"配列番号1に記載のアミノ酸の繰り返しを少なくとも2回含むペプチド。配列番号1に記載のアミノ酸配列の前記繰り返しが近接しているか、またはわずか6個のアミノ酸によって隔てられている、請求項1に記載のペプチド。配列番号1に記載のアミノ酸配列の繰り返しを9回含むペプチド。配列番号1に記載のアミノ酸配列の繰り返しが、近接しているか、またはわずか6個のアミノ酸によって隔てられている、請求項3に記載のペプチド。前記ペプチドが、周辺質分泌を可能にするシグナルペプチドをさらに含む、請求項1~4のいずれか1項に記載のペプチド。前記ペプチドが、配列番号1に記載のアミノ酸の前記繰り返しのうちの少なくとも1つでグリコシル化される、請求項1~5のいずれか1項に記載のペプチド。請求項1~6のいずれか1項で主張される少なくとも1つのペプチドと、第2のペプチドまたはタンパク質とを含むキメラタンパク質。前記第2のペプチドまたはタンパク質が、カンピロバクターCampylobacterに由来するもしくは固有であるペプチドまたはタンパク質を含む、請求項7に記載のキメラタンパク質。前記第2のタンパク質またはペプチドが、AcrA、毒素、トキソイド、抗体または周辺質タンパク質である、請求項7に記載のキメラタンパク質。前記毒素またはトキソイドが、百日咳菌Bordetellapertussis、破傷風菌Clostridiumtetaniまたはジフテリア菌Corynebacteriumdiphtheriaeに由来する、請求項9に記載のキメラタンパク質。前記抗体が樹状細胞を標的とする、請求項9に記載のキメラタンパク質。複数のグリコシル化部位を含むキメラタンパク質を生成する方法であって、第2のペプチドまたはタンパク質をコードする核酸配列に直接的にもしくはリンカーポリヌクレオチドを介して作用可能に連結した請求項1~5のいずれか1項に記載のペプチドをコードする核酸配列を含むキメラ遺伝子を操作することと、宿主内で前記キメラ遺伝子を発現させることと、を含む、方法。前記第2のペプチドまたはタンパク質がAcrA、毒素、トキソイド、抗体または周辺質タンパク質である、請求項12に記載の方法。前記第2のタンパク質が抗体を含み、および前記キメラタンパク質が、カンピロバクター感染症を処置するためのアジュバントを含まない組成物において使用される、請求項12に記載の方法。前記第2のタンパク質またはペプチドが、カンピロバクターに由来するまたは固有である、請求項12に記載の方法。前記毒素またはトキソイドが、百日咳菌、破傷風菌またはジフテリア菌に由来する、請求項13に記載の方法。前記抗体が樹状細胞を標的とする、請求項13に記載の方法。前記宿主が大腸菌Ecoliである、請求項12~17のいずれか1項に記載の方法。複数のN結合型グリカンによって前記キメラタンパク質をグリコシル化することをさらに含む、請求項12~18のいずれか1項に記載の方法。前記N結合型グリカンが、C.ジェジュニCjejuniに由来する、請求項19に記載の方法。真核生物、細菌および/または古細菌起源のN-グリカンを示すための請求項1~5のいずれか1項に記載のペプチドの使用。例えばワクチン中のグリカンキャリアとしての、請求項6に記載のペプチドまたは請求項7に記載のキメラタンパク質の使用。前記ワクチンが、動物由来感染症のヒト病原体、カンピロバクタージェジュニCampylobacterjejuniまたはカンピロバクターレクタスCampylobacterrectusに起因する旅行者下痢症に対するワクチン接種用である、請求項22に記載の使用。前記動物由来感染症のヒト病原体が、ネコおよびイヌにおけるカンピロバクターウプサリエンシスCampylobacterupsaliensis、ブタにおけるカンピロバクターコリーCampylobactercoliまたはニワトリにおけるカンピロバクタージェジュニである、請求項23に記載の使用。前記ワクチンが、カンピロバクターフィタスペネレアリスCampylobacterfetusvenerealisまたはカンピロバクターフィタスフィタスCampylobacterfetusvenerealisに起因する不妊性および流産を予防するためのウシまたはヒツジのワクチン接種用である、請求項22に記載の使用。ワクチン製剤中のアジュバントとしての請求項6に記載のペプチドの使用。ワクチンまたは医薬品の調製のための第2のタンパク質またはペプチドとの組み合わせでの請求項6に記載のペプチドの使用。ワクチンまたは医薬品の調製のための請求項7に記載のキメラタンパク質の使用。前記第2のペプチドまたはタンパク質が、カンピロバクターに由来するまたは固有であるタンパク質を含む、請求項27または28に記載の使用。前記第2のタンパク質がAcrA、毒素、トキソイド、抗体または周辺タンパク質である、請求項27または28に記載の使用。前記毒素またはトキソイドが、百日咳、破傷風菌またはジフテリア菌に由来する、請求項30に記載の使用。前記抗体が樹状細胞を標的とする、請求項30に記載の使用。請求項6に記載のペプチドまたは請求項7に記載のキメラタンパク質を含むワクチン。前記ワクチンが、動物由来感染症のヒト病原体、カンピロバクタージェジュニに起因する旅行者下痢症、またはカンピロバクターレクタスに起因する歯周病に対するワクチン接種用である、請求項33に記載のワクチン。前記動物由来感染症のヒト病原体が、ネコおよびイヌにおけるカンピロバクターウプサリエンシス、ブタにおけるカンピロバクターコリーまたはニワトリにおけるカンピロバクタージェジュニである、請求項34に記載のワクチン。前記ワクチンが、カンピロバクターフィタスペネレアリスまたはカンピロバクターフィタスフィタスに起因する不妊性および流産を予防するためのウシまたはヒツジのワクチン接種用である、請求項33に記載のワクチン。対象において細菌感染症を診断する方法であって、i前記対象から採取した試料を請求項6に記載のペプチドと接触させることであって、グリカンは細菌抗原の上に存在する代表的なグリカンである、接触させることと、ii請求項6に記載のペプチドの結合によって形成された結合複合体を、細菌抗原に特異的な抗体によって検出することと、を含み、結合複合体の存在が対象における細菌感染症を示している、方法。請求項6に記載のペプチドが固体支持体上に固定化されている、請求項37に記載の方法。前記固体支持体が、マイクロタイタープレート、ポリマービーズ、アガロースビーズ、常磁性ビーズまたは膜の表面である、請求項38に記載の方法。前記細菌抗原が、百日咳菌、破傷風菌、ジフテリア菌、動物由来感染症のヒト病原体、カンピロバクタージェジュニ、カンピロバクターレクタス、カンピロバクターレクタス、カンピロバクターフィタスペネレアリスまたはカンピロバクターフィタスフィタス由来である、請求項37~39のいずれか1項に記載の方法。前記動物由来感染症のヒト病原体が、カンピロバクターウプサリエンシス、カンピロバクターコリーまたはカンピロバクタージェジュニである、請求項40に記載の方法。対象において細菌感染症を診断するためのイムノアッセイキットであって、a各ペプチドが細菌抗原である少なくとも1つのグリカンを含む、請求項6に記載の1または複数のペプチドの混合物と、b請求項6に記載の1または複数のペプチドの前記混合物を前記対象からの生体試料と接触させるため、および請求項6に記載のペプチドの結合によって形成された結合複合体の形成を、細菌抗原に特異的である試料中の抗体でモニターするための使用説明書と、を含む、キット。本出願の目的は、複数のN結合型グリコシル化シークオンを含んでいるペプチドとその調製方法およびその使用を提供することである。広範な態様によれば、配列番号1に記載のアミノ酸配列セットを少なくとも2コピー含むペプチドが提供される本明細書ではこのペプチドをGlycoTagペプチドと呼ぶ。一実施形態では、GlycoTagペプチドは、配列番号1に記載のアミノ酸配列セットを9コピー含む。配列番号1に記載のアミノ酸配列セットの複数のコピーは、近接し得るか、またはわずか6個のアミノ酸によって隔てられ得る。GlycoTagペプチドは、周辺質分泌を促進するシグナルペプチドをさらに含むことができる。別の広範な態様によれば、少なくとも1つのGlycoTagペプチドと第2のペプチドまたはタンパク質を含むキメラタンパク質が提供される。GlycoTagは、配列番号1に記載のアミノ酸配列を少なくとも2コピー含み、それらは近接し得るか、またはわずか6個のアミノ酸によって隔てられ得る。一実施形態では、第2のペプチドまたはタンパク質は、カンピロバクターに由来する、またはカンピロバクターに固有のタンパク質を含む。一実施形態では、第2のタンパク質は、AcrAである。一実施形態では、第2のタンパク質またはペプチドは、毒素、トキソイド、抗体および周辺質タンパク質からなる群から選択される。毒素またはトキソイドは、百日咳菌Bordetellapertussis、破傷風菌Clostridiumtetaniおよびジフテリア菌Corynebacteriumdiphtheriaeから選択される群に由来し得る。一実施形態では、第2のタンパク質またはペプチドとして選択される抗体は、樹状細胞を標的にする。別の広範な態様によれば、複数のグリコシル化部位を含むキメラタンパク質を生成する方法が提供され、該方法は、第2のペプチドまたはタンパク質、例えば、細胞膜周辺腔に対してキメラタンパク質を標的にすることができるタンパク質またはペプチドをコードする核酸配列に直接的にもしくはリンカーを介して作用可能に連結されるGlycoTagをコードする核酸配列を含むキメラ遺伝子を操作するステップと、結果としてもたらされるキメラ遺伝子を宿主内で発現させるステップとを含む。宿主は、大腸菌であり得る。一実施形態では、第2のペプチドまたはタンパク質は、毒素もしくはトキソイド、抗体または周辺質タンパク質を含む。一実施形態では、毒素またはトキソイドは、百日咳菌、破傷風菌またはジフテリア菌に由来する。一実施形態では、第2のタンパク質は抗体を含み、およびキメラタンパク質はカンピロバクター感染症を処置するためのアジュバントを含まない組成物で用いられる。一実施形態では、抗体は樹状細胞を標的とする。一実施形態では、第2のタンパク質またはペプチドは、カンピロバクターに由来する、またはカンピロバクター固有のタンパク質を含む。別の実施形態では、第2のタンパク質は、AcrAである。一実施形態では、キメラタンパク質を生成する方法は、複数のN結合型グリカンを有するキメラペプチドまたはタンパク質をグリコシル化するさらなるステップを含む。一実施形態では、N結合型グリカンは、C.ジェジュニに由来する。本明細書に記述されるGlycoTagペプチドは、多くの異なる目的で用いられ得る。一実施形態では、GlycoTagペプチドを用いて、真核生物、細菌および/または、古細菌起源のN-グリカンを示すことができる。別の実施形態では、GlycoTagペプチドを用いて、O-グリカンを示すことができる。一実施形態では、特定のグリカンでグリコシル化される場合、GlycoTagペプチドは、ネコおよびイヌにおけるカンピロバクターウプサリエンシスCampylobacterupsaliensis、ブタにおけるカンピロバクターコリーCampylobactercoliおよびニワトリにおけるカンピロバクタージェジュニCampylobacterjejuniからなる群から選択される動物由来感染症のヒト病原体に対するワクチン接種のためのグリカンキャリアとして用いられることができる。別の実施形態では、GlycoTagペプチドは、カンピロバクタージェジュニに起因する旅行者下痢症に対するワクチン接種のためのグリカンキャリアとして用いられることができる。別の実施形態では、GlycoTagペプチドをウシおよびヒツジのワクチン接種のためのグリカンキャリアとして用いて、カンピロバクターフィタスペネレアリスCampylobacterfetusvenerealisおよびカンピロバクターフィタスフィタスCampylobacterfetusfetusに起因する不妊症および流産を予防することができる。さらに別の実施形態では、GlycoTagペプチドは、細菌感染症であると疑われる対象から採取した試料中の細菌性グリカンを表示し、次いで抗血清の存在もしくは非存在を決定し、または定量化するために用いられる診断方法において使用されることができる。別の実施形態では、本発明のGlycoTagペプチドは、ワクチン製剤中のアジュバントとして用いられることができる。GlycoTagペプチドは、ワクチンまたは医薬品の調製用の第2のタンパク質またはペプチドと組み合わせて用いられることもできる。第2のペプチドまたはタンパク質は、カンピロバクターに由来する、またはカンピロバクター固有のタンパク質を含み得る。一実施形態では、第2のタンパク質は、AcrAである。一実施形態では、第2のタンパク質またはペプチドは、毒素、トキソイド、抗体および周辺質タンパク質からなる群から選択される。毒素またはトキソイドは、百日咳菌、破傷風菌またはジフテリア菌に由来し得る。一実施形態では、第2のタンパク質として選択される抗体は、樹状細胞を標的とする。定義別段の定義がない限り、本明細書で使用するすべての専門用語および科学用語は、本発明が属する分野での当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書および特許請求の範囲で使用する、単数形1つa、1つanおよびそのtheは、文脈でそうではないと明白に示されていない限り、複数の参照を含む。本明細書で使用する用語含むは、それに続く記載が限定的なものであり、かつ必要に応じて、任意の他のさらなる好適な項目、例えば、1または複数のさらなる特徴、構成要素および/または成分を含むこともあり、または含まないこともあることを意味すると理解されることなる。用語核酸配列または核酸分子は、一本鎖または二本鎖形状でのDNAまたはRNA、具体的には、本発明によるタンパク質もしくはタンパク質の断片をコードするDNAを指す。用語タンパク質またはポリペプチドは、互換的に使用され、特定の作用様式、大きさ、三次元構造または由来に関係なくアミノ酸の鎖からなる分子を指す。したがって、タンパク質の断片または部分は、依然としてタンパク質と呼ばれ得る。本明細書で使用する用語ペプチドは、短いポリペプチドを指す。本明細書で使用する用語トキソイドは、その毒性が化学物質例えばホルマリンまたは熱処理にいずれかで弱められ、抑制され、または不活性化されているが、他の特性、通常は免疫原性が維持されている細菌性毒素を指す。本明細書で使用する用語トキソイドは、弱められ、抑制され、または不活性化された毒素のタンパク質またはペプチド断片を包含する。用語遺伝子は、領域転写領域を含むDNA配列を意味し、細胞内でRNA分子例えばmRNAに転写され、好適な調節領域例えばプロモーターに作用可能に連結される。このように、遺伝子は、プロモーター、例えば翻訳開始に関与する配列、タンパク質コード領域cDNAまたはゲノムDNAを含む5’リーダー配列、および例えば転写終結点を含む3’非翻訳配列などのいくつかの作用可能に連結された配列を含む。キメラ遺伝子または組換え遺伝子は、ある種において本来は、通常見られないいずれの遺伝子、特に、その核酸配列の1つまたは複数の部分が本来は互いに関連しないある遺伝子を指す。例えば、プロモーターは本来、転写領域の一部もしくは全体と、または別の調節領域と関連しない。用語キメラ遺伝子は、その中のプロモーターまたは転写調節配列が、1もしくは複数のコード配列に、またはアンチセンスセンス鎖の逆相補鎖もしくは反転した繰り返し配列センスとアンチセンス、それによって転写後、RNA転写物が二本鎖RNAを形成するに作用可能に連結されている発現構築物を含むと理解される。本明細書で使用する用語作用可能に連結されるとは、機能的関係でポリヌクレオチドエレメントの連結を指す。核酸が別の核酸配列と機能的関係に置かれる場合、その核酸は作用可能に連結される。例えば、プロモーターというより転写調節配列が、コード配列の転写に影響を及ぼす場合、それは、そのコード配列に作用可能に連結されている。作用可能に連結されるとは、連結されるDNA配列が通常、近接しており、およびキメラタンパク質を生成するために、2つのタンパク質コード領域を結合することが必要ならば、近接し、かつ読み枠内にあることを意味する。キメラタンパク質は、それ自体は本来、見られないが、結合ドメインの機能性を示す機能タンパク質を形成するために結合される種々のタンパク質のドメインまたはモチーフで構成されるタンパク質である。また、キメラタンパク質は、2種以上の天然のタンパク質からなる融合タンパク質であり得る。本明細書で使用する用語ドメインとは、特定の構造または機能を有するタンパク質の任意の部分またはドメインを意味し、そのドメインの少なくとも機能特性を有する新たなハイブリットタンパク質をもたらすために、別のタンパク質に移されることができる。本明細書で使用する用語標的ペプチドとは、細胞膜周辺腔などの細胞内小器官もしくは部位に対して、または細胞外間隙分泌シグナルペプチドに対してタンパク質を標的にすることができるアミノ酸配列を指す。標的ペプチドをコードする核酸配列は、タンパク質のアミノ末端側終端N末端側終端をコードする核酸配列に融合させるフレーム単位でことができる。本明細書では、核酸構築物またはベクターは、組換えDNA技術を用いて得た人工核酸分子を意味し、それを用いて宿主細胞に外来性DNAを送達することができると理解される。ベクターは、例えば、選択可能なマーカー、多重クローニング部位等以下を参照されたいの分子クローニングでの使用を容易にするために、遺伝因子をさらに含むことができる。本明細書で使用する用語GlycoTagペプチドとは、推定細胞質タンパク質Cj1433c由来のN結合型グリコシル化シークオンのコピーを2以上有するペプチドを指し、C.ジェジュニ株11168に天然に存在する。GlycoTagペプチドは、精製または単離した形状にすることができ、任意にそれに付着したグリカン類を含む。GlycoTagペプチドは、単独でまたは異なるタンパク質もしくはペプチドと組み合わせて用いられることができ、および例えば抗原/抗体送達系の開発、ワクチン、医薬品および診断検査薬の調製、およびカンピロバクター感染症に立ち向かうための療法の研究において、キメラタンパク質またはペプチドに組み込むことができる。GlycoTagペプチドを用いて、真核生物、細菌および/または古細菌の供給源のものを含むN-グリカン、またはこれらの3つの供給源のいずれかもしくはすべてに由来する酵素から産生されたN-グリカン模倣物を示すことができる。さらに、GlycoTagペプチドを用いて、スレオニンだけが必要な場合、いずれのO-グリカンを示すことができる。GlycoTagペプチドは、C.ジェジュニ株11168図3、配列番号31のタンパク質Cj1433cのN末端アミノ酸配列に由来する。このタンパク質のセグメントは、アミノ酸配列KIDLNNT配列番号1の繰り返しを9含み、各繰り返しは、N結合型グリコシル化シークオンDLNNTを含む。生物情報分析図2Aおよび2Bは、GlycoTagペプチドを含んでいるCj1433cタンパク質が細菌の細胞膜周辺腔に分泌されず、したがって天然の宿主における細菌のN結合型グリコシル化の必要条件の1つが欠けていることを示した。さらに、TMpredPredictionofTransmembraneRegionsandOrientationプログラムhttpwwwchembnetorgsoftwareTMPREDformhtmlおよびタンパク質内の膜貫通ヘリックスの予測のためのTMHMMプログラムhttpwwwcbsdtudkservicesTMHMM20を使用したが、Cj1433c内の膜貫通ドメインの存在を予測しなかった。したがってCj1433cタンパク質が、グリコシル化に非常に感受性が高い配列を含むであろうことは、予想外であった。これらの生物情報学分析に加えて、Scottら2010によって行われた総糖タンパク質の分析は、C.ジェジュニ内のN結合型糖タンパク質としてCj1433cタンパク質を検出できなかったScottNEら2010SimultaneousglycanpeptidecharacterizationusinghydrophilicinteractionchromatographyandparallelfragmentationbyCIDHCDandETDMSappliedtotheNlinkedglycoproteomeofCampylobacterjejuniMolCellProteomicsManuscriptM000031MCP201として2010年4月1日に発表された。理論にとらわれることを望むものではないが、これらの分析法がN-グリカン受容体ペプチドとしてGlycoTagペプチドの使用に成功したことは、思いも寄らなかったであろうことは、当業者にとって明らかである。驚くべきことに、本発明者らは、それが当てはまらないことを実証した。一実施形態では、種々の宿主系においてN結合型グリコシル化を可能にするために、GlycoTagペプチドは、宿主細胞から輸送を可能にするシグナルペプチドを含むように修飾されることができる。一実施形態では、シグナルペプチドは、細菌細胞の周辺質への輸送を可能にする。一実施形態では、GlycoTagペプチドは、ペクチン酸リアーゼBリーダー配列に融合される。一実施形態では、GlycoTagペプチドは、配列番号1に記載のアミノ酸配列の繰り返しを3~30回含む。別の実施形態では、GlycoTagペプチドは、配列番号1に記載のアミノ酸配列の繰り返しを3~30回含み、それらの繰り返しは、最高6個のアミノ酸によって互いに分離される。別の実施形態では、GlycoTagペプチドは、配列番号1に記載のアミノ酸配列の繰り返しを3~30回含み、それらの繰り返しは近接している。別の実施形態では、GlycoTagペプチドは、配列番号1に記載のアミノ酸配列の繰り返しを少なくとも9回含み、それらの繰り返しは、最高6個のアミノ酸によって互いに分離される。別の実施形態では、GlycoTagペプチドは、配列番号1に記載のアミノ酸配列の繰り返しを少なくとも9回含み、それらの繰り返しは近接している。別の実施形態では、GlycoTagペプチドは、配列番号1に記載のアミノ酸配列の繰り返しをおよそ9回含み、それらの配列番号1の9回の繰り返しは近接している。別の実施形態では、それらの配列番号1の9回の繰り返しは、最高6個のアミノ酸によって互いに分離される。約9のN結合型グリコシル化シークオンを含むGlycoTagペプチドは、グリカン構造の完全な、もしくはほぼ完全な相補体を晒し、それによって単一タンパク質またはペプチド内で多数のグリカン残基を効果的に晒すことが、現在では決定されている。配列番号1に記載のアミノ酸配列の繰り返しを9回含むGlycoTagペプチドのグリコシル化は、各々0~9のグリカンSDS-PAGE分析を用いて示すようにを含むグリコシル化ペプチドの混合物を生成することができる。一例において、異なるグリカン構造をGlycoTagペプチドに添加することができる。例えば、異なるグリカンをグリコシル化部位上に添加するには、異なるグリカンを大腸菌内の異なるグリコシル化経路を用いて達成することができる。特定の一例では、GlycoTagを完全にグリコシル化することは何もできないように、各遺伝子クラスター異なるグリコシル化経路のためのと関連する誘導可能なプロモーターを用いる。GlycoTagペプチドの調製当業者によって容易に認識されるように、GlycoTagペプチドおよびGlycoTagペプチドを含むタンパク質は、種々の周知の方法を用いて調製されることができる。一実施形態では、GlycoTagペプチドは、固体ペプチド合成を用いて、天然源から得られるペプチドを単離して全体的にまたは部分的に合成される。あるいは、GlycoTagペプチドは、天然源から得られるペプチドを単離して全体的にまたは部分的に調製される。一実施形態では、GlycoTagペプチドは、N結合型グリコシル化機構を随意に含む宿主細胞において、GlycoTagペプチドをコードする核酸配列を含むベクターを当技術分野で知られている技術を用いて組換え発現させることによって調製される。一実施形態では、宿主細胞は、C.ジェジュニのpgl機構を発現するように形質転換されている大腸菌であるWackerMら2002NlinkedglycosylationinCampylobacterjejunianditsfunctionaltransferintoEcoliScience29817903。GlycoTagペプチドをコードする核酸配列の宿主細胞への導入のためのキメラ遺伝子とベクターとの、好ましくは安定な構築物は通常、糖技術分野では知られている。キメラ遺伝子を生成するために、GlycoTagペプチドをコードする核酸配列は、標準の分子生物学的技術を用いて、宿主細胞内での発現に好適なプロモーター配列に作用可能に連結される。GlycoTagペプチド核酸配列がプロモーター配列の下流のベクターに簡単に挿入されるようにするには、このプロモーター配列がベクター内にすでに存在していてもよい。次いで、このベクターを用いて、宿主細胞を形質転換し、そのキメラ遺伝子は核ゲノム内にまたはプラスミド中に挿入されて、好適なプロモーターを用いてそこで発現される。一実施形態では、キメラ遺伝子は、微生物細胞例えばバクテリア内での発現のために好適なプロモーターと、それに作用可能に連結された本明細書に記載のGlycoTagペプチドまたは融合タンパク質をコードする核酸配列とを含む。一実施形態では、GlycoTagペプチドは、アフィニティークロマトグラフィーによる精製を容易にするために、親和性タグに融合される。一実施形態では、親和性タグは、GlycoTagペプチドのN末端に融合される。一実施形態では、親和性タグは、GlycoTagペプチドのC末端に融合される。もちろん、当業者が認識するように、検討される親和性精製の種類に応じて、多種多様な異なる親和性タグが用いられることができる。GlycoTagペプチドの精製を補助するのに用いられることができる親和性タグの具体例としては、エピトープタグクロマトグラフィータグ、およびより具体的には、ヘキサヒスチジンタグHis-タグと呼ばれることもあるが挙げられるが、これらに限定されない。GlycoTagペプチドを使用する方法および系GlycoTagペプチドは、多種多様な異なる用途で用いられることができる。一実施形態では、GlycoTagペプチドは、ワクチン製剤のアジュバントとして用いられることができる。もちろん、当業者が認識するように、GlycoTagペプチドは、意図される用途に応じて、異なるN-グリカンを保有するように設計されることができる。一実施形態では、特異的グリカンでグリコシル化される場合、GlycoTagペプチドは、カンピロバクターウプサリエンシスネコおよびイヌにおける、カンピロバクターコリーブタにおけるおよびカンピロバクタージェジュニニワトリにおけるなどの動物由来感染症のヒト病原体に対するワクチン接種のためのグリカンキャリアとして用いられることができる。別の例として、これも限定することを意図しないが、特異的グリカンでグリコシル化されたGlycoTagペプチドを用いて、ヒトに旅行者下痢症カンピロバクタージェジュニに対するワクチン接種することができ、および不妊症および流産カンピロバクターフィタスペネレアリスおよびカンピロバクターフィタスフィタスを予防するために、ウシおよびヒツジにワクチン接種することができる。一実施形態では、GlycoTagペプチドは、当技術分野で知られている技術を用いて、受容体タンパク質、ペプチドまたは抗体によって組換えで同時発現させることができる。受容体タンパク質、ペプチドおよび抗体としては、毒素、トキソイド、周辺質タンパク質、抗体と樹状細胞標的抗体が挙げられるがこれらに限定されない。一実施形態では、タンパク質はAcrAである。一実施形態では、毒素は百日咳菌、破傷風菌またはジフテリア菌によって発現される毒素から選択されることができる。もちろん、多くの他の例があり得る。受容体タンパク質、ペプチドまたは抗体とのGlycoTagペプチドの同時発現は、カンピロバクターもしくは他の細菌に対するワクチンまたは有効性が向上したワクチンを含むさまざまな有用な医薬品の調製のための基礎としての役割を果たすことができるので、これは特に有利になり得る。一例では、これも限定することを意図しないが、特異的グリカンでグリコシル化され、かつ他のタンパク質およびペプチドによって同時発現される場合、GlycoTagペプチドは、カンピロバクターウプサリエンシスネコおよびイヌにおける、カンピロバクターコリーブタにおけるおよびカンピロバクタージェジュニニワトリにおけるなどの動物由来感染症のヒト病原体に対するワクチン接種のためのグリカンキャリアとして用いられることができる。別の例として、これも限定することを意図しないが、他のタンパク質およびペプチドと、特異的グリカンでグリコシル化されたGlycoTagペプチドとの同時発現を用いて、旅行者下痢症カンピロバクタージェジュニに対するワクチン、ならびにカンピロバクターフィタスペネレアリスおよびカンピロバクターフィタスフィタスに対するワクチンを調製することができる。本発明の一実施形態では、GlycoTagを受容体タンパク質、ペプチドまたは抗体と融合させて、大腸菌または別の発現生物体の周辺質にこの融合物を向かわせるまたは該周辺質に対して融合物を標的にすることができる。多価のGlycoTagは、標的タンパク質中にさらなるN-グリカン受容体配列を操作する必要もなく、複数コピーで種々のグリカン構造をタンパク質キャリアまたはペプチドキャリアに高密度で付着する有利性がある。それは、複数のN-グリカン構造を示すことができるタンパク質およびペプチドの組換え発現を可能にするので、これは、特に有利になり得る。当業者が認識するように、多種多様なキャリアペプチドおよびキャリアタンパク質は、GlycoTagtpとの融合に好適である。これらとしては、毒素、トキソイド、周辺質タンパク質、抗体および樹状細胞標的抗体が挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態では、タンパク質はAcrAである。一実施形態では、毒素は百日咳菌、破傷風菌またはジフテリア菌によって表される毒素から選択されることができる。もちろん、多くの他の例があり得る。キャリアタンパク質に融合したGlycoTagは、カンピロバクターに対するワクチンおよび有効性が向上したワクチンを含むさまざまな有用な医薬品のための基礎としての役割を果たすことができるので、これは特に有利になり得る。GlycoTagペプチドは、アジュバントを含まない組成物でさえも用いられることができる。一例では、これも限定することを意図しないが、特異的グリカンでグリコシル化された場合、GlycoTagは、カンピロバクターウプサリエンシスネコおよびイヌにおける、カンピロバクターコリーブタにおけるおよびカンピロバクタージェジュニニワトリにおけるなどの動物由来感染症のヒト病原体に対するワクチン接種のためのグリカンキャリアとして用いられることができる。別の一例として、これも限定することを意図しないが、特異的グリカンでグリコシル化されたGlycoTagを用いて、ヒトに旅行者下痢症カンピロバクタージェジュニに対するワクチン接種することができ、ならびに不妊症および流産カンピロバクターフィタスペネレアリスおよびカンピロバクターフィタスフィタスを予防するために、ウシおよびヒツジにワクチン接種することができる。容易に認識されるように、GlycoTagペプチドは、任意の病原体免疫原性糖質エピトープ用のワクチンの調製で用いられることができる。別の非限定例では、好適にグリコシル化されたGlycoTagペプチドは、口腔病原体C.レクタスに対するワクチンの製造で用いられることができる。当業者が認識するように、GlycoTagをタンパク質またはペプチドに融合することができる方法は、いろいろとある。GlycoTagペプチドは、タンパク質グリコシル化機構をコードする遺伝子の存在下で、GlycoTag上の各部位のN-グリコシル化をもたらす大腸菌などの選択された発現ベクター生物体の周辺質を標的にすることができるタンパク質に直接またはリンカーを介して融合されることができる。一実施形態では、GlycoTag融合ペプチドもしくはタンパク質、またはキメラタンパク質は、第2のペプチドまたはタンパク質のコード配列に作用可能に連結されたGlycoTagペプチドのコード配列を含むキメラ遺伝子の発現から調製される。したがって、そのようなキメラ遺伝子と、宿主生物体におけるキメラ遺伝子の宿主生物でキメラ遺伝子の発現のためにそのようなキメラ遺伝子の発現のための適切な配列とを含むベクターも提供される。一実施形態では、GlycoTagペプチドとタンパク質との間の融合物には、アフィニティークロマトグラフィーによって精製を容易にするための親和性タグを含み得る。もちろん、当業者が認識するように、検討される親和性精製の種類に応じて、多種多様な異なる親和性タグが用いられることができる。さらに、融合産物の性質によって、親和性タグは、N末端またはC末端に置かれ得る。一実施形態では、GlycoTagペプチドを修飾して、GlycoTag融合タンパク質の存在下で発現するいかなる脂質結合糖質を付着することができる。別の実施形態では、GlycoTagペプチドは、診断アッセイ方法または診断アッセイ系で用いられる。この実施形態の一例では、GlycoTagペプチドは、感染性細菌に特有の特異的グリカンを示すように設計される。次いで、GlycoTagペプチドを免疫アッセイで用いて、感染性細菌に対して作られた抗体を検出して、任意に定量化することができる。免疫学的方法では、GlycoTagペプチドを、細菌感染症を有するのではないかと疑われる対象からの生体試料と接触させて、その混合物をインキュベートして、GlycoTagペプチドと、試料中に存在する示されるグリカンに特異的な抗体との間に結合複合体を形成させる次いで、結合複合体は、標準方法を用いて検出され、任意に定量化される。当業者によって認識されるように、このアッセイは、免疫アッセイに関して種々の周知の技術を用いて、行われ得る。一実施形態では、GlycoTagペプチドは、生体試料との接触の前に、固体支持体上に固定化される。固体支持体は、例えば、マイクロタイタープレート、ポリマービーズ、アガロースビーズ、常磁性ビーズまたは膜であり得る。別の態様によると、上述のグリコシル化GlycoTagペプチドと、グリコシル化GlycoTagペプチドおよび該グリコシル化GlycoTagペプチドの抗原成分に対応する細菌抗原に特異的な抗体によって形成される結合複合体の検出用試薬とを含むイムノアッセイキットが提供される。このイムノアッセイキットは、使用説明書および/または細菌感染症を有するのではないかと疑われる対象からの試料を採取する容器もしくは別の手段をさらに含み得る。本発明がより十分に理解されるように、以下の実施例を記載する。これらの実施例は、例証目的だけのためであり、本発明の範囲を多少なりとも限定すると解釈されてはならない。さらに、これらの実施例は、当業者にとって明白である本発明の均等物および変形例を排除することを意図しているものではない。実施例1:GlycoTag/AcrA融合タンパク質の調製2つのN-グリコシル化シークオンを天然に有するカンピロバクターフィタスフィタスAcrACffをタンパク質キャリアとして用いた。大腸菌BL21内でC.フィタスフィタスのAcrA遺伝子を発現させるために、分泌Sec経路を介してタンパク質を細胞膜周辺腔に向けるためのプラスミドpET22bNovagen上のペクチン酸リアーゼBpelBリーダー配列を用いて、プラスミドを構築した。したがって、プライマーAcrACff-NcoI5’-ATGGCCATGGATAATAAAAAATCAGCC-3’[配列番号3]およびAcrACff-XhoI5’-TTTCTCGAGTTTGCTTCCTTTGGCATCATTTATCG-3’[配列番号4]を用いて、C.フィタスフィタス82-20由来の染色体DNAからのAcrA遺伝子のヌクレオチド67~1052を増幅し、一方NcoIおよびXhoIのための制限酵素部位下線で示すを同時に導入した。このPCR産物を、同じ制限酵素で消化させたプラスミドpET22bに挿入した。AcrAタンパク質は、天然の宿主における周辺質タンパク質であり、およびC.ジェジュニタンパク質グリコシル化オペロンの存在下で大腸菌BL21内で発現するとIPTG0.1mMでの誘導の後、図7C、レーン1、N結合型グリコシル化の標的でもあるGlycoTagペプチド配列は、以下の通りに調製した:Cj1433cンパク質[配列番号2]のN末端をコードするDNA配列、CTCGAGTTCATAAAAAATTTCAAGCAACATGAAAAAATTAAGATAGATCTTAATAATACAAAGATAGATCTTAATAATACAAAGATAGATCTTAATAATACAAAGATAGATCTTAATAATACAAAGATAGATCTTAATAATACAAAGATAGATCTTAATAATACAAAGATAGATCTTAATAATACAAAGATAGATCTTAATAATACAAAGATAGATCTTAATAATACAAAGATAGAATTATCGCAATTAAAAAAAGAGCTCGAGXhoIのための制限酵素部位は、太文字で示すは、ゲノム配列決定株カンピロバクタージェジュニ11168ParkhillJら2000ThegenomesequenceofthefoodbornepathogenCampylobacterjejunirevealshypervariablesequencesNature403665668の染色体DNAからの遺伝子特異的オリゴヌクレオチド1433c-XhoI-1:5’-AAACTCGAGTTCATAAAAAATTTCAAGC-3’[配列番号5]および1433c-XhoI-2:5’-ATATCTCGAGCTCTTTTTTTAATTGCG-3’[配列番号6]を用いるPCRで生成した。消化したDNA断片をフレーム単位で、N末端構築物1、図4[配列番号7]に、C末端構築物2、図4[配列番号8]に、およびAcrACffコード配列構築物3、図4[配列番号9]のヌクレオチド457位でC.フィタスフィタスAcrAタンパク質AcrACffのリポイル-ドメインとα-ヘアピンドメインの間SymmonsMら2009TheassembledstructureofacompletetripartitebacterialmultidrugeffluxpumpPNAS10668936894に記述されるようにに融合させた。構築物1の場合、上記のPCR産物を、NcoI部位を通して導入した。構築物2の場合、上記のPCR産物を、XhoI部位を通して導入した。構築物3の場合、上記のPCR産物をNheI部位を通して導入した。それぞれの部位へのPCR産物の正しい挿入は、DNA塩基配列決定法によって確認した。融合タンパク質構築物1、2および3は、以下の通りに大腸菌BL21発現系で発現させた。0.6のOD600で37°Cでの増殖後、培養物を0.1mMのIPTGで誘導して、細胞を同じ温度でさらに1時間増殖させた。培養物を氷上で15分間冷却して、細胞を遠心4°C、10,000rpmで15分間によって収集し、1培養液量の氷冷PBS緩衝液中で2回洗浄して、最終的に、最初の培養液量の1/20に再懸濁させた。細胞は、超音波処理1分間のパルスを3回によって破壊して、4°C、15,000rpmで30分間遠心させた。TheQiaExpressionistQiagenを用いて上清からHisタグ付きタンパク質を精製した。続いて、Ni-NTAアフィニティークロマトグラフィーで精製したタンパク質の分析をSDS-PAGEで行い、ウエスタンブロット分析を、ヘキサヒスチジンタグSantaCruzBiotechIncに対して特異的なモノクローナル抗体を用いて行った。ヘキサヒスチジンタグに特異的なウエスタンブロットは、構築物2だけが約55kDa図5、レーン2の正しい大きさでタンパク質の過剰発現をもたらしたことを示した。N末端構築物1、C末端構築物2およびドメイン間構築物3のAcrACff-GlycoTag-His融合タンパク質の推定アミノ酸配列をそれぞれ、図6A、6Bおよび6Cに示す。実施例2:大腸菌BL21でのGlycoTag/AcrA構築物2の発現プラスミドpACYC184pACYCpgl-Cj上に位置したC.ジェジュニグリコシル化機構の存在下で、大腸菌BL21での発現WackerMら2002NlinkedglycosylationinCampylobacterjejunianditsfunctionaltransferintoEcoliScience29817901793は、C末端AcrA-GlycoTag-His融合タンパク質の可溶性で周辺質の発現をもたらした。この融合タンパク質をNi-NTAアフィニティークロマトグラフィーで精製して、ヘキサヒスチジンSantaCruzBiotechnologyIncに対して特異的なモノクローナル抗体と、C.ジェジュニN-グリカン特異的抗血清hR6とを用いてウエスタンブロット法で試験した。図7Bおよび7Cは、hR6と抗ヘキサンヒスチジン抗Hisによるウエスタンブロット分析結果を示す。1、2、3、4、5、6、7、8、9、10および11のN-グリカンが付着した融合タンパク質が観察されたので、部位占有の混合が生じる。図7Dに示すように、C.ジェジュニヘプタサッカリドが11付着したAcrAの本来の部位に2、GlycoTagペプチドの部位に9キメラ糖タンパク質を検出することができた。この結果は予想外のものであった。特定のタンパク質構造は、グリコシル化の効率を向上させることが以前に提唱されていたが、本実施例では、N結合型グリコシル化シークオンDLNNTは、GlycoTagペプチドにおいてわずかに2つのアミノ酸KIによって分離されたからである。実施例3:GlycoTagトキソイド融合タンパク質の調製実施例1に記述したように調製した配列番号1のGlycoTag配列を、百日咳菌ptxA,N末端、nt1~537、破傷風菌tet、C末端、nt2566~3945およびジフテリア菌NCTCtoxCd、nt79~654の免疫賦活トキソイドの遺伝子産物のN末端およびC末端に融合させた図8A。PCR産物は、以下のトキソイド遺伝子特異的オリゴヌクレオチドで生成し、一方制限酵素部位を挿入したNcoI、XhoI:Aminianらによって記述されたプラスミドはPCR反応に対する鋳型としての役割を果たすAminianら2007ExpressionandpurificationofatrivalentpertussistoxindiphtheriatoxintetanustoxinfusionproteininEscherichiacoliProteinExprPurif51170178。得られたPCR産物を、N末端またはC末端のGlycoTagAcrACff-His融合タンパク質を発現しているプラスミドに導入した。したがって、ヘキサヒスチジンコード配列により近いXhoI制限酵素部位およびpelBリーダーペプチドをコードする配列により近いNcoI部位を、以下のオリゴヌクレオチドによるQuikChange登録商標MutagenesisStratageneを用いるquickchange変異誘発によって除去した:N末端AcrACff-GlycoTag-His融合タンパク質またはC末端AcrACff-GlycoTag-His融合タンパク質をコードするプラスミドは、鋳型としての役割を果たした。その後、C末端またはN末端のヘキサヒスチジンタグ付きGlycoTag-毒素遺伝子構築物のいずれかを作製するために、AcrACffタンパク質のコード配列をPCR増殖毒素遺伝子と交換して上述のように、NcoI-XhoIを通して挿入した。融合タンパク質の発現、大腸菌の細胞膜周辺腔への分泌およびN-グリコシル化を上述のように分析した。異種大腸菌タンパク質グリコシル化系上記を参照されたいにおける発現、親和性タグ上記を参照されたい、およびグリコシル化によって、C末端pelB-toxCCd-GlycoTag-ヘキサヒスチジン構築物を実証し得る図8Cおよび8D。この場合もやはり、1、2、3、4、5、6、7、8および9のN-グリカンが付着した融合タンパク質が観察されたので、部位占有の混合が生じる図8Cおよび8D。興味深いことに、N-グリカンキャリアペプチドは、構築物の価数を増加させる融合で二量体形成を誘導すると思われる。実施例4:1つのトキソイドタンパク質に融合した2つのGlycoTagペプチドの調製ToxCCd-GlycoTag2融合タンパク質図9Aを作製するために、配列番号10の第2のGlycoTagペプチドを、実施例3で作製したToxCCd融合タンパク質に付着させた。したがって、C末端pelB-AcrACff-GlycoTag-His融合タンパク質をコードするプラスミドのhol消化後に得られた258bpのゲル精製DNA断片を、XhoI消化したC末端pelB-ToxCCd-GlycoTag-His融合タンパク質をコードするプラスミドに挿入した。第2のGlycoTagをコードするDNA配列の位置付けを、ヘキサヒスチジンをコードするプラスミドDNA配列内のハイブリッド形成するオリゴヌクレオチドよって配列決定するDNAで確認した。C.ジェジュニのN-グリカンによる発現とグリコシル化C.ジェジュニタンパク質グリコシル化機構をコードするプラスミドの存在下でおよびNi-NTAアフィニティークロマトグラフィーを上述のように行った。N-グリカン特異的抗血清hR6を用いるウエスタンブロット法による分析で、最高18のC.ジェジュニN-グリカンが付着したタンパク質が得られた。しかし、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17および18のN-グリカンが付着した融合タンパク質が観察されたので、部位占有の混合が生じる。実施例5:GlycoTag/抗体融合タンパク質の調製実施例1に記述したように調製した配列番号10のGlycoTagペプチドをコードする配列を、樹状細胞DCのDEC-205受容体を認識し、かつ上述のように大腸菌BL21内で発現し得る図8B一本鎖抗体scFvのC末端およびN末端で融合したWangWWら2009AversatileAfunctionaldendriticcelltargetingvaccinevectorMolPharm6158172。したがって、PCR産物は、特異的オリゴヌクレオチドで生成しAb-1433-XhoI5’-ATATCTCGAGGCGGCCGCAAGCTGAGGAGACTGTGACCATGACTCC-3’[配列番号21]、pET-Pstl5’-AATTCTGCAGTAATTTTGTTTAACTTTAAGAAGG-3’[配列番号22]プラスミドpWET7とともに;Ab-1433-NcoI,5’-ATATATATCCATGGGAGGTGGCGGATCAGAAGTGAAGC-3’[配列番号23]およびpET-KpnIATATGGTACCTTAGCAGCCGGATCTCAGTGG-3’配列番号24プラスミドpWET5とともに、該オリコヌクレオチドは、プラスミドpWET7からC末端scFvDEC205-GlycoTag融合を作製するためにおよびプラスミドpWET5からN末端scFvDEC205-GlycoTag融合を生成するためにscFv-DEC205遺伝子を増殖するWangWWら2009AversatilebifunctionaldendriticcelltargetingvaccinevectorMolPharm6158172。トキソイド-GlycoTag融合タンパク質の作製について上述したものと同様の戦略を適用して、AcrACffコードDNA配列をscFvDEC205コードDNA配列と交換した。異種大腸菌タンパク質グリコシル化系において、C末端pelB-scFvDEC205-GlycoTag-ヘキサヒスチジン構築物の発現上述のように、親和性タグ精製上述のようにおよびグリコシル化を行うことができた図8Eおよび8F。この場合もやはり、1、2、3、4、5、6、7、8および9のN-グリカンが付着した融合タンパク質が観察されたので、部位占有の混合が生じる。樹状細胞DCに対するN-グリコシル化GlycoTagペプチドを直接的に標的とする目的は、必要な抗原の量を減らし、かつ免疫刺激のためのアジュバント必要性を排除することである。DCは免疫系の抗原提示細胞であり、自然免疫応答および適応免疫応答で、特に、T細胞およびB細胞の免疫を予備刺激するまたは活性化する際に、重要な役割を担う。実施例6:GlycoTag融合タンパク質によるマウスの免疫化各々5匹のC57BL/6雌マウスを含む6群を、表1に記載の精製したGlycoTag融合タンパク質で免疫化した。1~6群のマウス血清標準手順を用いて単離したにおいて続いて起きた体液性抗体応答は、N-グリカン特異的抗体が2、3、4、5群で、かつ2>4>3>5の順で産生したことを示した。N-グリカンに対する体液性応答は、1群および6群では観察されなかった図10。実施例7:精製したGlycoTagによるマウスの免疫化各々5匹のC57BL/6雌マウスを含む7群を、表2に記載の精製したGlycoTag融合タンパク質で免疫化した。21日目図11Aおよび35日目図11Bの1~6v群のマウス血清標準手順を用いて単離したにおいて続いて起きた体液性抗体応答は、N-グリカン特異的抗体が3、5および7群で、かつ3>5=7の順で産生したことを示した。N-グリカンに対する有意な体液性応答は、1、2、4および6群で観察されなかった。興味深いことに、GlycoTag単独での使用が、GlycoTagをトキソイドに結合した時よりも強い抗体応答を誘導したことをこれらの結果は実証している。実施例8:GlycoTag融合タンパク質によるニワトリの免疫化各々8羽のニワトリを含む8群を、以下の通り精製されたGlycoTag融合タンパク質で免疫化した:0日目、すべてのニワトリ5羽を無作為に選んだの10の盲腸スワブは、微好気的条件下での2日間のインキュベーションの後、Karmali選択的寒天プレート上に播種したとき、カンピロバクターによるコロニー形成を示してなかった。7日目、500μLの事前採血を各ニワトリから採取し、その後に無菌PBS中で調製した抗原をフロイント完全アジュバントと1:1の比で用いて筋肉内IMに2回の注射によって異なる部位に150μL、または経口O投与によって投与し、各ニワトリに対して総量300μLで5μgの抗原による1回目の抗菌処置を行った表3。21日目、試験採血を行い、その後に、同じ抗原製剤だが、フロイトン完全アジュバントをフロイトン不完全アジュバントと置換して用いて2回目の抗菌処置を行った。28日目、2~8群内のニワトリに、カンピロバクタージェジュニ無菌PBS中で調製した1.5×108細胞を強制経口投与抗原投与した。35日目、ニワトリを安楽死させて、血液試料を各ニワトリから採取し最終採血、次いで盲腸内容物の10倍段階希釈液10-2~10-10をKarmali選択的寒天プレート上に播種することによって各ニワトリの盲腸内のカンピロバクターの量を分析してコロニー形成レベルを決定した。微好気的条件下での2日間のインキュベーションの後、カンピロバクターのコロニーの形成を記録した図12A。ToxC-GTl、1-9C.ジェジュニCj-グリカンIMおよびマイクロカプセル化MCToxC-GT1、1-9Cj-グリカンOによるワクチン接種後、カンピロバクタージェジュニのコロニー形成レベルの減少が得られた。血清標準手順を用いて単離したにおいて続いて起きた体液性抗体応答は、N-グリカン特異的抗体が4群および5群のニワトリにおいて産生したことを示した。N-グリカンに対する体液性応答は、1群のニワトリの血清プールで観察されなかった図12B。キトサンCSをベースにしたナノ粒子を使用しているマイクロカプセル化抗原MCを、記述されるようにMakhlofATozukaYandTakeuchiH2011DesignandevaluationofnovelpHsensitivechitosannanoparticlesfororalinsulindeliveryEuropeanJournalofPharmaceuticalSciences42445451ポリアニオントリポリリン酸TPPを用いた正に荷電したCSの高分子電解質複合体形成によって調製した。実施例9:GlycoTag融合タンパク質によるニワトリの用量依存的免疫化各々8羽ニワトリを含む8群を、1-9Cj-グリカンを保有する精製したGlycoTag融合ToxC-CTlタンパク質を以下の通り筋肉内注射で免疫化した:各々8羽のニワトリを含む8群を、表4に記載の精製したGlycoTag融合タンパク質で免疫化した。0日目、すべてのニワトリ5羽を無作為に選んだの10の盲腸スワブは、微好気的条件下での2日間のインキュベーションの後、Karmali選択的寒天プレート上に播種したとき、カンピロバクターによるコロニー形成を示してなかった。7日目、500μLの事前採血を各ニワトリから採取し、その後に無菌PBS中で調製した抗原をフロイント完全アジュバントと1:1の比で用いて筋肉内IMに2回の注射によって異なる部位に150μL投与し、各ニワトリに対して総量300μLでの抗原による1回目の抗菌処置を行った表3。21日目、試験採血を行い、その後に、同じ抗原製剤だが、フロイトン完全アジュバントをフロイトン不完全アジュバントと置換して用いて2回目の抗菌処置を行った。28日目、2~8群内のニワトリに、カンピロバクタージェジュニ野生型102または106を強制経口投与抗原投与した。35日目、ニワトリを安楽死させて、血液試料を各ニワトリから採取し最終採血、次いで盲腸内容物の10倍段階希釈液10-2~10-10をKarmali選択的寒天プレート上に播種することによって各ニワトリの盲腸内のカンピロバクターの量を分析してコロニー形成レベルを決定した。微好気的条件下での2日間のインキュベーションの後、カンピロバクターのコロニーの形成を記録した図13。カンピロバクター抗原投与用量依存的様式で、ToxC-GT1、1-9Cj-グリカンIMによるワクチン接種後、カンピロバクターのコロニー形成レベルの減少が得られた。実施例10:精製したMalE-GlycoTag融合タンパク質の調製GlycoTagペプチドをコードするDNA配列番号10を含むPCR断片を、オリゴヌクレオチドCS4925’-AAAATAAATATAGGACAACCGGTTCAGG-3’[配列番号25]およびCS4915’-TATCTCGAGTCACTCTTTTTTTAATTGCG-3’配列番号26を使い、プラスミドAcrACff-GlycoTag-Hisを鋳型として用い、QuikChangeMutagenesisKitStratageneでXhoI部位を除去して、増幅した。PCR産物をXhoIで消化させて、SalI-消化p2xプラスミドNewEnglandBiotechと結合させた。挿入物の正しい位置づけを、CS491を有する産物の配列決定によって確認した。大腸菌内でプラスミドpMAL-p2XNewEnglandBiolabs上に位置するIPTG誘導可能なptacプロモーターからのMalE-GlycoTag融合タンパク質の転写は、MalE-GlycoTag融合タンパク質の周辺質発現をもたらす配列番号27。大腸菌内での過剰発現の後、以下の組み合わせを用いてMalE-GlycoTag融合タンパク質を精製することができる:iアミロースアフィニティークロマトグラフィー;iiMalE-GlycoTag融合タンパク質のタンパク質切断例えば、第Xa因子による;およびiii分子ふるいクロマトグラフィー。すべての場合において、GlycoTagペプチドは、純粋な形で得られる。実施例11:MalE-GlycoTag-His融合タンパク質を用いるGlycoTagの調製GlycoTagペプチドをコードするDNA配列番号10を含んでいるPCR断片を、オリゴヌクレオチドCS4925’-AAAATAAATATAGGACAACCGGTTCAGG-3’[配列番号28]およびCS4945’-AATTTAAGCTTTGTTAGCAGCCGGATCTCAGTGG-3’配列番号29を使って、プラスミドAcrACff-GT-His-quickchangemutagenesisによってXhoIを除去を鋳型として用いて増幅した。PCR産物をXhoIおよびHindIIIで消化させて、SalI-HindIII消化プラスミドpMAL-p2Xと結合させた。大腸菌内でプラスミドpMAL-p2X上に位置するIPTG誘導可能なptacプロモーターからのMalE-GlycoTag融合タンパク質の転写は、MalE-GlycoTag-His融合タンパク質の周辺質発現をもたらす配列番号30、図14。カンピロバクタージェジュニグリコシル化オペロンの存在下または非存在下で、大腸菌内での過剰発現の後、以下の組み合わせを用いてMalE-GlycoTag融合タンパク質を精製することができる:iアミロースアフィニティークロマトグラフィー;iiMalE-GlycoTag融合タンパク質のタンパク質切断例えば、第Xa因子による、図15;およびiii分子ふるいクロマトグラフィー、Ni-NTAアフィニティークロマトグラフィー、またはゲル上での分離後の電気溶出。すべての場合において、GlycoTagペプチドは、純粋な形で得られる。実施例12:ワクチンとしてのGlycoTag付着オリゴ糖に対する免疫原性の研究において、GlycoTagペプチドをオリゴ糖キャリアペプチドとして用いることができる。グリコシル化GlycoTagを免疫賦活性タンパク質毒素に融合することができ、付加的なアジュバントの必要性が排除されることになる。グリコシル化GlycoTagペプチドを、種々の種/用途用の好ましい/標準化されたアジュバントと組み合わせて投与することができる。必要に応じて、糖が何も付着してない、または1、2、3、4、5、6、7、8もしくは9の糖が付着したGlycoTagトペプチドの混合物図7Dに見られるとして存在する複数のグリシル化GlycoTagの化学的消化またはタンパク質消化後に純粋なグリコシル化GlycoTagペプチドを得ることができる。GlycoTagペプチドをグリコシル化することで、化学的切断またはタンパク質切断からの防御をもたらす。アミノ酸繰り返し配列番号1に付着されるオリゴ糖は、プロテアーゼトリプシンによって切断を防ぐ。プロテアーゼへの曝露後、非グリコシル化されたまたは不完全にグリコシル化されたGlycoTagペプチドは切断されたのに対して、GlycoTagペプチドのグリコシル化された部分は、インタクトのままであったことが観察されたことで、この性質が確認された。本明細書で言及されたすべての刊行物、特許および特許出願は、本発明が関係する分野の当業者の技術レベルを示しており、各個々の刊行物、特許、および特許出願が具体的にかつ個々に参照によって組み込まれることを示されているように、同じ範囲まで参照によって本明細書に組み込まれる。本発明についてこのように説明してきたが、本発明が多くの方法で変化し得ることは、明らかであろう。このような変化は、本発明の精神および範囲からの逸脱とは見なされるべきではなく、当業者にとって明らかであるこのようなすべての変更は次の特許請求の範囲内に含まれることが意図される。"