アラビノースarabinose代謝経路関連遺伝子を含む遺伝子発現カセットをカンジダ属Candidiasp.菌株に導入することで作製された、アラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株。前記遺伝子発現カセットが下記の1~3のうちの1つであることを特徴とする、請求項1に記載のアラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株:1プロモーター、L-アラビノースイソメラーゼL-arabinoseisomeraseをコードするポリヌクレオチド及びターミネーターからなる遺伝子発現カセット、2プロモーター、L-リブロキナーゼL-ribulokinaseをコードするポリヌクレオチド及びターミネーターからなる遺伝子発現カセット、及び3プロモーター、L-リブロース-5-ホスフェート4-エピメラーゼL-ribulose-5-phosphate4-epimeraseをコードするポリヌクレオチド及びターミネーターからなる遺伝子発現カセット。前記カンジダ属菌株が、好ましくは、カンジダグイリエルモンジC.guillermondi、カンジダパラプシロシスC.parapsilosis及びカンジダトロピカリスC.tropicalisからなる群より選択されることを特徴とする、請求項1に記載のアラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株。前記カンジダ属菌株が、キシリトール脱水素酵素xylitoldehydrogenaseを不活性化させたカンジダトロピカリスであることを特徴とする、請求項1に記載のアラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株。キシリトール生産菌株が、受託番号:KCTC11761BPで寄託された菌株であることを特徴とする、請求項1に記載のアラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株。前記カンジダトロピカリス菌株が、受託番号:KCTC11137BPで寄託された菌株であることを特徴とする、請求項4に記載のアラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株。アラビノース代謝経路関連遺伝子を含む遺伝子発現カセットをカンジダ属菌株に導入することで作製された、アラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株の作製方法。下記の1~3の遺伝子発現カセットをカンジダ属菌株に導入する工程を含むことを特徴とする、請求項7に記載のアラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株の作製方法:1プロモーター、L-アラビノースイソメラーゼをコードするポリヌクレオチド及びターミネーターからなる遺伝子発現カセット、2プロモーター、L-リブロキナーゼをコードするポリヌクレオチド及びターミネーターからなる遺伝子発現カセット;及び3プロモーター、L-リブロース-5-ホスフェート4-エピメラーゼをコードするポリヌクレオチド及びターミネーターからなる遺伝子発現カセット。前記カンジダ属菌株が、好ましくは、カンジダグイリエルモンジ、カンジダパラプシロシスまたはカンジダトロピカリスからなる群より選択されることを特徴とする、請求項7に記載のアラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株の作製方法。前記カンジダ属菌株が、キシリトール脱水素酵素を不活性化させたカンジダトロピカリスであることを特徴とする、請求項7に記載のアラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株の作製方法。キシリトール生産菌株が、受託番号:KCTC11761BPで寄託された菌株であることを特徴とする、請求項7に記載のアラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株の作製方法。前記カンジダトロピカリス菌株が、受託番号:KCTC11137BPで寄託された菌株であることを特徴とする、請求項10に記載のアラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株の作製方法。1請求項1に記載のキシリトール生産菌株をバイオマス加水分解物及び炭素源を含んだ培地中で培養する工程、2培養された菌株からキシリトールを生産する工程、及び3培養液からキシリトールを分離する工程を含む、キシリトールの大量生産方法。工程1のバイオマス加水分解物が、好ましくは、トウモロコシ穂軸の加水分解物、サトウキビの加水分解物、ココナッツ副産物、及びカバノキの加水分解物からなる群より選択されることを特徴とする、請求項13に記載のキシリトールの大量生産方法。工程1の炭素源が、好ましくは、ブドウ糖、グリセロール、果糖、ガラクトース、ショ糖、マンノース、マルトース、セロビオース及びこれらの混合物からなる群より選択されることを特徴とする、請求項13に記載のキシリトールの大量生産方法。本発明の目的は、アラビトールの生成を抑制し、かつアラビノースを細胞成長に用いるように、アラビノース代謝経路を誘導することによって、キシリトール生産収率を最大化させた、キシリトール生産菌株を提供することである。本発明の別の目的は、前記キシリトール生産菌株の生産方法を提供することである。本発明のさらに別の目的は、前記キシリトール生産菌株を用いてブドウ糖またはグリセロールを炭素源とする培地で、キシリトールを高生産性で生産する方法を提供することである。前記目的を達成するために、本発明は、アラビノース代謝経路関連遺伝子を含む遺伝子発現カセットをカンジダ属菌株に導入することで作製された、アラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株を提供する。また、本発明は、アラビノース代謝経路関連遺伝子を含む遺伝子発現カセットをカンジダ属菌株に導入することで作製された、アラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株を作製する方法を提供する。また、本発明は、1前記キシリトール生産菌株をバイオマス加水分解物及び炭素源を含んだ培地中で培養する工程、2培養された菌株からキシリトールを生産する工程、及び3培養液からキシリトールを分離する工程を含む、キシリトールの大量生産方法を提供する。本発明は、キシロースとアラビノースの混合培地中で、副産物であるアラビトールの生成を抑制させ、かつアラビノースを細胞代謝に用いるように、アラビノース代謝経路を新たに導入したキシリトール生産菌株を用いることによる、効率的なキシリトール生産方法に関するものである。本方法は、キシリトール生産時の精製及び結晶化過程を妨害するアラビトール生成を抑制して、高生産性でキシリトールを生産するのに有用に用いることができる。以下、本発明を詳しく説明する。本発明は、アラビノース代謝経路関連遺伝子を含む遺伝子発現カセットをカンジダ属菌株に導入することで作製された、アラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株を提供する。また、本発明は、下記1ないし3の遺伝子発現カセットをカンジダ属菌株に導入することで作製された、アラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株を提供する。1プロモーター、L-アラビノースイソメラーゼをコードするポリヌクレオチド及びターミネーターからなる遺伝子発現カセット、2プロモーター、L-リブロキナーゼをコードするポリヌクレオチド及びターミネーターからなる遺伝子発現カセット、及び3プロモーター、L-リブロース-5-ホスフェート4-エピメラーゼをコードするポリヌクレオチド及びターミネーターからなる遺伝子発現カセット。前記プロモーターは、配列番号1で表わされる塩基配列を有するプロモーター、前記L-アラビノースイソメラーゼをコードするポリヌクレオチドは、配列番号7で表わされる塩基配列を有するポリヌクレオチド、前記L-リブロキナーゼをコードするポリヌクレオチドは、配列番号8で表わされる塩基配列を有するポリヌクレオチド、前記L-リブロース-5-ホスフェート4-エピメラーゼL-ribulose-5-phosphate4-epimeraseをコードするポリヌクレオチドは、配列番号9で表わされる塩基配列を有するポリヌクレオチド及び、前記ターミネーターは、配列番号2で表わされる塩基配列を有することが好ましいが、これに限定されるのではない。また、本発明は、受託番号:KCTC11761BP寄託機関:韓国生命工学研究院、寄託日:2010.09.08で寄託された、アラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株を提供する。前記アラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株PBDAU、LBDAUまたはEBDAUは、配列番号1で表わされる塩基配列を有するプロモーター、配列番号7で表わされる塩基配列を有するポリヌクレオチド及び配列番号2で表わされる塩基配列を有するターミネーターからなる遺伝子発現カセットを作製する工程と、配列番号1で表わされる塩基配列を有するプロモーター、配列番号8で表わされる塩基配列を有するポリヌクレオチド及び配列番号2で表わされる塩基配列を有するターミネーターからなる遺伝子発現カセットを作製する工程と、配列番号1で表わされる塩基配列を有するプロモーター、配列番号9で表わされる塩基配列を有するポリヌクレオチド及び配列番号2で表わされる塩基配列を有するターミネーターからなる遺伝子発現カセットを作製する工程、及び前記遺伝子発現カセットをカンジダ属菌株に導入することで作製することができるが、これに限定されない。前記カンジダ属菌株は、カンジダグイリエルモンジC.guillermondi、カンジダパラプシロシスC.parapsilosis及びカンジダトロピカリスC.tropicalisからなる群より選択されることが好ましいが、これに限定されるのではない。前記カンジダトロピカリスは、キシリトール脱水素酵素が不活性化されたカンジダトロピカリスであることが好ましいが、これに限定されるのではない。キシリトール脱水素酵素が不活性化された前記カンジダトロピカリスは、受託番号:KCTC11137BPで寄託された菌株であることが好ましいが、これに限定されるのではない。キシリトール脱水素酵素を完全に不活性化させた前記カンジダトロピカリスは、キシリトール生産の原料になるバイオマスの加水分解物に含まれているアラビノースに対する活性も同時に有している。また、前記カンジダトロピカリスは、アラビノースを炭素源として用いる代謝経路を有していない。アラビノースは、細胞内に入って来た後、キシロース還元酵素の非特異的活性によってアラビトールに転換された後、それ以上代謝することができずに細胞外に放出される。したがって、バイオマス加水分解物を直接基質として使用する場合、アラビトールが生成される。アラビトールは、キシリトールと同じ五炭糖糖アルコールであり、分子構造及び物性がキシリトールと類似であり、キシリトール生産時の精製及び結晶化過程を妨害して生産収率を低下させる副産物である。したがって、キシロースとアラビノースの混合培地を用いてキシリトールを生産する場合、アラビトールを生成させないキシリトール生産技術を開発する必要がある。本発明者等は、細菌菌株のアラビノース代謝経路[L-アラビノースイソメラーゼL-arabinoseisomerase;araA、L-リブロキナーゼL-ribulokinase;araB、及びL-リブロース-5-ホスフェート4-エピメラーゼL-ribulose-5-phosphate4-epimerase;araD]をカンジダトロピカリスBSXDH-3に導入して、アラビノースがキシルロース-5-リン酸に転換されてペントースリン酸経路及び解糖経路を通じて細胞代謝に用いることができるようにした。本発明者等は、キシリトール生産菌株PBDAU、LBDAU及びEBDAUのアラビノース代謝経路が、キシリトール生産時の精製及び結晶化を妨害するアラビトールの生成を抑制することを確認するため、構築された菌株をアラビノース最少培地で培養して経時的な乾燥菌体濃度、アラビノース消費量及びアラビトール生成量を確認した表1、表2及び表3参照。その結果、対照群である野生型カンジダトロピカリスは、炭素源としてアラビノースのみが存在する最少培地で増殖することができなかったことを確認し、キシリトール生産菌株LBDAUは、60時間の間1.6g/l程度の乾燥菌体濃度に増殖して、4.3g/lのアラビノースを消費したので、アラビノースはアラビトールに転換されないですべて細胞代謝に用いられたことを確認することができた。また、対照群であるキシリトール脱水素酵素を不活性化させたBSXDH-3は、炭素源としてアラビノースのみが存在する最少培地で乾燥菌体は増殖せず、アラビノースは消費せず、アラビトールも生成しない一方、キシリトール生産菌株PBDAUは、60時間の間2.1g/l程度の乾燥菌体濃度に増殖して、5.4g/lのアラビノースを消費し、アラビノースはアラビトールに転換されないですべて細胞代謝に用いられたことを確認することができた。また、対照群である野生型カンジダパラプシロシスは、炭素源にアラビノースのみが存在する最少培地で増殖することができないことを確認し、キシリトール生産菌株EBDAUは、60時間の間1.4g/l程度の乾燥菌体濃度に増殖して、4.1g/lのアラビノースを消費したので、アラビノースはアラビトールに転換されないですべて細胞代謝に用いられたことを確認することができた。このことから、本発明のアラビノース代謝経路が新たに導入されたキシリトール生産菌株は、アラビトール生成を抑制して高生産性でキシリトールを生産するのに有用に使用できることを確認した。また、本発明は、アラビノース代謝経路関連遺伝子を含む遺伝子発現カセットをカンジダ属菌株に導入することで作製された、アラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株の作製方法を提供する。また、本発明は、下記1ないし3の遺伝子発現カセットをカンジダ属菌株に導入する工程を含む、アラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株の作製方法を提供する。1プロモーター、L-アラビノースイソメラーゼをコードするポリヌクレオチド及びターミネーターからなる遺伝子発現カセット、2プロモーター、L-リブロキナーゼをコードするポリヌクレオチド及びターミネーターからなる遺伝子発現カセット、及び3プロモーター、L-リブロース-5-ホスフェート4-エピメラーゼをコードするポリヌクレオチド及びターミネーターからなる遺伝子発現カセット。前記プロモーターは配列番号1で表わされる塩基配列を有するプロモーター、前記L-アラビノースイソメラーゼをコードするポリヌクレオチドは配列番号7で表わされる塩基配列を有するポリヌクレオチド、前記L-リブロキナーゼをコードするポリヌクレオチドは配列番号8で表わされる塩基配列を有するポリヌクレオチド、前記L-リブロース-5-ホスフェート4-エピメラーゼをコードするポリヌクレオチドは配列番号9で表わされる塩基配列を有するポリヌクレオチド及び、前記ターミネーターは配列番号2で表わされる塩基配列を有することが好ましいが、これに限定されるのではない。また、本発明は、受託番号:KCTC11761BP寄託機関:韓国生命工学研究院、寄託日:2010.09.08で寄託された、アラビトール生成が抑制されたキシリトール生産菌株の作製方法を提供する。前記カンジダ属菌株は、カンジダグイリエルモンジ、カンジダパラプシロシス及びカンジダトロピカリスからなる群より選択されることが好ましいが、これに限定されるのではない。前記カンジダトロピカリスは、キシリトール脱水素酵素が不活性化されたカンジダトロピカリスであることが好ましいが、これに限定されるのではない。前記キシリトール脱水素酵素が不活性化されたカンジダトロピカリスは、受託番号:KCTC11137BPで寄託された菌株であることが好ましいが、これに限定されるのではない。本発明の一つの実施態様として、前記配列番号7、8及び9の遺伝暗号コドンを最適化するために、コドン使用頻度データベースhttp://www.kazusa.or.jp/codon/index.htmlのデータを用いてバチルスリケニフォルミスBacilluslicheniformisのL-アラビノースイソメラーゼaraA、大腸菌のL-リブロキナーゼaraB、L-リブロース-5-ホスフェート4-エピメラーゼaraDのコドンをカンジダ属菌株に好適なコドンに入れ替えて遺伝子CoAraA配列番号:7、CoAraB配列番号:8、CoAraD配列番号:9を合成したGENEART、ドイツ。最適化された遺伝子をグリセルアルデヒド-3-リン酸脱水素酵素glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenaseのプロモーターと選択マーカーであるURA3遺伝子、選択マーカーの除去のための反復配列gluまたはarg遺伝子を含むカセットにクローニングして、PGtrpfs2-CoAraA、PAHfs-CoAraB、PAHfs2-CoAraDをそれぞれ得た後、カンジダ属菌株に導入して、CoAraA、CoAraB、及びCoAraDを発現する変異株カンジダトロピカリスPBDAU、カンジダトロピカリスLBDAU及び変異株カンジダパラプシロシスEBDAUを得た。併せて、本発明は、本発明による前記形質転換体PBDAU、LBDAUまたはEBDAUを用いて、ブドウ糖またはグリセロールを炭素源とする培地でキシリトールを高生産性で生産する方法を提供する。具体的には、本発明によるキシリトール生産方法は、下記の工程を含む方法で遂行することが好ましいが、これに限定されない。1本発明の形質転換体をバイオマス加水分解物及び炭素源を含んだ培地中で培養する工程、2培養された菌株からキシリトールを生産する工程、及び3培養液からキシリトールを分離する工程。前記方法において、工程1のバイオマス加水分解物は、トウモロコシ穂軸の加水分解物、サトウキビの加水分解物、ココナッツ副産物、及びカバノキの加水分解物からなる群より選択されたいずれか一つであることが好ましいが、これに限定されず、キシロースを含むすべてのバイオマスが使用可能である。前記方法において、工程1の炭素源は、ブドウ糖またはグリセロールであることが好ましいが、これに限定されず、菌株培養に使用するすべての炭素源が使用可能である。本発明者等は、PBDAU、LBDAUまたはEBDAUのキシリトール生産性を確認するため、経時的なキシロース、キシリトール、アラビノース、アラビトール濃度を測定した表4、表5、表6及び表7、表8、表9及び表10参照。その結果、PBDAUのキシリトール生産性は、BSXDH-3が0.55g/l/h、PBDAUが0.63g/l/hであることが示され、PBDAUは対照群であるBSXDH-3に比べて15高いキシリトール生産性があることを確認し、BSXDH-3は60時間の間11.4g/lのアラビトールを生成するのに比べて、PBDAUは副産物であるアラビトールを生成せずにキシリトールのみを生産することを確認した。また、LBDAUのキシリトール生産性は、野生型菌株が0.51g/l/h、LBDAUが0.59g/l/hであることが示され、LBDAUは対照群である野生型菌株に比べて15高いキシリトール生成性があることを確認し、野生型菌株は60時間の間10.3g/lのアラビトールを生成するのに比べて、LBDAUは副産物であるアラビトールを生成せずにキシリトールのみを生産することを確認した。また、EBDAUのキシリトール生産性は、野生型菌株が0.44g/l/h、EBDAUが0.49g/l/hであることが示され、EBDAUは対照群である野生型菌株に比べて12高いキシリトール生産性があることを確認し、野生型菌株は60時間の間9.8g/lのアラビトールを生成するのに比べて、EBDAUは副産物であるアラビトールを生成せずにキシリトールのみを生産することを確認した。併せて、PBDAUのバイオマス加水分解物を用いた発酵槽で大量生産した場合のキシリトール生産性は、BSXDH-3が2.16g/l/h、PBDAUが2.28g/l/hであることを確認し、BSXDH-3は72時間の間6.4g/lのアラビトールを生成したのに比べて、PBDAUは副産物であるアラビトールを全く生成せずにキシリトールのみを純粋に生産することを確認した。このことから、アラビノース代謝経路が新たに導入された本発明のキシリトール生産菌株は、アラビトール生成を抑制して高生産性でキシリトールのみを純粋に生産するのに有用に使用することができ、またバイオマス加水分解物を用いた大量生産時にもアラビトール生成抑制を通じて、高濃度、高生産性でキシリトールを生産することができることを確認した。以下、本発明を実施例によって詳しく説明する。但し、下記の実施例は、本発明を例示するだけのものであって、本発明の内容が下記の実施例に限定されるのではない。<実施例1>グリセルアルデヒド-3-リン酸脱水素酵素のプロモーターとターミネーター配列のクローニングカンジダトロピカリスのグリセルアルデヒド-3-リン酸脱水素酵素GAPDHのプロモーターとターミネーターをクローニングするため、カンジダトロピカリスのゲノムDNAと下記のプライマー対を用いたポリメラーゼ連鎖反応PCRを遂行して、1455bpのプロモーター配列配列番号:1と309bpのターミネーター配列配列番号:2を得た。プロモーターPCR[94°C30秒、30サイクル94°C30秒、55°C1分、72°C1分30秒、72°C7分]:PGAP-FBglII:5-agatctaacgtggtatggttgtaagaaac-3配列番号:3;及びPGAP-RXbaI_BamHI:5-ggatccgcgtctagatgtttaaattctttaattg-3配列番号:4。ターミネーターPCR[94°C30秒、30サイクル94°C30秒、55°C1分、72°C1分、72°C7分]:TGAP-FXbaI_Xho:5-tctagattgctcgagctatccaacaaactctag-3配列番号:5;及びTGAP-RBamHI:5-ggatcctctggtttagaagtagggactgtatg-3配列番号:6。<実施例2>araA、araB、araDのコドン最適化コドン使用頻度データベースhttp://www.kazusa.or.jp/codon/index.htmlのデータを根拠にして、バチルスリケニフォルミスBacilluslicheniformisのL-アラビノースイソメラーゼaraA、大腸菌のL-リブロキナーゼaraB、L-リブロース-5-ホスフェート4-エピメラーゼaraDのコドンをカンジダトロピカリスに好適なコドンに入れ替えて遺伝子配列番号:7で表わされる塩基配列で構成されたCoAraA、配列番号:8で表わされる塩基配列からなるCoAraB及び配列番号:9で表わされる塩基配列からなるCoAraDを合成したGENEART、ドイツ。<実施例3>CoAraA、CoAraB及びCoAraDの発現カセット及び発現菌株の構築前記<実施例2>で合成した最適化された遺伝子をグリセルアルデヒド-3-リン酸脱水素酵素GAPDHのプロモーターと選択マーカーの除去のための反復配列gluまたはarg遺伝子とを含むカセットにクローニングして、PGtrpfs2-CoAraA、PAHfs-CoAraB及びPAHfs2-CoAraDをそれぞれ得た図2。<3-1>キシロース脱水素酵素の発現が抑制された、形質転換されたカンジダトロピカリスの構築カンジダトロピカリスのゲノムDNAを鋳型にして、下記のプライマーを用いたPCR94°C1分、25サイクル94°C30秒、58°C30秒、72°C30秒及び72°C3分を遂行して、カンジダトロピカリスのキシリトール脱水素酵素の遺伝子を増幅して、前記増幅されたカンジダトロピカリスのキシリトール脱水素酵素の遺伝子をpGEM-TeasyベクターBIONEX、韓国にクローニングした後、前記キシリトール脱水素酵素の遺伝子の中間にBamHI座位を導入して、前記導入されたBamHI座位にura3遺伝子を導入して、4.7kbの形質転換ベクターpXYL2-Ura3を得た。プライマーF:5-aatggtcttgggtcacgaatcc-3配列番号:10プライマーR:5-gctctgaccaagtcgtaggcttc-3配列番号:11前記で得たベクターpXYL2-Ura3をカンジダトロピカリスに導入して、それをウラシルuracilが欠乏した固形選択培地酵母窒素ベース無アミノ酸6.7g/l、ブドウ糖20g/l、寒天粉15g/lに塗抹して30°Cで2日間静置培養した。その後、固形培地で形成されたコロニーを、キシロースが含まれた固形培地酵母窒素ベース無アミノ酸6.7g/l、キシロース20g/l、寒天粉15g/lとブドウ糖が含まれた固形培地酵母窒素ベース無アミノ酸6.7g/l、ブドウ糖20g/l、寒天粉15g/lにそれぞれ播種して30°Cで2日間静置培養して、キシロースが含まれた固形培地では育つことができずに、ブドウ糖が含まれた固形培地でのみ育つ菌株を選択して、キシリトール脱水素酵素が除去されたカンジダトロピカリスを得た。<3-2>カンジダパラプシロシスのウラシル栄養要求体Uracilauxotroph構築URA3遺伝子を菌株構築のための選択マーカーとして使用するために、カンジダパラプシロシス菌株を突然変異を誘発するアルキル化剤であるEMSメタンスルホン酸エチルで処理してウラシル栄養要求体を構築した。カンジダパラプシロシス菌株をYM培地ブドウ糖20g/l、酵母抽出物3g/l、麦芽抽出物3g/l、ペプトン5g/l4mlに播種して、12時間の間30°C、150rpmで振とう培養した。続いて前記培養液をYM培地50mlに播種して、30°C、200rpmで12時間の間振とう培養した後、前記培養液30mlを50mlチューブtubeに移した後、30mlミニマルMinimalAバッファーリン酸水素二カリウムK2HPO410.5g/l、リン酸二水素カリウムKH2PO44.5g/l、硫酸アンモニウムNH42SO41.0g/l及びクエン酸ナトリウム0.5g/lで細胞を二度洗浄して、細胞を再び15mlミニマルMinimalAバッファーで再懸濁させた後、EMS450μlを添加した。その後、30°C、200rpmで振とう培養させながら90分間反応させた後、細胞を5mlミニマルAバッファーで二回洗浄してそれを1mlミニマルAバッファーで再懸濁して、5-FOA固形培地酵母窒素ベース6.7g/l、ブドウ糖20g/l、5-FOA0.8g/l、ウラシル0.1g/l、寒天粉15g/lに塗抹して、30°Cで2日間静置培養した。固形培地で形成されたコロニーは、URA3遺伝子が不活性化した菌株であり、このようにウラシル栄養要求性カンジダパラプシロシス菌株を得た。<3-3>野生型カンジダトロピカリスからの、CoAraA、CoAraB及びCoAraD遺伝子を発現する菌株の構築前記カセットPGtrpfs2-CoAraAを野生型カンジダトロピカリス菌株に導入して、それをウラシルが欠乏した固形選択培地酵母窒素ベース6.7g/l、ブドウ糖20g/l、寒天粉15g/lに塗抹して、30°Cで2日間静置培養した。固形培地で形成されたコロニーはカセットが導入された菌株であり、それをYM培地ブドウ糖20g/l、酵母抽出物3g/l、麦芽抽出物3g/l、ペプトン5g/l4mlに播種して、12時間の間30°C、150rpmで振とう培養した。続いて前記培養液を5-FOA固形培地酵母窒素ベース6.7g/l、ブドウ糖20g/l、5-FOA0.8g/l、ウラシル0.1g/l、寒天粉15g/lに塗抹して、30°Cで2日間静置培養した。固形培地で形成されたコロニーは、導入されたURA3遺伝子が除去された菌株であり、同一な方法でPAHfs-CoAraB、PAHfs2-CoAraDを順に導入して、CoAraA、CoAraB及びCoAraDを発現する変異株カンジダトロピカリスLBDAUを得た。<3-4>キシリトール脱水素酵素が除去されたカンジダトロピカリスからの、CoAraA、CoAraB及びCoAraD遺伝子を発現する菌株の構築前記で得たカセットPGtrpfs2-CoAraAをキシリトール脱水素酵素が不活性化されたカンジダトロピカリスBSXDH-3受託番号:KCTC11137BPに導入して、それをウラシルが欠乏した固形選択培地酵母窒素ベース6.7g/l、ブドウ糖20g/l及び寒天粉15g/lに塗抹して、30°Cで2日間静置培養した。固形培地で形成されたコロニーはカセットが導入された菌株であり、それをYM培地ブドウ糖20g/l、酵母抽出物3g/l、麦芽抽出物3g/l及びペプトン5g/l4mlに播種した後、12時間の間30°C、150rpmで振とう培養した。続いて前記培養液を5-FOA固形培地酵母窒素ベース6.7g/l、ブドウ糖20g/l、5-FOA0.8g/l、ウラシル0.1g/l及び寒天粉15g/lに塗抹して、30°Cで2日間静置培養した。固形培地で形成されたコロニーは、導入されたURA3遺伝子が除去された菌株であり、前記のような方法でPAHfs-CoAraB及びPAHfs2-CoAraDを順番に導入して、CoAraA、CoAraB及びCoAraDを発現する変異株カンジダトロピカリスPBDAUを得た。<3-5>カンジダパラプシロシスからの、CoAraA、CoAraB及びCoAraD遺伝子を発現する菌株の構築前記で得たカセットPGtrpfs2-CoAraAをURA3遺伝子が不活性化されたカンジダパラプシロシス菌株に導入して、それをウラシルが欠乏した固形選択培地酵母窒素ベース6.7g/l、ブドウ糖20g/l、寒天粉15g/lに塗抹して、30°Cで2日間静置培養した。固形培地で形成されたコロニーはカセットが導入された菌株であり、それをYM培地ブドウ糖20g/l、酵母抽出物3g/l、麦芽抽出物3g/l、ペプトン5g/l4mlに播種して、12時間の間30°C、150rpmで振とう培養した。続いて前記培養液を5-FOA固形培地酵母窒素ベース6.7g/l、ブドウ糖20g/l、5-FOA0.8g/l、ウラシル0.1g/l、寒天粉15g/lに塗抹して、30°Cで2日間静置培養した。固形培地で形成されたコロニーは、導入されたURA3遺伝子が除去された菌株であり、同様な方法でPAHfs-CoAraB、PAHfs2-CoAraDを順番に導入して、CoAraA、CoAraB及びCoAraDを発現する変異株カンジダパラプシロシスEBDAUを得た。<実施例4>導入されたアラビノース代謝経路の作動有無の確認前記<実施例3>で得たカンジダトロピカリスPBDAU、LBDAU及びカンジダパラプシロシスEBDAUのアラビノース代謝経路が正常に作動するかどうかを確認するために、構築された菌株をアラビノース最少培地で培養した。<4-1>野生型カンジダトロピカリスLBDAUのアラビノース代謝経路の作動有無の確認LBDAUをYM培地ブドウ糖20g/l、酵母抽出物3g/l、麦芽抽出物3g/l及びペプトン5g/l4mlに播種して、12時間の間30°C、150rpmで振とう培養した。続いて、前記培養液をアラビノース最少培地アラビノース20g/l、酵母窒素ベース6.7g/l、寒天粉15g/l50mlに播種して、60時間の間30°C、200rpmで振とう培養した。試料を分光光度計を用いて600nmで吸光度を測定して、あらかじめ分析した標準曲線で換算して算出した。また、経時的なアラビノース、アラビトール濃度を測定した。測定方法は下記のとおりである。まず、試料を遠心分離して上澄液を0.2μmフィルターでろ過した後、HPLCシステム[Sugar-PakIカラム、HPLCポンプ、屈折率検出器Waters、米国、移動相:水、0.5ml/分、温度:90°C]で分析した。表1アラビノース最少培地での細胞成長及びアラビノース消費量とアラビトール生成量分析その結果、表1にみられるようにように、対照群である野生型カンジダトロピカリスは、炭素源としてアラビノースのみ存在する最少培地では増殖することができないことを確認し、したがってアラビノースを消費することもできずアラビトールを生成することもできないことを確認した。一方、LBDAUは、60時間の間に1.6g/l程度の乾燥菌体濃度に増殖し、4.3g/lのアラビノースを消費した。アラビノースはアラビトールに転換されないですべて細胞代謝に用いられたことを確認することができた。したがって、LBDAUに導入されたアラビノース代謝経路が十分に作動していることを確認することができた。<4-2>変異株カンジダトロピカリスPBDAUのアラビノース代謝経路の作動有無の確認PBDAUをYM培地ブドウ糖20g/l、酵母抽出物3g/l、麦芽抽出物3g/l及びペプトン5g/l4mlに播種した後、12時間の間30°C、150rpmで振とう培養した。続いて、前記培養液をアラビノース最少培地アラビノース20g/l、酵母窒素ベース6.7g/l及び寒天粉15g/l50mlに播種して、60時間の間30°C、200rpmで振とう培養した。試料を分光光度計を用いて600nmで吸光度を測定し、あらかじめ分析した標準曲線で換算して算出して、経時的な乾燥菌体濃度を測定した。また、経時的なアラビノース、アラビトール濃度を測定した。測定方法は次のとおりである。まず、試料を遠心分離して上澄液を0.2μmフィルターでろ過した後、HPLCシステム[Sugar-PakIカラム、HPLCポンプ、屈折率検出器Waters、米国、移動相mobilephase:水、0.5ml/分、温度:90°C]で分析した。経時的な細胞乾燥菌体濃度Drvcellweight及びアラビノース消費量とアラビトール生産量は次のとおりである。表2アラビノース最少培地での細胞成長及びアラビノース消費量とアラビトール生産量分析その結果、表2にみられるようにように、対照群であるBSXDH-3は、炭素源にアラビノースのみ存在する最少培地では増殖することができず、アラビノースを消費することもできずアラビトールを生成させることもできないことを確認した。一方、PBDAUは、60時間の間に2.1g/l程度の乾燥菌体濃度に増殖して、5.4g/lのアラビノースを消費し、アラビノースはアラビトールに転換されないですべて細胞代謝に用いられたことを確認した。したがって、PBDAUに導入されたアラビノース代謝経路が十分に作動していることを確認することができた。<4-3>カンジダパラプシロシスEBDAUのアラビノース代謝経路の作動有無の確認EBDAUをYM培地ブドウ糖20g/l、酵母抽出物3g/l、麦芽抽出物3g/l、ペプトン5g/l4mlに播種した後、12時間の間30°C、150rpmで振とう培養した。続いて、前記培養液をアラビノース最少培地アラビノース20g/l、酵母窒素ベース6.7g/l、寒天粉15g/l50mlに播種して、60時間の間30°C、200rpmで振とう培養した。試料を分光光度計を用いて600nmで吸光度を測定し、あらかじめ分析した標準曲線で換算して算出して経時的な乾燥菌体濃度を測定した。また、経時的なアラビノース、アラビトール濃度を測定した。測定方法は次のとおりである。まず、試料を遠心分離して上澄液を0.2フィルターでろ過した後、HPLCシステム[Sugar-PakIカラム、HPLCポンプ、屈折率検出器Waters、米国、移動相:水、0.5ml/分、温度:90°C]で分析した。経時的な細胞乾燥菌体濃度及びアラビノース消費量及びアラビトール生成量は、次のとおりである。表3アラビノース最少培地での細胞成長及びアラビノース消費量とアラビトール生成量分析その結果、表3にみられるようにように、対照群である野生型カンジダパラプシロシスは、炭素源にアラビノースのみ存在する最少培地では増殖することができず、アラビノースを消費することもできずアラビトールを生成させることもできなかった。一方、EBDAUは、60時間の間に1.4g/l程度の乾燥菌体濃度に増殖して、4.1g/lのアラビノースを消費した。アラビノースは、アラビトールに転換されないですべて細胞代謝に用いられたことを確認することができた。したがって、EBDAUに導入されたアラビノース代謝経路が十分に作動していることを確認することができた。<実施例5>形質転換体を用いたキシリトールの生産<5-1>形質転換体PBDAUと補助基質にブドウ糖を用いたキシリトールの生産構築された形質転換体PBDAUをYM培地ブドウ糖20g/l、酵母抽出物3g/l、麦芽抽出物3g/l、ペプトン5g/l4mlに播種して、12時間の間30°C、150rpmで振とう培養した。その後、前記培養液をキシロース及びアラビノースを含んだ生産培地キシロース30g/l、アラビノース30g/l、ブドウ糖20g/l、酵母抽出物10g/l、リン酸二水素カリウムKH2PO45g/l及び硫酸マグネシウムMgSO47H2O0.2g/l50mlに播種した後、60時間の間30°C、200rpmで振とう培養し、培養開始14時間後、20時間後、26時間後及び32時間後にそれぞれブドウ糖2.5g/lずつ添加した。経時的なキシロース、キシリトール、アラビノース、アラビトール濃度を測定した。測定方法は次のように遂行した。まず、試料を遠心分離して上澄液を0.2μmフィルターでろ過した後、HPLCシステム[Sugar-PakIカラム、HPLCポンプ、屈折率検出器Waters、米国、移動相:水、0.5ml/分、温度:90°C]で分析した。経時的なキシロース、キシリトール、アラビノース及びアラビトールの濃度は、下記のとおりである。表4培養時間によるキシリトール及びアラビトールの濃度変化その結果、キシリトール生産性は、BSXDH-30.55g/l/h、PBDAU0.63g/l/hであることが示され、PBDAUは対照群であるBSXDH-3に比べて15高いキシリトール生産性を示した。また、BSXDH-3は、60時間の間に11.4g/lのアラビトールを生成したのに比べて、PBDAUは副産物であるアラビトールを生成せずにキシリトールのみを生産することを確認することができた。したがって、PBDAUを通じたキシリトール生産方法は、キシリトール生産時の精製及び結晶化過程を妨害するアラビトールを生産しないので、キシリトール生産収率を顕著に高めることができることを確認することができた。<5-2>形質転換体PBDAUと補助基質にグリセロールを用いたキシリトールの生産構築された形質転換体PBDAUをYM培地ブドウ糖20g/l、酵母抽出物3g/l、麦芽抽出物3g/l、ペプトン5g/l4mlに播種して、12時間の間30°C、150rpmで振とう培養した。その後、前記培養液をキシロースとアラビノース及びグリセロールを含んだ生産培地キシロース30g/l、アラビノース30g/l、グリセロール20g/l、酵母抽出物10g/l、リン酸二水素カリウムKH2PO45g/l及び硫酸マグネシウムMgSO47H2O0.2g/l50mlに播種して、36時間の間30°C、200rpmで振とう培養した。経時的なキシロース、キシリトール、アラビノース、アラビトール濃度を測定した。測定方法は次のように遂行した。まず、試料を遠心分離して上澄液を0.2μmフィルターでろ過した後、HPLCシステム[Sugar-PakIカラム、HPLCポンプ、屈折率検出器Waters、米国、移動相:水、0.5ml/分、温度:90°C]で分析した。経時的なキシロース、キシリトール、アラビノース、アラビトールの濃度変化は、下記のとおりである。表5培養時間によるキシリトール及びアラビトールの濃度変化その結果、キシリトール生産性は、BSXDH-3が0.65g/l/h、PBDAUが0.74g/l/hであることが示され、PBDAUは対照群であるBSXDH-3に比べて14高いキシリトール生産性を示した。また、BSXDH-3は、42時間の間に6.4g/lのアラビトールを生成したのに比べて、PBDAUは副産物であるアラビトールを生成せずにキシリトールのみを生産することを確認することができた。したがって、PBDAUを通じたシリトール生産方法は、キシリトール生産時の精製及び結晶化過程を妨害するアラビトールを生産しないので、キシリトール生産収率を顕著に高めることができることを確認することができた。<5-3>形質転換体LBDAUと補助基質にブドウ糖を用いたキシリトールの生産構築された形質転換体LBDAUをYM培地ブドウ糖20g/l、酵母抽出物3g/l、麦芽抽出物3g/l、ペプトン5g/l4mlに播種して、12時間の間30°C、150rpmで振とう培養した。その後、前記培養液をキシロースとアラビノース及びブドウ糖を含んだ生産培地キシロース30g/l、アラビノース30g/l、ブドウ糖20g/l、酵母抽出物10g/l、リン酸二水素カリウムKH2PO45g/l及び硫酸マグネシウムMgSO47H2O0.2g/l50mlに播種して、60時間の間30°C、200rpmで振とう培養し、14時間後、20時間後、26時間後及び32時間後にブドウ糖2.5g/lずつ添加した。経時的なキシロース、キシリトール、アラビノース、アラビトール濃度を測定した。測定方法は次のとおりである。まず、試料を遠心分離して上澄液を0.2μmフィルターでろ過した後、HPLCシステム[Sugar-PakIカラム、HPLCポンプ、屈折率検出器Waters、米国、移動相:水、0.5ml/分、温度:90°C]で分析した。経時的なキシロース、キシリトール、アラビノース、アラビトールの濃度変化は、下記のとおりである。表6培養時間によるキシリトール及びアラビトールの濃度変化その結果、キシリトール生産性は、野生型菌株が0.51g/l/h、LBDAUが0.59g/l/hであることが示され、LBDAUは対照群である野生型菌株に比べて15高いキシリトール生産性を示した。また、野生型菌株は、60時間の間に10.3g/lのアラビトールを生成したのに比べて、LBDAUは副産物であるアラビトールを生成せずにキシリトールのみを生産することを確認することができた。<5-4>形質転換体LBDAUと補助基質にグリセロールを用いたキシリトールの生産構築された形質転換体LBDAUをYM培地ブドウ糖20g/l、酵母抽出物3g/l、麦芽抽出物3g/l、ペプトン5g/l4mlに播種して、12時間の間30°C、150rpmで振とう培養した。その後、前記培養液をキシロースとアラビノース及びグリセロールを含んだ生産培地キシロース30g/l、アラビノース30g/l、グリセロール20g/l、酵母抽出物10g/l、リン酸二水素カリウムKH2PO45g/l及び硫酸マグネシウムMgSO47H2O0.2g/l50mlに播種して、36時間の間30°C、200rpmで振とう培養した。経時的なキシロース、キシリトール、アラビノース、アラビトール濃度を測定した。測定方法は下記のとおりである。まず、試料を遠心分離して上澄液を0.2μmフィルターでろ過した後、HPLCシステム[Sugar-PakIカラム、HPLCポンプ、屈折率検出器Waters、米国、移動相:水、0.5ml/分、温度:90°C]で分析した。経時的なキシロース、キシリトール、アラビノース、アラビトールの濃度変化は、下記のとおりである。表7培養時間によるキシリトール及びアラビトールの濃度変化その結果、キシリトール生産性は、野生型菌株が0.58g/l/h、LBDAUが0.63g/l/hであることが示され、LBDAUは対照群である野生型菌株に比べて10高いキシリトール生産性を示した。また、野生型菌株は、42時間の間に6.7g/lのアラビトールを生成したのに比べて、LBDAUは副産物であるアラビトールを生成せずにキシリトールのみを生産することを確認することができた。<5-5>形質転換体EBDAUと補助基質にブドウ糖を用いたキシリトールの生産構築された形質転換体EBDAUをYM培地ブドウ糖20g/l、酵母抽出物3g/l、麦芽抽出物3g/l、ペプトン5g/l4mlに播種して、12時間の間30°C、150rpmで振とう培養した。その後、前記培養液をキシロースとアラビノース及びブドウ糖を含んだ生産培地キシロース30g/l、アラビノース30g/l、ブドウ糖20g/l、酵母抽出物10g/l、リン酸二水素カリウムKH2PO45g/l及び硫酸マグネシウムMgSO47H2O0.2g/l50mlに播種して、60時間の間30°C、200rpmで振とう培養し、14時間後、20時間後、26時間後、32時間後にブドウ糖2.5g/lずつ添加した。経時的なキシロース、キシリトール、アラビノース、アラビトール濃度を測定した。測定方法は下記のとおりである。まず、試料を遠心分離して上澄液を0.2フィルターでろ過した後、HPLCシステム[Sugar-PakIカラム、HPLCポンプ、屈折率検出器Waters、米国、移動相:水、0.5ml/分、温度:90°C]で分析した。経時的なキシロース、キシリトール、アラビノース、アラビトールの濃度変化は、下記のとおりである。表8培養時間によるキシリトール及びアラビトールの濃度変化その結果、キシリトール生産性は、野生型菌株が0.44g/l/h、EBDAUが0.49g/l/hであることが示され、EBDAUは対照群である野生型菌株に比べて12高いキシリトール生産性を示した。また、野生型菌株は、60時間の間に9.8g/lのアラビトールを生成したのに比べて、EBDAUは副産物であるアラビトールを生成せずにキシリトールのみを生産することを確認することができた。したがって、EBDAUを通じたキシリトール生産方法は、キシリトール生産時の精製及び結晶化過程を妨害するアラビトールを生産しないので、キシリトール生産収率を顕著に高めることができることを確認することができた。<5-6>形質転換体EBDAUと補助基質にグリセロールを用いたキシリトールの生産構築された形質転換体EBDAUをYM培地ブドウ糖20g/l、酵母抽出物3g/l、麦芽抽出物3g/l、ペプトン5g/l4mlに播種して、12時間の間30°C、150rpmで振とう培養した。その後、前記培養液をキシロースとアラビノース及びグリセロールを含んだ生産培地キシロース30g/l、アラビノース30g/l、グリセロール20g/l、酵母抽出物10g/l、リン酸二水素カリウムKH2PO45g/l及び硫酸マグネシウムMgSO47H2O0.2g/l50mlに播種して、36時間の間30°C、200rpmで振とう培養した。経時的なキシロース、キシリトール、アラビノース、アラビトール濃度を測定した。測定方法は下記のとおりである。試料を遠心分離して上澄液を0.2μmフィルターでろ過した後、HPLCシステム[Sugar-PakIカラム、HPLCポンプ、屈折率検出器Waters、米国、移動相:水、0.5ml/分、温度:90°C]で分析した。経時的なキシロース、キシリトール、アラビノース、アラビトールの濃度変化は、下記のとおりである。表9培養時間によるキシリトール及びアラビトールの濃度変化その結果、キシリトール生産性は、野生型菌株が0.49g/l/h、EBDAUが0.56g/l/hであることが示され、EBDAUは対照群である野生型菌株に比べて13高いキシリトール生産性を示した。また、野生型菌株は、42時間の間に5.2g/lのアラビトールを生成したのに比べて、EBDAUは副産物であるアラビトールを生成せずにキシリトールのみを生産することを確認することができた。したがって、EBDAUを通じたキシリトール生産方法は、キシリトール生産時の精製及び結晶化過程を妨害するアラビトールを生産しないので、キシリトール生産収率を顕著に高めることができることを確認することができた。<実施例6>形質転換体PBDAUとバイオマス加水分解物を用いたキシリトールの大量生産形質転換体を用いてキシリトールを大量生産するために、糖成分がキシロース82.9、アラビノース11.4、ブドウ糖5.7であるトウモロコシ穂軸の加水分解物を基質として用い、グリセロールを補助基質として用いた。これはトウモロコシ穂軸、サトウキビ、ココナッツ副産物、カバノキなどのバイオマスには、キシロース、アラビノース、ブドウ糖などからなるヘミセルロースが豊かであり、特にキシロースの含有量が高いので、それを加水分解した物質をキシリトール生産に直接用いることができるからである。構築された形質転換体PBDAUをYM培地ブドウ糖20g/l、酵母抽出物3g/l、麦芽抽出物3g/l、ペプトン5g/l50mlに播種して、12時間の間30°C、200rpmで振とう培養した。その後、前記培養液をバイオマス加水分解物を用いたキシリトール生産培地キシロース50g/l、ブドウ糖3.5g/l、アラビノース6.9g/l、グリセロール15g/l、酵母抽出物10g/l、リン酸二水素カリウムKH2PO45g/l及び硫酸マグネシウムMgSO47H2O0.2g/l1lが入った発酵槽に播種して、30°C、pH4.0、500~800rpmで撹拌させながら培養した。培養開始の12時間後から栄養溶液feedingsolutionキシロース503g/l、ブドウ糖34.7g/l、アラビノース69.2g/l、グリセロール150g/lを添加して培地内のキシロース濃度が100g/l以下になるように調節して72時間の間流加式培養を遂行した。経時的な乾燥菌体濃度は、分光光度計を用いて600nmで吸光度を測定し、あらかじめ分析した標準曲線で換算して算出した。また、キシロース、キシリトール、アラビノース、アラビトール濃度を測定した。測定方法は下記のとおりである。まず、試料を遠心分離して上澄液を0.2μmフィルターでろ過した後、HPLCシステム[Sugar-PakIカラム、HPLCポンプ、屈折率検出器Waters、米国、移動相:水、0.5ml/分、温度:90°C]で分析した。経時的な乾燥菌体濃度、キシロース、キシリトール、アラビノース、アラビトールの濃度は、下記のとおりである。表10培養時間によるキシリトール及びアラビトールの濃度変化その結果、キシリトール生産性は、BSXDH-3が2.16g/l/h、PBDAUが2.28g/l/hであることが示され、PBDAUは対照群であるBSXDH-3に比べて5.6高いキシリトール生産性を示した。また、BSXDH-3は、72時間の間に6.4g/lのアラビトールを生成したのに比べて、PBDAUは副産物であるアラビトールを生成せずにキシリトールのみを生産することを確認することができた。したがって、本発明のPBDAU菌株は、実際にバイオマス加水分解物を用いた大量生産において副産物であるアラビトールは生成せずに、高濃度、高生産性でキシリトールを生産することができることを確認することができた。