"ペギレート化燐脂質を含む燐脂質からなるリポソーム二重層、並びに該リポソーム二重層内に含まれる治療上有効な量の光増感剤からなる、保存のための凍結乾燥を必要としない光力学治療用の製薬リポソーム処方物。前記燐脂質が、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール、ポリエチレングリコール結合燐脂質およびこれら3つの物質の組み合わせからなる群から選ばれる請求項1に記載のリポソーム処方物。前記燐脂質が、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルグリセロールおよびペギレート化ジステアロイルホスファチジルエタノールアミンの組み合わせである請求項1に記載のリポソーム処方物。前記ジパルミトイルホスファチジルコリンの濃度は0.5-2.0w/vであり、前記ジパルミトイルホスファチジルグリセロールの濃度は0.05-0.2w/vである請求項3に記載のリポソーム処方物。前記光増感剤がジヒドロポルフィリンおよびテトラヒドロポルフィリンからなる群から選ばれる請求項1から4のいずれか1項に記載のリポソーム処方物。前記光増感剤がテモポルフィンである請求項1から5のいずれか1項に記載のリポソーム処方物。前記ジパルミトイルホスファチジルコリンの濃度は0.5-2.0w/vであり、前記ペギレート化ジステアロイルホスファチジルエタノールアミンの濃度は0.05-0.2w/vである請求項3に記載のリポソーム処方物。前記光増感剤の治療上有効な濃度が、0.0001-0.15w/vである請求項1から7のいずれか1項に記載のリポソーム処方物。製薬投与のために水性流体により再構成される請求項1から8のいずれか1項に記載のリポソーム処方物。光力学治療PDTに使用される改善された光増感剤処方物を提供するのが本発明の目的である。リポソーム膜中に非極性光増感剤を配合し、それにより非極性および極性の物質を同じベシクルを使用して輸送するのが本発明の他の目的である。凍結防止剤として単糖またはポリアルコールを添加することにより凍結乾燥中配合された非極性光増感剤を有するリポソーム構成物の構造およびサイズを保存するのが本発明の他の目的である。改善された薬剤動力学の性質を有する光増感剤処方物を提供するのが本発明の他の目的である。細胞膜を通る非極性光増感剤の輸送を改善しそのためPDTの能率を増大させるのが本発明の他の目的である。本発明は、非極性ポルフィリン光増感剤および1つ以上の燐脂質を含む光力学治療用の製薬リポソーム処方物に関し、それらは凍結乾燥を要することなく安定に貯蔵できる。リポソーム処方物は、静脈内投与のための治療上有効な量の光増感剤を提供する。燐脂質は、ペギレーションにより改変でき、すなわちそれらは燐脂質の統合された部分としてポリエチレングリコールを含む。形成されたリポソームは、膜内に非極性光増感剤を含み、そして非極性光増感剤および第二の極性の物質の組み合わされたターゲティングに有用である。処方物が単糖またはポリアルコールの存在を含むとき、それは、リポソームベシクルのサイズおよび治療上有効な量の光増感剤の含量を保存しつつ、有効に凍結乾燥できる。本発明は、また水性ベシクルによる再構成で形成されるリポソーム組成物に関する。好適な水性ベシクルによる再構成での凍結乾燥された処方物は、また静脈内投与に有用なリポソームを形成する。本発明の上記および他の目的、特徴および利点は、図とともに読まれる以下の記述から明らかになるだろう。凍結乾燥を要することなく貯蔵して安定な、非極性ポルフィリン光増感剤および1つ以上の燐脂質を含む光力学治療用の製薬リポソーム処方物は、以下に記述される。リポソーム処方物は、静脈内投与のための治療上有効な量の光増感剤を提供する。燐脂質は、ペギレーションにより改変でき、すなわちそれらは燐脂質の統合した部分としてポリエチレングリコールを含む。形成されたリポソームは、膜内に非極性光増感剤を含みそして非極性光増感剤および第二の極性物質の組み合わさったターゲティングに有用である。処方物は、単糖またはポリアルコールを使用する凍結乾燥工程により保存でき、かなり安定な貯蔵期間を有する必要がない。工程のサイクルは、リポソームベシクルのサイズ並びに光増感化合物の膜含量を保存する。本発明の非極性光増感剤は、周知のポルフィリンに基づく化合物を含む。本発明の実施に有利に使用される特定の光増感剤は、ポルフィリン単環光増感剤に基づくものであり、ジュウテリオポルフィリン、エチオポルフィリン、プロトポルフィン、ヘマトポルフィリン、フェオホルバイド並びにそれらの誘導体、特にジ-およびテトラ-ヒドロポルフィリン誘導体640-780ナノメートルの範囲で最大の光吸収を有するを含む。燐脂質は、ペギレーションにより改変されても統合する部分としてポリエチレングリコールを含む、またはされなくてもよい。形成されたリポソームは、膜内に非極性光増感剤を含み、そして非極性光増感剤および第二の極性物質の組み合わさったターゲティングに有用である。光増感剤処方物は、望ましくない細胞または組織または他の望まない材料へ非極性光増感剤分子を向かわせるのに有用であり、そして適切な光源による照射後ターゲットを損傷するのに有用である。光増感剤処方物は、また、光増感剤の制限された光化学活性化によりまたはそれなしで蛍光イメージング法を使用することによって望ましくない細胞または組織または他の望まない材料をモニターするのに有用である。特に、本発明のリポソーム処方物は、非極性光増感剤を輸送するのに有用である。非極性物質は、ベシクルの膜内に一体化され、それによってより容易に開放する構造を生成して、細胞膜への直接の作用のために光増感剤を放す。このメカニズムは、作用の1つの好ましい場所である細胞膜系に直接光増感剤を伝達する。そのため、適切な外部の光源による照明により有効に活性化される光増感剤は、望ましくない細胞、組織または他の構造を不可逆的に損傷できる。従来構築されたリポソーム処方物は、ベシクルのルミナールluminal部分中に捕捉されるいくつかの化合物を輸送するのに使用されている。本発明は、1つのリポソーム内の2つの異なる輸送コンパートメントの組み合わせに焦点をあてており、非極性および極性の物質の組み合わさった輸送を可能にする。この方法で、膜内に光増感剤を存在させることによって、光増感剤は、それらの作用点に有効に向けられるが、リポソーム粒子内のルミナール部分は、他の物質治療に有益な効果を有する医薬を含むを包含するために、自由のままである。さらに、グルコースのような単糖および燐脂質へ付着した光増感剤の組み合わせは、二糖の代わりに生理学的に普通の炭水化物を使用して凍結乾燥および再水和中、リポソームのサイズを保存するのに優れた手段である。この多面的な概念は、治療に有益な効果を有すると思われる物質の添加を可能にする。1つのベシクル内の膜に結合した光増感剤とともに2つ以上の物質を組み合わせることは、ターゲティング細胞治療の酸素含量に直接または間接に影響し、光力学治療の有効性に影響する。例えば、これらの効果は、哺乳動物のチオレドキシンレダクターゼTrxRの阻害剤のような酵素の活性の阻害剤を添加することにより達成できる。そのため、目標とした細胞の細胞質に到達した後にのみ有効なため、阻害剤は、抗酸化剤として通常作用するTrx/TrxR経路をブロックするだろう。実施例m-THPCを含むリポソームの製造mTHPCTemoporfinは、参考として本明細書に引用される米国特許4992257および5162519に記述されている通りに合成された。リポソームは、以下の一般的な方法で製造された。非極性光増感剤、アスコルビン酸パルミテートおよび燐脂質をクロロホルム/メタノールに溶解する。溶液を、次にクロロホルム/メタノール混合物がガスクロマトグラフィーにより検出できなくなるまで、回転蒸発器を使用して真空下乾燥する。注入用の水を添加して少なくとも2時間50°Cの温度で脂質フィルムを再水和する。混合物を次に最後に100ナノメートルの穴のサイズを使用するホモゲナイザーフィルター系を通す。好ましくは、再水和の水に単糖またはポリアルコールを補給する。濾液を集め、バイアルに入れ、好ましくは凍結乾燥する。凍結乾燥した組成物を、投与前に注入用の水により再構成する。前記の方法を使用して、リポソーム処方物のいくつかの異なる調製物を以下のように製造した。実施例1a成分量w/vmTHPC0.05-0.15ジパルミトイルホスファチジルコリン0.5-2.0ジパルミトイルホスファチジルグリセロール0.05-0.2ペギレート化ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン0.05-0.2アスコルビン酸パルミテート0.002-0004注入用の水加えて上記濃度にする実施例1b成分量w/vmTHPC0.05-0.15ジパルミトイルホスファチジルコリン0.5-2.0ジパルミトイルホスファチジルグリセロール0.05-0.2アスコルビン酸パルミテート0.002-0004注入用の水加えて上記濃度にする実施例1c成分量w/vmTHPC0.05-0.15ジパルミトイルホスファチジルコリン0.5-2.0ジパルミトイルホスファチジルグリセロール0.05-0.2グリコース2.0-12.0アスコルビン酸パルミテート0.002-0004注入用の水加えて上記濃度にするすべては、本発明によるそれらの使用で十分に機能することが分かった。リポソームm-THPCの物理的および化学的安定性リポソーム処方物の物理的安定性は、光子相関スペクトル分析により粒子サイズの分布をモニターすることにより測定された。リポソームmTHPCの安定性貯蔵条件平均粒子サイズ分布nm最初16623°C-1ヶ月17723°C-4ヶ月167処方物のリポソーム二重層内のmTHPCの局在化リポソーム処方物のゲル濾過は、セファデックスG50カラムで行われた。図1に示されるように、脂質およびmTHPCは、すべてのフラクションにわたって同じ分布を示し、両者の成分の物理的な相互作用すなわち膜二重層中へのmTHPCの一体化を示す。分布は、表1および2に示されるように、超音波処理によりリポソーム構造を破壊した後でも著しく変化しない。マウスにおける製剤動力学Balb/cマウスに同系間の非転移マウス結腸直腸腫瘍細胞系であるColo26を使用した。細胞を、10加熱不活性化ウシ胎児血清、1ストレプトマイシン-ペニシリンおよび200mMのL-グルタミンを補ったRosewellParkMemorialInstituteRPMI-1640培地で、95空気および5CO2中で37°Cで単層培養として維持した。6週令の無胸腺雌マウスSwiss,nu/nuに、2×106Colo26細胞を右後ろ足の皮下に接種した。2週後、腫瘍が5-7mmの直径に達したとき、m-THPCの処方物0.5mg/kgを静脈内に注入した。非侵襲性LIF測定を、医薬投与後異なる時間で3つの異なる部位、すなわち皮膚が重なった腫瘍、左後ろ足上の皮膚が重なった対称的な正常の組織および隆起した皮膚で行った。選択された時点で、マウスを殺し、そして腫瘍および正常の組織からの蛍光信号を直接接触して測定した。図2は、4匹のマウスで測定された注入後の時間の関数として、mTHPC、生成物AおよびBの蓄積を示す。非侵襲性測定は、24時間で最適な比1.3で正常な組織に比べて腫瘍中のmTHPCのよりよい蓄積の傾向を立証した。注入24時間および48時間後の腫瘍および筋肉との直接接触で行われた侵襲性測定は、それぞれ2.7および3.0の比を示した。生成物Aに関する測定は、投与後0.5時間、4時間、6時間、8時間、12時間、24時間、36時間、48時間および72時間で1匹のマウスでなされた。生成物Aは、mTHPCと同様な薬剤動力学の傾向を示した。mTHPCに比べて、腫瘍組織の最高の蛍光強度は、注入4時間後既に達した。生成物Bに関する測定は、投与後0.5時間、4時間、6時間、8時間、12時間、24時間、36時間、48時間および72時間で1匹のマウスでなされた。腫瘍の最高の蛍光強度は、静脈内注入8時間後に測定された。mTHPCに比べて、生成物Bは、完全に異なる製剤動力学の性質を示している。生成物Bの濃度は、mTHPCより遙かに早く16時間腫瘍中で増加した。リポソームm-THPCの抗腫瘍活性Balb/cマウスに同系間の非転移マウス結腸直腸腫瘍細胞系であるColo26を使用した。細胞を、10加熱不活性化ウシ胎児血清、1ストレプトマイシン-ペニシリンおよび200mMのL-グルタミンを補ったRosewellParkMemorialInstituteRPMI-1640培地で、95空気および5CO2中で37°Cで単層培養の無胸腺雌マウスSwiss,nu/nuに、2×106Colo26細胞を右後ろ足の皮下に接種した。2-3週後、腫瘍が10-13mmの直径に達したとき、m-THPCの処方物0.5mg/kgを静脈内に注入した。他に示されない限り、1つの生成物あたり1群3匹のマウスを、それぞれのPDT処理後に使用した。a.光力学治療0.5時間、4時間、6時間、72時間の医薬-光の間隔DLIを、mTHPC、生成物Aリポソームおよびm-THPCおよび生成物BPEG化リポソームおよびm-THPCとしての生成物に使用した。それぞれの動物は、ケタミン12.5mg/mLの筋肉内注入により麻酔にかけられ、次に光ダイオードレーザーを使用して100mW/cm2で10J/cm2により652nmで光照射された。b.PDT効果の評価形態学的方法PDT処理後の腫瘍組織壊死を評価するために、EvansBlue染色法を使用した。マウスに、PDT処理直後Evansブルー1を腹腔内に0.25mL注入した。24時間後、マウスをハロタンの過剰投与により殺し、腫瘍を取り出しそして縦に切開した。図3に例示されているように、腫瘍全体および腫瘍の切片の写真をとった。染色されない壊死領域を腫瘍の損傷と考えた。1.医薬-光の間隔DLI=0.5時間。壊死は、使用された生成物に関係なく観察されなかった。2.医薬-光の間隔DLI=4時間。mTHPC-PDTにより処理された2匹のマウスは、部分的な腫瘍の壊死を立証した。生成物Aにより処理された2匹のマウスは、部分的な壊死を生じ、一方三番目のマウスの腫瘍は、変化がなかった。生成物B-PDTにより処理された3匹のマウスは、腫瘍の壊死を立証し、2匹のマウスでは、明確な腫瘍の壊死が観察され、一方1匹のマウスでは、腫瘍の壊死は部分的であった。3.医薬-光の間隔DLI=6時間。6匹のマウスを生成物Aについて使用した。明確な壊死が、生成物Aにより処理された2匹のマウスの腫瘍に認められ、そして4匹の他のものは、変化がなかった。生成物Bでは、明確な腫瘍壊死がすべてのマウスに観察された。mTHPC-PDTにより処理された2つの腫瘍は、明確な壊死を立証し、1つの腫瘍は壊死がなかった。壊死を示すmTHPC-PDT腫瘍は、肉眼による観察により確認された。図に関連して本発明の好ましい態様を記述したが、本発明が記述された態様に限定されず、そして種々の変化および改変が、請求の範囲に規定された本発明の範囲または趣旨から離れることなく当業者により行われうることを理解すべきである。本実施形態に係るリポソーム処方物は以下のように記載してもよい。付記1燐脂質から実質的になるリポソーム二重層、並びに治療上有効な量の非極性光増感剤を含むことを特徴とする光力学治療用の製薬リポソーム処方物。付記2該燐脂質が、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール、ポリエチレングリコール結合燐脂質およびこれら3つの物質の組み合わせからなる群から選ばれる付記1のリポソーム処方物。付記3該光増感剤がポルフィリンマクロ環光増感剤である付記1のリポソーム処方物。付記4該ポルフィリンマクロサイクル光増感剤が、ジュウテリオポルフィリン、エチオポルフィリン、プロトポルフィン、ヘマトポルフィリン、フェオホルバイド並びにそれらのジ-およびテトラ-ヒドロポルフィリン誘導体からなる群から選ばれる付記1のリポソーム処方物。付記5凍結乾燥され、1つ以上の単糖またはポリアルコールをさらに含み、好適な水性ベシクルを添加すると凍結乾燥処方物はリポソーム二重層内に治療上有効な量の非極性光増感剤を含むリポソームを形成する付記1のリポソーム処方物。付記6該単糖がグルコースおよびフラクトースからなる群から選ばれる付記5のリポソーム処方物。付記7該ポリアルコールがイノシトールおよびマンニトールからなる群から選ばれる付記5のリポソーム処方物。付記8単糖対燐脂質の濃度比が1:2-1:12の間である付記5のリポソーム処方物。付記9ポリアルコール対燐脂質の濃度比が1:2-1:12の間である付記5のリポソーム処方物。付記10製薬投与のために水性流体により再構成される付記5のリポソーム処方物。付記11光増感剤の治療上有効な濃度が、0.0001-0.15w/vである付記1又は5のリポソーム処方物。付記12ブチル化ヒドロキシトルエン、アスコルビン酸パルミテートおよびこれら2つの組み合わせからなる群から選ばれる成分をさらに含む付記1又は5のリポソーム処方物。付記13処方物が、特に極性があり予め選択された治療でいくらかの有益な効果を有するのに好適な少なくとも1つの追加の製薬上活性な物質をさらに含む付記1又は5のリポソーム処方物。"