哺乳類での虚血性腎障害および腎毒性障害を含む腎尿細管細胞障害を検出するための方法であって、1哺乳類の被検体から尿試料を得るステップ;2前記尿試料とNGALを含む腎尿細管細胞障害バイオマーカーに対する抗体とを接触させて、前記抗体と前記バイオマーカーとの複合体を形成させるステップ;そして3前記抗体-バイオマーカー複合体を検出するステップを含んでなる、方法。前記被検体から断続的に複数の尿試料を得る、請求項1に記載の方法。前記尿試料が連続的に得られる、請求項2に記載の方法。前記抗体-バイオマーカー複合体を検出するステップが、前記複合体と前記バイオマーカーを検出するための第2の抗体とを接触させることを含む、請求項1に記載の方法。前記哺乳類被験体がヒト患者である、請求項1に記載の方法。腎尿細管細胞障害に対する処置の効果を観察する方法であって、1腎尿細管細胞障害に罹った哺乳類被験体に対して処置をおこなうステップ;2前記被験体から少なくとも1つの処置後の尿試料を得るステップ;そして3前記処置後の尿試料での前記腎尿細管細胞障害のバイオマーカーの存在を検出するステップを含んでなる、方法。前記バイオマーカーがNGALを含む、請求項6に記載の方法。後続の処置後の尿試料を1個以上得るステップをさらに有し、前記後続の処置後の尿試料に前記バイオマイーカーの存在が検出されなくなるまで、前記処置をおこなうステップが続けられる、請求項6に記載の方法。前記検出するステップが、i前記尿試料と前記バイオマーカーに対する捕捉抗体とを接触させて、前記抗体と前記バイオマーカーとの複合体を形成させるステップ;そしてii前記抗体-バイオマーカー複合体を検出するステップを含んでなる、請求項6に記載の方法。前記抗体-バイオマーカー複合体を検出するステップが、1前記捕獲抗体-バイオマーカー複合体から、前記尿試料の任意の未結合物質を分離するステップ;2前記捕獲抗体-バイオマーカー複合体と前記バイオマーカーを検出するための第2の抗体とを接触させて、前記バイオマーカーと前記第2の抗体との間の複合体を形成させるステップ;3前記バイオマーカー-第2の抗体複合体から、任意の未結合の第2の抗体を分離するステップ;そして4前記バイオマーカー-第2の抗体複合体の前記第2の抗体を検出するステップを含んでなる、請求項9に記載の方法。前記ステップiが尿試料と前記第1の抗体が加えられた培地とを接触させるステップを含んでなる、請求項10に記載の方法。虚血性腎障害および腎毒性障害を含む腎尿細管細胞障害に対する即時型または早発型のバイオマーカーの存在を被検体の尿液体中で検出するのに用いられるキットであって、1一定量の尿試料を取得する手段;2腎尿細管細胞障害に対するバイオマーカーと複合体を形成することが可能な捕捉抗体が加えられ、該バイオマーカーがNGALを含む培地;3前記バイオマーカーと前記捕獲抗体との複合体を検出するためのアッセイを含んでなる、キット。前記尿試料の量が1ml未満、より一般的には10μl未満である、請求項12に記載のキット。前記取得手段が、表面を有する装置を含み、該表面が前記培地を含む、請求項12に記載のキット。前記取得手段が、前記尿試料を受け取るための容器を含み、前記容器の尿接触面が培地を含む、請求項12に記載のキット。前記アッセイがELISAを含む、請求項12に記載のキット。前記取得手段が、前記培地を含むカセットを有する装置を含んでなる、請求項12に記載のキット。ポイントオブケアキットである、請求項12に記載のキット。前記尿試料の量が1ml未満、より一般的には10μl未満である、請求項18に記載のポイントオブケアキット。前記取得手段が、ディップスティックを有する装置を含み、該ディップスティックの表面が前記培地を含む、請求項19に記載のポイントオブケアキット。前記アッセイが、比色ディップスティックアッセイを含んでなる、請求項19に記載のポイントオブケアキット。哺乳類の被検体の虚血性腎障害および腎毒性障害を含む腎尿細管細胞障害の状態を測定するための競合的酵素結合免疫吸着アッセイELISAであって、前記被検体の尿試料中でのNGALの存在を検出するための、前記NGALに特異的な第1の抗体を含む、キット。前記尿試料の液量を約1ml以下とすることができる、請求項22に記載のELISAキット。事象によって引き起こされる虚血性腎障害および腎毒性障害を含む腎尿細管細胞障害の程度を特定するための方法であって、1哺乳類の被験体から少なくとも1個の尿試料を得るステップ;2前記尿試料中の腎尿細管細胞障害のバイオマーカーの存在を検出するステップ;3前記事象の時間に比例して、前記尿試料中の前記バイオマーカーの存在が発現される時間に基づいて、前記尿細管細胞傷害の程度を決定するステップを含んでなる、方法。前記バイオマーカーがNGALを含む、請求項24に記載の方法。前記事象が外科的処置である、請求項24に記載の方法。前記事象が、腎臓への血液供給減少、心機能障害、外科的処置、集中治療室の患者、および前記被検体に対する医薬品、造影剤、または他の医薬物質の投与である、請求項24に記載の方法。哺乳類での虚血性腎障害および腎毒性障害を含む腎尿細管細胞障害を検出するための方法であって、1哺乳類の被検体から1ml以下の第1の尿を含む尿試料を得るステップ;2前記尿試料と腎尿細管細胞障害のバイオマーカーに対する抗体とを接触させて、前記抗体と前記バイオマーカーとの複合体を形成させるステップ;そして3前記抗体-バイオマーカー複合体を検出するステップと、を含んでなる、方法。前記バイオマーカーがNGALを含む、請求項28に記載の方法。実施例1NGALは、尿中で検出可能である小さなプロテアーゼ耐性の分泌ポリペプチドである。NGALmRNAおよびタンパク質レベルの顕著な上方制御が、早期虚血後マウス腎臓で示された。分泌タンパク質を暗示する点状細胞質分布状態で、NGALタンパク質発現が近位尿細管細胞で主に検出された。実際、ARFのマウスおよびラットの両モデルでの虚血障害後に、NGALが尿中にまさしく最初の尿排出物で容易かつ迅速に検出され、この際、腎臓の白血球浸潤は観察されなかった。尿細管細胞からのNGALの起源はインビトロで虚血障害にさらされた培養ヒト近位尿細管細胞で、さらに確認され、ここではNGALmRNAは細胞で顕著に、かつ即座に誘導され、NGALタンパク質が軽度のATP欠乏の1時間以内に、培地で容易に検出可能であった。我々の結果は、NGALが虚血性腎障害のために新規の早期尿バイオマーカーを示し得ることを示す。腎虚血-再灌流障害後、早期に上方制御された新規遺伝子の同定:マウスモデルでの腎虚血-再灌流障害の後すぐに誘導された転写産物に対するゲノムワイドな検索によって、7つの早期バイオマーカーが同定された。3匹の異なるマウスを、再灌流期間3、12、および24時間の各々で検討し、少なくとも2つの別々のマイクロアレイ実験を各検討した動物について実施した。対照および虚血腎臓のトランスクリプトームプロフィールの比較は、一貫して10倍より多く誘導された7つの遺伝子の小さなサブセットを生じた。これらの転写産物のうちの1つシステインリッチタンパク質61Cyr61は、腎虚血1によって誘導されることがごく最近になって確認された。驚くべきことに、その他の6つの異なって発現された遺伝子の挙動は、ARF文献に対して新規である。我々は、以前には認識されなかった遺伝子の1つ、すなわち、好中球ゼラチナーゼ関連リポカリンNGALを、さらに特徴づけるために、選択した。早期腎不全の動物モデルの特徴付け:短時間の腎虚血の構造および機能的帰結が報告されている3~7虚血-再灌流障害マウスモデルを用いた。虚血障害の固有の組織病理学的な特徴は、片側45分および両側30分の両方の虚血の後に、24時間再灌流試料で容易に明らかであった。これらは、刷子縁膜、尿細管拡張、平坦化尿細管上皮、管腔破片、および間質性の浸透物図1の損失を含んだ。アポトーシスの細胞の存在は、TUNELアッセイを使用して報告されている。アポトーシスは、付着細胞と同様に管腔内の脱離細胞にある遠位尿細管細胞とヘンレ係蹄上行脚とに主に局所化した。偶発的な近位尿細管細胞もアポトーシスであったが、糸球体はアポトーシスが基本的に欠けていた。TUNEL陽性細胞は、対照腎臓、または虚血性試料ではTdTが除去されたとき虚血性試料で検出された図示せず。上記の組織学的およびアポトーシス変化は、より軽度の虚血にさらされた腎臓には無かった両側虚血の5、10、または20分、図示せず。血清クレアチニンレベルは、観察される組織病理学的な変化を反映した。このように、片側腎虚血または軽度の無症状性両側虚血を有するマウスは、対照動物と区別のつかない血清クレアチニンレベルを示した。その一方で、30分間にわたる両側虚血を有するマウスは血清クレアチニンの著しい増加を示した図1。NGALmRNAは、早期の虚血後腎臓で著しく誘導された:マイクロアレイ分析によって、NGALは、同じ動物から得た対照腎臓と比較したとき各々の時点で3匹の動物で得た平均値±SD、虚血性マウス腎臓での3、12、および24時間の再灌流で、一貫して3.2±0.5倍、11.1±1.2倍、および4.3±0.6倍誘導されることがわかった。この発見は、β-アクチンおよびGAPDHの両方で正規化プロトコルを使用することで、半定量的なRT-PCRによって確認された。既に報告されているように3、試験したいずれの再灌流期間であっても、βーアクチンまたはGAPDHのいずれかのmRNA発現において顕著な変化がないことが示された。しかし、マウス特異的プライマーを用いることで、我々はNGALmRNA発現の著しい上方制御を検出した再灌流の3、12、および24時間で、それぞれ4.1±0.5倍、9±0.6倍、および4.2±0.4倍、ここで値は3匹の異なる動物から得た平均値±SDを表す。これらの結果を図1に示し、トランスクリプトーム分析よって検出された変化に全体にわたって一致している。NGALタンパク質は、初期の虚血性マウス腎臓の近位尿細管で、著しく過剰発現される:腎臓のNGALタンパク質の虚血後発現は、mRNAのそれに対応する。ウエスタン分析によれば、NGALはまさしく、対照マウス腎臓で25kDaの免疫反応性ペプチドとして検出可能だった。NGALとしてのこの帯域の同一性は、異なる実験セットで確立された。ここで、組み換えマウスリポカリンによる一次抗体のプレインキュベーションがこの免疫応答性を完全にブロックした図示せず。片側の虚血性実験では、図2パネルAで示すように、NGAL発現は、損傷の3時間以内で3匹の別々の動物に由来する虚血腎で、NGAL発現がデンシトメトリーによって3-4倍に誘導された。この反応は、8匹の異なる動物に由来する両側の虚血で、著しく高められた。これらのマウスのNGALを、再灌流の3時間後に3倍に誘導し、24時間で12倍を上回る大きさでピークに達し、72時間の回復期間で正常のレベルに落ちた図2、パネルB。免疫組織化学法を使用して、NGALタンパク質は対照マウス腎臓でかろうじて検出可能であったが、図3で例示されるように、虚血の3時間以内で、近位尿細管内で主に上方制御される。これらの切片での近位尿細管の同定は、刷子縁膜の存在、細胞寸法に対する核の比率、および細胞形態学に基づいた。誘導されたNGALは、近位尿細管細胞内で点状細胞質分布中に現れ、分泌タンパク質であることを暗示した。この発現パターンは、虚血-再灌流障害の片側および両側の両方のモデルで同一であり、研究した全ての動物において、一貫して明らかだった。糸球体はNGAL発現が欠けており、NGALを発現している好中球は、はっきりとは確認されなかった。NGALが培養ウィルムス腫瘍腎臓細胞で、エンドソームと少なくとも部分的に共局在する11ことから、NGALおよびRab11後期再循環エンドソームのマーカーの分布を、連続腎臓切片で検討した。組み合わせた画像は、Rab11とのNGALの重要な共局在性を表した図示せず。虚血の後で強化されたNGAL発現の機能的な有意性を測定するために、連続腎臓切片は、NGAL発現、TUNEL陽性の核またはPCNA陽性の核について調べられた。NGALを過剰発現している尿細管細胞がTUNEL陽性ではなかった図示せずのに対して、NGALとPCNAの顕著な共局在性は、48時間の還流期間で増殖および再生する細胞で明らかだった図示せず。NGALタンパク質は、マウスでARFの誘導直後に尿に容易に検出される:この実験は、虚血性腎障害の早期非侵襲性バイオマーカーとして尿NGALを検出することの有用性を示す。試料のローディングを等しくするために尿クレアチニン濃度を用いることで、NGALは、虚血前の尿には存在しなかった。著しい対照をなすものとして、NGALは、図4Aおよび図4Bに示すように、試験した全ての動物で上記障害虚血後のまさしく最初の尿排出物での2時間以内に25kDa帯域として顕在化した。NGALとしてのこの帯域の同一性は、実験の別々のセットで確立され、組み換えマウスリポカリンによる一次抗体のプレインキュベーションがこの免疫応答性を完全にブロックした図示せず。NGALは、ウエスタン分析によって、未処理の尿のわずか1μlほどで、容易に検出され、検討される全ての期間24時間の再灌流の間持続した。次に、我々は尿NGAL排出を、既に確立された障害マーカー例えば、β2-ミクログロブリンおよびNAGのものと比較した。尿NGALが虚血の2時間以内に明白であったにもかかわらず、β2-ミクログロブリンは、12時間の片側虚血図4、パネルAおよび8時間の両側虚血図4、パネルBの後のみに、同一尿試料で検出可能であった。同様に、尿NAG排出は、非虚血性対照動物と比較して、片側虚血図4の下段、パネルAの12時間後および両側虚血図4の下段、パネルBの8時間後に著しく増加した。NGALタンパク質は、マウスでの軽度の腎虚血後でさえ、尿中で容易に検出される:明白なARFが存在しない場合、尿NGAL検出の感度を決定するために、我々は、マウスの異なるセットが5、10、または20分間の両側腎動脈閉塞のみにさらされるプロトコルを用いた。これらの研究を、軽度の無症状腎虚血後に尿NGAL排出を評価するように設計した。24時間還流後に測定した血清クレアチニンは、全てのこれらのマウスで正常範囲内であった。目立つことには、NGALはこれらの動物で未処理の尿のわずか1μlほどで、容易に検出され図5、その出現はARFを有する動物と比較して、いくらか遅れていた。したがって、このように、30分の両側虚血が2時間以内で尿NGAL排出に帰着する図4一方で、20または10分の両側虚血を有するマウスは4時間後に尿NGALを示し、そして5分の虚血を有するものは6時間後のみにNGALを排出した図5。このように、尿のNGAL出現は、腎虚血のドーズおよび持続時間に関連があるように見える。実施例2NGALタンパク質は、ラットでのARF誘導直後に、尿で容易に検出される:腎動脈閉鎖に対する反応に種差があることについての議論10が存在することから、我々は次に、異なる動物モデルすなわち、腎虚血-再潅流障害の十分確立されたラットモデルでのNGALの挙動を調べた。試料のローディングを等しくするために尿クレアチニン濃度を用いることで、NGALは、虚血前の尿には存在しなかった。著しい対比において、図6に示すように、NGALは上記障害の3時間以内虚血後のまさしく最初の尿排出物でに、25kDaの免疫応答性ペプチドとして明らかであった。比較として、虚血障害のこのモデルでの血清クレアチニンが、24時間の再灌流のみで上昇した図示せず。再び、NGALを1μlの未処理尿で検出可能であり、試験した継続期間全体24時間の再灌流で持続した。実施例3NGALmRNAは、早期の軽度の虚血後の培養ヒト近位尿細管細胞で誘導される:虚血性近位尿細管細胞からNGALの起源を確認するために、我々は、既に記載したインビトロでの虚血のプロトコルを、培養ヒト近位尿細管細胞RPTECでのATP欠乏によって改変した。1μmアンチマイシンでのインキュベーションは、1時間以内の対照の約83±3への軽度の部分的ATP欠乏をもたらし、より漸進的なな減少が6時間で対照の約75±3であった4回の実験の平均値±SD。この軽度のATP欠乏がもたらす形態学的な帰結は、識別可能でなかった。NGALmRNAは、休止細胞で検出可能であっただけである。しかし、部分的なATP欠乏の後に、図7に示すように、急激かつ期間依存型のNGALmRNAの誘導が、RT-PCRによって明らかになった。NGALタンパク質は、インビトロで早期虚血後の培地中で容易に検出される:我々は、軽度のATP欠乏後に、RPTEC細胞およびその培地中でのNGALタンパク質発現を検討した。NGALタンパク質は、対照RPTEC細胞では検出可能であり、図7で示すように、その発現は期間依存型のかたちで、ATP欠乏後に増加した。対照細胞からのNGAL免疫応答性タンパク質は培地中で見つからなかったが、NGALは軽度のATP欠乏の1時間以内に容易に検出可能であった。さらに、NGALタンパク質存在量のさらなる増加が、ATP欠乏期間に関係していることに注目した。これらの結果は、誘導されたNGALタンパク質が培地中に急速に分泌され、インビボでの腎虚血後の尿中でのNGALの敏速な出現に類似していることを、示唆する。実施例4NGALタンパク質は、マウスでの軽度の腎臓腎毒症の後の早期に尿中で容易に検出される:腎毒症が尿中でのNGALタンパク質の発現をもたらすかどうかを決定し、それによって腎毒性腎障害の早期非侵襲性バイオマーカーとしての有用性が示唆され、シスプラチンによって誘発された腎毒症がマウスで誘導された。シスプラスチン腎毒性の確立されたマウスモデルでは、NGALはシスプラスチン投与の1日以内に尿中に容易に検出された図8A、最下部トラック。それとは対照的に、尿β2-ミクログロブリンは、2日後にかろうじて検出可能であり、シスプラスチン後4ないし5日目まで容易に検出ことはできなかった図8、パネルA、最上部トラック。同様に、増加した尿NAG排出は、シスプラスチン投与後4および5日目まで、明らかにならなかった図8、パネルB。シスプラチン腎毒性は、腎尿細管細胞でのアポトーシスと壊死とによって特徴づけられる:マウスに対して、シスプラチンを5mg/kgまたは20mg/kg体重のいずれかの用量で、単回腹腔内注射をおこなった。対照マウスでの結果と、より高用量のシスプラチンを与えられたものでの結果とを図9に示す。より高用量のものは、尿細管細胞壊死をもたらし、このことはヘマトキシリン-エオシンにより染色した切片で、尿細管拡張、管腔破片、および平坦化上皮が存在することで明らかである上側中央パネル。同様に証明されたことは、尿細管細胞がプログラム化された細胞死を遂行したことであり、濃く強く染色された核によって示した上側右パネル。このことは、アポトーシスの特徴である濃縮化およびフラグメント化した核を示すTUNELアッセイによって確認された下側中央および右パネル。対照腎臓では壊死またはアポトーシスは検出されなかった上側および下側左パネル。より少ない用量のシスプラチンで処置したマウスから得た腎臓はまた、未処理の対照図示せずと同様に、正常に見えた。図9は、5つの別々の実験を表す。NGALタンパク質は、シスプラチンによって腎臓尿細管で迅速に誘導される:腎臓に対する虚血障害の後でNGALが誘導される17ので、シスプラチン誘導腎毒性障害に対する反応が決定された。ウエスタン分析によって、図10で例示されるように、NGALは対照マウスから腎臓溶解産物でかろうじて検出可能であったが、3時間のシスプラチン投与20mg/kg中に急速に誘導された。期間依存型の増加が腎臓NGAL発現で見られ、48時間でピークがあり、また最大で96時間まで持続的な上方制御を示した。これらの結果は、図11に示すように、免疫蛍光染色によって確認された。シスプラチン注射後、3時間3h最上段右側パネルおよび12時間12h下段左側パネルで収集した腎臓は、NGALタンパク質の誘導を示した。また、図11に示すものは、12時間HPで収集した切片の高倍率拡大像である下段右側パネル。左下パネルの矢印は、HP画像に示される領域を示す。NGALを、シスプラチン注射の3時間以内に、主に近位尿細管細胞で誘導したが、対照マウス由来の細胞Conでは存在していなかった最上段左側パネル。これらの切片での近位尿細管の同定は、刷子縁膜の存在、細胞寸法に対する核の比率、および細胞形態学に基づいた。誘発されたNGALは、近位尿細管細胞内で点状細胞質分布の状態で現れ、分泌タンパク質であることを暗示した。誘発されたNGALは、近位尿細管細胞内で点状細胞質分布の状態で現れ、分泌タンパク質であることを暗示した。この発現パターンは、虚血-再灌流障害マウスモデルで観察されたもの17と類似していた。糸球体はNGAL発現が欠けており、NGAL発現好中球は明白ではなかった。図11は、核時点での5匹の動物を示す。NGALタンパク質は、高用量シスプラチンの後、尿中で容易に検出される:NGALタンパク質を、高用量シスプラチン20mg/kgの後に、尿中で検出し、それによって腎毒性腎障害の早期非侵襲性バイオマーカーとしてその有用性が示された。試料のローディングを等しくするために尿クレアチニン濃度を用いることで、NGALは、虚血前の尿には基本的には存在しなかった。著しい対比において、尿NGALを、図12最上段のパネルに示すように、試験した動物の全てで、シスプラスチン障害20μg/kgの3時間以内に容易に検出した。NGALとしてのこの帯域の同一性は、実験の別々のセットで確立され、組み換えマウスリポカリンによる一次抗体のプレインキュベーションがこの免疫応答性を完全にブロックした図示せず。NGALは、ウエスタン分析によって、未処理の尿のわずか5μlほどで、容易に検出可能であった。期間依存型の増加が尿NGAL排出で見られ、48時間でピークがあり、また最大で96時間まで持続的な上方制御を示した。次いで、我々は、尿NGAL排出を、既に確立された障害マーカー例えばNAGのものと比較した。尿NGALがシスプラチンの3時間以内に顕在化したのに対して、尿NAG排出は障害の96時間後にのみ、著しく増加した中央パネル。さらに、血清クレアチニン測定による腎機能の評価は、シスプラチンの96時間後のみに顕著な変化を示した下段側パネル。図は、各々の時点での5つの独立した実験を示す。NGALタンパク質は、低用量シスプラチンの後でさえ尿中に検出される:異なるセットのマウスを、図13で示す無症状腎毒性障害後に、尿NGAL測定の感度を決定するために、5μg/kgのシスプラチン注射のみにさらした。NGALは、これらの動物で、未処理の尿のわずか5μlで検出可能であった最上段のパネルが、その出現は20μg/kgシスプラチンによる動物と比較して量的により少ないように思われた図12、最上段のパネル。したがって、尿中でのNGALの出現は、腎毒素の用量に相関する。尿NGAL排出がシスプラチン3時間以内で顕在化したのに対して、動物のこのグループにおける尿NAG排出は、障害の96時間後でも著しい増加はなかった中央パネル。さらにまた、血清クレアチニン測定による腎機能の評価は、低用量シスプラチンの96時間後であっても著しい変化はないことを示した下段側パネル。この例は、NGALが、現在使用しているものよりも感度の高い腎臓腎毒性マーカーであることを示している。シスプラチン後の尿NGAL排出は、用量および期間依存型である:図14に示すように、シスプラチン投与後の腎障害の重症度の指標としてのその有用性を測定するために、尿NGAL排出を定量化した。このことは、標準として使用する既知量のNGALの発現および精製を必要とした。SDS-PAGEによる組み換えNGALタンパク質の分析とそれに続くクーマシーブルー染色は、適当な大きさの単一のタンパク質バンドを示した最上段左側パネル。既知濃度のアリコートのウエスタンブロットは、3~100ng/mlの範囲で信号の強さの直線的増加を示した上端右側パネル。次に、尿中のNGAL量を、組換え体精製NGALの所定の標準と比較することで、測定した。20μg/kgシスプラチンに続いて、尿NGAL排出に期間依存型の増加が認められた下段側パネル。同様の、しかしいくらかは鈍くなった反応が、無症状腎毒性障害をもたらすシスプレチン用量で処置された動物で顕在化した。実施例5腎移植後2時間の患者から尿試料を得た。これは虚血性腎障害の予測可能なヒトモデルであり、図15に示す。生体血縁ドナーから腎臓を受け取った患者n=6と比較して、移植に先だって一定時間にわたって氷上で保存した死体腎臓を受け取った患者n=4は、ウエスタンブロットおよびELISAによって容易に定量化される尿NGALの増加を示したパネルA。尿NGALと冷却虚血時間との間に有意な相関があり、NGAL排出が腎障害の度合いに比例していることを示したパネルBr=0.98、スピアマン分析。有意な相関は、尿NGALとピーク血清クレアチニンとの間にもあったパネルCr=0.96、スピアマン分析。移植後2時間以内に測定された尿NGALが、血清クレアチニンピークによって反映されるように、数日後に起こるARFの前兆であることを強調することは重要である。正常ヒト対照または慢性腎不全の患者から得た尿は、ほぼ検出不可能な量のNGALを含むことから、尿NGALの上方制御が急性腎障害に特異的であることが示される図示せず。また、尿路感染症および腎移植拒絶2種類の好中球関連疾患を有する患者から得た尿は、最小限の量のNGAL図示せずを含むのみであるから、死体腎臓移植組織に含まれる著しく多量>100ng/mlのものと容易に区別される。これらのデータは、NGALが腎移植後の急性腎障害のための新規な早期尿バイオマーカーであることを示す。実施例6図16の結果に示すように、開心術の後の15人の患者から予め、一連の尿試料を得た。尿NGALをウエスタンブロットおよびELISAによって定量したところ、それら15人の患者のうち5人で上昇することがわかったパネルA。各線は、1人の患者を表す。基線からの血清クレアチニンの変化をパネルAの右側に示す。同じ5人の患者が、血清クレアチニンが基線から50以上増加したとして定義される術後の急性腎不全を発症したことで、約33の罹患率を生じた。急性腎不全を発症しなかった10人の患者では、尿NGAL排出について、術後12時間以内にほとんど検出不可能なレベルへと急激に正常化する、わずかな早期増加6.0±2.0ng/mgクレアチニンの2時間値が認められたパネルA。顕著な対比では、急性腎不全をその後発症した患者は、尿NGALの2時間値が10倍を上回る増加75±10ng/mgクレアチニンと尿NGALの4時間値が20倍を上回る増加120±12ng/mgクレアチニンを示した。尿NGALの量と心肺バイパス時間との間の相関が存在することから、NGAL排出が腎障害の度合いに比例することが示されるパネルBr=0.76、スピアマン分析。また、尿NGALとピーク血清クレアチニンとの間に有意な相関が認められたパネルCr=0.66、スピアマン分析。心臓手術の2時間以内に測定された尿NGALが血清クレアチニンピークによって反映されるような、数時間または数日後でさえ生じるARFの予兆であったことを、もう一度強調することは重要である。これらのデータは、NGALが開心術後の急性腎障害のための新規な早期尿バイオマーカーであることを示し、その定量化は、この非常に感受性の高い集団での急性腎不全の予兆である。本発明が好ましい実施形態に関連して記載される一方で、前述した明細書を読解した後で当業者は種々の変更、等価物の置換、および本明細書中に述べられる被検体物質に対する変更をもたらすことが可能である。それ故、本発明は、本明細書中に具体的に記載されたもの以外の方法で実行することができる。したがって、本明細書中での保護が添付された特許請求の範囲とその等価物とによってのみ制限されることが、意図される。参考文献1MuramatsuYTsujieMKohdaYPhamBPerantoniAOZhaoHJoSKYuenPSTCraigLHuXStarRAEarlydetectionofcysteinerichprotein61inurinefollowingrenalischemiareperfusioninjuryKidneyInt621601161020022YoshidaTKureliaMBeatoFMinHIngelfingerJRStearsRLSwinfordRDGullansSRTangSSMonitoringchangesingeneexpressioninrenalischemiareperfusionintheratKidneyInt611646165420023SupavekinSZhanhWKucherlapatiRKaskelFJMooreLCDevarajanPDifferentialgeneexpressionfollowingearlyrenalischemiareperfusionKidneyInt631714172420034NogaeSMiyazakiMKobayashiNSaitoTAbeKSaitoHNakanePKNakanishiYKojiTInductionofapoptosisinischemiareperfusionmodelofmousekidneyPossibleinvolvementofFasJAmSocNephrol962063119985DaemenMARCVandeVenMWCMHeinemanEBuurmanWAInvolvementofendogenousinterleukin10andtumornecrosisfactor□inrenalischemiareperfusioninjuryTransplantation6779280019996KellyKJPlotkinZDagherPCGuanosinesupplementationreducesapoptosisandprotectsrenalfunctioninthesettingofischemicinjuryJClinInvest1081291129820017BurneNJRabbHPathophysiologicalcontributionsoffucosyltransferasesinrenalischemiareperfusioninjuryJImmunol1692648265220028FeldenbergLRThevanantherSdelRioMDeLeonMDevarajanPPartialATPdepletioninducesFasandcaspasemediatedapoptosisinMDCKcellsAmJPhysiol276F837F84619999DevarajanPDeLeonMTalasazanFSchoenfeldARDavidowitzEJBurkRDThevonHippelLindaugeneproductinhibitsrenalc1ellapoptosisviaBcl2dependentpathwaysJBiolChem2764059940605200110MolitorisBAWeinbergJMVenkatachalamMAZagerRANathKAGoligorskyMSAcuterenalfailureIIExperimentalmodelsofacuterenalfailureimperfectbutindispensableAmJPhysiolRenalPhysiol278F1F12200011KjeldsenLCowlandJBBorregaardNHumanneutrophilgelatinaseassociatedlipocalinandhomologousproteinsinratandmouseBiochimBiophysActa1482272283200012MegyesiJSafirsteinRLPricePMInductionofp21WAF1CIPSD1inkidneytubulecellsaffectsthecourseofcisplatininducedacuterenalfailureJClinInvest101777782199813ShiraishiFCurtisLMTruongLPossKVisnerGAMadsenKNickHSAgarwalAHemeoxygenase1geneablationorexpressionmodulatescisplatininducedrenaltubularapoptosisAmJPhysiol278F726F736200014RameshGReevesWBTNFαmediateschemokineandcytokineexpressionandrenalinjuryincisplatinnephrotoxicityJClinInvest110835842200215MuramatsuYTsujieMKohdaYPhamBPerantoniAOZhaoHJoSKYuenPSTCraigLHuXStarRAEarlydetectionofcysteinerichprotein61inurinefollowingrenalischemicreperfusioninjuryKidneyInt6216011610200216YangJGoetzDLiJYWandWMoriKSetlikDDuTErdjumentBromageHTempstPStrongRBaraschJAnirondeliverypathwaymediatedbyalipocalinMolCell1010451056200217MishraJMaQPradaAMitsnefesMZahediKYangJBaraschJDevarajanPIdentificationofNGALasanovelurinarybiomarkerforischemicinjuryJAmSocNephrol1425342543200318TsuruyaKNinomiyaTTokumotoMHirakawaMMasutaniKTaniguchiMFukudaKKanaiHKishiharaKHirakataHIidaMDirectinvolvementofthereceptormediatedapoptoticpathwaysincisplatininducedrenaltubularcelldeathKidneyInt637282200319BundgaardJSengelovHBorregaardNKjeldsenLMolecularcloningandexpressionofacDNAencodingNgalalipocalinexpressedinhumanneutrophilsBiochemBiophysResCommun20214681475199420DelRioMImamADeLeonMGomezGMishraJMaQParikhSDevarajanPThedeathdomainofkidneyankyrininteractswithFasandpromotesFasmediatedcelldeathinrenalepitheliaJAmSocNephrol1541512004