"aサイトメガロウイルスCMVAD169株のgBタンパク質に少なくとも10nMの親和性で結合し;bヒト抗体又は断片であり、c線維芽細胞培養物においてCMVを中和する、単離されたモノクローナル抗体mAb又はその免疫反応性断片。完全抗体の形態である、請求項1に記載のmAb。二重特異性抗体である、請求項1に記載のmAb。CMVのAD169株のgBに対して少なくとも1nMの親和性を有する、請求項1に記載のmAb又は断片。重鎖が、GFTFNRHG配列番号67もしくはGSISSEDFC配列番号68のCDR1を有し;かつ/又は重鎖が、SSDGANQ配列番号69もしくはICYTGD配列番号70のCDR2領域を有し;かつ/又は重鎖が、ARDGRCEGERCYSGVTDF配列番号71もしくはAREDRRQLHSRPYFYYGLDV配列番号72のCDR3領域を有する、請求項1に記載の抗体。軽鎖が、QNIGGY配列番号73もしくはQSLLHSNGHNY配列番号74のCDR1領域を有し;かつ/又は軽鎖が、DAS配列番号75もしくはLG配列番号76のCDR2領域を有し;かつ/又は軽鎖が、QQRNSWPPLT配列番号77もしくはQALQTPNT配列番号78のCDR3領域を有する、請求項1に記載の抗体。4A2、19B10、313、338、又は345である、請求項6に記載の抗体又は断片。請求項1~7のいずれか1項に記載のmAbもしくは断片をコードしている第1のヌクレオチド配列を含む1以上の核酸分子、又は全長にわたり前記第1のヌクレオチド配列に相補的な第2のヌクレオチド配列を含む1以上の核酸分子。請求項1~7のいずれかに1項に記載のmAb又は断片を産生する発現系を含む組換え宿主細胞であって、哺乳動物細胞、微生物細胞、昆虫細胞又は植物細胞である組換え宿主細胞。mAb又はその免疫反応性断片の製造方法であって、請求項9に記載の細胞を培養すること、及び前記mAb又は断片を回収することを含む方法。請求項1~7のいずれかに記載の単離されたモノクローナル抗体又は断片を薬学的に許容され得る賦形剤とともに含む医薬組成物。さらに、追加の医療用薬剤を薬学的に許容され得る賦形剤とともに含む、請求項11に記載の医薬組成物。CMVに感染したヒト対象のCMVを治療するための方法であって、かかる治療を必要とする対象に、有効量の請求項1~7のいずれかに記載の抗体又は断片を投与することを含む方法。ヒト対象においてCMVの感染に対する抵抗性を増強する方法であって、かかる強化を必要とする対象に、有効量の請求項1~7のいずれかに記載の抗体又は断片を投与することを含む方法。対象が免疫無防備状態である、請求項13又は14に記載の方法。対象が妊娠女性である、請求項13又は14に記載の方法。本明細書で用いる場合、用語治療とは、既にCMVに感染している対象におけるウイルス負荷を低減すること、又はかかる対象における該疾患の症状を改善することをいう。かかる症状としては、網膜炎及び肝炎を含む。用語抵抗性を付与するとは、CMVによるウイルス感染において少なくとも重症度が低下する予防効果をいう。不死化細胞は、改変されていない初代単離細胞よりも顕著に多数の継代を経ても生存し得る細胞をいう。本発明との関連において用いる場合、不死化は、必ずしも、当該細胞が非常に長い期間にわたって抗体を分泌し続けることを意味する必要はなく、初代細胞培養よりも長く生存し得ることのみを意味する。抗体が分泌される期間は、その同定及びコードヌクレオチド配列の回収に充分な期間であればよい。本明細書において、ヒト細胞から単離した抗体などのヒト抗体は、強い免疫応答を誘起しない。ヒトから単離された抗体であっても、誘起される免疫応答に一定レベルのバックグラウンドノイズがあるため、治療されたヒトの5~10にヒト抗体による応答があることが知られている。免疫応答は体液性、細胞性又はその両方であり得る。特に、この割合の個体では高レベルのサイトカインが見られ得る。CMVのgBタンパク質は、130kDaの前駆タンパク質として合成され、共有結合を維持したまま116kDaN末端と58kDaC末端の断片に切断される;観察される分子量はグリコシル化状態に応じて種々であり得る。AD-2抗原性決定基は、gp116の67~82番目の残基をいう。CMVに対する自然免疫の大部分はAD-2への結合によると説明されているすなわち、この領域を包含するペプチドによってブロックされ得るOhlin上掲。本発明の抗体は、実施例1に記載するように、CMV曝露ヒトドナーから、米国特許第7,413,868号、PCT公報の国際公開第2005/045396号及び国際公開第2008/008858号に記載されすべて、参照により組み込まれる、出願人らが権利を有するCellSpot商標法を用いて回収される。本発明のヒト抗体又はヒト化抗体の製造は、慣用的な組換え手法によって、例えば、チャイニーズハムスター卵巣細胞又は他の真核生物細胞株昆虫細胞などによって行われる。あるいは、植物及びトランスジェニック動物例えば、ウシの乳汁中、又は微生物、植物もしくは昆虫由来の単細胞系、あるいはかかる細胞の無細胞抽出物中において抗体を含む組換え物質を生成させる方法も知られている。また、抗体をコードしているヌクレオチド配列が入手できることから、同じエピトープに結合する関連断片、例えば、Fab、Fab’2又はFv断片を組換え技術により作製させてもよく又は前記タンパク質自体のタンパク質分解的処理によって作製してもよい、前記抗体を一本鎖形態で作製してもよい。組換え抗体の作製の操作に関するさまざまな手法が当該技術分野で知られている。キメラ抗体、ヒト化抗体及びヒト抗体は、すべて本発明の範囲に含まれ、フィブロネクチン、トランスフェリン又はリポカリンなどの他のタンパク質骨格を基礎とした抗体模倣物も本発明の範囲に含まれる。同様に、現在、2種類の別々の抗体に由来する抗原特異性ドメインが組み込まれた単一の抗体様分子二重特異性抗体を作製するための数多くの技術が存在している。好適な技術が、MacrogenicsRockville,MD、MicrometBethesda,MD及びMerrimacCambridge,MAによって報告されている例えば、OrcuttKD,AckermanME,CieslewiczM,QuirozE,SlusarczykAL,FrangioniJV,WittrupKD.AmodularIgG-scFvbispecificantibodytopology.ProteinEngDesSel.201023:221-228;FitzgeraldJ,LugovskoyA.Rationalengineeringofantibodytherapeuticstargetingmultipleoncogenepathways.MAbs.20111;33;BaeuerlePA,ReinhardtC.BispecificT-cellengagingantibodiesforcancertherapy.CancerRes.200969:4941-4944を参照のこと。したがって、非常に広範な株に反応性を有する単一の抗体が、異なるCMVエピトープに対する反応性を有する個々の抗体のFabドメインを用いて構築することができ、例えば、gBとgH複合体の両方に対して活性を有する、あるいは、同一又は異なる株に由来するgBタンパク質に反応性を示す二重特異性抗体を構築することができる。高親和性gH抗体は、例えば、MacagnoA,BernasconiNL,VanzettaF,DanderE,SarasiniA,RevelloMG,GernaG,SallustoF,LanzavecchiaA.IsolationofhumanmonoclonalantibodiesthatpotentlyneutralizehumancytomegalovirusinfectionbytargetingdifferentepitopesonthegH/gL/UL128-131Acomplex.JVirol.201084:1005-1013に報告されている。また、他の株に由来するgHタンパク質に対する高親和性抗体を作製し、使用してもよい。治療で使用する場合、組換え技術により作製された抗体又は断片を、標準的な賦形剤を用いて医薬組成物に製剤化し、標準的なプロトコルに従って投与する。医薬組成物は、本発明のモノクローナル抗体又は断片、特に、あらゆるCMV株のgBタンパク質と交差反応性であるモノクローナル抗体又は断片を活性成分として有するものであってもよい。あるいは、ある株のgBタンパク質に対してより強く反応するモノクローナル抗体、別の株のgBタンパク質に対してより強く反応するモノクローナル抗体の2種類のモノクローナル抗体のみを活性成分としてもよい。全ての場合において、他のCMVタンパク質に結合する薬剤を含む、追加の治療用薬剤を含んでいてもよい。また、当該組成物は抗体以外に、ビタミンなどの栄養物質、又は抗体以外の任意の他の有益な化合物を含んでいてもよい。一実施形態において、投与する製剤を、感染に対する抵抗性を増大させるために使用する場合、完全抗体相補領域含有Fc領域を含むを使用する。典型的には、該抗体は、0.01~20mg/ヒト対象kgの投薬量レベル、0.01~5mg/kgの範囲の量、又はこれらの範囲内の中間の量で投与される。一実施形態では、0.1~1.0mg/kgの範囲の量を使用する。数日間、数週間又は数ヶ月間を空けて反復投与することで効果を得ることができる。別の実施形態では、ウイルス量を低減させるための治療効果を得るため、完全抗体相補領域含有Fc領域を含むを使用する。当該プロトコルにおける投与量は、0.001~50mg/kg程度、又はこの範囲内の中間の値0.01、1もしくは10mg/kgなどが採用される。また、反復投与を行ってもよい。治療的処置としては、感染の診断後できるだけ早く投与されるが、数日以内の投与も本発明の範囲に含まれる。また、反復投与を採用してもよい。肺における炎症応答を低減させる目的の場合、該抗体の免疫特異的断片のみを使用すれば十分である。投薬量レベルは完全抗体の場合と同様である。また、免疫特異的断片と完全抗体の混合物の投与も本発明の範囲に含まれる。本発明の抗体組成物の投与は、典型的には注射、一般的には静脈内注射により行われる。したがって、非経口投与が好ましい。しかし、遺伝子療法インビボでの組換え抗体の作製を含む任意の奏効可能な投与方法が包含される。製剤は、抗体組成物を投与するために当該技術分野で一般的に知られた方法で調製される。好適な製剤は、標準的な薬方書、例えば、Remington’sPharmaceuticalSciences,最新版,MackPublishingCo.,Easton,PA参照により本明細書に組み込まれるにおいて知得できる。製剤は、典型的には、等張性溶液バッファーを含む、酸化防止剤などを含む非経口投与に適したもの、並びに送達媒体リポソーム、ミセル及びナノ粒子などを含むエマルションである。望ましいプロトコル及び製剤は、担当医師の判断並びに対象の具体的な病状に依存することができる。投薬量レベルは、適宜、対象の年齢、一般健康状態及び感染重症度に依存する。以下の実施例は、本発明を例示するために示したものであり、本発明を限定するもののではない。実施例1CMVgBに対する抗体を分泌するヒトB細胞の単離CMVに対する力価が確認された50名の成人由来の末梢血単核細胞を用いて、抗ウイルス抗体を産生するヒトB細胞について調査した。CMVgBタンパク質に対する所望の抗体を有する対象を特異的mAbのクローニングに使用した。調査の結果、対象の約10が50,000個に1個より多い頻度で所望の細胞を有していた。希少な好ましい細胞の調査及び回収を行うため、本発明者らは、既報のCellSpot商標技術米国特許第7,413,868号、参照により本明細書に組み込まれるを使用した。CellSpot商標アッセイ法は、単一細胞から分泌されるIgGを該細胞の近傍においてフットプリントとして捕捉することにより、ELISAと同等のアッセイを、ほぼ単一細胞の寸法の仮想ウェルまで効果的に縮小するものであり、そのため、数百万個の細胞を容易に解析することができる。さらに、顕微鏡的多重化試薬組み合せて着色された蛍光ラテックスミクロスフィア,米国特許第6,642,062号参照、参照により本明細書に組み込まれるを使用することにより、各クローンの分泌抗体のフットプリントの特異性及び/又は親和性について、複数の生化学的プローブを用いて詳細に特性評価することができる。この定量的アッセイは、調査集団から極めて希少な好ましい細胞を抽出できるためには充分な忠実度であり、クローニングされた発現細胞は、元の同定アッセイと整合する表現型を示す。スクリーニング基準は、精製gBタンパク質並びにウイルス溶解物に対する結合とした。gBタンパク質は、CMVのAD169株に感染させた293細胞から精製した。クローンの親和性ランクの順序付けは、ビーズ上の抗原を血清アルブミンで希釈して行う。これにより、分泌IgGフットプリントに対する多価結合アビディティ効果の機会が低減され、より高い固有の親和性が選択される。非B細胞を、ヒトドナーの血漿中のPBMCから標準的な磁気分離法を用いて枯渇させた。細胞をIMDM/20HI-FCSに1e6/mlで再懸濁させ;EBV感染B95-8細胞の上清から直接ペレット化を用いて不死化させた。EBVは1:100の希釈度で添加し、細胞を37°Cで2時間培養した。過剰のEBVを洗浄し、細胞を以下のいずれかとした:1IMDM、20HI-FCS、20巨細胞腫馴化培地、2μg/mlCpGODN2006、及び10ng/mlIL-10中、2e6/mlで調査のみのために培養する、又は2さらに、磁気陽性選択を用いて表面IgGについて選択する。細胞を200~300細胞/ウェルで、放射線照射ヒト肺細胞MRC-5、5,000細胞/ウェル上、IMDM、20HI-FCS、20巨細胞腫馴化培地、2μg/mlCpGODN2006、及び10ng/mlIL-10中で培養した。培地は2~3日毎に補給した。6日目に、ウェルの内容物の半分をCellSpot商標でアッセイした。次いで、調査アッセイで陽性の少数ウェル内の残りの細胞を、同じフィーダー細胞と培養条件で、10、5、1、及び0.5細胞/ウェルに希釈した。4~5日後、これらの限界希釈プレートをELISA又はCellSpot商標によって再度測定した。CellSpot商標ナノ粒子をウイルス溶解物又は精製gBタンパク質とコンジュゲートさせ、所望の抗体についてスクリーニングした。CMVAD169ウイルスに感染させた細胞から調製した溶解物は、Virusysカタログ番号CV046から購入したこの溶解物は、正常ヒト皮膚線維芽細胞NHDF細胞株において作製されたものである。組換えCMVgB抗原をヒスチジンタグ融合タンパク質として293細胞内で産生させ、ニッケルキレート化カラムを用いて精製した。精製gBタンパク質をELISA及びCellSpotに使用した。AD169溶解物及びgB精製タンパク質の調製物を、それぞれ、既報の方法であるHarrimanら上掲及びCollariniら上掲に従ってナノ粒子にコンジュゲートさせた。次いで、限界希釈した陽性ウェルの内容物を、逆転写酵素-PCRを用いて処理し、該抗体の重鎖及び軽鎖をコードするmRNAを回収した。PBMCの解凍からRT-PCRによるコードmRNA配列回収までの全期間は10~12日間であった。実施例2CMVgBに対するヒト抗体のクローニング陽性ELISAウェルの再構成Ig重鎖遺伝子及びIg軽鎖遺伝子の増幅を、セミネステッドポリメラーゼ連鎖反応PCRを用いて行った。それまで未知のV遺伝子再構成を増幅するため、ファミリーに特異的なV遺伝子プライマーの集合ヒトIg遺伝子座内のほぼすべてのV遺伝子セグメントを認識するを構築した。5’プライマーを、Cγ、Cκ及びCλ遺伝子セグメントに特異的なプライマーミックスと共に使用した。限界希釈CMV-gB特異的B細胞のクローン性を、相違する子孫細胞のV遺伝子増幅物の配列を比較することにより明確に調べ、増幅させた完全長V遺伝子再構成をIgG発現ベクター内にクローニングした。詳細には、単離B細胞から得た全mRNAを、市販のRNA精製キットRNeasy商標;Qiagenドイツを用いて抽出した。全RNA調製物及びプライマーとしてオリゴヌクレオチドを使用することにより、逆転写-PCRを行った。各試料について3回:軽鎖カッパκについて1回、軽鎖ラムダλについて1回、及びガンマ重鎖γについて1回のPCR反応を実施した。QIAGEN登録商標OneStepRT-PCRキットを増幅に使用したQiagenカタログ番号210212。連結RT-PCR反応においては、固有のRT酵素ブレンドOmniscript商標及びSensiscript商標を使用して、C-κ、C-λ又はCγ遺伝子のCH1コンセンサス領域に対応するアンチセンス配列特異的プライマーを用いてcDNAを合成し、RTを50°Cで1時間行った後、高い特異性と感度のためにHotStarTaqDNAPolymeraseによるcDNAのPCR増幅を行う。各PCR反応では、5’センスプライマーの混合物を使用した。プライマー配列は、VH、VK及びVLのリーダー配列に基づくものとした。PCR反応を95°Cで15分間実施し、初期高温開始反応の後、95°Cで30秒間変性、60°Cで45秒間アニーリング及び72°Cで1分間伸長を20サイクル行った。可変Ig断片の検出及び発現ベクター内へのクローニングのためのネステッドPCR.第2ラウンドでは、1回目の増幅反応物の5μlのアリコートを使用した。使用したプライマーは5’BglII及び3’XbaI制限部位を有するものである。30回のPCRサイクルを行った。第1ラウンドと第2ラウンドの増幅には同一の条件を使用した。5マイクロリットルの各反応液を添加し、1アガロースゲル上で分離し、次いで臭化エチジウムで染色した。V-CPCR産物は、それぞれ、500及び450bpのVH及びVLの再構成断片が増幅されたものと予測される。およそ500bpの分子サイズを有するPCRバンドが陽性の結果を示した。PCR産物を精製しQiagenゲル精製キットカタログ番号28704、抽出したPCR産物について、特異的定常領域プライマーを用いて直接配列を決定した。クローニングした断片の配列は、組換え体作製のために調製したプラスミドを用いて配列決定することにより確認した。哺乳動物細胞でのインビトロ抗体作製のため、上述のPCR断片を消化し、ヒトγ1又はヒトκもしくはλの定常領域を有する個々の発現ベクター内にクローニングした。重鎖及び軽鎖をコードしている発現ベクターで293ヒト腎臓細胞株Invitrogenをコトランスフェクトした。発現プラスミドを、カチオン性脂質系トランスフェクション試薬293fectin商標;Invitrogenを使用して導入した。各トランスフェクション反応では、20μgの精製プラスミドと40μLの293fectin商標を1mLのOpti-MEM登録商標Invitrogenと混合し、室温で5分間インキュベートした後、結合させ、室温で20分間複合体を形成させた。DNA-293fectin複合体を、90mmペトリ皿に播種した3×106個の細胞に添加し、37°C、8CO2でインキュベートした。最後に、トランスフェクションの72時間後に遠心分離3,000g,4°Cで15分間を行い、上清を回収し、分泌された抗体を収集した。約200万個のリンパ球から、AD169溶解物に結合する45個のクローンを単離した。このうち、大部分は組換えgBタンパク質にも結合した。AD169とgBの両方に結合したmAbのうち2種類4A2及び19B10が中和能を有していた。これらのうち一方4A2は、gBタンパク質上の保存部位であるAD-2ペプチドに結合する。他のmAb5C5は、AD-2に結合するが、ウイルスを中和しない。4A2及び19B10の可変領域、D/J接合領域、フレームワークFR領域及び相補性決定CDR領域を含む重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列を以下に示す。重鎖上の分泌シグナル配列をイタリック体で示し、CDR1~3に下線を付している。蛍光ビーズ上に高密度又は低密度のいずれかで完全長gBタンパク質又はAd-2ペプチドでコートしたCellSpotプローブを調製することにより、高親和性抗体を作製した。理論に拘束されないが、低密度では多価配位の親和性効果が低減されるため、検索は、高い固有の親和性を有する抗体に有利となる。複数の高親和性抗体を単離し、配列決定した。CMVに反応性である他のモノクローナル抗体の配列を決定し、配列番号9~36、及び38~66として示す。ヒトIgG1重鎖定常領域のヌクレオチド配列を配列番号37に示す。本発明の抗体において、重鎖は、GFTFNRHG配列番号67もしくはGSISSEDFC配列番号68のCDR1;及び/又はSSDGANQ配列番号69もしくはICYTGD配列番号70のCDR2領域;及び/又はARDGRCEGERCYSGVTDF配列番号71もしくはAREDRRQLHSRPYFYYGLDV配列番号72のCDR3領域を有するものであり得る。他の実施形態において、軽鎖は、QNIGGY配列番号73もしくはQSLLHSNGHNY配列番号74のCDR1領域;及び/又はDAS配列番号75もしくはLG配列番号76のCDR2領域;及び/又はQQRNSWPPLT配列番号77もしくはQALQTPNT配列番号78のCDR3領域を有するものである。実施例3親和性の測定本発明の抗体の親和性を、ForteBio登録商標MenloPark,CAバイオセンサー解析によって測定した。この方法では、アミン反応性バイオセンサー上のカルボン酸基をEDC/NHSにより活性化した。抗体pH5のMESバッファー中で希釈を、プローブの活性化された表面に結合させ、残りの活性カルボキシル基をエタノールアミンでブロックした。gBタンパク質をAbコートプローブとともにインキュベートし、Abコートプローブとの会合速度及び解離速度をForteBio登録商標装置によって測定した。1回の実験において、4A2は168pMの親和性を、19B10は697pMの親和性を示した。これを、対応するIC50単位:μg/mlとして表1に示す。これらの親和性定数は、公開されているgBに対するモノクローナル抗体よりも明らかに良好である。gBのAD-2エピトープに対するmAb310、313、345及び4A2の結合親和性を測定した。gB結合反応速度を表2に示す。mAb310、313及び338は、mAb4A2よりも約10倍高い結合力を有する。また、mAb323、316及び338も、mAb4A2より高い結合力を有するデータ非図示。残りのmAbの結合親和性も試験され、同様に、公開されているgBに対するモノクローナル抗体よりも良好である。実施例4Elisa結合アッセイ及びエピトープマッピングmAb4A2及び19B10を、精製gBタンパク質、及びAD-2:NETIYNTTLKYGDV配列番号79で示される保存ペプチドに対する結合について評価した。図1に示されるように、4A2は、完全長タンパク質とペプチドAD-2のどちらにも良好に結合するが、19B10は該タンパク質にしか結合しない。実施例5ウイルス中和アッセイmAb4A2及び19B10は、MRC5一次線維芽細胞においてCMVのAD169株を中和した。前記抗体の連続希釈物を等容量のAD169108/mlのストックを希釈し、2000感染細胞/ウェルとしたと混合し、室温で1時間インキュベートした後、96ウェルマイクロプレート内の単層の標的細胞に添加した。24時間後、細胞を固定し、透過性にし、HRPに結合させたIE1中間初期タンパク質1,UL123としても知られている,複製中のウイルスのマーカーに対するモノクローナル抗体で染色した。感染細胞を、HRP基質の沈着により検出した。感染細胞の数を抗体濃度に対してプロットした。また、ウイルスの中和を、VR1814株Revelloら,J.Gen.Virol.200182:1429-1438を用いて評価した。mAb4A2、310、313、338及び345はVR1814株を、ヒト臍静脈内皮細胞HUVEC及びヒト包皮線維芽細胞HFFの両方において中和した。図2A及び2Bは、mAb4A2、310、313、338及び345の各々のIC50とIC90の値を示す。図3及び4は、それぞれ、mAb4A2、310、313、338及び345の各々によるHUVEC細胞及びHFF細胞における中和を示す。二重試験で行った結果を示す。AD169及びVR1814株を中和する他のmAbも同様に試験される。"