"水性免疫原性組成物であって、該組成物は、被験体への投与後に、aN.meningitidisの少なくとも血清群W135に対して殺菌性であり、かつbH.influenzaeb型疾患に対して防御性である、免疫応答を誘導し得、ここで、該組成物は、i結合体化した血清群W135莢膜サッカリド抗原;およびii結合体化したH.influenzaeb型Hib莢膜サッカリド抗原を含み、ここで、該血清群W135サッカリドは、ジフテリアトキソイドに結合体化される、組成物。水性免疫原性組成物であって、該組成物は、被験体への投与後に、aN.meningitidisの少なくとも血清群W135に対して殺菌性であり、かつbH.influenzaeb型疾患に対して防御性である、免疫応答を誘導し得、ここで、該組成物は、i結合体化した血清群W135莢膜サッカリド抗原;およびii結合体化したHib莢膜サッカリド抗原を含み、ここで、該血清群W135サッカリドは、破傷風トキソイドに結合体化される、組成物。水性免疫原性組成物であって、該組成物は、被験体への投与後に、aN.meningitidisの少なくとも血清群W135に対して殺菌性であり、かつbH.influenzaeb型疾患に対して防御性である、免疫応答を誘導し得、ここで、該組成物は、i結合体化した血清群W135莢膜サッカリド抗原;およびii結合体化したHib莢膜サッカリド抗原を含み、ここで、該血清群W135サッカリドは、H.influenzaeプロテインDに結合体化される、組成物。水性免疫原性組成物であって、該組成物は、被験体への投与後に、aN.meningitidisの少なくとも血清群W135に対して殺菌性であり、かつbH.influenzaeb型疾患に対して防御性である、免疫応答を誘導し得、ここで、該組成物は、i結合体化した血清群W135莢膜サッカリド抗原;およびii結合体化したHib莢膜サッカリド抗原を含み、ここで、該Hibサッカリドは、破傷風トキソイドに結合体化される、組成物。水性免疫原性組成物であって、該組成物は、被験体への投与後に、aN.meningitidisの少なくとも血清群W135に対して殺菌性であり、かつbH.influenzaeb型疾患に対して防御性である、免疫応答を誘導し得、ここで、該組成物は、i結合体化した血清群W135莢膜サッカリド抗原;およびii結合体化したHib莢膜サッカリド抗原を含み、ここで、該組成物はリン酸アルミニウムアジュバントを含む、組成物。水性免疫原性組成物であって、該組成物は、被験体への投与後に、aN.meningitidisの少なくとも血清群W135に対して殺菌性であり、かつbH.influenzaeb型疾患に対して防御性である、免疫応答を誘導し得、ここで、該組成物は、i結合体化した血清群W135莢膜サッカリド抗原;およびii結合体化したHib莢膜サッカリド抗原を含み、ここで、該血清群W135サッカリドはCRM197ジフテリアトキシン変異体に結合体化され、そして、該組成物は1用量につき<30μgの髄膜炎菌サッカリドを含む、組成物。結合体化した血清群Cおよび血清群Y、そして、必要に応じて血清群A由来の莢膜サッカリド抗原をさらに含む、請求項1~6のいずれか1項に記載の組成物。1以上のN.meningitidisの血清群B由来のポリペプチド抗原をさらに含む、請求項1~7のいずれか1項に記載の組成物。前記血清群W135サッカリドが30未満の重合度を有する、請求項1~8のいずれか1項に記載の組成物。請求項1~9のいずれか1項に記載の組成物であって、請求項4または請求項5に従属する場合に、前記血清群W135サッカリドが、ジフテリアトキソイド、破傷風トキソイドまたはCRM197ジフテリアトキシン変異体に結合体化される、組成物。同じキャリアタンパク質が全ての血清群に使用される、請求項1~10のいずれか1項に記載の組成物。前記血清群W135サッカリドが1:5~5:1のサッカリド:タンパク質比w/wを有する、請求項1~11のいずれか1項に記載の組成物。前記血清群W135サッカリドがリンカーを介して結合体化される、請求項1~12のいずれか1項に記載の組成物。前記血清群W135サッカリドが直接結合体化される、請求項1~12のいずれか1項に記載の組成物。請求項1~14のいずれか1項に記載の組成物であって、請求項1~3または5~6のうちの1項に従属する場合に、前記Hibサッカリドが、CRM197ジフテリアトキシン変異体、破傷風トキソイド、またはN.meningitidsの外膜複合体に結合体化される、組成物。アジュバントを含む、請求項1~15のいずれか1項に記載の組成物。水酸化アルミニウムアジュバントを含まない、請求項1~16のいずれか1項に記載の組成物。請求項1~17のいずれか1項に記載の組成物であって、請求項1~4または6のうちの1項に従属する場合に、該組成物が、リン酸アルミニウムアジュバントを含む、組成物。前記Hib抗原がリン酸アルミニウムに吸着される、請求項5または請求項18に記載の組成物。前記Hib抗原がリン酸アルミニウムに吸着されない、請求項5または請求項18に記載の組成物。前記Hib抗原が最初に凍結乾燥される、請求項1~20のいずれか1項に記載の組成物。医薬として使用するための、請求項1~21のいずれか1項に記載の組成物であって、該医薬は、被験体における免疫応答を誘導する、組成物。前記免疫応答がaN.meningitidisの少なくとも血清群W135に対して殺菌性であり、かつbH.influenzaeb型疾患に対して防御性である、請求項22に記載の組成物。前記免疫応答が、≧0.15μg/mlの抗ポリリボシルリビトールホスフェートPRP抗体の濃度の生成を含む、請求項22に記載の組成物。前記結合体が1:5~5:1のサッカリド:タンパク質比w/wを有する、請求項1~24のいずれか1項に記載の組成物。細菌性髄膜炎の処置または予防のための医薬の製造における、請求項1~21のいずれか1項に記載の組成物の使用。請求項1~25のいずれか1項に記載の組成物の1以上の単位用量と、薬学的に受容可能なキャリアとを含む、薬学的組成物。水性形態の請求項27に記載の薬学的組成物。非経口注射に適した形態にパッケージングされた、請求項27または請求項28に記載の薬学的組成物。明細書中に記載の発明。従って、小児において髄膜炎菌血清群A、血清群C、血清群W135および血清群Yに対して防御するワクチン、ならびにまた、投与前に再構成を必要としないワクチンについての必要性が残っている。さらに、血清群Bに対して広範に防御するワクチンについての必要性が残っている。発明の開示本発明は、これらの種々の必要性の全てを満たし、8種類の別々の知見に基づく。第1に、本発明者らは、髄膜炎菌血清群C、血清群W135および血清群Y由来の結合体化莢膜サッカリドが、単回用量で組み合わせた場合、ヒトにおいて安全でかつ免疫原性であることを見出した。第2に、本発明者らは、血清群A由来の結合体化莢膜サッカリドが添加される場合にこの効果が保持されることを見出した。第3に、本発明者らは、これらの結合体化した抗原が、凍結乾燥を必要とせずに、水性の単回用量において安定に組み合わされ得ることを見出した。第4に、本発明者らは、血清群B感染に対する広い保護が、少数の規定ポリペプチド抗原を用いることによって達成され得ることを見出した。第5に、本発明者らは、これらのポリペプチド抗原が、5つの血清群のいずれの防御効力をも損失することなく、サッカリド抗原と組み合わされ得ることを見出した。第6に、本発明者らは、Hib結合体が添加される場合でさえも効力が保持されることを見出した。第7に、本発明者らは、血清群W135結合体の効力が、血清群B株由来のタンパク質抗原の添加によって増強されることを見出した。最後に、本発明者らは、髄膜炎菌結合体へのHib結合体の添加が、血清群W135の髄膜炎菌に対する全体的活性を増強することを見出した。本発明は例えば、以下の項目を提供する。項目1被験体への投与後に、N.meningitidisの血清群B、血清群C、血清群W135および血清群Yに対して殺菌性である免疫応答を誘導し得る、水性免疫原性組成物であって、該組成物は、i結合体化した血清群C莢膜サッカリド抗原;ii結合体化した血清群W135莢膜サッカリド抗原;iii結合体化した血清群Y莢膜サッカリド抗原;およびiv血清群B由来の1以上のポリペプチド抗原を含む、組成物。項目2v結合体化した血清群A莢膜サッカリド抗原をさらに含む、項目1に記載の組成物。項目3前記血清群A莢膜サッカリドが、そのモノサッカリド単位の少なくとも20は3位および4位のいずれかに-OHを有さないように改変される、項目2に記載の組成物。項目4前記組成物が、37°Cにて28日間保存され得、この期間の後、結合体化したMenAサッカリドの初期合計量の20未満が結合されていない、項目2または項目3に記載の組成物。項目5前記結合体化したサッカリドがオリゴサッカリドである、項目1~項目4のいずれかに記載の組成物。項目6前記サッカリドが、ジフテリアトキソイド、破傷風トキソイド、H.influenzaeプロテインD、およびCRM197から選択されるキャリアタンパク質に結合体化される、項目1~項目5のいずれかに記載の組成物。項目7前記組成物が、1~10の規定された血清群Bポリペプチド抗原をさらに含み、該組成物が、少数の超毒性系統A4、ET5およびN.meningitidis血清群Bの系統3に対して殺菌性である免疫応答を誘導し得る、項目1~項目6のいずれかに記載の組成物。項目8以下の5つの抗原:iオリゴマー形態のNadAタンパク質;ii741タンパク質;iii936タンパク質;iv953タンパク質;およびv287タンパク質のうちの1以上を含む、項目7に記載の組成物。項目9配列番号2のアミノ酸配列を含む第1ポリペプチド;配列番号7のアミノ酸配列を含む第2ポリペプチド;および配列番号8のアミノ酸配列を含む第3ポリペプチドを含む、項目8に記載の組成物。項目10H.influenzaeB型Hibに対して防御するサッカリド抗原をさらに含む、項目1~項目9のいずれかに記載の組成物。項目11Streptococcuspneumoniaeに対して防御する抗原をさらに含む、項目1~項目10のいずれかに記載の組成物。項目12リン酸アルミニウムアジュバントを含む、項目1~項目11のいずれかに記載の組成物。項目13気密シールした容器に包装された、項目1~項目12のいずれかに記載の組成物。項目14前記容器がバイアルまたは注射器である、項目13に記載の組成物。項目15医薬として使用するための、項目1~項目14のいずれかに記載の組成物。項目16哺乳動物において免疫応答を惹起するための医薬の製造における、i結合体化した血清群C莢膜サッカリド抗原;ii結合体化した血清群W135莢膜サッカリド抗原;iii結合体化した血清群Y莢膜サッカリド抗原;iv血清群B由来の1以上のポリペプチド抗原;および必要に応じてv結合体化した血清群A莢膜サッカリド抗原の使用。項目17哺乳動物において抗体応答を惹起するための方法であって、該哺乳動物に項目1~項目15のいずれかに記載の組成物を投与する工程を包含する、方法。項目18水性免疫原性組成物であって、該組成物は、被験体への投与後に、aN.meningitidisの少なくとも血清群W135に対して殺菌性であり、そしてbH.influenzaeb型疾患に対して防御性である、免疫応答を誘導し得、ここで、該組成物は、i結合体化した血清群W135莢膜サッカリド抗原;ii結合体化したH.influenzaeb型莢膜サッカリド抗原を含む、組成物。項目19血清群Cおよび血清群Y、必要に応じて血清群A由来の結合体化した莢膜サッカリド抗原をさらに含む、項目18に記載の組成物。項目20N.meningitidis由来の血清群B由来の1以上のポリペプチド抗原をさらに含む、項目18または項目19に記載の組成物。従って、本発明は、被験体への投与後に、N.meningitidisの血清群B、血清群C、血清群W135および血清群Yに対して殺菌性である免疫応答を誘導し得る、水性免疫原性組成物を提供し、ここで、この組成物は、以下を含む:i結合体化した血清群C莢膜サッカリド抗原;ii結合体化した血清群W135莢膜サッカリド抗原;iii結合体化した血清群Y莢膜サッカリド抗原;およびiv血清群B由来の1以上のポリペプチド抗原。この水性組成物はまた、N.meningitidisの血清群Aに対して殺菌性である免疫応答を誘導し得、従ってさらにv結合体化した血清群A莢膜サッカリド抗原を含み得る。本発明はまた、被験体への投与後に、aN.meningitidisの少なくとも血清群W135に対して殺菌性であり、そしてbH.influenzaeb型疾患に対して防御性である、免疫応答を誘導し得る水性免疫原性組成物を提供し、ここで、この組成物は、i結合体化した血清群W135莢膜サッカリド抗原;ii結合体化したH.influenzaeb型莢膜サッカリド抗原を含む。この組成物は、血清群Cおよび血清群Y、必要に応じて血清群A由来の結合体化した莢膜サッカリド抗原をさらに含み得る。この組成物はさらに、N.meningitidis由来の血清群B由来のポリペプチド抗原を含み得る。好ましいサッカリド抗原はオリゴサッカリドである。血清群C、血清群W135および血清群Y莢膜ポリサッカリドを髄膜炎菌から調製するための技術は、長年にわたって公知であり、代表的には、以下の工程を含むプロセスを含む:例えば、カチオン性界面活性剤を用いるポリサッカリド沈澱、エタノール分画、タンパク質を除去するための冷フェノール抽出およびLPSを除去するための超遠心分離[例えば、参考文献8を参照のこと]。より好ましいプロセス[9]は、ポリサッカリド沈澱、続いて低級アルコールを用いた沈澱したポリサッカリドの可溶化を含む。沈澱は、カチオン性界面活性剤例えば、テトラブチルアンモニウム塩およびセチルトリメチルアンモニウム塩例えば、臭化物塩またはヘキサジメトリンブロミドhexadimethrinebromide塩およびミリスチルトリメチルアンモニウム塩を用いて達成され得る。セチルトリメチルアンモニウムブロミドCTABは、特に好ましい[10]。沈澱した物質の可溶化は、低級アルコール例えば、メタノール、プロパン-1-オール、プロパン-2-オール、ブタン-1-オール、ブタン-2-オール、2-メチル-プロパン-1-オール、2-メチル-プロパン-2-オール、ジオールなどを用いて達成され得るが、CTAB-ポリサッカリド複合体を可溶化するためにはエタノールが特に適切である。エタノールは、エタノールおよび水の総含量に基づいて50と95との間の最終エタノール濃度になるように、沈澱したポリサッカリドに添加され得る。再可溶化後、このポリサッカリドは、夾雑物を除去するためにさらに処理され得る。微量の夾雑物でさえも受け入れられない状況例えば、ヒトのワクチン生産では、これは特に重要である。これは代表的に、1以上の濾過工程例えば、深層濾過depthfiltration、活性炭を通した濾過が用いられ得る、サイズ濾過および/または限外濾過を含む。一旦濾過されて夾雑物が除去されると、ポリサッカリドは、さらなる処理および/または加工のために沈澱され得る。これは、例えば、カルシウム塩またはナトリウム塩の添加によりカチオンを交換することにより、便利に達成され得る。精製後、莢膜サッカリドは、以下に記載される通り、キャリアタンパク質に結合体化される。髄膜炎菌サッカリドの精製および結合体化のためのさらなる方法および代替方法は、参考文献11および参考文献12に開示される。精製に対する代替法として、本発明の莢膜サッカリドは、全合成または部分合成によって入手され得る。例えば、Hib合成は、参考文献13に開示され、そしてMenA合成は参考文献14に開示される。サッカリドは、化学的に改変され得、例えば、O-アセチル化または脱O-アセチル化され得る。任意のこのような脱-O-アセチル化または超アセチル化は、このサッカリド中の特定の位置に存在し得る。例えば、大部分の血清群C株は、O-アセチル基をシアル酸残基のC-7位および/またはC-8位に有するが、臨床単離株の約15は、これらのO-アセチル基を欠く[15,16]。このアセチル化は、防御効力に影響を与えるようには見えない例えば、MenjugateTM製品とは異なり、NeisVac-CTM製品は、脱O-アセチル化サッカリドを使用するが、両方のワクチンが有効である。血清群W135のサッカリドは、シアル酸-ガラクトースジサッカリド単位のポリマーである。血清群Yのサッカリドは、ジサッカリド反復単位がガラクトースの代わりにグルコースを含むこと以外は、血清群W135のサッカリドに類似する。血清群Cのサッカリドのように、MenW135サッカリドおよびMenYサッカリドは、種々のO-アセチル化を有するが、シアル酸の7位および9位に有する[17]。任意のこのような化学的改変は好ましくは、結合体化の前に起こるが、あるいは、またはさらに、結合体化の間に起こり得る。異なる血清群由来のサッカリドは、好ましくは別々に精製され、次いで結合体化の前または後のいずれかに合わされ得る。血清群A本発明の組成物は、結合体化した血清群A莢膜サッカリド抗原を含み得る。このサッカリドは、血清群C、血清群W135および血清群Yについて上記を参照のことと同じように、精製および結合体化され得るが、これは、構造的に異なる-一方、血清群C、血清群W135および血清群Yの莢膜は、周囲のシアル酸N-アセチル-ノイラミン酸、NeuAcに基づき、血清群Aの莢膜はN-アセチル-マンノサミンに基づき、N-アセチル-マンノサミンは、天然のシアル酸前駆体である。血清群Aのサッカリドは、特に加水分解感受性であり、水性媒体中でのその不安定性は、a血清群Aに対する液体ワクチンの免疫原性が経時的に減少すること、およびbサッカリド加水分解産物のワクチン中への放出に起因して、品質制御がより困難であることを意味する。ネイティブなMenA莢膜サッカリドは、α1→6結合型N-アセチル-D-マンノサミン-1-ホスフェートのホモポリマーであり、C3およびC4に部分的O-アセチル化を有する。主なグリコシド結合は、C1のヘミアセタール基およびD-マンノサミンのC6のアルコール基を含む1-6ホスホジエステル結合である。平均鎖長は93モノマーである。これは、以下の式を有する:本発明者らは、ネイティブな血清群Aサッカリドの免疫原性活性を保持するが、水中でずっと安定である改変サッカリド抗原を調製した。モノサッカリド単位の3位の炭素および4位の炭素に結合した基は、ブロッキング基によって置換される[参考文献18]。ヒドロキシルの代わりにブロッキング基を有するモノサッカリド単位の数は、変動し得る。例えば、全てまたは実質的に全てのモノサッカリド単位は、ブロッキング基を有し得る。あるいは、モノサッカリド単位の少なくとも10、少なくとも20、少なくとも30、少なくとも40、少なくとも50、少なくとも60、少なくとも70、少なくとも80または少なくとも90は、ブロッキング基を有し得る。少なくとも1、少なくとも2、少なくとも3、少なくとも4、少なくとも5、少なくとも6、少なくとも7、少なくとも8、少なくとも9、少なくとも10、少なくとも11、少なくとも12、少なくとも13、少なくとも14、少なくとも15、少なくとも16、少なくとも17、少なくとも18、少なくとも19、少なくとも20、少なくとも21、少なくとも22、少なくとも23、少なくとも24、少なくとも25、少なくとも26、少なくとも27、少なくとも28、少なくとも29または少なくとも30のモノサッカリド単位は、ブロッキング基を有し得る。同様に、モノサッカリド単位上のブロッキング基の数は、変動し得る。例えば、任意の特定のモノサッカリド単位の数は、1または2であり得る。末端モノサッカリド単位は、そのネイティブヒドロキシルの代わりにブロッキング基を有しても有さなくてもよい。さらなる反応例えば、結合体化のためのハンドルを提供するために、遊離のアノマー性ヒドロキシル基を末端モノサッカリド単位に保持することが好ましい。アノマー性ヒドロキシル基は、例えば、NaBH3CN/NH4Clを用いる還元的アミノ化によってアミノ基-NH2または-NH-E、ここでEは窒素保護基に変換され得、次いで他のヒドロキシル基がブロッキング基に変換された後に再生され得る。ヒドロキシル基を置換するためのブロッキング基は、ヒドロキシル基の誘導体化反応によって、すなわち、ヒドロキシル基の水素原子を別の基に置き換えることによって、直接的にアクセス可能であり得る。ブロッキング基として作用するヒドロキシル基の適切な誘導体は、例えば、カルバメート、スルホネート、カルボネート、エステル、エーテル例えば、シリルエーテルまたはアルキルエーテルおよびアセタールである。このようなブロッキング基のいくつかの具体例は、アリル、Aloc、ベンジル、BOM、t-ブチル、トリチル、TBS、TBDPS、TES、TMS、TIPS、PMB、MEM、MOM、MTM、THPなどである。直接的にはアクセス可能でなく、ヒドロキシル基を完全に置き換える他のブロッキング基としては、C1-12アルキル、C3-12アルキル、C5-12アリール、C5-12アリール-C1-6アルキル、NR1R2R1およびR2は、以下の段落で定義される、H、F、Cl、Br、CO2H、CO2C1-6アルキル、CN、CF3、CCl3などが挙げられる。好ましいブロッキング基は、以下の式のものである:-O-X-Yまたは-OR3、ここで:XはCO、SOまたはSO2であり;YはC1-12アルキル、C1-12アルコキシ、C3-12シクロアルキル、C5-12アリールまたはC5-12アリール-C1-6アルキルであり、これらの各々は、F、Cl、Br、CO2H、CO2C1-6アルキル、CN、CF3またはCCl3から独立して選択される1、2または3個の基で必要に応じて置換され得るか;あるいはYは、NR1R2であり;R1およびR2は、H、C1-12アルキル、C3-12シクロアルキル、C5-12アリール、C5-l2アリール-C1-6アルキルから独立して選択されるか;またはR1およびR2は一緒になって、C3-12飽和複素環式基を形成し得;R3は、C1-12アルキルまたはC3-12シクロアルキルであり、これらの各々は、F、Cl、Br、CO2C1-6アルキル、CN、CF3またはCCl3から1、2または3個の基で必要に応じて置換され得るか;あるいはR3は、C5-12アリールまたはC5-12アリール-C1-6アルキルであり、これらの各々は、F、Cl、Br、CO2H、CO2C1-6アルキル、CN、CF3またはCC13から選択される1、2、3、4または5個の基で必要に応じて置換され得る。R3が、C1-12アルキルまたはC3-12シクロアルキルである場合、これは代表的に、上記に定義した通りの1、2または3個の基で置換される。R1およびR2が一緒になってC3-12飽和複素環式基を形成する場合、R1およびR2が窒素原子と一緒になって、3と12との間の任意の数の炭素原子例えば、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12を含む飽和複素環式環を形成することが意図される。この複素環式基は、窒素原子以外に1または2個のヘテロ原子例えば、N、OまたはSを含み得る。C3-12飽和複素環式基の例は、ピロリジニル、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニル、イミダゾリジル、アゼチジニルおよびアジリジニルである。ブロッキング基-O-X-Yおよび-OR3は、標準的誘導体化手順例えば、ヒドロキシル基とアシルハライド、アルキルハライド、スルホニルハライドなどとの反応により-OH基から調製され得る。それゆえ、-O-X-Yにおける酸素原子は好ましくは、ヒドロキシル基の酸素原子であり、一方、-O-X-Yにおける-X-Y基は好ましくは、ヒドロキシル基の水素原子と置き換わる。あるいは、このブロッキング基は、置換反応例えば、Mitsonobu型置換によって接近可能であり得る。ヒドロキシル基からブロッキング基を調製するこれらの方法および他の方法は、周知である。より好ましくは、ブロッキング基は、-OCOCF3[19]、またはカルバメート基-OCONR1R2であり、ここでR1およびR2は、C1-6アルキルから独立して選択される。より好ましくは、R1およびR2は、両方ともメチルである、すなわち、ブロッキング基は、-OCONMe2である。カルバメートブロッキング基は、グリコシド結合に対して安定化効果を有し、穏やかな条件下で調製され得る。好ましい改変MenAサッカリドは、n個のモノサッカリド単位を含み、ここで、モノサッカリド単位の少なくともhは、3位および4位の両方において-OH基を有さない。hの値は、24以上例えば、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、98、99または100であり、好ましくは50以上である。存在しない-OH基は、好ましくは上記に定義した通りのブロッキング基である。他の好ましい改変MenAサッカリドは、モノサッカリド単位を含み、ここで、モノサッカリド単位少なくともs個は、3位に-OHを有さず、4位に-OHを有さない。sの値は、少なくとも1例えば、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、60、70、80、90である。存在しない-OH基は、好ましくは上記に定義した通りのブロッキング基である。本発明での使用に適切な改変MenAサッカリドは、以下の式を有する:ここで、nは、1~100の整数好ましくは、5~25、より好ましくは15~25の整数であり;Tは式AまたはBであり:各Z基は、OHまたは上記で定義した通りのブロッキング基から独立して選択され;そして各Q基は、OHまたは上記で定義した通りのブロッキング基から独立して選択され;Yは、OHまたは上記で定義した通りのブロッキング基から選択され;Eは、Hまたは窒素保護基であり;ここでQ基の約7より多く例えば、8、9、10以上がブロッキング基である。n2個のZ基の各々は、互いに同じであっても異なっていてもよい。同様に、n2個のQ基の各々は、互いに同じであっても異なっていてもよい。Z基の全ては、OHであってもよい。あるいは、Z基の少なくとも10、少なくとも20、少なくとも30、少なくとも40、少なくとも50または少なくとも60は、OAcであってもよい。好ましくは、Z基の約70はOAcであり、Z基の残りはOHまたは上記で定義したブロッキング基である。Q基の少なくとも約7は、ブロッキング基である。好ましくは、少なくとも10、少なくとも20、少なくとも30、少なくとも40、少なくとも50、少なくとも60、少なくとも70、少なくとも80、少なくとも90または100までもがブロッキング基である。好ましいブロッキング基は、電子吸引基である。理論によって束縛されることを望まないが、グリコシド結合が、グリコシド結合におけるサッカリドヒドロキシル基の分子内求核攻撃からの補助に起因してすなわち、環状中間体の形成によって、加水分解に不安定であると考えられる。ヒドロキシル基の求核性が高くなるほど、分子内求核攻撃の傾向が高くなる。電子吸引ブロッキング基は、酸素孤立電子対を脱局在化し、それによって酸素求核性を低減して分子内求核攻撃の傾向を低下させる効果を有する。それゆえ、血清群Aを保護するために、水性組成物は、上記に定義した通りのMenA改変サッカリドを含み得る。本発明の好ましい組成物は、37°Cにて28日間保存され得、その期間の後、結合体化したMenAサッカリドの初期合計量のf未満が未結合であり、ここでfは、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5またはそれ未満である。共有結合体化本発明の組成物における莢膜サッカリドは、通常、キャリアタンパク質へと結合体化される。一般に、結合体化は、サッカリドの免疫原性を増強する。なぜなら、これらをT非依存性抗原からT依存性抗原へと変換し、従って免疫記憶をプライミングさせるからである。結合体化は、小児用ワクチンに特に有用であり、周知の技術である[例えば、参考文献20~29に概説される]。好ましいキャリアタンパク質は、細菌性トキシンまたは細菌性トキソイド例えば、ジフテリアトキソイドもしくは破傷風トキソイド、またはCRM197ジフテリアトキシン変異体[30~32]である。他の適切なキャリアタンパク質としては、N.meningitidis外膜タンパク質[33]、合成ペプチド[34,35]、熱ショックタンパク質[36,37]、百日咳菌タンパク質[38,39]、サイトカイン[40]、リンホカイン[40]、ホルモン[40]、増殖因子[40]、種々の病原体由来抗原由来の複数のヒトCD4T細胞エピトープを含む人工タンパク質[41]例えば、N19タンパク質[42]、H.influenzae由来のプロテインD[43,44]、ニューモリシンpneumolysin[45]、肺炎球菌表面タンパク質PspA[46]、鉄取り込みタンパク質[47]、C.difficile由来のトキシンAまたはトキシンB[48]、変異体細菌毒素例えば、コレラ毒素CTまたはE.coli熱不安定性毒素LT例えば、Glu-29における置換を有するCT[49]などが挙げられる。好ましいキャリアは、ジフテリアトキソイド、破傷風トキソイド、H.influenzaeプロテインD、特にCRM197である。本発明の組成物内で、例えば、キャリア抑制の危険性を減らすために、1種より多いキャリアタンパク質を使用することが可能である。従って、異なるキャリアタンパク質が、異なる血清群のために使用され得る例えば、血清群Aサッカリドは、CRM197に結合され得、一方、血清群Cサッカリドは、破傷風トキソイドに結合体化され得る。特定のサッカリド抗原のために1種より多いキャリアタンパク質を使用することもまた、可能である例えば、血清群Aサッカリドは、2種の群で存在し得、いくつかは、CRM197に結合体化され得、そして、その他は、破傷風トキソイドに結合体化され得る。しかし、一般的に、すべての血清群について同じキャリアタンパク質を使用することが好ましく、CRM197は好ましい選択である。単一のキャリアタンパク質は、1種より多いサッカリド抗原を保有し得る[50]。例えば、単一のキャリアタンパク質は、血清群A由来のサッカリドおよび血清群C由来のサッカリドに結合体化していてもよい。この目的を達成するために、サッカリドは、結合体化反応の前に混合され得る。しかし、一般的に、各々の血清群に対して別々の結合体を有することが好ましい。1:5すなわち、タンパク質過剰と5:1すなわち、サッカリド過剰との間のサッカリド:タンパク質比w/wを有する結合体が、好ましい。1:2と5:1との間の比が好ましく、1:1.25と1:2.5との間の比がより好ましい。過剰なキャリアタンパク質は、MenAおよびMenCについて好適であり得る。結合体は、遊離のキャリアタンパク質とともに使用され得る[51]。所定のキャリアタンパク質が、本発明の組成物において遊離形態および結合体化形態の両方で存在する場合、非結合体化形態は、好ましくは、全体として、この組成物におけるキャリアタンパク質総量の5重量以下であり、そしてより好ましくは、2重量未満で存在する。必要な場合は任意の適切なリンカーを用いて、任意の適切な結合体化反応が使用され得る。このサッカリドは、代表的に、結合体化前に活性化されるかまたは官能基化される。活性化は、例えば、シアン化試薬例えば、CDAP例えば、1-シアノ-4-ジメチルアミノピリジニウムテトラフルオロボレート[52,53など]を含み得る。他の適切な技術は、カルボジイミド、ヒドラジド、活性エステル、ノルボラン、p-ニトロ安息香酸、N-ヒドロキシスクシンイミド、S-NHS、EDC、TSTUを使用する;参考文献27のイントロダクションもまた参照のこと。リンカー基を介した結合が、任意の公知の手順例えば、参考文献54および参考文献55に記載の手順を用いて作製され得る。結合の1種は、ポリサッカリドを還元的アミノ化すること、得られるアミノ基をアジピン酸リンカー基の一端とカップリングすること、次いで、タンパク質をアジピン酸リンカー基の他端とカップリングすることを含む[25,56,57]。他のリンカーとしては、B-プロピオンアミド[58]、ニトロフェニル-エチルアミン[59]、ハロアシルハライド[60]、グリコシド結合[61]、6-アミノカプロン酸[62]、ADH[63]、C4~C12部分[64]などが挙げられる。リンカーの使用の代替としては、直接結合が使用され得る。タンパク質への直接結合は、ポリサッカリドの酸化、その後のタンパク質による還元的アミノ化例えば、参考文献65および参考文献66に記載される通りを含み得る。このサッカリドへのアミノ基の導入例えば、末端=O基を-NH2に置換することによる、その後のアジピン酸ジエステル例えば、アジピン酸N-ヒドロキシスクシンイミドジエステルによる誘導体化およびキャリアタンパク質との反応を含むプロセスが、好ましい。別の好ましい反応は、例えば、MenAまたはMenCについてのプロテインDキャリアを用いたCDAP活性化を使用する。結合体化後、遊離のサッカリドおよび結合体化されたサッカリドは、分離され得る。多くの適切な方法が存在し、これらの方法としては、疎水性クロマトグラフィー、接線tangential限外濾過、ダイアフィルトレーションなどが挙げられる[参考文献67および68などもまた参照のこと]。本発明の組成物が、結合体化されたオリゴサッカリドを含む場合、オリゴサッカリド調製が結合体化の前に行われることが好ましい。結合体化後、本発明の方法は、結合体化していないキャリアタンパク質のレベルを測定する工程を包含し得る。この測定を行う1つの方法は、キャピラリー電気泳動[69]例えば、遊離溶液中またはミセル界面動電micellarelectrokineticクロマトグラフィー[70]を含む。結合体化後、本発明の方法は、結合体化していないサッカリドのレベルを測定する工程を包含し得る。この測定を行う1つの方法は、HPAEC-PAD[67]を含む。結合体化後、本発明の方法は、結合体化したサッカリドを結合体化していないサッカリドから分離する工程を包含し得る。これらのサッカリドを分離する1つの方法は、1つの成分を選択的に沈澱させる方法を使用することである。結合体化していないサッカリドを溶液中に残すために、例えば、デオキシコレート処理[67]による、結合体化したサッカリドの選択的沈澱が好ましい。結合体化後、本発明の方法は、結合体の分子の大きさおよび/またはモル量を測定する工程を包含し得る。特に、分布が測定され得る。これらの測定を行う1つの方法は、多角度光散乱測光法multianglelightscatteringphotometryおよび示差屈折率測定法differentialrefractometrySEC-MALS/RI[71]による検出を用いるサイズ排除クロマトグラフィーを含む。オリゴサッカリド莢膜サッカリドは、一般的に、オリゴサッカリドの形態で使用される。これらは、精製莢膜ポリサッカリドの例えば、加水分解によるフラグメント化により都合よく形成され、通常、その後に、所望される大きさのフラグメントが精製される。ポリサッカリドのフラグメント化は、好ましくは、オリゴサッカリドにおいて30未満例えば、血清群Aについては、10と20との間、好ましくは、約10;血清群W135および血清群Yについては、15と25との間、好ましくは、約15~20;血清群Cについては、12と22との間;などの最終平均重合度DPを与えるように実施される。DPは、イオン交換クロマトグラフィーまたは比色定量アッセイ[72]により、都合よく測定され得る。加水分解が実施される場合、その加水分解物は、一般的に、短い長さのオリゴサッカリドを除去するために、大きさが調整される[73]。これは、種々の方法例えば、限外濾過、その後のイオン交換クロマトグラフィーにより達成され得る。血清群Aについては、約6以下の重合度を有するオリゴサッカリドが好ましくは除去され、そして血清群W135および血清群Yについては、約4未満の重合度を有するオリゴサッカリドが好ましくは、除去される。サッカリドの化学的加水分解は一般に、当該分野で標準的である条件下での酸または塩基のいずれかでの処理を含む。莢膜サッカリドのそれらの構成モノサッカリドへの脱重合のための条件は、当該分野で公知である。1つの脱重合方法は、過酸化水素の使用を含む[11]。過酸化水素は、サッカリドに例えば、1の最終H2O2濃度を与えるように添加され、次いで所望の鎖長の減少が達成されるまで、混合物が例えば、約55°Cでインキュベートされる。経時的な減少は、混合物からサンプルを取り出し、次いでこのサンプル中のサッカリドの平均分子サイズを測定することによって追跡され得る。次いで、一旦所望の鎖長に達したら、脱重合は、迅速な冷却によって停止され得る。血清群B病原体例えば、B型肝炎ウイルス、ジフテリアおよび破傷風に対するワクチンは、代表的に単一のタンパク質抗原例えば、HBV表面抗原または破傷風トキソイドを含む。対照的に、無細胞百日咳ワクチンは代表的に、少なくとも3種のB.pertussisタンパク質を含み、そしてPrevNarTM肺炎球菌ワクチンは、7種類の別個の結合体化サッカリド抗原を含む。他のワクチン例えば、細胞性百日咳ワクチン、麻疹ワクチン、不活化ポリオワクチンIPVおよび髄膜炎菌OMVワクチンは、まさにその性質から、多数の抗原の複雑な混合物である。それゆえ、1種の抗原、少数の規定された抗原、または規定されていない抗原の複雑な混合物によって防御が惹起され得るか否かは、問題となっている病原体に依存する。上記で言及した通り、血清群Bの髄膜炎菌に対するワクチンは、逃げられやすいelusiveことが証明されている。OMVに基づくワクチンは、狭い効力を示す。さらに、OFF2DV中に存在する規定されていない多数の抗原は、それらの可変の性質と合わせて、OMVが種々の品質制御の問題を有することを意味する。本発明者らは、血清群B感染に対する広い防御が達成され得ること、および少数の規定された血清群Bポリペプチド抗原を用いることによってこれが達成され得ることを見出した。それゆえ、本発明の組成物は、この組成物が、2以上すなわち、2または3の超毒性hypervirulent系統A4、ET-5およびN.meningitidis血清群Bの系統3に対して殺菌性である免疫応答を誘導し得るように、1以上のポリペプチド抗原を含む。髄膜炎菌血清群A[74]および髄膜炎菌血清群B[75,76]についてのゲノム配列が報告されており、そして適切な抗原が、これらのコードされるポリペプチドから選択され得る[例えば、参考文献77~82]。候補抗原を操作して、異種発現が改善されている[参考文献83~85]。1つの好ましい組成物は、Tbpタンパク質およびHsfタンパク質を含む[86]。Hsfは、自己トランスポーターautotransporterタンパク質であり[87-89]、nhhA[89]、GNA0992[77]またはNMB0992[75]としても公知である。Tbpは、トランスフェリン結合タンパク質であり[90~93]、TbpAおよびTbpBの両方、ならびにTbpAおよびTbpBの高分子量形態および低分子量形態を包含する。Tbpは、上記の個々のタンパク質およびこれらのタンパク質の複合体、ならびにトランスフェリンを結合し得る、他の任意のタンパク質およびそれらの複合体を包含する。TbpはTbpAまたはTbpBの高分子形態または低分子形態のいずれをも言及し得るが、高分子量形態および低分子量形態の両方のTbpAおよび/またはTbpBが存在することが好ましい。最も好ましくは、高分子量および低分子量のTbpAが存在する。別の好ましい組成物は、血清群BリポオリゴサッカリドLOS[94]を包含する。LOSは、血清群Bポリペプチドに加えて用いられてもよく、またはその代わり/それらの代わりに用いられてもよい。別の好ましい組成物は、Neisseria内の異なる機能を有する少なくとも2つの異なるカテゴリーのタンパク質の各々から選択された少なくとも1つの抗原を含む。このようなカテゴリーのタンパク質の例としては、以下が挙げられる:付着因子、自己トランスポータータンパク質、毒素、内在性外膜タンパク質および鉄捕獲タンパク質ironacquisitionproteins。これらの抗原は、参考文献95の命名法を用いて、以下の通りに選択され得る:FhaB、NspAPilC、Hsf、Hap、MafA、MafB、Omp26、NMB0315、NMB0995、NMB1119およびNadAからなる群より選択される少なくとも1つのNeisseria付着因子;Hsf、Hap、IgAプロテアーゼ、AspA、およびNadAからなる群より選択される少なくとも1つのNeisseria自己トランスポーター;FrpA、FrpC、FrpA/C、VapD、NM-ADPRTNMB1343およびLPS免疫型L2およびLPS免疫型L3のいずれかまたは両方からなる群より選択される少なくとも1つのNeisseria毒素;TbpA、TbpB、LbpA、LbpB、HpuA、HpuB、Lipo28GNA2132、Sibp、NMB0964、NMB0293、FbpA、Bcp、BfrA、BfrBおよびP2086XthAからなる群より選択される少なくとも1つのNeisseriaFe捕獲タンパク質;PilQ、OMP85、FhaC、NspA、TbpA、LbpA、TspA、TspB、TdfH、PorB、MItA、HpuB、HimD、HisD、GNA1870、OstA、HlpAGNA1946、NMB1124、NMB1162、NMB1220、NMB1313、NMB1953、HtrA、およびPLDAOMPLAからなる群より選択される少なくとも1つのNeisseria膜会合タンパク質好ましくは外膜タンパク質、特に内在性外膜タンパク質。Neisseria抗原のこれらの組合せは、Neisseria感染に対するワクチンの効力の驚くべき増強につながるといわれる[95]。特に好ましい組成物は、以下の5つの抗原のうちの1以上を含む[96]:1NadAタンパク質好ましくはオリゴマー形態例えば、トリマー形態;2741タンパク質;3936タンパク質;4953タンパク質;および5287タンパク質。MenB由来のNadANeisseriaの付着因子Aは、参考文献80においてタンパク質961として開示されており配列番号2943および配列番号2944、そして参考文献75においてNMB1994として開示されているGenBank登録番号11352904および7227256もまた参照のこと。このタンパク質の詳細な研究は、参考文献97において見出され得る。本発明に従って使用される場合、NadAは、種々の形態をとり得る。NadAの好ましい形態は、トランケーションtruncation改変体または欠失改変体例えば、参考文献83~85に開示されているトランケーション改変体または欠失改変体である。特に、そのC末端膜アンカーを有さないNadA例えば、本明細書中の配列番号1を与える、2996株についての残基351~残基405の欠失が好ましく、これは本明細書中で、時に、例えば上付きCの使用例えば、NadACにより区別される。その膜アンカードメインを有さないNadAのE.coliにおける発現は、培養上清へのこのタンパク質の分泌をもたらし、同時にその23マーリーダーペプチドの除去が生じる例えば、2996株については327マーを残す[本明細書中で、配列番号2]。そのリーダーペプチドを有さないポリペプチドは、本明細書中で、時に、上付きNLの使用例えば、NadANLまたはNadACNLにより区別される。好ましいNadAポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する:a配列番号2に対して50以上の例えば、60、70、80、90、95、99またはそれより高い同一性を有するアミノ酸配列;および/またはb配列番号1の少なくともn個連続したアミノ酸のフラグメントを含むアミノ酸配列であって、ここで、nが、7以上例えば、8、10、12、14、16、18、20、25、30、35、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250またはそれより大きいであるアミノ酸配列。bについての好ましいフラグメントは、配列番号1のC末端および/またはN末端から、1個以上例えば、1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、15個、20個、25個またはそれより多くのアミノ酸が欠けている例えば、NadAC、NadANL、NadACNL。他の好ましいフラグメントは、配列番号1由来のエピトープを含み、そして配列番号1の特に好ましいフラグメントは、配列番号2である。これらの種々の配列は、NadA改変体例えば、対立遺伝子改変体、ホモログ、オルソログortholog、パラログparalog、変異体などを包含する。種々のNadA配列は、参考文献98の図9に示される。MenB由来の741タンパク質は、参考文献80配列番号2535および配列番号2536において開示され、そして参考文献75においてNMB1870として開示されるGenBank登録番号GI:7227128もまた参照のこと。血清群Aにおける対応するタンパク質[74]は、GenBank登録番号7379322を有する。741は、本来、リポタンパク質である。本発明に従って使用される場合、741タンパク質は、種々の形態をとり得る。741の好ましい形態は、トランケーション改変体または欠失改変体である例えば、参考文献83~85に開示されているトランケーション改変体または欠失改変体。特に、741のN末端は、そのポリグリシン配列まで欠失されても、およびポリグリシン配列を含めて欠失されてもよくすなわち、MC58株の残基1~残基72の欠失[本明細書中で、配列番号3]、この配列は、時に、本明細書中で、接頭辞ΔGの使用により区別される。この欠失は、発現を増強し得る。この欠失はまた、741の脂質化部位を除去する。好ましい741配列は、以下のアミノ酸配列を有する:a配列番号3に対して50以上例えば、60、70、80、90、95、99またはそれより高いの同一性を有するアミノ酸配列;および/またはb配列番号3由来の少なくともn個連続するアミノ酸のフラグメントを含むアミノ酸配列であって、ここで、nは、7以上例えば、8、10、12、14、16、18、20、25、30、35、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250またはそれより多くである、アミノ酸配列。bについての好ましいフラグメントは、741由来のエピトープを含む。他の好ましいフラグメントは、配列番号3のC末端および/またはN末端から、1個以上例えば、1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、15個、20個、25個またはそれより多くのアミノ酸が欠けている。これらの配列は、741改変体例えば、対立遺伝子改変体、ホモログ、オルソログ、パラログ、変異体などを包含する。種々の741配列は、参考文献85の配列番号1~配列番号22、参考文献99の配列番号1~配列番号23および参考文献100の配列番号1~配列番号299において見出され得る。血清群B由来の936タンパク質は、参考文献80配列番号2883および配列番号2884に開示され、NMB2091は、参考文献75に開示されるGenBank登録番号GI:7227353もまた参照のこと。血清群Aにおける対応する遺伝子[74]は、GenBank登録番号7379093を有する。本発明に従って使用される場合、936タンパク質は、種々の形態をとり得る。936の好ましい形態は、トランケーション改変体または欠失改変体例えば、参考文献83~85に開示されているトランケーション改変体または欠失改変体である。特に、936のN末端リーダーペプチドが、欠失され得る例えば、936NL[本明細書中で、配列番号4]を与える、MC58株の残基1~残基23の欠失。好ましい936配列は、以下のアミノ酸配列を有する:a配列番号4に対して50以上例えば、60、70、80、90、95、99またはそれより高いの同一性を有するアミノ酸配列;および/またはb配列番号4由来の少なくともn個連続したアミノ酸のフラグメントを含むアミノ酸配列であって、ここで、nが、7以上例えば、8、10、12、14、16、18、20、25、30、35、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250またはそれより多くである、アミノ酸配列。bについての好ましいフラグメントは、936由来のエピトープを含む。他の好ましいフラグメントは、配列番号4のC末端および/またはN末端由来の1個以上例えば、1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、15個、20個、25個またはそれより多くのアミノ酸が欠けている。これらの配列は、936改変体例えば、対立遺伝子改変体、ホモログ、オルソログ、パラログ、変異体などを包含する。血清群B由来の953タンパク質は、参考文献80配列番号2917および配列番号2918に開示され、参考文献75においてNMB1030として開示されるGenBank登録番号GI:7226269もまた参照のこと。血清群Aにおける対応するタンパク質[74]は、GenBank登録番号7380108を有する。本発明に従って使用される場合、953タンパク質は、種々の形態をとり得る。953の好ましい形態は、トランケーション改変体または欠失改変体例えば、参考文献83~85に開示されているトランケーション改変体または欠失改変体である。特に、953のN末端リーダーペプチドが、欠失され得る例えば、953NL[本明細書中で、配列番号5]を与える、MC58株の残基1~残基19の欠失。好ましい953配列は、以下のアミノ酸配列を有する:a配列番号5に対して50以上例えば、60、70、80、90、95、99またはそれより高いの同一性を有するアミノ酸配列;および/またはb配列番号5由来の少なくともn個連続したアミノ酸のフラグメントを含むアミノ酸配列であって、ここで、nが、7以上例えば、8、10、12、14、16、18、20、25、30、35、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250またはそれより多くである、アミノ酸配列。bについての好ましいフラグメントは、953由来のエピトープを含む。他の好ましいフラグメントは、配列番号5のC末端由来および/またはN末端由来の1個以上例えば、1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、15個、20個、25個またはそれより多くのアミノ酸が欠けている。これらの配列は、936改変体例えば、対立遺伝子改変体、ホモログ、オルソログ、パラログ、変異体などを包含する。953の対立遺伝子形態は、参考文献82の図19において見られ得る。血清群B由来の287タンパク質は、参考文献80配列番号3103および配列番号3104に開示され、参考文献75においてNMB2132として開示され、そして参考文献77においてGNA2132として開示されるGenBank登録番号GI:7227388もまた参照のこと。血清群Aにおける対応するタンパク質[74]は、GenBank登録番号7379057を有する。本発明に従って使用される場合、287タンパク質は、種々の形態をとり得る。287の好ましい形態は、トランケーション改変体または欠失改変体例えば、参考文献83~85に開示されているトランケーション改変体または欠失改変体である。特に、287のN末端は、そのポリ-グリシン配列までおよびポリ-グリシン配列を含めて欠失され得る例えば、ΔG287[本明細書中で、配列番号6]を与える、MC58株についての残基1~残基24の欠失。この欠失は、発現を増強し得る。好ましい287配列は、以下のアミノ酸配列を有する:a配列番号6に対して50以上例えば、60、70、80、90、95、99またはそれより高いの同一性を有する、アミノ酸配列;および/またはb配列番号6由来の少なくともn個連続したアミノ酸のフラグメントを含むアミノ酸配列であって、ここで、nが、7以上例えば、8、10、12、14、16、18、20、25、30、35、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250またはそれより多くである、アミノ酸配列。bについての好ましいフラグメントは、287由来のエピトープを含む。他の好ましいフラグメントは、配列番号6のC末端由来および/またはN末端由来の1個以上例えば、1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、15個、20個、25個またはそれより多くのアミノ酸が欠けている。これらの配列は、287改変体例えば、対立遺伝子改変体、ホモログ、オルソログ、パラログ、変異体などを包含する。287の対立遺伝子形態は、参考文献82の図5および図15、ならびに参考文献80の実施例13および図21において見られ得る配列番号3179~配列番号3184。好ましいMenB抗原は、2996株、MC58株、95N477株および394/98株のうちの1種において見出されるアミノ酸配列を含む。タンパク質287は、好ましくは、2996株由来であるか、または、より好ましくは、394/98株由来である。タンパク質741は、好ましくは、血清群BのMC58株、2996株、394/98株もしくは95N477株由来であるか、または、血清群Cの90/18311株由来である。MC58株が、より好ましい。タンパク質936、タンパク質953およびタンパク質NadAは、好ましくは、2996株由来である。組成物が、特定のタンパク質抗原例えば、741または287を含有する場合、その組成物は、1種より多い改変体の形態で例えば、同じタンパク質であるが、1種より多い株由来である、その抗原を含有し得る。これらのタンパク質は、縦列タンパク質または別個のタンパク質として含まれ得る。しかし、いくつかの実施形態では、本発明の組成物は、同じタンパク質であるが1種より多い株由来であるタンパク質を含む。このアプローチは、741タンパク質について有効であることが見出されている。このタンパク質は、抗髄膜炎菌抗体応答を惹起するために極めて有効な抗原であり、全ての髄膜炎菌血清群にわたって発現されている。系統発生的分析は、これらのタンパク質が2つの群に分かれること、およびそれらの分けられたもののうちの一方が、合計3つの改変体をさらに与え[101]、そして一方で、所定の改変体に対して惹起された血清は、同じ改変体群内においては殺菌性であり、他の2つの改変体のうちの1つを発現する株に対しては活性ではないことすなわち、改変体内の交差防御は存在するが、改変体間の交差防御は存在しないことを示している[99,101]。従って、最大の株にまたがったcross-strain効力のためには、組成物が、タンパク質741の1種より多い改変体を含有すべきことが好ましい。各々の改変体由来の例示的配列を、本明細書中で、配列番号10、配列番号11および配列番号12に与え、これらの配列は、天然のリポタンパク質形態では脂質が共有結合するN末端システイン残基で始まる。従って、この組成物が、以下のうちの少なくとも2種を含有すべきことが好ましい:1配列番号10に対して少なくともaの配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、そして/または配列番号10由来の少なくともx個連続するアミノ酸のフラグメントからなるアミノ酸配列を含む、第1のタンパク質;2配列番号11に対して少なくともbの配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、そして/または配列番号11由来の少なくともy個連続するアミノ酸のフラグメントからなるアミノ酸配列を含む、第2のタンパク質;ならびに3配列番号12に対して少なくともcの配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、そして/または配列番号12由来の少なくともz個連続するアミノ酸のフラグメントからなるアミノ酸配列を含む、第3のタンパク質。aの値は、少なくとも85例えば、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、99.5またはそれより大きいである。bの値は、少なくとも85例えば、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、99.5またはそれより大きいである。cの値は、少なくとも85例えば、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、99.5またはそれより大きいである。aの値、bの値およびcの値は、本質的に、互いに関連しない。xの値は、少なくとも7例えば、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、60、70、80、90、100、120、140、160、180、200、225、250である。yの値は、少なくとも7例えば、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、60、70、80、90、100、120、140、160、180、200、225、250である。zの値は、少なくとも7例えば、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、60、70、80、90、100、120、140、160、180、200、225、250である。xの値、yの値およびzの値は、本質的に、互いに関連しない。いずれの所定の741アミノ酸配列も、分類1、分類2および分類3のうちの1種よりも多くに分類されないことが好ましい。従って、いずれの所定の741配列も、分類1、分類2および分類3のうちのただ1種にのみ分類される。従って、以下が好ましい:タンパク質1が、タンパク質2に対してi未満の配列同一性を有すること;タンパク質1が、タンパク質3に対してj未満の配列同一性を有すること;およびタンパク質2が、タンパク質3に対してk未満の配列同一性を有する。iの値は、60以上例えば、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90などであり、最大がaである。jの値は、60以上例えば、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90などであり、最大がbである。kの値は、60以上例えば、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90などであり、最大がcである。iの値、jの値およびkの値は、本質的に、互いに関連しない。本発明の組成物は、少数例えば、t種より少ない抗原、ここで、tは、10、9、8、7、6、5、4または3であるの精製された血清群B抗原を含む。この組成物が複雑な抗原混合物も規定されていない抗原混合物も含まないことが特に好ましい。例えば、外膜小胞を組成物中に含まないことが好ましい。この抗原は好ましくは、異種宿主において組換えにより発現され、次いで精製される。t種のMenB抗原を含む組成物については、t種の別個のポリペプチドが存在し得るが、複雑さをなおさらに減らすために、これらの抗原のうちの少なくとも2種を単一のポリペプチド鎖ハイブリッドタンパク質[参考文献83~85]として発現することが好ましい。すなわち、その結果、t種の抗原は、tよりも少ない種類のポリペプチドを形成する。ハイブリッドタンパク質は、2つの主な利点を提供する:第1に、不安定であり得るかまたはそのままではほとんど発現されないかもしれないタンパク質が、この問題を克服する適切なハイブリッドパートナーを付加することによって補助され得る;第2に、2つの別々に有用なタンパク質を産生するためにたった1種の発現および精製を用いることが必要とされるので、商業的製造が単純化される。本発明の組成物中に含まれるハイブリッドタンパク質は、上記に列挙した抗原のうちの2以上すなわち、2、3、4または5を含み得る。5種の抗原の2種からなるハイブリッドが好ましい。5種の基本抗原NadA、741、953、936および287の組み合わせ内で、ある抗原は、1種より多いハイブリッドタンパク質において存在し得るか、および/または非ハイブリッドタンパク質として存在し得る。しかし、抗原は、ハイブリッドとして存在するかまたは非ハイブリッドとして存在するかのいずれかが好ましいが、両方として存在することは好ましくない。しかし、ハイブリッド抗原および非ハイブリッド好ましくは、リポタンパク質抗原の両方としてタンパク質741を含むことは、有用であり得る特に、1種より多い741改変体が使用される場合。ハイブリッドタンパク質は、式NH2-A-[-X-L-]n-B-COOHにより表され得、ここで:Xは、5種の基本抗原のうちの1種のアミノ酸配列であり;Lは、必要に応じたリンカーアミノ酸配列であり;Aは、必要に応じたN末端アミノ酸配列であり;Bは、必要に応じたC末端アミノ酸配列であり;そしてnは、2、3、4または5である。最も好ましくは、nは2である。本発明において使用するための2抗原ハイブリッドとしては、以下が挙げられる:NadAおよび741;NadAおよび936;NadAおよび953;NadAおよび287;741および936;741および953;741および287;936および953;936および287;953および287。2種の好ましいタンパク質は、以下である:X1が936であり、かつX2が741である;X1が287であり、かつX2が953である。-X-部分が、その野生型形態においてリーダーペプチド配列を有する場合、これは、ハイブリッドタンパク質に含まれてもよくまたは削除されてもよい。いくつかの実施形態において、このリーダーペプチドは、ハイブリッドタンパク質のN末端に位置する-X-部分のリーダーペプチドを除いて、欠失されるすなわち、X1のリーダーペプチドは維持されるが、X2...Xnのリーダーペプチドは、削除される。このことは、全てのリーダーペプチドを削除し、かつX1のリーダーペプチドを部分-A-として使用することと等価である。[-X-L-]の各々のnの場合について、リンカーアミノ酸配列-L-は、存在してもよく、存在しなくてもよい。例えば、n=2である場合、上記ハイブリッドは、NH2-X1-L1-X2-L2-COOH、NH2-X1-X2-COOH、NH2-X1-L1-X2-COOH、NH2-X1-X2-L2-COOHなどであり得る。リンカーアミノ酸配列-L-は、代表的に、短い例えば、20以下すなわち、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1のアミノ酸。例としては、クローニングを容易にする短いペプチド配列、ポリ-グリシンリンカーすなわち、Glynを含有するn=2、3、4、5、6、7、8、9、10またはそれより大きいおよびヒスチジンタグすなわち、Hisnn=3、4、5、6、7、8、9、10またはそれより大きいが挙げられる。他の適切なリンカーアミノ酸配列は、当業者に明らかである。有用なリンカーは、Gly-SerジペプチドがBamHI制限酵素部位から形成されていてクローニングおよび操作が容易になるGSGGGG配列番号9であり、そしてGly4テトラペプチドは、代表的なポリ-グリシンリンカーである。Xn1が、ΔGタンパク質であり、かつLnがグリシンリンカーである場合、これは、Xn1が、ΔGタンパク質ではなく、かつLnが存在しないことと等価であり得る。-A-は、任意のN末端アミノ酸配列である。-A-は、代表的に、短い例えば、40以下すなわち、39、38、37、36、35、34、33、32、31、30、29、28、27、26、25、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1のアミノ酸。例としては、タンパク質輸送をもたらすリーダー配列またはクローニングもしくは精製を容易にする短いペプチド配列例えば、ヒスチジンタグ、すなわち、Hisnn=3、4、5、6、7、8、9、10またはそれより大きいが挙げられる。他の適切なN末端アミノ酸配列は、当業者に明らかである。X1が、それ自体のN末端メチオニンを欠く場合、-A-は、好ましくは、N末端メチオニンを提供するオリゴペプチド例えば、1、2、3、4、5、6、7または8アミノ酸を有するである。-B-は、必要に応じたC末端アミノ酸配列である。-B-は、代表的に、短い例えば、40以下すなわち、39、38、37、36、35、34、33、32、31、30、29、28、27、26、25、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1のアミノ酸。例としては、タンパク質輸送をもたらす配列、クローニングもしくは精製を容易にする短いペプチド配列例えば、ヒスチジンタグ、すなわち、Hisnn=3、4、5、6、7、8、9、10またはそれより大きいを含むまたはタンパク質安定性を増強する配列が挙げられる。他の適切なC末端アミノ酸配列は、当業者に明らかである。2種の特に好ましい本発明のハイブリッドタンパク質は、以下のとおりである:これらの2種のタンパク質は、特に、配列番号2を有するNadAと組み合わせて使用され得る。従って、本発明について使用するためのMenB抗原の好ましい組成物は、従って、配列番号2のアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド、配列番号7のアミノ酸配列を含む第2のポリペプチドおよび配列番号8のアミノ酸配列を含む第3のポリペプチドを含む。これは、本発明について使用するためのMenB抗原の好ましい群である。上述のように、本発明の組成物は、MenBの超毒性系統A4、超毒性系統ET-5および系統3のうちの2種または3種に対して有効な血清殺菌性抗体応答を誘導し得る。それらは、超毒性系統のサブグループI、サブグループIII、サブグループIV-1またはET-37複合体の1種以上に対する殺菌性抗体応答および他の系統例えば、超侵襲性系統に対する殺菌性抗体応答をさらに誘導し得る。これらの抗体応答は、マウスにおいて都合よく測定され、そしてワクチン効力の標準的な指標である[例えば、参考文献77の巻末の注14を参照のこと]。血清殺菌活性SBAは、補体によって媒介される細菌殺傷を測定し、そしてヒトまたはウサギ乳仔の補体を用いてアッセイされ得る。WHO基準は、ワクチンが、レシピエントの90より多くにおいて、少なくとも4倍のSBA上昇を誘導することを要求している。この組成物は、これらの超毒性系統内の各々および全てのMenB株に対して殺菌性抗体応答を誘導する必要はない;むしろ、特定の超毒素系統内の血清群Bの髄膜炎菌の4種以上のさらなる株の任意の所定の群に対して、この組成物により誘導される抗体は、この群のうちの少なくとも50例えば、60、70、80、90またはそれより高いに対して殺菌性である。好ましい株群は、以下の国のうちの少なくとも4つにおいて単離された株を含む:GB、AU、CA、NO、IT、US、NZ、NL、BRおよびCU。上記血清は、好ましくは、少なくとも1024例えば、210、211、212、213、214、215、216、217、218またはそれより高い、好ましくは、少なくとも214の殺菌力価を有する。すなわち、この血清は、参考文献77に記載されるように、1/1024に希釈される場合、特定の株の試験細菌の少なくとも50を殺傷可能である。好ましい組成物は、血清群Bの髄膜炎菌の以下の株に対する殺菌応答を誘導し得る:iクラスターA4由来の961-5945株B:2b:P1.21,16および/またはG2136株B:-;iiET-5複合体由来のMC58株B:15:P1.7,16bおよび/または44/76株B:15:P1.7,16;iii系統3由来の394/98株B:4:P1.4および/またはBZ198株B:NT:-。より好ましい組成物は、961-5945株、44/76株および394/98株に対する殺菌応答を誘導し得る。961-5945株およびG2136株は、ともにNeisseriaMLST基準株である[参考文献102におけるids638および1002]。MC58株は、広範に利用可能であり例えば、ATCCBAA-335、そして参考文献75において配列決定された株であった。44/76株は、広範に使用され、そして特徴付けられており例えば、参考文献103、そしてNeisseriaMLST基準株の1つである[参考文献102におけるid237;参考文献104における表2の32行目]。394/98株は、元々、ニュージーランドにおいて1998年に単離され、そしてこの株を用いたいくつかの公開された研究が存在している例えば、参考文献105および106。BZ198株は、別のMLST基準株である[参考文献102におけるid409;参考文献104における表2の41行目]。この組成物は、ET-37複合体由来の血清群W135のLNP17592株W135:2a:P1.5,2に対する殺菌応答をさらに誘導し得る。これは、フランスにおいて2000年に単離されたHaji株である。本発明の組成物に含まれ得る他のMenBポリペプチド抗原としては、以下のアミノ酸配列:参考文献78からの配列番号650;参考文献78からの配列番号878;参考文献78からの配列番号884;参考文献79からの配列番号4;参考文献80からの配列番号598;参考文献80からの配列番号818;参考文献80からの配列番号864;参考文献80からの配列番号866;参考文献80からの配列番号1196;参考文献80からの配列番号1272;参考文献80からの配列番号1274;参考文献80からの配列番号1640;参考文献80由来の配列番号1788;参考文献80由来の配列番号2288;参考文献80からの配列番号2466;参考文献80からの配列番号2554;参考文献80からの配列番号2576;参考文献80からの配列番号2606;参考文献80からの配列番号2608;参考文献80からの配列番号2616;参考文献80からの配列番号2668;参考文献80からの配列番号2780;参考文献80からの配列番号2932;参考文献80からの配列番号2958;参考文献80からの配列番号2970;参考文献80からの配列番号2988、のうちの1個を含むMenBポリペプチド抗原、またはa上記配列に対して50以上の例えば、60、70、80、90、95、99またはそれより高い同一性を有する;および/もしくはb上記配列由来の少なくともn個連続するアミノ酸のフラグメントを含み、nが7以上例えば、8、10、12、14、16、18、20、25、30、35、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250またはそれより高いである、アミノ酸配列を含むポリペプチドが挙げられる。bについての好ましいフラグメントは、関連配列由来のエピトープを含む。これらのポリペプチドのうちの1種より多く例えば、2種、3種、4種、5種、6種、7種、8種、9種、10種、11種、12種、13種、14種またはそれより多くが含まれ得る。さらなる抗原性成分非髄膜炎菌でかつ非ナイセリア属の抗原好ましくは、髄膜炎菌成分に対する免疫応答を減少させないものもまた、本発明の組成物に含まれ得る。例えば、参考文献107は、Hibサッカリドと一緒のN.meningitidis血清群Bおよび血清群C由来のオリゴサッカリドの組み合わせを開示している。特に好ましい非髄膜炎菌抗原としては、以下が挙げられる:-ジフテリア抗原例えば、ジフテリアトキソイド[例えば、参考文献108の第3章]。-破傷風抗原例えば、破傷風トキソイド[例えば、参考文献108の第4章]。-B.pertussis由来の百日咳ホロトキシンholotoxinPTおよび糸状赤血球凝集素FHA必要に応じて、また、ペルタクチンならびに/または凝集原2および凝集原3と組み合わせて[例えば、参考文献109および110]。-細胞性破傷風抗原。-A型肝炎ウイルス由来の抗原例えば、不活性化ウイルス[例えば、111,112]。-B型肝炎ウイルス由来の抗原例えば、表面抗原および/またはコア抗原[例えば、112,113]表面抗原は、好ましくは、リン酸アルミニウムに吸着される[114]。-ポリオ抗原例えば、IPV[例えば、115,116]。この混合物は、これらのさらなる抗原のうちの1種以上を含有し得、これらの抗原は、必要な場合、無毒化例えば、化学的手段および/または遺伝的手段による百日咳トキシンの無毒化され得る。ジフテリア抗原がこの混合物中に含有される場合、破傷風抗原および百日咳抗原もまた含有することが好ましい。同様に、破傷風抗原が含有される場合、ジフテリア抗原および百日咳抗原もまた含有することが好ましい。同様に、百日咳抗原が含有される場合、ジフテリア抗原および破傷風抗原もまた含有することが好ましい。この混合物中の抗原は、代表的に、少なくとも各々1μg/mlの濃度で存在する。一般的に、任意の所定の抗原の濃度は、その抗原に対する免疫応答を誘発するために充分である。実際の免疫原性例えば、ELISA力価は低減され得るが、これらを合わせることにより、個々のサッカリド抗原の防御効力が除去されないことが好ましい。この混合物中でのタンパク質抗原の使用の代替として、この抗原をコードする核酸が使用され得る。従って、この混合物のタンパク質成分は、そのタンパク質をコードする核酸好ましくは、例えば、プラスミド形態のDNAにより置換され得る。同様に、本発明の組成物は、サッカリド抗原を模倣するタンパク質例えば、ミモトープmimotope[117]または抗イディオタイプ抗体を含有し得る。これらは、個々のサッカリド成分を置換し得るか、または、それらを補充し得る。一例として、ワクチンは、MenC[118]またはMenA[119]の莢膜ポリサッカリドのペプチド模倣物を、そのサッカリド自体の代わりに、含有し得る。本発明の組成物に含まれるのに好ましい2種の非髄膜炎菌抗原は、H.influenzaeB型Hibを防御するものおよびStreptococcuspneumoniaeを防御するものである。HaemophilusinfluenzaeB型Hibこの組成物がH.influenzaeB型抗原を含む場合、それは、代表的に、Hib莢膜サッカリド抗原である。H.influenzaeb由来のサッカリド抗原は、周知である。有利なことに、このHibサッカリドは、特に、子供におけるその免疫原性を増強するために、キャリアタンパク質に共有結合される。一般的にポリサッカリド結合体の調製および特にHib莢膜ポリサッカリドの調製は、良く実証されている[例えば、参考文献21~29など]。本発明は、任意の適切なHib結合体を使用し得る。適切なキャリアタンパク質は、上記に記載され、そして、Hibサッカリドに関して好ましいキャリアは、CRM197HbOC、破傷風トキソイドPRP-TおよびN.meningitidisの外膜複合体PRP-OMPである。結合体のサッカリド部分は、ポリサッカリド例えば、全長ポリリボシルリビトールホスフェートPRPであり得るが、ポリサッカリドを加水分解してオリゴサッカリド例えば、約1kDa~約5kDaのMWを形成することが好ましい。好ましい結合体は、アジピン酸リンカーを介してCRM197へと共有結合されたHibオリゴサッカリドを含む[120,121]。破傷風トキソイドもまた、好ましいキャリアである。Hib抗原の投与は、好ましくは、0.15μg/ml以上の抗PRP抗体濃度をもたらし、そして、より好ましくは、1μg/ml以上の抗PRP抗体濃度をもたらす。組成物が、Hibサッカリド抗原を含有する場合、組成物は、水酸化アルミニウムアジュバントをまた含有しないことが好ましい。この組成物がリン酸アルミニウムアジュバントを含有する場合、このHib抗原は、このアジュバントに吸着されてもよく[122]、または吸着されなくてもよい[123]。吸着の防止は、抗原/アジュバント混合の間の正確なpH、適切な電荷ゼロ点を有するアジュバントおよび組成物中の種々の異なる抗原に対する適切な混合順序を選択することにより、達成され得る[124]。本発明の組成物は、1種より多いHib抗原を含有し得る。Hib抗原は、例えば、本発明の髄膜炎菌組成物による再構成のために凍結乾燥され得る。Streptococcuspneumoniaeこの組成物が、S.pneumoniae抗原を含む場合、それは、代表的に、好ましくは、キャリアタンパク質に結合体化された莢膜サッカリド抗原である[例えば、参考文献125~127]。S.pneumoniaeの1種より多くの血清型由来のサッカリドを含有することが好ましい。例えば、23種の異なる血清型由来のポリサッカリドの混合物が広範に使用されており、5種と11種との間の異なる血清群由来のポリサッカリドを用いた結合体ワクチンも同様である[128]。例えば、PrevNarTM[1]は、7種の血清型4、6B、9V、14、18C、19Fおよび23F由来の抗原を含有し、各々のサッカリドは、個々に、還元的アミノ化によりCRM197に結合体化され、0.5ml用量あたり2μgの各々のサッカリド4μgの血清型6Bを有し、そして、結合体は、リン酸アルミニウムアジュバントに吸着される。本発明の組成物は、好ましくは、少なくとも血清型6B、血清型14、血清型19Fおよび血清型23Fを含有する。結合体は、リン酸アルミニウムに吸着され得る。肺炎球菌由来のサッカリド抗原の使用の代替として、この組成物は、1種以上のポリペプチド抗原を含有し得る。肺炎球菌のいくつかの株についてのゲノム配列が利用可能であり[129,130]、そして逆ワクチン学の対象とされ[131~134]て適切なポリペプチド抗原が同定され得る[135,136]。例えば、この組成物は、参考文献137で定義されたような、以下の抗原のうちの1種以上を含有し得る:PhtA、PhtD、PhtB、PhtE、SpsA、LytB、LytC、LytA、Sp125、Sp101、Sp128、Sp130およびSp130。この組成物は、これらの抗原のうちの1種より多く例えば、2種、3種、4種、5種、6種、7種、8種、9種、10種、11種、12種、13種または14種を含有し得る。いくつかの実施形態において、この組成物は、肺炎球菌由来のサッカリド抗原およびポリペプチド抗原の両方を含有し得る。これらは、単純に混合して使用されてもよく、またはこの肺炎球菌サッカリド抗原は、肺炎球菌タンパク質に結合体化されてもよい。このような実施形態に適切なキャリアタンパク質としては、前の段落において列挙した抗原が挙げられる[137]。肺炎球菌抗原は、例えば、髄膜炎菌抗原および/またはHib抗原と一緒に、凍結乾燥され得る。薬学的組成物本発明の組成物は、上述の成分に加えて、代表的に、1以上の薬学的に受容可能なキャリアを含有し、このようなキャリアとしては、それ自体ではその組成物を受容する個体に有害な抗体の生成を誘導しない、任意のキャリアが挙げられる。適切なキャリアは、代表的に、大きく、ゆっくりと代謝される高分子例えば、タンパク質、ポリサッカリド、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリマーアミノ酸、アミノ酸コポリマー、スクロース[138]、トレハロース[139]、ラクトース、および脂質凝集物例えば、油小滴またはリポソームである。このようなキャリアは、当業者に周知である。上記ワクチンはまた、希釈剤例えば、水、生理食塩水、グリセロールなどを含有し得る。さらに、補助物質例えば、湿潤剤または乳化剤、pH緩衝物質などが存在し得る。無菌で発熱物質を含まず、リン酸緩衝化された生理食塩水は、代表的なキャリアである。薬学的に受容可能な賦形剤の徹底的な考察は、参考文献140において入手可能である。本発明の組成物は、水性形態すなわち、液体または懸濁物である。この型の液体処方物は、水性媒質中で再構成する必要性なくこの組成物がそのパッケージングされた形態から直接的に投与されることを可能にし、従って、注射に理想的である。組成物は、バイアル中に存在してもよく、またはこれらは充填済みready-filled注射器中に存在してもよい。この注射器は、針付きまたは針無しで供給され得る。注射器は、単回用量のこの組成物を含み、一方、バイアルは、単回用量または複数回用量を含み得る。本発明の液体組成物はまた、凍結乾燥形態から他のワクチンを再構成するために例えば、凍結乾燥されたHib抗原またはDTP抗原を再構成するために適している。本発明の組成物がこのような即座の再構成のために用いられるべき場合、本発明は、キットを提供し、このキットは、2つのバイアルを備えてもよく、またはこのキットは、1つの充填済み注射器および1つのバイアルを備えてもよく、この注射器の内容物は、注射前にこのバイアルの内容物を再活性化するために用いられる。本発明の組成物は、単位用量形態または複数用量形態でパッケージングされ得る。複数用量形態については、バイアルが、充填済み注射器よりも好ましい。有効投薬容量は、慣用的に確立され得るが、注射用組成物の代表的なヒト用量は、0.5mlの容量を有する。本発明の組成物のpHは、好ましくは、pH6とpH8との間であり、好ましくは約7である。適切なpHは、緩衝剤の使用によって維持され得る。組成物が水酸化アルミニウム塩を含有する場合、ヒスチジン緩衝剤を使用することが好ましい[141]。この組成物は、無菌および/または発熱物質を含まないかもしれない。本発明の組成物は、ヒトに関して等張であり得る。本発明の組成物は免疫原性であり、そしてより好ましくはワクチン組成物である。本発明によるワクチンは、予防的すなわち、感染を防ぐためまたは治療的すなわち、感染を処置するためのいずれかであり得るが、代表的には予防的である。ワクチンとして使用される免疫原性組成物は、免疫学的有効量の抗原、ならびに必要に応じて、任意の他の成分を含有する。免疫学的有効量により、単回用量においてかまたはある一連のものの一部としてのいずれかでの、個体に対するその量の投与が、処置または予防のために有効であることを意味する。この量は、処置されるべき個体の健康状態および身体状態、年齢、処置されるべき個体の分類学群例えば、非ヒト霊長類、霊長類など、その個体の免疫系の抗体合成能力、所望される防御の程度、そのワクチンの処方、処置医によるその医学的状態の評価および他の関連因子に依存して変化する。この量が、慣習的な試験を通して決定され得る比較的広範な範囲にわたることが予想される。各々の用量内で、個々のサッカリド抗原の量は、一般的に、サッカリドの質量として測定して1μg~50μgの間例えば、約1μg、約2.5μg、約4μg、約5μgまたは約10μgである。各サッカリドは、1用量あたり、実質的に同じ量で存在し得る。しかし、MenYサッカリド:MenW135サッカリドの比w/wは、1より大きくてもよく例えば、2:1、3:1、4:1、5:1、10:1またはそれより大きく、そして/またはMenYサッカリド:MenCサッカリドの比w/wは、1未満例えば、1:2、1:3、1:4、1:5またはより低くであってもよい。血清群A:血清群C:血清群W135:血清群Y由来のサッカリドについての好ましい比w/wは、1:1:1:1、1:1:1:2、2:1:1:1、4:2:1:1、8:4:2:1、4:2:1:2、8:4:1:2、4:2:2:1、2:2:1:1、4:4:2:1、2:2:1:2、4:4:1:2および2:2:2:1である。血清群C:血清群W135:血清群Y由来のサッカリドについての好ましい比w/wは、1:1:1、1:1:2、1:1:1、2:1:1、4:2:1、2:1:2、4:1:2、2:2:1および2:1:1である。実質的に等価な重量の各サッカリドを用いることが好ましい。本発明の好ましい組成物は、1用量あたり50μg未満の髄膜炎菌サッカリドを含有する。他の好ましい組成物は、1用量あたり40μg以下の髄膜炎菌サッカリドを含有する。他の好ましい組成物は、1用量あたり30μg以下の髄膜炎菌サッカリドを含有する。他の好ましい組成物は、1用量あたり25μg以下の髄膜炎菌サッカリドを含有する。他の好ましい組成物は、1用量あたり20μg以下の髄膜炎菌サッカリドを含有する。他の好ましい組成物は、1用量あたり10μg以下の髄膜炎菌サッカリドを含有するが、理想的には、本発明の組成物は、1用量あたり少なくとも10μgの総髄膜炎菌サッカリドを含有する。本発明の組成物は、特に、複数用量様式でパッケージングされる場合、抗菌剤を含有し得る。本発明の組成物は、洗浄剤例えば、Tweenポリソルベート例えば、Tween80を含有し得る。洗浄剤は、一般に、低いレベル例えば、0.01未満で存在する。本発明の組成物は、ナトリウム塩例えば、塩化ナトリウムを含有して張度を与え得る。10±2mg/mlNaClの濃度が、代表的である。本発明の組成物は、一般的に、緩衝剤を含有する。リン酸緩衝剤が、代表的である。本発明の組成物は一般に、他の免疫調節剤とともに投与される。特に、組成物は通常、1以上のアジュバントを含む。このようなアジュバントとしては、以下が挙げられるがこれらに限定されない:A.無機質含有組成物本発明におけるアジュバントとしての使用のために適切な無機質含有組成物としては、無機塩例えば、アルミニウム塩およびカルシウム塩が挙げられる。本発明は、無機塩例えば、水酸化物例えば、オキシヒドロキシド、リン酸塩例えば、ヒドロキシリン酸塩、オルトリン酸塩、硫酸塩など[例えば、参考文献142の第8章および第9章を参照のこと]、または異なる無機化合物の混合物を含み、この組成物は、任意の適切な形態例えば、ゲル、結晶、非晶質などをとり、そして、吸着が好ましい。この無機質含有組成物はまた、無機塩の粒子として処方され得る[143]。B.油エマルジョン本発明におけるアジュバントとしての使用のために適切な油エマルジョン組成物としては、スクアレン-水エマルジョン例えば、MF59が挙げられる[参考文献142の第10章;参考文献144もまた参照のこと。]5スクアレン、0.5Tween80および0.5Span85、マイクロフルイダイザーmicrofluidizerを用いて、サブミクロン粒子に処方される。完全フロイントアジュバントCFAおよび不完全フロイントアジュバントIFAもまた、使用され得る。C.サポニン処方物[参考文献142の第22章]サポニン処方物はまた、本発明においてアジュバントとして使用され得る。サポニンは、広範な植物種の樹皮、葉、茎、根および花においてさえ見られる、不均一な群のステロールグリコシドおよびトリテルペノイドグリコシドである。Quillaiasaponariaモリナの木Molinatreeの樹皮由来のサポニンは、アジュバントとして広範に研究されている。サポニンはまた、Smilaxornataサルサパリラsarsaprilla、GypsophillapaniculataブライドベールbridesveilおよびSaponariaofficianalisサボンソウsoaprootから市販され得る。サポニンアジュバント処方物としては、精製された処方物例えば、QS21および液体処方物例えば、ISCOMが挙げられる。QS21は、StimulonTMとして市販される。サポニン組成物は、HPLCおよびRP-HPLCを用いて精製されている。これらの技術を用いて特定の精製フラクションが同定されており、これらのフラクションとしては、QS7、QS17、QS18、QS21、QH-A、QH-BおよびQH-Cが挙げられる。好ましくは、このサポニンは、QS21である。QS21の生成方法は、参考文献145に開示されている。サポニン処方物はまた、ステロール例えば、コレステロールを含有し得る[146]。サポニンとコレステロールとの組み合わせが使用されて、免疫刺激複合体immunostimulatingcomplexISCOMと呼ばれる独特な粒子を形成し得る[参考文献142の第23章]。ISCOMとしてはまた、代表的に、リン脂質例えば、ホスファチジルエタノールアミンまたはホスファチジルコリンが挙げられる。任意の公知のサポニンが、ISCOMにおいて使用され得る。好ましくは、このISCOMは、QuilA、QHAおよびQHCのうちの1つ以上を含む。ISCOMは、参考文献146~148にさらに記載されている。必要に応じて、このISCOMは、さらなる洗剤を含まなくてもよい[149]。サポニンベースのアジュバントの開発の概説は、参考文献150および151に見られ得る。D.ビロソームおよびウイルス様粒子ビロソームおよびウイルス様粒子VLPもまた、本発明においてアジュバントとして使用され得る。これらの構造体は、一般的に、必要に応じてリン脂質と組み合わされるかまたはリン脂質とともに処方されたウイルス由来の1つ以上のタンパク質を含む。それらは、一般的に、非病原性で非複製性であり、そして一般的に、あらゆる天然ウイルスゲノムを含まない。このウイルスタンパク質は、組換え的に生成されてもよく、またはウイルス全体から単離されてもよい。ビロソームまたはVLPにおける使用のために適切なこれらのウイルスタンパク質としては、インフルエンザウイルス由来のタンパク質例えば、HAまたはNA、B型肝炎ウイルス由来のタンパク質例えば、コアタンパク質またはキャプシドタンパク質、E型肝炎ウイルス由来のタンパク質、麻疹ウイルス由来のタンパク質、シンドビスウイルス由来のタンパク質、ロタウイルス由来のタンパク質、口蹄疫ウイルス由来のタンパク質、レトロウイルス由来のタンパク質、ノーウォークウイルス由来のタンパク質、ヒトパピローマウイルス由来のタンパク質、HIV由来のタンパク質、RNAファージ由来のタンパク質、Qβファージ由来のタンパク質例えば、コートタンパク質、GAファージ由来のタンパク質、frファージ由来のタンパク質、AP205ファージ由来のタンパク質およびTy由来のタンパク質例えば、レトロトランスポゾンTyタンパク質p1が挙げられる。VLPは、参考文献152~157においてさらに考察されている。ビロソームは、例えば、参考文献158においてさらに考察されている。E.細菌誘導体または微生物誘導体本発明における使用のために適切なアジュバントとしては、細菌誘導体または微生物誘導体例えば、腸内細菌リポポリサッカリドLPSの無毒性誘導体、リピドA誘導体、免疫刺激オリゴヌクレオチドならびにADPリボシル化トキシンおよびそれらの無毒性誘導体が挙げられる。LPSの無毒性誘導体としては、モノホスホリルリピドAMPLおよび3-O-脱アシル化MPL3dMPLが挙げられる。3dMPLは、3脱O-アシル化モノホスホリルリピドAと、4、5または6アシル化鎖との混合物である。3脱O-アシル化モノホスホリルリピドAの好ましい小さい粒子形態は、参考文献159に開示されている。3dMPLのこのような小さい粒子は、0.22μmメンブレンを通って滅菌濾過されるために充分小さい[159]。他の無毒性LPS誘導体としては、モノホスホリルリピドA模倣物例えば、アミノアルキルグルコサミニドホスフェート誘導体例えば、RC-529が挙げられる[160,161]。リピドA誘導体としては、Escherichiacoli由来のリピドA誘導体例えば、OM-174が挙げられる。OM-174は、例えば、参考文献162および163に記載されている。本発明におけるアジュバントとしての使用のために適切な免疫刺激性オリゴヌクレオチドとしては、CpGモチーフグアノシンへのホスフェート結合により連結された非メチル化シトシンを含むジヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列が挙げられる。パリンドローム配列またはポリdG配列を含む、二本鎖RNAおよびオリゴヌクレオチドもまた、免疫刺激性であることが示されている。CpGは、ヌクレオチド改変体/アナログ例えば、ホスホロチオエート改変体を含み得、そして、二本鎖または一本鎖であり得る。参考文献164、165および166は、可能なアナログ置換例えば、グアノシンの2’-デオキシ-7-デアザグアノシンによる置換を開示している。CpGオリゴヌクレオチドのアジュバント効果は、参考文献167~172において、さらに考察されている。このCpG配列例えば、GTCGTTモチーフまたはTTCGTTモチーフは、TLR9に導かれ得る[173]。このCpG配列例えば、CpG-AODNは、Th1免疫応答誘導に特異的であってもよく、または、このCpG配列例えば、CpG-BODNは、B細胞応答誘導に、より特異的であってもよい。CpG-AODNおよびCpG-BODNは、参考文献174~176において考察されている。好ましくは、このCpGは、CpG-AODNである。好ましくは、このCpGオリゴヌクレオチドは、5’末端がレセプター認識のために接近可能であるように構築される。必要に応じて、2つのCpGオリゴヌクレオチド配列がそれらの3’末端で結合されて、イムノマーimmunomerを形成し得る。例えば、参考文献173および177~179を参照のこと。細菌ADP-リボシル化トキシンおよびその無毒化誘導体は、本発明においてアジュバントとして使用され得る。好ましくは、このタンパク質は、E.coli由来E.coli熱不安定性エンテロトキシンLT、コレラ由来CTまたは百日咳由来PTである。粘膜アジュバントとしての無毒化ADP-リボシル化トキシンの使用は、参考文献180に記載されており、そして、非経口的アジュバントとしての無毒化ADP-リボシル化トキシンの使用は、参考文献181に記載されている。このトキシンまたはトキソイドは、好ましくは、AサブユニットおよびBサブユニットの両方を含むホロトキシンの形態である。好ましくは、このAサブユニットは、無毒化変異を含み;好ましくは、このBサブユニットは、変異していない。好ましくは、このアジュバントは、無毒化LT変異体例えば、LT-K63、LT-R72およびLT-G192である。ADP-リボシル化トキシンおよびその無毒化誘導体特に、LT-K63およびLT-R72のアジュバントとしての使用は、参考文献182~189において見出され得る。アミノ酸置換についての多くの参考文献は、好ましくは、参考文献190に記載のADP-リボシル化トキシンのAサブユニットおよびBサブユニットの整列に基づく。参考文献190は、特に、本明細書中で、その全体が参考として援用される。F.ヒト免疫調節因子本発明におけるアジュバントとしての使用のために適切なヒト免疫刺激因子としては、サイトカイン例えば、インターロイキン例えば、IL-1、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-12[191]など[192]、インターフェロン例えば、インターフェロン-γ、マクロファージコロニー刺激因子および腫瘍壊死因子が挙げられる。G.生体接着因子および粘膜接着因子生体接着因子および粘膜接着因子もまた、本発明においてアジュバントとして使用され得る。適切な生体接着因子としては、エステル化ヒアルロン酸マイクロスフェア[193]または粘膜接着因子例えば、ポリアクリル酸、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリサッカリドおよびカルボキシメチルセルロースの架橋誘導体が挙げられる。キトサンおよびその誘導体もまた、本発明においてアジュバントとして使用され得る[194]。H.微粒子微粒子もまた、本発明においてアジュバントとして使用され得る。生分解性かつ無毒性の材料例えば、ポリα-ヒドロキシ酸、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリ無水物、ポリカプロラクトンなどと、ポリラクチド-co-グリコリドとから形成される微粒子すなわち、直径約100nm~約150μm、より好ましくは、直径約200nm~約30μm、そして、最も好ましくは、直径約500nm~約10μmの粒子が好ましく、必要に応じて処理されて、例えば、SDSによって負に荷電した表面または例えば、カチオン性洗剤例えば、CTABによって正に荷電した表面を有する。I.リポソーム参考文献142の第13章および第14章アジュバントとしての使用のために適切なリポソーム処方物の例は、参考文献195~197に記載されている。J.ポリオキシエチレンエーテル処方物およびポリオキシエチレンエステル処方物本発明における使用のために適切なアジュバントとしては、ポリオキシエチレンエーテルおよびポリオキシエチレンエステルが挙げられる[198]。このような処方物は、オクトキシノールと組み合わせたポリオキシエチレンソルビタンエステル界面活性剤[199]、ならびに少なくとも1つのさらなる非イオン性界面活性剤例えば、オクトキシノールと組み合わせたポリオキシエチレンアルキルエーテル界面活性剤またはポリオキシエチレンアルキルエステル界面活性剤[200]をさらに含む。好ましいポリオキシエチレンエーテルは、以下の群より選択される:ポリオキシエチレン-9-ラウリルエーテルlaureth9、ポリオキシエチレン-9-ステオリルエーテル、ポリオキシエチレン-8-ステオリルエーテル、ポリオキシエチレン-4-ラウリルエーテル、ポリオキシエチレン-35-ラウリルエーテルおよびポリオキシエチレン-23-ラウリルエーテル。K.ポリホスファゼンPCPPPCPP処方物は、例えば、参考文献201および202において記載されている。L.ムラミルペプチド本発明におけるアジュバントとしての使用のために適切なムラミルペプチドの例としては、N-アセチル-ムラミル-L-トレオニル-D-イソグルタミンthr-MDP、N-アセチル-ノルムラミル-L-アラニル-D-イソグルタミンnor-MDPおよびN-アセチルムラミル-L-アラニル-D-イソグルタミニル-L-アラニン-2-1’,2’-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヒドロキシホスホリルオキシ-エチルアミンMTP-PEが挙げられる。M.イミダゾキノロン化合物本発明におけるアジュバントとしての使用のために適切なイミダゾキノロン化合物の例としては、参考文献203および204にさらに記載される、Imiquamodおよびそのホモログ例えば、Resiquimod3Mが挙げられる。本発明はまた、上に同定されるアジュバントの1つ以上の局面の組み合わせを含み得る。例えば、以下のアジュバント組成物が、本発明において使用され得る:1サポニンおよび水中油型エマルジョン[205];2サポニン例えば、QS21無毒性LPS誘導体例えば、3dMPL[206]:3サポニン例えば、QS21無毒性LPS誘導体例えば、3dMPLコレステロール;4サポニン例えば、QS213dMPLIL-12必要に応じて、ステロール[207];53dMPLと、例えば、QS21および/または水中油型エマルジョンとの組み合わせ[208];6マイクロフルイダイズされてサブミクロンエマルジョンにされるか、またはボルテックスされてより大きい粒子サイズのエマルジョンを生じるかのいずれかの、10スクアレン、0.4Tween80TM、5プルロニックブロックpluronic-blockポリマーL121およびthr-MDPを含有するSAF;72スクアレン、0.2Tween80、ならびにモノホスホリピドAMPL、トレハロースジミコレートTDMおよび細胞壁骨格CWSからなる群由来の1つ以上の細菌細胞壁成分を含むRibiTMアジュバント系RASRibiImmunochem好ましくは、MPLCWSDetoxTM;ならびに81つ以上の無機塩例えば、アルミニウム塩LPSの無毒性誘導体例えば、3dMPL。免疫刺激因子として作用する他の物質は、参考文献142の第7章に開示されている。アルミニウム塩アジュバントの使用が特に好ましく、そして抗原は一般に、このような塩に吸着される。MenjugateTM結合体およびNeisVacTMMenC結合体は、水酸化物アジュバントを使用し、一方、MeningitecTMは、ホスフェートを使用する。一部の抗原を水酸化アルミニウムに吸着するが、他の抗原はリン酸アルミニウムに会合させることが本発明の組成物において可能である。しかし、一般に、単一の塩のみ水酸化物またはリン酸塩であって、両方ではないを使用することが好ましい。水酸化アルミニウムは好ましくは、アジュバントとしては避けられる。特に、この組成物がHib抗原を含む場合には、アジュバントとしては避けられる。水酸化アルミニウムを含まない組成物は、このように好ましい。むしろ、リン酸アルミニウムが用いられ得、そして代表的アジュバントは、0.6mgAl3/mlにて含まれる、0.84と0.92との間のPO4/Alモル比を有する非晶質ヒドロキシリン酸アルミニウムである。低用量のリン酸アルミニウムの吸着が、例えば、50μg/結合体/用量と100μg/結合体/用量との間のAl3で使用され得る。リン酸アルミニウムが使用され、抗原をこのアジュバントに吸着しないことが所望される場合、これは、例えば、リン酸緩衝液の使用により遊離のリン酸イオンを溶液中に含むことによって促進される。全ての結合体が吸着される必要はない。すなわち、一部または全てが溶液中に遊離していてもよい。リン酸カルシウムは、別の好ましいアジュバントである。処置の方法本発明はまた、本発明の薬学的組成物を哺乳動物に投与する工程を包含する、哺乳動物において抗体応答を惹起するための方法を提供する。本発明は、有効量の本発明の組成物を投与する工程を包含する、哺乳動物において免疫応答を惹起するための方法を提供する。この免疫応答は好ましくは防御性であり、好ましくは抗体を含む。この方法は、追加免疫応答を惹起し得る。この哺乳動物は好ましくはヒトである。ワクチンが予防的用途のためのものである場合、ヒトは好ましくは小児例えば、よちよち歩きの幼児または乳児または十代の少年少女である;このワクチンが治療用途のためのものである場合、ヒトは好ましくは成人である。小児が意図されるワクチンはまた、例えば、安全性、投薬量、免疫原性などを評価するために、成人にも投与され得る。本発明はまた、医薬として使用するための本発明の組成物を提供する。この医薬は好ましくは、哺乳動物において免疫応答を惹起し得すなわち、これは、免疫原性組成物である、そして好ましくはワクチンである。本発明はまた、哺乳動物における免疫応答を惹起するための医薬の製造における以下の使用を提供する:i結合体化した血清群C莢膜サッカリド抗原;ii結合体化した血清群W135莢膜サッカリド抗原;iii結合体化した血清群Y莢膜サッカリド抗原;iv血清群B由来の1以上のポリペプチド抗原;および必要に応じてv結合体化した血清群A莢膜サッカリド抗原。これらの使用および方法は、以下によって引き起こされる疾患の予防および/または処置のために好ましい:Neisseria例えば、髄膜炎、敗血症septicaemia、菌血症、淋病など。細菌性および/または髄膜炎菌性の髄膜炎の予防および/または処置が好ましい。治療処置の効力をチェックする1つの方法は、本発明の組成物の投与後にNeisseriaの感染をモニタリングすることを含む。予防的処置の効力をチェックする1つの方法は、この組成物の投与後に5つの基本抗原に対する免疫応答をモニタリングすることを含む。本発明の組成物の免疫原性は、この組成物を、試験被験体例えば、12ヶ月齢~16ヶ月齢の小児、または動物モデル[209]に投与し、次いで抗莢膜IgG全体および高アビディティ抗莢膜IgGの血清殺菌性抗体SBAおよびELISA力価GMTを含む標準的なパラメータを決定することにより、決定され得る。これらの免疫応答は、一般的に、この組成物の投与後約4週間で決定され、そして、この組成物の投与前に決定された値と比較される。少なくとも4倍または8倍のSBA増加が好ましい。1用量より多くのこの組成物が投与される場合、1回より多くの投与後決定が行われ得る。本発明の好ましい組成物は、患者において、容認可能な百分率のヒト被験体に対して各々の抗原成分についての血清防御基準より優れた抗体力価を与え得る。宿主がその力価より上ではその抗原に対してセロコンバージョンされると考えられる関連する抗体力価を有する抗原は周知であり、そしてこのような力価は、WHOのような機関により公開されている。好ましくは、被験体の統計学的に有意なサンプルのうちの80より多く、より好ましくは90より多く、さらにより好ましくは93より多く、そして最も好ましくは96~100が、セロコンバージョンされる。本発明の組成物は一般に、患者に直接的に投与される。直接的な送達は、非経口注射例えば、皮下に、腹腔内に、静脈内に、筋肉内に、または組織の間隙空間への、または直腸投与、経口投与、膣投与、局所投与、経皮投与、鼻腔内投与、眼内投与、耳投与、肺投与もしくは他の粘膜投与によって達成され得る。大腿または上腕への筋肉内投与が好ましい。注射は、針例えば、皮下針を介し得るが、針なしでの注射が、代替的に使用され得る。代表的な筋肉内用量は、0.5mlである。本発明は、全身免疫および/または粘膜免疫を惹起するために用いられ得る。投与量処置は、単回用量スケジュールまたは複数回用量スケジュールであり得る。複数回用量は、初回免疫スケジュールおよび/または追加免疫スケジュールにおいて用いられ得る。初回投与スケジュールには、追加免疫投与スケジュールが続き得る。初回免疫投与の間例えば、4~16週間の間および初回免疫投与と追加免疫投与との間の適切なタイミングは、慣用的に決定され得る。Neisseria感染は、身体の種々の領域に罹患し得、それゆえ、本発明の組成物は、種々の形態で調製され得る。例えば、この組成物は、液体溶液または液体懸濁物のいずれかとしての、注射可能物として調製され得る。この組成物は、微細粉末またはスプレーを用いて例えば、吸入器として肺投与のために調製され得る。この組成物は、坐剤またはペッサリーとして調製され得る。この組成物は、例えば、スプレー、点滴剤、ゲルまたは散剤として、鼻腔投与、耳投与または眼投与のために調製され得る[例えば、参考文献210および211]。肺炎球菌サッカリド[212,213]、肺炎球菌ポリペプチド[214]、Hibサッカリド[215]、MenCサッカリド[216]、およびHibサッカリド結合体およびMenCサッカリド結合体の混合物[217]の鼻投与に関する成功が報告されている。保存安定性本発明の組成物は、特に、血清群Aサッカリド成分に関して、改善された安定性を提供する。本発明は、ワクチン組成物を調製するためのプロセスを提供し、このプロセスは、以下の工程を包含する:1i結合体化した血清群C莢膜サッカリド抗原、ii結合体化した血清群W135莢膜サッカリド抗原、iii結合体化した血清群Y莢膜サッカリド抗原、およびiv血清群B由来の1以上のポリペプチド抗原を混合する工程;2工程1から得られる組成物を少なくとも1週間保存する工程;3工程2からの保存された組成物を含む、患者への注射の準備ができた注射器を調製する工程;ならびに必要に応じて、4この組成物をこの患者に注射する工程。工程1はまた、v結合体化した血清群A莢膜サッカリド抗原を混合することを包含し得る。工程1はまた、vi結合体化したHib抗原を混合することを包含し得る。工程1はまた、vii肺炎球菌抗原を混合することを包含し得る。工程2は好ましくは、少なくとも2週間、少なくとも4週間、少なくとも6週間、少なくとも8週間、少なくとも10週間、少なくとも12週間またはそれよりも長期の保存を含む。保存工程2は、室温例えば、10±10°C未満であってもよく、またはそうでなくてもよい。本発明はまた、ワクチン組成物を調製するためのプロセスを提供し、このプロセスは、以下の工程を包含する:1i結合体化した血清群C莢膜サッカリド抗原、ii結合体化した血清群W135莢膜サッカリド抗原、iii結合体化した血清群Y莢膜サッカリド抗原、およびiv血清群B由来の1以上のポリペプチド抗原を混合する工程;ならびに2この混合した抗原から単位用量体積を抽出する工程;ならびにcこの抽出された単位用量を、気密シールした容器にパッケージングする工程。工程1はまた、v結合体化した血清群A莢膜サッカリド抗原を混合することを包含し得る。工程1はまた、vi結合体化したHib抗原を混合することを包含し得る。工程1はまた、vii肺炎球菌抗原を混合することを包含し得る。この気密シールした容器は、バイアルまたは注射器であり得る。本発明は、本発明の組成物を含む、気密シールした容器を提供する。一般論用語含むcomprisingとは、含むincludingおよびなるconsistingを意味する例えば、Xを含む組成物は、Xのみからなってもよく、またはさらなる何かを含んでもよい例えば、XY。数値xに関する用語約aboutとは、例えば、x±10を意味する。単語実質的にsubstantiallyは、完全にcompletelyを除外しない例えば、実質的にYを含まない組成物は、Yを完全に含まなくてよい。必要な場合、単語実質的には、本発明の定義から除外され得る。2つのアミノ酸配列の間での配列同一性百分率に対する言及は、整列した場合に、その百分率のアミノ酸が、これらの2つの配列を比較して同一であることを意味する。この整列および相同性パーセントまたは配列同一性は、当該分野で公知のソフトウェアプログラム例えば、参考文献218のセクション7.7.18に記載されるものを用いて決定され得る。好ましい整列は、ギャップオープンペナルティgapopenpenalty12およびギャップ伸長ペナルティgapextensionpenalty2、BLOSUMマトリクス62でアフィンギャップ検索を用いるSmith-Waterman相同性検索アルゴリズムによって決定される。Smith-Waterman相同性検索アルゴリズムは、参考文献219において教示される。用語アルキルとは、直鎖形態および分枝鎖形態の両方のアルキル基をいう。このアルキル基は、-O-、-NH-または-S-より選択される、1個、2個または3個のヘテロ原子によって中断され得る。このアルキル基はまた、1個、2個または3個の二重結合および/または三重結合によって中断され得る。しかし、用語アルキルは、通常、ヘテロ原子による中断も二重結合もしくは三重結合による中断も有さないアルキル基をいう。C1~12アルキルに対して言及がなされる場合、そのアルキル基は、1と12との間の任意の数の炭素原子例えば、C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12を含み得ることが意味される。同様に、C1~6アルキルに対して言及がなされる場合、そのアルキル基は、1と6との間の任意の数の炭素原子例えば、C1、C2、C3、C4、C5、C6を含み得ることが意味される。用語シクロアルキルは、シクロアルキル基、ポリシクロアルキル基およびシクロアルケニル基、ならびにこれらとアルキル基との組み合わせ例えば、シクロアルキルアルキル基を包含する。このシクロアルキル基は、-O-、-NH-または-S-より選択される、1個、2個または3個のヘテロ原子によって中断され得る。しかし、用語シクロアルキルは、通常、ヘテロ原子による中断を有さないシクロアルキル基をいう。シクロアルキル基の例としては、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロへキセニル基、シクロヘキシルメチル基およびアダマンチル基が挙げられる。C3~12シクロアルキルに対して言及がなされる場合、そのシクロアルキル基は、3と12との間の任意の数の炭素原子例えば、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12を含み得ることが意味される。用語アリールとは、芳香族基例えば、フェニルまたはナフチルをいう。C5~12アリールに対して言及がなされる場合、そのアリール基は、5と12との間の任意の数の炭素原子例えば、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12を含み得ることが意味される。用語C5~12アリール-C1~6アルキルとは、ベンジル、フェニルエチルおよびナフチルメチルのような基をいう。窒素保護基としては、シリル基例えば、TMS、TES、TBS、TIPS、アシル誘導体例えば、フタルイミド、トリフルオロアセトアミド、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、t-ブトキシカルボニルBoc、ベンジルオキシカルボニルZまたはCbz、9-フルオレニルメトキシカルボニルFmoc、2-トリメチルシリルエトキシカルボニル、2,2,2-トリクロロエトキシカルボニルTroc、スルホニル誘導体例えば、β-トリメチルシリルエタンスルホニルSES、スルフェニル誘導体、C1~12アルキル、ベンジル、ベンズヒドリル、トリチル、9-フェニルフルオレニルなどが挙げられる。好ましい窒素保護基は、Fmocである。クローニングまたは精製などを容易にするために含まれる配列は、本発明に必ずしも寄与せず、そして、除外または除去されてもよい。糖環が開環形態および閉環形態で存在し得ること、ならびに閉環形態が本明細書中の構造式で示されるが、開環形態もまた本発明に含まれることが理解される。本発明のポリペプチドは、種々の手段例えば、組換え発現、細胞培養物からの精製、少なくとも部分的な化学合成などにより、種々の形態例えば、天然、融合体、非グリコシル化、脂質付加lipidatedなどで調製され得る。本発明のポリペプチドは、好ましくは、実質的に純粋な形態で調製されるすなわち、他のN.meningitidisタンパク質も宿主細胞タンパク質も実質的に含まない。このポリペプチドの発現はNeisseriaにおいて起こり得るが、異種宿主が好ましい。異種宿主は、原核生物性例えば、細菌または真核生物性であり得る。異種宿主は好ましくはE.coliであるが、他の適切な宿主としては、Bacillussubtilis、Vibriocholerae、Salmonellatyphi、Salmonellatyphimurium、Neisserialactamica、Neisseriacinerea、マイコバクテリア例えば、M.tuberculosis、酵母などが挙げられる。本発明に従う核酸は、多くの方法例えば、少なくとも部分的な化学合成により、ゲノムライブラリーまたはcDNAライブラリーから、生物自体からなどで調製され得、そして種々の形態例えば、一本鎖、二本鎖、ベクター、プローブなどを採り得る。これらは、好ましくは、実質的に純粋な形態で調製されるすなわち、他のN.meningitidis核酸も宿主細胞核酸も実質的に含まない。用語核酸は、DNAおよびRNA、ならびにまた、それらのアナログ例えば、改変された骨格例えば、ホスホロチオエートなどを含むDNAおよびRNA、ならびにまた、ペプチド核酸PNAなどを包含する。本発明は、例えば、アンチセンス目的またはプロービングprobing目的で上に記載されている配列に対して相補的な配列を含む核酸を包含する。血清群に続いて、髄膜炎菌分類は、血清型、血清サブタイプserosubtypeを、次いで免疫型immunotypeを含み、そして、標準的な命名法は、血清群、血清型、血清サブタイプおよび免疫型を列挙し、各々は、コロンにより隔てられる例えば、B:4:P1.15:L3,7,9。血清群Bにおいて、いくつかの系統が、しばしば、疾患を引き起こし超侵襲性、いくつかの系統は、他よりも重篤な疾患形態を引き起こし超毒性、そして、その他は、ほとんど稀にしか疾患を引き起こさない。7種の超毒性系統、すなわち、サブグループI、サブグループIIIおよびサブグループIV-1、ET-5複合体、ET-37複合体、A4クラスターおよび系統3が認識されている。これらは、マルチローカス酵素電気泳動multilocusenzymeelectrophoresisMLEEにより規定されているが、マルチローカス配列分類multilocussequencetypingMLSTもまた、髄膜炎菌を分類するために使用されている[参考文献104]。発明を実施する形態ΔG287-953ハイブリッドタンパク質髄膜炎菌血清群Bの394/98株由来のタンパク質287および髄膜炎菌血清群Bの2996株由来のタンパク質953をコードするDNAを消化し、そして短いリンカー配列と一緒に連結して、配列番号7のアミノ酸配列をコードするプラスミドを得た。このプラスミドをE.coliにトランスフェクトし、そして細菌を増殖させてこのタンパク質を発現させた。適切な増殖の後に、細菌を収集し、そしてこのタンパク質を精製した。培養物から、細菌を遠心分離し、そしてペレットを、ペレット:緩衝液の体積比が1:8で、50mM酢酸緩衝液pH5の存在下で均質化した。高圧ホモジナイザーAVESTIN、14000psiにて4サイクルを用いて溶解を行った。溶解後、尿素を5Mの最終濃度で添加し、続いて室温にて1時間攪拌した。200mM酢酸緩衝液pH45M尿素を用いて、pHを6から5へと低下させた。混合物を16800gにて60分間、2~8°Cにおいて遠心分離した。上清を収集し、そしてSARTOBRANP0.45~0.22μmSARTORIUSによって濾過した。濾過した上清中のタンパク質は、-20°Cにて少なくとも30日間、そして2~8°Cにて少なくとも15日間安定であった。タンパク質を、溶出に350mMNaCl50mMアセテート5M尿素pH5.00を用いたカチオン交換カラムSPFF,AmershamBiosciencesにてさらに精製した。大部分の不純物は素通り画分flow-thruに存在した。より低いNaCl濃度180mMを用いた事前溶出洗浄は、夾雑する2つのE.coliタンパク質を有利に除去した。溶出した物質を、200mMTRIS/HCl5M尿素pH9を用いてpH8に調整し、そして溶出に5M尿素中の150mMNaCl20mMTRIS/HClpH8.00を用いてQSepharoseHPカラムAmershamでさらに精製した。さらに、減少した塩90mMを用いた事前溶出洗浄は、不純物を除去するために有用であった。QHPカラムからの濾過した溶出物質を、PBSpH7.00150mMNaCl10mMリン酸カリウム、pH7.00を用いて1:2希釈し、次いで接線方向の濾過によって10体積のPBSpH7.00に対してダイアフィルトレーションした。ダイアフィルトレーションの終わりに、この物質を1.6倍濃縮して、約1.2mg/mlの総タンパク質とした。30,000DaカットオフメンブレンRegeneratedCellulosemembrane50cm2,MilliporePLCTK30を用いて、この物質を約90の収率で透析することが可能であった。936-ΔG741ハイブリッドタンパク質髄膜炎菌血清群Bの2996株由来のタンパク質936および髄膜炎菌血清群BのMC58株由来のタンパク質741をコードするDNAを消化し、そして短いリンカー配列と一緒に連結して、配列番号8のアミノ酸配列をコードするプラスミドを得た。このプラスミドをE.coliにトランスフェクトし、そして細菌を増殖させてこのタンパク質を発現させた。この組換えタンパク質は分泌されなかったが、この細菌内で可溶性のままであった。適切な増殖の後、細菌を遠心分離し、湿ったペーストを得て、そして以下の通りに処理した:-20mMリン酸ナトリウムpH7.00の存在下での、高圧システムによるホモジナイゼーション。-遠心分離および直交方向のorthogonal濾過による清澄化。-20mMリン酸ナトリウムpH7.00中の150mMNaClによる溶出を用いたカチオン性カラムクロマトグラフィーSPSepharoseFastFlow。-素通り画分を収集する、アニオン性カラムクロマトグラフィーQSepharoseXL。-20mMリン酸ナトリウムpH7.00による溶出を用いた疎水性カラムクロマトグラフィーPhenylSepharose6FastFlowHighSub。-10Kdのカットオフでの、PBSpH7.4に対するダイアフィルトレーション。--20°Cでの最終滅菌濾過および保存。最終物質中のタンパク質は、-20°Cおよび2~8°Cの両方において少なくとも3ヶ月間にわたって安定であった。NadANLCタンパク質髄膜炎菌血清群Bの2996株由来のNadAタンパク質をコードするDNAを消化して、そのC末端をコードする配列を除去して、配列番号1のアミノ酸配列をコードするプラスミドを得た。このプラスミドをE.coliにトランスフェクトし、そして細菌を増殖させてこのタンパク質を発現させた。組換えタンパク質を培養培地中に分泌させ、そしてリーダーペプチドは、この分泌されたタンパク質配列番号2中に存在しなかった。上清を以下の通りに処理した:-7倍濃縮および直交流UFカットオフ30Kdによる緩衝液20mMTRIS/HClpH7.6に対するダイアフィルトレーション。-20mMTRIS/HClpH7.6中の400mMNaClによる溶出を用いたアニオン性カラムクロマトグラフィーQSepharoseXL。-TRIS/HClpH7.6中の50mMNaClによる溶出を用いた疎水性カラムクロマトグラフィー工程PhenylSepharose6FastFlowHighSub。-200mMリン酸ナトリウムpH7.4による溶出を用いたヒドロキシルアパタイトセラミックカラムクロマトグラフィーHAMacro.Prep。-PBSpH7.4に対するダイアフィルトレーションカットオフ30Kd。-最終滅菌濾過および-20°Cでの保存。最終物質中のタンパク質は、-20°Cおよび2~8°Cの両方において少なくとも6ヶ月間安定であった。NadAタンパク質は、分解感受性であり、そして短縮形態のNadAは、ウェスタンブロットまたは質量分析法例えば、MALDI-TOFによるによって検出されて、10kDaまでの分子量低下を示し得る。分解産物は、ネイティブNadAから例えば、カラムTSK300SWXL、プレカラムTSKSWXL、TOSOHAASを用いるゲル濾過によって分離され得る。このような濾過によって、以下の3つのピークが得られる:i保持時間12.637分および見かけのMW885.036Daを有する第1のピーク;ii保持時間13.871分および見かけのMW530.388Daを有するピーク;iii保持時間13.871分および見かけのMW530.388Daを有するピーク。これらの3つのピークの光散乱分析は、i208500Da、ii98460Da、iii78760Daという実際のMW値を示す。従って、この第1のピークは、NadA凝集物を含み、そして第3のピークは分解産物を含む。NadANLCの推定分子量は34.113Daであるので、ピークiiは、所望の抗原である、三量体タンパク質を含む。抗原の組合せマウスを、これらの3つのタンパク質を含む組成物で免疫し、そして比較の目的のために、3のタンパク質をまた単独で試験した。1群あたり10匹のマウスを用いた。この混合物は、種々の株に対して高い殺菌性力価を誘導し得た:個々のマウスを見ると、三重混合物は、個々の抗原を得た3つの血清群B株に対して高くかつ一貫した殺菌力価を誘導した:組合せおよびOMVとの比較さらなる実験では、これらの抗原1用量あたり20μgの各抗原を、H44/76株Norwayまたは394/98株NewZealandのいずれかから調製した10μgのOMVと組み合わせて投与した。ポジティブコントロールは、血清群Bについては抗莢膜SEAM-3mAbまたは他の株についてはCRM197結合体化莢膜サッカリドであった。この混合物はほぼ常に、単独のOMVよりも良好な力価を与え、そしてこの混合物をOMVに添加することはほぼ常に、OMVの効力を有意に増強した。多くの場合、この抗原混合物は、ポジティブコントロールを用いて見られる応答と一致したかまたはその応答を超えた。超毒性系統試験以下の抗原を、種々の超毒性系統由来の種々の血清群B株に対して試験した:aNadANLCbΔG287-953c936-ΔG741da、bおよびcの混合物eH44/76株Norwayから調製したOMVf394/98株NewZealandから調製したOMVgΔG287とeとの混合物hdとeとの混合物idとfとの混合物。SEAM-3をポジティブコントロールとして用いた。結果は、以下の通りであった。結果を、示した超毒性系統における、血清殺菌性力価が1024を超えた株の百分率として表す:特定の参照株に対しては、殺菌性力価は以下の通りであった:それゆえ、組成物d、組成物hおよび組成物iは、超毒性系統A4、超毒性系統ET-5および超毒性系統3由来の広範囲の種々の株の血清群Bの肺炎球菌に対して殺菌性抗体応答を誘導する。組成物hおよび組成物iを用いた力価は、一般に、dを用いるよりも高かったが、超毒性系統A4、超毒性系統ET-5および超毒性系統3内での株の有効範囲はより優れているというわけではなかった。分類されていない株の有効範囲もまた、組成物d、組成物hおよび組成物iを用いて高かった。髄膜炎菌結合体および/またはHib結合体との組合せ三重MenB組成物を、血清群C、血清群W135および血清群Yについてのオリゴサッカリド結合体の混合物と組み合わせて、以下の抗原を含むワクチンを得る:MenA結合体10μgサッカリド12.5~33μgCRM197および/またはHbOCHib結合体10μgサッカリド2~5μgCRM197を含め、類似のワクチンを調製する。1つの一連の試験において、血清群C、血清群W135および血清群Yの結合体を組合せた。各結合体は、40μg/mlで存在したサッカリドとして測定した。MenB抗原を用いた使用の前の保存については、組み合わせた結合体を、15mgスクロース、10mMリン酸緩衝液pH7.2の存在下で[-45°Cで3時間、50mTorr減圧での-35°Cで20時間、50mTorrにて30°Cで10時間、125mTorrにて30°Cで9時間]凍結乾燥した。凍結乾燥前の最終体積は0.3mlであった。それゆえ、0.6mlの水溶液中での再懸濁後、このサッカリドは、1血清群あたり12μgで存在する。凍結乾燥を、便宜のためにのみ用いた。そして、最終産物の通常の保存の間の効力も安定性も、凍結乾燥を必要としない。第2のバッチの物質を、血清群C、血清群W135および血清群Yについてと同じサッカリド投与量にて血清群A結合体もまた含むこと以外は同様にして調製した。第3のバッチの物質を、髄膜炎菌についてと同じサッカリド投与量にてHib-CRM197結合体もまた含むこと以外は血清群A、血清群C、血清群W135および血清群Yと同様にして調製した。比較のために、血清群Aおよび血清群Cの結合体の凍結乾燥した調製物を調製した。MenA物質を、上記の通り、15mgのスクロースを用いて凍結乾燥して、再構成後に12μgの用量のサッカリドを与えた。MenC物質を、9mgのマンニトールを用いて凍結乾燥して、再構成後に12μgの用量のサッカリドを与えた。これらの物質を600μlの血清群混合物dまたは、コントロールとして、すなわち、抗原を欠くこと以外は同一の組成の群2および群3と組合せて、8つの組成物を得た:これらの組成物を、200μlの体積でCD/1マウス1群あたり8匹に0日目、21日目および35日目に腹腔内投与し、最終的に49日目に出血させた。49日目の血清を、SBAアッセイにおいて、血清群A、血清群B、血清群C、血清群W135および血清群Yにおける種々の髄膜炎菌株に対して試験した。結果は以下であった:従って、これらの髄膜炎菌タンパク質抗原は、結合体化した髄膜炎菌およびHibサッカリド抗原の添加後でさえも有効なままである。同様に、これらの髄膜炎菌結合体は、これらのタンパク質抗原の添加後でさえも、効力を保持する。実際、このデータは、これらの結合体へのこれらのタンパク質抗原の添加が抗MenW135効力を群2および群7と比較して増強することを示唆する。さらに、これらのタンパク質抗原は、群4および群5がそうであるように、単独で良好な抗MenY力価を与える[参考文献220を参照のこと]ので、特に、血清群Yに対して、あるレベルの交差反応性が存在する。このデータはまた、髄膜炎菌結合体へのHib結合体の添加が抗W135活性を群2および群3と比較して増強することをを示す。改変されたMenAサッカリドの使用莢膜ポリサッカリドをMenAから精製し、そして凍結乾燥してMenAオリゴサッカリドを得た。このポリサッカリド2gを、10mg/mLのポリサッカリド濃度にて、50mM酢酸緩衝液pH4.75中で50°Cにて約4時間加水分解した[73]。加水分解後、この溶液を回転エバポレーションによって乾燥した。このオリゴサッカリドを、以下の反応スキームを用いて活性化した:このオリゴサッカリドをDMSO中に溶解して、10mg/mLのサッカリド濃度を得た。1:20であるオリゴサッカリド:CDIのモル比に従って、次いで、21.262gのCDIを添加し、そして反応混合物を室温にて16時間攪拌した。得られたMenA-CDI化合物を、80:20v/vのアセトン:DMSO混合物中での選択的沈澱、続いて遠心分離によって精製した。結合したイミダゾールに対する遊離イミダゾールの比を決定することによって、活性化反応の効率は、約67.9であると算出された。第2の反応工程において、MenA-CDIオリゴサッカリドを、約10mg/mLのサッカリド濃度でDMSO中に可溶化した。1:100であるMenA-CDI単位:DMAのモル比に従って、36.288gの99塩酸ジメチルアミンすなわち、R1およびR2=Meを添加し、そして反応混合物を室温にて16時間攪拌した。反応産物を凍結乾燥し、そして10mg/mL水の溶液に再可溶化した。低分子量反応試薬特に、ジメチルアミンDMAをこのオリゴサッカリド調製物から除去するために、3.5kDaMWCOメンブレンSpectra/PorTMを通して透析工程を行った。以下の4回の透析工程を実施した:i2Lの1M塩化ナトリウムに対して16時間透析係数1:20、ii2Lの0.5M塩化ナトリウムに対して16時間透析係数1:20、iiiおよびiv2LのWFIに対して16時間透析係数1:20。精製を改善するために、1kDaMWCOメンブレンCentriconTMを通したダイアフィルトレーション工程もまた実施した。精製されたMenA-CDI-DMA産物を、pH6.5において、25mML-ヒスチジンFlukaTM中で緩衝化した。改変されたMenAサッカリドの結合体MenA-CDI-DMAを調製するために、プロセス全体は以下の通りであった:-オリゴサッカリドフラグメントを生じる、ポリサッカリドの加水分解-このオリゴサッカリドフラグメントのサイズ分け-サイズ分けしたオリゴサッカリドの末端アルデヒド基の還元的アミノ化-CDI反応前の、Fmoc基による末端-NH2基の保護-DMA反応の間の-NH2基の固有の脱保護-SIDEAN-ヒドロキシスクシンイミドアジピン酸による末端-NH2基の活性化-CRM197タンパク質への共有結合。改変されたMenAオリゴサッカリド結合体は、上昇した温度において、その天然対応物よりもずっと加水分解耐性が高かった。例えば、37°Cにおいて28日後、放出されたサッカリドの百分率は、改変したオリゴサッカリドについて6.4であり、一方、天然抗原については23.5である。さらに、改変されたオリゴサッカリドによって誘導された力価は、ネイティブな糖構造体を用いて得られる力価よりも有意に低くはない。改変されたMenA結合体を、未改変のオリゴサッカリドの結合体の代替物としてのMenC結合体、MenW135結合体およびMenY結合体と組み合わせる。この四価混合物を3つのMenBポリペプチドと混合して、単回用量でN.meningitidisの血清群A、血清群B、血清群C、血清群W135および血清群Yに対して有効なワクチンを得る。肺炎球菌の組合せ組み合わされた3つのMenBタンパク質は肺炎球菌サッカリド結合体と混合して、各々の肺炎球菌血清群の2μg/用量の最終濃度を得る血清群6Bについては二倍。従って、再構成したワクチンは、以下の抗原を含む:本発明が、例示のみのために記載されており、本発明の範囲および趣旨内にあるままに改変が行われ得ることが理解される。参考文献これらの内容は、本明細書中に参考として援用される"