下記の工程を含む、魚類の健康状態の診断方法。魚類から採取した被検試料における、IL2配列番号1、IL413A配列番号2、IL413B配列番号3、IL6配列番号4、IL10配列番号5、IL12p40配列番号6、IL17AF1配列番号7、IL17AF2配列番号8、IL17AF3配列番号9、IL21配列番号10、TGFβ1配列番号11、IFNγ配列番号12、IFNγ2配列番号13、TNFα配列番号14、TNFβ配列番号15、IL1β配列番号16、IL7配列番号17、IL12p35配列番号18、IL15配列番号19、IL15Like配列番号20、IL18配列番号21、およびIIFN1配列番号22から成る群から選択されるサイトカイン遺伝子の発現量を測定する工程工程の測定結果に基づいて、魚類の健康状態を評価する工程前記サイトカイン遺伝子の発現量が、該遺伝子より転写されるmRNA量から測定される、請求項1に記載の方法。前記mRNA量の発現量が、RTPCR法またはリアルタイムRTPCR法により測定される、請求項2に記載の方法。前記RTPCRがマルチプレックスRTPCRである、請求項3に記載の方法。以下のp1~p22のいずれかに記載のプライマーセットから成る群から選択されるプライマーセットを用いて遺伝子を増幅する、請求項4に記載の方法。において、被検試料における遺伝子発現量と対照試料における遺伝子発現量とを比較することにより遺伝子の発現量を解析し、それにより魚類の健康状態を診断する、請求項1~7のいずれかに記載の方法。以下のp1~p22の魚類の健康状態診断用プライマーセット。p1配列番号25に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号26に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp2配列番号27に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号28に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp3配列番号29に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号30に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp4配列番号31に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号32に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp5配列番号33に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号34に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp6配列番号35に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号36に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp7配列番号37に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号38に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp8配列番号39に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号40に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp9配列番号41に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号42に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp10配列番号43に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号44に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp11配列番号45に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号46に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp12配列番号47に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号48に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp13配列番号49に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号50に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp14配列番号51に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号52に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp15配列番号53に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号54に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp16配列番号55に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号56に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp17配列番号57に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号58に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp18配列番号59に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号60に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp19配列番号61に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号62に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp20配列番号63に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号64に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp21配列番号65に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号66に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp22配列番号67に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号68に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセット配列番号1~22のいずれかに示す塩基配列からなるポリヌクレオチドにハイブリダイズし、該ポリヌクレオチドを検出するための少なくとも15塩基以上の長さを有する魚類の健康状態診断用プローブ。請求項9に記載のプライマーセットを少なくとも含む、魚類の健康状態診断用キット。上記のように、従来の魚病診断技術は時間を要する、病原体の種類を選ぶ、など様々な制限があった。そこで、本発明の課題は、病原体側からではなくホストである魚類側から魚類の健康状態を簡便かつ迅速に診断する手段を提供することにある。本発明者らは、上記の課題を解決するために鋭意検討を行った結果、病原体の構成成分の刺激によって複数のサイトカイン遺伝子の発現量が変動することから、それらのサイトカイン遺伝子が魚類の健康状態の指標となることを見出した。そこで、本発明者らは、当該複数のサイトカイン遺伝子をワンアッセイで測定できる系を確立し、本発明を完成させるに至った。本発明は以下の発明を包含する。1下記の工程を含む、魚類の健康状態の診断方法。魚類から採取した被検試料における、IL2配列番号1、IL413A配列番号2、IL413B配列番号3、IL6配列番号4、IL10配列番号5、IL12p40配列番号6、IL17AF1配列番号7、IL17AF2配列番号8、IL17AF3配列番号9、IL21配列番号10、TGFβ1配列番号11、IFNγ配列番号12、IFNγ2配列番号13、TNFα配列番号14、TNFβ配列番号15、IL1β配列番号16、IL7配列番号17、IL12p35配列番号18、IL15配列番号19、IL15Like配列番号20、IL18配列番号21、およびIIFN1配列番号22から成る群から選択されるサイトカイン遺伝子の発現量を測定する工程工程の測定結果に基づいて、魚類の健康状態を評価する工程2前記サイトカイン遺伝子の発現量が、該遺伝子より転写されるmRNA量から測定される、1に記載の方法。3前記mRNA量の発現量が、RTPCR法またはリアルタイムRTPCR法により測定される、2に記載の方法。4前記RTPCRがマルチプレックスRTPCRである、3に記載の方法。5以下のp1~p22のいずれかに記載のプライマーセットから成る群から選択されるプライマーセットを用いて遺伝子を増幅する、4に記載の方法。において、被検試料における遺伝子発現量と対照試料における遺伝子発現量とを比較することにより遺伝子の発現量を解析し、それにより魚類の健康状態を診断する、1~7のいずれかに記載の方法。9以下のp1~p22の魚類の健康状態診断用プライマーセット。p1配列番号25に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号26に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp2配列番号27に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号28に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp3配列番号29に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号30に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp4配列番号31に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号32に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp5配列番号33に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号34に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp6配列番号35に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号36に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp7配列番号37に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号38に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp8配列番号39に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号40に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp9配列番号41に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号42に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp10配列番号43に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号44に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp11配列番号45に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号46に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp12配列番号47に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号48に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp13配列番号49に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号50に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp14配列番号51に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号52に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp15配列番号53に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号54に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp16配列番号55に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号56に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp17配列番号57に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号58に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp18配列番号59に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号60に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp19配列番号61に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号62に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp20配列番号63に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号64に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp21配列番号65に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号66に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセットp22配列番号67に示す塩基配列からなるプライマーと配列番号68に示す塩基配列からなるプライマーとから構成されるプライマーセット10配列番号1~22のいずれかに示す塩基配列からなるポリヌクレオチドにハイブリダイズし、該ポリヌクレオチドを検出するための少なくとも15塩基以上の長さを有する魚類の健康状態診断用プローブ。119に記載のプライマーセットを少なくとも含む、魚類の健康状態診断用キット。本発明によれば、複数のサイトカイン遺伝子の発現動態を同時に解析することにより、魚類の健康状態を迅速かつ簡便に把握することが可能である。よって、本発明は、養殖魚の健康管理や医薬品抗菌剤、ワクチン、免疫賦活剤の有効性の評価に有用である。本発明の魚類の健康状態の診断方法は、魚類から摘出した被検試料におけるサイトカイン遺伝子の発現動態を解析することを特徴とする。本発明の魚類の健康状態の診断方法は、具体的には、魚類から摘出した被検試料におけるサイトカイン遺伝子の発現量を測定する工程と、該測定結果に基づいて、魚類の健康状態を診断する工程を含む。上記のサイトカイン遺伝子は、IL2配列番号1NM001037994、IL413A配列番号2、IL413B配列番号3、IL6配列番号4NM001032722、IL10配列番号5AJ539537、IL12p40配列番号6NM001100604、IL17AF1配列番号7AB522594、IL17AF2配列番号8AB522595、IL17AF3配列番号9AB522596、IL21配列番号10NM001037993、TGFβ1配列番号11、IFNγ配列番号12AJ616216、IFNγ2配列番号13、TNFα配列番号14NM001037985、TNFβ配列番号15NM001037986、IL1β配列番号16、IL7配列番号17NM001136148、IL12p35配列番号18NM001100605、IL15配列番号19NM001033048、IL15Like配列番号20NM001033640、IL18配列番号21NM001032632、およびIIFN1配列番号22AJ583023から成る群から選択されるサイトカイン遺伝子をいう。本発明における魚類の健康状態の診断は、上記サイトカイン遺伝子のうち、少なくとも1種以上、好ましくは少なくとも2種以上のサイトカイン遺伝子の発現量を測定することにより行う。少なくとも2種以上のサイトカイン遺伝子の発現量を測定する場合、限定はされないが、例えば、5種、10種、15種、20種等のサイトカイン遺伝子を診断対象とする魚種や診断目的に応じて適宜選択すればよい。また、本発明において、サイトカイン遺伝子は、配列番号1~22に示された塩基配列を有する遺伝子に限定されず、配列番号1~22に示された塩基配列と実質的に同一の塩基配列を有する遺伝子をも包含する。実質的に同一とは、例えば、配列番号1~22に示された塩基配列と85以上、好ましくは90以上、より好ましくは95以上、さらにより好ましくは98以上、最も好ましくは99以上の同一性を意味する。ここで、同一性は、例えば、相同性計算アルゴリズムNCBIBLASTNationalCenterforBiotechnologyInformationBasicLocalAlignmentSearchToolを用い、以下の条件期待値=10;ギャップを許す;フィルタリング=ON;マッチスコア=1;ミスマッチスコア=-3にて計算することができる。本発明において、魚類の健康状態の診断とは、病原微生物感染の有無や程度の判定、病原体保有状態であるか否かの判定を行うことをいう。本発明において診断対象となる魚類としては、海水魚及び淡水魚のいずれであってもよく、好ましくは養殖魚であり、より好ましくは海水で生息する養殖魚である。海水で生息する養殖魚としては、特に限定されないが、ハマチ、ブリ、カンパチ、シマアジ、タイ、トラフグ、ヒラメ、サケ、スズキ、サバなどが挙げられる。本発明の方法はまた、淡水で生息する養殖魚、例えばアユ、フナなど、及び観賞魚、例えば金魚、コイ、メダカなどにも適用可能である。本発明において用いられる被検試料としては、魚類より摘出した組織や体液であれば特に限定はされず、魚種によって異なるが、例えば、頭腎、脾臓、胸腺、鰓、腸、血液などが挙げられる。また、本発明において用いられる対照試料としては、健常であることが確認された魚類由来の上記と同様の組織や体液など挙げられる。これらの試料は分離、抽出、濃縮、精製などの前処理を行ってもよい。遺伝子の発現量とは、遺伝子の転写産物であるmRNA量をいう。本発明において、被検試料および対照試料における遺伝子の発現量は、当業者に公知の任意の方法により測定することができ、また、測定は、各方法の常法に従って実施すればよい。各方法について様々なプロトコルが報告されており、当業者であれば公知のプロトコルに従い、又は公知のプロトコルを適宜修正や変更を行い実施することができる。mRNA量を測定する場合、魚類からのRNAの抽出は、当該技術分野において通常用いられる手法、例えば、グアニジンチオシアネート-トリフルオロ酢酸セシウム法、グアニジン/塩化セシウム法などに従って行うことができる。また、RNA抽出に際しては、RNeasy等の市販のRNA抽出用キットに添付される抽出プロトコルを改良した独自のプロトコルに従って行うことが好ましい。mRNAの調製は、得られた全RNA画分をオリゴdTセルロースやポリUセファロース等を用いたアフィニティーカラム法、あるいはバッチ法により処理することによって行う。さらに、ショ糖密度勾配遠心法等によりポリRNAをさらに分画してもよい。mRNA量の測定は、所望のmRNA量を測定できる方法であれば特に限定されず、公知の方法から適宜選択して用いることができる。例えば、上記のサイトカイン遺伝子にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドをプライマーとした遺伝子増幅法、または、上記のサイトカイン遺伝子にハイブリダイズするオリゴポリヌクレオチドをプローブとしたハイブリダイゼーション法を利用することができる。具体的には、RTPCR法、リアルタイムRTPCR法、マイクロアレイ法、ノーザンブロット法、ドットブロット法、RNアーゼプロテクションアッセイ法などが挙げられる。上記の方法に用いるプライマーやプローブは、標識し、当該標識のシグナル強度を調べることによりmRNA量を測定することができる。なかでも、リアルタイムRTPCR法はRNAを直接サンプルに使用でき、遺伝子増幅過程を光学的に測定することで増幅に必要な温度サイクルの回数から遺伝子定量が可能である上で好ましい。また、複数のサイカイン遺伝子を同時にかつ迅速に定量できる点で、複数のプライマーセットを同一反応系で用いるマルチプレックスRTPCR法やマルチプレックスリアルタイムRTPCR法がさらに好ましい。遺伝子発現量の測定は、データの再現性の観点から、同一の被検試料の各遺伝子に対して複数のデータを得ることが好ましい。その場合、これらのデータの平均値を各遺伝子の発現量とすることができる。また、これらのデータの分散あるいは標準偏差の値から、再現性を検証することができる。次に、上記サイトカイン遺伝子の発現量の測定結果に基づいて魚類の健康状態を診断する。診断は、例えば、上記の各サイトカイン遺伝子について、対照試料における遺伝子発現量に対する被検試料における遺伝子発現量相対的発現量を算出することにより行う。ここで、対照試料としては、たとえば、健常魚類より摘出した上記と同様の組織や体液、あるいは、治療用薬剤投与前の疾病罹患魚類より摘出した上記と同様の組織や体液を挙げることができる。また、発現量が一定のGADPHなどのハウスキーピング遺伝子を内部標準遺伝子として被検試料および対照試料においてその発現量を測定し、試料間のRNA量の補正を行なうことが好ましい。測定の結果、被検試料におけるサイトカイン遺伝子の発現量が対照試料におけるサイトカイン遺伝子の発現量に比べて有意に高い場合は、該被検試料を採取した魚類が病原体による疾病に罹患している可能性があり、健康状態が悪いと判定できる。また、被検試料におけるサイトカイン遺伝子の発現量が対照試料におけるサイトカイン遺伝子の発現量と同等か低い場合は、該被検試料を採取した魚類が細病原体による疾病に罹患している可能性が低く、健康状態が良い、あるいは、薬剤治療により病態が改善されたと判定できる。遺伝子発現量の定量をRTPCR法で行う場合、用いられるプライマーセットは、前記のサイトカイン遺伝子の各塩基配列に基づき設計し、合成精製の各工程を経て調製することができる。プライマーのサイズ塩基数は、鋳型DNAとの間の特異的なアニーリングが可能とするために、20~40塩基である。プライマーの設計は、センス鎖5末端側とアンチセンス鎖3末端側からなる1組あるいは1対2本のプライマーが互いにアニールしないよう、両プライマー間の相補的配列を避けると共に、プライマー内のヘアピン構造の形成を防止するため自己相補配列をも避けるようにする。さらに、鋳型DNAとの安定な結合を確保するため、GC含量を約50にし、プライマー内においてGCrichあるいはATrichが偏在しないようにする。アニーリング温度はTmmeltingtemperatureに依存するので、特異性の高いPCR産物を得るため、Tm値が55~65°Cで互いに近似したプライマーを選定する。また、PCRにおけるプライマー使用の最終濃度が約01~1μMになるよう調整する等を留意することも必要である。また、プライマー設計用の市販のソフトウェア、例えばOligoTM[NationalBioscienceInc米国製]、GENETYX[ソフトウェア開発株日本製]等を用いることもできる。本発明における上記の各サイトカイン遺伝子を増幅できるプライマーセットとして、具体的には下記のプライマーセットが例示できる。マルチプレックスPCRの場合は、下記のプライマーセットを複数用いることによって、同時に複数のサイトカイン遺伝子を同一反応液中で増幅することができる。p1IL2遺伝子増幅用プライマーセット:FwAGGTGACACTATAGAATAggacgatcatcattgcatcaIL413A遺伝子増幅用プライマーセット:FwAGGTGACACTATAGAATAcaactgtggggatgctttttIL413B遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAtcaaagtctggcactgatcgIL6遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAtgaatggtgattcagacccaIL10遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAgctggacctgctcttcaactIL12p40遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAtcatctgcttttcccaaaccIL17F1遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAtttggttcaggctgatgttgIL17AF2遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAagtgcattgtggggattctcIL17AF3遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAtcaggcccactgttatacccIL21遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAagaatatgaagccgctggtgTGFβ1遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAgtcgcagttcccttcaacatIFNγ遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAtttgcgtggttcagacacatIFNγ2遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATActgtcagcggtacaatgacgTNFα遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAaagctgctacaacgccatttTNFβ遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAggaatgcaatttgacgtcctIL1β遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAtgaacctgtcgacctacgtgIL7遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAtgacctgcgacagaaatcagIL12p35遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAtgttcagtggaatggactgcIL15遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAagctgcgcagatgagagactIL15Like遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAgcgaatgctgtgtgtcatctIL18遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAtcccatgacattgcagaaaaIIFN1遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAaatctctggagctgctggacを利用して合成することが可能である。試料から抽出したRNAより合成したcDNAを鋳型として、上記のプライマーセットを用いてPCR増幅を行う。PCR増幅は上記のプライマーセットを用いる以外は特に制限はなく、常法に従って行えばよい。具体的には、鋳型DNAの変性、プライマーへの鋳型へのアニーリング、および耐熱性酵素TaqポリメラーゼやThermusthemophilis由来のTthDNAポリメラーゼなどのDNAポリメラーゼを用いたプライマーの伸長反応を含むサイクルを繰り返すことにより、目的とする各サイトカイン遺伝子の特定の遺伝子配列を含む断片を増幅させる。PCR反応液の組成、PCR反応条件温度サイクル、サイクルの回数等は、上記のプライマーセットを用いたPCRにおいて高感度でPCR増幅産物が得られるような条件を予備実験等により当業者であれば適切に選択および設定することができる。プライマーのTmに基づいて適当なPCR反応条件を選択する方法は、当該技術分野においてよく知られており、例えば、最初に94°Cで5分間の変性反応、次に94°Cで50秒間変性、55°Cで50秒間アニーリング、72°Cで1分間伸長を1サイクルとして30サイクル、最後に72°Cで1分間の伸長反応により実施することができる。但し、ここに示した条件は一例に過ぎず、用いる酵素、反応温度、反応時間、サイクル数などは適宜変更することも可能である。このようなPCRの一連の操作は、市販のPCRキットやPCR装置を利用して、その操作説明書に従って行うことができる。PCR装置は、例えば、GeneAmpPCRSystem9700AppliedBiosystems社製、GeneAmpPCRSystem9600AppliedBiosystems社製などが使用できるが、本発明方法においては、RNAをcDNAに変換しPCRを行うRTPCR反応を、1本のチューブ内で連続的に実施することのできる、TakaraOneStepRTPCRKitAMVTAKARA社製が好適に使用できる。PCR増幅産物の検出は、アガロースゲル電気泳動やキャピラリー電気泳動などの慣用の電気泳動、DNAハイブリダイゼーションやリアルタイムPCR等の方法を用いて行う。また、予め蛍光色素等により標識したプライマーを用いて当該PCRを行い、増幅産物を検出することもできる。また、DNAハイブリダイゼーションでは、マイクロアレイなどの固定化担体にPCR増幅産物を結合させ、蛍光または酵素反応等によりPCR増幅産物を確認する。検出用の固定化担体は、検出すべきサイトカイン遺伝子とハイブリダイズしうる配列を有するDNA断片が固定化されている支持体である。支持体としては、例えば、ナイロン膜、ニトロセルロース膜、ガラス、シリコンチップなどを用いることができる。また、プローブとしては、各サイトカイン遺伝子の塩基配列の連続する部分配列からなるポリオリゴヌクレオチド、あるいは、各サイトカイン遺伝子の塩基配列に対する相補配列の連続する部分配列からなるポリオリゴヌクレオチド断片が用いられる。プローブの長さは特に限定されないが、例えば15塩基以上、好ましくは20塩基以上であれば目的とする遺伝子の間で特異的なハイブリッドを形成できる。上記ヌクレオチド断片は、例えば、各塩基配列を有するポリヌクレオチドcDNAを適当な制限酵素で切断するか、あるいは、周知の化学合成技術により、invitroにおいて合成することができる。また、前記のサイトカイン遺伝子を特異的に増幅させるプライマーとして利用可能なオリゴヌクレオチドは、当該遺伝子を特異的に検出するためのプローブとしても使用可能であることは当業者にとって周知であるため、この知見を元にブローブとして利用可能なオリゴヌクレオチドを設計すればよい。上記ヌクレオチド断片をプローブとして使用する場合、標識物質により標識化する。標識物質は、特に限定はされないが、例えば、蛍光物質、放射性同位体、酵素、アビジン若しくはビオチンなどを用いることができる。蛍光物質としては、フルオレッセンスイソチオシアネートFITC、テトラメチルローダミンイソチオシアネートTRIC、シアニン色素例えば、CyDyeTMシリーズのCy3、Cy5等、アセチルアミノフルオレンAFFなどが挙げられ、酵素としては、ペルオキシダーゼ、β-ガラクトシダーゼ、アルカリホスファターゼなどが挙げられ、放射性同位体としては、125Iや3Hなどが挙げられる。上記のプローブとして用いるポリオリゴヌクレオチド断片は、前記サイトカイン遺伝子とストリンジェントな条件下でハイブリダイゼーションすることを特徴とする。ここで、ストリンジェントな条件とは、前記サイトカイン遺伝子とポリオリゴヌクレオチド断片との選択的かつ検出可能な特異的結合を可能とする条件である。ストリンジェント条件は、塩濃度、有機溶媒例えば、ホルムアミド、温度、及びその他公知の条件によって定義される。ストリンジェンシーは、塩濃度を減じるか、有機溶媒濃度を増加させるか、又はハイブリダイゼーション温度を上昇させるかによって増加する。例えば、ストリンジェントな塩濃度は、通常、NaCl約750mM以下及びクエン酸三ナトリウム約75mM以下、より好ましくはNaCl約500mM以下及びクエン酸三ナトリウム約50mM以下、最も好ましくはNaCl約250mM以下及びクエン酸三ナトリウム約25mM以下である。ストリンジェントな有機溶媒濃度は、ホルムアミド約35以上、好ましくは約50以上である。ストリンジェントな温度条件は、約30°C以上、好ましくは約37°C以上、より好ましくは約42°C以上である。その他の条件としては、ハイブリダイゼーション時間、洗浄剤例えば、SDSの濃度、及びキャリアーDNAの存否等であり、これらの条件を組み合わせることによって、様々なストリンジェンシーを設定することができる。また、プローブはマイクロアレイなどの固定化担体に固定化して用いてもよい。マイクロアレイの形成方法は特に限定されず、当業者が利用可能ないかなる方法を用いてもよく、例えば、固相担体表面で直接プローブを合成する方法オンチップ法、又は予め調製したプローブを固相担体表面に結合する方法などがある。固相担体表面で直接プローブを合成する場合には、光照射で選択的に除去される保護基を用い、半導体製造に利用されるフォトリソグラフィー技術及び固相合成技術を組み合わせて所定の微少なマトリックス領域でのオリゴヌクレオチドの選択的な合成を行う方法が一般的である。一方、予めプローブを調製して固相担体表面に結合する方法では、プローブ核酸の種類や固相担体の種類に応じて、スポッタ装置によりポリ陽イオン化合物やアミノ基、アルデヒド基、エポキシ基等を有するシランカップリング剤などで表面処理した固相担体の表面に点着する方法、反応活性基を導入したプローブ核酸を合成し、予め反応性基を形成させるように表面処理した固相担体表面に該プローブ核酸を点着して該プローブ核酸を固相担体表面に共有結合により結合固定させる方法などが利用できる。またもう一つの態様として、タンパク質量を測定する場合、その測定法としては、例えば、上記サイトカイン遺伝子によりコードされるポリペプチドに対する抗体または抗体断片を用いて測定する方法を用いることができる。具体的には、ブロッティング法、ドットブロット法、プロテインアレイ、免疫沈降法、酵素免疫測定法2、Fab、Fab、Fvなどが挙げられる。例えば、ポリクローナル抗体は、抗原を感作した哺乳動物例えば、ウサギ、ラット、マウスなどから血液を採取し、この血液から公知の方法により血清を分離することにより調製できる。また、モノクローナル抗体を得るには、上記抗原を感作した哺乳動物から抗体産生細胞脾臓細胞、リンパ節細胞などを取り出して骨髄腫細胞などと細胞融合させる。こうして得られたハイブリドーマをクローニングして、その培養物から抗体を回収しモノクローナル抗体とすることができる。抗原に用いるタンパク質もしくはその部分ペプチドは、例えば前記の塩基配列を有するサイトカイン遺伝子又はその部分遺伝子を発現ベクターに組込み、これを適当な宿主細胞に導入して、形質転換体を作成し、該形質転換体を培養して組み換えタンパク質を発現させ、発現させた組み換えタンパク質を培養体又は培養上清から精製することにより得ることができる。あるいは、これらの遺伝子によってコードされるアミノ酸配列、あるいは全長cDMAによってコードされるアミノ酸配列の部分アミノ酸配列からなるオリゴペプチドを化学的に合成し、免疫原として用いることもできる。本発明の方法に用いる上記サイトカイン遺伝子の発現量を測定するための試薬を予め組み合わせてキット化することもできる。例えば、キットには、前記のプライマーセット、プローブとして用いるポリオリゴヌクレオチド、または抗体のいずれかを少なくとも含んでいればよい。また、該キットには、必要に応じて、RNA抽出用試薬、PCR用緩衝液やDNAポリメラーゼ等のPCR用試薬、染色剤や電気泳動用ゲル等の検出用試薬、固定化担体、標識物質、標識の検出に用いられる基質化合物、陽性や陰性の標準試料、キットの使用方法を記載した指示書等を含めることもできる。なお、キット中の試薬は溶液でも凍結乾燥物でもよい。以下、実施例によって本発明を更に具体的に説明するが、これらの実施例は本発明を限定するものでない。実施例1魚類診断用マルチプレックスRTPCRの構築ターゲット遺伝子下記表1に示すフグのサイトカイン遺伝子をターゲット遺伝子とした。データベースに登録されていないサイトカイン遺伝子については、クローニングし、シークエンシングにより配列を決定した。また、βactin、GAPDHは内部標準遺伝子として用いた。全ターゲット遺伝子が発現するRNA溶液の調製免疫賦活剤によるinvitro刺激により、上記の全ターゲット遺伝子が発現するRNA溶液を調製した。まず、3尾のフグ魚体重20gから頭腎を摘出し、スパチュラ、ステンレスメッシュを用いてすりつぶした。そこに5FBSGibco社製、1StreptomycinPenicillinMPmedicals社製を含むRPMI培地wako社製を加え細胞浮遊液を作製した。得られた細胞浮遊液を1×107cellsmlに調整し4区に分け、最終濃度が10μgmlになるようにLPSSigma社製、polyICSigma社製、PHAwako社製、ImiquimodLktLaboratories社製の免疫賦活剤をそれぞれ添加した。その後、穏やかに懸濁し、22°Cで4時間静置した。静置後、4°Cで1500rpmの条件で10分間遠心分離し、上清を除去した。その後、RNAlaterに一晩浸し、RNAlaterを除いたのち、使用時まで80°Cに保存した。invitro刺激した頭腎組織からのRNAの抽出は、4区それぞれISOGENを用いプロトコルに従って行った。抽出した4区それぞれのRNAはRecombinantDNase1を用いプロトコルに従ってゲノムDNAの除去を行った。その後、DNase処理したRNAは4区それぞれ100ngμlになるように調整し、刺激したそれぞれのRNAを混合し、これを全ターゲット遺伝子が発現している鋳型RNAポジティブコントロールとして使用とした。マルチプレックスRTPCR用プライマーの構築上記のターゲット遺伝子について、各PCR産物の大きさが最低6bp以上離れるようにGenomeLabGeXPeXpressProfilersoftwareを用いて、各遺伝子に対してFwプライマーおよびRvプライマーを設計した。IL2遺伝子増幅用プライマーセットFwAGGTGACACTATAGAATAggacgatcatcattgcatcaRTPCR反応Singlet反応設計したプライマーの特異性を確認するため、各遺伝子に特異的なプライマーを用いてRTPCR反応を行った。反応は2で作製したRNAを鋳型とし、GenomeLabGeXPStartKitを用いて行った。まずRT反応は、DNaseRNaseFreeH2O、RTBuffer5×、KANrRNAwithRI、RvPrimer、ReverseTranscriptase、Templateを混合し、20μlのボリュームで行った。反応条件は、48°Cで1分間、42°Cで1時間、95°Cで5分間とした。続いて、PCR反応は、RT反応産物を鋳型に、25mMMgCl2、PCRBuffer5×、PCRFwPrimer、DNAPolymerase、Templateを混合し、20μlのボリュームで行った。反応条件は、最初に95°C、10分間の熱変性、次いで、94°C、30秒の熱変性、55°C、60秒のアニーリング、70°C、90秒の伸長を1サイクルとして計45サイクルを行い、その後室温保存とした。当該PCRは、初期の数サイクルでユニバーサル配列を含むPCR産物を生成し、その後、PCRBuffer中に含まれるユニバーサルプライマーを利用することによって遺伝子を増幅させるものである。RT反応およびPCR反応はC1000ThermalCyclerを用いて行った。マルチプレックス反応各遺伝子プライマーでの非特異反応の確認を行うため、全ターゲット遺伝子のFwプライマーを混合したFwプライマー混合液と、全ターゲット遺伝子のRvプライマーを混合したRvプライマー混合液をそれぞれ調製し、これらの各混合液をFwプライマーおよびRvプライマーとしてマルチプレックスRTPCR反応を行った。反応は、に記載の条件に従った。さらに、全ターゲット遺伝子の増幅効率を、GenomeLabGeXPsoftwareの検出最適値となるDyeSignal10000に近づけるよう、特に発現量の高い遺伝子および低い遺伝子について、混合前のRvプライマー濃度を977pMから2500nMの範囲で調整し、Rvプライマー混合液を作製した。この濃度調製後のRvプライマー混合液を用いる以外は、に記載の条件に従い、マルチプレックスRTPCR反応を行った。5電気泳動RTPCR反応終了後、サンプル1μlをSampleLoadingSolutionに混合した。その後、全量をCEQサンプルプレートBeckmancoulter社製に移し、ミネラルオイルを1滴添加した。CEQ8000AutomatedSequencerBeckmancoulter社製にCEQサンプルプレートをセットし電気泳動した。6解析得られたピークデータはGenomeLabGeXPsoftwareを用いて解析し、のSinglet反応で得られたデータについては、プライマーの特異性を確認し、のマルチプレックス反応で得られたデータについては、各遺伝子の反応及び非特異産物の有無を確認した図1。また、プライマー濃度を調整したマルチプレックス反応で得られたデータについては、GenomeLabGeXPsoftwareの検出限界となるDyeSignalが10000から20000前後におさまることを確認した図2。実施例2マルチプレックスRTPCRによるサイトカイン遺伝子発現量の測定疑似感染モデル魚の作製30gのフグにリポポリサッカライド溶液100μlまたはpolyIC溶液100μlを腹腔内注射した。その後、継時的に取り上げ頭腎を摘出した。摘出した頭腎は使用するまでの間RNAlaterに一晩浸し、RNAlaterを除いたのち、使用時まで80°Cに保存した。RNAの調製摘出した頭腎から、ISOGENを用いてプロトコルに従って全RNAを抽出した。抽出したRNAはRecombinantDnase1を用いてプロトコルに従ってゲノムDNAの除去を行った。マルチプレックスRTPCR検量線の作製のための鋳型として2で作製したRNAのうち4時間刺激のものを段階希釈したものを用い、測定するサンプルは2で作製したRNA用いて行った。マルチプレックスRTPCRは、IL2、IL413A、IL413B、IL6、IL10、IL12p40、IL17AF1、IL17AF2、IL17AF3、IL21、TGFβ1、IFNγ、IFNγ2の13遺伝子のFwプライマーを混合したFwプライマー混合液と、同13遺伝子のRvプライマーを混合したRvプライマー混合液実施例1で濃度を最適化したプライマー混合液をそれぞれ調製し、これらの各混合液をFwプライマーおよびRvプライマーとしてGenomeLabGeXPStartKitを用いて行った。まずRT反応ではDNaseRNaseFreeH2O、RTBuffer5×、KANrRNAwithRI、Rvプライマー混合液、ReverseTranscriptase、Templateを混合し、20μlのボリュームで行った。反応条件は、48°Cで1分間、42°Cで1時間、95°Cで5分間とした。次に、PCR反応はRT反応終了後の産物を鋳型に、25mMMgCl2、PCRBuffer5×、Fwプライマー混合液、DNAPolymerase、Templateを混合し、20μlのボリュームで行った。反応条件は、最初に95°C、10分間の熱変性、次いで、94°C、30秒の熱変性、55°C、60秒のアニーリング、70°C、90秒の伸長を1サイクルとして計35サイクルを行い、その後室温保存した。RT反応およびPCR反応はC1000ThermalCyclerを用いて行った。電気泳動RTPCR反応終了後、サンプル1μlをSampleLoadingSolutionに混合した。その後、全量をCEQサンプルプレートBeckmancoulter社製に移し、ミネラルオイルを1滴添加した。CEQ8000AutomatedSequencerBeckmancoulter社製にCEQサンプルプレートをセットし電気泳動した。解析得られたピークデータはGenomeLabGeXPsoftwareを用いて解析し、TheGeXPeXpressProfilerを用いて対象となる遺伝子のピークデータの決定を行った。同時に、発現データの補正を行うために、発現量の変動が安定している内部標準遺伝子の選択を行った。その後GeXPQuantToolを用いて解析し、検量線より各遺伝子の発現量を換算し、その後、内部標準遺伝子で補正した各遺伝子の発現量を定量した。結果を図3~12に示す。IL2、IL413A、IL413B、IL10、IL17AF1、IL17AF2、IL17AF3、IL21、TGFβ1、IFNγの10遺伝子については、LPSおよびpolyICによる刺激によって発現量が有意に増加することが確認された。従って、これらのサイトカイン遺伝子は、魚類の健康状態を評価する指標として用いることができるといえる。