"バイオプリンターであって、該バイオプリンターは、a.1つ以上のプリンターヘッドを含み、ここで、プリンターヘッドは、少なくとも1つのカートリッジを受け保持するための手段を含み、および前記カートリッジは、i.バイオインク、およびii.支持物質、の1つ以上から選択されるコンテンツを含み、該バイオプリンターはさらに、b.少なくとも1つのカートリッジの位置を較正するための手段、およびc.少なくとも1つのカートリッジのコンテンツを分注するための手段を含むことを特徴とするバイオプリンター。少なくとも1つのカートリッジのコンテンツを分注するための手段は、ピストンの適用、圧力の適用、圧縮ガスの適用、水圧、またはそれらの組み合わせであることを特徴とする、請求項1に記載のバイオプリンター。温度を調節するための手段をさらに含むことを特徴とする、請求項1に記載のバイオプリンター。周囲温度、カートリッジの温度、カートリッジのコンテンツの温度、受け面の温度、またはそれらの組み合わせを調節するための手段をさらに含むことを特徴とする、請求項3に記載のバイオプリンター。温度を調節するための手段は、発熱体であることを特徴とする、請求項4に記載のバイオプリンター。温度を調節するための手段は、放射加熱器、対流加熱器、伝導性のヒーター、ファンヒーター、熱交換器、またはそれらの組み合わせであることを特徴とする、請求項5に記載のバイオプリンター。温度を調節するための手段は、冷却要素であることを特徴とする、請求項4に記載のバイオプリンター。温度を調節するための手段は、冷媒の容器、冷却した液体、氷、放射冷却器、対流冷却器、伝導性の冷却器、ファンクーラー、またはそれらの組み合わせであることを特徴とする、請求項7に記載のバイオプリンター。a.プリンターステージ、b.受け面、c.沈着のオリフィス、d.バイオインク、e.支持物質、およびf.印刷された構成物、の1つ以上に湿潤剤を適用するための手段をさらに含み、ここで、湿潤剤は、バイオインクまたは支持物質が、バイオプリンターによって分注される前、分注と略同時に、およびバイオインクまたは支持物質が、バイオプリンターによって分注された後、から選択される1つ以上の時点で適用されることを特徴とする、請求項1に記載のバイオプリンター。沈着のオリフィスを含むカートリッジの位置を較正する方法であって、ここで、該カートリッジは、バイオプリンターに取り付けられ、該方法は、少なくとも1つの軸に沿ってカートリッジの位置を較正する工程を含み、ここで、該軸は、x軸、y軸、およびz軸から選択され、および各較正は、レーザーの使用によって行われることを特徴とする方法。レーザーの使用による少なくとも1つの軸に沿ったカートリッジの位置の較正は、a.軸に沿ってレーザービームを位置付ける工程、b.レーザービームの軸に垂直である軸に沿ってカートリッジを動かし、その動きを、レーザービームがカートリッジによって遮断されるとすぐに止める工程を含み、ここで、レーザービームが遮断される位置は記録され、該較正はさらに、c.レーザービームの経路内で、レーザービームの同じ軸に沿ってカートリッジを動かし、その動きを、センサー限界が達成されるとすぐに止める工程を含み、ここで、センサー限界が達成される位置は記録され、該較正はさらにまた、d.レーザービームがカートリッジ上の1つ以上の点の正確な位置を測定することができるように、カートリッジを位置付ける工程、およびe.1つ以上の軸内で、工程abc、およびdの1つ以上を繰り返し、空間でのカートリッジの位置を決定するために、記録された位置の計算を行う工程を含むことを特徴とする、請求項10に記載の方法。分注のオリフィスを含むカートリッジの位置を較正するためのシステムであって、ここで、該カートリッジは、バイオプリンターに取り付けられ、前記システムは、少なくとも1つの軸に沿ってカートリッジの位置を較正するための手段を含み、ここで、該軸は、y軸、x軸、およびz軸から選択されることを特徴とするシステム。カートリッジの位置を較正するための手段は、レーザーアライメント、光学的アライメント、機械的アライメント、圧電のアライメント、磁気のアライメント、電場または、静電容量のアライメント、超音波のアライメント、またはそれらの組み合わせであることを特徴とする、請求項12に記載のシステム。組織構成物を作成するための方法であって、該方法は、a.コンピューターモジュールが、所望の組織構成物の視覚表示の入力を受信する工程、b.コンピューターモジュールが、一連のコマンドを生じさせる工程を含み、ここで、該コマンドは、視覚表示に基づき、バイオプリンターによって読取り可能であり、該方法はさらに、c.コンピューターモジュールが、一連のコマンドをバイオプリンターに提供する工程、およびd.該バイオプリンターが、定義された幾何学的構造を有する構成物を形成するために、コマンドに従ってバイオインクおよび支持物質を沈着させる工程を含むことを特徴とする方法。視覚表示は、所望の組織構成物の1つ以上を、a.バイオインク、b.バイオインクの具体的な組成物、c.支持物質、およびd.支持物質の具体的な組成物、の1つ以上として識別する工程を含むことを特徴とする、請求項14に記載の方法。請求項1のバイオプリンターから沈着した1つ以上の構造を受けるための受け面であって、該受け面は、略平ら又は略滑らかであることを特徴とする受け面。請求項1のバイオプリンターから沈着した1つ以上の構造を受けるための受け面であって、該受け面の形は、1つ以上の沈着した構造の、大きさ、形状、または構成、または幾何学的構造に適応するか又は影響を及ぼすように設計されていることを特徴とする、受け面。組織および臓器の緊急の必要性を取り除くための、再生医療および組織工学技術の適用を促進するツールおよび技術が必要とされている。また、持続不可能な研究開発コストを課すことなく、革新的でコスト効率の良い新薬の数および品質を実質的に増加させるツールおよび技術も必要とされている。したがって、本発明者は、組織および臓器を作成するための、デバイス、システム、および方法を本明細書に記載する。本明細書には、バイオプリンターが記載され、該バイオプリンターは、1つ以上のプリンターヘッドを含み、ここで、プリンターヘッドは、少なくとも1つのカートリッジを受ける且つ保持するための手段を含み、および前記カートリッジは、バイオインクおよび支持物質の1つ以上から選択されるコンテンツcontentsを含み、プリンターヘッドはさらに、少なくとも1つのカートリッジの位置を較正するための手段、および少なくとも1つのカートリッジのコンテンツを分注するdispensingための手段を含む。1つの実施形態において、本明細書に記載されるプリンターヘッドは、1つのカートリッジを受ける且つ保持するための手段を含む。別の実施形態において、本明細書に記載されるプリンターヘッドは、1つを超えるカートリッジを受ける且つ保持するための手段を含む。別の実施形態において、バイオプリンターは、プリンターステージprinterstageを更に含む。別の実施形態において、少なくとも1つのカートリッジを受ける且つ保持するための手段は、次のものから選択される:磁気引力、コレットチャックのグリップ、フェルール、ナット、バレルアダプター、またはそれらの組み合わせ。また別の実施形態において、少なくとも1つのカートリッジを受ける且つ保持するための手段は、コレットチャックのグリップである。また別の実施形態において、少なくとも1つのカートリッジの位置を較正するための手段は、次のものから選択される。レーザーアライメント、光学的アライメント、機械的アライメント、圧電のアライメント、磁気のアライメント、電場または、静電容量のアライメント、超音波のアライメント、またはそれらの組み合わせ。また別の実施形態において、少なくとも1つのカートリッジの位置を較正するための手段は、レーザーアライメントである。別の実施形態において、少なくとも1つのカートリッジのコンテンツを分注するための手段は、ピストンの適用、圧力の適用、圧縮ガスの適用、水圧hydraulics、またはそれらの組み合わせである。また別の実施形態において、少なくとも1つのカートリッジのコンテンツを分注するための手段は、ピストンの適用である。また別の実施形態において、ピストンの直径は、カートリッジの直径より短い。別の実施形態において、バイオプリンターは、温度を調節するための手段をさらに含む。また別の実施形態において、バイオプリンターは、周囲温度、カートリッジの温度、カートリッジのコンテンツの温度、受け面の温度、またはそれらの組み合わせを調節するための手段をさらに含む。また別の実施形態において、温度を調節するための手段は、発熱体である。また別の実施形態において、温度を調節するための手段は、ヒーターである。また別の実施形態において、温度を調節するための手段は、放射加熱器、対流加熱器、伝導性のヒーター、ファンヒーター、熱交換器、またはそれらの組み合わせである。また別の実施形態において、温度を調節するための手段は、冷却要素である。また別の実施形態において、温度を調節するための手段は、冷媒coolantの容器、冷却した液体、氷、放射冷却器、対流冷却器、伝導性の冷却器、ファンクーラー、またはそれらの組み合わせである。また別の実施形態において、温度は、約40°Cから約90°Cの間に調節される。また別の実施形態において、温度は、約0°Cから約10°Cの間に調節される。別の実施形態において、本明細書に記載されるバイオプリンターは、次の1つ以上に湿潤剤を適用するための手段をさらに含む:プリンターステージ;受け面、沈着のオリフィスdepositionorifice、バイオインク、支持物質、または印刷された構成物。また本明細書には、沈着のオリフィスを含むカートリッジの位置を較正する方法が開示され、ここで、該カートリッジはバイオプリンターに取り付けられ、該方法は、少なくとも1つの軸に沿ったカートリッジの位置を較正する工程を含み、ここで、該軸は、x軸、y軸、およびz軸から選択され、および各較正は、レーザーの使用によって行われる。1つの実施形態において、方法は、レーザーを活性化し、少なくとも1つの実質的に安定した及び/又は実質的に固定されたレーザービームを生じさせる工程を含み、ここで、前記レーザービームは、地面に対して水平である。別の実施形態において、方法は、レーザーを活性化し、少なくとも1つの実質的に安定した及び/又は実質的に固定されたレーザービームを生じさせる工程を含み、ここで、前記レーザービームは、地面に対して垂直である。また別の実施形態において、各較正は、第1および第2のレーザーの使用によって行われる。また別の実施形態において、第1レーザーは、地面に対して垂直であり、第2のレーザーは地面に対して水平である。別の実施形態において、水平方向のレーザーの使用によるy軸に沿ったカートリッジの位置の較正は、カートリッジがi第1のy八分円に位置付けられ、ii分注のオリフィスdispensingorificeがレーザービームの上限以下となるように、カートリッジを位置付ける工程、aレーザービームの方へカートリッジを動かし、その動きを、レーザービームがカートリッジによって遮断されるとすぐに止める工程を含み、ここで、レーザービームがカートリッジによって遮断される位置は、第1のy位置であり、該較正はさらに、bカートリッジが第2のy八分円に位置付けられ、分注のオリフィスがレーザービームの上限以下となるように、カートリッジを再び位置付ける工程、cレーザービームの方へカートリッジを動かし、その動きを、レーザービームがカートリッジによって遮断されるとすぐに止める工程を含み、ここで、レーザービームがカートリッジによって遮断される位置は、第2のy位置であり、および該較正はさらにまた、d第1のy位置と第2のy位置との間の中間点を計算する工程を含む。別の実施形態において、水平方向のレーザーの使用によるx軸に沿ったカートリッジの位置の較正は、ai第1のy位置と第2のy位置との間の中間点に、およびiiレーザーのセンサー境界sensorthreshold外にカートリッジを位置付ける工程、bセンサー境界の方へカートリッジを動かし、その動きを、カートリッジがセンサー境界に達するとすぐに止める工程を含み、cここで、カートリッジがカートリッジ幅の半分増加したセンサーに接する位置は、x位置である。別の実施形態において、水平方向のレーザーの使用によるz軸に沿ったカートリッジの位置の較正は、a分注のオリフィスがレーザービーム上に位置するように、カートリッジを位置付けする工程、bレーザービームの方へカートリッジを動かし、その動きを、レーザービームがカートリッジによって遮断されるとすぐに止める工程を含み、ここで、レーザービームがカートリッジによって遮断される位置は、z位置である。別の実施形態において、垂直方向のレーザーの使用によるy軸に沿ったカートリッジの位置の較正は、aカートリッジが、i第1のy八分円に位置付けられ、ii分注のオリフィスがレーザービームのセンサー境界外にあるように、カートリッジを位置付けする工程、bレーザービームの方へカートリッジを動かし、その動きを、レーザービームがカートリッジによって遮断されるとすぐに止める工程を含み、ここで、レーザービームがカートリッジによって遮断される位置は、第1のy位置であり、該較正はさらに、cカートリッジが第2のy八分円に位置付けられ、分注のオリフィスがレーザービームのセンサー境界外にあるように、カートリッジを再び位置付けする工程、dレーザービームの方へカートリッジを動かし、その動きを、レーザービームがカートリッジによって遮断されるとすぐに止める工程を含み、ここで、レーザービームがカートリッジによって遮断される位置は、第2のy位置であり、該較正はさらにまた、e第1のy位置と第2のy位置との間の中間点を計算する工程、およびf随意に、a-eを繰り返し、計算された中間点を平均化する工程を含む。別の実施形態において、垂直方向のレーザーの使用によるx軸に沿ったカートリッジの位置の較正は、aカートリッジが、i第1のx八分円に位置付けられ、ii分注のオリフィスがレーザービームのセンサー境界外にあるように、カートリッジを位置付けする工程、bレーザービームの方へカートリッジを動かし、その動きを、レーザービームがカートリッジによって遮断されるとすぐに止める工程を含み、ここで、レーザービームがカートリッジによって遮断される位置は、第1のx位置であり、該較正はまた、cカートリッジが第2のx八分円に位置付けられ、分注のオリフィスがレーザービームのセンサー境界外にあるように、カートリッジを再び位置付けする工程、dレーザービームの方へカートリッジを動かし、その動きを、レーザービームがカートリッジによって遮断されるとすぐに止める工程を含み、ここで、レーザービームがカートリッジによって遮断される位置は、第2のx位置であり、該較正はさらにまた、e第1のx位置と第2のx位置との間の中間点を計算する工程、およびf随意に、a-eを繰り返し、計算された中間点を平均化する工程を含む。別の実施形態において、垂直方向のレーザーの使用によるz軸に沿ったカートリッジの位置の較正は、a分注のオリフィスがレーザービーム上およびレーザーセンサーの範囲境界の外に位置付けられるようにプリンターヘッドを位置付けする工程、bセンサー境界が達成されるz軸に沿ってプリンターヘッドを動かす工程を含み、ここで、z位置は、レーザーセンサー境界が達成される位置であり、および該較正はさらに、随意に、aおよびbを繰り返し、平均のz位置を計算する工程を含む。別の実施形態において、z軸に沿ったカートリッジの位置の較正は、分注のオリフィスの位置を視覚的に決定する工程を含む。本明細書にはさらに、分注のオリフィスを含むカートリッジの位置を較正するためのシステムが記載され、ここで、該カートリッジは、バイオプリンターに取り付けられ、前記システムは、少なくとも1つの軸に沿ってカートリッジの位置を較正するための手段を含み、ここで、該軸は、y軸、x軸、およびz軸から選択される。1つの実施形態において、カートリッジを較正するための手段は、レーザーアライメント、光学的アライメント、機械的アライメント、圧電のアライメント、磁気のアライメント、電場または、静電容量のアライメント、超音波のアライメント、またはそれらの組み合わせである。別の実施形態において、カートリッジを較正するための手段は、レーザーアライメントである。また別の実施形態において、レーザーアライメントの手段は、水平方向のレーザーおよび垂直方向のレーザーから選択される、少なくとも1つのレーザーを含む。また別の実施形態において、レーザーアライメントの手段は、水平方向のレーザーおよび垂直方向のレーザーを含む。また別の実施形態において、レーザーアライメントの手段は、垂直軸上では±40μmまで及び水平軸上では±20μmまで正確である。さらに本明細書には、組織構成物を作成するための方法が記載され、該方法は、コンピューターモジュールが、所望の組織構成物の視覚表示の入力を受信する工程、コンピューターモジュールが、一連のコマンドを生成する工程を含み、ここで、該コマンドは、視覚表示に基づき、バイオプリンターによって読取り可能であり、該方法はさらに、コンピューターモジュールが、バイオプリンターに一連のコマンドを提供する工程、およびバイオプリンターが、定義された幾何学的配置を有する構成物を形成するために、コマンドに従ってバイオインクおよび支持物質を沈着させる工程を含む。幾つかの実施形態において、コンピューターモジュールは、ディスプレイスクリーンを含む。さらなる実施形態において、コンピューターモジュールは、グラフィカルユーザーインタフェースGUIを含む。またさらなる実施形態において、ユーザーは、コンピューターモジュールによって提供されるGUIを使用して所望の組織構成物の視覚表示を形成するために、1つ以上の対象のコンテンツを定義する。1つの実施形態において、ディスプレイスクリーンは、略同じ形状および略等しい大きさの複数の対象を含むグリッドから本質的に成る。また別の実施形態において、各対象は、円の形状である。また別の実施形態において、ユーザーは、所望の組織構成物の視覚表示を形成するために、1つ以上の対象のコンテンツを定義する。また別の実施形態において、ユーザーに定義された対象のコンテンツは、バイオインクまたは支持物質から選択される。さらなる実施形態において、ディスプレイスクリーンは、ユーザーによって電子的に又は手動で入力される、三次元のレンダリングから成り、それによって、三次元のレンダリングの様々な構成要素は、バイオプリンターにバイオ印刷プロトコルを実行する前に、任意の適切な平面またはベクトルに調節され得る。さらに本明細書には、カートリッジをバイオプリンターに取り付ける方法が記載され、該方法は、aカートリッジをコレットチャックに挿入する工程を含み、ここで、該コレットチャックは、バイオプリンターのプリンターヘッドに取り付けられ、および該方法はさらに、bコレットチャックの外側のカラーを調節する工程を含み、ここで、該挿入および調節において、プリンターヘッドの位置は実質的に変更されない。さらに本明細書には、少なくとも1つのオリフィスを含む、本明細書に記載されるバイオプリンターともに使用するためのカートリッジが記載され、ここで、該オリフィスのエッジは滑らか又は略滑らかである。1つの実施形態において、カートリッジは、キャピラリーチューブcapillarytubeまたはマイクロピペットである。別の実施形態において、カートリッジは、バイオインクを含む。また別の実施形態において、カートリッジは、支持物質を含む。また別の実施形態において、オリフィスは、円形または正方形である。また別の実施形態において、カートリッジは、約1μmから約1000μmまでの内径を有している。また別の実施形態において、カートリッジは、約500μmの内径を有している。また別の実施形態において、カートリッジは、約1μlから約50μlまでの体積を有している。また別の実施形態において、カートリッジは、約5μlの体積を有している。また別の実施形態において、カートリッジは、バイオインクの組成物を示すように印が付けられている。また別の実施形態において、カートリッジは、支持物質の組成物を示すように印が付けられている。幾つかの実施形態において、バイオインク及び/又は支持物質がプライミングされるprimed。さらなる実施形態において、バイオインクは、バイオプリンタープロトコルを開始する前に分注のオリフィスの高さにまでバイオインクを押し出すことによってプライミングされる。さらなる実施形態において、支持物質は、バイオプリンタープロトコルを開始する前に分注のオリフィスの高さにまで支持物質を押し出すことによってプライミングされる。さらに本明細書には、カートリッジをバイオプリンターに取り付けるためのシステムが記載され、該システムは、カートリッジを受け、バイオプリンターのプリンターヘッドにカートリッジを固定するための手段を含み、ここで、カートリッジを受け固定するための手段の使用において、プリンターヘッドの位置は実質的に変更されない。幾つかの実施形態において、カートリッジを受け、プリンターヘッドにカートリッジを固定するための手段は、次のものから選択される:磁気引力、コレットチャックのグリップ、フェルール、ナット、バレルアダプター、またはそれらの組み合わせ。1つの実施形態において、カートリッジを受け、プリンターヘッドにカートリッジを固定するための手段は、コレットである。さらに本明細書には、バイオプリンターから分注された1つ以上の構造を受けるための受け面が記載される。1つの実施形態において、受け面は、平らまたは略平らである。別の実施形態において、受け面は、滑らか又は略滑らかである。また別の実施形態において、受け面は、a平らまたは略平らであり、b滑らか又は略滑らかであり、またはc画定されるdefined又は略画定される。別の実施形態において、受け面の形topographyは、1つ以上の分注された構造の大きさ、形状、または構成、または幾何学的構造に適応するか影響を及ぼすように設計されている。また別の実施形態において、受け面は、固形物、半固形物、またはそれらの組み合わせを含む。また別の実施形態において、受け面は、ガラス、プラスチック、金属、金属合金、またはそれらの組み合わせを含む。また別の実施形態において、受け面は、ゲルを含む。また別の実施形態において、受け面は、1つ以上の構造の接着に抵抗する。また別の実施形態において、受け面は、重合したNovoGel商標を含む。本発明は、再生医療、組織/臓器の工学、生物学および医療の研究、および創薬の分野に関する。より具体的には、本発明は、組織および臓器を作成するためのデバイス、そのようなデバイスを較正し使用するためのシステムおよび方法、および本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法によって作成された組織および臓器に関する。本明細書には、特定の実施形態において、バイオプリンターが開示され、該バイオプリンターは、1つ以上のプリンターヘッドを含み、ここで、プリンターヘッドは、少なくとも1つのカートリッジを受け保持するための手段を含み、ここで、前記カートリッジは、バイオインクおよび支持物質の1つ以上から選択されるコンテンツを含み、該バイオプリンターはさらに、少なくとも1つのカートリッジの位置を較正するための手段、および少なくとも1つのカートリッジのコンテンツを分注するための手段を含む。また本明細書には、特定の実施形態において、沈着のオリフィスを含むカートリッジの位置を較正する方法が記載され、ここで、該カートリッジはバイオプリンターに取り付けられ、該方法は、少なくとも1つの軸に沿ってカートリッジの位置を較正する工程を含み、ここで、該軸は、x軸、y軸、およびz軸から選択され、および各較正は、レーザーの使用によって行われる。また本明細書には、特定の実施形態において、沈着のオリフィスを含むカートリッジの位置を較正するためのシステムが開示され、ここで、該カートリッジはバイオプリンターに取り付けられ、前記システムは、少なくとも1つの軸に沿ってカートリッジの位置を較正するための手段を含み、ここで、該軸は、y軸、x軸、およびz軸から選択される。また本明細書には、特定の実施形態において、組織構成物を作成するための方法が開示され、該方法は、コンピューターモジュールが、所望の組織構成物の視覚表示の入力を受信する工程、コンピューターモジュールが、一連のコマンドを生じさせる工程を含み、ここで、該コマンドは、視覚表示に基づき、バイオプリンターによって読取り可能であり、該方法はさらに、コンピューターモジュールが、一連のコマンドをバイオプリンターに提供する工程、およびバイオプリンターが、定義された幾何学的構造を有する構成物を形成するためのコマンドに従って、バイオインクおよび支持物質を沈着させる工程を含む。また本明細書には、特定の実施形態において、カートリッジをバイオプリンターに取り付ける方法が開示され、該方法は、aカートリッジをコレットチャックに挿入する工程を含み、ここで、該コレットチャックは、バイオプリンターのプリンターヘッドに取り付けられ、および該方法はさらに、bコレットチャックの外側のカラーを調節する工程を含み、ここで、該挿入および調節において、プリンターヘッドの位置は実質的に変更されない。また本明細書には、特定の実施形態において、カートリッジをバイオプリンターに取り付けるためのシステムが開示され、該システムは、カートリッジを受け、バイオプリンターのプリンターヘッドにカートリッジを固定するための手段を含み、ここで、カートリッジを受け固定するための手段の使用において、プリンターヘッドの位置は実質的に変更されない。<特定の定義>特に他に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術的及び科学的用語は、本発明の属する当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書で言及される、すべての出版物、特許出願、特許、および他の参考文献は、それら全体が引用によって組み込まれる。本明細書及び添付の請求項に使用されるように、単数形a、an、およびtheは、文脈がはっきりと特に指示していない限り、複数の言及を含む。したがって、例えば、核酸への言及は、1つ以上の核酸、及び/又は本開示などを読むことで当業者に明らかになるであろう本明細書に記載されるタイプの組成物などを含む。本明細書のまたはへのあらゆる言及は、特に他に明記のない限り、及び/又はを包含するように意図される。本明細書で使用されるように、同種移植片は、レシピエントと同じ種の遺伝的に同一でないメンバーに由来する臓器または組織を意味する。本明細書で使用されるようにバイオインクは、液体、半固形、または複数の細胞を含む固形組成物を意味する。幾つかの実施形態において、バイオインクは、細胞溶液、細胞集合体、細胞を含むゲル剤、多細胞体、または組織を含む。幾つかの実施形態において、バイオインクは、支持物質をさらに含む。幾つかの実施形態において、バイオインクは、バイオ印刷を可能にする特異的な生体力学的特性を提供する、細胞構造がない物質をさらに含む。本明細書で使用されるように、バイオ印刷は、自動化した、コンピューター支援の、三次元のプロトタイピングデバイス例えば、バイオプリンターと適合性のある方法を介して、細胞の三次元の正確な沈着例えば、細胞溶液、細胞を含むゲル剤、細胞懸濁液、細胞濃度、多細胞集合体、多細胞体などを利用することを意味する。本明細書で使用されるように、カートリッジは、バイオインクまたは支持物質を受ける且つ保持することができる任意の対象を意味する。本明細書で使用されるように、コンピューターモジュールは、より大きなコンピューターシステムと相互に作用するコードのセクションを含むソフトウェアコンポーネントを意味する。幾つかの実施形態において、ソフトウェアモジュールまたはプログラムモジュールは、ファイルの形態で生じ、典型的に、より大きなソフトウェアシステム内の具体的なタスクを処理する。幾つかの実施形態において、モジュールは、1つ以上のソフトウェアシステムに含まれ得る。他の実施形態において、モジュールは、1つ以上の他のモジュールとともに1つ以上のソフトウェアシステムへとシームレスに統合され得る。コンピューターモジュールは、随意に、コードの独立型のセクション、または随意に、別々に識別可能ではないコードである。コンピューターモジュールの重要な特徴は、エンドユーザーが、識別された機能を行うためのコンピューターを使用することを可能にするということである。本明細書で使用されるように、移植可能なは、生体適合性があり、一時的に又は実質的に永続的にかのいずれかで、有機体に挿入または移植可能であるか、あるいは有機体上に付着可能であることを意味する。本明細書で使用されるように、臓器は、共通機能に働くように構造ユニットへ連結された組織の集りを意味する。臓器の例は、限定されないが、皮膚、汗腺、脂線、乳腺、骨、脳、視床下部、脳下垂体、松果体、心臓、血管、喉頭、気管、気管支、肺、リンパ管、唾液腺、粘液腺、食道、胃、胆嚢、肝臓、膵臓、小腸、大腸、結腸、尿道、腎臓、副腎、管渠、尿管、膀胱、卵管、子宮、卵巣、精巣、前立腺、甲状腺、副甲状腺、マイボーム腺、耳下腺、扁桃、腺様、胸腺、およびひ臓を含む。本明細書で使用されるように、患者は、任意の個人を意味する。該用語は、被験体、レシピエント、およびドナーと交換可能である。該用語はどれも、医療専門家例えば、医師、看護婦、ナースプラクティショナー、医師助手、看護士、ホスピス職員、ソーシャルワーカー、治験担当者などまたは科学研究者の監督常時またはその他を必要とするものとして解釈されるべきではない。本明細書で使用されるように、幹細胞は、効能および自己複製を示す細胞を意味する。幹細胞は、限定されないが、全能細胞、多能性細胞、分化多能性細胞、少能性細胞、分化単能細胞、および始原細胞を含む。幹細胞は、胚性幹細胞、周産期の幹細胞、成体幹細胞、羊膜の幹細胞、および人工多能性幹細胞であり得る。本明細書で使用されるように、組織は、細胞の集合体を意味する。組織の例は、限定されないが、結合組織例えば、疎性結合組織、強靭結合組織、弾性組織、網状結締組織、および脂肪組織、筋組織例えば、骨格筋、平滑筋および心筋、尿生殖器組織、胃腸組織、肺組織、骨組織、神経組織、および上皮組織例えば、単層上皮および重層上皮、内胚葉由来組織、中胚葉由来組織、および外胚葉由来組織を含む。本明細書で使用されるように、異種移植片は、レシピエントとは異なる種に由来する臓器または組織を意味する。<臓器移植の現在の方法>現在、新たなdenovo臓器合成のための信頼できる方法はない。臓器は、例えば、腎臓と肝臓の提供のための生体ドナー、例えば、肺と心臓の提供のための死亡したドナー、および少数例では、動物例えば、ブタの心臓弁に由来するだけである。したがって、臓器移植を必要とする患者は、ドナー臓器が入手可能になるのを待たなければならない。これは結果的に入手可能な臓器の不足につながる。さらに、有機体から採取された臓器に頼ることによって、移植拒絶反応の確率が増加する。<移植拒絶反応>特定の例において、臓器移植を受ける患者は、超急性拒否反応を経験する。本明細書で使用されるように、超急性拒否反応は、ドナー臓器に対するレシピエントが有する先在する抗体から結果として生じる、補体媒介性の免疫反応を意味する。超急性拒否反応は、数分内に生じ、血液凝集によって特徴付けられる。移植器官がすぐに取り除かれないと、患者は敗血症になり得る。レシピエントが最初に免疫抑制剤を投与されなければ、異種移植片は超急性拒否反応をもたらす。幾つかの実施形態において、新たに作成された組織または臓器は、抗原を含まず、それ故、レシピエントの抗体によって認識することができない。特定の例において、臓器移植を受ける患者は、急性拒絶反応を経験する。本明細書で使用されるように、急性拒絶反応は、移植後約1週間から移植後約1年までで始まる免疫反応を意味する。急性拒絶反応は、ドナー臓器上に異質のHLA分子があることから結果として生じる。特定の例において、APCは、異質のHLAを認識し、ヘルパーT細胞を活性化する。特定の例において、ヘルパーT細胞は、細胞毒性T細胞およびマクロファージを活性化する。特定の例において、細胞毒性T細胞およびマクロファージがあることで、結果的に、異質のHLAを有する細胞の死亡をもたらし、それ故、移植器官の損傷あるいは死亡につながる。急性拒絶反応は、腎臓移植の約60-75および肝臓移植の50-60において生じる。幾つかの実施形態において、新たに作成された組織または臓器は、HLAを含まず、それ故、結果的にヘルパーT細胞の活性化をもたらす。特定の例において、臓器移植を受ける患者は、慢性拒否反応を経験する。本明細書で使用されるように、慢性拒否反応は、移植組織に対する、慢性の炎症反応および免疫反応から結果として生じる移植拒絶反応を意味する。幾つかの実施形態において、新たに作成された組織または臓器は、抗原または異質のHLAを含まず、それ故、炎症反応または免疫反応を誘発しない。特定の例において、臓器移植を受ける患者は、慢性同種移植脈管障害CAVを経験する。本明細書で使用されるように、慢性同種移植脈管障害は、移植器官の内部血管の線維化から結果として生じる移植器官の機能の喪失を意味する。特定の例において、CAVは、移植器官に対する長期的な免疫反応の結果である。幾つかの実施形態において、新たに作成された組織または臓器は、抗原または異質のHLAを含まず、それ故、免疫反応を結果的にもたらさない。移植拒絶反応を回避するために、臓器レシピエントは、免疫抑制剤を投与される。免疫抑制剤は、限定されないが、コルチコステロイド例えば、プレドニゾンおよびヒドロコルチゾン、カルシニューリン阻害剤例えば、シクロスポリンおよびタクロリムス、抗増殖剤例えば、アザチオプリンおよびミコフェノール酸、免疫系の特定成分に対する抗体例えば、バシリキシマブ、ダクリズマブdacluzimab、抗胸腺細胞グロブリンATG、および抗リンパ球グロブリンALGおよびmTOR阻害剤例えば、シロリムスおよびエベロリムスを含む。しかしながら、免疫抑制剤は、限定されないが、感染感受性例えば、ニューモシスティスカリニ肺炎PCP、サイトメガロウイルス肺炎CMV、単純性疱疹ウイルスおよび帯状疱疹ウイルスによる感染、および悪性細胞の蔓延、高血圧、脂質異常症、高血糖症、消化性潰瘍、肝臓および腎臓の損傷、および他の薬との相互作用を含む、いくつかのマイナスの副作用を有する。幾つかの実施形態において、新たに作成された組織または臓器は、結果的に免疫反応をもたらさず、それ故、免疫抑制剤の投与を必要としない。<感染>特定の例において、ドナー臓器は、感染因子によって感染され得る。感染した臓器の移植後、感染因子は、一つには免疫抑制剤の使用が原因でドナーの全体にわたって広がりかねない。限定しない例として、レシピエントは、移植器官から、HIV、西ナイルウイルス、狂犬病、C型肝炎、リンパ球脈絡髄膜炎ウイルスLCMV、結核、シャガス病、およびクロイツフェルト-ヤコブ病に感染した。このような感染はまれではあるが、それにもかかわらず生じる場合があり、すなわち、死亡したドナーのための社会生活歴は必然的に最近親者に由来するため、多くの場合不正確であり、血清学的検査は、セロコンバージョンが起こらないと、偽陰性結果をもたらし得るか、または輸血後の血液希釈が原因で偽陰性をもたらし得る。さらに、採取された臓器が生存可能である時間が限定されているため、多くの一般的ではない感染因子はスクリーニングされていない。幾つかの実施形態において、新たに作成された組織または臓器は、感染因子を含まない。<ドナーの合併症>生体ドナーは、臓器の提供の結果として合併症も経験し得る。これらの合併症は、院内感染、麻酔に対するアレルギー反応、および手術ミスを含む。さらに、臓器は、提供した臓器をいつか必要となるかもしれない。例えば、腎臓ドナーの残りの腎臓または肝臓ドナーの残りの葉は、損傷しかねない。幾つかの実施形態において、新たに作成された組織または臓器は、ドナー臓器の必要性を除去し、故にドナーに対する負の副作用を回避する。入手可能な臓器の不足およびドナー臓器移植後のすべての合併症を考慮すると、組織および臓器の新たな作成の方法が必要とされている。<組織工学>組織工学は、臓器または組織の増強、修復、または置換を介して組織機能を回復、維持、改善する生物学的代替物の開発に向けて、工学とライフサイエンスの原理を適用し、組み合わせる学際的分野である。典型的な組織工学に対する基本的なアプローチは、生体適合性であり、最終的に生物分解性である環境例えば、スキャフォールドに生細胞を播種し、その後、始原細胞の個体群がさらに拡大する且つ成熟するように、この構成物をバイオリアクター内で培養し、移植後に標的組織をもたらすことである。生物学的な細胞外マトリックスECMを模倣する適切なスキャフォールドによって、発展中の組織は、インビトロinvitroおよびインビボinvivoの成熟後の所望の臓器の形態および機能の両方を取り入れ得る。しかしながら、天然の組織のようなアーキテクチャーを有する十分に高い細胞密度を達成することは、スキャフォールドの全体にわたる細胞の分布および空間的配置を制御する能力が限定されるため、困難である。これらの限定によって、結果的に、機械的性質が乏しい及び/又は機能が不十分な組織または臓器がもたらされ得る。さらなる困難は、スキャフォールドの生物分解、残留ポリマーの捕捉、および製造プロセスの工業上のスケールアップに関係している。スキャフォールドがないアプローチが試みられた。現在のスキャフォールドがないアプローチは、いくつかの制限を受ける:各層が異なる細胞型を含む、多層構造などの複雑な幾何学的構造は、天然の組織のような結果を再生可能に達成するために、具体的なアーキテクチャー内で細胞型の明確で高分解能の配置を必要とし得る。尺度および幾何学的構造は、拡散及び/又は栄養供給に対する機能的な血管網のための必要条件によって限定される。組織の生存能力は、拡散を限定し、栄養に対する細胞のアクセスを制限する制限物質によって損なわれ得る。本明細書には、特定の実施形態において、三次元の組織構成物を作成する、デバイス、システム、および方法が開示される。本明細書に開示される、デバイス、システム、および方法は、次の三相プロセスを利用する:i前処理、あるいはバイオインクの調製、ii処理、すなわち、バイオプリンターによるバイオ用紙へのバイオインク粒子の実際の自動化した送達/印刷、およびiii後加工、すなわち、バイオリアクターにおける印刷された構成物の成熟/インキュベーション。最終的な構造物形成は、バイオインク粒子の融合によって後加工中に起こる。本明細書に開示される、デバイス、システム、および方法は、以下の利点を有する:それらは、細胞を含む組織及び/又は臓器をもたらすことができる。それらは、発生生物学の原則を活用することによって、天然の組織形成プロセスの環境条件を模倣する。それらは、広範囲の複雑なトポロジー例えば、多層構造、繰り返しの幾何学模様、セグメント、シート、チューブ、嚢などを達成することができる。それらは、製造の自動化した手段と適合性があり、スケーラブルである。バイオ印刷は、組織の修復、組織の増強、組織の置換、および臓器の置換に有用な、細胞を含む移植可能な組織を作成する方法を向上させることができる。さらに、バイオ印刷は、インビトロのアッセイに有用な組織を含むマイクロスケールの組織アナログを作成する方法を向上させることができる。<バイオ印刷>本明細書には、特定の実施形態において、組織および臓器を作成するための、デバイス、システム、および方法が開示される。幾つかの実施形態において、デバイスは、バイオプリンターである。幾つかの実施形態において、方法は、バイオ印刷技術の使用を含む。さらなる実施形態において、本明細書に記載される、デバイス、システム、および方法の使用によって作成された組織および臓器は、バイオ印刷される。幾つかの実施形態において、バイオ印刷された細胞の構成物、組織、および臓器は、三次元の送達装置例えば、バイオプリンターによって例えば、ヒドロゲル及び/又はで多孔質膜で作られた生体適合性のある表面上に、細胞溶液、細胞懸濁液、細胞を含むゲル剤またはペースト剤、細胞濃度、多細胞体例えば、シリンダー、楕円体、リボンなど、および支持物質を含む、細胞の三次元の、自動化した、コンピューター支援の沈着に基づいた、急速なプロトタイピング技術を利用する方法で作られる。本明細書で使用されるように、幾つかの実施形態において、組織及び/又は臓器に言及するために使用されるときの、用語操作されたengineeredは、細胞、細胞溶液、細胞懸濁液、細胞を含むゲル剤またはペースト剤、細胞濃縮物、多細胞集合体、およびそれらの層が、コンピューターコードに従うコンピューター支援のデバイス例えば、バイオプリンターによって、三次元構造を形成するために位置付けられる。さらなる実施形態において、コンピュータースクリプトは、例えば、1つ以上のコンピュータープログラム、コンピューターアプリケーション、またはコンピューターモジュールである。またさらなる実施形態において、三次元の組織構造は、初期の形態形成における自己集合現象に類似した細胞または多細胞体の印刷後の融合を介して形成される。手動での配置を含む三次元構造をもたらすために、生体適合性のある表面上に、細胞、多細胞集合体、及び/又はそれらの層を配置する多くの方法が利用可能であるが、バイオプリンターなどの、自動化した、コンピューター支援の機械による位置決めが利点となっている。この技術による細胞または多細胞体の送達の利点は、細胞、多細胞集合体及び/又は様々な組成物を有するそれらの層の計画された又は所定の配向またはパターンを示す構成物をもたらすための、細胞または多細胞体の、急速で、正確で、再生可能な配置を含む。利点はまた、細胞障害を最小限にしながら、確かな高い細胞密度を含むことである。幾つかの実施形態において、バイオ印刷の方法は、連続的及び/又は実質的に連続的である。連続的なバイオ印刷方法の限定しない例は、バイオインクの貯蔵器に接続された分注チップdispensetip例えば、シリンジ、キャピラリーチューブなどを介してバイオプリンターからバイオインクを分注することである。さらに限定しない実施形態において、連続的なバイオ印刷方法は、機能ユニットの繰り返しのパターンにおいてバイオインクを分注することである。様々な実施形態において、繰り返しの機能ユニットは、例えば、円、正方形、矩形、三角形、多角形、および不規則な幾何学的構造を含む、任意の適切な幾何学的構造を有する。さらなる実施形態において、バイオ印刷された機能ユニットの繰り返しのパターンは層を含み、複数の層は、隣接してバイオ印刷され例えば、積み重ねられ、操作された組織または臓器を形成する。様々な実施形態において、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、またはそれ以上の層は、隣接してバイオ印刷され例えば、積み重ねられ、操作された組織または臓器を形成する。幾つかの実施形態において、バイオ印刷された機能ユニットは、モザイク模様のパターンで繰り返す。モザイク模様のパターンは、平面をオーバーラップや隙間で満たさない図の平面である。連続的な及び/又はモザイク模様のバイオ印刷の利点は、バイオ印刷された組織の増加した作成を含むことができることである。増加した作成は、増加した尺度、増加した複雑性、または減少した時間または生産費用の達成を含むことができる。別の限定しない潜在的な利点は、三次元の構成物のバイオ印刷を完了するのに必要な較正事象の数を減らすことができるということである。連続的なバイオ印刷はまた、随意にシリンジの機構を使用して、バイオインクの大きな貯蔵器からのより大きな組織の印刷を促進し得る。連続的なバイオ印刷での方法は、印刷高さ、ポンプ速度、ロボット速度、またはそれらの組み合わせなどのパラメーターを、独立してまたは互いに関連して、最適化及び/又は平衡化することを含み得る。一例では、沈着のためのバイオプリンターのヘッドスピードは3mm/sであり、分注の高さは、第1層に関しては0.5mmであり、各々の続く層に関しては、0.4mm増加した。幾つかの実施形態において、分注の高さは、バイオプリンターの分注チップの直径と略等しい。限定されることなく、適切な及び/又は最適な分注の距離によって、結果的に物質が分注針にぴったり付くflatteningまたは接着することはない。様々な実施形態において、バイオプリンターの分注チップは、約20、50、100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000μm、またはそれ以上の内径を有し、それらにおいてインクリメントincrementsを含む。様々な実施形態において、バイオプリンターのバイオインク貯蔵器は、約.0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100立方センチメートル、またはそれ以上の容積を有し、それらにおいてインクリメントを含む。ポンプ速度は、システムにおける残留圧力の上昇が低いときに、適切及び/又は最適であり得る。好都合なポンプ速度は、貯蔵器と分注針の断面積の割合に依存し得、割合が大きいと、より低いポンプ速度を必要とする。幾つかの実施形態において、適切な及び/又は最適な印刷速度によって、物質の機械的結着性に影響を与えることなく、一様な線路の沈着が可能となる。本明細書に開示される本発明は、ビジネス方法を含む。幾つかの実施形態において、本明細書に開示される、デバイスおよび方法の速度およびスケーラビリティは、操作された組織及び/又は臓器の作成のために、産業施設及び/又は商業施設を設計し、建築し、かつ経営するために利用される。さらなる実施形態において、操作された組織及び/又は臓器は、例えば、組織損傷、組織障害、及び/又は臓器不全の医学的処置のための、物質、ツール、およびキット、またはバイオアッセイ及び/又は点検としての薬物スクリーニングを行うための、物質、ツール、およびキットとして、作成、保存、分配、売買、広告、および販売される。<バイオプリンター>本明細書には、特定の実施形態において、組織を作成するためのバイオプリンターが開示される。幾つかの実施形態において、バイオプリンターは、バイオ印刷プロセスを自動化する任意の器機である。特定の実施形態において、本明細書に開示されるバイオプリンターは、1つ以上のプリンターヘッドを含み、ここで、プリンターヘッドは、少なくとも1つのカートリッジを受け保持するための手段を含み、前記カートリッジは、バイオインクおよび支持物質の1つ以上から選択されるコンテンツを含み、該バイオプリンターはさらに、少なくとも1つのカートリッジの位置を較正するための手段、および少なくとも1つのカートリッジのコンテンツを分注するための手段を含む。様々な実施形態において、バイオプリンターは、二次元または三次元での所定の幾何学的構造例えば、位置、パターンなどにおいて、バイオインク及び/又は支持物質を分注する。幾つかの実施形態において、バイオプリンターは、プリンターヘッドを、プリンターステージまたはバイオ印刷された物質を受けるように適合された受け面に対して動かすことによって、特定の幾何学的構造を達成する。他の実施形態において、バイオプリンターは、プリンターステージまたは受け面を、プリンターヘッドに対して動かすことによって、特定の幾何学的構造を達成する。特定の実施形態において、バイオプリンターは、滅菌環境において維持される。幾つかの実施形態において、本明細書に開示されるバイオプリンターは、1つ以上のプリンターヘッドを含む。さらなる実施形態において、プリンターヘッドは、少なくとも1つのカートリッジを受ける且つ保持するための手段を含む。幾つかの実施形態において、プリンターヘッドは、1つを超えるカートリッジを受ける且つ保持するための手段を含む。幾つかの実施形態において、少なくとも1つのカートリッジを受ける且つ保持するための手段は、次のものから選択される:磁気引力、コレットチャックのグリップ、フェルール、ナット、バレルアダプター、またはそれらの組み合わせ。幾つかの実施形態において、少なくとも1つのカートリッジを受ける且つ保持するための手段は、コレットチャックのグリップである。幾つかの実施形態において、本明細書に開示されるバイオプリンターは、少なくとも1つのカートリッジの位置を較正するための手段を含む。幾つかの実施形態において、少なくとも1つのカートリッジの位置を較正するための手段は、次のものから選択される:レーザーアライメント、光学的アライメント、機械的アライメント、圧電のアライメント、磁気のアライメント、電場または、静電容量のアライメント、超音波のアライメント、またはそれらの組み合わせ。幾つかの実施形態において、少なくとも1つのカートリッジの位置を較正するための手段は、レーザーアライメントである。幾つかの実施形態において、本明細書に開示されるバイオプリンターは、少なくとも1つのカートリッジのコンテンツを分注するための手段を含む。幾つかの実施形態において、少なくとも1つのカートリッジのコンテンツを分注するための手段は、ピストンの適用、圧力の適用、圧縮ガスの適用、水圧の適用、またはそれらの組み合わせの適用である。幾つかの実施形態において、少なくとも1つのカートリッジのコンテンツを分注するための手段は、ピストンの適用である。幾つかの実施形態において、ピストンの直径は、カートリッジの直径より短い。幾つかの実施形態において、本明細書に開示されるバイオプリンターは、受け面をさらに含む。さらなる実施形態において、受け面は、バイオプリンターがバイオインク及び/又は支持物質を分注する、無細胞毒性の面である。幾つかの実施形態において、本明細書に開示されるバイオプリンターは、プリンターステージをさらに含む。さらなる実施形態において、受け面は、プリンターステージの面である。他の実施形態において、受け面は、プリンターステージとは離れた構成要素であるが、ステージに付けられるか又は保持される。幾つかの実施形態において、受け面は、平ら又は略平らである。幾つかの実施形態において、受け面は、滑らか又は略滑らかである。他の実施形態において、受け面は、略平ら且つ略滑らかである。またさらなる実施形態において、受け面は、バイオ印刷された構造の形状、大きさ、構成、または幾何学的構造に特に適応するように設計されている。またさらなる実施形態において、受け面は、バイオ印刷された構成物の大きさ、形状、構成、または幾何学的構造を制御するか又はそれらに影響を与える。幾つかの実施形態において、本明細書に開示されるバイオプリンターは、温度を調節するための手段を含む。幾つかの実施形態において、温度を調節するための手段は、周囲温度を調節する及び/又は維持する。他の様々な実施形態において、温度を調節するための手段は、限定しない例として、プリントヘッド、カートリッジ、カートリッジのコンテンツ例えば、バイオインク、支持物質など、プリンターステージ、および受け面の温度を調節及び/又は維持する。幾つかの実施形態において、温度を調節するための手段は、発熱体である。幾つかの実施形態において、温度を調節するための手段は、ヒーターである。幾つかの実施形態において、温度を調節するための手段は、放射加熱器、対流加熱器、伝導性のヒーター、ファンヒーター、熱交換器、またはそれらの組み合わせである。幾つかの実施形態において、温度を調節するための手段は、冷却要素である。幾つかの実施形態において、温度を調節するための手段は、冷媒の包装容器、冷却した液体、氷、またはそれらの組み合わせである。幾つかの実施形態において、温度を調節するための手段は、放射冷却器、対流冷却器、伝導性の冷却器、ファンクーラー、またはそれらの組み合わせである。様々な実施形態において、温度を調節するための手段は、温度を、約0、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、または90°Cまで調節することであり、それらにおいてインクリメントを含む。幾つかの実施形態において、温度は、約40°Cから約90°Cの間に調節される。他の実施形態において、温度は、約0°Cから約10°Cの間に調節される。幾つかの実施形態において、本明細書に開示されるバイオプリンターは、次の1つ以上に湿潤剤を適用するための手段をさらに含む:プリンターステージ;受け面、沈着のオリフィス、バイオインク、支持物質、または印刷された構成物。幾つかの実施形態において、湿潤剤を適用するための手段は、液体を適用する任意の適切な方法例えば、噴霧器、ピペット、インクジェットなどである。幾つかの実施形態において、湿潤剤は、水、組織培養培地、緩衝食塩水、血清、またはそれらの組み合わせである。さらなる実施形態において、バイオインクまたは支持物質がバイオプリンターによって分注された後、湿潤剤は適用される。幾つかの実施形態において、湿潤剤は、バイオプリンターによって分注されているバイオインクまたは支持物質とともに、同時または略同時に適用される。幾つかの実施形態において、湿潤剤は、バイオインクまたは支持物質がバイオプリンターによって分注される前に適用される。<プリンターヘッド>本明細書には、特定の実施形態において、組織および臓器を作成するための方法が開示される。幾つかの実施形態において、本明細書に開示されるバイオプリンターは、1つ以上のプリンターヘッドを含む。さらなる実施形態において、プリンターヘッドは、少なくとも1つのカートリッジを受ける且つ保持するための手段を含む。またさらなる実施形態において、プリンターヘッドは、少なくとも1つのカートリッジをバイオプリンターに取り付ける。少なくとも1つのカートリッジを受ける且つ保持するための多くの手段は適切である。少なくとも1つのカートリッジを受ける且つ保持するための適切な手段は、少なくとも1つのカートリッジをバイオプリンターに確実に、正確に、且つ安全に取り付ける手段を含む。様々な実施形態において、少なくとも1つのカートリッジを受ける且つ保持するための手段は、限定しない例として、磁気引力、コレットチャックのグリップ、フェルール、ナット、バレルアダプター、またはそれらの組み合わせである。幾つかの実施形態において、本明細書に開示されるプリンターヘッドは、1つのカートリッジを受ける且つ保持する。様々な他の実施形態において、本明細書に開示されるプリンターヘッドは、2、3、4、5、6、7、8、9、10、またはそれ以上のカートリッジを同時に受ける且つ保持する。さらなる実施形態において、本明細書に開示されるプリンターヘッドは、受けた且つ保持した複数のカートリッジの中からバイオ印刷に利用されるカートリッジを選択するための手段をさらに含む。幾つかの実施形態において、本明細書に開示されるプリンターヘッドは、1つ以上のカートリッジの容積を超えたバイオインク及び/又は支持物質を含むための貯蔵器をさらに含むまたは貯蔵器と液体連結している。さらなる実施形態において、貯蔵器は、分注のオリフィスを介する分注のために、バイオインク及び/又は支持物質を1つ以上のカートリッジに提供する。貯蔵器を含むプリンターヘッドの構成は、連続的または略連続的なバイオ印刷の適用に特に有用である。本明細書に開示される貯蔵器には多くの容積が適している。様々な実施形態において、貯蔵器は、例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、150、200、250、300、350、400、450、500mlまたはそれ以上の内容積を有し、それらにおいてインクリメントを含む。幾つかの実施形態において、バイオ印刷は、印刷高さ、ポンプ速度、ロボット速度、またはそれらの組み合わせなどのパラメーターを、独立してまたは互いに関連して構成するためのコンピューターの使用を含む。さらなる実施形態において、コンピューターコードは、受け面を超えるプリンターヘッドの高さを構成するために、プリンターヘッドの位置を指定する。さらなる実施形態において、コンピューターコードは、バイオインク及び/又は支持物質のための分注特性を構成するために、プリンターヘッドの動作の方向および速度を指定する。<カートリッジ>本明細書には、特定の実施形態において、組織および臓器を作成するためのバイオプリンターが開示される。幾つかの実施形態において、バイオプリンターに取り付けられたカートリッジは、バイオインクまたは支持物質を含む。幾つかの実施形態において、バイオプリンターは、具体的な細胞の構成物、組織、または臓器を形成するために、具体的なパターンおよび具体的な位置でバイオインクまたは支持物質を分注する。複合組織の構成物を作成するために、バイオプリンターは、正確な速度および均一の量で、バイオインクまたは支持物質を沈着させる。したがって、a滑らか又は略滑らかな分注のオリフィスおよびb滑らか又は略滑らかな内面を有するカートリッジが必要とされている。本明細書で使用されるように、カートリッジは、バイオインクまたは支持物質を受ける且つ保持することができる任意の対象を意味する。幾つかの実施形態において、本明細書に開示されるカートリッジは、バイオインクを含む。幾つかの実施形態において、本明細書に開示されるカートリッジは、支持物質を含む。幾つかの実施形態において、本明細書に開示されるカートリッジは、バイオインクおよび支持物質の組み合わせを含む。本明細書には、特定の実施形態において、少なくとも1つの分注のオリフィスを含む、本明細書に開示されるバイオプリンターとともに使用するためのカートリッジが開示される。幾つかの実施形態において、カートリッジは、1つの分注のオリフィスを含む。様々な他の実施形態において、カートリッジは、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、30、40、50、60、70、80、90、100、またはそれ以上の分注のオリフィスを含む。さらなる実施形態において、分注のオリフィスのエッジは滑らか又は略滑らかである。本明細書に開示される分注のオリフィスには多くの形状が適している。様々な実施形態において、分注のオリフィスに適切な形状は、限定しない例として、円形、卵形、三角形、正方形、矩形、多角形、および不規則な形状を含む。幾つかの実施形態において、分注のオリフィスは、円形である。他の実施形態において、分注のオリフィスは、正方形である。また他の実施形態において、分注のオリフィスは、卵形、長方形、または矩形であり、リボン状の形態で固形または半固形のバイオインク及び/又は支持物質を分注する。幾つかの実施形態において、カートリッジの内面は、滑らか又は略滑らかである。幾つかの実施形態において、カートリッジは、較正を促進するための剛構造で構成される。幾つかの実施形態において、カートリッジの壁は、細胞の付着に抵抗する物質で構成される。幾つかの実施形態において、カートリッジは、生体適合性である物質で構成される。多くのタイプのカートリッジは、本明細書に開示されるバイオプリンターとの使用およびバイオプリンターを使用する方法に適している。幾つかの実施形態において、カートリッジは、1つ以上の分注のオリフィスを通って半固形または固形のバイオインクまたは支持物質を押し出すことを含むバイオ印刷と適合性がある。幾つかの実施形態において、カートリッジは、1つ以上の分注のオリフィスを通って、液体または半固形の細胞溶液、細胞懸濁液、または細胞濃度を分注することを含むバイオ印刷と適合性がある。幾つかの実施形態において、カートリッジは、非連続的なバイオ印刷と適合性がある。幾つかの実施形態において、カートリッジは、連続的及び/又は略連続的なバイオ印刷と適合性がある。幾つかの実施形態において、カートリッジは、キャピラリーチューブまたはマイクロピペットである。幾つかの実施形態において、カートリッジは、シリンジまたは注射針である。略丸い又は円筒状のカートリッジには多くの内径が適している。様々な実施形態において、適切な内径は、限定しない例として、1、10、50、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000μmまたはそれ以上を含み、それらにおいてインクリメントを含む。他の様々な実施形態において、適切な内径は、限定しない例として、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100mmまたはそれ以上を含み、それらにおいてインクリメントを含む。幾つかの実施形態において、カートリッジは、約1μmから約1000μmまでの内径を有している。特定の実施形態において、カートリッジは、約500μmの内径を有している。別の特定の実施形態において、カートリッジは、約250μmの内径を有している。本明細書に開示されるカートリッジには多くの内容積が適している。様々な実施形態において、適切な内容積は、限定しない例として、1、10、20、30、40、50、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000μlまたはそれ以上を含み、それらにおいてインクリメントを含む。他の様々な実施形態において、適切な内容積は、限定しない例として、1、2、3、4、5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、200、300、400、500mlまたはそれ以上を含み、それらにおいてインクリメントを含む。幾つかの実施形態において、カートリッジは、約1μlから約50μlまでの容積を有している。特定の実施形態において、カートリッジは、約5μlの容積を有している。幾つかの実施形態において、カートリッジは、米国特許第7,051,654号に記載されるように、受け面上へのバイオインク及び/又は支持物質のインクジェット印刷と適合性がある。さらなる実施形態において、カートリッジは、本明細書に記載されるコンピューターコードの制御下で、電位開口型のノズルまたは注射針の形態で分注のオリフィスを含む。幾つかの実施形態において、カートリッジはプライミングされる。幾つかの実施形態において、カートリッジをプライミングすることによって、分注、沈着、または押出のプロセスの正確性が増加する。本明細書で使用されるように、プライミングされるprimedは、分注される物質バイオインクまたは支持物質が、分注のオリフィスに接する位置に位置付けられるまで、カートリッジのコンテンツを圧縮し、進めることによって、カートリッジのコンテンツが、分注、沈着、または押出の準備がなされることを意味する。幾つかの実施形態において、コンテンツが簡潔または略簡潔であるとき、およびコンテンツがカートリッジのオリフィスと物理的に接触しているときに、カートリッジはプライミングされる。幾つかの実施形態において、カートリッジは、そのコンテンツの組成物を示すように印が付けられる。さらなる実施形態において、カートリッジは、その中に含まれるバイオインク及び/又は支持物質の組成物を示すように印が付けられる。幾つかの実施形態において、カートリッジの表面は、色付けされている。幾つかの実施形態において、カートリッジの外側表面は、染色される、塗られる、ペンで印が付けられる、ステッカーで印が付けられる、またはそれらの組み合わせである。幾つかの実施形態において、カートリッジの外側表面は、カートリッジの表面の不透明度を増加させるために例えば、カートリッジの表面から反射されるレーザービームの量を増加させるために印が付けられる。幾つかの実施形態において、カートリッジの表面は、色付けされている。幾つかの実施形態において、カートリッジの外側表面は、刻み目が付けられているscored。本明細書で使用されように刻み目が付けられたscoredは、表面の平滑性を減少させるためにカートリッジの表面に印を付けることを意味する。カートリッジの表面に刻み目を付けるために、任意の適切な方法が使用される例えば、酸性の物質の適用、腐食性の物質の適用、研磨物質の適用など。幾つかの実施形態において、カートリッジの外側表面は、塗られる、磨かれる例えば、先端熱加工される、エッチングされる例えば、レーザーエッチングされる、ペンで印が付けられる、ステッカーで印が付けられる、またはそれらの組み合わせである。<グリップ>本明細書には、特定の実施形態において、組織および臓器を作成するためのバイオプリンターが開示される。幾つかの実施形態において、バイオプリンターに取り付けられたカートリッジは、バイオインク及び/又は支持物質を含む。幾つかの実施形態において、バイオプリンターは、具体的な細胞の構成物、組織、または臓器を形成するために、具体的なパターンおよび具体的な位置でバイオインクまたは支持物質を分注する。幾つかの実施形態において、バイオインクを含むカートリッジは、使い捨てである。幾つかの実施形態において、カートリッジは、コンテンツの押出後にバイオプリンターから取り出される。幾つかの実施形態において、続いて、新しいカートリッジがバイオプリンターに取り付けられる。複合体構造を作成するために、本明細書に開示されるバイオプリンターは、適切な反復可能な正確性を有するカートリッジからバイオインク及び/又は支持物質を分注する。様々な実施形態において、適切な反復可能な正確性は、任意の軸上の、約±5、10、20、30、40、50μmの正確性を含む。幾つかの実施形態において、本明細書に開示されるバイオプリンターは、約±20μmの反復可能な正確性を有するカートリッジからバイオインク及び/又は支持物質を分注する。しかしながら、カートリッジの制御されない除去および挿入は、結果的に、組織構成物に関してプリンターヘッドおよび故にカートリッジの位置の変更をもたらし、そのため、新しいカートリッジから沈着した第1バイオインク粒子の配置の精度は、以前のカートリッジから沈着した最近のバイオインク粒子と比べて変わり得る。したがって、カートリッジをプリンターヘッドに取り付け、固定する方法が必要とされ、ここで、前記取り付けおよび固定は、プリンターヘッドの位置の最小の変化をもたらすだけである。本明細書には、特定の実施形態において、カートリッジをバイオプリンターに取り付ける方法が開示され、該方法は、aカートリッジをコレットチャックに挿入する工程を含み、ここで、該コレットチャックは、バイオプリンターのプリンターヘッドに取り付けられ、および該方法はさらに、bコレットチャックの外側のカラーを調節する工程を含み、ここで、該挿入および調節において、プリンターヘッドの位置は実質的に変更されない。本明細書には、特定の実施形態において、カートリッジをバイオプリンターに取り付けるためのシステムが開示され、該システムは、カートリッジを受け、バイオプリンターのプリンターヘッドにカートリッジを固定するための手段を含み、ここで、カートリッジを受け固定するための手段の使用において、プリンターヘッドの位置は実質的に変更されない。幾つかの実施形態において、カートリッジを受け、プリンターヘッドにカートリッジを固定するための手段は、チャックまたはフェルールである。本明細書で使用されるように、チャックは、調節可能な顎から成る把持具を意味する。幾つかの実施形態において、カートリッジを受け、プリンターヘッドにカートリッジを固定するための手段は、コレットである。本明細書で使用されるように、コレットは、保持される対象のまわりのカラーを形成し強力な締め付けを発揮する、チャックの亜型を意味する。本明細書で使用されるように、フェルールは、1つの対象を別の対象に固定するために使用されるバンド例えば、金属バンドを意味する。幾つかの実施形態において、カートリッジを受け、プリンターヘッドにカートリッジを固定するための手段は、バレルアダプターである。本明細書で使用されるように、バレルアダプターは、1つの対象を別の対象に固定するために使用される糸を通したチューブを意味する。<受け面>本明細書には、特定の実施形態において、組織および臓器を作成するためのバイオプリンターが開示される。幾つかの実施形態において、バイオプリンターは、バイオインク及び/又は支持物質の、複数の要素、セクション、及び/又は領域を受け面上へと分注する。さらなる実施形態において、分注は、具体的なパターンおよび具体的な位置で生じる。またさらなる実施形態において、バイオプリンターが、バイオインク及び/又は支持物質を受け面上へと沈着する位置は、ユーザー入力によって定義され、コンピューターコードに変換される。幾つかの実施形態において、バイオインク及び/又は支持物質の、要素、セクション、及び/又は領域の各々は、300mmx300mmx160mm未満の寸法を有している。ほんの一例として、バイオインクまたは支持物質のセクションの寸法は、75mmx5.0mmx5.0mm、0.3mmx2.5mmx2.5mm、1mmx1mmx50mm、または150mmx150mmx80mmであり得る。一般に小規模な各セクション、および幾つかの場合において、必要とされる高い精度が原因で、受け面の微細な欠陥が、結果的に、細胞の構成物、組織、または臓器の欠陥および潜在的に失敗をもたらし得る。したがって、バイオインク及び/又は支持物質のセクションを受けることができる、略滑らか且つ略平らな受け面、または画定または略画定された受け面が必要とされている。本明細書には、特定の実施形態において、本明細書に開示されるバイオプリンターによって作成された1つ以上の構造を受けるための受け面が開示される。幾つかの実施形態において、受け面は、平ら又は略平らである。幾つかの実施形態において、受け面は、滑らか又は略滑らかである。幾つかの実施形態において、受け面は、平ら又は略平らである。幾つかの実施形態において、受け面は、画定または略画定される。他の実施形態において、受け面は、具体的なバイオ印刷された構造の、形状、大きさ、構成、または幾何学的構造に特に適応するように設計されている。さらなる実施形態において、受け面は、バイオ印刷された構成物の大きさ、形状、構成、または幾何学的構造を制御するか又はそれらに影響を与える。幾つかの実施形態において、受け面は、固形物、半固形物、またはそれらの組み合わせを含む。幾つかの実施形態において、受け面は、ガラス、被覆ガラス、プラスチック、被覆プラスチック、金属、金属合金、またはそれらの組み合わせを含む。幾つかの実施形態において、受け面は、ゲルを含む。幾つかの実施形態において、受け面およびその上の任意の被覆は、生体適合性がある。様々な実施形態において、受け面は、本明細書に開示される支持物質及び/又は制限物質のいずれかを含む。具体的な実施形態において、受け面は、重合したNovoGel商標または重合したアガロース、重合したゼラチン、細胞外マトリックスまたはその構成要素、コラーゲン、またはそれらの組み合わせを含む。<ソフトウェア>本明細書には、特定の実施形態において、組織および臓器を作成するための、バイオプリンターが開示される。幾つかの実施形態において、バイオプリンターに取り付けられた1つ以上のカートリッジは、バイオインク及び/又は支持物質を含む。幾つかの実施形態において、バイオプリンターは、具体的な細胞の構成物、組織、または臓器を形成するために、具体的なパターンおよび具体的な位置でバイオインクまたは支持物質を分注する。複合組織の構成物を作成するために、バイオプリンターは、受け面上の正確な位置で二次元または三次元でバイオインクまたは支持物質を沈着する。幾つかの実施形態において、バイオプリンターが、バイオインク及び/又は支持物質を沈着させる位置は、ユーザー入力によって定義され、コンピューターコードに変換される。さらなる実施形態において、コンピューターコードは、指定されたタスクを行うために書かれた、デジタル加工デバイスの中央処理装置CPUにおいて実行可能な、一連の命令を含む。幾つかの実施形態において、限定しない例として、印刷高さ、ポンプ速度、ロボット速度、及び/又は可変的な分注のオリフィスの制御を含む、付加的なバイオ印刷パラメーターは、ユーザー入力によって定義され、コンピューターコードに変換される。他の実施形態において、このようなバイオ印刷パラメーターは、ユーザー入力によって直接的に定義されないが、本明細書に記載されるコンピューターコードによって他のパラメーターおよび条件から派生する。本明細書には、特定の実施形態において、組織構成物、組織、および臓器を作成するための方法が開示され、該方法は、コンピューターモジュールが、所望の組織構成物の視覚表示の入力を受信する工程、コンピューターモジュールが、一連のコマンドを生じさせる工程を含み、ここで、該コマンドは、視覚表示に基づき、バイオプリンターによって読取り可能であり、該方法はさらに、コンピューターモジュールが、一連のコマンドをバイオプリンターに提供する工程、およびバイオプリンターが、定義された形状を有する構成物を形成するためのコマンドに従って、バイオインク及び/又は支持物質を沈着させる工程を含む。<コンピューター読取り可能な媒体>幾つかの実施形態において、バイオプリンターがバイオインク及び/又は支持物質を沈着させる位置は、ユーザー入力によって定義され、コンピューターコードに変換される。幾つかの実施形態において、本明細書に開示される、デバイス、システム、および方法は、コンピューター読取り可能な媒体またはコンピューター読取り可能なプログラムコードによってコード化された媒体をさらに含む。さらなる実施形態において、コンピューター読取り可能な媒体は、バイオプリンターあるいはその構成要素またはバイオプリンターあるいはその構成要素に接続されたコンピューターなどのデジタル加工デバイスの有形要素である。またさらなる実施形態において、コンピューター読取り可能な媒体は、デジタル加工デバイスから随意に除去可能である。幾つかの実施形態において、コンピューター読取り可能な媒体は、限定しない例として、CD-ROM、DVD、フラッシュメモリ装置、ソリッドステートメモリ、磁気ディスクドライブ、磁気テープドライブ、光ディスク駆動装置、クラウドコンピューティングのシステムおよびサービスなどを含む。<コンピューターモジュール>幾つかの実施形態において、本明細書に記載される、デバイス、システム、および方法は、ソフトウェア、サーバー、およびデータベースモジュールを含む。幾つかの実施形態において、コンピューターモジュールは、より大きなコンピューターシステムと相互に作用するコードのセクションを含むソフトウェアコンポーネントである。さらなる実施形態において、ソフトウェアモジュールまたはプログラムモジュールは、1つ以上のファイルの形態で生じ、典型的に、より大きなソフトウェアシステム内の具体的なタスクを処理する。幾つかの実施形態において、モジュールは、1つ以上のソフトウェアシステムに含まれる。他の実施形態において、モジュールは、1つ以上の他のモジュールとともに1つ以上のソフトウェアシステムへと統合される。コンピューターモジュールは、随意に、コードの独立型のセクション、または随意に、別々に識別可能ではないコードである。幾つかの実施形態において、コンピューターモジュールは、単一のアプリケーション内にある。他の実施形態において、コンピューターモジュールは、複数のアプリケーション内にある。幾つかの実施形態において、コンピューターモジュールは、1つの機械上でホストされるhosted。他の実施形態において、コンピューターモジュールは、複数の機械上でホストされる。幾つかの実施形態において、コンピューターモジュールは、1つの位置において複数の機械上でホストされる。他の実施形態において、コンピューターモジュールは、1つ以上の位置において複数の機械上でホストされる。さらに本明細書には、位置と位置決めのデータのフォーマットが記載される。幾つかの実施形態において、本明細書に記載されるデータファイルは、限定しない例として、タブ区切り形式、コンマ区切り形式、文字区切り形式、デリミッター区切り形式、XML、JSON、BSON、およびYAMLを含む、任意の適切なデータの整列化形式でフォーマットされる。コンピューターモジュールの重要な特徴は、エンドユーザーが、識別された機能を行うためのコンピューターを使用することを可能にするということである。<グラフィックユーザーインタフェース>幾つかの実施形態において、コンピューターモジュールは、グラフィカルユーザーインタフェースGUIを含む。本明細書で使用されるように、グラフィックユーザーインタフェースは、アプリケーションの入出力の画像表示に加え、テキスト表示、および情報が保存される階層的構造または他のデータ構造を使用するユーザー環境を意味する。幾つかの実施形態において、コンピューターモジュールは、ディスプレイスクリーンを含む。さらなる実施形態において、コンピューターモジュールは、ディスプレイスクリーンを介して、二次元のGUIを提示する。他の実施形態において、コンピューターモジュールは、ディスプレイスクリーンを介して、バーチャルリアリティー環境などの三次元のGUIを提示する。幾つかの実施形態において、ディスプレイスクリーンは、タッチスクリーンまたはマルチタッチスクリーンであり、対話型のGUIを提示する。幾つかの実施形態では、ディスプレイスクリーンは、規則的に間隔を置かれた、略同じ形状と略等しい大きさの対象を含むグリッドから本質的に成るGUIを提示する。提示された対象には任意の適切な形状がある。幾つかの実施形態では、対象に適切な形状は、これらの例に限定されないが、円形、卵形、正方形、矩形、三角形、ダイヤモンド形、多角形、あるいはその組み合わせを含む。幾つかの実施形態では、ユーザーは、所望組織構成物の二次元又は三次元の視覚表示を形成するために、1以上の対象のコンテンツを定義する。例えば、図4を参照。幾つかの実施形態では、対象のユーザー定義のコンテンツは、これらの例に限定されないが、様々な組成物を有するバイオインク、又は様々な組成物を有する支持物質である。幾つかの実施形態では、ユーザーは、細胞の色又は対象の形状を変更することにより、対象のコンテンツを定義する。<バイオインク>ある実施形態において、本明細書に記載されているのは、組織と器官を作成するためのデバイス、システム及び方法である。幾つかの実施形態では、デバイスは、随意にバイオインクを含んでいる少なくとも1個のカートリッジを受け、保持するために、1つ以上のプリンターヘッドを含む。幾つかの実施形態では、その方法は、バイオインクの使用を含む。さらなる実施形態では、本明細書に記載されているデバイス、システム及び方法の使用により作成された組織と器官は、作成時に、又はその後にバイオインクを含む。幾つかの実施形態では、バイオインクは、複数の細胞から成る、液体、半固形又は固形の組成物を含む。幾つかの実施形態では、バイオインクは、液体又は半固形細胞溶液、細胞懸濁液、又は細胞濃度を含む。さらなる実施形態では、細胞の溶液、懸濁液又は濃度は、液体又は半固形例えば、粘性の担体、及び複数の細胞を含む。またさらなる実施形態では、担体は、本明細書に記載されているもののように、適切な細胞栄養培地である。幾つかの実施形態では、バイオインクは、半固形又は固形の多細胞の集合体、又は多細胞体を含む。さらなる実施形態では、1複数の細胞又は細胞集合体と、生体適合性の液体又はゲルを所定の割合で混合し、バイオインクをもたらし、2バイオインクを圧縮し、所望細胞密度及び粘度を有するバイオインクを製造することにより、バイオインクを製造する。幾つかの実施形態では、バイオインクの圧縮を、遠心分離、タンジェント流濾過TFF、又はそれらの組み合わせによって達成する。幾つかの実施形態では、バイオインクを圧縮することにより、押し出し可能な組成物が結果として生じ、多細胞の集合体又は多細胞体の成形を可能にする。幾つかの実施形態では、押し出し可能とは、ノズル又はオリフィス例えば1つ以上のホール又はチューブを通して強制的に例えば圧力下において形成され得ることを意味する。幾つかの実施形態では、バイオインクの圧縮は、細胞を適切な密度になるまで育てることから生ずる。バイオインクに必要な細胞密度は、使用されている細胞、及び製造される組織又は器官に応じて変化する。幾つかの実施形態では、バイオインクの細胞を凝集及び/又は接着する。幾つかの実施形態では、凝集するcohere、凝集したcohered、及び凝集cohesionは、細胞、多細胞の集合体、多細胞体、及び/又はそれらの層を結合する、細胞間密着性を指す。さらなる実施形態では、その用語は、融合するfuse、融合したfused、及び融合fusionと互換的に使用される。幾つかの実施形態では、バイオインクはさらに、支持物質、細胞培養培地、細胞外マトリクスあるいはその成分、細胞接着薬剤、細胞死抑制剤、抗アポトーシス薬、抗酸化剤、押し出しコンパウンド、及びそれらの組み合わせを含む。<細胞>様々な実施形態では、本明細書に開示されているのは、複数の細胞から成る液体、半固形又は固形組成物を含むバイオインクである。幾つかの実施形態では、バイオインクは、液体又は半固形細胞溶液、細胞懸濁液、又は細胞濃度を含む。幾つかの実施形態では、いかなる哺乳動物細胞も、バイオインク、及び本明細書に記載されているデバイス、システム及び方法を使用する組織と器官の生成で使用するのに適している。様々な実施形態では、細胞は任意の適切な細胞である。さらに様々な実施形態では、細胞は、脊椎動物細胞、哺乳動物細胞、ヒト細胞又はそれらの組み合わせである。幾つかの実施形態では、本明細書に開示された方法の中で使用される細胞のタイプは、生成される細胞構成物、組織又は器官のタイプに依存する。幾つかの実施形態では、バイオインクは1つのタイプの細胞を含む相同性のインクhomologousinkとも呼ぶ。幾つかの実施形態では、バイオインクは1つを超えるタイプの細胞を含む異種のインクheterologousinkとも呼ぶ。さらなる実施形態では、細胞は、これらの例に限定されないが、収縮細胞又は筋細胞例えば骨格筋細胞、心筋細胞、平滑筋細胞及び筋芽細胞、結合組織細胞例えば骨細胞、軟骨細胞、繊維芽細胞、及び造骨細胞、軟骨細胞又はリンパ組織に分化する細胞、骨髄細胞、内皮細胞、皮膚細胞、上皮細胞、乳房細胞、血管細胞、血液細胞、リンパ細胞、神経細胞、シュワン細胞、胃腸細胞、肝細胞、膵細胞、肺細胞、気管細胞、角膜細胞、尿生殖器の細胞、腎臓細胞、生殖細胞、脂肪細胞、実質細胞、周皮細胞、中皮細胞、間質細胞、未分化細胞例えば胚細胞、幹細胞及び始原細胞、内胚葉由来細胞、中胚葉由来細胞、外胚葉由来細胞、及びそれらの組み合わせである。幾つかの実施形態では、細胞は成体の、分化細胞である。さらなる実施形態では、分化細胞は、例えば分離時の平滑筋細胞、繊維芽細胞又は内皮細胞と一致する組織特異的な表現型を有する細胞であって、その中で、組織特異的な表現型あるいは表現型を示す可能性は、分離時から使用時まで維持される。他の実施形態では、細胞は成体の、未分化細胞である。さらなる実施形態では、未分化細胞は、例えば平滑筋細胞、繊維芽細胞、又は内皮細胞の決定的な組織特異的な特性を有していないか、失った細胞である。幾つかの実施形態では、未分化細胞は幹細胞を含む。さらなる実施形態では、幹細胞は効力と自己複製を示す細胞である。幹細胞は、これらに限定されないが、全能細胞、多能性細胞、分化多能細胞、少能性細胞、分化単能細胞及び始原細胞を含む。幹細胞は、胚幹細胞、成体幹細胞、羊水幹細胞及び人工多能性幹細胞であってもよい。さらに他の実施形態では、細胞は、成体の分化細胞及び成体の未分化細胞の混合物である。<細胞培養培地>幾つかの実施形態では、バイオインクは細胞培養培地を含む。細胞培養培地は任意の適切な培地である。様々な実施形態では、適切な細胞培養培地は、これらの例に限定されないが、Dulbecco’sPhosphateBufferedSaline、Earle’sBalancedSalts、Hanks’BalancedSalts、Tyrode’sSalts、Alsever’sSolution、Gey’sBalancedSaltSolution、Kreb’s-HenseleitBufferModified、Kreb’s-RingerBicarbonateBuffer、Puck’sSaline、Dulbeco’sModifiedEagle’sMedium、Dulbecco’sModifiedEagle’sMedium/NutrientF-12Ham、NutrientMixtureF-10HamHam’sF-10、Medium199、MinimumEssentialMediumEagle、RPMI-1640Medium、Ames’Media、BGJbMediumFitton-JacksonModification、Click’sMedium、CMRL-1066Medium、Fischer’sMedium、GlascowMinimumEssentialMediumGMEM、Iscove’sModifiedDulbecco’sMediumIMDM、L-15MediumLeibovitz、McCoy’s5AModifiedMedium、NCTCMedium、Swim’sS-77Medium、WaymouthMedium、William’sMediumE、あるいはそれらの組み合わせを含む。幾つかの実施形態では、細胞培養培地は変更されるか補充される。幾つかの実施形態では、細胞培養培地はさらに、アルブミン、セレニウム、トランスフェリン、フェチュイン、砂糖、アミノ酸、ビタミン、成長因子、サイトカイン、ホルモン、抗生物質、脂質、脂質担体、シクロデキストリン又はそれらの組み合わせを含む。<細胞外マトリクス>幾つかの実施形態では、バイオインクはさらに、1つ以上の細胞外マトリクスの成分又はその誘導体を含む。幾つかの実施形態では細胞外マトリクスは、細胞によって生成され、細胞から細胞外マトリクス空間に輸送されるタンパク質を含んでおり、そこでそれらは、組織を一緒に保持し、引張力を提供し、及び/又は細胞シグナル伝達を促進するための補助として役立っている。細胞外マトリクス成分の例は、これらに限定されないが、コラーゲン、フィブロネクチン、ラミニン、ヒアルロン酸塩、エラスチン及びプロテオグリカン類を含む。例えば、多細胞の集合体は、様々なECMタンパク質例えば、ゼラチン、フィブリノゲン、フィブリン、コラーゲン、フィブロネクチン、ラミニン、エラスチン、及び/又はプロテオグリカンを含み得る。ECM成分又はECM成分の誘導体は、多細胞の集合体を形成するために使用される細胞ペーストに加えられ得る。細胞ペーストに加えられたECM成分又はECM成分の誘導体は、ヒト又は動物源から精製され得、又は当該技術分野に既知の組換え方法によって生成され得る。あるいは、ECM成分又はECM成分の誘導体は、細長い細胞体中の細胞によって自然に分泌され得るか、又は細長い細胞体を作るために使用される細胞は、当該技術分野に既知の任意の適切な方法によって遺伝子操作され得、1以上のECM成分又はECM成分の誘導体、及び/又は1以上の細胞接着分子又は細胞マトリクス接着分子例えば、セレクチン、インテグリン、免疫グロブリン及びアドヘリンの発現レベルを変化させることができる。ECM成分又はECM成分の誘導体は、多細胞の集合体中で、細胞の凝集を促進し得る。例えば、ゼラチン及び/又はフィブリノゲンは、多細胞の集合体を形成するために使用される細胞ペーストに、適切に加えられ得る。その後、フィブリノゲンは、トロンビンの追加によってフィブリンに転換され得る。幾つかの実施形態では、バイオインクは、細胞接着を促進する薬剤をさらに含む。幾つかの実施形態では、バイオインクは、細胞死例えば壊死、アポプトーシス又は自己貪食を阻害する薬剤をさらに含む。幾つかの実施形態では、そのバイオインクは、抗アポプトーシス薬をさらに含む。細胞死を阻害する薬剤は、これらに限定されないが、小分子、抗体、ペプチド、ペプチボディ又はそれらの組み合わせを含む。幾つかの実施形態では、細胞死を阻害する薬剤は次のものから選択される:抗TNF薬剤、インターロイキンの活性を阻害する薬剤、インターフェロンの活性を阻害する薬剤、GCSF顆粒球コロニー刺激因子の活性を阻害する薬剤、マクロファージ炎症性タンパク質の活性を阻害する薬剤、TGF-Bトランスフォーミング増殖因子Bの活性を阻害する薬剤、MMPマトリックスメタロプロテイナーゼの活性を阻害する薬剤、カスパーゼの活性を阻害する薬剤、MAPK/JNKシグナル伝達カスケードの活性を阻害する薬剤、Srcキナーゼの活性を阻害する薬剤、JAKヤーヌスキナーゼの活性を阻害する薬剤、又はそれらの組み合わせ。幾つかの実施形態では、バイオインクは抗酸化剤を含む。<押し出しコンパウンド>幾つかの実施形態では、バイオインクはさらに、押し出しコンパウンドすなわちバイオインクの押し出し特性を変更する化合物を含む。押し出しコンパウンドの例は、これらに限定されないが、ゲル剤、ヒドロゲル剤、界面活性剤ポリオール例えば、プルロニックF-127又はPF-127、熱応答性ポリマー、ヒアルロン酸塩、アルギン酸塩、細胞外マトリクス成分及びその誘導体、コラーゲン、その他の生物学的適合性のある天然又合成ポリマー、ナノファイバー、及び自己組織化ナノファイバーを含む。ゲルときに、ゼリーとも呼ばれるは、種々の方法で定義される。例えば、米国薬局方は、ゲルを、液体がしみこんだ小さな無機粒子又は大きな有機分子で構成されている、いずれかの懸濁液から成る半固体系として定義している。ゲルは、単相系又は二相系を含む。単相ゲルは、分散した高分子と液体との間に明らかな境界が存在しない様式で、液体全体に均一に分布する有機高分子からなる。いくつかの単相ゲルは、合成高分子例えば、カルボマー又は天然ゴム例えば、トラガカントから調製される。幾つかの実施形態において、単相ゲルは、一般的に水性であるが、アルコール及び油を用いても生成されるであろう。二相ゲルは、小さな別個の粒子のネットワークからなる。ゲルは、疎水性又は親水性に分類することもできる。特定の実施形態では、疎水性ゲルの基材は、ポリエチレンを有する液体パラフィン又はコロイドシリカでゲル化した脂肪油、あるいは、アルミニウム又は亜鉛石鹸からなる。対照的に、疎水性ゲルの基材は、通常は、水、グリセロール、又は適切なゲル化剤例えば、トラガカント、デンプン、セルロース誘導体、カルボキシビニルポリマー、及びマグネシウム-アルミニウムシリケートでゲル化したプロピレングリコールからなる。特定の実施形態では、本明細書に開示する組成物又はデバイスのレオロジーは、擬塑性、可塑性、チキソトロピック、又はダイラタントである。適切なヒドロゲルは、コラーゲン、ヒアルロン酸塩、フィブリン、アルギナート、アガロース、キトサン及びそれらの組み合わせから由来するものを含む。他の実施形態では、適切なヒドロゲルは、合成ポリマーである。さらなる実施形態では、適切なヒドロゲルは、ポリアクリル酸及びその誘導体、ポリ酸化エチレン及びそのコポリマー、ポリビニルアルコール、ポリホスファゼン及びそれらの組み合わせから由来するものを含む。様々な具体的な実施形態では、支持物質は次のものから選択される:ヒドロゲル、NovoGel商標、アガロース、アルギン酸塩、ゼラチン、マトリゲル商標、ヒアルロナン、ポロクサマー、ペプチドヒドロゲル、ポリイソプロピルn-ポリアクリルアミド、ポリエチレングリコールジアクリラートPEG-DA、ヒドロキシエチルメタクリレート、ポリジメチルシロキサン、ポリアクリルアミド、ポリ乳酸、シリコン、絹、又はそれらの組み合わせ。幾つかの実施形態では、ヒドロゲルベースの押し出しコンパウンドは、熱可逆性ゲル剤また、熱応答性ゲル剤又はサーモゲルとして知られているである。幾つかの実施形態では、適切な熱可逆性ヒドロゲルは、室温においては液体ではない。具体的な実施形態では、適切なヒドロゲルのゲル化温度Tgelは、約10°C、約15°C、約20°C、約25°C、約30°C、約35°C、及び約40°Cであって、それらにおいてインクリメントを含む。特定の実施形態では、適切なヒドロゲルのTgelは、約10°Cから25°Cである。幾つかの実施形態では、本明細書に記載されているバイオインク例えば、ヒドロゲル、1つ以上の細胞タイプ、その他の添加剤などを含むは、室温においては液体ではない。具体的な実施形態では、本明細書に記載されているバイオインクのゲル化温度Tgelは、約10°C、約15°C、約20°C、約25°C、約30°C、約35°C、及び約40°Cであって、それらにおいてインクリメントを含む。特定の実施形態では、本明細書に記載されているバイオインクのTgelは約10°Cから約25°Cである。ポリオキシプロピレン及びポリオキシエチレンで構成されるポリマーは、水溶液に組み込まれると、熱可逆性ゲルを形成する。これらのポリマーは、バイオプリンター機器内で維持することができる温度で、液態からゲル状態まで変化する能力を有している。液態からゲル状態の相転移は、溶液中のポリマー濃度及び成分に依存する。ポロクサマー407プルロニックF127又はPF‐127は、ポリオキシエチレン-ポリオキシプロピレンコポリマーから成る、非イオン性界面活性剤である。その他のポロクサマーは、188F-68グレード、237F-87グレード、338F-108グレードを含む。ポロクサマー水溶液は、酸、アルカリ、金属イオン存在下で安定である。PF-127は、平均分子量が13,000である、一般式E106P70E106の市販されているポリオキシエチレン-ポリオキシプロピレントリブロックコポリマーである。そのポリマーは、ポリマーのゲル化性を強化する適切な方法によってさらに精製され得る。それは、およそ70のエチレンオキシドを含み、これが親水性を有する。それは一連のポロクサマーABA型ブロックコポリマーの一つである。PF-127は、良好な溶解能力を有し、毒性が低く、したがって、適切な押し出しコンパウンドであると考えられる。幾つかの実施形態において、本明細書で提示されるヒドロゲル及びバイオインクの粘度は、本明細書で記載されている任意の手段で測定される。例えば、幾つかの実施形態において、LVDV‐IICPConePlateViscometer及びConeSpindleCPE‐40は、ヒドロゲル及びバイオインクの粘度を計算するために使用される。他の実施形態において、Brookfieldスピンドル及びカップ粘度計は、ヒドロゲル及びバイオインクの粘度を計算するために使用される。幾つかの実施形態では、本明細書で参照する粘度範囲は、室温で測定される。他の実施形態では、本明細書で参照する粘度範囲は、体温例えば、健康なヒトの平均体温で測定される。さらなる実施形態では、ヒドロゲル及び/又はバイオインクは、約500と1,000,000センチポイズの間、約750と1,000,000センチポイズの間;約1000と1,000,000センチポイズの間;約1000と400,000センチポイズの間;約2000と100,000センチポイズの間;約3000と50,000センチポイズの間;約4000と25,000のセンチポイズの間;約5000と20,000センチポイズの間;あるいは約6000と15,000センチポイズの間の粘度を有していることにより、特徴づけられる。幾つかの実施形態では、バイオインクは、連続的なバイオ印刷に適している細胞及び押し出しコンパウンドを含む。具体的な実施形態では、バイオインクには約1500mPasの粘度がある。PluronicF-127及び細胞形質成分の混合物は、連続的なバイオ印刷に適していてもよい。そのようなバイオインクは、冷たい4°Cリン酸塩緩衝食塩水PBS中に48時間にわたり、30w/vまで連続して混合することによって、PluronicF-127の粉末を溶かし、調製されてもよい。PluronicF-127も水に溶かされてもよい。細胞は標準的な無菌の細胞培養技術を使用し、培養され膨張してもよい。細胞は、例えば200gでペレット状であって、30のPluronicF-127で再懸濁され、その再懸濁液が約10°Cから約25°Cのゲル化温度で凝固することができるバイオプリンターに張り付けられたリザーバーへ吸引されてもよい。バイオ印刷よりも前のバイオインクのゲル化は随意である。PluronicF-127から成るバイオインクを含むバイオインクは、液体として分注することができる。様々な実施形態では、PluronicF-127の濃度は、適切な粘度及び/又は細胞毒性特性を有する任意の値になり得る。PluronicF-127の適切な濃度は、またバイオ印刷された時にその形状を保持する間、重量を支持することができ得る。幾つかの実施形態では、PluronicF-127の濃度は、約10、約15、約20、約25、約30、約35、約40、約45、あるいは約50である。ある実施形態では、PluronicF-127の濃度が、約30と約40の間、又は約30と約35の間である。図5は、510μmの針を備えたシリンジと接続されたNovoGenMMX商標バイオプリンターを使用する、PF-127の連続的な沈着によって生じた、三次元の、錐体形の構成物を示す。図6は、510μmの針を備えたシリンジと接続されたNovoGenMMX商標バイオプリンターを使用する、PF-127の連続的な沈着によって生じた、三次元の、立方体形左と中空の立方体形右の構成物を示す。幾つかの実施形態では、バイオインクの細胞構造例えば押し出しコンパウンドなどがない成分は、使用前に取り除かれる。さらなる実施形態では、細胞構造がない成分は、例えば、ヒドロゲル、界面活性剤ポリオール、熱応答性ポリマー、ヒアルロン酸塩、アルギン酸塩、コラーゲン又は他の生物学的適合性のある天然又は合成ポリマーである。またさらなる実施形態では、細胞構造がない成分は、物理的、化学的、又は酵素的な手段によって取り除かれる。幾つかの実施形態では、細胞構造がない成分の割合は、使用時に細胞の成分と関連付けられたままである。幾つかの実施形態では、細胞は、細胞間相互作用を増加させるために、前処理される。例えば、細胞は、バイオインクを形成する前に細胞間相互作用を強めるために、遠心分離の後に遠心管の内部でインキュベートされてもよい。<支持物質>一定の実施形態では、本明細書に開示されているのは、組織と器官を作成するためのデバイス、システム及び方法である。幾つかの実施形態では、デバイスは、随意に支持物質を含んでいる少なくとも1個のカートリッジを受け、保持するために、1つ以上のプリンターヘッドを含む。幾つかの実施形態では、その方法は、支持物質の使用を含む。さらなる実施形態では、本明細書に記載されているデバイス、システム及び方法の使用により作成された組織と器官は、作成時に、又はその後に支持物質を含む。幾つかの実施形態では、支持物質は、増殖する細胞又はそれに遊走する細胞、あるいはそれに接着する細胞を排除することができる。幾つかの実施形態では、支持物質は、栄養培地に透過性である。幾つかの実施形態では、支持物質の粘度は変わりやすい。幾つかの実施形態では、支持物質の粘度は、支持物質の温度の変更により変化する。幾つかの実施形態では、支持物質の粘度は、支持物質の圧力の変更により変化する。幾つかの実施形態では、支持物質の粘度は、支持物質の濃度の変更により変化する。幾つかの実施形態では、支持物質の粘度は、交差結合例えば、化学的な架橋剤の使用によって、あるいは光架橋photocrossinking例えば、紫外線暴露によってにより変化する。幾つかの実施形態では、支持物質の透過性は変わりやすい。幾つかの実施形態では、支持物質の透過性は、支持物質の温度又は支持物質の周囲の温度を変えることにより変更される。幾つかの実施形態では、支持物質の透過性は、支持物質を、支持物質の透過性を変更する薬剤と接触させることにより変更される。幾つかの実施形態では、支持物質のコンプライアンスすなわち、弾性又は硬性は変更される。幾つかの実施形態では、支持物質のコンプライアンスは、支持物質の温度又は支持物質の周囲の温度を変えることにより変更される。幾つかの実施形態では、支持物質のコンプライアンスは、支持物質を、支持物質のコンプライアンスを変更する薬剤と接触させることにより変更される。多くの支持物質は、本明細書に記載されている方法で使用するのに適している。幾つかの実施形態では、ヒドロゲルは、非粘着性、生物学的適合性、押し出し成形される、バイオ印刷可能な、細胞構造がなく、そして適切な強度であることを含む、1つ以上の有利な特性を持つ典型的な支持物質である。幾つかの実施形態では、適切なヒドロゲルは天然ポリマーである。ある実施形態では、制限物質はNovoGel商標で構成される。さらなる実施形態では、適切なヒドロゲルは、界面活性剤ポリオール例えば、PluronicF-127、コラーゲン、ヒアルロン酸塩、フィブリン、アルギン酸塩、アガロース、キトサン、誘導体又はそれらの組み合わせから由来するものを含む。その他の実施形態において、適切なヒドロゲルは、合成ポリマーである。さらなる実施形態では、適切なヒドロゲルは、ポリアクリル酸及びその誘導体、ポリエチレンオキシド及びそのコポリマー、ポリビニルアルコール、ポリホスファゼン及びそれらの組み合わせから由来するものを含む。様々な具体的な実施形態では、制限物質は、ヒドロゲル、NovoGel商標、アガロース、アルギン酸塩、ゼラチン、マトリゲル商標、ヒアルロナン、ポロクサマー、ペプチドヒドロゲル、ポリイソプロピルn-ポリアクリルアミド、ポリエチレングリコールジアクリラートPEG-DA、ヒドロキシエチルメタクリレート、ポリジメチルシロキサン、ポリアクリルアミド、ポリ乳酸、シリコン、絹、又はそれらの組み合わせから選択される。幾つかの実施形態では、支持物質は、バイオプリンター中に存在する前の細胞を含んでいる。幾つかの実施形態では、支持物質は、細胞の懸濁液を含んでいるヒドロゲルである。幾つかの実施形態では、支持物質は、1を超える細胞型の混合物を含んでいるヒドロゲルである。<支持物質の典型的な使用>幾つかの実施形態では、支持物質は、生物学的な構成物例えば細胞の構成物、組織、器官などを構成するための成形ユニットbuildingunitsとして使用される。さらなる実施形態では、支持物質ユニットは、所望構成物の細胞形質成分すなわち中間の細胞ユニットを欠くドメインを定義し維持するために使用される。幾つかの実施形態では、支持物質は任意の形状又は大きさを仮定することができる。例えば、ある実施形態によると、元々、バッファーと水で混合された粉末剤相中のNovoGel商標溶液は、その粘度を減少するために加熱され、所望寸法を有する微量ピペットであるいは、ピストンの負の変位によって、所望形状のチェンバで吸収されてもよい。ピペットあるいはチェンバ中のNovoGel商標溶液は、例えば、ピペットあるいはチェンバの外側に空気を押し入れるか、微量ピペットを、冷液を備えた包装容器へ詰めることによって、室温に冷却され得、その結果、それを、所望形状を有するゲルすなわち支持物質へ凝固させることができる。結果として生じる支持物質は、特定の細胞の構成物、組織又は器官の構造の間で、ピペット又はチェンバから分注されてもよい。例えば、図4を参照。幾つかの実施形態では、支持物質は、バイオ印刷の後の操作された組織又は器官の生存度を増加させるために使用される。さらなる実施形態では、支持物質は、制限物質例えば支持物質の一時的な、又は半永久的な格子を通じて、組織又は器官と栄養培地との間の直接的な接触を提供する。幾つかの実施形態では、組織は多孔性の、又はギャップされた物質gappedmaterialで抑制される。組織又は器官の細胞のうち、少なくともいくつかの、栄養に対する直接のアクセスは、組織又は器官の生存度を増加させる。さらなる実施形態では、本明細書に開示された方法は、操作された組織又は器官の生存度を増加させるために、次のものを含む、追加的で随意の工程から成る:1凝集された多細胞の集合体を位置づける前に、制限物質例えば支持物質の基層を随意に分注すること;2随意に周辺の制限物質を分注すること;3定義された形状内の組織の細胞をバイオ印刷すること;そして、4格子、メッシュ、又はグリッドのように、制限物質中の隙間をもたらすパターン内で発生期の組織を重ねる、制限物質の伸長体例えばシリンダー、リボンなどを分注すること。幾つかの実施形態では、パターンを重ねる隙間は、組織又は器官の表面の周囲で、一様に、又は略一様に分散される。他の実施形態では、隙間は非一様に分散され、それにより組織又は器官の細胞は、非一様に栄養に晒される。一様でない実施形態では、栄養に対する差次的なアクセスは、組織又は器官の1つ以上の特性に影響を及ぼすために利用されてもよい。例えば、バイオ印刷された細胞の構成物、組織又は器官の1つの表面上の細胞を、別の表面上の細胞より速く増殖させることは、望ましいかもしれない。幾つかの実施形態では、栄養に対する組織又は器官の様々な部分の曝露は、組織又は器官の所望エンドポイントへの発達に影響を及ぼすために、様々な時に変化され得る。幾つかの実施形態では、制限物質は、これらに限定されないが、バイオ印刷の直後例えば10分以内、バイオプリントの後例えば10分後、細胞が互いに実質的に凝集する前、細胞が互いに実質的に凝集した後、細胞が細胞外マトリクスを生成する前、細胞が細胞外マトリクスを生成した後、使用する直前などを含む、任意の適切な時に取り除かれる。様々な実施形態では、制限物質は任意の適切な方法によって取り除かれる。例えば、幾つかの実施形態では、制限物質は切除されるか、細胞から引き離すか、消化されるか、溶かされる。<バイオプリンターカートリッジの位置を較正する方法とシステム>特定の実施形態で、本明細書に開示されているのは、組織と器官を作成するためのバイオプリンターである。幾つかの実施形態では、バイオプリンターに付けられたカートリッジは、バイオインク及び/又は支持物質を含む。幾つかの実施形態では、バイオプリンターは、具体的な組織構成物を形成するために、具体的なパターンで、具体的な位置に、バイオインク又は支持物質を堆積させる。幾つかの実施形態では、バイオインクを含むカートリッジは、使い捨てである。幾つかの実施形態では、カートリッジは、コンテンツの押し出し、分注又は沈着の後に、バイオプリンターから放出される。幾つかの実施形態では、新しいカートリッジはバイオプリンターに付けられている。複雑な構造を作成するために、本明細書に開示されたバイオプリンターは、バイオインク及び/又は支持物質を、適切で反復可能な精度を有するカートリッジから分注する。様々な実施形態では、適切で反復可能な精度は、任意の軸上で約±5、10、20、30、40又は50μmの精度を含む。幾つかの実施形態では、本明細書に開示されたバイオプリンターは、バイオインク及び/又は支持物質を、約±20μmの反復可能な精度を有するカートリッジから分注する。しかしながら、幾つかの実施形態では、カートリッジの除去及び挿入のために、組織構成物に対するプリンターヘッドしたがってカートリッジの位置が変化する。したがって、プリンターステージ、受け面、組織又は器官に対するプリンターヘッド、カートリッジ及び分注のオリフィスの位置を正確に較正する方法が必要である。幾つかの実施形態では、プリンターヘッドの位置を較正する方法は、少なくとも1つのレーザーの使用を含む。さらなる実施形態では、プリンターヘッドの位置を較正する方法は、第1及び第2のレーザーの使用を含む。幾つかの実施形態では、プリンターヘッドの位置を較正する方法は、手動の例えば視覚的な較正を含む。幾つかの実施形態では、プリンターヘッドの位置を較正する方法は、手動の較正及びレーザー較正を含む。幾つかの実施形態では、プリンターヘッドの位置は1つの軸に沿って較正され、ここで軸は、X軸、Y軸及びZ軸から選択される。幾つかの実施形態では、プリンターヘッドの位置は2つの軸に沿って較正され、ここで軸は、X軸、Y軸及びZ軸から選択される。幾つかの実施形態では、プリンターヘッドの位置は3つの軸に沿って較正され、ここで軸は、X軸、Y軸及びZ軸から選択される。幾つかの実施形態では、較正は、少なくとも1つのレーザーの使用によって行われる。さらなる実施形態では、較正は、第1及び第2のレーザーの使用によって行われる。<水平方向のレーザーを使用する較正方法>特定の実施形態で、本明細書に開示されているのは、分注のオリフィスを含むプリンターヘッドの位置を較正する方法である。幾つかの実施形態では、本明細書に開示された方法はさらに、レーザーを活性化し少なくとも1つの略安定した及び/又は略定常的なレーザービームを発生させることを含み、ここで前記レーザービームは地面に水平である。図1を参照。幾つかの実施形態では、その方法は、少なくとも1つの軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することを含み、ここで軸はX軸、Y軸及びZ軸から選択される。幾つかの実施形態では、その方法は、少なくとも2つの軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することを含み、ここで軸は、X軸、Y軸及びZ軸から選択される。幾つかの実施形態では、その方法は、少なくとも3つの軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することを含み、ここで軸は、X軸、Y軸及びZ軸から選択される。幾つかの実施形態では、その方法は、aY軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正すること;bX軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正すること;及び/又は、cZ軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することを含み;ここで、それぞれの軸は、デカルト座標系中の同じ名前の軸に相当する。幾つかの実施形態では、較正は少なくとも1つのレーザーの使用によって行われる。幾つかの実施形態では、較正は第1及び第2のレーザーの使用によって行われる。幾つかの実施形態では、Y軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することは、aプリンターヘッドがi第1のy八分円に位置し、ii分注のオリフィスがレーザービームの上限よりも下になるように、プリンターヘッドの位置を決めること;bプリンターヘッドをレーザービームの方へ動かし、レーザービームがプリンターヘッドによって遮断されるとすぐにその動きを止めることここで、レーザービームがプリンターヘッドによって遮断される位置が、第1のy位置である;cプリンターヘッドが第2のy八分円に位置し、分注のオリフィスがレーザービームの上限よりも下になるように、プリンターヘッドを再度位置づけること;dプリンターヘッドをレーザービームの方へ動かし、レーザービームがプリンターヘッドによって遮断されるとすぐにその動きを止めることここで、レーザービームが遮断される位置が、第2のy位置である;eそして、第1のy位置と第2のy位置の間の中間点を計算すること、を含む。幾つかの実施形態では、X軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することは、aプリンターヘッドをi第1のy位置と第2のy位置の間の中間点であって、iiレーザーのセンサー境界の外側に位置付けること;bプリンターヘッドをセンサー境界に向けて動かし、プリンターヘッドがセンサー境界に接触するとすぐにその動きを止めること;ここで、プリンターヘッドがプリンターヘッド幅の半分増加したセンサーに接する位置が、x位置である。幾つかの実施形態では、Y軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することは、aレーザービームがプリンターヘッドの1つの側面の正確な位置を測定することができるように、プリンターヘッドを位置付けること;bレーザービームがプリンターヘッドの反対側の正確な位置を測定することができるように、プリンターヘッドを位置づけること;cそして、各々の測定間のレーザー位置と測定した距離と関連するように、プリンターヘッドの中間位置を計算すること、を含む。幾つかの実施形態では、X軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することは、aレーザービームがプリンターヘッドの1つの側面の正確な位置を測定することができるように、プリンターヘッドを位置づけること;bレーザービームがプリンターヘッドの反対側の正確な位置を測定することができるように、プリンターヘッドを位置づけること;cそして、各々の測定間のレーザー位置と測定した距離と関連するように、プリンターヘッドの中間位置を計算すること、を含む。幾つかの実施形態では、Z軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することは、a分注のオリフィスがレーザービームよりも上に位置するように、プリンターヘッドを位置づけること;bプリンターヘッドをレーザービームに向けて動かし、レーザービームがプリンターヘッドによって遮断されるとすぐにその動きを止めることここで、レーザービームが遮断される位置がz位置である、を含む。<垂直方向のレーザーを使用する較正方法>特定の実施形態で、本明細書に開示されているのは、分注のオリフィスを含むプリンターヘッドの位置を較正する方法である。幾つかの実施形態では、本明細書に記載された方法はさらに、レーザーを活性化し少なくとも1つの略安定した及び/又は略定常的なレーザービームを発生させることを含み、ここで前記レーザービームは地面に垂直である。図2を参照。幾つかの実施形態では、その方法は少なくとも1つの軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することを含み、ここで軸は、X軸、Y軸及びZ軸から選択される。幾つかの実施形態では、その方法は少なくとも2つの軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することを含み、ここで軸は、X軸、Y軸及びZ軸から選択される。幾つかの実施形態では、その方法は少なくとも3つの軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することを含み、ここで軸は、X軸、Y軸及びZ軸から選択される。幾つかの実施形態では、その方法は、aY軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正すること;bX軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正すること;そして、cZ軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することを含み;ここで、それぞれの軸は、デカルト座標系中の同じ名前の軸に相当する。幾つかの実施形態では、Y軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することは、aプリンターヘッドがi第1のy八分円に位置し、ii分注のオリフィスがレーザーのセンサー境界の外側になるように、プリンターヘッドの位置を決めること;bプリンターヘッドをレーザービームの方へ動かし、レーザービームがプリンターヘッドによって遮断されるとすぐにその動きを止めることここで、レーザービームがプリンターヘッドによって遮断される位置が、第1のy位置である;cプリンターヘッドが第2のy八分円に位置し、分注のオリフィスがレーザーのセンサー境界の外側にあるように、プリンターヘッドを再度位置づけること;dプリンターヘッドをレーザービームの方へ動かし、レーザービームがプリンターヘッドによって遮断されるとすぐにその動きを止めることここで、レーザービームが遮断される位置が、第2のy位置である;eそして、第1のy位置と第2のy位置の間の中間点を計算すること、を含む。幾つかの実施形態では、X軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することは、aプリンターヘッドをi第1のy位置と第2のy位置の間の中間点に、及びiiレーザーのセンサー境界の外側に位置付けること;bプリンターヘッドをセンサー境界に向けて動かし、プリンターヘッドがセンサー境界に接触するとすぐにその動作を止めること;ここで、プリンターヘッドがプリンターヘッド幅の半分増加したセンサーに接する位置が、x位置である。幾つかの実施形態では、Z軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することは、a分注のオリフィスがレーザーセンサー範囲限界のちょうど外側になるように、レーザービームよりも上に位置するように、プリンターヘッドを位置づけること;bプリンターヘッドをセンサー境界が到達するまで下げることここで、レーザーセンサー境界が到達した位置がz位置である、を含む。幾つかの実施形態では、工程a及びbは、プリンターヘッドの複数の点で繰り返され、測定された高さがz位置を決定するために平均化された。幾つかの実施形態では、Z軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することは、aレーザービームがプリンターヘッドの底の1点以上の正確な位置を測定することができるように、プリンターヘッドを位置付けること;bレーザー位置及び既知の測定された距離に基づいて、プリンターヘッドの絶対的な又は平均の部位を計算すること、を含む。<垂直水平方向のレーザーを用いた較正方法>特定の実施形態で、本明細書に開示されているのは、分注のオリフィスを含むプリンターヘッドの位置を較正する方法であって、ここでプリンターヘッドはバイオプリンターに付けられており、該方法は少なくとも1つの軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することを含み、ここで、軸はX軸、Y軸及びZ軸から選択される。幾つかの実施形態では、その方法は少なくとも2つの軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することを含み、ここで軸は、X軸、Y軸及びZ軸から選択される。幾つかの実施形態では、その方法は少なくとも3つの軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することを含み、ここで軸は、X軸、Y軸及びZ軸から選択される。幾つかの実施形態では、その方法は、aY軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正すること;bX軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正すること;そして、cZ軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正することを含み;ここで、軸はそれぞれ、デカルト座標系中の同じ名前の軸に相当する。幾つかの実施形態では、較正は、第1のレーザー及び第2レーザーの使用を含む。幾つかの実施形態では、第1のレーザーは垂直方向のレーザーであって、第2のレーザーは水平方向のレーザーである。<レーザーを使用する較正のためのシステム>特定の実施形態で、本明細書に開示されているのは、沈着のオリフィスを含むカートリッジの位置を較正するためのシステムであって、ここでカートリッジは、バイオプリンターに付けられ、前記システムは、少なくとも1つの軸に沿ってカートリッジの位置を較正するための手段を含んでおり、ここで軸は、Y軸、X軸及びZ軸から選択される。また、特定の実施形態では、本明細書に開示されているのは、分注のオリフィスを含むプリンターヘッドの位置を較正するためのシステムであって、ここでプリンターヘッドは、バイオプリンターに付けられており、前記システムは、X軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正するための手段;Y軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正するための手段;またZ軸に沿ってプリンターヘッドの位置を較正するための手段を含んでいる。幾つかの実施形態では、プリンターヘッドの位置を較正するためのシステムは、X軸、Y軸及びZ軸に沿ってプリンターヘッドを較正するための手段を含む。幾つかの実施形態では、X軸、Y軸及びZ軸に沿ってプリンターヘッドを較正するための手段は、レーザーアライメント、光学的アライメント、機械的アライメント、圧電のアライメント、磁気のアライメント、電場又は静電容量のアライメント、超音波のアライメント又はそれらの組み合わせである。幾つかの実施形態では、プリンターヘッドの位置を較正するためのシステムは、X軸、Y軸及びZ軸に沿ってプリンターヘッドを較正するための手段を含む。幾つかの実施形態では、X軸、Y軸及びZ軸に沿ってプリンターヘッドを較正するための手段は、レーザーアライメントである。幾つかの実施形態において、レーザーアライメント手段は、少なくとも1つのレーザーを含む。幾つかの実施形態では、レーザーアライメント手段は、複数のレーザーを含む。幾つかの実施形態では、レーザーアライメントは、それが任意の適切な精度を有していることを意味する。様々な実施形態では、適切な精度は、任意の軸上で約±5、10、20、30、40又は50μmの精度を含む。幾つかの実施形態では、レーザーアライメント手段は、垂直軸上で±40μm及び水平軸上で±20μmまで正確である。幾つかの実施形態では、レーザーの経路は、レーザー源と測定点の間で遮断されない。幾つかの実施形態では、レーザーの経路は、反射面又は光学レンズの使用によって、最大179°までで変更される。幾つかの実施形態では、レーザーの経路は90°までで変更される。幾つかの実施形態では、水平方向のレーザービームは、反射面を使用する偏光によって、垂直の経路において測定するために使用される。幾つかの実施形態では、垂直方向のレーザービームは、反射面を使用する偏光によって、水平の経路で測定するために使用される。<実施例>以下の具体的な例は、単に例示的なものとして解釈されるべきであり、方法はどうであれ、開示されているものの残りを限定するものとして、解釈されるべきではない。さらなる精錬なしで、当業者は、本明細書の記載に基づいて、本発明をその十分な程度まで利用することができると考えられる。本明細書に引用されるすべての公報は、それらの全体が引用によって本明細書に組み込まれる。これらに対する引用によって、このような情報の利用可能性及び一般的な普及が証明される。実施例1:HASMC-HAEC混合細胞シリンダー<細胞培養>平滑筋細胞:主要なヒト大動脈の平滑筋細胞HASMCを、37°C及び5のCO2で、10のウシ胎児血清FBS、100U/mlのペニシリン、0.1mg/mlのストレプトマイシン、0.25μg/mlのアムホテリシンB、0.01MのHEPESすべてInvitrogenCorp.,Carlsbad,CAから、50mg/Lのプロリン、50mg/Lのグリシン、20mg/Lのアラニン、50mg/Lのアスコルビン酸、及び3μg/LのCuSO4すべてSigma,St.Louis,MOからを補った、低グルコースのダルベッコ変法イーグル培地InvitrogenCorp.,Carlsbad,CAで維持し、増殖させた。継代4と8の間のHASMCのコンフルエントconfluentな培養物を、すべての研究において使用した。内皮細胞:主要なヒト大動脈の内皮細胞HAECを、2のFBS、1μg/mlのヒドロコルチゾン、10ng/mlのヒト表皮増殖因子、3ng/mlの塩基性線維芽細胞増殖因子、10μg/mlのヘパリン、100U/mlのペニシリン、0.1mg/mlのストレプトマイシン、及び0.25μg/mlのアムホテリシンBすべてInvitrogenCorp.,Carlsbad,CAからで補った、Medium200で維持し増殖した。細胞を、37°C及び5のCO2でフラスコで処理されたゼラチンブタの血清から;Sigma,St.Louis,MOでコーティングした組織培養上で増殖させた。継代4と8の間のHAECのコンフルエントな培養物を、すべての研究において使用した。<NovoGel商標のモールド>2w/vのNovoGel商標溶液の調製:1gの低融点NovoGel商標を、50mlのダルベッコ燐酸緩衝生理食塩水DPBSに溶かした。簡潔に言うと、NovoGel商標が完全に溶解するまで、DPBS及びNovoGel商標を、持続的に撹拌しながら、ホットプレート上で85°Cまで加熱した。NovoGel商標溶液を、125°Cで25分間、蒸気滅菌によって殺菌した。温度が66.5°Cを超えて維持される限り、NovoGel商標溶液は、液相にとどまった。この温度未満では、相転移が生じ、NovoGel商標溶液の粘度が増加し、NovoGel商標が固形ゲルを形成する。NovoGel商標モールドの調製:NovoGel商標のモールドを、10cmのペトリ皿に合うテフロン登録商標のモールドを使用して、細胞シリンダーのインキュベーションのために作成した。簡潔に言うと、テフロン登録商標のモールドを、70のエタノール溶液を使用し、45分間モールドを紫外線にさらして、あらかじめ殺菌した。殺菌したモールドを、10cmのペトリ皿VWRInternationalLLC,WestChester,PAの上に置き、しっかりと取り付けた。このアセンブリテフロン登録商標のモールドペトリ皿を縦に維持し、45mlのあらかじめ暖められた、無菌の2のNovoGel商標溶液を、テフロン登録商標のモールドとペトリ皿の間の空間に注いだ。その後、アセンブリを1時間室温で横に置き、NovoGel商標の完全なゲル化が可能となった。ゲル化の後、テフロン登録商標のプリントを取り除き、NovoGel商標のモールドを、DPBSを使用して2回洗浄した。その後、17.5mlのHASMC培地を、NovoGel商標のモールドに加えた。<HASMC-HAECシリンダー>HASMC-HAEC混合細胞シリンダーの作成:混合細胞シリンダーを調製するために、HASMC及びHAECを個別に集め、その後、前もって決められた割合で混合した。簡潔に言うと、培地を、コンフルエントな培養フラスコから取り除き、細胞をDPBS1ml/5cm2の増殖領域で洗浄した。細胞を、10分間、トリプシン1ml/15cm2の増殖領域の存在下でのインキュベーションによって、培養フラスコの表面から分離した。HASMCを0.15のトリプシンを使用して分離し、一方で、HAECを0.1のトリプシンを使用して分離した。インキュベーション後に、適切な培地をフラスコに加えたトリプシンの容積に対して2Xの容積。細胞懸濁液を、6分間200gで遠心分離にかけ、その後、上清溶液を完全に除去した。細胞ペレットを、それぞれの培地中に再懸濁し、血球計を使用して数えた。HASMC及びHAECの適切な容積を混合し、5、7.5、10、12.5、及び15のHAEC総細胞集団のとしてを含む、混合した細胞懸濁液を得た。混合した細胞懸濁液を、5分間200gで遠心分離にかけ、その後、上清溶液を完全に除去した。混合した細胞ペレットを、6mlのHASMC培地中に再懸濁し、20mlのガラスバイアルに移動させ、その後、60分間150rpmで、及び37°C及び5のCO2で、オービタルシェーカー上でインキュベートした。これによって、細胞が互いに凝集し、細胞-細胞接着を開始することが可能となる。インキュベーション後に、細胞懸濁液を、15mlの遠心分離チューブに移動させ、5分間200gで遠心分離にかけた。上清培地の除去後、細胞ペレットを、400μlのHASMC培地中に再懸濁し、数回ピペットアップ及びピペットダウンすることで、すべての細胞塊が壊れたことを確認した。細胞懸濁液を、15mlの遠心チューブの内部に置いた0.5mlのマイクロチューブへ移動させ、その後、4分間2000gで遠心分離にかけ、高密度の及びコンパクトな細胞ペレットを形成した。50mmの長さの細胞シリンダーを得るために、上清培地を吸収し、細胞を吸収によってキャピラリーチューブOD1.0mm,ID0.5mm,L75mm;DrummondScientificCo.,Broomall,PAへ移動させた。キャピラリー内部の細胞ペーストを、20分間、37°C及び5のCO2で、HASMC培地でインキュベートした。その後、細胞シリンダーを、キャピラリーを供給したプランジャーを使用して、キャピラリーチューブからNovoGel商標のモールドHASMC培地で覆われたの溝へと沈着させた。細胞シリンダーを、24時間及び48時間、37°C及び5のCO2でインキュベートした。実施例2:多層の血管のチューブ<細胞培養>平滑筋細胞:主要なヒト大動脈平滑筋細胞HASMC;GIBCOを、37°C及び5のCO2で、10のウシ胎児血清FBS、100U/mlのペニシリン、0.1mg/mlのストレプトマイシン、0.25μg/mlのアムホテリシンB、0.01MのHEPESすべて、InvitrogenCorp.,Carlsbad,CAから、50mg/Lのプロリン、50mg/Lのグリシン、20mg/Lのアラニン、50mg/Lのアスコルビン酸、及び3μg/LのCuSO4すべて、Sigma,St.Louis,Moで補った、低グルコースのダルベッコ変法イーグル培地DMEMで維持し、増殖させた。継代4と8の間のHASMCのコンフルエントな培養物を、すべての研究において使用した。内皮細胞:主要なヒト大動脈の内皮細胞HAECを、2のFBS、1μg/mlのヒドロコルチゾン、10ng/mlのヒト表皮増殖因子、3ng/mlの塩基性線維芽細胞増殖因子、10μg/mlのヘパリン、100U/mlのペニシリン、0.1mg/mlのストレプトマイシン、及び0.25μg/mlのアムホテリシンBすべて、InvitrogenCorp.,Carlsbad,CAからによって補われた、Medium200において維持し、増殖させた。細胞を、37°C及び5のCO2でフラスコで処理されたゼラチンブタの血清から;Sigma,St.Louis,MOでコーティングした組織培養上で増殖させた。継代4と8の間のHAECのコンフルエントな培養物を、すべての研究において使用した。線維芽細胞:主要なヒト大動脈の線維芽細胞HDFを、37°C及び5のCO2で、2のFBS、1μg/mlのヒドロコルチゾン、10ng/mlのヒト表皮増殖因子、3ng/mlの塩基性線維芽細胞増殖因子、10μg/mlのヘパリン、100U/mlのペニシリン、及び0.1mg/mlのストレプトマイシンすべて、InvitrogenCorp.,Carlsbad,CAからによって補われたMedium106において維持し、増殖させた。継代4と8の間のHDFのコンフルエントな培養物を、すべての研究において使用した。<NovoGel商標溶液及びモールド>2及び4w/vのNovoGel商標溶液の調製:1g又は2gそれぞれ2又は4に関するの低融点のNovoGel商標UltrapureLMPを、50mlのダルベッコ燐酸緩衝生理食塩水DPBSに溶かした。簡潔に言うと、DPBS及びNovoGel商標を、NovoGel商標が完全に溶解するまで、持続的に撹拌しながら、ホットプレート上で85°Cまで加熱した。NovoGel商標溶液を、125°Cで25分間、蒸気滅菌によって殺菌した。温度が66.5°Cを超えて維持される限り、NovoGel商標溶液は液相にとどまる。この温度未満で相転移が生じ、NovoGel商標溶液の粘度が増加し、NovoGel商標が固形ゲルを形成する。NovoGel商標のモールドの調製:NovoGel商標のモールドを、10cmのペトリ皿に合うテフロン登録商標のモールドを使用して、細胞シリンダーのインキュベーションのために作成した。簡潔に言うと、テフロン登録商標のモールドを、70のエタノール溶液を使用し、45分間モールドを紫外線にさらして、あらかじめ殺菌した。殺菌されたモールドを、10cmのペトリ皿の上に置き、しっかりと取り付けた。このアセンブリテフロン登録商標のモールドペトリ皿を縦に維持し、45mlのあらかじめ暖められた、無菌の2のNovoGel商標溶液を、テフロン登録商標のモールドとペトリ皿の間の空間に注いだ。その後、アセンブリを1時間室温で横に置き、NovoGel商標を完全にゲル化することが可能となった。ゲル化の後、テフロン登録商標のプリントを取り除き、NovoGel商標のモールドを、DPBSを使用して2回洗浄した。その後、17.5mlのHASMC培地を、HASMC-HAEC混合細胞シリンダーをインキュベートするために、NovoGel商標のモールドに加えるか、あるいは、17.5mlのHDF培地を、HDF細胞シリンダーをインキュベートするために、NovoGel商標のモールドに加える。<細胞シリンダー>HASMC-HAEC混合細胞シリンダーの作成:混合細胞シリンダーを調製するために、HASMC及びHAECを個別に集め、その後、前もって決められた割合で混合した。簡潔に言うと、培地を、コンフルエントな培養フラスコから取り除き、細胞をDPBS1ml/5cm2の増殖領域で洗浄した。細胞を、10分間、トリプシン1ml/15cm2の増殖領域の存在下で、インキュベーションによって培養フラスコの表面から分離した。HASMCを0.15のトリプシンを使用して分離し、一方で、HAECを0.1のトリプシンを使用して分離した。インキュベーション後に、適切な培地をフラスコに加えたトリプシンの容積に対して2Xの容積。細胞懸濁液を、6分間200gで遠心分離にかけ、その後、上清溶液を完全に除去した。細胞ペレットを、それぞれの培地中に再懸濁し、血球計を使用して数えた。HASMC及びHAECの適切な容積を混合し、15のHAEC及び残部85のHASMC総細胞集団の割合としてを含む混合した細胞懸濁液を得た。混合した細胞懸濁液を、5分間200gで遠心分離にかけ、その後、上清溶液を完全に除去した。混合した細胞ペレットを、6mlのHASMC培地中で再懸濁し、20mlのガラスバイアルに移動させ、その後、60分間150rpmで、及び37°C及び5のCO2で、オービタルシェーカー上でインキュベートした。これによって、細胞が互いに凝集し、細胞-細胞接着を開始することが可能となる。インキュベーション後に、細胞懸濁液を、15mlの遠心分離チューブに移動させ、5分間200gで遠心分離にかけた。上清培地の除去後、細胞ペレットを、400μlのHASMC培地中で再懸濁し、数回ピペットアップ及びピペットダウンすることで、すべての細胞塊が壊れたことを確認した。細胞懸濁液を、15mlの遠心分離チューブの内部に置いた0.5mlのマイクロチューブへ移動させ、その後、4分間2000gで遠心分離にかけ、高密度の及びコンパクトな細胞ペレットを形成した。50mmの長さの細胞シリンダーを得るために、上清培地を吸収し、細胞を吸収によって、キャピラリーチューブOD1.0mm,ID0.5mm,L75mmへ移動させた。キャピラリー内部の細胞ペーストを、20分間、37°C及び5のCO2で、HASMC培地中にインキュベートした。その後、細胞シリンダーを、キャピラリーが供給されたプランジャーを使用して、キャピラリーチューブからNovoGel商標HASMC培地によって覆われたのモールドの溝へと沈着させた。細胞シリンダーを、24時間、37°C及び5のCO2でインキュベートした。HDF細胞シリンダーの作成:HDFシリンダーを、HASMC-HAEC混合細胞シリンダーを調製するのと類似の方法を使用して調製した。簡潔に言うと、培地をコンフルエントなHDF培養フラスコから取り除き、細胞をDPBS1ml/5cm2の増殖領域で洗浄した。細胞を、10分間、トリプシン0.1;1ml/15cm2の増殖領域の存在下でインキュベーションによって、培養フラスコの表面から分離した。インキュベーション後に、HDF培地をフラスコに加えたトリプシンの容積に対して2Xの容積。細胞懸濁液を、6分間200gで遠心分離にかけ、その後、上清溶液を完全に除去した。細胞ペレットを、6mlのHDF培地中で再懸濁し、20mlのガラスバイアルに移動させ、その後、75分間150rpmで、及び37°C及び5のCO2で、オービタルシェーカー上でインキュベートした。インキュベーション後に、細胞懸濁液を、15mlの遠心分離チューブに移動させ、5分間200gで遠心分離にかけた。上清培地の除去後、細胞ペレットを、400μlのHDF培地中で再懸濁し、数回ピペットアップ及びピペットダウンすることで、すべての細胞塊が壊れたことを確認した。細胞懸濁液を、15mlの遠心分離チューブの内部に置いた0.5mlのマイクロチューブへ移動させ、その後、4分間2000gで遠心分離にかけ、高密度の及びコンパクトな細胞ペレットを形成した。50mmの長さの細胞シリンダーを得るために、上清培地を吸収し、細胞を吸収によってキャピラリーチューブOD1.0mm,ID0.5mm,L75mmへ移動させた。キャピラリー内部の細胞ペーストを、20分間、37°C及び5のCO2で、HDF培地中にインキュベートした。その後、細胞シリンダーを、キャピラリーチューブから、NovoGel商標のモールドHDF培地により覆われていたの溝へ沈着させた。細胞シリンダーを、24時間、37°C及び5のCO2でインキュベートした。<多層の血管チューブの作成>NovoGel商標のベースプレートの調製:10mlのあらかじめ暖められた>40°CNovoGel商標2w/vを、10cmのペトリ皿へ分注することにより、NovoGel商標のベースプレートを作成した。分注直後に、ディッシュの全体のベースを包含し、均一の層を形成するように、NovoGel商標を平らに広げた。ペトリ皿を、20分間室温でインキュベートし、それによりNovoGel商標を完全にゲル化させた。多層の血管のチューブ:HDFの外部層及びHASMC-HAECの内部層から成る血管のチューブを、HDFシリンダー、及びHASMC-HAEC混合細胞シリンダーを利用して作成した。図4に示されるように、幾何学的配置を利用した。簡潔にいうと、24時間のインキュベーション時間の最後に、成熟したHDF及びHASMC-HAECシリンダーを吸引し、キャピラリーチューブに戻し、さらなる使用まで適切な培地に置いた。NovoGel商標のロッドから成る支持構造を、以下のように調製した:あらかじめ暖めた2のNovoGel商標を、キャピラリーチューブL=50mmへ吸引し、冷たいPBS溶液4°Cで急速に冷やした。5cmの長さのゲル化したNovoGel商標のシリンダーを、キャピラリープランジャーを使用するから沈着させ、NovoGel商標ベースプレートにまっすぐ置いた。第2のNovoGel商標シリンダーを第1のそれに隣接させ、また、第1層を形成するために、10のNovoGel商標シリンダーが沈着するまで、そのプロセスを繰り返した。ここで、20μlのPBSをNovoGel商標シリンダーよりも上に分注し、湿った状態を維持した。さらに、6のNovoGel商標シリンダーを、図4層2に示すような位置で、層1の上に沈着させた。その後、3つのHDFシリンダーを、位置4、5及び6に沈着させ、層2を完成させた。各々のHDFシリンダーを分注した後に、40μlのHDF培地を沈着したシリンダーの上に分注し、細胞のシリンダーの脱水を予防すると同時に、続くシリンダーの沈着を補助した。層3のための次のNovoGel商標シリンダーを沈着させ、その後、位置3及び6にHDFシリンダーを沈着させた。HDF培地を有する構造の再湿潤した後、HASMC-HAEC混合シリンダーを、位置4及び5の中に置いた。続いて、40μlのHASMC培地及び40μlのHDF培地を、細胞シリンダーの上に分注した。位置1及び7でNovoGel商標シリンダーを、位置2及び6でHDFシリンダーを、位置3及び5でHASMC-HAEC混合シリンダーを、そして最後に、位置4で4のNovoGel商標シリンダーを沈着させることにより、層4を完成させた。層5、6及び7を同様に、図4に示す位置に、NovoGel商標シリンダーを、その後HDFシリンダーを、そして最後に、HASMC-HAECシリンダーを置くことにより完成させた。一旦全体の構成物が完成すると、0.5mlの暖かいNovoGel商標を、構成物の各々の末端にわたって分注し、それにより、5分間室温でゲル化させた。そのNovoGel商標のゲル化の後に、30mlのHASMC培地をペトリ皿全体の構成物を完全に沈めたことを確実にするために加えた。構成物を、37°C及び5のCO2で24時間インキュベートし、それにより、細胞のシリンダー間の融合を可能とした。24時間の最後に、周囲のNovoGel商標支持構造を、融合した多層の血管のチューブから除去した。実施例3:バイオプリンターバイオプリンターをアセンブリした。バイオプリンターは、カートリッジを保持するためのコレットチャックのグリップ、及びカートリッジのコンテンツを分注するためのピストンを有しているプリンターヘッドを含んでいた。使用されるカートリッジは、長さが75-85mmである、ガラス製のマイクロキャピラリーチューブだった。バイオインク又は支持物質を必要とする度に、新しいキャピラリーチューブを充填した。構造物を印刷するために、印刷プロセスの間、すなわち、プリンターヘッドに新しいキャピラリーが充填されるときに、±20μmの分注位置繰り返し精度を必要とする。x―、y―、そしてz-方向での同じ点に関する、充填されたキャピラリーチューブの繰り返し精度を維持するために、バイオプリンターは、マイクロキャピラリーチューブの位置の較正するための、レーザー較正システムを含んでいた。レーザー較正システムは、すべてのキャピラリーチップの位置を、一般的な参照位置に較正した。印刷の動作は、すべてこの参照位置に関連するようにした。3つの軸x-、y-、又はz-軸すべてを、単一のレーザー測距センサーの使用を通じて較正した。そのシステムは、レーザーセンサー及びレーザービームを含んでいた。センサー境界は、レーザーセンサーの距離を感知する最大であった。そのセンサーを、あらかじめ定義した境界よりもさらに離れているシグナルはすべて無視するように構成した。そのセンサーは、三角測量を使用し、対象キャピラリーチップに対する距離を測定する。レーザーセンサーを、ビームが垂直Z軸に照準するように適応させた。<垂直方向のレーザーの較正>X軸での較正:キャピラリーチップを、レーザービームの左-xに傾けて、レーザーセンサーの範囲で移動させた。センサーがキャピラリーエッジを検出するまで、キャピラリーをX方向に移動させ、この位置を記録した。上記の工程を反対側から繰り返したすなわち、チップをレーザービームの右xに傾け、センサーがキャピラリーエッジを検出するまで、-x方向に移動させる。両方の工程からの位置を平均し、キャピラリーの中間点を計算した。随意に、上記の工程を、異なるy-位置のために繰り返し、また、計算された中間点を平均した。Y軸での較正:上記の処置X軸でのを、Y軸で繰り返した。Z軸での較正:ビームがキャピラリーの底面に当たり、チップをセンサーの範囲境界のちょうど外側にあるように、キャピラリーチップをセンサービームの上に移動させた。センサー境界に到達するまで、キャピラリーを減らし、そしてその位置をz―位置として記録した。随意に、上記の工程をキャピラリーチップの表面上の複数の点で繰り返し、測定された高さを平均した。<水平方向のレーザーの較正>Y軸での較正:チップがレーザービームの高さのちょうど下になり、キャピラリーを1つ側面方向に離れるy-方向ように、キャピラリーを移動させた。キャピラリーをレーザーに向けてy-方向に移動させた。レーザーセンサーがキャピラリーに反射されるビームを検出したときに、キャピラリーを止め、この位置を記録した。上記の工程を、レーザーの他の側面方向に離れ、y-方向に動いたキャピラリーを動かした。上記の工程からの中間点をy-位置として記録した。X軸での較正:Y軸での較正の結果を使用して、レーザーをキャピラリーに集中するように、Y軸を移動させた。キャピラリーを、センサー境界を過ぎて移動させ、センサーに向けて移動させた。キャピラリーがセンサー境界を横切り、センサー出力が変わるとすぐに、キャピラリーを止めた。この位置プラス1/2のキャピラリー幅y-較正からをx-位置として記録した。Z軸での較正:レーザービームがなくなるまで、キャピラリーをx-位置から上に移動させた。キャピラリーチップをレーザービームへ向けて下に移動させ、レーザービームが遮断されるとすぐに止めたY軸に対するプロセスと同じプロセスを使用する。この位置をz-位置として記録した。<キャピラリープライミング>キャピラリーから印刷する前に、バイオインク又は支持物質がキャピラリーのまさに先端で印刷し始めるように、キャピラリー内部にバイオインク又は支持物質をプライミングした。較正レーザーを、キャピラリーをプライミングするために使用した。キャピラリーチップを、ちょうどレーザービームの上に移動させ、ビームはY軸にした。キャピラリーチップはレーザービームの上の20-100μmの間にあった。バイオインク又は支持物質がキャピラリーチップから分注し始め、レーザービームを遮断するまで、プリンターヘッド中の分注ピストンが押し下げられた。ピストンを逆方向20-100μmに駆動させることにより、分注されたバイオインク又は支持物質を吸引し、キャピラリーチューブに戻した。その後、キャピラリーをプライミングし、分注の準備を行った。<NovoGel商標キャピラリーの洗浄>NovoGel商標を支持物質として使用した。キャピラリーチューブの外側表面に付着する過剰なNovoGel商標を取り除き、過剰なNovoGel商標が印刷品質に影響を与えることを回避するために、過剰なNovoGel商標を取り除いた。除去する特性をバルクのNovoGel商標容器へ統合した。バルクのNovoGel商標容器を、隔壁を付けられるように開いた蓋を有する、標準的な医療用バイアルに合わせた。隔壁を、1-2mmの厚いシリコンの中央にある横断線で構成する。隔壁を通してキャピラリーをバルクのNovoGel商標容器に浸し、NovoGel商標を吸引することによって、キャピラリーが容器から出ると、過剰なNovoGel商標をキャピラリーから除去し、バルク容器内に残った。<血管構造物の印刷>バイオプリンター及びカートリッジを上記のように組み立てた。バイオプリンターは、バイオプリンターによって生成された構造を受け取るためのペトリ皿を有するステージを有していた。ペトリ皿をNovoGel商標でコーティングした。ユーザーは、血管構造物の2次元の表示例えば図4を参照を、バイオプリンターに接続されたコンピューターのソフトウェアプログラムに入力した。血管構造物の2次元の表示を、血管構造物の空間を定義し、血管構造物を取り囲む、HASMC-HAEC混合細胞シリンダー、HDFシリンダー、及びNovoGel商標のロッドから成った。HASMC-HAEC混合細胞シリンダーとHDF細胞シリンダーを、実施例1のように調製し、プリンターヘッドのコレットチャックに挿入するためにキャピラリーチューブに吸引した。あるいは、キャピラリーチューブをプリンターヘッドに充填し、バルクのNovoGel商標容器に浸し、NovoGel商標をキャピラリーチューブに吸引した。垂直方向のレーザー較正システムを使用し、キャピラリーチューブを較正した。ソフトウェアプログラムからのコマンドがバイオプリンターに提供された時、バイオプリンターは、HASMC-HAECロッドとHDFロッド及びNovoGel商標ロッドを交互にして、ペトリ皿の上の所定の位置に、三次元構造物を印刷する。実施例2を参照。それぞれのロッドをペトリ皿に置いた後、少量の培地でロッドを湿らせた。一旦、全体の構成物が完成すると、暖かいNovoGel商標を、構成物の各々の末端に分注し、室温でゲル化させ、そして、細胞培養培地をペトリ皿に加え、全体の構成物を沈めた。その後、構成物を、37°C及び5のCO2でインキュベートし、細胞シリンダー間の融合を可能とした。インキュベーション時間の最後に、周囲のNovoGel商標支持構造を、融合した多層の血管のチューブから除去した。本発明はその具体的な実施形態に関して記載されているが、創造性のある方法論によって、さらなる変更ができることは理解される。この特許出願は、一般に本発明の原則に従い、本発明の属する技術分野において既知あるいは慣行の範囲内であり、前記記載の必須の特徴に適用され得、添付の特許請求の範囲に従うような、本開示からのこのような逸脱を含んで、本発明の任意の変更、使用、適用を包含するように意図される。"