"検査水の全窒素を定量するための方法であって、前記検査水へペルオキソ二硫酸のアルカリ金属塩を添加し、アルカリ性下において加熱する工程1と、工程1を経た前記検査水に対し、塩化バナジウムIIIと、亜硝酸イオンとの反応によりジアゾニウム塩を生成可能なジアゾ化試薬とを添加し、酸性下において加熱する工程2と、工程2を経た前記検査水について、前記ジアゾ化試薬による着色の吸光度および生成した前記ジアゾニウム塩による着色の吸光度のうちの少なくとも一つの吸光度を測定することで亜硝酸イオン濃度を測定する工程3とを含み、前記ジアゾ化試薬として、ケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物群および3-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オン骨格含有化合物群からなる群から選ばれた化合物を用いる、全窒素の定量方法。工程1において、前記検査水を90°Cから沸騰温度までの温度で加熱する、請求項1に記載の全窒素の定量方法。工程3の前に、工程2を経た前記検査水のpHが7より大きくなるよう調整する工程をさらに含み、かつ、工程3において前記ジアゾ化試薬による着色の吸光度を測定する、請求項1または2に記載の全窒素の定量方法。前記芳香族第一級アミン化合物群は、オルト位若しくはパラ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第1群と、メタ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第2群とからなる、請求項1または2に記載の全窒素の定量方法。前記第1群が1-アミノアントラキノン、2-ニトロアニリン、4-ニトロアニリン-2-スルホン酸ナトリウム、p-ニトロアニリン、2-アミノ-3-ヒドロキシアントラキノンおよび1-アミノ-4-ブロモアントラキノン-2-スルホン酸ナトリウムからなり、前記第2群が3’-アミノアセトフェノンおよび3-アミノベンゾフェノンからなる、請求項4に記載の全窒素の定量方法。前記3-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オン骨格含有化合物群が3-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オンおよび2-アミノ-3-クロロ-1,4-ナフトキノンからなる、請求項1または2に記載の全窒素の定量方法。工程2において前記ジアゾ化試薬を前記第1群から選択し、かつ、工程3において前記ジアゾ化試薬による着色の吸光度を測定する、請求項4または5に記載の全窒素の定量方法。工程2において、塩化バナジウムIIIおよび前記ジアゾ化試薬とともに、前記検査水に対してアルコール系化合物並びに次亜りん酸およびその塩からなる化合物群から選択された少なくとも1種の化合物をさらに添加する、請求項7に記載の全窒素の定量方法。工程2において前記ジアゾ化試薬を前記第2群から選択し、かつ、工程3において前記ジアゾ化試薬による着色の吸光度を測定する、請求項4または5に記載の全窒素の定量方法。工程2において前記ジアゾ化試薬を前記3-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オン骨格含有化合物群から選択し、かつ、工程3において前記ジアゾ化試薬による着色の吸光度を測定する、請求項6に記載の全窒素の定量方法。工程3の前に、工程2を経た前記検査水のpHが7より大きくなるよう調整する工程をさらに含む、請求項7から10のいずれかに記載の全窒素の定量方法。工程2において前記ジアゾ化試薬を前記第2群から選択し、かつ、工程3において前記ジアゾニウム塩による着色の吸光度を測定する、請求項4または5に記載の全窒素の定量方法。本発明の目的は、亜硝酸イオンによるジアゾ化反応を利用し、検査水の全窒素を簡単な操作で高濃度の領域まで定量できるようにすることにある。本発明は、検査水の全窒素を定量する方法に関するものであり、この方法は、検査水へペルオキソ二硫酸のアルカリ金属塩を添加し、アルカリ性下において加熱する工程1と、工程1を経た検査水に対し、塩化バナジウムIIIと、亜硝酸イオンとの反応によりジアゾニウム塩を生成可能なジアゾ化試薬とを添加し、酸性下において加熱する工程2と、工程2を経た検査水について、ジアゾ化試薬による着色の吸光度および生成したジアゾニウム塩による着色の吸光度のうちの少なくとも一つの吸光度を測定することで亜硝酸イオン濃度を測定する工程3とを含んでいる。この方法では、ジアゾ化試薬として、ケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物群および3-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オン骨格含有化合物群からなる群から選ばれた化合物を用いる。工程1では、例えば、検査水を90°Cから沸騰温度までの温度で加熱する。本発明の定量方法の一形態では、例えば、工程3の前に、工程2を経た検査水のpHが7より大きくなるよう調整する工程をさらに含み、かつ、工程3においてジアゾ化試薬による着色の吸光度を測定する。本発明において用いられる芳香族第一級アミン化合物群は、通常、オルト位若しくはパラ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第1群と、メタ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第2群とからなる。第1群は、例えば、1-アミノアントラキノン、2-ニトロアニリン、4-ニトロアニリン-2-スルホン酸ナトリウム、p-ニトロアニリン、2-アミノ-3-ヒドロキシアントラキノンおよび1-アミノ-4-ブロモアントラキノン-2-スルホン酸ナトリウムからなり、第2群は、例えば、3’-アミノアセトフェノンおよび3-アミノベンゾフェノンからなる。一方、3-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オン骨格含有化合物群は、例えば、3-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オンおよび2-アミノ-3-クロロ-1,4-ナフトキノンからなる。この定量方法の他の一形態では、工程2においてジアゾ化試薬を第1群から選択し、かつ、工程3においてジアゾ化試薬による着色の吸光度を測定する。この場合、工程2において、塩化バナジウムIIIおよびジアゾ化試薬とともに、検査水に対してアルコール系化合物並びに次亜りん酸およびその塩からなる化合物群から選択された少なくとも1種の化合物をさらに添加するのが好ましい。この定量方法のさらに他の一形態では、工程2においてジアゾ化試薬を第2群から選択し、かつ、工程3においてジアゾ化試薬による着色の吸光度を測定する。この定量方法のさらに他の一形態では、工程2においてジアゾ化試薬を3-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オン骨格含有化合物群から選択し、かつ、工程3においてジアゾ化試薬による着色の吸光度を測定する。工程3においてジアゾ化試薬による着色の吸光度を測定する上記各形態の定量方法においては、通常、工程2を経た検査水のpHが7より大きくなるよう調整する工程をさらに含むのが好ましい。この定量方法のさらに他の一形態では、工程2においてジアゾ化試薬を第2群から選択し、かつ、工程3においてジアゾニウム塩による着色の吸光度を測定する。本発明に係る全窒素の定量方法は、上述の工程を含むものであるため、亜硝酸イオンによるジアゾ化反応を利用したものでありながら、検査水の全窒素を簡単に高濃度の領域まで定量することができる。本発明の方法により全窒素を定量可能な検査水は、特に限定されるものではないが、通常は工場排水や生活排水等の窒素の排出規制が設けられている排水の他、海洋水、湖沼水、河川水および地下水等の天然水であり、窒素化合物を含む可能性のあるものである。但し、本発明の定量方法は、窒素化合物を含まない検査水に対して適用することも可能である。検査水の全窒素を定量する際には、先ず、所定量の検査水を採取し、この検査水に含まれる窒素化合物を酸化分解することで当該窒素化合物を構成する窒素を硝酸イオンへ変換するための前処理をする工程1。なお、検査水に当初から含まれる亜硝酸イオンは、この工程において併せて酸化され、一度硝酸イオンへ変換される。また、検査水に当初から含まれる硝酸イオンは、この工程において、そのまま硝酸イオンとして維持される。この工程では、ペルオキソ二硫酸のアルカリ金属塩を用い、アルカリ性下において窒素化合物を酸化分解する。ペルオキソ二硫酸アルカリ金属塩を用いた方法は、例えば、日本工業規格JISK0102工場排水試験方法2008の45.2に挙げられた紫外吸光光度法において、窒素化合物を硝酸イオンへ変換するための方法として記載されており、この記載に従って実行することができる。但し、この紫外吸光光度法による方法は、ペルオキソ二硫酸のアルカリ金属塩を添加した検査水をアルカリ性下において120°Cで30分間加熱することから、その操作において蒸気滅菌装置やオートクレーブのような耐圧反応器を用いる必要がある。このため、当該方法は、本発明の定量方法の自動化を想定したとき、自動化装置の複雑化を招くことになることから支障がある。そこで、本発明の定量方法は、自動化を想定したとき、上述の紫外吸光光度法において規定の方法を、耐圧容器を用いずに実行できるように改変するのが好ましい。具体的には、工程1では、検査水にペルオキソ二硫酸のアルカリ金属塩を添加し、アルカリ性下において、90°Cから検査水が沸騰する温度まで好ましくは100°C以下の温度範囲で加熱するのが好ましい。ここで用いられるペルオキソ二硫酸アルカリ金属塩は、通常、ペルオキソ二硫酸カリウムまたはペルオキソ二硫酸ナトリウムである。ペルオキソ二硫酸アルカリ金属塩は、通常、水溶液として検査水へ添加するのが好ましい。また、ペルオキソ二硫酸アルカリ金属塩を添加した検査水は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、水酸化カルシウムまたは水酸化バリウムなどのアルカリ性水溶液を別途添加することでアルカリ性に調整することができる。なお、ペルオキソ二硫酸アルカリ金属塩は、このようなアルカリ性水溶液の溶液として検査水へ添加することもでき、この場合、検査水は、アルカリ性水溶液を別途添加しなくてもアルカリ性に調整され得る。ペルオキソ二硫酸アルカリ金属塩は、検査水に含まれる窒素化合物の全量を十分に酸化分解可能なように添加量を設定するのが好ましいが、あまり過剰に添加すると、未反応のペルオキソ二硫酸アルカリ金属塩が検査水に残留し、それが後記する工程2において誤発色を引き起こす可能性がある。特に、この工程において90°Cから検査水が沸騰する温度まで好ましくは100°C以下の温度範囲で検査水を加熱する場合、未反応のペルオキソ二硫酸アルカリ金属塩が検査水に残留しやすい。このため、アルカリ性に調整後の検査水におけるペルオキソ二硫酸アルカリ金属塩の濃度は、通常、0.5~20g/Lになるよう設定するのが好ましく、1~10g/Lになるよう設定するのがより好ましい。この工程での加熱時間は、検査水に含まれる窒素化合物の全量を十分に酸化分解できかつぺルオキソ二硫酸アルカリ金属塩が一部未反応のまま残留することのないよう全量が消費または自己分解により消滅するように設定するのが好ましく、通常、30~120分が好ましい。なお、ペルオキソ二硫酸アルカリ金属塩を消滅させるためにこの工程での加熱時間が長くなる場合、検査水に含まれる窒素化合物の酸化分解に十分な時間加熱した後、検査水に対して紫外線照射等の処理をすることで残留するペルオキソ二硫酸アルカリ金属塩を酸化分解することもできる。この場合、この工程での加熱時間を短縮することができる。次に、工程1を経た検査水に対し、塩化バナジウムIIIとジアゾ化試薬とを添加し、酸性下において反応させる工程2。ここでは、検査水に含まれる硝酸イオン、すなわち、検査水に当初から含まれる硝酸イオンおよび工程1において生成した硝酸イオンに対して塩化バナジウムIIIが酸性下で還元剤として作用し、硝酸イオンを還元して亜硝酸イオンへ変換する。また、生成した亜硝酸イオンは、酸性下でジアゾ化試薬と反応し、ジアゾニウム塩を生成する。ここで、塩化バナジウムIIIによる硝酸イオンの還元は、ジアゾ化試薬の存在下においても阻害されず、安定に進行し得る。また、ジアゾ化試薬によるジアゾニウム塩の生成反応は、塩化バナジウムIIIの存在下においても阻害されず、安定に進行し得る。なお、塩化バナジウムIIIにより酸性下で硝酸イオンを亜硝酸イオンに還元可能なことは、例えば、次の非特許文献2において知られている。郷康弘、分析化学、55巻、4号、259-262頁、2006年検査水に対する塩化バナジウムIIIの添加量は、通常、検査水に含まれる硝酸イオンの全量を亜硝酸イオンへ還元可能なように設定するのが好ましく、通常、この工程において所要の薬剤を添加した後の検査水における濃度が0.1~2.0g/Lになるよう設定するのが好ましく、0.2~1.0g/Lになるよう設定するのがより好ましい。この工程で用いられるジアゾ化試薬は、亜硝酸イオンとの反応によりジアゾニウム塩を生成可能なもの、特に、検査水への添加によりそれ自体で検査水を着色させることができ、同時に、生成したジアゾニウム塩により検査水を着色させることができるものである。このようなジアゾ化試薬としては、通常、ケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物の群および3-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オン骨格含有化合物の群からなる群から選ばれた化合物を用いることができる。芳香族第一級アミン化合物の群は、オルト位若しくはパラ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第1群と、メタ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第2群とからなる。第1群は、例えば、1-アミノアントラキノン、2-ニトロアニリン、4-ニトロアニリン-2-スルホン酸ナトリウム、p-ニトロアニリン、2-アミノ-3-ヒドロキシアントラキノン、1-アミノ-4-ブロモアントラキノン-2-スルホン酸ナトリウム、2-アミノ-2’-フルオロ-5-ブロモベンゾフェノン、4-アミノベンゾフェノン、4-フルオロ-2-ニトロアニリン、5-アミノ-2-ニトロベンゾトリフルオリド、4-アミノ-3-ニトロベンゾフェノン、2-アミノ-5-ニトロベンゾフェノンおよび4,6-ジニトロ-o-トルイジンなどを含むが、1-アミノアントラキノン、2-ニトロアニリン、4-ニトロアニリン-2-スルホン酸ナトリウム、p-ニトロアニリン、2-アミノ-3-ヒドロキシアントラキノンおよび1-アミノ-4-ブロモアントラキノン-2-スルホン酸ナトリウムからなるものが特に好ましい。一方、第2群は、例えば、3’-アミノアセトフェノン、3-アミノベンゾフェノン、2-アミノ-9-フルオレノン、m-ニトロアニリンおよび2-クロロ-5-ニトロアニリンなどを含むが、3’-アミノアセトフェノンおよび3-アミノベンゾフェノンからなるものが好ましい。3-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オン骨格含有化合物の群は、例えば、3-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オン、2-アミノ-3-クロロ-1,4-ナフトキノンおよび3-アミノ-5,5-ジメチル-2-シクロヘキセン-1-オンなどを含むが、3-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オンおよび2-アミノ-3-クロロ-1,4-ナフトキノンからなるものが特に好ましい。ジアゾ化試薬は、通常、溶媒に溶解した溶液として検査水へ添加するのが好ましい。ジアゾ化試薬を溶解するために用いられる溶媒としては、例えば、逆浸透膜等により膜処理することで得られる純水、蒸留水およびイオン交換水等の精製水、ジメチルスルホキシド、N,N-ジメチルホルムアミド、アセトン並びにメタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ポリエチレングリコールおよびグリセリン等のアルコール類などが挙げられる。検査水へのジアゾ化試薬の添加量は、検査水に含まれる亜硝酸イオンの全量がジアゾニウム塩の生成に関与するのに十分な量に設定する必要があり、検査水に含まれるものと想定される亜硝酸イオンと少なくとも等モルに設定する必要がある。この点に関し、検査水中に含まれる窒素化合物から硝酸イオンを経て誘導される亜硝酸イオンを考慮すると、検査水に含まれる亜硝酸イオン濃度は一般的に0~35mg[NO2-]/L程度の範囲と想定されることから、例えば、検査水の量を2.0mLとした場合のジアゾ化試薬の添加量は、通常、1.5μmol以上になるよう設定するのが好ましい。但し、検査水の亜硝酸イオン濃度が35mg[NO2-]/Lよりも大幅に低いことが判明している、または、想定されるような場合、ジアゾ化試薬の添加量は1.5μmol未満であってもよい。この工程において、塩化バナジウムIIIによる硝酸イオンの還元反応およびジアゾ化試薬と亜硝酸イオンとの反応によるジアゾニウム塩の生成反応は、酸性下で加熱することにより進行させる。具体的には、全窒素の定量結果に影響する可能性がある窒素元素を含まずかつ本工程での反応を阻害しない酸を検査水に添加することで検査水を酸性に調整し、その環境下で反応を進行させる。酸としては、例えば、塩酸および硫酸などの無機酸、酢酸、ベンゼンスルホン酸、クエン酸およびコハク酸などの有機酸並びにこれらの水溶液を用いることができるが、通常は塩酸水溶液希塩酸または硫酸水溶液希硫酸を用いるのが好ましい。検査水に対する酸の添加量は、この工程での反応が円滑かつ安定に進行するように検査水を酸性に調整可能なように設定するのが好ましく、通常、検査水のpHが3以下になるように設定するのが好ましく、0~1.5になるよう設定するのが特に好ましい。ここで、酸は、塩化バナジウムIIIの溶媒として検査水へ添加するのが好ましい。すなわち、検査水は、塩化バナジウムIIIの酸溶液を添加することで酸性に調整するのが好ましい。この際、酸としては、希塩酸または希硫酸を用いるのが特に好ましい。工程1の終了後の検査水がアルカリ性の場合、そこに塩化バナジウムIIIを添加すると水酸化バナジウムとして析出してしまうことになるが、塩化バナジウムIIIを酸溶液として添加すると、このような問題が発生せず、添加した塩化バナジウムIIIは硝酸イオンを安定に還元することができる。なお、塩化バナジウムIIIは、既述の精製水を用いて調製した水溶液として検査水へ添加することもできるが、この場合、検査水に対する酸の添加時期は、塩化バナジウムIIIの水溶液を添加する前が好ましい。このようにすることで、上述のような水酸化バナジウムの析出を抑えることができる。但し、工程1において用いるペルオキソ二硫酸アルカリ金属塩は、自己分解により酸性化合物になると、それが検査水のpHを酸性側へ移行させる作用を有する。したがって、工程1においてアルカリ性水溶液およびペルオキソ二硫酸アルカリ金属塩の使用量を調整することで、工程1の終了時の検査水が中性~酸性になるよう制御すれば、検査水に対して塩化バナジウムIIIの水溶液を添加してから酸を添加することもできる。なお、ジアゾ化試薬の添加時期は、検査水に対する塩化バナジウムIIIの酸溶液または酸の添加前であってもよいし、添加後であってもよく、特に限定されない。この工程での反応のための加熱温度は、通常、60~100°Cに設定するのが好ましい。加熱温度が60°C未満の場合は、検査水に含まれる硝酸イオンが亜硝酸イオンに還元されにくい場合がある。反応に要する時間は、加熱温度により変動し、加熱温度を高めるほどに短縮することができるが、通常、5~120分程度である。この工程において、硝酸イオンの還元により生成した亜硝酸イオンは、酸により調整された酸性下においてジアゾ化試薬と反応し、ジアゾニウム塩を生成する。これにより、ジアゾ化試薬の添加により着色した検査水は、ジアゾ化試薬が亜硝酸イオンとの反応により消費されることでジアゾ化試薬自体による着色が退色し、同時に、生成したジアゾニウム塩による着色を呈するようになる。次に、工程2を経た検査水の吸光度を測定する工程3。ここで測定する吸光度は、検査水に残留しているジアゾ化試薬が検査水に付与している着色の吸光度以下、吸光度Aと称することがある。、または、ジアゾ化試薬の反応により生成するジアゾニウム塩が検査水に付与している着色の吸光度以下、吸光度Bと称することがある。である。吸光度Aは、ジアゾ化試薬そのものが検査水に付与する着色についてのものであり、この着色はジアゾ化試薬が検査水中の亜硝酸イオンとの反応で消費されるに従って着色強度が低下する。このため、吸光度Aと検査水におけるジアゾ化試薬濃度および亜硝酸イオン濃度とは相関性を有する。吸光度Aの測定波長は、ジアゾ化試薬が検査水に付与する着色の極大吸収波長またはその付近の波長であり、使用するジアゾ化試薬の種類により異なるため特定されるものではないが、通常は250~600nmの範囲にある。一方、吸光度Bは、反応により生成したジアゾニウム塩が検査水に付与する着色についてのものであり、この着色は反応の進行によりジアゾニウム塩濃度が高まるに従って着色強度が高まる。そして、ジアゾニウム塩濃度は、検査水の亜硝酸イオン濃度に応じて高まることから、吸光度Bと、工程1を経た検査水における亜硝酸イオン濃度とは相関性を有する。吸光度Bの測定波長は、生成するジアゾニウム塩が検査水に付与する着色の極大吸収波長またはその付近の波長であり、生成するジアゾニウム塩の種類すなわち使用するジアゾ化試薬の種類により異なるため特定されるものではないが、通常は250~600nmの範囲にある。この工程では、吸光度Aまたは吸光度Bと亜硝酸イオン濃度との関係を予め調べて作成しておいた検量線に基づいて、吸光度Aまたは吸光度Bの測定値から検査水の亜硝酸イオン量を判定する。ここで作成する検量線は、亜硝酸イオン濃度と吸光度Aまたは吸光度Bとの間の直線関係が比較的高濃度の亜硝酸イオン濃度の範囲まで良好に成立することから、検査水に含まれる亜硝酸イオンの定量可能範囲がJIS法等の従来法で可能な範囲よりも広い0~53mg[NO2-]/Lの範囲になる。検査水の全窒素濃度は、工程3で得られた亜硝酸イオンの定量結果から換算することで求めることができる。工程3での亜硝酸イオンの上述の定量可能範囲は、全窒素換算で0~16mg[N]/Lの広範囲に相当する。したがって、本発明の定量方法は、窒素化合物を含む検査水の全窒素濃度を測定するための方法として有効である。なお、工程3では、亜硝酸イオンの定量結果の信頼性を高めるために、吸光度Aと吸光度Bとの両方を測定し、各吸光度に基づいて検査水の亜硝酸イオン量を別々に判定することもできる。この場合、吸光度Aによる判定結果と吸光度Bによる判定結果とが実質的に一致していれば、定量結果の信頼性が高いものと判断することができる。本発明の定量方法は、工程3において吸光度Aを測定する場合、工程3の前に、工程2を経た検査水のpHが7より大きくなるよう調整する工程工程3’を含むのが好ましい。吸光度Aは、検査水のpHが7以下のとき、pH値により数値が異なる場合があることから亜硝酸イオンの定量結果に多少の誤差を生じさせる可能性があるが、このような調整をすると、吸光度AはpHの影響による測定誤差が小さくなるため、亜硝酸イオン濃度の定量精度をより高めることができる。検査水のpHは、通常、工程2の終了後の検査水へアルカリ金属の水酸化物、炭酸塩若しくは炭酸水素塩などのアルカリ化合物またはその水溶液を添加することで調整することができるが、通常は水酸化ナトリウム水溶液を添加することで調整するのが好ましい。本発明の定量方法の好ましい一形態形態1では、工程2においてオルト位若しくはパラ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第1群からジアゾ化試薬を選択し、工程3において吸光度Aを測定する。この場合、ジアゾ化試薬が検査水中の亜硝酸イオンとの反応で消費されやすく、ジアゾ化試薬による着色強度が低下しやすいため、亜硝酸イオン濃度の定量精度を高めやすい。但し、この形態の工程2で生成したジアゾニウム塩は、それを形成するジアゾニウムイオンのジアゾニオ基-N2が容易に分解され、その基がヒドロキシル基-OHに変換された化合物以下、変換化合物という場合がある。を生成する傾向にある。特に、工程2は、加熱下で実行されるため、このような変換化合物の生成が進行しやすい。例えば、ジアゾ化試薬として1-アミノアントラキノンを用いた場合、そのジアゾニウムイオンのジアゾニオ基がヒドロキシル基に変換され、変換化合物として1-ヒドロキシアントラキノンが生成する。生成した変換化合物のヒドロキシル基は、ジアゾ化試薬のアミノ基-NH2と同様に非共有電子対を有することから、それが結合している芳香族構造部分と共役系を形成する。このため、変換化合物は、ジアゾ化試薬の極大吸収波長の近接波長に極大吸収波長を有する別の色素として検査水を着色し、工程3において測定する吸光度に影響する可能性がある。例えば、1-アミノアントラキノンによる着色の吸光スペクトルでは480nm付近が極大吸収波長になるが、変換化合物である1-ヒドロキシアントラキノンによる着色の吸光スペクトルでは極大吸収波長が400nm付近になる。このため、工程3において、発光ダイオードのような光源を用いて吸光度を測定するとき、当該光源からは波長幅を持った光が照射されることになるため、目的の吸光度の測定において変換化合物による検査水の着色が障害になりやすい。そこで、この形態の工程2では、検査水へ塩化バナジウムIIIおよびジアゾ化試薬とともに、アルコール系化合物並びに次亜りん酸およびその塩からなる化合物群から選択された少なくとも1種の化合物以下、添加剤という場合がある。を添加するのが好ましい。このような添加剤を添加した場合、工程2において生成したジアゾニウム塩のジアゾニウムイオンは、ジアゾニオ基が水素原子へ速やかに還元されることで変換化合物とは別の化合物に変換される。例えば、ジアゾ化試薬が1-アミノアントラキノンの場合、この工程では、1-ヒドロキシアントラキノンの生成が抑えられ、代わりにアントラキノンが生成する。この別の化合物は、ジアゾニオ基の還元による水素原子が芳香族構造部分の共役系に関与しないことから検査水を着色しにくく、工程3での吸光度の測定に影響しにくい。添加剤として利用可能なアルコール系化合物としては、例えば、エタノール、メタノール、プロパノール、ブタノール、ポリエチレングリコールおよびグリセリンなどを挙げることができる。また、次亜りん酸塩としては、次亜りん酸ナトリウム、次亜りん酸カリウムおよび次亜りん酸カルシウム並びにこれら次亜りん酸塩の水和物などを挙げることができる。添加剤は、通常、溶媒に溶解した溶液として検査水に添加するのが好ましい。溶媒としては、例えば、既述の精製水およびジメチルスルホキシドなどが挙げられる。また、添加剤は、検査水を酸性に設定するために用いられる酸やその水溶液の溶液として検査水へ添加することもできる。さらに、ジアゾ化試薬をアルコール類に溶解した溶液として検査水へ添加する場合、溶媒として用いるアルコール類を添加剤として用いることもできる。検査水への添加剤の添加量は、工程2での反応により生成するジアゾニウム塩のジアゾニウムイオンの全量を還元するのに十分な量に設定するのが好ましく、通常、検査水へ添加するジアゾ化試薬量と少なくとも等モルになるよう設定するのが好ましい。本発明の定量方法のさらに他の好ましい一形態形態2では、工程2においてメタ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第2群からジアゾ化試薬を選択し、かつ、工程3において吸光度Aを測定する。また、本発明の定量方法のさらに他の好ましい一形態形態3では、工程2において3-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オン骨格含有化合物の群からジアゾ化試薬を選択し、工程3において吸光度Aを測定する。これらの場合においても、ジアゾ化試薬が検査水中の亜硝酸イオンとの反応で消費されやすく、ジアゾ化試薬による着色強度が低下しやすいため、亜硝酸イオン濃度の定量精度を高めやすい。なお、形態1~3においては、pHの影響による吸光度Aの測定誤差を抑えるために、工程3の前に、工程2を経た検査水のpHが7よりも大きくなるよう設定するのが特に好ましい。本発明の定量方法のさらに他の好ましい一形態では、工程2においてメタ位にケトン基若しくはニトロ基を有する芳香族第一級アミン化合物からなる第2群からジアゾ化試薬を選択し、工程3において吸光度Bを測定する。この場合、第2群のジアゾ化試薬と検査水中の亜硝酸イオンとの反応が進行しやすく、生成するジアゾニウム塩による着色強度が高まりやすいため、亜硝酸イオン濃度の定量精度を高めやすい。本発明の定量方法において用いられる各種の水溶液は、既述の精製水を用いて調製することが明記されている以外のものについても、既述の精製水を用いて調製したものを用いるのが好ましい。試薬および分光光度計以下の実施例等で用いた試薬および分光光度計は次のものである。亜硝酸性窒素標準液イオンクロマトグラフ用:和光純薬工業株式会社コード147-0634110重量塩酸:和光純薬工業株式会社コード085-075351mol/L塩酸:和光純薬工業株式会社コード083-0109510w/v水酸化ナトリウム溶液:和光純薬工業株式会社コード191-115551mol/L水酸化ナトリウム溶液:和光純薬工業株式会社コード192-021750.2mol/L水酸化ナトリウム水溶液:上記の1mol/L水酸化ナトリウム溶液を蒸留水で5倍に希釈したもの。塩化バナジウムIII:シグマアルドリッチジャパン株式会社コード208272L-グルタミン酸:和光純薬工業株式会社コード074-00505硫酸アンモニウム:和光純薬工業株式会社コード019-03435ペルオキソ二硫酸カリウム:和光純薬工業株式会社コード169-11891水酸化ナトリウム-ペルオキソ二硫酸カリウム溶液:日本工業規格JISK0102工場排水試験方法2008の45.2紫外吸光光度法、a試薬、4の記載に従って調製したもの。ここで用いた水酸化ナトリウムは、和光純薬工業株式会社製の窒素測定用コード191-08625であり、また、ペルオキソ二硫酸カリウムは上記のものである。次亜りん酸ナトリウム一水和物:和光純薬工業株式会社コード193-022251-プロパノール:和光純薬工業株式会社コード162-04816ジメチルスルホキシド試薬特級:和光純薬工業株式会社コード043-072161-アミノアントラキノン:東京化成工業株式会社コードA05902-ニトロアニリン:東京化成工業株式会社コードN0118p-ニトロアニリン:東京化成工業株式会社コードN01194-ニトロアニリン-2-スルホン酸ナトリウム:東京化成工業株式会社コードA03752-アミノ-3-ヒドロキシアントラキノン:東京化成工業株式会社コードA03153’-アミノアセトフェノン:東京化成工業株式会社コードA02493-アミノベンゾフェノン:東京化成工業株式会社コードA18993-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オン:東京化成工業株式会社コードA19362-アミノ-3-クロロ-1,4-ナフトキノン:東京化成工業株式会社コードA12881-アミノ-4-ブロモアントラキノン-2-スルホン酸ナトリウム:東京化成工業株式会社コードA0279スルファニルアミド試薬特級:和光純薬工業株式会社コード191-04502ナフチルエチレンジアミン窒素酸化物測定用:和光純薬工業株式会社コード147-04141分光光度計:株式会社島津製作所の商品名UV-1600PC実施例1亜硝酸イオン溶液の調製亜硝酸イオン濃度が0.0、4.0、8.0および12.0mg[N]/Lの4種類の亜硝酸イオン溶液を用意した。亜硝酸イオン濃度が0mg[N]/Lの亜硝酸イオン溶液は蒸留水をそのまま用い、また、他の亜硝酸イオン溶液は亜硝酸性窒素標準液を蒸留水で希釈することで亜硝酸イオン濃度を調整した。検量線の作成用意した4種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ2.5mLに対し、1-アミノアントラキノンの1-プロパノール溶液濃度0.5g/L1.0mL、塩化バナジウムIIIの10重量塩酸溶液塩化バナジウムIII濃度1.5g/L1.0mLおよび蒸留水0.5mLを添加し、pHを0.3に設定した。この亜硝酸イオン溶液を60°Cで30分間加熱した後、反応液の350~600nmの吸光スペクトルを測定した。結果を図1に示す。次に、測定した吸光スペクトルから、1-アミノアントラキノンによる発色波長である480nmの吸光度吸光度Aを抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。各濃度の亜硝酸イオン溶液の吸光度を表1に示し、また、表1に基づいて作成した検量線を図2に示す。表1において、吸光度の変化量は、亜硝酸イオン濃度が0.0mg[N]/Lの亜硝酸イオン溶液の吸光度を基準とした場合の変化量減少量である。図2によると、作成した検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~12.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。評価日本工業規格JISK0808水質監視用全窒素自動計測器2008の6.2.4に記載された、L-グルタミン酸および硫酸アンモニウムを窒素換算濃度mg[N]/Lで同量ずつ含む標準試料原液を調製し、これを希釈することで全窒素濃度が4.0および12.0mg[N]/Lの2種類の検査水試料を用意した。各検査水試料に含まれるL-グルタミン酸および硫酸アンモニウムを日本工業規格JISK0102工場排水試験方法2008の45.2紫外吸光光度法に記載の方法により酸化分解した。より具体的には、同法のc操作の1~4に記載の方法により、水酸化ナトリウム-ペルオキソ二硫酸カリウム溶液を用い、各検査水試料のL-グルタミン酸および硫酸アンモニウムを120°C、30分の加熱条件で酸化分解した。次に、酸化分解処理を施した各検査水試料3.0mLに対し、検量線の作成において用いたものと同じ1-アミノアントラキノンの1-プロパノール溶液1.0mLと塩化バナジウムIIIの10重量塩酸溶液1.0mLとを添加し、pHを0.3に設定した。そして、各検査水試料を60°Cで30分間加熱した後、反応液について480nmの吸光度を測定し、この吸光度から作成した検量線に基づいて各検査水試料の亜硝酸イオン濃度を判定した。結果を表2に示す。実施例2亜硝酸イオン溶液の調製亜硝酸イオン濃度が0.0、2.0、4.0および6.0mg[N]/Lの4種類の亜硝酸イオン溶液を実施例1と同様の方法で用意した。検量線の作成用意した4種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ2.0mLに対し、2-ニトロアニリンのジメチルスルホキシド溶液濃度0.3g/L0.5mL、塩化バナジウムIIIの1mol/L塩酸溶液塩化バナジウムIII濃度10.0g/L0.2mLおよび蒸留水0.4mLを添加し、pHを1.2に設定した。この亜硝酸イオン溶液を95°Cで20分間加熱した後、反応液の315~515nmの吸光スペクトルを測定した。結果を図3に示す。次に、測定した吸光スペクトルから、2-ニトロアニリンによる発色波長である415nmの吸光度吸光度Aを抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。各濃度の亜硝酸イオン溶液の吸光度を表3に示し、また、表3に基づいて作成した検量線を図4に示す。表3に表示した吸光度の変化量は、表1と同様のものである。図4によると、作成した検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~6.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。評価全窒素濃度が2.0および6.0mg[N]/Lの2種類の検査水試料を実施例1と同様の方法で用意した。各検査水試料を実施例1と同様の方法で酸化分解処理した。そして、酸化分解処理後の各検査水試料2.4mLに対し、検量線の作成において用いたものと同じ2-ニトロアニリンのジメチルスルホキシド溶液0.5mLと塩化バナジウムIIIの1mol/L塩酸溶液0.2mLとを添加し、pHを1.2に設定した。そして、各検査水試料を95°Cで20分間加熱した後、反応液について415nmの吸光度を測定し、この吸光度から作成した検量線に基づいて各検査水試料の亜硝酸イオン濃度を判定した。結果を表4に示す。実施例3亜硝酸イオン溶液の調製亜硝酸イオン濃度が0.0、2.0、4.0および6.0mg[N]/Lの4種類の亜硝酸イオン溶液を実施例1と同様の方法で用意した。検量線の作成用意した4種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ2.0mLに対し、p-ニトロアニリンのジメチルスルホキシド溶液濃度0.3g/L0.4mL、塩化バナジウムIIIの1mol/L塩酸溶液塩化バナジウムIII濃度5.0g/L0.6mLおよび蒸留水0.4mLを添加し、pHを0.8に設定した。この亜硝酸イオン溶液を60°Cで30分間加熱した後、反応液の280~480nmの吸光スペクトルを測定した。結果を図5に示す。次に、測定した吸光スペクトルから、p-ニトロアニリンによる発色波長である380nmの吸光度吸光度Aを抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。各濃度の亜硝酸イオン溶液の吸光度を表5に示し、また、表5に基づいて作成した検量線を図6に示す。表5に表示した吸光度の変化量は、表1と同様のものである。図6によると、作成した検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~6.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。評価全窒素濃度が2.0および6.0mg[N]/Lの2種類の検査水試料を実施例1と同様にして用意した。各検査水試料を実施例1と同様の方法で酸化分解処理した。そして、酸化分解処理後の各検査水試料2.4mLに対し、検量線の作成において用いたものと同じp-ニトロアニリンのジメチルスルホキシド溶液0.4mLと塩化バナジウムIIIの1mol/L塩酸溶液0.6mLとを添加し、pHを0.8に設定した。そして、各検査水試料を60°Cで30分間加熱した後、反応液について380nmの吸光度を測定し、この吸光度から作成した検量線に基づいて各検査水試料の亜硝酸イオン濃度を判定した。結果を表6に示す。実施例4亜硝酸イオン溶液の調製亜硝酸イオン濃度が0.0、4.0、8.0および12.0mg[N]/Lの4種類の亜硝酸イオン溶液を実施例1と同様の方法で用意した。検量線の作成用意した4種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ2.5mLに対し、1-アミノアントラキノンのジメチルスルホキシド溶液濃度0.5g/L1.0mL、塩化バナジウムIIIの10重量塩酸溶液塩化バナジウムIII濃度10.0g/L0.15mL、次亜りん酸ナトリウム一水和物の10重量塩酸溶液水分子を含めた次亜りん酸ナトリウム一水和物濃度5g/L1.0mLおよび蒸留水0.5mLを添加し、pHを0.2に設定した。pHが上記のように設定された亜硝酸イオン溶液を95°Cで10分間加熱した後、反応液の350~600nmの吸光スペクトルを測定した。結果を図7に示す。次に、測定した吸光スペクトルから、1-アミノアントラキノンによる発色波長である480nmの吸光度吸光度Aを抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。各濃度の亜硝酸イオン溶液の吸光度を表7に示し、また、表7に基づいて作成した検量線を図8に示す。表7に表示した吸光度の変化量は、表1と同様のものである。図8によると、作成した検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~12.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。評価全窒素濃度が4.0および12.0mg[N]/Lの2種類の検査水試料を実施例1と同様にして用意した。0.2mol/L水酸化ナトリウム水溶液にペルオキソ二硫酸カリウムを溶解し、ペルオキソ二硫酸カリウム濃度が30g/Lの溶液を調製した。各検査水試料2.5mLに対して調製した溶液を0.5mLずつ添加し、各検査水試料を95°Cで60分間加熱した。続いて、検量線の作成において用いたものと同じ1-アミノアントラキノンのジメチルスルホキシド溶液1.0mL、塩化バナジウムIIIの10重量塩酸溶液0.15mLおよび次亜りん酸ナトリウム一水和物の10重量塩酸溶液1.0mLを添加し、pHを0.2に設定した。そして、各検査水試料を95°Cで10分間加熱した後、反応液について480nmの吸光度を測定し、この吸光度から作成した検量線に基づいて各検査水試料の亜硝酸イオン濃度を判定した。結果を表8に示す。参考例1[参考例1A]亜硝酸イオン溶液の調製亜硝酸イオン濃度が0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0および12.0mg[N]/Lの7種類の亜硝酸イオン溶液を実施例1と同様の方法で用意した。検量線の作成用意した7種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ2.0mLに対して1-アミノアントラキノンの1-プロパノール溶液濃度0.2g/L2.0mLを添加し、さらに10重量塩酸0.5mLを添加してpHを0.6に設定した。この亜硝酸イオン溶液を25°Cで15分間放置して反応させた後、反応液の282~600nmの吸光スペクトルを測定した。結果を図9に示す。次に、測定した吸光スペクトルから1-アミノアントラキノンによる発色波長である480nmの吸光度吸光度Aを抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。また、測定した吸光スペクトルから反応により生成したジアゾニウム塩による発色波長である330nmの吸光度吸光度Bを抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図10に示す。図10によると、作成した2種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~12.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1B]pHを0.6に調整した亜硝酸イオン溶液を25°Cで15分間放置して反応させた後、反応液に10w/v水酸化ナトリウム溶液0.6mLをさらに加えてpHを12.4に調整してから吸光スペクトルを測定した点を除いて参考例1Aと同様に操作し、2種類の検量線を作成した。吸光スペクトルの測定結果を図11に示し、検量線を図12に示す。図12によると、作成した2種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~12.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1C]亜硝酸イオン溶液の調製亜硝酸イオン濃度が0.0、2.0、4.0および6.0mg[N]/Lの4種類の亜硝酸イオン溶液を実施例1と同様の方法で用意した。検量線の作成用意した4種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ2.0mLに対して2-ニトロアニリンのジメチルスルホキシド溶液濃度0.3g/L0.5mLを添加し、さらに1mol/L塩酸0.2mLを添加してpHを1.2に設定した。この亜硝酸イオン溶液を25°Cで10分間放置して反応させた後、反応液の240~500nmの吸光スペクトルを測定した。結果を図13に示す。次に、測定した吸光スペクトルから2-ニトロアニリンによる発色波長である410nmの吸光度吸光度Aを抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。また、測定した吸光スペクトルから反応により生成したジアゾニウム塩による発色波長である280nmの吸光度吸光度Bを抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図14に示す。図14によると、作成した2種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~6.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1D]pHを1.2に調整した亜硝酸イオン溶液を25°Cで10分間放置して反応させた後、反応液に1mol/L水酸化ナトリウム溶液0.4mLをさらに加えてpHを12.7に調整してから吸光スペクトルを測定した点を除いて参考例1Cと同様に操作し、2種類の検量線を作成した。吸光スペクトルの測定結果を図15に示し、検量線を図16に示す。図16によると、作成した2種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~6.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1E]亜硝酸イオン溶液の調製亜硝酸イオン濃度が0.0、0.5、1.0、1.5および2.0mg[N]/Lの5種類の亜硝酸イオン溶液を実施例1と同様の方法で用意した。検量線の作成用意した5種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ2.0mLに対して4-ニトロアニリン-2-スルホン酸ナトリウムの水溶液濃度0.6g/L0.2mLを添加し、さらに1mol/L塩酸0.2mLを添加してpHを1.1に設定した。この亜硝酸イオン溶液を25°Cで10分間放置して反応させた後、この反応液について4-ニトロアニリン-2-スルホン酸ナトリウムによる発色波長である370nmの吸光度吸光度Aを測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。また、反応液について、生成したジアゾニウム塩による発色波長である260nmの吸光度吸光度Bを測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図17示す。図17によると、作成した2種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~2.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1F]pHを1.1に調整した亜硝酸イオン溶液を25°Cで10分間放置して反応させた後、反応液に1mol/L水酸化ナトリウム溶液0.4mLをさらに加えてpHを12.9に調整してから4-ニトロアニリン-2-スルホン酸ナトリウムによる発色波長である370nmの吸光度吸光度Aおよび生成したジアゾニウム塩による発色波長である260nmの吸光度吸光度Bを測定した点を除いて参考例1Eと同様に操作し、2種類の検量線を作成した。結果を図18に示す。図18によると、作成した2種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~2.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1G]亜硝酸イオン溶液の調製亜硝酸イオン濃度が0.0、1.0、2.0、3.0、4.0および5.0mg[N]/Lの6種類の亜硝酸イオン溶液を実施例1と同様の方法で用意した。検量線の作成用意した6種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ2.0mLに対してp-ニトロアニリンのジメチルスルホキシド溶液濃度0.33g/L0.3mLを添加し、さらに1mol/L塩酸0.5mLを添加してpHを0.7に設定した。この亜硝酸イオン溶液を25°Cで5分間放置して反応させた後、この反応液についてp-ニトロアニリンによる発色波長である380nmの吸光度吸光度Aを測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。また、反応液について、生成したジアゾニウム塩による発色波長である310nmの吸光度吸光度Bを測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図19に示す。図19によると、作成した2種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~5.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1H]pHを0.7に調整した亜硝酸イオン溶液を25°Cで5分間放置して反応させた後、反応液に1mol/L水酸化ナトリウム溶液0.7mLをさらに加えてpHを12.8に調整してからp-ニトロアニリンによる発色波長である380nmの吸光度吸光度Aを測定した点を除いて参考例Gと同様に操作し、検量線を作成した。結果を図20に示す。図20によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~5.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1I]亜硝酸イオン溶液の調製亜硝酸イオン濃度が0.0、4.0、8.0、12.0および16.0mg[N]/Lの5種類の亜硝酸イオン溶液を実施例1と同様の方法で用意した。検量線の作成用意した5種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ2.5mLに対して2-アミノ-3-ヒドロキシアントラキノンのジメチルスルホキシド溶液濃度0.5g/L1.5mLを添加し、さらに1mol/L塩酸0.2mLを添加してpHを1.3に設定した。この亜硝酸イオン溶液を25°Cで5分間放置して反応させた後、この反応液について2-アミノ-3-ヒドロキシアントラキノンによる発色波長である520nmの吸光度吸光度Aを測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。また、反応液について、生成したジアゾニウム塩による発色波長である460nmの吸光度吸光度Bを測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図21に示す。図21によると、作成した2種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~16.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1J]pHを1.3に調整した亜硝酸イオン溶液を25°Cで5分間放置して反応させた後、反応液に1mol/L水酸化ナトリウム溶液0.5mLをさらに加えてpHを12.8に調整してから2-アミノ-3-ヒドロキシアントラキノンによる発色波長である560nmの吸光度吸光度Aおよび生成したジアゾニウム塩による発色波長である520nmの吸光度吸光度Bを測定した点を除いて参考例1Iと同様に操作し、2種類の検量線を作成した。結果を図22に示す。図22によると、作成した2種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~16.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1K]亜硝酸イオン溶液の調製亜硝酸イオン濃度が0.0、0.5、1.0、1.5および2.0mg[N]/Lの5種類の亜硝酸イオン溶液を実施例1と同様の方法で用意した。検量線の作成用意した5種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ2.0mLに対して3-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オンのジメチルスルホキシド溶液濃度0.33g/L0.1mLを添加し、さらに1mol/L塩酸0.2mLを添加してpHを1.1に設定した。この亜硝酸イオン溶液を25°Cで10分間放置して反応させた後、この反応液について3-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オンによる発色波長である280nmの吸光度吸光度Aを測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。結果を図23に示す。図23によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~2.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1L]pHを1.1に調整した亜硝酸イオン溶液を25°Cで10分間放置して反応させた後、反応液に1mol/L水酸化ナトリウム溶液0.4mLをさらに加えてpHを12.9に調整してから3-アミノ-2-シクロヘキセン-1-オンによる発色波長である270nmの吸光度吸光度Aを測定した点を除いて参考例1Kと同様に操作し、検量線を作成した。また、反応液について、生成したジアゾニウム塩による発色波長である320nmの吸光度吸光度Bを測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図24に示す。図24によると、作成した2種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~2.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1M]亜硝酸イオン溶液の調製亜硝酸イオン濃度が0.0、4.0、8.0および12.0mg[N]/Lの4種類の亜硝酸イオン溶液を実施例1と同様の方法で用意した。検量線の作成用意した4種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ2.0mLに対して2-アミノ-3-クロロ-1,4-ナフトキノンのジメチルスルホキシド溶液濃度0.5g/L1.0mLを添加し、さらに1mol/L塩酸0.2mLを添加してpHを1.3に設定した。この亜硝酸イオン溶液を95°Cで30分間放置して反応させた後、300~600nmの吸光スペクトルを測定した。結果を図25に示す。次に、測定した吸光スペクトルから2-アミノ-3-クロロ-1,4-ナフトキノンによる発色波長である460nmの吸光度吸光度Aを抽出し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。結果を図26に示す。図26によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~12.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1N]pHを1.3に調整した亜硝酸イオン溶液を95°Cで30分間放置して反応させた後、反応液に1mol/L水酸化ナトリウム溶液0.5mLをさらに加えてpHを12.9に調整してから吸光スペクトルを測定した点を除いて参考例1Mと同様に操作し、検量線を作成した。検量線は、吸光スペクトルから2-アミノ-3-クロロ-1,4-ナフトキノンによる発色波長である480nmの吸光度吸光度Aと、生成したジアゾニウム塩による発色波長である330nmの吸光度吸光度Bとを抽出し、それぞれの吸光度による2種類のものを作成した。吸光スペクトルの測定結果を図27に示し、検量線を図28に示す。図28によると、作成した2種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~12.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1O]亜硝酸イオン溶液の調製亜硝酸イオン濃度が0.0、2.0、4.0、6.0および8.0mg[N]/Lの5種類の亜硝酸イオン溶液を実施例1と同様の方法で用意した。検量線の作成用意した5種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ2.0mLに対して3’-アミノアセトフェノンのジメチルスルホキシド溶液濃度0.3g/L1.0mLを添加し、さらに1mol/L塩酸0.2mLを添加してpHを1.2に設定した。この亜硝酸イオン溶液を25°Cで10分間放置して反応させた後、この反応液について3’-アミノアセトフェノンと亜硝酸イオンとの反応により生成したジアゾニウム塩による発色波長である330nmの吸光度吸光度Bを測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。結果を図29に示す。図29によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~8.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1P]pHを1.2に調整した亜硝酸イオン溶液を25°Cで10分間放置して反応させた後、反応液に1mol/L水酸化ナトリウム溶液0.4mLをさらに加えてpHを12.7に調整してから3’-アミノアセトフェノン自体による発色波長である330nmの吸光度吸光度Aを測定した点を除いて参考例1Oと同様に操作し、検量線を作成した。また、反応液について、3’-アミノアセトフェノンと亜硝酸イオンとの反応により生成したジアゾニウム塩による発色波長である310nmの吸光度吸光度Bを測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。これらの結果を図30に示す。図30によると、作成した2種類の検量線は、いずれも、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~8.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1Q]亜硝酸イオン溶液の調製亜硝酸イオン濃度が0.0、2.0、4.0、6.0および8.0mg[N]/Lの5種類の亜硝酸イオン溶液を実施例1と同様の方法で用意した。検量線の作成用意した5種類の亜硝酸イオン溶液のそれぞれ2.0mLに対して3-アミノベンゾフェノンのジメチルスルホキシド溶液濃度0.5g/L1.0mLを添加し、さらに1mol/L塩酸0.2mLを添加してpHを1.2に設定した。この亜硝酸イオン溶液を25°Cで10分間放置した後、3-アミノベンゾフェノンと亜硝酸イオンとの反応により生成したジアゾニウム塩による発色波長である330nmの吸光度吸光度Bを測定し、この吸光度から亜硝酸イオン濃度を判定するための検量線を作成した。結果を図31に示す。図31によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~8.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。[参考例1R]pHを1.2に調整した亜硝酸イオン溶液を25°Cで10分間放置して反応させた後、反応液に1mol/L水酸化ナトリウム溶液0.4mLをさらに加えてpHを12.7に調整してから3-アミノベンゾフェノン自体による発色波長である330nmの吸光度吸光度Aを測定した点を除いて参考例1Qと同様に操作し、検量線を作成した。結果を図32に示す。図32によると、この検量線は、少なくとも亜硝酸イオン濃度が0~8.0mg[N]/Lの範囲で高い直線性を示している。比較例1亜硝酸イオン濃度が0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9および1.0mg[N]/Lの11種類の亜硝酸イオン溶液を実施例1と同様の方法で用意した。そして、各亜硝酸イオン溶液に対して日本工業規格JISK0102、工場排水試験方法200843.1.1非特許文献1に規定されたナフチルエチレンジアミン吸光光度法を適用し、540nmの吸光度と亜硝酸イオン濃度との関係を調べた。結果を図33に示す。図33によると、亜硝酸イオン濃度の定量可能範囲は0~0.3mg[N]/Lの範囲に止まり、本法で高濃度の亜硝酸イオンを定量することはできないことがわかる。参考例2[参考例2A]実施例1と同様にして亜硝酸イオン濃度が12.0mg[N]/Lの亜硝酸イオン溶液を調製した。調製した亜硝酸イオン溶液を3本の試験管A、BおよびCのそれぞれに2.5mLずつ入れ、各試験管の亜硝酸イオン溶液へ1-アミノアントラキノンのジメチルスルホキシド溶液濃度0.5g/L1.0mLを加えた。また、10重量塩酸を0.5mLずつ添加し、pHを0.5に設定した。そして、ブロックヒーターを用いて各試験管を下記の条件で加熱した後、360~600nmの吸光スペクトルを測定した。結果を図34に示す。なお、図34には、試験管Aについて、1-アミノアントラキノンのジメチルスルホキシド溶液を添加直後であって加熱前に同様の吸光スペクトルを測定した結果ブランクを併せて示している。試験管A:95°Cで10分間試験管B:95°Cで30分間試験管C:85°Cで10分間図34によると、加熱後の試験管A~Cについての吸光スペクトルは、1-アミノアントラキノンによる発色波長である480nmに近い440~470nm付近において不一致が生じている図34の一点鎖線枠内。これは、480nm付近を中心として発光波長に幅のある発光ダイオードや同様に感度波長に幅のあるフォトトランジスタを用いて1-アミノアントラキノンによる着色の吸光度を測定しようとする場合、加熱温度や加熱時間の変動により吸光度の測定結果が変動することを意味し、亜硝酸イオンの定量結果が不正確になる可能性があることを示している。[参考例2B]1-アミノアントラキノンのジメチルスルホキシド溶液を1-アミノアントラキノンの1-プロパノール溶液濃度0.5g/Lに変更した点を除いて参考例2Aと同様に操作し、360~600nmの吸光スペクトルを測定した。結果を図35に示す。なお、図35には、試験管Aについて、1-アミノアントラキノンの1-プロパノール溶液を添加直後であって加熱前に同様の吸光スペクトルを測定した結果ブランクを併せて示している。図35によると、加熱後の試験管A~Cについての吸光スペクトルは、1-アミノアントラキノンによる発色波長である480nmに近い440~470nm付近においても略一致している図35の一点鎖線枠内。これは、480nm付近を中心として発光波長に幅のある発光ダイオードや同様に感度波長に幅のあるフォトトランジスタを用いて1-アミノアントラキノンによる着色の吸光度を測定しようとする場合においても、加熱温度や加熱時間の変動により吸光度の測定結果が実質的に変動しないことを意味し、信頼性の高い亜硝酸イオンの定量結果が得られることを示している。[参考例2C]亜硝酸イオン濃度が0.0、4.0、8.0および12.0mg[N]/Lの4種類の亜硝酸イオン溶液を実施例1と同様の方法で調製した。調製した4種類の亜硝酸イオン溶液2.0mLを個別の試験管に入れ、各試験管を90°Cのブロックヒーターに装着した。そして、各試験管へ1-アミノ-4-ブロモアントラキノン-2-スルホン酸ナトリウムの水溶液濃度1.0g/L0.8mL、10重量塩酸水溶液0.5mLおよび蒸留水0.5mLを添加し、pHを0.5に設定した。ブロックヒーターによる亜硝酸イオン溶液の加熱温度を95°Cに変更して15分間反応させた後、反応液の360~600nmの吸光スペクトルを測定した。結果を図36に示す。図36によると、亜硝酸イオン溶液の濃度が異なることで420~540nmの範囲での極大吸収波長が変動している。これは、測定された吸光スペクトルにおいて、1-アミノ-4-ブロモアントラキノン-2-スルホン酸ナトリウムによる着色の吸光スペクトルと、1-アミノ-4-ブロモアントラキノン-2-スルホン酸ナトリウムからジアゾニウム塩を経由して生成したヒドロキシ体1-ヒドロキシ-4-ブロモアントラキノン-2-スルホン酸ナトリウムの吸光スペクトルとが融合した状態で現れているためと考えられる。特に、亜硝酸イオン濃度が高いほど極大吸収波長が低波長側へ移動しているのは、亜硝酸イオン濃度が高いためにヒドロキシ体の生成量が相対的に多くなるためと考えられる。[参考例2D]蒸留水0.5mLに替えて水分子を含めた次亜りん酸ナトリウム一水和物濃度を10g/Lに設定した次亜りん酸ナトリウム一水和物水溶液0.5mLを試験管へ加えた点を除いて参考例2Cと同様に操作し、反応液の360~600nmの吸光スペクトルを測定した。結果を図37に示す。図37によると、亜硝酸イオン濃度が異なる場合であっても、亜硫酸イオン濃度が12.0mg[N]/Lの場合を除いて420~540nmの範囲での極大吸収波長は略一定している。これは、次亜りん酸ナトリウム一水和物水溶液を用いることで参考例2Cのようなヒドロキシ体の生成が抑制され、1-アミノ-4-ブロモアントラキノン-2-スルホン酸ナトリウムによる着色の吸光スペクトルが安定に得られたためと考えられる。参考例3[参考例3A]蒸留水2.5mL対してジアゾ化試薬であるp-ニトロアニリンのジメチルスルホキシド溶液濃度0.3g/L0.15mLを添加したジアゾ化試薬水溶液を4つ用意し、このうちの3つのそれぞれに1mol/L塩酸を0.03mL、0.06mLおよび0.09mL添加することで水素イオン濃度を0.011mol/L、0.022mol/Lおよび0.033mol/Lに調整した3種類の溶液を調製した。これらの溶液を25°Cで5分間放置した後、290~480nmの吸光スペクトルを測定した。結果を図38に示す。図38には、1mol/L塩酸を添加していないジアゾ化試薬水溶液のみについて同様の吸光スペクトルを測定した結果を併せて示している。[参考例3B]参考例3Aで用意したものと同様のジアゾ化試薬水溶液を4つ用意し、このうちの3つのそれぞれに1mol/L塩酸に替えて1mol/L水酸化ナトリウム溶液を0.03mL、0.06mLおよび0.09mL添加することでpHを7以上に調整した3種類の溶液を調整した。これらの溶液について、参考例3Aと同様の条件で放置した後に吸光スペクトルを測定した。結果を図39に示す。図39には、1mol/L水酸化ナトリウム溶液を添加していないジアゾ化試薬水溶液のみについて同様の吸光スペクトルを測定した結果を併せて示している。[参考例3C]参考例3Aと同様にして水素イオン濃度を調整した3種類の溶液を調製し、これらの溶液を25°Cで5分間放置した。その後、それぞれの溶液に1mol/L水酸化ナトリウム溶液0.15mLを添加し、pHをそれぞれ12.6、12.5および12.3に調整した3種類の溶液を調製した。これらの溶液について、参考例3Aと同様に吸光スペクトルを測定した結果を図40に示す。図40には、参考例3Aで用意したものと同じジアゾ化試薬水溶液に1mol/L水酸化ナトリウム溶液0.15mLのみを添加することでpHを12.7に調整した溶液について、同様の吸光スペクトルを測定した結果を併せて示している。[参考例3A~3Cの説明]参考例3Aに関する図38は、吸光スペクトルを測定した溶液の水素イオン濃度が異なることで、ジアゾ化試薬であるp-ニトロアニリンの濃度が同じであっても極大吸収波長の吸光度が異なることを示している。より具体的には、溶液の水素イオン濃度が0.011mol/L増加する毎に、極大吸収波長の吸光度は約5低下することを示している。これに対し、参考例3Bに関する図39は、ジアゾ化試薬水溶液に1mol/L水酸化ナトリウム溶液を添加してpHを7以上に設定すれば、p-ニトロアニリンの濃度が同じ溶液において極大吸収波長の吸光度に大きな変化が生じないことを示している。そして、参考例3Cに関する図40は、1mol/L塩酸を添加することで水素イオン濃度を高めた溶液は、1mol/L水酸化ナトリウム溶液の添加によりpHを7以上に調整してから吸収スペクトルを測定すると、極大吸収波長の吸光度に殆ど変化が生じないことを示している。以上の結果より、検査水の亜硝酸イオンを定量するときは、ジアゾ化試薬の反応後の検査水のpHを7以上に調整してから吸光度を測定するのが好ましいものと考えられる。"