"α4β7媒介性のトラフィッキングを実質的に保存しながらCNSへのα4β1媒介性の白血球トラフィッキングによって媒介される疾患を治療するための、対象における式Iの治療上有効な用量の使用。前記用量が約0.01mg/kg~約5mg/kgである、請求項1に記載の使用。前記用量が、約0.2mg/kg~約1.0mg/kgである、請求項2に記載の使用。前記用量が約0.2mg/kg~約0.5mg/kgである、請求項3に記載の使用。前記用量が約1.0mg/kg~約2.0mg/kgである、請求項1に記載の使用。式Iの前記化合物が前記対象に毎週投与される、請求項2、3、4または5のいずれかに記載の使用。式Iの前記化合物が前記対象に毎月投与される、請求項2、3、4または5のいずれかに記載の使用。式Iの投与の前の前記対象の血流におけるsMAdCAMレベルに比較して、前記対象の血流におけるsMAdCAMレベルが投与後に75以上維持されるように式Iの前記用量が選択される、請求項1に記載の使用。少なくとも部分的にα4β1活性を通じて媒介される生物学的プロセスを調節するための、対象における治療上有効量な用量のコンジュゲートの使用であって、ここで前記コンジュゲートが、生体適合性ポリマーに共有結合された2つ以上のα4β1低分子アンタゴニストを含み、かつここで前記コンジュゲートが、α4β7に対してよりもα4β1に対して20~100倍大きい効力を有する、使用。前記コンジュゲートが、α4β7に対してよりもα4β1に対して30~80倍大きい効力を有する、請求項9に記載の使用。前記コンジュゲートが式Iの化合物を含む、請求項9または10に記載の使用。前記コンジュゲートが、自己免疫疾患を有する対象に投与される、請求項9、10または11のいずれかに記載の使用。前記コンジュゲートが、多発性硬化症を有する対象に投与される、請求項12に記載の使用。前記コンジュゲートが、炎症性疾患を有する対象に投与される、請求項9、10または11のいずれかに記載の使用。前記コンジュゲートが、細胞増殖性障害を有する対象に投与される、請求項9、10または11のいずれかに記載の使用。前記コンジュゲートが、移植片拒絶または移植片対宿主病を予防するために対象に投与される、請求項9、10または11のいずれかに記載の使用。前記コンジュゲートが、傷害後の神経保護を促進するために対象に投与される、請求項9、10または11のいずれかに記載の使用。前記コンジュゲートの投与の用量または間隔が、式Iの投与の前の前記対象の血流中のsMAdCAMレベルに比較して投与後に、前記対象の血流におけるsMAdCAMのレベルを75以上維持するように選択される、請求項9、10または11のいずれかに記載の使用。自己免疫疾患を有する対象の治療における、生体適合性ポリマーに対して共有結合された2つ以上のα4β1低分子アンタゴニストを含むコンジュゲートの治療上有効な用量の使用であって、前記コンジュゲートが、α4β7に対してよりもα4β1に対して20~100倍大きい効力を有する、使用。前記自己免疫疾患が多発性硬化症である、請求項19に記載の使用。前記用量が、約0.01mg/kg~約5mg/kgである、請求項19に記載の使用。前記用量が、約0.2mg/kg~約1.0mg/kgである、請求項21に記載の使用。前記用量が、約0.2mg/kg~約0.5mg/kgである、請求項22に記載の使用。前記用量が、約1.0mg/kg~約2.0mg/kgである、請求項21に記載の使用。前記コンジュゲートが、前記対象に毎週投与される、請求項19、20、21、22、23または24のいずれかに記載の使用。式Iの前記化合物が、前記対象に毎月投与される、請求項19、20、21、22、23または24のいずれかに記載の使用。多発性硬化症を有する対象の治療における、生体適合性ポリマーに対して共有結合された2つ以上のα4β1低分子アンタゴニストを含むコンジュゲートの治療上有効な用量の使用であって、前記コンジュゲートが、α4β7に対してよりもα4β1に対して20~100倍大きい効力を有する、使用。前記用量が、約0.01mg/kg~約5mg/kgである、請求項27に記載の使用。前記用量が、約0.2mg/kg~約1.0mg/kgである、請求項28に記載の使用。前記用量が、約0.2mg/kg~約0.5mg/kgである、請求項29に記載の使用。前記用量が、約1.0mg/kg~約2.0mg/kgである、請求項28に記載の使用。式Iの前記化合物が、前記対象に毎週投与される、請求項27、28、29、30または31のいずれかに記載の使用。前記コンジュゲートが、前記対象に毎月投与される、請求項27、28、29、30または31のいずれかに記載の使用。炎症性疾患を有する対象の治療における、生体適合性ポリマーに対して共有結合された2つ以上のα4β1低分子アンタゴニストを含むコンジュゲートの治療上有効な用量の使用であって、前記コンジュゲートが、α4β7に対してよりもα4β1に対して20~100倍大きい効力を有する、使用。前記用量が、約0.01mg/kg~約5mg/kgである、請求項34に記載の使用。前記用量が、約0.2mg/kg~約1.0mg/kgである、請求項35に記載の使用。前記用量が、約0.2mg/kg~約0.5mg/kgである、請求項35に記載の使用。前記用量が、約1.0mg/kg~約2.0mg/kgである、請求項35に記載の使用。前記コンジュゲートが、前記対象に毎週投与される、請求項34、35、36、37または38のいずれかに記載の使用。前記コンジュゲートが、前記対象に毎月投与される、請求項34、35、36、37または38のいずれかに記載の使用。治療を必要とする患者の治療のための式Iの使用であって、前記対象に対して、約0.5mg/kg~約2.0mg/kgという式Iの毎週用量または毎月用量を投与することを包含する、使用。自己免疫疾患を有する患者の治療のための式Iの使用であって、前記対象に対して、約0.5mg/kg~約2.0mg/kgという式Iの毎週用量または毎月用量を投与することを包含する、使用。従って、α4β1インテグリンに選択的に結合し、α4β7を通じたシグナル伝達および/またはα4β7媒介性の関連の経路を利用するプロセスに対してほとんど影響がない化合物を用いる組成物、および治療の方法が必要である。発明の要旨この要旨は、詳細な説明において下にさらに記載される、選択された概念を簡略化された形式で導入するために提供される。この要旨は、特許請求される本発明の主題の重要または必須の特徴を特定するものではなく、特許請求される本発明の主題の範囲を限定するために用いるように意図されるものでもない。特許請求される本発明の主題の他の特徴、詳細、有用性および利点は、添付の図面に図示され、添付の特許請求の範囲に規定される態様を含む以下の書面による詳細な説明から明らかとなろう。本発明は、必要としている対象、好ましくはヒト対象において、選択的にα4β1インテグリンヘテロ二量体に拮抗するための方法を提供する。本発明の方法は、生体適合性ポリマーに共有結合された2つ以上のα4β1低分子アンタゴニストを含むコンジュゲートを利用する。α4β1を選択的に阻害するこれらの方法は、少なくとも部分的にα4β1活性を通じて媒介される正常な生物学的プロセスおよび病理学的な生物学的プロセスの両方を調節するために用いられ得る。従って、本発明は、対象における疾患の治療のためにα4β1ヘテロ二量体を選択的に阻害する化合物の使用に関する。このような疾患としては、限定するものではないが、炎症性疾患、自己免疫性疾患および細胞増殖性障害が挙げられる。本発明における使用のためのこのようなコンジュゲートの治療上有効な量は、種々の投与経路を通じて対象に提供されてもよく、かつ必要に応じて、薬学的に許容される担体とともに提供されてもよい。特定の態様では、本発明は、以下の式Iに示されるような化合物:を含むコンジュゲート、ならびにこのような化合物の関連する薬学的に許容される塩、ラセミ混合物、ジアステレオマーおよびエナンチオマーを含むコンジュゲートの使用に関する。式Iに示されるアルキレンオキシド[CH2-CH2-O]-反復ユニットの数が変化し、約100~100,000;好ましくは約20,000~60,000また約20~約60キロダルトンkDaとも表わされる;さらに好ましくは約30,000~約50,000すなわち約30~約50kDaの、コンジュゲート中の単一または複数のポリマー部分から生じるポリマーの総量の平均分子量を提供する。この種の合成有機ポリマーは多分散系であることが当業者には明白である。多分散系とは、本明細書に意図される長さのポリマー分子が、同じ種類のものでさえ、異なるサイズ直鎖またはマルチアームのポリマーについての鎖の長さになるという事実を指す。従って、平均分子量は、平均する方法次第である。多分散性指数PDIは分子量の変動の一般的な指標であり、数平均分子量に対する重量平均分子量の比である。PDIは、所与のポリマーサンプル中の分子量の分布の指標である。計算されたPDIは、重量平均分子量を数平均分子量で割ったものである。これは、ポリマーのバッチにおける個々の分子量の分布を示す。本発明のコンジュゲートについて、PDIは、1より大きい値を有するが、ポリマー鎖が均一な鎖長に近づくと、PDIは、均一1に近づく。これは、ポリマーのバッチにおける個々の分子量の分布を示す。数平均分子量とは、ポリマーの分子量を決定する一つの方法である。数平均分子量は、個々のポリマーの分子量の一般的平均である。数平均分子量は、n個のポリマー分子の分子量を測定すること、重量を合計すること、およびnで割ることによって決定される。ポリマーの平均分子量は、浸透圧法、末端基滴定および束一性によって決定され得る。重量平均分子量は、光散乱、小角中性子散乱SANS、X線散乱、および沈降速度によって決定され得る。数平均に対する重量平均の比は、多分散性指数と呼ばれる。多分散性を有さないポリマーの理論的な試料は、1という多分散性指数を有するであろう。本発明の多分散性指数の好ましい範囲は、約1.10~約1.05である。さらに好ましくは、約1.05から市販の実現可能な合成の上限までの範囲であり、これは今まで約1.02である。式Iのコンジュゲートはまた、米国特許出願公開第20060013799号にも記載されており、その全体は参照によって援用される。本発明における使用のためにさらに想定される他のコンジュゲート組成物としては、米国特許出願公開第20060013799号に個々に記載されるような、2つ以上のα4β1特異的な低分子アンタゴニストおよび生体適合性ポリマーを含む特異的なα4β1選択性コンジュゲートが挙げられる。一態様では、本発明は、CNSへのα4β1媒介性の白血球トラフィッキングを阻害し、一方ではα4β7媒介性のトラフィッキングを実質的に保持する式Iの治療上有効な用量の使用を提供する。一態様では、式Iの上記用量は、典型的には、約0.01mg/kg~約10mg/kgであり、好ましくは、約0.2mg/kg~約1.0mg/kgである。別の態様では、上記用量は、約1.0mg/kg~約2.0mg/kgである。特定の態様では、上記用量は、約0.5mg/kgである。上記用量は好ましくは、毎週または毎月投与される。本発明の別の態様では、生体適合性ポリマーに共有結合された2つ以上のα4β1低分子を含むコンジュゲートの治療上有効な用量の使用を提供し、ここでこのコンジュゲートが、少なくとも部分的にα4β1活性を通じて媒介される生物学的プロセスの調節において、α4β7に対してよりもα4β1に対して20~100倍大きい効力を有する。好ましくは、このコンジュゲートは、式Iの化合物のように、α4β7に対してよりもα4β1に対して30~80倍大きい効力を有する。本発明における使用のためのコンジュゲートおよび化合物は、限定するものではないが、自己免疫疾患例えば、多発性硬化症、炎症性疾患、および細胞増殖性障害を含む、疾患および障害を含む、種々のα4β1媒介性の生物学的プロセスの調節のために利用され得る。従って、本発明の1つの特定の態様では、本発明は、自己免疫疾患、例えば、多発性硬化症、関節リウマチ、喘息、乾癬、炎症性腸疾患などの治療のための本発明のコンジュゲートおよび化合物の使用を提供する。本発明の別の特定の態様では、本発明は、炎症性疾患、例えば、再狭窄およびアテローム性動脈硬化症の治療のための本発明のコンジュゲートおよび化合物の使用を提供する。他の特定の態様では、本発明は、造血系列の細胞に関与する異常な増殖である、造血系の新生物、および特にB細胞悪性腫瘍のような細胞増殖性障害の治療のための本発明のコンジュゲートおよび化合物の使用を提供する。本発明のさらに別の特定の態様では、本発明は、例えば、移植片拒絶または移植片対宿主病GVHDを予防するためなどの、免疫抑制を促進するための本発明のコンジュゲートおよび化合物の使用を提供する。さらに他の特定の態様では、本発明は、脊髄損傷のような損傷後の神経保護を誘導するための本発明のコンジュゲートおよび化合物の使用を提供する。いくつかの態様では、本発明は、生体適合性ポリマーに共有結合された2つ以上のα4β1低分子アンタゴニストを含むコンジュゲートの治療上有効な用量の使用であってを提供し、このコンジュゲートは、自己免疫疾患を有する患者の治療において、α4β7に対してよりもα4β1に対して20~100倍大きい効力を有する、使用が提供される。他の態様では、本発明は、必要とする患者の治療のための式Iの使用であって、約0.5mg/kg~約2.0mg/kgという式Iの毎週用量または毎月用量を患者に投与することを包含する、使用を提供する。さらに他の態様では、本発明は、自己免疫疾患を有する患者の治療のための式Iの使用であって、約0.5mg/kg~約2.0mg/kgという式Iの毎週用量または毎月用量を患者に投与することを包含する、使用を提供する。本発明のこれらおよび他の態様および使用は、書面の詳細な説明にさらに詳細に、そして添付の図面に図示されるとおり記載される。定義本明細書に用いられる用語は、当業者によって理解されるとおりの平易でかつ通常の意味を有するものとする。以下の定義は、本発明を理解するのに読者の助けとなるものであるが、特に示さない限りこのような用語の意味を変更もそうでなければ制限もするものではない。投与することという用語は、本明細書において用いる場合、本発明のコンジュゲートを含んでいる組成物による、記述される種々の障害の治療を包含する。投与することという用語はまた、治療の経過の間異なる時点で複数の用量が提供される単一の用量および投薬計画を包含する。投薬計画の単一用量または複数用量のいずれかが他の活性剤と組み合わせた形態で投与されてもよい。本明細書において用いる場合、α4β1選択性選択的という用語は、他のインテグリンヘテロ二量体よりも、特にα4β7よりもα4β1ヘテロ二量体に優先的に結合して調節する化合物を指す。本発明の方法における使用のためのα4β1選択性分子は、α4β7に対してよりもα4β1に対して、少なくとも20~100倍大きい効力、さらに詳細には、α4β7に対してよりもα4β1に対して30~80倍大きい効力によって特徴付けられる。自己免疫性疾患という用語は、本明細書において用いる場合、内因性ペプチドに対して自己反応性である宿主組織または免疫エフェクター細胞と反応する抗体の産生によって特徴付けられる疾患および障害を指す。細胞増殖性障害という用語は、本明細書において用いる場合、限定するものではないが、細胞の脱分化または制御されない細胞分裂を含む、異常な細胞増殖または細胞活性に関連する任意の疾患または障害を指す。免疫抑制という用語は、本明細書において用いる場合、例えば、移植片もしくは移植物の拒絶を妨げるため、または自己免疫性疾患を制御するための、免疫応答の抑制を指す。炎症性障害という用語は、本明細書において用いる場合、種々の細胞学的および化学的反応によって生じる組織の損傷または破壊によって特徴付けられる病理学的プロセスによって特徴付けられる任意の疾患または障害を指す。対象という用語は、本明細書において用いる場合、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを指す。治療上有効な量という用語は、本明細書において用いる場合、所望の生物学的応答または医学的応答を惹起するような本発明のコンジュゲートの量を意味する。処置する、治療するtreat、処置、治療treatment、処置すること、治療することtreatingなどの用語は、所望の病理学的な効果および/または生理学的な効果を得ることを指す。治療とは、本明細書において用いる場合、哺乳動物、具体的にはヒトにおいて所望の効果を達成するための任意の処置を包含し、そして以下を包含する:a疾患または生理学的影響を受け易い場合があるが、まだそれとは診断されていない対象でその疾患または生理学的影響が生じることを妨げること;b疾患または生理学的影響を阻害すること、すなわち、その発生を止めること;ならびにc疾患または生理学的影響を和らげること、例えば、退縮を生じること例えば、疾患または生理学的影響の症状を完全にまたは部分的に除去するため。治療の効果は、疾患、生理学的影響またはその症状を完全にまたは部分的に予防するという観点から、または組織拒絶のような有害反応を妨げる生理学的状態を維持するのにおいて、予防的であり得る。この効果はまた、疾患もしくは生理学的な影響、および/またはこの疾患もしくは生理学的影響に起因する有害な影響に対する応答のために部分的もしくは完全な治癒という観点で治療的でもあり得る。発明の詳細な説明本明細書に記載される技術の実施は、別段示さない限り、当該分野の当業者の技術の範囲内である、有機化学、製薬化学、ポリマー技術、細胞生物学、生化学の従来の技術および説明を使用し得る。本発明の組成物を含む薬学的調製物の調製のための技術を含む、適切な技術の詳細な例示説明は、本明細書の詳細な説明および実施例を参照してなされ得る。しかし、当然ながら、他の等価な従来の手順もまた用いられてもよい。このような従来の技術および説明は、Lehninger,PrinciplesofBiochemistry第3版,W.H.FreemanPub.,NewYork,N.Y.;およびBergら、2002Biochemistry,第5版,W.H.FreemanPub.,NewYork,N.Y.のような標準的な実験マニュアルで見出され得る。薬学的組成物を製剤する方法は、多くの刊行物、例えば、PharmaceuticalDosageForms:Tablets,第2版,改訂増補版、第1-3巻,編集Liebermanら;PharmaceuticalDosageForms:ParenteralMedications,第1-2巻、編集Avisら;ならびにPharmaceuticalDosageForms:DisperseSystems,第1-2巻,編集Liebermanら;発行MarcelDekker,Inc.に記載されている。薬学的に許容される担体の説明は、AmericanPharmaceuticalAssociationandthePharmaceuticalSocietyofGreatBritainが発行したTheHandbookofPharmaceuticalExcipients.に見出され得る。これらの刊行物の各々は、本発明における使用のためにその全体が参照によって援用される。本明細書において、および添付の特許請求の範囲において用いる場合、単数形1つの、あるa、an:不定冠詞およびこの、そのthe:定冠詞とは、文脈が明確に他を示すのでない限り、複数の言及を含むことに注意のこと。従って、例えば、ある賦形剤anexcipientという言及は、1つ以上の賦形剤を指し、この投与計画thedosageregimeという言及は、当業者に公知の等価な工程および方法の言及を包含するなどである。別段定義しない限り、本明細書に用いられる全ての技術的用語および科学的用語は、本発明が属する当該分野の当業者によって通常理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に言及される全ての刊行物は、現在記載される本発明と関連して用いられ得る機器、処方物および方法を記載および開示する目的のために、参照によって援用される。ある範囲の値が示される場合、その範囲の上限と下限との間の各々の介在する値、およびその言及される範囲の任意の他の言及される値もしくは介在する値が、本発明内に包含されることが理解される。これらのより小さい範囲の上限および下限は独立して、より小さい範囲に包含されてもよく、また言及される範囲における任意の特に排除された限界に依拠して本発明内に包含されてもよい。言及される範囲が、限界のうち1つまたは両方を包含する場合、それらの包含された限界の両方のいずれかを除外する範囲もまた本発明に包含される。以下の説明では、多数の具体的な詳細が示されて、本発明のさらに充実した理解が得られる。しかし、本発明は、これらの具体的な詳細の1つ以上がなくても行われ得ることが当業者には明白である。他の場合、当業者に周知の特徴および手順は、本発明をあいまいにしないために、記載していない。本発明の方法は、米国特許出願公開第20060013799号に開示される特定のα4β1選択性アンタゴニストのようなα4β1選択性阻害剤の治療上有効な量を対象に投与することを包含する、その必要な対象におけるα4β1媒介性の障害の治療を提供する。本発明の好ましい態様は、式Iの化合物の治療上有効な量を対象に投与することを包含する、その必要な対象においてα4β1媒介性の障害を治療するための方法である。特定の態様では、この化合物の治療上有効な量とは、約0.01mg/kg/日~約30mg/kg/日である。α4β1選択性コンジュゲートを含む本発明の組成物は、限定するものではないが、経口、経鼻、肺、舌下、眼、経皮、直腸、膣および非経口すなわち、皮下、筋肉内、皮内、静脈内などを含む任意の従来の投与経路によって投与され得る。皮下、筋肉内または皮内という投与経路が好ましい。経口、局所および非経口投与のための液体剤形における本発明の組成物の調製では、任意の通常の薬学的な媒体または賦形剤を使用してもよい。従って、液体の投与剤形、例えば、懸濁液すなわち、コロイド、エマルジョンおよび分散物および溶液のためには、適切な担体および添加物としては、限定するものではないが、薬学的に許容され得る湿潤剤、分散剤、凝集剤、増粘剤、pH調節剤すなわち、緩衝液浸透物質、着色剤、香料、芳香剤、防腐剤すなわち、微生物増殖などを制御するためが挙げられ、液体ビヒクルが使用されてもよい。非経口の処方物の場合は、無菌の非発熱性の液体ビヒクルが好ましい。全てではないが上記で列挙される成分が、各々の液体剤形に必要である。例えば、再構成または吸入のための乾燥粉末、顆粒、カプセル、カプレット、ジェルキャップ、丸剤および錠剤各々が、中間放出、時限放出および徐放性の処方物を含むのような固体の経口調製物においては、適切な担体および添加物としては、限定するものではないが、希釈剤、顆粒化剤、滑沢剤、結合剤、流動促進剤、崩壊剤などが挙げられる。それらの投与が容易であるおかげで、錠剤およびカプセルは、最も有利な経口の単位剤形であり、この場合、固体の薬学的な担体が、明らかに使用される。必要に応じて、錠剤は、標準的な技術によって、糖コーティング、ゼラチンコーティング、フィルムコーティングまたは腸溶性コーティングされてもよい。α4β1選択性コンジュゲートを含む組成物は、1単位剤形、例えば、錠剤、カプセル、粉末、注射液、茶さじ一杯などあたりに、本明細書に記載されるような有効用量を送達するのに必要な量のコンジュゲートを含む。本明細書の薬学的組成物は、1単位剤形、例えば、錠剤、カプセル、粉末、注射用の滅菌溶液または懸濁液、坐剤などあたりに、約0.01mg/kg~約300mg/kg好ましくは、約0.1mg/kg~約10mg/kg;およびより好ましくは、約0.5mg/kg~約2.0mg/kgを含み、そして所定の時間にわたって80を超えるα4β1受容体飽和を提供する用量で与えられ得る。投与量は、投与の間の時間間隔に依存する。好ましくは、α4β1コンジュゲートを用いる、本発明に記載されるα4β1インテグリン媒介性の障害の治療のための方法は、週または月単位で行われ、式Iの化合物の約0.01mg/kg/週~約1mg/kg/週;そして、より好ましくは、約0.2mg/kg/週~約0.5mg/kg/週のコンジュゲート、または約0.5mg/kg/月~約3mg/kg/月、それよりさらに好ましくは約1mg/kg/月~約2mg/kg/月のコンジュゲートを含んでいる、薬学的に許容される担体を含む剤形を用い、そして選択された投与方式に適切な任意の形態に構成されてもよい。しかし、この投薬量は、対象の要件、治療されている状態の重篤度、および特定の投薬計画に必要な時間の長さおよび滴定のスケジュールに依存して変化し得る。例えば、自己免疫疾患のような慢性疾患のため、または移植のための免疫抑制における使用のため、この投薬計画は、急性投与であっても、もしくは慢性投与であっても、または両方であってもよく、薬学的組成物は、このような長期投与に合った用量および薬学的賦形剤を用いて処方される。有利には、本発明の方法における使用のための組成物は、単位剤形、例えば、錠剤、丸剤、カプセル、再構成もしくは吸入のための乾燥粉末、顆粒、トローチ剤lozenges、非経口溶液または懸濁液のプレフィルドシリンジ、定量エアロゾルまたは液体スプレー、点滴、アンプル、自動注入装置または坐剤であって、経口、経鼻、舌下、眼内、経皮、非経口、直腸、膣、乾燥粉末インヘイラーまたは他の吸入もしくはガス注入手段による投与のためのものである。非経口溶液はまた、バルクのアンプルまたはバイアルで提供されてもよく、ここでは所望の量の薬物が、所望の間隔で投薬のために抜き取られてもよい。あるいは、この組成物は、低頻度の投与;例えば、2週毎の間隔隔週で、または1月に1回、または6週間の間隔に適切な形態で与えられてもよく、処方物製剤は、筋肉内注射のための皮下注射またはデポ調製物を得るように適合されてもよい。錠剤のような本発明の方法で用いるための固体の薬学的組成物を調製するため、主要な活性成分を、薬学的な担体、例えば、従来の錠剤成分、例えば、希釈剤、結合剤、接着剤、崩壊剤、滑沢剤、抗接着剤および流動促進剤と混合する。適切な希釈剤としては限定するものではないが、デンプンすなわち、加水分解され得る、コーンスターチ、コムギデンプンまたはジャガイモデンプン、ラクトース顆粒化、噴霧乾燥された、または無水、スクロース、スクロースベースの希釈剤、デキストロース、イノシトール、マンニトール、ソルビトール、微結晶性セルロースすなわち、AVICEL商標微結晶性セルロース、FMCCorp.Philadelphia,PA、第二リン酸カルシウム、硫酸カルシウム二水塩、乳酸カルシウム三水和物などが挙げられる。適切な結合剤および接着剤としては、限定するものではないが、アカシアガムacaciagum、グアーガムguargum、ガムトラガカントtragacanthgum、スクロース、ゼラチン、グルコース、デンプン、およびセルロース誘導体類すなわち、メチルセルロース、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなど、水溶性または分散性の結合剤例えば、アルギン酸およびその塩、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、ヒドロキシエチルセルロース例えば、TYLOSE商標,HoechstCelanese,Dallas,Texas、ポリエチレングリコール、多糖体酸類、ベントナイト類、ポリメタクリレート類およびアルファ化デンプンなどが挙げられる。適切な崩壊剤としては、限定するものではないが、デンプンコーンスターチ、ジャガイモデンプンなど、デンプングリコール酸ナトリウム、アルファ化デンプン、粘土ケイ酸アルミニウムマグネシウム、セルロース例えば、架橋カルボキシルメチルセルロースナトリウムおよび微結晶性セルロース、アルギン酸塩、アルファ化デンプンすなわち、コーンスターチなど、ガムすなわち、寒天、グアーガム、イナゴマメ、カラヤゴム、ペクチン、およびガムトラガカント、架橋ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。適切な滑沢剤および抗接着剤としては限定するものではないが、ステアリン酸塩マグネシウム、カルシウムおよびナトリウムの塩、ステアリン酸、タルク、ワックス、ステアロウエットstearowet、ホウ酸、塩化ナトリウム、DL-ロイシン、カーボワックスcarbowax4000、カーボワックスcarbowax6000、オレイン酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウムなどが挙げられる。適切な流動促進剤としては限定するものではないが、滑石タルク、コーンスターチ、シリカすなわち、CABO-SIL商標シリカCabot,Boston,MASYLOID商標シリカW.R.Grace/Davison、およびAEROSIL商標Degussaなどが挙げられる。甘味料および香味料を、歯で噛める固体剤形に添加して、経口剤形のおいしさを改善してもよい。さらに、着色剤およびコーティングを、薬物の特定を容易にするため、または審美的な目的のためにこの固体剤形に添加しても、塗布してもよい。これらの担体を、薬学的な活性剤と処方して、治療的な放出プロフィールを有する薬学的に活性な正確な適切な用量を得る。一般に、これらの担体を、コンジュゲートと混合して、本発明における使用のためのコンジュゲートの均一な混合物を含む固体の予備処方組成物を形成する。一般には、予備処方は、以下の3つの共通の方法のうちの1つによって形成される:a湿式造粒法、b乾式造粒法、およびc乾式混合法。これらの予備処方組成物を均一という場合、活性成分がその組成物全体にわたって均一に分散され、その結果この組成物が、錠剤、丸剤およびカプセルのような等しく有効な剤形に容易に小分割され得ることを意味する。次に、この固体予備処方組成物を、本発明の活性成分の約0.1mg~約500mgを含む上記の種類の単位剤形に小分割する。新規な組成物を含有する錠剤または丸剤をまた、多層の錠剤または丸剤に処方して、徐放性製品を得てもまたは二重放出の製品を得てもよい。例えば、二重放出の錠剤または丸剤は、内側投薬成分および外側投薬成分を含んでもよく、その外側投薬成分は、内側投薬成分よりも外皮の形態である。この2つの成分は、胃での分解に抵抗することを助け、かつ内側成分が丸ごと十二指腸に通過するか、または放出が遅れることを可能にする、腸溶性層によって隔てられてもよい。種々の物質がこのような腸溶性の層またはコーティングのために用いられてもよく、このような物質としては、多数のポリマー物質、例えば、セラック、酢酸セルロースすなわち、酢酸フタル酸セルロース、トリメリト酸酢酸セルロース、ポリ酢酸ビニルフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、酢酸コハク酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メタクリル酸塩、およびアクリル酸エチルコポリマー類、メタクリル酸塩、およびメタクリル酸メチルコポリマー類などが挙げられる。徐放性の錠剤はまた、溶液湿式造粒では結合剤として働く中でわずかに溶解性もしくは不溶性の物質または低融点固体溶融型湿式造粒では、活性成分を組み込み得るを用いるフィルムコーティングまたは湿式造粒法によって作製されてもよい。これらの物質としては、活性成分を顆粒化するか、コーティングするか、封入するか、そうでなければ溶解度を制限して、放出の長いかまたは徐放性の製品を得るために用いられ得る、天然および合成のポリマー、ワックス、水素化油、脂肪酸およびアルコールすなわち、蜜ろう、セチルアルコール、セチルステアリルアルコールなど、脂肪酸のエステル、金属せっけん、および他の許容される物質が挙げられる。本発明における使用のためのα4β1選択性コンジュゲートを含む液体型は、経口的にまたは注入による投与のために組み込まれ得る。これらの剤形としては、限定するものではないが、水溶液、適切に風味付けされたシロップ、水性もしくは油性の懸濁液、および綿実油、ゴマ油、ヤシ油またはピーナツ油のような食用油で風味付けされたエマルジョン、ならびにエリキシルおよび同様の薬学的ビヒクルが挙げられる。水性懸濁液のための適切な懸濁剤としては、合成および天然のガム、例えば、アカシアゴム、寒天、アルギン酸すなわち、アルギン酸プロピレン、アルギン酸ナトリウムなど、グアーガム、カラヤゴム、ローカストビーンガム、ペクチン、トラガカントガムおよびキサンタンガム、セルロース誘導体類、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースおよびヒドロキシプロピルメチルセルロース、ならびにそれらの組み合わせ、合成ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン、カルボマーすなわち、カルボキシポリメチレン、およびポリエチレングリコール;粘土、例えば、ベントナイト、ヘクトライト、アタパルジャイトまたはセピオライト;ならびに他の薬学的に許容される懸濁剤、例えば、レシチン、ゼラチンなどが挙げられる。適切な界面活性剤としては限定するものではないが、ドキュセートナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリソルベート、オクトキシノール-9、ノノキシノール-10、ポリソルベート20、ポリソルベート40、ポリソルベート60、ポリソルベート80、ポリオキサマー188、ポリオキサマー235およびそれらの組み合わせが挙げられる。適切な解膠剤または分散剤としては、製剤等級のレシチン類が挙げられる。適切な凝集剤としては限定するものではないが、単純な中性の電解液すなわち、塩化ナトリウム、カリウム、塩化物など、高度に荷電された不溶性ポリマー類および多価電解質種、水溶性の二価または三価のイオンすなわち、カルシウム塩、ミョウバンまたは硫酸塩、クエン酸塩およびリン酸塩pH緩衝液および凝集剤として処方物中で一緒に用いられ得るが挙げられる。適切な防腐剤としては限定するものではないがパラベンすなわち、メチル、エチル、n-プロピルおよびn-ブチル、ソルビン酸、チメロサール、四級アンモニウム塩、ベンジルアルコール、安息香酸、グルコン酸クロルヘキシジン、フェニルエタノールなどが挙げられる。液体の薬剤の剤形で用いられ得る多くの液体ビヒクルがあるが、特定の剤形で用いられる液体ビヒクルは、懸濁剤単数または複数と適合されなければならない。例えば、非極性の液体ビヒクル、例えば、脂肪酸エステルおよびオイル液体ビヒクルは、HLB親水性親油性バランスの低い界面活性剤、ステアラルコニウムヘクトライト、水不溶性樹脂、水不溶性フィルム形成ポリマーなどのような懸濁剤とともに用いるのが最も良い。逆に、極性の液体、例えば、水、アルコール、ポリオールおよびグリコールは、よりHLBの高い界面活性剤、ケイ酸白土、ガム、水溶性セルロース誘導体類、水溶性ポリマーなどのような懸濁剤とともに用いるのが最も良い。非経口投与のためには、滅菌懸濁液および溶液が所望される。非経口投与のために有用な液体型としては、無菌の溶液、エマルジョンおよび懸濁液が挙げられる。静脈内投与が所望される場合、適切な防腐剤を一般には含む等張性調製物が使用される。適切な非経口の防腐剤としては、フェノール、ベンジルアルコール、フェノキシエタノール、メチルパラベンまたはポリパラベンおよびそれらの組み合わせが挙げられる。一般には、式Iの化合物は、必要に応じて適切な防腐剤を含んでいる、薬物溶液が注射されるかまたは注入される、組織または液体と適合性である生理学的に受容可能なpHで、無菌生理食塩水または緩衝化無菌生理食塩水中に溶解されてもよい。α4β1選択性コンジュゲートはまた、小型の単層性小胞、大型の単層性の小胞、多層性の小胞などのようなリポソーム送達系の形態で投与され得る。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミン、ホスファチジルコリンなどのような種々のリン脂質から形成され得る。治療上有効な量のコンジュゲート薬物は通常、1日あたり体重1kgあたり約0.1mg/kg~約300mg/kgという投薬レベルで提供される。好ましくは、この範囲は、1日あたり体重1kgあたり約0.2mg/kg~約10mg/kg;そして最も好ましくは、1日あたり体重1kgあたり約0.5mg/kg~約1.0mg/kgである。有利には、本発明の化合物は、週に1回、隔週bi-weeklyまたは毎月の用量で投与されてもよく、または1日総投与量は、1日に2回、3回または4回の分割用量で投与されてもよい。投与されるべき最適の投薬量は、当業者によって容易に決定され得、そして用いられる特定の化合物、投与方式、調製の強度、および疾患状態の進行によって変化する。さらに、対象の年齢、体重、食事および投与時間を含む、治療されている特定の対象に関連する要因によって、用量を適切な治療レベルに調節する必要性が生じる。一般的な合成方法本発明の方法における使用のためのα4β1選択性のコンジュゲートを、一般的な合成方法に従い、かつ実施例1にさらに詳細に図示されるように合成してもよい。このような実施例は、単に例示説明であって、本発明における使用のためのα4β1コンジュゲートの産生のための方法は、化学的反応および記載される条件によって限定されるべきではない。α4β1選択性のコンジュゲートの成分は、薬学的に許容される塩の形態で提供され得る。医薬における使用のために、化合物の塩は、参照文献InternationalJ.Pharm.,1986,33,201~217、およびJ.Pharm.Sci.,19971月,66,1,1に開示される塩のような薬学的に許容される塩である。しかし、他の塩が、本発明のコンジュゲートにおいて用いられる化合物の調製に使用されてもよい。本発明の化合物を用いる治療に適する疾患本発明の方法は、α4β1インテグリンシグナル伝達を少なくとも部分的に介して媒介される種々の疾患、障害および生理学的効果の治療に有用である。特定の態様では、本発明の方法は、自己免疫性障害を治療するために用いられる。集団の実質的にわずかが、自己免疫性疾患に罹患しており、この疾患は、慢性、消耗衰弱性および生命に危険がある場合が多い。自己免疫性疾患は、最大65歳までの全ての年齢群の女性のうちで死亡の10番目の主要な原因であると推定されている。参照によって本明細書に援用される、NoelR.RoseおよびIanR.MacKay,TheAutoimmuneDiseases第4版の記載によれば、自己免疫によって生じる80を超える疾患がある。このような疾患状態としては、例として、喘息、アルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症、AIDS認知症、糖尿病急性若年発症糖尿病を含む、炎症性腸疾患潰瘍性大腸炎およびクローン病、多発性硬化症、リウマチ関節炎、組織移植、腫瘍転移、髄膜炎、脳炎、脳卒中および他の脳外傷、腎炎、網膜炎、シェーグレン病、アトピー性皮膚炎、乾癬、心筋虚血および急性白血球媒介性肺損傷、例えば、成人呼吸窮迫症候群で生じるものが挙げられる。特定の態様では、本発明の方法は、多発性硬化症を治療するために用いられる。多発性硬化症という用語は、本明細書において用いる場合、一次進行性多発性硬化症PPMS、二次進行性多発性硬化症SPMSおよび再発型多発性硬化症RFMS再発寛解型多発性硬化症およびこの疾患の全ての他の再発型を包含するを含むがこれらに限定されない、疾患の全ての状態を包含する。他の態様では、本発明の方法は、炎症性疾患を治療するために用いられる。炎症性疾患、例えば、アテローム性動脈硬化症および再狭窄両方とも動脈血管に影響するは、動脈の壁における慢性の炎症性応答から生じる。アテローム性動脈硬化症は、心血管系疾患の主要な原因であり、白血球の蓄積および連続的動員は、血栓症、心筋梗塞または発作をもたらす、破裂し易い脆弱なアテローム斑の発達と関連する。プラークマクロファージは、プラーク中のほとんどの白血球を占め、α4β1媒介性の相互作用を介して循環血液から動員された単球から分化されると考えられる。WoollardKJおよびGeissmannF,NatRevCardiol.2010Feb;72:77~86.Epub2010Jan12。再狭窄、すなわち血管形成術のような介入後の炎症性応答は、冠動脈の再狭窄化を生じる。これは典型的には、血管形成術を行った患者の40~50で3~6カ月内に生じて、心筋梗塞および虚血を含む、重大な病理をもたらす。自己免疫性疾患および炎症性疾患の両方とも、ヒトの適応免疫系または生来の免疫系の異常な反応を通じて生じる。自己免疫では、患者の免疫系は、身体自体の細胞および/またはタンパク質に対して活性化される。炎症性疾患では、病理学は、免疫系の過剰反応およびその引き続く下流のシグナル伝達に起因する。これらのプロセスは、少なくとも部分的にα4β1シグナル伝達を通じて媒介され、従って、α4β1の選択的な阻害は、治療の介入において膨大な適用を有する。本発明のコンジュゲートおよび組成物を用いて治療され得る、他の例示的な自己免疫性疾患および/または炎症性疾患状態としては、限定するものではないが、炎症性状態、例えば、結節性紅斑、アレルギー性結膜炎、視神経炎、ぶどう膜炎、アレルギー性鼻炎、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、脈管炎、ライター症候群、全身性エリテマトーデス、全身性進行性硬化症、多発性筋炎、皮膚筋炎、ウェーグナー肉芽腫症、大動脈炎、サルコイドーシス、リンパ球減少症、側頭動脈炎、心膜炎、心筋炎、うっ血性心不全、結節性多発動脈炎、過敏症候群、アレルギー、好酸球増加症候群、チャーグストラウス症候群、慢性閉塞性肺疾患、過敏性肺炎、慢性活動性肝炎、間質性膀胱炎、自己免疫性内分泌腺不全、原発性胆汁性肝硬変、自己免疫性再生不良性貧血、慢性持続性肝炎および甲状腺炎が挙げられる。他の態様では、本発明の方法が、細胞増殖性障害を治療するために用いられる。α4β1インテグリンは、能動的に治癒する血管および腫瘍関連血管の両方で見出されるA4B1およびフィブロネクチンに対する造血前駆細胞のホーミングを促進することが示されている。これらの前駆細胞は、腫瘍血管におけるα4β1の存在に起因して、腫瘍における能動的な血管形成の部位には向かうが正常な組織には向かわない。本発明の方法による組成物によるα4β1の遮断は、前駆細胞が血管へ固着すること、新規に形成された血管へ遊走すること、および異なる細胞種へ変化することを妨げ得る。従って、α4β1媒介性のホーミングプロセスを撹乱することは、腫瘍において新規な血管形成を抑制することにおいて有用である。血液学的障害、および具体的には、白血病および多発性硬化症もまた、本発明の方法を用いる治療に適している。さらに具体的には、細胞増殖性障害とは、例えば、急性リンパ球芽性白血病ALL、急性骨髄性白血病AML、慢性骨髄性白血病CML、および慢性リンパ球性白血病CLLである。本発明の他の態様では、侵襲性白血球活性に関与する損傷によって生じる損傷のレベルを軽減するための方法が提供される。例えば、脊髄損傷SCIによって生じる身体障害の程度は、最初の損傷後に好中球および単球/マクロファージのα4β1媒介性の髄腔内流入から部分的に生じる二次組織破壊に関連する。このような好中球および単球/マクロファージの流入を妨げる方法は、損傷された脊髄の酸化的活性を有意に低減し、生き延びたミエリン含有白質に関連する機能的回復を改善し得る。FlemingJCら,ExpNeurol.2008Dec;2142:147-59.Epub2008May1。損傷後の本発明の組成物でのα4β1の阻害および特に早期介入の方法は、神経保護的なストラテジーとして神経学的に重要であり得る。以下の実施例は、本発明を実施および使用する方法の完全な開示および説明を当業者に提供するように示され、本発明者らがその発明とみなすものの範囲を限定する意図ではなく、下の実験が行われた全ての実験または唯一の実験であることを示すもことを意図することでも、または意味するものでもない。多数の変形および/または改変が、広範に記載される本発明の趣旨もしくは範囲から逸脱することなく、特定の実施形態に示される本発明に対して行われ得るということが当業者には理解されるであろう。従って、本開示はあらゆる点において例示説明であって、限定ではないと解釈されるべきである。用いられる数値例えば、量、温度などに関して正確性を保証する労力を払ったが、ある程度の実験誤差および逸脱は、考慮されるべきである。他に示さない限り、部分は、重量部分であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏温度であり、かつ圧力は大気圧または大気圧付近である。実施例1式Iのコンジュゲートの生成本発明の好ましい方法で用いられる式Iの化合物は、以下の成分を用いて合成した:40kDaの3-アームPEGアルコール0.25g、0.00625mmol、NOFCorp.Japanおよび低分子阻害剤2-3,3-ジメチル-1-ピリジン-3-イルスルホニルピロリジン-2-カルボキサミド-3-4-2-オキソ-1H-イミダゾ[4,5-b]ピリジン-32H-イルフェニルプロパン酸0.04g、0.056mmolと:一緒にトリフェニルホスフィン0.025g、0.094mmolと。これらの成分を、トルエン5mLから共沸蒸留によって乾燥した。半分の容積を蒸留して2.5mL、その混合物を室温まで冷却した。CH2Cl20.5mLを添加して反応物を均一にした。ジエチルアゾジカルボキシレート0.015mL、0.094mmolを滴下して、反応物を48時間攪拌した。HPLC法Cによって、出発のPEGアルコールの完全な消失が示された。反応物を真空中で濃縮して、t-ブチルエステルを白色固体として得た。この得られたt-ブチルエステルは式Iである。ELN476063と同様に、汎α4β1およびαβ7阻害剤のコンジュゲートは、低分子阻害剤をコンジュゲートすることによって作製され、2-2-ジエチルアミノ-5-1-オキソ-1-ピロリジン-1-イルブタン-2-イルピリミジン-4-イルアミノ-3-4-2-オキソ-1H-イミダゾ[4,5-b]ピリジン-32H-イルフェニルプロパン酸を、上記の式Iの化合物について記載されるような光延条件下でカップリングした。低分子阻害剤を作製する詳細な方法は、米国特許出願公開第20070037804号に示される。式IおよびELN476063などを含む薬物分子とのコンジュゲートを作製する詳細な方法は、その全てが、その全体として参照によって本明細書に援用される米国特許出願公開第20070021555号および同第20080031848号に開示される。実施例2インビトロ効力の研究式Iの化合物の効力を、α4-依存性リガンド相互作用を独立して測定するいくつかのアッセイを用いて決定した、詳細には:1式Iの化合物がα4β1特異的な多価のリガンドの結合と競合する能力、2ヒトVCAN-1に対するヒトリンパ球細胞Jurkat商標細胞株のα4β1依存性の接着の阻害;3フィブロネクチンに対するヒトリンパ球細胞Jurkat商標TM細胞株のα4β1依存性の接着の阻害;および4Jurkat商標細胞上の活性化されたα4β1に対するヒト血清FNの結合の阻害。これらのアッセイの各々によって、α4β1結合に基づいて式Iの効力が確認された。多価の競合アッセイ式Iの効力を、α4β1特異的な多価のリガンドを用いてリンパ球結合競合アッセイで評価した。このリガンドは、α4β1に高い親和性を有するいくつかの低分子のための担体として機能する非特異的な抗体から構成される。この多価のリガンドは以下のとおり調製した。非特異的な抗体を、非求核性の緩衝液中に溶解して、EDCおよびスルホ-NHSで処理し、それによって、抗体の表面上でアスパラギン酸塩およびグルタミン酸塩側鎖を活性化した。その後、α4β1インテグリンに対する結合について重要でない分子の領域における一次アミノ基を保有する、α4β1インテグリンの低分子阻害剤を、混合物に添加した。適切な期間にわたってコンジュゲーションの反応を進行させた後、その反応混合物を2-ヒドロキシエチルアミンの添加によってクエンチした。次いで、非特異的な抗体現この段階で、低分子α4β1阻害剤の複数のコピーを提示しているを、透析によって低分子量の混入物から分離した。多価のリガンドは、Jurkat商標細胞α4β1インテグリンを提示するに対して高い結合力を示し、この相互作用の競合は、極めて強力なα4β1阻害性の化合物の効力を識別するための手段である。従って、このアッセイは、式I分子の効力を特徴付けるために用いられる極めてストリンジェントなアッセイである。α4β1に対する式Iの結合は、式Iがヒトリンパ球上の多価のリガンドに置き換わる能力を示す競合結合アッセイによって実証された。Jurkat商標細胞を、室温で30分間、1:400に希釈した多価のリガンドの存在下で式Iの滴定によってアッセイ緩衝液中でインキュベートした。次に、未結合の試薬をいくつかの洗浄工程によって除去し、この洗浄工程では、細胞をベックマンBeckman卓上遠心分離機で、300×gで5分間ペレットにし、次いで新鮮な緩衝液中に再懸濁した。残りの結合した抗体多価リガンドを、細胞とGoatFab’2抗-マウスIgGFc-フィコエリトリンBeckman-CoulterInc.,BreaCAと30分間、4°Cでインキュベートすること、続いて、洗浄およびFACS分析によって検出した。式Iの化合物は、多価のリガンドの結合の有意な置換を示した。この阻害は、再現性であって、試験されたロット間で一致し図1を参照のこと、ここで分子は18.8nMおよび17.7nMのIC50を示した。式Iの効力は、異なる種からの100の血清の存在下で変わらず、このことは、式Iが血清タンパク質に結合しなかったことを示すデータ示さず。α4β1依存性の接着:rs-hu-VCAM-1に対するJurkat商標の接着Jurkat商標リンパ腫T細胞は、高レベルのα4β1インテグリンを発現し、かつVCAM-1に対してα4インテグリン-依存性の方式で強力に接着する。この接着の阻害を評価するためのアッセイをまた用いて、式Iの分子の効力を決定した。式Iが接着を妨げる能力を、式III式Iの単一の低分子成分、および抗-α4抗体である21/6での阻害と比較した。96ウェルプレートCostar3590を、PBSPBS1mMのCaCl21mMのMgCl2中で0.25μl/ウェルで用いてrs-hu-VCAM-1RDSystems,SantaCruz,CAでコーティングして、4°Cで一晩インキュベートした。インキュベーション後、プレートを、アッセイ緩衝液20mMのHepes,140mMのNaCl,1mMのCaCl2,1mMのMgCl2および0.3のBSAを用いて30分間室温でブロックし、アッセイ緩衝液を用いて3回洗浄した。蛍光的に標識したJurkat商標細胞カルセインフルオレセイン色素,MolecularProbes,Carlsbad,CAを、96ウェルのFlexiPlateFalcon353911のウェルに対して、アッセイ緩衝液中で105細胞/ウェル最終容積:100μl/ウェルで添加した。種々の濃度のコンジュゲート、化合物または抗体の添加後、細胞を30分間室温でインキュベートした。次いで細胞を、rs-hu-VCAM-1コーティングしたプレートに移して、30分間室温で結合させた。このプレートを、アッセイ緩衝液を用いて3回洗浄して、蛍光を読んだAppliedBiosystems,CytoFluorseries4000,FosterCity,CA。式Iは、0.5nMというEC50値でヒトVCAM-1に対するJurkat商標細胞のα4β1依存性の接着を強力に阻害した図2。興味深いことに、式Iの化合物について3つのα4β1アンタゴニスト低分子が存在するが、式Iは、式IIIよりも23倍強力であるようであったそれぞれ、0.5nM対11.6nMというEC50。α4β1依存性接着:ヒトフィブロネクチンに対するJurkat商標細胞の接着Jurkat商標細胞は、μ4β1-依存性の方式でフィブロネクチンFNに接着する。式I、式IIIおよび抗-α4抗体である21/6を用いるこの接着の阻害をまた用いて、式Iの分子の効力を決定した。96ウェルプレートCostar3590を、フィブロネクチンFNCalbiochemを0.6μg/ウェルでPBSPBS1mMのCaCl21mMのMgCl2中で用いて一晩4°Cでコーィングした。次いで、このプレートを、アッセイ緩衝液20mMのHepes、140mMのNaCl、1mMのCaCl2、1mMのMgCl2、および0.3のBSAを用いて30分間室温でブロックして、アッセイ緩衝液を用いて3回洗浄した。蛍光的に標識したJurkat商標細胞カルセイン蛍光色素,MolecularProbes,C-1430製造手順に従って用いたを、96ウェルのFlexiPlateFalcon353911のウェルに105細胞/ウェル最終容積:100μL/ウェルのアッセイ緩衝液および10μg/mLのTS2/16抗体α4β1を活性化するβ1インテグリンに対するに添加した。α5インテグリンに対する5μg/mLの阻害性抗体BDPharmingen,FranklinLakes,NJを、緩衝液に添加して、FNに対するα5-依存性の接着を妨げる。種々の濃度での化合物または抗-α4抗体21/6,GG5/3,またはHP2/1の添加後、その細胞を通常の氷上で30分間インキュベートした。次いで、細胞を、FNでコーティングしたプレートに移して、35分間室温で結合させた。そのプレートを、アッセイ緩衝液を用いて3回洗浄し、蛍光を読み取ったAppliedBiosystems,CytoFluorSeries4000。FNおよびα4β1の相互作用は、VCAM-1アッセイにおける9.7nMからFNアッセイにおける1.1nMまでの21/6のEC50のシフトによって示されるようにVCAM-1相互作用よりもストリンジェントではない図3を参照のこと。式Iは、その低分子成分0.1nMと同様に0.2nMというEC50でFNの接着を阻害した。式Iおよび式IIIの2つの化合物は、極めて強力な化合物であり、従ってアッセイの感度に達し、効力の相違は、もはや測定できない。ヒト血清におけるα4β1FN捕捉アッセイJurkat商標細胞の表面上のα4β1受容体は、溶液中で、血清中に存在する内因性のFNを捕捉し得る。この一価の相互作用の阻害もまた、式Iの効力の評価として用いた。対数期のJurkat商標細胞を、以下の条件下で96ウェルのFlexiPlate中でインキュベートした:50のヒト血清、2×20μg/mlのα5インテグリンに対する阻害性抗体BDPharmingen,FranklinLakes,NJおよび2×の化合物または抗体をある範囲の濃度で含有する、アッセイ緩衝液20mMのHepes、140mMのNaCl、1mMのCaCl2、1mMのMgCl2、および0.3のBSAの中で、105個の細胞/50μl/ウェルにおいて、室温で30分間。50のヒト血清、抗体15/72×、20μg/mlおよびMnCl22×、3mMを含有する等体積のアッセイ緩衝液を次に各々のウェルに添加した。これらの試薬は、α4インテグリン活性化剤として働き、受容体が血清からFNを捕捉することを可能にする。次いで、このプレートを室温でさらに30分間インキュベートした。次いで細胞を冷たいアッセイ緩衝液で2回洗浄し、ニワトリ抗-ヒトFN抗体AmericanResearchProducts,PalosVerde,CAを15μg/mLとともに冷たいアッセイ緩衝液中で、30分間氷上で、暗所でインキュベートした。次いで細胞を1回洗浄して、FACS分析のために300μlの冷アッセイ緩衝液中に再懸濁したBecton-Dickinson,FranklinLakes,NJ。式Iは、0.05nMというEC50で50のヒト血清中でFN捕捉を阻害した図4。このアッセイでは、式IIIは、式Iよりも依然として強度が劣るがわずか2.6倍の差であったVCAM-1の接着アッセイで観察される23倍の相違とは異なる。式Iは、抗-α4抗体21/6よりも約6倍強力であったEC50=0.32nM。このアッセイは、受容体と一価の可溶性リガンドとの相互作用を測定しており、多価の相互作用に関与するVCAM-1接着アッセイよりもストリンジェンシーが低い。実施例3インビトロの選択性の研究式Iを、その特異性を特徴づけるために、α4β1以外のインテグリンに依存性であるいくつかの細胞接着アッセイにおいて、およびα9β1α4β1に最も密接に関連するインテグリンでの多価のリガンドアッセイにおいて試験した。式Iの特異性を、4つの非-α4β1インテグリン-依存性アッセイにおいてその活性を検査することによって評価した:1Α4β7に対するα4β7-依存性の接着;2ICAM-1に対するαLβ2LFA-1-依存性の接着;3ヒトフィブロネクチンFNに対するα5β1-依存性の接着;および4α9β1細胞上の多価の競合。これらを下のように各々簡略に記載する。α4β7-依存性の接着:Α4β7-Fcに対する8866細胞の接着96ウェルプレートCostar3590のウェルを、ヒトFcに対するマウス抗体Sigma.I-6260を用いて、それらを、H/S20mMのHepes,140mMのNaCl,1mMのCaCl2,1mMのMgCl2に含有される1:300希釈の抗体とともに室温で1時間インキュベートすることによってコーティングした。このプレートを、アッセイ緩衝液20mMのHepes,140mMのNaCl,1mMのCaCl2,1mMのMgCl2および0.3のBSAを用いて室温で1時間ブロックし、次いで同じ緩衝液で3回洗浄した。次に、アッセイ緩衝液20mMのHepes,140mMのNaCl,1mMのCaCl2,1mMのMgCl2および0.3のBSA中に含まれる組み換えヒトΑ4β7-Fcをこのウェルに30ng/ウェルで添加して、4°Cで一晩インキュベートした。次いでそのプレートを、アッセイ緩衝液中で3回洗浄した。蛍光的に標識した8866細胞カルセイン蛍光色素,Molecularprobes.C-1430製造業者の手順に従って用いたを、アッセイ緩衝液中で105細胞/ウェル最終容積:100μl/ウェルで96ウェルのFlexiPlateFalcon353911のウェルに添加した。種々の濃度の化合物または抗-α4抗体21/6,GG5/3またはHP2/1の添加後、細胞を室温で30分間インキュベートした。次いで、細胞をΑ4β7-Fcでコーティングしたプレートに移して、室温で30分間結合させた。このプレートを、アッセイ緩衝液を用いて3回洗浄して、蛍光を読み取ったAppliedBiosystems,CytoFluorseries4000,FosterCity,CA。αLβ2依存性接着:ICAM-1-Fcに対する8866細胞の接着96ウェルプレートCostar3590を、マウス腹水抗-HuFcSigma-Aldrich,St.Louis,MOを用いて1:300で、H/S中で、室温で1時間コーティングした。このプレートを、アッセイ緩衝液20mMのHepes、140mMのNaCl、1mMのCaCl2、1mMのMgCl2および0.3のBSAを用いて室温で1時間ブロックして、同じ緩衝液で3回洗浄しrヒト-ICAM-1-FcRDSystems,SantaCruz,CA,720-IC、次いでアッセイ緩衝液中で40ng/ウェルで、4°Cで一晩捕捉して、このプレートをアッセイ緩衝液中で再度3回洗浄した。カルセインで標識した8866細胞アッセイ緩衝液最終容積:100μl/ウェル中で105個の細胞/ウェルを、50ng/mLのPMAとともに、およびある濃度範囲の化合物とともに、96ウェルFlexiPlate中で、室温で30分間、予備インキュベートした。抗-αLβ2Pharmingen,555381を10μg/mLでまた、正の対照として用いて、αLβ2-依存性結合を阻害した。次いで、細胞をICAM-1-Fcでコーティングしたプレートに移して、37°Cで35分間5のCO2インキュベーター結合させた。このプレートを、アッセイ緩衝液を用いて3回洗浄して、蛍光を読み取ったAppliedBiosystems,CytoFluorseries4000。α5β1依存性接着:ヒトFNに対するTHP-1細胞の接着96ウェルプレートCostar3590を、PBSPBS1mMのCaCl21mMのMgCl2中に含まれる、FNCalbiochem,Gibbstown,NJを0.6μl/ウェルで用いて4°Cで一晩コーティングした。次いで、このプレートを、アッセイ緩衝液20mMのHepes、140mMのNaCl、1mMのCaCl2、1mMのMgCl2、および0.3のBSAを用いて室温で30分間ブロックし、アッセイ緩衝液を用いて3回洗浄した。カルセイン標識したTHP-1細胞アッセイ緩衝液中で105細胞/ウェル最終容積:100μL/ウェルを、96ウェルのFlexiPlate中で、10μg/mL21/6、10μg/mlTS2/16中で、およびある濃度範囲の化合物とともに、室温で30分間、予備インキュベートした。抗-α5抗体PharmingenFranklinLakes,NJも5μg/mLで、正の対照として用いてα5β1依存性の結合を阻害した。次いで、細胞をFNコーティングしたプレートに移して、室温で30分間結合させた。このプレートを、アッセイ緩衝液を用いて3回洗浄して蛍光を読み取ったAppliedBiosystems,CytoFluorseries4000。α9β1に対する競合結合対数期のSW480-発現性α9β1細胞を、以下の条件下で96ウェルのFlexiPlateFalcon353911中でインキュベートした:アッセイ緩衝液20mMのHepes、140mMのNaCl、1mMのCaCl2、1mMのMgCl2および0.3のBSA中で105細胞/100μL/ウェル、および無関係のマウス抗体に対してコンジュゲートされたα9β1に対して選択的に結合する低分子。α9β1結合因子は、そのEC90濃度1:400希釈で提供し、および式Iは、ある範囲の濃度で提供した。インキュベーションは、室温で30分間行った。次いで未結合の試薬をアッセイ緩衝液中で2回の洗浄によって除去した。残りの結合したα9β1結合性の分子を、アッセイ緩衝液中で、1:200希釈で用いたヤギFab’2抗マウスIgGFc-PEImmunotech,Miami,FLによって、30分間、氷上で、暗野で検出した。次いで細胞を1回洗浄して、FACS分析のために300μlの冷アッセイ緩衝液中に再懸濁したBecton-Dickinson,FranklinLakes,NJ。結果式Iは、αLβ2LFA-1およびα5β1インテグリンに対して測定可能な活性を有さず、α4β7およびα9β1に対しては測定可能な活性を有し、これはそれぞれ38nMおよび51nMというEC50であった。α9β1に対する式Iの効力は、α4β1に関するその効力の3倍内であった平均MV競合のEC50がα4β1=16.5nM、対、EC50がα9β1=51nM。結果を表1にまとめる。式Iによって、α4β7よりもα4β1の活性の75倍優先的な阻害;α9β1に対して軽度の交差反応性これは、α4とα9との間の相同性、および重複するリガンドに基づけば予想外ではない;ならびにαLβ2LFA-1およびα5β1インテグリンに対する活性がないということが示された。表1は、特異性のデータをまとめる:実施例4α4β1選択性コンジュゲートを用いるヒトの薬物動態式Iのα4β1選択性化合物の血漿の薬物動態挙動を評価した。18~45歳の健康なヒト被験者を、この研究に登録した。39人の健常な男性および女性年齢18~45歳包含を、この研究に登録した。被験者を、6つのコホートに分けて、被験者にそれぞれ、式Iの化合物を0.05、0.1、0.2、0.5、1.0および2.0mg/kg投与した。末梢静脈血サンプルを、各々の被験者から直接の静脈穿刺によって採取試験管に採取した。4.0mlの血液試料を、以下の時点で式Iのコンジュゲートの血漿濃度の測定のためにヘパリンナトリウム中に各々の被験者から採取した:投与前、投与の2、4、8、12、16、24、30、36、48、72、96、120、168、240、336、504、672、1440、および2160時間後。液体クロマトグラフィータンデム質量分析LC/MS/MS検出を用いて、コンジュゲートを投与された被験者での式Iの血漿濃度を決定した。これらの結果のまとめを図5に示す。式Iの定量下限lowerlimitofquantitationLLOQは、10.0ng/mLであって、検量線は、10.0~1000ng/mLの範囲にわたって許容できた。非コンパートメントの薬物動態PKパラメーターは、WinNonlin5.2ソフトウェアPharsightCorporation,MountainView,CAを用いて算出した。表2は、最初の5つのコホートについての予備的PKパラメーター評価のまとめである。コホート10.05mg/kgについて全ての時点で、式Iの濃度は、10ng/mLというLLOQ未満で維持された。この群に関してPKパラメーター評価は行わなかった。式Iの露出は、0.1、0.2、0.5、1.0および2.0mg/kgの用量群について期待される様式よりも大きく増大した。排出半減期は、濃度対時間曲線の非線形の性質のため、評価が困難である。要約すると、式Iの皮下SC投与後、AUCは、用量比例様式よりも大きく増大し、これは式Iの排出半減期の用量関連性の延長から生じた。Cmaxはまた、予想される様式よりも大きく増大した。式IのPK挙動は、用量の増大に伴う全身クリアランスおよび見かけの分布容積の減少によって特徴付けられた。最初の研究によって、1週あたり0.2~0.5mg/kgおよび1月あたり1.0~2.0mg/kgという式Iについての好ましい投与範囲が支持される。実施例5インテグリン受容体飽和アッセイ末梢血リンパ球を、実施例4に記載されるヒト臨床試験の6つのコホートの血液サンプルから採取して、α4β1およびα4β7受容体の飽和パーセンテージならびに総α4受容体数について分析した。α4β1インテグリン飽和、α4β7インテグリン飽和、ならびに総α4受容体数を、採取した循環のリンパ球で決定した。2mlの溶解緩衝液を各々の試験管に添加し、その試験管を2~4秒間ボルテックスした。それらを再度2~8°Cで13~17分間インキュベートして、光に対する暴露を低減するためにアルミニウムホイルでカバーした。このようなインキュベーションの終わりに、細胞をボルテックスして、2200rpmで5分間、4~15°Cで遠心分離した。上清を、吸引して廃棄し、そのペレットを0.5mlのオルト固定溶液[PBSリン酸緩衝化生理食塩水中の1のホルムアミドpH7.6]に再懸濁し、式Iの13×溶液および15/7または2G3の13×溶液を、1×PBS中にFBSの5容積を含むアッセイ培地中で提供した。α4β1インテグリン飽和アッセイを、式Iがヘテロ二量体に結合するとき、インテグリンのβ鎖における高次構造変化を認識する、リガンド誘導性の結合部位抗体である15/7を用いて行った。この立体構造変化によって、マウス抗ヒト抗体によって認識されるエピトープが明らかになった。フィコエリトリン標識したロバ抗マウスIgGを、レポーターとして用いた。FACSCalibur商標フローサイトメトリーを用いるフローサイトメトリー分析BectonDickinson,FranklinLakes,NewJerseyを行って、飽和パーセントを評価して、過剰の式Iを血液サンプルの異なるアリコートに添加して、100の飽和を決定した。mAb13β1インテグリン鎖に対する市販のラットモノクローナル抗-ヒト抗体を、血液の異なるアリコートに添加して、0の飽和を得た。mAb13mは、15/7の結合を無効にして、これを用いて、α4β1アッセイのためのベースラインを確立した。α4β7インテグリン飽和アッセイを、インテグリンのβ7鎖に選択的に結合する抗体2G3を用いて行った。全血を、ヘパリンナトリウムの試験管に収集して、式Iを、血液のアリコートに25μg/mlの最終濃度まで添加して、飽和したサンプルを調製した。式Iを、血液のアリコートに5μg/mlの最終濃度まで添加して、バックグラウンドのためのサンプルを調製した。次いで、式Iを含まない試験アリコートを2G3で処理して、リンパ球に対する式Iの結合を、Fab’2抗-マウスIgGPEを用いて検出して、結合した2G3を検出した。阻害性モノクローナル抗体FIB27β7インテグリン鎖に対する市販のモノクローナル抗-ヒト抗体を、血液の異なるアリコートに添加して、0の飽和を得た。FIB27は、2G3の結合を無効にし、これを用いてα4β7アッセイのためのベースラインを確立した。リンパ球のPE蛍光を、FACSCalibur商標フローサイトメーターを用いて分析して、平均の蛍光強度MFIを、これらのアッセイの両方において、試験サンプルについて、バックグラウンドおよび飽和を決定した。α4β1およびα4β7の両方の飽和パーセントを、試験サンプル測定値から決定したバックグラウンド測定値を差引きすること、これを飽和レベル測定値からバックグラウンド測定値を引いたもので割ること、およびこの割った数に100を掛けることによって算出した。全ての投薬において、β1受容体の70~100飽和が生じたが、コホート4~6では、飽和は最大14日間持続した図6を参照のこと。対応して、α4受容体の総数は、全ての投薬レベルで減少したデータ示さずα4β7の飽和のパーセンテージは、コホート40.5mg/kgで開始して検討した。この用量およびより高用量では、α4β7の飽和は、80以上であった。α4β1およびα4β7の受容体占有率は、2週以上の間0.5mg/kg以上の投薬で匹敵すると考えられる。α4β1飽和は、α4β7飽和よりも長く持続する0.5mg/kgで;より低用量は、α4β7飽和については試験しなかった。実施例6式Iでのヒト対象の治療後のインテグリン受容体下方制御末梢血液リンパ球を、実施例4に記載のように0.5mg/kgを投与されているヒトコホートから収集した。10μlの9F10-PEBiolegend,SanDiego,CAヒトα4インテグリンと交差反応するマウス抗α4インテグリン抗体を、総抗α4下方制御の決定のために試験管に添加して、その試験管を約2秒間ボルテックスした。次いでこの試験管を2~8°Cで30~50分間インキュベートした。2mlの溶解緩衝液を、各々の試験管に添加して、その試験管を2~4秒間ボルテックスした。それらを再度、2~8°Cで13~17分間インキュベートして、アルミニウムホイルでカバーして、曝光を低減した。このようなインキュベーションの終わりに、細胞をボルテックスして、4~15°Cで、2200rpmで5分間遠心分離した。その上清を吸引して廃棄し、ペレットを0.5mlのオルトの固定溶液Ortho’sfixativesolution[PBSリン酸緩衝化生理食塩水中に1のホルムアルデヒドpH7.6]の中に再懸濁する。平均蛍光強度MFIは、9F10-PEの結合について決定して、同じサンプルの0時点のMFIベースラインに対して正規化して、受容体の下方制御を算出した。α4β1およびα4β7についてのMFIは、実施例4に記載の15/7または2G3抗体アッセイからの正規化MFIを用いて決定した。式Iの0.5mg/kgの投薬量を投与されているヒト臨床試験コホートにおける受容体下方制御の結果を図7および8に示す。図7は、このコホート内の平均の下方制御を示し、図8は、この投薬量を投与されている個人からの結果を示す。総α4およびα4β1受容体の下方制御は相関した。有意なα4β7受容体下方制御は観察されなかった。実施例7リンパ球カウントおよび受容体の占有に対する式Iの投与量の影響ヒト対象における種々の投与量の式Iの生理学的影響を、従来のα4標的化治療剤NatalizumabTysabri商標の影響と比較した。ナタリズマブNatalizumabTysabri商標は、α4β1およびα4β7の両方に結合して調節する抗-α4抗体である。末梢血液リンパ球を、実施例4に記載のように、0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.5mg/kg、1.0mg/kgまたは2.0mg/kgの単回用量を投与されている種々のヒトコホートから収集し、リンパ球カウントをベースラインの割合として、初回の投与後6日目に測定した。末梢静脈血サンプルは、各々の対象から直接静脈穿刺によって収集試験管中に吸引した。4.0mlの血液サンプルを各々の対象から収集した。リンパ球のレベルは、標準的な臨床プロトコールによって測定した。図9は、式Iの種々の投薬量での患者リンパ球を示す棒グラフであり、図10は、患者の式Iの血漿濃度と相対リンパ球カウントとの間の関係を図示する折れ線グラフである。これらの投与量群の各々が、匹敵するレベルのナタリズマブNatalizumabTysabri商標を投与されている患者に比較して低レベルのリンパ球カウンがを示された。実施例8受容体飽和に対する式Iの投薬量の影響α4β1およびα4β7受容体飽和、リンパ球での占有率および発現に対する式Iの種々の用量の効果を、漸増性の用量研究で決定した。受容体飽和を決定するための方法は、実施例5に示したとおりであった。このレベルは、異なるコホートにおける最初の投与後91日間続いた。0.1mg/kg~2mg/kgの間で、リンパ球上のα4β1受容体は、図11に示されるとおり、少なくとも1週間完全に飽和された。対照的に、α4β7受容体飽和は、投与後14日までにベースラインに戻った。特定のコホートでは、飽和のこの測定されたレベルは、発現レベルと独立していることが示され、このことは、選択性を実証したことが示される。例えば、コホート4では、図12に示されるとおり、α4β1飽和のレベルは、投与後360で高く維持されたが、α4β7の飽和は、30より下に低下した。図13に示されるとおり、α4β7の発現レベルは実際に、α4β1に示される発現レベルよりも高く残った。コホート5に与えられたより高い式Iの用量1.0mg/kgは、図14に示されるように、α4β1およびα4β7の両方の飽和レベルがより高くなった。これによって、受容体の飽和のレベルが用量依存性であること、および適切な投薬量および投与計画によって制御され得ることが示される。実施例9用量選択式Iの好ましい投薬量とは、α4β1のその調節を通じて有効性を示すが、α4β7によって媒介され得るなんらの有害事象をも最小化する投薬量である。約90のα4β1受容体飽和を生じることが既知の最小用量を見積もるため、α4β1受容体飽和の別個のレベルおよび期間をもたらす用量範囲および投与計画を決定する。この評価によって、α4β7飽和を低下しながら、許容できるα4β1受容体飽和を生じる可能性が高い最小用量を決定する。このような研究からの結果を表3にまとめる:実施例10式Iによるα4β1媒介性の細胞接着の選択的な阻害式Iの化合物による、それぞれ、α4β1およびα4β7に対するα4β1およびα4β7媒介性の細胞接着の阻害を、細胞ベースのSRUBIND商標細胞接着アッセイSRUBiosystems,Woburn,MAを用いて試験した。式Iの化合物を、ある範囲の濃度でα4β1およびJurkat細胞またはα4β7および8866細胞とともにインキュベートした。比較のためにELN476063も試験した。この化合物-細胞混合物を、α4β1またはα4β7でコーティングしてあるSRUBIND商標アッセイプレートに添加して、細胞の結合をPVWシフトで測定した。簡潔に述べると、TiO2SRUBIND商標アッセイプレートを、抗-ヒトFc抗体を用いて、続いてヒトFc-α4β1またはFc-α4β7でコーティングした。式IおよびELN476063ペグ化した低分子α4-選択性インテグリン阻害剤を、ある範囲の濃度で、α4β1およびJurkat細胞またはα4β7および8866細胞とともにインキュベートした。次いで、この化合物-細胞混合物を、SRUBindアッセイプレートに添加して、細胞の結合を開始して、これをPVWシフトによって測定した。接着の100阻害を、抗-α4インテグリンブロッキング抗体の飽和性濃度で前処理した細胞で観察されるPWVシフトとして規定して、0の阻害最大の細胞接着は、それぞれ、α4β1またはα4β7プレート上でインキュベートした未処理のJurkat細胞または8866細胞で観察されるPWVシフトとして規定した。式Iの化合物は、それぞれ0.4nMおよび60nMというIC50で、α4β7に対するα4β7細胞よりも約150倍強力に、VCAM-1に対するα4β1細胞の接着を阻害した図15A。対照的に、ELN476063は、それぞれ、1.7および1.2nMというIC50で、α4β1およびα4β7に対するα4β1およびα4β7媒介性の細胞接着の等効力のα4β7を示した図15B。式Iの化合物は、ELN470603よりも4倍超強力にα4β1接着を阻害した。さらに、式Iの化合物は、ELN470603よりも4倍超強力にα4β1媒介性の接着を阻害し、このことは、式Iの化合物が、α4β1媒介性の接着の強力かつ選択性の阻害剤であるが、α4β7媒介性の接着の阻害剤ではないことを示している。実施例11α4β7リガンドMadCAM-1よりもα4β1リガンドVCAM-1の可溶性型の選択的な下方制御α4インテグリンの阻害は、それらのリガンド、VCAM-1およびMAdCAM-1の可溶性の循環型の下方制御を生じることが示されているMillonigら、J.NeuroimmunologyOct8;2271~2:190~4.Epub2010Aug232010。sVCAM-1およびsMAdCAM-1のマウス血漿レベルを、式Iの化合物およびELN476063について3週間にわたってある範囲の濃度を用いて単回投与実験で測定した。式Iの化合物またはELN476063の単回皮下投与後のsVCAM-1およびsMAdCAM-1調節の動態を、21日間にわたって計算した。未処置のC57BL/6マウスを、単回の皮下注射のPBSビヒクル、式Iの化合物またはELN476063FIGある範囲の用量で用いて治療した。4匹のマウスを各々のレベル/時点について投与した。これを、非選択性のコンジュゲートの効果に対して比較した。式Iの化合物およびELN476063の両方とも、sVCAM-1およびsMAdCAM-1の急速な用量依存性の下方制御を生じ、これは薬物レベルが低下するにつれて回復した。マウスでの0.5mg/kgの用量は、ヒトの0.2mg/kgの用量と等価であると推定されたCmaxに基づく。ヒトでの0.2mg/kgの用量は、マウスでの0.5mg/kgの用量を用いてマウスで得られたCmax値0.83μg/mLに匹敵するであろうCmax値0.57ng/mLを生じることとなる。マウスでの0.5mg/kgの用量は、急なCNS細胞トラフィッキングをブロックするのに十分に有効であった。同じ分析を用いて、0.5mg/kgというヒト用量は、1mg/kg5.5~4.3ug/mLというマウスの用量に匹敵する3.7μg/mLというCmax値を生じることとなる。0.5mg/kgというヒト用量は、急なCNS細胞トラフィッキングを妨げるのにこれもやはり十分に有効である1.0mg/kgCmaxによるというマウス用量にほぼ匹敵する。図16A~16Fは、sVCAM-1図16Aおよび図16B、sMAdCAM-1図16Cおよび16D、および血漿薬物レベル図16Eおよび図16Fを投与後4時間~21日にわたる種々の時点で示す。評価基準として、ビヒクル処理した動物における平均レベルに基づいた可溶性の接着分子の50下方制御を、図16のグラフに破線で示すこれらの投薬量から生じるsVCAM-1およびsMAdCAM-1の急速な用量依存性の下方制御は、薬物レベル低下につれて回復されるグラフEおよびFを参照のこと。式Iの化合物およびELN476063の血漿薬物濃度、対sVCAM-1またはsMAdCAM-1を、図16にまとめた実験で用いた各々のマウスについてプロットした。可変勾配の非線形回帰を用いて曲線をあてはめた。インビトロ選択性データと一致して、式Iの化合物は、sVCAM-1をより強力に下方制御したが、ELN476063に比較した場合、sMAdCAM-1レベルに対する影響は最小限であった。VCAM-1の最大阻害が3nM程度の低い式Iの化合物血漿濃度で見られたが、sMAdCAM-1は、最高の血漿濃度でさえ十分下方制御されなかった図17A。対照的に、sVCAM-1およびsMAdCAM-1は、ELN476063の等価な血漿濃度で同様に下方制御される図17B。α4β7リガンドMAdCAM-1を上回るα4β1リガンドVCAM-1の可溶型の選択的な下方制御によって、インビトロ選択性は、可溶性の接着分子の選択的調節を通じてインビボで維持され、sMAdCAM-1よりもsVCAM-1の調節を介してインビボで反映されるとおり、α4β7よりもα4β1についての式Iの化合物のインビトロ選択性および効力を示すということが示される。実施例12式Iの投与による細胞トラフィッキングの選択的阻害放射性標識した脾臓細胞およびリンパ節細胞を処理したEAEマウスに養子移入して、種々の臓器での総放射性を定量した。簡潔に述べると、実験的自己免疫性脳炎EAEを、C57BL/6マウスに、CFA中で乳化されたMOG35-55ペプチドの皮下注射、続いて、0日目および2日目に百日咳毒素の腹腔内注射を介して誘発した。誘発後12日目に、臨床スコア2後肢の足取りに影響のマウスを、研究に登録して、ある範囲の用量でPBS、ELN476063、または式Iを皮下投与した。未処置のマウス由来の脾臓細胞および腸間膜リンパ節細胞を一晩培養して、インビトロにおいて111インジウムで標識し、導入13日後に登録したEAEマウスに養子移入した。細胞移入の約16時間後、臓器を回収し、秤量して、放射能をガンマカウンターによって定量した。式Iの化合物は、0.5~3.0mg/kg、ただし0.1mg/kg以下ではない用量でEAEマウスの脊髄および脳への放射性標識細胞のトラフィッキングを有意に阻害することができた図19B、図19C、図19Eおよび図19F。式Iの化合物は、α4β7相互作用によって部分的に媒介される可能性が高い小腸のパイアー斑への細胞トラフィッキングに大きく影響しなかった図19Aおよび19D。パイアー斑およびCNSへのトラフィッキングの阻害が、10および1.0mg/kgの用量でELN476063で観察された。sVCAM-1は、CNSトラフィッキングをブロックする式Iの化合物の用量で下方制御されるが、0.1mg/kgでは下方制御されず図18A、これによってsVCAM-1は、薬物レベルだけでなく、薬物活性の可能性のあるマーカーであることが示される。CNSへの細胞トラフィッキングの有意な阻害が、sMAdCAM-1レベルに大きく影響しなかった式Iの化合物で示され、これによって、式Iの化合物が、α4β7-依存性免疫細胞トラフィッキングを妨げることなくCNS炎症を調節したことが示される図18B。実際、図15Bに示されるとおり、血漿中のsMAdCAMのレベル血流中で見出されたレベルと相関するは、最大3mg/kgの用量でさえ、式Iの投与後に少なくとも75の正常なレベルを保持している。従って、式Iの投与は、sVCAM-1レベルの統計学的に有意な下方制御を有することが示されるレベルにおいて、sMAdCAMを通じたシグナル伝達に影響しない。上記は単に本発明の原理を例示するものである。当業者は、本明細書に明確に記載されることも示されないが、本発明の原理を具現化し、かつその趣旨および範囲内に含まれる種々の構成を考案できることが理解される。さらに、本明細書に言及される全ての実施例および条件付きの表現は、主として、読者が本発明の原理および技術分野を進歩させるするように本発明者らが与える概念を理解するのを助けるものであって、このような詳細に言及される実施例および条件に対する制限はないと解釈されるべきである。さらに本発明の原理、態様および実施形態、ならびにその特定の実施例について述べている本明細書の全ての供述は、その構造的および機能的な等価物の両方を包含するものとする。"