"腫瘍細胞の表面に存在するプロセシングされていないc-Metに特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。エピトープ配列VVDTYYDDQL配列番号2に特異的に結合する、請求項1に記載の単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。ATCCに寄託され、PTA-11406と命名されたハイブリドーマ細胞株で産生された抗体LMH82が結合するエピトープに特異的に結合する、請求項1または2に記載の単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。ATCCに寄託され、PTA-11406と命名されたハイブリドーマ細胞株で産生されたLMH82である、請求項1から3に記載の単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。i相補性決定領域CDR配列の配列番号15、配列番号16および配列番号17のそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはii相補性決定領域CDR配列の配列番号18、配列番号19および配列番号20のそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン軽鎖を含み、c-Metに特異的に結合する、請求項1から4のいずれかに記載の単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。i配列番号21と少なくとも90同一である可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはii配列番号22に少なくとも90同一である可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖:を含む、請求項1から5のいずれかに記載の単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。エピトープ配列RHFQSCSQCLSAPPFVQCGW配列番号5またはエピトープ配列RHFQSCSQCLSAPPF配列番号6に特異的に結合する、請求項1に記載の単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。ATCCに寄託され、PTA-11405と命名されたハイブリドーマ細胞株で産生された抗体LMH80が結合するエピトープに特異的に結合する、請求項1に記載の単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。ATCCに寄託され、PTA-11405と命名されたハイブリドーマ細胞株で産生されたLMH80である、請求項1または8に記載の単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。i相補性決定領域CDR配列の配列番号7、配列番号8および配列番号9のそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはii相補性決定領域CDR配列の配列番号10、配列番号11および配列番号12のそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン軽鎖を含み、c-Metに特異的に結合する、請求項1に記載の単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。i配列番号13に少なくとも90同一である可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはii配列番号14に少なくとも90同一である可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む、請求項1に記載の単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。腫瘍細胞上のc-Metに特異的に結合し、c-Met受容体が活性化していない状況で前記受容体の下方制御を誘導する、単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。コア配列DVLPEFRDSY配列番号4から成るc-Metのα鎖のエピトープ配列に特異的に結合する、請求項12に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。前記抗体が、配列番号29に記載の可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖、および/または配列番号30に記載の可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む、請求項12または13に記載の抗原またはその抗原結合性フラグメント。i配列番号29に少なくとも90同一である可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはi配列番号30に少なくとも90同一である可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含み、c-Metに特異的に結合する、単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。i相補性決定領域CDR配列の配列番号23、配列番号24および配列番号25のそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはii相補性決定領域CDR配列の配列番号26、配列番号27および配列番号28のそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン軽鎖を含み、c-Metに特異的に結合する、単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。scFVである請求項15または16に記載の抗原結合性フラグメント。腫瘍細胞上のc-Metに特異的に結合し、c-Met受容体が活性化していない状況で前記受容体の下方制御を誘導する、請求項15もしくは16に記載の抗体、または請求項17に記載の抗原結合性フラグメント。対象における腫瘍細胞の細胞増殖を阻害する方法であって、前記対象に抗体またはその抗原結合性フラグメントを投与することを含み、前記抗体が、配列番号29を含む可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖、および/または配列番号30を含む可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含むLMH87である、方法。対象における腫瘍細胞の細胞増殖を阻害する方法であって、前記対象に単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントを投与することを含み、前記抗体が、i相補性決定領域CDR配列の配列番号23、配列番号24および配列番号25のそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはii相補性決定領域CDR配列の配列番号26、配列番号27および配列番号28のそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン軽鎖を含む、方法。前記抗原結合性フラグメントがscFvである、請求項19または20に記載の方法。c-Metのαまたはβ鎖上に存在するエピトープに特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントであって、前記エピトープが、VVDTYYDDQL配列番号2、VRRLKETKDGFMFLT配列番号3、DVLPEFRDSY配列番号4、およびRHFQSCSQCLSAPPFVQCGW配列番号5から成る群から選抜されるアミノ酸配列を含む、またはそれらから本質的に成る、単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。c-Metエピトープ配列RHFQSCSQCLSAPPF配列番号6に特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。DVLPEFRDSY配列番号4から成るコアエピトープ配列に特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。c-Metエピトープ配列VRRLKETKDGFMFLT配列番号3に特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。請求項1から18または22から25の1つに記載の抗体のVVDTYYDDQL配列番号2、VRRLKETKDGFMFLT配列番号3、DVLPEFRDSY配列番号4、RHFQSCSQCLSAPPFVQCGW配列番号5およびRHFQSCSQCLSAPPF配列番号6から成る群から選抜されるエピトープへの結合を競合的に阻害することが可能な抗体。i配列番号37に少なくとも90同一であるアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはi配列番号38に少なくとも90同一であるアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン軽鎖を含み、c-Metに特異的に結合する、単離されたアゴニスト抗c-Met抗体LMH85。i配列番号31、配列番号32および配列番号33に記載の相補性決定領域CDRのそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはi配列番号34、配列番号35および配列番号36に記載の相補性決定領域CDRのそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン軽鎖を含み、c-Metに特異的に結合する、請求項27に記載のアゴニスト抗c-Met抗体LMH85。配列番号37の可変領域配列を含む免疫グロブリン重鎖および配列番号38の可変領域配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含むscFv。c-Metのアンタゴニストである請求項29に記載のscFv。薬剤に結合する、請求項1から18または22から30のいずれか1項に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。検出可能標識もしくは機能性標識から選抜される薬剤、または、細胞毒もしくは抗新生物薬剤から選抜される治療薬剤に結合する、請求項31に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。請求項1から18または22から30のうちのいずれか1項に記載の抗体または抗原結合性フラグメントをコードする、単離された核酸配列。請求項33に記載の核酸配列であって、前記配列が、配列番号39の重鎖可変領域配列および/または配列番号40の軽鎖可変領域配列を含む、核酸配列。配列番号41の重鎖可変領域配列および/または配列番号42の軽鎖可変領域配列を含む、またはそれらから成る請求項33に記載の核酸配列。請求項33から35のうちのいずれか1項に記載の単離された核酸配列を含むベクター。請求項36に記載のベクターを含む宿主細胞。前記核酸を発現し、前記抗体が産生されるように請求項37に記載の宿主細胞を培養することを含む、抗c-Met抗体を産生する工程。請求項1から18もしくは22から30のうちのいずれか1項に記載の抗体もしくは抗原結合性フラグメント、または請求項31に記載の抗体複合体を薬学的に許容される担体もしくは賦形剤と共に含む、医薬組成物。抗ガン薬剤もしくは治療剤、血管新生の阻害剤または免疫変調成分から成る群から選抜される薬剤と同時にまたは連続して投与される、請求項39に記載の医薬組成物。対象における望ましくない細胞増殖または細胞増殖性疾患を治療する方法であって、請求項1から18もしくは22から30のいずれか1項に記載の抗体もしくはその抗原結合性フラグメント、または請求項31に記載の複合物の治療上有効量を前記対象に投与することを含む、方法。対象における疾患を診断する方法であって、前記対象または前記対象から得られたサンプルと、請求項1から18もしくは22から30のいずれか1項に記載の抗体もしくは抗原結合性フラグメント、または請求項31に記載の複合物とを接触させること、およびヒトc-Metと抗体または複合物との間の結合に関して前記対象またはサンプルを解析すること、を含む方法。請求項1から18もしくは22から30のいずれか1項に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメントまたは請求項31に記載の抗体複合物の、対象における望ましくない細胞増殖を減少させるか、細胞増殖性疾患を調節するか、治療するための薬剤の製造における使用。薬学的に許容される担体または賦形剤と一緒に、配列RHFQSCSQCLSAPPFVQCGW配列番号5またはRHFQSCSQCLSAPPF配列番号6を含む、またはそれらから成る、ワクチン抗原。抗c-Met抗体を得るために動物を免疫化する方法であって、配列番号1の配列を含む切断c-Met抗原フラグメントをc-Metを過剰発現する細胞と連続して、または一緒に前記動物に投与することを含む、方法。請求項45に記載の免疫処置方法により産生された抗体またはその抗原結合性フラグメント。癌細胞における化学療法剤に対する耐性の克服または軽減に使用される、請求項1から18もしくは22から30のうちのいずれか1項に記載の抗体または抗原結合性フラグメント。これらの文献において証明されたように、抗腫瘍療法のターゲットとしてのc-Metに対する強い関心が明らかに存在し、様々なアプローチが、現在調査されている。あらゆる受容体アゴニスト活性がない状況で腫瘍細胞上のc-Metを標的とすることができる、または特異的にc-Met活性、特にTK活性を阻害する、さらなる特異的抗体に対する明らかなニーズが存在する。本明細書における参考文献の引用は、そのようなものが本発明に対する先行技術であるという承認として解釈されないものとする。本発明につながる作業において、本発明者らは、治療および/または診断試薬として利用するため、c-Metに結合することができる抗体を産生しようと努力した。抗体を産生するために独特の免疫戦略を使用した。この戦略には無傷のヒトc-Met過剰発現細胞とc-Metのアミノ酸残基25-567を含むヒトc-Metから誘導した精製フラグメントでマウスを免疫化することを含んでいた。フラグメントは、N末端の余分な3つのアミノ酸残基ETRおよびC末端の余分な9つのアミノ酸ADLと終末のHis6タグを含み、配列番号1に記載の配列に対応している。余分なN末端およびC末端のアミノ酸は、IgリーダーN末端とインフレームでc-Metフラグメントをクローン化すること、および精製C末端配列を可能とする。免疫プロトコルに使用されたc-Metフラグメント内には、N末端のα鎖アミノ酸25-307およびβ鎖アミノ酸308-519の最初の212のアミノ酸が配置されている。配列は2つのドメイン、7枚羽根のβプロペラドメインおよびシステインリッチな小さいドメインを含むGherardiら、2003。βプロペラドメインは現在、適切なsemaドメインとも呼ばれる。βプロペラドメインはc-Met配列のアミノ酸残基514で終結し、また、システインリッチなドメインは、c-Metのアミノ酸残基520-561を含む。短いリンカーアミノ酸残基515-519が2つのドメインを接続する。構成的にc-Metを過剰発現するA549細胞と生理的に適切なc-Metタンパク質フラグメント配列番号1のフラグメントとを結合する独特のアプローチを用いて、本発明者らはいくつもの抗体を同定し、機能上の基準に基づいて3つのサブセットに分類した。例えば、本発明者らは、c-Metに結合できる様々な抗体を同定し、そのうち1つはc-Metのβ鎖のエピトープを認識し、そのうち6つはc-Metのα鎖上に存在するエピトープを明確に認識し、そしてそのうち3つは、立体構造エピトープを認識するように思われる。そのような抗体は、治療および/または診断に適用する際に重要である。本明細書に同定された抗体は、c-Metのプロセシングされた形態かプロセシングされていない形態かのいずれかに特異的に結合してc-Met受容体の機能または活性を調節することができる合成物を代表するものであり、結果として、c-Metを特徴づけて調節するのに有益な治療および/または診断試薬ならびに癌の治療/検出のための基盤を提供する。更に、本発明による抗体のいくつかは、c-Met受容体のHGF依存性およびHGF非依存性の活性化を阻害することができる。本発明は、腫瘍細胞の表面に存在するプロセシングされていないc-Metに特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供する。プロセシングされていないc-Metは、典型的には正常細胞の表面では発見されない。したがって、プロセシングされていないc-Metを認識できる抗c-Met抗体は、腫瘍特異的であることが予想される。c-Met腫瘍特異的抗体の有用性により、TK阻害剤、標的siRNA、および抗体等のc-Met標的治療剤に対する感応性または感受性があるものとして、腫瘍または癌細胞を同定し、特徴づけるための方法が提供される。そのような腫瘍特異的抗体の有利性は、本発明の当業者に直ちに認識可能であろう。本発明者らは、細胞表面でc-Metのプロセシングされていないp170形態を特異的に認識するLMH80、LMH81およびLMH82と命名された3つの抗体を生成した。これらの抗体により認識されたエピトープはいずれも、フューリン切断部位すなわちαおよびβ鎖を分離する部位と重ならないことが発見された。抗体LMH80/81は、c-Metのβ鎖内にαヘリックス構造を結合し、一方LMH82は、METβプロペラドメインの底面上の鎖2aおよび2bを連結するループを結合する。本発明者らは、抗体LMH80および非浸透性免疫蛍光を用いて、c-Met先駆物質がヒト癌細胞の細胞表面上で発現されることを立証することができたが、これはヒトSkHep1およびLoVo培養細胞株での過去の研究と一致する。GomesDAら,2008;KomadaMら1993;MondinoAら,1991。さらに、c-Metのプロセシングされていないp170形態は細胞表面に露出され、HGFにより活性化され得ることが、癌細胞由来のマウスにより証明されているRodriguesGAら,1991;RongSら,1992。ラットの非癌性初代培養肝細胞の非浸透分析により、p170は、細胞表面の1251-HGF結合には利用できなかったことが示唆されMizuno,Kら,1993、これは、p170細胞表面発現は癌細胞に特異的であることを強く示唆しており、重要である。本明細所に記載のLMH85に対する点状のc-Met染色は、以前に報告されたような細胞表面上のc-Metの非共有結合性の集団を示す可能性が高いFaletto,DLら,1992。このパターンはLMH80に対しても認められたため、p170も細胞表面で類似の非共有結合性の集団を形成することを示している可能性がある。したがって、抗体LMH80-82は、放射線治療剤および化学療法剤を腫瘍へ向け、肝臓のような正常組織を過剰レベルの毒性から保護するのに有用であり得る。更に、ナノ粒子技術が発展するにつれて、これらの抗体は、そのような粒子を腫瘍塊内にさらに保持していくための非常に有用なツールとなり得る。一実施例においては、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、プロセシングされていないc-Metp170のα鎖に存在する配列に特異的に結合する。より詳細には、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、プロセシングされていないc-Met上のエピトープ配列VVDTYYDDQL配列番号2に特異的に結合する。別の実施例において、抗体は、ATCCに寄託され、PTA-11406と命名されたハイブリドーマ細胞株で産生された抗体LMH82が結合するエピトープに、特異的に結合する。別の実施例において、抗体は、ATCCに寄託され、PTA-11406と命名されたハイブリドーマ細胞株で産生されたLMH82である。別の実施例において、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、i相補性決定領域CDR配列の配列番号15、配列番号16および配列番号17のそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはii相補性決定領域CDR配列の配列番号18、配列番号19および配列番号20のそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン軽鎖を含み、この抗体はc-Metに特異的に結合する。別の実施例において、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、i配列番号21に少なくとも90同一である可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはii配列番号22に少なくとも90同一である可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む。好ましい実施例において、免疫グロブリン重鎖は、配列番号21と少なくとも93、95、99同一の可変領域のアミノ酸配列を含む。またさらなる実施例において、免疫グロブリン重鎖は、配列番号21に記載の可変領域のアミノ酸配列を含む。好ましい実施例において、免疫グロブリン軽鎖は、配列番号22と少なくとも93、95、99同一の可変領域のアミノ酸配列を含む。またさらなる実施例において、免疫グロブリン軽鎖は、配列番号22に記載の可変領域のアミノ酸配列を含む。別の実施例において、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、プロセシングされていないc-Metp170のβ鎖に存在する配列に特異的に結合する。別の実施例において、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、プロセシングされていないc-Met上のエピトープ配列RHFQSCSQCLSAPPFVQCGW配列番号5またはエピトープ配列RHFQSCSQCLSAPPF配列番号6に特異的に結合する。別の実施例において、抗体は、ATCCに寄託され、PTA-11405と命名されたハイブリドーマ細胞株で産生された抗体LMH80が結合するエピトープに特異的に結合する。別の実施例において、抗体は、ATCCに寄託され、PTA-11405と命名されたハイブリドーマ細胞株で産生されたLMH80である。別の実施例において、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、i相補性決定領域CDR配列の配列番号7、配列番号8および配列番号9のそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはii相補性決定領域CDR配列の配列番号10、配列番号11および配列番号12のそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン軽鎖を含み、この抗体はc-Metに特異的に結合する。別の実施例において、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、i配列番号13に少なくとも90同一である可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはii配列番号14に少なくとも90同一である可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む。好ましい実施例において、免疫グロブリン重鎖は、配列番号13と少なくとも93、95、99同一の可変領域のアミノ酸配列を含む。またさらなる実施例において、免疫グロブリン重鎖は、配列番号13に記載の可変領域のアミノ酸配列を含む。好ましい実施例において、免疫グロブリン軽鎖は、配列番号14と少なくとも93、95、99同一の可変領域のアミノ酸配列を含む。またさらなる実施例において、免疫グロブリン軽鎖は、配列番号14に記載の可変領域のアミノ酸配列を含む。本発明者らは、思いがけず、本発明の抗c-Met抗体のあるものは、受容体の自己活性化を引き起こすことなくc-Met受容体の下方制御を誘導することができることを発見した。従来技術の抗体は典型的には受容体活性化を引き起こし、したがって、アゴニストとして機能するか、または受容体を最初に活性化させてから下方制御させる部分アゴニストとして作用する。ちなみに、c-Met受容体の自己活性化を誘導する抗体が網膜の問題を引き起こす場合があることが分かった。さらに、本発明の抗体が、c-Met受容体のリガンド依存性および非リガンド依存性の活性化を阻害することがわかった。したがって最初の自己活性化が全くない状態でc-Met受容体の下方制御を誘導することができる抗体は、癌治療において、重大な副作用または毒性をもたらさずに有効性を増強する可能性を含めて、とりわけ有利である。例えば、使用において毒性のリスクが無く、副作用も少ない抗体濃度を高くすることができる。標準的な治療と比較して、副作用の少ない治療薬を設計できるため、特に効果的で望ましい薬剤を臨床医に提供することができる。したがって本発明は、腫瘍細胞上のc-Metに特異的に結合し、c-Met受容体が活性化していない状況で受容体の下方制御を誘導する、単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供する。特に、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、受容体の自己活性化またはHGFリガンドの存在に関係なくc-Met受容体の下方制御を誘導する。一実施例において、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、コア配列DVLPEFRDSY配列番号4から成るc-Metのα鎖のエピトープ配列に特異的に結合する。またさらなる実施例において、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、配列番号29に記載の可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖、および/または配列番号30に記載の可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む。別の実施例において、本発明は、受容体が活性化していない状況でc-Met受容体の下方制御を誘導する抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供し、この抗体は、配列番号29に記載の可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖、および/または配列番号30に記載の可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含む。本発明の分野の当業者は所与の抗体またはその抗原結合性フラグメントがc-Met受容体の下方制御/分解を誘導することができるかどうかを決定することができるだろう。そのような分析には、本明細書の実施例において記載されているものが含まれる。本発明はまた、i配列番号29に少なくとも90同一である可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはii配列番号30に少なくとも90同一である可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖:を含み、c-Metに特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供する。抗体またはその抗原結合性フラグメントが、受容体が活性化していない状態でc-Met受容体の下方制御を誘導することが好ましい。好ましい実施例において、免疫グロブリン重鎖は、配列番号29と少なくとも93、95、99同一の可変領域のアミノ酸配列を含む。またさらなる実施例において、免疫グロブリン重鎖は、配列番号29に記載の可変領域のアミノ酸配列を含む。好ましい実施例において、免疫グロブリン軽鎖は、配列番号30と少なくとも93、95、99同一の可変領域のアミノ酸配列を含む。またさらなる実施例において、免疫グロブリン軽鎖は、配列番号30に記載の可変領域のアミノ酸配列を含む。本発明はまた、i相補性決定領域CDR配列の配列番号23、配列番号24および配列番号25のそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはii相補性決定領域CDR配列の配列番号26、配列番号27および配列番号28のそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン軽鎖を含み、c-Metに特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供する。抗体またはその抗原結合性フラグメントが、受容体が活性化していない状態でc-Met受容体の下方制御を誘導することが好ましい。別の実施例において、上記による抗原結合性フラグメントは、i配列番号29の可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖:および/またはii配列番号30の可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含むscFVである。本発明の分野の当業者は、腫瘍細胞上のc-Met受容体の下方制御が細胞増殖および侵襲の阻害およびアポトーシス誘導をもたらすことを理解するであろう。したがって、本発明は対象における腫瘍細胞の細胞増殖を阻害する方法を提供し、この方法は、受容体が活性化していない状態でc-Met受容体の下方制御を誘導する本発明による抗体またはその抗原結合性フラグメントを対象に投与することを含む。一実施例において、抗体は、配列番号29を含む可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖、および/または配列番号30を含む可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含むLMH87である。別の実施例では、対象における腫瘍細胞の細胞増殖を阻害する方法は、対象に単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントを投与することを含み、この抗体は、i相補性決定領域CDR配列の配列番号23、配列番号24および配列番号25のそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはii相補性決定領域CDR配列の配列番号26、配列番号27および配列番号28のそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン軽鎖を含む。抗体またはその抗原結合性フラグメントは、c-Met受容体の下方制御/分解の誘導により細胞増殖を阻害することが好ましい。別の実施例において、c-Met受容体の下方制御/分解の誘導による腫瘍細胞増殖を阻害する方法は、対象に抗体LMH87に基づくscFvを投与することにより達成される。別の実施例において、c-Met受容体の下方制御/分解の誘導による腫瘍細胞増殖を阻害する方法は、LMH87と同一のエピトープ配列に結合する抗体LMH88を対象に投与することにより達成される。抗体またはその抗原結合性フラグメントは、1つまたは複数の他の治療剤と一緒に投与してもよい。好適な他の治療剤の例としては、上皮細胞成長因子EGF受容体を標的とする薬剤、老化関連受容体様キナーゼSARKまたは抗血管新生薬剤を標的とする薬剤が挙げられる。本発明はまた、c-Metのαまたはβ鎖上に存在するエピトープに特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供し、このエピトープは、VVDTYYDDQL配列番号2、VRRLKETKDGFMFLT配列番号3、DVLPEFRDSY配列番号4、およびRHFQSCSQCLSAPPF配列番号6から成る群から選抜されるアミノ酸配列を含む、または基本的にこのアミノ酸配列から成る。一実施例において、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、c-Metのエピトープ配列RHFQSCSQCLSAPPFVQCGW配列番号5に特異的に結合する。実施例において、抗体は、配列DVLPEFRDSY配列番号4から成るコアエピトープ配列に結合する。別の実施例において、抗体またはその抗原結合性フラグメントはコアエピトープ配列VRRLKETKDGFMFLT配列番号3に特異的に結合する。別の実施例において、抗体は、抗体LMH84が結合するエピトープ配列VRRLKETKDGFMFLT配列番号3に特異的に結合する。本発明による抗体は、様々な強さの親和性でc-Met受容体に結合する。一実施例において、本発明は、約10-35nMの範囲の親和性で配列RHFQSCSQCLSAPPFVQCGW配列番号5を含むc-Metのエピトープに特異的に結合する抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供する。別の実施例において、本発明は、低親和性、好ましくは5nM未満、より詳細には3nM未満の親和性で配列DVLPEFRDSY配列番号4を含むc-Metのエピトープに特異的に結合する抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供する。特定の一実施例において、本発明はエピトープ配列DVLPEFRDSY配列番号4に結合し、配列番号29および配列番号30それぞれに記載の重鎖および軽鎖可変領域の配列を含むLMH87と命名された抗体を提供する。別の実施例、において、本発明は、高親和性、好ましくは70nM超、より詳細には75nM超の親和性で配列DVLPEFRDSY配列番号4を含むc-Metのエピトープに特異的に結合する抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供する。抗原結合親和性をアッセイする方法は当技術分野において周知であり、最大半量結合アッセイ、拮抗実験、BIAcoreおよびスキャチャード解析を含む。別の実施例において、本発明は、コアエピトープ配列DVLPEFRDSY配列番号4から成るc-Metのエピトープに特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供し、この抗体は、寄託番号PTA-7680でATCCに寄託されたハイブリドーマ細胞株により産生されたMet4抗体ではない。本発明は、さらにVVDTYYDDQL配列番号2、VRRLKETKDGFMFLT配列番号3、DVLPEFRDSY配列番号4、RHFQSCSQCLSAPPFVQCGW配列番号5およびRHFQSCSQCLSAPPF配列番号6から成る群から選抜されたエピトープへの本発明の抗体の結合を競合的に阻害できる抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供する。本発明はさらに、本明細書で記述するように本発明の抗体、例えば、LMH80、LMH82、LMH84、LMH85またはLMH87と命名された抗体を競合的に阻害できる抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供する。本発明は、さらにc-Met受容体のアゴニストである抗体を提供する。一実施例において、本発明は、i配列番号37に少なくとも90同一であるアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはii配列番号38に少なくとも90同一であるアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン軽鎖を含み、c-Metに特異的に結合する、アゴニスト抗c-Met抗体LMH85を提供する。好ましい実施例において、免疫グロブリン重鎖は、配列番号37と少なくとも93、95、99同一の可変領域のアミノ酸配列を含む。またさらなる実施例において、免疫グロブリン重鎖は、配列番号37に記載の可変領域のアミノ酸配列を含む。好ましい実施例において、免疫グロブリン軽鎖は、配列番号38と少なくとも93、95、99同一の可変領域のアミノ酸配列を含む。またさらなる実施例において、免疫グロブリン軽鎖は、配列番号38に記載の可変領域のアミノ酸配列を含む。別の実施例において、本発明はさらに、i配列番号31、配列番号32および配列番号33に記載の相補性決定領域CDRのそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン重鎖、および/またはii配列番号34、配列番号35および配列番号36に記載の相補性決定領域CDRのそれぞれ、またはそれらの1つもしくは複数に実質的に記載されているアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン軽鎖を含み、c-Metに特異的に結合する、アゴニスト抗c-Met抗体LMH85を提供する。驚いたことに、本発明者らは、c-MetのHGF活性化をブロックすることにより、LMH85に基づくscFvがアンタゴニスト活性を示すことを発見した。したがって、本発明はさらに配列番号37の可変領域配列を含む免疫グロブリン重鎖、および配列番号38の可変領域配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含むscFvを提供する。本発明はさらに、薬剤、好ましくは検出可能な標識もしくは機能性標識、または治療薬に結合された本発明による抗体もしくはその抗原結合性フラグメント、またはscFvのうちのいずれかを提供する。特に好ましい抗体は、抗体LMH80、LMH81またはLMH82により例示されるようなc-Metのプロセシングされていない形態に特異的に結合するものである。治療薬は抗体に直接または間接的に結合され得る。治療薬の例には、これらに限定するものではないが、細胞毒、放射性同位体例えば、ヨウ素131、イットリウム90またはインジウム-111、免疫調節剤、血管新生抑制物質、抗新血管新生および/または他の血管新生化薬剤、トキシン、抗増殖性の薬剤、アポトーシス促進性の薬剤、化学療法剤、チロシンキナーゼ阻害薬および治療用核酸がある。本発明による抗体はポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体であってもよい。抗体またはその抗原結合性フラグメントは、キメラ抗体、ヒト化抗体、またはヒト抗体であってもよい。あるいは、組み換え方法で抗体を産生してもよい。本明細書に記述された抗体または抗原結合性フラグメントは、ヒト可変領域フレームワーク配列および定常領域配列を含むことが好ましい。本発明の抗体は、あらゆる抗体クラス、IgM、IgG、IgE、IgA、IgD、またはサブクラスに属することができる。IgGの代表的なサブクラスはIgG1、IgG2、IgG3およびIgG4である。本発明による抗原結合性フラグメントは、Fab、Fab’、Fab‘2、Fv、Fd、単鎖FvscFv、ジスルフィド結合FvssdFv、VLおよびVHドメインフラグメント、ドメイン抗体、三重特異性Fab3、二重特異性Fab2、ダイアボディVL-VH2またはVH-VL2、トリアボディ三価、テトラボディ四価、ミニボディscFv-CH32、二重特異性単鎖Fvビス-scFv、IgGdeltaCH2、scFv-FcおよびscFv2-Fcから選抜されてもよい。本発明はさらに、いずれかの実施例による本明細書に記述された抗体または抗原結合性フラグメントをコードする、単離された核酸配列を提供する。したがって、本発明はさらに、本明細書に記述された抗体のヌクレオチド酸配列まで及ぶ。したがって一実施例において、抗体または抗原結合性フラグメントは、配列番号39の核酸配列を含む免疫グロブリン重鎖の可変領域、および/または配列番号40の核酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖の可変領域を含む。別の実施例において、抗原結合性フラグメントは、配列番号41の核酸配列を含む、免疫グロブリン重鎖の可変領域および/または配列番号42の核酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖の可変領域を含むか、またはこれらから成るscFvである。本発明はさらに、本発明の1つまたは複数の核酸配列を含むベクターを提供する。一実施例において、ベクターは、本明細書に記載された抗体または抗原結合性フラグメントをコードする核酸配列を含む。一実施例において、ベクターは、配列番号39の配列を含む重鎖可変領域を含む核酸配列、および/または配列番号40の配列を含む軽鎖可変領域配列を含む。別の実施例において、ベクターは、配列番号41の配列を含む重鎖可変領域、および/または配列番号42の配列を含む軽鎖可変領域を含む核酸配列を含む。さらなる実施例において、ベクターは、配列番号13の配列をコードする重鎖可変領域の核酸配列、および/または配列番号14の配列をコードする軽鎖可変領域の核酸配列を含む。さらなる実施例において、ベクターは、配列番号21の配列をコードする重鎖可変領域の核酸配列、および/または配列番号22の配列をコードする軽鎖可変領域の核酸配列を含む。本発明は、さらに本発明による抗体またはその抗原結合性フラグメントを発現する本発明の核酸配列を含む、形質転換されたか形質移入された宿主細胞を提供する。宿主細胞は、本発明によるベクターを含むのが好ましい。宿主細胞は、細菌、酵母、植物または動物細胞のようなあらゆる細胞型であり得る。本発明はさらに、核酸が発現され、抗体が産生されるように本発明の宿主細胞を培養することを含む本発明の抗c-Met抗体を産生する工程を提供し、この宿主細胞は、本発明の少なくとも1つの核酸配列を含む。一実施例において、1つの隣接する核酸上の2つの別々のオープンリーディングフレームにより免疫グロブリン軽鎖および免疫グロブリン重鎖がコードされる。本発明は、さらに薬学的に許容される担体または賦形剤と一緒に本発明による抗体もしくはその抗原結合性フラグメント、scFvまたは抗体複合体を含む医薬組成物を提供する。一実施例において、組成物は、配列番号13、もしくは配列番号21、もしくは配列番号29、もしくは配列番号37のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖の可変領域、および/または配列番号14、配列番号22、配列番号30もしくは配列番号38のアミノ酸配列を含む可変領域を含む免疫グロブリン軽鎖、を含む抗体もしくはその抗原結合性フラグメントを、薬学的に許容される担体または賦形剤と一緒に含む。別の実施例において、組成物は、薬学的に許容される担体または賦形剤と一緒に、本発明によるハイブリドーマPTA-11405またはPTA-11406と命名により産生された抗体を含む。本発明の組成物は、治療すべき疾患に応じて、単独で、または他の処置、治療剤もしくは薬剤と組み合わせて同時にまたは順次に投与することができる。本発明は、本明細書中に記載された本発明の抗体またはその抗原結合性フラグメントと、抗癌剤もしくは治療剤、血管新生の阻害剤、または免疫変調成分等の他の薬剤もしくは治療剤とを含む組成物を予想し、それを含む。抗癌剤または治療剤は、1つまたは複数の癌治療抗体またはその活性フラグメント複数可であってもよい。抗体複数可は、癌細胞または腫瘍において変質されるか過剰発現させられる癌抗原またはタンパク質、または受容体に特異的であってもよい。そのような実施形態の代表的なものにおいて、抗癌剤は、抗EGFR薬剤または、抗体国際公開第02/092771号、国際公開第05/081854号および国際公開第09/023265号に記載されたもの等であってもよい。より一般的には、これらの抗癌剤は、チロシンキナーゼ阻害剤もしくはリン酸化カスケード阻害剤、翻訳後モジュレーター、細胞増殖阻害剤もしくは細胞分裂阻害剤、およびシグナル伝達阻害剤であり得る。本発明による典型的な抗癌剤は、抗悪性腫瘍薬、例えば、ドキソルビシン、カルボプラチン、テモゾロミドおよびシスプラチンを含む。本発明による典型的な免疫変調成分は、インターロイキン、腫瘍壊死因子TNFおよび免疫応答を刺激して癌細胞もしくは腫瘍を減少させるか排除するデキサメタゾン等の他の増殖因子、サイトカイン、またはホルモンを含む。本発明による抗体、その抗原結合性フラグメントまたは複合物は、例えば対象における望ましくない細胞増殖または細胞増殖性疾患を治療する方法であって、本発明の抗体もしくは抗原結合性フラグメント、scFvまたは抗体複合物の治療的有効量を前記対象に投与することを含む方法など、ヒトまたは動物体の治療または診断の方法に使用されてもよい。方法は、癌の治療に使用されることが好ましい。一実施例において本発明は、対象における疾患を診断する方法を提供し、この方法には、対象または対象から得たサンプルを本発明の抗体、抗体フラグメントもしくは抗体複合体と接触させ、ヒトc-Metと抗体または抗体複合体との間の結合に関して対象またはサンプルを解析することが含まれる。方法は、インビトロまたはインビボで実施することができる。したがって本発明は、癌または癌性の病状、特にc-Met媒介癌または腫瘍を診断または監視するための方法を提供する。一実施例において、この方法は、対象から得た組織または体液の組織学的試料または副画分を使用してインビトロで実施される。さらなる実施例において、この方法は、標識抗体と、任意の有用で適切な造影法または評価法とを使用して、培養された腫瘍生検または試料細胞を使用して、インビボまたはエキソビボで実施される。本発明はさらに、試料におけるヒトc-Metの有無または量を検出する方法を提供し、この方法は試料と本発明の抗体、抗体フラグメントまたは本発明の複合物とを接触させ、ヒトc-Metと抗体または複合物との間の結合に関して試料を分析することを含む。テストできる適切な試料の例としては、血液、血清、血漿のほかに細胞、腫瘍または組織のバイオプシーも挙げられるが、必ずしもこれらに限定されない。本発明はまた、腫瘍または細胞の試料を特徴づけるための、またはインビトロ、エキソビボおよびインビボの診断検査を含む腫瘍もしくは癌をスクリーニングするためのアッセイにおける、または対象のc-Metにより顕在化された細胞増殖性疾患を診断するための試薬の製造における、本発明による抗体またはその抗原結合性フラグメントの使用を提供する。本発明は、c-Metの存在もしくは活性および/または本発明の抗体の活性もしくは結合を調節するのに有効と思われる薬剤をスクリーニングするためのアッセイシステムを提供する。抗原ペプチドまたは抗体を試験系内に導入することが可能であり、生じた細胞培養内に有望な薬物を導入することも可能であり、次いで培養を検査して、その有望な薬物のみの添加による、または公知の物質複数可の添加量の効果による細胞の活性、抗体の結合または、HGF反応の活性の量および広がりにおける変化を観察することが可能である。本発明はまた、本発明による抗体もしくは抗原結合性フラグメント、またはその抗体複合体の薬剤における使用を提供する。例えば、本発明はまた、対象における望ましくない細胞増殖を減少させるため、または細胞増殖性疾患を調節もしくは治療するための薬剤の製造における本発明による抗体もしくはその抗原結合性フラグメントまたは抗体複合体の使用を提供する。薬剤は癌の治療に使用されるのが好ましい。本発明はさらに、対象の抗腫瘍治療における本発明の抗体複合体の使用を提供する。本発明による治療薬または造影剤を送達するためにこのような複合物を使用できることが理解されよう。本発明はさらに、対象における望ましくない細胞増殖を阻害する方法を提供し、この方法は、本発明による抗体もしくは抗原結合性フラグメントまたは本発明による抗体複合体を対象に投与することを含む。一実施例において、配列番号13、配列番号21、配列番号29または配列番号37を含む免疫グロブリン重鎖の可変領域配列、および/または配列番号14、配列番号22、配列番号30または配列番号38を含む免疫グロブリン軽鎖の可変領域配列を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントを用いてこの方法を実行する。方法は癌の治療に使用されるのが好ましい。別の実施例において、配列番号37を含む免疫グロブリン重鎖の可変領域配列、および配列番号38を含む免疫グロブリン軽鎖の可変領域配列を含むscFvを用いてこの方法を実行する。本発明は、さらに配列RHFQSCSQCLSAPPFVQCGW配列番号5またはRHFQSCSQCLSAPPF配列番号6を含む、またはそれらから成るワクチン抗原を、薬学的に許容される担体または賦形剤と一緒に提供する。好ましい実施形態において、ワクチンは癌を治療するために使用する。本発明はさらに、抗c-Met抗体を得るために動物を免疫化する方法を提供し、この方法は、配列番号1の配列を含む切断c-Met抗原フラグメントをc-Metを過剰発現する細胞と、順番に、または一緒に動物に投与することを含む。一実施例において、抗原フラグメントおよび細胞を交互に動物に投与する。この実施例による動物はマウス、ラットまたはウサギであることが好ましい。別の実施例において、VVDTYYDDQL配列番号2、VRRLKETKDGFMFLT配列番号3、DVLPEFRDSY配列番号4、およびRHFQSCSQCLSAPPFVQCGW配列番号5から成る群から選抜された配列を含む抗原ペプチド配列で動物を免疫化する。本発明は、さらに本発明による免疫化方法により産生された抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供する。ERBB3シグナル伝達EngelmanJAら,2007の活性化により、肺癌細胞においてc-Met増幅がゲフィチニブ耐性に結びつくことが分かった。したがって、本発明は、さらに癌細胞において化学療法剤に対する耐性を克服するか緩和するために、本発明による抗体または抗原結合性フラグメントの使用法を提供する。好ましい実施例において、本発明による抗体またはその抗原結合性フラグメントは、c-Metの増幅により引き起こされる化学療法剤での治療に対する耐性を克服することができる。化学療法剤は当業者に公知であり、本明細書の別の箇所に記載されているような薬剤を含む。一実施例において、抗体または抗原結合性フラグメントは、配列番号29を含む可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖、および/または配列番号30を含む可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含むLMH87抗体である。別の実施例において、抗体は、配列番号37を含む可変領域のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖、および/または配列番号38を含む可変領域アミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖を含むscFvscFv85である。配列表の見出し配列番号1-N末端の余分な3アミノ酸およびC末端の余分な9アミノ酸を有するc-Metの残基25-567のアミノ酸配列。配列番号2-ヒトc-Met配列の残基121-130に対応し、かつ抗体LMH82のコアエピトープ配列に対応するエピトープのアミノ酸配列。配列番号3-ヒトc-Met配列の残基216-230に対応し、かつ抗体LMH84のコアエピトープ配列に対応するエピトープのアミノ酸配列。配列番号4-ヒトc-Met配列の残基236-245に対応し、かつ抗体LMH86、LMH87、LMH88およびLMH89のコアエピトープ配列に対応するエピトープのアミノ酸配列。配列番号5-ヒトc-Met配列の残基521-541に対応し、かつ抗体LMH81のコアエピトープ配列に対応するエピトープのアミノ酸配列。配列番号6-ヒトc-Met配列の残基521-535に対応し、かつ抗体LMH80のコアエピトープ配列に対応するエピトープのアミノ酸配列。配列番号7-抗体LMH80のCDRH1のアミノ酸配列。配列番号8-抗体LMH80のCDRH2のアミノ酸配列。配列番号9-抗体LMH80のCDRH3のアミノ酸配列。配列番号10-抗体LMH80のCDRL1のアミノ酸配列。配列番号11-抗体LMH80のCDRL2のアミノ酸配列。配列番号12-抗体LMH80のCDRL3のアミノ酸配列。配列番号13-抗体LMH80の重鎖可変領域のアミノ酸配列。配列番号14-抗体LMH80の軽鎖可変領域のアミノ酸配列。配列番号15-抗体LMH82のCDRH1のアミノ酸配列。配列番号16-抗体LMH82のCDRH2のアミノ酸配列。配列番号17-抗体LMH82のCDRH3のアミノ酸配列。配列番号18-抗体LMH82のCDRL1のアミノ酸配列。配列番号19-抗体LMH82のCDRL2のアミノ酸配列。配列番号20-抗体LMH82のCDRL3のアミノ酸配列。配列番号21-抗体LMH82の重鎖可変領域のアミノ酸配列。配列番号22-抗体LMH82の軽鎖可変領域のアミノ酸配列。配列番号23-抗体LMH87のCDRH1のアミノ酸配列。配列番号24-抗体LMH87のCDRH2のアミノ酸配列。配列番号25-抗体LMH87のCDRH3のアミノ酸配列。配列番号26-抗体LMH87のCDRL1のアミノ酸配列。配列番号27-抗体LMH87のCDRL2のアミノ酸配列。配列番号28-抗体LMH87のCDRL3のアミノ酸配列。配列番号29-抗体LMH87の重鎖可変領域のアミノ酸配列。配列番号30-抗体LMH87の軽鎖可変領域のアミノ酸配列。配列番号31-抗体LMH85のCDRH1のアミノ酸配列。配列番号32-抗体LMH85のCDRH2のアミノ酸配列。配列番号33-抗体LMH85のCDRH3のアミノ酸配列。配列番号34-抗体LMH85のCDRL1のアミノ酸配列。配列番号35-抗体LMH85のCDRL2のアミノ酸配列。配列番号36-抗体LMH85のCDRL3のアミノ酸配列。配列番号37-抗体LMH85の重鎖可変領域のアミノ酸配列。配列番号38-抗体LMH85の軽鎖可変領域のアミノ酸配列。配列番号39-抗体LMH87の重鎖可変領域のヌクレオチド配列。配列番号40-抗体LMH87の軽鎖可変領域のヌクレオチド配列。配列番号41-抗体LMH85の重鎖可変領域のヌクレオチド配列。配列番号42-抗体LMH85の軽鎖可変領域のヌクレオチド配列。選択された定義本明細書で使用される場合、用語抗体は、免疫グロブリン分子の可変部にある、少なくとも1つのエピトープ認識部位で標的に結合できる免疫グロブリン分子を指す。この用語はポリクローナルおよびモノクローナル抗体のほかに、要求された特異性のエピトープ認識部位を有する抗体部分を含む変種、融合タンパク質、ヒト化抗体、ヒト抗体、キメラ抗体および他の任意の要求された特異性のエピトープ認識部位を含む免疫グロブリン分子の修飾された構成も包含する。用語抗体は、天然で産生されるか或いは部分的または完全に合成されるかにかかわらず免疫グロブリンを指す。この用語は、抗体結合ドメインであるかまたは抗体結合ドメインと相同である結合ドメインを有するポリペプチドまたはタンパク質をも包含する。CDR移植抗体もこの用語に包含される。抗体は、抗体およびそのフラグメントを含めた特異的エピトープを結合する任意の免疫グロブリンである。この用語はポリクローナル、モノクローナル、およびキメラ抗体を包含し、キメラ抗体は米国特許第4,816,397号明細書および同第4,816,567号明細書に記載されている。用語抗体は、4つの完全長ポリペプチド鎖、2つの重H鎖および2つの軽L鎖、またはその等価なIgホモログ例えば重鎖をわずかにしか含まないラクダのナノボディを一般的に含む野生型免疫グロブリンIg分子;Ig分子の本質的なエピトープ結合特徴を保持する、その完全長の機能性変異体、変種、または誘導体、二重特異dualspecific、二重特異性bispecific、多重特異性、および複可変領域抗体を含む。免疫グロブリン分子は、あらゆるクラス例えば、IgG、IgE、IgM、IgD、IgA、およびIgY、またはサブクラス例えば、lgG1、lgG2、lgG3、lgG4、lgA1、およびlgA2であり得る。さらに、用語抗体の意味の範囲内には任意の抗体フラグメントも含まれる。抗体フラグメントは、完全長ではない少なくとも1つのポリペプチド鎖を含む分子を意味し、i軽鎖可変VL、重鎖可変VH、軽鎖定常CLおよび重鎖定常1CH1ドメインから成る一価のフラグメントであるFabフラグメント;iiヒンジ領域のジスルフィド結合により連結された2つのFabフラグメントを含む二価のフラグメントであるFab’2フラグメント;iiiVHおよびCH1ドメインから成るFabFdフラグメントの重鎖部分;iv抗体の単一アームのVLおよびVHドメインから成る可変フラグメントFvフラグメント;v単一の可変ドメインを含むドメイン抗体dAbフラグメントWard,E.S.ら,Nature341,544-5461989;viラクダ抗体;vii単離された相補性決定領域CDR;viii抗原結合部位を形成するように2つのドメインが会合することを可能にするペプチドリンカーによってVHドメインおよびVLドメインが連結される、単鎖FvフラグメントBirdら,Science,242,423-426,1988;Hustonら,PNASUSA,85,5879-5883,1988;ix単一のポリペプチド鎖上でVHおよびVLドメインを発現するが、同一鎖上の2つのドメイン間の対合が不可能な短いリンカーを使用し、別の鎖の相補性ドメインと対合させ2つの抗原結合部位を作る、二価の二重特異性抗体であるダイアボディ国際公開第94/13804号;P.Holligerら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA906444-6448,1993;ならびに、x相補性軽鎖ポリペプチドと一緒に、一対の抗原結合ドメインを形成する一対のタンデムFvセグメントVH-CH1-VH-CH1を含む直鎖状抗体;xi多価抗体フラグメントscFvの二量体、三量体および/または四量体PowerおよびHudson,JImmunol.Methods242:193-20492000;ならびに、xii重鎖および/もしくは軽鎖の他の非完全長部分、またはその変異体、変種、もしくは誘導体の単独、またはあらゆる組み合わせを含む。抗体は多数の方法で修飾され得るため、用語抗体は、所要の特異性を有する結合ドメインを有する任意の特異的結合メンバーまたは物質を包含すると解釈されるべきである。よって、この用語は、天然で産生されるか或いは部分的または完全に合成されるかにかかわらず、免疫グロブリン結合ドメインを含む任意のポリペプチドを含めた抗体の抗体フラグメント、抗体の誘導体、機能均等価物およびホモログを包含する。従って、別のポリペプチドに融合している免疫グロブリン結合ドメインを含むキメラ分子または均等物が含まれる。キメラ抗体のクローニングおよび発現は、欧州特許出願公開第0120694号明細書および同第0125023号、ならびに米国特許第4,816,397号明細書および同第4,816,567号明細書に記載されている。本明細書で使用される場合、用語抗原結合性フラグメントは、Fab、Fab’、Fab’2、Fv、Fd、単鎖FvscFv、ジスルフィド結合FvssdFv、VLおよびVHドメインフラグメント、ドメイン抗体、三重特異性Fab3、二重特異性Fab2、ダイアボディVL-VH2またはVH-VL2、トリアボディ三価、テトラボディ四価、ミニボディscFv-CH32、二重特異性単鎖Fvビス-scFv、IgGdeltaCH2、scFv-FcおよびscFv2-Fcを含むと解釈される。Fabフラグメントは、抗体分子の一価の抗原結合性フラグメントから成り、パパイン酵素で全抗体分子を分解して、無傷の軽鎖および重鎖の一部分から成るフラグメントを産生することにより得られる。抗体分子のFab’フラグメントは、ペプシンで全抗体分子を処理し、次いで還元して無傷の軽鎖および重鎖の一部分から成る分子を産生することにより得ることができる。このように処理された抗体分子ごとに2つのFab’フラグメントが得られる。抗体のFab’2フラグメントは2つのジスルフィド結合により一緒になった2つのFab’フラグメントの二量体から成り、酵素ペプシンで全抗体を処理し、還元をしないことにより得られる。Fvフラグメントは、軽鎖の可変部、および2つの鎖として発現された重鎖の可変部を含む遺伝子改変フラグメントである。単鎖抗体SCAは、適切な、そして柔軟なポリペプチドリンカーにより連結した、軽鎖の可変部と重鎖の可変部を含む遺伝子改変の単鎖分子である。本明細書で使用される場合、抗体可変領域は、相補性決定領域CDR:つまりCDR1、CDR2およびCDR3、およびフレームワーク領域FRのアミノ酸配列を含む抗体分子の軽鎖および重鎖の部分を指す。VHは、重鎖の可変部を指す。VLは、軽鎖の可変部を指す。本発明において使用される方法によれば、CDRおよびFRに割り当てられたアミノ酸位置をKabatに従って定義してもよいSequencesofProteinsofImmunologicalInterestNationalInstitutesofHealth,Bethesda,Md.,1987and1991またはChotiaおよびLesk1987J.MolBiol.196:901-917。抗体または抗原結合フラグメントのアミノ酸の番号付けも、Kabatの番号付けに従っている。本発明の抗体については、IMGT付番方式を使用して、相補性決定領域の決定を行ったLefranc,M-Pら,NucleicAcidsResearch27,209-2121999。用語抗体複合体は本明細書で使用される場合、付着させた治療薬または標識を含む抗体またはその抗原結合フラグメントを指す。薬剤は共有結合的にもしくは非共有結合的に、またはリンカーによって付着されていてもよい。薬剤は、検出可能または機能性標識を含む標識を包含すると理解されてもよい。適切な治療薬は本明細書の他の部分で記述されている。本明細書で使用される場合、用語特異的に結合するは、抗体が別の細胞または実体とよりも、特定の細胞または実体と、より長い間、および/またはより強い親和性で、より高頻度に、より速やかに反応する、または結合することを意味するものと解釈されるものとする。また、第1の標的に特異的に結合する抗体が、第2の標的に特異的に結合する場合も結合しない場合もあるということも、この定義を読むことにより理解される。そのため、特異的結合は、別の分子との排他的な結合または検出できない結合を必ずしも要求せず、これは、用語選択的結合によって包含される。必ずというわけではないが一般的に、結合への言及は特異的結合を意味する。本明細書で使用される場合、用語細胞増殖性疾患およびその文法上のバリエーションは、細胞、組織または臓器に関して使用される場合、あらゆる望ましくない、過剰な、または異常な細胞、組織または臓器の成長、増殖、分化または生存を指す。望ましくない細胞増殖疾患は、対象における望ましくない、過剰な、または異常な細胞数、細胞成長、細胞増殖、細胞生存または分化という特徴を有する、いずれも良性で過形成状態の疾病および生理学的条件を含む。そのような障害の具体例としては、転移性および非転移性の新生物形成、腫瘍および癌悪性病変が挙げられる。本明細書で使用される場合、用語c-Metはc-Met受容体、原癌遺伝子およびHGF/SFの受容体または、HGFに結合できるc-Metの部分、およびチロシンキナーゼ活性を有する部分、または配列番号1に記載のc-Met受容体部分を含む、c-Met受容体の一部分を指す。用語c-Metはヒトc-Metを指すことが好ましい。用語キメラ抗体は、重鎖および/または軽鎖の一部分が、特定の種例えばマウス由来か、特定の抗体のクラスまたはサブクラスに属する抗体の対応配列と同一か、または相同である一方で、鎖の残りの部分が、別の種例えば霊長類由来か、別の抗体のクラスまたはサブクラスに属する抗体の対応配列と同一か、または相同である抗体を指し、またそのような抗体のフラグメントも、所望の生物学的活性を示す限り含まれる。本明細書で使用される場合、用語相補性決定領域同義語CDR;つまりCDR1、CDR2、およびCDR3は、抗原結合に必要な抗体可変ドメインのアミノ酸残基を指す。各可変ドメインは、CDR1、CDR2およびCDR3として同定された3つのCDR領域を有するのが一般的である。相補性決定領域はそれぞれ、Kabatにより定義されるようなCDR領域のアミノ酸残基を含んでもよいすなわち、軽鎖可変ドメインのアミノ酸残基24-34または24-39L1、50-56または55-61L2および89-97または93-102L3、ならびに重鎖可変ドメインの31-35または26-35H1、50-65または50-66H2および95-102または97-108H3;Kabatら,SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,5thEd.PublicHealthService,NationalInstitutesofHealth,Bethesda,MD.1991ならびに/または、超可変ループの残基、つまり、軽鎖可変ドメインの残基26-32L1、50-52L2および91-96L3、ならびに重鎖可変ドメインの26-32H1、53-55H2および96-101H3;ChothiaおよびLesk1987J.MolBiol.196:901-917。場合によっては、相補性決定領域は、Kabatに従って定義されたCDR領域および超可変ループの両方のアミノ酸を含むことができる。当業者は、FRの位置決めにおけるいくらかの変化、例えば変異例えば、遺伝子欠失および/または挿入の結果、例えば5つまでの残基の変化、または4つの残基の変化、2つの残基の変化、1つの残基の変化例えば本明細書で例示された抗体としてを認識するであろう。本明細書を通して、用語含む、または含むもしくは含むこと等のバリエーションは、述べられた要素、整数もしくはステップ、または要素、整数もしくはステップのグループの包含を意味するが、他のいかなる要素、整数もしくはステップ、または要素、整数もしくはステップのグループも排除しないと理解される。用語から成るまたはから本質的に成るは、より大型の産物に共有結合で付着されていない、定義された数の残基のペプチド配列を指す。用語定常領域CRは、本明細書で使用される場合、エフェクター機能を与える抗体分子の部分を指す。対象のヒト化抗体の定常領域はヒト免疫グロブリン由来である。重鎖の定常領域は、α、デルタ、イプシロン、ガンマまたはミューの5つのイソタイプのうちのいずれかから選択することができる。さらに、重鎖の多様なサブクラス重鎖のIgGサブクラスのようなは、異なったエフェクター機能をもたらし、したがって所望の重鎖の定常領域を選ぶことにより、所望のエフェクター機能を有する抗体を産生することができる。好ましい重鎖の定常領域は、ガンマ1IgG1、ガンマ2IgG2、ガンマ3IgG3およびガンマ4IgG4である。軽鎖の定常領域は、カッパまたはラムダタイプ、好ましくはカッパタイプであり得る。フレームワーク領域以下FRは、CDR残基以外の可変ドメイン残基である。天然抗体の各可変ドメインは、FR1、FR2、FR3およびFR4として同定された4つのFRを有する。用語ヒト化抗体はキメラ分子を指すものとして理解され、一般に、組み換え技術を使用して作製され、非ヒト種の免疫グロブリンから誘導されたエピトープ結合部位、ならびにヒト免疫グロブリンの構造および/または配列に基づいた分子の残存する免疫グロブリン構造を有する。抗原結合部位は、ヒト抗体の可変ドメイン内の適切なフレームワーク領域上に移植された非ヒト抗体の相補性決定領域CDRおよびヒト抗体の残りの領域を含むことが好ましい。用語ヒト抗体は、抗体分子および結合タンパク質に関して本明細書で使用される場合、ヒト、例えばヒトの生殖細胞系または体細胞で発見された配列に由来する、または対応する可変例えばVH、VL、CDRおよびFR領域および定常抗体領域を有する抗体を指す。用語同一性およびその文法上のバリエーションは、2つ以上の参照された実体が同じであることを意味する。したがって、2つの抗体配列が同一である場合、それらには少なくとも参照された領域または部分の中で同一のアミノ酸配列がある。2つの核酸配列が同一である場合、それらには少なくとも参照された領域または部分の中で同一のポリヌクレオチド配列がある。同一性は配列の限定された部分領域またはドメイン全体に存在する場合がある。GAPNeedlemanandWunsch,J.MolBiol.48:444-453.1970分析GCGprogramは、ギャップ生成ペナルティー=5、およびギャップ伸張ペナルティー=0.3で、ポリヌクレオチドの同一性を決定する。別段の記載のない限り、問い合わせ配列は少なくとも長さ45ヌクレオチドであり、GAP分析は、少なくとも45ヌクレオチドの領域にわたって2つの配列をアラインさせる。問い合わせ配列は少なくとも長さ100ヌクレオチドであり、GAP分析は、少なくとも100ヌクレオチドの領域にわたって2つの配列をアラインさせるのが好ましい。2つの配列はそれらの全長にわたってアラインさせるのが最も好ましい。DNA、RNAまたはタンパク質を含む用語単離されたは、天然の状態において付随しているまたは連結されているポリヌクレオチド/ポリペプチド配列から少なくとも部分的に分離されているポリヌクレオチド/ポリペプチドを意味する。好ましくは、単離されたポリヌクレオチド/ポリペプチドは、それらが天然で付随している他の構成成分を少なくとも60、好ましくは少なくとも75、および最も好ましくは少なくとも90含まない。用語モノクローナル抗体は、同一の抗原複数可、好ましくは抗原複数可内の同一のエピトープ決定基に結合することができる同種の抗体集団を指す。この用語は、抗体のソース、またはそれを作る方法に関して限定することを意図しない。用語核酸は、本明細書で使用される場合、用語ポリヌクレオチドと交換可能である。用語薬学的に許容可能なは、生理学的に許容することができ、一般的にアレルギーまたは同様の有害反応をもたらさない分子的実体および組成物を指す。用語対象は、本明細書で使用される場合、任意の動物、特に哺乳動物、特に農業または獣医学に関連し、かつ/または一般に医薬品もしくは治療薬で治療される、または医薬品もしくは治療薬の動物試験に使用される動物もしくは哺乳動物を意味し、ヒト、ウマ、ウシ、ブタ、ネコおよびイヌを含み、適切な場合には用語患者と交換可能に使用されてもよい。患者は霊長類であることが好ましい。特に、患者はヒトである。用語記載されているのと実質的に同じは、本発明のそのCDR領域が、配列番号7から12または15から20または23から28または31から36の特定された領域と同一または高度に相同であることを意味する。高度に相同は、少数、好ましくは1から4、または、1から3、または1から2個のみの置換がCDR内に行われ得ることを意味する。用語治療的有効量は、細胞増殖疾患の1つまたは複数の症状を、その疾患の臨床的な特性として観察され認められるレベルを下回るレベルまで縮小させるかまたは阻害するのに十分な量の抗体または抗原結合性フラグメントを意味するものと解釈する。当業者は、このような量は特定の抗体、フラグメント、および/もしくは特定の患者、ならびに/または疾病のタイプもしくは重症度もしくはレベルにより変動するであろうことを認識しているであろう。したがってこの用語は、本発明を特定の量に限定するものと解釈するべきではない。本明細書で使用される場合、用語治療する治療すること治療およびその文法上のバリエーションは、患者において生理学的な反応または結果を得ることが望まれるプロトコル、レジメン、プロセスまたは治療法を個々の患者に受けさせることを意味する。治療を受けた患者の全員が特定の治療プロトコル、レジメン、プロセスまたは治療法に反応するとは限らないため、治療では、所望の生理学的な応答または結果が全ての患者または患者集団において達成されることが要求されない。したがって、所与の患者または患者集団が治療に反応しない、または不十分な反応を示す場合もある。用語腫瘍または癌の使用は交換可能であり、その成長、増殖または生存が、その対応物である正常な細胞よりも大きい細胞または細胞集団、例えば細胞増殖性障害または細胞分化性障害の細胞または細胞集団を指す。成長は制御できないのが一般的である。発明の詳細な説明本発明は、当分野の通常の分子生物学、微生物学および組換DNA技術を使用する。例えば、SambrookらMolecularCloningALaboratoryManual1989を参照のこと。本明細書に記載された特定の実施形態は、例示のみを目的とし、本発明はこの実施形態の範囲に限定されない。機能上等価な抗体本発明はさらに、本発明の抗体の重鎖および軽鎖可変部配列の1つまたは複数のアミノ酸が付加、欠失、または置換されているが、本発明の抗体の機能をなお保持している抗体またはその抗原結合性フラグメントを想定する。これらの改変は、例えば、部位特異的変異誘発によるような意図的なものであってもよいし、その抗体を発現する宿主の変異により得られるような偶発的なものであってもよい。当分野で公知の任意の技術を使用して、変異変化させたポリペプチドを調製することができる。例えば、本発明のポリヌクレオチドをインビトロで突然変異誘発させることができる。そのようなインビトロ突然変異誘発技術は、適切なベクターへポリヌクレオチドをサブクローン化し、そのベクターをE.coliのXL-1redStratagene等の突然変異誘発株に形質転換し、適切な世代数にわたって、形質転換された細菌を繁殖させることを含む。本明細書に記述された技術を使用して、変異/改変DNAから誘導した産物をスクリーニングし、それらが受容体結合および/または受容体阻害活性を有しているかどうかを容易に判定することができる。アミノ酸配列の変異体を設計する際に、変異部位の位置および変異の性質は、修飾される特性複数可によって異なるであろう。変異に関する部位は、例えば最初に1保守的なアミノ酸を選択し、次いで達成される結果に応じてより過激な選択をして置換する、2標的残基を欠失させる、または3決められた部位に隣接させて他の残基を挿入するなどによって、個々にまたは連続して修飾することができる。アミノ酸配列の欠失は、一般に約1~15個の残基、より好ましくは約1~10個の残基、典型的には約1~5個の連続した残基の範囲に及ぶ。置換変異体では、可変部を含む抗体および/または免疫グロブリン鎖分子の少なくとも1つのアミノ酸残基が除去され、その代わりに異なる残基が挿入されている。置換変異誘発で重要性の高い部位は、抗原結合に関して重要であると同定された部位を含む。これらの部位、特にヒト抗体および/または免疫グロブリン鎖の他の少なくとも3箇所の同一に保存された部位の配列の範囲内に入る部位は、比較的保守的な方法で置換されることが好ましい。代表的な置換という見出しの下の表1にこのような保存的置換を示す。本発明により、保守的なアミノ酸置換も想定される。これらは、下の表に記載のアミノ酸置換を意味すると理解される。本明細書に記載のアミノ酸はL異性体であることが好ましい。しかし、ポリペプチドが免疫グロブリン結合の所望の機能特性を保有する限りにおいて、L-アミノ酸残基の代わりにD異性体の残基を使用することができる。修飾体にはさらに構造上および機能上の類似体、例えば、合成もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体および誘導された形態を有するペプチド模倣体が含まれる。抗体の製造ハイブリドーマによるモノクローナル抗体製造のための一般的な方法はよく知られている。不死化抗体産生細胞系は、融合以外の技術、例えば、発癌性DNAを用いたBリンパ球の直接的な形質転換またはエプスタインバーウイルスを用いたトランスフェクションによっても作製され得る。例えば、M.Schreierら,HybridomaTechniques1980;Hammerlingら,MonoclonalAntibodiesAndT-cellHybridomas1981;Kennettら,MonoclonalAntibodies1980;また、米国特許第4,341,761号、同第4,399,121号、同第4,427,783号、同第4,444,887号、同第4,451,570号、同第4,466,917号、同第4,472,500号、同第4,491,632号、同第4,493,890号を参照されたい。c-Metに対して産生されたモノクローナル抗体のパネルは、種々の特性、例えばイソタイプ、エピトープ、親和性などに関してスクリーニングすることができる。特に興味深いのは、c-Metまたはそのサブユニットの活性を模倣するモノクローナル抗体である。このようなモノクローナル抗体は特異的結合メンバー活性アッセイにおいて容易に同定することができる。高親和性抗体はまた、天然または組換えの特異的結合メンバーの免疫親和性精製が可能である場合にも有用である。本発明の実施において有用なモノクローナル抗体は、適当な抗原特異性の抗体分子を分泌するハイブリドーマを含有する栄養培地を含むモノクローナルハイブリドーマ培養を開始することにより産生できる。培養は、ハイブリドーマが抗体分子を培地内に分泌するのに十分な条件下および時間にわたって維持する。次いで抗体含有培地を回収する。次いで、周知の技術により、抗体分子をさらに単離することができる。抗原を含む精製semaドメインと本発明による生存c-Met発現細胞とを用いた動物の免疫化も、本発明の抗体をもたらすことができる。本発明者らが知る限り、抗c-Met抗体産生のためのこのような免疫化方法は今まで記載されていない。抗体に関する方法でさらに使用され得る適切な方法は、親和性精製、非変性ゲル精製、HPLCまたはRP-HPLC、サイズ排除、プロテインAカラムでの精製、およびこれらの技術のあらゆる組み合わせを含む。例えばELISA分析を使用して、抗体のイソタイプを判定することができ、マウスIg吸収済み抗ヒトIgを使用して、ヒトIgを同定することができる。組換え抗体の産生本発明の抗体および抗原結合性フラグメントはさらに、容易に利用可能な技術と材料、例えば自動ペプチド合成装置例えば、AppliedBiosystems,FosterCity,Calif.を参照のことを使用して組換えにより産生することができる。可変ドメインは任意の生殖細胞系または再構成されたヒト可変ドメイン由来であってもよく、または公知ヒト可変ドメインのコンセンサス配列に基づく合成可変ドメインであってもよい。本発明のCDR由来配列は、組換えDNA技術を用いて、CDR領域を欠く可変ドメインのレパートリー内に導入され得る。例えば、MarksらBio/Technology,1992,10:779-783は、可変ドメイン領域の5’末端またはその近傍に対するコンセンサスプライマーをヒトVH遺伝子の第3フレームワーク領域に対するコンセンサスプライマーと共に使用して、1つまたは複数のCDRを欠くVH可変ドメインのレパートリーを得る、抗体可変ドメインのレパートリーの産生方法を記載している。Marksらはさらに、このレパートリーがどのようにして特定の抗体のCDRと組み合わされ得るかを記載している。類似した技術を用いて、本発明のCDR由来配列を、1以上のCDRを欠くVHまたはVLドメインのレパートリーとシャッフルすることが可能であり、シャッフルされた完全VHまたはVLドメインはコグネイトVLまたはVHドメインと組合されて本発明の抗体をもたらし得る。次いで、レパートリーは、好適な宿主系例えば、国際公開第92/01047号のファージディスプレイ系において提示され得、その結果、適切な特異的結合メンバーが選択され得る。レパートリーは、104個以上、例えば、106~108または1010メンバーの任意の個々のメンバーからなり得る。類似の混合またはコンビナトリアル技術はまた、StemmerNature,1994,370:389-391によって開示され、Stemmerは、β-ラクタマーゼ遺伝子に関連する技術を記載するが、このアプローチが抗体の産生のために使用され得るとの見解を述べている。抗体は、当技術分野において公知の選択および/または変異誘発法を使用して親和成熟させてもよい。米国特許第5,969,108号に公開されているようなファージディスプレイ法によっても、本発明の組換え抗体を産生することができる。本発明の抗体はさらに、抗体の定常領域またはその一部を含み得る。例えば、配列番号14、22、30または38に基づく抗体は、それらのC末端において、ヒトCκまたはCλ鎖を含む抗体の軽鎖定常ドメインに結合され得る。同様に、配列番号13、21、29または37に基づく抗体は、それらのC末端において、任意の抗体のイソタイプ、例えば、IgG、IgA、IgE、IgDおよびIgM、およびイソタイプのサブクラスのいずれか、特にIgG1、IgG2bおよびIgG4に由来する免疫グロブリン重鎖の全部または一部に結合され得る。組換え産生のため、本発明の抗体をコードする核酸が単離され、さらなるクローニングDNAの増幅または発現のために、複製可能なベクター内に挿入されるのが好ましい。この抗体をコードするDNAは、通常の手法を使用して例えば、抗体の重鎖および軽鎖をコードするDNAに特異的に結合可能なオリゴヌクレオチドプローブを使用することにより、容易に単離または合成される。多くのベクターが入手可能である。ベクター成分としては、これらに制限されるものではないが、一般に次のものの1つまたは複数が含まれる:シグナル配列、本発明の抗体またはそのフラグメント例えば本明細書に提供された情報から誘導されたをコードする配列、エンハンサーエレメント、プロモーター、および転写終結配列である。iシグナル配列成分。本発明の抗体は組換え手法によって直接的に産生されるだけではなく、シグナル配列または成熟タンパク質もしくはポリペプチドのN末端に特異的切断部位を有する他のポリペプチドであることが好ましい、異種性ポリペプチドとの融合ポリペプチドとしても生産され得る。好ましく選択された異種シグナル配列は、宿主細胞によって認識されプロセシングされるすなわち、シグナルペプチダーゼによって切断されるものである。天然の抗体シグナル配列を認識せずプロセシングしない原核生物宿主細胞に対しては、シグナル配列は、例えばアルカリホスファターゼ、ペニシリナーゼ、lppまたは耐熱性エンテロトキシンIIリーダーの群から選択される原核生物シグナル配列により置換される。酵母の分泌に関しては、天然シグナル配列は、例えば酵母インベルターゼリーダー、α因子リーダー、または酸ホスファターゼリーダー、カンジダアルビカンスグルコアミラーゼリーダー、または国際特許公開第90/13646号に記載されているシグナルにより置換され得る。哺乳動物細胞の発現においては、哺乳動物のシグナル配列のほかウイルス分泌リーダー、例えば単純ヘルペスgDシグナルも利用することができる。このような前駆体領域のDNAは、抗体をコードするDNAに対するリーディングフレーム内に結合される。iiプロモーター成分。発現ベクターおよびクローニングベクターは、通常は宿主生物によって認識されるプロモーターを有し、抗体核酸と操作可能に連結している。原核生物宿主での使用に適したプロモーターには、phoAプロモーター、βラクタマーゼおよびラクトースプロモーター系、アルカリホスファターゼ、トリプトファンtrpプロモーター系、およびtacプロモーター等のハイブリッドプロモーターが含まれる。しかし、他の公知の細菌プロモーターも適している。細菌系で使用されるプロモーターも、抗体をコードするDNAと操作可能に結合したシャインダルガーノS.D.配列を有するであろう。真核生物についてのプロモーターが知られている。実質上全ての真核生物の遺伝子は、転写開始部位より約25から30塩基上流に位置するAT富化領域を有する。多数の遺伝子の転写開始位置より70から80塩基上流に見出される他の配列は、Nが任意のヌクレオチドであるCNCAAT領域である。大部分の真核生物遺伝子の3’末端には、コード配列の3’末端へのポリA末端の付加に対するシグナルとなり得るAATAAA配列がある。これらの配列は全て真核生物の発現ベクターに適切に挿入される。酵母宿主と共に用いて好適なプロモーター配列の例としては、3-ホスホグリセラートキナーゼまたは他の糖分解酵素、例えばエノラーゼ、グリセルアルデヒド-3-リン酸デヒドロゲナーゼ、ヘキソキナーゼ、ピルビン酸デカルボキシラーゼ、ホスホフルクトキナーゼ、グルコース-6-リン酸イソメラーゼ、3-ホスホグリセレートムターゼ、ピルビン酸キナーゼ、トリオセリン酸イソメラーゼ、ホスホグルコースイソメラーゼ、およびグルコキナーゼ等に対するプロモーターが挙げられる。他の酵母プロモーターとしては、成長条件によって転写が制御される付加的効果を有する誘導プロモーターであり、アルコールデヒドロゲナーゼ2、イソチトクロムC、酸ホスファターゼ、窒素代謝と関連する分解性酵素、メタロチオネイン、グリセルアルデヒド-3-リン酸デヒドロゲナーゼ、およびマルトースおよびガラクトースの利用を支配する酵素のプロモーター領域がある。酵母の発現に使用される適切なベクターとプロモーターはEP73,657にさらに記載されている。酵母エンハンサーも、酵母プロモーターと共に有利に使用される。哺乳動物の宿主細胞におけるベクターからの抗体転写は、例えば、ポリオーマウイルス、伝染性上皮腫ウイルス、アデノウイルス例えばアデノウイルス2、CMV、ウシ乳頭腫ウイルス、トリ肉腫ウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、B型肝炎ウイルスおよび最も好ましくはサルウイルス40SV40のようなウイルスのゲノムから得られるプロモーター、異種性哺乳動物プロモーター、例えばアクチンプロモーターまたは免疫グロブリンプロモーター、ヒートショックプロモーターによって、このようなプロモーターが宿主細胞系に適合し得る限り、調節される。iiiエンハンサーエレメント成分。より高等な真核生物による本発明の抗体をコードするDNAの転写は、ベクター中にエンハンサー配列を挿入することによって増強されることが多い。哺乳動物の遺伝子由来の多くのエンハンサー配列が現在公知であるグロビン、エラスターゼ、アルブミン、α-フェトプロテインおよびインシュリン。しかしながら、典型的には、真核細胞ウイルス由来のエンハンサーが用いられるであろう。例としては、複製起点の後期側のSV40エンハンサー100-270塩基対、サイトメガロウイルス初期プロモーターエンハンサー、複製起点の後期側のポリオーマエンハンサーおよびアデノウイルスエンハンサーが挙げられる。真核生物のプロモーターの活性化のための増強要素については、Yaniv1982,Nature,297:17-18も参照されたい。エンハンサーは、抗体コード配列の5’または3’位でベクター中にスプライシングされ得るが、プロモーターから5’位に位置するのが好ましい。iv転写終結成分。真核生物宿主細胞酵母、真菌、昆虫、植物、動物、ヒト、または他の多細胞生物由来の有核細胞に用いられる発現ベクターは、転写の終結およびmRNAの安定化に必要な配列も含む。このような配列は、真核生物またはウイルスのDNAまたはcDNAの5’、時には3’の非翻訳領域から一般に取得できる。これらの領域は、抗体をコードしているmRNAの非翻訳部分にポリアデニル化断片として転写されるヌクレオチドセグメントを含む。一つの有用な転写終結成分はウシ成長ホルモンポリアデニル化領域である。国際公開第94/11026号とその中に開示された発現ベクターを参照されたい。v宿主細胞の選択および形質転換。本明細書のベクターにDNAをクローニングまたは発現させるのに適した宿主細胞は、上述の原核生物、酵母、または高等真核生物の細胞である。この目的に適した原核生物には、真正細菌、例えばグラム陰性またはグラム陽性生物体、例えばエシェリチアのような腸内菌科、例えば大腸菌、エンテロバクター、エルウィニアErwinia、クレブシエラ、プロテウス、サルモネラ、例えばネズミチフス菌、セラチア属、例えばセラチアマルセスキャンスおよび赤痢菌属、ならびに桿菌、例えば枯草菌およびバシラスリシェニフォルミスBacilluslicheniformis、シュードモナス属、例えば緑膿菌およびストレプトマイセス属が含まれる。一つの好適な大腸菌クローニング宿主は大腸菌294ATCC31446であるが、他の大腸菌B、大腸菌X1776ATCC31537および大腸菌W3110ATCC27325のような株も好適である。これらの例は限定するものではなく例示的なものである。原核生物に加えて、糸状菌または酵母菌のような真核微生物が、抗体をコードするベクターに適したクローニング宿主または発現宿主である。サッカロミセスセレヴィシア、または一般的なパン酵母は、下等真核生物宿主微生物のなかで最もよく用いられる。しかしながら、多数の他の属、種および菌株も、一般的に入手可能で本明細書で使用することができ、例えば、シゾサッカロマイセスポンベ;クルイベロマイセス宿主、例えばK.ラクティス、K.フラギリスATCC12424、K.ブルガリカスATCC16045、K.ウィッケラミイATCC24178、K.ワルチイATCC56500、K.ドロソフィラルムATCC36906、K.サーモトレランス、およびK.マルキシアナス;ヤローウィアEP402226;ピチアパストリスEP183070;カンジダ;トリコデルマリーシアEP244234;アカパンカビ;シュワニオマイセス、例えばシュワニオマイセスオクシデンタリス;および糸状真菌、例えばパンカビ属、アオカビ属、トリポクラジウム、およびコウジカビ属宿主、例えば偽巣性コウジ菌およびクロカビが使用できる。グリコシル化抗体の発現に適した宿主細胞は、多細胞生物から誘導される。無脊椎動物細胞の例としては、植物および昆虫の細胞が挙げられる。多数のバキュロウイルス株および変異体および対応する許容可能な昆虫宿主細胞、例えばスポドプテラフルギペルダ毛虫、アエデスアエジプティ蚊、アエデスアルボピクトゥス蚊、ドゥロソフィラメラノガスターショウジョウバエ、およびボンビクスモリが同定されている。トランスフェクションのための種々のウイルス株、例えば、オートグラファカリフォルニカNPVのロイシンL-変異体とボンビクスモリNPVのBm-5株が公に利用でき、そのようなウイルスは本明細書に記載の本発明によるウイルスとして使用でき、特にスポドプテラフルギペルダ細胞のトランスフェクションに使用することができる。有用な哺乳動物宿主株化細胞の例としては、SV40によって形質転換されたサル腎臓CV1株COS-7,ATCCCRL1651;ヒト胚腎臓株[293または懸濁培養での増殖のためにサブクローン化された293細胞、Grahamら,J.GenVirol.36:591977;ハムスター乳児腎細胞BHK,ATCCCCL10;チャイニーズハムスター卵巣細胞/CHO,Urlaubら,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,77:42161980;マウスのセルトリ細胞TM4,Mather1980Biol.Reprod.23:243-251;サルの腎細胞CVIATCCCCL70;アフリカミドリザルの腎細胞VERO-76,ATCCCRL-1587;ヒト子宮頸癌細胞HELA,ATCCCCL2;イヌ腎細胞MDCK,ATCCCCL34;バッファローラット肝細胞BRL3A,ATCCCRL1442;ヒト肺細胞W138,ATCCCCL75;ヒト肝細胞HepG2,HB8065;マウス乳房腫瘍細胞MMT060562,ATCCCCL51;TRI細胞Matherら1982,AnnalsN.Y.Acad.Sci.383:44-68;MRC5細胞;FS4細胞;およびPER.C6商標CrucellNVがある。キメラ抗体キメラ抗体は、一つの種の抗体産生細胞から得られた軽鎖および重鎖の可変領域VLおよびVHを、別の種の軽鎖および重鎖の定常領域と組み合わせることによる組み換え手法により作られる。キメラ抗体は、ヒトのドメインを主に有する抗体を産生するために、齧歯類またはウサギの可変領域とヒトの定常領域を利用するのが一般的である。例えば、キメラ抗体は、本明細書で記述するようにいずれかの実施形態に従って、ヒトの定常領域に融合されたマウス抗体の可変領域を含む。そのようなキメラ抗体の産生は当技術分野において公知であり、標準的な方法例えば、inMorrison,Science229:12021985;Oiら,BioTechniques4:2141986;Gilliesら,1989J.Immunol.Methods125:191-202;米国特許第5,807,715号;同第4,816,567号および同第4,816,397号に記載により達成され得る。さらに、本発明のキメラ抗体のヒト定常領域は、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgG5、IgG6、IgG7、IgG8、IgG9、IgG10、IgG11、IgG12、IgG13、IgG14、IgG15、IgG16、IgG17、IgG18またはIgG19の定常領域から選択し得ることも想定される。ヒト化抗体およびヒト抗体本発明の抗体は、ヒト化抗体またはヒト抗体であり得る。非ヒト例えばマウス抗体のヒト化形態とは、キメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖またはその断片例えばFv、Fab、Fab’、Fab’2または抗体の他の抗原結合サブ配列であって、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含むものである。ヒト化抗体はレシピエントの相補性決定領域CDRの残基が、マウス、ラットまたはウサギのような所望の特異性、親和性および能力を有する非ヒト種ドナー抗体のCDRの残基によって置換されたヒト免疫グロブリンレシピエント抗体を含む。幾つかの例では、ヒト免疫グロブリンのFvフレームワーク残基が、対応する非ヒト残基によって置換されている。また、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にも、移入されたCDRもしくはフレームワーク配列にも見出されない残基を含んでいてもよい。一般に、ヒト化抗体は、全てあるいは実質的に全てのCDR領域が非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、全てあるいは実質的に全てのFR領域がヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のものである、少なくとも1つ、典型的には2つの可変ドメインの実質的に全てを含む。ヒト化抗体はまた、最適には免疫グロブリン定常領域Fc、典型的にはヒトの免疫グロブリンの定常領域の少なくとも一部を含むであろうJonesら,1986Nature,321:522-525;Riechmannら,1988Nature,332:323-329;およびPresta1992Curr.Op.Struct.Biol.2:593-596。非ヒト抗体をヒト化する方法は当技術分野で公知である。一般的に、ヒト化抗体には非ヒト由来の1つまたは複数のアミノ酸残基が導入されている。これらの非ヒトアミノ酸残基は、典型的には移入可変ドメインから得られる移入残基と称されることが多い。Jonesら上記;Riechmannら上記;Verhoeyenら1988サイエンス、239:1534-1536の方法に従って、ヒト抗体の対応配列の代わりに齧歯類のCDRまたはCDR配列を置換することにより、実質的にヒト化を実施できる。よって、このようなヒト化抗体は、無傷のヒト可変ドメインより実質的に少ない分が非ヒト種由来の対応する配列で置換されたキメラ抗体米国特許第4,816,567号である。実際には、ヒト化抗体は典型的には幾つかのCDR残基および場合によっては幾つかのFR残基が齧歯類抗体の類似する部位からの残基によって置換されたヒト抗体である。また、ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリHoogenboomおよびWinter1991JMolBiol,227:381;Marksら1991JMolBiol,222:581を含む当技術分野で公知の種々の方法を用いて作成することができる。また、ColeらおよびBoernerらの技術も、ヒトモノクローナル抗体の調製に好適であるColeら,MonoclonalAntibodiesandCancerTherapy,AlanR.Liss.p.771985およびBoernerら1991J.Immunol.147:86-95。同様に、ヒト抗体は、ヒト免疫グロブリン座位をトランスジェニック動物、例えば内在性免疫グロブリン遺伝子が部分的または完全に不活性化されたマウスに導入することにより産生することができる。投与の際に、遺伝子再配列、組立、および抗体レパートリーを含むあらゆる観点においてヒトに見られるものに非常に類似しているヒト抗体の産生が観察される。このアプローチは、例えば米国特許第5,545,807号;同第5,545,806号;同第5,569,825号;同第5,625、126号;同第5,633,425号;同第5,661、016号に記載されている。guidedselectionと呼ばれる技術を使用して、選抜された抗原決定基を認識する完全ヒト抗体を産生することができる。このアプローチにおいて、選抜された非ヒトモノクローナル抗体、例えばマウス抗体を、同一のエピトープを認識する完全ヒト抗体の選択のガイドとして使用するJespersら,Bio/technology12:899-9031988。抗体はさらに、当技術分野において公知の選択法および/または変異誘発法を使用して親和性成熟させてもよい。好ましい親和性成熟抗体は、成熟抗体が調製される出発抗体一般的に、マウス、ヒト化またはヒトの5倍、より好ましくは10倍、さらに好ましくは20または30倍の親和性を有する。修飾抗体抗体のグリコシル化パターンを、参照抗体の元のグリコシル化パターンから変更してもよい。この変更は、抗体中に見出される1つまたは複数の炭水化物部分を除去し、および/または抗体中に存在しない1つまたは複数のグリコシル化部位を付加することを意味する。抗体のグリコシル化は典型的にはN-結合かO-結合である。N-結合はアスパラギン残基の側鎖への炭水化物部分の付加を意味する。Xがプロリン以外の任意のアミノ酸であるアスパラギン-X-セリンおよびアスパラギン-X-スレオニンのトリペプチド配列は、アスパラギン側鎖への炭水化物部分の酵素的付加のための認識配列である。したがって、ポリペプチド中にこれらのトリペプチド配列の何れかが存在すると、潜在的なグリコシル化部位が生成される。O-結合グリコシル化は、5-ヒドロキシプロリンまたは5-ヒドロキシリジンもまた使用し得るが、糖N-アセチルガラクトサミン、ガラクトース、またはキシロースのうちの一つのヒドロキシアミノ酸、最も一般的にはセリンまたはスレオニンへの付加を意味する。抗体へのグリコシル化部位の付加は、アミノ酸配列が1つまたは複数の上述のトリペプチド配列N-結合グリコシル化部位に対するものを含むようにこれを改変することにより簡便に達成される。改変はまた、O-結合グリコシル化部位に対する原抗体の配列への1つまたは複数のセリンまたはスレオニン残基の付加または置換によってもなされ得る。本発明の抗体の修飾されたグリコフォームは、これに限らないが、エフェクター機能を増強するか減少させる、および/または抗体の半減期を変更する等の種々の目的に有益であり得る例えば、国際公開第2007/010401を参照のこと。そのような変更は、C1q結合およびCDCまたはFcyR結合およびADCCの低下または増大という結果となり得る。例えば、重鎖定常領域のアミノ酸残基の1つまたは複数を置換することができ、したがって修飾された抗体と比較して、抗原に結合する能力を保持する一方でエフェクター機能を変更することができる。米国特許第5,624,821号および米国特許第5,648,260号を参照のこと。操作されたグリコフォームは、当業者に公知の任意の方法、例えば、操作された、もしくは変異発現系統の使用により、1つもしくは複数の酵素、例えばβ1、4-N-アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼIIIGnTII1との同時発現により、様々な生物体、もしくは様々な生物体の培養細胞株における抗体もしくはそのフラグメントの発現により、または抗体もしくはフラグメントを発現した後、炭水化物を変更することにより生成することができる。操作されたグリコフォームを生成する方法は、当技術分野において公知であり、以下に記載されたものを含むがこれらに限定するものではない。Umanaら,1999,Nat.Biotechnol17:176-180;Daviesら,2007BiotechnolBioeng74:288-294;Shieldsら,2002,JBiolChem277:26733-26740;Shinkawaら,2003,JBiolChem278:3466-3473米国特許第6,602,684号;米国特許出願第10/277,370号;米国特許出願第10/113,929号;PCT国際公開第00/61739A1号;PCT国際公開第01/292246A1号;PCT国際公開第02/311140A1号;PCT国際公開第02/30954A1号;Potelligent登録商標technologyBiowa,Inc.Princeton,N.J.;GlycoMAb商標glycosylationengineeringtechnologyGLYCARTbiotechnologyAG,Zurich,Switzerland。例えば、国際公開第00061739号;EA第01229125号;米国特許公開第20030115614号;Okazakiら,2004,JMB,336:1239-49を参照のこと。例えば、抗体の抗体依存性細胞障害活性ADCCおよび/または補体依存性細胞障害活性CDCを強化するため、エフェクター機能に関して本発明の抗体を修飾することは望ましい場合がある。抗体のFc領域に1つまたは複数のアミノ酸置換を導入することにより、これを達成してもよい。その代わりに、または追加で、システイン残基複数可をFc領域に導入し、それにより、この領域に鎖間ジスルフィド結合を形成させるようにしてもよい。そのようにして生成されたホモ二量体抗体では、内部移行能力が改善され、ならびに/または相補鎖媒介細胞殺傷および抗体依存性細胞障害ADCCが増強され得る。Caronら,J.Exp.Med.176:1191-11951992およびShopes,B.J.Immunol.148:2918-29221992を参照のこと。抗腫瘍活性が増強したホモ二量体抗体はまた、Wolffら,Cancerresearch53:2560-25651993に記載されたようなヘテロ二官能性架橋を用いても調製し得る。あるいは、抗体は、2つのFc領域を有するように操作して、相補鎖溶解およびADCC能力を向上させることもできる。Stevensonら.Anti-CancerDrugDesign3:219-2301989を参照のこと。抗体の血清半減期を延長するために、例えば米国特許第5,739,277号に記載のように、抗体特に抗体フラグメントへサルベージ受容体結合エピトープを組み入れてもよい。本明細書で使用される場合、用語サルベージ受容体結合エピトープはIgG分子例えば、IgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4のFc領域のエピトープを指し、IgG分子のインビボの血清半減期の延長を担う。あるいは、ペグ化により抗体半減期を延長させ得る。抗体複合体本発明はさらに、薬剤または検知可能な標識に結合した本明細書のいずれかの実施形態による抗体および抗原結合性フラグメントを提供する。標識は、例えば検出可能なまたは機能的な標識を含むことができる。治療薬には細胞毒、または抗新生物薬を含むことができる。検知可能な標識には、ラジオアイソトープ例えば、ヨウ素-131、イットリウム-90、インジウム-111、C14、S35、P32、P33、H3、I125、I131、ガリウム67および68、スカンジウム-47、ルテチウム-177、ラジウム-223を含み得る。細胞毒は、細胞に有害な例えば死滅させるあらゆる薬剤を含む。当技術分野において公知のこれらのクラスの薬剤およびその作用メカニズムの記述については、Goodmanら,GoodmanandGilman’sThePharmacologicalBasisofTherapeutics,8thEd.,MacmillanPublishingCo.,1990.を参照のこと。例えばVitetta1993および米国特許第5,194,594号において抗体免疫毒素の調製に関連するさらなる技術が提供されている。代表的な毒素としては、ジフテリアA鎖、ジフテリア毒素の非結合活性フラグメント、緑膿菌からの外毒素A鎖、リシンA鎖、アブリンA鎖、モデクシンmodeccinA鎖、α-サルシン、アレウリテスフォーディAleuritesfordiiタンパク質、ジアンチンdianthinタンパク質、フィトラカアメリカーナPhytolacaamericanaタンパク質PAPI、PAPII、およびPAP-S、モモルディカチャランチアmomordicacharantiaインヒビター、クルシンcurcin、クロチンcrotin、サパオナリアオフィシナリスsapaonariaofficinalisインヒビター、ゲロニンgelonin、ミトゲリンmitogellin、レストリクトシンrestrictocin、フェノマイシンphenomycin、エノマイシンenomycinおよびトリコテセンtricotheceneが挙げられる。例えば、国際公開第93/21232号を参照のこと。本発明による好適な抗新生物薬には、タキソール、サイトカラシンB、グラミシジンD、エチブロ、エメチン、ゲフィチニブマイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラセンジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンD、1つのデヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、およびピュロマイシン、代謝拮抗物質例えばメソトレキサート、6-メルカプトプリン、6-チオグアニン、シタラビン、のような、フルダラビン、5-フルオロウラシル、ダカルバジン、ヒドロキシウレア、アスパラギナーゼ、ゲムシタビン、クラドリビン、アルキル化剤例えばメクロレタミン、チオテパ、クロランブシル、メルファラン、のような、カルムスチンBSNU、ロムスチンロムスチン、シクロホスファミド、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、ダカルバジンDTIC、プロカルバジン、マイトマイシンC、シスプラチンおよびカルボプラチン等の他の白金誘導体、、抗生剤例えばダクチノマイシン以前はアクチノマイシン、ブレオマイシン、ダウノルビシン以前はダウノマイシン、ドキソルビシン、イダルビシン、ミトラマイシン、マイトマイシン、ミトキサントロン、プリカミシン、アントラマイシンAMCが含まれる。標識には蛍光標識も含まれ、例えばビオチンストレプトアビジン、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、ウレアーゼ、カタラーゼ、アルカリフォスファターゼ、βガラクトシダーゼ、およびクロラムフェニコールトランスフェラーゼがある。好適な検出可能な標識には、T7-、His-、myc-、HA-およびFLAG-タグ;高電子密度の試薬;エネルギー移動分子;常磁性標識;フルオロフォアフルオレッセイン、ローダミン、フィコエリトリン;発色団;化学発光イミダゾール、ルシフェラーゼ;およびバイオ発光剤を含む。本発明の抗体は、検出可能なまたは機能的な標識で標識され得る。検出可能な標識には、これらに限定するものではないが、アイソトープ3H,14C,32P,35S,36CI,51Cr,57Co,58Co,59Fe,90Y,121l,124l,125l,131l,111ln,117Lu,211At,198Au,67Cu,225Ac,213Bi,99Tcおよび186Re等の放射標識があり、抗体イメージングの分野において公知の通常の化学的性質を使用して、本発明の抗体に付加され得る。標識としてはまた、蛍光標識例えば、フルオレセイン、ローダミン、テキサスレッドおよびMRI-CTイメージングの分野において通常使用される標識が挙げられる。また、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、β-グルクロニダーゼ、β-ガラクトシダーゼ、ウレアーゼ等の酵素標識も挙げられる。標識としてはさらに、ビオチンのような化学部分が挙げられ、これは、特定の同族の検出可能な部分例えば、標識アビジンに結合することによって、検出され得る。機能的標識としては、腫瘍の部位を標的とし、腫瘍組織の破壊を引き起こすように設計された物質が挙げられる。このような機能的標識としては、細胞傷害性薬物例えば、5-フルオロウラシルまたはリシン等および酵素例えば、細菌性カルボキシペルオキシダーゼまたはニトロレダクターゼ等が挙げられ、これらは、腫瘍部位でプロドラッグを活性薬物に転換することができる。また、フラグメントを含む抗体、ならびに特異的結合メンバー、抗体および/またはこれらのサブユニットの産生または活性を調節する薬物は、特定の診断用途を有し得、例えば、癌、前癌性病変、過剰増殖性の細胞成長に関連する、またはそれがもたらす状態等の病状を検出および/または測定する目的で利用され得る。例えば、特異的結合メンバー、抗体またはそのサブユニットを使用して、公知の技術、例えば、融合マウス脾臓リンパ球および骨髄腫細胞を利用するハイブリドーマ技術等によって、種々の細胞培地中で、それら自体に対するポリクローナル抗体とモノクローナル抗体との両方を産生し得る。同様に、本発明の特異的結合メンバーの活性を模倣またはアンタゴナイズする低分子が、発見または合成され得、そして診断および/または治療のプロトコルにおいて使用され得る。放射性同位体標識された特異的結合メンバー、特に抗体およびそのフラグメントは、インビトロ診断技術ならびにインビボでの放射性画像化技術および放射免疫治療において有用である。インビボでの画像化の例において、本発明の特異的結合メンバーは、放射性同位体複数可よりむしろ、造影剤磁気共鳴画像増強剤が挙げられるが、これに限定されないに結合体化され得、ここで、例えば、抗体分子が多数の常磁性イオンを、キレート基を介して負荷される。キレート基の例としては、EDTA、ポルフィリン、ポリアミン、クラウンエーテル、およびポリオキシムが挙げられる。常磁性イオンの例としては、ガドリニウム、鉄、マンガン、レニウム、ユーロピウム、ランタン、ホルミウム、およびテルビウムが挙げられる。本発明のさらなる態様において、放射性同位体標識された特異的結合メンバー、特に抗体およびそのフラグメント、特に放射性免疫結合体は、放射免疫治療、特に癌治療のための放射性同位体標識された抗体として有用である。またさらなる態様において、放射標識された特異的結合メンバー、特に抗体およびそのフラグメントは、放射免疫誘導手術の手技において有用であり、ここで、これらのメンバーは、癌細胞、前癌細胞、腫瘍細胞、および過剰増殖細胞の存在および/または位置を、このような細胞を除去する手術の前、手術の間または手術の後に同定し、示すことができる。本発明の免疫結合体または抗体融合タンパク質ここで、本発明の特異的結合メンバー、特に抗体およびそのフラグメントは、他の分子または薬剤に結合体化または付着されているとしては、さらに、化学解離剤、毒素、免疫調節因子、サイトカイン、細胞毒性物質、化学療法剤または薬物に結合体化された結合メンバーが挙げられるが、これらに限定されない。放射免疫治療RAITは臨床実習に入り、種々の抗体免疫結合体を使用して有効性を実証してきた。131Iで標識されたヒト化抗癌胎児抗原抗CEA抗体hMN-14は、結腸直腸癌において評価されBehrTMら2002Cancer94補遺4:1373-81、そしてこの同じ抗体の90Y標識を有するものが、甲状腺髄様癌において評価されているSteinRら2002Cancer941:51-61。モノクローナル抗体を使用する放射免疫治療もまた、非ホジキンリンパ腫および膵臓癌について、評価および報告されているGoldenbergDM2001CritRevOncolHematol391-2:195-201;GoldDVら2001CritRevOncolHematol391-2147-54。特定の抗体を用いる放射免疫治療の方法もまた、米国特許第6,306,393号および同第6,331,175号に記載されている。放射免疫誘導手術RIGSもまた、臨床実習に入り、そして有効性および有用性が実証されている抗CEA抗体および腫瘍関連抗原に対する抗体の使用を含むKimJCら2002IntJCancer974:542-7;SchneebaumSら2001WorldJSurg2512:1495-8;AvitalSら2000Cancer898:1692-8;McIntoshDGら1997CancerBiotherRadiopharm124:287-94。動物モデル癌または動物異種移植片研究のインビボ動物モデルを当業者が使用して、本発明の抗体またはそのフラグメントをさらに、または追加的にスクリーニング、評価および/または検証してもよく、これにはc-Metの調節、c-Metの下方制御のさらなる評価、および/またはインビボでのc-Met活性化/tk活性の阻害、ならびに腫瘍進行および/または浸潤の阻害が含まれる。そのような動物モデルとしては、これらに限定するものではないが、c-Met媒介癌、またはc-Metが活性化もしくは過剰発現された細胞腎細胞癌などの異種移植片のモデルを含む。代表的かつ好適なモデルは、HGFおよびc-Metの両方を発現するいくつかの癌化細胞株中にあるグリア芽腫のU87MGマウス異種移植モデルであるGuerinCら2000BiochemBiophysResCommun273:287-293;TsengJRら2008JNudeMed491:129-134。競合的阻害エピトープへの本発明のLMH抗体の結合を競合的に阻害する抗体は、当技術分野において公知の従来の競合結合アッセイを使用して、スクリーニングし、同定することができる。多くの種類の競合結合アッセイが公知であるが、例えば、固相直接または間接放射免疫測定法RIA、固相直接または間接酵素免疫測定法EIA、サンドイッチ競合アッセイStahliら,MethodsEnzymol,92:242-253,1983;Kimら,Infect.Immun.57:944,1989を参照のこと;固相化の直接的なビオチン-アビジンEIAKirklandら,JImmunol,137:3614-36191986を参照のこと;固相直接標識アッセイ、固相直接標識サンドイッチアッセイHarlowandLane,Antibodies:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborPress,1988125I標識を使用する固相直接標識RIAMorelら,CurrStudHematolBloodTransfus,55:53-63,1988を参照のこと;固相直接型ビオチン-アビジンEIACheungら,Virology176:546,1990;または直接標識RIAMoldenhauerら,ScandJImmunol,32:77-82,1990がある。例えば、HarlowおよびLane,1988を参照のことこのようなアッセイは典型的には、固体表面に結合した精製抗原、標識されていない試験タンパク質および標識された比較タンパク質を使用する。試験タンパク質が存在する状態で固体表面に結合された標識の量を測定することにより、競合的阻害を計測する。本発明の組成物本発明の抗体は、通常、医薬組成物の形態で投与され、これは、抗体またはその抗原結合性フラグメントに加え、少なくとも1つの成分を含み得る。したがって、本発明の、および本発明に従い使用される医薬組成物は、有効成分に加えて、薬学的に許容される賦形剤、担体、バッファー、安定剤または当業者に周知の他の物質を含み得る。そのような物質は無毒性であるべきであり、有効成分の効力を妨げるべきではない。担体または他の物質の厳密な性質は、経口経路または静脈内等の注射であり得る投与経路に左右されるであろう。経口投与用の医薬組成物は錠剤、カプセル剤、散剤または液体形態であり得る。錠剤は、固体担体、例えばゼラチン、または補助物質を含み得る。液体医薬組成物は、一般に、液体担体、例えば水、石油、動物もしくは植物油、鉱油または合成油を含む。生理食塩水、デキストロースもしくは他の糖溶液、またはグリコール、例えばエチレングリコール、プロピレングリコールもしくはポリエチレングリコールが含有され得る。静脈内注射、または罹患部位における注射の場合、有効成分は、発熱物質を含有せず適当なpH、等張性および安定性を有する非経口的に許容される水溶液の形態であろう。当業者は、例えば等張性ビヒクル、例えば食塩注射剤、リンゲル注射剤、乳酸添加リンゲル注射剤を使用して、適当な溶液を製造することが十分に可能である。必要に応じて、保存剤、安定剤、バッファー、抗酸化剤および/または他の添加剤も加えてよい。実施形態のいくつかにおいては、リポソームおよび/またはナノ粒子を有効成分と共に使用してもよい。リポソームの構造および利用は、当業者に一般に公知である。リポソームは、水性媒体に分散され、自発的に多重膜同心二重層小胞多重膜小胞MLVとも称されるを形成するリン脂質から形成される。MLVは、一般に、25nmから4μmの直径を有する。MLVの超音波処理により、核に水性溶液を含む200から500オングストロームの範囲の直径を有する小さい単層小胞SUVの形成が生じる。リン脂質は、水に分散されると、脂質と水とのモル比に応じて、リポソーム以外の種々の構造を形成することができる。低い比では、リポソームが優先的構造である。リポソームの物理的特性は、pH、イオン強度および2価カチオンの存在に依存する。リポソームはイオン性および極性物質に対して低い透過性を示すことがあるが、高い温度では、それらの透過性を顕著に変化させる相転移を受ける。この相転移は、ゲル状態として知られる密に詰まった秩序構造から、液体状態として知られるゆるく詰まった低秩序構造への変化を伴う。本発明の組成物は、治療すべき状態に応じて、単独で、または他の処置、治療用物資もしくは薬剤と組合せて同時または連続的に投与され得る。また、本発明は、本明細書に記載されている抗体またはそのフラグメントおよび他の物質または治療用物質、例えば、抗癌物質もしくは治療、ホルモン、抗EGFR物質もしくは抗体、抗c-Met物質もしくは抗体、抗HGF物質、例えばAMG-102、血管新生抑制薬または免疫モジュレーター、を含む組成物を想定し、これを含む。より一般的には、これらの抗癌物質はチロシンキナーゼインヒビターまたはリン酸化カスケードインヒビター、翻訳後モジュレーター、細胞増殖または分裂インヒビター例えば、抗有糸分裂物質、またはシグナル伝達インヒビターであり得る。他の治療薬または療法は、適当な用量の鎮痛薬、例えば非ステロイド性抗炎症薬例えばアスピリン、パラセタモール、イブプロフェンまたはケトプロフェンまたはオピエート、例えばモルヒネ、または制吐薬の投与を含み得る。組成物は、チロシンキナーゼインヒビター限定的なものではないが、AG1478およびZD1839、STI571、OSI-774、SU-6668が含まれる、ドキソルビシン、テモゾロミド、シスプラチン、カルボプラチン、ニトロソウレア、プロカルバジン、ビンクリスチン、ヒドロキシ尿素、5-フルオロウラシル、シトシンアラビノシド、シクロホスファミド、エピポドフィロトキシン、カルムスチン、ロムスチンおよび/または他の化学療法剤と組合せて連続的すなわち、前または後にまたは同時に投与することができる。したがって、これらの物質は抗EGFR特異的物質またはチロシンキナーゼインヒビター、例えばAG1478、ZD1839、STI571、OSI-774、またはSU-6668であることが可能であり、あるいはより一般的な抗癌および抗腫瘍物質、例えばドキソルビシン、シスプラチン、テモゾロミド、ニトロソウレア、プロカルバジン、ビンクリスチン、ヒドロキシ尿素、5-フルオロウラシル、シトシンアラビノシド、シクロホスファミド、エピポドフィロトキシン、カルムスチンまたはロムスチンであり得る。また、組成物は、ホルモン、例えばデキサメタゾン、免疫モジュレーター免疫調節物質、例えばインターロイキン、腫瘍壊死因子TNF、または免疫応答および癌細胞もしくは腫瘍の減少もしくは排除を刺激する他の増殖因子もしくはサイトカインと共に投与され得る。本発明の抗体は、任意の適当な経路、通常は血流もしくはCSF内へのまたは直接的に腫瘍の部位内への注射により、治療を要する患者に投与され得る。厳密な用量は、抗体が診断用なのか治療用なのか、腫瘍のサイズおよび位置、抗体の厳密な性質全抗体、フラグメント、ジアボディなどであるかどうかならびに抗体に結合した検出可能なまたは機能的な標識の性質を含む多数の要因に左右される。放射性核種が治療に使用される場合、適切な最小の単回用量は、約45mCi/m2から最大約250mCi/m2である。好ましい投与量は15~40mCiの範囲であり、さらに好ましい投与量範囲は20~30mCi、または10~30mCiである。そのような療法は骨髄または幹細胞置換を要するかもしれない。腫瘍イメージングまたは腫瘍治療のための典型的な抗体用量はFab’2形態の抗体0.5~40mg、好ましくは1~4mgの範囲となろう。裸抗体は、好ましくは、20~1000mgタンパク質/用量、または20~500mgタンパク質/用量、または20~100mgタンパク質/用量の用量で投与される。これは成人患者の単一治療のための用量であり、小児および乳児では、比例的に調節することが可能であり、また、他の抗体形態では、分子量に比例して調節され得る。治療は、医師の判断により、毎日、週2回、毎週または毎月の間隔で反復され得る。適切な血管形成阻害剤抗血管新生剤の例には、これらに限定するものではないが、ウロキナーゼ阻害剤、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤例えばmarimastat、neovastat、BAY12-9566、AG3340、BMS-275291および類似の剤、内皮細胞遊走および増殖の阻害剤例えばTNP-470、スクワラミン、2-メトキシエストラジオール、コンブレタスタチン、エンドスタチン、アンジオスタチン、ペニシラミン、SCH66336Schering-PloughCorp,Madison,NJ、R115777JanssenPharmaceutica,Inc,Titusville,NJおよび類似の剤、血管新生促進因子のアンタゴニスト例えば例えばZD6474、SU6668、血管形成剤および/またはそれらの受容体に対する抗体例えばVEGF、bFGF、およびアンギオポエチン-1、サリドマイド、サリドマイド類似体例えばCC-5013、Sugen5416、SU5402、血管新生阻害のリボザイム例えばangiozyme、インターフェロン例えばインターフェロンa2a、スラミンおよび類似の剤、VEGF-Rキナーゼ阻害薬および他の血管新生阻害のチロシンキナーゼ阻害剤例えばSU011248、内皮特異的インテグリン/生存シグナル伝達の阻害剤vitaxin等および類似の剤、銅アンタゴニスト/キレート剤テトラチオモリブデート、カプトプリル等のおよび類似の剤、カルボキシアミド-トリアゾールCAI、ABT-627、CM101、インターロイキン12インターロイキン12、IM862、PNU145156Eと同様血管新生を阻害するヌクレオチド分子例えばアンチセンス-VEGF-cDNA、アンジオスタチンをコードするcDNA、p53をコードするcDNおよび欠損VEGFレセプター-2をコードするcDNAおよび類似の剤を含む。血管新生、新生血管形成、および/または他の血管新生化の阻害剤には他にも、抗血管新生ヘパリン誘導体および関連分子例えば、ヘパリナーゼIII、テモゾロミド、NK4、マクロファージ遊走阻止因子MIF、シクロオキシゲナーゼ2阻害剤、低酸素誘導因子1の阻害剤、血管新生阻害の大豆イソフラボン、オルチプラズ、フマギリンおよびその類似体、ソマトスタチン類似体、多流酸ペントサン、テコガランナトリウム、ダルテパリン、タムスタチン、トロンボスポンジン、nM-3、コンブレタスタチン、カンスタチン、アバスチン、他の関連ターゲットに対する抗体例えば抗α-v/β3インテグリンおよび抗キニノスタチンmAbsおよび類似の剤が含まれる。細胞生存度の計測細胞の毒性および生存度細胞アポトーシス、溶解、成長、増殖等は、当技術分野において公知の熱量測定、ルミネセンス、放射測定、または蛍光分析に基づく種々の方法で計測することができる。細胞生存度を判定するための比色分析技術には、例えば、トリパンブルー排除法が含まれる例えば、実施例1および2を参照のこと。手短に言えば、細胞をはトリパンブルーで染色し、血球計を使用して数える。生存細胞は色素を排除する一方、死滅したおよび死につつある細胞は青色染料を取り込み、光学顕微鏡で容易に識別される。ニュートラルレッドは生存細胞により吸着され、細胞ライソゾームに集中し;生存細胞はニュートラルレッドで染色された細胞の数の定量化により光学顕微鏡で測定することができる。細胞生存度を判定するための蛍光定量的な技術は、例えば、ヨウ化プロピジウム、つまり蛍光DNA挿入剤を含む。プロピジウムヨウ化物は生存細胞から排除されるが、死細胞の核を染色する。その後、ヨウ化プロピジウム標識細胞のフローサイトメトリーを使用して生細胞および死細胞を定量することができる。乳酸デヒドロゲナーゼLDHの放出は、構造損傷および細胞死を示し、分光光度酵素アッセイにより測定することができる。ブロモデオキシウリジンBrdUは新しく合成したDNAに組み入れられ、蛍光色素標識抗体を用いて検出することができる。蛍光染料Hoechst33258はDNAを標識し、細胞の増殖を定量するために使用され得る例えば、フローサイトメトリー。蛍光染料カルボキシフルオレセインジアセテートスクシンイミジルエステルCFSEまたはCFDA-SEの定量的な組み入れにより、細胞分裂分析を提供することができる例えば、フローサイトメトリー。この技術はインビトロまたはインビボのいずれかで使用することができる。7-アミノアクチノマイシンD7-AADは、DNAと会合するとスペクトルシフトを受ける蛍光インターカレーターであり、細胞分裂分析を提供することができる例えば、フローサイトメトリー。細胞増殖を確認するための放射測定技術としては、例えば、[3H]-チミジンが挙げられ、これは生細胞の新たに合成されたDNA中に組み入れられ、細胞の増殖を決定するために頻繁に使用される。細胞生存率を定量するために、死細胞からのクロム51Cr-放出を、シンチレーション計数により定量することができる。細胞生存度を測定するための発光技術には、例えば、CellTiter-Glo発光細胞生存度測定PromegaMadisonWis.を含む。この技術は、存在ATPの量を定量化して生存細胞数を測定する。細胞生存度および細胞増殖を判定するための市販のキットには、例えばCellProliferationBiotrakELISAAmershamBiosciencesPiscataway,N.J.;蛍光試薬の取り込み差に基づいた迅速な細胞数計測および生存度決定を提供するGuavaViaCount商標Assay,GuavaTechnologies,Hayward,Calif.;CyQUANT商標;細胞増殖アッセイキットMolecularProbes,Inc.,Eugene,Oreg.;およびCytoLuxAssayKitPerkinElmerLifeSciencesInc.,Boston,Mass.がある。DELFIA商標アッセイキットPerkinElmerLifeSciencesInc.,Boston,Mass.は、時間分解蛍光測定法を使用して細胞の増殖および生存度を判定することができる。Quantos商標細胞増殖アッセイは、溶解細胞からのDNA色素複合体の蛍光を計測する、蛍光に基づいた分析であるStratagene,LaJolla,Calif.。CellTiter-Glo細胞生存度アッセイは、細胞生存度を計測するための発光アッセイであるPromega,MadisonWis.。用途本発明の抗体は、種々の適用、例えば研究、診断および治療への適用に有用である。本明細書に記述された抗体は、ac-Met受容体への例えばリガンド、阻害剤の結合、b受容体シグナル伝達機能、および/またはc刺激性機能、を阻害する減少させる場合も阻止する場合もあるための阻害剤として作用することができる。c-Met受容体機能の阻害剤として作用する抗体は、リガンド結合を直接または間接的に例えば、コンホメーション変化を引き起こすことによりブロックすることができる。例えば、抗体は、リガンドの結合の阻害により、または脱感作リガンドの結合の阻害の有無に関わらずによりc-Met受容体機能を阻害することができる。一態様において、本発明は、対象の障害を治療または予防する方法を提供する。本明細書で使用される場合、障害は正常機能の破壊、または正常機能に対する干渉である。診断アッセイ本発明はまた、異常に発現されたc-Metのような刺激の存在を、本発明の抗体により認識されるその能力を参照することにより検出する方法を含む種々の診断用途に関する。本発明の抗体複数可の診断用途には、当業者には周知かつ標準的である本記載に基づくインビトロおよびインビボ用途が含まれる。c-Met状態特にc-Metの異常発現に関するもののインビトロ査定および評価のための診断アッセイおよびキットは、患者のサンプル、例えば、癌、前癌状態、過剰増殖細胞増殖に関連した状態を有するまたは有する疑いのあるもの、または腫瘍サンプルを診断、評価およびモニターするために利用され得る。c-Met状態の査定および評価は、薬物の臨床試験のための患者の適合性、または特定の化学療法剤もしくは本発明の特異的結合メンバー、特に抗体その組合せを含むの投与のための、異なる物質または抗体と比較した場合の患者の適合性の判定においても有用である。このタイプの診断モニターおよび評価は、乳癌におけるHER2タンパク質に対する抗体HercepTest,DakoCorporationを利用して既に実施されており、この場合、アッセイは、ヘルセプチンHerceptinを使用する抗体療法に関して患者を評価するためにも用いられる。インビボ用途には、腫瘍のイメージングまたは個体の癌状態の評価放射性イメージングを含むが含まれる。細胞中のc-Metの存在は、当業者に公知のインビトロ免疫学的手順またはインビボ免疫学的手順によって確認され得る。例えば、c-Met受容体は1つまたは複数の抗体と複合体を形成し、複合体の1つのメンバーは検出可能な標識で標識される。これらの実験で最もよく使用される標識は放射性元素、酵素、紫外光に露出された場合に蛍光を発する化学物質その他である。多数の蛍光物質が公知であり、標識として利用することができる。これらは、例えば、フルオレセイン、ローダミン、オーラミン、テキサスレッド、AMCAブルーおよびルシフェールイエローを含む。また、抗c-Met抗体は放射性元素で、または酵素で標識することもできる。放射性標識は現在利用可能な計数法のいずれかによって検出することができる。好ましい同位体は3H、14C、32P、35S、36Cl、51Cr、57Co、58Co、59Fe、90Y、121I、124I、125I、131I、111In、211At,198Au,67Cu,225Ac,213Bi,99Tcおよび186Reから選択することができる。酵素標識は同様に有用であって、現在利用されている比色、分光測定、蛍光分光測定、アンペロメトリーまたはガソメトリー技術のいずれかによって検出することができる。酵素は、カルボジイミド、ジイソシアネート、グルタルアルデヒドなどのような橋渡し分子との反応によって、選択された粒子に結合体化される。これらの手法で用いることができる多くの酵素が公知であり、利用することができる。好ましいのはペルオキシダーゼ、β-グルクロニダーゼ、β-D-グルコシダーゼ、β-D-ガラクトシダーゼ、ウレアーゼ、グルコースオキシダーゼペルオキシダーゼおよびアルカリ性ホスファターゼである。米国特許第3,654,090号、同第3,850,752号および同第4,016,143号は、別の標識材料および方法を開示しているため例示的に参照される。本発明はさらに、現在の治療法で使用するための本発明の抗体を含む治療または診断キットの使用法を想定する。そのようなキットは、一般に適切な容器手段内に、本発明の少なくとも1つのLMH抗体またはフラグメントの薬学的に許容される製剤を含むであろう。キットは、生体試料中にc-Met受容体の存在を検出するために使用することができる。本発明の抗体組成物は、液剤または凍結乾燥した形態で、単独か、または他のエピトープに特異的な追加の抗体との組み合わせで、提供することができる。抗体は標識されていても、標識されていなくてもよく、補助成分例えばトリス、リン酸および炭酸塩等の緩衝液、安定剤、賦形剤、殺生物剤および/またはウシ血清アルブミン等の不活性タンパク質などを有するキットに含めることができる。例えば、抗体は、補助成分を有する凍結乾燥した混合物として提供することができ、またはユーザーが組み合わせるように補助成分を別にして提供できる。一般に、これらの補助材料は活性な抗体の量に基づいて約5重量未満、通常は、抗体濃度に基づいて少なくとも約0.001重量の総量で存在するだろう。抗体に結合することができる二次抗体が使用される場合、そのような抗体は、例えば別のバイアルまたは容器に入れてキットで提供することができる。二次抗体が存在する場合は、典型的には標識され、本明細書に記述された抗体製剤と類似の方法で調剤することができる。腫瘍細胞本発明による腫瘍細胞はc-Metを発現するあらゆる細胞である。これらは例えば膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、胆管癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、腎癌、肝臓癌、肺癌、上咽頭癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌および甲状腺癌等の癌、骨肉腫、横紋筋肉腫、滑膜肉腫等の筋骨格肉腫、カポジ肉腫、平滑筋肉腫および線維肉腫等の軟部組織肉腫、T細胞白血病、リンパ腫および多発性骨髄腫等の造血器悪性腫瘍、ならびにグリア芽腫、メラノーマ、中皮腫およびウィルムス腫瘍等の他の新生物を含む。アプタマーアプタマーを使用して本明細書に記述されたc-Metエピトープ配列を標的にすることが可能であることも理解されるであろう。核酸アプタマー適応可能なオリゴマーは、分子標的に結合する能力をもたらす二次および/または三次構造を形成することができる核酸分子である。アプタマーの生成方法は当技術分野において公知であり、Masciniにより一般に開示された方法を使用して調製され得るAptamersinBioanalysis,JohnWileySonsInc,2009。アプタマーライブラリーは、例えば、ベクターまたはRNAアプタマーの場合の発現ベクターへランダムなオリゴヌクレオチドをクローン化することにより産生され、ここでは、ランダム配列には、PCRプライマーが結合する部位を提供する公知の配列が隣接する。活性が亢進したアプタマーは、例えばSELEXSystematicEvolutionofLigandsbyExponentialenrichment指数関数的濃縮によるリガンドの系統的進化を使用して、選抜された。アプタマーライブラリーの産生および/またはスクリーニングに好適な方法は、例えばElloingtonandSzostak,Nature346:818-22,1990に記載されている。したがって本発明はさらに、本明細書に記載されたc-Metのエピトープ配列に特異的に結合する核酸アプタマーにも関する。そのようなアプタマーは、本明細書に記述された細胞増殖性疾患の治療においてc-Metを標的とするために使用することができる。寄託申告モノクローナル抗体LMH80を産生するハイブリドーマ細胞株は、2010年10月14日にAmericanTypeCultureCollectionATCC10801UniversityBoulevard,Manassas,VAより入手した。このハイブリドーマには、特許寄託番号PTA-11405が割り当てられている。モノクローナル抗体LMH82を産生するハイブリドーマ細胞株は、2010年10月14日にAmericanTypeCultureCollectionATCC10801UniversityBoulevard,Manassas,VAより入手した。このハイブリドーマには、特許寄託番号PTA-11406が割り当てられている。これらの寄託物は、ブダペスト条約下の要件に従って入手することができるであろう。しかしながら、寄託物の入手が可能であっても、政府の決定により付与された特許権に減損をもたらすような本主題の発明の実施が許可されるわけではないことを理解するべきである。さらに、本主題の培養寄託物は、微生物の寄託のためのブタペスト条約の規定に合わせて保存され、公共の利用に供される、すなわち、それらは寄託物の試料提供を求める最も最近の要求があった後少なくとも5年間、かついかなる場合でも、寄託日から少なくとも30年間、あるいは、当該培養物の開示を発令する任意の特許の有効期間プラス寄託物の試料が最後に要求された後さらに5年間、それらを生存させてコンタミをしないようにし続けるために必要なあらゆる配慮をもって保存されるであろう。寄託者は、受託者が試料を要求された時に、寄託物の状態のために万一試料が提供できない場合には、寄託物差し替えの義務を受け入れる。具体的な実施形態に示される通り、広範に記載された本発明の範囲から逸脱することなく本発明に対して多くのバリエーションおよび/または変更が行われ得ることは、当業者により理解されるであろう。したがって、本発明の実施形態はあらゆる点で例示的なものであり、限定的なものと考えてはならない。下記の非限定的な実施例において本発明をさらに記載する。実施例1材料および方法1.1細胞肺腺癌細胞株A549ATCCCCL-185および神経膠腫細胞株U87MGATCCHTB-14はすべて、AmericanTypeCultureCollectionATCC、USAから得た。細胞株はすべて、5FCSと5mMのGlutamaxInvitrogen,Melbourne,Australiaを含むDMEM/F12培養液において37°C、5CO2で培養した。SK-OV-3ヒト卵巣癌細胞はATCCATCC番号HTB-77から得た。1.2免疫方法および抗体産生ヒト肺癌細胞株A549を、25-567H配列番号1と命名された精製された切断c-Metフラグメントと組み合わせてミュータントマウスを免疫化するために使用した。A549細胞は自動活性化されたc-Met受容体を含み、したがって恒常的にc-Metを過剰発現させる。これらの細胞は、さらにc-Met受容体のあるプロセシングされていない形態を含む。免疫処置に使用された切断c-Metフラグメントは、c-Metの残基25-567を含む構築物を形質移入されたCHO-Lec細胞由来であり、残基25-567には、Igリーダー配列N末端のフレームにおけるクローン化、および精製C末端のため、N末端ETRで別の3アミノ酸およびC末端で別の9アミノ酸His6末端の標識を含むをさらに含む。形質移入されたCHO-Lec細胞は、DrErmannoGherardiCambridgeUniversityMedicalSchool,MRCCentre,UnitedKingdomにより提供された。表に記載した免疫プロトコルにより示されるように、BALB/cミュータントマウスを、フロイント完全アジュバントSigmaでの最初の免疫処置後、フロイントアジュバントSigma中2×106溶解A549細胞で、または、精製切断組み換えc-Met抗原で、4週間隔で4~5回、腹腔内でi.p.免疫化することにより、マウスハイブリドーマを産生した。フロイント不完全アジュバントを次の免疫化に使用した。免疫プロトコルを下の表1に記載する。免疫化されたマウスの脾臓細胞をマウス骨髄腫細胞株SP2/0と融合した。新規に産生したクローンの上澄部を、下に記載したように、組み換えc-Met抗原と一緒に比反応性に関してELISAによりスクリーンした。次いで下で記載するように、陽性の上澄部を、A549細胞上のc-Met受容体への結合に関してフローサイトメトリーによりスクリーニングした。抗体を、プロテインAアフィニティークロマトグラフィーを標準方法に従って使用して、陽性クローンの上澄部から精製した。1.3ELISA分析ELISA分析では、ElisaプレートNuncMaxiSorp446612のウェルを、0.05MのPBS緩衝液、pH7.2中3μg/mlのc-Met抗原50μlで4°Cで一晩コートした。インキュベーション後、上澄部を除去し、ウェルを洗浄緩衝液0.05のTween20-PBSで2回洗浄し、次いで3のFCS/PBSを230μl/ウェルで室温で1時間ブロックした。次いで、ウェルを洗浄緩衝液0.05のTween2-PBSで1回洗浄しPBSでリンスした。次いで、サンプルハイブリドーマ上清100μlを各ウェルに添加し、プレートを1時間室温でインキュベートした。その後、洗浄緩衝液0.05のTween2-PBSで4回洗浄しPBSでリンスした。次いで、洗浄緩衝液に1:2000に希釈されたヤギ抗マウスIgガンマ-APSigmaA3438100μlを添加し室温で1時間インキュベートした。インキュベーション後、ウェルを洗浄緩衝液で4回洗浄しPBSでリンスした。室温で10分間pNPP1mg/mlnジエタノールアミン-HCL緩衝液pH9.6100μlで発色させた。その後、停止液3.0MのNaOH、50μl/ウェルを添加した。ODは405nmで計測された。試薬は以下のように調製された:標識:ヤギ抗マウスIg全-アルカリホスファターゼSigmaA-3688ロット69H92071FCS/PBS中1:3000希釈、100μl/ウェル、室温1時間基質:pNPPパラニトロフェニル燐酸;ICNCatNo.151766;ロットNo.6909C、貯蔵-20°C1mg/mlジエタノールアミンHCI0.1M中およびMgCI2.6H20緩衝液100μl/ウェル、室温10分1.4フローサイトメトリー5×105A549細胞を、抗体LMH85または抗体LMH8710μg/mlと一緒にインキュベートした。結合した抗体はPE標識抗マウス抗体を使用して検出された。対照抗体はマウスlgG1イソタイプと一致した抗体だった。PEシグナル強度の上昇は、c-Metに結合する抗体を示す。1.5SKOV-3細胞遊走アッセイ抗体を、NeuroProbeのAシリーズ96ウェルChemotaxisChamberを用いて、コラーゲンでコートされた8μm膜のフレームをつけて、細胞遊走を刺激するまたは阻害する能力に関してテストした。卵巣癌細胞SK-OV-3をすべての分析に使用した。チャンバーの底のウェルを、0.25BSAを有するRPMIで希釈した所望の濃度の抗体で充填した。アンタゴニスト検定では、0.3pMのHGFを抗体と混合した。チャンバーの上部を、RPMI/0.25BSA中4×105SK-OV-3細胞で充填した。37°Cのインキュβーで4時間インキュベーションした後、膜は遊走細胞と共に回収し、4のホルムアルデヒドで1h固定し、PBSで洗浄し、DeepRedCytoplasmicStainInVitrogenで一晩染色した。LiCor社製Odessey赤外スキャナを使用して、700nmで膜をスキャンし、細胞を計測した。1.6エピトープマッピングc-Metのアミノ酸1-567SEMAドメインを含むに及ぶPepSet商標ペプチドライブラリーを合成したMimotopes,Clayton,Australia。ライブラリーはN末端にビオチン標識した、20-merペプチドで、15個のアミノ酸を重ねたものからなり、96ウェルのストレプトアビジン被覆プレートにあらかじめ吸収させた。LMH抗体80~89をこのプレートに添加し、標準的なELISAを使用して、個々の単一のペプチドに対するそれらの反応性を測定した。各抗体のエピトープは、抗体と反応したペプチドの配列を重ねることにより決定し、コアの共通アミノ酸配列を決定した。1.7ウエスタン分析細胞は6ウェルプレートに2x105/ウェルで播種し、8時間、37°C、5C02でインキュベートした。培地を除去し、細胞をPBSで2回、無血清培地で1回洗浄した後、16時間血清飢餓状態とした。アゴニストおよびアンタゴニストの分析については、各抗体50mg/mlを付加し、37°C、5C02で45分間、細胞をインキュベートした。その後、アンタゴニストテストのみ、HGF400ng/mlを直後に培地に付加し、細胞をさらに7分インキュベートした。c-Met下方制御分析については、各抗体50mg/mlを付加し、細胞を8時間インキュベートした。処理後、上記に記載したように、TritonX-100細胞溶解緩衝液で細胞を溶解し、処理して、c-Met免疫沈降したPillayら,2009。4-12のBis-Tris勾配ゲルInvitrogen上でタンパク質試料を分離し、平衡緩衝器中22°Cで20分間ゲルを浸漬した[2xMES緩衝液Invitrogen、10メタノール、1:1000NuPage酸化防止剤InvitrogenおよびddH20]。iBlotdrytransfersystemInvitrogenを使用して、PVDF膜にあらかじめ平衡にしたゲルを移した。OdysseybufferLI-CORBiosciences,Lincoln,NE中で、膜ブロッキングおよび抗体インキュベーションのステップをすべて行った。全c-Metを、Met25H2マウスmAbCellSignalingTechnology,Danvers,MAか、または、ウサギポリクローナル抗Metc-Met抗体Abeam、Cambridge、UKのいずれかでプローブすることにより検出した。リン酸エステル化されたc-Metをリン酸-MetTyr1234/12353D7ウサギmAbCellSignalingTechnologyでプローブすることにより検出した。検出に使用された二次抗体は、IRDyeCW800標識アフィニティ精製抗ウサギIgG抗体RocklandImmunochemicals,Gilbertsville,PAだった。OdysseyInfraredImagingSystemLI-CORBiosciencesを使用して、ウェスタンブロットを解析した。1.8xCELLigence検定はすべて0.5FCSおよび5mMのGlutamaxを含むDMEM/F12Invitrogenで行なった。A549細胞を未処理のE-プレートRocheDiagnostics,Basel,Switzerlandに、ウェルあたり5,000細胞播種し、U87MG細胞を、1:50マトリゲルBDBiosciences,FranklinLakes,NJで前処理されたE-プレートに、ウェル当たり40,000細胞播種した。プレートを、37°C、5CO2の加湿された細胞インキュベーター内でxCELLigenceRTCASP装置RocheDiagnosticsに接続した。RTCAソフトウエア1.2RocheDiagnostics上の下記の解析プログラムを使用し、細胞増殖に関するデータを収集した。まず1分間隔の180スイープ、続いて、30分間隔の999スイープを開始した。A549細胞を21時間増殖させ、U87MG細胞を48時間増殖させた後、このプログラムを中止し、抗体処理物を細胞に直接付加した。1分間隔で180スイープ、続いて、30分間隔で999スイープの第2プログラムを、A549細胞に対して60時間、U87MG細胞に対して120時間終了するまで実行した。RTCAソフトウエア1.2プログラムRocheDiagnosticを使用して、データを解析した。抗体付加直前のポイントまで読み値を標準化した。データは全て、時間に対して平均細胞インデックス±SEMとして示す。1.9U87MG異種移植片試験U87MG異種移植片試験を基本的に上で記載したように実施した[Pillayら、2009]。簡単に述べると、4~6週齡の雌のBALB/cヌードマウスの腹面の左右脇腹に、1x106細胞を注射した。腫瘍サイズが100mm3に到達した時に、処理を開始した。腹腔内i.p.投与経路を使用した後、腫瘍測定および統計分析を上で記載したように実施した[Pillayら、2009]。MonashUniversityAnimalEthicsCommitteeはこのプロジェクトを承認した。1.10抗c-Met抗体のBiocore分析LMH抗体の親和性をBIAcore分析により、詳細な記載に従ってNiebaLら、1997測定した。簡単に述べると、NTAセンサチップにNi2をロードし、His6-c-Met25-567フラグメントを固定化するために使用した。LMH抗体を、見かけの親和性KDを測定するため濃度をばらつかせて素子上を通過させた。素子をEDTAで再生成した。1.11細胞表面での下方制御のための方法A549細胞を播種して一晩置き、無血清培養液で2回洗浄し、次いで、無血清培養液を加えて24時間処理した。翌日、抗体をシャーレの培養液を使用した8時間の処理に付加した。処理完了後、シャーレを多量のPBS、pH8.0で3回洗浄した。次に、PBS、pH8.0中0.5mg/mlの不浸透性EZリンク登録商標Sulfo-NHS-LC-BiotinThermoScientificを付加し、細胞を4°Cで1時間振とうさせた。冷やした100mMの多量のグリシンで細胞を3回洗浄した。c-Metの免疫沈殿法IPのため、細胞をTritonX-100細胞溶解緩衝液[30mMのHEPES、pH7.4、150mMのNaCI、1のTritonX-100、10mMのNaF、CalbiochemProteaseInhibitorCocktailSetI、200μMNa3V04および0.4v/vH202]を付加して溶解し、20分間氷上でインキュベートした。次いで、遠心法により4°Cで溶解物を清澄化し、抗c-MetビーズSantaCruzを使用して免疫沈降した。SDS-PAGEと移行の後、ビオチン化c-Metに関してIRDye680に標識したストレプトアビジンLiCorBiosciencesを使用して、または全c-Metに関してウサギ抗Met1000-1100ポリクローナル抗体Abeam、次いで二次抗体として、抗ウサギIRDye800を使用して、膜をプローブした。赤外線検出を使用して、ブロットを発色させた。結果実施例2:抗c-Met抗体の特性記述表2にLMH抗体80~89の特性記述の要旨を記す。LMHクローンの上澄みを最初に、組み換え切断c-Met抗原との特異的な反応性について、材料および方法で記述したようにELISA分析によりスクリーニングした。次いで陽性の上澄部を、フローサイトメトリーによりA549細胞上のc-Met受容体への結合に関してスクリーニングした。表2にこれらの統計分析の結果を示す。図1Aに、イソタイプ対応対照に対する、抗体LMH85およびLMH87の結合を示す代表的なFACS分析を示す。免疫ブロット/ウエスタンブロット解析で、抗体の反応性を調査した。A549細胞から全c-Metを免疫沈降し、25H2でc-Metのββ鎖に結合する市販の抗体および抗体LMH80、82、84および86から89をプローブした。この分析の結果を、図1B抗体LMH80、LMH84およびLMH87に関しておよび表2に示す。抗体LMH82、84、86、87、88および89がc-Metのα鎖に結合し、一方LMH80がβ鎖に特異的に結合した抗体LMH80、LMH84およびLMH87の代表的なブロットを図1Bに示す。さらに確認の実験で、LoVo細胞のc-Metを抗体LMH80、81、82または85により免疫沈降し、受容体がプロセシングされていない形態でもプロセシングされた形態でもc-Metβ鎖を認識する25H2でウエスタンブロットした。このデータは、抗体LMH80、81および82が、c-Metのプロセシングされていない形態を認識したという点で、A549細胞で見られたものを支持している図示せず。免疫沈殿法検査は、抗体抗体LMH80、81、82および84-89がc-Metを免疫沈降することができたことを示した。図1Cは、LMH抗体LMH85、LMH86、LMH87、LMH88およびLMH89の代表的な免疫ブロットを示す。図1Dで示すように、免疫ブロットにより、選抜されたLMH抗体のアゴニスト/アンタゴニスト活性を調査した。A459細胞を抗体単独で、またはHGFリガンド存在下の抗体で処理し、全細胞可溶化物を用意した。抗体LMH85はc-Metのリン酸エステル化を促進し、したがってc-Metのアゴニストとして作用することが認められた。抗体LMH86および87はc-Metのリン酸エステル化に効果がない。さらに、抗体LMH86は、HGFに刺激されたc-Metのリン酸エステル化を阻止することができなかった。表2に抗体のアゴニスト/アンタゴニスト活性を要約する。BIAcore分析により、LMH抗体の結合親和性を決定した。表2に解離定数を示す。実施例3:抗体LMH85およびLMH87のアゴニストおよびアンタゴニストのプロファイル抗体LMH85は、SK-OV-3細胞での遊走を誘導することができ図1E、上のパネル、これはc-Metのリン酸エステル化を誘導するその能力と一致している。対照的に、LMH87単独では細胞遊走に効果がなく図1E、上のパネル、アゴニスト活性の欠如が確認できる。しかしながら対照的に、抗体LMH87は、SK-OV3細胞のHGF/SF誘導性遊走を有意に阻害した図1E、下のパネル、p<0.05。このデータは、抗体LMH87がc-Metのアンタゴニストであることを確認している。これらの結果は生化学データと一致している。c-MetのLMH85活性化により遊走が増加し、一方c-Met活性化に効果がないLMH87は細胞遊走に効果がない。図1fで示したように、HGFが細胞遊走を刺激した一方、陰性対照は細胞遊走刺激を示さなかった。HGFをLMH87と混合すると、使用されたすべての濃度で細胞遊走の一貫した減少が認められた細胞遊走が約60減少。これは、LMH87がc-Metアンタゴニストであることを示す。実施例4:LMH抗体のさらなる特性記述図2に示すように、LMH抗体80~82および85をc-Metへの結合に関してさらに特徴づけた。縮小状況下では、c-Metのプロセシングされていない形態は無傷のままであるが、プロセシングされた形態はα鎖およびβ鎖に還元されている。したがって、免疫ブロットにおいてLMH80-82がプロセシングされたc-Metに結合した場合、β鎖は存在しているはずである。図2で示したように、LMH抗体LMH80-82のみが、細胞表面上の受容体のプロセシングされていない形態に結合した。対照的に、抗体LMH85は、β鎖の存在が立証するように、プロセシングされていないc-Metおよびプロセシングされたc-Metの両方を免疫沈降することがわかった。図3は、抗体LMH80-82がプロセシングされていないc-Metを認識することをさらに示す。LoVo結腸癌細胞は主にプロセシングされていないc-Metを発現する。フローサイトメトリー分析により証明されたように、LMH80および81はこれらの細胞への強い結合を示す。U87MG細胞は主にプロセシングされていないc-Metを発現し、プロセシングされていない受容体の発現量は少ない。抗体LMH85と比較して、LMH80-82のこれらの細胞への結合は弱く、それらがc-Metのプロセシングされていない形態を認識することが確認できる。実施例5:LMH抗体のエピトープマッピングLMH抗体のエピトープマッピングを、材料および方法での記述に従って実行した。ELISA分析により、所与の20-merペプチドへの抗体の反応性を決定し、代表的な抗体LMH80、LMH82およびLMH87の結果を図4A-Cに示す。各抗体が結合したペプチド配列を、コアエピトープを決定するために整列させた。抗体LMH80は、c-Met配列のアミノ酸521~535にあるコアアミノ酸配列RHFQSCSQCLSAPPFを有するエピトープを認識した。抗体LMH81は、c-Met配列のアミノ酸521~541にあるコアアミノ酸配列RHFQSCSQCLSAPPFVQCGWを有するエピトープを認識した。抗体LMH82は、c-Met配列のアミノ酸121~130にあるコアアミノ酸配列VVDTYYDDQLを有するエピトープを認識した。抗体LMH87は、コアアミノ酸配列DVLPEFRDSYを有するエピトープを認識した。c-Met配列のアミノ酸236~245にある抗体LMH86、LMH88およびLMH89もこのコアエピトープを認識した。抗体LMH84は、c-Met配列のアミノ酸216~230にあるコアアミノ酸配列VRRLKETKDGFMFLTを有するエピトープを認識した。実施例6:LMH抗体のアミノ酸配列LMH85およびLMH87に対して、可変重鎖および軽鎖のアミノ酸配列を、材料および方法で記述したような標準プロトコルで決定した。抗体LMH85およびLMH87に関して相補性決定領域CDRを下に示す。CDR配列は以下のとおりである:重鎖CDRLMH80LMH80VHCDR1GYTFTDNS配列番号7LMH80VHCDR2VNTETGEP配列番号8LMH80VHCDR3ARDGHYFAY配列番号9軽鎖CDRLMH80LMH80VLCDR1QSLLYSSNQKDY配列番号10LMH80VLCDR2WAS配列番号11LMH80VLCDR3QQYYSYPLT配列番号12重鎖CDRLMH82LMH82VHCDR1GYTFTDYY配列番号15LMH82VHCDR2INPNNGGT配列番号16LMH82VHCDR3ARSGY配列番号17軽鎖CDRLMH82LMH82VLCDR1QSILHSNGNTY配列番号18LMH82VLCDR2KVS配列番号19LMH82VLCDR3FQGSHVPWT配列番号20重鎖CDRLMH85LMH85VHCDR1GYTFIIYW配列番号31LMH85VHCDR2INPSNDYT配列番号32LMH85VHCDR3ARDSYDYDDGAYAMDY配列番号33軽鎖CDRLMH85LMH85VLCDR1SGVNY配列番号34LMH85VLCDR2ATS配列番号35LMH85VLCDR3QQWISHPFT配列番号36重鎖CDRLMH87LMH87VHCDR1GNTLKDDH配列番号23LMH87VHCDR2IYPGGGRT配列番号24LMH87VHCDR3TNLVFDV配列番号25軽鎖CDRLMH87LMH87VLCDR1KSLLHSNGNTY配列番号26LMH87VLCDR2RMS配列番号27LMH87VLCDR3MQNLEYPFT配列番号28実施例7:単鎖scFvフラグメントのアンタゴニスト活性scFv85またはscFv87のいずれか50μg/mlでA549細胞を1時間処理し、次に、HGFを付加した。次いで、全細胞可溶化物を調製し、全c-Met、リン酸エステル化c-MetTyr1234/1235およびTyr1230/1234/1235または積載量に関する対照pan-actin抗体に関してプローブした。両リン酸エステル化c-Metブロットは、scFv87ではなくscFv85が、c-MetのHGF刺激をブロックしたことを示す図5を参照。したがって、scFvLMH85は、c-MetのHGF刺激のアンタゴニストとして作用する。この機能は、c-Met受容体のアゴニストである無傷のLMH85抗体とは著しく異なる。実施例8:LMH87はc-met全表面をダウンレギュレートし、癌細胞増殖を阻害する。A549肺癌細胞におけるc-Metをダウンレギュレートする抗体LMH87の能力について、8時間または24時間抗体で細胞を処理することによりテストした。LMH87はA549細胞の表面のc-Met図6A、上のパネルを40図6A、下の棒グラフ、全細胞のc-Metを同量図6A、下のブロットダウンレギュレートできた。濃度測定図B、棒グラフにより判定されるように、LMH87は、さらにU87MGグリオーマ細胞図6Bの全c-Metを50減少させた。未処理、または、PBS処理した対照は、c-Metの類似の総量を示すが、LMH87で処理された細胞は、両細胞株において全c-Metの低減を示す。したがって、LMH87がc-Met受容体の下方制御を引き起こすことが見出された。したがって、このデータは、A549細胞の表面からc-Metが除去されたことを証明する。抗体LMH86、88および89は抗体LMH87と同一のコアエピトープに結合する。しかし、LMH88が全c-Metレベルを下げる他の唯一の抗体だった;c-Met受容体の抗体LMH87の下方制御は少なくとも24時間持続した図6C。実施例9:抗体LMH87のインビトロおよびインビボでの細胞増殖の阻害図7Aで、LMH87で処理されたA549細胞のxCELLigence商標分析をインビトロで実施した。xCELLigenceシステムは、所与の刺激に応じたリアルタイムの細胞の分析を容易にする。図6Cで示したように、A459細胞をPBSで、または抗体LMH87の複数回投与;10μg/ml、50μg/ml、および100μg/ml、で処理した。50および100μg/mlの両処理群とも、PBS対照群と比較して、細胞指標の有意な減少を引き起こし、これは細胞増殖の阻害と一致している。さらに、抗体LMH87はマウス異種移植モデルにおいて腫瘍増殖を著しく阻害することができた。LMH87で治療されたマウスのU87MG異種移植片の結果を、図7Bに示す。LMH87は12日目p=0.014および14日目p=0.03に腫瘍増殖を有意に阻害した。考察本発明者らは、c-Metに結合し、癌の治療に有益な一連の抗体を同定した。3つの抗体、LMH80、81および82は、癌細胞表面のプロセシングされていない形態のc-Metへ優先的に結合することができる点が独特である。この特質はこれらの抗体に腫瘍特異性をもたらすため、腫瘍細胞への細胞毒、放射性同位体およびsiRNA等の化合物の送達に理想的である。これらの抗体のうち、LMH80はc-Metのβ鎖に特異的であり、LMH82はc-metのα鎖に特異的であった。発明者により同定された別の抗体、抗体LMH85は、c-Metのアゴニストであることが認められ、c-Met上にある立体配座エピトープを認識するようである。この抗体に基づいたscFVは興味深いことに、c-MetのHGF活性化をブロックし、したがって、アンタゴニスト活性を示す。抗体LMH86、LMH87、LMH88およびLMH89はすべてc-Metのα鎖上の同一のコアエピトープ配列を認識することが認められた。このグループの代表的な抗体LMH87は癌細胞に結合してc-Met受容体の下方制御/分解を直接引き起こし、インビトロのおよびインビボの両方で見られる腫瘍増殖を抑制することが示された。別の代表的な抗体LMH88も、c-Met受容体の下方制御/分解を引き起こすことがわかった。参考文献"