"下記構造を有する化合物を合成する方法であって、但し、RはHである。ai下記構造を有する化合物を、適切な条件下でエポキシ化剤と反応し、エポキシドを形成すること、iiステップaiで形成されたエポキシドを適切な条件下で、R4NF但し、各Rは独立に同じであるか、又は異なっており、直鎖又は分岐鎖のアルキル、アラルキル又はアリール基である。で開裂し、フルオロアルコールを形成すること、iiiステップbiiで形成されたフルオロアルコールを、非求核性塩基及び式C6H5CH2X但し、XはBr、Cl、I又はFである。を有する有機ハライドを用いて適切な条件下でアルキル化し、下式を有する化合物を形成すること、b下記構造を有する化合物を適切な条件下でエポキシ化剤で処理し、エポキシドを形成すること、cステップbで形成されたエポキシドを下記構造を有する化合物と適切な条件下でカップリングし、下記構造を有する化合物を形成すること、diステップciiで形成された化合物を、適切な条件下で非求核性塩基及び式C6H5CH2X但し、Xは、Br、Cl、I又はFである。を有する有機ハライドでアルキル化すること、及びiiステップdiで形成された化合物を、適切な条件下で、R4NF但し、各Rは独立に同じであるか、又は異なっており、直鎖又は分岐鎖のアルキル、アラルキル又はアリール基である。で脱シリル化すること、iiiステップdiiで形成された化合物を、適切な条件下で金属アルコキシドで処理し、脱保護された二糖を形成すること、ivステップdiiiで形成された二糖を、適切な条件下でアルキル化し、選択的に脱保護された下記構造を有する二糖を形成すること、eiステップdivで形成された選択的に脱保護された二糖を、適切な条件下でステップaiiiで形成された化合物とカップリングし、保護されれた三糖を形成すること、及びiiステップeiで形成された保護された三糖を、適切な条件下で脱保護し、下記構造を有する三糖を形成すること、但し、RはHである。を具備した方法。下記構造を有する三糖セラミドを合成するための方法であって、a下記構造を有する三糖を合成すること、但し、RはPMBである。biステップaで形成された三糖を、適切な条件下でエポキシ化剤と反応し、三糖エポキシドを形成すること、及びiiステップbiで形成された三糖エポキシドを、適切な条件下で下記構造を有する化合物と反応し、下記構造を有する保護された三糖セラミドを形成すること、ciステップbiiで形成されたセラミドを適切な条件下でアシル化すること、及びiiステップciで形成された化合物を適切な条件下で選択的に脱保護し、三糖セラミドを形成すること、を具備した方法。下記構造を有するメルカプト三糖を合成する方法であって、a下記構造を有する化合物を適切な条件下で、下記構造を有する化合物とカップリングし、下記構造を有する二糖を形成すること、bステップaiiで形成された二糖を、適切な条件下で下記構造を有する化合物とカップリングし、下記構造を有する三糖を形成すること、cステップbで形成された三糖を適切な条件下でヨードスルホンアミド化し、下記構造を有するヨードスルホンアミドを形成すること、及びdステップcで形成されたヨードスルホンアミドを適切な条件下でチオレートと反応し、メルカプト三糖を形成すること、を具備した方法。下記構造を有する六糖セラミドを合成する方法であって、a下記構造を有する化合物を、適切な条件下で、下記構造を有する化合物とカップリングし、下記構造を有する化合物を形成すること、biステップaで形成された化合物を適切な条件下でエポキシ化剤と反応し、六糖エポキシドを形成すること、及び、ii六糖エポキシドを、適切な条件下で下記構造を有するスズエーテルと反応し、六糖アルコールを形成すること、cステップbiiで形成された六糖アルコールを、適切な条件下でアシル化し、下記構造を有する六糖アセテートを形成すること、dステップcで形成された六糖アセテートを、パルミチン酸無水物の存在下、適切な条件下で還元的にアシル化し、六糖セラミドを形成すること、e六糖セラミドを適切な条件下で脱シリル化し、部分的に脱保護された六糖セラミドを形成すること、fi部分的に脱保護された六糖セラミドを適切な条件下で還元し、脱保護された六糖セラミドアセテートを形成すること、ii脱保護された六糖セラミドアセテートを適切な条件下でアシル化し、六糖セラミドパーアセテートを形成すること、及びg六糖セラミドパーアセテートを適切な条件下でケン化し、六糖セラミドを形成すること、を具備した方法。下記構造を有する六糖セラミドを合成する方法であって、a下記構造を有する化合物を、適切な条件下で、下記構造を有する化合物とカップリングし、下記構造を有する六糖を形成すること、及びbiステップaで形成された六糖を、パルミチン酸無水物の存在下、適切な条件下で還元し、パルミトイルアミドを形成すること、iiパルミトイルアミドを、適切な条件下で、R4NF但し、各Rは独立に、同じであるか、又は異なっており、直鎖又は分岐鎖のアルキル、アラルキル又はアリール基である。で脱シリル化し、部分的に脱保護された六糖を形成すること、iiiステップbiiで形成された六糖を適切な条件下で脱保護し、脱保護された六糖を形成すること、ivステップbiiiで形成された六糖を、適切な条件下でアシル化し、六糖セラミドパーアセテートを形成すること、v六糖セラミドパーアセテートを適切な条件下でケン化し、六糖セラミドを形成すること、を具備した方法。下記構造を有するアリル六糖を合成する方法であって、a下記構造を有する化合物を、適切な条件下で下記構造を有する化合物とカップリングし、但し、RはHである。下記構造を有する六糖を形成すること、biステップaで形成された化合物を、適切な条件下でR4NF但し、各Rは独立に同じであるか、又は異なっており、直鎖又は分岐鎖のアルキル、アラルキル又はアリール基である。で脱シリル化し、部分的に脱保護された六糖を形成すること、iiステップbiで形成された六糖を適切な条件下で脱保護し、脱保護された六糖を形成すること、及びiiiステップbiiで形成された化合物を適切な条件下でパーアシル化し、下記構造を有する六糖パーアセテートを形成すること、ciステップbiiiで形成された六糖パーアセテートを適切な条件下でエポキシ化剤と反応し、六糖エポキシドパーアセテートを形成すること、iiステップciで形成された六糖エポキシドパーアセテートを適切な条件下でアリルアルコールで処理し、アリル六糖パーアセテートを形成すること、及びiiiアリル六糖パーアセテートを適切な条件下でケン化し、アリル六糖を形成すること、を具備した方法。下記構造を有する六糖を合成する方法であって、a下記構造を有する化合物を適切な条件下で、下記構造を有する化合物とカップリングし、下記構造を有する化合物を形成すること、biステップaで形成された化合物を適切な条件下でアシル化すること、及びiiステップbiで形成された化合物を適切な条件下でエポキシ化剤と反応し、下記構造を有するエポキシドを形成すること、ci該エポキシドを、適切な条件下でR4NF但し、各Rは独立に同じであるか、又は異なっており、直鎖又は分岐鎖のアルキル、アラルキル又はアリール基である。で処理すること、及びiiステップciで形成された化合物を、適切な条件下でアルキル化し、下記構造を有する化合物を形成すること、但し、RはH又はアシルである。dステップciiで形成された化合物を、適切な条件下で下記構造を有する化合物とカップリングし六糖を形成すること、を具備した方法。下記構造を有する化合物但し、nは約0から約9の間の整数である。下記構造を有する化合物但し、nは約0から約9の間の整数である。下記構造を有する化合物但し、nは約0から約9の間の整数である。ヒト患者に抗体を誘導する方法であって、該抗体が、ヒト乳房腫瘍細胞と免疫反応性であり、下記構造を有する化合物の所定量を、単独で、又は抗体を誘導するのに効果的な適切な免疫学的アジュバントに結合して該患者に投与することを具備した方法。請求の範囲第11項に記載の方法であって、該誘導される抗体がMBr1抗体である方法。請求の範囲第11項に記載の方法であって、該患者が臨床的に回復中であるか、又は該患者が外科手術によって治療されている場合には、一部の除去されていない疾患部分を制限する方法。請求の範囲第11項に記載の方法であって、該アジュバントがタンパク質キャリアー、バクテリア又はリポソームである方法。請求の範囲第14項に記載の方法であって、該アジュバントがカルメット-ゲラン杆菌である方法。患者に抗体を誘導する方法であって、該抗体がヒト乳房腫瘍細胞と免疫反応性であり、請求の範囲第8項に記載の化合物の所定量を、単独で、又は該抗体を誘導するのに効果的な適切な免疫学的アジュバントに結合して、該患者に投与することを具備した方法。請求の範囲第16項に記載の方法であって、該誘導される抗体がMBr1抗体である方法。請求の範囲第16項に記載の方法であって、該患者が臨床的に回復中であるか、又は該患者が外科手術によって治療されている場合には、一部の除去されていない疾患部分を制限する方法。請求の範囲第16項に記載の方法であって、該アジュバントがタンパク質キャリアー、バクテリア又はリポソームである方法。請求の範囲第19項に記載の方法であって、該アジュバントが、カルメット-ゲラン杆菌である方法。患者に抗体を誘導する方法であって、該抗体がヒト乳房腫瘍細胞と免疫反応性であり、請求の範囲第9項に記載の化合物の所定量を、単独で、又は該抗体を誘導するのに効果的な適切な免疫学的アジュバントに結合して、該患者に投与することを具備した方法。請求の範囲第21項に記載の方法であって、該誘導される抗体がMBr1抗体である方法。請求の範囲第21項に記載の方法であって、該患者が臨床的に回復中であるか、又は該患者が外科手術によって治療されている場合には、一部の除去されていない疾患部分を制限する方法。請求の範囲第21項に記載の方法であって、該アジュバントがタンパク質キャリアー、バクテリア又はリポソームである方法。請求の範囲第24項に記載の方法であって、該アジュバントがカルメット-ゲラン杆菌である方法。患者に抗体を誘導する方法であって、該抗体がヒト乳房腫瘍細胞と免疫反応性であり、請求の範囲第10項に記載の化合物の所定量を、単独で、又は該抗体を誘導するのに効果的な適切な免疫学的アジュバントに結合して、該患者に投与することを具備した方法。請求の範囲第26項に記載の方法であって、該誘導される抗体がMBr1抗体である方法。請求の範囲第26項に記載の方法であって、該患者が臨床的に回復中であるか、又は該患者が外科手術によって治療されている場合には、一部の除去されていない疾患部分を制限する方法。請求の範囲第26項に記載の方法であって、該アジュバントがタンパク質キャリアー、バクテリア又はリポソームである方法。請求の範囲第29項に記載の方法であって、該アジュバントがカルメット-ゲラン杆菌である方法。患者の乳ガンの再発を防止する方法であって、請求の範囲第8項に記載の化合物で患者をワクチン接種することを具備した方法。患者の乳ガンの再発を防止する方法であって、請求の範囲第9項に記載の化合物で患者をワクチン接種することを具備した方法。患者の乳ガンの再発を防止する方法であって、請求の範囲第10項に記載の化合物で患者をワクチン接種することを具備した方法。実験の詳細一般的手順全ての空気に敏感な反応及び湿気に敏感な反応は、特に示さない限り、アルゴン雰囲気下、炎で乾燥した装置中で行った。空気に敏感な液体及び溶液は、シリンジ又はカニューレを介して移し替えた。可能な場合には、反応を薄層クロマトグラフィーTLCでモニターした。大まかな溶媒の除去は、Buchiロータリーエバポレーターで、アスピレータによる減圧下で行い、少量の溶媒は、真空ポンプにより0.1~0.5mmHgで除去した。融点mpは矯正されておらず、エレクトロサーマルシリーズIA9100デジタル融点測定器を用い、軟質ガラスキャピラリー管で行った。赤外吸収スペクトルIRは、パーキン-エルマー1600シリーズ、フーリエー変換装置を用いて記録した。サンプルは、特に断らない限り、NaClプレート上にそのままneatのフィルムとして調製した。吸収バンドは、波数cm1で記録した。関連した帰属可能なバンドのみを報告した。プロトン核磁気共鳴1HNMRスペクトルは、ブルッカーAMX-400スペクトロメーターを用い、400MHzで測定した。ケミカルシフトは、テトラメチルシランTMS;δ=0ppmからの低磁場をppmで記載した。多重度は通常の方式で略記した。即ち、s=一重線、d=二重戦、t=三重線、q=四重線、m=多重線、br=幅広である。炭素核磁気共鳴13CNMRスペクトルは、ブルッカーAMX-400スペクトロメーターを用い、複合パルスデカップリングをしながら100MHzで測定した。サンプルは1HNMRスペクトルと同様に調製し、ケミカルシフトは、TMS0ppmに比して記載した。残留CHCl3を内部標準δ=77.0ppmとして使用した。全ての高分解能質量分析スペクトルHRMS分析は、内部標準としてパーフルオロケロセンPFKを用い、JEOLJMXDX303HF質量分析計で電子衝撃イオン化法EIにより測定した。低分解能質量スペクトルMSは、DelsiNermagR1010質量分析計で、電子衝撃イオン化法EI又は示されたキャリアーガスアンモニア又はメタンを用いる化学イオン化法CIで測定した。ガスクロマトグラフィー/質量スペクトルGCMSに対しては、キャリアーガスとしてヘリウムを用い、DB-5を融解させたキャピラリーカラム30m、0.25mm厚さを使用した。典型的な条件は、60~250°C、40°C/分の温度プログラムを使用した。薄層クロマトグラフィーTLCは、プレコーティングされたガラスプレートシリカゲル60、0.25mm厚さを用いて行った。視覚化は、254nmのUVランプを用いての発光、又はアニスアルデヒド染色液3.5ml酢酸中の9.2mlのp-アニスアルデヒド、12.5mlの濃硫酸及び338mlの95エタノールEtOHへの浸漬と着色のための加熱により行った。フラッシュシリカゲルクロマトグラフィーは、標準のプロトコールに従って行った。特に断らない限り、全ての溶媒及び試薬は、市販品のグレードであり、以下に示す以外、購入したまま使用した。以下の溶媒は、かっこ内に示した乾燥方法を用いて、アルゴン下で蒸留した:CH2Cl2CaH2;THFNa/ケチル;Et2ONa/ケチル;ジイソプロピルアミンCaH2。略語OTfトリフレートTLC薄層クロマトグラフィーEtOAc酢酸エチルTIPSトリイソプロピルシリルPMBp-メトキシベンジルBnベンジルAcアセテートhexヘキサンTHFテトラヒドロフランcollコリジンLiHMDSリチウムヘキサメチルジシラジドDMFN,N-ジメチルホルムアミドDMAP2-ジメチルアミノピリジンDDQ2,3-ジクロロ-5,6-ジシアノ-1,4-ベンゾキノンTABFテトラ-n-ブチルアンモニウムフルオライドM.S.モレキュラーシーブr.t.室温r.b.丸底フラスコ。例1ポリマーに結合されたグリカール18の調製ポリマーに結合されたガラクタール7500mg;SJDanishefskyetalJAmChemSoc19928331を100mlのポリマーフラスコに置き、減圧下に乾燥した。N2下、0°Cに冷却し、乾燥CH2Cl220ml及び新たに調製したMurray溶液30ml;RWMurrayandRJeyaramanJOrgChem19852847を加えた。0°Cで~90分攪拌した後、溶液をN2の圧力を用いて濾過した。酸化の手順を繰り返した。得られた7のエポキシドを真空ラインに、乾燥するまで~3時間保持した。グルカール19の溶液8mlの乾燥THF中1.0gを加え、混合物を-23°Cドライアイス-CCl4でで冷却した。ZnCl2のTHF溶液0.8ml、1.0Mを加えた。混合物をゆっくりr.t.に暖め~2時間以上、次いで一夜r.t.で攪拌した。ポリマーに結合したグルカール18を3×20mlのTHFで軽く洗浄し、真空ラインで乾燥した。ポリマーに結合された四糖20の調製ポリマーに結合されたグルカール18及びSnOTf20.08g、1.92mmolを混合し、減圧下に乾燥した。N2下で0°Cに冷却し、ジ-t-ブチルピリジン1.7ml、7.57mmolを含む、フコシルドナー10の20ml乾燥THF溶液を加えた。混合物をゆっくりr.t.に暖め、一夜攪拌した。ポリマーを2×20mlの乾燥THF、2×20mlの乾燥ジオキサン、20mlのDMSO、及び2×20mlのTHFで洗浄した。得られたポリマーに結合した四糖20を真空ラインに保持し、乾燥した。四糖グリカール21の調製ポリマーに結合された四糖2050mgを2mlのTHF中で攪拌し、各0.2mlの、TBAF及びAcOHのTHF1.0M溶液で処理した。混合物を一夜40°Cで攪拌した。ポリマーを3×5mlのTHFで洗浄した。合わせた洗浄液を濃縮し、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーにかけ2:1EtOAc:hex、無色のゴム状物として四糖グリカール21を得た。収量9.0mg。例2ジオール18’の調製ガラクタール7’0.100g;0.304mmolの5ml乾燥CH2Cl2溶液を、0°C、N2雰囲気下で、10mlのMurray溶液新たに調製したもので処理し、0°Cで40分攪拌した。TLC1;1EtOAc:hexでは、7’の痕跡は全く示されなかった。溶媒を、乾燥N2気流を用いて蒸発させた。残渣としての7’のエポキシドを真空ラインに~2時間保持した。N2雰囲気下でエポキシドにグルカール誘導体3’0.150g、0.496mmolの3ml乾燥THF溶液を加えた。-78°Cに冷却し、ZnCl2の1.0MEt2O溶液0.50ml、0.50mmolを加えた。混合物をゆっくりr.t.に暖め~2時間以上、一夜攪拌した。TLC1:1EtOAc:hexは、反応が完結したことを示した。飽和NaHCO3水溶液20mlを加え、次いで混合物をEtOAc3×20mlで抽出した。有機層をMgSO4で乾燥した。シリカゲルのカラムクロマトグラフィー1:3EtOAc:hexで、無色の固体としてジオール18’を得た。収量:173mg89。[αD23-9.8°c=1.0、CH2Cl2。四糖22の調製ジオール18’86mg、0.133mmol及びフコシルドナー100.290g、0.665mmolを、ベンゼンを用いて、共沸して乾燥した。この混合物を0.65mlのジ-t-ブチルピリジンと共に3mlの乾燥THFに溶解し、次いで、カニューレを介してSnOTf20.30g、0.72mmol及び4ÅのMS500mgを含有するフラスコに、0°C、N2雰囲気下で加えた。混合物を0°Cで、~7時間攪拌した。TLC1:3EtOAc:hexによりジオール18’の痕跡は全く示されなかった。混合物を飽和NaHCO3水溶液100mlとEtOAc2×100mlの間に分配した。有機層をMgSO4で乾燥した。有機層をEtOAcを用いてシリカを通して濾過し、粗生物を得た。該粗生物を、次にシリカのクロマトグラフィー1:9EtOAc:hexで精製し、四糖22を得た。収量:170mg86。ヨードスルホンアミド23の調製手順1四糖グリカール22120mg、81.1mmol及びPhSO2NH220mg、0.13mmolをベンゼンを用いて共沸により乾燥した。4ÅのMS0.2gを加えたグローブバッグ。N2下で0°Cに冷却した後、乾燥CH2Cl21.0mlを加えた。混合物を、炎で乾燥したセライト及び4ÅのMSのプラグを通し、カニューレを介して、Icoll2ClO4の溶液100mgのAgcoll2ClO4、5mlのコリジン、及び60mgのI2から1mlの乾燥CH2Cl2中で調製した。で処理した。混合物を0°Cで40分攪拌した。TLC1:4EtOAc:hexにより、主成分としてヨードスルホンアミド23が示された。混合物を、セライトを通して濾過し、これをEt2Oで軽く洗浄した。有機層を、飽和Na2S2O3水溶液、飽和CuSO4水溶液、食塩水で抽出し、MgSO4で乾燥した。シリカのカラムクロマトグラフィー1:4EtOAc:hexにより、無色の固体としてヨードスルホンアミド23を得た。収量:115mg80。手順2四糖グリカール22200mg、0.135mmol、PhSO2NH242mg、0.27mmol、及び200mgの粉末状4ÅMSの2.0ml乾燥CH2Cl2溶液を、0°C、N2雰囲気下で、Icoll2ClO4120mgのAgcoll2ClO4及び67mgのI2から1mlの乾燥CH2Cl2中で調製した。と処理した。混合物を0°Cホイルを用いて光から保護した。30分攪拌した。TLC1:2EtOAc:hexにより、若干のグリカールと共に、主にヨードスルホンアミドが示された。0°Cで更に~1時間後、TLCでは、観測しうる改善は見られなかった。混合物を、セライトを通して濾過し、これをEt2Oで洗浄し、飽和Na2S2O3水溶液、飽和CuSO4水溶液、食塩水で抽出した後、有機層をMgSO4で乾燥した。シリカのカラムクロマトグラフィー1:3EtOAc:hexで、無色固体として23を得た。収量:165mg69。[αD23=-85.7°c=1.0、CH2Cl2。六糖25の調製ヨードスルホンアミド2360mg、34mmolを35mlのr.b.中で、200mgの粉末状4ÅMSグローブバッグで処理した。N2下で、このフラスコに保護されたラクタール24のTHF溶液1.5mlを加えた。混合物を-78°Cに冷却し、AgBF440mg、0.206mmolの0.25ml乾燥THF溶液を加えた。混合物を攪拌し、ゆっくり一夜r.t.に暖めた。混合物を45°Cに暖め、~35時間攪拌した。TLCでは、微量のヨードスルホンアミドのみが示された。飽和NH4Cl水溶液5mlを加え、混合物を3×10mlのEtOAcで抽出した。有機層をMgSO4で乾燥した。シリカのカラムクロマトグラフィー1:3EtOAc:hexにより、無色の油状物として25を得た。収量:42mg55[αD23=-33.8°c2.0、CH2Cl2。六糖25aの調製六糖2555mg、24.4mmolの~1.5mlTHF溶液を、0°CでTBAF0.25ml、1.0MTHF溶液、0.25mmolで処理し、r.t.で一夜攪拌した。TLC1:9MeOH:CH2Cl2により、25aと、より極性の低い物質の3:1混合物が示された。追加の1.0MTBAF0.10mlを加え、混合物をr.t.で一夜攪拌した。TLCは、反応が完結したことを示した。溶媒を、N2の気流を用いて除去した。シリカのクロマトグラフィー1:19MeOH:CH2Cl2で、~1:2の、2種類の化合物に相当する混合物を得た。該2種類の混合物は、2,4-環状カーボネート基が存在するか、存在しないかのみが異なる。粗収量:2種類の生成物の全重量として35mg。粗製混合物は、そのまま次の反応に使用した。パーアセチル化された六糖26の調製六糖25a36mgの0.25ml乾燥THF溶液を、~8mlの明るい青色のNa/NH3溶液に、-78°Cドライアイス浴、N2雰囲気下でカニューレを介して加えた。ドライアイス浴を除去した後、混合物を還流したNH3ドライアイスコンデンサー中で15分攪拌した。2mlの乾燥MeOHをゆっくり加えた後、得られた混合物を、N2気流を吹き込んでNH3を除去しながら攪拌した。MeOH溶液をDowex50X8HでpHが~8から9になるまで処理し、次いで、濾過した。樹脂をMeOHで洗浄した。残渣を濃縮し、真空ラインに保持して乾燥した。N2雰囲気下で、残渣を1mlの乾燥ピリジン及び0.5mlのAc2Oで処理し、一夜r.t.で撹拌した。TLCEtOAcで、六糖26が主要成分であることが示された。濃縮し、残渣をシリカのカラムクロマトグラフィー1:4hex:EtOAcで精製した。六糖17の調製六糖2610.0mg、6.3mmolを0°C、N2下で0.5mlの乾燥CH2Cl2で処理した。ジオキシラン溶液0.20mlを加え、混合物を0°Cで~40分攪拌した。TLCEtOAcでは、痕跡量の26も示されなかった。溶媒をN2気流で蒸発させた。エポキシドを真空ラインで~2時間乾燥した。エポキシドを、N2雰囲気下で0.5mlのアリルアルコール塩基性アルミナを通して乾燥させたもの及び0.5ml乾燥THFで処理した。-78°Cに冷却し、乾燥Et2O中の1.0MのZnCl210mlを加えた。ゆっくりr.t.に暖めた後、混合物を一夜攪拌した。飽和NaHCO3水溶液5mlを加え、混合物を3×5mlのEtOAcで抽出した。合わせた有機層を、MgSO4で乾燥し、濾過し、油状物になるまで濃縮した。該油状物を真空ラインで~2時間乾燥した。残渣を、ピリジン:Ac2O2:1、1.5mlで一夜攪拌しながら処理した。溶媒を除去し、残渣をシリカのカラムクロマトグラフィー1:4hex:EtOAcで精製し、無色の固体として六糖17を得た。収量:5.5mg。結果と考察複合体形成可能な形態での、ルイスY血液型決定子の高収斂合成Ley決定子の構築は、図2に示されるように、ラクタール1aから開始されるWNHaworthELHirstMMTPlantRJWReynoldsJChemSoc19302644。両一級水酸基を、これらのTBDPSエーテルとして標準的な条件下で保護し、3’及び4’ヒドロキシ官能基は、環状カーボネートとして一つの基で保護される2a。2つのα-結合したフコース残基の立体特異的な導入によって四糖グリカール3aが、一段階で、51の収率で得られる。使用されるドナーは、公知のフルオロ糖5aSJDanishefskyJOriyamaDAGriffithCHWongDPDumasJAmChemSoc19921148329であり、Mukaiyamaのオリジナルの条件を修飾して調製したTMukaiyamaYMuraiSShodaChemLett1981431。グリカール3aは、グルコース残基のN-アセチル官能基を欠くLeyハプテンに相当する。次に、問題は、この基、並びにガラクトーススペーサーモジュールを導入することである。先に開発された方法論DAGriffithSJDanishefskyOntheSulfonamidoglycosilationofGlycalsARoutetoOrigosaccharidesWith2AmidohexoseSubynitsJAmChemSoc19901125811は、これらの目的を達成するのに適していることが判明した。グリカール3aをヨードニウムジコリジンパークロレート及びベンゼンスルホンアミドと処理し、ヨードスルホンアミド4aを得る。テトラフルオロホウ酸銀の存在下、ガラクタール9aの3-スタニルエーテルを用いるアザグリコシル化SJDanishefskyKKosekiDAGriffithJGervayJMPetersonFEMcDonaldTOriyamaJAmChemSoc19921148331で五糖グリカール6aを図3に示すように75の収率で得た。6aが得られれば、一連のアザグリコシル化を繰り返すか、該グリカールをそのエポキシドとして活性化し、更にグリコシル化を続けることができる。Leyハプテンが複合体形成可能な形態に変形できることを示すためには、アリルグリコシドの形成が重要である。スルホンアミド基を目的のアセトアミド基に変換する可能性を示した。グリカール6aを示されたように二段階で脱保護する。パーアセチル化してアセトアミドグリカール7aを得た。ジメチルジオキシランで該グリカールをそのエポキシドに活性化しRLHalcombSJDanishefskyJAmChemSoc19891116661、次いで塩化亜鉛の存在下においてアリルアルコールでエポキシドを開環し、所望のパーアセチル化されたβ-アリル五糖が得られる。該五糖を、メトキシドを作用させて脱アセチル化し、標的のLeyハプテンをそのβ-アリルグリコシド8aとして得た。8a:αD727°IR335029402900283016501550136513001155107010301HNMRδ595532514519504502468451340438196123HRMScaldforC35H56NO24Na9003325found9003310。8aのオゾン化によって誘導されるアルデヒドは、Bernstein及びHallの方法でキャリアータンパクと複合体形成されうる。この合成は、公知のLey決定子への最も直接的なルートであるOHindsgaulTNorbergJLePenduRULemieuxCarbohydrRes1982109109USpohrRULemieuxibid1988174211;以前の合成に対しては、JCJacquinetPSinayJOrgChem197742720SNilssonHLohnTNorbergGlycoconjugateJ1989621RRSchmidtaTopferTetrahedronLett1991323353WKinzyALowCarbohydrateRes1993245193を参照。この方法は、各ステップで立体特異的であり、これは、ドナーとアクセプターの双方としてグリカールが幅広く利用可能であることを示しており、1,2-グリカールエポキシド及び推定されるこれらのN-スルホニルアジリジン対照物を利用することができる。この方法は、多数の類似体の製造を可能にし、複合体形成の戦略のバリエーションを広げることができる。3a及び6aの合成を以下に示す。3a:2.00g2.47mmolのラクタールカーボネート2aに、4.44g9.86mmolのフコシルフルオライド5aを加えた。混合物を5回ベンゼンで共沸し、2時間高真空下に置いた。アルゴン雰囲気下で、2.77ml12.33mmolのジ-t-ブチルピリジン及び16mlの乾燥エーテルを加えた。2.0gの新たに活性化した4Aモレキュラーシーブを加え、混合物を1時間室温で攪拌した。アルゴンのグローブバック中で、2.34g12.33mmolの塩化第一スズSnCl2及び2.56g12.33mmolの過塩素酸銀AgClO4を加えた。フラスコに還流冷却器を付け、反応物を72時間還流させた。反応を、5mlの飽和重炭酸塩で停止させ、セライトのバッドを通して濾過した。50mlの酢酸エチルで希釈し、飽和重炭酸塩で2回、飽和硫酸銅で2回、及び飽和食塩水で2回洗浄した。有機層をMgSO4で乾燥し、濃縮した。20酢酸エチル/ヘキサンでフラッシュクロマトグラフィーにかけ、2.10g51の白色発泡体の3aを得た。3aαD789IR30403000290528602830182018001710163515851570148014601440141513701350130012601205114511009507356951HNMRδ809800766759756730750716726709699689643546538535489475480472469436455428417390400385382356378107HRMScalcdforC99H106O20Si2Na16946740found16946787。6a:230mg0.12mmolのヨードスルホンアミド4aを、乾燥ベンゼンで5回共沸し、高真空下に2時間置いた。15等量のスズエステル9a561mg1.80mmolの6a-TIPS-ガラクタール及び673μl1.32mmolのビストリブチルスズオキシドの80mlベンゼン溶液から、新たに活性化した4Aモレキュラーシーブを備えたDeanStarkトラップを用いて水を一夜共沸して除くことによって調製した。の2.4mlのTHF溶液を加えた。この溶液にアルゴン雰囲気下、攪拌しながら200mgの新たに活性化した4Aモレキュラーシーブを加えた。室温で1時間攪拌した。-78°Cに溶液を冷却し、カニューレを介して、187mg0.96mmolのテトラフルオロホウ酸銀の2.4mlTHF溶液を加えた。15時間以上かけて室温に暖め、明るい黄色に変わった反応物に2mlの飽和重炭酸塩を加えて反応を停止させた。反応混合物をセライトのパッドを通して分液ロートに濾過した。セライトのパッドを酢酸エチルで徹底的に洗浄した。有機層を飽和重炭酸塩で2回、及び飽和食塩水で2回洗浄した。有機層をMgSO4で乾燥した。濃縮し、25酢酸エチル/ヘキサンでクロマトグラフィーにかけ、193mg75の白色発泡体6aを得た。6aαD1264°IR350030403000290528401820180017051635159014401410125511951100108010358157306951HNMRδ809708765690676612550545528303491109LRMScaldforC120H141NO26SSi3Na2153found2153。固体支持体上での複雑に分岐したオリゴ糖ドメインの組立のための戦略:生物複合体形成可能な形態でのルイスbドメインの簡潔な合成への応用Lebタイプ1ドメインの組立は、ラクタールを便利な出発物質として使用するLeyタイプ2標的よりも相対的にかなり困難な仕事である。タイプ1決定子の場合、ラクタールは有効な出発物質ではない。Leb系の合成では、ポリマーをベースとしたオリゴ糖構築方法を適用する機会があったSJDanishefskyKFMcCLureJTRandolphRBRuggeriScience19932601307。この戦略は、図4にまとめてある。この戦略では、ポリマーに結合されたグリカール1を1,2-アンヒドロ誘導体2の直接の変換を経て糖供与用に活性化する。2と受容体であるグリカール3の反応で4が得られる。直接のエポキシ化と受容体3との反応を繰り返す。この方法の自己管理性及び合成の最後での簡単な1回の精製は、有用な特性である。本発明は、ポリマー結合法の重要な追加の側面を開示する。このロジックは図5に示されている。各グリコシル化で、唯一のC2水酸基が生じる、原則的には及び実際には、以下を参照、この水酸基は、溶液ベースのドナーとの反応で糖受容体として機能しうる。支持体にまだ保持されている5のグリカール結合は、更に伸長されうる。この方法では、C2での分岐は保護基の使い分けの要求を最小限にしながら達成される複雑なサポニンの合成でのこの戦略の応用に対して、JTRandolphSJDanishefskyJAmChemSoc19931158473を参照。原則的には、この分岐は、伸長する鎖の何れの位置でも実行することができる。このような伸長に対しては、伸長するドメインのポリマー側非還元末端上に生じる全ての先に生じた水酸基をふさぐ必要があるであろう。従って、ポリマーに結合されたオリゴ糖は、適切な場合には、ドナー又はアクセプターとして供される。糖鎖を小さな単位に分割する際に最初に払われた努力によって、四糖グリカール6を同定した。これは最終目的としてのH-タイプの血液型特異性に結びつく。ポリマーに支持されたガラクタール7ポリマー支持体として、刊行物に記載された手順を用いて機能化された1ジビニルベンゼンで架橋されたポリスチレンを使用した:THChanWQHuangJChemSocChemCommun1985909MJFarrallJMJFrechetJOrgChem1976413877を3,3-ジメチルジオキシランRWMurrayRJeyaramanJOrgChem1985502847の溶液と反応し、対応する1,2-アンヒドロ糖グリコシルドナーを得る。これを、ZnCl2の存在下、グルカール誘導体8の溶液で処理し、9RLHalcombSJDanishefskyJAmChemSoc19891116661を得る。このポリマーに結合された二糖は、SnOTf2の存在下におけるフコシルフルオライド10KCNicoloauCWHummelYIwabuchiJAmChemSoc19921143126の溶液との処理で、グリコシルアクセプターとして作用し、11を与える。テトラブチルアンモニウムフルオライドTBAFを用いて、支持体から三糖グリカールを回収し、7から50の全収率で12を得た。次に、ポリマーから回収された三糖は更なる合成に使用することができる。この目的に対しては、化合物12をTIPSClとの反応でシリルエーテル13に変換する。該シリルエーテルをPhSO2NH2の存在下、Icoll2ClO4を作用させてヨードスルホンアミド誘導体14に変換した。AgBF4の存在下での14とグリカールスズエステル誘導体15との反応で、16を77の収率で得たDAGriffithSJDanishefskyJAmChemSoc19901125811。四糖グリカール16を脱保護し、パーアセチル化して、6を得たSJDanishefskyKKosekiDAGriffithJGervayJMPetersonFEMsDonaldTOriyamaJAmChemSoc19921148331。このように、連続したポリマー-ベース及び溶液-ベースの方法によって、完全なH-タイプの決定子の合成を達成した。次の標的は、より複雑なLeb六糖17でる。方法は、図6に示したような手順に従った。ポリマーに結合されたガラクタール7を、3,3-ジメチルジオキシランでエポキシ化し、次いで、グルカール誘導体19と反応し18に変換する。次に、二糖ジオールををSnOTf2の存在下でフコシルドナー10を用いてビスフコシル化し、20を得る。TBAFで支持体から回収し、21を得た。これは、7から40の全収率で得られた。化合物21を、TIPSClと反応し、22を得た。Icoll2ClO4とPhSO2NH2を用いて、22から得られるヨードスルホンアミド23を、AgBF4の存在下でラクタール誘導体24と反応し、六糖グリカール25を55の収率で得た。25の脱保護は2段階で達成されシリルエーテルを除去するためのTBAFと、これに続く、芳香族保護基を除去するためのNa/NH3還元、粗生成物をパーアセチル化し、26を51の全収率で得た。化合物26を、1,2-アンヒドロ糖誘導体を経て、アリルグリコシド17に変換した。これは、Bernstein及びHallの方法でタンパク質と引き続きカップリングするために、オゾン分解でアルデヒドR=CH2CHOに活性化しうる。要するに、本発明は、生物認識に重要な分岐パターンを含む、複雑な炭水化物ドメインの合成のための固体支持体グリカール組立法に拡張される。特に、ヒト胃上皮組織へのHpyloriの結合に対する決定子が、保護基の操作の一部の複雑さを十分に回避しながら簡単に、立体特異的に形成される。実験手順:6:1HNMRδ63956553553352952751750949749048147545244844440638837736121819711813CNMRδ170801707717072170671706217034170211700917001169991696514492100229883985895557448733873137306714871017068679767426718670565946483623562226088603754212323221520852082207920762065206120571551IR33687296562934617465153751435913713122851065010460αD23511°HRMScalcdforC46H63NNaO28mz11003434found11003436。21:ポリマー結合されたガラクタール70.85mmolグリカール/gを導入を、フリット化した吹き出し口を備えた丸底フラスコに置き、これをCH2Cl2にN2下で懸濁し、0°Cに冷却し、次いで3,3-ジメチルジオキシランの溶液で処理した。この混合物を、0°Cで40分テフロン登録商標でコートした磁気撹拌棒で攪拌し、この後、可溶物をフリット化した吹き出し口を介してN2圧で濾過して除いた。ポリマーに結合された1,2-アンヒドロ糖を、次の段階用に物質を乾燥するため、数時間排気約0.1Torrした。この物質を再度N2下に置き、次いで19THF中、0.5M溶液として~10モル等量で処理した。この懸濁液を-40°Cに冷却し、ZnCl2THF中、1.0M溶液として~2モル等量で処理した。反応混合物をゆっくりrtまで暖め約2時間以上、次いで更に3~4時間攪拌した。可溶物を濾過により除き、ポリマー18をTHFで数回洗浄し、次いで減圧下に乾燥した。化合物18に、グローブバッグ中で、固体状のSnOTf2~等モル量を加え、混合物をN2下に置き、0°Cに冷却し、その後10THF中、0.2M溶液として、~5モル等量及びジ-tert-ブチルピリジン~8モル等量で処理した。この懸濁液をrtまで暖め、8~10時間攪拌した。混合物を無水THF2回、ジオキサン2回、再度THFで軽く洗浄し、次いで減圧下に乾燥した。化合物20100mgをTHFに懸濁し、AcOHとTBAFの1:3混合物TBAF中、~0.2M、~10モル等量で処理し、混合物を40°Cで18時間攪拌した。ポリマーをTHF3回で軽く洗浄し、洗浄液を合わせ、濃縮し、シリカゲルのカラムクロマトグラフィー1:1EtOAc:ヘキサンで精製した。化合物2118mgを無色固体として得た7から40の全収率。1HNMRδ74072561852650949644341540639738736536435726925211110913CNMRδ1533714575138601385213819137611285512852128441282412816128071276212756127459871983897659734792678877867780177797765763776107492744074167395728672647253674367296131609016651653IR346703029629236180721647314960145351358112402109561049273856972αD23825°HRMScalcdforC67H74NaO18mz11894772found11894757。25:2360mg、34μmol及び粉末状の4Aモレキュラーシーブ200mgの混合物へ、N2下でカニューレを介して240.21mmolの無水THF1.5ml溶液を加えた。この攪拌懸濁液を、-78°Cに冷却し、次いでAgBF40.21mmolの0.25ml無水THF溶液で処理した。この混合物を攪拌し、ゆっくりと一夜rtに暖めた。明るい黄色になった懸濁液を、攪拌しながらTLC2.5EtOAc:ヘキサンで23の痕跡が全く示されなくなるまで更に36時間加熱した。この混合物を飽和NH4Cl5mlで処理し、次いでEtOAc3×10mlで抽出し、有機層をMgSO4で乾燥した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィ1:3EtOAc:ヘキサンで精製し、無色の油状物として2542mg、55を得た。1HNMRδ817750720652630535532525515499492486452445432423422417408384379373366355350133131120098313CNMR145661327213148131451312813116130771304812131120111198611978119259563947091378964893186527338722471007071703769806959690668236792673867106649656765336460643464036345633059465883583754455332498619671842955948945931923382370364IR3491930301294122865518358181951649814962146231349912455115521095110494882273486920αD23338°HRMScalcdfor12C12013CH179NNaO29SSi4mz22781292found22781296。17:1HNMRδ60053752051851046444544342342742341140232920613113CNMRδ173213573105131033010249101629963968680798067784476677649758974807459739473617340715571387116704270267014677767306721627962346199555422971665IR3376629242165251383110324αD23128°HRMScalcdforC41H69NNaO29mz10623853found10623837。ヒト乳房腫瘍関連抗原の合成に応用されるグリカール組立法本発明は、六糖の収斂的合成であって、2つの三糖ドメインがカップリングに容易に反応しうる形態で効果的に組み立てられたものを提供する。ABC三糖の合成を図8に示す。この三糖のα-結合は、確立された条件GordonDMDanishefskySJCarbohydrateRes1990206361366を用いて、フルオロ糖ドナー4bを使用して形成されうる。適切な二糖アクセプターの調製は、5bDanishefskySJBeharVRandolphJTLloydKOJAmChemSoc19950000から開始される。5b自身は、グリカールのカップリングから得られる。ベンジル化と、次の脱シリル化、カーボネートの除去、及び選択的なジベンジル化で二糖6bが得られる。このようにして得られたアクセプターを、修飾されたMukaiyamaの条件MukaiyamaTMuraiYShodaSChemLett1981431433を使用してフルオロ糖4bと反応し、三糖グリカール7bを得た。PMBエーテルを脱保護し、ABC三糖8bを得た。これを適切なDEF三糖ドナーとのカップリングに使用した。DEF三糖の合成を図9に示した。ガラクタール9bのエポキシ化とアクセプター10bとの標準のカップリングHalcombRLDanishefskySJJAmChemSoc198911166616666で位置選択的に二糖11bを得た。フルオロ-フコース12bを使用したフコシル化DejterJuszynskiMFlowersHMCarbohydrRes19732861で、5:1の比のモノグリコシル化位置異性体を得た。主異性体は所望の三糖13bであった。この物質を、標準的な条件下で処理し、トランス-ジアキシャルヨードスルホンアミド14bを得た。14bのようなヨードスルホンアミドを用いるABC三糖受容体との直接のカップリングGriffethDADanishefskySJJAmChemSoc199011258115819DanishefskySJMcDonaldFEOriyamaTJAmChemSoc199211483318333はうまくいかず、三糖中に異なったドナー官能基を導入した。実際には、ヨードスルホンアミド14bを過剰のリチウムエタンチオレートで処理し、エチルチオグリコシド15bを得た図10。本発明者らにより確立された先例により、15bから所望のβ-結合した生成物を与える、スルホンアミドの関与を予想することができるGriffithDAPhD学位論文、エール大学、1992年。ドナー15bを、アクセプター8bの存在下でMeOTfと処理すると、10:1の六糖異性体混合物が得られた。主生成物16bが70~85の収率で得られた。セラミドの結合と、最終生成物の取得は、16bのエポキシ化と、引き続きのZnOTf2で促進されるスズエーテル17bとの反応で開始されるLiuKKCDanishefskySJJAmChemSoc199311549334934。このセラミドカップリングの収率は低いが、この反応が三糖7bで行われた場合、対応する生成物が66の収率で得られた。次にこの物質を使用して18bを得た。アセチル化の後、セラミド側鎖を、パルミチン酸無水物の存在下でH2下においてリンドラー触媒を用いてアジド官能基を還元し、18bを得た。脱シリル化とケン化を行った後、金属を溶解しての脱保護を行い、MeOHで反応を停止した。粗製混合物をパーアセチル化し、次いでケン化することでグリコスフィンゴリピッド1bを得た。アノメリックプロトンのケミカルシフト及びカップリング定数のみが天然物に対して報告されている。合成した1bのスペクトルはこのデータと完全に一致した。更に、この生成物を精密質量分析、並びに1H及び13CNMRで特徴づけた。合成した物質はまた、モノクローナル抗体MBr1に結合することが示された。加えて、本発明は対応するアリルグリコシドを提供する図11。上記のような16bの脱保護、及びアセチル化で、六糖グリカールのパーアセテートを得た。エポキシ化、アリルアルコールとの反応、及びケン化でアリルグリコシド19bを得た。Le決定子の場合と同様に、19bのアリル基のオゾン分解を、タンパク質のリジン残基への還元的カップリングに向けた段階として行った。3bの合成:3-O-4-メトキシベンジル-D-ガラクタールD-ガラクタール2b3.70g、25.3mmol及びジブチルスズオキシド6.30g、1.0等量の乾燥ベンゼン150ml懸濁液を、水を共沸により除去しながら、2時間還流下に加熱した。反応物を冷却し、PMBCl3.80ml、1.1等量及びテトラブチルアンモニウムブロマイド9.10g、1.1等量で処理し、4時間還流した。反応物をシリカカラムを通して濾過し、EtOAc/ヘキサン4:1で溶出した。生成物を含むフラクションを濃縮し、残渣をヘキサンで粉末化し、4.50g67の生成物を白色の結晶性固体として得た。mp117118°C23230°IR33131645151312281082821cm11HNMRδ72868964447045945242041840439739038238127325413CNMRδ15946145021420512946113959936761270177014636562745526LRMS284266249。4,6-ジ-O-ベンジル-3-O-4-メトキシベンジル-D-ガラクタール3b3-O-4-メトキシベンジル-D-ガラクタール2.28g、8.56mmol及び臭化ベンジル3.75ml、3.68mol等量。新たに塩基性アルミナを通したもののDMF30ml溶液を、N2下、0°CでNaH1.37g、4.0mol等量で二回分けて処理した。反応物を0.5時間0°Cで、更にrtで1時間攪拌した。反応物を50gの砕いた氷に注意深くあけ、100mlの水で希釈し、次いでEtOAc/ヘキサン1:1、100ml×3で抽出した。有機抽出物を水100ml×2で洗浄し、乾燥Na2SO4し、濃縮した。15EtOAc-ヘキサンでフラッシュクロマトグラフィーにかけ、3.58g94の表題化合物を透明な液体として得た。α23D482°IR3030286716451613151312471092821736cm11HNMRδ73472346245945145043913CNMRδ1590414399138301379013043128261282012803127771275712756113671000075587328731771137042702868355515LRMS464326309253。4bの合成ガラクタール3b3.20g、7.17mmolのCH2Cl2溶液を、N2下、0°Cでジメチルジオキシラン0.09M、80mlで処理し、全てのガラクタールが消費されるまで0.5~1時間、TLCヘキサン中30のEtOAc攪拌した。揮発成分を乾燥N2の気流で0°Cにおいて除去した。残渣を30mlの乾燥THFにN2下、0°Cで溶解し、TBAF36ml、モレキュラーシーブ上で保存したもので処理し、次いで周囲温度で20時間攪拌した。暗褐色の溶液を、シリカのパッド~4cmの深さを通して濾過し、EtOAc200mlで洗浄した。濾液を水200ml×3で洗浄し、乾燥MgSO4し、濃縮した。残渣を30EtOAc-ヘキサン50mlに再溶解し、シリカの短いカラム10cmd×4cmhを通して濾過し、同じ溶媒系1Lで洗浄した。濾液を濃縮し、2.59gのフルオロヒドリンを>90の純度で得た。残渣を、N2下、0°Cで乾燥DMF30mlに溶解し、臭化ベンジル958μl、1.5等量、塩基性アルミナを通して新たに濾過したもので、最後にNaH322mg、60懸濁物、1.5等量で処理し、0°Cで30分、rtで30分攪拌した。反応物を100gの氷にあけて、反応を停止し、1:1EtOAc:ヘキサン150ml×2で抽出した。有機抽出物を水150ml×2で洗浄し、乾燥MgSO4し、減圧下に濃縮した。10EtOAc-ヘキサンでフラッシュクロマトグラフィーにかけ、2.00g49の表題化合物を黄色がかった液体として得た。α23D153°IR291616121513124811031056734cm11HNMRδ73572468451549244847439638938636535635113CNMRδ159221383313811137621301612919128401282912821128041279012781127691275911377110208060790074927452735973547299727068345520LRHS454。6bの合成TIPS-カーボネートガラクタール5bDanishefskySJBeharVRandolphJTLloydKJAmChemSoc199500004.28g、5.62mmolのTHF25ml-MeOH5ml溶液をTBAF溶液1.0M、6.75ml、1.2等量で処理した。6時間後、追加のTBAF4mlを加え、更に3時間攪拌した。反応物を濃縮し、4:1EtOAc-ヘキサンで直接にクロマトグラフィーにかけ、2.20gのトリオールを得た。環状カーボネートの残りの混合物及び混合カーボネートを、MeOH中でMeONa1.0ml、25wtで加水分解し、クロマトグラフィーで精製した。全収量は3.02g93であった。この物質を直接ジベンジル化のステップに使用した。1HNMRδ73572464348748446346145344741941638738437836634632930827313CNMRδ144701384113822137831284512833128121278412773127641275710228997478997603746474077324731772647020691067796215。上記のようにして得たトリオールグリカール2.95g、5.1mmol、ジブチルスズオキシド1.33g、1.05等量及びビストリブチルスズオキシド1.69ml、0.65等量の乾燥ベンゼン50ml混合物をN2下で、水を共沸により除去しながら、5時間還流した。反応物を沸点以下に冷却し、臭化ベンジル2.43ml、4.0モル等量及びテトラブチルアンモニウムブロマイド3.29g、2.0等量で処理した。ベンゼン10mlを蒸留で除き、反応物を16時間還流した。反応物を直接にシリカカラムに導入し、15~20のEtOAc-ヘキサンで溶出して、3.48g90の生成物6bを透明な油状物として得た。α23D33°IR28671652145413641097736cm11HMNRδ73572164548848346946845945544944742941841339938537536034734113CNMRδ1444313864138421379913784137801284012834128261282312818128151278212775127691276712765127551275112746127311025699568057786975727510735773327294722871947012689067856662LRMS776。7bの合成ラクタール6b1.32g、1.74mmol、1.0等量及びフルオロ糖4b1.49g、2.60mmol、1.5等量をエーテル中で混合し、濃縮した。この混合物を、乾燥ベンゼン25ml×2でエバポレーションして乾燥し、真空中で2時間乾燥し、次いでグローブバッグ中でジ-t-ブチルピリジン389uL、1.0等量で処理し、窒素雰囲気下で乾燥エーテル18mlに溶解した。別の50mlフラスコに、4AM.S.4.0gを入れ、減圧下に炎で乾燥し、室温に冷却した。無水過塩素酸銀360mg、1.0等量及びSnCl2329mg、1.0等量をグローブバッグ中で加え、窒素でフラッシュした。塩混合物を水浴中に置き、糖の溶液を、両方に先端を設けた針を通して導入し、混合物を2分間超音波にかけた。反応物をアルミニウムホイルでラップし、45時間rtで攪拌した。濾液200mlを希NaHCO3100ml×2で洗浄し、乾燥MgSO4し、濃縮した。15~20のEtOAc/ヘキサンでフラッシュクロマトグラフィーにかけ、三糖1.107g、49と不純なラクタールを得た。三糖部分を2エーテル-塩化メチレンで再度クロマトグラフィーにかけ、879mg39の所望のα-生成物及び195mg8.6のβ-生成物を得た。不純物を含むラクタールのフラクションを3~4のエーテル-塩化メチレンで再度クロマトグラフィーにかけ、479mg36の純粋なラクタールを得た。回収された出発物質を基にして77のカップリング61のα-生成物収率であった。α23D418°IR28671648151314961453136412481097735cm11HNMRδ73371268364550349147646844042339738638237636936435334734334033633433132213CNMRδ15893144591389813884138781386413858138061380213082129041283312824128211281512808128051278312781127721276412758127551275012744127411273612733127311136510302100391000180937893787076537611751474847479743573917359733673157310729872157210719970556925679267695519。8bの合成PMB-三糖37mg、0.028mmolのCH2Cl21ml溶液を0°Cに冷却した。この反応物を、シリカカラムに直接導入し、20EtOAc-ヘキサンで溶出して所望の生成物を28mg84得た。α23D456°IR286616481496145312481097735cm11HNMRδ73671564350948548346546144142940840239739338637836736135313CNMRδ1443813878138621384713820138001378872627219704669666892678567746754。11bの合成グリカール9b4.32g、3.14mmolをCH2Cl220mlに溶解し、0°Cに冷却した。次に、これを0°Cでジメチルジオキシラン219ml、~3.14mmolと処理した。エポキシ化は、約1時間で完結し、次に反応混合物を乾燥N2の気流を用いて乾燥するまで濃縮した。残渣を、ベンゼン20mlで一回更に共沸し、真空ラインに0°Cで30分置き、その後、THF60mlに溶解し、-78°Cに冷却した。上記溶液に、カニューレを介して、共沸により乾燥させたガラクタール10b3.32g、10.95mmol、20mlTHF、次いでZnCl226.3ml、1.0Mエーテル溶液を加えた。反応混合物を室温まで暖め、一夜攪拌した。飽和Na2CO3水溶液40mlで処理した後、反応混合物を濃縮し、エーテル500mlで抽出した。有機層を飽和NaCl水溶液で洗浄し、乾燥MgSO4し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー1:4EtOAc-ヘキサンで精製し、6.20gの11bを白色の発泡体として得た87.4。IRxyzcm11HNMRδ64548547246846545542140839638233332711610413CNMRδ154451457599149827778376597427720471627086645262576160178411781177LRMS664647422380。13bの合成二糖11b2.64g、4.08mmolを共沸により3回乾燥し、2,6-ジ-tert-ブチルピリジンを含有するTHF20ml中でフルオロフコース12b1.64g、3.77mmol、モレキュラーシーブ4A、4.0gと混合した。この溶液を、カニューレを介して、AgClO41.56g、7.54mmol、SnCl21.43g、7.54mmol及びモレキュラーシーブ4A、4.0gのTHF15ml溶液を含むフラスコに-40°Cで加えた。反応混合物を-40°Cで30分攪拌し、次いで、フルオロフコースが消失するまで5°Cで34時間攪拌した。飽和NaHCO340mlで、5°Cにおいて処理した後、混合物をEtOAc700mlで抽出した。有機層を飽和NaClで洗浄し、乾燥MgSO4し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、1.93gの所望の三糖グリカール13b使用したフルオロフコースを基準にして48を得、微量の他のモノフコシル生成物のみを含む500mgの二糖を回収した。15bの合成共沸により乾燥した、グリカール13b1.11g、1.05mmol及びベンゼンスルホンアミド0.82g、5.24mmolの混合物をTHF20mlにモレキュラーシーブ4A、2.6gと共に溶解した。この混合物を-40°Cに冷却し、次いで、I20.54g、2.09mmolとAgsymcoll2COl40.986g、2.29mmolのTHF20ml溶液を、I2の茶色が消失するまで室温で約30分攪拌して、insituで調製したIsymcoll2COl4にカニューレを介して加えた。混合物を1時間以内に0°Cまで暖め、更に1時間攪拌した。飽和Na2S2O3水溶液で反応を停止した後、混合物を濾過し、EtOAc3×100mlで抽出した。合わせた有機層を飽和CuSO4100ml、飽和NaCl100ml×2で洗浄し、乾燥Na2SO4した。濃縮後、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー1:4EtOAc-ヘキサンで精製し、981mgの無色油状物を、所望のα-トランス-ジアキシャルヨードスルホンアミド及びそのシス異性体との21混合物として得た。次に、ヨードスルホンアミド混合物を、エタンチオール226.3mg、3.64mmol及びリチウムヘキサメチルジシリルアジド1.46ml、1.46mmolのDMF10ml溶液を含むフラスコに-40°Cで攪拌しながら加えた。反応混合物を-40°Cで一夜攪拌し、次いで飽和NaHCO3水溶液で反応を停止し、エーテル3×100mlで抽出した。合わせた有機層を飽和NaCl水溶液で洗浄し、乾燥Na2SO4した。濃縮後、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー3:97EtOAc-CHCl2で精製し、438mgの15b33及び333mgのそのままのシスヨードスルホンアミドを得た。16bの合成アクセプターである三糖8b92mg、0.077mmol、1.0等量、チオグリコシド15b198mg、2.0等量、及び新たに活性化した4Å-MS560mgの混合物を、N2下、rtでCH2Cl2-Et2O1:2、3.9mlに懸濁し、10分間攪拌した。反応物を0°Cに冷却し、次いでメチルトリフレート52.4uL、6.0等量で処理した。反応物を0°Cで4.5時間、更に15°Cに暖めながら1.5時間攪拌した。反応をTEA1.0mlで停止させ、反応物をシリカのパッドを通して濾過し、Et2Oで軽く洗浄した。濾液70mlを飽和NaHCO3水溶液50ml×2で洗浄し、乾燥Na2SO4し、濃縮した。粗生成物をHPLCヘキサン中17のEtOAc、15ml/分、260nmUV検出で精製し、158mg85の所望の生成物及び27.7mgのα-結合した副生成物約55純度を得た。保持時間22minα23D133°IR2940286517921652145411611101734cm11HNMRδ7873870664351550750349948946145444644243843442642141841340339837637036134632728411611310213CNMRδ155351445514078138991387513868xxx138541384313813138031379413782132311288112852xxx12838128361282712824128201281612802127931277212766127581274812743127371272010341102759979995598299776804980397909789178257768xxx76517588750974997491747374157402739273527319731072947267722572077176715671337033694569326848680867866775619761605614179917961795179216751186HRMScalcdforC138H169NO30SSi2Na24320920found24320970。19bの合成六糖グリカール16b85mg、0.035mmolのTHF6ml溶液を、N2下、rtにおいてTBAF1.0M、353uL、10等量で処理した。rtで38時間後、反応物を約1mlまで濃縮し、次いで、EtOAc60mlに溶解し、水30ml×2で洗浄し、乾燥Na2SO4し、濃縮した。CH2Cl2中4のMeOHでフラッシュクロマトグラフィーにかけ、70.0mg98の脱シリル-脱カーボネート生成物を得た。α23D18°28681652145511571094735cm11HNMRδ780747737695645586535530495489486446745443943442640639834534132932007313CNMRδ14487142491394913911138871386313854138371380013798137971371813164128741285212843128331282812825128211280212799127971278012707412767127631276112754127531275012744127331273112702126861033910278100751000999809975814280647898788677827740772676267516750975077495746974307358731773117271726772657255723672186965695368546818680867856779672154951660。N2下、-78°Cで、液体アンモニア約8mlに金属ナトリウム95mgを加え、2分間攪拌した。この青色の溶液に、上記の六糖グリカール70mg、33.8umolの乾燥THF2ml溶液を加えた。78°Cで45分後、反応を無水メタノール4mlで停止した。ほとんどのアンモニアを窒素の気流で除去し最終容積は約4mlであった。、反応物を約10mlのメタノールで希釈した。この溶液に、Dowex50X8890mg、洗浄し、乾燥したものを加え、5分攪拌した。この溶液を濾過し、メタノールで軽く洗浄し、最後にアンモニアを含むメタノール5mlで洗浄し、濾液を減圧下に濃縮した。残渣及びDMAP2.4mgをN2下に置き、DMF1.0ml、THF1.0ml及びTEA1.0mlに懸濁し、次いでAc2O0.3mlで処理した。20時間後EtOAcでTLC分析した。、反応物を水40mlにあけ、EtOAc40ml×2で抽出し、希NaHCO330ml、水30mlで洗浄し、乾燥Na2SO4し、濃縮した。CH2Cl2中80のEtOAcでフラッシュクロマトグラフィーにかけ、52.0mg93の生成物を白色の発泡体として得た。mp132134°Cα23D47°IR17421652137112271069cm11HNMRδ66864255854754053752952551550650249949248448146745645144543842942239521919211513CNMRδ17240171451708417054170521704817045170401703917034170231699916982169741693616900145431020110117988398459424756574957398736473497232718471537144708170747066701269776897687168676802679767886760673564436188618161426129610456182306210220812076206820642062205820572055204920431588。上記のパーアセチル六糖グリカール52mgを2分割22mgと30mgした。次に、六糖グリカール22.0mg、13.4umolの乾燥CH2Cl22ml溶液を、N2下、0°Cでアリルアルコール5mlで処理した。この混合物を室温で15時間攪拌した。過剰のアリルアルコールを減圧下に除去した。他のバッチ30mgを同様に処理した。粗生物物を合わせ、85EtOAc-CH2Cl2でクロマトグラフィーにかけ、35.8mg66の低極性生成物、及び15.7mg29のより極性な生成物を得た。33.2mg19umolの低極性物質をN2下で、無水メタノール14mlに溶解し、MeONaのメタノール溶液165uL、25重量で処理した。6時間後、反応物をDowex50X8200mg、洗浄し、乾燥したもので中和し、濾過し、濃縮して表題化合物19bを定量的な収率で得た。mp204206°α23D55°IR33562923165813741071cm11HNMRδ59959352451851449345645444240639939134734133732720112413CNMRδ174551357311757105481054210394103261027910108812180678005792078097679765676487644764175547486746873577263725071577116706470416968681662676264625761966163531123581678。構造体1bの予備合成の目的で、セラミド前駆体をABC三糖に結合したスキーム5。7bのエポキシ化、次いでZnOTf2で促進されるセラミド前駆体17bそのトリブチルスズエーテルとしてとの反応で、20bを得た。アセチル化及びPMBの除去を円滑に行い、21bを得た。これを適切なDEF三糖ドナーとのカップリングに供した。三糖15bを、アクセプター21bの存在下でMeOTfで処理すると、六糖異性体の4:1混合物を得た。主生成物22bを50の収率で得た。H2雰囲気下、パルミチン酸無水物の存在下でリンドラー触媒を用いてアジド官能基を還元してセラミド側鎖を構築し、18bを直接に得た。脱シリル化に続いて、金属を溶解してのスルホンアミド及びベンジル基の脱保護を行い、MeOHで反応を停止し、カーボネートとアセテート基を除去した。粗製混合物をパーアセチル化して78の収量でパーアセチル化した六糖を得た。NaOMeを用いたこの物質のケン化で天然物1bを96の収率で得た。1bのアノメリックプロトンのカップリング定数及びケミカルシフトは、報告されているデータと一致した。加えて、生成物を精密質量分析、並びに1H及び13CNMRで特徴づけた。20bの合成ベンジル化されたセラミド前駆体475mg、1.14mmolを4mlのPhHに溶解した。ビストリブチルスズエーテル0.29ml、0.34g、0.57mmolを加え、反応容器DeanStarkトラップを備えたものを還流するように加熱した。3時間後、反応物を冷却し、N2の気流下で濃縮した。別のフラスコに、グリカール7bを1ml無水CH2Cl2に溶解し、得られた溶液を0°Cに冷却し、3,3-ジメチルジオキシラン2.8ml、0.25mmol、0.09Mアセトン溶液の溶液を加えた。45分後、この溶液をN2の気流下、次いで減圧下で濃縮した。スズエーテルを1mlの無水THFに溶解し、ZnOTf2170mg、0.468mmolの1mlTHF混合物に-78°Cでカニューレを介して加えた1×0.5mlのTHFで洗浄。反応物を12時間かけて室温まで暖め、次いで蒸留水で反応を停止した。水層をEtOAcで3回抽出した。有機層を合わせ、無水MgSO4で乾燥した。フラッシュカラムクロマトグラフィー3:1ヘキサン/EtOAc、3×16cm、シリカゲルにかけ、265mg66の標的化合物20bを得た。1HNMRδ74371570367957654350750549048347746946145444544242541840540139138337937136535733232022921114212909113CNMRδ15881391139013871386138341382913821381130812871285512850128412833128281282612812128061278412776127712764127601275127451273612581135102710068198157947747707677667647557497477447397337327311730672372170069468768167967764255232431929702965295294292290227142IR344730623029292328532099161215861514149614541364cm1α23D250。21bの合成上記の三糖256mg、0.147mmolを2mlの無水CH2Cl2に溶解した。トリエチルアミン0.105ml、76mg、0.753mmol、DMAP2mg、0.02mmol及び無水酢酸0.042ml、45mg、0.445mmolを順次加えた。反応物を1時間攪拌し、次いで飽和NaHCO3水溶液で反応を停止した。抽出物を無水MgSO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー4:1ヘキサン/EtOAc、2×16cm、シリカゲルで精製し、235mg90の所望の化合物を得た。1HNMRδ74271770368157554350749949048547747647046245745244943443042541440640139539138538037436936335134333432221218714313009313CNMRδ169315881391139013869138651386138311382613821381138013081288128612841128351283012828128141280127912781276412760127581275112747127381260113510271008100681579979579479377477176875575374974574273973273173072472272170269468168067967563855232432029722967295294292291227209142IR30282923285220981751161115131496145313651232cm1α23D203。上述のようにして得た三糖230mg、0.129mmolを、4mlのCH2Cl2に溶解した。蒸留水1mlを加え、混合物を0°Cに冷却した。DDQ35mg、0.15mmolを加え、反応物を1時間攪拌した。反応を、飽和NaHCO3水溶液を加えて停止した。水層をCH2Cl2で3回抽出した。有機層を合わせ、洗浄して、無水MgSO4で乾燥した。フラッシュカラムクロマトグラフィー4:1ヘキサン/EtOAc、2×16cm、シリカで182mg85の標的化合物21bを得た。1HNMRδ73871357354150949849548748047747046545044544243843442841541140840138838237737036435134633933433032120919018414112709013CNMRδ16931659139313871386138513831382138113801285128412832128271282512817128001279412791127812775127701276712761127551274912745127211259107810261008994814806793775773770769767755753752743732731730729723721701700691681680678674638324319297296295294292291227209141IR35703087306230292924285320991950187317521496145313661231cm1α23D176。22bの合成チオグリコシド15b188mg、0.151mmol及びアクセプター21b125mg、0.0751mmolをベンゼンにより2回共沸で乾燥した。次に、この混合物を2.6mlの無水エーテル及び1.3mlのCH2Cl2に溶解し、この溶液に500mgの4Åモレキュラーシーブを加えた。この混合物を1時間攪拌し、次いで0°Cに冷却し、MeOTf0.051ml、74mg、0.45mmolを加えた。反応物を9時間0°Cで攪拌した。次に、トリエチルアミン1mlを加え、シリカのプラグを通して濾過し、Et2Oで洗浄した。濾液を飽和NaHCO3水溶液で洗浄し、無水MgSO4で乾燥した。分取HPLC85:15ヘキサン/EtOAcで精製し、108mg50の標的化合物22bを得た。反応物のb/a比は4:1であった。1HNMRδ77574670557551350950550049448648346545945344343943142341841540840535735434934533833132329228927521218512010909213CNMRδ169116591555140913921390138813864138591384713843138313821381013807138013211291128691286512856128431284012836128351282612817128121280812797127771276612764127601275412749127451274112731260103010271008997992980812806795792790783777768765755753751750374977491748774073273107307729872937267237217207132712570269469326925681679675683621620561324319297129682966294829382922912272071813181118011798169142119IR33443030292428642101178917541496145313661232cm1。18bの合成六糖22b66mg、0.023mmolを1mlのEtOAcに溶解した。リンドラー触媒66mgを加え、次いでパルミチン酸無水物23mg、0.046mmolを加えた。この系を減圧下でパージし、次いで1atmのH2下に置いた。24時間後、反応物をシリカゲルのプラグを通して濾過し、EtOAcで洗浄し、濃縮した。分取HPLC4:1ヘキサン/EtOAcで精製し、64mg90の所望の生成物18bを得た。1HNMRδ772742702565562531510505502496490462457438432426421407401341330323220182152132119115108088IR3531334630633030292428541790174816741496145413651236cm1α23D179。1bの合成上記のようにして得た六糖20mg、0.0065mmolを0.5mlのTHFに溶解した。テトラブチルアンモニウムフルオライド1.0MTHF溶液、0.050ml、0.050mmolを加え、反応物を2時間攪拌した。この溶液をシリカのプラグを通して濾過し、EtOAcで抽出し、濃縮した。残渣を1mlの無水MeOHに溶解し、NaOMe10mg、0.19mmolを加えた。反応物を3時間攪拌し、40mgのDowex50樹脂で中和し、濾過し、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー1.5×4cm、10~40uシリカゲル、95:5CH2Cl2/MeOHで16.5mg94の所望の化合物を得た。1HNMRδ77874674169760257656753753051949649349048347846645645344743242840640131327326125415013812308807813CNMRδ17341424139513901387138513833138261381413809137913721371131612901288128541284712837128321282712822128171281412805127991277912773127681276312759127491274612737127321269812658104110283102761003100282181581279679279078077377076775675375175074874673573473273072772671970169668568268067562461954852336932331929712967295429502943293729282920257227167141IR34243062302329232852164115301496145313621325cm1α23D32。フラスコにドライアイスコンデンサーを取り付け、4mlのNH3を充填した。ナトリウム18mg、0.78molを加え、得られた青色溶液に、29mgの上記六糖0.010mmolを加えた。反応物を-78°Cで45分攪拌した。反応を、MeOH3mlを添加して停止した。窒素を溶液上から吹き付け、NH3を蒸発させた。反応物を170mgのDowex50樹脂で中和し、濾過し、濃縮した。得られた残渣を、1mlの4:1THF/DMFに溶解した。トリエチルアミン0.5mlを加え、次いでDMAP3mg及び無水酢酸0.200mlを加えた。2時間後、反応物を減圧下に濃縮した。フラッシュカラム1.5×5cm、10~40mシリカ、9:1EtOAc/ヘキサンで精製し、18mg78のパーアセテートを得た。この六糖のサンプル15mg、0.0065mmolを0.5mlの無水MeOHに溶解し、NaOMe溶液30MeOH溶液、0.010ml、0.05mmolを加えた。この溶液を2時間攪拌し、9mgのDowex50樹脂で中和し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー1.5×4cm、C-18逆相シリカ、MeOHで精製し、9.6mgの天然物1を得た。スペクトルデータは、Hakomoriらによって報告されたものと一致した。生物学的結果MBR1六糖を、以下に示すような天然のB型及び非天然のA型の2形態で調製した。天然型の構造βは、以下の通りである。Fuca1→GalB1→3GalNAcB1→3Galα1→4GlB1→4GcB1→1Cer非天然型の構造αは、以下の通りであるFucα1→2GalB1→3GalNAcα1→3Galα1→4GalB1→1Cer双方ともモノクローナル抗体mAbMBr1との免疫反応性の試験を促進するためにセラミドに結合されている。薄層クロマトグラフィーTLCにより、2つの調製物は、同じ単一のバンドとして移動した。免疫TLCRitterGetalCancerRes50140310参照は、両形態ともMBr1モノクローナル抗体と特異的に反応することを示したが、β-型は10倍以上強く反応したことを示した比較染色は、1/10の抗原の量を示した。。mAbMBr1とβ型構造の高レベルの反応性を、フローサイトメトリー阻害アッセイを用いて確認した。mAbMBr1とMCF-7のような乳ガン細胞系との反応性は、8μg/mlのβ結合した調製物で98阻害されたが、8μgのα-結合した調製物では6のみ阻害された。GD3ガングリオシド負の対照は全てにおいて阻害を示さなかった。"