"aβigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖ドメイン;bMMP基質;及び、cRGDを含むペプチドを含む融合ペプチド。前記bMMP基質は、MMP1基質、MMP2基質、MMP3基質、MMP7基質、MMP8基質、MMP9基質、及びMMP12基質、MMP13基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質である第1項記載のペプチド。adhFas1ドメインと、bMMP基質間にリンカーペプチドを追加して含み、この時前記リンカーペプチドは、1乃至5個のアミノ酸で構成された第1項記載のペプチド。bMMP基質と、cRGDを含むペプチド間にリンカーペプチドを追加して含み、この時前記リンカーペプチドは、1個乃至5個のアミノ酸で構成されたものである第1項記載のペプチド。adhFas1ドメインは、配列番号1又は3のアミノ酸配列で表示されることを特徴とする第1項記載のペプチド。前記bMMP基質は、配列番号5乃至8のアミノ酸配列で表示されることを特徴とする第1項記載のペプチド。前記cRGDを含むペプチドは、配列番号9又は10のアミノ酸配列で表示されることを特徴とする第1項記載のペプチド。前記ペプチドは、配列番号11乃至17で表示されるアミノ酸配列を含むことを特徴とする第1項記載のペプチド。リンカーペプチドは、LE又はEFであることを特徴とする第2項記載のペプチド。リンカーペプチドは、VD又はVDGであることを特徴とする第2項記載のペプチド。第1項乃至第9項のペプチドを符号化するポリヌクレオチド。前記ポリヌクレオチドは、配列番号18乃至24の配列で表示される塩基配列を含むことを特徴とする第10項記載のポリヌクレオチド。プロモータ及びこれと作動可能に連結された第7項のポリヌクレオチドを含むベクター。第12項のベクターで形質転換された宿主細胞。第1項乃至第9項のいずれかに記載のペプチドを有効成分として含む炎症性疾患の予防及び治療用薬学的組成物。前記炎症性疾患は、浮腫、炎症性腸疾患、腹膜炎、蜂窩織炎、膵臓炎、骨髄炎、ショックを誘発するトラウマ、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、包嚢性繊維腫、急性気管支炎、慢性気管支炎、急性細気管支炎、慢性細気管支炎、骨関節炎、痛風、脊椎炎、硬直性脊椎、ライタスシンドローム、乾癬性関節炎、炎症性腸疾患を同伴した脊椎炎、青少年関節症、青少年交錯関節症、反応性関節症、感染性関節炎、感染後関節炎、リン菌関節炎、結核関節炎、ウィルス関節炎、真菌関節炎、梅毒関節炎、ライム病、脈管炎、シンドロームを同伴した関節炎、多発性動脈炎、過敏性脈管炎、ウェグナー肉芽腫症、多発性筋肉痛、巨大細胞動脈炎、カルシウム結晶蓄積関節炎、胃痛風、関節性関節炎、滑液嚢炎、テニスエルボー、神経性関節炎、関節血症、ヘーノホシェーンライン紫斑病、多心性膜内組織球症、異常血色素症、ヘモグロビン痛、家族性地中海熱、バセット病、全身性紅斑性嚢瘡、多発性硬化症、肺血症、肺血症ショック、急性呼吸器痛症シンドローム、複合器官異常、慢性閉鎖性肺疾患、リウマチ性性関節炎、急性呼吸不全症候群がある。さらに、炎症性疾患は急性及び慢性湿疹、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、皮膚炎性脱毛、剥落性皮膚炎、日光性皮膚炎及び乾癬からなる群より選ばれた第15項記載の薬学的組成物。第12項のベクターを有効成分として含むリウマチ性関節炎の予防及び治療用薬学的組成物。第1項のペプチドをこれを必要とする個体に有効量で投与することを特徴とするリウマチ性関節炎の予防及び治療方法。第12項のベクターをこれを必要とする個体に有効量で投与することを特徴とするリウマチ性関節炎の予防及び治療方法。治療剤に使用される第1項のペプチド。炎症性疾患の予防及び治療剤を製造するための第1項のペプチドの用途。リウマチ性関節炎の予防及び治療剤を製造するための第12項のベクターの用途。ここに、本発明者等は、dhFas1の治療効率を高めるための方法に関して研究を重ねる中、dhFas1断片にRGDを含むアミノ酸鎖を連結させる場合、その効果がはっきり増加はしなかったが、このmdhFas1とRGDペプチドをマトリクスメタロプロテナーゼMMPmatrixmetalloproteinaseにより分解される5個乃至10個のアミノ酸MMP基質で構成されたアミノ酸鎖で連結して、関節炎部位から選択的に切断されるようにする場合、関節炎治療効果が並外れて増加することを究明した。さらに、前記MMP基質はMMP1又はMMP3により分解される基質MMP1基質、MMP3基質又はMMP共通基質の場合、その効果が一層優れていることを見出し本発明を完成した。従って、本発明の目的はβigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドを提供することである。さらに、本発明の他の目的は、前記ペプチドを符号化するポリヌクレオチドを提供することである。さらに、本発明の他の目的は、プロモータ及びこれと作動可能に連結された前記ポリヌクレオチドを含むベクターを提供することである。さらに、本発明の他の目的は、前記ベクターで形質転換された宿主細胞を提供することである。さらに、本発明の他の目的は、前記ペプチドを有効成分として含むリウマチ性関節炎の予防及び治療用薬学的組成物を提供することである。さらに、本発明の他の目的は、前記ベクターを有効成分として含むリウマチ性関節炎の予防及び治療用薬学的組成物を提供することである。さらに、本発明の他の目的は、βigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドをこれを必要とする個体に有効量で投与することを特徴とするリウマチ性関節炎の予防及び治療方法を提供することである。さらに、本発明の他の目的は、プロモータ及びこれと作動可能に連結されたβigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドを符号化するポリヌクレオチドを含むベクターをこれを必要とする個体に有効量で投与することを特徴とするリウマチ性関節炎の予防及び治療方法を提供することである。さらに、本発明の他の目的は、βigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドのリウマチ性関節炎の予防及び治療剤を製造するための用途を提供することである。さらに、本発明の他の目的は、プロモータ及びこれと作動可能に連結されたβigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドを符号化するポリヌクレオチドを含むベクターのリウマチ性関節炎の予防及び治療剤製造する為の用途を提供することである。前記のような目的を達成するために、本発明はβigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドを提供する。本発明の他の目的を達成するために、本発明は前記ペプチドを符号化するポリヌクレオチドを提供する。本発明の他の目的を達成するために、本発明はプロモータ及びこれと作動可能に連結された前記ポリヌクレオチドを含むベクターを提供する。本発明の他の目的を達成するために、本発明は前記ベクターで形質転換された宿主細胞を提供する。本発明の他の目的を達成するために、本発明は前記ペプチドを有効成分として含むリウマチ性関節炎の予防及び治療用薬学的組成物を提供する。本発明の他の目的を達成するために、本発明は前記ベクターを有効成分として含むリウマチ性関節炎の予防及び治療用薬学的組成物を提供する。本発明の他の目的を達成するために、本発明はβigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドを、これを必要とする個体に有効量で投与することを特徴とするリウマチ性関節炎の予防及び治療方法を提供する。本発明の他の目的を達成するために、本発明はプロモータ及びこれと作動可能に連結されたβigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドを符号化するポリヌクレオチドを含むベクターを、これを必要とする個体に有効量で投与することを特徴とするリウマチ性関節炎の予防及び治療方法を提供する。本発明の他の目的を達成するために、本発明はβigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドのリウマチ性関節炎の予防及び治療剤を製造するための用途を提供する。本発明の他の目的を達成するために、本発明はプロモータ及びこれと作動可能に連結されたβigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドを符号化するポリヌクレオチドを含むベクターのリウマチ性関節炎の予防及び治療剤を製造するための用途を提供する。以下、本発明を詳細に説明する。本発明は、βigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドを提供する。本発明のペプチドは、βigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたことを特徴とする。βigh3は、ヒトの黒色素細胞腫細胞、哺乳動物の上皮細胞、角質形成細胞及び肺繊維芽細胞等を含む、多様な種類の細胞からTGFβ1により誘導される細胞の基質蛋白質である、βigh3はRGDモチーフと共に、相同性を有する4個の繰返された内部ドメインが含まれているが、このドメインは哺乳類、昆虫、ウニ、植物、酵母及び細菌を含む多様な種類の分泌蛋白質、又は膜蛋白質から極めて保存的な配列として発見される。前記保存的配列を含む蛋白質等には、ペリオスチン、ファスシクリンI、ウニHLC2、藻類のアルガルCAM及びマイコバクテリウムMPB70等が含まれるものとして究明された。このような蛋白質から保存的に発見される相同性ドメインfas1ドメインと称すは110乃至140個のアミノ酸で構成され、特に相同性が高い約10個のアミノ酸で構成された二つの枝H1及びH2を含んでいる。dhFas1はβigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖を意味する。βigh3蛋白質はリガンド認識部位であるRGDモチーフと、4個の内部繰返しドメインのfas1ドメインを含んでいる。前記fas1ドメインの内、四番目のドメインにはα3β1インテグリンと相互作用するモチーフが存在し、チロシンーヒスチジンアミノ酸配列を含み、繊維芽細胞の付着を媒介するYHモチーフが存在する。よって、四番目のfas1ドメインには相同性が極めて高い約10個のアミノ酸からなるH1及びH2がその内部に存在する。本発明のdhFas1は広く知られたβigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖であればどんなものでも可能であり、好ましくはマウス由来のdhFas1又はヒト由来のdhFas1でもあって、さらに、好ましくは配列番号1又は配列番号3のアミノ酸配列で表示されるものでもある。dhFas1は以前の方法大韓民国特許公開公報1020040086708により製作することもできる。本発明のRGDを含むアミノ酸鎖は、インテグリンを遮断する効果を有するRGD配列を含むものであればどんなものでも可能であって、好ましくは配列番号9又は配列番号10のアミノ酸配列で表示されるアミノ酸鎖でもあり得る。MMP基質とは、マトリクスメタロプロテナーゼMMPmatrixmetalloproteinaseにより分解される短いアミノ酸鎖を意味する。リウマチ性関節炎で滑膜細胞はMMPとカテプシンと言う酵素分泌を通じて、軟骨基質を破壊するものとして知られている。このようなMMPは約19種類の多様な酵素で構成され、大きくコラゲナーゼ、ゼラチナーぜ、ストロメライシン、膜性MMPの4種に区分され、コラゲナーゼ1、コラゲナーゼ2、コラゲナーゼ3が原形コラーゲンを破壊する主要コラゲナーゼとして知られている。本発明のMMP1基質は、MMP1により分解される短いアミノ酸鎖を意味する。MMP3基質はMMP3により分解される短いアミノ酸鎖を意味する。MMP共通基質はMMP1、MMP2及びMMP3により分解される短いアミノ酸鎖を意味する。本発明のMMP1基質、MMP3基質又はMMP共通基質は、前記dhFas1とインテグリンを遮断する効果を有するRGDを含むアミノ酸鎖間に存在して炎症の進行が始まるところで分解され、前記dhFas1とRGDを含むアミノ酸鎖の付着効率を増加させるものであれば、如何なる構成のアミノ酸鎖も可能であるが、好ましくはQGIA、LGLW又はLGIAで表示されるアミノ酸配列を含むアミノ酸鎖でもあって、より好ましくはGPQGIAG、GPLGLWARG又はGPLGIAGのアミノ酸配列を含むアミノ酸鎖でもあり、最も好ましくは配列番号6乃至8のアミノ酸配列で表示されるアミノ酸鎖でもあり得る。本発明のdhFas1MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチド以下、‘dhFas1MMP基質RGD構造ペプチド’と称す、さらに、mdhFas1、MMP1基質、及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドは、MFK24に;mdhFas1、MMP3基質、及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドはMFK27に;mdhFas1、MMP共通基質、及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドは、MFK25に;hsdhFas1、MMP1基質、及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドは、hsFJ24に;hsdhFas1、MMP3基質、及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドは、hsFJ27に;hsdhFas1、MMP共通基質、及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドはhsFJ25に命名するは、好ましくはRGDを含むアミノ酸鎖がRGDSP又はQERGDSLA配列を含むアミノ酸鎖か、又はMMP基質がGPQGIAG、GPLGLWARG又はGPLGIAGの配列を含むアミノ酸鎖でもあり得る。本発明のdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドは、好ましくは前記βigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖と、前記MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質間に、1乃至5個のアミノ酸で構成されたリンカーを含むペプチド、又は前記MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質と、前記RGDを含むアミノ酸鎖間に1乃至5個のアミノ酸で構成されたリンカーを含むことを特徴とするペプチドでもあり得る。前記βigh3の四番目のfas1ドメインからH1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖と、前記MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質間に含まれる、本発明の1乃至5個のアミノ酸で構成されたリンカーは、MMP基質とRGDを含むアミノ酸鎖を連結する短いペプチドで、その構成は特に制限はされないが、好ましくはVDバリンアスパラギン酸又はVDGバリンアスパラギン酸グライシンでもあり得る。さらに、前記MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質と、前記RGDを含む本発明の1乃至5個のアミノ酸で構成されたリンカーは、MMP基質とRGDを含むアミノ酸鎖を連結する短いペプチドで、その構成は特に制限はされないが、好ましくはLEルシングルタミン酸、又はEFグルタミン酸フェニルアラニンでもあり得る。本発明のdhFas1MMP基質ーRGD構造ペプチドは、より好ましくはRGDを含むアミノ酸鎖がRGDSP又はQERGDSLAで表示されるアミノ酸配列からなるアミノ酸鎖か、又はMMP基質がGPQGIAG、GPLGLWARG又はGPLGIAGのアミノ酸配列からなる、アミノ酸鎖であるペプチドでもあり、最も好ましくは配列番号12乃至17で表示されるアミノ酸配列を有するペプチドでもあり得る。本発明のdhFas1MMP基質ーRGD構造ペプチドは、dhFas1MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びRGDを含むアミノ酸鎖が連結されたペプチドに対して機能的同等物でもあって、好ましくは配列番号12乃至17のアミノ酸配列を有するペプチドと機能的同等物を含む。前記機能的同等物とは、アミノ酸の付加、置換又は欠失の結果、dhFas1MMP基質ーRGD構造ペプチド、好ましくは配列番号12乃至17のアミノ酸配列と、少なくとも60、好ましくは70より好ましくは80以上、最も好ましくは90以上の配列相同性を有するものにして、本発明のdhFas1MMP基質ーRGD構造ペプチド、好ましくは配列番号12乃至17のアミノ酸配列を有するペプチドと、実質的に同質の活性を示すペプチドを意味する。ここで‘実質的に同質の活性’とは、リウマチ性関節炎の予防及び治療を意味する。前記機能的同等物には、例えば、dhFas1MMP基質ーRGD構造ペプチド、好ましくは配列番号12乃至17のアミノ酸配列を有するペプチドのアミノ酸の内、一部が置換されるか、欠失又は付加されたアミノ酸の配列変形体が含まれる。アミノ酸の置換は好ましくは保存的置換である。天然に存在するアミノ酸の保存的置換の例には、脂肪族アミノ酸群、疎水性アミノ酸群、芳香族アミノ酸群、酸性アミノ酸群、塩基性アミノ酸群及びアミノ酸群の各アミノ酸群内部の同一なアミノ酸の置換でもあり得る。アミノ酸の欠失は好ましくは本発明のdhFas1MMP基質ーRGD構造ペプチド、好ましくは配列番号12乃至17のアミノ酸配列を有するペプチドの活性に直接関与しない部分に位置したアミノ酸の欠失を意味する。アミノ酸の付加は遺伝子操作過程で必要な制限酵素部位又はペプチド精製等のためのhistonetag等を含むペプチドの活性に影響を及ぼさない範囲でアミノ酸が付加されることを意味する。さらに、前記機能的同等物の範囲には、dhFas1MMP基質ーRGD構造ペプチド、好ましくは配列番号12乃至17のアミノ酸配列を有するペプチドの基本骨格及びこれの生理活性を維持しながらその一部化学構造が変形されたペプチド誘導体も含まれる。例えば、本発明のペプチドの安定性、貯蔵性、揮発性又は溶解度等を変更させるための構造変更及び生理活性を維持しながらGFPのような他の蛋白質と融合で作られた融合蛋白質等がこれに含まれる。本発明のペプチドを得るための遺伝子は、如何なる供給源のゲノムDNA又はcDNAからも分離可能で、好ましくはヒト又はマウスのcDNA又はゲノムライブラリーから分離することができる。本発明のペプチドを符号化する遺伝子を獲得するための一般的な方法は従来技術によく表れている参照:SambrookFitscManatisMolecularCloningALaboratoryMannualSecondEdition。さらに、如何なる動物の細胞でも、本発明のペプチドを符号化する遺伝子の分子クローニングのための核酸供給源として提供できる。DNAはクローンされたDNAから公知の技術により獲得することができ、好ましくは化学合成、cDNAクローニング又はゲノムDNAのクローニング、又はそれらの断片のクローニング又は望む細胞から精製された断片のクローニングにより、蛋白質を高水準に発現する細胞から製造されたcDNAライブラリーから獲得することができる[SambrookSambrookJFritschEFandManiatisTMolecularCloningALaboratoryManual2ndedColdSpringHarborLaboratoryColdSpringHarborNYbySilhavyTJBennanMLandEnquistLWExperimentswithGeneFusionsColdSpringHarborLaboratoryColdSpringHarborNYandbyAusubelFMetalCurrentProtocolsinMolecularBiologypublishedbyGreenePublishingAssocandWileylnterscience]。ゲノムDNAからクローニングされた遺伝子は、符号化域に付加されて調節域とイントロンDNA域を含む。cDNAからクローニングされた遺伝子はイントロン配列を含まない。供給源がなんであろうと、遺伝子は遺伝子の伝達のための適合したベクターで分子的にクローニングされなければならない。本発明のペプチド等は、当分野の熟練者が公知の方法により製造することができる。このようなペプチドは、より大きいポリペプチドの一部であって、本発明のペプチド配列を符号化するポリヌクレオチドを発現させ、原核又は真核細胞で生成させることができる。他の方法では、このようなペプチドは化学的方法により合成することができる。組換え宿主内の異種性蛋白質の発現、ポリペプチドの化学的合成及び試験管内転写のための方法は当分野において既に公知であり、文献参照文献:ManiatisetalMolecularCloningALaboratoryManual2ndEdColdSpringHarborNYBergerandKimmelMethodsinEnzymologyVolume152GuidetoMolecularCloningTechniquesAcademicPressIncSanDiegoCalifMerrifieldJJAmChemSoc91501ChaikenIMCRCCritRevBiochem11255KaiseretalAnnRevBiochem57957andOffordRESemisyntheticProteinsWileyPublishingに追加記載されている。一方、本発明はプロモータ及びこれと作動可能に連結されたdhFas1、MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを符号化するポリヌクレオチドを提供する。前記ポリヌクレオチドは、本発明のdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを符号化するものであれば、制限なく使用することができ、DNA、cDNA及びRNA配列を全て含む。好ましくは前記RGD構造はRGDSP又はQERGDSLAを含むアミノ酸配列からなるアミノ酸鎖でもあって、より好ましくはRGDSP又はQERGDSLAで構成されたアミノ酸配列からなるアミノ酸鎖でもある。前記MMP1基質はMMP1により分解されるMMP基質であって、MMP3基質はMMP3により分解される基質であって、MMP共通基質はMMP123全てにより分解されるMMP基質である。前記本発明のMMP1基質、MMP3基質又はMMP共通基質は、前記dhFas1とインテグリンを遮断する効果を有するRGDを含むアミノ酸鎖間に存在して炎症進行が始まるところで分解され、前記dhFas1とRGDを含むアミノ酸鎖の付着効率を増加させるものであれば如何なる構成のアミノ酸鎖も可能であるが、より好ましくはQGIALGLW又はLGIAで表示されるアミノ酸配列を含むアミノ酸鎖でもあり、より好ましくはGPQGIAG、GPLGLWARG又はGPLGIAGのアミノ酸配列を含むアミノ酸鎖である。より好ましくはGPQGIAG、GPLGLWARG又はGPLGIAGで構成されたアミノ酸配列からなるアミノ酸鎖である。最も好ましくは前記ポリヌクレオチドは、配列番号19乃至24の配列で表示される塩基配列を含むものでもあり得る。前記ポリヌクレオチドは天然で分離されるか、又は当業界に公知された遺伝工学的な方法により製造することもできる。一方、本発明はプロモータ及び作動可能に連結されたdhFas1MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びRGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを符号化するポリヌクレオチドを含むベクターを提供する。本発明でベクターとは、適合した宿主内でDNAを発現できる適合した調節配列に作動可能に連結されたDNA配列を含有するDNA製造物を意味する。ベクターはプラスミド、ファージ粒子又は簡単に潜在的ゲノム挿入物でもあり得る。適当な宿主に形質転換されると、ベクターは宿主ゲノムとは関係なく複製して機能できるか、又は一部の場合にゲノムそのものに統合されることもあり得る。プラスミドが現在ベクターの最も一般的に使用される形態であるので、本発明の明細書でプラスミド及びベクターは、たまには相互交換的に使用される。本発明の目的上、プラスミドベクターを利用するのが好ましい。このような目的に使用できる典型的なプラスミドベクターは、a宿主細胞当り数百個のプラスミドベクターを含むように複製が効率的になされるようにする複製開始点、bプラスミドベクターに形質転換された宿主細胞が選抜されるようにする抗生剤耐性遺伝子及び、c外来DNA切片が挿入できる制限酵素切断部位を含む構造を有している。適切な制限酵素切断部位が存在しなくとも、通常の方法による合成オリゴヌクレオチドアダプター又はリンカーを使用すればベクターと外来DNAを容易にライゲーションすることができる。前記プロモータとは、特定の宿主細胞で作動可能に連結された核酸配列の発現を調節するDNA配列を意味し、作動可能に連結されるとは、一つの核酸断片が他の核酸断片と結合されて、その機能又は発現が他の核酸断片により影響を受けることを意味する。よって、転写を調節するための任意のオペレータ配列、適合したmRNAリボソーム結合部位をコーティングする配列及び転写及び解読の終結を調節する配列を追加して含み得る。前記プロモータは全ての時間帯に常時的に目的遺伝子の発現を誘導するプロモータ又は特定した位置、時期に目的遺伝子の発現を誘導するプロモータを使用することができる。本発明のベクターはプラスミドベクター、コスミドベクター、バクテリオファージベクター及びウィルスベクター等を含むがこれに制限はされない。適合したベクターは発現ベクターにして、プラスミド、オペレータ、開始コードン、終結コードン、ポリアデニル化シグナル及びインハンサーのような発現調節エレメント等を含むことができ、目的によって多様に製造することができる。本発明のベクターは本発明のペプチドを符号化する核酸を宿主細胞へ伝達するために使用される全ての手段であって、好ましくはベクターはレトロウィルス、ヘルペスウィルス、アデノウィルス及びアデノ関連ウィルスのようなウィルスベクターである。従って、本発明のペプチドを符号化する遺伝子はウィルスベクターを使用して、又は直接的なDNA導入を通じて生体内、生体外又は試験管内で導入させる。標的組織内での発現は突然変異ベクターをウィルスベクター又は受容体リガンド等を利用して特定細胞に対して標的化するか、又は組織特異的プロモータを使用するか、又はその二つの方法全てを使用して実施できる。DNAウィルスベクターは弱毒化された、又は欠損型DNAウィルス、例えば、これに制限はされないが、単純疱疹ウィルス、パピロマウィルス、エブスタインバルウィルス、アデノウィルス、アデノ関連ウィルス、バクシニアウィルス等を含む。ウィルス遺伝子が全部又は殆ど全部欠失された欠損型ウィルスが好ましい。欠損型ウィルスは細胞に導入された後には、複製能がなく生産的なウィルス感染を誘導することができない。従って、欠損型ウィルスベクターを使用すれば、ベクターが他の細胞を感染させる心配もなく、特定の一部域にある細胞に投与することができる。従って、特定組織は特異的に標的化することができる。一方、本発明で使用された標準組換えDNA及び分子クローニング技術は、当分野で広く公知されており、次の文献に記載されているSambrookJFritschEFandManiatisTMolecularCloningALaboratoryManual2ndedColdSpringHarborLaboratoryColdSpringHarborNYbySilhavyTJBennanMLandEnquistLWExperimentswithGeneFusionsColdSpringHarborLaboratoryColdSpringHarborNYandbyAusubelFMetalCurrentProtocolsinMolecularBiologypublishedbyGreenePublishingAssocandWileylnterscience。一方、本発明は、本発明のベクターで形質転換された宿主細胞を提供する。宿主細胞は挿入された配列の発現を調節するか、又は好ましい特定方式で遺伝子生成物を進行させることを選択することができる。相異した宿主細胞は蛋白質の解毒及び解毒後プロセシングと変形に対する特徴的で特異的な機構を有している。適合した細胞株又は宿主システムでは、発現された異種蛋白質の好ましい変形及びプロセシングを提供することを選択することができる。酵母における発現は生物学的活性生成物を生産することができる。真核細胞における発現は天然ホールディングの可能性を増加することができる。本発明のベクターを安定で連続的にクローニング及び発現することができる宿主細胞は、当業界に公知の如何なる宿主細胞でも利用することができ、例えば、EcoliJM109EcoliBL21DEEcoliDH5αEcoliRR1EcoliLE392EcoliBEcoliX1776EcoliW3110等を使用することができ、さらに、アクロバクテリウムA4のようなアクロバクテリウム属菌株、バシラスサブチリスのようなバシリー、サルモネラチフィミュリム又はセラチアマルケセンスのような、さらに異なる腸内細菌及び多様なシュードモナス属菌株が宿主細胞として利用することができる。さらに、本発明のベクターを真核細胞に形質転換させる場合には、宿主細胞としてイースト、昆虫細胞及びヒトの細胞例えば、CHO細胞株W138BHKCOS7293HepG23T3RIN及びMDCK細胞株等が利用できる。本発明で宿主細胞は好ましくはEcoliでもあり得る。ベクターを宿主細胞内に伝達して宿主細胞を形質転換させる方法は、公知の方法であれば如何なるものでも可能であり、特に制限はされない。例えば、リン酸カルシウム沈殿法calciumphosphateprecipitation、DEAEdextran法、電気穿孔法、直接微細注入法、DNAローディングリポソーム法、リフォフェクタミンDNA複合体法、細胞音波粉砕法、高速微細噴射を利用した遺伝子爆撃法、多陽イオン法及び受容体媒介形質転移法により形質転換することができる。この技術等の内、一部は生体内又は生体外使用のために改良することができる。宿主細胞内に注入されたベクターは宿主細胞内で発現することができ、このような場合には大量の組換えペプチド又は蛋白質を得るようになる。例えば、ベクターがlacプロモータを含む場合には、宿主細胞にIPTGを処理して遺伝子発現を誘導することができる。本発明の方法において、形質転換された宿主細胞の培養は当業界で一般的に利用される培地を利用して実施することができる。例えば、形質転換体が原核細胞例えば、Ecoliの場合、LB培地を利用して形質転換体を培養することができる。形質転換体が動物細胞の場合には、例えば、EaglesminimumessentialmediumEagleHScience130432を利用して形質転換体を培養することができる。形質転換体の多様な培養方法は当業者に公知されており、SambrooketalMolecularCloningALaboratoryManualColdSpringHarborLaboratoryPressに開示されていて、この文献は本明細書に参照として挿入される。本発明のペプチドはリウマチ性関節炎を治療する効能が優れている。本発明の炎症性疾患には、これに限定はされないが、浮腫、炎症性腸疾患、腹膜炎、蜂窩織炎、膵臓炎、骨髄炎、ショックを誘発するトラウマ、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、包嚢性繊維腫、急性気管支炎、慢性気管支炎、急性細気管支炎、慢性細気管支炎、骨関節炎、痛風、脊椎炎、硬直性脊椎、ライタスシンドローム、乾癬性関節炎、炎症性腸疾患を同伴した脊椎炎、青少年関節症、青少年交錯関節症、反応性関節症、感染性関節炎、感染後関節炎、リン菌関節炎、結核関節炎、ウィルス関節炎、真菌関節炎、梅毒関節炎、ライム病、脈管炎、シンドロームを同伴した関節炎、多発性動脈炎、過敏性脈管炎、ウェグナー肉芽腫症、多発性筋肉痛、巨大細胞動脈炎、カルシウム結晶蓄積関節炎、胃痛風、関節性関節炎、滑液嚢炎、痩果炎、テニスエルボー、神経性関節炎、関節血症、ヘーノホシェーンライン紫斑病、多心性膜内組織球症、異常血色素症、ヘモグロビン痛、家族性地中海熱、バセット病、全身性紅斑性嚢瘡、多発性硬化症、肺血症、肺血症ショック、急性呼吸器痛症シンドローム、複合器官異常、慢性閉鎖性肺疾患、リウマチ性性関節炎、急性呼吸不全症候群がある。さらに、炎症性疾患は急性及び慢性湿疹、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、皮膚炎性脱毛、剥落性皮膚炎、日光性皮膚炎及び乾癬等がある。好ましくは、本発明の炎症性疾患はリウマチ性性関節炎である。このような本発明組成物の特徴は実施例で確認される。本発明の一実施例では本発明のmdhFas1MMP基質RGD構造ペプチド、mdhFas1,hsdhFas1及びmdhFas1RGD構造ペプチドを製作して滑膜細胞付着及び移住抑制効能を測定した。その結果、MFK24及びMFK25の場合、既存のYH18モチーフ、mdhFas1及び本発明のmdhFas1構造変形ペプチドに比べて細胞付着及び移住抑制効果が並外れて優れたことを確認した。さらに、mdhFas1とRGDSPを各々又は混合して同一な細胞付着試験を実施して、MFK24と比較した結果、MFK24が最も卓越な細胞付着抑制効果を示すことを確認した実施例3,比較例1及び比較例2参照。本発明の他の一実施例では、コラーゲン誘導関節炎マウスモデルルから本発明のペプチドの関節炎治療効果を確認した。本発明のペプチドを一定期間投与しながら関節炎指数を測定して対照群と比較した結果、対照群のmdhFas1及びMFK12の場合、30mgkg体重を投与した群から関節炎抑制効果が表れ、MMP2により分解されるMMP2基質を含むmdhFas1MMP2基質RGD構造ペプチド以下、MFK23と称すの場合、関節炎抑制効果が未備ではあるが、MMP1により分解されるMMP1基質を含む本発明のペプチドの場合、01mgkg体重を投与した群でも優れた関節炎抑制効果が持続されることを確認した。さらに、実験対象マウスの脚組織を検査した結果、本発明のペプチドを投与した群は01mgkg体重を投与した群でも滑膜細胞の増殖が抑制され、軟骨及び骨の形態破壊程度が減少することを観察することができ、炎症媒介物質の量を測定した結果、本発明のペプチドを投与した群は、01mgkg体重を投与した場合にも効果的に炎症媒介物質を抑制することを確認した。MFK12の場合、10mgkg体重を投与した群では関節部位が破壊され、滑膜細胞の過多増殖が観察されて、血管新生と細胞付着蛋白質の発現が対照群くらい増加されていることを確認し、30mgkg体重を投与した場合、治療効果が多少表れることを確認した。炎症媒介物質測定結果からも、MFK12は10mgkg体重を投与した群は対照群と比較して炎症媒介物質発現量に有意的差がなく、30mgkg体重を投与した場合、発現量減少が表れることを確認した実施例4、比較例3及び比較例4参照。これで本発明のペプチドは既存のペプチドに比べて関節炎治療効果が100倍以上優れていることを確認した。従って、本発明のdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドは、dhFas1、MFK12に比べて極めて少ない投与量でもリウマチ性関節炎に対する効果が優れたことを確認した。従って、本発明は前記dhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを有効成分として含むリウマチ性関節炎の予防及び治療用薬学的組成物を提供する。本発明の組成物はβigh3の四番目のfas1ドメインから、H1及びH2部位を除去したアミノ酸鎖MMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質;及びさらに、RGDを含むアミノ酸鎖が順に連結されたペプチドを有効成分として含むことを特徴とする。MP1基質はMMP1により分解される短いアミノ酸鎖を意味する。MMP3基質はMMP3により分解される短いアミノ酸鎖を意味する。MMPconsensus基質はMMP1、MMP2及びMMP3により分解される短いアミノ酸鎖を意味する。本発明のMMP1基質、MMP3基質及びMMP共通基質からなる群より選ばれたMMP基質は好ましくは、QGIALGLW又はLGIAを含むアミノ酸配列からなるアミノ酸鎖でもあり、より好ましくはGPQGIA,GPLGLWARG又はGPLGIGで構成されたアミノ酸配列からなるアミノ酸鎖でもある。前記RGDを含むアミノ酸鎖はRGDSP又はQERGDSLAで表示されるアミノ酸配列からなるアミノ酸鎖であることを特徴とする、リウマチ性関節炎の予防及び治療用薬学的組成物でもある。より好ましくは前記ペプチドが配列番号12乃至17で表示されるアミノ酸配列を有するペプチドでもあって、これの機能的同等物も含む。本発明のdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを利用する場合、dhFas1を利用する場合に比べて、少ない用量でもより優れた効能を表すことができ、その断片の長さが比較的短く蛋白質間で互いに固まらないので、剤形化する過程で調節が遥かに容易で薬剤伝達の面でも有利である。さらに、前記dhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを符号化するポリヌクレオチドを含むベクターを生体内で発現させ、リウマチ性関節炎の予防及び治療に有効な物質を生産できるので、本発明は前記dhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを符号化するポリヌクレオチドを含むベクターを有効成分として含むリウマチ性関節炎の予防及び治療用薬学的組成物を提供する。本発明に伴う組成物が適用できる疾患はリウマチ性関節炎である。本発明に伴う薬学的組成物は、dhFas1MMP基質RGD構造ペプチド、又は前記dhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを符号化するポリヌクレオチドを含むベクターを単独で含有するか、又は一つ以上の薬学的に許容される担体、賦形剤又は希釈剤を追加して含有することができる。薬学的に許容される担体には、例えば、経投与用担体又は非経口投与用担体を追加して含むことができる。経投与用担体はラクトース、澱粉、セルロース誘導体、マグネシウムステアリン酸、ステアリン酸等を含み得る。従って、ペプチド製剤に対する経投与用に使用される多様な薬剤伝達物質を含むことができる。さらに、非経口投与用担体は水、適合したオイル、食塩水、水性グルコース及びグリコール等を含むことができて、安定化剤及び保存剤を追加して含むことができる。適合した安定化剤には、亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸ナトリウム又はアスコルビン酸のような抗酸化剤がある。適合した保存剤にはベンズアルコニウムクロライド、メチル又はプロピルパラベン及びクロロブタノールがある。その他の薬学的に許容される担体には、下記の文献に記載されていることを参考にすることができるRemingtonsPharmaceuticalSciences19thedMackPublishingCompanyEastonPA1995。本発明の組成物はヒトを初めとする哺乳動物に如何なる方法を用いてでも投与することができる。例えば、経又は非経口的に投与することができる。非経口的な投与方法にはこれに限定はされないが、静脈内、筋肉内、動脈内、骨髄内、境膜内、心臓内、経皮、皮下、腹腔内、鼻腔内、腸管、局所、舌下又は直腸内投与でもあり得る。本発明の薬学的組成物は上述した通り、投与経路によって経口投与用又は非経口投与用製剤に剤形化することができる。経投与用製剤の場合に、本発明の組成物は、粉末、顆粒、錠剤、丸剤、糖衣錠剤、カプセル剤、液剤、ゲル剤、シロップ剤、スラリー剤、懸濁液等で当業界に公知された方法を利用して剤形化することができる。例えば、経用製剤は活性成分を固体賦形剤と配合した後、これを粉砕して適合した補助剤を添加して、顆粒混合物に加工することにより、錠剤又は糖衣製剤を収得することができる。適合した賦形剤の例には、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール及びマルチトール等を含む糖類と、トウモロコシ澱粉、小麦澱粉、米澱粉、及び馬鈴薯澱粉等を含む澱粉類、セルロース、メチルセルロース、ナトリウム、カルボキシメチルセルロース及びヒドロキシプロフィールメチルセルロース等を含むセルロース類、ゼラチン、ポリビニルピロリドン等のような充填剤が含まれることもある。さらに、場合によっては架橋結合ポリビニルピロリドン、寒天、アルギン酸又はナトリウムアルギナート等を崩解剤として添加することができる。さらには、前記薬学的組成物は抗凝集剤、潤滑剤、湿潤剤、香料、乳化剤及び防腐剤等を追加して含むことができる。非経口投与用製剤の場合には、注射剤、クリーム剤、ローション剤、外用軟膏剤、オイル剤、保湿剤、ゲル剤、エアロゾル及び鼻腔吸込み剤の形態で当業界に公知された方法で剤形化することができる。これらの剤形は全ての製薬化学に一般的に公知された処方箋である文献に記載されている。本発明組成物のdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドの総有効量は、単一投与量で患者に投与することができ、多重投与量で長期間投与される分割治療方法により、投与することができる。本発明の薬学的組成物は疾患の程度により、有効成分の含量を異にすることができる。好ましくは本発明の組成物のdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドの好ましい用量は1日当り患者の体重1kgにつき、約001μg乃至1000mg、最も好ましくは、01μg乃至100mgでもあり得る。しかし、前記dhFas1MMP基質RGD構造ペプチドの用量は薬学的組成物の投与経路及び治療回数ばかりでなく、患者の年齢、体重、健康状態、性別、疾患の重症度、食餌及び排泄率等多様な要因等を考慮して患者に対する有効投与量が決定されるので、このような点を考慮することにより、当分野の通常の知識を有する者であれば、前記dhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを、リウマチ性関節炎の予防及び治療剤としての特定した用途に伴う適切な有効投与量を決定することができる。本発明に伴う薬学的組成物は本発明の効果を示す限りその剤形、投与経路及び投与方法に特に制限はされない。従って、本発明のdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドは、リウマチ性関節炎の予防及び治療用薬学的組成物は、リウマチ性関節炎部位の滑膜細胞の付着及び移動を抑制して、リウマチ性関節炎の拡大を防ぎ、免疫細胞の浸潤を抑制させてリウマチ性関節炎の予防及び治療に効果的に使用することができる。以下、本発明を実施例により詳細に説明する。ただし、下記実施例は本発明を例示するのみ、本発明の内容が下記実施例に限定されるものではない。比較例1dhFas1ペプチドを利用した細胞の付着及び移住に及ぼす影響調査ヒトのβigh3のfas1ドメインの構造変形ペプチドを組換えペプチドで合成した以下、hsdhFas1ペプチドと称す図1参照。96ウェルプレートにヒトのβigh3を5ugmlの濃度で入れて、4°Cで14時間コーティングした。DMEM05BSA培地にヒトの繊維芽細胞を入れて、hsdhFas1ペプチドを濃度別に投与して混ぜて、37°Cで30分間培養した後、コーティングされたウェルに分株した。これを2時間培養した後、PBSで洗浄して付着されていない細胞を除去し、細胞内βNアセチルグルコサミニダーゼにより、活性化される基質を添加して,付着された細胞数により発色される程度を吸光度で測定した。hsdhFas1ペプチドの滑膜細胞の付着と、移動遮断効果を検証した結果、図3に示した通り、ヒトの滑膜細胞では濃度依存的にβigh3媒介付着を遮断することを確認した。さらに、マウスβigh3のfas1ドメインの構造変形ペプチドを組換えペプチドで合成して以下、mdhFas1ペプチドと称す、図2参照、マウス細胞株であるNH3T3細胞株を利用して同一の方法でmdhFas1ペプチドの滑膜細胞付着と移動遮断効果を試験した。その結果、図4に示した通り、mdhFas1もhsdhFas1のように、濃度依存的にβigh3媒介付着及び移住を遮断することを確認した。比較例2MFK12ペプチドを利用した細胞の付着及び移住に及ぼす影響調査マウスCIAモデルにおいてmdhFas1治療の際、濃度依存的に関節炎活性を抑制する結果を基に低用量投与時に、高い治療効果を表わせるペプチドをデザインするために、mdhFas1を基本構造としたペプチドに、RGDSPペプチドを結合させたペプチドを製作した以下、MFK12ペプチドと称す図5参照。mdhFas1RGD構造ペプチドをpET29b発現ベクターにクローニングして、これをEcoliBL21BL21pLyss又は、Rosettaに形質転換させた。形質転換された大腸菌を培養してmdhFas1RGD構造ペプチドを発現させた。マウスβigh3の四番目fas1ドメインから、H1及びH2部位を除去したペプチド名称:mdhFas1を符号化する遺伝子をマウスβigh3を鋳型にして、プライマーを利用してPCRで増幅した。増幅された産物をpET29b発現ベクターに制限酵素NdeIとEcoRIを利用してクローニングした後、RGDSPペプチドもまたプライマー、BL21pLyss又はRosettaに形質転換させた。形質転換された大腸菌を培養してmdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを発現させた。mdhFas1を基本構造としたペプチドに、MMP1基質ペプチド及びQERGDSLAペプチドを結合させたペプチドをMFK24ペプチドと称し図8参照、mdhFas1を基本構造としたペプチドにMMP共通基質ペプチド及びQERGDSLAペプチドを結合させたペプチドをMFK25ペプチドとした図9参照。マウスβigh3の四番目fas1ドメインから、H1及びH2部位を除去したペプチドを符号化する遺伝子を、マウスβigh3を鋳型にして、プライマー利用してPCRで増幅した。増幅された産物をpET29b発現ベクターに制限酵素NdeIとEcoRIを利用してクローニングした後、MMP基質sequence用プライマーを鋳型にして相補結合させた後、dhFas1が挿入されたpET29b発現ベクターの制限酵素EcoRIとSalIに挿入させた。QERGDSLAペプチドもまた、プライマーを鋳型にして相補結合させた後、dhFas1MMP基質sequenceが挿入されたpET29b発現ベクターに制限酵素SalIとXHOIに挿入して、これをEcoliBL21DEに形質転換させた。1-2.mdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドの製作及び分離IImdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドをpET29b発現ベクターにクローニングして、これをEcoliBL21、BL21pLyss又はRosettaに形質転換させた。形質転換された大腸菌を培養してmdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを発現させた。mdhFas1を基本構造としたペプチドにMMP3基質ペプチド及びQERGDSLAペプチドを結合させたペプチドをMFK27ペプチドとした図28参照。mdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドの大腸菌での発現を向上させるために、マウスβigh3のsignalpeptidesequenceをマウスβigh3を鋳型にプライマーを利用してPCRで増幅し、増幅された産物をpET29b発現ベクターに制限酵素NdeIとBglIIを利用してクローニングした。四番目のfas1ドメインから、H1及びH2部位を除去したペプチド名称:mdhFas1を符号化する遺伝子を、マウスβigh3を鋳型にして、プライマーを利用してPCRで増幅し、増幅された産物を、前記signalpeptidesequenceが挿入されたpET29b発現ベクターに制限酵素BglIIとEcoRIを利用してクローニングした。MMP3基質用プライマーを鋳型に相補結合させた後、前記signalpeptidesequence及びdhFas1が挿入されたpET29b発現ベクターの制限酵素EcoRIとSalIに挿入させた。QERGDSLAペプチドもまた、プライマーを鋳型にして相補結合させた後、前記signalpeptidesequence、dhFas1及びMMP3基質sequenceが挿入された、pET29b発現ベクターに制限酵素SalIとXhoIに挿入して、これをEcoliBL21DEに形質転換させた。1-3.hsdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドの製作及び分離IhsdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを、pET29b発現ベクターにクローニングし、これをEcoliBL21、BL21pLyes又はRosettaに形質転換させた。形質転換された大腸菌を培養してhsdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを発現させた。hsdhFas1を基本構造としたペプチドに、MMP1基質ペプチド及びQERGDSLAペプチドを結合させたペプチドをhsdhFas1ペプチドと称し図29参照、hsdhFas1を基本構造としたペプチドに、MMP共通基質ペプチド及びQERGDSLAペプチドを結合させたペプチドをhsdhFas1ペプチドとした図30参照。ヒトのβigh3の四番目のfas1ドメインから、H1及びH2部位を除去したペプチド名称:hsdhFas1を符号化する遺伝子をヒトのβigh3を鋳型にして、プライマーを利用してPCRで増幅した。増幅された産物をpET29b発現ベクターに制限酵素NdeIとEcoRIを利用して、クローニングした後、MMP基質sequence用プライマーMMP1基質用プライマーforward5AATTCGGACCACAAGGAATAGCAGGAG3reverse5TCGACTCCTGCTATTCCTTGTGGTCCG3、MMP3基質用プライマーforward5AATTCGGACCACTGGGACTGTGGGCAAGAGGAG3、reverse5AATTCGGACCACTGGGACTGTGGGCAAGAGGAG3、consensus基質用プライマーforward5AATTCGGACCACTGGGAGCAGGAG3、reverseTCGACTCCTGCTATTCCAGTGGTCCG3を鋳型にして、相補結合させた後、dhFas1が挿入されたpET29b発現ベクターの制限酵素EcoRIとSalIに挿入させた。QERGDSLAペプチドもまた、プライマーforward5TCGACCAAGAACGAGGAGATTCTCTGGCAC3、reverse5TCGAGTGCCAGAGAATCTCCTCGTTCTTGG3を鋳型にして、相補結合させた後、dhFas1MMP基質sequenceが挿入されたpET29b発現ベクターに制限酵素SalIとXhoIに挿入してこれをEcoliBL21DEに形質転換させた。1-4.hsdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドの製作及び分離IIhsdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドをpET29b発現ベクターにクローニングし、これをEcoliBL21、BL21pLyss又はRosettaに形質転換させた。形質転換された大腸菌を培養してhsdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを発現させた。hsdhFas1を基本構造としたペプチドにMMP3基質ペプチドを結合させたペプチドをhsFJ27ペプチドと称した図31参照。hsdhFas1MMP3基質RGD構造ペプチドの大腸菌での発現を向上させるために、ヒトのβigh3のsignalpeptidesequenceをヒトのβigh3を鋳型に、プライマーを利用してPCRで増幅した。増幅された産物をpET29b発現ベクターに制限酵素NdeIとBglIIを利用してクローニングした。四番目のfas1ドメインから、H1及びH2部位を除去したペプチド名称:hsdhFas1を符号化する遺伝子をヒトのβigh3を鋳型にして、プライマーを利用してPCRで増幅し、増幅された産物を前記signalpeptidesequenceが挿入されたpET29b発現ベクターに制限酵素BglIIとEcoRIを利用してクローニングした。MMP3基質用プライマーを鋳型にして相補結合させた後、前記signalpeptidesequence及びdhFas1が挿入されたpET29b発現ベクターの制限酵素EcoRSIとSalIに挿入させた。QERGDSLAペプチドもまた、プライマーを鋳型にして相補結合させた後、signalpeptidesequence及びdhFas1及びMMP3基質sequenceが挿入されたpET29b発現ベクターに制限酵素SalIとXhoIに挿入してこれをEcoliBL21DEに形質転換させた。1-5.dhFas1MMP基質RGD構造ペプチドの分離、確認前記実施例1-1乃至1-4から形質転換された菌株を培養して、dhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを過発現させて分離、確認した。過発現させた培養液を4°C、2000gで20分間遠心分離して上層液を捨てて細胞のみをまとめた。100ml培養液当り4ml溶液バッファー500mMNaCl05mMEDTA1mMPMSF1mMDTT1TritonX114を、細胞ペレットに入れて解き放して、超音波で細胞を粉砕した。粉砕した細胞を4°C、13000rpmで15分間遠心分離して上層液を50mlチューブに移した。NiNTAアガロースビードを混ぜて3mlをチューブに移し、付着バッファー500mMNaCl5mMImidazoleで2回洗浄した。洗浄した50の懸濁液状態のNiNTAアガロースビードに上層液を入れて4°Cで撹拌機で2時間結合させた後、コラムに移して4°CでNiNTAアガロースビードを10倍嵩の洗浄バッファー500mMNaCl20mMImidazole01TritonX114を入れて洗浄し、非特異的に結合した蛋白質を除去した。溶出バッファー500mMNaCl300mMImidazoleで本発明のペプチドを抽出した。生産された組換え蛋白質でLPSは、マウス当り1EU以下に維持するために、TritonX114を利用してLPSを除去し、分離されたペプチドからLPS除去用コラムを利用して再度除去した。その結果、図7乃至図9に示した通り、MFK23、MFK24、MFK25、MFK27、HsFJ24、HsFJ25及びHsFJ27が過発現され、精製過程を通じて分離されたことを確認した。実施例2mdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドの酵素消化試験MFK24及びMFK25が特定MMP等により切断されるか否かを確認するために、酵素分析と培養分析を行った。2-1.mdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドの酵素消化試験合成されたmdhFas1MMP基質構造変形蛋白質3ugをMMP1、MMP2、MMP3、cathepsinD、cathepsinL、cathepsinK、と共にenzymebufferに混ぜて、37°Cで4時間反応させた。15polyacrylamidegelで電気泳動した後、NitrocelluloseMembraneに移して3BSAが含まれたTBST溶液で、常温で1時間blockingした後、TBST溶液で10分ずつ3回洗浄後、1時間primaryantibodyと反応させた。TBST溶液で10分ずつ3回洗浄後、horseradishperoxidaseが付着したsecondaryantibodyと1時間反応させて、TBST溶液で10分ずつ3回洗浄後、ECLで発色してmdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドの量の変化を確認した。その結果、に示した通り、MFK23はMMP2酵素処理後、濃度依存的に切断されることを確認して、MMP1やMMP3のような他の種類のMMP処理の際には、切断されていないことを確認した。さらに、cysteineproteaseであるカテプシンKL及びD処理時にも切断されていないことを確認した。MFK24の場合、図11に示した通り、MMP1酵素処理後、濃度依存的に切断されることを確認し、MMP2やMMP3のような他の種類のMMP酵素又はカテプシンKL及びD処理時には切断されていないことを確認した。MFK25の場合、図12に示した通り、MMP1、MMP2及びMMP3処理時に、全て濃度依存的に切断されることを確認した。特に、MMP1とMMP3により、よく切断されることを確認した。しかし、システイン蛋白質分解酵素であるカテプシンKL及びD処理時には切断されていないことを確認した。2-2.mdhFas1MMP基質RGD構造ペプチド酵素消化培養分析MFK24が細胞に付着しながら実際MMP1により切断されるか、否かを確認するために、ヒトのRAFLSリウマチ性関節炎がある関節から由来した滑膜細胞にIL1βを処理してMMP1の発現を増幅させて、MFK24を培地に添加して培養した。DMEM10FBS2penicillinstreptomycin培地にヒトの滑膜細胞株を2日間育成後、01ngmlIL1βを添加して24時間刺激を与えた。mdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを1uMで処理して、3時間、6時間刺激後、mdhFas1を認識する抗βigh3抗体と、C末端のhistidinetagを認識する抗histidine抗体を利用してペプチドの量を確認した。その結果、図13に示した通り、抗ヒスチジン抗体を利用した場合が、抗βigh3抗体を利用した場合より、MFK24の量が少なく確認された。従って、MFK24が滑膜細胞から分泌されたMMP1により切断されることを確認した。実施例3mdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドの細胞株機能調節試験3-1.細胞付着試験96ウェルプレートにβigh3を5ugmlの濃度で入れて、4°Cで14時間コーティングした。DMEM05BSA培地にマウス繊維芽細胞を入れて、MFK24又はMFK25を濃度別に投与して混ぜた後、37°Cで30分間培養した後、コーティングウェルに分株した。これを2時間培養した後、PBSで洗浄して付着されていない細胞を除去し、細胞内βNアセチルグルコサミニダーゼにより、活性化される基質を添加して37°Cで1時間培養した。その後グリシンEDTA溶液を添加して、付着された細胞数によって発色される程度を吸光度で測定した。その結果、図14に示した通り、MFK23の場合、5uM以上の濃度で処理したとき、付着を抑制することを確認した。図15及び図16に示した通り、MFK24とMFK25はYH18モチーフ又はmdhFas1を単独で処理するか又は、これを同時に処理する場合に比べて極めて低い濃度でも細胞付着を抑制することを確認した。その結果、図32に示した通り、MFK27の場合、1uM以上の濃度で処理したとき、付着を抑制することを確認した。3-2.細胞移住試験細胞が移動できる大きさの8umの孔を有するトランスウェルのフィルタ下面に、βigh3を4°Cで12時間乃至14時間培養してコーティングした。DMEM05BSA培地にNIH3T3を入れて、MFK24又はMFK25を濃度別に投与して混ぜた後、37°Cで30分間培養した後、コーティングされたウェルの上位チャンバーに接種して7時間かけて37°Cで培養した。その後、パラホルムアルデヒドでフィルタ下面に移動した細胞を固定した後、クリスタルバイオレットを利用して移動した細胞を染色した。滅菌された綿棒で移動せずに上位チャンバーに残った細胞を拭取り、下面に移動した細胞数を顕微鏡で計数した。その結果、図14に示した通り、MFK23の場合、10uM又は30uMを処理した時、抑制効果を示すことを確認した。図15及び図16に示した通り、MFK24とMFK25も細胞移住を抑制することを確認した。mdhFas1とRGSPDアミノ酸鎖RGSPDで構成されたペプチドをそれぞれ、又は混合して同一な細胞付着試験を行いMFK24とその結果を比較した。その結果、図15に示した通り、MFK24は05uM濃度で80以上の高い付着抑制効果を示したことに比べて、mdhFas1は同一濃度で50、RGDSPは0の付着抑制効果を示し、これを同時に処理した場合にも50程度の付着抑制効果を示し、MFK24がmdhFas1とRGSPDに比べて効果的に細胞付着を抑制することを確認した。これでmdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドは、mdhFas1、RGDSP、YH18モチーフに比べてリウマチ性関節炎に対する効果がはるかに優れたことを確認した。実施例4hdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドの細胞株機能調節試験3-1.細胞付着試験96ウェルプレートにβigh3を5ugmlの濃度でいれて、4°Cで14時間コーティングした。DMEM05BSA培地にヒトの繊維芽細胞性滑膜細胞をいれて、HsFJ24、HsFJ25又はHsFJ27を濃度別に投与して混ぜた後、37°Cで30分間培養した後、コーティングウェルに分株した。これを2時間培養した後、PBSで洗浄して付着されていない細胞を除去し、細胞内βNアセチルグルコサミニダーゼにより、活性化される基質を添加して37°Cで1時間培養した。その後グリシンEDTA溶液を添加して、付着された細胞数により発色される程度を吸光度で測定した。その結果、図14に示した通り、MFK23の場合、5uM以上の濃度で処理した時、付着を抑制することを確認した。図33乃至図35に示した通り、HsFJ24、HsFJ25又はHsFJ27の場合、5uM以上の、濃度で処理した時、付着を抑制することを確認した。実施例5mdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドの関節炎治療効果確認5-1.コラーゲン誘導関節炎マウスモデルの製作ヒトのリウマチ性関節炎と類似した特徴を有するCIAマウスモデルは公知の文献andcollagenantibodyinducedarthritisinmiceChondrexRedmondWAに記載された通り下記のように製作された:牛型第2型コラーゲン100ugを、完全にフロイント補助剤と混ぜてマウスの尻尾に皮下接種3週後に、牛型第2型コラーゲン100ugを不完全フロイント補助剤と混ぜてマウスの尻尾に再接種製作して実験に使用した。5-2.mdhFas1MMP基質RGD構造ペプチドを利用したCIAマウスの関節炎治療効果試験CIAマウスを利用してMFK23MFK24の関節炎治療効果を試験した。CIAモデルから関節炎の治療効果を究明するために、牛型第2型コラーゲンを2度目注射した後、関節炎が発生する時点23日目から4週間、毎日MFK23又はMFK24を01mgkg1mgkg体重10mgkg又は体重30mgkg体重の量で、腹腔内にそれぞれ注射した。対照群では同一量のPBSを腹腔投与した。23目から50日目まで毎日臨床的関節炎指数を用いて関節炎の重症度を判定した。判定基準は下記の通りである。0;症状なし、1;一つの関節が浮腫及び軽いedema、2;2個以上の関節の重症度浮腫、3;大部分の関節で甚だしい浮腫、4;脚全体の甚だしい浮腫。その結果、図17に示した通り、MFK23の場合、既存のmdhFas1比較例3参照より関節炎の抑制効果が低いものと確認された。MFK24の場合、図19に示した通り、01mgkg体重を投与した場合にも、70ほどの関節炎を抑制することを確認した。MFK24は既存のmdhFas1又はMFK12とエタノールを利用して脱パラフィン化及び再脱水化させて、100メタノールに03過酸化水素を入れた溶液を利用して非特異的な組織内ペルオキシダーゼを遮断した。免疫組織化学検査のため、5BSAで非特異的な蛋白質の結合を遮断した後、それぞれの一次抗体に対する抗体と、4°Cで12時間乃至14時間培養後、洗浄バッファーで洗浄した。バイオチンが付着している二次抗体と常温で30分間培養後、洗浄してベクタースタチンABCキットを利用した反定量的逆転写PCR法で下記の通り測定した。マウスCIAモデルから脚組織を得て、皮膚を除去して残った組織は全て組織ホモジナイザーを利用して粉砕し、抽出試薬を利用して総RNAを抽出した。これを定量した後、7μgのRNAでAMV逆転写酵素、オリゴdT、10mMdNTPRNase阻害剤を利用して逆転写反応を行った。マウスTNFα、RANKL、IL1β、CCL2、MMP1、MMP3、IL6、VACM1及び18SRNAの反定量的なPCRのためのプライマーと、Taqman探針を使用してLC480で転写体数を求めて18SRNA転写体に比較して定量化した。前記反定量的なPCRのためのプライマー対は表8の通りである。MFK24の場合、図21に示した通り、炎症媒介物質の転写体数が関節炎対照群に比べて有意的に減少して、投与用量によってICAM1とRANKLの炎症部位発現も減少することを確認した。特に、01mgkg体重の低用量投与でも優れた効能を維持することを確認した図22参照。比較例3mdhFas1ペプチドの関節炎治療効果確認比較例1で製作したmdhFas1ペプチドを利用して実施例4と同一の方法でCIAマウスモデルから関節炎治療効果を測定した。その結果、mdhFas1ペプチドを利用した場合、図23に示した通り、関節炎は濃度依存的に抑制され、対照群マウスと比較した時、体重変化においても変わった異常所見がなかった。関節炎抑制程度は10mgkgを処理した場合、32程度、30mgkgを処理した場合、69程度関節炎を抑制することを確認した。比較例4MFK12ペプチドの関節炎治療効果確認比較例2で製作したMFK12ペプチドを利用して、実施例4及び実施例5と同一の方法でCIAマウスモデルから関節炎治療効果を測定した。その結果、MFK12ペプチドを利用した場合、図24に示した通り、関節濃度依存的に抑制され、対照群マウスと比較した時、体重変化においても変わった異常所見がなかった。関節炎抑制程度は10mgkgを処理した場合、27程度、30mgkgを処理した場合60程度関節炎を抑制することを確認した。さらに、図25に示した通り、2回目の免疫化措置以降4週後の50日目に10mgkgを処理した群は、関節炎部位が破壊されて滑膜組織細胞等が過多増殖されており、血管新生と細胞付着蛋白質の発現が対照群位増加されていることを確認した。一方30mgkgを処理した群から滑膜組織細胞の増殖が対照群に比べて抑制され、血管新生及び付着蛋白質の発現が減少されて正常に近い脚組織の形態を示し、MFK12は30mgkgを処理した時、治療効果があることを確認した。炎症媒介物質変化測定結果は、図26及び図27に示した通り、TNFα、IL6、IL1β、ICAM1とRANKLの発現は、10mgkg処理したものは関節炎対照群と比較して、類似した利用した量で発現しているが、30mgkg処理したものは関節炎対照群に比べて減少することを確認した。ICAM1とRANKLの発現は10mgkg処理したものは、関節炎対照群と比較して、類似した量で発現しているが、30mgkg処理したものは関節炎対照群に比べて減少することを確認した。"