"その構造中の少なくとも一部に下記式Aで表される構造を有し、下記組成1および2の緩衝液を含有するアクリルアミド系共重合体水性ゲルであることを特徴とする電気泳動用プレキャストゲル。1トリスアミノメタンおよびまたはビス2-ヒドロキシエチルイミノトリスヒドロキシメチルメタンと1種以上の両性電解質。2pHが6.0~6.8。構造単位A式中、M2は遷移金属イオンゲル緩衝液中の1種以上の両性電解質が、グリシンおよび/またはトリシンを必須とすることを特徴とする請求項1に記載の電気泳動用プレキャストゲル。1種以上の両性電解質において、グリシンおよび/またはトリシン以外の両性電解質の塩基解離定数の範囲が6.6~9.6であることを特徴とする請求項1あるいは2に記載の電気泳動用プレキャストゲル。グリシンおよび/またはトリシン以外の両性電解質が、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、グルタミン酸、トリプトファン、メチオニン、アラニン、バリン、アスパラギン酸、N,N-ビス2-ヒドロキシエチルグリシン、トリスヒドロキシメチルメチルアミノプロパンスルホン酸、2-アミノエチルスルホン酸、N,N-ビス2-ヒドロキシエチル-2-アミノエタンスルホン酸、3-N-モルホリノプロパンスルホン酸、N-トリスヒドロキシメチルメチル-2-アミノエタンスルホン酸、N-2-ヒドロキシエチルピペラジン-N‘-2-エタンスルホン酸、N-2-ヒドロキシエチルピペラジンプロパンスルホン酸、グリシルグリシン、トリスヒドロキシメチルメチルアミノプロパンスルホン酸、N-トリスヒドロキシメチルメチル-2-アミノエタンスルホン酸、2-アミノエチルスルホン酸から選択される一種以上であることを特徴とする請求項3に記載の電気泳動用プレキャストゲル。グリシンおよび/またはトリシン以外の両性電解質が、グリシンおよび/またはトリシンに対して0.1~100molの範囲で含まれることを特徴とする請求項1~4に記載の電気泳動用プレキャストゲル。ゲル中のトリスヒドロキシメチルアミノメタンおよびまたはビス2-ヒドロキシエチルイミノトリスヒドロキシメチルメタンの濃度が、0.07~0.2mol/Lであり、1種以上の両性電解質の濃度の合計が0.1~0.5mol/Lであることを特徴とする請求項1~5に記載の電気泳動用プレキャストゲル。アクリルアミド、下記化合物B、架橋剤、トリスアミノメタンおよびまたはビス2-ヒドロキシエチルイミノトリスヒドロキシメチルメタン、および1種以上の両性電解質からなり、pHが6.0~6.8である混合物水溶液を重合することを特徴とする電気泳動用プレキャストゲルの製造方法。化合物B式中、M2は遷移金属イオン請求項1~6に記載の電気泳動用プレキャストゲルと、ドデシル硫酸塩が存在するトリスアミノメタン及び両性電解質を含有する泳動用緩衝液を用い、蛋白質のりん酸化修飾状態を分析することを特徴とする電気泳動用プレキャストゲルの使用方法。本発明の目的は、蛋白質の分離能及びゲルの形状が長期安定で、分析方法が普及しているレムリーあるいはシャガーの泳動緩衝液が使用可能であり、使用者が経済的かつ効率的に分析を遂行することが可能な、蛋白質のりん酸化修飾状態の分析を目的として使用される電気泳動用プレキャストゲルを提供することにある。本発明者らは、前記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、以下の発明を見出した。すなわち本発明は、1その構造中の少なくとも一部に下記式Aで表される構造を有し、下記組成1および2の緩衝液を含有するアクリルアミド系共重合体水性ゲルであることを特徴とする電気泳動用プレキャストゲルに関する。1トリスアミノメタンおよびまたはビス2-ヒドロキシエチルイミノトリスヒドロキシメチルメタンと1種以上の両性電解質。2pHが6.0~6.8。化合物A式中、M2は遷移金属イオン2ゲル緩衝液中の1種以上の両性電解質が、グリシンおよび/またはトリシンを必須とすることを特徴とする請求項1に記載の電気泳動用プレキャストゲル。31種以上の両性電解質において、グリシンおよび/またはトリシン以外の両性電解質の塩基解離定数の範囲が6.6~9.6であることを特徴とする請求項1あるいは2に記載の電気泳動用プレキャストゲル。4グリシンおよび/またはトリシン以外の両性電解質が、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、グルタミン酸、トリプトファン、メチオニン、アラニン、バリン、アスパラギン酸、N,N-ビス2-ヒドロキシエチルグリシン、トリスヒドロキシメチルメチルアミノプロパンスルホン酸、2-アミノエチルスルホン酸、N,N-ビス2-ヒドロキシエチル-2-アミノエタンスルホン酸、3-N-モルホリノプロパンスルホン酸、N-トリスヒドロキシメチルメチル-2-アミノエタンスルホン酸、N-2-ヒドロキシエチルピペラジン-N‘-2-エタンスルホン酸、N-2-ヒドロキシエチルピペラジンプロパンスルホン酸、グリシルグリシン、トリスヒドロキシメチルメチルアミノプロパンスルホン酸、N-トリスヒドロキシメチルメチル-2-アミノエタンスルホン酸、2-アミノエチルスルホン酸から選択される一種以上であることを特徴とする請求項3に記載の電気泳動用プレキャストゲル。5グリシンおよび/またはトリシン以外の両性電解質が、グリシンおよび/またはトリシンに対して0.1~100molの範囲で含まれることを特徴とする請求項1~4に記載の電気泳動用プレキャストゲル。6ゲル中のトリスヒドロキシメチルアミノメタンおよびまたはビス2-ヒドロキシエチルイミノトリスヒドロキシメチルメタンの濃度が、0.07~0.2mol/Lであり、1種以上の両性電解質の濃度の合計が0.1~0.5mol/Lであることを特徴とする請求項1~5に記載の電気泳動用プレキャストゲル。7アクリルアミド、下記化合物B、架橋剤、トリスアミノメタンおよびまたはビス2-ヒドロキシエチルイミノトリスヒドロキシメチルメタン、および1種以上の両性電解質からなり、pHが6.0~6.8である混合物水溶液を重合することを特徴とする電気泳動用プレキャストゲルの製造方法。化合物B式中、M2は遷移金属イオン8請求項1~6に記載の電気泳動用プレキャストゲルと、ドデシル硫酸塩が存在するトリスアミノメタン及び両性電解質を含有する泳動用緩衝液を用い、蛋白質のりん酸化修飾状態を分析することを特徴とする電気泳動用プレキャストゲルの使用方法。本発明により、蛋白質の分離能及びゲルの形状が長期安定で、分析方法が普及しているレムリーあるいはシャガーの泳動緩衝液が使用でき使用者が経済的かつ効率的に分析を遂行することが可能な、蛋白質のりん酸化修飾状態の分析を目的として使用される電気泳動用プレキャストゲルを提供することができる。本発明の電気泳動用プレキャストゲルには、泳動用分離媒体とゲル緩衝液および分離媒体を保持するための担持体から構成される。また本発明の前記泳動用分離媒体は、アクリルアミド、下記化合物B、架橋剤、トリスアミノメタンおよび/またはビス2-ヒドロキシエチルイミノトリスヒドロキシメチルメタン、および1種以上の両性電解質からなり、pHが6.0~6.8である混合物水溶液を重合することにより製造可能である。化合物B式中、M2は遷移金属イオン前記化合物Bはアクリルアミドに対し、0.003~0.3質量の範囲で共重合させることが望ましい。0.3質量よりも多いと重合度が十分に大きくならず泳動用媒体としての使用に適さず、0.003質量以下では目的とするりん酸化状態による分離効果が得られない。前記化合物Bの遷移金属イオンとしては、鉄、マンガン、銅、亜鉛などの二価イオンが望ましく、特に好ましくは2価亜鉛イオンである。化合物は遷移金属イオンが配位した状態でアクリルアミドと混合しても良いし、重合時に二価の遷移金属化合物を添加して共重合体中に配位構造を形成しても良い。遷移金属化合物としては、塩化亜鉛、酢酸亜鉛、硫酸亜鉛などを用いることができる。前記架橋剤としては、N,N-メチレンビスアクリルアミド、N,N-ジアリル酒石酸アミド等の一般的なジビニル化合物を使用することができる。前記架橋剤はアクリルアミドと化合物Bの合計質量に対し、0.5~7質量の範囲で共重合させることが望ましい。0.5質量以下では、ゲルが柔らかくなりすぎて操作が難しく、7質量以上では鮮明な分離パターンを得ることが出来ない。前記アクリルアミドと化合物Bと架橋剤との合計が3~25質量となるように用いることが電気泳動用プレキャストゲルとしての使用に好ましい。前記ゲル緩衝液は、トリスヒドロキシメチルアミノメタンおよび/またはビス2-ヒドロキシエチルイミノトリスヒドロキシメチルメタンと1種以上の両性電解質を含有する。レムリーの泳動緩衝液を用いる場合には上記両性電解質として、グリシンがあげられ、シャガーの泳動緩衝液を用いる場合にはグリシンまたはトリシンのいずれも用いることができる。またグリシンおよび/またはトリシンとそれ以外の両性電解質を組み合わせることで、分画分子量範囲を広げることが可能となる。グリシンあるいはトリシン以外の両性電解質は、塩基解離定数の範囲が6.6~9.6であることが好ましい。具体的に両性電解質としてあげれば、グリシン、トリシン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、グルタミン酸、トリプトファン、メチオニン、アラニン、バリン、アスパラギン酸、N,N-ビス2-ヒドロキシエチルグリシン、トリスヒドロキシメチルメチルアミノプロパンスルホン酸、2-アミノエチルスルホン酸、N,N-ビス2-ヒドロキシエチル-2-アミノエタンスルホン酸、3-N-モルホリノプロパンスルホン酸、N-トリスヒドロキシメチルメチル-2-アミノエタンスルホン酸、N-2-ヒドロキシエチルピペラジン-N‘-2-エタンスルホン酸、N-2-ヒドロキシエチルピペラジンプロパンスルホン酸、グリシルグリシン、トリスヒドロキシメチルメチルアミノプロパンスルホン酸、N-トリスヒドロキシメチルメチル-2-アミノエタンスルホン酸、2-アミノエチルスルホン酸などあり、これら両性電解質を二種以上組み合わせて用いることもできる。これらの両性電解質は、ゲル内の電位勾配を緩やかにして分画分子量範囲を蛋白質の分離に適した範囲とし、分離パターンを鮮明にするために添加される。レムリーあるいはシャガーの泳動緩衝液とpHが6.0~6.8のゲルを用いて電気泳動を行った場合、両性電解質が未添加のゲルを用いると、泳動速度が早く分画分子量範囲が極端に高分子領域になるか、あるいは泳動速度が遅く分離パターンが不鮮明で分離に適さない結果となる。特に好ましくは、2種以上の両性電解質を組み合わせた場合で、pKbの低いものから順に陽極側へ移動するためグリシンあるいはトリシン単独の場合よりも、ゲル内の電位勾配の変化が緩やかなものとなり分離可能な蛋白質の特に低分子領域で鮮明な分離パターンを得ることができる。また、共存両性電解質の塩基解離定数pKbがpKb<6.6の場合、共存両性電解質はゲル内で酸解離状態となりゲル緩衝液のpHを変化させ、トレイリングイオンとして作用するために分離パターンに本来ないはずのバンドが検出されることになる。pKb>9.6の場合、グリシンよりも塩基解離定数が高いことになるため、ゲル内の電位勾配の変化を緩やかにする作用に寄与しない。ゲル緩衝液中のトリスヒドロキシメチルアミノメタンおよび/またはビス2-ヒドロキシエチルイミノトリスヒドロキシメチルメタンの濃度は、0.07mol/L~0.2mol/L、好ましくは0.08mol/L~0.1mol/Lである。この範囲は、レムリーのゲル緩衝液を使用して作成したゲルと同等の泳動時間を有するために必要なゲル中のリーディングイオンの量を含有させることのできる範囲である。ゲル中のトリスヒドロキシメチルアミノメタンの濃度が0.07mol/Lよりも低い場合、泳動像全体が不鮮明となり蛋白質の分離分析に使用しがたいものとなる。ゲル中のトリス濃度が0.2mol/Lより高くなるとゲル中のリーディングイオン濃度が高くなり、泳動時間が延長し、分析の作業効率が悪くなる。また、グリシンおよび/またはトリシンと、それらと共存する両性電解質の濃度の合計は0.1~0.5mol/Lであることが好ましい。特に好ましくは0.1~0.3mol/Lである。全両性電解質濃度が0.1mol/Lよりも少なければその効果は小さくなり泳動像は不鮮明で使用目的を達成できないし、0.5mol/Lより多くなると、十分な蛋白質のりん酸化状態に対する分離能を得ることができなくなる。また、共存両性電解質の添加量はグリシンおよび/またはトリシンに対して0.1~100molが好ましい。0.1molより低添加量の場合、ゲル内の電位勾配の変化を緩やかにする作用に寄与せず、100molよりも多く添加すると分離パターンは、不鮮明となるか、鮮明でも本来ないはずのバンドが検出される。前記ゲル緩衝液のpHは、6.0~6.8である。pH6.8よりも高い場合、ポリアクリルアミドゲルの加水分解が進行し易くなり、保管有効期限を長く持たせることが出来ない。pH6.0より低い場合、ポリアクリルアミドゲルとしての安定性は良好であるが、蛋白質の泳動像が不鮮明で実用に耐えないものとなる。pH6.8では冷蔵保存で6ヶ月もち、さらにpH6.3ではアクリルアミド自体のpHに近いため、pH6.8に比べ加水分解速度が著しく減少する。その結果1年もの長期間ゲルの形状、泳動像共に変化は見られず安定である。pH調製のためにトリスヒドロキシメチルアミノメタンおよび/またはビス2-ヒドロキシエチルイミノトリスヒドロキシメチルメタンは、塩酸または酢酸によって中和される。本発明のプレキャストゲルには、ゲルに弾力性を持たせゲル強度を向上させるため、アガロース、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリエチレンオキサイド、ポリメチルビニルエーテル等の水溶性ポリマーを含有させることもできる。本発明のプレキャストゲルは、アクリルアミド、前記化合物B、架橋剤および前記ゲル緩衝液を含有する水溶液を、ガラスあるいは樹脂製の担持体に充填した後、重合開始剤および/または紫外線照射あるいは電離性放射線の照射により発生するラジカルによってゲル化させることにより製造する。重合開始剤としては、過硫酸アンモニウム等の過酸化物と、N,N,N’,N’テトラメチルエチレンジアミン以下TEMEDと略す等の還元剤を併用するレドックス型の重合開始剤が賞用されるが、これら特に限定されるものではない。上記過酸化物及び還元剤は全モノマーに対し、0.05~5G-250、12容量酢酸、30容量メタノール溶液中で振とう機を使用して60分間行い、脱色は12容量酢酸、15容量メタノール溶液中で振とう機を使用して120分間行った。αカゼインおよび脱りん酸化αカゼインの移動度およびその差とそれぞれのバンドの鮮明さを表2-1に示す。移動度とは蛋白質の移動距離をパーセントで表したものである。移動度=/×100実施例-1と同様の方法で作成したプレキャストゲルを冷蔵下で8ヶ月間保管した後、実施例-1と同様の方法で泳動試験を行った。結果を表2-1の実施例-2に示す。表1の実施例-2のゲル緩衝液を用いてプレキャストゲルを作成した以外は実施例-1と同様に泳動試験を実施した。結果を表2-1の実施例-2に示す。アクリルアミド濃度7.5Tに変更し、表1の実施例-3のゲル緩衝液を用いプレキャストゲルを作成した以外は実施例-1と同様に泳動試験を実施した。結果を表2-1の実施例-3に示す。表1の実施例-4のゲル緩衝液を用いた以外は実施例-1と同様の方法でプレキャストゲルを作成した。トリス0.1mol/L、トリシン0.1mol/L、SDS0.1質量のシャガー処方の泳動緩衝液を用いて電気泳動を実施した。蛋白質試料および検出方法は実施例1と同様にした。結果を表2-1の実施例-4に示す。比較例1分離層にpH8.8の0.375mol/Lのトリス-塩酸ゲル緩衝液を、濃縮層にpH6.8の0.125mol/Lトリス-塩酸ゲル緩衝液を用いてプレキャストゲルを作成した以外は実施例-1と同様に泳動試験を実施した。結果を表2-2の比較例-1に示す。比較例-2比較例-1と同様の方法で作成したプレキャストゲルを冷蔵下で6ヶ月間保管した後、実施例-1と同様の方法で泳動試験を行った。結果を表2-2の比較例-2に示す。比較例-3分離層にpH6.8の0.375mol/Lのトリス-塩酸ゲル緩衝液を、濃縮層にpH6.8の0.125mol/Lトリス-塩酸ゲル緩衝液ゲル緩衝液を用いてプレキャストゲルを作成した以外は実施例-1と同様に泳動試験を実施した。結果を表2-2の比較例-3に示す。比較例-4前記化合物Bを加えなかった以外は実施例-1と同様にプレキャストゲルを作成し泳動試験を実施した。結果を表2-2の比較例-4に示す。表1ゲル緩衝液組成MOPS:3-N-モルホリノプロパンスルホン酸HEPES:N-2-ヒドロキシエチルピペラジン-N‘-2-エタンスルホン酸表2-1移動度表2-2移動度表2-1に示すとおり実施例-1と3から5のプレキャストゲルでは、りん酸化αカゼインと脱りん酸化αカゼインはいずれも鮮明なバンドとなり明確な移動度差を得ることができ、本発明のプレキャストゲルはレムリーまたはシャガーの泳動用緩衝液を用いて蛋白質をそのりん酸化状態により分離することができた。表2-1に示すとおり実施例-2から、本発明の電気泳動用プレキャストゲルは作成後6ヶ月経過しても、作成直後と同じバンド鮮明さ、移動度、りん酸化状態による移動度差を得ることができた。表2-2に示すとおりレムリー処方のゲル緩衝液を用いた比較例-1と2のプレキャストゲルでは、作成直後は明確な移動度差を得ることができたが、りん酸化-脱りん酸化たんぱく質の移動度差は実施例-1に比べて小さく、また作成後6ヶ月経過後には、鮮明なバンドを得ることができなかった。表2-2に示すとおり比較例-3のプレキャストゲルでは、明確な移動度差を得ることができなかった。バンドも不鮮明だった。表2-2に示すとおり比較例-4のプレキャストゲルでは、鮮明なバンドを得ることはできたが、αカゼインと脱りん酸化αカゼインの間に明確な移動度差を得ることができなかった。以上の結果から、本発明の電気泳動用プレキャストゲルが、蛋白質のりん酸化状態を明確に分離することが可能であり、かつプレキャストゲルに必要とされる長期安定性を持つことは明らかである。"