"高度不飽和脂肪酸含有グリセリドに高度不飽和脂肪酸に対して反応性の低いリパーゼを作用させて高度不飽和脂肪酸を濃縮する方法において、リパーゼ反応を25°C以下の温度で行うことを特徴とする飽和脂肪酸含有率を低減させる方法。リパーゼが、カンジダ属、アルカリゲネス属、バークホリデリア属、シュードモナス属、サーモマイセス属、リゾムコール属のいずれかに属する微生物由来のリパーゼである請求項1の方法。高度不飽和脂肪酸含有グリセリドに高度不飽和脂肪酸に対して反応性の低いリパーゼを作用させて高度不飽和脂肪酸を濃縮する方法において、リパーゼ反応を25°C以下の温度で行うことにより製造したグリセリド中の飽和脂肪酸の割合が12面積以下の高度不飽和脂肪酸含有グリセリド。リパーゼが、カンジダ属、アルカリゲネス属、バークホリデリア属、シュードモナス属、サーモマイセス属、リゾムコール属のいずれかに属する微生物由来のリパーゼである請求項3の高度不飽和脂肪酸含有グリセリド。リパーゼ反応によって高度不飽和脂肪酸を濃縮したグリセリドであって、グリセリド中のドコサヘキサエン酸の含有量が40面積以上であり、かつ、飽和脂肪酸の含有量が12面積以下であるグリセリド。グリセリド中のドコサヘキサエン酸の含有量が46面積以上である請求項5のグリセリド。飽和脂肪酸の含有量が10面積以下である請求項5又は6のグリセリド。パルミチン酸の含有量が8面積以下である請求項5ないし7いずれかのグリセリド。パルミチン酸の含有量が6面積以下である請求項8のグリセリド。グリセリド中のトリグリセリドの割合が80面積以上である請求項5ないし9いずれかのグリセリド。グリセリド中のトリグリセリドの割合が85面積以上である請求項10のグリセリド。リパーゼ反応によって高度不飽和脂肪酸を濃縮したグリセリドであって、グリセリド中のエイコサペンタエン酸の含有量が25面積以上であり、かつ、飽和脂肪酸の含有量が20面積以下であるグリセリド。グリセリド中のエイコサペンタエン酸の含有量が28面積以上である請求項12のグリセリド。飽和脂肪酸の含有量が17面積以下である請求項12又は13のグリセリド。上述のとおり、リパーゼ反応を用いて高度不飽和脂肪酸を含有する油脂を製造する方法は種々に検討されているが、本発明は高度不飽和脂肪酸含有油脂に含まれる飽和脂肪酸に着目した発明である。高度不飽和脂肪酸が濃縮された油脂は、ドコサヘキサエン酸以下、DHAとも略す。やエイコサペンタエン酸以下、EPAとも略す。などの有用成分を摂取する目的で使用される。その際、その目的に無関係、あるいはむしろ好ましくない飽和脂肪酸の含有量は少ないほど好ましいと考えられる。本発明は、より飽和脂肪酸の含有率の低い高度不飽和脂肪酸含有油脂を提供することを課題とする。本発明者らは、リパーゼ反応の収率、組成などについてさらに改良を図る余地がないか検討するなかで、製造条件のうち、30~40°Cが至適温度であるとの認識が固定しており、誰も注目しなかった反応温度を調節することにより、予想外の効果が得られることを見出し、本発明を完成させた。本発明は、下記1、2の飽和脂肪酸含有率を低減させる方法、3~14の飽和脂肪酸含有率の低いグリセリドを要旨とする。1高度不飽和脂肪酸含有グリセリドに高度不飽和脂肪酸に対して反応性の低いリパーゼを作用させて高度不飽和脂肪酸を濃縮する方法において、リパーゼ反応を25°C以下の温度で行うことを特徴とする飽和脂肪酸含有率を低減させる方法。2リパーゼが、カンジダ属、アルカリゲネス属、バークホリデリア属、シュードモナス属、サーモマイセス属、リゾムコール属のいずれかに属する微生物由来のリパーゼである1の方法。3高度不飽和脂肪酸含有グリセリドに高度不飽和脂肪酸に対して反応性の低いリパーゼを作用させて高度不飽和脂肪酸を濃縮する方法において、リパーゼ反応を25°C以下の温度で行うことにより製造したグリセリド中の飽和脂肪酸の割合が12面積以下の高度不飽和脂肪酸含有グリセリド。4リパーゼが、カンジダ属、アルカリゲネス属、バークホリデリア属、シュードモナス属、サーモマイセス属、リゾムコール属のいずれかに属する微生物由来のリパーゼである3の高度不飽和脂肪酸含有グリセリド。5リパーゼ反応によって高度不飽和脂肪酸を濃縮したグリセリドであって、グリセリド中のドコサヘキサエン酸の含有量が46面積以上であり、かつ、飽和脂肪酸の含有量が12面積以下であるグリセリド。6グリセリド中のドコサヘキサエン酸の含有量が46面積以上である5のグリセリド。7飽和脂肪酸の含有量が10面積以下である5又は6のグリセリド。8パルミチン酸の含有量が8面積以下である5ないし7いずれかのグリセリド。9パルミチン酸の含有量が6面積以下である8のグリセリド。10グリセリド中のトリグリセリドの割合が80面積以上である5ないし9いずれかのグリセリド。11グリセリド中のトリグリセリドの割合が85面積以上である10のグリセリド。12リパーゼ反応によって高度不飽和脂肪酸を濃縮したグリセリドであって、グリセリド中のエイコサペンタエン酸の含有量が25面積以上であり、かつ、飽和脂肪酸の含有量が20面積以下であるグリセリド。13グリセリド中のエイコサペンタエン酸の含有量が28面積以上である12のグリセリド。14飽和脂肪酸の含有量が17面積以下である12又は13のグリセリド。本発明において、面積とは、各種脂肪酸を構成成分とするグリセリドの混合物をガスクロマトグラフィーや薄層クロマトグラフィー/水素炎イオン化検出器TLC/FIDを用いて分析したチャートのそれぞれの成分のピーク面積の全ピーク面積に対する割合で、そのピークの成分の含有比率を示すものである。脂肪酸組成については実施例に示す方法によるガスクロマトグラフィーにより、脂質組成については、TLC/FIDを用いた。本発明の方法によれば、EPAやDHAなどの高度不飽和脂肪酸が濃縮され、かつ、飽和脂肪酸含有率が少ないグリセリドを製造することができる。健康に好ましいとされる高度不飽和脂肪酸を摂取する際に、余分な飽和脂肪酸の摂取量を低減することができる。以下、本発明を詳細に説明する。本発明において、高度不飽和脂肪酸とは、炭素数18以上、二重結合数3以上の脂肪酸であり、より好ましくは炭素数20以上、二重結合数3以上の脂肪酸である。具体的にはα‐リノレン酸18:3,n‐3、γ‐リノレン酸18:3,n‐6、アラキドン酸20:4,n‐6、ジホモγリノレン酸20:3,n‐6、エイコサペンタエン酸20:5,n‐3、ドコサペンタエン酸22:5,n‐6、ドコサヘキサエン酸22:6,n‐3などが例示される。これらはある種の微生物油、植物油や海産動物油などに多く含まれることが知られている。具体的には、イワシ、マグロ、カツオなどの魚類やオキアミなどの甲殻類の海産動物油、エゴマ、アマ、大豆、菜種などの植物油、モルティエレラMortierella属、ペニシリュームPenicillium属、アスペルギルスAspergillus属、ロードトルラRhodotorula属、フザリュームFusarium属に属するの微生物が産生する油脂などが例示される。本発明において、飽和脂肪酸とは、炭素数14,16,18の飽和脂肪酸である。これらは、エネルギー源としては重要な栄養素であるが、現代の食生活では通常の食事で必要以上に摂取されることが多く、過剰に摂取すべきではない脂肪酸と考えられている。本発明において、高度不飽和脂肪酸含有グリセリドとは、上記の高度不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含有するトリグリセリド、ジグリセリド、およびモノグリセリドである。上記の微生物油、植物油、海産動物油は高度不飽和脂肪酸を含有するトリグリセリドである。本発明において用いるリパーゼは、高度不飽和脂肪酸に対して作用しにくく、加水分解反応で未分解のグリセリド画分中に高度不飽和脂肪酸を濃縮する性質を持てば、どのようなリパーゼでも良い。例えばカンディダシリンドラセCandidacylindracea、カンジダルゴサCandidarugosa由来のリパーゼはDHA、アラキドン酸、γリノレン酸を濃縮する。リゾムコールミエヘイRhizomucormiehei由来のリパーゼもDHA濃縮能を有する。アルカリゲネスエスピーAlcaligenessp、シュードモナスエスピーPseudomonassp由来のリパーゼはEPA濃縮能を有する。これらはいずれも市販されており容易に入手できる。これらは必要に応じて固定化して使用することもできる。例示すれば、カンディダ属由来のリパーゼである、カンディダシリンドラセCandidacylindracea由来のリパーゼを用いることができる。カンディダシリンドラセCandidacylindracea由来のリパーゼとしては、名糖産業株式会社製リパーゼOFが例示される。あるいは、アルカリゲネスエスピーAlcaligenesspに属する微生物から得られるリパーゼリパーゼQLM、リパーゼQLC、リパーゼPL、いずれも名糖産業製、バークホリデリアセパシアBurkholderiacepaciaに属する微生物から得られるリパーゼリパーゼPS、天野エンザイム製、シュードモナスフルオレセンスPseudomonasfluorescensに属する微生物から得られるリパーゼリパーゼAK、天野エンザイム製、サーモマイセスラヌギノサスThermomyceslanuginosaに属する微生物から得られるリパーゼリポザイムTLIM、ノボザイム社製などが挙げられる。リパーゼの使用量は、通常トリグリセリド1gに対して10~2000ユニット、好ましくは200~700ユニットとするのが望ましい。なお1ユニットは1分間に1マイクロモルの脂肪酸を遊離する酵素量である。リパーゼによる加水分解反応は、リパーゼの加水分解活性が発現するのに十分な量の水の存在下に行う必要がある。水の存在量としては、トリグリセリドに対して10~200重量、好ましくは50~150重量とするのが望ましい。また加水分解は、脂肪酸の劣化、酵素の失活などを抑制するため、乾燥窒素等の不活性ガス雰囲気下で行うことが好ましい。またトコフェロール、アスコルビン酸、t-ブチルハイドロキノンなどの抗酸化剤を併用しても良い。加水分解反応は25°C以下、好ましくは10~25°C、さらに好ましくは15~20°Cで行う。低温であるほど、飽和脂肪酸の含有率を低下させるのには好ましいが、10°C以下では酵素反応の速度自体が遅くなりすぎる点や油脂の粘度が高くなる点に配慮すると、15~20°C前後が最も好ましい。大量反応の場合、反応相を平均15~20°Cになるよう設定し、±5°C程度の範囲に保持しながら反応を行えばよい。加水分解反応は撹拌や不活性ガス等の吹込による流動などによって行う。加水分解は、構成脂肪酸中に占めるドコサヘキサエン酸の割合が目的濃度になるまで反応を行う。条件は原料油脂により異なるが、例えばマグロ油DHA23程度含有などを原料とする場合、反応時間は7時間以上が好ましく、通常5~24時間加水分解することにより、1回のリパーゼ反応で、ドコサヘキサエン酸の割合は46面積以上になる。さらに長い時間反応させてもかまわない。実施例に示すように65時間反応しても悪影響はなかった。また酸価を加水分解の程度を示す指標とすることもでき、通常酸価が140以上になればドコサヘキサエン酸の割合は46面積以上になる。このようにして加水分解を行うことにより、未反応のトリグリセリドおよび加水分解物の混合物が反応液として得られる。高度布飽和脂肪酸に対して反応性が低いリパーゼはによる加水分解が進行するに従って、反応液中の未反応のトリグリセリドおよび部分グリセリドにおける構成脂肪酸中に占めるドコサヘキサエン酸やエイコサペンタエン酸などの高度布飽和脂肪酸の割合は高くなり、加水分解終了時にはドコサヘキサエン酸の濃度が40面積以上になるまで濃縮される。一方、遊離脂肪酸は大部分が高度不飽和脂肪酸以外の脂肪酸で占められる。加水分終了後は、遠心分離などによりリパーゼおよびグリセリンなどを含む水層を除去して油層の反応液を得た後、遊離脂肪酸を除去する。遊離脂肪酸の分離除去方法としては、アルカリ塩として除去する方法、液体クロマトグラフィー装置を用いる方法、分別留分法、結晶分別法など、公知の方法が採用できるが、分子蒸留、水蒸気蒸留が好ましい。遊離脂肪酸を除去することにより、高濃度でドコサヘキサエン酸を含有するトリグリセリドおよび部分グリセリドのグリセリド混合物が得られる。本発明の低温反応でドコサヘキサエン酸が40面積以上、さらには46面積以上に濃縮され、かつ、炭素数14,16,18の飽和脂肪酸量の合計が12面積以下、好ましくは、10面積以下のグリセリドを得ることができる。特に飽和脂肪酸の中でも含有量が多いパルミチン酸炭素数16の含有量が8面積以下、好ましくは6面積以下であるものが好ましい。また、低温でリパーゼ反応すると、得られる反応油中のグリセリドの脂質組成がトリグリセリドの比率の高いものとなった。実施例に示したマグロ精製魚油やカツオ精製魚油のようなドコサヘキサエン酸を多く含有する油脂を原料とした場合、40°Cではトリグリセリドの比率が70面積代程度であるが、低温反応では80面積以上のものが得られた。本発明のリパーゼ反応油脂について、脱酸、脱色、脱臭処理を行うことによって、高度不飽和脂肪酸が濃縮され、かつ、飽和脂肪酸含有量が低減されたグリセリドを得ることができる。脱酸、脱色、脱臭はどのような方法で行ってもよいが、脱酸処理は蒸留処理により、脱色処理は活性白土、活性炭などによる処理により、脱臭処理は水蒸気蒸留などにより行う。脱酸処理を蒸留で行うと、同時にモノグリセリドも除去されるので、得られる油脂のトリグリセリド比率をさらに高めることができる。トリグリセリドが85面積以上、好ましくは90面積以上のものを得ることもできる。以下に本発明の実施例を記載するが、本発明はこれらに何ら限定されるものではない。各実施例において、脂肪酸組成、酸価の測定は以下の方法で行った。脂肪酸組成の測定原料に用いた魚油の脂肪酸組成は、魚油をエチルエステル化してガスクロマトグラフィーにて測定した。すなわち、魚油40μLに1Nナトリウムエチラート/エタノール溶液1mLを加え、約30秒間撹拌した。その後、1N塩酸を1mL加えて中和し、ヘキサン2mL、飽和硫酸アンモニア水溶液3mLを加え、撹拌、静置後、上層をガスクロマトグラフィーにて測定した。酵素反応を行った油のグリセリド画分脂肪酸組成はグリセリド画分をエチルエステル化してから、酵素反応の副生成物である遊離脂肪酸を除去し、ガスクロマトグラフィーにて測定した。すなわち、反応油70μLに1Nナトリウムエチラートエタノール溶液1mLを加え、約30秒間撹拌した。その後、1N塩酸を1mL加えて中和後、ヘキサン700μLおよび飽和硫酸アンモニア水溶液3mLを加え撹拌、静置後、エチルエステルと遊離脂肪酸を含有する上層を回収した。得られた上層から遊離脂肪酸を除去する操作を以下の通りに行った。回収した上層であるエチルエステルと遊離脂肪酸が溶解したヘキサン溶液700μLにトリエチルアミンを10~20μL加えて振り混ぜてから、固相抽出カートリッジVarian社、BONDELUTSI、100mg、1mLに全量を負荷し、ヘキサンと酢酸エチルの混合溶液ヘキサン:酢酸エチル=50:1容積比1mLにてエチルエステルを溶出させて遊離脂肪酸を除去した。これをガスクロマトグラフィーにて測定した。ガスクロマトグラフィー分析条件機種;Agilent6850GCsystemカラム;DB-WAXJW122-7032カラム温度;200°C注入温度;300°C注入方法;スプリットスプリット比;50:1検出器温度:300°C検出器:FIDキャリアーガス:ヘリウム酸価AVの測定本発明の実施例において、酸価AVの測定は基準油脂分析試験法2003年度版社団法人日本油化学会編に準じて行った。油約0.5gをエタノールに溶解し、フェノールフタレイン1滴を加え、1N水酸化ナトリウム水溶液で中和滴定を行い、下式により算出した。AV=滴定量mL×56.11/サンプル重量g脂質組成の測定脂質組成は薄層クロマトグラフィー/水素炎イオン化検出器TLC/FID,イアトロスキャン、三菱化学ヤトロン株式会社にて行った。油20μLをヘキサン1mLに溶解し、クロマロッドに0.5μLを負荷した。ヘキサン、ジエチルエーテル、酢酸の混合溶液ヘキサン:ジエチルエーテル:酢酸=70:30:0.1容積比を展開溶媒として用い、35分間展開した。これをイアトロスキャンにて分析した。[実施例1]精製魚油1脱酸マグロ油、日本水産株式会社3mLに水1.5mLとリパーゼOF5mg名糖産業株式会社、600unit/mL油を加えて、10~60°Cの恒温槽内でマグネチックスターラーにて14時間撹拌した。14時間撹拌後、反応油約2mLをサンプリングし、80°Cで10分間加熱してリパーゼを失活させ、その後遠心分離機40°C、1800g、10分にて油層と水層とを分離し反応油を得た。得られた反応油のグリセリド画分の脂肪酸組成面積及び酸価と精製魚油1の脂肪酸組成面積を表1に示した。また、ガスクロマトグラフィーで得られたグリセリド画分中のミリスチン酸C14:0、パルミチン酸C16:0、ステアリン酸C18:0含量面積の合計を飽和脂肪酸含量として示した以下、実施例中で飽和脂肪酸含量と記載するときは同じ意味で用いる。反応温度30~60°Cでは飽和脂肪酸含量が15程度なのに対して、25°Cでは11.40、20°Cでは9.36、15°Cでは7.74、10°Cでは8.42と低温で反応すると大幅に減少した。10~25°Cで飽和脂肪酸含量が大幅に減少した。また、10°Cでは他の温度条件より反応速度が劣り、酸価AVが113.9と低い結果であったが、そのような条件においても飽和脂肪酸含量は8.42と低く、酸価AVが125.1と加水分解反応がより進行した40°C条件よりも大幅に低減された。リパーゼ加水分解反応で一般的に実施される温度帯40°C付近と飽和脂肪酸低減効果を比較するために、40°CでのDHAとEPA含量の合計、及び飽和脂肪酸含量を100としたときのそれぞれの温度での該当脂肪酸含量の割合をプロットし図1に示した。この図から、10~25°Cの条件でEPA、DHA含量は高いままで飽和脂肪酸含量が大幅に低減していることが分かる。[実施例2]精製魚油2脱酸マグロ油、日本水産株式会社200gに水100gとリパーゼOF320mg名糖産業株式会社、640unit/ml油を加えて、10~40°Cにて撹拌羽にて20時間撹拌した。20時間撹拌後、反応油を80°Cで15分間加熱してリパーゼを失活させ、その後上層の反応油を得た。得られた反応油のグリセリド画分の脂肪酸組成面積及び酸価と精製魚油2の脂肪酸組成面積を表2に示した脂肪酸組成については代表的な脂肪酸のみ。ここでグリセリド含量は酸価からオレイン酸相当として遊離脂肪酸含量を算出し、反応油全体から差し引いて算出した。また、ガスクロマトグラフィーで得られたグリセリド画分中のミリスチン酸C14:0、パルミチン酸C16:0、ステアリン酸C18:0含量面積の合計を飽和脂肪酸含量として示した。35、40°Cに比べ10~25°Cでは飽和脂肪酸含量が大幅に低減された。上記結果を図1同様に40°C反応油の結果を100としたときの各温度条件でのグリセリド画分中EPAとDHA含量、飽和脂肪酸含量を図2に示した。この図から、10~25°Cの条件でEPA、DHAは高いままで飽和脂肪酸が大幅に低減していることが分かる。[実施例3]8mLの精製魚油1に水4mLとリパーゼOF13.3mg600unit/mL油または6.7mg300unit/mL油を加えて、撹拌羽で撹拌した。反応温度は20°Cとした。2、5、8、14、20時間後に約1~2gをサンプリングし、80°Cで10分間加熱してリパーゼを失活させ、その後遠心分離機40°C、1800g、10分にて油層と水層とを分離し反応油を得た。時間ごとの飽和脂肪酸含量面積、EPAとDHA含量面積を図3、4に示した。反応時間とともに飽和脂肪酸含量は大幅に低減し、EPAとDHA含量は増加した。[比較例1]反応温度を40°Cにする以外は、実施例3のリパーゼを600unit/mL用いた場合と同じ条件、操作で反応を行った。時間ごとの飽和脂肪酸含量面積、EPAとDHA含量面積を図5に示した。飽和脂肪酸含量は反応2時間で15.0まで減少したが、反応時間が長くなっても更なる減少は認められず、15程度の高い含量で推移した。[実施例4、比較例2]精製魚油3脱酸マグロ油、日本水産株式会社3mLに水1.5mLとリパーゼOF5mg600unit/mL油を加えて、20°Cの恒温槽内でマグネチックスターラーにて14時間撹拌した。14時間撹拌後、反応油約2mLをサンプリングし、80°Cで10分間加熱してリパーゼを失活させ、その後遠心分離機40°C、1800g、10分にて油層と水層とを分離し反応油を得た。比較例として、上記実施例4の条件を温度だけ変化させて40°Cにて反応を行った。温度以外はすべて同じ条件、操作である。実施例4と比較例2の飽和脂肪酸含量面積、EPAとDHA含量面積を図6に示した。この図から20°C条件の場合、40°C条件と比較して飽和脂肪酸含量が大幅に減少し、EPA、DHA含量は若干増加することが分かった。[実施例5]精製魚油4脱酸マグロ油、日本水産株式会社6,000L、水3,000L、リパーゼOFを5kg300unit/mL油反応タンクに仕込み、20~25°Cに保ちながら21時間撹拌して反応を行った。21時間後に反応油約50gをサンプリングし、80°Cで10分間加熱してリパーゼを失活させ、上層の反応油を得た。精製魚油の飽和脂肪酸含量面積とEPAとDHA含量面積、反応油グリセリド画分中の飽和脂肪酸含量面積、EPA、DHA含量面積を図7に示した。大きいスケールで反応を行っても、EPAとDHAが濃縮されるとともに飽和脂肪酸含量が10以下と大幅に低減されることが確認された。[実施例6]実施例1の10、20、40、50°C条件での反応油に関してグリセリド画分中の脂質組成面積を測定した。表3に示すように、10、20°Cで反応するとトリグリセリドの比率が80面積以上のものを得ることができた。一方、40、50°Cで反応した場合は72.8、59.9程度であった。低温でリパーゼ反応を行うことにより、飽和脂肪酸含有量を低下させることができるだけでなく、トリグリセリドの比率を高めることができることが示された。[実施例7、比較例3]精製魚油5精製イワシ油、日本水産株式会社2gに、水2mL、リパーゼQLM名糖産業株式会社100~600unit/g油を加えて、20°Cまたは40°Cの温度条件下、マグネチックスターラーにて17~65時間撹拌した。その後、反応液を90°Cで15分間加熱してリパーゼを失活させ、遠心分離機室温、3000rpm、5分にて油層と水層とを分離し反応油を得た。得られた反応油の酸価、グリセリド画分の脂肪酸組成面積、加水分解率と精製魚油5の脂肪酸組成面積を表4に示した。加水分解率は酸価および精製魚油5のケン化価206.04より下記式にて算出した。加水分解率=酸価/ケン化価×100また、加水分解率と脂肪酸組成面積の関係を図8に示した。表4および図8から、リパーゼQLMを用いたEPA濃縮反応においても、20°Cで反応すると一般的に実施される温度帯である40°Cと比べ飽和脂肪酸含量が低減した。"