"第一および第二核酸鎖を含む、単離二本鎖リボ核酸dsRNAであって、前記第一鎖が長さにして15~35ヌクレオチドであり、前記dsRNAの前記第二鎖が長さにして19~35ヌクレオチドであり、前記第二オリゴヌクレオチド鎖は、前記二本鎖核酸が哺乳動物細胞内に導入される時に、AR標的遺伝子発現を減少させるために、前記第二オリゴヌクレオチド鎖長の少なくとも19ヌクレオチドにそって、表13から選択される、標的ARcDNA配列に十分に相補的である、単離dsRNA。少なくとも25塩基対の二本鎖領域を含む、請求項1に記載の単離dsRNA。前記第二オリゴヌクレオチド鎖が、その3’末端にて、1~5一本鎖ヌクレオチドを含む、請求項1に記載の単離dsRNA。前記第一鎖が、長さにして25~35ヌクレオチドである、請求項1に記載の単離dsRNA。前記第二鎖が、長さにして25~35ヌクレオチドである、請求項1に記載の単離dsRNA。前記第二オリゴヌクレオチド鎖が、前記第二オリゴヌクレオチド鎖長の最大で27ヌクレオチドにそって、GenBank寄託番号NM_000044.2およびNM_001011645.1からなる群より選択される標的ARcDNA配列に相補的である、請求項1に記載の単離dsRNA。第一オリゴヌクレオチド鎖の3’末端での第一ヌクレオチド位置1から開始して、位置1、2および/または3が、修飾ヌクレオチドによって置換される、請求項1に記載の単離dsRNA。前記第一鎖の前記3’末端と、前記第二鎖の前記5’末端が平滑末端を形成する、請求項1に記載の単離dsRNA。前記第一鎖が長さにして25ヌクレオチドであり、前記第二鎖が長さにして27ヌクレオチドである、請求項1に記載の単離dsRNA。前記第二鎖が、配列番号:164、166、174、177、179、1975、1984、1986、1987、1992、1994、1998、224、2074、1283、2136、246、2204、2220、2227、2230、2235および2239からなる群より選択される配列を含む、請求項1に記載の単離dsRNA。前記第一鎖が、配列番号:11、13、21、24、26、1570、1579、1581、1582、1587、1589、1593、71、1669、1220、1731、93、1799、1815、1822、1825、1830および1834からなる群より選択される配列を含む、請求項1に記載の単離dsRNA。表2、3、5、7、9および11にて示したDsiRNA試薬からなる群より選択された一組の第一鎖/第二鎖配列からなる、請求項1に記載の単離dsRNA。前記第一および第二鎖それぞれが、少なくとも26ヌクレオチドの長さを持つ、請求項1に記載の単離dsRNA。前記第一鎖の前記3’末端の前記修飾ヌクレオチド残基が、デオキシリボヌクレオチド、アシクロヌクレオチドおよび蛍光分子からなる群より選択される、請求項7に記載の単離dsRNA。第一オリゴヌクレオチド鎖の前記3’末端の位置1がデオキシリボヌクレオチドである、請求項7に記載の単離dsRNA。前記3’オーバーハングの前記ヌクレオチドが、修飾ヌクレオチドである、請求項1に記載の単離dsRNA。前記3’オーバーハングの前記修飾ヌクレオチドが、2’-O-メチルリボヌクレオチドである、請求項16に記載の単離dsRNA。前記3’オーバーハングのすべてのヌクレオチドが修飾ヌクレオチドである、請求項1に記載の単離dsRNA。前記第一および第二ヌクレオチド鎖の1つまたは両方が、5’リン酸塩を含む、請求項1に記載の単離dsRNA。前記修飾ヌクレオチド残基が、2’-O-メチル、2’-メトキシエトキシ、2’-フルオロ、2’-アリル、2’-O-[2-メチルアミノ-2-オキソエチル]、4’-チオ、4’-CH2-O-2’-ブリッジ、4’-CH22-O-2’ブリッジ、2’-LNA、2’-アミノおよび2’-O-N-メチルカルバメートからなる群より選択される、請求項1に記載の単離dsRNA。前記3’オーバーハングが、長さにして1~3ヌクレオチドである、請求項1に記載の単離dsRNA。前記3’オーバーハングが、長さにして1~2ヌクレオチドである、請求項1に記載の単離dsRNA。前記3’オーバーハングが、長さにして2ヌクレオチドであり、前記3’オーバーハングの前記修飾ヌクレオチドが、2’-O-メチル修飾リボヌクレオチドである、請求項1に記載の単離dsRNA。前記第一オリゴヌクレオチド鎖の5’末端ヌクレオチド残基に相補的である、前記第二鎖のヌクレオチド残基から開始して、前記第二オリゴヌクレオチド鎖が交互修飾および未修飾ヌクレオチド残基を含む、請求項1に記載の単離dsRNA。前記第一オリゴヌクレオチド鎖の5’末端ヌクレオチド残基に相補的である、前記第二鎖のヌクレオチド残基から開始して、前記第二オリゴヌクレオチド鎖が、位置18から前記第二オリゴヌクレオチド鎖の5’末端までの全ての位置で未修飾ヌクレオチド残基を含む、請求項1に記載の単離dsRNA。前記第一および前記第二鎖のそれぞれが、少なくとも26、多くとも30ヌクレオチドである長さを含む、請求項1に記載の単離dsRNA。前記dsRNAが、Dicerによって前記細胞中に内因的に開裂される、請求項1に記載の単離dsRNA。標的遺伝子の発現を減少させるために十分な前記単離二本鎖核酸の量が、前記細胞の環境中、1ナノモルまたはそれ以下、200ピコモルまたはそれ以下、100ピコモルまたはそれ以下、50ピコモルまたはそれ以下、20ピコモルまたはそれ以下、10ピコモルまたはそれ以下、5ピコモルまたはそれ以下、2ピコモルまたはそれ以下および1ピコモルまたはそれ以下からなる群より選択される、請求項1に記載の単離dsRNA。前記単離dsRNAが、1ナノモルまたはそれ以下の細胞環境中での効果的な濃度で、哺乳動物細胞内でinvitroでアッセイした時に、標的AR遺伝子発現を減少させることにおいて、前記標的ARcDNAの同一の少なくとも19ヌクレオチドに対して指向した単離21merのsiRNAよりも、大きな強度を有する、請求項1に記載の単離dsRNA。前記単離dsRNAが、200ピコモルまたはそれ以下、100ピコモルまたはそれ以下、50ピコモルまたはそれ以下、20ピコモルまたはそれ以下、10ピコモルまたはそれ以下、5ピコモルまたはそれ以下、2ピコモルまたはそれ以下および1ピコモルまたはそれ以下からなる群より選択された、細胞環境中での効果的な濃度で、哺乳動物細胞内でinvitroでアッセイした時に、標的AR遺伝子発現を減少させることにおいて、前記標的ARcDNAの同一の少なくとも19ヌクレオチドに対して指向した単離21merのsiRNAよりも、大きな強度を有する、請求項1に記載の単離dsRNA。前記単離dsRNAが、前記二本鎖核酸を哺乳動物に導入した時に、少なくとも10、少なくとも50、少なくとも80~90、少なくとも95、少なくとも98、少なくとも99からなる群より選択される量で表示まで、AR標的遺伝子発現を減少させるために、標的ARcDNA配列に十分に相補的である、請求項1に記載の単離dsRNA。前記第一および第二鎖が、化学的リンカーによって連結する、請求項1に記載の単離dsRNA。前記第一鎖の前記3’末端と、前記第二鎖の前記5’末端が、化学的リンカーによって連結する請求項1に記載の単離二本鎖核酸。前記第二または第一鎖のヌクレオチドが、Dicer開裂の方向を指示する修飾ヌクレオチドで置換される、請求項1に記載の単離二本鎖核酸。デオキシリボヌクレオチド、ジデオキシリボヌクレオチド、アシクロヌクレオチド、3’-デオキシアデノシンコルジセピン、3’-アジド-3’-デオキシチミジンAZT、2’、3’-ジデオキシイノシンddI、2’、3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン3TC、2’、3’-ジデヒドロ-2’、3’-ジデオキシチミジンd4T、3’-アジド-3’-デオキシチミジンAZT、2’、3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン3TCの一リン酸ヌクレオチドおよび2’、3’-ジデヒドロ-2’、3’-ジデオキシチミジンd4Tの一リン酸ヌクレオチド、4-チオウラシル、4-ブロモウラシル、5-ヨードウラシル、5-3-アミノアリル-ウラシル、2’-O-アルキルリボヌクレオチド、2’-O-メチルリボヌクレオチド、2’-アミノリボヌクレオチド、2’-フルオロリボヌクレオチドおよびロック核酸からなる群より選択される修飾核酸を含む、請求項1に記載の単離二本鎖核酸。リン酸塩、ホスホロチオエートおよびホスホトリエステルからなる群より選択されるリン酸骨格修飾を含む請求項1に記載の単離二本鎖核酸。モルホリノ核酸およびペプチド核酸PNAからなる群より選択される修飾を含む、請求項1に記載の単離二本鎖核酸。invitroで哺乳動物細胞を、前記細胞中の標的AR遺伝子の発現を減少させるのに十分な量で、請求項1の単離dsRNAと接触させることを含む、哺乳動物細胞内の標的AR遺伝子の発現を減少させるための方法。標的AR遺伝子発現が、少なくとも10、少なくとも50および少なくとも80~90からなる群より選択される量で表示まで減少する、請求項38の方法。ARmRNAレベルが、前記細胞を前記dsRNAに接触させてから少なくとも8日後、少なくとも90の量で表示まで減少する、請求項38の方法。ARmRNAレベルが、前記細胞を前記dsRNAに接触させてから少なくとも10日後、少なくとも70の量で表示まで減少する、請求項38の方法。請求項1の単離dsRNAを、哺乳動物内の標的AR遺伝子の発現を減少させるのに十分な量で、哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物中の標的AR遺伝子の発現を減少させる方法。前記単離dsRNAを、1マイクログラム~5ミリグラム/前記哺乳動物のキログラム/日、100マイクログラム~0.5ミリグラム/キログラム、0.001~0.25ミリグラム/キログラム、0.01~20マイクログラム/キログラム、0.01~10マイクログラム/キログラム、0.01~5マイクログラム/キログラムおよび0.1~2.5マイクログラム/キログラムからなる群より選択される用量で投与する、請求項42に記載の方法。前記単離dsRNAが、1ナノモルまたはそれ以下の細胞環境中での効果的な濃度で、哺乳動物細胞内でinvitroでアッセイした時に、標的AR遺伝子発現を減少させることにおいて、前記標的ARcDNAの同一の少なくとも19ヌクレオチドに対して指向した単離21merのiRNAよりも、大きな強度を有する、請求項42に記載の方法。前記投与段階が、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射、点滴、皮下注射、経皮、エアロゾル、直腸、膣、局所、経口および吸入伝達からなる群より選択された様式を含む、請求項42に記載の方法。細胞を、前記細胞の増殖を阻害するのに十分な量の請求項1に記載の単離dsRNAと接触させることを含む、増殖を選択的に阻害するための方法。前記細胞が対象の腫瘍細胞である、請求項46に記載の方法。前記細胞がinvitroでの腫瘍細胞である、請求項46に記載の方法。前記細胞が、前立腺癌細胞である、請求項46に記載の方法。前記細胞が、22Rv1およびVCaPからなる群より選択される前立腺癌である、請求項49に記載の方法。前記細胞が、A549腺癌ヒト肺胞癌細胞である、請求項49に記載の方法。前記細胞が哺乳動物前立腺癌である、請求項46に記載の方法。前記細胞がヒト細胞である、請求項46に記載の方法。前記dsRNAが、前記dsRNAを、少なくとも10、少なくとも50および少なくとも80~90からなる群より選択される量で表示まで、invitroにて哺乳動物細胞内に導入する時に、標的ARRNAレベルを減少させるのに十分な量で存在し、前記dsRNAが、1ナノモルまたはそれ以下の細胞環境中での効果的な濃度で、哺乳動物細胞内でinvitroでアッセイした時に、標的AR遺伝子発現を減少させることにおいて、前記標的ARcDNAの同一の少なくとも19ヌクレオチドに対して指向した単離21merのsiRNAよりも、大きな強度を有する、請求項71の単離dsRNAを含む製剤。前記効果的な量が、前記細胞の環境中、1ナノモルまたはそれ以下、200ピコモルまたはそれ以下、100ピコモルまたはそれ以下、50ピコモルまたはそれ以下、20ピコモルまたはそれ以下、10ピコモルまたはそれ以下、5ピコモルまたはそれ以下、2ピコモルまたはそれ以下および1ピコモルまたはそれ以下からなる群より選択される、請求項54に記載の製剤。前記dsRNAが、前記dsRNAを、少なくとも10、少なくとも50および少なくとも80~90からなる群より選択される量で表示まで、invitroにて哺乳動物細胞内に導入する時に、標的RNAレベルを減少させるのに十分な量で存在し、前記dsRNAが、1ナノモルまたはそれ以下の細胞環境中での効果的な濃度で、哺乳動物細胞内でinvitroでアッセイした時に、標的AR遺伝子発現を減少させることにおいて、前記標的ARcDNAの同一の少なくとも19ヌクレオチドに対して指向した単離21merのsiRNAよりも、大きな強度を有する、請求項2の単離dsRNAを含む製剤。前記効果的な量が、1マイクログラム~5ミリグラム/前記哺乳動物のキログラム/日、100マイクログラム~0.5ミリグラム/キログラム、0.001~0.25ミリグラム/キログラム、0.01~20マイクログラム/キログラム、0.01~10マイクログラム/キログラム、0.01~5マイクログラム/キログラムおよび0.1~2.5マイクログラム/キログラムからなる群より選択される用量である、請求項56の単離dsRNAを含む製剤。請求項1の単離dsRNAを含む哺乳動物細胞。請求項1の単離dsRNAと、薬理学的に許容可能な担体を含む、医薬組成物。請求項1の単離dsRNAと、その利用のための取扱説明書を含むキット。第一および第二核酸鎖を含む、単離二本鎖リボ核酸dsRNAから本質的になるAR阻害活性を有する組成物であって、前記第一鎖が長さにして15~35ヌクレオチドであり、前記dsRNAの前記第二鎖が長さにして19~35ヌクレオチドであり、前記第二オリゴヌクレオチド鎖は、前記二本鎖核酸が哺乳動物内に導入される時に、AR標的遺伝子発現を減少させるために、前記第二オリゴヌクレオチド鎖長の少なくとも19ヌクレオチドにそって、表13から選択される、標的ARcDNA配列に十分に相補的である、組成物。少なくとも25塩基対の二本鎖領域を含む、請求項61の単離dsRNA。前記第二オリゴヌクレオチド鎖が、その3’末端にて1~5一本鎖ヌクレオチドを含む、請求項61の単離dsRNA。前記第一鎖が、長さにして25~35ヌクレオチドである、請求項61に記載の単離dsRNA。前記第二鎖が、長さにして25~35ヌクレオチドである、請求項61に記載の単離dsRNA。前記第二オリゴヌクレオチド鎖が、前記第二オリゴヌクレオチド鎖長の最大で27ヌクレオチドにそって、GenBank寄託番号NM_000044.2およびNM_001011645.1からなる群より選択される標的ARcDNA配列に相補的である、請求項65に記載の組成物。対象中のAR関連疾患または障害を治療するため、または予防するための方法であって、前記対象中の前記AR関連疾患または障害を治療する、または予防するために十分な量で、対象に請求項1の単離RNAと薬理学的に許容可能な担体を投与し、それによって前記対象中の前記AR関連疾患または障害を治療する、または予防することを含む、方法。前記AR関連疾患または障害が、結腸直腸癌および肝細胞癌である、請求項67に記載の方法。第一および第二核酸鎖を含む、単離二本鎖リボ核酸dsRNAであって、前記dsRNAは平滑末端を含み、第一および第二オリゴヌクレオチド鎖はそれぞれ同じ数のヌクレオチド残基からなり、最大で35ヌクレオチドの長さであり、前記第二オリゴヌクレオチド鎖は、前記二本鎖核酸が哺乳動物細胞内に導入される時に、AR標的遺伝子発現を減少させるために、前記第二オリゴヌクレオチド鎖長の少なくとも19ヌクレオチドにそって、表13から選択される、標的ARcDNA配列に十分に相補的である、単離dsRNA。少なくとも25塩基対で第二本鎖領域を含む請求項69に記載の単離dsRNA。前記第一および前記第二鎖のそれぞれが、少なくとも25~35ヌクレオチドである長さを持つ、請求項69に記載の単離dsRNA。dsRNAが細胞環境中に1ナノモル未満の濃度で標的遺伝子の発現を減少させることのできる請求項69に記載の単離dsRNA。前記第一および前記第二鎖のそれぞれが、少なくとも26ヌクレオチドである長さを持つ、請求項69に記載の単離dsRNA。前記第一および第二鎖はそれぞれ、長さが26~30ヌクレオチドである請求項69に記載の単離dsRNA。前記第一および第二鎖はそれぞれ、長さが27ヌクレオチドである請求項69に記載の単離dsRNA。前記第二鎖が配列番号164、166、174、177、179、1975、1984、1986、1987、1992、1994、1998、224、2074、1283、2136、246、2204、2220、2227、2230、2235および2239からなる群より選択される配列を含む請求項69に記載の単離dsRNA。前記第一鎖が配列番号4517、4519、4527、4530、4532、4876、4885、4887、4888、4893、4895、4899、4577、4975、4778、5037、4599、5105、5121、5128、5131、5136および5140からなる群より選択される配列を含む請求項69に記載の単離dsRNA。表2、3、5、7、9および11に示すDsiRNA薬剤からなる群より選択される一組の第一/第二鎖の配列を含む請求項69に記載の単離dsRNA。第一および第二核酸鎖を含む単離二本鎖リボ核酸dsRNAであって、前記dsRNAが平滑末端を含み、前記第一および第二オリゴヌクレオチド鎖はそれぞれ、同数のヌクレオチド残基からなり、長さにして最大35ヌクレオチドであり、前記第一鎖の前記3’末端の最後および最後から二番目の残基と、前記第二鎖の前記5’末端の最後と最後から二番目の残基が、1つまたはそれ以上のミスマッチ塩基対を形成し、前記第二オリゴヌクレオチド鎖は、前記二本鎖核酸が哺乳動物細胞内に導入される時に、AR標的遺伝子発現を減少させるために、前記第二オリゴヌクレオチド鎖長の少なくとも19ヌクレオチドにそって、表13から選択される標的ARcDNA配列に十分に相補的であるdsRNA。少なくとも25塩基対の二本鎖領域を含む請求項79に記載の単離dsRNA。前記第一および第二鎖はそれぞれ、長さが25~35ヌクレオチドである請求項79に記載の単離dsRNA。前記第一鎖が配列番号3794、3796、3804、3807、3809、4153、4162、4164、4165、4170、4172、4176、3854、4252、4055、4314、3876、4382、4398、4405、4408、4413および4417からなる群より選択される配列を含む請求項79に記載の単離dsRNA。第一および第二核酸鎖を含む、単離二本鎖リボ核酸dsRNAから本質的になる、AR阻害活性を有する組成物であって、前記dsRNAが平滑末端を含み、前記第一および第二オリゴヌクレオチド鎖のそれぞれが、同数のヌクレオチド残基からなり、長さにして最大35ヌクレオチドであり、前記第一鎖の前記3’末端の最後および最後から二番目の残基と、前記第二鎖の前記5’末端の最後と最後から二番目の残基が、1つまたは2つのミスマッチ塩基対を形成し、前記第二オリゴヌクレオチド鎖は、前記二本鎖核酸が哺乳動物細胞内に導入される時に、AR標的遺伝子発現を減少させるために、前記第二オリゴヌクレオチド鎖長の少なくとも19ヌクレオチドにそって、表13から選択される、標的ARcDNA配列に十分に相補的である、組成物。。少なくとも25塩基対の二本鎖領域を含む、請求項83に記載の単離dsRNA。前記第一および第二鎖はそれぞれ、長さが25~35ヌクレオチドである請求項83に記載の単離dsRNA。aセンス領域およびアンチセンス領域であり、前記センス領域および前記アンチセンス領域が一緒に、15~35塩基対からなる二本鎖領域を形成し、前記アンチセンス領域が、表13より選択される配列の相補体である配列を含む、およびb0~2の3’オーバーハング領域であり、各オーバーハング領域は、長さにして6またはそれより少ないヌクレオチドである、からなる単離dsRNA分子。前記二本鎖領域が19~35塩基対からなる請求項86に記載の単離dsRNA。前記二本鎖領域が25~35塩基対からなる請求項86に記載の単離dsRNA。前記二本鎖領域が25~30塩基対からなる請求項86に記載の単離dsRNA。aセンス領域およびアンチセンス領域であり、前記センス領域および前記アンチセンス領域が一緒に、19~23塩基対からなる二本鎖領域を形成し、前記アンチセンス領域が、表13より選択される配列の相補体である配列を含む、およびb0~4のオーバーハング領域であり、各オーバーハング領域は、長さにして6またはそれより少ないヌクレオチドである、からなる単離siRNA分子。第一および第二核酸鎖と、少なくとも25塩基対の二本鎖領域を含む、単離二本鎖リボ核酸dsRNAであって、前記第一鎖の長さは25~34ヌクレオチドであり、前記第二鎖の長さは26~35ヌクレオチドであり、3‘末端に1~5単一鎖ヌクレオチドを含み、前記第二オリゴヌクレオチド鎖は、前記二本鎖核酸が哺乳動物細胞内に導入される時に、AR標的遺伝子発現を減少させるために、前記第二オリゴヌクレオチド鎖長の少なくとも19ヌクレオチドにそって、配列番号307~459、826~915、1024~1077、1312~1374、2311~2715および3622~3669からなる群より選択される、標的ARcDNA配列に十分に相補的である、単離二本鎖リボ核酸dsRNA。前記第二オリゴヌクレオチド鎖は、最大で27ヌクレオチドの長さに沿って、配列番号3766、3768および3770からなる群より選択される標的ARcDNAに十分に相補的である請求項91の単離dsRNA。第一オリゴヌクレオチド鎖の3’末端で第一ヌクレオチド位置1から開始し、位置1、2および/または3が修飾ヌクレオチドで置換される請求項91に記載の単離dsRNA。前記第一鎖の3’末端および前記第二鎖の5’末端が平滑末端を形成する請求項91に記載の単離dsRNA。前記第一鎖の長さが25ヌクレオチドであり、および前記第二鎖の長さが27ヌクレオチドである請求項91に記載の単離dsRNA。第二鎖が配列番号154~306、796~825、970~1023、1249~1311、1906~2310および3574~3621からなる群より選択される配列を含む請求項91に記載の単離dsRNA。第一鎖が配列番号1~153、766~795、916~969、1186~1248、1501~1905および3526~3573からなる群より選択される配列を含む請求項91に記載の単離dsRNA。表9に示すDsiRNA薬剤から成る群より選択される一組の第一/第二鎖の配列を含む、請求項91に記載の単離dsRNA。第一鎖および第二鎖はそれぞれ、長さが少なくとも26ヌクレオチドである請求項91に記載の単離dsRNA。前記第一鎖の前記3’末端の前記修飾ヌクレオチド残基が、デオキシリボヌクレオチド、アシクロヌクレオチドおよび蛍光分子からなる群より選択される請求項93に記載の単離dsRNA。第一オリゴヌクレオチド鎖の前記3’末端の位置1がデオキシリボヌクレオチドである請求項93に記載の単離dsRNA。前記3’オーバーハングの前記ヌクレオチドが修飾ヌクレオチドを含む請求項91に記載の単離dsRNA。前記3’オーバーハングの前記修飾ヌクレオチドが2’-O-メチルリボヌクレオチドである請求項102に記載の単離dsRNA。前記3’オーバーハングのヌクレオチドがいずれも修飾ヌクレオチドである請求項91に記載の単離dsRNA。第一および第二オリゴヌクレオチド鎖の一つまたは双方が5’リン酸塩を含む請求項91に記載の単離dsRNA。前記修飾ヌクレオチド残基が、2’-O-メチル、2’-メトキシエトキシ、2’-フルオロ、2’-アリル、2’-O-[2-メチルアミノ-2-オキソエチル]、4’-チオ、4’-CH2-O-2’-ブリッジ、4’-CH22-O-2’ブリッジ、2’-LNA、2’-アミノおよび2’-O-N-メチルカルバメートからなる群より選択される、請求項91に記載の単離dsRNA。前記3’オーバーハングの長さが1~3ヌクレオチドである請求項91に記載の単離dsRNA。前記3’オーバーハングの長さが1~2ヌクレオチドである請求項91に記載の単離dsRNA。3’オーバーハングの長さが2ヌクレオチドであり、前記3’オーバーハングの前記修飾ヌクレオチドは2’-O-メチル修飾リボヌクレオチドである請求項91に記載の単離dsRNA。第二オリゴヌクレオチド鎖が前記第一オリゴヌクレオチド鎖の5’末端ヌクレオチド残基と相補的である前記第二鎖のヌクレオチド残基から開始し、交互修飾および非修飾ヌクレオチド残基を含む請求項91に記載の単離dsRNA。第二オリゴヌクレオチド鎖が、前記第一オリゴヌクレオチド鎖の5’末端ヌクレオチド残基に相補的である第二鎖の残基から開始し、前記第二オリゴヌクレオチド鎖の位置18から5’末端までのどの位置にも非修飾ヌクレオチド残基を含む請求項91に記載の単離dsRNA。第一および第二鎖はそれぞれ長さが少なくとも26、最大でも30ヌクレオチドである請求項91に記載の単離dsRNA。前記dsRNAがDicerによって前記細胞中に内因的に開裂する請求項91に記載の単離dsRNA。標的遺伝子の発現を減少させるために十分な前記単離二本鎖核酸の量が、前記細胞の環境中、1ナノモルまたはそれ以下、200ピコモルまたはそれ以下、100ピコモルまたはそれ以下、50ピコモルまたはそれ以下、20ピコモルまたはそれ以下、10ピコモルまたはそれ以下、5ピコモルまたはそれ以下、2ピコモルまたはそれ以下および1ピコモルまたはそれ以下からなる群より選択される、請求項91に記載の単離dsRNA。前記単離dsRNAが、1ナノモルまたはそれ以下の細胞環境中での効果的な濃度で、哺乳動物細胞内でinvitroでアッセイした時に、標的AR遺伝子発現を減少させることにおいて、前記標的ARcDNAの同一の少なくとも19ヌクレオチドに対して指向した単離21merのsiRNAよりも、大きな強度を有する、請求項91に記載の単離dsRNA。前記単離dsRNAが、細胞環境中、200ピコモルまたはそれ以下、100ピコモルまたはそれ以下、50ピコモルまたはそれ以下、20ピコモルまたはそれ以下、10ピコモルまたはそれ以下、5ピコモルまたはそれ以下、2ピコモルまたはそれ以下および1ピコモルまたはそれ以下からなる群より選択される細胞環境中での効果的な濃度で、哺乳動物細胞内でinvitroでアッセイした時に、標的AR遺伝子発現を減少させることにおいて、前記標的ARcDNAの同一の少なくとも19ヌクレオチドに対して指向した単離21merのsiRNAよりも、大きな強度を有する、請求項91に記載の単離dsRNA。前記単離dsRNAが、前記二本鎖核酸を哺乳動物細胞に導入した時に、少なくとも10、少なくとも50、少なくとも80~90、少なくとも95、少なくとも98、少なくとも99からなる群より選択される量で表示まで、AR標的遺伝子発現を減少させるために、標的ARcDNA配列に十分に相補的である、請求項91に記載の単離dsRNA。前記第一および第二鎖が、化学的リンカーによって連結する、請求項91に記載の単離dsRNA。前記第一鎖の前記3’末端と、前記第二鎖の前記5’末端が、化学的リンカーによって連結する請求項91に記載の単離二本鎖核酸。前記第二または第一鎖のヌクレオチドが、Dicer開裂の方向を指示する修飾ヌクレオチドで置換される、請求項91に記載の単離二本鎖核酸。デオキシリボヌクレオチド、ジデオキシリボヌクレオチド、アシクロヌクレオチド、3’-デオキシアデノシンコルジセピン、3’-アジド-3’-デオキシチミジンAZT、2’、3’-ジデオキシイノシンddI、2’、3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン3TC、2’、3’-ジデヒドロ-2’、3’-ジデオキシチミジンd4T、3’-アジド-3’-デオキシチミジンAZT、2’、3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン3TCの一リン酸ヌクレオチドおよび2’、3’-ジデヒドロ-2’、3’-ジデオキシチミジンd4Tの一リン酸ヌクレオチド、4-チオウラシル、5-ヨードウラシル、5-3-アミノアリル-ウラシル、2’-O-アルキルリボヌクレオチド、2’-O-メチルリボヌクレオチド、2’-アミノリボヌクレオチド、2’-フルオロリボヌクレオチドおよびロック核酸からなる群より選択される修飾核酸を含む、請求項91に記載の単離二本鎖核酸。リン酸塩、ホスホロチオエートおよびホスホトリエステルからなる群より選択されるリン酸骨格修飾を含む請求項91に記載の単離二本鎖核酸。invitroで哺乳動物細胞を、前記細胞中の標的AR遺伝子の発現を減少させるのに十分な量で、請求項91の単離dsRNAと接触させることを含む、哺乳動物細胞内の標的AR遺伝子の発現を減少させるための方法。標的AR遺伝子発現が、少なくとも10、少なくとも50および少なくとも80~90からなる群より選択される量で表示まで減少する、請求項123の方法。ARmRNAレベルが、前記細胞を前記dsRNAに接触させてから少なくとも8日後に、少なくとも90の量で表示まで減少する、請求項123の方法。ARmRNAレベルが、前記細胞を前記dsRNAに接触させてから少なくとも10日後に、少なくとも70の量で表示まで減少する、請求項123の方法。請求項91の単離dsRNAを、哺乳動物内の標的AR遺伝子の発現を減少させるのに十分な量で、前記哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物中の標的AR遺伝子の発現を減少させる方法。前記単離dsRNAを、1マイクログラム~5ミリグラム/前記哺乳動物のキログラム/日、100マイクログラム~0.5ミリグラム/キログラム、0.001~0.25ミリグラム/キログラム、0.01~20マイクログラム/キログラム、0.01~10マイクログラム/キログラム、0.01~5マイクログラム/キログラムおよび0.1~2.5マイクログラム/キログラムからなる群より選択される用量で投与する、請求項127に記載の方法。前記単離dsRNAが、1ナノモルまたはそれ以下の細胞環境中での効果的な濃度で、哺乳動物細胞内でinvitroでアッセイした時に、標的AR遺伝子発現を減少させることにおいて、前記標的ARcDNAの同一の少なくとも19ヌクレオチドに対して指向した単離21merのsiRNAよりも、大きな強度を有する、請求項127に記載の方法。前記投与段階が、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射、点滴、皮下注射、経皮、エアロゾル、直腸、膣、局所、経口および吸入伝達からなる群より選択された様式を含む、請求項127に記載の方法。細胞を、前記細胞の増殖を阻害するのに十分な量の請求項91に記載の単離dsRNAと接触させることを含む、細胞の増殖を選択的に阻害するための方法。前記細胞が対象の腫瘍細胞にある、請求項131に記載の方法。前記細胞がinvitroでの腫瘍細胞である、請求項131に記載の方法。前記細胞がヒト細胞である、請求項131に記載の方法。前記dsRNAが、少なくとも10、少なくとも50および少なくとも80~90からなる群より選択される量で表示まで、前記dsRNAをinvitroにて哺乳動物細胞内に導入する時に、標的ARRNAレベルを減少させるのに効果的な量で存在し、前記dsRNAが、1ナノモルまたはそれ以下の細胞環境中での効果的な濃度で、哺乳動物細胞内でinvitroでアッセイした時に、標的AR遺伝子発現を減少させることにおいて、前記標的ARcDNAの同一の少なくとも19ヌクレオチドに対して指向した単離21merのsiRNAよりも、大きな強度を有する、請求項91の単離dsRNAを含む製剤。前記本発明は、二本鎖RNAdsRNAを含む組成物、およびそれらの調製するための方法を指向する。本発明のdsRNAは、invitroまたは哺乳動物対象中いずれかで、細胞内の標的AR遺伝子の発現を減少可能である。よりとりわけ、本発明は、効果的かつ非常に強力なAR阻害試薬として働き、長期間の阻害効果を任意に有する構造と改変パターンを持つ、Dicer基質siRNADsiRNAsを指向する。そのような効果が最近、KRAS標的転写産物に対して指向するDsiRNAsに関して文書とされたように米国特許第12/754,427号明細書を参照のこと、多くのそのようなDsiRNAsが、標的特異的阻害強度と、同一の標的RNAに対して指向した21ヌクレオチドsiRNAsに対して有意に増強された有効性を有する。1つの様態において、本発明は、第一および第二核酸鎖を含む単離された二本鎖リボヌ核酸dsRNAを提供し、そこで第一差は長さにして15~35ヌクレオチド、第二鎖は長さにして19~35ヌクレオチドであり、そこで第二オリゴヌクレオチド鎖は、二本鎖核酸が哺乳動物細胞内に導入された時に、AR標的遺伝子発現を減少させるために第二オリゴヌクレオチド鎖長の少なくとも19ヌクレオチドにそって、表13の標的ARcDNA配列に十分に相補的である。特定の実施形態において、単離されたdsRNAは、少なくとも25塩基対の二本鎖領域を有する。1つの実施形態において、単離されたdsRNAの第二鎖は、第二鎖の3’末端にて第一鎖の1~5ヌクレオチド一本鎖オーバーハングを含む。他の実施形態において、第一鎖は長さにして25~35ヌクレオチドである。さらなる実施形態において、第二鎖は長さにして25~35ヌクレオチドである。任意に、第二オリゴヌクレオチド鎖は、第二オリゴヌクレオチド鎖長の多くとも27ヌクレオチドにそって、GenBank寄託番号NM_000044.2またはNM_001011645.1の標的ARcDNA配列に相補的である。1つの実施形態において、第一オリゴヌクレオチド鎖の3’末端での第一ヌクレオチド位置1から開始して、位置1、2および/または3が、改変されたヌクレオチドによって置換される。特定の実施形態において、第一鎖の3’末端の改変されたヌクレオチド残基は、デオキシリボヌクレオチド、アシクロヌクレオチドまたは蛍光分子である。関連した実施形態において、第一オリゴヌクレオチド鎖の3’末端の位置1はデオキシリボヌクレオチドである。さらなる実施形態において、第一鎖の3’末端と、第二鎖の5’末端は平滑末端を形成する。他の実施形態において、第一鎖は長さにして25ヌクレオチドであり、第二鎖は長さにして27ヌクレオチドである。1つの実施形態において、第二鎖は、配列番号:164、166、174、177、179、1975、1984、1986、1987、1992、1994、1998、224、2074、1283、2136、246、2204、2220、2227、2230、2235および2239の配列を含む。他の実施形態において、第一鎖は、配列番号:11、13、21、24、26、1570、1579、1581、1582、1587、1589、1593、71、1669、1220、1731、93、1799、1815、1822、1825、1830および1834を含む。さらなる実施形態において、dsRNAは、表2、3、5,7、9および11のDsiRNA試薬に関して示したような、第一鎖/第二鎖配列の対を含む。1つの実施形態において、各第一および第二鎖は、少なくとも26ヌクレオチドの長さを持つ。他の実施形態において、3’オーバーハングのヌクレオチドは、改変されたヌクレオチドを含む。任意に、3’オーバーハングの改変されたヌクレオチドは、2’-O-メチルリボヌクレオチドである。関連する実施形態において、3’オーバーハングのすべてのヌクレオチドが、改変されたヌクレオチドである。さらなる実施形態において、1つまたは両方の第一および第二オリゴヌクレオチド鎖は、5’リン酸を含む。他の実施形態において、dsRNAの改変されたヌクレオチド残基は、2’-O-メチル、2’-メトキシエトキシ、2’-フルオロ、2’-アリル、2’-O-[2-メチルアミノ-2-オキソエチル]、4’-チオ、4’-CH2-O-2’-ブリッジ、4’-CH22-O-2’-ブリッジ、2’-LNA、2’-アミノまたは2’-O-N-メチルカルバメートである。1つの実施形態において、dsRNAの3’オーバーハングは、長さにして1~3ヌクレオチドである。任意に3’オーバーハングは、長さにして1~2ヌクレオチドである。関連する実施形態において、3’オーバーハングは長さにして2ヌクレオチドであり、3’のオーバーハングの改変されたヌクレオチドは、2’-O-メチル改変リボヌクレオチドである。さらなる実施形態において、第二オリゴヌクレオチド鎖は、第一オリゴヌクレオチド鎖の5’末端ヌクレオチド残基に対して相補的である第二鎖のヌクレオチド残基から開始して、交互改変および非改変ヌクレオチド残基を含む。他の実施形態において、第二オリゴヌクレオチド鎖は、第一オリゴヌクレオチド鎖の5’末端ヌクレオチド残基に対して相補的である第二鎖のヌクレオチド残基から開始して、第二オリゴヌクレオチド鎖の位置18から5’末端までの全ての位置で、非改変ヌクレオチドを含む。他の実施形態において、各第一および第二鎖は、少なくとも26および多くて30ヌクレオチドの長さを持つ。1つの実施形態において、dsRNAは、Dicerによって細胞内で内因的に開裂される。さらなる実施形態において、標的遺伝子の発現を減少させるのに十分な単離された二本鎖核酸の量は、細胞の環境において、1ナノモルまたはそれ以下、200ピコモルまたはそれ以下、100ピコモルまたはそれ以下、50ピコモルまたはそれ以下、20ピコモルまたはそれ以下、10ピコモルまたはそれ以下、5ピコモルまたはそれ以下、2ピコモルまたはそれ以下、または1ピコモルまたはそれ以下である。さらなる実施形態において、単離されたdsRNAは、哺乳動物細胞内で、invitroにて1ナノモルまたはそれ以下、200ピコモルまたはそれ以下、100ピコモルまたはそれ以下、50ピコモルまたはそれ以下、20ピコモルまたはそれ以下、10ピコモルまたはそれ以下、5ピコモルまたはそれ以下、2ピコモルまたはそれ以下、または1ピコモルまたはそれ以下の細胞環境中、効果的な濃度にてアッセイされた時に、標的AR遺伝子発現を減少させることにおいて、標的ARcDNAの同一の少なくとも19のヌクレオチドを指向した、単離された21mersiRNAよりも大きな強度を持つ。他の実施形態において、単離されたdsRNAは、二本鎖核酸が哺乳動物内に導入された時に、少なくとも10、少なくとも50、少なくとも80~90、少なくとも95、少なくとも98、または少なくとも99まで、AR標的遺伝子発現を減少させるために、標的ARcDNA配列に十分相補的である。さらなる実施形態において、第一および第二鎖は、化学架橋剤によって連結する。関連した実施形態において、第一鎖の3’末端と第二鎖の5’末端が、化学架橋剤によって連結する。1つの実施形態において、第二または第一鎖のヌクレオチドは、Dicer開裂の方向を指示する、改変されたヌクレオチドで置換される。他の実施形態において、dsRNAは、デオキシリボヌクレオチド、ジデオキシリボヌクレオチド、アシクロヌクレオチド、3’-デオキシアデノシンコルジセピン、3’-アジド-3’-デオキシチミジンAZT、2’、3’-ジデオキシイノシンddI、2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン3TC、2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシチミジンd4T、3’-アジド-3’-デオキシチミジンAZTのヌクレオチド一リン酸塩、2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン3TCと2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシチミジンd4Tのヌクレオチド一リン酸塩、4-チオウラシル、5-ブロモウラシル、5-ヨードウラシル、5-3-アミノアリル-ウラシル、2’-O-アルキルリボヌクレオチド、2’-O-メチルリボヌクレオチド、2’-アミノリボヌクレオチド、2’-フルオロリボヌクレオチドまたはロックされた核酸である、改変されヌクレオチドを持つ。さらなる実施形態において、dsRNAはリン酸塩、ホスホロチオエート、またはホスホトリエステルホスフェート骨格改変を持つ。さらなる実施様態において、dsRNAはモルホリノ核酸またはオリゴヌクレオチド、またはペプチド核酸PNAを含む。1つの実施形態において、本発明は、invitroにて哺乳動物細胞を、細胞内で標的AR遺伝子の発現を減少させるのに十分な量で、記述したような単離されたdsRNAと接触させることを含む、哺乳動物における標的AR遺伝子の発現を減少させるための方法を提供する。1つの実施形態において、標的AR遺伝子発現は、すくなくとも10、少なくとも50または少なくとも80~90まで減少する。他の実施形態において、標的ARmRNAレベルは、細胞がdsRNAに接触してから少なくとも8日後に、少なくとも90減少する。さらなる実施形態において、ARmRNAレベルは、細胞がdsRNAに接触してから少なくとも10日後に、少なくとも70減少する。さらなる実施形態において、本発明は、記述したような単離されたdsRNAを、哺乳動物中の標的AR遺伝子の発現を減少させるのに十分な量で、哺乳動物に投与することによって、哺乳動物中の標的AR遺伝子の発現を減少させるための方法を提供する。1つの実施形態において、単離されたdsRNAは、1マイクログラム~5ミリグラム/哺乳動物キログラム/日、100マイクログラム~0.5ミリグラム/キログラム、0.001~0.25ミリグラム/キログラム、0.01~20マイクログラム/キログラム、0.01~10マイクログラム/キログラム、0.10~5マイクログラム/キログラム、または0.1~2.5マイクログラム/キログラムの投与量で投与される。他の実施形態において、単離されたdsRNAは、1ナノモルまたはそれ以下の細胞の環境下効果的な濃度で、invitroにて哺乳動物細胞内でアッセイした時に、標的AR遺伝子発現を減少させることにおいて、標的ARcDNAの同一の少なくとも19ヌクレオチドを指向した、単離された21マーsiRNAよりも大きな強度を有する。さらなる実施形態において、投与段階には、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射、点滴、皮下注射、経皮、エアゾル、腸、膣、局所、経口または吸入伝達が含まれる。さらなる実施形態において、本発明は、細胞の増殖を阻害するのに十分な量で、細胞を記述したような単離dsRNAと接触させることによって、細胞の増殖を選択的に阻害するための方法を提供する。1つの実施形態において、細胞は対象の腫瘍細胞である。任意に、細胞はinvitroで腫瘍細胞、例えば前立腺癌細胞例えば22Rv1またはVCaPまたは腺癌細胞例えばA549または他の癌細胞である。特定の実施形態において、細胞は哺乳動物の前立腺細胞である。関連する実施形態において、細胞はヒト細胞である。さらなる実施形態において、本発明は、記述したような単離されたdsRNAを含む処方を提供し、そこで、dsRNAは、dsRNAがinvitroにて哺乳動物に導入された時に、少なくとも10、少なくとも50または少なくとも80~90まで、標的ARRNAレベルを減少させるために効果的な量で存在し、dsRNAは、1ナノモルまたはそれ以下の細胞の環境下、効果的な濃度で、哺乳動物細胞内でinvitroにてアッセイした時に、標的ARRNAレベルを減少することにおいて、標的ARcDNAの同一の少なくとも19ヌクレオチドを指向した、単離された21マーsiRNAよりも大きな強度を有する。1つの実施形態において、効果的な量は、細胞の環境中、1ナノモルまたはそれ以下、200ピコモルまたはそれ以下、100ピコモルまたはそれ以下、50ピコモルまたはそれ以下、20ピコモルまたはそれ以下、10ピコモルまたはそれ以下、5ピコモルまたはそれ以下、2ピコモルまたはそれ以下、または1ピコモルまたはそれ以下である。他の実施形態において、本発明は、記述したような単離されたdsRNAを含む処方を提供し、そこでdsRNAは、dsRNAが哺乳動物対象の細胞内に導入された時に、少なくとも10、少なくとも50または少なくとも80~90まで、標的RNAを減少させる効果的な量で存在し、dsRNAは1ナノモルまたはそれ以下の細胞の環境下での効果的な濃度で、哺乳動物細胞内でinvitroにてアッセイした時に、標的ARRNAレベルを減少させることにおいて、標的ARcDNAの同一の少なくとも19ヌクレオチドを指向した、単離された21マーsiRNAよりも大きな強度を有する。1つの実施形態において、効果的な量は、1マイクログラム~5ミリグラム/哺乳動物キログラム/日、100マイクログラム~0.5ミリグラム/キログラム、0.001~0.25ミリグラム/キログラム、0.01~20マイクログラム/キログラム、0.01~10マイクログラム/キログラム、0.10~5マイクログラム/キログラム、または0.1~2.5マイクログラム/キログラムの投与量である。さらなる実施形態において、本発明は、記述したような単離されたdsRNAを含む哺乳動物細胞を提供する。本発明の他の実施形態は、記述したような単離されたdsRNAと、薬理学的に許容可能な担体を含む薬理学的組成物を提供する。本発明のさらなる実施形態は、記述したような単離されたdsRNAと、その利用のための説明書を含むキットを提供する。さらなる様態において、本発明は、第一および第二核酸鎖を含む、単離された二本鎖リボ核酸dsRNAから本質的になる、AR阻害活性を有する組成物を提供し、そこで第一鎖は長さにして15~35ヌクレオチドであり、第二鎖は長さにして19~35ヌクレオチドであり、第二オリゴヌクレオチド鎖は、二本鎖核酸が哺乳動物細胞内に導入された時に、AR標的遺伝子発現を減少させるために、第二オリゴヌクレオチド鎖長の少なくとも19ヌクレオチドにそって、表13の標的ARcDNA配列に十分に相補的である。他の実施形態において、本発明は、本発明のdsRNAおよび/またはdsRNA含有組成物と薬理学的担体を、対象中のAR関連疾患または障害を治療するため、または予防するために十分な量で、対象に投与することによって、対象中のAR関連疾患または障害を治療するまたは予防するための方法を提供する。関連する実施形態において、AR関連疾患または障害は、前立腺癌または腺癌である。他の様態において、本発明は、第一および第二核酸鎖を含む、単離された二本鎖リボ核酸dsRNAを提供し、そこでdsRNAは平滑末端を含み、各第一および第二オリゴヌクレオチド鎖は、同数のヌクレオチド残基からなり、長さにして多くて35ヌクレオチドであり、第二オリゴヌクレオチド鎖は、二本鎖核酸が哺乳動物細胞内に導入された時に、AR標的遺伝子発現を減少させるために、第二オリゴヌクレオチド鎖長の少なくとも19ヌクレオチドにそって、表13の標的ARcDNA配列に十分に相補的である。1つの実施形態において、dsRNAは、細胞の環境において、1ナノモル以下の濃度で、標的遺伝子発現を減少可能である。他の実施形態において、各第一および第二鎖は、少なくとも26ヌクレオチドである長さを持つ。関連した実施形態において,各第一および第二鎖は、26~30ヌクレオチドである長さを持つ。任意に各第一および第二鎖は、27ヌクレオチドである長さを持つ。特定の実施形態において、dsRNAの第二鎖は、配列番号:164、166、174、177、179、1975、1984、1986、1987、1992、1994、1998、224、2074、1283、2136、246、2204、2220、2227、2230、2235および2239から選択される配列を含む。関連した実施形態において、dsRNAの第一鎖は、配列番号:4517、4519、4527、4530、4532、4876、4885、4887、4888、4893、4895、4899、4577、4975、4778、5037、4599、5105、5121、5128、5131、5136および5140から選択される配列を含む。さらなる実施形態において、dsDNAは、表2、3、5、7、9および11から選択される、第一鎖と相当する第二鎖の組を含む。本発明の他の様態は、第一および第二核酸鎖を含む単離された二本鎖リボ核酸sdRNAを提供し、そこでdsRNAは平滑末端を含み、第一および第二オリゴヌクレオチド鎖それぞれは、同数のヌクレオチド残基からなり、長さにして多くて35ヌクレオチドであり、第一鎖の3’末端の最後および最後から二番目の残基と、第二鎖の前記5’末端の最後および最後から二番目の残基が、1つまたは2つのミスマッチに基づく対を形成し、第二オリゴヌクレオチド鎖は、二本鎖核酸が哺乳動物細胞内に導入された時に、AR標的遺伝子発現を減少させるために、第二オリゴヌクレオチド鎖長の少なくとも19ヌクレオチドにそって、表13の標的ARcDNA配列に十分に相補的である。1つの実施形態において、第一鎖は、配列番号:3794、3796、3804、3807、3809、4153、4162、4164、4165、4170、4172、4176、3854、4252、4055、4314、3876、4382、4398、4405、4408、4413および4417の配列を含む。さらなる様態において、本発明は、第一および第二核酸鎖を含む、単離された二本鎖リボ核酸dsRNAから本質的になる、AR阻害活性を有する組成物を提供し、前記dsRNAは平滑末端を含み、第一および第二オリゴヌクレオチドそれぞれは、同数のヌクレオチド残基からなり、長さにして多くて35ヌクレオチドであり、第二オリゴヌクレオチド鎖は、二本鎖核酸が哺乳動物細胞内に導入された時に、AR標的遺伝子発現を減少させるために、第二オリゴヌクレオチド鎖長の少なくとも19ヌクレオチドにそって、表13の標的ARcDNA配列に十分に相補的である。他の様態において、本発明は、センス領域およびアンチセンス領域からなる単離されたdsRNA分子を提供し、そこでセンス領域およびアンチセンス領域は一緒に、15~35塩基対からなる二本鎖領域を形成し、アンチセンス領域は、表13の配列の相補的体である配列を含み、単離されたdsRNAはさらに、各オーバーハング領域が、長さにして6またはそれ以下のヌクレオチドである、0~2の3’オーバーハング領域を含む。任意に、二本鎖領域は、19~35塩基対からなる。特定の実施形態において、二本鎖領域は、25~30塩基対からなる。さらなる実施形態において、二本鎖領域は25~30塩基対からなる。さらなる様態において、本発明は、センス領域およびアンチセンス領域からなるsiRNA分子を提供し、そこでセンス領域およびアンチセンス領域は一緒に、19~23塩基対からなる二本鎖領域を形成し、アンチセンス領域は、表13の配列の相補体である配列を含み、単離されたdsRNAはさらに、各オーバーハング領域が、長さにして6またはそれ以下のヌクレオチドである、0~4のオーバーハング領域を含む。特定の様態において、本発明は、効果的かつ非常に強力なAR阻害剤試薬として働き、任意に延長された阻害効果期間を有する、構造および改変パターンを持つ、Dicer基質siRNAsDsiRNAsを指向する。多数のそのようなDsiRNAsは、同一の標的RNAに指向した19~23塩基対二本鎖核酸例えば21ヌクレオチドsiRNAsに対して有意に増強された、標的特異的な阻害強度と有効性を有する。特定のそのような実施形態において、そのようなDsiRNAは、1nMまたはそれ以下の濃度で好適に処方された時に、その中に含まれる19、20、21、22または23塩基対配列よりも、哺乳動物細胞内のAR標的遺伝子発現を減少させる際により強力である。さらなる様態において、本発明は、第一および第二核酸鎖と、少なくとも25塩基対の二本鎖領域を含む単離された二本鎖リボヌ核酸dsRNAを提供し、そこで第一鎖は長さにして25~34ヌクレオチドであり、第二鎖は長さにして26~35ヌクレオチドであり、かつその3’末端にて1~5の一本鎖ヌクレオチドを含み、そこで第二オリゴヌクレオチド鎖は、二本鎖核酸が哺乳動物細胞内に導入された時に、AR標的遺伝子発現を減少させるために第二オリゴヌクレオチド鎖長の少なくとも15ヌクレオチドにそって、配列番号:307~459、826~915、1024~1077、1312~1374、2311~2715または3622~3669の標的ARcDNA配列に十分に相補的である。任意に、第二オリゴヌクレオチド鎖は、第二オリゴヌクレオチド鎖長さの多くて27ヌクレオチドにそって、配列番号:3766、3768または3770の標的ARcDNA配列に相補的である。1つの実施形態において、第一オリゴヌクレオチド鎖の3’末端での第一ヌクレオチド位置1から開始して、位置1、2および/または3が、改変されたヌクレオチドによって置換される。特定の実施形態において、第一鎖の3’末端の改変されたヌクレオチド残基は、デオキシリボヌクレオチド、アシクロヌクレオチドまたは蛍光分子である。関連した実施形態において、第一オリゴヌクレオチド鎖の3’末端の位置1はデオキシリボヌクレオチドである。さらなる実施形態において、第一鎖の3’末端と、第二鎖の5’末端は平滑末端を形成する。他の実施形態において、第一鎖は長さにして25ヌクレオチドであり、第二鎖は長さにして27ヌクレオチドである。1つの実施形態において、第二鎖は、配列番号:154~306、796~825、970~1023、1249~1311、1906~2310および3574~3621の配列を含む。他の実施形態において、第一鎖は、配列番号:1~153、766~795、916~969、1186~1248、1501~1905および3526~3573の配列を含む。さらなる実施形態において、dsRNAは、表9のDsiRNA試薬に関して示したような、第一鎖/第二鎖配列の対を含む。1つの実施形態において、各第一および第二鎖は、少なくとも26ヌクレオチドの長さを持つ。他の実施形態において、3’オーバーハングのヌクレオチドは、改変されたヌクレオチドを含む。任意に、3’オーバーハングの改変されたヌクレオチドは、2’-O-メチルリボヌクレオチドである。関連する実施形態において、3’オーバーハングのすべてのヌクレオチドが、改変されたヌクレオチドである。さらなる実施形態において、1つまたは両方の第一および第二オリゴヌクレオチド鎖は、5’リン酸を含む。他の実施形態において、dsRNAの改変されたヌクレオチド残基は、2’-O-メチル、2’-メトキシエトキシ、2’-フルオロ、2’-アリル、2’-O-[2-メチルアミノ-2-オキソエチル]、4’-チオ、4’-CH2-O-2’-ブリッジ、4’-CH22-O-2’-ブリッジ、2’-LNA、2’-アミノまたは2’-O-N-メチルカルバメートである。1つの実施形態において、dsRNAの3’オーバーハングは、長さにして1~3ヌクレオチドである。任意に3’オーバーハングは、長さにして1~2ヌクレオチドである。関連する実施形態において、3’オーバーハングは長さにして2ヌクレオチドであり、3’のオーバーハングの改変されたヌクレオチドは、2’-O-メチル改変リボヌクレオチドである。さらなる実施形態において、第二オリゴヌクレオチド鎖は、第一オリゴヌクレオチド鎖の5’末端ヌクレオチド残基に対して相補的である第二鎖のヌクレオチド残基から開始して、交互改変および非改変ヌクレオチド残基を含む。他の実施形態において、第二オリゴヌクレオチド鎖は、第一オリゴヌクレオチド鎖の5’末端ヌクレオチド残基に対して相補的である第二鎖のヌクレオチド残基から開始して、第二オリゴヌクレオチド鎖の位置18から5’末端までの全ての位置で、非改変ヌクレオチドを含む。他の実施形態において、各第一および第二鎖は、少なくとも26および多くて30ヌクレオチドの長さを持つ。1つの実施形態において、dsRNAは、Dicerによって細胞内で内因的に開裂される。さらなる実施形態において、標的遺伝子の発現を減少させるのに十分な単離された二本鎖核酸の量は、細胞の環境において、1ナノモルまたはそれ以下、200ピコモルまたはそれ以下、100ピコモルまたはそれ以下、50ピコモルまたはそれ以下、20ピコモルまたはそれ以下、10ピコモルまたはそれ以下、5ピコモルまたはそれ以下、2ピコモルまたはそれ以下、または1ピコモルまたはそれ以下である。さらなる実施形態において、単離されたdsRNAは、哺乳動物細胞内で、invitroにて1ナノモルまたはそれ以下、200ピコモルまたはそれ以下、100ピコモルまたはそれ以下、50ピコモルまたはそれ以下、20ピコモルまたはそれ以下、10ピコモルまたはそれ以下、5ピコモルまたはそれ以下、2ピコモルまたはそれ以下、または1ピコモルまたはそれ以下の細胞環境中、効果的な濃度にてアッセイされた時に、標的AR遺伝子発現を減少させることにおいて、標的ARcDNAの同一の少なくとも15のヌクレオチドを指向した、単離された21マーsiRNAよりも大きな強度を有する。他の実施形態において、単離されたdsRNAは、二本鎖核酸が哺乳動物内に導入された時に、少なくとも10、少なくとも50、少なくとも80~90、少なくとも95、少なくとも98、または少なくとも99まで、AR標的遺伝子発現を減少させるために、標的ARcDNA配列に十分相補的である。さらなる実施形態において、第一および第二鎖は、化学架橋剤によって連結する。関連した実施形態において、第一鎖の3’末端と第二鎖の5’末端が、化学架橋剤によって連結する。1つの実施形態において、第二または第一鎖のヌクレオチドは、Dicer開裂の方向を指示する、改変されたヌクレオチドで置換される。他の実施形態において、dsRNAは、デオキシリボヌクレオチド、ジデオキシリボヌクレオチド、アシクロヌクレオチド、3’-デオキシアデノシンコルジセピン、3’-アジド-3’-デオキシチミジンAZT、2’、3’-ジデオキシイノシンddI、2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン3TC、2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシチミジンd4T、3’-アジド-3’-デオキシチミジンAZTのヌクレオチド一リン酸塩、2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン3TCと2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシチミジンd4Tのヌクレオチド一リン酸塩、4-チオウラシル、5-ブロモウラシル、5-ヨードウラシル、5-3-アミノアリル-ウラシル、2’-O-アルキルリボヌクレオチド、2’-O-メチルリボヌクレオチド、2’-アミノリボヌクレオチド、2’-フルオロリボヌクレオチドまたはロックされた核酸である、改変されヌクレオチドを含む。さらなる実施形態において、dsRNAはリン酸塩、ホスホロチオエート、またはホスホトリエステルホスフェート骨格改変を持つ。1つの実施形態において、本発明は、細胞内の標的AR遺伝子の発現を減少させるのに十分な量で、invitroにて哺乳動物細胞を、記述されたような単離dsRNAと接触させることを含む、哺乳動物細胞内の標的AR遺伝子の発現を減少させるための方法を提供する。1つの実施形態において、標的AR遺伝子発現は、少なくとも10、少なくとも50、または少なくとも80~90まで減少する。他の実施形態において、標的ARmRNAレベルは、細胞をdsRNAと接触させた少なくとも8日後に、少なくとも90減少する。さらなる実施形態において、ARmRNAレベルは、細胞をdsRNAと接触させた少なくとも10日後に、少なくとも70まで減少する。さらなる実施形態において、本発明は、哺乳動物中の標的AR遺伝子の発現を減少させるために十分な量で、哺乳動物に対して、記述したような単離したdsRNAを投与することによって、哺乳動物中の標的AR遺伝子の発現を減少させるための方法を提供する。1つの実施形態において、単離したdsRNAを、1マイクログラム~5ミリグラム/哺乳動物キログラム/日、100マイクログラム~0.5ミリグラム/キログラム、0.001~0.25ミリグラム/キログラム、0.01~20マイクログラム/キログラム、0.01~10マイクログラム/キログラム、0.10~5マイクログラム/キログラム、または0.1~2.5マイクログラム/キログラムの投与量で投与する。他の実施形態において、単離dsRNAは、1ナノモルまたはそれ以下の細胞の環境下での効果的な濃度で、哺乳動物細胞内でinvitroにてアッセイした時に、標的AR遺伝子発現を減少させることにおいて、標的ARcDNAの同一の少なくとも15ヌクレオチドを指向した、単離された21マーsiRNAよりも大きな強度を有する。さらなる実施形態において、投与段階には、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射、点滴、皮下注射、経皮、エアゾル、腸、膣、局所、経口または吸入伝達が含まれる。さらなる実施形態において、本発明は、細胞の増殖を阻害するのに十分な量で、細胞を記述したような単離dsRNAの量と接触させることによって、細胞の増殖を選択的に阻害するための方法を提供する。1つの実施形態において、細胞は対象の腫瘍細胞である。任意に、細胞はinvitroでの腫瘍細胞である。関連する実施形態において、細胞はヒト細胞である。さらなる実施形態において、本発明は、記述したような単離されたdsRNAを含む処方を提供し、そこで、invitroにて哺乳動物に導入された時に、dsRNAは、少なくとも10、少なくとも50または少なくとも80~90まで、標的ARRNAレベルを減少させるのに効果的な量で存在し、sdRNAは1ナノモルまたはそれ以下の細胞の環境下での効果的な濃度で、哺乳動物細胞内でinvitroにてアッセイした時に、標的ARRNAレベルを減少させることにおいて、標的ARcDNAの同一の少なくとも15ヌクレオチドを指向した、単離された21マーsiRNAsよりも大きな強度を有する。1つの実施形態において、効果的な量は、細胞の環境中、1ナノモルまたはそれ以下、200ピコモルまたはそれ以下、100ピコモルまたはそれ以下、50ピコモルまたはそれ以下、20ピコモルまたはそれ以下、10ピコモルまたはそれ以下、5ピコモルまたはそれ以下、2ピコモルまたはそれ以下、または1ピコモルまたはそれ以下である。他の実施形態において、本発明は、記述したような単離されたdsRNAを含む処方を提供し、そこでdsRNAは、哺乳動物対象の細胞内に導入された時に、dsRNAが少なくとも10、少なくとも50または少なくとも80~90まで、標的RNAレベルを減少させる効果的な量で存在し、dsRNAは1ナノモルまたはそれ以下の細胞の環境下での効果的な濃度で、哺乳動物細胞内でinvitroにてアッセイした時に、標的ARRNAレベルを減少させることにおいて、標的ARcDNAの同一の少なくとも15ヌクレオチドを指向した、単離された21マーsiRNAよりも大きな強度を有する。1つの実施形態において、効果的な量は、1マイクログラム~5ミリグラム/哺乳動物キログラム/日、100マイクログラム~0.5ミリグラム/キログラム、0.001~0.25ミリグラム/キログラム、0.01~20マイクログラム/キログラム、0.01~10マイクログラム/キログラム、0.10~5マイクログラム/キログラム、または0.1~2.5マイクログラム/キログラムの投与量である。さらなる実施形態において、本発明は、記述したような単離されたdsRNAを含む哺乳動物細胞を提供する。本発明の他の実施形態は、記述したような単離されたdsRNAと、薬理学的に許容可能な担体を含む薬理学的組成物を提供する。本発明のさらなる実施形態は、記述したような単離されたdsRNAと、その利用のための説明書を含むキットを提供する。さらなる様態において、本発明は、第一および第二核酸鎖と、少なくとも25塩基対の二本鎖領域を含む、単離された二本鎖リボ核酸dsRNAから本質的になる、AR阻害活性を有する組成物を提供し、そこで第一鎖は長さにして25~34ヌクレオチドであり、第二鎖は長さにして26~35ヌクレオチドであり、その3’末端にて1~5の一本鎖ヌクレオチドを含み、第二オリゴヌクレオチド鎖は、二本鎖核酸が哺乳動物細胞内に導入された時に、AR標的遺伝子発現を減少させるために、第二オリゴヌクレオチド鎖長の少なくとも15ヌクレオチドにそって、配列番号:307~459、826~915、1024~1077、1312~1374、2311~2715または3622~3669の標的ARcDNAに十分相補的である。他の実施形態において、本発明は、本発明のdsRNAおよび/またはdsRNA含有組成物と薬理学的担体を、対象中のAR-関連疾患または疾病を治療するため、または予防するために十分な量で、対象に投与することによって、対象中のAR-関連疾患または疾病を治療するまたは予防するための方法を提供する。関連する実施形態において、AR-関連疾患または疾病は、前立腺癌である。他の様態において、本発明は、第一および第二核酸と、少なくとも25塩基対の二本鎖領域を含む、単離された二本鎖リボ核酸dsRNAを提供し、そこで、dsRNAは平滑末端を含み、各第一および第二オリゴヌクレオチド鎖は、同数のヌクレオチド残基からなり、長さにして多くて35ヌクレオチドであり、そこで第二オリゴヌクレオチドは、二本鎖核酸が哺乳動物細胞内に導入された時に、AR標的遺伝子発現を減少させるために、第二オリゴヌクレオチド鎖長の少なくとも15ヌクレオチドにそって、配列番号:307~459、826~915、1024~1077、1312~1374、2311~2715または3622~3669の標的ARcDNA配列に十分に相補的である。1つの実施形態において、dsRNAは、細胞の環境下、1ナノモル以下の濃度で、標的遺伝子発現を減少可能である。他の実施形態において、各第一および第二鎖は、少なくとも26ヌクレオチドである長さを持つ。関連実施形態において、各第一および第二鎖は、26~30ヌクレオチドの長さを持つ。任意に、各第一および第二鎖は、27ヌクレオチドである長さを持つ。特定の実施形態において、dsRNAの第二鎖には、配列番号:154~306、796~825、970~1023、1249~1311、1906~2310および3574~3621から選択された配列が含まれる任意に、第二鎖は、配列番号:154~306、796~825、970~1023、1249~1311、1906~2310および3574~3621から選択される配列である。関連実施形態において、dsRNAの第一鎖には、配列番号:3784~5229から選択された配列が含まれる任意に、第一鎖は、配列番号:3784~5229から選択された配列である。さらなる実施形態において、dsRNAは、表5~8から選択された、第一鎖と相当する第二鎖の組を含む。本発明の他の様態は、第一および第二核酸と、少なくとも25塩基対の二本鎖領域を含む、単離された二本鎖リボ核酸dsRNAを提供し、そこで、dsRNAは平滑末端を含み、各第一および第二オリゴヌクレオチド鎖は、同数のヌクレオチド残基からなり、長さにして多くて35ヌクレオチドであり、第一鎖の3’末端の最後および最後から二番目の残基と、第二鎖の5’末端の最後および最後から二番目の残基が、1つまたは2つのミスマッチに基づく対を形成し、第二オリゴヌクレオチドは、二本鎖核酸が哺乳動物細胞内に導入された時に、AR標的遺伝子発現を減少させるために、第二オリゴヌクレオチド鎖長の少なくとも15ヌクレオチドにそって、配列番号:307~459、826~915、1024~1077、1312~1374、2311~2715または3622~3669の標的ARcDNA配列に十分相補的である。1つの実施形態において、第一鎖は、配列番号:3784~4506の配列を含む。さらなる様態において、本発明は、第一および第二核酸鎖と、少なくとも25塩基対の二本鎖領域を含む単離された二本鎖リボ核酸dsRNAから本質的になるAR阻害活性を有する組成物を提供し、そこで前記dsRNAは平滑末端を含み、第一および第二オリゴヌクレオチド鎖それぞれは、同数のヌクレオチド残基からなり、長さにして多くて35ヌクレオチドであり、第二オリゴヌクレオチドは、二本鎖核酸が哺乳動物細胞内に導入された時に、AR標的遺伝子発現を減少させるために、第二オリゴヌクレオチド鎖長の少なくとも15ヌクレオチドにそって、配列番号:307~459、826~915、1024~1077、1312~1374、2311~2715または3622~3669の標的ARcDNA配列に十分相補的である。他の様態において、本発明は、センス領域およびアンチセンス領域からなる単離されたdsRNA分子を提供し、そこでセンス領域およびアンチセンス領域は一緒に、19~35塩基対からなる二本鎖領域を形成し、アンチセンス領域は、配列番号:613~765、886~915、1132~1185、1438~1500または3121~3765の相補体である配列を含み、単離されたdsRNAはさらに、各オーバーハング領域が、長さにして6またはそれ以下のヌクレオチドである、0~2の3’オーバーハング領域を含む。任意に、二本鎖領域は、25~35塩基対からなる。さらなる様態において、本発明は、センス領域およびアンチセンス領域からなるsiRNA分子を提供し、そこでセンス領域およびアンチセンス領域は一緒に、19~23塩基対からなる二本鎖領域を形成し、アンチセンス領域は、配列番号:613~765、886~915、1132~1185、1438~1500または3121~3765の配列の相補体である配列を含み、単離されたdsRNAはさらに、各オーバーハング領域が、長さにして6またはそれ以下のヌクレオチドである、0~4のオーバーハング領域を含む。本発明は、形質、疾患および疾病の維持または発達を仲介する、AR遺伝子発現経路または他の細胞性工程に関与する遺伝子の発現および/または活性の調節に応答する、形質、疾患および疾病に関連している化合物、組成物および方法も指向する。とりわけ、本発明は、AR遺伝子発現に対するRNA干渉RNAiを仲介可能なDicer基質siRNAsDsiRNAsのような、Dicer酵素によって処理されうる小核酸分子に関する。そのような抗ARDsiRNAsは、例えば、癌および/または他の増殖性疾患、疾病または状態のような、対象中のARの調節に応答可能な形質、疾患および疾病の治療のための組成物を提供することにおいて、有用である。抗ARDsiRNAの有効性、強度、毒性および他の効果を、増殖性疾患の1つまたはそれ以上の動物モデルで試験可能である増殖性疾患の典型的な好適な動物モデルを以下に列記している。本発明は、invivoまたはinvitroにてAR遺伝子のレベルおよび/または発現を減少可能な、二本鎖RNAdsRNAを含む組成物、それらを調製するための方法を指向する。dsRNAの鎖の1つは、標的化AR転写産物の破壊および/または転写阻害を指向可能な19~35ヌクレオチドの範囲の長さを持つヌクレオチド配列の領域を含む。定義他に定義しない限り、本明細書で使用するところの全ての技術および科学的語句が、本発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解される意味を持つ。以下の参照は、本発明内で使用される多くの語句の一般的な定義を当業者に提供する。Singletonetal.,DictionaryofMicrobiologyandMolecularBiology2nded.1994;TheCambridgeDictionaryofScienceandTechnologyWalkered.,1988;TheGlossayofGenetics,5thEd.,R.Riegeretal.eds.,SpringerVerlag1991;andHaleMaham,TheHarperCollinsDictionayofBiology1991。本明細書で使用するように、以下の語句は、他の特定しない限り、以下のそれらに帰する意味を持つ。本発明は、AR発現を調節たとえば阻害可能な1つまたはそれ以上のDsiRNA分子を特徴とする。本発明のDsiRNAsは任意に、AR誤調節に関連した疾患または疾病例えば腫瘍形成および/または増殖などの維持または発達に関連した他の遺伝子および/または遺伝子産物のモジュレータとの組み合わせで使用可能である。本発明のDsiRNA試薬は、一般的にARとして以下で列挙し、本明細書に対して引用する、GenBank寄託番号NM_000044.2ヒトAR、長版、NM_001011645.1ヒトAR、短版およびNM_013476.3マウスARによって引用されたcDNA配列に相当するもののように、ARRNAsを調節する。本発明の種々の様態および実施形態の以下の記述が、典型的ARRNAsに対する参照で提供され、一般的にARと本明細書で引用される。しかしながら、そのような参照は、例示のみであると意味され、本発明の種々の様態および実施形態はまた、変異体ARRNAsまたはさらなるARスプライスバリアントのような、他のARRNAsも指向する。特定の様態および実施形態がまた、治療に対して標的化されうる表現型効果例えば腫瘍形成および/または増殖などを産出するために、その誤調節が、ARのものと関連して働くまたはAR調節に効果を与えたか、または与える遺伝子を含む、AR経路に関与する他の遺伝子も指向する。そのようなさらなる遺伝子は、AR標的化DsiRNAsの利用に関して本明細書で記述されたDsiRNAおよび方法を用いて標的化可能である。したがって、他の遺伝子のそのような阻害剤の阻害および効果を、本明細書で記述したように実施可能である。語句ARは、ARタンパク質、ペプチドまたはポリペプチドをコードしている核酸配列を意味する例えば、ARGenbank寄託番号NM_000044.2、NM_001011645.1およびNM_013476.3の配列のような、AR転写産物。特定の実施形態において、語句ARはまた、他のARイソフォーム、変異体AR遺伝子、AR遺伝子のスプライスバリアント、およびAR遺伝子多型のような、他のARコード配列を含むことも意味する。語句ARは、AR遺伝子/転写産物のポリペプチド遺伝子産物、例えば、ARGenbank寄託番号NM_000044.2、NM_001011645.1およびNM_013476.3によってコードされたもののような、ARタンパク質、ペプチドまたはポリペプチドを意味するために使用される。本明細書で使用するところの、AR関連疾患または障害は、変化したAR発現、レベルおよび/または活性に関連すると本技術分野で公知の疾患または疾病を意味する。とりわけ、AR-関連疾患または疾病は、癌および/または増殖性疾患、状態または疾病を含む。典型的AR関連疾患または障害は前立腺癌である。本明細書で使用するところの増殖性疾患または癌によって、単独または他の治療との組み合わせで、白血病、例えば急性骨髄性白血病AML、慢性骨髄性白血病CML、急性リンパ性白血病ALL、および慢性リンパ性白血病、カポジ肉腫のようなAIDS関連癌、乳癌、骨肉腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、繊維肉腫、巨細胞腫、アダマンチノーマおよび脊索腫のような骨癌、髄膜腫、膠芽細胞腫、下級星状細胞腫、オリゴデンドロサイトーマ、下垂体腫瘍、神経鞘腫および転移脳腫瘍のような脳腫瘍、マントル細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、アデノーマ、扁平上皮癌、喉頭癌、胆嚢および胆管癌、網膜芽腫のような網膜の癌、食道癌、胃癌、多発性骨髄腫、卵巣癌、子宮癌、甲状腺癌、精巣癌、子宮内膜腺癌、メラノーマ、結腸直腸癌、肺癌、膀胱癌、前立腺癌、非小細胞肺癌を含む肺癌、膵臓癌、肉腫、腎芽細胞腫、子宮頸癌、頭頸部癌、皮膚癌、鼻咽腔癌、脂肪肉腫、上皮性腫瘍、腎細胞癌、胆嚢腺癌、耳下腺癌、子宮内膜肉腫、多剤耐性癌のような種々のリンパ腫を含む頭頸部癌、および腫瘍血管形成に関連した新血管形成、黄斑変性例えば湿/乾AMD、角膜血管新生、糖尿病性レチオパシー、血管新生緑内障、近視性変性のような増殖性疾患および状態、および再狭窄および多発性嚢胞腎のような他の増殖性疾患および状態、細胞または組織内での疾患関連遺伝子発現の調節に応答可能な他の癌または増殖性疾患、状態、形質、遺伝型または表現型を含む、本技術分野で公知のように、制御されていない細胞増殖または複製によって特徴付けられる疾患、状態、形質、遺伝型または表現型を意味する。特定の実施形態において、AR標的配列のdsRNA-仲介阻害を査定する。そのような実施形態において、ARRNAレベルは、任意に、そのような抗-ARdsRNAが存在しないことに対する、本発明の抗-ARdsRNAの存在におけるARレベルの比較を介して、本技術分野で認識された方法例えばRT-PCR、ノザンブロット、発現アレイなどによって査定可能である。特定の実施形態において、抗-ARdsRNAの存在下のARレベルを、賦形剤のみの存在下、関連しない標的RNAに対して指向したdsRNAの存在下、または任意の治療のない状態で、観察したものと比較する。ARタンパク質のレベルを査定可能であること、ARタンパク質のレベルが、異なる条件下、ARRNAレベルおよび/またはdsRNAが、AR発現を阻害する程度に直接的または間接的いずれかで関連することがまた認識され、したがってARタンパク質レベルを査定する本技術分野で認識されている方法例えばウエスタンブロット、免疫沈降、他の抗体に基づく方法などもまた、本発明のdsRNAの阻害効果を試験するために使用可能である。選択された対照と比較して、本発明の抗ARdsRNAがシステム例えば、細胞フリーのinvitroシステム、細胞、組織または生命体に投与された時に、ARRNAまたはARタンパク質が評価された時に、ARタンパク質レベルにおける統計学的に有意な減少が見られた場合に、本発明の抗ARdsRNAが、AR阻害活性を有すると見なされる。実験値と、実施された複数アッセイ数の分布によって、または絶対値のいずれかとしてARRNAにおけるどんな減少レベルが、本技術分野で公知の統計学的有意差を決定する標準の方法によって査定されたように統計学的に有意と判断するかのパラメータが決定づけられる傾向にある。しかしながら、特定の実施形態において、AR阻害活性は、システム、細胞、組織または生命体におけるARのレベルにおける減少のまたは絶対レベルに基づいて定義される。例えば、特定の実施形態において、本発明のDsiRNAは、好適な対照に対して見られるARレベルに対して、本発明のDsiRNAの存在下で、ARRNAにおいて、少なくとも5減少または少なくとも10減少が観察される場合に、AR阻害活性を有すると見なされる。例えば、特定の実施形態において、対照に対して、ARレベルにおける例えば5または10の減少が観察される場合に、組織および/または対象中のinvivoARレベルが、本発明のDsiRNA試薬によって阻害されると見なされうる。特定の他の実施形態において、本発明のDsiRNAは、ARRNAレベルが、選択された対照に対して、少なくとも15まで、選択された対照に対して、少なくとも20まで、選択された対照に対して、少なくとも25まで、選択された対照に対して、少なくとも30まで、選択された対照に対して、少なくとも35まで、選択された対照に対して、少なくとも40まで、選択された対照に対して、少なくとも45まで、選択された対照に対して、少なくとも50まで、選択された対照に対して、少なくとも55まで、選択された対照に対して、少なくとも60まで、選択された対照に対して、少なくとも65まで、選択された対照に対して、少なくとも70まで、選択された対照に対して、少なくとも75まで、選択された対照に対して、少なくとも80まで、選択された対照に対して、少なくとも85まで、選択された対照に対して、少なくとも90まで、選択された対照に対して、少なくとも95まで、選択された対照に対して、少なくとも96まで、選択された対照に対して、少なくとも97まで、選択された対照に対して、少なくとも98まで、選択された対照に対して、少なくとも99まで減少するのが観察される場合に、AR阻害活性を持つと見なされる。いくつかの実施形態において、ARの完全阻害が、AR阻害活性をもつと見なされるために、DsiRNAに対して要求される。特定のモデル例えば細胞培養において、DsiRNAは、好適な対照に対して、ARレベルの少なくとも50減少が観察される場合に、AR阻害活性を有すると見なされる。特定の他の実施形態において、DsiRNAは、好適な対照に対して、ARレベルの少なくとも80減少が観察される場合に、AR阻害活性を有すると見なされる。特定の例の方法によって、以下の実施例において、一連のDsiRNAs標的化ARを、そのような細胞の環境下、およびトランスフェクション試薬LipofectamineTMRNAiMAX、Invitrogenの存在下、1nM濃度にて、invitroにてヒト22Rv1またはマウスLMTK-細胞中のARmRNAレベルを減少させる能力に関して試験した。以下の実施例中AR阻害活性はまず、アッセイした条件下、ARmRNAレベルの少なくとも70減少に効果があると観察されたDsiRNAsに対してまずみなした。AR阻害活性は、同一または同様のアッセイおよび条件が使用された時でさえ、以下の実施例に対して使用したものとくらべて、より厳しいか、より厳しくない条件下のいずれかで、dsRNAに帰することも企図される。例えば、特定の実施形態において、試験した本発明のdsRNAは、ARmRNAレベルにおいて、好適な対照に対して、少なくとも10減少、少なくとも20減少、少なくとも30減少、少なくとも40減少、少なくとも50減少、少なくとも60減少、少なくとも75減少、少なくとも80減少、少なくとも85減少、少なくとも90減少、少なくとも95減少が、細胞環境下、1nMdsRNA濃度またはそれ以下で、invitroにて哺乳動物細胞内で観察された場合に、AR阻害活性を有するとみなされる。本発明の二本鎖RNAがAR阻害活性を有するかどうかを決定するための他の評価項目の利用も企図される。特に、1つの実施形態において、ARmRNAレベルを査定することに加えて、またはそれとは別に、例えば、invitroまたはinvivoにて、哺乳動物細胞を接触させた48時間後にて試験したdsRNAの、ARタンパク質レベルを減少させる能力を査定し、試験したdsRNAが、好適な対照と比べて、ARタンパク質レベルにて、少なくとも10減少、少なくとも20減少、少なくとも30減少、少なくとも40減少、少なくとも50減少、少なくとも60減少、少なくとも70減少、少なくとも75減少、少なくとも80減少、少なくとも85減少、少なくとも90減少、少なくとも95減少が、invitroまたはinvivoにて、アッセイした二本鎖RNAに接触させた哺乳動物内で観察される場合に、AR阻害活性を有するとみなされる。企図されたさらなる評価項目には、例えばARレベルの減少に関する表現型-例えば、より詳細に本明細書の他の場所で記述したような、腫瘍または癌細胞レベルの増殖を停止させること、または減少させることを含む、invitroにて接触させた哺乳動物細胞株の増殖の減少および/またはinvivoでの腫瘍の増殖の減少の査定が含まれる。AR阻害活性をまた、なにが、投与した濃度、および投与後の時間間隔にしたがって調整したAR阻害活性を有するdsRNAを構成するかという査定で、時間間隔にわたり、濃度範囲強度にわたり評価可能でもある。したがって、特定の実施形態において、本発明のDsiRNAは、AR活性において少なくとも50の減少が、投与が観察され、存続した後、2時間、5時間、10時間、1日、2日、3日、4日、5日、6日、7日、8日、9日、10日またはそれ以上の期間で観察される場合に、AR阻害活性を有すると見なす。さらなる実施形態において、本発明のDsiRNAは、例えば本明細書で記述したようなAR阻害活性に対するinvitroアッセイ内で、細胞の環境中、1nMまたはそれ以下、500pMまたはそれ以下、200pMまたはそれ以下、100pMまたはそれ以下、50pMまたはそれ以下、20pMまたはそれ以下、10pMまたはそれ以下、10pMまたはそれ以下、5pMまたはそれ以下、2pMまたはそれ以下、または1pMまたはそれ以下の濃度にて、AR阻害活性例えば特定の実施形態において、少なくとも50のAR阻害が観察された場合、強力なAR阻害試薬であると見なす。特定の実施形態において、本発明の強力なAR阻害dsRNAは、効果的な伝達賦形剤例えば効果的な脂質ナノ粒子処方中で対象に投与した時に、10mg/kgまたはそれ以下の処方された濃度にて、AR阻害活性例えば特定の実施形態において、少なくとも20のARレベルの減少を可能なものとして定義される。好ましくは、本発明の強力なAR阻害dsRNAは、効果的な伝達賦形剤中対象に投与された時に、5mg/kgまたはそれ以下の処方された濃度にて、AR阻害活性例えば特定の実施形態において、少なくとも50のARレベルの減少を可能なものとして定義される。より好ましくは、本発明の強力なAR阻害dsRNAは、効果的な伝達賦形剤中対象に投与された時に、5mg/kgまたはそれ以下の処方された濃度にて、AR阻害活性例えば特定の実施形態において、少なくとも50のARレベルの減少を可能なものとして定義される。任意に、本発明の強力なAR阻害dsRNAは、効果的な伝達賦形剤中対象に投与された時に、2mg/kgまたはそれ以下、または1mg/kgまたはそれ以下の処方された濃度にて、AR阻害活性例えば特定の実施形態において、少なくとも50のARレベルの減少を可能なものとして定義される。特定の実施形態において、本発明のdsRNAの強度を、特定のレベルの標的遺伝子ノックダウンを達成するために必要な標的細胞の細胞質内に存在する、dsRNAのコピー数に対する参照で決定する。例えば、特定の実施形態において、強力なdsRNAは、1000またはそれ以下のRISC-ロードアンチセンス鎖のコピー数/細胞にて標的細胞の細胞質内に存在した場合に、標的mRNAの50またはそれより大きなノックダウンを引き起こしうるものである。より好ましくは、強力なdsRNAは、500またはそれ以下のRISC-ロードアンチセンス鎖のコピー数/細胞にて標的細胞の細胞質内に存在した場合に、標的mRNAの50またはそれより大きなノックダウンを引き起こしうるものである。任意に、強力なdsRNAは、300またはそれ以下のRISC-ロードアンチセンス鎖のコピー数/細胞にて標的細胞の細胞質内に存在した場合に、標的mRNAの50またはそれより大きなノックダウンを引き起こしうるものである。さらなる実施形態において、本発明のDsiRNAの強度は、同一の標的遺伝子内の同一の標的配列を指向した19~23マーdsRNAに対する参照で定義可能である。例えば、相当する19~23マーdsRNAに対して増強した強度を有する本発明のDsiRNAは、強度差の検出を許容するのに十分低い濃度例えば、本明細書で記述したようなinvitroアッセイ中、細胞の環境中1nMまたはそれ以下の、細胞の環境中100pMまたはそれ以下、細胞の環境中10pMまたはそれ以下、細胞の環境中1nMまたはそれ以下のトランスフェクション濃度。とりわけ強度差は、用量応答曲線を産生し、DsiRNA/dsRNAに関連したIC50値を同定する目的のための濃度範囲-例えば0.1pM~10nMにわたり、そのようなアッセイを実施することを介してもっともよく検出可能であるにて、本明細書で記述したinvitroアッセイでアッセイした時に、相当する19~23マーdsRNAと比較して、さらに5またはそれ以上、さらに10またはそれ以上、さらに20またはそれ以上、さらに30またはそれ以上、さらに40またはそれ以上、さらに50またはそれ以上まで標的遺伝子を減少させるDsiRNAでありうる。AR阻害レベルおよび/またはARレベルはまた、間接的にアッセイしてもよく、例えば、PSAレベルにおける減少、または対象中のポリープまたは腫瘍の大きさまたは数の減少の測定を、本発明の二本鎖核酸のARレベルおよび/またはAR阻害効果を査定するために使用してよい。特定の実施形態において、語句から本質的になるは、本発明の抗-ARdsRNAsの参照にて使用される。いくつかのそのような実施形態において、から本質的になるは、AR阻害活性の少なくとも特定のレベル例えば、少なくとも50のAR阻害活性を有する本発明のdsRNAを含む、およびまた、dsRNAのAR阻害活性に有意に影響を与えない1つまたはそれ以上のさらなる構成要素および/または改変も含む組成物を意味する。例えば、特定の実施形態において、本発明のdsRNAおよび/または組成物のdsRNA-関連構成要素の改変が、単離において、本発明のdsRNAに対して、3以上、5以上、10以上、15以上、20以上、25以上、30以上、35以上、40以上、45以上、50以上まで任意にAR阻害活性の強度または間隔を含むAR阻害活性を変えない場合、組成物は、本発明のdsRNAから本質的になる。特定の実施形態において、組成物は、AR阻害活性のより劇的な減少例えば有効性、間隔および/または強度において、80減少、90減少などが、さらなる構成要素または改変の存在下で発生し、そこでまだAR阻害活性が、さらなる構成要素および/または改変の存在下、有意に上昇しない例えばAR阻害活性の観察されたレベルが、本発明の単離されたdsRNAに対して観察されたものの10以内である場合でさえ、本発明のdsRNAから本質的になると見なされる。本明細書で使用するところの、語句dsRNAが、哺乳動物細胞内で、1ナノモルまたはそれ以下の前記細胞の環境下の効果的な濃度にて、invitroにてアッセイした時に、少なくともXまでARmRNAレベルを減少させるは、LipofectaminTMRNAiMAXInvitorgenの存在下、1ナノモルまたはそれ以下のトランスフェクション濃度にて、製造業者の取扱説明書にそってアッセイした時に、少なくともXまで、HeLa細胞集団の天然のARmRNAレベルを減少させるためのdsRNAに対する要求を意味する。そのようなHeLa細胞は、ATCCより入手され、10ウシ胎児血清HyCloneを含むDMEMHyClone中、37°C、5CO2下で維持する。ARmRNAレベルをついで、トランスフェクション後24時または48時でアッセイし、本明細書の他の場所で記述したような適切な対照に関して、阻害を査定する。特定の実施形態において、そのようなアッセイのHeLa細胞を、HepG2、HCT116、HuH7または他の細胞株で置換する。本明細書で使用するところの語句核酸は、一本鎖または二本鎖形状での、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチドまたは改変されたヌクレオチドおよびそれらのポリマーを意味する。本語句は、合成、天然に存在するおよび天然に存在せず、参照核酸と同様の結合特性を持ち、参照ヌクレオチドと同様の様式で代謝される、公知のヌクレオチド類似体、または改変された骨格残基または結合を含む核酸を企図する。そのような類似体の例には、ホスホロチオエート、ホスホルアミデート、メチルリン酸塩、キラル-メチルリン酸塩、2-O-メチルリボヌクレオチド、ペプチド-核酸PNAsが含まれるが、これらに限定はされない。本明細書で使用するところのヌクレオチドは、天然塩基標準および本技術分野でよく知られている改変塩基を持つものを含み、本技術分野で認識されたように使用される。そのような塩基は一般的に、ヌクレオチド糖部位の1’位に位置している。ヌクレオチドは一般的に、塩基、糖およびリン酸基を含む。ヌクレオチドは、糖、リン酸および/または塩基部位にて改変されないか、改変されうるヌクレオチド類似体、改変ヌクレオチド、非天然ヌクレオチド、非標準ヌクレオチドおよびその他として交互に引用される、例えば本明細書にて参考文献によってすべて組み込まれている、UsmanandMcSwiggen、上記;Eckstein,etal.,国際PCT特許第92/07065号パンフレット;Usmanetal,国際PCT特許第WO93/15187号パンフレット;UhlmanPeyman、上記を参照のこと。Limbach,etal,NucleicAcidsRes.22:2183,1994によって要約されたような、本技術分野で公知の改変核酸塩基の種々の例が存在する。核酸分子内に導入可能な塩基改変の非限定例のいくつかは、ヒポキサンチン、プリン、ピリジン-4-オン、ピリジン-2-オン、フェニル、シュードウラシル、2,4,6-トリメトキシベンゼン、3-メチルウラシル、ジヒドロウリジン、ナフチル、アミノフェニル、5-アルキルシチジン類例えば5-メチルシチジン、5-アルキルウリジン類例えばリボチミジン、5-ハロウリジン例えば5-ブロモウリジンまたは6-アザピリミジン類または6-アルキルピリミジン類例えば6-メチルウリジン、プロピンおよびその他Burgin,etal.,Biochemistry35:14090,1996;UhlmanPeyman,上記が挙げられる。本様態において、改変塩基は、1位でのアデニン、グアニン、シトシンおよびウラシルまたはそのそれらの等価物以外のヌクレオチド塩基を意味する。本明細書で使用するところの改変ヌクレオチドは、ヌクレオシド、ヌクレオ塩基、ペントース環またはリン酸基への1つまたはそれ以上の改変を持つヌクレオチドを意味する。例えば、改変ヌクレオチドは、アデノシン一リン酸、グアノシン一リン酸、ウリジン一リン酸およびシチジン一リン酸を含むリボヌクレオチド類、およびデオキシアデノシン一リン酸、デオキシグアノシン一リン酸、デオキシチミジン一リン酸およびデオキシシチジン一リン酸を含むデオキシリボヌクレオチド類を除外する。改変には、メチルトランスフェラーゼのような、ヌクレオチドを改変する酵素による改変の結果である、天然に発生するものが含まれる。改変ヌクレオチドにはまた、合成または天然に発生しないヌクレオチドが含まれる。ヌクレオチドにおける合成または天然に存在しない改変には、2’改変、例えば2’-メトキシエトキシ、2’-フルオロ、2’-アリル、2’-O-[2-メチルアミノ-2-オキソエチル]、4’-チオ、4’-CH2-O-2’-ブリッジ、4’-CH22-O-2’-ブリッジ、2’-LNA、および2’-O-N-メチルカルバメートを持つもの、または塩基類似体を含むものが含まれる。本明細書のために記述されたような、2’-改変ヌクレオチドに関連して、アミノによって、2’-NH2または2’-O-NH2が意味され、改変されてよく、または改変されなくてよい。そのような改変基は、例えば、Ecksteinetal.,米国特許第5,672,695号明細書およびMatulic-Adamicetal.,米国特許第6,248,878号明細書にて記述されている。本明細書の核酸分子に関して、改変は、二本鎖リボ核酸dsRNAの1つまたは両方の鎖上のパターンで、これらの試薬上に存在しうる。本明細書で使用するところの交互位置は、すべての他のヌクレオチドが改変されたヌクレオチドであるか、または定義された長さのdsRNAの鎖にわたるすべての改変されたヌクレオチド間で改変されていないヌクレオチド例えば、改変されていないリボヌクレオチドが存在する例えば5’-MNMNMN-3’、3’-MNMNMN-5’、式中Mは改変されたヌクレオチドであり、Nは改変されていないヌクレオチドであるパターンを意味する。改変パターンは、例えば本明細書で記述したような、位置ナンバリング慣例にしたがって、5’または3’末端いずれかの第一ヌクレオチド位置から開始する特定の実施形態において、位置1は、本発明のDsiRNA試薬の推定されるDicer開裂事象に続く鎖の終末残基に関して指定される。したがって位置1はいつも、本発明の前処理試薬の3’末端または5’末端残基を構成しない。交互位置での改変されたヌクレオチドのパターンは、鎖の全長で走ってよいが、しかし特定の実施形態で、それぞれ、少なくとも2、3、4、5、6または7つの改変されたヌクレオチドを含む、少なくとも4、6、8、10、12、14ヌクレオチドが含まれる。本明細書で使用するところの、位置の交互対は、2つの連続した改変されたヌクレオチドが、dsRNAの鎖の定義された長さにわたり、2つの連続した改変されていないヌクレオチドによって分離されるパターンを意味する例えば、5’-MMNNMMNNMMNN-3’、3’-MMNNMMNNMMNN-5’、式中Mは改変されたヌクレオチドであり、Nは改変されていないヌクレオチドである。改変パターンは、本明細書で記述したもののような、位置ナンバリング慣例にしたがって、5’または3’末端いずれかでの、第一ヌクレオチド位置から開始する。交互位置における改変されたヌクレオチドのパターンは、鎖の全長を走ってよいが、好ましくは、それぞれ、少なくとも4、6、8、10、12または14の改変されたヌクレオチドを含む、少なくとも8、12、16、20、24、28ヌクレオチドが含まれる。上記改変パターンは例示であり、本発明の範囲における制限は意図しないことが強調される。本明細書で使用するところの塩基類似体は、核酸二本鎖に組み込むことが可能な改変されたヌクレオチド中のヌクレオチド糖部位の1’位または核酸二本鎖内に組み込むことが可能なヌクレオチド糖部位置換中の等価の位置に位置するヘテロ環状部位を意味する。本発明のdsRNAsにおいて、塩基類似体は一般的に、一般的塩基グアニンG、シトシンC、アデニンA、チミンTおよびウラシルUを除く、プリンまたはピリミジン塩基のいずれかである。塩基類似体は、dsRNAs中他の塩基または塩基類似体と二本鎖となりうる。塩基類似体には、本発明の化合物および方法にて有用なもの、たとえば、参考文献によって本明細書に組み込まれている、Bennerに付与された米国特許第5,432,272号明細書および第6,001,983号明細書、およびManohARanに付与された米国公開第20080213891号明細書に開示されたものが含まれる。塩基の非限定例には、ハイポキサンチンI、キサンチンX、3β-D-リボフラノシル-2,6-ジアミノピリミジンK、3-β-D-リボフラノシル-1-メチル-ピラゾロ[4,3-d]ピリミジン-5,74H,6H-ジオンP、イソ-シトシンiso-C、イソ-グアニンiso-G、1-β-D-リボフラノシル-5-ニトロインドール、1-β-D-リボフラノシル-3-ニトロピロール、5-ブロモウラシル、2-アミノプリン、4-チオ-dT、7-2-チエニル-イミダゾ[4,5-b]ピリジンDsおよびピロール-2-カルボアルデヒドPa、2-アミノ-6-2-チエニルプリンS、2-オキソピリジンY、ジフルオロトリル、4-フルオロ-6-メチルベンズイミダゾール、4-メチルベンゾイミダゾール、3-メチルイソカルボスチリリル、5-メチルイソカルボスチリリルおよび3-メチル-7-プロピニルイソカルボスチリリル、7-アザインドリル、6-メチル-7-アザインドリル、イミジゾピリジニル、9-メチル-イミジゾピリジニル、ピローロピリジニル、イソカルボスチリリル、7-プロピニルイソカルボシチリリル、プロピニル-7-アザインドリル、2,4,5-トリメチルフェニル、4-メチルインドリル、4,6-ジメチルインドリル、フェニル、ナフタレニル、アントラセニル、フェナントラセニル、ピレニル、スチルベンジル、テトラセニル、ペンタセニルおよびそれらの構造誘導体Schweitzeretal.,J.Org.Chem.,59:7238-72421994;Bergeretal.,NucleicAcidsResearch,2815:2911-29142000;Moranetal.,J.Am.Chem.Soc.,119:2056-20571997;Moralesetal.,J.Am.Chem.Soc.,121:2323-23241999;Guckianetal.,J.Am.Chem.Soc.,118:8182-81831996;Moralesetal.,J.Am.Chem.Soc.,1226:1001-10072000;McMinnetal.,J.Am.Chem.Soc.,121:11585-115861999;Guckianetal.,J.Org.Chem.,63:9652-96561998;Moranetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.,94:10506-105111997;Dasetal.,J.Chem.Soc.,PerkinTrans.,1:197-2062002;Shibataetal.,J.Chem.Soc.,PerkinTrans.,1:1605-16112001;Wuetal.,J.Am.Chem.Soc.,12232:7621-76322000;ONeilletal.,J.Org.Chem.,67:5869-58752002;Chaudhurietal.,J.Am.Chem.Soc.,117:10434-104421995;および米国特許第6,218,108号明細書が含まれる。塩基類似体はまたユニバーサル塩基であってよい。本明細書で使用するところのユニバーサル塩基は、核酸二本鎖中に存在する場合に、二本鎖ヘリックス構造例えばリン酸骨格の構造を変化させずに、1つ以上の型の塩基と反対に位置可能な、改変ヌクレオチド中のヌクレオチド糖部位の1’位、またはヌクレオチド糖部位置換基中の等価位置に位置するヘテロ環状部位を意味する。さらに、ユニバーサル塩基は、存在する一本鎖核酸の、その中で標的核酸に対して二本鎖とする能力を破壊しない。ユニバーサル塩基を含む一本鎖核酸の、標的核酸を二本鎖とする能力を、当業者に理解される方法例えば、UV吸収、円偏光二色性、ゲルシフト、一本鎖ヌクレアーゼ感受性などによってアッセイ可能である。さらに、二本鎖形成が観察された条件は、二本鎖安定性または形成を決定するために変化してよく、融解温度Tmが、核酸二本鎖の安定性と相関するので、例えば温度が変化してよい。標的核酸に実際相補的である参照一本鎖核酸と比較して、ユニバーサル塩基を含む一本鎖核酸は、相補的核酸と形成された核酸二本鎖よりも低いTmを持つ標的核酸と一緒に二本鎖を形成する。しかしながら、ユニバーサル塩基が単一ミスマッチを産出するために塩基で置換された参照一本鎖核酸と比較して、ユニバーサル塩基を含む一本鎖核酸は、ミスマッチした塩基を持つ核酸と形成された二本鎖よりも、より高いTmを持つ標的核酸と二本鎖を形成する。いくつかのユニバーサル塩基は、塩基対形成条件下、ユニバーサル塩基と、すべての塩基グアニンG、シトシンC、アデニンA、チミンTおよびウラシルU間で水素結合を形成することによって塩基対化可能である。ユニバーサル塩基は、ただ1つの単一相補塩基と塩基対を形成する塩基ではない。二本鎖内で、ユニバーサル塩基は、水素結合を形成しなくてよく、また二本鎖の反対の鎖上、それと反対の各G、C、A、TおよびUと1つの水素結合または1つ以上の水素結合を形成してよい。好ましくは、ユニバーサル塩基は、二本鎖の反対の鎖上で、それと反対の塩基と相互作用しない。二本鎖において、ユニバーサル塩基間の塩基対化は、リン酸骨格の二本ヘリックス構造を変えずに発生する。ユニバーサル塩基はまた、スタッキング相互作用によって、同一の核酸鎖上の隣接ヌクレオチド中の塩基と相互作用してもよい。そのようなスタッキング相互作用は、とりわけ、ユニバーサル塩基が、二本鎖の反対の鎖上で、それとは反対に位置する塩基と、任意の水素結合を形成しない条件下で、二本鎖を安定化させる。ユニバーサル-結合ヌクレオチドの非限定例には、イノシン、1-β-D-リボフラノシル-5-ニトロインドール、および/または1-β-D-リボフラノシル-3-ニトロピロールが含まれるQuayetal.に付与された米国特許第20070254362号、VanAerschotetal.,Anacyclic5-nitroindazolenucleosideanalogueasambiguousnucleoside.NucleicAcidsRes.1995Nov11;2321:4363-70;Loakesetal.,3-Nitropyrroleand5-nitroindoleasuniversalbasesinprimersforDNAsequencingandPCR.NucleicAcidsRes.1995Jul11;2313:2361-6;LoakesandBrown,5-Nitroindoleasanuniversalbaseanalogue.NucleicAcidsRes.1994Oct11;2220:4039-43。本明細書で使用するところのループは、特定の一本鎖ヌクレオチド領域の側面の相補領域が、相補領域間の一本鎖ヌクレオチド領域が、二本鎖形成またはワトソン-クリック塩基対化から除外される方法でハイブリッド形成する、核酸の一本鎖によって形成される構造を意味する。ループは、任意の長さの一本鎖ヌクレオチド領域である。ループの例には、ヘパリン、ステムループまたは伸長ループのような構造中に存在する、対になっていないヌクレオチドが含まれる。本明細書で使用するところの、dsRNAの文脈中の伸長ループは、一本鎖ループ、および加えて、1、2、3、4、5、6または20までの塩基対またはループの側面の二本鎖を意味する。伸長ループ中、5’側上のループの側面に存在するヌクレオチドは、3’側上でループの側面に存在するヌクレオチドと二本鎖を形成する。伸長ループはヘアピンまたはステムループを形成してよい。本明細書で使用するところの、dsRNAの文脈中のテトラループは、隣接するワトソン-クリックハイブリッド形成ヌクレオチドの安定性に寄与する、安定二次構造を形成する4つのヌクレオチドからなるループ一本鎖領域を意味する。理論に制限されることなしに、テトラループは、スタッキング相互作用によって、隣接するワトソン-クリック塩基対を安定化させてよい。加えて、テトラループ中の4つのヌクレオチド間の相互作用には、非ワトソン-クリック塩基対化、スタッキング相互作用、水素結合、および接触相互作用が含まれるが、これらに限定はされないCheongetal.,Nature1990Aug16;3466285:680-2;HeusandPARdi,Science1991Jul12;2535016:191-4。テトラループは、4つの無作為塩基からなる単一モデルループ配列から推測されるものよりも高い隣接二本鎖融解温度Tmにおける増加を与える。例えば、テトラループは、長さにして少なくとも2塩基対の二本鎖を含むヘアピンに、10mMNaHPO4中、少なくとも55°Cの融解温度を与えうる。テトラループには、リボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド、改変ヌクレオチドおよびそれらの混合物が含まれてよい。RNAテトラループの例には、テトラループのUNCGファミリ-例えばUUCG、テトラループのGNRAファミリー例えばGAAA、およびCUUGテトラループが含まれるWoeseetal.,ProcNatlAcadSciUSA.1990Nov;8721:8467-71;Antaoetal.,NucleicAcidsRes.1991Nov11;1921:5901-5。DNAテトラループの例には、テトラフープのdGNNAファミリー例えば、dGTTA、テトラループのdGNRAファミリー、テトラループのdGNABファミリー、テトラループのdCNNGファミリー、テトラフープのdTNCGファミリー例えばdTTCGが含まれる。Nakanoetal.Biochemistry,4148,14281-14292,2002.;SHINJIetal.NipponKagakkaiKoenYokoshuVOL.78th;NO.2;PAGE.7312000.。本明細書で使用するところの語句siRNAは、各鎖が、RNA、RNA類似体類またはRNAおよびDNAを含む二本鎖核酸を意味する。siRNAは、19~23ヌクレオチドを含み、または21ヌクレオチドを含む。siRNAは典型的には、siRNA中の二本鎖領域が17~21ヌクレオチド、または19ヌクレオチドを含むように、各鎖の3’末端上に2bpオーバーハングを持つ。典型的には、siRNAのアンチセンス鎖は、AR遺伝子/RNAの標的配列と十分相補的である。本発明の抗-ARDiRNAは、少なくとも25ヌクレオチドの鎖長を有する。したがって、特定の実施形態において、抗-ARDsiRNAは、1つのオリゴヌクレオチド配列、長さにして少なくとも25ヌクレオチドであり、35または50まででしかない、またはそれ以上のヌクレオチドである、第一位配列を含む。RNAの本配列は、長さにして26~35、26~34、26~33、26~32、26~31、26~30、26~29ヌクレオチドでありうる。本配列は、長さにして27または28ヌクレオチドでありえ、長さにして27ヌクレオチドであり得る。DsiRNA試薬の第二配列は、真核細胞の細胞質内のような、生物学的状態下第一配列にアニールする配列でありうる。一般的に、第二オリゴヌクレオチド配列は、第一オリゴヌクレオチドと少なくとも19の相補塩基対を持ち、より典型的には、第二オリゴヌクレオチド配列は、第一オリゴヌクレオチド配列と、21またはそれ以上の相補塩基対を持ち、または25以上の相補塩基対を持つ。1つの実施形態において、第二配列は、第一配列と同一の長さであり、DsiRNA試薬は平滑末端である。他の実施形態において、DsiRNA試薬の末端は1つまたはそれ以上のオーバーハングを持つ。特定の実施形態において、DsiRNA試薬の第一および第二オリゴヌクレオチド配列は、化学的に合成可能で、典型的に化学的に合成される別のオリゴヌクレオチド鎖上に存在する。幾つかの実施形態において、両方の鎖は、長さにして26~35ヌクレオチドである。他の実施形態において、両方の鎖は、長さにして、25~30または26~30である。1つの実施形態において、両方の鎖は、長さにして27ヌクレオチドであり、完全に相補的であり、平滑末端を持つ。本発明の特定の実施形態において、抗-ARDsiRNAの第一および第二配列は、別のRNAオリゴヌクレオチド鎖上に存在する。1つの実施形態において、1つまたは両方のオリゴヌクレオチド鎖は、Dicerに対する基質として働くことが可能である。他の実施形態において、少なくとも1つの改変が、遺伝子発現を阻害することにおいて、二本鎖RNA構造の有効性を最大化する方向で、Dicerが二本鎖RNA構造に結合することを促進して存在する。本発明の特定の実施形態において、抗-ARDsiRNA試薬は、第一鎖センス鎖の3’末端で平滑末端を有し、第二鎖アンチセンス鎖の3’末端で3’オーバーハングを有する抗-ARDsiRNAと、異なる長さの2つのオリゴヌクレオチド鎖からなる。DsiRNAはまた、1つまたはそれ以上のデオキシリボ核酸DNA塩基置換基を含んでもよい。2つの別のオリゴヌクレオチドを含む好適なDsiRNA組成物は、化学結合基によって、それらのアニーリング領域外で化学的に連結可能である。多くの好適な化学連結基が、本技術分野で公知であり、使用可能である。好適な基は、DsiRNAにおけるDicer活性を妨げず、標的遺伝子から転写されたRNAの指向性破壊と干渉しない。あるいは、2つの別のオリゴヌクレオチドは、ヘアピン構造が、DsiRNA組成物を作製している2つのオリゴヌクレオチドのアニーリングに際して産出されるように、第三オリゴヌクレオチドによって連結可能である。ヘアピン構造は、DsiRNA上のDicer活性を妨げず、標的RNAの指向性破壊を干渉しない。本明細書で使用するように、標的RNAまたはcDNA配列例えばARmRNAに十分に相補的な配列を持つdsRNA、例えばDsiRNAまたはsiRNAは、dsRNAが、RNAi機構例えばRISC複合体または工程によって、標的RNAcDNA配列が列挙される場合、列挙されたcDNA配列に相当するRNA配列の崩壊を引き起こすのに十分な配列を持つことを意味する。dsRNA分子は、すべてのアンチセンス鎖残基が、標的配列中の残基に相補的であるようにデザイン可能である。あるいは、前記分子の安定性を増加させるため、および/または処理活性を増強するために、分子内に置換を実施可能である。置換は、鎖内で実施可能であり、または鎖の末端での残基に対して実施可能である。特定の実施形態において、置換および/または修飾は、DsiRNA試薬内の特定の残基で実施する。そのような置換および/または修飾には、例えば、DsiRNA試薬のセンス鎖の3’末端位置からナンバリングした時に、位置1、2および3の1つまたはそれ以上の残基でのデオキシ-修飾、およびDsiRNA試薬のアンチセンス鎖の3’末端残基での2’-O-アルキル例えば2’-O-メチル修飾の導入が含まれ、そのような修飾はまた、アンチセンス鎖の3’部分のオーバーハング位置にて、および活性siRNA試薬を形成するように処理されるDsiRNA試薬の領域内に含まれる、DsiRNAのアンチセンス鎖の他の残基にて実施される。先の修飾は、例として提供され、任意の様式で制限する意図はない。本発明の抗-ARDsiRNA試薬にて実施可能な修飾および置換のさらなる記述を含む、好ましいDsiRNA試薬の構造のさらなる考慮を以下に見ることができる。本明細書で使用するように、標的RNAまたはcDNA配列例えばARmRNAに十分に相補的な配列を持つdsRNAは、DsiRNAまたはsiRNAがRNAi機構例えばRISC複合体または工程によって標的RNAcDNAが列挙される場合、列挙されたcDNA入れつん移送補的なRNA配列の破壊を引き起こすために十分な配列を持つことを意味する。例えば、RANi機構または工程によって、標的RNAの破壊を引き起こすための、標的RNAまたはcDNA配列に十分相補的なdsRNAは、dsRNA活性の適切なアッセイ例えば、以下実施例2にて記述したようなinvitroアッセイ中の、標的RNAのレベルにおける検出可能な減少を引き起こすdsRNAとして同定可能であり、またはさらなる実施例において、RNAi機構または工程によって、標的RNAの破壊を引き起こすための標的RNAまたはcDNAに十分相補的なdsRNAを、dsRNA活性の適切なアッセイ中の、標的RNAのレベルにおける、少なくとも5、少なくとも10、少なくとも15、少なくとも20、少なくとも25、少なくとも30、少なくとも35、少なくとも40、少なくとも45、少なくとも50、少なくとも55、少なくとも60、少なくとも65、少なくとも70、少なくとも75、少なくとも80、少なくとも85、少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98、少なくとも99の減少を産出するdsRNAとして同定可能である。さらなる実施例において、RNAi機構または工程によって標的RNAの破壊を引き起こすための、標的RNAまたはcDNA配列に十分相補的なdsRNAは、細胞または生命体における標的RNAまたはタンパク質レベルに関して、阻害活性の特定のレベルの期間の査定に基づいて同定可能である。例えば、RNAi機構または工程によって標的RNAの破壊を引き起こすための、標的RNA配列またはcDNAに十分相補的なdsRNAは、細胞または生命体への前記dsRNAの投与少なくとも48時間後に、少なくとも20まで、標的mRNAレベルを減少可能なsdRNAとして同定可能である。好ましくは、RNAi機構または工程によって標的RNAの破壊を引き起こすための、標的RNAまたはcDNA配列に十分相補的なdsRNAは、細胞または生命体への前記dsRNAの投与少なくとも72時間後に、少なくとも40まで、細胞または生命体への前記dsRNAの投与少なくとも4、5または7日後に、少なくとも40まで、細胞または生命体への前記dsRNAの投与少なくとも48時間後に、少なくとも50まで、細胞または生命体への前記dsRNAの投与少なくとも72時間後に、少なくとも50まで、細胞または生命体への前記dsRNAの投与少なくとも4、5または7日後に、少なくとも50まで、細胞または生命体への前記dsRNAの投与少なくとも48時間後に、少なくとも80まで、細胞または生命体への前記dsRNAの投与少なくとも72時間後に、少なくとも80まで、細胞または生命体への前記dsRNAの投与少なくとも4、5または7日後に、少なくとも80まで、標的mRNAレベルを減少可能なsdRNAとして同定可能である。dsRNA分子は、アンチセンス鎖のすべての残基が、標的分子内の残基に相補的であるようにデザイン可能である。あるいは、置換を、分子の安定性を増加させ、および/または処理活性を増強するために、前記分子内で実施可能である。置換は、鎖内にて実施可能であり、または鎖の末端での残基にて実施可能である。特定の実施形態において、置換および/または改変は、DsiRNA試薬内の特定の残基にて実施される。そのような置換および/または改変には、例えばDsiRNAのセンス鎖の3’末端位置からナンバリングした場合、位置1、2および3の残基の1つまたはそれ以上でのデオキシ-改変、DsiRNA試薬のアンチセンス鎖の3’末端残基での、2’-O-アルキル例えば2’-O-メチル改変の導入が含まれ、そのような改変はまた、アンチセンス鎖の3’末端のオーバーハング位置、および活性siRNA試薬を形成するために処理されるDsiRNA試薬の領域内に含まれるDsiRNAのアンチセンス鎖の交互残基にて実施される。以上の改変は、例として提供され、任意の様式にて制限の意図はない。本発明の抗-ARDsiRNA試薬において実施可能な改変および置換のさらなる記述を含む、好ましいDsiRNA試薬の構造のさらなる考慮を以下で見ることが可能である。第一配列が、本明細書の第二配列に関して本質的に相補的であるとして引用される場合、2つの配列は完全に相補的であってよく、またはそれらの根本的な適用にもっとも関連のある状態下、ハイブリッド形成する能力を維持したまま、それらはハイブリッド形成に際して、1つまたはそれ以上に、しかし一般的に4、3または2以下のミスマッチ塩基を形成してよい。しかしながら、2つのオリゴヌクレオチドが、ハイブリッド形成に際して、1つまたはそれ以上の一本鎖オーバーハングを形成するようにデザインされる場合、そのようなオーバーハングは、相補性の決定に関して、ミスマッチとして見なされるものではない。例えば、より長いオリゴヌクレオチドが、より短いオリゴヌクレオチドに対して完全に相補的である21ヌクレオチドの配列を含む場合、長さにして21ヌクレオチドの1つのオリゴヌクレオチドを含むdsRNAと、長さにして23ヌクレオチドの他のオリゴヌクレオチドがまた、本発明の目的に対して、完全に相補的であるとしてまた引用されてよい。本明細書で使用する、語句二本鎖RNAまたはdsRNAは、以上で定義したような、2つの逆平行および本質的に相補的な核酸鎖を含む二本鎖構造を持つ、リボ核酸分子の複合体を意味する。二本鎖構造を形成する2つの鎖は、1つのより長いRNA分子の異なる位置であってよく、別々のRNA分子であってよい。別々のRNA分子の場合、そのようなdsRNAはしばしば、siRNA短い干渉RNAまたはDsiRNADicer基質siRNAsとして引用される。2つの鎖が1つのより長い分子の一部分である場合、したがって二本鎖構造を形成する1つの鎖の3’末端と、個々の他の鎖の5’末端間のヌクレオチドの連鎖によって連結される場合、連結しているRNA鎖は、ヘアピンループ、短ヘアピンRNAまたはshRNAとして引用される。2つの鎖が、二本鎖構造を形成する1つの鎖の3’末端と、個々の他の鎖の5’末端間のヌクレオチドの連鎖以外の方法によって共有的に連結する場合、連結している構造は、リンカーとして引用される。RNA鎖は、同一または異なる数のヌクレオチドを持ってよい。塩基対の最大数は、dsRNAのもっとも短い鎖中のヌクレオチドの数マイナス二本鎖中に存在する任意のオーバーハングである。二本鎖構造に加えて、dsRNAは、1つまたはそれ以上のヌクレオチドオーバーハングを含んでよい。加えて、本明細書で使用するところのdsRNAには、多重ヌクレオチドにおける本質的改変を含み、本明細書で開示されたか、本技術分野で公知のすべての型の改変を含む、リボヌクレオチド、ヌクレオシド間結合、末端基、キャップおよび共役部位への化学的改変が含まれうる。siRNA-またはDsiRNA-型分子内で使用されるような、任意のそのような改変は、本明細書および請求項の目的に対して、dsRNAによって包含される。語句二本鎖領域は、ワトソン-クリック塩基対化または相補的であるか、または本質的に相補的であるオリゴヌクレオチド鎖間の二本鎖に対して許容する他の様式のいずれかによって、互いに塩基対を形成する2つの相補的であるか、または本質的に相補的なオリゴヌクレオチド中の領域を意味する。例えば、21ヌクレオチドユニットを持つオリゴヌクレオチド鎖は、21ヌクレオチドユニットを持つオリゴヌクレオチドは、21ヌクレオチドユニットの他のオリゴヌクレオチドと塩基対化可能であり、二本鎖領域が19塩基対からなるように、各鎖上の19塩基のみが、相補的であるか、本質的に相補的である。残りの塩基対は、例えば、5’および3’オーバーハングとして存在する。さらに、二本鎖領域内で、100相補性は、必要ではなく、本質的な相補性が二本鎖領域内で許容可能である。本質的な相補性は、生物学的条件下でアニーリング可能であるような、鎖間の相補性を意味する。2つの鎖が、生物学的条件下でアニーリング可能であるかどうかを実験的に決定するための技術が、本技術分野でよく公知である。あるいは、2つの鎖を、それらが互いにアニールするかどうかを決定するために、合成し、生物学的条件下で一緒に加えることが可能である。多数の塩基にわたり塩基対を形成する一本鎖核酸が、ハイブリッドすると呼ばれる。ハイブリッド形成は、生理学的および生物学的に関連のある条件例えば、細胞内:pH7.2、140mMカリウムイオン、細胞外pH7.4、145mMナトリウムイオン下で典型的に決定される。ハイブリッド形成条件は一般的に、一価カチオンと生物学的に許容可能な緩衝液を含み、二価カチオン、複合体アニオン、例えばグルタミン酸カリウムからのグルタミン酸、スクロースのような非荷電種、および試料中の水の活性を減少させるための不活性ポリマー、例えばPEGを含んでよく、または含まなくてよい。そのような条件には、塩基対が形成される条件が含まれる。ハイブリッド形成は、二本鎖を形成している一本鎖核酸を乖離させるために必要な温度、すなわち融解温度、Tmによって測定される。ハイブリッド形成条件はまた、塩基対が形成されうる条件である。種々の厳密性条件を使用して、ハイブリッド形成を決定可能であるWahl,G.M.andS.L.Berger1987MethodsEnzymol.152:399;Kimmel.A.R.1987MethodsEnzymol.152:507を参照のこと。厳密性温度条件は通常、少なくとも約30°Cの、より好ましくは少なくとも約37°C、最も好ましくは少なくとも約42°Cの温度を含む。長さにして50塩基対以下であると予想されるハイブリッドに対するハイブリッド形成温度は、ハイブリッドの融解温度Tmの5~10°C下であるべきであり、そこでTmは、以下の等式にしたがって決定される。長さにして18塩基対以下のハイブリッドに対して、Tm°C=2AT塩基の4GC塩基の。長さにして18~49塩基対のハイブリッドに対して、Tm°C=81.516.6log10[Na]0.41GC-600/N、式中Nはハイブリッド中の塩基数であり、[Na]はハイブリッド形成緩衝液中のナトリウムイオンの濃度である1×SSC=0.165Mに対する[Na]。例えば、ハイブリッド形成決定緩衝液を表1に示す。ハイブリッド形成条件における有用な変化が、当業者に簡単に理解されるであろう。ハイブリッド形成技術は、当業者によく公知であり、例えば、BentonandDavisScience196:180,1977;GrunsteinandHognessProc.Natl.Acad.Sci.,USA72:3961,1975;Ausubeletal.CurrentProtocolsinMolecularBiology,WileyInterscience,NewYork,2001;BergerandKimmelAntisensetoMolecularCloningTechniques,1987,AcademicPress,NewYork;およびSambrooketal.,MolecularCloning:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratoryPress,NewYorkにて記述されている。本明細書で使用するところの、オリゴヌクレオチド鎖は、一本鎖核酸分子である。オリゴヌクレオチドは、リボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド、改変ヌクレオチド例えば2’改変を持つヌクレオチド、合成塩基類似体などまたはそれらの混合物を含んでよい。そのような改変オリゴヌクレオチドは、例えば細胞取込の増強、ヌクレアーゼの存在下での安定性の増加のような特性のために、天然の形態に対して好ましい。本明細書で使用するところの語句リボヌクレオチドは、天然および合成、非改変および改変リボヌクレオチドを包含する。改変には、糖部分に対する、塩基部分に対する、および/またはオリゴヌクレオチド中のリボヌクレオチド間の結合に対する変化が含まれる。本明細書で使用するところの語句リボヌクレオチドはとりわけ、2’リボース環位置にて、単一プロトン基を有するヌクレオチドである、デオキシリボヌクレオチドを除外する。本明細書で使用するところの語句デオキシリボヌクレオチドは、天然および合成、非改変および改変デオキシリボヌクレオチドを包含する。改変には、糖部分に対する、塩基部分に対する、および/またはオリゴヌクレオチド中のデオキシリボヌクレオチド間の結合に対する変化が含まれる。本明細書で使用するところの語句デオキシリボヌクレオチドにはまた、dsRNA試薬のDicer開裂を許容しない改変リボヌクレオチド、例えば、そのような残基の結合においてDicer開裂が発生することを許容しない、2’-O-メチルリボヌクレオチド、ホスホロチオエート-改変リボヌクレオチド残基なども含まれる。本明細書で使用するところの語句PS-NAは、ホスホロチオエート-改変ヌクレオチド残基を意味する。語句PS-NAはしたがって、ホスホロチオエート-改変リボヌクレオチドPS-RNAsおよびホスホロチオエート-改変デオキシリボヌクレオチドPS-DNAs両方を包含する。本明細書で使用するところのDicerは、dsRNAまたはdsRNA-含有分子、例えば二本鎖RNAdsRNAまたはプレ-ミクロRNAmiRNAを、通常3’末端に2塩基オーバーハングを持つ、二本鎖核酸断片19~25ヌクレオチド長に開裂する、RNaseIIIファミリー内のエンドリボヌクレアーゼを意味する。本発明のdsRNAに関して、本発明の試薬のdsRNA領域によって形成される二本鎖は、Dicerによって認識され、二本鎖の少なくとも1つの鎖上Dicer基質である。Dicerは、RNA干渉経路中の第一段階を触媒し、結果として、標的RNAの分解となる。ヒトDicerのタンパク質配列が、参考文献によって本明細書で組み込まれた、登録番号NP_085124下、NCBIデータベースにて提供される。Dicer開裂は、以下のように決定される例えば、Collingwoodetal.,Oligonucleotides18:1872002008を参照のこと。Dicer開裂アッセイにおいて、RNA二本鎖100pmolを、1ユニットの組換え体ヒトDicerStratagene、LaJolla,CAあり、またはなしで、20μLの20mMTrispH8.0、200mMNaCl、2.5mMMgCl2中、37°Cにて18~24時間インキュベートする。試料を、PerformaSR96-穴プレートEdgeBiosystems,Gaithersburg,MDを用いて脱塩する。Dicerでの前処理および後処理二本鎖RNAsの電子噴霧イオン化液体クロマトグラフィー質量分析ESI-LCMSを、ThermoFinniganTSQ7000、Xcaliburデータシステム、ProMassデータ処理ソフトウェアおよびParadigmMS4HPLCMichromBioResources,Auburn,CAからなるOligoHTCSシステムNavatia,Princeton,NJ:Hailetal.,2004を用いて実施する。本アッセイにおいて、Dicer開裂が、少なくとも5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、95または100のDicer基質dsRNAすなわち25~30bp、dsRNA、好ましくは26~30bpdsRNAが、より短いdsRNA例えば、19~23bpdsRNA、好ましくは21~23bpdsRNAに開裂される場で発生する。本明細書で使用するところのDicer開裂部位は、DicerがdsRNA例えば、本発明のDsiRNA試薬のdsRNA領域を開裂する部位を意味する。Dicerは、典型的にdsRNAsのセンスおよびアンチセンス鎖両方を開裂する、2つのRNaseIIIドメインを含む。RNaseIIIドメインとPAZドメイン間の平均距離が、産出する短い二本鎖核酸断片の長さを決定し、この距離は、変化可能であるMacraeetal.2006Science311:195-8。図1で示すように、Dicerは、アンチセンス鎖の3’末端から除去された、21番目と22番目のヌクレオチド間の部位にて、そしておよびセンス鎖の5’末端より除去された、21番目と22番目のヌクレオチド間の相当する部位で、2ヌクレオチド3’オーバーハングを持つアンチセンス鎖を有する、本発明の特定の二本鎖リボ核酸を開裂すると考案される。図1にて描写したものと異なる、dsRNA分子に対する考案された、および/または一般的なDicer開裂部位が、Macraeetal.にて記述されたものを含む、本技術分野で認識される方法を介して、同様に同定されうる。図1で描写したDicer開裂事象が、21ヌクレオチドsiRNAを産出する一方で、dsRNA例えばDsiRNAのDicer開裂が結果として、長さにして19~23ヌクレオチドのDicer-処理siRNA長の産出となりうることが留意される。実際、特定の実施形態において、二本鎖DNA領域は、21マーではなく、典型的に非優先19マーまたは20マーsiRNAの一般的なDicer切除を指向する目的のために、dsRNA内に含まれてよい。本明細書で使用するところの、オーバーハングは、dsRNAの5’末端または3’末端にて1つまたはそれ以上の遊離末端を持つ二本鎖の文脈において、対になっていないヌクレオチドを意味する。特定の実施形態において、オーバーハングは、アンチセンス鎖またはセンス鎖上の3’または5’オーバーハングである。いくつかの実施形態において、オーバーハングは、1~6ヌクレオチド、任意に1~5、1~4、1~3、1~2、2~6、2~5、2~4、2~3、3~6、3~5、3~4、4~6、4~5、5~6ヌクレオチド、または1、2、3、4、5または6ヌクレオチドの長さを持つ3’オーバーハングである。本発明のdsRNAは、二本鎖構造を形成するためにハイブリッド形成するのに十分相補的である2つのRNA鎖を含む。dsRNAの1つの鎖アンチセンス鎖は、AR標的遺伝子の発現の間に形成されたmRNAの配列から誘導された、標的配列に本質的に相補的な、一般的には完全に相補的な相補性の領域を含み、他の鎖センス鎖は、アンチセンス鎖に相補的な領域を含み、それによって2つの鎖は、好適な条件下で混合した時に、ハイブリッド形成し、二本鎖構造を形成する。一般的に、二本鎖構造は、長さにして15~35、任意に25~30、26~30、18~25、19~24または19~21塩基対である。同様に、標的配列に相補的な領域は、長さにして、15~35、任意に18~30、25~30、19~24または19~21ヌクレオチドである。本発明のdsRNAはさらに、1つまたはそれ以上の一本鎖ヌクレオチドオーバーハングを含んでよい。一般的に長さにして少なくとも25塩基対のDsiRNAsおよびsiRNAs特定の実施形態において、siRNAsの二本鎖構造は、20~23、任意に特に21塩基対を含む、長さにして15~35塩基対の二本鎖構造を含むdsRNAsが、RNA干渉を誘導することにおいて効果的であり得ることが同定されてきたElbashiretal.,EMBO20:6877-6888。また、20塩基対より短い二本鎖を有するdsRNAsも同様に効果的であり得ることが同定されてきた例えば15、16、17、18または19塩基対。特定の実施形態において、本発明のdsRNAは、19ヌクレオチドまたはそれ以上の長さの少なくとも1つの鎖を含みうる。特定の実施形態において、以下の表10の配列の1つに相補的な配列マイナス1つまたは両方の末端上の2~3個のヌクレオチドを含む、より短いdsRNAsが、以上で、および表2~5および7~10にて記述したdsRNAsと比較して同様に効果的であり得ることが合理的に予想されうる。したがって、表10の配列の1つに十分相補的な、少なくとも15、16、17、18、19、20またはそれ以上の連ヌクレオチドの部分配列を含み、完全配列を含むdsRNAから最高5、10、15、20、25または30阻害まで、本発明で記述したようなアッセイにて、AR標的遺伝子の発現を阻害するそれらの能力において異なるdsRNAsが、本発明によって企図される。1つの実施形態において、dsRNAsの少なくとも1つの末端が、1~5、任意に1~4、特定の実施形態において、1または2ヌクレオチドの一本鎖ヌクレオチドオーバーハングを持つ。少なくとも1つのヌクレオチドオーバーハングを持つ特定のdsRNA構造は、dsRNA分子の両方の間端にて、塩基対形成平滑末端を有する同等のものと比較して、優れた阻害特性を有する。本明細書で使用するところの語句RNA処理は、以下でより詳細に記述されている以下RNA処理項目を参照のことsiRNA、miRNAまたはRNaseH経路の構成要素例えばDrosha、Dicer、Argonaute2または他のRISCエンドリボヌクレアーゼおよびRNaseHによって達成される処理活性を意味する。本語句は、RNAの5’キャッピングの転写後工程と、非-RISCまたは非-RNaseH-仲介工程を介したRNAの分解からはっきり区別される。RNAのそのような分解は、種々の形態、例えば脱アデニル化3’ポリAテールの除去、および/または1つまたはそれ以上の種々のエンド-またはエキソ-ヌクレアーゼ例えばRNaseIII、RNaseP、RNaseT1、RNaseA1、2、3、4/5、オリゴヌクレオチダーゼなどによる、RNAの本体の部分または全てのヌクレアーゼ消化、を取り得る。相同配列によって、遺伝子、遺伝子転写産物および/または非コードポリヌクレオチドのような、1つまたはそれ以上のポリヌクレオチド配列によって共有されるヌクレオチド配列を意味する。例えば、相同配列は、サイトカインおよびその相当する受容体のような、遺伝子ファミリーの異なるメンバー、異なるタンパク質エピトープ、異なるタンパク質イソフォームまたは完全に相違する遺伝子のような、関連するが異なるタンパク質をコードしている2つまたはそれ以上の遺伝子によって共有されるヌクレオチド配列でありうる。相同配列は、非コードDNAまたはRNA、制御配列、イントロン、および転写制御または調節の部位のような、2つまたはそれ以上の非コードポリヌクレオチドによって共有されるヌクレオチド配列でありうる。相同配列はまた、1つ以上のポリヌクレオチド配列によって共有される保存配列領域を含みうる。相同性は、部分相同配列例えば99、98、97、96、95、94、93、92、91、90、89、88、87、86、85、84、83、82、81、80などもまた本発明で企図されるので、完全相同性例えば100である必要はない。実際、本発明のDsiRNA試薬のデザインおよび利用は、本明細書で記述したDsiRNA試薬と完全な相補性を有するARの標的RNAsに対してのみでなく、前記DsiRNA試薬に対して例えばただ99、98、97、96、95、94、93、92、91、90、89、88、87、86、85、84、83、82、81、80などだけの相補的である配列を有するARRNAsに対しての、そのようなDsiRNA試薬を利用する可能性も企図する。同様に、本発明の本明細書で記述されたDsRNA試薬は、前記DsiRNA試薬と標的ARRNA、例えばARの特定の対立バリアント例えば増強された治療的対象の対立遺伝子間の相補性の程度を増強するために、当業者によって簡単に変更されうる。実際、標的AR配列に関する挿入、欠損および単一点変異を持つDsiRNA試薬配列がまた、阻害に対して効果的であり得る。あるいは、ヌクレオチド類似体置換または挿入を持つDsiRNA試薬配列が阻害に対して効果的であり得る。配列同一性は、本技術分野で公知の配列比較および整列アルゴリズムによって決定してよい。2つの核酸配列のまたは2つのアミノ酸配列のパーセント同一性を決定するために、配列を比較の目的で整列させる例えばギャップを、最適配列のために、第一配列または第二配列中に導入可能である。相当するヌクレオチドまたはアミノ酸位置でのヌクレオチドまたはアミノ酸残基をついで比較する。第一配列中の位置が、第二配列中の相当する位置と同様の残基によって占有される場合、分子はその位置で同一である。2つの配列間のパーセント同一性は、配列によって共有された同一の位置の数の関数でありすなわち相同性=同一位置の/位置.時間.100の総、任意に、導入されたギャップの数および/または導入されたギャップの長さに対するスコアにペナルティーをかす。配列の比較と、2つの配列間の配列パーセント同一性の決定を、数学的アルゴリズムを用いて実施可能である。1つの実施形態において、整列は、十分な同一性をもって整列させた整列の特定の部分にわたり、しかし低度の同一性を持つ部分にはわたらずすなわち局所配列産出された。配列の比較のために使用した局所整列アルゴリズムの好ましい、非限定例は、KarlinandAltschul1993Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:5873-77にてのように改変された、KarlinandAltschul1990Proc.Natl.Acad.Sci.USA87:2264-68のアルゴリズムである。そのようなアルゴリズムは、Altshul,etal.1990J.Mol.Biol.215:403-10のBLASTプログラムバージョン2.0内に組み込まれる。他の実施形態において、整列が最適化されるギャップ整列は、適切なギャップを導入することによって形成され、パーセント同一性が、整列した配列の長さにわたり決定されるすなわちギャップ整列。比較の目的のために、ギャップ整列を得るために、ギャップBLASTを、Altschuletal.,1997NucleicAcidsRes.2517:3389-3402にて記述したように使用可能である。他の実施形態において、整列が最適化されるグローバル整列が、適切なギャップを導入することによって形成され、パーセント同一性が、整列した配列の全長にわたり決定されるすなわちグローバル整列。配列のグローバル比較のために利用される数学的アルゴリズムの好ましい、非限定例は、MyersandMiller,CABIOS1989のアルゴリズムである。そのようなアルゴリズムは、GCG配列整列ソフトウェアパッケージの一部である、ALIGNプログラムバージョン2.0内に組み込まれる。アミノ酸配列を比較するためにALIGNプログラムを利用する時に、PAM120ウェイト残基表、12のギャップ長ペナルティー、および4のギャップペナルティーを使用可能であるDsiRNAアンチセンス鎖およびARRNA配列の部分間の80より大きな配列同一性、例えば、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99または100の配列同一性が好ましい。あるいは、DsiRNAは、ARRNAの一部とハイブリッド形成可能なヌクレオチド配列またはオリゴヌクレオチド配列として機能的に定義してよい例えば、400mMNaCl、40mMPIPESpH6.4、1mMEDTA、12~16時間の50°Cまたは70°Cハイブリッド形成と続く洗浄。さらなる好ましいハイブリッド形成条件には、1×SSC中70°C、または1×SSC中50°C、50ホルムアミドでのハイブリッド形成と、続く0.3×SSC中70°Cでの洗浄、または4×SSC中70°C、または4×SSC中50°C、50ホルムアミドでのハイブリッド形成と、続く1×SSC中67°Cでの洗浄が含まれる。長さにして50塩基対以下であると見込まれるハイブリッドに対するハイブリッド形成温度は、当該ハイブリッドの融解温度Tmより5~10°C低いべきであり、Tmは以下の等式にしたがって決定される。長さにして18塩基対より少ないハイブリッドに対して、Tm°C=2AT塩基の4GC塩基の。長さにして18~49塩基対のハイブリッドに対して、Tm°C=81.516.6log10[Na]0.41GC-600/N、式中Nはハイブリッド中の塩基数であり、[Na]はハイブリッド形成緩衝液中のナトリウムイオンの濃度である1×SSC=0.165Mに対する[Na]。ポリヌクレオチドハイブリッド形成に対する厳密性条件のさらなる例が、Sambrook,J.,E.F.Fritsch,andT.Maniatis,1989,MolecularCloning:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,N.Y.,9および11章、およびCurrentProtocolsinMolecularBiology,1995,F.M.Ausubeletal.,eds.,JohnWileySons,Inc.,項目2.10および6.3~6.4にて提供される。等しいヌクレオチド配列の長さは、少なくとも10、12、15、17、20、22、25、27または30塩基であってよい。保存配列領域によって、ポリヌクレオチド内の1つまたはそれ以上の領域のヌクレオチド配列が、世代間で、または1つの生物学的システム、対象または生命体から、他の生物学的システム、対象または生命体までで有意に変化しないことを意味する。ポリヌクレオチドは、コードおよび非コードDNAおよびRNA両方を含みうる。センス領域によって、DsiRNA分子のアンチセンス領域に対して相補性を持つDsiRNA分子のヌクレオチド配列を意味する。さらに、DsiRNA分子のセンス領域は、標的核酸配列と相同性を持つ核酸配列を含みうる。アンチセンス領域によって、標的核酸配列に対して相補性を持つDsiRNA分子のヌクレオチド配列を意味する。さらに、DsiRNA分子のアンチセンス領域は、DsiRNA分子のセンス領域に対して相補性を持つ核酸配列を含む。本明細書で使用するところのアンチセンス鎖は、標的RNAのものに対して相補的な配列を持つ、一本鎖核酸分子を意味する。アンチセンス鎖が、塩基類似体で改変されたヌクレオチドを含む場合、その全長にわたり相同的である必要はないが、少なくとも標的RNAにハイブリッドしなければならない。本明細書で使用するところのセンス鎖は、アンチセンス鎖のものに対して相補的な配列を持つ、一本鎖核酸分子を意味する。アンチセンス鎖が、塩基類似体で改変されたヌクレオチドを含む場合、センス鎖は、アンチセンス鎖の全長にわたり相補的である必要はないが、しかしアンチセンス鎖と少なくとも二本鎖を形成しなければならない。本明細書で使用するところのガイド鎖は、dsRNAまたはdsRNA-含有分子の一本鎖核酸分子を意味し、結果としてRNA干渉となる、標的RNAのものと十分相補的である配列を持つ。DicerによるdsRNAまたはdsRNA-含有分子の開裂後、ガイド鎖の断片が、RISCに結合したままとなり、RISC複合体の一成分として標的RNAに結合し、RISCによって標的RNAの開裂を促進する。本明細書で使用するように、ガイド鎖は、連続一本鎖核酸を意味する必要はなく、好ましくはDicerによる開裂の部位で、不連続性を含んでよい。ガイド鎖はアンチセンス鎖である。本明細書で使用するところのパッセンジャー鎖は、dsRNAまたはdsRNA-含有分子のオリゴヌクレオチド鎖を意味し、ガイド鎖のものと相補的である配列を持つ。本明細書で使用するように、パッセンジャー鎖は、連続一本鎖核酸を意味する必要はなく、好ましくはDicerによる開裂の部位で、不連続性を含んでよい。パッセンジャー鎖はセンス鎖である。標的核酸によって、その発現、レベルまたは活性が調整されるべきである核酸配列を意味する。標的核酸は、DNAまたはRNAでありうる。ARを標的とする試薬に関して、特定の実施形態において、標的核酸はARRNAでありうる。ARRNA標的部位はまた、相当するcDNA配列によって区別しないで参照されうる。ARのレベルはまた、ARの上流効果器の標的化を介して標的化されてよく、または調整されたまたは誤調節されたARの効果がまた、ARシグナル伝達経路中のARの下流の分子の標的化によって調整されてもよい。相同性によって、核酸が、伝統的なワトソン-クリック、または他の非伝統的な型のいずれかによって、他の核酸配列と水素結合を形成可能であることを意味する。本発明の核酸分子に関して、その相補的な配列との核酸分子に対する結合自由エネルギーは、核酸の関連ある機能、例えばRNAi活性を進めることを許容するのに十分である。核酸分子に対する結合自由エネルギーの決定が、本技術分野でよく公知である例えば、Turneretal.,1987,CSHSymp.Quant.Biol.LIIpp.123-133;Frieretal.,1986,Proc.Nat.Acad.Sci.USA83:9373-9377;Turneretal.,1987,J.Am.Chem.Soc.109:3783-3785を参照のこと。パーセント相補性は、第二核酸配列と水素結合を形成可能な例えばワトソン-クリック塩基対化核酸分子中の連続残基の割合を示唆する例えば10ヌクレオチドを持つ第二核酸配列に対して対となる、第一オリゴヌクレオチド中の合計10ヌクレオチドのうち5、6、7、8、9または10ヌクレオチドが、それぞれ50、60、70、80、90および100相同性を表す。完全に相補的は、核酸配列の連続残基の全てが、第二核酸配列中の同一の数の連続残基と水素結合することを意味する。1つの実施形態において、本発明のDsiRNA分子は、1つまたはそれ以上の標的核酸分子またはそれらの部分に対して相補的である、19~30例えば19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29または30またはそれ以上のヌクレオチドを含む。1つの実施形態において、AR遺伝子発現を下方制御または減少させる本発明のDsiRNA分子を、対象または生命体内のAR-関連疾患または疾病例えば癌を治療する、予防するまたは減少させるために使用する。本発明の1つの実施形態において、本発明のDsiRNA分子の各配列は、独立して、長さにして25~35ヌクレオチド、特定の実施形態において、長さにして25、26、27、28、29、30、31、32、33、34または35ヌクレオチドである。他の実施形態において、本発明のDsiRNA二本鎖は独立して、25~30塩基対例えば25、26、27、28、29または30を含む。他の実施形態において、本発明のDsiRNA分子の1つまたはそれ以上の鎖は、標的AR核酸分子に相補的である、19~35ヌクレオチド例えば、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34または35を独立して含む。特定の実施形態において、本発明のDsiRNA分子は、長さにして25~34ヌクレオチド例えば長さにして25、26、27、28、29、30、31、32、33または34ヌクレオチド、任意に全てのそのようなヌクレオチドは、反対の鎖の同種ヌクレオチドと塩基対を形成するの二本鎖ヌクレオチドの長さを有する。本発明の典型的DsiRNA分子を図1および以下に示す。本明細書で使用するところの細胞は、その通常の生物学的意味において使用され、全多細胞生物を意味せず、例えば特にヒトを意味しない。細胞は、生命体、例えば鳥類、植物およびヒト、ウシ、ヒツジ、類人猿、サル、ブタ、イヌおよびネコのような哺乳動物中に存在しうる。細胞は、原核生物例えば細菌細胞または真核生物例えば哺乳動物または植物細胞でありうる。細胞は、体細胞または生殖細胞由来、全能細胞または多能性細胞、分裂細胞または非分裂細胞でありうる。細胞はまた、配偶子または胚、幹細胞または完全に分化した細胞から分化してよく、または含んでよい。特定の様態内で、語句細胞は、本明細書の1つまたはそれ以上の単離されたdsRNA分子を含むヒト細胞のような特に哺乳動物細胞を意味する。特定の様態において、細胞は、結果として標的核酸のRNA干渉となる、dsRNAまたはdsRNA-含有分子を有し、RNAiに対して必要とされるタンパク質およびタンパク質複合体、例えばDicerおよびRISCを含む。特定の実施形態において、本発明のdsRNAは、Dicer基質siRNAsDsiRNAである。DsiRNAsは、dicer基質ではない阻害核酸非DsiRNAsと比較して、特定の利点を有しうる。そのような利点には、非DsiRNAに対して、DsiRNAの効果の期間の増強、ならびに各阻害核酸が好適に処方され、同一の濃度で、哺乳動物細胞内の阻害活性に関して査定される時、非DsiRNA例えば19~32マーsiRNAと比較して、DsiRNAの阻害活性の増強が含まれるが、これらに限定はされない後者のシナリオの場合、DsiRNAは、非-DsiRNAよりもより強力なものとして同定されうる。非-DsiRNAに対するDsiRNAの強度の増強の検出はしばしば、結果としてDisRNAが、標的RNA例えばmRNAにおけるおよそ30~70のノックダウン活性を誘発することとなる、処方された濃度例えばdsRNAのトランスフェクション濃度でほとんど簡単に達成される。活性DsiRNAに関して、そのようなノックダウン活性のレベルは、ほとんどの場合、1nMまたはそれ以下の好適に処方されたinvitro哺乳動物細胞DsiRNAsトランスフェクション濃度で達成され、特定の例において、200pMまたはそれ以下、100pMまたはそれ以下、50pMまたはそれ以下、20pMまたはそれ以下、10pMまたはそれ以下、5pMまたはそれ以下、または1pMまたはそれ以下のDsiRNAトランスフェクション濃度で観察される。実際、標的RNAの30~70ノックダウンが観察される正確な濃度のDsiRNAs間の変動に起因して、効果的な濃度の範囲にわたる、DsiRNAsおよび非DsiRNAsの阻害活性の査定を介した、IC50曲線の構築が、非DsiRNA阻害試薬に対するDsiRNAの強度の増強を検出するための好ましい方法である。特定の実施形態において、Dicer開裂前、最初に形成されたような状態でのDsiRNAは、その中に含まれる19、20、21、22または23塩基対配列よりも、哺乳動物細胞中のAR標的遺伝子発現を減少させることにおいて、より強力である。特定のそのような実施形態において、dicer開裂前のDsiRNAは、その中に含まれる19~21マーよりもより強力である。任意に、dicer開裂前のDsiRNAは、それによって、dTdTオーバーハングを持つ21ヌクレオチド鎖長を有するsiRNAを形成する対称dTdTオーバーハングで合成される、その中に含まれた19塩基対二本鎖よりも強力である。特定の実施形態において、DsiRNAは、本発明のDsiRNAに対して列挙される21ヌクレオチド標的配列の少なくとも15ヌクレオチドを標的とする、19~23マーsiRNA例えばdTdTオーバーハングを持つ19塩基対二本鎖よりも強力である理論に結びつける希望はなしに、DsiRNAに対するそのような標的部位の同一性は、DsiRNAに対するAgo2開裂部位の同定を介して同定される。いったんDsiRNAのAgo2開裂部位がDsiRNAに対して決定されたらば、任意の他の阻害dsRNAに対するAgo2開裂部位の同定が実施され、それらのAgo2開裂部位を整列可能であり、それによって多数のdsRNAsに対する予想された標的ヌクレオチド配列の整列が決定される。特定の関連した実施形態において、DsiRNAは、本発明のDsiRNAに対して列挙される21ヌクレオチド標的配列の少なくとも20ヌクレオチドを標的とする、19~23マーsiRNAよりも強力である。任意に、DsiRNAは、本発明のDsiRNAに対して列挙される同一の21ヌクレオチド標的配列を標的とする、19~23マーsiRNAよりも強力である。特定の実施形態において、DsiRNAは、本発明のDsiRNAに対して列挙される同一の21ヌクレオチド標的配列を標的とする、任意の21マーsiRNAよりも強力である。任意に、DsiRNAは、本発明のDsiRNAに対して列挙される同一の21ヌクレオチド標的配列を標的とする、任意の21または22マーsiRNAよりも強力である。特定の実施形態において、DsiRNAは、本発明のDsiRNAに対して列挙される同一の21ヌクレオチド標的配列を標的とする任意の21、22または23マーsiRNAより強力である。以上で言及するように、そのような強度査定は、1nMまたはそれ以下の濃度で、好適に処方された例えば適切なトランスフェクト試薬で処方されたdsRNAsにおいてもっとも効果的に実施される。任意に、IC50査定を、効果的な阻害濃度の範囲にわたる活性を評価するために実施し、それによって、そのようにアッセイされたdsRNAsの相対強度のしっかりとした比較が許容される。本発明のdsRNA分子は、直接加えられ、または脂質例えばカチオン性脂質と複合体化、リポソーム内にパッケージ、または標的細胞または組織に伝達可能である。核酸または核酸複合体を、バイオポリマー内へのそれらの組み込みあり、またはなしで、直接皮膚適用、経皮適用、または注射を介して、exvivoまたはinvivoで、関連する組織に局所投与可能である。特定の実施形態において、本発明の核酸分子は、図1で示す配列と、以下の典型構造を含む。そのような核酸分子の実施例は、これらの図および典型構造にて定義した構造から本質的になる。さらに、そのような試薬を、DsiRNA試薬の改変パターン化の以下の記述にしたがって改変する場合、図1にて記述された構造物の化学的に改変された形態、および以下の典型構造を、図1および以下の典型構造のDsiRNA試薬に対して記述した全ての使用において利用可能である。他の様態において、本発明は、本発明の1つまたはそれ以上のDsiRNAを含む哺乳動物細胞を提供する。1つまたはそれ以上のDsiRNA分子は独立して、同一または異なる部位を標的とすることが可能である。RNAは、少なくとも1つの、好ましくは少なくとも4、8および12リボヌクレオチド残基を含む分子を意味する。少なくとも4、8または12RNA残基は連続してよい。リボヌクレオチドによって、β-D-リボフラノース部位の2’位でヒドロキシル基を持つヌクレオチドを意味する。本語句には、二本鎖RNA、一本鎖RNA、部分的に精製したRNAのような単離RNA、本質的に純粋なRNA、合成RNA、組換え体産出RNA、ならびに1つまたはそれ以上のヌクレオチドの添加、欠損、置換および/または変更によって、天然に存在するRNAとは異なる変更RNAが含まれる。そのような変更には、例えばRNAの1つまたはそれ以上のヌクレオチドでの、DsiRNAの末端または内部へのような、非ヌクレオチド物質の添加が含まれる。本発明のRNA分子中のヌクレオチドはまた、天然に存在しないヌクレオチドまたは化学的に合成されたヌクレオチドまたはデオキシヌクレオチドのような、非標準ヌクレオチドも含みうる。これらの変更RNAsは、類似体または天然に存在するRNAの類似体として引用可能である。対象によって、移植された細胞のドナーまたはレシピエントまたは細胞それら自身である、生命体を意味する。対象はまた、本発明のDsiRNA試薬を投与可能な生命体を意味する。対象は、ヒトまたはヒト細胞を含む、哺乳動物または哺乳動物細胞でありうる。語句薬理学的に許容可能な担体は、治療薬剤の投与のための担体を意味する。典型的な担体には、食塩水、緩衝食塩水、デキストロース、水、グリセロール、エタノールおよびこれらの混合物が含まれる。経口で投与される薬物に対して、薬理学的に許容可能な担体には、不活性希釈液、分散剤、結合剤、潤滑剤、甘味剤、香味料、着色料および保存料などのような、薬理学的に許容可能な賦形剤が含まれるが、これらに限定はされない。好適な不活性希釈液には、炭酸ナトリウムおよびカリウム、リン鎖ナトリウムおよびカリウムおよびラクトースが含まれ、トウモロコシデンプンおよびアルギン酸が好適な分散剤である。結合剤には、デンプンおよびゼラチンが含まれてよく、潤滑剤は存在するのであれば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクが一般的である。望むのならば、胃腸管での吸収を遅延させるために、錠剤を一ステアリン酸塩グリセリルまたは二ステアリン酸塩グリセリルのような物質でコートしてよい。開示されたdsRNAsの薬理学的に許容可能な担体は、リポソーム、カプシド、カプソイド、ポリマー性ナノカプセルまたはポリマー性ミクロカプセルのようなミセル構造であってよい。ポリマー性ナノカプセルまたはマイクロカプセルは、カプセル封入されたか、または結合したdsRNAの細胞内への伝達および放出を促進する。これらには、とりわけポリブチルシアノアクリレートを含む、ポリマー性および単量体物質が含まれる。物質および製造法の要約が発行されているKreuter,1991を参照のこと。ポリマー化/ナノ粒子産出段階で、単量体および/または多量体前駆体から形成されるポリマー性物質は、ナノ粒子を製造する領域の当業者が通常の技術にしたがって好適に選択してよいポリマー性物質の分子量および分子量分布であるように、先行技術から本質的に公知である。本発明の種々の方法には、本明細書で適切な対照として互換的に引用される、好適な対照に対して、値、レベル、特徴、特性、性質などを比較することを含む段階が含まれる。好適な対照または適切な対照は、比較の目的のために有用な、当業者によく知られた対照または標準である。1つの実施形態において、好適な対照または適切な対照は、本明細書で記述したような、RNAi法を実施する前に決定される、値、レベル、特徴、特性、性質などである。例えば、転写率、mRNAレベル、翻訳率、タンパク質レベル、生物学的活性、細胞特徴または性質、遺伝子型、表現型などを、本発明のRNAサイレンシング試薬例えばDsiRNAを細胞または生命体内に導入する前に決定可能である。他の実施形態において、好適な対照または適切な対照は、細胞または生物内で決定される値、レベル、特徴、特性、性質など、例えば正常な特質を示している対照または正常細胞または生命体である。また他の実施形態において、好適な対照または適切な対照は、前もって定義された値、レベル、特徴、特性、性質などである。語句invitroは、その業界で認識された意味を持ち、例えば、精製された試薬または抽出物、例えば細胞抽出物を含む。語句invivoはまた、その業界で認識された意味を持ち、例えば、生細胞、例えば不死化細胞、初代細胞、細胞株および/または生命体内の細胞を含む。本明細書で使用するところの治療または治療することは、治療薬剤例えばDsiRNA試薬またはそれをコードしているベクターまたはトランスジーンの、疾患または疾病を、または疾患または疾病の症状を治癒させる、直す、緩和する、軽減する、変化させる、治療する、改善する、改良するまたは影響を与える目的で、疾病をもつ患者への適用または投与、または治療薬剤の患者からの単離した組織または細胞株への適用または投与として定義される。語句治療または治療するはまた、予防的に薬剤を投与する文脈でも使用される。語句効果的用量または効果的投与量は、望む効果を達成するか、または少なくとも部分的に達成するために十分な量として定義される。語句治療的に効果的な用量は、疾患をすでに患っている患者における疾患またはその合併症を治癒する、または少なくとも部分的に停止させるのに十分な量として定義される。語句患者には、予防的または治療的治療いずれかを受けるヒトまたは他の哺乳動物対象が含まれる。抗-ARDsiRNA試薬の構造特定の実施形態において、本発明の抗-ARDsiRNA試薬は以下の構造を持つことができる。1つのそのような実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNAおよびYは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインである。関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNAおよびYは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、D=DNAである。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖である。本発明のDsiRNAは、広範囲の改変パターン例えば、2’-O-メチルRNAパターン、例えば伸長DsiRNA試薬内を持ちうる。本発明のDsiRNAsの第二鎖の特定の改変パターンを以下に示す。1つの実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他のそのような実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他のそのような実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。さらなる関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNAおよびD=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAはを含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。1つの関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、下線残基は2’-O-メチルRNAモノマーであり、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。他の関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。さらなる関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNAである。上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。以上の改変パターンをまた、例えば、以下記述した伸長DsiRNA構造およびミスマッチおよび/またはほころびたDsiRNA構造内に組み込むことも可能である。他の実施形態において、DsiRNAは、Dicer開裂を正しい方向にするように働く、1~3ミスマッチ残基を有する等しい長さを持つ鎖を含むとりわけ、3’-末端残基からナンバリングした時に、DsiRNAの第一鎖上の位置1、2または3の1つまたはそれ以上が、第一および第二鎖が互いにアニールする時に、第二鎖上の5’末端領域の相当する残基とミスマッチする。2つの末端ミスマッチ残基を持つ典型的27マーDsiRNA試薬を示し、式中X=RNA、M=鎖がアニールする時、他の相補的鎖の相当するM残基と対を形成しない水素結合しない核酸残基RNA、DNAまたは非天然または改変核酸。そのような試薬の任意の残基は任意に、2’-O-メチルRNAモノマーでありえ、上記非対称試薬に関して示したように、下第二鎖の3’-末端残基から始まる2’-O-メチルRNAモノマーの交互位置が、上記平滑/ほつれDsiRNA試薬中でも使用可能である。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖である。特定のさらなる実施形態において、本発明は、推定されるセンス鎖Dicer開裂部位の3’と、推定されるアンチセンス鎖Dicer開裂部位の相当する5’に位置する、二本鎖リボ核酸dsRNAの領域内に1つまたはそれ以上の塩基対化デオキシリボヌクレオチドを有するRNA干渉RNAiに対する組成物を提供する。本発明の組成物は、前駆体分子であるdsRNAを含み、すなわち本発明のdsRNAが、活性小干渉核酸siRNAを産出するようにinvivoで処理される。dsRNAは、Dicerによって、RISC内に組み込まれる活性siRNAに処理される。特定の実施形態において、本発明のDsiRNA試薬は、以下の典型的構造を持ちうる任意の以下の典型的構造は、例えば、上記構造の下鎖改変パターンと組み合わせ可能であることに留意のこと-1つの特定の実施例において、任意の上記構造中で示した下鎖改変パターンが、任意の以下の構造の下鎖の27のほとんどの3’残基に適用される。他の特定の実施例にて、下鎖の23のほとんどの3’残基における、任意の上記構造にて示した下鎖改変パターンが、任意の以下の構造の下鎖の23のほとんどの3’残基に適用される。1つのそのような実施形態において、DsiRNAは、以下を含み典型的右伸長、DNA伸長DsiRNA、式中X=RNA、Yは、特定の実施形態において、任意に2’-O-メチルRNAモノマーである0~10RNAモノマーからなる任意のオーバーハングドメインであり、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、D=DNA、およびN=1~50またはそれ以上であるが、任意に1~8または1~10である。N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖である。関連実施形態において、DsiRNAは、以下を含み、式中X=RNA、Yは、特定の実施形態において、任意に2’-O-メチルRNAモノマーである0~10RNAモノマーからなる任意のオーバーハングドメインであり、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、D=DNA、およびN=1~50またはそれ以上であるが、任意に1~8または1~10である。N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、以下を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは、特定の実施形態において、任意に2’-O-メチルRNAモノマーである0~10RNAモノマーからなる任意のオーバーハングドメインであり、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、D=DNA、Z=DNAまたはRNAおよびN=1~50またはそれ以上であるが、任意に1~8または1~10である。N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖であり、2’-O-メチルRNAモノマーが、上記スキーム中で本明細書で描写した下鎖ではなく、上鎖にそって交互残基で局在する。他のそのような実施形態において、DsiRNAは、以下を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは、特定の実施形態において、任意に2’-O-メチルRNAモノマーである0~10RNAモノマーからなる任意のオーバーハングドメインであり、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、D=DNA、Z=DNAまたはRNAおよびN=1~50またはそれ以上であるが、任意に1~8または1~10である。N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖であり、2’-O-メチルRNAモノマーが、上記スキーム中で本明細書で描写した下鎖ではなく、上鎖にそって交互残基で局在する。他のそのような実施形態において、DsiRNAは、以下を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、Yは、特定の実施形態において、任意に2’-O-メチルRNAモノマーである0~10RNAモノマーからなる任意のオーバーハングドメインであり、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、D=DNA、Z=DNAまたはRNAおよびN=1~50またはそれ以上であるが、任意に1~8または1~10である。N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖であり、2’-O-メチルRNAモノマーが、上記スキーム中で本明細書で描写した下鎖ではなく、上鎖にそって交互残基で局在する。他の実施形態において、DsiRNAは、以下を含み、式中X=RNA、Yは、特定の実施形態において、任意に2’-O-メチルRNAモノマーである0~10RNAモノマーからなる任意のオーバーハングドメインであり、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、D=DNA、Z=DNAまたはRNAおよびN=1~50またはそれ以上であるが、任意に1~8または1~10であり、少なくとも1つのD1Nが上鎖中に存在し、下鎖中の相当するD2Nと塩基対を形成する。任意にD1NとD1N1は、相当するD2NとD2N1と塩基対を形成し、D1N、D1N1、D1N2は、相当するD2N、D1N1およびD1N2などと塩基対を形成するなどである。N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖であり、2’-O-メチルRNAモノマーが、上記スキーム中で本明細書で描写した下鎖ではなく、上鎖にそって交互残基で局在する。本明細書で描写した構造において、センス鎖またはアンチセンス鎖いずれかの5’末端が任意にリン酸基を含む。他の実施形態において、DNA:DNA-伸長DsiRNAは、Dicer開裂を正しい方向にするように働く、1~3ミスマッチ残基を有する等しい長さを持つ鎖を含むとりわけ、3’-末端残基からナンバリングした時に、DsiRNAの第一鎖上の位置1、2または3の1つまたはそれ以上が、第一および第二鎖が互いにアニールする時に、第二鎖上の5’末端領域の相当する残基とミスマッチする。2つの末端ミスマッチ残基を持つ典型的DNA:DNA-伸長DsiRNA試薬を示し、式中X=RNA、M=鎖がアニールする時、他の相補的鎖の相当するM残基と対を形成しない水素結合しない核酸残基RNA、DNAまたは非天然または改変核酸、D=DNA、N=1~50またはそれ以上であるが、任意に1~15、または任意1~8であり、N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。そのような試薬の任意の残基は任意に、2’-O-メチルRNAモノマーでありえ、上記非対称試薬に関して示したように、下第二鎖の3’-末端残基から始まる2’-O-メチルRNAモノマーの交互位置が、上記平滑/ほつれDsiRNA試薬中でも使用可能である。1つの実施形態において、上鎖第一鎖はセンス鎖であり、下鎖第二鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖である。非対称/オーバーハング試薬に関して上で示したものと平行である改変およびDNA:DNA伸長パターンもまた、そのような平滑/ほつれ試薬内に組み込むことが可能である。1つの実施形態において、伸長したDsiRNA試薬が、dsRNA構造中の塩基対を形成するデオキシリボヌクレオチドの存在を必要としない、Dicer開裂の特定の方向を介して機能するようにモデル化された部位に位置するデオキシリボヌクレオチドを含むように提供される。そのような分子の典型的な構造を示し、式中X=RNA、Yは、特定の実施形態において、任意に2’-O-メチルRNAモノマーである0~10RNAモノマーからなる任意のオーバーハングドメインであり、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、D=DNAである。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖である。以上の構造は、Dicerが、その第一処理後形態として、最小21マーの二本鎖を開裂するようにさせるようにモデルとする。上記構造の下鎖癌チセンスである実施形態において、アンチセンス鎖の5’末端の最後および最後から二番目の残基で2つのデオキシリボヌクレオチド残基が存在することが、的外れの効果を減少させるのを助けうる先行研究が、的外れの効果を減少させるために、アンチセンス鎖の5’末端から少なくとも最後から二番目の2’-O-メチル修飾を示したように。例えば、米国特許第2007/0223427号明細書を参照のこと。1つの実施形態において、DsiRNAは、以下を含み典型的左伸長、DNA伸長DsiRNA、式中X=RNA、Yは、特定の実施形態において、任意に2’-O-メチルRNAモノマーである0~10RNAモノマーからなる任意のオーバーハングドメインであり、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、D=DNA、およびN=1~50またはそれ以上であるが、任意に1~8または1~10である。N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖である。関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、任意に2’-O-メチルRNAモノマー、D=DNA、N=1~50またはそれ以上であるが、任意に1~8または1~10。N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖である。さらなる実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、任意に2’-O-メチルRNAモノマー、D=DNA、N=1~50またはそれ以上であるが、任意に1~8または1~10。N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。Z=DNAまたはRNA。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖であり、2’-O-メチルRNAモノマーが、上記スキーム中で本明細書で描写した下鎖ではなく、上鎖にそって交互残基で局在する。他のそのような実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、任意に2’-O-メチルRNAモノマー、D=DNA、N=1~50またはそれ以上であるが、任意に1~8または1~10。N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。Z=DNAまたはRNA。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖であり、2’-O-メチルRNAモノマーが、上記スキーム中で本明細書で描写した下鎖ではなく、上鎖にそって交互残基で局在する。他のそのような実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNA、Z=DNAまたはRNA、およびN=1~50またはそれ以上であるが、任意に1~8または1~10。N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖であり、2’-O-メチルRNAモノマーが、上記スキーム中で本明細書で描写した下鎖ではなく、上鎖にそって交互残基で局在する。他のそのような実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、X=2’-O-メチルRNA、D=DNA、Z=DNAまたはRNA、およびN=1~50またはそれ以上であるが、任意に1~8または1~10。N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。Yは、特定の実施形態において、任意に2’-O-メチルRNAモノマーである0~10RNAモノマーからなる任意のオーバーハングドメインであり、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインである。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖であり、2’-O-メチルRNAモノマーが、上記スキーム中で本明細書で描写した下鎖ではなく、上鎖にそって交互残基で局在する。他のそのような実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、D=DNA、Z=DNAまたはRNA、およびN=1~50またはそれ以上であるが、任意に1~8または1~10であり、そこで少なくとも1つのD1Nが上鎖中に存在し、下鎖中の相当するD2Nと塩基対を形成する。任意にD1NとD1N1は、相当するD2NとD2N1と塩基対を形成し、D1N、D1N1、D1N2は、相当するD2N、D1N1およびD1N2などと塩基対を形成するなどである。N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖であり、2’-O-メチルRNAモノマーが、上記スキーム中で本明細書で描写した下鎖ではなく、上鎖にそって交互残基で局在する。関連実施形態において、DsiRNAは、を含み、式中X=RNA、D=DNA、Yは、特定の実施形態において、任意に2’-O-メチルRNAモノマーである0~10RNAモノマーからなる任意のオーバーハングドメインであり、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、N=1~50またはそれ以上であるが、任意に1~8または1~10であり、そこで少なくとも1つのD1Nが上鎖中に存在し、下鎖中の相当するD2Nと塩基対を形成する。任意にD1NとD1N1は、相当するD2NとD2N1と塩基対を形成し、D1N、D1N1、D1N2は、相当するD2N、D1N1およびD1N2などと塩基対を形成するなどである。N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖であり、2’-O-メチルRNAモノマーが、上記スキーム中で本明細書で描写した下鎖ではなく、上鎖にそって交互残基で局在する。他の実施形態において、DNA:DNA-伸長DsiRNAは、Dicer開裂を正しい方向にするように働く、1~3ミスマッチ残基を有する等しい長さを持つ鎖を含むとりわけ、3’-末端残基からナンバリングした時に、DsiRNAの第一鎖上の位置1、2または3の1つまたはそれ以上が、第一および第二鎖が互いにアニールする時に、第二鎖上の5’末端領域の相当する残基とミスマッチする。2つの末端ミスマッチ残基を持つ典型的DNA:DNA-伸長DsiRNA試薬を示し、式中X=RNA、M=鎖がアニールする時、他の相補的鎖の相当するM残基と対を形成しない水素結合しない核酸残基RNA、DNAまたは非天然または改変核酸、D=DNA、N=1~50またはそれ以上であるが、任意に1~15、または任意1~8であり、N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。そのような試薬の任意の残基は任意に、2’-O-メチルRNAモノマーでありえ、上記非対称試薬に関して示したように、下第二鎖の3’-末端残基から始まる2’-O-メチルRNAモノマーの交互位置が、上記平滑/ほつれDsiRNA試薬中でも使用可能である。1つの実施形態において、上鎖第一鎖はセンス鎖であり、下鎖第二鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖である。対称/オーバーハング試薬に関して上で示したものと平行である改変およびDNA:DNA伸長パターンもまた、そのような平滑/ほつれ試薬内に組み込むことが可能である。1つの実施形態において、伸長したDsiRNA試薬が、dsRNA構造中の塩基対を形成するデオキシリボヌクレオチドの存在を必要としない、Dicer開裂の特定の方向を介して機能するようにモデル化された部位に位置するデオキシリボヌクレオチドを含むように提供される。そのような分子の典型的な構造を示し、または式中X=RNA、Yは、特定の実施形態において、任意に2’-O-メチルRNAモノマーである0~10RNAモノマーからなる任意のオーバーハングドメインであり、Yは任意に2’-O-メチルRNAモノマーである、1~4RNAモノマーからなるオーバーハングドメインであり、D=DNA、N=0~15またはそれ以上であるが任意に0、1、2、3、4、5または6である。1つの実施形態において、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。あるいは、下鎖はセンス鎖であり、上鎖はアンチセンス鎖である。上記構造の下鎖癌チセンス鎖である任意の以上の実施形態において、アンチセンス鎖の5’末端の最後および最後から二番目の残基での2つのデオキシリボヌクレオチド残基の位置が、的外れの効果を減少させるのを助けうる先行研究が、的外れの効果を減少させるために、アンチセンス鎖の5’末端から少なくとも最後から二番目の2’-O-メチル修飾を示したように。例えば、米国特許第2007/0223427号明細書を参照のこと。特定の実施形態において、上記構造のD残基には、少なくとも1つのPS-DNAまたはPS-RNAが含まれる。任意に、上記構造のD残基には、Dicer開裂を阻害する少なくとも1つの改変されたヌクレオチドが含まれる。上記DNA-伸長DsiRNA試薬は、左伸長または右伸長のいずれかとして分類される一方で、単一の試薬内で左および右伸長DNA-含有配列両方を含むDsiRNA試薬例えば、コアdsRNA構造を取り囲む両側面がdsDNA伸長であるをまた、右伸長および左伸長試薬に関して本明細書で記述したものと同様の様式で、産出し、使用可能である。いくつかの実施形態において、本発明のDsiRNAはさらに、DNA:DNA-伸長DsiRNA試薬のセンスおよびアンチセンス鎖を連結する結合部位またはドメインを含む。任意に、そのような結合部位ドメインは、センス鎖の3’末端と、アンチセンス鎖の5’末端を連結する。結合部位は、オリゴメチレンジオールリンカー、オリゴエチレングリコールリンカー、または他の本技術分野で認識されるリンカー部位のような、化学的非ヌクレオチドリンカーでありうる。あるいは、リンカーは、任意に伸長ループおよび/またはテトラループを含む、ヌクレオチドリンカーでありうる。1つの実施形態において、DsiRNA試薬は、25塩基対長を持つセンス鎖と、1~4塩基3’-オーバーハング例えば1塩基3’オーバーハング、2塩基3’-オーバーハング、3塩基3’-オーバーハングまたは4塩基3’-オーバーハングを持つ27塩基対長を持つセンス鎖を持つ、非対称構造を持つ。他の実施形態において、本DsiRNA試薬は、センス鎖の3’末端にて、2つのデオキシヌクレオチドをさらに含む、非対称構造を持つ。他の実施形態において、DsiRNA試薬は、25塩基対長を持つアンチセンス鎖と、1~4塩基3’-オーバーハング例えば1塩基3’オーバーハング、2塩基3’-オーバーハング、3塩基3’-オーバーハングまたは4塩基3’-オーバーハングを持つ27塩基対長を持つセンス鎖を持つ、非対称構造を持つ。他の実施形態において、本DsiRNA試薬は、アンチセンス鎖の3’末端にて、2つのデオキシヌクレオチドをさらに含む、非対称構造を持つ。本発明の典型的AR標的化DsiRNA試薬は以下を含む。表2表3以上の表2~3の、および以下表5~12の各DsiRNAに対する推定される21ヌクレオチド標的配列を、表4に示す。表4以上表2および3、および以下表5~12内で、下線残基は、2’-O-メチル残基を示唆し、UPPERCASEはリボヌクレオチド類を示唆し、下ケースはデオキシリボヌクレオチドを意味する。以上表2、3および以下9~12のDsiRNA試薬は、平滑末端を有する25/27マー試薬である。以上表2、3および以下9~12の試薬の構造および/または改変パターンを、上記遺伝的配列構造に対して簡単に適合可能であり、例えば、第二鎖の3’オーバーハングを伸長させるか、または短縮させることが可能であり、第二鎖の2’-O-メチル化を第二鎖の5’末端まで伸長させることが可能であり、任意に交互部位でなどである。そのような改変をもつ25/27マーDsiRNAsをまた、上記DsiRNA試薬から簡単にデザイン可能であり、AR発現の機能的阻害剤としても予想されるので、そのようなさらなる改変は任意である。同様に、以下表5~8の試薬の、27マー平滑/ほつれおよび平滑/平滑DsiRNA構造および/または改変パターンを、例えばそのような構造に対するアンチセンス鎖の改変パターンの適用、および/またはそのような配列の上記遺伝的構造への適用のために、上記遺伝的配列構造に簡単に適用可能である。特定の実施形態において、各27ヌクレオチドの独立した鎖長を有する27マーDsiRNAsを、本明細書の表2、3および9~12にて示した、非対称25/27構造と同一のAR転写物内の部位の標的化のために、デザインし、合成する。典型的27/27DsiRNAsは、以下表5および6のDsiRNAに関して示したような平滑/ほつれ構造で、または以下表7および8のDsiRNAsに関して示したような平滑/平滑構造で、任意にデザインされる。表5表6表7表8特定の実施形態において、本発明のDsiRNA試薬は、第一鎖の、たとえば少なくとも19、少なくとも20、少なくとも21、少なくとも22、少なくとも23、少なくとも24、少なくとも25、または少なくとも26の残基が、第二鎖の相当する残基に相補的であることを要求する。特定の関連実施形態において、第二鎖の相当する残基に相補的なこれらの第一鎖残基は任意に連続残基である。本明細書で使用するところのDsiRNAmmは、DsiRNAのセンスおよびアンチセンス鎖によって形成された二本鎖の1、2、3または4つのミスマッチ塩基対を含む、ミスマッチ耐性領域を持つDsiRNAを意味し、そこでそのようなミスマッチは、DsiRNAのいずれかの末端の2つの末端塩基対間で横たわっているおよびしたがって末端塩基対を含まない場所で、DsiRNA内に位置する。ミスマッチ塩基対は、相当する標的核酸の推定されるAgo2切断部位の局所に関して本明細書で定義した、ミスマッチ-耐性領域内に局在する。ミスマッチ耐性領域は、標的鎖の推定Ago2切断部位の上流に局在する。本文脈中の上流は、DsiRNAmm二本鎖の5’-のほとんどの部位として理解され、5’はDsiRNA二本鎖のセンス鎖の方向を意味する。したがって、ミスマッチ耐性領域は、標的核酸の推定Ago2切断部位に相当するセンスパッセンジャー鎖上の塩基の上流であり図1、あるいは、DsiRNAmmのアンチセンスガイド鎖に対していう場合、ミスマッチ耐性領域は、標的核酸の推定Ago2切断部位に相補的な塩基の下流に位置すると記述することも可能であり、すなわち、DsiRNAmmのアンチセンス鎖の3’のほとんどの部分と記述可能であるアンチセンス鎖の位置1は、アンチセンス鎖の5’末端ヌクレオチドである、図1を参照のこと。1つの実施形態において、例えば図1にて描写したようなナンバリングで、ミスマッチ耐性領域は、二本鎖のセンス鎖の5’末端で開始したヌクレオチドからナンバリングした場合、塩基対3~9の間、または塩基対3~9を含んで位置する。したがって、本発明のDsiRNAmmは、右手伸長DsiRNAのセンス鎖の位置3、4、5、6、7、8または9のいずれか1つにおいて、単一のミスマッチ塩基対を有する位置1は、センス鎖の5’末端ヌクレオチドであり、位置9は、センス鎖配列に相当する標的ARRNA配列の推定Ago2切断部位の5’に接したセンス鎖のヌクレオチド残基である。特定の実施形態において、センス鎖の位置3、4、5、6、7、8または9の任意の位置で、ミスマッチ塩基対ヌクレオチドを有するDsiRNAmmに対して、アンチセンス鎖の相当するミスマッチ塩基対ヌクレオチドは、DsiRNAmmのセンス鎖配列とミスマッチ塩基対を形成するだけでなく、DsiRNAmm標的ARRNA配列ともミスマッチ塩基対を形成するしたがって、アンチセンス鎖配列とセンス鎖配列間の相補性は、DsiRNAmm内のミスマッチ塩基対にて中断され、相補性は、DsiRNAmmのアンチセンス鎖配列と標的ARRNA配列間で同様に中断される。他の実施形態において、DsiRNAmmのアンチセンス鎖のミスマッチ塩基対ヌクレオチドは、DsiRNAmmのセンス鎖配列の相当するヌクレオチドとミスマッチ塩基対を形成するだけでなく、その相当する標的ARRNA配列ヌクレオチドとも塩基対を形成するしたがって、アンチセンス鎖配列とセンス鎖配列間の相補性は、DsiRNAmm内のミスマッチ塩基対にて中断され、また相補性は、DsiRNAmmのアンチセンス鎖配列と標的ARRNA配列間で維持される。上述したように、ミスマッチ耐性領域ミスマッチ領域内で単一のミスマッチ塩基対を有する本発明のDsiRNAmm例えば、センス鎖の位置3、4、5、6、7、8または9のいずれか1つにてミスマッチヌクレオチド残基をもつDsiRNAmmはさらに、1、2または3つのさらなるミスマッチ塩基対を含みうる。好ましい実施形態において、DsiRNAmmのこれらの1、2または3つのさらなるミスマッチ塩基対は、センス鎖の位置3、4、5、6、7、8および/または9にてそしてアンチセンス鎖の相当する残基にて発生する。1つのさらなるミスマッチ塩基対が、DsiRNAmm内に存在する1つの実施形態において、センス鎖の2つのミスマッチ塩基対が、例えばアンチセンス鎖の相当するヌクレオチド残基にて発生もするミスマッチとともにセンス鎖の位置4および位置6両方のヌクレオチドで発生しうる。2つのミスマッチ塩基対を有するDsiRNAmm試薬において、ミスマッチは、連続して発生可能である例えば、センス鎖ヌクレオチド配列にそった連続位置にて。あるいは、アンチセンス鎖配列とミスマッチ塩基対を形成するセンス鎖のヌクレオチドが、アンチセンス鎖配列と塩基対を形成するヌクレオチドによって散在可能である例えば、位置4および5ではなく、位置3および6にてミスマッチヌクレオチドを有するDsiRNAmmに関して、センス鎖位置3および6のミスマッチ残基は、アンチセンス鎖の相当する残基とマッチした塩基対を形成する2つのヌクレオチドによって散在される。例えば、相当するアンチセンス鎖配列とミスマッチ塩基対を形成するセンス鎖のミスマッチ耐性領域内に局在するセンス鎖の2つの残基が、これらのミスマッチ塩基対間に局在する、0、1、2、3、4または5のマッチ塩基対で発生可能である。3つのミスマッチ塩基対を有する特定のDsiRNAmm試薬において、ミスマッチは、連続して発生可能である例えば、センス鎖ヌクレオチド配列にそって三重に。あるいは、アンチセンス鎖配列とミスマッチ塩基対を形成するセンス鎖のヌクレオチドが、アンチセンス鎖配列とマッチした塩基対を形成するヌクレオチドによって散在可能である例えば、位置5、6および7ではなく、位置3、4および8にてミスマッチヌクレオチドを有するDsiRNAmmに関して、センス鎖位置3および4のミスマッチ残基は、互いに隣接し、センス鎖位置4および8のミスマッチ残基は、アンチセンス鎖の相当する残基とマッチした塩基対を形成する3つの残基によって散在される。例えば、相当するアンチセンス鎖配列とミスマッチ塩基対を形成するセンス鎖のミスマッチ耐性領域内に局在するセンス鎖の3つの残基が、これらのミスマッチ塩基対の任意の2つの間に局在する、0、1、2、3または4のマッチ塩基対で発生可能である。4つのミスマッチ塩基対を有する特定のDsiRNAmm試薬に関して、ミスマッチは、連続して発生可能であるたとえば、センス鎖ヌクレオチド配列にそって四重に。あるいは、アンチセンス鎖配列とミスマッチ塩基対を形成するセンス鎖のヌクレオチドが、アンチセンス鎖配列とマッチした塩基対を形成するヌクレオチドによって散在可能である例えば、位置4および6ではなく、位置3、5、7および8にてミスマッチヌクレオチドを有するDsiRNAmmに関して、センス鎖位置7および8のミスマッチ残基は、互いに隣接し、センス鎖位置3および5のミスマッチ残基は、アンチセンス鎖の相当する残基とマッチした塩基対を形成する1つの残基によって散在される。同様に、センス鎖位置5および7のミスマッチ残基がまた、アンチセンス鎖の相当する残基と、マッチした塩基対を形成する1つのヌクレオチドによっても散在される。例えば、相当するアンチセンス鎖配列とミスマッチ塩基対を形成するセンス鎖のミスマッチ耐性領域内に局在するセンス鎖の4つの残基が、これらのミスマッチ塩基対の任意の2つの間に局在する、0、1、2または3のマッチ塩基対で発生可能である。例えば図1でまた描写したようなナンバリングで、他の実施形態において、本発明のDsiRNAmmは、DsiRNAのアンチセンス鎖の位置17,18、19、20、21、22または23の任意の1つにて、単一のミスマッチ塩基対ヌクレオチドを有するミスマッチ耐性領域を含む位置1はアンチセンス鎖の5’末端ヌクレオチドであり、位置17は、アンチセンス鎖配列に十分相補的な標的ARRNA配列の推定Ago2切断部位のアンチセンス鎖中の3’下流隣接であるアンチセンス鎖のヌクレオチド残基である。特定の実施形態において、DsiRNAmmのセンス鎖に関して、アンチセンス鎖の位置17、18、19、20、21、22または23の任意でミスマッチ塩基対ヌクレオチドを有するDsiRNAmmに対して、アンチセンス鎖のミスマッチ塩基対ヌクレオチドは、DsiRNAmmセンス鎖配列とのみミスマッチ塩基対を形成するのみでなく、DsiRNAmm標的ARRNA配列ともミスマッチ塩基対を形成するしたがって、アンチセンス鎖配列とセンス鎖配列間の相補性は、DsiRNAmm内のミスマッチ塩基対にて中断され、相補性は同様に、DsiRNAmmのアンチセンス鎖配列と標的ARRNA配列間で中断される。他の実施形態において、DsiRNAmmのアンチセンス鎖のミスマッチ塩基対ヌクレオチドは、DsiRNAmmのセンス鎖配列の相当するヌクレオチドとミスマッチ塩基対を形成するだけでまた、その相当する標的ARRNA配列ヌクレオチドと塩基対を形成するしたがって、アンチセンス鎖配列とセンス鎖配列間の相補性は、DsiRNAmm内のミスマッチ塩基で中断し、また相補性は、DsiRNAmmのアンチセンス鎖配列と標的ARRNA配列間で維持される。以上で記述したように、ミスマッチ耐性領域内で単一ミスマッチ塩基対を有する本発明のDsiRNAmm例えば、アンチセンス鎖の位置17、18、19、20、21、22または23にてミスマッチヌクレオチド残基を持つDsiRNAmmはさらに、1、2または3つのさらなるミスマッチ塩基対を含みうる。好ましい実施形態において、DsiRNAmmのこれらの1、2または3つのさらなるミスマッチ塩基対が、アンチセンス鎖の位置17、18、19、20、21、22および/または23でそしてセンス鎖の相当する残基にて発生する。1つのさらなるミスマッチ塩基対がDsiRNAmm内に存在する1つの実施形態において、アンチセンス鎖の2つのミスマッチ塩基対が、センス鎖の相当するヌクレオチド残基にてまた発生しているミスマッチを持ってアンチセンスの位置18および位置20両方のヌクレオチドで発生しうる。2つのミスマッチ塩基対を有するDsiRNAmm試薬において、ミスマッチは連続して例えば、アンチセンス鎖ヌクレオチド配列に沿った連続位置にて発生しうる。あるいは、センス鎖配列とミスマッチ塩基対を形成するアンチセンス鎖のヌクレオチドは、センス鎖配列と塩基対形成するヌクレオチドによって散在されうる例えば位置18および19ではなく、位置17および20でミスマッチヌクレオチドを有するDsiRNAmmに対して、アンチセンス鎖位置17および20のミスマッチ残基が、センス鎖の相当する残基とマッチ塩基対を形成する2つのヌクレオチドによって散在する。例えば、相当するセンス鎖配列とミスマッチ塩基対を形成するセンス鎖のミスマッチ耐性領域内に局在するアンチセンス鎖の2つの残基は、これらのミスマッチ塩基対間に局在する0、1、2、3、4、5、6または7マッチ塩基対で発生可能である。3つのミスマッチ塩基対を有する特定のDsiRNAmm試薬に関して、ミスマッチは連続して起こりうる例えば、アンチセンス鎖ヌクレオチド配列にそって三重に。あるいは、センス鎖配列とミスマッチ塩基対を形成するアンチセンス鎖のヌクレオチドが、センス鎖配列とマッチした塩基対を形成するヌクレオチドによって散在可能である例えば、位置19、20および21ではなく、位置17、18および22にてミスマッチヌクレオチドを有するDsiRNAmmに関して、アンチセンス鎖位置17および18のミスマッチ残基は、互いに隣接し、一方アンチセンス鎖位置18および122のミスマッチ残基は、センス鎖の相当する残基とマッチした塩基対を形成する3つの残基によって散在される。例えば、相当するセンス鎖配列とミスマッチ塩基対を形成するアンチセンス鎖のミスマッチ耐性領域内に局在するアンチセンス鎖の3つの残基が、これらのミスマッチ塩基対の任意の2つの間に局在する、0、1、2、3、4、5または6のマッチ塩基対で発生可能である。4つのミスマッチ塩基対を有する特定のDsiRNAmm試薬に関して、ミスマッチは、連続して発生可能であるたとえば、アンチセンス鎖ヌクレオチド配列にそって四重に。あるいは、センス鎖配列とミスマッチ塩基対を形成するアンチセンス鎖のヌクレオチドが、センス鎖配列と塩基対を形成するヌクレオチドによって散在可能である例えば、位置19および21ではなく、位置18、20、22および23にてミスマッチヌクレオチドを有するDsiRNAmmに関して、アンチセンス鎖位置22および23のミスマッチ残基は、互いに隣接し、一方アンチセンス鎖位置18および20のミスマッチ残基は、センス鎖の相当する残基とマッチした塩基対を形成する1つの残基によって散在される-同様に、アンチセンス鎖位置20および22のミスマッチ残基がまた、センス鎖の相当する残基とマッチ塩基対を形成する1つのヌクレオチドによって散在される。例えば、相当するセンス鎖配列とミスマッチ塩基対を形成するアンチセンス鎖のミスマッチ耐性領域内に局在するアンチセンス鎖の4つの残基が、これらのミスマッチ塩基対の任意の2つの間に局在する、0、1、2、3、4または5のマッチ塩基対で発生可能である。明確化の理由のために、上記DsiRNAmm試薬内のミスマッチヌクレオチド残基の配置を、DsiRNAmmのセンスまたはアンチセンス鎖いずれかの5’末端残基に関してナンバリングする。アンチセンス鎖のミスマッチ耐性領域ミスマッチ領域内に配置される位置のナンバリングが、推定Ago2開裂部位に対するセンスまたはアンチセンス鎖の5’末端の近位での変動をもってシフト可能である。したがって、アンチセンス鎖またはセンス鎖いずれか内の好ましいミスマッチ部位の配置をまた、推定Ago2切断部位に対して、そのようなミスマッチの許容される近位として同定可能でもある。したがって、1つの好ましい実施形態において、DsiRNAmmのセンス鎖のミスマッチヌクレオチドの位置は、相当する標的ARRNA配列の推定Ago2開裂部位の5’上流直近に配置されるセンス鎖のヌクレオチド残基である。他の好ましい実施形態において、DsiRNAmmのセンス鎖のミスマッチヌクレオチドは、推定Ago2開裂部位の2ヌクレオチド5’上流、推定Ago2開裂部位の3ヌクレオチド5’上流、推定Ago2開裂部位の4ヌクレオチド5’上流、推定Ago2開裂部位の5ヌクレオチド5’上流、推定Ago2開裂部位の6ヌクレオチド5’上流、推定Ago2開裂部位の7ヌクレオチド5’上流、推定Ago2開裂部位の8ヌクレオチド5’上流または推定Ago2開裂部位の9ヌクレオチド5’上流に局在するセンス鎖のヌクレオチド残基にて位置する。典型的単一ミスマッチ-含有25/27マーDsiRNAsDsiRNAmmは、以下の構造を含むそのようなミスマッチ-含有構造はまた、本明細書で示した他の典型的DsiRNA構造内に組み込んでもよい。式中、X=RNA、D=DNAおよびM=鎖がアニールする時に、他の相補的鎖の相当するM残基と塩基対水素結合を形成しない核酸残基RNA、DNAまたは天然に存在しないまたは改変核酸。そのような試薬の任意の残基は、任意に2’-O-メチルRNAモノマーでありえ、-以上で示したように、下第二鎖の3’-末端残基から始まる2’-O-メチルRNAの交互配置をまた、以上のDsiRNAmm試薬中で使用可能でもある。上記ミスマッチ構造に関して、上鎖はセンス鎖であり、下鎖はアンチセンス鎖である。特定の実施形態において、本発明のDsiRNAは、DsiRNAの2つの鎖内のミスマッチ塩基対として必ずしも存在しない、標的ARRNA配列に関して存在するミスマッチを含みうる-したがって、DsiRNAは、DsiRNAの第一および第二鎖間で完全な相補性を有してよく、また特定の実施形態において、有効性および/または強度および/または効果の期間を促進することにおいて有益であり得る標的ARRNAに関してミスマッチ残基を有する。ミスマッチが、アンチセンス鎖と標的ARRNA配列間で発生する、特定の実施形態において、ミスマッチの位置が、標的領域の推定Ago2切断部位の5’に局在したセンス鎖の配列に相当する位置で、アンチセンス内で配置される-例えば標的配列の推定Ago2切断部位に相補的であるアンチセンス残基の3’に対して、アンチセンス鎖内に位置するアンチセンス鎖残基。標的配列に関する単一ミスマッチ残基を持つ典型的25/27マーDsiRNAsは以下の構造を含む。式中、X=RNA、D=DNAおよびE=鎖がアニールする時に、他の相補的標的鎖の相当するARNA残基と塩基対水素結合を形成せず、また任意に相当するB残基と塩基対形成するB残基はまた、RNA、DNAまたは天然に存在しないまたは改変核酸核酸残基RNA、DNAまたは天然に存在しないまたは改変核酸。そのような試薬の任意の残基は、任意に2’-O-メチルRNAモノマーでありえ、-以上で示したように、下第二鎖の3’-末端残基から始まる2’-O-メチルRNAの交互配置をまた、以上のDsiRNA試薬中で使用可能でもある。以上で例示した構造に加えて、本発明のDsiRNAはまた、標的ARRNA配列とさらなるミスマッチを形成する、1、2または3のさらなる残基を有しうる。そのようなミスマッチは連続であってよく、または標的ARRNA配列とマッチした塩基対を形成するヌクレオチドによって散在しうる。マッチした塩基対を形成するヌクレオチドによって散在される場合、ミスマッチ残基は、そのようなミスマッチ形成残基間の1、2、3、4、5、6、7または8塩基対形成ヌクレオチドの間隔にて単一鎖内で互いに離れて隔たりうる。上記DsiRNAmm試薬に対してのように、また相当するセンス鎖ヌクレオチドとミスマッチを形成してよく、または形成しなくてよい標的ARRNA配列とミスマッチ塩基対を形成するアンチセンス鎖ヌクレオチドに関して、DsiRNAs内の好ましい配置が、DsiRNAの推定Ago2切断部位に相補的なアンチセンス鎖配列の3’下流に局在するアンチセンス鎖領域内であるたとえば、図1において、推定Ago2切断部位の3’であるアンチセンス鎖の領域が、ミスマッチ形成残基に関して好ましく、図1にて示した25/27マー試薬に対するアンチセンス鎖の位置17~23に局在する。したがって、1つの実施形態において、DsiRNAmmのアンチセンス鎖の標的ARRNA配列に関するミスマッチヌクレオチドの位置が、相当する標的ARRNA配列の推定Ago2開裂部位のアンチセンス鎖配列内の3’下流直近に局在するアンチセンス鎖のヌクレオチド残基である。他の好ましい実施形態において、標的ARRNA配列に関するDsiRNAmmのアンチセンス鎖のミスマッチヌクレオチドは、相当する推定Ago2開裂部位の2ヌクレオチド3’下流、相当する推定Ago2開裂部位の3ヌクレオチド3’下流、相当する推定Ago2開裂部位の4ヌクレオチド3’下流、相当する推定Ago2開裂部位の5ヌクレオチド3’下流、相当する推定Ago2開裂部位の6ヌクレオチド3’下流、相当する推定Ago2開裂部位の7ヌクレオチド3’下流、相当する推定Ago2開裂部位の8ヌクレオチド3’下流または相当する推定Ago2開裂部位の9ヌクレオチド3’下流に局在するアンチセンス鎖のヌクレオチド残基にて位置する。アンチセンス鎖の2つのミスマッチ形成ヌクレオチドを有するDsiRNA試薬においてミスマッチ形成ヌクレオチドは、標的ARRNA配列に関してミスマッチ形成している、ミスマッチは連続して発生しうる例えば、アンチセンス鎖ヌクレオチド配列にそって連続した位置で。あるいは、標的ARRNA配列とミスマッチ塩基対を形成するアンチセンス鎖のヌクレオチドは、標的ARRNA配列と塩基対形成するヌクレオチドによって散在されうる例えば、図1で示した25/27マー試薬のアンチセンス鎖の5’末端位置1から開始して位置18および19ではなく、位置17および20でミスマッチ形成ヌクレオチドを有するDsiRNAに関して、センス鎖位置17および20のミスマッチ残基が、標的ARRNA配列の相当する残基とマッチした塩基対を形成する2つのヌクレオチドによって散在する。例えば、相当する標的ARRNA配列とミスマッチ塩基対を形成するアンチセンス鎖のミスマッチ耐性領域内に位置するアンチセンス鎖の2つの残基は、これらのミスマッチ形成塩基対間に局在する標的ARRNA配列に関する0、1、2、3、4または5つのマッチした塩基対で発生しうる。標的ARRNA配列に関してミスマッチを形成している3つのミスマッチ形成塩基対を有する特定のDsiRNAに関して、ミスマッチ形成ヌクレオチドは、連続して発生しうる例えば、アンチセンス鎖ヌクレオチド配列にそって三重に。あるいは、標的ARRNA配列とミスマッチ塩基対を形成するアンチセンス鎖のヌクレオチドが、標的ARRNA配列とマッチした塩基対を形成するヌクレオチドによって散在可能である例えば、位置19、20および21ではなく、位置17、18および22にてミスマッチヌクレオチドを有するDsiRNAに関して、アンチセンス鎖位置17および18のミスマッチ残基は、互いに隣接し、一方アンチセンス鎖位置18および22のミスマッチ形成残基は、標的ARRNA配列の相当する残基とマッチした塩基対を形成する3つの残基によって散在される。例えば、相当する標的ARRNA配列とミスマッチ塩基対を形成するアンチセンス鎖のミスマッチ耐性領域内に局在するアンチセンス鎖の3つの残基が、これらのミスマッチ塩基対の任意の2つの間に局在する、0、1、2、3または4のマッチ塩基対で発生可能である。標的ARRNA配列に関してミスマッチを形成している4つのミスマッチ形成塩基対を有する特定のDsiRNAに関して、ミスマッチ形成ヌクレオチドは、連続して発生しうる例えば、センス鎖ヌクレオチド配列にそって四重に。あるいは、標的ARRNA配列とミスマッチ塩基対を形成するアンチセンス鎖のヌクレオチドが、標的ARRNA配列と塩基対を形成するヌクレオチドによって散在可能である例えば、位置18および20ではなく、位置17、19、21および22にてミスマッチヌクレオチドを有するDsiRNAに関して、アンチセンス鎖位置21および22のミスマッチ残基は、互いに隣接し、一方アンチセンス鎖位置17および19のミスマッチ形成残基は、標的ARRNA配列の相当する残基とマッチした塩基対を形成する1つの残基によって散在される-同様に、アンチセンス鎖位置19および21のミスマッチ形成残基はまた、標的ARRNAの相当するヌクレオチドとマッチした塩基対を形成する1つのヌクレオチドによって散在される。例えば、相当する標的ARRNA配列とミスマッチ塩基対を形成するアンチセンス鎖のミスマッチ耐性領域内に局在するアンチセンス鎖の4つの残基が、これらのミスマッチ塩基対の任意の2つの間に局在する、0、1、2または3のマッチ塩基対で発生可能である。上記DsiRNAmmと他のDsiRNA構造を、DsiRNAmmとDsiRNA試薬の特定の構造を例示するために記述する。上記DsiRNAmmとDsiRNA構造のデザインを、例えば以下に示した他のDsiRNA構造のDsiRNAmm形態を産出するために適合可能である。以上で例示したように、DsiRNAsはまた、DsiRNAのアンチセンス鎖と標的配列間の単一ミスマッチまたは2、3または4ミスマッチを有するようにデザイン可能であり、また任意に、DsiRNAのセンスおよびアンチセンス鎖配列間の完全な相補性を維持可能である。以下で例示するDsiRNA試薬はまた、それらの二本鎖および/または標的ARRNA-整列構造内に、挿入/欠損in/del構造を有しうる。したがって、本発明のDsiRNAsは、例えば、ミスマッチおよび/またはミスマッチ形成塩基対の位置に関して以上で記述したそれらの局所に相当する、そのようなin/delヌクレオチドの配置に対して最適な局所で、標的ARRNA配列と比較したアンチセンス配列、および/またはセンス鎖配列と比較したアンチセンス配列中、in/del変化を有するようにデザイン可能である。本発明のDsiRNAsは、Dicerによって処理され、RISCへ積み込むガイド鎖配列から自由であるようにモデル化されるので、センス鎖の3’-末端領域/アンチセンス鎖の5’-末端領域内でミスマッチを許容可能である。そのようなミスマッチを持つ本発明の典型的DsiRNA構造には、以下が含まれ、式中X=RNA、D=DNAおよびIおよびJ=互いに塩基対水素結合を形成しない核酸残基RNA、DNAまたは天然に存在しないまたは改変核酸で、また任意にJは、標的RNA配列ヌクレオチドHに相補的である。そのような試薬の任意の残基は、任意に2’-O-メチルRNAモノマーでありえ、-以上で示したように、下第二鎖の3’-末端残基から始まる2’-O-メチルRNAの交互配置-または任意の上記メチル化パターン-をまた、以上のDsiRNA試薬中で使用可能でもある。上記ミスマッチはまた、本発明のDsiRNAs内で組み合わせ可能である。以下の構造において、そのようなミスマッチは、非対称AR-770DsiRNA新規に導入されたミスマッチ残基はイタリック体である内に導入される。AR-77025/27merのDsiRNA、ミスマッチ位置=5’末端よりセンス鎖の22任意に、センス鎖の位置22のミスマッチA残基は、あるいはUまたはGである。AR-77025/27マーDsiRNA、ミスマッチ位置=センス鎖の23任意に、センス鎖の位置23のミスマッチG残基は、あるいはAまたはCである。AR-77025/27マーDsiRNA、ミスマッチ位置=センス鎖の24任意に、センス鎖の位置24のミスマッチg残基は、あるいはaまたはcである。AR-77025/27マーDsiRNA、ミスマッチ位置=センス鎖の25任意に、センス鎖の位置25のミスマッチc残基は、あるいはtまたはgである。AR-77025/27マーDsiRNA、ミスマッチ位置=アンチセンス鎖の1任意に、アンチセンス鎖の位置1のミスマッチG残基は、あるいはAまたはCである。AR-77025/27マーDsiRNA、ミスマッチ位置=アンチセンス鎖の2任意に、アンチセンス鎖の位置2のミスマッチC残基は、あるいはGまたはUである。AR-77025/27マーDsiRNA、ミスマッチ位置=アンチセンス鎖の3任意に、アンチセンス鎖の位置3のミスマッチC残基は、あるいはUまたはGである。AR-77025/27マーDsiRNA、ミスマッチ位置=アンチセンス鎖の4任意に、アンチセンス鎖の位置4のミスマッチU残基は、あるいはAまたはCである。さらなる実施例として、そのようなミスマッチは、非対称AR-2813、AR-2815およびAR-3599DsiRNAに導入される新規に導入されたミスマッチ残基はイタリック体である。AR-281325/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=5’-末端からセンス鎖の22任意に、センス鎖の位置22のミスマッチC残基は、あるいはAまたはGである。AR-281325/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=センス鎖の23任意に、センス鎖の位置23のミスマッチA残基は、あるいはCまたはUである。AR-281325/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=センス鎖の24任意に、センス鎖の位置24のミスマッチc残基は、あるいはtまたはgである。AR-281325/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=センス鎖の25任意に、センス鎖の位置25のミスマッチc残基は、あるいはtまたはgである。AR-281325/27マーDsiRNA、ミスマッチ位置=アンチセンス鎖の1任意に、アンチセンス鎖の位置1のミスマッチC残基は、あるいはAまたはGである。AR-281325/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=アンチセンス鎖の2任意に、アンチセンス鎖の位置2のミスマッチC残基は、あるいはGまたはAである。AR-281325/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=アンチセンス鎖の3任意に、アンチセンス鎖の位置3のミスマッチA残基は、あるいはUまたはGである。AR-281325/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=アンチセンス鎖の4任意に、アンチセンス鎖の位置4のミスマッチC残基は、あるいはUまたはGである。AR-281525/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=5’-末端からセンス鎖の22任意に、センス鎖の位置22のミスマッチC残基は、あるいはUまたはGである。AR-281525/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=センス鎖の23任意に、センス鎖の位置23のミスマッチC残基は、あるいはGまたはUである。AR-281525/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=センス鎖の24任意に、センス鎖の位置24のミスマッチa残基は、あるいはtまたはcである。AR-281525/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=センス鎖の25任意に、センス鎖の位置25のミスマッチa残基は、あるいはtまたはgである。AR-281525/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=アンチセンス鎖の1任意に、アンチセンス鎖の位置1のミスマッチA残基は、あるいはUまたはCである。AR-281525/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=アンチセンス鎖の2任意に、アンチセンス鎖の位置2のミスマッチA残基は、あるいはGまたはUである。AR-281525/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=アンチセンス鎖の3任意に、アンチセンス鎖の位置3のミスマッチC残基は、あるいはGまたはAである。AR-281525/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=アンチセンス鎖の4任意に、アンチセンス鎖の位置4のミスマッチC残基は、あるいはGまたはAである。AR-359925/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=5’-末端からセンス鎖の22任意に、センス鎖の位置22のミスマッチA残基は、あるいはUまたはGである。AR-359925/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=センス鎖の23任意に、センス鎖の位置23のミスマッチC残基は、あるいはGまたはAである。AR-359925/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=センス鎖の24任意に、センス鎖の位置24のミスマッチc残基は、あるいはaまたはgである。AR-359925/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=センス鎖の25任意に、センス鎖の位置25のミスマッチc残基は、あるいはaまたはgである。AR-359925/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=アンチセンス鎖の1任意に、アンチセンス鎖の位置1のミスマッチC残基は、あるいはUまたはGである。AR-359925/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=アンチセンス鎖の2任意に、アンチセンス鎖の位置2のミスマッチC残基は、あるいはGまたはUである。AR-359925/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=アンチセンス鎖の3任意に、アンチセンス鎖の位置3のミスマッチC残基は、あるいはUまたはGである。AR-359925/27merDsiRNA、ミスマッチ位置=アンチセンス鎖の4任意に、アンチセンス鎖の位置4のミスマッチA残基は、あるいはUまたはCである。以上で記したように、そのようなミスマッチの導入は、本明細書で記述した任意のDsiRNAs上で実施可能である。そのようなDsiRNA構造のミスマッチは、例えばセンス鎖の3’末端4ヌクレオチド/アンチセンス鎖5’末端4ヌクレオチド内に2、3または4ミスマッチを有するDsiRNAを産出するために混合可能である。実際、センス鎖の3’末端残基/アンチセンス鎖の5’末端残基にてDsiRNA内に導入可能な配列の柔軟性に関して、特定の実施形態において、本発明の非対称DsiRNAの配列要求を以下の典型的なAR-770DsiRNA配列に関して示したミニマリスト構造で表すことが出来る。式中n=1~5、1~10、1~20、1~30、1~50、または1~80またはそれ以上。AR-770標的:AR標的目標はまた、その相補的標的部位が、規定された標的部位と重なる、1つまたはそれ以上の種々のオリゴヌクレオチドによって標的とされる部位であり得る。例えば、典型的AR-2813DsiRNAに関して、AR配列に重なり、わずかばかり補正されたAR配列を標的としている特定のDsiRNAsが、AR-2808のものと同様の活性レベルを示しうる特に、図2のAR-2815およびAR2808DsiRNAを参照のこと。したがって、特定の実施形態において、デザインされた標的配列領域は、広く重なっている配列を有している一連のDsiRNAsによって効果的に標的とされる例えばAR-2813部位の周辺のDsiRNAsを考慮する場合、より包括的なAR標的配列が、例えば5’-CCCAGCCGCAATGCCTGATCTGTGGAGATGAAGC-3’配列番号:3783として引用されえ、そこで任意のDsiRNA例えば、AR-2808、AR2809、AR-2810、AR-2811、AR-2812、AR-2813、AR-2814およびAR-2815から選択されるDsiRNAsのみが、そのような配列領域内のサブ配列を標的とし、また全配列は、そのような一連のDsiRNAsに対する実行可能な標的と考慮可能である。さらに、および/またはあるいは、センス鎖の3’末端4ヌクレオチド/アンチセンス鎖の5’末端4ヌクレオチド内のミスマッチを、以上で記述したように、他のミスマッチ耐性位置にて位置するミスマッチと混合可能である。特定のAR配列の標的化を介して、ARレベルの阻害剤として、上記Dicer基質試薬DsiRNAsの本同定を考慮して、本明細書で記述したものと同様の構造を持つDsiRNAsがまた、配列番号:3766、配列番号:3768または配列番号:3770のAR配列内、またはそれらの変異体例えば、配列番号:3766、配列番号:3768または配列番号:3770の配列に対して、80同一性、90同一性、95同一性、96同一性、97同一性、98同一性、99同一性またはそれ以上の同一性を有する標的配列内の他の配列を標的とするように合成可能である。抗-ARDsiRNAデザイン/合成25~35ヌクレオチド、とりわけ25~30ヌクレオチドのより長いdsRNA種DsiRNAsが、19~23マーsiRNA試薬と比較して、活性の強度および期間に関して、予期せぬ効果的な結果を与えることが、実験的にわかってきた。dsRNA処理機構の根本的な理論にとらわれずに、より長いdsRNA種が細胞の細胞質中のDicer酵素に対する基質として働くことが考えられる。本発明のdsRNAをより短い区画に分割することに加えて、Dicerは、分割されたdsRNAから由来する一本鎖分割産物の、標的遺伝子ARまたはAR-関連疾患または疾病と関連する他の遺伝子から由来する細胞質RNA例えばARRNAの崩壊に関与するRISC複合体内への導入を促進すると考えられる。先行する研究Rossietal.,米国特許第2007/0265220号明細書は、DicerによるdsRNA種特にDsiRNA試薬の開裂性が、dsRNA種の活性の強度および期間の増加と一致することを示した。特定の好ましい抗-ARDsiRNA試薬を、プレスクリーンした集団から選択した。DsiRNAsのデザインは任意に、配列の領域に広がっている可能性のある多数のDsiRNA試薬の推定有効性/効率のinsilico査定にて実施する予測スコアリングアルゴリズムの利用を含みうる。より最近のv3アルゴリズムは、本技術分野ですでに利用可能なsiRNAスコアリングアルゴリズムに関する理論的に改善されたアルゴリズムを表すけれども、そのようなスコアリングアルゴリズムのデザインに関する情報は、例えば、Gongetal.BMCBioinformatics2006,7:516で見ることができる例えばv3およびv4スコアリングアルゴリズムは、ヒト配列中の任意のバイアスに依存していない機械学習アルゴリズムである。さらに、v3およびv4アルゴリズムは、Gongetal.にて記述されたデバイスのような、より古いv2アルゴリズムからのものよりも、複数倍大きいデータ組から由来する。本発明のDsiRNA試薬の第一および第二オリゴヌクレオチドは、完全に相補的であることを必要としない。実際、1つの実施形態において、センス鎖の3’-末端は、1つまたはそれ以上のミスマッチを含む。1つの様態において、2つのミスマッチが、センス鎖の3’末端に組み込まれる。他の実施形態において、本発明のDsiRNAは、それぞれが長さにおいて27ヌクレオチドであり、互いにアニールした時に、センス鎖の3’末端アンチセンス鎖の5’末端上に平滑筋末端と2つのヌクレオチド末端を持つ、2つのRNAオリゴヌクレオチドを含む二本鎖RNA分子である。特に3’-センス/5’-アンチセンス位置でのミスマッチまたは熱力学的安定性の減少の利用が、おそらくsiRNAのRISCへの進入とともに発生する速度制限巻き戻し段階に影響を与えることによって、アンチセンス鎖のRISCへの進入を促進するまたは有利に働かせるために提案されてきたSchwarzetal.,2003,Cell115:199-208;Khvorovaetal.,2003,Cell115:209-216。したがって、末端塩基組成物は、活性21マーsiRNA二本鎖を選択するためのデザインアルゴリズムに含まれてきたUi-Teietal.,2004,NucleicAcidsRes32:936-948;Reynoldsetal.,2004,NatBiotechnol22:326-330。本実施形態のdsRNAのDicer開裂で、ミスマッチを含む小さな最終末端配列が、アンチセンス鎖と対を形成しないままであるか3’-オーバーハングの一部となる、または最終21-マーsiRNAを完全に開裂して除去されるか、いずれかである。これらのミスマッチはしたがって、RISCの最終RNA組成物中のミスマッチとして持続しない。Dicer基質のセンス鎖の3’-末端での塩基ミスマッチまたは区画の不安定化がおそらくDicerによる処理を促進することによって、RNAi中の合成二本鎖の強度を改善したという発見が、25~30マーdsRNAsのデザインと利用を記述している過去の働きの驚くべき発見であったまた本明細書でDsiRNAsと呼ぶ。米国特許第2005/0277610号明細書、第2005/0244858号明細書および第2007/0265220号明細書。抗-ARDsiRNAの修飾二本鎖RNAsdsRNAsの効果を阻害する1つの主要な因子は、ヌクレアーゼによるdsRNAs例えばsiRNAsおよびDsiRNAsの分解である。3’-エキソヌクレアーゼは、血清中に存在する第一ヌクレアーゼ活性であり、アンチセンスDNAオリゴヌクレオチドの3’-末端の改変が、分解を防止するために重要であるEderetal.,1991,AntisenseResDev,1:141-151。RNase-Tファミリーヌクレアーゼは同定され、siRNAsの制御および分解に関与する3’から5’エキソヌクレアーゼ活性を持つERI-1と呼ばれたKennedyetal.,2004,Nature427:645-649;Hongetal.,2005,BiochemJ,390:675-679。この遺伝子はまた、マウス内でのThex1NM_02067またはヒト内でのTHEX1NM_153332として知られ、ヒストンmRNAの分解に関与し、またsiRNAs中の3’-オーバーハングの分解を仲介するが、二本鎖RNAを分解しないYangetal.,2006,JBiolChem,281:30447-30454。したがって、本発明のDsiRNAsを含む、dsRNAsの3’-末端-安定化が安定性を改善すると予測することが合理的である。XRN1NM_019001は、P-体中に存在し、miRNAによって標的化されたmRNAの分解に関与してきた5’から3’エキソヌクレアーゼでありRehwinkeletal.,2005,RNA11:1640-1647、またsiRNAによって指向されるような内部開裂によって開始される分解を完了するのに関与しうる。XRN2NM_012255は、核RNA処理に関与する異なる5’から3’エキソヌクレアーゼである。RNaseAは、RNAsを分解する哺乳動物における主要なエンドヌクレアーゼ活性である。ssRNAに対して特異的であり、ピリミジン塩基の3’-末端で開裂する。RNaseA開裂と一致するsiRNA分解産物は、血清中でのインキュベーション後、質量分析によって検出可能であるTurneretal.,2007,MolBiosyst3:43~50。3’-オーバーハングは、RNase分解に対するsiRNAの感受性を増強する。血清からのRNaseAの枯渇が、siRNAsの分解を減少させ、この分解が配列優先傾向を見せ、末端上でポリA/U配列を持つ配列に対してより悪いHaupenthaletal.,2006BichemPharmacol71:702-710。このことは、二本鎖のより安定性の低い領域が、呼吸をしえ、RNaseAによる分解に対して利用可能な一時的な一本鎖種を提供することを示唆している。RNaseA阻害剤を血清に加え、siRNA寿命および強度を改善可能であるHaupenthaletal.,2007,IntJ.Cancer121:206-210。21マー中、ホスホロチオエートまたはボラノホスフェート改変が、ヌクレオチド内リン酸結合を直接安定化させる。ボラノホスフェート改変RNAsは、ヌクレアーゼ耐性が高く、サイレンシング試薬として強力であり、比較的無毒性である。ボラノホスフェート改変RNAsは、標準の化学合成方法を用いて製造できず、代わりにinvitro転写IVTによって作製されるHalletal.,2004,NucleicAcidsRes32:5991-6000;Halletal.,2006,NucleicAcidsRes34:2773-2781。ホスホロチオエートPS改変は、任意の望む位置で、RNA二本鎖中簡単に配置可能であり、標準の化学合成方法を用いて作製可能である。PS改変は、用量依存毒性を示し、それにより、ほとんどの研究者は、siRNAs内への組み込みの制限を推奨し、ヌクレアーゼからの保護が最も重要な3’-末端が好まれるHarborthetal.,2003,AntisenseNucleicAcidDrugDev13:83-105;ChiuandRana,2003,MolCell10:549-561;Braaschetal.,2003,Biochemistry42:7967-7975;Amarzguiouietal.,2003,NucleicAcidsResearch31:589-595。より広範囲なPS改変が、強力なRNAi活性と両立可能であるが、しかし2’-O-メチルRNAのような糖改変の利用がよりすぐれている可能性があるChoungetal.,2006,BiochemBiophysResCommun342:919-927。種々の置換基を、一般的に二本鎖安定性Tmを増加させ、ヌクレアーゼ耐性を大きく改善可能な、リボースの2’-位置に配置可能である。2’-O-メチルRNAは、哺乳動物リボソームRNAsおよび転写RNAsにて見られる、天然に存在する改変である。siRNAs中の2’-O-メチル改変が公知であるが、二本鎖内の改変塩基の実際の位置が、強度を保つために重要であり、RNAに対する2’-O-メチルRNAの完全な置換は、siRNAを不活性化する。例えば、交互2’-O-メチル塩基を使用するパターンは、改変されていないRNAと等価の強度を持ち得、血清中極めて安定であるChoungetal.,2006,BiochemBiophysResCommun342:919-927;Czaudernaetal.,2003,NucleicAcidsResearch31:2705-2716。2’-フルオロ2’-F改変はまた、dsRNA例えばsiRNAおよびDsiRNA機能と両立可能であり、試薬コストおよび利用可能性のため最も一般的にはピリジン部位に位置し、プリン位置にて2’-O-メチル改変と組み合わせ可能であり、2’-Fプリンが利用でき、使用可能である。この種類の非常に改変された二本鎖は、invitroにて、RNAiの強力なトリガーでありえAllersonetal.,2005,JMedChem48:901-904;Prakashetal.,2005,JMedChem48:4247-4253;KraynackandBaker,2006,RNA12:163-176、invivoで使用した時に、活性の性能を改善し、期間を延長可能であるMorrisseyetal.,2005,Hepatology41:1349-1356;Morrisseyetal.,2005,NatBiotechnol23:1002-1007。非常に強力で、ヌクレアーゼ安定である、交互2’-Fおよび2’-O-Me塩基を含む平滑19マーの二本鎖が、Alleronによって教示された。このデザインにおいて、交互2’-O-Me残基は、Czaudernaによって使用されたものと同一のパターンで配置されるが、しかし残りのRNA残基は2’-F改変塩基に変換される。Morrisseyによって使用された、非常に強力な、ヌクレアーゼ耐性のsiRNAは、invivoにおいて、非常に強力な、ヌクレアーゼ耐性siRNAを使用した。2’-O-MeRNAおよび2’-FRNAに加えて、この二本鎖は、DNA、RNA、逆脱塩基残基、および3’-末端PSヌクレオシド内結合を含む。広範囲の改変は、特定の利点を持つ一方で、二本鎖のより制限された改変もまた、invivo性能を改善し、製造がより単純で、よりコストがかからない。Soutscheketal.2004,Nature432:173-178は、invivoで二本鎖を使用し、主に2つの2’-O-MeRNA塩基および制限された3’-末端PSヌクレオシド内結合を持つRNAであった。ロック核酸LNAsは、dsRNA例えばsiRNAおよびDsiRNAを安定させるために使用可能な異なる種類の2’-改変である。強度を維持するLNA組み込みのパターンは、2’-O-メチルまたは2’-F-塩基よりも制限され、そのように制限された改変が好ましいBraaschetal.,2003,Biochemistry42:7967-7975;Grunwelleretal.,2003,NucleicAcidsRes31:3185-3193;Elmenetal.,2005,NucleicAcidsRes33:439-447。制限された組み込みでさえ、LNA改変の利用は、invivoにてdsRNAの性能を改善可能であり、標的効果特性を変えるか、改善しうるMooketal.,2007,MolCancerTher6:833-843。細胞内または生動物内に導入された合成核酸は、外来として認識され、免疫応答を引き起こしうる。免疫刺激は、劇的に実験結果を変化させ、細胞死を導きさえする的外れの効果の主な種類を構成する。生来の免疫システムには、これらの応答を仲介するDNAおよびRNAととりわけ相互作用する受容体分子の集団が含まれ、その幾つかは、細胞質内に局在し、その幾つかはエンドソーム内に存在するMarquesandWilliams,2005,NatBiotechnol23:1399-1405;Schleeetal.,2006,MolTher14:463-470。カチオン性脂質またはリポソームによるsiRNAsの伝達は、siRNAを、細胞質およびエンドソーム区画両方へ曝露させ、invitroおよびinvivo両方で、1型インターフェロンIFN応答を引き起こすリスクを最大化するMorrisseyetal.,2005,NatBiotechnol23:1002-1007;SioudandSorensen,2003,BiochemBiophysResCommun312:1220-1225;Sioud,2005,JMolBiol348:1079-1090;Maetal.,2005,BiochemBiophysResCommun330:755-759。細胞内に転写されたRNAsは免疫原性が少なくRobbinsetal.,2006NatBiotechnl24:566-571、脂質に基づく方法を用いて伝達した時に免疫原性である合成RNAsは、invivoでさえ、機械的方法によって細胞内に導入された時に、免疫刺激を逃れるHeideletal.,2004,NatBiotechnol22:1579-1582。しかしながら、脂質に基づく伝達方法は一般的で、効果的で、広く使用される。とりわけ、全ての細胞型が存在し、免疫応答が産出されるリスクが最も高いinvivo適用に対して、免疫応答を防止するためのいくつかの一般的な戦略が必要である。化学的に改変したRNAsの利用が、これらの問題のほとんどまたはすべてを解決しうる。特定の実施形態において、改変がAR阻害活性を有することからDsiRNA試薬を阻害しない限り、改変を本発明の抗ARDsiRNA中に含められる。1つの実施形態において、1つまたはそれ以上の改変が、DsiRNA試薬のDicer処理を増強するように実施されるDsiRNAのDicer処理を測定するためのアッセイが上記されている。第二実施形態において、1つまたはそれ以上の改変が、より効果的なAR阻害となるように実施される本明細書で記述したように。DsiRANのAR阻害/AR阻害活性は、RNAレベルを測定するため、またはARポリペプチドレベルを測定するための本技術分野で認識されている方法を介してアッセイ可能であり、そのようなレベルは、たとえばARmRNAレベルの査定の代わりに、または加えて査定されるべきである。第三の実施形態において、1またはそれ以上の改変が、より大きなAR阻害活性を支持するように実施されるAR阻害活性を決定する方法は上記されている。第四の実施形態において、1つまたはそれ以上の改変が、細胞に伝達されるべき各DsiRNA試薬分子あたりのAR阻害活性がより強力な強度となるように実施されるAR阻害活性の強度が上記されている。改変は、配列内の3’-末端領域、5’-末端領域にて、3’-末端領域と5’-末端領域両方にて、または例えば種々の位置で組み入れることが可能である。以上で記した制限を考慮して、改変の数および組み合わせをDsiRNA試薬内に組み込むことが可能である。多数の改変が存在する場合、それらは同一であるか、または異なってよい。塩基、糖部位、リン酸骨格およびそれらの組み合わせに対する改変が企図される。いずれかの5’-末端がリン酸化可能である。リン酸骨格に対して企図される改変の例には、メチルホスフェート、ホスホロチオエート、およびアルキルホスホトリエステルのようなホスホトリエステル改変などを含むリン酸塩が含まれる。糖部位に対して企図される改変の例には、2’-O-メチルのような2’-アルキルピリミジン、2’-フルオロ、アミノおよびデオキシ改変などが含まれる例えば、Amarzguiouietal.,2003,NucleicAcidsResearch31:589-595を参照のこと。塩基に対して企図される改変の例には、脱塩基糖2-O-アルキル改変ピリミジン類、4-チオウラシル、5-ブロモウラシル、5-ヨードウラシルおよび5-3-アミノアルキル-ウラシルなどが含まれる。ロック核酸またはLNA’sも組み込むことが可能である。多くの他の改変が公知であり、以上の基準を満足させる限り使用可能である。改変の例はまた、米国特許題5,684,143号明細書、第5,858,988号明細書および第6,291,438号明細書、および米国特許第2004/0203145A1号明細書に開示されている。他の改変は、Herdewijn2000,AntisenseNucleicAcidDrugDev10:297-310,Eckstein2000,AntisenseNucleicAcidDrugDev10:117-21、Rusckowskietal.2000,AntisenseNucleicAcidDrugDev10:333-345、Steinetal.2001,AntisenseNucleicAcidDrugDev11:317-25、Vorobjevetal.2001,AntisenseNucleicAcidDrugDev11:77-85にて開示されている。企図される1つまたはそれ以上の改変をいずれかの鎖内に組み込むことが可能である。DsiRNA試薬中の改変の位置は、より強力な強度および安定性の授与、毒性の減少、Dicer処理の増強および免疫応答の最小化を含む、DsiRNA試薬の特徴に大きく影響を与えうる。1つの実施形態において、アンチセンス鎖またはセンス鎖、または両方の鎖が、1つまたはそれ以上の2’-O-メチル改変ヌクレオチドを持つ。他の実施形態において、アンチセンス鎖は、2’-O-メチル改変ヌクレオチドを含む。他の実施形態において、アンチセンス鎖は、2’-O-メチル改変ヌクレオチドからなる3’オーバーハングを含む。アンチセンス鎖はまた、さらなる2’-O-メチル改変ヌクレオチドを含みうる。本発明の特定の実施形態において、抗-ARDsiRNA試薬は、1つまたはそれ以上の以下の特徴を持つ。iDsiRNA試薬は非対称であり、例えばアンチセンス鎖上に3’オーバーハングを持つ、およびiiDsiRNA試薬は、活性siRNAへのdsRNAのDicer結合と処理の方向を指向するために、センス鎖上に改変3’末端を持つ。本実施形態にしたがって、dsRNA中最も長い鎖は、25~35ヌクレオチド例えば25、26、27、28、29、30、31、32、33、34または35ヌクレオチドを含む。特定のそのような実施形態において、DsiRNA試薬は、センス鎖が25~34ヌクレオチドを含み、センス鎖の3’末端が、アンチセンス鎖の5’末端と平滑末端を形成し、一方アンチセンス鎖が26~35ヌクレオチドを含み、アンチセンス鎖の3’末端上にオーバーハングを形成するように非対称である。1つの実施形態において、DsiRNA試薬は、センス鎖が25~38ヌクレオチドを含み、アンチセンス鎖が25~30ヌクレオチドを含むように非対称である。したがって、得られたdsRNAは、アンチセンス鎖の3’末端上にオーバーハングを持つ。オーバーハングは、1~4ヌクレオチド、例えば2ヌクレオチドである。センス鎖はまた5’リン酸を持ちうる。他の実施形態において、DsiRNA試薬のセンス鎖を、センス鎖の3’末端に位置する好適な修飾因子によりDicer処理のために改変し、すなわちDsiRNA試薬が、Dicer結合および処理の方向を指向するようにデザインされる。好適な修飾因子には、デオキシリボヌクレオチド、ジデオキシリボヌクレオチド、アシクロヌクレオチドなど、および蛍光分子などのような立体的に込み入った分子が含まれる。アシクロヌクレオチドは、dNMPs中に通常存在する2’-デオキシリボフラノシル糖の代わりに、2-ヒドロキシエトキシメチル基を置換する。他のヌクレオチド修飾因子には、3’-デオキシアデノシンコルジセピン、3’-アジド-3’-デオキシチミジンAZT、2’、3’-ジデオキシイノシンddI、2’、3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン3TC、2’、3’-ジデオキシチミジンd4T、および3’-アジド-3’-デオキシチミジンAZTの一リン酸ヌクレオチド、2’、3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン3TCおよび2’、3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシチミジンd4Tが含まれうる。1つの実施形態において、デオキシヌクレオチドを修飾因子として使用する。ヌクレオチド修飾因子を使用する時に、1~3ヌクレオチド修飾因子、または2ヌクレオチド修飾因子を、センス鎖の3’末端上のリボヌクレオチドの代わりに使用する。立体的に込み入った分子を使用する場合、それらは、アンチセンス鎖の3’末端にてリボヌクレオチドに接続する。したがって、鎖の長さは、修飾因子の組み込みにともなって変化しない。他の実施形態において、本発明は、アンチセンス鎖のDicer処理の方向を指向するために、DsiRNA試薬中の2つのDNA塩基を置換することを企図する。本発明のさらなる実施形態において、2つの末端DNA塩基を、センス鎖の3’末端とアンチセンス鎖の5’末端上で、二本鎖の平滑末端を形成しているセンス鎖の3’-末端上の2つのリボヌクレオチドの代わりに使用し、2つのヌクレオチドRNAオーバーハングは、アンチセンスの3’-末端に位置する。これは、平滑末端上にDNA、オーバーハング末端上にRNA塩基を持つ、非対称組成物である。本発明のDsiRNA試薬のセンスおよびアンチセンス鎖は、細胞の細胞質中で見られる条件のような、生物学的条件下でアニールする。さらに、DsiRNA試薬の、とりわけアンチセンス鎖の、1つの配列の一領域が、少なくとも15特定の実施形態において、19ヌクレオチドの配列長を持ち、そこでこれらの残基は、例えば、アンチセンス鎖の3’末端に隣接する21-ヌクレオチド領域中アンチセンス鎖の3’末端に隣接し、標的ARRNAのヌクレオチド配列に十分相補的である。さらに、DsiRNA試薬構造は、Dicerの開裂から産出されるオリゴヌクレオチド区画が、遺伝子発現を阻害することにおいてもっとも効果的であるオリゴヌクレオチドの部分であり得ることを確かにするために最適化可能である。例えば、本発明の1つの実施形態において、DsiRNA試薬構造の27-bpオリゴヌクレオチドが合成され、そこで予想される遺伝子発現を阻害する21~22-bp区画が、アンチセンス鎖の3’末端上に局在する。アンチセンス鎖の5’-末端上に局在する残りの塩基は、Dicerによって開裂され、捨てられる。この開裂された部分は均一であるかすなわち標的配列の配列に基づく、または不均一であり、核酸鎖を伸長するために加えられる。DsiRNA試薬はまた、1つまたはそれ以上の以下のさらなる特徴を持ちうる。aアンチセンス鎖は、典型的に21マーから右シフトを持つ例えば、DsiRNAは、DsiRNA内の推定Dicer開裂部位の5’まで伸長するアンチセンス鎖ヌクレオチドの長さを含み、そのようなアンチセンス鎖ヌクレオチドは、センス鎖中の推定Dicer開裂の3’を伸長しているセンス鎖の相当するヌクレオチドと塩基対を形成する、b鎖は、完全に相補的でなくてよい、すなわち鎖は、単一のミスマッチ塩基対を含んでよいミスマッチ塩基対を有するDsiRNAのAR阻害活性が、十分なレベルで維持される例えばミスマッチ塩基対を有しない相当するDsiRNAと比較して、少なくとも50AR阻害活性またはそれ以上、少なくとも60AR阻害活性またはそれ以上、少なくとも70AR阻害活性またはそれ以上、少なくとも80AR阻害活性またはそれ以上、少なくとも90AR阻害活性またはそれ以上または少なくとも95AR阻害活性またはそれ以上を維持するという条件で、特定の実施形態において、本発明のDsiRNAsは、1、2、3、4または5またはそれ以上のミスマッチ塩基対を有する。特定の実施形態において、ミスマッチ塩基対は、DsiRNAのアンチセンスとセンス鎖の間に存在する。いくつかの実施形態において、ミスマッチ塩基対は、アンチセンス鎖と標的RNA間に存在するまたは存在すると予想される。特定の実施形態において、アンチセンス鎖残基と、想定Ago2開裂部位の標的RNA配列中3’に局在する標的RNA内の相当する残基間でのミスマッチ塩基対の存在が維持され、本発明のDsiRNAのAR阻害活性を増強してもよい、cロック核酸のような塩基改変が、センス鎖の5’末端に含まれてよい。典型的21マーsiRNAは、従来の技術を用いてデザインされる。1つの技術において、種々の部位が、平行して、または試薬の1つが効果的であるという希望とともに、同一の標的に特異的な種々の異なるsiRNA二本鎖を含むプール中で一般に試験されるJietal.,2003,FEBSLett552:247-252。他の技術は、活性RNAi効果器分子を得る可能性を増加させるためのデザインルールおよびアルゴリズムを使用するSchwarzetal.,2003,Cell115:199-208;Khvorovaetal.,2003,Cell115:209-216;Ui-Teietal.,2004,NucleicAcidsRes32:936-948;Reynoldsetal.,2004,NatBiotechnol22:326-330;Kroletal.,2004,JBiolChem279:42230-42239;Yuanetal.,2004,NuclAcidsRes32ウェブ発行:W130-134;Boeseetal.,2005,MethodsEnzymol392:73-96。siRNAのハイスループット選別もまた開発されてきた米国特許第2005.0042641A1号明細書。潜在的標的部位をまた、二次構造予測によって解析可能であるHealeetal.,2005,NucleicAcidsRes333:e30。ついで、この21マーを、21マーの5’末端上に3~9のさらなるヌクレオチドを含めるために、右シフトをデザインするために使用する。これらのさらなるヌクレオチドの配列は制限されない。1つの実施形態において、追加したリボヌクレオチドは、標的遺伝子の配列に基づく。本実施形態においてさえ、標的配列とアンチセンスsiRNA間の完全な相補性は要求されない。本発明のDsiRNA試薬の第一および第二オリゴヌクレオチドは、完全な相補性を要求されない。これらは、生物学的条件下でアニールするのに、また標的配列に対して十分相補的なsiRNAを産出するDicerに対する基質を提供するのに十分相補的である必要があるのみである。ロック核酸またはLNA’sが当業者によく公知であるElmenetal.,2005,NucleicAcidsRes33:439-447;Kurrecketal.,2002,NucleicAcidsRes30:1911-1918;Crinellietal.,2002,NucleicAcidsRes30:2435-2443;BraaschandCorey,2001,ChemBiol8:1-7;Bondensgaardetal.,2000,Chemistry6:2687-2695;Wahlestedtetal.,2000,ProcNatlAcadSciUSA97:5633-5638。1つの実施形態において、LNAをセンス鎖の5’末端に組み込む。他の実施形態において、LNAを、アンチセンス鎖上に3’オーバーハングを含むようにデザインされた二本鎖中のセンス鎖の5’末端に組み込む。特定の実施形態において、本発明のDsiRNA試薬は、25-塩基対長を持つセンス鎖と、2塩基3’-オーバーハングを持つ27-塩基対長を持つアンチセンス鎖の非対称構造を持つ。他の実施形態において、非対称構造を持つこのDsiRNA試薬はさらに、2つのリボヌクレオチドの代わりに、センス鎖の3’末端にて2-デオキシヌクレオチドを含む。2つの別々のオリゴヌクレオチドを含む、特定のDsiRNA試薬組成物が、三次構造によって連結可能である。三次構造は、DsiRNA試薬上のDicer活性を阻害せず、標的遺伝子から転写されたRNAの指向崩壊を干渉しない。1つの実施形態において、三次構造は、化学結合基であってよい。多くの好適な化学結合基が本技術分野で公知であり、使用可能である。あるいは、三次構造は、ヘアピン構造が、dsRNA組成物を作製している2つのオリゴヌクレオチドのアニーリングに際して産出されるような様式で、DsiRNA試薬の2つのオリゴヌクレオチドを結合させるオリゴヌクレオチドであってよい。ヘアピン構造は、DsiRNA試薬上のDicer活性を阻害せず、ARRNAの指向崩壊を干渉しない。特定の実施形態において、本発明の抗-ARDsiRNA試薬は、Dicerによるその処理を増強する種々の特徴を持つ。そのような実施形態にしたがって、DsiRNA試薬は、siRNAを産出するためにDicerによって有され、以下の特徴の少なくとも1つを有すように十分な長さを持つ。iDsiRNAは非対称である、例えばセンス鎖上に3’オーバーハングを持つ、およびiiDsiRNA試薬は、活性siRNAへのdsRNAのDicer結合と処理の方向を指向するために、アンチセンス鎖上に改変3’末端を持つ。これらの実施形態にしたがって、DsiRNA中最も長い鎖は、25~35ヌクレオチドを含む。1つの実施形態において、センス鎖は25~30ヌクレオチドを含み、アンチセンス鎖は25~28ヌクレオチドを含む。したがって、得られるdsRNAは、センス鎖の3’末端上にオーバーハングを持つ。オーバーハングは、2ヌクレオチドのような、1~4ヌクレオチドである。アンチセンス鎖は、5’リン酸を持ってもよい。特定の実施形態において、DsiRNA試薬のセンス鎖を、センス鎖の3’末端に位置する好適な修飾因子によるDicer処理のために改変し、すなわちDsiRNA試薬が、Dicer結合および処理の方向を指向するようにデザインされる。好適な修飾因子には、デオキシリボヌクレオチド、ジデオキシリボヌクレオチド、アシクロヌクレオチドなど、および蛍光分子などのような立体的に込み入った分子が含まれる。アシクロヌクレオチドは、dNMPs中に通常存在する2’-デオキシリボフラノシル糖の代わりに、2-ヒドロキシエトキシメチル基を置換する。他のヌクレオチド修飾因子には、3’-デオキシアデノシンコルジセピン、3’-アジド-3’-デオキシチミジンAZT、2’、3’-ジデオキシイノシンddI、2’、3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン3TC、2’、3’-ジデオキシチミジンd4T、および3’-アジド-3’-デオキシチミジンAZTの一リン酸ヌクレオチド、2’、3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン3TCおよび2’、3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシチミジンd4Tが含まれうる。1つの実施形態において、デオキシヌクレオチドを修飾因子として使用する。ヌクレオチド修飾因子を使用する時に、1~3ヌクレオチド修飾因子、または2ヌクレオチド修飾因子を、センス鎖の3’末端上のリボヌクレオチドの代わりに使用する。立体的に込み入った分子を使用する場合、それらは、アンチセンス鎖の3’末端にてリボヌクレオチドに接続する。したがって、鎖の長さは、修飾因子の組み込みにともなって変化しない。他の実施形態において、本発明は、アンチセンス鎖のDicer処理の方向を指向するために、DsiRNA試薬中の2つのDNA塩基を置換することを企図する。さらなる本発明において、2つの末端DNA塩基を、センス鎖の3’末端とアンチセンス鎖の5’末端上で、二本鎖の平滑末端を形成している2つのリボヌクレオチドの代わりに3’-末端上に配置し、2ヌクレオチドRNAオーバーハングをアンチセンス鎖の3’末端上に配置する。これは、平滑末端上にDNA、オーバーハング末端上にRNA塩基を持つ、非対称組成物である。特定の他の実施形態において、DsiRNA試薬のアンチセンス鎖を、アンチセンス鎖の3’末端に位置する好適な修飾因子によるDicer処理のために改変し、すなわちDsiRNA試薬が、Dicer結合および処理の直接の方向を指向するようにデザインされる。好適な修飾因子には、デオキシリボヌクレオチド、ジデオキシリボヌクレオチド、アシクロヌクレオチドなど、および蛍光分子などのような立体的に込み入った分子が含まれる。アシクロヌクレオチドは、dNMPs中に通常存在する2’-デオキシリボフラノシル糖の代わりに、2-ヒドロキシエトキシメチル基を置換する。他のヌクレオチド修飾因子には、3’-デオキシアデノシンコルジセピン、3’-アジド-3’-デオキシチミジンAZT、2’、3’-ジデオキシイノシンddI、2’、3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン3TC、2’、3’-ジデオキシチミジンd4T、および3’-アジド-3’-デオキシチミジンAZTの一リン酸ヌクレオチド、2’、3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン3TCおよび2’、3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシチミジンd4Tが含まれうる。1つの実施形態において、デオキシヌクレオチドを修飾因子として使用する。ヌクレオチド修飾因子を使用する時に、1~3ヌクレオチド修飾因子、または2ヌクレオチド修飾因子を、アンチセンス鎖の3’末端上のリボヌクレオチドの代わりに使用する。立体的に込み入った分子を使用する場合、それらは、アンチセンス鎖の3’末端にてリボヌクレオチドに接続する。したがって、鎖の長さは、修飾因子の組み込みにともなって変化しない。他の実施形態において、本発明は、Dicer処理の方向を指向するために、dsRNA試薬中の2つのDNA塩基を置換することを企図する。さらなる発明において、2つの末端DNA塩基を、センス鎖の5’末端とアンチセンス鎖の3’末端上で、二本鎖の平滑末端を形成している2つのリボヌクレオチドの代わりにアンチセンス鎖の3’-末端上に配置し、2ヌクレオチドRNAオーバーハングをセンス鎖の3’末端上に配置する。これはまた、平滑末端上にDNA、オーバーハング末端上にRNA塩基を持つ、非対称組成物である。センスおよびアンチセンス鎖は、細胞の細胞質中で見られる条件のような、生物学的条件下でアニールする。さらに、dsRNA試薬の、とりわけアンチセンス鎖の、1つの配列の一領域が、少なくとも19ヌクレオチドの配列長を持ち、そこでこれらのヌクレオチドは、アンチセンス鎖の3’末端に隣接し、標的ARRNAのヌクレオチド配列に十分相補的である。さらに、DsiRNA試薬構造は、Dicerの開裂から産出されるオリゴヌクレオチド区画が、遺伝子発現を阻害することにおいてもっとも効果的であるオリゴヌクレオチドの部分であり得ることを確かにするために最適化可能である。例えば、本発明の1つの実施形態において、DsiRNA試薬構造の27-bpオリゴヌクレオチドが合成され、そこで予想される遺伝子発現を阻害する21~22-bp区画が、アンチセンス鎖の3’末端上に局在する。アンチセンス鎖の5’-末端上に局在する残りの塩基は、Dicerによって開裂され、捨てられる。この開裂された部分は均一であるかすなわち標的配列の配列に基づく、または不均一であり、核酸鎖を伸長するために加えられる。米国特許出願公開第2007/0265220号明細書は、27マーDsiRNAsが、化学改変がない場合でさえ、相当する21マーsiRNA組成物に対して、血清中での改善された安定性を示すことを開示している。5’リン酸塩の添加と組み合わせた時に、以上で詳述したようなパターンで、アンチセンス鎖中の2’-O-メチルRNAの挿入のような、DsiRNAの改変が、DsiRNA試薬の安定性を改善可能である。合成RNA二本鎖中のすべての鎖への5’-リン酸塩の添加が、ヌクレアーゼ安定性の程度の制御を与えるための、高額でない、生理学的方法でありうる。本発明のdsRNA試薬の化学改変パターンは、そのような試薬の有効性を増強するためにデザインする。したがってそのような改変は、dsRNAの強度の減少を避けるため、DsiRNA試薬のDicer処理との干渉を避けるため、dsRNA試薬の生物学的流体中の安定性を改善するためヌクレアーゼ感受性を減少させるため、または生来免疫システムによる検出を阻害する、または回避するためにデザインする。そのような改変はまた、毒性であることを避けるため、および本発明の即時dsRNA試薬の製造コストの増加を避けるため、またはその簡便さに影響を与えるためにもデザインされる。AR生物学および生化学NR3C4核受容体サブファミリー3、グループC、メンバー4としても知られるARは、アンドロゲンホルモンテストステロンまたはジヒドロテストステロン:Royetal.,Vitam.Horm.55:309-52の細胞質結合によって活性化され、結果としてARの核転座となる、核受容体であるWardelletal.,Pharmacol.Rev.584:782-97。核受容体のうち、ARがプロゲステロン受容体にもっとも近く関連し、より高用量のプロゲスチン類がARを阻害することが示されてきたBardinetal.,Pharmacol.Ther.2383:443-59;RaudrantandRabe,Drugs635:463-92。アンドロゲン制御遺伝子は、男性性表現型の発現と維持のために重要である。アンドロゲン受容体の2つのイソフォームAおよびBが同定されてきたWilsonandMcPhaul,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.914:1234-8。AR-Bは110kDa全長形態であり、一方でAR-Aは全長形態のN-末端のinvitroタンパク質分解の結果である、87kDaタンパク質である。したがって、AR-Aは全長形態AR-Bの最初の187アミノ酸を欠く;Gregoryetal.,JMolEndocrinol27:309-19。他の核受容体と同様に、アンドロゲン受容体は、構造中んおモジュールであり、N-末端からC-末端まで、以下の機能的ドメインからなる。N-末端制御ドメインは、完全リガンド活性化転写活性のために必要な、残基101および370の間の活性化機能1AF-1Jensteretal.,J.Biol.Chem.270:7341-6、構造性活性結合したリガンドなしの活性に関与する、残基360および485の間の活性化機能5AF-5、FXXLFモチーフ、式中F=フェニルアラニン、L=ロイシンおよびX=任意のアミノ残基、を含む残基1~36含有二量化表面、および分子内で両方がLBDと相互作用するSchaufeleetal.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.102:9802-7、Klokketal.,Mol.Cell.Biol.275:1823-43;vanRoyenetal.J.Cell.Biol.1771:63-72370~494頭尾相互作用Langleyetal.J.Biol.Chem.27050:29983-90;Berrevoetsetal.Mol.Endocrinol.128:1172-83;Dubbinketal.Mol.Endocrinol.189:2132-50;DNA結合ドメインDBD;DBDにそって、DBDをLBDと連結する柔軟な領域である、ヒンジ領域で、本領域は、リガンド依存核局在化シグナルを含むKakuetal.Endocrinology149:3960;アゴニスト誘導活性結合したアゴニストの存在下での活性に関与する活性化機能2AF-2、分子内でN-末端FXXFLモチーフに、またはLXXLLまたは好ましくはFXXFLモチーフを含む;Dubbinketal.Mol.Endocrinol.189:2132-50コアクティベータータンパク質いずれかに結合する、AF-2、およびリガンド依存核輸出シグナルSaporitaetal.J.Biol.Chem.27843:41998-2005を含むリガンド結合ドメインLBD;およびC-末端ドメイン。公知のヒトおよびマウスARcDNAおよびポリペプチド配列には以下が含まれる。マウス野生型AR配列配列番号:3770;Mus筋肉C57BL/6AR転写産物;GeneBank寄託番号NM_013476.3DsiRNAAR阻害活性を査定するためのinvitroアッセイ細胞フリー系でのRNAiを繰り返すinvitroアッセイを使用して、ARRNA配列類を標的化しているDsiRNA構造物を評価し、したがって、DsiRNAのAR特異的遺伝子阻害活性またAR阻害活性として本明細書で引用するを査定可能である。アッセイには、ARRNAに対して指向したDsiRNA試薬との利用に適合した、Tushletal.,1999,GenesandDevelopment,13,3191-3197およびZamoreetal.,2000,Cell,101,25-33によって記述されたシステムが含まれる。合胞体胚盤葉から由来したDrosophila抽出物を、invitroにてRNAi活性を再構築するために使用する。標的RNAは、T7RNAポリメラーゼを用いる選択されたAR発現プラスミドからのinvitro転写を介して、または化学合成を介して産出される。センスおよびアンチセンスDsiRNA鎖例えば各20μMを、90°Cにて1分間、ついで37°Cにて1時間100mM酢酸カリウム、30mMHEPES-KOH、pH7.4、2mM酢酸マグネシウムのような緩衝液中でのインキュベーションによってアニールし、ついで溶解緩衝液例えば100mM酢酸カリウム、pH7.4での30mMHEPES-KOH、2mM酢酸マグネシウム中で希釈する。アニーリングをTBE緩衝液中アガロースゲル上のゲル電気泳動によってモニタし、臭化エチジウムで染色可能である。Drosophila溶解物を、脱塩素化し、溶解した酵母糖蜜寒天上で回収したOregonRハエからの0~2時間齢胚を用いて調製する。溶解物を遠心し、上清を単離する。アッセイには、50溶解物[vol/vol]、RNA10~50pM最終濃度、およびDsiRNA10nM最終濃度を含む10[vol/vol]溶解緩衝液を含む反応混合物が含まれる。反応混合液はまた、10mMリン酸クレアチン、10ug/mlクレアチンホスホキナーゼ、100umGTP、100uMUTP、100uMCTP、500uMATP、5mMDTT、0.1U/μLRNasinPromegaおよび100uMの各アミノ酸を含む。酢酸カリウムの最終濃度を100mMに調節する。反応を氷上でプレアセンブルし、RNAを加える前10分間、25°Cにてプレインキュベートし、25°Cにてさらに60分間インキュベートする。反応を4容量の1.25×PassiveLysisBufferPromegaでクエンチする。標的RNA開裂をRT-PCR解析または本技術分野で公知の他の方法によってアッセイし、DsiRNAが反応より除外された対照反応と比較する。あるいは、アッセイのために内部標識した標的RNAを、[アルファ-32P]CTPの存在下、invitro転写によって調製し、スピンクロマトグラフィーによるG50Sephadexカラムを通し、さらなる精製なしに標的RNAとして使用する。任意に、標的RNAは、T4ポリヌクレオチドキナーゼ酵素を用いて、5’-32P-末端標識する。アッセイを、上記のように実施し、標的RNAとRNAiによって産出される特定のRNA開裂産物を、ゲルの自動写真上で可視化する。開裂の割合を、無傷の対照RNA、またはDsiRNAなしの対照反応からのRNA、およびアッセイによって産出された開裂産物を表すバンドのPHOSPHORIMAGER登録商標自動写真定量によって決定する。1つの実施様態において、本アッセイを、DsiRNA仲介RNAi開裂に対するARRNA標的中の標的部位を決定するために使用し、そこで多数のDsiRNA構造物を、例えば標識化標的RNAの電気泳動またはノザンブロットによって、ならびに本技術分野でよく公知の他の方法論によってアッセイ反応を解析することで、ARRNA標的のRNAi仲介開裂に関して選別する。特定の実施形態において、好適な対照に対して、本発明のDsiRNAは、例えばARレベルにおける50減少がシステム、細胞、組織または生命体にて観察された場合、AR阻害活性を持つと見なされる。本発明のDsiRNAのAR阻害活性の決定に対するさらなる境界および限界が以上に記述されている。抗-ARDsiRNA試薬の共役と伝達特定の実施形態において、本発明は、AR-関連疾患または疾病、またはAR-関連疾患または疾病を発達させるリスクを持つ患者を治療するための方法に関する。そのような実施形態において、DsiRNAは、AR-関連疾患または疾病を制御するための新規治療薬剤として働きうる。方法には、本発明の薬理学的組成物を患者例えばヒトに投与し、それによって、ARRNAの発現、レベルおよび/または活性が減少することが含まれる。ARRNAによってコードされたポリペプチドの発現、レベルおよび/または活性がまた、前記DsiRNAがAR転写産物の非コード領域に対して指向する場合例えば標的化5’UTRまたは3’UTR配列でさえ、本発明のDsiRNAによって減少しうる。それらの高い特異性のために、本発明のDsiRNAは、任意に多型対立遺伝子が個々および/または集団内で存在する対立遺伝子特異的様式にて、細胞および組織のAR配列を特に標的化可能である。AR-関連疾患または疾病の治療において、DsiRNAを、ARの他の脱制御を示している、および/または対象の細胞または組織、例えばARレベルの減少に対して標的化された対象の細胞または組織との接触に持ち込むことが可能である。例えば、ARRNA配列の全てまたは部分に、本質的に同一のDsiRNAを、invivoまたはinvitroいずれかで、そのような細胞との接触に持ち込むか、またはそのような細胞内へ導入してよい。同様に、ARRNA配列のすべてまたは一部に本質的に同一のDsiRNAを、AR-関連疾患または疾病を持つ、または発達させるリスクの対象に直接投与してよい。本発明のDsiRNA試薬の治療的利用は、多数の異なるDsiRNA試薬配列を含むDsiRNA試薬の処方の利用を含みうる。例えば、2またはそれ以上、3またはそれ以上、4またはそれ以上、5またはそれ以上などの本明細書で記述した試薬を、例えばARRNAの多数の異なる領域を標的とする、または標的ARRNAのみでなく、標的、例えばAR-関連疾患または疾病と関連した細胞性標的遺伝子も標的とする処方を産出するように組み合わせることができる。本発明のDsiRNAをまた、DsiRNA試薬のいずれかの鎖が、2つまたはそれ以上のARRNAの領域を独立して標的するように、またはDsiRNA試薬の鎖の1つが、本技術分野で公知のARの細胞性標的遺伝子を標的とするように構築してもよい。標的核酸分子の1つ以上の領域を標的とする多機能DsiRNA分子の利用がまた、ARRNAレベルおよび発現の強力な阻害剤を提供可能である。例えば、本発明の単一多機能DsiRNA構造物が、AR-770とAR-2947部位両方を同時に標的としえ、さらにおよび/またはあるいは、本発明の単一または多機能薬剤を、他に対して、ARの1つのスプライスバリアントを選択的に標的とするためにデザイン可能である。したがって、本発明のDsiRNA試薬は個々に、または他の薬剤との組み合わせまたは併せて、AR-関連疾病または疾患を治療する、阻害する、減少させるまたは予防するために使用可能である。例えば、DsiRNA分子を、治療に好適な条件下、単独で、または1つまたはそれ以上の薬剤との組み合わせで、対象に投与可能であり、当業者にとって明白な他の適切な細胞に投与可能である。DsiRNA分子をまた、対象または生体中のAR-関連疾患または疾病を治療する、阻害する、減少させるまたは予防するための他の公知の治療との組み合わせで使用可能である。例えば、記述した分子を、本技術分野で公知のように、対象または生体内のAR-関連疾患または疾病を治療する、阻害する、減少させるまたは予防するために、1つまたはそれ以上の公知の化合物、治療または手順と組み合わせて使用可能である。本発明のDsiRNA試薬は、他の部位例えばペプチドのような非核酸部位、有機化合物例えば染料、コレステロールなどと例えばそのセンスまたはアンチセンス鎖のその5’または3’末端で共役可能であり、または共役していなくてよい。この方法でDsiRNA試薬を改変することは、相当する非共役DsiRNA試薬と比較して細胞取込を改善し、得られるDsiRNA試薬誘導体の細胞標的化活性を増強してよく、細胞内のDsiRNA試薬誘導体をトレースするために有用であり、または相当する非共役DsiRNA試薬と比較してDsiRNA試薬誘導体の安定性を改善する。核酸を導入する方法、ベクターおよび宿主細胞本発明のDsiRNA試薬を、直接細胞にすなわち細胞内に導入してよく、または空洞、間質腔内、生命体の循環中に細胞外で導入してよく、経口で導入してよく、または核酸を含む溶液中細胞または生命体を浴させることによって導入してよい。血管または血管外循環、血液またはリンパ系、および脳脊髄液が、核酸を導入してよい部位である。本発明のDsiRNA試薬を、核酸を含む溶液の注射、核酸によって覆われた粒子の照射、核酸溶液中の細胞または生命体の浸漬、または核酸の存在下での細胞膜の電気泳動を含む、本技術分野で公知の核酸伝達方法を用いて導入可能である。脂質仲介担体伝達、化学仲介伝達、リン酸カルシウムのようなカチオン性リポソームトランスフェクションなどのような核酸を細胞に導入するための本技術分野で公知の他の方法を使用してよい。核酸を、以下の活性、細胞による核酸取込を増強する、または標的ARRNAの阻害を増加させる、の1つまたはそれ以上を達成する他の成分と一緒に導入してよい。標的ARRNAを持つ細胞は、生殖系または体性、分化全能性または多能性、分裂または非分裂、柔組織または上皮、不死化または形質導入などからであってよい。細胞は、幹細胞または分化細胞であってよい。分化した細胞型には、脂肪細胞、繊維芽細胞、筋細胞、心筋細胞、内皮細胞、ニューロン、グリア細胞、血液細胞、巨核球、リンパ球、マクロファージ、好中球、抗酸球、好塩基球、マスト細胞、白血球、顆粒球、ケラチノサイト、コンドロサイト、骨芽細胞、破骨細胞、肝細胞、内分泌または外分泌腺の細胞が含まれる。特定の標的ARRNA配列と、伝達されたDsiRNA試薬物質の用量に依存して、本工程は、ARRNAに対して部分的または完全な機能の欠損を提供しうる。標的細胞の少なくとも50、60、70、80、90、95または99またはそれ以上でのRNAレベルまたは発現ARRNA発現またはコードされたポリペプチド発現いずれかの減少または欠損が例である。ARRNAレベルまたは発現の阻害は、ARRNAまたはARRNA-コードタンパク質のレベルにおける不在または観察可能な減少を意味する。特異性は、細胞の他の遺伝子における明かな効果なしに、ARRNAを阻害する能力を意味する。阻害の結果は、細胞または生命体の外部特性の試験によって、またはRNA溶液ハイブリッド形成、ヌクレアーゼ保護、ノザンハイブリッド形成、逆転写、マイクロアレイでの遺伝子発現モニタリング、抗体結合、酵素免疫測定法ELISA、ウエスタンブロッティング、放射免疫アッセイRIA、他の免疫アッセイ、および蛍光活性化細胞解析FACSのような生化学的技術によって確認可能である。本発明のDsiRNA試薬による標的ARRNA配列の阻害は、invivoまたはinvitroいずれかで、AR-関連疾患または疾病の発達/進行、例えば腫瘍形成、増殖、転移などにおける、そのようなDsiRNA試薬の投与の効果に基づいて測定可能でもある。腫瘍または癌細胞レベルの処置および/または減少には、腫瘍または癌細胞レベルの増殖の停止または減少、例えば10、20、30、40、50、60、70、80、90、95または99またはそれ以上の減少が含まれ、また細胞、組織または対象への本発明のDsiRNA試薬の投与を介して達成可能である癌細胞レベルにおける、対数言語、例えば10倍、100倍、1000倍、105倍、106倍、107倍減少で測定可能もある。細胞株または全生命体でのRNA仲介阻害に関して、そのタンパク質産物が簡単にアッセイされる、レポーターまたは薬物体制遺伝子の発現を測定可能である。そのようなレポーター遺伝子には、アセトヒドロキシ酸シンターゼAHAS、アルカリホスファターゼAP、βガラクトシダーゼLacZ、ベータグルコロニダーゼGUS、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼCAT、グリーンフルオレセントタンパク質GFP、西洋わさびペルオキシダーゼHRP、ルシフェラーゼLuc、ノパリンシンターゼNOS、オクトパインシンターゼOCSおよびそれらの誘導体が含まれる。多数の選別可能なマーカーが利用可能であり、アンピシリン、ブレオマイシン、クロラムフェニコール、ゲンタマイシン、ヒグロマイシン、カナマイシン、リンコマイシン、メトトレキセート、ホスフィノリシン、プロマイシンおよびテトラサイクリンに対する耐性を供与する。アッセイに依存して、遺伝子発現の量の定量により、本発明にしたがって処理されない細胞と比較して、10、33、50、90、95または99以上である阻害の程度が決定可能である。より低用量の注射物質、およびRNAサイレンシング薬剤の投与後のより長い時間が、結果として、より小さな細胞画分における阻害となりうる例えば少なくとも標的細胞の10、20、50、75、90または95。細胞内での遺伝子発現の定量化は、標的ARRNAの蓄積または標的タンパク質の翻訳のレベルにて同様の量の阻害を示しうる。例として、阻害の効率を、細胞内の遺伝子産物の量を査定することによって決定してよく、RNAは、阻害DsiRNAのために使用した領域の外側にヌクレオチド配列を持つハイブリッド形成プローブで検出してよく、または翻訳されたポリペプチドは、その領域のポリペプチド配列に対して作製された抗体で検出してよい。DsiRNA試薬は、少なくとも1つのコピー/細胞の伝達を許容する量で導入してよい。より大きな用量例えば少なくとも5、10、100、500または1000コピー/細胞の物質が、より効果的な阻害を産出し得、より低い用量がまた特定の適用のために有用であり得る。薬理学的組成物特定の実施形態において、本発明は、本発明のDsiRNA試薬を含む薬理学的組成物を提供する。DsiRNA試薬試料は、好適に処方され、それが存在する場合に、十分な試料の部分が、遺伝子サイレンシングを誘導するために細胞内に入ることを許容する任意の方法によって細胞の環境内に導入可能である。dsRNAに関する多くの処方は、本技術分野で公知であり、dsRNAが標的細胞内に入り、働くことができる限り使用可能である。例えば、米国特許出願公開第2004/0203145A1明細書および第2005/0054598A1号明細書を参照のこと。例えば、本発明のDsiRNA試薬を、リン酸緩衝食塩水溶液、リポソーム、ミセル構造およびカプシドのような緩衝溶液中に処方可能である。カチオン性脂質でのDsiRNA試薬の処方を、DsiRNA試薬の細胞内へのトランスフェクションを促進するために使用可能である。例えば、リポフェクチン米国特許第5,705,188号明細書のようなカチオン性脂質、カチオン性グリセロール誘導体、およびポリリシンPCT国際特許公開第97/30731号明細書のようなポリカチオン性分子を使用可能である。好適な脂質には、すべて製造業者の取扱説明書にしたがって使用可能な、オリゴフェクタミン、リポフェクタミンLifeTechnologies、NC388RibozymePhARmaceuticals、Inc.Boulder,Colo.、またはFuGene6Rocheが含まれる。そのような組成物には典型的に、核酸分子と薬理学的に許容可能な担体が含まれる。本明細書で使用するところの語句薬理学的に許容可能な担体には、薬理学的投与に適合可能な食塩水、溶媒、分散培地、コーティング、抗菌剤、抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などが含まれる。補助的な活性化合物もまた組成物内に組み込むことができる。薬理学的組成物を、その意図する投与経路に適用するように処方する。投与経路の例には、非経口、例えば静脈内、皮膚内、皮下、経口例えば吸入、経皮局所、経粘膜および腸投与が含まれる。非経口、皮膚内または皮下適用のために使用される溶液および懸濁液には、以下の構成要素が含まれる。注射のための水、生理食塩水溶液、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒のような無菌希釈液、ベンジルアルコールまたはメチルパラベン類のような抗菌剤、アスコルビン酸または二硫化ナトリウムのような抗酸化剤、エチレンジアミンテトラ酢酸のようなc22Rv1ting薬剤、酢酸、クエン酸またはリン酸のような緩衝液および塩化ナトリウム、デキストロースのような張力の調節のための薬剤。pHを、塩酸または水酸化ナトリウムのような塩または塩基で調節可能である。非経口調製物は、ガラスまたはプラスチックからなるアンプル、使い捨てシリンジまたは多重用量バイアル内に同封可能である。注射可能な利用のために好適な薬理学的組成物には、無菌水溶液水溶性である場合または分散液、および無菌注射可能な溶液または分散液の即興調整のための無菌粉末が含まれる。静脈内投与のために、好適な担体には、生理学的食塩水、静菌水、CremophorEL.TM.BASF、PARsippany,NJまたはリン酸緩衝食塩水PBSが含まれる。全ての場合で、組成物は無菌でなければならず、簡単にシリンジ注入可能な程度まで流動的であるべきである。製造および保存の条件下で安定であるべきであり、細菌および真菌のような微生物の共雑活性に対して防止されなければならない。担体は、例えば水、エタノール、ポリオール例えばグリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレンングリコールなど、およびこれらの好適な混合液を含む、溶媒または分散培地でありうる。適切な流動性が、例えば、レシチンのようなコーティングの利用によって、分散液の場合、要求される粒子の大きさの維持によって、および界面活性剤の利用によって、維持可能である。微生物の活性の防止は、種々の抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン類、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなどによって達成可能である。多くの場合、組成物中の等張剤、例えば糖類、マンニトール、ソルビトールのようなポリアルコール類、塩化ナトリウムを含めることが好ましい。注射可能組成物の吸収の延長を、組成物内に、吸収を遅延させる試薬、例えばアルミニウム一ステアリン酸およびゼラチンを加えることによって達成可能である。無菌注射可能溶液は、要求された量で活性化合物を、要求されたように、1つまたは以上で列挙した成分の組み合わせとともに、選択された溶媒中に組み込み、続いて濾過滅菌することによって調製可能である。一般的に、分散液は、基礎分散培地と、以上で列記した要求された他の成分を含む、無菌賦形剤内に活性化合物を組み込むことによって調製する。無菌注射可能溶液の調製のための無菌粉末の場合、調製の好ましい方法は、吸引乾燥と、その先に無菌濾過した溶液から活性成分任意のさらなる望む成分の粉末を産出する凍結乾燥である。経口組成物は一般的に、不活性希釈液または食用担体を含む。経口治療投与の目的のために、活性化合物を、賦形剤と組み込み、錠剤、トローチまたは例えばゼラチンカプセルのようなカプセルの形態で使用可能である。経口組成物はまた、マウスウォッシュとしての利用のために流体賦形剤を用いて調製可能である。薬理学的に適合可能な結合剤、および/またはアジュバント物質を、組成物の部分として含めることが可能である。錠剤、ピル、カプセル、トローチなどは、任意の以下の成分、微晶質性セルロース、ガムトラガカントまたはゼラチンのような結合剤、デンプンまたはラクトースのような賦形剤、アルギン酸、プリモゲルまたはトウモロコシデンプンのような崩壊剤、ステアリン酸マグネシウムまたはSterotesのような潤滑油、二酸化コロイドシリコーンのような流動促進剤、スクロースまたはサッカリンのような甘味剤、またはペパーミント、サリチル酸メチルまたはオレンジ香味料のような香味料、または同様の性質の化合物を含んでよい。吸入による投与のために、化合物を、好適な高圧ガス、例えば二酸化炭素のような気体、またはネブライザーを含む、加圧容器またはディスペンサーからのエアゾルスプレーの形状で伝達する。そのような方法には、米国特許第6,468,798号明細書に記述されたものが含まれる。全身投与がまた、経粘膜または経皮法によって可能でもある。経粘膜または経皮投与のために、浸潤されるべきバリアに対して適切な浸潤剤が処方内で使用される。そのような浸潤剤は一般的に本技術分野で公知であり、例えば、経粘膜投与のために、合成洗剤、胆汁酸およびフシジン酸誘導体が含まれる。経粘膜投与は、経鼻スプレーまたは座薬の利用を通して実施可能である。経皮投与のために、活性化合物を、本技術分野で一般的に公知の軟膏ointments、軟膏salves、ジェルまたはクリーム内に処方する。化合物をまた、例えばココアバターまたは他のグリセリド類のような従来の座薬基体で座薬、または腸伝達のための停留かん腸の形態で調製可能である。化合物はまた、McCaffreyetal.2002,Nature,4186893,38-9流体力学トランスフェクション;Xiaetal.2002,NatureBiotechnol.,2010,1006-10ウイルス仲介伝達;またはPutnam1996,Am.J.HealthSyst.PhARm.532,151-160,erratumatAm.J.HealthSyst.Pharm.533,3251996にて記述された方法を含むが、これらに限定はされない、本技術分野で公知の方法を用いてトランスフェクションまたは感染によって投与可能である。化合物をまた、DNAワクチンのような核酸試薬の投与に好適な方法によって投与可能である。これらの方法には、遺伝子銃、生物注入器、および皮膚パッチならびに米国特許第6,194,389号明細書にて開示されたマイクロ粒子DNAワクチン技術のようなニードルフリー方法、および米国特許第6,168,587号明細書にて開示されたような粉末形状ワクチンによる哺乳動物経皮ニードルフリーワクチン化が含まれる。さらに、とりわけHamajimaetal.1998,Clin.Immunol.Immunopathol.,882,205-10.Liposomes、例えば、米国特許第6,472,375号明細書にて記述されたようなで開示されたように、経鼻伝達が可能であり、マイクロカプセル化も利用可能である。例えば、米国特許第6,471,996号明細書にて記述されたような生物分解性、標的化可能マイクロ粒子伝達システムもまた使用可能である。1つの実施形態において、活性化合物を、インプラントおよびマイクロカプセル化伝達系を含む、放出制御処方のような、体からの急速な消失に対して化合物を保護する担体で調製する。酢酸エチレンビニル、ポリアンヒドリド類、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルソエステル類およびポリ酢酸のような生物分解性、生物適合性ポリマーを使用可能である。そのような処方は、標準技術を用いて調製可能である。物質はまた、AlzaCorporationおよびNovaPharmaceuticals,Inc.から市販されており入手可能である。ウイルス抗原に対するモノクローナル抗体で感染した細胞を標的化したリポソームを含むリポソーム懸濁液を、薬理学的に許容可能な担体として使用可能でもある。これらは、例えば米国特許第4,522,811号明細書にて記述されたような、当業者に公知の方法にしたがって調製可能である。そのような化合物の毒性および治療効果を、例えばLD5050集団が致死する用量およびED5050集団中の治療的に効果的な用量を決定するために、細胞培養液または実験動物における標準薬理学的手順によって決定可能である。毒性および治療効果の間の用量比が、治療指数であり、比LD50/ED50で表すことが可能である。高い治療指数を表す化合物が好ましい。毒性副作用を表す化合物を使用してよい一方で、感染していない細胞への可能性のあるダメージを最小化し、それによって副作用を減少させるために、影響を受けた組織の部位へ、そのような化合物を標的化する伝達系をデザインすることに注意が払われるべきである。細胞培養アッセイおよび動物研究から得たデータを、ヒトにおける使用のための用量の範囲を定式化することにおいて使用可能である。そのような化合物の用量は、好ましくは毒性がほとんどないか、全くないED50を含む循環濃度範囲内にある。用量は、使用する用量形態および利用した投与経路に依存して、この範囲内で変化してよい。本発明の方法にて使用される化合物に対して、治療的に効果的な用量は、細胞培養アッセイからまず推定可能である。用量を、細胞培養液中で測定したようなIC50すなわち、症状の半最大阻害を達成する試験化合物の濃度を含む、循環血漿濃度範囲を達成するように、動物モデルにて定式化してよい。そのような情報を、ヒトにおける有用な用量をより正確に決定するために使用可能である。血漿中のレベルを、例えば高性能液体クロマトグラフィーによって測定してよい。本明細書で定義したように、治療的に効果的な量の核酸分子すなわち効果的用量は、選択した核酸に依存する。例えば、DsiRNA試薬をコードしているプラスミドを選択した場合、およそ1pg~1000mgの範囲の単一投与用量を投与してよく、いくつかの実施形態において、10、30、100または1000pg、または10、30、100または1000ng、または10、30、100または1000μg、または10、30、100または1000mgを投与してよい。いくつかの実施形態において、1~5gの組成物を投与可能である。組成物は、2日に一回を含む、1またはそれ以上の回数/日~1またはそれ以上の回数/週投与可能である。当業者は、疾患または疾病の重症度、先行治療、対象の一般的健康および/または年齢、他の疾患の存在を含むが、限定はしない、特定の要因が、対象を効果的に処置するために要求される用量およびタイミングに影響を与えうることを理解するであろう。さらに、治療的に効果的な量のタンパク質、ポリペプチド、または抗体での対象の治療には、単一治療が含まれてよく、または好ましくは一連の治療が含まれてよい。本発明の核酸分子は、例えば、Xiaetal.,2002上記にて記述されたものを含むが、限定はされない、本技術分野で公知の方法を用いて、発現構造物、例えばウイルスベクター、レトロウイルスベクター、発現カセット、またはプラスミドウイルスベクター内に挿入可能である。発現構造物は、例えば、吸入、経口、静脈注射、局所投与によって米国特許第5,328,470号明細書を参照のこと、または定位注射によって例えばChenetal.1994Proc.Natl.Acad.Sci.USA,91,3054-3057対象に伝達可能である。伝達ベクターの薬理学的調製物には、適切な希釈液中のベクターが含まれてよく、伝達賦形剤が埋め込まれる徐放マトリックスを含んでよい。あるいは、完全な伝達ベクター、例えばレトロウイルスベクターを、組換え体細胞から完全なまま産出可能である場合、薬理学的調製物は、遺伝子伝達系を産出する1つまたはそれ以上の細胞を含みうる。発現構造物は、適切な発現系での使用のために好適な構造物であってよく、本技術分野で公知のような、レトロウイルスベクター、直線発現カセット、プラスミドおよびウイルスまたはウイルス由来ベクターを含むが、限定はされない。そのような発現構造物には、1つまたはそれ以上の誘導可能なプロモーター、U6snRNAプロモーターまたはH1RNAポリメラーゼIIIプロモーターのような、RNAPolIIIプロモーター系、または本技術分野で公知の他のプロモーターを含んでよい。構造物は、siRNAの1つまたは両方の鎖を含みうる。両方の鎖を発現している発現構造物にはまた、両方の鎖を連結しているループ構造が含まれてよく、または各鎖は、同一の構造物内の別々のプロモーターから別々に転写されうる。各鎖はまた、別々の発現構造物、例えばTuschl2002,NatureBiotechnol20:5005-505から転写可能でもある。細胞の環境内にDsiRNA試薬を導入する方法が、細胞の型、およびその環境の構成に依存しうることが理解可能である。例えば、細胞が液体内でみられる時に、1つの好ましい処方は、リポフェクタミン中のような液体処方でであり、DsiRNA試薬を細胞の液体環境に直接加えることが可能である。脂質処方をまた、静脈内、筋肉内または腹腔内注射によって、または経口で、または吸入または本技術分野で公知のような他の方法によって動物に投与可能である。処方が、哺乳動物、とりわけヒトのような動物内への投与のために好適である場合、処方はまた薬理学的に許容可能である。オリゴヌクレオチドを投与するための薬理学的に許容可能な処方が公知であり、利用可能である。いくつかの例において、DsiRNA試薬を緩衝液または生理食塩水溶液中で処方し、処方したDsiRNA試薬を、卵母細胞での研究でのように、直接細胞内に注入することが好ましい可能性がある。DsiRNA試薬二本鎖の直接注射もまた実施されうる。dsRNA例えばDsiRNA試薬を導入する好適な方法に関して、米国特許公開第2004/0203145A1号明細書を参照のこと。好適な量のDsiRNA試薬を導入しなければならず、これらの量は、標準の方法を用いて実験的に決定可能である。典型的には、細胞の環境中の効果的な濃度の個々のDsiRNA試薬種は、50ナノモルまたはそれ以下、10ナノモルまたはそれ以下であり、または1ナノモルまたはそれ以下の濃度での組成物を使用可能である。他の実施形態において、200ピコモルまたはそれ以下、100ピコモルまたはそれ以下、50ピコモルまたはそれ以下、20ピコモルまたはそれ以下、および10ピコモルまたはそれ以下、5ピコモルまたはそれ以下、2ピコモルまたはそれ以下、または1ピコモルまたはそれ以下の濃度を用いる方法を、多くの環境で使用可能である。DsiRNA試薬組成物が処方され、それによって十分な量のDsiRNA試薬が細胞内に入り、その効果を発揮するという条件で、細胞が生きることが出来る細胞外マトリックスにDsiRNA試薬組成物を添加することによって方法を実施可能である。例えば、液体培養液または細胞増殖培地のような液体中、組織外植片中、または哺乳動物、とりわけヒトのような動物を含む全生命体中に存在する細胞での利用に方法が従う。ARRNAのレベルまたは活性は、本技術分野で公知の、または後に開発される好適な方法によって決定可能である。標的RNAおよび/または標的遺伝子の発現を測定するために使用する方法が、標的遺伝子の性質に依存しうることが理解可能である。例えば、標的ARRNA配列が、タンパク質をコードする場合、語句発現は、AR遺伝子ゲノムまたは外来委由来のいずれかから由来する、タンパク質またはARRNA/転写産物を意味しうる。そのような例において、標的ARRNAの発現を、ARRNA/転写産物の量を直接測定することによって、またはARタンパク質の量を測定することによって決定可能である。タンパク質を、染色または免疫ブロッティングによって、またはタンパク質が測定可能な反応を触媒する場合、反応速度を測定することによってのような、タンパク質アッセイにて測定可能である。すべてのそのような方法が、本技術分野で公知であり、使用可能である。標的ARRNAレベルが測定されるべきである場合、RNAレベルを検出するための本技術分野で認識された方法を使用可能である例えばRT-PCR、ノザンブロッディングなど。本発明のDsiRNA試薬にてARRNAsを標的化することにおいて、対象、組織中、invitroまたはinvivoいずれかでの、細胞中の、または細胞抽出物中の、ARRNAまたはタンパク質のレベルを減少させることにおける、DsiRNA試薬の有効性の測定をまた、AR-関連表現型例えば癌または腫瘍形成、増殖、転移、拡散などのような、たとえば疾患または疾病の減少の程度を決定するために使用可能でもある。上記測定は、細胞、細胞抽出物、組織、組織抽出物または他の好適な供給源物質上で実施可能である。ARRNAの発現が、減少したかどうかの決定は、RNAレベルにおける変換を正確に検出可能な好適な方法によってでありうる。典型的には、決定は、それによって、少なくとも一部の当該DsiRNA試薬が細胞質に入るように細胞の環境内へ、消化していないDsiRNAを導入し、ついで標的RNAのレベルを測定することによって実施される。同様の測定を、同一の未処理細胞上で行い、それぞれの測定から得られた結果を比較する。DsiRNA試薬は、薬理学的に効果的な量のDsiRNA試薬と、薬理学的に許容可能な担体を含む、薬理学的組成物として処方可能である。薬理学的、または治療的に効果的な量は、意図する薬理学的、治療または予防結果を産出するのに効果的なDsiRNA試薬の量を意味する。語句薬理学的に効果的な量および治療的に効果的な量または単に効果的な量は、意図する薬理学的、治療または予防結果を産出するのに効果的なRNAの量を意味する。例えば、当該臨床治療が、疾患または疾病に関連した測定可能なパラメータにおいて、少なくとも20の減少が見られた時に、効果的と認識され、当該疾患または疾病の治療に対する薬物の治療的に効果的な量は、当該パラメータにおける少なくとも20減少に影響を与えるのに必要な量である。本発明の好適な処方された薬理学的組成物を、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下、経皮、空路エアゾル、腸、膣およびバッカルおよびサブリンガルを含む局所投与を含む、非経口経路によってのような、本技術分野で公知の方法によって投与可能である。いくつかの実施形態において、薬理学的組成物は、静脈または非経口内点滴または注射によって投与される。一般に、dsRNAの好適な用量ユニットは、0.001~0.25ミリグラム/レシピエントの体重キログラム/日の範囲、0.01~20マイクログラム/レシピエントの体重キログラム/日の範囲、0.01~10マイクログラム/レシピエントの体重キログラム/日の範囲、0.01~5マイクログラム/レシピエントの体重キログラム/日の範囲、0.1~2.5マイクログラム/レシピエントの体重キログラム/日の範囲である。dsRNAを含む薬理学的組成物は、1日一回投与可能である。しかしながら、治療薬剤はまた、一日を通して適切な間隔で投与される、2、3、4、5、6またはそれ以上のサブ用量を含む用量ユニットで投与されうる。この場合、各サブ用量に含まれるdsRNAは、総合一日用量ユニットを達成するために相応により小さくなければいけない。用量ユニットはまた、例えば数日間隔にわたり、dsRNAの持続および一定放出を提供する従来の徐放処方を用いて、数日にわたる単一用量に対して合成可能である。徐放製剤が本技術分野でよく公知である。本実施形態において、用量ユニットは、相当する複数の毎日用量を含む。処方に関係なく、薬理学的組成物は、処置されている動物またはヒト中の標的遺伝子の発現を阻害するのに十分な量で、dsRNAを含まなければいけない。組成物は、dsRNAの複数ユニットの合計が、一緒に十分な容量を含む方法で合成可能である。ヒトに対する好適な用量範囲を処方するために、データを細胞培養アッセイと動物研究から得ることができる。本発明の組成物の用量は、毒性がほとんどまたは全くない、公知の方法によって決定したようなED50を含む、循環濃度の範囲内である。用量は、使用した用量および利用した投与経路に依存して、この範囲内で変化してよい。本発明の方法にて使用する化合物に対して、治療的に効果的な用量は、細胞培養アッセイよりまず推定可能である。細胞培養中で決定したような、IC50すなわち、症状の半最大阻害を達成する試験化合物の濃度を含む化合物の循環血漿濃度範囲を達成するために、動物モデルにて用量を定式化してよい。そのような情報は、ヒトにおける有用な用量をより正確に決定するために使用可能である。血漿中のdsRNAのレベルを、標準方法によって、例えば高性能液体クロマトグラフィーによって測定してよい。薬理学的組成物は、投与のための取扱説明書とともに、キット、容器、パックまたはディスペンサー内に含まれてよい。治療方法本発明は、AR例えばAR転写産物および/またはARタンパク質レベルの誤調節および/または上昇によって、全体としてまたは部分的に引き起こされる、またはARを選択的に標的化することを介して処置可能な疾患または疾病のリスクのあるまたは受けやすい対象を治療する予防的および治療的両方の方法を提供する。本明細書で使用するところの治療または治療することは、疾患または疾病、疾患または疾病の症状、または疾患に向かう傾向を治癒させる、治す、緩和する、軽減する、変化させる、治療する、改善する、好転させるまたは影響を与えるための目的で、疾患または疾病、疾患または疾病の症状、または疾患または疾病に向かう傾向を持つ患者への治療的薬剤例えばDsiRNA試薬またはそれをコードしているベクターまたはトランスジーンの投与、またはそのような患者から単離した組織または細胞株への治療薬剤の適用または投与として定義される。1つの様態において、本発明は、対象に治療薬剤例えばDsiRNA試薬またはそれをコードしているベクターまたはトランスジーンを投与することによって、対象中で、例えばAR発現の阻害を介して対象内での形質転換事象の開始を防止することを含む上記のような疾患または疾病を予防するための方法を提供する。疾患に対してリスクを有する対象を、例えば、本明細書で記述したような診断または予後アッセイの1つまたは組み合わせによって同定可能である。予防的薬剤の投与は、例えば対象中の癌の検出、または疾患または疾病の症状特徴の顕在化の前に実施可能であり、それによって疾患または疾病が予防され、あるいはその進行が遅延する。本発明の他の様態は、対象を治療的に治療する方法、すなわち疾患または疾病の症状の開始を変更することに関する。これらの方法は、invitro例えば、DsiRNA試薬とともに細胞を培養することによって、あるいはinvivo例えば対象にDsiRNA試薬を投与することによってで実施可能である。治療の予防的および治療的両方の方法に関して、そのような治療はとりわけ、ファーマコジェノミクスの領域から得られた知識に基づいてあつらえ、または改変してよい。本明細書で使用するところのファーマコジェノミクスは、遺伝子シークエンシング、統計学的遺伝学、および臨床試験および市場における薬物に対する遺伝子発現解析のような、ゲノミクス技術の適用を意味する。よりとりわけ、本語句は、どのようにして患者の遺伝子が、彼または彼女の薬物に対する応答を決定するか例えば、患者の薬物応答表現型または薬物応答遺伝子型の研究を意味する。したがって、本発明の他の様態は、個々の薬物応答遺伝子型にしたがって、本発明の標的ARRNA分子または標的ARRNAモジュレータいずれかでの個々の予防的または治療的治療をあつらえるための方法を提供する。ファーマコジェノミクスは、臨床医または医師が、治療より最も利益を得る患者へ、予防的または治療的処置を標的化し、毒性薬物関連副作用を経験する患者の治療を避けることを可能にする。治療薬剤を、選択した動物モデルで試験可能である。例えば、本明細書で記述したようなDsiRNA試薬またはそれをコードしている発現ベクターまたはトランスジーンは、前記試薬での治療の有効性、毒性または副作用を決定するために、動物モデルにて使用可能である。あるいは、試薬例えば治療薬剤を、そのような試薬の作用機序を決定するために、動物モデルにて使用可能である。ARmRNAレベルと発現の下方調節を評価するために有用なモデル細胞培養本発明のDsiRNA試薬を、invivoにて、例えば以下の手順を用いて、開裂活性に対して試験可能である。本発明のDsiRNA試薬によって標的化されたARcDNA内のヌクレオド配列を、以上のAR配列中で示す。本発明のDsiRNA試薬を、ARRNAおよびARタンパク質阻害の程度を決定するために、22Rv1または他の哺乳動物細胞を用いて、細胞培養液中で試験可能である。DsiRNA試薬例えば図1および上述構造を参照のことを、本明細書で記述したように、AR標的に対して選択する。ARRNA阻害は、たとえば、培養22Rv1細胞、または培養液中の他の形質転換されたか、形質転換されていない哺乳動物細胞への、好適なトランスフェクション薬剤によるこれらの試薬の伝達後に測定する。標的ARRNAの相対量を、増幅のリアルタイムPCRモニタリングを用いて、アクチンまたは他の適切な対照に対して測定する例えばABI7700TAQMAN登録商標。比較を、関係しない標的、または同一の総長および化学式を持つが、各位置において無作為に置換された無作為化DsiRNA対照、または単に適切な賦形剤処理または未処理対照に対して実施したオリゴヌクレオチド配列の混合物に対して実施する。第一および第二リード試薬を、標的に対して選択し、最適化を実施した。トランスフェクション試薬濃度を選択した後に、阻害のRNA経時変化を、リードDsiRNA分子で実施する。TAQMAN登録商標増幅のリアルタイムPCRモニタリングとmRNAのライトサイクラー定量化総RNAを、例えば大規模抽出のためにAmbionRnaqueous4-PCR精製キット、または96-ウェルプレートに対してPromegaSV96を用いて、DsiRNA伝達に続く細胞から調製する。Taqman解析のために、二重標識化プローブを、例えば5’末端にて共有結合したレポーター色素FAMまたはVICと3’末端に共役したクエンサー色素TAMARAで合成した。PCR増幅を、例えば10μL総RNA、100nMフォワードプライマー、100mMリバースプライマー、100mMプローブ、1×TaqManPCR反応緩衝液PE-AppliedBiosystems、5.5mMMgCl2、100μM各dATP、dCTP、dGTPおよびdTTP、0.2URNaseInhibitorPromega、0.025UAmpliTaqGoldPE-AppliedBiosystemsおよび0.2UM-MLVReverseTranscriptasePromegaからなる50μL反応液を用いて、ABIPRISM7700配列検出器上で実施する。温度サイクル条件は、48°Cにて30分間、95°Cにて10分間、続いて95°Cにて15秒間と60°Cにて1分間の40サイクルからなる。標的ARmRNAレベルの定量を、連続希釈総細胞RNA300、100、30、10ng/rxnから産出した標準に対して測定し、例えば、平行または同一チューブTaqMan反応中いずれかでの36B4mRNAに対して標準化する。ウエスタンブロッディング細胞タンパク質抽出物を、例えばRIPA緩衝液を使用して標準マイクロ調製技術を用いて調製可能である。細胞タンパク質抽出物を、4~12Tris-Glycineポリアクリルアミドゲル上で走らせ、膜上に移す。非特異的結合を、例えば5不脂肪ミルクとの1時間のインキュベーションにて阻害し、続いて4°Cにて16時間一次抗体でインキュベーション可能である。洗浄に続いて、二次抗体を、例えば室温にて1時間1:10,000希釈適用し、シグナルを、VersaDocイメージングシステム上で検出する。種々の細胞培養系において、カチオン性脂質が、培養液中の細胞に対するオリゴヌクレオチドのバイオアベイラビリティを増強することが示されてきたBennet,etal.,1992,Mol.Pharmacology,41,1023-1033。1つの実施形態において、本発明のDsiRNA分子を、細胞培養実験のために、カチオン性脂質と複合体化する。DsiRNAとカチオン性脂質混合物を、細胞への添加の直前に、血清を含まないOptimMEMInVitrogen中で調製する。OptiMEMを室温約20~25°Cまで温め、カチオン性脂質を最終の望む濃度まで加える。DsiRNA分子をOptiMEMに、望む濃度まで加え、溶液を希釈したDsiRNAに加え、15分間室温にてインキュベートする。用量応答実験において、RNA複合体を、カチオン性脂質の添加前に、OptiMEM内に連続希釈する。動物モデル抗-ARDsiRNA試薬の有効性を、動物モデルにおいて評価してよい。本技術分野で公知のような癌および/または増殖性疾患、状態または疾病の動物モデルを、抗-ARDsiRNAsの有効性、強度、毒性などの評価のために使用可能である。増殖性疾患の好適な動物モデルには、例えばプロト癌遺伝子例えばMye、Srcの機能を得る、および/または腫瘍抑制タンパク質例えばp53、Rbの機能の欠損を持つトランスジェニック齧歯類例えばマウス、ラット、または新生物形成を促進するDNA変化を誘導する照射または化学突然変異原誘発物質に曝露した齧歯類が含まれる。多くのそのような動物モデルは、例えばTheJacksonLaboratory,BarHarbor,ME,USAから市販されている。これらの動物モデルは、本発明の組成物のアッセイのための、供給源細胞または組織として使用してよい。そのようなモデルはまた、治療的利用に向かってAR遺伝子発現を調節することにおいて、本発明のDsiRNA組成物の有効性の前臨床評価のための使用のために使用または適合可能である。細胞培養モデルでのように、ほとんどのAR-関連マウス腫瘍異種移植片が、ARタンパク質を発現する癌細胞から由来したものである。ARを調節することの抗腫瘍効果の研究に関連する前立腺癌の異種移植片マウスモデルが種々のグループによって記述されてきたCompagnoetal.PLoSOne,2:e1006、指数関数的に去勢耐性腫瘍が増殖しているマウスへの抗-ARsiRNA注射の研究;Dehmetal.CancerRes.68:5469-77、22Rv1PCa細胞株中の前立腺癌療法耐性を仲介する構成的に活性なARの同定;Azumaetal.BiochemBiophysResCommun.391:1075-9、LNCaPおよび22Rv1ヒト前立腺癌細胞中のsiRNA標的化ARの研究。これらのモデルの利用は、抗-ARによるAR発現の阻害が、動物における腫瘍増殖の阻害を引き起こすことを示唆した。そのようなモデルを、ARレベル、発現、腫瘍/癌形成、増殖、拡散、他のAR-関連表現型、疾患または疾病の発達などを阻害する本発明のDsiRNA分子の有効性を評価することにおいて使用可能である。これらのモデルおよび他を同様に、前臨床設定にて、本発明のDisRNA分子の安全性/毒性および有効性を評価するために使用可能である。本発明のAR標的化DsiRNAの評価のために有用な動物モデル系の特異的な例には、野生型マウス、および同所性または皮下LNCaPまたは22Rv1異種移植片腫瘍モデルマウスが含まれる。invivo実験における例において、本発明のDsiRNAを、そのようなマウスモデルに、1~10mg/kgの範囲の用量で尾静脈注射するか、または繰り返し用量を、単一用量IC50レベルで投与し、臓器例えば前立腺、肝臓、腎臓、肺、膵臓、結腸、皮膚、脾臓、骨髄、リンパ節、乳腺脂肪体などを、最終用量の投与24時間後に回収する。そのような臓器をついで、使用するモデルに依存して、マウスおよび/またはヒトARレベルに関して評価する。活性期間も最終DsiRNA投与後1、4、7、14、21またはそれ以上で試験可能である。本発明の実施は、他に指摘しない限り、当業者の技術内である、化学、分子生物学、微生物学、組換え体DNA、遺伝学、免疫学、細胞生物学、細胞培養およびトランスジェニック生物学の従来の技術を使用する。例えば、Maniatisetal.,1982,MolecularCloningColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,N.Y.;Sambrooketal.,1989,MolecularCloning,2ndEd.ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,N.Y.;SambrookandRussell,2001,MolecularCloning,3rdEd.ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,N.Y.;Ausubeletal.,1992,CurrentProtocolsinMolecularBiologyJohnWileySons,includingperiodicupdates;Glover,1985,DNACloningIRLPress,Oxford;Anand,1992;GuthrieandFink,1991;HarlowandLane,1988,Antibodies,ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,N.Y.;JakobyandPastan,1979;NucleicAcidHybridizationB.D.HamesS.J.Higginseds.1984;TranscriptionAndTranslationB.D.HamesS.J.Higginseds.1984;CultureOfAnimalCellsR.I.Freshney,AlanR.Liss,Inc.,1987;ImmobilizedCellsAndEnzymesIRLPress,1986;B.Perbal,APracticalGuideToMolecularCloning1984;thetreatise,MethodsInEnzymologyAcademicPress,Inc.,N.Y.;GeneTransferVectorsForMammalianCellsJ.H.MillerandM.P.Caloseds.,1987,ColdSpringHarborLaboratory;MethodsInEnzymology,Vols.154and155Wuetal.eds.,ImmunochemicalMethodsInCellAndMolecularBiologyMayerandWalker,eds.,AcademicPress,London,1987;HandbookOfExperimentalImmunology,VolumesI-IVD.M.WeirandC.C.Blackwell,eds.,1986;Riott,EssentialImmunology,6thEdition,BlackwellScientificPublications,Oxford,1988;Hoganetal.,ManipulatingtheMouseEmbryo,ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,N.Y.,1986;Westerfield,M.,Thezebrafishbook.AguideforthelaboratoryuseofzebrafishDaniorerio,4thEd.,Univ.ofOregonPress,Eugene,2000を参照のこと。他に定義しない限り、本明細書で使用したすべての技術および化学的語句は、本発明の属する技術分野の当業者によって一般に理解されるのと同一の意味を持つ。本明細書で記述したものと同様の、または等価の方法および物質を、本発明の実施または試験で使用可能であり、好適な方法および物質が以下で記述されている。すべての発行物、特許明細書、特許、および本明細書で言及された他の参考文献が、その全てが参考文献によって組み込まれている。矛盾する場合、定義を含む本明細書が制御する。さらに、物質、方法および実施例は、例示のみであり、制限であるという意図はない。実施例本発明は、任意の様式で本発明の例示の方法を提供し、制限する意図はない、以下の実施例を参照して記述される。本技術分野でよく公知の標準技術、または以下で特に記述される技術を使用した。実施例1抗-ARDsiRNAデザイン好ましい抗-ARDsiRNA試薬を、プレスクリーンしたDsiRAの集団から選択した。DsiRNAのデザインは、配列の一領域に広がる、多数の可能性あるDsiRNAの予想された活性/有効性のinsilico評価を実施する、予測スコアリングアルゴリズムの利用が任意に含まれうる。実施例2二本鎖RNAオリゴヌクレオチドの調製とアッセイオリゴヌクレオチド合成および精製DsiRNA分子は、RNAメッセージ中の種々の部位、例えば本明細書で記述したRNA配列内の標的配列に相互作用するようにデザイン可能である。本例示薬剤において、2つの標的AR配列が選択された。各DsiRNA分子の1つの鎖の配列は、以上で記述した標的AR部位配列と相補的であった。DsiRNA分子は、本明細書で記述した方法を用いて化学的に合成した。一般に、DsiRNA構造物を、19~23マーsiRNAsに対して記述したような固相オリゴヌクレオチド合成法を用いて合成した例えば、Usmanetal.,米国特許第5,804,683号明細書;第5,831,071号明細書;第5,998,203号明細書;第6,117,657号明細書;第6,353,098号明細書;第6,362,323号明細書;第6,437,117号明細書;第6,469,158;Scaringeetal.,米国特許第6,111,086号明細書;第6,008,400号明細書;第6,111,086号明細書を参照のこと。個々のRNA鎖を合成し、標準の方法にしたがってHPLC精製したIntegratedDNATechnologies,Coralville,Iowa。例えば、RNAオリゴヌクレオチドを、標準技術DamhaandOlgivie,1993,MethodsMolBiol20:81-114;Wincottetal.,1995,NucleicAcidsRes23:2677-84を用いて、固相ホスホロアミダイト化学反応を用いて合成し、脱保護し、NAP-5カラムAmershamPharmaciaBiotech,Piscataway,N.J.上で脱塩した。オリゴマーを、15分間段階直線勾配を用いて、AmershamSource15Qcolumn1.0cmx25cm;AmershamPharmaciaBiotech,Piscataway,N.J.上のイオン交換高性能液体クロマトグラフィーIE-HPLCを用いて精製した。勾配は、90:10緩衝液A:B~52:48緩衝液A:Bで変化し、ここで緩衝液Aは100mMTrispH8.5であり、緩衝液Bは100mMTrispH8.5、1MNaClである。試料を260nmでモニタし、全長オリゴヌクレオチド種に相当するピークを回収し、プールし、NAP-5カラム上で脱塩し、凍結乾燥した。各オリゴマーの精度を、BeckmanPACE5000BeckmanCoulter,Inc.,Fullerton,Calif.上でのキャピラリー電気泳動CEによって決定した。CEキャピラリーは、100μm内径を持ち、ssDNA100RGelBeckman-Coulterを含む。典型的に、約0.6nmolのオリゴヌクレオチドをキャピラリー内に注入し、444V/cmの電場中で走らせ、260nmでのUV吸収によって検出した。変性Tris-Borate-7M-尿素ランニング緩衝液をBeckman-Coulterから購入した。オリゴリボヌクレオチドを、以下に記述する実験での使用のために、CEによって査定したように、少なくとも90純度で得た。化合物同一性を、製造業者の推奨プロトコールにしたがって、VoyagerDE.TM.BiospectometryWorkStationAppliedBiosystems,FosterCity,Calif.上での、マトリックス補助レーザー吸収イオン化飛行時間MALDI-TOF質量分析によって確認した。しばしば0.2の予測分子量内で、すべてのオリゴマーの比較分子量を得た。二本鎖の調製一本鎖RNAssRNAオリゴマーを、例えば100mM酢酸カリウム、30mMHEPES,pH7.5からなる二本鎖緩衝液中100μM濃度で、再懸濁した。相補的センスおよびアンチセンス鎖を等モル量で混合し、例えば50μM二本鎖の最終溶液を得た。試料をRNA緩衝液IDT中5’間100°Cまで熱し、使用の前に室温まで冷却した。二本鎖RNAdsRNAオリゴマーを-20°Cで保存した。一本鎖RNAオリゴマーを、凍結乾燥または-80°Cにてヌクレアーゼフリーの水中で保存した。命名法一貫性のために、以下の命名法を本明細書で使用した。二本鎖に与えた名前は、オリゴマーの長さと、オーバーハングの有無を示唆する。25/27は、25塩基センス鎖と、2-塩基3’-オーバーハングを含む、27塩基アンチセンス鎖を持つ非対称二本鎖である。27/25は、27塩基センス鎖と25塩基アンチセンス鎖を持つ非対称二本鎖である。細胞培養およびRNAトランスフェクション22Rv1細胞を、ATCCより得、5CO2下、37°Cにて、10ウシ胎児血清HyCloneを含むRPMIHyClone中で維持した。LMTK-細胞をATCCより得、5CO2下、37°Cにて、10ウシ胎児血清HyCloneを含むDMEMHyClone中で維持した。RNAトランスフェクションのために、細胞を、LipofectamineTMRNAiMAXInvitorogenを用いて、製造業者の取り扱い説明書にしたがって、1nMまたは0.1nMの最終濃度で、示唆したようなDsiRNAsでトランスフェクトした。簡単に記すと、各DsiRNAのストック溶液の一部を、Opti-MEMIInvitrogenと混合し、容量87.5μLとした。LipofectaminTMRNAiMAXを、OptiMEM中に87.5μまで希釈した。得られた150μL混合液を、50μL/ウェルにて、96ウェルプレートの個々のウェルに三重で加え、RTにて20分間インキュベートして、DsiRNA:LipofectamineTMRNAiMAX複合体を形成させた。一方、22Rv1細胞をトリプシン処理し、培地中に再懸濁させた。最後に、各細胞懸濁液100μLを各ウェル加え最終用量150μL、プレートを24時間インキュベーター内に配置した。AR阻害の評価AR標的遺伝子ノックダウンを、値をHPRTおよびSFRS9ハウスキーピング遺伝子に対して、そして対照DsiRNAsでのトランスフェクションに対して標準化して、qRT-PCRによって決定した。RNA単離および解析培地を吸引し、総RNAをSV96キットPromegaを用いて抽出した。およそ100ngの総RNAを、製造業者の取扱説明書にしたがって、SuperscriptII、OligodTおよびランダムヘキサマーを用いて逆転写した。典型的に、得られたcDNAの1/6を、AR遺伝子、およびヒト遺伝子HPRT-1およびSFRS9両方に特異的なプライマーとプローブを用いて、qPCRによって解析した。ABI7700を、増幅反応のために使用した。各試料を三重で試験した。相対ARRNAレベルを、HPRT1およびSFRS9RNAレベルに対して標準化し、対照DsiRNAsで処理した対照試料中で得たRNAレベルと比較した。22Rv1細胞中のタンパク質とmRNAノックダウンの評価22Rv1細胞を、10FBSPSなしを含むRPMI培地中、400,000細胞/ウェルの密度にて、6ウェルプレート中に播き、LipofectamineRNAiMAXInvitrogenを用いて対照またはARDsiRNAsで形質移入した。24および48時間後、細胞をPBSにて洗浄し、ウエスタンブロット法のためにTritonタンパク質溶解緩衝液中、RNA抽出のためにRNA溶解緩衝液中いずれかで溶解した。ウエスタンブロット法によるARタンパク質の定量ウエスタンブロット法のために、細胞をPBSで洗浄し、0.05mlの6倍の試料還元緩衝液を含む0.3ml溶解緩衝液で溶解した。15μlの本混合液をついで、4~20TrisGlycineゲル上にのせ、ウエスタン免疫ブロット法にかけた。ARN20に対する一次抗体はSantaCruzBiotechnologyサンタクルーズ,カリフォルニア州より得、アルファ-チューブリンに対する抗体を、Sigmaセントルイス,ミズーリ州から得た。蛍光標識化二次抗体AlexaFluor488をInvitrogenから購入した。Invitrogenからのタンパク質マーカーの分子量ラダーを、各ゲル上に走らせた。ARとα-チューブリンバンドを、ブロット上のそれらの移動にしたがって一時的に同定した。タンパク質バンド強度の定量化を、販売会社の推奨に従い、VersaDocImagingシステム4000MPおよびQuantityOne1-DAnalysisSoftwareBIO-RADを用いて実施した。ハウスキーピングタンパク質、α-チューブリンを、定量化のための内部標準として使用した。多重化qPCRを介したARmRNAの定量化総RNAを、SV96TotalRNAIsolationSystemPromega取扱説明書にしたがって抽出し、cDNAを、TranscriptorFirstStrandcDNASynthesisKitRoche;RandomPrimerandaHeatingStepof5700Cを用いるを用いて作製した。qPCRを、BIO-RADiQMultiplexPowermixと、AppliedBiosystemsTaqMan登録商標GeneExpressionAssaysからの相当するプライマープローブ組を用いて実施した。GAPDHまたはRPL23ハウスキーピング遺伝子を内部標準として使用した。実施例3ARのDsiRNA阻害-一次スクリーンARを標的としているDsiRNA分子を、上述のようにデザインして合成し、阻害有効性に関して22Rv1細胞中で試験した。トランスフェクションのために、アニールしたDsiRNAを、50μl/ウェルの容量で、トランスフェクション試薬LipofectaminTMRNAiMAX、Invitrogenと混合し、室温にて20分間インキュベートした。22Rv1ヒトまたはLMTK-マウス細胞をトリプシン処理し、培地中に再懸濁し、ウェルに加え100μL/ウェル、150μlの容量で、1nMの最終DsiRNA濃度を得た。各DsiRNAトランスフェクション混合液を、三重DsiRNA処理のために3ウェルに加えた。細胞を37°Cにて24時間、DsiRNAトランスフェクション混合液の継続存在下、インキュベートした。24時間の時点で、RNAを処理した細胞の各ウェルから調製した。トランスフェクション混合液を含む上清をまず除去して捨て、ついで細胞を溶解し、各ウェルからRNAを調製した。処理後の標的ARRNAレベルを、値を対照から得られた値に対して標準化して、AR標的遺伝子に対してqRT-PCRによって評価した。三重のデータを平均し、エラーを各処置に対して決定した。標準化データをグラフにし、対照との比較で、活性DsiRNAsによる標的mRNAの減少を決定した。試験の一次段階で、AR阻害有効性に対して試験したAR標的化DsiRNAは以下を含んだ。表9表10表11表12本実施例において、456の非対称DsiRNA試験したDsiRNAは、25/27mer構造を有するを構築し、1nMの濃度でのそのようなDsiRNAsの存在下インキュベートしたヒト22Rv1およびマウスLMTK-細胞中のAR阻害有効性に関して試験した。試験した456の非対称DsiRNAには、以上表2および3から選択したDsiRNAのサブセット、ならびにヒトAR、マウスARまたは両方内の特定の配列を標的としてデザインした対照DsiRNAのさらなる組が含まれた。456すべての試験した非対称DsiRNAsの配列および構造を、表9および10にて以上で示している。以上図2および3でのように、以上表9~12の下線を引いたヌクレオチド残基は、2’-O-メチル改変残基を示唆し、リボヌクレオチド残基をUPPERCASEとして示しており、一方デオキシリボヌクレオチド残基を下場合として示している。1nMでのヒトヒト22Rv1およびマウスLMTK-細胞中の上記456のAR標的化DsiRNAsのアッセイは、表13および14にて示した、以下のAR阻害有効性を明らかにした。ARレベルを、AR転写産物内の位置で配置されたqPCRアッセイを用いて決定したヒト22Rv1細胞実験に対して、確実なqPCRアッセイは、AR3382-3554アンプリコンYakimaYellowのものである。マウスLMTK-細胞実験に対して、対となるqPCRアッセイを実施し、MmAR1554-1667FAMおよびMmAR2413-2528YakimaYellowとした。表13表14以上表13で示したように、ヒト22Rv1細胞内で試験した408の非対称DsiRNAsのうち155が、1nMにて、22Rv1細胞内で、ヒトARの70以上の減少を示した。これらの155のDsiRNAsのうち、60が、1nMにて22Rv1細胞内で、ヒトARレベルの80またはそれ以上の減少を示した。以上表14にて示したように、細胞の環境中、1nMにてマウスLMTK-細胞中のマウスARレベルを阻害可能な多数の非対称DsiRNAをまたそのようなアッセイ中に同定した。実施例4ARのDsiRNA阻害-二次スクリーン以上の実験の72の非対称DsiRNAsを、ついで二次アッセイで試験し相2、そのようなアッセイは、図2~5にてヒストグラムの形態で示した。特に、以上で試験した456から選択した72の非対称DsiRNAsを、を、ヒト22Rv1細胞の環境中1nM、0.3nMおよび0.1nMにて、ヒトARの阻害に関して査定した図2および3。これらの72非対称DsiRNAsをまた、マウスLMTK-細胞の環境中1nM、0.3nMおよび0.1nMにて、マウスARの阻害に関して査定した図4および5。図2および3にて示すように、明かな数の非対称DsiRNAsが、22Rv1細胞の環境中でアッセイした時に、サブナノモル濃度にて、強いヒトAR阻害有効性を再現可能に示した。さらに、図4および5で示すように、多数のこれらの非対称DsiRNAsがまた、マウスLMTK-細胞の環境中でアッセイした時に、1nM、300pMおよび100pMにて、強いマウスAR阻害有効性を示した。一方、ヒトAR特異的、およびマウスAR特異的阻害非対称DsiRNAs両方をまた同定した。実施例5その他の好ましいDsiRNAによるARの阻害示したようにセンスおよびアンチセンス鎖配列を有し、AR野生型配列および適用可能な場合、バリアント配列を標的化している表2および3で示した残りのDsiRNA分子を、以上で記述したようにデザインおよび合成し、22Rv1胞および任意に、マウスLMTK-細胞中で、以上実施例3および4で記述したように阻害有効性に関して試験した。これらのDsiRNA試薬の、AR発現を阻害する能力を任意に、相当するAR標的配列指向21マーsiRNAsと比較して査定した本明細書で記述したARdsRNA試薬の21ヌクレオチド標的配列を、以上表4で示している。以上表2および3の、有意な数の残っている選択したDsiRNA試薬が、AR阻害剤としての有効性を示すと予測され、細胞の環境中、1nM、300pMおよび100pM濃度にて試験する。これらの追加DsiRNAsおよび本明細書で試験したDsiRNAsをまた、同族21マーsiRNA試薬と比べて、AR標的のレベルを減少させることにおける有効性の測定を介して決定したように、同族siRNAsをしのぐ能力に関しても試験する。そのような阻害効果の期間をまた、試験した0.1nM、0.3nM、1nMおよび5nMの濃度で、投与後24時間および48時間で試験する。本発明のDsiRNAsを、それによって効果の強度および/または期間の測定を介して決定したように、それらの同族21マーsiRNAをしのぐ能力に関して試験する。任意に、以上表5~8にて示したDsiRNA分子をまた同様に合成し、試験する。実施例622Rv1ヒト前立腺癌細胞内のARタンパク質のAR標的化DsiRNA-仲介ノックダウンAR転写産物のDsiRNA-仲介ノックダウンがまた、有意なARポリペプチドノックダウンを産出したことを確かめるために、ARタンパク質レベルを、ARを発現しているDsiRNA-処理22Rv1細胞中で試験した。図6Aで示すように、DsiRNA-仲介ARタンパク質ノックダウンが、効果的であることが示され、AR転写産物内の標的としたAR部位の位置と相関することが示された。図6B中で略図的に描写されたようなAR転写産物の長および短形態両方に相当するARポリペプチドが、AR-標的化DsiRNAAR-2224およびAR-2213の投与から24時間および48時間後の両方で、効果的にノックダウンされた。反対に、AR転写産物の長形態に相当するARポリペプチドのみが、AR-標的化DsiRNAAR-3518およびAR-3242によって効果的にノックダウンされたAR-2224およびAR-2813DsiRNAは、AR転写産物の長および短形態両方に対して指向し、一方で、AR-3518およびAR-3242DsiRNAは、AR転写産物の長形態内にのみ含まれる配列に特異的であった。これらのデータは、AR転写産物を阻害することにおいて効果的であると示されたDsiRNAがまた、ARポリペプチドレベルの効果的な阻害剤でもあること、およびAR転写産物の長および短形態両方を標的としているか、AR転写産物の長形態のみに特異的であるDsiRNAが、ARポリペプチドノックダウンの相当する選択性を示したことを立証した。実施例7AR標的化DsiRNAの修飾形態が、ARレベルをinvitroで減少させる32のAR-標的化DsiRNAAR-724、AR-730、AR-760、AR770、AR-775、AR-1210、AR-2224、AR-2720、AR-2808、AR-2813、AR-2815、AR-2819、AR-2874、AR-2897、AR-2934、AR-3518、AR-3548、AR-3576、AR-3599、AR-3617、AR-3635、AR-3641、AR-3759、AR-3762、AR-3767、AR-3771、AR-3837、AR-3844、AR-3853、AR-3869、AR-3948andAR-m2422を、図7-1~7-32で略図で示したように、2’-O-メチル改変パターンで調製した。32DsiRNA配列のそれぞれに対して、それぞれの6改変パターンを有するDsiRNAsを、A549細胞の環境中、0.1nM平行アッセイにておよび1.0nM濃度にて、ヒトA549細胞中のAR阻害に関してアッセイした。これらの実験の結果を、図7-1~7-32にてヒストグラムとして示す。一般に、32のDsiRNA配列は、ガイド鎖の2’-O-メチル改変の程度が増加するように、AR阻害有効性を減少させる傾向を示した。しかしながら、試験したほとんどすべてのDiRNA配列に関して、改変パターンは、invitroにて有意なAR阻害有効性をDsiRNAが維持するように同定可能であった。また、多くのDsiRNAs例えば、AR-2934、AR-3518、AR-3759、AR-3771、AR-3948が、試験した最も高く改変した状態においてさえも、強力なAR阻害有効性を示したことに注目すべきであった。これらのデータは、そのようなDsiRNAsを安定化させるのに、および/またはinvivoにて対象に治療的に投与した時の、そのようなDsiRNAの免疫原性の減少させるために十分な修飾レベルを有する、効果的なDsiRNA配列を同定することが可能でありうる。特定の実施形態において、本発明は、以下の1つまたはそれ以上から選択されたDsiRNAを提供する。表13上記改変DsiRNAアッセイにて試験した表13のDsiRNAのうち、AR-724、AR-730、AR-760、AR-770、AR-775、AR-2720、AR-2808、AR-2815、AR-2819、AR-3576、AR-3599、AR-3759、AR-3762、AR-3767およびAR-3771が、改変された時でさえ、強く効果的なDsiRNA配列であることを示したそして、AR-760、AR-775、AR-2815、AR-3576、AR-3599、AR-3759、AR-3762、AR-3767およびAR-3771が、試験した全ての改変条件下、非常に効果的なARの阻害剤であることが観察された。特定の関連実施形態において、選択されたAR-標的化DsiRNAは、AR-2813、AR-2815およびAR-3599および任意にAR-2815およびAR-3599である。実施例8肺組織中のAR-標的化DsiRNAのinvivo有効性invivoにてARに対して指向したDsiRNAの活性を試験するために、CD1オスマウスにAR-2813を投与した。マウスを、5グルコース対照賦形剤、対照DsiRNASCR2、またはAR-2813いずれかで、尾静脈注射によって処置した。DsiRNAを、InVivoFectamineTMInVitrogenTMInVitrogen中に処方し、10mg/kg体重/投与の用量で投与した1日投与しない日を挟んで2日間で投与した。最後の投与から3日後、動物を安楽死させ、肺を回収した。RNA発現解析のために、RNAを、Promega登録商標SV96RNA単離キットを用いて、肺組織溶解物から単離した。RNAを逆転写し、ついでTaqman定量PCRを、ARおよび標準化のためにハウスキーピング遺伝子GAPDHに特異的なプライマーおよびプローブ組を用いて、多重で、BioRadCFX96上で実施した。結果の確認のために、ARに対して、3つの異なるqPCRアッセイを使用したAR961、AR1554およびAR2と命名。図8に示すように、AR-2813DsiRNAは、回収した肺組織中のARのinvivoノックダウンの顕著な有効性を示した。特に、ARRNAレベルが、対照肺試料と比較して、およそ50~80まで、AR-2813投与動物のアッセイした肺組織中で減少した。したがって、AR-標的化DsiRNAは、肺組織において、invivoにて、強力かつ有効的な阻害剤であることが示された。実施例9ヒト22Rv1前立腺癌細胞およびA549腺癌細胞中、AR発現をノックダウンしたAR-標的化DsiRNAに対して計算したIC50値上の表6は、AR-標的化DsiRNAが、ARを発現しているDsiRNA-処理22rV1細胞中、AR転写産物およびポリペプチド両方のノックダウンを産出したことを確認した。活性AR-2813DsiRNAを用いて、そのようなノックダウンと関連したIC50値の同定するために、上記結果を確認し、拡張した。そのような実験を実施するために、脂質トランスフェクション試薬RNAiMAXとAR-2813DsiRNAまたはモック処理の用量曲線濃度を使用して、22Rv1細胞をinvitroでトランスフェクトした。形質移入から2日後、細胞を溶解し、タンパク質発現を、抗AR-抗体、または対照として抗-α-チューブリン抗体を用いるウエスタン解析によって決定した。図9にて示すように、多重ARタンパク質が22Rv1細胞中で検出され、全長AR上バンドと、本細胞株中の変異からの結果である頂短ARタンパク質下バンドを表している。DsiRNA-仲介ARタンパク質ノックダウンが、22Rv1細胞へのDsiRNA投与1日および2日後両方で、ARポリペプチドの長および短形態両方に対して効果的であることが示された上パネル。AR長形態ポリペプチド阻害第1日目54.6pM、第2日目5pM、およびAR短形態ポリペプチド阻害1日目86.8pMおよび2日目13.6pM両方に関連したIC50値を計算し、これは、AR-2813DsiRNAの阻害試薬としての明かな強度を示唆している。AR-2813DsiRNAはまた、ARmRNAレベルを劇的に阻害することが確認された例えば、アッセイした濃度のDsiRNAに依存して、少なくとも50または80以上までの減少。AR-標的化DsiRNAがまた、A549腺癌ヒト肺胞上皮細胞中のARmRNA発現を阻害することもわかった。図10の用量応答曲線にて示した様に、多数のAR-標的化DsiRNAが、A549細胞中、AR発現の強力な阻害剤であることが観察された。特に、A549細胞を、示した様な用量曲線濃度のAR-標的化とともに処方したDsiRNAを脂質トランスフェクション試薬RNAiMAXを用いて、invitroにてトランスフェクトした。トランスフェクション2日後、溶解細胞を溶解し、総RNAをSV96TotalRNAIsolationSystemPromegaを用いて抽出した。cDNAをTranscriptorFirstStrandcDNASythesisKitRoche、ランダムプライマーと5’70°Cの加熱段階を、利用を用いて作成した。qPCRを、iQMultiplexPowermixおよび相当するプライマープローブ組BIO-RADを用いて実施した。IC50値を、各以下のアッセイしたAR-標的化DsiRNAに対して計算した:AR-2813-M25IC50=21pM、AR-2815-M12IC50=0.7pM、AR-2874-M12IC50=0.4pM、AR-35180M12IC50=0.086pMおよびAR-3599-M25IC50=1.57pM。実施例10AR-標的化DsiRNAは、前立腺癌細胞株中の腫瘍細胞増殖を阻害した。AR-標的化DsiRNAが、ARを発現すると公知の癌細胞中の細胞増殖に影響を与えうるかどうかを明らかにするために、AR-標的化DsiRNAを前立腺癌細胞株22Rv1図11およびVCaP図12に与えた。図11にて示すように、ヒト前立腺癌細胞株22Rv1細胞の、AR-標的化DsiRNAAR-2813での形質移入により、対照DsiRNAで形質移入したそのような細胞と比較して、22Rv1細胞中の細胞増殖の劇的な少なくとも50阻害を産出したそのような実験において、22Rv1細胞を、RNAiMAXを用いてDsiRNAで、invitroにて5時間形質移入し、形質移入から6日後、細胞の増殖を細胞増殖アッセイPromegaによって測定した。そのような結果を拡張して、図12は、修飾されたAR-標的化DsiRNA特に、図7で示した様に、アンチセンスガイド鎖修飾パターンM25を持つ、AR-3599およびAR-2813DsiRNAは、そのような細胞への投与後、VCaPヒト前立腺癌細胞増殖を強力に阻害したこれらの実験において、細胞増殖値を、DsiRNAの形質移入仲介から投与5日後に査定した。明らかに、ARDsiRNAでのVCaP細胞の処理が、30pM程度低い形質移入の濃度にて、VCaP前立腺癌細胞株の増殖を阻害したAR-3599-M25に関して、細胞増殖が、30pM濃度にて、少なくとも50まで阻害された。したがって、DsiRNAは、前立腺癌細胞増殖の驚くべき強力な阻害剤であることが観察された。実施例11肝臓組織中のAR-標的化DsiRNAのinvivo有効性invivoにて、ARに対して指向したDsiRNAの活性をさらに試験するために、2ヶ月齢nu/nuオスマウスn=7に、InVivoFectamineTMInVitrogen2.0Invitrogen中に処方したARDsiRNAを注射し、1日目および4日目に10mg/kgivの用量で投与した。各7匹のマウスの3つのさらなる群PBS、未処理またはHPRT1対照DsiRNAを投与したを対照群として本研究に含めた。肝臓組織を、第二用量の投与から48時間後に回収し、後の利用のために、溶液RNAseEasy中に保存した。少量の肝臓組織を、500μlのQIAzol溶解緩衝液中でホモジナイズし、500μlのクロロホルムと混合し、遠心した。100μlの上水層をAV96結合プレートに移し、RNAをSV96TotalRNAIsolationSystemPromegaを用いて抽出した。cDNAを、TranscriptorFirstStrandcDNASythesisKitRoche、ランダムプライマーと5’70°Cの加熱段階を、利用を用いて作製した。qPCRを、iQMultiplexPowermixBIO-RADおよびAppliedBiosystemsTaqMan登録商標GeneExpressionAssaysからの相当するプライマープローブ組を用いて実施した。GAPDH、ハウスキーピング遺伝子を、定量の内部標準として使用した。図13に示すように、4つの異なるAR-標的化DsiRNAAR-2815-M12、AR-2874-M12、AR-3518-M12およびAR3599-M25それぞれが、未処理、PBS-または対照オリゴヌクレオチド-処理対照と比較して、少なくとも80特定の場合、少なくとも90または95まで、正常肝臓組織中のARmRNA発現を減少させた。invivoノックダウン結果が、図8および13にて示した結果を得るために使用した、InVivoFectamineTMInVitrogenトランスフェクション試薬以外の液体製剤で達成可能かどうかを確認するため、およびそのような製剤が、invivoにて移植された腫瘍細胞中のAR発現を阻害するかどうかを評価するために、AR-標的化DsiRNAを、異なる液体処方DL1およびDL2中に処方し、そのように処方したDsiRNAをついて、肝臓中に移植された腫瘍細胞中、および正常肝臓組織中のARのinvivoノックダウンに対して査定した。特にH460腫瘍を、皮下でマウスに移植し、2週間増殖させた。腫瘍がおよそ~300mm3であった時に開始し、5mg/kgの三用量を48時間間隔で静脈内投与した。DsiRNAを液体に基づく製剤DL1またはDL2中で処方した。AR-標的化DsiRNAsAR2813-M12およびAR3599-M25を本研究で試験した。一方、2つのさらなる群の各8匹マウス食塩水またはHPRT1DsiRNAを投与を、対照群として本研究に加えた。肝臓組織を最終用量の投与から48時間後に回収し、すぐに凍結した。凍結した組織を粉状にし、小さな部分の肝臓組織を、500μlのQIAzol溶解緩衝液中でホモジナイズし、500μlのクロロホルムと混合し、遠心した。100μlの上水層をSV96結合プレートに移し、RNAをSV96TotalRNAIsolationSystemPromegaを用いて抽出した。cDNAを、TranscriptorFirstStrandcDNASythesisKitRoche、ランダムプライマーと5’70°Cの加熱段階を、利用を用いて作製した。qPCRを、iQMultiplexPowermixBIO-RADおよびAppliedBiosystemsTaqMan登録商標GeneExpressionAssaysからの相当するプライマープローブ組を用いて実施した。GAPDH、ハウスキーピング遺伝子を、定量の内部標準として使用した。図14にて示したように、AR-標的化DsiRNAAR-2815-M12およびAR3599-M25が、正常肝臓組織中のARmRNA発現を、食塩水-または対照オリゴヌクレオチド-処理対照と比較して、少なくとも80までAR3599-M25に関して、少なくとも90まで減少させた。したがって、AR-標的化DsiRNAは、invivoにて肝臓組織中のARの強力かつ効果的な阻害剤であることが示された。実施例12適応症AR研究における現在の知識により、AR活性をアッセイするための方法、および研究、診断および治療利用のために、AR発現を制御可能な化合物に対する必要性が示される。本明細書で記述したように、本発明の核酸分子を、ARレベルに関連した疾患状態を診断するために、アッセイ中で使用可能である。さらに、核酸分子を、AR誤調節、レベルなどに関連する疾患状態を処置するために使用可能である。AR発現調節に関連可能な特定の疾患および疾病には、単独または他の治療との組み合わせで、癌および/または増殖性疾患、状態または疾病、および細胞または組織中のARのレベルに関連する、または応答しうる他の疾患、状態または疾病が含まれるが、限定はされない。AR発現調節に関連した特定の変性および疾患状態には、例えば前立腺癌、肺癌、結腸直腸癌、膀胱癌、膵臓癌および乳癌が含まれるが、限定はされない。ゲムシタビンおよびシクロホスファミドは、本発明の核酸分子例えばDsiRNA分子と組み合せ可能、または併用可能な化学治療剤の非限定例である。当業者は、抗癌化合物および治療のような、他の薬剤を同様に、本発明の核酸分子例えばDsiRNA分子と簡単に混合可能であり、したがって本発明の範囲内であることを認識するであろう。そのような化合物および治療は、本技術分野で公知でありたとえば、Cancer:PrinciplesandPracticeofOncology,Volumes1and2、edsDevita,V.T.,Hellman,S.、andRosenberg,S.A.,J.B.LippincottCompany、Philadelphia,USAを参照のこと、抗葉酸類、フルオロピリミジン類、シタラビン、プリン類似体、アデノシン類似体、アムサクリン、トポイソメラーゼI阻害剤類、アントラピラゾール類、レチノイド類、ブレオマイシン、アントラサイクリン類、マイトマイシンC、ダクチノマイシンおよびミトラマイシンのような抗生物質類、ヘキサメチルメラミン、デカルバジン、1-アスペルギナーゼ、白金類似体、窒素マスタード、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、イホスファミド、4-ヒドロペルオキシシクロホスファミド、ニトロソウレア、チオテパのようなアルキル化剤、ビンカアルカロイド類、エピポドフィロトキシン類、タキソールのような植物由来化合物、タモキシフェン、放射線治療、手術、栄養補助剤、遺伝子治療、3D-CRTのような放射療法、リシン、モノクローナル抗体Herceptinのような免疫毒素療法などが含まれるが、これらに限定はされない。組み合わせ療法のために、本発明の核酸を2つの方法のうち1つで調製する。第一に、試薬を、静脈内投与のための溶液中の、リポソーム内にカプセル封入した本発明の核酸と、イホスファミドの混合液のような、核酸と化学療法剤の調製において物理的に混合し、そこで両方の薬剤は、治療的に効果的な濃度で存在する例えば1000~1250mg/m2/日を伝達するための溶液中のイホスファミドと、0.1~100mg/kg/日を伝達するための同一の溶液中の本発明のリポソーム結合核酸。あるいは、試薬を、それらそれぞれの効果的な用量で別々に、しかし同時に投与する例えば、1000~1250mg/m2/dイホスファミドと0.1~100mg/kg/日本発明の核酸。業者は、本明細書で記述した疾患および状態を治療するために使用する他の化合物および治療を、本発明の核酸分子例えばsiNA分子と同様に混合可能であり、したがって本発明の範囲内であることを理解するであろう。実施例13DsiRNAに関する血清安定性DsiRNA試薬の血清安定性を、37°Cにて種々の時間間隔~24時間の間、50ウシ胎児血清中でのDsiRNA試薬のインキュベーションを介して査定する。血清を抽出し、核酸を、20非変性PAGE上で分離し、Gelstar染色によって可視化可能である。ヌクレアーゼ分解からの保護の相対レベルを、任意に修飾ありおよびなしでDsiRNAsに関して査定する。実施例14AR遺伝子発現の下方制御を評価するための、追加細胞培養モデルの利用抗-AR試薬での処置の後のAR仲介効果を見るために、種々の評価項目が細胞培養モデルで使用されてきた。表現型評価項目には、細胞増殖の阻害、RNA発現、およびARタンパク質発現の減少が含まれる。AR変異が、特定の腫瘍細胞の増殖の増加に直接関連するので、細胞増殖アッセイに対する増殖評価項目は、スクリーンとして使用可能である。本評価項目を測定可能な種々の方法が存在する。DsiRNAでの細胞の処置後、細胞を増殖させ典型的に5日間、その後細胞生存能力、ブロモデオキシウリジンBrdUの細胞DNA内への取込および/または細胞密度を測定する。細胞密度のアッセイは、Syto登録商標13またはCyQuant登録商標のような市販されている蛍光核酸鎖を用いることによって、96-ウェルフォーマットで実施可能である。第二の、確認評価項目として、ARタンパク質発現のレベルにおけるDsiRNA-仲介減少を、AR特異的ELISAを用いて評価可能である。実施例15AR誤調節のマウスモデルにおける、抗ARDsiRNA有効性の評価invitroアッセイから選んだ抗-ARDsiRNAをさらに、例えば異種移植片および以上で引用したような他の動物モデルを含む、マウスモデルにてさらに試験可能である。1つの例において、誤調節された例えば上昇したARレベルを有するマウスに、流体力学尾静脈注射を介して、本発明のDsiRNA試薬を投与する。3~4匹のマウス/群試験した特定のDsiRNA試薬に基づき分割に、50μgまたは200μgのDsiRNAを注射する。ARRNAのレベルを、RT-qPCRを用いて評価する。さらに、またはあるいは、ARのレベル例えばARタンパク質レベルおよび/または癌細胞/腫瘍形成、増殖または拡散を、本技術分野で認識される方法を用いて評価可能であり、またはARの誤調節に関連する表現型例えば腫瘍形成、増殖、転移などを、任意にAR転写産物またはARタンパク質レベルの測定のための代理としてモニタする。そのような動物モデルにおける活性DsiRNAを、標準の化学療法との組み合わせで続けて試験可能でもある。実施例16診断利用本発明のDsiRNA分子を、種々の適用、例えば臨床、工業、環境、農業および/または研究設定にて、分子標的例えばRNAの同定においてのような、種々の診断適用で使用可能である。DsiRNA分子のそのような診断利用には、再構築RNAi系を利用すること、例えば、細胞溶解物または部分的に精製した細胞溶解物を用いることが含まれる。本発明のDsiRNA分子は、疾患細胞内の遺伝的ドリフトおよび変異を試験するための診断ツールとして使用可能である。DsiRNA活性と、標的ARRNAの構造間の近い関係により、標的ARRNAの塩基対形成と三次元構造を変化させる、AR分子の領域における変異の検出が許容される。本発明にて記述された多重DsiRNA分子を用いることによって、RNA構造およびinvitroかつ細胞および組織内での機能に対して重要である、ヌクレオチド変化をマッピング可能である。標的ARRNAのDsiRNA分子での開裂を、遺伝子発現を阻害し、AR-関連疾患または疾病の進行における、特定の遺伝子産物の役割を定義するために使用可能である。この様式において、他の遺伝的標的を、疾患の重要なメディエータとして定義可能である。これらの実験は、組み合わせ療法例えば異なる遺伝子を標的とした多重DsiRNA分子、公知の低分子阻害剤と結合したDsiRNA分子、またはDsiRNA分子および/または他の化学または生物学的物質と組み合わせでの断続的な治療の可能性を提供することによって、疾患進行のよりよい治療を導きうる。本発明のDsiRNA分子の他のinvitro利用が本技術分野でよく公知であり、疾患または関係状態と関連したRNAsの存在の検出が含まれる。そのようなRNAは、標準の方法、例えば蛍光共鳴放射移動FRETを用いて、DsiRNAでの治療後、開裂産物の存在を測定することによって検出する。特定の例において、標的ARRNAの野生型または変異体または多型形態のみを開裂するDsiRNA分子をアッセイのために使用する。第一DsiRNA分子すなわち、標的ARRNAの野生型形態のみを開裂するものを使用して、試料中に存在する野生型ARRNAを同定し、第二DsiRNA分子すなわち標的RNAの変異体または多型形態のみを開裂するものを使用して、試料中の変異体または多型ARRNAを同定する。反応対照として、野生型、および変異体または多型ARRNA両方の合成基質が、両方のDsiRNA分子によって開裂され、反応中相対DsiRNA有効性と、非標的化ARRNA種の開裂がないことを示す。合成基質からの開裂産物がまた、試料集団中の野生型および変異体ARRNAsの解析のために、サイズマーカーを産出するために働く。したがって、各解析は、2つのDsiRNA分子、2つの基質および1つの未知の試料を必要とし、6つの反応にあわせる。開裂産物の存在を、各ARRNAの全長および開裂断片を、ポリアクリルアミドゲルの1つのレーン内で解析可能であるように、RNase保護アッセイを用いて決定する。変異体または多型ARRNAsの発現、および標的細胞内のAR-関連表現型変化の推定リスクへの洞察を得るために結果を定量化する必要は完全にはない。そのタンパク質産物が、表現型すなわち疾患相関/関連の発達において暗示されるARmRNAの発現が、リスクを確立するのに十分である。比較可能な特定の活性のプローブを、両方の転写産物のために使用する場合、ARRNAレベルの定性的比較が十分であり、初期診断のコストを減少させる。より高い変異体または多型形態の野生型に対する比が、ARRNAレベルを定性的または定量的に比較するかどうかのより高いリスクと比例する。本明細書で言及されたすべての特許および発行物は、本発明が属する技術分野の当業者のレベルの指標である。本明細書で引用したすべての参考文献は、各参考文献が、その全てが個々に参考文献によって組み込まれたのと同様の程度まで、参考文献によって組み込まれている。当業者は、本発明が目的を実施するためによく適合することを簡単に理解し、言及した結果および利点ならびにその中の固有のものを得る。好ましい実施形態の代表例として本明細書で記述する方法および組成物は例示であり、本発明の範囲を制限する意図はない。そこでの変化および他の利用が当業者に対して存在し、本発明の精神の範囲内で企図され、請求項の範囲によって定義される。種々の置換および改変を、本発明の範囲および精神から逸脱せずに本明細書で開示された本発明に対して実施可能であることが、当業者に簡単に理解されるであろう。したがって、そのような追加実施形態は、本発明および続く請求項の範囲内である。本発明は、RNAi活性を仲介するために、改善された活性をもつ核酸構造物を産出することに対して、本明細書で記述した化学的改変の種々の組み合わせおよび/または置換を試験することを当業者に教示する。そのような改善された活性は、改善された安定性、改善されたバイオアベイラビリティ、および/またはRNAi仲介細胞応答の改善された活性を含みうる。したがって、本明細書で記述した特定の実施形態は、限定ではなく、当業者は、本明細書で記述した改変の特定の組み合わせが、改善されたRNAi活性を持つDsiRNA分子を同定することに対して、不必要な実験なしに試験可能であることを簡単に理解可能である。本明細書で例示的に記述された発明は、本明細書で特に開示されていない、任意の要素または要素類、制限または制限類なしに好適に実施可能である。したがって、例えば、本明細書各例において、任意の語句含む、から本質的になるおよびからなるは、他の2つの語句いずれかに置換してよい。使用された語句および表現は、制限の語句ではなく記述の語句として使用され、示し、記述した特徴の任意の等価物またはその部分を除外するそのような語句および発現の利用において意図しておらず、種々の改変が、請求された本発明の目的の範囲内である可能性が認識される。したがって、本発明が、好ましい実施形態によって特に開示されているけれども、本明細書で開示されたコンセプトの任意の特徴、改変およびバリエーションが、当業者によって頼られてよいこと、およびそのような改変およびバリエーションが、記述ならびに付随する請求項によって定義されたように、本発明の範囲内であると考慮されることが理解されるべきである。さらに、本発明の特徴または様態が、Markushグループまたは他の代替グルーピングにて記述される場合、当業者は、本発明がMarkushグループまたは他のグループの任意の個々のメンバー、またはメンバーのサブグループに関してそれによって記述もされることを理解されうる。本発明を記述する文脈中特に続く請求項の文脈中語句a、anおよびtheならびに同様の参照は、本明細書の他で指摘するか、または文脈によって明確に矛盾しない限り、単数および複数両方をカバーすると理解されるべきである。語句含むcomprising、持つhaving、含むincludingおよび含むcontainingは、他に言及しない限り、無制限語句として構築されるべきであるすなわち、含むが、限定されないと意味する。本明細書の値の範囲の口述は単に、本明細書で他に指摘しない限り、その範囲内にある各別々の値を個々に引用する簡潔にした方法として供給する意図があり、各別々の値は、本明細書で個々に引用されるものとして、本明細書内に組み込まれる。本明細書で記述されたすべての方法を、本明細書他に引用しない限り、または文脈において明確に他に矛盾しない限り、好適な順番で実施可能である。任意の、そしてすべての例、または本明細書で定義される例示的言語たとえばのようなの利用は、単に本発明をよりよく例示する意図であり、他に請求しない限り、本発明の範囲における制限を提起するものではない。明細書中言及がないものは、本発明の実施に必須であるような、任意の非請求要素を示唆しているとして構成されるべきである。本発明の実施形態が本明細書で記述されており、本発明を実施するために本発明者等に公知の最適な様式が含まれる。これらの実施形態のバリエーションが、以下の記述を読むことに際して、当業者に明確になり得る。本発明者らは、当業者が、適切にそのようなバリエーションを利用することを期待しており、本発明に関して、本明細書で特に記述したもの以外で実施されるべきと意図している。したがって、本発明は、適用可能な法律によって許可されるように、本明細書に付随する請求項にて引用された対象のすべての改変および等価物を含む。さらに、全ての可能性あるそれらのバリエーションにおける任意上記要素の任意の組み合わせが、本発明で他に指摘されない限り、または文脈によって明確に矛盾しない限り、本明細書によって企図される。当業者は、ただ通常の実験を使用して、本明細書で記述される本発明の特定の実施形態に対する多くの等価物を認識するか、または究明することが出来る。そのような等価物は、以下の請求項によって企図される意図がある。"