"培地固化成分としてのセルロースと水とを含有するセルロースゲルからなる培養基材であって、前記セルロースが、当該セルロースを8塩化リチウムを含有するジメチルアセトアミド中に25mgmLの濃度で溶解した溶液の26°Cにおける粘度が12~35mPaSであるものであることを特徴とする、培養基材。前記セルロースゲルの厚さ2mmの波長500nmでの光線透過率が、25以上である、請求項1記載の培養基材。前記セルロースのゲルろ過によるピークトップ分子量が、115,000~1100,000である、請求項1又は2記載の培養基材。容器に収容されている、請求項1~3のいずれか1項記載の培養基材。前記セルロースゲルが栄養成分を含む請求項1~4のいずれか1項記載の培養基材からなることを特徴とする固体培地。8塩化リチウムを含有するジメチルアセトアミド中に25mgmLの濃度で溶解した溶液の26°Cにおける粘度が12~35mPaSであるセルロースを水に分散させ、固形チオシアン酸塩を添加した後、セルロースを加熱溶解させ、温度を下げて固化させる工程を含むことを特徴とする、セルロースゲル培養基材の製造方法。請求項5記載の固体培地に被検微生物又は被検試料を接触させ、セルロースゲルの溶解の有無又は程度を判定する工程を含むことを特徴とする、被検微生物によるセルラーゼ産生能力又は被検試料のセルラーゼ活性の検定方法。本発明は、上記のような従来のセルロースゲル培地の欠点を改良し、微生物コロニーの視認性のよいセルロースゲル培地を作製するためのセルロースゲル培養基材及びその製造方法を提供することを目的とする。また、本発明は、この培養基材を使用した固体培地を提供することを目的とする。さらに、本発明は、より迅速で効率のよいセルラーゼ産生微生物又はセルラーゼ活性のスクリーニング法を提供することを目的とする。本発明によれば、1培地固化成分としてセルロースと水とを含有するセルロースゲルからなる培養基材であって、前記セルロースが、当該セルロースを8塩化リチウムを含有するジメチルアセトアミド中に25mgmLの濃度で溶解した溶液の26°Cにおける粘度が12~35mPaSであるものであることを特徴とする、培養基材;2前記セルロースゲルの厚さ2mmの波長500nmでの光線透過率が、25以上である、前記1記載の培養基材;3前記セルロースのゲルろ過によるピークトップ分子量が、115,000~1100,000である、前記1又は2記載の培養基材;4容器に収容されている、前記1~3のいずれか1項記載の培養基材;5前記セルロースゲルが栄養成分を含む前記1~4のいずれか1項記載の培養基材からなることを特徴とする固体培地;68塩化リチウムを含有するジメチルアセトアミド中に25mgmLの濃度で溶解した溶液の26°Cにおける粘度が12~35mPaSであるセルロースを水に分散させ、固形チオシアン酸塩を添加した後、セルロースを加熱溶解させ、温度を下げて固化させる工程を含むことを特徴とする、セルロースゲル培養基材の製造方法;7前記5記載の固体培地に被検微生物又は被検試料を接触させ、セルロースゲルの溶解の有無又は程度を判定する工程を含むことを特徴とする、被検微生物によるセルラーゼ産生又は被検試料のセルラーゼ活性の検定方法、が提供される。本発明のセルロースゲル培養基材及びそれを用いた固体培地は、寒天培地と同程度の透明性光線透過率を有するため、従来のセルロースゲル培地の欠点であった培地上でのコロニーの視認性が飛躍的に向上しており、コロニーの判別が容易に行えるようになる。また、本発明のセルロースゲル培養基材及びそれを用いた固体培地は、セルロース濃度が低く、ゲルが低密度であるにもかかわらず、従来のセルロースゲル培地が有する、物理的に強い、溶解しにくい等の有利な特徴をすべて保持している。そのため、種々の微生物等の極限環境下における固体培養に、従来のセルロースゲル培地と同様に使用できる。また、微生物のスクリーニングにおいては迅速に且つ正確に目的の微生物の単離作業が行えることが望ましいが、本発明のセルロースゲル培養基材及びそれを用いた固体培地を使用することにより、さらに短時間でのスクリーニングが可能になる。すなわち、本発明のセルロースゲル培養基材及びそれを用いた固体培地は、レプリカの作製や別途のセルラーゼ活性のアッセイを必要とせず、単離した微生物のセルラーゼ活性や組換えセルラーゼ活性の有無又は強弱を培地上で直接目視で評価することができる。さらに、本発明のセルロースゲル培養基材及びそれを用いた固体培地は、従来のセルロースゲル培地と比較してゲル密度が1/7~1/2程度であるため、セルラーゼの分解の様子セルラーゼ活性を非常に短い時間で迅速に且つ容易に判断することができる。したがって、本発明によれば、セルロース分解微生物の探索やその酵素活性の強弱を判定する作業の効率化が可能となる。また、本発明のセルロースゲル培養基材及びそれを用いた固体培地は、セルロース原料の選択範囲が広いため、任意の強度とすることが可能であり、微生物培養用以外にも、例えば植物のカルス培養などに使用が可能である。従来のセルロースゲル培地では、セルロース濃度は2~3が最適であり、セルロース濃度を低減させると物理強度が保てず、培地として使用に適さないとされていた。高分子化合物は、分子量が大きくなるほど粘性が増加することから、物理強度の増強という点からすると、分子量の大きいセルロース、例えばバクテリアセルロースの使用が考えられる。しかし、本発明者らは、予想に反して、このような分子量の大きいセルロースを低濃度で用いたセルロースゲルは予測不能な不規則な収縮を起こすため均一な培地を作製することができず、使用に適さないこと、ある特定の性質を有するセルロースを用いることにより低濃度でも十分な強度を有するセルロースゲルの作製が可能であることを見出し、本発明を完成した。すなわち、本発明において使用されるセルロースとしては、微生物由来又は植物由来のいずれでもよいが、植物由来のセルロースが好ましい。ゲルろ過による分子量ピークトップ分子量は、115,000~1100,000であることができ、115,000~550,000が好ましい。本発明において使用されるセルロースは、8塩化リチウムを含有するジメチルアセトアミド中に25mgmLの濃度で溶解した溶液の26°Cにおける粘度が、12~35mPaSであるものが好ましく、12~30mPaSがさらに好ましく、12~27mPaSが特に好ましい。本発明のセルロースゲル培養基材及び培地におけるセルロース濃度は、0.1~1.8程度の低濃度とすることができ、好ましくは0.2~1.5、最も好ましくは0.5~1である。上記のようなセルロースを上記の濃度で用いることにより、従来のものと比較して透明性が高く、寒天培地に匹敵する透明性を有するセルロースゲルの製造が可能となる。本発明の培養基材及び培地のセルロースゲルは、厚さ2mm±0.1mmで波長500nmでの全光線透過率が25以上であり、好ましくは30以上、最大100までである。なお、全光線透過率は、以下のとおりに測定する:分光光度計ベックマンコールターDU800又は同等の機器を使用し、透過率測定Tモードにて、波長500nmで、シャーレに収容されたセルロースゲル厚さ約2mm2mm±0.1mmを測定する。培養基材を収容したシャーレの透過率をブランクとする。セルロースゲル培養基材は、基本的には水を含んだセルロースゲル及びその収容容器からなっている。セルロースゲル培養基材には、上記以外に、必要に応じて、水に溶解する物質又は溶媒を含有させても良い。このような任意の成分としては、水に溶解する有機溶媒例えばアルコールメタノール、エタノール、プロパノール等やアセトンなどの極性有機溶媒、pH調整剤や色素などの各種の培地の構成成分などが挙げられる。本発明のセルロースゲル培養基材は、特許文献1及び非特許文献1等に記載された従来の方法にしたがって製造することができるが、好ましくは以下のようにして製造することができる。所望の濃度となるように計量したセルロースを、予め算出した必要量の水に添加して攪拌することにより、十分に分散させる。これに固形のチオシアン酸塩を50以上になるように添加し、室温で十分に攪拌混合した後、加熱攪拌することによりセルロースを溶解させる。加熱温度は90°C~100°C程度が適温であり、加熱時間は10分~30分程度である。この溶液を所定の容器に分注し、冷ますことによって固化させ、セルロースゲルを形成させる。その後、十分に脱塩することにより、水とセルロースゲルとからなる培養基材が得られる。例えば、固化後、アルコール処理及び脱塩を行う。具体的には、アルコール処理は、セルロースゲルと等量終濃度50VV以上のアルコールエタノール、メタノール等を添加して数時間室温で振とうすること等により行うことができる。脱塩工程は、例えば水洗により行うことができる。上記のようにして製造したセルロースゲル培養基材は、公知の方法によって滅菌することができる。滅菌方法としては、高圧蒸気滅菌典型的には121°Cで15~20分程度が好ましい。上記のセルロースゲルを収容する容器としては、各種サイズのシャーレ平板培地作製用や試験管斜面培地等作製用等、任意の形状及び材質のものを利用することができる。微生物の視認性の点から、材質は、透明又は半透明のものが好ましく、透明のもの例えばガラス、プラスチック等が最も好ましい。この培養基材に栄養成分を含ませることにより、固体培地を作製することができる。栄養成分は、例えば、培養基材に、セルロースゲル体積と同容積の2倍濃度の液体培地培養液を添加し、ゲル内の水と置換させて1倍濃度とすることにより、培養基材に含有させることができる。栄養成分としては、使用目的に応じて、公知の処方の各種培地又はそれらに基づいて任意の成分を添加又は除去したもの等から、任意のものを選択することができる。本発明の培養基材及び培地を使用して培養可能な微生物は、非常に多岐にわたる。これらの微生物としては、標準的な条件下で生育可能な従来公知の細菌、真菌、古細菌等に加え、高温、極端なpH、高塩濃度等の条件の極限環境下又は有機溶媒存在下等の特殊環境下に生息する未知の微生物の単離にも使用することができる。セルロースゲルを構成するセルロースは、セルラーゼの本来の基質である。そのため、セルロース培地は、従来の寒天培地又はセルロース含有アガロースゲル培地と違い、セルラーゼの分解活性を培地上で、直接目視で確認できる利点がある。セルラーゼによるセルロースゲルの分解速度はセルロースの密度に依存しているため、低濃度のセルロースを用いた低密度のゲルを使用することにより、容易にセルラーゼ活性の有無等を視覚的に判別することができる。本発明のセルロースゲル培養基材及び培地は、単位体積あたりのセルロース量を従来のセルロースゲルプレートの1/7~1/2程度にすることができるので、セルラーゼによるゲルの分解が迅速かつ広範囲で起こり、セルラーゼ活性の検出及び活性の強弱も迅速かつ容易に観察することができる。したがって、本発明の培地は、上記のとおり各種微生物の培養に加えて、セルラーゼ活性又はその強度についてのスクリーニングに特に適している。スクリーニング方法の一例は、以下のとおりである。例えば培地としてNBNutrientbroth培地等を使用し、通常使用する培地濃度の1/2~1/100程度に希釈する。この培地を本発明のセルロースゲル培養基材に浸透させてスクリーニング用培地を作製する。試料としては、例えば木片、茎、葉等を採取し、滅菌水で洗浄した後、ろ紙等の上で乾燥させ、必要に応じて裁断等を行ったものを試料とし、培地に直接静置する。あるいは、細かく裁断した試料を滅菌水等に懸濁した後、培地に塗布する。この培地をインキュベーターに静置して、20°C~40°Cの温度範囲内の一定の温度で、適当な時間、培養を行う。培養後、セルロースゲルの溶解により生じる穴の大きさ、数等を目視で観察し、陽性及び陰性コントロールと比較することにより、試料中のセルラーゼ活性又はセルラーゼ産生微生物の有無又は活性の強弱を判定することができる。以下、本発明のセルロースゲル培養基材及び固体培地の製造例及び試験例に基づいて、本発明をさらに説明する。なお、以下においては、は特に示さない限りWVである。1.セルロース試料のゲルろ過による分子量測定セルロース試料として、商品名Avicel、Merck社製試料1、商品名セリッシュ、ダイセル化学製試料2、及びバクテリアセルロースBC試料3を使用した。試料1及び2は、植物由来セルロースである。なお、試料1は、特許文献1及び非特許文献1において記載された実験において使用されたものと同等である。各セルロース試料150mgを純水100mLに分散し、振とう機回転数:140rpm高崎科学器械;以下も同じ上で室温で24時間以上振とう攪拌した。ろ紙を用いた吸引ろ過を行い、集めたセルロース試料をアセトン和光純薬工業100mL中に再分散させ、振とう機上で室温で24時間以上振とう攪拌することにより洗浄した。次に、ろ紙を用いた吸引ろ過にて脱液した後、ジメチルアセトアミドDMAc、和光純薬工業で洗浄した。すなわち、DMAc100mL中にセルロース試料を再分散させ、振とう機上で室温で24時間以上振とう攪拌した。ろ紙を用いた吸引ろ過にて脱液した後、ろ紙に試料をはさみ、余分な液体を除去した。室温にて一晩真空乾燥を行い、8LiCl和光純薬工業を含むDMAcを、試料濃度が10mgmLになるように加え、溶解するまで40°Cで静置した。1LiClを含むDMAcにてそれぞれの溶液を20倍希釈し、高速遠心機を用いて、15,000rpmで15分間遠心し、上清を回収した。分子量マーカーとして、各種分子量のポリエチレングリコールPEG、関東化学及びポリエチレンオキシドPEO、関東化学を、それぞれ終濃度が0.5mgmLになるように1LiClを含むDMAcに添加した。分子量マーカーのサイズは、90万、58万、27万、19万、10万、4.3万、2.1万、6千、4千、千、6百、4百、2百とした。分子量マーカーを調製後、PEG及びPEOが溶解するまで40°Cで静置させ、15,000rpmで15分間遠心し、上清を回収した。HPLC分析は以下のとおりに行った。分析機種としては、HPLC本体はWaters社製商品名Waterse2695を使用し、検出器としてWaters社製商品名示差屈折計2414使用した。カラムは、東ソー社製商品名TSKgelSuperAWMH×2本、東ソー社製商品名ガードカラム:TSKguardcolumnSuperAWHを使用した。流速は、0.6mLminとし、溶離液には、1LiClを含むDMAcを使用した。サンプル注入量は50μL、カラム温度は40°Cに設定した。示差屈折計の設定は、極性、Resとした。結果を図1に示す。パネルAは、検量線から算出した各セルロース試料の分子量分布及びピークトップ分子量を表す。試料1のピークトップ分子量は約10万、試料2のピークトップ分子量は44万、試料3のピークトップ分子量は250万であった。パネルBは、各試料をインジェクションして得られたゲルろ過のパターンを表す図であり、パネルAの作成に使用したデータである。縦軸は示差屈折計から得られたシグナル強度、横軸は保持時間を表す。2.セルロース溶液の粘度測定セルロース溶液の粘度測定は、エーアンドデイ社製音叉振動式粘度計を使用して行った。各セルロース試料を、8LiClを含むDMAcに25mgmLの濃度で溶解させ、26°Cで粘度を測定した。粘度計の較正は、水及び粘度計校正用標準液を使用して行った。26°Cでの水及び標準液の粘度値は0.9及び54.0mPaSである。その結果、8LiCl/DMAc溶媒、試料1ピークトップ分子量10万、試料2ピークトップ分子量44万、試料3ピークトップ分子量250万の粘度は、それぞれ、5.3、7.9、26.9、41.4mPaSであった。3.セルロースゲル培養基材の作製3-1試料1を用いたセルロースゲル培養基材セルロース濃度3のセルロース培養基材を、以下のようにして作製した。市販のチオシアン酸カルシウム関東化学に蒸留水を添加し、終濃度が57以上になるようにチオシアン酸カルシウム水溶液を調製した。このチオシアン酸カルシウム溶液100mLに対し、試料1のセルロース3gを添加し、室温で3時間以上攪拌した。得られた懸濁液を内径8.4cmのプラスチック製シャーレに15mLずつ分注した後、120°C、1分間の加熱によりセルロースを溶解した。シャーレを4°Cで2時間静置した後、室温に移し、等量以上のメタノール和光純薬工業を添加して、振とう機を使用して2時間振とうした。振とう後、水道水を張った容器にシャーレを入れ、水を流しながら脱塩を行った。2時間以上経過した後、水道水を蒸留水に置換し、脱塩を行っている容器内の導電率を、導電率計TWINCOMPACTMETER、HORIBAを使用して測定し、導電率が10μScm以下になった時点で脱塩を終了した。脱塩したセルロースゲルをガラスシャーレ又は耐熱性シャーレ等の容器に移し、121°Cで20分間高圧蒸気滅菌した。また、試料1のセルロース量を1gとした以外は上記と同様にして、セルロース濃度1のセルロースゲル培養基材を作製した。3-2試料2を用いたセルロースゲル培養基材試料2のセルロース1gに対し29.7mLの水の割合になるように、セルロースと水とを混合し、ビーカー中で十分に攪拌10分間以上した。チオシアン酸カルシウム4水和物、関東化学の終濃度が50になるよう固形のチオシアン酸カルシウムを添加し、全量100mLとなった液を室温で3時間以上攪拌した。その後、この溶液を90°C程度で10分間攪拌し、内径8.4cmのプラスチック製シャーレに15mLずつ分注後、120°C、1分間の加熱によりセルロースを溶解させた。この加熱処理後、4°Cで2時間冷却し、室温の等量以上のエタノール純正化学を添加し、室温で2時間振とう処理をした。振とう後、水道水を張った容器にシャーレを入れ、水を流しながら脱塩を行った。2時間以上経過した後、水道水を蒸留水に置換し、脱塩を行っている容器内の導電率を、導電率計TWINCOMPACTMETER、HORIBAを使用して測定し、導電率が10μScm以下になった時点で脱塩を終了した。脱塩したセルロースゲルをガラスシャーレ又は耐熱性シャーレ等の容器に移し、121°Cで20分間高圧蒸気滅菌した。また、試料2のセルロース量を0.5gとした以外は上記と同様にして、セルロース濃度0.5のセルロースゲル培養基材を作製した。3-3試料3を用いたセルロースゲル培養基材上記3-2と同様の方法にしたがって、試料3を用いたセルロース濃度1のセルロースゲル培養基材を作製した。このようにして作製した各培養基材の特徴を表1に示す。表1において、密度は含有セルロース理論値をセルロースゲルの体積直径及び厚さをノギス又はレオメーターで測定して算出で除して算出した。また、相対体積は、各セルロースゲルの体積を、試料11のセルロースゲルの体積を100とし、これに対する相対値として算出した。4.培養基材の外観及び微細構造等4-1外観図2に、上記のようにして作製した各培養基材を、上からカメラにて撮影した写真を示す。パネルAは試料1セルロース濃度3、パネルBは試料2セルロース濃度1を用いたものである。試料1を用いた培養基材は明らかに不透明で白色であるのに対し、試料2を用いた培養基材は透明性を有していた。4-2微細構造走査型電子顕微鏡型番JSM-6700F、日本電子製を用いて上記で作製した各培養基材の構造を観察した倍率50000倍。結果を図3に示す。パネルAは試料1セルロース濃度3、パネルBは試料2セルロース濃度1を用いたものである。パネルCは、試料3セルロース濃度1を用いて作製した培養基材である。電子顕微鏡写真により、いずれの培養基材もナノファイバー化したセルロースを骨格部分とした網目構造を形成しており、大きな空隙を有する多孔質の構造体であることが確認された。4-3透明性培養基材の透明性をさらに評価するために、分光光度計ベックマンコールターDU800を使用し、透過率測定モードにて300nm~800nmまでの波長でシャーレ内のセルロースゲルをスキャンした。セルロースゲルの厚さはいずれも約2mm2mm±0.1mmであり、培養基材を収容したシャーレの透過率をブランクとした。セルロースゲルの透過率は波長500nmでの測定値にて評価した。比較のため、1寒天清水食品、商品名TaiyoAgarBMM5を用いた培養基材についても同様に測定した。結果を、図4に示す。パネルAは、1寒天、試料11及び3、試料20.5及び1の透過率を表す。パネルBは、試料1~3いずれも1の透過率を表す。波長500nmでの透過率は、試料2を用いた培養基材では、セルロース濃度1で45.8SD±4.2、セルロース濃度0.5で74.0SD±1.3であった。試料2のセルロース濃度0.5の透過率は、寒天に匹敵するものであった。一方、試料1を用いた培養基材では、セルロース濃度3で12.5SD±1.0、セルロース濃度1で51.4SD±4.0、試料3を用いた培養基材では、セルロース濃度1で23.0SD±2.0であった。4-4応力各培養基材の応力測定を行った。応力の測定は、サン科学社製レオメーターCR500DXSIIを使用して、以下のように行った。直径3mmの感圧軸を使用し、1mm6秒の速度で試料台を移動させ、感圧軸がセルロースゲル直径6.6~8.4cm×厚さ2mm±0.1mm表面に接してから1mm押し込むまでの応力の変化をモニターしたn=3。最大応力は、感圧軸を1mm押し込んだ時に測定された。セルロース濃度1の測定結果を図5に示す。最大応力値矢印で示すは、試料1を用いて作製した培養基材では0.14±0.08N、試料2を用いて作製した培養基材では0.47±0.07N、試料3を用いた培養基材では0.23±0.02Nであった。また、セルロース濃度0.5の試料2では0.14±0.00N、セルロース濃度3の試料1では0.88±0.04Nであった。試料2で作製したセルロースゲルは同濃度の試料1及び3で作製したセルロースゲルと比較して応力値が高いことが示された。4-5引張り強度各培養基材の引張り強度を測定した。引張り強度の測定はサン科学社製レオメーターCR500DXSIIを使用して、以下のようにして行った。各培養基材のゲル試料を幅1cm、長さ3cmのダンベル状に切り抜いた試験片厚さ2mm±0.1mmを用意した。試験片を測定機にセットし、試料台を0.42mm1秒の速度で移動させ、切断に要した力とゲルが切断した時の引張り距離を測定した。結果を図6及び表2に示す。試料1のセルロース濃度1の試験片は、強度不足のため測定機に設置することができず、測定ができなかった。試料2のセルロース濃度1で作製した培養基材は、試料1のセルロース濃度3で作製した培養基材よりも、切断に要した力は小さかったが、引張り距離は試料1のセルロース濃度3で作製した培養基材よりも2倍程度大きかった。このことは、試料2を用いて作製した培養基材が伸縮性に優れたゲルであることを示している。5.培地の作製及び各種微生物の培養試験微生物培養に関連する操作は、滅菌済みの器具及び溶液等を用いて、全て無菌的に行った。5-1大腸菌を使用した培養試験菌株として、EcoliATCC25922を使用した。検定用培地としては普通ブイヨン培地極東製薬工業を用いた。上記のように作製した各種培養基材に、121°C、20分で高圧蒸気滅菌済みの2倍濃度の検定用液体培地を15mL加え、シェーカータイテックにて2時間振とうすることにより、培養基材に浸透させ、培養基材中の水を1倍濃度の培地組成の液体に置換した。2時間後、シャーレ内に余った培地をアスピレータで吸引除去し、クリーンベンチ内で10分間乾燥させた後、検定用固定培地として使用した。菌の前培養を、トリソイ血液寒天培地ヒツジNo.2極東製薬工業で37°C、18~24時間、好気培養によって行った。得られたコロニーを採取して、121°C、20分で高圧蒸気滅菌済みの生理食塩水に懸濁し、McFarland05の菌液を調製した。更にこの菌液を滅菌済みの生理食塩水で50,000倍希釈した。この菌液50μLを各検定用固体培地に接種し、コンラージ棒で均一に塗り広げた。培養は、35°C、18時間、好気培養により行った。菌株の評価は、発育コロニー数を測定することにより行ったn=9。結果を図7に示す。パネルAは寒天培地1、パネルBは試料13、パネルCは試料21、パネルDは試料20.5の培地に生じたコロニーを上から撮影した写真を、それぞれ表す。試料2を用いた培地上のコロニーは、寒天培地上のものと同様、容易に視認できた。また、大腸菌は、いずれの固体培地においても同等の生育を示したパネルE。5-2枯草菌を使用した培養試験菌株として、BsubtilisATCC6633を使用した。検定用培地としては普通ブイヨン培地極東製薬工業を用いた。上記のように作製した各種培養基材に121°C、20分で高圧蒸気滅菌済みの2倍濃度の検定用液体培地を15mL加え、シェーカータイテックにて2時間振とうすることにより、培養基材に浸透させ、培養基材中の水を1倍濃度の培地組成の液体に置換した。2時間後、シャーレ内に余った培地をアスピレータで吸引除去し、クリーンベンチ内で10分間乾燥させた後、検定用固定培地として使用した。菌の前培養を、トリソイ血液寒天培地ヒツジNo.2極東製薬工業で37°C、18~24時間、好気培養によって行った。得られたコロニーを採取して、121°C、20分で高圧蒸気滅菌済みの生理食塩水に懸濁し、McFarland05の菌液を調製した。更にこの菌液を滅菌済みの生理食塩水で10,000倍希釈した。この菌液50μLを各検定用固体培地に接種し、コンラージ棒で均一に塗り広げた。培養は、35°C、18時間、好気培養により行った。菌株の評価は、発育コロニー数を測定することにより行ったn=9。結果を図8に示す。パネルAは寒天培地1、パネルBは試料13、パネルCは試料21、パネルDは試料20.5の培地に生じたコロニーを上から撮影した写真を、それぞれ表す。試料2を用いた培地上のコロニーは、寒天培地上のものと同様、容易に視認できた。また、大腸菌は、いずれの固体培地においても同等の生育を示したパネルE。5-3酵母を使用した培養試験菌株として、CalbicansATCC10231を使用した。検定用培地としてはサブローブドウ糖培地極東製薬工業を用いた。上記のように作製した各種培養基材に121°C、20分で高圧蒸気滅菌済みの2倍濃度の検定用液体培地を15mL加え、シェーカータイテックにて2時間振とうすることにより、培養基材に浸透させ、培養基材中の水を1倍濃度の培地組成の液体に置換した。2時間後、シャーレ内に余った培地をアスピレータで吸引除去し、クリーンベンチ内で10分間乾燥させた後、検定用固定培地として使用した。菌の前培養を、サブロー寒天培地極東製薬工業で37°C、20~24時間好気培養によって行った。得られたコロニーを採取して、121°C、20分で高圧蒸気滅菌済みの生理食塩水に懸濁し、McFarland05の菌液を調製した。更にこの菌液を滅菌済みの生理食塩水で2,500倍希釈した。この菌液50μLを各検定用固体培地に接種し、コンラージ棒で均一に塗り広げた。培養は、35°C、24時間、好気培養により行った。菌株の評価は、発育コロニー数を測定することにより行ったn=9。結果を図9に示す。パネルAは寒天培地1、パネルBは試料13、パネルCは試料21、パネルDは試料20.5の培地に生じたコロニーを上から撮影した写真を、それぞれ表す。試料2を用いた培地上のコロニーは、寒天培地上のものと同様、容易に視認できた。また、大腸菌は、いずれの固体培地においても同等の生育を示したパネルE。5-4セルラーゼ産生菌を使用した培養試験菌株として、SdegradansDSM17024を使用した。検定用培地としては2倍濃度のダイゴ人工海水SP溶液和光純薬工業に2mMとなるように硫酸アンモニウム和光純薬工業を添加し、121°C、20分で高圧蒸気滅菌したものを用いた。上記のように作製した各種培養基材に検定用液体培地を15mL加え、シェーカータイテックにて2時間振とうすることにより、培養基材に浸透させ、培養基材中の水を1倍濃度の培地組成の液体に置換した。2時間後、シャーレ内に余った培地をアスピレータで吸引除去し、クリーンベンチ内で10分間乾燥させた後、検定用固定培地として使用した。使用した培養基材は、試料1セルロース濃度3及び試料2セルロース濃度1を用いて作製した培養基材であった。菌の前培養用培地調製は、以下の手順で行った。Marinebrothベクトンディッキンソンアンドカンパニー1.87gを蒸留水50mLに溶解し、マグネティックスターラーでよく攪拌した。また、蒸留水中1セロビオース溶液を別途調製した。MarineBroth及びセロビオース溶液を121°C、20分で高圧蒸気滅菌し、室温に冷ました後、クリーンベンチ内でMarinebrothを0.45μmのメンブレンフィルターでろ過した。3mLのMarinebrothにセロビオース溶液を300μL添加し、ボルテックスミキサーでよく攪拌した。上記のように調製した前培養用培地3mLにグリセロール保存菌液を50~100μL滴下し、混合した後、30°C、20~24時間好気培養することにより、菌を前培養した。前培養した菌液を121°C、20分で高圧蒸気滅菌済みのMarinebroth溶液にてMcFarland05になるよう希釈し、さらにMarinebroth溶液にて菌液を100~500倍希釈した。この菌液50μLを各検定用固体培地に接種し、コンラージ棒で均一に塗り広げた。培養は、30°C、好気培養により行った。培地上に形成された穴溶解穴の直径を、顕微鏡の接眼ミクロメーターを用いて測定した。各培地n=3からランダムに5個の穴を選び、それらの直径の平均値を算出した。結果を図10に示す。パネルA、C、Eは試料1セルロース濃度3;パネルB、D、Fは試料2セルロース濃度1の培地である。パネルA及びBは48時間、C~Fは72時間培養後の培地表面の写真を示す図であるパネルA、B、E及びF。48時間の培養後、試料2セルロース濃度1の培地では0.4mmの穴が観察されたが、試料1を用いた培地では、顕微鏡ミクロメーターは測定できない小さな穴しか観察されなかった。さらに、72時間培養後の穴の大きさを測定したところ、試料2の培地では0.8mmであり、試料1の培地では0.2mmであった。さらに、培養7日後においても同様に測定した。結果を図11に示す。パネルAは試料1の培地、パネルBは試料2の培地である。7日後の穴の大きさは、試料2の培地では1.3mmであったのに対し、試料1の培地では0.4mmであった。したがって、Sdegradansによるセルロース培地の分解速度は、試料1の培地よりも試料2の培地の方が速く、分解菌の存在を早く容易に確認できることが示された。6.種々のセルロース試料を用いた培養基材の作製試料2及び試料3を用い、遠藤貴士著ボールミル処理による非晶セルロースの調製CelluloseCommun1380842006を参考として、種々の分子量のセルロース試料を調製した。ボールミル容器体積1Lへ試料2のセルロース原料を10g入れ、0、5、18、30、43、91時間、ボールミル処理を行った。同様に、試料3のセルロース試料については、0、5、18、30、43時間、ボールミル処理を行った。処理後の各試料について、上記1.に記載したとおりにゲルろ過により分子量を測定した。また、上記2.に記載したとおりに、セルロース溶液を調製し、溶液の粘度を測定した。さらに、上記3.に記載した方法にしたがって、それぞれの試料を1のセルロース濃度で含む培養基材を作製し、上記4.に記載したとおりに透過率、最大応力、密度を測定した。結果を表3及び4にそれぞれまとめて示す。試料2及び試料3のいずれも、ボールミル処理時間の増大とともに分子量の低下及び粘度の低下が起こっていること、及びセルロース分子量と粘度とには正の相関があることが確認された。試料2及び3をそれぞれ固化剤として作製した培養基材のいずれについても、波長500nmでの透過率は分子量及び粘度の減少と共に増加した表3及び4。試料3については、未処理のセルロースを用いて培養基材を作製した場合、ゲルが収縮することが既にわかっていたが表1、この収縮によりセルロース密度は増加し、必然的に光線透過率が低下する。しかし、ボールミル処理後のセルロースを用いて作製した培養基材は、処理時間の増大と共に相対体積が100に近づいた。すなわち、セルロースゲルのセルロース密度が処理時間の増大と共に低下し、それに伴って培養基材の収縮も抑制されたため、培養基材の透過率が上昇したと考えられる。透過率は、ボールミル処理時間が30時間の時に最大になった。一方、43時間処理した試料3のセルロースを用いた場合は、密度は低下しているものの、透過率も減少し、透明性が低下していた。この現象は91時間処理した試料2のセルロースにおいても確認された表4。試料2を固化剤として作製した培養基材について、5時間~43時間の処理で分子量及び粘度が低下すること、及びこの分子量の低下あるいは粘度の低下の範囲では作製した培養基材の物性透過率、応力、密度には影響を与えないこと、が明らかになった。しかし、91時間処理した試料2のセルロースについては、作製された培養基材の物性が非常に脆いものとなっていた。この出願は、平成22年10月29日出願の日本特許出願、特願2010-244327に基づくものであり、特願2010-244327の明細書及び特許請求の範囲に記載された内容は、すべてこの出願明細書に包含される。"