"リガンドが流路底面に固定化された流路型の表面プラズモン励起増強蛍光分光法用センサチップであって、該リガンドは糖鎖の形状の異なる二種以上のタイプが存在するアナライトのそれぞれと異なる結合能を有するものであり、該リガンドが流路の流れ方向に密度勾配を形成していることを特徴とする表面プラズモン励起増強蛍光分光法用センサチップ。上記リガンドが、レクチンである請求項1に記載の表面プラズモン励起増強蛍光分光法用センサチップ。上記密度勾配が、二以上の段階的な密度により形成されている請求項1または2に記載の表面プラズモン励起増強蛍光分光法用センサチップ。上記リガンドが二種以上のリガンドからなり、それぞれのリガンドが流路の流れ方向に密度勾配を形成して流路底面に固定化されている請求項1~3のいずれか一項に記載の表面プラズモン励起増強蛍光分光法用センサチップ。工程:請求項1~4のいずれか一項に記載の表面プラズモン励起増強蛍光分光法用センサチップを、第一のリガンドである上記リガンドの密度勾配の方向と流路の流れ方向とを一致させて配設する工程;工程:糖鎖の形状の異なる二種以上のタイプが存在するアナライト含む可能性のある検体を該表面プラズモン励起増強蛍光分光法用センサチップと接触させる工程;工程:上記工程の後に、該アナライトに結合し得る、蛍光物質で標識した第二のリガンドを、該表面プラズモン励起増強蛍光分光法用センサチップと接触させる工程;工程:上記工程の後に、該表面プラズモン励起増強蛍光分光法用センサチップの所定のエリアにおいて、表面プラズモン励起増強蛍光分光法に基づき該蛍光物質から発生した蛍光を測定し、該所定のエリアに捕捉されたアナライトを検出ないし定量する工程を含むことを特徴とする測定方法。上記工程において、上記表面プラズモン励起増強蛍光分光法用センサチップの複数のエリアにおいて表面プラズモン励起増強蛍光分光法に基づく測定を行い、その測定値に基づき、該複数のエリアに捕捉されたアナライトの全量に対する、特定の形状の糖鎖を有するアナライトの割合を求めることを含む、請求項5に記載の測定方法。本発明では、予めカラム処理により検体を分画する必要のない、すなわち迅速に測定することができ、カラム処理に伴うアナライトのロスを防止でき、特定のアナライトを高い精度で定量可能なSPFS用センサチップおよびそれを用いた測定方法を提供することを目的とする。本発明者らは、ある特定の形状の糖鎖を有する糖タンパク質以下特定アナライトと称することがある。に対する結合能の高いレクチンは、それとは異なる形状の糖鎖を有する糖タンパク質以下非特定アナライトと称することがある。に対しても弱いながらも多少の結合能を有することに着目した。そして、そのようなレクチンを流路型のSPFS用センサチップ上に密度勾配を形成させて固定化し、そこに上記特定アナライトおよび非特定アナライトが混在している試料を流下させると、特定アナライトおよび非特定アナライトの前記レクチンに対する結合能の違いにより、それぞれを流路の別々の部位に集積させる、あるいは前者のみを流路内に集積させる後者は集積させずに流下させることができ、しかもSPFSを用いるため、集積したアナライトを高精度で検出および定量することができることを見出し、本発明の完成に至った。すなわち、本発明のSPFS用センサチップは、リガンドが流路底面に固定化された流路型のSPFS用センサチップであって、該リガンドは糖鎖の形状の異なる二種以上のタイプが存在するアナライトのそれぞれと異なる結合能を有するものであり、該リガンドが流路の流れ方向に密度勾配を形成していることを特徴とする。上記リガンドは、レクチンであることが好ましい。上記密度勾配は、二以上の段階的な密度により形成されていることが好ましい。上記リガンドは、二種以上のリガンドからなり、それぞれのリガンドが流路の流れ方向に密度勾配を形成して流路底面に固定化されていることが好ましい。また、本発明の測定方法は、工程:本発明のSPFS用センサチップを、第一のリガンドである上記リガンドの密度勾配の方向と流路の流れ方向とを一致させて配設する工程;工程:糖鎖の形状の異なる二種以上のタイプが存在するアナライト含む可能性のある検体を該SPFS用センサチップと接触させる工程;工程:上記工程の後に、該アナライトに結合し得る、蛍光物質で標識した第二のリガンドを、該SPFS用センサチップと接触させる工程;工程:上記工程の後に、上記SPFS用センサチップの所定のエリアにおいて、SPFSに基づき該蛍光物質から発生した蛍光を測定し、該所定のエリアに捕捉されたアナライトを検出ないし定量する工程を含むことを特徴とする。上記工程において、上記SPFS用センサチップの複数のエリアにおいてSPFSに基づく測定を行い、その測定値に基づき、該複数のエリアに捕捉されたアナライトの全量に対する、特定の形状の糖鎖を有するアナライトの割合を求めることを含むことが好ましい。本発明によれば、分離操作によるロスや変質により定量結果の信憑性を損なうことなく、正確な定量が行えるとともに、プラズモン励起による電場増強効果により高感度測定が可能なSPFS用センサチップおよびそれを用いた測定方法を提供することができる。そのため、例えば試料中に含まれる特定アナライトと非特定アナライトとの量比が110000であっても、特定アナライトの精度の高い定量を示すことができる。またさらに、特定アナライトと非特定アナライトの両方を定量した場合には、それぞれについての精度の高い定量値から正確な量比を提示することができる。この110000という数値は、いくつかの文献で認められている量比よりも圧倒的に高い。そのため、本発明は新たな臨床的意義を見出せるツールとして極めて有用である。例えば、特定の形状の糖鎖を有する糖タンパク質AFPL3の検出に用いることによって、その量がまだ少ない初期の段階から肝癌の疾病診断などに応用することなどができる。このように、本発明は、高い感度広いダイナミックレンジおよび高い精度で二種類以上のアナライトを含む検体から特定アナライトを事前の分離操作によるロスなく定量できる。また二種類以上のアナライトそれぞれの定量を行うようにした場合には、複数のアナライトの定量結果を利用することが可能となる。例えば、糖鎖構造の異なる糖鎖タンパク質の検出および二種以上の検出量の相関は、病態の診断に有用である。以下、本発明のSPFS用センサチップおよび該センサチップを用いたSPFS測定方法を詳述する。<SPFS用センサチップ>本発明のSPFS用センサチップは、リガンドが固定化された流路型のSPFS用センサチップであって、例えば図1およびに示すように、該リガンドが流路の流れ方向に密度勾配を形成していることを特徴とする。本発明で用いるセンサチップは、リガンドの固定化の態様を除いて、SPFS測定に用いることができる公知のセンサチップと同様の構成をとることができ、その態様は特に限定されるものではない。また、本発明で用いる流路も、SPFS測定に用いることができる公知の流路と同様の構成をとることができ、その態様は特に限定されるものではない。リガンド本発明では二種類のリガンドを用いる。第一のリガンドは、検体中に含まれるアナライトと結合し、所定時間少なくともSPFSの測定を行う間保持し得る、流路底面に固定化された生体関連分子であって、糖鎖の形状の異なる二種以上のタイプが存在するアナライトのそれぞれと異なる結合能を有するものである。すなわち、第一のリガンドは、ある特定の形状の糖鎖を有するアナライト特定アナライトと高い親和性でもって結合するが、その他のアナライト非特定アナライトとも低いながらも多少の親和性をもって結合できるものであってもよいし、特定アナライトのみと特異的に結合して非特定アナライトとは実質的に結合しない非特異的な結合を除く。ものであってもよい。糖鎖を介してアナライトと結合し得る、第一のリガンドとして用いることのできる生体関連物質としては、レクチン,糖結合ドメインを有する酵素タンパク質,糖鎖に親和性を有するサイトカイン,これらの変異体、および糖鎖に相互作用を示す抗体がなど挙げられるが、特にレクチンが好ましい。第一のリガンドの候補となる生体関連物質としては、次のようなものが挙げられる。上記レクチンとしては、動植物、真菌、細菌、ウィルスなどから得られる様々な分子家系に属するレクチン、すなわち、細菌を含むすべての生物界で見出されるリシンB鎖関連のR型レクチン、真核生物全般に存在し糖タンパク質のフォールディングに関与するカルネキシンカルレティキュリン、多細胞動物に広く存在し、セレクチン、コレクチン等代表的なレクチンを多く含むカルシウム要求性のC型レクチン、動物界に広く分布しガラクトースに特異性を示すガレクチン、植物豆科で大きな家系を形成する豆科レクチン、およびこれと構造類似性をもち動物細胞内輸送に関わるL型レクチン、リソソーム酵素の細胞内輸送に関わるマンノース6リン酸結合性のP型レクチン、グリコサミノグリカンをはじめとする酸性糖鎖に結合するアネキシン、免疫グロブリン超家系に属しシグレックを含むI型レクチンなどが挙げられる。その他のレクチンとしては、ACAセンニンコクレクチン,BPLムラサキモクワンジュレクチン,ConAタチナタマメレクチン,DBAHorsegramレクチン,DSAヨウシュチョウセンアサガオレクチン,ECAデイゴマメレクチン,EELSpindleTreeレクチン,GNAユキノハナレクチン,GSLIグリフォニアマメレクチン,GSLIIグリフォニアマメレクチン,HHLアマリリスレクチン,ジャカリンジャックフルーツレクチン,LBAリママメレクチン,LCAレンズマメレクチン,LELトマトレクチン,LTLロータスマメレクチン,MPAアメリカハリグワレクチン,NPAラッパズイセンレクチン,PHAEインゲンマメレクチン,PHALインゲンマメレクチン,PNAピーナッツレクチン,PSAエンドウレクチン,PTLIシカクマメレクチン,PTLIIシカクマメレクチン,PWMヨウシュヤマゴボウレクチン,RCA120ヒママメレクチン,SBAダイズレクチン,SJAエンジュレクチン,SNAセイヨウニワトコレクチン,SSAニホンニワトコレクチン,STLジャガイモレクチン,TJAIキカラスウリレクチン,TJAIIキカラスウリレクチン,UDACommonStingingNettleレクチン,UEAIハリエニシダレクチン,VFAソラマメレクチン,VVAヘアリーベッチレクチン,WFAフジレクチン,WGAパンコムギレクチンなどを挙げることができる。上記糖結合ドメインを有する酵素タンパク質としては、各種グリコシダーゼキシラナーゼ、グルカナーゼ、および糖転移酵素UDP-GalNAc:ポリペプチドGalNAc転移酵素などが例示できる。また、糖鎖に親和性を有するサイトカインとしては、インターロイキン2IL2、インターロイキン12IL12、腫瘍壊死因子αTNF-α、繊維芽細胞成長因子FGFなどが例示できる。また、糖鎖に相互作用を示す抗体としては、糖鎖関連腫瘍マーカーCA199、フォルスマン抗原、T抗原、Tn抗原、シアリルT抗原、血液型関連糖鎖A,B,H,Lea,Lex抗原、分化関連抗原Ii,SSEA14に対する抗体などが例示できる。一方、第二のリガンドは、上記第一のリガンドにより捕捉されたアナライトを蛍光標識するためのリガンドである。この第二のリガンドは、測定の正確性のため、上記第一のリガンドとは異なり、糖鎖の形状の異なる二種以上のタイプのアナライトそれぞれと等しい結合能を有するもの、つまりアナライト間で実質的に変動のない部分を認識して結合しうるものである必要がある。第二のリガンドはアナライトに応じて適切なものを選択すればよいが、例えばアナライトが糖タンパク質である場合、第二のリガンドとしては糖タンパク質のタンパク質部分と相互作用を示す抗体が適切である。アナライト本発明において分析の対象とすることのできるアナライトとしては、糖鎖を有し、かつ、前述のような第一および第二のリガンドが存在する生体関連分子またはその断片である。このような生体関連分子としては、例えば、糖鎖を有する核酸一本鎖であっても二本鎖であってもよいDNA,RNA,ポリヌクレオチド,オリゴヌクレオチド,PNAペプチド核酸等,またはヌクレオシド,ヌクレオチドおよびそれらの修飾分子;糖鎖を有するタンパク質ポリペプチド,オリゴペプチド等、いわゆる糖タンパク質または糖ペプチド;糖鎖を有するアミノ酸修飾アミノ酸も含む。;糖質オリゴ糖,多糖類,糖鎖等;糖鎖を有する脂質、いわゆる糖脂質;またはこれらの修飾分子,複合体などが挙げられる。具体的には、バイオマーカーとして用いられる腫瘍マーカー,シグナル伝達物質,ホルモンなどが含まれる。本発明における典型的なアナライトである腫瘍マーカーの具体例として、αフェトプロテインAFPが挙げられる。このAFPは、胎児肝または肝細胞癌やヨークサック腫瘍などの悪性腫瘍で発現される癌胎児性糖タンパク質である。ヒトAFPには1分子当たり1本のアスパラギン結合型糖鎖が存在し、その糖鎖構造は既に明らかにされている。また、細胞の癌化に伴い糖鎖構造が変化することが知られており、肝細胞癌に伴い、上記アスパラギン結合型糖鎖の非還元末端のNアセチルグルコサミンにα16結合でフコースが付加した糖鎖を有するAFPが増加する。このような糖鎖の癌性変化は、前記第一のリガンドとして、糖鎖の構造によって親和性の異なる種々のレクチンを用いて検出することができる。例えば、レンズマメレクチンLCAは、フコースが付加された糖鎖を有するAFPLCA親和性AFP,AFPL3ともいう。に対する親和性が高いが、フコースが付加されていない糖鎖を有するAFPLCA非親和性AFP,AFPL1ともいう。に対する親和性が全くないわけではなく、多少の親和性を有し、これを捕捉することもできる。したがって、AFPをアナライトとするフコースが付加された糖鎖を有するAFPを特定アナライトとし、フコースが付加されていない糖鎖を有するAFPを非特定アナライトとする分析を行う場合、LCAを第一のリガンドとして用いることが好適である。密度勾配本発明のSPFS用センサチップにおいて、固定化されているリガンド第一のリガンドの密度は、流路の流れ方向に沿って勾配グラジェントを形成する。密度勾配は、連続的に密度が変化するように形成されていてもよいが、二以上の段階的な密度により形成されていてもよい。例えば、図1およびに示すように、当該SPFS用センサチップ上を5つのエリアに等分し、リガンドレクチンを固定化する際、流路の流れ方向に5つの段階的な密度を形成している態様などが挙げられる。このような段階的な密度を形成するためには、例えばリガンドの濃度が段階的に異なる溶液を調製し、流路底面の所定の区画にそれぞれの溶液を塗布してリガンドを固定化するようにすればよい。各エリアにおける第一のリガンドの密度、エリアの数およびサイズ、エリアどうしの間隔などは、特定アナライトを選択的に集積させることが可能な範囲で、用いる第一のリガンドの各アナライトに対する結合能や各アナライトとの接触時間送液時間ないし送液速度、各アナライトの数などの測定条件も考慮しながら、適宜調整することができる。実施例に示すように、第一のリガンドが固定化されたSPFS用センサチップの表面と、特定アナライトおよび非特定アナライトを含有する検体との接触時間が充分であれば、非特定アナライトが上流側で捕捉されたとしてもそのような非特定アナライトは徐々に下流側に移動し、一方で特定アナライトは上流側で捕捉され続けるので、最終的に特定アナライトと非特定アナライトを異なるエリアに分離して集積させることが可能であるが、接触時間が不充分であると、両者は充分に分離しないまま同じエリアに集積し、それぞれの定量を行えない虞がある。さらに、本発明のSPFS用センサチップに固定化される第一のリガンドは二種以上を併用することもできる。例えば、糖鎖の形状の異なる二種類のタイプの糖タンパク質の、それぞれの糖鎖に結合し得る二種類のリガンド例えばレクチンを用いる場合が挙げられる。また、上記二種類のリガンドは、それぞれ同じ方向に密度勾配を形成することも、逆の方向に密度勾配を形成することもできる。また、二種類のリガンドのうち、一方のリガンドのみに密度勾配を形成し、他方のリガンドは密度勾配なく一様な密度で形成したり、一方のリガンドが形成された領域の一部に部分的に、密度勾配をもって或いは一様な密度で形成したりすることもできる。密度勾配の形成の仕方は、特定アナライトを選択的に集積させて定量できるようであれば特に限定されるものではないが、より具体的には、次のような四通りの態様を代表的な例として示すことができる。なお、SPFS用センサチップに二種類以上のリガンドを固定化する際には、特定アナライトに結合能を有するリガンドが少なくとも密度勾配を有するように形成されれば、他の種類のリガンドが一様な密度や部分的に形成されていてもよい。《第一の態様》密度勾配の第一の態様は、図5に示すように、上流側で特定アナライトを優占的に捕捉し、下流側で非特定アナライトを優占的に捕捉する態様である。例えば、第一のリガンドとしてLCAを用い、これを上流側が低密度、下流側が高密度になるような密度勾配を形成した場合、LCA親和性AFP特定アナライトはLCAが低密度の上流側でも捕捉され、集積しやすいが、LCA非親和性AFP非特定アナライトはLCAが低密度の上流側では捕捉されにくいため、あるいは捕捉されたとしても結合力の弱さにより時間の経過につれて徐々に下流側に流されていくため、最終的にLCAが高密度の下流側に集積するものが多い。そのため、上流側に集積しているAFPの中ではLCA親和性AFP特定アナライトが優占的であり、一方、下流側に集積しているAFPの中ではLCA非親和性AFP非特定アナライトが優占的になる。このような第一の態様における第一のリガンドとしては、特定アナライトと高い親和性でもって結合するが、非特定アナライトとも低いながらも多少の親和性をもって結合できるものを選択する必要がある。なお、このような態様において、上記とは逆に上流側が高密度、下流側が低密度になるようなLCAの密度勾配を形成することは、LCA親和性AFP特定アナライトおよびLCA非親和性AFP非特定アナライトはともに上流側で捕捉されてしまい、互いに分離して定量することができないため不適切である。《第二の態様》密度勾配の第二の態様は、図5に示すように、上流から下流にかけてのいずれかの密度において特定アナライトを捕捉する一方、非特定アナライトは捕捉せずに流下素通りさせる態様である。例えば、上述した第一の態様と同様、第一のリガンドとしてLCAを用い、これを上流側が低密度、下流側が高密度になるような密度勾配を形成するが、最も下流側でも非特定アナライトが集積しないようにする。このような第二の態様における第一のリガンドとして、特定アナライトと高い親和性でもって結合するが、非特定アナライトとも低いながらも多少の親和性をもって結合できるものを選択した場合は、その下流側の密度を適切に調節する所定の値以下の密度にする必要があるが、特定アナライトのみと特異的に結合して非特定アナライトとは実質的に結合しないものを選択した場合は、その下流側の密度を調節する必要がなくなる。また、図2に示すように、SPFS用センサチップ上に固定化されたレクチンは密度勾配を形成しており、BMaの糖鎖部分図中、小さい丸が連なった鎖状の部分;図5中非特定アナライトに相当する。には結合せずに、BMaの糖鎖部分図中、小さい丸が連なり、分岐を有する鎖状の部分;図5中特定アナライトに相当する。に結合するため、典型的には、BMaは素通りし、BMaが、レクチン密度の高いエリアで捕捉される。《第三の態様》密度勾配の第三の態様として、図5に示すように、一方の第一のリガンドAが流路の上流から下流にかけて疎から密になるよう固定化され、もう一方の第一のリガンドBも、同じく流路の上流から下流にかけて疎から密になるよう固定化される態様が挙げられる。このような第三の態様は、二種類の第一のリガンドAおよびBを用いることで、二種類の特定アナライトAおよびBを互いに異なるエリアで別々に集積させることが可能である。すなわち、第一のリガンドAが特定の密度以上で固定化されているエリアに特定アナライトAを集積させ、第一のリガンドBが特定の密度以上で固定化されているエリアに特定アナライトBを集積させるが、前者のエリアと後者のエリアが重複しないよう、それぞれ固定化されたリガンドの密度を適切に調節して、例えば前者のエリアがより上流側になるよう、後者のエリアがより下流側になるようにすることができる。また、非特定アナライトは、いずれのエリアでも捕捉せずに流下させるようにすることも、二種類の特定アナライトAおよびBが集積しているエリアとは異なるエリア例えば最も下流側に集積させることも可能である。この場合、特定アナライトBおよび非特定アナライトが第一のリガンドAによって捕捉されないよう、また特定アナライトAおよび非特定アナライトが第一のリガンドBによって捕捉されないよう、留意する必要がある。すなわち、第三の態様において、第一のリガンドAとして、特定アナライトAと高い親和性でもって結合するが、特定アナライトBおよび非特定アナライトとも低いながらも多少の親和性をもって結合できるものを選択した場合は、特定アナライトAを優占的に捕捉するエリアでは特定アナライトBおよび非特定アナライトが実質的に捕捉されないよう第一のリガンドAの密度を適切に調節する所定の値以下の密度にする必要があり、特定アナライトAのみと特異的に結合して特定アナライトBおよび非特定アナライトとは実質的に結合しないものを選択した場合は、その密度を調節しなくともよい。一方、第一のリガンドBについても、特定アナライトBと高い親和性でもって結合するが、特定アナライトAおよび非特定アナライトとも低いながらも多少の親和性をもって結合できるものを選択した場合は、特定アナライトBを優占的に捕捉するエリアでは特定アナライトAおよび非特定アナライトが実質的に捕捉されないよう第一のリガンドBの密度を適切に調節する所定の値以下の密度にする必要があり、特定アナライトBのみと特異的に結合して特定アナライトAおよび非特定アナライトとは実質的に結合しないものを選択した場合は、その密度を調節する必要がなくなる。《第四の態様》密度勾配の第四の態様として、図5に示すように、一方の第一のリガンドAが流路の上流から下流にかけて疎から密になるよう固定化され、もう一方の第一のリガンドBが、逆に流路の上流から下流にかけて密から疎になるよう固定化される態様が挙げられる。このような第四の態様も、二種類の第一のリガンドAおよびBを用いることで、二種類の特定アナライトAおよびBをそれぞれ上流側および下流側で別々に捕捉することが可能である。すなわち、第一のリガンドAが特定の密度以上で固定化されている下流側に特定アナライトAを集積させ、第一のリガンドBが特定の密度以上で固定化されている上流側に特定アナライトBを集積させる。また、非特定アナライトは、いずれのエリアでも捕捉せずに流下させるようにすることも、二種類の特定アナライトAおよびBが集積しているエリアとは異なるエリア例えば最も下流側に集積させることも可能である。この場合も、上流側にある特定アナライトBが集積するエリアで特定アナライトAおよび非特定アナライトが捕捉されないよう、また下流側にある特定アナライトAが集積するエリアで特定アナライトBおよび非特定アナライトが捕捉されないよう、留意する必要がある。すなわち、第四の態様において、第一のリガンドAとして、特定アナライトAと高い親和性でもって結合するが、特定アナライトBおよび非特定アナライトとも低いながらも多少の親和性をもって結合できるものを選択した場合は、下流側にある特定アナライトAを優占的に捕捉するエリアでは特定アナライトBおよび非特定アナライトが実質的に捕捉されないよう第一のリガンドAの密度を適切に調節する所定の値以下の密度にする必要があり、特定アナライトAのみと特異的に結合して特定アナライトBおよび非特定アナライトとは実質的に結合しないものを選択した場合は、その下流側の密度を調節しなくともよい。一方、第一のリガンドBについても、特定アナライトBと高い親和性でもって結合するが、特定アナライトAおよび非特定アナライトとも低いながらも多少の親和性をもって結合できるものを選択した場合は、上流側にある特定アナライトBを優占的に捕捉するエリアでは特定アナライトAおよび非特定アナライトが実質的に捕捉されないよう第一のリガンドBの密度を適切に調節する所定の値以下の密度にする必要があり、特定アナライトBのみと特異的に結合して特定アナライトAおよび非特定アナライトとは実質的に結合しないものを選択した場合は、その上流側の密度を調節しなくともよい。<SPFS用センサチップを用いた測定方法>本発明の測定方法は、下記工程~を含むことを特徴とする。工程:本発明のSPFS用センサチップを、第一のリガンドである上記リガンドの密度勾配の方向と流路の流れ方向とを一致させて配設する工程。工程:糖鎖の形状の異なる二種以上のタイプが存在するアナライト含む可能性のある検体を該SPFS用センサチップと接触させる工程。工程:上記工程の後に、該アナライトに結合し得る、蛍光物質で標識した第二のリガンドを、該SPFS用センサチップと接触させる工程。工程:上記工程の後に、上記SPFS用センサチップの所定のエリアにおいて、SPFSに基づき該蛍光物質から発生した蛍光を測定し、該所定のエリアに捕捉されたアナライトを検出ないし定量する工程。上記工程において、上記SPFS用センサチップの複数のエリアにおいてSPFSに基づく測定を行い、その測定値に基づき、該複数のエリアに捕捉されたアナライトの全量に対する、特定の形状の糖鎖を有するアナライトの割合を求めることを含むことが好ましい。検体検体としては、例えば、血液血清血漿,尿,鼻孔液,唾液,便,体腔液髄液,腹水,胸水等などが挙げられ、所望の溶媒、緩衝液等に適宜希釈して用いてもよい。これら検体のうち、腫瘍マーカーが含まれる可能性のある血液,血清,血漿,尿,鼻孔液および唾液が好ましい。接触接触は、流路中に検体を送液し、SPFS用センサチップの第一のリガンドが固定化されている面が該送液中に浸漬され、該第一のリガンドと検体中のアナライトとが反応できる状態となるよう、SPFS用センサチップと検体とを接触させる態様が好ましい。送液速度は、第一のリガンドが固定化されたSPFS用センサチップと検体中のアナライトとの接触時間が充分なものとなるよう調整すればよく、必要に応じて流路を循環型のものとしてもよい。また、第一のリガンドとアナライトとをゆっくりと接触させる接触時間を長くするために、例えばゲルを用いるなどして送液の媒体に粘度を高めるようにしてもよい。蛍光物質で標識した第二のリガンド蛍光物質としては、SPFS測定できる公知の蛍光物質であれば、特に限定されず、また当該蛍光物質を第二のリガンドに標識する方法も、従来の方法を用いることができる。検出および定量SPFSによりアナライトと複合体を形成した第二のリガンドから発せられる蛍光を測定することにより、そのアナライトの検出または定量を行うことができる。流路の各エリアにおいて測定される蛍光の強度は、それぞれのエリアに捕捉されているアナライトの量を反映しており、別途作成した検量線を利用することなどにより、アナライトを定量することが可能である。例えば、前述した第一の態様において、特定アナライトおよび非特定アナライトそれぞれが捕捉されていると想定されるエリアの蛍光強度から、特定アナライトおよび非特定アナライトそれぞれを定量することができる。複数のエリアにまたがって特定アナライトおよび非特定アナライトが捕捉されているような場合には、それらのエリアの合計値から特定アナライトおよび非特定アナライトそれぞれの全量を求めることができ、また全てのエリアの定量値を合計すれば、特定アナライトおよび非特定アナライトを含むアナライトの全量を求めることができる。また、前述した第二および第四の態様のように、非特定アナライトを定量せず、したがってアナライトの全体量を定量しなくてもよい場合には、特定アナライトの検出または定量のみを行うようにすればよい。次に、本発明について実施例を示してさらに詳細に説明するが、本発明はこれらによって限定されるものではない。[実施例1]11抗原捕捉担体の固定化:屈折率nd152、厚さ1mmで外形が20mm×100mmのガラス製の透明な支持体SCHOTTAG社製BK7をプラズマ洗浄し、該支持体の片面にクロム薄膜をスパッタリング法により形成した後、その表面にさら金薄膜をスパッタリング法により形成した。クロム薄膜の厚さは1nm、金薄膜の厚さは50nmであった。得られた支持体上、長手方向に5等分するようにパッキンでエリアを形成し、5つのエリアにそれぞれ異なる濃度のレンズマメレクチンLCAを含む溶液を添加し、物理吸着により固定化した。その後、1重量牛血清アルブミンBSAを含むPBS溶液にて2時間静置することで、非特異的吸着防止処理を行い、5段階の密度勾配が形成されたSPFS用センサチップを製造した。12流路の作製:BSA溶液を除去洗浄の後、パッキンを外したSPFS用センサチップの表面に、2mm×10mmの穴を有する、外形が20mm×20mm、流路高さに対応する厚さ05mmを有するポリジメチルシロキサンPDMS製シートを5つ設け、流路の外側からSPFS用センサチップを覆うように厚さ4mmでPDMS製スペーサガスケットとして、流路とSPFS用センサチップとの隙間をシールするためのものと同外形のポリメチルメタクリレート板を乗せ圧着しただし、このシリコンゴムスペーサは送液に触れない状態とする。、ビスで流路と該ポリメチルメタクリレート板とを固定した。13抗原の送液:抗原として、和光純薬工業製ミュータスワコーAFPL3用コントロールLAFPL3が全AFPのうち約32を占め、全AFP濃度は約49ngmLであった。05mLを10分間かけてゆっくりと送液し、のちPBS溶液を20分間ゆっくりと送液してから表面プラズモンで共鳴角のシフトを経時的に測定し、抗原が結合されたことを確認した。ここで、SPFS用センサチップの金薄膜へのレーザ光の入射角度角が最適角になるようLD光源を固定した後、LD光源による励起光をSPFS用センサチップに照射し、カットフィルタ日本真空光学株製、集光レンズとして10倍の対物レンズ株ニコン製を介して、表面プラズモン励起増強蛍光分光法による蛍光をCCDイメージセンサ日本テキサスインスツルメンツ株製で検出し、ブランク蛍光シグナルとした。14蛍光標識抗体の作製:蛍光標識抗体を、蛍光物質ラベリングキットを利用し、以下のようにして作製した。すなわち、抗αフェトプロテインAFPモノクローナル抗体1D5;25mgmL;株日本医学臨床検査研究所製100μg相当と01M重炭酸ナトリウムとAlexaFluor登録商標647reactivedyeとを混合し室温にて1時間反応させた。反応後、ゲル濾過クロマトグラフィおよび限外濾過を行い標識に利用されなかったAlexaFluor647reactivedyeを取り除いた。15検出抗体の送液による反応:蛍光標識した抗AFPモノクローナル抗体を1000ngmL含むPBSを、15mL添加し、10分間かけてゆっくりと送液した。その後、Tween20を001重量含むPBSで30分間かけてゆっくりと送液洗浄した。16SPFS蛍光測定:洗浄開始から30分後にSPFS用センサチップ上5つのエリアの蛍光を順次CCDイメージセンサにより検出し、それぞれSPFSシグナルを測定した。17送液時間の最適化:13において、抗原を10分間送液し、その後PBSを20分送液してトータル30分間かけて送液したのと同様に、抗原を10分間送液し、その後PBSをそれぞれ送液して、トータル10分間抗原のみの送液,20分間,40分間および50分間かけて送液し流速はいずれの場合も一定である。、SPFS用センサチップ上5つのエリアそれぞれのSPFSシグナルを測定した。その結果を表1に示す。表1において、30分間送液した場合に、左から2番目と4番目のエリアに特に大きなピークが現れ、それぞれのエリアにAFPが集積している様子が観察された。後記18検量線の作成における推定と同様に、AFPL3は前者のエリアに、それ以外のAFPは後者のエリアに別々に集積していると推定される。送液時間が20分間,40分間および50分間の場合も、AFPL3およびそれ以外のAFPを異なるエリアに集積させることができている。一方、送液時間が10分間の場合、AFPL3およびそれ以外のAFPは左から1番目と2番目のエリアに、充分に分離せずに集積しているようである。リガンド密度が相対的に小さい12番目のエリアであっても、他のエリアより蛍光強度が大きいのは、12番目のエリアにはAFPL3および他のAFPの数に対して充分な数のリガンドが固定されているからであろう。18検量線の作成:11および12を実施した後、検量線用サンプル後述として調製したミュータスワコーAFPL3用コントロールL05mLを30分間かけてゆっくりと送液した。そして14で得られた蛍光標識抗AFPモノクローナル抗体を1000ngmL含むPBSを、15mL添加し、10分間かけてゆっくりと送液した。その後、Tween20を001重量含むPBSで30分間かけてゆっくりと送液洗浄した。洗浄開始から30分後1つのCCDから5つのエリアを順次観察し、それぞれのSPFSシグナルを測定した。検量線用サンプルは、PBSのみAFP濃度0ngmLおよび全AFP濃度がそれぞれ20,50,15および40ngmLとなるようにミュータスワコーAFPL3用コントロールLをPBSで希釈したものである。ミュータスワコーAFPL3用コントロールLはAFPL3が全AFPのうち約32を占めるものであるから、これら検量線用サンプルのAFPL3濃度はそれぞれ0,064,160,48および128ngmLとなる。これらの結果を表2に示す。表2から、先の結果と同様に左から2番目と4番目に大きなピークが現れ、AFPが集積している様子が観察された。/×100を計算したところ、前記AFPL3の含有率と同じ約32の比率となったことから、L3糖鎖構造のAFPAFPL3が上流側左から1番目と2番目に集積し、それ以外の糖鎖構造のAFPが左から下流側4番目と5番目に集積したものと推定される。これは、図5の第一の態様に相当するものと考えられ、SPFS用センサチップの上流側12番目のエリアに特定アナライトであるAFPL3が、その下流側45番目のエリアに非特定アナライトであるL3以外のAFPが集積している。そして、リガンド密度,リガンドとアナライトとの親和性,送液時間等の条件から、SPFS用センサチップの中間付近3番目のエリアに集積するAFPが少なかったものと考えられる。それぞれの合計値で検量線を作成すると、表3のようになった。19AFP試料の測定:AFPL3を含むミュータスワコーAFPL3用コントロールLと、AFPL3を含まないrecombinantAFPAbnova社とを、AFPL3の含有率が32になるように混合し、SPFSシグナルを測定した。SPFSシグナルの合計値とそれぞれの検量線とから、L3糖鎖を含むAFPは172ngmL、L3糖鎖を含まないAFPは470ngmLと算出され、仕込み計算濃度の157ngmL,477ngmLそれぞれとよく一致した。さらに、AFPの低濃度域0,20,100,500および2000pgmLで同様に検量線を作成し、直線性を確認した。その後、この検量線を用いて、AFPL3の含有率が32となるように調製した溶液を10倍および100倍希釈して、SPFSシグナルを測定した。SPFSシグナルの合計値とそれぞれの検量線から得られた濃度と、仕込み計算濃度とがよく一致した。[実施例2]21抗原捕捉担体の固定化は、実施例111と同様に実施し、SPFS用センサチップを製造した。22流路の作製において、流路の高さを下げて、流れてくる試料がSPFS用センサチップ表面に接触する確率を上げるため、流路高さに対応する厚さ01mmを有するPDMS製シートに変更した以外は実施例112と同様に実施した。23抗原の送液は、実施例113と同様に実施した。24検出抗体の送液による反応において、15の送液時間を2時間とすることで、2番目のエリアと4番目のエリアに集積することが分かった。25検量線の作成:18において、送液時間を2時間とした以外は18と同様にしてSPFSシグナルを測定した。その結果を表4に示す。2番目のエリアと4番目のエリアのみから検量線を作成した。26AFP試料の測定:実施例1の19と同様にSPFSシグナルを測定した。実施例1と同等の結果が得られた。[実施例3]31抗原捕捉担体の固定化は、レンズマメレクチンLCAの代わりに、特開平8134100号公報ユニチカに準じて作製した抗AFP抗体アニオン硫酸化チロシン5量体結合抗AFPモノクローナル抗体マウスを用いた以外は実施例111と同様にして実施し、SPFS用センサチップを製造した。32流路の作製は、実施例112と同様に実施した。33抗原の送液は、実施例113と同様に実施した。34検出抗体の送液による反応は、実施例115と同様に実施した。その結果、実施例2の表4と同様に分離できた。実施例1と同じ高い天井の流路でも、2番目のエリアと4番目のエリアに集積することがわかった。このことは、固相に抗体を用いる方がレクチンを用いるよりもブロードにならずに集積しやすいことを示しており、抗体の方が、レクチンよりもアフィニティが高いという一般的な知見に合致している。《考察》本発明のSPFS用センサチップを用いた測定方法は、ダイナミックレンジが広いことから、糖鎖構造の比が不明のAFPを分析する場合に、一方が約1pgmLで、もう一方が約10000pgmLであっても、同時測定が可能である。"