多孔質生体適合性支持体で構成される機能化半透膜であって、-前記多孔質生体適合性支持体は、その表面エネルギーが50mJ.m-2以上であるように前処理され、-前記多孔質生体適合性支持体の細孔は、5nmから100nmの間の内側サイズを有し、-前記機能化半透膜は、それぞれ親水性ポリマーおよび少なくとも1種の生物活性分子を含む少なくとも2つの層を備えることを特徴とする、機能化半透膜。親水性ポリマーが、セルロース化合物、ポリアクリルアミドおよびそれらのコポリマー、ポリビニルピロリドンPVPおよびそのコポリマー、ポリビニルアルコール、酢酸ビニルのコポリマー、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、親水性ポリメタアクリレート、多糖類、ヒアルロン酸系ポリマーならびにキトサンから選択されることを特徴とする、請求項1に記載の機能化半透膜。生物活性分子が、抗炎症剤、抗感染症剤、麻酔剤、成長因子、血管形成促進および/もしくは血管新生誘導剤、創傷治癒剤、免疫抑制剤、抗凝集剤および抗凝固剤を含む抗血栓剤、アンジオテンシン変換酵素ACEの阻害剤、またはインスリン分泌を促進する分子から選択されることを特徴とする、請求項1または請求項2に記載の機能化半透膜。親水性ポリマーおよび生物活性分子の少なくとも2つの層を備え、前記層のうちの第1の層は、前記支持体と第2の層との間に設置されるとともに細胞成長因子を含み、前記層のうちの第2の層は、抗血栓剤を含むことを特徴とする、請求項1から3のいずれか一項に記載の機能化半透膜。前記細胞成長因子がVEGFであること、および前記抗血栓剤がヘパリンであることを特徴とする、請求項4に記載の機能化半透膜。治療上有益な少なくとも1種の物質を生成する分泌細胞を封入するためのチャンバの製造のための、請求項1から5のいずれか一項に記載の膜の使用。治療上有益な少なくとも1種の物質を生成する分泌細胞を封入するためのチャンバであって、その壁は、治療上有益な少なくとも1種の物質を生成する分泌細胞を含有することができる空間を画定する、請求項1から5のいずれか一項に記載の機能化半透膜からなることを特徴とする、チャンバ。請求項7に記載の少なくとも1つの封入チャンバを備えることを特徴とする、バイオ人工臓器。膵島の細胞を含有するバイオ人工膵臓であることを特徴とする、請求項8に記載のバイオ人工臓器。したがって、本発明は、その表面エネルギーを増加させるように前処理された多孔質生体適合性支持体で構成され、また、それぞれ親水性ポリマーおよび少なくとも1種の生物活性分子を含む少なくとも2つの層も備えることを特徴とする、機能化半透膜に関する。より具体的には、これは、多孔質生体適合性支持体で構成される機能化半透膜であって、-前記多孔質生体適合性支持体は、その表面エネルギーが50mJ.m-2以上であるように前処理され、-前記多孔質生体適合性支持体の細孔は、5nmから100nmの間の内側サイズを有し、-前記機能化半透膜は、それぞれ親水性ポリマーおよび少なくとも1種の生物活性分子を含む少なくとも2つの層を備えることを特徴とする、機能化半透膜である。生体適合性支持体の調製は、国際出願WO02/060409に記載の方法に従って行われてもよい。生体適合性支持体は、多孔質ポリカーボネートまたはポリエステルまたはポリエチレンイミンからなり、その厚さは5μmから100μmの間、好ましくは10μmから60μmの間である。細孔の形成は、電子衝撃により、または重イオン衝撃により行われてもよく、この2番目の方法は、特に、米国特許第4956219号に記載されている。重イオン衝撃の場合、生体適合性支持体の表面に衝突させる重イオンの密度が細孔の密度を決定付け、一方化学的腐食処理時間が細孔のサイズを決定付ける。本発明に関連して、生体適合性支持体上に形成される細孔は、5ナノメートルから100ナノメートルの間、好ましくは5ナノメートルから50ナノメートルの間の内側サイズを有する。次いで、多孔質生体適合性支持体の表面は、その表面エネルギーを増加させるように処理される。支持体の処理は、多孔質生体適合性支持体の表面における極性部位の形成をもたらし、特に、処理は、カルボニル、ヒドロキシまたはアミン基の、およびフリーラジカルの割合の増加をもたらす。フリーラジカルは、互いに、または大気酸素と結合し、そのようにして極性部位を形成する。十分な表面エネルギーは、支持体上に置かれた水滴の接線と膜表面との間で測定される接触角が40°未満であるような表面エネルギーであると考えられ、これは、少なくとも50mJ.m-2の表面エネルギーに相当する。したがって、支持体の処理の目的は、50mJ.m-2以上の表面エネルギーを得ることである。以下の濡れおよび表面エネルギーの値は、例として示される。1未処理ポリカーボネート支持体:濡れ角水:60°、表面エネルギー:41J.m-2から44mJ.m-2極性成分:15mJ.m-22プラズマ処理ポリカーボネート支持体:濡れ角水:25°、表面エネルギー:66mJ.m-2極性成分:37.2mJ.m-23親水性層で被覆されたプラズマ処理ポリカーボネート支持体:濡れ角水:20°、表面エネルギー:66.7mJ.m-2極性成分:40mJ.m-2特に、ポリカーボネート製の生体適合性支持体の場合、本発明の半透膜を構成する生体適合性支持体の表面に存在する極性部位は、以下の部位を含む:CH3O、C2H3O、C3H3O、C3H7O、O、OH、C2OH、C8H5O、NH4、C2H8N、R-OHアルコール、R3-NHアミンおよびR-CO-NHアミド式中、置換基Rは、生体適合性支持体のポリカーボネートポリマーの構成基を表す。これらの極性部位は、生体適合性支持体の表面エネルギーを増加させ、したがって親水性ポリマーの層の付着を可能にする。好ましくは、生体適合性支持体の表面における極性部位の形成は、プラズマ処理、コロナ放電または大気圧もしくは真空下での電磁放電により行われる。例えば、支持体は、アルゴン高周波プラズマ処理される。支持体は、反応器容量の1リットルあたり2ワットから10ワットの間のプラズマ反応器放射出力で、1分から30分の間処理されてもよい。また、処理は、同じ出力であるが5秒から20秒間のマイクロ波プラズマにより行われてもよい。好ましくは、プラズマ処理は、真空下で行われる。プラズマ処理方法の実践に関しては、当業者により、A.RicardによるマニュアルReactiveplasmas、SVF版、1995が有利に参照され得る。また、処理は、コロナ放電により行われてもよい。処理電圧は、有利には50ボルトから500ボルトの間であり、強度は、処理デバイスおよび処理される支持体に基づき変動する。コロナ放電処理は、反対の平行電極を有するデバイスを利用して、隣接平行電極高さ約5mmの電極アークまたは吹付アーク間にガス流が存在する隣接平行電極であり、これにより高さ約10cmの電気アークが形成されるにより行われてもよい。コロナ放電または電磁放電処理方法の実践に関しては、当業者により、A.Ricard1995によるマニュアルが有利に参照され得る。処理時間は、10分の数秒程度、好ましくは0.1秒から1秒の間である。連続的処理の場合、暴露時間は、処理される材料が、1秒当たり数センチメートルから数デシメートルの速度で処理デバイスを通過するような時間である。さらに、生体適合性支持体は、処理の効率を増加させるために、数回処理されてもよい。最も好ましくは、およびポリカーボネート製の生体適合性支持体の場合、極性部位の形成は、20リットルのBransonRF型反応器において、50ワットの出力で10分間のアルゴンプラズマ処理により行われる。この具体的実施形態において、2次イオン質量分析法による測定によって、ポリカーボネート製の生体適合性支持体の表面において、極性部位として、以下の質量/電荷m/z比において検出される2次イオンの強度により定量化される以下の組成物が観察された。-ポジティブモードにおいて:31CH3O、43C2H3O、55C3H3O、59C3H7O、18NH4および46C2H8N、ならびに-ネガティブモードにおいて:16O、17OH、41C2OH、117C8H5O本発明によれば、少なくとも1種の生物活性分子を含む親水性ポリマーの各層は、10ナノメートルから1000ナノメートルの間、好ましくは10ナノメートルから100ナノメートルの間、最も好ましくは10ナノメートルから50ナノメートルの間の厚さを有する。本発明に関連して、親水性ポリマーという表現は、多孔質生体適合性支持体に塗布された場合に、前記ポリマー上に滴下された水滴が、国際出願WO02/060409に記載のような液滴試験に従う測定後に、25°未満、好ましくは22°未満の角度値を有するようなポリマーを意味するように理解される。好ましくは、親水性ポリマーは、水に可溶である。実際、宿主生物の体内へのバイオ人工臓器の移植のために、有機溶媒の使用は、その完全除去が困難であり、その存在は、たとえ微量であっても、人間または動物における治療的または外科的使用に適合しないことから、推奨されない。親水性ポリマーは、好ましくは、以下のポリマーから選択される。-セルロース化合物、例えばエチルセルロースEC、ヒドロキシプロピルメチルセルロースHPMC、例えばDOWCHEMICALS社から販売されているHPMCE4MもしくはHercules社から販売されているAqualonと呼ばれるもの、またはHercules社から販売されているカルボキシメチルセルロースCMC、-ポリアクリルアミドおよびそのコポリマー、例えばSIGMA社UPSALA、Swedenから販売されているもの、-ポリビニルピロリドンPVPおよびそのコポリマー、例えばBASF社により販売されているもの、例えばKollidonK30、K90、-ポリビニルアルコール、-酢酸ビニルのコポリマー、例えばHOECHST社からMowiolの商品名で販売されているポリ酢酸ビニルおよびポリビニルアルコールのコポリマー、-ポリエチレングリコール、例えばSIGMA社から販売されているもの、-ポリプロピレングリコール、-親水性ポリメタアクリレート、例えばDEGALANまたはDEGUSSA社から販売されているもの、-多糖類、-ヒアルロン酸系ポリマー、-キトサン、例えばSIGMA社から販売されているもの。好ましくは、親水性ポリマーは、セルロース化合物、特にHPMC、ECもしくはCMC、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコールおよびいくつかのポリアクリレート、例えばポリヒドロキシエチルアクリレートHEMA、またはアクリル酸のコポリマーから選択される。また、本発明に従い使用することができる親水性ポリマーは、上述の2種以上の親水性ポリマーの混合物、例えばHPMCおよびCMC、HPMCおよびEC等で構成されてもよい。生物活性分子は、親水性ポリマーと混合され、バイオ人工臓器を受け入れる患者の組織複数可の応答を誘導するように、半透膜の周囲の媒体内に放出されることを意図する。誘導することが望ましい組織の応答は、いくつかの種類の応答であってもよく、一般に、本発明による機能化半透膜中に導入され得る生物活性分子は、抗炎症剤、抗感染症剤、麻酔剤、成長因子、血管形成促進および/もしくは血管新生誘導剤、創傷治癒剤、免疫抑制剤、抗凝集剤および抗凝固剤を含む抗血栓剤、アンジオテンシン変換酵素ACEの阻害剤、またはインスリン分泌を促進する分子IGF、グルカゴン様ペプチド1GLP-1もしくはその誘導体、インクレチン模倣剤から選択される。抗炎症剤のうち、アセトアミノフェン、アミノサリチル酸、アスピリン、セレコキシブ、トリサリチル酸コリンマグネシウム、デクロフェナク、ジフルニサル、エトドラク、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、インターロイキンIL-10、IL-6突然変異タンパク質、抗IL-6、NOシンターゼ阻害剤例えばL-NAMEもしくはL-NMDA、インターフェロン、ケトプロフェン、ケトロラク、レフルノミド、メフェナム酸、ミコフェノール酸、ミゾリビン、ナブメトン、ナプロキセン、オキサプロジン、ピロキシカム、ロフェコキシブ、サルサレート、スリンダク、およびトルメチン等の非ステロイド系抗炎症薬NSAID、ならびにコルチゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾン、プレドニゾロン、ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、ブデソニド、リン酸デキサメタゾンナトリウム、フルニソリド、プロピオン酸フルチカゾン、パクリタキセル、タクロリムス、トラニラスト、トリアムシノロンアセトニド、フルオシノロンアセトニド、フルオシノニド、デソニド、デスオキシメタゾン、フルオシノロン、トリアムシノロン、トリアムシノロン、プロピオン酸クロベタゾール、およびデキサメタゾン等のコルチコイドを挙げることができる。抗凝集剤アセチルサリチル酸、クロピドグレル、チクロピジン、ジピリダモール、アブシキシマブ、エプチフィバチドおよびチロフィバン、抗凝固剤ヘパリン、ビバリルジン、ダビガトラン、レピルジン、フォンダパリヌクス、リバロキサバン、エポプロステノール、ワルファリン、フェンプロクモン、プロテインC、ドロトレコギンアルファ、抗トロンビン、ペントサンならびに血栓溶解剤アルテプラーゼ、ウロキナーゼ、テネクテプラーゼおよびレテプラーゼ等の抗血栓剤の使用が好ましい。好ましい抗血栓剤は、ヘパリンである。さらに、生物活性分子として、バイオ人工臓器の周囲の組織の十分な血管新生を可能とする分子を使用することが有利であり、これは、特に、以下のような成長因子であってもよい。-PDGF血小板由来成長因子ファミリーの成長因子:PDGF1、PDGF2、VEGF血管成長因子、VPF血管透過性因子、-EGF上皮細胞成長因子ファミリーの成長因子:EGF、ウロガストロンUROTGFα形質転換成長因子α、アンフィレグリン、-FGF線維芽細胞成長因子ファミリーの成長因子:1から6まで番号付けられ、ヘパリンと複合化していてもよい、-インスリンファミリーの成長因子:IGF-1およびIGF-2、-神経栄養因子NGF、-結合組織成長因子CTGF、-肝細胞成長因子HGF。好ましくは、成長因子は、血管形成の誘導により血管新生を促進する細胞成長因子、例えば塩基性線維芽細胞成長因子bFGF、血管内皮細胞成長因子VEGF、血小板由来内皮細胞成長因子PDGF1もしくは2、または肝細胞成長因子HGFである。親水性ポリマーおよび生物活性分子の層の調製のために、親水性ポリマーまたは親水性ポリマーの混合物を水に溶解させる。使用される親水性ポリマー、または親水性ポリマーの混合物とは無関係に、溶液の総重量によるその量は、好ましくは、1センチポアズから10センチポアズの間の粘度を有する親水性ポリマーの水溶液が得られるように調節される。例えば、約5センチポアズから10センチポアズcPsの粘度値は、1質量のPVPBASF社から販売されているKollidonK90の濃度を有する水溶液、または0.2質量のHPMCDOWCHEMICALS社から販売されているE4Mの濃度を有する水溶液において得られる。粘度の測定は、DIN30D型ニードルを利用して、室温で、および300rpmから500rpmの回転速度で行われる。したがって、例示を目的として、親水性ポリマーがヒドロキシプロピルメチルセルロースHPMC、ポリビニルピロリドンPVPまたはこれら2種のポリマーの混合物である場合、ポリマーの水溶液の総重量に対する親水性ポリマーの質量パーセントは、有利には0.1から1の間である。次いで、生物活性分子は、この親水性ポリマーの水溶液に添加され、次いで、25/100から75/100の間の生物活性分子/親水性ポリマーの重量比で撹拌することにより可溶化または懸濁されるが、好ましくはこの比は25/100から50/100の間であり、好ましくは、生物活性分子および親水性ポリマーとは無関係に、比は25/100である。生体適合性支持体上への親水性ポリマーおよび生物活性分子の層の塗布は、浸漬により行われてもよい。最も好ましくは、浸漬ステップの期間は、5秒から10分の間である。有利には、浸漬ステップは、15°Cから25°Cの間の温度で行われる。親水性ポリマーの溶液に生体適合性支持体を浸漬するためのステップの期間は、10ナノメートルから1000ナノメートルの間、好ましくは10ナノメートルから100ナノメートルの間、最も好ましくは10ナノメートルから50ナノメートルの間の厚さを有するポリマー層が得られるように調節される。親水性ポリマーおよび生物活性分子の次の層のそれぞれは、前の層を完全に乾燥させた後に、この同じ方法に従って調製される。また、生物活性分子の量を増加させるために、機能化層の連続的積層を調製することも可能であり、機能化層の数は、2から10の間、好ましくは2から5の間であってもよい。本発明の好ましい変形実施形態によれば、親水性ポリマーおよび生物活性分子の2つの層が生体適合性支持体上に塗布され、第1の層支持体と第2の層との間に設置されるは、細胞成長因子、例えばEC中のVEGFを含み、第2の外側の層は、抗血栓剤、例えばHPMC中のヘパリンを含むが、これは好ましい変形例であり、これらの2つの機能化層の積層は、逆であってもよいすなわち、第1の層がHPMC中のVEGFを含み、第2の層がEC中のヘパリンを含む。有利には、本発明の半透膜は、バイオ人工臓器内で生成される興味深い治療物質に対する非常に良好な透過特性、およびバイオ人工臓器内に含有される細胞の生存能力に必要な生物のための栄養物に対する良好な透過性を有する。同じく非常に有利には、細胞は、本発明による半透膜の表面に非常に弱く付着する。すなわち、本発明による機能化半透膜は、以下の特徴を有する。-機能化半透膜は、10000ダルトンから50000ダルトンの間、好ましくは10000ダルトンから30000ダルトンの間、最も好ましくは10000ダルトンから15000ダルトンの間のカットオフを有する。-機能化半透膜は、109pores/cm2から1011pores/cm2の細孔密度を有する。-機能化半透膜は、5μmから100μmの間、好ましくは10μmから60μmの間の厚さを有する。第1の実施形態によれば、親水性ポリマーおよび生物活性分子の層は、生体適合性支持体の両面を被覆してもよい。第2の好ましい実施形態において、親水性ポリマーおよび生物活性分子の層は、生体適合性支持体の2つの面のうち1つのみを被覆し、この実施形態によれば、親水性ポリマーおよび生物活性分子で被覆された生体適合性支持体の面は、バイオ人工臓器の外側に位置し、この臓器の移植部位の周囲の媒体と接触する面である。また、本発明の主題は、治療上有益な少なくとも1種の物質を生成する分泌細胞を封入するためのチャンバの製造のための、本発明による機能化膜の使用である。また、本発明の主題は、治療上有益な少なくとも1種の物質を生成する分泌細胞を封入するためのチャンバであって、その壁は、治療上有益な少なくとも1種の物質を生成する分泌細胞を含有することができる空間を画定する、上に定義されたような機能化半透膜からなることを特徴とするチャンバ、および、治療上有益な少なくとも1種の物質を生成する分泌細胞を封入するためのチャンバを備えるバイオ人工臓器であって、封入チャンバの壁は、上に定義されたような機能化半透膜からなることを特徴とするバイオ人工臓器である。バイオ人工臓器の製造のための本発明による半透膜の使用は、移植中の抗血栓剤の放出およびデバイスの周囲の血管の形成により移植性が向上される前記デバイスをもたらす。本発明による封入チャンバは、従来技術において説明されたバイオ人工臓器の構成チャンバの特徴を有し得る。バイオ人工臓器の一実施形態の制限されない例は、本発明による封入チャンバを備え、そのようなバイオ人工臓器は、図1上面図および図2断面図に示される。この具体的実施形態によれば、封入チャンバ1は、平行六面体形状を有し、親水性ポリマーおよび生物活性分子の層3が設置される生体適合性支持体2からなる、1つは頂部、1つは底部にある2つの機能化半透膜を備え、これらの2つの半透膜は、その外縁部41に沿って、およびその表面上の様々な点42に沿って溶接されている。2つの機能化膜は、治療上有益な少なくとも1種の物質を生成する細胞を含有する、封入チャンバのチャンバ5を画定する。チャンバは、有利には、内側マトリックス6でコーティングされている。封入チャンバの内側の高さは、細胞または分泌細胞の群の高さに相当し例えば膵島の場合、例えば、この高さは5μmから900μmの間である。膜の表面に位置する溶接点42は、封入チャンバの充填中の分泌細胞のより良好な分布を可能とし、特に、分泌細胞の凝集を回避することを可能にする。最後に、好ましい変形例によれば、バイオ人工臓器は、バイオ人工臓器を充填する、または空にすることを可能にする2つの可撓管7をさらに備え、これは、バイオ人工臓器が患者に移植される時に、外植を行うことなくバイオ人工臓器の内容物を交換する上で特に有利である。治療上有益な少なくとも1種の物質を生成する細胞は、例えば、封入チャンバがバイオ人工膵臓の製造用に意図される場合、インスリンを生成する膵島もしくはランゲルハンス島の細胞、またはMIN-6、RIN-m5fおよびINS-1等の細胞株から得られたインスリン細胞であってもよい。また、細胞は、封入チャンバがバイオ人工肝臓の製造用に意図される場合、肝細胞であってもよい。具体的実施形態において、細胞は、治療上有益な物質の発現を可能とする少なくとも1種の核酸でトランスフェクトまたは形質転換される。治療上有益な物質のうち、例示を目的として、インスリン、サイトカイン、ペプチドホルモン、成長ホルモンおよびカルシトニンを挙げることができる。一般に、治療上有益な物質という表現は、本発明の目的において、それを生成する細胞により放出または分泌され、宿主生物における標的細胞または標的分子に対して効果を示す物質、例えば神経伝達物質、ホルモン、成長因子またはサイトカイン等を意味するように理解される。分化初代細胞培養等の不死化細胞株を含む、非常に多様な細胞を使用することができる。細胞は、例えば、中胚葉の幹細胞の集団から誘導される筋細胞の前駆細胞であり、治療上有益な物質の発現を可能とする核酸で容易に形質転換され得る、筋芽細胞であってもよい。当業者により、例えば、WO94/02129、WO93/03768およびWO90/15863の番号で公開されているPCT出願が有利に参照され得る。また、細胞は、好ましくはヒト起源の膵臓のランゲルハンス島のβ細胞または肝細胞であってもよい。本発明による封入チャンバ内に含有される細胞は、適切な場合には、Matrigelの商品名で販売されているマトリックスとして、ラミニン、エンタクチンおよびヘパラン硫酸と組み合わせて、IV型コラーゲンマトリックス等のマトリックス中に組み込まれてもよい。本発明による封入チャンバ内に含有される細胞は、一般に、生存能力のある形態でのそれらの細胞の固定を可能とする任意の生成物または生成物の組合せで構成されるマトリックス中に組み込まれてもよい。別の態様によれば、本発明はまた、上に定義されたような少なくとも1つの封入チャンバを備えることを特徴とするバイオ人工臓器に関する。本発明によるバイオ人工臓器の特徴は、本質的に従来技術において知られている任意の種類のものであってもよい。本質的な特徴が細胞を封入するための少なくとも1つのチャンバを備えるという特徴である、本発明による機能化半透膜を備える本発明のバイオ人工臓器の調製に関して、当業者により、米国特許第5981211号、米国特許第4578191号、米国特許第5837234号、米国特許第6023009号、米国特許第5605835号および米国特許第4323457号が有利に参照され得る。本発明の具体的実施形態によれば、バイオ人工臓器は、ランゲルハンス島の細胞を含有するバイオ人工膵臓である。本発明の第2の具体的実施形態によれば、バイオ人工臓器は、肝細胞を含有する人工肝臓である。例示を目的として、本発明によるバイオ人工臓器は、腹腔内に、または腎被膜上に移植されてもよく、少なくとも5年間移植されたままであってもよく、必要に応じて、その内容物分泌細胞が交換されてもよい。[実施例1]半透膜の製造I.ヒドロキシプロピルメチルセルロースHPMCのみで被覆されたポリカーボネート製の支持体を備える膜対照膜I.A.HPMC溶液の調製処理の少なくとも前日に、0.2HPMCの濃度を得るために、2gのHPMCDowChemical社製E4Mを1lの注射用水に、または同等の比率で溶解することにより、以下の溶液を調製する。溶液を室温で一晩撹拌下磁気撹拌器に置く。I.B.ポリカーボネート支持体およびコーティングのプラズマ処理ポリカーボネートPokalonLonza社製製の支持体膜を、注射用水で事前に清浄化する。ポリカーボネート支持体膜の処理は、クリーンルームにおいてBransonプラズマ機で行い、以下の処理を適用する:Ar-50W-10分。このようにして処理されたポリカーボネート支持体膜を、すぐにHPMC溶液に浸漬し、次いで炉内で45°Cで乾燥させる。II.HPMC中のVEGFで機能化された本発明による膜II.AHPMCおよびVEGFの溶液の調製注射用水中0.1HPMC溶液1g/lを調製する。このHPMC溶液1mlを100mlのDPBSリン酸緩衝液中に希釈し、0.001のHPMC濃度を得る。10μgのVEGFを含有するバイアルに1mlのDPBSを添加することにより、10μg/mlすなわち10mg/lのVEGF溶液Tebu-bioSASの調製を行う。HPMC100部当たり25部のVEGFを含む溶液を調製するために、このVEGF溶液の全体すなわち1ml、したがって10μgのVEGFを含むを、4mlのHPMC溶液40μgのHPMCを含むと混合する。混合物を50mlのフラスコに導入し、VEGFについては0.2μg/ml、HPMCについては0.8μg/mlの最終濃度を得るために希釈する。同じ原理に従って、100/50および100/10のHPMC/VEGF比を有する溶液を調製する。II.Bプラズマ処理およびコーティングこれらのステップは、ポイントI.Bに記載のように行うが、ただし乾燥は室温で行う。III.エチルセルロースEC中のヘパリンにおいて100/25のEC/ヘパリン比で機能化された、本発明による膜III.A溶液の調製EC溶液を以下のように調製する。ECは、ペーストの形態Colorcon社製Surelease、25すなわち25mg/100mgで存在するが、これを注射用水中に1g/lに希釈し、すなわち250mg/lのECとする。10mg/lのECの溶液を得るために、この溶液を再び注射用水中に希釈する。市販のヘパリン溶液ヘパリンChoay25000IU、Sanofi-Aventis社製は、200mg/5mlのヘパリン濃度を有するが、10μg/mlのヘパリン濃度が得られるまで、これを注射用水中に希釈する。1mlのヘパリン溶液10μgのヘパリンを含有するを、4mlのEC溶液40μgのECを含有すると混合し、EC100部当たり25部のヘパリン比を有する溶液を得る。この溶液を50mlのフラスコに導入し、再び濃度をヘパリンについては0.2μg/ml、ECについては0.8μg/mlとするために希釈する。III.Bプラズマ処理およびコーティングこれらのステップは、ポイントI.Bに記載のように行うが、ただし乾燥は室温で行う。IV.EC中のヘパリンおよびHMPC中のVEGFで機能化された、本発明による膜IV.A溶液の調製EC中のヘパリンおよびHPMC中のVEGFの溶液を、それぞれポイントIII.AおよびII.Aで示された通りに調製する。IV.Bプラズマ処理およびコーティングポイントI.Bに記載のようにプラズマ処理を行う。以下の順番でコーティングを行う。-EC/ヘパリン溶液へのポリカーボネート支持体の浸漬、次いで室温での乾燥。-次いでHPMC/VEGF溶液へのヘパリンで機能化された支持体の浸漬、次いで室温での乾燥。V.シリコーン支持体を用いた本発明によるデバイスの調製シリコーン支持体を用いて、本発明によるデバイスを調製することができる。これらの支持体は、本発明による半透膜の補完的部分を構成する。シリコーン支持体Nusil社製を、以下の条件下で事前にプラズマ処理する:Ar-100W-7.5分次に、II部、III部およびIV部のプロトコルに記載のように機能化層の塗布を行うが、注射用水を蒸留水と置き換えることができる。[実施例2]半透膜の透過性の特性決定調製された膜のグルコースおよび免疫グロブリンIgGに対する透過性に関する試験を、以下のように行う。材料:透過性を試験しようとしている膜により隔てられた、頂部区画および底部区画からなる拡散チャンバ2つの区画間の不透過性はシールにより提供される、グルコースProlabo社製、NaClSigma社製、参照番号S3014、IgGSigma社製、参照番号I96640、蒸留水。溶液の調製-生理食塩水、1リットル当たり:NaCl9g蒸留水1l-グルコース溶液、1リットル当たり:グルコース4g生理食塩水1l-IgG溶液最終濃度5.75μg/ml、100ml当たり:ストックIgG10mg/ml575μl生理食塩水99.425mlプロトコル:3mlの生理食塩水を拡散チャンバの底部区画に導入し、透過性を試験しようとしている膜を、気泡の存在を回避しながら生理食塩水の上に設置する。3mlのグルコース溶液を頂部区画に導入し、拡散チャンバをパラフィルムで封止し、次いで37°Cでインキュベートする。グルコースの場合:拡散チャンバの頂部区画内に存在する溶液1mlを、穏やかに均質化した後に回収する。次いで、膜を取り外してペトリ皿内に置き、底部区画内の溶液1mlを、均質化した後に回収する。GlucoseRTUキットBioMerieux社製、参照番号61269を利用して、グルコースの酵素アッセイを行う。結果時間の関数としての底部区画内のグルコース含量として表現されるを、図3のグラフに示す。実施例1のポイントIにその調製が記載される最新の膜126.1および126.2に対する、本発明による機能化膜126.3、126.4および126.5のグルコースに対する透過性は、膜を機能化することを意図する処理が、グルコースに対する透過性を低減しないことを示している。IgGの場合:拡散チャンバの頂部区画内に存在する溶液1mlを、穏やかに均質化した後に回収する。次いで、膜を取り外してペトリ皿内に置き、1mlの蒸留水で洗浄する。洗浄水を保存する。底部区画内の溶液1mlを、均質化した後に回収する。Bradford法Bradford、1976およびWrightら、1996により、IgGのアッセイを行う。本発明による半透膜は、IgGに対して完全に不透過性であり、したがって、サイトカインおよびケモカインの封止チャンバの透過を有利に防止する。[実施例3]半透膜の移植試験実施例1に記載のように調製された膜を、健康なWistarラットの腹腔内に移植する。残りの実験部分において、膜を以下のように符号化する。-126.1および126.2:対照膜実施例1のI部に記載のように調製される、-126.3:VEGF/HPMC膜比:25/100、実施例1のII部に記載のように調製される、-126.4:ヘパリン/EC膜比:25/100、実施例1のIII部に記載のように調製される、-126.5:VEGF/HMPCヘパリン/EC膜両方の層に対して、比は25/100、膜は実施例1のIV部に記載のように調製される。230~250gの雄のWistarラットを、ガスイソフルランで麻酔する。左腸骨窩において3cmの開腹を行うと、膜を移植することができる。次いで、切開部を閉鎖する。次いで、ラットをケージ内に入れ、任意に食物および水を与える各膜を3匹のラットに移植する。1週間後、ラットをImalgene/Rumpun混合物で麻酔し、膜およびその周囲の腹膜組織を回収するために切開する。次いで、膜を2.5グルタルアルデヒド中に入れ、一方組織をPBS緩衝液中で調製された3パラホルムアルデヒド中で3時間固定する。回収した腹膜組織を、以下のプロトコルに従い、組織学的分析のためにパラフィン内に包埋する。I.サンプリングI.1.材料溶液-500mlの36ホルムアルデヒド参照番号:SIGMA-F8775-500mLのフラスコ1個。-500gの粉末パラホルムアルデヒド参照番号:SIGMA-30525-89-4のフラスコ1個、冷蔵庫内で保存する必要がある。-10mlの25グルタルアルデヒド参照番号:SIGMA-G5882-10×10mLのフラスコ1個。-500mLのPBS参照番号:GIBCO-14190-094のフラスコ1個。-500mLのPBS×10参照番号:GIBCO-14200-067のフラスコ1個。I.2.溶液の調製使用される生成物の毒性のため、安全キャビネット内でグローブを着用して以下のステップを行う。I.2.1.3のホルムアルデヒド溶液ホルムアルデヒドは、回収の間最大4時間の膜の周囲の組織の保存を可能とし、またエオシン/ヘマトキシン染色にも使用される。-100mLのフラスコ内に、100mLのPBSを入れる。-8.3mlの36ホルムアルデヒドを添加する。-混合する。I.2.2.8のパラホルムアルデヒド溶液ホルムアルデヒド溶液の代わりに、4のパラホルムアルデヒド溶液を使用することができ、パラホルムアルデヒド溶液は、24時間までの組織の固定を可能とし、また免疫細胞化学的染色に使用される。-2mLから3mLの蒸留水中に水酸化ナトリウムペレット1個を溶解することにより、アルカリ溶液を調製する。-100mLの蒸留水中の懸濁液として8gのパラホルムアルデヒドを添加する。-安全キャビネット内で、加熱磁気撹拌器上で懸濁液を加熱する。-懸濁液が沸騰してきたら約80°C、混合物が完全に透明となるまでアルカリ溶液を数滴添加する。-氷で急冷する。この溶液は、速やかに使用するか、すぐに使用可能な20mLずつの分量で-20°Cで保存する必要がある。PBSでの希釈により4パラホルムアルデヒド溶液を調製する20mlの8パラホルムアルデヒド溶液を20mlのPBSに導入し、次いで混合する。I.2.3.2.5のグルタルアルデヒド溶液-100mLのフラスコ内に、100mLの蒸留水を入れる。-10mLの25グルタルアルデヒドを添加する。グルタルアルデヒドにより、回収した膜を保存することができる。II.パラフィンへの組込みII.1.材料-500mLのPBS参照番号:GIBCO-14190-094のフラスコ1個。-500mLのPBS×10参照番号:GIBCO-14200-067のフラスコ1個。-1Lのトルエン参照番号:FISHERSCIENTIFIC-コード:T/2250/17の瓶1個、トルエンは非常に毒性であり揮発性であるため、安全キャビネット内で保存および取扱う必要がある。-1Lの70エタノールの瓶1個。-1Lの95エタノールの瓶1個。-1Lの100エタノールの瓶1個。-パラフィン参照番号:TYCO/HEALTHCARE-参照番号:8889501006。-組込み用標準カセットHISTOSETTE2参照番号:M.492、参照番号039753またはM.485、参照番号039775、Dutscher社カタログ1個。-組込み用の皿1個、37×24mm参照番号:RICHARDALLANSCIENTIFIC-カタログ番号58953-50mLのビーカー3個。-600mLのビーカー2個。-鉗子1組。-アルミニウム。-ゴム手袋。II.2.溶液II.2.1.PBS-空のPBSフラスコ500mLに、50mLのPBS×10を入れる。-450mLの蒸留水で調節する。-混合する。II.2.2.70のエタノール-1Lの瓶に、700mLのエタノールを入れる。-300mLの蒸留水で調節する。-混合する。II.2.3.95のエタノール-1Lの瓶に、950mLのエタノールを入れる。-50mlの蒸留水で調節する。-混合する。II.2.4.パラフィン-2個の600mLのビーカーに、パラフィンペレットを流し込む。-組織学室で、2個のビーカーを炉内に62°C~65°Cで設置する。-ビーカーを炉内に維持する。II.3.作業場の準備作業台上に、溶液を含む9個の容器を、以下の順番に置く:PBS容器2個およびエタノール容器7個。化学安全キャビネット内に50mLのトルエンのビーカー3個を置き、炉内にパラフィン容器3個を置く。II.4.浴回収した組織を、以下のステップに従って処理する。II.5.パラフィンへの組織の組込み-組込み用の皿に、液体パラフィンを流し込む。-組み込む組織を皿に入れる。-組込み用カセットを置き、その上にパラフィンを流して均一な被覆を形成する。-室温で数分冷却し、次いで冷蔵庫内に最低24時間置く。III.切片の調製III.1.材料-組込み用カセット-ミクロトーム-Permafrostスライド75×25mm参照番号:045796、Dutscher社カタログ。-使い捨て移植用ピペット1個-蒸留水を含有する容器1個-刷毛2個:大型刷毛1個小型刷毛1個-切片採取用ツール2個-スライド加熱器-1Lの95エタノールの瓶1個-1Lの100エタノールの瓶1個-トルエンの瓶1個参照番号:FISHERSCIENTIFIC-コード:T/2250/7-Hellendahl型染色槽5個-ゴム手袋。III.3.ミクロトーム切片LeicaRM2265ミクロトームを利用して、製造者の推奨に従い切片を形成した。III.4.パラフィン除去このステップにより、組織を保存しながらスライド上に存在するパラフィンを除去することができ、スライドは、以下の浴で処理する。IV.染色IV.1.材料-Permafrostスライド76×26mm、固定切片あり。-1Lのエオシンの瓶1個。-1Lのアルコール-酸の瓶1個。-1Lのアンモニア水の瓶1個。-ハリスヘマトキシリン参照番号:SURGIPATH-01562Σのフラスコ1個。-500mLの100エタノールの瓶1個。-トルエン浴1個。-接着剤参照番号:EUKITT1個。-カバーガラス25×75mm参照番号:ESCONo.2951。-蓋付きの槽13個参照番号:068506、Dutscher社カタログ187頁。-バスケット2個参照番号:068507、Dutscher社カタログ187頁。-吸収紙。-ゴム手袋。-コーヒーフィルタ1個。IV.2.溶液の調製IV.2.1.エオシン溶液1l1Lの瓶に、以下を入れる。-エオシン225RA2:3.125g参照番号:REACTIFRAL-312730-0100、-エリスロシンRA2:1.875g参照番号:REACTIFRAL-312820-0100、-蒸留水:1L混合し、コーヒーフィルタを利用して濾過する。IV.2.2.アルコール-酸の溶液1l1Lの瓶に、以下を入れる。-96アルコール:990mL、-塩酸HCl:10mL参照番号:PROLABO-20.246.298グローブおよび安全メガネを着用して取り扱う必要があるIV.2.3.96エタノールの溶液1l-1Lの瓶に、960mLの純エタノールを入れる。-40mLの蒸留水で調節し、混合する。IV.2.4.0.20アンモニア水の溶液1l1Lの瓶に、以下を入れる。-20水酸化アンモニウム2.5mL参照番号:FISHERSCIENTIFIC-コード;A/3367/17-蒸留水:1L次いで混合する。IV.3.染色プロトコル以下の連続浴を使用して組織の染色を行う。-ハリスヘマトキシリンへの1分30秒間の浸漬、-2回の水浴、-2回から3回の、撹拌下でのアルコール-酸溶液への浸漬、-2回の水浴、-組織が青色になるまでの、アンモニア水への浸漬、-1回の水浴、-エオシンへの10秒間の浸漬、-1回のアンモニア水浴、-3回の連続的な96エタノール浴、-最終的なトルエン浴水浴およびエタノール浴は、2~3回の急速撹拌からなる。浴の後、-損傷しないように注意しながら、組織に接着剤を塗布する。-カバーガラスを置き、いかなる気泡も除去するために十分に押す。-過剰の接着剤を大まかに除去する。-スライドをトルエン中に速やかに浸し、すぐに取り出す。-カバーガラスを動かさないよう注意しながら、吸収紙で拭き取る。-接着剤残渣の完全除去が達成されるまで、操作を2回から3回繰り返す。IV.4.各種溶液の役割ハリスヘマトキシリンにより、組織の好塩基性成分を赤紫色に染色することができる。アルコール-酸により、穏やかに脱染し、橙色の色合いを生成することができる。0.20NH4アンモニア水により、細胞核を紫色に染色することができる。エオシンにより、組織の好酸性成分を橙色-ピンク色に染色することができる。3回の96エタノール浴により、脱染を行うことができる。トルエン浴により、組織を固定し、過剰の染料を除去することができる。血管数の計測、その直径の測定、およびモジュールと第1の血管との間の距離の決定は、マイクロメータを利用して双眼レンズ下で行い、組織当たり3つの切片の割合で、各切片に対して5つの領域を計測する。V.結果膜の移植から7日後または1カ月後に調製された切片の画像は、図4および図5に複写されている。図6は、試験された様々な膜に対して、7日後、14日後または1ヵ月後に切片の5つの領域において計測された血管の数の平均を表す。図7は、試験された様々な膜に対して、7日後または1ヵ月後に切片の5つの領域において計測された半透膜と第1の血管との間の平均距離を表す。図8は、試験された様々な膜に対して、7日後または1ヵ月後に切片の5つの領域において測定された血管の平均直径を表す。これらの試験は、VEGFが血管の長期形成を誘導することを示している。ヘパリンはまた、血管新生誘導効果を示す。これらの2種の化合物が相乗効果を有することが分かるのが興味深い。