"アミロイドβペプチドのN末端部分に由来する5~15個の連続したアミノ酸配列が、単一もしくは複数個反復して、種子貯蔵タンパクのアミノ酸配列中に挿入されたアミノ酸配列を有する融合タンパク質を含む、アルツハイマー病を予防および/または治療するためのワクチン組成物。前記種子貯蔵タンパク質が、ダイズの11SグロブリンのA1aB1bサブユニット、インゲンマメのアルセリン、イネのプロラミンのいずれかであることを特徴とする、請求項1に記載のワクチン組成物。動物に投与した際にアミロイド特異性抗体の産生をもたらす、請求項1または2記載のワクチン組成物。動物に投与した際に脳においてアミロイド斑に関連した可溶性および/または不溶性アミロイドβ1~42の有意な減少を引き起こす、請求項1または2記載のワクチン組成物。認知記憶能の喪失を特徴とするアルツハイマー病に罹患した動物への投与が認知記憶能の回復をもたらす、請求項1または2記載のワクチン組成物。本発明は、新たなアルツハイマー病の予防および/または治療のためのワクチン組成物を提供することを目的とする。本発明者は、上記課題を解決するため鋭意研究を行った結果、アミロイドβペプチドのN末端部分に由来する5~15個の連続したアミノ酸配列が、単一もしくは複数個反復して、種子貯蔵タンパクのアミノ酸配列中に挿入されたアミノ酸配列を有する融合タンパク質改変型種子貯蔵タンパク質を含むアルツハイマー病の予防および/または治療に関するワクチン組成物を見出すことに成功し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は、以下を包含する。1アミロイドβペプチドのN末端部分に由来する5~15個の連続したアミノ酸配列が、単一もしくは複数個反復して、種子貯蔵タンパクのアミノ酸配列中に挿入されたアミノ酸配列を有する融合タンパク質を含む、アルツハイマー病を予防および/または治療するためのワクチン組成物。2前記種子貯蔵タンパク質が、ダイズの11SグロブリンのA1aB1bサブユニット、インゲンマメのアルセリン、イネのプロラミンのいずれかであることを特徴とする、1に記載のワクチン組成物。3動物に投与した際にアミロイド特異性抗体の産生をもたらす、1または2のワクチン組成物。4動物に投与した際に脳においてアミロイド斑に関連した可溶性および/または不溶性アミロイドβ1~42の有意な減少を引き起こす、1または2のワクチン組成物。5認知記憶能の喪失を特徴とするアルツハイマー病に罹患した動物への投与が認知記憶能の回復をもたらす、1または2のワクチン組成物。本発明によれば、アルツハイマー病に対する新たなワクチン組成物を提供することが可能となり、アルツハイマー病の予防や治療が可能となる。以下に、本発明を詳細に説明する。1.アミロイドβ抗原ペプチドおよびそれをコードする遺伝子本発明におけるアミロイドβ抗原ペプチドとは、天然のアミロイドβペプチド42アミノ酸残基のN末端部分に由来する5~15個、好ましくは5~10個の連続するアミノ酸残基からなるペプチドが挙げられる。具体的には、N末端から1番目~15番目のアミノ酸配列番号1を含む領域のペプチドを好適に用いることができ、好ましくは1番目~5番目のアミノ酸配列番号2からなるペプチドまたは4番目~10番目のアミノ酸配列番号3からなるペプチドを用いることができ、さらに好ましくは4番目~10番目のアミノ酸からなるペプチドを用いることができる。また、これらのペプチドは単一でもよいが、複数個、例えば、2~15個、好ましくは2~5個を反復させた一続きの連結ペプチドとしても用いることができる。アミロイドβ抗原ペプチドの遺伝子をコードする塩基配列は公知GenBankaccessionNo.AB113349であるため、この塩基配列情報をもとに、cDNAライブラリーからアミロイドβペプチドをコードするDNAをスクリーニング操作によって単離することができる。また、アミロイドβペプチドをコードするDNAは化学合成により作製することもできる。2.野生型種子貯蔵タンパク質およびそれをコードする遺伝子本発明における種子貯蔵タンパク質としては、日常の食生活において食経験がある作物種子に由来するタンパク質が挙げられる。例えば、ダイズの11Sグロブリンを構成する各サブユニット、ダイズの7Sグロブリンを構成する各サブユニット、インゲンマメのアルセリン、イネのプロラミン、イネのグロブリン、更には他の作物の種子貯蔵タンパク質が挙げられる。好ましい野生型種子貯蔵タンパク質としては、ダイズの11SグロブリンのA1aB1bサブユニット、7Sグロブリンのαサブユニットもしくはβサブユニットが挙げられるが、ダイズの11SグロブリンのA1aB1bサブユニットがより好ましい。本発明において野生型種子貯蔵タンパク質とはAβ抗原ペプチドが挿入される前の種子貯蔵タンパク質を意味し、配列番号5、23もしくは25のアミノ酸配列、又はこのアミノ酸配列と80以上、好ましくは90以上、より好ましくは95以上の同一性identityを有するアミノ酸配列を含むタンパク質が挙げられる。野生型種子貯蔵タンパク質は、種子貯蔵タンパク質としての機能を維持している限り、配列番号5、23もしくは25のアミノ酸配列において1個又は複数個好ましくは1~20個、より好ましくは1~10個、さらに好ましくは1~5個のアミノ酸の置換、挿入、付加及び/又は欠失が存在するアミノ酸配列を有するものであってもよい。ここで、アミノ酸配列の同一性とは、比較する2つのアミノ酸配列を必要に応じて間隙を導入して整列アラインメントさせ、得られる最大のアミノ酸配列の同一性をいう。アミノ酸配列の同一性を決定する目的のためのアラインメントは、当業者の周知の種々の方法を用いて行うことができ、例えばBLAST、BLAST-2、ALIGN又はMegalignDNASTARソフトウェアのような公に入手可能なコンピュータソフトウエアや、GeneWorks2.5.1ソフトウェア株帝人システムテクノロジー、GENETIX-WINソフトウェア開発株等の市販のソフトウェアを使用することもできる。野生型種子貯蔵タンパク質をコードする遺伝子としては、上記のような野生型種子貯蔵タンパク質をコードする配列を有するものであれば特に制限されないが、例えば、配列番号4、22もしくは24の塩基配列を有する遺伝子が例示される。なお、種子貯蔵タンパク質としての機能を有する限り、配列番号4、22もしくは24の相補配列とストリンジェントな条件でハイブリダイズする遺伝子であってもよい。ここで、ストリンジェントな条件としては、例えば、68°C、0.1×SSC、0.1SDSで洗浄する条件が挙げられる。3.野生型種子貯蔵タンパク質へAβ抗原ペプチドが挿入されたワクチン組成物本発明のワクチン組成物は、アミロイドβペプチドのN末端部分に由来する5~15個の連続したアミノ酸配列が、単一もしくは複数個反復して、種子貯蔵タンパクのアミノ酸配列中に挿入されたアミノ酸配列を有する融合タンパク質改変型種子貯蔵タンパク質を含む。ここで、融合タンパク質は、好ましくは、野生型種子貯蔵タンパク質をコードする遺伝子の可変領域コード部分にアミロイドβ抗原ペプチドをコードする遺伝子をフレームシフトが生じないように挿入することによって得ることができる。ここで、アミロイドβ抗原ペプチドをコードする遺伝子をフレームシフトが生じないように挿入するとは、改変型種子貯蔵タンパク質のアミノ酸配列のうち、アミロイドβ抗原ペプチドのアミノ酸配列を除いた配列が、野生型種子貯蔵タンパク質のアミノ酸配列と同一となるように、野生型種子貯蔵タンパク質の可変領域にアミロイドβ抗原ペプチドが挿入されたことをいうが、可変領域をコードする塩基配列を欠損することなくアミロイドβ抗原ペプチドをコードする遺伝子が挿入されたことの他、可変領域をコードする塩基配列の一部がアミロイドβ抗原ペプチドをコードする遺伝子と置換されたことをも含む。本発明において、野生型種子貯蔵タンパク質の可変領域とは、その中に外来遺伝子由来のアミノ酸配列が挿入された場合であっても、野生型種子貯蔵タンパク質と同等の安定した3次元構造を維持することができ、それにより野生型種子貯蔵タンパク質の特性を維持することができる領域をいう。例えば、種子貯蔵タンパク質が、配列番号5のアミノ酸配列を含むダイズの11SグロブリンのA1aB1bサブユニットである場合には、配列番号5のアミノ酸番号20~28の領域可変領域I、アミノ酸番号111~128の領域可変領域II、アミノ酸番号198~216の領域可変領域III、アミノ酸番号268~315の領域可変領域IV、アミノ酸番号490~495の領域可変領域Vの5ヶ所が可変領域として知られている。また、野生型種子貯蔵タンパク質が、配列番号5のアミノ酸配列に1個又は複数個のアミノ酸の置換、挿入、付加及び/又は欠失が存在する、配列番号5のアミノ酸配列と一定の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むものである場合には、配列番号5のアミノ酸番号20~28に相当する領域、アミノ酸番号111~128に相当する領域、アミノ酸番号198~216に相当する領域、アミノ酸番号268~315に相当する領域、アミノ酸番号490~495に相当する領域が可変領域となる。ここで、特定のアミノ酸配列に相当するアミノ酸配列とは、最大のアミノ酸配列の同一性が得られるように、比較する2つのアミノ酸配列を必要に応じて間隙を導入して整列アラインメントさせたときの、一方の特定の部分アミノ酸配列に対応する他方の部分アミノ酸配列をいい、このようなアミノ酸配列は当業者であれば容易に特定することができる。野生型種子貯蔵タンパク質に複数の可変領域が存在する場合には、1つ又は複数の可変領域にアミロイドβ抗原ペプチドを挿入することで、改変型種子貯蔵タンパク質を調製することができる。例えば、野生型種子貯蔵タンパク質として、配列番号5のアミノ酸配列を含むダイズの11SグロブリンのA1aB1bサブユニットを用いる場合には、Aβ抗原ペプチドを挿入する好ましい可変領域として、可変領域II、III、IV、Vのいずれかを選択することができるが、IIIまたはIVに挿入することがより好ましい。また、アミロイドβ抗原ペプチドを挿入する可変領域として、可変領域II、III、IV、Vのうち2以上の領域を選択することもでき、例えば、IIIとIVの2つの領域に同時に挿入することや、IIとIIIとIVの3つの領域に同時に挿入することや、IIとIIIとIVとVの4つの領域に同時に挿入すること等もできる。ここで、アミロイドβ抗原ペプチドをコードする遺伝子は、野生型種子貯蔵タンパク質をコードする塩基配列にフレームシフトが生じないように導入する必要がある。また、野生型種子貯蔵タンパク質をコードする遺伝子として、配列番号23のアミノ酸配列を含むインゲンマメのアルセリン5をコードする遺伝子を用いる場合には、可変領域については知られていないため、A1aB1bサブユニットとのDNA配列を比較してディスオーダー領域を確認し、更にアミノ酸配列及び立体構造を他の類似貯蔵タンパクと比較し、配列のギャップ及び構造上の違いを確認することによって、可変領域を推定する必要がある。このような推定により特定される配列番号23のアミノ酸番号149~150をコードする領域可変領域A及び/又はアミノ酸番号250~251をコードする領域可変領域Bにアルツハイマー病ワクチンをコードする遺伝子を挿入することが好ましい。また、野生型種子貯蔵タンパク質をコードする遺伝子が、配列番号23のアミノ酸配列に1個又は複数個のアミノ酸の置換、挿入、付加及び/又は欠失が存在する、配列番号23のアミノ酸配列と同一性を有するアミノ酸配列をコードする塩基配列を含むものである場合には、配列番号23のアミノ酸番号149~150に相当するアミノ酸配列をコードする領域、アミノ酸番号250~251に相当するアミノ酸配列をコードする領域にアルツハイマー病ワクチンをコードする遺伝子を挿入することが好ましい。さらに、野生型種子貯蔵タンパク質をコードする遺伝子として、配列番号25のアミノ酸配列を含むイネのプロラミンをコードする遺伝子を用いる場合には、立体構造および可変領域については知られていないため、アミノ酸配列を他の類似貯蔵タンパクと比較し、ギャップ構造を確認することによって、可変領域を推定する必要がある。このような推定により特定される配列番号25のアミノ酸番号110~111をコードする領域可変領域aにアルツハイマー病ワクチンをコードする遺伝子を挿入することが好ましい。また、野生型種子貯蔵タンパク質をコードする遺伝子が、配列番号25のアミノ酸配列に1個又は複数個のアミノ酸の置換、挿入、付加及び/又は欠失が存在する、配列番号25のアミノ酸配列と同一性を有するアミノ酸配列をコードする塩基配列を含むものである場合には、配列番号25のアミノ酸番号110~111に相当するアミノ酸配列をコードする領域にアルツハイマー病ワクチンをコードする遺伝子を挿入することが好ましい。4.アミロイドβ抗原ペプチドが挿入されたワクチン組成物の製造本発明のワクチン組成物を製造するための方法に限定はなく、慣用のペプチド合成法によるか、或いは、慣用のペプチド合成法によりあらかじめ、部分的に合成したペプチド同士を結合して、調製することができる。また当該ペプチドは、各メーカーから市販されているペプチドシンセサイザーを用いて装置のプロトコールに従って合成することができる。また、本発明の融合タンパク質は、組換えDNA技術により調製することができる。例えば、PCRや制限酵素などを用いて設計した融合タンパク質のアミノ酸配列をコードするDNAを調製し、これを宿主において機能するプロモーターを含み、自律増殖可能なベクターに挿入し、それを大腸菌、枯草菌、放線菌、酵母などの微生物、動植物やそれらの細胞又は組織等の宿主に導入して形質転換体としたり、トランスジェニック動植物を作製して、それらを培養、育成した後、本発明の融合タンパク質を適宜の方法により、採取精製することができる。また、本発明の融合タンパク質は、組換え植物により製造することができる。植物種としては、例えば、キク科Asteraceae、アブラナ科Brassicaceae、ウリ科Cucurbitaceae、セリ科Apiaceae、バラ科Rosaceae、ブドウ科Vitaceae、ツツジ科Vaccinium、パパイヤ科Caricaceae、マメ科Fabaceae、クルミ科Juglandaceae、アカザ科Chenopodiaceae、又はナス科Solanaceae、ヒルガオ科Convolvulaceae、イネ科Poaceae、又はヤモノイモ科Dioscoreaceae、又はヒルガオ科Convolvulaceaeなどに属する植物種、より詳細には、レタス、チコリ、ヨモギ、ブロッコリ、キャベツ、ダイコン、ワサビ、カラシ、キュウリ、メロン、カボチャ、ハヤトウリ、ニンジン、ミツバ、セロリ、リンゴ、プラム、ウメ、モモ、イチゴ、ラズベリー、アーモンド、ナシ、ビワ、ブドウ、クランベリー、コケモモ、ブルーベリー、パパイヤ、アルファルファ、ダイズ、クルミ、ホウレンソウ、トマト、トウガラシ、サツマイモ、イネ、トウモロコシ、コムギ、オオムギ、ライムギ、ヤマノイモ、ジャガイモなどが挙げられる。上記宿主への改変型種子貯蔵タンパク質をコードする遺伝子の導入は、すでに報告され、確立されている種々の方法により行うことができるが、アグロバクテリウム法、PEG法、エレクトロポレーション法、パーティクルガン法、ウイスカー超音波法などを用いて遺伝子導入用ベクターを導入することが好ましい。特に、組換え植物によって製造する場合は、本発明の融合タンパク質を発現させた植物体、例えば種子、茎葉、果実、塊茎等をそのまま加工して、本発明の融合タンパク質を含有する経口摂取用の組成物として使用することも随意である。5.ワクチン組成物の動物への投与方法上記により製造された当該ワクチン組成物を動物個体に投与することにより、アミロイドβに対する免疫反応が誘導され、それによってアミロイドβ沈着を低下させることができる。本発明のワクチン組成物は、皮下、経口、筋内、非経口又は腸内経路などの従来の経路のいかなるものによっても投与することができる。例えば、経口摂取や、皮下、皮内、筋肉内、血管内、腹腔内や胸腔内などの体腔内への注射器、カテーテル、点滴などによる投与方法を使用することができる。本発明のワクチン組成物を投与する動物としては、例えば、ヒトを含む哺乳動物及びその他の脊椎動物等が挙げられる。本発明のワクチン組成物を投与する際に、ワクチンの処方に通常用いられるアジュバント免疫原に対する免疫応答を増強できる物質または物質の組成物のことを配合することができ、アジュバントとしては、例えば、コレラトキシンBやサポニン系などが挙げられる。ワクチン組成物の投与量は、投与動物の年齢、性別、体重、症状、投与経路等の条件に応じて適宜設定することができるが、一般的には、アミロイドβペプチドの投与量に換算して一日あたり0.1~3000μg/kg体重の範囲であり、好ましくは1~1000μg/kg体重の範囲である。上記投与量は、数日間隔で投与してもよいし、数週間~数ヶ月間隔、例えば1~12週間隔で投与しても良い。また、投与回数は、数回から数十回が適当であるが、特に限定されるものではない。本発明の方法により、アミロイドβに対する免疫反応が誘導される。アミロイドβに対する免疫反応は、抗アミロイドβ抗体の産生、脳組織内のアミロイドβ量の減少およびアミロイドβ沈着の減少などにより確認することができる。抗アミロイドβ抗体の産生は、血中の抗アミロイドβ抗体の検出によって調べることができ、抗体レベルは、例えばELISA法により測定することができる。ELISA法は、例えばマイクロプレートに抗原を吸着させ、抗血清を調製し、調製した抗血清を2倍段階希釈し、希釈した抗血清をプレートに加え抗原抗体反応を行わせることによって行なう。そして発色のために、免疫動物の抗体をペルオキシダーゼ酵素標識した異種抗体と反応させ、二次抗体とする。吸光度が最大発色吸光度の12である場合、抗体の希釈倍率に基づいて、抗体価を算出することができる。脳組織におけるアミロイドβレベルは、例えば脳組織の抽出物およびBiosourceELISAkitなどを用いて測定することができる。アミロイドβ沈着の減少効果は、例えば次の方法によって測定することができる。脳組織切片を70ギ酸で処理し、5H2O2で内因性のペルオキシダーゼを失活させた後、抗Aβ抗体と切片を反応させ、ペルオキシダーゼ標識二次抗体を用いてDAB染色を行う。染色後、顕微鏡での観察によりAβ蓄積部分の面積を測定することができる。本発明のワクチン組成物を投与しない場合に比べ、蓄積部分の面積の割合が減少すれば、アミロイドβ沈着レベルが減少したと判断できる。以下に、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。なお、以下の実施例で行われる実験操作の手順は、特に記述しない限り、MolecularCloning第2版に記載される方法に従っている。実施例1アミロイドβ抗原ペプチドを挿入した改変型ダイズタンパク質の発現プラスミドの構築Aβ1-15抗原ペプチドβアミロイド抗原決定基として知られる配列番号1のアミノ酸配列からなるペプチド以下Aβ15と略すを含む改変型A1aB1bをコードする遺伝子をダイズ種子中で発現させるための発現プラスミドを構築した。Aβ15をコードする塩基配列をリジン残基を2個間に挟んでタンデムに2つ連結したオリゴヌクレオチドセンス鎖、配列番号6及びその相補配列からなるオリゴヌクレオチドアンチセンス鎖、配列番号7を、株式会社ファスマックのカスタムDNA受託合成サービスを利用して合成したセンス鎖をAB15F、アンチセンス鎖をAB15Rと呼ぶ。AB15FおよびAB15Rの各100pmolを、それぞれ最終濃度1mMのATP存在下でT4PolynucleotideKinaseタカラバイオ社製でリン酸化反応を行い、反応後の各反応液を混合し、94°Cで10分間加熱後、一時間かけて37°Cまで徐々に冷却しアニーリングを行った。こうしてリジン残基を2個間に挟んでAβ15が2つ連なったペプチドAβ15×2をコードする二本鎖DNA断片を得た。公知のA1aB1b遺伝子GenBankaccessionNo.AB113349のcDNAがpBluescriptIISK-ストラタジーン社製のSmaIサイトにクローニングされているプラスミドpBSK-A1aB1bを鋳型として、ベクター部分を含み、A1aB1bをコードする遺伝子の特定の可変領域が5’末端及び3’末端となるようにPCRを用いて増幅し、得られたDNA断片と、Aβ15×2をコードする前記二本鎖DNA断片とを連結して改変型A1aB1bをコードする遺伝子を含むプラスミドを作製した。具体的な方法を以下に示す。配列番号4のA1aB1bをコードする遺伝子の可変領域IIIに挿入するための、配列番号8及び9のプライマーペアからなるプライマーセットPS-2のプライマーセットを調製した。上記プライマーセットを用いてAβ15×2をコードするDNAが挿入される、配列番号4の塩基配列領域を、PS-2領域と呼ぶ。pBSK-A1aB1bの10ngを鋳型としてPCRを行った。PCRは、一反応あたり50μlの反応液を用い、変性反応を94°Cで2分、1サイクル実施後、変性反応を94°Cで30秒、アニーリングを57°Cで30秒及び伸長反応を68°Cで5分を1サイクルとして25サイクル行った。なお、反応液は200μMのdNTP混合液、1.5mMのMgSO4溶液、1μMの上記各プライマー、1ユニットのKOD-Plus-東洋紡績社製を含むKOD-Plus-Ver.2バッファーを含んでいる。以降PCRはプライマーを除き、特に記述がない限り同組成を用いて行った。こうして得られたDNA断片の50fmolと上記のAβ15×2をコードする二本鎖DNA断片の150fmolとを、DNAライゲーションキットタカラバイオ社製を用いて、16°Cで40分間連結反応を行った。反応産物を大腸菌DH5αコンピテントセルタカラバイオ社製に形質転換し、複数の形質転換大腸菌を得た。得られた大腸菌より、プラスミドDNAを抽出精製し、株式会社ファスマックのDNAシーケンシングサービスを用いて改変型A1aB1bをコードする遺伝子以降A1aB1bMK1と称するについて塩基配列の確認を行った。実施例2アミロイドβ抗原ペプチドを挿入した改変型ダイズタンパク質の発現プラスミドの構築Aβ4-10抗原ペプチドβアミロイド抗原決定基として知られる配列番号3のアミノ酸配列からなるペプチド以下Aβ7と略すを含む改変型A1aB1bをコードする遺伝子をダイズ種子中で発現させるための発現プラスミドを構築した。Aβ7をコードする塩基配列をタンデムに3つ連結したオリゴヌクレオチドセンス鎖、配列番号10及びその相補配列からなるオリゴヌクレオチドアンチセンス鎖、配列番号11を、株式会社ファスマックのカスタムDNA受託合成サービスを利用して合成したセンス鎖を410F、アンチセンス鎖を410Rと呼ぶ。以降、特に記述がない限りオリゴヌクレオチドは、同社のカスタムDNA受託合成サービスを利用して合成した。410Fおよび410Rの各100pmolを、それぞれ最終濃度1mMのATP存在下でT4PolynucleotideKinaseタカラバイオ社製でリン酸化反応を行い、反応後の各反応液を混合し、94°Cで10分間加熱後、一時間かけて37°Cまで徐々に冷却しアニーリングを行った。こうしてAβ7が3つ連なったペプチドAβ7×3をコードする二本鎖DNA断片を得た。公知のA1aB1b遺伝子GenBankaccessionNo.AB113349のcDNAがpBluescriptIISK-ストラタジーン社製のSmaIサイトにクローニングされているプラスミドpBSK-A1aB1bを鋳型として、ベクター部分を含み、A1aB1bをコードする遺伝子の特定の可変領域が5’末端及び3’末端となるようにPCRを用いて増幅し、得られたDNA断片と、Aβ7×3をコードする前記二本鎖DNA断片とを連結して改変型A1aB1bをコードする遺伝子を含むプラスミドを作製した。具体的な方法を以下に示す。配列番号4のA1aB1bをコードする遺伝子の可変領域II、IIIおよびIVに挿入するための、プライマーセットPS-1、配列番号12、13、プライマーセットPS-2、配列番号8、9、プライマーセットPS-3、配列番号14、15の計3つのプライマーセットを調製した。pBSK-A1aB1bの10ngを鋳型としてPCRを行った。PCRは、一反応あたり50μlの反応液を用い、変性反応を94°Cで2分、1サイクル実施後、変性反応を94°Cで30秒、アニーリングを57°Cで30秒及び伸長反応を68°Cで5分を1サイクルとして25サイクル行った。なお、反応液は200μMのdNTP混合液、1.5mMのMgSO4溶液、1μMの上記各プライマー、1ユニットのKOD-Plus-東洋紡績社製を含むKOD-Plus-Ver.2バッファーを含んでいる。こうして得られた各DNA断片の50fmolと上記のAβ7×3をコードする二本鎖DNA断片の150fmolとを、DNAライゲーションキットタカラバイオ社製を用いて、16°Cで40分間連結反応を行った。このように作製された改変型A1aB1b以降A1aB1bM1と称するをコードする遺伝子について塩基配列の確認を行った。実施例3大腸菌による改変型ダイズタンパク質の生産上記で作製されたA1aB1bMK1およびA1aB1bM1を大腸菌中で発現させ、それぞれのタンパク質を生産するための発現プラスミドを構築した。A1aB1bMK1およびA1aB1bM1遺伝子のDNA断片をリン酸化反応後、あらかじめNcoIおよびXhoIで切断後、T4DNAポリメラーゼタカラバイオ社製で平滑末端化した後、CIAPタカラバイオ社製で脱リン酸化反応を行った市販の大腸菌発現ベクターpET21dベクターNOVAGEN社製と連結反応を行った。得られたクローンの塩基配列を解析することによって、A1aB1bMK1およびA1aB1bM1遺伝子が順方向で連結したクローンを選択した。こうして、A1aB1bMK1およびA1aB1bM1をコードする遺伝子の下流に6×Hisタグが連結した大腸菌発現ベクターpETA1aB1bMK1およびpETA1aB1bM1を構築した。上記の方法により作製したpETA1aB1bMK1およびpETA1aB1bM1を形質転換した市販の大腸菌AD494系統NOVAGEN社製を抗生物質として15mg/lのカナマイシン、50mg/lのカルベニシリンを添加した公知のLB培地で37°C、120rpmで18時間前培養を行った。前培養を行った菌液を、新たに作製した抗生物質として15mg/lのカナマイシン、50mg/lのカルベニシリンを添加し、NaCl濃度を1Mに改変した改変LB培地に、5容量容量添加し37°C、120rpmで2時間培養を行った後、IPTGを最終1mMの濃度で添加し、20°C、50rpmの条件で、培養を継続した。培養後、遠心分離により菌体を回収した結果、6Lの培養液より約10gの菌体が回収された。得られた菌体は、市販のBugBusterProteinExtractionReagentNOVAGEN社製により可溶性タンパク質画分の抽出を行った。抽出後のタンパク質は、市販のHisBindPurificationKitsNOVAGEN社製により、精製を行った。精製後のタンパク質は、50mMTrisHClpH80、300mMNaCl、緩衝液で、一昼夜透析を行い脱塩した。こうして改変型タンパク質をpETA1aB1bMK1を96mgおよびpETA1aB1bM1を60mgを得ることができた。実施例4組換えダイズによる改変型ダイズタンパク質の生産A1aB1bMK1をコードする遺伝子を種子特異的に発現させるため、上記で得られたA1aB1bMK1をコードする遺伝子、公知のダイズのプロモーターGy1PおよびターミネーターGy1Tを公知のpUHGベクターY.Kita,K.Nishizawa,MTakahashi,MKitayama,M.Ishimoto.2007Geneticimprovementofsomaticembryogenesisandregenerationinsoybeanandtransformationoftheimprovedbreedinglines.PlantCellReports26:439-447に連結し、発現プラスミドの構築を行った。上記のうちA1aB1bMK1配列番号17をコードするDNA断片を得るため、配列番号18及び19のオリゴヌクレオチド対からなるプライマーセットを用いてPCRを行った。PCRは、一反応あたり50μlの反応液を用い、変性反応を94°Cで2分、1サイクル実施後、変性反応を94°Cで30秒、アニーリングを57°Cで30秒及び伸長反応を68°Cで2分を1サイクルとして25サイクル行った。こうして、A1aB1bMK1遺伝子のDNA断片を得た。A1aB1bMK1遺伝子のDNA断片、プロモーターDNA断片、ターミネーターDNA断片はリン酸化反応後、あらかじめSmaIで切断後CIAPタカラバイオ社製で脱リン酸化反応を行ったpUHGベクターと連結反応を行った。得られたクローンからGy1Pプロモーター、A1aB1bMK1をコードする遺伝子、Gy1Tターミネーターの順に正しく連結されたクローンを、塩基配列を解析することによって選択した。こうして、A1aB1bMK1をコードする遺伝子が種子特異的に発現する植物形質転換ベクターpUHGA1aB1bMK1を構築した。また、同様にしてGy1Pプロモーター、A1aB1bM1をコードする遺伝子、Gy1Tターミネーターの順に正しく連結されたA1aB1bM1配列番号21をコードする遺伝子を種子特異的に発現させるための植物形質転換ベクターpUHGA1aB1bM1を構築した。これらの植物形質転換ベクターは、公知の方法によってダイズ細胞に遺伝子導入を行い、A1aB1bMK1およびA1aB1bM1タンパク質が発現し、種子中に蓄積している形質転換種子を多数得ることができた。種子中のA1aB1bMK1およびA1aB1bM1タンパク質の蓄積は公知のアミロドβ抗体を用いたウエスタンブロット法による検出法で確認した。A1aB1bM1タンパク質の精製方法上記実施例4において作製した、A1aB1bM1タンパク質を蓄積する形質転換種子10粒を192gミルによって粉砕した。粉砕物の10倍容量のヘキサンと粉砕種子を混合し、室温で1時間振とう攪拌を行い脱脂した。15000rpm、室温、30分の遠心分離によりヘキサンを除いた後、種子粉砕物を室温で風乾した。風乾後の重量は18gであった。04MNaCl、35mMリン酸ナトリウム、10mM2-メルカプトエタノール、1プロテアーゼインヒビターカクテルProteaseInhibitorCocktailforplantcellandtissueextractsDMSOsolution、SIGMA社製からなるタンパク質抽出バッファー20mlと脱脂種子粉砕物を混合し、室温で1時間振とう攪拌を行い種子タンパク質の抽出を行った。15000rpm、室温、30分の遠心分離により上清16mlの回収を行い、RCDCプロテインアッセイキットIIBioRad社製によりタンパク質濃度を測定した。その結果、濃度は16.8mg/mlであり、269mgの種子タンパク質が抽出された。この種子タンパク質溶液を、ゲル濾過クロマトグラフィーに供試した。条件は以下のとおりである。カラム:SephacrylS30026mmID×60cmGEヘルスケア社製、流速:2mlmin、緩衝液:04MNaCl、35mMリン酸ナトリウム、002アジ化ナトリウム、10mM2-メルカプトエタノール、フラクション回収:3minfra。各フラクションを実施例4と同様にウエスタンブロット法に供試し、A1aB1bM1画分の同定を行った。こうして、濃度1mgmlのA1aB1bM1精製タンパク質溶液48mlを回収した。回収されたA1aB1bM1タンパク質を、上記実施例3で精製した大腸菌生産A1aB1bM1タンパク質を標品として用いたウエスタンブロット法による分析の結果、純度は100であった。実施例5ワクチン組成物によるマウス血清中の抗アミロイドβ抗体価の測定市販の2ヶ月齢マウスBALB/c各試験区5匹を用い、実施例3で得られたA1aB1bMK1およびA1aB1bM1を50μg/匹/回の投与量で1週間おきに5回皮下注射した。アジュバントとして、AbISCO100ISCONOVA社製を12μg/匹/回を用いた。投与開始から10週後にマウスから血液を採取し、血清中の抗Aβ42抗体量を測定した。Aβ1-42合成ペプチドペプチド研究所社製100μlを、ELISA用96ウェルプレートの各ウェルに吸着させ、BlockerCaseininPBSでブロッキングした後、マウス血清を加え、ペルオキシダーゼ標識抗マウスIgG抗体で検出した。検出試薬として1stepUltraTMBELISAを用いた。抗体価の評価は、RAINBOWsunriseマイクロプレートリーダーTECAN社製での吸光度測定により行った。結果を図1に示す。コントロール群A1aB1b野生型種子貯蔵タンパク質投与群と比較し、治療群の全個体において吸光度が高く抗体価の顕著な増加が観察された。実施例6ワクチン組成物の経口投与による行動試験本実施例で実施する行動試験では、公知のモーリス水迷路試験を行った。2ヶ月齢のAPPトランスジェニックマウスTgCRND8ChishtiMAYangDSJanusCPhinneyALHornePPearsonJStromeRZukerNLoukidesJFrenchJTurnerSLozzaGGrilliMKunickiSMorissetteCPaquetteJGervaisFBergeronCFraserPECarlsonGAGeorgeHyslopPSWestawayDTHEJOURNALOFBIOLOGICALCHEMISTRY2762156270を用い、本発明のワクチン組成物A1aB1bM1の認知機能回復効果について検討した。マウスを8匹ずつ2群に分け、予備訓練の後、1群をA1aB1bM1投与群とし、もう1群はアミロイドβ抗原を含まないA1aB1bコントロール群とした。投与群には、A1aB1bM1を0.5mg/匹/回の投与量で毎週1回で計16回4ヶ月間経口投与した。A1aB1bコントロール群も同様に行なった。試験は円形のプール直径150cm、深さ45cmの底に、水中に隠れるように円形のプラットホームを置き、マウスにプラットホームの位置を記憶させた後、投与群、コントロール群および非投与群のマウスを1ヶ月毎に1回/日で5日連続の遊泳試験を行った。この試験では、遊泳開始後プラットホームに到達するまでの遊泳時間を測定した。結果を図2に示す。A1aB1bM1投与群ではコントロール群に比べプラットフォーム到達までの時間において有意な改善が認められ、疾患マウスの学習障害を改善することが明らかとなった。実施例7脳アミロイドへの影響上記A1aB1bM1もしくはA1aB1bを経口投与したトランスジェニックマウスまたは非投与トランスジェニックマウスを、投与後4ヶ月で解剖し、前頭葉皮質、頭頂葉、および海馬の皮質を4パラホルムアルデヒドで固定し、パラフィンワックスに包埋して脳組織切片を調製した。上記組織を用いてアミロイドβタンパク質またはアミロイド斑を検出するために、組織切片を70ギ酸で処理し、5H2O2で内因性のペルオキシダーゼを失活させた。次いで組織切片をラビット抗panAβ抗体と反応させ、ペルオキシダーゼ標識二次抗体を加え、DAB染色を行った。染色した切片を、顕微鏡に連結させた3CCDカメラを用いて観察し、各領域におけるアミロイドβ蓄積部分の面積を測定し、面積率指数を計算した。アミロイドβ沈着指数を図3に示す。A1aB1bM1投与により、アミロイド斑がコントロールA1aB1b投与群に比べ有意に減少したことが確認された。"