"ヒアルロン酸および銀を含む組成物であって、ヒアルロン酸が130~230Kdaの間の平均重量分子量を有し、そして銀が多孔性スポンジ様構造を持つ微粒子化金属型またはコロイド性金属型を有する、前記組成物。ヒアルロン酸が145~210Kdaの間の平均重量分子量を有する、請求項1記載の組成物。ヒアルロン酸が160~200Kdaの間の平均重量分子量を有し、そして銀が多孔性スポンジ様構造を持つ微粒子化金属型を有する、請求項1記載の組成物。ヒアルロン酸が160~200Kdaの間の平均分子量を有し、そして銀がコロイド性金属型を有する、請求項1記載の組成物。多孔性スポンジ様構造を持つ微粒子化金属型の銀が、2~18マイクロメートルの間の平均粒子サイズおよび5m2/g未満ではない表面積を有する、請求項1~3記載の組成物。ヒアルロン酸が総組成物の0.1~2w/wの間の濃度を有する、先行する請求項いずれか記載の組成物。ヒアルロン酸が総組成物の0.1~0.5w/wの間の濃度を有する、請求項6記載の組成物。ヒアルロン酸が総組成物の0.2w/wの濃度を有する、請求項7記載の組成物。多孔性スポンジ様構造を持つ微粒子化金属型またはコロイド性金属型の銀が、総組成物の1~3w/wの間の濃度を有する、先行する請求項いずれか記載の組成物。銀が総組成物の2w/wの濃度を有する、請求項9記載の組成物。先行する請求項いずれか記載の組成物、および少なくとも1つの薬学的に許容されうる賦形剤を含む、薬学的配合物。少なくとも1つの賦形剤が、懸濁剤、ビヒクルおよび噴霧剤より選択される、請求項11記載の薬学的配合物。噴霧剤が、イソブタン/n-ブタン/プロパン混合物およびn-ブタンからなる群より選択される、請求項12記載の薬学的配合物。皮膚適用に適した乾式スプレー、泡または親水性ゲルの形である、請求項11記載の薬学的配合物。乾式スプレーの形の請求項14記載の薬学的配合物であって、160~200kDaの間の平均重量分子量を有するヒアルロン酸を0.2w/w濃度で、多孔性スポンジ様構造を持つ金属微粒子化型の銀を2w/w濃度で、そして噴霧剤としてn-ブタンを含む、前記配合物。乾式スプレーの形の請求項14記載の薬学的配合物であって、160~200kDaの間の平均重量分子量を有するヒアルロン酸を0.2w/w濃度で、コロイド性金属型の銀を2w/w濃度で、そして噴霧剤としてn-ブタンを含む、前記配合物。病変腔中に透明なゲルとして置かれ、最適な湿潤創傷治癒を促進する、乾式スプレーの形の請求項14~16記載の薬学的配合物。160~200kDaの間の平均重量分子量を有するヒアルロン酸を0.2w/w濃度で、多孔性スポンジ様構造を持つ金属微粒子化型またはコロイド性金属型の銀を2w/w濃度で、そして噴霧剤としてイソブタン/n-ブタン/プロパン混合物を含む、泡の形の請求項14記載の薬学的配合物。160~200kDaの間の平均重量分子量を有するヒアルロン酸を0.2w/w濃度で、多孔性スポンジ様構造を持つ金属微粒子化型またはコロイド性金属型の銀を2w/w濃度で含む、親水性ゲルの形の請求項14記載の薬学的配合物。表在性および/または小腔皮膚病変および/または創傷の局所治療における薬剤として使用するための請求項1~10記載の組成物または請求項11~19記載の配合物。表在性および/または小腔皮膚病変および/または創傷の局所治療における薬剤として使用するための請求項15記載の薬学的配合物。表在性および/または小腔皮膚病変および/または創傷の局所治療における薬剤として使用するための請求項16記載の薬学的配合物。表在性および/または小腔皮膚病変および/または創傷の局所治療における薬剤として使用するための請求項18記載の薬学的配合物。表在性および/または小腔皮膚病変および/または創傷の局所治療における薬剤として使用するための請求項19記載の薬学的配合物。本発明の1つの目的は、皮膚病変の治療に現在利用可能なものよりもより効率が高く、そしてより毒性でない、創傷被覆材および治癒のための組成物を提供することである。本発明の別の目的は、組織再生に対する阻害性の影響および治療しようとする組織に対する毒性を最小限にしつつ、強い抗菌/抗真菌活性剤を含む被覆材の臨床的必要性を満たすことである。本発明は、ヒアルロン酸および銀を含む組成物であって、ヒアルロン酸が130~230Kdaの間の平均重量分子量を有し、そして銀が、コロイド性金属型または多孔性スポンジ様構造を持つ微粒子化金属型を有する、前記組成物を提供する。本発明はまた、前記組成物および少なくとも1つの薬学的に許容されうる賦形剤を含む、薬学的配合物も提供する。薬剤としての、特に表在性および/または小腔皮膚病変および/または創傷の局所治療のための薬剤としての、前記組成物の使用もまた開示する。本発明はまた、皮膚適用に適した乾式スプレー、泡または親水性ゲルの形で、前記組成物を分配するための装置にも関する。本明細書において、用語重量平均分子量は、固有粘度法で計算されると意図されるTerbojevichら,Carbohydr.Res.,1986,363-377。本明細書において、スポンジ様構造は、オープンセルおよび/またはクローズドセル構造を持ち、5m2/gまたはそれより大きい表面積を持つ、完全多孔材料として意図される。1つの態様において、本発明は、ヒアルロン酸および銀を含む組成物であって、ヒアルロン酸が130~230Kdaの間の平均重量分子量を有し、そして銀が多孔性スポンジ様構造を持つコロイド性金属型または微粒子化金属型を有する、前記組成物に関する。本明細書に開示する組成物は、多様な種類の病変急性、慢性、多様な病因の潰瘍、火傷、痛む箇所soresの治癒を促進し、細菌および/または真菌感染を除去し、そして損傷を受けた組織の治癒を促進する。驚くべきことに、これらの利点が、本明細書に開示するように、ヒト線維芽細胞増殖を刺激して、その結果、コラーゲンおよびフィブロネクチンの沈着を生じ、そして銀がこれらの細胞に対して生じうる損傷に対して防御する、よく定義づけられた平均重量分子量MWを有する、ヒアルロン酸を含む組成物で得られることが見出された。当該技術分野に知られる組成物の抗菌活性は、塩の形で商業的に入手可能な銀例えば、SigmaAldrichから入手可能な、例えば硝酸塩、硫酸塩、炭酸塩およびその他、またはコロイド性金属、すなわちその安定性を改善する小分子タンパク質と会合したもの、または金属型の銀によって実行される。多様なタイプの金属性銀の中で、驚くべきことに、以下の特性を持つ微粒子化金属性銀が特に適切であることが見出された:-2~18マイクロメートルの平均粒子サイズ、好ましくは10マイクロメートル-表面積をかなり増加させる高多孔性を持つスポンジ様SL微小構造≧5m2/g;-高純度好ましくは>99.5;以後、スポンジ様微粒子化金属性銀前記の特異なスポンジ様多孔構造は、創傷床における即時および持続性両方のAgイオンAgの放出増進を促進し、この結果、以後の実験の結果によって立証されるような、最も一般的に用いられる銀の型に比較して、増加した抗菌および抗真菌活性が生じる。特に、本発明の組成物中に含まれるようなスポンジ様微粒子化金属性銀は、皮膚および衣服を染色せず、また、日光への曝露後、滲出液が存在する場合に、創傷を茶色に着色せず、そして本発明にしたがった薬学的型の調製において取り扱いがより容易である。微小スケール粒子サイズによって、スポンジ様微粒子化金属性銀は、他の構成要素と容易に混合可能となる。コロイド性金属性銀は、その代わり、スプレーの型での送達が望ましい場合には特に、粉末の塊の形成による閉塞を防止するため、微粒子化プロセスをまず経なければならない。本発明の組成物に用いる銀は、匹敵する抗細菌/抗微生物活性を有することが見出された、コロイド性またはスポンジ様微粒子化金属性銀であってもよいが、スポンジ様微粒子化金属性銀が好ましい。ヒアルロン酸HAは、交互のD-グルクロン酸およびN-アセチル-D-グルコサミン残基で構成される直鎖ヘテロ多糖であり、抽出源または使用する調製法に応じて、400~3x106Daの間の範囲であってもよい重量平均分子量を有する。ヒアルロン酸は、実際、例えば、ケイトウcockscombsからの抽出によってEP1389572B1、発酵によって、または合成手段によって得られうる。すでに述べたように、HAが、体内で、皮膚、腱、筋肉および軟骨などの多くの組織の細胞に対する機械的な補助から、組織の水和および関節の潤滑までに渡る、多数の役割を発揮することが知られている。さらに、HAが、膜受容体CD44を通じて、細胞増殖、遊走、分化および血管新生などの細胞生理学および生物学に関する、多くのそして異なるプロセスを調節可能であることが知られる。これらの効果は各々、異なる分子量を有するHAの分画に本質的に起因するものであり、そして特に、組織修復作用は、驚くべきことに、低重量分子量オリゴマー性HAを有するHA分画で顕著に明らかであり、そして分子量が増加するにつれて減少する。その代わり、数回の試験に渡って、驚くべきことに、固有粘度法Terbojevichら,Carbohydr.Res.,1986,363-377で計算される130~230kDaの間の範囲に含まれる、したがってその創傷治癒作用に関してすでに知られているものより顕著に高いMWを有する、重量平均MWを有するHAの特定の分画が、ヒト線維芽細胞増殖に対して非常に有効であることが見出された。さらに、驚くべきことに、130~230kDaの間の重量平均分子量を有するHAが、会合している銀コロイド性金属型またはスポンジ様微粒子化金属型の抗菌/抗真菌活性を改善し、細胞毒性を劇的に減少させることが見出された。こうしたHA分画は、適切な試験の後、本発明の目的の組成物のために選択され、本明細書記載の実験を通じて、標準的治療に勝る病原体に対する有効性、およびヒト線維芽細胞に対する毒性の減少の両方の結果、創傷治癒活性の増加が立証されている。驚くべきことに、本発明の組成物で用いられるHAは、抽出性、発酵ストレプトコッカス属Streptococcusまたは生合成バチルス属Bacillus供給源から、好ましくは発酵または生合成供給源から生じることが可能であり、そして130~230kDaの間、好ましくは145~210kDaの間、そしてさらにより好ましくは160~200kDaの間で構成される重量平均MWを有し;後者を略して、以後、160~200kDa重量平均MWHAと定義する。これは、MWに関して、望ましい仕様を持つHAを提供することが可能である、多くの会社例えばLifecoreBiomedical;QP社;生化学工業;資生堂;Fidiafarmaceuticiから購入可能である。見込みに反して、オリゴマー分画のものより顕著により高い重量平均分子量を有するヒアルロン酸分画は、オリゴマー分画のものより、線維芽細胞増殖に対して、より強い陽性の影響を有することが見出された。HAのこれらの特定の分画および銀を含む組成物は、特定の試験において、銀単独に基づく標準的組成物と比較して、抗菌/抗真菌効果の改善、そしてまた、線維芽細胞に対する毒性の減少を示す。例えば、図4の第3のカラムを参照すると、HAのこれらの特定の分画および銀を含む本発明の組成物は、対照試料に対して線維芽細胞の増殖を刺激する一方、HAを含まないコロイド性銀を用いると、本発明の組成物を用いた試験におけるものの3分の1程度に低い全体量で、対照に対する線維芽細胞の減少が観察される。これは、本発明の組成物が、当該技術の最先端よりも、明らかでそして予測不能な進歩を示し、記載される皮膚病変の局所治療に関して現在入手可能な組成物よりも、より効率的で、そしてより毒性でないことを意味する。以後、開示する実験の結果に基づき、予期せぬことに、重量平均分子量160~200kDaを有するHAおよびコロイド性または微粒子化スポンジ様金属性銀を含む、本発明の組成物が、以下の驚くべき特性を有することが見出された:-重量平均分子量160~200kDaを有するHAによる、線維芽細胞増殖を刺激する、前例のないそして驚くべき能力;-感染創傷で一般的に見られる微生物に対する慣用的な治療のものに少なくとも匹敵する、コロイド性銀または微粒子化スポンジ様金属性銀の存在に関連する抗菌活性;-特に、微粒子化スポンジ様金属性銀を用いた場合、本発明の組成物は、対比させるcontrastことが特に困難な、MRSAに対する標準的な治療よりもより活性である;-皮膚線維芽細胞に対する非常に低い毒性または毒性欠如;-HAが線維芽細胞増殖を刺激する能力を維持しながら、市場で入手可能な配合物の50より低い銀の量の存在下でもまた発揮される抗菌活性。これらの理由のため、本発明の組成物は、例えば多様な起源の皮膚病変および/または創傷急性、慢性、多様な病因の潰瘍、火傷、痛む箇所から生じる皮膚病変および創傷の治療のための、先行技術において知られる組成物よりも、そして現在入手可能な組成物よりも、特に有利である。好ましくは、本発明の組成物において、ヒアルロン酸は145~210Kdaの平均重量分子量を有する。好ましくは、本発明の組成物において、ヒアルロン酸は160~200Kdaの間の平均重量分子量を有し、そして銀は多孔性スポンジ様構造を持つ微粒子化金属型を有する。好ましくは、本発明の組成物において、多孔性スポンジ様構造を持つ微粒子化金属型の銀は、2~18マイクロメートルの間の平均粒子サイズおよび5m2/g未満ではない表面積を有する。好ましくは、本発明の組成物において、ヒアルロン酸は、総組成物の0.1~2w/wの間の濃度、より好ましくは総組成物の0.1~0.5w/wの間の濃度、そしてさらにより好ましくは総組成物の0.2w/wの濃度を有する。好ましくは、本発明の組成物において、コロイド性金属型または多孔性スポンジ様構造を持つ微粒子化金属型の銀は、総組成物の1~3w/wの間の濃度、より好ましくは総組成物の2w/wの濃度を有する。本発明記載の組成物は、多様な型で分配される、粉末、溶液または懸濁物の形であってもよく、とりわけ、親水性ゲル、泡、乾式スプレーが好ましく、これはこれらがいくつかの特に望ましい特性を示すためである。特に、乾式スプレーおよび泡は:創傷に適用するために、カットし、または成形する必要がないため、特別な操作を伴わずに、容易に適用可能である;創傷との接触を回避して適用可能であり、この方式で、さらなる汚染が引き起こされることを減少させる;適用しようとする部位に完璧に適用可能であり、すなわち、表在性の、平坦なまたはいずれにしろいくぶん空洞形成された創傷は、容易に均等に分配される乾式スプレーの適用から利益を受ける。実際、乾式スプレー中に存在するヒアルロン酸粉末は、滲出液と接触して、直ちに透明なゲルを形成し、これが、創傷治癒を促進し、そして同時に周囲の環境から分離し、さらなる汚染を防止する程度に、病変腔を湿らせたまま維持し;深い空洞の創傷においては、代わりに泡を適用することがより有用であり、これは一様にそして均等に全創傷床を満たし、創傷治癒剤ヒアルロン酸および抗菌剤銀の両方と病変部分との密接な接触を促進する;絆創膏で覆う必要は必ずしもなく、包帯交換工程を単純にする利点を持つ。ヒドロゲルの型に関しては、特に深くなく、または空洞形成されていない創傷およびほとんど滲出液を伴わない場合に、特定の適用を見出し;実際、ヒドロゲル自体は、治癒プロセスに基本的な正しい水分を伴う環境を提供する。1つの態様において、本発明は、ヒアルロン酸および銀を含む組成物であって、ヒアルロン酸が130~230Kdaの間の平均重量分子量を有し、そして銀がコロイド性金属型または多孔性スポンジ様構造を持つ微粒子化金属型を有する、前記組成物、ならびに少なくとも1つの薬学的に許容されうる賦形剤を含む、薬学的配合物を提供する。好ましくは、本発明の薬学的配合物は、懸濁剤、ビヒクルおよび噴霧剤より選択される少なくとも1つの賦形剤をさらに含む。より好ましくは、本発明記載の薬学的配合物において、噴霧剤は、イソブタン/n-ブタン/プロパン混合物およびn-ブタンからなる群より選択される。好ましくは、本発明記載の薬学的配合物は、皮膚適用に適した乾式スプレー、泡または親水性ゲルの形である。好ましくは、本発明記載の薬学的配合物は、病変腔中に透明なゲルとして置かれ、最適な湿潤創傷治癒を促進する、乾式スプレーの形である。より好ましくは、本発明記載の薬学的配合物は、160~200kDaの間の重量平均分子量を有するヒアルロン酸を0.2w/w濃度で、多孔性スポンジ様構造を持つ微粒子化金属性銀を2w/w濃度で、そして噴霧剤としてn-ブタンを含む、乾式スプレーの形である。より好ましくは、本発明記載の薬学的配合物は、160~200kDaの間の重量平均分子量を有するヒアルロン酸を0.2w/w濃度で、コロイド性金属性銀を2w/w濃度で、そして噴霧剤としてn-ブタンを含む、乾式スプレーの形である。好ましくは、本発明記載の薬学的配合物は、160~200kDaの間の重量平均分子量を有するヒアルロン酸を0.2w/w濃度で、多孔性スポンジ様構造を持つ金属性微粒子化型またはコロイド性金属型の銀を2w/w濃度で、そして噴霧剤としてイソブタン/n-ブタン/プロパン混合物を含む、泡の形である。好ましくは、本発明記載の薬学的配合物は、160~200kDaの間の重量平均分子量を有するヒアルロン酸を0.2w/w濃度で、多孔性スポンジ様構造を持つ金属微粒子化型またはコロイド性金属型の銀を2w/w濃度で、そして噴霧剤としてイソブタン/n-ブタン/プロパン混合物を含む、親水性ゲルの形である。1つの態様において、本発明は、薬剤として使用するための上に開示するような組成物または薬学的配合物に関する。別の態様において、本発明は、表在性および/または小腔皮膚病変および/または創傷の局所治療において使用するための上に開示するような組成物または薬学的配合物に関する。好ましくは、表在性および/または小腔皮膚病変および/または創傷の局所治療において使用するための薬学的配合物は、160~200kDaの間の平均重量分子量を有するヒアルロン酸を0.2w/w濃度で、多孔性スポンジ様構造を持つ微粒子化金属性銀を2w/w濃度で、そして噴霧剤としてn-ブタンを含む、乾式スプレーの形である。好ましくは、本発明にしたがって、表在性および/または小腔皮膚病変および/または創傷の局所治療において使用するための薬学的配合物は、160~200kDaの間の重量平均分子量を有するヒアルロン酸を0.2w/w濃度で、コロイド性金属性銀を2w/w濃度で、そして噴霧剤としてn-ブタンを含む、乾式スプレーの形である。好ましくは、本発明にしたがって、表在性および/または小腔皮膚病変および/または創傷の局所治療において使用するための薬学的配合物は、160~200kDaの間の重量平均分子量を有するヒアルロン酸を0.2w/w濃度で、多孔性スポンジ様構造を持つ金属微粒子化型またはコロイド性金属型の銀を2w/w濃度で、そして噴霧剤としてイソブタン/n-ブタン/プロパン混合物を含む、泡の形である。好ましくは、本発明にしたがって、表在性および/または小腔皮膚病変および/または創傷の局所治療において使用するための薬学的配合物は、160~200kDaの間の重量平均分子量を有するヒアルロン酸を0.2w/w濃度で、多孔性スポンジ様構造を持つ金属微粒子化型またはコロイド性金属型の銀を2w/w濃度で、そして噴霧剤としてイソブタン/n-ブタン/プロパン混合物を含む、親水性ゲルの形である。さらに別の態様において、本発明は、表在性および/または小腔皮膚病変および/または創傷を治療する方法であって、上に開示するような組成物または薬学的組成物の局所適用を含む、前記方法に関する。1つの態様において、本発明は、乾式スプレー、皮膚適用のための泡、または親水性ゲルの形で、上に開示するような組成物を分配するための装置に関する。最終産物を適用する際に見られる病的な状況を可能な限り正確に再現するため、本出願において示すすべての実験を、ヒト皮膚生検から単離した健康な線維芽細胞に対して行った。細胞培養試験は、損傷を受けているが、より深部の層である真皮およびより表層の層である表皮を含む創傷床を正確に模倣するため、支持体として、三次元の素材を用いた。研究プロトコルおよび材料を本明細書に報告する。実験1:異なるMWを有するHAの存在下で培養したヒト線維芽細胞のinvitro細胞増殖の評価。当該技術の最先端で入手可能なものに基づいて、異なるHA試料を調製し、そして特に、すべて1mg/ml培地の濃度で、以下を調製する:i.EP868437の実施例1にしたがって調製した、5,000~10,000Daの間で構成される重量平均MWを有するHA;ii.EP868437の実施例2にしたがって調製した、10,000~15,000Daの間で構成される重量平均MWを有するHA;iii.重量平均MW160,000~200,000Daを有するHA;iv.EP535200の実施例1にしたがって調製した、重量平均MW1,000,000Daを有するHA;v.重量平均MW1,500,000~3,200,000Daを有するHA、Hyalubrix登録商標Miglioreら,Arthr.Res.Ther.,2009,11,R183。ヒト皮膚生検からの健康な線維芽細胞の単離:簡潔には、抗生物質を添加したリン酸緩衝溶液PBS中で何回か洗浄した後、生検を皮下脂肪組織から取り除き、そして小片にカットして、これを酵素ディスパーゼによる酵素消化に30分間供する。処理終了時に、皮膚を根底の真皮から分離し、これをトリプシンで10分間消化し;次いで、細胞を遠心分離によって抽出する。細胞培養:20ウシ胎児血清FBS、1ペニシリン/ストレプトマイシンP/Sおよび1グルタミンを補充したDMEM培地中に植え付けることによって、細胞をinvitroで培養する。MTT試験:このアッセイは、培養細胞におけるコハク酸脱水素酵素活性の存在を定量的に測定し;生存細胞のミトコンドリアにのみ存在するこうした活性は、通常、代謝活性、生存性およびしたがって培養細胞の増殖をチェックするマーカーとして用いられる。この試験は、アゾール性azolic色素MTT3-4,5-ジメチルチアゾール-2-イル-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロミドがコハク酸脱水素酵素によって黄色から青色に変換されることに基づく。分光測定で決定された青色色素ホルマザンの量は、細胞培養におけるコハク酸脱水素酵素の存在に比例し、そして次いで、生存細胞数に比例する。細胞を0.5mg/mlMTT溶液と3時間インキュベーションする。インキュベーション終了時、抽出溶液90イソプロパノール、10DMSOを用いて、色素を細胞から抽出し、そして540/660nmの波長で読み取る。操作法:前述のように、三次元培養を用い、そして不織布Hyaff11上に細胞を正確に植え付けてEP618817の実施例2のように調製、細胞増殖試験を行った。これは、invivo線維芽細胞増殖を模倣することを意図する場合に選択する方法であり、そしてこれは、真皮において、皮膚線維芽細胞が挿入される、ヒアルロン酸およびコラーゲンで主に形成される細胞外三次元マトリックスからなるものである。前記にしたがって単離された線維芽細胞を、適切なプレート内に付着された不織布材料の小片1x1cm上に植え付け60,000、そして24時間培養を維持する。その後、試験しようとする、異なるHA試料を、培地に添加し、そして3日間処理した後、MTT試験を行って細胞増殖を評価した。対照は、HAで処理しない線維芽細胞からなった。結果:図1に明らかに示すように、当該技術の最先端で記載されるものとは対照的に、低MWHA分画は細胞増殖を刺激しない。その代わり、160~200kDa重量平均MW分画は、顕著な増殖活性を有し、一方、100万Daより高いMWは、毒性でない場合であっても効果がなかった。以下の方法にしたがって、I型コラーゲン図3およびフィブロネクチン図2の遺伝子発現の定量的評価によってもまた、線維芽細胞の増殖および生存度を確認する。上述のように線維芽細胞を単離し、そして培養し、そして試料i、ii、iiiその他は、細胞増殖に対して負の影響があったため除外したで3日間処理し;処理終了時、リアルタイムPCRを行って、I型コラーゲンおよびフィブロネクチンの遺伝子発現を評価した:供給者の指示にしたがって、Trizol法TRIZOL試薬、LIFETechnologies、GIBCOBRLを用いて、細胞RNAを抽出した。簡潔には、1.0mlのTrizolを添加することによって細胞を溶解し、そして260nmで吸光度を測定することによって、総RNAを定量化した。増幅する各遺伝子に関して、Primer3ソフトウェアRocheMolecularDiagnostics、米国カリフォルニア州プレザントンを用いて、適切なプライマーを選択した。Rotor-geneTM5500CorbettResearch、オーストラリアシドニーを用いて実行するリアルタイムPCRによって、遺伝子発現を評価した。結果を図2および3に要約する:これらは、160~200kDa重量平均MWHAが、対照と比較して、両方のタンパク質の遺伝子発現を有意に増加させることを確認し、そしてこれは、処理した線維芽細胞が、創傷の完全な治癒に必須である細胞外マトリックスを構築可能であることを意味する。結論:驚くべきことに、160~200kDa重量平均MWHAは、皮膚線維芽細胞増殖に対して、非常に効率的な作用を示した。こうした線維芽細胞は、細胞外マトリックスを沈着させ、したがって病変皮膚組織の修復を活性化することが可能であるため、生存性であり、そして代謝的に活性である。上記の予期されない結果に基づき、本明細書に提示する配合物の抗菌および抗真菌効果を評価する。使用する微生物は、感染創傷に一般的に存在するもの、すなわち:大腸菌、緑膿菌、フェカリス菌バンコマイシンに耐性、黄色ブドウ球菌メチシリン耐性およびC.アルビカンスである。実験培地中に溶解するために、コロイド型および金属型の両方の銀を含有する試験配合物を粉末の形で調製した。実験2:調製物の抗菌/抗真菌活性の評価。試験をinvitroで行い、したがって、溶解するかまたは懸濁して有効性を評価することが可能であるように、コロイド性金属性または微粒子化金属性銀を含有する試験配合物を粉末の形で調製した。対照配合物Cは、粉末、ならびに乾式スプレーKatoxyn登録商標、DevergeMMの形で商業的に入手可能である。配合物A0.2ナトリウムHAMW160~200kDa2コロイド性金属性銀4Syloid244賦形剤軽カオリン賦形剤適量で100に。配合物B0.2ナトリウムHAMW160~200kDa2微粒子化金属性銀、スポンジ様SL2MicroSilverBGTMPharma4Syloid244賦形剤軽カオリン賦形剤適量で100にを、4.25コロイド性金属性銀1.5過酸化ベンゾイル1無水グルコン酸カルシウム賦形剤ケイ酸アルミニウム賦形剤適量で100にからなる標準的商業的組成物配合物C-Katoxyn登録商標に対して試験した。試験微生物:各微生物の液体培養を供給業者の指示にしたがって調製した。リッチでそして生存している培養を得るために、インキュベーションを少なくとも48時間続けた;各培養のタイターを、マクファーランド基準を通じておおよそ決定した。いくつかの微生物に関しては、2つの100mLTSB試料TrypticSoyBroth;Millipore中に接種することによって、2つの試験懸濁物を調製し、液体培養量は、約103および約106CFUを含有した。次いで、接種物を計数に供して、T=0での懸濁物の微生物含量を正確に決定した。配合物試料:約1gの2つの試料を各配合物から抜き取り、そして103および106CFUを含有する懸濁物、または103CFUのみに添加した。このように調製した試料をインキュベーションし、そして微生物と産物の密接な接触を最大限にし、そして粉末沈降現象を防止するため、一定の緩慢な振盪および垂直方向の回転を維持した。インキュベーション30分後、アリコットを抜き取り、106CFUを含有する試料に対して適切な希釈を操作することによって、ろ過膜技術により懸濁物の微生物含量の計数を実行した。ろ過に用いた膜をTSA培地トリプトンダイズ寒天-Biogenetics中に移し、そして少なくとも5日間インキュベーションした。試験懸濁物中の細菌含量の計数を12時間後および24時間後に反復した。以下の表は、各試験配合物に関して、異なる接触時間後、多様な微生物濃度の対数減少値を開示する。表1-配合物Aデータから、配合物Aで処理したすべての接種物中の細菌含量は、12時間後および24時間後の両方で、実質的に無であると推測可能である。これは、配合物Aが殺菌剤として作用し、そして静菌剤ではないことを意味する。実際、欧州薬局方は、局所使用のための殺菌剤を、微生物と24時間接触させた後、少なくとも2対数分の濃度で、含量を減少させるものと定義している。表2-配合物B配合物Bは、配合物Aのものと同一の活性プロファイルを有する。これは、ヒアルロン酸と関連して配合された銀のこの実験において、微生物に対する活性が、コロイド型またはスポンジ様微粒子化金属型のいずれでも定性的/定量的に同一であることを意味する。表3-配合物C配合物Cもまた、配合物AおよびBで見られる結果を再現することが明らかであるようだが、得られたデータは、異なる配合物の間のいくつかの基本的な相違を考慮に入れると、絶対的に予期されない状況を生じさせる:AおよびBは、Cのものよりも明らかに低い半分に満たない銀濃度2を含有するCは、過酸化ベンゾイルBPを含有し;すべての過酸化物と同様、BPは、それ自体酸化剤であり、放出する酸素によって微生物を殺す能力を有するため、非常にしばしば、まさにニキビに対する局所調製物中で用いられる。したがって、配合物Cの活性は、含有される銀およびBPのためであり、BPは、一方で、銀酸化の活性化剤として作用し、そして他方で、抗菌剤、すなわち酸素の供給源として作用する。結論:試験したすべての配合物は、欧州薬局方にしたがって、局所使用のための殺菌剤と定義可能である。細菌含量を減少させる意味で、3つの調製物は定性的に同等であるが、定量的に同等ではなく、これは絶対的に予測不能であるように、160~200kDaに等しい重量平均MWを有するヒアルロン酸を含む配合物AおよびBは、Cに存在する銀の半分未満しか含有しないためである。したがって、配合物AおよびBは、銀濃度を顕著に低下させ、そしてさらなる活性剤過酸化ベンゾイルから放出される酸素の補助を伴わずに、同じ抗菌/抗真菌効果を誘導するため、配合物Cよりも効率的である。実験2a:上記データを考慮して、特に適切な微生物、すなわちメチシリン耐性黄色ブドウ球菌MRSAに対する組成物A、BおよびC上記のように定義の効果を評価する。MRSAは、ときに多剤耐性黄色ブドウ球菌と呼ばれるほど、治療が特に困難ないくつかの感染の原因となる細菌である。実際、該細菌は、β-ラクタム抗生物質およびセファロスポリンに耐性である。MRSA感染は、開放創傷を有するか、または侵襲性デバイス例えばカテーテルを所持する患者が汚染の高リスクを持つ病院において、特に困難である。無菌フィンガーパッドをMRSAで汚染させ30マイクロリットル体積中、108CFU;汚染領域を空中で3分間乾燥させ、その後、試験しようとする産物組成物A、BまたはCを約15cmの距離から5秒間、3秒間隔を置いて2回適用する。すべての配合物を、湿ったチャンバー中で、微生物と30分間、3時間、6時間または15時間接触させる。終了時、フィンガーパッドを1分間、中和培地中に浸して、抗菌作用を遮断し、そして微生物を収集する。中和培地の試料を適切に希釈して、そして適切な固体培地上に植え付ける。25時間の培養後、CFUを定量化して、そして生じたデータを図5に開示する。実験1の結果と一致して、組成物Cの活性は、組成物Aのものに、完全に重ね合わせ可能である。驚くべきことに、スポンジ様微粒子化金属性銀および重量平均MW200kDを有するHAを含む組成物Bは、顕著に優れた効果を有し、30分後およびそれより遅い時点の両方で、微生物集団をより実質的に減少させた。この側面は、組成物Bの銀の量が配合物Cのものの半分未満であることを考慮すると、特に注目に値する。結論:すべての試験した配合物はまた、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌MRSAにも有効であるが、スポンジ様微粒子化金属性銀および重量平均MW160~200kDaを有するHAを含む組成物Bは、実質的により効率的である。スポンジ様微粒子化金属性銀および重量平均MW160~200kDaを有するHAを含む組成物の活性は、この組成物中の銀の量が、商業的に入手可能な組成物中のものの半分未満であることを考慮すると、特に驚くべきことである。実験2および2aの結果を考慮して、皮膚線維芽細胞に対する配合物の細胞毒性効果を試験して、銀の存在が、実験1に示す線維芽細胞増殖に対する160~200kDa重量平均MWHAが発揮する効果を無にするかどうかを検証する。実験3:invitroでのヒト皮膚生検由来の健康な線維芽細胞の増殖に対する、本発明の配合物の活性。実験1に記載する方法にしたがって、線維芽細胞の単離および培養を行った。ブロモデオキシウリジンBrdU標識試験ブロモデオキシウリジンキット、BioAssayTMを通じて、細胞増殖を評価した。簡潔には、BrdUの取り込み後、細胞を抗BrdU抗体での標識に供し、そして次いで、適切な読み取り装置を通じて分析する。試料:MRSAに対する配合物Bの驚くべき有効性を考慮して、配合の利便性のため、配合物C市販製品と比較するために、配合物B微粒子化スポンジ様金属性銀および重量平均160~200kDaを有するHAに基づくを選択し、以下のように、異なる濃度5mg/ml;30mg/mlで試料を調製した。各配合物の適切な量を重量測定し、BrdUを含有するDMEM細胞培地に溶解し、そして振盪しながら10分間維持した。次いで、混合物を6000rpmで3分間遠心分離した。こうして得た上清を、培養細胞と接触させ、BrdUのみを含むDMEM中の細胞対照に対して、線維芽細胞増殖を評価した。実験結果を図4に要約し、この中で、最初のカラムは、インキュベーション3日後の細胞増殖値に相当し、そして第二のカラムはインキュベーション5日後に相当する。配合物Bが、含有する活性成分量に関わらず、対照に比較して、線維芽細胞増殖に正の効果を発揮することが直ちに明らかであるようである。対照に対して評価される効果は、5mg/mlの試料に関して、そして接触3日後に、より実質的であるが、また、30mg/ml試料に関しても、常に、対照に比較して、3日後および5日後の両方で、有意な細胞増殖が観察される。特に、図4の第三のカラムを参照すると、30mg/mlの組成物B2w/wの微粒子化スポンジ様銀および重量平均分子量160~200kDaを有する0.2ヒアルロン酸ナトリウムを含むを用いた試験において、対照試料に対して、線維芽細胞の増殖が観察される。その代わり図4、第四のカラム、4.25コロイド性銀、すなわち30mg/mlの組成物Bでの試験で用いた量に対して、より少量の銀総量およそ1/3を含む組成物Cを5mg/ml用いると、対照に対して線維芽細胞の減少が発現される。再び、160~200kDa重量平均MWHAは、抗菌/抗真菌剤と関連させた場合もまた、細胞増殖に対する予期されぬ特性を示す。これらの実験のデータは、実際、160~200kDa重量平均MWのヒアルロン酸が、微粒子化銀またはコロイド性銀の抗菌活性を改変しないまま、銀の細胞毒性活性から線維芽細胞を保護することを示す。配合物Cに関するデータは、その代わり、反対の傾向を示し;5mg/mlの濃度5日目で、すでに、対照と比較して、線維芽細胞増殖の阻害を示す負の増殖値を有する一方、30mg/mlを含有する試料では、処理3日後にすでに線維芽細胞数の減少が観察され、該試料の毒性を明らかに示す。5mg/ml試料で処理3日後のみがなお、対照と同一の線維芽細胞数を有したが、こうした結果は、同じ条件の濃度および処理時間で、50を超えて線維芽細胞増殖が増加する、同等の配合物Bと比較した際、絶対的に相当しない。やはり、本明細書に開示する実験データを考慮して、乾式スプレー、皮膚用の泡または親水性ゲルの形の、ヒアルロン酸および銀を含む本発明の組成物は、滲出液もまた含み、そして次いで、例えば大腸菌、緑膿菌、黄色ブドウ球菌およびフェカリス菌などの微生物、ならびにカンジダアルビカンスなどの真菌による感染が高リスクであることによって特徴付けられる、多様な起源急性、慢性創傷、多様な病因の潰瘍、火傷、痛む箇所の皮膚病変および/または創傷の局所治療に適している。用いるヒアルロン酸は、130~230kDaの間で構成される、好ましくは145~210kDaの間で構成される、そしてさらにより好ましくは160~200kDaの間で構成される重量平均MWを有する。最終組成物中の濃度は、重量0.1~2w/wの間、好ましくは0.1~0.5w/wの間、そしてさらにより好ましくは、0.2w/wに等しい。銀は、上記利点を考慮して、コロイド性金属型または微粒子化スポンジ様金属型であってもよく、後者の型が好ましい。最終組成物中の銀濃度は、1~3w/wの間で構成される可能性があり;好ましい濃度は2w/wに等しい。薬学的型に関しては、ヒドロゲルは、完全に表在性の皮膚病変および/または創傷に特に有用であり;乾式スプレーは、平坦なまたはわずかに空洞形成された皮膚病変および/または創傷で特定の使用を見出し、一方、皮膚用の泡は、空洞形成された皮膚病変および/または創傷上の適用に適している。乾式スプレーおよび皮膚用の泡の場合、本発明記載の組成物は、噴霧剤としてn-ブタン、またはn-ブタン、イソブタンおよびプロパンからなる混合物を含み;特に、乾式スプレー配合物においてはn-ブタンが好ましく、一方、皮膚用の泡に関しては、n-ブタン、イソブタンおよびプロパン混合物が、選択される噴霧剤である。例示的目的のため、選択される薬学的型の配合物および調製法を本明細書に提供するが、これは、配合の技術分野の当業者の知識にしたがって、修飾可能である。コロイド性金属性Agを含む乾式スプレー:産物100gは以下を含有する微粒子化し、そして篩にかけたヒアルロン酸を、あらかじめ微粒子化したコロイド性銀で進行性に希釈することによって、混合する。得たプレ混合物を、二酸化ケイ素で進行性に希釈することによって、混合する。こうして得た混合物を、最後に、均質になるまで、軽カオリンと混合する。上記で得た中間体産物を、次いで、加圧シリンダー中の分配に供する。微粒子化スポンジ様金属性Agを含む乾式スプレー:産物100gは以下を含有する微粒子化し、そして篩にかけたヒアルロン酸を、すでにミクロン粒子サイズを有するスポンジ様微粒子化金属性銀で進行性に希釈することによって、混合する。得たプレ混合物を、二酸化ケイ素で進行性に希釈することによって、混合する。こうして得た混合物を、最後に、均質になるまで、軽カオリンと混合する。上記で得た中間体産物を、次いで、加圧シリンダー中の分配に供する。コロイド性金属性銀に基づく皮膚用の泡:産物100gは以下を含有するLabrasol中のあらかじめ微粒子化しておいたコロイド性銀の分散物を、振盪しながら、ヒアルロン酸ナトリウムおよびグリセロールで構成される溶液に添加し、そして均質になるまで混合する。ソルビン酸カリウム、ベンジルアルコール、ポリソルベート80、アルファ-酢酸トコフェリル、水素化ダイズレシチンを添加し、そして溶解するまで振盪する。最終体積に到達するまで精製水を添加し、そして均質になるまで振盪する。得た調製物をろ過し、そして加圧容器中、分配に供する。微粒子化スポンジ様金属性銀に基づく皮膚用の泡:産物100gは以下を含有する:Labrasol中の微粒子化スポンジ様金属性銀の分散物を、振盪しながら、ヒアルロン酸ナトリウムおよびグリセロールで構成される溶液に添加し、そして均質になるまで混合する。ソルビン酸カリウム、ベンジルアルコール、ポリソルベート80、アルファ-酢酸トコフェリル、水素化ダイズレシチンを添加し、そして溶解するまで振盪する。最終体積に到達するまで精製水を添加し、そして均質になるまで振盪する。得た調製物をろ過し、そして加圧容器中、分配に供する。コロイド性金属性銀を含む親水性ゲル:産物100gは以下を含有する:メチル-p-ヒドロキシベンゾエートおよびプロピル-p-ヒドロキシベンゾエートを80°Cで精製水中に溶解する。溶液を室温に冷却した後、ヒアルロン酸ナトリウムを添加し、そして溶解が完了するまで混合する。次いで、均質な分散および後者の完全な水和が得られるまで、PEG400を溶解し、そして振盪を維持しながら、Carbomer974Pを添加する。次いで、水性相のゲル化が得られるまで、トリエタノールアミンを添加する。最後に、振盪しながら、グリセロール、プロピレングリコールおよびあらかじめ微粒子化しておいたコロイド性銀を添加し、そして均質になるまで混合する。微粒子化スポンジ様金属性銀を含む親水性ゲル:産物100gは以下を含有する:メチル-p-ヒドロキシベンゾエートおよびプロピル-p-ヒドロキシベンゾエートを80°Cで精製水中に溶解する。溶液を室温に冷却した後、ヒアルロン酸ナトリウムを添加し、そして溶解が完了するまで混合する。次いで、均質な分散および後者の完全な水和が得られるまで、PEG400を溶解し、そして振盪を維持しながら、Carbomer974Pを添加する。次いで、水性相のゲル化が得られるまで、トリエタノールアミンを添加する。最後に、振盪しながら、グリセロール、プロピレングリコールおよび微粒子化スポンジ様金属性銀を添加し、そして均質になるまで混合する。要約すると、2w/w濃度の銀とともに、130~230kDa、好ましくは145~210kDa、そしてより好ましくは160~200kDaの間の重量平均MWを有するHAを含む配合物は、潜在的に病原性である細菌を除去可能であり、そしてこれを、乾式スプレーまたは皮膚用の泡または親水性ゲルの形で、例えば、多様な起源の皮膚病変および/または創傷から生じる皮膚病変および創傷の治療のための局所療法で有効に使用することも可能である。本発明の組成物中の銀は、コロイド性金属型または微粒子化スポンジ様金属型で使用可能であり、MRSA感染に対する驚くべきより高い活性を考慮すると、後者が好ましい。"