発芽誘導物質と抗菌剤とを含む消毒組成物であって、前記発芽誘導物質が、前記抗菌剤からの攻撃に対する病原体の感受性を増加させ、かつ、前記抗菌剤が、前記発芽誘導物質を阻害しない、消毒組成物。前記発芽誘導物質が、タウロコール酸塩と少なくとも2種類のアミノ酸とを含む、請求項1に記載の組成物。前記タウロコール酸塩が、タウロコール酸ナトリウムであり、かつ、前記少なくとも2種類のアミノ酸が、ヒスチジン、アルギニン、アスパラギン酸、グリシンおよびバリンである、請求項2に記載の組成物。前記細菌性病原体が、C.ディフィシルCdifficile、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌methicillinresistantStaphylococcusaureus;MRSA、大腸菌Ecoli、緑膿菌Pseudomonasaeruginosa、カンジダアルビカンスCandidaalbicansおよびアスペルギルスニガーAspergillusnigerから選択される病原体である、請求項1~3のいずれか1項に記載の組成物。前記抗菌剤が、塩化ベンジルコニウムbenzylkoniumchlorideとベンジルアルコールとを含む、請求項1~4のいずれか1項に記載の組成物。前記発芽誘導物質が、最終組成物を基準に、1から10mMまでの量で提供され、かつ、前記抗菌剤が、0.01から2までの量で提供される、請求項1~5のいずれか1項に記載の組成物。液体、ゲル、泡、スプレーまたは錠剤の形の、請求項1~6のいずれか1項に記載の組成物。請求項1~7のいずれか1項に記載の組成物をしみ込ませた織物、メッシュまたはガーゼタイプの材料を含む、消毒ワイプ。請求項1~7のいずれか1項に記載の組成物を含む、消毒ハンドウォッシュ、または非生物表面をコーティングするための塗布剤もしくはラッカー。本質的に病原体フリーとなるよう表面を滅菌する方法であって、前記表面を、請求項1~7のいずれか1項に記載の組成物または請求項8に記載の消毒ワイプもしくは請求項8に記載の塗布剤と、前記病原体が発芽し殺傷されるのに十分な時間にわたり接触させることを含む方法。実施例1―発芽誘導物質溶液用のアミノ酸の組み合わせC.ディフィシルの株リボタイプ106株18587、リボタイプ001株8565健康保護局HealthProtectionAgency;HPA、英国北東部およびNCTC11204参考株を、3種類のリボタイプ027株;すなわちR20291嫌気レファレンス研究所AnaerobicReferenceLaboratory、カーディフ、18040および15900HPA、英国北東部と共に用いた。C.ディフィシル芽胞懸濁液の調製C.ディフィシルの芽胞を、以前Shettyetal1999に記載された通りに調製した。血液寒天プレートにC.ディフィシルの当該株を播種し、嫌気的にミニマックス嫌気ワークステーションMiniMACSanaerobicworkstation、ドンホイットリー社DonWhitley、英国シプリー、72時間、37°Cでインキュベートした。次いで、このプレートを移動して、室温で24時間、空気中に放置し、その後、すべてのコロニーを回収し、10mLの50生理食塩水0.9w/vおよび50メタノール変性アルコールmethylatedspiritsの中に入れた。この懸濁液を、ボルテックスで完全に混合し、その後、グラスウールに通して濾過し、使用するまで4°Cで保存した。芽胞懸濁液は、各実験の前に、13000rpmで5分間遠心し、滅菌蒸留水SDW中に再懸濁した。アミノ酸次のアミノ酸を、以下に詳述する実験において使用した:グリシン、L‐イソロイシン、L‐プロリン、D‐アラニン、L‐グルタミン酸、L‐エリンLerine、L‐スレオニン、L‐スパラギン酸Lsparticacid、L‐アルギニン、L‐バリン、L‐ロイシン、L‐グルタミン、L‐トリプトファンおよびL‐アスパラギンすべて、英国、シグマアルドリッチ社から、L‐リシン、L‐ヒスチジンおよびL‐メチオニンBDH社、L‐β‐フェニルアラニンファイソンズ社FisonsならびにL‐システインフルカ社Fluka。チロシンは、蒸留水中には溶解しなかったため、試験しなかった。C.ディフィシルの芽胞に対する共発芽誘導物質としての種々のアミノ酸の有効性すべての発芽誘導物質溶液は、0.4w/vのアミノ酸以前の研究Wheeldonetal2008において用いられたグリシンの濃度および13.8mMw/vタウロコール酸ナトリウムシグマアルドリッチ社、英国十二指腸における生理学的濃度Leverrieretal2003の二倍を含有しており、これらは、蒸留水中に溶解させて、121°Cで15分間オートクレーブ処理を行うことにより滅菌した。13.8mMタウロコール酸ナトリウムsodiumtaurocholate;STを含有する、二倍の濃度のチオグリコール酸塩培地Oxid社、英国も、他の発芽誘導物質溶液に対する比較のために試験した。次いで、各発芽誘導物質溶液100マイクロリットルを、100μLのC.ディフィシル芽胞106CFU/mLを含有するに加え、ボルテックスで完全に混合した。1時間後、この体積全200μLを、9.8mLのウィルキンス‐チャルグレンブロスOxoid社、英国に加え、10分間70°Cに平衡化するかまたは氷上で冷却するかのいずれかを行った。適切な希釈の後に、1mL試料を滅菌ペトリ皿にそれぞれ入れ、その後、0.1w/vSTおよび5v/vウマ脱線維血液を含有する、15mLの融解した偏性嫌気性細菌用寒天培地FAALabM社、英国を加えた。このプレートは、完全に混合し、その後、48時間、37°Cで嫌気的にインキュベートした。この方法は、LevinsonandHyatt1966を基に改変したものであった。C.ディフィシル芽胞の発芽に必要なアミノ酸の最適濃度の決定アルギニン、アスパラギン酸、グリシンおよびヒスチジンは、13.8mMのSTこれは、必要な濃度の二倍であるが、これは、実験中にそれらを1:2希釈するからであると共に、200、20、2、0.2および0.02mMにて調製し、蒸留水中に溶解させた。すべての溶液は、溶解するまで加熱し、また、オートクレーブ処理を行うことにより滅菌した。上記と同じ方法を用いて、C.ディフィシルNCTC11204、リボタイプ027R20291、001および106の芽胞に対して種々の濃度の発芽誘導物質溶液を試験した。C.ディフィシルの6種類の異なる株の芽胞に対するアミノ酸およびタウロコール酸塩の有効性アルギニン、アスパラギン酸、グリシンおよびヒスチジン20mMw/vでは、別々にまたは組み合わせて、13.8mMw/vSTに加え、加熱することにより蒸留水に溶解させ、その後、オートクレーブ処理を行うことにより滅菌した。上記で記載したのと同じ方法を用いて、C.ディフィシルリボタイプ001、106、027R20291、15900および18040およびNCTC11204の芽胞に対するこれらのアミノ酸溶液の有効性を決定した。C.ディフィシル芽胞の発芽に対する緩衝発芽誘導物質溶液のpHの効果アルギニン、アスパラギン酸、グリシンおよびヒスチジン20mMw/vで、13.8mMw/vSTならびに200mMw/vトリスは、蒸留水中に溶解させ、塩酸を用いてpH5、6、7、8および9へと調整し、その後、濾過0.2μmまたはオートクレーブ処理により滅菌した。上記と同じ方法を用いて、C.ディフィシルNCTC11204の芽胞に対して各緩衝溶液を試験した。実施例2―C.ディフィシルに対する、抗菌防腐剤を含有する発芽誘導物質溶液の効果発芽誘導物質溶液100mMw/vグリシン、ヒスチジン、バリン、アスパラギン酸およびアルギニン、13.8mMw/vタウロコール酸ナトリウム、100mMw/vトリス緩衝液、0.04w/v塩化ベンザルコニウム、2v/vベンジルアルコールを含有する溶液は、蒸留水を用いて必要な体積にメスアップし、塩酸を用いてpH7へと調整した。この溶液を加熱し、完全に混合してすべての成分を溶解させ、その後、滅菌のため、0.2μmの孔径に通して濾過したこの溶液は、使用濃度の二倍であるが、これは、実験中にこれを1:2希釈するからである。C.ディフィシル芽胞懸濁液の調製C.ディフィシル芽胞の調製は、上記で述べた通りに調製した。中和剤本中和剤は、Espigaresetal2003を基に改変したものであり、以下のものを含有していた:120mLv/vのTween80、25mLv/vの40メタ重亜硫酸ナトリウム、15.69gw/vのチオ硫酸ナトリウム五水和物、10gw/vのL‐システイン、4gw/vのレシチン。これを蒸留水を用いて1000mLにメスアップした。pHは、7へと調整し、オートクレーブ処理を行って滅菌した。発芽有効性試験100マイクロリットルの発芽誘導物質溶液上記で記載したものを、100μLのC.ディフィシル芽胞106CFU/mLを含有するに加え、ボルテックスで完全に混合した。コントロール用に、100μLの滅菌蒸留水を、100μLのC.ディフィシル芽胞懸濁液と混合した。また、芽胞懸濁液は、塩化ベンザルコニウムおよびトリス緩衝液を含有するアミノ酸またはタウロコール酸塩は含有しない溶液、トリス緩衝液と共にベンジルアルコールを含有するアミノ酸およびタウロコール酸塩は含有しない溶液、ならびに、5種類のアミノ酸およびタウロコール酸塩を含有する抗菌剤を全く含有しない溶液と共にインキュベートした。1時間後、この体積全200μLを、9.8mLの中和剤上記で記載したものに加え、10分間70°Cに平衡化する発芽している細胞を殺傷するための熱ショックかまたは氷上で冷却するコントロールかのいずれかを行った。適切な希釈の後に、1mL試料を滅菌ペトリ皿にそれぞれ入れ、その後、0.1w/vSTおよび5v/vウマ脱線維血液を含有する、15mLの融解した偏性嫌気性細菌用寒天培地FAALabM社、英国を加えた。このプレートは、完全に混合し、その後、嫌気的に、48時間、37°Cでインキュベートしたミニマックス嫌気ワークステーションminiMACSAnaerobicWorkstationドンホイットリーサイエンティフィック社DonWhitleyScientificLtd。この方法は、LevinsonandHyatt1966による以前の研究を基に改変したものであった。結果および考察C.ディフィシルNCTC11204の芽胞に対する、グリシンとの共発芽誘導物質としての他のアミノ酸の有効性グリシンおよびSTを伴う、アルギニン、アスパラギン酸またはヒスチジンとのC.ディフィシルNCTC11204芽胞のインキュベーションは、熱ショック後に、それぞれ、2.7899.8、3.069.99および3.1299.9というCFU/mLの大きな対数減少値をもたらした。バリングリシンおよびSTを伴うおよびロイシングリシンおよびSTを伴うは、それぞれ、1.7298.1および1.6297.6というCFU/mLの対数減少値をもたらしたが、これらは、グリシンおよびSTのみの場合1.85の対数減少値98.6に類似するものであった。試験した他のすべてのアミノ酸は、グリシンおよびタウロコール酸ナトリウムのみの場合よりも小さい対数減少値をもたらした。C.ディフィシルNCTC11204の芽胞に対する、グリシンおよびタウロコール酸ナトリウムの、単独でのおよび組み合わせての、共発芽誘導物質の有効性STを含有する溶液の中へ、最初のスクリーニングからの最も効果的な4種類のアミノ酸アルギニン、アスパラギン酸、ヒスチジンおよびグリシンを一緒に入れて、C.ディフィシル芽胞と共にインキュベートした場合には、STを伴うアルギニン、アスパラギン酸またはヒスチジンのいずれかと共に芽胞をインキュベートした場合しかし、グリシンなしでは、各溶液によってもたらされたのは1未満の対数減少値であったと比べて、3.7199.9というCFU/mLのより大きな対数減少値が、熱ショック後に、もたらされた。C.ディフィシル芽胞の発芽に必要なアミノ酸の最適濃度の決定クロストリジウムディフィシル芽胞の発芽は、アミノ酸濃度が10から100mMまでの間である場合に、試験したすべての株で最適であった。この濃度を下回る場合には、C.ディフィシル芽胞の発芽は有意に減少し、1未満の対数減少が0.1mMおよびそれ以下において観察された。熱ショックを与えずに芽胞を100mMのアミノ酸に曝露した場合には、C.ディフィシルのすべての株でCFU/mLの有意な減少が観察された。C.ディフィシルPCRリボタイプ027の種々の株の芽胞に対するアミノ酸およびタウロコール酸ナトリウムの有効性STと組み合わせた前記4種類のアミノ酸に曝露したC.ディフィシルPCRリボタイプ027のすべての株は、芽胞をチオグリコール酸塩培地およびSTに曝露した場合にもたらされた対数減少値と類似する対数減少値をもたらした。グリシンおよびタウロコール酸ナトリウムと組み合わせた場合には、アスパラギン酸もヒスチジンも、各リボタイプ027株で観察されたCFU/mLの対数減少値を増加させたが、しかしながら、アルギニンは、グリシンおよびSTに加えた場合にCFU/mLの対数減少値のさらなる増加をもたらさなかった。最も興味深かったのは、2つの臨床株18040および15900が、STと組み合わせたチオグリコール酸塩培地または前記4種類のアミノ酸に応答してR20291株よりも有意に大きい対数減少値をもたらしたということであった。C.ディフィシルの6種類の異なる株の芽胞に対するアミノ酸およびタウロコール酸ナトリウムの有効性アミノ酸およびチオグリコール酸塩溶液への曝露後のC.ディフィシルのNCTC11204参考株で、CFU/mLの最も大きい対数減少値がそれぞれ観察された。PCRリボタイプ001は、試験した種々の組み合わせの発芽誘導物質溶液のそれぞれにおいて、PCRリボタイプ207のR20291株に非常によく似た対数減少値をもたらした。例えば、C.ディフィシルリボタイプ001および027R20291では、前記4種類のアミノ酸およびSTとのインキュベーションとその後の熱ショックの後に、それぞれ、2.1299.2および1.9899というCFU/mLの対数減少値がもたらされた。C.ディフィシルNCTC11204芽胞の発芽に対する緩衝発芽誘導物質溶液のpHの効果緩衝発芽誘導物質溶液のpHは、当該アミノ溶液およびSTとのインキュベーションとその後の熱ショックの後にもたらされるCFU/mLの対数減少値に大きく影響する。酸性のpH5では、この発芽溶液は、CFU/mLの対数減少をもたらさなかったが、一方、中性のpH6.98では、CFU/mLの3.32の対数減少値99.9が観察され、;これが最適なpHであることが分かった。よりアルカリ性のpH8.81は、観察されたCFU/mLのこの対数減少値を減少させることとなったが、酸性pHの場合よりずっと小さい程度であった。C.ディフィシルに対する、抗菌防腐剤を含有する発芽誘導物質溶液の効果トリス緩衝液中のアミノ酸とタウロコール酸塩との混合物と共にC.ディフィシル芽胞を1時間インキュベートし、その後、熱ショックを与えた後に、CFU/mLの3を超える対数減少値99.9減少がもたらされた。しかしながら、熱ショックを与えない場合には、このアミノ酸溶液とのインキュベーション後の残存芽胞の数の減少はほとんどなかった0.13の対数減少値。トリス中に塩化ベンザルコニウムを含有する溶液またはトリス中にベンジルアルコールを含有する溶液とのC.ディフィシル芽胞のインキュベーションは、熱ショックがある場合にもない場合にも、0.3未満というCFU/mLの非常に低い対数減少値を生じさせた。しかしながら、トリス中にアミノ酸、タウロコール酸塩、塩化ベンザルコニウムおよびベンジルアルコールを含有する溶液と共にC.ディフィシル芽胞をインキュベートした場合には、氷で処理した芽胞ではCFU/mLの2.77の対数減少値99.8減少、また、熱ショックを与えた芽胞ではCFU/mLの2.99の対数減少値99.9減少となった。EDTAおよびクオロロヘキシジンcholorohexidineは発芽誘導物質溶液を阻害するが、一方、塩化ベンザルコニウムおよびベンジルアルコールは発芽に影響しない、とのことも発明者らは示した。塩化ベンザルコニウムbenzalkoniumcholorideおよびベンジルアルコールは殺芽胞性のものではなく、また、発芽を開始させるものではなかった。加熱処理されなかった芽胞は、塩化ベンザルコニウムbenzalkoniumcholoride、ベンジルアルコール、アミノ酸およびタウロコール酸ナトリウムとの1時間のインキュベーション後に、死滅した。芽胞は、塩化ベンザルコニウムおよびベンジルアルコールを含有する発芽誘導物質溶液でそれらが発芽するがために死滅したように思われる。当該中和剤は、C.ディフィシル細胞および他の細菌に対しては毒性がないとのことが分かった。また、当該中和剤は、これら抗菌剤の活性を無効にするするのに効果的であった。したがって、塩化ベンザルコニウム、ベンジルアルコール、アミノ酸およびタウロコール酸ナトリウムとの1時間のインキュベーション後にもたらされるCFU/mLの減少は、寒天プレートに対するキャリーオーバーの効果の結果である可能性は低い。本願発明者らは、塩化ベンザルコニウムおよびベンジルアルコールが、発芽誘導物質溶液の有効性に影響しない、とのことも見出した。塩化ベンザルコニウムおよびベンジルアルコールは、それ故に、防腐効果を示し、C.ディフィシルの発芽している芽胞を殺傷するようである。芽胞形成に対する発芽溶液の阻害効果図9および10に示す結果は、発芽溶液の存在下での培養72時間後では細胞数のうちの100が未だ栄養細胞であり、一方、コントロールPBS中の培養細胞では細胞数のうちの100が24時間後に芽胞である、とのことを指し示している。これらの結果は、本発明の発芽溶液が、C.ディフィシルの栄養細胞における芽胞形成を妨げる、とのことを示している。