マクロ分子または微生物により植物組織に浸潤するためのシステムであって、植物組織を収容するための少なくとも1つのシール可能なハッチを有するインフィルトレーションチャンバーと;インフィルトレーションチャンバー内の圧力を低下させるための手段と;インフィルトレーションチャンバーと流体連通させる第1の放出バルブと;第1の放出バルブおよび圧力低下手段を協調的に操作するための制御装置とを含み、その結果、インフィルトレーションチャンバー中の圧力が、i第1の時間の期間中に開始圧力から300ミリバール以下の標的圧力まで減少され、ii第2の時間の期間の間標的圧力で維持され、iii5秒以下の第3の時間の期間内に標的圧力から少なくともおよそ1バールの最終的な圧力まで増加される、システム。圧力低下手段とインフィルトレーションチャンバーとの間に提供される第2のバルブを圧力の調節のためにさらに含む、請求項1に記載のシステム。前記制御装置が、インフィルトレーションチャンバー内で圧力を調節する第2のバルブを操作するのに好適である、請求項2に記載のシステム。前記システムが、属、Agrobacterium、Rhizobium、Sinorhizobium、Mesorhizobium、Pseudomonas、Azospirillum、Rhodococcus、Phyllobaterium、Xanthomonas、BurkholderiaおよびErwiniaのメンバーから選択される細菌細胞、ならびに好ましくはAgrobacteriumtumefaciensまたはAgrobacteriumrhizogenesによる植物組織の浸潤に適合する、請求項1、2または3のいずれか一項に記載されるシステム。前記圧力低下手段が、少なくとも1つのバッファーチャンバー、真空ポンプまたは両方を含む、請求項1~4のいずれか一項に記載のシステム。制御バルブを介して互いに連結されたインフィルトレーションチャンバーおよびバッファーチャンバーを含み;真空ポンプを操作してバッファーチャンバー中の圧力を標的圧力以下まで低下させ、制御バルブを開いてインフィルトレーションチャンバーおよびバッファーチャンバーを互いと流体連通させるように、制御装置がプログラムされる、請求項5に記載のシステム。前記少なくとも1つのハッチが、インフィルトレーションチャンバーの側面において、またはインフィルトレーションチャンバーの上部において形成され;前記インフィルトレーションチャンバーが、50リットル、100リットル、200リットル、500リットル、750リットル、1000リットル、1500リットルまたは2000リットル以上の内部体積を有する、請求項1~6のいずれか一項に記載のシステム。前記システムが、およそ300ミリバール、200ミリバール、150ミリバール、100ミリバール、50ミリバールまたは25ミリバール以下の標的圧力をインフィルトレーションチャンバー内で確立するように操作可能であり;前記制御装置が、4分、3分、2分または1分以下の第2の時間の期間の維持に適合する、請求項1~7のいずれか一項に記載のシステム。前記インフィルトレーションチャンバーが5秒、4秒、3秒、2秒または1秒未満の第3の時間の期間内に1バールの圧力に少なくとも実質的に戻ることができるように、前記第1の放出バルブが構成される、請求項1~8のいずれか一項に記載のシステム。インフィルトレーションチャンバーから取り出されたマクロ分子および微生物の回収のためのフィルターをさらに含む、請求項1~9のいずれか一項に記載のシステム。前記第1の放出バルブが、1バールを超える圧力を有する流体源、不活性ガス、または両方と選択的に連通される、請求項1~7のいずれか一項に記載のシステム。マクロ分子または微生物により植物組織に浸潤する方法であって、aインフィルトレーションチャンバーの中へ植物組織を導入する工程と;bインフィルトレーションチャンバー内の圧力を第1の時間の期間中に300ミリバール以下の標的圧力まで低下させる工程と;cインフィルトレーションチャンバー内の前記標的圧力を5分以下の第2の時間の期間の間維持する工程と;dインフィルトレーションチャンバー内の圧力を5秒以下の第3の時間の期間内に部分的にまたは少なくとも実質的に1バールに戻す工程とを含む方法。前記標的圧力が、およそ300ミリバール、200ミリバール、150ミリバール、100ミリバール、75ミリバール、50ミリバールまたは25ミリバール以下であり;前記第3の時間の期間が、5秒、4秒、3秒、2秒または1秒以下である、請求項12に記載の方法。インフィルトレーションチャンバー内で圧力を低下させる前記工程が、iバッファーチャンバー内の圧力をインフィルトレーションチャンバーの標的圧力よりも低く低下させる工程と、iiバッファーチャンバーをインフィルトレーションチャンバーと流体連通させる工程とを含む、請求項12または13のいずれか一項に記載の方法。前記植物組織が、Nicotiana属、好ましくはNicotianatabacumのメンバーである植物全体または植物の部分を含み、前記微生物がAgrobacterium種である、請求項12、13または14のいずれか一項に記載の方法。植物の中へのアグロバクテリウム細胞のインフィルトレーションのためのシステム1の好ましい実施形態を、ここで図1および2を参照して記述する。植物は、Nicotiana属、および本実施形態においてNicotianatabacumであり得る。システムは工業プロセスの一部として使用することが意図される。図1中で示されるように、システム1は、制御バルブV1、放出バルブV2、圧力センサーM1および温度センサーTfを有するインフィルトレーションチャンバー2を含む。インフィルトレーションチャンバー2中の真空の形成のための真空ポンプP1に接続された真空ラインにおいて、制御バルブV1が提供される。制御バルブV1、放出バルブV2および真空ポンプP1はすべて、プログラマブル制御装置C1によって制御される。圧力センサーM1は、インフィルトレーションチャンバー2内の圧力の測定に好適である。圧力センサーM1は制御装置C1にも連結されて、インフィルトレーションチャンバー2内の圧力に関するフィードバックを提供する。温度センサーが提供されて、インフィルトレーションチャンバー2内の温度をモニタリングし、制御装置C1にさらなるフィードバックを提供する。制御バルブV1は、オン/オフタイプのバルブまたは比例バルブであり得る。インフィルトレーションチャンバー2は、イノキュラムタンクを収容するサイズにされる。本実施形態において、インフィルトレーションチャンバー2の内部寸法は565mm×325mm×500mm[長×幅×高]であり、92リットルの全体積を提供する。植物をインフィルトレーションチャンバー2中に置いて、イノキュレーションを行ない、一旦イノキュレーションサイクルが完了したならば取り出す。インフィルトレーションチャンバーの中へ一度に最高54の植物各々90mm×120mm3.5′′×4.7′′の典型的な寸法を有するをロードできることが意図される。植物の1つの層を細菌の溶液中に上下逆さまで吊り下げ、真空を適用することによって一度に処理することができる。したがって、処理のためにロードされる植物の数が植物を成長させたポットサイズおよび密度に応じることは理解されるだろう。例えば、100×100×100mmのポットサイズでは、1×1×1メートルの内部寸法を持つチャンバー中に100の植物を有することができる。インフィルトレーションのための植物は、1平方メートルあたり25、50、75、100、1000までの植物の密度で成長されている。植物の導入/取り出しを可能にするために、ハッチ図示せずをインフィルトレーションチャンバー2の上部に形成する。システム1はローディング機構図示せずも備えて提供されて、人間工学的ストレスの減少を支援または自動化を促進することができる。好適なイノキュラムは、実施例1として以下に記述される。インフィルトレーションチャンバー2の上部においてハッチを形成するのではなく、インフィルトレーションチャンバー2の側面でのローディングを可能にするように、側面壁において1つまたは複数のハッチを提供することができる。これはプロセス効率を改善例えばローディング/アンローディング時間を減少させることによるすることができ、操作者への重圧およびストレスも最小限するかまたは減少させる。例えば、インフィルトレーションチャンバー2の側面中に2つのハッチを形成して、トロリー、コンベアーなどのインフィルトレーションチャンバー2を介する単一パスを可能にすることができる。このアレンジの短所は、植物複数可がイノキュラムタンクから引き上げられることを可能にするように、追加スペースをインフィルトレーションチャンバー2内に提供しなくてはならないか、またはイノキュラムタンクを植物複数可と共に取り出さなくてはならないことである。制御バルブV1および放出バルブV2はインフィルトレーションチャンバー2の上部部分において配置される。これは、液体イノキュラムが真空ラインに入るリスクの回避を支援するために、制御バルブV1に特に重要である。インフィルトレーションチャンバー2中で真空が形成される場合、イノキュラムはアエロゾル化され得る。イノキュラムが真空ラインを介して真空ポンプP1の中へ吸引されることを防止するために、0.2マイクロメートルのHepaフィルターにカップルしたWoulffボトルが提供される。他のタイプのフィルターを使用することができる。本発明に記載のシステム1の操作は、ここで図1を参照して以下のとおり説明される。植物はハッチを介してインフィルトレーションチャンバーの中へ導入される。次いで、植物を転倒させ、真空チャンバー2中に保持されるイノキュラム中に沈め、その結果、植物が成長しているポットのみが曝露され続ける。制御装置C1は放出バルブV2を閉じ、制御バルブV1を開ける。次いで真空ポンプP1を操作して、インフィルトレーションチャンバー2内の圧力をおよそ50ミリバールの標的圧力まで低下させる。1バールから開始して、好ましくは、インフィルトレーションチャンバー2内の標的圧力への到達には90秒未満かかるすなわち、76mmから37.5mm水銀柱に真空を引く。2セットの試験機器を作製して本発明を検証し、第1のセットの機器において15~60秒および第2のセットの機器においておよそ70秒で標的圧力を達成できることが見出された。標的圧力の達成に必要とされる時間は、用いられた特定の真空ポンプに依存する。次いで制御装置C1は、制御バルブV1の調節もしくは真空ポンプP1の制御または両方によって、インフィルトレーションチャンバー2を標的圧力で保持する。圧力センサーM1は、標的圧力が維持されることを可能にするようにフィードバックを備えた制御装置C1を提供する。インフィルトレーションチャンバー2は、3分、2分または1分の間標的圧力で維持される。この期間が経過した後、制御装置C1は真空ポンプV1を停止し、次いで最終的に放出バルブV2を開ける前に制御バルブV1を閉じて、インフィルトレーションチャンバー内の圧力が約1バールに戻ることを可能にするすなわち約37.5mmから約76mm水銀柱。インフィルトレーションチャンバー2内の圧力を標的圧力から1バールに急速に好ましくは放出時間は5秒以下である戻すことによって、改善された効率を達成できることが見出された。本実施形態における放出バルブV2は、インフィルトレーションチャンバー2が1~3秒内に標的圧力からおよそ1バールへ戻ることを可能にするように構成される。第1のセットの試験機器は3秒未満の放出時間を達成し、第2のセットの試験機器は2秒未満の放出時間を達成した。排出口パイプの直径は所望される放出時間を達成するように選択される。本発明に記載の方法は、真空または部分真空を使用して植物による細菌の取り込みを支援することを含む。典型的には、植物をインフィルトレーションチャンバーの内部に上下逆さまで置き、葉を細菌懸濁液の中に完全に浸漬する。チャンバー中の圧力を約10分の数ミリバールにする。最初に空気を真空まで葉から引き抜き、空気を再導入するときに、葉は液体を引き込む。本発明のインフィルトレーションチャンバーは、NicotianabenthamianaおよびNicotianatabacumについては成功して使用され、短い期間内でかなりの数の植物をインフィルトレーションする手段を提供する。実施例1一過性発現のための植物のインフィルトレーションインフィルトレーションイノキュラムの調製。対象となる遺伝子または複数の遺伝子および遺伝子サイレンシングの抑制因子の発現のためのバイナリーベクターを、植物細胞において機能的な調節エレメントの制御下に置き、Agrobacteriumtumefaciens系統Agl1中に導入する。それぞれのアグロバクテリウム株およびバイナリーベクター複数可の選択のために、2g/L牛肉エキス、0.4g/L酵母エキス、2g/LBacto-Peptone、2g/Lショ糖、0.1g/LMgSO4および適切な抗生物質を含むYEB培地中で、細菌を増殖させる。細菌は、28°Cおよび250rpmでOD600が1.6を超えるまで、ロータリーシェーカー上の三角フラスコ中でまたはバイオリアクター使い捨ての滅菌済みビニールバッグを使用するWaveバイオリアクター等中で増殖させることができる。次いで、細菌培養物を10mM2-N-モルホリノエタンスルホン酸MESおよび適切な抗生物質を含有する新鮮なLBブロスMiller培地中で1:100に希釈し、OD600が2を超えるまでロータリーシェーカー上で28°Cおよび250rpmでさらに増殖させた。増殖はバイオリアクターを使用する使い捨ての滅菌済みビニールバッグ中であり得る。滅菌済みバッグは、1L、5L、10L、25L、50L、100L、250Lまたは500L以上である。増殖後に、細菌を8000gおよび4°Cで15分間の遠心分離によって回収することができる。ペレットにした細菌を、10mMMgCl2および5mMMESを含むインフィルトレーション溶液中に、最終的にpH5.6およびOD600=2で再懸濁する。Nicotianabenthamiana植物のインフィルトレーション4週齢のNicotianabenthamiana植物は、トマトブッシースタントウイルスTBSVp19遺伝子サイレンシングサプレッサーSwiss-ProtP50625を含有するAgrobacteriumtumefaciens系統Agl1および植物細胞において機能的な調節エレメントの制御下に対象となる遺伝子を含有するバイナリーベクターにより共インフィルトレーションすることができる。細菌のイノキュラムは1:1の比率および最終OD600nm=0.3で混合することができる。バキュームインフィルトレーションは本発明中で記述された通りである。発現の収穫、試料採取および分析。インフィルトレーションの6日後に、葉材料をヒートシール可能なパウチ中に回収し、シールし、ドライアイスの層の間に少なくとも10分間置く。収穫後に、すべての葉サンプルをさらなるプロセッシングまで-80°Cで保存する。収穫した葉をドライアイス上でコーヒーグラインダーを使用して細粉までホモジナイズし、50mMトリスpH7.4、150mMNaCl、0.1トリトンX-100、4M尿素および2mMDTTを含む3体積/重量の抽出バッファー中で抽出した。対象となる遺伝子の発現は標準的な方法に従っている。本発明の上記の実施形態の修飾されたアレンジは、ここで図2を参照して記述されるだろう。真空ポンプP1を直接使用して植物複数可が位置するインフィルトレーションチャンバー2を排出させる代わりに、真空ポンプP1でバッファーチャンバー3を排出させる。バッファーチャンバー3は第1のインフィルトレーションチャンバー2よりも大きな内部体積を有する。制御バルブV3は、インフィルトレーションチャンバー2とバッファーチャンバー3との間に提供される接続ラインにおいて提供される。使用に際して、真空ポンプP1は、インフィルトレーションチャンバー2の標的圧力未満の圧力までバッファーチャンバー3を排出する。制御装置C1は放出バルブV2を閉じることによってインフィルトレーションチャンバー2をシールする。次いで制御バルブV3を開き、インフィルトレーションチャンバー2およびバッファーチャンバー3を互いと流体連通させる。インフィルトレーションチャンバー2およびバッファーチャンバー3内の圧力を等しくする。インフィルトレーションチャンバー2内の初期圧力と比較してバッファーチャンバー3内で開始圧力を制御することによってチャンバー2、3の相対的体積および圧力によって決定されるように、所望される標的圧力をインフィルトレーションチャンバー2中で達成することができる。1つまたは複数の圧力センサーをインフィルトレーションチャンバー2もしくはバッファーチャンバー3または両方のチャンバー中に提供することができる。次いで制御バルブV3を閉鎖して、インフィルトレーションチャンバー2中の標的圧力を維持することができる。所望される標的圧力を維持するために任意で二次的な真空ポンプを提供され得る。必要とされる圧力は、インフィルトレーションチャンバー2の操作状態に関係なくバッファーチャンバー3中で再確立することができる。本発明から逸脱せずに本明細書において記載されるシステム1への様々な変化および修飾を組み入れることができることが認識されるだろう。例えば、インフィルトレーションチャンバー2の上方または下方に真空ポンプP1を提供することができる。システム1は定期的に完全に汚染除去されなくてはならないので、ポンプを汚染から保護することまたはポンプが洗浄できることを保証することが所望される。インフィルトレーションチャンバー2を洗浄するために、蒸気発生器を提供することができる。蒸気発生器はUSP水米国薬局方の規格に対して試験した精製水を利用することが意図される。あるいは、インフィルトレーションチャンバー2の内部は、例えば化学物質例えばVirkon、漂白剤の噴霧および徹底したすすぎによって、化学洗浄を促進するように適合させることができる。インフィルトレーションチャンバー2をイノキュレーションの間に洗浄することができる。しかしながら複数のサイクルのためにイノキュラムタンク中に保持されたイノキュラムを再び使用することも可能であるべきである。システムは、植物が転倒されイノキュラム中に沈められるように、植物を支援するフレーム構造をさらに含むことができる。システムは、植物のためのスロットのあるサポートグリッドもしくは排水できるイノキュラムリザーバーまたは両方を含むことができる。支持構造をローラーにマウントして取り扱いを促進することができる。さらに、ローディング/アンローディングを容易にするために、ローディングプラットフォームシザーリフト等を提供することができる。