凍結または乾燥中にアルミニウム塩アジュバントを保存するための方法であって、アルミニウム塩アジュバント;式:2~5NHC5~15CH3であり;およびR3はC1~6アルキルであるの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステル;または式:2もしくはSであり;RaおよびRbは独立にC1~6アルキルであり;およびRcはカルボン酸陰イオンおよびアミン部分で置換されたC1~6アルキルであるの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステル;ならびに必要に応じて、1種以上の糖、を含む水性懸濁液または溶液を凍結または乾燥することを含む、前記方法。水性懸濁液または溶液が凍結または凍結乾燥される、請求項1に記載の方法。水性懸濁液または溶液が少なくとも1種の抗原をさらに含む、請求項1または2に記載の方法。式の化合物が式:2~5NHC5~15CH3であるの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルであるか;式の化合物が式:の化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルであるか;式の化合物が式:の化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルであるか;または式の化合物が式:の化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルである、請求項1または2に記載の方法。式の化合物がNNジ、NNNトリ、もしくはNC1~6アルキルグリシンまたはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルである、請求項1~3のいずれか1項に記載の方法。式の化合物がNNジメチルグリシン、NNNトリメチルグリシン、もしくはNメチルグリシンまたはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルである、請求項5に記載の方法。式の化合物がNNジメチルグリシンまたはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルである、請求項6に記載の方法。式またはの化合物がジメチルスルホン、トリメチルグリシン、コカミドプロピルベタイン、プロリンベタインもしくはSメチルLメチオニンまたはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルである、請求項1~4のいずれか1項に記載の方法。アルミニウム塩アジュバントがリン酸アルミニウムまたは水酸化アルミニウムである、請求項1~8のいずれか1項に記載の方法。抗原またはそれぞれの抗原がアジュバント上に吸着されて提供される、請求項3~9のいずれか1項に記載の方法。式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルの濃度が少なくとも01Mである、請求項1~10のいずれか1項に記載の方法。1種の糖が用いられる、請求項1~11のいずれか1項に記載の方法。糖がスクロースであり、スクロースの濃度が001~05Mもしくは001~02Mであり、且つ式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルの濃度が02~5Mであるか、または糖がスクロースであり、スクロースの濃度が001~05Mもしくは001~02Mであり、且つ式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルの濃度が02~2Mであるか、または糖がマンニトールであり、マンニトールの濃度が02~08Mであり、且つ式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルの濃度が05~1Mであるか、または糖がスクロースであり、スクロースの濃度が001~07Mもしくは001~06Mもしくは001~05Mである、請求項1に記載の方法。2種以上の糖が用いられる、請求項1~10のいずれか1項に記載の方法。スクロースが別の糖と共に存在し、他の糖がラフィノース、スタキオースもしくは糖アルコールであるか、またはスクロースが別の糖と共に存在し、他の糖がラフィノースである、請求項14に記載の方法。糖が存在せず、式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルの濃度が03M~5Mである、請求項1~11のいずれか1項に記載の方法。懸濁液または溶液を凍結乾燥する、請求項1~16のいずれか1項に記載の方法。懸濁液または溶液を凍結乾燥して、不定形の固体マトリックスを形成させる、請求項17に記載の方法。乾燥した不定形の固体マトリックスを形成させ、該固体マトリックスを密封されたバイアル、アンプルまたはシリンジ中の粉末の形態で提供する、請求項18に記載の方法。得られるケーキを粉砕して粉末を形成させ、該粉末を密封されたバイアル、アンプルもしくはシリンジ中で提供するか、または固体マトリックスが錠剤もしくはカプセルの一部を形成する、請求項17に記載の方法。凍結または乾燥中にアルミニウム塩アジュバントを保存するための、請求項1または4~8のいずれか1項に記載の式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルおよび必要に応じて1種以上の糖を含む賦形剤の使用。請求項1または9に記載のアルミニウム塩アジュバント;1種以上の抗原;請求項1または4~8のいずれか1項に記載の式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステル;および必要に応じて、1種以上の糖、を含むワクチン組成物。請求項3~20のいずれか1項に記載の方法によって得られるワクチン組成物。ワクチン組成物のための再懸濁剤としての、請求項1または4~8のいずれか1項に記載の式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルおよび必要に応じて1種以上の糖を含む賦形剤の使用。ワクチン組成物が請求項22に記載のものであるか、または請求項3~20のいずれか1項に記載の方法によって得られるものである、請求項24に記載の使用。概要本発明は、凍結または乾燥、特に、凍結乾燥された場合の、アルミニウム塩ワクチンアジュバントに対する構造的損傷の低減および/または防止に関する。そのような構造的損傷は、式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルおよび必要に応じて1種以上の糖の存在下でアジュバントを凍結または乾燥することにより低減または防止される。典型的には、少なくとも1種の抗原が吸着されたアルミニウム塩アジュバントを、水性溶液中で式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルと接触させる。次いで、1種以上の糖が存在してもよい、得られる水性組成物を凍結または乾燥する。抗原が存在する場合、前記方法は、アルミニウム塩アジュバントおよび少なくとも1種の抗原を含むワクチン組成物を調製する方法である。アルミニウムアジュバントを含むワクチン調製物を、患者にワクチン調製物を投与する前に、それぞれ凍結または乾燥した後に解凍または再構成させることができる。本発明は、凍結または乾燥工程中にアルミニウムアジュバントの構造および機能を保存することができる。結果として、凍結または乾燥後のアルミニウムアジュバント化ワクチンの免疫原性を維持することができる。アルミニウム塩アジュバントアジュバントとしての使用にとって好適な任意の種類のアルミニウム塩を本発明において用いることができる。アルミニウム塩は、水酸化アルミニウム3、リン酸アルミニウム、塩酸アルミニウム、硫酸アルミニウム、アンモニウムミョウバン、カリウムミョウバンまたはケイ酸アルミニウムであってよい。好ましくは、用いられるアルミニウム塩アジュバントは、水酸化アルミニウムまたはリン酸アルミニウムである。最も好ましくは、アルミニウム塩アジュバントは、水酸化アルミニウム3である。典型的には、アルミニウム塩アジュバントは、アルミニウム塩から作られた水和ゲルの形態を取り、この水和ゲルは水性媒体中では粒子状懸濁液である。アルミニウム塩アジュバントの調製は当業者にはよく知られている。例えば、水酸化アルミニウムおよびリン酸アルミニウムアジュバントは、一般に、当業者には公知のように、アルミニウムイオンの水性溶液を明確に定義され、制御された化学的環境中でアルカリ条件に曝露することにより調製される。そのような方法を用いて、例えば、水酸化アルミニウムまたはリン酸アルミニウム水和ゲルを調製することができる。抗原本発明における使用にとって好適な抗原は、ワクチンの任意の免疫原性成分を含む。かくして、抗原は、タンパク質、細菌特異的タンパク質、ムコタンパク質、糖タンパク質、ペプチド、リポタンパク質、多糖、ペプチドグリカン、核タンパク質または融合タンパク質であってよい。抗原は、微生物、原生動物、腫瘍、悪性細胞、植物、動物、ヒト、またはアレルゲンから誘導されたものであってもよい。一実施形態においては、抗原は、タンパク質であるが、全ウイルスまたはビリオンを含まない。抗原は、例えば、組換えDNA技術を用いて誘導された合成のものであってもよい。抗原は、病原体関連抗原、腫瘍関連抗原、アレルギー関連抗原、神経欠損関連抗原、心血管疾患抗原、慢性関節リウマチ関連抗原などの疾患関連抗原であってもよい。抗原は、不活化または弱毒化/解毒化された毒素であってもよい。特に、ワクチン免疫原が誘導される病原体としては、ヒトパピローマウイルス、HIV、HSV2HSV1、インフルエンザウイルス、パラインフルエンザウイルス、ポリオウイルス、RSVウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、A型肝炎ウイルス、ノーウォークウイルス、腸ウイルス、アストロウイルス、麻疹ウイルス、ムンプスウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、サイトメガロウイルス、エプスタインバーウイルス、アデノウイルス、風疹ウイルス、ヒトT細胞リンパ腫I型ウイルス、B型肝炎ウイルス、C型肝炎ウイルス、D型肝炎ウイルス、ポックスウイルス、ワクシニアウイルス、サルモネラ菌、ナイセリア菌、ボレリア菌、クラミジア菌、クロストリジウム菌、例えば、CディフィシレおよびCテタニ、ボルデテラ菌、例えば、ボルデテラペルツシス、コリネバクテリア菌、例えば、Cジフテリア、プラスモジウム菌、コキソプラズマ菌、肺炎球菌、髄膜炎菌、クリプトコッカス菌、連鎖球菌、ビブリオコレラ菌、ブドウ球菌、ヘモフィルス菌、バチルス菌、例えば、バチルスアントラシス、大腸菌、カンジダ菌、アスペルギルス菌、エントアメーバ、ジアルジアおよびトリパノソーマが挙げられる。前記ワクチンをさらに用いて、いくつかの動物疾患に対して好適な免疫応答を刺激することができる。従って、ワクチン抗原は、手足口病ウイルス、コロナウイルス、ブルータングウイルス、ネコ白血病ウイルス、鳥インフルエンザウイルス、ヘンドラおよびニパウイルス、ペスチウイルス、例えば、牛ウイルス性下痢ウイルスおよびイヌパルボウイルスから誘導されてもよい。腫瘍関連抗原としては、例えば、メラノーマ関連抗原、乳癌関連抗原、結腸直腸関連抗原または前立腺癌関連抗原が挙げられる。アレルゲン関連抗原としては、ワクチンを投与する個体におけるアレルギー反応の抑制を刺激するためのワクチンにおける使用にとって好適な任意のアレルゲン抗原が挙げられる。式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステル式およびの化合物は、その生理学的に許容し得る塩またはエステルとして存在してもよい。塩は、典型的には、生理学的に許容し得る酸との塩であり、かくして、塩酸もしくは硫酸などの無機酸またはクエン酸、酒石酸、リンゴ酸、マレイン酸、マンデリン酸、フマル酸もしくはメタンスルホン酸などの有機酸を用いて形成されたものが挙げられる。塩酸塩が好ましい。エステルは、典型的には、C1~6アルキルエステル、好ましくは、C1~4アルキルエステルである。従って、エステルは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルまたはtertブチルエステルであってよい。エチルエステルが好ましい。本明細書で用いられるC1~6アルキル基は、好ましくは、C1~4アルキル基である。好ましいアルキル基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルおよびtertブチルから選択される。メチルおよびエチルが特に好ましい。疑いを避けるために、式および式の化合物の定義は、カルボン酸陰イオンがプロトン化されてCOOHを与え、アンモニウムまたはスルホニウム陽イオンが製薬上許容し得る陰イオンと結合した化合物も含む。さらに、疑いを避けるために、上記で定義された化合物を、任意の互変異性形態または鏡像異性形態で用いてもよい。式の化合物典型的には、R1は水素またはC1~6アルキルであり、R4は水素である。典型的には、R2は水素またはC1~6アルキルである。好ましくは、R1は水素またはC1~6アルキルであり、R4は水素であり、R2は水素またはC1~6アルキルである。好ましくは、式の化合物は、NC1~6アルキル、NNジもしくはNNNトリグリシンまたはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルである。アルキル基は、典型的には、C1~4アルキル基である。好ましいアルキル基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルおよびtertブチルから選択される。メチルおよびエチルが特に好ましい。式の好ましい化合物は、Nメチルグリシン、NNジメチルグリシンもしくはNNNトリメチルグリシンまたはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルである。Nメチルグリシンは、サルコシンとも呼ばれる。NNジメチルグリシンは、ジメチルグリシンまたは2酢酸とも呼ばれる。NNNトリメチルグリシンは、トリメチルグリシンとも呼ばれる。あるいは、式の化合物は、典型的には、式のグリシン誘導体またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステル:2~5NHC5~15CH3であるである。式の好ましい化合物は、トリメチルグリシンおよびコカミドプロピルベタインまたはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルである。あるいは、式の化合物は、典型的には、式のプロリン誘導体またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステル:である。好ましくは、式の化合物は、Sプロリン誘導体である。好ましくは、R8およびR9は両方ともメチルである;この化合物は、プロリンベタインとして知られる。Sプロリンベタインまたはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルが特に好ましい:式の化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルが好ましい。最も好ましくは、式の化合物は、NNジメチルグリシンまたはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルである。式の化合物典型的には、カルボン酸とRcのアミン置換基とを、Rcアルキル部分の同じ炭素原子に結合させる。典型的には、RcはC2~4またはC2~3アルキル部分である。式の化合物は、典型的には、式のスルホン化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステル:である。好ましいスルホン化合物は、メチルスルホニルメタンであり、これはジメチルスルホンとしても知られる。式の化合物は、典型的には、式の化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステル:部分で置換されたC1~6アルキル、例えば、メチルまたはエチルなどのC1~4アルキルであるである。式の好ましい化合物は、SメチルLメチオニンまたはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルである。糖本発明における使用にとって好適な糖としては、グルコース、フルクトース、グリセルアルデヒド、ラクトース、アラビノースおよびマルトースなどの還元糖;ならびに好ましくは、スクロースおよびラフィノースなどの非還元糖が挙げられる。糖は、単糖、二糖、三糖、または他のオリゴ糖であってよい。用語糖は、糖アルコールを含む。ガラクトースおよびマンノースなどの単糖;スクロース、ラクトースおよびマルトースなどの二糖;ラフィノースなどの三糖ならびにスタキオースなどの四糖が想定される。トレハロース、ウンベリフェロース、ベルバスコース、イソマルトース、セロビオース、マルツロース、ツラノース、メレジトースおよびメリビオースも本発明における使用にとって好適である。好適な糖アルコールはマンニトールである。2種以上の糖が存在してもよい。2、3または4種の糖を用いることができる。1種以上の糖が凍結または凍結乾燥される水性懸濁液中に存在する場合、好ましくは、スクロースまたはスクロースとラフィノースが存在する。スクロースはグルコースとフルクトースとの二糖である。ラフィノースはガラクトース、フルクトースおよびグルコースから構成される三糖である。凍結または乾燥される水性懸濁液凍結または乾燥される水性懸濁液または溶液を、アルミニウム塩アジュバントと、式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルの水性溶液とを混合することにより調製することができる。式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルは特に、ジメチルグリシン、SメチルLメチオニン、メチルスルホニルメタン、サルコシンおよびトリメチルグリシンから選択してもよく、例えば、ジメチルグリシン、SメチルLメチオニン、メチルスルホニルメタンまたはトリメチルグリシンであってよい。任意の好適な水性溶液を用いることができる。溶液を緩衝化してもよい。溶液は、HEPES溶液、トリス緩衝化溶液、リン酸緩衝化溶液または純水溶液であってもよい。必要に応じて、1種以上の糖を水性溶液中に溶解した後、アジュバントと混合する。あるいは、糖を、式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルの水性溶液中でアジュバントの懸濁液と混合することができる。存在する場合、一般に抗原を、アジュバントと、式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルとの混合の前にアジュバント上に吸着させる。アジュバントを、水和ゲルの形態で調製し、抗原を水和ゲル中に吸着させることができる。抗原吸着を、当業者にはよく知られた技術を用いて実行することができる。例えば、特定のタンパク質抗原については、アジュバントと抗原とが反対の電荷を有するpH間隔で吸着を最良に実行し、静電気引力および吸着を容易にすることができる。特定の抗原アジュバント組合せのためのタンパク質吸着は、抗原の性質および化学的環境に依存する。凍結させる水性懸濁液または溶液中の式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルおよびそれぞれの糖の濃度を、日常的な実験により決定することができる。かくして、最適化された濃度を選択することができる。式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルは、糖と相乗的に作用して、安定性を改善することができる。水性懸濁液または溶液中の式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルの濃度は、典型的には、0001M以上の範囲、好ましくは、001M以上の範囲およびより好ましくは、01M以上の範囲、例えば、01M~50Mにある。用いられる特定の濃度は、存在する場合、抗原の性質;用いられる式もしくはの特定の化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステル;1種以上の糖が用いられるかどうかと、その場合の糖の同一性;および採用される特定の凍結または乾燥手順などのいくつかの因子に依存する。かくして、式の化合物または式もしくは式の化合物、例えば、TMG、またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルの濃度は、好ましくは、001M~5M、01M~5M、02M~50Mまたは01M~1Mである。XがS2である式の化合物または式の化合物、例えば、MSM、またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルの濃度は、好ましくは、001M~4M、005M~2Mまたは007M~1Mまたはさらには053Mまでである。XがSである式の化合物または式の化合物、例えば、SメチルLメチオニン、またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルの濃度は、好ましくは、001M~5M、01M~5M、02M~3Mまたは01M~1Mである。NNジ、NNNトリ、もしくはNC1~6アルキルグリシンである式の化合物、例えば、NNジメチルグリシン、NNNトリメチルグリシン、もしくはNメチルグリシン、またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルの濃度は、典型的には、001M以上および好ましくは01M以上、例えば、01M~50M、033M~50M、05M~4Mまたは05M~3Mである。NNジメチルグリシンである式の化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルの濃度は、典型的には、001M以上、好ましくは、01M以上、例えば、01M~50M、033M~50M、05M~4Mまたは05M~3Mである。1種以上の糖が存在する場合、より少ないDMGまたはDMG塩またはエステルを用いることができる。1種以上の糖を用いる場合、凍結または乾燥させる水性懸濁液または溶液中の糖の濃度または糖の合計濃度は、典型的には、1M以下または07M以下、例えば、05M以下または029M以下である。10wvのスクロース溶液は、029Mのスクロース濃度を有する。糖濃度または合計濃度は、01mM、05mM、0073Mまたは0146Mまで下げてもよい。式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルがDMGまたはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルである場合、凍結または乾燥のための水性懸濁液または溶液中の糖の濃度は、糖が存在する場合、典型的には、1M以下または07M以下、例えば、05M以下または029M以下である。10wvのスクロース溶液は、029Mのスクロース濃度を有する。好ましくは、スクロースもしくはラフィノースなどの糖の濃度、または2種以上の糖が存在する場合、糖の合計濃度は05M以下、02M以下、01M以下もしくは10mM以下である。存在する場合の糖の最少濃度または、2種以上の糖が存在する場合の糖の最少合計濃度は、001M、01Mまたは02Mであってよい。かくして、糖濃度、例えば、スクロースもしくはラフィノースの濃度、または2種以上の糖が存在する場合の合計濃度は、001M~07M、0029M~05M、0058M~03Mまたは01M~03Mであってよい。糖がスクロースである場合、スクロースの濃度は、好ましくは001~02Mであり、DMGまたはその塩もしくはエステルの濃度は、好ましくは02~2Mである。用いられる特定の濃度は、抗原の性質、用いられる特定の式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルおよび採用される特定の凍結または乾燥手順などのいくつかの因子に依存する。糖の濃度または合計濃度は、01mM~07M、5mM~07M、0073M~05M、または0146M~0389Mであってよい。糖がマンニトールである場合、マンニトール濃度は、典型的には02~1Mまたは02~08Mであり、好ましくは025~06Mまたは04~08M、例えば、05~06Mである。式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルの最も効果的な濃度は、用いられる特定の種類の化合物、それが糖と共に用いられるかどうか、および用いられるアルミニウム塩アジュバントの種類、例えば、水酸化アルミニウムまたはリン酸アルミニウムアジュバントが用いられるかどうかに依存する。式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルと、糖との混合物を用いて、本発明者らはより低濃度の各成分を用いて、各成分を別々に用いる場合に得られるものと同じレベルのアジュバントの保護を達成することができることを証明した。糖の高濃縮溶液は、そのような濃縮された糖を含有するワクチン調製物を患者に注射した場合に部位特異的反応を与えることが知られている。従って、本発明は、式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルと組合せた場合により低濃度の糖を用いることができるという利点を有する。結果として、そのようなワクチン調製物を再構成させるか、または解凍する場合、糖の濃度が低下し、部位特異的反応の可能性が最小化される。凍結/乾燥凍結凍結は、任意の好適な方法により行われる。かくして、凍結は、液体窒素もしくは液体窒素蒸気中に浸すこと、4°C~80°Cの温度の冷凍庫に入れること、またはドライアイスとアルコール凍結浴槽を用いることにより実行することができる。大気圧で、4°C以下、10°C以下、15°C以下、20°C以下、25°C以下などの温度を用いることができる。乾燥典型的には、乾燥は凍結乾燥、真空乾燥、噴霧乾燥、噴霧凍結乾燥または流動床乾燥により達成される。凍結乾燥が好ましい。材料中の水を減少させ、材料をバイアル中に密封することにより、材料を容易に保存、輸送し、後にその元々の形態に再構成させることができる。乾燥条件を日常的な実験により好適に最適化することができる。乾燥時に、ウイルス粒子を含む組成物が形成される。かくして、ウイルス粒子を含むマトリックスが作製される。この組成物は、典型的には不定形の固体である。かくして、一般に固体マトリックス、一般的には不定形固体マトリックスが形成される。不定形とは、構造がなく、観察可能な規則的または反復的な分子組織を持たないことを意味する。乾燥手順を行って、例えば、凍結乾燥により不定形ケーキを形成させることができる。凍結乾燥凍結乾燥を標準的な手順に従って実行することができる。3つの主な段階がある:凍結、一次乾燥および二次乾燥である。凍結は、典型的には凍結乾燥装置を用いて実施される。この工程では、生物材料を、材料の固相と液相が同時に存在することができる最も低い温度であるその共晶点より下に冷却することが重要である。これにより、確実にその後の工程において融解よりもむしろ昇華が起こる。あるいは、不定形材料は共晶点を有さないが、一次および二次乾燥中のメルトバックまたは崩壊を防止するように生成物を下に維持する必要がある臨界点を有する。一次乾燥中に、十分な熱を供給して水が昇華できるようにしながら、好適なレベルの真空の適用により圧力を制御する。材料中の水の少なくとも50、典型的には60~70がこの段階で昇華する。一次乾燥は、高熱が生物材料の構造を分解するか、または変化させ過ぎないようにゆっくりであってよい。冷却コンデンサーチャンバおよび/または平板コンデンサーは、水蒸気が再凝固により捕捉される表面を提供する。二次乾燥プロセスにおいては、さらに熱を加えることにより水和反応の水を除去する。典型的には、圧力も低下させてさらなる乾燥を促進する。凍結乾燥プロセスの完了後、密封前に真空を窒素などの不活性気体で破壊するか、または材料を真空下で密封することができる。真空乾燥特定の実施形態においては、乾燥を約1300Paの真空乾燥を用いて実行する。しかしながら、真空乾燥は本発明にとって必須ではなく、他の実施形態においては、ウイルス粒子と接触させた保存混合物を回転させるか、または凍結乾燥する。有利には、本発明の方法は、ウイルス粒子を含有する保存混合物を真空にかけることをさらに含む。便利には、真空を20000Pa以下、好ましくは、10000Pa以下の圧力で適用する。有利には、真空を、少なくとも10時間、好ましくは16時間以上の期間適用する。当業者には公知のように、真空適用の期間はサンプルのサイズ、用いられる装置および他のパラメーターに依存する。噴霧乾燥および噴霧凍結乾燥別の実施形態においては、乾燥は、本発明の保存混合物と混合されたウイルス粒子を噴霧乾燥または噴霧凍結乾燥することにより達成される。これらの技術は当業者にはよく知られており、気体、例えば、空気、無酸素気体もしくは窒素、または噴霧凍結乾燥の場合、液体窒素により液体供給物を乾燥させる方法を含む。液体供給物を液滴のスプレー中で霧化させる。次いで、乾燥チャンバ中の気体または液体窒素との接触により、液滴を乾燥させる。流動床乾燥さらなる実施形態においては、乾燥は、本発明の保存混合物と混合されたウイルス粒子を流動床乾燥することにより達成される。この技術は当業者にはよく知られており、典型的には流動状態を作る制御された速度条件下で生成物層に気体を通過させることを含む。この技術は、粒子状生成物材料の乾燥、冷却、凝集、顆粒化および被覆の段階を含んでもよい。流動化気体により、および/または流動層に浸した他の加熱表面により、熱を供給することができる。冷却は、冷却気体および/または流動層に浸した冷却表面を用いて達成することができる。凝集および顆粒化の工程は当業者にはよく知られており、達成しようとする生成物の特性に応じて様々な方法で実施することができる。粉末、顆粒または錠剤などの粒子状生成物の被覆は、制御された条件下で流動化された粒子上に液体を噴霧することにより達成することができる。凍結または乾燥により生成される組成物は、典型的には低い残留水分含量を有する固体マトリックスである。冷蔵温度よりも高い温度、例えば、4°C~56°C以上、または冷蔵温度よりも低い温度、例えば、0°C~70°C以下でワクチン活性の長期保存を提供する残留水分含量のレベルが達成される。かくして、本発明に従って生成される組成物は、5重量以下、2重量以下または1重量以下の残留水分含量を有してもよい。典型的には、前記組成物は01~5または05~5の残留水分含量を有する。前記組成物を乾燥粉末形態で取得することができる。乾燥、例えば、凍結乾燥工程の結果得られるケーキを、粉末形態に粉砕することができる。かくして、本発明による固体組成物は、自由流動粒子の形態を取ってもよい。固体組成物は、典型的には密封されたバイアル、アンプルまたはシリンジ中の粉末として提供される。吸入用の場合、粉末を乾燥粉末吸入器中で提供することができる。あるいは、固体マトリックスをパッチとして提供することができる。粉末を錠剤形態に圧縮してもよい。前記組成物は、アルミニウム塩アジュバント;1種以上の抗原;式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステル;および必要に応じて、1種以上の糖からなるか、または本質的にそれらからなってもよい。本発明の組成物の使用凍結または乾燥ワクチン組成物は、患者に投与する前に液体形態に変換される。凍結組成物を解凍し、必要に応じて、例えば、リン酸緩衝生理食塩水または注射用の水で希釈する。乾燥組成物を、例えば、リン酸緩衝生理食塩水または注射用の水により水性溶液として再構成させる。次いで、得られる水性溶液を、ワクチン接種を必要とする患者に、例えば、注射によって投与することができる。式もしくはの化合物またはその生理学的に許容し得る塩もしくはエステルおよび必要に応じて、1種以上の糖は、典型的には、例えば、それを患者に投与する前に液体形態に変換する場合、ワクチン組成物のための再懸濁剤として作用する。凍結または乾燥の有害な効果に対する保護天然形態にあるアルミニウム塩アジュバントは、通常、水性媒体中の粒子状懸濁液であるゲルの形態にある。凍結または乾燥は、沈降した固体化合物の対応する沈降率の増加およびより緊密な充填に伴う粒径の増加を特徴とする構造的変化を引き起こすことが多い。しかしながら、本発明を用いて、凍結または凍結乾燥の結果としての粒径の増加、沈降した固体の沈降率の増加および/またはより緊密な充填の形態にある損傷を低減することができる。沈降した固体化合物の対応する沈降率の増加およびより緊密な充填に伴う粒径の増加の形態にある構造的損傷を、実施例1に記載のアジュバント凝集アッセイを用いて評価することができる。凍結または凍結乾燥の前後でのアルミニウムアジュバントの物理化学的特性を評価するための他の分析方法を用いることもできる。例えば、アルミニウムゲル粒子の粒径分布を、レーザー回折分析、X線回折または赤外分光分析を用いて取得することができる。顕微鏡観察を用いて構造的変化を可視化することもできる。以下の実施例は、本発明を例示するものである。参考例も提供する。参考例アジュバント水酸化アルミニウムゲル3を、13mgmlの溶液としてSigmaから取得した。アジュバントの凍結アジュバントを実験室冷凍庫に入れ、そこで20°Cで一晩静置することにより凍結させた。次いで、それを解凍し、室温に平衡化させた。顕微鏡分析アジュバントを、100倍の倍率で顕微鏡的に試験した。水酸化アルミニウムの通常の損傷していない不定形構造および凍結後の損傷した凝集した結晶構造の例を、図1に示す。写真Aは、損傷していないアジュバントの均等に分布した粒子状懸濁液を示し、写真Bはそれと比較した、凍結により損傷したアジュバントに典型的な大きく凝集した平たい結晶構造の形成を示す。方法水酸化アルミニウムアジュバントを、pH68の13mgmlの溶液としてSigmaから取得した。最初に、50μl容量の水酸化アルミニウムを、96穴平底マイクロプレートのウェル中、100μl容量のスクロースおよび/またはDulbeccoのリン酸緩衝生理食塩水中に希釈した賦形剤に添加した。さらなる賦形剤はDMGであった。凍結する前のDMGおよびスクロースの最終濃度の一覧を、以下の表1に見出すことができる。アジュバントを20°Cで凍結した。約18時間後、Al3を含有するサンプルを解凍し、以下に記載のアジュバント凝集アッセイを用いて記載のように沈降レベルについて評価した。アジュバント凝集アッセイ各ウェルからサンプルを100μlマイクロピペット中に取り、室温で1時間、再安定化させた後、ピペット中の溶液の全高の割合として沈降したゲルの高さを測定することにより、凝集量を評価した。ピペット中の溶液の全高の割合としての沈降したゲルの高さを、ゲル容量として表した。ゲル容量が大きいほど、アジュバントはより構造的に無傷である。結果および考察これらの試験から得られた結果を、図2に2つの形態で示す。第1に、単純なXY散乱プロットを示し、これを3Dシートプロットにより補完する。DMGまたはスクロースの非存在下では、測定されたアジュバントの回収率は30に過ぎなかったが、これはアジュバント構造の非常に有意な喪失が凍結解凍中に起こったことを示唆している。製剤中のスクロース濃度を増加させることにより、試験した最も高い濃度で最大約70までアジュバントの回収率が増加した。DMG濃度のみを増加させることにより、アジュバントの回収率が増加した。DMGのみを用いた場合、良好な用量依存的応答が観察され、ほぼ100の回収率を達成することができた。DMGとスクロースの両方を用いるアジュバントの同時製剤化により、ほぼ100の回収率を達成するのに必要なDMGの量が有意に減少した。方法水酸化アルミニウムアジュバントを、pH68の13mgmlの溶液としてSigmaから取得した。最初に、50μl容量の水酸化アルミニウムアジュバントを、96穴平底マイクロプレートのウェル中、100μl容量のスクロースおよび/またはDulbeccoのリン酸緩衝生理食塩水中に希釈したさらなる賦形剤に添加した。さらなる賦形剤はSメチルLメチオニン、MSMおよびTMGであった。アジュバントを20°Cで凍結した。凍結する前のスクロースおよびさらなる賦形剤の最終濃度の一覧を、以下の表2に見出すことができる。約18時間後、Al3を含有するサンプルを解凍し、実施例1に記載のアジュバント凝集アッセイを用いて記載のように沈降レベルについて評価した。結果および考察これらの試験から得られた結果を、図3および4に2つの形態で示す。最初に単純なXY散乱プロットを示し、これを3Dシートプロットにより補完する。スクロースとさらなる賦形剤の両方の非存在下では、測定されたアジュバントの回収率は30に過ぎなかったが、これはアジュバント構造の非常に有意な喪失が凍結解凍中に起こったことを示唆している。製剤中のスクロース濃度を増加させることにより、試験した最も高い濃度で最大約70までアジュバントの回収率が増加した。さらなる賦形剤の濃度のみを増加させることにより、アジュバントの回収率が増加した。これらの場合の各々において、さらなる賦形剤のみを用いた場合、良好な用量依存的応答が観察され、ほぼ100の回収率を達成することができた。スクロースとさらなる賦形剤の一つの両方を用いるアジュバントの同時製剤化により、ほぼ100の回収率を達成するのに必要なさらなる賦形剤の量が有意に減少した。方法水酸化アルミニウムアジュバントを、pH68の13mgmlの溶液としてSigmaから取得した。アジュバントの容量を遠心分離してペレットを形成させた後、40mMHEPES25mMNaCl、pH79中で洗浄し、元の容量の半分の中に再懸濁したところ、約26mgmlの溶液が得られた。各バイアル中に、75μlの26mgmlアジュバント溶液および225μlの関連賦形剤を添加して好適な濃度に等しくなるようにしたところ、65mgmlの最終アジュバント濃度を含有する各バイアルが得られた。賦形剤の最終濃度の一覧を以下の表4に記載する。VirTisAdvantage凍結乾燥機により、以下の表3に示される乾燥周期を用いて、約3日間続けてサンプルを凍結乾燥した。ThermoSavantVLPポンプを用いて最初は300mTorrで、真空を適用する前に2時間、40°Cでサンプルを凍結した。棚温度および真空をプロセスを通じて調整し、コンデンサーを80°Cに維持した。サンプルを栓で塞ぐまで工程11を延長した後、真空を開放した。一次乾燥段階において、棚温度を45°Cまで低下させた。二次乾燥段階は、乾燥が完了するまで温度を30°Cに上昇させる一連の保持工程を含んでいた。プローブは棚温度とコンデンサー温度とを記録した。アジュバント凝集アッセイ凍結乾燥アジュバントを含有するバイアルを、300μlの精製水中で再構成し、ボルテックスした。各ウェルからサンプルを100μlのマイクロピペット中に取り、室温で90分間再安定化させた後、ピペット中の溶液の全高の割合として沈降したゲルの高さを測定することにより、凝集量を評価した。ピペット中の溶液の全高の割合としての沈降したゲルの高さを、ゲル容量として表した。ゲル容量が大きいほど、アジュバントはより構造的に無傷である。結果および考察結果を、上記の表4に記載し、図5に図示する。これらのものは、ある濃度範囲のDMG、TMG、Sメチルメチオニンまたはサルコシン、およびスクロースの存在下、凍結乾燥アジュバント溶液上でアジュバント構造を維持することができることを確認するものである。一般に、ケーキの品質は、より低濃度のさらなる賦形剤およびより高濃度のスクロースについてより良好である。材料および装置方法300μlの凍結乾燥バイアル1個あたり75μlのアジュバントを添加したことを考慮して、以下の賦形剤ミックスを、10mlのマスターミックスとしてHEPESバッファー中で作製した。上記のように、各バイアルに、75μlの26mgml水酸化アルミニウムアジュバントおよび225μlの好適な賦形剤ミックスを添加した。次いで、以下の表6に示される乾燥周期を用いて、VirTisAdvantage凍結乾燥機に入れる前にバイアルを閉栓した。凍結乾燥した後、バイアルを真空下で閉栓し、フタを付け、写真を撮った。アジュバントの凝集を実施例3に記載のように評価した。結果および考察結果を以下の表7~10に記載する。これらの結果は、DMG、TMG、SMMおよびサルコシンの存在により、アジュバント保護を減少させることなく糖の濃度を低下させることができることを示している。これは、アジュバント安定化における賦形剤の明確な役割を証明している。材料および装置方法300μlの凍結乾燥バイアル1個あたり75μlのアジュバントを添加したことを考慮して、以下の賦形剤ミックスを、10mlのマスターミックス中、HEPESバッファー中で作製した。上記のように、各バイアルに、75μlの26mgml水酸化アルミニウムアジュバントおよび225μlの好適な賦形剤ミックスを添加した。次いで、凍結乾燥機に入れる前にバイアルを閉栓し、以下の表12に示される乾燥周期で運転した。凍結乾燥した後、バイアルを真空下で閉栓し、フタを付け、写真を撮った。アジュバントの凝集を実施例3に記載のように評価した。結果および考察結果を以下の表13および14に記載する。これらの結果は、DMG、TMG、およびSMMの存在により、アジュバント保護を減少させることなく糖の濃度を低下させることができることを示している。これは、アジュバント安定化における賦形剤の明確な役割を証明している。序論ウシ血清アルブミンは、例えば、アジュバント上へのタンパク質吸着を測定しようとする実験におけるモデルとして一般的に用いられる。材料および装置タンパク質吸着Alhydrogelで供給されるを、BSAを含有するPBSに添加して、052のAlhydrogelおよび200μgmlのBSAの濃度を有する10ml最終容量に等しくなるようにした。タンパク質吸着工程を、室温で緩やかに振とうした後、4°Cに一晩入れることによりインキュベートした。以下の賦形剤ミックスを5ml容量で調製した:1315Mマンニトール1315M16MDMG1315M16MTMG1315M16MSMM1096Mマンニトール12MDMG1096M12MTMG1096M12MSMM0877Mマンニトール08MDMG0877M08MTMG0877M08MSMMPBS。アジュバント賦形剤の処理アジュバントを11の比の賦形剤濃度で混合して、半分の濃度の上記賦形剤、026Alhydrogelおよび100μgmlBSAを作製した。これを4°Cで12時間インキュベートした後、300μl容量に分割し、凍結、以下の表15に記載のように凍結乾燥、または液体として4°Cで保持した。タンパク質アッセイのためのブランクとしてタンパク質を含有させない等量のブランクを、考察されるように作製および処理した。凍結乾燥した後、バイアルを真空下で閉栓し、フタを付け、写真を撮り、ケーキをケーキ品質に関して実施例3に記載のようにスコア化した。次いで、液体バイアル、凍結バイアルおよび凍結乾燥バイアルを室温に置いて平衡化/解凍すると同時に、凍結乾燥バイアルを300μlの精製水中で再構成させ、完全な再構成が観察されるまでボルテックスした。300μl容量の各々をマイクロ遠心管上で1分間パルスしてアジュバントを沈降させ、上清を廃棄し、ペレットを等量のPBS中に再懸濁した。この手順を3回繰り返して、アジュバントから残留する賦形剤を完全に除去した。タンパク質アッセイ各々の賦形剤混合物を2回の対応ブランクと共に2回泳動した。液体サンプル、凍結乾燥サンプルおよび凍結サンプルを別々のプレート上で泳動した。タンパク質濃度を標準化するために、各プレートを200μgmlのBSAから開始して625μgmlまで段階的に希釈した標準曲線を用いて泳動した。50μl容量のアジュバントサンプルを各ウェルに添加した後、125μlのBradford溶液を添加した。プレートをプレートリーダーに移し、プレート振とうモードに5分間設定した後、各プレートを595nmの吸光度で読み取った。結果各プレートについて、標準曲線を作製し、これらの標準曲線を用いて、アジュバントサンプルのタンパク質濃度を確認すると共に、その対応するブランクも差し引いた。データをアジュバントサンプルの総タンパク質濃度/mlとして、およびまたPBS対照の割合としてプロットした。その結果を以下の表16~18ならびに図6および7に記載する。考察これらのマンニトールならびにDMG、TMGおよびSMM濃度により、アジュバント構造の完全に近い構造的保存が得られた。総タンパク質の結果は、アジュバントに吸着されたBSAレベルは、マンニトール賦形剤範囲間で同等であり、実際にマンニトールのみおよびPBSと同等であることを示している。これは、予め吸着させたAlhydrogelに導入した場合、賦形剤によって引き起こされるタンパク質の溶出がなかったことを示唆している。これはPBSおよびマンニトールの場合も同じであった。液体保持、凍結乾燥および凍結解凍の出来事は溶出を増幅しなかった。この実験は、アジュバントの構造が凍結乾燥中に保存される条件下でも依然としてタンパク質がアジュバントに吸着されることを示している。序論この実験は、マンニトール基剤と、アジュバント構造を保護することが以前に示されたレベルのDMG、TMGおよびSMMとを比較するものである。それは、両方の保存方法において抗体の活性を精査するためのドットブロットを用いて、ミョウバン抗体を4°Cで保持した場合と、それを凍結解凍した場合の両方においてミョウバンに結合した抗体の抗原性を比較するものである。材料方法ミョウバン上に吸着されたマウス抗体を凍結解凍し、様々な賦形剤の存在下、4°Cで保持した。マウス抗体がその抗原性を保持しているかどうかを見るためにドットブロットを用いてこれをアッセイした。2Alhydrogel溶液をPBSで052に希釈し、マウス抗体を添加して200μgmlの濃度にした。これを室温で1時間、撹拌しながら混合した後、4°Cで一晩静置した。次いで、ミョウバン抗体溶液を賦形剤溶液で11に希釈して、以下に列挙される最終賦形剤濃度を得た:0657Mマンニトール0657Mマンニトール08MDMG0657Mマンニトール08MTMG0657Mマンニトール08MSMMPBS。次いで、これらの溶液を2つのアリコートに分割した。各賦形剤の1つを4°Cで保持し、他のものを必要になるまで80°Cで保存した。保持されたマウス抗体活性のドットブロットニトロセルロース膜を必要な大きさに切断し、2μlのサンプルをドットとして印加した。これを乾燥させた後、振とう器上、室温で1時間、10mlPBSL005Tween205ミルク中でインキュベートした。次いで、この溶液を除去した後、膜を、PBS005Tween205ミルク中で15000に希釈された10mlの抗マウスHRP中、振とう器上で室温で1時間インキュベートした。次いで、膜をPBS005Tween20で10分間、3回洗浄した。膜をティッシュペーパー上にブロットして過剰のバッファーを除去した後、10mlのTMBを5分間膜上に載せた。次いで、TMBを叩いて除去し、ブロットの色を走査した。結果図8は、液体と凍結解凍サンプルの両方において、抗体を含有しない全てのサンプルが予想通り陰性であり、抗体のみの陽性対照が強い陽性であることを示している。液体サンプルにおいて、全てのドットは同じ希釈率では類似している。凍結サンプルは、特に賦形剤中のサンプルとPBS対照サンプルとの間であまり一致しない。PBSサンプルは様々な賦形剤中のサンプルよりも1500の希釈率ではより弱い。図9は、これと一致する結果を示す。賦形剤のみの対照を含む、抗体を含まない全ての陰性対照は陰性であり、これは賦形剤がアッセイを妨げていないことを示す。PBSサンプルは、特に1300および1500の賦形剤中のサンプルと比較した場合、凍結した場合の液体サンプルよりもこの場合もやはり弱い。結論両セットの結果は、凍結させた場合の賦形剤を含有するサンプルと比較したPBSのみのサンプルに関するより弱い陽性の結果を示す。これは、賦形剤が、抗体がその抗原性をより効率的に保持しているため、サンプルを凍結解凍する場合のミョウバンのみを含む抗体と比較した場合、ミョウバンを含む抗体に対する保護を提供することを示している。