免疫原性組成物であって、a薬学的に許容しうる担体、希釈剤又は補助剤、及びb配列番号10のアミノ酸配列からなるポリペプチドの類似体である、単離されたポリペプチドを含み、該類似体が、配列番号10のアミノ酸残基の20より少ない置換又は欠失を有する、免疫原性組成物。キメラポリペプチドであって、a配列番号10のアミノ酸配列からなるポリペプチド、及びb配列番号2、4、6、8又は20のアミノ酸配列からなるポリペプチド、又は、配列番号2、4、6、8又は20のアミノ酸配列からなるポリペプチドの類似体であって、配列番号2、4、6、8又は20のアミノ酸残基の20より少ない置換又は欠失を有する類似体を含み、該キメラポリペプチドが、ヘモフィルスインフルエンゼに対する免疫応答を誘発する、使用。発明の要約態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列又はその断片又は類似体を含む第2ポリペプチドに対して少なくとも70が同一であるポリペプチドをコードする分離したポリヌクレオチドを提供する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれたアミノ酸配列又はその断片又は類似体を含むポリペプチドに関する。他の態様においては、本発明のポリヌクレオチドによってコードされたポリペプチド、医薬組成物、発現制御領域に作用可能に結合した本発明のポリヌクレオチドを含むベクター、前記ベクターでトランスフェクトしたホスト細胞及び前記ホスト細胞を発現に適した条件下で培養する段階を含むポリペプチドの生産方法が提供される。発明の詳細な説明本発明は、ヘモフィルスインフルエンゼ感染症を予防、治療、及び又は診断するために用いることができるヘモフィルスインフルエンゼポリペプチドをコードする精製分離したポリヌクレオチドを提供する。本発明は、12の別個の好ましいポリヌクレオチドを提供し、各々が配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、及び23の1つによって別個に定義されている。更に、本発明は、12の別個のポリペプチドを提供し、各々が配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、又は24の1つによって別個に定義されている。本発明には本出願において本明細書に記載されているようにそのようなポリペプチドの突然変異体、変異体、相同体又は誘導体のような類似体をコードするポリヌクレオチドが含まれることを当業者は理解している。本発明は、本発明のDNA分子に対応するRNA分子も包含している。DNA分子とRNA分子のほかに、本発明は対応ポリペプチドとそのようなポリペプチドに特異的に結合する単一特異抗体を包含している。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列又はその断片又は類似体を含む第2ポリペプチドに対して少なくとも70が同一であるポリペプチドをコードする分離したポリヌクレオチドを提供する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列又はその断片又は類似体を含む第2ポリペプチドに対して少なくとも80が同一であるポリペプチドをコードする分離したポリヌクレオチドを提供する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列又はその断片又は類似体を含む第2ポリペプチドに対して少なくとも85が同一であるポリペプチドをコードする分離したポリヌクレオチドを提供する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列又はその断片又は類似体を含む第2ポリペプチドに対して少なくとも90が同一であるポリペプチドをコードする分離したポリヌクレオチドを提供する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列又はその断片又は類似体を含む第2ポリペプチドに対して少なくとも95が同一であるポリペプチドをコードする分離したポリヌクレオチドを提供する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列又はその断片又は類似体を含むポリペプチドをコードする分離したポリヌクレオチドを提供する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列又はその断片又は類似体をもつポリペプチドの一部をもったエピトープをコードするポリヌクレオチドに関する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列をもつポリペプチドの一部をもったエピトープをコードするポリヌクレオチドに関する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列又はその断片又は類似体をもつポリペプチドの一部をもったエピトープに関する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列をもつポリペプチドの一部をもったエピトープに関する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列を含む第2ポリペプチドに対して少なくとも70が同一であるポリペプチドをコードする分離したポリヌクレオチドを提供する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列を含む第2ポリペプチドに対して少なくとも80が同一であるポリペプチドをコードする分離したポリヌクレオチドを提供する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列を含む第2ポリペプチドに対して少なくとも85が同一であるポリペプチドをコードする分離したポリヌクレオチドを提供する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列を含む第2ポリペプチドに対して少なくとも90が同一であるポリペプチドをコードする分離したポリヌクレオチドを提供する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列を含む第2ポリペプチドに対して少なくとも95が同一であるポリペプチドをコードする分離したポリヌクレオチドを提供する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列を含むポリペプチドをコードする分離したポリヌクレオチドを提供する。態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列をもつポリペプチドの一部をもったエピトープをコードするポリヌクレオチドに関する。他の実施態様においては、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列又はその断片又は類似体をもつポリペプチドに結合特異性を有する抗体を産生することができるポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに関する。他の実施態様においては、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列をもつポリペプチドに結合特異性を有する抗体を産生することができるポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに関する。相同は、アミノ酸型の同一と類似又は保存の合計として定義される。アミノ酸配列を比較するためにCLUSTALプログラムのようなプログラムを使用し得る。このプログラムによって、アミノ酸配列が比較され、適するように両配列のスペースを挿入することにより最適アラインメントが見出される。最適アラインメントのアミノ酸同一又は類似アミノ酸型の同一と保存を計算することが可能である。BLASTxのようなプログラムは、類似の配列の最長の伸長物を配列させ、価値を一致まで対応させる。このようにいくつかの類似領域が見られる比較を得ることが可能であり、各々が異なるスコアをもっている。両方のタイプの同定分析が本発明に企図されている。他の実施態様においては、本発明のポリペプチドは抗原性である。他の実施態様においては、本発明のポリペプチドは免疫原性である。他の実施態様においては、本発明のポリペプチドは個体において免疫応答を誘発し得る。他の実施態様においては、本発明は、上で定義した本発明のポリペプチドに結合特異性を有する抗体を産生することができるポリペプチドに関する。他の実施態様においては、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列をもつポリペプチド又はその断片又は類似体に結合特異性を有する抗体を産生することができるポリペプチドに関する。他の実施態様においては、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列をもつポリペプチドに結合特異性を有する抗体を産生することができるポリペプチドに関する。結合特異性を有する抗体は、選択されたポリペプチドを認識結合するが試料、例えば、生体試料中の他の分子をほとんど認識結合しない抗体である。特異結合は、選択されたポリペプチドが抗原として使われるELISA分析を用いて測定し得る。本発明によれば、生物学的実験における防御は生存曲線、生存率又は生存期間の著しい増加によって定義される。生存曲線を比較するログランク試験、また、生存率や死亡するまでの日数を比較するフィッシャー確定試験を用いる統計分析がP値を計算するとともに2つのグループ間の差が統計的に有意であるかを求めるために用いることができる。005のP値は有意とみなされない。本発明の他の態様においては、本発明のポリペプチドの抗原性免疫原性断片、又はその類似体が提供される。本発明の断片は、1種以上のそのエピトープ領域を含まなければならず、抗原性免疫原性の性質を保持するその領域にも十分似ていなければならない。従って、本発明の断片の場合、記載されたポリペプチド又はその類似体の具体的な部分に100同一であってもよいので、同定度はおそらく無関係である。本発明は、更に、本発明のポリペプチド配列から少なくとも10の隣接アミノ酸残基をもつ断片を提供する。実施態様においては、少なくとも15の隣接アミノ酸残基をもつ断片を提供する。実施態様においては、少なくとも20の隣接アミノ酸残基をもつ断片を提供する。前と同様に、重要な課題は断片が抗原性免疫原性の性質を保持することである。本発明のポリペプチドの断片、類似体又は誘導体が本発明に関連して、即ち、抗原性免疫原性材料として使われることは当業者によって理解される。従って、例えば、1つ以上の付加、欠失、置換等を含むポリペプチドは本発明によって包含される。本明細書に用いられる本発明のポリペプチドの断片、類似体又は誘導体には、アミノ酸残基の1つ以上が保存アミノ酸残基で置換され好ましくは保存されかつ天然であっても天然でなくてもよいポリペプチドが含まれる。実施態様においては、本発明のポリペプチドの誘導体や類似体は、図面に示された配列又はその断片と約70が同一である。即ち、残基の70が同じである。他の実施態様においては、ポリペプチドは同一が80より多い。他の実施態様においては、ポリペプチドは同一が90より多い。他の実施態様においては、ポリペプチドは同一が95より多い。他の実施態様においては、ポリペプチドは同一が99より多い。他の実施態様においては、本発明のポリペプチドの類似体は置換、修飾又は欠失が約20のアミノ酸残基より少なく、好ましくは10未満である。実施態様においては、本発明のポリペプチドの誘導体又は類似体は、図面に示された配列又はその断片と約70が相同である。他の実施態様においては、ポリペプチドの誘導体又は類似体は相同が80より多い。他の実施態様においては、ポリペプチドの誘導体又は類似体は相同が90より多い。他の実施態様においては、ポリペプチドの誘導体又は類似体は相同が95より多い。他の実施態様においては、ポリペプチドの誘導体又は類似体は相同が99より多い。他の実施態様においては、本発明のポリペプチドの誘導体又は類似体はアミノ酸残基の置換、修飾又は欠失が約20より少なく、更に好ましくは10未満である。他の態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれたアミノ酸配列又はその断片又は類似体をもつ第2ポリペプチドに対して少なくとも70が同一であるポリペプチドを提供する。他の態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれたアミノ酸配列又はその断片又は類似体をもつ第2ポリペプチドに対して少なくとも80が同一であるポリペプチドを提供する。他の態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれたアミノ酸配列又はその断片又は類似体をもつ第2ポリペプチドに対して少なくとも85が同一であるポリペプチドを提供する。他の態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれたアミノ酸配列又はその断片又は類似体をもつ第2ポリペプチドに対して少なくとも90が同一であるポリペプチドを提供する。他の態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれたアミノ酸配列又はその断片又は類似体をもつ第2ポリペプチドに対して少なくとも95が同一であるポリペプチドを提供する。他の態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列又はその断片又は類似体を含むポリペプチドを提供する。他の態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列又はその断片又は類似体を特徴とするポリペプチドを提供する。他の態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれたアミノ酸配列をもつ第2ポリペプチドに対して少なくとも70が同一であるポリペプチドを提供する。他の態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれたアミノ酸配列をもつ第2ポリペプチドに対して少なくとも80が同一であるポリペプチドを提供する。他の態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれたアミノ酸配列をもつ第2ポリペプチドに対して少なくとも85が同一であるポリペプチドを提供する。他の態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれたアミノ酸配列をもつ第2ポリペプチドに対して少なくとも90が同一であるポリペプチドを提供する。他の態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれたアミノ酸配列をもつ第2ポリペプチドに対して少なくとも95が同一であるポリペプチドを提供する。他の態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれたアミノ酸配列を含むポリペプチドを提供する。他の態様によれば、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれたアミノ酸配列を特徴とするポリペプチドを提供する。これらの置換は、ポリペプチドの二次構造と親水性に対して影響が最少のものである。好ましい置換は、保存された当該技術において既知のものである。即ち、置換残基が疎水性、サイズ、電荷又は官能基のような物理的又は化学的性質を共有するものである。DayhoffMAtlasofProteinSequenceandStructure51978ArgosPEMBOJ87797851989に記載された置換が含まれる。例えば、下記群の1つに属する天然の或いは天然でないアミノ酸は保存的変化である。ala、pro、gly、gln、asn、ser、thr、valcys、ser、tyr、thrval、ile、leu、met、ala、phelys、arg、orn、his及びphe、tyr、trp、his。好ましい置換には、対応するLアミノ酸をDエナンチオマーに置換することが含まれている。好ましくは、本発明のポリペプチドの断片、類似体又は誘導体は少なくとも1つの抗原領域、即ち、少なくとも1つのエピトープを含む。代替的方法においては、類似体は精製を容易にする部分を取り込んでいる、例えば、所望のポリペプチドを効果的にタグ標識することによる融合ポリペプチドであり得る。タグを除去することは必要なことであり、融合ポリペプチド自体が用いるのに十分な抗原性を保持している例であってもよい。従って、類似体、誘導体又は断片について重要なことは、少なくともタンパク質又はポリペプチドが由来している程度の抗原性免疫原性をもっていることである。ポリペプチドの生物学的性質又は薬理学的性質を変える他の化合物、即ち、半減期を増大させるポリエチレングリコールPEG、精製を容易にするリーダー配列又は分泌アミノ酸配列、プレプロ配列又はプロ配列又は多糖を融合したポリペプチドも包含される。更に、アミノ酸領域が多型であることがわかった状態においては、異なるヘモフィルスインフルエンゼ株の異なるエピトープを効果的にミミックするように1つ以上の具体的なアミノ酸を変えることが望ましい。更に、本発明のポリペプチドは、安定性、支持体又は他の分子に結合する高疎水性を得るために末端NH2アシル化例えば、アセチル化又はチオグリコール酸アミノ化、例えば、アンモニア又はメチルアミンを用いた末端カルボキシアミノ化により修飾し得る。ポリペプチド断片又は類似体のヘテロ又はホモポリペプチド多量体も企図される。これらの重合体は、例えば、アビジンビオチン、グルタルアルデヒド又はジメチルスーパーイミデートのような架橋剤で架橋したポリペプチド1種以上を含む。そのような重合体としては、組換えDNA技術によって生成したマルチシストロンmRNAから生産された縦列又は逆方向隣接配列を2つ以上有するポリペプチドが含まれる。他の実施態様においては、本発明は、本出願の図面に定義されたポリペプチド又はその断片又は類似体又は誘導体を1種以上含むキメラポリペプチドに関する。他の実施態様においては、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列又はその断片又は類似体をもつポリペプチドを2つ以上含むキメラポリペプチドに関し、該ポリペプチドはキメラポリペプチドを形成するように結合されている。他の実施態様においては、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列をもつポリペプチドを2つ以上含むキメラポリペプチドに関し、該ポリペプチドはキメラポリペプチドを形成するように結合されている。抗原重合体即ち、合成多量体の形成を達成するために、ビスハロアセチル基、ニトロアリールハライド等を有するポリペプチドを用いることができ、その試薬はチオ基に特異的である。それ故、異なるペプチドの2つのメルカプト基間の結合は単結合であってもよく、炭素原子が少なくとも2個、典型的には少なくとも4個で16個以下、通常は約14個以下の結合基から構成されていてもよい。具体的な実施態様においては、本発明のポリペプチド断片又は類似体は、出発メチオニンMet残基を含んでいない。好ましくは、ポリペプチドはリーダー配列又は分泌配列シグナル配列を取り込まない。本発明のポリペプチドのシグナル部分は、確立された分子生物学的手法に従って求めることができる。一般に、問題のポリペプチドは、ヘモフィルス培養物から分離し、次に配列決定して成熟タンパク質の開始残基、それ故成熟ポリペプチドの配列を求めることができる。次の表Aは、図面に記載された本発明のポリペプチドのシグナル配列を記載したものである。本発明の他の態様によれば、i本発明のポリペプチドを担体、希釈剤又は補助剤と共に含む物質の組成物ii本発明のポリペプチドと担体、希釈剤又は補助剤とを含む医薬組成物iii本発明のポリペプチドと担体、希釈剤又は補助剤とを含むワクチンiv個体において免疫応答、例えば、ヘモフィルスに対する防御免疫応答を誘発する本発明のポリペプチドの免疫原性的に有効な量を該個体に投与することによりヘモフィルスに対して免疫応答を誘発する方法特にv本発明のポリペプチドの予防又は治療量を必要としている個体に投与することによりヘモフィルス感染症Haemophilusを予防及び又は治療する方法が提供される。免疫化する前に、本発明のポリペプチドは、テタヌストキシン、ジフテリアトキシン、B型肝炎ウイルス表面抗原、灰白髄炎ウイルスVP1抗原又は他のウイルス毒素又は細菌毒素又は抗原のような担体タンパク質又は強い免疫応答の発生を刺激する適切なタンパク質にカップリング又はコンジュゲートし得る。このカップリング又はコンジュゲーションは化学的に又は遺伝的に行うことができる。ペプチド担体結合の詳しい説明は、VanRegenmortelMHVBriandJPMullerSPlaueS《SyntheticPolypeptidesasantigens》LaboratoryTechniquesinBiochemistryandMolecularBiologyVol19BurdouRHVanKnippenbergPHElsevierNewYorkで得られる。他の態様によれば、1種以上の本発明のヘモフィルスポリペプチドを薬学的に許容しうる担体、希釈剤又は補助剤との混合物で含む医薬組成物が提供される。適切な補助剤としては、1水中油型エマルジョン製剤、例えば、MF59、SAF、Ribi2フロインド完全アジュバント又は不完全アジュバント3塩、即ち、AlK2、AlNa2、AlNH42、Al3、AlPO4、シリカ、カオリン4サポニン誘導体、例えば、Stimulon又はそれから生成された粒子、例えば、ISCOM免疫刺激複合体5サイトカイン、例えば、インターロイキン、インターフェロン、マクロファージコロニー刺激因子MCSF、腫瘍壊死因子TNF6他の物質、例えば、炭素ポリヌクレオチド、即ち、ポリICやポリAU、無毒化コレラ毒素CTB又は粘膜免疫を誘発する大腸菌Ecoli熱不安定毒素が含まれる。補助剤の詳しい説明は、MZIKhanetalPharmaceuticalResearchvol11No1pp211からの総説、GuptaetalVaccineVol13No14pp12631276からの他の総説、国際出願第9924578号で得られる。好ましい補助剤としては、QuilA、QS21、A1hydrogel又はAdjuphosが含まれる。本発明の医薬組成物は、注射、急速注入、鼻咽頭吸収、皮膚吸収による非経口投与、又はバッカル又は経口投与することができる。本発明の医薬組成物は、PRMurrayEJBaronMAPfallerFCTenoverRHYolkenManualofClinicalMicrobiologyASMPressWashingtonDC7thed1999p14811482に記載されているヘモフィルス感染症及び又はヘモフィルス感染症によって仲介される疾患又は症状の治療又は予防に用いられ、この文献の記載は本願明細書に含まれるものとする。実施態様においては、本発明の医薬組成物は、中耳炎急性又は再発、副鼻腔炎、気管支炎、肺塩、髄膜炎又は菌血症の治療又は予防に用いられる。実施態様においては、本発明の医薬組成物は、ヘモフィルス感染症及び又はヘモフィルス感染症によって仲介される疾患又は症状の治療又は予防に用いられる。他の実施態様においては、ヘモフィルス感染症はヘモフィルスインフルエンゼである。他の実施態様においては、ヘモフィルス感染症は型別不能ヘモフィルスインフルエンゼである。他の実施態様においては、ヘモフィルス感染症は型別可能ヘモフィルスインフルエンゼTypeableHaemophilusinfluenzaeである。本出願において用いられる個体という用語は哺乳動物が含まれる。他の実施態様においては、哺乳動物はヒトである。具体的な実施態様においては、医薬組成物は、乳児、高齢者又はイムノコンプロマイズド個体のようなヘモフィルスインフルエンゼ感染症の恐れがある個体に投与される。医薬組成物は、免疫処置の間に約1~6週間の間隔で1~3回好ましくは約0001~100μgkg抗原体重、更に好ましくは001~10μgkg、最も好ましくは01~1μgkgの単位剤形にある。医薬組成物は、免疫処置の間に約1~6週間の間隔で1~3回好ましくは約01~10μgkg、更に好ましくは1μg~1mg、最も好ましくは10~100μgの単位剤形にある。実施態様においては、ポリヌクレオチドは、本発明のポリペプチドをコードするオープンリーディングフレームORFを含むことができる配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21及び23に示されたものである。他の実施態様においては、ポリヌクレオチドは、本発明のポリペプチドをコードする配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23に示されたものである。縮重コドンで修飾することができる図面に示されたポリヌクレオチド配列が本発明のポリペプチドをなおコードすることは理解される。従って、本発明は、配列間で50が同一である上記ポリヌクレオチド又はその補体配列を提供する。実施態様においては、配列間で少なくとも70が同一である。実施態様においては、配列間で少なくとも75が同一である。実施態様においては、配列間で少なくとも80が同一である。実施態様においては、配列間で少なくとも85が同一である。実施態様においては、配列間で少なくとも90が同一である。他の実施態様においては、ポリヌクレオチドはストリンジェントな条件でハイブリダイズ可能である。即ち、少なくとも95が同一である。他の実施態様においては、同一が97より多い。ハイブリダイゼーションに適したストリンジェントな条件は当業者によって容易に求めることができる例えば、SambrooketalMolecularcloningALaboratoryManual2ndedColdSpringHarborNYCurrentProtocolsinMolecularBiologyEdAusubelFMetalJohnWileySonsIncNY。他の実施態様においては、本発明は、ストリンジェントな条件下でaポリペプチドをコードするDNA配列、又はbポリペプチドをコードするDNA配列の補体;のいずれかに対してハイブリダイズし、前記ポリペプチドが配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、又はその断片又は類似体を含むポリヌクレオチドを提供する。他の実施態様においては、本発明は、ストリンジェントな条件下でaポリペプチドをコードするDNA配列、又はbポリペプチドをコードするDNA配列の補体;のいずれかに対してハイブリダイズし、前記ポリペプチドが配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、又はその断片又は類似体を含むポリヌクレオチドを提供する。他の実施態様においては、本発明は、ストリンジェントな条件下でaポリペプチドをコードするDNA配列、又はbポリペプチドをコードするDNA配列の補体;のいずれかに対してハイブリダイズし、前記ポリペプチドが配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24を含むポリヌクレオチドを提供する。他の実施態様においては、本発明は、ストリンジェントな条件下でaポリペプチドをコードするDNA配列、又はbポリペプチドをコードするDNA配列の補体;のいずれかに対してハイブリダイズし、前記ポリペプチドが配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24を含むポリペプチドから少なくとも10の隣接アミノ酸残基を含むポリヌクレオチドを提供する。当業者によって容易に理解されるように、ポリヌクレオチドはDNAとRNA双方を含む。本発明は、また、本出願に記載されたポリヌクレオチドに相補的なポリヌクレオチドを含む。他の態様においては、本発明のポリペプチド、その断片又は類似体をコードするポリヌクレオチドは、DNA免疫法で用いることができる。即ち、注入時に複製可能であり発現可能であるベクターに取り込むことができ、よってインビボで抗原ポリペプチドが産生される。例えば、真核細胞において機能するCMVプロモーターの制御下でプラスミドベクターに取り込むことができる。好ましくは、ベクターは筋肉内注射される。他の態様によれば、ホスト細胞においてポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを発現させ、その発現したポリペプチド産物を回収することによる組換え技術によって本発明のポリペプチドを生産する製造工程又は方法が提供される。また、ポリペプチドは、確立された合成化学法、即ち、全ポリペプチドを生産するためにライゲートするオリゴペプチドの液相又は固相合成に従って生産し得るブロックライゲーション。ポリヌクレオチドとポリペプチドの獲得と評価の一般法は、次の文献SambrooketalMolecularcloningALaboratoryManual2ndedColdSpringHarborNYCurrentProtocolsinMolecularBiologyEdAusubelFMetalJohnWilelySonsIncNYPCRCloningProtocolsMolecularCloningtoGeneticEngineeringEdWhiteBAHumanaPressTotowaNewJersey490pProteinPurificationPrinciplesandPracticesScopesRKSpringerVerlagNY3rdEd380pCurrentProtocolsinImmunologyEdColiganJEetalJohnWileySonsIncNYに記載され、これらの文献の記載は本願明細書に含まれるものとする。組換え生産については、ホスト細胞を本発明のポリペプチドをコードするベクターでトランスフェクトし、次にプロモーターの活性化、形質転換体の選択又は遺伝子の増幅に適切なように修飾した栄養培地で培養する。適切なベクターは、選ばれたホストにおいて生存可能で複製可能なものであり、染色体配列、非染色体配列又は合成DNA配列、例えば、細菌プラスミド、ファージDNA、バキュロウイルス、酵母プラスミド、プラスミドとファージDNAの組合わせに由来するベクターが含まれる。ポリペプチド配列は、プロモーターと、リボソーム結合部位コンセンサス領域又はシャインダルガーノ配列と、任意によりオペレーター制御要素とを含む発現制御領域に作用可能に結合するように制限酵素を用いてベクターの適切な部位に取り込むことができる。確立された分子生物学原理に従って或るホストとベクターに適している発現制御領域の個々の成分が選択され得るSambrooketalMolecularCloningALaboratorymanual2ndedColdSpringHarborNYCurrentProtocolsinMolecularBiologyEdAusubelFMetalJohnWikeySonsIncNYこれらの文献の記載は本願明細書に含まれるものとする。適切なプロモーターとしては、LTR又はSV40プロモーター、Ecolilac、tac又はtrpプロモーター又はファージλPLプロモーターが挙げられるがこれらに限定されない。ベクターは、複製起点と選択マーカー、即ち、アンピシリン耐性遺伝子を組込むことが好ましい。適切な細菌ベクターとしては、pET、pQE70、pQE60、pQE9、pD10phagescript、psiX174、pbluescriptSK、pbsks、pNH8A、pNH16a、pNH18A、pNH46A、ptrc99a、pKK2233、pKK2333、pDR540、pRIT5又は真核ベクター、pBlueBacIII、pWLNEO、pSV2CAT、pOG44、pXT1、pSG、pSVK3、pBPV、pMSG又はpSVLが含まれる。ホスト細胞は、細菌細胞、即ち、大腸菌Ecoli、バシラスサチリスBacillussubtilis、ストレプトマイセスStreptomyces真菌細胞、即ち、アスペルギルスニガーAspergillusniger、アスペルギルスニダリンス酵母、即ち、サッカロミセスSaccharomyces又は真核細胞、即ち、CHO、COSが含まれる。ポリペプチドの培養内発現時に、細胞を、典型的には、遠心分離により収集し、次に物理的手段又は化学的手段発現したポリペプチドが培地に分泌していない場合により破壊し、得られた粗抽出物を保持して問題のポリペプチドを分離する。ポリペプチドの培養液又は溶解物からの精製は、ポリペプチドの性質によっては確立された手法により、即ち、硫酸アンモニウム又はエタノール沈殿、酸抽出、アニオン又はカチオン交換クロマトグラフィー、ホスホセルロースクロマトグラフィー、疎水性相互反応クロマトグラフィー、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー又はレシチンクロマトグラフィーを用いて達成することができる。最終精製は、HPLCを用いて達成することができる。ポリペプチドは、リーダー配列又は分泌配列を含めて又は含めずに発現することができる。前者の例においては、リーダーは転写後処理を用いて除去することができ米国特許第4431739号、同第4425437号、同第4338397号参照、これらの明細書の記載は本願明細書に含まれるものとする、発現したポリペプチドの精製に続いて化学的に除去することもできる。他の態様においては、本発明のヘモフィルスポリペプチドは、ヘモフィルスインフルエンゼ、特にヘモフィルスインフルエンゼ感染症の診断試験に用いることができる。いくつかの診断法、例えば、生体試料においてヘモフィルス菌を検出する段階が可能であり、下記手順a個体から生体試料を得る段階とb本発明のヘモフィルスポリペプチドと反応性の抗体又はその断片を該生体試料とインキュベートして混合物を形成する段階とcヘモフィルスの存在を示す該混合物において特異的に結合した抗体又は結合した断片を検出する段階とを行うことができる。また、前記抗体を含有する又は含有する疑いのある生体試料においてヘモフィルスインフルエンゼ抗原に特異的な抗体を検出する方法は、次のようにa個体から生体試料を得る段階とb本発明のヘモフィルスインフルエンゼポリペプチド又はその断片と該生物試料とをインキュベートして混合物を形成する段階とcヘモフィルスインフルエンゼに特異的な抗体の存在を示す該混合物において特異的に結合した抗原又は結合した断片を検出する段階とを行うことができる。当業者は、この診断試験が実質的にはポリペプチドに特異的な抗体が細菌内に存在しているかを求めるために、酵素結合免疫吸着分析ELISA、放射線免疫分析又はラテックス凝集分析を含むいくつかの形態を取ることができることを認識する。他の態様によれば、本発明は、中耳炎、副鼻腔炎、気管支炎、肺炎及び髄膜炎並びに菌血症を予防又は治療する方法であって、本発明の組成物の治療又は予防量を個体に投与する段階を含む、前記方法に関する。他の実施態様においては、ヘモフィルスインフルエンゼは型別不能ヘモフィルスインフルエンゼである。他の実施態様においては、ヘモフィルスインフルエンゼは型別可能ヘモフィルスインフルエンゼである。他の態様によれば、本発明は、中耳炎、副鼻腔炎、気管支炎、肺炎及び髄膜炎並びに菌血症を診断する方法であって、本発明の組成物の治療又は予防量を個体に投与する段階を含む、前記方法に関する。他の態様によれば、本発明は、ヘモフィルスインフルエンゼ感染症に感受性のある個体においてヘモフィルスインフルエンゼ細菌感染症を予防又は治療する方法であって、本発明の組成物の治療又は予防量を前記個体に投与する段階を含む、前記方法に関する。他の実施態様においては、ヘモフィルスインフルエンゼは型別不能ヘモフィルスインフルエンゼである。他の実施態様においては、ヘモフィルスインフルエンゼは型別可能ヘモフィルスインフルエンゼである。他の態様においては、本発明は、中耳炎、副鼻腔炎、気管支炎、肺炎及び髄膜炎並びに菌血症を診断する方法であって、本組成物の治療又は予防量を個体に投与する段階を含む、前記方法に関する。他の態様によれば、本発明は、ヘモフィルスインフルエンゼ感染症に感受性のある個体においてヘモフィルスインフルエンゼ細菌感染症を診断する方法であって、本発明の組成物の治療又は予防量を前記個体に投与する段階を含む、前記方法に関する。他の実施態様においては、ヘモフィルスインフルエンゼは型別不能ヘモフィルスインフルエンゼである。他の実施態様においては、ヘモフィルスインフルエンゼは型別可能ヘモフィルスインフルエンゼである。他の態様によれば、本発明は、ヘモフィルス感染症を予防又は治療するための医薬組成物の使用であって、該組成物の予防又は治療量を個体に投与する段階を含む、前記使用に関する。他の態様によれば、本発明のヘモフィルスポリペプチドは、ヘモフィルス感染症の診断を検出するための本発明のポリペプチドを含むキットに用いることができる。本発明のポリペプチドをコードするDNA配列は、ヘモフィルスインフルエンゼを含んでいる疑いのある生体試料においてその細菌の存在を検出するのに用いられるDNAプローブを設計するために用いることができる。本発明の検出法は、a個体から生体試料を得る段階とb本発明のポリペプチド又はその断片をコードするDNA配列を有する1種以上のDNAプローブを生体試料とインキュベートして混合物を形成する段階とcヘモフィルスインフルエンゼ菌の存在を示す該混合物において特異的に結合するDNAプローブを検出する段階とを含む。本発明のDNAプローブは、ヘモフィルスインフルエンゼ感染症を診断する方法として、例えば、ポリメラーゼ連鎖反応を用いて、試料において循環ヘモフィルスインフルエンゼ即ち、ヘモフィルスインフルエンゼ核酸を検出するために用いることができる。プローブは、慣用的な手法を用いて合成することができ、固相に固定化することができ、検出可能標識で標識することもできる。本出願に好ましいDNAプローブは、本発明のヘモフィルスインフルエンゼポリペプチドの少なくとも約6隣接ヌクレオチドに相補的な配列をもつオリゴマーである。個体においてヘモフィルスインフルエンゼを検出する他の診断法は、a本発明のポリペプチド又はその断片と反応性の抗体を検出可能標識で標識する段階とb標識抗体又は標識断片を該個体に投与する段階とcヘモフィルスインフルエンゼの存在を示す該個体において特異的に結合した標識抗体又は標識断片を検出する段階とを含む。本発明の他の態様は、ヘモフィルスインフルエンゼ感染症の診断、特に治療に特異的な抗体を生産する免疫原としての本発明のヘモフィルスポリペプチドの使用である。適切な抗体は、適切なスクリーニング法を用いて、例えば、試験モデルにおいてヘモフィルスインフルエンゼ感染症に対して受動的に防御する具体的な抗体の能力を測定することにより求めることができる。動物モデルの一例は実施例に記載されたマウスモデルである。抗体は、全抗体でもその抗原結合断片であってもよく、免疫グロブリン類に属していてもよい。抗体又は断片は、動物由来、特に哺乳動物由来、特にマウス、ラット又はヒト由来であってもよい。自然抗体又はその断片、又は所望される場合には、組換え抗体又は抗体断片であってもよい。組換え抗体又は抗体断片という用語は、分子生物学手法を用いて生産された抗体又は抗体断片を意味する。抗体又は抗体断片は、ポリクローナル又は好ましくはモノクローナルであってもよい。ヘモフィルスインフルエンゼポリペプチドと関連がある多くのエピトープに特異的であってもよいが1つに特異的であることが好ましい。本発明の他の態様は、ヘモフィルス感染症を予防又は治療するための本発明の医薬組成物の使用であって、該組成物の予防又は治療量を個体に投与する段階を含む、前記使用である。特に定義されない限り、本明細書に用いられるすべての技術科学用語は、本発明が属している当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に挙げたすべての出版物、特許出願、特許、他の参考文献の記載は全体で本願明細書に含まれるものとする。矛盾する場合には、定義を含む本明細書が支配する。更に、材料、方法、実施例は単に例示であり、限定するものではない。型別不能ヘモフィルスインフルエンゼNTHIポリペプチドの分離とこれらのポリペプチドをコードする遺伝子の同定表面曝露NTHIポリペプチドの分離細菌株型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ臨床分離物12085と10095はDMGranoffセントルイス、ミズリー州から、B20、A18、A108、C98、C26、B31をCentredeRechercheenInfectiologieduCentreHospitalierdelUniversiteLavalから供与された。型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ12085は、パキスタンの下気道感染症をもつ子供の血液から分離した。大腸菌EscherichiacoliDH5αGIBCOBRL、バーリントン、オンタリオを組換えDNA用のホスト株として用いた。大腸菌XL1BlueMRFストラタジーン、ラホーヤ、カリフォルニア州をλZAPExpressファージベクターによる感染用のホスト株として用いた。大腸菌XLOLRストラタジーンをインビボ励起繊維状λZAPExpressによる感染用のホスト株として用いた。抗血清完全又は不完全フロインドアジュバントシーダーレーンラボラトリーズ社、ホーンバイ、カナダの存在下外膜タンパク質で3週おきに皮下免疫した後にマウス抗血清を産生した。3回目の免疫処置の21日後に血清を集めた。熱死滅型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ12085についてELISAとウェスタンブロッティングによる反応性に基づいて4種のヒト抗血清を選択した。ヘモフィルスインフルエンゼライブラリーの構築とスクリーニング型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ12085DNAをゲノム抽出キットQIAgenを用いて抽出した。DNAをTsp509Iで消化し、EcoRI消化λZAPExpressファージアームストラタジーンにライゲートした。そのライゲーションを製造業者の推奨ストラタジーンに従ってギガパック抽出物に試験管内パッケージングした。組換えファージを大腸菌XL1BlueMRFに25×104PFU150mm直径プレートの密度で塗布した。8時間インキュベートした後、プレートをニトロセルロースディスクで重層し、得られたリフトをヒトとマウスの血清でイムノブロッティング処理した。正のクローンを集め、プラーク精製した。問題のヘモフィルス遺伝子をコードする組換えpBKCMVプラスミドをExAssist繊維状ヘルパーファージとλ耐性株大腸菌XLOLRを用いて精製バクテリオファージからインビボ切除により回収した。抗原の同定これらの組換え大腸菌の溶解物のSDSPAGAとイムノブロット分析から各クローンがヒト又はマウス抗血清と反応する1種以上のポリペプチドを発現したことがわかった。DNAシークエンシングと配列分析ゲノムクローンをタクダイデオキシターメネーターサイクルシークエンシングキットTaqDyeDeoxyTerminatorCycleSequencingKitアプライドバイオシステム、フォスターシティ、カリフォルニア州で配列決定した。いくつかの内部プライマーをクローン化挿入断片の中へ配列決定するために設計した。配列アセンブリをシークエンサーソフトウェアジーンコードコーポレーション、アンアーバ、ミシガン州を用いて行い、配列分析をマックベクターソフトウェアオックスフォードモレキュラー社、キャンベル、カリフォルニア州で行った。実施例1本実施例は、型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ遺伝子の発現ベクターへのクローニングを示すものである。型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ遺伝子BVHNTHI1~BVHNTHI12配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23のコード領域を、制限部位NcoICCATGG、NdeICATATG、SalIGTCGAC又はXhoICTCGAGを付加するために塩基拡張部分を有する下記のオリゴヌクレオチドプライマーを用いることにより型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ株12085のゲノムDNAからPCRDNAサーマルサイクラージーンアンプPCRシステム2400パーキンエルマー、サンホゼ、カリフォルニア州によって増幅した。PCR産物をキアゲン製キアクイックゲル抽出キットを用いることにより製造業者の説明書に従ってチャッツワース、カリフォルニア州アガロスゲルから精製し、適切なエンドヌクレアーゼファルマシアカナダ社、BaiedUrfe、カナダで消化した。pETベクターNovagen、マディソン、ウィスコンシン州を同様に消化し、キアゲン製キアクイックゲル抽出キットチャッツワース、カリフォルニア州を用いてアガロースゲルから精製した。消化したPCR産物を酵素制限pET発現ベクターにライゲートした。ライゲートした産物を大腸菌株DH5αφ80dlacΔM15△U169endA1recA1hsdR17deoRthi1supE44λgyrA96relA1ギブコBRS、ゲイザースバーグ、メリーランドにシマニスの方法HanahanDDNACloningDMGloveredIRLPressWashingtonDCvol1pp109135に従って形質転換した。組換え遺伝子含有プラスミドrpETをキアゲンキットチャッツワース、カリフォルニア州を用いて精製し、DNA挿入断片を配列決定したタクダイデオキシターメネーターサイクルシークエンシングキット、ABI、フォスターシティ、カリフォルニア州。表1DNAクローニング用オリゴヌクレオチドプライマー表ヌクレオチドの位置はクローニングの結果、即ち、PCR産物の長さと図1での位置を示す。実施例2本実施例は、他の型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ株由来のBVHNTHI1遺伝子のPCR増幅とシークエンシング及びその遺伝子の分子保存レベルの評価を記載するものである。それらの株由来型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ遺伝子BVHNTHI1のそれぞれのコード領域を、次のオリゴHAMJ3425CAAGGCGTTTTCATATGCCTGTCATTCGGCAGG3HAMJ3435CTAATTGACCTCGAGTTTTGCTGCTTTTAATTCTTGATAATATTG3を用いてゲノムDNAからPCRDNAサーマルサイクラージーンアンプPCRシステム2400パーキンエルマー、サンホセ、カリフォルニア州によって増幅した。PCR産物を、キアゲン製のキアクイックゲル抽出キットを用いて製造業者の説明書チャッツワース、カリフォルニア州に従ってアガロースゲルから精製し、DNA挿入断片を配列決定したタクダイデオキシターミネーターサイクルシークエンシングキット、ABI、フォスターシティ、カリフォルニア州。これらの8菌株すべてについて作成したPCR断片の長さは同一であった。これらの菌株12085、10095、A18、A108由来のヌクレオチドと予想アミノ酸配列のペアワイズ比較から、図25に示されるように99同一であることがわかった。実施例3本実施例は、組換え型別不能ヘモフィルスインフルエンゼBVHNTHI1ポリペプチドの作製と精製を示す図である。配列番号1に対応するBVHNTHI1遺伝子を有する組換えpET21bプラスミドを用いて大腸菌株TunerFompThsdSgaldcnlacYIノバジェン、マディソン、ウィスコンシンをエレクトロトランスフォームしたジーンパルサーII装置、バイオラドラボス、ミシソーガ、カナダ。この大腸菌株の中で、遺伝子がイソプロピルβdチオガラクトピラノシドIPTGによる誘発性のlacプロモーターの制御下にあるT7RNAポリメラーゼλDE3プロファージに存在するによって組換えポリペプチドのT7プロモーター制御発現が特異的に認識される。形質転換体TunerrpET21を100μgmlのカルベニシリンシグマアルドリッヒカナダ社、オークビル、カナダを含有するLBブイヨンペプトン10gl、酵母エキス5gl、NaCl10gl中250rpmで撹拌しながら37°CでA600値が05になるまで増殖した。型別不能ヘモフィルスインフルエンゼBVHNTHI1Hisタグ組換えポリペプチドの生産を誘発させるために、細胞をIPTGの存在下に1mMの最終濃度で30°Cにおいて3時間インキュベートした。500mlの培養物からの誘発細胞を遠心分離により沈降させ、70°Cで凍結した。IPTG誘導TunerrpET21の可溶性細胞質画分からの組換えポリペプチドの精製をHisタグ配列6個の隣接的ヒスチジン残基の性質に基づくアフィニティークロマトグラフィーによって行い、His結合金属キレート化樹脂に固定化した2価のカチオンNi2に結合した。概要としては、500mlのIPTG誘導培養物から得られた沈降細胞を1mMのフェニルメチルスルホニルフルオリドPMSFシグマを含有する溶解バッファー20mMトリス、500mMNaCl、5mMイミダゾール、pH79に再懸濁し、音波処理し、16000Xgで30分間遠心分離してデブリを除去した。上清をNiNTAアガロースカラムキアゲン、ミシソーガ、オンタリオ、カナダ上に析出させた。型別不能ヘモフィルスインフルエンゼBVHNTHI1Hisタグ組換えポリペプチドを250mMイミダゾール500mMNaCl20mMトリスpH79で溶離した。試料からの塩とイミダゾールの除去は、4°CでPBSに対して透析することにより行った。大腸菌の可溶性画分から得られた組換えポリペプチド量をMicroBCAピアス、ロックフォード、イリノイ州によって測った。実施例4本実施例は、BVHNTHI1で免疫化後、型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ感染症に対する免疫原性と防御能の分析を示すものである。5匹の雌のBALBcマウスチャールスリバー、オンタリオ、カナダを大腸菌熱不安定毒素アジュバントLT1μgセダーレーンラボラトリーズ社、ホーンバイ、カナダの存在下に25μgのアフィニティ精製BVHNTHI1Hisタグ組換えポリペプチドで、対照としてPBS中アジュバントのみで2週間おきに3回鼻内に免疫した。血液試料をそれぞれの免疫の前日と3回目42日目の注射の14日後に眼窩副鼻腔から集めた。抗体力価を型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ株12085の熱死滅外膜小胞についてELISAにより求めた。二次抗体は、アルカリンホスファターゼに結合したヤギ抗マウスIgGIgMHLFc特異的ジャクソンイムノリサーチラボス、ミシソーガ、オンタリオを用いた。抗血清の反応性力価を相互の希釈度として定義し、吸光度が免疫前血清試料で得たものより2倍増加した。BVHNTHI1によって誘発した免疫応答が機能的に重要であるかを調べるために、約2×105CFUの型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ株12085で肺臓内に攻撃したマウスにおいて14日後にインビボ防御能を評価した。型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ攻撃接種物の試料をチョコレート寒天プレート上に塗布して攻撃量を確かめた。型別不能ヘモフィルスインフルエンゼのインビボ増殖を制限する点で予防接種の有効性を測定するために、注射の5時間後にペントバルビタールナトリウムEuThanylの腹腔内注射によってマウスを犠牲にした。気管支肺胞洗浄について細菌数定量用連続希釈のプレーティングにより細菌クリアランスを評価した。アジュバントのみを注射したマウスを負の対照として用いた。免疫原性実験の結果表2から、免疫動物の血清の特異抗体のレベルが対照血清に相対して約1000倍まで上昇したことがわかった。平均力価をOMPで測定し、熱死滅試料は1つの希釈だけ異なり、BVHNTHI1ポリペプチドが実際に表面曝露抗原であることが確認された。表2血清aにおけるNTHI特異的抗体に対する全身免疫の影響a免疫処置の42日目に免疫マウスと対照マウスから血清試料を集めた。防御実験の結果表3から、菌株12085が対照動物の肺に容易に増殖して攻撃後5時間までに生存できる型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ細胞数が200だけ増加したことがわかった。対照的に、BVHNTHI1免疫マウスによる菌株12085の実質的な肺クリアランスが明らかであったが、免疫動物の肺における細菌沈着物の最初の数の35だけが攻撃後5時間までに回収された。表3型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ12085aの肺クリアランスに対する全身免疫の影響a各数値は各時間での5匹の動物の平均である。bP00098は非対合性t検定とウエルシュ補正に従って算出し、対照と比較した。実施例5本実施例は、ヒト血清と防御マウスからの抗血清による型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ株12085由来の組換えポリペプチドの認識を示すものである。標準ウェスタンブロット法を用いて精製組換えポリペプチドがヒト血清によって認識されるかを調べた。更に、外膜タンパク質標品で免疫したマウスからの抗血清を精製組換えポリペプチドに対して試験した。これらの標品で免疫したマウスは、型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ株12085で攻撃した後に高肺クリアランスを示した。抗原の調製については、精製組換えポリペプチドをSDSと2メルカプトエタノールを含有する試料バッファーで100°Cで5分間処理した。ポリペプチドをLaemmliUKCleavageofstructuralproteinsduringtheassemblyoftheheadofthebacteriophageT4Nature227680685の方法に従ってSDSPAGEで分離した。SDSPAGE後、ポリペプチドをゲルからニトロセルロース紙へ方法TowbinHStaehelinTGordonJElectrophoretictransferofproteinfrompolyacrylamidegelstonitrocellulosesheetsprocedureandsomeapplicationsProcNatlAcadSciUSA7643504354で電気泳動で移し、ヒト又はマウス抗血清でプローブした。抗体と反応性の抗原の検出を結合抗マウス又は抗ヒト免疫グロブリンと色基質を用いた間接酵素イムノアッセイで行った。表4の結果から、ほとんどのポリペプチドがヒト免疫系によってすでに見られたことがわかる。ワクチン候補としてこれらのポリペプチドは、ヒトにおいて強力な免疫応答を誘発させる可能性がある。更に、ほとんどのポリペプチドが防御マウスからの血清によって認識された。血清反応性は、感染症のマウスモデルにおいて高肺クリアランスに相関している。表4正常ヒト血清と防御マウス由来の抗血清と型別不能ヘモフィルスインフルエンゼ12085組換えポリペプチドとの反応性aの数は反応の強さを示し、《-》記号は反応しないことを示している。bマウスをそれぞれの組換えポリペプチドで免疫し、肺クリアランスを実施例4のように測定した。cndは実施せず。本明細書は、以下の発明を開示する。下記より選ばれた1種を含む単離されたポリペプチド。a配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれたアミノ酸配列をもつ第2ポリペプチドに対して少なくとも70が同一であるポリペプチドb配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれたアミノ酸配列をもつ第2ポリペプチドに対して少なくとも95が同一であるポリペプチドc配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列を含むポリペプチドd配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列をもつポリペプチドに結合特異性を有する抗体を産生することができるポリペプチドe配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22及び24より選ばれた配列をもつポリペプチドの一部をもったエピトープfN末端Met残基が欠失しているa、b、c、d又はeのポリペプチド又はg分泌アミノ酸配列が欠失しているa、b、c、d又はeのポリペプチド。