NOD2NucleotidebindingOligomerizationDomainprotein2を発現する幹細胞にNOD2のアゴニストを添加して培養した幹細胞またはその培養物を含む、免疫疾患または炎症性疾患の予防または治療用の薬学的組成物。前記NOD2のアゴニストが、MDPムラミルジペプチドであることを特徴とする、請求項1に記載の薬学的組成物。前記幹細胞が、ヒト成体幹細胞、ヒト多能性幹細胞、誘導多能性幹細胞inducedpluripotentstemcell、動物の胚性幹細胞または動物の成体幹細胞であることを特徴とする、請求項1に記載の薬学的組成物。前記成体幹細胞が、間葉系幹細胞、ヒト組織由来間葉系間質細胞、ヒト組織由来間葉系幹細胞、多能性幹細胞または羊膜上皮細胞であることを特徴とする、請求項3に記載の薬学的組成物。前記成体幹細胞が、臍帯由来間葉系幹細胞、臍帯血由来間葉系幹細胞、骨髄由来間葉系幹細胞、脂肪由来間葉系幹細胞、筋肉由来間葉系幹細胞、神経由来間葉系幹細胞、皮膚由来間葉系幹細胞、羊膜由来間葉系幹細胞および胎盤由来間葉系幹細胞から構成された群から選択される間葉系幹細胞であることを特徴とする、請求項4に記載の薬学的組成物。NOD2を発現する分離された間葉系幹細胞を含む、免疫疾患または炎症性疾患の予防または治療用の薬学的組成物。前記免疫疾患または炎症性疾患が、自己免疫疾患、移植拒絶反応、関節炎、移植片対宿主病、細菌感染、敗血症または炎症であることを特徴とする、請求項1または6に記載の薬学的組成物。前記自己免疫疾患が、クローン病、紅斑病、アトピー性皮膚炎、関節リウマチ、橋本甲状腺炎、悪性貧血、アディソン病、1型糖尿病、ループス、慢性疲労症候群、線維筋痛、甲状腺機能低下症および亢進症、硬皮症、ベーチェット病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、重症筋無力症、メニエール症候群Menieressyndrome、ギランバレー症候群GuilianBarresyndrome、シェーグレン症候群Sjogrenssyndrome、白斑症、子宮内膜症、乾癬、白斑症、全身性硬皮症、喘息および潰瘍性大腸炎からなる群から選択されることを特徴とする、請求項7に記載の薬学的組成物。NOD2を発現する幹細胞にNOD2アゴニストを添加して培養した幹細胞またはその培養物を被験体に投与する段階を含む、被験体の免疫反応または炎症反応を抑制する方法。免疫反応または炎症反応を抑制して、被験体の免疫疾患または炎症性疾患の予防または治療を行うことである、請求項9に記載の方法。前記NOD2のアゴニストが、MDPであることを特徴とする、請求項9に記載の方法。前記NOD2のアゴニストの濃度が、培地に対して1~100μgmlであり、添加して培養する時間が01~200時間であることを特徴とする、請求項9に記載の方法。NOD2を発現する分離された間葉系幹細胞またはその培養物を被検体に投与する段階を含む、被検体の免疫反応または炎症反応を抑制する方法。前記投与段階が、腹腔もしくは血管内投与、病変への直接投与または関節腔Synovialcavity内投与であることを特徴とする、請求項9または13に記載の方法。NOD2を発現する幹細胞にNOD2のアゴニストを添加して培養する段階を含む、免疫抑制剤または抗炎症剤の製造方法。前記NOD2のアゴニストが、MDPであることを特徴とする、請求項15に記載の方法。NOD2を発現する分離された間葉系幹細胞を培養する段階を含む、免疫抑制剤または抗炎症剤の製造方法。NOD2を発現する幹細胞をNOD2のアゴニストを添加した培地で培養する段階を含み、培養時、前記幹細胞からPGE2プロスタグランジンE2またはTGFβ1Transforminggrowthfactorbeta1が分泌されることが特徴である、PGE2またはTGFβ1の製造方法。前記NOD2のアゴニストが、MDPであることを特徴とする、請求項18に記載の方法。NOD2を発現する分離された間葉系幹細胞を培養する段階を含み、培養時、前記幹細胞からPGE2またはTGFβ1が分泌されることが特徴であるPGE2またはTGFβ1の製造方法。NOD2を発現する幹細胞およびNOD2のアゴニストを含む、移植体。前記NOD2のアゴニストが、MDPであることを特徴とする、請求項21に記載の移植体。NOD2を発現する分離された幹細胞を含む、移植体。移植体内でNOD2を発現する幹細胞にNOD2のアゴニストを添加して培養し、その後幹細胞を除去した、前記移植体。前記NOD2のアゴニストが、MDPであることを特徴とする、請求項24に記載の移植体。移植体内でNOD2を発現する幹細胞にNOD2のアゴニストを添加して培養する段階を含む移植体の製造方法。培養段階の後に、幹細胞を除去する段階をさらに含むことが特徴である、請求項26に記載の方法。前記NOD2のアゴニストが、MDPであることを特徴とする、請求項26に記載の方法。NOD2を発現する幹細胞またはNOD2のアゴニストを含む、複合体。前記幹細胞のNOD2にNOD2のアゴニストが結合されていることが特徴である、請求項29に記載の複合体。前記幹細胞のNOD2にNOD2のアゴニストが結合されNOD2が活性化されていることが特徴である、請求項29に記載の複合体。NOD2を発現する幹細胞にNOD2のアゴニストを添加して得た、培養物。本発明者らは、幹細胞を用いて、より効果的に免疫または炎症を調節する方法を開発しようと鋭意努力を続けた結果、NOD2受容体が幹細胞で発現され、NOD2受容体を介して幹細胞が免疫調節することを確認した後、NOD2のアゴニストであるMDPで幹細胞を処理することにより、PGE2およびTGFβ1が有意に大量に生産され、免疫反応がより一層効果的に抑制され、それにより、大腸炎モデルおよびアトピー性皮膚炎モデルに対する治療効果が実証されることにより、本発明を完成するに至った。本発明の目的は、従来の免疫抑制剤および炎症抑制剤を代替することができる、副作用がなく且つ経済的であるNOD2を発現する幹細胞に、NOD2のアゴニストを添加して培養した幹細胞またはその培養物を含む、免疫疾患または炎症性疾患の予防または治療用の薬学的組成物を提供することにある。本発明の別の目的は、前記組成物を免疫疾患または炎症性疾患にかかった被験体に投与する段階を含む、免疫疾患または炎症性疾患の治療方法を提供することである。本発明のさらに別の目的は、前記幹細胞またはその培養物を被験体に投与する段階を含む、被験体の免疫反応または炎症反応を抑制する方法を提供することである。本発明のさらに別の目的は、免疫抑制剤または抗炎症剤の製造方法を提供するもことである。本発明のさらに別の目的は、様々な用途で使用されているプロスタグランジンE2およびTGFβ1の製造方法を提供することである。本発明のさらに別の目的は、前記のNOD2を発現する幹細胞およびNOD2のアゴニストを含む移植体または前期移植体から幹細胞を除去した移植体および前記移植体の製造方法を提供することである。本発明のさらに別の目的は、上記のNOD2を発現する幹細胞およびNOD2のアゴニストを含む複合体を提供することである。本発明のさらに別の目的は、NOD2を発現する幹細胞にNOD2のアゴニストを添加して培養して得られる培養物を提供することである。本発明は、免疫疾患および炎症性疾患の予防または治療に使用することができる医薬品組成物を提供するのに効果的である。また、複数の有用な用途で知られているPGE2およびTGFβ1を、構成的な面において簡易で経済的でありながら、化学工程がなく、且つ向上した収率で生産することができるPGE2およびTGFβ1の製造方法を提供するのに効果的である。本発明に係る薬学的組成物は、副作用が知られている既存の免疫抑制剤および抗炎症剤に代わるものとして、副作用がなく経済的に使用することができる細胞治療剤としてクローン病、関節リウマチ、アトピー性皮膚炎等の自己免疫疾患等の免疫疾患および炎症性疾患の予防または治療に使用することができるので有用である。前記の目的を達成するための一つの様態として、本発明は、NOD2NucleotidebindingOligomerizationDomainprotein2を発現する幹細胞にNOD2のアゴニストを添加して培養した幹細胞またはその培養物を含む免疫疾患または炎症性疾患の予防または治療用の薬学的組成物を提供する。本発明では、NOD2NucleotidebindingOligomerizationDomainprotein2のアゴニストで幹細胞を処理した場合、その間葉系幹細胞におけるPGE2およびTGFβ1の分泌が促進され、これが次に免疫および炎症を調節することを確認した。即ち、本発明は、幹細胞の免疫および炎症調節機能がNOD2と関連があることを確認し、また、NOD2アゴニストによって処理された幹細胞の改善された免疫抑制および炎症抑制効果を確認し、NOD2アゴニストで処理された幹細胞およびその培養物が免疫調節および炎症調節のための細胞治療剤として利用できることを確認した。また、NOD2NucleotidebindingOligomerizationDomainprotein2を発現する幹細胞にNOD2のアゴニストを添加して培養した幹細胞またはその培養物を含む、免疫疾患または炎症性疾患の予防または治療用の薬学的組成物として使用できることを提示する。本発明で使用される用語、NOD2及びNOD2受容体は、互換的に使用することができる。本発明で使用される用語、アゴニストは一般的に、受容体を正に刺激する役割を果たす化学物質を意味するもので、作用剤とも呼ばれる。即ち、アンタゴニストがリガンドを妨害したり負の機能を有する一方、アゴニストは正の機能を有する。本発明では、アゴニストは、一般的に受容体と結合する化学物質を意味する用語であるリガンドと互換的に使用することができる。本発明の目的上、アゴニストはNOD2アゴニストであってもよい。本発明で使用される用語、NOD2アゴニストは、NOD2受容体に結合してNOD2を活性化させ得る物質を制限なく意味しているが、その例として、MDPムラミルジペプチドであってもよい。本発明で使用される用語、MDPはムラミルジペプチドで、本発明ではNOD2の経路を活性化させ間葉系幹細胞におけるPGE2分泌を促進させるアゴニストとして使用することができる。本発明において、アゴニストを添加して培養という表現は、例えば、間葉系幹細胞の培地にアゴニストを添加して培養することであってもよい。好ましくは、1~100μgmlの濃度で01~200時間、さらに好ましくは1~72時間の間アゴニストを添加して培養することであってもよい。また、アゴニストを添加して培養した後、培地を交換して培養することであってもよい。本発明で使用される用語、幹細胞は、様々な組織に分化できる能力を有する細胞、即ち未分化細胞であり、間葉系幹細胞は、骨髄、臍帯血、胎盤または胎盤組織細胞、脂肪または脂肪組織細胞などの様々な成体細胞に由来する多能性の性質を有する幹細胞を意味する。例えば、骨髄に由来する間葉系幹細胞は、脂肪組織、骨軟骨組織、筋肉組織に分化できる多能性によって、細胞治療剤としての開発のために、様々な研究が進められている。本発明において、前記幹細胞は、ヒト成体幹細胞、ヒトの多能性幹細胞、誘導多能性幹細胞、動物の胚性幹細胞または動物の成体幹細胞であってもよい。一方、成体幹細胞は、間葉系幹細胞、ヒト組織由来間葉系間質細胞、ヒト組織由来間葉系幹細胞、多能性幹細胞または羊膜上皮細胞であってもよく、間葉系幹細胞は、臍帯、臍帯血、骨髄、脂肪、筋肉、神経、皮膚、羊膜および胎盤からなる群から選ばれる供給源由来の間葉系幹細胞であってもよく、特に、ヒト由来のものが好ましい。最も好ましくは、ヒト臍帯血由来間葉系幹細胞hUCBMSCであってもよい。各供給源由来の幹細胞を得る方法は、当技術分野で公知の方法によることができ、本発明の実施例の方法に限定されない。好ましくは、ヒト由来間葉系幹細胞を1~100μgmlの濃度のMDPで01~200時間の間処理した間葉系幹細胞を用いることである。01時間より少ない時間の間MDPを添加する場合、NOD2の経路が十分に活性化されないことがあり、200時間以上MDPを添加することは経済的に多くの利益を得ることができないので、より好ましくは01~200時間、さらにより好ましくは1~72時間、最も好ましくは24時間の間MDPで処理した間葉系幹細胞を用いることができる。前記間葉系幹細胞の培養に使用される培地としては、当技術分野で幹細胞培養に適合すると公知されている通常の培地を使用することができるが、例えばDMEMダルベッコ修飾イーグル培地、またはケラチノサイトSFMケラチノサイト血清フリー細胞を使用することができ、最も好ましくは、DmediaGibcoを使用することができる。前記間葉系幹細胞の培地に添加剤を補充することができる。一般的に、等張液中の中性緩衝剤例えばリン酸塩およびまたは高濃度の重炭酸塩およびタンパク質の栄養分例えば血清、例えばFBS、血清代替物、アルブミン、または必須アミノ酸および非必須アミノ酸、例えばグルタミンを含有することができる。さらに、脂質脂肪酸、コレステロール、血清のHDLまたはLDLエキスおよびこの種類のほとんどの保存液培地で見られるその他の成分例えば、インスリンまたはトランスフェリン、ヌクレオシドまたはヌクレオチド、ピルビン酸塩、グルコースなどの糖源、任意のイオン化形態または塩であるセレニウム、ヒドロコルチゾンなどのグルココルチコイド、およびまたはβメルカプトエタノールなどの還元剤を含有することができる。また、培地は、細胞が相互に付着したり、容器の壁に付着したり、または大きなクラスタを形成するのを防止する目的で、抗凝集剤、例えばInvitrogenが販売しているものCat0010057AEを含むことが有益であるといえる。本発明の一実施態様では、NOD2アゴニストの一つであるMDPムラミルジペプチドを添加して培養した幹細胞の培養物が単核細胞MNCの増殖を抑制することが確認された。単核細胞は血流を循環しているうちに組織に移動し、移動した場所でマクロファージに成熟していく。単核細胞、マクロファージ、および樹状細胞は、体の免疫防御システムの中で最も重要なもので、これらの抗原提示能力とTリンパ球の機能を調節する能力を通じて後天性免疫反応を誘導する上で中枢的な役割を果たす。一方、単核細胞およびマクロファージは、免疫過程における1次防衛線の一つである。また、単核細胞は、後天性免疫反応の認識段階および活性化段階で補助細胞としての機能を果たす。これらの主な機能は、抗原をTリンパ球によって認識可能な形で提示し抗原提示細胞APC、T細胞活性化のための2次の合図役として作用する膜タンパク質と分泌型タンパク質を生産することである。一部の単核食細胞は樹状細胞に分化されることもあり、樹状細胞は、タンパク質抗原に対するTリンパ球の反応を誘導するのに重要な役割を果たす。細胞および臓器の移植拒絶反応が起こる場合、体内に移植された細胞臓器が外部の異物として認識され、したがって単核細胞、マクロファージ、および樹状細胞が増加する。したがって、MDPムラミルジペプチドを添加して培養した幹細胞の培養物によって単核細胞の増殖が抑制される場合、体内の免疫反応の抑制をもたらすことは、当業者にとっては自明な事項であるといえよう。本発明で使用される用語、単核細胞は骨髄や末梢血細胞に由来する単核の食作用白血球を意味する。さらに、本発明の別の実施態様では、MDPムラミルジペプチドを添加して培養した幹細胞がPGE2およびTGFβ1の分泌を促進し、MNC抑制がPGE2およびTGFβ1によるものであることが確認された。このようなPGE2はインターロイキン1βなどの炎症性サイトカインおよびTNFαなどのサイトカインの分泌を抑制する役割をするものと報告されている。また、TGFβ1は、抗炎症性サイトカインとみなされる。また、本発明の別の実施態様において、MDP処理した幹細胞は、抗炎症性サイトカインのIL10を高収率で生産すること、さらに、調節性T細胞群を形成することが示唆されている。したがって、本発明に係る幹細胞およびその培養物は、免疫疾患および炎症性疾患の予防および治療に有用である。ここで、前記の免疫疾患または炎症性疾患は、自己免疫疾患、移植拒絶反応、移植片対宿主病、関節炎、細菌感染、敗血症または炎症等であり、前記の自己免疫疾患は、クローン病、紅斑病、アトピー性皮膚炎、関節リウマチ、橋本甲状腺炎、悪性貧血、アディソン病、1型糖尿病、ループス、慢性疲労症候群、線維筋痛、甲状腺機能低下症および亢進症、硬皮症、ベーチェット病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、重症筋無力症、メニエール症候群Menieressyndrome、ギランバレー症候群GuilianBarresyndrome、シェーグレン症候群Sjogrenssyndrome、白斑症、子宮内膜症、乾癬、白斑症、全身性硬皮症、喘息、または潰瘍性大腸炎等が挙げられる。本発明で使用される用語、炎症性疾患は、炎症に起因する病変を総称し、これらに限定されないが、好ましくは浮腫、皮膚炎、アレルギー、アトピー性皮膚炎、喘息、結膜炎、歯肉炎、鼻炎、中耳炎、咽喉炎、扁桃炎、肺炎、胃潰瘍、胃炎、クローン病、大腸炎、痔、痛風、強直性脊椎炎、リウマチ熱、ループス、線維筋痛症fibromyalgia、乾癬性関節炎、骨関節炎、関節リウマチ、肩関節周囲炎、腱炎、腱鞘炎、筋炎、肝炎、膀胱炎、腎炎、シェーグレン症候群sjogrenssyndrome、または多発性硬化症であり得る。本発明で使用される用語、免疫疾患とは、特定の免疫反応の発生に関連する疾患を意味し、これらに限定されないが、好ましくは、自己免疫疾患、移植拒絶反応、移植片対宿主病であり得、自己免疫疾患は、クローン病、紅斑病、アトピー性皮膚炎、関節リウマチ、橋本甲状腺炎、悪性貧血、アディソン病、1型糖尿病、ループス、慢性疲労症候群、線維筋痛症、甲状腺機能低下症および亢進症、硬皮症、ベーチェット病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、重症筋無力症、メニエール症候群Menieressyndrome、ギランバレー症候群GuilianBarresyndrome、シェーグレン症候群Sjogrenssyndrome、白斑症、子宮内膜症、乾癬、白斑症、全身性硬皮症、喘息、または潰瘍性大腸炎位であり得る。本発明の実施態様によれば、大腸炎の動物モデルおよびアトピー性皮膚炎モデルにおいて、本発明による幹細胞またはその培養物が炎症性疾患である大腸炎を治療し、免疫疾患アトピーを治療することが確認され、免疫疾患および炎症性疾患の治療効果があることが確認された。本発明で使用される用語、予防は、前記組成物の投与により免疫疾患または炎症性疾患の発症を抑制するかまたは遅延させる全ての行為を意味し、治療は、前記組成物の投与により免疫疾患または炎症性疾患の症状が好転または改善するすべての行為を意味する。また、本発明の組成物は、1mlあたり10×105個~10×109個、好ましくは10×106個から10×108個、より好ましくは10×107個の細胞を含むことができる。本発明の組成物は凍結されていない状態で使用してもよく、また後の使用のため凍結させてもよい。凍結の必要がある場合は、標準の冷凍保存剤例えばDMSO、グリセロール、Epilife登録商標、細胞凍結培地CascadeBiologicsを凍結前の細胞集団に添加することができる。また、前記組成物は、薬学的分野における通常の方法に従って、患者への身体内投与に適した単位投与剤形に製剤化することにより投与してもよく、前記製剤には、単回または複数回用量の有効量を含める。これらの目的に適合した剤形としては、非経口投与製剤として注射用アンプルのような注射剤、注入バックのような注入剤、およびエアロゾル製剤のようなスプレー剤等が好ましい。前記の注射用アンプルは使用直前に注射液と混合調製が可能で、注射液としては生理食塩水、ブドウ糖、マンニトール、リンゲル液等が使用できる。また、注入バッグはポリ塩化ビニルまたはポリエチレン製のものを使用することができ、バクスターBaxter、ベクトンディッキンソンBectonDickinson、メドウセプツMedcep、ナショナルホスピタルプロダクツNationalHospitalProductsまたはテルモTerumo社の注入バックを例示することができる。前記薬学的製剤は、前記有効成分の他に一つ以上の薬学的に許容可能な通常の不活性担体、例えば注射剤の場合には、保存剤、無痛化剤、可溶化剤または安定化剤などを、そして局所投与用製剤の場合には、基剤base、賦形剤、潤滑剤または保存剤等をさらに含んでもよい。前述のように製造された本発明の組成物または薬学的製剤は、当技術分野において一般的に使用される投与方法を用いて、移植またはその他の用途に使用される他の幹細胞と併せて投与することができ、またそれらの幹細胞との混合物の形で投与されてもよい。好ましくは、治療が必要な患者の疾患部位に直接生着または移植したり、腹腔内に直接移植または注入できるが、前述の方法に限定されない。また、前記の投与は、カテーテルを用いた非外科的投与および疾患部位切開後の注入または移植等の外科的投与方法も全て可能だが、カテーテルを用いた非外科的投与方法がより好ましい。また、通常の方法によって非経口的に、例えば病変に直接投与する方法の他に、造血系幹細胞移植の一般的な方法である血管内注入による移植も可能である。前記幹細胞は、単回用量または複数回用量で1日あたり細胞10×104~10×1010個kg体重、好ましくは細胞10×105~10×109個kg体重の量で投与できる。しかし、有効成分の実際の投与量は、治療しようとする疾患の種類、疾患の重症度、投与経路、患者の体重、年齢、性別等の様々な関連要素を考慮して決定されると理解されるべきである。したがって、前記の投与量は、どのような面から見ても、本発明の範囲を限定するものではない。別の様態として、本発明は、前記組成物を免疫疾患または炎症性疾患にかかった被験者に投与する段階を含む、免疫疾患または炎症性疾患の治療方法を提供する。さらに別の様態として、本発明に係るNOD2アゴニストで処理された幹細胞およびその培養物を投与することにより、免疫反応を抑制するか炎症を調節することができ、本発明は、NOD2を発現する幹細胞にNOD2のアゴニストを添加して培養した幹細胞またはその培養物を被験体に投与する段階を含む被験体の免疫反応または炎症反応の抑制方法を提供する。本発明で使用される用語、被験体とは、ウシ、イヌ、ブタ、ニワトリ、ヒツジ、ウマ、ヒトを含む哺乳動物を意味するが、これに限定されない。この時、前記の免疫反応または炎症の抑制方法は、ヒトを除く動物に限定されてもよい。また、好ましくは、NOD2のアゴニストを添加して培養した幹細胞またはその培養物の投与は腹腔または血管内投与、病変への直接投与または関節腔を形成し短期間で成長し、紡錘形を示すことが確認され、各UCBサンプルから分離された間葉系幹細胞を、それぞれ618および620と命名した。実施例2:hUCBMSCが発現する受容体の確認21:TLR2、TLR4、NOD1およびNOD2のhUCBMSCにおける機能的発現の確認TLR2Toll様受容体2、TLR4Toll様受容体4、NOD1NucleotidebindingOligomerizationDomainproteins1とNOD2NucleotidebindingOligomerizationDomainproteins2がhUCBMSCで機能的に発現されるか否かをRTPCRを介して調べた。具体的には、hUCBMSCの全てのRNAは、Easyspin全RNA抽出キットIntronBiotechnology、Seongnam、Koreaを使用して抽出した。cDNAは1μgの全RNAからSuperscriptIIIリバーストランスクリプターゼInvitrogen、Carlsbad、CA、USAとオリゴdTプライマーInvitrogenを用いて作製した。プライマーセットは、以下の通りであるF:フォワード、R:リバース。TLR2F配列番号1:5GATGCCTACTGGGTGGAGAA3TLR2R配列番号2:5CGCAGCTCTCAGATTTACCC3TLR4F配列番号3:5ACAGAAGCTGGTGGCTGTG3TLR4R配列番号4:5TCTTTAAATGCACCTGGTTGG3NOD1F配列番号5:5CCACTTCACAGCTGGAGACA3NOD1R配列番号6:5TGAGTGGAAGCAGCATTTTG3NOD2F配列番号7:5GAATGTTGGGCACCTCAAGT3NOD2R配列番号8:5CAAGGAGCTTAGCCATGGAG3Rip2F配列番号9:5CCATTGAGATTTCGCATCCT3Rip2R配列番号10:5ATGCGCCACTTTGATAAACC3RPL13AF配列番号11:5CATCGTGGCTAAACAGGTAC3RPL13AR配列番号12:5GCACGACCTTGAGGGCAGCC3PCR条件は、95°Cで3分間解離させた後、30サイクルを行い、10分間の間72°Cで最終的に延長した。1サイクルは、94°Cで30秒、60°Cで30秒、72°Cで1分の構成とした。PCR産物は、15アガロースゲルから分離し、ゲルドキュメンテーションシステムで可視化させ、写真撮影した。図1aに示すように、単球性白血病細胞株すなわちTHP1細胞を陽性対照群として使用した時、すべての受容体がTHP1細胞およびhUCBMSCにおいて発現していた。TLR4はTHP1細胞よりhUCBMSCにおいてより高レベルで発現していた。一方、TLR2、NOD1、NOD2の発現レベルはTHP1細胞で高かった。一方、Rip2もhUCBMSCで発現することが観察された。22:発現が確認された受容体のアゴニストによる刺激によるサイトカイン生産の分析上記実施例22で発現が確認された受容体の機能を調べるために、アゴニストの刺激に対応したIL8の生産を調査した。hUCBMSCを96ウェルプレート中、細胞2×104個ウェルで、2のFBSを補充したKSFM培地で培養した。24時間後、各々の受容体のアゴニストであるPam3CSK4TLR2アゴニスト、Pam3、LPSTLR4アゴニスト、TriDAPNOD1アゴニスト、TDAP、およびMDPNOD2アゴニストで処理して24時間さらに培養した。上清を集め、遠心分離した後、02μmフィルターで濾過した。その後、IL8とPGE2の濃度をELISAキットRDSystems、Minneapolis、MN、USAを用いて測定した。UltrapureLPSEcoliO111:B4、Pam3CSK4、およびTriDAPはInvivogenSanDiego、CA、USAから購入した。MDPAc6OステアロイルムラミルAlaDGluNH2ムラミルジペプチドは、Bachem社Bubendorf、Switzerlandから購入した。組換えヒトインターフェロンγは、PeprotechRockyhill、NJ、USAから購入した。その結果、図1bと1cに示されるように、Pam3CSK4トリアシル化ペプチドTLR2アゴニスト、LPSリポ多糖、TLR4アゴニスト、TriDAPトリジアミノピメリン酸、NOD1アゴニスト、およびMDPNOD2アゴニストで、各々刺激を与えた時、hUCBMSCにおいて、IL8が投与量依存的に増加した。即ち、hUCBMSCにおいてこれらの特定のアゴニストに対応してNOD1、NOD2、TLR2、TLR4が発現されて機能していることが確認された。23:アゴニストによるTLRおよびNLRに対する刺激がhUCBMSCの増殖に与える影響に関する分析1本実施例では、特定の種類のMSCはTLRの刺激に影響を受けるという研究結果PavsnerFicheretalTolllikereceptorsandtheirligandscontrolmesenchymalstemcellfunctions、Blood、1091422、2007に基づき、hUCBMSCの場合を検証するために、各アゴニストで処理して4日間培養した後分析した。より詳しくは、96ウェルプレート中、細胞を2×103個ウェルで2のFBSを補充したMSC培地で培養した。培養24時間後、細胞を各10μgmlの濃度のPam3CSK4TLR2アゴニスト、LPSTLR4アゴニスト、TriDAPNOD1アゴニスト、およびMDPNOD2アゴニストで処理してさらに4日間培養した。増殖はCellCountingKit8DojindoMolecularTechnologies、Rockville、MD、USを使用して測定した。各実験群の結果における差異は±SDで示した。すべての統計の解析は、MSExcelプログラムを使用しており、P005は、統計的有意と解釈し、以下同様である。その結果、図1dと1eに示されるように、どのようなアゴニストもhUCBMSCの増殖に影響を及ぼさないことを確認することができた。24:アゴニストによるTLRとNLRに対する刺激がhUCBMSCの増殖に与える影響に関する分析2本発明者らはTLRおよびNLRアゴニストが、ヒトMNCの増殖に対するhUCBMSCの抑制能力を強化するか否かについて調査した。MSCとリンパ球の間における直接相互作用がMSCによるリンパ球増殖の抑制に重要であるという研究に基づいて、本発明者らは直接接触条件でMNC増殖に対するhUCBMSCの抑制能力にMDPが影響を与えるか否かを調査した。その結果、図2に示すように、hUCBMSC618は、細胞対細胞接触条件においてヒトMNCを急激に抑制した。しかし、TLRPam3CSK4とLPSおよびNLRアゴニストTriDAPとMDPは、前記のような条件でMNC増殖に対するhUCBMSCの抑制効果に影響を与えなかった図2。実施例3:NOD2Rip2依存的経路を通じたMDPによるhUCBMSCの免疫抑制増進効果の確認131:MDP処理時にhUCBMSCで製造される分泌因子がMNC増殖に与える効果の確認また、水溶性因子がMSCによる免疫抑制を媒介することが知られているため、本発明者らはUCBMSCによって製造される分泌因子がヒトMNCの増殖に影響を与えるか否かを調査した。培養培地CMを用意し、hUCBMSCを24時間以上アゴニストと共培養し、洗浄した後、新たな培地に交換した。4日間さらに培養した後、対照群であるCMおよびアゴニスト処理されたhUCBMSC618を用意して、3日間hUCBMSCのCMの存在下でMNCを培養した。その結果、MNCの増殖は対照群であるhUCBMSCの培地UCMで弱く抑制された図3a。驚くべきことに、MNCの増殖は、MDPで前処理したUCMMDPUCMの存在下でより一層抑制された。しかし、他のアゴニストPam3CSK4、LPS、TriDAPの場合はそのようではなかった図3a。他のhUCBMSC620から製造されたUCMを使用した実験でも類似した結果を示した図3b。さらに、UCMの存在下で異種マウス脾細胞の増殖が抑制され、この細胞増殖の抑制はMDPの刺激によって増大した図3c。これらの結果は、hUCBMSCからMDPによって誘導された分泌因子が、免疫抑制において重要な役割を果たすことを裏付けるものである。32:MDP処理時におけるhUCBMSCの免疫抑制増進効果の確認MDPがhUCBMSCの免疫抑制効果を強化させるか否かを確認するため、次の実験を行った。対照群であるhUCBMSCの培地CMを調製し、アゴニスト処理されたhUCBMSCを培養5日目に回収した。その後、MNCをさらに3日間hUCBMSCのCMで共培養することによってMNCの増殖を観察した。その結果、図4Aに示されるように、アゴニストであるMDPで処理した間葉系幹細胞の上澄液UCBMSC618MDPの場合、アゴニストを添加せずに培養したUCBMSC上澄液UCBMSC618に比べて著しくMNC増殖が抑制された。これに反して、他のアゴニストLPS等で処理した間葉系幹細胞上澄液UCBMSC618Pam3UCBMSC618LPSUCBMSC618TDAPの場合は、アゴニストを添加せずに培養したUCBMSC上澄液UCBMSC618と同様のMNC抑制率であった。即ち、何も添加していない陰性対照群と比較してMNC増殖が若干抑制されるだけだった。これらの結果は、MDPを添加した結果、間葉系幹細胞から分泌される水溶性因子によって著しくMNC増殖が抑制されたことを示す。33:siRNAを用いた、MNC抑制におけるNOD2、Rip2とMDPの関係の検証さらにNOD2およびRip2のsiRNAと対照群siCTLを利用して、MNC抑制におけるNOD2、Rip2およびMDPの相互関係を検証するための実験を行なった。細胞が60の濃度となったとき、siRNAを導入し、RIPK2receptorinteractingserinethreoninekinase2またはRip2Receptorinteractingkinaseprotein2NOD1およびNOD2のアダプタで、RICKまたはCARDIAKとも呼ばれるキナーゼの一種Bertinetal、1999Inoharaetal、1999Oguraetal、2001bのsiRNAである、siRIPK2M00360202、NOD2のsiRNAであるsiNOD2J01138807および非標的対照siControl1、D00181001は、DharmaconChicago、IL、USA社から購入した。DharmaFECT1Dharmaconを導入薬剤として使用し、siRNAは、100nmolLの濃度で導入した。導入の48時間後に培地を交換し、陰性対照群MNC単独で培養した培地および陽性対照アゴニストを添加せずに培養したUCBMSC上澄液UMSで処理した培地を除き、細胞を10μgmLMDPNOD2アゴニストで各々24時間ずつ処理した。即ち、対照群として、MNC単独で培養した培地i、アゴニストを添加せずに培養したUCBMSCの上澄液UMSで処理した培地iiを用意し、MDPとUMSで処理した培地iii、MDP、UMSと対照siRNAsiCTLで処理した培地iv、MDP、UMSとsiNOD2で処理した培地vおよびMDP、UMSとsiRip2で処理した培地viを用意した。その後MNCの増殖を光学密度450nmで検証した。その結果、図4Bに示されるように、培地ivは、培地iiiと同じ程度の増殖抑制を示しているのに対し、培地v、viは、培地iiと同じ程度に抑制されることが確認された。即ち、NOD2とRip2のsiRNAは、MDPによって強化されたMNCの抑制をそれ以前の程度まで戻したが、対照群siRNAは、そのような結果を示さなかった。この結果から、NOD2およびRip2はMDP誘導免疫反応を正に調整しているとが分かる。したがって、NOD2およびRip2がMDP調節性のUCBMNC抑制に必要であると見なされる。実施例4:MDPのNOD2Rip2依存的経路を通じたhUCBMSCの免疫抑制増進効果とその確認2実験結果の検証のために、実施例1で得られた間葉系幹細胞株620について、実施例32および33と同じ方法で実験を行った。その結果、図5Aに示されるように、実施例31と同じようにアゴニストとしてMDPで処理した間葉系幹細胞上澄液UCBMSC618MDPの場合は、他の受容体をアゴニストで処理したか、またはアゴニストを添加せずに培養したUCBMSC上澄液UCBMSC620と比べて著しくMNCの増殖を抑制することが示され、また、図5Bに示されるように、実施例33と同様にNOD2とRip2のsiRNAは、MDPによって強化されたMNCの抑制をMDPで強化される以前に戻したが、対照群siRNAは、そのような結果を示さないことが確認された。これらの結果は、MDPがNOD2Rip2依存的経路を通じた、間葉系幹細胞によるMNC増殖抑制を強化することを意味するであろう。これらの実験結果は、前記の実施例3の結果と共に、本発明に係るMDPで処理した幹細胞およびその培養物が優れた免疫抑制効果を示すため、関節リウマチおよびクローン病などの自己免疫疾患やアトピー性皮膚炎などの免疫疾患の治療のための免疫調節組成物として非常に有用に使用されることを示す。実施例5:MDPによって生産されたPGE2のUMSUCBMSC上澄液UMSによるMNCの抑制との関連性についての分析51:MDPのMSCに対するPGE2分泌量増加効果を確認hUCBMSC2×104個ウェルを96ウェルプレートの2FBSを補充したMSC培地で培養した後、24時間後に1μgmLPam3CSK4TLR2アゴニスト、1μgmLLPSTLR4アゴニスト、10μgmLTriDAPNOD1アゴニストまたは10μgmLMDPNOD2アゴニストを各々添加して24時間培養した後、培養上澄液を得た。培養上澄液は、遠心分離した後、02μmフィルターで濾過し、その後PGE2の濃度をELISAキットRDシステム、Minneapolis、MN、USAを用いて製造業者のプロトコルに従って測定した。その結果、図6aに示されるように、hUCBMSCを他の受容体のアゴニストで処理した場合と比較し、NOD2のアゴニストであるMDPで処理した場合、PGE2の産生を有意に増加させ得ることが確認できた。52:COX2の発現とMDP処理との関係についての確認各種細胞に1μgmLPam3CSK4TLR2アゴニスト、1μgmLLPSTLR4アゴニスト、10μgmLTriDAPNOD1アゴニストまたは10μgmLMDPNOD2アゴニストを各々添加して24時間培養した。その後、回収した細胞を2mMのジチオスレイトールとプロテアーゼカクテルRoche社、USを添加した1のNonidetP40バッファを使用して溶解させた。細胞溶解産物は、12のSDSPAGEで分離させ、ニトロセルロース膜に移し、1次抗体COX2、GAPDHSantaCruzbiotechnology、SantaCruz、CA、USAで免疫染色した。その後2次抗体で免疫染色した後、タンパク質をECLenhancedchemiluminescence試薬IntronBiotechnologyを用いて検出した。その結果、図6bに示されるように、hUCBMSCを他の受容体のアゴニストで処理した場合に比べ、NOD2のアゴニストであるMDPで処理した場合、COX2の発現を強化することが確認できた。53:COX2の発現とNOD2、Rip2およびMDP処理との関係COX2の発現とNOD2、Rip2との関係を調べるために、MDPで処理した後siNOD2、siRip2で処理した細胞のCOX2の発現量を調べた。タンパク質の発現量の測定は、実施例52と同様であり、siRNA処理方法は、実施例33に記載された方法と同様に行った。その結果、図6cに示されるように、COX2の発現は、NOD2とRip2の抑制により減少したことが確認された。この結果によって、COX2の発現がNOD2とRip2に依存することを示していると判断することができる。54:NOD2、Rip2およびCOX2のPGE2発現に対する影響の確認MDP処理の効果の持続時間を決定するために、hUCBMSCをMDPで処理し、1日後にMDPを除去した後、PGE2産生量を調べた。MDPは処理1日後に培地を除去した後、PBSリン酸緩衝生理食塩水を用いて5回洗浄することにより、除去した。一方、実施例51のようにMDPで処理してPGE2の濃度を測定した。この時、NOD2、Rip2とCOX2のPGE2発現に対する影響を調べるために、実施例33の各対照群すなわちsiRNAsiCTL、siNOD2、siRip2およびCOX2の抑制剤であるインドメタシンSigma社StLouis、MO、USAで細胞を処理した。その結果、図6dに示されるように、MDPが1日後に除去されたにもかかわらず、MDPで刺激したhUCBMSCは培養5日後の時点で対照群よりもPGE2を多く生産することが示された。また、NOD2とRip2のsiRNAが導入された場合およびインドメタシンでCOX2を抑制した場合、MDPによって強化されたPGE2の生産量は再び抑制されることが分かった。これは、NOD2、Rip2とCOX2がhUCBMSCにおけるMDP誘導性PGE2生産に重要であることを示唆している。55:hUCBMSCによるMNC抑制におけるPGE2の役割の確認hUCBMSCによるMNC抑制におけるPGE2の役割を調べるために、MSC上澄液、MDPで処理して培養したMSC上澄液、およびMDPとインドメタシンCOX2阻害剤で処理して培養したMSC上澄液でMNC細胞を処理したときの、MNCの増殖を調べた。この実験は、前記実施例3と同一の方法により行った。その結果、図6eに示されるように、MDPで処理したMSC培養液の場合MNCの増殖を顕著に抑制するが、インドメタシンIndoと同時に処理した場合には、陰性対照群と類似したMNCの増殖を示した。これらの実験結果は、実施例54と共にhUCBMSCによるMNC抑制がPGE2によるものであることを意味する。このような実験結果は、本発明によるMDP処理した幹細胞およびその培養物がPGE2を生産することにより、免疫抑制用組成物として極めて有用であることを意味する。一方、これまで調べてきたように、PGE2は炎症性サイトカインであるインターロイキン1βおよびTNFαのようなサイトカインの分泌を抑制する役割を果たすものであると報告されていることからも、本発明によるMDP処理した幹細胞およびその培養物は抗炎症組成物として有用である。56:NOD2およびCOX2のMDPにより誘導される抗炎症性サイトカインであるIL10インターロイキン10の産生量の影響についての確認IL10の濃度を測定するためにhUCBMSC1×105個ウェルを24ウェルプレート中で2のFBSを補充したMSC培地に播種seedingした後、24時間後、siNOD2またはインドメタシンIndoで処理し、24時間さらに追加で培養した。5回洗浄した後、新しいRPMIを新たに加え、5日後にUCBMSC上澄液UMSを得た。MNCは1×106個ウェルでUMSおよびConAシグマ社StLouisMo、USAと共に培養した。3日後に細胞上澄液を収集して遠心分離し、02μmフィルターで濾過し、IL10の濃度をELISAキットRDSystems、Minneapolis、MN、USAを用いて測定した。その結果、図6fに示されるように、MDP処理によって抗炎症性サイトカインのIL10の生産量が大幅に増加するが、NOD2抑制やインドメタシン処理によって、IL10の産生が抑制されることを確認することができた。これらの実験結果は、MDPの処理に応じて、抗炎症性サイトカインであるIL10もPGE2と同様にNOD2Rip2経路に依存して、その生産量が顕著に増加することを示唆している。即ち、本発明によるMDP処理した幹細胞は、抗炎症性サイトカインであるIL10を高収率で生産するため、本発明によるMDP処理した幹細胞またはその培養物は、抗炎症組成物、特に関節炎などの治療のための抗炎症組成物として有用である。実施例6:MDPに反応して、hUCBMSCによって生成されたPGE2およびTGFβ1のMNC抑制との関連性について61:MSCにおけるPGE2およびTGFβ1の分泌量増加効果の確認およびCOX2発現に対するMDPの確認肝細胞成長因子であるTGFβ、IDO1インドールアミン23ジオシキゼナーゼ1、NO一酸化窒素、およびPGE2プロスタグランジンE2のような水溶性因子は、MSCによる免疫抑制を調節する候補因子である。hUCBMSCでTLRおよびNLRアゴニストがNO、PGE2とTGFβ1を含む分泌因子を誘導するか否かを確認するために、それぞれの細胞をPam3CSK4、LPS、TriDAP、およびMDPと共に24時間培養し、培養上澄液を収集して得た。前記実施例51と52と類似した方法により分泌因子の分泌を確認した。その結果、マクロファージにおいてLPSがNOの生成を誘導したが、hUCBMSCにおいてTLRとNODアゴニストによる単独処理はNOを生成しなかった図7a。興味深いことに、PGE2とTGFβ1の生成は、他のアゴニストではなく、MDPに反応してhUCBMSCにおいて促進された図7bと7c。さらに、MDPの曝露は刺激後24時間目にhUCBMSCにおいてPGE2の生成の主要酵素であるCOX2の発現を増加させた図7d。62:PGE2とTGFβ1のMNC増殖に対する効果の確認単核球の増殖でPGE2の効果を確認するために、hMNCとマウス脾臓単核細胞を、様々な濃度のPGE2の存在下で培養した。実験は、実施例55と同じ方法で行った。その結果、hMNCとマウス脾臓単核細胞の増殖は、10ngmL以上の濃度のPGE2の存在下で著しく抑制された図7eおよび7f。次に、本発明者らはMDPで前処理したUCMによってhMNCが抑制されるのはPGE2およびTGFβ1によるものかどうかを調査した。実験は、実施例55と同じ方法で行った。その結果、hMNC増殖に対するMDPUCMの抑制能力は、一般的なCOX阻害剤であるインドメタシンによって完全に除去された図7g。さらに、TGFβ1中和抗体と同時処理した場合は、MDPUCMはhMNCの増殖を抑制できなかった図7h。このような結果は、hUCBMSCにおいてMDPがPGE2とTGFβ1の生成を誘導し、これがhUCBMSCの免疫抑制能力を媒介することを示唆している。実施例7:hUCBMSCにおいて、MDPによるCOX2発現、PGE2およびTGFβ1の生成とNOD2およびRip2の関係についての分析NOD2とRip2はMDP誘導免疫反応に対して重要である。したがって、本発明者らはMDPに反応したhUCBMSCにおけるCOX2の発現とPGE2およびTGFβ1の生成にNOD2およびRip2が必要であるかを調査した。実験は、実施例54と同じ方法で行った。その結果、hUCBMSCにおいてNOD2およびRip2両方の遺伝子およびタンパク質がsiRNAによって著しく抑制された図8。siRNAによるNOD2およびRip2の下方調節はhUCBMSCにおいてMDP誘導性COX2の発現を抑制した図9a。NOD2およびRip2に対するsiRNA処理は、対照群siRNAと比較してMDPUCMでPGE2およびTGFβ1の生成を減少させた図9bおよび9c。さらに、MLR実験ではNOD2およびRip2の下方調節がhMNC増殖においてMDPによって増大したUCMの抑制効果を元の状態にもどした図9d。このような結果は、MDPがNOD2Rip2経路を通じてhUCBMSCにおいてPGE2およびTGFβ1生成の増加を導き、これはUCMMSCの免疫抑制能力を強化することを示唆する。実施例8:MDPで前処理されたUCMのhMNCにおける、IL10の生成および調節性T細胞群に対するの効果の確認81:MDPで前処理されたUCMのhMNCにおける、IL10生成の効果分析骨髄間質細胞で生成されたPGE2は、宿主マクロファージによって生成されるIL10にとって重要であると公知されているNemethKAetalBonemarrowstromalcellsattenuatesepsisviaprostaglandinE2dependentreprogrammingofhostmacrophagestoincreasetheirinterleukin10productionNatMed1542492009。MDPがhUCBMSCからPGE2生成を誘導するため、本発明者らはhMNCによるIL10の生成がMDPUCMの存在下で増加するかについて調査した。実験は、実施例56と同じ方法で行った。その結果、MDP刺激に関係なく、UCBMSC単独ではIL10を生成していなかったデータの提示は無し。hMNC単独ではIL10を生成しなかったが、UCMの存在下でIL10の生成は、上方調節された図10a。さらに、hMNCによるIL10の生成は非処理のUCMに比べMDPUCMの存在下で、より多く増加した図10a。しかし、インドメタシンまたはTGFβ1中和抗体単独処理はMDPUCMによって促進されたhMNCのIL10生成を元に戻し、このレベルはインドメタシンおよびTGFβ1中和抗体の組み合わせ処理によって、より減少した図10a。hUCBMSCにおいてsiRNAによってNOD2が抑制される時、非処理のUCMに比べてMDPUCMの存在下でhMNCによるIL10生成は増加しなかった図10a。82:MDPで前処理されたUCMのhMNCにおいて、T細胞群に対する効果についての分析次に、本発明者らはhMNCが調節性T細胞Tregに分化されるにあたって、UCMの効果を調査した。具体的には、UCMでhMNCを5日間培養した後、hMNC内のCD4、CD25、Foxp3を同時に発現する細胞の比率をフローサイトメトリーで測定した。その結果、hMNCにおいて調節性T細胞群はUCMの存在下で50以上増加し、これは非処理のUCMよりMDPUCMにおいて培養されたhMNCにおいてより増加したことを示す図10b。同様に、インドメタシンおよびTGFβ1中和抗体の処理、またはsiRNAによるNOD2の抑制はMDPUCMによって増加されたTreg群を元の状態に戻した図10b。これらの結果は、UCMにおいてMDP誘導性のPGE2およびTGFβ1がhMNCによるIL10の生成およびhMNCのTregへの分化に重要な役割を果たすことを示唆する。実施例9:他の幹細胞におけるNOD2の発現の確認他の幹細胞の場合にもNOD2NucleotidebindingOligomerizationDomainprotein2のアゴニストを添加して培養した場合、NOD2受容体アゴニストの反応によって免疫調節および炎症の調節が可能であるかを確認するために、ヒト単球性白血病細胞株THP1細胞を陽性対照群として、脂肪由来幹細胞ADMSCおよび羊膜上皮幹細胞AECがNOD2を発現するか調べるために、前記実施例2と同じ方法でRTPCRを行った。ヒト羊膜上皮幹細胞は、韓国ソウルの九老病院から患者の同意を得て出産後に採取した後、ソウル大学校機関倫理委員会の承認取得IRBNo0611001002、得られた羊膜から羊膜上皮細胞を分離した。脂肪由来幹細胞の場合は、韓国ソウルのポラメ病院の患者の同意を得て採取しSNUIRB0600001001、これから脂肪由来幹細胞を分離培養した。その結果、図11に示されるように、脂肪由来幹細胞および羊膜上皮幹細胞で陽性対照群であるTHP1細胞よりNOD2が多く発現していることが観察された。即ち、間葉系幹細胞以外にも、他の幹細胞もまたNOD2受容体を発現することが確認されており、他の幹細胞の場合もNOD2受容体アゴニストの反応によって免疫調節および炎症調節が可能であることが認められる。実施例10:大腸炎動物モデルにおける治療効果の検証101:大腸炎の動物モデルで治療効果の分析本発明者らはhUCBMSC処理が大腸炎マウスを治療してMDP刺激がDSSで誘発された大腸炎に対するhUCBMSCの保護効果を増進させるかについて調査した。hUCBMSC投与のために、細胞を24時間MDPの存在下または不在下で培養した後、PBSで洗浄してMDPを除去した。具体的には大腸炎にかかった動物モデルにMDPで処理した幹細胞の効果を検証するために、マウス株中央実験動物、C57BL6Nマウスを3のDSSデキストラン硫酸ナトリウムで処理して大腸炎を誘発させた後、2日後にMDPで処理したhUCBMSC、処理していないhUCBMSCおよびsiRNAで処理してNOD2を抑制したhUCBMSCを腹腔内に処置した。この時、3のDSSは、7日間飲用水で投与した。その結果、MDP刺激がないhUCBMSCの腹腔内投与は、PBS処理または線維芽細胞処理マウスと比較してDSSで誘発された大腸炎マウスの体重減少および致死率を改善した図12aと12b。さらに、MDPで刺激されたhUCBMSCMDPMSCは、大腸炎を有さない対照群マウスの90まで体重減少を回復させ、大腸炎誘導致死から完全に治療された図12aおよび12Bb。疾病活性指数Diseaseactivityindexは、hUCBMSCによって若干減少したが、PBSまたは線維芽細胞投与群とは著しく異なっている。しかしMDPMSCは、疾病活性指数を著しく改善させた図12c。NOD2がsiRNAによって下方調節された時、MDPMSCは、体重減少、生存率および疾病活性指数を改善させることができなかった。14日目にマウスを屠殺し、大腸の長さと組織病理学を分析した。肉眼検査の結果、炎症による大腸の短縮はhUCBMSC処理によってわずかに緩和されたが、これはMDPの添加によって増強されたことが示された図12dと12e。病理組織学的分析の結果、DSS処理マウスにおいて、腸の全体の粘膜の破壊、重篤な浮腫病変、および固有層と粘膜下層で炎症細胞の散在した浸潤が観察された図12f。hUCBMSC処理マウスでは、大腸の一部に限定された粘膜下層の粘膜びらんおよび浮腫が認められた図12f。しかし、MDPMSCは、大腸の病理学的損傷を完全に治療し、病理学的スコアを著しく減少させた図12fおよび12g。期待通り、DSSで誘発された大腸炎でsiNOD2処理hUCBMSCの投与は、病理学的重篤度を防ぐことも、または病理学的スコアを減少させることもできなかった図12fと12g。このような結果は、MDPが大腸炎に対してhUCBMSCの保護効果を増進させることを示し、これはNPD2が必要であることを示唆する。102:大腸炎の動物モデルにおける炎症性サイトカインおよびT細胞のクラスター分析また、本発明者らは大腸炎マウスでhUCBMSCで誘発された炎症性サイトカイン生成の調節におけるMDPの効果を調査した。その結果、DSS処理されたマウスの大腸でhUCBMSCは、IL6およびIFNγの生成を減少させ、IL10生成を増加させた図13a。さらに、DSS処理されたマウスの大腸でMDPMSCは、IL6およびIFNγの生成をほぼ遮断し、IL10の生成を増進させたが、これは、NOD2の下方調節によって除去された図13a。hUCBMSCがマウスの大腸でTreg群に影響を与えるかを確認するために、Foxp3細胞の大腸浸潤を蛍光顕微鏡で観察した。その結果、hUCBMSCは、PBS処理された大腸炎マウスと比較して、大腸でFox3p細胞の局在化が増加した図13b。また、Foxp3細胞の大腸での局在化はMDPMSCによってより増加したが、これはhUCBMSCにおいてNOD2抑制によって元の状態に戻った図13b。このような現象は、ウエスタンブロッティング分析で大腸からのFoxp3発現を定量化して確認された。Foxp3タンパク質の発現は、PBS処理大腸炎マウスと比較してhUCBMSC投与されたマウスでより高い結果が示された図13cと13d。同様に、大腸におけるFoxp3のレベルはMDPMSCによってより一層増加しており、またこれはNOD2下方調節によって元の状態に戻された図13cと13d。103:大腸炎の動物モデルにおける炎症細胞浸潤の分析最後に、本発明者らは、マウスの大腸での炎症細胞の浸潤を調査した。好中球浸潤のために、MPOミエロペルオキシダーゼ活性を用いて分析した。その結果、DSS処理されたマウスの大腸でhUCBMSCは、MPO活性およびCD4およびCD11b細胞の浸潤をさらに減少させた図13e。前記の結果と同様に、MDPMSCは、MPO活性ならびにCD4およびCD11b細胞の大腸での浸潤を減少させたが、これはNOD2のsiRNAによって元の状態に戻された図13e。前記のような結果は、hUCBMSCが抗炎症反応を誘導し、前炎症反応を抑制し、これはNOD2依存的様式でMDPによって促進されることを裏付けるものである。また、このような結果は、本発明によるMDPで処理した幹細胞またはその培養物は、大腸炎など、実際の動物モデルにおいて炎症を治療できることを示唆する結果といえる。実施例11:アトピー性皮膚炎を誘発した動物モデルに対するMDP処理したhUCBMSCの治療効果の確認111:アトピー性皮膚炎の誘発およびhUCBMSCの注入試験開始1日前に出生8週齢の雌NCNgaマウスの背中部位を除毛した後、脱毛クリームを使用して背中部位の皮膚の毛を完全に除去した。試験開始日に4のSDSドデシル硫酸ナトリウム水溶液150μlを脱毛した背中の部位に塗布して皮膚の脂肪成分を除去して、約3~4時間後、完全に乾燥した後、DfDermatophagoidesfarinaエキス100mgを背中の部位および耳介部に均一に塗布した。Dfエキスの塗布は週2回を3週間、合計で6回実施Dfエキス塗布時毎にSDS水溶液の塗布必須して、アトピー性皮膚炎を誘発した。前記実施例1で用意した2×106個のhUCBMSCを200μlのリン酸緩衝生理食塩水PBSに浮遊させてNCNgaマウスに週1回ずつDf塗布と同一期間の3週間と、アトピー性皮膚炎誘発後1週間、即ち合計4週間に4回、静脈または皮下に注射した。MDPで処理したhUCBMSCの注入は24時間10μlmLMDPを培地に添加してhUCBMSCを培養した後、PBSで5回水洗した後、注射した。112:MDP処理したhUCBMSCの治療効果を肉眼病変レベルで検証MDPで処理したhUCBMSCのアトピー性皮膚炎に対する治療効果を確認するために、hUCBMSCの4週目の注射投与の24時間後に剖検し、肉眼病変を評価した。肉眼病変は角質生成乾燥、擦過表皮剥離、紅斑、浮腫のスコアを症状に応じて、0点から3点まで付与した後、その数値を合算して評価した。その結果、図14に示されるように、アトピー性皮膚炎誘発群に比べて誘発に併せてhUCBMSCを静脈内注射した群では、若干の病変の緩和傾向のみが確認され、大きな差は観察されなかったが、MDP処理したhUCBMSCを注射した群の場合は、静脈注射と皮下注射を施行した群の両方に有意な病変の緩和が観察された。このような結果は、本発明のMDP処理した幹細胞またはその培養物が、アトピー性皮膚炎等の自己免疫疾患の治療が可能であることを示唆する結果といえる。113:MDPで処理したhUCBMSCの治療効果を血清中の免疫グロブリンEIgEの分析を通じて検証MDPで処理したhUCBMSCのアトピー性皮膚炎に対する治療効果を確認するために、hUCBMSCの4週目の注射投与の24時間後に剖検し、剖検時に採血した血清について市販のOptEIAmousesetBDBioscience、Mississauga、Canadaを利用して免疫グロブリンEIgE濃度を測定した。その結果、図15に示されるように、hUCBMSCを静脈内注射した群とMDPで処理したhUCBMSCを静脈内注射した群では有意なIgE抑制効果が確認されており、抑制率においては、MDPで処理したhUCBMSCを静脈注射した群がより高い抑制率を示した。しかし、MDPで処理したhUCBMSCを皮下注射した群は、誘発群との大きな差は見られなかった。114:MDPで処理したhUCBMSCの治療効果を血清中の免疫グロブリンG1IgG1の分析を通じて検証MDPで処理したhUCBMSCのアトピー性皮膚炎に対する治療効果を確認するために、hUCBMSCの4週目の注射投与の24時間後に剖検し、剖検時に採血した血清について、アトピー性皮膚炎のTh2の免疫反応の代表指標である血清中の免疫グロブリンG1IgG1の数値をELISAキットBethylLaboratoriesInc、Montgomery、TX、USAを利用して比較した。その結果、図16に示すように、すべてのhUCBMSC投与群において有意なIgG1の抑制効果が観察された。115:MDPで処理したhUCBMSCの治療効果を皮膚組織に対する病理組織学的検査を通じて検証MDPで処理したhUCBMSCのアトピー性皮膚炎に対する治療効果を確認するために、hUCBMSCの4週目の注射投与の24時間後に剖検し、皮膚組織を摘出して10の中性ホルマリン溶液で固定して、十分な固定を経た後、組織の処理過程を経て、パラフィン包埋し、3~4μmに薄く切断して、HEヘマトキシリンエオジンで染色して病理学的分析を実施した。その結果、図17に示されるように、誘発群の場合には、表皮の異常増殖と肌内に炎症細胞の過剰な浸潤が観察された。これらの病変の症状についてhUCBMSCを静脈内注射した群、MDPで処理したhUCBMSCを静脈内注射または皮下注射した群いずれも表皮の厚さと炎症細胞の浸潤程度が減少する傾向が観察され、MDPで処理したhUCBMSCを皮下注射した群、静脈注射した群、hUCBMSCを静脈内注射した群の順に病変の抑制が確認された。116:MDPで処理したhUCBMSCの治療効果を皮膚組織に対する病理組織学的検査を通じて検証MDPで処理したhUCBMSCのアトピー性皮膚炎に対する治療効果を確認するために、hUCBMSCの4週目の注射投与の24時間後に剖検し、皮膚組織を摘出して10の中性ホルマリン溶液で固定し、十分な固定を経た後、組織の処理過程を経て、パラフィン包埋し、3~4μmに薄く切断してトルイジンブルーで染色し、アトピー性皮膚炎の主な病変のひとつである肥満細胞の脱顆粒の程度を分析した。その結果、図18に示されるように誘発群の場合、脱顆粒された肥満細胞が多数観察され、すべての群で肥満細胞の脱顆粒が減少する傾向が観察された。前記のような結果は、本発明によるMDPで処理した幹細胞またはその培養物が、アトピー性皮膚炎等、実際の動物モデルにおける免疫疾患を治療可能であることを示唆する結果である。別途に定義されない限り、本明細書で使用されているすべての技術的および科学的用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって通常理解されるものと同一の意味を有する。一般的に、本明細書で使用された命名法は、本技術分野で公知であり、一般的に使用されているものである。