SEQIDNO7に示された重鎖可変領域相補性決定領域のアミノ酸配列を有するCDRを含む重鎖可変領域およびSEQIDNO8に示された軽鎖可変領域CDRのアミノ酸配列を有するCDRを含む軽鎖可変領域を含む、191P4D12抗体またはその抗原結合フラグメント。SEQIDNO7の20番目のアミノ酸~136番目のアミノ酸の範囲のアミノ酸配列からなる重鎖可変領域およびSEQIDNO8の23番目のアミノ酸~130番目のアミノ酸の範囲のアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、請求項1記載の抗体または抗原結合フラグメント。SEQIDNO7の20番目のアミノ酸~466番目のアミノ酸の範囲のアミノ酸配列からなる重鎖およびSEQIDNO8の23番目のアミノ酸~236番目のアミノ酸の範囲のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、請求項2記載の抗体。Fab、F2、Fv、またはscfvフラグメントである、請求項1または2記載の抗原結合フラグメント。完全ヒト抗体である、請求項1または2記載の抗体。組換えにより産生された、請求項1~5のいずれか一項記載の抗体。AmericanTypeCultureCollectionアクセッション番号PTA11267で寄託されたハイブリドーマによって産生された抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列からなる重鎖可変領域、およびATCCアクセッション番号PTA11267で寄託されたハイブリドーマによって産生された抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む、抗体またはその抗原結合フラグメント。ATCCアクセッション番号PTA11267で寄託されたハイブリドーマによって産生された抗体の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびATCCアクセッション番号PTA11267で寄託されたハイブリドーマによって産生された抗体の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、請求項7記載の抗体。細胞傷害剤と結合体化された前記請求項のいずれか一項記載の抗体または抗原結合フラグメントを含む、抗体薬物結合体。前記細胞傷害剤がモノメチルアウリスタチンEである、請求項9記載の抗体薬物結合体。癌治療において使用するための、請求項9または請求項10記載の抗体薬物結合体。癌が膵臓癌、肺癌、膀胱癌、または乳癌である、請求項11記載の抗体薬物結合体。放射線または化学療法剤と組み合わせて癌治療において使用するための、請求項9または請求項10記載の抗体薬物結合体。請求項9または請求項10記載の抗体薬物結合体をヒト用単位剤形で含む、薬学的組成物。癌治療において使用するための、請求項14記載の薬学的組成物。癌が膵臓癌、肺癌、膀胱癌、または乳癌である、請求項15記載の薬学的組成物。請求項9または請求項10記載の抗体薬物結合体を対象に投与する工程を含む、対象において癌を治療するための方法。発明の詳細な説明節の概要I定義II191P4D12抗体III抗体薬物結合体総論IIIマイタンシノイドIIIアウリスタチンおよびドラスタチンIIIカリチアマイシンIII他の細胞傷害剤IV191P4D12に結合する抗体薬物結合体VリンカーユニットVIストレッチャーユニットVIIアミノ酸ユニットVIIIスペーサーユニットIX薬物ユニットX薬物ローディングXIADCの細胞傷害作用を確かめる方法XII191P4D12を発現する癌の処置XIII抗体ベースの療法の標的としての191P4D12XIV191P4D12ADCカクテルXV併用療法XVIキット製造物品I定義特別の定義のない限り、本明細書において使用される全ての技術用語、記号、および他の科学用語もしくは専門用語は、本発明の属する当業者によって一般に理解される意味を有することが意図される。場合によっては、一般に理解される意味を有する用語が、明確さのため、およびまたはすぐに参照するために本明細書において定義される。本明細書においてこのような定義を含めることは、当技術分野において一般に理解されるとの実質的な差異を示すと解釈しなければならないとは限らない。本明細書において記載または参照される技術および手順のうちの多くは、当業者によって十分に理解され、当業者によって従来の方法論、例えば、SambrooketalMolecularCloningALaboratoryManual2ndeditionColdSpringHarborLaboratoryPressColdSpringHarborNYに記載される広く使用されている分子クローニング方法論を使用して一般的に使用される。適宜、一般的には、市販のキットおよび試薬の使用を含む手順が、特別の記載のない限りは製造業者が規定したプロトコールおよびまたはパラメーターに従って実行される。商品名が本明細書において用いられる場合、商品名についての言及は、文脈によって特に定めのない限り、製品製剤、後発医薬、および商品名の製品の活性のある薬学的成分についても言及している。進行型癌、局所進行型癌、進行型疾患および局所進行型疾患という用語は、関連する組織被膜を突き破って拡大した癌を意味し、この用語は、米泌尿器学会のシステムでステージCの疾患、WhitmoreJewettのシステムでステージC1~C2の疾患、およびTNMシステムでステージT3~T4およびNの疾患を含むと意図される。一般的に、局所進行型疾患を有する患者に対して、手術は勧められない。これらの患者は、臨床的に限局化した癌を有する患者と比較して、実質的に好ましくない結果を有する。AFPという略語は、ジメチルバリンバリンドライソロインドラプロインフェニルアラニンpフェニレンジアミンを指す。MMAEという略語は、モノメチルアウリスタチンEを指す。AEBという略語は、アウリスタチンEとパラアセチル安息香酸を反応させることによって生成されたエステルを指す。AEVBという略語は、アウリスタチンEとベンゾイル吉草酸を反応させることによって生成されたエステルを指す。MMAFという略語は、ドバリンバリンドライソロインドラプロインフェニルアラニンを指す。特別の記載のない限りは、アルキルという用語は、約1~約20個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖の飽和炭化水素を指し、約1~約8個の炭素原子が好ましい。アルキル基の例は、メチル、エチル、nプロピル、イソプロピル、nブチル、イソブチル、secブチル、tertブチル、nペンチル、2ペンチル、3ペンチル、2メチル2ブチル、nヘキシル、nヘプチル、nオクチル、nノニル、nデシル、3メチル2ブチル、3メチル1ブチル、2メチル1ブチル、1ヘキシル、2ヘキシル、3ヘキシル、2メチル2ペンチル、3メチル2ペンチル、4メチル2ペンチル、3メチル3ペンチル、2メチル3ペンチル、23ジメチル2ブチル、および33ジメチル2ブチルである。アルキル基は単独でも別の基の一部でも、ハロゲン、O、O、O、アリール、CR、OCR、COR、CNH2、CNHR、CN2、NHCR、SR、SO3R、S2R、SR、OH、O、N3、NH2、NH、N2、およびCNを含むが、これに限定されない1個または複数の基、好ましくは、1個~3個の基によって置換されてもよく、それぞれのRは独立して、H、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、またはアリールより選択され、前記のO、O、O、アリール、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、およびC2~C8アルキニル基は、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、ハロゲン、O、O、O、アリール、CR、OCR、COR、CNH2、CNHR、CN2、NHCR、SR、SO3R、S2R、SR、OH、N3、NH2、NH、N2、およびCNを含むが、これに限定されない1個または複数の基によってさらに置換されてもよく、それぞれのRは独立して、H、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、またはアリールより選択される。特別の記載のない限りは、アルケニルおよびアルキニルという用語は、約2~約20個の炭素原子を有する直鎖および分枝鎖の炭素鎖を指し、約2~約8個の炭素原子が好ましい。アルケニル鎖は、鎖の中に少なくとも1つの二重結合を有し、アルキニル鎖は、鎖の中に少なくとも1つの三重結合を有する。アルケニル基の例には、エチレンまたはビニル、アリル、1ブテニル、2ブテニル、イソブチレニル、1ペンテニル、2ペンテニル、3メチル1ブテニル、2メチル2ブテニル、および23ジメチル2ブテニルが含まれるが、これに限定されない。アルキニル基の例には、アセチレニック、プロパルギル、アセチレニル、プロピニル、1ブチニル、2ブチニル、1ペンチニル、2ペンチニル、および3メチル1ブチニルが含まれるが、これに限定されない。アルケニル基およびアルキニル基は単独でも別の基の一部でも、ハロゲン、O、O、O、アリール、CR、OCR、COR、CNH2、CNHR、CN2、NHCR、SR、SO3R、S2R、SR、OH、O、N3、NH2、NH、N2、およびCNを含むが、これに限定されない1個または複数の基、好ましくは、1個~3個の基によって置換されてもよく、それぞれのRは独立して、H、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、またはアリールより選択され、前記のO、O、O、アリール、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、およびC2~C8アルキニル基は、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、ハロゲン、O、O、O、アリール、CR、OCR、COR、CNH2、CNHR、CN2、NHCR、SR、SO3R、S2R、SR、OH、N3、NH2、NH、N2、およびCNを含むが、これに限定されない1個または複数の置換基によってさらに置換されてもよく、それぞれのRは独立して、H、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、またはアリールより選択される。特別の記載のない限りは、アルキレンという用語は、約1個~約20個の炭素原子を有し、親アルカンの同じ炭素原子または2個の異なる炭素原子から2個の水素原子が取り除かれることによって得られる2個の一価ラジカル中心を有する、分枝鎖または直鎖の飽和炭化水素ラジカルを指し、約1~約8個の炭素原子が好ましい。代表的なアルキレンには、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン、ヘキシレン、ヘプチレン、オクチレン、ノニレン、デカレン、14シクロヘキシレンなどが含まれるが、これに限定されない。アルキレン基は単独でも別の基の一部でも、ハロゲン、O、O、O、アリール、CR、OCR、COR、CNH2、CNHR、CN2、NHCR、SR、SO3R、S2R、SR、OH、O、N3、NH2、NH、N2、およびCNを含むが、これに限定されない1個または複数の基、好ましくは、1個~3個の基によって置換されてもよく、それぞれのRは独立して、H、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、またはアリールより選択され、前記のO、O、O、アリール、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、およびC2~C8アルキニル基は、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、ハロゲン、O、O、O、アリール、CR、OCR、COR、CNH2、CNHR、CN2、NHCR、SR、SO3R、S2R、SR、OH、N3、NH2、NH、N2、およびCNを含むが、これに限定されない1個または複数の置換基によってさらに置換されてもよく、それぞれのRは独立して、H、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、またはアリールより選択される。特別の記載のない限りは、アルケニレンという用語は、少なくとも1つの炭素炭素二重結合を含有する、置換されてもよいアルキレン基を指す。例示的なアルケニレン基には、例えば、エテニレンおよびプロペニレンが含まれる。特別の記載のない限りは、アルキニレンという用語は、少なくとも1つの炭素炭素三重結合を含有する、置換されてもよいアルキレン基を指す。例示的なアルキニレン基には、例えば、アセチレン、プロパルギル、および4ペンチニルが含まれる。特別の記載のない限りは、アリールという用語は、親芳香環構造の1個の炭素原子から1個の水素原子が取り除かれることによって得られる、6~20個の炭素原子からなる一価の芳香族炭化水素ラジカルを指す。アリール基の中には、例示的な構造においてArで示されるものもある。代表的なアリール基には、ベンゼン、置換ベンゼン、フェニル、ナフタレン、アントラセン、ビフェニルなどから得られるラジカルが含まれるが、これに限定されない。アリール基は単独でも別の基の一部でも、ハロゲン、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、O、O、O、アリール、CR、OCR、COR、CNH2、CNHR、CN2、NHCR、SR、SO3R、S2R、SR、OH、NO2、N3、NH2、NH、N2、およびCNを含むが、これに限定されない、1個または複数の、好ましくは、1個~5個、さらには1個~2個の基によって置換されてもよく、それぞれのRは独立して、H、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、またはアリールより選択され、前記のC1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、O、O、O、およびアリール基は、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、ハロゲン、O、O、O、アリール、CR、OCR、COR、CNH2、CNHR、CN2、NHCR、SR、SO3R、S2R、SR、OH、N3、NH2、NH、N2、およびCNを含むが、これに限定されない1個または複数の置換基によってさらに置換されてもよく、それぞれのRは独立して、H、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、またはアリールより選択される。特別の記載のない限りは、アリーレンという用語は、二価の置換されてもよいアリール基を指し、例示的なアリール基としてフェニルを用いて以下の構造に示したように、オルト、メタ、またはパラの構造でもよい。代表的なアリール、アリール、およびアリール基には、ベンジル、2フェニルエタン1イル、2フェニルエテン1イル、ナフチルメチル、2ナフチルエタン1イル、2ナフチルエテン1イル、ナフトベンジル、2ナフトフェニルエタン1イルなどが含まれるが、これに限定されない。特別の記載のない限りは、複素環という用語は、3個~14個の環原子とも呼ばれるを有する、単環式、二環式、または多環式の環構造を指す。ここで、少なくとも1つの環の中にある少なくとも1個の環原子は、N、O、P、またはSより選択されるヘテロ原子である。複素環は、N、O、P、またはSより独立して選択される1個~4個の環ヘテロ原子を有してもよい。複素環の中にある1個または複数のN、C、またはS原子が酸化されてもよい。単環式複素環は、好ましくは、3個~7個の環員を有し、二環式の複素環は、好ましくは、5個~10個の環員を有する。ヘテロ原子を含む環は芳香族でもよく、非芳香族でもよい。特別の記載のない限りは、複素環の任意のヘテロ原子または炭素原子がそのペンダント基に取り付けられて、安定した構造となる。複素環は、PaquettePrinciplesofModernHeterocyclicChemistry、特に、1章、3章、4章、6章、7章、および9章、TheChemistryofHeterocyclicCompoundsAseriesofMonographs、特に、13巻、14巻、16巻、19巻、および28巻ならびにJAmChemSoc825566に記載されている。複素環基の例には、例として、かつ非限定的に、ピリジル、ジヒドロピリジル、テトラヒドロピリジル、チアゾリル、ピリミジニル、フラニル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、テトラゾリル、ベンゾフラニル、チアナフタレニル、インドリル、インドレニル、キノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリル、ピペリジニル、4ピペリドニル、ピロリジニル、2ピロリドニル、ピロリニル、テトラヒドロフラニル、bisテトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、bisテトラヒドロピラニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、オクタヒドロイソキノリニル、アゾシニル、トリアジニル、6H125チアジアジニル、2H6H152ジチアジニル、チエニル、チアントレニル、ピラニル、イソベンゾフラニル、クロメニル、キサンテニル、フェノキサチニル、2Hピロリル、イソチアゾリル、イソキサゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、インドリジニル、イソインドリル、3Hインドリル、1Hインダゾリル、プリニル、4Hキノリジニル、フタラジニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シンノリニル、プテリジニル、4Hカルバゾリル、カルバゾリル、βカルボリニル、フェナントリジニル、アクリジニル、ピリミジニル、フェナントロリニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フラザニル、フェノキサジニル、イソクロマニル、クロマニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピペラジニル、インドリニル、イソインドリニル、キヌクリジニル、モルホリニル、オキサゾリジニル、ベンゾトリアゾリル、ベンズイソキサゾリル、オキシインドリル、ベンゾキサゾリニル、およびイサチノイルが含まれる。好ましい複素環基には、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、インドリル、ベンゾピラゾリル、クマリニル、イソキノリニル、ピロリル、チオフェニル、フラニル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、キノリニル、ピリミジニル、ピリジニル、ピリドニル、ピラジニル、ピリダジニル、イソチアゾリル、イソキサゾリル、およびテトラゾリルが含まれるが、これに限定されない。複素環基は単独でも別の基の一部でも、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、ハロゲン、O、O、O、アリール、CR、OCR、COR、CNH2、CNHR、CN2、NHCR、SR、SO3R、S2R、SR、OH、N3、NH2、NH、N2、およびCNを含むが、これに限定されない1個または複数の基、好ましくは、1個~2個の基によって置換されてもよく、それぞれのRは独立して、H、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、またはアリールより選択され、前記のO、O、O、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、およびアリール基は、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、ハロゲン、O、O、O、アリール、CR、OCR、COR、CNH2、CNHR、CN2、NHCR、SR、SO3R、S2R、SR、OH、N3、NH2、NH、N2、およびCNを含むが、これに限定されない1個または複数の置換基によってさらに置換されてもよく、それぞれのRは独立して、H、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、またはアリールより選択される。例として、かつ非限定的に、炭素結合複素環は、ピリジンの2位、3位、4位、5位、もしくは6位ピリダジンの3位、4位、5位、もしくは6位ピリミジンの2位、4位、5位、もしくは6位ピラジンの2位、3位、5位、もしくは6位フラン、テトラヒドロフラン、チオフラン、チオフェン、ピロール、もしくはテトラヒドロピロールの2位、3位、4位、もしくは5位オキサゾール、イミダゾール、もしくはチアゾールの2位、4位、もしくは5位イソキサゾール、ピラゾール、もしくはイソチアゾールの3位、4位、もしくは5位アジリジンの2位もしくは3位アゼチジンの2位、3位、もしくは4位キノリンの2位、3位、4位、5位、6位、7位、もしくは8位またはイソキノリンの1位、3位、4位、5位、6位、7位、もしくは8位において結合されてもよい。なおさらに典型的には、炭素結合複素環には、2ピリジル、3ピリジル、4ピリジル、5ピリジル、6ピリジル、3ピリダジニル、4ピリダジニル、5ピリダジニル、6ピリダジニル、2ピリミジニル、4ピリミジニル、5ピリミジニル、6ピリミジニル、2ピラジニル、3ピラジニル、5ピラジニル、6ピラジニル、2チアゾリル、4チアゾリル、または5チアゾリルが含まれる。例として、かつ非限定的に、窒素結合複素環は、アジリジン、アゼチジン、ピロール、ピロリジン、2ピロリン、3ピロリン、イミダゾール、イミダゾリジン、2イミダゾリン、3イミダゾリン、ピラゾール、ピラゾリン、2ピラゾリン、3ピラゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドール、インドリン、または1Hインダゾールの1位イソインドールまたはイソインドリンの2位モルホリンの4位およびカルバゾールまたはβカルボリンの9位において結合されてもよい。なおさらに典型的には、窒素結合複素環には、1アジリジル、1アゼテジル、1ピロリル、1イミダゾリル、1ピラゾリル、および1ピペリジニルが含まれる。特別の記載のない限りは、カルボサイクルという用語は、3個~14個の環原子を有し、環原子の全てが炭素原子である、飽和または不飽和の、非芳香族の、単環式、二環式、または多環式の環構造を指す。単環式のカルボサイクルは、好ましくは、3個~6個の環原子、さらにより好ましくは、5個または6個の環原子を有する。二環式のカルボサイクルは、好ましくは、例えば、ビシクロ45、55、56、もしくは66構造として配置される7個~12個の環原子を有するか、またはビシクロ56もしくは66構造として配置される9個もしくは10個の環原子を有する。カルボサイクルという用語は、例えば、アリール環と融合した単環式のカルボサイクルを含む。カルボサイクルは、好ましくは、3~8個のカルボサイクル原子を有する。カルボサイクル基は単独でも別の基の一部でも、例えば、ハロゲン、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、O、O、O、アリール、CR、OCR、COR、CNH2、CNHR、CN2、NHCR、SR、SO3R、S2R、SR、OH、O、N3、NH2、NH、N2、およびCNを含むが、これに限定されない1個または複数の基、好ましくは、1個または2個の基によって置換されてもよく、それぞれのRは独立して、H、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、またはアリールより選択され、前記のC1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、O、O、O、およびアリール基は、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、ハロゲン、O、O、O、アリール、CR、OCR、COR、CNH2、CNHR、CN2、NHCR、SR、SO3R、S2R、SR、OH、N3、NH2、NH、N2、およびCNを含むが、これに限定されない1個または複数の置換基によってさらに置換されてもよく、それぞれのRは独立して、H、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、またはアリールより選択される。単環式カルボサイクル置換基の例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、1シクルペント1enyl、1シクルペント2enyl、1シクルペント3enyl、シクロヘキシル、1シクロヘキシ1enyl、1シクロヘキシ2enyl、1シクロヘキシ3enyl、シクロヘプチル、シクロオクチル、13シクロヘキサジエニル、14シクロヘキサジエニル、13シクロヘプタジエニル、135シクロヘプタトリエニル、およびシクロオクタジエニルが含まれる。カルボシクロは単独でも別の基の一部でも、二価の前記で定義された、置換されてもよいカルボサイクル基を指す。文脈によって特に定めのない限り、ハイフンは、ペンダント分子に取り付けられる点を指定する。従って、アリールまたはC1~C8アルキレンという用語は、アルキレンラジカルの任意の炭素原子がペンダント分子に取り付けられ、アルキレンラジカルの炭素原子に結合している水素原子の1つが、本明細書において定義されたアリールラジカルによって置換されている、本明細書において定義されたC1~C8アルキレンラジカルを指す。特定の基が置換される場合、この基は、置換基リストより独立して選択される1個または複数の置換基、好ましくは、1個~5個の置換基、より好ましくは、1個~3個の置換基、最も好ましくは、1個~2個の置換基を有してもよい。しかしながら、この基は、一般的に、ハロゲンより選択される任意の数の置換基を有してもよい。置換される複数の基もこのように示される。分子内の特定の場所における任意の置換基または変化の定義は、その分子の他の場所にある定義とは無関係であることが意図される。当業者であれば、化学的に安定であり、かつ当技術分野において公知の技法ならびに本明細書において示された方法によって容易に合成することができる化合物を提供するように、本発明の化合物上にある置換基および置換パターンを選択できることが理解される。本明細書において使用される場合、保護基は、一過的または持続的に、多官能性化合物にある1つの反応部位を選択的にブロックする基を指す。本発明において使用するための適切なヒドロキシ保護基は薬学的に許容されるものであり、化合物が活性になるために、対象に投与された後に親化合物から切断される必要があるものでもよく、切断される必要がないものでもよい。切断は、体内の正常な代謝プロセスを介したものである。ヒドロキシ保護基は当技術分野において周知であり、例えば、エーテル、エステル、カーボネート、カルバメート、スルホネート、ならびにホスフェート保護基を含む。その全体が、および全ての目的のために参照により本明細書に組み入れられる、ProtectiveGroupsinOrganicSynthesisbyTWGreeneandPGMWutsを参照されたい。ヒドロキシ保護基の例には、メチルエーテルメトキシメチルエーテル、メチルチオメチルエーテル、メトキシメチルエーテル、ベンジルオキシメチルエーテル、pメトキシベンジルオキシメチルエーテル、pニトロベンジルオキシメチルエーテル、oニトロベンジルオキシメチルエーテル、メチルエーテル、グアイアコールメチルエーテル、tブトキシメチルエーテル、4ペンテニルオキシメチルエーテル、シロキシメチルエーテル、2メトキシエトキシメチルエーテル、222トリクロロエトキシメチルエーテル、bisメチルエーテル、2エトキシメチルエーテル、メトキシメチルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、1メトキシシクロヘキシルエーテル、4メトキシテトラヒドロチオピラニルエーテル、4メトキシテトラヒドロチオピラニルエーテルSSジオキシド、1フェニル4メトキシピペリジン4イルエーテル、14メトキシピペリジン4イルエーテル、14ジオキサン2イルエーテル、テトラヒドロフラニルエーテル、テトラヒドロチオフラニルエーテル置換エチルエーテル、例えば、1エトキシエチルエーテル、1エチルエーテル、12エトキシエチルエーテル、1メチル1メトキシエチルエーテル、1メチル1ベンジルオキシエチルエーテル、1メチル1ベンジルオキシ2フルオロエチルエーテル、1メチル1フェノキシエチルエーテル、2トリメチルシリルエーテル、tブチルエーテル、アリルエーテル、プロパルギルエーテル、pクロロフェニルエーテル、pメトキシフェニルエーテル、ベンジルエーテル、pメトキシベンジルエーテル、34ジメトキシベンジルエーテル、トリメチルシリルエーテル、トリエチルシリルエーテル、トリプロピルシリルエーテル、ジメチルイソプロピルシリルエーテル、ジエチルイソプロピルシリルエーテル、ジメチルヘキシルシリルエーテル、tブチルジメチルシリルエーテル、ジフェニルメチルシリルエーテル、ベンゾイルギ酸エステル、酢酸エステル、クロロ酢酸エステル、ジクロロ酢酸エステル、トリクロロ酢酸エステル、トリフルオロ酢酸エステル、メトキシ酢酸エステル、トリフェニルメトキシ酢酸エステル、フェニル酢酸エステル、安息香酸エステル、炭酸アルキルメチル、炭酸アルキル9フルオレニルメチル、炭酸アルキルエチル、炭酸アルキル222トリクロロエチル、炭酸11ジメチル222トリクロロエチル、アルキルスルホネート、メタンスルホネート、ベンジルスルホネート、トシレート、メチレンアセタール、エチリデンアセタール、およびtブチルメチリデンケタールが含まれるが、これに限定されない。好ましい保護基は、式Ra、Si、CRa、CORa、CNH、S2Ra、S2OH、P2、およびPORaによって表され、式中、Raは、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、C2~C20アルキニル、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、C2~C20アルキニレン、C6~C10アリール、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、C2~C20アルキニレン、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、またはC2~C20アルキニレンであり、前記のアルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、アリール、カルボサイクル、および複素環ラジカルは単独でも別の基の一部でも、置換されてもい。ネイティブなグリコシル化パターンの変化とは、ネイティブ配列の191P4D12において見出される1つまたはそれ以上の糖質部分を欠失させること、ならびにあるいは、そのネイティブ配列の191P4D12中には存在しない1つまたはそれ以上のグリコシル化部位を付加することを意味することが本明細書における目的のために意図される。さらに、前記の句は、ネイティブタンパク質のグリコシル化の質的変化を、存在する種々の糖質部分の性質および比率の変化を含めて含む。アナログという用語は、別の分子と構造的に類似する、または類似もしくは対応する属性を共有する、分子を指す。例えば、191P4D12タンパク質のアナログは、191P4D12に特異的に結合する抗体もしくはT細胞に特異的に結合することができる。抗体という用語は、特別の明確な定めがない限りは、その最も広い意味で使用される。従って、抗体は天然のものでもよく、従来のハイブリドーマ技術によって生成されたモノクローナル抗体など人工生成されてもよい。191P4D12抗体は、モノクローナル抗体およびポリクローナル抗体、ならびにこれらの抗体の抗原結合ドメインおよびまたは1つまたはそれ以上の相補性決定領域を含むフラグメントを含む。本明細書において使用される抗体という用語は、191P4D12に特異的に結合し、かつまたは望ましい生物学的活性を示す、任意の形態の抗体もしくはそのフラグメントを指す。抗体という用語は、具体的には、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体、および抗体フラグメントを、それらが191P4D12に特異的に結合し、かつまたは望ましい生物学的活性を示す限り含む。本明細書において提供される方法および組成物において、任意の特異的抗体を使用することができる。従って、一態様において、抗体という用語は、組み合わされると標的抗原の特異的結合部位を形成する、軽鎖免疫グロブリン分子由来の少なくとも1つの可変領域と、重鎖分子由来の少なくとも1つの可変領域とを含む分子を含む。一態様において、抗体は、IgG抗体である。例えば、抗体は、IgG1抗体、IgG2抗体、IgG3抗体、またはIgG4抗体である。本方法および組成物において有用な抗体は、細胞培養物、ファージ、またはウシ、ウサギ、ヤギ、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ヒツジ、イヌ、ネコ、サル、チンパンジー、および類人猿が含まれるが、これに限定されない種々の動物において作製することができる。従って、一態様において、本発明の抗体は、哺乳動物抗体である。ファージ技術を用いて、最初の抗体を単離するすることができ、または特異性特徴が変化したもしくはアビディティ特徴が変化した変異体を生成することができる。このような技術は日常的であり、当技術分野で周知である。一態様において、抗体は、当技術分野で公知である組換え手段によって生成される。例えば、組換え抗体は、宿主細胞を、その抗体をコードするDNA配列を含むベクターでトランスフェクトすることによって生成することができる。少なくとも1つのVL領域および1つのVH領域を発現するDNA配列を宿主細胞においてトランスフェクトするために、1つまたはそれ以上のベクターを使用することができる。抗体作製および抗体生成するための組換え手段の例示的記載には、DelvesANTIBODYPRODUCTIONESSENTIALTECHNIQUES;ShephardetalMONOCLONALANTIBODIES;GodingMONOCLONALANTIBODIESPRINCIPLESANDPRACTICE;CURRENTPROTOCOLSINIMMUNOLOGYが含まれる。本発明の抗体は、望ましい機能の媒介における抗体の効力を高めるように組換え手段によって改変することができる。従って、組換え手段を使用して置換によって抗体を改変できることは本発明の範囲内にある。典型的には、置換は保存的置換である。例えば、抗体の定常領域中の少なくとも1つのアミノ酸を、異なる残基で置換することができる。例えば、米国特許第5624821号、米国特許第6194551号、出願番号WO9958572;およびAngaletalMolImmunol3010508を参照のこと。アミノ酸における改変には、アミノ酸の欠失、付加、および置換が含まれる。場合によっては、このような変化は、望ましくない活性、例えば、補体依存性細胞傷害性を低減するためになされる。頻繁に、抗体は、検出可能なシグナルを提供する物質を共有結合または非共有結合のいずれかで結合することによって標識される。多種多様な標識および結合体化技術が公知であり、科学文献および特許文献の両方において広範に報告されている。これらの抗体は、正常な191P4D12または欠損型191P4D12に対する結合についてスクリーニングすることができる。例えば、AntibodyEngineeringAPracticalApproachを参照のこと。望ましい生物学的活性を有する適切な抗体は、以下のインビトロアッセイ、増殖、遊走、接着、軟寒天増殖、脈管形成、細胞間連絡、アポトーシス、輸送、シグナル伝達が含まれるが、これに限定されない、および以下のインビボアッセイ、例えば、腫瘍増殖の阻害を用いて同定することができる。本明細書において提供される抗体はまた診断用途においても有用であり得る。捕捉抗体または非中和抗体として、これらの抗体は、特定の抗原に、その抗原の受容体結合も生物学的活性も阻害することなく結合する能力について、スクリーニングすることができる。中和抗体として、抗体は、競合的結合アッセイにおいて有用であり得る。これらの抗体はまた、191P4D12またはその受容体を定量するために使用することができる。本明細書で使用する抗体の抗原結合部分または抗体フラグメントという用語は、抗原に特異的に結合する能力を保持する191P4D12抗体の1つまたは複数のフラグメントを意味する。抗体の抗原結合機能は完全長抗体のフラグメントによって働くことが示されている。抗体の抗原結合部分という用語の中に含まれる結合フラグメントの例には、Fabフラグメント、VL、VH、CLおよびCH1ドメインからなる一価フラグメントF2フラグメント、2つのFabフラグメントがジスルフィド架橋によってヒンジ領域で連結されている二価フラグメントVHおよびCH1ドメインからなるFdフラグメント抗体の1本のアームのVLおよびVHドメインからなるFvフラグメント、VHドメインからなるdAbフラグメントNature341544546ならびに単離された相補性決定領域が含まれる。さらに、Fvフラグメントの2つのドメインであるVLおよびVHは別々の遺伝子によってコードされているが、組換え法を用いると、一価分子として知られる例えば、BirdetalScience242423426およびHustonetalProcNatlAcadSciUSA8558795883を参照のことを形成するように、VL領域およびVH領域が対となった1本のタンパク質鎖として作製されるのを可能にする合成リンカーによって接続することができる。このような単鎖抗体もまた、抗体の抗原結合部分という用語の中に含まれることが意図される。これらの抗体フラグメントは、当業者に公知の従来の技法を用いて得られ、フラグメントは、インタクトな抗体と同様に有用性についてスクリーニングされる。本明細書において使用される場合、抗原の任意の形態が、191P4D12に特異的な抗体を作製するために使用することができる。従って、惹起抗原は、1つのエピトープであってもよく、複数のエピトープであってもよく、またはタンパク質全体であってもよく、これらは単独であっても、当技術分野で公知の1つまたはそれ以上の免疫原性増強薬剤と組み合わせてもよい。惹起抗原は、単離された全長タンパク質であっても、細胞表面タンパク質であってもよく、可溶性タンパク質であってもよい。抗原は、遺伝子組換え細胞において生成することができる。抗原をコードするDNAは、ゲノムDNAであっても、非ゲノムDNAであってもよく、細胞外ドメインの少なくとも一部をコードする。本明細書において使用される場合、部分という用語は、適宜、関心対象の抗原の免疫原性エピトープを構成する最小限の数のアミノ酸または核酸を指す。関心対象の細胞の形質転換のために適切な任意の遺伝子ベクターを使用することができる。遺伝子ベクターには、アデノウイルスベクター、プラスミド、および非ウイルスベクター、例えば、カチオン性脂質が含まれるが、これに限定されない。一態様において、本明細書における方法および組成物の抗体は、関心対象の191P4D12の細胞外ドメインの少なくとも一部に特異的に結合する。本明細書において提供される、抗体またはその抗原結合フラグメントは、生物活性薬剤に結合体化することができる。本明細書において使用される場合、生物活性薬剤という用語は、抗原に結合し、かつまたは細胞死滅毒素を増強するために望ましい生物学的効果を増強もしくは媒介する、任意の合成化合物または天然化合物を指す。一態様において、本発明において有用な結合フラグメントは、生物学的に活性なフラグメントである。本明細書において使用される場合、生物学的に活性なという用語は、望ましい抗原性エピトープに結合可能であり、かつ生物学的効果を直接的もしくは間接的に発揮可能である、抗体もしくは抗体フラグメントを指す。直接的効果には、増殖シグナルの調節、刺激、およびもしくは阻害;抗アポトーシスシグナルの調節、刺激、およびもしくは阻害;アポトーシスシグナルもしくは壊死シグナルの調節、刺激、およびもしくは阻害;ADCCカスケードの調節、刺激、およびもしくは阻害;ならびにCDCカスケードの調節、刺激、およびもしくは阻害が含まれるが、これに限定されない。二重特異性抗体もまた本方法および組成物において有用である。本明細書において使用される場合、二重特異性抗体という用語は、少なくとも2つの異なる抗原性エピトープに対する結合特異性を有する抗体、典型的には、モノクローナル抗体を指す。一態様において、エピトープは同じ抗原に由来する。別の態様において、エピトープは、2つの異なる抗原に由来する。二重特異性抗体を生成する方法は当技術分野で公知である。例えば、二重特異性抗体は、2つの免疫グロブリン重鎖軽鎖対の同時発現を使用して組換え生成することができる。例えば、MilsteinetalNature30553739を参照のこと。または、二重特異性抗体は、化学的結合を使用して調製することができる。例えば、BrennanetalScience22981を参照のこと。二重特異性抗体は、二重特異性抗体フラグメントを含む。例えば、HollingeretalProcNatlAcadSciUSA90644448GruberetalJImmunol1525368を参照のこと。本明細書に記載のモノクローナル抗体は、具体的には、重鎖およびまたは軽鎖の一部が、特定の種に由来する抗体または特定の抗体クラスもしくは抗体サブクラスに属する抗体中の対応配列と同一または相同であるが、その鎖の残りが、別の種に由来する抗体または別の抗体クラスもしくは抗体サブクラスに属する抗体中の対応配列と同一または相同であるキメラ抗体、ならびにこのような抗体のフラグメントを、それらが標的抗原に特異的に結合し、かつまたは望ましい生物学的活性を示す限り含む。。化学療法剤という用語は、腫瘍増殖の阻害において有効な全ての化合物を指す。化学療法剤の非限定的例には、アルキル化剤、例えば、ナイトロジェンマスタード、エチレンイミン化合物、およびアルキルスルホネート、代謝拮抗物質、例えば、葉酸、プリンアンタゴニストもしくはピリミジンアンタゴニスト;有糸分裂インヒビター、例えば、ビンカアルカロイド、アウリスタチン、およびポドフィロトキシン誘導体等の抗チューブリン剤、細胞傷害性抗生物質、DNA発現または複製を損なうかまたは阻害する化合物、例えば、DNA副溝結合剤、ならびに増殖因子受容体アンタゴニストが含まれる。さらに、化学療法剤には、細胞傷害剤、抗体、生物学的分子および低分子が含まれる。化合物という用語は、化合物それ自体を指し、かつ化合物それ自体を含み、ならびに明記されても明記されなくても、かつ文脈によって以下のものが排除されると明らかにされていない限り、以下のものを指し、かつ以下のものを含む多形型を含む、化合物の非結晶型および結晶型。これらの型は混合物の一部でもよく、分離されていてもよい典型的には本明細書において提供される構造で示される型である、化合物の遊離酸型および遊離塩基型光学異性体および互変異性体を指す、化合物の異性体。光学異性体には鏡像異性体およびジアステレオマー、キラル異性体および非キラル異性体が含まれる。光学異性体には、単離された光学異性体、ならびにラセミ混合物および非ラセミ混合物を含む光学異性体の混合物が含まれる異性体は分離された型でもよく、1つまたは複数の他の異性体との混合物に含まれてもよいジュウテリウムを含有する化合物およびトリチウムを含有する化合物を含む、ならびに治療および診断に有効な放射性同位体を含む放射性同位体を含有する化合物を含む、化合物の同位体二量体、三量体などを含む、化合物の多量体型酸添加塩および塩基添加塩を含む、化合物の塩、好ましくは、薬学的に許容される塩。有機対イオンおよび無機対イオンを有する塩を含む、化合物の塩、好ましくは、薬学的に許容される塩。双性イオン型を含む、化合物の塩、好ましくは、薬学的に許容される塩。この場合、化合物が2種類以上の対イオンと結合するのであれば、2種類以上の対イオンは同じでもよく異なってもよいならびにヘミソルベート、モノソルベート、ジソルベートなどを含む、化合物の溶媒和化合物。溶媒和化合物には、有機溶媒和化合物および無機溶媒和化合物が含まれ、前記の無機溶媒和化合物には水和物が含まれる化合物が2種類以上の溶媒分子と結合しているであれば、2種類以上の溶媒分子は同じでもよく、異なってもよい。場合によっては、本明細書において本発明の化合物についてなされる言及は、前記の型、例えば、塩およびまたは溶媒和化合物の1つについての明示的な言及を含む。しかしながら、この言及は強調にすぎず、前記で特定されたような前記の他の型を除外すると解釈してはならない。本明細書において使用される場合、保存的置換という用語は、当業者にとって公知であるアミノ酸置換を指し、一般的には、生じる分子の生物学的活性を変えることなく行うことができる。当業者であれば、一般的に、ポリペプチドの非必須領域における一アミノ酸置換は、生物学的活性を実質的には変えないことを認識するを参照のこと。このような例示的置換は、好ましくは、表IIおよび表IIIに示される置換に従ってなされる。例えば、このような変化には、イソロイシン、バリン、およびロイシンのうちのいずれかを、これらの疎水性アミノ酸のうちの他のいずれかで置換すること;グルタミン酸をアスパラギン酸で置換することおよびその逆;アスパラギンをグルタミンで置換することおよびその逆;ならびにスレオニンをセリンで置換することおよびその逆が含まれる。他の置換もまた、特定のアミノ酸の環境およびタンパク質の三次構造におけるそのアミノ酸の役割に応じて保存的であると考えられ得る。例えば、グリシンおよびアラニンは、頻繁に交換可能である。アラニンおよびバリンも同様であり得る。比較的疎水性のメチオニンは、ロイシンおよびイソロイシンと頻繁に交換可能であり、時には、バリンで交換可能である。リジンおよびアルギニンは、そのアミノ酸残基の大きな特徴が電荷であり、かつこれらの2つのアミノ酸残基の異なるpKが重要でない位置において、頻繁に交換可能である。なお他の変化が、特定の環境においては保存的であると考えられ得る;第1315頁Biochemistry2ndEDLubertStryer編;HenikoffetalPNAS1992Vol891091510919;LeietalJBiolChem1995May19;2701188211886を参照のこと。他の置換もまた許容可能であり、経験的に、または公知の保存的置換に従って決定することができる。細胞傷害剤という用語は、細胞の発現活性、細胞の機能を阻害もしくは防止し、かつまたは細胞の破壊を引き起こす物質を指す。この用語は、放射性同位体、化学療法剤、および毒素、例えば、細菌起源、真菌起源、植物起源、または動物起源の低分子毒素もしくは酵素活性毒素を、そのフラグメントおよびまたは変異体を含めて、含むことが意図される。細胞傷害剤の例には、アウリスタチン例えば、アウリスタチンE、アウリスタチンF、MMAE、およびMMAF、アウロマイシン、マイタンシノイド、リシン、リシンA鎖、コンブレスタチン、デュオカルマイシン、ドラスタチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、タキソール、シスプラチン、cc1065、エチジウムブロミド、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ジヒドロキシアントラシンジオン、アクチノマイシン、ジフテリア毒素、シュードモナス属外毒素A、PE40、アブリン、アブリンA鎖、モデクシンA鎖、αサルシン、ゲロニン、マイトジェリン、レトストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシン、キュリシン、クロチン、カリチアマイシン、サパオナリオアオフィシナリスインヒビター、および糖質コルチコイド、ならびに他の化学療法剤、ならびに放射性同位体、例えば、At211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212またはBi213、P32、およびLu177を含むLuの放射性同位体が含まれるが、これに限定されない。抗体はまた、プロドラッグをその活性形態へと変換可能である抗癌プロドラッグ活性化酵素に結合体化することができる。本明細書において使用される場合、ダイアボディという用語は、2つの抗原結合部位を含む小さい抗体フラグメントを指し、このフラグメントは、同じポリペプチド鎖中に軽鎖可変ドメインに接続している重鎖可変ドメインを含む。同じ鎖の2つのドメイン間での対合を可能にするには短すぎるリンカーを使用することによって、それらのドメインは、別の鎖の相補的ドメインと対合させられ、2つの抗原結合部位を作り出す。ダイアボディは、例えば、EP404097;WO9311161;およびHollingeretalProcNatlAcadSciUSA90644448において、より完全に記載される。191P4D12発現細胞に対する191P4D12結合剤の作用に関して枯渇させるという用語は、191P4D12発現細胞の数の減少または191P4D12発現細胞の排除を指す。遺伝子産物という用語は、ペプチドタンパク質またはmRNAを示すために本明細書において使用される。例えば、本発明の遺伝子産物は、時には、本明細書において、癌アミノ酸配列、癌タンパク質、表Iに列挙した癌のタンパク質、癌mRNA、表Iに列挙した癌のmRNAなどとも呼ばれる。一態様において、癌タンパク質は、図1の核酸によってコードされる。癌タンパク質は、フラグメント、あるいは図1の核酸によってコードされる全長タンパク質でもよい。一態様において、癌アミノ酸配列は、配列同一性または配列類似性を決定するために使用される。別の態様において、配列は、図1の核酸によってコードされるタンパク質の天然の対立遺伝子変異体である。別の態様において、配列は、本明細書中にさらに記載されるような、配列変異体である。ヘテロ結合体抗体は、本方法および組成物において有用である。本明細書において使用される場合、ヘテロ結合体抗体という用語は、共有結合した2つの抗体を指す。このような抗体は、架橋剤の使用を含む合成タンパク質化学における公知方法を使用して調製することができる。例えば、米国特許第4676980号を参照のこと。ホモログという用語は、例えば、対応する位置において同じである、または類似する化学残基の配列を有することによって、別の分子に対して相同性を示す分子を指す。一態様において、本明細書において提供される抗体は、ヒト抗体である。本明細書において使用される場合、ヒト抗体という用語は、相補性決定領域を含む、軽鎖配列および重鎖配列の本質的に全ての配列がヒト遺伝子由来である、抗体を指す。一態様において、ヒトモノクローナル抗体は、トリオーマ技術、ヒトB細胞技術を参照のこと、EBV形質転換技術を参照のことによって、またはファージディスプレイを参照のことによって調製される。特定の態様において、ヒト抗体は、トランスジェニックマウスにおいて産生される。このような部分的または完全なヒトの抗体を作るための技術は当技術分野において公知であり、このような任意の技術を使用することができる。1つの特定の好ましい態様によれば、完全ヒト抗体配列が、ヒト重鎖抗体遺伝子およびヒト軽鎖抗体遺伝子を発現するように操作されたトランスジェニックマウスにおいて作られる。ヒト抗体を産生するトランスジェニックマウスおよびその子孫を調製することに関する例示的記載は、出願番号WO0243478および米国特許第6657103号において見出される。次いで、望ましい抗体を産生するトランスジェニックマウス由来のB細胞が、その抗体の連続的産生のためのハイブリドーマ細胞株を作るために融合することができる。例えば、米国特許第5569825号;同第5625126号;同第5633425号;同第5661016号;および同第5545806号;ならびにJakobovitsAdvDrugDelRev313342;GreenetalJExpMed18848395を参照のこと。本明細書において使用される場合、ヒト化抗体という用語は、非ヒト抗体由来の配列ならびにヒト抗体由来の配列を含む、抗体の形態を指す。このような抗体は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小限の配列を含む、キメラ抗体である。一般的に、ヒト化抗体は、少なくとも1つ、典型的には2つの可変ドメインのうちの実質的に全てを含み、その超可変ループのうちの全てまたは実質的に全てが、非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、FR領域のうちの全てまたは実質的に全てが、ヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体はまた、任意で、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部、典型的には、ヒト免疫グロブリンのものを含む。例えば、Cabilly米国特許第4816567号;QueenetalProcNatlAcadSciUSA861002910033;およびAntibodyEngineeringAPracticalApproachを参照のこと。本明細書において使用される場合、阻害するまたは阻害という用語は、測定可能な量だけ低減すること、または完全に阻止することを意味する。単離されたまたは生物学的に純粋なという句は、ある物質のネイティブ状態において見出される、通常はその物質に付随する成分を実質的または本質的に含まない、物質を指す。従って、本発明による単離されたペプチドは、好ましくはそのペプチドのインサイチュ環境においてそのペプチドに通常は付随する物質を含まない。例えば、ポリヌクレオチドは、191P4D12遺伝子以外の遺伝子に対応するかもしくは相補的であるか、またはその191P4D12遺伝子産物以外のポリペプチドもしくはそのフラグメントをコードする、汚染ポリヌクレオチドから実質的に分離されている場合に単離されたと言われる。当業者であれば、単離された191P4D12ポリヌクレオチドを得るために核酸単離手順を容易に使用することができる。タンパク質は、例えば、191P4D12タンパク質に通常は付随する細胞構成物から191P4D12タンパク質を取り出すために物理的方法、機械的方法、または化学的方法が使用される場合に単離されたと言われる。当業者であれば、単離された191P4D12タンパク質を得るために、標準的な精製方法を容易に使用することができる。または、単離されたタンパク質は化学的手段によって調製することができる。適切な標識には、放射性核種、酵素、基質、補因子、インヒビター、蛍光部分、化学発光部分、磁気粒子などが含まれる。このような標識の使用を開示する特許には、米国特許第3817837号;同第3850752号;同第3939350号;同第3996345号;同第4277437号;同第4275149号;および同第4366241号が含まれる。さらに、本明細書において提供される抗体は、フルオロボディの抗原結合成分として有用であり得る。例えば、ZeytunetalNatBiotechnol21147379を参照のこと。哺乳動物という用語は、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、およびヒトを含む、哺乳動物として分類される任意の生物を指す。本発明の一態様において、哺乳動物はマウスである。本発明の別の態様において、哺乳動物はヒトである。転移癌および転移疾患という用語は、局所的リンパ節または遠位部位に広がっている癌を意味し、AUAシステムにおけるステージDの疾患およびTNMシステムにおけるステージTxNxMを含むことを意味する。モジュレーターもしくは試験化合物もしくは薬物候補という用語または文法的等価物は、本明細書において使用される場合、癌の表現型または癌配列、例えば、核酸配列もしくはタンパク質配列の発現または癌配列の効果、例えば、シグナル伝達、遺伝子発現、タンパク質相互作用などを直接的もしくは間接的に変える能力について試験しようとする任意の分子、例えば、タンパク質、オリゴペプチド、有機低分子、多糖、ポリヌクレオチドなどを指す。一局面において、モジュレーターは、本発明の癌タンパク質の効果を中和する。中和するとは、タンパク質の活性が、細胞に対する結果として生じる効果とともに阻害もしくはブロックされることを意味する。別の局面において、モジュレーターは、本発明の遺伝子およびその対応するタンパク質の効果を、そのタンパク質のレベルを規準化することによって中和する。好ましい態様において、モジュレーターは、発現プロファイル、本明細書において提供される核酸またはタンパク質の発現プロファイル、または下流エフェクター経路を変える。一態様において、モジュレーターは、癌の表現型を、例えば、正常な組織フィンガープリントへと抑制する。別の態様において、モジュレーターは、癌の表現型を誘導した。一般的に、複数のアッセイ混合物が、種々の薬剤濃度を用いて並行して実施されて、その種々の濃度に対する応答の差が得られる。典型的には、これらの濃度のうちの1つは、ネガティブコントロール、すなわち、ゼロ濃度または検出レベル未満として役立つ。モジュレーター、薬物候補、または試験化合物は、多数の化学物質のクラスを含むが、典型的には、これらは、有機分子、好ましくは、100ダルトン超および約2500ダルトン未満の分子量を有する有機低分子化合物である。好ましい低分子は、2000D未満または1500D未満または1000D未満または500D未満である。候補薬剤は、タンパク質との構造的相互作用、特に、水素結合のために必要な官能基を含み、典型的には、少なくともアミン基、カルボニル基、ヒドロキシル基、またはカルボキシル基を含み、好ましくは、これらの官能化学基のうちの少なくとも2つを含む。この候補因子は、しばしば、前記の官能基のうちの1つまたはそれ以上で置換された環状炭素構造もしくは複素環式構造、およびまたは芳香環構造もしくは多芳香環構造を含む。モジュレーターはまた、生体分子、例えば、ペプチド、糖、脂肪酸、ステロイド、プリン、ピリミジン、それらの誘導体、それらの構造アナログ、もしくはそれらの組み合わせを含む。特に好ましいのは、ペプチドである。ある種類のモジュレーターは、ペプチドであり、例えば、約5アミノ酸~約35アミノ酸であり、約5アミノ酸~約20アミノ酸が好ましく、約7アミノ酸~約15アミノ酸が特に好ましい。好ましくは、癌調節タンパク質は可溶性であり、非膜貫通領域を含み、かつまたは溶解性を補助するためのN末端Cysを有する。一態様において、フラグメントのC末端は遊離酸として維持され、そのN末端は、カップリング、すなわち、システインに対するカップリングを補助するための遊離アミンである。一態様において、本発明の癌タンパク質は、本明細書において考察されるような免疫原性薬剤に結合体化される。一態様において、癌タンパク質はBSAに結合体化される。例えば、好ましい長さの本発明のペプチドは、それよりも長いペプチドタンパク質を作り出すために互いに、または他のアミノ酸に連結することができる。調節ペプチドは、前記で概説されるような天然のタンパク質の消化物、ランダムペプチド、または偏りのあるランダムペプチドでもよい。好ましい態様において、ペプチドタンパク質ベースのモジュレーターは、本明細書において定義されるような抗体およびそのフラグメントである。モノクローナル抗体という用語は、本明細書において使用される場合、実質的に均一な抗体の集団から得られた抗体、すなわち、その集団を含む個々の抗体は、微量で存在し得る、起こり得る天然の変異以外は同じである、を指す。モノクローナル抗体は非常に特異的であり、1つの抗原性エピトープに対する。対照的に、従来の抗体調製物は、典型的には、異なるエピトープに対する複数の抗体を含む。一態様において、ポリクローナル抗体は、複数の抗原性エピトープを含む1つの抗原との異なるエピトープ特異性、親和性、またはアビディティを有する、複数のモノクローナル抗体を含む。修飾語モノクローナルとは、実質的に均一な抗体集団から得られている抗体の特徴を示し、これは、特定の何らかの方法により抗体を産生することを必要とすると解釈すべきではない。例えば、本発明に従って使用されるべきモノクローナル抗体は、KohleretalNature256495によって最初に記載されたハイブリドーマ方法によって作られてもよく、組換えDNA方法によって作られてもよい。モノクローナル抗体はまた、例えば、ClacksonetalNature352624628およびMarksetalJMolBiol222581597に記載された技術を使用して、ファージ抗体ライブラリーから単離することができる。これらのモノクローナル抗体は、通常はELISAによって決定される、通常は少なくとも約1μM、より通常は少なくとも約300nM、典型的には少なくとも約30nM、好ましくは少なくとも約10nM、より好ましくは少なくとも約3nM以上のKdで結合する。薬学的賦形剤とは、アジュバント、担体、pH調整剤、および緩衝剤、張性調整剤、湿潤剤、防腐剤などの物質を含む。薬学的に許容可能なとは、ヒトまたは他の哺乳動物と生理学的に適合性である、非毒性およびまたは不活性の組成を指す。ポリヌクレオチドという用語は、長さが少なくとも10塩基もしくは10塩基対のヌクレオチド、リボヌクレオチドもしくはデオキシリボヌクレオチドのいずれか、またはいずれかの型のヌクレオチドの改変形態のポリマー形態を意味し、これは、一本鎖形態および二本鎖形態のDNAおよびまたはRNAを含む。当技術分野において、この用語は、しばしば、オリゴヌクレオチドと同義に用いられる。ポリヌクレオチドは、本明細書において開示される配列を含んでもよく、例えば、図1に示したように、チミジンはまたウラシルでもよい、この定義は、DNAとRNAとの間の化学構造の差、特に、RNAにおける4種の主要な塩基のうちの1つがチミジンの代わりにウラシルであるという観察に関係がある。ポリペプチドという用語は、少なくとも約4アミノ酸、少なくとも約5アミノ酸、少なくとも約6アミノ酸、少なくとも約7アミノ酸、または少なくとも約8アミノ酸のポリマーを意味する。本明細書全体を通して、アミノ酸に関する標準的な3文字または1文字の名称が、使用される。当技術分野において、この用語は、しばしば、ペプチドまたはタンパク質と同義である。組換えDNA分子またはRNA分子は、インビトロでの分子操作に供された、DNA分子またはRNA分子である。本明細書において使用される場合、単鎖FvまたはscFvまたは単鎖抗体という用語は、抗体のVHドメインおよびVLドメインを含む抗体フラグメントを指し、これらのドメインは、一本のポリペプチド鎖中に存在する。一般的に、Fvポリペプチドは、VHドメインとVLドメインとの間に、sFvが抗原結合のための望ましい構造を形成するのを可能にするポリペプチドリンカーをさらに含む。sFvの概説については、PluckthunThePharmacologyOfMonoclonalAntibodiesvol113RosenburgおよびMoore編、SpringerVerlagNewYorkpp269315を参照のこと。本明細書において使用される場合、特異的な、特異的に結合する、および特異的に結合するという用語は、標的抗原エピトープに対する抗体の選択的結合を指す。抗体は、所定の条件の組の下で、適切な抗原に対する結合を、無関係の抗原または抗原混合物に対する結合と比較することによって、結合特異性について試験することができる。抗体は、その適切な抗原に対して、無関係の抗原もしくは抗原混合物よりも少なくとも2倍、少なくとも5倍、少なくとも7倍、好ましくは少なくとも10倍結合する場合に、その抗体は特異的であると考えられる。一態様において、特異的抗体は、191P4D12抗原にのみ結合するが無関係の抗原には結合しない抗体である。別の態様において、特異的抗体は、ヒト191P4D12抗原に結合するが、191P4D12抗原と70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99またはそれ以上のアミノ酸相同性を有する非ヒト191P4D12抗原とは結合しない、抗体である。別の態様において、特異的抗体は、ヒト191P4D12抗原に結合し、かつマウス191P4D12抗原に結合するが、ヒト抗原に対する結合の程度の方が高い、抗体である。別の態様において、特異的抗体は、ヒト191P4D12抗原に結合しかつ霊長類191P4D12抗原に結合するが、ヒト抗原に対する結合の程度の方が高い、抗体である。別の態様において、特異的抗体は、ヒト191P4D12抗原および任意の非ヒト191P4D12抗原に結合するが、ヒト抗原またはその任意の組み合わせに対する結合の程度の方が高い。本明細書において使用される場合、処置するためまたは治療的および文法的に関連する用語は、疾患の任意の結果についての任意の改善、例えば、生存の延長、罹患率の低下、およびまたは代替的治療様式の副産物である副作用の減弱を指す。当技術分野において容易に認識されるように、疾患の完全な根絶は、処置行為のための必要要件ではないにも関わらず、好ましい。変異体という用語は、記載された型または基準からの変化を示す分子、例えば、具体的に記載されるタンパク質の対応する位置において1つまたはそれ以上の異なるアミノ酸残基を有するタンパク質を指す。アナログは、変異体タンパク質の一例である。スプライスアイソフォームおよび一塩基多型が、変異体のさらなる例である。本発明の191P4D12タンパク質およびまたは191P4D12関連タンパク質は、本明細書において具体的に同定されるもの、ならびに本明細書において概説される方法もしくは当技術分野で容易に利用可能な方法に従って過度な実験を行わずに単離作製および特徴付けすることができる、対立遺伝子変異体、保存的置換変異体、アナログ、およびホモログを含む。異なる191P4D12タンパク質の部分またはそのフラグメントを合わせた融合タンパク質、ならびに191P4D12タンパク質と異種ポリペプチドとの融合タンパク質もまた包含される。このような191P4D12タンパク質は、総称して、191P4D12関連タンパク質、本発明のタンパク質、または191P4D12と呼ばれる。191P4D12関連タンパク質という用語は、4アミノ酸、5アミノ酸、6アミノ酸、7アミノ酸、8アミノ酸、9アミノ酸、10アミノ酸、11アミノ酸、12アミノ酸、13アミノ酸、14アミノ酸、15アミノ酸、16アミノ酸、17アミノ酸、18アミノ酸、19アミノ酸、20アミノ酸、21アミノ酸、22アミノ酸、23アミノ酸、24アミノ酸、25アミノ酸、もしくは25アミノ酸よりも多くの191P4D12タンパク質配列のポリペプチドフラグメント;あるいは少なくとも30アミノ酸、少なくとも35アミノ酸、少なくとも40アミノ酸、少なくとも45アミノ酸、少なくとも50アミノ酸、少なくとも55アミノ酸、少なくとも60アミノ酸、少なくとも65アミノ酸、少なくとも70アミノ酸、少なくとも80アミノ酸、少なくとも85アミノ酸、少なくとも90アミノ酸、少なくとも95アミノ酸、少なくとも100アミノ酸、少なくとも105アミノ酸、少なくとも110アミノ酸、少なくとも115アミノ酸、少なくとも120アミノ酸、少なくとも125アミノ酸、少なくとも130アミノ酸、少なくとも135アミノ酸、少なくとも140アミノ酸、少なくとも145アミノ酸、少なくとも150アミノ酸、少なくとも155アミノ酸、少なくとも160アミノ酸、少なくとも165アミノ酸、少なくとも170アミノ酸、少なくとも175アミノ酸、少なくとも180アミノ酸、少なくとも185アミノ酸、少なくとも190アミノ酸、少なくとも195アミノ酸、少なくとも200アミノ酸、少なくとも225アミノ酸、少なくとも250アミノ酸、少なくとも275アミノ酸、少なくとも300アミノ酸、少なくとも325アミノ酸、少なくとも330アミノ酸、少なくとも335アミノ酸、少なくとも339アミノ酸またはそれ以上の191P4D12タンパク質配列のポリペプチドフラグメントを指す。II191P4D12抗体本発明の別の局面は、191P4D12関連タンパク質に結合する抗体を提供する。1つの態様において、191P4D12関連タンパク質に結合する抗体は、SEQIDNO2のアミノ酸配列を含む191P4D12タンパク質に特異的に結合する抗体である。SEQIDNO2のアミノ酸配列を含む191P4D12タンパク質に特異的に結合する抗体には、他の191P4D12関連タンパク質に結合することができる抗体が含まれる。例えば、SEQIDNO2のアミノ酸配列を含む191P4D12タンパク質に結合する抗体は、191P4D12変種およびそのホモログまたは類似体などの191P4D12関連タンパク質に結合することができる。本発明の191P4D12抗体は、特に、癌の予後判定アッセイ、画像化および治療方法論において有用である。同様に、このような抗体は、結腸癌および他の癌の処置およびまたは予後判定において、191P4D12がこれらの他の癌においても発現または過剰発現している程度まで有用である。さらに、細胞内で発現される抗体は、191P4D12の発現が関係する癌、例えば、進行したもしくは転移性の結腸癌または他の進行癌もしくは転移癌を処置することにおいて治療上有用である。抗体、特にモノクローナル抗体、を調製するための種々の方法が当技術分野で周知である。例えば、抗体は、単離されたまたは免疫結合体の形をした191P4D12関連タンパク質、ペプチド、またはフラグメントを使用して、適切な哺乳動物宿主を免疫することによって調製することができる;HarlowAntibodiesColdSpringHarborPressNY。さらに、191P4D12GST融合タンパク質などの191P4D12融合タンパク質も使用することができる。特定の態様において、図1のアミノ酸配列の全てまたは大部分を含むGST融合タンパク質が作製され、次いで、適切な抗体を生成するために、免疫原として使用される。別の態様において、191P4D12関連タンパク質が合成され、免疫原として使用される。さらに、当技術分野で公知の裸のDNAでの免疫技術が、コードされる免疫原に対する免疫応答を発生させるために、使用される。図1に示した191P4D12タンパク質のアミノ酸配列は、抗体を作製するための191P4D12タンパク質の特定の領域を選択するために分析することができる。例えば、191P4D12アミノ酸配列の疎水性および親水性分析は、191P4D12構造における親水性領域を同定するために使用される。免疫原性構造を示す191P4D12タンパク質の領域、ならびに他の領域およびドメインは、当技術分野で公知の種々の他の方法、例えば、ChouFasman分析、GarnierRobson分析、KyteDoolittle分析、Eisenberg分析、KarplusSchultz分析またはJamesonWolf分析を使用して容易に同定することができる。親水性プロファイルは、HoppTPandWoodsKR1981ProcNatlAcadSciUSA7838243828の方法を使用して作製することができる。ハイドロパシープロファイルは、KyteJandDoolittleRF1982JMolBiol157105132の方法を使用して作製することができる。パーセント接近可能残基プロファイルは、JaninJ1979Nature277491492の方法を用いて作製することができる。平均可撓性プロファイルは、BhaskaranRPonnuswamyPK1988IntJPeptProteinRes32242255の方法を使用して作製することができる。βターンプロファイルは、DeleageGRouxB1987ProteinEngineering1289294の方法を使用して作製することができる。従って、これらのプログラムまたは方法のいずれかによって同定される各領域は本発明の範囲内である。191P4D12抗体の作製のための好ましい方法は、本明細書で提供される実施例によってさらに例示される。免疫原として使用するためのタンパク質またはポリペプチドを調製する方法は、当技術分野で周知である。タンパク質と、担体、例えば、BSA、KLHまたは他の担体タンパク質との免疫原性結合体を調製する方法もまた、当技術分野で周知である。ある状況では、例えば、カルボジイミド試薬を用いた直接結合が使用される。他の場合において、連結試薬、例えば、PierceChemicalCoRockfordILによって供給されるものが有効である。191P4D12免疫原の投与は、当技術分野で理解されるように、しばしば、適切なアジュバントの使用とともに、適切な期間にわたる注射によって行われる。免疫化スケジュールの間に、抗体形成の妥当性を確かめるために、抗体力価を調べることができる。191P4D12モノクローナル抗体は、当技術分野で周知の種々の手段によって生成することができる。例えば、望ましいモノクローナル抗体を分泌する不死化細胞株は、一般に知られるように、KohlerおよびMilsteinの標準的ハイブリドーマ技術または抗体産生B細胞を不死化する改変法を使用して調製される。望ましい抗体を分泌する不死化細胞株は、抗原が191P4D12関連タンパク質であるイムノアッセイによってスクリーニングされる。適切な不死化細胞培養物が同定された場合、その細胞を増殖させ、インビトロ培養物または腹水のいずれかから抗体を生成することができる。本発明の抗体またはフラグメントはまた、組換え手段によって生成することができる。キメラ領域または相補性決定領域が接ぎ合わされた複数種由来の抗体の状況において、191P4D12タンパク質の望ましい領域に特異的に結合する領域も生成することができる。ヒト化またはヒトの191P4D12抗体も生成することができ、治療状況における使用に好ましい。非ヒト抗体CDRの1つまたは複数を対応するヒト抗体配列で置換することによって、マウスおよび他の非ヒト抗体をヒト化する方法は周知である。Carteretal1993ProcNatlAcadSciUSA894285およびSimsetal1993JImmunol1512296もまた参照のこと。好ましい態様において、本発明の抗体は、完全ヒト191P4D12抗体を含む。当技術分野における種々の方法は、完全ヒト191P4D12MAbを生成する手段を提供する。例えば、好ましい態様は、Xenomouseと呼ばれる、抗体産生が不活性化され、ヒト重鎖遺伝子座および軽鎖遺伝子座を用いて操作されたトランスジェニックマウスを使用した技法を提供する。ヒト抗体を産生するトランスジェニックマウスを作る例示的記載は、米国特許第6657103号に見られる。米国特許第5569825号同第5625126号同第5633425号同第5661016号および同第5545806号ならびにMendezetalNatureGenetics15146156KellermanSAGreenLLCurrOpinBiotechnol13593597も参照されたい。さらに、本発明のヒト抗体は、再編成されいないヒト重鎖ならびにκ軽鎖免疫グロブリン配列と、内因性μ鎖およびκ鎖遺伝子座を不活性化する標的化変異をコードするヒト免疫グロブリン遺伝子ミニ遺伝子座を含有するHuMAbマウスを使用して作製することができるNature368856859を参照のこと。別の態様において、本発明の完全ヒト抗体は、トランスジーンおよびトランスクロモソーム上にヒト免疫グロブリン配列を有するマウス、例えば、ヒト重鎖トランスジーンおよびヒト軽鎖トランスクロモソームを有するマウスを用いて産生することができる。このようなマウスは本明細書においてKMマウスと呼ばれ、TomizukaetalProcNatlAcadSciUSA97722727およびTomizukaらへのPCT公報WO0243478に記載されている。本発明のヒトモノクローナル抗体はまた、ヒト免疫グロブリン遺伝子のライブラリーをスクリーニングするためにファージディスプレイ法を使用して調製することができる。ヒト抗体単離用の、このようなファージディスプレイ法は、当技術分野において確立されている。例えば、Ladneretalへの米国特許第5223409号同第5403484号および同第5571698号Doweretalへの米国特許第5427908号および同第5580717号McCaffertyetalへの米国特許第5969108号および同第6172197号ならびにGriffithsetalへの米国特許第5885793号同第6521404号同第6544731号同第6555313号同第6582915号および同第6593081号を参照のこと。本発明のヒトモノクローナル抗体はまた、免疫化の際にヒト抗体応答が発生するように、ヒト免疫細胞が再構成されているSCIDマウスを使用して作ることもできる。このようなマウスは、例えば、Wilsonetalへの米国特許第5476996号および5698767号に記載されている。好ましい態様において、本発明の191P4D12MAbは、AmericanTypeCultureCollectionアクセッション番号PTA11267で寄託されたハイブリドーマによって産生され、Ha22261と命名された抗体の重鎖可変領域および軽鎖可変領域、またはHa22261の重鎖可変領域および軽鎖可変領域のアミノ酸配列と相同のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含み、ここで、抗体は、本発明の191P4D12MAbの所望の機能特性を保持している。Ha22261の重鎖可変領域は、SEQIDNO7の20番目のE残基から136番目のS残基のアミノ酸配列からなり、Ha22261の軽鎖可変領域は、SEQIDNO8の23番目のD残基から130番目のR残基のアミノ酸配列からなる。本発明の抗体の定常領域として、任意の定常領域サブクラスを選択することができる。一態様において、重鎖定常領域としてヒトIgG1定常領域、軽鎖定常領域としてヒトIgκ定常領域を使用することができる。例えば、本発明は、単離されたモノクローナル抗体、または重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む、その抗原結合部分を提供する:重鎖可変領域は、図3に示した重鎖可変領域アミノ酸配列と少なくとも80相同のアミノ酸配列を含み、かつ軽鎖可変領域は、図3に示した軽鎖可変領域アミノ酸配列と少なくとも80相同のアミノ酸配列を含む。他の態様において、VHおよびまたはVLアミノ酸配列は、図3に示したVHおよびVL配列と85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98または99相同でもよい。別の態様において、本発明は、単離されたモノクローナル抗体、またはヒト化重鎖可変領域およびヒト化軽鎖可変領域を含む、その抗原結合部分を提供する、ここで、重鎖可変領域は、図3に示した重鎖可変領域CDRのアミノ酸配列を有する相補性決定領域を含み、軽鎖可変領域は、図3に示した軽鎖可変領域CDRのアミノ酸配列を有するCDRを含む。本発明の操作された抗体には、VHおよびまたはVLの中のフレームワーク残基が改変されているものが含まれる。典型的に、このようなフレームワークの改変は、抗体の免疫原性を下げるためになされる。例えば、1つのアプローチは、1つまたは複数のフレームワーク残基を、対応する生殖系列配列に復帰突然変異させることである。より具体的には、体細胞変異を経ている抗体は、抗体の元となった生殖系列配列とは異なるフレームワーク残基を含有することがある。このような残基は、抗体フレームワーク配列を、抗体の元となった生殖系列配列と比較することによって同定することができる。フレームワーク領域配列をその生殖系列配置に戻すために、例えば、部位特異的変異誘発またはPCRを介した変異誘発によって、体細胞変異を生殖系列配列に復帰突然変異させることができる。このような復帰突然変異抗体もまた本発明に含まれると意図される。別の型のフレームワーク改変は、T細胞エピトープを取り除くために、フレームワーク領域の中の1つまたは複数の残基、または1つまたは複数のCDR領域の中の1つまたは複数の残基さえも変異させて、抗体の潜在的な免疫原性を少なくすることを伴う。このアプローチは、脱免疫化とも呼ばれ、Carretalによる米国特許公開公報第20030153043号にさらに詳しく説明される。フレームワークまたはCDR領域の中になされる改変に加えて、またはその代わりとして、本発明の抗体は、典型的には、抗体の1つまたは複数の機能特性、例えば、血清半減期、補体結合、Fc受容体結合、およびまたは抗原依存性細胞傷害性を変えるために、Fc領域内の改変を含むように操作されてもよい。さらに、本発明の191P4D12MAbは化学的に改変されてもよく、グリコシル化を変えるように改変されてもよく、また、MAbの1つまたは複数の機能特性を変えるように改変されてもよい。これらの態様はそれぞれ以下でさらに詳しく説明される。一態様において、ヒンジ領域内のシステイン残基の数が変化、例えば、増加または減少するように、CH1のヒンジ領域が改変される。このアプローチは、Bodmeretalへの米国特許第5677425号にさらに説明されている。CH1のヒンジ領域内のシステイン残基の数は、例えば、軽鎖および重鎖の組み立てを容易にするために、または191P4D12MAbの安定性を上げる、もしくは下げるために変えられる。別の態様において、抗体のFcヒンジ領域は、191P4D12MAbの生物学的半減期を短くするように変異される。より具体的には、抗体のスタフィロコッカスプロテインA結合がネイティブなFcヒンジドメインSpA結合と比べて低下するように、1つまたは複数のアミノ酸変異が、FcヒンジフラグメントのCH2CH3ドメイン界面領域に導入される。このアプローチは、Wardetalによる米国特許第6165745号にさらに詳しく説明されている。別の態様において、生物学的半減期が長くなるように、191P4D12MAbが改変される。様々なアプローチが可能である。例えば、Wardへの米国特許第6277375号に記載のように変異を導入することができる。または、生物学的半減期を長くするために、Prestaetalによる米国特許第5869046号および同第6121022号に記載のように、IgGのFc領域のCH2ドメインの2つのループから取られたサルベージ受容体結合エピトープを含有するように、抗体のCH1領域内またはCL領域内を変えることができる。さらに他の態様では、Fc領域は、191P4D12MAbのエフェクター機能を変えるために、少なくとも1つのアミノ酸残基を異なるアミノ酸残基で置換することによって変えられる。例えば、エフェクターリガンドに対する抗体の親和性が変化しているが、親抗体の抗原結合能を保持しているように、アミノ酸特異的残基より選択される1つまたは複数のアミノ酸を、異なるアミノ酸残基で置換することができる。親和性が変えられるエフェクターリガンドは、例えば、Fc受容体または補体のC1成分でもよい。このアプローチは、Winteretalによる米国特許第5624821号および同第5648260号にさらに詳しく説明されている。191P4D12抗体と191P4D12関連タンパク質との反応性は、適宜、191P4D12関連タンパク質、191P4D12発現細胞またはその抽出物を用いて、ウエスタンブロット、免疫沈降、ELISA、およびFACS分析を含む多くの周知の手段によって確立することができる。191P4D12抗体またはそのフラグメントは、検出可能なマーカーで標識されてもよく、第2の分子に結合体化されてもよい。適切な検出可能なマーカーには、放射性同位体、蛍光化合物、生物発光化合物、化学発光化合物、金属キレート剤または酵素が含まれるが、これに限定されない。さらに、2つまたはそれ以上の191P4D12エピトープに特異的な二重特異性抗体は、当技術分野で一般に公知の方法を使用して作製される。ホモ二量体抗体もまた、当技術分野で公知の架橋技術によって作製することができる。さらに別の好ましい態様において、本発明の191P4D12MAbは、Ha22261と命名された抗体の重鎖および軽鎖を含む抗体である。Ha22261の重鎖は、SEQIDNO7の20番目のE残基から466番目のK残基のアミノ酸配列からなり、Ha22261の軽鎖は、SEQIDNO8配列の23番目のD残基から236番目のC残基のアミノ酸配列からなる。この配列を図2および図3に示した。好ましい態様において、Ha22261は細胞傷害剤と結合体化している。Ha22261と命名された抗体を産生するハイブリドーマは、2010年8月18月にAmericanTypeCultureCollectionPOBox1549ManassasVA20108に送られ、アクセッション番号PTA11267が割り当てられた。III抗体薬物結合体総論別の局面において、本発明は、抗体が、細胞傷害剤、例えば、化学療法剤、薬物、増殖阻害剤、毒素に結合体化している、あるいは放射性同位体に結合体化している、抗体薬物結合体を提供する。別の局面において、さらに、本発明は、ADCを使用する方法を提供する。1つの局面において、ADCは、細胞傷害剤または検出可能な薬剤に共有結合した本明細書記載の191P4D12MAbを含む。癌処置において、細胞傷害剤または細胞分裂阻害剤、すなわち、腫瘍細胞を死滅または阻害する薬物を局所送達するために抗体薬物結合体を用いるとAnticancerResearch19605614NiculescuDuvazandSpringerAdvDrgDelRev26151172米国特許第4975278号、薬物部分を腫瘍に標的送達し、腫瘍内で細胞内蓄積させることが可能になる。この場合、これらの非結合体化薬物を全身送達すると、正常細胞に対して容認できないレベルの毒性が生じることがあり、腫瘍細胞が排除されることも求められるLancetpp60305ThorpeAntibodyCarriersOfCytotoxicAgentsInCancerTherapyAReviewinMonoclonalAntibodies84BiologicalAndClinicalApplicationsAPincheraetalpp475506。それにより、最小の毒性で最大の効力が求められる。これらの戦略において、ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体がどちらも有用であると報告されているCancerImmunolImmunother2118387。これらの方法において用いられる薬物には、ダウノマイシン、ドキソルビシン、メトトレキセート、およびビンデシン前記が含まれる。抗体毒素結合体において用いられる毒素には、細菌毒素、例えば、ジフテリア毒素、植物毒素、例えば、リシン、低分子毒素、例えば、ゲルダナマイシンJouroftheNatCancerInst9215731581MandleretalBioorganicMedChemLetters1010251028MandleretalBioconjugateChem13786791、マイタンシノイドProcNatlAcadSciUSA9386188623、およびカリチアマイシンCancerRes582928HinmanetalCancerRes5333363342が含まれる。これらの毒素は、チューブリン結合、DNA結合、またはトポイソメラーゼ阻害を含む機構によって細胞傷害作用および細胞分裂阻害作用を発揮することができる。一部の細胞傷害薬物は、大きな抗体またはタンパク質受容体リガンドと結合体化した時に不活性になる、または活性が低くなる傾向がある。抗体薬物結合体の例は、正常Bリンパ球および悪性Bリンパ球の表面上に見出されるCD20抗原に対するマウスIgG1κモノクローナル抗体と111Inまたは90Y放射性同位体がチオ尿素リンカーキレート剤によって結合している抗体放射性同位体結合体であるZEVALINであるEurJourNuclMed2776677WisemanetalBlood99433642WitzigetalJClinOncol20245363WitzigetalJClinOncol20326269。さらに、2000年に、huCD33抗体とカリチアマイシンが連結した抗体薬物結合体であるMYLOTARGが、注射による急性骨髄性白血病処置のために認可された25686米国特許第4970198号同第5079233号同第5585089号同第5606040号同第5693762号同第5739116号同第5767285号同第5773001号。さらに、CanAgを発現する癌、例えば、結腸癌、膵臓癌、胃癌、およびその他の癌を処置するために、huC242抗体がジスルフィドリンカーSPPを介してマイタンシノイド薬物部分、DM1に連結している抗体薬物結合体であるカンツズマブメルタンシンが第II相臨床試験に進んでいる。さらに、前立腺腫瘍の有望な処置のために、抗前立腺特異的膜抗原モノクローナル抗体とマイタンシノイド薬物部分、DM1が連結している抗体薬物結合体であるMLN2704が開発中である。最後に、ドラスタチンの合成類似体である、アウリスタチンペプチド、アウリスタチンE、およびモノメチルアウリスタチンが、キメラモノクローナル抗体cBR96およびcAC10と結合体化されNatureBiotechnology21778784、治療開発中である。さらに、ADCの作製において有用な化学療法剤が本明細書に記載されている。使用することができる、酵素活性を有する毒素およびその断片には、ジフテリアA鎖、ジフテリア毒素の非結合活性断片、エキソトキシンA鎖に由来する、リシンA鎖、アブリンA鎖、モデシンA鎖、αサルシン、シナアブラギリタンパク質、ジアンチンタンパク質、アメリカヤマゴボウタンパク質、ニガウリ阻害剤、クルシン、クロチン、サボンソウ阻害剤、ゲロニン、ミトゲリン、レストリクトシン、フェノマイシン、およびエノマイシン、ならびにトリコテセンが含まれる。例えば、1993年10月28日に公開されたWO9321232を参照されたい。放射性結合体化抗体を作製するために、様々な放射性核種を利用することができる。例には、212Bi、131I、131In、90Y、および186Reが含まれる。抗体および細胞傷害剤の結合体は、様々な二官能性タンパク質カップリング剤、例えば、Nスクシンイミジル3プロピオネート、イミノチオラン、イミドエステルの二官能性誘導体、活性エステル、アルデヒド、bisアジド化合物ヘキサンジアミン、bisジアゾニウム誘導体エチレンジアミン、ジイソシアネート、およびbis活性フッ素化合物を用いて作られる。例えば、リシン免疫毒素は、VitettaetalScience2381098に記載のように調製することができる。炭素14標識1イソチオシアナトベンジル3メチルジエチレントリアミンペンタ酢酸は、放射性ヌクレオチドを抗体に結合体化するための例示的なキレート剤である。抗体と、1つまたは複数の低分子毒素、例えば、カリチアマイシン、マイタンシノイド、ドラスタチン、アウリスタチン、トリコテセン、およびCC1065、ならびに毒素活性を有するこれらの毒素の誘導体との結合体も本明細書において意図される。IIIマイタンシノイドマイタンシノイド薬物部分として使用するのに適したマイタンシン化合物は当技術分野において周知であり、公知の方法に従って天然源から単離することができ、または遺伝子工学法を用いて作製することができるPNAS9979687973を参照されたい。または、公知の方法に従って、マイタンシノールおよびマイタンシノール類似体を合成により調製することができる。例示的なマイタンシノイド薬物部分には、修飾された芳香環を有するもの、例えば、C19デクロロP2の水素化アルミニウムリチウム還元によって調製C20ヒドロキシC19デクロロもしくは放線菌属を用いた脱メチル、またはLAHを用いた脱塩素によって調製ならびにC20デメトキシ、C20アシルオキシ、デクロロ、ならびに他の位置に修飾を有するものが含まれる。例示的なマイタンシノイド薬物部分には、修飾を有するもの、例えば、C9SHC14アルコキシメチルC14ヒドロキシメチルまたはアシルオキシメチルC15ヒドロキシアシルオキシC15メトキシから単離C18Nデメチルならびに45デオキシも含まれる。マイタンシノイドを含有するADC、これを作る方法、およびこの治療上の使用は、例えば、米国特許第5208020号同第5416064号同第6441163および欧州特許第EP0425235B1号に開示されている。これらの開示は参照により本明細書にはっきりと組み入れられる。LiuetalProcNatlAcadSciUSA9386188623は、DM1と命名されたマイタンシノイドと、ヒト結腸直腸癌に対するモノクローナル抗体C242が連結したADCについて説明した。この結合体は、結腸癌培養細胞に対して高度に細胞傷害性であることが見出され、インビボ腫瘍増殖アッセイにおいて抗腫瘍活性を示した。CharietalCancerResearch52127131は、ジスルフィドリンカーを介して、マイタンシノイドが、ヒト結腸癌細胞株上にある抗原に結合するマウス抗体A7、またはHER2neu癌遺伝子に結合する別のマウスモノクローナル抗体TA1と結合体化しているADCについて述べている。細胞1個につき3x105個のHER2表面抗原を発現するヒト乳癌細胞株SKBR3に対して、TA1マイタンソノイド結合体の細胞傷害性がインビトロで試験された。この薬物結合体は、遊離マイタンシノイド薬物とほぼ同じ程度の細胞傷害性を実現した。抗体分子1個あたりのマイタンシノイド分子の数を増やすことによって細胞傷害性を高めることができた。マウスにおけるA7マイタンシノイド結合体の全身細胞傷害性は低かった。IIIアウリスタチンおよびドラスタチン一部の態様において、ADCは、ドラスタチンまたはドラスタチンのペプチド類似体および誘導体であるアウリスタチンと結合体化した本発明の抗体を含む。ドラスタチンおよびアウリスタチンは、微小管の動態、GTP加水分解、ならびに核分裂および細胞分裂を妨害することが示されておりAntimicrobAgentsandChemother4535803584、抗癌活性および抗真菌活性AntimicrobAgentsChemother4229612965を有する。ドラスタチンまたはアウリスタチン薬物部分は、ペプチド薬物部分のN末端またはC末端を介して抗体に取り付けることができる。例示的なアウリスタチン態様には、2004年5月28日に発表されたSenteretalProceedingsoftheAmericanAssociationforCancerResearchVolume45AbstractNumber623に開示され、米国特許出願公開第20050238649号において説明された、N末端結合モノメチルアウリスタチン薬物部分DEおよびDFが含まれる。これらの開示は、その全体が参照によりはっきりと組み入れられる。例示的なアウリスタチン態様はMMAEであるとの共有結合を示す。別の例示的なアウリスタチン態様はMMAFである。式中、波線は、抗体薬物結合体のリンカーとの共有結合を示す。MMAEまたはMMAFおよび様々なリンカー成分を含むさらなる例示的な態様は、以下の構造および略語を有する。典型的には、ペプチドをベースとする薬物部分は、2個以上のアミノ酸およびまたはペプチド断片の間でペプチド結合を形成することによって調製することができる。このようなペプチド結合は、例えば、ペプチド化学分野において周知の液相合成法に従って調製することができる。アウリスタチンドラスタチン薬物部分は、US5635483US5780588PettitetalJAmChemSoc11154635465PettitetalAntiCancerDrugDesign13243277PettitGRetalSynthesis1996719725PettitetalJChemSocPerkinTrans15859863およびDoroninaNatBiotechnol21778784の方法に従って調製されてもよい。IIIカリチアマイシン他の態様において、ADCは、1個または複数のカリチアマイシン分子と結合体化した本発明の抗体を含む。カリチアマイシン系抗生物質は、pM未満の濃度で二本鎖DNAを切断することができる。カリチアマイシン系の結合体の調製については、米国特許第5712374号、同第5714586号、同第5739116号、同第5767285号、同第5770701号、同第5770710号、同第5773001号、同第5877296号を参照されたい。使用することができるカリチアマイシンの構造類似体には、γ1I、α2I、α3I、Nアセチルγ1I、PSAG、およびθI1が含まれるが、これに限定されない、LodeetalCancerResearch5829252928、およびAmericanCyanamidに対する前記の米国特許。抗体を結合体化することができる別の抗腫瘍薬物は、葉酸代謝拮抗剤であるQFAである。カリチアマイシンおよびQFAはいずれも細胞内作用部位を有し、原形質膜を容易に通過しない。従って、抗体を介した内部移行によって、これらの薬剤が細胞に取り込まれると、細胞傷害作用が大幅に高まる。III他の細胞傷害剤本発明の抗体と結合体化することができる他の抗癌剤には、BCNU、ストレプトゾイシン、ビンクリスチンおよび5フルオロウラシル、米国特許第5053394号、同第5770710号に記載のLLE33288複合体と総称される薬剤ファミリー、ならびにエスペラミシンが含まれる。使用することができる、酵素活性を有する毒素およびその断片には、ジフテリアA鎖、ジフテリア毒素の非結合活性断片、エキソトキシンA鎖、リシンA鎖、アブリンA鎖、モデシンA鎖、αサルシン、シナアブラギリタンパク質、ジアンチンタンパク質、アメリカヤマゴボウタンパク質、ニガウリ阻害剤、クルシン、クロチン、サボンソウ阻害剤、ゲロニン、ミトゲリン、レストリクトシン、フェノマイシン、およびエノマイシン、ならびにトリコテセンが含まれる。例えば、1993年10月28日に公開されたWO9321232を参照されたい。さらに、本発明は、抗体と、核酸分解活性のある化合物との間に形成されたADCを意図する。腫瘍を選択的に破壊するために、抗体は高放射性原子を含んでもよい。放射性結合体化抗体を作製するために、様々な放射性同位体を利用することができる。例には、At211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212、P32、Pb212、およびLuの放射性同位体が含まれる。結合体が検出のために用いられる場合、シンチグラフィー研究用の放射性原子、例えば、tc99mもしくはI123、または核磁気共鳴イメージング用のスピン標識、例えば、再度、ヨウ素123、ヨウ素131、インジウム111、フッ素19、炭素13、窒素15、酸素17、ガドリニウム、マンガン、または鉄を含んでもよい。放射性標識または他の標識を公知のやり方で結合体に組み込むことができる。例えば、水素の代わりに、例えば、フッ素19を含む適切なアミノ酸前駆体を用いて、ペプチドを生合成してもよく、アミノ酸化学合成によって合成してもよい。ペプチド内のシステイン残基を介して、tc99mまたはI123、Re186、Re188、およびIn111などの標識を取り付けることができる。リジン残基を介してイットリウム90を取り付けることができるIODOGEN法BiochemBiophysResCommun804957を用いて、ヨウ素123を組み込むことができる。MonoclonalAntibodiesinImmunoscintigraphyは他の方法について詳述している。IV191P4D12に結合する抗体薬物結合体化合物本発明は、特に、薬物を標的送達するための抗体薬物結合体化合物を提供する。本発明者らは、この抗体薬物結合体化合物が、191P4D12発現細胞に対して強力な細胞傷害活性およびまたは細胞分裂阻害活性を有することを発見した。この抗体薬物結合体化合物は、少なくとも1つの薬物ユニットと共有結合した抗体ユニットを含む。薬物ユニットは直接、共有結合してもよく、リンカーユニットを介して共有結合してもよい。一部の態様において、抗体薬物結合体化合物は、以下の式LPを有するか、その薬学的に許容される塩または溶媒和化合物であり、式中、Lは、抗体ユニット、例えば、本発明の191P4D12MAbであり、は、リンカーユニット薬物ユニット部分であり、式中、LUはリンカーユニットであり、Dは、標的細胞に対する細胞分裂阻害活性または細胞傷害活性を有する薬物ユニットでありpは1~20の整数である。一部の態様において、pは、1~10、1~9、1~8、1~7、1~6、1~5、1~4、1~3、または1~2である。一部の態様において、pは、2~10、2~9、2~8、2~7、2~6、2~5、2~4、または2~3である。他の態様において、pは、1、2、3、4、5、または6である。一部の態様において、pは2または4である。一部の態様において、抗体薬物結合体化合物は、以下の式Lpを有するか、その薬学的に許容される塩または溶媒和化合物であり、式中、Lは、抗体ユニット、例えば、191P4D12MAbでありAaWWYyはリンカーユニットであり、式中、Aはストレッチャーユニットであり、aは0または1であり、それぞれのWは独立してアミノ酸ユニットであり、wは0~12の整数であり、Yは自己犠牲スペーサーユニットであり、yは0、1、または2でありDは、標的細胞に対して細胞分裂阻害活性または細胞傷害活性を有する薬物ユニットでありpは1~20の整数である。一部の態様において、aは0または1であり、wは0または1であり、yは0、1、または2である。一部の態様において、aは0または1であり、wは0または1であり、yは0または1である。一部の態様において、pは1~10、1~9、1~8、1~7、1~6、1~5、1~4、1~3、または1~2である。一部の態様において、pは2~8、2~7、2~6、2~5、2~4、または2~3である。他の態様において、pは1、2、3、4、5、または6である。一部の態様において、pは2または4である。一部の態様において、wが0でない場合、yは1または2である。一部の態様において、wが1~12である場合、yは1または2である。一部の態様において、wは2~12であり、yは1または2である。一部の態様において、aは1であり、wおよびyは0である。複数の抗体を含む組成物の場合、抗体1個あたりの薬物分子の数の平均である薬物ローディングはpによって表される。薬物ローディングは、抗体1個あたり1~20個の薬物でもよい。結合体化反応調製物中の抗体1個あたりの薬物の数の平均は、質量分析、ELISAアッセイ、およびHPLCなどの従来手段によって特徴付けることができる。pに関する抗体薬物結合体の定量分布も求めることができる。場合によっては、他の薬物ローディングを有する抗体薬物結合体からの、pがある特定の値の均一な抗体薬物結合体の分離、精製、および特徴付けは、逆相HPLCまたは電気泳動などの手段によって達成することができる。例示的な態様において、pは2~8である。抗体薬物結合体化合物の作製は、当業者に公知の任意の技法によって達成することができる。簡単に述べると、抗体薬物結合体化合物は、抗体ユニットとして191P4D12MAb、薬物、任意で、薬物と結合剤をつなぐリンカーを含む。好ましい態様において、抗体は、前記のHa22261と命名された抗体の重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む191P4D12MAbである。より好ましい態様において、抗体は、前記のHa22261と命名された抗体の重鎖および軽鎖を含む191P4D12MAbである。薬物およびまたはリンカーを結合剤に共有結合するために、多くの異なる反応を利用することができる。これは、多くの場合、リジンのアミン基、グルタミン酸およびアスパラギン酸の遊離カルボン酸基、システインのスルフヒドリル基、ならびに芳香族アミノ酸の様々な部分を含む、結合剤、例えば、抗体分子のアミノ酸残基の反応によって達成される。最も一般的に用いられる非特異的な共有結合方法の1つは、化合物のカルボキシ基を抗体のアミノ基に連結するカルボジイミド反応である。さらに、化合物のアミノ基を抗体分子のアミノ基に連結するために、二官能性薬剤、例えば、ジアルデヒドまたはイミドエステルが用いられている。薬物を結合剤に取り付けるためにシッフ塩基反応も用いられる。この方法は、グリコールまたはヒドロキシ基を含有する薬物を過ヨウ素酸酸化してアルデヒドを形成し、次いで、このアルデヒドを結合剤と反応させることを伴う。結合剤のアミノ基を有するシッフ塩基の形成を介して取り付けが行われる。薬物を結合剤に共有結合するために、カップリング剤としてイソチオシアネートも使用することができる。他の技法が当業者に公知であり、本発明の範囲内である。ある特定の態様では、リンカーの前駆体である中間体を薬物と適切な条件下で反応させる。ある特定の態様では、薬物およびまたは中間体にある反応基が用いられる。その後に、薬物と中間体とが反応した生成物、すなわち誘導体化薬物を、191P4D12MAbと適切な条件下で反応させる。抗体薬物結合体化合物の特定のユニットがそれぞれ本明細書において詳述される。例示的なリンカーユニット、ストレッチャーユニット、アミノ酸ユニット、自己犠牲スペーサーユニット、および薬物ユニットの合成および構造は、米国特許出願公開第20030083263号、同第20050238649号、および同第20050009751号にも記載されている。これらはそれぞれ、その全体が、および全ての目的のために参照により本明細書に組み入れられる。Vリンカーユニット典型的には、抗体薬物結合体化合物は、薬物ユニットと抗体ユニットとの間にリンカーユニットを含む。一部の態様では、細胞内環境においてリンカーが切断されると抗体から薬物ユニットが放出されるように、リンカーは細胞内条件下で切断可能である。さらに他の態様では、リンカーユニットは切断することができず、薬物は、例えば、抗体分解によって放出される。一部の態様において、リンカーは、細胞内環境に存在する切断剤によって切断可能である。リンカーは、例えば、リソソームプロテアーゼまたはエンドソームプロテアーゼを含むが、これに限定されない、細胞内ペプチダーゼまたはプロテアーゼ酵素によって切断されるペプチジルリンカーでもよい。一部の態様において、ペプチジルリンカーは、少なくとも2アミノ酸長または少なくとも3アミノ酸長である。切断剤はカテプシンBおよびカテプシンDならびにプラスミンを含んでもよく、これらは全てジペプチド薬物誘導体を加水分解して、標的細胞内にある活性薬物を放出することが知られている。最も代表的なものは、191P4D12発現細胞に存在する酵素によって切断可能なペプチジルリンカーである。例えば、癌組織において高発現しているチオール依存性プロテアーゼであるカテプシンBによって切断可能なペプチジルリンカーを使用することができる。このようなリンカーの他の例は、例えば、その全体が、および全ての目的のために参照により本明細書に組み入れられる米国特許第6214345号に記載されている。特定の態様では、細胞内プロテアーゼによって切断可能なペプチジルリンカーは、ValCitリンカーまたはPheLysリンカーである。細胞内タンパク質分解による治療剤放出を用いる利点の1つは、薬剤が結合体化された時には典型的に弱毒化し、結合体の血清安定性が典型的に高いことである。他の態様において、切断可能なリンカーは、pH感受性、すなわち、ある特定のpH値での加水分解に対して感受性である。典型的に、pH感受性リンカーは酸性条件下で加水分解される。例えば、リソソーム内で加水分解される酸不安定性リンカーを使用することができる。このようなリンカーは、中性pH条件下で、例えば、血中の中性pH条件下で比較的安定であるが、リソソームの近似pHであるpH55未満またはpH50では不安定である。ある特定の態様では、加水分解性リンカーはチオエーテルリンカーである。さらに他の態様では、リンカーは還元条件下で切断可能である。例えば、SATA、SPDPプロピオネート、SPDBブチレート、ならびにSMPTトルエン、SPDB、およびSMPTを用いて形成することができるジスルフィドリンカーを含めて、様々なジスルフィドリンカーが当技術分野において公知である。さらに他の特定の態様において、リンカーは、マロネートリンカー、マレイミドベンゾイルリンカー12991304、または3Nアミド類似体130512である。さらに他の態様では、リンカーユニットは切断することができず、薬物は抗体分解によって放出される。典型的に、リンカーは、細胞外環境に対して実質的に感受性でない。リンカーに関して本明細書において使用される場合、細胞外環境に対して実質的に感受性でないとは、抗体薬物結合体化合物が細胞外環境に存在している時に、抗体薬物結合体化合物の試料に含まれるリンカーの約20以下、典型的には約15以下、さらに典型的には約10以下、さらにより典型的には約5以下、約3以下、または約1以下が切断されることを意味する。リンカーが、細胞外環境に対して実質的に感受性でないかどうかは、例えば、抗体薬物結合体化合物を血漿と所定の時間インキュベートし、次いで、血漿中に存在する遊離薬物の量を定量することによって確かめることができる。相互排他的でない他の態様において、リンカーは細胞内部移行を促進する。ある特定の態様では、リンカーは治療剤と結合体化した時に、細胞内部移行を促進する。さらに他の態様では、リンカーはアウリスタチン化合物および191P4D12MAbと結合体化した時に、細胞内部移行を促進する。本発明の組成物および方法と共に使用することができる様々な例示的なリンカーは、WO2004010957、米国特許出願公開第20060074008号、米国特許出願公開第20050238649号、および米国特許出願公開第20060024317号に記載されている。リンカーユニットは、薬物ユニットおよび抗体ユニットを連結して、抗体薬物結合体化合物を形成するのに使用することができる二官能性化合物である。一部の態様において、リンカーユニットは、以下の式AaWwYyを有し、式中、Aはストレッチャーユニットであり、aは0または1であり、それぞれのWは独立して、アミノ酸ユニットであり、wは0~12の整数であり、Yは自己犠牲スペーサーユニットであり、yは0、1、または2である。一部の態様において、aは0または1であり、wは0または1であり、yは0、1、または2である。一部の態様において、aは0または1であり、wは0または1であり、yは0または1である。一部の態様において、wが1~12である場合、yは1または2である。一部の態様において、wは2~12であり、yは1または2である。一部の態様において、aは1であり、wおよびyは0である。VIストレッチャーユニットストレッチャーユニットが存在すれば、ストレッチャーユニットは、抗体ユニットを、アミノ酸ユニットが存在すればアミノ酸ユニットに、スペーサーユニットが存在すればスペーサーユニットに、または薬物ユニットに連結することができる。191P4D12MAb61に存在し得る有用な官能基には、天然のものでも化学操作を介したものでも、スルフヒドリル基、アミノ基、ヒドロキシル基、炭水化物のアノマーヒドロキシル基、およびカルボキシルが含まれるが、これに限定されない。適切な官能基はスルフヒドリルおよびアミノである。一例では、スルフヒドリル基は、191P4D12MAbの分子内ジスルフィド結合を還元することによって作製することができる。別の態様において、スルフヒドリル基は、191P4D12MAbのリジン部分のアミノ基を、2イミノチオランまたは他のスルフヒドリル生成試薬と反応させることによって作製することができる。ある特定の態様では、191P4D12MAbは組換え抗体であり、1つまたは複数のリジンを有するように操作される。ある特定の他の態様では、組換え191P4D12MAbは、さらなるスルフヒドリル基、例えば、さらなるシステインを有するように操作される。一態様において、ストレッチャーユニットは、抗体ユニットの硫黄原子との結合を形成する。硫黄原子は抗体のスルフヒドリル基に由来するものでもよい。この態様の代表的なストレッチャーユニットは式IIIaおよびIIIbの角括弧の中に描かれている。式中、L、W、Y、D、w、およびyは前記で定義され、R17はC1~C10アルキレン、C1~C10アルケニレン、C1~C10アルキニレン、カルボシクロ、O、O、O、アリーレン、C1~C10アルキレンアリーレン、C2~C10アルケニレンアリーレン、C2~C10アルキニレンアリーレン、アリーレンC1~C10アルキレン、アリーレンC2~C10アルケニレン、アリーレンC2~C10アルキニレン、C1~C10アルキレン、C2~C10アルケニレン、C2~C10アルキニレン、C1~C10アルキレン、C2~C10アルケニレン、C2~C10アルキニレン、ヘテロシクロ、C1~C10アルキレン、C2~C10アルケニレン、C2~C10アルキニレン、C1~C10アルキレン、C2~C10アルケニレン、C1~C10アルキニレン、r、またはrCH2より選択され、rは1~10の整数であり、前記のアルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、アリール、カルボサイクル、カルボシクロ、ヘテロシクロ、およびアリーレンラジカルは単独でも別の基の一部でも置換されてもよい。一部の態様において、前記のアルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、アリール、カルボサイクル、カルボシクロ、ヘテロシクロ、およびアリーレンラジカルは単独でも別の基の一部でも置換されない。一部の態様において、R17はC1~C10アルキレン、カルボシクロ、O、アリーレン、C1~C10アルキレンアリーレン、アリーレンC1~C10アルキレン、C1~C10アルキレン、C1~C10アルキレン、C3~C8ヘテロシクロ、C1~C10アルキレン、C1~C10アルキレン、r、およびrCH2より選択され、rは1~10の整数であり、前記のアルキレン基は置換されず、残りの基は置換されてもよい。はっきりと示されていない場合でも、1~20個の薬物部分を抗体に連結できることが全ての例示的な態様から理解されるはずである。例示的なストレッチャーユニットは、R17が5である式IIIaのストレッチャーユニットである。別の例示的なストレッチャーユニットは、R17がrCH2であり、rが2である式IIIaのストレッチャーユニットである。例示的なストレッチャーユニットは、R17がアリーレンまたはアリーレンC1~C10アルキレンである式IIIaのストレッチャーユニットである。一部の態様において、アリール基は非置換フェニル基である。さらに別の例示的なストレッチャーユニットは、R17が5である式IIIbのストレッチャーユニットである。ある特定の態様では、ストレッチャーユニットは、抗体ユニットの硫黄原子とストレッチャーユニットの硫黄原子とのジスルフィド結合を介して抗体ユニットに連結される。この態様の代表的なストレッチャーユニットは、式IVの角括弧の中に描かれている。式中、R17、L、W、Y、D、w、およびyは前記で定義されている。本願全体を通じて、以下の式の中のS部分は、文脈によって特に定めのない限り、抗体ユニットの硫黄原子を指すことに留意すべきである。さらに他の態様では、ストレッチャーは、抗体の第1級アミノ基または第2級アミノ基との結合を形成することができる反応部位を含有する。これらの反応部位の例には、活性化エステル、例えば、スクシンイミドエステル、4ニトロフェニルエステル、ペンタフルオロフェニルエステル、テトラフルオロフェニルエステル、無水物、酸塩化物、塩化スルホニル、イソシアネート、およびイソチオシアネートが含まれるが、これに限定されない。この態様の代表的なストレッチャーユニットは、式VaおよびVbの角括弧の中に描かれている。式中、R17、L、W、Y、D、w、およびyは前記で定義されている。一部の態様において、ストレッチャーは、抗体に存在し得る改変された炭水化物基と反応する反応部位を含有する。例えば、炭水化物を、過ヨウ素酸ナトリウムなどの試薬を用いて穏やかに酸化することができ、酸化された炭水化物の得られたユニットを、ヒドラジド、オキシム、第1級または第2級アミン、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレート、およびアリールヒドラジド、例えば、Kanekoetal1991BioconjugateChem213341に記載のアリールヒドラジドなどの官能基を含有するストレッチャーと縮合することができる。この態様の代表的なストレッチャーユニットは、式VIa、VIb、およびVIcの角括弧の中に描かれている。式中、R17、L、W、Y、D、w、およびyは前記で定義されている。VIIアミノ酸ユニットアミノ酸ユニットが存在する場合、スペーサーユニットが存在すれば、ストレッチャーユニットをスペーサーユニットに連結し、スペーサーユニットが存在しなければ、ストレッチャーユニットを薬物部分に連結し、ストレッチャーユニットおよびスペーサーユニットが存在しなければ、抗体ユニットを薬物ユニットに連結する。Wwは、例えば、モノペプチド、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、ペンタペプチド、ヘキサペプチド、ヘプタペプチド、オクタペプチド、ノナペプチド、デカペプチド、ウンデカペプチド、またはドデカペプチドユニットでもよい。それぞれのWユニットは独立して、以下の角括弧の中に示した式を有し、wは0~12の整数である。式中、R19は水素、メチル、イソプロピル、イソブチル、secブチル、ベンジル、pヒドロキシベンジル、CH2OH、CHCH3、CH2CH2SCH3、CH2CONH2、CH2COOH、CH2CH2CONH2、CH2CH2COOH、3NHCNH2、3NH2、3NHCOCH3、3NHCHO、4NHCNH2、4NH2、4NHCOCH3、4NHCHO、3NHCONH2、4NHCONH2、CH2CH2CHCH2NH2、2ピリジルメチル、3ピリジルメチル、4ピリジルメチル、フェニル、シクロヘキシル、である。一部の態様において、アミノ酸ユニットは、薬物ユニットを遊離するために、癌または腫瘍に関連するプロテアーゼを含む1種類または複数の種類の酵素によって酵素的に切断することができる。1つの態様では、薬物ユニットは放出されるとインビボでプロトン化されて、薬物となる。ある特定の態様では、アミノ酸ユニットは天然アミノ酸を含んでもよい。他の態様において、アミノ酸ユニットは非天然アミノ酸を含んでもよい。例示的なWwユニットは式~によって表される。式中、R20およびR21は以下の通りである式中、R20、R21、およびR22は以下の通りである式中、R20、R21、R22、およびR23は以下の通りである例示的なアミノ酸ユニットには、式VIIのユニットが含まれるが、これに限定されない。式中、R20はベンジルであり、R21は4NH2であるか、R20はイソプロピルであり、R21は4NH2であるか、またはR20はイソプロピルであり、R21は3NHCONH2である。別の例示的なアミノ酸ユニットは式VIIIのユニットである。式中、R20はベンジルであり、R21はベンジルであり、R22は4NH2である。特定の酵素、例えば、腫瘍関連プロテアーゼによる酵素的切断のために、有用なWwユニットを設計し、Wwユニットの選択性を最適化することができる。一態様において、Wwユニットは、カテプシンB、C、およびD、またはプラスミンプロテアーゼによって切断が触媒されるユニットである。一態様において、Wwはジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、またはペンタペプチドである。R19、R20、R21、R22、またはR23は水素以外のものである場合、R19、R20、R21、R22、またはR23が取り付けられる炭素原子はキラルである。R19、R20、R21、R22、またはR23が取り付けられる炭素原子はそれぞれ独立して配置または配置にある。アミノ酸ユニットの1つの局面において、アミノ酸ユニットはバリンシトルリンである。別の局面において、アミノ酸ユニットはフェニルアラニンリジンである。アミノ酸ユニットのさらに別の局面において、アミノ酸ユニットはNメチルバリンシトルリンである。さらに別の局面において、アミノ酸ユニットは5アミノ吉草酸、ホモフェニルアラニンリジン、テトライソキノリンカルボキシレートリジン、シクロヘキシルアラニンリジン、イソネペコチン酸リジン、βアラニンリジン、グリシンセリンバリングルタミン、およびイソネペコチン酸である。VIIIスペーサーユニットスペーサーユニットが存在し、アミノ酸ユニットが存在する時には、スペーサーユニットはアミノ酸ユニットを薬物ユニットに連結する。または、アミノ酸ユニットが存在しない時には、スペーサーユニットはストレッチャーユニットを薬物ユニットに連結する。アミノ酸ユニットおよびストレッチャーユニットがいずれも存在しない時には、スペーサーユニットも薬物ユニットを抗体ユニットに連結する。スペーサーユニットは、2つの大まかなタイプ非自己犠牲スペーサーユニットまたは自己犠牲スペーサーユニットである。非自己犠牲スペーサーユニットは、抗体薬物結合体からアミノ酸ユニットが切断された後に、特に、酵素によって切断された後に、スペーサーユニットの一部または全てが薬物部分に結合したままになっているスペーサーユニットである。非自己犠牲スペーサーユニットの例には、スペーサーユニットおよびグリシンスペーサーユニットが含まれるが、これに限定されない。グリシングリシンスペーサーユニットまたはグリシンスペーサーユニットを含有する結合体が、酵素によって酵素的切断を受けると、グリシングリシン薬物部分またはグリシン薬物部分がLAaWwから切断される。一態様において、標的細胞内で独立した加水分解反応が起こって、グリシン薬物部分結合が切断され、薬物が遊離される。スキーム1一部の態様において、非自己犠牲スペーサーユニットはGlyである。一部の態様において、非自己犠牲スペーサーユニットはGlyGlyである。一態様において、スペーサーユニットが存在しない、薬物リンカー結合体、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物が提供される。または、自己犠牲スペーサーユニットを含有する結合体がDを放出することができる。本明細書において使用される場合、自己犠牲スペーサーという用語は、間隔のあいた2つの化学部分を一緒にして、安定したトリパータイト分子に共有結合することができる二官能性化学部分を指す。これは、第1の部分と第2の化学部分との結合が切断されれば、第2の化学部分から自発的に分離する。一部の態様において、Yyは、フェニレン部分がQmで置換されたpアミノベンジルアルコールユニットである。式中、QはC1~C8アルキル、C1~C8アルケニル、C1~C8アルキニル、O、O、O、ハロゲン、ニトロ、またはシアノであり、mは0~4の整数である。アルキル基、アルケニル基、およびアルキニル基は単独でも別の基の一部でも置換されてもよい。一部の態様において、Yは、PAB基のアミノ窒素原子を介してWwに連結し、カーボネート基、カルバメート基、またはエーテル基を介してDと直接つながっているPAB基である。特定の理論または機構に拘束されるものではないが、スキーム2は、Tokietal2002JOrgChem6718661872に記載のように、カルバメート基またはカーボネート基を介してDに直接取り付けられたPAB基の可能性のある薬物放出機構を図示している。スキーム2スキーム2において、QはC1~C8アルキル、C1~C8アルケニル、C1~C8アルキニル、O、O、O、ハロゲン、ニトロ、またはシアノであり、mは0~4の整数であり、pは1~約20である。アルキル基、アルケニル基、およびアルキニル基は単独でも別の基の一部でも置換されてもよい。特定の理論または機構に拘束されるものではないが、スキーム3は、エーテル結合またはアミン結合を介してDと直接取り付けられたPAB基の可能性のある薬物放出機構を図示している。式中、Dは、薬物ユニットの一部である酸素基または窒素基を含む。スキーム3スキーム3において、QはC1~C8アルキル、C1~C8アルケニル、C1~C8アルキニル、O、O、O、ハロゲン、ニトロ、またはシアノでありmは0~4の整数でありpは1~約20である。アルキル基、アルケニル基、およびアルキニル基は単独でも別の基の一部でも置換されてもよい。自己犠牲スペーサーの他の例には、PAB基と電子的に類似する芳香族化合物、例えば、2アミノイミダゾール5メタノール誘導体およびオルトまたはパラアミノベンジルアセタールが含まれるが、これに限定されない。アミド結合が加水分解されると環化するスペーサー、例えば、置換および非置換の4アミノ酪酸アミド、適切に置換されたビシクロ221およびビシクロ222環構造、ならびに2アミノフェニルプロピオン酸アミドを使用することができる。グリシンのα位置において置換されたアミン含有薬物の脱離も自己犠牲スペーサーの例である。一態様において、スペーサーユニットは、スキーム4に示したような分枝bisスチレンユニットである。これは、複数の薬物を組み込み、放出するのに使用することができる。スキーム4スキーム4において、QはC1~C8アルキル、C1~C8アルケニル、C1~C8アルキニル、O、O、O、ハロゲン、ニトロ、またはシアノでありmは0~4の整数でありnは0または1でありpは1~約20である。アルキル基、アルケニル基、およびアルキニル基は単独でも別の基の一部でも置換されてもよい。一部の態様において、D部分は同じである。さらに別の態様において、D部分は異なる。1つの局面において、スペーサーユニットは、式~によって表される式中、QはC1~C8アルキル、C1~C8アルケニル、C1~C8アルキニル、O、O、O、ハロゲン、ニトロ、またはシアノでありmは0~4の整数である。アルキル基、アルケニル基、およびアルキニル基は単独でも別の基の一部でも置換されてもよい。抗体薬物結合体化合物を含む式IおよびIIの態様は、以下を含んでもよい式中、wおよびyはそれぞれ、0、1、または2、およびであり、式中、wおよびyはそれぞれ0、である。IX薬物ユニット薬物部分は、任意の細胞傷害剤、細胞分裂阻害剤、または免疫調節剤でよい。Dは、スペーサーユニット、アミノ酸ユニット、ストレッチャーユニット、または抗体ユニットとの結合を形成することができる原子を有する薬物ユニットである。一部の態様において、薬物ユニットDは、スペーサーユニットとの結合を形成することができる窒素原子を有する。本明細書において使用される場合、薬物ユニットおよび薬物部分という用語は同義語であり、同義に用いられる。細胞傷害剤、細胞分裂阻害剤、または免疫調節剤の有用なクラスには、例えば、抗チューブリン剤、DNA副溝結合剤、DNA複製阻害剤、およびアルキル化剤が含まれる。一部の態様において、薬物は、アウリスタチン、例えば、アウリスタチンE、またはその誘導体である。アウリスタチンは、例えば、アウリスタチンEとケト酸との間で形成されるエステルでもよい。例えば、アウリスタチンEはパラアセチル安息香酸またはベンゾイル吉草酸と反応して、それぞれ、AEBおよびAEVBを生成することができる。他の代表的なアウリスタチンには、AFP、MMAF、およびMMAEが含まれる。例示的なアウリスタチンの合成および構造は、米国特許出願公開第20030083263号国際公開公報第04010957、国際公開公報第02088172号、および米国特許第7498298号同第6884869号同第6323315号同第6239104号同第6034065号同第5780588号同第5665860号同第5663149号同第5635483号同第5599902号同第5554725号同第5530097号同第5521284号同第5504191号同第5410024号同第5138036号同第5076973号同第4986988号同第4978744号同第4879278号同第4816444号および同第4486414号に記載されている。これらはそれぞれ、その全体が、および全ての目的のために参照により本明細書に組み入れられる。アウリスタチンは、微小管の動態ならびに核分裂および細胞分裂を妨害し、抗癌活性を有することが示されている。アウリスタチンはチューブリンに結合し、191P4D12発現細胞に対して細胞傷害作用または細胞分裂阻害作用を発揮することができる。アウリスタチンまたは得られた抗体薬物結合体が所望の細胞株に対して細胞分裂阻害作用または細胞傷害作用を発揮するかどうか確かめるために使用することができる、当技術分野において公知の多くの異なるアッセイがある。化合物がチューブリンに結合するかどうか確かめるための方法が当技術分野において公知である。例えば、MulleretalAnalChem20067843904397HameletalMolecularPharmacology199547965976およびHameletalTheJournalofBiologicalChemistry1990265281714117149を参照されたい。本発明のために、チューブリンに対する化合物の相対親和性を確かめることができる。本発明の好ましいアウリスタチンの中には、チューブリンに対するMMAEの結合親和性の110から、チューブリンに対するMMAEの結合親和性の10倍、20倍、さらには100倍まででチューブリンに結合するものもある。一部の態様において、Dは、式DEまたはDFのアウリスタチン、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物型であり、式中、独立して、それぞれの場所で、波線は結合を示しR2はC1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、もしくはC2~C20アルキニルでありR3はH、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、C2~C20アルキニル、カルボサイクル、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、C2~C20アルキニレン、アリール、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、C2~C20アルキニレン、複素環、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、もしくはC2~C20アルキニレンでありR4はH、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、C2~C20アルキニル、カルボサイクル、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、C2~C20アルキニレン、アリール、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、C2~C20アルキニレン、複素環、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、もしくはC2~C20アルキニレンでありR5はHもしくはC1~C8アルキルでありまたはR4およびR5は一緒になってカルボサイクル環を形成し、式sを有し、式中、RaおよびRbは独立して、H、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、C2~C20アルキニル、もしくはカルボサイクルであり、sは2、3、4、5、もしくは6でありR6はH、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、もしくはC2~C20アルキニルでありR7はH、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、C2~C20アルキニル、カルボサイクル、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、C2~C20アルキニレン、アリール、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、C2~C20アルキニレン、複素環、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、もしくはC2~C20アルキニレンでありそれぞれのR8は独立して、H、OH、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、C2~C20アルキニル、O、O、O、もしくはカルボサイクルでありR9はH、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、もしくはC2~C20アルキニルでありR24はアリール、複素環、もしくはカルボサイクルでありR25はH、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、C2~C20アルキニル、カルボサイクル、O、O、O、もしくはOR18であり、式中、R18はH、ヒドロキシル保護基、もしくはOR18がOである場合、直接結合でありR26はH、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、もしくはC2~C20アルキニル、アリール、複素環、もしくはカルボサイクルでありR10はアリールもしくは複素環でありZはO、S、NH、もしくはNR12であり、式中、R12はC1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、もしくはC2~C20アルキニルでありR11はH、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、C2~C20アルキニル、アリール、複素環、mR14、もしくはmCH2でありmは1~1000の整数であるか、またはm1~1000でありR13はC2~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、もしくはC2~C20アルキニレンでありR14はH、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、もしくはC2~C20アルキニルでありR15のそれぞれの出現は独立して、H、COOH、nN2、nSO3H、nSO3C1~C20アルキル、nSO3C2~C20アルケニル、もしくはnSO3C2~C20アルキニルでありR16のそれぞれの出現は独立して、H、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、C2~C20アルキニル、もしくはnCOOHでありnは0~6の整数であり、前記のアルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、アリール、カルボサイクル、および複素環ラジカルは単独でも別の基の一部でも置換されてもよい。式DEのアウリスタチンは、前記のアルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、アリール、カルボサイクル、および複素環ラジカルが置換されていないアウリスタチンを含む。式DEのアウリスタチンは、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、およびR9の基が置換されておらず、R19、R20、およびR21の基が本明細書に記載のように置換されてもよいアウリスタチンを含む。式DEのアウリスタチンは、R2がC1~C8アルキルでありR3、R4、およびR7が独立して、H、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、C2~C20アルキニル、単環式C3~C6カルボサイクル、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、C2~C20アルキニレン、C6~C10アリール、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、C2~C20アルキニレン、複素環、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、もしくはC2~C20アルキニレンより選択され、前記のアルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、カルボサイクル、アリール、および複素環ラジカルは置換されてもよくR5がHでありR6がC1~C8アルキルでありそれぞれのR8は独立して、OH、O、O、もしくはOより選択され、前記のアルキル、アルケニル、およびアルキニルラジカルは置換されてもよくR9がHもしくはC1~C8アルキルでありR24が、置換されてもよいフェニルでありR25がOR18であり、R18は、H、ヒドロキシル保護基、もしくはOR18がOである場合、直接結合でありR26がH、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、C2~C20アルキニル、もしくはカルボサイクルより選択され、前記のアルキル、アルケニル、アルキニル、およびカルボサイクルラジカルは置換されてもよい、アウリスタチンまたはその薬学的に許容される塩型もしくは溶媒和化合物型を含む。式DEのアウリスタチンは、R2がメチルでありR3がH、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、もしくはC2~C8アルキニルであり、前記のアルキル、アルケニル、およびアルキニルラジカルは置換されてもよくR4がH、C1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、C2~C8アルキニル、単環式C3~C6カルボサイクル、C6~C10アリール、C1~C8アルキレン、C2~C8アルケニレン、C2~C8アルキニレン、C1~C8アルキレン、C2~C8アルケニレン、C2~C8アルキニレンであり、前記のアルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、アリール、およびカルボサイクルラジカルは単独でも別の基の一部でも、置換されてもよくR5がHでありR6がメチルでありR7がC1~C8アルキル、C2~C8アルケニル、もしくはC2~C8アルキニルであり、それぞれのR8はメトキシでありR9がHもしくはC1~C8アルキルでありR24がフェニルでありR25がOR18であり、R18は、H、ヒドロキシル保護基、もしくはOR18がOである場合、直接結合でありR26がメチルである、アウリスタチンまたはその薬学的に許容される塩型を含む。式DEのアウリスタチンは、R2がメチルでありR3がHもしくはC1~C3アルキルでありR4がC1~C5アルキルでありR5がHでありR6がメチルでありR7がイソプロピルもしくはsecブチルでありR8がメトキシでありR9がHもしくはC1~C8アルキルでありR24がフェニルでありR25がOR18であり、R18は、H、ヒドロキシル保護基、もしくはOR18がOである場合、直接結合でありR26がメチルである、アウリスタチン、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物型を含む。式DEのアウリスタチンは、R2がメチルもしくはC1~C3アルキルでありR3がHもしくはC1~C3アルキルでありR4がC1~C5アルキルでありR5がHでありR6がC1~C3アルキルでありR7がC1~C5アルキルでありR8がC1~C3アルコキシでありR9がHもしくはC1~C8アルキルでありR24がフェニルでありR25がOR18であり、R18は、H、ヒドロキシル保護基、もしくはOR18がOである場合、直接結合でありR26がC1~C3アルキルである、アウリスタチン、またはその薬学的に許容される塩型を含む。式DFのアウリスタチンは、R2がメチルでありR3、R4、およびR7が独立して、H、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、C2~C20アルキニル、単環式C3~C6カルボサイクル、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、C2~C20アルキニレン、C6~C10アリール、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、C2~C20アルキニレン、複素環、C1~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、もしくはC2~C20アルキニレンより選択され、前記のアルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、カルボサイクル、アリール、および複素環ラジカルは単独でも別の基の一部でも、置換されてもよくR5がHでありR6がメチルでありそれぞれのR8がメトキシでありR9がH、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、もしくはC2~C20アルキニルであり前記のアルキル、アルケニル、およびアルキニルラジカルは置換されてもよくR10が、置換されてもよいアリールもしくは置換されてもよい複素環でありZがO、S、NH、もしくはNR12であり、R12は、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、もしくはC2~C20アルキニルであり、これらはそれぞれ置換されてもよくR11がH、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、C2~C20アルキニル、アリール、複素環、mR14、もしくはmCH2であり、前記のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、および複素環ラジカルは置換されてもよくmは1~1000の整数であるか、もしくはm0でありR13がC2~C20アルキレン、C2~C20アルケニレン、もしくはC2~C20アルキニレンであり、これらはそれぞれ置換されてもよくR14がH、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、もしくはC2~C20アルキニルであり、前記のアルキル、アルケニル、およびアルキニルラジカルは置換されてもよく、R15のそれぞれの出現は独立して、H、COOH、nN2、nSO3H、nSO3C1~C20アルキル、nSO3C2~C20アルケニル、もしくはnSO3C2~C20アルキニルであり、前記のアルキル、アルケニル、およびアルキニルラジカルは置換されてもよくR16のそれぞれの出現は独立して、H、C1~C20アルキル、C2~C20アルケニル、C2~C20アルキニル、もしくはnCOOHであり、前記のアルキル、アルケニル、およびアルキニルラジカルは置換されてもよくnは0~6の整数である、アウリスタチン、またはその薬学的に許容される塩を含む。これらのいくつかの態様において、R10は、置換されてもよいフェニルである。式DFのアウリスタチンは、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、およびR9の基が非置換であり、R10およびR11の基が本明細書に記載されてものであるアウリスタチンを含む。式DFのアウリスタチンは、前記のアルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、アリール、カルボサイクル、および複素環ラジカルが非置換のアウリスタチンを含む。式DFのアウリスタチンは、R2がC1~C3アルキルでありR3がHもしくはC1~C3アルキルでありR4がC1~C5アルキルでありR5がHでありR6がC1~C3アルキルでありR7がC1~C5アルキルでありR8がC1~C3アルコキシでありR9がHもしくはC1~C8アルキルでありR10が、置換されてもよいフェニルでありZがO、S、もしくはNHでありR11が本明細書において定義されたものであるアウリスタチン、またはその薬学的に許容される塩を含む。式DFのアウリスタチンは、R2がメチルでありR3がHもしくはC1~C3アルキルでありR4がC1~C5アルキルでありR5がHでありR6がメチルでありR7がイソプロピルもしくはsecブチルでありR8がメトキシでありR9がHもしくはC1~C8アルキルでありR10が、置換されてもよいフェニルでありZがO、S、もしくはNHでありR11が本明細書において定義されたものであるアウリスタチン、またはその薬学的に許容される塩を含む。式DFのアウリスタチンは、R2がメチルでありR3がHもしくはC1~C3アルキルでありR4がC1~C5アルキルでありR5がHでありR6がメチルでありR7がイソプロピルもしくはsecブチルでありR8がメトキシでありR9がHもしくはC1~C8アルキルでありR10がフェニルでありZがOもしくはNHでありR11が本明細書において定義されたもの、好ましくは、水素であるアウリスタチン、またはその薬学的に許容される塩型を含む。式DFのアウリスタチンは、R2がC1~C3アルキルでありR3がHもしくはC1~C3アルキルでありR4がC1~C5アルキルでありR5がHでありR6がC1~C3アルキルでありR7がC1~C5アルキルでありR8がC1~C3アルコキシでありR9がHもしくはC1~C8アルキルでありR10がフェニルでありZがOもしくはNHであり、R11が本明細書において定義されたもの、好ましくは、水素であるアウリスタチン、またはその薬学的に許容される塩型を含む。式DEもしくはDFのアウリスタチンは、R3、R4、およびR7が独立してイソプロピルもしくはsecブチルであり、R5がHであるアウリスタチンを含む。例示的な態様において、R3およびR4はそれぞれイソプロピルであり、R5はHであり、R7はsecブチルである。残りの置換基は本明細書において定義されたものである。式DEもしくはDFのアウリスタチンは、R2およびR6がそれぞれメチルであり、R9がHであるアウリスタチンを含む。残りの置換基は本明細書において定義されたものである。式DEもしくはDFのアウリスタチンは、R8のそれぞれの出現がOCH3であるアウリスタチンを含む。残りの置換基は本明細書において定義されたものである。式DEもしくはDFのアウリスタチンは、R3およびR4がそれぞれイソプロピルであり、R2およびR6がそれぞれメチルであり、R5がHであり、R7がsecブチルであり、R8のそれぞれの出現がOCH3であり、R9がHであるアウリスタチンを含む。残りの置換基は本明細書において定義されたものである。式DFのアウリスタチンは、ZがOもしくはNHであるアウリスタチンを含む。残りの置換基は本明細書において定義されたものである。式DFのアウリスタチンは、R10がアリールであるアウリスタチンを含む。残りの置換基は本明細書において定義されたものである。式DFのアウリスタチンは、R10がフェニルであるアウリスタチンを含む。残りの置換基は本明細書において定義されたものである。式DFのアウリスタチンは、ZがOであり、R11がH、メチル、もしくはtブチルであるアウリスタチンを含む。残りの置換基は本明細書において定義されたものである。式DFのアウリスタチンは、ZがNHであり、R11がmCH2であり、R15がnN2であり、R16がC1~C8アルキルもしくはnCOOHであるアウリスタチンを含む。残りの置換基は本明細書において定義されたものである。式DFのアウリスタチンは、ZがNHであり、R11がmCH2であり、R15がnSO3Hであるアウリスタチンを含む。残りの置換基は本明細書において定義されたものである。好ましい態様において、Dが式DEのアウリスタチンである場合、wは1~12、好ましくは、2~12の整数であり、yは1もしくは2であり、aは好ましくは1である。一部の態様において、Dが式DFのアウリスタチンである場合、aは1であり、wおよびyは0である。例示的な薬物ユニットは、以下の構造を有する薬物ユニット、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物を含む。1つの局面において、トリエチレングリコールエステルなどがあるが、これに限定されない親水基を、薬物ユニットのR11に取り付けることができる。理論に拘束されるものではないが、親水基は薬物ユニットの内部移行および非凝集を助ける。一部の態様において、薬物ユニットはTZT1027ではない。一部の態様において、薬物ユニットは、アウリスタチンE、ドラスタチン10、またはアウリスタチンPEではない。例示的な抗体薬物結合体化合物は、LまたはmAbsが、本明細書において示されたHa22261と命名された191P4D12MAbを表す、以下の構造を有するか、またはその薬学的に許容される塩である。一部の態様において、薬物ユニットは、カリチアマイシン、カンプトテシン、マイタンシノイド、またはアントラサイクリンである。一部の態様において、薬物は、タキサン、トポイソメラーゼ阻害剤、ビンカアルカロイドなどである。一部の代表的な態様において、適切な細胞傷害剤には、例えば、DNA副溝結合剤、CBI化合物米国特許第6130237号も参照されたい、デュオカルマイシン、タキサン、ピューロマイシン、およびビンカアルカロイドが含まれる。他の細胞傷害剤には、例えば、CC1065、SN38、トポテカン、モルホリノドキソルビシン、リゾキシン、シアノモルホリノドキソルビシン、エキノマイシン、コンブレタスタチン、ネトロプシン、エポシロンAおよびB、エストラムスチン、クリプトフィシン、セマドチン、マイタンシノイド、ディスコデルモリド、エリュテロビン、およびミトキサントロンが含まれる。一部の態様において、薬物は抗チューブリン剤である。抗チューブリン剤の例には、アウリスタチン、タキサン、Taxotere、T67、ならびにビンカアルカロイドが含まれる。他の抗チューブリン剤には、例えば、バッカチン誘導体、タキサン類似体、ノコダゾール、コルヒチンおよびコルシミド、エストラムスチン、クリプトフィシン、セマドチン、マイタンシノイド、コンブレタスタチン、ディスコデルモリド、およびエリュテロビンが含まれる。ある特定の態様では、細胞傷害剤は、抗チューブリン剤の別のグループであるマイタンシノイドである。例えば、特定の態様では、マイタンシノイドは、マイタンシンまたはDM1である。ある特定の態様では、細胞傷害剤または細胞分裂阻害剤はドラスタチンである。ある特定の態様では、細胞傷害剤または細胞分裂阻害剤は、アウリスタチンクラスの細胞傷害剤または細胞分裂阻害剤である。従って、特定の態様において、細胞傷害剤または細胞分裂阻害剤はMMAEである。別の特定の態様において、細胞傷害剤または細胞分裂阻害剤はAFPである。ある特定の態様では、細胞傷害剤または細胞分裂阻害剤は、式XII~XXIの化合物またはその薬学的に許容される塩である。X薬物ローディング薬物ローディングはpによって表され、分子内にある抗体1個あたりの薬物部分の数の平均である。薬物ローディングは、抗体1個あたり1~20個の薬物部分でもよい。本発明のADCは、1~20個の範囲の薬物部分と結合体化した抗体が集まったものを含む。結合体化反応からのADC調製物中にある抗体1個あたりの薬物部分の数の平均は、質量分析およびELISAアッセイなどの従来手段によって特徴付けることができる。pに関するADCの定量分布も求めることができる。場合によっては、他の薬物ローディングを有するADCから、pがある特定の値の均一なADCを、電気泳動などの手段によって分離、精製、および特徴付けすることができる。一部の抗体薬物結合体において、pは、抗体の取り付け部位の数によって限定されることがある。例えば、取り付けがシステインチオールの場合、前記の例示的な態様と同様に、抗体は、1個だけのシステインチオール基または数個のシステインチオール基を有してもよく、リンカーを取り付けることができる1個だけの十分に反応性のあるチオール基または数個の十分に反応性のあるチオール基を有してもよい。ある特定の態様では、薬物ローディングが大きくなると、例えば、p5になると、ある特定の抗体薬物結合体の凝集、不溶性、毒性、または細胞透過性の喪失が起こる場合がある。ある特定の態様では、本発明のADCの薬物ローディングは、1~約8約2~約6約3~約5約3~約4約31~約39約32~約38約32~約37約32~約36約33~約38または約33~約37である。実際には、ある特定のADCについて、抗体1個あたりの薬物部分の最適比は8未満でもよく、約2~約5でもよいことが示されている。米国特許第7498298号を参照されたい。ある特定の態様では、結合体化反応の間に、薬物部分の最大理論値より少ない薬物部分が抗体と結合体化される。抗体は、例えば、下記で議論するように、薬物リンカー中間体またはリンカー試薬と反応しないリジン残基を含有することがある。一般的に、抗体は、薬物部分に連結することができる遊離かつ反応性のシステインチオール基を含有しない。実際には、抗体にあるほとんどのシステインチオール残基はジスルフィド架橋として存在する。ある特定の態様では、反応性システインチオール基を作製するために、抗体は、部分的または完全な還元条件下で、ジチオスレイトールまたはトリカルボニルエチルホスフィンなどの還元剤によって還元することができる。ある特定の態様では、リジンまたはシステインなどの反応性求核基を曝露するために、抗体は変性条件に供される。ADCのローディングは、様々なやり方で、例えば、抗体に対してモル過剰な薬物リンカー中間体またはリンカー試薬を制限することによって、結合体化の反応時間または温度を制限することによって、システインチオール修飾のための部分的または限定的な還元条件によって、リンカー薬物取り付けの数およびまたは位置を制御するように、システイン残基の数および位置が改変されるように、抗体のアミノ酸配列を組換え法によって操作することによってにおいて開示されたようにチオMabまたはチオFabが調製される制御することができる。複数の求核基が薬物リンカー中間体と反応する、またはリンカー試薬と反応した後に薬物部分試薬と反応する場合、結果として生じた生成物が、抗体に取り付けられた1つまたは複数の薬物部分が分布しているADC化合物の混合物であることが理解されるだろう。抗体あたりの薬物の数の平均は、抗体に特異的であり、かつ薬物に特異的なデュアルELISA抗体アッセイによって混合物から計算することができる。個々のADC分子を、混合物中で質量分析によって特定し、HPLC、例えば、疎水性相互作用クロマトグラフィーによって分離することができる。ある特定の態様では、単一のローディング値を有する均一なADCを、電気泳動またはクロマトグラフィーによって結合体化混合物から単離することができる。XIADCの細胞傷害作用を確かめる方法薬物または抗体薬物結合体が細胞に対して細胞分裂阻害作用およびまたは細胞傷害作用を発揮するかどうか確かめる方法は公知である。一般的に、抗体薬物結合体の細胞傷害活性または細胞分裂阻害活性は、細胞培地中で、抗体薬物結合体の標的タンパク質を発現する哺乳動物細胞を曝露する工程約6時間~約5日間、細胞を培養する工程および細胞生存率を測定する工程によって測定することができる。細胞をベースとするインビトロアッセイを用いて、生存率、細胞傷害性、および抗体薬物結合体のアポトーシス誘導を測定することができる。抗体薬物結合体が細胞分裂阻害作用を発揮するかどうか確かめるために、チミジン組み込みアッセイを用いることができる。例えば、96ウェルプレートの1ウェルにつき5000個細胞の密度で標的抗原を発現する癌細胞を72時間にわたって培養し、72時間の最後の8時間の間に05μCiの3Hチミジンに曝露することができる。培養細胞への3Hチミジンの組み込みは、抗体薬物結合体の存在下および非存在下で測定される。細胞傷害性を確かめるために、壊死またはアポトーシスを測定することができる。壊死は、典型的には、原形質膜の透過性の増大細胞の膨張、および原形質膜の破裂によって達成される。アポトーシスは、典型的には、膜小胞化、細胞質の凝集、および内因性エンドヌクレアーゼの活性化を特徴とする。癌細胞に対するこれらの任意の作用が確かめられることは、抗体薬物結合体が癌処置において有用であることを示している。細胞生存率は、細胞において、ニュートラルレッド、トリパンブルー、またはALAMARブルーの取り込みを確かめることによって測定することができる。このようなアッセイにおいては、色素を含有する培地中で細胞をインキュベートし、細胞を洗浄し、色素の細胞取り込みを反映する残った色素が分光測定される。細胞傷害性を測定するために、タンパク質結合色素であるスルホローダミンBも使用することができる。または、テトラゾリウム塩、例えば、MTTが、生細胞を検出するが、死細胞を検出しないことによって哺乳動物細胞の生存および増殖を定量比色するアッセイにおいて用いられる。アポトーシスは、例えば、DNA断片化を測定することによって定量することができる。インビトロでDNA断片化を定量測定するための商業的な測光法を利用することができる。このようなアッセイの例は、TUNELおよびELISAをベースとするアッセイを含めてBiochemica1999no2pp3437に記載されている。アポトーシスはまた、細胞の形態変化を測定することによって確かめることもできる。例えば、壊死と同様に、原形質膜完全性の喪失は、ある特定の色素の取込みを測定することによって確かめることができる。アポトーシス細胞数を測定する方法は、DukeandCohenCurrentProtocolsinImmunologyに記載されている。細胞を、DNA色素によって標識し、クロマチンの凝集および核内膜に沿った辺縁趨向について観察することもできる。アポトーシスを確かめるために測定することができる他の形態変化には、例えば、細胞質の凝集、膜小胞化の増大、および細胞収縮が含まれる。アポトーシス細胞の存在は、培養物の付着区画および浮遊区画の両方において測定することができる。例えば、両区画とも、上清を除去し、付着した細胞をトリプシン処理し、遠心分離による洗浄工程の後に調製物を組み合わせ、アポトーシスを検出することによって収集することができる。。191P4D12治療用組成物の作用を適切な動物モデルにおいてインビボで評価することができる。例えば、異種癌モデルを使用することができる。異種癌モデルにおいては、癌外植片または継代された異種移植片組織が、免疫不全動物、例えば、ヌードマウスまたはSCIDマウスに導入される。例えば、PCT特許出願WO9816628および米国特許第6107540号は、原発腫瘍の発症、微小転移巣、および後期疾患に特有の骨芽細胞性転移の形成を再現することができる様々なヒト前立腺癌異種移植片モデルについて述べている。腫瘍形成の阻害、腫瘍退縮、または転移などを測定するアッセイを用いて、効力を予測することができる。アポトーシスの促進を評価するインビボアッセイは、治療用組成物の評価において有用である。一態様において、治療用組成物で処置された腫瘍保有マウス由来の異種移植片をアポトーシス巣の存在について試験し、未処置コントロール異種移植片保有マウスと比較することができる。処置されたマウスの腫瘍においてアポトーシス巣が見られる程度から前記組成物の治療効力が分かる。上述の方法の実施において使用される治療用組成物は、所望の送達方法に適した担体を含む薬学的組成物に処方することができる。適切な担体は、治療用組成物と組み合わされた場合に治療用組成物の抗腫瘍機能を保持し、患者の免疫系と一般的に非反応性である任意の材料を含む。例には、任意の多数の標準的な薬学的担体、例えば、滅菌リン酸緩衝食塩水溶液、静菌水などが含まれるが、これに限定されない。治療製剤を可溶化し、治療用組成物を腫瘍部位に送達することができる任意の経路を介して投与することができる。潜在的に効率的な投与経路には、静脈内、非経口、腹腔内、筋肉内、腫瘍内、皮内、器官内、同所などが含まれるが、これに限定されない。静脈注射に好ましい製剤は、防腐処理をした静菌水、防腐処理をしていない滅菌水の溶液に溶解した、およびまたは09の滅菌注射用塩化ナトリウム、USPを含むポリ塩化ビニルバッグもしくはポリエチレンバッグの中で希釈された治療用組成物を含む。治療タンパク質調製物は凍結乾燥されてもよく、滅菌粉末として、好ましくは、真空下で保管されてもよく、次いで、注射前に、静菌水または滅菌水に溶解して再構成されてもよい。上述の方法を用いて癌を処置するための投与量および投与プロトコールは方法および標的癌によって異なり、一般的に、当技術分野において認められている他の多くの要因に左右されるだろう。XII191P4D12を発現する癌の処置限られたセットの組織において通常発現するが、表Iに列挙した癌のような癌においても発現するタンパク質として191P4D12を同定されたことは、このような癌の処置に対する多くの治療アプローチを切り開く。注目すべきは、標的とされた抗腫瘍治療は、標的とされたタンパク質が正常組織で、さらに生命維持に必要な正常器官組織で発現する場合でも有用であったことである。生命維持に必要な器官は、生命を維持するために必要な器官、例えば、心臓または結腸である。生命維持に必要ではない器官は除去されても、個体がなお生存することができる器官である。生命維持に必要ではない器官の例は、卵巣、乳房、および前立腺である。正常組織における、さらに生命維持に必要な正常組織における標的タンパク質の発現は、標的タンパク質が過剰発現する特定の腫瘍の治療剤としての標的タンパク質に対する標的化薬剤の有用性を無効にしない。例えば、生命維持に必要な器官における発現は、それ自体ではかつそのものは有害ではない。さらに、前立腺および卵巣のような重要でないと考えられる器官は、死亡率に影響を及ぼすことなく除去することができる。最後に、いくつかの生命維持に必要な器官は、免疫寛容のために正常器官発現の影響を受けない。免疫寛容器官は、血液器官関門によって血液から保護されている器官であり、従って、免疫療法の手が届かない。免疫寛容器官の例は脳および精巣である。従って、191P4D12タンパク質の活性を阻害する治療アプローチは、191P4D12を発現する癌に罹患している患者に有用である。これらの治療アプローチは、一般的に、3つのクラスに分けられる。第1のクラスは、腫瘍細胞増殖に関する191P4D12機能を調節して、腫瘍細胞増殖の阻害もしくは遅延をもたらす、または腫瘍細胞の死滅を誘導する。第2のクラスは、191P4D12タンパク質と191P4D12タンパク質の結合パートナーもしくは他のタンパク質との結合または会合を阻害するための種々の方法を含む。第3のクラスは、191P4D12遺伝子の転写または191P4D12mRNAの翻訳を阻害するための種々の方法を含む。従って、癌患者は、191P4D12発現の存在およびレベルについて、好ましくは、腫瘍組織の免疫組織化学的評価、定量的191P4D12画像化、または191P4D12発現の存在および程度を確実に示す他の技術を用いて評価することができる。腫瘍生検または外科手術標本の免疫組織化学分析は、この目的に好ましい。腫瘍組織の免疫組織化学分析のための方法は、当技術分野で周知である。XIII抗体ベースの療法の標的としての191P4D12191P4D12は、抗体ベースの治療戦略の魅力的な標的である。細胞外分子および細胞内分子の両方について多くの抗体の戦略が当技術分野で公知であるの使用を参照のこと。191P4D12は、対応する正常細胞に対して種々の系統の癌細胞において発現するので、非標的器官および非標的組織に免疫反応性組成物が結合することによって引き起こされる毒性の、非特異的なかつまたは非標的な影響を及ぼすことなく優れた感受性を示す、191P4D12免疫反応性組成物の全身投与が準備される。191P4D12のドメインと特異的に反応する抗体は、好ましくは毒素もしくは治療剤との抗体薬物結合体として、191P4D12発現癌を全身処置するために有用である。当業者であれば、免疫原性分子を特異的に標的化し、かつ結合するために抗体を使用できることを理解する。さらに、当業者であれば、抗体を細胞傷害剤に結合体化することは日常的であることを理解するを参照のこと。細胞傷害剤およびまたは治療剤が、この細胞に、例えば、これら薬剤を、その細胞が発現する分子に特異的な抗体に結合体化することによって直接送達される場合、細胞傷害剤は、その細胞に対して既知の生物学的効果を発揮する。細胞を死滅させるために抗体細胞傷害剤結合体を使用する広範な種々の組成物および方法が当技術分野で公知である。癌の状況において、代表的な方法は、腫瘍を有する哺乳動物に、発現細胞表面に利用可能な、または局在に利用可能な発現されている抗原に結合する標的化薬剤61に連結された、選択された細胞傷害剤およびまたは治療剤を含む、生物学的に有効な量の結合体を投与する工程を含む。代表的な態様は、細胞傷害剤およびまたは治療剤を、191P4D12を発現する細胞に送達する方法であり、この方法は、細胞傷害剤を、191P4D12エピトープに免疫特異的に結合する抗体に結合体化する工程、およびこの細胞を、抗体薬物結合体に曝露する工程を含む。別の例示的態様は、転移癌を罹患していると疑われる個体を処置する方法であり、この方法は、この個体に、細胞傷害剤およびまたは治療剤に結合体化した、治療的有効量の抗体を含む薬学的組成物を非経口投与する工程を含む。191P4D12抗体を使用する癌免疫療法は、他の型の癌の処置において首尾よく使用されてきた種々のアプローチに従って行うことができる、多発性骨髄腫、胃癌、B細胞リンパ腫、白血病、結腸直腸癌、および乳癌が含まれるが、これに限定されない。治療アプローチの中には、毒素または放射性同位体への裸の抗体の結合体化、例えば、抗CD20抗体へのそれぞれY91もしくはI131の結合体化、IDECPharmaceuticalsCorpまたはBexxar、CoulterPharmaceuticalsを伴うものもあれば、抗体および他の治療剤、例えば、Herceptinとパクリタキセルの同時投与を伴うものもある。好ましい態様において、抗体は、細胞傷害剤、好ましくはMMAEという名称のアウリスタチン誘導体に結合体化することができる。191P4D12抗体療法は癌の全ての段階に有用であるが、抗体療法は、進行癌または転移癌において特に適切であり得る。本発明の抗体療法による処置は、1回またはそれ以上の化学療法を受けたことがある患者に適応がある。または、本発明の抗体療法は、化学療法による処置を受けたことがない患者のために化学療法レジメンまたは放射線レジメンと組み合わされる。さらに、抗体療法は、特に、化学療法剤の毒性にあまり耐えられない患者にとって、低用量の併用化学療法の使用を可能にし得る。Fanetal、Prewettetal、およびHancocketalは、化学療法剤と一緒に種々の抗体を使用することを記載している。表Iに記載の癌を処置する191P4D12モノクローナル抗体は、腫瘍に対して強力な免疫応答を起こす抗体または直接細胞傷害性である抗体を含む。この点に関して、191P4D12モノクローナル抗体は、補体媒介性細胞傷害機構または抗体依存性細胞傷害機構のいずれかによって腫瘍細胞溶解を誘発することができる。これらの機構はともに、補体タンパク質上のエフェクター細胞Fc受容体部位との相互作用のために、免疫グロブリン分子のインタクトなFc部分を要する。さらに、腫瘍増殖に対して直接的な生物学的効果を発揮する191P4D12MAbは、191P4D12を発現する癌を処置するために有用である。細胞傷害性MAbが直接的に作用する機構には、以下が含まれる細胞増殖の阻害、細胞分化の調節、腫瘍新脈管形成因子プロファイルの調節、およびアポトーシスの誘導。特定の191P4D12MAbが抗腫瘍効果を発揮する機構は、ADCC、補体媒介性細胞溶解などのような、細胞死を評価する当技術分野で一般に公知の任意の数のインビトロアッセイを用いて評価される。従って、本発明の治療法において使用される好ましいモノクローナル抗体は、標的191P4D12抗原を高親和性で特異的に結合する、完全ヒト抗体である。XIV191P4D12ADCカクテル本発明の治療法は、単一の191P4D12ADC、および異なるMAbの組み合わせ、すなわち、カクテルの投与を意図する。このようなMAbカクテルは、これらカクテルが、異なるエピトープを標的とするMAbを含むか、異なるエフェクター機構を利用するか、または免疫エフェクター機能に依存するMAbと細胞傷害性MAbを直接組み合わせる限りは、特定の利点を有し得る。このような組み合わされたMAbは相乗的治療効果を示し得る。さらに、191P4D12MAbは、種々の化学療法剤および生物学的薬剤、アンドロゲンブロッカー、免疫モジュレーター、外科手術または放射線を含むが、これに限定されない、他の治療様式と同時に投与することができる。好ましい態様において、191P4D12MAbは、結合体化された形態で投与される。191P4D12ADC製剤は、腫瘍細胞に抗体を送達することができる任意の経路を介して投与される。投与経路には、静脈内、腹腔内、筋肉内、腫瘍内、皮内などが含まれるが、これに限定されない。一般的に、処置は、典型的には約01mgkg体重、02mgkg体重、03mgkg体重、04mgkg体重、05mgkg体重、06mgkg体重、07mgkg体重、08mgkg体重、09mgkg体重、1mgkg体重、2mgkg体重、3mgkg体重、4mgkg体重、5mgkg体重、6mgkg体重、7mgkg体重、8mgkg体重、9mgkg体重、10mgkg体重、15mgkg体重、20mgkg体重、または25mgkg体重の範囲の用量での、許容可能な投与経路、例えば、静脈内注射を介した191P4D12ADC調製物の反復投与を含む。一般的に、1週間あたり、10~1000mgMAbの範囲の用量が有効かつ十分に許容される。転移性乳癌の処置におけるHerceptinでの臨床経験に基づくと、約4mgkg患者体重のIVの初回負荷投与量、続いて、約2mgkgIVの毎週投与量のMAb調製物が、許容可能な投与レジメンを示す。好ましくは、この初回負荷投与量は、90分間以上の注入として投与される。定期的な維持用量が、初期投与量が十分許容されたことを条件として、30分間以上の注入として投与される。当業者により認識されるように、種々の要因が、特定の症例における理想的な投与レジメンに影響を及ぼし得る。このような要因には、例えば、使用されるMAbの結合親和性および半減期、患者における191P4D12発現の程度、循環中の分離した191P4D12抗原の程度、望ましい定常状態の抗原濃度レベル、処置頻度、ならびに本発明の方法と組み合わせて使用される化学療法剤もしくは他の薬剤の影響、ならびに特定の患者の健康状態が含まれる。任意で、最も有効な投与レジメンなどの決定を助けるために、所定のサンプル中の191P4D12レベルについて患者を評価すべきである。このような評価はまた、治療の間にわたってモニタリング目的で使用され、他のパラメーターの評価と組み合わせて、治療的成功を測定するために有用である。本発明の目的は、191P4D12を発現する腫瘍細胞の増殖を阻害する、または遅らせる191P4D12ADCを提供することである。本発明のさらなる目的は、新脈管形成および他の生物学的機能を阻害する方法を提供し、それによって、哺乳動物、好ましくはヒトにおいて、このような191P4D12ADCを用いて、特に、他の薬物または免疫学的に活性な処置とこのような191P4D12ADCとを併用して、腫瘍増殖を低減させることである。XV併用療法一態様において、ヒト腫瘍を含む腫瘍が、化学療法剤または放射線またはこれらの組み合わせとともに191P4D12ADCで処置される場合、相乗効果がある。言い換えると、191P4D12ADCによる腫瘍増殖の阻害は、化学療法剤または放射線またはこれらの組み合わせと組み合わされる場合、予想よりも強くなる。相乗効果は、例えば、191P4D12ADCのみの処置または191P4D12ADCおよび化学療法剤または放射線による処置の相加効果から予想されるよりも大きな、組み合わせ処置による腫瘍増殖阻害により示され得る。好ましくは、相乗効果は、寛解が、191P4D12ADCによる処置または191P4D12ADCおよび化学療法剤もしくは放射線の付加的組み合わせによる処置から予想されない場合に、癌の寛解によって実証される。191P4D12ADCおよび化学療法もしくは放射線の組み合わせ、またはその両方を使用して腫瘍細胞の増殖を阻害する方法は、化学療法もしくは放射線療法、およびこれらの組み合わせを始める前、その間またはその後に、191P4D12ADCを投与する工程を含む。例えば、191P4D12ADCは、典型的には、放射線療法およびまたは化学療法を開始する1日間~60日間前、好ましくは、3日間~40日間前、より好ましくは、5日間~12日間前に投与される。しかしながら、処置プロトコールおよび特定の患者の要求に応じて、この方法は最も有効な処置を提供し、最終的には、患者の寿命を延ばす様式において行われる。化学療法剤の投与は、非経口経路および腸経路による全身投与を含め、種々の方法で達成することができる。一態様において、191P4D12ADCおよび化学療法剤は別々の分子として投与される。化学療法剤または化学療法の特定の例には、シスプラチン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、メクロレタミン、ストレプトゾトシン、シクロホスファミド、カルムスチン、ロムスチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、プロカルバジン、マイトマイシン、シタラビン、エトポシド、メトトレキサート、5フルオロウラシル、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ブレオマイシン、パクリタキセル、トセタキセル、アルデスロイキン、アスパラギナーゼ、ブスルファン、カルボプラチン、クラドリビン、ダカルバジン、フロクスウリジン、フルダラビン、ヒドロキシウレア、イホスファミド、インターフェロンα、ロイプロリド、メゲストロール、メルファラン、メルカプトプリン、プリカマイシン、ミトーテン、ペグアスパルガーゼ、ペントスタチン、ピポブロマン、プリカマイシン、ストレプトゾトシン、タモキシフェン、テニポシド、テストラクトン、チオグアニン、チオテパ、ウラシルマスタード、ビノレルビン、ゲムシタビン、クロラムブシル、タキソールおよびこれらの組み合わせが含まれる。191P4D12ADCと組み合わせて使用される放射線源は、処置される患者に対して外部にある、または内部にあるかのいずれかであり得る。この放射線源が患者に対して外部にある場合、この療法は、外部ビーム放射線療法として公知である。放射線源が患者に対して内部にある場合、この処置は、近接放射線療法といわれる。前記の治療レジメンはさらに、さらなる癌治療剤およびまたはレジメン、例えば、さらなる化学療法、癌ワクチン、シグナル伝達インヒビター、異常な細胞増殖もしくは癌を処置するのに有用な薬剤、IGF1Rに結合することによって腫瘍増殖を阻害する抗体に記載されるような抗CTLA4抗体または他のリガンド、ならびにサイトカインと組み合わせることができる。哺乳動物がさらなる化学療法に供される場合、前記の化学療法剤を使用することができる。さらに、増殖因子インヒビター、生物学的応答調節物質、抗ホルモン治療、選択的エストロゲン受容体調節因子、新脈管形成インヒビター、および抗アンドロゲンを使用することができる。例えば、抗ホルモン、例えば、抗エストロゲン、例えば、Nolvadexまたは抗アンドロゲン、例えば、Casodex2ヒドロキシ2メチル3プロピオンアニリドを使用することができる。前記の治療アプローチは、広範に種々の外科的、化学療法的または放射線治療的レジメンのうちのいずれか1つと併用することができる。本発明の治療アプローチは、低用量の化学療法およびまたは低頻度の投与の使用を可能にし得る。これは、全ての患者に対して、特に化学療法剤の毒性に十分に耐性ではない患者に対しても好都合である。XVIキット製造物品本明細書中で記載される研究用途、予後判定用途、予防用途、診断用途および治療用途における使用のために、キットが本発明の範囲内に含まれる。このようなキットは、1つまたはそれ以上の容器、例えば、バイアル、チューブなどを収容するために区画化されたキャリア、包装、または容器を備えてもよい。各容器は、使用、例えば、本明細書中に記載される使用のための説明書を含むラベルまたは挿入物と一緒に、前記方法において使用される別個の要素の1つを含む。例えば、容器は、検出可能に標識される抗体または検出可能に標識することができる抗体を含んでもよい。キットは、薬物ユニットを含む容器を備えてもよい。キットは、図2もしくは図3におけるアミノ酸配列またはそれらのアナログ、あるいはこのようなアミノ酸配列をコードする核酸分子の全てまたは一部を含んでもよい。本発明のキットは、典型的には、前記の容器およびそれに付随した1つまたはそれ以上の他の容器を備える。この他の容器は、商業的なまたは使用者の観点から望ましい物質を含む。この物質には、例えば、緩衝液、希釈剤、フィルター、針、シリンジ、キャリア、包装、容器、バイアル、ならびにまたは内容物を列挙したチューブラベルおよびもしくは使用説明書、ならびに使用説明書を有する包装挿入物が含まれる。ラベルは、組成物が特定の治療用途または非治療的用途、例えば、予後判定用途、予防用途、診断用途、または研究用途のために使用されることを示すために、容器上または容器と一緒に存在してもよく、本明細書中に記載のように、インビボまたはインビトロでの使用のいずれかについての指示を示してもよい。指示およびまたは他の情報はまた、キットと一緒に、またはキット上に含まれる挿入物またはラベル上に載っていてもよい。ラベルはまた、容器上にまたは容器に付けられてもよい。ラベルを形成する文字、数字または他の字が容器それ自体に成型またはエッチングされた場合、ラベルはその容器上に存在してもよい。ラベルが、例えば、包装挿入物として、容器を保持する入れ物またはキャリア内に存在する場合は、容器に付けられてもよい。ラベルは、組成物が、状態、例えば、表Iに示した組織の癌の、診断、処置、予防または予後判定のために使用されることを示してもよい。キットおよび製造物品という用語は、同義語として使用することができる。本発明の別の態様において、組成物、例えば、抗体または抗体薬物結合体を含む製造物品、例えば、表Iに示したもののような組織の癌の診断、予後判定、予防およびまたは処置のために有用な物質を含む製造物品が提供される。製造物品は、典型的には、少なくとも1つの容器および少なくとも1つのラベルを備える。適切な容器には、例えば、ボトル、バイアル、シリンジおよび試験管が含まれる。容器は、ガラス、金属またはプラスチックのような種々の材料から形成することができる。この容器は、アミノ酸配列、低分子、核酸配列、細胞集団およびまたは抗体を保持してもよい。別の態様において、容器は、細胞および組織における191P4D12のタンパク質発現の評価において使用するために、または関連する研究目的、予後判定目的、診断目的、予防目的および治療目的のために、抗体、その結合フラグメントまたは特異的結合タンパク質を含む。このような使用のための説明書およびまたは指示書が、このような容器上に、またはその容器と共に備えられてもよく、これらの目的のために使用される試薬および他の組成物またはツールも同様であり得る。または、容器はまた、状態を処置、診断、予後判定または予防するために有効な組成物を保持してもよく、滅菌アクセスポートを有してもよい。前記組成物における活性薬剤は、191P4D12に特異的に結合できる抗体または191P4D12に特異的に結合する抗体薬物結合体であり得る。製造物品はさらに、薬学的に許容可能な緩衝液、例えば、リン酸緩衝食塩水、リンゲル液およびまたはデキストロース溶液を含む第二の容器を含んでもよい。製造物品はさらに、商業的なおよび使用者の観点から望ましい他の物質を含んでもよく、これには他の緩衝液、希釈剤、フィルター、攪拌棒、針、シリンジならびにまたは使用のための指示書およびもしくは説明書の付いた包装挿入物が含まれる。本発明の種々の局面が、以下の数個の実施例によって、さらに説明および例示される。これらはいずれも、本発明の範囲を制限することを意図しない。実施例1191P4D12抗原当技術分野において公知のサプレッションサブトラクティブハイブリダイゼーション法を用いて191P4D12遺伝子配列を発見した。標準的な方法を用いて、9つの正常組織のプールに由来する膀胱腫瘍マイナスcDNAから、223bpの191P4D12SSH配列を同定した。膀胱癌cDNAライブラリーから完全長191P4D12cDNAクローンを単離した。このcDNAは長さが3464bpであり、510アミノ酸ORFをコードする。191P4D12遺伝子はネクチン4遺伝子と相同性を示す。さらなる参照については、US20040083497およびPCT公報WO2004016799を参照されたい。191P4D12抗原の例示的な態様については、図1を参照されたい。実施例2191P4D12モノクローナル抗体の作製1つの態様において、191P4D12および191P4D12変種に対する治療用モノクローナル抗体は、191P4D12または191P4D12変種に結合、内部移行し、191P4D12または191P4D12変種の生物学的機能を破壊または調節する、それぞれのタンパク質に特異的な、または変種間で共通する配列に特異的なエピトープと反応する抗体、例えば、リガンド、基質、および結合パートナーとの相互作用を破壊する抗体を含む。このようなMAbを作製するための免疫原には、細胞外ドメインまたは191P4D12タンパク質配列全体をコードまたは含有するように設計された免疫原、アミノ酸配列のコンピュータ分析から機能モチーフを含有すると予測された領域および抗原性があると予測された191P4D12タンパク質変種領域が含まれる。免疫原には、ペプチドおよび組換えタンパク質、例えば、tag5191P4D12、精製された哺乳動物細胞由来Hisタグ化タンパク質が含まれる。さらに、マウスを免疫するために、高レベルの191P4D12、例えば、ラット1191P4D12または30019191P4D12を発現するように操作された細胞が用いられる。191P4D12に対するMAbは、マウス重鎖およびκ軽鎖遺伝子座が不活化され、ヒト重鎖およびκ軽鎖免疫グロブリン遺伝子座の大半が挿入されているXenoMousetechnologyを用いて作製した。Ha22261と命名されたMAbは、pTag5mychis191P4D12によるヒトγ1産生XenoMiceの免疫化から作製した。191P4D12MAbHa22261は、ELISAによってpTag5mychis191P4D12タンパク質に特異的に結合し、組換え191P4D12発現細胞および複数種の191P4D12発現癌細胞株にも特異的に結合する。Ha22261と命名された抗体を産生するハイブリドーマは、2010年8月18日にAmericanTypeCultureCollectionPOBox1549ManassasVA20108に送られ、アクセッション番号PTA11267が割り当てられた。それぞれのハイブリドーマ細胞からトリゾール試薬を用いてmRNAを単離した後に、191P4D12MAbHa22261のDNAコード配列を決定した。以下のプロトコールを用いて、ハイブリドーマ細胞から抗191P4D12Ha22261重鎖可変核酸配列および軽鎖可変核酸配列を配列決定した。Ha22261分泌ハイブリドーマ細胞をトリゾール試薬で溶解した。総RNAを精製および定量した。オリゴ1218プライミングとGibcoBRLSuperscriptPreamplificationシステムを用いて、総RNAから第1鎖cDNAを作製した。ヒト免疫グロブリン重鎖可変プライマーおよびヒト免疫グロブリン軽鎖可変プライマーを用いて第1鎖cDNAを増幅した。PCR産物を配列決定し、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を決定した。重鎖可変領域および軽鎖可変領域の核酸配列およびアミノ酸配列を図2および図3に列挙した。Ha22261MAbとヒトIg生殖系列とのアラインメントを図4A~4Bに示した。実施例3組換えDNA方法を用いたHa22261発現Ha22261MAbをトランスフェクト細胞において組換え発現させるために、Ha22261MAb重鎖可変配列および軽鎖可変配列をそれぞれ、ヒト重鎖IgG1定常領域およびヒト軽鎖Igκ定常領域の上流にクローニングした。完全なHa22261MAbヒト重鎖カセットおよび軽鎖カセットを、クローニングベクターの中のCMVプロモーターエンハンサーの下流にクローニングした。ポリアデニル化部位をMAbコード配列の下流に含めた。組換えHa22261MAb発現構築物をCHO細胞にトランスフェクトした。組換え細胞から分泌されたHa22261MAbと細胞表面191P4D12との結合をフローサイトメトリーによって評価した。ラットコントロール細胞およびラット191P4D12細胞を、ハイブリドーマまたはHa22261重鎖ベクター構築物および軽鎖ベクター構築物によってトランスフェクトされたCHO細胞いずれかからのHa22261MAbによって染色した。フローサイトメトリーによって結合を検出した。結果から、CHO細胞において発現された組換え発現Ha22261は、ハイブリドーマから精製されたHa22261と同じように191P4D12に結合することが分かる。191P4D12組換えタンパク質との結合について、組換え細胞から分泌されたHa22261MAbもELISAによって評価した。図5Bに示したように、Ha22261と191P4D12タンパク質との結合はCHO由来MAb材料とハイブリドーマ細胞由来MAb材料との間で同一であった。実施例4Ha22261MAbの抗体薬物結合体化以下のプロトコールを用いて、Ha22261vcMMAEと命名された本発明の抗体薬物結合体を作り出すために、本明細書に記載のvcリンカーを用いて、Ha22261Mabと、MMAEと命名されたアウリスタチン誘導体を結合体化した。細胞傷害性vcMMAEを作り出すために、表IVに示した一般的方法を用いて、vcリンカーとMMAEとの結合体化を完了した。次に、以下のプロトコールを用いて、Ha22261vcMMAEと命名された本発明の抗体薬物結合体を作製した。簡単に述べると、Ha22261MAbを10mM酢酸塩pH50、1ソルビトール、3Lアグリニンに溶解した15mgmL溶液を、この溶液のpHを75に調整する20体積の01MTrisClpH84、25mMEDTA、および750mMNaCl、5mMEDTA、ならびに150mM塩化ナトリウムと共に添加する。次いで、23モル当量のTCEPを添加することによってMAbを部分的に還元し、次いで、37°Cで2時間攪拌する。次いで、部分的に還元したMAb溶液を5°Cに冷却し、44モル当量のvcMMAEを6DMSO溶液として添加する。混合物を5°Cで60分間撹拌し、次いで、vcMMAEを基準にして1モル当量のNアセチルシステインを添加した後にさらに15分間攪拌する。10体積の20mMヒスチジンpH60を用いた抗体薬物結合体の限外濾過ダイアフィルトレーションによって、クエンチされた過剰なvcMMAEおよび他の反応成分を除去する。結果とした生じた抗体薬物結合体はHa22261vcMMAEと名付けられ、以下の式を有する。式中、MAbはHa22261であり、pは1~8である。本実施例において示した抗体薬物結合体のp値は約38であった。実施例5Ha22261vcMMAEの特徴付けHa22261MAbの抗体薬物結合体化というタイトルの実施例に示した手順を用いて、191P4D12に結合する抗体薬物結合体を作製し、当技術分野において公知のアッセイの組み合わせを用いてスクリーニング、同定、および特徴付けを行った。AFACSによる親和性の決定PC3ヒト191P4D12細胞の表面上に発現している191P4D12に対するHa22261vcMMAEの結合親和性、PC3カニクイザル191P4D12細胞の表面上に発現している191P4D12に対するHa22261vcMMAEの結合親和性、およびPC3ラット191P4D12細胞の表面上に発現している191P4D12に対するHa22261vcMMAEの結合親和性を試験した。簡単に述べると、最終濃度が160nM~0011nMの11種類のHa22261vcMMAE希釈液を、それぞれの細胞タイプと4°Cで一晩インキュベートした。インキュベーションの終わりに、細胞を洗浄し、抗hIgGPE検出抗体と4°Cで45分間インキュベートした。結合しなかった検出抗体を洗浄した後に、細胞をFACSによって分析する。図6~8に列挙したように平均蛍光強度値を得た。MFI値をGraphpadPrisimソフトウェアに入力し、YBmaxXの1部位結合式を用いて分析して、図6~8に示したHa22261vcMMAE飽和曲線を作成した。Bmaxは、Ha22261vcMMAEと191P4D12との最大結合時のMFI値であり、Kdは、最大半量結合に達するのに必要なHa22261vcMMAE濃度であるHa22261vcMMAE結合親和性である。PC3ヒト191P4D12細胞の表面上に発現している191P4D12に対するHa22261vcMMAEの親和性、PC3カニクイザル191P4D12細胞の表面上に発現している191P4D12に対するHa22261vcMMAEの親和性、およびPC3ラット191P4D12細胞の表面上に発現している191P4D12に対するHa22261vcMMAEの親和性の計算値は、それぞれ、069nM、034nM、および16nMである。BSPRによる親和性の決定精製された組換え191P4D12に対するHa22261MAbおよびHa22261vcMMAEの親和性を表面プラズモン共鳴によって行った。簡単に述べると、ヤギ抗ヒトFcγポリクローナルAbをCM5センサーチップの表面に共有結合により固定した。次いで、精製されたHa22261MAbまたはHa22261vcMMAEを前記チップの表面上に捕捉した。平均して、約300RUの試験Ha22261MAbまたはHa22261vcMMAEを各サイクルにおいて捕捉した。その後に、このような表面上に、1nM~100nMにわたる一連の5~6種類の組換え191P4D12希釈液を注入して、BIAevaluation32およびCLAMPソフトウェアを用いて処理され、11相互作用モデルに大域的にフィットされた結合曲線を作成した。表Vは、組換え191P4D12に対するHa22261MAbおよびHa22261vcMMAEの会合速度定数および解離速度定数ならびに親和性をまとめたものである。CHa22261MAbのドメインマッピング191P4D12タンパク質の特定のドメインに対するHa22261MAbの結合部位をマッピングするために、このようなドメインを発現する数種類のラット1組換え細胞株を作製した。標準的なプロトコールを用いて、Ha22261と細胞表面との結合をFACSによって評価した。図10に示したように、Ha22261MAbはVC1ドメイン発現細胞ならびに野生型191P4D12に結合するが、C1C2ドメイン発現細胞に結合しない。さらに、Ha228e61と名付けられた別の191P4D12MAbは、細胞表面上にある191P4D12C1C2ドメインを認識するが、VC1ドメインを認識しない。このことは、Ha22261MAbの結合部位が191P4D12の1~147aaドメインに位置するが、191P4D12に結合する全てのMAbがこのドメインを認識するとは限らないことを示唆する。図10に示した結果をさらに裏付けるために、ウエスタンブロット分析を行った。簡単に述べると、191P4D12の細胞外部分全体ならびに表VIに示した特定のドメインをマウスFc融合タンパク質として293T細胞において発現させ、精製した。ヤギ抗マウスHRPをコントロールとして使用した。図11に示したように、SDSPAGEによって分離し、Ha22261ビオチンの後にストレプトアビジンHRPでプローブした時に、完全長191P4D12、V、およびVC1融合構築物に対応するバンドは認められたが、C1C2融合構築物に対応するバンドは認められなかった。このことは、Ha22261MAbの結合エピトープが191P4D12の1147aaドメイン内に位置することをさらに示唆する。実施例6Ha22261vcMMAEにより媒介される細胞傷害性ヒト191P4D12、カニクイザル191P4D12、およびラット191P4D12を発現するように操作されたPC3細胞において、Ha22261vcMMAEが191P4D12依存性細胞傷害性を媒介する能力を評価した。簡単に述べると、1日目に、PC3Neo、PC3ヒト191P4D12細胞、PC3カニクイザル191P4D12細胞、またはPC3ラット191P4D12細胞を96ウェルプレートに播種した。翌日、示された濃度のHa22261vcMMAEまたはvcMMAEと結合体化したコントロールMAbを含有する等量の培地を各ウェルに添加した。細胞を37°Cで4日間インキュベートした。インキュベーション期間の終わりに、AlamarBlueを各ウェルに添加し、インキュベーションをさらに4時間続けた。励起波長620nmおよび発光波長540nmでBiotekプレートリーダーを用いて、結果として生じた蛍光を検出した。図9A~9Dの結果から、Ha22261vcMMAEは、PC3ヒト191P4D12、PC3カニクイザル191P4D12、およびPC3ラット191P4D12細胞において細胞傷害性を媒介したのに対して、vcMMAEと結合体化したコントロールヒトIgGは全く効果がなかったことが分かる。Ha22261vcMMAEの特異性は、191P4D12を発現しないPC3Neo細胞に対する毒性の欠如によってさらに証明された。従って、これらの結果から、Ha22261vcMMAEは細胞傷害薬物を191P4D12発現細胞に選択的に送達して、191P4D12発現細胞を死滅できることが分かる。実施例7Ha22261vcMMAEはインビボで腫瘍成長を阻害する腫瘍組織細胞表面上でのかなりの191P4D12発現と正常組織における限定的な191P4D12発現のために191P4D12は抗体療法の優れた標的であり、同じようにADCを介した療法の優れた標的でもある。従って、ヒト膀胱癌、肺癌、乳癌、および膵臓癌異種移植片マウスモデルにおけるHa22261vcMMAEの治療効力を評価する。腫瘍成長および転移形成に対する抗体薬物結合体の効力をマウス癌異種移植片モデルにおいて研究する。Matrigelで11希釈して混合した5x104~106個の癌細胞を雄SCIDマウスの右側腹部に注射することによって、皮下腫瘍を作製する。腫瘍形成に対するADC効力を試験するために、腫瘍細胞注射と同日にADC注射を開始する。コントロールとして、マウスに精製ヒトIgGもしくはPBSまたはヒト細胞において発現していない無関係の抗原を認識する精製MAbを注射する。予備研究では、腫瘍成長に対するコントロールIgGまたはPBS間で差違は認められなかった。カリパス測定を用いて腫瘍サイズを測定する。腫瘍体積を幅2x長さ2として計算する。幅は最も短い寸法であり、長さは最も長い寸法である。直径が15cmより大きな皮下腫瘍を有するマウスを屠殺する。卵巣腫瘍は腹腔内に転移し、成長することが多い。従って、雌マウスの腹膜内に200万個の細胞を直接注射することによって、マウスの腹腔内において卵巣腫瘍を成長させる。マウスが瀕死になるまで、マウスの身体全体の健康、身体活動、および外見をモニタリングする。屠殺時に、腫瘍量を確かめるために腹腔を検査し、離れた場所への転移を評価するために肺を収集してもよい。または、エンドポイントとして死亡を使用してもよい。次いで、適切な治療のためにマウスを群に分け、191P4D12またはコントロールMAbをip注射する。異種移植片癌モデルの利点は血管新生および血管形成を研究できることである。腫瘍成長は新血管の発達にある程度依存する。毛細血管系および発達している血液ネットワークは宿主に由来するが、新脈管構造の開始および構築は異種移植片腫瘍によって調節される72870SolesviketalEurJCancerClinOncol201295。腫瘍組織およびその周囲微小環境のIHC分析などの当技術分野において公知の手順に従って、血管新生に対する抗体および低分子の効果を研究する。Ha22261ADCは、肺癌異種移植片、膀胱癌異種移植片、乳癌異種移植片、および膵臓癌異種移植片の形成を阻害する。これらの結果は、癌、好ましくは、表Iに示した癌の局所期および進行期の治療におけるHa22261ADCの有用性を示す。191P4D12ADC191P4D12モノクローナル抗体の作製というタイトルの実施例に記載のように、191P4D12に対してモノクローナル抗体を産生した。さらに、Ha22261MAbの抗体薬物結合体化というタイトルの実施例に記載のように、このMAbを毒素と結合体化して、Ha22261vcMMAEを形成した。Ha22261vcMMAEが191P4D12に結合する能力を確かめるために、Ha22261vcMMAEをFACSおよび当技術分野において公知の他の方法によって特徴付けた。細胞株および異種移植片BT483およびHPAC細胞は、当技術分野において公知のようにLグルタミンおよび10FBSを添加したDMEM中で維持した。AGB8、AGPanc4、AGPanc2、AGB1、AGL4、およびAGPanc3異種移植片はSCIDマウスにおける連続増殖によって維持した。SCIDマウス中のヒト肺癌異種移植片AGL4の皮下腫瘍形成モデルにおけるHa22261vcMMAEMAbの評価本実験では、患者由来肺癌異種移植片AGL4をSCIDマウス中で連続継代することによって維持した。ストック腫瘍を無菌的に収集し、酵素消化して単一細胞懸濁液にした。200万個の細胞をSCIDマウス一匹一匹の側腹部に移植した。次いで、動物を7つの群6つの191P4D12抗体治療群およびコントロール抗体H311012群に無作為に割り当てた。研究が終了するまで、全ての抗体を週2回、750μg動物で腹腔内投与した。3~4日ごとにカリパス測定を用いて腫瘍成長をモニタリングした。腫瘍体積を幅2x長さ2として計算した。幅は最も短い寸法であり、長さは最も長い寸法である。結果から、191P4D12MAbはSCIDマウス中のヒト肺癌異種移植片AGL4における腫瘍成長を有意に阻害しなかったことが分かる。さらに、他の191P4D12MAbを本研究において使用した。結果は示していない。SCIDマウス中のヒト膵臓癌異種移植片HPACの皮下腫瘍形成モデルにおけるHa22261MAbの評価別の実験では、ヒト膵臓癌HPAC細胞をSCIDマウス一匹一匹の側腹部に注射した。次いで、動物を8つの群7つの191P4D12抗体治療群およびコントロール抗体H31412群に無作為に割り当てた。研究が終了するまで、全ての抗体を週2回、500μg動物で腹腔内投与した。3~4日ごとにカリパス測定を用いて腫瘍成長をモニタリングした。腫瘍体積を幅2x長さ2として計算した。幅は最も短い寸法であり、長さは最も長い寸法である。結果から、コントロール抗体と比較して、191P4D12MAbはSCIDマウス中のヒト膵臓異種移植片における腫瘍成長を阻害しなかったことが分かる。さらに、他の191P4D12MAbを本研究において使用した。結果は示していない。SCIDマウス中のヒト膵臓癌異種移植片AGPanc3の皮下腫瘍形成モデルにおけるHa22261MAbの評価別の実験では、患者由来膵臓癌異種移植片AGPanc3をSCIDマウス中で連続継代することによって維持した。ストック腫瘍を無菌的に収集し、1mm3の細片に切り刻んだ。6つの細片をSCIDマウス一匹一匹の側腹部に移植した。次いで、動物を以下のコホート2つの191P4D12MAb治療群およびコントロール抗体H31412群に無作為に割り当てた。研究が終了するまで、全ての抗体を週2回、500μg動物で腹腔内投与した。3~4日ごとにカリパス測定を用いて腫瘍成長をモニタリングした。腫瘍体積を幅2x長さ2として計算した。幅は最も短い寸法であり、長さは最も長い寸法である。結果から、コントロール抗体と比較して、191P4D12MAbはSCIDマウス中のヒト膵臓異種移植片における腫瘍成長を阻害しなかったことが分かる。さらに、他の191P4D12MAbを本研究において使用した。結果は示していない。SCIDマウス中の皮下に確立されたヒト肺癌異種移植片AGL4におけるHa22261vcMMAEの効力別の実験では、患者由来肺癌異種移植片AGL13をSCIDマウス中で連続継代することによって維持した。ストック腫瘍を無菌的に収集し、1mm3の細片に切り刻んだ。6つの細片をSCIDマウス一匹一匹の側腹部に移植した。腫瘍が200mm3のおおよその体積に達するまで、未治療の状態で腫瘍を成長させた。10mgkgのHa22261vcMMAEおよびコントロールADCを、7日ごとに2回投与するために静脈内大量瞬時投与によって投与した。投与されたADCの量は、投与直前に得られたそれぞれの動物の個々の体重に基づいた。3~4日ごとにカリパス測定を用いて腫瘍成長をモニタリングした。腫瘍体積を幅2x長さ2として計算した。幅は最も短い寸法であり、長さは最も長い寸法である。結果から、コントロールADCと比較して、Ha22261vcMMAEを用いた治療はヌードマウスに皮下移植されたAGL4肺癌異種移植片の成長を有意に阻害したことが分かる。さらに、他の191P4D12MAbを本研究において使用した。結果は示していない。SCIDマウス中の皮下に確立されたヒト乳癌異種移植片BT483におけるHa22261vcMMAEの効力本実験では、ヒト乳癌BT483細胞を用いてストック異種移植片を作製した。ストック異種移植片をSCIDマウス中で連続継代することによって維持した。ストック腫瘍を無菌的に収集し、1mm3の細片に切り刻んだ。6つの細片をSCIDマウス一匹一匹の側腹部に移植した。腫瘍が100mm3のおおよその体積に達するまで、未治療の状態で腫瘍を成長させた。5mgkgのHa22261vcMMAEおよびコントロールADCを、4日ごとに4回投与するために静脈内大量瞬時投与によって投与した。投与されたADCの量は、投与直前に得られたそれぞれの動物の個々の体重に基づいた。3~4日ごとにカリパス測定を用いて腫瘍成長をモニタリングした。腫瘍体積を幅2x長さ2として計算した。幅は最も短い寸法であり、長さは最も長い寸法である。結果から、コントロールADCと比較して、Ha22261vcMMAEを用いた治療は、SCIDマウスに皮下移植されたBT483乳腺腫瘍異種移植片の成長を有意に阻害したことが分かる。さらに、他の191P4D12MAbを本研究において使用した。結果は示していない。SCIDマウス中の皮下に確立されたヒト膀胱癌異種移植片AGB1におけるHa22261vcMMAEの効力別の実験では、患者由来膀胱癌異種移植片AGB1をSCIDマウス中で連続継代することによって維持した。ストック腫瘍を無菌的に収集し、1mm3の細片に切り刻んだ。6つの細片をSCIDマウス一匹一匹の側腹部に移植した。腫瘍が230mm3のおおよその体積に達するまで、未治療の状態で腫瘍を成長させた。4mgkgのHa22261vcMMAEおよびコントロールADCを静脈内大量瞬時投与によって1回投与した。投与されたADCの量は、投与直前に得られたそれぞれの動物の個々の体重に基づいた。3~4日ごとにカリパス測定を用いて腫瘍成長をモニタリングした。腫瘍体積を幅2x長さ2として計算した。幅は最も短い寸法であり、長さは最も長い寸法である。結果から、コントロールADCと比較して、Ha22261vcMMAEを用いた治療はAGB1膀胱癌異種移植片の成長を有意に阻害したことが分かる。さらに、他の191P4D12MAbを本研究において使用した。結果は示していない。SCIDマウス中の皮下に確立されたヒト膵臓癌異種移植片AGPanc2にけるHa22261vcMMAEの効力別の実験では、患者由来膵臓癌異種移植片AGPanc2をSCIDマウス中で連続継代することによって維持した。ストック腫瘍を無菌的に収集し、1mm3の細片に切り刻んだ。5つの細片をSCIDマウス一匹一匹の側腹部に移植した。腫瘍が100mm3のおおよその体積に達するまで、未治療の状態で腫瘍を成長させた。5mgkgのHa22261vcMMAEおよびコントロールADCを、4日ごとに4回投与するために静脈内大量瞬時投与によって投与した。投与されたADCの量は、投与直前に得られたそれぞれの動物の個々の体重に基づいた。3~4日ごとにカリパス測定を用いて腫瘍成長をモニタリングした。腫瘍体積を幅2x長さ2として計算した。幅は最も短い寸法であり、長さは最も長い寸法である。結果から、コントロールADCと比較して、Ha22261vcMMAEを用いた治療はAGPanc2膵臓癌異種移植片の成長を有意に阻害したことが分かる。さらに、他の191P4D12MAbを本研究において使用した。結果は示していない。SCIDマウス中の皮下に確立されたヒト膵臓癌異種移植片AGPanc4におけるHa22261vcMMAEの効力別の実験では、患者由来膵臓癌異種移植片AGPanc4をSCIDマウス中で連続継代することによって維持した。ストック腫瘍を無菌的に収集し、1mm3の細片に切り刻んだ。6つの細片をSCIDマウス一匹一匹の側腹部に移植した。5mgkgのHa22261vcMMAEおよびコントロールADCを、7日ごとに3回投与するために静脈内大量瞬時投与によって投与した。投与されたADCの量は、投与直前に得られたそれぞれの動物の個々の体重に基づいた。3~4日ごとにカリパス測定を用いて腫瘍成長をモニタリングした。腫瘍体積を幅2x長さ2として計算した。幅は最も短い寸法であり、長さは最も長い寸法である。結果から、コントロールADCと比較して、Ha22261vcMMAEを用いた治療はAGPanc4膵臓癌異種移植片の成長を有意に阻害したことが分かる。さらに、他の191P4D12MAbを本研究において使用した。結果は示していない。SCIDマウス中の皮下に確立されたヒト膀胱癌異種移植片AGB8における比較投与量のHa22261vcMMAEの効力本実験では、患者由来膀胱癌異種移植片AGB8をSCIDマウス中で連続継代することによって維持した。ストック腫瘍を無菌的に収集し、1mm3の細片に切り刻んだ。6つの細片をSCIDマウス一匹一匹の側腹部に移植した。腫瘍が200mm3のおおよその体積に達するまで、未治療の状態で腫瘍を成長させた。次いで、動物を以下の3つのコホート2つのHa22261vcMMAE治療群およびコントロールADCVCD375ce5pvcMMAE群に無作為に割り当てた。Ha22261vcMMAEを5mgkgまたは10mgkgで投与し、コントロールADCを5mgkgで与えた。全てのADCを静脈内大量瞬時投与によって1回投与した。投与されたADCの量は、投与直前に得られたそれぞれの動物の個々の体重に基づいた。3~4日ごとにカリパス測定を用いて腫瘍成長をモニタリングした。腫瘍体積を幅2x長さ2として計算した。幅は最も短い寸法であり、長さは最も長い寸法である。結果から、10mgkgHa22261vcMMAEを用いた治療は、5mgkgHa22261vcMMAEと比較してAGB8膀胱癌異種移植片の成長を阻害したことが分かる。結論要約すると、図12~20は、Ha22261vcMMAEと名付けられた191P4D12ADCが、191P4D12を発現する腫瘍細胞の増殖をコントロールADCと比較して有意に阻害したことを示している。従って、Ha22261vcMMAEは、表Iに示した癌を治療および管理するために治療目的で使用することができる。実施例8191P4D12ADCを用いてヒトの癌腫を処置および診断するためのヒト臨床試験191P4D12に特異的に結合する191P4D12ADCを本発明に従って使用し、特定の腫瘍、好ましくは、表Iに列挙した腫瘍の処置において使用した。これらの指標の各々と関連して、2つの臨床的アプローチを、首尾よく実行する。I補助的療法補助的療法において、患者を、化学療法剤もしくは抗腫瘍性薬剤およびまたは放射線療法あるいはそれらの組み合わせと組み合わせた191P4D12ADCによって処置する。原発癌の標的、例えば、表Iに列挙した癌を、191P4D12ADCを標準的な一次治療および二次治療に加えることによって標準的なプロトコールの下で処置する。プロトコールの設計は、以下の例によって評価されるような有効性を取り扱う。原発性または転移性の病変の腫瘍塊の縮小、無増悪生存期間の延長、全生存、患者の健康の改善、疾患の安定化、ならびに標準的な化学療法および他の生物学的薬剤の常用量を減少させる能力が含まれるが、これに限定されない。これらの投薬量の減少は、化学療法剤または生物学的薬剤の用量関連毒性を減少させることによって、さらなる療法およびまたは長期の療法を可能にする。191P4D12ADCは、化学療法剤または抗腫瘍性薬剤と組み合わせて、数種の補助的な臨床試験において利用される。II単独療法腫瘍の単独療法における191P4D12ADCの使用に関連して、191P4D12ADCは、化学療法剤または抗腫瘍性薬剤を伴わずに患者に投与される。一態様において、単独療法を、広範囲の転移疾患を有する末期癌患者において臨床的に行う。プロトコールの設計は、以下の例によって評価されるような有効性を取り扱う。原発性または転移性の病変の腫瘍塊の縮小、無増悪生存期間の延長、全生存、患者の健康の改善、疾患の安定化、ならびに標準的な化学療法および他の生物学的薬剤の常用量を減少させる能力が含まれるが、これに限定されない。投薬投薬レジメンを、最適な所望の応答をもたらすように調整することができる。例えば、単一のボーラスを投与してもよく、いくつかの分割用量を、ある期間にわたって投与してもよく、またはその用量は、治療状況の難局により示されるように、比例して減少または増加してもよい。投与の容易さおよび投薬の均一性のために単位剤形で非経口組成物を処方することが特に有利である。本明細書中で使用される場合、単位剤形態とは、処置される哺乳動物対象に対する単一の投薬として適した物理的に分離した単位をいう。所定の量の活性化合物を含む各単位は、必要とされる薬学的担体と関係して所望の治療効果をもたらすように算出される。本発明の単位剤形の仕様は、その抗体およびまたはADCの特有の特徴および達成される特定の治療効果または予防効果、ならびに個体における処置の感受性に関する、このような活性化合物を配合する分野に固有の制限によって決められ、それらに直接依存する。本発明に従って組み合わせて投与される191P4D12ADCの治療的有効量についての例示的、非限定的な範囲は、約05~約10mgkg、約1~約5mgkg、少なくとも1mgkg、少なくとも2mgkg、少なくとも3mgkg、または少なくとも4mgkgである。他の例示的、非限定的な範囲は、例えば、約05~約5mgkg、または例えば、約08~約5mgkg、または例えば、約1~約75mgkgである。本発明の高用量の態様は、10mgkgよりも多い投薬量に関する。投薬量の値が緩和されるべき状態の型および重篤度によって変動し得、単一用量または複数用量を含んでもよいことに留意すべきである。任意の特定の対象に関して、特定の投薬レジメンは、個々のニーズ、および組成物を投与するか、組成物の投与を監督する者の専門的な判断に従って、ある期間にわたって調整すべきであること、ならびに本明細書中に示した投薬量の範囲は単なる例示であり、特許請求の範囲の組成物の範囲または実施を限定することを意図しないことがさらに理解されるべきである。臨床開発計画CDPは、補助的療法または単独療法に関連した191P4D12ADCによる処置を追求し、開発する。試験は最初に安全性を証明し、その後、反復投与での効力を確認する。試験は、標準的な化学療法と191P4D12ADCを加えた標準的な療法とを比較する非盲検である。認識される通り、患者の登録に関して利用することができる1つの非限定的な基準は、生検によって決定されるような、患者の腫瘍における191P4D12の発現レベルである。任意のタンパク質または抗体の注入に基づく治療と同様に、安全上の問題は、主に以下:サイトカイン放出症候群、すなわち、低血圧、発熱、震え、悪寒;その物質に対する免疫原性応答の発生;および191P4D12を発現する正常細胞に対する毒性に関する。標準的な検査および追跡調査を、これらの安全上の問題の各々をモニタリングするために利用する。191P4D12ADCは、ヒトへの投与において安全であることが見出された。実施例9IHCによる癌患者標本における191P4D12タンパク質の検出免疫組織化学によって、191P4D12タンパク質発現を膀胱癌患者、乳癌患者、膵臓癌患者、肺癌患者、卵巣癌患者、食道患者、および頭頚部患者に由来する患者腫瘍標本において試験した。簡単に述べると、ホルマリン固定、パラフィンろう包埋した組織を4ミクロン切片に切断し、ガラススライドの上にのせた。切片を脱ろうし、再水和し、EZRetrieverマイクロウェーブの中に入れてEDTA抗原賦活化溶液によって95°Cで30分間処理した。次いで、内因性ペルオキシダーゼ活性を不活性化するために、切片を3過酸化水素溶液によって処理した。無血清タンパク質ブロックを用いて非特異的結合を阻害した後に、モノクローナルマウス抗191P4D12抗体またはアイソタイプコントロールとインキュベートした。その後に、SuperEnhancer試薬中でのインキュベーションとその後のポリマーHRP二次抗体結合体とのインキュベーションからなるSuperSensitivePolymerhorseradishperoxidaseDetectionSystemによって切片を処理した。次いで、切片を、DABキットを用いて発色させた。核をヘマトキシリンを用いて染色し、明視野顕微鏡観察によって分析した。茶色染色によって示されたように、191P4D12免疫反応性抗体を用いて患者標本において特異的染色が検出された、21、21、21、21、21、および21を参照されたい。対照的に、コントロール抗体はどちらの患者標本も染色しなかった、21、21、21、21、21、および21を参照されたい。結果から、191P4D12は患者の膀胱癌組織、乳癌組織、膵臓癌組織、肺癌組織、卵巣癌組織、食道癌組織、および頭頚部癌組織の腫瘍細胞において発現していることが分かる。これらの結果から、191P4D12はヒト癌において発現し、この抗原に対する抗体およびHa22261vcMMAEと命名された抗体薬物結合体は診断目的および治療目的に有用なことが分かる。実施例10Ha22261MAbの結合エピトープの決定Ha22261とヒト、カニクイザル、ラット、およびマウスに由来する191P4D12タンパク質との交差反応性を確かめるために、これらのオルソログをPC3細胞株において組換えにより過剰発現させた。Ha22261は191P4D12のカニクイザルオルソログおよびラットオルソログと強く交差反応することが示された。EC50結合値を表VIIに示した。Ha22261とマウスオルソログとの結合は結合EC50値の有意な低下を示す。このことから、Vドメインにおける重要なアミノ酸置換は191P4D12に対するHa22261の親和性に影響を及ぼしたことが分かる。表VIIIは、Vドメインを含有する191P4D12オルソログのaa1~180タンパク質配列アラインメントを示す。ラットオルソログ配列にある2つのアミノ酸Thr75およびSer90だけが、それぞれ、マウスオルソログ配列においてIleおよびAsnの代わりに置換されている。ヒト配列にある対応するアミノ酸はAla76およびSer91であることに留意しなければならない。これらのアミノ酸がHa22261の結合エピトープを含むかどうか確かめるために、191P4D12およびそのマウスオルソログのいくつかの変異構築物を作製し、PC3細胞において発現させた。標準的なアラニン置換変異誘発の代わりにマウスアミノ酸をヒト配列に導入し、逆にヒトアミノ酸をマウス配列に導入した。191P4D12のSer91がAsnに変異すると、Ha22261結合が著しく損なわれることが示された。このことは、このアミノ酸Ser91が結合に絶対必要であり、Ha22261MAbによって認識されるエピトープを含んでいるのに違いないことを裏付けている。位置76にあるAlaのさらなる変異も191P4D12に導入した。Ha22261と二重変異体A76I、S91Nとの結合はマウスオルソログ結合に極めて似ていることが示された。逆に、マウス配列にあるAsn90がSerに変異すると、Ha22261とマウス変異オルソログとの結合が劇的に改善する。このことは、この位置にあるアミノ酸がHa22261結合に重要なことをさらに裏付けている。Ha22261とマウスオルソログ二重変異体A90S、I75Aとの結合は191P4D12ヒトオルソログと極めて似ているように思われる。まとめると、これらのデータから、Ser91およびAla76は、Ha22261と、細胞表面上にある191P4D12タンパク質との結合において重要な役割を果たし、191P4D12表面にある、Ha22261によって認識されるエピトープの一部を構成することが分かる。この考えを視覚化するために、本発明者らは、191P4D12およびIgドメイン含有タンパク質からなるファミリーメンバーの公表された結晶構造データに基づいて191P4D12Vドメインのコンピュータモデルを、PyMOLを用いて作製した。Ala76の位置およびSer91の位置を示した。さらに、191P4D12分子上にあるHa22261結合部位をさらに精巧にするために、本発明者らはラットE細胞表面上にあるVドメインに対応する191P4D12フラグメントを設計および発現した。以下の構築物をレトロウイルスベクター内で作製した。191P4D12Ha22261MAbの結合をFACSによって評価した。図26に示したように、Ha22261はVドメイン発現細胞ならびに野生型191P4D12に結合するが、以前に作製されたC1C2ドメイン発現細胞に結合しない。このことから、この抗体の結合部位が、最初の150アミノ酸の中にある191P4D12Vドメインに位置することが分かる。結果から、Ha22261MAbは、位置aa1~150の191P4D12タンパク質vドメインに結合することが分かり、さらに、Ha22261MAbの結合にはaaSer91およびaaAla76を含む特異的エピトープが重要であることが分かる。本願全体を通して、種々のウェブサイトのデータコンテンツ、刊行物、特許出願および特許が参照される、すなわち、URLによって参照される。これらの参照の各々の開示は、本明細書によってその全体が参照により本明細書に組み入れられる。本発明は、本明細書中に開示される態様によって範囲が限定されるべきではなく、この態様は、本発明の個々の局面の単一の例示として意図され、機能的に等価である任意の態様が本発明の範囲内である。本明細書中に記載されるものに加えて、本発明のモデルおよび方法に対する種々の改変は、前述の説明および開示から当業者に明らかとなり、同様に本発明の範囲内に含まれることが意図される。このような改変または他の態様は、本発明の真の範囲および精神から逸脱することなく実施することができる。表I悪性である場合に191P4D12を発現する組織結腸膵臓卵巣乳房肺膀胱表IIアミノ酸の略語表IIIアミノ酸置換行列GCGSoftware90BLOSUM62アミノ酸置換行列から編集。値が大きければ大きいほど、関連する天然タンパク質において置換が見つかる可能性は高くなる。表IVvcMMAEを合成するための一般的方法式中、AA1アミノ酸1AA2アミノ酸2AA5アミノ酸5DILドライソロインDAPドラプロインリンカーValCit表VBiacore会合速度および解離速度ならびに結果として生じた親和性の計算表VIドメインマッピングアッセイにおいて用いられた191P4D12構築物表VII表VIIISEQIDNO11~13、出現順表IX