"表面上に活性化されたカルボン酸基を有する固体担体上にグラフトすることによって、少なくとも一つの反応性アミン基を有する核酸を固定する方法であって、上記の活性化された固体担体に上記核酸をpH6以下で共有結合性のカップリングcovalentcouplingをする段階を有する方法。下記の~の段階から成る、固体担体上に少なくとも一種の第一アミン基を有する核酸リガンドを固定する方法:表面に活性化されたカルボン酸基を有する固体担体を用意し、少なくとも一種の第一アミン基を有する核酸リガンドを用意し、上記記核酸を上記固体担体の表面上に存在する活性化されたカルボン酸基とpH6以下の条件下にカップリングする、ただし、段階aとbの順番はどちらでもよい。活性化されたカルボン酸基がN-ヒドロキシスシニイミドまたはその誘導体との反応で得る請求項1または2に記載の方法。カップリング段階のpHが35~45の範囲にある請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。カップリング段階を0°C~35°Cの温度で実行する請求項1~4のいずれか一項に記載の方法。核酸リガンドが3または5末端に少なくとも一種の第一アミンを有する5~120ヌクレオチドのポリヌクレオチドである請求項1~5のいずれか一項に記載の方法。核酸リガンドが長さが5~120ヌクレオチドのポリヌクレオチドとiiこのポリヌクレオチドに結合したスペーサ鎖とから成り、上記第一アミン基は上記記ポリヌクレオチドの3または5末端またはスペーサ鎖に結合している請求項1~5のいずれか一項に記載の方法。スペーサ鎖をC2-C20直鎖アルキルおよび第一アミン基で置換したC2-C20ポリエチレングリコールからなる群の中から選択する請求項7に記載の方法。固体担体がシリカゲル、デキストランゲル、アガロースゲルおよびこれらの誘導体から成る群の中から選択する請求項1~8のいずれか一項に記載の方法。カップリング段階cが下記およびの2つの段階から成る請求項1~9のいずれか一項に記載の方法:上記核酸リガンドを上記固体担体の表面上の活性化されたカルボン酸基とpH6以下の条件下で反応させ、上記核酸リガンドを上記固体担体の表面上に存在する活性化されたカルボン酸基にカップリングする反応をpH75以上の条件下で続ける。カップリング段階の後にカップリング反応をブロックする段階が続く請求項1~9のいずれか一項に記載の方法。少なくとも一種の第一アミン基を有する核酸リガンドが核酸アプタマーから成る請求項1~9のいずれか一項に記載の方法。請求項1~12のいずれか一項に記載の固定化方法を実行することから成る親和性担体の製造方法。請求項13に記載の製造方法で得られる固体の親和性担体。核酸リガンドがアミド結合を介して固定され、表面に最初から存在するカルボン酸基の少なくとも001が核酸リガンドで誘導体化されている固体の親和性担体。核酸リガンド濃度が少なくとも0005μmolゲルml~04μmolゲルm1のクロマトグラフィゲルである、核酸リガンドがアミド結合を介して固定された固体の親和性担体。固体の親和性担体がアガロースゲル、デキストランゲル、シリカゲルおよびこれらの誘導体から成る群の中から選択される請求項16に記載の固体の親和性担体。核酸リガンドが核酸アプタマーであり、表面に下記式IIIの構造を有する請求項14~17のいずれか一項に記載の固体の親和性担体:ここで、SUPは担体を表し、NHnNUCLは核酸アプタマーを表し、nは0または1に等しい指数であり、SPACはスペーサ鎖を表し、NUCLは標的分子に特異的に結合する核酸を表し、この核酸は5~120のヌクレオチドから成る請求項14~18のいずれか一項に記載の固体担体の表面で形成される、核酸リガンドと標的分子との相互作用で得られる錯体。請求項14~18のいずれか一項に記載の親和性担体の、標的分子を精製するための使用。請求項14~18のいずれか一項に記載の親和性担体の、標的分子を検出するための使用。下記aとbの段階から成る請求項14~18のいずれか一項に記載の親和性担体を用いた標的分子の精製方法:a重要な標的分子を含む精製すべき組成物を請求項14~18のいずれか一項に記載の親和性担体と接触させて、親和性担体にグラフトした核酸リガンドと上記標的分子との間に錯体を形成し、b段階aで作った錯体から標的分子を開放して、精製された標的分子を回収する。標的分子が血漿蛋白であることを特徴とする請求項20または21に記載の使用または請求項22に記載の方法。従って、親和性担体、特に医学的に重要な物質の工業的スケールでの精製に適した特定の親和性担体を製造する新しい方法に対するニーズがある。本発明は、表面上に活性化したカルボン酸基を有する固体担体上にグラフトすることによって少なくとも一つの反応性アミン基を有する核酸を固定する方法に関するもので、本発明方法ではpH6以下で上記の活性化された固体担体に上記核酸をカップリングする段階を有する。本発明の別の定義では、本発明は下記の~の段階から成る、少なくとも一種の第一アミン基を有する核酸リガンドを固体担体上に固定する方法に関するものである:表面に活性化されたカルボン酸基を有する固体担体を用意し、少なくとも一種の第一アミン基を有する核酸リガンドを用意し、上記記載核酸を上記固体担体の表面上に存在する活性化されたカルボン酸基とpH6以下の条件下にカップリングする、ただし、段階aとbの順番はどちらでもよい。本発明の一つの好ましい実施例では、活性化されたカルボン酸基はNヒドロキシスシニイミドまたはその誘導体との反応で得られる。本発明をさらに上記固定化方法を実行することから成る親和性担体の製造方法にも関するものである。本発明の他の対象は、上記定義の製造方法によって得られる固体の親和性担体と、標的タンパクを精製または検出する方法でのその使用にある。本発明のさらに他の対象は、核酸リガンドと標的分子との相互作用で得られる錯体にある。この錯体は上記定義のように上記固体担体の表面上で形成される。本発明はさらに、下記aとbの段階から成る上記親和性担体を用いた標的分子の精製方法にも関するものである:a重要な標的分子を含む精製すべき組成物を上記親和性担体と接触させて、親和性担体にグラフトした核酸リガンドと上記標的分子との間に錯体を形成し、b段階aで作った錯体から標的分子を開放して、精製された標的分子を回収する。実施例1親和性担体の入手1グラフト用緩衝液:100mM酢酸ナトリウム、pH=4221595μlのアプタマーをグラフト緩衝液中に25グラムリットルで調整するすなわち4mgのアプタマー。3グラフト化には下記を使用した:a第1の親和性担体を調製するためのアプタマーは5端に親水性C1111アミノ369トリオキサウンデカンlイル鎖を有する配列SEQNo1のMapt2CSポリヌクレオチドから成る、b第2の親和性担体を調製するためアプタマーは配列SEQIDNo2のMapt12ポリヌクレオチドから成り、その5端は12メチレンCH2から成るスペーサ鎖C12スペーサに結合し、その3端はoligodTに結合。c第3の親和性担体を調製するためアプタマーは配列SEQIDNo1のMapt2CSポリヌクレオチドから成り、その5端は6メチレンCH2から成るスペーサ鎖C6スペーサに結合。41mMのHC1で洗浄し、次いでグラフト緩衝液で洗浄して、NHS活性化されたカルボン酸基を有する1mlのゲル、すなわちNHS活性化セファロース4ファストフローNHSActivatedSepHarose4fastflowをグラフト。2遺伝子導入ウサギのミルクFVIITG:100または200または1000μgのFVIITGで製造した精製した組換え型ヒト因子FVIIの組成物の注入、注入に使用するFVIITG組成物は35~40mMのNaC1と、32~4mMのMgCl2となるように、調整物中に最初に含まれるシトラートをCaC12で中和し、調整物緩衝液で変成した。3クロマトグラフィで使用する緩衝液:50mMトリス50mMNaC110mMCaC124mMMgC12。4流速:05ml分5溶出緩衝液:50mMトリス、10mMEDTA、pH=746洗浄または再生用緩衝液:1MNaC150プロピレングリコール7各テストで使用した殺菌溶液:01または05MNaOH1m11MNaCl50プロピレングリコール2×1ml。結果は[図1]~[図5]に示す。[図1]および[図2]は、出発組成物に含まれるVII因子の量とは無関係に、被精製組成物が親和性担体を通った瞬間にほとんど全てのヒト第VII因子が親和性担体に保持されることを示している。被精製因子VIIの2つの量100μgおよび200μgで、出発組成物中に含まれるVII因子の10以下が親和性担体に保持されないと見積られる。[図1]および[図2]はさらに、狭い溶出ピークを示し、それは本発明の親和性担体が優れたクロマトグラフ性状を示している。[図3]は1mgのヒト因子VIIを含む出発組成物で得られたクロマトグラフプロフィルを示す。[図3]のクロマトグラフプロフィルは[図1][図2]に示すものと非常に似ている。このことは本発明の親和性担体の標的リガンドの保持に対する非常に高いキャパシティを示している。[図4]および[図5]は、05MNaOHと50のプロピレングリコールの混合液から成る消毒溶液でドラスチックな消毒処理する段階を含む、実施例1に記載の方法で調整した親和性担体上で200μg図4および1000μg図5の量のヒト因子VIIを精製して得られるクロマトグラフプロフィルを示す。得られたクロマトグラフプロフィルは本発明の親和性担体のキャパシティが有害な消毒処理に耐えることを示している。遺伝子導入ヒト因子VIIに一連の精製、洗浄および消毒段階を実行しても同じクロマトグラフプロフィルが得られることが確認されている。これは本発明の親和性担体の安定度が優れていることを示し、それは重要な標的リガンドを多数反復して精製できることを意味する。実施例3使用したアプタマーの量を関数とする親和性担体のグラフト収率と、得られた親和性担体の積載能積載能グラフト収率に対するアプタマーの量の影響と親和性担体の積載能積載能、loadingcapacityをMapt2CSおよびMapt22CSLinkTechnologiesとをカップリングし、酸化してホスフォジエステル基を作り、シアノエチル基を除去し、スペーサ鎖末端にある第一アミン基を脱保護して得られる。第VII因子に向かうのはMapt22CSである。親和性担体の積載能換言すれば保持能はゲル1ml当たりのFVIIのmgで表され、Tp5緩衝液50mMトリス、10mM°CaC12、pH75中の組換え型ヒトFVIIの組成物を注入して評価する。[表1]および[表2]は予備活性化されたゲルのNHS活性化セファロース4フアストフローNHSActivatedSepHarose4fastflowおよびMapt22CSPEGアプタマーをグラフトするための反応収率を、1ml当たりのゲルに対して反応で使用したアプタマーの量の関数で表したものである。収率はカップリング反応の終わりに上澄み中に存在するアプタマーの量を定量的PCRで数量化して求めた。[表1]および[表2]にはmlのゲル当たりのグラフトしたアプタマーの最終量も記載してある。Mapt22CSPEGおよびMapt2CSPEGアプタマーで得られたカップリング収率はテストしたアプタマーの全ての量で90~100の間にある。特に、1mlのゲルに対して04μmolまでグラフトでき、これはゲルの表面に存在する活性化されたカルボン酸基の官能基化百分比の2に対応する。組換え型ヒトFVIIの場合の親和性担体の積載能は1mlのゲル当たりにグラフトしたアプタマーの量に対して直線的に変化する。グラフトしたアプタマーの量が多くなっても担体の積載能の飽和作用は見られず、従って、アプタマーの官能性の減失は観測されない。これらの結果から、6mgml以上のグラフトアプタマー濃度を有する親和性担体を得ることができ、1mlのゲル当たり8mgの組換え型ヒトFVIIより多いFVIIに対する積載能を有する。[表3]は表面でグラフトしたアプタマー数を関数とした親和性担体の積載能を示す。実施例4NHSで予め活性化した固体担体への核酸の化学的グラフトの比較テスト4.1.各種pHを用いた比較テスト実施例1で使用した予備活性化した出発担体のグラフトの中性またはわずかにアルカリ性pH条件下での比較テストを行い、その結果を[表4]に示す。次のプロトコルを使用した:115mlの1mMHC1、次いで、7mlのグラフト緩衝液で洗浄した1mlのゲル。65mlまたは35mlのMapt2CSを1g1濃度で加え、そのゲルをMapt2CSを用いて室温で4時間培養した。2活性化されたサイトを50mMトリス緩衝液pH=74で中和。グラフト段階後、グラフトされないアプタマーの量をカラム出口で測定した。結果は、[表1]に記載のグラフト条件とは無関係にグラフト収率は0~最大10の範囲にあることを示している。上記のGossetalの観察結果とは逆に、塩度salinityを高くしてもカップリング収率を上げるには十分でない。4.2.二価カチオンの添加またはNaC1の添加で被グラフト核酸の負電荷を中和した比較テスト下記のプロトコルを使用した:115mlの1mMHC1、次いで、700μlのグラフト緩衝液で洗浄した100μlのゲル/650μlのMa2CSoligo5、130mg1の添加、そのゲルのMapt2CSを用いた室温での4時間の培養。2使用条件:条件1:92mMMOPS緩衝液、pH=70、200mMCaCl2、200m1MgCl2条件2:92mMMOPS緩衝液、pH=70、200mMCaCl2、200m1MgC12条件3:02MNaHCO3、05MNaC1、pH83条件3:02MNaHCO3、2MNaCl、pH83。グラフト段階後に未グラフトアプタマーの量をカラム出口で測定した。その結果は、上記のグラフト条件の全てで、グラフト収率が0から最大10に変動することを示した。上記の全ての実験結果は、従来技術で推薦されるような塩基の存在下または中性pHや予備活性化ゲルの指示パンフレットに記載の方法で実施する方法では予備活性化ゲルへのアプタマーのカップリング収率は非常に低い10以下ことを示している。NaC1溶液を使用してイオン強度を2Mまで増加させるか、アプタマーの負電荷をマスクする二価カチオン塩を使用しても、カップリング収率を上げることはできない。当業者の予想とは逆に、カップリング段階を酸性pHの存在下で実行することで、アプタマーの標的タンパクへの結合能を害すること無しに、予備活性化端階へのアプタマーのカップリングを大幅に増加させることができる。実施例5本発明カップリング反応を実行するためのパラメータの変更Mapt2CSPEGC11アプタマーのスペーサ鎖中に存在する脂肪族第一アミン基を用いたゲルNHS活性化セファロース4フアストフローNHSActivatedSepHarose4fastflowに記載の第1の親和性担体の製造方法で作られ、このアプタマーは[表6]ではMapt2CSoligo55アミン親水性C11とよばれる。25端に疎水性C6スペーサ鎖を有し、3端に逆デオキシリボチミジン残基3dT5を有する配列SEQIDNo1のMapt2CSDNAポリヌクレオチドから成っているアプタマー。これは実施例1のcに記載の第3の親和性担体の製造方法で作られ、このアプタマーは[表6]ではMapt2CSoligo25アミンC6および3dTとよばれる。35端に疎水性C12スペーサ鎖を有する配列SEQIDNo1のMapt2CSDNAポリヌクレオチドから成っているアプタマー。これは実施例1のbに記載の第2の親和性担体の製造方法で作られ、このアプタマーは[表6]ではMapt2CSoligo35アミンC12とよばれる。43端に疎水性のC6スペーサ鎖を有する配列SEQIDNo1のMapt2CSDNAポリヌクレオチドから成っているアプタマー。これは実施例1のcに記載の第3の親和性担体の製造方法で作られ、このアプタマーは[表6]ではMapt2CSoligo73アミンC6とよばれる。55端に親水性C11スペーサ鎖を有し、3端に逆デオキシリボチミジン残基3dT5を有する配列SEQIDNo4のMapt抗FIXaRNARNAポリヌクレオチドから成るアプタマー。これは実施例1のaに記載の第1の親和性担体の製造方法で作られ、このアプタマーは[表6]ではMapt抗FIXaRNA5アミン親水性C11とよばれる。さらに、5端に親和性C11スペーサ鎖を有する配列SEQIDNo5のMapt12CSODNAポリヌクレオチドから成るアプタマーも作った。これは実施例1のaに記載の第1の親和性担体の製造方法で作られ、このアプタマーはMaptI2CSOoligo55アミン親水性C11とよばれる。このアプタマーに関する結果は表6には示していない。6.2.RNAアプタマーのグラフト条件配列SEQIDNo5のRNAアプタマーは下記グラフト条件下でグラフトした:1300μgのRNAアプタマーを500μlのゲルと一緒に培養した。最終ゲル濃度は06g1。2グラフト反応は17°CRT、pH42で25時間実行した。3次いで、200mMボレート緩衝液で17°C、pH9で25時間中和して反応を停止させた。4上澄み中の未グラフトアプタマーの残存量を測定し、アガロースゲル電気泳動法と、GelRed登録商標35を用いた染色と、同じ電気泳動ゲルの他のレーンに付けたRNAアプタマーの既知量の較正範囲との比較でグラフト収率を求めた。結果は、グラフト収率が99以上であることを示した。この結果はグラフト方法をpHが5以下で行うことが、核酸リガンドがDNAポリヌクレオチドから成るかRNAポリヌクレオチドから成るかにかかわらず従って、DNARNAハイブリッドポリヌクレオチドから成る核酸リガンドでも、全てのタイプの核酸リガンドのグラフトで有効であることを示している。このリガンドには修飾塩基を有するRNAポリヌクレオチドから成るリガンドを含み、修飾塩基を有するポリヌクレオチドから成るリガンドも含む。6.3.グラフト反応の効率実施例5に記載のカップリング反応を実行したが、時間、温度およびpHを変えた。結果は[表6]に示した。[表6]の結果は、同じアプタマーの場合、例えテスト条件が変わっても100のグラフト収率が得られることを示している。特に、これらの結果は実施例4の結果、特にpH38の非常に酸性状態でも最大のグラフト収率が得られる[表5]の結果を確認している。これらの結果はさらに、室温で実行したカップリング反応の速度が迅速であることを確認している。また、これらの条件下でのグラフト度およびグラフト収率は中和段階を実行した時に観測されるものと同じであるので、最大グラフト収率を得るためにはpH9で中和段階を行い、カップリング反応を続けることが必要でないことを示している[表6]参照。さらに、[表6]の結果は、アプタマーのスペーサ鎖が親水性であるか疎水性であるかはグラフト効率に影響しないことも示している。また、親水性または疎水性のスペーサ鎖をDNAまたはRNAポリヌクレオチドの5端に結合させても3端に結合させてもグラフトは有効であることを示している。なお、従来のPolybrene登録商標ヘキサメチレンブロマイド、15ジメチル1,5ジアザウンデカメチレンポリメソブロマイドを用いた培養によるDNAポリヌクレオチド電荷の中和ではカップリング反応を実行できないことを付け加えておく。6.4.親和性担体の官能性61に記載のMapt2CSoligo5アプタマーを固定した親和性担体の官能性を下記のカップリング反応温度、時間およびpH条件下でテストした:条件No1:48h、5°C、pH42、条件No2:48h、5°C、pH38、条件No3:2h、5°C、pH42、条件No4:lh、室温RT、pH42テストでは上記条件No1~4で500μ1のアプタマーを各々グラフトしたゲル最終濃度44mgmlを使用した。各クロマトグラフィ担体に対して遺伝子導入ウサギミルクFVIITGで製造した27mgの精製した組換え型ヒトFVIIの組成物を注入した。この注入に使用したFVIITG組成物は最初に含まれるシトラートをCaC12で中和し、35~40mMの間のNaC1、32~4mMの間のMgC12が得られるように緩衝液を変えて調製した。クロマトグラフィで使用した緩衝液:50mMトリス10mM°CaC12pH75流速:05ml分溶出緩衝液:50mMトリス、10mMEDTA、pH=75。結果は上記条件No1~4に対して[図6]~[図9]に示した。結果は下記[表7]にも示した。[図6]~[図9]および[表7]の結果は、ほとんど全てのヒト第VII因子は被精製組成物を担体上に通した時点で親和性担体に保持されることを示しているが、条件No248h、5°C、pH38でグラフトして調製した親和性担体の場合には第VII因子の保持度は実質的なものであるが、最高ではないことが観測される。上記の結果はさらに、親和性担体に保持されたヒト第VII因子の全てが溶出段階で放出されることを示している。上記結果は、完全な機能を有する親和性担体がグラフト条件No1およびグラフト条件No34を使用して調製できることを意味し、標的分子を保持し、それから開放するという親和性担体の能力の観点からはグラフト温度および時間の条件は全く設定的なものではないということを示している。特に、短時間1時間および高温室温でアプタマーを結合するための条件によって、アプタマーのグラフト度を100にすることができ、標的のヒト第VII因子に結合するためのグラフトされたアプタマーの能力を全く失わないということが観測される。それに対して、アプタマーをpH38でカップリングした親和性担体で悪い結果が得られたことから、グラフトされたアプタマーの一体性を維持する、特に、標的ヒト第VII因子に結合するグラフトされたアプタマーの能力を維持するためには、pH条件が重要であることを示している。カップリング反応をpH38で実行した場合、出発サンプルを選択的に濃縮してヒト第VII因子をリッチにする能力を維持した親和性担体が得られるが、この親和性担体は第VII因子をかなりロスし20以上、従って、経済的にプロセスを実施できないので、ヒト第VII因子の工業的精製方法としては使えない。実施例7生物媒体との接触段階と強力消毒段階1Mの水酸化ナトリウムとを含む工業的条件下での親和性担体の一体性の維持この実施例7では、工業的プロセス条件下で使用した場合、複数回のサイクル後でも、本発明で定義の親和性担体は標的タンパクを保持、溶出する能力を維持することを示す。7.1.グラフト担体の調製下記3つのアプタマーを使用して実施例1に記載のグラフト方法でグラフト担体を調製した:1グラフト担体No1:5端に親水性C1111アミノ3,6,9トリオキサウンデカン1イル鎖を有する配列SEQIDNo1のMapt2CSポリヌクレオチドから成るアプタマー。2グラフト担体No2:5端に親水性C1111アミノ3,6,9トリオキサウンデカン1イル鎖を有する配列SEQIDNo3のMapt22CSポリヌクレオチドから成るアプタマー。3グラフト担体No3:5端で6メチレンCH2C6スペーサスペーサ鎖と結合した配列SEQIDNo3のポリヌクレオチドが接着したMapt22C5から成るアプタマー。グラフト収率はそれぞれ100グラフト担体No1、93グラフト担体No2および87グラフト担体No3であった。得られた親和性担体の理論上の静的容量すなわち各グラフトアプタマーがヒトFVII分子に結合した場合の親和性担体に保持されるヒトFVIIの量は担体1ミリリットル当たりそれぞれ187mg担体No1、173mgml担体No2および163mgml担体No3であった。7.2.ヒトFVIIの精製方法の操作条件ヒトFVIIがリッチなFVIITG組成物を使用し、最終FVIITG濃度を約50000ppmにした。この組成物はデスgla形のFVIIFVIIの非活性形の比率が高く、この組成物のFVII比活性アミノリシス活性/抗原で表される活性は約04である。一般的プロトコルは下記である:1グラフト担体の容積の5倍の緩衝液容積を使用してTP4緩衝液50mMトリス、10mMCaC12、4mMMgCl2、pH75中で担体を平衡化。2予め10mMCaC12と4mMMgC12とを含む50mMトリス緩衝液に対して透析した原材料FVIITG組成物の注入3洗浄緩衝液グラフト担体の容積の8倍で洗浄、4pH75の50mMトリス、10mMEDTA平衡化緩衝液で平衡化グラフト担体の容積の3倍7.3.ヒトFVII精製用担体の特性7.1に記載の方法で作った3つの担体の活性ヒトFVIIaの選択的保持能をテストした。3つの担体は1ミリリットルのグラフト担体当たり約10mgのヒトFVIIa保持能を有することが分かった。これは7.1で計算した理論上の最大静的容量の53~58を表す。この結果は3つの担体にグラフトしたアプタマーへの接近がよくでき、機能することを示している。71に記載の方法で作った3つの親和性担体は[表8]に示すように活性GLAドメインを有するヒトFVII分子を選択的に保持できる。[表8]の結果は、組成物中に存在するヒトFVIIの総量に対してヒトFVIIを41のみを含む活性GLAドメインを有する組成物から、組成物中に存在するヒトFVIIの総量に対して活性GLAドメイン含むヒトFVIIの70~80から成るヒトFVIIがリッチな最終組成物が得られることを示している。この結果は上記3つの親和性担体はiヒトFVIIを精製でき、ヒトFVIIの非活性形を除去して、ヒトFVIIの活性形がリッチな精製されたFVIIの組成物を得ることができるということを示している。7.4.水酸化ナトリウム処理に対する親和性担体の耐性上記3つの親和性担体の1N水酸化ナトリウム溶液を用いた長時間処理に対する耐久性をテストした。7.1に記載の方法で作った担体を1M水酸化ナトリウム溶液と100時間接触させた。洗浄して水酸化ナトリウムを除去した後に、ヒトFVIIに対する精製した3つの親和性担体の能力を測定した。結果は[表9]に示す。[表9]の結果は、1M水酸化ナトリウムで長時間100時間処理しても担体No1、No2およびNo3のヒトFVIIを精製する能力は有意に変化しないことを示している。7.5.各種生物培地と長時間接触させたときの親和性担体の耐性ヒトFVIIの精製方法の出発材料とし使用可能な各種の生物培地で長期間処理した時の3つの親和性担体の耐久性をテストした。次の2つの生物学的培地をテストした:ヒト血漿の凍結上澄みcryosupematant、ヒト血漿の凍結上澄みcryosupematantおよび被精製組成物との接触のシミュレーション:TP4緩衝液親和性担体の容積の5倍の注入3溶出緩衝液親和性担体の容積の5倍で溶出。41Mソーダ溶液親和性担体の容積の5倍での消毒を10分間行う。5TP4緩衝液親和性担体の容積の10倍で親和性担体を再平衡化。親和性担体No3に対して上記の精製サイクルを15回または30回実行し、15回目または30回目のサイクル後にヒトFVIIに対する親和性担体の能力を求めた。結果は[表11]に示した。[表11]の結果は、標的タンパクの精製をシュミレーションした方法を少なくとも30回実行した後でも、ヒトFVIIを精製する親和性担体の能力は不変であることを示している。"