのいくつかの組み合わせを含有し、これは白血球を低浸透圧ショック後に等張性に戻すのに役立つ。塩化ナトリウム溶液を200mlの蒸留水に添加した場合バッグ5、0.9NaCl溶液となる。バッグ3は、20mlの滅菌濾過された空気を含有する。バッグ4は、溶液例えば、約60mlの塩化カルシウム緩衝液1.17CaCl2二水和物、USPを含有し、これはバッグBの血漿を凝固させ、血小板と血清への分離を促進するよう作用する。バッグ5は約200mlの水を含有する。他の実施形態において、図2Bに示される6個のバッグのセットを、図2Aに示されるバッグ1~5の代わりに使用し得る。追加のバッグは、滅菌室の生成場所の滅菌性の維持を助ける。本方法のこの実施形態において、上記のようにバフィーコート、血漿およびRBCに分離後、白血球をバッグCから滅菌バッグ1に移し、血漿をこれも滅菌されている6番目のバッグに入れた後、6バッグのシステムを元の3連のバッグのセットから分離する。このセットを1単位としてパッケージとし、高圧蒸気を使用して滅菌し、これにより患者への二次感染の危険がかなり減少する。次いで、白血球をバッグCからバッグ1に移し、バッグを垂直な位置または平らな位置に保持しながら、時間および温度を含む活性化条件下においてインキュベートし、活性化させるようにする。本発明の目的のために、本発明の種々の態様および実施形態において、白血球の活性化は、少なくとも1段階を含むプロセスとして定義され、これにより細胞白血球を不活性から機能的に活性する状態に移し、この状態は、生物学的に活性な物質の合成または合成前の物質、例えば、IL-8などのサイトカインの細胞質から細胞膜への転移、あるいは細胞外培地への放出が伴う。上清は、遠心分離、重力による沈降、濾過または他の細胞除去方法により実質的に細胞を含有していない状態にされた細胞外培地である。本発明の目的のために、本発明の種々の態様および実施形態において、実質的に細胞を含まない上清は、約1×106個/mlより少ない白血球を含有する上清として定義される。いくつかの実施形態において、実質的に細胞を含まない上清は、約1×105個/ml、約1×104個/ml、約1×103個/ml、約1×102個/mlまたは1×101個/mlより少ない白血球を含有する。いくつかの実施形態において、実質的に細胞を含まない上清は、白血球を検出できないものである。インビボでの白血球の活性化は、細胞の血管壁に近く、およびこれに沿った遊走を含むことができ、これには、白血球の内皮壁への接着性、拡散および溢出を増加させる、P-セレクチンおよびCD42b発現の増加が介在し、内皮細胞のリガンドであるICAM-1およびICAM-2と相互作用する活性化CD11b、細胞外マトリックスタンパク質ラミニンとの相互作用を介した炎症巣への遊走および呼吸バースト、脱顆粒、食作用およびサイトカインの放出などの炎症性刺激に対する機能的反応がかなりの程度介在する。本発明の目的のために、白血球の活性化は、以下のいくつかの指標の少なくとも1つであるが、多くの場合、2つ以上により示される。白血球の活性化の1つ指標は、顆粒球、単球およびリンパ球を含む白血球集団上のCD11b受容体の活性形態の発現の増加および/またはセレクチン接着受容体であるCD62Lの発現レベルの低下があり、これは白血球表面から排出し、CD11bを介して白血球の内皮細胞への強力な接着を促進させる。いくつかの実施形態において、白血球はまた、リンパ球特異的活性化マーカーであるCD69レベルの増加を呈し、p-セレクチンを介してバフィーコート内の残留血小板を含む活性化顆粒球と単球との間の相互作用の結果として血小板マーカー42Bを発現し、および/またはIL-8の生成の増加を呈し得る。さらに白血球活性化の他の指標には、タンパク質またはポリペプチド、脂質、糖、接着分子として機能する酸素ラジカルおよび他の生化学部分、IL-8を含むサイトカイン、成長因子、酵素、転写因子および細胞シグナル受容体および細胞シグナル伝達物質のうちの1つ以上の生成の増加を含み得る。これらの分子のいずれの発現レベルの変化も、インキュベーションさせることなく、本明細書に記載のように新鮮なバフィーコートに含有される白血球の観点から評価する。白血球が活性化すると、活性化を維持し、本明細書に記載のように、高い活性化レベル、例えば、かなり高いCD11bの発現レベルまたは高いもしくはかなり高いCD69の発現レベルおよびかなり低いCD62Lの発現レベルを獲得し得る。さらに、活性化すると、白血球はまた、IL-8、IL-6、TNF-αおよびVEGFなどのサイトカインを生成する能力を増加させる。白血球活性化を示す細胞表面マーカーおよび分泌型可溶性因子の他の例は、実施例に記載される。したがって、活性化白血球組成物は、活性化の指標の少なくとも1つを呈する白血球を含む組成物である。いくつかの実施形態において、活性化白血球はさらに血小板を含む。いくつかの実施形態において、白血球を単に室温で静置させることによりインキュベーションする。本発明の目的のために、室温は、約12°C~約28°C、およびいくつかの実施形態において、約16°C~約25°C、約18~25°Cおよび約20~25°Cの温度を指す。インキュベーション時間は、温度により変化し得、一般に、約30分~約24時間で変化する。白血球を活性化するために必要なインキュベーション時間は、インキュベーションを行う温度におよそ反比例する。したがって、インキュベーション時間は、高温時に短くなる。例えば、白血球を室温で静置させる実施形態において、インキュベーション時間は、一般に、約90分~2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23以上および24時間以上の範囲であるおよびその部分的な範囲として、例えば、90分、2時間、3時間、4時間、5時間、6時間、7時間、8時間、9時間、10時間、11時間、12時間、13時間、14時間、15時間、16時間以上のいずれかの最短時間がある。好ましい実施形態において、インキュベーション時間は、約3、4、5、6、7または8時間~約20時間の範囲である。より好ましい実施形態において、白血球のインキュベーションは、約18°C~約24°Cにて約8時間~約12時間で起こる。他の実施形態において、白血球のインキュベーションは、例えば、室温以上~約37°Cにて熱にさらすことを含む。高温でのインキュベーション時間は、一般に、30、45、60または90分~約2、3、4、5、6、7、8、9、10、11または12時間および約24時間までのさらなる時間増分以上のいずれかの範囲であるその部分的な範囲には、例えば、30、45、60または90分、2時間、3時間、4時間、5時間、6時間などのいずれかの最短時間がある。インキュベーション後、白血球懸濁液に、一般に低浸透圧ショックを行う。好ましい実施形態において、低浸透圧ショックは即時にすなわち、任意の干渉ステップまたは不要な間を入れずに、前ステップの完了時に、典型的には2分未満で行われる。例えば、各図に記載のシステムでは、低浸透圧ショックはバッグ5から、白血球を含有するバッグ1に蒸留水を移すことにより開始され得る。低浸透圧ショック処理は、典型的に約24~45秒間で行われる。CD4T細胞の減少が少ないと考えられるため、この範囲内での、より短い方の時間が好ましい。CD4T細胞は、種々のサイトカイン例えば、IFNγ、IL-2、IL-4、IL-17を生成することが知られており、これは、創傷治癒に有益であり得る。このステップの後に、好ましくはこの直後に、白血球を等張性に戻す。再度、実施形態の例として、各図に記載のシステムを参照すると、これはバッグ2からバッグ1に塩化ナトリウム溶液を移すことにより達成される。塩化ナトリウム溶液の体積の、細胞懸濁水溶液の体積に対する比は、一般に約1:10である。等張性を戻す処理の後に、システム全体を遠心分離する。このプロセスは、前の2ステップの過程に添加された水および塩溶液を除去し、白血球が赤血球の溶血液にさらされることを防ぐ。遠心分離の結果として、白血球はペレットを形成する。遠心分離後、バッグ1由来の上清をバッグCに移し、遠心分離の結果としてバッグ1に形成された白血球のペレットを血清または白血球により馴化させるために使用される他の培地に再懸濁させる。一実施形態において、血清は一連の個別のステップにより得られ、これを第1の白血球インキュベーションと同時に行うことができ、CaCl2などの凝固剤と血漿を接触させることを必要とする。このプロセスにより、大部分がフィブリン鎖の血塊および血小板の凝集体が形成される。この処理の結果として、得られた血清は、一般に約0~約0.2×103個/μLの範囲の残留血小板レベルを有する。したがって、この実施形態において、バッグ4由来のCaCl2をバッグBに移す。バッグBは、ここでは血漿およびCaCl2の組成物を含有し、典型的には約37°Cで凝集する。この実施形態において、血漿は、白血球が活性化のためにインキュベーションされた時間と実質的同じ時間で凝固剤と接触したままであるが、血漿は、異なる時間および実質的に短い時間、例えば約90分~約24時間で凝固剤と接触させたままであってよい。等張性に戻し、遠心分離した後に得られたバッグ1の白血球のペレットを白血球と同じまたは異なる血液試料から得られることができるバッグBからの約20ml~約200ml以上の血清と混合させ、この場合は血清を含むインキュベーション組成物を形成する。バッグシステムの例を使用して調製された活性化白血球について記載したが、白血球が不活性から機能的に活性する状態に移るような時間に白血球をインキュベーションし、白血球に低浸透圧ショックを行い、白血球組成物の等張性を戻すことにより調製された任意の組成物を使用し、活性化白血球馴化上清の調製時に使用する活性化白血球を提供することができる。さらに、血清具体的にヒト血清が多くの場合、インキュベーション組成物に使用されるが、サイトカイン、成長因子および/または活性化白血球由来の他の可溶性成分の放出を補助する生理学的培地である限り他の培地を使用することができる。例えば、血漿が血清の代わりに使用され得る。使用され得る他のインキュベーション培地はさらに、培養培地または生理食塩水もしくは糖およびアミノ酸などの細胞生存性および細胞機能性に不可欠な他の成分例えば、乳酸加リンゲル液、酢酸加リンゲル液、ハンク平衡塩溶液HBSS、アール平衡塩溶液EBSS、標準クエン酸生理食塩水SSC、HEPES緩衝生理食塩水HBS、ゲイ平衡塩溶液GBSSの添加が可能な生理食塩緩衝液を含む。生理食塩溶液および培養培地をヒト血清または臨床グレードの動物血清あるいは血清置換物で補充することができ得る。インキュベーション組成物は、別にまたは加えて、血清タンパク質、例えば、ヒトアルブミンもしくはウシアルブミン、γ-グロブリン、トランスフェリンまたは異なる組織由来の他のタンパク質、移植タンパク質あるいは移植抽出物を含有し得る。さらに、インターフェロン-γなどの1つまたは複数のアゴニストをインキュベーション組成物に添加し、細胞から可溶性アゴニストの放出を促進することができる。インキュベーション組成物を、上清を馴化させる時間および温度条件下においてインキュベーションし、そうして活性化白血球馴化上清を生成する。これらの条件は約室温すなわち、約12°C~約28°Cおよびいくつかの実施形態において、約16°C~約25°C、約18~25°Cおよび約20~25°C~約37°Cを含む。一般に、インキュベーション時間は、30、45、60または90分~約2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、18、24、36、48、60、~約72時間以上のいずれかの範囲である。いくつかの実施形態において、組成物を、室温にて約1~約48時間、例えば、約18°C~約24°Cにて約8時間~約18時間または約1時間、約24時間あるいは約48時間インキュベーションする。他の実施形態において、組成物を約37°Cにて約1~約5時間または約30分、約60分あるいは約5時間インキュベーションする。結果として、上清は、白血球が多くのサイトカイン、成長因子および他の可溶性生物学的活性分子を上清に分泌するという点で馴化されるようになり、これは、プロセスの終わりに正常以上のすなわち、正常な非病原性のドナーから単離された血清より高い、かつ自己血清の場合、創傷のある患者の血清より高い濃度において上清に存在する。サイトカインの生成および分泌を刺激するため、インターフェロン-γなどのアゴニストをインキュベーション組成物に添加し得る。実施例に示されるように、第2のインキュベーションの結果として、白血球は、高い活性レベル、例えば、より高いCD11bおよび特にCD69の発現レベル、より低いCD62Lの発現レベルならびにIL-8および他のサイトカインおよび成長因子の生成の増加を獲得する。この第2のインキュベーション後、白血球を実質的に、例えば、遠心分離、重力により沈降、濾過または他の細胞除去法により除去する。いくつかの実施形態において、白血球を完全に除去し、細胞非含有のALCSを得る。例えば、バッグシステムを利用するこれらの実施形態において、バッグシステム全体を再度、バッグ1の白血球ペレットをALCSから分離するため遠心分離する。別法として、白血球および馴化血清を含むバッグ1を遠心分離の前にシステムから分離し、図2に図示されていない新たな空のバッグをバッグ1に接合、すなわち結合し、次いで、これらの2つのバッグを遠心分離し、白血球ペレットをALCSから分離する。遠心分離後、バッグ1の液体部分をシステムの残りの空のバッグまたは新たなバッグのいずれかに移す。白血球を遠心分離により除去する実施形態において、一般に遠心力は300g~10000g、遠心時間は5分~60分の範囲である。残留血小板を減少または排除することが望ましい実施形態において、血小板もペレットになるように、1000gより高いg力を使用する。残留赤血球、RBC残留物および他の残骸を減少または排除することが望ましい実施形態において、高速約10000gを使用することができる。本発明の一態様において、ALCSは、少なくとも1つのサイトカイン、成長因子またはIL-8、PDGF、抗体-1、VEGF、IL-6、TNFαまたはIL-1βから選択された可溶性伝達物質の濃度が、そのALCSをもたらしたインキュベーション組成物を調製するために使用された同じ培地であるが、培地と活性化白血球組成物の接触前の同じサイトカイン、成長因子または可溶性伝達物質の濃度の少なくとも約1.25、1.5、2、3、4、5、6、7、8、9、10倍以上である。例えば、いくつかの実施形態において、ALCSは、少なくとも1つのサイトカイン、成長因子またはIL-8、PDGF、抗体-1、VEGF、IL-6、TNFα、IL-1βまたはその組み合わせあるいはその部分的組み合わせから選択された可溶性伝達物質の濃度がすなわち、標準偏差を含み、または含まないかのいずれかにおいて、表7に記載の非馴化血清のIL-8、PDGF、抗体-1、VEGF、IL-6、TNFαまたはIL-1βの濃度の少なくとも約1.25、1.5、2、3、4、5、6、7、8、9、10倍以上である。いくつかの実施形態において、少なくともIL-8、少なくともPDGF、少なくとも抗体-1、少なくともVEGF、少なくともIL-6、少なくともTNFαまたは少なくともIL-1βに対して高濃度である。他の実施形態において、IL-8、PDGF、抗体-1、VEGF、IL-6、TNFαまたはIL-1βの少なくとも2つ、少なくとも3つ、少なくとも4つ、少なくとも5つ、少なくとも6つまたは7つ全てに対して高濃度である。この手順の次に、実質的に細胞非含有のALCSを凍結もしくは凍結乾燥またはフリーズドライすることができる。防腐剤例えば、抗酸化剤、トレハロースなどの糖、塩化ナトリウムなどの添加剤が、サイトカインおよび成長因子の活性を維持させる点から有益であり得る。白血球のペレットを同様に保存することができ、そうして他の培地を馴化させるために再利用し、追加のALCSを得ることができる。血清および/または血漿を利用する実施形態において、本発明の種々の態様における使用のための血清および/または血漿を、同じまたは異なる血液試料由来に関わらず活性化白血球組成物として同時に調製することができるが、他の実施形態において、血清および/または血漿は、独立して活性化白血球組成物として調製されることを記載しておく。例えば、血清および/または血漿を市販のまたは非営利供給業者の血液製剤から得ることができる。最近に、血清および/または血漿を1つ以上のドナーから得ることができ、または一定期間保存していてもよく、凍結保存されてもよい。さらに、血清および/または血漿を調製するために使用される血液試料は、同じドナー由来に関わらず活性化白血球を調製するために使用されるものと同じである必要はないため、これらの調製は、活性化白血球組成物の調製と同じ物理的場所または同じ時間になされる必要はない。ALCSが使用前に保存される実施形態において、室温にて、冷蔵または凍結して保存することができる。ALCSが室温にて保存される実施形態において、その生成後に最大約5日間、例えば、その生成後に約12、24、48、72時間以上の範囲の保存期間を有する。ALCSが冷蔵で保存される実施形態において、少なくとも約7日間以上、例えば、少なくとも約1、2、3、4、5、6、7または8週間あるいは約1~2週間、約1~3週間、約1~4週間、約1~5週間、約1~6週間、約1~7週間または約1~8週間の保存期間を有する。ALCSを凍結して保存する実施形態において、凍結して保存後、必要時に解凍することができる。いくつかの実施形態において、凍結ALCSは、少なくとも約1週間~1カ月または少なくとも約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10または11カ月~1年、または少なくとも約1年、少なくとも約2年もしくは少なくとも約3年の保存期間を有する。他の実施形態において、ALCS組成物を、全ての溶液の容量を同等に減らした、より少量の血液試料から調製することができ、小さいバッグを使用することができる。さらに、これらの異なる大きさのバッグおよび異なる用量の血清の使用により、異なる濃度の可溶性物質を含むALCSが生成される。これらの実施形態においてでも、同種異系血液試料または自己血液試料を出発材料として使用することができる。より少量の使用により、他の状況では健常な免疫システムを有するが、ある種の外傷による創傷例えば、戦場および戦闘状態に苦しむ患者を治療する緊急状況において、外部の血液銀行を使用することなく、臨床医が自律的に血液採取を行うことができる。これらの実施形態において、伝染性の疾患および抗原の試験の手間を省くことができる。しかし、このような場合、難治性の創傷のある患者は、有効なALCS調製物に臨床的に許容される血液ドナーではない。この状況が起きた場合、ALCSは、本明細書に記載の手段により同種異系のドナーから生成されるだろう。創傷に苦しむ患者は、生理学的に障害があり得、または創傷以外は健常であり得る。例えば、既に損傷した代謝系により、糖尿病患者および他の医学的に危険な患者は、患者自身の白血球がこの手順に適切でない可能性があるため、異種の血液由来のALCSの使用候補である。しかし、外傷患者の例などのように、他の状況では健常な患者も本発明のALCS組成物に良好な候補となる。本発明は、いかなる種類の創傷の治療、および治癒を促進させるのにも有用である。いくつかの実施形態において、ALCS、例えば、実質的に細胞非含有のALCSを唯一の活性創傷治癒剤として創傷に投与する。他の実施形態において、他の治療様式と併用する。例えば、標準的なシリンジまたは同様な投薬デバイスを用いた投薬の簡易性が、本発明のALCS組成物を安全かつ使いやすくしている。本発明の治療に適している創傷は、典型的に生体組織の火傷、刺傷、切傷または裂傷の形態である。皮膚の創傷は、表皮、真皮または、全層の創傷の場合は皮下組織を貫通し得る。したがって、本発明の組成物および方法を用いた治療に適している代表的な創傷の種類は、火傷例えば、火または皮膚に対して強い腐食性のある薬剤にさらされたことにより生じる、潰瘍例えば、褥瘡性潰瘍または任意の他の圧迫潰瘍、静脈性潰瘍および糖尿病性潰瘍、腱炎、開心手術後などの深部胸骨創傷、冠血流再建術後の大伏在静脈への外科手術による創傷および大伏在静脈摘出に対する外科手術による創傷ならびに腹部外科手術および任意の他の種類の外科手術後の術後創傷がある。他の創傷は、銃撃、ナイフまたは皮膚に切傷または裂傷を生じ得る任意の他の物体により生じる創傷を含む、戦闘または他の激しい活動中に被るなどの外傷を生じるものである。口腔の創傷例えば、歯、ならびに投薬の副作用としてまたは種々の病状の症状例えば、カポジ肉腫に関連した痛みとして生じる創傷、内部創傷例えば、裂肛などの筋組織の断裂および胃または腸の潰瘍などの胃腸管に対する創傷または病変もまた、本発明の治療に適し得る。ALCSを血管不全により悪化した任意の創傷を治療するために使用することができる。本発明の目的のために、血管不全は、罹患領域へのかん流不全を生じる不十分な血液循環を指す。このような不全は、外傷例えば、骨折に隣接する血管系への損傷または種々の病状例えば、糖尿病およびアテローム性動脈硬化により生じる恐れがある。いずれの例においても、外傷または疾患が誘発した場合であれ、血管不全は有効な創傷治癒の可能性を低下させる。ALCSはこれらの患者の創傷治癒転帰を改善する場合に有用であり得、本明細書に記載の方法により投与されるべきである。さらに、治療のアルゴリズムは創傷の重症度または種類あるいは血管不全の程度により限定されるべきではない。ALCSは最も重篤な創傷および血管不全を示す患者により効果的であり得る。活性化白血球馴化上清は、具体的に糖尿病性足部潰瘍および褥瘡性潰瘍の治療に有用である。褥瘡性潰瘍は、寝たきりの患者の体表面上の長期圧迫および妨げられた血流により生じる皮膚および下層組織の慢性圧迫潰瘍であるBerlowitz2007。褥瘡性潰瘍は、高齢者の疾病率および死亡率の原因となる。IV期の圧迫潰瘍の少なくとも48は治療1年後においても治癒していないままであるGirouard2008。褥瘡に苦しむ患者はまた、通常、糖尿病および高血圧などの併発病状を有する。これらの病状はさらに、褥瘡の治療の成果を複雑にする。他の態様において、本発明は、本発明の組成物を創傷に投与することを含む創傷の感染の発症を阻害する方法に関する。一実施形態において、創傷は外傷により生じる。別の実施形態において、創傷は外科手術により生じる。創傷を治療する方法が関与する態様において、創傷はまた、本発明の組成物を含む製品を創傷に投与することにより治療され得る。一般に、活性化白血球馴化血清の投薬は、ALCSを創傷にまたは創傷周辺の組織に直接1つ以上の注入手段により実行される。ALCSは直接開放性創傷に投薬され得る。シリンジ内の試料全体を配置することができ、臨床医は臨床パラメーターに基づいて必要であると決定した場合、追加のALCSを投与することを選択することができる。ALCSは種々の部位の創傷に注入することができる。一実施形態において、注入は、創傷の全長に対して約1cm毎~約3cm毎に行う。各注入部位にて、0.1~0.3mlのALCSを注入する。他の実施形態において、シリンジ全体を創傷内の単一の部位に1回で注入することができる。創傷への注入において、ルアーロックシリンジまたはシリンジおよび針の間にロック機能がある任意の他の市販のシリンジを使用することが好ましい。創傷、具体的に圧迫創傷の生物学的空間は、多くの場合限定されている。創傷に注入する場合、圧力がシリンジに生じ、針と分離する危険がある。ロックしたシリンジを使用すると、この危険が排除される。18G以上の針を吸引に使用する場合、創傷への注入においては22~35Gの大きさの針に交換する。創傷組織に注入が可能でない場合、ALCSを創傷の傷口に直接投薬することができる。この方法の投薬は、シリンジまたはチューブを用いた直接投薬を使用して行われることができる。ALCSを創傷に、またはその周りに被覆材の補助とともに投薬することができる。乾燥被覆材は、ガーゼおよび救急絆、非粘着性メッシュ、膜および箔、泡状物質および組織接着剤を含む。保湿保護バリア被覆材には、ペースト、クリームおよび軟膏、非透過性もしくは半透過性の膜もしくは箔、親水コロイド、ハイドロゲルおよび配合剤を含む。生物活性被覆材は、抗菌性被覆材、双方性被覆材、単一成分の生物学的被覆材および配合剤例えば、軟膏、ゲル、フィブリンシーラント、成長因子および血管新生因子例えば、PDGF、VEGF、コラーゲンを含む。いくつかの実施形態において、創傷をALCSに含浸させた滅菌ガーゼで包む。乳酸加リンゲルハルトマン溶液などの組成物を染み込ませることができる、例えば、滅菌ガーゼパッドなどの被覆材、アルギン酸含有被覆材、ポリウレタン被覆材またはカルボキシメチルセルロース被覆材を適用して、創傷を被覆し、続いて乾燥被覆材を適用する。対象の創傷に強い感染性がある場合、その時、Silverlonなどの銀被覆材を適用することができる。注入後の被覆材の選択は、臨床医の決定に基づく。購入可能性、過去の臨床成功歴および患者の耐性は全て、創傷被覆材の選択で考慮される要因である。創傷を例えば滅菌水および石鹸で洗浄するため、被覆材を定期的に、例えば約24時間後に取り除くことができる。別の実施形態において、ALCSを、投与前に生理学的に不活性および/または吸収性マトリックスまたは足場と組み合わせる。マトリックスまたは足場をヒトへの移植に適した任意の材料から形成することができる。例えば、マトリックスまたは足場はコラーゲン、ヒアルロン酸またはゼラチン、泡状物質あるいはその組み合わせを含む任意の生体適合性材料を含み得る。コラーゲンはヒト組織または他のコラーゲン生成哺乳類動物の組織から調製されたコラーゲンを含む任意の供給源から得られることができる。ALCSおよびマトリックス/足場材料の組み合わせは、圧入の手段により、または注入によりヒトへ投与される泡状物質、ゲルまたはパテを形成することができる。これにより、患者に有益となる部位へのALCSの徐放性送達が可能になる。泡状物質は、フィブリンシーラントを含み得る。いくつかの実施形態において、ALCSおよびマトリックス/足場材料の混合物は、商業的に調製され、ヘルスケア業者に予混合して提供される。他の実施形態において、ヘルスケア業者がALCSおよびマトリックス/足場をヒトに投与する前に混合する。臨床医がさらに投薬が必要であるかを決定すると、ALCSを創傷に、例えば、4週間後に1回、または1回以上投薬することができる。考慮され得る要因には、創傷の寸法幅、長さおよび深さの増大、膿、発熱または再治療が必要であるような治療抵抗性の創傷感染を示す任意の他の徴候または症状を含む。再治療に加えて、外科的創面切除のための紹介が、臨床医が適切と思われる任意の時点で示され得る。ALCSを、加温治療的加熱、電気刺激、磁力、レーザー光線療法、サイクロイド振動療法および超音波などの任意の他の従来の創傷治療と併用することができる。また、幼虫治療、皮膚代替物、培養角化細胞エピセル、ジェンザイムバイオサージェリー、ヒト皮膚代用品ダーマグラフト、スミスアンドネフュー社、死体由来の処理済みの真皮アロダーム、ライフセル社、二層の皮膚等価物アプリグラフ、オルガノジェネシス、トランスサイトスミスアンドネフュー社、成長因子PDGFは現在、局所使用において許可された唯一の成長因子であるおよびフィブリンシーラントなどの生物学的療法とともに使用することができる。いくつかの実施形態において、ALCSを、KCIにより製造される市販の創傷療法であるVACと併用する。VACは創傷に陰圧を加えることにより創傷治癒を促進する。これらの実施形態において、ALCSは、VAC療法の前に創傷に投薬されることが好ましい。さらに他の実施形態において、ALCSは、高圧療法と併用するThackham2008。例えば、ALCSを、患者が受ける高圧療法の直前に創傷に投薬することができる。ALCSはまた、低エネルギー衝撃波療法と併用することができる例えば、創傷長1cm当たり約0.1mJ/mm2、5Hzのインパルス。DumfarthetalAnnThoracSurg86190913を参照のこと。治療後、創傷を長さ、幅および高さ測定に対して評価することができる。典型的に、創傷は、これらのパラメーターの測定全てが無視できるほどである場合、治癒したと考えられる。ALCSは鎮痛効果も得られることができる。次に、本発明の1つまたは複数の態様を、以下の非限定的実施例に従い説明する。実施例1-細胞活性化の分析血清の馴化における本発明の好ましい実施形態に従い作製された活性化白血球組成物を細胞表面マーカー、すなわち、種々の白血球集団顆粒球、単球およびリンパ球のCD11b、CD62LおよびCD69により特徴づけた。CD11bはICAM-1CD54および他のリガンドの接着受容体である。大部分は顆粒球および単球/マクロファージに発現するが、低いレベルでリンパ球にも発現する。細胞表面のCD11bの発現は、白血球が活性化する場合に増加する。さらに、CD11bは構造を変化させる。CD11bの活性化形態は、抗体CBRM1/5により認識される。CD11bの非活性化形態は、異なる抗体D12により認識される。CD62Lは、セレクチンファミリー由来の接着受容体である。CD62Lは、顆粒球、単球およびリンパ球を含む全ての白血球のクラスで構成的に発現される。活性化すると、白血球はその表面からCD62Lを急速に排出する。CD69はリンパ球活性化抗原である。CD69の発現は、活性化するとリンパ球表面で非常に早期に増加する。白血球を次の3つの時点、すなわち生成プロセスの開始直前新鮮なバフィーコートFBC、第1のインキュベーション直後インキュベーションされたバフィーコートIBCおよび活性化プロセスの終わりEAPつまり低浸透圧ショック後で試料採取し、その後血清と共に37°Cにて90分間の第二のインキュベーションを行った。各時点で、白血球を、対応する活性化マーカーに対して特異的なモノクローナル抗体で標識した後、フローサイトメトリーにより分析した。抗体染色のために、各時点の細胞をPBS/0.02アジ化ナトリウムで洗浄し、FACS染色溶液PBS、2正常マウス血清、0.02アジ化ナトリウムに0.5×106個/100μlにて再懸濁させた。100μlの分量の細胞懸濁液を適切なモノクローナル抗体と4°Cの暗室にて30分間インキュベーションした。インキュベーション後、細胞を赤血球溶解緩衝液で処理し、洗浄し、PBSに再懸濁させ、FACSキャリバーフローサイトメトリーベクトンディッキンソンにて分析した。抗CD11b抗体および抗CD62L抗体をフィコエリトリンPEに複合体化させ、CD69抗体をフルオレセインイソチオシアネートFITCに複合体化させた。白血球集団間でより区別するため、CD11bで標識された細胞を、アロフィコシアニンAPCに複合体化させた単球マーカーCD14に対する抗体でも二重標識し、さらにCD62L抗体で標識した細胞を顆粒球マーカーCD15-APCでも二重標識した。Tリンパ球およびBリンパ球を識別するため、CD69抗体で染色した細胞を、抗CD3-APC抗体および抗CD19-APC抗体でさらに二重染色した。同じ条件下において、無関係であるが、アイソタイプ適合抗体抗CD14抗体もしくは抗CD15抗体または抗CD3/CD19抗体と合わせてで染色した細胞を陰性対照として使用した。高い側方光散乱性SSCを用いて、単球を明色のCD14陽性細胞として決定し、顆粒球を暗色のCD14陽性細胞または明色のCD15陽性細胞として識別した。Tリンパ球をCD3陽性細胞として決定し、Bリンパ球をCD19陽性細胞として決定した。4~6つの上記の実験の結果を表1、2および3にまとめる。データを、染色細胞の平均蛍光強度±標準偏差として示す。表1に示されるデータは、一般の抗体D12および抗活性化形態の抗体CBRM1/5の両方により認識されたCD11bの発現レベルが、新鮮なバフィーコートFBCに比べ全ての白血球集団の活性化プロセスの終わりEAPにかなり増加したことを示す。CD11bの活性化形態の上方制御はより明白であった。表1:白血球活性化を示す白血球集団のCD11bの発現表2:白血球活性化を示す白血球集団のCD62Lの発現表3:活性化を示すTリンパ球およびBリンパ球のCD69の発現生成プロセスの異なる段階でのCD62Lの発現の比較では、すでにインキュベートされたバフィーコートの段階IBCでの全ての白血球集団では劇的にかつ顕著に減少したことが示された。活性化プロセスの終わりEAPでは、CD62Lのレベルは無視できるほどであった表2。表3に示されるように、CD11bの上方制御およびCD62Lの下方制御は、特異的リンパ球活性化マーカーCD69の発現と一致しており、実際上発現しな状態から中等度であるが、かなりのレベルに増加した。実施例2-血清のインキュベーション中の活性化白血球によるサイトカイン分泌の分析10×106個の細胞を含有する活性化白血球組成物を遠心分離し、本発明の好ましい実施形態に従い、細胞ペレットを5mlの血清に再懸濁させた。IL-8および他のサイトカインの濃度を、RDシステムズ製の最適化されたELISAプレートを使用して37°Cにてインキュベーションの種々の時点で測定した。白血球を含有しない白血球再懸濁液に使用した血清中のサイトカイン濃度pg/mlを並行して測定し、活性化白血球の存在下において生成された値から減算した。IL-8についての5つの実験結果を表4に平均±標準偏差としてまとめる。種々のサイトカインおよび成長因子GFの追加の実験の結果を表5にまとめるn>10。表4:活性化白血球によって血清に放出されたIL-8の濃度pg/ml表5:活性化白血球によって血清に放出されたサイトカインおよび成長因子の濃度pg/ml表4および表5に示されるデータは、活性化白血球が、創傷治癒に関連するIL-8および他のサイトカインならびに成長因子の上清への持続放出を少なくとも5時間を支援することができることを示す。実施例3.原材料新鮮なバフィーコートから試料採取された白血球と、生成プロセスの中間段階および最終段階から試料採取された白血球の、サイトカインおよび成長因子を放出する能力の比較白血球を次の3つの時点、すなわち生成プロセスの開始直前新鮮なバフィーコートFBC、第1のインキュベーション直後インキュベーションされたバフィーコートIBCおよび活性化プロセスの終わりEAPつまり低浸透圧ショック後において試料採取し、続いて血清と37°Cにて90分間インキュベーションした。各時点で、10×106個の細胞を含有する白血球組成物を遠心分離し、本発明の好ましい実施形態に従い、細胞ペレットを5mlのインキュベーション培地RPMIまたは各試料に対応する元の培地新鮮なバフィーコートにおいては血漿およびインキュベーションされたバフィーコートおよび最終生成物においては血清に再懸濁させた。各試料由来の白血球をRPMIにおいて1時間、血漿/血清において5時間37°Cにてインキュベーションし、これらの時間中に放出された種々のサイトカインの濃度を、RDシステムズ製の最適化されたELISAプレートを使用して測定した。RPMIはサイトカインを含有しなかったが、白血球を含有しない白血球再懸濁液に使用した対応する血漿または血清中のサイトカイン濃度pg/mlを並行して測定し、活性化白血球の存在下において生成された値から減算した。結果を表6に平均±標準偏差としてまとめるn=3~6。表6:生成プロセスの異なる段階で試料採取された白血球によるサイトカインおよび成長因子放出の比較表6に示されたデータは、原材料バフィーコートの白血球ではサイトカインを放出する能力が低かったが、白血球からのサイトカイン放出は、生成プロセス中に増加し、生成の終わりでは最大であったことを示す。生成の終わりの活性化白血球を本発明の好ましい実施形態に従い、血清に再懸濁させた場合、サイトカイン放出は、RPMIでの放出に比べ2~3倍高くなった。実施例4.最終生成物中のサイトカイン含量の分析創傷治癒に関連する種々のサイトカインおよび成長因子の濃度を、室温にて活性化白血球と1時間、24時間および48時間インキュベーションした後、細胞が遠心分離によりペレット化された後の最終生成物の液体部分において測定した。アッセイは、イーバイオサイエンス製の最適化されたELISAプレートを使用して行われた。結果を表7に平均±標準偏差としてまとめるn>10。表7:生成の終わりの様々な時間でのサイトカイン含量表7に示されるデータは、生成の終わりに、ALCSが関連のサイトカインおよび成長因子をかなりの量含有することを示す。本発明の好ましい実施形態に従い、活性化白血球と血清のプレインキュベーションの時間を延長した場合、サイトカイン濃度が増加した。活性化白血球により馴化される前に使用された血清中の抗体-1を除く各サイトカインおよび成長因子の含量は2~3倍とかなり低下した。出願に引用される刊行物の一覧JParkinetalAnOverviewoftheImmuneSystemLancet200135717771789AMorettaetalHumanNKCellsFromHLAClassISpecificKillerIglikeReceptorstotheTherapyofAcuteLeukemiasImmunolRev2008Aug2245869JLietalPathophysiologyofAcuteWoundHealingClinicalDermatol2007JanFeb25918GBroughton2ndetalWoundHealingAnOverviewPlastReconstrSurg2006Jun1171eS32eSAKTsirogiannietalWoundHealingImmunologicalAspectsInjury2006Apr37Suppl1S512Epub2006AJSingeretalCutaneousWoundHealingNewEngJMed199934173846PMartinWoundHealingAimingForPerfectSkinRegenerationScience19972767581ADAgaibyetalImmunoInflammatoryCellDynamicsDuringCutaneousWoundHealingJAnat1999Nov19553142DRossiZlotnikAThebiologyofchemokinesandtheirreceptorsAnnuRevImmunol20001821724213DWHRichesMacrophageInvolvementInWoundRepairRemodelingandRbrosisInTheMolecularandCellularBiologyofWoundRepair1ndednpp95±141NewYorkLondonPlenumPressDGreilingetalFibronectinProvidesaConduitforFibroblastTransmigrationfromCollagenousStromaintoFibrinClotProvisionalMatrixJCellSci199711086170MGTonnesenetalAngiogenesisInWoundHealingJInvestigDermatolSympProc20005406JPKimetalMechanismsofHumanKeratinocyteMigrationonFibronectinUniqueRoleofRGDSiteandIntegrinsJCellPhysiol199215144350JJTomaseketalMyofibroblastsandMechanoRegulationofConnectiveTissueRemodellingNatRevMolCellBiol3349363SWerneretalRegulationofWoundHealingbyGrowthFactorsandCytokinesPhysiolRev2003Jul8383570DAKeenReviewofResearchExaminingtheRegulatoryRoleofLymphocytesinNormalWoundHealingJWoundCare2008SLiekensetalAngiogenesisregulatorsandclinicalapplicationsBiochemPharmacol2001Feb16125370CUNieslerMWJFergusonTGFbetasuperfamilycytokinesinwoundhealinginTGFbetaandRelatedCytokinesinInflammationBreitSNandSMWahledBirkhauserBasel2001pp173198CHHeldinandBWestermarkMechanismofactionandinvivoroleofplateletderivedgrowthfactorPhysiolRev1999Oct791283316SBlotnikTlymphocytessynthesizeandexportheparinbindingepidermalgrowthfactorlikegrowthfactorandbasicfibroblastgrowthfactormitogensforvascularcellsandfibroblastsdifferentialproductionandreleasebyCD41andCD81TcellsProcNatlAcadSciUSA19949128902894BMDoshietalWoundHealingFromaCellularStressResponsePerspectiveCellStressChaperones2008Dec133939GJMoranetalAntimicrobialProphylaxisforWoundsandProceduresintheEmergencyDepartmentInfectDisClinNorthAm2008MAFonderetalTreatingtheChronicWoundAPracticalApproachtotheCareofNonhealingWoundsandWoundCareDressingsJAmAcadDermatol2008Feb58185206JAThackhametalTheUseofHyperbaricOxygenTherapytoTreatChronicWoundsAReviewWoundRepairRegen20081998MayJun1632130DRBerlowitzetalAreallpressureulcerstheresultofdeeptissueinjuryAReviewoftheLiteratureOstomyWoundManage2007Oct53348KGirouardetalThesymptomofpainwithpressureulcersareviewoftheliteratureOstomyWoundManage2008May54304032DumfarthetalProphylacticlowenergyshockwavetherapyimproveswoundhealingafterveinharvestingforcoronaryarterybypassgraftsurgeryaprospectiverandomizedtrialAnnThoracSurg2008Dec86190913特許刊行物および非特許刊行物双方を含む、本明細書に引用されるすべての刊行物は、本発明が関与する当業者の技術レベルを示すものである。全てのこれらの刊行物は、個々の刊行物が具体的かつ個別に、参照により組み込まれたと示されたと同程度に、本明細書に参照により組み込まれる。本明細書の発明は、特定の実施形態に関して記載されているが、これらの実施形態は、本発明の原理および適用を例示するものにすぎないということが理解される。従って、添付の特許請求の範囲に定義される、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、例示的な実施形態に対する多くの変更が可能であり、他の構成が考案され得ることが理解される。