配列番号1で表される29個のアミノ酸の配列からなる合成ペプチド。配列番号2で表される36個のアミノ酸の配列からなるペプチド。請求項1に記載の合成ペプチドを含む抗菌剤。請求項2に記載のペプチドを含む抗菌剤。近年、MRSAメチシリン耐性黄色ブドウ球菌等、多剤耐性菌による院内感染が大きな社会問題となっている。抗生物質は、細菌の基質の合成を特異的に阻害するため、優れた抗菌性を発揮するが、抗生物質が乱用されると、細菌の薬剤耐性遺伝子に変異が生じ、細菌に抗生物質が作用しなくなるという問題がある。それに対し、抗菌ペプチドは、抗生物質とは作用機序が異なり、耐性菌が生まれにくいということが分かってきている。そのため、抗菌ペプチドは、抗生物質の代替品として期待されている。そこで、本発明の目的は、抗菌性に優れ、特にMRSAに対して有効なペプチド等を提供することにある。本発明者らは、イシカワガエルの皮膚に含まれる抗菌ペプチドについて、更なる同定を進めた結果、先の9種の抗菌ペプチドとは異なる、36個のアミノ酸からなる新たな抗菌ペプチドを単離、同定したpalustrin2ISb。palustrin2ISbのアミノ酸配列は、GlyLeuTrpAsnSerIleLysIleAlaGlyLysLysLeuPheValAsnValLeuAspLysIleArgCysLysValAlaGlyGlyCysLysThrSerProAspValGluである配列番号2。このpalustrin2ISbのC末端側には、2個のシステインがジスルフィド結合した構造この構造をラナボックスと称するが存在し、そのラナボックスに続いて7つのアミノ酸が連なるという構造的な特徴が認められる。先の9種の抗菌ペプチドでもラナボックスは認められたが、ラナボックス以降に連なるアミノ酸は認められなかったことから、palustrin2ISbのラナボックス以降の7つのアミノ酸を除去した29個のアミノ酸からなる合成ペプチドを作製したpalustrin2ISbdesC7。palustrin2ISbdesC7のアミノ酸配列は、GlyLeuTrpAsnSerIleLysIleAlaGlyLysLysLeuPheValAsnValLeuAspLysIleArgCysLysValAlaGlyGlyCysである配列番号1。天然ペプチドであるpalustrin2ISbと、合成ペプチドであるpalustrin2ISbdesC7とについて、抗菌活性を調べたところ、いずれのペプチドにも抗菌活性が認められた。特に、palustrin2ISbdesC7は、palustrin2ISbに比べて強い抗菌活性が認められた。本発明のペプチド等には、優れた抗菌性があるので、抗菌剤等に活用できる。以下、本発明の実施形態を図面に基づいて詳細に説明する。ただし、以下の説明は、本質的に例示に過ぎず、本発明、その適用物あるいはその用途を制限するものではない。<palustrin2ISbの単離、同定>1抽出奄美大島産人工増殖体:2004年4月7日交配のイシカワガエル2年4ヶ月齢:体長約6cmの5個体を試料とした。試料のそれぞれについて、断頭後、全身の皮膚を剥がした。次に、その皮膚を直ちにハサミで細断した後、液体窒素で凍結しながら粉砕した。粉砕した皮膚は、ペプチド分解酵素を失活させるために、少量ずつ沸騰した100mlの湯の中に投入し、7分間保持した。皮膚を含む湯を氷水で冷却することにより、粗抽出液を得た。その粗抽出液に対し、容量の5になるように酢酸を4ml加え、ハンディミキサーでホモジナイズすることにより酢酸抽出を行った。更に、酢酸抽出を行った粗抽出液に対し、容量の60になるように冷アセトンを120ml加え、30分間冷却しながら攪拌し、除タンパクを行った。その後、4°C、10000g、20分間の条件で遠心分離することにより、粗抽出液から沈殿物を除去した。そうして得られた上清を遠心エバポレーターにより濃縮し、第1試料液を得た。第1試料液は、使い捨てカラムであるC18カートリッジBONDELUTに通し、次の各ステップの処理を行うことにより、精製に用いる保持物質第2試料液を得た。第1ステップ:C18カートリッジに100メタノールを6ml通して、活性基を活性化した。第2ステップ:C18カートリッジに0.1トリフルオロ酢酸TFAを6ml通して、C18カートリッジを洗浄した。第3ステップ:C18カートリッジに第1試料液を注入し、非吸着物質を溶出した。第4ステップ:C18カートリッジに0.1TFAを12ml通して、非吸着物質を溶出した。第5ステップ:C18カートリッジに70メタノールを12ml通して、C18カートリッジに保持されていた保持物質を溶出し、第2試料液を回収した。2精製第2試料液を遠心エバポレーターを用いて濃縮し、その濃縮した第2試料液を用いて逆相HPLC高速液体クロマトグラフィーにより、5段階の処理を通じて精製を行った。HPLCの諸条件は次の通りである。カラムオーブン温度は40°C、第2試料液の流速は0.5ml/minとした。溶出液については220nmの波長での吸光度をモニタリングし、2分毎の分画をサンプリングした。第2段階以降の精製は、後述する抗菌アッセイによって抗菌活性が見られた分画に対してのみ、続けて逆相HPLCによる精製を進めた。精製に用いた逆相HPLCカラムとアセトニトリルの濃度勾配を次に示す。第1段階:C18逆相カラムODS-80TM4.6×150mm、東ソー株式会社製、0-70アセトニトリル/35分間第2段階:C18逆相カラムODS-80TM4.6×150mm、東ソー株式会社製、35-65アセトニトリル/60分間第3段階:C18逆相カラムODS‐80TM4.6×150mm、東ソー株式会社製、35-45アセトニトリル/50分間第4段階:C8逆相カラムOctyl-80TS4.6×250mm、東ソー株式会社製、36-46アセトニトリル/50分間第5段階最終段階:シアノプロピル逆相カラムCN-80TS4.6×250mm、東ソー株式会社製、22-26アセトニトリル/20分間3抗菌アッセイ精製した各分画を乾固し、その1/50量を50μlのMueller-Hinton培地に溶解し、試料培地を作製した。対数増殖期のBL21大腸菌を1×106cfucolonyformingunits/mlに希釈し、大腸菌希釈液を作製した。そして、各試料培地に50μlの大腸菌希釈液を混合し、96穴マイクロプレートに入れ、37°Cで一晩培養した。なお、Mueller-Hinton培地のみに50μlの大腸菌希釈液を混合したブランクコントロールも同じプレートで培養した。一晩培養後、大腸菌希釈液を混合した各試料培地の吸光度波長600nmを測定した。大腸菌が増殖すれば、培地が濁って吸光度が増加する。従って、ブランクコントロールよりも吸光度が著しく1/2~1/3程度低い分画を抗菌活性のある分画として選択した。4構造決定精製によって最終的に得られた試料に含まれるペプチドの質量値は、MALDI-TOF-MSAXIMA-CFRplus、島津製作所製により測定した。また、そのペプチドのアミノ酸配列は、アミノ酸シーケンサPPSQ-10、島津製作所製により決定した。その結果、得られたペプチドpalustrin2ISbのアミノ酸一次配列1文字表記を次に示す。GLWNSIKIAGKKLFVNVLDKIRCKVAGGCKTSPDVE3文字表記に変換して表すと、GlyLeuTrpAsnSerIleLysIleAlaGlyLysLysLeuPheValAsnValLeuAspLysIleArgCysLysValAlaGlyGlyCysLysThrSerProAspValGluとなる配列番号2。このように、palustrin2ISbは、36個のアミノ酸からなり、そのC末端側には、2つのシステイン配列中で示すがジスルフィド結合した構造ラナボックスが存在していることがわかった。palustrin2ISbでは、ラナボックス以降に更に連なる7つのアミノ産KTSPDVEの部分が認められた。本発明者らが先にイシカワガエルの皮膚から単離、同定した9種類の抗菌ペプチドにも、同様のラナボックスは認められたが、いずれもC末端に位置しており非特許文献1参照、palustrin2ISbのように、ラナボックス以降に連なるアミノ酸は認められなかった。そこで、本発明者らは、palustrin2ISbのラナボックス以降に連なる7個のアミノ酸を削除することで抗菌活性が高まるのではないかとの仮説を立て、そのような29個のアミノ酸の配列からなる合成ペプチドpalustrin2ISbdesC7を作製した。5合成ペプチドの作製合成ペプチドpalustrin2ISbdesC7は、ペプチド合成機PSSM-8、島津製作所製を用いて作製した。palustrin2ISbdesC7のアミノ酸一次配列1文字表記を次に示す。GLWNSIKIAGKKLFVNVLDKIRCKVAGGC3文字表記に変換して表すと、GlyLeuTrpAsnSerIleLysIleAlaGlyLysLysLeuPheValAsnValLeuAspLysIleArgCysLysValAlaGlyGlyCysとなる配列番号1。6抗菌性の測定天然ペプチドpalustrin2ISbと、合成ペプチドpalustrin2ISbdesC7のそれぞれの抗菌性を、最小発育阻止濃度MICの測定により行った。具体的には、96穴マイクロプレートの各ウェルに、培地49μl、ペプチド1μl2倍希釈系列で7段階の濃度、各菌種の菌液50μlを加えて混合し、37°Cで1晩静置培養した。培養後、各ウェルに対し、マイクロプレートリーダーで吸光度波長600nmの測定を行うとともに、ウェル内の白濁や沈殿の有無を目視により観察し、その発育阻止効果を判定した。抗菌性を評価する菌種には、大腸菌、黄色ブドウ球菌、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌、真菌のカンジダの4種を用いた。それぞれの菌種に用いた培地と接種した菌濃度を次の表1に示す。図1に、これら菌種に対する天然のペプチドpalustrin2ISb及び合成ペプチドpalustrin2ISbdesC7のMICの測定結果を示す。なお、MICは微生物の発育を阻止する最も低い濃度であり、その数値が低いほど抗菌活性が強いことを意味する。また、NAは、100μMでも抗菌活性が認められなかったことを示している。同図に示すように、palustrin2ISbは、カンジダでは100μMでは抗菌活性は認められなかったが、MRSAでは100μM、大腸菌及び黄色ブドウ球菌では6.3μMで抗菌活性が認められた。また、palustrin2ISbdesC7は、カンジダで100μM、MRSAで12.5μM、大腸菌で6.3μM、黄色ブドウ球菌で1.6μMで抗菌活性が認められた。ペプチドpalustrin2ISb、合成ペプチドpalustrin2ISbdesC7の双方に抗菌活性が認められたことから、これらは抗菌剤として利用できる。抗菌剤の具体例としては、例えば、ペプチドを希釈媒体に混合して所定濃度に調整し、液状や粉状に加工して抗菌剤を作製する。そして、求める抗菌性を示す濃度以上となるように、被抗菌対象の素材に抗菌剤を添加すればよい。特に、palustrin2ISbdesC7は、palustrin2ISbよりも強い抗菌活性が認められ、院内感染が問題となっているMRSAに強い抗菌活性が認められたことから、MRSAに対する抗菌剤としての利用が期待できる。