融合ループ1ドメイン及び融合ループ2ドメインを含むgBタンパク質細胞外ドメインの少なくとも一部分を含むサイトメガロウイルスgBポリペプチドであって、前記FL1及びFL2ドメインの少なくとも一つが少なくとも一つのアミノ酸欠失又は置換を含む、前記サイトメガロウイルスgBポリペプチド。前記細胞外ドメインのアミノ酸の少なくとも50、少なくとも70、少なくとも80、少なくとも90を含むか又は前記細胞外ドメイン全体を含む、請求項1に記載のCMVgBポリペプチド。非機能性膜貫通ドメインを含む、請求項1又は2に記載のCMVgBポリペプチド。前記TMドメインの少なくとも一部分の欠失を含む、請求項3に記載のCMVgBポリペプチド。前記TMドメインのアミノ酸の少なくとも50、少なくとも70、少なくとも80又は少なくとも90が欠失されている、請求項4に記載のCMVgBポリペプチド。配列番号1に記載の配列の位置725~775の又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置のアミノ酸の欠失を含む、請求項4又は5に記載のCMVgBポリペプチド。配列番号1に記載の配列の位置701~775の又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置のアミノ酸の欠失を含む、請求項4又は5に記載のCMVgBポリペプチド。前記FL1ドメインに少なくとも一つのアミノ酸欠失又は置換を含む、請求項1~7のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチド。前記FL2ドメインに少なくとも一つのアミノ酸欠失又は置換を含む、請求項1~8のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチド。前記FL1及びFL2ドメインの両方に少なくとも一つのアミノ酸欠失又は置換を含む、請求項1~7のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチド。細胞質ドメインの少なくとも一部分の欠失を含む、請求項1~10のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチド。前記細胞質ドメインの少なくとも一つの疎水性アミノ酸領域の欠失を含む、請求項11に記載のCMVgBポリペプチド。配列番号1に記載の配列のアミノ酸825~877の又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置のアミノ酸の欠失を含む、請求項12に記載のCMVgBポリペプチド。前記細胞質ドメインのアミノ酸の少なくとも80、少なくとも90、少なくとも95の欠失又は前記細胞質ドメイン全体の欠失を含む、請求項11に記載のCMVgBポリペプチド。前記融合ループFL1ドメインにおける少なくとも一つのアミノ酸置換が、配列番号1に記載の配列の位置155~157に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるYIYから選択される少なくとも一つのアミノ酸の、芳香族アミノ酸以外の極性アミノ酸での置換を含む、請求項1~14のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチド。前記置換が、配列番号1に記載の配列の位置155~157又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるYIYから選択される少なくとも二つのアミノ酸の、芳香族アミノ酸以外の極性アミノ酸での置換を含む、請求項15に記載のCMVgBポリペプチド。前記極性アミノ酸がリシン、ヒスチジン及びアルギニンから成る正に荷電したアミノ酸の群から選択される、請求項15又は16に記載のCMVgBポリペプチド。配列番号1に記載の配列の位置156に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるイソロイシンがヒスチジンで置換されている、請求項17に記載のCMVgBポリペプチド。配列番号1に記載の配列の位置157に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるチロシンがアルギニンで置換されている、請求項17又は18に記載のCMVgBポリペプチド。配列番号1に記載の配列の位置155に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるチロシンがグリシンで置換されている、請求項15~19のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチド。配列番号1に記載の配列の融合ループFL1ドメインにおける位置155~157に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるアミノ酸YIYがアミノ酸GHRでそれぞれ置換されている、請求項1~14のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチド。配列番号1に記載の配列の融合ループFL1ドメインにおける位置155~157に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるアミノ酸YIYがカイト及びドーリトルスケールで測定される疎水性スコア3未満、7未満、8未満を有するアミノ酸のストレッチで置換されている、請求項1~14のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチド。前記融合ループFL2ドメインにおける少なくとも一つのアミノ酸置換が、配列番号1に記載の配列の位置240~242に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるWLYから選択される少なくとも一つのアミノ酸の、リシン、ヒスチジン及びアルギニンから成る群から選択される正に荷電したアミノ酸での置換を含む、請求項1~22のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチド。配列番号1に記載の配列の位置240~242に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるWLYから選択されるアミノ酸が、ヒスチジンで置換されている、請求項23に記載のCMVgBポリペプチド。配列番号1に記載の配列の位置242に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるチロシンが、ヒスチジンで置換されている、請求項23又は24に記載のCMVgBポリペプチド。配列番号1に記載の配列の融合ループFL2ドメインにおける位置240~242に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるアミノ酸WLYが、アミノ酸AFHでそれぞれ置換されている、請求項1~22のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチド。リーダー配列の少なくとも一部分の欠失を含む、請求項1~26のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチド。リーダー配列のアミノ酸の少なくとも40、少なくとも50、少なくとも70、少なくとも80、少なくとも90又はリーダー配列全体の欠失を含む、請求項27に記載のCMVgBポリペプチド。リーダー配列のアミノ酸の少なくとも40、少なくとも50、少なくとも70、少なくとも80、少なくとも90又はリーダー配列全体の欠失を含むCMVgBポリペプチド。請求項1~26のいずれか1項に記載の一つ以上の特徴をさらに含む、請求項29に記載のCMVgBポリペプチド。配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16、配列番号18、配列番号19、配列番号20及び配列番号21に記載の配列から成る群から選択される配列を有するCMVgBポリペプチド。CMVgBポリペプチドの集団を含む調製物であって、前記集団の少なくとも50、少なくとも60又は少なくとも70が三量体形態である、前記調製物。適切な薬学的担体と混合した請求項1~31のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチドを含む免疫原性組成物。pUL131、gL、gH、pUL128、pUL130又はこれらのいずれかの組合せから成る群から選択される少なくとも1個以上のCMV抗原をさらに含む、請求項33に記載の免疫原性組成物。アジュバントをさらに含む、請求項33又は34に記載の免疫原性組成物。アジュバントがリポソーム製剤中の3DMPL及びQS21を含む、請求項35に記載の免疫原性組成物。アジュバントが水中油型乳剤を含む、請求項35に記載の免疫原性組成物。請求項1~31のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号11、配列番号13、配列番号15及び配列番号17に記載の配列から成る群から選択される配列を有するポリヌクレオチド。請求項38又は39に記載のポリヌクレオチドを含む組換えベクター。請求項40に記載の組換えベクターで形質転換された宿主細胞。CMV感染の予防及び又は治療における使用のための、請求項1~31のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチド又は請求項33~37のいずれか1項に記載の組成物。CMV感染を予防及び又は治療するための医薬の調製における請求項1~31のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチド又は請求項33~37のいずれか1項に記載の組成物の使用。新生児における先天性CMV感染を予防するための請求項42又は43に記載の使用。請求項1~31のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチドを含む組成物又は請求項33~37のいずれか1項に記載の組成物の免疫学的有効量を対象に投与するステップを含む、CMVに対する免疫応答を誘発するための方法。請求項1~31及び33~37のいずれか1項に記載のCMVgBポリペプチドを含む組成物の免疫学的有効量を対象に投与するステップを含む、新生児においてCMVの先天性感染を予防するための方法。対象がCMV血清陰性対象である、請求項42~44のいずれか1項に記載の使用又は請求項45若しくは46に記載の方法。前記CMV血清陰性対象が出産年齢の女性である、請求項47に記載の使用又は方法。前記CMV血清陰性対象が青年期の女子である、請求項47に記載の使用又は方法。本発明の第一の態様では、融合ループ1ドメイン及び融合ループ2ドメインを含むgBタンパク質細胞外ドメインの少なくとも一部分を含むサイトメガロウイルスgBポリペプチドであって、前記FL1及びFL2ドメインの少なくとも一つが少なくとも一つのアミノ酸欠失又は置換を含むCMVgBポリペプチドが提供される。第二の態様では、リーダー配列のアミノ酸の少なくとも40、少なくとも50、少なくとも70、少なくとも80、少なくとも90又はリーダー配列全体の欠失を含むCMVgBポリペプチドが提供される。第三の態様では、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16、配列番号18、配列番号19、配列番号20及び配列番号21に記載の配列からなる群から選択される配列を有するCMVgBポリペプチドが提供される。第四の態様では、CMVgBポリペプチドの集団を含む調製物であって、前記集団の少なくとも50、少なくとも60又は少なくとも70が三量体形態である調製物が提供される。第五の態様では、適切な薬学的担体と混合した本発明のCMVgBポリペプチドを含む免疫原性組成物が提供される。さらなる態様では、本発明のCMVgBポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが提供される。なおさらなる態様では、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号11、配列番号13、配列番号15及び配列番号17に記載の配列からなる群から選択される配列を有するポリヌクレオチドが提供される。なおさらなる態様では、本発明のポリヌクレオチドを含む組換えベクターが提供される。なおさらなる態様では、本発明の組換えベクターで形質転換された宿主細胞が提供される。なおさらなる態様では、CMV感染を予防及び又は治療するための医薬の調製における本発明のCMVgBポリペプチドの使用が提供される。なおさらなる態様では、CMV感染の予防及び又は治療における使用のための本発明のCMVgBポリペプチドが提供される。なおさらなる態様では、本発明のCMVgBポリペプチドを含む組成物の免疫学的有効量を対象に投与するステップを含む、CMVに対する免疫応答を誘発するための方法が提供される。配列表の説明配列番号1CMVAD169株由来の全長gBポリペプチドのアミノ酸配列。配列番号2CMVAD169株由来のgBDeltaTMポリペプチドのアミノ酸配列。配列番号3CMVAD169株由来のgBSLP12ポリペプチドのアミノ酸配列。配列番号4CMVAD169株由来のgBSLP12Del2ポリペプチドのアミノ酸配列。配列番号5CMVAD169株由来のgBSLP1Del2ポリペプチドのアミノ酸配列。配列番号6CMVAD169株由来のgBSLP12ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列。配列番号7CMVAD169株由来のgBSLP1Del2ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列。配列番号8CMVAD169株由来のgBSLP12Del2ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列。配列番号9CMVAD169株由来のgBSLP12Delta725ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列。配列番号10CMVAD169株由来のgBSLP12Delta725ポリペプチドのアミノ酸配列。配列番号11CMVAD169株由来のgBSLP12Delta113ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列。配列番号12CMVAD169株由来のgBSLP12Delta113ポリペプチドのアミノ酸配列。配列番号13CMVAD169株由来のgBSLP12Delta725LVL759ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列。配列番号14CMVAD169株由来のgBSLP12Delta725LVL759ポリペプチドのアミノ酸配列。配列番号15CMVAD169株由来のgBSLP12Delta725LVL776ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列。配列番号16CMVAD169株由来のgBSLP12Delta725LVL776ポリペプチドのアミノ酸配列。配列番号17CMVAD169株由来のgBSLP12Delta725CD33ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列。配列番号18CMVAD169株由来のgBSLP12Delta725CD33ポリペプチドのアミノ酸配列。配列番号19CMVAD169株由来のgBSLP12Delta725LVL759ポリペプチドの成熟形態でのアミノ酸配列。配列番号20CMVAD169株由来のgBSLP12Delta725LVL776ポリペプチドの成熟形態でのアミノ酸配列。配列番号21CMVAD169株由来のgBSLP12Delta725CD33ポリペプチドの成熟形態でのアミノ酸配列。詳細な説明本発明は、優れた免疫原性及び良好な加工特徴を示す新規CMVgBポリペプチドに関する。本発明のgBポリペプチドは、ワクチンなどの免疫原性組成物への包含のための抗原として特に適切である。詳細には、本発明のgBポリペプチドは、改善された均一な生成物プロファイルを示す。実際、本発明者らは発現において、膜貫通ドメインを欠いているgBポリペプチドなどの先行技術のgBポリペプチドが高分子量多量体を含む、集団を不均一にするさまざまなサイズの多量体に会合したことを認めた。本発明者らは多量体プロファイルが安定でなく、所与のサイズの多量体の割合が実験ごとに変化したことも認めた。この種の可変性と不安定性はワクチン製剤の観点においては許容されない。したがって改善された均一かつ安定な生成物プロファイルを表すCMVgBポリペプチドに対する必要性は残っている。同様に高分子量多量体への凝集も組換えポリペプチドの続く精製のプロセスに悪影響を有する場合がある。したがって改善された加工特徴を表すCMVgBポリペプチドに対する必要性は残っている。膜貫通ドメインを欠いているCMVgBポリペプチドは、EP0802979に記載されている。驚くべきことに本発明者らは、膜貫通ドメインを欠いているCMVgBポリペプチドなどの特定の領域における突然変異の導入が、対応する非突然変異ポリペプチドよりも集団がさらに均一であるだけでなく実験ごとで安定しているプロファイルも示すなどの改善されたプロファイルの生成物をもたらすことを認めた。詳細には、高分子量多量体は減少し、三量体の割合が2倍増加している。典型的には、三量体は、本発明のCMVgBポリペプチド集団の少なくとも50、適切には少なくとも60、より適切には少なくとも70に相当する。膜貫通ドメインを欠いているCMVgBポリペプチドと比較してこれらの突然変異は、得られた突然変異体の発現レベルに影響を与えず、分泌レベルにも影響しない。これらの突然変異は、免疫応答を誘導することに関与すると周知であるCMVgBの抗原性エピトープの外側にある。膜貫通ドメインを欠いている先行技術のポリペプチドなどポリペプチドが高分子量多量体に会合する集団から、ポリペプチドのより簡便でより良い精製に関連する改善された三量体化プロファイルをポリペプチドが有する集団への移行が認められた。詳細には、本発明者らは、本発明によるポリペプチドの精製収率が膜貫通ドメインを欠いている先行技術のCMVgBポリペプチドで得られた精製収率より顕著に高いことを認めた。収率の改善は、少なくとも2倍、おそらく少なくとも3から5倍である。付加的に本発明による新規ポリペプチドにおけるさらなる突然変異が、先行技術のポリペプチドよりもさらに効率的に発現及び分泌されるポリペプチドをもたらすために示される。そのような特性は、抗原産生が典型的には限定因子である分野、ワクチン製造に関する抗原産生の観点において顕著な利点を示す。本発明者らは、膜貫通ドメインを欠いているCMVgBポリペプチドなどの先行技術gBポリペプチドが、ポリペプチドのN末端及びC末端に不均一性を示したことも認めた。実際に本発明者らは、細胞中での組換え発現及び分泌後に異なるサイズを有するポリペプチドの少なくとも二つの異なる形態をもたらすクリッピングがgBのC末端細胞質ドメインにおいて生じたことを認めた。ワクチンへのなどの免疫原性組成物中への包含の目的のために、主に一つの単一形態からなるという意味でgBポリペプチドの均一な集団を有することは好ましい。本発明者らは、C末端細胞質ドメインの少なくとも一部を欠失させると、クリッピングはもはや生じず、gBの単一形態から主になるポリペプチドの集団をもたらすことを見出した。同様に、膜貫通ドメインを欠いているCMVgBポリペプチドなどの先行技術gBポリペプチドが、ポリペプチドのN末端部分において不均一性を示すことが認められた。実際に本発明者らは、ポリペプチドの組換え発現及び分泌後にシグナル配列がシグナルペプチダーゼによってさまざまなアミノ酸位置で切断され、したがって、さまざまなN末端を有するgB成熟ポリペプチドの集団が生じたことを認めた。この現象は、シグナルペプチダーゼのゆらぎとも称される。効率化の目的で、詳細には安定のために、抗原が可能な限り均一で、可能な限り未分解であるようにワクチンに含まれ、それによりワクチンロットに再現性があり、安定であることはワクチン分野において重要である。改善された均一な生成物プロファイルが本発明のCMVgBポリペプチドの集団が少なくとも50の三量体からなることを意味することは、本発明の意味において理解される。典型的には、本発明のCMVgBポリペプチド集団を含む調製物は、少なくとも50、適切には少なくとも60、より適切には少なくとも70の三量体からなる。そのような少なくとも50の三量体のプロファイルも本明細書において改善された三量体化プロファイル又は三量体に富んだプロファイルと称される。これらの用語は、同義かつ互換的であると考えられる。ポリペプチドのC末端部分における均一性不均一性に関して、不均一集団は、集団が異なるサイズを有する少なくとも二つのポリペプチドからなることを意味し、一方、均一集団は所与のサイズの単一ポリペプチドから主になる集団として理解される。ポリペプチドのN末端部分における均一性不均一性に関して、不均一集団は、集団がN末端の異なるアミノ酸でそれぞれ始まるさまざまな成熟ポリペプチドからなることを意味する。反対に本発明により均一集団は、N末端が所与の同一のアミノ酸で不変的に始まる単一の成熟ポリペプチドから主になる集団として理解される。本発明において成熟ポリペプチドは、シグナル配列が切除されているポリペプチドを意味する。典型的には本発明の意味でのN末端均一集団においてシグナル配列の切断後に産生された成熟ポリペプチドの30を超える、適切には少なくとも80、より適切には80から90、より適切には少なくとも99はN末端が同じアミノ酸で始まる。したがって一実施形態では、シグナル配列の切断後に産生された成熟CMVgBポリペプチドの集団であって、成熟gBポリペプチドの少なくとも30、少なくとも80、80から90がN末端に同じアミノ酸を含む集団を含む調製物が提供される。詳細には、本発明の成熟ポリペプチドは、適切にはN末端位置がセリン又はヒスチジンで始まる。gBは、多数の役割を有するエンベロープ糖タンパク質Bである。それは、HCMVゲノムのUL55遺伝子によってコードされている。gBの天然形態のサイズは、株ごとに若干変わる場合があるオープンリーディングフレームのサイズに依存する。例えば2717bp長のAD169株のORFは906アミノ酸の全長gBをコードするが、Towne株のORFは907アミノ酸の全長gBをコードしている。本発明は、任意のCMV株に由来するgBタンパク質に適用可能であるが、理解を容易にするために本明細書におけるアミノ酸位置に関して番号付けは、他に記載する場合を除いて、AD169株に由来する配列番号1のgBポリペプチドのアミノ酸配列との関係で与えられる。しかし本発明は、AD169株に限定されない。任意の他のCMV株のgBポリペプチドの同等のアミノ酸位置は、容易に利用可能な十分に周知のアラインメントアルゴリズムを用いてアミノ酸配列をアラインすることにより当業者によって決定され得る。したがって他のCMVgBポリペプチドに言及する場合、それはAD169とは異なる任意の株のCMVgBポリペプチドとして理解される。AD169gBの天然形態は、タンパク質のN末端からC末端方向にポリペプチドを分泌へ標的化することを含むポリペプチドの細胞内輸送に関与することが周知であるアミノ酸シグナル配列、又はシグナルペプチド、に続いてリーダー配列と称される領域、配列番号1に記載の配列のアミノ酸456と460との間のフューリン型の内部タンパク質分解切断部位を含有する細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン及びC末端細胞質ドメインを含有する。さらにアミノ酸のストレッチが別のヘルペスウイルス由来のgBタンパク質との配列アラインメントに基づいて推定融合ループとしてCMVgBのアミノ酸配列中に同定されている9596600。HSV融合ループは実験的に決定された68256836。前記ストレッチは、宿主細胞とのウイルスの融合にそれらが関与するためにそう呼ばれた。上の文献により、本明細書の残りにおいてFL1及びFL2と称される二つの推定ループがCMVgBにおける配列アラインメントによって同定された。前記融合ループは、膜貫通ドメイン上流のタンパク質の細胞外ドメインにある。驚くべきことに、本発明者らは、特定のアミノ酸を突然変異させることによって非機能性膜貫通ドメインを有するCMVgBポリペプチドの融合ループFL1及びFL2を破壊することが、非機能性膜貫通ドメインを有するがインタクトな融合ループを有するCMVgBポリペプチドと比較して発現において改善された三量体化プロファイルを示す生成物を生じることを認めた。したがって一部の実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、融合ループFL1又はFL2の少なくとも一つに例えばアミノ酸置換又は欠失などの突然変異を含む。適切には、本発明のポリペプチドは、少なくとも一つのアミノ酸置換又は欠失を融合ループFL1に含む。適切には、本発明のポリペプチドは、少なくとも一つのアミノ酸置換又は欠失を融合ループFL2に含む。より適切には、本発明のCMVgBポリペプチドは、融合ループFL1及びFL2の両方の突然変異を含み、そのような突然変異したCMVgBポリペプチドは本発明の目的を形成する。例えば本発明のgBポリペプチドは、少なくとも一つのアミノ酸置換又は欠失を融合ループFL1に及び少なくとも一つのアミノ酸置換又は欠失を融合ループFL2に含む。本発明の意味において、CMVAD169の融合ループFL1を包含するアミノ酸、すなわちFL1のアミノ酸配列は、配列番号1に記載の配列の155YIY157と定義される。同様に融合ループFL2を包含するアミノ酸、すなわちFL2のアミノ酸配列は、本発明の意味において配列番号1に記載の配列の240WLY242と定義される。対応する融合ループFL1及びFL2配列は、例えば配列アラインメントによって他のCMV株由来のgBポリペプチドにおいて同定され得る。前記融合ループの破壊は、欠失又はアミノ酸置換などの点突然変異によるかにかかわらず、これらのアミノ酸トリプレットに関連する任意の種類の突然変異を含むことができ、非突然変異形態と比較して三量体形態にあるポリペプチドの高い割合を有する生成物である、組換え発現において三量体に富み、改善されたプロファイルを有する生成物を生じる。FL1に関する非限定的な適切な突然変異は、配列番号1に記載の配列の155YIY157アミノ酸から選択される、又は異なる株に由来する他のCMVgBポリペプチドの対応する位置のアミノ酸の、少なくとも一つの、適切には少なくとも二つの欠失又は極性アミノ酸、ヒスチジン及びアルギニンからなる正に荷電したアミノ酸の群から選択されるアミノ酸での置換である。したがって一部の実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチド、詳細には非機能性膜貫通ドメインを有するポリペプチドは、少なくともイソロイシン、適切には少なくともチロシン、適切には少なくともチロシンがヒスチジンで置換されている又は欠失している突然変異した融合ループFL1を有する。代替的に本発明のCMVgBポリペプチドは、少なくともチロシンがアルギニンで置換されている突然変異した融合ループFL1を有する。詳細な実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチド、詳細には非機能性膜貫通ドメインを有するポリペプチドは、少なくともイソロイシン及びチロシンがヒスチジン及びアルギニンでそれぞれ置換されている又は欠失している突然変異した融合ループFL1を有する。さらなる実施形態では、非機能性膜貫通ドメインを有する本発明のCMVgBポリペプチドは、少なくともチロシンがグリシンで置換されている又は欠失している場合によりイソロイシンのヒスチジンでの置換若しくは欠失又はチロシンのアルギニンでの置換若しくは欠失と組み合わされている、或いは両方の置換又は欠失と組み合わされている突然変異した融合ループFL1を有する。具体的な実施形態では、非機能性膜貫通ドメインを有する本発明のCMVgBポリペプチドは、配列番号1に記載の配列の3アミノ酸155YIY157又は異なる株に由来する他のCMVgBポリペプチドの対応する位置がアミノ酸155GHR157で置換されている又は欠失している突然変異した融合ループFL1を有する。FL1ドメインの突然変異は、代替的方法においても定義され得る。下に記載のとおり、具体的なアミノ酸配列の疎水性度は、カイト及びドーリトルスケールなどの疎水性スケールを用いて決定され得る。アミノ酸155YIY157を包含するFL1ドメインは、そのスケールで19を達成する。一実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドにおいて、配列番号1に記載の配列の位置155~157に、又は他のCMVgBポリペプチドの対応する位置にあるアミノ酸YIYのストレッチは、カイト及びドーリトルスケールを用いて測定された疎水性スコア3未満、詳細には7未満、より詳細には8未満を有する3アミノ酸のストレッチで置換される。アミノ酸のストレッチ全体でのスコアが上に記載の値に達する限り三つすべてのアミノ酸が同時に置換されなくてもよい。例えば3アミノ酸長のストレッチの一つだけの又は二つのアミノ酸が置換される場合があり、スコアは、置換されたアミノ酸の性質に元の性質をそれぞれ足したものに基づいて算出される。融合ループFL2に関する非限定的な適切な突然変異は、配列番号1に記載の配列の240WLY242から選択される、又は異なる株に由来する他のCMVgBポリペプチドの対応する位置のアミノ酸の、少なくとも一つの、適切には少なくとも二つの欠失又はリシン、ヒスチジン及びアルギニンからなる群から選択される正に荷電したアミノ酸、適切にはヒスチジンでの置換である。したがって一部の実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、少なくともチロシン、適切には少なくともロイシン、適切には少なくともトリプトファンがヒスチジンで置換されている又は欠失しており、場合により上に記載の突然変異した融合ループFL1と組み合わされている突然変異した融合ループFL2を有する。詳細な実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、配列番号1に記載の配列の3アミノ酸240WLY242又は異なる株に由来する他のCMVgBポリペプチドの対応する位置がアミノ酸240AFH242で置換されており、場合により上に記載のFL1突然変異と組み合わされている突然変異した融合ループFL2を有する。FL1及び又はFL2融合ループに関連する突然変異は、上に記載の突然変異に限定されない。さらなる突然変異は、上に記載のものに付加的であるか否かにかかわらず、例えば配列番号1に記載の配列の上のトリプレット155YIY157及び240WLY242の周辺の、又は異なる株に由来する他のCMVgBポリペプチドの対応する位置のアミノ酸を突然変異させることなどは、生じる突然変異体ポリペプチドが改善された、三量体に富むプロファイルを示し、前記さらなる突然変異がポリペプチドが宿主細胞で組換え的に発現される際にその産生、プロセシング又は安定性を妨げない限り実施され得る。本発明者らは、少なくとも一つの融合ループの突然変異とポリペプチドのC末端細胞質ドメインにおける付加的突然変異とを組み合わせることも改善された三量体化プロファイルを有するCMVgBポリペプチドを提供することも認めた。本発明の意味においてgBCMVポリペプチドのC末端細胞質ドメインは、膜貫通ドメインの下流にあるドメインとして理解される。詳細には、C末端細胞質ドメインにおける追加的突然変異は、疎水性領域、適切にはプロリンリッチ領域、適切には高度に親水性で陰性に荷電した領域、場合によりこれらすべての欠失に適切には関する。非限定的例として、適切な突然変異は配列番号1に記載の配列のアミノ酸825~877の欠失に対応し、Del2と称される。除去された上の配列の記述は、アミノ酸位置825~877に厳密には限定されず、得られた突然変異体ポリペプチドが改善された三量体に富んだプロファイルを表し、宿主細胞において組換え的に発現される際に産生、プロセシング又は安定性に関して影響しない限り変更できる。したがって一部の実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、少なくとも一つの融合ループ、適切にはFL1の突然変異、及び少なくとも一つの疎水性領域、一つのプロリンリッチ領域及びC末端細胞質ドメインにおける一つの高度に親水性の領域の欠失、詳細には配列番号1に記載の配列のアミノ酸825から877の欠失の両方を含む。アミノ酸配列又はその断片の疎水性度は、この配列又はその断片を構成するアミノ酸の種類によって決められる。アミノ酸は一般にそれらの側鎖により異なる群に分類される。例えばいくつかの側鎖は、非極性と考えられ、他のいくつかは極性と考えられる。本発明の意味においてアラニン、グリシン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、プロリン、フェニルアラニン及びトリプトファンは疎水性アミノ酸の一員であると考えられ、一方セリン、スレオニン、アスパラギン、グルタミン、チロシン、システイン、リシン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸及びグルタミン酸は、極性アミノ酸の一員であると考えられる。それらの疎水性度にかかわらず、アミノ酸はそれらの側鎖が共有する一般的特性に基づいてサブグループにも分類される。例えばフェニルアラニン、トリプトファン及びチロシンは一緒に芳香族アミノ酸として分類され、本発明の意味において芳香族アミノ酸として考えられる。アスパラギン酸及びグルタミン酸は、酸性又は負に荷電したアミノ酸の一員であり、一方リシン、アルギニン及びヒスチジンは、塩基性又は正に荷電したアミノ酸の一員であり、それらは本発明の意味においてそのように考えられる。20個のアミノ酸のそれぞれの疎水性及び親水性特性を利用し、各アミノ酸に疎水性スコアを割り当て、それにより疎水性順位を作る疎水性スケールは利用可能である。例示的例としてのみ、カイト及びドーリトルスケールが以前に論じられ、引用され得る。このスケールは、予め決定された長さのセグメント内の平均疎水性度を算出することを可能にする。したがってアミノ酸配列中の疎水性領域は、本発明による突然変異のための潜在的標的として当業者によって同定され得る。生じる突然変異体タンパク質の改善された生成物プロファイルを導くための前記領域の突然変異の能力は、次いで下に記載のとおり検査され得る。疎水性領域の突然変異は、上に表示の前記領域若しくはその部分の欠失、又は前記領域中の疎水性アミノ酸を極性アミノ酸で置換する点突然変異からなる場合がある。突然変異の関連性は、宿主細胞での組換え発現において突然変異したポリペプチドの生成物プロファイルに前記突然変異がもたらした影響を分析することによって決定される、すなわち関連突然変異は、突然変異したポリペプチドの集団内に少なくとも50、適切には少なくとも60、より適切には少なくとも70の三量体が存在する改善された、三量体に富むプロファイルを誘導する。本発明者らは、上に記載の改善された生成物プロファイルを維持しながらさまざまな程度にC末端細胞質ドメインが除去され得ることを認めた。したがって本発明は、細胞質ドメインのアミノ酸が適切には10、より適切には20、より適切には60、より適切には80、より適切には90が除去されたCMVgBポリペプチドを検討する。場合により細胞質ドメイン全体が除去され得る。詳細には、本発明者らは、細胞質ドメインの少なくとも70、適切には少なくとも80又はそれ以上を除去すると、得られたCMVgBポリペプチドは宿主細胞で組換え的に発現される際により良い発現及び分泌レベルを示すことを認めた。したがって一部の実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、少なくとも一つの融合ループ、適切にはFL1又は場合により両方の突然変異並びに細胞質ドメイン全体、例えば配列番号1に記載の配列のアミノ酸776から906又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置の欠失の両方を含む。互いに凝集する場合がある精製されたポリペプチドなどの集団内の構成要素の識別をそれらのサイズ又は密度により可能にする任意の方法は、生成物プロファイルをモニタリングするため及び所与の突然変異が上に記載の改善された生成物プロファイルを付与しているかどうかを決定するために用いられ得る。適切な方法は、分析的超遠心分離法などの沈降又はクロマトグラフィー、詳細にはサイズ排除クロマトグラフィーなどに基づき得る。代替的にタンパク質又はポリペプチド試料中の凝集レベルを評価するための方法は、二つのタンパク質若しくはポリペプチド又はそれ以上の間に共有結合を形成するように架橋結合剤で試料を処置することからなる場合がある。グルタルアルデヒドは、架橋結合剤として適切に用いられ得る。架橋結合後、試料を変性条件でゲルにロードするステップ及びタンパク質の存在について例えばCoomassieblue又は硝酸銀でゲルを染色するステップは、それらの分子量に応じて分離された凝集物を呈示する。周知の分子量を有するタンパク質からなるラダーを平行してロードするステップは、さまざまな凝集物の分子量を決定することを可能にする。単量体形態でのポリペプチドなどの最小単位の分子量が周知であれば、次いで凝集物の観察された分子量は、凝集物内の多量体化レベルの指標となる。例えば膜貫通ドメインが除去されたCMVAD169gBポリペプチドは、838アミノ酸長である。アミノ酸の平均分子量が110kDaであることを考慮すると、このポリペチドの予測される分子量は92kDaである。したがってそのようなポリペプチドが凝集すると、生じる多量体の平均分子量は92の倍数であると予測される。詳細には三量体を形成する場合、膜貫通ドメインが除去されたgBの3分子からなるそのような三量体の予測される平均分子量は276kDaである。融合ループFL1及び又はFL2における上に記載の任意の突然変異は、さらなる突然変異と組み合わされ得る。詳細には、本発明によるCMVgBポリペプチドは、非機能的膜貫通ドメインを有し、融合ループ突然変異などのさらなる特異的突然変異を含むと理解される。ポリペプチド内の膜貫通ドメインの位置は、アミノ酸20個の疎水性及び親水性特性を用いてアミノ酸配列からハイドロパシースケールを算定できるコンピュータープログラムの使用を通じて予測され得る。配列の予め決定された長さのセグメント内の平均ハイドロパシーは、プログラムが配列中を移動して連続的に算出される。これらの連続的疎水親水性指標スコアは、次いでN末端からC末端へプロットされ、ほとんどの周知の配列決定されたタンパク質において見出されたアミノ酸組成の総平均ハイドロパシーに対応する中間点線が印刷される。膜結合タンパク質は、膜の脂質二重層中に包埋される配列部分に対応して線の疎水性側に大きな連続した領域を呈する。膜貫通ドメインは、ポリペプチドの細胞膜への固着に関与する。ウイルスエンベロープ糖タンパク質において、膜貫通ドメインは、典型的には、ポリペプチドのC末端部分付近に2027個の無電荷の、主に疎水性アミノ酸のストレッチを含有する。CMVgBに関して上に記載のハイドロパシー分析の適用の例は、引用されるSpaeteらによる刊行物である。実際に著者らは、株AD169及びTowne由来のCMVgBポリペプチド中に、gBポリペプチドのC末端付近に二つの広い、近接する疎水性ピークとして明らかである推定疎水性膜貫通ドメインを同定した。最初のものはアミノ酸715から748を含み、二番目のものはアミノ酸752から772を含む。Reschkeらによる刊行物は、代替的にアミノ酸751771の第2のストレッチをAD169CMVgBの推定膜貫通ドメインとして同定した。したがってこれら二つの刊行物は、AD169CMVgBの推定膜貫通ドメインが少なくともアミノ酸751771及び場合によりアミノ酸714771を含むことを示唆する。本発明の意味では、CMVgBポリペプチドの膜貫通ドメインは、配列番号1に記載の配列の少なくともアミノ酸701775又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置のアミノ酸を包含し、したがって74アミノ酸長である。非機能的膜貫通ドメインによって、宿主細胞における発現で生じるポリペプチドの前記細胞からの分泌が可能になるように推定膜貫通ドメインの少なくとも一部が変更されていることが本発明の意味において理解される。一実施形態では、本発明のgBポリペプチドは、膜貫通ドメイン全体が除去されている。代替的実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、膜貫通ドメインの部分を保持している。詳細には、CMVgBポリペプチドは、膜貫通ドメインのアミノ酸の少なくとも5、適切には少なくとも10、より適切には少なくとも20、より適切には少なくとも30又は少なくとも50を保持している。したがって一部の実施形態では、膜貫通ドメインのアミノ酸数の少なくとも50が本発明のCMVgBポリペプチドにおいて除去されており、膜貫通ドメインのアミノ酸数の適切には少なくとも70、より適切には少なくとも80、より適切には少なくとも90、さらには95が除去されている。詳細な一実施形態により本発明のCMVgBポリペプチドの膜貫通ドメインは、配列番号1に記載の配列のアミノ酸701775、又は他のCMVgBポリペプチドの対応する位置のアミノ酸を除去することによって非機能的にされる。ポリペプチド内の膜貫通ドメインの位置を決定するための上に記載の推定に基づいて欠失の程度は、宿主細胞中での発現で生じる欠失CMVgBポリペプチドが前記細胞から分泌される限りさらに変更され得る。膜貫通ドメインの機能変更は、アミノ酸の欠失に限定されない。変更は、挿入及び又は置換など任意の他の種類のアミノ酸突然変異からなり得る。アミノ酸の欠失、挿入及び置換は、宿主細胞中での発現で生じる突然変異したCMVgBポリペプチドが宿主細胞から分泌される限りどのような方法とも組み合わされ得る。生じた突然変異したポリペプチドが細胞から分泌される能力についての、例えば膜貫通ドメインの所与の部分の欠失などの所与の突然変異の影響を評価することは当業者の能力の範囲内である。ポリペプチドの分泌は検出されることができ、分泌レベルは当技術分野において周知の任意の技術によって評価され得る。非限定的な例示的例として、発現において細胞内に保持される及び細胞培養上清又は細胞培養培地に分泌される発現されたポリペプチドの存在量を別々に測定することは可能である。典型的には、発現において、任意の一般的溶解方法により細胞が溶解される前に細胞培養上清は回収され、二つの画分を提供する。次いでポリペプチドの存在量は、当技術分野において周知の任意のタンパク質検出技術によって各画分において測定され得る。例えばポリペプチドはウエスタンブロットによって又はELISAアッセイによって検出され得る。細胞外ドメインの少なくとも一部分を含むは、融合ループFL1及びFL2を含む又は包含する細胞外ドメインの少なくとも一部として本発明の意味において理解される。細胞外ドメイン中の融合ループ外の追加的アミノ酸の数は、変化し得る。本発明のポリペプチドにおいて存在する細胞外ドメインのアミノ酸の適切な数又はアミノ酸の百分率は、得られたポリペプチドが抗原エピトープを含み、改善された三量体化プロファイルを示すものであるべきである。適切には細胞外ドメインのアミノ酸の少なくとも50、より適切には少なくとも70、より適切には少なくとも80、さらには90が本発明のポリペプチドにおいて保持され、その百分率は必然的に融合ループFL1及びFL2を包含する。一実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、二つの融合ループFL1及びFL2の内の一つに、場合により両方に少なくとも一つの突然変異を含む細胞外ドメイン全体を保持する。細胞質ドメイン少なくとも一部分の保持とは、発現及び分泌のために必要なアミノ酸の数を意味する。適切には、本発明のCMVgBポリペプチドは、細胞質ドメインのアミノ酸の少なくとも5、より適切には少なくとも10を含み、20又はそれ以上であり得る。したがって一部の実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドにおける細胞質ドメインのアミノ酸の少なくとも80、少なくとも90又は少なくとも95が除去されている。さらなる実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、細胞外ドメイン全体が除去されている。例えばその少なくとも一部の欠失などの膜貫通ドメインの突然変異は、細胞質ドメインの例えばその少なくとも一部の欠失などの突然変異と組み合わされ得る。任意の組合せが、上に記載のとおり生じる突然変異したCMVgBポリペプチドが宿主細胞での発現において前記細胞から分泌され、改善された三量体化プロファイルを示す限り本発明において企図される。したがって詳細な実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、膜貫通ドメイン全体及び細胞質ドメイン全体の両方が除去されている。代替的実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、膜貫通ドメイン全体が除去され、細胞質ドメインの少なくとも一部、例えばその10などを保持する。さらなる代替的な実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、細胞質ドメイン全体が除去され、膜貫通ドメインの少なくとも30を保持している。驚くべきことに本発明者らは、融合ループFL1及び又はFL2の突然変異を細胞質ドメインの少なくとも一部の欠失、場合によりその全体の欠失並びに膜貫通ドメインの少なくとも一部の欠失、場合によりその全体の欠失と組み合わせることが、先行技術のポリペプチドよりもより効率的に発現及び分泌されるポリペプチドを提供することを認めた。同様に本発明者らは、先行技術のCMVポリペプチドのシグナル配列が、ポリペプチドの組換え発現及び分泌後に、シグナルペプチダーゼによってさまざまなアミノ酸位置で切除され、それによりN末端にさまざまな末端を有する成熟gBポリペプチドの集団を生成することを認めた。驚くべきことに本発明者らは、gBポリペプチドのリーダー配列に突然変異を導入することが主に一つの部位で切除されるシグナル配列を生じ、それによりN末端に同じアミノ酸を有する成熟gBポリペプチドの均一な集団を生成することを認めた。したがって一実施形態では、シグナル配列の切断後に産生される成熟gBポリペプチドの集団を含む調製物であって、成熟gBポリペプチドの少なくとも30、少なくとも80、80から90がN末端に同じアミノ酸を含む調製物が提供される。詳細には、本発明の成熟ポリペプチドは、適切にはN末端位置はセリン又はヒスチジンで始まる。リーダー配列のアミノ酸の少なくとも40、適切には少なくとも50、より適切には少なくとも70、より適切には少なくとも80又はさらには少なくとも90の欠失を含むCMVgBポリペプチドを提供することは、本発明の目的である。一実施形態では、リーダー配列全体の欠失を含むCMVgBポリペプチドが提供される。本発明者らは、リーダー配列の上記の欠失がシグナル配列に生じる、少なくとも一つのアミノ酸の置換などの突然変異と組み合わされ得ることも認めた。代替的に前記シグナル配列は、少なくとも一つのアミノ酸挿入を含み得る。リーダー配列の欠失の程度及びシグナル配列における突然変異の種類は、組換え発現及び分泌後に生じるgBポリペプチドが一つの主な部位でシグナルペプチダーゼによって切除され、それによりN末端に同じアミノ酸を有する成熟gBポリペプチドの集団を生成する限り変更できる。ポリペプチド集団内のN末端アミノ酸の同一性は、当技術分野において周知の任意の配列決定技術を通じて決定され得る。代替的にポリペプチド集団内のポリペプチドの異なる形態は、トリプシン消化に供されてよく、生成されたさまざまなペプチドは、MSMSなどの質量分析によって分析され得る。周知の配列の標準ペプチドとの比較は、消化されたペプチドのアミノ酸組成の決定を可能にする。本発明者らは、改善された三量体化プロファイル、より良い発現及び分泌、C末端クリッピングの欠如、並びにシグナル配列切断後のN末端の均一性などの突然変異の各種類によってと比較して付与される特性をいまだ維持したまま、リーダー配列の上記の欠失及び又はシグナル配列の突然変異が融合ループFL1及びFL2ドメイン及び又はTMドメインの少なくとも一部分の欠失及び又は細胞質ドメインの少なくとも一部分の欠失に関連する上に記載の突然変異いずれとも組み合わされ得ることに注目した。したがって一部の実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、リーダー配列に変更を、場合によりシグナル配列における突然変異、任意の既に記載のFL1及び又はFL2ドメイン突然変異並びに細胞質ドメインにおける及び本明細書において開示のTMドメインにおける任意の突然変異と組み合わされて含む。本発明のCMVgBポリペプチドは、それらが天然においてと同じ状態では存在しないこという意味において天然に存在しない、すなわちそれらの配列は人工的に改変されている。用語ポリペプチド又はタンパク質は、モノマーがアミド結合を介して相互に結合されたアミノ酸であるポリマーを意味する。本明細書において用いられる用語ポリペプチド又はタンパク質は、任意のアミノ酸配列を包含し、糖タンパク質などの修飾された配列を含むことを意図する。用語ポリペプチドは、天然に存在するタンパク質及び天然に存在しないタンパク質の両方を網羅することを具体的には意図する。用語断片は、ポリペプチドに関して、ポリペプチドの部分を意味する。用語免疫原性断片は、全長基準タンパク質又はポリペプチドの少なくとも一つの主な免疫原性エピトープを保持するポリペプチドのすべての断片を意味する。ポリペプチド内の方向は、個々のアミノ酸のアミノ成分及びカルボキシ成分の方向によって定義されるN末端からC末端への方向で一般に列挙される。ポリペプチドはN末端又はアミノ末端からC末端又はカルボキシ末端に向けて翻訳される。さらなる突然変異、例えば内部タンパク質分解部位の突然変異などを保有する上に記載のgBポリペプチドを本発明において用いることもでき、その結果前記部位は無効となる。例えば配列番号1に記載の配列のアミノ酸456から460付近、又は異なる株に由来する他のCMVgBポリペプチドの対応する位置にあるフューリン切断部位は、突然変異し得る。適切には、配列番号1に記載の配列と関連して、T456で置換されたR456、Q458で置換されたR458及びT459で置換されたR459からなる群から選択される少なくとも一つのアミノ酸置換が実施される。したがって特定の実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、配列番号1に記載の配列のアルギニンR456、R458及びR459又は異なる株に由来する他のCMVgBポリペプチドの対応する位置がそれぞれスレオニン、グルタミン酸及びスレオニンで置換されるさらなる点突然変異を含む。一部の他の実施形態では、配列番号1に記載の配列の位置50及び357のアルギニンは、セリンで置換された。なおさらなる実施形態では、本発明のgBポリペプチド、詳細にはC末端細胞質ドメイン中の疎水性領域の欠失を含むものは、配列番号1に記載の配列の位置778のシステインがアラニンで置換されるさらなる点突然変異を含む。場合により、発現及び回収を促進するために本発明のgBポリペプチドは、N末端にシグナルペプチドを含み得る。シグナルペプチドは、当技術分野において周知の多数のシグナルペプチドから選択されることができ、典型的には本発明のgBポリペプチドの組換え発現のために選択された系における産生及びプロセシングを促進するために選ばれる。特定の実施形態では、シグナルペプチドは、AD169株由来の天然gBタンパク質に天然に存在するもの、すなわち配列番号1に記載の配列のアミノ酸120である。代替的にシグナルペプチドは、配列がgBとは異なるタンパク質から生じる異種性配列であってよい。本発明のCMVgBポリペプチドのコンテクストにおける使用のために適切な例示的シグナルペプチドは、組織プラスミノーゲンアクチベーター、単純ヘルペスウイルスgDタンパク質、ヒトエンドスタチン、HIVgp120、CD33、ヒトHer2Neu又はエプスタインバーウイルスgp350のシグナルペプチドを含む。シグナルペプチドは、新たに合成された分泌性タンパク質又は膜タンパク質を膜に及び膜を通り抜けるように方向付ける短いアミノ酸配列である。シグナルペプチドは、ポリペプチドのN末端にしばしばであるが普遍的にではなくあり、タンパク質が膜を通った後にシグナルペプチダーゼによってしばしば切除される。この切断は、タンパク質成熟のプロセスにおけるステップとして一般に考えられる。詳細には、一度シグナルペプチドが切除されると、タンパク質は成熟形態にあると称される。典型的には、シグナル配列は、三つの一般的構造的特徴N末端極性塩基性領域、疎水性コア及び親水性c領域を含有する。一実施形態により本発明のgBポリペプチドは、天然gBに天然で存在するシグナルペプチドを含む。代替的実施形態では、本発明のgBポリペプチドは、タンパク質CD33のシグナルペプチドなどの異種性シグナルペプチドを含む。シグナル配列は、非天然性であってよく、アミノ酸の置換、挿入又は欠失などの突然変異を含んでもよい。したがって本発明のgBポリペプチドがシグナルペプチド、詳細には天然シグナルペプチドを含む一部の実施形態では、前記シグナルペプチドは、少なくとも一つのアミノ酸置換を適切にはシグナルペプチドのC末端部分に含む。代替的に前記シグナルペプチドは、少なくとも一つのアミノ酸挿入を、適切にはシグナルペプチドのC末端部分に含む。場合により、本明細書に開示の本発明のCMVgBポリペプチドは、組換え的に発現されたポリペプチドの続くプロセシング又は精製を促進するタグを構成するアミノ酸配列の付加を含み得る。そのようなタグは、抗原性又はエピトープタグ、酵素的タグ又はポリヒスチジンタグであってよい。典型的には、タグは、ポリペプチドのC末端又はN末端などのポリペプチドの一つの又は他方の末端に位置付けられる。したがって一部の実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、ポリペプチドのC末端にあるポリヒスチジンタグを含む。特定の実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16及び配列番号18又はこれらのサブ配列から選択されるアミノ酸配列を有する。代替的に別の実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、配列番号19、配列番号20、配列番号21から選択されるアミノ酸配列を有する。本開示の別の態様は、本発明のCMVgBポリペプチドをコードする核酸に関する。そのような核酸又はベクターが導入される細胞も本発明の一部である。宿主細胞は細菌細胞であってよいが、より一般的には酵母細胞、植物細胞、昆虫細胞又は哺乳動物細胞などの真核細胞である。一実施形態により本発明のCMVgBポリペプチドはCHO細胞で組換え的に発現される。用語ポリヌクレオチド及び核酸配列は、長さ少なくとも10塩基のヌクレオチドの重合体形態を意味する。ヌクレオチドは、リボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド又はいずれかのヌクレオチドの修飾された形態であってよい。用語はDNAの一本鎖及び二本鎖形態を含む。単離されたポリヌクレオチドとは、それが由来する生物の天然に存在するゲノムでは直に近接しているコード配列の両側と直に近接していないポリヌクレオチドを意味する。一実施形態では、ポリヌクレオチドはポリペプチドをコードする。核酸の5及び3方向は、個々のヌクレオチド単位の結合性を参照することによって定義され、デオキシリボース糖環の炭素位置により指定される。ポリヌクレオチド配列の情報内容は、5から3方向に読み取られる。組換え核酸は、天然に存在しない配列を有するもの又は配列の二つの別々のセグメントの人工的な組合せからなる配列を有するものである。この人工的な組合せは、化学合成又はより一般的には核酸の単離されたセグメントの、例えば遺伝子工学技術による人工的な操作によって達成され得る。組換えタンパク質は、細菌細胞又は真核細胞などの宿主細胞に導入されている異種性核酸によってコードされるものである。核酸は、導入された核酸によってコードされるタンパク質を発現できるシグナルを有する発現ベクターに導入することができ、又は核酸は宿主細胞染色体に組み込むことができる。特定の実施形態では、組換え核酸は、選択された原核細胞宿主又は、哺乳動物、植物若しくは昆虫の細胞などの真核細胞宿主における発現のためにコドン最適化される。複製及び発現を促進するために、核酸は原核細胞又は真核細胞の発現ベクターなどのベクターに組み込まれ得る。本明細書において開示される核酸は、多様なベクター、鶏痘ウイルス、仮性狂犬病、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、レトロウイルス及び他多数などのウイルス性DNAを含むの任意の一つに含まれ得るが、最も一般的には、ベクターは、ポリペプチド発現産物を生成するために適する発現ベクターである。発現ベクターでは、CMVgBポリペプチドをコードする核酸は典型的には近接して、mRNA合成を方向付ける適切な転写制御配列の向きに配置される。すなわち目的のポリヌクレオチド配列は、適切な転写制御配列に作動可能に連結される。そのようなプロモーターの例はCMVの初期プロモーター、LTR又はSV40プロモーター、バキュロウイルスの多角体プロモーター、大腸菌lac又はtrpプロモーター、ファージT7及びラムダPLプロモーター並びに原核細胞又は真核細胞又はそれらのウイスルにおいて遺伝子の発現を制御することが周知である他のプロモーターを含む。典型的には、発現ベクターは、翻訳開始のためのリボソーム結合部位及び転写ターミネーターも含有する。場合によりベクターは、発現を増幅するための適切な配列を含む。付加的に発現ベクターは、形質転換された宿主細胞の選択のための表現型形質を提供するために、ジヒドロ葉酸還元酵素、真核細胞培養のためのネオマイシン耐性若しくはカナマイシン耐性又は大腸菌におけるテトラサイクリン若しくはアンピシリン耐性などの一個以上の選択可能マーカー遺伝子を場合により含む。発現ベクターは、例えば翻訳の効率を改善するために付加的発現要素も含み得る。これらのシグナルは、ATG開始コドン及び隣接配列を含み得る。一部の場合では、例えば翻訳開始コドン及び関連する配列要素は適切な発現ベクターに目的のポリヌクレオチド配列と同時に挿入される。そのような場合では、付加的翻訳制御シグナルは必要無い。しかし配列をコードするポリペプチドだけ又はその部分が挿入される場合、異種性翻訳制御シグナルがCMVgB配列の発現のために提供される。開始コドンは、目的のポリヌクレオチド配列の翻訳を確実にするために正しい読み枠で位置する。異種性転写要素及び開始コドンは、種々の由来であってよい。所望により発現の効率は、用いる細胞系に適切なエンハンサーの包含によってさらに増大され得るResultsProblCellDiffer2012562、BitteretalMethodsinEnzymol153516544。当業者を組換えCMVgB核酸の産生に導くために十分な例示的手順は、SambrooketalMolecularCloningALaboratoryManual2dedColdSpringHarborLaboratoryPress1989、SambrooketalMolecularCloningALaboratoryManual3dedColdSpringHarborPress2001、AusubeletalCurrentProtocolsinMolecularBiologyGreenePublishingAssociates1992及びAusubeletalShortProtocolsinMolecularBiology、ACompendiumofMethodsfromCurrentProtocolsinMolecularBiology4thedWileySons1999において見出され得る。本発明のCMVgBポリペプチドをコードする例示的核酸は、配列番号6、7、8、9、11、13、15及び17によって示される。例示的変異体と配列同一性を共有する追加的配列変異体は当業者によって産生され得る。典型的には、核酸変異体は、ヌクレオチド又はアミノ酸の1、又は2、又は5、又は10、又は15、又は20未満だけ異なるポリペプチドをコードする。すなわちコードされるポリペプチドは少なくとも80、又は85、より一般的には少なくとも約90以上、95など、又はさらには98又は99の配列同一性を共有する。CMVgBポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列が遺伝暗号重複性によりそれ自体はより少ない配列同一性を共有する場合があることは当業者によって直ちに理解されるであろう。CMVgBポリペプチドとポリヌクレオチド配列との間の類似性は、ポリペプチドとヌクレオチド配列全般に関して、配列間の類似性の意味において表されることができ、他には配列同一性と称されることは当業者によって理解されるであろう。配列同一性は同一性百分率の意味においてしばしば測定され、百分率が高いほど、二つの配列の一次構造はより類似している。一般的に二つのアミノ酸配列の一次構造が類似しているほど、より類似するのは、フォールディング及び会合から生じるより高次の構造である。CMVgBポリペプチド及びポリヌクレオチド配列の変異体は、一つ又は少数のアミノ酸欠失、付加又は置換を有し得るが、それにもかかわらずそれらのアミノ酸及び一般にそれらのポリヌクレオチド配列の非常に高い百分率を共有する。配列同一性を決定する方法は当技術分野において十分に周知である。種々のプログラム及びアラインメントアルゴリズムは、SmithandWatermanAdvApplMath24821981、NeedlemanandWunschJMolBiol484431970、HigginsandSharpGene732371988、HigginsandSharpCABIOS51511989、CorpetetalNucleicAcidsResearch16108811988及びPearsonandLipmanProcNatlAcadSciUSA8524441988に記載されている。AltschuletalNatureGenet61191994は、配列アラインメント方法及び相同性算出の詳細な検討を示す。TheNCBIBasicLocalAlignmentSearchToolは、配列分析プログラムblastp、blastn、blastx、tblastn及びtblastxに関連する使用のためにtheNationalCenterforBiotechnologyInformation及びインターネットを含むいくつかの供給源から入手可能である。このプログラムを用いてどのように配列同一性を決定するかの記載は、インターネット上のNCBIウェブサイトで入手可能である。二つの核酸間の配列類似性の別の徴候は、ハイブリダイズする能力である。二つの核酸の配列が類似しているほどそれらがハイブリダイズする条件はよりストリンジェントになる。ハイブリダイゼーション条件のストリンジェンシーは配列依存的であり、異なる環境パラメーター下で異なる。したがって特定の程度のストリンジェンシーにおいて生じるハイブリダイゼーション条件は、選んだハイブリダイゼーション方法の性質並びにハイブリダイズする核酸配列の組成及び長さに応じて変化する。一般的にハイブリダイゼーションの温度及びハイブリダイゼーション緩衝液のイオン強度は、ハイブリダイゼーションのストリンジェンシーを決定するが、洗浄時間もストリンジェンシーに影響する。一般的にストリンジェントな条件は、規定のイオン強度及びpHにおいて具体的な配列に対する熱融解点より約5°Cから20°C低くなるように選択される。Tmは、完全に一致するプローブに標的配列の50がハイブリダイズする温度である。核酸ハイブリダイゼーションのための条件及びストリンジェンシーの算出は、例えばSambrooketalMolecularCloningALaboratoryManualColdSpringHarborLaboratoryPressColdSpringHarborNY2001、TijssenHybridizationWithNucleicAcidProbesPartITheoryandNucleicAcidPreparationLaboratoryTechniquesinBiochemistryandMolecularBiologyElsevierScienceLtdNYNY1993及びAusubeletalShortProtocolsinMolecularBiology4thedJohnWileySonsInc1999において見出され得る。本開示の目的のためにストリンジェントな条件は、ハイブリダイゼーション分子と標的配列との間に25未満のミスマッチがある場合にだけハイブリダイゼーションが生じる条件を包含する。ストリンジェントな条件は、より正確な定義のためにストリンジェンシーの詳細なレベルに分割され得る。したがって本明細書において用いられる中程度のストリンジェンシー条件は、25を超える配列ミスマッチを有する分子はハイブリダイズしない条件であり中度のストリンジェンシーの条件は、15を超えるミスマッチを有する分子はハイブリダイズしない条件であり、高ストリンジェンシーの条件は、10を超えるミスマッチを有する配列はハイブリダイズしない条件である。非常に高ストリンジェンシーの条件は、6を超えるミスマッチを有する配列がハイブリダイズしない条件である。対照的に低ストリンジェンシーな条件下でハイブリダイズする核酸は、配列同一性がより少ないもの又は核酸の短いサブ配列にだけ配列同一性を有するものを含む。したがって本開示に包含される核酸の種々の変異体が、実質的にその全長にわたって配列番号6、7、8、9、11、13、15及び17の少なくとも一つにハイブリダイズできることは理解されるであろう。本明細書において開示されるCMVgBポリペプチドは、組換えタンパク質の発現及び精製のために十分確立された手順を用いて産生される。当業者を導くために十分な手順は、例えば上に引用した参考文献SambrookandtheAusubelにおいて見出され得る。追加的及び具体的な詳細は、本明細書以下に提供される。配列番号6、7、8、9、11、13、15及び17によって表される例示的核酸などのCMVgBポリペプチドをコードする組換え核酸は、ベクター及び宿主細胞の選択に応じて電気穿孔法、リポソーム媒介形質移入、リン酸カルシウム沈殿、感染、形質移入などの任意の種々の十分に周知の手順によって宿主細胞に導入される。それにより組換えCMVgBポリペプチドコード核酸を含む宿主細胞も本開示の特徴である。有利な宿主細胞は、大腸菌などの原核宿主細胞並びに、真菌及びピキアパストリスなどの酵母細胞、昆虫細胞、植物細胞及び哺乳動物細胞を含む多数の真核宿主細胞を含む。組換えCMVgB核酸は、例えば発現ベクターなどのベクターを介して宿主細胞に導入される。上に記載のとおりベクターは、最も典型的にはプラスミドであるが、しかしそのようなベクターは例えばウイルス粒子、ファージなどであってもよい。適切な発現ホストの例は大腸菌、ストレプトマイセス及びサルモネラチフィリウムなどの細菌細胞サッカロマイセスセレビジエ、ピキアパストリス及びアカパンカビなどの真菌細胞ショウジョウバエ及びスポドプテラフルギペルダなどの昆虫細胞3T3、COS、CHO、BHK、HEK293又はボウズメラノーマなどの哺乳動物細胞藻類細胞を含む植物細胞などを含む。宿主細胞は、プロモーターの活性化のため、形質転換体を選択するため又は挿入されたポリヌクレオチド配列を増幅するために適切であるように改変された従来技術の栄養培地で培養され得る。温度、pHなどの培養条件は、典型的には発現のために選択された宿主細胞で以前用いられたものであり、当業者に並びに、例えばFreshneyCultureofAnimalCellsaManualofBasicTechniquethirdeditionWileyLissNewYork及びこれに引用されている参考文献を含む本明細書に引用される参考文献において明らかである。本発明の核酸に対応する発現産物は、植物、酵母、真菌、細菌などの非動物細胞においても産生され得る。SambrookBergerandAusubelに加えて、細胞培養に関する詳細は、PayneetalPlantCellandTissueCultureinLiquidSystemsJohnWileySonsIncNewYorkNY、GamborgandPhillipsPlantCellTissueandOrganCultureFundamentalMethodsSpringerLabManualSpringerVerlag及びAtlasandParksTheHandbookofMicrobiologicalMediaCRCPressBocaRatonFLにおいて見出され得る。細菌系では多数の発現ベクターが発現産物の使用目的に応じて選択され得る。例えば多量のポリペプチド又はその断片が抗体産生のために必要である場合、容易に精製されるタンパク質の高レベル発現を導くベクターが好ましくは用いられる。そのようなベクターは、これだけに限らないが、目的のコード配列がアミノ末端の翻訳を開始するメチオニン及び続く触媒活性ベータガラクトシダーゼ融合タンパク質を産生するためのベータガラクトシダーゼの7残基の配列を伴ってベクターにインフレームでライゲーションされ得るBLUESCRIPTpINvectorsJBiolChem26455035509アミノ末端メチオニンがヒスチジンタグを伴ってインフレームでライゲーションされるpETvectorsなどの多機能性大腸菌クローニング及び発現ベクターを含む。同様にサッカロマイセスセレビジエなどの酵母では、アルファ因子、アルコールオキシダーゼ及びPGHなどの構成的又は誘導性プロモーターを含有する多数のベクターが望まれる発現産物の産生のために用いられ得る。概説に関してBerger、Ausubel及び例えばGrantらを参照されたい。哺乳動物宿主細胞では、プラスミド及びウイルスに基づく系の両方を含む多数の発現系が利用され得る。宿主細胞は、場合により挿入された配列の発現を調節する又は発現されたタンパク質を望まれる様式にプロセシングするその能力に関して選ばれる。タンパク質のそのような修飾は、これだけに限らないがグリコシル化及びアシル化を含む。タンパク質の前駆体形態を成熟形態に切断する翻訳後プロセシングは、場合により宿主細胞の背景において実施される。3T3、COS、CHO、HeLa、BHK、MDCK、293、WI38などのさまざまな宿主細胞は、そのような翻訳後活性に関して特定の細胞性機構及び特徴的機序を有し、導入された外来性タンパク質の正確な修飾及びプロセシングを確実にするために選ばれ得る。本明細書で開示の核酸によってコードされる組換えCMVgBポリペプチドの長期間、高収量の産生のために、安定発現系が典型的には用いられる。例えば本発明のCMVgBポリペプチドを安定に発現する細胞系は、ウイルス性複製開始点又は内在性発現エレメント及び選択可能マーカー遺伝子を含有する発現ベクターを宿主細胞に導入することによって得られる。ベクターの導入に続いて、細胞は、選択培地に交換される前に12日間、濃縮培地で増殖される。選択可能マーカーの目的は、選択に耐性を付与することであり、その存在は導入された配列を順調に発現する細胞の増殖及び回収を可能にする。例えば安定に形質転換された細胞の耐性群又はコロニーは、細胞種に適する組織培養技術を用いて増殖され得る。CMVgBをコードする核酸で形質転換された宿主細胞は、場合によりコードされたタンパク質の細胞培養物からの発現及び回収に適する条件下で培養される。適切な宿主細胞系の形質導入及び適切な細胞密度への宿主細胞の増殖に続いて、選択されたプロモーターは、適切な手段によって誘導され、細胞は追加的な期間培養される。分泌されたポリペプチド産物は、次いで培養培地から回収され、精製される。代替的に細胞は遠心分離によって収集され、物理的又は化学的手段によって破壊され、得られた粗抽出物はさらなる精製のために保持される。タンパク質の発現において用いられる真核又は微生物細胞は、凍結融解サイクル、超音波処理、機械的破壊又は細胞の使用を含む任意の簡便な方法によって破壊され得る。CMVgBポリペプチドは、硫酸アンモニウム又はアルコール沈殿、酸抽出、アニオン又はカチオン交換クロマトグラフィー、ホスホセルロースクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー及びレクチンクロマトグラフィーを含む当技術分野において十分に周知の任意の多数の方法によって組換え細胞培養物から回収及び精製され得る。所望によりタンパク質リフォールディングステップは、成熟タンパク質の立体配置を完了させるために用いられ得る。最後に高速液体クロマトグラフィーが最終的な精製ステップにおいて用いられ得る。上に記載の参照事項に加えて、例えばSandanaBioseparationofProteinsAcademicPressInc及びBollagetalProteinMethods2ndEditionWileyLissNY、WalkerTheProteinProtocolsHandbookHumanaPressNJ、HarrisandAngalProteinPurificationApplicationsAPracticalApproachIRLPressatOxfordOxfordUK、ScopesProteinPurificationPrinciplesandPractice3rdEditionSpringerVerlagNY、JansonandRydenProteinPurificationPrinciplesHighResolutionMethodsandApplicationsSecondEditionWileyVCHNY及びWalkerProteinProtocolsonCDROMHumanaPressNJにおいて記載のものを含む種々の精製方法が当技術分野において周知である。一例では、CMVgBポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、哺乳動物細胞への導入に適するベクター中にクローン化される。この例示的実施形態ではCMVgBポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列は、Amaxaによって開発されたpMAXベクターに導入される。ポリペプチドは構成的プロモーター、初期CMVプロモーター下で発現される。チャイマーを発現している安定に形質移入された細胞の選択は、カナマイシンの存在下で増殖する形質移入された細胞の能力に基づいて行われる。pMAXの組み込みに成功した細胞は、pMAXベクターがカナマイシン耐性遺伝子を発現することからカナマイシンの存在下で増殖できる。選択された細胞は、クローン的に増やされ、CMVgBポリペプチドの発現について特徴付けられる。代替的に本発明のCMVgBポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列は、アンピシリン耐性遺伝子を発現するNRCによって開発されたpTT5ベクターに導入されてもよい。形質移入及び発現の誘導に続いて、発現されるポリペプチドは回収される。以下は、CMVgBポリペプチドを精製するための例示的手順である。精製を促進するためにCMVgBポリペプチドはC末端ポリヒスチジンタグを含む。簡潔には、細胞培養上清は、形質移入の6日後に回収された。清澄化後、上清はニッケルカラムにロードされた。用語精製は、その存在が望まれない構成成分を組成物から除去するプロセスを意味する。精製は相対的用語であり、望ましくない構成成分のすべての痕跡を組成物から除去することを必要としない。ワクチン産生のコンテクストにおいて精製は、遠心分離、透析、イオン交換クロマトグラフィー及びサイズ排除クロマトグラフィー、アフィニティー精製又は沈殿などのプロセスを含む。したがって用語精製されたは、絶対的な純度を必要とせず、むしろ相対的用語として意図される。実質的に純粋な核酸又はタンパク質の調製物は、望まれる核酸又はタンパク質が調製物の全核酸含有量の少なくとも50に相当するように精製され得る。特定の実施形態では、実質的に純粋な核酸又はタンパク質は、調製物の全核酸又はタンパク質含有量の少なくとも60、少なくとも70、少なくとも80、少なくとも85、少なくとも90、少なくとも95又はそれ以上に相当する。本発明の意味では、単離された生物学的構成成分は、構成成分が天然で存在する生物の細胞中の他の生物学的構成成分から実質的に分離又は精製されている。単離されている核酸及びタンパク質は、標準的精製方法によって精製された核酸及びタンパク質を含む。用語は、宿主細胞における組換え発現によって調製された核酸及びタンパク質並びに化学的に合成された核酸及びタンパク質も包含する。本発明のCMVgBポリペプチド及び核酸は、CMV感染を治療するための医薬の調製において有用である。本発明のCMVgBポリペプチドは、ワクチンなどの免疫原性組成物への包含のための抗原として特に適切である。したがって本発明は、本発明の任意のCMVgBポリペプチドを含有する組成物の免疫学的有効量を対象に投与することによってCMVに対する免疫応答を誘発するための方法も包含する。対象は、HCMV血清陽性又はHCMV血清陰性対象のいずれであってもよい。一部の実施形態では、対象は、典型的には12から16歳の青年期の女子である。代替的に対象は出産年齢の女性である。典型的には、出産年齢の女性の群は、妊娠可能である16から45歳の間の女性を表す。詳細な実施形態では、本発明は、HCMV血清陰性の出産年齢の女性に本発明のgBポリペプチドを含む組成物の免疫学的有効量を投与するステップを含む、CMVに対する免疫応答を誘発するための方法を企図する。代替的実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドは、CMV感染を予防及び又は治療するための医薬の調製において用いられる。適切には、組成物又は医薬は、CMVでの感染を減少させる若しくは予防する防御免疫応答及び又はCMVでの感染に続く病理学的応答を減少させる若しくは予防する防御免疫応答を誘発する。詳細には、出産年齢の女性が本発明の任意のCMVgBポリペプチドを含有する組成物の免疫学的有効量を投与される本発明の方法は、母親から胎児へのCMV伝染を予防する、すなわちCMV先天性感染を予防する。用語新生児でのHCMV先天性感染の予防は、新生児が誕生時にHCMV感染していないことを意味する。代替的に本発明の免疫学的組成物を受ける適切な対象は、例えば臓器移植患者などの免疫無防備状態の対象である。したがって一部の実施形態では、本発明は、免疫無防備状態の対象においてCMV感染を減少及び又は予防するための本発明のCMVgBポリペプチドの使用を企図する。さらなる実施形態では、本発明は、免疫無防備状態の対象に本発明のCMVgBポリペプチドを投与するステップを含む、CMVに対する免疫応答を誘発するための方法を企図する。対象は、生存している多細胞性脊椎生物である。本開示の状況において対象は、ヒト以外の動物、例えばマウス、コットンラット又はヒト以外の霊長類などの実験的対象であってよい。代替的に対象は、上に記載のとおりヒト対象であってよい。抗原は、動物において抗体を産生することによる免疫応答及び又はT細胞応答を刺激できる化合物、組成物又は物質であり、動物に注射される、吸収される又は他に導入される組成物を含む。用語抗原は、すべての関連する抗原性エピトープを含む。用語エピトープ又は抗原決定基は、B及び又はT細胞が応答する抗原上の部位を意味する。主な抗原性エピトープは、機能的に重要な宿主免疫応答が生じるエピトープである。したがって病原体に対する防御免疫応答に関して、主な抗原性エピトープは宿主免疫系によって認識される場合に病原体によって生じる疾患からの防御をもたらす抗原成分である。用語T細胞エピトープは、適切なMHC分子に結合した場合にT細胞によって特異的に結合されるエピトープを意味する。B細胞エピトープは、抗体によって特異的に結合されるエピトープである。免疫応答は、B細胞、T細胞又は単球などの免疫系の細胞の刺激に対する応答である。免疫応答はB細胞応答であってよく、抗原特異的中和抗体などの特異的抗体の産生を生じる。免疫応答は、CD4応答又はCD8応答などのT細胞応答であってもよい。いくつかの場合では、応答は、ある種の抗原、詳細にはCMVに特異的である。抗原が病原体由来である場合、抗原特異的応答は病原体特異的応答である。防御免疫応答は、病原体の有害な機能若しくは活性を妨げ、病原体による感染を減少させる又は病原体による感染から生じる症状を低下させる免疫応答である。防御免疫応答は、例えばプラーク減少アッセイ若しくはELISA中和アッセイにおけるウイルス複製若しくはプラーク形成の阻害によって又はinvivoでの病原体チャレンジへの耐性を測定することによって測定され得る。典型的には、免疫応答は、Th1型サイトカインの産生、例えばTh1型免疫応答によって特徴付けられる免疫応答を誘発する。Th1型免疫応答は、IL2及びIFNγを産生するCD4Tヘルパー細胞によって特徴付けられる。対照的にTh2型免疫応答は、IL4、IL5及びIL13を産生するCD4ヘルパー細胞によって特徴付けられる。免疫学的有効量は、対象において免疫応答を誘発するために用いられる組成物の量である。一般に望まれる結果は、CMVなどの病原体に対して対象を防御できる又は防御に寄与する抗原特異的免疫応答の産生である。しかし病原体に対する防御免疫応答を得ることは、免疫原性組成物の複数回投与を必要とする場合がある。したがって本開示の状況において用語、免疫学的有効量は、防御免疫応答を達成するために以前の又は続く投与と組み合わされて寄与する分割用量を包含する。同様に提供されるのは、CMVgBポリペプチド及び薬学的に許容される希釈剤、担体又は賦形剤を含むワクチンなどの免疫原性組成物である。免疫原性組成物は、例えばCMVなどの病原体に対する、特異的免疫応答を誘発できるヒト又は動物対象への投与に適する物質の組成物である。そのように免疫原性組成物は、一つ以上の抗原又は例えば本発明のCMVgBポリペプチドなどの抗原性エピトープを含む。免疫原性組成物は、賦形剤、担体及び又はアジュバントなどの免疫応答を誘発又は増強できる一つ以上の追加的構成成分も含み得る。特定の場合では、免疫原性組成物は、病原体によって引き起こされる症状又は状態に対して対象を防御する免疫応答を誘発するために投与される。いくつかの場合では、病原体によって生じる症状又は疾患は、病原体への対象の曝露後に病原体の複製を妨げることによって予防される。本開示の状況において用語免疫原性組成物は、CMVに対する防御的又は緩和的な免疫応答を誘発する目的で対象に又は対象の集団に投与することを目的とする組成物を包含して理解される。本発明による免疫原性組成物は、CMVgBポリペプチドを含有する組成物に限定されない。本発明は、本発明のCMVgBポリペプチド及び、pp6、IE1、pUL131、gL、gH、pUL128、pUL130又はこれらの任意の組合せからなる群から選択される少なくとも一つ以上のCMV抗原を含む、ワクチンなどの免疫原性組成物も企図する。本発明は、本発明のCMVgBポリペプチド及び、HPV、クラミジア、RSV、トキソプラズマゴンディ、帯状疱疹及びアスペルギルスからなる群から選択される少なくとも一つ以上の抗原を含む、ワクチンなどの免疫原性組成物も企図する。多数の薬学的に許容される希釈剤及び担体及び又は薬学的に許容される賦形剤が当技術分野において周知であり、例えばRemingtonsPharmaceuticalSciencesbyEWMartinMackPublishingCoEastonPA15thEditionに記載されている。形容詞薬学的に許容されるは、希釈剤又は担体又は賦形剤が対象への投与に適切であることを示す。一般に希釈剤、担体及び又は賦形剤の性質は、用いられる投与の具体的な様式に依存する。例えば非経口製剤は、通常、水、生理食塩水、平衡塩溶液、水性デキストロース、グリセロースなどの薬学的及び生理学的に許容される液体をビヒクルとして含む注射可能な液体を含む。特定の製剤では、液体希釈剤は用いられない。そのような製剤では、例えば医薬用グレードのトレハロース、マンニトール、乳糖、デンプン又はステアリン酸マグネシウムを含む無毒性固体担体が用いられ得る。したがって、適切な賦形剤及び担体は、選択された投与経路によって対象に送達されるために適する製剤を産生するために当業者によって選択され得る。賦形剤は、非限定的にグリセロール、ポリエチレングリコール、ガラス形成ポリオールNラウロイルサルコシン、Lプロリン、非界面活性剤スルホベタイン、塩酸グアニジン、尿素、トリメチルアミンオキシド、KCl、Ca2、Mg2、Mn2、Zn2、ジチオスレイトール、ジチオエリトロール、βメルカプトエタノール、界面活性剤の懸濁液油中水型及び水中油型を含む乳剤及び可逆的乳剤を含むその変異体、リポ糖、リポ多糖、免疫賦活性核酸、リポソーム、Toll受容体アゴニスト及びそのような構成成分の種々の組合せを含む。本発明のCMVgBポリペプチドとの組合せでの使用に適するアジュバントは、サポニンである。したがって本発明の免疫原性組成物は、サポニンQS21を含み得る。QS21は、キラヤサポナリアモリナの樹皮由来の天然サポニンとして当技術分野において十分に周知であり、CD8細胞傷害性T細胞、Th1細胞及び主にIgG2a抗体応答を誘導する。疑念を避けるためにQS21に対する基準はOPT821を含む。本発明の適切な形態では、本発明の免疫原性組成物は、QS21を実質的に純粋な形態で含む、すなわちQS21は、純度少なくとも80、少なくとも85、少なくとも90、例えば純度少なくとも95又は純度少なくとも98である。本発明の組成物は、QS21を約1μgから約100μgの間、例えば約1μgから約60μgの間又は10μgから約50μgの間で、例えば約10μg、約125μg、約15μg、約20μg、約25μg、約30μg、約40μg又は詳細には約50μgの量で含み得る。詳細には、QS21は、約40μgから60μgの間又は45から55μgの間又は47から53μgの間又は48から52μgの間又は49から51の間又は約50μgの量で存在する。代替的に、QS21は、21μgから29μgの間又は約22μgから約28μgの間又は約23μgから約27μgの間又は約24μgから約26μgの間又は約25μgの量で存在する。一部の実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドを含む免疫原性組成物は、QS21を約10μg、例えば約5μgから15μgの間、約6μgから約14μg、約7μgから約13μg、約8μgから約12μg又は約9μgから約11μg又は約10μgの量で含む。さらなる実施形態では、本発明の免疫原性組成物は、QS21を約5μg程度、例えば約1μgから9μgの間、約2μgから約8μg、約3μgから約7μg、約4μgから約6μg又は約5μgの量で含む。本発明の組成物のヒト用量におけるQS21の適切な量は、例えば1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49又は50μgのいずれかである。本発明のCMVgBポリペプチドを含む免疫原性組成物は、QS21及びステロール、詳細にはコレステロールを含み得る。そのような組成物は、ステロールが存在しない組成物と比較して、アジュバント効果は維持されているが減少した反応原性を示す。反応原性研究は、WO9633739に開示の方法に従って評価され得る。本発明によるステロールは、外来性ステロールを意味すると受け取られる。適切には、外来性ステロールはWO9633739に記載のサポニンアジュバントと関連する。詳細な実施形態では、コレステロールは、QS21の量を超えて存在し、例えばQS21ステロールの比は、典型的には1100から11の程度、適切には110から11の間及び好ましくは15から11である。詳細には、QS21ステロールの比は、少なくとも12である。詳細な実施形態では、QS21ステロールの比は15である。適切なステロールはβシトステロール、スチグマステロール、エルゴステロール、エルゴカルシフェロール及びコレステロールを含む。詳細な一実施形態では、本発明の組成物はステロールとしてコレステロールを含む。これらのステロールは当技術分野において十分周知であり、例えばコレステロールはMerckIndex11thEdn341頁において動物性脂肪中に発見された天然に存在するステロールとして開示されている。したがって特定の実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドを含む免疫原性組成物は、QS21をその低反応原性組成物において含む。QS21が外来性コレステロールで抑制されている低反応原性組成物の数個の詳細な形態が存在する。特定の実施形態では、サポニンステロールは、リポソーム構造の形態にある。したがって例えば本発明のCMVgBポリペプチドは、QS21及びコレステロールの組合せを含むアジュバントを含む免疫原性組成物において適切に用いられ得る。用語リポソームは、一般に水性の内部を封入している単層状又は多層状脂質構造を意味する。リポソーム及びリポソーム製剤は、当技術分野において十分に周知である。リポソームを形成できる脂質は、脂肪性又は脂肪性様の特性を有するすべての物質を含む。リポソーム中の脂質を構成できる脂質は、グリセリド、グリセロリン脂質、グリセロホスフィノリピド、グリセロホスホノリピド、スルホリピド、スフィンゴ脂質、リン脂質、イソプレノリド、ステロイド、ステアリン、ステロール、アルケオリピド、合成カチオン性脂質及び脂質含有炭水化物を含む群から選択され得る。リポソームは、適切にはリン脂質を含み得る。適切なリン脂質はホスファチジルコリンの合成の中間体であるホスホコリン天然リン脂質誘導体タマゴホスホコリン、タマゴホスホコリン、ダイズホスホコリン、水素添加ダイズホスホコリン、天然のリン脂質としてのスフィンゴメエリン及び合成リン脂質誘導体ホスホコリン、ホスホグリセロール、ホスファチジン酸、ホスホエタノールアミン、ホスホセリン、ポリエチレングリコールPEGリン脂質を含む。一実施形態では、リポソームは1パルミトイル2オレオイルグリセロ3ホスホエタノールアミンを含む。一実施形態では、高度に精製されたホスファチジルコリンが用いられ、ホスファチジルコリン、水素添加ホスファチジルコリン、ホスファチジルコリン、水素添加ホスファチジルコリンを含む群から選択され得る。さらなる実施形態では、リポソームはホスファチジルエタノールアミンPOPE又はその誘導体を含む。リポソームサイズは、リン脂質組成及びそれらの調製のために用いられる方法に応じて30nmから数μmまで変化し得る。本発明の詳細な実施形態では、リポソームサイズは、50nmから500nmの範囲となり、さらなる実施形態では50nmから200nmとなる。動的レーザー光散乱法は、リポソームサイズを測定するために用いられる当業者に十分周知の方法である。本発明のリポソームは、ジオレオイルホスファチジルコリンDOPC及びステロール、詳細にはコレステロールを含み得る。したがって詳細な実施形態では、非機能性膜貫通ドメイン並びに融合ループFL1及びFL2の少なくとも一つ、場合により両方を有するgBポリペプチドなどの本発明のCMVgBポリペプチドを含む免疫原性組成物は、QS21を本明細書に記載の任意の量でリポソームの形態で含み、前記リポソームはジオレオイルホスファチジルコリンDOPC及びステロール、詳細にはコレステロールを含む。本発明の免疫原性組成物は、一つ以上のさらなる免疫賦活剤を含み得る。一実施形態では、本明細書に記載の本発明のCMVgBポリペプチドを含む免疫原性組成物は、リポ多糖、適切にはリピドAの無毒性誘導体、詳細にはモノホスホリルリピドA又はより詳細には3脱アシル化モノホスホリルリピドAをさらに含む。3DMPLは、GlaxoSmithKlineBiologicalsNAによってMPLの名称で販売されており、明細書全体においてMPL又は3DMPLと称される。例えば米国特許第4436727号、第4877611号、第4866034号及び第4912094号を参照されたい。3DMPLは、主にIFNγ表現型を有するCD4T細胞応答を促進する。3DMPLは、GB2220211Aに開示の方法により産生され得る。化学的には、それは、3、4、5又は6アシル化鎖を有する3脱アシル化モノホスホリルリピドAの混合物である。本発明の組成物では小粒子3DMPLが用いられ得る。小粒子3DMPLは、022μmフィルターを通して滅菌的にろ過され得るような粒子サイズを有する。そのような調製物はWO9421292に記載されている。本発明の組成物は、3DMPLを約1μgから約100μgの間、例えば約1μgから約60μgの間、又は10μgから約50μgの間、例えば約10μg、約125μg、約15μg、約20μg、約25μg、約30μg、約40μg又は詳細には約50μgの量で含み得る。詳細には、3DMPLは、約40μgから60μgの間、又は45から55μgの間、又は47から53μgの間、又は48から52μgの間、又は49から51の間、又は約50μgの量で存在する。代替的に3DMPLは、21μgから29μgの間、又は約22μgから約28μgの間、又は約23μgから約27μgの間、又は約24μgから約26μgの間、又は約25μgの量で存在する。別の実施形態では、免疫原性組成物のヒト用量は、3DMPLを約10μg、例えば5から15μgの間、適切には6から14μgの間、例えば7から13μgの間、又は8から12μgの間、又は9から11μgの間、又は10μgのレベルで含む。さらなる実施形態では、免疫原性組成物のヒト用量は、3DMPLを約5μg、例えば1から9μgの間、又は2から8μgの間、又は適切には3から7μgの間、又は4から6μgの間、又は5μgのレベルで含む。本発明の組成物における3DMPLの適切な量は、例えば1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49又は50μgのいずれかである。他の実施形態では、リポ多糖は、米国特許第6005099号及び欧州特許第0729473B1号に記載のとおりβ16グルコサミン二糖であってよい。当業者は、3DMPLなどの種々のリポ多糖をこれらの参考文献の教示に基づいて容易に産生できるであろう。前述の免疫賦活剤に加えて、MPLの上記の構造の一部であるアシル化単糖及び二糖誘導体も適切なアジュバントである。他の実施形態では、アジュバントは、リピドAの合成誘導体であり、そのいくつかはTLR4アゴニストとして記載され、これだけに限らないがOM1743ドデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ4oホスホノ□Dグルコピラノシル23ヒドロキシテトラデカノイルアミノ□DグルコピラノシルジヒドロゲンホスフェートOM294DP3ドデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ4オキソ5アザ93ヒドロキシテトラデカノイルアミノデカン110ジオール110ビスOM197MPAcDP3□ドデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ4オキソ5アザ93ヒドロキシテトラデカノイルアミノデカン110ジオール1ジヒドロゲノホスフェート10を含む。本明細書上に記述したなどのさまざまなアジュバントの組合せもCMVgBポリペプチドを含む組成物において用いられ得る。例えば既に記載のとおり、QS21は3DMPLと共に製剤され得る。QS213DMPLの比は、15から51及びしばしば実質的に11など典型的には110から101程度となる。典型的には、比は、3DMPLQS21、251から11の範囲である。したがって一部の実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドを含む免疫原性組成物は少なくともQS21及び3DMPLを含む。本発明のCMVgBポリペプチドを含む免疫原性組成物は、水中油型乳剤とも適切に製剤され得る。水中油型乳剤は代謝可能な油を含む。油は、レシピエントに無害であり代謝によって変換され得る任意の植物油、魚油、動物油又は合成油であってよい。木の実、種子及び穀物は植物油の一般的な供給源である、合成油も適切である。したがって本発明のCMVgBポリペプチドとの組合せで用いられる水中油型乳剤は、代謝可能な油を含む。詳細な実施形態では、水中油型乳剤は、スクアレンを含む。水中油型乳剤は、表面活性物質をさらに含み得る。本発明の水中油型乳剤は、一つ以上の表面活性物質を含む。適切な表面活性物質は、当業者に十分周知であり、これだけに限らないがポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、ソルビタントリオレエート、ホスファチジルコリン、ポリオキシエチレンセトステアリルエーテル及びオクトキシノール9を含む。本発明の詳細な実施形態では、水中油型乳剤に含まれるのは、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートである。さらなる実施形態では、本発明の水中油型乳剤は、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート及びさらなる表面活性物質、詳細にはソルビタントリオレエートを含む。本発明の水中油型乳剤は、トコールを含んでもよい。トコールは当技術分野において十分周知であり、EP0382271に記載されている。詳細にはトコールはαトコフェロール又はアルファトコフェロールコハク酸エステルなどのその誘導体である。本発明の詳細な実施形態では、本発明のCMVgBポリペプチドを、スクアレン及びαトコフェロールを含む水中油型乳剤との組合せで含む免疫原性組成物が提供される。詳細な実施形態では、水中油型乳剤は、代謝可能な油、トコール及び表面活性物質を含む。本発明のさらなる実施形態では、本発明の水中油型乳剤は、代謝可能な油、表面活性物質、及び場合により第二の表面活性物質を含む。本発明のさらなる実施形態では、本発明の水中油型乳剤は、代謝可能な油、ポリオキシエチレンアルキルエーテル親水性非イオン性表面活性物質セトステアリルエーテル及び疎水性非イオン性表面活性物質又はソルビタントリオレエートスパン85を含む。一部の実施形態では、非機能性膜貫通ドメイン並びに突然変異した融合ループFL1及びFL2の少なくとも一つ、場合により両方を有するgBポリペプチドなどの本発明のCMVgBポリペプチドを含む免疫原性組成物は、スクアレン、アルファトコフェロール及びポリソルベート80を含む水中油型乳剤を含む。適切には、水中油型は、ワクチンの一用量当たり11mg又はそれ以下、例えば0511mg、0510mg又は059mg、110mg、111mg、210mg、48mg又は4555mgの間の代謝可能な油及び5mg又はそれ以下、例えば015mg、025mg、035mg、045mg、054mg、12mg又は23mgの間の乳化剤を含む。適切には、存在する場合はトコールは、ヒトワクチン用量当たり12mg以下、例えば0512mg、1011mg、111mg、210mg、49mg又は57mgの間である。用語ワクチンヒト用量とは、ヒトへの使用に適合する容積である用量を意味する。一般的にはこれは025から15mlの間である。一実施形態では、ヒト容量は05mlである。さらなる実施形態では、ヒト容量は05mlより多い、例えば06、07、08、09又は1mlである。さらなる実施形態では、ヒト容量は1mlから15mlの間である。別の実施形態では、詳細には免疫原性組成物が小児科用である場合、ヒト容量は025から05mlの間などの05ml未満であってよい。典型的には、免疫原性組成物は、抗原の免疫防御量を含有し、従来技術によって調製され得る。ヒト対象への投与用のものを含むワクチンなどの免疫原性組成物の調製は、一般にPharmaceuticalBiotechnologyVol61VaccineDesignthesubunitandadjuvantapproacheditedbyPowellandNewmanPlenurnPress1995、NewTrendsandDevelopmentsinVaccineseditedbyVolleretalUniversityParkPressBaltimoreMarylandUSA1978に記載されている。リポソーム中への封入は、例えばFullertonによる米国特許第4235877号に記載されている。タンパク質のマクロ分子へのコンジュゲーションは、例えばLikhiteによる米国特許第4372945号及びArmorらによる米国特許第4474757号によって開示されている。典型的には、免疫原性組成物の各用量中のタンパク質の量は、典型的な対象において顕著な有害な副作用を伴わずに免疫防御的応答を誘導する量として選択される。本状況における免疫防御は、感染に対する完全な防御を必然的には意味せず、症状又は疾患、特にウイルスに関連する重度の疾患に対する防御を意味する。抗原の量は、用いられる具体的な免疫原に応じて変化し得る。一般に各ヒト用量は、約1μgから約100μg、例えば約1μg、約2μg、約5μg、約10μg、約15μg、約20μg、約25μg、約30μg、約40μg又は約50μgなどの約1μgから約50μg、などの11000μgのタンパク質を含むことが予測される。免疫原性組成物中で利用される量は、対象集団に基づいて選択される。具体的な組成物についての最適量は、抗体力価及び対象における他の応答の観察を含む標準的研究によって確認され得る。初回ワクチン接種に続いて対象は約4週間以内に追加免疫を受けることができる。他に説明する場合を除いて、本明細書において用いられるすべての技術用語及び科学用語は、本開示が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。分子生物学における一般的用語の定義は、BenjaminLewinGenesVpublishedbyOxfordUniversityPress1994、KendrewetalTheEncyclopediaofMolecularBiologypublishedbyBlackwellScienceLtd1994及びRobertAMeyersMolecularBiologyandBiotechnologyaComprehensiveDeskReferencepublishedbyVCHPublishersInc1995において見出し得る。単数形a、an及びtheは、文脈上他に明確に示す場合を除いて複数の参照事項を含む。核酸又はポリペプチドに与えられるすべての塩基サイズ又はアミノ酸サイズ及びすべての分子量又は分子質量値は、およそであり記載のために提供されることはさらに理解される。用語複数のは、二つ以上を意味する。核酸又はポリペプチドに与えられるすべての塩基サイズ又はアミノ酸サイズ及びすべての分子量又は分子質量値は、およそであり記載のために提供されることはさらに理解される。付加的に、抗原などの物質の濃度又はレベルに関して示された数的限定は、およそであることが意図される。したがって濃度が少なくとも200pgであると示された場合、濃度は少なくともおよそ200pgであると理解されることが意図される。本明細書に記載のものと類似の又は等価の方法及び物質は本開示の実施又は検査において用いられ得るが、適切な方法及び物質は下に記載される。用語含むは含むを意味する。したがって文脈上他に要求する場合を除いて用語含む及び含む含んでいるなどの変化形は、述べられた化合物若しくは組成物又はステップ、或いは化合物又はステップの群の包含を意味すると理解されるが、任意の他の化合物、組成物、ステップ又はそれらの群の排除とは理解されない。略字例えばはラテン語exempligratiaに由来し、本明細書において非限定的例を示して用いられる。したがって略字例えばは用語例えばと同義である。続く実施形態が、本発明において企図されるaN末端からC末端への方向で、融合ループ1ドメイン及び融合ループ2ドメインを含む細胞外ドメインの少なくとも一部分、場合により膜貫通ドメインの少なくとも一部分、並びに細胞質ドメインの少なくとも一部分を含み、FL1ドメインの少なくとも一つのアミノ酸が置換又は欠失されており、存在する場合はTMドメイン又はその部分が非機能性である、サイトメガロウイルスgBポリペプチド。b配列番号1に記載の配列に関連して位置701~775の又は他のCMVgBポリペプチドの対応する位置のアミノ酸を欠失することによって前記TMドメインが非機能的にされている、実施形態aのCMVgBポリペプチド。c前記融合ループFL2ドメインに少なくとも一つのアミノ酸置換又は欠失をさらに含む、実施形態a又はbのCMVgBポリペプチド。d前記ポリペプチドの前記細胞質ドメイン中の一つの疎水性アミノ酸領域の欠失を少なくともさらに含む、実施形態aからcのいずれかのCMVgBポリペプチド。e前記融合ループFL1ドメイン中の一つのアミノ酸置換が、配列番号1に記載の配列に関連して位置155~157に又は他のCMVgBポリペプチド中の対応する位置にあるYIY中の少なくとも一つのアミノ酸の、芳香族性ではない極性アミノ酸での置換からなる、実施形態aからdのいずれか一つのCMVgBポリペプチド。f前記置換が、配列番号1に記載の配列に関連して位置155~157に又は他のCMVgBポリペプチド中の対応する位置にあるYIY中の少なくとも二つのアミノ酸の、芳香族性ではない極性アミノ酸での置換からなる、実施形態eのCMVgBポリペプチド。g前記極性アミノ酸がリシン、ヒスチジン及びアルギニンからなる正に荷電したアミノ酸の群から選択される、実施形態e又はfのCMVgBポリペプチド。h配列番号1に記載の配列に関連して位置156に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるイソロイシンがヒスチジンで置換されている、実施形態gのCMVgBポリペプチド。i配列番号1に記載の配列に関連して位置157に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるチロシンがアルギニンで置換されている、実施形態g又は請求項hのCMVgBポリペプチド。j配列番号1に記載の配列に関連して位置155に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるチロシンがグリシンで置換されている、実施形態eからiのいずれかのCMVgBポリペプチド。k配列番号1に記載の配列に関連して融合ループFL1ドメインにおける位置155~157に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるアミノ酸YIYがアミノ酸GHRでそれぞれ置換されている、実施形態aからdのいずれかのCMVgBポリペプチド。l配列番号1に記載の配列に関連して前記融合ループFL1ドメインにおける位置155~157に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるアミノ酸YIYのストレッチがカイト及びドーリトルスケールによって測定される19の疎水性スコアを有し、カイト及びドーリトルスケールによって測定される3未満、7未満、8未満の疎水性スコアを有する3アミノ酸のストレッチで置換されている、実施形態aからdのいずれかのCMVgBポリペプチド。m前記融合ループFL2ドメインにおけるアミノ酸置換が、配列番号1に記載の配列に関連して位置240~242に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるWLYの内の少なくとも一つのアミノ酸の、リシン、ヒスチジン及びアルギニンからなる群から選択される正に荷電したアミノ酸での置換からなる、実施形態cからlのいずれかのCMVgBポリペプチド。n配列番号1に記載の配列に関連して位置240~242に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるWLYの内のアミノ酸が、ヒスチジンで置換されている、実施形態mのCMVgBポリペプチド。o配列番号1に記載の配列に関連して位置242に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にある少なくともチロシンがヒスチジンで置換されている、実施形態m又はnのCMVgBポリペプチド。p配列番号1に記載の配列に関連して融合ループFL2ドメインにおける位置240~242に又は他のCMVgBポリペプチドにおける対応する位置にあるアミノ酸WLYがアミノ酸AFHでそれぞれ置換されている、実施形態cからnのいずれか一つのCMVgBポリペプチド。q細胞質ドメインにおける欠失が配列番号1に記載の配列に関連してアミノ酸825から877の領域に対応する、実施形態dからpのいずれか一つのCMVgBポリペプチド。r前記ポリペプチドが内部タンパク質分解部位で突然変異している、実施形態aからqのいずれか一つのCMVgBポリペプチド。s配列番号1に記載の配列に関連して又は異なるCMVgBポリペプチドの対応する位置のT456で置換されたR456、Q458で置換されたR458及びT459で置換されたR459からなる群から選択される少なくとも一つのアミノ酸置換が実施されている、実施形態rのCMVgBポリペプチド。t配列番号1に記載の配列に関連してR456、R458及びR459又は異なるCMVgBポリペプチドの対応する位置がT456、Q458及びT459でそれぞれ置換されている、実施形態sのCMVgBポリペプチド。u配列番号1に記載の配列に関連してアルギニンがセリンで置換されている、実施形態aからtのいずれかのCMVgBポリペプチド。v配列番号1に記載の配列に関連してアルギニンがセリンで置換されている、実施形態aからuのいずれかのCMVgBポリペプチド。w配列番号1に記載の配列に関連してシステインがアラニンで置換されている、実施形態aからvのいずれかのCMVgBポリペプチド。x配列番号3に記載の配列のCMVポリペプチド。y配列番号4に記載の配列のCMVポリペプチド。z配列番号5に記載の配列のCMVポリペプチド。aaAUCによる測定でCMVgBポリペプチドの50より多くが三量体形態にある、前記ポリペプチドを含む調製物。bb適切な薬学的担体と混合した実施形態aからzのいずれか一つのCMVgBポリペプチドを含む免疫原性組成物。ccアジュバントをさらに含む、実施形態bbの免疫原性組成物。dd実施形態azのいずれか一つのCMVgBポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。ee実施形態ddのポリヌクレオチドを含む組換えベクター。ff実施形態eeの組換えベクターで形質転換された宿主細胞。ggCMV感染の予防及び又は治療における使用のための、実施形態aからzのいずれかのCMVgBポリペプチド。hhCMV感染を予防及び又は治療するための医薬の調製における実施形態aからzのいずれか一つのCMVgBポリペプチドの使用。ii実施形態aからzのいずれかのCMVgBポリペプチドを含む組成物の免疫学的有効量を対象に投与するステップを含む、CMVに対する免疫応答を誘発するための方法。本発明は続く非限定的実施例を参照することによってさらに記載される。実施例1CMVgBポリペプチド下に示すすべてのgBポリペプチド変異体は、CMV株AD169由来のgBのアミノ酸配列に由来する。したがって突然変異の位置を特定する場合のアミノ酸の番号付けは配列番号1に記載のAD169CMVgBの配列に関連する。同様に下に記載のそれらそれぞれが含有する特定の突然変異に加えて、続く構築物はすべて膜貫通ドメインが除去されている及びすべて次の点突然変異アミノ酸Sで置換されたアミノ酸R50及びR357を含む。下の変異体が一過性形質移入のためのヒスチジンタグをポリペプチドのC末端に含むが、前記タグの配列は本明細書に開示の配列番号に含まれない。11gBSLP12gBSLP12変異体は、gBの推定融合ループ、FL1及びFL2それぞれを標的化する2系列の点突然変異を含む。FL1は、アミノ酸155YIY157をアミノ酸155GHR157で置換することによって突然変異させ、一方FL2はアミノ酸240WLY242をアミノ酸240AFH242で置換することによって突然変異させた。この構築物は830アミノ酸長のタンパク質をコードする。gBSLP12の完全アミノ酸配列は配列番号3に示される。111発現ベクターpMaxAD169gBSLP12の構築gBSLP12遺伝子配列はGeneartcompanyによって合成された。コード配列をCHO細胞での発現のためにコドン最適化した。HindIII及びBamHI制限部位を5末端及び3末端にそれぞれ導入した。コドン最適化遺伝子配列は、第一推定融合ループ及び第二推定融合ループの両方において突然変異を保有する。合成DNA断片は、KpnI及びSacIクローニング部位を用いてAD169gBSLP12pMAプラスミドを生成するようにpMAベクターにクローン化された2558bp長DNA挿入物として受け取った。AD169gBSLP12pMAプラスミドをHindIII及びBamHIで制限した。gBSLP12遺伝子を含有する2530bpDNA断片をゲル精製し、哺乳動物発現ベクターpMaxにライゲーションした。pMaxCloningvector骨格は、Amaxa商業的ベクターの多重クローニング部位に存在するATG開始コドンを除くために改変されている。自動化DNA配列決定機による配列検証後、pMaxAD169gBSLP12組換えプラスミドをCHOS細胞を一過的に形質移入するために用いた。12gBSLP12Del2アミノ酸Pro825からLys877を包含する一つの疎水性領域の欠失をgBSLP12変異体に導入し、gBSLP12Del2変異体を生成した。この構築物は777アミノ酸長のタンパク質をコードする。gBSLP12Del2変異体の完全なアミノ酸配列を配列番号4に示す。gBSLP12Del2をコードするヌクレオチド配列を配列番号8に示す。121発現ベクターpMaxAD169gBSLP12Del2の構築AD169gBSLP12コード配列中に存在する特有の制限部位HindIII及びClaIを包含する2159bpDNA断片を、AD169gBSLP12pMAプラスミドを鋳型として並びにプライマーSLPFw及びSLPRvを用いてPCRによって増幅した。AD169gBSLP12Del2遺伝子のC末端部分もClaI及びSacI制限部位を包含する745bp断片として、Del2pMAベクターを鋳型として並びにプライマーDelFw及びDelRvを用いてPCR増幅した。gBSLP12Del2遺伝子のC末端部分をコードする合成DNA断片を保有しているDel2pMAベクターは、GeneArtcompanyによって構築された。適切な酵素での制限後、PCR断片をHindIII及びSacIで制限したpMaxベクターにクローン化した。自動化DNA配列決定機による配列検証後、pMaxAD169gBSLP12組換えプラスミドをCHOS細胞を一過的に形質移入するために用いた。13gBSLP1Del2アミノ酸Pro825からLys877を包含する一つの疎水性領域の欠失をgBSLP1変異体に導入し、gBSLP1Del2変異体を生成した。この変異体は、777アミノ酸長タンパク質をコードする。gBSLP1Del2変異体の完全なアミノ酸配列を配列番号5に示す。131発現ベクターpMaxAD169gBSLP1Del2の構築gBSLP1遺伝子は、GeneArtによって最初に合成された。コドン最適化遺伝子配列は、第一推定融合ループに突然変異を保有する。この合成遺伝子は、KpnI及びSacIクローニング部位を用いてAD169gBSLP1pMAプラスミドを生成するようにpMAベクターにクローン化された2558bpDNA断片として受け取った。発現ベクターpMaxAD169gBSLP1Del2をAD169gBSLP1pMA及びベクタープラスミドDel2pMAから構築した。pMAgBSLP21ベクターをHindIII及びClaIで制限し、SLP1Del2タンパク質のN末端部分をコードする1964bpDNA断片をゲル精製によって単離した。ベクタープラスミドDel2pMAをClaI及びSacIで消化し、gBSLP1Del2タンパク質のC末端部分をコードする420bpDNA断片をゲル精製によって単離した。これら二つの断片をHindIII及びSacIで制限したpMax発現ベクターに一緒にライゲーションし、最終的発現ベクターpMaxAD169gBSLP1Del2を生成した。自動化DNA配列決定機による配列検証後、pMaxAD169gBSLP1Del2組換えプラスミドをCHOS細胞を一過的に形質移入するために用いた。gBSLP1Del2をコードするヌクレオチド配列を配列番号7に示す。14gBSLP12Delta113アミノ酸793で始まる細胞質ドメインのC末端部分の欠失及び膜貫通ドメインのアミノ酸701775の欠失をgBSLP12Delta113変異体で実施した。変異体は717アミノ酸長タンパク質をコードする。gBSLP12Delta113変異体の完全なアミノ酸配列を配列番号12に示す。141ベクターpTT5gBSLP12Delta113の構築pTT5gBSLP12Delta113発現ベクターを構築するために用いた戦略は続くとおりである。最初にpMaxAD169gBSLP1ベクターをHindIII及びClaIで制限した。得られた1970bpgB断片をゲル精製で単離した。ClaI及びBamHI部位を包含するgBSLP12Delta113構築物のC末端はGeneartによって合成され、pMAベクターにクローン化された230bp長DNA挿入物として受け取った。New2pMAベクターをClaI及びBamHIで制限し、230bp挿入物をゲル精製した。二つのゲル精製DNA断片を、予めHindIII及びBamHIで制限したpMax発現ベクターに一緒にライゲーションし、pMaxAD169gBSLP12Delta113プラスミドを生成した。次いでAD169gBSLP12Delta113構築物の位置50及び357のセリンをStratageneからのQuickChangeMultiSiteDirectedMutagenesisキットを用いて両方とも天然のアルギニンに復帰させた。得られたプラスミドを制限酵素HindIII及びBamHIで消化した。2200bpgB断片をゲル精製し、予めHindIII及びBamHIで制限したpTT5ベクターにライゲーションし、最終pTT5gBSLP12Delta113発現ベクターを生成した。このベクターをCHOS細胞を一過的に形質移入するために用いた。gBSLP12Delta113をコードするヌクレオチド配列を配列番号11に示す。15gBSLP12Delta725アミノ酸725で始まる膜貫通ドメインの部分の欠失及び細胞質ドメイン全体の欠失をgBSLP12Delta725で実施した。この変異体は724アミノ酸長タンパク質をコードする。gBSLP12Delta725変異体の完全なアミノ酸配列を配列番号10に示す。151発現ベクターpTT5gBSLP12Delta725の構築最初にgBSLP12Del2構築物の位置50及び357のセリンをStratageneからのQuickChangeMultiSiteDirectedMutagenesisキットを用いて両方とも天然のアルギニンに復帰させた。得られたプラスミドを制限酵素HindIII及びClaIで消化し、得られた1970bpgB断片をゲル精製によって単離した。ClaI及びBamHI制限部位を包含し、続く配列ATCGATCCCCTGGAGAACACCGACTTCAGGGTGCTGGAGCTGTACTCCCAGAAGGAACTGAGGTCCAGCAACGTGTTCGACCTGGAGGAAATCATGAGAGAGTTCAACAGCTACAAGCAGCGCGTGAAGTACGTGGAGGACAAGGTGGTGGACCCCCTGCCCCCCTACCTGAAGGGCCTGGACGACCTGATGAGCGGACTCGGGGCTGCTGGAAAGGCCTGAGGATCCを含むPCR断片も生成した。1970bpHindIIIClaI断片並びにClaI及びHindIIIで制限したPCRDNAを一緒にpTT5ベクターのHindIIIとBamHIとのクローニング部位の間に最終pTT5gBSLP12Delta725発現ベクターを生成するためにライゲーションした。自動化DNA配列決定機による配列確認後、pTT5gBSLP12Delta725組換えプラスミドをCHOS細胞を一過的に形質移入するために用いた。gBSLP1Delta725をコードしているヌクレオチド配列を配列番号9に示す。16gBSLP12Delta725LVL759この変異体は683アミノ酸長タンパク質をコードしている。gBSLP12Delta725LVL759の完全なアミノ酸配列を配列番号14に示す。161発現ベクターpTT5AD169Delta725LVL759の構築pTT5gBSLP12Delta725RRleader2プラスミドをStratageneからのQuickChangeIIXLSiteDirectedMutagenesisキット並びにプライマーCAN14985gtgcatcgtgtgcctgggatccgaggccgtgagccacagg3及びCAN14995cctgtggctcacggcctcggatcccaggcacacgatgcac3を用いて突然変異させ、中間体プラスミドpTT564913を得た。この中間体プラスミドを同じQuickChangeIIXLSiteDirectedMutagenesisキット並びにプライマーCAN16505gtgaacctgtgcatcgtgtgcctggccctggccagccaccgggccaacgagacaa3及びCAN16515ttgtctcgttggcccggtggctggccagggccaggcacacgatgcacaggttcac3を用いて突然変異させ、最終発現ベクターpTT5SLP12725LVL759を得た。gBSLP12Delta725LVL759をコードするヌクレオチド配列を配列番号13に示す。17gBSLP12Delta725LVL776この変異体は683アミノ酸長タンパク質をコードしている。gBSLP12Delta725LVL776変異体の完全なアミノ酸配列を配列番号16に示す。171発現ベクターpTT5AD169Delta725LVL776の構築上の中間体プラスミドpTT569413を同じQuickChangeIIXLSiteDirectedMutagenesisキット並びにプライマーCAN16485cctgtgcatcgtgtgcctgggagccctggccagccaccgggccaacgagacaatc3及びCAN16495gattgtctcgttggcccggtggctggccagggctcccaggcacacgatgcacagg3を用いて突然変異させ、さらなる中間体プラスミドpTT5LVL7581を得た。この中間体プラスミドを同じQuickChangeIIXLSiteDirectedMutagenesisキット並びにプライマーCAN16975tggtgtgcgtgaacctgtgcatcgtgctcctgggagccctggcccaccgggccaacgagacaatctac3及びCAN16985gtagattgtctcgttggcccggtgggccagggctcccaggagcacgatgcacaggttcacgcacacca3を用いて突然変異させ、最終発現ベクターpTT5gBSLP12Delta725LVL776を得た。gBSLP12Delta725LVL759をコードするヌクレオチド配列を配列番号15に示す。18gBSLP12Delta725CD33gBSLP12Delta725CD33変異体は677アミノ酸長タンパク質をコードする。この構築物は、ヌクレオチド1から192を包含するgB遺伝子のN末端部分がCD33のシグナル配列で置き換えられたことを除いてgBSLP12Delta725構築物とほとんど同一である。gBSLP12Delta725CD33変異体の完全なアミノ酸配列を配列番号18に示す。181発現ベクターpTT5gBSLP12Delta725CD33の構築gBSLP12Delta725CD33遺伝子を、pTT5gBSLP12Delta725プラスミドを鋳型として、並びにプライマーCD33及びCMO578を用いるPCR増幅によって構築した。フォワードプライマーはHindIII部位及びCD33シグナル配列を含有する。リバースプライマーは終止コドン及びBamHI部位を含有する。適切な酵素での制限後、PCR断片をHindIII及びBgIIIで制限したpEE14ベクターにクローン化した。pEE14gBSLP12Delta725CD33組換えプラスミドを配列検証後に選択した。最終的にgBSLP12Delta725CD33遺伝子を次のとおりpTT5ベクターにサブクローン化した。コード配列をpEE14gBSLP12Delta725CD33ベクターを鋳型として、並びにプライマーCD33F及びEctoRvを用いてPCR増幅した。フォワード及びリバースプライマーはHindIII及びBamHIクローニング部位をそれぞれ含有する。増幅されたDNA及びpTT5ベクターをライゲーションの前にHindIII及びBamHIで制限した。得られたpTT5gBSLP12Delta725CD33発現ベクターを配列検証後にCHOS細胞を一過的に形質移入するために用いた。gBSLP12Delta725CD33をコードするヌクレオチド配列を配列番号17に示す。実施例2CMVgBポリペプチドの発現上に記載のさまざまなDNA構築物をInvitrogenのFreeStyleMAXCHO発現システムを用いてCHO細胞に一過的に形質移入した。ポリペプチドgBDeltaTMをコードする構築物を対照として用いた。gBDeltaTMのアミノ酸配列を配列番号2に示す。gBDeltaTMを発現するために用いた発現ベクターはpMaxAD169であった。FreeStyleMAXCHOシステムは、CHOS細胞系及び形質移入試薬としての合成カチオン性脂質に基づくポリマーを用いる。形質移入のためのプラスミドDNAをQiagenMaxiprepキットを製造者のプロトコールに従って用いて単離した。形質移入複合体をInvitrogenによって推奨されるとおり調製した。簡潔には、375μgのプラスミド及び375μlのFreeStyleMAX形質移入試薬を別々に06mlのOptiProSFM培地中に希釈した。直後に希釈したFreeStyleMAX形質移入試薬を希釈したDNA溶液に添加した。DNAFreeStyleMAX混合物を細胞培養物に添加する前に10分間、室温でインキュベートした。形質移入した培養物を37°Cで3日間インキュベートした。次いで培養物を29°Cでさらに3日間維持した。形質移入後6日目に、懸濁液中の形質移入された細胞及び細胞培養培地を含む細胞培養物各1mlを回収した。細胞培養上清を12000gでの遠心分離によって懸濁された細胞から分離した。上清を回収し、細胞性ペレットを溶解緩衝液1mlに溶解した。12000g、4°C、5分間の遠心分離によって細胞可溶化液から不溶性物質を除去した。培養上清及び可溶化した細胞性画分の一定分量をMOPS緩衝液を用いてCriterionXT412BisTrisgelにかけた。タンパク質をニトロセルロース膜に転写し、膜を抗gB抗体MAb27156で探索した。代替的に発現及び分泌レベルを抗gB抗体を用いるElisaアッセイによって検出した。アッセイは96ウエルプレートで実施した。プレートをポリクローナル抗gB抗体でコートした。3スキムミルク、1時間、37°Cでの飽和ステップ後、抗体を一晩4°Cでインキュベートした。次いでウエルを4回洗浄した。検査する各試料の2倍希釈系列の一連の10個を、コートしたプレートにビオチンコンジュゲートしたモノクローナル抗gB抗体の存在下で2時間、37°Cで添加した。PBS01Tween20で4回洗浄後、ストレプトアビジン西洋ワサビペルオキシダーゼ100μlを添加し、30分間、37°Cでインキュベートした。プレートをPBS01Tween20で4回及び水で1回洗浄した。次いでプレートを01Mクエン酸緩衝液pH58中の75テトラメチルベンジジンの100μlで10分間、37°Cでインキュベートした。この反応を100μlの04NH2SO4で停止し、比色定量を分光光度計450620nmで読み取った。濃度が既知である精製gBDeltaTMの以前のロットをこの実験において標準として用いた。ソフトウエアSoftMaxProを用いて検査した各試料の濃度を定量した。21gBSLP12、gBSLP1Del2及びgBSLP12Del2の発現及び分泌ウエスタンブロット分析図3に示すのは、独立して実施した3回の実験からの代表的ウエスタンブロットである。レーンA、B、C及びDは、gBDeltaTM、gBSLP12、gBSLP1Del2及びgBSLP12Del2で形質移入した培養物の細胞性画分をそれぞれ表す。前記細胞性画分中に存在するgBのレベルは、細胞内にあるgBのレベルを示す。レーンE、F、G及びHは、gBDeltaTM、gBSLP12、gBSLP1Del2及びgBSLP12Del2で形質移入した培養物の上清をそれぞれ表す。前記上清中に存在するgBのレベルは、分泌されたgBのレベルを示す。レーンB、C及びDに存在するgBのレベルをレーンAに存在するgBのレベルと比較すると、細胞内gBのレベルが融合ループを突然変異させても変化しないままであることが示される、すなわち本発明のポリペプチドは、インタクトな融合ループを有するgBDeltaTMと比較して融合ループ内の突然変異が分泌に影響しないことを示唆している。実際にレーンF、G及びHに存在するgBのレベルをレーンEに存在するgBのレベルと比較すると、本発明のgBポリペプチドの発現及びそれらの分泌は、先行技術のgBポリペプチドの発現及び分泌と少なくとも同様に効率的であることが認められる。22gBSLP12gBSLP12Delta113及びgBSLP12Delta725の発現及び分泌ElisaアッセイElisaアッセイによって得られた結果の定量及びグラフの形態での表示を図4に示す黒色バーはそれぞれgBDeltaTM、gBSLP12、gBSLP12Delta113及びgBDelta725で形質移入した培養物の細胞性画分を表し、灰色バーは同じ培養物の上清を表す。したがって発現された変異体ごとの灰色バーと黒色バーとの合計は、CHO細胞への形質移入後に達成された総発現レベルを表す。gBDeltaTMに関して、発現されたポリペプチド集団内で、ポリペプチドのおよそ半分が細胞内に保持され、ポリペプチドのおよそ半分が分泌されたことを認めた。驚くべきことにgBSLP12が発現された場合、総発現レベルがgBDeltaTMよりも顕著に高かったことが認められた。さらに細胞内形態及び分泌形態のそれぞれのレベルを比較すると、80を超えるポリペプチドが分泌された一方で1020だけが細胞内に残ったことが認められ、gBSLP12もgBDeltaTMよりもより効率的に分泌されたことを示唆している。この結果は、融合ループの突然変異は発現及び分泌に肯定的な影響を有することを示唆している。gBDeltaTMを超える高い発現及び分泌レベルは、ポリペプチドgBSLP12Delta113及びgBSLP12Delta725でも同様に認められた。しかし驚くべきことにこれら二つのポリペプチドは、gBSLP12よりもさらにより顕著に、2倍を超えて及びおよそ16倍でそれぞれ発現され、細胞質ドメインの少なくとも一部の欠失を融合ループ突然変異と組み合わせることが発現を及びしたがって得られる分泌されたポリペプチドの最終収量をさらに改善することを示唆している。23gBSLP12、gBSLP12Delta113、gBSLP12Delta725、gBSLP12の発現及び分泌融合ループの役割ウエスタンブロットを図5に示す。図5Aは、gBSLP12がgBSLP12Delta725と同様に効率的に分泌されることを示し、両方ともgBDeltaTMよりも高い分泌レベルを示しており、Elisaアッセイによって認められた結果を確認している。レーンM及びNは、インタクトな融合ループFL1及びFL2を有するgBSLP12Delta725で形質移入した培養物の細胞性画分及び上清を表している。培養物上清中のgBの検出の欠如は、gBの良い発現分泌レベルは融合ループが突然変異することを必要とすることを示唆しており、同様の観察が図5BgBタンパク質が検出できなかったにおいてなされた。gBDeltaTMよりも良い分泌を達成するための融合ループFL1及びFL2の突然変異の必要性は、ポリペプチドgBSLP12Delta113について同様に観察された。gBは、インタクトな融合ループFL1及びFL2を有するgBSLP12Delta113で形質移入した培養物の上清において、gBSLP12Delta113で形質移入した培養物の上清と比較してほとんど観察されなかった。24gBSLP12Delta725、gBSLP12Delta725LVL759及びgBSLP12Delta725LVL776の発現及び分泌ウエスタンブロットを図5Cに示す。gBSLP12Delta725LVL759で形質移入した培養物の上清に存在するgBのレベルは、gBSLP12Delta725で形質移入した培養物の上清に存在するgBのレベルと少なくとも同様である。gBSLP12Delta725LVL776で形質移入した培養物の上清に存在するgBのレベルは、gBSLP12Delta725で形質移入した培養物の上清に存在するgBのレベルよりわずかに低い。これらの結果は、本発明のポリペプチドのN末端部分における突然変異が前記ポリペプチドの分泌レベルに顕著な影響を与えないことを示す。実施例3CMVgBポリペプチドの生成物プロファイルgBDeltaTM、gBSLP12及びgBSLP1Del2を実施例2に記載のとおりCHO細胞において一過的に発現させ、培養上清を形質移入後6日目に回収した。清澄化後、上清に350mMNaCl及び04Empigenを補充し、次いで022μmろ過した。ニッケルカラムを細胞に対応する培養上清から形質移入及び分泌されたポリペプチドを精製するために用いた。XK16カラムを10mMTRISHCl、350mMNaCl、10mMイミダゾール及び04Empigenを含む緩衝液pH80で平衡化した。予め清澄化、補充及びろ過した細胞培養上清を流速4ml分でロードし、保持されたタンパク質を平衡化緩衝液で洗浄した。溶出は流速4ml分で、10mMTRISHCl、350mMNaCl、350mMイミダゾール及び04Empigenを含む緩衝液pH80で実施した。次いで溶出された画分を、10mMリン酸緩衝液及び04Empigenを含む緩衝液pH72で平衡化したXK26カラムに流速2ml分で注入した。最初のタンパク質ピークをさらなる分析のために回収した。次いでこのピークに対応する溶出画分を、10mMリン酸及び04Empigenを含む緩衝液pH72で平衡化したセルファインサルフェートカラムにロードした。溶出は流速3ml分で、5mMリン酸、1MNaCl及び01プルロニックF68を含む緩衝液pH72で実施した。次いで上の精製プロセスから得られた精製ポリペプチドを続く実験に供した。31グルタルアルデヒド架橋結合実験グルタルアルデヒドの最終濃度05及び1となるように各精製ポリペプチドの15μlにグルタルアルデヒドを直接添加した。対照として各精製ポリペプチドの試料をグルタルアルデヒドを添加しないままにした。混合物を150分間インキュベートし、次いでグルタルアルデヒド反応をNaBH4を添加することによって停止し、試料を氷上、20分間インキュベートした。次いで試料をMOPS緩衝液を用いてCriterionXT412BisTrisゲルにかけた。ゲルをCoomassieblueR250で染色し、図9に示す。結果ポリペプチドの多量体がグルタルアルデヒドで処置するより前に試料中に存在した場合、任意の所与のサイズの多量体が架橋結合され、次いで変性条件でゲル上を移動する場合にそのように維持される。したがって前記多量体はそれらの分子量に応じて移動した。反対に、グルタルアルデヒドで処置しなかった対照試料では、前記試料中に存在する任意の多量体は、変性条件でゲル上を移動する際に単量体に変性され、対照試料中のポリペプチドはポリペプチドの単量体と等しい分子量に応じて移動した。gBDeltaTMの多量体プロファイルを考慮すると、グルタルアルデヒドで処置した試料中に非常に高分子量の二つのバンドを認める。これらの二つのバンドが同じ強度であることが認められ、gBDeltaTM試料が主に2種類の多量体を含み、試料中の各多量体の割合がほぼ同じであることが示唆される。反対に試料がグルタルアルデヒドで処置されたgBSLP12のプロファイル、詳細にはレーンE及びFを考慮すると、二つの高分子量バンドが同様に認められたが、各バンドの強度は顕著に異なっている。実際に低分子量バンドの強度は、最も高分子量のものより少なくとも3~5倍強く、gBSLP12試料中の低分子量多量体集団は、高分子量多量体の集団よりも大きいことを示唆している。同様の観察が、低い方のバンドの強度が高い方のバンドの強度よりもおよそ2~3倍強いgBSLP2Del2試料を考慮する場合になされた。これは、gBSLP12とgBSLP1Del2とが、先行技術のポリペプチドgBDeltaTMとは異なる低分子量多量体に富んだ割合を有する類似の多量体プロファイルを有することを示唆している。この実験で用いたゲルは、gBDeltaTMに関するレーンにおいて認められた低分子量バンドがgBSLP12及びgBSLP1Del2に関するレーンにおいて認められたものと同じサイズであるかどうかを決定するために十分な分解能を提供しないことを指摘する。同じ理由で、各バンドの実際のサイズを正確に決定することは不可能であり、認められた多量体を二量体又は三量体などに同定することはこの実験からは困難である。この情報を入手するために、続く二つの実験を精製ポリペプチドで実施した。32分析的超遠心分離法gBDeltaTM、gBSLP12、gBSLP1Del2分析的超遠心分離法を、遠心力に反応して分子が移動する速度を測定することによって、精製ポリペプチド試料中のさまざまな分子種の溶液中での均一性及びサイズ分布を決定するために用いた。これは、沈降速度実験によって得られるさまざまな分子種の沈降係数の算出に基づく。精製後、10mMリン酸ナトリウム、1MNaCl、01Pluronic、pH72に再懸濁したgBDeltaTM、gBSLP12及びgBSLP1Del2をAN60Tiローターを15°Cに平衡化させた後に、BeckmanCoulterProteomeLabXL1分析的超遠心分離機にて28000rpmで回転させた。データ収集のために160スキャンを280nm及び230nmで5分ごとに記録した。データ分析をC分布を決定するためにプログラムSEDFITを用いて実施した。タンパク質の偏比容の決定を、それらのアミノ酸配列及び予測されるグリカン組成と組み合わせたSEDNTERPソフトウエアで実施した。SEDNTERPを、PluronicF68の寄与を無視することによって緩衝液の粘度及び密度を決定するためにも用いた。結果を、分子量に対してプロットした各分子種の濃度を示すグラフの形態で示す。すべての分子種の相対的存在量の決定を分布全体の曲線下総面積を試料の100とみなし、分子種ごとの寄与により表される総面積の百分率を算出することによって実施した。結果図10は、分析的超遠心分離法によって分析した精製gBDeltaTM、gBSLP12及びgBSLP1Del2のプロファイルを連続的に示す。gBDeltaTM試料に対応するグラフは、複数のピークによって表される不均一な分布を示す。詳細には、前記試料中に認められる主な集団は、417kDa及び723kDaの分子種である。より高分子量の多量体も前記試料中に存在する。反対に融合ループFL1及びFL2を突然変異させると、対応する精製gBSLP12ポリペプチドのプロファイルは、主な集団が327kDaの分子種であるより均一な集団を示す。より高分子量の多量体の存在はかろうじて認められた。類似のプロファイルが、主な集団が311kDaの分子種であるgBSLP1Del2試料において認められたが、より高分子量の多量体の存在はわずかである。結論として本発明のgBポリペプチドは、三量体集団が、先行技術のgBポリペプチドの三量体集団と比較しておよそ2倍増加している改善された生成物プロファイルを示す。33分析的超遠心分離法gBSLP12Delta725、gBSLP12Delta113精製ポリペプチドgBSLP12Delta725及びgBSLP12Delta113中のさまざまな分子種の溶液中での均一性及びサイズ分布を決定するために分析的超遠心分離法を32節に記載のとおり実施した。ポリペプチドは、実施例2に記載のとおり組み換え的に発現させ、本実施例3の最初の段落に記載のとおり精製した。精製後、gBSLP12Delta725及びgBSLP12Delta113をそれぞれ01プルロニックを含む緩衝液又はPluronicを含まない緩衝液のいずれかに再懸濁した。結果図11Aは、01Pluronicの存在下又は非存在下での分析的超遠心分離法によって分析した精製gBSLP12Delta113ポリペプチドのプロファイルを連続的に示す。Pluronic非存在下で認められたプロフィルは、精製ポリペプチドの集団内で三量体を表す類似の72の集団を有して、図10においてgBSLP12及びgBSLP12Del2について認められたプロファイルと比較して改善された生成物プロファイルと同様であった。しかし、Pluronicの存在下では、三量体の百分率は単量体の百分率の増加及び230kDa付近の多量体の存在に伴って低下した。Pluronicの存在下でのgBSLP12Delta113ポリペプチドの単量体化の傾向は、界面活性剤への感受性を示している。図11Bは、01Pluronicの存在下又は非存在下での分析的超遠心分離法によって分析した精製gBSLP12Delta725ポリペプチドのプロファイルを連続的に示す。Pluronicが存在するか否かにかかわらずこの精製ポリペプチドで認められたプロファイルは類似している。実際に三量体の百分率は両方の場合において70程度である、すなわち上のgBSLP12及びgBSLP12Del2ポリペプチドで認められた三量体百分率と同様に高く、したがってgBSLP12Delta725も先行技術のgBポリペプチドと比較して改善された生成物プロファイルを示す。結論gBSLP12Delta113及びgBSLP12Delta725の両方が三量体に富む割合を有して改善された生成物プロファイルを示すが、得られた結果はgBSLP12Delta725が溶液中での増大した構造安定性を有する追加的利点を表すことを示す。実際に界面活性剤処置は、このポリペプチドの沈降特性に観察可能な影響を有さなかった。34サイズ排除クロマトグラフィー精製gBDeltaTM及びgBSLP12のタンパク質サイズを、280nmでのUV検出器及びTSKG5000PWXLカラムを用いるサイズ排除クロマトグラフィーによっても決定した。試料を室温、流速05ml分でロードした。溶出は同じ流速、室温でPBS01Pluronicで実施した。サイログロブリン、フェリチン、カタラーゼ、アルドラーゼ、アルブミン、コンアルブミン、オボアルブミン、炭酸脱水素酵素及びリボヌクレアーゼを較正のために用いた。結果図13に示すとおり、gBSLP12はサイズ排除クロマトグラフィーによって測定された357kDaのサイズを有する。先行技術の二つのポリペプチド、gBDeltaTM及びgBS50DeltaTMは710kDaの類似するサイズを有する。これらの結果は、本発明のポリペプチドが先行技術のポリペプチドとは異なる生成物プロファイルを有するという分析的超遠心分離法で得られた上の結果を確認する。実施例4gBSLP12ポリペプチドのC末端クリッピング41発現及び精製gBDeltaTM、gBSLP12、gBSLP12Delta113及びgBSLP12Delta725ポリペプチドを実施例2に記載のとおり一過的に形質移入し、発現させた。gBSLP12、gBSLP12Delta113及びgBSLP12Delta725ポリペプチドを実施例3の最初の段落に記載のとおり精製した。形質移入後6日目に回収した後、gBDeltaTM上清にBisTris及びEmpigenBBをそれぞれ最終濃度20mM及び04に達するまで補充した。次いでそれを、20mMBisTris04EmpigenBBを含む緩衝液pH60で平衡化したQSeharoseXLカラムにロードした。結合したペプチドを20mMBisTris04EmpigenBBを含む緩衝液pH60を75と20mMBisTris04EmpigenBB1MNaClを含む緩衝液pH60を25との混合液でカラムから溶出させた。次いで溶出液にリン酸ナトリムを最終濃度10mMに達するまで補充し、pH68に調整した。次いでそれを10mMリン酸ナトリウム04EmpigenBB025MNaClを含む緩衝液pH68で平衡化したヒドロキシアパタイトtypeIIカラムにロードした。ポリペプチドを含有する素通り画分を回収し、10mMリン酸ナトリウム04EmpigenBB025MNaClを含む緩衝液pH68で平衡化したCellufineSulfateカラムにロードした。ポリペプチドを含有する素通り画分を回収し、100kDPelliconXL膜を用いる限外ろ過によって濃縮し、10mMリン酸ナトリウム04EmpigenBBを含む緩衝液pH72で平衡化したSuperdex200カラムにロードした。溶出物を回収し、濃縮及び10mMリン酸カリウムpH72で透析ろ過した。42ウエスタンブロット分析上の精製ポリペプチドをNグリコシダーゼF脱グリコシル化キットを製造者の説明書に従って用いて脱グリコシル化した。精製した各脱グリコシル化ポリペプチドの等量をMOPS緩衝液を用いてCriterionXT412BisTrisゲルにかけた。タンパク質をニトロセルロース膜に転写し、膜を抗gB抗体MAb27156又は抗6XHisタグ抗体のいずれかで探索した。結果図14Aは、抗gB抗体が精製gBDeltaTMポリペプチドの集団における二つの異なる形態を認識することを示し、ポリペプチドが精製された集団において異なるサイズの少なくとも二つの形態、それぞれ92kDa及び80kDaで存在することを示唆している。アミノ酸の分子量の平均値に基づいて、830アミノ酸を含むgBDeltaTMの分子量は91kDa付近であるはずである。したがって92kDaのバンドはおそらく全長gBDeltaTMポリペプチドに対応し、一方80kDaのバンドはポリペプチドの短縮バージョンに対応し、集団内でいくらかのポリペプチドが切断され、80kDa付近のクリップされた生成物が産生されていることを示唆している。図14Bは、細胞中でのgBSLP12ポリペプチドの組換え発現において、抗gB抗体が類似するサイズの二つの形態、92kDa及び80kDaをそれぞれ認識する同一プロファイルを提供することを示し、このポリペプチドにおいて類似の切断が生じていることを示唆している。本明細書において、gBSLP12の予測される分子量も91kDa付近であることに注目する。膜を抗Hisタグ抗体で探索すると、92kDa付近のバンドだけが検出された。HisタグがポリペプチドのC末端にあることから、これらのデータは切断がポリペプチドのC末端部分で生じ、したがってC末端を失った80kDaの断片が生じることを示唆する。図14Cは、細胞中でのgBSLP12Delta113ポリペプチドの組換え発現において、抗gB抗体が一つのバンドだけを認識することを示している。gBSLP12Delta113がアミノ酸717個を含むことから、平均分子量が79kDa付近であるはずであると予測される。したがって80kDa付近の一つのバンドだけの観察結果はこの精製ポリペプチドの集団が全長ポリペプチドだけからなっていることを示し、以前認められたC末端部分での切断がポリペプチドのこの集団においてはもはや生じていないことを示唆している。これは、膜を抗Hisタグ抗体で探索し、80kDa付近の同一バンドを観察することによって確認された。同様の結論が、ポリペプチドgBSLP12Delta725に関して図14Dに示すウエスタンブロットから得られた。レーンDは、一つのバンドだけを認識する抗gB抗体で探索した膜を表す。アミノ酸824個を含むこのポリペプチドの予測される平均分子量も79kDaであるはずである。レーンCは、抗Hisタグ抗体で探索した膜を表し、同様に80kDa付近の一つのバンドだけを認識し、ポリペプチドのC末端が存在することを示している。ポリペプチドは脱グリコシル化の過程で沈殿する場合があり、不完全な脱グリコシル化を生じる場合がある。脱グリコシル化が不完全である場合、いくらかのポリペプチドはそのグリコシル化形態で残り、その形態は典型的にはゲル中を拡散して移動する。結論図14に示すデータは、ポリペプチドgBDeltaTM及びgBSLP12のポリペプチドのC末端部分で生じるクリッピングが細胞質ドメインの少なくとも一部を除去すると生じないことを示している。実施例5ポリペプチドgBSLP12Delta725のN末端不均一性図12Aに示すとおり、CMVgBSLP12Delta725ポリペプチドは、細胞中で組換え発現されると、N末端で不均一である成熟ポリペプチドの集団を生じる。実際にシグナルペプチダーゼは、示すとおり異なるアミノ酸位置でシグナル配列を切断する。この現象はシグナルペプチダーゼのゆらぎとも称される。51発現及び精製実施例1に記載のとおりHisタグを含有するgBSLP12Delta725、gBSLP12Delta725LVL759、gBSLP12Delta725LVL776及びgBSLP12Delta725CD33ポリペプチドを実施例2に記載のとおり組換え発現させた。形質移入後6日目に培養上清を回収した。EDTAfreeproteaseinhibitorcocktailを上清に添加し、NaCl濃度を500mMに、最終pHを83に調整した。IMACsepharose6FFを直径5cmのガラスカラムに詰めた。カラムを5カラム容積の結合緩衝液で平衡化した。上清を平衡化したカラムに流速10ml分でロードした。未結合物質を2カラム容積の上の結合緩衝液で洗浄した。50mlの画分で回収した。カラムを追加的に2カラム容積の上の結合緩衝液でさらに洗浄した。10mlの画分で回収した。カラムに結合したタンパク質を6カラム容積の溶出緩衝液で溶出した。10mlの画分で回収した。画分をSDSPAGEゲルにロードし、陽性画分をプールし、CentriconUltrafiltrationdeviceで濃縮した。濃縮したタンパク質をRCDCmodifiedLowrycolorimetricassayで定量した。5から10μgの精製タンパク質をNグリコシダーゼF脱グリコシル化キットを製造者の説明書に従って用いて脱グリコシル化した。脱グリコシル化タンパク質をRCDCprecipitationreactantによって沈殿させ、SDSPAGE還元ローディング緩衝液に再懸濁し、SDSPAGEにロードした。脱グリコシル化タンパク質に対応する位置に移動したタンパク質バンドをトリプシン消化及びMSMSペプチドマッピング分析のために切った。52トリプシン消化精製タンパク質を含有するゲル片をアセトニトリルで脱水した。タンパク質を還元緩衝液を添加することによって30分間、40°Cで還元し、アルキル化緩衝液を添加することによって20分間、40°Cでアルキル化した。次いでゲル片を、ACNを添加することによってさらに5分間、40°Cで脱水及び洗浄した。次いでゲル片を5分間、40°C乾燥し、次いでトリプシン溶液、25mM重炭酸アンモニウムで4°C、40分間再水和させた。タンパク質消化を、58°C、1時間実施し、1ギ酸及び2ACNの混合液15μlで停止させた。上清を96ウエルプレートに移し、トリプシン消化ペプチドの抽出を室温で抽出緩衝液を用いる2回の30分間抽出ステップで実施した。すべての抽出ペプチドを96ウエルプレートにプールし、次いで真空遠心分離で完全に乾燥させた。プレートをシールし、LCMSMS分析へのさらなるプロセスまで20°Cで保存した。53質量分析LCMSMS分析の前に、抽出ペプチドを02ギ酸12μl中で15分間撹拌して再溶解し、次いで2000rpm、1分間遠心分離した。LCカラムは、高圧充填セルで充填したC18逆相カラムである。長さ100mmの75lmidフューズドシリカキャピラリーにC18Jupiter5lm300Åreversephasematerialを充填した。このカラムをnanoLC2Dシステムに設置し、LTQOrbitrapに繋いだ。クロマトグラフィーに用いた緩衝液は、02ギ酸及び100ACN02ギ酸であった。最初の12分間、試料5μlを流速650nl分でカラムにロードし、続いて緩衝液Bを20分間で280にし、次いで10分間で緩衝液Bを2に戻す勾配をかけた。LCMSMSデータ取得をOrbitrapで取得されたスキャンイベント1についての完全スキャンMSからなす4スキャンイベントサイクルを用いて遂行した。結果図12は、検査したさまざまなポリペプチドのシグナル配列の切断部位に生じたシグナルペプチダーゼのゆらぎの定量的評価の結果を示す。シグナルペプチダーゼのゆらぎは、表示のポリペプチドの各集団内でそれらのN末端が異なるアミノ酸から始まるさまざまな成熟ポリペプチド形態の生成をもたらす。図12Aは、全タンパク質抽出物のトリプシン消化後に続く、MSMSによるN末端を含む得られたペプチドの相対的定量を示し、gBSLP12Delta725ポリペプチドの集団が表示のとおりそれぞれ異なるアミノ酸で始まる比較的等量の割合の五つの異なるポリペプチド形態として溶液内に主に存在したことを認めた。図12B及び12Cは、それぞれgBSLP12Delta725LVL759及びgBSLP12Delta725LVL776の集団に存在するポリペプチドのさまざまな形態のMSMS相対的定量の同様の分析を示す。これら二つのポリペプチドの集団は99より高い百分率で一つの主なポリペプチドの形態として溶液内に主に存在したことが認められた。二つの代替的切断部位がシグナルペプチダーゼによって切断され、ポリペプチドのそれぞれの集団内のわずか1未満を表すN末端に別のアミノ酸を有する二つの追加的ポリペプチド形態を生成する。図12Dは、gBSLP12Delta725CD33ポリペプチドの集団に存在するポリペプチドのさまざまな形態のMSMS相対的定量の同様の分析を示す。この集団は99より高い百分率で一つの主なポリペプチドの形態として溶液内に主に存在したことが認められた。他の切断部位がシグナルペプチダーゼによって切断され、gBSLP12Delta725CD33ポリペプチドの集団内のわずか1未満を表すN末端に別のアミノ酸を有する一つの追加的ポリペプチド形態を生成する。結論これらの結果は、シグナルペプチダーゼが一貫して一つの主な切断部位だけを認識することから、gBSLP12Delta725LVL759、gBSLP12Delta725LVL776及びgBSLP12Delta725CD33ポリペプチドではもはやゆらぎは生じなかったことを示している。これは、gBポリペプチドのシグナル配列及びリーダー配列になされた改変が、顕著な肯定的影響を成熟ポリペプチド集団の不均一性に有し、前記ポリペプチド集団を、99を超える程度に均一にしたことを示唆している。実施例6本発明の例示的CMVgBポリペプチドを含有する免疫原性組成物の免疫原性C末端Hisタグを含み、節で記載されたとおり発現及び精製された次のポリペプチドgBDeltaTM、gBSLP12、gBSLP12Delta113、gBSLP12Delta725、LVL759、LVL776及びCD33を含有する免疫原性組成物の免疫原性を次のとおり検査した。61実験設計C57BL6マウス10匹の群を21日間隔での2回投与で上記の例示的免疫原性組成物でワクチン接種した。免疫処置は、筋肉内に行った。免疫原性は、免疫処置1の21日後及び免疫処置2の14日後での中和アッセイ及びELISAによって測定されるワクチン接種への体液性免疫応答を分析することによって評価した。62統計的分析C57BL6マウス10匹の群を初期読み取りで2倍の差異を有する90の検出力を得るように設計した。統計的分析を免疫処置2の14日後のデータにUNISTATを用いて実施した。分散の分析のために適用したプロトコールは次のとおり簡潔に記載され得るデータの対数変換正規性を検証するための各集団でのシャピロウイルク検定異なる集団間の分散の均一性を検証するためのコクラン検定選択されたデータについての分散分析多重比較のためのチューキーHSD検定。63中和アッセイアッセイの前に、MRC5細胞を96ウエルプレートに播種し、3日間、37°Cでインキュベートした。熱不活性化血清の系列希釈物を一定量のヒトCMVAD169ウイルスと1時間、37°Cでインキュベートした。インキュベーション後、血清とウイルスとの混合物を、MRC5細胞を含む96ウエルプレートに添加した。プレートを2000rpmで1時間、37°Cで遠心分離した。一晩37°Cでインキュベーションした後、プレートを80アセトン溶液で固定した。アセトン溶液を除去し、CMV陽性ウエルを特異的モノクローナルビオチンコンジュゲート抗初期I抗体を用いて1時間、37°Cで検出した。プレートをPBSで3回洗浄した。洗浄後、ストレプトアビジン西洋ワサビペルオキシダーゼを追加的に30分間、37°Cで添加した。プレートを3回洗浄し、TrueBlue溶液と10分間インキュベートした。特異的な有色シグナルを顕微鏡下の目視検査によって記録した。中和力価を、血清を含まないウイルス投与対照と比較して、CMV陽性ウエルの数を50低下させる血清の最も高い希釈度の逆数として表した。結果中和抗体応答を最初の免疫処置の21日後及び2回目の免疫処置の14日後に収集した血清試料について測定した。試料をヒトCMVAD169に対するそれらの中和活性に関して検査した。結果を図15Aに示す。検査したすべてのポリペプチドは、免疫処置2の14日後に有意な応答を誘導した。gBSLP12、gBSLP12Delta113、gBSLP12Delta725及びLVL759は、gBDeltaTMと有意には異ならない力価を誘導した。CD33及びLVL776は、gBDeltaTMより有意に低い力価を誘導した。p値≧005→統計的に異ならない。p値005→統計的に異なる。64ELISAアッセイ抗gB抗体の定量をコーティング抗原としてgBと称するgBポリペプチドを用いてELISAによって実施した。抗原をPBS中に最終濃度4μgmlに希釈し、96ウエルプレートで一晩、4°Cでインキュベートした。次いでプレートを1ウシ血清アルブミンを含有するPBS200μlで1時間、37°Cで飽和させた。血清の2倍希釈系列をウエルに添加し、1時間30分、37°Cでインキュベートした。プレートをPBS01Tween20で4回洗浄した。100μlのビオチンコンジュゲート抗マウスIgを各ウエルに添加し、1時間、37°Cでインキュベートした。PBS01Tween20での4回洗浄後、100μlのストレプトアビジン西洋ワサビペルオキシダーゼを添加し、追加的に30分間、37°Cでインキュベーション。プレートをPBS01Tween20で4回及び水で1回洗浄した。次いでプレートを01クエン酸緩衝液pH58中の75テトラメチルベンジジンの100μlと10分間、22°Cでインキュベートした。この反応を100μlの04NH2SO4で停止し、比色定量を分光光度計450620nmで読み取った。濃度が既知である精製gBDeltaTMの以前のロットをこの実験における標準として用いた。ソフトウエアSoftMaxProを用いて、ELISA力価を決定し、ELISAUnitmlで表した。結果ELISA力価を最初の免疫処置の21日後及び2回目の免疫処置の14日後に回収した血清試料について測定した。結果を図15Bに示す。検査したすべてのポリペプチドは、免疫処置2の14日後に有意な応答を誘導した。gBSLP12Delta113及びgBSLP12Delta725は、gBDeltaTMによって誘導された力価と有意には異ならない力価を誘導した。gBSLP12、CD33、LVL759及びLVL776は有意には異ならない力価を誘導した。gBDeltaTMは、gBSLP12、CD33、LVL759及びLVL776より有意に高い力価を誘導した。p値≧005→統計的に異ならない。p値005→統計的に異なる。