前立腺ガン細胞の増殖を阻害または低減する方法であって、前記細胞に対してPLA2阻害物質を投与する工程を含む方法。前立腺ガンを治療する方法であって、治療を要する患者にPLA2阻害物質を投与する工程を含む方法。前立腺ガン細胞がアンドロゲン非依存性前立腺ガンAIPC細胞である請求項1または2に記載の方法。PLA2阻害物質がcPLA2αの阻害物質である請求項1ないし3のいずれかに記載の方法。PLA2阻害物質がsPLA2IIAの阻害物質である請求項1ないし3のいずれかに記載の方法。PLA2阻害物質が、ヒトsPLA2IIAタンパク質の70から74アミノ酸残基またはその他の種類のsPLA2タンパク質における同等のアミノ酸残基から本質的に構成されているペプチド、に由来する、立体配置的に束縛された分子である請求項5に記載の方法。立体配置的に束縛された前記分子が、環状分子である請求項6に記載の方法。立体配置的に束縛された前記分子が、環状ペプチドまたはその誘導体である請求項6に記載の方法。立体配置的に束縛されたペプチドが、下記式:A1A2A3A4A5式中、A1はF、Y、W、または2Napであり、A2はLまたはIであり、A3はSまたはTであり、A4はF、Y、W、または2Napであり、A5はRまたはKである。の構造を有する環状ペプチドである請求項8に記載の方法。前記ペプチドが、cFLSYK、cFLSYRおよびcLSRからなる群より選ばれる請求項9に記載の方法。cPLA2αの阻害物質をsPLA2IIAの阻害物質と併せて投与する請求項1ないし10のいずれかに記載の方法。被験者において前立腺ガンまたはその転移を検出する方法であって、前記被験者に由来する被験試料において発現しているPLA2mRNAのレベルを測定する工程;およびiで測定されたPLA2mRNAの前記レベルを、健康なまたは正常な個体に由来する対照試料において発現しているPLA2mRNAのレベルと比較する工程を含み、iによる被験試料のPLA2mRNAのレベルが、健康なまたは正常な個体に由来する前記対照試料でのレベルに比して高いことによって、前記被験者におけるガン細胞の存在が示される方法。被験者において前立腺ガンまたはその転移を検出する方法であって、前記被験者に由来する被験試料におけるPLA2ポリペプチドのレベルを測定する工程;およびiで測定されたPLA2ポリペプチドの前記レベルを、健康なまたは正常な個体に由来する対照試料におけるPLA2ポリペプチドのレベルと比較する工程を含み、iによる被験試料の前記PLA2ポリペプチドのレベルが、健康なまたは正常な個体に由来する前記対照試料でのレベルに比して高いことによって、前記被験者におけるガン細胞の存在が示される方法。被験者の前立腺ガンに対する疾病素質を評価する方法であって、前記被験者のPLA2遺伝子において、多型または後成的変化が存在するかを確認する工程を含む方法。前立腺ガン細胞がアンドロゲン非依存性前立腺ガンAIPC細胞である請求項12ないし14のいずれかに記載の方法。PLA2がcPLA2αである請求項12ないし14のいずれかに記載の方法。PLA2がsPLA2IIAである請求項12ないし14のいずれかに記載の方法。しかしながら、これまでのところ、sPLA2IIAが、前立腺腫瘍形成と関連することを示す証明は存在しなかった。我々は今回、アンドロゲン除去療法を受けた被験者における免疫組織化学法により、IIAタイプの分泌型ホスホリパーゼA2が、アンドロゲン非依存性の腫瘍細胞において、良性の腺におけるよりも増加していること、これに対して細胞質型ホスホリパーゼA2αのレベルは変化していないことを示した。我々はまた、前立腺ガン細胞をsPLA2IIA処理すると、この細胞の増殖が強力に増大すること、そして、この増殖効果は、sPLA2IIA酵素に対する選択的阻害物質またはcPLA2α酵素に対する選択的阻害物質のいずれを投与しても、阻止されることを見出した。このことは、前立腺ガン細胞の増殖においてPLA2が直接的な役割をもつことの実証を、初めて提供するものである。また、このクラスに属する酵素が、前立腺ガンの治療に関して、治療上の重要な標的であることを明らかにするものである。したがって本発明は、第一の態様において、前立腺ガン細胞の増殖を阻害または低減する方法であって、前記細胞に対してPLA2阻害物質を投与する工程を含む方法、を提供する。第二の態様において、本発明は、前立腺ガンを治療する方法であって、治療を要する患者にPLA2阻害物質を投与する工程を含む方法、を提供する。上記第一および第二の態様の好ましい実施形態において、前立腺ガン細胞はアンドロゲン非依存性前立腺ガンAIPC細胞である。本発明の上記第一および第二の態様によると、前記PLA2阻害物質は、PLA2酵素のいずれをも阻害し得る。好ましくは、前記PLA2阻害物質は、1BIIAIIDIIEIIFIIIIVVおよびXというPLA2酵素の群から選択される1種類の酵素を阻害することが好ましい。ある実施形態において、前記PLA2阻害物質はcPLA2αの阻害物質である。例えば、この阻害物質は、ピロリジン1すなわちWO0027824に記載のような置換ピロリジン、WO9915493に記載のような910ジヒドロ910エタノアントラセン誘導体、JP12119292に記載のようなアザロマイシン系阻害剤、WO9825893に記載のようなアリルスルホンアミド、WO9805637に記載のようなインドール2カルボン酸誘導体、WO9808818WO9943651WO9943654WO9943672などに記載のようなインドール誘導体、JP12038380に記載のような3スルファニルプロパン12ジオール誘導体、WO0034254に示されているような複素環式化合物、または、WO9705135やWO9833797に記載のようなオキサゾリジンジオンやチアゾリジンジオンの誘導体であってよい。別の実施形態において、前記PLA2阻害物質はsPLA2IIAの阻害物質である。例えば、この阻害物質は、JP8325154に記載のような安息香酸、JP9110835に記載のような6アザスピロ45デカン誘導体、WO0000220あるいはWO9519959で挙げられているような脂肪酸アミド誘導体、WO9735567で挙げられているような安息香酸、WO9738966で挙げられているような脂肪酸誘導体、JP0045740で挙げられているようなテトロン酸、WO9805332で挙げられているような二窒素複素環式化合物、WO0071118で挙げられているようなオキサジアジンあるいはチオキサジアジンの誘導体、WO9824437で挙げられているようなスルホニルアミノピラゾール、EP839806EP950657EP952149あるいはWO0007590に記載のアセトアミド系阻害剤、EP675110WO9837069WO9959999WO9951605WO0007591WO0037358あるいはWO0000201で挙げられているようなオキソアセトアミド類、または、WO9921545WO9921546あるいはWO9921559で挙げられているような各種誘導体であってよい。特に好ましい実施形態において、PLA2阻害物質は、ヒトsPLA2IIAタンパク質の70から74アミノ酸残基またはその他の種類のsPLA2タンパク質における同等のアミノ酸残基から本質的に構成されているペプチド、に由来する、立体配置的に束縛された分子である。立体配置的に束縛された前記分子は、好ましくはペプチドであり、さらに好ましくは環状ペプチドである。ある好ましい実施形態において、立体配置的に束縛されたペプチドは、下記式:A1A2A3A4A5式中、A1はF、Y、W、または2Napであり、A2はLまたはIであり、A3はSまたはTであり、A4はF、Y、W、または2Napであり、A5はRまたはKである。の構造を有する環状ペプチドである。本発明の、さらに好ましい実施形態において、前記ペプチドは、cFLSYK、cFLSYRおよびcLSRからなる群より選ばれる。ここで用いられる場合、cFLSYKという語は環状FLSYKを意味し、cFLSYRは環状FLSYRを意味し、cLSRは環状LSRを意味する。2NapAという語は、2ナフチルアラニンの省略形である。さらに好ましい実施形態において、上記のペプチドはDアミノ酸を含有し、本発明の第一の態様におけるペプチドの逆方向に相当する配列を有する。ある好ましい実施形態において、本発明の方法は、sPLA2IIAの阻害物質をcPLA2αの阻害物質と併せて投与することを包含する。さらに別の態様において、本発明は、前立腺ガン治療用の薬の製造における、PLA2阻害物質の使用を提供する。さらに別の態様において、本発明は、前立腺ガン治療用の薬の製造における、ヒトsPLA2IIAタンパク質の70から74アミノ酸残基またはその他の種類のsPLA2タンパク質における同等のアミノ酸残基から本質的に構成されているペプチド、に由来する、立体配置的に束縛された分子の使用を提供する。さらに別の態様において、本発明は、被験者において前立腺ガンまたはその転移を検出する方法であって、前記被験者に由来する被験試料において発現しているPLA2mRNAのレベルを測定する工程;およびiで測定されたPLA2mRNAの前記レベルを、健康なまたは正常な個体に由来する対照試料において発現しているPLA2mRNAのレベルと比較する工程を含み、iによる被験試料のPLA2mRNAのレベルが、正常または健康な個体に由来する前記対照試料でのレベルに比して高いことによって、前記被験者におけるガン細胞の存在が示される方法を提供する。さらに別の態様において、本発明は、被験者において前立腺ガンまたはその転移を検出する方法であって、前記被験者に由来する被験試料におけるPLA2ポリペプチドのレベルを測定する工程;およびiで測定されたPLA2ポリペプチドの前記レベルを、健康なまたは正常な個体に由来する対照試料におけるPLA2ポリペプチドのレベルと比較する工程を含み、iによる被験試料の前記PLA2ポリペプチドのレベルが、健康なまたは正常な個体に由来する前記対照試料でのレベルに比して高いことによって、前記被験者におけるガン細胞の存在が示される方法を提供する。さらに別の態様において、本発明は、被験者の前立腺ガンに対する疾病素質を評価する方法であって、前記被験者のPLA2遺伝子において、多型または後成的変化が存在するかを確認する工程を含む方法を提供する。別途定義されていない限り、本明細書等において用いられている技術用語および科学用語はすべて、当該技術分野における例えば、細胞培養、分子遺伝学、核酸化学、ハイブリダイゼーション技術、または生化学における通常の技術を有する者によって一般的に理解される意味と同一の意味を有する。分子的、遺伝的および生化学的な手法ColdSpringHarborLaboratoryPressColdSpringHarborNY、および、AusubeletalShortProtocolsinMolecularBiology4thEdJohnWileySonsIncおよびその全文についてCurrentProtocolsinMolecularBiologyを参照されたい。ここでは、これら文献は、参照のために記載したものである。、ならびに化学的手法に関しては、標準的な手法が用いられている。本明細書全体を通してを含むcompriseの語、または、comprisesやcomprising等の変化形は、ある記述された成分、整数もしくは工程、または、成分、整数もしくは工程の集合を含むことを意味し、その他のいかなる成分、整数および工程、ならびに、成分、整数および工程の集合をも除外しないと理解してよい。PLA2酵素本発明の方法には、いかなるPLA2酵素を標的とする工程も包含される。拡大しつつあるPLA2酵素スーパーファミリーの、分類および特徴付けについての総説が、SixおよびDennisBiochimBiophysActa1488119で公表されており、本願発明の各方法は、ここで示された全ての酵素を標的にするよう企図している。本発明の好ましい実施形態において、PLA2酵素は、sPLA2IIAまたはcPLA2αである。また、好ましくは、PLA2酵素はヒト酵素である。ヒトsPLA2IIAの核酸配列およびタンパク質配列を、配列番号1および3において、それぞれ示した。ヒトcPLA2αの核酸配列およびタンパク質配列を、配列番号2および4において、それぞれ示した。PLA2阻害物質タンパク質系またはペプチド系の阻害物質一実施形態において、ペプチド系の各種PLA2阻害物質は、化学的にまたはリコンビナントに、PLA2配列から導き出されたオリゴペプチドおよそ1025アミノ酸長として合成される。上記に代わり、天然の、またはリコンビナント生産されたPLA2を消化することによって、例えば、トリプシン、サーモリシン、キモトリプシン、ペプシンなどのタンパク質分解酵素を用いた消化によって、PLA2断片を生産することもできる。タンパク分解の切断部位を同定するために、コンピュータ分析を、市販のソフトウェア、例えばMacVectorOmegaPCGeneMolecularSimulationIncを使用して利用することができる。このような、タンパク分解または合成による断片は、アミノ酸残基を、部分的または完全にPLA2の機能を阻害するのに必要なだけ何個でも含んでいてよい。好ましい断片としては、長さとして少なくとも5101520253035404550556065707580859095100個またはそれ以上の個数のアミノ酸長を含むものがあげられる。タンパク質系またはペプチド系の阻害物質はまた、PLA2の優性阻害型変異体であってもよい。優性阻害型変異体という語は、天然の状態に対し変異を施されたPLA2ポリペプチドであって、PLA2が通常に相互作用するタンパク質と相互作用して、その結果、内生した天然型PLA2による相互作用を妨害するものを意味する。抗PLA2抗体本発明において用いる抗体という語は、PLA2のある抗原決定基に対する結合能を有するような、完全な分子およびその断片、例えばFab、F2、およびFvを包含する。これらの抗体断片は、当該抗体に対応する抗原に対し、選択的に結合するようなある能力を保持しており、以下のとおり定義される。1Fabは、抗体分子のうち1価の抗原結合部位を含む断片であって、抗体分子全体をパパイン酵素で分解することにより、1個の完全なL鎖、およびH鎖1個の一部を生成させることで生産され得る断片である;2Fabは、1個の抗体分子の断片であって、抗体分子全体をペプシンで処理した後に還元処理を行い、1個の完全なL鎖、および、対応するH鎖の一部を生成させることで得られる断片である;なお、もとの抗体分子1個あたり、2個のFabが得られる;32は、抗体分子全体を、上記の酵素であるペプシンで処理し、引き続いての還元処理を行わないことで得られる抗体断片である;なお、F2は、2個のFab断片が2個のジスルフィド結合で互いに結び付いている、Fabの2量体である;4Fv、すなわち、L鎖の可変領域と、2本の鎖として発現したH鎖の可変領域とを含む、遺伝子改変により得られる断片として定義される断片;および5単鎖抗体すなわち、L鎖の可変領域と、H鎖の可変領域とを含み、これらが、遺伝的に融合された一本鎖分子などの適当なポリペプチドリンカーによって連結されている、遺伝子改変により得られる分子として定義される断片。これらの断片を作製する手法は、本技術分野において知られている。例えば、HarlowおよびLaneAntibodiesALaboratoryManualColdSpringHarborLaboratoryNewYork、を参照されたい。なお、ここでは参照のために言及した。本発明における抗体は、完全なPLA2またはその断片を免疫抗原として用いることにより、調製することができる。動物を免疫するためのペプチドとして、cDNAの翻訳または化学合成に由来するものを用いることができる。所望の場合はペプチドを精製およびキャリアタンパク質に結合させる。このような、ペプチドに対し化学的にカップリングされて一般に利用される、キャリア物質には、キーホールリンペットヘモシアニン、サイログロブリン、ウシ血清アルブミン、および破傷風トキソイドが包含される。カップリングの施されたペプチドを、その後、動物例えばマウスやウサギの免疫に使用することができる。所望に応じて、ポリクローナル抗体をさらに精製してもよい。例えば、対応する抗体の産生を引き起こすペプチドを結合した基体により、結合および溶出を行うことによって、精製を行うことができる。当業者は、ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体を、精製および/または濃縮するための、免疫学分野において一般的な種々の技術について知識を有しているであろう。モノクローナル抗体は、連続継代性培養細胞株のかたちで、抗体分子の産生を供給できるような技術のいずれを用いても、調製することができる。このような技術として、例えば、ハイブリドーマ法、ヒトB細胞ハイブリドーマ法や、EBVハイブリドーマ法等があるKohleretalNature2564954971975KozboretalJImmunolMethods8131421985CoteetalProcNatlAcadSciUSA80202620301983ColeetalMolCellBiol621091201984。本技術分野において知られている各種手法によって、PLA2に対する結合性を示す抗体を同定し、抗体発現ライブラリーから単離することが可能である。例えば、PLA2への結合性を示す抗体の結合ドメインを同定および単離する手法として、バクテリオファージをベクターとする系があげられる。このベクター系は、大腸菌内のマウス抗体レパトアから、あるいはヒトの抗体レパトアから、Fab断片のコンビナトリアルライブラリーを発現させるために利用されてきた。この方法論を、前もって選択されたリガンドに対して結合性を有するモノクローナル抗体を発現したハイブリドーマ細胞株に適用することもできる。所望のモノクローナル抗体を分泌するハイブリドーマは、本技術分野における通常の技術的手段を有する者にとってよく理解される技術を用いた、様々な手法で生産することができ、このような手法についてここでは繰り返さない。これら技術の詳細は、例えばMonoclonalAntibodiesHybridomasANewDimensioninBiologicalAnalysisRogerHKennettら編PlenumPress1980およびUS4172124等の文献において記述されている。なお、これら文献は参照のために組み込んだ。さらに、ヒト化された抗体の種々の組み合わせをもったキメラ抗体分子を生産する方法が、本技術分野において知られており、このような方法には、マウス可変領域をヒト定常領域と連結する手法や、マウス抗体の相補性決定領域を、ヒト抗体分子フレームワークに継ぎ合わせる手法が包含される。アンチセンス化合物アンチセンス化合物という語は、PLA2mRNA分子の少なくとも一部に相補的であって345521985、たとえばmRNA翻訳などの、転写後の事象を妨害する能力を有するDNAまたはRNA分子を包含する。PLA2をコードするmRNAのうち少なくとも15個の連続したヌクレオチドに対して相補的な、アンチセンスオリゴマーが好ましい。このようなものは、合成が容易であるとともに、標的となるPLA2産生細胞に導入される際、これより大きな分子よりも問題を引き起こしにくいからである。アンチセンス法の使用は、本技術分野においてよく知られている。好ましいアンチセンス核酸は、配列番号3または4で示されているアミノ酸配列をコードする配列のうち、少なくとも15個の連続したヌクレオチドに対して相補的な核酸配列を含むものである。核酸触媒核酸触媒という語は、ある特定の基質を特異的に認識して、この基質の化学的修飾を触媒するような、DNA分子もしくはDNAを含有した分子、または、RNAもしくはRNAを含有した分子を意味する。核酸触媒中の核酸塩基は、ACGTまたはUであってもよいし、これら塩基の誘導体であってもよい。これら塩基の誘導体は、本技術分野においてよく知られている。典型的には、核酸触媒は、標的核酸を特異的に認識するアンチセンス配列、および、核酸を開裂させる酵素活性部位を有している。特異性を達成する目的において、好ましいRNA酵素およびDNA酵素は、配列番号3または4で示されているアミノ酸配列をコードする配列のうち、少なくとも約1215個の連続したヌクレオチドに対して相補的な核酸配列を含む。本発明において特に有用なRNA酵素のタイプは、ハンマーヘッド型RNA酵素、および、ヘアピン型RNA酵素である。本発明におけるRNA酵素、および該RNA酵素をコードするDNAは、本技術分野においてよく知られている手法を用いて化学的に合成することができる。RNAポリメラーゼプロモーター、例えば、T7RNAポリメラーゼやSP6RNAポリメラーゼに対するプロモーターに、操作可能に連結された、DNA分子から、RNA酵素を調製することもできる。したがって、本発明においては、本発明のRNA酵素をコードするような、核酸分子すなわちDNAまたはcDNAも提供される。ベクターが、DNA分子に操作可能に連結されたRNAポリメラーゼプロモーターをも含む場合、RNAポリメラーゼおよびヌクレオチドと一緒にインキュベーションすることによって、RNA酵素をinvitroで生産することもできる。別の実施形態として、DNAを発現カセットベクターまたは転写カセットベクターに挿入してもよい。合成後に、RNA酵素を安定化する能力を有し、RNA酵素をRNA分解酵素抵抗性となすようなDNA分子へのライゲーションを行ってRNA分子に修飾を施すことができる。また、リポソームによる輸送系へ適用するために、RNA酵素を修飾してホスホチオphosphothioアナログとなすことも可能である。また、この修飾によって、RNA酵素はエンドヌクレアーゼ活性に対し抵抗性を有するものとなる。RNA阻害物質dsRNAは、ある特定のタンパク質の産生を特異的に阻害するために、特に有用なものである。理論により制限されることを求めるわけではないが、DoughertyおよびParksにより、dsRNAによってタンパク質産生を低減し得るメカニズムについてのモデルが提唱されている。このモデルは、近年、Waterhouseらによって、修正および展開されている。この技術は、関心を寄せている遺伝子のmRNA、この場合はPLA2タンパク質をコードするmRNA、と本質的に同一な配列を含むdsRNA分子の存在を必要とする。都合のよいことに、このようなdsRNAを、組換えベクターまたは宿主細胞における単一の翻訳領域によって産生させることができる。この領域では、センス配列とアンチセンス配列とが、無関係な配列に隣接しており、これによって、センス配列とアンチセンス配列とがハイブリダイズして、この無関係な配列がループ構造を形成しているようなdsRNA分子の形成が可能となる。PLA2を標的とする適切なdsRNA分子の設計および生産は、十分に当業者の能力の範囲内であり、DoughertyおよびParksWaterhouseetalWO9932619WO9953050WO9949029およびWO0134815を考慮に入れればなおさらのことである。ここで用いられる用語スモール干渉RNAおよびRNAiは、特異的にある遺伝子産物を標的とし、その結果、無発現または低形質の表現型をもたらすような相補的二重鎖RNAを意味する。より具体的には、このdsRNAは、PLA2をコードする標的RNAに由来する短いヌクレオチド配列を2個含んでおり、これらヌクレオチド配列が互いにアニーリング可能であるという自己相補性を有していて、標的遺伝子の発現をおそらく転写後レベルで阻害する。RNAi分子についてはFireetalNature3918068111998で記述されており、またSharpにより、GenesDevelopment131391411999で概説されている。低分子阻害物質PLA2を抑制する低分子阻害物質は、LehrExpertOpinTherPatents1111231136およびHansfordetalChemBiochem4181185に記載されている。ペプチドおよびペプチドアナログ類好ましい実施形態において、本発明の方法は、ヒトsPLA2IIAタンパク質の70から74アミノ酸残基またはその他の種類のsPLA2タンパク質における同等のアミノ酸残基から本質的に構成されているペプチド、に由来する、立体配置的に束縛された分子を投与する工程を含む。一般に、ヒトsPLA2IIAタンパク質の70から74アミノ酸残基に言及することは、その他の種類のsPLA2タンパク質、例えばsPLA2IIAの相同分子種など、における同等の残基への言及を包含すると解釈される。立体配置的に束縛された分子という語は、立体配置的に束縛されたペプチド、ならびに、立体配置的に束縛されたペプチドアナログおよび誘導体を意味する。したがって、本発明における立体配置的に束縛された分子は、ヒトsPLA2IIAタンパク質の70から74残基から本質的に構成されているペプチド、およびそのアナログもしくは誘導体を包含する。アナログという語は、ヒトsPLA2IIAタンパク質における70から74残基のように存在する自然発生型のアルファ‐アミノ酸に対して、化学的に類似した構造を有する分子を示す。具体例として、gemジアミノアルキル基またはアルキルマロニル基を含有する分子が包含される。誘導体という語は、ヒトsPLA2IIAタンパク質の70から74残基のように存在する自然発生型のアルファ‐アミノ酸中の、1個以上の側鎖が修飾されているアルファアミノ酸を包含する。したがって例えば、ヒトsPLA2IIAタンパク質の70から74残基において存在する自然発生型アミノ酸を、対応するDアミノ酸やNメチルアミノ酸などの、コードされていないまたは修飾された様々なアミノ酸で、置換することができる。その他の修飾として、ヒドロキシル、チオール、アミノ、およびカルボキシル基を、化学的に類似した各種置換基で置換することなどが挙げられる。本発明は、立体配置的に束縛された、生物学的に活性なヒトsPLA2IIAペプチドの擬ペプチド、の使用を包含する。擬ペプチドはすなわち、上記ペプチドの活性を擬態し、そのことによって、前立腺ガン細胞のsPLA2IIA依存性増殖を阻害する能力を示すようなアナログおよび誘導体である。これら擬ペプチドは、三次元形状および生物活性の双方について、ここで記述されているsPLA2IIAペプチド自体と、実質的に同一であることが好ましい。実質的同類とは、ペプチド中の、sPLA2IIA酵素と反応する置換基どうしの幾何学的位置関係が保存されていることを意味すると同時に、その擬ペプチドが、前立腺ガン細胞のsPLA2IIA依存性増殖を阻害することを意味する。擬ペプチドは、あるペプチドの生物活性を擬態する分子であるが、化学的特性については、もはやペプチド性ではない。厳密な定義によれば、擬ペプチドとは、ペプチド結合をまったく含有していない分子のことをいう。しかし、擬ペプチドという用語は、特性について完全なペプチド性ではない分子、たとえばシュードpseudoペプチド、セミペプチドおよびペプトイドpeptoidsなどを示すために使用されることがある。完全にペプチド性であるか部分的にペプチド性であるかに関わらず、本発明の方法において使用できる擬ペプチドでは、反応性の化学的部位の空間的配置が、該擬ペプチドの元にあたるペプチドの活性基の三次元配置に、非常に類似している。このようの活性部位の幾何学的類似の結果として、上記擬ペプチドは、上記ペプチドの生物活性と類似した生物学的システムに対して効果を有する。ある特定のペプチドの、ペプチド自体でなく擬態物を用いることには、明らかな利点がある。というのは、ペプチドは一般に、望ましくない二つの特性:生物学的利用能が低いことおよび作用の持続時間が短いこと、をしめすからである。擬ペプチドは、これら主要な二つの障害を回避する手段を提供し、このことは、この分子が経口投与で有効かつ作用を長時間持続するのに十分な程度に小さいためである。擬ペプチドによれば、コストをかなり節減し、また患者の服薬率を相当に向上させることもでき、このことは、擬ペプチドが、ペプチドの腸管外投与とは違って経口的に投与可能なためである。さらには、擬ペプチドは生産においてペプチドよりもはるかに安価である。ヒトsPLA2IIAペプチドの70から74残基に基づき、同様の生物活性ひいては同様の効用を有する、適当な擬ペプチドは、容易に利用可能な技術を用いて開発することができる。よって、例えば、ペプチド結合を、当該擬ペプチドに元のペプチドと同様の構造をとらせて同様の生物活性をもたせるような非ペプチド結合と、置換してもよい。アミノ酸の化学基を、同様の構造を有する他の化学基で置換することによって、さらなる修飾を行うことも可能である。ヒトsPLA2IIAの70から74残基に基づいたsPLA2IIAペプチドを元にした擬ペプチドを開発するには、元のペプチドの三次構造をNMR分光法、結晶解析、および/またはコンピュータ利用の分子モデリングにより決定することが助けとなる。これらの技法は、元のペプチドよりも、作用力価および/または生物学的利用能および/または安定性、の高いアナログ/誘導体を開発するために役立つ。ヒトsPLA2IIAの70から74残基から本質的に構成されている、あるsPLA2IIAペプチドの構造に関する情報を利用し、三次元データベースを検索して同様の構造を有する分子を同定することができる。これには例えばMACCS3DあるいはISIS3D、ChemDBS3D、およびSybyl3DBUnityなどのプログラムが用いられる。化学構造のデータベースは、CambridgeCrystallographicDataCentre、ChemicalAbstractsServiceや、ACD3Dなどの、多数の情報源から入手可能である。denovo設計用のプログラムとしては、Ludi、Leapfrogや、Aladdinなどが挙げられる。当業者には、擬ペプチドの設計において、これらデータベースを用いた設計または同定による構造のわずかな変更、あるいは化学構造の調整が必要となりうることが理解されるであろう。ヒトsPLA2IIAの70から74アミノ酸残基に基づいたペプチド誘導体および擬ペプチド化合物について、ここで説明する解析を用いて、前立腺ガン細胞のsPLA2IIA依存性増殖を阻害する能力を有するかを確認する試験を行うことができる。ペプチド誘導体および擬ペプチドは、少なくとも90の、好ましくは少なくともcFLSYRと同程度の、前立腺ガン細胞に対する増殖抑制活性を有することが好ましい。また、ペプチド誘導体および擬ペプチドは、sPLA2IIAを特異的に阻害することが好ましい。本発明の方法において用いられる分子は、たとえばペプチドは、立体配置的に束縛されている。立体配置的な束縛とは、ペプチドが安定であり、三次元形態で好ましい立体配座をとっていることを意味する。立体配置的な束縛には、ペプチドにおけるある残基が、立体配置上の可動性を制限されていることなどの、局所的な束縛一群の残基について立体配置上の可動性が制限されて、これら残基が何らかの二次的な構造単位を形成しているなどの、領域性の束縛;および、ペプチド全体の構造が問題となる全体的な束縛、が包含される。ペプチドの活性構造を、環化などの共有結合による修飾、または、ガンマ‐ラクタムもしくは他のタイプの架橋の組込みによって、安定化することができる。例えば、側鎖を主鎖に対して環化反応させて、互いに反応した部位の双方にLガンマラクタム成分を作り出すことができる。一般的には、Hrubyetal1992ApplicationsofSyntheticPeptidesinSyntheticPeptidesAUser’sGuide259345を参照されたい。環化を達成するために、例えば、シスチン架橋の形成、それぞれの末端アミノ酸のうちアミノ末端基とカルボキシ末端基とのカップリング、Lys残基あるいは類縁の相同体のアミノ基を、Asp、Gluあるいは類縁の相同体のカルボキシ基とカップリングさせること、なども用いることができる。ポリペプチドのアルファ‐アミノ基と、リジン残基のイプシロン‐アミノ基との、ヨード酢酸無水物を用いたカップリングも採用できる。例えば、WoodandWetzel1992IntlJPeptideProteinRes3953339を参照されたい。US5891418に記載されている別の手法では、金属イオンと錯形成した骨格を、ペプチドの構造中に入れ込んでいる。典型的には、好ましい金属‐ペプチド骨格は、ある錯体形成金属イオンの配位圏に必要な、各々必要数の配位基にもとづいて形成されている。一般に、有効性を示す金属イオンの大多数において、配位数は4から6である。ペプチド鎖中の配位基の種類には、官能性としてアミン性、アミド性、イミダゾール性、グアニジノ性などの窒素原子チオールまたはジスルフィドにおける硫黄原子および官能性としてヒドロキシ、フェノール、カルボニル、カルボキシルなどの酸素原子が包含される。さらに、上記ペプチド鎖または各個のアミノ酸を化学的に変換して、例えばオキシム、ヒドラジノ、スルフヒドリル、フォスフェート、シアノ、ピリジノ、ピペリジノ、またはモルフォリノなどの配位基を含有させることもできる。さらなる手法として、二機能性の架橋物質を、例えば、Nスクシンイミジル3プロピオネート、スクシンイミジル63プロピオンアミドヘキサノエート、スルフォスクシンイミジル63プロピオンアミドヘキサノエートなどを用いることができる。上述したペプチドおよび誘導体を化学的に合成する技術については、上記引用文献中で記述されており、また、BorgiaおよびFields2000TibTech18243251において総説がなされており、この総説に記載の引用文献中で詳細に説明されている。診断方法本発明はまた、ヒトおよび他の哺乳類において前立腺ガンを診断するための、核酸に基づいた方法およびタンパク質に基づいた方法を包含する。ここで用いられる診断diagnosisという語、および、例えばdiagnose、diagnosedやdiagnosing等の、ただしこれらだけに制限されない変化形は、臨床段階での初期の診断のみに制限されることはなく、臨床段階でのいかなる診断および予後をも包含すると解釈されるものとする。例えば、ここでいう診断アッセイ形態とは、患者の寛解を評価すること、または、例えば外科手術もしくは化学療法の後に、病気の再発あるいは腫瘍の再発を監視すること、または、初期腫瘍の転移の存在を判定することに、ひとしく関連する。ここでいうアッセイの使用もすべて、本発明に包含される。したがって、PLA2の発現を、RNAレベルまたはタンパク質レベルのいずれでも、前立腺ガンを診断するために、または前立腺ガンの進行を監視する予後徴候として用いることができる。核酸に基づいた診断アッセイは、長さが少なくとも約20ヌクレオチドであって、PLA2をコードするRNAに特異的にハイブリダイズする、もしくはPLA2をコードするRNAからcDNAを増幅するプローブを用いた、試料におけるRNAレベルの検出または相対的な計量にもとづくことが好ましい。都合のよいことに、いかなる形態のハイブリダイゼーションアッセイも、試料中の、PLA2をコードするRNAを検出するために使用可能である。すなわち、例えばマイクロアレイ技術を利用した高処理スクリーニング系、または通常のノーザンハイブリダイゼーション法、または逆転写ポリメラーゼ連鎖反応法が使用可能である。生体内の局在性の検出も利用でき、組織切片を用いて行うことができる。診断用イムノアッセイには、PLA2の少なくとも約5から10個の連続したアミノ酸残基を含むペプチド領域の一箇所のみに結合するような、モノクローナル抗体およびポリクローナル抗体を包含する抗体、またはFab断片、F2断片もしくはscFv断片、を利用することが適当である。本発明はさらに、ここで記述されているアッセイへの使用に適した、合成もしくはリコンビナントのペプチド、または抗体のいずれをも包含する。これら診断方法の好ましい実施形態において、PLA2はsPLA2IIAまたはcPLA2αである。別の態様において、本発明は、前立腺ガンに対する疾病素質を診断する方法に関する。したがって、本発明は一態様において、被験者の前立腺ガンに対する疾病素質を評価する方法であって、前記被験者のPLA2遺伝子において、多型または後成的変化が存在するかを確認する工程を含む方法を提供する。ある実施形態において、前記多型は、NCBIデータベースやCeleraデータベースのような公的または民間データベースにおいて既に同定されているPLA2多型である。本発明は、前立腺ガンに対する感受性を診断するための、核酸に基づいた方法およびタンパク質に基づいた方法を包含する。PLA2遺伝子における多型は、点変異、欠失および/または挿入であってよい。このような多型の検出は、PLA2遺伝子由来のDNA断片を分離して塩基配列解析を行うことで行ってもよいし、あるいは、個体からmRNAを分離して、これからDNAを合成して塩基配列解析に供することで行ってもよい。多型の検出はまた、識別用のオリゴヌクレオチドプローブを用いたハイブリダイゼーション法や、識別用のオリゴヌクレオチドプローブを用いた増幅法によっても行うことができる。適切な方法として、ゲノムDNAのサザン分析制限酵素分解による直接的な変異解析RNAのノーザン分析変性高速液体クロマトグラフィ遺伝子単離および塩基配列解析遺伝子増幅産物を用いた、アレル特異的オリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションエキソントラッピング法シングルベースエクステンションまたは、PLA2タンパク質の解析などが挙げられる。ある実施形態において、後成的な変化は、被験者のPLA2遺伝子における異常メチル化、または、被験者のPLA2遺伝子近隣における、内在レトロウィルスプロモーターもしくは転移因子プロモーターの挿入である。治療剤のスクリーニング方法また、本発明には、前立腺ガンの治療に有効な治療剤を明らかにする各種方法も包含される。したがって、第一の態様において、本発明は、前立腺ガンの増殖を低減または阻害する化合物をスクリーニングする方法であって、候補化合物の存在下および非存在下でのPLA2活性を測定する工程を含み、該化合物の存在下でPLA2活性が低減されることによって、該化合物が前立腺ガン細胞の増殖を低減または阻害することが示される方法を提供する。別の態様において、本発明は、前立腺ガンの増殖を低減または阻害する化合物をスクリーニングする方法であって、候補化合物の存在下および非存在下でのPLA2発現レベルを測定する工程を含み、該化合物の存在下でPLA2発現が低減されることによって、該化合物が前立腺ガン細胞の増殖を低減または阻害することが示される方法を提供する。この態様のうち、さらに一実施形態において、この方法は、PLA2を発現させる能力を有する翻訳系を候補化合物に曝露する工程、および、該化合物の存在下におけるPLA2の発現レベルを、該化合物が存在しない以外は同様の条件下で得られるレベルと比較する工程を含む。前記翻訳系は、無細胞翻訳系であってよい。また、前記翻訳系は真核または原核細胞を含んでいてもよい。さらに別の態様において、本発明は、前立腺ガンの増殖を低減または阻害する化合物をスクリーニングする方法であって、候補化合物がPLA2基質へのPLA2の結合を調節する能力を測定する工程を含み、該化合物の存在で基質へのPLA2の結合レベルが変化することによって、該化合物が前立腺ガン細胞の増殖を低減または阻害することが示される方法を提供する。これらスクリーニング方法の好ましい実施形態において、PLA2はsPLA2IIAまたはcPLA2αである。治療方法我々は、前立腺ガン細胞への外来性sPLA2IIAの投与が、細胞増殖を刺激することを示した。また、PLA2阻害物質の投与が、sPLA2IIA介在の細胞増殖を阻害することを示した。従って、PLA2阻害物質を、細胞において前立腺ガン細胞の増殖を阻害または低減するために用いることができ、特に、前立腺ガンの細胞のような、高いsPLA‐IIA活性を有する細胞において用いることができる。PLA2阻害物質は、前立腺ガン、とりわけAIPCに対して、治療上に用いることができる。ここで用いられる治療上にという語は、予防的投与および治療的投与の双方を意味している。よって、PLA2阻害物質を、ハイリスクの患者に、前立腺ガンの可能性および/または重症度を減らす目的で投与してもよいし、既に前立腺ガンを呈している患者に投与してもよい。上述したペプチド、アナログおよび低分子阻害物質は、各種成分と組み合わせて組成物とすることが好ましい。好ましくは、この組成物を、薬剤として許容される担体または希釈剤と組み合わせて、ヒト用あるいは動物用などの医薬製剤を製造する。適当な担体および希釈剤としては、リン酸緩衝食塩水などの等張食塩水、水、ドライパウダー、ミセル等が挙げられる。この製剤の投与は、本技術分野で知られているいかなる手段によっても行うことができる。輸送方式として、直接注射、局所的輸送や、経口輸送などが挙げられるが、これらに限定はされない。よってこの製剤を、とりわけ、局所、非経口、筋内、静脈内、皮下、眼内、経口または経皮投与用に調剤することができる。典型的には、各ペプチドまたはそのアナログもしくは誘導体の投与量は001から30mgkg体重であり、好ましくは01から10mgkgであり、さらに好ましくは01から1mgkg体重である。記載した投与経路および投与量は、目安にすぎない。熟練した従事者であれば、個別の患者あるいは条件のいずれに対しても、最適な投与経路および投与量を容易に決定できるからである。本発明を、以下の実施例を参照してさらに説明する。この実施例は例証のみを意図したものであり、限定的なものではない。材料と方法細胞株および培養:細胞株LNCaP、DU145およびPC3を、AmericanTypeCultureCollectionから購入した。すべての細胞培養物を、LNCaPは5FBS含有の、DU145およびPC3は10FBS含有のRPMI1640中で、37°C、5CO2の加湿環境中で維持した。アンドロゲン添加を伴う実験については、細胞を、フェノールレッドを含有せず、炭ろ過された同濃度のFBSを含有するRPMI1640中で培養した。本項で説明する実施例について、LNCaPでは継代数が30から45の間、DU145では65から80の間、PC3では25から40の間の細胞を使用した。試薬:sPLA2IIAを、記載のように、ヒトsPLA2IIAを発現しているチャイニーズハムスター卵巣細胞株5A2に由来する培養上清からイムノアフィニティークロマトグラフィーによって精製した16527902797。sPLA2IIAの不活性型変異体であるH48QをコードするcDNAを、標準的な分子的手法を用い、オリゴヌクレオチド介在の部位特異的変異誘発によって構築した。このcDNAを、チャイニーズハムスター卵巣細胞において、ヒトメタロチオネインプロモーターによる制御下で発現させた。H48Qを、この細胞株由来の培養上清から、イムノアフィニティークロマトグラフィーによって精製した。純度の確認は、銀染色したSDSゲルにおける一本のバンドの存在確認、および、アミノ末端のペプチド配列解析によって行った。精製されたタンパク質において、放射標識大腸菌アッセイJBiolChem2763315633614による確認を行うと、酵素活性は検出されなかった。変異型タンパク質およびsPLA2IIAのいずれも、ELISA法31175で定量した。sPLA2IIA阻害物質を、Fmocメトキシカルボニル固相化学法を用いて、樹脂からの切り離しより前に側鎖保護基を除去することなく合成した。ペプチドの環化を、標準的なペプチド合成活性化および化学的カップリングを用いて、脱保護よりも前に行った。cPLA2阻害物質であるピロリジン1は、MichaelGelb博士のご厚意により入手した。試験において使用した抗体としては、ポリクローナル抗sPLA2IIa抗体、我々が産生させたモノクローナル抗sPLA2IIA抗体4A1、および抗cPLA2ポリクローナル抗体があげられる。細胞増殖アッセイ:細胞を、FBS含有RPMI01mlと共に、96ウェルプレートのウェルあたり1×104個ずつ蒔いた。密度7080に達したのち、培地を、種々の処理剤を含むものと、3日ごとに交換した。処理の後、MTSアッセイを用いて生細胞数を測定した。手短にいうと、20ulのMTS溶液を各ウェルに加え、細胞を1時間インキュベートした。490nmにおける吸光度を、ELISAマイクロプレートリーダーを用いて測定した。各試験は4連で行い、少なくとも3回繰り返して行った。フローサイトメトリー解析:細胞を、25mlフラスコに、上述した条件で蒔いた。トリプシン処理および細胞数測定という処理を行ったのち、LNCaP細胞を1mLPBSに希釈し、02mL04TritonX100を加えて、5分間、RT、50μlのヨウ化プロピジウム溶液および20μLのRNA分解酵素の存在下でインキュベートした。細胞あたりDNA量を、FACScaliburフローサイトメーターおよびCellQuestソフトウェアを用いたフローサイトメトリーによって測定した。統計分析は、試料あたり10000事象に対して実施した。RTPCR:LNCaP、DU145またはPC3細胞から、Trizol試薬を用いて、細胞の全RNAを分離した。第一鎖cDNAを、5μgのRNAから、cDNA予備増幅システムで、SuperScriptII逆転写酵素およびオリゴプライマーを用いて合成した。これを、AmplitaqDNAポリメラーゼを使用した標準的なPCR反応における鋳型として用いた。増幅産物を、MetaPhorアガロースを材料とした2TAEアガロースゲル上で解析し、UV照射下で撮像した。25および100bpのDNAラダーを、大きさの基準として用いた。プライマーは、GenBankデータベースに蓄積されたヒトsPLA2IIAmRNAに基づいて設計され、その構造は以下:フォワード5TTTGTCACCCAAGAACTCTTAC3リバース5GGGAGGGAGGGTATGAGA3であった。組織:正常な前立腺は、脳死状態の臓器提供者から、以前に記述されているようにCancerResearch6163316334入手した。良性前立腺過形成の組織を、経尿道的前立腺切除術から入手した。ガン組織は、前立腺全摘出術から入手した。被験者からはインフォームドコンセントを得た。また、研究手順はCentralSydneyAreaHealthServiceEthicsReviewCommitteeにより認可を受けた。免疫組織化学法:前立腺組織を、いずれも10ホルムアルデヒド溶液中、24時間で固定し、パラフィン包埋した。組織切片を、1ヤギ血清中に溶解された適当な一次抗体を共存させマイクロウェーブによる抗体賦活化処理に供した後、1時間、37°Cの条件でインキュベートした。二次抗体として、ビオチン化ヤギ抗ウサギまたはマウスIgG抗体を、1通常ヤギ血清で1200に希釈して用いた。アビジンビオチンペルオキシダーゼ複合体系を用いてシグナルを増幅し、DAB液状発色基質系を用いて可視化した。切片を、ヘマトキシリンで対比染色した。各試料について、アイソタイプおよび試験に対するネガティブコントロール試験を、それぞれ、一次抗体に替えてウサギIgGまたは1ヤギ血清を用いることで行った。画像解析:イムノペルオキシダーゼ染色は、免疫後IgGを使用した場合の濃度が、免疫前IgG使用、およびIgGなしの場合で観察された濃度よりも明らかに高いときに、陽性かつ特異的であるとみなした。特異的な染色を、免疫陽性の正常またはガン性上皮細胞の割合に応じて、記載のように等級付けした。簡潔にいうと、陽性染色された正常またはガン性上皮細胞のスライドあたり割合を、三つのグループに分類した:グループ1033グループ23466およびグループ367100。ゼロは、特異的染色を呈する細胞がなかったことを示す。統計分析:統計分析には、NumberCruncherStatisticalSystemを使用した。データの分析を、一元配置分散分析および相関係数によって適切なように行った。両側P値005のとき、有意であるとした。実施例1:sPLA2IIAは前立腺ガン細胞において誘導され、AIPCにおいて恒常的に活性化している。我々は、SerialAnalysisofGeneExpressionのデータベースを検索し、前立腺ガンにおける各種PLA2酵素の定常状態mRNAレベルをそれぞれ確認した。SAGEに用いたcDNAライブラリーは、それぞれ、PR317正常前立腺、PR317前立腺ガンであり、いずれも顕微解剖された前立腺組織に由来して得られたものである。我々は、sPLA2IIAmRNAレベルが、前立腺ガンにおいて正常前立腺の22倍高く、一方、他のものは、前立腺のライブラリーでは発現されていないか、ガンにおいて変化が認められないことを明らかにした。SAGEの結果を裏付け、また、発現解析をアンドロゲン非依存性前立腺ガンまで拡張するために、我々は、前立腺全摘出術を受ける以前に3か月間のアンドロゲン除去療法を受けていた患者の前立腺組織におけるsPLA2IIA発現を、免疫組織化学法によって調べた。アンドロゲン除去療法後も検体に残存しているガン細胞が、AIPCに最も近いと考えられた。ただし、これらは前立腺内に限られていた。対照として、アンドロゲン除去療法を受けることなく前立腺全摘出術を受けた患者からのガン検体を利用した。免疫組織化学法には2種類の抗体を用い、いずれの場合も同様の発現パターンが示された。対照群においては、、ガン細胞に隣接した良性の腺において弱く不均一な染色が認められ、ガン細胞において非常に強い染色が認められた。アンドロゲン除去群においては、良性の腺の染色はなくなり、一方AIPC細胞はsPLA2IIA発現を維持していた。我々はまた、sPLA2IIA対応の染色の程度は、腫瘍の悪性度および術後のPSAレベルと明らかに関連していることを明らかにしたデータ非表示。sPLA2IIAの染色体座位が、前立腺ガン感受性遺伝子座であるCAPBAmJHumGenet64776787と重複していることも明らかになった。cPLA2αの免疫組織化学染色については、アンドロゲンの状態に関わらず、正常細胞とガン細胞とで差異は認められなかったデータ非表示。アンドロゲン除去後の良性の腺においてsPLA2IIAの発現がなかったことは、sPLA2IIA遺伝子の発現にアンドロゲンが必要であることを示唆している。このことを検証するために、我々は、MatInspectorRelease53を用いてsPLA2IIA遺伝子の5’‐隣接領域を探索し、546から527のアンドロゲン応答エレメント、GAGGTAAATGGTATTCTCを見出した。次に、我々は、アンドロゲン応答性のヒト前立腺ガン細胞株であるLNCaPを、種々の量のアンドロゲンで処理し、sPLA2IIAのmRNAおよびタンパク質のレベルをRTPCRおよびELISAにより測定した。実際に、1nMアンドロゲン処理後に、sPLA2IIA転写産物レベルの上昇が認められた。これに対し、3kbのゲノムDNA中、cPLA2α遺伝子の5隣接領域において、AREは認められなかった。アンドロゲンによる処理は、cPLA2αのmRNAおよびタンパク質のレベルに対して影響を及ぼさなかったデータ非表示。併せて鑑みると、これらの結果は、sPLA2IIAの発現は通常アンドロゲンに依存しcPLA2αの発現は依存しないこと、および、AIPCでは、sPLA2IIAの発現が、まだ明らかでないメカニズムを経てアンドロゲン非依存性になることを示している。実施例2:前立腺ガン細胞におけるsPLA2IIAの発ガン作用。前立腺ガン細胞の増殖に対するsPLA2IIAの生物学的関連を調べるために、LNCaP細胞を、添加量を低濃度から順に割り振ったリコンビナントのヒトsPLA2IIAで処理し、細胞増殖を観察した。LNCaPは、アンドロゲン受容体とPSAの両方を発現する唯一の、入手可能な前立腺ガン細胞株である。3522Hテトラゾリウムアッセイで測定すると、外来性に添加されたsPLA2IIAは、1nMもの少量で、一貫してかつ添加量依存性に、LNCaP細胞の増殖を促進した。これに対し、sPLA2IIAの不活性型変異タンパク質であるH48Qを添加しても、未処理の細胞と比較して促進された結果は示されず、よって、上述の増殖促進効果には酵素活性が不可欠であることが示された。我々は以前、ヒトsPLA2IIAが、未変性のsPLA2IIAタンパク質の70から74残基を含むペンタペプチド配列によって、添加量依存性に阻害されることを示したJBiolChem2712399223998。線状ペプチド配列に固有の屈曲性のために、invitroの活性分析において、阻害の程度は弱かった。我々は最近、2種類の新規環状ペプチドを設計した。これらは、cFLSYR、ならびに、そのFおよびYが2ナフチルアラニンで置換された環状ペプチドLSRである。いずれも、効力が線状ペプチドよりも顕著に向上していた。外来性sPLA2IIAの、前立腺ガン細胞数に対する強い促進効果は、sPLA2IIA阻害物質cFLSYRによって、試験した全濃度において完全に阻止された。我々は次に、sPLA2IIAが、LNCaP細胞の分布に対して、細胞周期の各種段階においてどのように作用するかを確認する目的で、フローサイトメトリー分析を行った。sPLA2IIAを含有した培地中では、未処理の細胞と比較して、G1期にあるLNCaP細胞の割合が、74から62に減少し、これに対応して、G2M期の細胞が増加していた。sPLA2IIAおよびその阻害物質の双方が存在する条件では、G1およびG2期の細胞の比率は、基礎レベルまで回復した。これらの結果により、前立腺ガン細胞における、sPLA2IIA酵素活性の生物学的な重要性が立証され、また、sPLA2IIA誘導性の細胞増殖が、少なくとも部分的には、G1期からG2M期へ移行する細胞の比率が増加することに起因すると説明される。実施例3:sPLA2IIAの発ガン作用にはcPLA2α活性が必要である。近年、エイコサノイド産生に対するsPLA2の作用を説明するために、2種類のモデルが提唱されているJBiochem131285292。一つは、膜リン脂質の直接開裂である。このモデルでは、sPLA2が形質膜リン脂質に直接結合し、遊離されたアラキドン酸が、エイコサノイド産生の基質となる。リゾリン脂質および/またはアラキドン酸代謝による産物エイコサノイドが、カルシウム動員を介して、内生cPLA2αの間接的な活性化を制御する。ここで増強されたcPLA2α活性が、今度は、結果としてエイコサノイド産生を増強する。第二のモデルは、細胞表面GPI結合型ヘパラン硫酸プロテオグリカン受容体を介した、細胞内エイコサノイド経路の、間接的な調節である。内部移行したsPLA2が、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ制御のリン酸化を介したcPLA2α活性化を経由して、直接または間接的に、下流の酵素系にアラキドン酸を供給する。sPLA2IIA誘導性の細胞増殖が、cPLA2αに依存しているかを確認するために、LNCaP細胞を、一定の有効量のsPLA2IIAの存在下または非存在下で、種々の添加量の、cPLA2選択的阻害物質であるピロリジン1BiochimBiophysActaBiomembranes2160166で処理した。cPLA2αを遮断すると、sPLA2IIA誘導性の細胞増殖は完全に消失し、cPLA2α活性がsPLA2IIA誘導性の細胞増殖に必要であることが証明される。sPLA2IIAの非存在下では、cPLA2α阻害物質は、細胞増殖に対して、影響を及ぼさなかった。このことは、LNCaP細胞において、cPLA2αが独立的に細胞増殖を促進するわけではないことを示唆する。実施例4:sPLA2IIA阻害物質は、内因性の増殖を抑制する。我々による、AIPCにおいては増殖を促進するsPLA2IIAが恒常的に発現しているという知見に基づいて、我々は、sPLA2IIAの、AIPC治療の標的としての可能性に注目した。我々は、PLA2阻害物質を用いると、COX阻害物質を単独で用いるよりもよい成果が得られると推論する。後者はプロスタグランジンの産生しか抑制しないからである。内生のsPLA2IIAを遮断することのの、細胞増殖に対する効果を試験するために、我々は、まず、sPLA2IIAmRNAの基礎レベルを、3種類のヒト前立腺ガン細胞株において確認した。阻害物質の一般的な毒性の可能性もまた拡張するために、アンドロゲン非依存性の細胞株であるPC3およびDU145を、実験に含めた。sPLA2IIAをコードするmRNAは、LNCaPおよびPC3と違ってDU145においては検出されなかった。我々は、次に、個々の阻害物質、cFLSYRおよびcLSRの、細胞増殖に対する効果を、ある範囲の添加量にわたって試験した。LNCaPおよびPC3細胞の増殖が顕著に減少し、最小有効量は、いずれの阻害物質についても1nMであった。これに対し、どちらの阻害物質も、DU145に対しては効果を及ぼさなかった。これは、おそらく内生sPLA2IIAの欠如のためであろう。このように、少量で有効であること、および、内生のsPLA2IIAを含有する細胞株に対してのみ特異的に有効であることは、非特異的な細胞毒性では、阻害効果を説明し難いということを示している。要約すると、常態ではアンドロゲン誘導性であるsPLA2IIA遺伝子発現が、アンドロゲン非依存性前立腺ガンにおいては恒常的に活性化されている。外来性に添加されたsPLA2IIAは、前立腺ガン細胞の増殖を、その酵素反応生成物およびcPLA2を介して促進する。AIPCを含む前立腺ガンについて、sPLA2阻害物質によって、より良い治療成果の達成が期待できる。ここまで本明細書において言及されている文献はすべて、参照の記載によってその全体が組み込まれている。上述した本発明の方法およびシステムの様々な改良例および変形例が、本発明の範囲および思想から逸脱することなく、当業者に想起されるであろう。ここまで、本発明を、特定の好ましい実施形態と関連付けて説明してきたが、特許請求の範囲に記載された発明は、このような特定の実施形態に過度に限定されないものと理解する。さらには、分子生物学あるいは関連分野における知識を有する者にとって明らかとなるような、本発明を実施するための上述の手段に関する種々の改変は、本発明の範囲内であるとみなす。