以下の段階を含む、固形腫瘍を有する患者を同定する方法:固形腫瘍を有する可能性のある患者由来の末梢血単核細胞を含む試料を用意する段階;該試料における正常を上回るEphA3非造血性非腫瘍細胞のレベルを検出する段階であって、それにより、固形腫瘍を有する患者を同定する、段階。EphA3細胞がCD34であるかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項1記載の方法。EphA3細胞がCD45であるかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項1記載の方法。EphA3細胞がCD44、CD90、および/またはKDRを発現するかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項1記載の方法。EphA3細胞がCD34およびCD45であるかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項1記載の方法。EphA3細胞がCD44、CD90、および/またはKDRを発現するかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項5記載の方法。患者が乳癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、結腸腺癌、腎細胞癌、移行上皮癌、前立腺腺癌、または黒色腫を有する、請求項1~6のいずれか一項記載の方法。EphA3非造血性非腫瘍細胞のレベルを検出する段階が、該細胞の表面におけるEphA3発現を検出する段階を含む、請求項1~6のいずれか一項記載の方法。細胞の表面におけるEphA3発現が、フローサイトメトリーによって検出される、請求項8記載の方法。細胞の表面における発現を検出する段階が、EphA3に選択的に結合する第1の抗体と該細胞とを接触させることを含む、請求項8記載の方法。第1の抗体が結合するエピトープとは異なるエピトープでEphA3に選択的に結合する第2の抗体と前記細胞とを接触させることをさらに含む、請求項10記載の方法。第2の抗体が、第1の抗体と同じ検出可能な標識で標識されている、請求項11記載の方法。EphA3非造血性非腫瘍細胞のレベルを検出する段階がRTPCR反応を含む、請求項1~6のいずれか一項記載の方法。癌治療物質を患者に投与する段階をさらに含む、請求項1~6のいずれか一項記載の方法。患者が乳癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、結腸腺癌、腎細胞癌、移行上皮癌、前立腺腺癌、または黒色腫を有する、請求項14記載の方法。癌治療物質が抗血管antivascular治療物質である、請求項14記載の方法。抗血管治療物質が、血管内皮増殖因子VEGFアンタゴニストであるか、またはEphA3を活性化する抗体である、請求項16記載の方法。癌治療物質が、EphA3に選択的に結合する抗体である、請求項14記載の方法。以下の段階を含む、癌治療物質の有効性をモニターする方法:癌治療物質による治療後に、固形腫瘍を有する患者由来の末梢血におけるEphA3非造血性非腫瘍細胞のレベルを決定する段階;末梢血におけるEphA3非造血性非腫瘍細胞のレベルを、癌治療物質による治療前のレベルと比較する段階。癌治療物質が抗血管治療物質である、請求項19記載の方法。抗血管治療物質が、VEGFアンタゴニストであるか、またはEphA3を活性化する抗体である、請求項20記載の方法。癌治療物質が、EphA3に選択的に結合する抗体である、請求項19記載の方法。EphA3細胞がCD34であるかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項19記載の方法。EphA3細胞がCD45であるかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項19記載の方法。EphA3細胞がCD44、CD90、および/またはKDRを発現するかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項19記載の方法。EphA3細胞がCD34およびCD45であるかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項19記載の方法。EphA3細胞がCD44、CD90、および/またはKDRを発現するかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項26記載の方法。EphA3非造血性非腫瘍細胞のレベルを決定する段階が、該細胞の表面におけるEphA3発現を検出する段階を含む、請求項19~27のいずれか一項記載の方法。細胞の表面におけるEphA3発現が、フローサイトメトリーによって検出される、請求項28記載の方法。非造血性細胞の表面における発現を検出する段階が、EphA3に選択的に結合する第1の抗体と該細胞とを接触させることを含む、請求項28記載の方法。異なるEphA3エピトープに選択的に結合する第2の抗体と前記細胞とを接触させることをさらに含む、請求項30記載の方法。第1および第2の抗体が検出可能な同じ標識で標識されている、請求項31記載の方法。癌治療物質が、EphA3に選択的に結合する治療的抗体であり、かつEphA3非造血性非腫瘍細胞のレベルを決定する段階が、該治療的抗体が結合するエピトープとは異なるエピトープに結合する抗体と該細胞とを接触させることを含む、請求項19~27のいずれか一項記載の方法。患者が乳癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、結腸腺癌、腎細胞癌、移行上皮癌、前立腺腺癌、または黒色腫を有する、請求項19~27のいずれか一項記載の方法。EphA3の発現を検出する段階がRTPCR反応を含む、請求項19~27のいずれか一項記載の方法。試料における非造血性細胞の存在を検出するためのキットであって、EphA3エピトープに選択的に結合する第1の抗体、および異なるEphA3エピトープに選択的に結合する第2の抗体を含む、前記キット。第1および第2の抗体が検出可能な同じ標識で標識されている、請求項36記載のキット。CD34、CD45、CD90、およびKDRからなる群より選択される表面マーカーに結合する抗体をさらに含む、請求項36記載のキット。以下の段階を含む、患者由来の末梢血におけるEphA3細胞の非造血性非腫瘍集団の存在または非存在を同定する方法:患者由来の末梢血細胞を含む試料を用意する段階;試料中の非造血性非腫瘍細胞におけるEphA3の発現の存在または非存在を検出する段階であって、非造血性非腫瘍細胞上のEphA3発現の存在によって固形腫瘍の存在が示される、段階。発明の詳細な説明定義本明細書で用いる場合、固形腫瘍とは、対象における新生物細胞を含む異常な組織塊のことを指す。固形腫瘍は良性であっても悪性であってもよい。本発明の方法および組成物を用いて検出および/またはモニターすることのできる固形腫瘍は、新血管形成によって特徴づけられる。腫瘍血管系微小血管系とも称されるは、内皮細胞の急速な増殖、不良な壁構造、血漿タンパク質の透過性の増大、および、需要に応じて血流を増加させる能力が限られていることによって特徴づけられる。腫瘍血管系は、腫瘍塊の腫瘍細胞が、正常細胞と比較して増殖面での優位性を獲得することを可能にする。固形腫瘍は、それを形成する細胞の種類にちなんで命名される。固形腫瘍の例には、肉腫、癌腫上皮腫瘍、黒色腫および神経膠芽腫がある。癌細胞または腫瘍細胞という用語は、互換的に用いられ、新生物細胞を指す。この用語は、良性および悪性である細胞を含む。新生物形質転換は、腫瘍細胞の由来元である細胞種に対する腫瘍細胞の表現型変化を伴う。この変化には、接触阻害の喪失、形態変化、および異常増殖が含まれうるFreshneyCultureofAnimalCellsaManualofBasicTechnique2を生じる。F2を穏和な条件下で還元させてヒンジ領域内のジスルフィド結合を切断し、それにより、F2二量体をFab単量体に変換させることができる。Fab単量体は本質的には、ヒンジ領域の部分を伴うFabである他の抗体断片のより詳細な説明については、FundamentalImmunologyWEPauledRavenPressNYを参照。無傷の抗体の消化に関してはさまざまな抗体断片が定義されているが、当業者は、化学的に、または組換えDNA法を用いることによって、そのような断片を新規に合成しうることを理解しているであろう。したがって、本明細書で用いる抗体という用語には、完全抗体の修飾によって生成されるか、または組換えDNA法を用いて合成される抗体断片も含まれる。抗体には、可変重鎖領域と可変軽鎖領域が直接に、またはペプチドリンカーを介して連結して一つになり、連続したポリペプチドを形成した、単鎖Fv抗体sFvまたはscFvなどの単鎖抗体単一のポリペプチド鎖として存在する抗体を含むVHVL二量体が含まれる。単鎖Fv抗体とは、直接連結しているか、またはペプチドコードリンカーによって連結しているVHコード配列およびVLコード配列を含む核酸から発現されうる、共有結合したVHVLのことである例えば、HustonetalProcNatAcadSciUSA85587958831988。VHおよびVLは単一ポリペプチド鎖として互いに接続しているが、VHドメインおよびVLドメインは非共有結合により会合する。または、抗体は別の断片であってもよい。例えば組換え手法を用いて、可溶性タンパク質として、またはディスプレイ法から得られる断片として、他の断片を作製することもできる。抗体には、ダイアンチボディdiantibodyおよびミニアンチボディminiantibodyも含まれうる。また、本発明の抗体には、ラクダ科動物由来の抗体などの重鎖二量体も含まれる。本発明において、抗体は、間質始原細胞の表面に存在するEphA3と結合することができる形態で利用される。本明細書で用いる場合、V領域とは、CDR3およびフレームワーク4を含めた、フレームワーク1、CDR1、フレームワーク2、CDR2、およびフレームワーク3のセグメントを含む抗体可変領域ドメインのことを指し、これらのセグメントは、B細胞分化の際に重鎖および軽鎖のV領域遺伝子の再構成の結果としてVセグメントに加えられる。本明細書で用いる場合、相補性決定領域CDRとは、軽鎖可変領域および重鎖可変領域によって構築される4つのフレームワーク領域の間に差し挟まれた、各鎖における3つの超可変領域のことを指す。CDRは、抗原のエピトープに対する結合を主に担う。各鎖のCDRは典型的には、N末端から順に番号を付してCDR1、CDR2およびCDR3と称され、典型的には個々のCDRが位置する鎖によっても特定される。すなわち、VHCDR3はそれが見いだされる抗体の重鎖の可変ドメインに位置し、一方、VLCDR1はそれが見いだされる抗体の軽鎖の可変ドメインに由来するCDR1である。異なる軽鎖または重鎖のフレームワーク領域の配列は、種内で比較的保存されている。抗体のフレームワーク領域は、構成要素である軽鎖および重鎖のフレームワーク領域が組み合わさったものであり、三次元空間にCDRを位置づけて整列させる働きをする。CDRおよびフレームワーク領域のアミノ酸配列は、当技術分野において周知のさまざまな定義、例えば、KabatChothiainternationalImMunoGeneTicsデータベースIMGT、およびAbMなどを用いて決定することができる例えば、Johnsonetal、前記;ChothiaLesk1987CanonicalstructuresforthehypervariableregionsofimmunoglobulinsJMolBiol196901917;ChothiaCetal1989ConformationsofimmunoglobulinhypervariableregionsNature342877883;ChothiaCetal1992structuralrepertoireofthehumanVHsegmentsJMolBiol227799817;AlLazikanietalJMolBiol1997273を参照。抗原結合部位の定義は、以下のものにも記載されている:RuizetalIMGTtheinternationalImMunoGeneTicsdatabaseNucleicAcidsRes28219221;およびLefrancMPIMGTtheinternationalImMunoGeneTicsdatabaseNucleicAcidsResJan1292079;MacCallumetalAntibodyantigeninteractionsContactanalysisandbindingsitetopographyJMolBiol262732745;およびMartinetalProcNatlAcadSciUSA8692689272;MartinetalMethodsEnzymol203121153;PedersenetalImmunomethods1126;およびReesetalInSternbergMJEProteinStructurePredictionOxfordUniversityPressOxford1411721996。エピトープまたは抗原決定基とは、抗体が結合する抗原上の部位のことを指す。エピトープは、連続したアミノ酸、またはタンパク質の三次フォールディングによって近接する非連続的なアミノ酸の両方から形成されうる。連続したアミノ酸から形成されるエピトープは典型的には、変性溶媒に曝露されても保たれるが、一方、三次フォールディングによって形成されるエピトープは典型的には、変性溶媒による処理によって失われる。エピトープは、特有の空間的高次構造内に典型的には少なくとも3個のアミノ酸、より一般的には少なくとも5個または8~10個のアミノ酸を含む。エピトープの空間的高次構造を決定する方法には、例えば、X線結晶解析および二次元核磁気共鳴が含まれる。例えば、EpitopeMappingProtocolsinMethodsinMolecularBiologyVol66GlennEMorrisEdを参照。本明細書で用いる場合、キメラ抗体とは、a抗原結合部位可変領域が、クラス、エフェクター機能および/もしくは種が異なるかもしくは改変された定常領域、または該キメラ抗体に新たな特性を付与する全く異なる分子、例えば酵素、毒素、ホルモン、増殖因子、薬物などと連結されるように、定常領域またはその一部分が改変、置換または交換されている、免疫グロブリン分子;またはb可変領域またはその一部分が、異なるもしくは改変された抗原特異性を有する可変領域もしくはその一部分によって;または別の種由来もしくは別の抗体クラスもしくはサブクラス由来の対応する配列によって改変、置換、または交換されている、免疫グロブリン分子のことを指す。本明細書で用いる場合、ヒト化抗体とは、ドナー抗体由来のCDRがヒトのフレームワークに移植された免疫グロブリン分子のことを指す。ヒト化抗体はまた、フレームワーク配列中にドナー起源の残基を含んでもよい。ヒト化抗体はまた、ヒト免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部分を含んでもよい。ヒト化抗体はまた、レシピエント抗体にも、移入されたCDRまたはフレームワーク配列にも見いだされない残基を含んでもよい。ヒト化は、超ヒト化superhumanizing抗体TanetalJImmunol16911192002および表面再処理resurfacing例えば、StaelensetalMolImmunol4312432006;およびRoguskaetalProcNatlAcadSciUSA919691994などの手法を含む、当技術分野において公知の方法例えば、JonesetalNature3215225251986;RiechmannetalNature3323233271988;VerhoeyenetalScience239153415361988;PrestaCurrOpStructBiol25935961992;米国特許第4816567号を用いて行うことができる。本発明との関連におけるヒューマニア化Humaneered商標抗体とは、参照抗体の結合特異性を有する改変ヒト抗体のことを指す。本発明に用いるためのヒューマニア化商標抗体は、ドナー免疫グロブリンに由来する最小配列を含む免疫グロブリン分子を有する。典型的には、抗体は、参照抗体の重鎖のCDR3領域由来の結合特異性決定基BSDをコードするDNA配列をヒトVHセグメント配列と連結させ、かつ参照抗体由来の軽鎖CDR3BSDをヒトVLセグメント配列と連結させることによってヒューマニア化される。ヒューマニア化のための方法は、米国特許出願公開第20050255552号および米国特許出願公開第20060134098号に提供されている。本明細書で用いるヒト抗体は、ヒト化抗体およびヒューマニア化商標抗体、ならびに公知の手法を用いて作製されるヒトモノクローナル抗体を包含する。本明細書で用いる治療用抗体とは、固形腫瘍を有する患者に投与されるヒト抗体またはキメラ抗体のことを指す。組換えという用語は、例えば細胞、または核酸、タンパク質もしくはベクターへの言及で用いられる場合、該細胞、該核酸、該タンパク質または該ベクターが、異種核酸もしくは異種タンパク質の導入またはネイティブの核酸もしくはタンパク質の変更によって改変されていること、または該細胞がそのように改変された細胞に由来することを示している。したがって、例えば、組換え細胞は、ネイティブ非組換え型の細胞では見いだされない遺伝子を発現するか、または通常であれば異常に発現される、低発現される、もしくは全く発現されないネイティブ遺伝子を発現する。本明細書における組換え核酸という用語は、一般には、例えばポリメラーゼおよびエンドヌクレアーゼなどを用いる核酸の操作によって、元々はインビトロで形成された、天然には通常見いだされない形態にある核酸を意味する。このようにして、種々の配列の機能的な連結が達成される。したがって、通常は連結していないDNA分子を連結させることによってインビトロで形成される、線状形態にある単離核酸、または発現ベクターはいずれも、本発明において組換え体とみなされる。組換え核酸を作製し、宿主細胞または宿主生物に再導入すれば、それは非組換えにより、すなわちインビトロ操作ではなく宿主細胞のインビボ細胞機構を用いて複製される;しかし、そのような核酸は、組換えにより産生された後には非組換えにより複製されるが、それでもなお本発明において組換え体とみなされることが理解されよう。同様に、組換えタンパク質とは、組換え手法を用いて、すなわち上述したような組換え核酸の発現を通じて作製されたタンパク質である。抗体と特異的にまたは選択的に結合するまたは特異的にまたは選択的に免疫反応性であるという語句は、タンパク質またはペプチドに言及している場合、抗体が関心対象のタンパク質と結合する結合反応のことを指す。本発明との関連において、抗体は典型的には、他の抗原に対する親和性よりも少なくとも100倍高い親和性でEphA3と結合する。平衡解離定数KDという用語は、解離速度定数kd、時間1を会合速度定数ka、時間1、M1で除算したもののことを指す。平衡解離定数は、当技術分野における任意の公知の方法を用いて測定することができる。本発明の抗体は高親和性抗体である。そのような抗体は、500nM未満、多くの場合には50nM未満または10nM未満の高い親和性を有する。したがって、いくつかの態様において、本発明の抗体は、500nM~100pMの範囲、または50nMもしくは25nM~100pMの範囲、または50nMもしくは25nM~50pMの範囲、または50nMもしくは25nM~1pMの範囲の親和性を有する。標識または検出可能な部分とは、分光学的、光化学的、生化学的、免疫化学的、化学的、または他の物理的手段によって検出可能な組成物のことである。例えば、有用な標識には、蛍光色素、高電子密度試薬、酵素例えば、ELISAに一般的に用いられるもの、放射性標識、ビオチン、ジゴキシゲニン、もしくはハプテンおよびタンパク質、または検出可能にすることのできる他の実体が含まれる。標識は抗体へと任意の場所で組み入れることができる。さらに、標識は抗EphA3抗体と直接コンジュゲートされている必要はなく、抗EphA3抗体と結合する二次抗体などの二次検出用物質上に存在してもよい。例えば、HermansonBioconjugateTechniques1996AcademicPressIncSanDiegoに記載された方法を用いるといった、抗体を標識とコンジュゲートさせるための当技術分野において公知の任意の方法を利用することができる。ポリペプチド、ペプチドおよびタンパク質という用語は、本明細書において互換的に用いられ、アミノ酸残基の重合体を指す。この用語は、天然のアミノ酸重合体、修飾残基を含むもの、および天然に存在しないアミノ酸重合体ばかりでなく、1つまたは複数のアミノ酸残基が、対応する天然アミノ酸の人工的な化学模倣体である、アミノ酸重合体にも適用される。アミノ酸という用語は、天然アミノ酸および合成アミノ酸、ならびに天然アミノ酸と同様に機能するアミノ酸類似体およびアミノ酸模倣体のことを指す。天然アミノ酸とは、遺伝暗号によってコードされるアミノ酸、ならびに後に修飾されたアミノ酸、例えば、ヒドロキシプロリン、γカルボキシグルタミン酸、およびOホスホセリンなどのことである。アミノ酸類似体とは、天然のアミノ酸と同じ基本化学構造を有する化合物、例えば、α炭素に水素、カルボキシル基、アミノ基およびR基が結合したもの、例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウムなどのことを指す。そのような類似体は、修飾されたR基例えば、ノルロイシンまたは修飾されたペプチド骨格を有しうるが、天然アミノ酸と同じ基本化学構造を保っている。アミノ酸模倣体とは、アミノ酸の一般化学構造とは異なる構造を有するが、天然のアミノ酸と同様に機能する化合物のことを指す。アミノ酸は、本明細書中で、一般的に知られているそれらの3文字記号、またはIUPACIUB生化学命名委員会により推奨されている1文字記号のいずれかによって言及することができる。ヌクレオチドも同様に、一般的に受け入れられているそれらの1文字コードによって言及することができる。1つのaまたは1つのanは、他に指示のない限り、1つまたは複数を意味するものとする。序論本発明は一部には、固形腫瘍を有する癌患者の末梢血における、EphA3を発現する非造血性非腫瘍細胞の発見に基づく。そのような細胞は、癌治療物質による治療後、例えば抗血管形成療法後に減少し、そのような患者における治療の治療有効性の指標として用いることができる。さらに、そのような細胞を、患者、例えば、癌の症状を有するか、またはさもなければ癌を有する疑いのある患者における固形腫瘍の存在を診断するために用いることもできる。本発明に従ってモニターまたは診断することのできる患者には、抗EphA3抗体などの癌作用物質を投与することが望ましい、任意の種類の固形腫瘍を有するか、または任意の種類の固形腫瘍を有する疑いのある患者が含まれる。これらの腫瘍には、乳癌、肺癌、前立腺癌、胃癌、食道癌、結腸直腸癌、肝癌、卵巣癌、外陰部癌、腎臓癌、移行上皮癌、子宮頸癌、子宮内膜癌、子宮内膜増殖症、子宮内膜症、絨毛癌、頭頸部癌、鼻咽頭癌、喉頭癌、肝芽腫、カポジ肉腫、黒色腫、皮膚癌、血管腫、海綿状血管腫、血管芽腫、膵癌、網膜芽腫、星状細胞腫、神経膠芽腫、神経鞘腫、乏突起膠腫、髄芽腫、神経芽腫、線維肉腫、横紋筋肉腫、骨原性肉腫、平滑筋肉腫を含む肉腫、尿路癌、甲状腺癌、ウィルムス腫瘍、脳腫瘍、および腎細胞癌を含む固形腫瘍が含まれる。本発明に従ってモニターまたは診断することのできる患者はまた、母斑症に関連した異常血管増殖および浮腫脳腫瘍に関連したものなどを有してもよい。EphA3非造血性非腫瘍細胞を有する患者の同定EphA3非造血性非腫瘍細胞を有する癌患者は、患者由来の末梢血細胞上でのEphA3の発現を検出することによって同定することができる。EphA3発現は、当技術分野において周知の方法を用いて検出することができる。多くの場合には、免疫学的アッセイを用いて、細胞表面のEphA3タンパク質の存在を検出することができる。免疫学的アッセイには、ELISA、蛍光活性化細胞選別などが含まれる。または、EphA3をコードするmRNAのレベルを検出することによってEphA3発現を検出することもできる。例えば、RTPCRなどの核酸増幅法を利用して、RNAの量を定量する。細胞をEphA3非造血性非腫瘍細胞として同定するためには、細胞を典型的には、CD45の発現に関しても評価する。任意で、細胞を、CD34、CD44、CD90、およびKDRのうちの1つまたは複数に関してさらに評価することもできる。EphA3発現を評価するために、患者から、末梢血細胞を含む試料を入手する。それらの血液細胞を、公知の手法、例えば、フローサイトメトリーまたは他の抗体ベースのアッセイなどを用いて、EphA3の発現および任意でCD34または他のマーカーの発現に関して評価する。患者は、末梢血におけるEphA3単核細胞のレベルが、固形腫瘍を有しない正常個体で観察されるレベルよりも、例えば、少なくとも2倍、好ましくは少なくとも5倍または10倍を上回って高ければ、EphA3非造血性非腫瘍細胞に関して陽性とみなされる。正常個体では典型的には、末梢血単核細胞の約0002がEphA3であるに過ぎない。したがって、正常値を上回るレベルは固形腫瘍の存在を示す。EphA3非造血性非腫瘍細胞を有する癌患者は、典型的には、固形腫瘍を標的とする癌治療物質によって治療される。そのような物質には、EphA3を活性化する抗EphA3抗体を含む抗血管治療物質;および/またはVEGFアンタゴニストなどの物質が含まれる。血管系を標的とする抗EphA3抗体の例は、例えば、WO2008112192に記載されている。固形腫瘍を有する患者の治療のために用いうる抗EphA3抗体の他の例は、WO2011053465に提示されている。いくつかの態様において、本発明は、固形腫瘍を有する患者に対する癌治療の治療有効性をモニターする方法を提供する。治療物質による治療後に、患者からの末梢血試料を入手して、EphA3非造血性非腫瘍細胞のレベルが治療前のレベルと比べて低下したかどうかを決定するために評価する。そのような細胞の濃度における少なくとも20、典型的には少なくとも50または100またはそれ以上の低下により、その治療の治療効果が示される。いくつかの態様において、患者におけるEphA3非造血性非腫瘍細胞の存在は、その患者が、細胞増殖を阻害する他の癌治療物質に反応性であることを示す。そのような化合物は細胞死を引き起こしてもよく、そうでなくてもよい。EphA3間質細胞を有する患者に投与しうる細胞傷害性物質には、抗体、例えば、VEGFアンタゴニスト、Her2neu抗体など;Lアスパラギナーゼ、インターロイキン、インターフェロン、アロマターゼ阻害剤、抗エストロゲン剤、抗アンドロゲン剤、副腎皮質ステロイド、ゴナドレリンアゴニスト、トポイソメラーゼ1および2の阻害剤、微小管活性物質、アルキル化剤、ニトロソ尿素、抗新生物性代謝拮抗剤、白金含有化合物、脂質キナーゼまたはプロテインキナーゼ標的物質、プロテインホスファターゼまたは脂質ホスファターゼ標的物質、血管新生阻害物質、抗アポトーシス経路阻害剤、アポトーシス経路アゴニスト、テロメラーゼ阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、メタロプロテイナーゼ阻害剤およびアミノペプチダーゼ阻害剤などの物質といった化合物が含まれる。そのような物質の例には、シスプラチン、シクロホスファミド、ダカルバジン、イホスファミド、メクロレタミン、メルファラン、カルムスチン、エストラムチン、ロムシチン、5フルオロウラシル、メトトレキサート、ゲニステイン、タキソール、ゲムシタビン、シタラビン、フルダラビン、ブスルファン、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、イダルビシン、エピルビシン、エソルビシン、デトルビシン、パクリタキセルおよびドセタキセルなどのタキサン類、エトポシド、ビンブラスチンおよびビンクリスチン、ビノレルビンなどのビンカアルカロイド類、アムサクリン、トレチノイン、ダカルバジンDTIC、アクチノマイシン、マイタンシノール、リファマイシン、ストレプトバリシン、カルミノマイシン、ミトキサントロン、ブレオマイシン、マイトマイシン、カンプトテシン、ボルテゾミブ、テモゾロミド、コンブレタスタチン、コンブレタスタチンA2、コンブレタスタチンA4、カリチアマイシン、ロイプロリド、およびペガスパルガーゼ、フルオロデオキシウリジン、プトラフールptorafur、5デオキシフルオロウリジン、カペシタビン、タモキシフェン、トレメフィンtoremefine、トルムデックスtolmudex、チミタックthymitaq、フルタミド、フルオキシメステロン、ビカルタミド、フィナステリド、トリオキシフェン、酢酸リュープロレリンleuproelin、エストラムスチン、ドロロキシフェン、酢酸メゲステロール、アミノグルテチミド、テストラクトン、マイトマイシンA、BおよびC、ミトラマイシン、アントラマイシン、ポルフィロマイシン、カルボプラチン、オキサリプラチン、テトラプラチン、白金DACH、オルマプラチン、サリドマイド、レナリドマイド、テロメスタチン、ポドフィロトキシン、エピポドフィロトキシン、テニポシド、アミノプテリン、メトプテリン、6メルカプトプリン、チオグアニン、アザッツオプリンazattuoprine、アロプリノール、クラドリビン、フルダラビン、ペントスタチン、2クロロアデノシン、デオキシシチジン、シトシンアラビノシド、シタラビン、アザシチジン、5アザシトシン、ゲンシタビンgencitabine、5アザシトシンアラビノシド、ロイロシン、ロイロシジン、ビンデシン、エチレンイミンならびにメチルメラミンが含まれるが、これらに限定されない。抗EphA3抗体一般的に用いられる数多くのイムノアッセイを、EphA3発現を検出するために用いることができる。適用しうる抗体技術の一般的概要については、HarlowLaneAntibodiesALaboratoryManualおよびHarlowLaneUsingAntibodiesに記載がある。MethodsinCellBiologyAntibodiesinCellBiologyvolume37;BasicandClinicalImmunologyを含む他の情報源も参照されたい。免疫学的結合アッセイには、ポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体のいずれを用いることもできる。一般的に用いられるアッセイには、非競合的アッセイ例えば、サンドイッチアッセイおよび競合的アッセイが含まれる。一般的に用いられるアッセイ形式には、フローサイトメトリーに基づくアッセイ、ならびに他のイムノアッセイが含まれる。細胞表面のEphA3を検出するための抗EphA3抗体を、EphA3タンパク質もしくは断片に対して産生させること、または組換えにより作製することができる。数多くの手法を、抗体の結合特異性を決定するために用いることができる。抗体の結合特異性を決定するために用いうるイムノアッセイの形式および条件の記載については、例えば、HarlowLane、前記を参照されたい。いくつかの態様において、抗EphA3抗体はポリクローナル抗体である。ポリクローナル抗体の調製方法は当業者に公知である例えば、HarlowLaneMethodsinImmunology、いずれも前記。ポリクローナル抗体は、免疫剤および必要に応じてアジュバントを1回または複数回注射することによって、哺乳動物において産生させることができる。免疫剤には、EphA3受容体タンパク質またはその断片が含まれる。いくつかの態様において、抗EphA3抗体はモノクローナル抗体である。モノクローナル抗体はハイブリドーマ法を用いて調製することができる。ハイブリドーマ法では、マウス、ハムスターまたは他の適切な宿主動物に対して、典型的には免疫剤による免疫処置を行って、該免疫剤と特異的に結合すると考えられる抗体を産生するかまたは産生することができるリンパ球を誘発する。または、インビトロでリンパ球に対して免疫処置を行ってもよい。いくつかの態様においては、ヒトモノクローナル抗体を用いることが望ましい場合がある。ヒトモノクローナル抗体は、ファージディスプレイライブラリーを含む、当技術分野において公知のさまざまな手法を用いて作製することができる。同様に、内因性免疫グロブリン遺伝子が部分的にまたは完全に不活化されているトランスジェニック動物、例えばマウスにヒト免疫グロブリン遺伝子座を導入することによって、ヒト抗体を作製することもできる。抗原刺激を行うとヒト抗体の産生が観察されるが、これは遺伝子再構成、構築および抗体レパートリーを含むすべての点で、ヒトにおいて見られるものとよく似ている。このアプローチは、例えば、米国特許第5545807号;第5545806号;第5569825号;第5625126号;第5633425号;第5661016号、および以下の科学出版物:MarksetalBioTechnology10779783;LonbergetalNature368856859;MorrisonNature36881213;FishwildetalNatureBiotechnology1484551;NeubergerNatureBiotechnology14826;LonbergHuszarInternRevImmunol136593に記載されている。抗体特異性本発明との使用に適した抗体の一例は、mAbIIIA4の結合特異性を有する抗体である。モノクローナル抗体mAbIIIA4は、ネイティブEphA3球状エフリン結合ドメインと結合するSmithetalJBiolChem279952295312004;およびVearingetalCancerRes65674567542005。EphA3表面に対する高親和性mAbIIIA4結合は、EphA3とのエフリンA5相互作用の全体的な親和性にほとんど影響を及ぼさない。例えば、末梢血におけるEphA3非造血性非腫瘍細胞のレベルが正常を上回ると決定された患者に投与される治療用抗体として、本発明とともに用いるのに適したヒト改変抗体の例は、WO2011053465に提供されている。そのような抗体を診断用に用いることもできる。抗EphA3抗体を治療用に用いる場合には、治療有効性をモニターするための、末梢血におけるEphA3非造血性非腫瘍細胞のレベルに関するその後の分析で、EphA3の異なるエピトープに結合する抗体を使用することが好ましい。いくつかの態様においては、EphA3に対する結合についてmAbIIIA4と競合するか、またはmAbIIIA4と同じエピトープに結合するモノクローナル抗体を用いて、末梢血細胞上でのEphA3発現を評価する。いくつかの競合的結合アッセイのいずれかを用いて、同じ抗原に対する結合をめぐる2つの抗体間の競合を測定することができる。例えば、この目的にサンドイッチELISAアッセイを用いることができる。例示的なアッセイでは、ウェルの表面を被覆するために捕捉抗体を用いることによってELISAを行う。続いて、飽和濃度未満のタグ標識抗原を捕捉表面に添加する。このタンパク質は、特異的な抗体:抗原相互作用を介して抗体と結合すると考えられる。洗浄の後、検出可能な部分と連結している第2の抗体をELISAに添加する。この抗体が捕捉抗体と同じ抗原上の部位と結合するか、またはその部位に対する結合を妨げるのであれば、この部位はもはや結合に利用できないため、この抗体は標的タンパク質に結合することができないと考えられる。しかし、この第2の抗体が抗原上の異なる部位を認識するのであれば、この抗体は結合することができると考えられる。結合は、結合している検出可能な標識の量を定量することによって検出することができる。バックグラウンドは、単一の抗体を捕捉抗体および検出抗体の両方として用いることによって定まり、一方、最大シグナルは、抗原特異的抗体で捕捉して、抗原上のタグに対する抗体で検出することによって確定することができる。バックグラウンドおよび最大シグナルを参照基準として用いることによって、抗体をペアワイズ様式で評価して、特異性を決定することができる。特定の抗体が別の抗体と同じエピトープを認識する能力は、典型的には、そのような競合アッセイ法によって決定される。上記のアッセイ法のいずれかを用いて、第1の抗体の存在下で、抗原に対する第2の抗体の結合が少なくとも30、通常は少なくとも約40、50、60または75、多くの場合は少なくとも約90減少する場合に、第1の抗体は第2の抗体の結合を競合的に阻害するとみなされる。いくつかの態様において、抗体はmAbIIIA4と同じエピトープに結合する。IIIA4およびヒト改変誘導体に対するエピトープは、EphA3のN末端球状リガンド結合ドメイン以下の部分的ヒトEphA3配列中のアミノ酸29~202内に存在する:IIIA4抗体は、受容体に対してエフリンA5の結合と隣接して結合するが、エフリンA5の結合を実質的には妨げない。抗体IIIA4に対するエピトープは、部位特異的変異誘発を用いて、SmithetalJBiolChem27995222004によってさらに特徴づけられている。この分析では、132位のグリシンのグルタミン酸への突然変異G132Eにより、IIIA4に対する結合が消失する。バリン133のグルタミン酸への突然変異V133Eにより、IIIA4抗体に対するEphA3の結合はおよそ100分の1に減少する。その後、本発明者らにより、アルギニン136もエピトープの一部であることが観察された。ラットの高度に保存されたEphA3タンパク質の配列において、この残基をロイシンに変更するR136L。ラットEphA3は、IIIA4とも、IIIA4のヒト改変誘導体とも結合しない。したがって、G132、V133およびR136上記配列において太字および下線で表示は、IIIA4エピトープ内の重要なアミノ酸である。いくつかの態様においては、EphA3細胞を、IIIA4抗体エピトープとは異なるエピトープに対する第2の抗体を用いて検出することができる。すなわち、いくつかの態様においては、結合に関して第1のEphA3抗体と競合しない第2のEphA3抗体を使用する。結合親和性いくつかの態様において、本発明との使用に適した抗体は、ヒトEphA3に対する高親和性結合を有する。本発明においては、抗体の解離定数KDが約10nM未満、例えば約5nM、または約2nM、または約1nM、またはそれ未満であるならば、抗体と抗原との間に高親和性結合が存在する。当業者に周知であるように、表面プラズモン共鳴アッセイ、飽和アッセイ、またはELISAもしくはRIAなどのイムノアッセイといった種々の方法を用いて、抗体のその標的抗原に対する結合親和性を決定することができる。結合親和性を決定するための例示的な方法は、KrinneretalMolImmunolFeb4491625に記載されているような、CM5センサーチップを用いるBIAcore商標2000装置BiacoreABFreiburgGermanyでの表面プラズモン共鳴解析によるものである。EphA3発現の検出のための抗EphA3抗体は、EphA3の任意の領域に結合することができる。EphA3発現を検出するために用いられる抗体は、典型的には、検出可能な標識で標識される。アッセイに用いられる具体的な標識または検出可能な基は、それがアッセイに用いられる抗体の特異的結合を著しく妨げない限り、本発明の決定的に重要な局面ではない。標識は、抗体と直接結合させてもよく、または検出アッセイに用いられる別の物質、例えば二次抗体などと結合させてもよい。検出可能な基は、検出可能な物理的特性または化学的特性を有する任意の物質でありうる。そのような検出可能な標識は、イムノアッセイの分野において十分に開発されており、一般に、そのような方法において有用なほとんどあらゆる標識を本発明の方法に適用することができる。すなわち、標識は、分光学的、光化学的、生化学的、免疫化学的、電気的、光学的または化学的な手段によって検出可能な任意の組成物である。本発明において有用な標識には、蛍光化合物例えば、フルオレセインイソチオシアネート、テキサスレッド、ローダミン、フルオレセイン、Alexafluor488、Alexafluor647など、放射性標識、酵素例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、およびELISAに一般的に用いられるその他のもの、ストレプトアビジン/ビオチン、および金コロイドまたは着色ガラスまたはプラスチックビーズ例えばポリスチレン製、ポリプロピレン製、ラテックス製など、または磁性マイクロビーズを含む磁性ビーズが含まれる。抗体をビーズと直接コンジュゲートさせてもよい。または、ビーズは、ビオチン化抗体と結合することができるストレプトアビジンコンジュゲート磁性マイクロビーズのように、抗体を捕捉することができる試薬とコンジュゲートさせてもよい。いくつかの態様において、本発明に用いるための抗体捕捉ビーズは、ストレプトアビジンコンジュゲートマイクロビーズに、Alexafluor647などの蛍光性標識をコンジュゲートさせたものである。化学発光性化合物を用いることもできる。固形腫瘍を有するか、または固形腫瘍を有する疑いのある患者の血液中に存在する非造血性非腫瘍細胞上でのEphA3発現を検出するために2つの抗体を利用するいくつかの態様において、シグナルを増幅するために2つの抗体を同じ標識で標識してもよい。他の態様において、抗体は異なる標識で標識してもよい。RNA発現他の態様において、EphA3の発現は、末梢血細胞において発現される、EphA3をコードするmRNAのレベルを検出することによって検出することができる。多くの場合には、RTPCRなどの核酸増幅法を利用して、RNAの量を定量する。そのような態様において、典型的には、他の表面マーカーであるCD34、CD45、CD44、CD90、KDRの発現も評価する。そのような態様において、フローサイトメトリーなどによってまず選別した細胞の集団に対して、それがCD34などの表面マーカーを発現するかどうかを決定するために、増幅法を利用してもよい。以下の実施例は例証のためのみに提供されるものであり、限定のために提供されるものではない。当業者は、変更または修正を行っても本質的に同様の結果が得られると考えられる、重要性の低い種々のパラメーターを容易に理解するであろう。キット本発明はさらに、固形腫瘍を有するか、または固形腫瘍を有する疑いのある患者の血液における非造血性細胞、非腫瘍細胞上でのEphA3発現を評価するためのキットも提供する。キットは、EphA3に選択的に結合する1つまたは複数の抗体を含みうる。典型的な態様において、本発明のキットは、異なるエピトープでEphA3に結合する2つの抗体を含む。いくつかの態様において、この2つの抗体は検出可能な同じ標識で標識されている。または、2つの抗体を異なる検出可能な標識で標識してもよい。キットは任意で、他の構成要素、例えば、CD34、CD45、CD44、CD90もしくはKDRなどの他の表面マーカーに対する抗体;または、EphA3発現を検出するために用いうる緩衝液、材料および構成要素などを含むことができる。実施例1.腫瘍血管系および間質上でのEphA3発現パターン腫瘍間質発現を例証するための一例として、ヒト前立腺癌の凍結腫瘍切片を免疫組織化学によって分析するために、マウスIIIA4抗体を用いた腺房腺癌、n=8図1a。並行処理した切片でIIIA4染色パターンの特異性を確認し図1b、60倍モル過剰量の組換え可溶性EphA3細胞外ドメインの存在下でIIIA4mAbを用いたところ、抗EphA3シグナルは、二次抗体のみを用いて試験した対照切片で観察されたバックグラウンドレベルまで減少した図1c。さらに別の切片を、間質性および血管性の構成要素をそれぞれ顕示させるために、抗線維芽細胞活性化タンパク質FAP抗体mF19図1dおよび抗CD31抗体図1eを用いて分析した。対応する分析を、乳癌、肺癌、結腸癌、腎臓癌および膀胱癌および黒色腫を含む、多岐にわたるヒト腫瘍に対して行った表1。分析した膀胱非移行上皮癌を除き、他の腫瘍ではすべて、間質性構成要素におけるEphA3の発現が明らかになった。免疫組織化学によれば、移行上皮癌TCCを有する患者数例は間質陽性であるデータは示さず。実施例2.EphA3は、ヒト末梢血中における、循環内皮始原細胞とは別個のサイドポピュレーション上で発現される本実施例は、ヒト末梢血における、循環内皮細胞とは別個の細胞の集団上でEphA3が発現されることを示す。8mlのBDVacutainerCPTTubeを記載された通りに用いてDudaetalNatureprotocols28058102007、正常志願者および癌患者から採取した末梢血の試料から末梢血単核細胞を単離した。各ドナーからの並行処理試料を、EphA3のみ上のパネルに関して分析するか図2、または多パラメーターフローサイトメトリーによって、MSCマーカーCD90、CD44およびKDRと合わせて図2a、もしくは内皮始原マーカーCD34、KDRおよびCD133の発現と合わせて図2b、EphA3の発現に関して分析した。試料のそれぞれ、ならびに対照試料において、合計1×106個ずつの細胞を分析した。後者には、アイソタイプを合致させた関連のない対照抗体を含む試料、FMO1項目除外蛍光fluorescenceminusone試料、および適切な検出器設定を決定するために用いた非染色試料を含めた。興味深いことに、EphA3細胞はCD90CD44KDR間質細胞集団内では見いだされたが図2a、CD45dimCD34CD133CEP細胞集団では見いだされなかった図2b。実施例3.末梢血におけるCEPおよびEphA3細胞のフローサイトメトリー定量血液試料におけるCEPの濃度を推定するために、FITCコンジュゲート抗CD34、パシフィックブルーコンジュゲート抗CD45、Alexa674コンジュゲート抗CD31、およびPEコンジュゲート抗CD133とともにインキュベートした1×106個の末梢血単球を、フローサイトメトリーによって逐次的に分析した。単一の細胞集団を特異的に分析するために、分析した細胞をゲート処理にかけて、シグナルの特異性を確認するために、上記に概略を示した対照試料を含めた図3a。生存している単一の細胞集団に対してゲートを調整した後に、αEphA3mAbIIIA4により、平行処理した試料からの単一の細胞集団を分析した図3b。実施例4.癌細胞における末梢血中のCEPおよびEphA3細胞の濃度本実施例は、癌患者の末梢血において、CEPおよびEphA3壁非内皮血管細胞の濃度が有意に増加していることを示す。ヒト循環単核細胞を、mabIIIA4を用いてEphA3陽性細胞の濃度図4aに関して、または図3に概略を示したプロトコールを用いてCEPの濃度図4bに関して分析した。このプロットは、47人の癌患者および37人の正常志願者からのデータをまとめており、ここで2つの試料集団の統計分析はWilcoxonのマッチドペア符号付順位検定を用いて行った。フローサイトメトリー分析の分析により、EphA3陽性細胞およびCEPの数はいずれも、癌患者の末梢血において、正常志願者よりも有意に多いことが明らかになった。実施例5.抗血管療法後のCEPおよびEphA3発現細胞の濃度CEPおよびEphA3発現細胞の濃度は抗血管療法後に低下する。抗血管療法アバスチンAvastinを受けている合計10人n=10の結腸癌患者からの末梢血試料を、治療前および治療を終了したその6週後に、mabIIIA4を用いてEphA3細胞の存在に関して、およびCEPの存在に関して分析した。統計分析Wilcoxonのマッチドペア符号付順位検定により、治療後にこれらの患者の血液中のEphA3陽性細胞およびCEPの濃度の有意な低下が明らかになった図5。以上を総合すると、これらの実施例は、EphA3が、CEPとは表現型の上で別個の循環CD34CD45CD44CD90KDREphA3MSCの部分集団の目印となることを示している。疾患と相関したCEP濃度の増大と同様に14、これらのEphA3MSCも癌患者の末梢血中で増加していた。抗血管治療は、被験癌患者の全例において、EphA3陽性細胞の数を、正常志願者において見いだされるレベルまで減少させた。実施例6.EphA3発現を検出するための、mabIIIA4以外の抗体の使用脾臓B細胞とSP20細胞との融合による、マウスに対する組換えEphA3Fc融合タンパク質による免疫処置を用いて、ヒトEphA3の細胞外ドメインに対する一群のマウスモノクローナル抗体を作製した。ハイブリドーマ上清を、組換えヒトEphA3細胞外ドメインに対する抗体結合、およびIIIA4によって認識されるEphA3上の部位に対する結合をめぐる競合に関してスクリーニングした。EphA3と特異的に結合し、かつIIIA4エピトープに対する結合について競合しない、SL2、SL5、SL6およびSL7と命名された4種のモノクローナル抗体が同定された。これらの抗体はそれぞれ、マウスIgG1アイソタイプ抗体である。組換えEphA3細胞外ドメインに対する抗体の結合を、EphA3の主要なリガンドであるエフリンA5の組換え細胞外ドメインの存在下または非存在下において、EphA3Fcを用いるELISAによって決定した。図6に示されているデータは、これらの抗体のうちの3種SL2、SL6およびSL7が、EphA3およびエフリンA5とあらかじめ結合させたEphA3に対して同等な結合活性を有することを示している。抗体SL5の結合はエフリンA5の存在によって阻害され、それ故にSL5はエフリン結合部位と重なり合うエピトープを認識する。したがって、SL2、SL6およびSL7はEphA3に対して特異的であるが、エフリン結合部位とも、IIIA4エピトープとも結合しない。この一群の抗体により、EphA3細胞外ドメイン上の少なくとも3つの重なり合わないエピトープが特定される。これらの抗体のうちの3種、SL2、SL5およびSL7の、ヒトLK63細胞の表面でのネイティブEphA3に対する結合を、フローサイトメトリーによって決定した図7。10熱非働化ウシ胎仔血清を加えたRPMI1640培地中でLK63細胞を維持した。フローサイトメトリー分析のために、200gでの5分間の遠心処理によって細胞を収集した。細胞をPBSInvitrogen中で1回洗浄して、氷上で25分間、2ウシ血清アルブミンBSAPBS中の10μgmlラットIgGによってブロックした。細胞を25nM精製抗体とともに氷上で30分間インキュベートし、冷PBS05BSA中で1回洗浄した上で、氷上で20分間、FITCコンジュゲート抗マウス二次抗体JacksonImmunoresearchの1:100希釈物中でインキュベートした。細胞を冷PBS05BSA中で1回洗浄して、その後にFACS分析のために05mlの冷PBS中に再懸濁させた。ヨウ化プロピジウム1μl試料、Sigmaを用いて、FITCチャンネルの読み取り値から非生存細胞を除外した。細胞をFACSCaliber装置BecktonDickinsonによって分析した。SL2抗体を、製造元の推奨に従った標準的な方法により、Alexa488とコンジュゲートさせた。この抗体調製物は、抗体1分子につき、Alexa488分子をおよそ10個有する。コンジュゲートさせた抗体を用いて、急性骨髄性白血病AMLと診断された患者からの骨髄細胞に対するSL2の結合を決定した。図8に示されているデータは、SL2が、癌患者由来の初代細胞上のEphA3の分析のための高感度の検出試薬となることを示している。抗体の最大の結合は、SL2濃度が01μgmlで達成された。これらの抗体はそれぞれ、EphA3を発現するヒト細胞に結合する。したがって、これらの抗体は、体液および患者試料から得られるEphA3発現細胞の検出に用いるために適した試薬である。本発明をその具体的な態様を参照しながら説明してきたが、当業者であれば、本発明の範囲から逸脱することなく、さまざまな変更を行ってもよく、等価物で置き換えてもよいことを理解すべきである。加えて、特定の状況、材料、物質組成、工程、工程の1つまたは複数の段階に合わせるために多くの改変を行って、本発明の範囲から逸脱することなく、本発明によって提供される恩典を達成することもできる。そのような改変はすべて、本明細書に添付される特許請求の範囲内にあるものとする。本明細書中に引用された刊行物、特許出願、アクセッション番号、および他の参考文献はすべて、それぞれの個々の刊行物または特許出願が具体的かつ個別的に示されて参照により組み入れられるのと同じ程度で、参照により本明細書に組み入れられる。