"創傷治癒を改善するための組成物であって、月経由来幹様細胞、及び治療的に有効な量の月経由来幹様細胞を創傷へ送達して治癒を改善するためのビヒクルであって、治療的に有効な量の月経由来幹様細胞を接種されるビヒクル、を含むことを特徴とする、前記組成物前記月経由来幹様細胞が、実質的に異種の細胞集団、実質的に同種の細胞集団、又はCD117を発現する細胞集団のいずれか一つ以上を含む、請求項1に記載の組成物。ビヒクルに接種される月経由来幹様細胞が、約1×106細胞~約1×1010細胞の範囲である、請求項1に記載の組成物。前記ビヒクルが生物分解性マトリックス、ゲル、又は月経由来幹様細胞の皮下注射に適する医薬的に許容し得る賦形剤のいずれか一つを含む、請求項1に記載の組成物。創傷に細胞を投与するためにビヒクルに医薬的に有効な量の月経由来幹様細胞を接種する工程を含む、創傷治癒を改善するための組成物を調製する方法。前記月経由来幹様細胞を接種する工程が、ビヒクルに約1×106細胞~約1×1010細胞の範囲で細胞を加える工程を含む、請求項5に記載の方法。前記月経由来幹様細胞が、実質的に異種の細胞集団、実質的に同種の細胞集団、又はCD117を発現する細胞集団のいずれか一つ以上を含む、請求項5に記載の方法。前記ビヒクルが生物分解性マトリックス、ゲル、又は月経由来幹様細胞の皮下注射に適する医薬的に許容し得る賦形剤のいずれか一つを含む、請求項5に記載の方法。ビヒクル中に接種された適用量の治療的に有効な量の月経由来幹様細胞を少なくとも一回創傷へ投与する工程を含む、創傷治癒を改善する方法。前記適用量の月経由来幹様細胞をビヒクル毎に約1×106細胞~約1×1010細胞の範囲で接種する、請求項9に記載の方法。前記適用量の月経由来幹様細胞をビヒクル毎に1×1010細胞超で接種する、請求項9に記載の方法。前記月経由来幹様細胞が実質的に異種の細胞集団、実質的に同種の細胞集団、又はCD117を発現する細胞集団のいずれか一つ含む、請求項9に記載の方法。前記ビヒクルが生物分解性マトリックス、ゲル、又は月経由来幹様細胞の皮下注射に適する医薬的に許容し得る賦形剤のいずれか一つを含む、請求項9に記載の方法。適用量の月経由来幹様細胞を接種された少なくとも2形態のビヒクルを創傷へ投与する工程を含む、請求項13に記載の方法。月経由来幹様細胞を接種されたビヒクルを創傷へ投与する前に、十分に創傷を清拭する工程を含む、請求項14に記載の方法。月経由来幹様細胞を接種されたビヒクルの創傷への各投与の前に、十分に創傷を清拭する工程を含む、請求項9に記載の方法。治療的に有効な量の月経由来幹様細胞を接種された生物分解性マトリックス又はゲルを、1ヶ月から6ヶ月の範囲で少なくとも月に一回創傷に投与する、請求項13に記載の方法。治療的に有効な量の月経由来幹様細胞を接種された医薬的に許容し得る賦形剤もまた、約1ヶ月から約6ヶ月の範囲で毎週皮下注射によって創傷へ投与される、請求項17に記載の方法。治療的に有効な量の月経由来幹様細胞を接種された医薬的に許容し得る賦形剤を、1ヶ月から6ヶ月の範囲で毎週皮下注射によって創傷へ投与する、請求項13に記載の方法。月経由来幹様細胞を接種されたビヒクルを創傷に投与する前に、十分に創傷を清拭する工程を含む、請求項9に記載の方法。本発明は創傷治癒を改善するための治療用組成物並びにその製造方法及び使用を提供する。前記治療用組成物は、治療的に有効な量の細胞を創傷へ送達して治癒を改善するためにビヒクルに接種seedされた月経由来幹様細胞stemlikecellを含む。前記月経由来幹様細胞は月経から単離され、実質的に異種の細胞集団、実質的に同種の細胞集団、又はCD-117を発現する細胞集団のいずれか一つ又は組み合わせを含む。一つの態様において、前記月経由来幹様細胞は約1×106細胞~約1×1010細胞の範囲でビヒクルに接種される。別の態様において、治療中、患者の耐性及び創傷治癒の進行に依存して、前記月経由来幹様細胞はビヒクルごとに約1×1010細胞超で又は約1×106細胞未満で接種される。前記ビヒクルは生物分解性マトリックス、ゲル、又は月経由来幹様細胞の皮下注射に適する医薬的に許容し得る賦形剤のいずれか一つであってもよい。創傷治癒を改善するための組成物を調製する方法が提供される。前記方法は、創傷に細胞を投与するために治療的に有効な量の月経由来幹様細胞をビヒクルに接種する工程を含む。前記接種工程は担体に約1×106細胞~約1×1010細胞の範囲で月経由来幹様細胞を加える工程を含む。別の態様において、前記月経由来幹様細胞はビヒクルごとに約1×1010細胞超で又は約1×106細胞未満で接種される。前記月経由来幹様細胞は、実質的に異種の細胞集団、実質的に同種の細胞集団、又はCD-117を発現する細胞集団のいずれか一つ以上であってもよい。創傷治癒を改善するための方法もまた提供される。前記方法は、適用量のビヒクル中に接種された治療的に有効な量の月経由来幹様細胞を、少なくとも一回創傷へ投与する工程を含む。一つの態様において、前記方法は、月経由来幹様細胞を接種されたビヒクルを創傷へ投与する前に、十分に創傷を清拭する工程を含む。前記適用量の月経由来幹様細胞は、ビヒクルごとに約1×106細胞~約1×1010細胞の範囲で接種されてもよい。前記適用量の月経由来幹様細胞は、ビヒクルごとに約1×1010細胞超で又は約1×106細胞未満で接種されてもよい。代わりの態様において、前記方法は、適用量dosageの月経由来幹様細胞を接種された少なくとも2形態のビヒクルを創傷へ投与する工程を含む。月経から単離された治療的に有効な量の多能性の細胞を接種された生物分解性マトリックス又はゲルは、治療中の患者の耐性及び創傷治癒の進行に依存する1ヶ月から6ヶ月までまたはそれより長い治療期間、日、週又は月に少なくとも一回投与される。治療的に有効な適用量の月経由来幹様細胞を接種された医薬的に許容し得る賦形剤もまた、治療中の患者の耐性及び創傷治癒の進行に依存する一ヶ月から六ヶ月までまたはそれより長い治療期間、毎日、毎週、毎月基準basisで皮下注射によって創傷へ一緒に投与されてもよい。一つの態様において、治療的に有効な量の月経由来幹様細胞を接種された前記医薬的に許容し得る賦形剤は、治療中の患者の耐性及び創傷治癒の進行に依存する1ヶ月から6ヶ月までまたはそれより長い治療期間、毎週皮下注射によって創傷へ投与される。本発明は、創傷治癒を改善するための、月経由来幹様細胞MSCを用いる治療用組成物並びにその製造方法及び使用を提供する。MSCは、創傷治癒を改善又は促進する目的及び創傷治癒に関する他の問題に対処する目的のために治療用組成物中で対象に投与されてもよい。創傷部位へのMSCの投与は、MSCの創傷への体の自然な反応の模倣を誘引し及び/又は引き起こす。例えば、MSCは自然な創傷治癒機構を含む及び/又は補助する他の細胞型、例えば、線維芽細胞、炎症細胞、又は血管新生のための細胞に分化し、又は化学走化性因子、成長因子、又は他の創傷治癒介在物質を産生及び分泌してもよい。月経由来幹様細胞用語月経由来幹様細胞、MSCは、参照によりその全体が本願に組み込まれる米国特許出願第12615372号明細書の方法に従って月経から単離される、あらゆる生存可能な高増殖性の多能性細胞multipotentcell集団、さもなければ多能性細胞pluripotentcell集団を意味し、前記集団は、異種の細胞集団又は、同種の細胞集団、系統中立のlineageuncomitted細胞集団、系統コミットなlineagecommitted細胞集団、表面マーカーCD117及び/又はSSEA-4を積極的に発現する細胞集団、又はそれから派生するあらゆる細胞集団を含むがそれらに限定されない、それから派生するあらゆる細胞集団である。発明を実施するための月経由来幹様細胞は、本開示において提示される機能及び方法を実行できる十分な量のMSCを生産する、いかなる適切な技術を使用して単離されてもよい。これらの方法の例は米国特許出願第12615372号明細書において記載されている方法を含むがそれらに限定されない。細胞表面マーカーはMSCを単離する及び/又は豊富にするための別の手段を提供する。例えば、MSC上のCD117のような表面マーカーは、米国特許出願第12615372号明細書において記載されている特定のモノクローナル又はポリクローナル抗体と反応性である。抗体はMSC細胞集団を捕獲し又は豊富にするための試薬として使用され得る。MSC単離非制限的な態様として、MSCは月経から単離され、抗生物質処理で洗われ、回収されてもよい。MSCはi細胞の新鮮な供給源、ii細胞の新鮮な供給源の培養物、iii新鮮な細胞の培養物からの細胞単離株すなわち、CD117選択又は他の積極的若しくは消極的選択によって得られる、iv凍結保存後に解凍された細胞、v冷凍保存され、次に解凍された後に培養される細胞、vi凍結保存されて解凍された試料の培養物からの細胞単離株、又はvii米国特許出願第12615372号明細書において記載されているような他のあらゆる細胞集団として使用され、本発明の治療用組成物に接種してもよい。一つの非制限的な例において、MSCは、約1~3時間回収カップを膣内に配置して回収した月経から単離される。二つの別個の回収物から回収された月経を、下記のように冷却された培地を含む二つの回収チューブに入れる:第一のチューブはヘパリンナトリウムを含むHBSS及び抗生物質を含む培地を有し、第二のチューブはヘパリンナトリウムを含むHBSS及び、例えば、米国特許出願第12615372号明細書において記載されているような抗生物質を含む培地を有する。培地及び月経を含む前記回収チューブは密封され、約24~約72時間以内の回収工程のために、冷凍形態のレンガを有するスタイロフォーム冷却器に輸送される。培地試料内の前記月経は抗生物質カクテル中で抗生物質洗浄を受ける。最終濃縮カクテルはHBSS中にバンコマイシン160μg/ml、クラフォラン500μg/ml、アミカシン200μg/ml、ゲンタマイシン240μg/ml、及びアンフォテリシンB5.4μg/mlを含み、これは回収に用いられる濃度と同じである。第一のチューブにおいて、1mlの原液抗生物質カクテルを19mlのHBSS及び0.4mlのヘパリン400ユニットに加える。第二のチューブにおいて、0.2mlのヘパリン200ユニットを10mlのDPBSに加える。第一のチューブヘパリン及びDPBS又は代わりにHBSS内の月経試料は抗生物質洗浄処理を受ける。前記試料は100ミクロンフィルターを用いて50ml円錐管に濾過される。第一の回収チューブを10mlのDPBS及び0.2mlのヘパリンで洗浄し、50ml円錐管に加える。次に前記50ml円錐管を840g、7分間、4.0°Cで遠心分離する。上清はペレットを乱さないよう注意して除去される。1mlの希釈抗生物質カクテル及び0.4mlのヘパリンをHBSSと共に残ったペレットに加え、ペレットを再懸濁する。細胞を含むこの混合物を2~8°Cで20~30時間培養し、培養の初めの5時間は試料を回転装置に置く。培養の後、細胞の混合物を同じ遠心分離パラメーターで再び遠心分離し、ペレットを5mlのDPBS又はHBSSに再懸濁してもよい。第二のチューブヘパリン、HBSS内の前記月経試料を感染症試験に用いる。細胞数、細胞生存率、感染症試験、及び微生物学的試験を、米国特許出願第12615372号明細書に記載されている技術に従って、二つの月経細胞試料のそれぞれで行ってよい。次に、前記二つの月経細胞試料約5mlを、米国特許出願第12615372号明細書に記載されている技術に従って、凍結保存してもよい。5mlの凍結保存培地DPBS中に20のHSA及び20のDMSOを二つの月経細胞試料のそれぞれに個別に加える。凍結保存細胞を、米国特許出願第12615372号明細書に記載されている技術に従って、解凍してもよい。代わりに、それぞれの細胞試料を更に処理して、特定の細胞マーカー、例えばCD117、を発現する細胞を単離してもよい。細胞選択を、米国特許出願第12615372号明細書に開示されている技術に従って、250万の細胞から1億までの細胞について実施してもよい。細胞選択の前に、新鮮な細胞又は解凍した細胞を氷上に少なくとも15分間置く。細胞を300g、10分間、4°Cで遠心分離する。上清を除去し、ペレットを300mlのワーキングバッファーworkingbufferに、ワーキングバッファー10mlにつき約1滴のDNA分解酵素パルモザイム、100μlのFeRブロッキング試薬、及び100μlのCD117ミクロビーズと共に再懸濁する米国特許出願第12615372号明細書に記載されているように。この混合物を20~25分間、氷上で冷やす。2mlのワーキングバッファーを加える。前記混合物を含むチューブを10分間、300g、4°Cで遠心分離する。上清を除去し、ペレットを500μlのワーキングバッファーに再懸濁する。次に、前記再懸濁した細胞を磁石台上でMSカラム約500μlのワーキングバッファーで湿らせるに通す。前記MSカラムを500μlのワーキングバッファーで3回洗浄する。洗浄されてカラムを通る非ラベル細胞nonlabeledcellを取り出し、細胞数、細胞生存率、等を分析する。次に、前記MSカラムを磁石台から移して、1mlのワーキングバッファーをMSカラムに通し、ラベル細胞labeledcellを取り出す。回収されたラベル細胞を別のMSカラムに通してラベル細胞を濃縮してもよい。この場合、ラベル細胞はCD117細胞である。前述の処理は普遍的予防策を取って生物学的安全キャビネットにおける無菌操作に従って実施する。次に、単離したCD117MSCを、米国特許出願第12615372号明細書に開示されている技術に従って、冷凍保存してもよい。次に、冷凍保存した又は新鮮な細胞を本発明に従ってマトリックス、ゲル、又は医薬的に許容し得る賦形剤に接種するために調製する。CD117選択細胞を解凍する凍結保存しているならば。細胞の使用の前に、試料を5回洗浄して細胞から抗生物質を除去する。前記細胞を10mlのDPBS及び0.2mlのヘパリン防腐剤なしで洗浄する。試料を軽くボルテックスし、840g、7分間、4.0°Cで遠心分離する。上清を除去し、ペレットを5回洗い直して、処理用の細胞を準備する。次に、解凍した又は新鮮なCD117細胞を、増殖のために15のチャン完全培地Chanscompletemedia又はヒト血清DMEM完全培地又は等価物に蒔く。十分な増殖の後、細胞を任意にCD117に関して選択し、再び増殖させてもよい。CD117選択細胞の一回の増殖又は二回の増殖の目的は、応用のために所望の数の細胞を得ることである。接種のために、これらの増殖したCD117細胞をすぐに使用してもよいし、又は凍結保存して、後に解凍してもよい。製剤本発明は、MSC及び医薬的に許容し得る賦形剤又はマトリックス又はゲルを含む治療用組成物を提供する。対象の治療用組成物は、混合物中に医薬的に許容し得る賦形剤又はマトリックス又はゲル及びMSCを単独で又は1以上の生物学的活性物質例えば、成長因子のようなの組み合わせにおいて、治癒を改善するための様々な方法による患者の創傷への投与に効果的な濃度strengthで含む。生物学的活性物質を含む治療用組成物のあらゆる調製物は、本発明の代替的な特徴である。更に、治療に望ましいのであれば、前記組成物は湿潤剤又は乳化剤のような少量の補助物質、又はMSCの効果を高めるpH緩衝剤を含んでもよい。MSCが組み込まれ又は埋め込まれ得るマトリックスは、生物学的適合性、レシピエント適合性のマトリックス、及びレシピエントに有害でない産物へ分解するマトリックスを含む。これらのマトリックスはMSCのための補助及び保護を提供する。非制限的な例として、MSCを接種されたバイオマトリックスを調製するために、以下のマトリックスのいずれもが使用されてよい:インテグラ二層マトリックス創傷被覆材IntegraBilayerMatrixWoundDressing、プロメガマトリックス創傷被覆材PromegaMatrixWoundDressing、又は等価物。一つの態様において、創傷被覆材全体を使用してもよく、又はより小さい断片に切断してもよい。別の態様において、4つの等しい断片を使用してもよい。所望量のMSCを接種するために、二つのT75フラスコ及び二つのシャーレの中に前記創傷被覆材を置く。MSCを15チャン培地325mlのMEMα、75mlのFBS、90mlのChangB、10mlのChangC、5mlのPenstrep、及び5mlのL-グルタミン中に蒔いてもよい。細胞量は選択される。次に、チャン培地及び所望量のMSCの混合物を、選択したマトリックスにゆっくりと適用することにより、MSCをマトリックス中に接種する。具体的には、細胞が材料上に吸収されるように、自動ペレットから直接マトリックス上にゆっくりと放出することにより、MSCを接種した。MSCをマトリックスに接種する工程の非制限的な例一つの態様において、マトリックス中の単層のCD117MSC細胞系を培養する方法を提供する。MSCM29156RACD117陽性画分の冷凍保存した試料を37~40°Cの水槽中で、完全に解凍しきらないように解凍する。部分的に解凍した細胞をDNA分解酵素10ml毎に1滴を含む冷やした15チャン細胞培地に移し、転倒により穏やかに混合する。5mlの細胞調製物に対し、25mlの冷やした培地を用いる。調製物を120gで5分間遠心分離する。上清をピペットで除き、DNA分解酵素を含まない15完全チャン培地中に転倒によって再懸濁する。再び、120gで5分間遠心分離する。上清をピペットで除き、1cm2毎に5000細胞で細胞をフラスコ中に蒔いて、翌日回収する例えば、1T175フラスコ中に100万細胞;1cm2毎に1000細胞で蒔いて、3~5日中に回収する。75~80コンフルエントになると、細胞をトリプシン処理できる。トリプシン処理の前に、適当量のTrypLEトリプシン様酵素、チャン培地、及びDPBSを約36.0~38.0°Cで温める。培地をフラスコから吸引する。T-25、T-75又はT-175フラスコを5,10及び25mlのカルシウム及びマグネシウムを含まない予熱したDPBSでそれぞれ洗浄する。T-25、T-75又はT-175に1.5ml、3ml及び6mlの予熱したTrypLEをそれぞれ加える。CO2培養器において、36.0~38.0°Cで約5分間、フラスコを攪拌及びインキュベートする。穏やかに細胞を取り除き、フラスコの内容物を、前に加えたTrypLEと同じ量のチャン培地で希釈する。フラスコの内容物を50ml遠心分離チューブに移す。T-25、T-75又はT-175非組織培養処理nontissueculturetreatedフラスコを追加の5、10及び25mlのカルシウム又はマグネシウムを含まないDPBSでそれぞれ洗浄する。洗浄液をフラスコの内容物を含む50ml遠心分離チューブに加える。前記チューブを120gで5分間遠心分離する。遠心分離後、上清を廃棄する。細胞ペレットの体積を記録し、20μlを取り出して細胞数を数える。マトリックスに接種する工程を、まず殺菌したハサミを用いてマトリックスを所望の大きさに切断して適切な大きさのシャーレの中に置いて、実施する。培地を前記シャーレに加え、マトリックスに吸収させる。200万の細胞又は他の細胞量をマトリックス上に、中心から始めて端へと渦状にゆっくりと蒔く。細胞をマトリックス中に安定させる。所望の大きさのマトリックスを打ち抜き、細胞側が創傷へ向くように創傷へ移す。残りのMSCを別のマトリックス上に蒔いてもよく、又は米国特許出願第12615372号明細書に開示されている方法に従って濃縮及び冷凍保存してもよい。別の態様において、MSCの成長及び/又は分化を補助する生体吸収性ゲルを含む混合物にMSCを混合してもよい。細胞量は選択される。次に、チャン培地及び所望量のMSCの混合物をゲルへゆっくりと適用することにより、MSCをゲル中に穏やかに接種する。具体的には、細胞がゲル中に穏やかに混合されるように自動ピペットから直接ゲル上へゆっくりとMSCを放出して、MSCを接種してもよい。非制限的な例として、ダーマサイエンス社が製造する、ダーマグラン-B3Oz創傷ゲルチューブ、ダーマグラン-B親水性創傷ゲルがある。他の適切なゲルは、慢性又は急性の創傷用の主要な被覆又は充填剤のいずれかを提供する、親水性の包帯剤を含んでもよい。ゲルは、創傷治癒に繋がる湿性、少し酸性の環境をビタミンA、ビタミンB6、カルシウム及びマグネシウムと共に提供する、亜鉛-栄養素包帯剤及び平衡pH技術balancedpHtechnologyを含んでもよい。MSCをまた、装置、例えばシリンジ、による皮下注射での送達のために、医薬的に許容し得る担体又は賦形剤と混合してもよい。本願に記載される前記医薬的に許容し得る担体又は賦形剤、例えばビヒクル、補助剤、担体又は希釈剤、は、一般に容易に入手可能である。一般に、医薬的に許容し得る担体又は賦形剤は、細胞に対して化学的に不活性なものであり、且つ、使用条件下で有害な副作用又は毒性を有さないものである。例は、シラン、溶媒、分散媒、細胞培養培地、リン酸塩、クエン酸塩のような水性緩衝液、及び他の有機酸;アスコルビン酸を含む酸化防止剤;低分子量約10残基未満ポリペプチド;血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリンのようなタンパク質;ポリビニルピロリドンのような親水性ポリマー;グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン又はリシンのようなアミノ酸;単糖、二糖、及びグルコース、マンノース、又はデキストリンを含む他の炭水化物;EDTAのようなキレート剤;マンニトール又はソルビトールのような糖アルコール;ナトリウムのような塩形成対イオン;及び/又は非イオン性界面活性剤を含むが、それらに制限されない。あらゆる担体又は賦形剤は、殺菌され、シリンジを介して容易に送達できる程度に流動性である。本発明のこの特徴は、医薬的に許容し得る担体又は希釈剤、及び必要に応じて上記に列挙された他の成分中にMSCを組み込むことによって調製される。この例において、MSCを、MSCの細胞生存を補助する溶液を含む混合物中に混合してもよい。細胞量は選択される。次に、チャン培地及び所望量のMSCの混合物を選択した溶液へゆっくりと適用することで、MSCを穏やかに溶液中へ接種する。具体的には、細胞がゲル中に穏やかに混合されるように、自動ピペットから直接溶液上へゆっくりとMSCを放出して、MSCを接種してもよい。針管腔又は穴が皮下注射の間に剪断力で細胞が損傷を受けないのに十分な直径例えば、30ゲージ又はより大きいである限りは、従来のシリンジを使用し得る。治療MSCを含む治療用組成物は、信頼できる医学判断の範囲内で投与され、過度の毒性、炎症、アレルギー反応、又は妥当な利益/危険比に相応の他の合併症なしにヒトの組織と接触させて使用するのに適している。MSCは、創傷治癒を改善又は促進するために、治療用組成物中で対象へ投与されてもよい。創傷部位へのMSCの投与によって、細胞は、創傷への体の自然な反応を模倣することとなる。例えば、MSCは機能して、自然の創傷治癒機構を含む及び/又は補助する他の細胞型、例えば線維芽細胞、炎症細胞又は血管新生のための細胞、へと自然に分化する。投与の前に、物理的又は化学的方法によって創傷を清拭してもよい。一つの態様において、MSCを接種したマトリックスを創傷へ適用する。別の態様において、MSCをスプレーし又は生体吸収性ゲル若しくは溶液を含む混合物中で創傷へ局所的に適用してもよい。任意に、MSCの局所的な適用の後にマトリックスを創傷部位に適用し、適切な位置に包帯をしてもよい。更に別の態様において、MSCを創傷部位で皮下に注射する。本発明の治療用組成物は、MSCの投薬形態と適合性の方法及び治療的に有効な量において投与される。投与されるMSCの量は、例えば、治療を受ける対象、対象の器官の受容能力、治療用組成物を受け入れる細胞システム又は免疫システム、及び細胞又は組織治療の性質等に依存する。投与に必要な治療用組成物の投薬の量及び頻度は、専門家の判断に依存し、それぞれの個体に固有である。最初の投与の及び後に続く投与のための適切な処方計画もまた様々であるが、マトリックス、ゲル又は注射単独又はいくつかの組み合わせのその後の投与によって望まれる又は示されるような一以上の間隔例えば、時間、日、週、月又は年で繰り返される投薬doseが後に続く最初の投薬投与を含み得る。一つの態様において、治療用組成物の適用量は、創傷部位毎に約1×106細胞~約1×1010細胞の範囲でよく、また、投与経路及び創傷部位の大きさに依存してもよい。適用量は創傷部位での投与毎に1×1010細胞超又は1×106細胞未満を含んでもよい。治療は1ヶ月から6ヵ月まで又はそれより長く、毎日、毎週、又は毎月起こり得る適用量の投与を含んでもよい。適用量及び治療は患者の耐性及び治療の進行に一部依存する。非制限的な例において、MSCはマトリックス中に接種された約1×106細胞~約1×1010細胞の範囲にわたってもよい。接種されたマトリックスは創傷部位に局所的に適用される。適切な適用量は創傷部位において投与毎に1×1010細胞超又は1×106細胞未満を含んでもよい。治療は1ヶ月から6ヵ月まで又はそれより長く、毎日、毎週、又は毎月起こり得る適用量の投与を含んでもよい。一週間後の足場が能力がなければ、その後同数の細胞の局所皮下注射を適用する。適用量は必要に応じて増やしても減らしてもよい。非制限的な例において、MSCはゲル中に接種された約1×106細胞~約1×1010細胞の範囲にわたってもよい。適切な適用量は創傷部位において投与毎に1×1010細胞超又は1×106細胞未満を含んでもよい。混合物は創傷部位に局所的に適用される。治療は1ヶ月から6ヵ月まで又はそれより長く、毎日、毎週、又は毎月も適用量の投与を含んでもよい。適用量は必要に応じて増やしても減らしてもよい。別の非制限的な例において、MSCは、創傷部位付近又は創傷部位内へ皮下に注射される接種された約1×106細胞~約1×1010細胞の範囲にわたってもよい。治療は1ヶ月から6ヵ月まで又はそれより長く、毎日、毎週、又は毎月の適用量の投与を含んでもよい。別の態様において、適用量投与は、繰り返される投薬間隔におけるマトリックス又はゲルの投与と共に又は代わりの間隔で、後に続くMSCの皮下注射の投与に加えて適用量のMSCを接種されたマトリックス又はゲルを投与することを含んでもよい。更なる態様において、十分な治療期間、十分な適用量で、接種されたマトリックス、ゲル、及び/又は皮下注射のあらゆる組み合わせにおいて、MSCを投与してもよい。マトリックスを用いた投与この例において、約1×106細胞の適用量範囲でMSCを接種された生物分解性マトリックスを、前記形成方法に従って調製し、創傷に適用する又は創傷への投与の前に冷却条件下28°Cで保存する。必要に応じて、接種された生物分解性マトリックスの投与の前に創傷を清拭してもよい。接種された生物分解性マトリックスは創傷への局所適用によって投与される。マトリックスは包帯をされ、マトリックスと創傷との接触を保ち、MSCを創傷部位へ移動させる。創傷治癒の進行に依存して6ヵ月まで投与を毎週繰り返す。投与の細胞適用量及び頻度を、患者の耐性及び治療の進行に従って増やしても減らしてもよい。発明の製剤に従って、及び創傷状態に依存して、約1×106~約1×1010MSCの局所皮下注射によって治療を補ってもよい。皮下注射は、創傷の重大性、治癒の進行及び耐性に依存して毎日、毎週、又は毎月であってよい。ゲルを用いた投与この例において、約1×106細胞の適用量範囲でMSCを接種されたゲルを調製し、創傷に適用する又は投与の前に冷却条件下28°Cで保存する。接種されたゲルの投与の前に創傷を清拭してもよい。接種されたゲルは、創傷への噴霧又は直接の適用によって局所的に投与される。ゲルは包帯をされ、ゲル及びMSCと創傷との接触を保ち、創傷部位へMSCを移動させる。創傷治癒の進行に依存して6ヵ月まで投与を毎週繰り返してもよい。投与の適用量及び頻度を、創傷の重大性、治療の進行、及び耐性に従って増やしても減らしてもよい。発明の製剤に従って、及び創傷状態に依存して、約1×106~約1×1010MSCの局所皮下注射によって治療を補ってもよい。皮下注射は、創傷の重大性、治癒の進行及び耐性に依存して毎日、毎週、又は毎月であってよい。皮下注射を用いた投与この例において、約1×106細胞の適用量範囲で医薬的に許容し得る賦形剤中に懸濁したMSCを調製し、創傷に適用する又は投与の前に冷却条件下28°Cで保存する。皮下注射の前に創傷を清拭してもよい。創傷治癒の進行に依存して6ヵ月まで投与を毎週繰り返してもよい。投与の適用量及び頻度を、創傷の重大性、治療の進行、及び耐性に従って増やしても減らしてもよい。MSCを用いるいずれもの治療の間、実験室評価は、ヘマトクリット、ヘモグロビン、平均赤血球容積MCV、平均赤血球ヘモグロビンMCH、平均赤血球ヘモグロビン濃度MCHC、赤血球分布幅RDW、血小板数、赤血球数、白血球数WBC及び差、プロトロンビン時間PT及び国際標準化比INRを含む。臨床化学は、カルシウム、ナトリウム、カリウム、塩化物、重炭酸塩、アルブミン、総ビリルビン及び直接ビリルビン、ALT、AST、トリグリセリド、コレステロール、血糖、BUN、ALP、血清クレアチニン、心臓トロポニン、CK、血清アミラーゼ及び膵リパーゼのようなパラメーターの分析を含む。血清アミラーゼ又はCKの上昇があれば、膵アミラーゼ及びCKアイソザイムCK-MM、CK-MB、CK-BBをそれぞれ分析する。尿検査は、特定の比重、pH、タンパク質、グルコース、ケトン、潜血、ビリルビン、ウロビリノゲン、及び亜硝酸塩の分析を含む。尿検査に異常があれば、顕微鏡検査細胞、キャストcast及び結晶の識別を実施する。治療の間、幹細胞産物、サイトカイン、及び成長因子の血漿レベルの測定のために血液試料を回収する。更に、更なるPK分析のために血清試料を回収する必要であれば。いずれの治療に関しても、第一の終点は、重大な不利な事象、投薬を制限する毒性、又はグレード1~4の検査所見の異常を含む。治療に関する第二の終点は、ベースラインから28日目までの投薬における変化、治療による影響を受けない患者、治療に対する反応における急速な創傷治癒、急速なMSC成長すなわち、治療中の二つの連続した測定における最下点からの1log増加、又は治療の1日目から28日目までの臨床検査における重大な変化のいずれか一つを含む。ラット研究ラット研究を実施して、マトリックス及びMSCを含む治療用組成物を用いた治療のラットにおける効果を測定した。マトリックスは、45酸化再生セルロース及び55コラーゲンを有し、殺菌条件下で包装され、凍結乾燥されたORCプロモグランマトリックスであった。研究のため、48匹のオスの成体ヌードスプラーグドーリーラット250gmを16匹の3つの実験集団に分けた。前記3グループは、以下のように処置された:1普通の創傷をマトリックス無細胞の皮膚マトリックス、プロモグランのみで処置;2虚血性創傷をMSCビヒクル溶液で処置;及び3虚血性創傷をMSCビヒクル及びMSCで処置。痛みのために、それぞれのラットを麻酔し、体重を量ってブプレノルフィン8~12時間間隔で0.01~0.05mg/kg2を与えるの皮下注射を投与した。ラットの背中を刈り、10ポピドンヨード溶液消毒ベータダイン、続いて第三70イソプロピルアルコール洗浄と一緒に70エタノール洗浄、続いて手術部位へのポビドンヨード溶液の適用の3つの交互の洗浄によって皮膚を消毒した。外科処置の間、39°Cを超えない温度でラットを保った。ChenCらの創傷修復再生中継器1999748694において記載されるように、ラットに双茎皮膚弁外科処置をした。2.5×11cmの大きさの皮膚弁用の長方形の型板をラットの背中にトレースした。型板の頭側の基準は肩甲骨の下の角であり、尾側の基準である坐骨結節の面へ広げた。2対の直径6mmのパンチ傷を、型板の基準から3.6cm及び7.2cmで型板の中線の両側を中心として弁に沿って作成した。バイオプシーbiopsyを0日試料とし、分析まで-80°Cで冷凍した。虚血性皮膚弁グループについて、型板の横の線を、皮筋層を貫いて、皮筋層の下にあるフェイシャルfacial組織の相対的に無血管の面まで切開し、皮膚弁を作成した。骨格筋の上にある緩んだ結合組織の面を通して鈍い切開によって皮膚弁を上げ、次に元の位置に戻して切り込みに沿って9mmのステンレス鋼止め釘で再付着した。外科処置の日0日、その後隔日2、4、6、8、及び10日に、ラットをイソフルレンで麻酔し、体重を量り、創傷包帯を外し、創傷表面領域をフェルトペンを用いて酢酸塩シートでトレースし、試験物質を局所的に創傷へ再適用し、創傷に再び包帯をした。復元後、ラットをケージに戻した。外科処置のときに、創傷をプログマンマトリックスベヒクル及びMSC又はプログマンマトリックスベヒクル単独で処置し、非接着性包帯テガダーム、3Mで包帯をした。MSCを受け、屠殺を予定していないグループについて、100μlにつき100万MSCの適用量で、2、4、6、及び8日に創傷へ包帯をするマトリックスへMSCを注入した。それぞれの創傷の酢酸塩トレースを高解像度のHPスキャンジェット3Cスキャナーを使用してデジタル化した。それぞれの創傷の大きさをNIHイメージJhttprsbwebnihgovijを使用して計算した。平均創傷面積及び平均の標準誤差を計算した。2、6、8、及び10日に、創傷の分析のため、それぞれのグループから4匹のラットを屠殺した。安楽死のため、ラットのグループをイソフルレンで麻酔し、その後屠殺した。創傷部位を8mm穴開け器で切り取り、分析のために組織標本を-80°Cで冷凍した。第一の終点は、隔日の創傷サイズ測定によって評価される創傷治癒の比率であった。0、2、6、8、及び10日からの創傷の組織像を、パラフィン切片のヘマトキシリン及びエオシンHE染色並びに免疫組織化学染色又は免疫蛍光染色を用いて評価した。免疫組織化学染色を用いて、創傷内のヒト細胞についてヒト主要組織適合抗原を用いて評価した。0、2、6、8、及び10日からの創傷切除物の生化学的分析を、市販のELISA分析を用いて、血管内皮成長因子VEGF、塩基性線維芽細胞成長因子bFGF、及び肝細胞成長因子HGFについて実施した。表1に示されるように、創傷面積を、統計的な有意差について、チューキーTukeyHSD事後検定を用いた一元分散分析を用いて評価した。受傷後の2日目において、無細胞マトリックスビヒクルプロモグラン中のMSCで処置された虚血性創傷についての平均創傷面積は、無細胞マトリックスビヒクルのみを用いて処置された虚血性創傷についての又は無細胞マトリックスビヒクルを用いて処置された通常の非虚血性創傷についての平均創傷面積よりも有意に小さかった。MSCは、虚血性皮膚での創傷治癒において、未処置の創傷での治癒を越える早期のポシティブな効果を提供した。4日目及び6日目において、虚血性創傷における治癒の比率は、通常の創傷及びMSCで治療した虚血性創傷の両方における治癒よりも有意に遅かった。8日目において、3グループ全てにおける創傷は完全な治癒にほぼ達しており、平均創傷面積は有意には違わなかった。10日目において、全ての創傷が外観上は治癒したように見えた。表1:創傷面積の統計分析有意性P<0.053つの処置グループについての平均創傷面積と外科処置後の日数のグラフを図2に示す。本発明の好ましい態様を示し、記載してきたが、より広い特徴において、本発明から逸脱することなく多くの変更及び修正がなされてもよいことは、当業者にとって明らかであろう。そのため、添付した特許請求の範囲は、発明の真の精神及び範囲内に収まるものとしてそのような変更及び修正の全てに及ぶことを意図されている。"