"患者の原発性癌を予防する方法であり、患者に治療有効量のRANKL阻害剤を投与することを含む方法。患者の原発性癌を治療する方法であり、原発性癌の起源の組織中の癌細胞を減少させるため、又は癌の進行を阻止するために、患者に治療有効量のRANKL阻害剤を投与することを含む方法。癌細胞のアポトーシスを増大させる方法であり、癌細胞に治療有効量のRANKL阻害剤を投与することを含み、好ましくは当該癌細胞が原発性癌である方法。前記癌が乳癌又は前立腺癌である、請求項1~3のいずれか1項に記載の方法。前記癌が、性ホルモン受容体、好ましくはプロゲステロン又はエストロゲン受容体を有する癌細胞を含む、請求項1~4のいずれか1項に記載の方法。前記癌がホルモン依存性癌である、請求項1~5のいずれか1項に記載の方法。請求項1~6のいずれか1項に記載の癌、特にホルモン依存性癌の治療又は予防に使用される、RANKL阻害剤。ホルモン治療、好ましくはホルモン補充治療を受けていた、好ましくは当該ホルモンがプロゲステロン又はプロゲスチンであり、又はホルモン避妊を受けていた患者のホルモン依存性癌の治療又は予防に使用されるRANKL阻害剤。ホルモン治療、好ましくは性ホルモンのホルモン治療、特にホルモン補充治療と組み合わせて患者のホルモン依存性癌の治療又は予防に使用される、又はホルモン避妊と組み合わせて、特に癌発生のリスクを減少させるために使用される、RANKL阻害剤。前記癌が、乳癌、胸部癌又は前立腺癌である、請求項7~9のいずれか1項に記載の阻害剤。前記癌が上皮細胞起源である、請求項7~10のいずれか1項に記載の阻害剤。更なる抗癌治療、好ましくは放射線治療又は化学治療と組み合わせられる、又はそれらの効果を増大させる、請求項7~11のいずれか1項に記載の阻害剤。原発癌を治療若しくは予防するための、又は癌の再発を治療又は予防するための、請求項7~12のいずれか1項に記載の阻害剤。前記RANKL阻害剤が、RANKL又はRANKリガンド、好ましくは抗RANKL抗体、例えばDenosumab、又はsiRNAである、請求項7~13のいずれか1項に記載の阻害剤。前記癌が、胸腺組織細胞又は胸腺癌細胞、及び又は上皮細胞又は基底細胞、及び又は癌幹細胞から選択される癌性細胞を含む、請求項7~14のいずれか1項に記載の阻害剤。RANKL阻害剤、及びエストロゲン、プロゲステロン若しくはプロゲスチンから選択されるホルモン若しくはその誘導体、又はホルモン避妊剤を含有する医薬組成物。請求項1~15のいずれか1項に記載の治療に使用される、請求項16に記載の組成物。更に、医薬として許容される希釈剤、担体、可溶化剤、乳化剤、保存料及び又は助剤を含有する、請求項16又は17に記載の組成物。ホルモン治療に使用される、請求項16又は18に記載の組成物。前記ホルモン治療が、避妊又はホルモン補充治療である、請求項19に記載の組成物。化学治療剤及びRANKL阻害剤を含有するキット。RANKL阻害剤、及びエストロゲン、プロゲステロン、又はプロゲスチンから選択されるホルモン又はその誘導体、又はホルモン避妊剤を含有するキット。本発明は、特に、転移癌細胞から遠隔の原発腫瘍の予防又は治療における、有効成分としてRANKL阻害剤を使用する癌治療に関する。本発明において、癌治療は、患者の体内の癌細胞を減少させること、又は少なくとも当該疾患の更なる進行を防止することとして理解されるべきである。RANKL阻害剤は、例えばUS2008107597WO2010022120A1US6740522US7411050EP2003203A1等で広く知られている抗体、又はUS2004167072に開示されるポリペプチド阻害剤を含む。これらの従来のRANKL阻害剤のいずれも、本発明に使用され得る。RANKLは、樹状細胞及び破骨細胞の機能を制御する細胞表面受容体RANKの公知のリガンドである。本発明において、癌の発生における更なるメカニズムが発見された。RANKLは、ホルモンに影響される癌の発生を促進する。そのようなホルモンは、各人の正常のホルモンのバックグラウンド由来のものであってもよく、又は人工的に投与されてもよい。更に、このリガンドの癌における細胞メカニズム及び作用が調査され、特定された。RANKLの効果、RANKL活性は、RANKLのRANKへの結合及びその結果引き起こされる活性化を含む。RANKは、更に、IKKα、IκBα、P-NFκB及びサイクリンD1、並びにId2-p21、MAPK、Erk及びp38経路を活性化する。これらの因子のいずれかの活性の変化は、癌細胞の生存率を低下させるのに、又は治療若しくは予防法に使用できる。これらのタンパク質のほとんどは細胞内に存在し、RNAi等によりそれらの活性又は発現を細胞内で阻害することにより、それらの機能を阻害することが出来る。RANKL及びRANKは細胞外の標的であるが、RNAi等の細胞内の阻害手段によっても活性を変化させられる。本発明において、MPA等のプロゲスチンのインビボ投与が、細胞内の重要な破骨細胞分化因子であるRANKLの強力な誘導を引き起こすことが判明した。これらの細胞におけるRANKL又はその受容体のRANKの阻害又は不活性化は、プロゲスチン誘導性増殖を妨げる。重要なことに、RANKL/RANK阻害は、プロゲスチン駆動性癌の発生を減少し、発生を遅延し、そして癌幹細胞の自己再生を低下させた。RANKLは骨転移に影響することが知られているが、本発明は、一般的な癌及び転移が関与しない癌を治療する可能性を初めて提供するものであり、転移は、本発明の治療の標的ではない。好ましくは、前記癌は、原発性癌である。当該癌は、非転移性であってもよい。先行技術において、RANKアンタゴニストの癌治療における使用が示唆されていた。しかしながら、この示唆に基づく治療手段は、結局開示されていない。本発明において、特に好ましい標的は、増殖のためのホルモンシグナルに依存する細胞である。RANK/RANKL駆動性癌の発生における重要な要素は、ホルモンのバックグラウンドである。本発明において、RANK/RANKLの癌形成作用は、性ホルモン、特にホルモン補充治療又は避妊用に女性に広く投与される、プロゲステロン及びその誘導体に関連している。従って、本発明の好ましい態様に係るRANK/RANKLアンタゴナイズ治療は、性ホルモン又はその機能的誘導体が過剰に存在する患者を治療するためのものである。本発明において治療又は予防される癌として、原発性乳癌を含む乳癌が挙げられる。好ましい態様において、前記癌は、増殖がホルモンに依存する癌である。そのようなホルモンは、女性ホルモン、例えばプロゲステロン又はエストロゲン等であってもよい。癌細胞は、ホルモン受容体、特にプロゲステロン受容体及び又はエストロゲン受容体を有していてもよい。エストロゲン受容体の例は、ESR1ERアルファ鎖を含む、ESR2ERベータ鎖を含む又はヘテロマー受容体、例えばERアルファ及びERベータ鎖の混成受容体である。そのような受容体の存在は、細胞においてホルモンシグナリングが要求されることを示唆する。特に、このシグナリングは、RANKL介在性であってもよい。好ましくは、前記ホルモンシグナリングは、プロゲステロン受容体が介在してもよい。特定の態様において、前記癌は、プロゲステロン受容体を有するが機能的なエストロゲン受容体を有しない癌細胞を含む。ホルモンによるRANKLの活性化は、DNAダメージ誘導性の細胞死から癌又は癌前駆細胞を保護する。故に、これらのホルモンは、RANKL活性を増大することにより、癌を支持し得る。本発明において、治療される好ましい癌の種類は、発生の過程で性ホルモン依存性を示す癌、特に乳癌又は前立腺癌である。更なる癌の種類として、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、B細胞急性リンパ芽球性白血病リンパ腫、T細胞急性リンパ芽球性白血病リンパ腫、成人T細胞白血病T細胞リンパ腫、NK細胞腫瘍、大型顆粒リンパ球白血病、ランゲルハンス細胞組織球増殖症、骨髄性新生物、急性骨髄性白血病、急性単球性白血病、骨髄異形成症候群、及び慢性骨髄増殖性疾患が挙げられる。特に好ましくは、前記癌は、肺癌、乳癌、胸部癌、黒色腫、肉腫、前立腺癌、頭頸部癌、原発起源が不明な癌、リンパ腫、白血病、腎臓癌及び消化管癌から選択される。好ましくは、前記癌は、ホルモン駆動癌様乳癌又は前立腺癌である。そのようなホルモンは、エストロゲン若しくはプロゲステロン、又はそれらの人工の機能的同等物、例えばプロゲスチン、又はRANKLを誘導することが知られている他の因子、例えばPTHrP又はビタミンDである。前記癌は、上皮起源であってもよい。好ましくは、前記癌は、その起源の組織中で、例えば乳癌又は胸部癌の場合胸部で、又は前立腺癌の場合は前立腺で治療又は予防される。本発明において、前記癌は、原発性癌であってもよい。本明細書中に示すように、原発性癌の発生は、RANKL活性の阻害により予防又は遅延され得る。故に、前記原発性癌は、治療又は予防され得る。加えて、再発した癌の治療又は予防も可能である。一つの態様において、本発明は、患者の癌の予防又は治療に使用されるRANKL阻害剤を提供し、ここで、当該患者は、ホルモン治療を受けており、好ましくはホルモン補充治療を受けており、好ましくは当該治療にエストロゲン、プロゲステロン又はプロゲスチンが使用され、又はホルモン避妊を受けている。治療という用語は、癌患者に対して有益な効果、特に癌細胞の減少、癌の更なる進行の防止を指すものとして解釈され得るが、必ずしも絶対的な治癒の意味ではなく、可能ではあるが本発明により必ずしも要求されない。同様に、予防は、癌の発生の確実な防止に常に成功することとして解釈されないが、患者の癌の発生の相対的な減少、又は癌の発生の遅延、即ち予防的治療として解釈される。癌の予防は、本発明の特段の利益である。RANKL誘導性のアポトーシスに対する保護は癌の発生における本質的なステップであるから、癌の発生においてこのステップを阻害して、癌の兆候をしばらくの間防止又は遅延させることが出来る。本発明における治療又は予防は、良性腫瘍又は瘤の治療に使用され得るため、癌の形成における更なる発生を阻害する。患者の正常のホルモンレベルは、通常、本発明における癌の発生に関与するRANKL経路の引き金を引くのに充分である。場合によっては、ホルモンレベルは、生理的又は人為的な原因により、患者の体内で増大している。そのようなホルモンレベルの増大は、RANKL関連の癌の発生及び進行を増大させ得るため、好ましい態様において、本発明における治療対象は、ホルモン、特に性ホルモン、例えばプロゲステロン、又はエストロゲン等のホルモンのレベル、例えば血中濃度が増大している。ホルモン補充治療のための、又はホルモン避妊のための特にプロゲステロン及びその誘導体、患者への女性ホルモンの投与は、RANKL経路を介して、癌、特に乳癌又は前立腺癌等のホルモン駆動性癌のリスクを増大させる。更に、前更年期等の内在的プロゲステロン系の何らかの下方制御は、癌のリスクを増大させる。一方、RANKL阻害剤の投与は、乳癌のリスクを低下させ得て、又は乳癌の治療に使用され得る。機構的に、RANKL活性は、乳癌細胞をアポトーシスから保護し、癌形成的突然変異に関して、乳癌の生存率を増大させる。故に、RANKL活性の低下は、かかる保護的効果を阻害し、その結果、癌細胞の死滅を増大させる。患者は、性ホルモンを用いた治療を受けており、又は受けたことがあってもよい。本発明において、癌の発生におけるRANKL活性は、性ホルモンにより、特にエストロゲン又はプロゲステロン若しくはその誘導体に影響されることが見出された。故に、好ましい態様において、患者は、ホルモンで治療され、好ましくはエストロゲン、プロゲステロン又はプロゲスチンによるホルモン補充治療を受け、又はホルモン避妊を受けている。プロゲスチンの例として、メドロキシプロゲステロン、ノルエチステロン、エチステロン、ノルエチノドレル、酢酸ノルエチンドロン、二酢酸エチノジオール、レボノルゲストレル、ノルゲストレル、デソゲストレル、ゲストデン、ノルゲスチメート、ドロスピレノン、ジエノゲスト、ネステロン、酢酸ノメゲストロール、トリメゲストロン、タナプロゲット、酢酸メゲストロール、エトノゲストレルが挙げられる。好ましくは、前記ホルモン又は誘導体は、プロゲスチンと同一の効果を有する。特に、前記ホルモンは、RANKLを誘導する。ホルモン補充治療において、又はホルモン避妊において、ホルモン、一般に性ホルモンのレベルは、プロゲステロンのレベルが増大するように上方制御されて、これが、RANKL経路を介して癌の発生と結び付き得る。故に、ホルモンによる治療又はホルモン避妊を受けている、又は受けたことのある患者は、乳癌が発生するリスクが増大している。これらの患者において、RANKL阻害剤の投与は、癌、癌の発生又は癌の進行の予防又は治療において、特に有効である。特に、治療すべき患者で見られ得る高いプロゲスチン及び/又はプロゲステロンレベルは、例えば、血清濃度であり、又は02ngml以上、好ましくは03ngml以上である。RANKL阻害剤は、RANKL活性を低下させる任意の化合物又は薬剤と理解されるべきである。任意のRANKLリガンド、特に、遊離RANKLを不活性化し、RANKとの結合を競合的に阻害し、RANKの活性化を阻害する、抗RANKL抗体を含む。更に、RANKL阻害剤は、RANKをブロックするRANKアンタゴニスト、RANKL細胞受容体を含む。更に、RANKL自体、RANK、IKKα、IκBα、P-NFκB、サイクリンD1NFκB経路阻害、Id2、MAPKErk及びp38を含む、RANKLシグナリング経路のいずれかの要素がアンタゴナイズされ、又はp21が増大又はアゴナイズされId2経路の阻害、RANKLシグナリングが阻害され、RANKL活性が低下する。Id2経路は、細胞周期進行を阻害する主要なサイクリン依存的キナーゼ阻害剤であるp21の転写リプレッサーとして機能する。故に、Id2経路は、p21の情報制御を阻害して細胞の増殖を停止させる。RANKL阻害剤は、RANKL自体、RANK、IKKα、IκBα、P-NFκB、サイクリンD1NFκB経路阻害、Id2、MAPKErk及びp38のいずれかを阻害又はアンタゴナイズし、又はp21を増大又はアンタゴナイズし、又は好ましくはRANKLの阻害であるそれらの因子の2、3、4、5つ又は全てを併せ持つ。RANKL阻害剤は、RANKL濃度、特に血清濃度を低下させ、又はRANKL発現を低下させる、任意の化合物であってもよい。RANKL阻害剤は、更に、細胞表面上、特に癌細胞表面上のRANKL濃度を低下させ、及び/又はRANKL発現を低下させ、及び/又はRANKL結合に応答してのRANK活性化を低下させる。RANKL阻害剤は、粗に、IKKαの細胞内濃度及び/又は発現及び/又は活性化を低下させ得る。更に、RANKL阻害剤は、IκBαの細胞内濃度及び/又は発現及び/又は活性化を低下させ得る。更に、RANKL阻害剤は、P-NFκBの細胞内濃度及び/又は発現及び/又は活性化を低下させ得る。RANKL阻害剤は、更に、サイクリンD1の細胞内濃度及び/又は発現及び/又は活性化を低下させ得る。RANKL阻害剤は、更に、Id2の細胞内濃度及び/又は発現及び/又は活性化を低下させ得る。RANKL阻害剤は、更に、p21の細胞内濃度及び/又は発現及び/又は活性化を増大させ得る。RANKL阻害剤は、更に、MAPKErkの細胞内濃度及び/又は発現及び/又は活性化を低下させ得る。RANKL阻害剤は、更に、p38の細胞内濃度及び/又は発現及び/又は活性化を低下させ得る。好ましくは、細胞の因子をアンタゴナイズするため、siRNAが投与されて、これらの因子の発現及び機能を低下させる。RNA干渉RNAiは、配列特異的に遺伝子発現を抑制するメカニズムである。RNA干渉は、真核細胞の特定の遺伝子機能を抑制する高度に効果的な手段である。細胞及び生物に適用された場合、RNAiは、短鎖干渉RNAsiRNA又はショートヘアピンRNAshRNAをコードするベクターを導入した後、RNAiは、標的mRNAを分解する。様々なRNAiの方法が公知であり、植物細胞、ショウジョウバエ及びヒト黒色腫細胞における遺伝子発現制御手法として一般的に知られているものは、例えばUS20020162126及びUS20020173478に記載されている。本発明の方法及び組成物に使用されるsiRNAは、RANKLシグナリング経路の所望の分子又はそのような分子の組み合わせを標的とするように選択される。そうして、それらは標的遺伝子に対応する様々なRNAを標的とする。当業者は、本明細書中、siRNAは、siRNAの変法、即ちハイブリッドDNA/RNAコンストラクト又は任意のそれらの類似物、二重鎖RNA,micromiRNA、並びに様々なsiRNAの形態、例えばsiRNA複製、ウイルス及び非ウイルスベクター中のスモールヘアピンRNAshRNA、及び担体中のsiRNA又はshRNAを含む。RNAKLのRNAiは、例えば、WO2005028633に記載されている。当該技術分野において、RNAiを使用して遺伝子発現を阻害する様々な方法が存在し、例えばWO02055692、WO02055693、EP1144623B1及びWO03074654に記載されている。siRNA治療を使用することにより、いずれかの細胞内因子が標的となり、本発明のRANKLアンタゴナイズ及び阻害治療のために、阻害される。故に、そのような任意の化合物は、RANKL阻害剤として使用できる。好ましい態様において、RANKL阻害剤は、RANKL又はRANKリガンド、好ましくは抗RANKL抗体、例えばデノスマブDenosumabであり、又はUS2008107597に開示されているものである。抗RANKL抗体は、任意の機能的類似体及び誘導体を含む、例えばFab、Fab2、Fv又は単鎖抗体scAb等を含む。RANKL活性に関連するタンパク質及び印紙、特にRANKL及びRANK、並びにRANKLシグナリング経路のいずれかのタンパク質に特異的に結合する抗体も、本発明で意図される。当該抗体は、全長タンパク質、タンパク質の可溶化形態、又はその断片による免疫化により生産されてもよい。本発明の抗体は、ポリクローナルでもモノクローナルでもよく、組み換え抗体であってもよく、例えば軽鎖及び重鎖のマウス定常領域がヒト配列に置き換えられたキメラ抗体、又は相補鎖決定領域のみマウス起源であるCDRグラフト抗体等であってもよい。本発明の抗体は、ヒト抗体であってもよく、例えば、ヒト抗体を産生できる組換え動物の免疫化により産生されたものであってもよいWO9312227。抗体は、生体試料中のRANKLを検出するのに有用であるため、当該タンパク質を生産する細胞又は組織の同定を可能とする。また、RANKLに結合する抗体及び他の結合化合物とのブロック相互作用は、RANKL阻害剤としての医薬的用途を有する。RANKL阻害剤は、患者の体循環中で遊離RANKL濃度を減少させるのに適し、使用され得る。RANKはRANKLの唯一の天然の受容体ではない。オステオプロテギンOPGは、RANKL活性RANKLのRANKへの結合及びそのIKKα、IκBα、PNFκB及びサイクリンD1を介した、又はId2p21、MAPKErk及びp38を介したシグナル経路を低下させられる分泌性のデコイ受容体である。故に、OPGは、RANKL阻害剤として投与されてもよい。更に、RANK又はその可溶化形態自体が、RANKLの遊離血清濃度を低下させるためのRANKLリガンド及び阻害剤として使用され得る。前記阻害剤は、通常、治療有効量、即ち癌細胞の生存率を顕著に低下させるためにRANKL活性を低下させられる量で、投与される。特定の態様において、前記RANKL活性は、正常なヒトの通常のレベルにまで抑制されてもよく、更に、RANKL活性は、通常のレベルを下回って低下させられてもよい。好ましくは、RANKL活性は25以上、30以上、40以上、50以上、60以上、70以上、80以上、又は90以上減少させられる。好ましい態様において、この減少は、RANKLの血清レベルと一致する。前記阻害剤は、抗癌治療、好ましくは放射線又は化学治療と組み合わせて、又はそれらを強化するために使用されてもよい。本発明のこの側面において、対象における癌治療の効率を増大させる方法が提供され、当該方法は、癌治療を必要とする対象に治療有効量のRANKL阻害剤を投与する工程を含み、ここで、当該対象は、小分子薬剤、血管新生阻害剤、腫瘍ワクチン、化学治療、免疫治療、放射線治療、遺伝子治療及びそれらの組み合わせからなる群から選択される癌治療にも供される。RANKLは、DNAの損傷に関連する細胞死から癌細胞を保護する機能を有する。RANKL活性を低下させてRANKLの癌保護作用を低下させることにより、細胞はDNA損傷により死滅しやすくなる。故に、好ましい態様において、癌は、RANKL阻害剤と、更に細胞に損傷を与える更なる抗癌治療、例えば放射線又は化学治療等とを組み合わせて添加することにより治療される。好ましくは、そのような更なる癌治療剤は、特定の組織、例えば胸部に特異的なものであってもよく、例えば局所的な化学治療剤の投与、又は当該組織の癌細胞を標的とするホーミング剤の投与であってもよい。この態様において、本発明は、化学治療剤及びRANKL阻害剤を含むキットにも関する。更なる態様において、RANKL阻害剤は、ホルモン補充治療との組み合わせの使用、又はホルモン避妊との組み合わせの使用を提供し、これらは、乳癌細胞の発生のリスクを減少させる。前記患者は、好ましくは哺乳類、特に好ましくは霊長類、尚もより好ましくはヒト、特に女性である。患者は、ホルモン、特に女性ホルモンによる治療を受けており、又は受けたことがあってもよい。そのような過去の治療は、5,4,3,2年前、又は363230282624222018161412108765432又は1か月前であってもよい。患者、特にプロゲステロン又はプロゲスチンによるホルモン補充治療又はホルモン避妊を受けている女性は、癌の発生リスクが増大している。この増大したリスクを低下させるため、本発明は、上記のようなRANKL阻害剤の組み合わせ使用を提供する。更に、本発明は、癌患者のRANKL活性を低下させる方法を提供し、当該方法は、当該患者にRANKL阻害剤を投与する工程を含む。更なる態様において、本発明は、患者の癌細胞の量を減少させる方法に関し、当該方法は、当該患者にRANKL阻害剤を投与する工程を含む。更に、本発明は、細胞のDNA損傷による細胞死を増大させる方法を教示し、当該方法は、RANK、RANKL、IKKα、IkBα、PNFκB、サイクリンD1、Id2、MAPKErk、p38の阻害又はp21の増大、又はそれらの組み合わせを含み、特に、当該細胞にRANKL阻害剤を投与することによる、当該細胞におけるRANKLの阻害との組み合わせを含む。本発明に係る治療を受ける細胞は、ホルモン依存性癌が発生し得る組織、特に胸部組織の細胞であってもよく、癌細胞であってもよい。更に、前記細胞は、上皮細胞又は癌幹細胞であってもよい。特に、上皮由来の癌は、本発明の方法により効果的に治療され得る。特に好ましい態様において、前記癌は、乳腺上皮細胞起源である。更に、RANKL阻害は癌幹細胞に顕著な効果を及ぼし、そのような幹細胞を含む癌を予防又は減少させられる。好ましい治療又は予防方法は、上記のように、患者がホルモン治療、好ましくはホルモン補充治療、好ましくはプロゲステロン又はプロゲスチンによる治療、又はホルモン避妊を受けていることを特徴とする。上記のように、特に女性ホルモンによるホルモン治療は、乳癌のリスクを増大させるため、本発明の治療又は予防方法において、好ましくは、患者は、当該治療の前に、又は当該治療の期間中に、そのようなホルモン治療を受けている。ホルモンの過去の投与は、1,2,3,4,5年又はそれ以上前であってもよい。更なる側面において、本発明は、RANKL阻害剤及びプロゲステロン又はプロゲスチンから選択されるホルモン又はその誘導体、又はホルモン避妊剤を含有する、医薬組成物を提供する。上記のように、RANKL阻害は、女性ホルモン、特にエストロゲン、プロゲステロン又はプロゲスチンによる癌発生のリスクを減少させられる。更に、そのようなホルモンとRANKL阻害剤との組み合わせの投与の教示も、本発明により提供される。そのようなホルモンは、ホルモン補充療法又はホルモン避妊として使用されてもよい。ホルモン避妊製剤の最もありふれた種類のものは、エストロゲンとプロゲスチンの両方を含有し、又はプロゲステロン又はその合成類似体のみを含有するプロゲステロン製剤である。ホルモン依存性癌の発生のリスクを低下させるため、本発明は、女性ホルモン避妊剤を含むホルモン治療剤とRANKL阻害剤の組み合わせ使用を提供する。治療的又は予防的使用における医薬組成物又は製剤は、医薬として許容される希釈剤、担体、可溶化剤、乳化剤、保存料及び/又は助剤を含有してもよい。また、本発明は、治療有効量のRANKL阻害剤を含有する医薬組成物を提供する。治療有効量という用語は、特定の投与条件又は経路において治療効果を提供する量を意味する。前記組成物は、液体又は凍結乾燥状態であってもよく、様々なpH値及びイオン強度の希釈剤Tris、酢酸又はリン酸緩衝剤、Tween又はPolysorbate等の可溶化剤、ヒト血清アルブミン又はゼラチン等の担体、チメロサール又はベンジルアルコール等の保存料、及びアスコルビン酸又はメタ重亜硫酸ナトリウム等の抗酸化剤を含有してもよい。具体的な組成物の選択は、治療される状態、投与経路及び所望の薬物動態パラメーターを含む、多くの要素に依存する。siRNA製剤は、好ましくは、リポソーム製剤として投与される。本発明は、上記のようなホルモン治療剤、及びRANKL阻害剤を含むキットに関する。そのようなキットは、ホルモン治療剤及びRANKL阻害剤の別個の投与を可能とする。溶解性、安定性、血漿半減期及び生体利用効率を増大させるために、水溶性ポリマーで修飾されたRANKL阻害剤を含有する組成物も包含する。また、長期間の調整放出を行うために、RANKL阻害剤が、リポソーム、マイクロエマルジョン、ミセル又はベシクルに包摂されることも想定される。可溶性RANKL阻害剤は、腹腔内投与に適した微小粒子に製剤化されてもよい。本発明の組成物は、皮下、静脈内、又は筋肉内のいずれかの注射により、又は経口、経鼻、腹腔内、又は直腸投与により投与されてもよい。最終的に選択される投与経路は、多くの要素に依存し、当業者により確かめられる。また、本発明は、本発明の治療有効量の抗RANKL阻害核酸と医薬として許容される助剤とを含有する医薬組成物を提供する。核酸組成物は、RANKL又は上記のようなRANKLシグナリング経路の一部又は全部のコーディング領域、及び/又は隣接領域を、アンチセンス治療レジメンの一部として細胞及び組織に送達するのに適している。好ましい態様において、本発明は、以下のように定義される。1.対象の癌を治療又は予防する方法であり、当該対象に治療有効量のRANKL阻害剤を投与する工程を含む、前記方法。2.癌細胞のアポトーシスを増大させる方法であり、当該癌細胞にRANKL阻害剤を投与する工程を含む、前記方法。3.前記癌が乳癌又は前立腺癌である、項1又は2のいずれかに記載の方法。4.前記癌が、性ホルモン受容体、好ましくはプロゲステロン又はエストロゲン受容体を有する癌細胞を含む、項1~3のいずれか1項に記載の方法。5.前記癌が、原発性癌である、又は前記癌細胞が原発性癌の細胞である、項1~4のいずれか1項に記載の方法。6.患者のホルモン依存性癌の治療又は予防において使用されるRANKL阻害剤であり、好ましくは、当該癌が、性ホルモン受容体、好ましくはプロゲステロン又はエストロゲン受容体を有する癌細胞を含む、阻害剤。7.前記患者が、ホルモン治療、好ましくはプロゲステロン又はプロゲスチンによるホルモン補充治療を、好ましくはホルモン避妊を受けたことがある、項6に記載の阻害剤。8.前記癌が乳癌、胸部癌又は前立腺癌である、項6又は7のいずれかに記載の阻害剤。9.前記癌が上皮細胞起源である、項6~8のいずれか1項に記載の阻害剤。10.更なる抗癌治療、好ましくは放射線又は化学治療と組み合わせられる、又はそれらを強化する、項6~9のいずれか1項に記載の阻害剤。11.原発性癌を治療又は予防する、又は癌の再発を治療又は予防する、項6~10のいずれか1項に記載の阻害剤。12.ホルモン治療、好ましくは性ホルモンを用いたホルモン補充治療又はホルモン避妊と組み合わせて使用される、RANKL阻害剤。13.癌の発生のリスクを減少させる、項6~12のいずれか1項に記載の阻害剤。14.癌患者のRANKL活性を低下させる方法であり、当該患者にRANKL阻害剤を投与する工程を含む、前記方法。15.患者の癌細胞の量を減少させる方法であり、当該患者にRANKL阻害剤を投与する工程を含む、前記方法。16.細胞のDNAダメージによる細胞死を増大させる方法であり、好ましくは当該細胞にRANKL阻害剤を投与することにより、当該細胞中のRANK又はRANKL又はIKK-αを阻害する工程を含む、前記方法。17.前記患者又は細胞がホルモン治療を受けたことがある、項14~16のいずれか1項に記載の方法。18.前記ホルモンが、プロゲステロン又はプロゲスチンである、項14~17のいずれか1項に記載の方法。19.前記ホルモン治療が、ホルモン補充治療、又はホルモン避妊剤の投与を含む、項14~18のいずれか1項に記載の方法。20.前記RANKL阻害剤が、RANKL又はRANKリガンド又はsiRNAである、項1~19のいずれか1項に記載の阻害剤又は方法。21.前記RANKL阻害剤が抗RANKL抗体である、項20に記載の阻害剤又は方法。22.前記抗RANKL抗体がDenosumabである、項21に記載の方法。23.前記細胞が胸部組織細胞又は乳癌細胞であり、又は前記癌が胸部組織細胞又は乳癌細胞から選択される癌性細胞を含む、項1~22のいずれか1項に記載の阻害剤又は方法。24.前記細胞が上皮細胞又は基底細胞又は癌幹細胞であり、又は前記癌が、上皮細胞又は基底細胞又は癌幹細胞から選択される癌性細胞を含む、項1~23のいずれか1項に記載の阻害剤又は方法。25.RANKL阻害剤、及びエストロゲン、プロゲステロン若しくはプロゲスチンから選択されるホルモン若しくはその誘導体、又はホルモン避妊剤を含有する医薬組成物。26.更に、医薬として許容される希釈剤、担体、可溶化剤、乳化剤、保存料及び又は助剤を含有する、項25に記載の組成物。27.ホルモン治療に使用される、項25又は26のいずれかに記載の組成物。28.前記ホルモン治療が、避妊又はホルモン補充治療である、項27に記載の組成物。29.化学治療剤及びRANKL阻害剤を含有するキット。30.RANKL阻害剤、及びエストロゲン、プロゲステロン、又はプロゲスチンから選択されるホルモン又はその誘導体、又はホルモン避妊剤を含むキット。本発明は、以下の図面及び実施例により更に詳述されるが、それらの具体例に限定されることはない。実施例1:マウスRankfloxedマウスが最近作製された。要するに、Rank遺伝子座を有しないマウスを作製するために、rankfloxedマウスが、βアクチンCreユビキタスデリーターマウスと交配させられた。rankfloxed又はrankΔ遺伝子座を有するマウス及びMMTVCreマウスをBALBcバックグラウンド上に7回バッククロスした後、MMTVCrerankΔfloxedが作製された。MMTVNeuTマウスは、GuidoForniMilanから提供して頂いた。MMTVCre及びMxCreマウスはJacksonLaboratoryから取得された。K5Cre、IKKαfloxed及びNFATc1floxedマウスは、既に記載されている。マウスの遺伝型は、PCR及びサザンブロット解析により判定された。全ての実験において、同一のブリーディングからの同腹マウスのみが使用された。全てのマウスは、制度的ガイドラインに従い交配及び維持された。腫瘍におけるRANKの欠失及びCreの効果RankΔmam雌で発生した腫瘍のサザンブロットは、RANKの欠失を示し、いくつかの残りの野生型のバンドが観察されたが、これは、他の細胞腫及び又はエスケーパー細胞の存在により説明され得る。Cre陰性対照の雌及びMMTVCreトランス遺伝子を発現する同腹において腫瘍発生の差は見られず、これは、Creの発現が、MPADMBA胸部腫瘍モデルで腫瘍の発生率に影響しないことを示唆する。実施例2:MPADMA誘導胸部癌形成MPADMBA処理は、公知のように実施された。要するに、6週齢マウスをケタミンキシラジンで麻酔し、徐放型MedroxyprogesteroneAcetatペレットを右脇腹に皮下移植した。図2aに概説したように、その後8週間に6回、200μlのDMBAを経口投与した。胸部腫瘍の発生は、触診により判断した。Cre陰性対照の雌及びMMTVCreトランス遺伝子を発現する同腹において腫瘍発生に差は見られず、これは、Creの発現自体はMPADMBA胸部腫瘍モデルにおいて腫瘍の発生に影響しないことを示唆する。実施例3:胸部組織移植移植実験のために、未産3週齢ドナーから胸部上皮組織を切り出し、公知のように、それを3週齢ホストnunuマウスの胸部脂肪体に移植した。手術の3週間後、ホストをつがわせ、胸部組織を解析のために切り出した。実施例4:組織学、ホールマウント及び免疫組織化学組織学的解析のために、5μm切片を切り出し、ヘマトキシリン及びエオシンで染色した。乳腺のホールマウント染色は、公知のように実施された。イムノペルオキシダーゼ染色のため、パラフィン包埋切片を脱水し、抗原エピトープを10mMクエン酸緩衝剤又は超音波を使用して露出させた。切片を、サイトケラチン5、サイトケラチン14、Eカドヘリン、抗Ki67及び抗活性カスパーゼ3に対する抗体とインキュベーションし、ペルオキシダーゼコンジュゲート二次抗体で可視化した。組織形態的指標は、陽性上皮細胞数を全上皮細胞数で割って算出され、Ki67染色では核の数は1000個以上で、活性カスパーゼ3染色では5000個以上であった。実施例5:ウエスタンブロットヒト乳癌細胞株SKBR3及び初代非形質転換マウス胸部上皮細胞を、組み換えマウスRANKLref9で刺激し、又はしなかった。腺癌を対照及び突然変異マウスから単離し、タンパク質ライゼートを調製した。ウエスタンブロットを、標準的なプロトコルを使用して実施した。要するに、ブロットを1xTBS01Tween20中5BSAで1時間ブロッキングし、一次抗体で一昼夜4°Cでインキュベートした。マウスRANKLCyclinD1βアクチンリン酸化NFκBNFκBリン酸化IκBαIκBαリン酸化IKKαIKKαIKKβIKKγリン酸化AktAktリン酸化Erk12Erk12及びp38MAPKp53リン酸化Chk1Chk1p38MAPK及びγH2Axに反応する一次抗体を使用した。ブロットをTBSTで30分間3回洗浄し、HRPコンジュゲート二次抗体で1時間室温でインキュベートし、TBSTで30分間3回洗浄し、ECLで可視化した。実施例6:qRTPCR腫瘍の全RNAを、説明書に従い、RNeasyMiniKitを使用して調製した。全RNAは、定量的RTPCR解析に供した。以下のプライマーが使用された。βアクチン順プライマー5’GCTCATAGCTCTTCTCCAGGG3’βアクチン逆プライマー5’CCTGAACCCTAAGGCCAACCG3’RANKL順プライマー5’CTGAGGCCCAGCCATTTG3’RANKL逆プライマー5’GTTGCTTAACGTCATGTTAGAGATCTTG3’RANK順プライマー5’CTTGGACACCTGGAATGAAG3’RANK逆プライマー5’CAGCACTCGCAGTCTGAGTT3’CyclinD1順プライマー5’CTGTGCGCCCTCCGTATCTTA3’CyclinD1逆プライマー5’GGCGGCCAGGTTCCACTTGAG3’p21順プライマー5’GTGGCCTTGTCGCTGTCTT3’p21逆プライマー5’GCGCTTGGAGTGATAGAAATCTG3’tRANKL順プライマー5’GCGCCGGGCCAGCCGAGACTAC3’RANKL1順プライマー5’GTCCCACACGAGGGTCCGCTGC3’RANKL2順プライマー5’TGCGCACTCCGGCGTCCCG3’RANKL3順プライマー5’CCGAGACTACGGCGGATCCTAACAG3’RANKLcom逆プライマー5’TCAGTCTATGTCCTGAACTTTGAAAGCCCC3’Puma順プライマー5’CCGCCTGATGCCCTCCGCTGTAT3’Puma逆プライマー5’CGGGCCCACTCCTCCTCCTCCAC3’Noxa順プライマー5’ACTTTGTCTCCAATCCTCCG3’Noxa逆プライマー5’GTGCACCGGACATAACTGTG3’Bim順プライマー5’GTTGAACTCGTCTCCGATCC3’Bim逆プライマー5’GCCCCTACCTCCCTACAGAC3’実施例7:DNAダメージ応答細胞周期のアレスト及びアポトーシスの測定のために、マウス胸部上皮細胞及びSKBR3ヒト乳癌細胞を6ウェルプレートに100000細胞/ウェルの細胞密度で播種し、そして24時間培養した。これらの細胞を、組換えRANKLの存在下又は非存在下、ドキソルビシン又はγ放射線で処理した。細胞周期のアレスト及び死細胞の数は、プロビジウムヨーダイド染色を使用して判定された。インビトロで乳腺上皮細胞死を判定するため、対照及びRANKΔmam同腹雌を、合計の線量5Grayでγ放射線処理した。6時間後、乳腺を単離して、アポトーシスの指標である活性カスパーゼ3で免疫染色した。実施例8:初代胸部上皮細胞のFACS解析胸部上皮サブ集団のFACS解析のために、以下の組織分解プロトコルを使用して、単細胞懸濁液を作成した。鼠蹊部の両方の脂肪体からリンパ節を取り除き、脂肪体を、50mlファルコンチューブ中の2mlの完全Epicult培地10ngmlEGF4μgmlヘパリン25mlFBS及び抗生物質を添加したEpiCult-B基本培地に25xコラゲナーゼ/ヒアルロニダーゼを加えたものの中で、37°Cで25時間消化した。強く撹拌した後、ペレットを10mLのHF培地で洗浄した。そして、ペレットを、予め温めておいたトリプシン‐EDTA2ml中に再懸濁した。もう一度10mlのHFで洗浄した後、ペットを予め温めておいた2mlのディスパーゼに200μlの1mgmLDNAseIを添加したものの中で再懸濁した。HFによる最後の洗浄の後、細胞をカウントし、FACS染色用に調製した。100万個の細胞を、以下の抗体でインキュベーションした。内皮細胞をラベルするビオチンコンジュゲート抗CD31、及び造血系細胞をラベルするビオチン化CD45及びTer119、室温、10分間。造血及び内皮細胞は、ストレプトアビジンコンジュゲートAPCを使用するFACSにより排除された。抗CD49f及びCD24による染色は、公知のように10、11、胸部幹細胞集団を同定するのに使用された。実施例9:癌幹細胞アッセイ胸部癌幹細胞、即ち腫瘍出発細胞TICの自己新生は、公知のように、マンモスフィアアッセイを使用してアッセイされた。要するに、同程度のサイズの腫瘍をすりつぶし、25xコラゲナーゼ/ヒアルロニダーゼを添加した完全EpiCult培地中で消化した。そして、2x105個の細胞を、6ウェル超低接着プレート中で、B2720ngmlEGF及び20ngmlbFGFを添加した無血清EpiCult培地中で培養した。7日間の培養で形成された初代マンモスフィアを穏やかな遠心分離で回収し、トリプシンを用いて消化して単細胞の懸濁物とし、そして上記のように、それらの二次マンモスフィアを形成する能力をアッセイした。実施例10:接着依存的増殖ソフトアガー中の細胞の増殖能力を、公知のようにアッセイした。要するに、DNAグレードアガロースを底層として使用し、15mlアガロース中に2x104個のSKBR3細胞を播種した。細胞は、10FCSを添加した15mlDMEMで重層され、24日間培養された。実施例11:プロゲステロンアッセイ第1のインキュベーション:ビオチン化モノクローナルプロゲステロン特異的抗体及びルテニウム複合体でラベルされたプロゲステロン誘導体の存在下、30μlの試料を、ダナゾールとインキュベーションして、プロゲステロンを放出させた。試料由来のプロゲステロンは、抗体結合部位において、ラベルされたプロゲステロンと競合する。第2のインキュベーションストレプトアビジン被覆微小粒子を添加した後、前記複合体は、ビオチンとストレプトアビジンの相互作用により固相に結合する。固相に結合したラベルされたプロゲステロン誘導体の量は、試料のプロゲステロン量と反比例する。当該反応混合物を測定セルに充填する。当該セル中で、前記微小粒子は、電極表面に磁気的に捕捉される。未結合の基質は、ProCellで除去される。電極に電圧をかけると、光電子増倍管により測定される化学発光放射を誘導する。結果は、2点キャリブレーションにより装置特異的に作成されるキャリブレーション曲線及び試薬バーコードにより提供されるマスター曲線により判定される。試薬ワーキング溶液Mストレプトアビジン被覆微小粒子、1ボトル、65ml:ストレプトアビジン被覆微小粒子、072mgmL;保存料。R1抗プロゲステロンAbビオチン、1ボトル、10ml:ビオチン化モノクローナル抗プロゲステロン抗体015mgL、リン酸緩衝剤25mmolLpH70保存料。R2プロゲステロンペプチドRu2、1ボトル、8ml:プロゲステロンとルテニウム複合体との会合、10ngmlリン酸緩衝剤25mmolLpH70保存料。実施例12:統計本明細書中の全ての値は、平均semとして表される。群間の比較は、スチューデントt検定により行われた。腫瘍発生のKaplanMeier解析において、ログランク検定が実施された。P005は、統計的に顕著なものとして受け入れられた。ログランク検定に加えて、posthocpower解析が実施され、実験動物の数あたり等しい腫瘍発生回数の帰無仮説を正しく否定する可能性を計算した。RANKΔmam動物を含む試験において、帰無仮説は、0933の確率で否定され、IKKαΔmam動物の場合は0766である。この帰無仮説の試験に関連するI型誤差確率は005である。ヒトデータは、ペアt検定、MannWhitneyU検定又はSpearmanランク検定を使用して解析された。実施例13:RANKLレベルに対するプロゲスチンの効果雌のマウスにMPAペレットを移植して、RANK発現を試験した。MPA処理は、単離された胸部上皮細胞においてRANKLmRNAの2000倍以上の誘導をもたらした。RANKLのデコイ受容体オステオプロゲステリン、PTHrP、及びTRAILは、単離された胸部上皮細胞のRANKmRNA発現を変化させなかった。免疫組織化学により、乳腺におけるRANKLタンパク質の誘導が確認された。単離された胸部上皮細胞のウエスタンブロッティングも、RANKLの19kDa可溶性形態の誘導を示し、これは、選択的スプライシング、及び細胞表面からRANKLを刈り取る2つのプロテアーゼMMP14及びADAM17TACEの誘導による可能性が最も高い。インビトロ細胞培養アッセイにおけるMPAに応答するRANKL誘導は観察されず、これは、プロゲスチン自体はRANKL発現を誘導するのに不十分であることを示す。MPAは乳癌細胞のプロラクチン受容体及びプロラクチンの転写を誘導し、プロラクチンはJak2Stat5シグナリングを介してRANKLを直接誘導するため、MPAがプロラクチン受容体ノックアウトマウスの乳腺においてRANKLを誘導するか否かが試験された。MPAは雌対照マウスにおいてRANKLタンパク質の実質的な生産を引き起こすが、我々は、プロラクチン受容体突然変異におけるRANKL誘導を検出し得なかった。このデータは、MPAが、プロラクチン受容体を介して乳腺におけるRANKL発現を引き起こすこと、及び/又はプロラクチン及びMPAがRANKL誘導において協調していることを示唆する。実施例14:RANKLRANK機能不全マウスにおけるRANKLレベルに対するプロゲスチンの効果MPA媒介腫瘍形成におけるRANKLRANKの役割を試験するため、K5Cre及びMMTVCre媒介RANK遺伝子座除去を使用して、胸部上皮細胞においてRANKを除去した。いずれのマウスも健康に見え、骨構造やリンパ節形成も正常であった。予想通り、K5CrerankfloxΔマウスは、成熟期に正常に見える乳腺を呈したが、これらのマウスは、母乳を分泌する小葉腺胞構造が妊娠中に発達しなかった。これらの効果は、移植実験を使用した細胞自律的であった。MMTVCrerankfloxΔマウスにおいて、未産雌における乳腺の発達及び妊娠期の母乳を分泌する小葉腺胞構造の形成は、正常に見えた。正常の生理学における幾つかの細胞集団に影響し得るK5CrerankfloxΔマウスにおける発生の効果の問題を排除するため、MMTVCrerankfloxΔマウスは、全ての更なる実験に使用された。これらのMMTVCrerankfloxΔ突然変異マウスは、以後RANKΔmamと表記する。実施例15:プロゲスチン投与によるRANKL活性化のメカニズム野生型の集団において、MPA処理は、胸部上皮細胞の増殖を引き起こす。MPAが誘導する胸部上皮細胞の増殖は、RANKΔmam雌において顕著に低下した。故に、未産雌へのRANKL腹腔内注射は、RANKを介した乳腺上皮細胞の増殖を引き起こした。最近、内生的プロゲステロンは、妊娠期及び発情周期におけるLinCD24CD49fhi幹細胞の数に影響することが報告された。いずれの研究も、系は、インビボ完全抗体ブロッキング試験及びRT-PCR発現に基づいて暗示されたが、これが二次的な効果ではなく哺乳類上皮細胞におけるRANKLRANKの直接の効果であるか否かはわからなかった。故に、MPA等のプロゲスチンもLinCD24CD49fhi細胞を増幅できるか否かをアッセイした。MPA処理は、LinCD24CD49fhi細胞を2倍増幅した。そのような増幅は、MPA処理したRANKΔmam雌では起こらなかった。これらのデータは、RANKLRANK系がLinCD24CD49fhi細胞の増幅をコントロールするという最初の遺伝的な証明を提供する。図16:対照及びRANKLRANK欠損マウスにおける、RANKRANKLを介した癌発生に対するプロゲスチンの影響WomensHealthInitiative及びMillionWomenStudyにおいて、プロゲスチンは、乳癌の発生と疫学的に関連していた。プロゲスチン駆動乳癌は、雌マウスでモデル化されており、DNAダメージ薬剤ジメチルベンズアントラセンの存在下、徐放型MPAペレットの移植は胸部癌を引き起こす。対照雌において、MPADMBA処理は、触診可能な乳癌の急速な発生を誘導した。興味深いことに、RANKΔmam雌マウスにおいて、MPADMBA誘導胸部癌の発生に顕著な遅延が観察された。RANKΔmam雌における腫瘍発生の遅延は、生存率の顕著な向上も引き起こした。RANKΔmam雌で発生した腫瘍のサザンブロッティングにおいて、RANKの欠失が確認された。対照及びRANKΔmam雌で発生した全ての腫瘍は、サイトケラチン5及びCK14陽性基底細胞サブタイプのEカドヘリン発現管腺癌の典型的な組織病理を示した。しかしながら、RANKΔmam雌で生じた管腺癌は、扁平新生物の発展領域を頻繁に発生させた。これらの組織病理的変化と同様に、対照及びRANKΔmam雌の胸部腺癌の遺伝子発現プロフィールは、遺伝子クラスタリングにより評価されるように、分子署名の区別できる相違を示した。実施例17:プロゲスチン試行及びDNAダメージの後の癌の発生RANKΔmamがプロゲスチン誘導胸部癌の発生の遅延を示したので、今度は、MPADMBA試行後早期の胸部腫瘍の発生を解析した。最後のDMBA処理の1週間後、全てのRANK発現対照雌は、既に、複数のInsitu腺癌を呈しており、浸潤性の胸部腫瘍もあった。対照的に、RANKΔmam動物は、最後のDMAB試行の1週間後、Insituで観察された癌は非常に僅かで、浸潤性の胸部癌は認められなかった。最後のDMBA試行から3週間後、Insituの癌の発生は、対照とRANKΔmam雌の間で同等であったが、浸潤性の癌は、尚もRANKΔmam雌では非常に低頻度であった。更に、増殖はRANKΔmam雌の癌において顕著に低下した。肝臓、心臓、筋肉及び増殖期間を含む複数の他の組織においてRANKの欠失が見られたが、胸部上皮細胞では見られず、MxCrerankfloxfloxマウスの使用は、MPADMBA誘導胸部癌の発生を遅延しなかった。これは、RANKRANKL機能不全の効果が、胸部上皮細胞に限定されることを示唆する。更に、乳癌の遺伝的モデルであるMMTVNeuTトランスジェニックマウスにおいて、RANKの乳腺特異的欠失は、胸部癌の発生又は腺癌の組織病理学を変化させなかった。故に、胸部上皮細胞におけるRANKの遺伝的不活性化は、プロゲスチン駆動胸部癌の発生の顕著な減少及び遅延を引き起こす。実施例18:RANKLシグナリング胸部上皮細胞におけるIKKαNFκBCyclinD1を介したRANKLRANKシグナリングは、図14aに示されている。RANKL刺激は、実際に、初代マウス乳腺上皮細胞におけるNFκB及びIκBαのリン酸化を引き起こした。加えて、MECのRANKL刺激は、p38-MAPK及びERKのリン酸化を引き起こした。RANKがインビボでプロゲステロンの下流のNFκBCyclinD1活性化を仲介するか否かを直接示すため、マウスをMPAで処理した。MPA処理の3日後、核へのリン酸化IκBαの蓄積が見られ、これは、活性NFκB経路の指標であり、また、胸部上皮細胞におけるサイクリンD1タンパク質の発現が誘導された。これらのいずれも、RANKΔmam雌では著しく低下した。更に、対照及びRANKΔmam雌から単離したMPADMBA誘導哺乳類腺癌において、我々は、NFκB経路の阻害及びサイクリンD1のmRNA発現の下方制御を見出した。これらの初代腫瘍において、Id2経路により転写的に抑制される遺伝子であるp21mRNAの上方制御も観察された。Id2経路は、胸部上皮細胞においてRANKLRANKの下流の経路であることが確認されている。これらの知見をヒトに拡張するために、ヒトSKBR3乳癌細胞株がアッセイされた。RANKL刺激は、NFκB、p38MAPK及びERK活性化、並びにSKBR3細胞の増殖を誘導した。更にRANKL刺激の効果を試験するために、インビボでの腫瘍形成に関連するこれらの細胞の接着非依存的な増殖能力をアッセイした。重要なことに、EGFR刺激と類似して、RANKLに誘導されたSKBR3細胞のソフトアガー中の増殖は、RANKシグナリングが増殖を引き起こすだけでなく、接着非依存的増殖を誘導する形質転換因子としても振る舞うことを示す。破骨細胞において、NFκB経路を除いて、カルシニューリンNFATc1シグナリング経路は、RANKLRANK仲介破骨細胞形成に必須であることが見出された。NFATc1は、RANKL仲介破骨細胞形成の過程で、Id2経路によっても制御される。これらの重要なRANKLRANK活性化経路がMPADMBA誘導胸部癌においても操作可能であるか評価するため、MMTVCrenfatc1floxΔ及びMMTVCreIkkαfloxfloxマウスを作製して、胸部上皮細胞においてNFATc1及びIKKαを欠失させた。いずれの突然変異マウスも健康に見え、アッセイされたいずれの期間においても機能不全を示さなかった。MPADMBAによる試行において、IKKαΔmamマウスは、胸部癌の発生の遅延を示した。IKKαΔmamマウス由来の腫瘍において、IKKβ及びIKKγの正常な発現は見られたが、NFκBの活性化は低下しており、IκBタンパク質レベルは増大し、p65NFκBリン酸化は減少し、そしてNFκB標的遺伝子のサイクリンD1の発現が下方制御された。これは、IKKαが、実際に、これらの癌において、NFκBシグナリングに必要であることを示唆する。予想された通り、Id2経路遺伝子のp21は、IKKαΔmamマウス由来の腫瘍に影響しなかった。対照及びNFATc1Δmamマウスの間で、腫瘍発生における顕著な差は見られなかった。これは、下流のシグナリングの必要性が、破骨細胞前駆体及び乳腺上皮細胞の間で異なることを示唆する。故に、乳腺上皮細胞において、NFATc1でなくIKKαの欠失が、プロゲスチン駆動乳癌の発生に影響する。実施例19:DNAダメージによるホルモン駆動癌発生MPA処理は胸部上皮細胞の迅速かつ強力な増殖を誘導するが、MPA単独は、DNA突然変異を誘導する発がん物質を必要とする胸部癌を引き起こすのに充分でない。細胞周期アレストやアポトーシス等のDNAダメージに対する細胞応答におけるRANKLの役割を解析するため、マウス初代胸部上皮細胞及びRANKL応答ヒト乳癌細胞株SKBR3を、DNA損傷剤ドキソルビシン又はγ放射線により処理した。RANKL処理は、機能的DNAダメージ応答の古典的なマーカーであるγH2AX及びp53の誘導又はChk1の活性化のいずれも引き起こさなかった。更に、RANKLは、γ放射線又はドキソルビシンによるDNAダメージ後の早期の細胞周期のアレストに影響しなかった。驚くべきことに、RANKL処理は、γ放射線又はドキソルビシンが誘導したDNAダメージに応答した細胞死からの顕著な保護をもたらした。γ放射線が誘導するアポトーシス促進分子Bim、Puma及びNoxaの上方制御は、RANKLの存在下で起こらなかった。インビボにおいて、雌マウスのγ放射線照射は、胸部上皮細胞のアポトーシスを5倍に誘導した。故に、この公知のシステムが、γ放射線誘導細胞死に対するMPARANKLRANKの効果を評価するのに使用された。MPA処理は、実際に、インビボで胸部上皮細胞をγ放射線誘導アポトーシスから保護した。胸部上皮細胞でのRANK発現の喪失は、MPAのγ放射線誘導細胞死に対する保護効果を無効にした。更に、IKKα経路は、MPA誘導性のγ放射線後の胸部上皮の保護に関与していた。故に、細胞周期の進行を促進するのに加え、MPAは、RANKLRANK及びIKKαシグナリングを介して、DNAダメージ後の細胞死から細胞を保護できる。実施例20:腫瘍出発幹細胞ヒト及びマウスにおいて、胸部腫瘍は、幹細胞集団から生じ得ることが示されている。故に、RANKの喪失が、乳癌幹細胞、即ち腫瘍出発細胞に影響するか否かを試験した。TICは、非接着性マンモスフィアを形成する能力により機能的に評価された。対照及びRANKΔmam雌から単離した癌細胞は、初代マンモスフィアを形成できた。しかしながら、単一細胞に分散した細胞が二次マンモスフィアを形成する能力は、RANKΔmamマウス由来のTICにおいて、顕著に阻害されたこれらのデータは、RANK活性又は発現の喪失が、癌幹細胞の自己新生能力を顕著に阻害することを示唆する。実施例21:考察これらの結果に基づき、MPA等のホルモンがいかにしてRANKLを介して癌を駆動するかの分子メカニズムが明らかになった。MPAが、乳腺のRANKLの強力な誘導を引き起こす。かかるMPAに応答してのRANKLの誘導は、プロラクチン受容体及び恐らく他の中間物の発現を必要とする。胸部上皮細胞上のRANKを介したRANKLは、これらの細胞を細胞周期に移行させ、重要なことに、γ放射線を含むDNAダメージに応答するアポトーシスからマウス及びヒト胸部上皮細胞を保護する。更に、RANKLRANKは、乳癌幹細胞の自己新生及び接着非依存的増殖をコントロールする。故に、プロゲスチンが誘導したRANKLRANKは、損傷を受けた胸部上皮に対して、乳癌が発生するのに重要な増殖及び生存の利点を提供する。これらの効果は、少なくとも部分的に、IKKαNFκBシグナリング経路を介して媒介される。数百万人の女性が避妊及びホルモン補充治療においてプロゲステロン誘導体を服用している。そのようなホルモンは、乳癌発生のリスクの増大と疫学的に関連していた。本発明は、RANKLRANK系が、プロゲスチン及び上皮癌形成の間の重要な分子的関連であることを示している。故に、RANKL阻害は、癌を予防及び/又は治療するための新しいアプローチである。また、RANKL阻害は、放射線又は他のDNA損傷薬剤等に基づく抗癌治療に対する癌細胞の感受性を強化するのにも使用され得る。参考文献1HanadaRetalCentralcontroloffeverandfemalebodytemperaturebyRANKLRANKNature46250592TarutaniMetalTissuespecificknockoutofthemousePigagenerevealsimportantrolesforGPIanchoredproteinsinskindevelopmentProcNatlAcadSciUSA94740053GareusRetalNormalepidermaldifferentiationbutimpairedskinbarrierformationuponkeratinocyterestrictedIKK1ablationNatCellBiol946194AliprantisAOetalNFATc1inmicerepressesosteoprotegerinduringosteoclastogenesisanddissociatessystemicosteopeniafrominflammationincherubismJClinInvest1183775895AldazCMLiaoQYLaBateMJohnstonDAMedroxyprogesteroneacetateacceleratesthedevelopmentandincreasestheincidenceofmousemammarytumorsinducedbydimethylbenzanthraceneCarcinogenesis172069726CaoYLuoJLKarinMIkappaBkinasealphakinaseactivityisrequiredforselfrenewalofErbB2Her2transformedmammarytumorinitiatingcellsProcNatlAcadSciUSA1041585277RobinsonGWHennighausenLInhibinsandactivinsregulatemammaryepithelialcelldifferentiationthroughmesenchymalepithelialinteractionsDevelopment124270188FataJEetalTheosteoclastdifferentiationfactorosteoprotegerinligandisessentialformammaryglanddevelopmentCell10341509LaceyDLetalOsteoprotegerinligandisacytokinethatregulatesosteoclastdifferentiationandactivationCell931657610StinglJetalPurificationanduniquepropertiesofmammaryepithelialstemcellsNature439993711ShackletonMetalGenerationofafunctionalmammaryglandfromasinglestemcellNature43984812DontuGetalInvitropropagationandtranscriptionalprofilingofhumanmammarystemprogenitorcellsGenesDev1712537013FreedmanVHShinSICellulartumorigenicityinnudemicecorrelationwithcellgrowthinsemisolidmediumCell3355914JonesDHetalRegulationofcancercellmigrationandbonemetastasisbyRANKLNature440692615AsselinLabatMLetalControlofmammarystemcellfunctionbysteroidhormonesignallingNature16JoshiPAetalProgesteroneinducesadultmammarystemcellexpansionNature17KimNSetalReceptoractivatorofNFkappaBligandregulatestheproliferationofmammaryepithelialcellsviaId2MolCellBiol2610021318FreedmanVHShinSICellulartumorigenicityinnudemicecorrelationwithcellgrowthinsemisolidmediumCell3355919EwanKBetalTransforminggrowthfactorbeta1mediatescellularresponsetoDNAdamageinsituCancerRes6256273120PeceSetalBiologicalandmolecularheterogeneityofbreastcancerscorrelateswiththeircancerstemcellcontentCell140627321HanahanDWeinbergRAThehallmarksofcancerCell1005770"