"STEAP-1タンパク質の存在を、該STEAP-1タンパク質を含むと疑われる生物学的試料において決定する方法であって、該方法が、該生物学的試料を89ジルコニウム標識抗STEAP-1抗体に曝露し、該生物学的試料における該89ジルコニウム標識抗STEAP-1抗体の該タンパク質への結合を決定することを含み、該89ジルコニウム標識抗STEAP-1抗体の該タンパク質への結合が、該生物学的試料における該STEAP-1タンパク質の存在を示す方法。イムノPETイメージング法である、請求項1に記載の方法。前立腺、肺、結腸、膀胱、卵巣の細胞又はユーイング肉腫細胞の増殖性疾患を有すると疑われる患者において行われる、請求項1に記載の方法。本発明の実施態様の詳細な説明STEAP-1に結合する単離された抗体が提供される。さらに、抗STEAP-1抗体を含んでなるイムノコンジュゲートが提供される。本発明の抗体及びイムノコンジュゲートは、例えば、STEAP-1の発現の変更、例えば発現の増加と関係している疾患の診断又は治療に有用である。ある実施態様では、本発明の抗体又はイムノコンジュゲートは、腫瘍又は癌などの細胞増殖性疾患の診断又は治療に有用である。ある実施態様では、STEAP-1は、前立腺、肺又は結腸の組織の腫瘍又は癌に発現される。ある実施態様では、本発明の抗体又はイムノコンジュゲートは、STEAP-1、例えば細胞表面上に発現されるSTEAP-1の検出に有用である。ある実施態様では、本発明の抗体又はイムノコンジュゲートは、前立腺、肺又は結腸組織の、正常細胞及び/又は腫瘍又は癌細胞の表面におけるSTEAP-1発現の検出に有用である。抗STEAP-1抗体をコードするポリヌクレオチドが提供される。抗STEAP-1抗体をコードするポリヌクレオチドを含むベクターが提供され、さらに該ベクターを含む宿主細胞が提供される。また、本発明のポリヌクレオチド、抗STEAP-1抗体又はイムノコンジュゲートのいずれか一又は複数を含有する製剤を含む組成物が提供される。抗STEAP-1抗体、抗体と薬剤のコンジュゲート、又はイムノコンジュゲートを用いて腫瘍又は癌を含むがこれらに限定されない細胞増殖性疾患の治療方法が提供される。このような方法は、限定しないが、哺乳動物の前立腺、肺又は結腸における腫瘍及び癌の治療を含む。抗STEAP-1抗体、抗体と薬剤のコンジュゲート又はイムノコンジュゲートを用いて組織細胞上のSTEAP-1の発現を検出する方法が提供される。このような方法は、限定しないが、非限定的な例として、前立腺、肺又は結腸細胞の正常細胞、腫瘍細胞、又は癌細胞上の、STEAP-1の発現を検出を含む。一般的技術本願明細書中に記載又は引用される技術及び手順は、一般に十分に理解されるものであり、当業者によって従来の方法論を用いて共通して実施されるものである。その例として、以下の文献に記載される方法論が広く利用されている。Sambrook等MolecularCloningALaboratoryManual3rdeditionColdSpringHarborLaboratoryPressColdSpringHarborNYCURRENTPROTOCOLSINMOLECULARBIOLOGY;theseriesMETHODSINENZYMOLOGYPCR2APRACTICALAPPROACH、HarlowandLane編集ANTIBODIESALABORATORYMANUALandANIMALCELLCULTURE;OligonucleotideSynthesis;MethodsinMolecularBiologyHumanaPressCellBiologyALaboratoryNotebookAcademicPress;AnimalCellCulture編集1987;IntroductiontoCellandTissueCulturePlenumPress;CellandTissueCultureLaboratoryProceduresJWileyandSons;HandbookofExperimentalImmunology;GeneTransferVectorsforMammalianCells;PCRThePolymeraseChainReaction;CurrentProtocolsinImmunology;ShortProtocolsinMolecularBiology;Immunobiology;Antibodies;Antibodiesapracticalapproach;Monoclonalantibodiesapracticalapproach;Usingantibodiesalaboratorymanual;TheAntibodies;及びCancerPrinciplesandPracticeofOncology。89ZrImmunoPETComphrehensiveProceduresfortheProductionof89ZrLabeledMonoclonalAntibodies。定義と省略記号定義単離された抗体とは、その自然環境の成分から同定され分離され及び/又は回収されたものである。その自然環境の汚染成分とは、抗体の研究、診断又は治療的な使用を妨害する物質であり、酵素、ホルモン、及び他のタンパク質様又は非タンパク質様溶質が含まれる。ある実施態様では、タンパク質は、例えばローリー法で測定した場合95を超える抗体、ある実施態様では99重量を超えるまで、例えばスピニングカップシークエネーターを使用することにより、少なくとも15のN末端あるいは内部アミノ酸配列の残基を得るのに充分なほど、あるいは、例えばクーマシーブルーあるいは銀染色を用いた非還元あるいは還元条件下でのSDSPAGEにより均一になるまで十分なほど精製される。抗体の自然環境の少なくとも一の成分が存在しないため、単離された抗体には、組換え細胞内のインサイツでの抗体が含まれる。しかしながら、通常は、単離された抗体は少なくとも一の精製工程により調製される。単離された核酸分子は、例えば天然の環境に通常付随している少なくとも一の他の核酸分子から分離された核酸分子である。さらに、単離された核酸分子は、例えば、核酸分子を通常発現するが、その核酸分子がその天然の染色体位置と異なる染色体位置にあるか又は染色体外に存在する、細胞に含まれる核酸分子を含む。精製とは、分子が、含まれる試料中の重量にして少なくとも95、又は重量にして少なくとも98の濃度で試料中に存在することを意味する。ここで用いる実質的に類似、実質的に同じなる用語は、当業者が2つの数値の差異に、該値によって測定される生物学的性質上わずかに又は全く生物学的及び/又は統計学的有意差がないと認められるほど、2つの数値が有意に類似していることを意味する。前記2つの値間の差異は、参照/比較値の例えば約50以下、約40以下、約30以下、約20以下、及び/又は約10以下である。ここで用いる実質的に減少、又は実質的に異なるという句は、当業者が2つの数値の差異に、該値によって測定される生物学的性質上統計学的に有意であると認められるほど、2つの数値が有意に異なっていることを意味する。前記2つの値間の差異は、参照/比較分子の値の、例えば約10より大きく、約20より大きく、約30より大きく、約40より大きく、及び/又は約50より大きい。ここで使用されるベクターという用語は、それが結合している他の核酸を輸送することのできる核酸分子を意味するものである。一つのタイプのベクターはプラスミドであり、これは付加的なDNAセグメントが結合されうる円形の二本鎖DNAを意味する。他の型のベクターはファージベクターである。他の型のベクターはウイルスベクターであり、付加的なDNAセグメントをウイルスゲノムへ結合させうる。所定のベクターは、それらが導入される宿主細胞内において自己複製することができる。他のベクターは、宿主細胞への導入時に宿主細胞のゲノム中に組み込まれ、宿主ゲノムと共に複製する。更に、所定のベクターは、それらが作用可能に結合している遺伝子の発現を指令し得る。このようなベクターはここでは組換え発現ベクターと呼ぶ。一般に、組換えDNA技術で有用な発現ベクターはしばしばプラスミドの形をとる。本明細書では、プラスミドが最も広く使用されているベクターの形態であるので、プラスミドとベクターを相互交換可能に使用する場合が多い。ここで交換可能に使用されるポリヌクレオチド又は核酸は、任意の長さのヌクレオチドのポリマーを意味し、DNA及びRNAが含まれる。ヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、修飾されたヌクレオチド又は塩基、及び/又はそれらの類似体、又はDNAもしくはRNAポリメラーゼにより、もしくは合成反応によりポリマー中に取り込み可能な任意の基質とすることができる。ポリヌクレオチドは、修飾されたヌクレオチド、例えばメチル化ヌクレオチド及びそれらの類似体を含み得る。存在するならば、ヌクレオチド構造に対する修飾は、ポリマーの組み立ての前又は後になされ得る。ヌクレオチドの配列は非ヌクレオチド成分により中断されてもよい。ポリヌクレオチドは合成後になされる修飾、例えば標識との結合を含みうる。他のタイプの修飾には、例えばキャップ、類似体との自然に生じたヌクレオチドの一又は複数の置換、ヌクレオチド間修飾、例えば非荷電連結及び荷電連結を有するもの、ペンダント部分、例えばタンパク質を含むもの、インターカレータを有するもの、キレート剤を含むもの、アルキル化剤を含むもの、修飾された連結を含むもの、並びにポリヌクレオチドの未修飾形態が含まれる。更に、糖類中に通常存在する任意のヒドロキシル基は、例えばホスホナート基、ホスファート基で置き換えられてもよく、標準的な保護基で保護されてもよく、又は付加的なヌクレオチドへのさらなる連結を調製するように活性化されてもよく、もしくは固体又は半固体担体に結合していてもよい。5及び3末端のOHはホスホリル化可能であり、又は1~20の炭素原子を有する有機キャップ基部分又はアミンで置換することもできる。また他のヒドロキシルは標準的な保護基に誘導体化されてもよい。またポリヌクレオチドは当該分野で一般的に知られているリボース又はデオキシリボース糖類の類似形態のものをさらに含み得、これらには例えば2Oメチル、2Oアリル、2フルオロ又は2アジドリボース、炭素環式糖の類似体、アルファアノマー糖、エピマー糖、例えばアラビノース、キシロース類又はリキソース類、ピラノース糖、フラノース糖、セドヘプツロース、非環式類似体、及び非塩基性ヌクレオシド類似体、例えばメチルリボシドが含まれる。一又は複数のホスホジエステル連結は代替の連結基で置き換えてもよい。これらの代替の連結基には、限定されるものではないが、ホスファートがPS、PS、NR2、PR、POR、CO又はCH2と置き換えられた実施態様のものが含まれ、ここでそれぞれのR及びRは独立して、H又は、エーテル結合を含んでいてもよい置換もしくは未置換のアルキル、アリール、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル又はアラルジルである。ポリヌクレオチド中の全ての結合が同一である必要はない。先の記述は、RNA及びDNAを含むここで引用される全てのポリヌクレオチドに適用される。ここで使用されるオリゴヌクレオチドとは、短く、一般的に単鎖であり、また必ずしもそうではないが、一般的に約200未満のヌクレオチド長さの、一般的に合成のポリヌクレオチドを意味する。オリゴヌクレオチド及びポリヌクレオチドなる用語は、相互に排他的なものではない。ポリヌクレオチドについての上述した記載はオリゴヌクレオチドと等しく、十分に適用可能である。ここで同定した参照ポリペプチド配列に関するパーセントアミノ酸配列同一性とは、配列を整列させ、最大のパーセント配列同一性を得るために必要ならば間隙を導入し、如何なる保存的置換も配列同一性の一部と考えないとした後の、特定の参照ポリペプチド配列のアミノ酸残基と同一である候補配列中のアミノ酸残基のパーセントとして定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を測定する目的のためのアラインメントは、当業者の技量の範囲にある種々の方法、例えばBLAST、BLAST2、ALIGN、又はMegalignソフトウエアのような公に入手可能なコンピュータソフトウエアを使用することにより達成可能である。当業者であれば、比較される配列の完全長に対して最大のアラインメントを達成するために必要な任意のアルゴリズムを含む、配列をアラインメントするための適切なパラメータを決定することができる。しかし、ここでの目的のためには、アミノ酸配列同一性値は、配列比較コンピュータプログラムALIGN2を使用することによって得られる。ALIGN2配列比較コンピュータプログラムはジェネンテック社によって作製され、ソースコードは米国著作権庁ワシントンDC20559に使用者用書類とともに提出され、米国著作権登録番号TXU510087で登録されている。ALIGN2プログラムはジェネンテック社、サウスサンフランシスコカリフォルニアから公的に入手可能であり、ソースコードからコンパイルしてもよい。ALIGN2プログラムは、UNIXオペレーティングシステム、好ましくはデジタルUNIXV4.0Dでの使用のためにコンパイルされる。全ての配列比較パラメータは、ALIGN2プログラムによって設定され変動しない。アミノ酸配列比較にALIGN2が用いられる状況では、与えられたアミノ酸配列Aの、与えられたアミノ酸配列Bとの、又はそれに対するアミノ酸配列同一性は次のように計算される:分率X/Yの100倍ここで、Xは配列アラインメントプログラムALIGN2のA及びBのプログラムアラインメントによって同一であると一致したスコアのアミノ酸残基の数であり、YはBの全アミノ酸残基数である。アミノ酸配列Aの長さがアミノ酸配列Bの長さと異なる場合、AのBに対するアミノ酸配列同一性は、BのAに対するアミノ酸配列同一性とは異なることは理解されるであろう。特に断らない限りは、ここでの全てのアミノ酸配列同一性値は、直ぐ上のパラグラフに示したようにALIGN2コンピュータプログラムを用いて得られる。特に明記しない限り、本明細書で用いられるSTEAP-1なる用語は、霊長類及び齧歯動物のような哺乳動物を含む任意の脊椎動物の供与源からの任意の天然のSTEAP-1を指す。この用語は、細胞内のプロセシングから生じる任意の形態のSTEAP-1だけでなく、完全長のプロセシングされていないSTEAP-1を包含する。また、この用語は、天然に生じるSTEAP-1の変異体、例えばスプライス変異体、対立遺伝子変異体及びアイソフォームも包含する。ヒトSTEAP-1のアミノ酸配列を図1配列番号1に示す。一実施態様では、STEAP-1は、正常な前立腺、肺又は結腸細胞の表面などの細胞表面上に発現され、その発現は、前立腺、肺又は結腸癌細胞、或いはそのような癌細胞の転移部位において増大する。図1は、マウス及びカニクイザルのSTEAP-1のアミノ酸配列それぞれ配列番号2及び3も表している。抗体及び免疫グロブリンは、類似の構造的特徴を有する糖タンパク質である。抗体は、特定の抗原に対して結合特異性を示すが、免疫グロブリンは、抗体と、一般に抗原特異性を欠く抗体様分子の双方を含む。後者の種類のポリペプチドは、例えばリンパ系では低レベルで、骨髄腫では高レベルで産出される。抗体及び免疫グロブリンなる用語は、最も広義で相互に交換可能に使用され、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、一価抗体、多価抗体、多重特異性抗体が含まれ、さらにある種の抗体断片も含まれ得る。抗体は、キメラ、ヒト、ヒト化及び/又は親和成熟したものであってよい。抗STEAP-1抗体又はSTEAP-1に結合する抗体は、抗体がSTEAP-1をターゲッティングする際に診断用及び/又は治療用の薬剤として有用である程度に十分な親和性を有してSTEAP-1を結合することが可能である抗体を指す。好ましくは、関係がなくSTEAP-1でないタンパク質への抗STEAP-1抗体の結合の程度は、例えばラジオイムノアッセイによって測定するところの、STEAP-1への抗体の結合のおよそ10未満である。ある実施態様では、STEAP-1に結合する抗体は、≦1μM、≦100nM、≦10nM、≦1nM、又は≦01nMの解離定数を有する。ある実施態様では、抗STEAP-1抗体は、異なる種のSTEAP-1間で保存されるSTEAP-1のエピトープに結合する。抗体の可変領域又は可変ドメインとは、抗体の重鎖又は軽鎖のアミノ末端ドメインを意味する。重鎖の可変ドメインはVHと称されうる。軽鎖の可変ドメインはVLと称されうる。これらのドメインは一般に抗体の最も可変の部分であり、抗原結合部位を含む。可変という用語は、可変ドメインのある部位が、抗体の中で配列が広範囲に異なっており、その特定の抗原に対する各特定の抗体の結合性及び特異性に使用されているという事実を意味する。しかしながら、可変性は抗体の可変ドメインにわたって一様には分布していない。軽鎖及び重鎖の可変ドメインの両方の相補性決定領域又は高頻度可変領域と呼ばれる3つのセグメントに濃縮される。可変ドメインのより高度に保持された部分はフレームワーク領域と呼ばれる。天然の重鎖及び軽鎖の可変ドメインは、βシート構造を結合し、ある場合にはその一部を形成するループ結合を形成する、3つのCDRにより連結されたβシート配置を主にとる4つのFR領域をそれぞれ含んでいる。各鎖のCDRは、FRによって近接して結合され、他の鎖のCDRと共に、抗体の抗原結合部位の形成に寄与している。定常ドメインは、抗体の抗原への結合に直接関連しているものではないが、種々のエフェクター機能、例えば抗体依存性細胞毒性への抗体の関与を示す。任意の脊椎動物種からの抗体の軽鎖には、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ及びラムダと呼ばれる2つの明確に区別される型の一つが割り当てられる。その重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、抗体は異なるクラスが割り当てられる。免疫グロブリンには5つの主なクラスがある:IgA、IgD、IgE、IgG及びIgM、更にそれらは、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1、及びIgA2等のサブクラスに分かれる。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインはそれぞれα、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。免疫グロブリンの異なるクラスのサブユニット構造及び三次元立体配位はよく知られており、例えば、Abbas等.CellularandMolImmunology第4版に概説されている。抗体は、抗体と1以上の他のタンパク質又はペプチドとの共有結合性又は非共有結合性の会合により形成された融合大分子の一部であり得る。完全長抗体、インタクトな抗体、及び全抗体という用語は、本明細書では交換可能に使用され、ほぼインタクトな形態の抗体を指し、以下に定義するような抗体断片は意味しない。この用語は、特にFc領域を含む重鎖を有する抗体を指す。抗体断片は完全な抗体の一部のみを含んでなるものであり、その一部は、完全な抗体に存在する場合のその一部に通常関連する機能の少なくとも一、及び多ければその殆ど又は全てを保持する。一実施態様では、抗体断片は完全な抗体の抗原結合部位を含んでなるために、抗原結合能を有する。他の実施態様では、抗体断片は、例えばFc領域を含んでなるものは、完全な抗体に存在する場合のFc領域に通常関連する生物学的な機能、例えばFcRn結合、抗体半減期の調節、ADCC機能及び補体結合の少なくとも一を保持する。一実施態様では、抗体断片は、完全な抗体と実質的に類似したインビボ半減期を有する一価性抗体である。例えば、このような抗体断片は、インビボ安定性を断片に与えることができるFc配列に結合した抗原結合アームを含んでもよい。抗体のパパイン消化は、Fab断片と呼ばれる2つの同一の抗体結合断片を生成し、その各々は単一の抗原結合部位を持ち、残りは容易に結晶化する能力を反映してFc断片と命名される。ペプシン処理はF2断片を生じ、それは2つの抗原結合部位を持ち、抗原を交差結合することができる。Fvは、完全な抗原結合部位を含む最小抗体断片である。ある実施態様では、二本鎖Fv種は、堅固な非共有結合をなした一つの重鎖及び一つの軽鎖可変ドメインの二量体からなる。一本鎖Fv種では、柔軟なペプチドリンカーによって1の重鎖及び1の軽鎖可変ドメインは共有結合性に連鎖することができ、よって軽鎖及び重鎖は、二本鎖Fv種におけるものと類似の二量体構造に連結することができる。この配置において、各可変ドメインの3つのCDRは相互に作用してVHVL二量体表面に抗原結合部位を形成する。集合的に、6つのCDRが抗体に抗原結合特異性を付与する。しかし、単一の可変ドメインでさえ、全結合部位よりも親和性が低くなるが、抗原を認識して結合する能力を有している。またFab断片は、重鎖及び軽鎖の可変ドメインを含み、軽鎖の定常ドメインと重鎖の第一定常領域を有する。Fab断片は、抗体ヒンジ領域からの一又は複数のシステインを含む重鎖CH1領域のカルボキシ末端に数個の残基が付加している点でFab断片とは異なる。FabSHは、定常ドメインのシステイン残基が一つの遊離チオール基を担持しているFabに対するここでの命名である。F2抗体断片は、間にヒンジシステインを有するFab断片の対として生産された。また、抗体断片の他の化学結合も知られている。一本鎖Fv又はscFv抗体断片は、抗体のVH及びVLドメインを含み、これらのドメインは単一のポリペプチド鎖に存在する。通常、scFvポリペプチドはVH及びVLドメイン間にポリペプチドリンカーを更に含み、それはscFvが抗原結合に望まれる構造を形成するのを可能にする。scFvの概説については、ThePharmacologyofMonoclonalAntibodiesvol113Rosenburg及びMoore編SpringerVerlagNewYorkpp269315のPluckthunを参照のこと。ダイアボディなる用語は、2つの抗原結合部位を持つ小さい抗体断片を指し、その断片は同一のポリペプチド鎖内で軽鎖可変ドメインに重鎖可変ドメインが結合してなる。非常に短いために同一鎖上で2つのドメインの対形成が可能であるリンカーを使用して、ドメインを他の鎖の相補ドメインと強制的に対形成させ、2つの抗原結合部位を創製する。ダイアボディは二価でも二特異性であってもよい。ダイアボディは、例えば、欧州特許第404097号;国際公開第93/11161号;Hudson等NatMed9129134;及びHollinger等ProcNatlAcadSciUSA9064446448に更に詳細に記載されている。トリアボディ及びテトラボディもまたHudson等NatMed9129134に記載されている。ここで使用されるモノクローナル抗体なる用語は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、集団に含まれる個々の抗体は、少量で存在しうる可能性がある突然変異、例えば自然に生じる突然変異を除いて同一である。従って、モノクローナルとの形容は、個別の抗体の混合物ではないという抗体の性質を示す。ある実施態様では、このようなモノクローナル抗体は、通常、標的に結合するポリペプチド配列を含む抗体を含み、この場合、標的に結合するポリペプチド配列は、複数のポリペプチド配列から単一の標的結合ポリペプチド配列を選択することを含むプロセスにより得られる。例えば、この選択プロセスは、雑種細胞クローン、ファージクローン又は組換えDNAクローンのプールのような複数のクローンからの、唯一のクローンの選択とすることができる。重要なのは、選択された標的結合配列を更に変化させることにより、例えば標的への親和性の向上、標的結合配列のヒト化、細胞培養液中におけるその産生の向上、インビボでの免疫原性の低減、多選択性抗体の生成等が可能になること、並びに、変化させた標的結合配列を含む抗体も、本発明のモノクローナル抗体であることである。異なる決定基に対する異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体の調製物とは異なり、モノクローナル抗体の調製物の各モノクローナル抗体は、抗原の単一の決定基に対するものである。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体の調製物は、それらが他の免疫グロブリンで通常汚染されていないという点で有利である。モノクローナルとの形容は、抗体の、実質的に均一な抗体の集団から得られたものであるという特性を示し、抗体を何か特定の方法で生産しなければならないことを意味するものではない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は様々な技術によって作製することができ、それらの技術には、例えば、ハイブリドーマ法;Harlow等AntibodiesALaboratoryManual;Hammerling等MonoclonalAntibodiesandTCellhybridomas563681、組換えDNA法、ファージディスプレイ技術;Marks等JMolBiol222581597;Sidhu等JMolBiol338299310;Lee等JMolBiol34010731093;FellouseProcNatlAcadSciUSA1011246712472;及びLee等JImmounolMethods284119132、並びに、ヒト免疫グロブリン座位の一部又は全部、或るいはヒト免疫グロブリン配列をコードする遺伝子を有する動物にヒト又はヒト様抗体を生成する技術;Jakobovits等Nature362255258;Bruggemann等YearinImmunol733;米国特許第5545807号;同第5545806号;同第5569825号;同第5625126号;同第5633425号;同第5661016号Marks等BioTechnology10779783;Lonberg等Nature368856859;MorrisonNature368812813;Fishwild等NatureBiotechnol14845851;NeubergerNatureBiotechnol14826及びLonberg及びHuszarInternRevImmunol136593参照が含まれる。ここでモノクローナル抗体は、特にキメラ抗体を含み、それは特定の種由来又は特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体において、対応する配列に一致する又は類似する重鎖及び/又は軽鎖の一部であり、残りの鎖は、所望の生物学的活性を表す限り、抗体断片のように他の種由来又は他の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体において、対応する配列に一致するか又は類似するものである。非ヒトの抗体のヒト化型は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含むキメラ抗体である。一実施態様では、ヒト化抗体は、レシピエントの高頻度可変領域の残基が、マウス、ラット、ウサギ又は所望の特異性、親和性及び/又は能力を有する非ヒト霊長類のような非ヒト種からの高頻度可変領域の残基によって置換されたヒト免疫グロブリンである。例として、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域残基は、対応する非ヒト残基によって置換される。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にも、もしくはドナー抗体にも見出されない残基を含んでいてもよい。これらの修飾は抗体の特性をさらに洗練するために行われる。一般に、ヒト化抗体は、全てあるいは実質的に全ての高頻度可変ループが非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、全てあるいは実質的に全てのFRが、ヒト免疫グロブリン配列のものである少なくとも一又は典型的には2つの可変ドメインの実質的に全てを含むであろう。また、ヒト化抗体は、場合によっては免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部、典型的にはヒト免疫グロブリンのものの少なくとも一部も含む。さらなる詳細については、Jones等Nature321522525;Riechmann等Nature332323329;及びPrestaCurrOpStructBiol2593596を参照のこと。また次の文献とそこに引用されている文献を参考のこと:Vaswani及びHamiltonAnnAllergyAsthmaImmunol1105115;HarrisBiochemSocTransactions2310351038;Hurle及びGrossCurrOpBiotech5428433。ヒト抗体は、ヒトによって生産される抗体のアミノ酸配列に相当するアミノ酸配列を有するもの、及び/又はここに開示されたヒト抗体を作製する任意の技術を使用して製造されたものである。ヒト抗体のこの定義は、特に非ヒト抗原結合残基を含んでなるヒト化抗体を除く。ここで使用される高頻度可変領域、HVR又はHVなる用語は、配列において高頻度可変であり、及び/又は構造的に定まったループを形成する抗体可変ドメインの領域を意味する。一般に、抗体は6つの高頻度可変領域を含み;VHに3つ、VLに3つである。天然の抗体では、H3及びL3は6つの高頻度可変領域のうちで最も高い多様性を示す、特にH3は抗体に良好な特異性を与える際に特有の役割を果たすように思われる。Xu等Immunity133745;MethodsinMolecularBiology248125のJohnsonandWu。実際、重鎖のみからなる天然に生じるラクダ科の抗体は機能的であり、軽鎖が無い状態で安定である。HamersCasterman等Nature363446448;Sheriff等NatureStructBiol3733736。多数の高頻度可変領域の描写が使用され、ここに含まれる。カバット相補性決定領域は配列変化に基づいており、最も一般的に使用されている。Chothiaは、代わりに構造的ループの位置に言及している。AbM高頻度可変領域は、カバットCDRとChothia構造的ループの間の妥協を表し、OxfordMolecularのAbM抗体モデリングソフトウェアにより使用される。接触高頻度可変領域は、利用できる複合体結晶構造の分析に基づく。これら高頻度可変領域のそれぞれからの残基を以下に示す。高頻度可変領域は、次のような拡大高頻度可変領域を含むことができる、即ち、VLの24-36又は24-34、46-56又は50-56及び89-97又は89-96と、VHの26-35又は26-35A、50-65又は49-65及び93-102、94-102、又は95-102である。可変ドメイン残基には、これら各々を規定するために、上掲のKabat等に従って番号を付した。本発明のヒト化抗STEAP-1120v.24抗体のHVR-H1、HVR-H2、及びHVR-H3高頻度可変領域は、カバット番号付けを用いると、H26-H35A、H49-H6、及びH95-H102である。本発明のヒト化抗STEAP-1120v.24抗体のHVRL1、HVR-L2及びHVRL3の高頻度可変領域は、カバット番号付けを用いると、L24-34、L50-56、及びL89-97である。ここで使用されるHVR及びCDRという用語は互換可能である。フレームワーク又はFR残基は、ここで定義する高頻度可変領域残基以外の可変ドメイン残基である。カバットによる可変ドメイン残基番号付け又はカバットに記載のアミノ酸位番号付けなる用語及びその異なる言い回しは、Kabat等SequencesofProteinsofImmunologicalInterest5thEdPublicHealthServiceNationalInstitutesofHealthBethesdaMDの抗体の編集の軽鎖可変ドメイン又は重鎖可変ドメインに用いられる番号付けシステムを指す。この番号付けシステムを用いると、実際の線形アミノ酸配列は、可変ドメインのFR又はHVR内の短縮又は挿入に相当する2、3のアミノ酸又は付加的なアミノ酸を含みうる。例えば、重鎖可変ドメインには、重鎖FR残基82の後に挿入された残基と、H2の残基52の後に単一アミノ酸の挿入を含んでもよい。残基のKabat番号は、標準のカバット番号付け配列によって抗体の配列の相同領域でアライメントすることによって与えられる抗体について決定してもよい。親和成熟抗体とは、その改変を有していない親抗体と比較して、抗原に対する抗体の親和性に改良を生じせしめる、その一又は複数のHVRにおいて一又は複数の改変を持つものである。一実施態様では、親和成熟抗体は、標的抗原に対してナノモル又はピコモルの親和性を有する。親和成熟抗体は、当該分野において知られている手順によって生産される。Marks等BioTechnology10:779783は、VH及びVLドメインシャッフリングによる親和成熟について記載している。HVR及び/又はフレームワーク残基のランダム突然変異誘導は、Barbas等ProcNatAcadSciUSA91:38093813;Schier等Gene169:147155;Yelton等JImmunol155:19942004;Jackson等JImmunol154:33109;及びHawkins等JMolBiol226:889896に記載されている。阻止抗体又はアンタゴニスト抗体とは、結合する抗原の生物学的活性を阻害するか又は低下させる抗体である。特定の阻止抗体又はアンタゴニスト抗体は、抗原の生物学的活性を、ほぼ又は完全に阻害する。本明細書において使用するアゴニスト抗体は、対象とするポリペプチドの機能活性の少なくとも一つを模倣する抗体である。抗体のエフェクター機能とは、抗体のFc領域に帰する生物学的活性を意味し、抗体のアイソタイプにより変わる。抗体のエフェクター機能の例には、C1q結合及び補体依存性細胞障害;Fcレセプター結合性;抗体依存性細胞媒介性細胞障害;貪食作用;細胞表面レセプターのダウンレギュレーション;及びB細胞活性化が含まれる。Fcレセプター又はFcRは、抗体のFc領域に結合するレセプターを記載するものである。ある実施態様では、FcRは天然のヒトFcRである。ある実施態様では、FcRはIgG抗体と結合するもので、FcγRI、FcγRII及びFcγRIIIサブクラスのレセプターを含み、これらのレセプターの対立遺伝子変異体、選択的にスプライシングされた形態のものも含まれる。FcγRIIレセプターには、FcγRIIA及びFcγRIIBが含まれ、主としてその細胞質ドメインは異なるが、類似のアミノ酸配列を有するものである。活性型レセプターFcγRIIAは、細胞質ドメインにチロシン依存性免疫レセプター活性化モチーフを含んでいる。阻害型レセプターFcγRIIBは、細胞質ドメインにチロシン依存性免疫レセプター阻害性モチーフを含んでいるを参照。FcRに関しては、RavetchandKinetAnnuRevImmunol9457492Capel等Immunomethods42534;及びdeHaas等JLabClinMed12633041に概説されている。将来的に同定されるものも含む他のFcRはここでのFcRという言葉によって包含される。また、Fcレセプター又はFcRなる用語には、母性IgGの胎児への移送とKim等JImmunol24249、免疫グロブリンのホメオスタシスの調節を担う新生児性レセプターFcRnも含まれる。FcRnへの結合の測定方法は公知である。インビボでのヒトFcRnへの結合とヒトFcRn高親和性結合ポリペプチドの血清半減期は、例えばヒトFcRnを発現するトランスジェニックマウス又は形質転換されたヒト細胞株、又はFc変異形ポリペプチドを投与された霊長類動物においてアッセイすることができる。国際公開公報00/42072にFcRへの結合を向上又は減弱させた抗体変異型が述べられている。この特許公開の内容はここに出典明記により具体的に組み込まれる。Shields等JBiolChem965916604も参照のこと。ヒトエフェクター細胞とは、一又は複数のFcRsを発現し、エフェクター機能を実行する白血球のことである。ある実施態様では、その細胞が少なくともFcγRIIIを発現し、ADCCエフェクター機能を実行することが望ましい。ADCCを媒介するヒト白血球の例として、末梢血液単核細胞、ナチュラルキラー細胞、単球、細胞障害性T細胞及び好中球が含まれる。エフェクター細胞は天然源、例えば血液から単離してもよい。抗体依存性細胞媒介性細胞障害又はADCCとは、ある種の細胞障害細胞細胞、好中球及びマクロファージ上に存在するFcレセプターと結合した分泌Igにより、これらの細胞障害エフェクター細胞が抗原担持標的細胞に特異的に結合し、続いて細胞毒により標的細胞を死滅させることを可能にする細胞障害性の形態を意味する。ADCCを媒介する主要な細胞NK細胞はFcγRIIIのみを発現するのに対し、単球はFcγRI、FcγRII及びFcγRIIIを発現する。造血細胞でのFcRの発現は、RavetchandKinetAnnuRevImmunol945792の464頁の表3に要約されている。対象の分子のADCC活性をアッセイするために、米国特許第5500362号又は同第5821337号に記載されているようなインビトロADCCアッセイを実施することができる。このようなアッセイにおいて有用なエフェクター細胞には、末梢血液単核細胞及びナチュラルキラー細胞が含まれる。代わりとして、もしくは付加的に、対象の分子のADCC活性は、例えば、Clynes等95652656において開示されているような動物モデルにおいて、インビボで評価することが可能である。補体依存性細胞障害もしくはCDCは、補体の存在下で標的を溶解することを意味する。典型的な補体経路の活性化は補体系の第1補体が、同族抗原と結合した抗体に結合することにより開始される。補体の活性化を評価するために、CDCアッセイを、例えばGazzanoSantoro等JImmunolMethods202163に記載されているように実施することができる。Fc領域アミノ酸配列を変更してC1q結合能力が増大又は減少したポリペプチド変異体は、米特許第6194551号B1及び国際公開公報99/51642に記述される。それらの特許文献の内容は、出典明記によって、特別に本願明細書に組み込まれるものとする。またIdusogie等JImmunol16441784184を参照のこと。Fc領域含有ポリペプチドなる用語は、Fc領域を含む抗体もしくはイムノアドヘンシンのようなポリペプチドを指す。Fc領域のC末端リジンは、例えば、ポリペプチドの精製中又はポリペプチドをコードする核酸を組み換え操作することによって除去してもよい。したがって、本発明のFc領域を有するポリペプチドを含んでなる組成物は、K447を有するポリペプチド集団、すべてのK447が除去されたポリペプチド集団、又はK447残基を有するポリペプチドとK447残基を有さないポリペプチドの混合集団を包含しうる。本願明細書における目的のためのアクセプターヒトフレームワークは、ヒト免疫グロブリンフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワークから得られるVL又はVHフレームワークのアミノ酸配列を含有するフレームワークである。ヒト免疫グロブリンフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワークから得られるアクセプターヒトフレームワークは、その同じアミノ酸配列を含有するか、又は既存のアミノ酸配列変化を含有してもよい。ある実施態様では、既存のアミノ酸変化の数は、10以下、9以下、8以下、7以下、6以下、5以下、4以下、3以下又は2以下である。既存のアミノ酸変化がVH中に存在する場合、好ましくは、それらの変化は位置71H、73H及び78Hの内の3つ、2つ又は1つのみ起こり、例えば、それらの位置のアミノ酸残基は、71A、73T及び/又は78Aであってよい。一実施態様では、VLアクセプターヒトフレームワークは、VLヒト免疫グロブリンフレームワーク配列又はヒトコンセンサスフレームワーク配列と配列が同一である。ヒトコンセンサスフレームワークは、ヒト免疫グロブリンVL又はVHフレームワーク配列の選別において、最も共通して生じるアミノ酸残基を表すフレームワークである。通常、ヒト免疫グロブリンVL又はVH配列は、可変ドメイン配列のサブグループから選別する。通常、Kabat等SequencesofProteinsofImmunologicalInterest5thEdPublicHealthServiceNationalInstitutesofHealthBethesdaMDによると、配列のサブグループはサブグループである。一実施態様では、VLについて、上掲のKabat等によると、前記サブグループはサブグループκIである。一実施態様では、VHについて、上掲のKabat等によると、前記サブグループはサブグループIIIである。VHサブグループIIIコンセンサスフレームワークは、上掲のKabat等の可変重鎖サブグループIIIのアミノ酸配列から得られるコンセンサス配列を含有する。一実施態様では、VHサブグループIIIコンセンサスフレームワークアミノ酸配列は、以下の配列のそれぞれの少なくとも一部又は全部を含む。VLサブグループIコンセンサスフレームワークは、Kabat等の可変軽鎖κサブグループIのアミノ酸配列から得られたコンセンサス配列を含んでなる。一実施態様では、VHサブグループIコンセンサスフレームワークアミノ酸配列は、以下の配列のそれぞれの少なくとも一部又は全部を含む。分泌シグナル配列又はシグナル配列とは、細胞膜、通常は原核生物の内側の膜又は内側と外側の両方の膜を通して、対象となる新しく合成されたタンパク質の方向付けに使用することのできる短いシグナルペプチドをコードする核酸配列を意図する。このようにして、対象となるタンパク質、例えば免疫グロブリン軽鎖又は重鎖ポリペプチドは、原核宿主細胞の周辺に、あるいは培地中に分泌される。分泌シグナル配列によってコードされるシグナルペプチドは、宿主細胞に内在しても、あるいはそれらは外因性でもよく、発現されるポリペプチドに本来あるシグナルペプチドを含む。分泌シグナル配列は、典型的には発現されるポリペプチドのアミノ末端に存在し、典型的にはポリペプチドの生合成と分泌の間に細胞質から酵素的に取り除かれる。従って、シグナルペプチドは、通常、成熟タンパク質産物には存在しない。遊離したシステインアミノ酸は、親抗体内に改変されているシステインアミノ酸残基を指し、チオール官能基を有し、対形成もしないし、分子内ないし分子間ジスルフィド架橋の一部にもならない。チオール反応値なる用語は、遊離したシステインアミノ酸の反応性の定量的特徴づけである。チオール反応値は、チオール反応試薬と反応するシステイン改変抗体の遊離したシステインアミノ酸の割合であって、1の最大値に変換される。例えば、ビオチン-マレイミド試薬などのチオール反応試薬と100の収率で反応してビオチン標識抗体を形成するシステイン改変抗体の遊離システインアミノ酸はチオール反応値が1.0となる。チオール反応試薬と80の収率で反応する同じ又は異なる親抗体内で改変された他のシステインアミノ酸はチオール反応値が0.8となる。チオール反応試薬と完全に反応しない同じ又は異なる親抗体内で改変された他のシステインアミノ酸はチオール反応値が0となる。特定のシステインのチオール反応値の測定は、ELISAアッセイ、質量分析、液体クロマトグラフィ、オートラジオグラフィ、又は他の定量的な分析試験によって行ってもよい。システイン改変抗体のキャプチャやシステイン反応性の比較及び定量化を可能にするチオール反応試薬には、ビオチンPEOマレイミドビオチニル3マレイミドプロピオナミジル36dioxaoctainediamine、Oda等NatureBiotechnology19379382PierceBiotechnologyIncビオチンBMCC、PEOヨードアセチルビオチン、ヨードアセチルLCビオチン、及びビオチンHPDP及びNαビオシチンが含まれる。ビオチン化、二官能性及び多官能性リンカー試薬の他の商業的な供与源には、MolecularProbesEugeneOR、及びSigmaStLouisMOが含まれる。親抗体は、一又は複数のアミノ酸残基が一又は複数のシステイン残基に置き換わっているアミノ酸配列を含む抗体である。親抗体は、天然の又は野生型の配列を含んでいてもよい。親抗体は、他の天然、野生型又は修飾した形態の抗体と比較して既存のアミノ酸配列修飾を有してもよい。親抗体は、対象の標的抗原、例えば生物学上重要なポリペプチドに対するものであってもよい。また、非ポリペプチド抗原に対する抗体も考慮される。一般的に結合親和性は、分子の単一結合部位とその結合パートナーとの間の非共有結合的な相互作用の総合的な強度を意味する。特に明記しない限り、結合親和性は、結合対のメンバー間の1:1相互作用を反映する内因性結合親和性を意味する。一般的に、分子XのそのパートナーYに対する親和性は、解離定数として表される。親和性は、本明細書中に記載のものを含む当業者に公知の共通した方法によって測定することができる。低親和性抗体は抗原にゆっくり結合して素早く解離する傾向があるのに対し、高親和性抗体は抗原により密接により長く結合したままとなる。結合親和性の様々な測定方法が当分野で公知であり、それらの何れかを本発明のために用いることができる。以下に具体的な例示的実施態様を記載する。一実施態様では、本発明のKd又はKd値は、以下のアッセイで示されるような、所望の抗体のFab型とその抗原を用いて実行される放射性標識した抗原結合アッセイで測定される。段階的な力価の非標識抗原の存在下で、最小濃度の標識抗原にてFabを均衡化して、抗Fab抗体コートプレートと結合した抗原を捕獲することによって抗原に対するFabの溶液結合親和性を測定する。アッセイの条件を決めるために、ミクロタイタープレートを5μg/mlの捕獲抗Fab抗体を含む50mM炭酸ナトリウムにて一晩コートして、その後2のウシ血清アルブミンを含むPBSにて室温で2~5時間、ブロックする。非吸着プレートに、100pM又は26pMの[125I]抗原を段階希釈した所望のFabと混合するCancerRes5745934599の抗VEGF抗体、Fab12の評価と一致する。ついで所望のFabを一晩インキュベートする;しかし、インキュベーションは平衡状態に達したことを確認するまでに長時間かかるかもしれない。その後、混合物を捕獲プレートに移し、室温でインキュベートする。そして、溶液を取り除き、プレートを0.1のTween20を含むPBSにて8回洗浄する。プレートが乾燥したら、150μl/ウェルの閃光物質を加え、プレートをTopcountγ計測器にて10分間計測する。最大結合の20か又はそれ以下濃度のFabを選択してそれぞれ競合結合測定に用いる。他の実施態様によると、~10反応単位の固定した抗原CM5チップを用いて25°CのBIAcoreTM2000又はBIAcoreTM3000にて表面プラズモン共鳴アッセイを行ってKd又はKd値を測定する。簡単に言うと、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサーチップを、提供者の指示書に従ってNエチルNカルボジイミド塩酸塩及びNヒドロキシスクシニミドで活性化した。抗原を10mM酢酸ナトリウムで5μg/mlに希釈し、結合したタンパク質の反応単位がおよそ10になるように5μl/分の流速で注入した。抗原の注入後、反応しない群をブロックするために1Mのエタノールアミンを注入した。動力学的な測定のために、2倍の段階希釈したFabを25°C、およそ25μl/分の流速で0.05Tween20を含むPBSに注入した。会合及び解離のセンサーグラムを同時にフィットさせることによる単純一対一ラングミュア結合モデルを用いて、会合速度と解離速度を算出した。平衡解離定数をkoff/kon比として算出した。例として、ChenY等JMolBiol293865881を参照。上記の表面プラスモン共鳴アッセイによる結合速度が106M-1S-1を上回る場合、分光計、例えば、流動停止を備えた分光光度計又は撹拌キュベットを備えた8000シリーズSLMAminco分光光度計で測定される、漸増濃度の抗原の存在下にて、PBS、25°Cの、20nMの抗抗原抗体の蛍光放出強度における増加又は減少を測定する蛍光消光技術を用いて結合速度を測定することができる。また、本発明の結合速度又は会合の速度又は会合速度又はkonは、~10反応単位の固定した抗原CM5チップを用いて25°CのBIAcoreTM2000又はBIAcoreTM3000を用いた前述と同じ表面プラズモン共鳴アッセイにて測定される。疾病は、本発明の物質/分子又は方法を用いた治療によって利益を得る任意の症状又は疾患である。これには、問題とする疾患に哺乳動物がかかりやすくなる病理学的症状を含む慢性及び急性の疾病を含む。本明細書中で治療される疾患の非限定的な例には、前立腺、肺、及び結腸の癌又は転移などの癌性症状が含まれる。細胞増殖性疾患及び増殖性疾患なる用語は、異常な細胞増殖にある程度関連している疾患を意味する。一実施態様では、細胞増殖性疾患は癌である。本明細書中の腫瘍とは、悪性か良性かにかかわらず、すべての腫瘍性細胞成長及び増殖と、すべての前癌性及び癌性細胞及び組織を意味する。癌癌性細胞増殖性疾患、増殖性疾患及び腫瘍なる用語は、本明細書に参照されるように相互に限定的なものでない。癌及び癌性なる用語は、一般的に調節不可能な細胞増殖に特徴がある哺乳動物の生理学的状態を指すか又は表す。癌の例には細胞腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫及び白血病又はリンパ系腫瘍が含まれるが、これに限定されるものではない。このような癌のより具体的な例には、扁平細胞癌例えば扁平上皮細胞癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌、及び肺の扁平上皮癌を含む肺癌、腹膜の癌、肝細胞性癌、胃腸癌を含む胃又は腸の癌、膵癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝癌、膀胱癌、尿道の癌、肝腫瘍、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜又は子宮上皮癌、唾液腺上皮癌、腎臓癌又は腎癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝臓癌、及び肛門癌、陰茎癌、メラノーマ、多発性メラノーマ、及びB細胞リンパ腫、脳並びに頭頸部癌と、これらに関連する転移とが含まれる。STEAP-1を発現する細胞とは、細胞表面に内在性のSTEAP-1又は形質移入されたSTEAP-1を発現する細胞である。STEAP-1を発現する癌とは、細胞表面にSTEAP-1タンパク質が存在する細胞を有する癌である。STEAP-1を発現する癌がその細胞表面上に生成するSTEAP-1のレベルは、抗STEAP-1抗体がそれに結合して癌に対して治療的効果を持つことができるのに十分なものである。STEAP-1を過剰発現する癌では、同じ組織種類の非癌性細胞と比較して、その細胞表面におけるSTEAP-1のレベルが有意に高い。このような過剰発現は、遺伝子増幅か、或いは転写又は翻訳の増大によるものでありうる。STEAP-1の過剰発現は、細胞表面上に存在するSTEAP-1タンパク質のレベルの上昇を評価することにより、診断アッセイ又は予後アッセイ例えば、免疫組織化学アッセイ、FACS分析で決定することができる。或いは又は加えて、例えば蛍光インサイツハイブリダイゼーション法1998年10月公開のFISH;国際公開第98/45479号参照、サザンブロット法、ノーザンブロット法、又は実時間定量PCRRT-PCR等のポリメラーゼ連鎖反応PCR技術により、細胞内のSTEAP-1コード化核酸又はmRNAのレベルを測定することができる。また、例えば抗体に基づくアッセイ例えば、1990年6月12日発行の米国特許第4933294号、1991年4月18日公開の国際公開第91/05264号、1995年3月28日発行の米国特許5401638号、及びSiasらによるJImmunolMethods1327380参照を用いて、血清等の生物学的流体に含まれる抗原を測定することにより、STEAP-1の過剰発現を調査することができる。上記アッセイ以外にも、当業者であれば様々なインビボアッセイが利用できる。例えば、患者の体内の細胞を、放射性同位元素等の検出可能なラベルで随意に標識した抗体に曝すことができ、例えば外側から放射能をスキャンしたり、抗体に曝された患者から採取した生検を分析したりすることで、患者の細胞に対する抗体の結合を評価することができる。STEAP-1を発現する癌には、前立腺癌、肺癌、及び結腸癌が含まれる。ここで使用されるところの治療は、治療されている個体又は細胞の天然の過程を改変するための臨床的介入を意味し、予防のため又は臨床的病理の過程中に実施することができる。治療の望ましい効果には、疾病の発生又は再発の防止、症状の寛解、疾病の任意の直接的又は間接的病理的結果の低減、転移の防止、疾病の進行速度の低減、疾病状態の回復又は緩和、及び寛解又は改善された予後が含まれる。ある実施態様では、本発明の抗体は疾患又は疾病の進行を遅らせるため又は疾患又は疾病の進行をゆっくりにするために用いられる。治療の成功及び疾病の改善を評価する上記パラメータは、医師のよく知る日常的な手順により容易に測定可能である。癌の治療法の効率は、例えば腫瘍増殖停止時間TTPの評価及び/又は反応率RRの決定により測定することができる。前立腺癌の場合、治療法の進行は常套的な方法、通常は血清PSA前立腺に特異的な抗原のレベルを測定することにより評価することができ、血中PSAのレベルが高い程、癌は重症である。PSAを検出するためのアッセイは市販されており、例えばHybitechTandemE及びTandemRPSAアッセイキット、YangProsCheckポリクローナルアッセイYangLabs、ワシントン州ベルビュー、AbbottImxAbbottLabs、イリノイ州アボットパーク等が入手可能である。転移の決定は、ステージ試験、骨のスキャン、並びにカルシウム及び骨への広がりを決定するその他酵素レベルの試験により行うことができる。領域内の骨盤及びリンパ節への広がりを探すためにCTスキャンを行うこともできる。胸部レントゲン及び既知の方法による肝臓の酵素レベルの測定を使用して、それぞれ肺及び肝臓への転移を探すこともできる。疾病をモニタリングするためのその他の常套的な方法には、経直腸的超音波検査TRUS及び経直腸的針生検TRNBが含まれる。個体は脊椎動物である。ある実施態様では、脊椎動物は哺乳動物である。哺乳動物には、限定するものではないが、家畜動物、スポーツ用動物、愛玩動物、霊長類、マウス及びラットが含まれる。ある実施態様では、哺乳動物はヒトである。有効量とは所望の治療又は予防結果を達成するために必要な用量及び時間の効果的な量を意味する。本発明の物質/分子の治療的有効量は、例えば個体の疾病ステージ、年齢、性別、及び体重、並びに個体に所望の応答を誘発する物質/分子の能力などの因子に従って変わりうる。また、治療的有効量は、物質/分子の任意の毒性又は有害な影響よりも治療的に恩恵のある効果が上回る量を包含する。予防的有効量とは所望の予防結果を達成するために必要な用量及び時間の効果的な量を意味する。必須ではないが一般的に、予防的用量は疾患の初期ステージ又はその前の患者に用いるので、予防的有効量は治療的有効量よりも少ないであろう。癌の場合、薬剤の治療的有効量は、癌細胞の数を減らし、腫瘍の大きさを低減し、癌細胞の周辺器官への浸潤を抑制しつまり、或る程度遅らせ、好ましくは止め、腫瘍の転移を抑制しつまり、或る程度遅らせ、好ましくは止め、腫瘍の成長をある程度抑制し、及び/又は癌に関連する症状の一又は複数をある程度緩和することができる。薬剤が既存の癌細胞の増殖を防止及び/又は死滅させることができる範囲まで、薬剤の細胞分裂停止能及び/又は細胞障害性は許容される。慢性投与とは、急性モードの反対の意味で連続モードでの薬剤の投与であり、これにより初期治療効果活性を長期間に亘って維持しようとするものである。断続的投与とは、中断無く連続的に行われるのではなく、周期的に行われる性質を持つ処置である。一又は複数の更なる治療的薬剤との組合せ投与には同時及びいずれかの順序での連続投与が含まれる。ここで用いられる担体は、製薬上許容される担体、賦形剤、又は安定化剤を含み、使用される用量及び濃度でそこに暴露される細胞又は哺乳動物に対して非毒性のものである。しばしば、生理学的に許容される担体の例は、水性pH緩衝溶液である。生理学的に許容される担体は、リン酸塩、クエン酸塩、及び他の有機酸などの緩衝剤;アスコルビン酸を含む酸化防止剤;低分子量ポリペプチド;血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリンなどのタンパク質;ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー;グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン又はリジンなどのアミノ酸;グルコース、マンノース、又はデキストリンを含む単糖類、二糖類、及び他の炭水化物;EDTAなどのキレート剤;マンニトール又はソルビトールなどの糖アルコール;ナトリウムなどの塩形成対イオン;及び/又はTWEENTM、ポリエチレングリコール、及びPLURONICSTMなどの非イオン性界面活性剤を含む。本明細書中で用いられる標識なる用語は、抗体などの試薬に直接的又は間接的にコンジュゲートされて標識された抗体を生成する、検出可能な化合物又は組成物を指す。標識自体が検出可能なものであってもよく、酵素標識の場合、検出可能な基質化合物ないしは組成物の化学的変化を触媒するものであってもよい。用語イムノPETは、STEAP-1-vc-MMAEADC又はthioMAb薬物コンジュゲートTDCなどの抗体薬物コンジュゲートを含む放射性標識抗体の陽電子放射断層撮影PETについて使用される用語である。用語89Zr-STEAP-1イムノPETは、STEAP-1のジルコニウム放射性標識PETイメージングを指す。エピトープタグなる用語は、ここで用いられるときは、タグポリペプチドと融合した抗PSCA抗体ポリペプチドを含んでなるキメラポリペプチドを意味する。タグポリペプチドは、その抗体が産生され得るエピトープを提供するのに十分な残基を有し、その長さは融合するIgポリペプチドの活性を阻害しないよう充分に短い。また、タグポリペプチドは、好ましくはそのような抗体が他のエピトープと実質的に交差反応しないように十分に独特である。適切なタグポリペプチドは、一般に、少なくとも6のアミノ酸残基、通常は約8~50のアミノ酸残基を有する。小分子とは、ここで、約500ダルトン未満の分子量を持つと定義される。パッケージ挿入物という用語は、その治療薬の用途に関する効能、用途、服用量、投与方法、配合禁忌及び/又は警告についての情報を含む、治療薬の商業的包装に慣習的に含まれる指示書を指す。単離された核酸とは、RNA、DNA、又は混合ポリマーなどの核酸であり、天然配列に生来含まれる、リボソーム及びポリメラーゼ等の複合体又はタンパク質、並びに他のゲノムDNA配列から実質的に分離されている。この表現は、天然に生じる環境から除去された核酸配列を包含し、組換えDNA単離物又はクローニングされたDNA単離物、及び化学的に合成された類似体又は異種系により生物学的に合成された類似体を含む。実質的に純粋な分子には、分子の単離された形態が含まれる。ベクターは、シャトルベクター及び発現ベクターを含む。一般に、プラスミドコンストラクトも複製起源例えば、ColE1複製起源及び選択マーカー例えば、アンピシリン又はテトラサイクリン耐性を、それぞれ細菌内のプラスミドの複製及び選択を目的として含むであろう。発現ベクターは必要なコントロール配列又は本発明の抗体断片を含む抗体の発現の調節因子を、細菌又は真核細胞内に含むベクターを表す。好適なベクターを以下に示す。本発明の抗STEAP-1抗体を生成する細胞は、親ハイブリドーマ細胞、例えばATCCに寄託されるハイブリドーマ、並びに当該抗体をコードする核酸が導入されている細菌及び真核宿主細胞を含む。好適な宿主細胞を以下に示す。ここで用いられる際の増殖阻害剤は、細胞、特にPSCAを発現する癌細胞の増殖を、インビトロ又はインビボで阻害する化合物又は組成物を意味する。よって、増殖阻害剤は、S期でPSCAを発現する細胞の割合を有意に減少させるものである。増殖阻害剤の例は、細胞周期の進行を阻害する薬剤、例えばG1停止又はM期停止を誘発する薬剤を含む。古典的なM期ブロッカーは、ビンカス、タキサン類、及びトポイソメラーゼII阻害剤、例えばドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシン、エトポシド、及びブレオマイシンを含む。またG1停止させるこれらの薬剤は、S期停止にも波及し、例えば、DNAアルキル化剤、例えば、タモキシフェン、プレドニゾン、ダカルバジン、メクロレタミン、シスプラチン、メトトレキセート、5フルオロウラシル、及びアラCである。更なる情報は、TheMolecularBasisofCancerMendelsohn及びIsrael編Chapter1表題CellcycleregulationoncogeneandantineoplasticdrugsMurakami等、特に13頁に見出すことができる。タキサン類は、共にイチイに由来する抗癌剤である。ヨーロッパイチイに由来するドセタキセル、ローンプーランローラーは、パクリタキセル、ブリストルマイヤースクウィブの半合成類似体である。パクリタキセル及びドセタキセルは、チューブリン二量体から微小管の集合を促進し、細胞の有糸分裂を阻害する結果となる脱重合を防ぐことによって微小管を安定化にする。ここで用いられる細胞障害性剤という用語は、細胞の機能を阻害又は阻止し及び/又は細胞死ないしは破壊を生ずる物質を指す。この用語は、放射性同位体、化学治療薬、例えばメトトレキセート、アドリアマイシン、ビンカアルカロイド、ドキソルビシン、メルファラン、マイトマイシンC、クロランブシル、ダウノルビシン又はその他インターカレート剤、酵素及びその断片、例えば核溶解性酵素、抗生物質、及び毒素、例えばその断片及び/又は変異体を含む小分子毒素又は細菌、糸状菌、植物又は動物起源の酵素的に活性な毒素、毒素、増殖阻害剤、薬剤成分、そして下記に開示する種々の抗腫瘍又は抗癌剤を含むように意図されている。他の細胞障害性薬が下記に記載されている。殺腫瘍性剤は、腫瘍細胞の破壊を引き起こす。毒素は、細胞の成長又は増殖に対して有害な作用を有することができる任意の物質である。化学療法剤は、癌の治療に有用な化合物である。化学療法剤の例には、チオテパ及びCYTOXANシクロホスファミドのようなアルキル化剤;ブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファンのようなスルホン酸アルキル類;ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、及びウレドーパのようなアジリジン類;アルトレートアミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド及びトリメチローロメラミンを含むエチレンイミン類及びメチラメラミン類;アセトゲニン;デルタ9テトラヒドロカナビノール;βラパチョーネ;ラパコール;コルヒチン;ベツリン酸;カンプトセシン、CPT11、アセチルカンプトテシン、スコポレクチン及び9アミノカンプトテシンを含む;ブリオスタチン;カリスタチン;CC1065;ポドフィロトキシン;ポドフィリン酸;テニポシド;クリプトフィシン;ドラスタチン;ドゥオカルマイシン;エロイテロビン;パンクラチスタチン;サルコジクチン;スポンギスタチン;クロランブシル、クロロナファジン、チョロホスファミド、エストラムスチン、イフォスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシドヒドロクロリド、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロフォスファミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード;カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチンなどのニトロスレアス;抗生物質、例えばエネジイン抗生物質、特にカリケアマイシンγ1I及びカリケアマイシンωI1参照;ダイネマイシンAを含むダイネマイシン;エスペラマイシン;並びにネオカルチノスタチン発色団及び関連する色素タンパクエネジイン抗生物質発色団、アクラシノマイシン類、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン類、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、6ジアゾ5オキソLノルロイシン、ADRIAMYCINドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マーセロマイシン、マイトマイシンCのようなマイトマイシン、マイコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン;代謝拮抗剤、例えばメトトレキセート及び5フルオロウラシル;葉酸アナログ、例えばデノプテリン、メトトレキセート、プテロプテリン、トリメトレキセート;プリンアナログ、例えばフルダラビン、6メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン;ピリミジンアナログ、例えばアンシタビン、アザシチジン、6アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロキシウリジン;アンドロゲン類、例えばカルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン;抗副腎剤、例えばアミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン;葉酸リプレニッシャー、例えばフロリン酸;アセグラトン;アルドホスファミドグリコシド;アミノレブリン酸;エニルウラシル;アムサクリン;ベストラブシル;ビサントレン;エダトラキセート;デフォファミン;デメコルシン;ジアジコン;エルフォルニチン;酢酸エリプチニウム;エポシロン;エトグルシド;硝酸ガリウム;ヒドロキシ尿素;レンチナン;ロニダミン;メイタンシノイド類、例えばメイタンシン及びアンサミトシン;ミトグアゾン;ミトキサントロン;モピダモール;ニトラクリン;ペントスタチン;フェナメット;ピラルビシン;ロソキサントロン;2エチルヒドラジド;プロカルバジン;PSK多糖複合体;ラゾキサン;リゾキシン;シゾフィラン;スピロゲルマニウム;テニュアゾン酸;トリアジコン;222トリクロロトリエチルアミン;トリコテセン類A、ロリジンA及びアングイジン;ウレタン;ビンデシン、FILDESIN;ダカーバジン;マンノムスチン;ミトブロニトール;ミトラクトール;ピポブロマン;ガシトシン;アラビノシド;チオテパ;タキソイド類、例えばTAXOLパクリタキセル、ABRAXANETMパクリタキセルのクレモフォー無添加アルブミン操作ナノ粒子製剤、及びTAXOTEREドキセタキセル;クロランブシル;ゲムシタビン;6チオグアニン;メルカプトプリン;メトトレキサート;プラチナアナログ、例えばシスプラチン及びカルボプラチン;ビンブラスチン;プラチナ;エトポシド;イホスファミド;マイトキサントロン;ビンクリスチン;オキサリプラチン;ロイコボビン;ビノレルビン;ノバントロン;エダトレキセート;ダウノマイシン;アミノプテリン;イバンドロナート;トポイソメラーゼ阻害剤RFS2000;ジフルオロメチロールニチン;レチノイン酸のようなレチノイド;カペシタビン;上述したもののいずれかの薬学的に許容可能な塩類、酸類又は誘導体:並びに上記のうち2以上の組み合わせ、例えば、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、及びプレドニソロン併用療法の略称であるCHOP、及び5FU及びロイコボビンとオキサリプラチンを組み合わせた治療法の略称であるFOLFOXが含まれる。またこの定義に含まれるものには、癌の成長を助けるホルモンの作用を調節、低減、遮断又は阻害するように働き、多くの場合全身処置の形態で使用される抗ホルモン剤がある。それらはそれ自体がホルモンであってもよい。それらは例えば抗エストロゲン及び選択的エストロゲン受容体モジュレータを含み、例えば、タモキシフェンタモキシフェンを含む、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、4ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、LY117018、オナプリストーン、及びトレミフェン;抗プロゲステロン;エストロゲンレセプター下方調節剤;卵巣を抑止又は停止させる機能がある作用剤、黄体形成ホルモン放出ホルモンアゴニスト、例えば酢酸リュープロリド及びELIGARD、酢酸ゴセレリン、酢酸ブセレリン及びトリプテレリン;その他抗アンドロゲン、例えばフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド;並びに副腎のエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、例えば4イミダゾール、アミノグルテチミド、酢酸メゲストロール、エキセメスタン、フォルメスタニー、ファドロゾール、ボロゾール、レトロゾール、及びアナストロゾールである。加えて、このような化学療法剤の定義には、クロドロネート又はOSTAC、エチドロン酸、NE58095、ゾレドロン酸/ゾレドロネート、アレンドロネート、パミドロン酸、チルドロン酸、又はリセドロン酸、並びにトロキサシタビン;アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に接着細胞の増殖に結びつくシグナル伝達経路における遺伝子の発現を阻害するもの、例えばPKCα、Raf、及びHRas、及び上皮成長因子レセプター;THERATOPEワクチン及び遺伝子治療ワクチン等のワクチン、例えばALLOVECTINワクチン、LEUVECTINワクチン、及びVAXIDワクチン;トポイソメラーゼ1阻害剤;rmRH;ラパチニブ;及び上記のもののいずれかの製薬的に許容される塩類、酸類又は誘導体が含まれる。ここで用いられる際の増殖阻害剤は、細胞の成長をインビトロ又はインビボの何れかで阻害する化合物又は組成物を意味する。よって、増殖阻害剤は、S期で細胞の割合を有意に減少させるものである。増殖阻害剤の例は、細胞周期の進行を阻害する薬剤、例えばG1停止又はM期停止を誘発する薬剤を含む。古典的なM期ブロッカーは、ビンカス、タキサン類、及びトポイソメラーゼII阻害剤、例えばドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシン、エトポシド、及びブレオマイシンを含む。またG1停止させるこれらの薬剤は、S期停止にも波及し、例えば、DNAアルキル化剤、例えば、タモキシフェン、プレドニゾン、ダカルバジン、メクロレタミン、シスプラチン、メトトレキセート、5フルオロウラシル、及びアラCである。更なる情報は、TheMolecularBasisofCancerMendelsohn及びIsrael編Chapter1表題CellcycleregulationoncogeneandantineoplasticdrugsMurakami等、特に13頁に見出すことができる。タキサン類は、共にイチイに由来する抗癌剤である。ヨーロッパイチイに由来するドセタキセル、ローンプーランローラーは、パクリタキセル、ブリストルマイヤースクウィブの半合成類似体である。パクリタキセル及びドセタキセルは、チューブリン二量体から微小管の集合を促進し、細胞の有糸分裂を阻害する結果となる脱重合を防ぐことによって微小管を安定化にする。細胞内代謝物なる用語は、抗体抗原コンジュゲート上の細胞内部で代謝プロセス又は反応から生じている化合物に関する。代謝プロセス又は反応はADCのペプチドリンカーのタンパク質切断や、ヒドラゾン、エステル又はアミドなどの官能基の加水分解といった酵素的な過程であってもよい。細胞内代謝物には、限定するものではないが、細胞内への移行、拡散、取り込み又は輸送後に細胞内切断が行われた遊離薬剤及び抗体が含まれる。細胞内に切断される及び細胞内切断なる用語は、抗体-薬剤コンジュゲートに対する細胞内の代謝プロセス又は反応であって、これによって薬剤成分と抗体間の共有結合、すなわちリンカーが壊れ、その結果、細胞内の抗体から遊離した薬剤が分離される。ゆえに、ADCの切断された成分は細胞内代謝物である。生物学的利用能なる用語は、患者に投与される薬剤の所定の量の全身有効性を指す。生物学的利用能は、投与された用量形態から体循環に達する薬剤の時間と総量の測定値を示す絶対的な用語である。細胞障害活性なる用語は、抗体-薬剤コンジュゲート又は抗体-薬剤コンジュゲートの細胞内代謝物の細胞殺傷効果、細胞増殖抑制効果又は増殖阻害効果を指す。細胞障害活性は、細胞の半分が生存する単位容量当たりの濃度であるIC50値として表されてもよい。アルキルは、ノルマル、第2級、第3級、又は環式の炭素原子を含むC1C18炭化水素である。例として、メチル、エチル、1-プロピル、2-プロピル2、1-ブチル、2-メチル-1-プロピル2、2-ブチルCH2CH3、2-メチル-2-プロピル3、1-ペンチル、2-ペンチルCH2CH2CH3、3-ペンチル2、2-メチル-2-ブチル2CH2CH3、3-メチル-2-ブチルCH2、3-メチル-1-ブチル2、2-メチル-1-ブチルCH2CH3、1-ヘキシル、2-ヘキシルCH2CH2CH2CH3、3-ヘキシル、2-メチル-2-ペンチル2CH2CH2CH3、3-メチル-2-ペンチルCHCH2CH3、4-メチル-2-ペンチルCH2CH2、3-メチル-3-ペンチル2、2-メチル-3-ペンチルCH2、23-ジメチル-2-ブチル2CH2、33-ジメチル-2-ブチルC3がある。本明細書中で用いるC1-C8アルキルなる用語は、1から8の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖の、飽和ないしは不飽和炭化水素を指す。典型的なC1-C8アルキル基には、限定するものではないが、-メチル、-エチル、-nプロピル、-nブチル、-nペンチル、-nヘキシル、-n-ヘプチル、-n-オクチル、-n-ノニル、及び-n-デシルが含まれ、一方、分岐したC1-C8アルキルには、限定するものではないが、-イソプロピル、-secブチル、-イソブチル、-tertブチル、-イソペンチル、2-メチルブチルが含まれ、不飽和のC1-C8アルキルには、限定するものではないが、-ビニル、-アリル、-1-ブテニル、-2-ブテニル、-イソブチレニル、-1-ペンテニル、-2-ペンテニル、-3-メチル-1-ブテニル、-2-メチル-2-ブテニル、-23-ジメチル-2-ブテニル、1-ヘキシル、2-ヘキシル、3-ヘキシル-アセチレニル、-プロピニル、-1-ブチニル、-2-ブチニル、-1-ペンチニル、-2-ペンチニル、-3-メチル-1-ブチニル、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、n-ヘキシル、イソヘキシル、2-メチルペンチル、3-メチルペンチル、22-ジメチルブチル、23-ジメチルブチル、22-ジメチルペンチル、23-ジメチルペンチル、33-ジメチルペンチル、234-トリメチルペンチル、3-メチルヘキシル、22-ジメチルヘキシル、24-ジメチルヘキシル、25-ジメチルヘキシル、35-ジメチルヘキシル、24-ジメチルペンチル、2-メチルヘプチル、3-メチルヘプチル、n-ヘプチル、イソヘプチル、n-オクチル、及びイソオクチルが含まれる。C1-C8アルキル基は、限定するものではないが、置換されていなくてもよいし、-C1-C8アルキル、-O-、-アリール、-CR、-OCR、-COR、-CNH2、-CNHR、-CN2-NHCR、-SO3R、-S2R、-SR、-OH、-ハロゲン、-N3、-NH2、-NH、-N2、及び-CNを含め、一又は複数の基によって置換されていてもよく、各々のRは、H、-C1-C8アルキル及びアリールから別々に選択される。アルケニルは、不飽和の少なくとも一部、すなわち炭素-炭素、sp2二重結合を有するノルマル、第2級、第3級、又は環式の炭素原子を含むC2-C18炭化水素である。例には、限定するものではないが、エチレン又はビニル、アリル、シクロペンテニル及び5-ヘキセニルなどがある。アルキニルは、不飽和の少なくとも一部、すなわち炭素-炭素、sp三重結合を有するノルマル、第2級、第3級、又は環式の炭素原子を含むC2-C18炭化水素である。例には、限定するものではないが、アセチレン及びプロパルギルなどがある。アルキレンは、1~18の炭素原子であって、親のアルカンと同じ又は2つの異なる炭素原子から2つの水素原子を取り除くことによって誘導される2つの一価基センターを有する飽和した、分岐鎖又は直鎖又は環式の炭化水素基を指す。典型的なアルキレン基には、限定するものではないが、メチレン12-エチル、13-プロピル、14-ブチルなどが含まれる。C1-C10アルキレンは、式-1-10-の直鎖の飽和した炭化水素基である。C1-C10アルキレンの例には、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン、ヘキシレン、ヘプチレン、オクチレン、ノニレン、及びデカレンが含まれる。アルケニレンは、2~18の炭素原子であって、親のアルケンと同じ又は2つの異なる炭素原子から2つの水素原子を取り除くことによって誘導される2つの一価基センターを有する不飽和の、分岐鎖又は直鎖又は環式の炭化水素基を指す。典型的なアルケニレン基には、限定するものではないが、12-エチレンが含まれる。アルキニレンは、2~18の炭素原子であって、親のアルキンと同じ又は2つの異なる炭素原子から2つの水素原子を取り除くことによって誘導される2つの一価基センターを有する不飽和の、分岐鎖又は直鎖又は環式の炭化水素基を指す。典型的なアルキニレン基には、限定するものではないが、アセチレン、プロパルギル、及び4-ペンチニルが含まれる。アリールは炭素環の芳香基を指す。アリール基の例には、限定するものではないが、フェニル、ナフチル及びアントラセニルが含まれる。炭素環の芳香基又はヘテロサイクリック芳香基は、置換されていなくてもよいし、限定するものではないが、-C1-C8アルキル、-O-、-アリール、-CR、-OCR、-COR、-CNH2、-CNHR、-CN2-NHCR、-S2R、-SR、-OH、-ハロゲン、-N3、-NH2、-NH、-N2、及び-CNを含む、一又は複数の基によって置換されていてもよく、各々のRは、H、-C1-C8アルキル及びアリールから別々に選択される。アリレンは2つの共有結合を有するアリール基であり、以下の構造で示すようなオルト、メタ又はパラの立体配置でありうる。ここで、フェニル基は置換されていなくても、限定するものではないが、-C1-C8アルキル、-O-、-アリール、-CR、-OCR、-COR、-CNH2、-CNHR、-CN2-NHCR、-S2R、-SR、-OH、-ハロゲン、-N3、-NH2、-NH、-N2、及び-CNを含む最大4つの基にて置換されてもよく、それぞれのRは、H、-C1-C8アルキル及びアリールから個々に選択される。アリールアルキルは、炭素原子、典型的には末端又はsp3炭素原子に結合した水素原子のうちの1つがアリール基に置換している非環式アルキル基を指す。代表的なアリールアルキル基には、限定するものではないが、ベンジル、2-フェニルエタン-1-イル、2-phenylethen-1-イル、ナフチルメチル、2-ナフチルエタン-1-イル、2-naphthylethen-1-イル、ナフトベンジル、2-ナフトフェニルエタン-1-イルなどが含まれる。アリールアルキル基は6~20の炭素原子を含み、例えば、アルカニル、アルケニル又はアルキニル基を含む、アリールアルキル基のアルキル部分は1~6の炭素原子であり、アリール部分は5~14の炭素原子である。ヘテロアリールアルキルは、炭素原子、典型的には末端又はsp3炭素原子に結合した水素原子のうちの1つがヘテロアリール基に置換している非環式アルキル基を指す。典型的なヘテロアリールアルキル基には、限定するものではないが、2-ベンズイミダゾリルメチル、2-フリルエチルなどが含まれる。ヘテロアリールアルキル基は6~20の炭素原子を含み、例えば、アルカニル、アルケニル又はアルキニル基を含む、ヘテロアリールアルキル基のアルキル部分は1~6の炭素原子であり、ヘテロアリール部分は5~14の炭素原子であり、1~3のヘテロ原子はN、O、P及びSから選択される。ヘテロアリールアルキル基のヘテロアリール部分は3~7員環を有するモノシクロ又は7~10員環を有するビシクロ、例えばビシクロ45、55、56、又は66システムであってもよい。置換されたアルキル、置換されたアリール、置換されたアリールアルキルとは、アルキル、アリール及びアリールアルキルをそれぞれ意味し、一又は複数の水素原子がそれぞれ別々に置換基に置換している。典型的な置換基には、限定するものではないが、-X、-R、-O-、-OR、-SR、-S-、-NR2、-NR3、=NR、-CX3、-CN、-OCN、-SCN、-N=C=O、-NCS、-NO、-NO2、=N2、-N3、-NCR、-CR、-CNR2、-SO3-、-SO3H、-S2R、-OS2OR、-S2NR、-SR、-OP2、-P2、-PO-3、-PO3H2、-CR、-CX、-CR、-CO2R、-CO2-、-COR、-CSR、-CSR、-CNR2、-CNR2、-CNR2が含まれ、それぞれのXは個々にハロゲン:F、Cl、Br又はIであり、それぞれのRは個々に-H、C2-C18アルキル、C6-C20アリール、C3-C14複素環、保護基又はプロドラッグ部分である。上記のアルキレン、アルケニレン及びアルキニレン基もまた、同じように置換されてもよい。ヘテロアリール及び複素環は、一又は複数の環原子がヘテロ原子、例えば窒素、酸素及び硫黄である環式システムを指す。複素環基は、1~20の炭素原子とN、O、P及びSから選択される1~3のヘテロ原子を含む。複素環は、3~7員環を有するモノシクロ又は7~10員環を有するビシクロ、例えばビシクロ45、55、56、又は66システムであってもよい。複素環は、PaquetteLeoAPrinciplesofModernHeterocyclicChemistry、特に第13467及び9章;TheChemistryofHeterocyclicCompoundsAseriesofMonographs、特に13141619及び28号;及び、JAmChemSoc825566に記載される。複素環の例には、例示のためであって限定するものではなく、ピリジル、ジヒドロピリジル、テトラヒドロピリジル、チアゾリル、テトラヒドロチオフェニル、硫黄酸化型テトラヒドロチオフェニル、ピリミジニル、フラニル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、テトラゾリル、ベンゾフラニル、チアナフタレニル、インドリル、インドレニル、キノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリル、ピペリジニル、4-ピペリドニル、ピロリジニル、2-ピロリドニル、ピロリニル、テトラヒドロフラニル、ビス-テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ビス-テトラヒドロピラニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、オクタヒドロイソキノリニル、アゾチニル、トリアジニル、6H-125-チアジアジニル、2H6H-152-ジチアジニル、チエニル、チアンスレニル、ピラニル、イソベンゾフラニル、クロメニル、キサンテニル、フェノキサチニル、2H-ピロリル、イソチアゾリル、イソキサゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、インドリジニル、イソインドリル、3H-インドリル、1H-インダゾリル、プリニル、4H-キノリジニル、フタラジニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、チノリニル、プテリジニル、4aH-カルバゾリル、カルバゾリル、β-カルボリニル、フェナンスリジニル、アクリジニル、ピリミジニル、フェナンスロリニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フラザニル、フェノキサジニル、イソクロマニル、クロマニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピペラジニル、インドリニル、イソインドリニル、キヌクリジニル、モルホリニル、オキサゾリジニル、ベンゾトリアゾリル、ベンズイソキサゾリル、オキシンドリル、ベンズオキサゾリニル、及びイサチノイルが含まれる。例示的なものであって限定するものではなく、炭素結合複素環は、ピリジンの2、3、4、5、又は6位、ピリダジンの3、4、5、又は6位、ピリミジンの2、4、5、又は6位、ピラジンの2、3、5、又は6位、フラン、テトラヒドロフラン、チオフラン、チオフェン、ピロールないしはテトラヒドロピロールの2、3、4、又は5位、オキサゾール、イミダゾールないしはチアゾールの2、4、又は5位、イソキサゾール、ピラゾールないしはイソチアゾールの3、4、又は5位、アジリジンの2又は3位、アゼチジンの2、3、又は4位、キノリンの2、3、4、5、6、7、又は8位、又はイソキノリンの1、3、4、5、6、7、又は8位に結合する。さらにより典型的には、炭素結合複素環には、2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、5-ピリジル、6-ピリジル、3-ピリダジニル、4-ピリダジニル、5-ピリダジニル、6-ピリダジニル、2-ピリミジニル、4-ピリミジニル、5-ピリミジニル、6-ピリミジニル、2-ピラジニル、3-ピラジニル、5-ピラジニル、6-ピラジニル、2-チアゾリル、4-チアゾリル、又は5-チアゾリルが含まれる。例示的なものであって限定するものではなく、窒素結合複素環は、アジリジン、アゼチジン、ピロール、ピロリジン、2-ピロリン、3-ピロリン、イミダゾール、イミダゾリジン、2-イミダゾリン、3-イミダゾリン、ピラゾール、ピラゾリン、2-ピラゾリン、3-ピラゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドール、インドリン、1H-インダゾールの1位、イソインドールないしはイソインドリンの2位、モルフォリンの4位、カルバゾールないしはβ-カルボリンの9位に結合する。さらにより典型的には、窒素結合複素環には、1-アジリジル、1-アゼテジル、1-ピロリル、1-イミダゾリル、1-ピラゾリル、及び1-ピペリジニルが含まれる。C3-C8複素環は、1~4の環状炭素原子が個々にO、S及びNからなる群のヘテロ原子に置換されている芳香族ないしは非芳香族のC3-C8複素環を指す。C3-C8複素環の代表的な例には、限定するものではないが、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェン、インドリル、ベンゾピラゾリル、クマリニル、イソキノリニル、ピロリル、チオフェニル、フラニル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、キノリニル、ピリミジニル、ピリジニル、ピリドニル、ピラジニル、ピリダジニル、イソチアゾリル、イソキサゾリル及びテトラゾリルが含まれる。C3-C8複素環は置換されていなくても、限定するものではないが、-C1-C8アルキル、-O-、-アリール、-CR、-OCR、-COR、-CNH2、-CNHR、-CN2-NHCR、-S2R、-SR、-OH、-ハロゲン、-N3、-NH2、-NH、-N2、及び-CNを含む最大7基に置換されていてもよく、各々のRは、H、-C1-C8アルキル及びアリールからそれぞれ選択される。C3-C8ヘテロシクロは、複素環基の水素原子のうちの1つが結合に置換されている上記のC3-C8複素環基を指す。C3-C8ヘテロシクロは置換されていなくても、限定するものではないが、-C1-C8アルキル、-O-、-アリール、-CR、-OCR、-COR、-CNH2、-CNHR、-CN2-NHCR、-S2R、-SR、-OH、-ハロゲン、-N3、-NH2、-NH、-N2、及び-CNを含む最大6基に置換されていてもよく、各々のRは、H、-C1-C8アルキル及びアリールからそれぞれ選択される。炭素環は、単環として3~7の炭素原子又は二環として7~12の炭素原子を有する飽和ないしは不飽和の環を意味する。単環の炭素環は3~6の環状原子、より一般的には5又は6の環状原子を有する。二環式の炭素環は、例えばビシクロ45、55、56又は66システムとして配置した7~12の環状原子、又はビシクロ56又は66システムとして配置した9又は10の環状原子を有する。単環の炭素環の例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、1-シクロペント-1-エニル、1-シクロペント-2-エニル、1-シクロペント-3-エニル、シクロヘキシル、1-シクロヘキス-1-エニル、1-シクロヘキス-2-エニル、1-シクロヘキス-3-エニル、シクロヘプチル、及びシクロオクチルが含まれる。C3-C8炭素環は、3、4、5、6、7又は8員の飽和ないしは不飽和非芳香族炭素環である。代表的なC3-C8炭素環には、限定するものではないが、-シクロプロピル、-シクロブチル、-シクロペンチル、-シクロペンタジエニル、-シクロヘキシル、-シクロヘキセニル、-13-シクロヘキサジエニル、-14-シクロヘキサジエニル、-シクロヘプチル、-13-シクロヘプタジエニル、-135-シクロヘプタトリエニル、-シクロオクチル、及び-シクロオクタジエニルが含まれる。C3-C8炭素環基は置換されていなくても、限定するものではないが、-C1-C8アルキル、-O-、-アリール、-CR、-OCR、-COR、-CNH2、-CNHR、-CN2-NHCR、-S2R、-SR、-OH、-ハロゲン、-N3、-NH2、-NH、-N2、及び-CNを含む一又は複数の基に置換されていてもよく、各々のRは、H、-C1-C8アルキル及びアリールからそれぞれ選択される。C3-C8カルボシクロは、炭素環基の水素原子のうちの1つが結合に置換されている上記のC3-C8炭素環基を指す。リンカーは、共有結合を含む化学的な部分又は薬剤部分に抗体を共有結合させる原子の鎖を指す。様々な実施態様では、リンカーには、二価の基、例としてalkyldiyl、aryldiyl、heteroaryldiyl、アルキロキシ及びアルキラミノの繰り返しユニットである-nOn-などの部分、及び、スクシナート、スクシンアミド、ジグリコレート、マロネート及びカプロアミドを含む二酸エステル及びアミドが含まれる。キラルなる用語は、鏡像パートナーの重ね合わすことができない特性を有する分子を指し、一方、アキラルなる用語は、鏡像パートナーの重ね合わすことができる分子を指す。立体異性体なる用語は、同一の化学構造を有するが、空間の原子又は基の配列に関しては異なる化合物を指す。ジアステレオマーはキラリティの2以上の中心を有し、その分子が互いの鏡像でない立体異性体を指す。ジアステレオマーは、異なる物理的性質、例えば融点、沸点、分光特性及び反応性を有する。ジアステレオマーの混合物は、電気泳動及びクロマトグラフィなどの高分解能解析手順により分離されうる。鏡像異性体は、互いに重ね合わせることができない鏡像である化合物の2つの立体異性体を指す。本明細書中で用いる立体化学的定義及び慣例は、一般にSPParkerEdMcGrawHillDictionaryofChemicalTermsMcGrawHillBookCompanyNewYork;及び、ElielEandWilenSStereochemistryofOrganicCompoundsJohnWileySonsIncNewYorkに従う。多くの有機化合物は光学的に活性な形態で存在する。すなわち直線偏光の平面を回転する能力を有する。光学的に活性な化合物を記載する場合、接頭語DとL又はRとSを用いて、キラル中心の周りの分子の絶対配置を示す。接頭後dとl又はとは、化合物による直線偏光の回転のサインを示すために用いるものであって、又は1は化合物が左旋性であることを意味する。又はdを接頭に付した化合物は右旋性である。所定の化学構造では、互いの鏡像であることを除いて、これらの立体異性体は同一である。また、特定の立体異性体は鏡像異性体とも称され、この異性体の混合物は鏡像異性体混合物と称されることが多い。鏡像異性体の50:50混合物は、化学的反応又は過程において立体選別でも立体特異性でもなくなった場合に生じうるラセミ混合物又はラセミ化合物を指す。ラセミ混合物及びラセミ化合物なる用語は、光学的活性を欠く、2つの鏡像異性種を指す。脱離基は、他の官能基によって置換されうる官能基を指す。特定の脱離基は当分野で公知であり、例として、限定するものではないが、ハロゲン化物、メタンスルホニル、pトルエンスルホニル、トリフルオロメチルスルホニル、及びトリフルオロメチルスルホネートなどがある。省略記号リンカー成分:MC=6マレイミドカプロイルVal-Cit又はvc=バリン-シトルリンシトルリン=2アミノ5ウレイドペンタン酸PAB=pアミノベンジルオキシカルボニルリンカー成分の例Me-Val-Cit=N-メチル-バリン-シトルリンMC6-OH=マレイミドカプロイル-ポリエチレングリコールSPP=Nスクシンイミジル4ペンタノエートSPDP=Nスクシンイミジル3プロピオネートSMCC=スクシンイミジル4シクロヘキサン1カルボキシレートIT=イミノチオラン細胞障害性剤:MMAE=モノメチルアウリスタチンEMMAF=薬剤のC末端にフェニルアラニンを有するアウリスタチンEの変異体MMAF-DMAEA=C末端のフェニルアラニンに対するアミド連結にDMAEAを有するMMAFMMAF-TEG=フェニルアラニンにエステル化したテトラエチレングリコールを有するMMAFMMAF-NtBu=MMAFのC末端にアミドとして結合した、NtブチルDM1=NデアセチルN-メイタンシンDM3=NデアセチルN2メイタンシンDM4=NデアセチルN2メイタンシンさらに、略語は以下の通りである:AEはアウリスタチンEであり、BocはNであり、citはシトルリンであり、dapはドラプロインであり、DCCは13ジシクロヘキシルカルボジイミドであり、DCMはジクロロメタンであり、DEAはジエチルアミンであり、DEADはジエチルアゾジカルボキシレートであり、DEPCはジエチルホスホリルシアニダートであり、DIADはジイソプロピルアゾジカルボキシレートであり、DIEAはNNジイソプロピルエチルアミンであり、dilはドライソロイシンであり、DMAはジメチルアセトアミドであり、DMAPは4ジメチルアミノピリジンであり、DMEはエチレングリコールジメチルエーテルであり、DMFはNNジメチルホルムアミドであり、DMSOはジメチルスルホキシドであり、doeはドラフェニンであり、dovはNNジメチルバリンであり、DTNBは55ジチオビスであり、DTPAはジエチレントリアミンペンタ酢酸であり、DTTはジチオトレイトールであり、EDCIは13エチルカルボジイミド塩酸塩であり、EEDQは、2エトキシ1エトキシカルボニル12ジヒドロキノリンであり、ESMSはエレクトロスプレー質量分析であり、EtOAcは酢酸エチルであり、FmocはNであり、glyはグリシンであり、HATUは、ONNNNテトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートであり、HOBtは1ヒドロキシベンゾトリアゾールであり、HPLCは高速液体クロマトグラフィであり、ileはイソロイシンであり、lysはリジンであり、MeCNはアセトニトリルであり、MeOHはメタノールであり、Mtrは4アニシルジフェニルメチルであり、ノルエフェドリンではなく、PBSはリン酸塩緩衝生理食塩水であり、PEGはポリエチレングリコールであり、Phはフェニルであり、Pnpはpニトロフェニルであり、MCは6マレイミドカプロイルであり、pheはLフェニルアラニンであり、PyBropは、ブロモトリスピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェイトであり、SECはサイズ排除クロマトグラフィであり、Suはスクシンイミドであり、TFAはトリフルオロ酢酸であり、TLCは薄層クロマトグラフィであり、UVは紫外線であり、valはバリンである。組成物及びその作製方法STEAP-1に結合する抗体が提供される。抗STEAP-1抗体を含んでなるイムノコンジュゲートが提供される。本発明の抗体及びイムノコンジュゲートは、例えば、STEAP-1の発現の増加などの発現の変更と関係する疾患の診断や治療に有用である。ある実施態様では、本発明の抗体又はイムノコンジュゲートは、癌などの細胞増殖性疾患の診断や治療に有用である。抗STEAP-1抗体一態様では、本発明はSTEAP-1に結合する抗体を提供する。いくつかの実施態様では、ヒト及びカニクイザルのSTEAP-1の成熟形態に結合する抗体が提供される。そのような実施態様では、ヒトのSTEAP-1の成熟形態は配列番号1図1のアミノ酸配列を有する。cynoSTEAP-1は配列番号3図1のアミノ酸配列を有する。いくつかの実施態様では、STEAP-1に対する抗体は、細胞表面に発現されるSTEAP-1の成熟形態に結合する。いくつかの実施態様では、細胞表面に発現されるSTEAP-1の成熟形態に結合する抗体は、細胞の成長を阻害する。いくつかの実施態様では、抗STEAP-1抗体は、細胞表面に発現されるSTEAP-1の成熟形態に結合して、細胞増殖を阻害する。ある実施態様では、抗STEAP-1抗体は、細胞表面に発現されるSTEAP-1の成熟形態と結合して、細胞死を誘導する。いくつかの実施態様では、抗STEAP-1抗体は、癌細胞の表面に発現されるSTEAP-1の成熟形態に結合する。いくつかの実施態様では、抗STEAP-1抗体は、同じ組織起源の正常細胞と比較して癌細胞の表面に過剰に発現されるSTEAP-1の成熟形態に結合する。いくつかの実施態様では、抗STEAP-1抗体は、細胞毒素又は検出可能な標識にコンジュゲートされ、細胞表面上のSTEAP-1に結合する。いくつかの実施態様では、抗体毒素コンジュゲートは細胞の成長を阻害する。いくつかの実施態様では、抗体検出可能な標識コンジュゲートは、その表面上にSTEAP-1を発現する細胞をインビトロ又はインビボで検出可能にする。一態様では、抗STEAP-1抗体はモノクローナル抗体である。一態様では、抗STEAP-1抗体は抗体断片、例えばFab、FabSH、Fv、scFv又は2断片である。一態様では、抗STEAP-1抗体はキメラ、ヒト化、又はヒトの抗体である。一態様では、本発明書中に記載のいずれかの抗STEAP-1抗体は精製される。ファージライブラリから得られる例示的なモノクローナル抗体は、本願明細書において提供される。ライブラリをスクリーニングするために用いられる抗原は、STEAP-1β及びαの細胞外ドメインに対応する、配列番号28又は配列番号30のアミノ酸配列の配列を有するポリペプチドとした。ライブラリスクリーニングから生じる抗体は親和性成熟される。一態様では、マウス120.545、120グラフト、及びヒト化120v.24とSTEAP-1への結合について競合するモノクローナル抗体が提供される。また、マウス120.545、120グラフト及びヒト化120v.24と同じエピトープに結合するモノクローナル抗体が提供される。本発明の一態様では、抗STEAP-1抗体をコードするポリヌクレオチドが提供される。ある実施態様では、抗STEAP-1抗体をコードするポリヌクレオチドを含むベクターが提供される。ある実施態様では、前記のベクターを含む宿主細胞が提供される。本発明の他の態様では、抗STEAP-1抗体をコードする抗STEAP-1抗体又はポリヌクレオチドを含有する組成物が提供される。ある実施態様では、本発明の組成物は、本明細書中で列挙したものなどの細胞増殖性疾患の治療のための製薬的製剤である。例示的な抗STEAP-1抗体の詳細な解説は、以下の通りである:1.抗STEAP-1抗体の具体的な実施態様一態様では、本発明は、図2Bの配列番号9又は10を含む重鎖可変ドメインを含んでなる抗STEAP-1抗体を提供する。一態様では、本発明は、図2Aの配列番号6を含む軽鎖可ドメインを含んでなる抗STEAP-1抗体を提供する。一態様では、本発明は、カバット位置A24V、V37I、V48M、F67I、及びL78Fにおけるアミノ変更のうちの一又は複数を有する、配列番号9を含む重鎖を含んでなる抗STEAP-1抗体を提供する。一実施態様では、重鎖は、配列番号25、75、76、77、78、及び79から選択された重鎖フレームワーク領域を含む。本明細書で使用する重鎖フレームワーク領域は、FR-H1-H4又はHC-FR1-FR4と表記され、軽鎖フレームワーク領域は、FR-L1-L4又はLC-FR1-FR4と表記される。一態様では、本発明は、配列番号6を含む軽鎖を含んでなる抗STEAP-1抗体を提供する。一態様では、本発明は、図2A及び2Bに示す抗体120.v24のHVR配列の1、2、3、4、5、又は6を含んでなる抗STEAP-1抗体を提供する。抗STEAP-1抗体は、STEAP-1を結合する能力を保持する限り、任意の適切なフレームワーク可変ドメイン配列を含んでもよい。例えば、いくつかの実施態様では、本発明の抗STEAP-1抗体は、ヒトのサブグループIII重鎖フレームワークコンセンサス配列を含んでなる。これらの抗体の一実施態様では、重鎖フレームワークコンセンサス配列は、位置24、37、48、67及び/又は78に置換を含む。これらの抗体の一実施態様では、位置24はA又はVであり、位置37はI又はVであり、位置48はM又はVであり、位置67はI又はFであり、及び/又は、位置78はF又はLである。一実施態様では、これらの抗体は、huMAb4D58の重鎖可変ドメインフレームワーク配列、例えば配列番号21、22、23及び24を含む。huMAb4D58はハーセプチン抗HER2抗体として商業的に公知であり、米国特許第6407213号及び同第5821337号、及びLee等JMolBiol340107393においても言及される。このような実施態様では、これらの抗体はさらに、ヒトのκI軽鎖フレームワークコンセンサス配列を含む。このような実施態様では、これらの抗体は、huMAb4D58の軽鎖可変ドメインフレームワーク配列、例えば配列番号17、18、19及び20を含む。一実施態様では、抗STEAP-1抗体は、フレームワーク配列及び高頻度可変領域を含む重鎖可変ドメインを含んでなり、このときフレームワーク配列はFRH1FRH4配列、それぞれ配列番号21又は25FR-H1、22FR-H2、23FR-H3、及び24FR-H4を含み、HVRH1は配列番号14のアミノ酸配列を含み、HVRH2は配列番号15のアミノ酸配列を含み、そしてHVRH3は配列番号16のアミノ酸配列を含んでいる。一実施態様では、抗STEAP-1抗体は、フレームワーク配列及び高頻度可変領域を含む軽鎖可変ドメインを含んでなり、このときフレームワーク配列はFRL1FRL4配列、それぞれ配列番号17、18、19及び20を含み、HVRL1は配列番号11、12及び13から選択されるアミノ酸配列を含む。これらの抗体の一実施態様では、重鎖可変ドメインは配列番号9又は10を含み、軽鎖可変ドメインは配列番号6を含む。いくつかの実施態様では、本発明は、アミノ酸配列配列番号9又は10に対して少なくとも90、91、92、93、94、95、96、97、98又は99の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含んでなる抗STEAP-1抗体を提供する。いくつかの実施態様では、少なくとも90、91、92、93、94、95、96、97、98又は99の配列同一性を有するアミノ酸配列は、参照配列と比較して置換、挿入又は欠失を含有するが、そのアミノ酸配列を含む抗体はSTEAP-1に結合する能力を保持する。いくつかの実施態様では、合計1~10のアミノ酸が、配列番号9、10、14、15、16、21、22、23、24、25、75、76、77、78、及び/又は79の配列において置換されているか、挿入されているか、又は欠失されている。いくつかの実施態様では、置換、挿入又は欠失はHVR以外の領域で起こる。いくつかの実施態様では、抗STEAP-1抗体は、配列番号9又は10から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含んでなる。いくつかの実施態様では、本発明は、図2B配列番号9又は10に示す重鎖可変ドメインを含む抗STEAP-1抗体を提供する。いくつかの実施態様では、重鎖HVR及びFR配列は以下を含む。いくつかの実施態様では、本発明は、図2A配列番号6に示す軽鎖可変ドメインを含む抗STEAP-1抗体を提供する。いくつかの実施態様では、軽鎖HVR配列は以下を含む。いくつかの実施態様では、軽鎖FR配列は以下を含む。一態様では、本発明は、アミノ酸配列番号6に少なくとも90、91、92、93、94、95、96、97、98又は99の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含んでなる抗STEAP-1抗体を提供する。いくつかの実施態様では、少なくとも90、91、92、93、94、95、96、97、98又は99の配列同一性を有するアミノ酸配列は、参照配列と比べて置換、挿入又は欠失を含有するが、そのアミノ酸配列を含む抗体はSTEAP-1への結合能を保持する。いくつかの実施態様では、合計1~10のアミノ酸が、配列番号6、11、12、13、17、18、19及び20から選択される配列において置換されているか、挿入されているか、又は欠失されている。いくつかの実施態様では、置換、挿入又は欠失はHVR以外の領域で起こる。いくつかの実施態様では、抗STEAP-1抗体は、アミノ酸配列の配列番号6を含む軽鎖可変ドメインを含んでなる。一態様では、本発明は、配列番号9及び10から選択されるアミノ酸配列に少なくとも90、91、92、93、94、95、96、97、98又は99の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、アミノ酸配列の配列番号6に少なくとも90、91、92、93、94、95、96、97、98又は99の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインとを含んでなる抗STEAP-1抗体を提供する。いくつかの実施態様では、少なくとも90、91、92、93、94、95、96、97、98又は99の配列同一性を有するアミノ酸配列は、参照配列と比べて置換、挿入又は欠失を含有するが、そのアミノ酸配列を含む抗体はSTEAP-1への結合能を保持する。いくつかの実施態様では、合計1~10のアミノ酸が、参照配列において置換されているか、挿入されているか、又は欠失されていおり、この参照配列は、配列番号9、10、14、15、16、21、22、23、24、25、75、76、77、78、79から選択される配列を含むがこれら限定されない。いくつかの実施態様では、置換、挿入又は欠失はHVR以外の領域で起こる。いくつかの実施態様では、抗STEAP-1抗体は、配列番号9又は10のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号6から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインとを含んでなる。一態様では、本発明は、図2Bに示すものから選択される1、2又は3のVHHVR、及び/又は図2Aに示すものから選択される1、2又は3のVLHVRを含んでなる抗STEAP-1抗体を提供する。一態様では、本発明は、図2Bに示すものから選択される重鎖可変ドメインと、図2Aに示すものから選択される軽鎖可変ドメインとを含んでなる抗STEAP-1抗体を提供する。2.抗体断片本発明は抗体断片を包含する。抗体断片は、酵素消化などの古典的な手段や組み換え技術によって生成されうる。特定の場合では、全抗体よりも抗体断片の利用に利点がある。より小さいサイズの断片によりクリアランスが速くなり、固形腫瘍へのアクセスが改善されうる。ある抗体断片の概説については、Hudson等NatMed9129134を参照。抗体断片を生産するために様々な技術が開発されている。伝統的には、これらの断片は、完全な抗体のタンパク分解性消化を介して誘導されていた及びBrennan等Science22981を参照されたい。しかし、これらの断片は現在は組換え宿主細胞により直接生産することができる。例えば、Fab、Fv及びScFv抗体断片はすべて、大腸菌で発現され、分泌されるため、この断片の大規模産生が容易となる。抗体断片は上述において検討した抗体ファージライブラリーから分離することができる。別法として、FabSH断片は大腸菌から直接回収することができ、化学的に結合してF2断片を形成することができる。他のアプローチ法では、F2断片を組換え宿主細胞培養から直接分離することができる。サルベージレセプター結合エピトープ残基を含有する、インビボ半減期が増加したFab及びF2断片は米国特許第5869046号に記載される。抗体断片の生産のための他の方法は当業者には明らかであろう。ある実施態様では、抗体は単鎖Fv断片である。国際公開第93/16185号;米国特許第5571894号;及び米国特許第5587458号を参照のこと。Fv及びscFvは、定常領域が欠けている完全な結合部を有する唯一の種である;したがって、それらは、インビボでの使用の間の非特異的結合を減らすために適する。scFv融合タンパク質は、scFvのアミノ末端又はカルボキシ末端の何れかで、エフェクタータンパク質の融合物を得るために構築されうる。上掲のAntibodyEngineeringedBorrebaeckを参照。また、抗体断片は、例えば米国特許第5641870号に記載されているような直鎖状抗体であってもよい。このような直線状の抗体は単特異的又は二重特異的であってもよい。3.ヒト化抗体本発明はヒト化抗体を包含する。非ヒト抗体をヒト化する様々な方法は従来からよく知られている。例えば、ヒト化抗体には非ヒト由来の一又は複数のアミノ酸残基が導入されている。これら非ヒトアミノ酸残基は、しばしば、典型的には移入可変ドメインから得られる移入残基と呼ばれる。ヒト化は、本質的にはヒト抗体の該当する高頻度可変領域配列を置換することによりウィンターと共同研究者の方法、RiechmannほかNature332323327、VerhoeyenほかScience23915341536を使用して実施することができる。よって、このようなヒト化抗体は、完全なヒト可変ドメインより実質的に少ない分が非ヒト種由来の該当する配列で置換されたキメラ抗体である。実際には、ヒト化抗体は、典型的にはいくつかの高頻度可変領域残基及び場合によってはいくらかのFR残基が齧歯類抗体の類似部位からの残基によって置換されているヒト抗体である。抗原性を低減するには、ヒト化抗体を生成する際に使用するヒトの軽重両方の可変ドメインの選択が非常に重要となりうる。ベストフィット法では、齧歯動物抗体の可変ドメインの配列を既知のヒト可変ドメイン配列のライブラリ全体に対してスクリーニングする。次に齧歯動物のものと最も近いヒト配列をヒト化抗体のヒトフレームワーク領域として受け入れる;Chothia等JMolBiol196901。他の方法では、軽鎖又は重鎖の特定のサブグループのヒト抗体全てのコンセンサス配列から誘導される特定のフレームワーク領域を使用する。同じフレームワークをいくつかの異なるヒト化抗体に使用できる;Presta等JImmunol1512623。更に、抗体を、抗原に対する高親和性や他の好ましい生物学的性質を保持してヒト化することが一般的に望ましい。この目標を達成するべく、ある方法によって、親及びヒト化配列の三次元モデルを使用して、親配列及び様々な概念的ヒト化産物の分析工程を経てヒト化抗体を調製する。三次元免疫グロブリンモデルは一般的に入手可能であり、当業者にはよく知られている。選択された候補免疫グロブリン配列の推測三次元立体配座構造を図解し、表示するコンピュータプログラムは購入可能である。これら表示を見ることで、候補免疫グロブリン配列の機能における残基のありそうな役割の分析、すなわち候補免疫グログリンの抗原との結合能力に影響を及ぼす残基の分析が可能になる。このようにして、例えば標的抗原に対する親和性が高まるといった、望ましい抗体特性が達成されるように、FR残基をレシピエント及び移入配列から選択し、組み合わせることができる。一般的に、高頻度可変領域残基は、直接的かつ最も実質的に抗原結合性に影響を及ぼしている。4.ヒト抗体本発明のヒト抗STEAP-1抗体は、上記のように、ヒト由来のファージディスプレイライブラリから選択したFvクローン可変ドメイン配列を公知のヒト定常ドメイン配列と結合することによって構築することができる。あるいは、本発明のヒトモノクローナル抗STEAP-1抗体は、ハイブリドーマ法によって作製することができる。ヒトモノクローナル抗体の生産のためのヒトミエローマ及びマウスヒトヘテロミエローマ細胞株は、例えば、KozborJImmunol1333001;Brodeur等MonoclonalAntibodyProductionTechniquesandApplicationspp5163;及びBoerner等JImmunol14786によって記載されている。免疫化することで、内因性免疫グロブリンの生産なしに、ヒト抗体の完全なレパートリーを生産することが可能なトランスジェニック動物を生産することが現在は可能である。例えば、キメラ及び生殖細胞系変異体マウスでの抗体重鎖結合領域遺伝子のホモ接合体欠失は、内因性抗体の生産の完全な阻害をもたらすことが記載されている。そのような生殖細胞系変異体マウスでのヒト生殖細胞系免疫グロブリン遺伝子配列の転移は、抗原の挑戦によってヒト抗体の生産を引き起こす。例えば、Jakobovits等ProcNatlAcadSciUSA902551;Jakobovits等Nature362255;Bruggermann等YearinImmunol733を参照のこと。また、遺伝子シャフリングは、ヒト抗体が開始非ヒト、例えば齧歯類の抗体と類似した親和性及び特性を有している場合、非ヒト、例えば齧歯類の抗体からヒト抗体を得るために使用することもできる。エピトープインプリンティングとも呼ばれるこの方法により、本明細書中に記載のファージディスプレイ技術により得られた非ヒト抗体断片の重鎖可変領域遺伝子又は軽鎖可変領域遺伝子の何れかをヒトVドメイン遺伝子のレパートリーで置換し、非ヒト鎖/ヒト鎖scFvないしFabキメラの集団を作成する。抗原を選択することにより、ヒト鎖が初めのファージディスプレイクローンにおいて一致した非ヒト鎖の除去により破壊された抗原結合部位を回復する、非ヒト鎖/ヒト鎖キメラscFvないしFabが単離される、つまり、エピトープがヒト鎖のパートナーの選択をつかさどる。残りの非ヒト鎖を置換するためにこの工程を繰り返すと、ヒト抗体が得られる。伝統的なCDR移植による非ヒト抗体のヒト化と異なり、この技術により、非ヒト起源のFR又はCDR残基を全く持たない完全なヒト抗体が得られる。5.二重特異性抗体二重特異性抗体は、少なくとも2つの異なるエピトープに対して結合特異性を有するモノクローナル抗体である。ある実施態様では、二重特異性抗体はヒト又はヒト化の抗体である。ある実施態様では、結合特異性の一つはSTEAP-1に対するものであり、他方は任意の他の抗原に対するものである。ある実施態様では、二重特異性抗体は、STEAP-1の2つの異なるエピトープに結合しうる。また、二重特異性抗体はSTEAP-1を発現する細胞に細胞障害剤を局在化するためにも使用されうる。これらの抗体はSTEAP-1結合アーム及び細胞障害剤、抗インターフェロンα、ビンカアルカロイド、リシンA鎖、メトトレキセート又は放射性同位体ハプテンと結合するアームを有する。二重特異性抗体は完全長抗体又は抗体断片2二重特異性抗体として調製することができる。二重特異性抗体を作製する方法は当該分野において既知である。二重特異性抗体の伝統的な組み換え産生は二つの免疫グロブリン重鎖軽鎖対の同時発現に基づき、ここで二つの重鎖は異なる特異性を持っている。免疫グロブリン重鎖及び軽鎖が無作為に取り揃えられているため、これらのハイブリドーマは10個の異なる抗体分子の可能性ある混合物を産生し、そのうちただ一つが正しい二重特異性構造を有する。通常、アフィニティークロマトグラフィー工程により行われる正しい分子の精製は、かなり煩わしく、生成物収率は低い。同様の方法が1993年5月13日に公開の国際公報第93/08829号及びTraunecker等、EMBOJ1036553659に開示されている。異なるアプローチ法では、所望の結合特異性を有する抗体可変ドメインを免疫グロブリン定常ドメイン配列と融合させる。該融合は例えば、少なくともヒンジの一部、CH2及びCH3領域を含む免疫グロブリン重鎖定常ドメインとの融合である。ある実施態様では、軽鎖の結合に必要な部位を含む第一の重鎖定常領域は、融合の少なくとも一つに存在する。免疫グロブリン重鎖の融合、望まれるならば免疫グロブリン軽鎖をコードしているDNAを、別個の発現ベクター中に挿入し、適当な宿主生物に同時形質移入する。これにより、コンストラクトに使用される三つのポリペプチド鎖の等しくない比率が最適な収率をもたらす態様において、三つのポリペプチド断片の相互の割合の調節に大きな融通性が与えられる。しかし、少なくとも二つのポリペプチド鎖の等しい比率での発現が高収率をもたらすとき、又はその比率が特に重要性を持たないときは、2又は3個全てのポリペプチド鎖のためのコード化配列を一つの発現ベクターに挿入することが可能である。このアプローチ法の一実施態様では、二重特異性抗体は、第一の結合特異性を有する一方のアームのハイブリッド免疫グロブリン重鎖と他方のアームのハイブリッド免疫グロブリン重鎖軽鎖対とからなる。二重特異性分子の半分にしか免疫グロブリン軽鎖がないと容易な分離法が提供されるため、この非対称的構造は、所望の二重特異性化合物を不要な免疫グロブリン鎖の組み合わせから分離することを容易にすることが分かった。このアプローチ法は、国際公報第94/04690号に開示されている。二重特異性抗体を産生する更なる詳細については、例えばSuresh等MethodsinEnzymology121210を参照されたい。他のアプローチ法によれば、一対の抗体分子間の界面を操作して組換え細胞培養から回収されるヘテロダイマーのパーセントを最大にすることができる。界面は抗体定常ドメインのCH3ドメインの少なくとも一部を含む。この方法では、第1抗体分子の界面からの一又は複数の小さいアミノ酸側鎖がより大きな側鎖と置き換えられる。大きな側鎖と同じ又は類似のサイズの相補的キャビティを、大きなアミノ酸側鎖を小さいものと置き換えることにより第2の抗体分子の界面に作り出す。これにより、ホモダイマーのような不要の他の最終産物に対してヘテロダイマーの収量を増大させるメカニズムが提供される。二特異性抗体とは架橋抗体やヘテロ抱合抗体を含む。例えば、ヘテロ抱合体の一方の抗体がアビジンと結合し、他方はビオチンと結合していても良い。このような抗体は、例えば、免疫系細胞を不要な細胞に対してターゲティングさせること及びHIV感染の治療等の用途が提案されている。ヘテロ抱合抗体は適当な架橋方法によって生成できる。当技術分野においては、適切な架橋剤は周知であり、それらは複数の架橋法と共に米国特許第4676980号などに記されている。抗体断片から二重特異性抗体を産生する技術もまた文献に記載されている。例えば、化学結合を使用して二重特異性抗体を調製することができる。Brennan等Science22981は完全な抗体をタンパク分解性に切断してF2断片を産生する手順を記述している。これらの断片は、ジチオール錯体形成剤亜砒酸ナトリウムの存在下で還元して近接ジチオールを安定化させ、分子間ジスルヒド形成を防止する。産生されたFab断片はついでチオニトロベンゾアート誘導体に転換される。FabTNB誘導体の一つをついでメルカプトエチルアミンでの還元によりFabチオールに再転換し、他のFabTNB誘導体の等モル量と混合して二重特異性抗体を形成する。作られた二重特異性抗体は酵素の選択的固定化用の薬剤として使用することができる。最近の進歩により大腸菌からFabSH断片を直接回収することが容易となっており、これにより化学的にカップリングされて二重特異性抗体にを形成する。Shalaby等JExpMed175217225は、完全なヒト化二重特異性抗体F2分子の産生について記述している。各々のFab断片は大腸菌から別々に分泌されて、インビトロで化学的にカップリングされて、二重特異性抗体を形成する。したがって、形成された二重特異性抗体は、HER2を過剰発現する細胞及び正常ヒトT細胞に結合するだけでなく、ヒト胸部腫瘍の標的に対するヒト細胞毒性リンパ球の溶解活性を引き起こすことができた。組換え細胞培養から直接的に二重特異性抗体断片を作成し分離する様々な方法もまた記述されている。例えば、二重特異性抗体はロイシンジッパーを使用して生産された。Kostelny等JImmunol14815471553。Fos及びJunタンパク質からのロイシンジッパーペプチドを遺伝子融合により二つの異なった抗体のFab部分に結合させられた。抗体ホモダイマーはヒンジ領域で還元されてモノマーを形成し、ついで再酸化させて抗体ヘテロダイマーを形成する。この方法はまた抗体ホモダイマーの生産に対して使用することができる。Hollinger等ProcNatlAcadSciUSA9064446448により記述されたダイアボディ技術は二重特異性抗体断片を作成する別のメカニズムを提供した。断片は、同一鎖上の2つのドメイン間の対形成を可能にするのに十分に短いリンカーにより軽鎖可変ドメインに重鎖可変ドメインを結合してなる。従って、一つの断片のVH及びVLドメインは他の断片の相補的VL及びVHドメインと強制的に対形成させられ、2つの抗原結合部位を形成する。単鎖Fvダイマーを使用する他の二重特異性抗体断片製造方策もまた報告されている。Gruber等JImmunol1525368を参照されたい。二価より多い抗体も考えられる。例えば、三重特異性抗体を調製することができる。Tutt等JImmunol14760。6.多価抗体多価抗体は、抗体が結合する抗原を発現する細胞により、二価抗体よりも早くインターナリゼーションされうる。本発明の抗体は、3又はそれ以上の結合部位を有する多価抗体であり得、抗体のポリペプチド鎖をコードする核酸の組換え発現により容易に生成することができる。多価抗体は二量化ドメインと3又はそれ以上の抗原結合部位を有する。ある実施態様では、二量化ドメインはFc領域又はヒンジ領域を有する。このシナリオにおいて、抗体はFc領域と、Fc領域のアミノ末端に3又はそれ以上の抗原結合部位を有しているであろう。ある実施態様では、多価抗体は3からおよそ8の抗原結合部位を有する。このような一実施態様では、多価抗体は4つの抗原結合部位を含む。多価抗体は少なくとも1つのポリペプチド鎖を有し、ポリペプチド鎖は2又はそれ以上の可変ドメインを有する。例えば、ポリペプチド鎖はVD1nVD2nFcを有し、ここでVD1は第1の可変ドメインであり、VD2は第2の可変ドメインであり、FcはFc領域のポリペプチド鎖の一つであり、X1及びX2はアミノ酸又はポリペプチドを表し、nは0又は1である。例えば、ポリペプチド鎖は:VHCH1柔軟なリンカーVHCH1Fc領域鎖;又はVHCH1VHCH1Fc領域鎖を有し得る。ここで多価抗体は、少なくとも2つの軽鎖可変ドメインポリペプチドをさらに有してもよい。ここで多価抗体は、例えば約2~約8の軽鎖可変ドメインポリペプチドを有する。ここで考察される軽鎖可変ドメインポリペプチドは軽鎖可変ドメインを有し、場合によってはCLドメインを更に有する。7.単一のドメイン抗体いくつかの実施態様では、本発明の抗体は単一のドメイン抗体である。単一のドメイン抗体は、抗体のすべてないしは一部の重鎖可変ドメイン又はすべてないしは一部の軽鎖可変ドメインを含んでなる単一ポリペプチドである。ある実施態様では、単一のドメイン抗体は、ヒトの単一のドメイン抗体である。一実施態様では、単一のドメイン抗体は、抗体のすべてないしは一部の重鎖可変ドメインからなる。8.抗体変異体いくつかの実施態様では、ここに開示する抗体のアミノ酸配列の修飾を考える。例えば、抗体の結合親和性及び/又は生物学的特性を向上することができれば望ましい。抗体のアミノ酸配列変異体は、抗体をコードする核酸に適切な変化を導入して、又はペプチド合成により調製される。そのような修飾は、抗体のアミノ酸配列内の残基の、例えば、欠失型、又は挿入或いは置換を含む。最終構成物が所望する特徴を有していれば、欠失、挿入又は置換をどのように組合せてもよい。アミノ酸変化は、配列ができるときに被検体の抗体アミノ酸配列に導入されうる。突然変異誘発に好ましい位置である抗体の特定の残基又は領域の同定に有益な方法は、Cunningham及びWellsによりScience24410811085に開示されているように、アラニンスキャニング突然変異誘発と呼ばれる。ここで、標的となる残基又は残基の組が同定され、中性の、又は負に荷電したアミノ酸で置換され、アミノ酸の抗原との相互作用に影響を与える。次いで、置換に対する機能的感受性を示しているそれらアミノ酸位置を、置換の部位において、又は置換の部位のために、さらなる、又は他の変異体を導入することにより精製する。このように、アミノ酸配列変異体を導入する部位は予め決定されるが、突然変異自体の性質は予め決定する必要は無い。例えば、任意の部位における突然変異の機能を分析するために、標的コドン又は領域においてalaスキャンニング又はランダム突然変異誘発を実行し、発現した免疫グロブリンを所望の活性についてスクリーニングする。アミノ酸配列挿入には、1残基から100以上の残基を有するポリペプチドまでの長さに亘るアミノ-末端融合及び/又はカルボキシ-末端融合、ならびに、単一又は多重アミノ酸残基の配列内挿入を含む。端末挿入の例には、N-末端メチオニル残基を持つ抗体が含まれる。抗体分子の他の挿入変異体には、抗体の血清半減期を増加させるポリペプチド又は酵素の抗体のN-末端又はC-末端への融合が含まれる。ある実施態様では、本発明の抗体は、抗体がグリコシル化される程度を増加又は低減するために変更する。ポリペプチドのグリコシル化は、典型的には、N結合又はO結合の何れかである。N結合とは、アスパラギン残基の側鎖への炭水化物部分の結合を意味する。アスパラギンXセリン及びアスパラギンXスレオニンのトリペプチド配列は、アスパラギン側鎖への糖鎖部分の酵素的結合のための認識配列である。従って、ポリペプチド中にこれらのトリペプチド配列の何れかが存在すると、潜在的なグリコシル化部位が作出される。O結合グリコシル化は、ヒドロキシアミノ酸、最も一般的にはセリン又はスレオニンに、糖類Nアセチルガラクトサミン、ガラクトース、又はキシロースの一つが結合することを意味するが、5ヒドロキシプロリン又は5ヒドロキシリジンもまた用いられる。抗体へのグリコシル化部位の付加又は欠失は、アミノ酸配列を、一又は複数の上述したトリペプチド配列が作られるか又は除かれるように変化させることによって簡便に達成される。該変化は、元の抗体の配列への一又は複数のセリン又はスレオニン残基の付加、又はこれによる置換によってもなされる。抗体がFc領域を含有する場合、それに接着する炭水化物を変更してもよい。例えば、抗体のFc領域に接着するフコースを欠損する成熟炭水化物構造の抗体は、米国公開特許第2003/0157108号に記載される。米国公開特許第2004/0093621号も参照のこと。抗体のFc領域に接着した炭水化物内のNアセチルグルコサミンを二分する抗体は、国際公報第03/011878号、JeanMairet等、及び米国特許第6602684号、Umana等に参照されている。抗体のFc領域に接着するオリゴサッカライド内の少なくとも一のガラクトース残基を有する抗体は、国際公報第97/30087号、Patel等に報告される。また、抗体のFc領域に接着する変更された炭水化物を有する抗体については、国際公報第98/58964号及び国際公報第99/22764号も参照のこと。また、修飾されたグリコシル化を有する抗原結合分子については、米国公開特許第2005/0123546号を参照。ある実施態様では、グリコシル化変異体はFc領域を含有し、Fc領域に接着される炭水化物構造はフコースを欠いている。このような変異形は改善されたADCC機能を有する。場合によって、Fc領域は、更にADCCを改善する一つ以上のアミノ酸置換、例えばFc領域の位置298、333及び/又は334の置換を更に含む。脱フコース化又はフコース欠失抗体に関する文献の例には以下のものを含む:米国公開番号2003/0157108;国際公報2000/61739;国際公報2001/29246;米国公開番号2003/0115614;米国公開番号2002/0164328;米国公開番号2004/0093621;米国公開番号2004/0132140;米国公開番号2004/0110704;米国公開番号2004/0110282;米国公開番号2004/0109865;国際公報2003/085119;国際公報2003/084570;国際公報2005/035586;国際公報2005/035778;;国際公報2005/053742;Okazaki等JMolBiol33612391249;及びYamaneOhnuki等BiotechBioeng87614。脱フコース化抗体を産生する細胞株の例として、タンパク質フコース化欠失Lec13CHO細胞;米国公開番号2003/0157108PrestaL;及び国際公報2004/056312Adams等特に実施例11、及びノックアウト細胞株、例としてα16フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、FUT8ノックアウトCHO細胞などがある。一実施態様では、抗体が変更されてその血清半減期が改善される。抗体の血清半減期を増やすために、例えば米国特許第5739277号に記載のように、サルベージレセプター結合エピトープを抗体に組み込んでもよい。本明細書中で用いるサルベージレセプター結合エピトープなる用語は、IgG分子のインビボ血清半減期を増やす役割を担うIgG分子のFc領域のエピトープを指す。他の型の変異体はアミノ酸置換変異体である。これらの変異体は、抗体分子において少なくとも一つのアミノ酸残基に異なる残基が挿入されている。置換突然変異について関心ある部位は高度可変領域を含むが、FR交互変化も考慮される。保存的置換は、好ましい置換と題して表1に示す。これらの置換が生物学的活性の望ましい変化をもたらす場合、表1に例示的置換と名前を付けた又はアミノ酸の分類を参照して以下に更に記載するような、より実質的な変化を導入して、生成物をスクリーニングしてよい。抗体の生物学的性質における実質的な修飾は、置換領域のポリペプチド骨格の構造、例えばシート又は螺旋配置、標的部位の分子の電荷又は疎水性、又は側鎖の嵩を維持するそれらの効果において実質的に異なる置換を選択することにより達成される。アミノ酸は、その側鎖の特性の類似性に従ってグループ化することができる:無極性:AlaValLeuIleProPheTrpMet無電荷極性:GlySerThrCysTyrAsnGln酸性:AspGlu塩基性:LysArgHis別法では、天然に生じる残基は共通の側鎖特性に基づいて群に分けてもよい:疎水性:ノルロイシン、met、ala、val、leu、ile;中性の親水性:cys、ser、thr、asn、gln;酸性:asp、glu;塩基性:his、lys、arg;鎖配向に影響する残基:gly、pro;及び芳香族:trp、tyr、phe。非保存的置換は、これらの分類の一つのメンバーを他の分類に交換することを必要とするであろう。このような置換された残基も、保存的置換部位か、残存する部位に、導入することができる。ある型の置換変異体は、親抗体の一又は複数の高頻度可変領域残基の置換を含む。一般的に、さらなる発展のために選択され、得られた変異体は、それらが作製された親抗体と比較して変更した生物学的特性を有している。そのような置換変異体を作製する簡便な方法は、ファージディスプレイを使用する親和性突然変異を含む。簡潔に言えば、幾つかの高頻度可変領域部位を突然変異させて各部位における全ての可能なアミノ酸置換を生成させる。このように生成された多価抗体は、繊維状ファージ粒子から、各粒子内に充填されたファージコートタンパク質の少なくとも一部への融合物としてディスプレイされる。ファージディスプレイ変異体は、ついで、それらの生物学的活性についてスクリーニングされる。修飾のための候補となる高頻度可変領域部位を同定するために、スキャニング突然変異誘発を実施し、抗原結合に有意に寄与する高頻度可変領域残基を同定することができる。別法として、又はそれに加えて、抗原抗体複合体の結晶構造を分析して抗体と抗原の接点を特定するのが有利である場合もある。このような接触残基及び隣接残基は、ここに述べた技術を含む当分野で公知の技術に従う置換の候補である。そのような変異体が生成されると、変異体のパネルにここに記載する技術を含む当分野で公知の技術を用いてスクリーニングを施し、一又は複数の関連アッセイにおいて優れた特性を持つ抗体を更なる開発のために選択する。抗体のアミノ酸配列変異体をコードする核酸分子は、この分野で知られた種々の方法によって調製される。これらの方法は、限定するものではないが、天然源からの単離又は初期に調製された抗体の変異体又は非変異体のオリゴヌクレオチド媒介突然変異誘発、PCR突然変異誘発、及びカセット突然変異誘発による調製を含む。本発明の抗体のFc領域内に一以上のアミノ酸修飾を導入してFc領域変異型を生成することが望ましい。Fc領域変異体は、ヒンジシステイン修飾を含む、一以上のアミノ酸位置でのアミノ酸修飾を有するヒトFc領域配列を含みうる。当分野での記載や教示に従って、ある実施態様では、本発明の抗体が野生型の対応抗体と比較して例えばFc領域内に一以上の変異を有することを考慮する。にもかかわらず、この抗体はその野生型対応物と比較して治療的有用性を示す実質的に同じ特徴を維持している。例えば、国際公開第99/51642号などに記載のようにC1q結合及び/又は補体依存性細胞障害を変更する結果となるFc領域内に特定の変異を生じさせることが考えられる。また、Fc領域変異型の他の例に関するDuncanWinterNature32273840;米国特許第5648260号;米国特許第5624821号;及び国際公開公報94/29351を参照。国際公開公報00/42072及び国際公開公報2004/056312は、FcRへの結合が改善したか、減退した抗体変異体を開示している。これらの特許文献の内容は出典明記によって、本明細書に特別に組み込まれる。また、Shields等JBiolChem965916604を参照のこと。半減期が増加して、胎児への母性IgGの移送を担う及びKim等JImmunol24249新生児Fcレセプターへの結合が改善している抗体は、米国特許公開2005/0014934A1に開示されている。これらの抗体は、FcRnへのFc領域の結合を向上させる一又は複数の置換を有するFc領域を含んでなる。Fc領域アミノ酸配列が変更されてC1q結合能力が増加したか減少したポリペプチド変異体は、米国特許第6194551号B1、国際公開公報99/51642に開示される。これらの特許文献の内容は出典明記によって、本明細書に特別に組み込まれる。また、Idusogie等JImmunol16441784184を参照のこと。一態様では、本発明は、Fc領域を含むFcポリペプチドの境界面に修飾を含む抗体を提供する。この修飾はヘテロ二量体化を容易にする及び/又は促進する。これらの修飾は第一Fcポリペプチドに隆起、そして第二Fcポリペプチドに腔の導入を含み、この隆起は第1及び第2のFcポリペプチドの複合体形成を促進するように腔に配置することができる。これらの修飾を有する抗体の生成方法は、例えば米国特許第5731168号に記載のように、当分野で公知である。9.抗体誘導体本発明の抗体は当該分野において知られ直ぐに利用できる更なる非タンパク質性部分を含むように更に修飾することができる。好ましくは、抗体の誘導体化に適した部分は水溶性ポリマーである。水溶性ポリマーの非限定的な例には、限定されるものではないが、ポリエチレングリコール、エチレングリコール/プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ13ジオキソラン、ポリ136トリオキサン、エチレン/無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸、及びデキストラン又はポリポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー、プロリプロピレンオキシド/エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチレン化ポリオール、ポリビニルアルコール、及びそれらの混合物が含まれる。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは水中におけるその安定性のために製造の際に有利であろう。ポリマーは任意の分子量であってよく、分枝状でも非分枝状でもよい。抗体に結合するポリマーの数は変化してもよく、一を超えるポリマーが結合する場合、それらは同じでも異なった分子でもよい。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数及び/又はタイプは、限定されるものではないが、その抗体誘導体が定まった条件下での治療に使用されるかどうか、改善される抗体の特定の性質又は機能を含む考慮事項に基づいて決定することができる。他の実施態様では、放射線に曝すことによって選択的に熱すことができる非タンパク質性部分と抗体のコンジュゲートが提供される。一実施態様では、非タンパク質性部分は炭素ナノチューブである。放射線はいずれの波長のものでもよく、限定するものではないが、通常の細胞に害を及ぼさないが、抗体非タンパク質性部分に近位の細胞が死滅する温度にまで非タンパク質性部分を加熱する波長が含まれる。抗体の作製方法1.ハイブリドーマベースの方法本発明の抗STEAP-1モノクローナル抗体は、Kohler等Nature256495により最初に記載されたハイブリドーマ法を用いて作製でき、又は組換えDNA法によって作製することができる。ハイブリドーマ法においては、マウス又はその他の適当な宿主動物、例えばハムスターを免疫化し、免疫化に用いられるタンパク質と特異的に結合する抗体を生産するか又は生産することのできるリンパ球を誘導する。一般的に、STEAP-1への抗体は、STEAP-1とアジュバントを複数回皮下又は腹腔内に注射することにより動物内に生じる。STEAP-1は当分野で公知の方法を用いて調製されうる。その方法のいくつかは本明細書中でさらに記載される。例えば、STEAP-1は組み換えて産生されてもよい。一実施態様では、動物を、免疫グロブリン重鎖のFc部位に融合したSTEAP-1の細胞外ドメインを含有するSTEAP-1の誘導体で免疫化する。一実施態様では、動物を、STEAP-1IgG1融合タンパク質で免疫化する。一実施態様では、動物は、一リン酸化リピドA/トレハロースジクリノミコレートにより溶液中のSTEAP-1の免疫原性誘導体にて免疫化され、該溶液は複数の部位の皮下に注射される。2週後に、動物を追加免役する。7~14日後、動物から採血して、血清を抗STEAP-1力価について検定する。力価がプラトーになるまで動物を追加免役する。別法として、リンパ球をインビトロで免疫することもできる。次に、リンパ球を、ポリエチレングリコールのような適当な融剤を用いて骨髄腫細胞と融合させ、ハイブリドーマ細胞を形成する。このようにして調製されたハイブリドーマ細胞を、適当な培養培地、例えば融合していない親の骨髄腫細胞の増殖又は生存を阻害する一又は複数の物質を含む培地に播き、増殖させる。例えば、親の骨髄腫細胞が酵素ヒポキサンチングアニジンホスホリボシルトランスフェラーゼを欠失するならば、ハイブリドーマのための培地は、典型的には、HGPRT欠失細胞の増殖を妨げる物質であるヒポキサンチン、アミノプテリン及びチミジンを含有するであろう。ある実施態様では、骨髄腫細胞は、効率的に融合し、選択された抗体産生細胞による抗体の安定な高レベルの生産を支援し、HAT培地のような培地に対して感受性である細胞である。例示的な骨髄腫株化細胞には、限定するものではないが、マウス骨髄腫系、例えば、ソークインスティテュートセルディストリビューションセンター、SanDiegoCaliforniaUSAから入手し得るMOPC21及びMPC11マウス腫瘍、及びアメリカ培養細胞系統保存機関、RockvilleMarylandUSAから入手し得るSP2又はX63Ag8653細胞から誘導されたものが含まれる。ヒト骨髄腫及びマウス-ヒトヘテロ骨髄腫株化細胞もまたヒトモノクローナル抗体の産生のために開示されている;Brodeur等MonoclonalAntibodyProductionTechniquesandApplications5163頁。ハイブリドーマ細胞が生育している培地を、STEAP-1に結合するモノクローナル抗体の産生についてアッセイする。好ましくは、ハイブリドーマ細胞により産生されるモノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈降又はインビトロ結合検定、例えばラジオイムノアッセイ又は酵素結合免疫吸着検定によって測定する。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えばMunsonほかAnalBiochem107220のスキャッチャード分析法によって測定することができる。所望の特異性、親和性、及び/又は活性の抗体を産生するハイブリドーマ細胞が確定された後、該クローンを限界希釈法によりサブクローニングし、標準的な方法により増殖させることができる。この目的に対して好適な培地には、例えば、DMEM又はRPMI1640培地が包含される。加えて、該ハイブリドーマ細胞は、動物において腹水腫瘍としてインビボで増殖させることができる。サブクローンにより分泌されたモノクローナル抗体は、例えばプロテインAHAROSE、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、又はアフィニティークロマトグラフィーのような常套的な免疫グロブリン精製法により、培地、腹水、又は血清から好適に分離される。2.ある一つのライブラリスクリーニング法本発明の抗STEAP-1抗体は、所望の活性を有する抗体についてスクリーニングするためにコンビナトリアルライブラリを用いて作製することができる。例えば、ファージディスプレイライブラリを生成して、所望の結合特性を有する抗体についてこのライブラリをスクリーニングするためには当分野で様々な方法が公知である。このような方法は、一般にMethodsinMolecularBiology178137のHoogenboom等に、ある実施態様では、Lee等JMolBiol34010731093に記載される。原則として、合成抗体クローンを、ファージコートタンパク質と融合した抗体可変領域の種々の断片を表示するファージを有するファージライブラリをスクリーニングすることによって選択される。このようなファージライブラリは、所望される抗原に対するアフィニティークロマトグラフィーによって選別される。所望される抗原と結合することができるFv断片を発現するクローンは抗原へ吸収され、それによって、ライブラリの非結合クローンから分離される。次いで、この結合クローンは、抗原から溶出させることが可能であり、抗原吸収/溶出の付加的サイクルによってさらに濃縮することができる。本発明の任意の抗STEAP-1抗体は、興味の対象であるファージクローンを選択するために適切な抗原スクリーニング手法を設計し、続いて、興味の対象であるファージクローンからのFv配列、及びKabat等SequencesofProteinsofImmunologicalInterestFifthEditionNIHPublication913242BethesdaMDvols13に記載の適切な定常領域配列を用いての全長抗STEAP-1抗体クローンの構築によって得ることができる。ある実施態様では、抗体の抗原結合ドメインは、約110アミノ酸の2つの可変領域である軽及び重鎖で形成され、その双方には、3つの高頻度可変ループ又は相補鎖決定領域が存在する。可変ドメインは、Winter等,AnnRevImmunol12433455に記載のように、VH及びVLが短くて柔軟なペプチドを介して共有結合している一本鎖Fv断片として、又は定常ドメインと融合して非共有的に相互作用しているFab断片のいずれかとしてファージ上に機能的に表示することができる。ここで用いられているように、scFvコード化ファージクローン、及びFabコード化ファージクローンは、総称してFvファージクローン又はFvクローンと呼ぶ。VH及びVL遺伝子のレパートリーを、ポリメラーゼ連鎖反応によって分離してクローンし、ファージライブラリにおいてランダムに組み換えられることが可能であり、それは、Winter等,AnnRevImmunol12433455に記載のように抗原結合クローンについて探索することが可能である。免疫化したソースからのライブラリは、ハイブリドーマを構成する必要がなく、免疫原に対する高親和性抗体を提供する。あるいは、天然レパートリーをクローニングして、Griffiths等,EMBOJ12725734に記載のようにどんな免疫化もせずに、幅広い非自己及びまた自己抗原に対するヒト抗体の単一のソースを提供することが可能である。最終的には、天然ライブラリは、また、Hoogenboom及びWinterJMolBiol227381388に記載のように、幹細胞からの再配列されていないV遺伝子セグメントをクローニングし、及びランダム配列を有するPCRプライマーを利用して高度可変CDR3領域をコードし、インビトロでの再配列を完成させることによって合成的に作製することができる。ある実施態様では、繊維状ファージは、マイナーコートタンパク質pIIIへの融合によって、抗体断片を表示するのに用いられる。この抗体断片は、一本鎖Fv断片として表示することが可能であり、そのVH及びVLドメインは、例えば、Marks等,JMolBiol222581597に記載のような、又は、例えば、Hoogenboom等,NuclAcidsRes1941334137に記載のような、1つの鎖はpIIIと融合し、もう一方の鎖は、幾つかの野生型コートタンパク質を置換することによってファージ表面上に表示されるようになるFabコートタンパク質構造のアセンブリがある細菌宿主細胞のペリプラズムへ分泌されるFab断片のように、柔軟なポリペプチドスペーサーによって同じポリペプチド鎖上に連結されている。一般的に、抗体遺伝子断片をコードする核酸は、ヒト又は動物から収集した免疫細胞から得られる。抗STEAP-1クローンに有利になるように偏ったライブラリが望ましい場合には、検体をSTEAP-1で免疫化して抗体応答を生成させ、そして、脾臓細胞及び/又は他の末梢血リンパ球である循環B細胞を、ライブラリ構築のために回収する。好ましい実施態様では、STEAP-1免疫化により、STEAP-1に対するヒト抗体を産生するB細胞が生じるように、抗STEAP-1クローンに好ましいヒト抗体遺伝子断片ライブラリは、機能的ヒト免疫グロブリン遺伝子アレイを有するトランスジェニックマウスにおける抗STEAP-1抗体応答を生成することによって得られる。ヒト抗体産生トランスジェニックマウスの作製は以下に記載する。抗STEAP-1反応細胞集団のさらなる濃縮は、適切なスクリーニング手法を利用してSTEAP-1特異的膜結合抗体を発現するB細胞を単離すること、例えば、STEAP-1アフィニティクロマトグラフィーによる細胞分離、又は蛍光色素標識STEAP-1への細胞の吸着とその後の蛍光標示式細胞分取器によって得ることができる。あるいは、非免疫化供与体からの脾臓細胞及び/又はB細胞又は他のPBLの利用によって可能性のある抗体レパートリーのより良い表示が提供され、また、STEAP-1が免疫原ではない任意の動物種を利用した抗体ライブラリの構築が可能となる。インビトロの抗体遺伝子コンストラクトを取り込むライブラリに関しては、幹細胞を被検体から収集して非再配列の抗体遺伝子セグメントをコードする核酸を提供する。対象の免疫細胞は、種々の動物種、例えばヒト、マウス、ラット、ウサギ目、オオカミ、犬科、ネコ科、ブタ、ウシ、ウマ、及びトリ種等から得ることができる。抗体可変遺伝子セグメントをコードする核酸を、興味の対象の細胞から回収して増幅した。再配列したVH及びVL遺伝子ライブラリの場合では、その所望するDNAは、Orlandi等,ProcNatlAcadSci8638333837に記載されているように、リンパ球からのゲノムDNA又はmRNAを単離し、再配列したVH及びVL遺伝子の5及び3末端と一致するプライマーによるポリメラーゼ連鎖反応を行うことによって得ることが可能であり、よって発現のための多様なV遺伝子レパートリーを作製することができる。このV遺伝子は、Orlandi等及びWard等,Nature341544546に記載のように、成熟Vドメインをコードするエクソンの5末端のバックプライマーとJセグメントに基づいた前方向プライマーにより、cDNA及びゲノムDNAから増幅することが可能である。しかしながら、cDNAからの増幅のためには、バックプライマーは、また、Jones等,Biotechnol98889に記載のようにリーダーエクソンに、前方向プライマーは、Sastry等,ProcNatlAcadSci8657285732に記載のように定常領域内に基づくことが可能である。相補性を最大にするために、Orlandi等又はSastry等に記載のように、縮重をプライマーへ取り込むことが可能である。ある実施態様では、例えば、Marks等,JMolBiol222581597の方法に記載のように、又はOrum等,NucleicAcidsRes2144914498の方法に記載のように、免疫細胞の核酸試料に存在するすべての入手可能なVH及びVL配列を増幅するために、各V遺伝子ファミリーを標的にしたPCRプライマーを用いて、そのライブラリの多様性を最大にする。発現ベクターへの増幅DNAのクローニングに関しては、希な制限部位を、Orlandi等に記載のように、又はClackson等,Nature352624628に記載のようにタグ付加したプライマーによるさらなるPCR増幅によって、PCRプライマー内の1つの末端へタグとして導入することができる。合成的に再配列したV遺伝子のレパートリーは、V遺伝子セグメントからインビボで誘導することができる。殆どのヒトVH遺伝子セグメントはクローニング及び配列決定に報告されている、そしてマッピングがされている;これらクローニングされたセグメントは、Hoogenboom及びWinterJMolBiol227381388に記載のように、多様な配列と長さのH3ループをコードするPCRプライマーによる多様なVH遺伝子レパートリーを作製するのに用いられる。VHレパートリーは、また、Barbas等ProcNatlAcadSciUSA8944574461に記載されているように、単一の長さの長いH3ループに焦点を合わせたすべての配列多様性をともなって作製することができる。ヒトVκ及びVλセグメントはクローニング及び配列決定がなされ、合成軽鎖レパートリーを作製するのに利用することができる。VH及びVLフォールドの範囲及びL3及びH3の長さに基づく合成的V遺伝子レパートリーは、相当に構造的多様性を有する抗体をコードする。DNAをコードするV遺伝子の増幅に続いて、生殖系のV遺伝子セグメントは、Hoogenboom及びWinterJMolBiol227381388の方法に従ってインビトロで再配列することができる。抗体断片のレパートリーは、幾つかの方法でVH及びVL遺伝子レパートリーを共に組み合わせることによって構築することができる。各レパートリーを異なるベクターで作製し、そのベクターを、例えばHogrefe等Gene128119126に記載のようにインビトロで、又はコンビナトリアルインフェクション、例えばWaterhouse等NuclAcidsRes2122652266に記載のloxP系によってインビボで作製することが可能である。このインビボの組み換え手法では、大腸菌の形質転換効率によって強いられるライブラリの大きさの限界を克服するために、二本鎖種のFabフラグメントが利用される。ナイーブのVH及びVLレパートリーは、1つはファージミドへ、そして他はファージベクターへと個別にクローニングされる。この2つのライブラリは、その後、各細胞が異なる組み合わせを有し、そのライブラリの大きさが、存在する細胞の数によってのみ限定されるように、ファージミド含有細菌のファージ感染によって組み合わせられる。双方のベクターは、VH及びVL遺伝子が単一のレプリコンへ組み換えられ、ファージビリオンへ共にパッケージされるように、インビボの組み換えシグナルを有する。これら巨大なライブラリは、良好な親和性の多くの多様な抗体を提供する。別法として、このレパートリーは、例えばBarbas等ProcNatlAcadSciUSA8879787982に記載のように同じベクターへ連続してクローニング、又は、Clakson等Nature352624628に記載のようにPCR後に、クローニングすることでアセンブリすることができる。PCRアセンブリは、また、柔軟なペプチドスペーサーをコードしているDNAとVH及びVLDNAを連結させて、単鎖のFvレパートリーを形成することに利用することができる。さらに他の技術では、細胞内でのPCRアセンブリは、Embleton等NuclAcidsRes2038313837に記載のように、PCRによってリンパ球内のVH及びVL遺伝子を組み合わせて、その後、連結した遺伝子のレパートリーをクローニングするのに利用される。ナイーブのライブラリによって産生された抗体は中度の親和性である可能性があるが、Winterら上掲に記載のように第二番目のライブラリから構築して遊離することによって、親和性成熟をもインビトロで模倣することが可能である。例えば、Hawkins等JMolBiol226889896の方法、又はGram等ProcNatlAcadSciUSA8935763580の方法においてエラープローンポリメラーゼで報告されているを利用することによって、突然変異をインビトロでランダムに導入することができる。さらには、1つ又はそれより多いCDRをランダムに変異させることによって、例えば、選択した個々のFvクローンにおいて、対象のCDRまで及ぶランダム配列を有するプライマーによるPCRを利用して、そしてより高い親和性クローンをスクリーニングすることで親和性成熟をおこなうことが可能である。国際公開第9607754号は、免疫グロブリン軽鎖の相補性決定領域へ突然変異生成を誘導して軽鎖遺伝子のライブラリを作製する方法を記載している。その他の有効な手法は、Marks等Biotechnol10779783に記載のように、非免疫化供与体から得られた天然で発生するVドメイン変異体のレパートリーによるファージディスプレイによって選択されたVH又はVLドメインを組み換えること、及び数回のチェーンシャッフリングにおいてより高い親和性についてスクリーニングすることである。この技術は、109Mの範囲の親和性の抗体及び抗体断片の産生を可能にする。ライブラリのスクリーニングは当分野で公知の様々な技術によって達成されうる。例えば、STEAP-1は、吸収プレートのウェルをコーティングするために利用すること、吸収プレートへ付着させた宿主細胞上で発現させるか又はセルソーティングで利用すること、又はストレプトアビジンでコーティングしたビーズによる捕獲のためにビオチンとコンジュゲートすること、又はファージディスプレイライブラリをパニングするためのあらゆる他の方法において利用することが可能である。吸着剤との少なくともファージ粒子の一部分の結合に適した条件下で、ファージライブラリの試料を固定化STEAP-1と接触させる。通常は、pH、イオン強度、温度等を含む条件を選択して、生理学的条件を模倣する。固相と結合したファージを洗浄し、その後、例えばBarbas等ProcNatlAcadSciUSA8879787982に記載されているように酸で、又は例えばMarks等JMolBiol222581597に記載にされているようにアルカリで、又は例えばClackson等Nature352624628の抗原競合法に類似の手法であるSTEAP-1抗原競合によって溶出する。ファージは、1回目の選択で20~1000倍に濃縮することが可能である。さらには、この濃縮したファージを細菌培養液で生育させ、さらなる回の選択に供することが可能である。選択の効率は多くの要因に依存し、それには、洗浄の間の解離の動力学、そして単一のファージ上の複数の抗体断片が同時に抗原と関われるかどうかということが含まれる。一次解離定数を有する抗体は、短い洗浄、多価ファージディスプレイ及び固相の抗原の高いコーティング密度の利用によって保持することが可能である。高い密度は、多価相互作用を介してファージを安定化するだけでなく、解離したファージの再結合に有利に作用する。遅い解離動力学を有する抗体の選択は、Bass等Proteins8309314及び国際公開第92/09690号に記載されているような長い洗浄と単価ファージディスプレイの利用、そしてMarks等Biotechnol10779783に記載されているような抗原の低度のコーティング密度によって促進することが可能である。親和性に僅かな違いがあったとしても、STEAP-1に対する異なる親和性のファージ抗体の中で選択することは可能である。しかしながら、選択した抗体のランダム変異は、多くの変異を生じやすく、その殆どが抗原と結合し、僅かがより高い親和性である。STEAP-1を限定すると、希な高い親和性のファージが競合して除かれることが可能である。すべてのより高い親和性の変異を保持するために、ファージは、過度のビオチン化STEAP-1とインキュベートすることが可能であるが、STEAP-1に対する標的モル濃度親和定数よりも低いモル濃度のビオチン化STEAP-1とインキュベートできる。次いで、高親和性結合ファージをストレプトアビジンでコーティングした常磁性体ビーズによって捕獲することが可能である。そのような平衡捕獲は、結合の親和性に従い、親和性の低い過度のファージから、僅かに2倍高い親和性の変異体クローンの単離を可能にする感度で抗体を選択することを可能にする。固相と結合したファージを洗浄するのに用いる条件を操作して、解離定数を基礎として識別することも可能である。抗STEAP-1クローンは活性を元に選択されうる。ある実施態様では、本発明は、STEAP-1を天然に発現する生細胞に結合する抗STEAP-1抗体を提供する。一実施態様では、本発明は、STEAP-1リガンドとSTEAP-1との結合をブロックするが、STEAP-1リガンドと第二タンパク質との結合をブロックしない抗STEAP-1抗体を提供する。このような抗STEAP-1抗体に対応するFvクローンは、上記のようなファージライブラリから抗STEAP-1クローンを単離して、場合によって、好適な宿主細胞で個体集団を成長させることによって、ファージクローンの単離した母集団を増幅する、望ましいブロック活性及び非ブロック活性のそれぞれについてSTEAP-1と第二タンパク質を選択する、固定されたSTEAP-1に抗STEAP-1ファージクローンを吸着する、過剰量の第二タンパク質を用いて、第二タンパク質の結合決定基と共有するかオーバーラップするSTEAP-1結合決定基を認識する任意の望ましくないクローンを溶出する、そして、工程の後に吸着されたまま残ったクローンを溶出する、ことによって選別できる。場合によって、所望のブロック/非ブロック特性を有するクローンを、本明細書に記載の選別手順を一又は複数回繰り返すことによって、さらに濃縮できる。ハイブリドーマ由来のモノクローナル抗体をコードするDNA又は本発明のファージディスプレイFvクローンは、常法を用いて即座に分離されて、配列決定される。ひとたび分離されたならば、DNAを発現ベクター中に入れ、ついでこれを、この状況以外では抗体タンパク質を産生しない大腸菌細胞、サルCOS細胞、チャイニーズハムスター卵巣細胞、又は骨髄腫細胞のような宿主細胞中に形質移入し、組換え宿主細胞におけるモノクローナル抗体の合成を獲得することができる。抗体をコードするDNAの細菌での組み換え発現に関する概説論文には、Skerra等CurrOpinioninImmunol5256262及びPluckthunImmunolRevs130151188が含まれる。本発明のFvクローンをコードするDNAは、重鎖及び/又は軽鎖定常領域をコードする公知のDNA配列と組み合わせて、完全長ないし一部の重鎖及び/又は軽鎖をコードするクローンを形成できる。このために、何れかのアイソタイプの定常領域、例えばIgG、IgM、IgA、IgD及びIgE定常領域を用いることができることが理解されるであろう。このような定常領域は任意のヒト又は動物種から得ることができる。ある動物種の可変ドメインDNAから得て、次いでハイブリッドである完全長重鎖及び/又は軽鎖のコード配列を形成するために他の動物種の定常領域DNAに融合したFvクローンは、本明細書で用いられるキメラ及びハイブリッド抗体の定義に含まれる。ある実施態様では、ヒト可変DNAから得たFvクローンをヒト定常領域DNAに融合して、完全長ないし一部のヒト重鎖及び/又は軽鎖のコード配列を形成する。また、本発明のハイブリドーマ由来の抗STEAP-1抗体をコードするDNAは、例えば、ハイブリドーマクローン由来の相同的マウス配列の代わりにヒト重鎖及び軽鎖定常ドメインのコード化配列を置換することの方法によって修飾することができる。ハイブリドーマ又はFvクローン由来の抗体ないし抗体断片をコードするDNAは、免疫グロブリンコード化配列に非免疫グロブリンポリペプチドのコード化配列の全て又は一部を共有結合させることによってさらに修飾することができる。そのように、キメラ又はハイブリッド抗体は、本発明のFvクローン又はハイブリドーマクローン由来の抗体の結合特異性を有するように調製される。3.ベクター、宿主細胞及び組換え方法本発明の抗体の組み換え生成のために、コードする核酸を単離して、更なるクローニング又は発現のために複製ベクターに挿入する。抗体をコードするDNAは従来の手順で簡単に単離し、配列決定される。多くのベクターが利用可能である。用いる宿主細胞にある程度依存してベクターを選択する。一般的に、宿主細胞は原核生物又は真核生物由来の細胞である。IgG、IgM、IgA、IgD及びIgE定常領域を含め、任意のアイソタイプの定常領域がこの目的のために使われてもよく、このような定常領域はヒト又は動物種の何れかから得られうることは理解されるであろう。原核生物の宿主細胞を用いた抗体生成ベクターの構築本発明の抗体のポリペプチド成分をコードしているポリヌクレオチド配列は標準的な組換え技術を使用して得ることができる。所望のポリヌクレオチド配列はハイブリドーマ細胞のような抗体産生細胞から単離し配列決定することができる。あるいは、ポリヌクレオチドはヌクレオチド合成機又はPCR法を使用して合成することができる。ひとたび得られると、ポリペプチドをコードしている配列は原核生物宿主中で異種ポリヌクレオチドを複製し、発現することが可能な組換えベクター中に挿入される。当該分野において入手でき知られている多くのベクターを本発明の目的のために使用することができる。適切なベクターの選択は、主として、ベクターに挿入される核酸のサイズとベクターで形質転換される特定の宿主に依存する。各ベクターは、機能及び属する特定の宿主細胞への適合性に応じて、様々な成分を含む。一般的に、限定するものではないが、ベクター成分には複製起源、選択マーカー遺伝子、プロモータ、リボゾーム結合部位、シグナル配列、異種性核酸挿入及び転写終末配列が含まれる。一般には、レプリコン及び宿主細胞と適合性のある種に由来するコントロール配列を含んでいるプラスミドベクターが、宿主細胞と関連して使用される。そのベクターは、通常、複製開始点並びに形質転換細胞において表現型の選択を提供可能なマーキング配列を有する。例えば、一般的に大腸菌は、大腸菌種由来のプラスミドであるpBR322を用いて形質転換する。pBR322はアンピシリン及びテトラサイクリン耐性のコード遺伝子を含んでいるため、形質転換細胞を容易に同定することができる。pBR322、その誘導体又は他の微生物プラスミド又はバクテリオファージも外来性タンパク質を発現する微生物によって使用可能なプロモータを含むか、含むように変更される。特定の抗体の発現に使用されるpBR322誘導体の例はCarter等の米国特許第5648237号に詳細に記載されている。また、レプリコン及び宿主微生物と適合性のあるコントロール配列を含んでいるファージベクターを、これらの宿主との関連でトランスフォーミングベクターとして使用することができる。例えば、λGEMTM11のようなバクテリオファージを、大腸菌LE392のような感受性の宿主細胞を形質転換するために使用できる組換えベクターを作製する際に利用することができる。本発明の発現ベクターは各ポリペプチド成分をコードする2又はそれ以上のプロモータ-シストロン対を含みうる。プロモーターはその発現を調節するシストロンの上流に位置している非翻訳配列である。原核生物のプロモーターは典型的には誘導性と構成的との二つのクラスのものがある。誘導性プロモーターは、例えば栄養分の有無又は温度の変化のような、培養条件の変化に応答してその調節下でシストロンの転写レベルを増大させるように誘導するプロモーターである。様々な潜在的宿主細胞によって認識されるプロモータが非常にたくさん公知となっている。選択したプロモーターを、制限酵素消化によって供給源DNAからプロモータを除去し、本発明のベクター内に単離したプロモータを挿入することによって軽鎖又は重鎖をコードするシストロンDNAに作用可能に連結することができる。天然プロモーター配列と多くの異種プロモーターの双方を、標的遺伝子の増幅及び/又は発現を生じさせるために使用することができる。ある実施態様では、天然の標的ポリペプチドプロモーターと比較して、一般的に発現する標的遺伝子をより多く転写させ、効率をよくするので、異種プロモーターが有用である。原核生物宿主での使用に好適なプロモーターには、PhoAプロモーター、βガラクタマーゼ及びラクトースプロモーター系、トリプトファンプロモーター系及びハイブリッドプロモーター、例えばtac又はtrcプロモーターが含まれる。しかし、細菌中で機能性である他のプロモーターも好適である。そのヌクレオチド配列は発表されており、よって当業者は、任意の必要とされる制限部位を供給するリンカー又はアダプターを使用して標的軽鎖及び重鎖をコードするシストロンにそれらを作用可能に結合させることができるCell20269。本発明の一態様では、組換えベクター内の各シストロンは、膜を貫通して発現されるポリペプチドの転写を誘導する分泌シグナル配列成分を含む。一般に、シグナル配列はベクターの成分でありうるか、ベクター中に挿入される標的ポリペプチドDNAの一部でありうる。この発明の目的のために選択されるシグナル配列は宿主細胞によって認識されプロセシングされるものでなければならない。異種ポリペプチドに天然のシグナル配列を認識せずプロセシングする原核生物宿主細胞に対しては、シグナル配列は、例えばアルカリホスファターゼ、ペニシリナーゼ、Ippあるいは熱安定性エンテロトキシンIIリーダー、LamB、PhoE、PelB、OmpA及びMBPからなる群から選択される原核生物シグナル配列によって置換される。一実施態様では、発現系の双方のシストロンに使用されるシグナル配列はSTIIシグナル配列又はその変異体である。他の態様では、本発明による免疫グロブリンは宿主細胞の細胞質内で産生されるので、各シストロン内に分泌シグナル配列の存在は必要でない。この点において、免疫グロブリン軽鎖及び重鎖は発現され、折り畳まれ、集合して細胞質内に機能的免疫グロブリンを形成する。ジスルフィド結合形成に好適な細胞質条件を示し、発現したタンパク質サブユニットを好適に折り畳み、集合することができる宿主系が存在する。Proba及びPluckthunGene159203。また、本発明の抗体は、発現されるポリペプチド成分の量的な比を変更することにより、分泌されて適切に集合体化される本発明の抗体の産出を最大化することができる発現系を用いても生成することができる。このような変更は、少なくとも部分的にはポリペプチド成分の翻訳強度を同時に変更することにより行われる。翻訳の強度を変更するための一つの技術は、Simmons等の米国特許第5840523号に開示されている。この方法は、シストロン内の翻訳開始領域の変異体を利用する。任意のTIRについて、一連のアミノ酸又は核酸配列の変異体を一定の範囲の翻訳強度を有するように作製することができ、これにより特定の鎖に所望の発現レベルが得られるようにこの因子を調節する便利な手段が提供される。TIR変異体は、アミノ酸配列を変更しうるコドンの変化を起こす常套的な変異原性技術により生成することができる。特定の実施態様では、ヌクレオチド配列における変化はサイレントである。TIRにおける変更は、例えば、シャインダルガノ配列の数又はスペーシングの変更、並びにシグナル配列の変更を含みうる。変異シグナル配列を生成するための一つの方法は、シグナル配列のアミノ酸配列を変更しないコード配列の始めにコドンバンクを生成することである。これは、各コドンの3番目のヌクレオチド位置を変更することにより達成することができる。さらに、いくつかのアミノ酸、例えばロイシン、セリン、及びアルギニンは、1番目及び2番目の位置を複数有しており、これによって前記バンクの作製が複雑になり得る。変異原性の方法は、Yansura等METHODSACompaniontoMethodsinEnzymol4151158に詳細に記載されている。一実施態様では、含有される各シストロンについて一定の範囲のTIR強度を有する一組のベクターを生成する。この限定された組により、各鎖の発現レベル、及び種々のTIR強度の組み合わせにおける所望の抗体産物の産出を比較することができる。TIR強度は、Simmons等による米国特許第5840523号に詳細に記載されているレセプター遺伝子の発現レベルを定量化することにより決定することができる。翻訳強度の比較に基づいて、所望の個々のTIRを選択し、本発明の発現ベクターコンストラクトと組み合わせる。本発明の抗体を発現するのに適した原核生物宿主細胞には、古細菌及び真正細菌、例えばグラム陰性又はグラム陽性生物が含まれる。有用な細菌の例には、エシェリキア属、バシラス属、エンテロバクター属、シュードモナス種、ネズミチフス菌、霊菌、クレブシエラ属、プロテウス属、赤痢菌、根粒菌、ビトレオシラ又はパラコッカスが含まれる。一実施態様では、グラム陰性菌が使用される。一実施態様では、大腸菌細胞が本発明の宿主として使用される。大腸菌株の例として、遺伝子型W3110ΔfhuAptr3lacIqlacL8ΔompTΔdegP41kanRを有する33D3株を含むW3110株11901219頁;ATCC寄託番号27325及びその誘導体が含まれる。また、大腸菌294大腸菌B大腸菌λ1776及び大腸菌RV308など、他の株及びその誘導体も好適である。この例は限定的なものでなく例示的なものである。定義した遺伝子型を有する上記の何れかの細菌の誘導体の構築方法は当業者に公知であり、例としてBass等Proteins8309314に記載されている。一般的に、細菌細胞中でのレプリコンの複製能を考慮して適した細菌を選択することが必要である。pBR322、pBR325、pACYC177、又はpKN410のようなよく知られたプラスミドを使用してレプリコンを供給する場合、例えば、大腸菌、セラシア属、又はサルモネラ種を宿主として好適に用いることができる。典型的に、宿主細胞は最小量のタンパク質分解酵素を分泌しなければならず、望ましくは更なるプロテアーゼインヒビターを細胞培養中に導入することができる。抗体産生上述した発現ベクターで宿主細胞を形質転換又は形質移入し、プロモーターを誘導し、形質転換体を選択し、又は所望の配列をコードする遺伝子を増幅するのに適するように修飾された通常の栄養培地中で培養する。形質転換とは、DNAを原核生物宿主中に導入し、そのDNAを染色体外要素として、又は染色体組込みによって複製可能にすることを意味する。使用される宿主細胞に応じて、形質転換はそのような細胞に適した標準的技術を使用してなされる。塩化カルシウムを用いるカルシウム処理は実質的な細胞壁障害を含む細菌細胞のために一般に使用される。形質転換のための他の方法はポリエチレングリコール/DMSOを用いる。さらに別の方法はエレクトロポレーションである。本発明のポリペプチドを生産するために使用される原核生物細胞は当該分野で知られ、選択された宿主細胞の培養に適した培地中で増殖させられる。好適な培地の例には、ルリア培地プラス必須栄養分サプリメントが含まれる。ある実施態様では、培地は発現ベクターを含む原核生物細胞の増殖を選択的に可能にするために、発現ベクターの構成に基づいて選択される選択剤をまた含む。例えば、アンピシリンがアンピシリン耐性遺伝子を発現する細胞の増殖用培地に加えられる。炭素、窒素及び無機リン酸源の他に任意の必要なサプリメントを、単独で、又は複合窒素源のような他のサプリメント又は培地との混合物として導入される適切な濃度で含有させられうる。場合によっては、培養培地はグルタチオン、システイン、シスタミン、チオグリコレート、ジチオエリトリトール及びジチオトレイトールからなる群から選択される一又は複数の還元剤を含みうる。原核生物宿主細胞は適切な温度で培養される。ある実施態様では、例えば、大腸菌の増殖に対しては、温度は約20°Cから約39°C、約25°Cから約37°Cの範囲、又は約30°Cである。培地のpHは、主として宿主生物に応じて、約5から約9の範囲の任意のpHでありうる。ある実施態様では、大腸菌に対しては、pHは好ましくは約6.8から約7.4、又は約7.0である。本発明の発現ベクターに誘導性プロモータが用いられる場合、プロモータの活性に適する条件下でタンパク質発現を誘導する。本発明の一態様では、ポリペプチドの転写制御のためにPhoAプロモータが用いられる。したがって、形質転換した宿主細胞を誘導のためにリン酸限定培地で培養する。ある実施態様では、リン酸限定培地はC.R.A.P培地である263133147を参照。様々な他の誘導因子は用いるベクターコンストラクトに応じて当業者に知りうるように用いてよい。一実施態様では、発現された本発明のポリペプチドは宿主細胞の細胞膜周辺中に分泌され、そこから回収される。タンパク質の回収は、一般的には浸透圧ショック、超音波処理又は溶解のような手段によって典型的には微生物を破壊することを含む。ひとたび細胞が破壊されると、細胞片又は全細胞を遠心分離又は濾過によって除去することができる。タンパク質は、例えばアフィニティー樹脂クロマトグラフィーによって更に精製することができる。あるいは、タンパク質は培養培地に輸送しそこで分離することができる。細胞を培養物から除去することができ、培養上清は濾過され、生成したタンパク質の更なる精製のために濃縮される。発現されたポリペプチドを更に単離し、ポリアクリルアミドゲル電気泳動法及びウェスタンブロットアッセイ法のような一般的に知られている方法を使用して同定することができる。本発明の一態様では、抗体産生は発酵法によって多量に受け継がれる。組換えタンパク質の生産には様々な大規模流加発酵法を利用することができる。大規模発酵は少なくとも1000リットルの容量、ある実施態様では約1000から100000リットルの容量である。これらの発酵槽は、酸素と栄養分、特にグルコースを分散させる撹拌翼を使用する。小規模発酵とは一般におよそ100リットル以下の容積で、約1リットルから約100リットルの範囲でありうる発酵槽での発酵を意味する。発酵法では、タンパク質の発現の誘導は、典型的には、細胞が適切な条件下にて、初期定常期に細胞があるステージで、所望の密度、例えば約180-220のOD550まで増殖したところで開始される。当該分野で知られ上述されているように、用いられるベクターコンストラクトに応じて、様々なインデューサーを用いることができる。細胞を誘導前の短い時間の間、増殖させてもよい。細胞は通常約12-50時間の間、誘導されるが、更に長い又は短い誘導時間としてもよい。本発明のポリペプチドの生産収量と品質を改善するために、様々な発酵条件を変更することができる。例えば、分泌される抗体ポリペプチドの正しい組み立てとフォールディングを改善するために、例えばDsbタンパク質又はFkpAのようなシャペロンタンパク質を過剰発現する更なるベクターを用いて宿主原核細胞を同時形質転換させることができる。シャペロンタンパク質は細菌宿主細胞中で生産される異種性タンパク質の適切な折り畳みと溶解性を容易にすることが実証されている。Chen等JBioChem2741960119605;Georgiou等米国特許第6083715号;Georgiou等米国特許第6027888号;Bothmann及びPluckthunJBiolChem2751710017105;Ramm及びPluckthunJBiolChem2751710617113;Arie等MolMicrobiol39199210。発現された異種タンパク質のタンパク質分解を最小にするために、タンパク質分解酵素を欠くある種の宿主株を本発明に用いることができる。例えば、原核生物宿主細胞株を改変して、プロテアーゼIII、OmpT、DegP、Tsp、プロテアーゼI、プロテアーゼMi、プロテアーゼV、プロテアーゼVI及びその組合せのような既知の細菌プロテアーゼをコードしている遺伝子に遺伝子突然変異を生じさせることができる。幾つかの大腸菌プロテアーゼ欠損株が利用でき、例えば、上掲のJoly等;Georgiou等米国特許第5264365号;Georgiou等米国特許第5508192号;Hara等MicrobialDrugResistance26372に記載されている。ある実施態様では、タンパク質溶解性酵素を欠損した、一以上のシャペロンタンパク質を過剰発現するプラスミドで形質転換した大腸菌株を本発明の発現系の宿主細胞として用いる。抗体精製一実施態様では、本明細書中で産生した抗体タンパク質は、更なるアッセイや使用のために実質的に均一である調製物を得るためにさらに精製される。当分野で公知の標準的なタンパク質精製方法を用いることができる。以下の方法は好適な精製手順の例である:免疫親和性又はイオン交換カラムによる分画化、エタノール沈降法、逆相HPLC、シリカ又はDEAEなどの陽性交換樹脂によるクロマトグラフィ、クロマトフォーカシング、SDS-PAGE、硫酸アンモニウム沈降法及び、例えばSephadexG75を用いたゲル濾過法。一態様では、固形層に固定したプロテインAを本発明の抗体産物の免疫親和性精製法に用いる。プロテインAは抗体のFc領域に高い親和性で結合する黄色ブドウ球菌から単離した41kDの細胞壁タンパク質である。Lindmark等JImmunolMeth62113。プロテインAを固定した固形層は、ガラス又はシリカ表面、又は孔を調節したガラスカラム又はケイ酸カラムを含むカラムでありうる。ある方法では、カラムは非特異的な混入物の接着を防ぐ可能性があるグリセロールなどの試薬でコートされている。精製の初めの工程では、上記に記載のように細胞培養物からの調製物をプロテインA固定固形層に適応し、プロテインAに対象とする抗体を特異的に結合させる。ついで、固形層を洗浄して、固形層に非特異的に結合した混入物を除去してもよい。最後に、対象とする抗体を溶出により固形層から除去する。真核生物の宿主細胞を用いた抗体の生成一般的に、真核生物宿主細胞で用いるためのベクターは、以下の非限定的な成分の一以上を含む:シグナル配列、複製起点、一以上のマーカー遺伝子、エンハンサー因子、プロモータ及び転写終末因子。シグナル配列成分真核生物の宿主細胞に用いるベクターは、シグナル配列あるいは成熟タンパク質あるいは対象とするポリペプチドのN末端に特異的切断部位を有する他のポリペプチドを含んでいてもよい。選択された異種シグナル配列は宿主細胞によって認識され加工されるものであってもよい。哺乳動物細胞での発現においては、哺乳動物のシグナル配列並びにウイルス分泌リーダー、例えば単純ヘルペスgDシグナルが利用できる。このような前駆体領域のDNAは、多価抗体をコードするDNAに読み取り枠を一致させて結合される。複製開始点一般には、哺乳動物の発現ベクターには複製開始点成分は不要である。例えば、SV40開始点は典型的にはただ初期プロモーターを有しているために用いられる。選択遺伝子成分発現及びクローニングベクターは、選択可能マーカーとも称される選択遺伝子を含む。典型的な選択遺伝子は、アンピシリン、ネオマイシン、メトトレキセートあるいはテトラサイクリンのような抗生物質あるいは他の毒素に耐性を与え、必要があれば栄養要求性欠陥を補い、又は複合培地から得られない重要な栄養素を供給するタンパク質をコードする。選択方法の一例では、宿主細胞の成長を抑止する薬物が用いられる。異種性遺伝子で首尾よく形質転換した細胞は、薬物耐性を付与するタンパク質を生産し、よって選択工程を生存する。このような優性選択の例は、薬剤ネオマイシン、ミコフェノール酸及びハイグロマイシンを使用する。哺乳動物細胞に適切な選択可能なマーカーの他の例は、抗体核酸を捕捉することのできる細胞成分を同定することを可能にするもの、例えばDHFR、チミジンキナーゼ、メタロチオネインI及びII、好ましくは、霊長類メタロチオネイン遺伝子、アデノシンデアミナーゼ、オルニチンデカルボキシラーゼ等々である。例えば、DHFR選択遺伝子によって形質転換された細胞は、先ず、DHFRの競合的アンタゴニストであるメトトリキセートを含む培地において形質転換物の全てを培養することで同定される。野生型DHFRを用いた場合の好適な宿主細胞は、DHFR活性に欠陥のあるチャイニーズハムスター卵巣株化細胞である。あるいは、抗体をコードするDNA配列、野生型DHFRタンパク質、及びアミノグリコシド3ホスホトランスフェラーゼのような他の選択可能マーカーで形質転換あるいは同時形質転換した宿主細胞は、カナマイシン、ネオマイシンあるいはG418のようなアミノグリコシド抗生物質のような選択可能マーカーの選択剤を含む培地中での細胞増殖により選択することができる。米国特許第4965199号を参照のこと。プロモーター成分発現及びクローニングベクターは通常は宿主生物体によって認識され対象のポリペプチドをコードする核酸に作用可能に結合しているプロモーターを含む。真核生物のプロモーター配列が知られている。例えば、実質的に全ての真核生物の遺伝子が、転写開始部位からおよそ25ないし30塩基上流に見出されるATリッチ領域を有している。多数の遺伝子の転写開始位置から70ないし80塩基上流に見出される他の配列は、Nが任意のヌクレオチドであるCNCAAT領域である。大部分の真核生物遺伝子の3末端には、コード配列の3末端へのポリA尾部の付加に対するシグナルであるAATAAA配列がある。ある実施態様では、これらの配列のいずれか又は全ては真核生物の発現ベクターに適切に挿入される。哺乳動物の宿主細胞におけるベクターからの転写は、例えば、ポリオーマウイルス、伝染性上皮腫ウイルス、アデノウイルス、ウシ乳頭腫ウイルス、トリ肉腫ウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、B型肝炎ウイルス及びサルウイルス40のようなウイルスのゲノムから得られるプロモーター、異種性哺乳動物プロモーター、例えばアクチンプロモーター又は免疫グロブリンプロモーター、熱ショックプロモーターによって、このようなプロモーターが宿主細胞系に適合し得る限り、調節される。SV40ウイルスの初期及び後期プロモーターは、SV40ウイルスの複製起点を更に含むSV40制限断片として簡便に得られる。ヒトサイトメガロウイルスの最初期プロモーターは、HindIIIE制限断片として簡便に得られる。ベクターとしてウシ乳頭腫ウイルスを用いて哺乳動物宿主中でDNAを発現させる系が、米国特許第4419446号に開示されている。この系の変形例は米国特許第4601978号に開示されている。また、単純ヘルペスウイルスからのチミジンキナーゼプロモーターの制御下でのマウス細胞におけるヒトβインターフェロンcDNAの発現を記載している、Reyes等Nature297598601を参照。あるいは、ラウス肉腫ウイルス長末端反復をプロモーターとして使用することができる。エンハンサーエレメント成分より高等の真核生物によるこの発明の抗体をコードしているDNAの転写は、ベクター中にエンハンサー配列を挿入することによってしばしば増強される。哺乳動物遺伝子由来の多くのエンハンサー配列が現在知られている。しかしながら、典型的には、真核細胞ウイルス由来のエンハンサーが用いられるであろう。例としては、複製起点の後期側のSV40エンハンサー、サイトメガロウイルス初期プロモーターエンハンサー、複製起点の後期側のポリオーマエンハンサー及びアデノウイルスエンハンサーが含まれる。また、真核生物プロモーターの活性化のためのエンハンサー要素を記載している、YanivNature2971718も参照のこと。エンハンサーは、抗体ポリペプチドコード配列の5又は3位でベクター中にスプライシングされうるが、一般にはプロモーターから5位に位置している。転写終末成分また、真核生物宿主細胞に用いられる発現ベクターは、典型的には、転写の終結及びmRNAの安定化に必要な配列を含みうる。このような配列は、真核生物又はウイルスのDNA又はcDNAの5、時には3の非翻訳領域から一般に取得できる。これらの領域は、抗体をコードしているmRNAの非翻訳部分にポリアデニル化断片として転写されるヌクレオチドセグメントを含む。一つの有用な転写終結成分はウシ成長ホルモンポリアデニル化領域である。国際公開第94/11026号とそこに開示された発現ベクターを参照のこと。宿主細胞の選択及び形質転換ここに記載のベクター中のDNAをクローニングあるいは発現させるために適切な宿主細胞は、脊椎動物の宿主細胞を含む本明細書中に記載の高等真核生物細胞を含む。培養中での脊椎動物細胞の増殖は常套的な手順になっている。有用な哺乳動物宿主株化細胞の例は、SV40によって形質転換されたサル腎臓CV1株ヒト胚腎臓株;ハムスター乳児腎細胞;チャイニーズハムスター卵巣細胞/DHFR;マウスのセルトリ細胞サルの腎細胞アフリカミドリザルの腎細胞;ヒト子宮頸癌細胞;イヌ腎細胞;バッファローラット肝細胞;ヒト肺細胞;ヒト肝細胞;マウス乳房腫瘍細胞;TRI細胞;MRC5細胞FS4細胞;及びヒト肝癌株である。宿主細胞は、抗体生産のために上述の発現又はクローニングベクターで形質転換され、プロモーターを誘導し、形質転換体を選択し、又は所望の配列をコードしている遺伝子を増幅するために適切に修飾された常套的栄養培地で培養される。宿主細胞の培養本発明の抗体を産生するために用いられる宿主細胞は種々の培地において培養することができる。市販培地の例としては、ハムのF10、最小必須培地、RPMI1640及びダルベッコの改良イーグル培地シグマが宿主細胞の培養に好適である。また、Ham等MethEnz5844Barnes等AnalBiochem102255米国特許第4767704号;同4657866号;同4927762号;同4560655号;又は同5122469号;国際公開第90/03430号;国際公開第87/00195号;又は米国再発行特許第30985号に記載された何れの培地も宿主細胞に対する培地として使用できる。これらの培地には何れもホルモン及び/又は他の成長因子、塩類、バッファー、ヌクレオチド、抗生物質、微量元素及びグルコース又は等価なエネルギー源を必要に応じて補充することができる。任意の他の補充物質もまた当業者に知られている適当な濃度で含むことができる。培養条件、例えば温度、pH等々は、発現のために選ばれた宿主細胞について過去に用いられているものであり、当業者には明らかであろう。抗体の精製組換え技術を用いる場合、抗体は細胞内で生成され、又は培地内に直接分泌される。抗体が細胞内に生成された場合、第1の工程として、宿主細胞か溶解された断片の何れにしても、粒子状の細片が、例えば遠心分離又は限外濾過によって除去されうる。抗体が培地に分泌された場合は、そのような発現系からの上清を、一般的には先ず市販のタンパク質濃縮フィルター、例えばAmicon又はPelliconの限外濾過装置を用いて濃縮してもよい。PMSFなどのプロテアーゼ阻害剤を上記の任意の工程に含めて、タンパク質分解を阻害してもよく、また抗生物質を含めて外来性の汚染物の成長を防止してもよい。細胞から調製した抗体組成物は、例えば、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、及びアフィニティークロマトグラフィーを用いて精製でき、アフィニティクロマトグラフィーが従来の技術である。アフィニティーリガンドとしてのプロテインAの適合性は、抗体中に存在する免疫グロブリンFc領域の種及びアイソタイプに依存する。プロテインAは、ヒトγ1、γ2、又はγ4重鎖に基づく抗体の精製に用いることができる。プロテインGは、全てのマウスアイソタイプ及びヒトγ3に推奨されている。アフィニティーリガンドが結合されるマトリクスはアガロースであってもよく、他の材料も使用可能である。孔制御ガラスやポリベンゼン等の機械的に安定なマトリクスは、アガロースで達成できるものより早い流速及び短い処理時間を可能にする。抗体がCH3ドメインを含む場合、BakerbondABXTM樹脂が精製に有用である。イオン交換カラムでの分画、エタノール沈殿、逆相HPLC、シリカでのクロマトグラフィー、ヘパリンでのクロマトグラフィー、アニオン又はカチオン交換樹脂上でのHAROSETMクロマトグラフィー、クロマトフォーカシング、SDSPAGE、及び硫酸アンモニウム沈殿法も、回収される多価抗体に応じて利用可能である。予備的精製工程に続いて、目的の抗体及び混入物を含む混合液を、例えばpH約2.5-4.5、好ましくは低塩濃度の溶出緩衝液を用いた低pH疎水性作用クロマトグラフィによってさらに精製してもよい。一般に、研究、試験及び臨床において使用するための抗体を調製するために、上記の方法と一致しており、及び/又は当業者が対象の特定の抗体にふさわしいと思われる、様々な方法が当分野で確立されている。イムノコンジュゲートまた、本発明は、化学療法剤、薬剤、増殖阻害剤、毒素、又は放射性同位体などの一又は複数の細胞毒性剤にコンジュゲートした本発明の何れかの抗STEAP-1抗体を含む、イムノコンジュゲートを提供する。ある実施態様では、イムノコンジュゲートは抗STEAP-1抗体と化学療法剤又は他の毒素とを含む。イムノコンジュゲートの生成に有用な化学治療薬を本明細書中に記載した。酵素活性毒素及びその断片も用いられてもよく、本明細書中に記載する。ある実施態様では、イムノコンジュゲートは抗STEAP-1抗体と一又は複数の小分子毒素、限定するものではないが、例えばカリケアマイシン、メイタンシノイド、ドラスタチン、アウロスタチン、トリコセン及びCC1065、及び毒性活性を有するこれら薬剤の誘導体などの小分子薬剤とを含む。このようなイムノコンジュゲートの例は以降にさらに詳細に検討される。1.例示的なイムノコンジュゲート本発明のイムノコンジュゲートは、以下の式Iのものであり、任意のリンカーを介して、一又は複数の薬剤部分に抗STEAP-1抗体がコンジュゲートしているものである。Ab-P式Iしたがって、抗STEAP-1抗体は直接又はリンカーを介して薬剤にコンジュゲートしうる。式Iでは、pは抗体当たりの薬剤部分の平均数であり、例えば1抗体当たりおよそ1~およそ20の薬剤部分、ある実施態様では、抗体当たり1~およそ8の薬剤部分の範囲でありうる。例示的なリンカー例示的なリンカーと薬剤成分を本明細書中において開示する。リンカーは、一又は複数のリンカー成分を含みうる。例示的なリンカー成分には、6マレイミドカプロイル、マレイミドプロパノイル、バリンシトルリン、アラニンフェニルアラニン、pアミノベンジルオキシカルボニル、Nスクシンイミジル4ペンタノエート、Nスクシンイミジル4シクロヘキサン1カルボキシレート、Nスクシンイミジルアミノ安息香酸エステル、及び一又は複数の反復単位EO又はPEOとしてのエチレンオキシ-CH2CH2O-が含まれる。様々なリンカー成分が当分野で公知であり、そのいくつかを以下に記載する。リンカーは、細胞内での薬剤の放出を容易にする切断可能なリンカーでもよい。例えば、酸に弱いリンカー、プロテアーゼ感受性リンカー、感光性リンカー、ジメチルリンカー又はジスルフィド含有リンカーを使用してもよい。一実施態様では、ADCのリンカーLは以下の式を有する。このとき、-A-は、抗体のシステインチオールに共有結合にて付着したストレッチャーユニットであり、aは0又は1であり、各々の-W-は、独立したアミノ酸ユニットであり、wはそれぞれ、0から12の整数であり、-Y-は、薬剤成分に共有結合にて付着したスペーサーユニットであり、そして、yは0、1又は2である。ストレッチャーユニットストレッチャユニットは、存在する場合には、抗体ユニットをアミノ酸ユニットに連結することができる。この点に関しては、抗体は、ストレッチャーの求電性の官能基と結合することができる遊離システインチオール基を有する。天然ないし化学的操作のいずれにかによって抗体に存在することができる有用な官能基には、スルフヒドリル、アミノ、ヒドロキシル、カルボキシ、炭水化物のアノマー水酸基及びカルボキシルが含まれるがこれらに限定されるものではない。一態様では、抗体官能基はスルフヒドリル又はアミノである。スルフヒドリル基は、抗体の分子内ジスルフィド結合の還元によって生成されうる。あるいは、2イミノチオラン又は他のスルフヒドリル生成試薬を用いて、抗体のリジン成分のアミノ基を反応させることによって、スルフヒドリル基を生成することができる。一実施態様では、抗体は、ストレッチャーユニットの求電子性の官能基と結合することができる遊離したシステインチオール基を有する。式Iのコンジュゲートの例示的なストレッチャーユニットは、式II及び式IIIで示すものであり、このときAb、-W-、-Y-、-D、w及びyは前記に定義した通りであり、R17は、r、C3-C8カルボシクリル、O-r、アリーレン、r-アリーレン、-アリーレン-r-、r-、-r、C3-C8ヘテロシクリル、r-、--r-、-rCNRbr-、-r-、-r-CH2-、-rCNRbr-、-rCNRbr-CH2-、-rCNRbr-、-rCNRbr-CH2-、及び-rCNRbr-から選択される二価の基であり、RbはH、C1-C6アルキル、フェニル又はベンジルであり、そして、rはそれぞれ、1から10の範囲の整数である。アリーレンには、芳香族環システムから2つの水素原子を除去して得られる6~20の炭素原子の二価の芳香族炭化水素基が含まれる。代表的なアリーレン基には、ベンゼン、置換されたベンゼン、ナフタレン、アントラセン、ビフェニルなどから得られる基が含まれるが、これらに限定されるものではない。ヘテロシクリル基には、一又は複数の環原子がヘテロ原子、例えば窒素、酸素及び硫黄である環式システムが含まれる。複素環基は、1~20の炭素原子とN、O、P及びSから選択される1~3のヘテロ原子を含む。複素環は、3~7員環を有するモノシクロ又は7~10員環を有するビシクロ、例えばビシクロ45、55、56、又は66システムであってもよい。複素環は、PaquetteLeoAPrinciplesofModernHeterocyclicChemistry、特に第13467及び9章;TheChemistryofHeterocyclicCompoundsAseriesofMonographs、特に13141619及び28号;及び、JAmChemSoc825566に記載される。複素環の例には、例示のためであって限定するものではなく、ピリジル、ジヒドロピリジル、テトラヒドロピリジル、チアゾリル、テトラヒドロチオフェニル、硫黄酸化型テトラヒドロチオフェニル、ピリミジニル、フラニル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、テトラゾリル、ベンゾフラニル、チアナフタレニル、インドリル、インドレニル、キノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリル、ピペリジニル、4-ピペリドニル、ピロリジニル、2-ピロリドニル、ピロリニル、テトラヒドロフラニル、ビス-テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ビス-テトラヒドロピラニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、オクタヒドロイソキノリニル、アゾチニル、トリアジニル、6H-125-チアジアジニル、2H6H-152-ジチアジニル、チエニル、チアンスレニル、ピラニル、イソベンゾフラニル、クロメニル、キサンテニル、フェノキサチニル、2H-ピロリル、イソチアゾリル、イソキサゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、インドリジニル、イソインドリル、3H-インドリル、1H-インダゾリル、プリニル、4H-キノリジニル、フタラジニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、チノリニル、プテリジニル、4aH-カルバゾリル、カルバゾリル、β-カルボリニル、フェナンスリジニル、アクリジニル、ピリミジニル、フェナンスロリニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フラザニル、フェノキサジニル、イソクロマニル、クロマニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピペラジニル、インドリニル、イソインドリニル、キヌクリジニル、モルホリニル、オキサゾリジニル、ベンゾトリアゾリル、ベンズイソキサゾリル、オキシンドリル、ベンズオキサゾリニル、及びイサチノイルが含まれる。カルボシクリル基には、単環として3~7の炭素原子又は二環として7~12の炭素原子を有する飽和ないしは不飽和の環が含まれる。単環の炭素環は3~6の環状原子、より一般的には5又は6の環状原子を有する。二環式の炭素環は、例えばビシクロ45、55、56又は66システムとして配置した7~12の環状原子、又はビシクロ56又は66システムとして配置した9又は10の環状原子を有する。単環の炭素環の例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、1-シクロペント-1-エニル、1-シクロペント-2-エニル、1-シクロペント-3-エニル、シクロヘキシル、1-シクロヘキス-1-エニル、1-シクロヘキス-2-エニル、1-シクロヘキス-3-エニル、シクロヘプチル、及びシクロオクチルが含まれる。IIからVIなどの式IのADCのすべての例示的な実施態様から、明確に示していない場合であっても、改変したシステイン残基の数に応じて、1から4の薬剤成分が抗体に連結していることが理解される。図示する式IIのストレッチャーユニットは、R17が-5-である、マレイミド-カプロイルから得られる。図示する式IIのストレッチャーユニットは、R17が-2-である、マレイミド-プロパノイルから得られる。他の図示する式IIのストレッチャーユニットは、R17が-r-CH2-であり、rが2である。他の図示する式IIのストレッチャーユニットは、R17が-rCNRbr-CH2-であり、RbがHであり、各々のrが2である。図示する式IIIのストレッチャーユニットは、R17が-5-である。他の実施態様では、ストレッチャーユニットは、抗体の改変されたシステイン硫黄原子とストレッチャーユニットの硫黄原子との間のジスルフィド結合により、システイン改変抗抗体に連結する。この実施態様の代表的なストレッチャーユニットは、式IVで表され、R17、Ab-、-W-、-Y-、-D、w及びyは前記に定義する通りである。さらに他の実施態様では、ストレッチャーの反応基は、抗体の遊離したシステインチオールと結合することができるチオール反応性の官能基を含む。チオール反応性の官能基の例には、限定するものではないが、マレイミド、α-ハロアセチル、活性エステル、例として、スクシンイミドエステル、4-ニトロフェニルエステル、ペンタフルオロフェニルエステル、テトラフルオロフェニルエステル、無水物、酸クロリド、塩化スルホニル、イソシアネート及びイソチオシアネートが含まれる。この実施態様の代表的なストレッチャーユニットは、式Va及びVbに表され、このとき、-R17-、Ab-、-W-、-Y-、-D、w及びyは前記に定義した通りである。他の実施態様では、リンカーは、分岐した多機能性リンカー成分を介して一より多い薬剤成分を抗体へ共有結合的に付着させるために樹枝状型であるBioorganicMedicinalChemistryLetters1222132215;Sun等BioorganicMedicinalChemistry111761176;KingTetrahedronLetters4319871990。樹枝状のリンカーは抗体に対する薬剤のモル比を増やす、すなわち負荷することができ、これはADCの力価に関連がある。したがって、システイン改変抗体は1つの反応性のシステインチオール基のみを有する場合、多くの薬剤成分が樹枝状のリンカーを介して付着されうる。アミノ酸ユニットリンカーはアミノ酸残基を含んでいてもよい。アミノ酸ユニットは、存在する場合には、抗体を本発明のシステイン改変抗体-薬剤コンジュゲートの薬剤成分に連結する。-Ww-は、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、ペンタペプチド、ヘキサペプチド、ヘプタペプチド、オクタペプチド、ノナペプチド、デカペプチド、ウンデカペプチド又はドデカペプチドのユニットである。アミノ酸ユニットを含むアミノ酸残基には、天然に生じるもの、並びにシトルリンなどの微量アミノ酸及び天然に生じないアミノ酸類似体が含まれる。各々の-W-ユニットはそれぞれ、以下の角括弧で示す式を有し、wは、0から12の範囲の整数である。このとき、R19は、ヒドロゲン、メチル、イソプロピル、イソブチル、secブチル、ベンジル、pヒドロキシベンジル、-CH2OH、-CHCH3、-CH2CH2SCH3、-CH2CONH2、-CH2COOH、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2COOH、-3NHCNH2、-3NH2、-3NHCOCH3、-3NHCHO、-4NHCNH2、-4NH2、-4NHCOCH3、-4NHCHO、-3NHCONH2、-4NHCONH2、-CH2CH2CHCH2NH2、2pyridylmethyl-、3-ピリジルメチル-、4ピリジルメチル-、フェニル、シクロヘキシル、であり、R19が水素以外である場合に、R19が付着される炭素原子はキラルである。R19が付着される各々の炭素原子は、独立して又は配位又はラセミ混合物にある。したがって、アミノ酸ユニットは、鏡像異性的に純粋であるか、ラセミ性であるか、又はジアステレオ異性であってもよい。例示的な-Ww-アミノ酸ユニットには、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド又はペンタペプチドが含まれる。例示的なジペプチドには、バリン-シトルリン、アラニン-フェニルアラニンが含まれる。例示的なトリペプチドには、グリシン-バリン-シトルリン及びグリシン-グリシン-グリシンが含まれる。アミノ酸リンカーを含むアミノ酸残基には、天然に生じるもの、並びにシトルリンなどの微量アミノ酸及び天然に生じないアミノ酸類似体が含まれる。アミノ酸ユニットは、腫瘍関連プロテアーゼを含む一又は複数の酵素によって切断され、薬剤成分を遊離する。この薬剤成分は、一実施態様では、薬剤を提供するために、放出時にインビボでプロトン化される。アミノ酸リンカー構成成分は、特定の酵素、例えば腫瘍関連プロテアーゼ、カテプシンB、C及びD、又はプラスミンプロテアーゼによって酵素的に切断されるために設定し、その選択性が最適化されうる。スペーサーユニットスペーサユニットは、存在する場合には、アミノ酸ユニットが存在する場合に、アミノ酸ユニットを薬剤部分に連結する。あるいは、アミノ酸ユニットがない場合には、スペーサーユニットはストレッチャーユニットを薬剤成分に連結する。アミノ酸ユニット及びストレッチャーユニットがともにない場合には、スペーサーユニットも薬剤成分を抗体ユニットに連結する。スペーサーユニットは、自己犠牲型及び非自己犠牲型の2つの一般的なタイプである。非自己犠牲的なスペーサーユニットは、抗体-薬剤コンジュゲート又は薬剤成分-リンカーからアミノ酸ユニットが切断、特に酵素的に切断された後に、スペーサーユニットの一部ないしはすべてが薬剤成分に結合したままとなるものである。グリシン-グリシンスペーサーユニット又はグリシンスペーサーユニットを含むADCが腫瘍細胞関連プロテアーゼ、癌細胞関連プロテアーゼ又はリンパ球関連プロテアーゼによって酵素切断される場合、グリシン-グリシン-薬剤成分又はグリシン-薬剤成分がAb-Aa-Ww-から切断される。一実施態様では、独立した加水分解反応が標的細胞の中で起こり、グリシン-薬剤成分の結合が切断され、薬剤が遊離される。他の実施態様では、-Yy-は、フェニレン部分がQmに置換しているpアミノベンジルカルバモイルユニットであり、このときQは-C1-C8アルキル、-O-、-ハロゲン、-ニトロ、又は-シアノであり、そして、mは0~4の範囲の整数である。非自己犠牲型スペーサーユニットの例示的な実施態様は、-Gly-Gly-、-Gly-、-Ala-Phe-、-Val-Cit-である。一実施態様では、スペーサーユニットがない、又は薬学的に許容可能な塩ないしはその溶媒和化合物である、薬剤成分-リンカー又はADCが提供される。あるいは、自己犠牲的なスペーサーユニットを含むADCは-Dを放出しうる。一実施態様では、-Y-はPABグループのアミノ窒素原子を介して-Ww-に連結されるPABグループであり、カルボナート、カルバメート又はエーテル基を介して-Dに直接連結しており、このときADCは以下のような例示的な構造を有する。このとき、Qは、-C1-C8アルキル、-O-、-ハロゲン、-ニトロ、又は-シアノであり、mは0~4の範囲の整数であり、そして、pは1から4の範囲である。自己犠牲的なスペーサーの他の例には、PABグループに電子的に類似している芳香族化合物、例として、2アミノイミダゾール5メタノール誘導体BioorgMedChemLett92237、複素環式のPAB類似体、βグルクロニド、及びオルトないしはパラアミノベンジルアセタールが含まれるが、これらに限定されるものではない。アミド結合加水分解の際に環化されるスペーサー、例として、置換した、及び、置換していない4アミノ酪酸アミドChemistryBiology2223、適切に置換されたビシクロ221、及び、ビシクロ222環システムJAmerChemSoc945815、及び2アミノフェニルプロピオン酸アミドJOrgChem555867などが使われてもよい。また、グリシンで置換されるアミン含有薬剤の除去JMedChem271447は、ADCに有用な自己犠牲的スペーサーの例である。例示的なスペーサーユニットを式X~XIIに示す。樹枝状リンカー他の実施態様では、リンカーLは、分岐状の、多機能リンカー成分により一又は複数の薬剤成分が抗体に共有結合するために樹枝型のリンカーであってもよいBioorganicMedicinalChemistryLetters1222132215;Sun等BioorganicMedicinalChemistry1117611768。樹枝状のリンカーは抗体に対する薬剤のモル比を増す、すなわち負荷することができ、これはADCの力価に関連がある。したがって、システイン改変抗体は1つの反応性のシステインチオール基のみを有する場合、多くの薬剤成分が樹枝状のリンカーを介して付着されうる。分岐状の、樹枝状リンカーの例示的な実施態様には、26ビスpクレゾール及び246トリスフェノールデンドリマーユニットJAmerChemSoc1251568815689;Shamis等JAmerChemSoc12617261731;Amir等AngewChemIntEd4244944499が含まれる。一実施態様では、スペーサーユニットは分岐状ビススチレンであり、これを用いて複数の薬剤を取り込み、放出することができ、以下の構造を有し、2プロパン13ジオールデンドリマーユニットを含みAngewChemIntEd4244904494、Qは、-C1-C8アルキル、-O-、-ハロゲン、-ニトロ、又は-シアノであり、mは0~4の範囲の整数であり、nは0又は1であり、そして、pは1から4の範囲である。式Iの抗体-薬剤コンジュゲート化合物の例示的な実施態様には、XIIIa、XIIIb、XIIIc、及びXIIIdが含まれる。式Iaの抗体-薬剤コンジュゲート化合物の他の例示的な実施態様には、XIVa-eが含まれる。このとき、Xは以下のものであり、Yは以下の通りであり、そして、RはそれぞれH又はC1-C6アルキルであり、そして、nは1~12である。他の実施態様では、リンカーは、抗体に存在する求電子性の基に反応することができる求核基を有する反応性の官能基を有する。抗体上の有用な求電子性の基は、アルデヒド及びケトンカルボニル基が含まれるが、これらに限定されるものではない。リンカーの求核基のヘテロ原子は抗体上の求電子性の基と反応して、抗体ユニットに共有結合することができる。リンカーの有用な求核基には、ヒドラジド、オキシム、アミノ、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレート及びアリールヒドラジドが含まれるが、これらに限定するものではない。抗体の求電子性の基は、リンカーへの付着に都合の良い部位を提供する。一般的に、ペプチド-タイプのリンカーは、2以上のアミノ酸及び/又はペプチド断片間でペプチド結合を形成することによって調製されうる。このようなペプチド結合は、例えば、ペプチド化学の分野では周知である液相合成方法ThePeptidesvolume1pp76136AcademicPressに従って調製されうる。リンカー中間生成物は、スペーサー、ストレッチャー及びアミノ酸ユニットを含む反応のいずれかの組合せ又は連続によってアセンブリされてもよい。スペーサー、ストレッチャー及びアミノ酸ユニットは、天然で求電子性、求核性、又は遊離の基である反応性官能基を用いうる。反応性官能基には、カルボキシル、ヒドロキシル、パラニトロフェニルカルボネート、イソチオシアネート、及びO-メシル、O-トシル、-Cl、-Br、-Iなどの脱離基、又はマレイミドが含まれるが、これらに限定されるものではない。他の実施態様では、リンカーは、溶解性又は反応性を変更した基に置換されてもよい。例えば、ADCを調製するために用いる合成手段に応じて、スルホン酸又はアンモニウムなどの荷電性の置換基は、試薬の水溶性を増し、抗体又は薬剤成分とリンカー試薬とのカップリング反応を容易にしうるか、又はDとAb-Lとのカップリング反応、又はAbとD-Lとのカップリング反応を容易にしうる。例示的な薬剤部分メイタンシン及びメイタンシノイドいくつかの実施態様では、イムノコンジュゲートは一又は複数のメイタンシノイド分子と結合している本発明の抗体を含んでなる。メイタンシノイドは、チューブリン重合を阻害するように作用する分裂阻害剤である。メイタンシンは、最初、東アフリカシラブMaytenusserrataから単離されたものである。その後、ある種の微生物がメイタンシノイド類、例えばメイタンシノール及びC3メイタンシノールエステルを生成することが発見された。合成メイタンシノール及びその誘導体及び類似体は、例えば米国特許第4137230号;同4248870号;同4256746号;同4260608号;同4265814号;同4294757号;同4307016号;同4308268号;同4308269号;同4309428号;同4313946号;同4315929号;同4317821号;同4322348号;同4331598号;同4361650号;同4364866号;同4424219号;同4450254号;同4362663号;及び同4371533号に開示されている。メイタンシノイド薬剤成分は、発酵又は化学修飾、発酵産物の誘導体化によって調製するために相対的に利用可能である抗体に対する非ジスルフィドリンカーによる共役に好適な官能基による誘導体化に従う、血漿中で安定、そして様々な腫瘍細胞株に対して有効であるため、抗体薬剤コンジュゲートの魅力的な薬剤成分である。メイタンシノイド薬剤部分としての使用に適切なメイタンシン化合物は当分野で周知であり、公知の方法に従って天然の供給源から単離してもよいし、又は遺伝子工学技術を用いて産生してもよいPNAS9979687973を参照。また、マイタンシノール及びマイタンシノール類似体は、公知の方法に従って合成して調製されてもよい。メイタンシノイド薬剤部分の例示的な実施態様には、本明細書中において開示した構造を有するDM1;DM3;及びDM4が含まれる。アウリスタチン類及びドラスタチン類いくつかの実施態様では、イムノコンジュゲートは、ドラスタチン又はドロスタチンペプチジル類似体ないしは誘導体、例えばアウリスタチンにコンジュゲートした本発明の抗体を含んでなる。ドラスタチン及びアウリスタチンは、微小管動態、GTP加水分解及び核と細胞の分割を妨げAntimicrobAgentsandChemother4535803584、抗癌活性及び抗真菌性活性AntimicrobAgentsChemother4229612965を有することが示されている。ドラスタチン又はアウリスタチン薬剤成分は、ペプチジル薬剤分子のN末端又はC末端により抗体に接着しうる。例示的なアウリスタチンの実施態様には、N末端連結モノメチルアウリスタチン薬剤部分DE及びDFを含み、2004年3月28日に公開されたSenter等ProceedingsoftheAmericanAssociationforCancerResearchVolume45AbstractNumber623に開示される。この開示内容は出典明記によってその全体が特別に援用される。ペプチド性薬剤部分は以下の式DE及びDFから選択されうる。ここで、DE及びDFの波線は、独立して各々の位置で、抗体又は抗体-リンカー成分への共有結合部位を示す。R2は、H及びC1-C8アルキルから選択され、R3は、H、C1-C8アルキル、C3-C8炭素環式化合物、アリール、C1-C8アルキルアリール、C1-C8アルキル-、C3-C8ヘテロ環及びC1-C8アルキル-から選択され、R4は、H、C1-C8アルキル、C3-C8炭素環式化合物、アリール、C1-C8アルキル-アリール、C1-C8アルキル-、C3-C8ヘテロ環及びC1-C8アルキル-から選択され、R5は、H及びメチルから選択され、又はR4及びR5は共同で環状炭素を形成し、Ra及びRbがH、C1-C8アルキル及びC3-C8炭素環式化合物からそれぞれ選択される式-n-を有し、nは2、3、4、5及び6から選択され、R6は、H及びC1-C8アルキルから選択され、R7は、H、C1-C8アルキル、C3-C8炭素環式化合物、アリール、C1-C8アルキル-アリール、C1-C8アルキル-、C3-C8ヘテロ環及びC1-C8アルキル-から選択され、各々のR8は、H、OH、C1-C8アルキル、C3-C8炭素環及びO-からそれぞれ選択され、R9は、H及びC1-C8アルキルから選択され、R10は、アリール又はC3-C8ヘテロ環から選択され、ZはO、S、NH、又はR12がC1-C8アルキルであるNR12であり、R11は、H、C1-C20アルキル、アリール、C3-C8ヘテロ環、-m-R14、又は-m-CH2から選択され、mは、1~1000の範囲の整数であり、R13はC2-C8アルキルであり、R14は、H又はC1-C8アルキルであり、各々のR15の発生は、独立してH、COOH、-n-N2、-n-SO3H、又は-n-SO3-C1-C8アルキルであり、各々のR16の発生は、独立してH、C1-C8アルキル、又は-n-COOHであり、R18は、-C2-C2-アリール、-C2-C2、及び-C2-C2から選択され、そして、nは0から6の範囲の整数である。一実施態様では、R3、R4及びR7は、それぞれイソプロピル又はsec-ブチルであり、R5はH又はメチルである。ある例示的な実施態様では、R3及びR4は各々イソプロピルであり、R5はHであり、そしてR7はsec-ブチルである。さらに他の実施態様では、R2及びR6はそれぞれメチルであり、R9は-Hである。さらに他の実施態様では、各々のR8の発生はOCH3である。例示的な実施態様では、R3及びR4は各々イソプロピルであり、R2及びR6はそれぞれメチルであり、R5はHであり、R7はsec-ブチルであり、各々のR8の発生は-OCH3であり、そしてR9は-Hである。一実施態様では、Zは-O-又は-NH-である。一実施態様では、R10はアリールである。ある例示的な実施態様では、R10は-フェニルである。ある例示的な実施態様では、Zが-O-の場合、R11は-H、メチル又はt-ブチルである。一実施態様では、Zが-NHである場合に、R11は-CH2である。このR15は-n-N2であり、R16は-C1-C8アルキル又は-n-COOHである。他の実施態様では、Zが-NHである場合に、R11は-CH2である。このR15は-n-SO3Hである。式DEの例示的なアウリスタチンの実施態様はMMAEである。ここで、波線は抗体-薬剤コンジュゲートのリンカーへの共有結合を示す。式DFの例示的なアウリスタチンの実施態様はMMAFである。ここで、波線は抗体-薬剤コンジュゲートのリンカーへの共有結合を示すBioconjugateChem17114124を参照。他の薬剤部分には以下のMMAF誘導体が含まれる。ここで、波線は抗体-薬剤コンジュゲートのリンカーへの共有結合を示す。一態様では、限定するものではないが、上記のようなトリエチレングリコールエステルを含む親水基はR11で薬剤部分に結合することができる。ある特定の理論に縛られるものではないが、親水基は薬剤部分の内在化及び非凝集に存在する。アウリスタチン/ドラスタチン又はその誘導体を含む式IのADCの例示的な実施態様は、米国特許公開第20050238649号A1及びDoronina等BioconjugateChem17114124に記載されており、これは出典明記によってここに明確に援用される。MMAE又はMMAFと様々なリンカー成分を含む式IのADCの例示的な実施態様は、以下の構造及び略記号を有するBioconjugateChem17114124を参照。このような場合、薬剤放出は細胞内の抗体分解に影響を受けると思われる。同上。一般的に、ペプチドベースの薬剤部分は、2以上のアミノ酸及び/又はペプチド断片間でペプチド結合を形成することによって調製されうる。このようなペプチド結合は、例えば、ペプチド化学の分野において周知の液相合成方法に従って調製することができる。アウリスタチン/ドラスタチン薬剤部分は、米国特許公開第20050238649号A1;米国特許公開第5635483号;米国特許第5780588号;Pettit等JAmChemSoc11154635465;Pettit等AntiCancerDrugDesign13243277;PettitGR等Synthesis1996719725;及びPettit等JChemSocPerkinTrans15859863;及びDoroninaNatBiotechnol21778784の方法に従って調製されうる。特に、式DFのアウリスタチン/ドラスタチン薬剤部分、例えばMMAF及びその誘導体は、米国特許公開第20050238649号A1及びDoronina等BioconjugateChem17114124に記載の方法を用いて調製されうる。式DEのアウリスタチン/ドラスタチン薬剤部分、例えばMMAE及びその誘導体は、Doronina等NatBiotech21778784に記載の方法を用いて調製されうる。薬剤-リンカー部分であるMCMMAF、MCMMAE、MCvcPABMMAF、及びMCvcPABMMAEは、例えばDoronina等NatBiotech21778784、及び米国特許公開第2005/0238649号A1に記載のような常套的な方法によって都合よく合成され、その後対象の抗体にコンジュゲートされてもよい。薬剤ローディング薬剤ローディングは、式Iの分子において、抗体当たりの薬剤部分の平均数であり、pによって表される。薬剤ローディングは抗体当たり1~20の薬剤部分の範囲であってもよい。式IのADCには、1から20の薬剤部分の範囲でコンジュゲートされる抗体の集まりが含まれる。コンジュゲート反応からのADCの調製において抗体当たりの薬剤部分の平均数は、質量分析、ELISAアッセイ及びHPLCなどの従来の方法によって特徴付けられうる。pに関するADCの定量的分布も決定されうる。いくつかの場合では、pが他の薬剤ローディングを有するADCの一定の値である場合の均質なADCの分離、精製及び特徴づけは、逆相HPLC又は電気泳動などの手段によって達成されうる。ある抗体-薬剤コンジュゲートでは、pは抗体上の結合部位の数によって限定されうる。例えば、結合がシステインチオールである場合、上記の例示的な実施態様のように、抗体はたった1つ又は複数のシステインチオール基を有してもよいし、結合しうるリンカーによってたった1つ又は複数の十分に活性なチオール基を有してもよい。ある実施態様では、薬剤ローディングが高いと、例えばp>5であると、特定の抗体-薬剤コンジュゲートの凝集、難溶性、毒性又は細胞透過性の喪失が起こりうる。ある実施態様では、本発明のADCの薬剤ローディングは、1からおよそ8、およそ2からおよそ6、およそ3からおよそ5、およそ3からおよそ4、およそ3.1からおよそ3.9、およそ3.2からおよそ3.8、およそ3.2からおよそ3.7、およそ3.2からおよそ3.6、およそ3.3からおよそ3.8、又はおよそ3.3からおよそ3.7の範囲である。実際、あるADCでは、抗体当たりの薬剤部分の適切な比は、8未満であってもよいし、およそ2~およそ5であってもよい。米国特許公開第20050238649号A1を参照。ある実施態様では、理論的な最大よりも少ない薬剤部分がコンジュゲート反応の間に抗体にコンジュゲートされる。抗体は、例えば、以下に検討するように、薬剤-リンカー中間体又はリンカー試薬と反応しないリジン残基を含みうる。一般に、抗体は薬剤部分に結合しうる多くの遊離した反応性のシステインチオール基を含まず、実際、抗体のほとんどのシステインチオール残基はジスルフィド架橋として存在する。ある実施態様では、抗体は、反応性のシステインチオール基を生成するために、部分的ないしは完全に還元な条件下で、ジチオトレイトール又はトリカルボニルエチルホスフィンなどの還元剤により還元されうる。ある実施態様では、抗体は変性条件下に曝されるとリジンやシステインなどの反応性の求核基を現す。ADCのローディングは、例えば、抗体に対して薬剤-リンカー中間体又はリンカー試薬のモル過剰量を限定する、コンジュゲートの反応時間又は温度を限定する、システインチオール修飾のための還元条件を限定する、システイン残基がリンカー-薬剤接着の数及び/又は位置の制御のために変更されるように、抗体のアミノ酸配列を組み換え技術によって改変するにおいて開示されるように調製したthioMab又はthioFabことによるなど、異なる方法で制御しうる。1以上の求核基が薬剤部分試薬が続くリンカー試薬又は薬剤-リンカー中間体と反応する場合、その結果生じる生成物は、抗体に結合した一又は複数の薬剤部分を有するADC化合物の混合物であると考えられる。抗体当たりの薬剤の平均数は、抗体特異的かつ薬剤特異的である二重ELISAアッセイによって混合物から算出されうる。個々のADC分子は、質量分析によって混合物中で識別され、HPLC、例えば疎水性相互作用クロマトグラフィによって分離されうる。ある実施態様では、単一のローディング値をもつ均質なADCは、電気泳動又はクロマトグラフィによってコンジュゲート混合物から単離してもよい。イムノコンジュゲートの調製方法式IのADCは、当業者に公知の有機化学的反応、条件及び試薬を用いた様々な手段、例えば、共有結合によってAb-Lを形成するための二価のリンカーと抗体の求核基との反応とその後の薬剤部分Dとの反応、及び共有結合によってD-Lを形成するための二価のリンカーと薬剤部分の求核基との反応とその後の抗体の求核基との反応などによって調製されてもよい。後者の手段による式IのADCを調製するための例示的な方法は米国特許公開第20050238649号A1に記載されており、出典明記によって本明細書中に明確に援用される。抗体の求核基には、限定するものではないが、N末端アミン基、側鎖アミン基、例えばリジン、側鎖チオール基、例えばシステイン、及び抗体がグリコシル化される糖水酸基又はアミノ基が含まれる。アミン、チオール及び水酸基は、求核であり、反応して、リンカー部分及びリンカー試薬上の求電子性基により共有結合を形成することができる。このリンカー部分及びリンカー試薬には、活性エステル類、例えばNHSエステル類、HOBtエステル類、ハロギ酸類及び酸ハロゲン化物;アルキル及びベンジルハロゲン化物、例えばハロアセトアミド類;アルデヒド類、ケトン類、カルボキシル及びマレイミド基、が含まれる。特定の抗体は、還元しうる鎖間ジスルフィド、すなわちシステイン架橋を有する。抗体は、抗体が完全ないしは部分的に還元されるように、還元剤、例えばDTT又はトリカルボニルエチルホスフィンによる処置によって、リンカー試薬を用いたコンジュゲート反応を行ってもよい。ゆえに、各々のシステイン架橋は、理論的には、2つの反応性のチオール求核基を形成する。あるいは、リジン残基の修飾によって、例えば、チオールにアミンを転換させる2イミノチオランを用いてリジンを反応させることによって、抗体にスルフヒドリル基を導入することができる。反応性のチオール基は、1、2、3、4又はそれ以上のシステイン残基を導入することによって抗体に導入されてもよい。また、本発明の抗体-薬剤コンジュゲートは、アルデヒドないしはケトンカルボニル基などの抗体上の求電子性基とリンカー試薬や薬剤上の求核基との間の反応によって生成してもよい。リンカー試薬上の有用な求核基には、限定するものではないが、ヒドラジド、おきしむ、アミノ、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレート、及びアリールヒドラジドが含まれる。一実施態様では、抗体を修飾して、リンカー試薬又は薬剤上の求核置換基と反応させることができる求電子性の部分を導入する。他の実施態様では、グリコシル化された抗体の糖質を、例えば過ヨウ素酸塩酸化剤を用いて酸化して、リンカー試薬又は薬剤部分のアミン基と反応しうるアルデヒド又はケトン基を形成させてもよい。生じたイミンシッフ塩基群が安定結合を形成するか、又は例えば安定アミン結合を形成させるホウ化水素試薬によって、還元してもよい。一実施態様では、ガラクトースオキシダーゼ又はナトリウムメタ過ヨウ素酸塩の何れかによるグリコシル化抗体の炭水化物部分の反応により、薬剤上の適当な基と反応することができる抗体のカルボニル基が生じうる。他の実施態様では、N末端セリン又はスレオニン残基を含む抗体はナトリウムメタ過ヨウ素酸塩と反応して、第一のアミノ酸の代わりにアルデヒドを生成するBioconjugateChem3138146;US5362852。このようなアルデヒドは、薬剤部分又はリンカー求核基と反応することができる。薬剤部分上の求核基には、限定するものではないが、反応して、リンカー部分及びリンカー試薬上の求電子性の基と共有結合することができるアミン、チオール、ヒドロキシル、ヒドラジド、オキシム、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボン酸エステル及びアリールヒドラジド基が含まれる。このリンカー部分及びリンカー試薬には、活性エステル類、例えばNHSエステル類、HOBtエステル類、ハロギ酸類及び酸ハロゲン化物;アルキル及びベンジルハロゲン化物、例えばハロアセトアミド類;アルデヒド類、ケトン類、カルボキシル及びマレイミド基、が含まれる。本発明の化合物は、限定するものではないが、以下の架橋剤:市販されているBMPS、EMCS、GMBS、HBVS、LCSMCC、MBS、MPBH、SBAP、SIA、SIAB、SMCC、SMPB、SMPH、スルホEMCS、スルホGMBS、スルホKMUS、スルホMBS、スルホSIAB、スルホSMCC、及びスルホSMPB、及びSVSB安息香酸塩にて調製したADCが特に考えられる。20032004ApplicationsHandbookandCatalogの467498頁を参照。また、抗体と細胞障害性剤のイムノコンジュゲートは、種々の二官能性タンパク質カップリング剤、例えばNスクシンイミジル3プロピオナート、スクシンイミジル4シクロヘキサン1カルボキシラート、イミノチオラン、イミドエステル類の二官能性誘導体、活性エステル類、アルデヒド類、ビスアジド化合物ヘキサンジアミン、ビスジアゾニウム誘導体エチレンジアミン、ジイソシアネート、及び二活性フッ素化合物を使用して作製することができる。例えば、リシン免疫毒素は、Vitetta等Science2381098に記載されているようにして調製することができる。炭素14標識1イソチオシアナトベンジル3メチルジエチレントリアミン五酢酸が抗体に放射性ヌクレオチドをコンジュゲートするためのキレート剤の例である。国際公開第94/11026号を参照されたい。別法として、抗体と細胞障害性剤を含有する融合タンパク質は、例えば組換え技術又はペプチド合成により作製される。組み換えDNA分子は、コンジュゲートの所望する特性を破壊しないリンカーペプチドをコードする領域により離間しているか、又は互いに隣接しているコンジュゲートの抗体と細胞障害性の部分をコードする領域を含みうる。更なる他の実施態様では、腫瘍の事前ターゲティングに利用するために、レセプターに抗体をコンジュゲートし、ここで抗体レセプターコンジュゲートを患者に投与し、続いて清澄剤を使用して循環から非結合コンジュゲートを除去し、細胞障害性剤にコンジュゲートするリガンドを投与してもよい。システイン改変抗STEAP-1抗体の調製本発明の設定、選別及び調製方法により、さらに、求電子性の官能性と反応するシステイン改変抗STEAP-1抗体が可能である。これらの方法によりさらに、所定の設定した選択した部位に薬剤分子を有する抗体-薬剤コンジュゲート化合物などの抗体複合体化合物が可能である。抗体表面上の反応性のシステイン残基により、マレイミド又はハロアセチルなどのチオール反応基を介した薬剤成分の特異的なコンジュゲートが可能である。マレイミド基に対するCys残基のチオール官能基の求核反応性は、リジン残基のアミノ基又はN末端アミノ基などのタンパク質内の任意の他のアミノ酸官能性の、およそ1000倍である。ヨードアセチル及びマレイミド試薬のチオール特異的官能性はアミン基と反応するが、より高いpHとより長い反応時間が必要である。タンパク質内の遊離チオールの量は、標準的なエルマンのアッセイによって推定されてもよい。免疫グロブリンMはジスルフィド結合五量体の例であるのに対し、免疫グロブリンGは、サブユニットを一緒に結合している内部ジスルフィド架橋を有するタンパク質の例である。このタンパク質では、ジチオトレイトール又はselenolAnalBiochem304147156などの試薬によるジスルフィド結合の還元は、反応性の遊離チオールを生成するために必要である。この手法により、抗体立体構造及び抗原結合特異性が失われうる。Pheselectorアッセイにより、ELISAファージ様式での抗体の反応性システイン基の検出が可能であり、これによってシステイン改変抗体の設定の助けとなる。システイン改変抗体をウェルの表面にコートし、ファージ粒子とインキュベートして、HRP標識した二次抗体を添加して、吸光度を検出する。ファージにディスプレイされる変異タンパク質は、迅速で、強力な、ハイスループット方法でスクリーニングされうる。システイン改変抗体のライブラリを生成して同じ手法を用いて結合選別を行い、抗体又は他のタンパク質のランダムなタンパク質ファージライブラリから遊離Cys取込みの反応性の部位を適切に同定することができる。この技術は、ファージにディスプレイされるシステイン変異タンパク質を、チオール反応性でもあるレポーターグループ又は親和性試薬と反応させることを含む。PHESELECTORアッセイにより、抗体の反応性のチオール基のスクリーニングが可能である。この方法によるA121C変異の同定は一例である。完全なFab分子は、反応性チオール基を有するThioFab変異体をより多く同定するために、効果的に検索されうる。パラメーターである断片的な表面のアクセス容易性を用いて、ポリペプチド内のアミノ酸残基に対する溶媒のアクセスしやすさを同定して、定量化した。表面のアクセス容易性は、溶媒分子、例えば水が接触することができる表面積として表されうる。水が占める面積は1.4Å半径球として概算される。アルゴリズムを用いて公知のX線結晶学由来の座標によりタンパク質の各アミノ酸の表面アクセス容易性を算出する結晶学プログラムのCCP4SuiteとしてActaCrystD50760763、ソフトウェアは入手自由であるか許可されている1925603825orbyinternetwwwccp4acukdisthtmlINDEXhtml。BLeeandFMRichardsJMolBiol55379400のアルゴリズムに基づいて、表面アクセス容易性の算出を実行する2つの例示的なソフトウェアモジュールは、AREAIMOL及びSURFACEである。AREAIMOLは、タンパク質のヴァンデルワールス表面を転がるので、プローブ球の中心の座標としてタンパク質の溶媒にアクセスする表面を定義する。AREAIMOLは、各原子の周りの拡がった球上に表面ポイントを生成して、周囲の原子と関連する同等の球内にあるものを除くことによって溶媒にアクセス容易な表面を算出する。AREAIMOLは、PDB座標ファイルに原子の溶媒にアクセス容易な領域を見つけ、残基、鎖、及び全分子がアクセス容易な領域をまとめる。個々の原子がアクセス容易な領域は、偽PDB出力ファイルに書き込まれる。AREAIMOLは各エレメントについて単一の半径を仮定し、限られた数の異なるエレメントを認識するのみである。AREAIMOL及びSURFACEは、絶対的なアクセス容易性、すなわち正方形のオングストロームの数を示す。部分的な表面アクセス容易性は、ポリペプチド内のアミノ酸に関する標準の状態を参照することで算出される。基準状態はトリペプチドGly-X-Glyであり、ここで、Xは対象のアミノ酸であり、基準状態は伸展した高次構造、すなわちβ鎖内の高次構造様でなければならない。伸展した高次構造はXのアクセス容易性を最大にする。算出したアクセス容易な領域をGly-X-Glyトリペプチド基準状態のアクセス容易な領域で割って、比率を比率を示す。これが部分的なアクセス容易性となる。アクセス容易性の割合は、100を乗じた部分的アクセス容易性である。表面アクセス容易性を算出するための他の例示的なアルゴリズムは、ポリペプチドのX線座標に基づいて水球体に対するアミノ酸残基の部分的アクセス容易性を算出するプログラムxsaeのSOLVモジュールに基づく。抗体のすべてのアミノ酸の部分的表面アクセス容易性は、利用できる結晶構造情報を使用して算出されてもよいJMolBiol229969995。システイン改変抗体をコードするDNAを容易に単離し、従来の手順を用いて配列決定される。ハイブリドーマ細胞はこのようなDNAの供与源として役立つ。単離した後、DNAを発現ベクターに入れ、ついでそれを、大腸菌、サルのCOS細胞、チャイニーズハムスター卵巣細胞、又は他の哺乳動物の宿主細胞、例えば抗体タンパク質を産生しない骨髄腫細胞などの宿主細胞に形質移入して、組み換え宿主細胞内でモノクローナル抗体の合成を得てもよい。設定及び選別の後、改変された、非常に反応性のある対になっていないCys残基を有するシステイン改変抗体、例えばThioFabが、細菌、例えば大腸菌システムCurrOpinioninImmunol5256262;PluckthunImmunolRevs130151188又は哺乳類の細胞培養システム、例えばチャイニーズハムスター卵巣細胞における発現、及び一般的なタンパク質精製技術を用いた精製JBiolChem2661098210988によって産生されてもよい。改変されたCysチオール基は、求電子性リンカー試薬及び薬剤-リンカー中間生成物と反応して、システイン改変抗体薬剤コンジュゲート及び他の標識したシステイン改変抗体を形成する。親抗体に存在し、鎖内及び鎖間のジスルフィド結合を形成するシステイン改変抗体Cys残基は、反応性チオール基を全く持っておらず、求電子性のリンカー試薬又は薬剤-リンカー中間生成物と反応しない。新規に改変されたCys残基は対形成せずに、反応することができる。すなわち求電子性のリンカー試薬又は薬剤-マレイミドなどの薬剤-リンカー中間生成物にコンジュゲートすることができる。例示的な薬剤-リンカー中間生成物には、MC-MMAE、MC-MMAF、MC-vc-PAB-MMAE及びMC-vc-PAB-MMAFが含まれる。重鎖及び軽鎖の改変したCys残基の構造位置は連続する番号付けシステムに従って番号付けする。この連続する番号付けシステムは、N末端から始まるカバット番号付けシステムSequencesofProteinsofImmunologicalInterest5thEdPublicHealthServiceNationalInstitutesofHealthBethesdaMDに関連しており、a、b、cで示す挿入がカバット番号付けスキームとは異なる。カバット番号付けシステムを用いると、実際の直鎖のアミノ酸配列は、可変ドメインのFRないしCDRが短くなっているアミノ酸か、又はFRないしCDRに挿入を含むアミノ酸を含みうる。システイン改変重鎖変異体部位は連続する番号付け及びカバット番号付けスキームによって同定される。一実施態様では、システイン改変抗STEAP-1抗体は、システインによって親抗STEAP-1抗体の一又は複数のアミノ酸残基を置換する、そして、チオール反応性の試薬とシステイン改変抗体を反応させることによって、システイン改変抗STEAP-1抗体のチオール反応性を決定することを含む方法によって調製される。システイン改変抗体は親抗体よりチオール反応性の試薬との反応性が高くてもよい。遊離システインアミノ酸残基は、重鎖ないし軽鎖、又は定常ドメインないし可変ドメインに位置してもよい。また、抗体断片、例えばFabは、抗体断片のアミノ酸を置換する一又は複数のシステインアミノ酸によって改変して、システイン改変抗体断片を形成してもよい。本発明の他の実施態様は、一又は複数のシステインアミノ酸を親抗STEAP-1抗体に導入して、システイン改変抗STEAP-1抗体を生成する、そして、チオール反応性の試薬によりシステイン改変抗体のチオール反応性を決定することを含み、このとき、システイン改変抗体は親抗体よりもチオール反応性の試薬と反応性が高いものである、システイン改変抗STEAP-1抗体を調製する方法を提供する。システイン改変抗体を調製する方法の工程は、システイン改変抗体をコードする核酸配列を突然変異誘発する、システイン改変抗体を発現させる、そして、システイン改変抗体を単離して、精製することを含む。システイン改変抗体を調製する方法の工程は、ファージ又はファージミド粒子から選択されるウイルス粒子上にシステイン改変抗体を発現させることを含んでもよい。また、システイン改変抗体を調製する方法の工程は、システイン改変抗体をチオール反応性の親和性試薬と反応させ、親和性標識した、システイン改変抗体を生成させる、そして、親和性標識したシステイン改変抗体のキャプチャ培地への結合を測定することを含んでもよい。本発明の他の実施態様は、親抗体に一又は複数のシステインアミノ酸を導入して、システイン改変抗体を生成する、システイン改変抗体をチオール反応性の親和性試薬と反応させ、親和性標識した、システイン改変抗体を生成させる、そして、親和性標識したシステイン改変抗体のキャプチャ培地への結合を測定する、そして、チオール反応性の試薬によりシステイン改変抗体のチオール反応性を決定することを含む、チオール反応のために高い反応性を有し、対形成をしないシステインアミノ酸を有するシステイン改変抗体をスクリーニングする方法である。システイン改変抗体をスクリーニングする方法の工程は、システイン改変抗体をコードする核酸配列を突然変異誘発する、システイン改変抗体を発現させる、そして、システイン改変抗体を単離して、精製することを含んでもよい。システイン改変抗体をスクリーニングする方法の工程は、ファージ又はファージミド粒子から選択されるウイルス粒子上にシステイン改変抗体を発現させることを含んでもよい。また、システイン改変抗体をスクリーニングする方法の工程は、システイン改変抗体をチオール反応性の親和性試薬と反応させ、親和性標識した、システイン改変抗体を生成させる、そして、親和性標識したシステイン改変抗体のキャプチャ培地への結合を測定することを含んでもよい。標識したシステイン改変抗STEAP-1抗体システイン改変抗STEAP-1抗体は部位特異的であり、チオール反応性の試薬と効率よくカップリングしうる。チオール反応性の試薬は、多機能性リンカー試薬、キャプチャ、すなわち親和性、標識試薬、検出標識、固相固定化試薬、又は薬剤-リンカー中間生成物であってもよい。チオール反応性試薬の一例はNエチルマレイミドである。ある例示的な実施態様では、ビオチンリンカー試薬とのThioFabの反応によりビオチン化されたThioFabが生じ、これによって改変されたシステイン残基の存在及び反応性が検出され、測定されうる。多機能リンカー試薬とのThioFabの反応により、薬剤成分試薬又は他の標識とさらに反応しうる官能化されたリンカーを有するThioFabが生じる。薬剤-リンカー中間生成物とのThioFabの反応により、ThioFab薬剤コンジュゲートが生じる。本明細書中で記述される例示的な方法は一般に、抗体の同定及び産生、さらに一般的には、本明細書中に記載の設定及びスクリーニングの工程によって他のタンパク質に応用されてもよい。このような手法は、反応基が例えばマレイミド、ヨードアセトアミド、ピリジルジスルフィド、又は他のチオール反応性の結合パートナーである他のチオール反応性試薬のコンジュゲーションに応用されてもよいBioconjugateChem12;HermansonGinBioconjugateTechniquesAcademicPressSanDiegopp4055643671。チオール反応性の試薬は、薬剤成分、フルオロホア、例としてフルオレセイン又はローダミンのような蛍光染料、イメージング又は放射性治療用金属のためのキレート剤、ペプチジル又は非ペプチジル標識ないしは検出用タグ、又はポリエチレングリコールの各種アイソフォームなどのクリアランス改変剤、第三成分に結合するペプチド、又は他の炭水化物又は親油性剤であってもよい。システイン改変抗STEAP-1抗体の使用システイン改変抗STEAP-1抗体とそのコンジュゲートは治療用及び/又は診断用の薬剤としての使用が明らかにされうる。本発明はさらに、STEAP-1関連疾患と関係する一又は複数の症状を予防するか、管理するか、治療するか又は、寛解する方法を提供する。特に、本発明は、癌、例えば前立腺癌、肺癌、結腸癌、膀胱癌、卵巣癌、及びユーイング肉腫などの細胞増殖性疾患と関係する一又は複数の症状を予防するか、管理するか、治療するか又は、寛解する方法を提供する。本発明はまた更に、STEAP-1関連の疾患又はこのような疾患を発達させる素因を診断するための方法、並びに好ましくは細胞関連のSTEAP-1ポリペプチドを結合する抗体、及び抗体の抗原結合断片を同定するための方法を提供する。本発明の他の実施態様は、STEAP-1関連の疾患に応答する状態の治療において有用な医薬の調製のためのシステイン改変抗STEAP-1抗体の使用に関する。システイン改変抗STEAP-1抗体-薬剤コンジュゲートの調製式IのADCは、当業者に公知の有機化学的反応、条件及び試薬を用いた様々な手段、例えば、システイン改変抗体のシステイン基をリンカー試薬と反応させて、共有結合によって抗体-リンカー中間生成物Ab-Lを形成させ、その後に薬剤成分Dと反応させる、及び薬剤成分の求核基をリンカー試薬と反応させて、共有結合によって薬剤-リンカー中間生成物D-Lを形成させ、その後にシステイン改変抗体のシステイン基と反応させる、などによって調製されてもよい。コンジュゲート方法及びは、様々なシステイン改変抗体、薬剤成分及びリンカーを用いて行い、式Iの抗体-薬剤コンジュゲートを調製してもよい。抗体システインチオール基は求核基であり、反応して、リンカー試薬及び薬剤-リンカー中間生成物の求電子基と共有結合することができる。このリンカー試薬及び薬剤-リンカー中間生成物には、活性エステル類、例えばNHSエステル類、HOBtエステル類、ハロギ酸類及び酸ハロゲン化物、アルキル及びベンジルハロゲン化物、例えばハロアセトアミド類、アルデヒド類、ケトン類、カルボキシル及びマレイミド基、及びスルフィド交換による、ピリジルジスルフィドを含むジスルフィドが含まれる。薬剤成分の求核基には、リンカー成分及びリンカー試薬の求電子基と共有結合するために反応することができる、アミン、チオール、ヒドロキシル、ヒドラジド、オキシム、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボン酸エステル及びアリールヒドラジド基が含まれるが、これらに限定されるものではない。システイン改変抗体は、DTT又はTCEPホスフィンヒドロクロライド;Getz等AnalBiochemVol2737380;SoltecVenturesBeverlyMAなどの還元剤にて処理した後に、鎖間及び鎖内のジスルフィド結合を再形成させるために再酸化させることによって、リンカー試薬とのコンジュゲートに対して反応性にしてもよい実施例x。例えば、CHO細胞に発現される完全長のシステイン改変モノクローナル抗体を、新たに導入したシステイン残基と培養培地中に存在するシステインとの間で形成しうるシステイン付加物のジスルフィド結合を還元するために、およそ50倍の過剰なTCEPにて37°Cで3時間かけて還元する。還元されたThioMabを希釈して、10mM酢酸ナトリウム、pH5にてHiTrapSカラムに流し、0.3M塩化ナトリウムを含むPBSにて溶出する。希釈硫酸銅水、室温に終夜置くことにより親Mabに存在するシステイン残基間にジスルフィド結合が再構築された。あるいは、デヒドロアスコルビン酸は、システイン付加物の還元分解反応の後にシステイン改変抗体の鎖内ジスルフィド基を再構築させるための有効な酸化体である。当分野で公知の他の酸化体、すなわち酸化剤及び酸化条件が用いられてもよい。外気酸化も有効である。この低刺激性の部分的な再酸化工程により、高品位の鎖内ジスルフィドが効率よく形成され、新たに導入されたシステイン残基のチオール基が維持される。およそ10倍過剰な薬剤-リンカー中間生成物、例えばMC-vc-PAB-MMAEを添加し、混合して、室温におよそ1時間置いて、コンジュゲートに作用させ、抗体-薬剤コンジュゲートを形成させた。コンジュゲート混合物をゲル濾過し、HiTrapSカラムに流して溶出させ、過剰な薬剤-リンカー中間生成物と他の不純物を除去した。図16は、コンジュゲートのために細胞培養物から発現されるシステイン改変抗体を調製するための一般的な方法を示す。細胞培養培地にシステインを含む場合、新たに導入されたシステインアミノ酸と培地のシステインとの間にジスルフィド付加物が形成しうる。これらのシステイン付加物に○で示すは、コンジュゲートのために反応するシステイン改変抗体を生成するために還元されなければならない。システイン付加物は、おそらく様々な鎖間ジスルフィド結合とともに、TCEPなどの還元剤によって抗体の還元型を生じさせるために、還元により切断される。対形成したシステイン残基間の鎖間ジスルフィド結合は、硫酸銅、DHAA又は周囲酸素への曝露による不完全酸化条件下で再形成される。新たに導入され、改変され、対形成しないシステイン残基は、リンカー試薬や薬剤-リンカー中間生成物と反応して本発明の抗体コンジュゲートを形成するために利用されうる状態にある。哺乳類の細胞株において発現されるThioMabは、-S-S-結合形成によって外部からコンジュゲートされた改変CysへのCys付加物となる。したがって、精製されたThioMabを、実施例5に記載の還元及び再酸化の手順にて処理して、反応性のThioMabsを生産する。これらのThioMabを用いて、細胞障害性剤、蛍光体及び他の標識を含むマレイミドとコンジュゲートさせる。図15は、アウリスタチン薬剤成分が、改変されたシステイン基の軽鎖LC-ADC、重鎖HC-ADC、及びFc領域Fc-ADCに付着している、システイン改変抗STEAP-1抗体薬剤コンジュゲートADCの実施態様を示す。薬学的製剤抗体薬剤コンジュゲートの投与本発明の抗体-薬剤コンジュゲートは、治療される症状に適切な任意の手段によって投与されてもよい。典型的にADCは、非経口的に、すなわち注入、皮下、筋肉内、静脈内、皮内、くも膜下腔内及び硬膜外投与される。前立腺、肺及び/又は結腸等の癌を治療するために、一実施態様では、抗体-薬剤コンジュゲートは静脈内注入により投与される。注入により投与される用量は、1用量当たりおよそ1μg/m2からおよそ10000μg/m2の範囲で、一般に週1回、合計1、2、3又は4回の用量である。あるいは、用量範囲は、およそ1μg/m2からおよそ1000μg/m2、およそ1μg/m2からおよそ800μg/m2、およそ1μg/m2からおよそ600μg/m2、およそ1μg/m2からおよそ400μg/m2、およそ10μg/m2からおよそ500μg/m2、およそ10μg/m2からおよそ300μg/m2、およそ10μg/m2からおよそ200μg/m2、及びおよそ1μg/m2からおよそ200μg/m2である。投薬は、1日1回、1週間に1回、1週間に複数回、1か月に複数回、1か月に複数回、1か月に1回又は疾患の症状が寛解又は緩和するように間欠的に投与されてもよい。投与は、腫瘍又はリンパ腫の症状、治療される白血病が寛解するまで開示したいずれかの間隔で継続されてもよい。このような寛解又は軽減がこのような継続的な投与によって延長される症状の寛解又は軽減が達成される後に、投与を続けてもよい。また、本発明は、前立腺癌、肺癌、又は結腸癌に罹っている患者に、治療的に有効な量の前記実施態様のいずれか一のヒト化120v.24抗体であって、細胞障害性分子や検出可能な分子にコンジュゲートされていない抗体を投与することを含む、前立腺癌、肺癌、又は結腸癌、及び/又はそれら癌の転移を緩和する方法を提供する。抗体は一般的に、およそ1μg/m2からおよそ1000mg/m2の用量範囲で投与される。また、本発明は、前立腺癌、肺癌、又は結腸癌に罹っている患者に、治療的に有効な量の前記実施態様のいずれか一のヒト化120v.24抗体であって、細胞障害性分子や検出可能な分子にコンジュゲートされている抗体を投与することを含む、前立腺癌、肺癌、又は結腸癌、及び/又はそれら癌の転移を緩和する方法を提供する。抗体は一般的に、およそ1μg/m2からおよそ1000mg/m2の用量範囲で投与される。一態様では、本発明はさらに、少なくとも一の本発明の抗STEAP-1抗体及び/又は少なくとも一のこのイムノコンジュゲート及び/又は少なくとも一の本発明の抗STEAP-1抗体-薬剤コンジュゲートを含有する薬学的製剤を提供する。いくつかの実施態様では、薬学的製剤は、1抗STEAP-1抗体及び/又は抗STEAP-1抗体-薬剤コンジュゲート及び/又はこのイムノコンジュゲートと、2薬学的許容性のある担体とを含有する。いくつかの実施態様では、薬学的製剤は、1抗STEAP-1抗体及び/又はこのイムノコンジュゲートと、場合によって2少なくとも一の付加的治療剤とを含有する。本発明の抗体ないしイムノコンジュゲート又は本発明の抗体-薬剤コンジュゲートを含んでなる治療用製剤は、所望の純度を持つ抗体又は抗体-薬剤コンジュゲートと、場合によっては生理学的に許容される担体、賦形剤又は安定化剤を混合することにより、水溶液又は凍結乾燥又は他の乾燥製剤の形態に調製されて保存される。許容される担体、賦形剤又は安定化剤は、用いられる用量と濃度でレシピエントに非毒性であり、ホスフェート、シトレート、ヒスチジン及び他の有機酸等のバッファー;アスコルビン酸及びメチオニンを含む酸化防止剤;保存料;低分子量のポリペプチド;血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリン等のタンパク質;ポリビニルピロリドン等の親水性ポリマー;グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン又はリシン等のアミノ酸;グルコース、マンノース、又はデキストリンを含む単糖類、二糖類、及び他の炭水化物;EDTA等のキレート化剤;スクロース、マンニトール、トレハロース又はソルビトール等の糖;ナトリウム等の塩形成対イオン;金属錯体;及び/又はTWEENTM、PLURONICSTM又はポリエチレングリコール等の非イオン性界面活性剤を含む。インビボ投与に用いられる薬学的製剤は一般に滅菌されている。これは滅菌濾過メンブレンによる滅菌によって容易に達成される。また活性成分は、例えばコアセルベーション技術あるいは界面重合により調製されたマイクロカプセル、例えばそれぞれヒドロキシメチルセルロース又はゼラチンマイクロカプセル及びポリマイクロカプセルに、コロイド状ドラッグデリバリー系に、あるいはマクロエマルションに捕捉させてもよい。このような技術は、RemingtonsPharmaceuticalSciences16theditionOsolAEdに開示されている。徐放性調合物を調製してもよい。徐放性調合物の好ましい例は、本発明の抗体ないしイムノコンジュゲートを含む疎水性固体ポリマーの半透性マトリクスを含み、そのマトリクスは成形物、例えばフィルム又はマイクロカプセルの形態である。徐放性マトリクスの例には、ポリエステル、ヒドロゲル、又はポリ、ポリラクチド、Lグルタミン酸とγエチルLグルタメートのコポリマー、非分解性エチレン酢酸ビニル、分解性乳酸グリコール酸コポリマー、例えばLUPRONDEPOTTM、及びポリD3ヒドロキシブチル酸が含まれる。エチレン酢酸ビニル及び乳酸グリコール酸等のポリマーは、分子を100日以上かけて放出することを可能にするが、ある種のヒドロゲルはタンパク質をより短い時間で放出する。カプセル化された抗体ないしイムノコンジュゲートが体内に長時間残ると、37°Cの水分に暴露された結果として変性又は凝集し、生物活性を喪失させ免疫原性を変化させるおそれがある。合理的な戦略を、関与するメカニズムに応じて安定化のために案出することができる。例えば、凝集機構がチオジスルフィド交換による分子間SS結合の形成であることが見いだされた場合、安定化はスルフヒドリル残基を修飾し、酸性溶液から凍結乾燥させ、水分含有量を制御し、適当な添加剤を使用し、また特定のポリマーマトリクス組成物を開発することによって達成されうる。抗体-薬剤コンジュゲート治療本発明の抗体-薬剤コンジュゲートを用いて、例えば腫瘍抗原の過剰発現に特徴がある様々な疾患ないしは疾病を治療することが考慮される。例示的な症状又は過剰増殖性疾患には、良性ないし悪性の腫瘍;白血病及びリンパ系の悪性腫瘍が含まれる。他には、神経系、神経膠、星状性、視床下部、腺性、マクロファージ性、上皮性、間質性、胚盤胞性、炎症性、血管形成性、及び、自己免疫性を含む免疫性の疾患が含まれる。他にも、前立腺癌、肺癌、及び結腸癌が含まれる。動物モデル及び細胞に基づくアッセイにおいて同定されるADC化合物はさらに、腫瘍を有する高次霊長類及びヒトの臨床試験で試験されうる。ヒトの臨床試験は、前立腺、肺又は結腸の細胞増殖性疾患、例えば限定するものではないが、前立腺癌、肺癌及び結腸癌、並びにこれら癌の転移を経験する患者において、本発明の抗STEAP-1モノクローナル抗体ないしイムノコンジュゲートの有効性を試験するために設定されうる。臨床試験は、公知の治療的投薬計画、例えば放射線及び/又は公知の化学療法剤及び/又は細胞障害性剤を伴う化学療法と組み合わせてADCの有効性を評価するように設定されてもよい。癌はSTEAP-1発現細胞を含んでおり、本発明のADCは癌細胞に結合することが可能である。癌のSTEAP-1発現を決定するために、様々な診断用/予後用のアッセイが利用できる。一実施態様では、STEAP-1過剰発現はIHCによって分析されてもよい。腫瘍生検のパラフィン包埋組織切片はIHCアッセイに用い、試験した腫瘍細胞の割合や染色の程度に関して、STEAP-1タンパク質染色強度判定基準に照らし合わせてもよい。疾患の予防又は治療のために、ADCの好適な用量は、上記のように、治療する疾患のタイプ、疾患の重症度及び経過、分子を予防目的で投与するか治療目的で投与するか、以前の治療法、患者の病歴及び抗体への応答性、及び担当医師の判断に依存するであろう。分子は一時的又は一連の治療にわたって好適に患者に投与される。疾患のタイプ及び重症度に応じて、約1μg/kg~15mg/kgの分子が、例えば一以上の分割投与又は連続注入による患者投与の初回候補用量である。ある典型的な1日量は、上記の要因に応じて、約1μg/kg~約100mg/kg以上の範囲であろう。患者に投与されるADCの例示的な用量は、およそ0.1からおよそ10mg/患者体重kgの範囲である。症状に応じて、数日間以上にわたる繰り返し投与は、所望の疾患症状の抑制が得られるまで持続する。例示的な用量投薬計画は、およそ4mg/kgの初回負荷投与量の後に、およそ2mg/kgの抗STEAP-1抗体の維持用量を毎週投与することを含む。他の投与計画も有用でありうる。この治療の経過は従来技術及びアッセイにより容易にモニターされる。併用療法本発明の抗体-薬剤コンジュゲートは、薬学的組合せ製剤又は併用療法としての用量投薬計画において、抗癌性質を有する少なくとも一つの追加の化合物を組み合わされてもよい。薬学的併用製剤又は用量投薬計画の少なくとも一つの追加の化合物は、それらが互いに悪影響を与えないように、併用のADCに対して相補的な活性を有するのが好ましい。少なくとも一つの追加の化合物は、化学療法剤、細胞障害性剤、サイトカイン、増殖阻害性剤、抗ホルモン剤及び/又は心臓保護剤であってもよい。このような分子は、意図する目的のために有効である量で好適に組み合わされる。また、本発明のADCを含有する製薬的組成物は、治療的に有効な量の化学療法剤、例えばチューブリン形成インヒビター、トポイソメラーゼインヒビター又はDNA結合剤を有してもよい。一態様では、第一の化合物は本発明の抗STEAP-1ADCであり、少なくとも一つの追加の化合物は抗STEAP-1抗体である。一実施態様では、少なくとも一つの追加の化合物は、抗PSCA抗体である。一実施態様では、少なくとも一つの追加の化合物は、抗HER2抗体のトラスツズマブハーセプチン登録商標、ジェネンテックインク、カリフォルニア州サウスサンフランシスコである。一実施態様では、少なくとも一つの追加の化合物は、抗HER2抗体のペルツズマブオムニターグTM、ジェネンテックインク、カリフォルニア州サウスサンフランシスコ、米国特許第6949245号参照である。一実施態様では、少なくとも一つの追加の化合物は抗VEGF抗体である例えば、アバスチン登録商標、ジェネンテックインクである。いずれの場合も、少なくとも一つの追加の化合物は、ネイキッド抗体ないしはADCである。一実施態様では、少なくとも一つの追加の化合物は抗体でありネイキッド抗体ないしはADC、追加の抗体は、第2、第3、第4、第5、第6、又はそれ以上の抗体であり、第2、第3、第4、第5、第6、又はそれ以上の追加の抗体ネイキッド抗体ないしはADCを組み合わせることが、STEAP-1を発現する組織中の細胞増殖性疾患の治療に効果的である。他の治療的投薬計画は、放射線療法及び/又は骨髄及び末しょう血液移植、及び/又は細胞障害性剤、化学療法剤又は増殖阻害性剤を含むがこれらに限定されない本発明に従って同定される抗癌剤の投与と組み合わされてもよい。前記のうちの一実施態様では、化学療法剤は、例えば、シクロホスファミド、ヒドロキシダウノルビシン、アドリアマイシン、ドキソルビシン、ビンクリスチン、プレドニゾロン、CHOP、CVPないしはCOP、又は抗PSCA、抗HER2、オムニターグTMないしは抗VEGFなどの免疫治療法などの薬剤又は薬剤の組合せである。併用療法は同時又は連続的な投薬計画として投与されてもよい。連続して投与される場合、組合せは2以上の投与で投与されてもよい。組合せ投与には、別々の製剤又は単一の製薬的製剤を用いての同時投与や、いずれかの順序での連続投与が含まれ、このとき、両方の活性剤が同時にその生物学的活性を及ぼす一定時間があるのが好ましい。一実施態様では、ADCによる治療は、本明細書において同定される抗癌剤、及び異なる化学療法剤の混合物の同時投与を含む一又は複数の化学療法剤又は増殖阻害性剤の併用投与を伴う。化学療法剤には、タキサン及び/又はアンスラサイクリン抗生物質が含まれる。このような化学療法剤のための調製や投薬計画は、製造業者の指示に従って使われてもよいし、又は経験的に熟練した専門家によって測定されうる。このような化学療法の調製や投薬計画は、ChemotherapyServiceEdMCPerryWilliamsWilkinsBaltimoreMdにも記載される。前記いずれかの同時投与される薬剤の好適な用量は現在用いられている通りでもよいし、新規に同定される薬剤と他の化学療法剤ないしは治療の組み合わされる作用に応じて低くしてもよい。併用療法により相乗効果が生じ得、相乗的、すなわち、同時に用いた活性成分が別々に該化合物を用いて生じる効果の合計よりも多い場合に生じる効果が生じうる。活性成分が、組み合わせた単位用量製剤に同時に製剤化され、投与されるか、又は同時に送達される場合、別々の製剤として交互に又は同時に送達される場合、又は、いくつかの他の投薬計画によってなされる場合に、相乗効果が達成されうる。交替療法で送達される場合、例えば異なる注射器での異なる注入によって、化合物が投与されるか又は順次送達される場合に、相乗効果が達成されてもよい。通常は、交替療法の間、各々の活性成分の有効用量は順次、すなわち連続的に投与されるのに対して、併用療法では、2以上の活性成分の有効用量は一緒に投与される。抗体-薬剤コンジュゲートの代謝産物代謝産物が先行技術に対して新規性及び非自明性を有する限りにおいて、本明細書中に記載のADC化合物のインビボ代謝産物も、本発明の権利内である。このような生成物は、投与された化合物の、例えば酸化、還元、加水分解、アミド化、エステル化、酵素切断などから生じうる。したがって、本発明は、代謝産物が生じるために十分な時間、本発明の化合物を哺乳動物と接触させることを含む方法によって生成される新規の自明でない化合物を包含する。典型的には、代謝産物は、放射性標識したADCを調製して、ラット、マウス、モルモット、サルなどの動物又はヒトに検出可能な用量で非経口投与し、代謝が生じるために十分な時間をおいて、尿、血液又は他の生体試料から変換生成物を単離することによって同定される。標識されているので、これら生成物は容易に単離される。代謝産物の構造は従来の様式、例えばMS、LC/MS又はNMR分析によって決定される。通常、当分野の技術者に周知の従来の薬物代謝研究と同じ方法で代謝産物の分析が行われる。インビボで見られない限り、変換生成物は本発明のADC化合物の治療的投薬のための診断検査法において有用である。抗STEAP-1抗体及びイムノコンジュゲートの更なる使用方法診断法と検出の方法一態様では、本発明の抗STEAP-1抗体及びイムノコンジュゲートは、生体試料中のSTEAP-1の存在を検出するために有用である。本明細書中で用いる検出するなる用語は、定量的又は定性的な検出を包含する。ある実施態様では、生体試料は、細胞又は組織を含む。ある実施態様では、このような組織には、他の組織、例えば前立腺、肺及び結腸と比較して高いレベルでSTEAP-1を発現する正常及び/又は癌性組織が含まれる。一態様では、本発明は、生体試料中のSTEAP-1の存在を検出する方法を提供する。ある実施態様では、前記方法は、STEAP-1への抗STEAP-1抗体の結合に許容される条件下で抗STEAP-1抗体と生体試料を接触させ、抗STEAP-1抗体とSTEAP-1との間に複合体が形成されるか否かを検出することを含む。一態様では、本発明は、STEAP-1の発現増加と関係している疾患を診断する方法を提供する。ある実施態様では、前記方法は、抗STEAP-1抗体と試験細胞を接触させ、STEAP-1への抗STEAP-1抗体の結合を検出することによって試験細胞によるSTEAP-1の発現レベルを測定し、そして、試験細胞によるSTEAP-1の発現レベルをコントロール細胞によるSTEAP-1の発現レベルと比較することを含み、コントロール細胞と比べて試験細胞によるSTEAP-1の発現レベルが高い場合にSTEAP-1の発現の増加に関連する細胞増殖性疾患の存在が示される。ある実施態様では、試験細胞は、STEAP-1の発現の増加に関連する疾患があると疑われる患者から得られる。ある実施態様では、前記疾患は、癌又は腫瘍などの細胞増殖性疾患である。本発明の抗体を用いて診断されうる例示的な細胞増殖性疾患には、前立腺癌、肺癌及び結腸癌、又はこれら癌の転移が含まれる。ある実施態様では、上記のような診断ないし検出の方法は、表面にSTEAP-1を発現する細胞から得た膜調製物中又は細胞の表面において発現されるSTEAP-1に対する抗STEAP-1抗体の結合を検出することを含む。ある実施態様では、前記方法は、STEAP-1への抗STEAP-1抗体の結合に許容される条件下で抗STEAP-1抗体と細胞を接触させ、抗STEAP-1抗体と細胞表面上のSTEAP-1との間に複合体が形成されるか否かを検出することを含む。細胞の表面上に発現されたSTEAP-1への抗STEAP-1抗体の結合を検出するための例示的なアッセイはFACSアッセイである。ある他の方法は、STEAP-1に対する抗STEAP-1抗体の結合を検出するために用いてもよい。前期の方法には、限定するものではないが、当分野で周知である抗原結合アッセイ、例えばウェスタンブロット、放射性免疫アッセイ、ELISA、サンドイッチイムノアッセイ、免疫沈降アッセイ、蛍光イムノアッセイ、プロテインAイムノアッセイ、イムノPET、及び免疫組織化学が含まれる。ある実施態様において、89Zr-抗STEAP-1-イムノPetのインビトロ、又はインビボでの分析は、原発性前立腺腫瘍病変における抗体の取り込みと生体内分布を定量化するために使用することができ、原発腫瘍が転移するときに腫瘍抗原プロファイルの変化を特定するのに役立てることができる。イムノPETは陽電子放出放射性同位元素を必要とする例えば、ジルコニウム89ZRVerelIetalJNuclMed2003441271128189ZrImmunoPETComprehensiveProceduresfortheProductionof89ZrLabeledMonoclonalAntibodies;イムノPETの使用は、モノクローナル抗体mAbとPETの組み合わせであり、腫瘍の検出およびmAbの定量化を改善するための魅力的な選択肢である。長寿命の陽電子エミッターである89Zrは、例えば3.27dの半減期など、イムノPET用に理想的な物理的特性を有し、これは、最適な腫瘍対非腫瘍比を達成するためにインタクトなmAbに必要とされる時間と一致する。デスフェリオキサミンBDfに基づく典型的な二官能性試薬は、モノクローナル抗体mAbを含む抗体への89Zrの錯体形成に用いられる。デスフェリオキサミンBN’-{5-[アセチルヒドロキシアミノ]ペンチル}-N-[5-{4-[5-アミノペンチルヒドロキシアミノ]-4-オキソブタノイル}アミノペンチル]-N-ヒドロキシコハク酸イミドN-hydroxysuccinamideCAS登録番号70-51-9;また、デフェロキサミン、デフェロキサミンB、DFO-B、DFOA、DFB又はデスフェラールとして知られるは、放線菌ストレプトマイセスpilosus図20上によって生成される細菌のシデロフォアである。デスフェリオキサミンBは体内から過剰な鉄を除去するために使用されるキレート剤などの医療用途を有するChemicalReviews8915631579。DFO-Bのメシル酸塩は市販されている。最初の実験は、N-S-アセチルチオアセチル-DfSATA-Df及び、リジン側鎖のεアミノ基に結合したマレイミド基、4-[N-マレイミドメチル]シクロヘキサン-1-カルボン酸塩で修飾されたmAbmAb-SMCCで行われたJNuclMed381128MeijsWEetalAfacilemethodforthelabelingofproteinswithzirconiumisotopesNuclMedBiol2343948。別の例示的なアミノ反応性官能性キレート剤が、無水コハク酸Sucで修飾されたDfに基づいて、Dfのアミノ基をカルボン酸に変換するために用いられ、続いて2,3,5,6-テトラフルオロフェニルエステルTFPとして活性化された。TFP-N-Suc-Df図20、中央は、mAbのリジンεアミノ基へ結合され、精製されたmAb-N-Suc-Dfは89Zrと錯体化された。得られた89Zr-mAb-N-Suc-Dfは生理的条件下では安定であり、その生体内分布をマウスにおけるmAb-SMCC-SATA-Dfと比較したJNuclMed44127181。しかし、TFP-N-Suc-Dfの調製は、FeIII錯体としてヒドロキサミド基の保護を必要とする。鉄は89Zrとキレート化する前に、EDTAによる処理により除去されるが、しかし、多段階法は面倒であり、デスフェリオキサミンからの鉄の除去が不完全、及び/又はコンジュゲーションバッファーからのEDTAの除去が不完全である危険性を持ちあわせており、これは89Zr-キレート化収量にマイナスの影響を及ぼす可能性がある。従って、ヘテロ二官能性アミノ反応試薬のp-イソチオシアナートベンジル-デスフェリオキサミンDf-Bz-NCSが、チオ尿素結合を介するタンパク質へのDfの取り込みのために最近開発されたNatureProtocolsオンライン出版DOI101038nprot200822PerkLRetalpIsothiocyanatobenzyldesferrioxamineanewbifunctionalchelateforfacileradiolabelingofmonoclonalantibodieswithzirconium89forimmunoPETimagingEuropeanJournalOfNuclearMedicineAndMolecularImaging。Df-Bz-NCSを用いて調製された抗体コンジュゲートは、TFP-N-Suc-Dfを用いて調製された基準のコンジュゲートに匹敵する安定性とイメージング特性を示した。リジンεアミノ基を介した抗体と89Zrの結合について信頼できる方法が開発されて以来、89Zr標識抗体を用いる前臨床的イムノPET研究および臨床イムノPET研究の報告数が急速に増加しているCancerBiotherRadiopharm1865561NagengastWBetalInvivoVEGFimagingwithradiolabeledbevacizumabinahumanovariantumorxenograftJNuclMed4813139PerkLRetalZrasaPETsurrogateradioisotopeforscoutingbiodistributionofthetherapeuticradiometalsYandLuintumorbearingnudemiceaftercouplingtotheinternalizingantibodycetuximabJNuclMed461898906PerkLRetalQuantitativePETimagingofMetexpressinghumancancerxenograftswithZrlabelledmonoclonalantibodyDN30EuropeanJournalOfNuclearMedicineAndMolecularImaging35185767PerkLRetalPreparationandevaluationofZrZevalinformonitoringofYZevalinbiodistributionwithpositronemissiontomographyEuropeanJournalOfNuclearMedicineAndMolecularImaging33133745BorjessonPKetalPerformanceofimmunopositronemissiontomographywithzirconium89labeledchimericmonoclonalantibodyU36inthedetectionoflymphnodemetastasesinheadandneckcancerpatientsClinCancerRes12213340AertsHJetalDisparitybetweeninvivoEGFRexpressionand89ZrlabeledcetuximabuptakeassessedwithPETJNuclMed5012331DijkersECetalDevelopmentandCharacterizationofClinicalGrade89ZrTrastuzumabforHER2neuImmunoPETImagingJNuclMed50974981。ジルコニウム錯体の実施態様はまた、ジルコニウム結合キレート配位子、例えば、DTPACAS登録番号67-43-6、DOPA1,4,7,10-テトラアザシクロドデカン-1,4,7,10-四酢酸AdvancedDrugDeliveryReviews6013471370シクロペンタジエニル、及びアリル基PureandAppliedChemistry63797806ErkerGJourofOrganometallicChem400185203を含み、それらの各々は本明細書に参照により援用される。ジルコニウム錯体Zおよび他の放射性核種は、リジン側鎖のεアミノ基を介して又はシステインのチオール基を介して、モノクローナル抗体mAbを含む抗体Abへコンジュゲートすることができる。mAbにおいて、約40のリジン側鎖ProteinSci14243646又は8つのシステインClinCancerRes10706370がコンジュゲーションのために利用可能であるため、両方のアプローチは、mAbコンジュゲートの比率及び結合部位に関して不均一性を与える。結合部位内のリジン残基の修飾は、複合体の生物学的活性を低下させる可能性がありJNuclMed4830410ShivelyJE18FlabelingforimmunoPETwherespeedandcontrastmeetJNuclMed481702TaitJFetalImproveddetectionofcelldeathinvivowithannexinVradiolabeledbysitespecificmethodsJNuclMed47154653SchellenbergerEAetalOpticalimagingofapoptosisasabiomarkeroftumorresponsetochemotherapyNeoplasia518792、一方、ヒンジ領域におけるシステインの修飾は血漿半減期の減少を与えるClinCancerRes10706370。これらの制限は、生化学的アッセイ、PHESELECTORによる部位特異的コンジュゲーションの目的のため、システインへの変異について抗体の好ましいアミノ酸を迅速に同定するために、選択的に配置されたシステインを含むように操作されたmAbを使用することによって回避することができる。得られた抗体THIOMABは続いて、化学選択的及び部位特異的に細胞傷害性薬剤と、結合親和性を損なうことなく又は抗体足場の安定性に悪影響を及ぼすことなくコンジュゲートされるNatBiotechnol2692532。イメージングの観点から、高度な標的親和性及び最小限の非特異的な取り込みが最適な画質に必要である。したがって、部位特異的に放射性標識されたシステイン操作抗体THIOMABsは、不変の結合親和性及び足場の安定性を備えたトレーサーを与えることができ、これは、標的組織外において代謝物の非特異的取り込みを最小限にすることができる。本発明の一態様は、新規なDfに基づくチオール反応性官能性試薬である、マレイミドシクロヘキシル-デスフェリオキサミンDf-Chx-Mal、ブロモアセチルデスフェリオキサミンDf-Bac及びヨードアセチル-デスフェリオキサミンDf-Iacを使用する、THIOMABの部位特異的な放射性標識のための方法である。例示的な実施態様では、これらの試薬がトラスツズマブTHIOMABチオトラスツズマブに部位特異的にコンジュゲートし、89Zrとキレート化し、インビトロ及びインビボで評価される場合を含む。ある実施態様では、抗STEAP-1抗体は標識される。標識には、限定するものではないが、直接検出される標識又は分子、並びに、例えば酵素反応又は分子相互作用によって間接的に検出される酵素ないしはリガンドなどの分子が含まれる。例示的な標識には、限定するものではないが、放射性同位体である32P、14C、125I、3H及び131I、フルオロフォア、例えば希有土類キレート又はフルオレセイン及びその誘導体、ローダミン及びその誘導体、ダンシル、ウンベリフェロン、ルシフェラーゼ、例えばホタルルシフェラーゼ及び細菌ルシフェラーゼ、ルシフェリン、23ジヒドロフタルアジネジオン、西洋わさびペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、βガラクトシダーゼ、グルコアミラーゼ、リソチーム、サッカライドオキシダーゼ、例えばグルコースオキシダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ及びグルコース6リン酸デヒドロゲナーゼ、複素環のオキシダーゼ、例えばウリカーゼ及びキサンチンオキシダーゼ、HRP、ラクトペルオキシダーゼ又はマイクロペルオキシダーゼなどの色素前駆体を酸化するために水素ペルオキシダーゼを用いる酵素とカップリングさせたもの、ビオチン/アビジン、スピン標識、バクテリオファージ標識、安定した遊離基などが含まれる。ある実施態様では、抗STEAP-1抗体は不溶性基質に固定される。固定化は、溶液中で遊離したままであるいずれかのSTEAP-1から抗STEAP-1抗体を分離することを伴う。これは従来、水不溶性基質ないしは表面に吸着させる又は共有的にカップリングさせるなどしてアッセイ手順の前に抗STEAP-1抗体を不溶化するか、又は抗STEAP-1抗体とSTEAP-1との複合体の形成の後に、例えば免疫沈降によって抗STEAP-1抗体を不溶化することによって達成される。診断ないし検出の上記いずれかの実施態様は、抗STEAP-1抗体の代わりに、ないしは抗STEAP-1抗体に加えて本発明のイムノコンジュゲートを用いて行われうる。治療法本発明の抗体ないしイムノコンジュゲートは、例えばインビトロ、エクスビボ、及びインビボの治療法で使われてもよい。一態様では、本発明は、STEAP-1へのイムノコンジュゲートの結合が許容される条件下で抗STEAP-1抗体ないしはそのイムノコンジュゲートに細胞を曝すことを含む、インビボ又はインビトロでの細胞の成長ないしは増殖を阻害するための方法を提供する。細胞成長又は増殖を阻害することは、細胞の成長ないしは増殖を少なくとも10、20、30、40、50、60、70、80、90、95又は100低減することを意味し、細胞死を誘導することを含む。ある実施態様では、細胞は腫瘍細胞である。ある実施態様では、細胞は前立腺、肺、結腸、膀胱、又は卵巣の細胞、或いはユーイング肉腫の細胞である。ある実施態様では、細胞は、例えば本明細書中に例示したような異種移植片である。一態様では、本発明の抗体ないしイムノコンジュゲートは、前立腺癌、肺癌、結腸癌、膀胱癌、又は卵巣癌の細胞、或いはユーイング肉腫の細胞の増殖性疾患を治療するか又は予防するために用いる。ある実施態様では、細胞増殖性疾患は、STEAP-1の発現及び/又は活性の増加と関係している。例えば、ある実施態様では、前立腺、肺、結腸、膀胱、又は卵巣の細胞、或いはユーイング肉腫の細胞増殖性疾患は、前立腺、肺、結腸、膀胱、又は卵巣の細胞、或いはユーイング肉腫の細胞の表面上のSTEAP-1の発現増加と関係している。ある実施態様では、前立腺、肺、結腸、膀胱、又は卵巣の細胞、或いはユーイング肉腫の細胞増殖性疾患は腫瘍又は癌、或いはこれら癌の転移である。一態様では、本発明は、抗STEAP-1抗体ないしそのイムノコンジュゲートの有効量を個体に投与することを含む、前立腺、肺、又は結腸の細胞の増殖性疾患を治療するための方法を提供する。ある実施態様では、前立腺、肺又は結腸の細胞の増殖性疾患を治療するための方法は、抗STEAP-1抗体又は抗STEAP-1イムノコンジュゲートと、本明細書に挙げるような少なくとも一の付加的治療剤とを含有する薬学的製剤の有効量を個体に投与することを含む。一態様では、本発明の抗体ないしイムノコンジュゲートの少なくともいくつかは、ヒト以外の種のSTEAP-1を結合しうる。したがって、本発明の抗体ないしイムノコンジュゲートは、例えば、STEAP-1を含む細胞培養物において、ヒトにおいて、又は、本発明の抗体ないしイムノコンジュゲートが交差反応するSTEAP-1を有する他の哺乳動物においてSTEAP-1を結合するために用いてもよい。一実施態様では、抗STEAP-1抗体ないしイムノコンジュゲートは、イムノコンジュゲートのコンジュゲートした細胞毒素が細胞内部に送達するように、STEAP-1を抗体ないしイムノコンジュゲートと接触させて抗体ないしイムノコンジュゲート抗原複合体を形成させることによって、前立腺、肺又は結腸の細胞上のSTEAP-1をターゲティングするために使われてもよい。一実施態様では、抗STEAP-1抗体が結合するSTEAP-1はヒトSTEAP-1である。一実施態様では、抗STEAP-1抗体が結合するSTEAP-1はカニクイザルSTEAP-1である。一実施態様では、ヒト化抗STEAP-1抗体はヒト及び/又はカニクイザルSTEAP-1に結合する。一実施態様では、抗STEAP-1抗体ないしイムノコンジュゲートは、個体のSTEAP-1が結合されるように抗体ないしイムノコンジュゲートを個体に投与することを含む、STEAP-1発現及び/又は活性の増加と関係する疾患を患っている個体において抗体を結合させるための方法に用いられうる。一実施態様では、結合した抗体ないしイムノコンジュゲートはSTEAP-1を発現する前立腺、肺、結腸、膀胱、又は卵巣の細胞、或いはユーイング肉腫の細胞内に取り込まれる。一実施態様では、STEAP-1はヒトのSTEAP-1であり、個体はヒト個体である。あるいは、個体は、抗STEAP-1抗体が結合するSTEAP-1を発現している哺乳動物であってもよい。また更に、個体は、STEAP-1が導入された哺乳動物であってもよい。抗STEAP-1抗体ないしイムノコンジュゲートは、治療目的のためにヒトに投与されうる。さらに、抗STEAP-1抗体ないしイムノコンジュゲートは、獣医学の目的のため又はヒト疾患の動物モデルとして、抗体が交差反応するSTEAP-1を発現する非ヒト哺乳動物に投与されうる。後者に関して、このような動物モデルは、本発明の抗体ないしイムノコンジュゲートの治療有効性を評価するために有用となりうる。本発明の抗体ないしイムノコンジュゲートが、治療において単独、又は他の組成物と組み合わせて使われてもよい。例えば、本発明の抗体ないしイムノコンジュゲートは、少なくとも一の付加的治療剤及び/又はアジュバントと同時に投与されてもよい。ある実施態様では、付加的治療剤は、細胞障害性剤、化学療法剤又は増殖阻害性剤である。このような実施態様のうちの一つでは、化学療法剤は、例えば、シクロホスファミド、ヒドロキシダウノルビシン、アドリアマイシン、ドキソルビシン、ビンクリスチン、プレドニゾロン、CHOP、CVPないしはCOP、又は抗PSCA例えば米国特許第6824780号参照、抗VEGF、ジェネンテックインク、抗HER2例えば、ハーセプチン登録商標、オムニターグTM、ジェネンテックインク、又は抗HER2とタキソール登録商標例えば、BioWorldToday、1999年11月17日、1頁の組み合わせなどの免疫治療法などの薬剤又は薬剤の組合せであって、この併用療法は、前立腺、肺及び/又は結腸の細胞増殖性疾患、癌及び/又は癌の転移の治療に有用である。上記の併用治療には、併用投与、及び別々の投与、別々の場合には、本発明の抗体ないしイムノコンジュゲートは付加的治療剤及び/又はアジュバントの前、同時及び/又はその後に投与することができる。また、本発明の抗体ないしイムノコンジュゲートは、放射線療法と組み合わせて使われてもよい。本発明の抗体ないしイムノコンジュゲートは、非経口的、皮下、腹膜内、肺内、及び鼻腔内、そして、必要に応じて局所の治療のために、病巣内投与を含む任意の好適な手段によって投与することができる。非経口注入には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹膜内、又は皮下的な投与を含む。加えて、抗体ないしイムノコンジュゲートを、特に抗体ないしイムノコンジュゲートの用量を減少して、パルス注入によって好適に投与する。投与が短期のものであるか長期のものであるかにある程度依存して、任意の好適な経路、例えば、静脈内又は皮下注射などの注射によって投与することができる。本発明の抗体ないしイムノコンジュゲートは、医学的実用性に合わせた様式で調製し、1回分に分けて、投与される。ここで考慮する要因は、治療する特定の疾患、治療する特定の哺乳動物、個々の患者の臨床状態、疾患の原因、薬剤の運搬部位、投与の方法、投与の日程計画、及び医師が知る他の因子を含む。必要ではないが場合によっては、問題の疾患を予防するか又は治療するために一般に用いられる一つ以上の作用剤と抗体ないしイムノコンジュゲートとを調製する。そのような他の作用剤の有効量は、製剤中の抗体ないしイムノコンジュゲートの量、疾患の型又は治療、及び上記の他の因子に依存する。これらは、一般的に、ここに記載されるものと同じ用量及び投与経路で、又はここに記載される用量の1~99で、或いは経験的/臨床的に適切と判断される任意の用量及任意の投与経路で、用いられる。疾患の予防又は治療のために、本発明の抗体ないしイムノコンジュゲートの好適な用量は、治療する疾患のタイプ、抗体ないしイムノコンジュゲートのタイプ、疾患の重症度及び経過、抗体ないしイムノコンジュゲートを予防目的で投与するか治療目的で投与するか、以前の治療法、患者の病歴及び抗体ないしイムノコンジュゲートへの応答性、及び担当医師の判断に依存するであろう。抗体ないしイムノコンジュゲートは一時的又は一連の治療にわたって適切に患者に投与される。疾患のタイプ及び重症度に応じて、約1μg/kg~100mg/kgの抗体ないしイムノコンジュゲートを、例えば一以上の分割投与又は連続注入による患者投与の初期候補用量とすることができる。ある典型的な1日量は、上記の要因に応じて、約1μg/kg~100mg/kg以上の範囲であろう。症状に応じて、数日間以上にわたる繰り返し投与は、通常、所望の疾患症状の抑制が得られるまで持続する。抗体ないしイムノコンジュゲートの用量の例は、約0.05mg/kg~約10mg/kgの範囲であろう。ゆえに、約0.5mg/kg、2.0mg/kg、4.0mg/kg又は10mg/kgの抗体ないしイムノコンジュゲートの一以上の用量を患者に投与してもよい。このような用量は、間欠的に、例えば週ごと又は3週ごとに投与してもよい。初期のより高い負荷投与量の後、一以上のより低い用量を投与してもよい。例示的用量療法は、約4mg/kgの初期負荷投与量の後、約2mg/kgの毎週の維持用量抗体を投与することを含む。しかしながら、他の投与計画が有効かもしれない。この治療の進行は、従来技術及びアッセイにより容易にモニターすることができる。アッセイ本発明の抗STEAP-1抗体及びイムノコンジュゲートは、当分野で公知の様々なアッセイによって、それらの物理的/化学的な性質及び/又は生物活性について特徴付けされうる。活性アッセイ一態様では、アッセイは、生物学的な活性を有する抗STEAP-1抗体ないしそのイムノコンジュゲートを同定するために提供される。生物学的な活性には、例えば、細胞成長又は増殖の阻害能、又はプログラムされた細胞死を含む細胞死誘導能が含まれうる。また、インビボ及び/又はインビトロでのこのような生物学的な活性を有する抗体ないしイムノコンジュゲートが提供される。ある実施態様では、抗STEAP-1抗体又はそのイムノコンジュゲートは、インビトロでの細胞成長又は増殖を阻害する能力について試験される。細胞成長又は増殖の阻害のためのアッセイは当分野で周知である。本明細中に記載の細胞殺傷アッセイにて例示した細胞増殖のためのあるアッセイは、細胞生存度を測定する。このようなあるアッセイは、Promegaから市販されているCellTiterGloTM発光細胞生存率アッセイである。このアッセイは、代謝活性のある細胞の指標であるATPの存在の量に基づいて生細胞数を決定する。Crouch等JImmunolMeth1608188、米国特許第6602677号を参照。アッセイは、自動ハイスループットスクリーニングに用いられるように96又は384ウェルフォーマットで行ってもよい。Cree等AntiCancerDrugs6398404を参照。アッセイ手順は、単一の試薬試薬を直接培養細胞に加えることを伴う。この結果細胞溶解が生じ、ルシフェラーゼ反応によって生産される発光シグナルが生成される。この発光シグナルは、培養物中に存在する生細胞の数に直接比例している、ATPの存在の量に比例する。データは、ルミノメーター又はCCDカメラ画像デバイスによって記録することができる。発光の結果は相対的な光の単位として表す。細胞増殖についての他のアッセイはMTTアッセイであり、これは、ミトコンドリアレダクターゼによる325ジフェニルテトラゾリウムブロマイドのホルマザンへの酸化を測定する比色アッセイである。CellTiterGloTMアッセイのように、このアッセイは、細胞培養物に存在する代謝活性のある細胞の数を表す。例としてMosmannJImmunolMeth655563及びZhang等CancerRes6538773882を参照。一態様では、抗STEAP-1抗体は、インビトロでの細胞死を誘導する能力について試験される。細胞死の誘導についてのアッセイは当分野で周知である。いくつかの実施態様では、このようなアッセイは、例えば、プロピジウムヨウ素トリパンブルーCytotechnology17111を参照、又は7AADの取り込みによって示される膜統合性の喪失を測定する。例示的なPI取り込みアッセイでは、細胞は、10の熱不活性化FBSと2mMのLグルタミンを添加した、ダルベッコ変更イーグル培地:ハムF12中で培養する。したがって、このアッセイは、補体と免疫エフェクター細胞の非存在下で行う。100×20mmのディッシュにディッシュ当たり3×106の密度で細胞を播き、終夜接着させる。培地を取り除き、新鮮な培地のみ、又は様々な濃度の抗体ないしイムノコンジュゲートを含む培地と交換する。細胞を3日間インキュベートする。処置後、単層をPBSにて洗浄し、トリプシン処理によって脱離させる。次いで、1200rpmで4°Cで5分間遠心して、ペレットを3mlの冷却Ca2結合バッファに再懸濁し、細胞凝集塊を取り除くために35mmのストレーナーを取り付けた12×75mmチューブに分注する。次いで、チューブにPIを加える。試料は、FACSCANTMフローサイトメーター及びFACSCONVERTTMCellQuestソフトウェアを用いて分析される。次いで、PI取り込みによって定まる統計学的に有意なレベルの細胞死を誘導する抗体ないしイムノコンジュゲートを同定する。一態様では、抗STEAP-1抗体ないしイムノコンジュゲートは、インビトロでのアポトーシスを誘導する能力について試験される。アポトーシスを誘導する抗体ないしイムノコンジュゲートの例示的なアッセイはアネキシン結合アッセイである。例示的なアネキシン結合アッセイでは、細胞を培養し、前段落で述べたようにディッシュに播く。培地を取り除き、新鮮培地のみ、又は0.001~10μg/mlの抗体ないしイムノコンジュゲートを含む培地と交換する。3日間のインキュベート後、単層をPBSで洗浄し、トリプシン処理によって脱離させる。次いで、細胞を遠心して、Ca2結合バッファに再懸濁し、前段落で述べたようにチューブに分注する。その後、チューブに標識したアネキシンを加える。試料は、FACSCANTMフローサイトメーター及びFACSCONVERTTMCellQuestソフトウェアを用いて分析される。次いで、コントロールと比べて統計学的に有意なレベルのアネキシン結合を誘導する抗体ないしイムノコンジュゲートを同定する。アポトーシスを誘導する抗体ないしイムノコンジュゲートの他の例示的なアッセイは、ゲノムDNAのヌクレオソーム間分解を検出するためのヒストンDNAELISA比色アッセイである。このアッセイは、例えば細胞死検出ELISAキットを用いて行うことができる。上記いずれかのインビトロアッセイに用いるための細胞には、天然でSTEAP-1を発現する又はSTEAP-1を発現するように操作された細胞ないしは細胞株が含まれる。このような細胞には、同じ細胞起源の正常細胞と比べてSTEAP-1を過剰発現する腫瘍細胞が含まれる。また、このような細胞には、STEAP-1を発現する細胞株や、正常にSTEAP-1を発現しないがSTEAP-1をコードする核酸を形質移入してある細胞株が含まれる。一態様では、抗STEAP-1抗体ないしそのイムノコンジュゲートは、インビボでの細胞成長又は増殖を阻害する能力について試験される。ある実施態様では、抗STEAP-1抗体ないしそのイムノコンジュゲートは、インビボでの腫瘍成長を阻害する能力について試験される。異種移植片モデルなどのインビボモデルシステムが前記の試験のために用いられうる。例示的な異種移植片システムでは、好適に免疫を低下させた非ヒト動物、例えばSCIDマウスにヒト腫瘍細胞が導入される。本発明の抗体ないしイムノコンジュゲートは動物に投与される。抗体ないしイムノコンジュゲートの腫瘍成長を阻害するか又は減少させる能力が測定される。上記の異種移植片システムのある実施態様では、ヒト腫瘍細胞はヒト患者の腫瘍細胞である。このような異種移植片モデルを調製するために有用な細胞には、ヒトの前立腺、肺、又は結腸の腫瘍細胞株が含まれ、これには、限定されるものではないが、外来性のSTEAP-1を発現するPC3細胞と、天然にSTEAP-1を発現する細胞が含まれ、天然にSTEAP-1を発現する細胞には、限定されるものではないが、LnCAP細胞SouthernResearchInstitute、アラバマ州バーミンガム、LuCAP77細胞、及びLuCAP35V細胞ワシントン大学、ワシントン州シアトルが含まれる。ある実施態様では、皮下投与や、哺乳動物の脂肪体などの好適な部位に移植することによって好適に免疫を低下させた非ヒト動物にヒト腫瘍細胞を導入する。結合アッセイ及び他のアッセイ一態様では、抗STEAP-1抗体はその抗原結合活性について試験される。例えば、ある実施態様では、抗STEAP-1抗体は、細胞の表面に発現される外来性又は内在性のSTEAP-1に結合する能力について試験される。FACSアッセイが前記の試験に用いられてもよい。一態様では、競合アッセイを用いて、STEAP-1への結合について、120v.24抗体を含むがこれに限定されない、120グラフト又はそのヒト化変異体と競合するモノクローナル抗体を同定してもよい。ある実施態様では、前記の競争する抗体は、変異1220v.24ヒト化抗STEAP-1抗体を含む、120グラフト抗体、又はヒト化120グラフト抗体が結合する同じエピトープに結合する。例示的な競合アッセイには、限定するものではないが、HarlowandLaneAntibodiesALaboratoryManualch14に挙げられるものなどの常套的アッセイが含まれる。抗体が結合するエピトープをマッピングするための詳細な例示的な方法は、MethodsinMolecularBiologyvol66のMorrisEpitopeMappingProtocolsに示される。2つの抗体のそれぞれが50以上他の結合をブロックする場合、これらの抗体は同じエピトープに結合すると言える。例示的な競合アッセイでは、固定されたSTEAP-1は、STEAP-1に結合する第一標識抗体と、STEAP-1への結合について第一抗体と競合する能力について試験されている第二非標識抗体とを含む溶液中でインキュベートされる。二次抗体はハイブリドーマ上清に存在してもよい。コントロールとして、固定したSTEAP-1を第一標識抗体を含むが第二非標識抗体は含まない溶液中でインキュベートする。STEAP-1への第一抗体の結合に許容される条件下でのインキュベートの後、過剰な結合していない抗体を取り除き、固定されたSTEAP-1と結合している標識の量を測定する。固定されたSTEAP-1と結合している標識の量がコントロール試料と比較して試験試料において実質的に減少している場合、二次抗体がSTEAP-1への結合について第一抗体と競合していることが示唆される。ある実施態様では、固定されたSTEAP-1は、細胞の表面上に、又はその表面上にSTEAP-1を発現する細胞から得た膜調製物中に存在する。一態様では、精製した抗STEAP-1抗体はさらに、限定するものではないが、N末端配列決定法、アミノ酸分析、非変性サイズ排除高圧液体クロマトグラフィ、質量分析、イオン交換クロマトグラフィ及びパパイン消化を含む、一連のアッセイによって特徴付けることができる。一実施態様では、本発明は、全てではないが幾つかのエフェクター機能を有する変更された抗体を考慮し、この抗体は、抗体のインビボ半減期が重要であり、更に特定のエフェクター機能が不要又は有害である多くの用途の好ましい候補となる。特定の実施態様では、抗体のFc活性を測定して、所望の特性だけが維持されていることを確認する。インビボ及び/又はインビトロ細胞障害アッセイを行って、CDC及び/又はADCC活性の減少/枯渇を確認することができる。例えば、Fcレセプター結合アッセイを行って、抗体がFcγR結合を欠損しているが、FcRn結合能は維持していることを確認することができる。ADCCを仲介する第一細胞であるNK細胞は、FcγRIIIのみを発現し、その一方で単核細胞はFcγRI、FcγRII及びFcγRIIIを発現する。造血系細胞でのFcR発現については、Ravetch及びKinetAnnuRevImmunol945792の464頁の表3に要約されている。対象とする分子のADCC活性を評価するためのインビトロアッセイの一例は、米国特許第5500362号又は同第5821337号に記載されている。そのようなアッセイに有用なエフェクター細胞には、末梢血単核細胞及びナチュラルキラー細胞が含まれる。あるいは、又は加えて、対象とする分子のADCC活性は、例えばClynes等のPNAS95652656に開示されているような動物モデルにおいてインビボに評価することができる。また、C1q結合アッセイを行って、抗体がC1qに結合できない、つまりCDC活性を欠損していることを確認してもよい。補体活性化を評価するために、例えばGazzanoSantoro等JImmunolMethods202163に記載のように、CDCアッセイを行ってもよい。また、FcRn結合及びインビボクリアランス/半減期測定を、当分野で公知の方法を用いて行うことができる。以下は本発明の方法及び組成物の例である。前述の一般的な記載から、様々な他の実施態様が実施されうることが理解されるであろう。実施例1:ヒト化抗STEAP-1抗体の調製抗体、抗体断片、VLドメイン又はVHドメインのアミノ酸配列変異体をコードする核酸分子を、当分野で公知の様々な方法によって調製する。これらの方法には、限定するものではないが、天然源からの単離又は初期に調製された抗体、抗体断片、VLドメイン又はVHドメインの変異体ないしは非変異体の、オリゴヌクレオチド媒介突然変異誘発、PCR突然変異誘発、及びカセット突然変異誘発による調製が含まれる。例えば、キュンケル法を用いた変異アミノ酸を有するアミノ酸置換のために、VH内、場合によって一又は複数のCDR内のVLの利用可能なアミノ酸位置をターゲットとすることによってライブラリを作製することができる。例えば、Kunkel等MethodsEnzymol154367382及び本明細書中の実施例を参照のこと。また、ランダム化配列の生成も以下の実施例に記載する。オリゴヌクレオチド配列は、本発明のポリペプチドのCDR又はFR領域の特定の位置に対して設定されたコドンセットの一又は複数を含む。コドンセットは所望の変異体アミノ酸をコードするのに用いられる、一組の異なるヌクレオチドトリプレット配列である。コドンセットは、IUBコードによって下で示すように、特定のヌクレオチド又はヌクレオチドの等モル混合物を示すために符号を使って表される。IUBコードGグアニンAアデニンTチミンCシトシンRA又はGYC又はTMA又はCKG又はTSC又はGWA又はTHA又はC又はTBC又はG又はTVA又はC又はGDA又はG又はTHNA又はC又はG又はT例えば、コドンセットDVKでは、DはヌクレオチドA又はG又はTであり、VはA又はG又はCであり、KはG又はTである。このコドンセットは18個の異なるコドンを表し、アミノ酸Ala、Trp、Tyr、Lys、Thr、Asn、Lys、Ser、Arg、Asp、Glu、Gly及びCysをコードすることができる。オリゴヌクレオチド又はプライマーのセットは、標準の方法を使って合成できる。一組のオリゴヌクレオチドは、例えば、コドンセットによって提供されるヌクレオチドトリプレットの可能な組合せのすべてを代表し、所望のアミノ酸群をコードする配列を含む固相法によって合成することができる。ある位置での選ばれたヌクレオチド縮退を有するオリゴヌクレオチドの合成は、当技術分野で公知である。そのようなある種のコドンセットを有しているヌクレオチドのセットは、市販の核酸シンセサイザーAppliedBiosystemsFosterCityCAなどから入手可能を使って合成することができ、又は市販品を入手することができる例えば、LifeTechnologiesRockvilleMDから。したがって、特定のコドンセットを有する合成オリゴヌクレオチドセットは、一般的に異なる配列の複数のオリゴヌクレオチドを含み、この相違は配列全体の中のコドンセットによるものである。本発明で使用されるように、オリゴヌクレオチドは可変ドメイン核酸鋳型へのハイブリダイゼーションを可能にする配列を有し、また、クローニングに役立つ制限酵素部位を含むこともできる。1つの方法では、変異体アミノ酸をコードする核酸配列は、オリゴヌクレオチドが媒介する突然変異誘発によって作製することができる。この手法はZoller等NucleicAcidsRes1064876504頁が記載しているように、当技術分野で公知である。つまり、変異体アミノ酸をコードしている核酸配列は所望のコドンセットをコードしているオリゴヌクレオチドセットをDNA鋳型とハイブリダイズすることによって作製され、前記鋳型は可変部核酸鋳型配列を含むプラスミドの一本鎖型である。ハイブリダイゼーションの後、DNAポリメラーゼを用いて鋳型の二次相補鎖すべてを合成し、この相補鎖はオリゴヌクレオチドプライマーを取り込み、前記オリゴヌクレオチドセットによって提供されるコドンセットを含むようになる。通常、長さが少なくとも25ヌクレオチドのオリゴヌクレオチドが使われる。最適オリゴヌクレオチドは、突然変異体をコードするヌクレオチドの両側が鋳型と完全に相補性である12から15個のヌクレオチドを持つ。これにより、オリゴヌクレオチドが正しく一本鎖DNA鋳型分子にハイブリダイズするようになる。オリゴヌクレオチドは、当技術分野で公知の手法、例えばCrea等ProcNatlAcadSciUSA755765頁に記載の手法を使って容易に合成される。DNA鋳型はバクテリオファージM13ベクター市販のM13mp18及びM13mp19ベクターが適当に由来するベクター、又はViera等MethEnzymol1533頁に記載されている一本鎖ファージ複製起点を含むベクターによって生成される。このように、突然変異させるべきDNAは、一本鎖鋳型を生成するためにこれらのベクターの1つに挿入することができる。一本鎖鋳型の生産は、上掲Sambrook等のセクション4.21~4.41で記載されている。天然のDNA配列を変えるために、オリゴヌクレオチドが適当なハイブリダイゼーション条件の下で一本鎖鋳型にハイブリダイズされる。DNA重合酵素、通常、T7DNAポリメラーゼ又はDNAポリメラーゼIのクレノー断片を次に加え、合成のためのプライマーとしてオリゴヌクレオチドを使って鋳型の相補鎖を合成する。こうしてDNAの1つの鎖は遺伝子1の突然変異した形態をコードし、他の鎖元の鋳型は遺伝子1の未変性、未変更の配列をコードするようにヘテロ二本鎖分子が形成される。このヘテロ二本鎖分子は、次に適当な宿主細胞、通常大腸菌JM101のような原核生物に形質転換される。細胞を増殖させた後にアガロースプレートの上へプレートし、突然変異したDNAを含む細菌コロニーを同定するために32リン酸塩で放射性標識されたオリゴヌクレオチドプライマーを使ってスクリーニングする。上記の方法は、プラスミドの両方の鎖が突然変異を含むホモ二本鎖分子が作製されるように修正することができる。この修正は以下の通りである。一本鎖オリゴヌクレオチドを先に述べたように一本鎖鋳型にアニールする。3つのデオキシリボヌクレオチド、デオキシリボアデノシンdATP、デオキシリボグアノシンdGTP及びデオキシリボチミジンdTTの混合物を、dCTP-aSと呼ばれる修飾されたチオデオキシリボシトシンAmershamから入手できると合わせる。この混合物を鋳型-オリゴヌクレオチド複合体に加える。DNAポリメラーゼをこの混合物へ追加すると、突然変異した塩基以外は鋳型と同一のDNA鎖が生成する。さらに、この新しいDNA鎖はdCTPの代わりにdCTP-aSを含み、これはDNA鎖を制限酵素による消化作用から保護するのに役立つ。二本鎖ヘテロ二本鎖の鋳型鎖に適当な制限酵素でニックを入れた後、突然変異を起こさせる部位を含む領域の後方で鋳型鎖はExoIIIヌクレアーゼ又は適当な他のヌクレアーゼで消化することができる。反応を終了すると、部分的にだけ一本鎖の分子が残る。次に、完全な二本鎖DNAホモ二本鎖が、4つのデオキシリボヌクレオチド三燐酸のすべて、ATP及びDNAリガーゼの存在下でDNAポリメラーゼを使って形成される。このヘテロ二本鎖分子は、次に適当な宿主細胞に形質転換することができる。前に示したように、オリゴヌクレオチドセットの配列の長さは鋳型核酸にハイブリダイズするために十分な長さであり、また、必須ではないが制限部位を含むこともできる。DNA鋳型はバクテリオファージM13ベクターに由来するベクター、又はViera等MethEnzymol1533頁に記載されている一本鎖ファージ複製起点を含むベクターによって生成される。このように、突然変異させるべきDNAは、一本鎖鋳型を生成するためにこれらのベクターの1つに挿入する必要がある。一本鎖鋳型の生産は、上掲Sambrook等のセクション4.21~4.41で記載されている。他の方法によると、ライブラリーは上流及び下流のオリゴヌクレオチドセットを提供することによって生成することができ、各セットは、オリゴヌクレオチドの配列内で提供されたコドンセットによって確立された異なる配列を有する複数のオリゴヌクレオチドを持つ。上流及び下流のオリゴヌクレオチドセットは、可変ドメイン鋳型核酸配列と共に、PCR産物のライブラリーを作製するためにPCR法で使うことができる。PCR産物は確立された分子生物学的手法を使って他の関連した、又は無関係な核酸配列、例えばウイルスのコートタンパク質構成成分及び二量体化ドメインと融合することができるので、核酸カセットと呼ぶこともある。オリゴヌクレオチドセットは、核酸カセットを作製するための鋳型として可変ドメイン核酸鋳型配列を使ってPCR法で使うことができる。可変ドメイン核酸鋳型配列は、対象核酸配列すなわち、置換の対象となるアミノ酸をコードしている核酸配列を含む免疫グロブリンの軽鎖又は重鎖のいかなる部分でもよい。可変ドメイン核酸鋳型配列は、第1の核酸鎖及び相補性の第2の核酸鎖を有する二本鎖DNA分子の一部である。可変ドメイン核酸鋳型配列は、少なくとも可変ドメインの一部を含み、また少なくとも1つのCDRを持つ。場合によっては、可変ドメイン核酸鋳型配列は複数のCDRを含む。可変ドメイン核酸鋳型配列の上流部及び下流部は、上流域のオリゴヌクレオチドセット及び下流域のオリゴヌクレオチドセットの構成メンバーによるハイブリダイゼーションの対象とすることができる。上流のプライマーセットの第1のオリゴヌクレオチドは第1の核酸鎖にハイブリダイズすることができ、下流のプライマーセットの第2のオリゴヌクレオチドは第2の核酸鎖にハイブリダイズすることができる。オリゴヌクレオチドプライマーは1つ又は複数のコドンセットを含むことができ、可変部核酸鋳型配列の一部にハイブリダイズするように設計することができる。これらのオリゴヌクレオチドの使用により、PCR後に2つ以上のコドンセットをPCR産物すなわち核酸カセットに導入することができる。抗体可変ドメインをコードしている核酸配列の領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドプライマーは、アミノ酸置換の対象となるCDR残基をコードする部分を含む。上流域及び下流域のオリゴヌクレオチドセットは、オリゴヌクレオチド配列内に制限部位を含むように合成することもできる。これらの制限部位は、さらなる抗体配列を有している発現ベクターへの核酸カセットすなわちPCR反応生成物の挿入を容易にする。一実施態様では、制限部位は外来の核酸配列を導入することなく、又は元のCDR又はフレームワーク核酸配列を取り除くことなく核酸カセットのクローニングを容易にするようになっている。核酸カセットは、PCR反応によって作製した対象アミノ酸置換を含む軽鎖又は重鎖の配列の一部又はすべての発現のために、いかなる適当なベクターにもクローニングすることができる。本発明で詳述される方法によると、核酸カセットはウイルスコートタンパク質のすべて又は一部と融合した軽鎖又は重鎖配列の一部又はすべてすなわち、融合タンパク質を形成の生産を可能にしているベクターにクローニングされるか、あるいは、粒子又は細胞の表面で提示される。数種類のベクターが入手でき、それらは本発明の実施に用いることができるが、ファージミドベクターが本明細書での使用には好ましいベクターであり、その訳はそれらが相対的に容易に構築し、また容易に増幅することができるからである。当業者に公知のように、ファージミドベクターは、通常、プロモーター、シグナル配列、表現型選択遺伝子、複製起点部位及び他の必要な構成成分を含む様々な構成成分を含む。特定の変異体アミノ酸の組合せが発現される場合、核酸カセットは、重鎖又は軽鎖の可変ドメインのすべて又は一部をコードすることができ、また変異体アミノ酸の組合せをコードすることができる配列を含む。ライブラリーの場合のようにこれらの変異体アミノ酸又は変異体アミノ酸の組合せを含んでいる抗体の作製のために、核酸カセットは、さらなる抗体配列、例えば軽鎖及び重鎖可変部の可変又は定常ドメインのすべて又は一部を含んでいる発現ベクターに挿入することができる。これらのさらなる抗体配列は他の核酸配列、例えばウイルスコートタンパク質をコードする配列と融合することができ、したがって融合タンパク質の生産を可能にする。ここでは、マウス抗ヒトSTEAP-1抗体のヒト化について記載する。材料と方法残基番号はカバットに従う。一文字アミノ酸略記号を用いる。DNA縮重はIUBコードを用いて表す。マウス120可変ドメインのクローニングとキメラ120抗体の生成-標準的な方法を用いて、M2-120545を産生するハイブリドーマ細胞から総RNAを抽出した。可変軽鎖および可変重鎖ドメインを、重鎖および軽鎖に対する変性プライマーによるRT-PCRを用いて増幅した。フォワードプライマーは、VLおよびVHの領域のN末端アミノ酸配列に特異的とした。それぞれLCおよびHCのリバースプライマーは、種間で高度に保存されている定常軽鎖および定常重鎖ドメイン1の領域にアニールするように設定した。増幅されたVLおよびVHは、哺乳動物発現ベクタにクローンをつくられた。インサートのポリヌクレオチド配列は、慣例的な配列決定法を用いて決定した。M2-120545VLおよびVHのアミノ酸配列はそれぞれ図2Aおよび2Bに示す。マウス120キメラの生成-ヒトIgGの定常ドメインに、マウス120の可変重鎖及び可変軽鎖の領域を融合させることによって、キメラ抗STEAP-1を調製した。結果として生じる抗体を本明細書において120キメラ、キメラ120、キメラ120IgG又はFcキメラと称する。アクセプターヒトコンセンサスフレームワークへの直接高頻度可変領域移植-マウス120のヒト化の間に構築された変異体を、IgGの形態のタンパク質として又はファージ上にディスプレイされるFabとして評価した。この試験に用いるファジミドは、一価性Fab-g3ディスプレイベクターであって、phoAプロモーターの制御下にある2つのオープンリーディングフレームからなる。第一オープンリーディングフレームは、アクセプター軽鎖のVL及びCH1ドメインに融合したstIIシグナル配列からなり、第二オープンリーディングフレームは、微量ファージコートタンパク質P3が続くアクセプター重鎖のVH及びCH1ドメインに融合したstIIシグナル配列からなる。マウス120のVLおよびVHドメインを、ヒトVLκIおよびヒトVHサブグループIIIコンセンサス配列と配列比較した。CDRグラフトを作製するために、マウス120抗体の高頻度可変領域を、huKIおよびhuIIIアクセプターフレームワークに移植した。マウス120抗体の高頻度可変領域をアクセプターヒトコンセンサスフレームワークに操作して、直接CDR-グラフトを生成した。VLドメインでは、以下の領域をヒトコンセンサスアクセプターに移植した:位置24-34、50-56および89-97。VHドメインでは、位置26-35a、49-65および95-102を融合した。120グラフトの軽鎖および重鎖の可変領域の配列を図2A-2Bに示す。CDRは囲みで示す。これらCDR定義には、それら配列の超可変性、それらの構造的位置および抗原抗体接触への関与によって決定される位置が含まれる。ファージ上にディスプレイされるFabとして又はIgGとして発現される直接グラフト変異体は、各々の高頻度可変領域のために異なるオリゴヌクレオチドを用いたキュンケル突然変異誘発によって生成した。DNA塩基配列決定法によって正しいクローンを評価した。ヒト化120ファージ変異体の生成-キュンケル突然変異誘発によってファージにディスプレイされるFabとして、ヒト化120変異体を生成した。リン酸化オリゴヌクレオチドを、50mMTrispH7.5、10mMMgCl2中の300ngのキュンケルテンプレートに添加して、終体積を10μlにした。混合物を90°Cで2分、50°Cで5分アニールさせ、次いで氷上で冷ました。次いで、アニールさせたテンプレートに、0.5μlの10mMATP、0.5μlの10mMdNTP、1μlの100mMDTT、1μlの10×TMバッファ、80UのT4リガーゼ、及び4UのT7ポリメラーゼを添加して充填し、総量20μlにし、室温に2時間置いた。次いで充填してライゲートさせた生成物にてXL1-ブルー細胞を形質転換した。DNA塩基配列決定法によって正しいクローンを同定した。正しいファージクローンを50μg/mlのカルベニシリン及びM13/KO7ヘルパーファージを含む25mlの2YT中で37°Cで終夜生育させた。ヒト化120変異体の評価-IgGとして発現されるヒト化変異体を、Steap1ポジティブ及びネガティブ細胞株を用いたFACS分析によって評価した。また、ファージにディスプレイされるFabとして発現されるヒト化変異体を、FACS分析によって評価した。まずFab変異体を発現するファージを、Fabの軽鎖に融合されるflag-tagを検出するために使用するファージELISAを用いてそれらのFabディスプレイレベルについて評価した。MaxiSorpマイクロタイタープレートを、PBS中10μg/mlの抗gD1766にて終夜をかけてコートし、その後カゼインブロッカーにてブロックした。培養物上清からのファージを、組織培養マイクロタイタープレート中で0.5BSAを含むPBSTにて段階的に希釈し、コートしたウェルに移し、1時間おいて、Fabディスプレイファージを捕獲した。PBSTにてプレートを洗浄し、HRPコンジュゲート抗M13を添加して40分間置いた。PBSTにてプレートを洗浄し、テトラメチルベンジジン基質を添加して反応させた。405nmの吸光度を、ファージの表面上のFabディスプレイレベルの推量として用いた。ファージ調製物を、希釈によってディスプレイについて正規化した。低ディスプレイファージをFACS分析のために適切に用いた。ファージ結合のFACS分析のために、細胞を、2mMEDTAを用いてプレートから取り出し、15mlの円錐形底のチューブに回収し、遠心分離法によってペレット化した。細胞は、FACSバッファ中の100μlのファージに再懸濁し、氷上で1~2時間インキュベートした。遠心分離法によって試料をFACSバッファにて2回洗浄した。2μg/mlの抗M135G7コントロール抗体を加え、少なくとも45分間氷上でインキュベートした。遠心分離法によって試料をFACSバッファにて2回洗浄した。抗マウスPEの1200希釈物を加え、氷上で30分間インキュベートした。遠心分離法によって試料をFACSバッファにて再度2回洗浄し、FACSにて分析した。FACSによるIgGの分析のために、ファージFACSなどの目的で細胞を調製した。5μg/mlの各IgGを加え、氷上に1時間おいた。遠心分離法によって試料をFACSバッファにて2回洗浄し、抗ヒトPEコンジュゲートの1200希釈物を加え、30分間おいた。遠心分離法によって試料をFACSバッファにて再度2回洗浄し、FACSにて分析した。IgG産生および親和性測定-プロテインG親和性クロマトグラフィにてIgGを精製した。親和性測定は、293STEAP1NTLB50細胞上のスキャッチャード分析によって行った。結果と考察マウス120可変ドメイン配列およびCDRアサインメントグラフト設定-M2-120545のヒト化のために用いるヒトアクセプターフレームワークは、コンセンサスヒトκIVLドメインおよびヒトサブグループIIIコンセンサスVHドメインに基づく。マウスM2-120545のVLおよびVHドメインを、ヒトκIおよびサブグループIIIドメインとそれぞれ配列比較した。各々の相補性領域を同定し、ヒトアクセプターフレームワークに移植して、ファージ上のFabとしてディスプレイされ、IgGとして発現されうるCDRグラフトを生成した。ヒト化抗STEAP1抗体バージョン24可変領域の配列を図2Aおよび2Bに示す。ファージ上にディスプレイされる120-グラフトFab及び120-グラフトIgGを、FACS分析によって外因性STEAP1発現細胞への結合について試験した。120-グラフトIgGはSTEAP1発現細胞に特異的に結合したが、120-グラフトIgGについて観察されるFACSシグナルは、結合親和性に欠損を示すキメラ120IgGについて観察されるシグナルよりも小さかった。また、120-グラフトIgGをディスプレイするファージは、STEAP1発現細胞上でのみ観察されたFACSシグナルを生成した。この変化は、キメラ120IgGについて観察される変化よりも小さかった。120-グラフトIgGのスキャッチャード分析からも、結合親和性の有意な欠失が示された。M2-120545のヒト化-CDR構造及びVL:VHドメインパッキングに影響するおよそ30バーニア位置が同定されており、抗体のヒト化の際にはドナーとヒトフレームワーク間の位置での変化を考慮しなくてはならない487499。マウスM2-120545とコンセンサスヒトκIVLドメイン及びヒトサブグループIIIコンセンサスVHドメインとの配列比較を評価すると、VHドメイン内の6つの重要なバーニヤ位置:24、37、48、67、73、78での配列相違が明らかとなった。これらの位置の影響を評価するために、マウスの残基を、ファージ上のFabのヒトコンセンサスサブグループIIIVHドメインに、別々に導入した。ファージ上にディスプレイされる120-グラフトFabに対して以下の突然変異をそれぞれ行った:A24V、V37I、V48M、F67IおよびL78F。N73Tは試験しなかった。各ファージ変異体は、ファージ上にディスプレイされる軽鎖に融合されるエピトープタグの力価によって決定される等量Fabディスプレイレベルに対して希釈により正規化し、STEAP-1発現細胞及び非発現細胞のFACS分析によってSTEAP-1への結合について評価した。2°なる用語はFACS分析の二次抗体を指す。α-120なる用語はマウス120抗STEAP1抗体を指す。α-10H1なる用語はコントロール抗体を指す。24ファージ、37ファージなどの用語は、ファージにディスプレイされる本明細書において開示されるヒト化抗STEAP1変異体を指す。Ch120ファージはファージ上にディスプレイされる120キメラを指し、120グラフトファージはファージにディスプレイされる120グラフトを指す。。それらのFabディスプレイレベルによる正規化したファージクローンの重要性は、異なるファージ力価の120-グラフトのFACS分析により例証される。いったん低いファージ濃度に希釈すると、120-グラフトファージは観察可能なFACS変化を示さない。したがって、それらディスプレイレベルの異なるファージクローンの正規化は、Steap1についてのそれらの親和性相違を評価するための重要な処置であった。Fabディスプレイレベルについての正規化の後、更なる突然変異A24Vを含む120-グラフトの変異体は他の変異体を上回るFACS変化を示した。IgGとして発現される場合、120v24は試験されるすべての濃度のキメラ120抗体に類似のFACS変化を示した。120v24の続くスキャッチャード分析では、293STEAP-1NTLB50細胞への結合について2.2nMのKdが示され、120キメラ及び原型のマウスM2-120545の2倍の改善を示した。表2:細胞表面STEAP-1に対する抗STEAP-1抗体結合親和性抗STEAP-1ネイキッド抗体、マウス120およびキメラ120の結合活性も、FACS分析を用いて試験した。結合は、293安定性STEAP-1NTLB50、PC3安定性STEAP-1PS54における外因性STEAP-1、およびLNCaP細胞における内因性STEAP-1について比較した。図7D-Fに結果を示す。細胞表面上に外因性ヒトSTEAP-1を発現するNTLB50細胞は、ヒトSTEAP-1DNAにより安定して293細胞を形質転換することによって調製した。細胞表面上に外因性ヒトSTEAP-1を発現するPS54細胞は、ヒトSTEAP-1DNAにより安定してPC3を形質転換することによって調製した。LNCaP細胞は内因的にSTEAP-1を発現する。実施例2:抗STEAP1抗体の特徴づけ抗STEAP-1抗体を特徴付けた、または、標準的な方法によって特徴付けてもよい。ELISAに基づくアッセイ:ELISAによる抗STEAP-1抗体のスクリーニングを以下のように行い、すべて室温でインキュベートする。試験プレートを、精製したSTEAP-1を含む50mM炭酸ナトリウムバッファpH9.6にて2時間かけてコートし、その後、0.5ウシ血清アルブミンを含むリン酸緩衝生理食塩水にて30分間かけてブロックし、その後0.05ツイーン20を含むPBSにて4回洗浄する。試験抗体上清を加え、振とうしながら2時間インキュベートし、その後PBSTにて4回洗浄する。25mlのリン酸クエン酸バッファpH50中に10mgのoフェニレンジアミンジヒドロクロライドと10μlの30過酸化水素溶液を含む溶液を100μl/ウェル添加して15分間インキュベートしてプレートを反応させる。25M硫酸を100μl/ウェル添加して反応を止める。自動ELISAプレート読み取り機にてプレートの490nmの吸光度を読み取ってデータを得る。スキャッチャード分析による抗STEAP-1結合の特徴づけ:モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、関連分野において公知の標準的な技術を用いて、MunsonetalAnalBiochem107220において記述されるスキャッチャード分析によって決定されうる。またScatchardGAnnNYAcadSci51660も参照のこと。実施例3:抗STEAP-1抗体薬剤コンジュゲートの産生抗STEAP-1アウリスタチンADCの産生-抗STEAP-1抗体マウス120545、120キメラ、120グラフト、及びヒト化120フレームワーク変異体を以下の薬剤リンカー成分:spp-DM1、smcc-DM1、MC-vc-PAB-MMAE;MC-vc-PAB-MMAF;MC-MMAE、MC-MMAF、vc-MMAEおよびvc-MMAFにコンジュゲートさせることによって抗STEAP-1ADCを生成した。この薬剤とリンカー成分及び接着方法は、本明細書中、並びに2004年2月5日に公開の国際公開2004/010957、2005年9月9日公開の国際公開2006/034488、及びDoroninaSOetalNatureBiotechnol21778784において開示されている。国際公開2004/010957に記載の方法論に従って標準的な方法を用いて、結合の前に、抗体をTCEPにて部分的に還元した。DoroninaetalNatBiotechnol21778784および米国公開特許2005/0238649A1に記載の方法論に従って標準的な方法を用いて、部分的に還元した抗体を上記の薬剤リンカー成分にコンジュゲートした。簡単に言うと、部分的に還元した抗体を薬剤リンカー成分と組み合わせて、該成分をシステイン残基にコンジュゲートさせた。コンジュゲート反応を止め、ADCを精製した。各々のADCについての薬剤負荷をHPLCにて測定した。本明細書中で用いる、ADCのリンカー-薬剤構成成分である-MC-vc-PAB-MMAE又は-MC-vc-PAB-MMAFは-vcMMAE又は-vcMMAFと略されることもあり、構成成分である-MC-MMAFはMCMMAF又はmcMMAFと略されることもある。抗STEAP-1メイタンシノイドADCの産生-抗STEAP-1抗体、マウス120、120キメラ、120グラフト及びヒト化120フレームワーク変異体をリンカー薬剤成分-smcc-DM1にコンジュゲートさせることによって抗STEAP-1ADCを生成した。ハーセプチン抗HER2抗体のコンジュゲートについては、国際公開2005/037992において開示される方法に従って前記のコンジュゲートを行ってもよい。実施例4:インビボ腫瘍体積減少アッセイインビボ及びインビトロでの腫瘍体積低減能についての毒素コンジュゲート抗STEAP-1モノクローナル抗体又は非コンジュゲート抗STEAP-1モノクローナル抗体の有効性を試験するために、以下のプロトコールを用いた。哺乳類細胞株およびヒト腫瘍異種移植片:293はヒト不死化胎仔腎臓細胞株であり、PC-3はヒト前立腺腺癌細胞株であり、LNCaPは前立腺カルチノーマ細胞株である。すべての細胞は、50/50ダルベッコ変更イーグル高グルコース培地、10ウシ胎児血清、2mMグルタミン、1ペニシリン-ストレプトマイシンを添加したハムF12中で生育させ、5CO2下、37°Cで培養した。293およびPC-3安定性細胞株は、完全長STEAP1のいずれかをコードするサイトメガロウイルス作動性ベクター又は空のベクターによる形質移入によって生成し、400μg/mlのG418において選択した。ヒト前立腺の外植片モデルであるLuCAP77およびLuCAP35Vは、シアトル大学から得た。細胞表面上の外因性及び内因性のSTEAP-1の発現は、以下の通りに免疫組織化学およびFACS分析によって示した。ヒツジおよびマウスの抗STEAP-1抗体は、STEAP-1の細胞内アミノ末端ペプチドに対して生成したを参照。STEAP-1の細胞外ドメインに対するモノクローナル抗体は、STEAP-1によって過渡的に形質移入した293T細胞によってマウスを免疫化して生成した。IHC分析のために、一次ヒツジ抗STEAP-1抗体を検出に用いた。FACS分析のために、細胞を90集密度まで生育させ、2mMEDTAを含むPBSを用いてプレートから取り除いた。細胞を洗浄して、FACSバッファに再懸濁し、抗STEAP-1抗体と室温で60分間インキュベートした後、フィコエリトリンにコンジュゲートさせた適切な二次抗体と60分間インキュベートした。分析はFACSscanにて行った。免疫蛍光法のために、細胞をチャンバースライドにて終夜生育させ、その後一次抗体と37°Cで60分間インキュベートした。細胞をパラホルムアルデヒドに固定し、1BSAにてブロックし、蛍光にコンジュゲートさせた適切な二次抗体とインキュベートした。インビボ前立腺癌異種移植片モデルを用いて、抗STEAP-1ADCの有効性を試験した。これらのモデルにはヒト細胞株LNCaPが含まれる。前立腺の外植片モデルには、LuCaP77およびLuCaP35Vが含まれる。各前立腺の外植片モデルは、CharlesRiverLabの去勢した雄SCIDベージュマウス、又は去勢されていない雄SCIDベージュマウスに続けて移植して維持した。去勢していないマウスには腫瘍移植の前にテストステロンペレットを与え、腫瘍移植の少なくとも2週間前に去勢を行って、テストステロンレベルを最低にした。ドナーマウスの腫瘍がが800~1000mm3に達した時に、腫瘍組織を無菌的に取り出し、研究動物のために小さい移植可能な大きさの切片に解体した。腫瘍は着床部位のくぼみに置き、皮膚は傷用クリップを用いて閉じた。LNCaP細胞株モデルのために、インビトロ成長LNCaP細胞を、テストステロンペレットを与えた雄SCIDベージュマウスに、50マトリゲル中1マウスにつき800万個~1000万個の細胞で皮下投与した。平均腫瘍サイズが100~200mm3に達したら、マウスをランダムに10匹づつのグループに分け、試験抗体ADC又はコントロール抗体を単回IV投与した。いくつかの実験において、試験抗体又はコントロール抗体を複数回投与した。いくつかの実験において、図8B及び11に示すように試験抗体およびコントロール抗体を単回投与した。前立腺の外植片モデルはLuCap77であり、テストステロンペレットは外因性腫瘍の移植のおよそ3~7日前に移植した。週に2回、4週間腫瘍を測定し、その後試験の残りの期間は週に1回か2回、又は試験期間中ずっと週に1回測定した。時間が経つに連れて試験動物の中で有意に低い腫瘍体積示したものを有用であるとみなした。いくつかの症例において、腫瘍体積は初期体積から有意に減少し、試験期間中低いままであった。図8-11に結果を示す。抗STEAP1アウリスタチン薬剤コンジュゲートはインビボで前立腺腫瘍体積を低減する3mg/kgのマウス抗STEAP-1120-MC-vc-PAB-MMAEの投与は、前立腺腫瘍異種移植片モデルに有効であった。PBS及び抗gp120-MC-vc-PAB-MMAEをコントロールとして用いた。0、7および14日目に投与を行った。図8Aを参照。ヒト化抗STEAP-1抗体120v24-MC-vc-PAB-MMAE、120v24-MC-MMAF、120v24-MC-MMAF、及び抗STEAP-1120キメラ-MC-vc-PAB-MMAEの、LNCap-Ner腫瘍を移植したSCIDベージュマウスへの投与は、有効であることが示された。ベヒクル、抗ブタクサ-MC-vc-PAB-MMAE及び抗ブタクサ-MC-MMAFをコントロールとして用いた。図8に示す日に投与を行った。図8Bに結果を示す。抗STEAP-1抗体120キメラ-MC-vc-PAB-MMAE及び抗STEAP-1120キメラ-MC-MMAFの投与は、LNCaP細胞を移植したSCIDベージュマウスの前立腺癌異種移植片モデルにおいて有効であったことが示された。およそ15、25および30日目に、3mg/kg又は6mg/kgの3用量をマウスに投与した。コントロール抗ブタクサ-MC-vc-PAB-MMAE及び抗ブタクサ-MC-MMAFを用いた。図9を参照。抗STEAP-1抗体120キメラ-MC-vc-PAB-MMAEの投与は、LuCap77細胞を移植したSCIDベージュ雄マウスの前立腺癌異種移植片モデルにおいて有効であったことが示された。ベヒクル及び抗ブタクサ-MC-vc-PAB-MMAEをコントロールとした。3mg/kgの試験抗体およびコントロール抗体の3用量を投与した。図10を参照。3mg/kgのヒト化抗STEAP-1抗体120v24-MC-vc-PAB-MMAE、6mg/kg及び12mg/kgの抗STEAP-1抗体120v24-MC-MMAFの、LuCap35V前立腺腫瘍を移植した去勢したSCIDベージュマウスへの投与は、コントロールと比較して有効であることが示された。薬剤負荷は1抗体につき3.1であった。コントロール抗体は、12mg/kgで投与した抗ブタクサ-MC-MMAFと、6mg/kgで投与した抗gp120-MC-vc-PAB-MMAEとした。図11を参照。抗STEAP1アウリスタチン薬剤コンジュゲートはインビトロ前立腺腫瘍体積を低減するインビトロ細胞殺傷アッセイを行って、抗STEAP-1薬剤コンジュゲートの、STEAP-1を発現する細胞の増殖の阻害及び/又は殺傷についての有効性を評価した。簡単に言うと、STEAP-1を発現する細胞を、96ウェルプレートにおよそ2,000個の細胞/ウェルで播き、2通り、抗体薬剤コンジュゲートにて24時間後に処理した。プレートは、37°Cで5~7日間インキュベートし、CellTiterGlo発光細胞生存率測定キットにて反応させた。試験細胞には、PS54、LB50、ベクターのみを形質移入したPC3細胞、ベクターのみを形質移入した293細胞、および内因性STEAP-1を発現するLNCaP細胞が含まれる。試験された抗体薬剤コンジュゲートには、コントロール抗体-MC-MMAF、コントロール抗体-vc-MMAE、抗STEAP-1抗体120キメラ-vc-MMAE、抗STEAP-1抗体120-キメラ-MC-MMAF、および抗STEAP1抗体キメラ-vc-MMAFが含まれる。図14A-Eに結果を示す。実施例5:還元及び再酸化によるコンジュゲートのためのシステイン改変抗STEAP-1抗体の調製CHO細胞に発現する完全長のシステイン改変抗STEAP-1モノクローナル抗体を、およそpH8.0の500mMホウ酸ナトリウム及び500mM塩化ナトリウムに溶解し、およそ50~100倍過剰な1mMTCEPホスフィンハイドロクロライド;GetzetalAnalBiochemVol2737380;SoltecVenturesBeverlyMAにて37°Cでおよそ1~2時間かけて還元する。還元したThioMabを希釈し、10mM酢酸ナトリウム、pH5にてHiTrapSカラムに流し、0.3M塩化ナトリウムを含むPBSにて溶出する。溶出した還元ThioMabをpH7の2mMデヒドロアスコルビン酸にて3時間、又は2mM硫酸銅水溶液にて室温で終夜をかけて処理する。外気酸化も有効であるかもしれない。SephadexG25樹脂に溶出することによってバッファを交換し、1mMDTPAを有するPBSにて溶出する。この溶液の280nmの吸光度から還元した抗体の濃度を決定し、DTNBと反応させて412nmの吸光度を決定することによってチオールの濃度を決定することによってチオール/Ab値を確認する。実施例6:システイン改変抗STEAP-1抗体と薬剤リンカー中間生成物のコンジュゲートによるシステイン改変抗STEAP-1抗体薬剤コンジュゲートの調製実施例5の還元及び再酸化の手順の後に、システイン改変抗STEAP抗体をPBSバッファに溶解し、氷上で冷却する。マレイミドなどのチオール反応性官能基を有する、アウリスタチン薬剤リンカー中間生成物、例としてMC-MMAE、MC-MMAF、MC-val-cit-PAB-MMAE、又はMC-val-cit-PAB-MMAFの抗体当たりの改変システインと比較したときのおよそ1.5モル等価物をDMSOに溶解し、アセトニトリルと水にて希釈し、PBS中の冷却した還元、再酸化抗体に加える。およそ1時間後、過剰のマレイミドを加えて、反応を止め、任意の反応していない抗体チオール基をキャップする。遠心限外濾過によって反応混合物を濃縮し、システイン改変抗STEAP-1抗体薬剤コンジュゲートを精製し、PBSのG25樹脂により溶出して脱塩し、滅菌条件下にて0.2μmフィルターにより濾過し、貯蔵のために凍結する。上記の手順によって、以下のシステイン改変抗STEAP-1抗体薬剤コンジュゲートを調製した。軽鎖V205Cthiohu120およびMC-MMAFのコンジュゲートによるthiohuman120-MC-MMAF;重鎖A118Cthiohu120およびMC-MMAFのコンジュゲートによるthiohuman120-MC-MMAF;軽鎖V205Cthiohu120及びMC-val-cit-PAB-MMAEのコンジュゲートによるthiohuman120-MC-val-cit-PAB-MMAE;重鎖A118Cthiohu120及びMC-val-cit-PAB-MMAEのコンジュゲートによるthiohuman120-MC-val-cit-PAB-MMAE。実施例7:システイン改変抗STEAP1抗体の特徴付け上記のように調製したシステイン改変抗STEAP-1抗体薬剤コンジュゲートをアッセイして、インビトロで親抗体の活性を保持したことを確認した。抗STEAP-1TDCthio-human120-vc-PAB-MMAEvcEと略す及びthio-human120-vc-PAB-MMAEvcEと略すを、STEAP-1発現細胞及び非発現細胞のFACS分析によって、STEAP-1への結合について評価した。2ndonlyなる用語はFACS分析の二次抗体を指す。TDCコントロール及びADCstdコントロールをそれぞれコントロール抗体thio及び非thiovcPABMMAE薬剤コンジュゲートとした。huSteap1ADCは、親ヒト抗STEAP-1抗体由来のvcPABMMAE薬剤コンジュゲートである。示すように、TDCは、親huSteap1ADCの変化と類似のFACS変化を示した。また、インビトロ細胞殺傷アッセイを行って、システイン改変抗STEAP1抗体薬剤コンジュゲートの、STEAP-1を発現する細胞の増殖の阻害及び/又は殺傷についての有効性を評価した。簡単に言うと、STEAP-1を発現する細胞を、96ウェルプレートにおよそ2,000個の細胞/ウェルで播き、2通り、抗体薬剤コンジュゲートにて24時間後に処理した。プレートは、37°Cで5~7日間インキュベートし、CellTiterGlo発光細胞生存率測定キットにて反応させた。試験細胞には、PS54、LB50、および内因性STEAP-1を発現するLNCaP細胞が含まれる。試験された抗体薬剤コンジュゲートには、コントロール抗体-vc-MMAE、コントロールthio抗体-vc-MMAE、抗-STEAP-1TDCthio-human120-vc-PAB-MMAEvcEと略す及びthio-human120-vc-PAB-MMAEvcEと略す、及びhuSteap1ADC、親ヒト抗STEAP-1抗体由来のvc-PAB-MMAE薬剤コンジュゲートが含まれる。図19A-Cに示すように、抗STEAP-1TCDは、インビトロでの親ADCの活性を保持する。実施例8:システイン改変抗STEAP-1抗体薬剤コンジュゲートについてのインビボ腫瘍体積の低減インビボ前立腺癌異種移植片モデルを用いて、システイン改変抗STEAP-1ADCの有効性を試験した。これらのモデル及び用いた試験プロトコールは、実施例4に記載のものと対応する。抗STEAP-1TDCthio-human120-vc-PAB-MMAEの、LNCap-Ner腫瘍を移植したSCIDベージュマウスへの投与は、有効であることが示された。ベヒクル、コントロール抗体-vc-MMAE及びコントロールthio抗体-vc-MMAEをコントロールとして用いた。また、抗STEAP-1TDCの効果を、ポジティブコントロールとしてのヒト抗STEAP-1抗体120-MC-vc-PAB-MMAEと比較した。0日目に単回用量を投与した。すべての抗体は3mg/kgで投与した。図20に結果を示す。図21は、3mg/kgの抗STEAP-1TDCthio-human120-vc-PAB-MMAE及び、1、3又は6mg/kgの抗STEAP-1TDCthio-human120-MC-MMAFの投与は、LNCaP細胞を移植したSCIDベージュマウスの前立腺癌異種移植片モデルにおいて有効であったことが示されたことを示す。0日目に、0.3、1又は3mg/kg又は1、3又は6mg/kgの単回用量をマウスに投与した。ベヒクル、コントロール抗体-vc-MMAEおよびコントロールthio抗体-vc-MMAEをコントロールとして用いた。図22は、3mg/kgの抗STEAP-1TDCthio-human120-vc-PAB-MMAE及び3又は6mg/kgの抗STEAP-1TDCthio-human120-MC-MMAFの投与は、LuCap35V細胞を移植したSCIDベージュ雄マウスの前立腺癌異種移植片モデルにおいて有効であったことが示されたことを示す。0日目に、0.3、1又は3mg/kg又は1、3又は6mg/kgの単回用量をマウスに投与した。ベヒクル、コントロール抗体-vc-MMAEおよびコントロールthio抗体-vc-MMAEをコントロールとして用いた。実施例9:抗体120変異体24由来の抗STEAP-1抗体SGIVの調製と特徴付け改善した抗体発現レベルを得るように軽鎖及びフレームワーク領域がさらに修飾されている他のLC抗STEAP-1抗体変異体を調製した。材料と方法残基番号はカバットに従った。一文字アミノ酸略号を用いる。DNA縮重はIUBコードを用いて表す。修正した軽鎖変異体の調製:120v24抗体の変異体を生成して特徴付けた。SGIV軽鎖のアミノ酸配列は配列番号:90に示す。この配列はmu120抗体の対応する領域及び120v24抗体の対応する領域と整列配置して、図23に示す。変異体120v24と比較したときの変異体SGIVの評価-SGIVおよび120v24抗体をIgGとして発現させ、内因性STEAP-1を発現する、安定形質転換Steap1ポジティブ細胞株293Steap1NTLB48、293Steap1NTLB50、及び293Steap1NTLB53、並びにLNCaP細胞を用いたFACS分析によって評価した。実施例1に記載のように細胞を調製した。5μg/mlの各IgGを加え、氷上に1時間置いた。遠心分離法によって試料をFACSバッファにて2回洗浄し、抗ヒトPEコンジュゲートの1200希釈物を加え、30分間置いた。遠心分離法によって試料をFACSバッファにて再度2回洗浄し、試料をFACSにて分析した。STEAP-1に対するSGIV及び120v24結合のスキャッチャードに基づく親和性決定-STEAP-1に対する120v24およびシモンズIV抗体の結合親和性を、標準的な方法に従ってスキャッチャード分析を用いて決定した。プロテインG親和性クロマトグラフィにてIgGを精製した。親和性測定は、2通りのPC-3-PS54、293-LB50およびLNCaP-BR細胞のスキャッチャード分析によって行った。LNCaPBR細胞および293LB50細胞における120v24およびSGIVのスキャッチャードプロットは、それぞれ図25および26に示す。PC-3-PS54、293-LB50及びLNCaP-BR細胞、並びに過渡的にSTEAP-1を発現する293細胞における、mu1789、mu120、Fcキメラ、ヒト化120v24、thio-120v24及びthio-SGIVについての平均結合親和性を比較した表を図27に示す。SGIVおよび120v24の部位特異的突然変異誘発:SGIVおよび120v24抗体の変異体は、上記の標準的な突然変異誘発プロトコールを用いて調製した。変異体の第一クラスは、さらに結合親和性を向上させるためにシモンズIVの特定の残基を120v24の対応する残基に置換する、部位特異的突然変異誘発に起因した。生産された特定の変異体は、図24に示すように以下の通りであった。LSVLVH1、残基42及び43をそれぞれK及びAに修飾した。LSVLVH2、残基3をQに修飾し、残基42及び43をそれぞれK及びAに修飾し、残基85をTに修飾した。LSQ、残基3をQに修飾した。LSCH1、残基15をVに修飾し、残基83をFに修飾した。変異体の第二クラスは、抗体発現レベルを向上させる目的で、120v24の特定の残基をシモンズIVの対応する残基に置換する、部位特異的突然変異により生成した。特定の変異体は、図24に示すように以下の通りであった。EDFW1、残基3をVに修飾し、残基9をDに修飾し、残基12をAに修飾し、残基13をVに修飾し、残基15をLに修飾し、残基17をEに修飾し、残基19をAに修飾し、そして残基22をNに修飾した。EDFW2、120v24の残基42及び43をそれぞれQ及びPに修飾した。EDFW3、残基60をDに修飾し、残基80をAに修飾し、残基83をVに修飾し、そして、残基85をVに修飾した。EDall、残基3をVに修飾し、残基9をDに修飾し、残基12をAに修飾し、残基13をVに修飾し、残基15をLに修飾し、残基17をEに修飾し、残基19をAに修飾し、残基22をNに修飾し、120v24の残基42及び43をそれぞれQ及びPに修飾し、残基60をDに修飾し、残基80をAに修飾し、残基83をVに修飾し、そして、残基85をVに修飾した。EDPro、残基43をPに修飾し、残基80をAに修飾した。EDpl、残基9をDに修飾し、残基42をQに修飾し、残基60をDに修飾した。結果と考察SGIV抗体の調製-抗STEAP-1抗体バージョン24の可変領域の配列を図23および24に示す。部位特異的突然変異誘発を使用して、シモンズIV又は単にSGIVと称する他の変異体を、上記の標準的な突然変異誘発プロトコールを用いて調製した。図23および24は、SGIV軽鎖の配列をmu120抗体および120v24の配列と整列配位させて示す。SGIV抗体の様々な生成物の力価を図29に示す。FACを用いた、STEAP-1に対するSGIVおよび120v24の結合の比較-細胞表面に発現されるSTEAP-1に対する両抗体120v24およびSGIVの結合能を、FACを用いて測定した。外因性STEAP-1又は内因性STEAP-1のいずれかを発現する細胞株に対する抗体結合を、2通り測定した。結果を図28にまとめる。図28に示すように、両抗体は、4つすべての細胞株のSTEAP1を結合することが可能であった。STEAP-1に対するSGIV抗体の結合親和性と120v24との比較-STEAP1に対するSGIV及び120v24の結合親和性を、スキャッチャード分析を用いて調べた。LNCaPBR細胞および293LB50細胞における120v24およびSGIVのスキャッチャードプロットをそれぞれ図25および26に示す。PC-3-PS54、293-LB50およびLNCaP-BR細胞、並びに過渡的にSTEAP-1を発現する293細胞における、mu1789、mu120、Fcキメラ、ヒト化120v24、thio-120v24およびthio-SGIV抗体の平均結合親和性を比較する表を、図27に示す。結果から、293-LB50およびLNCaPBR細胞における120v24抗体の結合親和性がSGIV変異体の結合親和性のおおよそ1.5倍であることが示される。実施例10:89Zr-抗STEAP-1-vc-MMAEイムノPETジルコニウム-89-抗STEAP-1vc-MMAEイムノPETイメージングを、幾つかのマウス原発性前立腺腫瘍においてSTEAP-1vc-MMAE発現レベルを測定するために行い、他の実証されたインビトロでの特性評価及び受容体発現の測定と比較して、マウスモデルにおける抗体の内在化および腫瘍の取り込みを評価した。インビボでの前立腺癌異種移植モデルが、抗STEAP-1ADCの有効性をテストするために使用された。これらのモデルは、ヒト細胞株LNCaPを含んでいたATCCCRL-1740又は南部諸州研究学会SouthernResearchInstitute,バーミンガム、アラバマ州。前立腺移植片モデルはLuCaP77及びLuCaP35Vを含んでいたワシントン大学,シアトル、ワシントン州。各前立腺移植片モデルは、去勢された動物アンドロゲン非依存性モデル、LuCAP35Vまたは去勢されていない動物アンドロゲン依存モデル、LuCAP77に逐次に移植することによって維持され、100μCiの89Zr-抗STEAP-1-vc-MMAEが投与され、4日後に撮像された。Lucap96.1;Lucap70;Lucap77及びLucap35V原発性腫瘍が評価され、インビトロでの特性評価に類似した結果を与えた[実施例4;図8-11を参照]。図30に示すように、89Zr-STEAP-1-vc-MMAEの取込みはLucap35Vで最高で、Lucap96.1で最小であった[Lucap96.1>Lucap70>Lucap77>Lucap35V]。多週間にわたる有効性試験が、3日間の腫瘍取り込みの研究と並行して実行された[Lucap35V:強い効力に相当する高度なSTEAP-1-vc-MMAEの取込みを示した;Lucap70:中庸な取込み及び効力を示し、従って89ZrイムノPETは、抗体の組織レベルでの生体内分布を監視する非侵襲的方法を提供し、マウスからヒトに至るまで種を越えて使用することができるDijkersECetalNatureVolume87Number5に記載の転移性乳癌患者におけるハーセプチン2陽性病変で示される。89Zr-イムノPETは腫瘍の飽和点を決定するために使用することができ、将来の薬物療法のための投薬レジメンのデザインを容易にしている。前述の本発明は、理解を明確にするために図と例とを挙げていくらか詳細に記述されているが、この記載及び実施例は本発明の範囲を制限するものと解されるべきではない。本明細書において引用されるすべての特許及び科学文献の開示は、出典明記によって特別に本明細書中に援用される。"