"下記A又はBのタンパク質をコードするDNA:A配列番号20、22、もしくは25のアミノ酸配列、又は、配列番号24の少なくとも56位~455位からなるアミノ酸配列を有し、かつキシラナーゼ活性を有するタンパク質、B配列番号20、22、もしくは25のアミノ酸配列、又は配列番号24の少なくとも56位~455位からなるアミノ酸配列において、1若しくは数個のアミノ酸が置換、欠失、挿入又は付加されたアミノ酸配列を有し、かつキシラナーゼ活性を有するタンパク質。前記配列番号24の少なくとも56位~455位からなるアミノ酸配列が、配列番号24のアミノ酸配列である、請求項1に記載のDNA。下記aまたはbのDNAである、請求項1に記載のDNA:a配列番号19もしくは21の塩基配列、又は配列番号23の少なくとも166位~1368位からなる塩基配列を有するDNA、b配列番号19もしくは21の塩基配列、又は配列番号23の少なくとも166位~1368位からなる塩基配列と相補的な塩基配列を有するプローブ、又は前記相補的な塩基配列から調製され得るプローブとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ、キシラナーゼ活性を有するタンパク質をコードするDNA。前記配列番号23の少なくとも166位~1368位からなる塩基配列が、配列番号23の塩基配列である、請求項3に記載のDNA。下記A又はBのタンパク質:A配列番号20、22、もしくは25のアミノ酸配列、又は配列番号24の少なくとも56位~455位からなるアミノ酸配列を有し、かつキシラナーゼ活性を有するタンパク質、B配列番号20、22、もしくは25のアミノ酸配列、又は配列番号24の少なくとも56位~455位からなるアミノ酸配列において、1若しくは数個のアミノ酸が置換、欠失、挿入又は付加されたアミノ酸配列を有し、かつキシラナーゼ活性を有するタンパク質。前記配列番号24の少なくとも56位~455位からなるアミノ酸配列が、配列番号24のアミノ酸配列である、請求項5に記載のタンパク質。請求項5又は6に記載のタンパク質と、マーカーペプチド、ペプチドタグ、分泌シグナルペプチド、及びこれらの一部から選ばれるペプチドとが結合した融合タンパク質。請求項7に記載のタンパク質をコードするDNA。請求項1~4、及び請求項8のいずれか一項に記載のDNAを含む組換えベクター。請求項9の組換えベクターを含む形質転換細胞。請求項10に記載の形質転換細胞を培地に培養し、得られる培養物からキシラナーゼ活性を有するタンパク質を採取することを特徴とする、キシラナーゼの製造方法。前記組換えベクターは、請求項7に記載の融合タンパク質であって、分泌シグナルを含む融合タンパク質を発現することができ、かつ、前記形質転換細胞は前記融合タンパク質を分泌する能力を有し、キシラナーゼ活性を有する組換えタンパク質を培養上清から採取することを特徴とする、請求項11に記載の組換えタンパク質の製造方法。請求項5もしくは6に記載のタンパク質、又は請求項7に記載の融合タンパク質と、セルラーゼとを、キシランを含むバイオマス資源に反応させて糖を生成させる、糖液の製造方法。前記反応を50~75°Cで行うことを特徴とする、請求項13に記載の方法。請求項13又は14に記載の方法で製造された糖液又はその分画物を炭素源として含む培地で、目的物質を産生する微生物を培養し、目的物質を培養物中から採取する、目的物質の製造法。前記微生物が、コリネバクテリウムグルタミカム及びエシェリヒアコリに属する微生物から選択される細菌である、請求項15に記載の方法。前記目的物質がL-アミノ酸である、請求項15又は16に記載の方法。請求項5もしくは6に記載のタンパク質、又は請求項7に記載の融合タンパク質を、キシランを含むバイオマス資源に反応させる、バイオマス資源の分解方法。前記反応を50~75°Cで行うことを特徴とする、請求項18に記載の方法。本発明の課題は、セルロース系バイオマスとして有用なサトウキビバガス等のバイオマス資源の糖化に有用なキシラナーゼ及びその遺伝子、並びにそれらの利用法を提供することにある。本発明者は、上記課題を解決するために、サトウキビバガスと牛糞便を混合し、約半年間発酵させたバガス堆肥中から全DNAを抽出し、該DNAのライブラリーを作製し、キシラナーゼ活性をもとにスクリーニングを行い、キシラナーゼ活性を有する組換え体を取得し、キシラナーゼ遺伝子を同定した。さらにこれらのキシラナーゼ遺伝子を含む組換えベクターによって形質転換された形質転換体を用いてキシラナーゼ活性を有する新規組換えタンパク質を製造し、該組換えキシラナーゼを、市販のバイオマス糖化酵素に添加することにより、市販酵素のみによるセルロース糖化率よりも、その糖化率が向上することを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち本発明は、以下のとおりである。1下記A又はBのタンパク質をコードするDNA:A配列番号20、22、もしくは25のアミノ酸配列、又は、配列番号24の少なくとも56位~455位からなるアミノ酸配列を有し、かつキシラナーゼ活性を有するタンパク質、B配列番号20、22、もしくは25のアミノ酸配列、又は配列番号24の少なくとも56位~455位からなるアミノ酸配列において、1若しくは数個のアミノ酸が置換、欠失、挿入又は付加されたアミノ酸配列を有し、かつキシラナーゼ活性を有するタンパク質。2前記配列番号24の少なくとも56位~455位からなるアミノ酸配列が、配列番号24のアミノ酸配列である、前記DNA。3下記aまたはbのDNAである、前記DNA:a配列番号19もしくは21の塩基配列、又は配列番号23の少なくとも166位~1368位からなる塩基配列を有するDNA、b配列番号19もしくは21の塩基配列、又は配列番号23の少なくとも166位~1368位からなる塩基配列と相補的な塩基配列を有するプローブ、又は前記相補的な塩基配列から調製され得るプローブとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ、キシラナーゼ活性を有するタンパク質をコードするDNA。4前記配列番号23の少なくとも166位~1368位からなる塩基配列が、配列番号23の塩基配列である、前記DNA。5下記A又はBのタンパク質:A配列番号20、22、もしくは25のアミノ酸配列、又は配列番号24の少なくとも56位~455位からなるアミノ酸配列を有し、かつキシラナーゼ活性を有するタンパク質、B配列番号20、22、もしくは25のアミノ酸配列、又は配列番号24の少なくとも56位~455位からなるアミノ酸配列において、1若しくは数個のアミノ酸が置換、欠失、挿入又は付加されたアミノ酸配列を有し、かつキシラナーゼ活性を有するタンパク質。6前記配列番号24の少なくとも56位~455位からなるアミノ酸配列が、配列番号24のアミノ酸配列である、前記タンパク質。7前記タンパク質と、マーカーペプチド、ペプチドタグ、分泌シグナルペプチド、及びこれらの一部から選ばれるペプチドとが結合した融合タンパク質。8前記のタンパク質をコードするDNA。9前記DNAを含む組換えベクター。10前記組換えベクターを含む形質転換細胞。11前記形質転換細胞を培地に培養し、得られる培養物からキシラナーゼ活性を有するタンパク質を採取することを特徴とする、キシラナーゼの製造方法。12前記組換えベクターは、分泌シグナルを含む前記融合タンパク質を発現することができ、かつ、前記形質転換細胞は前記融合タンパク質を分泌する能力を有し、キシラナーゼ活性を有する組換えタンパク質を培養上清から採取することを特徴とする、前記組換えタンパク質の製造方法。13前記タンパク質又は融合タンパク質と、セルラーゼとを、キシランを含むバイオマス資源に反応させて糖を生成させる、糖液の製造方法。14前記反応を50~75°Cで行うことを特徴とする、前記糖液の製造方法。15前記方法で製造された糖液又はその分画物を炭素源として含む培地で、目的物質を産生する微生物を培養し、目的物質を培養物中から採取する、目的物質の製造法。16前記微生物が、コリネバクテリウムグルタミカム及びエシェリヒアコリに属する微生物から選択される細菌である、前記目的物質の方法。17前記目的物質がL-アミノ酸である、前記目的物質の方法。18前記タンパク質又は融合タンパク質を、キシランを含むバイオマス資源に反応させる、バイオマス資源の分解方法。19前記反応を50~75°Cで行うことを特徴とする、前記バイオマス資源の分解方法。本発明により提供されるバガス堆肥に由来する新規なキシラナーゼは、セルラーゼとの併用により、バガス等のバイオマス資源の分解効率を向上させることができることから、バイオマス資源からの糖生産に有用である。特に、好ましい形態では、高い最適反応温度及び温度安定性を有しているので、高温での長時間の処理が必要なバガスの糖化には有用である。また、本発明のDNAは、前記キシラナーゼを製造するのに有用である。本発明のタンパク質は、キシラナーゼ活性を有するタンパク質以下、キシラナーゼということがあるであり、本発明のDNAは、該タンパク質をコードするDNA以下キシラナーゼ遺伝子ということがあるである。尚、キシラナーゼは、キシラナーゼそれ自体であってもよく、キシラナーゼに他のペプチドが結合した融合タンパク質であってもよい。また、キシラナーゼ遺伝子は、キシラナーゼ又はキシラナーゼと他のペプチドとの融合タンパク質をコードする構造遺伝子であってもよく、該構造遺伝子にプロモーターやターミネーター等の発現調節配列が結合したものであってもよい。キシラナーゼ活性とは、ヘミセルロース分子の骨格を作るキシロース糖間のβ-1,4-グリコシド結合を切断することにより、ヘミセルロースを分解する活性を意味する。ヘミセルロースにキシラナーゼを作用させるとその主成分であるキシランが分解され、キシロオリゴ糖及びキシロースが生成する。また、セルロース系バイオマス中のセルロース繊維を取り巻くヘミセルロースがキシラナーゼによって分解されると、セルロースはセルラーゼによって分解されやすくなる。以下、本発明を詳細に説明する。<1>キシラナーゼ及びそれをコードするDNA本発明のキシラナーゼ遺伝子は、バガス堆肥からメタゲノムクローニングによってキシラナーゼ活性を有するタンパク質をコードするDNAとして同定されたものである。これらのキシラナーゼ遺伝子の塩基配列を、配列番号19、21、及び23に示す。これらのキシラナーゼ遺伝子がコードするアミノ酸配列を、配列番号20、22及び24に示す。本発明のキシラナーゼには、配列番号20、22、又は24のアミノ酸配列を有するタンパク質が含まれる。これらのアミノ酸配列をSignalP30へ入力し、シグナルペプチド予測を行った。その結果、配列番号24のアミノ酸配列では、55位のアミノ酸残基よりもN末端側の配列がシグナルペプチドであると予測された。そして、実施例に示すように、配列番号24の56位~455位からなるペプチドと、Sec系又はTat系シグナルペプチドとを連結した融合タンパク質を、コリネバクテリウムグルタミカムCorynebacteriumglutamicumで発現させたところ、キシラナーゼ活性を示した。したがって、本発明のキシラナーゼには、配列番号24の少なくとも56位~455位からなるアミノ酸配列を有するタンパク質が含まれる。また、配列番号20又は22のアミノ酸配列を有するペプチドと、Sec系又はTat系シグナルペプチドとを連結した融合タンパク質も、上記と同様にして発現させたところ、いずれもキシラナーゼ活性を示した。配列番号22と24のアミノ酸配列は相同性が高く、これらの共通配列を配列番号25に示す。配列番号25の410アミノ酸残基中、336個が共通するアミノ酸残基である。また、配列番号25中、8~188位では、181アミノ酸中173アミノ酸956が同一アミノ酸である。配列番号25のアミノ酸配列を有するタンパク質も、本発明のキシラナーゼに含まれる。本発明のキシラナーゼは、配列番号20、22、もしくは25のアミノ酸配列、又は配列番号24の少なくとも56位~455位からなるアミノ酸配列を有するタンパク質の保存的バリアント、すなわち、上記アミノ酸配列を有するタンパク質のホモログや人為的な改変体等であってもよい。すなわち、上記アミノ酸配列において、1若しくは数個の位置での1若しくは数個のアミノ酸の置換、欠失、挿入又は付加等を含む配列を有するタンパク質であってもよい。また、上記アミノ酸配列に含まれる第1番目のメチオニンMetは欠失していてもよい。1若しくは数個とは、アミノ酸残基のタンパク質の立体構造における位置やアミノ酸残基の種類によっても異なるが、具体的には好ましくは1~20個、より好ましくは1~10個、さらに好ましくは1~5個を意味する。また、保存的変異の代表的なものは、保存的置換である。保存的置換とは、置換部位が芳香族アミノ酸である場合には、Phe、Trp、Tyr間で、置換部位が疎水性アミノ酸である場合には、Leu、Ile、Val間で、極性アミノ酸である場合には、Gln、Asn間で、塩基性アミノ酸である場合には、Lys、Arg、His間で、酸性アミノ酸である場合には、Asp、Glu間で、ヒドロキシル基を持つアミノ酸である場合には、Ser、Thr間でお互いに置換する変異である。保存的置換とみなされる置換としては、具体的には、AlaからSer又はThrへの置換、ArgからGln、His又はLysへの置換、AsnからGlu、Gln、Lys、His又はAspへの置換、AspからAsn、Glu又はGlnへの置換、CysからSer又はAlaへの置換、GlnからAsn、Glu、Lys、His、Asp又はArgへの置換、GluからGly、Asn、Gln、Lys又はAspへの置換、GlyからProへの置換、HisからAsn、Lys、Gln、Arg又はTyrへの置換、IleからLeu、Met、Val又はPheへの置換、LeuからIle、Met、Val又はPheへの置換、LysからAsn、Glu、Gln、His又はArgへの置換、MetからIle、Leu、Val又はPheへの置換、PheからTrp、Tyr、Met、Ile又はLeuへの置換、SerからThr又はAlaへの置換、ThrからSer又はAlaへの置換、TrpからPhe又はTyrへの置換、TyrからHis、Phe又はTrpへの置換、及び、ValからMet、Ile又はLeuへの置換が挙げられる。さらに、上記のような保存的変異を有するキシラナーゼは、配列番号20、22、又は、24のアミノ酸配列もしくは配列番号24の少なくとも56位~455位からなるアミノ酸配列に対して、80以上、好ましくは90以上、より好ましくは95以上、より好ましくは97以上、特に好ましくは99以上の相同性を有し、かつ、キシラナーゼ活性を有するタンパク質であってもよい。尚、本明細書において、相同性homologyは、同一性identityを指すことがある。本発明のキシラナーゼは、好ましい形態では下記の性質を有する。1最適反応pH:5.5~7.5後述のXyn111、Xyn112、及びXyn115の最適反応pHは、各々7付近、7.0~7.5付近.5.5~7.5付近である。2最適反応温度:65°C~80°CXyn111、Xyn112、及びXyn115の最適反応温度は、各々65°C付近、70°C付近、75-80°C付近である。3温度安定性:50°Cで約16時間安定Xyn111、Xyn112、及びXyn115は、50°Cで16時間保持後に80以上の活性を維持する。特に、Xyn112、及びXyn115は、各々65°C、70°Cで16時間保持後に約60の活性を維持する。本発明のキシラナーゼは、他のペプチドとの融合タンパク質であってもよい。他のペプチドとしては、マーカーペプチドマーカータンパク質、ペプチドタグ、及び分泌シグナルペプチド等が挙げられる。キシラナーゼに連結されるペプチドは一種だけでもよく、2又はそれ以上のペプチドであってもよい。尚、キシラナーゼがシグナルペプチドとの融合タンパク質の場合は、分泌可能な宿主細胞中で発現した後、シグナルペプチドが切断されてキシラナーゼ部分のみが細胞外に分泌され得る。マーカーペプチドとしては、マーカーとして機能し得るペプチドであれば特に制限されるものではなく、例えば、アルカリフォスファターゼ、抗体のFc領域、HRP、GFPなどを具体的に挙げることができる。また、ペプチドタグとしては、特に制限されないが、Mycタグ、Hisタグ、FLAGタグ、GSTタグなどの従来知られているペプチドタグを具体的に例示することができる。また、分泌シグナルペプチドとしては、キシラナーゼ遺伝子を発現させる宿主で機能し得るものであれば特に制限されず、例えば、コリネ型細菌を宿主として用いる場合は、コリネ型細菌由来のSec系及びTat系分泌経路の分泌シグナルペプチドWO0123591、WO2005103278参照が挙げられる。融合タンパク質は、常法により作製することができる。例えばHisタグは、NiNTAとHisタグの親和性を利用したキシラナーゼ活性を有するタンパク質等の精製等や、高濃度のキシラナーゼ活性を有するタンパク質等を含有する培養上清の生産に有用である。本発明のDNAは、上記のキシラナーゼをコードする。具体的には、配列番号20、22、もしくは、25のアミノ酸配列、又は配列番号24の少なくとも56位~455位からなるアミノ酸配列をコードするDNAが含まれる。また、これらのアミノ酸配列を有するタンパク質の保存的バリアントをコードするDNAであってもよい。より具体的には、配列番号19、もしくは21の塩基配列、又は配列番号23の少なくとも166位~1368位からなる塩基配列を有するDNAが挙げられる。配列番号23の少なくとも166位~1368位からなる塩基配列としては、配列番号23の塩基配列が挙げられる。本発明のDNAは、これらのものに限定されず、コード領域において各アミノ酸をコードするコドンを同じアミノ酸をコードする他の等価のコドンに置換したものであってもよい。また、本発明のDNAには、配列番号19、もしくは21の塩基配列、又は配列番号23の少なくとも166位~1368位からなる塩基配列の相補的な塩基配列を有するプローブ、又は前記相補的な塩基配列から調製され得るプローブとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ、キシラナーゼ活性を有するタンパク質をコードするDNAも含まれる。ストリンジェントな条件とは、いわゆる特異的なハイブリッドが形成され、非特異的なハイブリッドが形成されない条件をいう。一例を示せば、相同性が高いDNA同士、例えば80以上、好ましくは90以上、より好ましくは95以上、より好ましくは97、特に好ましくは99以上の相同性を有するDNA同士がハイブリダイズし、それより相同性が低いDNA同士がハイブリダイズしない条件、例えば、42°Cでのハイブリダイゼーション、及び1×SSC、01のSDSを含む緩衝液による42°Cでの洗浄処理を挙げることができ、65°Cでのハイブリダイゼーション、及び01×SSC、01のSDSを含む緩衝液による65°Cでの洗浄処理をより好ましく挙げることができる。なお、ハイブリダイゼーションのストリンジェンシーに影響を与える要素としては、上記温度条件以外に種々の要素があり、当業者であれば、種々の要素を適宜組み合わせて、上記例示したハイブリダイゼーションのストリンジェンシーと同等のストリンジェンシーを実現することが可能である。ハイブリダイゼーションに用いるプローブは、遺伝子の相補配列の一部であってもよい。そのようなプローブは、公知の遺伝子配列に基づいて作製したオリゴヌクレオチドをプライマーとし、これらの塩基配列を含むDNA断片を鋳型とするPCRによって作製することができる。例えば、プローブとして、300bp程度の長さのDNA断片を用いる場合には、ハイブリダイゼーションの洗いの条件は、50°C、2×SSC、01SDSが挙げられる。本発明のDNAは、本明細書に開示されたDNA配列情報等に基づき、例えばサトウキビバガスを種々の動物糞便と混合することにより作製されたバガス堆肥、またはバガス堆肥を施肥した耕作地やバガス堆肥保存場所などの土壌等の全DNAから、PCR又はハイブリダイゼーションなど公知の方法により調製することができる。その他、前記DNA情報に基づいて化学合成によっても調製することができる。また、キシラナーゼ遺伝子には、微生物の個体差、種の違いに基づく場合などの天然に生じる変異mutant又はvariantを含む場合があるが、このような変異を有するキシラナーゼ遺伝子も、本発明のDNAに含まれる。また、前記のキシラナーゼの保存的バリアントをコードする遺伝子は、例えば、部位特異的変異法によって、コードされるタンパク質の特定の部位のアミノ酸残基が置換、欠失、挿入または付加を含むようにキシラナーゼ遺伝子の塩基配列を改変することによって取得することができる。また、そのような遺伝子は、公知の突然変異手段、例えば市販の突然変異誘発キットを用いることによっても取得することができる。キシラナーゼと他のペプチドとの融合タンパク質をコードするDNAは、キシラナーゼをコードするDNAと、他のペプチドをコードするDNAとを連結することによって構築することができる。得られたDNAを発現させることによって、融合タンパク質を製造すすることができる。<2>組換えベクター本発明の組換えベクターは、キシラナーゼ遺伝子を含む組換えベクターである。キシラナーゼ遺伝子は、キシラナーゼのみをコードするDNAであってもよく、前記融合タンパク質をコードするDNAであってもよい。組換えベクターは、キシラナーゼ遺伝子を含む限り特に制限されず、任意のベクターにキシラナーゼ遺伝子を挿入することによって構築することができる。ベクターは、使用する宿主に応じて適宜選択することができる。宿主としては、エシェリヒアコリ等のエシェリヒア属細菌、及びコリネ型細菌が挙げられる。コリネ型細菌のベクターとしては、コリネ型細菌で自律複製可能なプラスミド、例えば、特開平3210184号公報に記載のプラスミドpCRY30;特開平272876号公報及び米国特許5185262号明細書公報に記載のプラスミドpCRY21、pCRY2KE、pCRY2KX、pCRY31、pCRY3KE及びpCRY3KX;特開平1191686号公報に記載のプラスミドpCRY2およびpCRY3;特開昭5867679号公報に記載のpAM330;特開昭5877895号公報に記載のpHM1519;特開昭58192900号公報に記載のpAJ655、pAJ611及びpAJ1844;特開昭57134500号公報に記載のpCG1;特開昭5835197号公報に記載のpCG2;特開昭57183799号公報に記載のpCG4およびpCG11等を挙げることができる。エシェリヒアコリで発現可能なベクターとしては、pUC19、pUC18、pBR322、pHSG299、pHSG298、pHSG399、pHSG398、RSF1010、pMW119、pMW118、pMW219、pMW218等を用いることが出来る。ベクターとしては、特に制限されないが、キシラナーゼを宿主細胞内で発現させることができる発現系を含むものが好ましい。そのような発現系としては、例えば、染色体、エピソーム及びウイルスに由来する発現系、より具体的には、細菌プラスミド由来、酵母プラスミド由来のベクター、バクテリオファージ由来、トランスポゾン由来及びこれらの組合せに由来するベクター、例えば、コスミドやファージミドのようなプラスミドとバクテリオファージの遺伝的要素に由来するものを挙げることができる。発現系は発現を起こさせるだけでなく発現を調節する制御配列を含んでいてもよい。また、発現系は、分泌シグナルを含む分泌発現系であってもよい。コリネ型細菌の分泌発現系としては、細胞外でタンパク質がフォールディングされるGeneralsecretionpathwayWO0123591参照と、細胞内でタンパク質がフォールディングされて分泌されるTwinargininetranslocationpathwayWO2005103278参照が挙げられる。<3>形質転換細胞本発明の形質転換細胞は、本発明のDNA又は組換えベクターを含む。形質転換細胞とは、本発明のDNA又は組換えベクターを宿主細胞に導入することによって得られる細胞を意味し、導入の手法は制限されない。宿主細胞としては、エシェリヒアコリ等のエシェリヒアコリ属細菌、コリネバクテリウムグルタミカム等のコリネ型細菌、ストレプトミセス属細菌等の放線菌、バチルスサブチリス等のバチルス属細菌、ストレプトコッカス属細菌、スタフィロコッカス属細菌等の原核細胞や、酵母、アスペルギルス等の真菌細胞や、ドロソフィラS2、スポドプテラSf9、カイコ培養細胞等の昆虫細胞や、植物細胞等を挙げることができる。宿主細胞としては、特にエシェリヒアコリ、コリネ型細菌、および放線菌を含む種々の微生物細胞が挙げられる。エシェリヒアコリには、一般にクローニングや異種タンパク質の発現によく利用される菌株、例えば、HB101、MC1061、JM109、CJ236、MV1184、及びそれらの誘導体等が含まれる。コリネ型細菌とは好気性のグラム陽性桿菌であり、従来ブレビバクテリウム属に分類されていたが現在コリネバクテリウム属に統合された細菌を含み、またコリネバクテリウム属と非常に近縁なブレビバクテリウム属細菌を含む。コリネ型細菌を使用することの利点には、これまでにタンパク質の分泌に好適とされてきたカビ、酵母やバチルス属細菌と比べて本来的に菌体外に分泌されるタンパク質が極めて少なく、目的タンパク質を分泌生産した場合にその精製過程が簡略化、省略化できること、また糖、アンモニアや無機塩等を含む単純な培地で容易に生育するため、培地代や培養方法、培養生産性の点で優れていることが含まれる。このようなコリネ型細菌の例として以下のものが挙げられる。コリネバクテリウムアセトアシドフィラムコリネバクテリウムアセトグルタミカムコリネバクテリウムアルカノリティカムコリネバクテリウムカルナエコリネバクテリウムグルタミカムコリネバクテリウムリリウムコリネバクテリウムメラセコーラコリネバクテリウムサーモアミノゲネスコリネバクテリウムハーキュリスブレビバクテリウムディバリカタムブレビバクテリウムフラバムブレビバクテリウムインマリオフィラムブレビバクテリウムラクトファーメンタムブレビバクテリウムロゼウムブレビバクテリウムサッカロリティカムブレビバクテリウムチオゲニタリスコリネバクテリウムアンモニアゲネスブレビバクテリウムアルバムブレビバクテリウムセリヌムミクロバクテリウムアンモニアフィラム具体的には、下記のような菌株を例示することができる。コリネバクテリウムアセトアシドフィラムATCC13870コリネバクテリウムアセトグルタミカムATCC15806コリネバクテリウムアルカノリティカムATCC21511コリネバクテリウムカルナエATCC15991コリネバクテリウムグルタミカムATCC13020ATCC13032ATCC13060,ATCC13869,FERMBP734コリネバクテリウムリリウムATCC15990コリネバクテリウムメラセコーラATCC17965コリネバクテリウムエッフィシエンスAJ12340コリネバクテリウムハーキュリスATCC13868ブレビバクテリウムディバリカタムATCC14020ブレビバクテリウムフラバムATCC13826ATCC14067AJ12418ブレビバクテリウムインマリオフィラムATCC14068ブレビバクテリウムラクトファーメンタムATCC13869ブレビバクテリウムロゼウムATCC13825ブレビバクテリウムサッカロリティカムATCC14066ブレビバクテリウムチオゲニタリスATCC19240コリネバクテリウムアンモニアゲネスATCC6871ATCC6872ブレビバクテリウムアルバムATCC15111ブレビバクテリウムセリヌムATCC15112ミクロバクテリウムアンモニアフィラスATCC15354とりわけ、野生株コリネバクテリウムグルタミカムCorynebacteriumglutamicumATCC13869よりストレプトマイシン耐性変異株として分離したコリネバクテリウムグルタミカムAJ12036は、その親株野生株に比べ、タンパク質の分泌に関わる機能遺伝子に変異が存在することが予測され、タンパク質の分泌生産能が至適培養条件下での蓄積量としておよそ2~3倍と極めて高いため、宿主菌として好適である。さらに、このような菌株から細胞表層タンパク質を生産しないように改変した菌株を宿主として使用すれば、培地中に分泌された目的タンパク質の精製が容易となり、特に好ましい。そのような改変は、突然変異または遺伝子組換え法により染色体上の細胞表層タンパク質またはその発現調節領域に変異を導入することにより行うことができる。細胞表層タンパク質を生産しないように改変されたコリネ型細菌としては、AJ12036の細胞表層タンパク質PS2破壊株であるコリネバクテリウムグルタミカムYDK010株が挙げられるWO0123491参照。また、枯草菌、酵母、麹菌、放線菌等のタンパク質分泌能を利用して、キシラナーゼを培地中に生産させてもよい。組換え発現ベクターの宿主細胞内への導入方法は、従来の慣用的に用いられている方法により行うことができる。コンピテントセル法、プロトプラスト法、エレクトロポレーション法、マイクロインジェクション法、リポソーム融合法等、種々のものが挙げられる。コリネ型細菌への導入方法としては、具体的には例えば、プロトプラスト法、エレクトロポレーション法等を使用することができるが、これらに限定されない。<3>キシラナーゼの製造法上記のような形質転換細胞を培地に培養し、得られる培養物からキシラナーゼ活性を有するタンパク質を採取することにより、キシラナーゼを製造することができる。形質転換体を培養するための培地は公知であり、例えば、Ecoliの培養にはLB培地などの栄養培地や、M9培地などの最少培地に炭素源、窒素源、ビタミン源等を添加した培地を用いることができる。形質転換体は宿主に応じて、通常、16~42°C、好ましくは25~37°Cで5~168時間、好ましくは8~72時間培養される。宿主に依存して、振盪培養と静置培養のいずれも可能であるが、必要に応じて攪拌を行ってもよく、通気を行ってもよい。コリネ型細菌を発現宿主として選択する場合は、培地としては、例えばCM2G培地等を用いることができる。また、コリネ型細菌のL-アミノ酸生産における培養条件や、その他Sec系、Tat系のシグナルペプチドを用いたタンパク質の製造法に記載の条件を用いることが出来るWO0123591、WO2005103278参照。また、キシラナーゼ発現のために誘導型プロモーターを用いた場合は、培地にプロモーター誘導剤を添加して培養を行うこともできる。培養物からキシラナーゼを採取する方法としては、特に制限されず、公知の方法を用いることができる。キシラナーゼが分泌生産された場合は、培養物の培養上清をそのまま使用することもできる。培養上清からキシラナーゼを精製又は単離するには、硫酸アンモニウム沈殿、エタノール等の溶媒沈殿、透析、限外濾過、酸抽出、及び各種クロマトグラフィー、例えばゲル濾過クロマトグラフィー、アニオン又はカチオン交換クロマトグラフィー、ホスホセルロースクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、ハイドロキシアパタイトクロマトグラフィー及びレクチンクロマトグラフィーを含めた公知の方法が挙げられ、好ましくは、高速液体クロマトグラフィー、又はこれらの組み合わせを挙げることができる。また、上記アフィニティークロマトグラフィーに用いる担体としては、例えば、キシラナーゼに対する抗体を結合させた担体や、キシラナーゼにペプチドタグを付加した場合は、このペプチドタグに親和性のある物質を結合した担体が挙げられる。また、SDSポリアクリルアミド電気泳動法、等電点電気泳動法等等も用いることができる。キシラナーゼの精製方法は、ペプチド合成の際にも適用することができる。キシラナーゼを細胞内に蓄積させた場合は、形質転換細胞を破砕し、破砕物の遠心上清から上記と同様にしてキシラナーゼを精製又は単離することができる。例えば、形質転換体の培養終了後、遠心により集菌した菌体を菌体破砕用バッファー20~100mMTrisHCl、5mMEDTAに懸濁し、超音波破砕をBransonMODELSonifier250のマイクロチップを用い、outputcontrol7dutycycle50で約10分間行うことにより菌体を破砕することができる。この破砕処理液を12000rpmで10分間遠心して上清を得ることができる。また、前記遠心後の沈殿について必要に応じて塩酸グアニジウムまたは尿素などで可溶化したのち更に精製することもできる。得られたキシラナーゼの酵素活性は、キシランを含むバイオマス、例えばバガスを基質とした糖化試験により確認することが出来る。また精製された酵素の活性測定は、特開200754050、特許2759209号、BaileyetalJBiotech23257270記載の方法によって測定することが出来る。<4>糖液の製造方法キシラナーゼを、キシランを含むバイオマス資源に反応させることにより、バイオマス資源を分解することができる。また、キシラナーゼとセルラーゼをキシランを含むバイオマス資源に反応させて糖を生成させることにより、糖液を得ることができる。本発明のキシラナーゼはヘミセルラーゼの一種であり、本発明のキシラナーゼに加えて、別のキシラナーゼ又はヘミセルラーゼを用いてもよい。セルラーゼとは、βグリコシド結合の加水分解に関与する酵素で、非結晶セルロースを分子内部から切断するエンドグルカナーゼEC3214、結晶セルロースの末端から分解し、セロビオースを遊離するエキソグルカナーゼセロビオヒドロラーゼEC32191、及び、セロビオース及びセロオリゴ糖の末端からグルコースを生成するβ-グルコシダーゼEC32121がある。市販のセルラーゼは、前記活性を含むセルラーゼの混合物として販売されており、Aspergillusniger由来、Trichodermareesei由来の酵素が利用される場合が多い。Novozymes社のCellicCtec、CelluclastNovozymesAS、Novozyme188NovozymesAS、及びGenencor社のAccelleraseがコストパフォーマンスに優れ代表的な市販糖化酵素である。その他の市販酵素としては、明治製菓株のメイセラーゼなどが挙げられる。セルラーゼの活性測定は、IrwinetalBiotechnolBioeng4210021013を参考に測定できる。ヘミセルラーゼとは、ヘミセルロースに含まれるグリコシド結合の加水分解に関与する酵素の総称である。ヘミセルロースとは、陸上植物細胞の細胞壁を構成する多糖類のうち、セルロースとペクチン以外のものであり、ヘミセルロース成分にはキシランが多く含まれており、ヘミセルラーゼの主成分は、エンド14βキシラナーゼEC3218、及びβ14キシロシダーゼEC32137等であるが、その他のグルコシド結合加水分解酵素も含まれている。市販のヘミセルラーゼとしては、Novozymes社のCellicHtecが挙げられる。Genencor社や天野エンザイム株などからも入手できる。バイオマス資源とは、植物や藻類が生産する、ヘミセルロース成分を含むセルロース系及び/又はリグノセルロース系バイオマスを包含し、そのようなバイオマスには、例えば、バガス、木材、ふすま、麦わら、稲わら、もみがら、大豆粕、大豆オカラ、コーヒー粕、コメ糠等が含まれる。本発明においてはバガスを用いることが望ましい。バガスは、サトウキビを搾汁後、残渣として得られる。バイオマス資源の分解または糖化のための手法としては、公知の方法を用いることが出来る。例えば用いられるバイオマス資源は、乾燥物でも、また湿潤物でもよいが、処理効率を高めるために予め1001000μmサイズに粉砕されていることが好ましい。この粉砕はボールミル、振動ミル、カッターミル、ハンマーミル等の機械を用いて行うことが出来る。粉砕したバイオマス資源を水性媒体中に懸濁し、本発明のキシラナーゼとセルラーゼを加え、攪拌しながら加温して、バイオマス資源を分解または糖化することが出来る。キシラナーゼとセルラーゼは、バイオマス資源に同時に加えてもよく、キシラナーゼをバイオ資源に加えて反応させた後にセルラーゼを加えて反応させてもよい。上記方法において、反応液のpHおよび温度は、キシラナーゼ及びセルラーゼが失活しない範囲であればよいが、本発明のキシラナーゼは、前記のとおり、最適反応温度が高く、温度安定性にも優れているため、最適反応温度又はその付近の温度で反応を行うことが好ましい。例えば、一般的に常圧で反応を行う限り、温度は595°C、好ましくは2580°C、より好ましくは50~75°C、50~70°C、50~65°C、又は50~55°C、pHは111好ましくは49の範囲でよい。例えば、セルラーゼとしてNovozymes社のCellicCtecを用いる場合は、35~55°C、pH45~60の条件が挙げられる。酵素量としては、01~05が挙げられる。反応時間は、酵素量等により適宜設定することができる。本発明のキシラナーゼの酵素量は特に制限されず、予備実験を行う等して適宜設定すればよい。キシラナーゼとセルラーゼは、バイオマス資源に同時に作用させてもよく、キシラナーゼを作用させた後にセルラーゼを作用させてもよい。また、本発明のキシラナーゼに加えて、別のキシラナーゼ又はヘミセルラーゼを用いてもよい。反応中に、本発明のキシラナーゼ、セルラーゼ及びヘミセルラーゼのいずれか1種又は2種以上を、追添してもよい。上記のようにしてバイオマス資源を分解すると、主としてグルコースが生成するが、キシロース、マンノース、アラビノース等の糖も生成する。得られた糖液は、用途に応じて、さらに化学反応又は酵素反応によって異性化又は分解させてもよい。得られた糖液は、用途に応じて、そのまま使用することもできるし、水分を除去して乾燥物として使用することもできる。また、糖液中の成分は適宜分画して使用してもよい。分画物には、粗精製物及び精製物も含まれる。精製物としてはグルコースが挙げられる。<5>目的物質の製造方法前記方法により得られた糖液又はその分画物は、例えば、発酵法により目的物質の製造における炭素源として用いることができる。目的物質としては、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、ブタンジオール等のアルコールが挙げられる。その他、酢酸、乳酸、プロピオン酸、3-ヒドロキシプロピオン酸、コハク酸、クエン酸、アミノ酸、核酸が挙げられる。特にL-アミノ酸としては、L-リジン、L-オルニチン、L-アルギニン、L-ヒスチジン、L-シトルリン、L-イソロイシン、L-アラニン、L-バリン、L-ロイシン、L-グリシン、L-スレオニン、L-セリン、L-プロリン、L-フェニルアラニン、L-チロシン、L-トリプトファン、L-システイン、L-シスチン、L-メチオニン、L-グルタミン酸、L-アスパラギン酸、L-グルタミン及びL-アスパラギンが挙げられる。また、本発明のL-アミノ酸には上記アミノ酸を出発物質として得られるL-アミノ酸誘導体も含まれ、GABA、pヒドロキシDフェニルグリシン、DOPA、コハク酸、リンゴ酸、ピルビン酸が挙げられる。核酸としては、プリンヌクレオシド、プリンヌクレオチドなどが挙げられる。プリンヌクレオシドには、イノシン、キサントシン、グアノシン、アデノシンなどが含まれ、プリンヌクレオチドには、プリンヌクレオシドの5-燐酸エステル、例えばイノシン酸イノシン-5-リン酸。以下IMPともいう、キサンチル酸キサントシン-5-リン酸。以下XMPともいう、グアニル酸グアノシン-5-モノリン酸。以下GMPともいう、アデニル酸アデノシン-5-モノリン酸。以下AMPともいうなどが含まれる。また、本発明の核酸には、上記核酸を出発物質として得られる核酸誘導体も含まれ、AraUウラシルアラビノシド、ZVAZバラシクロビル等が挙げられる。本発明により製造される目的物質は、1種でもよく、2種又はそれ以上であってもよい。<5-1>目的物質の製造に用いることが出来る微生物目的物質の製造に用いる微生物は、上記方法で得られる糖、例えばグルコースを資化することができ、目的物質生産能を有し、液体培地で培養したときに培地又は微生物細胞中に目的物質を蓄積させることができる微生物であれば、特に制限されない。蓄積する目的物質の量は、培地から回収できる程度に蓄積できればいずれでもよい。本発明に用いる微生物又はそれを育種するための親株としては、エシェリヒア属細菌、パントエア属細菌を代表とする腸内細菌科に属する微生物や、コリネ型細菌等を用いることができる。その他の腸内細菌科に属する微生物としては、エンテロバクターEnterobacter属、クレブシエラKlebsiella属、セラチアSerratia属、エルビニアErwinia属、サルモネラSalmonella属、モルガネラMorganella属などのγ-プロテオバクテリアに属する腸内細菌が挙げられ、またその他の微生物としては、アリサイクロバチルスAlicyclobacillus属細菌、バチルスBacillus属細菌、サッカロマイセス属やキャンディダ属等に属する酵母などが挙げられる。エシェリヒア属細菌としては、ナイトハルトらの著書NeidhardtFCetalEscherichiacoliandSalmonellaTyphimuriumAmericanSocietyforMicrobiologyWashingtonDC1208table1に挙げられるもの、例えばエシェリヒアコリ等が利用できる。エシェリヒアコリの野生株としては、例えばK12株又はその誘導体、エシェリヒアコリMG1655株ATCCNo47076、及びW3110株ATCCNo27325等が挙げられる。これらを入手するには、例えばアメリカンタイプカルチャーコレクションATCCより分譲を受けることができる住所ATCCAddressPOBox1549ManassasVA201081UnitedStatesofAmerica。すなわち、菌株毎に対応する登録番号が付与されており、この登録番号を利用して分譲を受けることができる。各菌株に対応する登録番号はアメリカンタイプカルチャーコレクションのカタログに記載されているhttpwwwatccorg参照。また、エンテロバクター属細菌としては、エンテロバクターアグロメランスEnterobacteragglomerans、エンテロバクターアエロゲネス等、パントエア属細菌としてはパントエアアナナティスPantoeaananatisが挙げられる。尚、近年、エンテロバクターアグロメランスは、16SrRNAの塩基配列解析などにより、パントエアアグロメランスPantoeaagglomerans又はパントエアアナナティスPantoeaananatis、パントエアスチューアルティPantoeastewartii等に再分類されているものがある。本発明においては、腸内細菌科に分類されるものであれば、エンテロバクター属又はパントエア属のいずれに属するものであってもよい。パントエアアナナティスを遺伝子工学的手法を用いて育種する場合には、パントエアアナナティスAJ13355株FERMBP6614、AJ13356株FERMBP6615、AJ13601株FERMBP7207及びそれらの誘導体を用いることができる。これらの株は、分離された当時はエンテロバクターアグロメランスと同定され、エンテロバクターアグロメランスとして寄託されたが、上記のとおり、16SrRNAの塩基配列解析などにより、パントエアアナナティスに再分類されている。コリネ型細菌としては、バージーズマニュアルオブデターミネイティブバクテリオロジーBergeysManualofDeterminativeBacteriology第8版599頁1974に定義されている一群の微生物であり、好気性,グラム陽性,非抗酸性,胞子形成能を有しない桿菌に分類される微生物が利用できる。なお、コリネ型細菌は、従来ブレビバクテリウム属に分類されていたが現在はコリネバクテリウム属細菌として統合された細菌IntJSystBacteriol41255、及びコリネバクテリウム属と非常に近縁なブレビバクテリウム属細菌及びミクロバテリウム属細菌を含む。このようなコリネ型細菌の例として以下のものが挙げられる。コリネバクテリウムアセトアシドフィラムコリネバクテリウムアセトグルタミカムコリネバクテリウムアルカノリティカムコリネバクテリウムカルナエコリネバクテリウムグルタミカムコリネバクテリウムリリウムコリネバクテリウムメラセコーラコリネバクテリウムサーモアミノゲネスコリネバクテリウムエフィシェンスコリネバクテリウムハーキュリスブレビバクテリウムディバリカタムブレビバクテリウムフラバムブレビバクテリウムインマリオフィラムブレビバクテリウムラクトファーメンタムブレビバクテリウムロゼウムブレビバクテリウムサッカロリティカムブレビバクテリウムチオゲニタリスコリネバクテリウムアンモニアゲネスブレビバクテリウムアルバムブレビバクテリウムセリヌムミクロバクテリウムアンモニアフィラム具体的には、下記のような菌株を例示することができる。コリネバクテリウムアセトアシドフィラムATCC13870コリネバクテリウムアセトグルタミカムATCC15806コリネバクテリウムアルカノリティカムATCC21511コリネバクテリウムカルナエATCC15991コリネバクテリウムグルタミカムATCC13020ATCC13032ATCC13060コリネバクテリウムリリウムATCC15990コリネバクテリウムメラセコーラATCC17965コリネバクテリウムエッフィシエンスAJ12340コリネバクテリウムハーキュリスATCC13868ブレビバクテリウムディバリカタムATCC14020ブレビバクテリウムフラバムATCC13826ATCC14067AJ12418ブレビバクテリウムインマリオフィラムATCC14068ブレビバクテリウムラクトファーメンタムATCC13869コリネバクテリウムグルタミカムATCC13869ブレビバクテリウムロゼウムATCC13825ブレビバクテリウムサッカロリティカムATCC14066ブレビバクテリウムチオゲニタリスATCC19240コリネバクテリウムアンモニアゲネスATCC6871、ATCC6872ブレビバクテリウムアルバムATCC15111ブレビバクテリウムセリヌムATCC15112ミクロバクテリウムアンモニアフィラムATCC15354これらを入手するには、例えばアメリカンタイプカルチャーコレクション住所POBox1549ManassasVA2010812301ParklawnDriveRockvilleMaryland20852UnitedStatesofAmericaより分譲を受けることができる。また、AJ12340株は、1987年10月27日付けで通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所現独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター〒3058566日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6にFERMBP1539の受託番号でブダペスト条約に基づいて寄託されている。また、AJ12418株は、1989年1月5日付けで通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所にFERMBP2205の受託番号でブダペスト条約に基づいて寄託されている。バチルス属細菌を用いるときは、バチルス属細菌としては、バチルスズブチリス、バチルスアミロリケファシエンス、バチルスプミルス等が挙げられる。バチルスズブチリスとしては、バチルスズブチリス168MarburgATCC6051、バチルスズブチリスPY79Plasmid19841219等が、バチルスアミロリケファシエンスとしては、バチルスアミロリケファシエンスTATCC23842、及びバチルスアミロリケファシエンスNATCC23845等が挙げられる。また、バチルスプミルスとしては、バチルスプミルスGottheilNo3218ATCCNo21005米国特許第3616206号等が挙げられる。以下、上述したような親株にL-アミノ酸又は核酸生産能を付与する方法について述べる。L-アミノ酸生産能を付与するには、栄養要求性変異株、L-アミノ酸のアナログ耐性株又は代謝制御変異株の取得や、L-アミノ酸の生合成系酵素の発現が増強された組換え株の創製等、従来、コリネ型細菌又はエシェリヒア属細菌等のアミノ酸生産菌の育種に採用されてきた方法を適用することができるアミノ酸発酵、株学会出版センター、1986年5月30日初版発行、第77~100頁参照。ここで、L-アミノ酸生産菌の育種において、付与される栄養要求性、アナログ耐性、代謝制御変異等の性質は、単独でもよく、2種又は3種以上であってもよい。また、発現が増強されるL-アミノ酸生合成系酵素も、単独であっても、2種又は3種以上であってもよい。さらに、栄養要求性、アナログ耐性、代謝制御変異等の性質の付与と、生合成系酵素の増強が組み合わされてもよい。L-アミノ酸生産能を有する栄養要求性変異株、アナログ耐性株、又は代謝制御変異株を取得するには、親株又は野生株を通常の変異処理、すなわちX線や紫外線の照射、またはNメチルN’ニトロNニトロソグアニジン等の変異剤処理などによって処理し、得られた変異株の中から、栄養要求性、アナログ耐性、又は代謝制御変異を示し、かつL-アミノ酸生産能を有するものを選択することによって得ることができる。また、L-アミノ酸生産能の付与又は増強は、遺伝子組換えによって、酵素活性を増強することによっても行うことが出来る。酵素活性の増強は、例えば、L-アミノ酸の生合成に関与する酵素をコードする遺伝子の発現が増強するように細菌を改変する方法を挙げることができる。遺伝子の発現を増強するための方法としては、遺伝子を含むDNA断片を、適当なプラスミド、例えば微生物内でプラスミドの複製増殖機能を司る遺伝子を少なくとも含むプラスミドベクターに導入した増幅プラスミドを導入すること、または、これらの遺伝子を染色体上で接合、転移等により多コピー化すること、またこれらの遺伝子のプロモーター領域に変異を導入することにより達成することもできる国際公開パンフレット第9534672号参照。上記増幅プラスミドまたは染色体上に目的遺伝子を導入する場合、これらの遺伝子を発現させるためのプロモーターはコリネ型細菌において機能するものであればいかなるプロモーターであっても良く、用いる遺伝子自身のプロモーターであってもよいし、改変したものでもよい。コリネ型細菌で強力に機能するプロモーターを適宜選択することや、プロモーターの35、10領域をコンセンサス配列に近づけることによっても遺伝子の発現量の調節が可能である。以上のような、酵素遺伝子の発現を増強する方法は、国際公開第0018935号パンフレット、欧州特許出願公開1010755号明細書等に記載されている。以下、細菌にL-アミノ酸生産能を付与する方法、及びL-アミノ酸生産能が付与された細菌について例示する。L-スレオニン生産菌L-スレオニン生産能を有する微生物として好ましいものは、L-スレオニン生合成系酵素の1種又は2種以上の活性が増強された細菌が挙げられる。L-スレオニン生合成系酵素としては、アスパルトキナーゼIIIlysC、アスパルテートセミアルデヒドデヒドロゲナーゼasd、thrオペロンにコードされるアスパルトキナーゼIthrA、ホモセリンキナーゼthrB、スレオニンシンターゼthrC、アスパルテートアミノトランスフェラーゼアスパルテートトランスアミナーゼが挙げられる。カッコ内は、その遺伝子の略記号である以下の記載においても同様。これらの酵素の中では、アスパルテートセミアルデヒドデヒドロゲナーゼ、アスパルトキナーゼI、ホモセリンキナーゼ、アスパルテートアミノトランスフェラーゼ、及びスレオニンシンターゼが特に好ましい。L-スレオニン生合成系遺伝子は、スレオニン分解が抑制されたエシェリヒア属細菌に導入してもよい。スレオニン分解が抑制されたエシェリヒア属細菌としては、例えば、スレオニンデヒドロゲナーゼ活性が欠損したTDH6株特開2001346578号等が挙げられる。L-スレオニン生合成系酵素は、最終産物のL-スレオニンによって酵素活性が抑制される。従って、L-スレオニン生産菌を構築するためには、L-スレオニンによるフィードバック阻害を受けないようにL-スレオニン生合成系遺伝子を改変することが望ましい。また、上記thrA、thrB、thrC遺伝子は、スレオニンオペロンを構成しているが、スレオニンオペロンは、アテニュエーター構造を形成しており、スレオニンオペロンの発現は、培養液中のイソロイシン、スレオニンに阻害を受け、アテニュエーションにより発現が抑制される。この改変は、アテニュエーション領域のリーダー配列あるいは、アテニュエーターを除去することにより達成出来るLynnSPetal1987JMolBiol1945969国際公開第0226993号パンフレット国際公開第2005049808号パンフレット参照。スレオニンオペロンの上流には、固有のプロモーターが存在するが、非天然のプロモーターに置換してもよいし国際公開第9804715号パンフレット参照、スレオニン生合成関与遺伝子の発現がラムダファージのリプレッサーおよびプロモーターにより支配されるようなスレオニンオペロンを構築してもよい。欧州特許第0593792号明細書参照また、L-スレオニンによるフィードバック阻害を受けないように細菌を改変するために、αaminoβhydroxyvalericacidAHVに耐性な菌株を選抜することも可能である。このようにL-スレオニンによるフィドバック阻害を受けないように改変されたスレオニンオペロンは、宿主内でコピー数が上昇しているか、あるいは強力なプロモーターに連結し、発現量が向上していることが好ましい。コピー数の上昇は、プラスミドによる増幅の他、トランスポゾン、Muファージ等でゲノム上にスレオニンオペロンを転移させることによっても達成出来る。L-スレオニン生合成系酵素以外にも、解糖系、TCA回路、呼吸鎖に関する遺伝子や遺伝子の発現を制御する遺伝子、糖の取り込み遺伝子を強化することも好適である。これらのL-スレオニン生産に効果がある遺伝子としては、トランスヒドロナーゼpntAB遺伝子欧州特許733712号明細書、ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼ遺伝子pepC、ホスホエノールピルビン酸シンターゼ遺伝子pps、コリネ型細菌あるいはバチルス属細菌のピルビン酸カルボキシラーゼ遺伝子国際公開第9918228号パンフレット、欧州出願公開第1092776号明細書が挙げられる。また、L-スレオニンに耐性を付与する遺伝子、L-ホモセリンに耐性を付与する遺伝子の発現を強化することや、宿主にL-スレオニン耐性、L-ホモセリン耐性を付与することも好適である。耐性を付与する遺伝子としては、rhtA遺伝子、rhtB遺伝子欧州特許出願公開第0994190号明細書、rhtC遺伝子欧州特許出願公開第1013765号明細書、yfiK、yeaS遺伝子欧州特許出願公開第1016710号明細書が挙げられる。また宿主にL-スレオニン耐性を付与する方法は、欧州特許出願公開第0994190号明細書や、国際公開第9004636号パンフレット記載の方法を参照出来る。L-スレオニン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、EcoliTDH6pVIC40、Ecoli472T23pYN7、EcoliNRRL21593、EcoliFERMBP3756、EcoliFERMBP3519及びFERMBP3520、EcoliMG44214947956、EcoliVL643及びVL2055などのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。TDH6株はthrC遺伝子を欠損し、スクロース資化性であり、また、そのilvA遺伝子がリーキー変異を有する。この株はまた、rhtA遺伝子に、高濃度のスレオニンまたはホモセリンに対する耐性を付与する変異を有する。B3996株は、RSF1010由来ベクターに、変異thrA遺伝子を含むthrABCオペロンを挿入したプラスミドpVIC40を保持する。この変異thrA遺伝子は、スレオニンによるフィードバック阻害が実質的に解除されたアスパルトキナーゼホモセリンデヒドロゲナーゼIをコードする。B3996株は、1987年11月19日、オールユニオンサイエンティフィックセンターオブアンチビオティクスに、受託番号RIA1867で寄託されている。この株は、また、1987年4月7日、ロシアンナショナルコレクションオブインダストリアルマイクロオルガニズムズに、受託番号B3996で寄託されている。EcoliVKPMB5318も、L-スレオニン生産菌又はそれを誘導するための親株として使用できる。B5318株は、イソロイシン非要求性であり、プラスミドpVIC40中のスレオニンオペロンの制御領域が、温度感受性ラムダファージC1リプレッサー及びPRプロモーターにより置換されている。VKPMB5318は、1990年5月3日、ロシアンナショナルコレクションオブインダストリアルマイクロオルガニズムズに、受託番号VKPMB5318で国際寄託されている。エシェリヒアコリのアスパルトキナーゼホモセリンデヒドロゲナーゼIをコードするthrA遺伝子はGenBankAccessionNoU00096で登録されているエシェリヒアコリMG1655株のゲノム配列上の塩基番号337~2799に位置し、GenBankaccessionNoAAC73113にて登録されているタンパク質をコードする遺伝子である。エシェリヒアコリのホモセリンキナーゼをコードするthrB遺伝子はGenBankAccessionNoU00096で登録されているエシェリヒアコリMG1655株のゲノム配列上の塩基番号2801~3733に位置し、GenBankaccessionNoAAC73114にて登録されているタンパク質をコードする遺伝子である。エシェリヒアコリのスレオニンシンターゼをコードするthrC遺伝子はGenBankAccessionNoU00096で登録されているエシェリヒアコリMG1655株のゲノム配列上の塩基番号3734~5020に位置し、GenBankaccessionNoAAC73115にて登録されているタンパク質をコードする遺伝子である。これら3つの遺伝子は、リーダーペプチドをコードするthrL遺伝子の下流に、thrLABCからなるスレオニンオペロンとしてコードされている。スレオニンオペロンの発現を増大させるには、転写に影響するアテニュエーター領域を、好ましくは、オペロンから除去することが有効である。スレオニンによるフィードバック阻害に耐性のアスパルトキナーゼホモセリンデヒドロゲナーゼIをコードする変異thrA遺伝子、ならびに、thrB遺伝子及びthrC遺伝子は、スレオニン生産株EcoliVKPMB3996に存在する周知のプラスミドpVIC40から一つのオペロンとして取得できる。プラスミドpVIC40の詳細は、米国特許第5705371号に記載されている。rhtA遺伝子は、ホモセリン及びスレオニンに耐性を与える遺伝子rhtresistanttothreoninehomoserineとして取得されたGenBankAccessionNoU00096で登録されているエシェリヒアコリMG1655株のゲノム配列上の塩基番号848433~849320相補鎖に位置し、GenBankaccessionNoAAC73900にて登録されているタンパク質をコードする遺伝子である。また、rthAの発現を向上させるrhtA23変異が、ATG開始コドンに対して1位のG→A置換であることが判明している。エシェリヒアコリのasd遺伝子はGenBankAccessionNoU00096で登録されているエシェリヒアコリMG1655株のゲノム配列上の塩基番号3571798~3572901相補鎖に位置し、GenBankaccessionNoAAC76458にて登録されているタンパク質をコードする遺伝子である。遺伝子の塩基配列に基づいて作製されたプライマーを用いるPCRにより得ることができる。他の微生物のasd遺伝子も同様に得ることができる。また、エシェリヒアコリのaspC遺伝子はGenBankAccessionNoU00096で登録されているエシェリヒアコリMG1655株のゲノム配列上の塩基番号983742~984932相補鎖に位置し、GenBankaccessionNoAAC74014にて登録されているタンパク質をコードする遺伝子であり、PCRにより得ることができる。他の微生物のaspC遺伝子も同様に得ることができる。L-リジン生産菌以下、L-リジン生産菌及びその構築方法を例として示す。例えば、L-リジン生産能を有する株としては、L-リジンアナログ耐性株又は代謝制御変異株が挙げられる。L-リジンアナログの例としては、オキサリジン、リジンヒドロキサメート、S-2-アミノエチル-L-システイン以下、AECと略記することがある。、γ-メチルリジン、α-クロロカプロラクタムなどが挙げられるが、これらに限定されない。これらのリジンアナログに対して耐性を有する変異株は、腸内細菌科に属する細菌やコリネ型細菌を通常の人工変異処理に付すことによって得ることができる。L-リジン生産菌として具体的には、エシェリヒアコリAJ11442株FERMBP1543、NRRLB12185;特開昭5618596号公報及び米国特許第4346170号明細書参照、エシェリヒアコリVL611株特開2000189180号公報等が挙げられる。また、エシェリヒアコリのL-リジン生産菌として、WC196株国際公開第9617930号パンフレット参照を用いることも出来る。また、L-リジン生合成系の酵素活性を上昇させることによっても、L-リジン生産菌を構築することが出来る。これらの酵素活性の上昇は、酵素をコードする遺伝子のコピー数を細胞内で上昇させること、または発現調節配列を改変することによって達成できる。遺伝子の発現を増強するための改変は、例えば、遺伝子組換え技術を利用して、細胞中の遺伝子のコピー数を高めることによって行うことができる。例えばgapA遺伝子を含むDNA断片を、宿主細菌で機能するベクター、好ましくはマルチコピー型のベクターと連結して組換えDNAを作製し、これを細菌に導入して形質転換すればよい。遺伝子のコピー数を高めることは、上述のような遺伝子を細菌のゲノムDNA上に多コピー存在させることによっても達成できる。細菌のゲノムDNA上に遺伝子を多コピーで導入するには、ゲノムDNA上に多コピー存在する配列を標的に利用して相同組換えにより行う。ゲノムDNA上に多コピー存在する配列としては、レペティティブDNA、転移因子の端部に存在するインバーテッドリピートが利用できる。また、ゲノム上に存在するgapA遺伝子の横に、それぞれの遺伝子をタンデムに連結させてもよいし、ゲノム上の不要な遺伝子上に重複して組み込んでもよい。これらの遺伝子導入は、温度感受性ベクターを用いて、あるいはintegrationベクターを用いて達成することが出来る。あるいは、特開平2109985号公報に開示されているように、遺伝子をトランスポゾンに搭載してこれを転移させてゲノムDNA上に多コピー導入することも可能である。ゲノム上に遺伝子が転移したことの確認は、遺伝子の一部をプローブとして、サザンハイブリダイゼーションを行うことによって確認出来る。さらに、遺伝子の発現の増強は、上記した遺伝子コピー数の増幅以外に、国際公開0018935号パンフレットに記載した方法で、ゲノムDNA上またはプラスミド上の遺伝子の各々のプロモーター等の発現調節配列を強力なものに置換することや、各遺伝子の-35、-10領域をコンセンサス配列に近づけること、遺伝子の発現を上昇させるようなレギュレーターを増幅すること、又は、遺伝子の発現を低下させるようなレギュレーターを欠失または弱化させることによっても達成される。例えば、lacプロモーター、trpプロモーター、trcプロモーター、tacプロモーター、araBAプロモーター、ラムダファージのPRプロモーター、PLプロモーター、tetプロモーター、T7プロモーター、φ10プロモーター等が強力なプロモーターとして知られている。また、gapA遺伝子のプロモーター領域、SD領域に塩基置換等を導入し、より強力なものに改変することも可能である。プロモーターの強度の評価法および強力なプロモーターの例は、Goldsteinらの論文ProkaryoticpromotersinbiotechnologyBiotechnolAnnuRev19951105128等に記載されている。さらに、リボソーム結合部位RBSと開始コドンとの間のスペーサー、特に開始コドンのすぐ上流の配列における数個のヌクレオチドの置換がmRNAの翻訳効率に非常に影響を及ぼすことが知られており、これらを改変することも可能である。遺伝子のプロモーター等の発現調節領域は、プロモーター検索ベクターやGENETYX等の遺伝子解析ソフトを用いて決定することも出来る。これらのプロモーター置換または改変により遺伝子の発現が強化される。発現調節配列の置換は、例えば温度感受性プラスミドを用いた方法や、Redドリブンインテグレーション法を使用することが出来る。L-リジン生合成系酵素をコードする遺伝子としては、ジヒドロジピコリン酸合成酵素遺伝子dapA、アスパルトキナーゼ遺伝子、ジヒドロジピコリン酸レダクターゼ遺伝子、ジアミノピメリン酸脱炭酸酵素遺伝子、ジアミノピメリン酸デヒドロゲナーゼ遺伝子以上、国際公開第9640934号パンフレット、ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼ遺伝子特開昭6087788号公報、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ遺伝子特公平6102028号公報、ジアミノピメリン酸エピメラーゼ遺伝子特開2003135066号公報、アスパラギン酸セミアルデヒド脱水素酵素遺伝子asd等のジアミノピメリン酸経路の酵素の遺伝子、あるいはホモアコニット酸ヒドラターゼ遺伝子特開2000157276号公報等のアミノアジピン酸経路の酵素等の遺伝子が挙げられる。また、親株は、エネルギー効率に関与する遺伝子、ニコチンアミドヌクレオチドトランスヒドロゲナーゼをコードする遺伝子、L-リジン排出活性を有するタンパク質をコードするybjE遺伝子、グルタミン酸デヒドロゲナーゼをコードする遺伝子、または、これらの任意の組み合わせの遺伝子の発現レベルが増大していてもよい。カッコ内は、それらの遺伝子の略記号である。エシェリヒアコリ由来の野生型ジヒドロジピコリン酸合成酵素はL-リジンによるフィードバック阻害を受けることが知られており、エシェリヒアコリ由来の野生型アスパルトキナーゼはL-リジンによる抑制及びフィードバック阻害を受けることが知られている。したがって、dapA遺伝子及びlysC遺伝子を用いる場合、これらの遺伝子は、L-リジンによるフィードバック阻害を受けない変異型遺伝子であることが好ましい。L-リジンによるフィードバック阻害を受けない変異型ジヒドロジピコリン酸合成酵素をコードするDNAとしては、118位のヒスチジン残基がチロシン残基に置換された配列を有するタンパク質をコードするDNAが挙げられる。また、L-リジンによるフィードバック阻害を受けない変異型アスパルトキナーゼをコードするDNAとしては、352位のスレオニン残基がイソロイシン残基に置換、323位のグリシン残基がアスパラギン残基に置換、318位のメチオニンがイソロイシンに置換された配列を有するAKIIIをコードするDNAが挙げられるこれらの変異体については米国特許第5661012号及び第6040160号明細書参照。変異型DNAはPCRなどによる部位特異的変異法により取得することができる。なお、変異型変異型ジヒドロジピコリン酸合成酵素をコードする変異型dapA及び変異型アスパルトキナーゼをコードする変異型lysCを含むプラスミドとして、広宿主域プラスミドRSFD80、pCAB1、pCABD2が知られている米国特許第6040160号明細書。同プラスミドで形質転換されたエシェリヒアコリJM109株米国特許第6040160号明細書は、AJ12396と命名され、同株は1993年10月28日に通産省工業技術院生命工学工業技術研究所現独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに受託番号FERMP13936として寄託され、1994年11月1日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、FERMBP4859の受託番号のもとで寄託されている。RSFD80は、AJ12396株から、公知の方法によって取得することができる。L-リジン生産において、このような酵素としては、ホモセリンデヒドロゲナーゼ、リジンデカルボキシラーゼcadAldcC、マリックエンザイム等があり、該酵素の活性が低下または欠損した株は国際公開第WO9523864号、第WO9617930号パンフレット、第WO2005010175号パンフレットなどに記載されている。リジンデカルボキシラーゼ活性を低下または欠損させるためには、リジンデカルボキシラーゼをコードするcadA遺伝子とldcC遺伝子の両方の発現を低下させることが好ましい。両遺伝子の発現低下は、WO2006078039号パンフレットに記載の方法に従って行うことができる。これらの酵素活性を低下あるいは欠損させる方法としては、通常の変異処理法又は遺伝子組換え技術によって、ゲノム上の上記酵素の遺伝子に、細胞中の当該酵素の活性が低下または欠損するような変異を導入すればよい。このような変異の導入は、例えば、遺伝子組換えによって、ゲノム上の酵素をコードする遺伝子を欠損させたり、プロモーターやシャインダルガルノSD配列等の発現調節配列を改変したりすることなどによって達成される。また、ゲノム上の酵素をコードする領域にアミノ酸置換ミスセンス変異を導入すること、また終始コドンを導入することナンセンス変異、一~二塩基付加欠失するフレームシフト変異を導入すること、遺伝子の一部分、あるいは全領域を欠失させることによっても達成出来るWangJPetal2006JAgricFoodChem5494059410WinklerWC2005CurrOpinChemBiol9594602QiuZandGoodmanMF1997JBiolChem27286118617WenteSRandSchachmanHK1991JBiolChem2662083320839。また、コード領域の全体又は一部が欠失したような変異酵素をコードする遺伝子を構築し、相同組換えなどによって、該遺伝子でゲノム上の正常遺伝子を置換すること、又はトランスポゾン、IS因子を該遺伝子に導入することによっても酵素活性を低下または欠損させることができる。例えば、上記の酵素の活性を低下または欠損させるような変異を遺伝子組換えにより導入する為には、以下のような方法が用いられる。目的遺伝子の部分配列を改変し、正常に機能する酵素を産生しないようにした変異型遺伝子を作製し、該遺伝子を含むDNAで腸内細菌科に属する細菌に形質転換し、変異型遺伝子とゲノム上の遺伝子で組換えを起こさせることにより、ゲノム上の目的遺伝子を変異型に置換することが出来る。このような相同組換えを利用した遺伝子置換は、Redドリブンインテグレーションと呼ばれる方法DatsenkoKAandWannerBL2000ProcNatlAcadSciUSA9766406645、Redドリブンインテグレーション法とλファージ由来の切り出しシステムChoEHGumportRIGardnerJFJ2002Bacteriol18452005203とを組合わせた方法WO2005010175号参照等の直鎖状DNAを用いる方法や、温度感受性複製起点を含むプラスミドを用いる方法などがある米国特許第6303383号特開平05007491号公報。また、上述のような相同組換えを利用した遺伝子置換による部位特異的変異導入は、宿主上で複製能力を持たないプラスミドを用いても行うことが出来る。好ましいL-リジン生産菌として、エシェリヒアコリWC196ΔcadAΔldcCpCABD2が挙げられるWO2006078039。この菌株は、WC196株より、リジンデカルボキシラーゼをコードするcadA及びldcC遺伝子を破壊し、リジン生合成系遺伝子を含むプラスミドpCABD2米国特許第6040160号を導入することにより構築した株である。WC196株は、EcoliK12に由来するW3110株から取得された株で、352位のスレオニンをイソロイシンに置換することによりL-リジンによるフィードバック阻害が解除されたアスパルトキナーゼIIIをコードする変異型lysC遺伝子米国特許第5661012号でW3110株の染色体上の野生型lysC遺伝子を置き換えた後、AEC耐性を付与することにより育種された米国特許第5827698号。WC196株は、EscherichiacoliAJ13069と命名され、1994年12月6日、工業技術院生命工学工業技術研究所現独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター、〒3058566日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に受託番号FERMP14690として寄託され、1995年9月29日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、受託番号FERMBP5252が付与されている。WC196ΔcadAΔldcC自体も、好ましいL-リジン生産菌である。WC196ΔcadAΔldcCは、AJ110692と命名され、2008年10月7日独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター〒3058566日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に国際寄託され、受託番号FERMBP11027が付与されている。pCABD2は、L-リジンによるフィードバック阻害が解除された変異を有するエシェリヒアコリ由来のジヒドロジピコリン酸合成酵素DDPSをコードする変異型dapA遺伝子と、L-リジンによるフィードバック阻害が解除された変異を有するエシェリヒアコリ由来のアスパルトキナーゼIIIをコードする変異型lysC遺伝子と、エシェリヒアコリ由来のジヒドロジピコリン酸レダクターゼをコードするdapB遺伝子と、ブレビバクテリウムラクトファーメンタム由来ジアミノピメリン酸デヒドロゲナーゼをコードするddh遺伝子を含んでいる国際公開第WO9516042、WO0153459号パンフレット。上記のようなL-リジン生合成に関与する酵素の遺伝子発現を増強する手法、酵素活性を低下させる方法は、その他のL-アミノ酸生合成酵素をコードする遺伝子についても同様に適用することができる。L-リジン生産能を有するコリネ型細菌としては、AEC耐性変異株ブレビバクテリウムラクトファーメンタムAJ11082NRRLB11470株など:特公昭561914号公報、特公昭561915号公報、特公昭5714157号公報、特公昭5714158号公報、特公昭5730474号公報、特公昭5810075号公報、特公昭594993号公報、特公昭6135840号公報、特公昭6224074号公報、特公昭6236673号公報、特公平511958号公報、特公平7112437号公報、特公平7112438号公報参照;その生育にL-ホモセリン等のアミノ酸を必要とする変異株特公昭4828078号公報、特公昭566499号公報参照;AECに耐性を示し、更にL-ロイシン、L-ホモセリン、L-プロリン、L-セリン、L-アルギニン、L-アラニン、L-バリン等のアミノ酸を要求する変異株米国特許第3708395号及び第3825472号明細書参照;DL-αアミノεカプロラクタム、αアミノラウリルラクタム、アスパラギン酸アナログ、スルファ剤、キノイド、Nラウロイルロイシンに耐性を示すL-リジン生産変異株;オキザロ酢酸脱炭酸酵素デカルボキシラーゼまたは呼吸系酵素阻害剤の耐性を示すL-リジン生産変異株特開昭5053588号公報、特開昭5031093号公報、特開昭52102498号公報、特開昭539394号公報、特開昭5386089号公報、特開昭559783号公報、特開昭559759号公報、特開昭5632995号公報、特開昭5639778号公報、特公昭5343591号公報、特公昭531833号公報;イノシトールまたは酢酸を要求するL-リジン生産変異株特開昭559784号公報、特開昭568692号公報;フルオロピルビン酸または34°C以上の温度に対して感受性を示すL-リジン生産変異株特開昭559783号公報、特開昭5386090号公報;エチレングリコールに耐性を示し、L-リジンを生産するブレビバクテリウム属またはコリネバクテリウム属の生産変異株米国特許第4411997号明細書などが挙げられる。L-システイン生産菌L-システイン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、フィードバック阻害耐性のセリンアセチルトランスフェラーゼをコードする異なるcysEアレルで形質転換されたEcoliJM15、細胞に毒性の物質を排出するのに適したタンパク質をコードする過剰発現遺伝子を有するEcoliW3110、システインデスルフォヒドラーゼ活性が低下したEcoli株、cysB遺伝子によりコードされる正のシステインレギュロンの転写制御因子の活性が上昇したEcoliW3110などのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。L-ロイシン生産菌L-ロイシン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、ロイシン耐性のEcoil株またはβ2チエニルアラニン、3ヒドロキシロイシン、4アザロイシン、555トリフルオロロイシンなどのロイシンアナログ耐性のEcoli株、国際公開第9606926号に記載された遺伝子工学的方法で得られたEcoli株、EcoliH9068などのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。本発明に用いる細菌は、L-ロイシン生合成に関与する遺伝子の1種以上の発現が増大されることにより改良されていてもよい。このような遺伝子の例としては、好ましくはL-ロイシンによるフィードバック阻害が解除されたイソプロピルマレートシンターゼをコードする変異leuA遺伝子に代表される、leuABCDオペロンの遺伝子が挙げられる。さらに、本発明に用いる細菌は、細菌の細胞からL-アミノ酸を排出するタンパク質をコードする遺伝子の1種以上の発現が増大されることにより改良されていてもよい。このような遺伝子の例としては、b2682遺伝子及びb2683遺伝子が挙げられる。コリネ型細菌のL-イソロイシン生産菌としては、分岐鎖アミノ酸排出タンパク質をコードするbrnE遺伝子を増幅したコリネ型細菌特開2001169788、L-リジン生産菌とのプロトプラスト融合によりL-イソロイシン生産能を付与したコリネ型細菌特開昭6274293、ホモセリンデヒドロゲナーゼを強化したコリネ型細菌特開昭6291193、スレオニンハイドロキサメート耐性株特開昭62195293、αケトマロン耐性株特開昭6115695、メチルリジン耐性株特開昭6115696が挙げられる。L-ヒスチジン生産菌L-ヒスチジン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、Ecoli24株、Ecoli80株、EcoliNRRLB12116B12121、EcoliH9342及びH9343、EcoliH9341、EcoliAI80pFM201などのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。L-ヒスチジン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、L-ヒスチジン生合成系酵素をコードする遺伝子の1種以上の発現が増大した株も挙げられる。かかる遺伝子の例としては、ATPフォスフォリボシルトランスフェラーゼ遺伝子、フォスフォリボシルAMPサイクロヒドロラーゼ遺伝子、フォスフォリボシルATPピロフォスフォヒドロラーゼ遺伝子、フォスフォリボシルフォルミミノ5アミノイミダゾールカルボキサミドリボタイドイソメラーゼ遺伝子、アミドトランスフェラーゼ遺伝子、ヒスチジノールフォスフェイトアミノトランスフェラーゼ遺伝子、ヒスチジノールフォスファターゼ遺伝子、ヒスチジノールデヒドロゲナーゼ遺伝子などが挙げられる。hisG及びhisBHAFIにコードされるL-ヒスチジン生合成系酵素はL-ヒスチジンにより阻害されることが知られており、従って、L-ヒスチジン生産能は、ATPフォスフォリボシルトランスフェラーゼ遺伝子にフィードバック阻害への耐性を付与する変異を導入することにより効率的に増大させることができる。L-ヒスチジン生産能を有する株の具体例としては、L-ヒスチジン生合成系酵素をコードするDNAを保持するベクターを導入したEcoliFERMP5038及び5048、アミノ酸輸送の遺伝子を導入したEcoli株、スルファグアニジン、DL124トリアゾール3アラニン及びストレプトマイシンに対する耐性を付与したEcoli80株などが挙げられる。L-グルタミン酸生産菌L-グルタミン酸生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、EcoliVL334thrCなどのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。EcoliVL334は、thrC遺伝子及びilvA遺伝子に変異を有するL-イソロイシン及びL-スレオニン要求性株である。thrC遺伝子の野生型アレルは、野生型EcoliK12株の細胞で増殖したバクテリオファージP1を用いる一般的形質導入法により導入された。この結果、L-イソロイシン要求性のL-グルタミン酸生産菌VL334thrCが得られた。L-グルタミン酸生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、L-グルタミン酸生合成系酵素1種又は2種以上の活性が増強された株が挙げられるが、これらに限定されない。かかる遺伝子の例としては、グルタメートデヒドロゲナーゼgdhA、グルタミンシンテターゼ、グルタメートシンテターゼ、イソシトレートデヒドロゲナーゼ、アコニテートヒドラターゼ、クエン酸シンターゼ、メチルクエン酸シンターゼprpC、フォスフォエノールピルベートカルボシラーゼ、ピルベートデヒドロゲナーゼ、ピルベートキナーゼ、フォスフォエノールピルベートシンターゼ、エノラーゼ、フォスフォグリセロムターゼ、フォスフォグリセレートキナーゼ、グリセルアルデヒド3フォスフェートデヒドロゲナーゼ、トリオースフォスフェートイソメラーゼ、フルクトースビスフォスフェートアルドラーゼ、フォスフォフルクトキナーゼpfkApfkB、グルコースフォスフェートイソメラーゼなどが挙げられる。これらの酵素の中では、グルタメートデヒドロゲナーゼ、クエン酸シンターゼ、フォスフォエノールピルベートカルボキシラーゼ、及びメチルクエン酸シンターゼが好ましい。シトレートシンテターゼ遺伝子、フォスフォエノールピルベートカルボキシラーゼ遺伝子、及び/またはグルタメートデヒドロゲナーゼ遺伝子の発現が増大するように改変された株の例としては、欧州特許出願公開第1078989号、欧州特許出願公開第955368号及び欧州特許出願公開第952221号に開示されたものが挙げられる。L-グルタミン酸生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、L-グルタミン酸の生合成経路から分岐してL-グルタミン酸以外の化合物の合成を触媒する酵素の活性が低下または欠損している株も挙げられる。このような酵素の例としては、イソシトレートリアーゼ、αケトグルタレートデヒドロゲナーゼ、フォスフォトランスアセチラーゼ、アセテートキナーゼ、アセトヒドロキシ酸シンターゼ、アセトラクテートシンターゼ、フォルメートアセチルトランスフェラーゼ、ラクテートデヒドロゲナーゼ、グルタメートデカルボキシラーゼなどが挙げられる。αケトグルタレートデヒドロゲナーゼ活性が欠損した、または、αケトグルタレートデヒドロゲナーゼ活性が低下したエシェリヒア属に属する細菌、及び、それらの取得方法は米国特許第5378616号及び第5573945号に記載されている。具体例としては下記のものが挙げられる。EcoliW3110sucAKmrEcoliAJ12624EcoliAJ12628EcoliAJ12949EcoliW3110sucAKmrは、EcoliW3110のαケトグルタレートデヒドロゲナーゼ遺伝子以下、sucA遺伝子ともいうを破壊することにより得られた株である。この株は、αケトグルタレートデヒドロゲナーゼを完全に欠損している。また、αケトグルタレートデヒドロゲナーゼ活性が低下したコリネ型細菌としては、例えば、以下の株が挙げられる。ブレビバクテリウムラクトファーメンタムL302株特開2006340603号明細書ブレビバクテリウムラクトファーメンタムΔS株国際公開9534672号パンフレットブレビバクテリウムラクトファーメンタムAJ12821ブレビバクテリウムフラバムAJ12822コリネバクテリウムグルタミカムAJ12823コリネバクテリウムグルタミカムL302株特開2006340603号L-グルタミン酸生産菌の他の例としては、エシェリヒア属に属し、アスパラギン酸代謝拮抗物質に耐性を有するものが挙げられる。これらの株は、αケトグルタレートデヒドロゲナーゼを欠損していてもよく、例えば、EcoliAJ13199、さらにL-グルタミン酸分解能が低下したFFRMP12379AJ13138などが挙げられる。パントエアアナナティスのL-グルタミン酸生産菌の例としては、パントエアアナナティスAJ13355株が挙げられる。同株は、静岡県磐田市の土壌から、低pHでL-グルタミン酸及び炭素源を含む培地で増殖できる株として分離された株である。パントエアアナナティスAJ13355は、1998年2月19日に、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター住所〒3058566日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に、受託番号FERMP16644として寄託され、1999年1月11日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、受託番号FERMBP6614が付与されている。尚、同株は、分離された当時はエンテロバクターアグロメランスEnterobacteragglomeransと同定され、エンテロバクターアグロメランスAJ13355として寄託されたが、近年16SrRNAの塩基配列解析などにより、パントエアアナナティスPantoeaananatisに再分類されている。また、パントエアアナナティスのL-グルタミン酸生産菌として、αケトグルタレートデヒドロゲナーゼαKGDH活性が欠損した、または、αKGDH活性が低下したパントエア属に属する細菌が挙げられる。このような株としては、AJ13355株のαKGDHE1サブユニット遺伝子sucAを欠損させたAJ13356、及びAJ13355株から粘液質低生産変異株として選択されたSC17株由来のsucA遺伝子欠損株であるSC17sucAがある。AJ13356は、1998年2月19日、工業技術院生命工学工業技術研究所現独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター、〒3058566日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に受託番号FERMP16645として寄託され、1999年1月11日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、受託番号FERMBP6616が付与されている。AJ13355及びAJ13356は、上記寄託機関にEnterobacteragglomeransとして寄託されているが、本明細書では、Pantoeaananatisとして記載する。また、SC17sucA株は、ブライベートナンバーAJ417が付与され、2004年2月26日に上記の産業技術総合研究所特許生物寄託センターに受託番号FERMBP08646として寄託されている。さらに、パントエアアナナティスのL-グルタミン酸生産菌として、SC17sucARSFCPGpSTVCB株、AJ13601株、NP106株、及びNA1株が挙げられる。SC17sucARSFCPGpSTVCB株は、SC17sucA株に、エシェリヒアコリ由来のクエン酸シンターゼ遺伝子gltA、ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼ遺伝子ppsA、およびグルタメートデヒドロゲナーゼ遺伝子gdhAを含むプラスミドRSFCPG、並びに、ブレビバクテリウムラクトファーメンタム由来のクエン酸シンターゼ遺伝子gltAを含むプラスミドpSTVCBを導入して得た株である。AJ13601株は、このSC17sucARSFCPGpSTVCB株から低pH下で高濃度のL-グルタミン酸に耐性を示す株として選択された株である。また、NP106株は、AJ13601株からプラスミドRSFCPGpSTVCBを脱落させた株である。AJ13601株は、1999年8月18日に、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター〒3058566日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に受託番号FERMP17516として寄託され、2000年7月6日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、受託番号FERMBP7207が付与されている。さらにコリネ型細菌にL-グルタミン酸生産能を付与する方法として、メカノセンシティブチャンネルmechanosensitivechannelをコードするyggB遺伝子を増幅する方法国際公開WO2006070944号、コード領域内に変異を導入した変異型yggB遺伝子を導入する方法を用いることも可能である。yggB遺伝子は、GenBankAccessionNoNC003450で登録されているコリネバクテリウムグルタミカムATCC13032株のゲノム配列上の塩基番号1337692~1336091相補鎖に位置し、NCgl1221とも呼ばれるGenBankaccessionNoNP600492にて登録されている膜タンパク質をコードする遺伝子である。L-グルタミン酸生産能を付与または増強する別の方法として、有機酸アナログや呼吸阻害剤などへの耐性を付与する方法や細胞壁合成阻害剤に対する感受性を付与する方法も挙げられる。例えば、モノフルオロ酢酸耐性を付与する方法特開昭50113209、アデニン耐性またはチミン耐性を付与する方法特開昭57065198、ウレアーゼを弱化させる方法特開昭52038088、マロン酸耐性を付与する方法特開昭52038088、ベンゾピロンまたはナフトキノン類への耐性を付与する方法特開昭561889、HOQNO耐性を付与する方法特開昭56140895、αケトマロン酸耐性を付与する方法特開昭572689、グアニジン耐性を付与する方法特開昭5635981、ペニシリンに対する感受性を付与する方法特開平488994などが挙げられる。このような耐性菌の具体例としては、下記のような菌株が挙げられる。ブレビバクテリウムフラバムAJ3949コリネバクテリウムグルタミカムAJ11628ブレビバクテリウムフラバムAJ11355コリネバクテリウムグルタミカムAJ11368ブレビバクテリウムフラバムAJ11217コリネバクテリウムグルタミカムAJ11218ブレビバクテリウムフラバムAJ11564ブレビバクテリウムフラバムAJ11439コリネバクテリウムグルタミカムH7684ブレビバクテリウムラクトファーメンタムAJ11426FERMP5123;特開平56048890号公報参照コリネバクテリウムグルタミカムAJ11440FERMP5137;特開平56048890号公報参照ブレビバクテリウムラクトファーメンタムAJ11796FERMP6402;特開平58158192号公報参照L-フェニルアラニン生産菌L-フェニルアラニン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、コリスミ酸ムターゼプレフェン酸デヒドロゲナーゼ及びチロシンリプレッサーを欠損したEcoliAJ12739、フィードバック阻害が解除されたコリスミ酸ムターゼプレフェン酸デヒドラターゼをコードする変異型pheA34遺伝子を保持するEcoliHW1089、EcoliMWEC101b、EcoliNRRLB12141NRRLB12145NRRLB12146及びNRRLB12147などのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。また、親株として、フィードバック阻害が解除されたコリスミ酸ムターゼプレフェン酸デヒドラターゼをコードする遺伝子を保持するEcoliK12W3110pPHAB、EcoliK12W3110pPHAD、EcoliK12W3110pPHATerm及びAJ12604と命名されたEcoliK12W3110pBRaroG4pACMABも使用できる。さらに、yedA遺伝子またはyddG遺伝子にコードされるタンパク質の活性が増大したエシェリヒア属に属するL-フェニルアラニン生産菌も使用できる。コリネ型細菌のフェニルアラニン生産菌としては、ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼまたはピルビン酸キナーゼ活性が低下したコリネバクテリウムグルタミカBPS13株及びK78欧州特許公開公報331145号、特開平02303495号、チロシン要求性株特開平05049489等を使用することができる。また、フェニルアラニン生産菌としては、副生物を細胞内に取り込むように改変すること、例えば、L-トリプトファンの取り込み遺伝子tnaBmtrや、L-チロシンの取り込み遺伝子であるtyrPの発現量を向上させることによっても、効率よくL-フェニルアラニンを生産する菌株を取得することができるEP1484410。L-トリプトファン生産菌L-トリプトファン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、変異trpS遺伝子によりコードされるトリプトファニルtRNAシンテターゼが欠損したEcoliJP4735pMU3028及びJP6015pMU91、セリンによるフィードバック阻害を受けないフォスフォグリセリレートデヒドロゲナーゼをコードするserAアレル及びトリプトファンによるフィードバック阻害を受けないアントラニレートシンターゼをコードするtrpEアレルを有するEcoliSV164、トリプトファナーゼが欠損したEcoliAGX17及びAGX6aroP、フォスフォエノールピルビン酸生産能が増大したEcoliAGX17pGX50pACKG4ppsなどのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。yedA遺伝子またはyddG遺伝子にコードされるタンパク質の活性が増大したエシェリヒア属に属するL-トリプトファン生産菌も使用できる。L-トリプトファン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、アントラニレートシンターゼ、フォスフォグリセレートデヒドロゲナーゼ、3デオキシDアラビノヘプツロン酸7リン酸シンターゼ、3デヒドロキネートシンターゼ、シキミ酸デヒドロゲナーゼ、シキミ酸キナーゼ、5エノール酸ピルビルシキミ酸3リン酸シンターゼ、コリスミ酸シンターゼ、プレフェン酸デヒドラターゼ、コリスミ酸ムターゼ及び、トリプトファンシンターゼから選ばれる1種又は2種以上の酵素の活性が増強された株も挙げられる。プレフェン酸デヒドラターゼ及びコリスミ酸ムターゼは、2機能酵素chorismatemutaseprephenatedehydrogenaseとしてpheA遺伝子によってコードされている。これらの酵素の中では、フォスフォグリセレートデヒドロゲナーゼ、3デオキシDアラビノヘプツロン酸7リン酸シンターゼ、3デヒドロキネートシンターゼ、シキミ酸デヒドラターゼ、シキミ酸キナーゼ、5エノール酸ピルビルシキミ酸3リン酸シンターゼ、コリスミ酸シンターゼ、プレフェン酸デヒドラターゼ、コリスミン酸ムターゼプレフェン酸デヒドロゲナーゼが特に好ましい。アントラニレートシンターゼ及びフォスフォグリセレートデヒドロゲナーゼは共にL-トリプトファン及びL-セリンによるフィードバック阻害を受けるので、フィードバック阻害を解除する変異をこれらの酵素に導入してもよい。このような変異を有する株の具体例としては、脱感作型アントラニレートシンターゼを保持するEcoliSV164、及び、フィードバック阻害が解除されたフォスフォグリセレートデヒドロゲナーゼをコードする変異serA遺伝子を含むプラスミドpGH5をEcoliSV164に導入することにより得られた形質転換株が挙げられる。L-トリプトファン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、阻害解除型アントラニレートシンターゼをコードする遺伝子を含むトリプトファンオペロンが導入された株も挙げられる。さらに、トリプトファンオペロン中のトリプトファンシンターゼをコードする遺伝子の発現を増大させることによりL-トリプトファン生産能を付与してもよい。トリプトファンシンターゼは、それぞれtrpA及びtrpB遺伝子によりコードされるα及びβサブユニットからなる。さらに、イソシトレートリアーゼマレートシンターゼオペロンの発現を増大させることによりL-トリプトファン生産能を改良してもよい。コリネ型細菌としてはサルフアグアニジンに耐性株であるコリネバクテリウムグルタミクムAJ12118FERMBP478特許01681002号、トリプトファンオペロンが導入されたコリネ型細菌特開昭63240794号公報、コリネ型細菌由来のシキミ酸キナーゼをコードする遺伝子を導入したコリネ型細菌特開01994749号公報を用いることができる。L-プロリン生産菌L-プロリン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、ilvA遺伝子が欠損し、L-プロリンを生産できるEcoli702ilvAなどのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。本発明に用いる細菌は、L-プロリン生合成に関与する遺伝子の一種以上の発現を増大することにより改良してもよい。L-プロリン生産菌に好ましい遺伝子の例としては、L-プロリンによるフィードバック阻害が解除されたグルタメートキナーゼをコードするproB遺伝子が挙げられる。さらに、本発明に用いる細菌は、細菌の細胞からL-アミノ酸を排出するタンパク質をコードする遺伝子の一種以上の発現が増大することにより改良してもよい。このような遺伝子としては、b2682遺伝子及びb2683遺伝子が挙げられる。L-プロリン生産能を有するエシェリヒア属に属する細菌の例としては、NRRLB12403及びNRRLB12404、VKPMB8012、ドイツ特許第3127361号に記載のプラスミド変異体、BloomFRetalに記載のプラスミド変異体などのEcoli株が挙げられる。L-アルギニン生産菌L-アルギニン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、Ecoli237株、及び、変異Nアセチルグルタメートシンターゼを保持するその誘導株、Ecoli382株、NアセチルグルタメートシンテターゼをコードするargA遺伝子が導入されたアルギニン生産株などのエシェリヒア属に属する株が挙げられるが、これらに限定されない。L-アルギニン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、L-アルギニン生合成系酵素をコードする遺伝子の1種以上の発現が増大した株も挙げられる。かかる遺伝子の例としては、Nアセチルグルタミルフォスフェートレダクターゼ遺伝子、オルニチンアセチルトランスフェラーゼ遺伝子、Nアセチルグルタメートキナーゼ遺伝子、アセチルオルニチントランスアミナーゼ遺伝子、オルニチンカルバモイルトランスフェラーゼ遺伝子、アルギノコハク酸シンテターゼ遺伝子、アルギノコハク酸リアーゼ遺伝子、カルバモイルフォスフェートシンテターゼ遺伝子が挙げられる。L-バリン生産菌L-バリン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、ilvGMEDAオペロンを過剰発現するように改変された株が挙げられるが、これらに限定されない。アテニュエーションに必要なilvGMEDAオペロンの領域を除去し、生産されるL-バリンによりオペロンの発現が減衰しないようにすることが好ましい。さらに、オペロンのilvA遺伝子が破壊され、スレオニンデアミナーゼ活性が減少することが好ましい。L-バリン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、アミノアシルtRNAシンテターゼの変異を有する変異株も挙げられる。例えば、イソロイシンtRNAシンテターゼをコードするileS遺伝子に変異を有するEcoliVL1970が使用できる。EcoliVL1970は、1988年6月24日、ロシアンナショナルコレクションオブインダストリアルマイクロオルガニズムズに、受託番号VKPMB4411で寄託されている。さらに、生育にリポ酸を要求する、及び/または、HATPaseを欠失している変異株を親株として用いることができる。コリネ型細菌のL-バリン生産菌としては、例えば、L-バリン酸生合成に関与する酵素をコードする遺伝子の発現が増強するように改変した菌株を挙げることができる。L-バリン酸生合成に関与する酵素としては、例えば、ilvBNCオペロンによりコードされる酵素、すなわちilvBNによりコードされるアセトヒドロキシ酸シンターゼやivlCによりコードされるイソメロリダクターゼが挙げられる。尚、ilvBNCオペロンは、L-バリン及び又はL-イソロイシン及び又はL-ロイシンによるオペロンの発現調節を受けるので、生成するL-バリンによる発現抑制を解除するためにアテニュエーションを解除することが望ましい。L-バリン生産能を有するコリネ型細菌としては、L-バリン産生を減少させる物質代謝経路に関与する、少なくとも1種の酵素の活性を低下あるいは欠損させることにより行ってもよい。例えば、L-ロイシン合成に関与するスレオニンデヒドラターゼやDパントセナート合成に関与する酵素の活性を低下させることが考えられる国際公開0050624号。L-バリン生産能を付与する別の方法として、アミノ酸アナログなどへの耐性を付与する方法も挙げられる。例えば、L-イソロイシンおよびL-メチオニン要求性,ならびにDリボス,プリンリボヌクレオシドまたはピリミジンリボヌクレオシドに耐性を有し,かつL-バリン生産能を有する変異株FERMP1841、FERMP29、特公昭53025034や、ポリケトイド類に耐性を有する変異株、更には酢酸を唯一の炭素源とする培地でL-バリン耐性を示し、且つグルコースを唯一の炭素源とする培地でピルビン酸アナログに感受性を有する変異株FERMBP3006、FERMBP3007、特許3006929号が挙げられる。L-イソロイシン生産菌L-イソロイシン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、6ジメチルアミノプリンに耐性を有する変異株、チアイソロイシン、イソロイシンヒドロキサメートなどのイソロイシンアナログに耐性を有する変異株、さらにDLエチオニン及び/またはアルギニンヒドロキサメートに耐性を有する変異株が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、スレオニンデアミナーゼ、アセトヒドロキシ酸シンターゼなどのL-イソロイシン生合成に関与するタンパク質をコードする遺伝子で形質転換された組換え株もまた親株として使用できる。コリネ型細菌のL-イソロイシン生産菌としては、分岐鎖アミノ酸排出タンパク質をコードするbrnE遺伝子を増幅したコリネ型細菌特開2001169788、L-リジン生産菌とのプロトプラスト融合によりL-イソロイシン生産能を付与したコリネ型細菌特開昭6274293、ホモセリンデヒドロゲナーゼを強化したコリネ型細菌特開昭6291193、スレオニンハイドロキサメート耐性株特開昭62195293、αケトマロン耐性株特開昭6115695、メチルリジン耐性株特開昭6115696が挙げられる。L-メチオニン生産菌L-メチオニン生産菌又はそれを誘導するための親株の例としては、L-スレオニン要求株、ノルロイシンに耐性を有する変異株が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、メチオニンリプレッサーを欠損した株や、ホモセリントランスサクシニラーゼ、シスタチオニンγシンテースなどのL-メチオニン生合成に関与するタンパク質をコードする遺伝子で形質転換された組換え株もまた親株として使用できる。次に、微生物に核酸生産能を付与する方法と核酸生産菌について例示する。核酸生産能を有する細菌微生物は、上記のような細菌微生物に、例えば、プリンヌクレオシド要求性、又はさらにプリンアナログ等の薬剤に対する耐性を付与することにより、取得することが出来る特公昭38-23099、特公昭54-17033、特公昭55-45199、特公昭57-14160、特公昭57-41915、特公昭59-42895参照。例えば、栄養要求性及び薬剤耐性を持つバチルス属細菌は、NメチルNニトロNニトロソグアニジンNTG、またはEMS等の通常の変異処理に用いられている変異剤による処理によって取得することが出来る。プリンヌクレオシドを生産するバチルス属細菌としては、以下のものが挙げられる。バチルス属に属するイノシン生産株の具体例として、バチルスズブチリスKMBS16株を使用することができる。同菌株は、プリンオペロンリプレッサーをコードするpurR遺伝子の欠損purRspc、スクシニル-AMPシンターゼをコードするpurA遺伝子の欠損purAerm、およびプリンヌクレオシドホスホリラーゼをコードするdeoD遺伝子の欠損deoDkanが導入された、既知のバチルスズブチリスtrpC2株168Marburgの誘導体である特開2004242610、US2004166575A1。また、バチルスズブチリス菌株AJ3772FERMP2555特開昭62014794等を使用することもできる。グアノシン生産能を有するバチルス属細菌としては、IMP脱水素酵素の活性が上昇したバチルス属細菌特開平358787、プリンアナログ耐性又はデコイニン耐性遺伝子が組み込まれているベクターをアデニン要求性変異株に導入したバチルス属細菌特公平428357等が挙げられる。またプリンヌクレオチドを生産するバチルス属細菌としては、以下のものが挙げられる。イノシン酸生産菌としては、バチルスズブチリスのフォスファターゼ活性が弱化したイノシン生産株が報告されているUchidaKetalAgrBiolChem196125804805、FujimotoMUchidaKAgrBiolChem196529249259。グアニル酸生産菌としては、アデニン要求性を有しさらにデコイニンまたはメチオニンスルフォキシドに耐性を有し、かつ5-グアニル酸グアノシン-5-モノリン酸、以下GMPともいう生産能を有するバチルス属の変異株が挙げられる特公昭56-12438号公報。また、キサンチル酸生産菌は、コリネバクテリウムアンモニアゲネスCorynebacteriumammmoniagenesを中心とするコリネ型細菌の育種に用いたられる方法を使用して構築することができる。例えば、PRPPamidotransferaseを強化株特開平8168383、脂肪族アミノ酸耐性株特開平4262790、デヒドロプロリン耐性株韓国特許公開公報200356490を取得することによって、キサンチル酸生産菌を構築することができる。また、プリン系物質生産能を有するバチルス属細菌を育種する方法として、以下の方法が挙げられる。プリンヌクレオシド及びプリンヌクレオチドに共通のプリン生合成に関与する酵素、すなわちプリン生合成酵素の細胞内での活性を上昇させる方法が挙げられる。該酵素の細胞内での活性は、バチルス属細菌の非改変株、例えば野生型のバチルス属細菌よりも上昇させることが好ましい。活性が上昇するとは、例えば、細胞当たりの酵素分子の数が増加した場合や、酵素分子当たりの比活性が上昇した場合などが該当する。例えば、前記酵素の遺伝子の発現量を上昇させることにより活性を上昇させることができる。前記プリン生合成に関与する酵素としては、たとえばホスホリボシルピロリン酸アミドトランスフェラーゼ、ホスホリボシルピロリン酸シンセターゼPRPPsynthetaseEC2761などが挙げられるペントースリン酸系に取り込まれたグルコースなどの糖源が代謝により生成したカタボライトの一部は、リブロース-5-リン酸を経由して、リボース-5-リン酸となる。生合成されたリボース-5-リン酸より、プリンヌクレオシド、ヒスチジン、およびトリプトファン生合成の不可欠な前駆物質であるホスホリボシルピロリン酸PRPPが生成される。具体的には、リボース-5-リン酸は、ホスホリボシルピロリン酸シンセターゼによりPRPPに転換される。したがって、ホスホリボシルピロリン酸シンセターゼの活性が上昇するように改変することにより、バチルス属細菌にプリン系物質生産能を付与又は増強することができる。ホスホリボシルピロリン酸シンセターゼの活性が上昇するとは、ホスホリボシルピロリン酸シンセターゼの活性が野生株又は親株等の非改変株に対して増加していることをいう。ホスホリボシルピロリン酸シンセターゼの活性は例えば、Switzer等の方法MethodsEnzymol197851311、Roth等の方法MethodsEnzymol1978511217により、測定することができる。ホスホリボシルピロリン酸シンセターゼの活性が上昇したバチルス属細菌は、例えば、特開2004242610号公報に記載の方法と同様にして、プラスミドを用いる方法や染色体上に組込む方法などにより、ホスホリボシルピロリン酸シンセターゼをコードする遺伝子をバチルス属細菌で高発現させることにより作製することができる。一方、プリンヌクレオシド、ヒスチジン、およびトリプトファン生合成に不可欠な前駆物質であるPRPPが生成されると、その一部は、プリン生合成に関与する酵素群によりプリンヌクレオチド、プリンヌクレオシドへと変換される。そのような酵素群をコードする遺伝子としては、バチルスズブチリスのプリンオペロン、具体的にはpurEKBpurCQLFpurMNHpurDオペロンの遺伝子EbboleDJandZalkinHJBiolChem198726217827487現在では、purEKBCSQLFMNHDとも呼ばれる:BacillussubtilisandItsClosestRelativesEditorinChiefALSonensheinASMPressWashingtonDC2002。GenBankAccessionNoNC000964、およびエシェリヒアコリのpurレギュロンの遺伝子EscherichiaandSalmonellaSecondEditionEditorinChiefFCNeidhardtASMPressWashingtonDC1996が例示される。したがって、これらの遺伝子の発現を増強することにより、プリン系物質生産能を付与又は増強することもできる。なお、本発明に用いることが出来るプリンオペロン遺伝子はこれらのものには限定されず、他の微生物や動植物由来の遺伝子も利用することも出来る。プリンオペロンの発現量を増大させる方法としては、プラスミドを用いる方法や染色体上に組込む方法などにより、プリンオペロン遺伝子をバチルス属細菌で高発現させる方法が挙げられる。プリンオペロンの発現量を増大させる第2の方法として、プリンオペロン固有のプロモーターをより強力なプロモーターに置換することや、固有のプロモーターの35、10領域をコンセンサス配列に置換することが挙げられる。例えば、バチルスズブチリスBsubtilis168Marburg株ATCC6051では、プリンオペロンの35配列はコンセンサス配列TTGACAであるが、10配列はTAAGATであり、コンセンサス配列TATAATとは異なっているEbboleDJandHZaliknJBiolChem198726282748287。したがって、10配列TAAGATをコンセンサス配列にすること、あるいはコンセンサス配列に近づけ、TATAAT、またはTATGAT、もしくはTAAAATとなるように改変することで、プリンオペロンの転写活性を上昇させることができる。なお、プロモーター配列の置換は、下記の遺伝子置換と同様の方法で行うことが出来る。プリンオペロンの発現量を増大させる第3の方法として、プリンオペロンのリプレッサーの発現量を低下させる方法も挙げられるUSP6284495号。プリンオペロンのリプレッサーの発現とは、プリンオペロン遺伝子の転写、及び転写産物の翻訳の両方を含む。また、発現量を低下させるとは、発現量が、非改変株、例えば野生型のバチルス属細菌における発現量よりも低いこと、及び、発現が実質的に消失していることを含む。プリンペオペロンのリプレッサープリンリプレッサーの発現量を低下させるためには、例えば、バチルス属細菌を紫外線照射またはNTGもしくはEMS等の通常変異処理に用いられている変異剤によって処理し、プリンリプレッサーの発現量が低下した変異株を選択する方法を採用することができる。また、プリンリプレッサーの発現量が低下したバチルス属細菌は、変異処理の他に、例えば、遺伝子組換え法を用いた相同組換え法ExperimentsinMolecularGeneticsColdSpringHarborLaboratorypressMatsuyamaSandMizushimaSJBacteriol198516211961202により、染色体上のプリンリプレッサーをコードする遺伝子purR;GenBankAccessionNC000964コード領域は塩基番号54439~55293を、正常に機能しない遺伝子以下、破壊型遺伝子ということがあるで置換することによって得ることができる。さらに、プリン系物質の細胞内への取り込みを弱化することによっても、プリン系物質生産能を強化することができる。例えば、プリンヌクレオシドの細胞内へ取り込みは、プリンヌクレオシドの細胞内への取り込みに関与する反応を遮断することによって弱化することができる。上記プリンヌクレオシドの細胞内への取り込みに関与する反応は、たとえばヌクレオシドパーミアーゼに触媒される反応である。さらに、プリンヌクレオシドを製造する場合には、プリンヌクレオシド生産能を増強させるためにプリン系物質を分解する酵素の活性を低下させてもよい。このような酵素として、例えば、プリンヌクレオシドホスホリラーゼが挙げられる。PRPPから、プリン生合成に関与する酵素群により生合成されたプリンヌクレオチドは、脱リン酸化されて、プリンヌクレオシドに変換される。プリンヌクレオシドを効率的に蓄積せしめるためには、プリンヌクレオシドを更に分解してヒポキサンチン等とするプリンヌクレオシドホスホリラーゼの活性を低下させることが好ましい。すなわち、イノシンをはじめとするプリンヌクレオシドを基質とするプリンヌクレオシドホスホリラーゼを弱化、あるいは欠損させるように改変することが望ましい。プリンヌクレオシドホスホリラーゼ活性の低下は、具体的には、バチルス属細菌でプリンヌクレオシドホスホリラーゼをコードするdeoD遺伝子とpupG遺伝子を破壊することによって達成することができる。本発明のバチルス属細菌は、上記のようなdeoD遺伝子とpupG遺伝子を単独、または同時に破壊するように改変されたものであってもよい。deoD遺伝子、pupG遺伝子は、例えばバチルス属由来の遺伝子deoDGenBankAccessionNoNC000964pupGGenBankAccessionNoNC000964が利用できる。また、プリン系物質生産能を増強させるために、サクシニル-AMPシンターゼの活性を低下させてもよい。サクシニル-AMPシンターゼをコードする遺伝子としては、purA遺伝子が挙げられる。purA遺伝子としては、例えば、GenBankAccessionNoNC000964コード領域は相補鎖の塩基番号41534604155749で登録されている塩基配列を有するものが挙げられる。さらに、プリン系物質生産能を増強させるために、イノシンモノリン酸IMP脱水素酵素の活性を低下させてもよい。IMP脱水素酵素をコードする遺伝子としては、guaB遺伝子が挙げられる。guaB遺伝子としては、例えば、GenBankAccessionNoNC000964で登録されている塩基配列を有するものが挙げられる。また、プリン系物質生産能を増強させる方法として、プリン系物質を排出する活性を有するタンパク質をコードする遺伝子を増幅することが考えられる。このような遺伝子が増幅された細菌としては、例えば、rhtA遺伝子を増幅したバチルス属細菌が挙げられる特開2003219876。遺伝子組換えにより、上記のL-アミノ酸生産菌を育種する場合、使用する遺伝子は、上述した遺伝子情報を持つ遺伝子や、公知の配列を有する遺伝子に限られず、保存的バリアント、すなわちコードされるタンパク質の機能が損なわれない限り、その遺伝子のホモログや人為的な改変体等、保存的変異を有する遺伝子も使用することができる。すなわち、公知のタンパク質のアミノ酸配列において、1若しくは数個の位置での1若しくは数個のアミノ酸の置換、欠失、挿入又は付加等を含む配列を有するタンパク質をコードする遺伝子であってもよい。保存的バリアント等については、前記のキシラナーゼ及びそれをコードする遺伝子について記載したのと同様である。<5-2>目的物質の製造における微生物の培養本発明の方法により製造された糖液又はその分画物以下、併せて糖と記載することがある。を炭素源として、目的物質生産能を有する微生物を培養し、培地又は微生物細胞から目的物質を採取する。炭素源として上記糖を用いること以外は、通常の発酵法と同様の方法を用いることができる。本発明の方法は、回分培養batchculture、流加培養Fedbatchculture、連続培養法continuouscultureのいずれも用いることができ、本発明により得られる糖は、初発培地に含まれていてもよいし、流加培地に含まれていてもよいし、これらの両方に含まれていてもよい。流加培養とは、培養容器に培地を連続的または間欠的に流加し、培養終了時までその培地を容器から抜き取らない培養方法をいう。また連続培養とは、培養容器に培地を連続的または間欠的に流加するとともに容器から培地通常、流加する培地と等量を抜き取る方法をいう。また、初発培地とは、流加培養または連続培養において流加培地を流加させる前の回分培養batch培養に用いる培地培養開始時の培地のことを意味し、流加培地とは流加培養または連続培養を行う際に発酵槽に供給する培地を意味する。また、回分培養batch培養とは、一回毎に新たな培地を用意し、そこへ株を植えて収穫まで培地を加えない方法を意味する。糖は、目的物質を製造するのに適した濃度であればどのような濃度で用いてもかまわない。培地中の糖濃度としては、好ましくは005wv~50wv程度、より好ましくは01wv~40wv程度、特に好ましくは02wv~20wv程度培地に含有させる。本発明の方法により製造される糖は、単独で用いることも出来るし、他の方法で得られたグルコース、あるいは、フラクトース、スクロース、廃糖蜜、澱粉加水分解物などの他の炭素源と組み合わせて用いることも出来る。この場合、本発明の方法により得られる糖と他の炭素源は任意の比率で混合することが可能である。他の炭素源として好ましいのは、フラクトース、スクロース、ラクトース、ガラクトース、廃糖蜜、澱粉加水分解物や、他のバイオマスの加水分解により得られた糖液などの糖類、エタノール、グリセロールなどのアルコール類、フマール酸、クエン酸、コハク酸等の有機酸類である。使用する培地は、炭素源として本発明の方法により得られる糖を用いる以外は、微生物を用いたL-アミノ酸の発酵生産において従来より用いられてきた培地を用いることができる。すなわち、炭素源に加えて、窒素源、無機イオン及び必要に応じその他の有機成分を含有する通常の培地を用いることができる。ここで、窒素源としては、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム、酢酸アンモニウム、ウレア等の無機アンモニウム塩または硝酸塩、大豆加水分解物などの有機窒素、アンモニアガス、アンモニア水等を用いることができる。また、ペプトン、酵母エキス、肉エキス、麦芽エキス、コーンスティープリカー、大豆加水分解物等も利用できる。培地中にこれらの窒素源が1種のみ含まれていてもよいし、2種以上含んでいてもよい。これらの窒素源は、初発培地にも流加培地にも用いることができる。また、初発培地、流加培地とも、同じ窒素源を用いてもよいし、流加培地の窒素源を初発培地と異なるものを使用してもよい。培地には、炭素源、窒素源の他にリン酸源、硫黄源が含まれていることが好ましい。リン酸源としては、リン酸2水素カリウム、リン酸水素2カリウム、ピロリン酸などのリン酸ポリマー等が利用出来る。また、硫黄源とは、硫黄原子を含んでいるものであればいずれでもよいが、硫酸塩、チオ硫酸塩、亜硫酸塩等の硫酸塩、システイン、シスチン、グルタチオン等の含硫アミノ酸が望ましく、なかでも硫酸アンモニウムが望ましい。また、培地には、上記成分の他に、増殖促進因子増殖促進効果を持つ栄養素が含まれていてもよい。増殖促進因子とは、微量金属類、アミノ酸、ビタミン、核酸、更にこれらのものを含有するペプトン、カザミノ酸、酵母エキス、大豆たん白分解物等が使用できる。微量金属類としては、鉄、マンガン、マグネシウム、カルシウム等が挙げられ、ビタミンとしては、ビタミンB1、ビタミンB2、ビタミンB6、ニコチン酸、ニコチン酸アミド、ビタミンB12等が挙げられる。これらの増殖促進因子は初発培地に含まれていてもよいし、流加培地に含まれていてもよい。また、培地には、生育にアミノ酸などを要求する栄養要求性変異株を使用する場合には要求される栄養素を補添することが好ましい。特に本発明に用いることができるL-リジン生産菌は、後述のようにL-リジン生合成経路が強化されており、L-リジン分解能が弱化されているものが多いので、L-スレオニン、L-ホモセリン、L-イソロイシン、L-メチオニンから選ばれる1種又は2種以上を添加することが望ましい。初発培地と流加培地は、培地組成が同じであってもよく、異なっていてもよい。また、初発培地と流加培地は、硫黄濃度が同じであってもよく、異なっていてもよい。さらには、流加培地の流加が多段階で行われる場合、各々の流加培地の組成は同じであってもよく、異なっていてもよい。なお、本発明で用いる培地は、炭素源、窒素源、及び必要に応じてその他の成分を含む培地であれば、天然培地、合成培地のいずれでもよい。培養は好気的条件下で1~7日間実施するのがよく、培養温度は20°C~45°C、好ましくは24°C~45°C、特に好ましくは33~42°Cで培養することが好ましい。培養は通気培養が好ましく、酸素濃度は、飽和濃度に対して5~50に、望ましくは10程度に調節して行うことが好ましい。また、培養中のpHは5~9が好ましい。尚、pH調整には無機あるいは有機の酸性あるいはアルカリ性物質、例えば炭酸カルシウム、アンモニアガス、アンモニア水等を使用することができる。上記のような条件下で、好ましくは10時間~120時間程度培養することにより、培養液中に著量の目的物質が蓄積される。また、L-リジン等の塩基性アミノ酸を製造する際には、培養中のpHが65~90、培養終了時の培地のpHが72~90となるように制御し、発酵中の発酵槽内圧力が正となるように制御する、あるいは、炭酸ガスもしくは炭酸ガスを含む混合ガスを培地に供給して、培地中の重炭酸イオン及び/又は炭酸イオンが少なくとも2gL以上存在する培養期があるようにし、前記重炭酸イオン及び/又は炭酸イオンを塩基性アミノ酸を主とするカチオンのカウンタイオンとする方法で発酵し、目的の塩基性アミノ酸を回収する方法で製造を行ってもよい特開200265287、US20020025564A、EP1813677A。また、L-グルタミン酸発酵においては、L-グルタミン酸が析出するような条件に調整された液体培地を用いて、培地中にL-グルタミン酸を析出させながら培養を行うことも出来る。L-グルタミン酸が析出する条件としては、例えば、pH50~40、好ましくはpH45~40、さらに好ましくはpH43~40、特に好ましくはpH40を挙げることができる。欧州特許出願公開第1078989号明細書培養液からの目的物質の回収は通常イオン交換樹脂法、沈殿法その他の公知の方法を組み合わせることにより実施できる。なお、菌体内に目的物質が蓄積する場合には、例えば菌体を超音波などにより破砕し、遠心分離によって菌体を除去して得られる上清からイオン交換樹脂法などによって、目的物質を回収することができる。目的物質がアミノ酸又は核酸の場合は、回収される目的物質は、フリー体であっても、硫酸塩、塩酸塩、炭酸塩、アンモニウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩を含む塩であってもよい。また、本発明において採取される目的物質は、目的物質以外に微生物菌体、培地成分、水分、及び微生物の代謝副産物を含んでいてもよい。採取された目的物質の純度は、50以上、好ましくは85以上、特に好ましくは95以上であるUS5431933JP1214636BUS4956471US4777051US4946654US5840358US6238714US20050025878。以下、実施例により、本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の技術的範囲はこの実施例により限定されるものではない。実施例1メタゲノムクローニングによるキシラナーゼ遺伝子の単離1DNAの単離種子島の畜産農家が作製したサトウキビバガスを主体とした堆肥を採集した。このバガス堆肥は、サトウキビバガスと牛糞便を混合し、数ヶ月間発酵させたものである。堆肥は屋外のコンクリート床で適宜作製されており、発酵期間が異なるいくつかのバガス堆肥があった。発酵期間の異なるいくつかのバガス堆肥における、バガスの分解状況を目視で観察したところ、発酵期間約6ヶ月のバガス堆肥では、目視ではバガス片が確認できないほどバガスの分解が進んでいたことから、このバガス堆肥をメタゲノムライブラリー構築のための遺伝子源として採取した。グラム陰性菌としてEcoliW3110株、グラム陽性菌としてラクトバチルスムリヌスLactobacillusmurinusラット盲腸由来分離株、酵母としてサッカロマイセスカールスベルゲンシスSaccharomycescarlsbergensisCBS1513株、糸状菌としてアスペルギルスニガーAspergillusnigerJCM2261株の菌体及びバガス堆肥を用いて、DNA抽出方法の検討を行った。DNA抽出方法としては、BloodCellcultureDNAMidikit、又は、UltraCleanMegaSoilDNAIsolationKitMOBIOLaboratories。UltraCleanは同社の商標を用いた方法、及び凍結融解法を検討した。前記キットを用いたDNA抽出は、各々のキットに添付されたプロトコールに従って行った。但し、UltraCleanMegaSoilDNAIsolationKitを用いた場合は、ビーズ破砕処理前に500μlの100mgml塩化リゾチーム溶液ナカライテスク株式会社及び220μlの3mgmlNアセチルムラミダーゼMutanolysinfromStreptomycesglobisporusATCC21553溶液を添加し、37°Cで30分間の溶菌前処理を行った以外は、プロトコールに従ってDNA抽出を行った。また、プロトコールには、溶菌操作時に激しく攪拌する手法とゆっくり震盪する手法が記載されていたため、どちらの手法も検討した。凍結融解法は以下の方法で行った。菌体またはサンプルのTEバッファー10mMTrisHCl1mMEDTApH80懸濁液に塩化リゾチームナカライテスク及びドデシル硫酸ナトリウムをそれぞれ終濃度5mgml及び50mgmlとなるように添加して37°Cで1時間反応させた後、反応液の入ったプラスチックチューブを80°Cフリーザーであらかじめ冷却しておいたエタノールに浸して80°Cフリーザー中に30分間置き、その後65°Cに設定したウォーターバスに30分間浸すことによる凍結融解を3回繰り返した。凍結融解後、プロテアーゼKQIAGENを終濃度1mgmlとなるように添加し、60°Cで1時間反応させた。その後、反応液と等量のTE飽和フェノール:クロロホルム:イソアミルアルコール25241を添加し、30分間ゆっくりと混合した後に、遠心6000×g、20分して上清を回収する操作を3回繰り返した。続いて、回収した上清と等量のクロロホルムイソアミルアルコール241を添加し、20分間ゆっくりと混合した後に、遠心6000×g、20分して上清を回収した。回収した上清に終濃度03Mとなるように酢酸ナトリウムナカライテスク溶液を添加し、上清の25倍量のあらかじめ冷却したエタノールを添加してゆっくり混合した後に、遠心9400×g、30分上清を除去して、DNA沈殿物を回収した。回収したDNAにあらかじめ冷却しておいた70エタノールを添加し、よく混合した後に、遠心9400×g、30分して上清を除去して、DNA沈殿物を洗浄した。沈殿物を室温で風乾後にTE溶液に溶解させた。抽出した全DNA溶液をパルスフィールドゲル電気泳動に供し、泳動終了後に20kbp近辺のDNA断片を含むゲルを切り出した。パルスフィールドゲル電気泳動には、CHEFDRIIISystemBioRadLaboratoriesIncを使用し、1アガロースゲルLonzaRocklandInc、SeakemGTGagaroseを用い、05×TBEバッファー中で、バッファー温度14°C、Angle120°、Switchtime130秒、Voltage6Vcmの条件で電気泳動を行った。BloodCellcultureDNAMidikitによるDNA抽出は、他の手法と比較してDNA抽出効率が低かった。また、凍結融解法ではグラム陰性菌が他の微生物と比較して著しくDNA抽出効率が高く、サンプルに存在する微生物のDNAを偏りなく抽出することが困難であると判断した。UltraCleanMegaSoilDNAIsolationKitを使用した場合には、微生物種によるDNA抽出効果のばらつきは比較的小さく、グラム陰性菌を除く他の微生物種及びバガス堆肥からのDNA抽出効率は凍結融解法とほぼ同等であった。また、バガス堆肥からのDNA抽出において、溶菌操作時に激しく攪拌した場合には、抽出したDNAが断片化し、好ましいサイズのDNA断片2040kbpが得られなかったが、ゆっくり震盪した場合には、抽出したDNAに断片化は認められず、好ましいサイズのDNA断片が得られたため、この方法をDNA抽出法として用いることとした。メタゲノムライブラリー構築のため、バガス堆肥10gからUltraCleanMegaSoilDNAIsolationKitを用い、前述の方法でDNAを抽出することにより、8mlのDNA抽出液を得た。DNA抽出液に032ml5MNaCl溶液及び166mlエタノールを添加してエタノール沈殿を行い、風乾後に02mlの10mMTEバッファーpH80に再溶解することでDNAの濃縮を行い、20°Cで保存した。2DNAの精製及びDNAライブラリーの構築バガスコンポストから抽出したDNA溶液中に混入していると推測される酵素反応阻害物質の影響を検討するため、16srRNA遺伝子のコンセンサス配列プライマーセットJCM27f配列番号28、及びJCM1492R配列番号29を用いたPCR反応96°C10秒、96°C30秒、50°C30秒、72°C2分を30サイクル、72°C5分30秒を行った。PCR反応にはExTaqDNAポリメラーゼTAKARAを用い、H2O229μl、10×バッファー3μl、dNTPs24μl、ExTaqDNAポリメラーゼ02μl、20pmolμlの各プライマー05μl、鋳型DNA溶液05μl、総量30μlとなる反応液組成でPCR反応を行った。PCR反応の結果、16SrRNA遺伝子のPCR産物は得られなかったことから、混入している酵素反応阻害物質がライブラリー構築にも影響することが懸念された。そこでDNAライブラリー構築の操作における種々の酵素反応阻害物質を除去することを目的として、DNAの電気泳動と泳動後ゲルからのDNA回収を行った。バガス堆肥から単離した全DNA溶液をパルスフィールドゲル電気泳動に供し、泳動終了後に20kbp近辺のDNA断片を含むゲルを切り出した。パルスフィールドゲル電気泳動には、CHEFDRIIISystemBioRadLaboratoriesIncを使用し、1アガロースゲルLonzaRocklandInc、SeakemGTGagaroseを用い、05×TBEバッファー中で、バッファー温度14°C、Angle120°、Switchtime130秒、Voltage6Vcmの条件で電気移動を行った。切り出したゲル片を、20ml025×TBEバッファーを満たした透析チューブフナコシ株式会社、スペクトラ/ポアCE透析用チューブに入れ、025×TBEバッファーを満たしたミニゲル電気泳動槽中で電圧をかけることで、ゲルから透析膜内の025×TBEバッファー中にDNA断片を回収した。DNA断片を含む025×TBEバッファーを回収し、20mlフェノールクロロホルム溶液[TE飽和フェノール:クロロホルム:イソアミルアルコール=25241]を添加し30分間ゆっくり浸透した後、遠心9400×g、20分して上清を回収した。回収した上清に20mlクロロホルム溶液[クロロホルム:イソアミルアルコール=241]を添加して、30分間ゆっくり浸透した後、遠心9400×g、20分して、再度上清を回収した。回収した上清に19ml3M酢酸ナトリウムと152mlのイソプロパノールを添加してアルコール沈殿を行い、DNA断片を回収した。回収したDNAを鋳型として、前記と同様の方法により16srRNA遺伝子のPCRを行った結果、増幅産物が得られ、酵素反応阻害物質の除去を確認した。回収したDNAを鋳型として、CopyControlFosmidLibraryProductionKitEPICENTREBiotechnologies。CopyControlは同社の商標を用い、キットに付属のプロトコールに従って、回収したDNA断片のバガス堆肥DNAライブラリーを構築し、終濃度20グリセロール溶液として80°Cで保存した。3発現スクリーニングキシランの分解活性を指標に目的遺伝子のスクリーニングを行った。上記のバガス堆肥DNAライブラリーを有するEcoliを、125μgmlのクロラムフェニコールを添加したLB寒天培地tryptone100gL、Bactoyeastextract50gL、NaCl100gL、寒天20gL以下、LBcm寒天培地と記載するに塗布し、37°Cで一晩培養した後、出現したコロニーをナイロンメンブレンAmersham、HybribondNmembraneを使って、06キシラン含有のLBcm寒天培地にコピーし、37°Cで一晩培養した。コロニーが出現したことを確認した後、寒天培地に300μlの10倍希釈したInductionsolutionCopyControlTMFosmidLibraryProductionKitに含まれるを添加し、再度37°Cで1週間培養を行いながら、寒天培地上のキシラン分解によるハロー形成の有無を観察し、ハロー形成を確認できたコロニーから順次釣菌を行った。釣菌したEcoliクローンは純化後に、06キシラン含有のLBcm寒天培地におけるハロー形成を確認した。4キシラナーゼ遺伝子の特定キシラン分解活性を発揮するバガス堆肥フォスミドを有するEcoli株から、QIAGENPlasmidKitQIAGENGmbHを用いてフォスミドベクターを抽出した。抽出したフォスミドベクターを、BamHI、HindIII、KpnI、SalI、又は、Sau3AIタカラバイオ株式会社により、それぞれの酵素に付属のプロトコールに従って消化した後に、消化断片をpUC18ベクタータカラバイオ株式会社にサブクローニングし、06キシラン及び100μgmlアンピシリンを含有するLB寒天培地で、キシラン分解を示すEcoliクローンをスクリーニングした。キシラン分解を示すクローンからプラスミドを調製し、全塩基配列決定をタカラバイオ株式会社に委託した。決定した全塩基配列情報から、Genetyxversion612GENETYXCORPORATIONによりオープンリーディングフレームを見出し、アミノ酸配列に翻訳した後に、タンパク質データベースによる相同性検索を行うことにより、キシラナーゼをコードすると推定される8種類の塩基配列配列番号19、21、及び23を含むを決定した。これらの翻訳アミノ酸配列と一致する既知アミノ酸配列は存在せず、新規のキシラナーゼ遺伝子配列であると考えられた。これら翻訳アミノ酸配列間の相同性、及びこれらのアミノ酸配列と既知配列との相同性を表1に示す。キシラナーゼをコードすると推定される8種類の塩基配列をXyn101、Xyn102、Xyn111配列番号19、Xyn112配列番号21、Xyn113、Xyn114、Xyn115配列番号23、Xyn116と命名した。Xyn111、Xyn112、及びXyn115のキシラナーゼを発現するクローンEcoliJM109Xyn111、EcoliJM109Xyn112、及びEcoliJM109Xyn115は、各々AJ110764、AJ110765、及びAJ110769と命名された。AJ110764及びAJ110765は平成22年1月29日に、AJ110769は平成22年3月11日に、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター〒3058566日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に寄託され、各々受託番号FERMP21897、FERMP21898、及びFERMP21939が付与され、2011年1月25日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、各々FERMBP11325、FERMBP11326、及びFERMBP11327の受託番号が付与されている。5キシラナーゼ遺伝子の大腸菌TAクローニング上記のように決定したキシラナーゼ遺伝子配列に基づき、当該ORFのDNA領域を増幅するDNAプライマーを作製し、サブクローンDNAの希釈液をテンプレートとしてKODplusver2TOYOBOCOLTDの標準プロトコールに従ってPCRを行った。Xyn111配列番号19、Xyn112配列番号21、及びXyn115配列番号23のDNA領域を増幅するDNAプライマーを配列番号1~6に記載する。PCR産物はアガロースゲル電気泳動を行い、予想される分子量のバンドを切り出し、QIAEXIIGelExtractionKitQIAGENGmbHの標準プロトコールに従って精製した。TaKaRaExTaqタカラバイオ株式会社を用い、精製したPCR産物にdA付加し、pGEMTEasyvectorPromegaCorporationの標準プロトコールに従い、T4ライゲースによるライゲーションを行った。ライゲーション反応は4°Cで16時間とした。得られたライゲーション混液5μLを用い、CompetenthighJM109TOYOBOCOLTDを常法に従い形質転換した。得られた形質転換体を純化し、06キシランと50μgmlのアンピシリンを含有するLB寒天培地上でのハロー形成を検討したところ、Xyn113及びXyn116を除く6つのORFをクローニングした形質転換体でハロー形成を確認した。Xyn113及びXyn116を見出したサブクローンDNA断片には、他のキシラナーゼをコードすると予想されるORFも存在しているため、サブクローンが示すハロー形成はXyn113及びXyn116ではなくこれらの別のORFによるものと考えられた。そのため、Xyn113及びXyn116は大腸菌では発現または機能できない遺伝子と考えられた。6Corynebacteriumglutamicumによる発現系構築上記の各キシラナーゼ遺伝子を発現させるための宿主としては、Cglutamicumを選択した。Cglutamicumのタンパク質分泌系の特徴として、もともと分泌しているタンパク質がほとんど無く、発現させた異種タンパク質が高純度で培地中に蓄積する点が挙げられる。タンパク質分泌経路は、細胞外でタンパク質がフォールディングされるGeneralsecretionpathwayWO0123591参照と、細胞内でタンパク質がフォールディングされて分泌されるTwinargininetranslocationpathwayWO2005103278参照が知られ、目的遺伝子によってどちらの系が上手く働くかは異なるため、両方の分泌系を構築した。各キシラナーゼのアミノ酸配列をSignalP30へ入力し、シグナルペプチド予測を行った。すると、Xyn115のN末端アミノ酸残基から55番目と56番目のアミノ酸残基の間で切断されることが予想されたため、56番目のアミノ酸残基以降をコリネ型細菌での発現ベクターにあるSec系およびTat系シグナルペプチドに連結させるように、各々のDNA断片を連結した。Xyn111、Xyn112はシグナル配列が予想されなかったため、1番目のアミノ酸残基以降をSec系およびTat系シグナルペプチドに連結させた。他のキシラナーゼでは、Xyn101、Xyn102、Xyn114及びXyn116でXyn115と同様にシグナル配列が予測されたため、切断部位以降の配列をSec系およびTat系シグナルペプチドに連結させた。Sec系の発現宿主としては、CglutamicumYDK010株を用いた。当該株はCglutamicum変異株であるYSr株の細胞表層タンパク質PS2をコードする遺伝子の破壊株である国際公開パンフレットWO0123591記載。一方、Tat系の発現宿主としては、CglutamicumWDK010株を用いた。当該株はCglutamicum2256株ATCC13869由来の細胞表層タンパク質PS2遺伝子破壊株である。WDK010は以下の工程で構築された。WO02081694記載のCglutamicumBrevibacteriumlactofermentumAJ12036株からゲノムDNAを抽出した。AJ12036株は、Cglutamicum2256株から、もともと存在するプラスミドpAM330を脱落させた株である。このAJ12036株のゲノムDNAを鋳型として、プライマーYSrpsL55AGGTCAGTGGCGAGTTTCTT3配列番号26とプライマーYSrpsL35GGTAGGTAGCGCCACCAACA3配列番号27を用いてPCR増幅を行い、PS2をコードする遺伝子の一部を含む1kbpの断片を得た。PCRの条件は以下の通りである。PyrobestDNAポリメラーゼを使用。H2O378μlPCRバッファー5μldNTPs4μlPyrobestDNAポリメラーゼ02μl10μMの各プライマー1μl100ngμlDNA1μl総量50μl<PCR反応条件>Cycle198°C5分間Cycle298°C10秒間57°C05分間72°C1分間このDNA断片とCglutamicumATCC13869株を用いて、WO02081694の実施例9に記載されている方法と同様にして遺伝子置換株を作製した。得られた遺伝子置換株が100mgLストレプトマイシンを含むCM2G寒天培地で生育する事を確認した。更にこの遺伝子置換株を用いて、WO02081694の実施例9に記載されている方法と同様にして細胞表層タンパク質PS2遺伝子完全破壊株を作成し、本菌株をWDK010株と命名した。発現プラスミドの構築はAppEnvMicro200369358366に記載されている方法に従った。Sec系については、AppEnvMicro200369358366記載のプラスミドpPSPTG1を鋳型として、CspBプロモーターおよびシグナルペプチドSlpAシグナルCorynebacteriumammoniagenes由来をコードする領域をPCR増幅するためのDNAプライマー配列番号7、8を設計した。Tat系については、ApplMicrobiolBiotechnol2008786774記載のプラスミドpPTPPGを鋳型として、CspBプロモーターおよびシグナルペプチドTorAシグナルEscherichiacoli由来をコードする領域をPCR増幅するプライマー配列番号7、9を設計した。なお、Sec系での発現系、Tat系での発現系ともに、その増幅DNA断片でのプロモーター配列の上流にBamHIサイトを付与した。各キシラナーゼ遺伝子のDNA断片については、前述の当該TAクローンより抽出したプラスミドを鋳型としてXyn111配列番号19、Xyn112配列番号21は1番目のアミノ酸残基、Xyn115配列番号23は56番目のアミノ酸残基から、ストップコドンの1つ前のアミノ酸残基までを増幅するプライマー配列番号10~18を用いたPCRによって取得した。その際、Sec系及びTat系のシグナル配列と相同性を持つ20塩基をプライマーの5末端に付与し、また、各ストップコドンの下流にXbaIサイトを付与するようにプライマーを設計した。他のキシラナーゼ遺伝子に関しても、シグナル配列が予測されなかったXyn113に関しては一番目のアミノ酸、予測されたXyn101、Xyn102、Xyn114及びXyn116に関しては切断部位以下のアミノ酸から、ストップコドンの一つ前のアミノ酸までを増幅するプライマーを設計した。各キシラナーゼ遺伝子のDNA断片については、前述の当該TAクローンより抽出したプラスミドを鋳型としてXyn111配列番号19、Xyn112配列番号21は1番目のアミノ酸残基、Xyn115配列番号23は56番目のアミノ酸残基から、ストップコドンの1つ前のアミノ酸残基までを増幅するプライマー配列番号10~18を用いたPCRによって取得した。その際、Sec系及びTat系のシグナル配列と相同性を持つ20塩基をプライマーの5末端に付与し、また、各ストップコドンの下流にXbaIサイトを付与するようにプライマーを設計した。PCRは、KODplusver2TOYOBOCOLTDの標準プロトコールに従い行った。プロモーターおよびシグナルペプチドのPCR産物は、AMpureベックマンコールター株式会社の標準プロトコールに従って精製した。PCR産物はアガロースゲル電気泳動を行い、予想される分子量のバンドを切り出し、QIAEXIIGelExtractionKitQIAGENGmbHの標準プロトコールに従って精製した。次に、プロモーター及びシグナルペプチドのPCR産物と取得キシラナーゼ遺伝子のPCR産物を11体積比で混合したものを鋳型とし、プロモーター配列に対応するプライマー配列番号7およびストップコドンに対応するプライマー配列番号16Xyn111配列番号19に対応配列番号17Xyn112配列番号21に対応配列番号18Xyn115配列番号23に対応などを用いたクロスオーバーPCRを行った。これにより、プロモーター、シグナル配列、及びキシラナーゼをコードするDNA断片が増幅された。このクロスオーバーPCR産物を制限酵素BamHIおよびXbaIにて消化した後、アガロースゲル電気泳動を行い、目的とする分子量のDNAバンドを切り出し、QIAEXIIGelExtractionKitQIAGENGmbHの標準プロトコールに従って精製した。これらのDNA断片を、特開平9322774EP0841395記載のCorynebacteriumEcoliシャトルベクターであるpPK4のBamHIXbaI部位に挿入してSec系及びTat系の取得キシラナーゼ分泌発現プラスミドを得た。これらのプラスミドを、Sec系はYDK010株へ、また、Tat系はWDK010株へエレクトロポレーション法により導入し、25mglのカナマイシンを含むCM2G寒天培地酵母エキストラクト10g、トリプトン10g、グルコース5g、NaCl5g、寒天15g、水で1LにしてpH72に調整で生育した菌株を選択した。選択した菌株をCM2G液体培地酵母エキストラクト10g、トリプトン10g、グルコース5g、NaCl5g、水で1LにしてpH72に調整に植菌し、30°Cで一晩前培養した。MMTG液体培地グルコース120g、硫酸マグネシウム七水和物3g、硫酸アンモニウム30g、リン酸二水素カリウム15g、硫酸鉄七水和物003g、硫酸マンガン四水和物003g、チアミン塩酸塩045mg、ビオチン045mg、DLメチオニン015g、炭酸カルシウム50g、水で1LにしてpH70に調整に25mglのカナマイシンを添加し、大型試験管に4mlを張り込んで前培養液を5の割合で接種し、30°Cで72時間培養した。培養終了後の培養上清をキシラン含有アガロースプレートに滴下し、ハローを形成することでキシラン分解活性を確認したところ、5に記載した大腸菌クローンで活性が確認できなかったXyn113及びXyn116では、コリネ型細菌発現系でも活性が確認できなかった。また、大腸菌クローンでは活性が確認できたXyn102でも、コリネ型細菌発現系での活性が確認できなかった。活性を確認したXyn111配列番号19、Xyn112配列番号21、Xyn115配列番号23、Xyn101、及びXyn114は、同培養上清をSDSPAGEに供し、予想される分子量の位置にタンパク質の発現があることを確認した。酵素活性やタンパク質発現量より、Xyn111はTat系、Xyn112、Xyn115、Xyn101、及びXyn114はSec系を選択した。実施例2キシラナーゼによるバガスの糖化各キシラナーゼのサトウキビバガスの糖化を助ける働きを評価するため、以下のバガス糖化能向上効果試験を行った。バガスは種子島より入手し、更にバガス粉砕は、以下の条件で行った。乾燥:天日乾燥粉砕委託先:奈良機械製作所粉砕機:奈良式自由粉砕機M-4型粉砕条件:回転速度5500minスクリーン:ダイヤスクリーン09mm篩がけ:目開き015mmと0355mmの篩を用い、0150355mmのバガスを回収し、試験に用いた。実施例1に記載した方法で調製したCglutamicum培養上清を、10kDaカットアウトの限外ろ過膜Vivaspin20SartoriumStedimBiotechGmbHを用いて10倍濃縮し、50mM酢酸ナトリウムバッファーに置換した。ポジティブコントロールとして、NovozymesbiomasskitNovozymesAS社に含まれるキシラナーゼ製剤NS50030Xyn30及びNS50014Xyn14を、一方、ネガティブコントロールとして、50mM酢酸ナトリウムバッファー、及びpPK4を導入したYDK010の培養上清を、それぞれ評価に用いた。なお、サンプルはN3で評価を行った。各サンプルのタンパク質量をProteinAssayCBBSolutionナカライテスク社の標準プロトコールに従って定量した。また、ImageJを用い、SDSPAGEの画像において目的バンドが総タンパク質に占める割合を算出し、酵素濃度の算出に用いた。セルラーゼミックスとして、0143gmlCelluclastNovozymesAS社、及び0033gmlNovozyme188NovozymesAS社、抗生物質として5mgmlGeneticineを50mM酢酸ナトリウムバッファーに溶解させ調製した。ブチルゴム栓付きガラスバイアルに、01g乾燥バガスと4mlの50mM酢酸ナトリウムバッファーもしくは50mMリン酸バッファーを添加し、121°Cで20分オートクレーブ滅菌したものに、φ022のPESフィルターMILLEXGPMilliporeを用いて滅菌した05mlのセルラーゼミックス液、及び、05mlの試験サンプルを添加し、50°Cでゆっくり振とうしながら4日間糖化反応を行った。酵素量は5mLの反応系あたり65mg~150mgとなるよう調製した。反応終了後に、反応液の遠心14000rpm、10min上清を回収し、バイオテックアナライザーAS310によってグルコース濃度を測定した。全ての試験区にバガスを入れない反応系をおき、そのグルコース量をブランクとして差し引いた値をバガス由来の遊離グルコース量とし、バガス含有グルコース量に対する遊離グルコース量の割合を糖化率として求めた。なお、50mMリン酸バッファーを添加した場合、サンプルの最終pHは7付近となるため、pH70条件下でのバガス糖化試験とした。キシラナーゼ非添加区50mM酢酸ナトリウムバッファー図中NCと記載での糖化反応の結果、産生したグルコース濃度を基準にした。そして、この時の糖化率を1とした場合の各サンプルの糖化率の相対比を算出し、それらを平均化したものを、図1pH5及び図2pH7に示す。なお、NS50014Xyn14図中X14と記載添加とNS50030Xyn30図中X30と記載添加の場合は3回分の試験データの平均であるため、N9であり、Xyn111、Xyn112、Xyn115各々図中X111、X112、X115と記載の添加では2回分の試験データの平均であるため、N6である。また、標準偏差をエラーバーで示した。その結果、pH7の条件では、本発明のキシラナーゼの添加はいずれも市販のキシラナーゼ添加よりも高い糖化率を示し、セルラーゼの糖化反応を助ける効果が明瞭であった。また、pH5の条件においては、pH7の場合よりも小さいものの、その糖化を促進する傾向にあることが判明した。他のキシラナーゼXyn101、及びXyn114に関しても同様の試験を行ったが、いずれも市販のキシラナーゼと有意な差は認められなかった。実施例3キシラナーゼの酵素学的特性評価各キシラナーゼの酵素学的特性を評価するため、以下の試験を行った。1最適反応pH樺材由来のキシランXylanfromBirchwood、Sigma社とクエン酸リン酸バッファーpH3580、pH05刻みにより、1基質溶液を作製し、オートクレーブ処理によりキシランを溶液中でよく分散させた。酵素液としては、実施例1に記載した方法で調製したCglutamicum培養上清を、10kDaカットアウトの限外ろ過膜Vivaspin20SartoriumStedimBiotechGmbHを用いて10倍濃縮し、50mM酢酸ナトリウムバッファーに置換したものを用いた。酵素反応はBerrinらの方法ProteinExpressionandPurification191791872000に従い、1基質溶液180μLと酵素液20μLをマイクロプレート内で混合し、サーマルサイクラーを用いて50°Cで5分間反応させた。なお、各pHにつき1酵素あたりN3で反応を行った。反応後の溶液を50μL取り、1DNS溶液100μLと混合し、95°Cで5分間反応させた。なお、1DNS溶液とは、1ジニトロサリチル酸、005亜硫酸ナトリウム、1水酸化ナトリウム、20酒石酸ナトリウムカリウムで構成される溶液を指し、このDNS溶液は還元糖量測定において一般的に用いられる。反応液の吸光度540nmを測定し、キシロース溶液で作成した検量線より、生成されたキシロオリゴ糖量を算出した。事前の検証により、酵素液に含まれる糖は検出されなかったが、基質液には特に酸性域において酸加水分解産物と思われる還元糖が検出された。そこで、すべてのpHの基質に対し、酵素液の代わりに蒸留水を加えたブランクを作成し、基質液由来のバックグラウンドの糖を差し引いた値を生成糖量とした。最大の生成糖量を示したサンプルを1とした際の各pHでの生成糖量を比活性として求めた。至適反応pHのグラフを図3に示した。各新規キシラナーゼは、いずれも似た至適pHパターンを示し、至適pHは70付近であった。一方、市販キシラナーゼXyn14は至適pHが65付近であった。2最適反応温度XylanfromBirchwoodとクエン酸-リン酸バッファーを用いて、1基質溶液を作成し、オートクレーブ処理によりキシランを溶液中でよく分散させた。酵素液は前項に記載した方法で調製した。酵素反応は前項に記載した方法に準じて、1基質溶液90μLと適宜蒸留水で希釈した酵素液10μLをマイクロプレート内で混合し、サーマルサイクラーを用いて35~85°Cで5分間反応させた。なお、各温度につき1酵素あたりN3で反応を行った。反応後の溶液を50μL取り、DNS溶液100μLと混合し、95°Cで5分間の呈色反応をさせ、反応液の吸光度を測定した。すべての温度サンプルに対し、酵素液の代わりに蒸留水を加えたブランクを作成し、基質液由来のバックグラウンドの値を差し引いた値を生成糖量とした。最大の生成糖量を示したサンプルを1とした際の各温度での生成糖量を比活性として示した。至適反応温度のグラフを図4に示した。Xyn111は65°C、Xyn112及び市販酵素Xyn14は70°C、Xyn115は75°Cにて最も高い活性を示した。3短時間での温度安定性前項に記載した方法で調製した酵素液をクエン酸-リン酸バッファーで希釈し、pHが7であることを確認した。酵素液を50~75°Cで10分間反応させたものを熱処理酵素とした。1基質溶液90μLと、熱処理酵素液又は非熱処理酵素液10μLをマイクロプレート内で混合し、サーマルサイクラーを用いて50°Cで5分間反応させた。なお、各熱処理温度につき1酵素あたりN3で反応を行った。反応後の溶液を50μL取り、DNS溶液100μLと混合し、95°Cで5分間の呈色反応をさせ、反応液の吸光度を測定した。すべての温度サンプルに対し、酵素液の代わりに希釈に用いたバッファーを加えたブランクを作成し、基質液由来のバックグラウンドの値を差し引いた値を生成糖量とした。非熱処理酵素液を加えたサンプルの平均値を1とした際の各熱処理温度での生成糖量を比活性として示した。市販酵素Xyn14は35507080°Cで検討を行った。短時間での温度安定性のグラフを図5に示した。新規酵素Xyn112と市販酵素Xyn14はほぼ同様の活性プロファイルを示した。一方、Xyn115は高温にて処理しても比較的高い活性を保持し、75°Cで10分間処理しても78の活性を保持した。4長時間での温度安定性バガスの糖化反応は50°Cで4日間かけて行う長時間反応であるため、より長い時間の熱処理に対する温度安定性を検討した。前項に記載した方法において、酵素液の熱処理時間を10分間から16時間に延長し、その他の条件は前項と同様にして試験を行った。比熱処理酵素液を加えたサンプルの平均値を1とした際の各熱処理温度での生成糖量を比活性として示した。長時間での温度安定性を図6に示した。50°Cにて16時間処理しても新規酵素は86-97の活性を保持したのに対し、市販酵素は69まで活性が低下した。特にXyn115は高温にて処理しても比較的高い活性を保持し、70°Cで16時間処理しても61の活性を保持した。50°Cの16時間処理において新規キシラナーゼが市販酵素Xyn14よりも活性を高く保持したことは、実施例2に示したバガス糖化能向上効果の結果を支持する。バガスを糖化する工程は長時間反応であるため、新規酵素の温度安定性が長時間にわたり高く維持されることは産業上有効な性質である。"