"生物活性の検出方法であって、1つ以上の既定の生物活性の発生源を含み得るサンプルと、第1の吸光度スペクトルを有する第1の指示試薬を含む、第1の指示薬システムであって、第1の既定の生物活性によって、前記第1の指示試薬を、第1の生物学的誘導体に変換させることができる、第1の指示薬システムと、既定の生物活性によって、第2の発光スペクトルを有する第2の生物学的誘導体に変換される第2の指示試薬を含む、第2の指示薬システムと、水性混合物から前記第1の指示試薬を受容及び濃縮する基材と、を提供する工程と、前記サンプル、前記第1の指示試薬、及び前記第2の指示試薬を含む、第1の水性混合物を形成する工程と、前記第1の水性混合物を前記基材と流体連通させて、前記第1の指示試薬の濃度が、前記第1の水性混合物中の前記第1の指示試薬の濃度よりも低い、第2の水性混合物を形成する工程と、前記第2の生物学的誘導体からの蛍光の有無を検出する工程と、を含み、前記第1の吸光度スペクトルが、前記第2の発光スペクトル内に存在する波長の少なくとも一部分内に、検出可能な吸光度を含む、生物活性の検出方法。前記第2の生物学的誘導体からの蛍光の前記有無を検出する工程が、前記第2の水性混合物中の蛍光の前記有無を検出することを含む、請求項1に記載の方法。前記基材を観察して、前記第1の指示試薬又は前記第1の生物学的誘導体を検出する工程を更に含む、請求項1又は請求項2に記載の方法。前記第1の水性混合物中の前記第1の指示試薬の濃度が、通常であれば検出可能な量の前記第2の生物学的誘導体の検出を、阻止するために十分なものである、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。滅菌剤に前記生物活性を晒す工程を更に含む、請求項1~4のいずれか一項に記載の方法。一定の期間、前記生物活性を温度シフトに晒す工程を更に含む、請求項1~5のいずれか一項に記載の方法。前記第1の指示試薬が、発色団を含み、前記第1の生物学的誘導体を検出する工程が、色を検出することを含む、請求項1~6のいずれか一項に記載の方法。前記第2の指示試薬が、蛍光発生化合物を含む、請求項1~7のいずれか一項に記載の方法。前記第2の生物学的誘導体の前記有無を検出する工程が、前記第2の生物学的誘導体の量を測定することを更に含む、請求項1~8のいずれか一項に記載の方法。前記第1の生物学的誘導体の前記有無を検出する工程が、前記第1の生物学的誘導体の量を測定することを更に含む、請求項1~9のいずれか一項に記載の方法。前記第1の指示試薬又は前記第2の生物学的誘導体を検出する、計器を提供する工程と、前記計器を使用して、前記第1の指示試薬又は前記第2の生物学的誘導体を検出する工程と、を更に含む、請求項1~10のいずれか一項に記載の方法。前記第1の指示試薬及び前記第2の生物学的誘導体を検出する、計器を提供する工程と、前記計器を使用して、前記第1の指示試薬及び前記第2の生物学的誘導体を検出する工程と、を更に含む、請求項1~11のいずれか一項に記載の方法。生物活性の検出方法であって、第1チャンバ及び第2チャンバを含む、ハウジングと、第1の水性液体を収容する容器であって、前記容器は、前記第1チャンバ内に配置され、前記容器の少なくとも一部分が壊れやすく、前記液体が、第1の吸光度スペクトルを有する第1の指示試薬を含む、第1の指示薬システムと、第2の既定の生物活性によって、第2の発光スペクトルを有する第2の生物学的誘導体に変換される第2の指示試薬を含む、第2の指示薬システムとを含み、第1の既定の生物活性によって、前記第1の指示試薬を、第1の生物学的誘導体に変換させることができ、前記第1の吸光度スペクトルが、前記第2の発光スペクトルの波長の少なくとも一部分内に、検出可能な吸光度を含む、容器と、前記第2チャンバ内に配置される、前記第2の既定の生物活性の発生源と、前記第1の水性液体から前記第1の指示試薬を受容及び濃縮する基材であって、前記ハウジング内に配置される、基材と、を含む、生物学的滅菌インジケーターを提供する工程と、前記第1の水性液体を前記基材と流体連通させて、前記第1の指示試薬の濃度が、前記第1の水性液体中の前記第1の指示試薬の濃度よりも低い、第2の水性液体を形成する工程と、前記第2の水性混合物中の前記第2の生物学的誘導体からの蛍光の有無を検出する工程と、を含む、生物活性の検出方法。前記生物学的滅菌インジケーターの前記ハウジングが、第1部分と、前記第1部分に結合するように適合される、第2部分と、を含み、前記第2部分が、前記第1部分に結合される場合、前記第1部分に対して、第1の位置と第2の位置との間で移動可能であり、前記ハウジングの前記第2部分を、前記第1の位置から前記第2の位置に移動させる工程を更に含む、請求項13に記載の方法。既定の生物活性を検出するためのシステムであって、第1の吸光度スペクトルを有する第1の指示試薬を含む、第1の指示薬システムであって、第1の既定の生物活性によって、前記第1の指示試薬を、第1の生物学的誘導体に変換させることができる、第1の指示薬システムと、既定の生物活性によって、第2の発光スペクトルを有する第2の生物学的誘導体に変換される第2の指示試薬を含む、第2の指示薬システムと、液体媒質を保持するように構成される槽と、水性混合物から前記第1の指示試薬を受容及び濃縮する基材と、前記槽を受容して、前記第1の指示試薬又は前記第2の生物学的誘導体を検出するように構成される計器と、を含み、前記第1の吸光度スペクトルが、前記第2の発光スペクトル内に存在する波長の少なくとも一部分内に、検出可能な吸光度を含む、既定の生物活性を検出するためのシステム。本開示は、全般的には、サンプル中の生物活性を検出するための方法に関する。本発明の方法は、少なくとも2種の例えば、第1及び第2の指示試薬で生物活性を検出するための手段を提供する。本方法は、反応混合物中の、第2の指示試薬の生物学的誘導体の、迅速で敏感な検出を提供し、この反応混合物には、初期には、その生物学的誘導体の検出を妨害するために十分高い濃度の、第1の指示試薬が含まれる。一態様では、本開示は、生物活性の検出方法を提供する。本方法は、1つ以上の既定の生物活性の発生源を含み得るサンプルと、第1の吸光度スペクトルを有する第1の指示試薬を含む、第1の指示薬システムと、第2の既定の生物活性によって、第2の発光スペクトルを有する第2の生物学的誘導体に変換される第2の指示試薬を含む、第2の指示薬システムと、水性混合物から第1の指示試薬を受容及び濃縮する基材とを、提供する工程を含み得る。第1の指示試薬は、第1の既定の生物活性によって、第1の生物学的誘導体に変換させることができる。第1の吸光度スペクトルは、第2の発光スペクトル内に存在する波長の少なくとも一部分内に、検出可能な吸光度を含み得る。本方法は、このサンプル、第1の指示試薬、及び第2の指示試薬を含む、第1の水性混合物を形成する工程を更に含み得る。本方法は、第1の水性混合物を基材と流体連通させて、第1の指示試薬の濃度が、その第1の水性混合物中の第1の指示試薬の濃度よりも低い、第2の水性混合物を形成する工程を更に含み得る。本方法は、第2の生物学的誘導体からの蛍光の有無を検出する工程を更に含み得る。一部の実施形態では、第2の生物学的誘導体からの蛍光の有無を検出する工程は、第2の水性混合物中の蛍光の有無を検出することを含み得る。一部の実施形態では、本方法は、基材を観察して、第1の指示試薬又は第1の生物学的誘導体を検出する工程を更に含み得る。上記のいずれかの実施形態において、第1の水性混合物中の第1の指示試薬の濃度は、通常であれば検出可能な量の第2の生物学的誘導体の検出を、阻止するために十分なものとすることができる。上記のいずれかの実施形態において、本方法は、生体細胞の増殖を促進するための栄養素を提供する工程を更に含み得、第1の水性混合物を形成する工程は、その栄養素を含む混合物を形成することを含む。上記のいずれかの実施形態において、本方法は、滅菌剤に生物活性を晒す工程を更に含み得る。滅菌剤は、蒸気、エチレンオキシド、過酸化水素、ホルムアルデヒド、及びオゾンからなる群から選択することができる。上記のいずれかの実施形態において、第1の指示試薬は、発色団を含み得、第1の試薬の生物学的誘導体を検出する工程は、色を検出することを含む。上記のいずれかの実施形態において、第1の指示試薬は、発色性指示薬を含み得る。上記のいずれかの実施形態において、第1の指示試薬は、pH指示薬又は酵素基質を含み得る。一部の実施形態では、第1の指示試薬は、ブロモクレゾールパープルを含み得る。上記のいずれかの実施形態において、第2の指示試薬は、蛍光発生化合物を含み得る。蛍光発生化合物は、蛍光発生酵素基質を含み得る。上記のいずれかの実施形態において、第2の生物学的誘導体の有無を検出する工程は、第2の生物学的誘導体の量を測定することを更に含み得る。上記のいずれかの実施形態において、第1の生物学的誘導体の有無を検出する工程は、第1の生物学的誘導体の量を測定することを更に含み得る。上記のいずれかの実施形態において、本方法は、第1の指示試薬、又は第2の指示試薬の生物学的誘導体を検出する、計器を提供する工程と、その計器を使用して、第1の指示試薬、又は第2の指示試薬の生物学的誘導体を検出する工程とを、更に含み得る。一部の実施形態では、本方法は、第1の指示試薬又は第2の生物学的誘導体を検出する、計器を提供する工程と、その計器を使用して、第1の指示試薬又は第2の生物学的誘導体を検出する工程とを、更に含み得る。一部の実施形態では、本方法は、第1の指示試薬及び第2の生物学的誘導体を検出する、計器を提供する工程と、その計器を使用して、第1の指示試薬及び第2の生物学的誘導体を検出する工程とを、更に含み得る。別の態様では、本開示は、生物活性の検出方法を提供する。本方法は、ハウジング、容器、第2の既定の生物活性の発生源、及び基材を提供する工程を含み得る。ハウジングは、第1チャンバ及び第2チャンバを含み得る。容器は、第1の水性液体を収容することができる。容器は、第1チャンバ内に配置することができる。容器の少なくとも一部分は、壊れやすくすることができる。第1の水性液体は、第1の吸光度スペクトルを有する第1の指示試薬を含む、第1の指示薬システムと、既定の生物活性によって、第2の発光スペクトルを有する第2の生物学的誘導体に変換される第2の指示試薬を含む、第2の指示薬システムとを含み得、第1の吸光度スペクトルは、第2の発光スペクトル内に存在する波長の少なくとも一部分内に、検出可能な吸光度を含む。第1の指示試薬は、第1の既定の生物活性によって、第1の生物学的誘導体に変換させることができる。既定の生物活性の発生源は、第2チャンバ内に配置することができる。基材は、ハウジング内に配置することができ、第1の水性液体から第1の指示試薬を受容及び濃縮することができる。本方法は、第1の水性混合物を基材と流体連通させて、第1の指示試薬の濃度が、その第1の水性混合物中の第1の指示試薬の濃度よりも低い、第2の水性混合物を形成する工程を更に含み得る。本方法は、第2の生物学的誘導体からの蛍光の有無を検出する工程を更に含み得る。一部の実施形態では、第2の生物学的誘導体からの蛍光の有無を検出する工程は、第2の水性混合物中の蛍光の有無を検出することを含み得る。一部の実施形態では、第1の水性混合物を基材と流体連通させて、第2の水性液体を形成する工程は、壊れやすい容器の少なくとも一部分を断裂させることを含み得る。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーターは、ハウジング内に配置される破砕装置を更に含み得、壊れやすい容器を断裂させることは、容器及び破砕装置を互いに対して押し付けることを含む。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーターのハウジングは、第1部分及び第2部分を含み得る。第2部分は、第1部分に結合するように適合させることができ、この第2部分は、第1部分に結合される場合、第1部分に対して、第1の位置と第2の位置との間で移動可能である。本方法は、ハウジングの第2部分を、第1の位置から第2の位置に移動させる工程を更に含み得る。別の態様では、本開示は、既定の生物活性を検出するためのシステムを提供する。本システムは、第1の吸光度スペクトルを有する第1の指示試薬を含む、第1の指示薬システムと、既定の生物活性によって、第2の発光スペクトルを有する第2の生物学的誘導体に変換される第2の指示試薬を含む、第2の指示薬システムと、液体媒質を保持するように構成される槽と、水性混合物から第1の指示試薬を受容及び濃縮する基材と、槽を受容して、第1の指示試薬、又は第2の指示試薬の生物学的誘導体を検出するように構成される計器とを含み得る。第1の指示試薬は、第1の既定の生物活性によって、第1の生物学的誘導体に変換させることができる。第1の吸光度スペクトルは、第2の発光スペクトル内に存在する波長の少なくとも一部分内に、検出可能な吸光度を含む。一部の実施形態では、計器は、第1の生物学的誘導体を検出するように構成することができる。一部の実施形態では、本システムは、プロセッサを更に含み得る。本システムの上記のいずれかの実施形態において、計器は、液体媒質の温度を調節するように、更に構成することができる。本システムの上記のいずれかの実施形態において、計器は、第1の指示試薬及び第2の生物学的誘導体の双方を検出するように構成することができる。用語好ましい及び好ましくはとは、特定の状況下で、特定の利益をもたらすことができる、本発明の実施形態を指す。しかしながら、他の実施形態もまた、同じ状況又は他の状況下で、好ましい場合がある。更には、1つ以上の好ましい実施形態の詳細説明は、他の実施形態が有用ではないことを意味するものではなく、本発明の範囲から他の実施形態を排除することを意図するものではない。用語含む及びその変化形は、これらの用語が、本説明及び特許請求の範囲に現れる場合、限定する意味を有するものではない。本明細書で使用するとき、1つの、その、少なくとも1つの、及び1つ以上のは、互換的に使用される。それゆえ、例えば、1つの基材とは、1つ以上の基材を意味するように、解釈することができる。用語及び/又はとは、列記される要素のうちの1つ若しくは全て、又は列記される要素のうちの任意の2つ以上の組み合わせを意味する。生物活性とは、本明細書で使用するとき、生体細胞に関連する、いずれかの特定の触媒プロセス、又はプロセス群を指す。生物活性の非限定的な例としては、分解酵素活性例えば、炭水化物発酵経路、同化酵素活性例えば、核酸、アミノ酸、又はタンパク質に関する合成経路、共役反応例えば、代謝経路、生体分子媒介レドックス反応例えば、電子伝達系、及び生物発光反応が挙げられる。既定の生物活性とは、本方法が、特定の生物学的プロセス例えば、酵素反応、又は生物学的プロセス群例えば、生化学的経路の検出に向けて進められることを意味する。特定の既定の生物活性を、特定のタイプの細胞例えば、癌細胞又は微生物、又は病理学的プロセスに関連付けることができる点が、当業者には理解されるであろう。生物学的誘導体とは、本明細書で使用するとき、生物活性の生成物を指す。この生成物としては、例えば、酵素反応の生成物、及び生物学的電子伝達系の生成物が挙げられる。生体分子とは、本明細書で使用するとき、生存生物内で天然に存在する、いずれかの化学化合物、並びにそのような天然に存在する化合物の、誘導体又は断片とすることができる。生体分子は、窒素、酸素、リン、及びイオウと共に、主として炭素及び水素からなる。他の元素が組み込まれる場合もあるが、極めて稀である。生体分子としては、タンパク質、ポリペプチド、炭水化物、多糖類、脂質、脂肪酸、ステロイド、プロスタグランジン、プロスタサイクリン、ビタミン、補助因子、サイトカイン、及び核酸DNA、RNA、ヌクレオシド、ヌクレオチド、プリン、及びピリミジンが挙げられる、例えば抗生物質及び毒素を含めた、生存生物によって作り出される代謝産物が挙げられるが、これらに限定されない。生体分子としてはまた、化学物質で修飾例えば、過ヨウ素酸ナトリウムで酸化されているタンパク質又は抗体などの、天然に存在する化合物の誘導体を挙げることもできる。生体分子としてはまた、架橋された天然に存在する生体分子、すなわち天然に存在する生体分子の、化学物質で架橋された生成物を挙げることもできる。それゆえ、生体分子としては、非修飾分子及び修飾分子例えば、グリコシル化されたタンパク質、酸化された抗体の双方、並びにそれらの断片例えば、タンパク質断片が挙げられるが、これらに限定されない。生体分子の断片としては、例えば、化学処理、酵素処理、又は照射処理による、加水分解から生じるものを挙げることができる。また本明細書では、終端点による数値範囲の詳細説明は、その範囲内に含まれる全ての数を包含する例えば、1~5は、1、1.5、2、2.75、3、3.80、4、5などを包含する。上記の本発明の課題を解決するための手段は、開示される実施形態のそれぞれ、又は本発明のあらゆる実装を説明することを意図するものではない。以下の説明により、例示的実施形態を、より具体的に例示する。本出願の全体にわたる幾つかの箇所で、実施例のリストを通じて指針が提供され、それらの実施例は、様々な組み合わせで使用することができる。いずれの場合でも、記載されるリストは、代表的な群としての役割のみを果たすものであり、排他的なリストとして解釈するべきではない。本開示は、生物活性を検出するための迅速法に関する。本方法は、2種以上の指示試薬の使用を含む。本方法は、第1の指示試薬及び第2の指示試薬を含む、液体混合物を提供する工程を含み、第1の指示試薬は、通常であれば検出可能な量の、第2の指示試薬の生物学的誘導体の検出例えば、光学検出を、妨害するために十分な濃度で、混合物中に存在する。本発明の方法は、第2の指示試薬の生物学的誘導体の検出を促進するために、液体混合物のバルクから、妨害量の第1の指示試薬の少なくとも一部分を隔離することによって、生物活性の迅速で敏感な検出を提供する。本方法は、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体を、より容易に観察するための手段を更に提供する。本発明の方法は、生物活性の自動検出に関するシステム内で、使用することができる。本発明のシステム及び/又は本開示の方法を使用して、生物活性例えば、酵素、細胞、又は微生物に関連する活性を検出することができる。一部の実施形態では、本発明のシステム及び/又は方法を使用して、例えば、プロセス例えば、消毒プロセス、食品又は飲料の調製プロセス、滅菌プロセスへの曝露を生き残った、特定のタイプの微生物例えば、栄養細胞又は芽胞に関連する、生物活性を検出することができる。本発明の方法は、サンプル中の生物活性の検出に関する。このサンプルは、本明細書で定義されるような生物活性を含む、いずれかのサンプルとすることができる。好適なサンプルの非限定的な例としては、細胞例えば、哺乳類細胞、昆虫細胞、酵母細胞、糸状菌、細菌細胞の懸濁液若しくは培養液、環境サンプル例えば、表面のスワブ、食品例えば、原材料、プロセス中のサンプル、及び最終製品サンプル、飲料、臨床サンプル例えば、血液、尿、痰、組織、粘膜、糞便、創傷滲出液、膿、及び水例えば、地表水、飲料水、プロセス水が挙げられる。微生物例えば、細菌、真菌、ウイルスは、生物活性の発生源であり、生理液、例えば、血液、唾液、眼球レンズ液、滑液、脳脊髄液、膿、汗、滲出液、尿、粘液、分泌乳などのような、いずれかの発生源に由来し得る、試験サンプル中で分析することができる。更には、試験サンプルは、身体部位、例えば、創傷、皮膚、鼻孔、頭皮、爪などに由来し得る。具体的な対象のサンプルとしては、鼻サンプル例えば、前鼻孔、鼻咽頭腔、鼻腔、前部鼻前庭などからの、並びに外耳、中耳、口腔、直腸、膣、又は他の同様の組織からのサンプルなどの、粘液含有サンプルが挙げられる。特定の粘膜組織の例としては、頬粘膜、歯肉粘膜、鼻粘膜、眼粘膜、気管粘膜、気管支粘膜、胃腸粘膜、直腸粘膜、尿道粘膜、尿管粘膜、膣粘膜、子宮頸部粘膜、及び子宮粘膜が挙げられる。生理液以外に、他の試験サンプルとしては、液体媒質中に溶解される固体、並びに他の液体を挙げることができる。対象のサンプルとしては、プロセス流、水、土壌、草木又は他の植物、空気、表面例えば、汚染表面などを挙げることができる。サンプルとしてはまた、培養細胞を挙げることもできる。サンプルとしてはまた、細胞、芽胞、又は酵素を含むデバイス例えば、生物学的インジケーターデバイス上、若しくはデバイス内のサンプルを挙げることもできる。固体サンプルは、崩壊させることができ例えば、混合、音波破砕、均質化によって、液体例えば、水、緩衝剤、ブロス中に懸濁させることができる。一部の実施形態では、サンプル材料を含むサンプル採取デバイス例えば、スワブ、スポンジを、本方法で使用することができる。あるいは、サンプル材料を本方法で使用する前に、サンプル採取デバイスから、そのサンプル材料を溶離させる例えば、すすぐ、擦り落とす、搾り出すことができる。一部の実施形態では、液体サンプル又は固体サンプルは、液体例えば、水、緩衝剤、ブロス中に希釈することができる。好適なサンプルはまた、滅菌剤に晒された、液体サンプル及び/又は固体サンプルである。これらのサンプルの非限定的な例としては、芽胞懸濁液、芽胞ストリップ、及び芽胞若しくは栄養型微生物細胞の懸濁液が塗布された様々な材料の試験片が挙げられる。好適なサンプルとしてはまた、細胞を含むか、又は従前に細胞を含んでいた、細胞懸濁培地例えば、培養ブロス、半固体細胞培養培地、及び組織培養培地、濾液も挙げられる。好適なサンプルとしてはまた、細胞溶解物も挙げられる。細胞溶解物は、化学的手段例えば、洗浄剤、酵素、機械的手段音波振盪、均質化、フレンチプレスによって、又は当該技術分野において既知の他の細胞溶解手段によって、作り出すことができる。図1A~1Cは、本開示による、液体媒質から、基材上、又は基材内に、指示試薬又はその生物学的誘導体を受容及び濃縮するプロセスを示す。図1Aは、基材30、及び有色指示試薬を含む液体混合物20を収容する槽10の上面斜視図を示す。図1Bは、液体混合物20中に、基材30を液浸させた直後の、図1Aの槽10の上面斜視図を示す。図1Cは、基材30が液体混合物20から有色指示試薬を受容及び濃縮することを可能にするために十分な期間の後の、図1Bの槽10の上面斜視図を示す。図1Cでは、液体混合物の色は、より強度が軽減されている一方で、基材30は、有色指示試薬を受容及び保持していることにより、その初期の無色状態から、有色状態に変化している点を認めることができる。一部の実施形態では、基材は、指示試薬又はその生物学的誘導体を、受動的に受容及び濃縮することができる例えば、試薬又は誘導体の、液体媒質を通じた単純な拡散によって。あるいは、又は更には図示せず、基材は、指示試薬及び/又は生物学的誘導体を能動的に受容及び濃縮することができる例えば、混合若しくは混転を介して、液体に対して基材を移動させることができ、かつ/又は、基材の主表面に対する、概して横方向、接線方向、若しくは垂直方向の流体の流れを介して、基材に対して液体媒質を移動させることができる。指示試薬先行技術は、既定の生物活性を検出するための方法で使用されている、既知の、市販の、多様な起源の色覚性及び蛍光発生酵素基質を数多く含み、それらの酵素基質は、本開示による第1の指示試薬又は第2の指示試薬としての使用に関して好適である。これらの中には、様々な蛍光発生4-メチルウンベリフェリル誘導体4-メチルウンベリフェロンに加水分解性;例えば、それぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、英国特許第1,547,747号、及び欧州特許第0,000,063号で開示されるような、7-アミド-4-メチル-クマリンの誘導体;ジアセチルフルオレセイン誘導体;及びフルオレスカミンがある。本開示による第1の指示試薬は、第1の吸収スペクトルを有する試薬を含み、それゆえ、その指示試薬は、電磁スペクトルの、紫外線波長及び/又は可視波長での光を吸収する。一部の実施形態では、第1の指示試薬は、指示薬染料例えば、pH指示薬染料、レドックス染料とすることができる。いずれかの所定の生物活性を検出するために使用される、特定の指示薬染料は、例えば、検出される生物活性との適合性例えば、好ましくは非阻害性、溶解度、検出システム例えば、視覚的及び/又は自動的を含めた、当該技術分野において既知の評価基準に従って選択される。本方法のいずれかの実施形態において、指示薬染料は、生物活性を検出するために好適な、pH指示薬とすることができる。指示薬染料は、例えば、pHの範囲、生物活性との適合性、及び溶解度などの、当該技術分野において既知の評価基準に従って選択することができる。一部の実施形態では、塩形態のpH指示薬を使用して、例えば、水性混合物中での、そのpH指示薬の溶解度を増大させることができる。好適なpH指示薬染料の非限定的な例としては、例えば、チモールブルー、トロペオリンOO、メチルイエロー、メチルオレンジ、ブロモフェノールブルー、ブロモクレゾールグリーン、メチルレッド、ブロモチモールブルー、フェノールレッド、ニュートラルレッド、フェノールフタレイン、チモールフタレイン、アリザリンイエロー、トロペオリンO、ニトラミン、トリニトロ安息香酸、チモールブルー、ブロモフェノールブルー、テトラブロモフェノールブルー、ブロモクレゾールグリーン、ブロモクレゾールパープル、メチルレッド、ブロモチモールブルー、フェノールレッド、コンゴレッド、及びクレゾールレッドが挙げられる。本方法のいずれかの実施形態において、指示薬染料は、生物活性を検出するために好適な、酸化還元指示薬レドックス指示薬とも呼ばれるとすることができる。酸化還元指示薬染料は、pH依存性、又はpH非依存性とすることができる。酸化還元指示薬染料の非限定的な例としては、2,2’-ビピリジンRu錯体、ニトロフェナントロリンFe錯体、N-フェニルアントラニル酸、1,10-フェナントロリンFe錯体、N-エトキシクリソイジン、2,2’-ビピリジンFe錯体、5,6-ジメチルフェナントロリンFe錯体、o-ジアニシジン、ジフェニルアミンスルホン酸ナトリウム、ジフェニルベンジジン、ジフェニルアミン、ビオロゲン、2,6-ジブロモフェノールインドフェノールナトリウム、2,6-ジクロロフェノールインドフェノールナトリウム、o-クレゾールインドフェノールナトリウム、チオニンラウスバイオレットの異名、メチレンブルー、インジゴテトラスルホン酸、インジゴトリスルホン酸、インジゴジスルホン酸、インジゴモノスルホン酸、フェノサフラニン、サフラニンT、及びニュートラルレッドが挙げられる。一部の実施形態では、第1の指示試薬は、実施例4に示すように、スルホンフタレインpH指示薬例えば、ブロモクレゾールパープルとすることができる。スルホンフタレインpH指示薬例えば、ブロモクレゾールパープルは、水性混合物中に、1リットル当り約0.03gの濃度で存在し得る。スルホンフタレインpH指示薬は、基材例えば、荷電ナイロン基材、例えば、GEOsmonicsLabstoreMinnetonka,MNより入手可能な、MAGNAPROBE、0.45マイクロメートル荷電ナイロン膜、品番NP0HY00010などによって、受容及び濃縮することができる。この基材は、概して平面的なストリップ例えば、約3mm×約10mmであるストリップとして構成することができる。本開示による第2の指示試薬は、第2の生物学的誘導体に変換させることができる。第2の生物学的誘導体は、第2の吸収スペクトルを有する試薬を含む。更には、第2の生物学的誘導体は、特徴的な第2の発光スペクトル例えば、蛍光発光スペクトルを有する。一部の実施形態では、第2の生物学的誘導体は、電磁エネルギースペクトルの紫外部での波長を含む、特徴的な第2の吸収スペクトルを有する。第2の生物学的誘導体の第2の発光スペクトルは、電磁エネルギースペクトルの可視部での波長を含み得る。第2の指示試薬としての使用に関して好適な化合物は、蛍光発生化合物例えば、蛍光発生酵素基質を含む。蛍光発生酵素基質としては、4-メチルウンベリフェリル誘導体、7-アミド-4-メチルクマリン誘導体、及びジアセチルフルオレセイン誘導体が挙げられる。好適な4-メチルウンベリフェリル誘導体としては、例えば、4-メチルウンベリフェリル-2-アセタミド-4,6-O-ベンジリデン-2-デオキシ-β-D-グルコピラノシド;4-メチルウンベリフェリルアセテート;4-メチルウンベリフェリル-N-アセチル-β-D-ガラクトサミニド;4-メチルウンベリフェリル-N-アセチル-α-D-グルコサミニド;4-メチルウンベリフェリル-N-アセチル-β-D-グルコサミニド;2’-4-メチルウンベリフェリル-α-D-N-アセチルノイラミン酸;4-メチルウンベリフェリルα-L-アラビノフラノシド;4-メチルウンベリフェリルα-L-アラビノシド;4-メチルウンベリフェリルブチラート;4-メチルウンベリフェリルβ-D-セロビオシド;メチルウンベリフェリルβ-D-N,N’ジアセチルキトビオシド;4-メチルウンベリフェリルエライジンサン塩;4-メチルウンベリフェリルβ-D-フコシド;4-メチルウンベリフェリルα-L-フコシド;4-メチルウンベリフェリルβ-L-フコシド;4-メチルウンベリフェリルα-D-ガラクトシド;4-メチルウンベリフェリルβ-D-ガラクトシド;4-メチルウンベリフェリルa-D-グルコシド;4-メチルウンベリフェリルβ-D-グルコシド;4-メチルウンベリフェリルβ-D-グルクロニド;4-メチルウンベリフェリルp-グアニジノ安息香酸塩;4-メチルウンベリフェリルヘプタノエート;4-メチルウンベリフェリルα-D-マンノピラノシド;4-メチルウンベリフェリルβ-D-マンノピラノシド;4-メチルウンベリフェリルオレエート;4-メチルウンベリフェリルパルミテート;4-メチルウンベリフェリルホスフェート;4-メチルウンベリフェリルプロピオネート;4-メチルウンベリフェリルステアレート;4-メチルウンベリフェリルサルフェート;4-メチルウンベリフェリルβ-D-N,N’,N-トリアセチルキトトリオース;4-メチルウンベリフェリル2,3,5-トリ-o-ベンゾイル-α-L-アラビノフラノシド;4-メチルウンベリフェリル-p-トリメチルアンモニウムシンナメートクロリド;及び4-メチルウンベリフェリルβ-D-キシロシドが挙げられる。好適な7-アミド-4-メチルクマリン誘導体としては、例えば、L-アラニン-7-アミド-4-メチルクマリン;L-プロリン7-アミド-4-メチルクマリン;L-チロシン-7-アミド-4-メチルクマリン;L-ロイシン-7-アミド-4-メチルクマリン;L-フェニルアラニン-7-アミド-4-メチルクマリン;及び7-グルタミルフェニルアラニン-7-アミド-4-メチルクマリンが挙げられる。好適な7-アミド-4-メチルクマリンのペプチド誘導体としては、例えば、N-t-BOC-Ile-Glu-Gly-Arg7-アミド-4-メチルクマリン;N-t-BOC-Leu-Ser-Thr-Arg7-アミド-4-メチルクマリン;N-CBZ-Phe-Arg7-アミド-4-メチルクマリン;Pro-Phe-Arg7-アミド-4-メチルクマリン;N-t-BOC-Val-Pro-Arg7-アミド-4-メチルクマリン;及びN-グルタリル-Gly-Arg7-アミド-4-メチルクマリンが挙げられる。好適なジアセチルフルオレセイン誘導体としては、例えば、フルオレセインジアセテート、フルオレセインジ-β-D-ガラクトピラノシド、及びフルオレセインジラウレートが挙げられる。検出される生物活性が、例えばゲオバチルスステアロサーモフィルスからの、α-D-グルコシダーゼ、キモトリプシン、又は脂肪酸エステラーゼである場合には、好ましい蛍光発生酵素基質は、それぞれ、4-メチルウンベリフェリル-α-D-グルコシド、7-グルタミルフェニルアラニン-7-アミド4メチルクマリン、又は4-メチルウンベリフェリルヘプタノエートである。検出される生物活性が、例えばバチルスサブティリス由来の、α-L-アラビノフラノシダーゼである場合には、好ましい蛍光発生酵素基質は、4-メチルウンベリフェリル-α-L-アラビノフラノシドである。検出される生物活性が、例えばバチルスサブティリス由来の、β-D-グルコシダーゼである場合には、好ましい蛍光発生酵素基質は、4-メチルウンベリフェリル-β-D-グルコシドである。酵素を含む生物活性を検出する際に、本発明の方法を実施するためには、オペレーターは、検出される酵素活性と、酵素と反応することにより、蛍光、色などのいずれかによって検出することができる生成物を作り出す、酵素基質とに関して、知識豊富であるべきであるその全体が参照により本明細書に組み込まれる、M.Rothの、MethodsofBiochemicalAnalysisVol.7,D.Glock編,IntersciencePublishers,NewYork,NY,1969を参照。利用される適切な酵素基質は、検出される生物活性に応じて決定される。本開示の方法は、第1の吸収スペクトルを有する第1の指示試薬と、生物活性によって、第2の発光スペクトルを有する第2の生物学的誘導体に変換される、第2の指示試薬とを含み、第1の吸収スペクトルは、第2の発光スペクトルと、少なくとも部分的に重なり合う。それゆえ、第1の指示試薬及び第2の生物学的誘導体の双方が、液体混合物中に存在する場合、第1の指示試薬は、第2の指示試薬によって放出される光の少なくとも一部分を吸収することにより、第2の生物学的誘導体を検出する能力を減少させる可能性がある。本開示による、第1の指示試薬と第2の生物学的誘導体との関係性を、図面によって示すことができる。図2は、例示的な第1の指示試薬である、ブロモクレゾールパープル以降では、BCPと呼ばれるの吸光度スペクトルと、例示的な第2の指示試薬である、4-メチルウンベリフェリルβ-D-グルコシドの可能な生物学的誘導体、4-メチルウンベリフェロン以降では、4MUと呼ばれるの蛍光発光スペクトルとを示す。これらのスペクトルは、実施例1及び実施例2で説明されるように取得された。BCPの吸光度スペクトルを示す線Aは、約600nmの可視範囲での吸光度極大を示し、425~550nmの波長での、BCPによる比較的小さい吸光度を有する。このデータは、約600nmの可視波長での吸光度ピーク、及び<330nmの紫外線波長での吸光度ピークを示す。4MUの蛍光発光スペクトルを示す線Bは、約450nmで、発光極大を示し、375~425nm及び475~525nmの範囲で、比較的小さい発光を有する。図2では、BCPの吸光度スペクトルが、4MUの蛍光発光ピークの全体450nmを中心とすると実質的に重なり合うことを認めることができる。第1の指示試薬を含有する溶液による、いずれの特定波長の光の吸光量も、その溶液中の第1の指示試薬の濃度と、選択される波長での、その指示試薬のモル吸光係数とによって影響を受けることが、関連分野の当業者には理解されるであろう。第2の指示試薬の生物学的誘導体を含有する溶液による、いずれの特定波長の光の放出量も、その溶液中の第2の生物学的誘導体の濃度と、その生物学的誘導体の蛍光量子収率とによって影響を受けることもまた、当業者には理解されるであろう。それゆえ、液体混合物中の第1の指示試薬の濃度を、適切な基材と併せて選択して、iその基材が、液体混合物から、第1の指示薬基質を十分に除去することにより、第2の生物学的誘導体の、より敏感な検出を可能にし、ii第1の指示試薬又は、その生物学的誘導体が、その基材材料上で、より容易に検出されることを可能にすることができる。ブロモクレゾールパープルと4-メチルウンベリフェリル-α-D-グルコシドとの組み合わせは、それぞれ、本開示による、好適な第1の指示試薬及び第2の指示試薬の一実施例を表す。この組み合わせを使用して、例えば、炭水化物の酸最終生成物への発酵などの、第1の生物活性、及び-α-D-グルコシダーゼ酵素活性などの、第2の生物活性を検出することができる。これらの活性は、例えば、滅菌プロセスに生物学的滅菌インジケーターを晒した後の、生存芽胞の有無を示し得る。ブロモクレゾールパープルは、例えば、水性混合物中、約0.03g/Lの濃度で使用することができる。4-メチルウンベリフェリル-α-D-グルコシドは、例えば、水性混合物中、約0.05~約0.5g/L例えば、約0.05g/L、約0.06g/L、約0.07g/L、約0.08g/L、約0.09g/L、約0.1g/L、約0.15g/L、約0.2g/L、約0.25g/L、約0.3g/L、約0.35g/L、約0.4g/L、約0.45g/L、約0.5g/Lの濃度で使用することができる。それゆえ、本開示によれば、第1の指示試薬は、通常であれば検出可能な量の、第2の指示試薬の生物学的誘導体の検出を、妨害する恐れがある。いずれの提案される第1の指示試薬と第2の指示試薬との間のスペクトル干渉も、当業者が、以下の簡単な実験を行なうことによって、実証することができる。最初に、オペレーターは、提案される第2の指示試薬の、予期される生物学的誘導体の、比較的低濃度ではあるが、蛍光検出可能な水溶液を作製する。例えば、第2の指示試薬が、4-メチルウンベリフェリル化合物である場合には、予期される生物学的誘導体は4MUである。この溶液は、例えば、1ミリリットル当り、約0.05~0.2マイクログラムの4MUを含有し得る。次に、オペレーターは、有効量の、提案される第1の指示試薬を添加する。例えば、BCPが、提案される第1の指示試薬である場合には、BCPは、発酵性微生物の検出のための、微生物学的増殖培地中で使用される濃度例えば、1ミリリットル当り0.04ミリグラムで、添加することができる。BCPを有する4MU溶液の蛍光と、BCPを有さない4MU溶液の蛍光とを比較することによって、第1の指示試薬この実施例では、BCPが、第2の指示試薬の生物学的誘導体この場合は4MUの検出を妨害し得るか否かを判定することができる。次いで、オペレーターは、低減された量のBCPを4MU溶液に添加することによって、比較的低い濃度の4MUの検出が改善されるか否かを試験することができる。このタイプの実験は、第1の指示試薬と第2の指示試薬との任意の組み合わせを使用して、容易に行なうことができる。この手順の一実施例が、実施例3に示される。基材本開示による好適な基材は、指示試薬を受容及び濃縮するように構成される。指示試薬又はその生物学的誘導体を濃縮する、基材の能力は、当該技術分野において既知であり、かつ本明細書で論じられる、様々な力のうちの1つ以上によって、影響を受ける場合がある。それゆえ、当業者は、例えば、プラスに荷電することが既知である基材を選択して、マイナスに荷電することが既知である指示試薬又はその生物学的誘導体を濃縮することができる。反対に、当業者は、マイナスに荷電することが既知である基材を選択して、プラスに荷電することが既知である指示試薬又はその生物学的誘導体を濃縮することができる。当業者は、疎水性の特性を有することが既知である基材を選択して、疎水性基材によって保持される疎水性部分を含むことが既知である指示試薬又はその生物学的誘導体を濃縮することができる。更には、当業者は、候補の基材材料を、一定の期間、指示試薬又はその生物学的誘導体を含む液体と接触させ、その基材を分析して、検出可能量の指示試薬又はその誘導体が、基材上、又は基材内に蓄積するか否かを判定することによって、好適な基材材料を容易に選択することができる。基材材料は、指示試薬又はその生物学的誘導体の、既知の特性に従って選択することができる点が、当業者には明らかであろう。例えば、プラスに荷電する基材は、指示試薬の生物学的誘導体がマイナスに荷電する分子である場合の方法で使用するために、選択することができる。更には、マイナスに荷電する基材は、指示試薬の生物学的誘導体がプラスに荷電する分子である場合の方法で使用するために、選択することができる。あるいは、本発明の方法での、所定の第1の指示試薬と共に使用するための、いずれかの所定の基材材料の適合性は、以下の実験手法を使用して容易に判定することができる。好適な槽例えば、試験管内で、既定の生物活性の発生源例えば、炭水化物を酸性最終生成物に発酵させることが可能な微生物細胞を、第1の指示試薬例えば、pH指示薬と共に、生物活性を促進するように選択される液体媒質例えば、発酵性炭水化物を含むブロス培地に添加することができる。既定の生物活性を促進する条件下で、この液体媒質を、候補の基材材料と接触させることができ、媒質から基材を取り出して、過剰な液体を、任意選択的に、すすぎ及び/又は吸い取ることにより除去し、その基材材料が、液体媒質との接触の間に、第1の指示試薬及び/又はその生物学的誘導体を濃縮したか否かを判定するために、目視観察又は計器観察する例えば、分光反射率計又は蛍光計でことができる。図示の実施形態では、好適な基材/指示薬の組み合わせは、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体のいずれかが、接触期間の間に、その基材材料上、若しくは基材材料中に液体媒質から濃縮された証拠を示す。基材材料を有さない対照反応を実施して、混合物中の生物活性の存在を確認することができる。基材は、概して平面的なシート形状例えば、図1Aに示すような、膜のストリップに製作することができる。基材のサイズ及び/又は有効表面積もまた、指示試薬又はその生物学的誘導体を濃縮する、基材の能力に影響を及ぼし得る。基材に関する好ましい材料としては、多孔質材料例えば、織布材料、不織布材料、多孔性膜、微多孔性膜、濾紙が挙げられる。一部の実施形態では、特に好ましい基材材料としては、例えば、荷電ナイロン膜例えば、GEOsmonicsLabstoreMinnetonka,MNより入手可能な、MAGNAPROBE、0.45マイクロメートル荷電ナイロン膜、品番NP0HY00010などの、荷電膜が挙げられる。本開示で使用される基材は、様々な材料から製作することができる。その全体が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第6,562,297号は、pH指示薬の固定化のための膜を説明している。好適な基材材料の非限定的な例としては、例えば、天然材料例えば、セルロース、合成材料例えば、ナイロン、並びにそれらの組み合わせ及び/又は誘導体が挙げられる。生物活性の検出方法:図3は、本開示による、複数個の生物活性のうちの1つを検出するための方法の、一実施形態のブロック図を示す。本方法は、複数個の既定の生物活性のうちの1つを含み得るサンプルと、第1の指示試薬及び第2の指示試薬と、水性媒質から、第1の指示試薬、及び任意選択的にその生物学的誘導体を、受容並びに濃縮する基材とを提供する工程40を含む。一部の実施形態では、本方法は、消毒剤、抗生物質、又は滅菌剤に、生物活性を晒す、任意選択工程45を含み得る。この任意選択工程は、滅菌プロセスの有効性を判定するために、又は選択的集積培養プロセスの後の、既定の生物活性又は微生物を検出するために、含めることができる。滅菌剤に生物活性を晒す工程は、滅菌プロセスに生物活性を晒すことを含み得る。滅菌プロセスは、サンプルを、例えば、蒸気、乾性温熱、エチレンオキシド、ホルムアルデヒド、過酸化物、過酸化水素、過酢酸、オゾン、又はこれらの混合物例えば、オゾンと過酸化水素との混合物などの、滅菌剤に晒すことを含む。本方法は、サンプルと第1の指示試薬及び第2の指示試薬とを含む、第1の水性混合物を形成する工程50を含む。この第1の水性混合物は、水性媒質中で形成される。本方法での生物活性の発生源は、本明細書で説明されるような、1つ以上の生物活性を含むか、又は含む可能性がある、いずれかのサンプルとすることができる。水性媒質とは、本明細書で使用するとき、第1の指示試薬及び第2の指示試薬が、その中に溶解若しくは懸濁しているか、又は溶解若しくは懸濁することができる、水性液体を指す。好ましくは、この媒質は、検出される既定の生物活性の検出を、実質的に妨害しない。一部の実施形態では、水性媒質は、その媒質のpHを調整するための構成成分例えば、緩衝剤を含み得る。水性媒質は、1つ以上の生物活性の検出を促進するための、当該技術分野において既知の試薬例えば、洗浄剤、補助因子、細胞溶解剤を更に含み得る。一部の実施形態では、サンプルは水を含み、それゆえ、そのサンプル自体を、水性媒質と見なすことができる。いずれかの実施形態において、サンプルは、そのサンプルを第1の指示試薬及び第2の指示試薬と混合する前に、任意選択的に第2の液体例えば、水性媒質、希釈剤、緩衝剤、消毒剤を中和する溶液と混合することができる。一部の実施形態では、水性媒質は、その媒質をサンプルと混合する前に、第1の指示試薬及び/又は第2の指示試薬と組み合わせることができる。一部の実施形態では、第1の指示試薬及び第2の指示試薬、並びにサンプルを、水性媒質に連続的に添加して、第1の水性混合物を形成することができる。一部の実施形態では、第1の指示試薬及び第2の指示試薬を、水性媒質及びサンプルと、同時に組み合わせて、第1の水性混合物を形成することができる。いずれかの実施形態において、第1の指示試薬及び第2の指示試薬のいずれか若しくは双方は、その試薬が水性媒質及び/又はサンプルと組み合わされて、第1の水性混合物を形成する前に、最初は、乾燥試薬、液体、ゲル、又はフィルムの形態とすることができる。第1の指示試薬は、本明細書で説明される、いずれかの好適な試薬とすることができる。第1の指示試薬は、既定の生物活性を検出するように選択されるため、第1の指示試薬及びその生物学的誘導体の化学的性質は既知であり、それゆえ、好適な基材材料を、本明細書で説明されるように特定することができる。第2の指示試薬は、本明細書で説明される、いずれかの好適な試薬とすることができる。本方法のいずれかの実施形態において、第1の水性混合物を形成する工程は、栄養素を含む第1の水性混合物を形成することを含み得る。この栄養素は、標的の細胞又は微生物の増殖を促進するために提供することができ、例えば、栄養素の混合物として提供することができる。微生物の増殖を促進するための栄養素及び栄養培地は、当該技術分野において既知であり、例えば、CRCPressBocaRaton,FLによる出版の、RonaldAtlasによるHandbookofMicrobiologicalMediaに見出すことができる。Matnerら米国特許第5,073,488号は、生物学的滅菌インジケーター内の細菌の芽胞の増殖及び検出のための、栄養培地を説明している。真核細胞例えば、哺乳類細胞、昆虫細胞の増殖を促進するための栄養素及び栄養培地もまた、当該技術分野において既知であり、それらの栄養素及び栄養培地としては、例えば、糖例えば、グルコース、アミノ酸、ビタミン例えば、チアミン、ナイアシン、コリン、イノシトール、血清、及びこれらの混合物が挙げられる。本開示の方法は、第1の水性混合物を基材と流体連通させて、第2の水性混合物を形成する工程60を更に含む。典型的には、第1の水性混合物を基材と流体連通させるプロセスは、槽例えば、管、ボトル、フラスコ、マイクロウェル内で実施される。いずれかの実施形態において、この槽を封止して、例えば、蒸発を最小限に抑え、かつ/又は、外因性の生物活性による汚染を防止することができる。いずれかの実施形態において、第1の水性混合物を基材と流体連通させる工程は、既定の生物活性を促進する条件下で、液体混合物と基材とを接触させることを含み得る。当業者には、既定の生物活性を促進する条件が理解されるであろう。この条件としては、例えば、混合物のpH、イオン強度、又は緩衝能;第1の指示試薬及び/又は第2の指示試薬の濃度;混合物又は槽内の補助因子の存在;及び/又は混合物の温度を挙げることができる。本方法のいずれかの実施形態において、第1の水性混合物を基材と流体連通させる工程は、その混合物の温度を制御することを含み得る。一部の実施形態では、温度は、加熱ブロック、インキュベーター、又は当該技術分野において既知の、何らかの他の好適な加熱手段を使用して、周囲温度よりも高い温度例えば、生物活性を伴う、触媒反応又は結合反応などの反応を促進する温度に制御することができる。一部の実施形態では、混合物の温度は、周囲温度よりも低い温度に制御することができる。一部の実施形態では、混合物を一過性の温度シフト例えば、熱ショック又は低温ショックに晒すことにより、既定の生物活性の検出を促進することができる。本開示による、第1の水性混合物を基材と流体連通させる工程は、第1の指示試薬、並びに任意選択的にその生物学的誘導体を、基材上、及び/又は基材内に濃縮することを含む。この結果として、第2の水性混合物中の第1の指示試薬の濃度は、第1の水性混合物中の第1の指示試薬の濃度よりも低いものとなる。上述のように、基材は、第1の指示試薬を受容及び濃縮するように選択される。基材は、水性媒質との接触を介して、第1の指示試薬を受容する。基材は、様々な手段を介して、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体を保持する。理論に束縛されるものではないが、基材材料上、及び/又は基材材料内への、第1の指示試薬若しくはその生物学的誘導体の蓄積は、様々な化学的引力のうちの1つ以上を通じて生じ得るものであり、それらの化学的引力としては、例えば、イオン性相互作用、疎水性相互作用、ファンデルワールス力、及び水素結合が挙げられるが、これらに限定されない。基材による、第1の指示試薬若しくはその生物学的誘導体の受容及び濃縮のプロセスは、水性媒質と基材との流体連通の期間中に発生する。この流体連通の期間中に、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体は、多数の要因に応じて決定され得る速度で、基材上に蓄積し、それらの要因としては、例えば、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体の濃度、液体媒質に接触する基材材料の表面積、基材の多孔度、基材材料に関連する電荷密度、並びに/あるいは、基材による、第1の指示試薬若しくはその生物学的誘導体の受容又は濃縮を、妨害する方法で、基材及び/又は第1の指示試薬又はその生物学的誘導体と相互作用する恐れがある、液体媒質中の他の物質が挙げられる。基材上への、第1の指示試薬若しくはその生物学的誘導体の少なくとも一部分の受容及び濃縮は、比較的短い接触期間内例えば、数分以内に生じ得るものであり、より長い接触期間例えば、最大1時間、最大2時間、最大4時間、最大18時間、最大24時間、最大7日間、最大2週間にわたって継続し得る。一部の実施形態では、第1の指示試薬は、比較的短い期間内例えば、数分、数時間で、基材上、又は基材内に濃縮し得るが、第1の生物学的誘導体は、存在する場合には、比較的長い期間例えば、数時間、数日にわたって、基材上、又は基材内に、検出可能に濃縮し得ない。上述の、水性混合物と基材との流体連通のいずれかの期間中に、基材は、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体の全て若しくは一部分を、受容及び濃縮することができる。一部の実施形態では、基材は、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体の少なくとも5パーセントを、受容及び濃縮する。一部の実施形態では、基材は、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体の少なくとも10パーセントを、受容及び濃縮する。一部の実施形態では、基材は、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体の少なくとも20パーセントを、受容及び濃縮する。一部の実施形態では、基材は、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体の少なくとも30パーセントを、受容及び濃縮する。一部の実施形態では、基材は、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体の少なくとも40パーセントを、受容及び濃縮する。一部の実施形態では、基材は、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体の少なくとも50パーセントを、受容及び濃縮する。一部の実施形態では、基材は、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体の少なくとも75パーセントを、受容及び濃縮する。一部の実施形態では、基材は、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体の少なくとも80パーセントを、受容及び濃縮する。一部の実施形態では、基材は、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体の少なくとも90パーセントを、受容及び濃縮する。一部の実施形態では、基材は、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体の90パーセント超を、受容及び濃縮する。一部の実施形態では、基材は、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体の95パーセント超を、受容及び濃縮する。基材が第1の指示試薬又はその生物学的誘導体を受容及び濃縮することについての判定は、実施例1に示すように、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体を含む液体媒質を、一定の期間、基材と流体連通させて、その試薬又はその生物学的誘導体の存在に関して基材を分析することによって、容易に達成することができる。好ましくは、基材に関連する、試薬又は生物学的誘導体の量が、その基材によって保持される量を示すように、いずれの過剰な液体媒質も、その基材を分析する前に、基材から除去される例えば、吸い取り又は遠心分離によって。好適な分析方法は、当業者には明らかであろう。例えば、有色の第1の指示試薬例えば、pH指示薬を受容及び濃縮する基材は、例えば、X-Riteモデル530P携帯用分光濃度計を使用して、反射分光方によって分析することができる。それゆえ、サンプル及び第1の指示試薬又はその生物学的誘導体を含む液体媒質を、好適な基材と流体連通させると、バルク液体媒質中の第1の指示試薬又はその生物学的誘導体の濃度は、第1の指示試薬又はその生物学的誘導体が基材によって受容及び濃縮されるため、減少する。本発明のこの特徴は、比較的低濃度の、第2の指示試薬の生物学的誘導体の検出を促進するが、これは、第1の指示試薬が、水性混合物から基材上に濃縮されるため、第1の指示試薬による干渉すなわち蛍光の吸収の少なくとも一部分が取り除かれるためである。一部の実施形態では、第1の指示試薬及び/又はその生物学的誘導体は、自由拡散形態である場合すなわちバルク液体媒質中で、生物活性を阻害する恐れがある。これらの実施形態では、本発明の更なる有利点は、基材が、第1の指示試薬の少なくとも一部分を効果的に隔離することにより、第1の指示試薬による生物活性の阻害を低減することができる点である。再び図3を参照すると、本方法は、細胞の増殖を促進する、任意選択工程65を更に含み得る。細胞の増殖を促進する工程は、例えば、芽胞の発芽、エネルギー代謝、生合成、及び/又は細胞分裂を促進する条件例えば、栄養素、発芽剤、緩衝剤、酸化還元電位、気体を提供することを含むように、広範に使用される。細胞の増殖を促進する工程は、元のサンプルからの、1つ以上の既定の生物活性の増幅をもたらし得ることにより、その既定の生物活性の検出感度を改善することができる。本開示の方法は、第2の指示試薬の生物学的誘導体本明細書では、第2の生物学的誘導体と呼ばれるを検出する工程70を更に含む。一部の実施形態では、第2の生物学的誘導体は、水性媒質中で検出することができる。第2の生物学的誘導体の有無を検出する工程により、それぞれ、サンプル中の対応する既定の生物活性の有無が示される。第2の生物学的誘導体は、幾つかの手段によって検出することができる。一部の実施形態では、第2の生物学的誘導体は、光学的に検出することができる。一部の実施形態では、第2の生物学的誘導体を検出する工程は、その生物学的誘導体を視覚的に検出することを含み得る。一部の実施形態では、第2の生物学的誘導体を検出する工程は、その生物学的誘導体を、計器を使用して検出することを含み得る。例えば、第2の生物学的誘導体が、蛍光計などの光学計器を使用して検出することができる場合である。いずれかの実施形態において、その第2の生物学的誘導体の有無を検出する工程は、第2の生物学的誘導体の量を測定することを更に含み得る。この量の測定は、当該技術分野において既知の任意の手段、例えば、計器例えば、蛍光計を使用してその量を測定することによって、実施することができる。一部の実施形態では、第2の生物学的誘導体の量を測定する工程は、水性混合物中の蛍光を、蛍光標準と比較することを含み得る。いずれかの実施形態において、本開示の方法は、第1の指示試薬又はその第1の生物学的誘導体を検出する工程75を、任意選択的に含む。第1の指示試薬又は第1の生物学的誘導体を検出するための手段は、当業者には理解されるように、その第1の指示試薬又は第1の生物学的誘導体の性質に応じて決定される。例えば、第1の指示試薬が色覚性有色であり、かつ/又は第1の生物学的誘導体が色覚性化合物である場合には、その第1の指示試薬及び/又は第1の生物学的誘導体は、光学的に視覚的に、又は計器例えば、分光光度計によって検出することができる。一部の実施形態では、第1の指示試薬又は第1の生物学的誘導体を検出する工程は、基材と関連しない水性混合物の部分内で例えば、バルク液体中で、第1の指示試薬又は第1の生物学的誘導体を検出することを更に含み得る。例えば、第1の指示試薬又は第1の生物学的誘導体が、分光光度計などの光学計器を使用して検出される場合、その光路は、基材のいずれの部分とも交差しない。いずれかの実施形態において、第1の指示試薬又は第1の生物学的誘導体の有無を検出する工程は、第1の指示試薬又は第1の生物学的誘導体の量を測定することを更に含み得る。この量の測定は、例えば、計器例えば、分光光度計、分光濃度計を使用してその量を測定することを含めた、当該技術分野において既知の任意の手段によって、実施することができる。それぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第5,252,484号及び同第5,418,167号では、迅速な読み出しの生物学的インジケーターの一実施形態が説明され、この生物学的インジケーターは、酵素キャリア芽胞ストリップと、4-メチルウンベリフェリル-α-D-グルコシド蛍光発生酵素基質である、MUG及びブロモクレゾールパープルpH指示薬である、BCPを有する溶液を収容する、アンプルとを含む。MUGは、酵素活性によって、MUGの蛍光誘導体である、4-メチルウンベリフェロン4MUに加水分解されることが既知である。米国特許第5,252,484号の実施例1及び実施例2に示すように、MUGの酵素加水分解によって作り出される4MUは、酵素キャリアを、MUG及びBCPを含む溶液と流体連通させた後、数分以内に、蛍光によって視覚的に検出することができる。本研究者らは、米国特許第5,252,484号の実施例1で説明されるものと同様の、溶液中で使用されるBCPの濃度が、水溶液中の低濃度の4MUの検出を妨害するために十分であることを見出した。本開示による、溶液からの、BCPの少なくとも一部分の除去は、生物学的インジケーター内の、より少量の4MUの検出を可能にすることにより、滅菌プロセスに晒されていたことによって不活化及び/又は死滅しなかった生物活性例えば、芽胞、酵素の、より早期の検出が可能になる。生物活性を検出するためのシステム本開示は、サンプル中の既定の生物活性を検出するためのシステムを含む。本システムを、本発明の方法に従って使用することにより、サンプル中の1つ以上の既定の生物活性を検出することができる。本システムは、第1の既定の生物活性によって、第1の生物学的誘導体に変換させることができる、第1の指示試薬を含む、第1の指示薬システムを含む。この第1の指示試薬は、第1の吸収スペクトル、及び任意選択的に第1の発光スペクトルを有する。本システムは、第2の既定の生物活性によって、第2の生物学的誘導体に変換せることができる、第2の指示試薬を含む、第2の指示薬システムを更に含む。この第2の生物学的誘導体は、第1の吸収スペクトル、及び第2の発光スペクトルを有する。本システムは、液体サンプルを受容するように構成される計器を更に含み、この液体サンプルは、第1の指示試薬、第2の指示試薬、第1の生物学的誘導体、第2の生物学的誘導体、又は上記のうちの2つ以上の任意の組み合わせを含み得る。この計器は、分析機器の分野において既知のようなシッパー手段を介して、外部容器から液体サンプルを引き込むように構成することができる。あるいは、この計器は、液体サンプルを収容する槽例えば、管、マイクロウェルプレートなどを受容するように構成することができる。この計器は、第2の生物学的誘導体を検出するように構成される。任意選択的に、この計器は、第1の指示試薬、第2の指示試薬、第1の生物学的誘導体、又は上記のうちの2つ以上の任意の組み合わせを検出するように、更に構成することができる。本システムの指示試薬は、特定の既定の生物活性を検出するための、本明細書で説明されるような、いずれかの好適な指示試薬とすることができる。第1の指示試薬及び第2の指示試薬は、キットの形で提供することができ、例えば、このキットは、指示試薬及びサンプルが中に混合される、水性媒質例えば、緩衝剤、懸濁媒質、希釈剤を、任意選択的に含み得る。本明細書で論じられるように、サンプルは、水を含み得ることにより、その水性媒質を構成することができる。任意選択的に、このキットは、サンプルと第1の指示試薬及び第2の指示試薬とを含む水性混合物が中に形成される、槽例えば、管、キュベットなどを更に含み得る。一部の実施形態では、本システムは、例えば、それぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、2010年11月1日出願の米国特許出願第61/408,977号及び同第61/408,988号の生物学的インジケーター、並びに米国特許第5,252,484号で説明される生物学的インジケーターなどの、生物学的滅菌インジケーターと共に使用することができる。色覚性化合物の吸収スペクトルを検出するための計器は、当該技術分野において既知であり、例えば、それらの計器としては、様々な市販の分光光度計及び分光濃度計が挙げられる。蛍光化合物の発光スペクトルを検出するための計器もまた、当該技術分野において既知であり、例えば、それらの計器としては、様々な市販の蛍光計が挙げられる。そのような計器は、液体サンプル及び/又は既定の場所に配置される基材に関連する、指示試薬又はその生物学的誘導体を検出するように、容易に適合させることができる。一部の実施形態では、基材は、水性混合物から取り出して、計器によって指示試薬又はその生物学的誘導体を検出することができるように配置する例えば、表面上、又はキュベット内にことができる。その全体が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第6,025,189号は、内蔵型の生物学的インジケーター内の既定の場所で、生物活性に関連する蛍光シグナルを検出するように構成される、計器を説明している。そのような計器を、色覚性シグナルを検出するように改変することは、当該技術分野における通常の技術の範囲内である。一部の実施形態では、本システムは、プロセッサを更に含み得る。一部の実施形態では、この計器は、計器を制御して、指示試薬若しくはその生物学的誘導体に関連するデータを、収集及び/又は伝送することが可能な、マイクロプロセッサを含み得る。本システムの一部の実施形態では、プロセッサは、外部プロセッサを含み得る。この外部コンピュータは、パーソナルコンピュータPC、デスクトップコンピュータ、ラップトップコンピュータ、ハンドヘルドコンピュータ、ワークステーションなどを含み得る。例えば、ソフトウェアを外部コンピュータにロードして、計器を制御し、かつ/あるいは、計器からのデータの収集、転送、及び/又は分析を促進することができる。一部の実施形態では、本システムは、液体の温度を調節するための手段を更に含み得る。温度制御のための手段としては、例えば、熱電対及び熱交換器などの、当該技術分野において既知のいずれかの手段を挙げることができる。有利には、これらの実施形態は、温度を制御することによって生物活性を促進することができ、かつ生物活性の生成物を検出することができる、システムを提供する。生物学的滅菌インジケーター:図4~10は、本開示の一実施形態による、生物学的滅菌インジケーター100を示す。生物学的滅菌インジケーターの他の好適な実施形態は、同時係属のPCT国際公開第2011/011189号、表題BiologicalSterilizationIndicatorandMethodofUsingSame;米国特許出願第61/409,042号、表題BiologicalSterilizationIndicatorSystemandMethod;同第61/408,997号、表題BiologicalSterilizationIndicatorSystemandMethod;及び同第61/408,977号、表題BiologicalSterilizationIndicatorandMethodofUsingSameで説明され、これらのそれぞれは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。生物学的滅菌インジケーター100は、ハウジング102を含み得、このハウジング102は、一体に結合されて、内蔵型の生物学的滅菌インジケーターを提供するように適合される、第1部分104及び第2部分106例えば、キャップを含み得る。一部の実施形態では、第1部分104及び第2部分106は、同じ材料で形成することができ、一部の実施形態では、第1部分104及び第2部分106は、異なる材料で形成することができる。ハウジング102は、生物学的滅菌インジケーター100のリザーバ103を画定することができ、このリザーバ103内に、他の構成要素を配置することができ、滅菌プロセスの間、滅菌剤を注ぎ込むことができる。ハウジング102は、第1部分104の壁部108、及び/又は第2部分106の壁部110などの、少なくとも1つの液体不透過性の壁部によって、画定することができる。一部品の一体型ハウジング102もまた採用することができ、又は第1部分104及び第2部分106は、本開示の趣旨及び範囲から逸脱することなく、他の形状、寸法、若しくは相対的構造を取ることができる点を理解するべきである。ハウジング102例えば、壁部108及び壁部110に関して好適な材料としては、ガラス、金属例えば、箔、ポリマー例えば、ポリカーボネートPC、ポリプロピレンPP、ポリフェニレンPPE、ポリエチレン、ポリスチレンPS、ポリエステル例えば、ポリエチレンテレフタレートPET、ポリメタクリル酸メチルPMMA又はアクリル樹脂、アクリロニトリルブタジエンスチレンABS、シクロオレフィンポリマーCOP、シクロオレフィンコポリマーCOC、ポリスルホンPSU、ポリエーテルスルホンPES、ポリエーテルイミドPEI、ポリブチレンテレフタレートPBT、セラミック、磁器、又はこれらの組み合わせを挙げることができるが、それらに限定されない。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、液体122を収容し、かつ生物学的滅菌インジケーター100の内部、例えば、ハウジング102の少なくとも一部分の内部例えば、少なくとも、ハウジング102の第1部分104の内部に受容されるように寸法決めされる、壊れやすい容器120を更に含み得る。壊れやすい容器120は、様々な材料で形成することができ、それらの材料としては、金属例えば箔、ポリマー例えば、ハウジング102に関して上記に列挙されるポリマーのうちのいずれか、ガラス例えば、ガラスアンプル、及びこれらの組み合わせのうちの1つ以上が挙げられるが、それらに限定されない。一部の実施形態では、容器120の一部分のみが壊れやすく、例えば、容器120は、壊れやすい部分又はカバー例えば、壊れやすい障壁、フィルム、膜などを含み得る。壊れやすい容器120は、容器120が無損傷であり、かつ液体122が中に収容される第1の状態、及び容器120の少なくとも一部分が断裂する第2の状態を有し得る容器120の第2の状態では、液体122は、例えば容器120が生物学的滅菌インジケーター100内に配置される場合、生物学的滅菌インジケーター100のリザーバ103と流体連通することができる。例示の実施形態に示すように、容器120は、以下でより詳細に説明される、挿入部材130によって、生物学的滅菌インジケーター100内部で定位置に保持し、かつ/又は断裂させることができる。容器120は、例えば、挿入部材130例えば、破砕装置として機能する挿入部材に対して容器120を押し付けることによって、又は容器120に対して挿入部材130を押し付けることによって、断裂させることができる。ハウジング102の第1部分104は、生物学的滅菌インジケーター100の構成要素の大半を収容するように適合させることができ、管、管状本体、基部などと称することができる。ハウジング102は、ハウジング102の第1部分104及び第2部分106の一方若しくは双方によって画定することができる、リザーバ103を含み得る。生物学的滅菌インジケーター100は、リザーバ103と流体連通して配置される、芽胞又は別の生物活性の発生源115又は芽胞の所在部位を更に含み得る。図4~6に示すように、ハウジング102の第2部分106は、1つ以上の開口107を含み、ハウジング102の内部例えば、リザーバ103と環境との間の流体連通を提供することができる。例えば、1つ以上の開口107は、滅菌プロセスの間、芽胞115と環境との間の流体連通を提供することができ、生物学的滅菌インジケーター100内への入口としての、かつ滅菌剤通路164以下でより詳細に説明するの入口としての役割を果たすことができる。一部の実施形態では、ハウジング102の第2部分106を、ハウジング102の第1部分104の第1例えば、開放末端部101に結合することができ、芽胞115を、ハウジング102の第1部分104の、第1末端部101とは反対側の第2例えば、閉鎖末端部105に配置することができる。一部の実施形態では、障壁又はフィルター例えば、無菌障壁、図示せずを、滅菌剤通路164内に例えば、開口107によって形成される入口に配置して、汚染性若しくは異質の生物、物体、又は材料が、生物学的滅菌インジケーター100に入り込むことを阻止することができる。そのような障壁は、気体透過性、微生物不透過性の材料を含み得、様々な結合手段によって、ハウジング102に結合することができ、それらの手段としては、接着剤、熱融着、超音波溶接などが挙げられるが、これらに限定されない。あるいは、この障壁は、ハウジング102の第1部分104に結合される例えば、スナップ嵌め係合、ねじ込み係合、圧入係合、又はこれらの組み合わせで支持構造第2部分106などを介して、滅菌剤通路164に結合することができる。滅菌剤への曝露の間、滅菌剤は、この障壁を通過して、滅菌剤通路164に入り、芽胞115と接触することができる。一部の実施形態では、例示の実施形態に示すように、ハウジング102は、内側壁部又は部分的壁部118、棚部、隔壁、フランジなどによって少なくとも部分的に隔離することができる下方部分114及び上方部分116を含み得、この内側壁部118内には、下方部分114と上方部分116との間の流体連通を提供する、開口部117を形成することができる。一部の実施形態では、ハウジング102の第1部分104の下方部分114単純に下方部分114又はハウジング102の下方部分114と称される場合もあるは、芽胞115又は芽胞の所在部位を収容するように適合させることができる。一部の実施形態では、下方部分114は、ハウジング102の検出部分又は検出領域と称することができるが、これは、下方部分114の少なくとも一部分を、芽胞の増殖の標示に関して検査することができるためである。更には、一部の実施形態では、ハウジング102の第1部分104の上方部分116簡略性のために、上方部分116又はハウジング102の上方部分116と称される場合もあるは、特に作動の前に、壊れやすい容器120の少なくとも一部分を収容するように適合させることができる。一部の実施形態では、ハウジング102の上方部分116によって少なくとも部分的に画定される、リザーバ103の部分は、第1チャンバ又はリザーバ、区画、領域、又は容積109と称することができ、ハウジング102の下方部分114によって少なくとも部分的に画定される、リザーバ103の部分は、第2チャンバ又はリザーバ、区画、領域、又は容積111と称することができる。一部の実施形態では、第2チャンバ111は、芽胞増殖チャンバ又は検出チャンバと称することができ、滅菌プロセスの有効性を判定するために、芽胞の生存度に関して検査される容積を含み得る。第1チャンバ109及び第2チャンバ111は、滅菌剤及び液体122が、第1チャンバ109からすなわち第1チャンバ109を通過して第2チャンバ111に移動することを可能にするように、互いに流体連通して配置することができる。一部の実施形態では、第1チャンバ109と第2チャンバ111との間の流体接続の程度例えば、第1チャンバ109と第2チャンバ111とを接続する、開口部117などの、開口部のサイズは、作動工程すなわち液体122が容器120から解放されることの後に、作動工程と同時に、及び/又は作動工程に応答して、増大させることができる。一部の実施形態では、第1チャンバ109例えば、上方部分116内のと第2チャンバ111例えば、下方部分114内のとの間の流体連通又は流体接続の度合の制御は、挿入部材130の少なくとも一部分によって提供することができる。容器120は、滅菌の間、及び容器120が第1の断裂していない状態にあるとき、第1チャンバ109内に配置して、保持することができる。芽胞115は、容器120が第1の状態にあるとき、第2チャンバ111内に環境と流体連通して収容することができる。第1チャンバ109及び第2チャンバ111は、容器120が、第2チャンバ111内に存在しないように、具体的には、容器120が、第1の断裂していない状態にあるときに、第2チャンバ111内に存在しないように構成することができる。滅菌剤は、滅菌の間に、第2チャンバ111内に移動することができ例えば、第1チャンバ109を介して、液体122は、作動の間に、容器120が断裂して、液体122がハウジング102の内部へと解放されると、第2チャンバ111内に移動することができる例えば、第1チャンバ109から。結果として、容器120が第1の状態にあるとき、第1チャンバ109及び第2チャンバ111は、互いに、また環境と例えば、滅菌の間、流体連通することができる。例えば、第1チャンバ109及び第2チャンバ111は、1つ以上の開口107を介して、環境と流体連通することができる。一部の実施形態では、第1チャンバ109及び第2チャンバ111は、滅菌剤が生物学的滅菌インジケーター100に入る際に、第1チャンバ109が、第2チャンバ111の上流に配置されるような方式で、環境と流体連通することができる。すなわち第1チャンバ109は、滅菌剤の入口例えば、1つ以上の開口107と第2チャンバ111との間に配置することができ、滅菌剤の入口は、第1チャンバ109の、第2チャンバ111とは反対の側に、配置することができる。図7及び図9に示すように、一部の実施形態では、第1チャンバ109は、特に容器120が第1の状態にある場合、第1部分104及び第2部分106の一方若しくは双方によって画定することができる。更には、一部の実施形態では、第1チャンバ109は、ハウジング102の第1部分104の開放末端部101に隣接し、ハウジング102の第2部分106に隣接して配置され、かつ/又は第2部分106によって少なくとも部分的に画定される、第1末端部112を含み得る。第1チャンバ109は、第2チャンバ111に隣接し、かつ第2チャンバ111と流体連通して配置され、ハウジング102の閉鎖末端部105に向けて配置される、第2末端部13を更に含み得る。第1チャンバ109の第1末端部112は、ハウジング102の第1部分104及び/又は第2部分106によって、画定することができる。図7及び図9に更に示すように、一部の実施形態では、第2チャンバ111は、第1チャンバ109に隣接し、かつ第1チャンバ109と流体連通して配置され、ハウジング102の開放末端部101に向けて配置される、第1末端部124と、ハウジング102の閉鎖末端部105によって少なくとも部分的に画定されるか、閉鎖末端部105を含むか、又は閉鎖末端部105に隣接して配置される、第2末端部125とを含み得る。換言すれば、図7及び図9に示すように、生物学的滅菌インジケーター100は、長手方向DLを含み得、一部の実施形態では、第1チャンバ109は、第2チャンバ111の長手方向上方に、配置することができる。一部の実施形態では、第2チャンバ111は、生物学的滅菌インジケーター100の閉鎖末端部105によって、少なくとも部分的に画定することができるか、閉鎖末端部105を含み得るか、又は閉鎖末端部105に隣接して配置することができる。更には、一部の実施形態では、第2チャンバ111は、第1チャンバ109、及び生物学的滅菌インジケーター100が作動される際に解放される、容器120内の液体122の容積のうちの少なくとも一方よりも小さく例えば、容積及び/又は断面積ですることができる。結果として、そのような実施形態では、第2チャンバ111は、第2チャンバ111内に存在する気体例えば、空気が、第2チャンバ111内への流体の移動を阻止する恐れがある、空気閉塞効果を呈し得る。一部の実施形態では、以下でより詳細に説明するように、第2チャンバ111が、生物学的滅菌インジケーター100の別の部分に通気することを可能にする、流体通路により、第2チャンバ111内への流体の移動を促進することができる。一部の実施形態では、壁部118分割壁と称される場合もあるは、角度を付けるか、又は傾斜させて、例えば、ハウジング102の長手方向DLに対して、非ゼロの角度かつ非直角の方向に例えば、長手方向DLが、ハウジング102の長さに沿って延びる場合配置することができる。壁部118の、そのような角度付け又は傾斜により、滅菌の後に、容器120が破砕されて、液体122を解放した後の、上方部分116から下方部分114への、液体122の移動を促進することができる。図4~6に示すように、一部の実施形態では、壁部118は、ハウジング102の内法寸法の変化によって、少なくとも部分的に形成することができる。例えば、図示のように、壁部118は、第1チャンバ109内の第1の長手方向位置から、第2チャンバ111内の第2の長手方向位置への、断面積の減少によって形成することができる。更には、単なる例として、ハウジング102の内部断面形状を、第1チャンバ109から第2チャンバ111への移行部で、第1チャンバ109内の実質的に丸い形例えば、周長の50未満を構成する、1つの平坦面を有するから、第2チャンバ111内の実質的な平行六面体例えば、実質的な正方形へと、変化させることができる。更には、一部の実施形態では、壁部118はまた、ハウジング102の外法寸法の変化によって、少なくとも部分的に形成することもできる。図4~6に示すように、一部の実施形態では、ハウジング102は、壁部118と一致して角度付けされ壁部118が角度付けされる場合には、かつハウジング102の外側形状及び外法寸法の変化を含む、段差部又は、棚部、張り出し部、移行部など123を含む。しかしながら、一部の実施形態では、ハウジング102の内法寸法が変化して、第1チャンバ109とは異なる断面形状又は寸法を有する、第2チャンバ111を作り出す場合であっても、ハウジング102の外側形状及び外法寸法を変化させる必要はないこと、又は内側形状及び/又は内法寸法の変化と一致して変化させる必要はないことを理解するべきである。例えば、一部の実施形態では、段差部123は、長手方向DLに対して、実質的に垂直に配向することができる。一部の実施形態では、リザーバ103は、少なくとも約0.5ミリリットルmLの容積を有し、一部の実施形態では、少なくとも約1mL、一部の実施形態では、少なくとも約1.5mLの容積を有する。一部の実施形態では、リザーバ103は、約5mL以下の容積を有し、一部の実施形態では、約3mL以下、一部の実施形態では、約2mL以下の容積を有する。一部の実施形態では、壊れやすい容器120は、少なくとも約0.25mLの容積を有し、一部の実施形態では、少なくとも約0.5mL、一部の実施形態では、少なくとも約1mLの容積を有する。一部の実施形態では、壊れやすい容器120は、約5mL以下の容積を有し、一部の実施形態では、約3mL以下、一部の実施形態では、約2mL以下の容積を有する。一部の実施形態では、壊れやすい容器120内に収容される液体122の容積は、少なくとも約50マイクロリットル、一部の実施形態では、少なくとも約75マイクロリットル、一部の実施形態では、少なくとも約100マイクロリットルである。一部の実施形態では、壊れやすい容器120内に収容される液体122の容積は、約5mL以下、一部の実施形態では、約3mL以下、一部の実施形態では、約2mL以下である。一部の実施形態では、第1チャンバ109すなわちハウジング102の第1部分104の上方部分116によって形成されるは、少なくとも約500マイクロリットル又は立方ミリメートルの容積を有し、一部の実施形態では、少なくとも約1000マイクロリットル、一部の実施形態では、少なくとも約2000マイクロリットル、一部の実施形態では、少なくとも約2500マイクロリットルの容積を有する。一部の実施形態では、第1チャンバ109は、約5000マイクロリットル以下の容積を有し、一部の実施形態では、約4000マイクロリットル以下、一部の実施形態では、約3000マイクロリットル以下の容積を有する。一部の実施形態では、第1チャンバ109は、約2790マイクロリットル、又は2800マイクロリットルの容積を有する。一部の実施形態では、第2チャンバ111すなわちハウジング102の第1部分104の下方部分114によって形成されるは、少なくとも約5マイクロリットルの容積を有し、一部の実施形態では、少なくとも約20マイクロリットル、一部の実施形態では、少なくとも約35マイクロリットルの容積を有する。一部の実施形態では、第2チャンバ111は、約250マイクロリットル以下の容積を有し、一部の実施形態では、約200マイクロリットル以下、一部の実施形態では、約175マイクロリットル以下、一部の実施形態では、約100マイクロリットル以下の容積を有する。一部の実施形態では、第2チャンバ111は、約208マイクロリットル、又は210マイクロリットルの容積を有する。一部の実施形態では、第2チャンバ111の容積は、第1チャンバ109の容積の少なくとも約5であり、一部の実施形態では、少なくとも約7である。一部の実施形態では、第2チャンバ111の容積は、第1チャンバ109の容積の約20以下であり、一部の実施形態では、約15以下、一部の実施形態では、約12以下、一部の実施形態では、約10以下である。一部の実施形態では、第2チャンバ111の容積は、第1チャンバ109の容積の約7.5である。一部の実施形態では、第2チャンバ111の容積は、容器120内に収容される液体122の容積の約60以下であり、一部の実施形態では、約50以下、一部の実施形態では、約25以下である。一部の実施形態では、容器120内に収容される液体122の容積よりも実質的に少ない容積を有するように、第2チャンバ111を設計することにより、その追加的な液体容積が、意図せざる蒸発を補償し得ることを確実にすることができる。一部の実施形態では、第1チャンバ109すなわちハウジング102の第1部分104の上方部分116によって形成されるは、第1チャンバ109と第2チャンバ111との間の移行部で、又は第2チャンバ111に隣接する位置で、少なくとも約25mm2の断面積又は、平均断面積を有し、一部の実施形態では、少なくとも約30mm2、一部の実施形態では、少なくとも約40mm2の断面積を有する。一部の実施形態では、第1チャンバ109は、第1チャンバ109と第2チャンバ111との間の移行部で、又は第2チャンバ111に隣接する位置で、約100mm2以下の断面積を有し、一部の実施形態では、約75mm2以下、一部の実施形態では、約50mm2以下の断面積を有する。一部の実施形態では、第2チャンバ111すなわちハウジング102の第1部分104の下方部分114によって形成されるは、第1チャンバ109と第2チャンバ111との間の移行部で、又は第1チャンバ109に隣接する位置で、少なくとも約5mm2の断面積を有し、一部の実施形態では、少なくとも約10mm2、一部の実施形態では、少なくとも約15mm2の断面積を有する。一部の実施形態では、第2チャンバ111は、約30mm2以下の断面積又は、平均断面積を有し、一部の実施形態では、約25mm2以下、一部の実施形態では、約mm2以下の断面積を有する。一部の実施形態では、第1チャンバ109と第2チャンバ111との間の移行部での、第2チャンバ111の断面積は、その移行部での第1チャンバ109の断面積の、約60以下、一部の実施形態では、約50以下、一部の実施形態では、約40以下、一部の実施形態では、約30以下とすることができる。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、基材119を更に含み得る。一部の実施形態では、図4~7、及び図9に示すように、基材119は、壁部118に隣接して、具体的には、壁部118の上に安置されるように、配置することができる。基材119は、生物学的滅菌インジケーター100の上方部分116すなわち第1チャンバ109と下方部分114すなわち第2チャンバ111との間に配置することができ、一部の実施形態では、第1チャンバ109及び第2チャンバ111を、少なくとも部分的に画定することができる。それゆえ、一部の実施形態では、基材119は、容器120と芽胞115との間に配置することができる。一部の実施形態では、基材119は、基材119が第2チャンバ111内に配置されないように、第1チャンバ109内に、すなわち壁部118の第1チャンバ側上に配置することができる。更には、基材119は、第2チャンバ111から外への、検定シグナル例えば、蛍光の拡散を、最小限に抑えるように配置することができる。一部の実施形態では、基材119の材料構成に応じて、基材119はまた、生物学的滅菌インジケーター100からのシグナルの正確な読み取りを阻害する恐れのある、染料、指示試薬、又は溶液からの他の材料すなわち阻害物質を吸収することもできる。一部の実施形態では、図4~7、9、及び図10に示すように、基材119は、1つ以上の開口121を含み得、この開口121は、生物学的滅菌インジケーター100の第1チャンバ109と第2チャンバ111との間の、流体の移動を制御するすなわち数、サイズ、形状、及び/又は場所に応じて、促進並びに/あるいは制限するように構成することができ、具体的には、容器120が断裂される際、芽胞115への液体122の移動を促進することができる。単なる例として、図示のように、開口121を、基材119の中心の前方又はの前部に配置した場合、具体的な利益又は有利点が認められた。図4~10に示す実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100又は内部構成要素の前方とは、全般的には、平坦面126に向かうものとして説明することができる。全般的には、生物学的滅菌インジケーター100の前方は、読み取り装置によって検査される、生物学的滅菌インジケーター100の部分を指すことができる。更には、単なる例として、開口121は、円形又は丸い形であるとして示されるが、しかしながら、他の断面開口形状も可能であり、本開示の範囲内にある。更には、単なる例として、また図6に示すように、基材119は、第1チャンバ109と第2チャンバ111との間の移行部で、第1チャンバの断面積を実質的に充填するように成形される。しかしながら、基材119の他の形状も可能であり、生物学的滅菌インジケーター100の、ハウジング102、第1チャンバ109、第2チャンバ111、壁部118、又は別の部分に対応するように適合させることができる。上述のように、第2チャンバ111は、検査される容積を含み得る。そのような容積を、芽胞の生存度に関して検定し、滅菌手順の致死性又は有効性を判定することができる。一部の実施形態では、この検査される容積は、第2チャンバ111の全て、又は一部分とすることができる。一部の実施形態では、基材119は、検査される容積の外側に配置することができ、このことにより、その容積内の、検定プロセスを妨害する恐れがある構造の数を、最小限に抑えることができる。例えば、一部の実施形態では、基材119が、芽胞115、芽胞キャリア135、及び芽胞リザーバ136のうちの少なくとも1つと直接接触しないように、基材119を配置することができる。一部の実施形態では、基材119が、検出システム例えば、蛍光励起源及び発光検出器などの、光学検出システムと、芽胞115、芽胞キャリア135、及び芽胞リザーバ136のうちの少なくとも1つとの間に位置しないように、基材119を配置することができる。基材119は、容器120が第1の状態及び/又は第2の状態にあるとき、特に、容器120が第2の状態にあるとき、上記の位置を有し得る。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100内での基材の位置は、芽胞の生存度に関する迅速な検出システム例えば、蛍光検出と、より緩徐な例えば、一晩又は24時間の検出システム例えば、芽胞の増殖に反応して色変化を呈し得る例えば、24時間でpH指示薬との相関関係に影響を及ぼし得る。例えば、一部の実施形態では、基材119は、様々な時点での蛍光の読み取り値と、24時間後の増殖の結果との相関関係を、改善することができる。具体的には、基材119が、本明細書で説明され、かつ図1、2、及び図4~7に示すような、第1の位置にある場合、蛍光は、増殖との正確な相関関係を示し得る。そのような相関関係は、他の基材の位置、及び基材を有さない生物学的滅菌インジケーターに勝る、改善とすることができる。更には、基材119は、容器120が第1の状態にあるとき、基材119が容器120と直接接触しないように、生物学的滅菌インジケーター100内に配置することができる。例えば、一部の実施形態では、基材119は、第1チャンバ109内に例えば、第1チャンバ109の底部末端部例えば、第2末端部113に隣接して配置することができるが、そのような実施形態であっても、基材119が容器120に接触しないように、基材119を配置することができる。例えば、図4、5、及び図7~9に示すように、一部の実施形態では、容器120が第1の状態にあるとき、挿入部材130を、容器120と基材119との間に配置することができ、それにより、挿入部材130が、容器120を第1の状態に保持する。挿入部材130、又はその一部分は、基材119に隣接して配置することができる。例えば、例示の実施形態に示すように、基材119は、挿入部材130と壁部118との間に例えば、間に挟み込んで配置することができる。それゆえ、一部の実施形態では、基材119は、挿入部材130と第2チャンバ111との間に配置することができる。上述のように、一部の実施形態では、基材119は、生物学的滅菌インジケーター100内の、流体の流れを制御するか、若しくは流体の流れに影響を及ぼすように、具体的には、第1チャンバ109と第2チャンバ111との間の流体の流れを制御するように、配置及び構成することができる。例えば、一部の実施形態では、基材119は、滅菌剤が第2チャンバ111に及び芽胞115に送達される速度を制御するように構成する例えば、サイズ決定する、成形する、配向する、かつ/又は特定の材料で構築することができる。例えば、滅菌剤の送達速度は、基材119が、第1チャンバ109と第2チャンバ111との間に存在しない場合には、そうではない場合よりも小さくなる可能性がある。更には、一部の実施形態では、基材119は、検査される容積から外へと検出可能生成物が拡散する速度を制御するように構成する例えば、サイズ決定する、成形する、配置する、配向する、かつ/又は特定の材料で構築することができる。一部の実施形態では、検出可能生成物は、芽胞の生存度を示すシグナル例えば、蛍光シグナルを含み得、一部の実施形態では、検出可能生成物は、芽胞115自体とすることができる。検査される容積から外への、検出可能生成物の拡散を制御することは、液体122の容積が、第2チャンバ111の又は検査される容積の容積よりも大きい実施形態で、特に有用とすることができるが、これは容器120が、その第2の断裂した状態にあるとき、そのような実施形態での液体122が、生物学的滅菌インジケーター100内で、第2チャンバ111又は検査される容積よりも高いレベルまで、延在し得るためである。そのような実施形態では、検出可能生成物は、液体122の容積の全体にわたってすなわち検査される容積の、外側の容積にまで、自由に移動することができるが、ただし、基材119などの、そのような拡散を制御するための何らかの障壁又は手段が存在する場合は、その限りではない。例えば、一部の実施形態では、基材119を、検査される容積の直上のすなわち液体122のレベルよりも低いレベルに配置して、基材119の上方に位置する液体122の部分への、検出可能生成物の移動を阻止することができる。一部の実施形態では、基材119は、滅菌剤及び/又は検出可能生成物に対する、物理的障壁若しくは遮断物を提供することによって、滅菌剤の送達速度例えば、第2チャンバ111内への及び/又は検出可能生成物の拡散速度例えば、第2チャンバ111から外へのを制御することができる。そのような物理的障壁はまた、容器120が、第2の断裂した状態にあるとき、容器120の破砕部分を回収する機能も果たし、その破砕部分が、検出プロセス例えば、光学検出プロセスを遮断、屈折、反射、又は他の方法で妨害する恐れがある、検査される容積内への破砕部分の移動を阻止することができる。更には、一部の実施形態では、液体122は、芽胞115と接触する前、又は接触した後に、正確な検定若しくは検出プロセスを妨害する恐れがある、1種以上の阻害物質又は他の構成成分を含み得る。一部の実施形態では、阻害物質の例としては、染料、指示試薬、芽胞の生存度の検出のために不可欠な反応例えば、酵素反応を阻害する恐れがある他の材料若しくは物質例えば、塩類など、検出プロセスを妨害する恐れがある他の材料若しくは物質のうちの少なくとも1つ、又はこれらの組み合わせを挙げることができる。そのような実施形態では、基材119は、液体122からの、又は少なくとも、検査される液体122の容積からの1種以上の阻害物質を、吸収及び/又は選択的に濃縮するように構成することができる。例えば、一部の実施形態では、芽胞115と接触する前に、又は芽胞115との接触の結果として、2種以上の指示試薬が液体122中に存在し得る。そのような実施形態では、第1の指示試薬例えば、蛍光検出に関して使用されるは、芽胞の生存度の検出のために不可欠とすることができるが、その一方で、第2の指示試薬例えば、pH指示薬が、実際に、第1の指示試薬の検出に干渉する場合がある。単なる例として、第2の指示試薬がpH指示薬例えば、ブロモクレゾールパープル、メチルレッド、又はこれらの組み合わせのうちの1つ以上である実施形態では、pH指示薬は、例えばそのpH指示薬が、第1の指示試薬の蛍光のスペクトルバンドと類似する波長で、電磁放射線を放出する例えば、pH指示薬が色の推移を呈する際に実施形態では、第1の指示試薬の蛍光読み取りに抵触又は干渉する場合がある。そのような実施形態では、基材119は、液体122と接触して配置される際に、第2の指示試薬を吸収及び/又は選択的に濃縮して、液体122中の、又は少なくとも検査される液体122の容積中の、第2の指示試薬の濃度を低減するように構成する例えば、適切な材料で形成することができる。更には、一部の実施形態では例えば、壁部118が傾斜しており、基材119が、壁部118に隣接して配置される実施形態では、基材119は、角度を付けるか、又は傾斜させて、例えば、ハウジング102の長手方向DLに対して、非ゼロの角度かつ非直角の方向に配置することができる。基材119の、そのような角度付け又は傾斜により、滅菌の後に、容器120が破砕されて、液体122を解放した後の、第1チャンバ109から第2チャンバ111への、液体122の移動を促進することができる。一部の実施形態では、基材119は、上記の機能のうちの1つ以上を達成するために、様々な材料で形成することができる。基材材料の例としては、綿、グラスウール、布、不織ポリプロピレン、不織レーヨン、不織ポリプロピレン/レーヨン配合物、不織ナイロン、不織ガラス繊維若しくは他の不織繊維、濾紙、微多孔性の疎水性及び親水性フィルム、ガラス繊維、連続気泡ポリマーフォーム、及び半透過性プラスチックフィルム例えば、粒子充填フィルム、熱誘起相分離TIPS膜など、並びにこれらの組み合わせを挙げることができるが、それらに限定されない。例えば、基材119を使用して、1種以上の指示試薬例えば、ブロモクレゾールパープルBCPを選択的に濃縮することができる実施形態では、基材119は、荷電ナイロンGEOsmonicsより入手可能な商品名MAGNAPROBE例えば、0.45マイクロメートル、カタログ番号NP0HY00010、材料番号1226566で、リプローブ可能な荷電転写膜などで形成することができる。基材119を採用することができる方法及びシステムの実施例はまた、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、2010年11月1日出願の、同時係属の米国特許出願第61/408,887号、表題MethodofDetectingaBiologicalActivityでも説明される。一部の実施形態では、挿入部材130、壁部118、及び/又は基材119若しくはその中の開口部のうちの1つ以上の、少なくとも一部分は、第1チャンバ109例えば、上方部分116内のと第2チャンバ111例えば、下方部分114内のとの間の流体連通を提供することができ、かつ/あるいは、第1チャンバ109と第2チャンバ111との間の流体連通を制御することができる例えば、第1チャンバ109と第2チャンバ111との間の流体接続の度合を制御することによって。生物学的滅菌インジケーター100は、第1チャンバ109と第2チャンバ111とを流体結合するように配置することができる、第1流体通路160を含み得、この第1流体通路160は、滅菌剤例えば、滅菌の間の、容器120が、第1の断裂していない状態にあるとき及び/又は液体122例えば、滅菌の後の作動の間に、容器120が、第2の断裂した状態にあるときが、芽胞115に到達することを可能にすることができる。図示の実施形態では、第1流体通路160は、全般的には、以下のうちの1つ以上によって、画定することができる:1挿入部材130、例えば、以下で説明する開口177、挿入部材130内に形成される開口部、及び/又は挿入部材130例えば、その前方部分とハウジング102との間などの、挿入部材130の周囲のいずれかの開放空間を介して;2壁部118、例えば、壁部118によって画定される開口117;3基材119、例えば、その中に形成される開口121、又は基材119例えば、その前方部分とハウジング102との間などの、基材119の周囲のいずれかの開放空間;4ハウジング102、例えば、その中に形成される、いずれかの開口部又は空間;及びこれらの組み合わせ。結果として、第1流体通路160は、全般的には、図示の実施形態では、図7及び図10の矢印によって表される。生物学的滅菌インジケーター100は、第2チャンバ111を、第1チャンバ109などの、生物学的滅菌インジケーター100の別のチャンバ若しくは別の部分と流体結合するように配置される、第2流体通路162を更に含み得る。第2流体通路162は、例えば、滅菌剤及び/又は液体122が、第2チャンバ111内に移動される際、第2チャンバ111内に従前に存在していた気体が排出されて、第2チャンバ111から抜け出ることを可能にするように、更に配置することができる。それゆえ、以下でより詳細に説明される、第2流体通路162は、生物学的滅菌インジケーター100内の内部通気口としての役割を果たし得る。一部の実施形態では、基材119は、以下のうちの少なくとも1つを可能にし得る、第1チャンバ109と第2チャンバ111との間の物理的障壁又は遮断物を提供することができる:滅菌剤が第2チャンバ111内に送達される際の、滅菌剤の送達速度/殺傷率の制御;第2チャンバ111から外への、芽胞115及び/又は検出可能生成物の拡散の制御;容器120が第2の断裂した状態にあるときの、第2チャンバ111への及び芽胞115への液体122の送達速度の制御;又はこれらの組み合わせ。一部の実施形態では、基材119は、作動の間すなわち容器120が第2の状態にあるとき、第2チャンバ111への液体122の送達に対する物理的障壁を提供することができるため、基材119内の開口121、及び/又は基材119の角度を制御することにより、所望の液体送達速度を生じさせることができる。更には、又は代替的には、第2流体通路162は、第2チャンバ111内に閉じ込められた、あらゆる気体又は空気に関する通気口を提供して、所望されるときの、基材119を通過するか又は基材119を越えて第2チャンバ111内へ入る、液体122の移動を促進することができる。更には、又は代替的には、ハウジング102を、所望されるときの、第2チャンバ111への液体122の移動を促進するように構成する例えば、適切な材料で形成し、かつ/又は微細構造の溝、若しくは他の物理的な表面改変で構成することができる。一部の実施形態では、液体122は、生き残った芽胞の発芽を助長する発芽培地などの、芽胞のための栄養培地を含み得る。一部の実施形態では、液体122は、栄養素と組み合わせて栄養培地を形成することができる、水又は、別の溶媒を含み得る。好適な栄養素は、生き残った芽胞の発芽及び/又は増殖を助長するために必要な栄養素を含み得、リザーバ103内に、例えば、生物学的滅菌インジケーター100の、芽胞115の近傍の領域内に、乾燥形態例えば、ビーズ又は他のキャリア内に封入される、粉末形態、錠剤形態、カプレット形態、カプセル形態、フィルム若しくはコーティング、別の好適な形状又は構成、あるいはこれらの組み合わせで、提供することができる。栄養培地は、全般的には、芽胞が生存可能である場合には、芽胞の発芽及び初期増殖を誘導するように選択することができる。栄養培地は、1種以上の糖を含み得、それらの糖としては、グルコース、フルクトース、セロビオースなど、又はこれらの組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。栄養培地はまた、塩も含み得、それらの塩としては、塩化カリウム、塩化カルシウムなど、又はこれらの組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。一部の実施形態では、栄養素は、少なくとも1種のアミノ酸を更に含み得、それらのアミノ酸としては、メチオニン、フェニルアラニン、及びトリプトファンのうちの、少なくとも1つが挙げられるが、これらに限定されない。一部の実施形態では、栄養培地は、指示薬分子、例えば、芽胞の発芽又は増殖に応答して変化する光学特性を有する、指示薬分子を含み得る。好適な指示薬分子としては、pH指示薬分子、酵素基質、DNA結合色素、RNA結合色素、他の好適な指示薬分子、又はこれらの組み合わせを挙げることができるが、それらに限定されない。図4~10に示すように、生物学的滅菌インジケーター100は、挿入部材130を更に含み得る。一部の実施形態では、挿入部材130は、容器120が、滅菌の間に、芽胞115から隔離された場所内に無損傷で保持されるように、容器120を保持又は支持するように適合させることができる。すなわち一部の実施形態では、挿入部材130は、特に、容器120が、作動工程すなわち滅菌プロセスの後に実施することができる、液体122を、容器120から解放して、芽胞115に導入する工程の間に破砕される前の、容器120のためのキャリア132図4を参照を含み得る又はキャリア132として機能することができる。一部の実施形態では、挿入部材130は、容器120が、ハウジング102内で、例えばハウジング102に対して長手方向に、少なくとも多少は移動することを可能にするように、更に適合させることができる。図示の実施形態の挿入部材130は、以下でより詳細に説明される。他の好適な挿入部材及びキャリアの実施例は、同時係属のPCT国際公開第2011/011189号で説明されている。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、図4~7、及び図9に示すように、芽胞キャリア135を更に含み得る。しかしながら、一部の実施形態では、芽胞115を収容するように適合された部分を含むように、挿入部材130を改変することができる。例えば、一部の実施形態では、挿入部材130及び芽胞キャリア135は、容器120を保持し、かつ最終的には、所望されるときに断裂させるように適合される、第1部分と、滅菌の間すなわち断裂の前に、芽胞115を、生物学的滅菌インジケーター100の、容器120から隔離された領域内に収容するように適合される、第2部分とを含む、1つの挿入部材として、一体的に形成することができる。図4~7、及び図9に示すように、芽胞キャリア135は、芽胞115を、直接的に又は基材上に配置することができる、芽胞リザーバ136凹部、ディボット、ウェル、陥凹などと称することもできるを含み得る。液体122が容器120から解放される際に、液体122と混合されるように配置される、栄養培地を採用する実施形態では、その栄養培地は、芽胞リザーバ136の近傍、又は芽胞リザーバ136内に配置することができ、栄養培地は、容器120から水が解放される際に、その水と混合する例えば、その水中に溶解することができる。単なる例として、栄養培地が、乾燥形態で提供される実施形態では、この乾燥形態は、リザーバ103の内部に、芽胞リザーバ136の内部に、芽胞用の基材上に、又はこれらの組み合わせで存在することができる。一部の実施形態では、液体と乾燥栄養培地との組み合わせを、採用することができる。一部の実施形態では、芽胞リザーバ136は、少なくとも約1マイクロリットルの容積を有し、一部の実施形態では、少なくとも約5マイクロリットル、一部の実施形態では、少なくとも約10マイクロリットルの容積を有する。一部の実施形態では、芽胞リザーバ136は、約250マイクロリットル以下の容積を有し、一部の実施形態では、約175マイクロリットル以下、一部の実施形態では、約100マイクロリットル以下の容積を有する。図7及び図9に示すように、一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、ハウジング102の壁部108に結合させるか、若しくは一体的に形成することができる、リブ又は突出部165を更に含み得、このリブ又は突出部165は、芽胞キャリア135を、ハウジング102内の所望の場所内に、かつ/又は読み取り装置12の検出システム例えば、光学検出システムに対して所望の角度若しくは配向で維持するように、配置することができる。図4~7、及び図9に示すように、ハウジング102の第2部分106は、第1部分104に結合するように適合させることができる。例えば、図示のように、第2部分106は、ハウジング102の第1部分104の上方部分116例えば、第1末端部101に結合するように適合させることができる。一部の実施形態では、図4~7に示すように、第2部分106は、ハウジング102の第1部分104の少なくとも一部分を受容するように寸法決めすることができる、キャップの形態とすることができる。図4、5、及び図7、8に示すように、滅菌の間、及び作動の前には、第2部分106は、第1部分104に対して、第1の非作動位置148にあることが可能であり、容器120は、第1の無損傷状態にあることが可能である。図9に示すように、ハウジング102の第2部分106は、第1部分104に対して、第2の作動位置150例えば、第2部分106が、完全に押し下げられる場所へと移動させることができ、容器120は、第2の断裂した状態にあることが可能である。例えば、滅菌の後に、第2部分106を、第1の位置148から第2の位置150へとすなわち十分な量移動させて、容器120の断裂を引き起こし、容器120から液体122を解放して、液体122が、芽胞115と流体連通することを可能にすることによって、生物学的滅菌インジケーター100を作動させることができる。生物学的滅菌インジケーター100は、読み取り装置のウェル内に、生物学的滅菌インジケーター100を配置する前に、ウェル内に生物学的滅菌インジケーター100を配置した後に、又はウェル内に生物学的滅菌インジケーター100を配置すると同時に、作動させることができるすなわち生物学的滅菌インジケーター100を、読み取り装置内の定位置へと滑り込ませることができ、第2部分106を、その第2の位置150に至るまで、例えば、ウェルの底部が、第2部分106を、その第2の位置150へと移動させるために十分な抵抗力を提供するまで、押し付け続けることができる。第2の位置150は、第1の位置148よりも、生物学的滅菌インジケーター100の第1部分104の閉鎖末端部105に近接させて位置決めすることができる。例示の実施形態に示すように、一部の実施形態では、ハウジング102の第1部分104は、段差部、張り出し部、又は平坦から丸い形への移行部152を含み得る。段差部152は、第2部分106が、その第1の位置148にあるとき、露出しているように示され、第2部分106が、その第2の位置150にあるとき、隠されているか、又は覆われているように示される。それゆえ、段差部152を探知することにより、第2部分106が、第1の位置148にあるすなわち生物学的滅菌インジケーター100が非作動であるか、又は第2の位置150にあるかすなわち生物学的滅菌インジケーター100が作動しているを判定することができる。生物学的滅菌インジケーター100のそのような機構を使用して、生物学的滅菌インジケーター100の状態を判定し、例えば、生物学的滅菌インジケーター100が作動しているか否かを確認することは、同時係属の米国特許出願第61/409,042号で、より詳細に説明されている。段差部152の長手方向位置は、単なる例として示されるが、しかしながら、段差部152は、その代わりに、異なる長手方向位置に例えば、生物学的滅菌インジケーター100の閉鎖末端部105に、より近接させて配置することができ、又は一部の実施形態では、丸い形の部分から平坦面への移行部は、段階的、テーパー形状、又は傾斜状とすることができる点を理解するべきである。ハウジング102の第1部分104と第2部分106との間に、様々な結合手段を採用することにより、第1部分104及び第2部分106が、互いに取り外し可能に結合されることを可能にすることができ、それらの結合手段としては、重力例えば、1つの構成要素を、別の構成要素の上に、又はその接合部分に設置することができる、ねじ山、圧入係合摩擦嵌め係合又は締まり嵌め係合と称される場合もある、スナップ嵌め係合、磁石、接着剤、熱封止、他の好適な取り外し可能結合手段、及びこれらの組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、再び開放する必要はなく、第1部分104及び第2部分106を、互いに取り外し可能に結合させる必要はないが、むしろ、互いに恒久的に、又は半恒久的に結合させることができる。そのような恒久的又は半恒久的結合手段としては、接着剤、縫合、ステープル、ネジ、クギ、リベット、無頭釘、クリンプ、溶接例えば、音波例えば、超音波溶接、任意の熱接着技術例えば、結合させる構成要素の一方若しくは双方に適用される、熱及び/又は圧力、スナップ嵌め係合、圧入係合、熱封止、他の好適な恒久的若しくは半恒久的結合手段、及びこれらの組み合わせを挙げることができるが、それらに限定されない。恒久的又は半恒久的結合手段の一部はまた、取り外し可能であるように適合させることも、またその逆も可能であり、単なる例として、この方式で分類されることが、当業者には理解されるであろう。図7及び図9に示すように、第2部分106は、第1部分104に対する第1の長手方向位置148と、第1部分104に対する第2の長手方向位置150との間で、移動可能とすることができるが、しかしながら、生物学的滅菌インジケーター100は、その代わりに、第1の位置148及び第2の位置150が、必ずしも、ハウジング102の第1部分104及び第2部分106の一方若しくは双方に対する、長手方向位置であるとは限らないような、異なる構成とすることが可能である点を理解するべきである。第2部分106は、第2部分106が第2の位置150へと移動され、液体122が容器120から開放された後すなわち容器120が、第2の断裂した状態にあるときに、第1部分104の第1末端部101、具体的には、第1部分104の開放上方末端部157に接触して、生物学的滅菌インジケーター100を閉鎖又は封止する例えば、気密封止するように配置することができる、封止部156例えば、突起部、突出部、フラップ、フランジ、oリングなど、又はこれらの組み合わせを更に含み得る。すなわち芽胞115は、容器120が第2の状態にあるとき、環境から封止することができる。封止部156は、様々な形態を取ることができ、図7及び図9では、例として、第2部分106の壁部110と共に、ハウジング102の第1部分104の上方末端部157を受容して、生物学的滅菌インジケーター100を封止するように寸法決めされる、内側リング又は空洞部を形成するものとして示される。一部の実施形態では、封止部156及び上方末端部157の一方若しくは双方は、ハウジング102の第2部分106を、ハウジング102の第1部分104に結合するために、それぞれ、封止部156及び上方末端部157の他方に係合するように構成される構造例えば、突出部を更に含み得る。更には、一部の実施形態では、ハウジング102の第2部分106を、ハウジング102の第1部分104に結合して、作動の後に、生物学的滅菌インジケーター100を環境から封止することができる。そのような封止は、液体122が容器120から解放された後の、液体122の汚染、蒸発、若しくは溢流を阻止することができ、かつ/又は生物学的滅菌インジケーター100の内部の汚染を阻止することができる。ここで、挿入部材130を、より詳細に説明する。図4、5、及び図7に示すように、滅菌の間、及び作動の前には、第2部分106は、第1部分104に対して、第1の位置148にあることが可能である。第1の位置148では、容器120は、下方部分114、第2チャンバ111、又は芽胞115から隔離された場所内に、無損傷で保持することができ、液体122を、容器120内部に収容することができる。図9に示すように、滅菌の後に、生物学的滅菌インジケーター100を作動させて、容器120から液体122を解放し、第2チャンバ111へと、液体122を移動させることができる。すなわちハウジング102の第2部分106を、第1部分104に対して、第2の位置150に移動させることができる。第2部分106が、第1の位置148から第2の位置150に移動されると、ハウジング102の第2部分106の封止部156が、第1部分104の上方末端部157に係合して、生物学的滅菌インジケーター100のリザーバ103を、環境から封止することができる。そのような実施形態では、第2部分106は、第2の位置150で、第1部分104に可逆的に係合することができ、一部の実施形態では、第2部分106は、第1部分104に不可逆的に係合することができる。しかしながら、第1部分104及び第2部分106に関する構造並びに結合手段は、図示の実施形態では、単なる例として示されるものであり、上述の結合手段のいずれもが、その代わりに、ハウジング102の第1部分104と第2部分106との間で採用することができる点を理解するべきである。挿入部材130は、容器120が、滅菌の間に、芽胞115から隔離された場所内に無損傷で保持されるように、容器120を保持又は支持するように適合させることができる。すなわち上述のように、一部の実施形態では、挿入部材130は、特に、容器120が、作動工程すなわち典型的には滅菌プロセスの後に実施される、液体122を、容器120から解放して、芽胞115に導入する工程の間に破砕される前の、容器120のためのキャリア132を含み得る又はキャリア132として機能することができる。更には、挿入部材130は、容器120とハウジング102との間、及び/又は容器120とハウジング102内の他のあらゆる構成要素若しくは構造例えば、キャリア132などの、挿入部材130の少なくとも一部分などとの間に、少なくとも最小限の空隙部例えば、最小限の断面積の空間を維持する、ハウジング102内の位置に、容器120を保持して、例えば、生物学的滅菌インジケーター100内に、実質的に一定の滅菌剤通路164を維持するように適合させることができる。一部の実施形態では、挿入部材130は、ハウジング102内の実質的に一定の場所内に、容器120を保持するように適合させることができる。一部の実施形態では、図6に示すように、ハウジング102の少なくとも一部分は、ハウジング102例えば、壁部108及び/又はその内側表面が、ハウジング102の長手方向DLで概して先細になる、テーパー形状部分146を含み得る。結果として、ハウジング102内の断面積は、長手方向DLに沿って、概して減少し得る。一部の場合には、容器120の周囲例えば、容器120と周囲を取り囲む構造との間に少なくとも最小限の空隙部を維持するための手段が提供されない場合、容器120が、滅菌剤通路164を閉塞又は遮断する方式で、ハウジング102内に例えば、テーパー形状部分146内に配置され得る可能性が、存在し得る。しかしながら、本開示の生物学的滅菌インジケーター100は、このことが発生することを阻止するように設計される。例えば、図示の実施形態では、挿入部材130具体的には、キャリア132は、ハウジング102のテーパー形状部分146の外に、容器120を保持するように構成することができるため、作動の前の生物学的滅菌インジケーター100がいずれの配向にあっても、少なくとも最小限の断面積が、容器120の周囲に維持される。例えば、図4~8に示す実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100が、上下を逆転される場合であっても、容器120は、挿入部材130との接触から脱落する可能性はあるが、いずれの配向であっても、容器120は、生物学的滅菌インジケーター100の作動まで、テーパー形状部分146又は芽胞115に、より近接して移動されることはない。更には、作動までは、容器120とハウジング102及び/又は挿入部材130との間の、少なくとも最小限の空隙部具体的には、その空隙部の断面積を維持して、例えば、実質的に一定の滅菌剤通路164を、容器120の周囲から、第1流体通路160を通じて、第2チャンバ111内へと提供することができる。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100の構成要素の、相対的なサイズ設定及び配置は、作動の前に、容器120が、生物学的滅菌インジケーター100内の実質的に一定の場所内に、無損傷で保持されるように構成することができる。そのような構成により、実質的に一定の滅菌剤通路164を提供することができ、作動の前に、生物学的滅菌インジケーター100内で、容器120が移動することが、仮にあるとしても、実質的に不可能であるような位置に、容器120を維持することができる。一部の実施形態では、挿入部材130の少なくとも一部分は、容器120が、ハウジング102内で、例えば、容器120が無損傷である第1の長手方向位置と、容器120の少なくとも一部分が断裂される第2の長手方向位置との間で、ハウジング102に対して長手方向で移動することを可能にするように適合させることができる。単なる例として、挿入部材130は、作動の前に、容器120を保持及び支持するように適合され、かつ作動の間に、例えば、第2部分106が、ハウジング102の第1部分104に対して移動されるときに、容器120がハウジング102内で移動することを可能にするように適合される、1つ以上の突起部又はアーム158容器120の周りで離間する2つの突起部158を、単なる例として示すを含み得る。突起部158はまた、生物学的滅菌インジケーターが作動されるときに、容器120を所望の方式で断裂させるように適合させる例えば、成形及び/又は配置することもできる。結果として、挿入部材130は、場合によって、作動の前に、容器120を保持するよう機能することができ、作動の間に、容器120を破砕するように機能することができる。結果として、挿入部材130、又はその一部分は、場合によって、キャリア例えば、キャリア132及び/又は破砕装置と称することができる。単なる例として、突起部158は、図4、及び図6~10では、分割壁118に当接するように適合された基部又は支持部127に、結合されるものとして示される。例えば、基部127は、リザーバ103内に受容されるように寸法決めすることができ、かつ分割壁118の上に設置されるか、分割壁118に当接するか、又は他の方法で分割壁118と協働若しくは結合するように、寸法決めすることができる。生物学的滅菌インジケーター100の内部構造との、そのような結合により、所望されるときに容器120を破砕するために必要な、抵抗及び力を提供することができる。しかしながら、一部の実施形態では、挿入部材130は基部127を含まず、突起部158は、ハウジング102の一部分に結合されるか、又はハウジング102の一部分を形成することができる。一部の実施形態では、挿入部材130は、ハウジング102と一体的に形成されるか、又はハウジング102によって提供される。図示のように、挿入部材130は、突起部158を連結し、かつハウジング102の内側表面及び/又は容器120の外側表面に対応するように成形される、側壁部131を更に含み得る。そのような側壁部131は、突起部158に支持及び剛性を提供して、容器120を、一貫した方式で確実に破砕することを援助することができる。側壁部131はまた、作動の間に、容器120がハウジング102内を移動する際、容器120を所望の方式で誘導して、例えば、突起部158に所望の方式で接触させ、容器120を確実に断裂させるように、成形及び寸法決めすることもできる。側壁部131、及び/又はハウジング102の壁部108又はその内側表面はまた、例えば、挿入部材130の外側表面と、ハウジング102の内側表面との間に、生物学的滅菌インジケーター100の第2流体通路162の少なくとも一部分を画定するように、成形することもできる。例えば、一部の実施形態では、図4、5、8、及び図9に示すように、挿入部材130の側壁部131は、第2流体通路162の少なくとも一部分を形成するように構成される、チャネル又は溝、陥凹など169を含み得る。第2流体通路162は、生物学的滅菌インジケーター100内部の内部通気口又は通気チャネルとして機能することにより、気体例えば、第2チャンバ111内に例えば、生物学的滅菌インジケーター100の閉鎖末端部105付近に閉じ込められていた空気などの、排出される気体が、生物学的滅菌インジケーター100の第2チャンバ111から抜け出ることを可能にすることができる。一部の実施形態では、第2流体通路162は、作動の間に、第2チャンバ111内に存在する気体のための逃げ道、すなわち内部通気口を提供することにより、液体122が容器120から解放される際に、第1チャンバ109から第2チャンバ111内への液体122の移動を促進することができる。更には、又は代替として、一部の実施形態では、第2流体通路162は、滅菌の間に、第2チャンバ111内に存在する気体のための逃げ道、すなわち内部通気口を提供することにより、生物学的滅菌インジケーター100の第2チャンバ111内への、及び芽胞115への、滅菌剤の移動を促進して、第2チャンバ111内への、より効率的な滅菌剤の浸入を可能にする。単なる例として、図5及び図10に示すように、第2流体通路162は、挿入部材130の一部分例えば、チャネル169、及びハウジング102の壁部108内例えば、壁部108の内側表面内に形成されるチャネル又は溝、陥凹など163の双方によって、少なくとも部分的に画定することができる。しかしながら、一部の実施形態では、第2流体通路162が、第2チャンバ111と、生物学的滅菌インジケーター100の別の内部部分若しくは領域との間に、流体連通を提供するように、第2流体通路162を、完全にハウジング102で形成することができ、又は、生物学的滅菌インジケーター100の他の構成要素の、様々な組み合わせで形成することができる点を理解するべきである。例えば、第2流体通路162は、ハウジング102及び挿入部材130の双方によって形成する必要はなく、これらの構成要素の一方、又は他の構成要素によって、形成することができる。更には、図5及び図10に示すように、第2流体通路162の少なくとも一部分を画定する、チャネル163は、チャネル163が、ハウジング102の内側及び外側上で可視であるように、ハウジング102の外側表面及び内側表面内に成形される。しかしながら、ハウジング102の外側表面は、そのような形状を含む必要はなく、むしろ、一部の実施形態では、ハウジング102の外側表面は、実質的に均一又は無変化のまま維持することができ、ハウジング102例えば、ハウジング102の壁部108の内側表面が、チャネル163を含み得る。更には、一部の実施形態では、挿入部材130又はハウジング102のいずれもが、それぞれ、チャネル169又はチャネル163を含むのではなく、むしろ、挿入部材130とハウジング102との間に、第2チャンバ111と流体連通する空間又は間隙が提供されるように、挿入部材130並びにハウジング102が成形及び寸法決めされ、そのような空間又は間隙が、第2流体通路162として機能する。図7及び図9に更に示すように、一部の実施形態では、第1流体通路160及び/又は第2流体通路162は、壁部118、基材119、挿入部材130、及びハウジング102のうちの1つ以上によって、少なくとも部分的に画定することができる。更には、第1流体通路160及び第2流体通路162の少なくとも一方は、芽胞キャリア135、又はその一部分によって、少なくとも部分的に画定することができる。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、容器120が、第1の断裂していない状態にあるとき、以下の順序で配置構成される、以下の構成要素を含み得る:生物学的滅菌インジケーター100のハウジング102の閉鎖末端部105、第2チャンバ111、基材119、挿入部材130、第1チャンバ109、容器120、ハウジング102又はハウジング102の第2部分106の開放末端部101。例示の実施形態に示すように、第2流体通路162は、第2チャンバ111が、第1チャンバ109などの、生物学的滅菌インジケーター100の別の部分に通気することを可能にし得る。一部の実施形態では、特に、第2流体通路162が、第2チャンバ111を、第1チャンバ109へ戻して通気する実施形態では、第2流体通路162は、第1流体通路160が第2チャンバ111に入る位置よりも上方例えば、垂直上方に配置される位置で、第2チャンバ111から出ることができる。換言すれば、一部の実施形態では、第2流体通路162は、第2チャンバ111から、第1流体通路160が第2チャンバ111に入る位置例えば、以下で説明する、第1のレベルL1又は第2のレベルL2よりも上方にある、生物学的滅菌インジケーター100内の位置例えば、以下で説明する、第4のレベルL4まで、延在することができる。更には、一部の実施形態では、第2流体通路162が第1チャンバ109に入る位置は、第1流体通路160が第2チャンバ111に入る位置よりも上方例えば、垂直上方に配置することができる。一部の実施形態では、第1流体通路160は、第2チャンバ111を、生物学的滅菌インジケーター100の近位部分例えば、第2チャンバ111に近接又は隣接して、例えば、第1のレベルL1及び/又は第2のレベルL2に配置される、第1チャンバ109の一部分と流体結合するように配置することができ、第2流体通路162は、第2チャンバ111を、生物学的滅菌インジケーター100の遠位部分すなわち第2チャンバ111からより遠くに、例えば、以下で説明する第3のレベルL3、及び/又は第4のレベルL4に配置される、第1チャンバ109の一部分と流体結合するように配置することができる。結果として、第2流体通路162が第1チャンバ109に入る位置は、第1流体通路160が第2チャンバ111に入る位置よりも、第2チャンバ111から遠くに配置することができる。より具体的には、また単なる例として、図7及び図9を参照すると、一部の実施形態では、流体は、挿入部材130、基材119、ハウジング102、及び/又は第2チャンバ111の前方に概して配置される、第1のレベル、高さ、若しくは位置例えば、長手方向位置L1、並びに基材119内の開口121のレベルに概ね配置される、第2のレベル、高さ、又は位置例えば、長手方向位置L2などの、様々な場所で、第2チャンバ111に入ることができる。上述のように、流体が第2チャンバ111内に移動することを可能にする、第1チャンバ109と第2チャンバ111との間の様々な開口部及び空間を、第1流体通路160と総称することができる点を理解するべきである。図7に更に示すように、一部の実施形態では、気体例えば、排出される気体は、第2流体通路162を介してすなわち流体が、第1流体通路160を介して第2チャンバ111内に移動する際に、挿入部材130、基材119、ハウジング102、及び/又は第2チャンバ111の後方に概して配置される、第3のレベル、高さ、若しくは位置例えば、長手方向位置L3で、第2チャンバ111から抜け出ることができる。図7及び図9に示す、生物学的滅菌インジケーター100の垂直的な直立配向では、第3のレベルL3は、第1のレベルL1及び第2のレベルL2の双方以上に位置する。更には、一部の実施形態では、第3のレベルL3は、生物学的滅菌インジケーター100の動作中例えば、読み取り装置のウェル内に設置されるとき、滅菌の間、及び/又は作動の間、依然として、第1のレベルL1及び第2のレベルL2の双方以上に位置することができる。すなわち一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、動作中に傾斜させることができる例えば、図7若しくは図9の左手側に向けて、図4若しくは図6の右手側に向けて、図4若しくは図6の奥へ、及び/又は図7若しくは図9の手前に。第1のレベルL1、第2のレベルL2、及び第3のレベルL3は、単なる例として示されるが、しかしながら、第1流体通路160が第2チャンバ111に入る正確な場所、及び/又は第2流体通路162が第2チャンバ111から出る正確な場所は、図7及び図9に示すものとは異なるものにすることができる点を理解するべきである。図7及び図9に示すように、第2流体通路162は、挿入部材130のチャネル169及び/又はハウジング102のチャネル163によって、少なくとも部分的に画定され、これらは、全般的に、以下の論考では単純にチャネルと称され、図示の実施形態のチャネル169及び/又はチャネル163の、少なくとも一部分を指すように、解釈することができる図示の実施形態では、チャネルは、第2チャンバ111内の任意の地点、又は第3のレベルL3に位置しているとして説明することができる、入口と、第4のレベル、高さ、又は位置例えば、長手方向位置L4に概して配置される、出口とを有する。図7及び図9に示すように、例えば、生物学的滅菌インジケーター100の動作中には、チャネルの出口位置すなわち第4のレベルL4は、第1流体通路160が第2チャンバ111と接続する位置すなわち第1のレベルL1及び/又は第2のレベルL2よりも上方に、概して配置される。換言すれば、第1流体通路160は、第1チャンバ109の第2下方末端部113を、第2チャンバ111の第1上方末端部124に、流体結合するように配置することができる。その一方で、第2流体通路162は、第2チャンバ111例えば、第2チャンバ111の第1上方末端部124を、第1チャンバ109の上方部分例えば、第1上方末端部112に、流体結合するように配置することができる。更には、一部の実施形態では、第2流体通路162又はチャネルが第2チャンバ111と接続する位置又はレベルは、容器120が、その第2の断裂した状態にあるときに、液体122で最後に充填される、第2チャンバ111の部分に位置しているとして、説明することができる。一部の実施形態では、容器120が、第2の断裂した状態にあり、第2チャンバ111が、液体122で少なくとも部分的に充填される場合、液体122は、あるレベル、高さ、又は位置例えば、長手方向位置Lを有し得、第2流体通路162は、そのレベルLよりも下方の位置と、レベルLよりも上方の位置との間に延在し得る。結果として、容器が第2の状態にあるとき、第2チャンバ111が、液体122で充填される際、第2チャンバ111は、第2流体通路162によって、継続的に通気することができる。一部の実施形態では、第1流体通路160は、第1チャンバ109と第2チャンバ111との間の、主要又は一次的な流体連通路として機能することができ、第2流体通路162は、第2チャンバ111と第1チャンバ109との間の、補助的又は二次的な流体連通路としての役割を果たすことができる例えば、第2流体通路162が、第1チャンバ109内に抜け出るものであって、生物学的滅菌インジケーター100の別の部分に抜け出るものではない場合。そのような実施形態では、第2流体通路162の総合的な空間、容積、及び/又は面積は、第1流体通路160のものよりも実質的に小さいものとすることができる。一部の実施形態では、第1流体通路160及び第2流体通路162の少なくとも一部分は、実質的に互いに離隔しているものとして、又は実質的に平行で交差しないものとして、説明することができる。一部の実施形態では、第1流体通路160及び第2流体通路162は、それぞれ、第1チャンバ109と第2チャンバ111との間で、実質的に長手方向に例えば、長手方向DLに実質的に平行に延在することができる。すなわち全般的には、1第1チャンバ109から第2チャンバ111への流体の移動の、少なくとも大半に対応するように構成される、第1流体通路160などの第1流体通路と、2第2チャンバ111からの気体を通気するように構成される、第2流体通路162などの第2流体通路とを含む、生物学的滅菌インジケーター100は、1つのみの内部チャンバを含んでいたか、あるいは流体が第2チャンバ111に入る通路と同じ流体通路を介して、気体が第2チャンバ111から抜け出なければならないような、第1チャンバ109及び第2チャンバ111を接続する、1つのみの流体通路を含んでいた、生物学的滅菌インジケーター100に勝る有利点を有する。例示の実施形態に示すように、第1流体通路160及び第2流体通路162を構成することによって、一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、第2チャンバ111内に、滅菌剤及び/又は液体122を移動させる試みの結果として生じる恐れがある、あらゆる空気閉塞効果を、少なくとも部分的に排除することができる。更には、一部の実施形態では、第2流体通路162は、生物学的滅菌インジケーター100が作動して、液体122が、重力により第2チャンバ111内に移動することを可能にする一方で、生物学的滅菌インジケーター100は、液体122を第2チャンバ111内に移動させるために、生物学的滅菌インジケーター100の上下を逆転させるか、又は他の方法で再配向することを必要とせずに、同じ配向例えば、図4、5、7、及び図9に示すような、実質的に垂直的な直立配向で維持される。挿入部材130を引き続き参照すると、挿入部材130の突起部158は、比較的、剛性であり、固定されているものとして示される。すなわち一部の実施形態では、突起部158は、容器120がハウジング102内で移動する際に、容器120に対して、実質的に屈曲、歪曲、変形、又は他の方法で対処するように適合させることができない。むしろ、一部の実施形態では、図4~7、及び図9に示すように、突起部158は、作動の前に、容器120を上に配置して無損傷で保持することができる、上方末端部159を有するように、それぞれ構成することができる。図4、5、及び図7に示すように、一部の実施形態では、突起部158は、例えば、楕円形又はカプセル形状の容器120が採用される場合、容器120を、その半曲末端部で断裂させるように配置することができる。突起部158に、キャリア132の少なくとも一部分を形成させることの潜在的な1つの有利点は、容器120が断裂する際に、容器120の底部を非拘束的にすることができるため、比較的容易かつ確実に、液体122を、容器120から解放して、芽胞115に向けて移動させることができる点である。そのような実施形態では、例えば、楕円形又はカプセル形状の容器120が採用される場合、挿入部材130を使用して、容器120の平坦面に実質的に垂直の方向で、容器120を断裂させることができる。そのような実施形態では、容器120を、その側面に沿って断裂させることは、容器120の下方末端部の周囲に、幾分の開放空間を維持することと共に達成されるため、容器120が断裂する際の、容器120から芽胞115の近位への液体122の移動を促進することができる。上述のように、突起部158は、例えばハウジング102の第2部分106が、ハウジング102の第1部分104に対して移動する例えば、第1の位置148から第2の位置150へとことに応答して、容器120がハウジング102に対して移動する例えば、長手方向DLに沿って際に、容器120を断裂させるように適合させることができる。一部の実施形態では、突起部158は、1つ以上の縁端部例えば、テーパー形状の縁端部若しくは尖端部を含むか、又は他の方法で、粉砕力を集中させるように構成して、突起部158に隣接する領域内での、容器120に対する圧力を増大させ、容器120を、より容易に、かつ1つ以上の所望の領域内で断裂させることを促進することができる。一部の実施形態では、そのような力の集中により、第2部分106を第1部分104に対して移動させて、容器120又は、その一部分を断裂させるために必要とされる、全体的な労力又は力を低減することができる。図4~7、及び図9に示すように、突起部158は、挿入部材130の基部127と一体的に形成されるが、しかしながら、突起部158は、その代わりに、ハウジング102の壁部108と一体的に形成することができる点を理解するべきである。更には、一部の実施形態では、突起部158は、ハウジング102に結合することができ、あるいは突起部158及び基部127は、別個の挿入部材によって提供することができる。そのような実施形態では、突起部158は、それぞれ、別個の挿入部材とすることができ、又は複数の突起部158を、1つ以上の挿入部材によって提供することができる。更には、挿入部材130は、壁部118に当接して、芽胞115の近位例えば、ハウジング102の下方部分114内への、第1部分の挿入部材130の移動を阻止するように構成することができる。更には、一部の実施形態では、図4~7、及び図9に示すように、突起部158は、長手方向DLに沿って延在することができ、突起部158の長さ及び/又は厚さ例えば、厚さは、長さに沿って変化し得るを調整して、ハウジング102内の所望の位置、及び所望の方式での、容器120の断裂を制御することができる。突起部158の構成を、単なる例として、図4~10に示す。全般的には、突起部158のそれぞれは、単なる例として、芽胞115に向けて、長手方向DLに沿って厚さが増大する例えば、容器120、又はハウジング102の中心に向けて、内側方向にものとして示される。そのような構成により、例えば、第2部分106が、第2の位置150に移動することに応答して、容器120が、芽胞115に向けて移動するにつれて、容器120に利用可能な断面積を減少させることができる。更には、生物学的滅菌インジケーター100は、単なる例として、2つの突起部158、及び側壁部131を含むものとして図3~10に示されるが、1つの突起部158、若しくは構造的に可能な限り多くの突起部158、及び他の構成を採用することができる点を理解するべきである。更には、突起部158は、ハウジング102の形状及び寸法、容器120の形状及び寸法、挿入部材130の形状及び寸法、並びに/あるいは容器120を断裂させるために所望される方式及び位置に応じて、所望されるように成形及び寸法決めすることができる。上述のように、一部の実施形態では、ハウジング102の少なくとも一部分は、テーパー形状とすることができる例えば、図6のテーパー形状部分146を参照。結果として、ハウジング102内の断面積は、長手方向DLに沿って、概して減少し得る。しかしながら、ハウジング102の内法寸法は、ハウジング102の外法寸法を変化させることなく、テーパー形状部分で、長手方向D1に沿って概して減少し得ることを理解するべきである。一部の実施形態では、ハウジング102の内側部分が、その長さに沿って先細となる場合であっても、ハウジング102の外法寸法は、その長さに沿って均一とすることができる。一部の実施形態では、1つ以上の突起部158のみが、長手方向DLに沿って、厚さが変化し得るすなわち容器120に向けて、例えば、半径方向でことにより、ハウジング102の寸法が変化しない場合であっても例えば、ハウジング102が、内部又は外部のいずれにも、いずれのテーパー形状部分146を含まない場合であっても、容器120が、作動の間にハウジング102内で移動するにつれて、容器120に利用可能な断面積は概して減少する。図4~10に示すように、突起部158のそれぞれの、上方末端部159は、丸形、湾曲、又は弓状の表面を含み、この表面により、突起部158の上方末端部159の上方に、容器120が少なくとも部分的に設置される、第1の位置148から、突起部158の間又はハウジング102の壁部108と1つ以上の突起部158との間の、より小さい断面積の領域内に、容器120が少なくとも部分的に押し込められる位置への、容器120の移動を促進することができる。更には、丸形の上方末端部159は、容器120の時期尚早の破砕を阻止することができ、このことにより、生物学的滅菌インジケーター100の時期尚早の作動すなわち液体122の時期尚早の解放を阻止することができる。一部の実施形態では、図6に示すように、挿入部材130は、容器120を、突起部158の上方に、かつ1つ以上の突起部158の、内側方向を向く表面の、いずれかの部分に隣接する領域から離れて保持することにより、生物学的滅菌インジケーター100の偶発的又は時期尚早の作動を阻止することが可能になるように、サイズ決定及び成形することができる。そのような構成はまた、衝撃又は材料の膨張例えば、滅菌プロセスの間の熱曝露によるによる、不用意な破砕も阻止することができる。突起部158の上方末端部159によって、少なくとも部分的に形成することができる、キャリア132は、容器120の底部部分を保持するように構成することができ、突起部158は、容器120がハウジング102内に配置される際、容器120の底部付近の場所で、容器120を断裂させるように、配置することができる。そのような構成により、容器120が、その底部付近で破砕されることを可能にすることができ、容器120からの液体122の除去を促進することができ、このことにより、芽胞115への液体122の利用可能性を増進することができ、液体122を、芽胞115と例えば、芽胞リザーバ136と流体連通するように解放することの確実性を増進することができる。そのような構成は、単なる例として示されるが、しかしながら、突起部158は、任意の所望の方式で容器120を断裂させるように構成及び配置することができる点を理解するべきである。本開示の一部の実施形態は、比較的小さい力を使用する、壊れやすい容器120の最適かつ安全な破砕を提供する一方で、生物学的滅菌インジケーター100の芽胞領域例えば、ハウジング102の第2チャンバ111への液体122の移動を増進し、かつ/又は生物学的滅菌インジケーター100の芽胞領域内での、液体122の封じ込めを増進する。更には、本開示の一部の実施形態は、生物学的滅菌インジケーター100の検出チャンバ例えば、第2チャンバ111などの、生物学的滅菌インジケーター100の特定領域に、液体を推進するように動作する。図4~10に示す実施形態では、挿入部材130は、容器120の周りで、かつ/又は側壁部131の周りで、ほぼ等しく離間する、2つの突起部158を含むものとして示される。しかしながら、一部の実施形態では、側壁部131は、側壁部131から半径方向内側に延在する、1つの中実の例えば、実質的に環状、又は半環状の突起部158を含み得る。更には、一部の実施形態では、側壁部131は、ハウジング102の内側表面の周囲で、図示されるものよりも更に延在し得る。しかしながら、図4~10に示すもののような、より狭い例えば、角度寸法で1つ以上の突起部158を採用することにより、実質的に一定又は実質的に非閉塞の滅菌剤通路164を、容器120の周囲に提供することができる。挿入部材130が、1つ以上の突起部158を含む場合であれ、又は側壁部131を含む場合であれ、挿入部材130は、ハウジング102内の一定の場所内に、容器120を保持して、滅菌の間、実質的に一定の滅菌剤通路164を提供するように構成することができる。例えば、容器120が、作動の前に例えば、滅菌の間に、ハウジング102内で、移動又は回転する例えば、半径方向及び/又は長手方向にことを可能にするのではなく、挿入部材130は、実質的に一定の位置に、容器120を保持することができ、このことにより、不用意な遮断の機会が殆ど又は全く伴わない、容器120の外側表面とハウジング102の内側表面との間の、滅菌剤の実質的に一定かつ比較的非閉塞の通路を可能にすることができる。例示の実施形態に示すように、挿入部材130は、実質的に水平に、又は生物学的滅菌インジケーターの長手方向DLに対して垂直に配置される例えば、挿入部材130が、生物学的滅菌インジケーター内に配置される場合、1つ以上の突起部161を更に含み得る。突起部161は、第2突起部又は水平突起部と称することができ、その一方で、容器120を保持及び/又は破砕するために使用される突起部158は、第1突起部又は垂直突起部と称することができる。第2突起部161は、基部127のように下向きに角度付けされない。結果として、第2突起部161は、様々な目的に関して使用することができる。例えば、第2突起部161は、容器120を断裂させる力の下で、挿入部材130を安定させる例えば、生物学的滅菌インジケーター100のハウジング102内の所望の位置に、挿入部材130を保持することを援助することができる。更には、第2突起部161は、容器120が断裂した後に、容器120の断裂部分を保持及び/又は回収することにより、芽胞の増殖、及び/又は芽胞の増殖の検出に悪影響を及ぼす恐れがある、生物学的滅菌インジケーター内の芽胞の近位への、そのような部分の移動を阻止するように、機能することができる。芽胞115に至る固体の移動を阻止しつつ、芽胞115に至る流体の移動を依然として可能にする、第2突起部161の他の形状及び構成を採用することができる。一部の実施形態では、挿入部材130例えば、基部127は、ハウジング102の第2チャンバ111すなわち下方部分114内への流体の移動例えば、液体122の移動を促進又は可能にすること;ハウジング102の第2チャンバ111内への、断裂した容器120の断片又は諸部分例えば、固体の移動を最小限に抑えること、すなわち断裂した容器120の諸部分を回収及び/又は保持すること;並びに/あるいは、ハウジング102の第2チャンバ111から外への、芽胞115及び/又はシグナルの拡散を最小限に抑えることのうちの、1つ以上に関して適合させることができる。例えば、一部の実施形態では、基部127は、格子又はフィルターとして機能するように構成することができる。一部の実施形態では、芽胞の増殖は、蛍光指示薬/分子例えば、蛍光色素分子又は他のマーカーによって判定される。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100内での、作動の後の液体のレベルが、芽胞115の場所よりも上方である場合には、そのような分子若しくはマーカー、又は芽胞115自体が、芽胞リザーバ136から離れる方向に、若しくは芽胞リザーバ136から外へ、かつ潜在的には、ハウジング102の第2チャンバ111から外へ、移動又は拡散する恐れがある。結果として、生物学的滅菌インジケーター100の諸部分例えば、挿入部材130は、生物学的滅菌インジケーター100の第2チャンバ111から外への、様々な指示薬、分子、及び/又はマーカーの望ましくない拡散を阻止するように構成することができる。一部の実施形態では、上述のように、基材119もまた、そのような望ましくない拡散を阻止することができる。図4~7に示す実施形態では、挿入部材130の基部127は、概してU字形又は馬蹄形であり、滅菌の間の芽胞115に向けた滅菌剤の移動、及び作動の間の芽胞115に向けた液体122の移動を促進する、中心開口177図5を参照を含む。基部127の馬蹄形は、ハウジング102の上方部分116すなわち第1チャンバ109と下方部分114すなわち第2チャンバ111との間の開口部を増大させることができるが、しかしながら、この形状は、単なる例として示すものであり、他の形状を採用することもできる。一部の実施形態では、挿入部材130は、下向きに延出する1つ以上の突起部127を含むものとして説明することができ、この突起部127は、壁部118、又は生物学的滅菌インジケーター100の別の内部構造に当接するか、若しくは他の方法で結合して、挿入部材130のための基部若しくは支持部を提供し、作動の前のハウジング102に対する挿入部材130及び容器120の移動を阻止し、かつ/又は作動の間の容器120の破砕を援助するように適合される。結果として、一部の実施形態では、基部127は、その代わりに、第3突起部127と称することができる。例示の実施形態に示すように、一部の実施形態では、挿入部材130は、生物学的滅菌インジケーター100の第1チャンバ109内に、完全に存在するように構成することができるため、挿入部材130が、検査又は検出プロセスを潜在的に妨害する可能性がある、第2チャンバ111内へと、延在することがない。更には、挿入部材130は、第2チャンバ111内への、生物学的滅菌インジケーター100の他の部分例えば、断裂した容器120の移動を阻止するように構成することができる。図示の実施形態の挿入部材130は、中心の長手方向対称軸に関して、概して対称であることにより、2つの同一の第1突起部158、2つの同一の第2突起部161、及び2つの同一の第3突起部127が存在する。しかしながら、挿入部材130は、いずれの対称軸も含む必要はなく、第1突起部158は、互いに同じである必要はなく、第2突起部161は、互いに同じである必要はなく、第3突起部127は、互いに同じである必要はない。挿入部材130、並びに様々な突起部158、161、及び突起部127は、滅菌剤通路164を制御して、例えば、生物学的滅菌インジケーター100の殺傷/生存率を調整し、容器120の不用意な断裂を阻止し、ハウジング102内での容器120の移動を促進し、ハウジング102と接合若しくは係合し、かつ/又は容器120の破砕を制御するように、サイズ決定及び配置することができる。単なる例として、図示の挿入部材130は、少なくとも以下を含む一体型デバイスであるとして示される:作動の前に容器120を保持するための手段、作動の間に容器120を断裂させるための手段;ハウジング102内での容器120の移動を可能にするための手段;実質的に均一な滅菌剤通路164を提供するための手段、作動の後の断裂した容器120の諸部分を回収及び/又は保持する又はハウジング102の第2チャンバ111内への、断裂した容器120の諸部分の移動を、少なくとも部分的に阻止するための手段;並びに/あるいは作動後の、ハウジング102の第2チャンバ111から第1チャンバ109への、芽胞115及び/又はシグナルの拡散を最小限に抑えるための手段。しかしながら、一部の実施形態では、挿入部材130は、単一の一体型デバイスの一部とすることができない、複数の部分を含み得、それらの部分のそれぞれを、上記の機能のうちの1つ以上を行なうように適合させることができる点を理解するべきである。挿入部材130が挿入部材と称される理由は、図示の実施形態では、上記の機能を実行するデバイスが、ハウジング102のリザーバ103具体的には、第1チャンバ109内に挿入することができるデバイスであるためである。しかしながら、挿入部材130は、その代わりに、ハウジング102自体、又は生物学的滅菌インジケーター100の別の構成要素によって提供することができ、必ずしもハウジング102内に挿入される必要がないことを理解するべきである。用語挿入部材が、簡略性のために、本開示の全体を通して説明されるが、そのような用語は限定することを意図するものではないことを理解するべきであり、上記の機能のうちの1つ以上を実行する他の等価の構造を、挿入可能な挿入部材130の変わりに、又は挿入可能な挿入部材130と組み合わせて使用することができる点を理解するべきである。更には、図示の実施形態では、挿入部材130は、ハウジング102内に、具体的にはハウジング102の第1部分104及び第1チャンバ109内に挿入可能であり、かつ、そこから取り外し可能である。しかしながら、挿入部材130がハウジング102内に挿入可能な場合であっても、挿入部材130は、ハウジング102から取り外し可能である必要はなく、むしろ、挿入部材130を所望の場所内に配置した後は、ハウジング102からの挿入部材130の取り外しを阻止する方式で、ハウジング102に固定結合させることができる点を理解するべきである。一部の実施形態では、ハウジング102の少なくとも一部分、例えば、ハウジング102の下方部分114は、電磁放射線の波長、又は様々な波長に対して透過的例えば、可視光線光学検出方法が採用される場合、可視光線に対して透過的とすることができ、このことにより、芽胞の増殖の検出を促進することができる。すなわち一部の実施形態では、図6、7及び図9に示すように、ハウジング102の少なくとも一部分は、検出窓167を含むか、又は検出窓167を形成することができる。更には、一部の実施形態では、図6に示すように、ハウジング102の少なくとも一部分、例えば、下方部分114は、1つ以上の平面壁部168を含み得る。そのような平面壁部168により、芽胞の増殖の検出例えば、光学検出を促進することができる。更には、上記で示し、かつ説明されるように、ハウジング102の第1部分104の壁部108は、段差部152、段差部123、及びテーパー形状壁部、すなわち段差部170などの、1つ以上の段差状若しくはテーパー形状領域を含み得る。テーパー形状壁部170は、ハウジング102の下方部分、すなわち検出部分114の、全体的な厚さ及びサイズを低減するように機能し得ることにより、ハウジング102の外法寸法が、内法寸法に加えて低減される。生物学的滅菌インジケーター100の下方部分114の、そのようなサイズ及び/又は厚さの低減により、検出を促進することができる。更には、段差部及び/又はテーパー形状壁部123、152、170などの、1つ以上の機構を有することは、生物学的滅菌インジケーター100が、読み取り又は検出デバイスに、1つの配向のみで結合されることを可能にし得るため、生物学的滅菌インジケーター100が、読み取り装置に対してキー止めされ、このことにより、ユーザーのエラーを最小限に抑え、検出プロセスの確実性を増進することができる。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100の1つ以上の部分を、読み取り装置に対してキー止めすることができる。本開示の生物学的滅菌インジケーターは、全般的には、滅菌の間、液体122及び芽胞115を、隔離させながらも比較的接近させて維持する例えば、内蔵型の生物学的滅菌インジケーター100の内部でことにより、滅菌プロセスに晒した後に、液体122と芽胞115とを容易に組み合わせることができる。液体122及び芽胞115は、検出プロセスの間、インキュベートすることができ例えば、読み取り装置12は、生物学的滅菌インジケーター100をインキュベートすることができる、又は生物学的滅菌インジケーター100は、検出プロセスの前にインキュベートすることができる。一部の実施形態では、液体122を使用して芽胞をインキュベートする場合、室温よりも高いインキュベーション温度を使用することができる。例えば、一部の実施形態では、インキュベーション温度は、少なくとも約37°Cであり、一部の実施形態では、インキュベーション温度は、少なくとも約50°C例えば、56°Cであり、一部の実施形態では、少なくとも約60°Cである。一部の実施形態では、インキュベーション温度は、約60°C以下であり、一部の実施形態では、約50°C以下、一部の実施形態では、約40°C以下である。検出プロセスは、芽胞115からの例えば、芽胞リザーバ136内部からの、又は芽胞115の周囲を取り囲む液体122からの、検出可能な変化を検出するように適合させることができる。すなわち検出プロセスは、様々な特性を検出するように適合させることができ、それらの特性としては、電磁放射線例えば、紫外バンド、可視バンド、及び/又は赤外バンドでの、蛍光、発光、光散乱、電子的特性例えば、コンダクタンス、インピーダンスなど、又はこれらの組み合わせ、濁度、吸収度、ラマン分光光度、偏光度など、又はこれらの組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。そのような特性の検出は、蛍光計、分光光度計、比色計などのうちの1つ以上、又はこれらの組み合わせによって実施することができる。蛍光、可視光線などを測定する実施形態などの、一部の実施形態では、検出可能な変化は、特定波長で検出することによって測定される。芽胞及び/又は液体122は、芽胞の生存度の標示である生化学反応の結果として、上記の特性のうちの1つ以上を生じさせるように適合させる例えば標識することができる。結果として、検出可能な変化が存在しない例えば、ベースライン又はバックグラウンドの読み取り値と比較してことは、有効な滅菌プロセスを意味し得るが、その一方で、検出可能な変化は、無効な滅菌プロセスを意味し得る。一部の実施形態では、検出可能な変化は、上記の特性のうちの1つ以上が変化する例えば、蛍光の増大、濁度の減少など際の速度を含み得る。一部の実施形態では、芽胞の生存度は、酵素活性を利用することによって、判定することができる。参照により本明細書に組み込まれる、Matnerらの米国特許第5,073,488号、表題RapidMethodforDeterminingEfficacyofaSterilizationCycleandRapidRead-outBiologicalIndicatorで説明されるように、特定のタイプの芽胞に関して、滅菌プロセスの有効性を判定するために利用することができる特に有用な特性を有する酵素を、特定することができる。そのような特性としては、1酵素が、1×106個の試験微生物の集団を、約6の対数で減少させるすなわち試験微生物の増殖の欠如によって測定される、約0個の集団までために十分な滅菌条件に供される場合に、その酵素に関する基質系との反応によって測定されるような、バックグラウンドと等しい残留活性を有すること、及び2酵素が、1×106個の試験微生物の集団を、少なくとも1の対数で、ただし6の対数未満で減少させるためにのみ十分な滅菌条件に供される場合に、その酵素基質系との反応によって測定されるような、バックグラウンドよりも高い酵素活性を有することを、挙げることができる。酵素基質系は、酵素によって反応が引き起こされ、検出可能な変化によって明白であるような、検出可能な酵素修飾生成物を生じさせる物質、あるいは物質の混合物を含み得る。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、生物学的滅菌インジケーター100が、例えば芽胞115付近に配置される1つのみの検出窓例えば、図6の検出窓167を含む、片面モードで検定することができる。しかしながら、一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、2つ以上の検出窓例えば、ハウジング102の下方部分114の、双方の平行壁部168の、全て又は一部分によって形成される窓を含み得ることにより、生物学的滅菌インジケーター100は、2つ以上の検出窓を介して検定することができる。複数の検出窓を採用する実施形態では、検出窓を、左右に並べて片面モードと同様に配置することができ、又は検出窓を、互いに対して一定の角度例えば、90度、180度などで配向することができる。全般的には、芽胞115は、リザーバ103と流体連通する、芽胞リザーバ136の内部に配置される。一部の実施形態では、芽胞リザーバ136は、リザーバ103の一部分例えば、第2チャンバ111の一部分を形成する。図7に示すように、リザーバ103は、滅菌の間、環境と流体連通して例えば、開口107を介して、滅菌プロセスの間、滅菌剤がリザーバ103に入り、芽胞115を滅菌することを可能にする。容器120は、滅菌の間、液体122を収容して、液体122が、滅菌の間に、芽胞115、リザーバ103、及び滅菌剤と流体連通することを阻止するように構成することができる。ここで、芽胞115及び/又は芽胞リザーバ136の様々な詳細をより詳細に説明する。一部の実施形態では、芽胞115は、ハウジング102の下方部分114内に直接配置することができ、又は芽胞115は、芽胞リザーバ136例えば、芽胞キャリア135によって提供されるなどの、芽胞リザーバ内に配置することもできる。芽胞115が、ハウジング102の下方部分114内に直接配置される場合であれ、又は芽胞リザーバ内に配置される場合であれ、芽胞115は、様々な方式で提供することができる。一部の実施形態では、芽胞115は、生物学的滅菌インジケーター100内の所望の場所内に配置して、乾燥させることができる、芽胞懸濁液中に存在し得る。一部の実施形態では、芽胞115は、生物学的滅菌インジケーター100内の所望の場所内に配置及び/又は固定することができる、基材図示せず上に提供することができる。一部の実施形態は、乾燥形態で提供される芽胞115と基材上に提供される芽胞115との組み合わせを含み得る。一部の実施形態では、この基材は、芽胞115を支持し、かつ/又は、芽胞115を所望の所在部位内に維持することに役立つように、配置することができる。そのような基材としては、様々な材料を挙げることができ、それらの材料としては、紙、ポリマー例えば、ハウジング102に関して上記に列挙されるポリマーのうちのいずれか、接着剤例えば、アクリレート、天然若しくは合成ゴム、シリコーン、シリコーンポリ尿素、イソシアネート、エポキシ、又はこれらの組み合わせ、織布、不織布、微多孔性材料例えば、微多孔性ポリマー材料、反射性材料例えば、金属箔、ガラス、磁器、セラミック、ゲル形成材料例えば、グアーガム、又はこれらの組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。更には、又は代替的には、そのような基材は、親水性コーティングを含むか、又は親水性コーティングに結合させて、液体122を芽胞115と緊密に接触させることを、促進することができる例えば、採用される液体122が、水性である場合。更には、又は代替的には、そのような親水性コーティングは、液体122と芽胞115とを流体結合するように配置される、いずれの流体通路にも適用することができる。一部の実施形態では、親水性コーティングに加えて、又は親水性コーティングの代わりに、液体122が、優先的に移動して芽胞115と接触するように、ハウジング102の他の部分例えば、ハウジング102の下方部分114及び/又は芽胞リザーバ136の他の部分に、疎水性コーティングを適用することができる。生物学的滅菌インジケーター100の一部の実施形態は、芽胞キャリア135を含まない。むしろ、芽胞リザーバ136が、ハウジング102の下方部分114自体によって提供され、芽胞115は、下方部分114内に配置することができ、下方部分114の内側表面若しくは壁部に吸着させることができ、又はこれらの組み合わせとすることができる。一部の実施形態では、芽胞115は、ハウジング102の下方部分114内に配置される、基材上に提供することができる。一部の実施形態では、芽胞115は、1つの芽胞の所在部位内に、又は複数個の芽胞の所在部位内に配置することができ、それらの所在部位の全ては、リザーバ103内、ハウジング102の下方部分114内、及び/又は芽胞リザーバ136内のいずれかに配置することができる。一部の実施形態では、複数の芽胞の所在部位を有することにより、滅菌剤及び液体122に対する芽胞の曝露を最大化することができ、製造性を改善することができ例えば、生物学的滅菌インジケーター100内部の凹部内に、芽胞の所在部位のそれぞれを定置することによって、芽胞の定置を促進することができる、検出特性を改善することができる例えば、1つの大きい芽胞の所在部位の中央の芽胞は、それほど容易に検出することができないため。複数個の芽胞の所在部位を採用する実施形態では、芽胞の各所在部位は、異なる既知数の芽胞を含み得、かつ/又は芽胞の各所在部位は、複数個の芽胞のタイプを試験することができるように、異なる芽胞を含み得る。複数のタイプの芽胞を採用することによって、生物学的滅菌インジケーター100を、様々な滅菌プロセスに関して使用することができ、芽胞の特定の所在部位を、特定の滅菌プロセスに関して分析することができ、又は複数のタイプの芽胞を使用して、滅菌プロセスの有効性若しくは信頼性を、更に試験することができる。更には、一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、複数個の芽胞リザーバ136を含み得、各芽胞リザーバ136が、1つ以上の芽胞115の所在部位を含み得る。複数個の芽胞リザーバ136を採用する、一部の実施形態では、複数個の芽胞リザーバ136を、リザーバ103と流体連通して配置することができる。一部の実施形態では、芽胞115は、芽胞115及び/又は芽胞リザーバ136に密着するか、若しくは上から装着されるように適合される、カバー図示せずで覆うことができる。そのようなカバーは、製造、滅菌、及び/又は使用の間、生物学的滅菌インジケーター100の所望の領域の範囲内に、芽胞を維持することに役立ち得る。このカバーは、採用される場合には、実質的に検出プロセスを妨げることがなく、かつ/又は対象の電磁放射線波長に対して少なくとも部分的に透過性である材料で、形成することができる。更には、カバーの材料構成に応じて、一部の実施形態では、このカバーにより、芽胞115に沿った液体122例えば、栄養培地のウィッキングを促進することができる。一部の実施形態では、このカバーはまた、毛管チャネル、親水性の微多孔性線維若しくは膜など、又はこれらの組み合わせなどの、芽胞リザーバ136内への又は芽胞115への流体の流れを促進するための機構も含み得る。更には、一部の実施形態では、このカバーは、シグナルを分離するか、又はシグナルを増強することができ、このことにより検出を促進することができる。そのようなカバーは、芽胞115が、芽胞リザーバ136内部に配置される場合であれ、又はハウジング102の下方部分114内に直接配置される場合であれ、採用することができる。更には、そのようなカバーは、複数個の芽胞の所在部位を採用する実施形態で、採用することができる。このカバーとしては、様々な材料を挙げることができ、それらの材料としては、紙、ポリマー例えば、ハウジング102に関して上記に列挙されるポリマーのうちのいずれか、接着剤例えば、アクリレート、天然若しくは合成ゴム、シリコーン、シリコーンポリ尿素、イソシアネート、エポキシ、又はこれらの組み合わせ、織布、不織布、微多孔性材料例えば、微多孔性ポリマー材料、ガラス、磁器、セラミック、ゲル形成材料例えば、グアーガム、又はこれらの組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、反射性表面、白色表面、黒色表面、又は表面の光学特性を最適化するために好適な別の表面改変などの、改変された内側表面を更に含み得る。反射性表面例えば、金属箔によって提供されるを配置することにより、検定又は検出デバイスから芽胞リザーバ136内へ送られるシグナルを反射し、かつ/あるいは芽胞リザーバ136内部で生成されるあらゆるシグナルを、検定デバイスに向けて反射して戻すことができる。結果として、この反射性表面は、生物学的滅菌インジケーター100からのシグナルを改善する例えば、その強度を改善するように機能することができる。そのような反射性表面は、ハウジング102の内側表面、ハウジング102の内側表面に結合される材料、芽胞リザーバ136の内側表面、芽胞リザーバ136の内側表面に結合される材料などによって提供することができ、又は反射性表面は、芽胞基材の一部分を形成するか、若しくは芽胞基材に結合することができ、あるいはこれらの組み合わせとすることができる。同様に、一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、検定デバイスから芽胞リザーバ136内へ送られる特定のシグナルを増大及び/又は減少させ、かつ/あるいは芽胞リザーバ136内部で生成される特定のシグナルを増大及び/又は減少させるように配置される、白色表面及び/又は黒色表面を更に含み得る。単なる例として、白色表面を使用して、シグナルを増強することができ、黒色表面を使用して、シグナル例えば、ノイズを低減することができる。一部の実施形態では、芽胞115は、所望の表面上での芽胞115の固定化を助長するために、機能化表面上に配置することができる。例えば、そのような機能化表面は、ハウジング102の内側表面、芽胞リザーバ136の内側表面によって提供することができ、芽胞基材の一部分を形成するか、若しくは芽胞基材に結合することなどが可能であり、又はこれらの組み合わせとすることができる。一部の実施形態では、芽胞115は、微細構造表面又は微細複製表面例えば、それらの全てが参照により本明細書に組み込まれる、HalversonらのPCT国際公開第2007/070310号、Hanschenらの米国特許出願公開第2003/0235677号、及びGrahamらのPCT国際公開第2004/000569号で開示されるもののような、微細構造表面など上に配置される例えば、コーティング又は別の適用方法によって適用される。例えば、そのような微細構造表面は、ハウジング102の内側表面によって提供することができ、芽胞リザーバ136の内側表面によって提供することができ、芽胞基材の一部分を形成するか、若しくは芽胞基材に結合することなどが可能であり、又はこれらの組み合わせとすることができる。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、液体122が容器120から解放される際に、芽胞115及び液体122と組み合わされるように配置される、ゲル形成材料を更に含み得る。例えば、このゲル形成材料は、芽胞115の近傍に例えば、芽胞リザーバ136内に、ハウジング102の下方部分114内に、配置することができ、芽胞基材の一部分を形成するか、若しくは芽胞基材に結合することなどが可能であり、又はこれらの組み合わせとすることができる。そのようなゲル形成材料は、液体122が芽胞と接触する際に、芽胞及び栄養素を含む、ゲル例えば、ヒドロゲル若しくはマトリクスを形成することができる。ゲル形成材料例えば、グアーガムは、水和するとゲルを形成する能力を有し、シグナル例えば、蛍光の局在化を援助することができ、芽胞115を定位置に固定することができ、芽胞115及び/又は芽胞リザーバ136からの信号の拡散を、最小限に抑えることを助けることができ、かつ/あるいは検出を増進することができるため、特に有用とすることができる。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、吸収材料又はウィッキング材料を更に含み得る。例えば、ウィッキング材料は、芽胞115の近傍に例えば、芽胞リザーバ136内に配置することができ、芽胞基材の少なくとも一部分を形成するか、若しくは芽胞基材に結合することなどが可能であり、又はこれらの組み合わせとすることができる。そのようなウィッキング材料としては、液体122を芽胞と緊密に接触させることを促進することができる、多孔質のウィッキングパッド、浸漬パッドなど、又はこれらの組み合わせを挙げることができる。一部の実施形態では、壊れやすい容器120は、壊れやすい容器120の、所望の方式での断裂を促進するように構成することができる。例えば、一部の実施形態では、壊れやすい容器120の下方部分は、その下方部分が、壊れやすい容器120の別の部分よりも優先的に断裂するように、より薄く、かつ/又はより低い強度の材料で形成することができる。更には、一部の実施形態では、壊れやすい容器120は、壊れやすい容器120の、所望の方式での断裂を促進するように配置される、様々な機構を含み得、それらの機構としては、薄く、かつ/若しくは低い強度の区域、切り込み線、ミシン目など、又はこれらの組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。壊れやすい容器120は、液体122が壊れやすい容器120の内部に収容される、第1の閉鎖状態と、壊れやすい容器120が断裂して、液体122がリザーバ103及び/又は芽胞リザーバ136内に解放され、芽胞115と流体連通する、第2の開放状態とを有し得る。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、手動で作動させることができる例えば、第2部分106を、第2の位置150に移動させることができる。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、読み取り装置によって作動させることができる例えば、生物学的滅菌インジケーター100が、読み取り装置内に配置される際に。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、そのような読み取り装置とは無関係のデバイス例えば、作動デバイスを使用して、例えば、生物学的滅菌インジケーター100を読み取り装置のウェル内に配置する前に、そのデバイス内に生物学的滅菌インジケーター100を配置することによって作動させることができる。一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、読み取りデバイス、読み取りデバイスとは無関係のデバイス、及び手動による作動のうちの、2つ以上の組み合わせによって作動させることができる。生物学的滅菌インジケーター100、及び読み取り装置などの別のデバイスの、一方若しくは双方は、壊れやすい容器120の時期尚早又は偶発的な断裂を阻止するように、更に構成することができる。例えば、一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100、作動デバイス、又は読み取り装置は、ハウジング102の第2部分106が第2の位置150へと移動することを、所望されるまで阻止するように配置される、ロック又はロッキング機構を含み得る。そのような実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100は、そのロックが移動するか、取り外されるか、又はロック解除されるまで、作動させることができない。更には、又は代替的には、一部の実施形態では、生物学的滅菌インジケーター100、作動デバイス、及び/又は読み取り装置は、ハウジング102の第2部分106が、作動の後に、第2の位置150から第1の位置148へと移動して戻ることを阻止するように配置される、ロック又はロッキング機構を含み得る。一部の実施形態では、例示の実施形態に示すように、ハウジングの少なくとも一部分を、平坦にすることができ例えば、平行壁部168、芽胞リザーバ136に対して実質的に平面的とすることができ、また平行壁部168の一方若しくは双方、又はその一部分例えば、検出窓167は、その壁部168又は検出窓167の少なくとも1つの寸法が、芽胞リザーバ136及び/又は芽胞115の所在部位の、少なくとも1つの寸法に実質的に一致するように、サイズ決定することができる。換言すれば、壁部168又はその一部分例えば、検出窓167は、芽胞リザーバ136及び/又は芽胞115の所在部位の断面積と、実質的に同じサイズである断面積を含み得る。壁部168/検出窓167と、芽胞リザーバ136及び/又は芽胞115の所在部位との、そのようなサイズの一致により、検出又は検定プロセスの間に検出されるシグナルを最大化することができる。あるいは、又は更には、壁部168又は検出窓167は、リザーバ103と一致するようにサイズ決定することができる例えば、少なくとも1つの寸法又は断面積を、一致するようにサイズ決定することができる。検出区画間のそのようなサイズの一致により、芽胞の検定及び検出を改善することができる。図4~10に示す生物学的滅菌インジケーター100は、少なくとも、芽胞115が配置される生物学的滅菌インジケーター100の部分が、比較的薄いすなわちz方向寸法が最小化されることにより、芽胞から壁部168又は検出窓167までの光路長が最小化され、かつ/又は液体122又は栄養培地中の妨害物質のいずれの影響も最小限に抑えられる。使用時には、生物学的滅菌インジケーター100は、滅菌プロセス用の滅菌バッチと共に、定置することができる。滅菌の間、滅菌剤は、リザーバ103すなわち第1チャンバ109及び第2チャンバ111、芽胞リザーバ136、及び芽胞115と、主に滅菌剤通路164を介して流体連通することにより、滅菌剤は、芽胞に到達して、滅菌済みの芽胞を作り出すことができる。上述のように、第1流体通路160と第2流体通路162との協働により、第2チャンバ111内への、具体的には生物学的滅菌インジケーター100の閉鎖末端部105内への、滅菌剤の移動を促進することができる。更には、滅菌の間、壊れやすい容器120は閉鎖状態にあり、少なくとも部分的に、挿入部材130のキャリア132によって、無損傷で保持される。壊れやすい容器120が、閉鎖状態にあるとき、液体122は、滅菌剤から防護され、リザーバ103具体的には、ハウジング102の下方部分114によって少なくとも部分的に形成される、第2チャンバ111、芽胞リザーバ136、芽胞115、又は滅菌剤通路136とは流体連通しない。滅菌は、容器120が第1の状態にあるとき、第1流体通路160を介して、第1チャンバ109から第2チャンバ111へ滅菌剤を移動させることと、第1チャンバ109から第2チャンバ111への滅菌剤の移動に応答して、又は滅菌剤の移動を促進するために、第2流体通路162を介して、第2チャンバ111から外へ排出気体例えば、閉じ込められた空気を移動させることとを更に含み得る。滅菌に続いて、生物学的滅菌インジケーター100を使用して、その滅菌プロセスの有効性を判定することができる。ハウジング102の第2部分106は、従前に第1の位置148にロックされている場合には、ロック解除して、第1の位置148図6を参照から第2の位置150図7を参照に移動させることにより、生物学的滅菌インジケーター100の作動を引き起こすことができる。第2部分106のそのような移動により、壊れやすい容器120を、ハウジング102内で、例えば、長手方向DLに沿って、突起部158の上方末端部159の上方の位置から、突起部158の内側の内部の位置まで移動させることができ、このことにより、壊れやすい容器120を断裂させることができる。壊れやすい容器120を断裂させることにより、壊れやすい容器120を、その閉鎖状態から、その開放状態へと変化させ、液体122を、リザーバ103内に解放して、芽胞リザーバ136及び芽胞115と流体連通させることができる。液体122は、芽胞のための栄養培地例えば、発芽培地を含み得るか、又は液体122は、乾燥形態例えば、粉末又は錠剤の形態の栄養培地に接触して、栄養培地を形成することができるため、滅菌済みの芽胞及び栄養培地を含む、混合物が形成される。次いで、この混合物を、検出若しくは検定プロセスの前に、又はそのプロセスの間、インキュベートすることができ、生物学的滅菌インジケーター100を、芽胞の増殖の標示に関して検査することができる。作動は、容器120が第2の状態にあるとき、第1流体通路160を介して、第1チャンバ109から第2チャンバ111へ液体122を移動させることと、第1流体通路160を介した、第1チャンバ109から第2チャンバ111への液体122の移動に応答して、又は液体122の移動を促進するために、第2流体通路162を介して、第2チャンバ111から外へ排出気体例えば、閉じ込められた空気を移動させることとを更に含み得る。芽胞115の検出可能な変化を検出するために、液体122と芽胞115とが組み合わされた直後に、生物学的滅菌インジケーター100を検定して、ベースラインの読み取り値を獲得することができる。その後は、このベースラインの読み取り値からの、あらゆる検出可能な変化を、検出することができる。生物学的滅菌インジケーター100は、継続的若しくは断続的に、監視及び測定することができる。一部の実施形態では、インキュベーション工程の一部分又は全体は、検出可能な変化を測定する前に実施することができる。一部の実施形態では、インキュベーションは、ある1つの温度で例えば、37°Cで、50~60°Cで、など実施することができ、検出可能な変化の測定は、異なる温度で例えば、室温で、25°C、又は37°Cで実施することができる。生物学的滅菌インジケーター100の読み出し時間すなわち滅菌プロセスの有効性を判定するための時間は、一部の実施形態では、8時間未満とすることができ、一部の実施形態では、1時間未満、一部の実施形態では、30分未満、一部の実施形態では、15分未満、一部の実施形態では、5分未満、一部の実施形態では、1分未満とすることができる。実施形態実施形態1は、生物活性の検出方法であって、1つ以上の既定の生物活性の発生源を含み得るサンプルと、第1の吸光度スペクトルを有する第1の指示試薬を含む、第1の指示薬システムであって、第1の既定の生物活性によって、この第1の指示試薬を、第1の生物学的誘導体に変換させることができる、第1の指示薬システムと、既定の生物活性によって、第2の発光スペクトルを有する第2の生物学的誘導体に変換される第2の指示試薬を含む、第2の指示薬システムと、水性混合物から第1の指示試薬を受容及び濃縮する基材とを、提供する工程と、サンプル、第1の指示試薬、及び第2の指示試薬を含む、第1の水性混合物を形成する工程と、第1の水性混合物を基材と流体連通させて、第1の指示試薬の濃度が、その第1の水性混合物中の第1の指示試薬の濃度よりも低い、第2の水性混合物を形成する工程と、第2の生物学的誘導体からの蛍光の有無を検出する工程とを含み、第1の吸光度スペクトルが、第2の発光スペクトル内に存在する波長の少なくとも一部分内に、検出可能な吸光度を含む、生物活性の検出方法である。実施形態2は、第2の生物学的誘導体からの蛍光の有無を検出する工程が、第2の水性混合物中の蛍光の有無を検出することを含む、実施形態1の方法である。実施形態3は、基材を観察して、第1の指示試薬又は第1の生物学的誘導体を検出する工程を更に含む、実施形態1又は実施形態2の方法である。実施形態4は、第1の水性混合物中の第1の指示試薬の濃度が、通常であれば検出可能な量の第2の生物学的誘導体の検出を、阻止するために十分なものである、前述の実施形態のいずれか1つの方法である。実施形態5は、生体細胞の増殖を促進するための栄養素を提供する工程を更に含み、第1の水性混合物を形成する工程が、その栄養素を含む混合物を形成することを含む、前述の実施形態のいずれか1つの方法である。実施形態6は、滅菌剤に生物活性を晒す工程を更に含む、前述の実施形態のいずれか1つの方法である。実施形態7は、滅菌剤が、蒸気、エチレンオキシド、過酸化水素、ホルムアルデヒド、及びオゾンからなる群から選択される、実施形態6の方法である。実施形態8は、一定の期間、生物活性を温度シフトに晒す工程を更に含む、前述の実施形態のいずれか1つの方法である。実施形態9は、第1の指示試薬が、発色団を含み、第1の生物学的誘導体を検出する工程が、色を検出することを含む、前述の実施形態のいずれか1つの方法である。実施形態10は、第1の指示試薬が、発色性指示薬を含む、実施形態9の方法である。実施形態11は、第1の指示試薬が、pH指示薬又は酵素基質を含む、実施形態9又は実施形態10の方法である。実施形態12は、第1の指示試薬が、ブロモクレゾールパープル、ブロモクレゾールグリーン、コンゴレッド、及びメチルオレンジからなる群から選択される、実施形態11の方法である。実施形態13は、第2の指示試薬が、蛍光発生化合物を含む、前述の実施形態のいずれか1つの方法である。実施形態14は、蛍光発生化合物が、蛍光発生酵素基質を含む、実施形態13の方法である。実施形態15は、第2の生物学的誘導体の有無を検出する工程が、第2の生物学的誘導体の量を測定することを更に含む、前述の実施形態のいずれか1つの方法である。実施形態16は、第1の生物学的誘導体の有無を検出する工程が、第1の生物学的誘導体の量を測定することを更に含む、前述の実施形態のいずれか1つの方法である。実施形態17は、第1の生物学的誘導体の量を測定することが、第2の水性混合物の、基材に関連しない部分内で測定される色の量を、色標準と比較することを含む、実施形態16の方法である。実施形態18は、第1の指示試薬又は第2の生物学的誘導体を検出する、計器を提供する工程と、その計器を使用して、第1の指示試薬又は第2の生物学的誘導体を検出する工程とを、更に含む、前述の実施形態のいずれか1つの方法である。実施形態19は、第1の指示試薬及び第2の生物学的誘導体を検出する、計器を提供する工程と、その計器を使用して、第1の指示試薬及び第2の生物学的誘導体を検出する工程とを、更に含む、前述の実施形態のいずれか1つの方法である。実施形態20は、生物活性の検出方法であって、第1チャンバ及び第2チャンバを含む、ハウジングと、第1の水性液体を収容する容器であって、この容器は、第1チャンバ内に配置され、容器の少なくとも一部分が壊れやすく、この液体が、第1の吸光度スペクトルを有する第1の指示試薬を含む、第1の指示薬システムと、第2の既定の生物活性によって、第2の発光スペクトルを有する第2の生物学的誘導体に変換される第2の指示試薬を含む、第2の指示薬システムとを含み、第1の既定の生物活性によって、第1の指示試薬を、第1の生物学的誘導体に変換させることができ、第1の吸光度スペクトルが、第2の発光スペクトルの波長の少なくとも一部分内に、検出可能な吸光度を含む、容器と、第2チャンバ内に配置される、第2の既定の生物活性の発生源と、第1の水性液体から第1の指示試薬を受容及び濃縮する基材であって、ハウジング内に配置される基材とを含む、生物学的滅菌インジケーターを提供する工程と、第1の水性液体を基材と流体連通させて、第1の指示試薬の濃度が、その第1の水性液体中の第1の指示試薬の濃度よりも低い、第2の水性液体を形成する工程と、第2の水性混合物中の第2の生物学的誘導体からの蛍光の有無を検出する工程とを含む、生物活性の検出方法である。実施形態21は、第1の水性液体を基材と流体連通させる工程が、壊れやすい容器の少なくとも一部分を、断裂させることを含む、実施形態20の方法である。実施形態22は、生物学的滅菌インジケーターが、ハウジング内に配置される破砕装置を更に含み、壊れやすい容器を断裂させることが、容器及び破砕装置を互いに対して押し付けることを含む、実施形態21の方法である。実施形態23は、生物学的滅菌インジケーターのハウジングが、第1部分と、第1部分に結合するように適合される、第2部分とを含み、この第2部分が、第1部分に結合される場合、第1部分に対して、第1の位置と第2の位置との間で移動可能であり、ハウジングの第2部分を、第1の位置から第2の位置に移動させる工程を更に含む、実施形態20又は実施形態21の方法である。実施形態24は、ハウジングが長手方向を含み、ハウジングの第2部分を移動させる工程が、ハウジングの第2部分を長手方向で移動させることを含む、実施形態23の方法である。実施形態25は、ハウジングの第2部分を、第1の位置から第2の位置に移動させる工程に応答して、ハウジング内で容器を移動させることを更に含む、実施形態23の方法である。実施形態26は、ハウジング内で容器を移動させることにより、容器を断裂させる、実施形態25の方法である。実施形態27は、第1の吸光度スペクトルを有する第1の指示試薬を含む、第1の指示薬システムであって、第1の既定の生物活性によって、この第1の指示試薬を、第1の生物学的誘導体に変換させることができる、第1の指示薬システムと、既定の生物活性によって、第2の発光スペクトルを有する第2の生物学的誘導体に変換される第2の指示試薬を含む、第2の指示薬システムと、液体媒質を保持するように構成される槽と、水性混合物から第1の指示試薬を受容及び濃縮する基材と、槽を受容して、第1の指示試薬又は第2の生物学的誘導体を検出するように構成される計器とを含み、第1の吸光度スペクトルが、第2の発光スペクトル内に存在する波長の少なくとも一部分内に、検出可能な吸光度を含む、既定の生物活性を検出するためのシステムである。実施形態28は、プロセッサを更に含む、実施形態27のシステムである。実施形態29は、計器が、液体媒質の温度を調節するように更に構成される、実施形態27又は実施形態28のシステムである。実施形態30は、計器が、第1の指示試薬及び第2の生物学的誘導体の双方を検出するように構成される、実施形態27~29のいずれか1つのシステムである。本発明を、以下の実施例によって例示する。具体的な実施例、材料、量、及び手順は、本明細書に記載される本発明の範囲及び趣旨に従って、広範に解釈されるものとして理解されたい。参考実施例1-ブロモクレゾ-ルパープルBCPの吸光度スペクトル。この参考実施例は、ブロモクレゾ-ルパープルの吸光度スペクトルを示す。SigmaChemicalCo.St.Louis,MOより得たブロモクレゾ-ルパープルカタログ番号B-5880を、pH7.3のリン酸緩衝生理食塩水中に、0.004の濃度で溶解させた。この溶液を、石英キュベット内に定置し、TECANINFINITEM200PlateReaderTecanUSDurham,NCに提供される、1cmキュベットアダプターを使用して、紫外可視吸光度スペクトルを走査した。この走査パラメーターを、表1に提示する。結果を、図2に示されるグラフで示す。吸光度のピークは、約300nm、約380nm、及び約600nmの波長で認めることができる。参考実施例2:7-ヒドロキシ-4-メチルクマリン4-メチルウンベリフェロンの発光スペクトル。この参考実施例は、4-メチルウンベリフェロンの発光スペクトルを示す。SigmaChemicalCo.St.Louis,MOより得た、4-メチルウンベリフェロン4MU、カタログ番号m1381を、pH7.3のリン酸緩衝生理食塩水中に、0.004mg/mLの濃度で溶解させた。この溶液を、石英キュベット内に定置し、TECANINFINITEM200PlateReaderに提供される、1cmキュベットアダプターを使用して、発光スペクトルを記録した。この走査パラメーターを、表2に提示する。結果を、図2に示されるグラフで示す。発光のピークは、約450nmの波長で認めることができる。参考実施例3-4MUの検出に対するBCPの影響この参考実施例は、同じ溶液中に2種の化合物が存在する場合の、4MUの蛍光の検出に対するBCPの影響を示す。実施例2で説明されるように調製した、4-メチルウンベリフェロン4MUの原液を、リン酸緩衝生理食塩水中に、表3に示す濃度まで、段階希釈した。ブロモクレゾ-ルパープルBCPの原液を、実施例1で説明されるように、リン酸緩衝生理食塩水中に調製した。このブロモクレゾ-ルパープル0.03mg/mLの最終濃度を、表3に示す、4MUのそれぞれの溶液と混合した。それぞれの溶液の各3部のアリコート100マイクロリットル/ウェルを、96ウェルプレート内に装填し、TECANINFINITEM200PlateReaderを使用して、各ウェル内での蛍光を測定した。励起波長は350nmとし、検出は420nmとした。相対蛍光単位RFUとして列挙される結果を、表3に示す。このデータは、試験された4MUのあらゆる濃度で、溶液中のブロモクレゾ-ルパープルの存在が、測定可能な蛍光の減少をもたらしたことを示す。この結果は、3部の複製の平均である。全ての値は、相対蛍光単位RFUで報告される。参考実施例4.-液体培地からのBCPの吸着この参考実施例は、増殖培地から基材材料上への、BCPの吸着を示す。水1リットル当り、17gの細菌用ペプトン、0.17gのL-アラニン、及び0.03gのブロモクレゾ-ルパープルpH指示薬染料からなる、芽胞増殖培地溶液を調製した。この栄養培地溶液のpHを、0.1Nの水酸化ナトリウムで、7.6に調節した。60個のホウケイ酸ガラス管12mL、VWR、カタログ53283-802のそれぞれに、1.0mLの調製済み増殖培地を添加して、ライナーなしキャップクロージャーVWR、カタログ66010-680で蓋をした。2つの異なる基材材料を評価した:GE荷電ナイロンGEOsmonicsLabstoreMinnetonka,MNより入手可能な、MAGNAPROBE、0.45マイクロメートル荷電ナイロン膜、品番NP0HY00010、及び紙WhatmanInc.USAPiscataway,NJより入手可能な、Whatmanグレード1Chrセルロースクロマトグラフィー用ペーパー。2つの基材材料のそれぞれの、20個のストリップを、4mm×10mmのサイズに切り出した。全てのストリップを、PropperCHEX-ALLIIInstantSealingPouchPropper,ManufacturingInc.LongIslandCity,NY内に定置して、AMSCO滅菌器SterisMentor,OH内で、121°Cの蒸気液体サイクルで、30分間、それらを滅菌することによって、予備滅菌した。これらの滅菌済みの基材ストリップを、パウチから無菌状態で取り出して、ガラス管に移動させ、20個の管のそれぞれにつき5つのナイロン基材のストリップ、及び異なる20個の管のそれぞれにつき5つの紙基材のストリップとした。G.ステアロサーモフィルスの芽胞ATCC7953を収容する、分解した、蒸気滅菌器用1292ATTESTRapidReadoutBiologicalIndicator3MSt.Paul,MNから、芽胞ストリップを取得した。この芽胞ストリップを、それぞれ約6.4mm×6.4mmの、4等分に切り出し、表4に従って、また以下で更に説明するように、ガラス管に添加した。1292ATTESTの芽胞ストリップの1片6.4mm×6.4mmを、それぞれが5片のナイロン基材及び増殖培地を収容する、10個のガラス管のそれぞれに添加した。芽胞ストリップの1片を、各管が5片のワットマン紙及び増殖培地を収容する、10個のガラス管のそれぞれに添加した。芽胞ストリップの1片を、各管が増殖培地のみを収容し、基材を収容しない、10個のガラス管のそれぞれに添加した。残りの30個の管である、5片のナイロン基材を収容する10個の管、5片の紙基材を収容する10個の管、及び基材を収容しない10個の管には、芽胞ストリップ片を添加しなかった。上記のサンプルのそれぞれのうちの、2つの管を、1分の時点で、以下の観察及び分析に関して選択した。管の中にある間のナイロン又は紙の基材材料の色と、周囲を取り囲む液体増殖培地の色とを、基材が培地よりも暗いか又は明るいかに関して比較した。増殖培地を収容するガラス管から取り出したときの、基材材料の色を、観察及び記録した。X-Rite530P濃度計X-RiteGrandRapidsMIを使用して、濃度測定読み取り値を取得する前に、ナイロン基材及び紙基材のストリップを管から取り出して、KIMWIPEKimberly-Clark上に定置した。X-Rite530P濃度計に対する光学濃度設定は、Vフィルターの結果を提供する色に設定した。基材のΔEの結果に関して、選択されたPantone2665U及びPantone102Uと比較するように、X-Rite濃度計を設定した。CIE76色差式を使用して、各PantoneでのΔEを計算した。ΔEの値は、LAB色空間内での、測定された点から基準値のPantoneの色までの距離である。より低いΔEは、測定された色が、より基準値に近いことを示す。約2.5のΔEの値は、人間の眼が色を識別するための、ほぼ最小の閾値である。使用する2つの基準値は、Pantone2665U薄い紫色、及びPantone102U明るい黄色とした。これらの2つの値は、色相環上で正反対に位置するものではないため、2665UでのΔEの増大が、必ずしも102UでのΔEの正確な減少を意味するものではないことに留意されたい。換言すれば、2665UでのΔEは、何物かが、より紫色になったか否かを示すのみであり、何物かが、より黄色になったか否かを示すものではない。各管内の培地の色もまた、観察及び記録した表5。3重に、各管から200μLの量の培地を取り出して、96ウェルプレート透明な底部を有する、黒色の組織培養処理96ウェルプレート、COSTARCLS-3603-48EA内に定置し、Gen5ソフトウェアでSYNERGY4分光光度計を使用して、590nm及び430nmでの光学濃度を測定した。OD測定値は、モノクロメーターBioTekWinooski,VTを使用して取得した。残りの管を、56°Cでインキュベートした。30分、1時間、4時間、及び24時間のインキュベーションの、それぞれの時間で、各サンプルのうちの2つの管をインキュベーターから取り出して、目視観察し、かつ上述のように計器測定した。全てのバイアル瓶内の培地は、4時間の読み取り後までは、紫色に維持された。芽胞を有さないサンプルは、24時間後も紫色に維持された。芽胞を有する全てのサンプルは、BCPpH指示薬染料によって示される、培地のpHの減少をもたらす細胞の増殖により、24時間までには、視覚的に黄色に変化した。それぞれの時間間隔で、培地から基材を取り出す前に、基材の色を、培地の色と比較した表6を参照。2つの色の間に何らかの差異が存在した場合には、その差異を記録した。基材としてナイロン基材を使用した、全ての場合で、基材は、周囲の培地よりも暗い色合いを呈した。基材として紙を使用した、全ての場合で、基材は、周囲の培地よりも明るい色合いを呈した。これらの結果は、指示試薬を受容及び濃縮する点で、ナイロン基材が、紙基材よりも優れていることを示す。殆どの場合、暗いとは、基材が培地よりも視覚的に暗い紫色であることを意味したが、24時間の、芽胞を有するナイロンは、例外として、より暗い黄色であった。殆どの場合、明るいとは、基材が培地よりも視覚的に明るい紫色であることを意味したが、24時間の、芽胞を有する紙は、例外として、より明るい黄色であった。芽胞を有するサンプルに関しては、24時間での、590nmでのOD測定値は、黄色の強度の差異を示すものではない。それゆえ、24時間での、430nmで取得されたOD値のみを評価した。紙基材の存在下での、芽胞を有する培地サンプル、及び芽胞を有し、基材を有さない培地サンプル対照の、24時間の430nmでの読み取り値は、双方とも、表7に示すように、それぞれ、0.827及び0.835の、同様のODの値を有する。しかしながら、ナイロンの存在下での、芽胞を有する培地サンプルは、対照又は紙基材を有するサンプルよりも0.5OD単位小さい、わずか0.271のODを有するものであった。このことは、ナイロンの存在下での培地の黄色の強度が、指示試薬を受容及び濃縮するナイロン基材により、低減されたことを示す。全ての値は、n=63つの読み取り値×2つの管を表す。n=5の読み取り値:管1に関する3つの読み取り値、及び管2に関する2つの読み取り値。サンプルの色が黄色であることにより、590nmでのODは、培地の色を正確に測定するものではない。1分での、基材を有さない対照芽胞あり及び芽胞なしの吸光度を、培地に関する初期ベースラインOD測定値と見なした。表8は、1分の時点でさえ、ナイロンの存在下での、芽胞を有するサンプル培地の、590nmでのOD1.124が、芽胞を有する、紙の存在下でのサンプル培地のOD1.404、又は芽胞を有する対照1.402よりも低いものであったことを示す。この差異は、培地の紫色の強度が、BCP指示試薬を急速に受容及び濃縮するナイロン基材により、既に低減されたことを示す。24時間での、ナイロンの存在下での、芽胞を有さないサンプル培地の、590nmでのODは、紙の存在下での培地のOD1.708、又は芽胞を有さない対照サンプルのOD、1.812よりも遙かに低い、1.122であった。24時間での、芽胞を有する基材サンプルの色は、黄色であり、Vフィルターは、基材の色を正確に測定するものではない。24時間での、芽胞を有する基材サンプルの色は、黄色であり、Vフィルターは、基材の色を正確に測定するものではない。上記の表は、様々な長さの時間にわたって、培地芽胞あり及び芽胞なしに晒した後の、基材の濃度測定読み取り値を示す。各基材に関する、時間0の読み取り値は、基材サンプルを培地中に定置する前の、初期濃度測定読み取り値である。紫色である基材を評価する場合、Vフィルター及びΔEPantone2665Uが、最大の対比を示すものであった。ナイロン基材に関する、Vフィルターでの平均濃度測定読み取り値は、表10に示すように、実験全体を通して上昇し、高いまま維持された唯一の例外は、芽胞ありのサンプルに関して、基材が24時間の時点で黄色であったときである。対照的に、紙基材に関する濃度測定読み取り値は、それらの時点の全体にわたって、ほぼ一定のまま維持された。同様に、表11に示す、ナイロン基材のΔEPantone2665Uの値は、実験全体を通して、概して減少した唯一の例外は、芽胞ありのサンプルに関して、基材が24時間の時点で黄色であったときである。このことは、ナイロン基材が、BCP指示試薬を受容及び濃縮していることを示すものであった。一方で、対照的に、紙基材に関するΔEPantone2665Uの値は、ほぼ一定のまま維持された。表12は、24時間の時点で、ナイロン基材に関するΔEPantone102Uの値が、紙基材に関するEPantone102Uの値よりも大幅に低いものであったことを示し、ナイロン基材が、紙基材よりもpantone102Uの色に近いものより明るい黄色であったことを示す。参考実施例52回の24時間のインキュベーション後の、液体培地からの、ナイロン基材のBCPの吸着この参考実施例は、液体増殖培地からナイロン基材上への、BCPの吸着を示す。実施例4で使用したものと同じ培地及び構成要素を、実施例5で使用した。4つのガラス管のそれぞれに、1.0mLの調製済み増殖培地を添加した。1292ATTESTの芽胞ストリップの1片を、約6.4mm×6.4mmに切り出して、各ガラス管に添加した。これらの管を、インキュベーター内に、56°Cで24時間定置して、G.ステアロサーモフィルス細胞の増殖を助長させた。24時間のインキュベーションの後、ナイロン基材の5つ5のストリップそれぞれ4mm×10mmに切り出すを、2つ2の管に添加した。これらの管を、インキュベーター内に、56°Cで更に24時間定置した。管に対する2回目の24時間のインキュベーション期間の後ナイロン基材の添加の24時間後、以下の分析を実行した。ナイロン基材片を管から取り出し、KIMWIPE上に定置して、基材ストリップの濃度測定読み取り値を取得した。各管から、200μLの3つのアリコートを採取し、96ウェルプレート内に定置した。それらの培地の、430nmでの光学濃度を測定した。n=124つの管のそれぞれからの、3つの読み取り値n=31つの対照の管からの1つの読み取り値表13は、ナイロン基材を管に添加した24時間後の培地の、基材を添加しなかった対照と比較した、430nmでのODの減少を示す。2つのサンプルの間のOD測定値の差異は、サンプル培地中に存在する黄色の量の差異を示す。このことは、ナイロンの存在下での、培地の黄色の強度が、指示試薬を受容及び濃縮するナイロン基材により、低減されたことを示す。n=105つのナイロン基材のストリップ×2つの管表14は、既に24時間インキュベートされていた、芽胞を有する培地の管に、添加された24時間後の、ナイロン基材のΔE102Uの値を示す。この値を、培地中に定置しなかったナイロン基材と比較した。2つのサンプルの間のΔE測定値の差異は、芽胞を有する黄色の培地に晒された基材の色が、培地に晒されなかった基材よりもpantone102U明るい黄色に近いことを示す。参考実施例6-様々な基材による、液体培地からのBCPの吸着この参考実施例は、様々な基材材料上への、液体増殖培地からのBCPの吸着を示す。水1リットル当り、17グラムの細菌用ペプトンC、0.17グラムのL-アラニン、及び0.03グラムのブロモクレゾ-ルパープルBCPpH指示薬染料からなる、芽胞増殖培地溶液を調製した。この栄養培地溶液のpHを、0.1Nの水酸化ナトリウムで、7.6に調節した。ホウケイ酸ガラス管12mL、VWR、カタログ53283-802のそれぞれに、1.0mLの調製済み増殖培地を添加して、ライナーなしキャップクロージャーVWR、カタログ66010-680で蓋をした。4つの異なる基材材料を評価した:1GE荷電ナイロンGEOsmonicsLabstoreMinnetonka,MNより入手可能な、MAGNAPROBE、0.45マイクロメートル荷電ナイロン膜、品番NP0HY00010;2第4級アミン基でプラスに荷電した、BIO-RAD高強度ナイロン膜BIO-RADLifeSciencesHercules,CAより入手可能な、ZETA-PROBEGTGenomics、カタログ162-0196;30.2μMのニトロセルロースInvitrogenCorporationCarlsbad,CAより入手可能、カタログLC-2000、及び40.2μMの二フッ化ポリビニリデンPVDF膜InvitrogenCorporationCarlsbad,CAより入手可能、カタログLC-2002。基材材料のそれぞれの、幾つかのストリップを、各ガラス管に関する1つ1のストリップにとって十分な、4mm×10mmのサイズに切り出した。全てのストリップを、PropperCHEX-ALLIIInstantSealingPouchPropper,ManufacturingInc.LongIslandCity,NY内に定置して、AMSCO滅菌器SterisMentor,OH内で、蒸気液体サイクル121°Cでので30分間、それらを滅菌することによって、予備滅菌した。次いで、それらのストリップを、各管に無菌状態で移動させた。各基材の2つの管を、基材を収容しない2つの対照の管と共に評価した。以下の観察及び分析を、0時間、30分、1時間、4時間、及び24時間の時点で実行した:1各管内の基材材料の色を、同じ管の周囲の培地の色と比較した。暗いか、又は明るいか、2基材材料を管から取り出し、KIMWIPE上に定置して吸い取り乾燥させ、次いで上述のように、Vフィルターで濃度測定読み取り値を取得し、3各管から200μLの培地を取り出して、96ウェルプレート透明な底部を有する、黒色の組織培養処理96ウェルプレート、COSTARCLS-3603-48EA内へと、3重に移動させ、Gen5ソフトウェアでSYNERGY4分光光度計を使用して、590nmでの培地の光学濃度を測定した。OD測定値は、モノクロメーターBioTekWinooski,VTを使用して取得した。残りの管を、56°Cでインキュベートした。30分、1時間、4時間、及び24時間のインキュベーションの、それぞれの時間で、各サンプルのうちの2つの管を、インキュベーターから取り出して、目視観察し、かつ上述のように計器測定した。暗い=基材が、培地よりも視覚的に暗い紫色であった明るい=基材が、培地よりも視覚的に明るい紫色であったそれぞれの読み取りで、基材を培地から取り出す前に、培地の色を、基材の色と視覚的に比較した。基材の色と培地の色との差異を観察して、表15内に報告した。培地との接触の30分後に、ナイロン基材材料は、双方とも培地よりも視覚的に暗いものとなり、実験全体を通して、より暗いまま維持された。表16は、様々な長さの時間にわたって培地に晒された後の、基材材料の濃度測定読み取り値を示す。各基材に関する、時間0の読み取り値は、培地中に定置されている基材の、30秒以内の初期濃度測定読み取り値である。全ての場合で、ナイロン基材の濃度測定は、30分以内で上昇し、実験全体を通して高いまま維持された。表17は、各基材材料を収容する管から、指定の時間で取り出された培地の、平均光学濃度読み取り値を示す。各時点で、いずれのナイロン基材の存在下にあった培地に関するODも、ニトロセルロース又はPVDFのいずれかを含む培地に関するOD読み取り値よりも、低いものであったことに注目するべきである。更には、ニトロセルロース又はPVDFは、OD読み取り値の変化を殆ど示すことなく、対照のODの値に極めて類似している。参考実施例7-液体培地からのメチルレッドMRの基材吸着この参考実施例は、様々な基材材料上への、液体増殖培地からのBCPの吸着を示す。水1リットル当り、17グラムの細菌用ペプトン、0.17グラムのL-アラニン、及び0.03グラムのメチルレッドpH指示薬染料からなる、芽胞増殖培地溶液を調製した。この栄養培地溶液のpHを、0.1Nの塩酸で、4.2に調節した。ホウケイ酸ガラス管12mL、VWR、カタログ53283-802のそれぞれに、1.0mLの調製済み増殖培地を添加して、ライナーなしキャップクロージャーVWR、カタログ66010-680で蓋をした。2つの異なる基材材料を評価した:GE荷電ナイロンGEOsmonicsLabstoreMinnetonka,MNより入手可能な、MAGNAPROBE、0.45マイクロメートル荷電ナイロン膜、品番NP0HY00010;第4級アミン基でプラスに荷電した、BIO-RAD高強度ナイロン膜BIO-RADLifeSciencesHercules,CAより入手可能な、Zeta-ProbeGTGenomics、カタログ162-0196。基材材料のそれぞれの、幾つかのストリップを、各ガラス管に関する1つ1のストリップにとって十分な、4mm×10mmのサイズに切り出した。全てのストリップを、PropperCHEX-ALLIIInstantSealingPouchPropper,ManufacturingInc.LongIslandCity,NY内に定置して、AMSCO滅菌器SterisMentor,OH内で、蒸気液体サイクル121°Cでので30分間、それらを滅菌することによって、予備滅菌した。次いで、それらのストリップを、各管に無菌状態で移動させた。以下の観察及び分析を、各基材の2つの管に関して、0時間、30分、1時間、4時間、及び24時間の時点で実行した:1基材材料を管から取り出し、KIMWIPE上に定置して吸い取り乾燥させ、次いで上記で実行したように、Vフィルターで濃度測定読み取り値を取得し、2各管内の基材材料の色を、同じ管の周囲の培地の色と比較した。暗いか、又は明るいか。残りの管を、56°Cでインキュベートした。30分、1時間、4時間、及び24時間のインキュベーションの、それぞれの時間で、各サンプルのうちの2つの管を、インキュベーターから取り出して、目視観察し、かつ上述のように計器測定した。上記の表は、様々な長さの時間にわたって、培地に晒した後の、基材の濃度測定読み取り値を示す。各基材に関する、時間0の読み取り値は、培地中に定置されている基材の、30秒以内の初期濃度測定読み取り値である。全ての場合で、ナイロン基材の濃度測定は、30分以内で上昇し、実験全体を通して高いまま維持された。暗い=基材が、培地よりも視覚的に暗いものであった明るい=基材が、培地よりも視覚的に明るいものであったそれぞれの読み取りで、基材材料を培地から取り出す前に、培地の色を、基材の色と比較した表19を参照。基材の色と培地の色との差異を、観察及び報告した。培地との接触の30分後に、ナイロン基材材料は、双方とも培地よりも視覚的に暗いものとなり、実験全体を通して、より暗いまま維持された。参考実施例8BCP及びメチルレッドでのアクリジンオレンジAO検出の阻害この参考実施例は、pH指示薬の一方すなわちBCP又はMRが、アクリジンオレンジを有する溶液中に存在する場合の、アクリジンオレンジの蛍光の検出に対する、BCP及びメチルレッドの影響を示す。17グラムの細菌用ペプトン、0.17グラムのL-アラニンからなる、芽胞増殖培地溶液を調製した。200μLの容積の、この増殖培地を、2つ2の96ウェルプレート内の各ウェルに添加した。4.8g/Lから開始して0.75g/Lまで希釈される、pH指示薬溶液の希釈系列を、メチルレッドMR及びブロモクレゾ-ルパープルBCPの双方に関して作製した。1:50から開始して1:800まで希釈される、アクリジンオレンジの希釈系列を作製した。プレート1では、20μLの適切な希釈のBCPを、プレートの各横列に添加し、20μLの適切な希釈のアクリジンオレンジAOを、プレート1の各縦列に添加した。プレート2では、20μLの適切な希釈のメチルレッドを、プレートの各横列に添加し、20μLの適切な希釈のアクリジンオレンジAOを、プレート2の各縦列に添加した。プレート1及びプレート2の設定に関しては、表20を参照されたい。プレート1及びプレート2を、SYNERGY4分光光度計内に定置して、吸光度の読み取り値を、590nmで取得した。更には、435nm/530nmでの蛍光励起/発光の読み取り値もまた、収集した表21A、21Bを参照。計器の検出閾値を上回るシグナル計器の検出閾値を上回るシグナル全てのアクリジンオレンジの濃度に関して、溶液中のブロモクレゾ-ルパープルの量が減少するにつれて、アクリジンオレンジによって生成されるシグナルが増大した。換言すれば、BCPの存在は、アクリジンオレンジのシグナルを覆い隠すものであった。例えば、0.3g/Lの初期BCP濃度を有する横列に関しては、0のBCPを有する横列と比較して、約27~36のアクリジンオレンジの蛍光シグナルが失われる。計器の検出閾値を上回るシグナル計器の検出閾値を上回るシグナルBCPと同様に、メチルレッドもまた、アクリジンオレンジの蛍光シグナルを覆い隠すものであった。メチルレッドの濃度が高いほど、検出されるアクリジンオレンジの蛍光シグナルは低下する。例えば、0.3g/Lの初期メチルレッド濃度を有する横列に関しては、メチルレッドを有さない横列と比較して、約3~27のアクリジンオレンジの蛍光シグナルが失われる表22A、22Bを参照。実施例1~3:生物活性の検出3MATTEST1291RapidReadoutBiologicalIndicatorを、3MCompanySt.Paul,MNより得る。荷電ナイロン膜MAGNAPROBE、0.45マイクロメートル荷電ナイロン膜、品番NP0HY00010を、GEOsmonicsLabstoreMinnetonka,MNより得る。生物学的インジケーターのキャップを取り外し、この生物学的インジケーター管を反転させることによって、ガラスアンプルを取り出す。このアンプルは、後の使用のために確保する。ナイロン膜を、小さいストリップ0.5cm×2cmに切り出す。生物学的インジケーター管の底部の壁部に隣接させて、ストリップを定置し縦方向に、各管内にガラスアンプルを再び定置する。各管上に、再び慎重にキャップを取り付ける。この改変された生物学的インジケーターを、様々な長さの時間にわたって、蒸気への曝露に晒す表23に示す。この蒸気曝露は、HWSteamResistometerHWTechnologyLLCRochester,NYより入手可能内の、270°F/132°CのGravitySteamで遂行される。蒸気への曝露に続いて、生物学的インジケーターを放冷し、製造元の使用説明書に従って、生物学的インジケーター内でアンプルを粉砕する。アンプルを、インキュベーター内に56°Cで定置して、定期的に例えば、15分後、30分後、45分後、60分後、90分後、120分後、3時間後、4時間後、6時間後、8時間後、12時間後、18時間後、24時間後、36時間後、48時間後、及び/又は72時間後に取り出して、液体媒質の色、ナイロン膜の色、及び液体媒質の蛍光を観察する。蛍光は、手持ち式の紫外光源で管を照射することによって、視覚的に検出することができ、あるいは、好適な蛍光計内に管又は管からの液体を定置して、蛍光を測定することができる。蒸気曝露に殆ど晒されないか、又は全く晒されない例えば、0~1分の蒸気曝露生物学的インジケーターは、ブロス中、及びナイロン膜上で、pH指示薬ブロモクレゾ-ルパープルの、紫色から黄色への転換を示す。これらの生物学的インジケーターはまた、蛍光発生酵素基質の、蛍光最終生成物4-メチルウンベリフェロンへの実質的な転換も示す。致死的な蒸気曝露に晒される例えば、≧15分生物学的インジケーターは、ナイロン膜上でのブロモクレゾ-ルパープルの蓄積を示すが、その指示薬の、紫色から黄色への実質的な転換は示さない。これらの生物学的インジケーターは、蛍光発生酵素基質の、蛍光最終生成物への実質的な転換を示さない。準備実施例1-生物学的滅菌インジケーターBIの準備本開示を例示するために、上記の説明に従って、かつ図4~7に示すように、幾つかの生物学的滅菌インジケーターBIを準備した。実施例で使用されるBIの具体的な詳細を、以下に記載する。図4~7に示すように、生物学的滅菌インジケーター100は、ハウジング102を含み、このハウジング102は、一体に結合されて、内蔵型の生物学的滅菌インジケーターを提供する、第1部分104例えば、中空管及び第2部分106例えば、キャップを含むものとした。このキャップは、長さ約21mm×直径約14mmの全体寸法を有する、成形ポリプロピレンとした。第1部分104中空管は、長さ約52mm及び頂部の直径約12mmの全体寸法を有し、図4~6に示す形状を有する、成形ポリプロピレンとした。第1部分104例えば、中空管の全容積は、約3mLとした。図4~6に示すように、ハウジング102の第2部分キャップ106は、ハウジング102の内部例えば、リザーバ103と環境との間の流体連通を提供する、6つの開口又は開口部107を含むものとした。障壁としての役割を果たす濾紙材料図4~6には示さずを、滅菌剤通路内に、開口107の上から配置し、片面感圧接着性紙ラベルで、定位置に保持した。この濾紙材料は、現在入手可能な、蒸気滅菌器用の3MATTEST1291RapidReadoutBiologicalIndicatorSt.Paul,MNの、3MCompanyより入手可能のキャップ内に存在するものと、同じ材料とした。生物学的滅菌インジケーター100は、液体増殖培地122を収容する、壊れやすい容器120を更に含むものとした。壊れやすい容器120は、ホウケイ酸ガラスで作製され、芽胞の増殖培地を収容するものとした。この培地は、pH指示薬ブロモクレゾールパープル、及び蛍光酵素基質4-メチルウンベリフェリル-α-D-グルコシドを含有する、修正されたトリプティックソイブロスTSBからなるものとした。このアンプルは、長さ約40mm×直径約4mmであり、約500μLの培地液を保持するものとした。液体増殖培地122は、St.Paul,MNの、3MCompanyより、蒸気滅菌器用の3MATTEST1291RapidReadoutBiologicalIndicatorとして現在入手可能な製品内で使用されるものと、同じ培地とした。図4~7に示すように、挿入部材130によって、液体培地容器120を、生物学的滅菌インジケーター100内部で定位置に保持した。挿入部材破砕装置とも呼ばれる130は、容器120を定位置に保持することと、液体培地容器120を破砕するために第2部分106が押し下げられる、BIの作動工程の間に実施される、容器120の制御された破砕を促進するように機能することとの双方に役立つものとした。挿入部材130は、長さ約22mm×幅約9mmの寸法を有する、成形ポリカーボネート構造とした。第2部分106は、作動の後に、第1部分104の第1末端部101と、第1部分104の開放上方末端部157で接触して、生物学的滅菌インジケーター100を閉鎖又は封止する例えば、気密封止するように配置される、封止突起部156を有するものとした。生物学的滅菌インジケーター100は、第1部分104と流体連通して配置される、G.ステアロサーモフィルスの芽胞ATCC7953115を更に含むものとした。芽胞115は、ポリプロピレンの芽胞キャリア1359mm×4mmの、芽胞リザーバ136内に付着させた。芽胞115は、ポリプロピレンの表面上に直接付着させ、芽胞リザーバ136は、約15μLの容積を有するものとした。ハウジング102は、内側部分的壁部若しくは棚部118によって部分的に隔離される、下方部分114第1チャンバ109を少なくとも部分的に画定する及び上方部分116第2チャンバ111を少なくとも部分的に画定するを含むものとし、この内側壁部又は棚部118内には、第1チャンバ109と第2チャンバ111との間の流体連通を提供する、開口部117を形成した。第2チャンバ111は、芽胞115を収容するように適合させた。第1チャンバ109は、特に作動の前に、壊れやすい容器120を収容するように適合させた。壁部118は、図4~7に示すように、ハウジング102の長手方向に対して、非ゼロの角度かつ非直角に、角度付けされるか、又は傾斜するものとした。芽胞増殖チャンバ又は検出チャンバと称することもできる第2チャンバ111は、滅菌プロセスの有効性を判定するために、芽胞の生存度に関して検査される容積を含むものとした。液体培地容器120は、滅菌の間、及び容器120が断裂していないとき、第1チャンバ109内に配置して、保持した。芽胞115は、滅菌の間、第2チャンバ111内に、環境と流体連通させて収容した。滅菌の間に、第2チャンバ111内に、滅菌剤が移動した例えば、第1チャンバ109を介して。その後、液体培地122が、作動の間、容器120が断裂して、液体122がハウジング102の内部へと解放されると、第2チャンバ111内に移動した例えば、第1チャンバ109から。第1チャンバ109は、約2800マイクロリットルの容積全ての内部構成要素が存在しない状態でを有するものとした。壁部118の直上の、第1チャンバ109の断面積は、約50mm2とした。第2チャンバ111は、約210マイクロリットルの容積を有するものとした。壁部118の直下の、第2チャンバ111の断面積は、約20mm2とした。生物学的滅菌インジケーター100は、基材119を更に含むものとした。基材119は、サイズを約9mm×約8mmとして、壁部118の上に安置されるように寸法決めした。基材119は、生物学的滅菌インジケーター100の第1チャンバ109と第2チャンバ111との間に配置した。基材119は、貫通して形成される、直径約3.2mm0.125インチの開口121を含み、この穴は、基材のほぼ中心に置かれるものとした。基材119は、挿入部材130と壁部118との間に配置した例えば、間に挟み込んで。基材119は、荷電ナイロンで形成し、具体的には、GEWaterProcessTechnologiesTrevose,PAより、商品名MAGNAPROBE0.45マイクロメートルの孔径、30cm×3mのロール、カタログ番号NP0HY00010、材料番号1226566で入手可能な、リプローブ可能な荷電転写膜とした。生物学的滅菌インジケーター100は、第2チャンバ111を第1チャンバ109と流体結合するように配置される、図7に示すような通気機構162を有するものとした。また、図7に示すように、生物学的滅菌インジケーター100は、ハウジング102の壁部108と一体的に形成される、リブ又は突出部165を有し、このリブ又は突出部165は、芽胞キャリア135を、ハウジング102内の所望の場所内に維持するように、配置されるものとした。ハウジング102は、ハウジング102内の断面積が、長手方向DLに沿って、概して減少するように、先細のものとした例えば、図6のテーパー形状部分146を参照。実施例1-蛍光の読み取り値と24時間後の増殖との相関関係図4~7に示し、かつ準備実施例1で上述した設計の、生物学的インジケーターBIを、~1×107CFUのG.ステアロサーモフィルスATCC7953芽胞嚢を使用して構築した。一部のBI結果は、表26及び表27に示され、以下で論じられるは、基材材料を使用することなく作製した。液体増殖培地122は、St.Paulの3MCompanyより入手可能な、蒸気滅菌器用の3MATTEST1292RapidReadoutBiologicalIndicator内で使用されるものと同じものとした。次いで、各BIを、HWSteamResistometerHWTechnologyLLCRochester,NYより入手可能内の、270°F/132°CのGravitySteamで、1分、1分45秒、2分、2分15秒、2分30秒、及び3分の、様々な長さの蒸気滅菌サイクルで処理した。滅菌に続いて、BIを放冷して、3MCompanyより入手可能な290AUTOREADER読み取り装置と類似の、3MCompanySt.Paul,MNより入手可能な490AUTOREADER読み取り装置内で作動させた;490AUTOREADERの具体的な機構は、同時係属の米国特許出願第61/409042号代理人整理番号66175US002及び同第61/408997号代理人整理番号66176US002で説明される。365/460nmの励起/発光での、蛍光の読み取り値を、1分毎に60分間取得した。蛍光が検出された場合には、ありとして報告し、蛍光が検出されない場合には、NFすなわち蛍光なしとして報告した。また、読み取り装置内での24時間のインキュベーションの後に、BIを取り出して、紫色から黄色への培地中のpH指示薬の色変化に基づいて、増殖に関して評価した。色変化が観察された場合には、ありとして報告し、色変化が観察されない場合には、なしとして報告した。以下の表24及び表25に示す結果は、全ての長さの滅菌サイクルに晒された全てのBIに関して、基材が第1の場所内に配置される場合の、蛍光の結果と24時間の増殖の確認結果との間の良好な相関関係を示す。以下の表26及び表27に示す結果は、基材が存在しなかった場合のBIに関して、特に2分15秒、2分30秒、及び3分のサイクル時間で、矛盾する結果が観察されたことを示す。本発明の広範囲で記載される数値範囲及びパラメーターは、近似値であるが、具体的な実施例に記載される数値は、可能な限り正確に報告する。しかしながら、全ての数値は、それらの対応する試験測定値に見出される標準偏差から必然的に生じる一定の範囲を、本質的に含む。全ての見出しは、読者の利便性のためであり、指定のない限り、その見出しに続く本文の意味を限定するために使用するべきではない。本明細書で引用される、全ての特許、特許出願、刊行物の完全な開示内容、並びに核酸及びタンパク質のデータベースエントリーは、個別に組み込まれる場合のように、参照により本明細書に組み込まれる。本発明の範囲及び趣旨から逸脱することなく、本発明の様々な修正及び変更が、当業者には明らかとなり、また、本明細書に記載される例示的実施形態に、本発明が不当に限定されるものではないことを理解するべきである。"