"小麦末粉の抽出物を有効成分とする脳保護剤。脳保護が虚血性脳障害による予防用である請求項1記載の脳保護剤。脳保護が虚血に由来して発生するアポトーシス抑制によるものである請求項1又は請求項2記載の脳保護剤。経口剤である請求項1~請求項3のいずれかに記載の脳保護剤請求項1~請求項4のいずれかに記載の脳保護剤を含有する飲食品本発明は、脳の保護作用を有する剤を提供することを課題とする。またこの剤を含有する飲食品を提供することを課題とする。本発明者らは小麦末粉に着目して試験した結果、小麦末粉の抽出物に虚血によって引き起こされるアポトーシス発生の抑制作用があることを知見したことに基づき、本発明を提案する。すなわち、本発明は、1小麦末粉の抽出物を有効成分とする脳保護剤。2脳保護が虚血性脳障害による予防用である1記載の脳保護剤。3脳保護が虚血に由来して発生するアポトーシス抑制によるものである1又は2記載の脳保護剤。4経口剤である1~3のいずれかに記載の脳保護剤51~4のいずれかに記載の脳保護剤を含有する飲食品本発明は、虚血によって発生するアポトーシスを抑制し、脳保護作用を有する剤を提供することができる。また虚血性の脳障害を予防する飲食品を提供することができる。本発明の脳保護剤は小麦末粉の抽出物を有効成分とする。小麦粉を分類するには大きく分けて2つの方法がある。ひとつは、タイプ種類による分類で、もうひとつはグレード等級によるものでる。グレードによる分類は、原料の小麦粒の形態に由来する。本発明に用いる末粉はグレードによる分類である。同じ小麦粒の胚乳部分でも、中心部は灰分が少なく、色が白く、またたんぱく質の量も少なくなる傾向がある。製粉工程で、主にこの中心部分からとれる粉を分類して上級粉と呼ぶ。上級粉は、灰分が低く、乳白色または淡黄色の冴えた色をしている。逆に、表皮近くからとれる下級粉は、たんぱく質も多くなり、色がくすんで茶褐色を帯びてくる。一般に、灰分値が03~035のものは特等粉、035~045のものは1等粉、045~065のものは2等粉、07~10のものは3等粉、そして12~20のものを末粉すえこと分類している。また小麦粒の外皮はふすまとして別に篩い分けられる末粉は通常食用には適さないため、ふすまとあわせて動物用飼料としたり、工業用の糊原料とされたりする。本発明はこの末粉を原料としている。小麦末粉から本発明の剤を調製するためには、末粉を水で抽出する。以降末粉として記載した場合は、小麦末粉を意味する。末粉は飼料用として市販されているものでよいが、製粉直後のものが脂質分の酸化がなく好ましい。末粉1重量部に対して水5~10重量部を加え、攪拌しながら、05~1時間室温抽出する。抽出時間を短縮するためには、超音波振動を与えるなど物理的な振動を加え、水溶性成分を抽出する。小規模な抽出操作であれば、末粉1重量部に対して水5重量部を加え攪拌分散させた後、超音波処理を3~10分行うことで有効成分が水に溶出してくる。ついで、遠心分離あるいはフィルター濾過で固液分離を行い、ロ液又は上清を回収する。回収した上清又はロ液は乾燥処理を行い粉末化する。乾燥処理は通常の液体を乾燥する方法であれば噴霧乾燥やドラムドライヤー、凍結乾燥などどのような方法でも適用できるが、活性を低下させないためには可能な限り低温で乾燥させることが好ましい。本発明の脳保護剤は、上記の方法で得られた乾燥物を更に粉砕し、超微細粒子とすることもできる。本発明品の脳保護剤は、常法によって、粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤として製品化することができる。また、水や果汁に溶解して液状、ゼリー状の飲料として製品化することもできる。更に、各種飲食品に添加して利用することもできる。このような飲食品としては、特に限定されない。本発明の脳保護剤の有効投与量は、経口摂取において成人1日当り1~10gである。以下実施例を示し、本発明をさらに説明する。<試験例1>1.酸化ストレスによる神経細胞のアポトーシス予防試験A.試験材料および方法1使用細胞及び培養方法DSファーマバイオメディカル株式会社より購入したヒト神経芽細胞腫由来SHSY5Y細胞継代数X18を使用した。通常培養用培地はDMEMHamsF12和光純薬工業株式会社に不活化したウシ胎児血清ライフテクノロジーズジャパン株式会社15、非必須アミノ酸Sigma1、ペニシリンSIGMA50000U、ストレプトマイシン明治製菓0。05pot。を添加して使用した。通常培養においては、10cmシャーレに細胞を播種し、8090コンフルエント時に005トリプシンEDTA溶液で細胞を剥離して継代を行った。培養は37°C、5二酸化炭素、95空気存在下で行った。2プレート播種継代したSHSY5Y細胞継代数X19~25を96wellプレート96wellマイクロテストプレート;FALCON日本ベクトンディッキンソン株式会社上に10~15×105cellsmLで播種し、一晩培養した。3試薬調製6Hydroxydopamineの調製酸化ストレス誘因物質として6Hydroxydopamine6OHDAを用いた。6OHDAを150mMになるよう蒸留水で調製し、最終濃度150μMになるよう培地に添加した。末粉抽出物の調製日本製粉株式会社製の末粉を用いた。末粉1gに対して水5mLを添加し、3分超音波処理を行った。遠心機で1000rpm×10分遠心後、上清を回収し、凍結乾燥を行い乾燥物を得た。以下水抽出物と呼ぶ。抽出物を3、10、30および100mgmLになるよう蒸留水で調製し、それぞれ最終濃度が3、10、30および100μgmLになるよう培地通常培養培地6OHDAを添加したものに添加した。4MTTアッセイMTT試薬の調製34、5dimethylthiazol2yl2、5diphenyltetrazoliumbromideMTTをPBSで5mgmLになるよう調製し、045μmフィルターアデバンテック東洋株式会社で濾過したものをMTT溶液とした。MTT溶液は分注し、使用まで20°C保存とした。使用時は、500μgmLになるよう通常培養培地に添加したMTT培地。MTTアッセイ6OHDAおよび被験物質添加から15時間後、MTTアッセイを行った。6OHDAおよび被験物質添加培地からMTT培地に交換して3時間インキュベートした後、培地を除去し、dimethylsulfoxideを添加した。沈殿したホルマザンを溶解させた後、570nmの吸光度を測定した。B.結果測定結果を図1に示す。末粉水抽出物を6OHDA150μMと同時に添加した結果、末粉水抽出物は用量依存的に6OHDAの酸化ストレスによるアポトーシスを抑制することが分かった。特に10μg/mL以上の濃度としたとき顕著なアポトーシス抑制効果が確認できた。<試験例2>1.人工的脳梗塞モデルを用いた脳保護効果の確認試験人工的に脳血流を遮断して脳梗塞モデルを作成して本発明の脳保護作用を確認した。A.試験方法1脳保護剤の調製と投与試験例1で用いた抽出物を連続的に経口投与して脳保護効果を確認した。試験用の脳保護剤は、あらかじめ1日分ずつ規定量を秤量分注し、投与日および群を記載して20°Cに保存した。投与液の調製は用時調製とし、転倒混和にて、10、30、60mgmLになるように溶解した。2試験動物マウス,SlcddY,雄60匹を用いた。入荷時:4週齢手術解剖時:7週齢入荷時に種、系統、週齢、動物数及び性別を確認し、一般状態および外観を観察するとともに体重を測定した。馴化期間は7日間とした。体重をもとに、各群に差がないよう群分けを行った。3試験系の環境条件飼育環境設定温度:25°C許容範囲23~27°C、設定湿度:60許容範囲40~80、照明:午前7時点灯、午後7時消灯の12時間に維持された福岡大学薬学部動物飼育室で動物を飼育した。動物は、プラスチックケージを用いて、1ケージあたり5匹で飼育した。飼料固形飼料CE2、日本クレア株式会社を給餌器に入れて自由に摂取させた。.飲料水フィルターで洗浄した水道水を給水瓶より自由に摂取させた。4投与方法投与経路胃ゾンデを用いた強制経口投与とした。また1日1回14日間投与した。投与液量は、最も近い測定体重値から換算して、10mLkgで算出した。群構成および投与量投与量mgkg使用動物数対照群015100mgkg群10015300mgkg群30015600mgkg群600155脳梗塞モデルの作成80ナイロンモノフィラメントEthilonEthiconNJUSAを11mmの長さに切り、先端から4mmをシリコン樹脂XantoprenBayerDentalOsakaJapanでコーティングしたものを塞栓子として作成した。これを以下の手法でマウスに挿入して脳梗塞モデルを作成した。手術方法マウスに2halothane吸入より麻酔を導入し、続いて1halothane吸入によって麻酔を維持し手術台上に固定した。マウスの頚部の中央を切開し、左側総頸動脈と外頸動脈を結紮した。総頸動脈を切開し、塞栓子が中大脳動脈MCAの起始部に到達するように内頸動脈と外頸動脈の分岐部から内頸動脈を経由して9mm挿入した。再灌流は、塞栓子を手前に引き抜くことによって行った。MCA閉塞時間は4時間を負荷し、24時間後に行動観察Neurologicalscoreおよび235TriphenyltetrazoliumchlorideTTC染色を行い、梗塞巣体積の変化を測定した。6行動観察NeurologicalscoreMCA閉塞4時間後再灌流を行い、その梗塞巣の変化を観察するためMCA閉塞24時間後に、脳梗塞のスコア付を行った。スコア付は以下の通り。Score0運動機能に影響なし1胴体の屈曲、前肢のlifting2正常な姿勢でのcircling行動3明らかな姿勢の異常でのcircling行動4Rolling行動5自発的な行動がなく、体が傾く状態7TTC染色および画像解析行動観察の後、マウスの頚椎を脱臼して、ただちに断頭した。取り出した脳を冷えた生理食塩水でよく冷し、アクリル製スライサーマウス用Sagittaltypeスライス厚2mm;株式会社ニューロサイエンス;Fig3を用いて、大脳皮質を含む脳の前額断スライスを2mm間隔で作製した。2235triphenyltetrazoliumchlorideシグマアルドリッチジャパン株式会社を生理食塩水で作製し、切片を溶液中で37°C、30分間インキュベートした。その後、スライドガラス上に並べ、デジタルスチルカメラMVCFD91SONYで撮影した。梗塞巣体積は。割面の写真から梗塞総面積を画像解析ソフトNIHImage163で測定し算出した。B.結果図2に示すとおり、行動観察Neurologicalscoreの結果、用量依存的に脳梗塞に伴う障害発生が抑制された。4時間目までの行動は比較的活発であったが、末粉抽出物投与量に応じて、行動が活発であった。末粉抽出物600mgKg投与群ではNeurologicalscoreは2以下と良好であり、本発明の脳保護剤の効果が行動上も確認された。また24時間後の行動はいずれも悪化していたが、無投与群と比較して投与群の行動スコアは低く、脳梗塞の進行が抑制されていることが推測された。また図3、図4に示すとおり脳梗塞巣の画像解析の結果用量依存的に脳梗塞巣の減少が認められた。特に600mgKg投与群では、脳梗塞部位は対照無投与群と比較して顕著であった。これは上記の行動観察の結果とよく対応していた。以上の結果から本発明の脳保護剤は虚血性の脳梗塞による脳の障害を予防することが明らかとなった。"