"配列番号2で表されるアミノ酸配列の第50番から第73番までのアミノ酸配列とそのN末端に結合するX1nで表されるアミノ酸配列とからなるポリペプチドaのC末端に、配列番号2で表されるアミノ酸配列の第218番から第261番までのアミノ酸配列とそのN末端に結合するX2mで表されるアミノ酸配列とからなるポリペプチドbのN末端が結合してなるタンパク質であって、脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質;Aに規定されるタンパク質において上記第50番から第73番までアミノ酸配列および/または上記第218番から第261番までのアミノ酸配列の領域中に1もしくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/または付加されたアミノ酸配列からなり、かつ脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質;またはCAに規定されるタンパク質のアミノ酸配列に対して少なくとも60の配列相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつ脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質。配列番号2で表されるアミノ酸配列の第50番から第73番までのアミノ酸配列とそのN末端に結合するX1nで表されるアミノ酸配列とからなるポリペプチドaのC末端に、配列番号2で表されるアミノ酸配列の第229番から第261番までのアミノ酸配列とそのN末端に結合するX2mで表されるアミノ酸配列とからなるポリペプチドbのN末端が結合してなるタンパク質であって、脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質;Aに規定されるタンパク質において上記第50番から第73番までアミノ酸配列および/または上記第229番から第261番までのアミノ酸配列の領域中に1もしくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/または付加されたアミノ酸配列からなり、かつ脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質;またはCAに規定されるタンパク質のアミノ酸配列に対して少なくとも60の配列相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつ脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質。X1nで表されるアミノ酸配列が、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表されるアミノ酸配列の第1番から第49番までのアミノ酸配列から選択される任意の数n1≦n≦49のアミノ酸配列であるか但し、配列番号21における第2番目及び第8番目のアミノ酸Xaa、並びに配列番号23における第6番目のアミノ酸Xaaは、任意のアミノ酸である。;又は、X1nで表されるアミノ酸配列が、配列番号11に表されるアミノ酸配列の第1番から第48番までのアミノ酸配列から選択される任意の数n1≦n≦48のアミノ酸配列である、請求項1又は2に記載のタンパク質。X2mで表されるアミノ酸配列が、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表されるアミノ酸配列の第192番から第217番までのアミノ酸配列から選択される任意の数m1≦m≦26のアミノ酸配列若しくは配列番号2~10及び12~23のいずれかに表されるアミノ酸配列の第192番から第228番までのアミノ酸配列から選択される任意の数m1≦m≦37のアミノ酸配列であるか;又は、X2mで表されるアミノ酸配列が、配列番号11に表されるアミノ酸配列の第191番から第216番までのアミノ酸配列から選択される任意の数m1≦m≦26のアミノ酸配列若しくは配列番号11に表されるアミノ酸配列の第191番から第227番までのアミノ酸配列から選択される任意の数m1≦m≦37のアミノ酸配列である、請求項1~3のいずれか1項に記載のタンパク質。X1nで表されるアミノ酸配列が、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表されるアミノ酸配列の第1番から第49番、第26番から第49番、第40番から第49番、または第43番から第49番までのアミノ酸配列であるか但し、配列番号21における第2番目及び第8番目のアミノ酸Xaa、並びに配列番号23における第6番目のアミノ酸Xaaは、任意のアミノ酸である。;又は、X1nで表されるアミノ酸配列が、配列番号11に表されるアミノ酸配列の第1番から第48番、第26番から第48番、第40番から第48番、または第43番から第48番までのアミノ酸配列である、請求項1~4のいずれか1項に記載のタンパク質。X2mで表されるアミノ酸配列が、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表わされるアミノ酸配列の第192番から第217番までのアミノ酸配列若しくは配列番号2~10及び12~23のいずれかに表わされるアミノ酸配列の第192番から第228番までのアミノ酸配列であるか;又は、X2mで表されるアミノ酸配列が、配列番号11で表わされるアミノ酸配列の第191番から第216番までのアミノ酸配列若しくは配列番号11で表わされるアミノ酸配列の第191番から第227番までのアミノ酸配列である、請求項1~4のいずれか1項に記載のタンパク質。X1nで表されるアミノ酸配列が配列番号2に表されるアミノ酸配列の第1番から第49番または第26番から第49番までのアミノ酸配列であり、かつ、X2mで表されるアミノ酸配列が配列番号2で表されるアミノ酸配列の第192番から第217番までのアミノ酸配列または配列番号2で表されるアミノ酸配列の第192番から第228番までのアミノ酸配列である、請求項1~6のいずれか1項に記載のタンパク質。前記タンパク質が、Aに規定されるタンパク質である、請求項1~7のいずれか1項に記載のタンパク質。前記タンパク質が、Aに規定されるタンパク質のアミノ酸配列に対して少なくとも70の配列相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつ脂肪滴への特異的局在性を示す、請求項1~7のいずれか1項に記載のタンパク質。標識タンパク質及び/又はアフィニティタグとの融合タンパク質である、請求項1~9のいずれか1項に記載のタンパク質。被導入物質により修飾された請求項1~10のいずれか1項に記載のタンパク質。被導入物質が、蛍光化合物である、請求項11に記載のタンパク質。請求項1~10のいずれか1項に記載のタンパク質をコードする核酸。請求項13に記載の核酸を含む、発現用ベクター。請求項14に記載の発現用ベクターにより形質転換された、形質転換体。哺乳細胞において脂肪滴の可視化に用いるための、請求項13に記載の発現用ベクター。哺乳細胞において脂肪滴の可視化に用いるための、請求項1~12のいずれか1項に記載のタンパク質。請求項1~12のいずれか1項に記載のタンパク質に対する抗体。脂肪滴の染色には従来SudanIII赤色色素、OilRedO赤色色素、NileRed黄色蛍光色素、Bodipy493503緑色蛍光色素などが用いられてきた。いずれも脂溶性化合物であり、中性脂肪に親和性が高いため、脂肪滴内部の脂質自体を染色する顕微鏡観察で円形三次元であれば球形の像が得られる。SudanIIIやOilRedOは70エタノールなどに溶解して使用するが、実はこのような高濃度のエタノールは脂肪滴を融合させてしまい正しい像が得られないと言う問題がある。また、グリセロールを含む包埋剤を用いると、アルデヒド類で固定した後でもやはり脂肪滴の融合が見られる非特許文献2参照。NileRedやBodipy493503は水系の溶液で使用できるが、Bodipy493503の方が、相対的に脂肪滴特異性に優れている。また、Bodipy493503と、化学構造の若干異なるその誘導体が開発されており、脂肪滴に親和性のある赤色蛍光色素もある。これらの色素は、トリグリセリドなどの中性脂肪に対する親和性を利用するもので、原理的に必ずしも脂肪滴に特異的に作用するものではない。現在最も汎用されているBodipy493503は、条件によって赤色の蛍光が出てしまい、多色の蛍光観察に問題を起こしうることが発見された非特許文献3参照。また、細胞内在性の脂肪滴膜局在タンパク質に蛍光タンパク質を融合させたコンストラクトも多数作製され、脂肪滴の染色イメージングに利用されている。しかし、これらは本来的には当該タンパク質の機能を調べる道具であるから、発現させた当該タンパク質の機能が強く現れる可能性があり、脂肪滴が当該タンパク質の影響を受けて細胞内の状態が変化する可能性もある。したがって、これら従来技術では、細胞内における本来の脂肪滴の正確な情報が得られないという問題がある。また、小胞体ERなど他の部位に局在したり、全部の脂肪滴を均一にイメージングできないという問題がある非特許文献4~8。上述の従来技術では、ADRPと蛍光タンパク質の融合体EGFPADRPが脂肪滴のイメージングツールとして優れている非特許文献4参照。しかし、ADRPは脂肪滴の成長や動態に密接に関連しているタンパク質であり非特許文献9参照、それ自体の強制発現の影響を考慮する必要がある。また、EGFPADRPを発現させた場合、本来細胞で発現しているADRPを検出することが手技的に煩雑となり、評価が難しい。抗体を用いて脂肪滴を可視化する方法では、抗ADRP抗体が汎用されている。抗体染色の場合、固定や透過処理permeabilizationの工程において脂肪滴や脂肪滴膜の形態が変化する場合が多いこと、必ずしも細胞性の抗原が全ての脂肪滴膜に均一に存在しないことから、全ての脂肪滴膜を完全に均一に染めだすことは困難である非特許文献10参照。本発明の課題は、上記従来技術における問題点を解決できる細胞内脂肪滴の可視化イメージング技術を提供することにある。具体的には、本発明の課題は、正確な像イメージとして、細胞内における脂肪滴のみを特異的に可視化する技術を提供することにある。また、同時に、本発明の課題は、本来の細胞の状態、及び細胞内における本来の脂肪滴の状態を変化させることなく、該脂肪滴のみを特異的に可視化する技術を提供することにある。なお、特許文献1には、C型肝炎ウイルスの非構造タンパク質4BNS4BのN末端側50番から74番のアミノ酸からなるポリペプチド、及びNS4BのN末端側40番から63番のアミノ酸からなるポリペプチドが記載されている。しかしながら、特許文献1に記載される技術は、脂肪滴の可視化技術に関するものではない。非特許文献11には、NS4BのC末端領域をHuh7細胞に発現させた場合、点状の構造が観察されたことが記載され、さらに、NS4BのC末端領域は膜に関係するであろうことが示唆されている。しかしながら、非特許文献11には、NS4BのC末端領域は脂肪滴には局在しなかった事が記載されている。したがって、非特許文献11に記載の技術は、脂肪滴の可視化技術に関するものではない。非特許文献12には、NS4BのC末端側にEGFPを融合させたタンパク質NS4B-EGFPを細胞で発現させたところ、NS4B-EGFPがERに局在して観察されたことが記載されている。非特許文献12には、脂肪滴の可視化技術に関する知見は記載されていない。非特許文献13には、NS4Bは、細胞質に渡って点状のパターンspotlikepatternを示したことが記載されている。非特許文献13には、脂肪滴の可視化技術に関する知見は記載されていない。本発明者は、上記課題を解決するため鋭意検討した結果、C型肝炎ウイルスhepatitisCVirus;HCVの非構造タンパク質4BNS4BのN末端側領域とC末端側領域を融合させたタンパク質が脂肪滴に特異的に局在することを見出した。本発明は、係る知見により完成されたものである。すなわち、本発明は以下に関する。1配列番号2で表されるアミノ酸配列の第50番から第73番までのアミノ酸配列とそのN末端に結合するX1nで表されるアミノ酸配列とからなるポリペプチドaのC末端に、配列番号2で表されるアミノ酸配列の第218番から第261番までのアミノ酸配列とそのN末端に結合するX2mで表されるアミノ酸配列とからなるポリペプチドbのN末端が結合してなるタンパク質であって、脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質;Aに規定されるタンパク質において上記第50番から第73番までアミノ酸配列および/または上記第218番から第261番までのアミノ酸配列の領域中に1もしくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/または付加されたアミノ酸配列からなり、かつ脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質;またはCAに規定されるタンパク質のアミノ酸配列に対して少なくとも60の配列相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつ脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質。2配列番号2で表されるアミノ酸配列の第50番から第73番までのアミノ酸配列とそのN末端に結合するX1nで表されるアミノ酸配列とからなるポリペプチドaのC末端に、配列番号2で表されるアミノ酸配列の第229番から第261番までのアミノ酸配列とそのN末端に結合するX2mで表されるアミノ酸配列とからなるポリペプチドbのN末端が結合してなるタンパク質であって、脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質;Aに規定されるタンパク質において上記第50番から第73番までアミノ酸配列および/または上記第229番から第261番までのアミノ酸配列の領域中に1もしくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/または付加されたアミノ酸配列からなり、かつ脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質;またはCAに規定されるタンパク質のアミノ酸配列に対して少なくとも60の配列相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつ脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質。3X1nで表されるアミノ酸配列が、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表されるアミノ酸配列の第1番から第49番までのアミノ酸配列から選択される任意の数n1≦n≦49のアミノ酸配列であるか但し、配列番号21における第2番目及び第8番目のアミノ酸Xaa、並びに配列番号23における第6番目のアミノ酸Xaaは、任意のアミノ酸である。;又は、X1nで表されるアミノ酸配列が、配列番号11に表されるアミノ酸配列の第1番から第48番までのアミノ酸配列から選択される任意の数n1≦n≦48のアミノ酸配列である、1又は2に記載のタンパク質。4X2mで表されるアミノ酸配列が、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表されるアミノ酸配列の第192番から第217番までのアミノ酸配列から選択される任意の数m1≦m≦26のアミノ酸配列若しくは配列番号2~10及び12~23のいずれかに表されるアミノ酸配列の第192番から第228番までのアミノ酸配列から選択される任意の数m1≦m≦37のアミノ酸配列であるか;又は、X2mで表されるアミノ酸配列が、配列番号11に表されるアミノ酸配列の第191番から第216番までのアミノ酸配列から選択される任意の数m1≦m≦26のアミノ酸配列若しくは配列番号11に表されるアミノ酸配列の第191番から第227番までのアミノ酸配列から選択される任意の数m1≦m≦37のアミノ酸配列である、1~3のいずれかに記載のタンパク質。5X1nで表されるアミノ酸配列が、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表されるアミノ酸配列の第1番から第49番、第26番から第49番、第40番から第49番、または第43番から第49番までのアミノ酸配列であるか但し、配列番号21における第2番目及び第8番目のアミノ酸Xaa、並びに配列番号23における第6番目のアミノ酸Xaaは、任意のアミノ酸である。;又は、X1nで表されるアミノ酸配列が、配列番号11に表されるアミノ酸配列の第1番から第48番、第26番から第48番、第40番から第48番、または第43番から第48番までのアミノ酸配列である、1~4のいずれかに記載のタンパク質。6X2mで表されるアミノ酸配列が、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表わされるアミノ酸配列の第192番から第217番までのアミノ酸配列若しくは配列番号2~10及び12~23のいずれかに表わされるアミノ酸配列の第192番から第228番までのアミノ酸配列であるか;又は、X2mで表されるアミノ酸配列が、配列番号11で表わされるアミノ酸配列の第191番から第216番までのアミノ酸配列若しくは配列番号11で表わされるアミノ酸配列の第191番から第227番までのアミノ酸配列である、1~4のいずれかに記載のタンパク質。7X1nで表されるアミノ酸配列が配列番号2に表されるアミノ酸配列の第1番から第49番または第26番から第49番までのアミノ酸配列であり、かつ、X2mで表されるアミノ酸配列が配列番号2で表されるアミノ酸配列の第192番から第217番までのアミノ酸配列または配列番号2で表されるアミノ酸配列の第192番から第228番までのアミノ酸配列である、1~6のいずれかに記載のタンパク質。8前記タンパク質が、Aに規定されるタンパク質である、1~7のいずれかに記載のタンパク質。9前記タンパク質が、Aに規定されるタンパク質のアミノ酸配列に対して少なくとも70の配列相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつ脂肪滴への特異的局在性を示す、1~7のいずれかに記載のタンパク質。10標識タンパク質及び/又はアフィニティタグとの融合タンパク質である、1~9のいずれかに記載のタンパク質。11被導入物質により修飾された1~10のいずれかに記載のタンパク質。12被導入物質が、蛍光化合物である、11に記載のタンパク質。131~10のいずれか1項に記載のタンパク質をコードする核酸。1413に記載の核酸を含む、発現用ベクター。1514に記載の発現用ベクターにより形質転換された、形質転換体。16哺乳細胞において脂肪滴の可視化に用いるための、13に記載の発現用ベクター。17哺乳細胞において脂肪滴の可視化に用いるための、1~12のいずれかに記載のタンパク質。181~12のいずれかに記載のタンパク質に対する抗体。本発明のタンパク質は、細胞内小器官である脂肪滴への特異的局在性を示す。また、本発明のタンパク質によれば、生細胞又は固定細胞において脂肪滴を特異的に可視化イメージングすることが可能となる。さらに、本発明のタンパク質によれば、正確な像として、細胞内における脂肪滴のみを特異的に可視化することができる。同時に、本発明のタンパク質によれば、本来の細胞の状態、及び細胞内における本来の脂肪滴の状態を変化させることなく、該脂肪滴のみを特異的に可視化することが可能となる。本発明の第一の態様は、配列番号2で表されるアミノ酸配列の第50番から第73番までのアミノ酸配列とそのN末端に結合するX1nで表されるアミノ酸配列とからなるポリペプチドaのC末端に、配列番号2で表されるアミノ酸配列の第218番から第261番までのアミノ酸配列とそのN末端に結合するX2mで表されるアミノ酸配列とからなるポリペプチドbのN末端が結合してなるタンパク質であって、脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質;Aに規定されるタンパク質において上記第50番から第73番までアミノ酸配列および/又は上記第218番から第261番までのアミノ酸配列の領域中に1もしくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/または付加されたアミノ酸配列からなり、かつ脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質;またはCAに規定されるタンパク質のアミノ酸配列に対して少なくとも60の配列相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつ脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質に関する。本発明において、タンパク質が脂肪滴への特異的局在性を有するとは、蛍光タンパク質であるmCherryと対象タンパク質との融合タンパク質をコードする領域を含む哺乳細胞用発現ベクターでOc細胞を形質転換トランスフェクションし、蛍光顕微鏡により該細胞を観察した場合に、融合タンパク質が脂肪滴膜にのみ局在する細胞数が50を超え、該融合タンパク質が脂肪滴膜及び細胞内の他の部位例えば、細胞質、ER等の細胞小器官に局在する細胞数が50未満であり、かつ該融合タンパク質が脂肪滴には局在せず細胞内の他の部位に局在する細胞数が0であることを意味する。形質転換トランスフェクション及び蛍光顕微鏡による観察の具体的な方法は、実施例に記載する通りである。該融合タンパク質が脂肪滴膜にのみ局在する細胞の数は、好ましくは50以上、より好ましくは60以上、特に好ましくは70以上、最も好ましくは80以上、90以上、95以上である。本発明の第一の態様において、Aに規定されるタンパク質は、以下の構造からなる。X1n-WAKHMWNFISGIQYLAGLSTLPGN-X2m-VSPTHYVPESDAAARVTQILSSLTITQLLKRLHQWINEDCSTPC上記の構造において、X1n-WAKHMWNFISGIQYLAGLSTLPGNは、ポリペプチドaに相当する。X2m-VSPTHYVPESDAAARVTQILSSLTITQLLKRLHQWINEDCSTPCは、ポリペプチドbに相当する。ここで、例えば、n=5である場合には、X15は、AASSWのように、相互に同一又は異なるアミノ酸を含み得る。また、例えば、m=5である場合には、X25は、AASSWのように、相互に同一又は異なるアミノ酸を含み得る。上記の通り、Aに規定されるタンパク質は、上記ポリペプチドのC末端に上記ポリペプチドbのN末端が結合してなるタンパク質である。ポリペプチドaは、配列番号2で表わされるアミノ酸配列の第50番から第73番までのアミノ酸配列をそのC末端領域に有する。第50番から第73番までの上記アミノ酸配列の領域は、この領域の中に、本発明のタンパク質が脂肪滴への特異的局在性を示すために機能する領域を含むからである。一方、ポリペプチドbは、配列番号2で表わされるアミノ酸配列の第218番から第261番までのアミノ酸配列をそのC末端領域に有する。第218番から第261番までの上記アミノ酸配列も、この領域の中に、本発明のタンパク質が脂肪滴への特異的局在性を示すために機能する領域を含むからである。ポリペプチドaのN末端領域は、X1nで表わされるアミノ酸配列で構成され、そのアミノ酸残基の数nは、上記の通り、0~49の範囲であり、好ましくは7~49の範囲、より好ましくは10~49の範囲、さらに好ましくは24~49の範囲である。本発明のタンパク質が脂肪滴に特異的な局在性を示す限り、アミノ酸配列X1nを構成するアミノ酸の種類は特に限定されるものではない。例えば、アミノ酸配列X1nは、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表されるアミノ酸配列の第1番から第49番までのアミノ酸配列から選択される任意の数n1≦n≦49のアミノ酸配列であってもよい但し、配列番号21における第2番目及び第8番目のアミノ酸Xaa、並びに配列番号23における第6番目のアミノ酸Xaaは、本発明のタンパク質が脂肪滴への特異的局在性を示す限り、任意のアミノ酸を取り得る。或いは、アミノ酸配列X1nは、配列番号11に表されるアミノ酸配列の第1番から第48番までのアミノ酸配列から選択される任意の数n1≦n≦48のアミノ酸配列であってもよい。脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質を提供するという観点から、アミノ酸配列X1nは、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表わされるアミノ酸配列の第43番から第49番までのアミノ酸配列であるか、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表わされるアミノ酸配列の第40番から第49番までのアミノ酸配列であるか、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表わされるアミノ酸配列の第26番から第49番までのアミノ酸配列であるか、または、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表わされるアミノ酸配列の第1番から第49番までのアミノ酸配列であることが好ましい但し、配列番号21における第2番目及び第8番目のアミノ酸Xaa、並びに配列番号23における第6番目のアミノ酸Xaaは、本発明のタンパク質が脂肪滴への特異的局在性を示す限り、任意のアミノ酸を取り得る。或いは、アミノ酸配列X1nは、配列番号11に表わされるアミノ酸配列の第43番から第48番までのアミノ酸配列であるか、配列番号11に表わされるアミノ酸配列の第40番から第48番までのアミノ酸配列であるか、配列番号11に表わされるアミノ酸配列の第26番から第48番までのアミノ酸配列であるか、または、配列番号11に表わされるアミノ酸配列の第1番から第48番までのアミノ酸配列であることが好ましい。アミノ酸配列X1nが、これらのアミノ酸配列である場合には、本発明のタンパク質が有する脂肪滴に対する特異的局在性が強まるからである。一方、ポリペプチドbのN末端領域は、アミノ酸配列X2mで構成され、そのアミノ酸残基の数mは、上記の通り、0~26である。アミノ酸配列X2mを構成するアミノ酸の種類は特に限定されるものではない。例えば、アミノ酸配列X2mは、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表されるアミノ酸配列の第192番から第217番までのアミノ酸配列から選択される任意の数m1≦m≦26のアミノ酸配列であってもよい。或いは、アミノ酸配列X2mは、配列番号11に表されるアミノ酸配列の第191番から第216番までのアミノ酸配列から選択される任意の数m1≦m≦26のアミノ酸配列であってもよい。脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質を提供するという観点から、アミノ酸配列X2mは、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表わされるアミノ酸配列の第192番から第217番までのアミノ酸配列であることが好ましい。或いは、アミノ酸配列X2mは、配列番号11で表わされるアミノ酸配列の第191番から第216番までのアミノ酸配列であることが好ましい。アミノ酸配列X2mが、これらのアミノ酸配列である場合には、本発明のタンパク質が有する脂肪滴に対する特異的局在性が強まるからである。また、本発明の第二の態様は、配列番号2で表されるアミノ酸配列の第50番から第73番までのアミノ酸配列とそのN末端に結合するX1nで表されるアミノ酸配列とからなるポリペプチドaのC末端に、配列番号2で表されるアミノ酸配列の第229番から第261番までのアミノ酸配列とそのN末端に結合するX2mで表されるアミノ酸配列とからなるポリペプチドbのN末端が結合してなるタンパク質であって、脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質;Aに規定されるタンパク質において上記第50番から第73番までアミノ酸配列および/または上記第229番から第261番までのアミノ酸配列の領域中に1もしくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び/または付加されたアミノ酸配列からなり、かつ脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質;またはCAに規定されるタンパク質のアミノ酸配列に対して少なくとも60の配列相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつ脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質に関する。本発明の第二の態様において、Aに規定されるタンパク質は、以下の構造からなる。X1n-WAKHMWNFISGIQYLAGLSTLPGN-X2m-AAARVTQILSSLTITQLLKRLHQWINEDCSTPC上記の構造において、X1n-WAKHMWNFISGIQYLAGLSTLPGNは、ポリペプチドaに相当する。X2m-AAARVTQILSSLTITQLLKRLHQWINEDCSTPCは、ポリペプチドbに相当する。ここで、例えば、n=5である場合には、X15は、AASSWのように、相互に同一又は異なるアミノ酸を含み得る。また、例えば、m=5である場合には、X25は、AASSWのように、相互に同一又は異なるアミノ酸を含み得る。上記の通り、Aに規定されるタンパク質は、上記ポリペプチドのC末端に上記ポリペプチドbのN末端が結合してなるタンパク質である。ポリペプチドaは、配列番号2で表わされるアミノ酸配列の第50番から第73番までのアミノ酸配列をそのC末端領域に有する。第50番から第73番までの上記アミノ酸配列の領域は、この領域の中に、本発明のタンパク質が脂肪滴への特異的局在性を示すために機能する領域を含むからである。一方、ポリペプチドbは、配列番号2で表わされるアミノ酸配列の第229番から第261番までのアミノ酸配列をそのC末端領域に有する。第229番から第261番までの上記アミノ酸配列も、この領域の中に、本発明のタンパク質が脂肪滴への特異的局在性を示すために機能する領域を含むからである。ポリペプチドaのN末端領域は、X1nで表わされるアミノ酸配列で構成され、そのアミノ酸残基の数nは、上記の通り、0~49の範囲であり、好ましくは7~49の範囲、より好ましくは10~49の範囲、さらに好ましくは24~49の範囲である。本発明のタンパク質が脂肪滴に特異的な局在性を示す限り、アミノ酸配列X1nを構成するアミノ酸の種類は特に限定されるものではない。例えば、アミノ酸配列X1nは、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表されるアミノ酸配列の第1番から第49番までのアミノ酸配列から選択される任意の数n1≦n≦49のアミノ酸配列であってもよい但し、配列番号21における第2番目及び第8番目のアミノ酸Xaa、並びに配列番号23における第6番目のアミノ酸Xaaは、本発明のタンパク質が脂肪滴への特異的局在性を示す限り、任意のアミノ酸を取り得る。或いは、アミノ酸配列X1nは、配列番号11に表されるアミノ酸配列の第1番から第48番までのアミノ酸配列から選択される任意の数n1≦n≦48のアミノ酸配列であってもよい。脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質を提供するという観点から、アミノ酸配列X1nは、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表わされるアミノ酸配列の第43番から第49番までのアミノ酸配列であるか、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表わされるアミノ酸配列の第40番から第49番までのアミノ酸配列であるか、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表わされるアミノ酸配列の第26番から第49番までのアミノ酸配列であるか、または、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表わされるアミノ酸配列の第1番から第49番までのアミノ酸配列であることが好ましい但し、配列番号21における第2番目及び第8番目のアミノ酸Xaa、並びに配列番号23における第6番目のアミノ酸Xaaは、本発明のタンパク質が脂肪滴への特異的局在性を示す限り、任意のアミノ酸を取り得る。或いは、アミノ酸配列X1nは、配列番号11に表わされるアミノ酸配列の第43番から第48番までのアミノ酸配列であるか、配列番号11に表わされるアミノ酸配列の第40番から第48番までのアミノ酸配列であるか、配列番号11に表わされるアミノ酸配列の第26番から第48番までのアミノ酸配列であるか、または、配列番号11に表わされるアミノ酸配列の第1番から第48番までのアミノ酸配列であることが好ましい。アミノ酸配列X1nが、これらのアミノ酸配列である場合には、本発明のタンパク質が脂肪滴により特異的に局在するからである。一方、ポリペプチドbのN末端領域は、アミノ酸配列X2mで構成され、そのアミノ酸残基の数mは、上記の通り、0~37である。アミノ酸配列X2mを構成するアミノ酸の種類は特に限定されるものではない。例えば、アミノ酸配列X2mは、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表されるアミノ酸配列の第192番から第228番までのアミノ酸配列から選択される任意の数m1≦m≦37のアミノ酸配列であってもよい。或いは、アミノ酸配列X2mは、配列番号11に表されるアミノ酸配列の第191番から第227番までのアミノ酸配列から選択される任意の数m1≦m≦26のアミノ酸配列であってもよい。脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質を提供するという観点から、アミノ酸配列X2mは、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表わされるアミノ酸配列の第192番から第228番までのアミノ酸配列であることが好ましい。或いは、アミノ酸配列X2mは、配列番号11で表わされるアミノ酸配列の第191番から第227番までのアミノ酸配列であることが好ましい。アミノ酸配列X2mが、これらのアミノ酸配列である場合には、本発明のタンパク質が脂肪滴により特異的に局在するからである。ところで、配列番号2に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が1b型であるHCV-O株ゲノム塩基配列のGenBankAccessionnumberAB19133、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberBAD91386の非構造タンパク質4BNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号3に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が1a型であるHCVisolateHポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberP27958のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号4に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が1c型であるHCVゲノム塩基配列のAccessionnumberD14853、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberBAA03581のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号5に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が2a型であるHCVポリプロテインcds領域の塩基配列のAccessionnumberAY746460、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberAAU89634のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号6に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が2b型であるHCVゲノム塩基配列のAccessionnumberAF238486、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberAAF59945のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号7に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が2c型であるHCVゲノム塩基配列のAccessionnumberD50409、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberQ68749のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号8に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が2k型であるHCVゲノム塩基配列のAccessionnumberAB031663、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberBAA88057のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号9に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が3a型であるHCVゲノム塩基配列のAccessionnumberD28917、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberQ81495のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号10に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が3b型であるHCVゲノム塩基配列のAccessionnumberD49374、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberBAA08372のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号11に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が4a型であるHCVisolate0242ポリプロテインcds領域の塩基配列のAccessionnumberDQ418783、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberABD75825のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号12に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が4d型であるHCVポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberABD75828のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号13に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が5a型であるHCVポリプロテインコード領域塩基配列のAccessionnumberY13184、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberCAA73640のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号14に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が6a型であるHCVポリプロテインコード領域塩基配列のAccessionnumberY12083、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberCAA72801のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号15に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が6b型であるHCVゲノム塩基配列のAccessionnumberD84262、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberBAA32664のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号16に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が6f型であるHCVゲノム塩基配列のAccessionnumberDQ835760、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberABI36963のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号17に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が6g型であるHCVゲノム塩基配列のAccessionnumberD63822、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberBAA09891のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号18に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が6h型であるHCVゲノム塩基配列のAccessionnumberD84265、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberBAA32667のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号19に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が6i型であるHCVゲノム塩基配列のAccessionnumberDQ835762、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberABI36965のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号20に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が6k型であるHCVゲノム塩基配列のAccessionnumberD84264、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberBAA32666のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号21に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が6l型であるHCVゲノム塩基配列のAccessionnumberEF424628、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberABP88847のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号22に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が6m型であるHCVゲノム塩基配列のAccessionnumberDQ835763、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberABI36966のNS4Bのアミノ酸配列である。配列番号23に示すアミノ酸配列は、遺伝子型が6o型であるHCVゲノム塩基配列のAccessionnumberEF424627、ポリプロテインアミノ酸配列のAccessionnumberABP88846のNS4Bのアミノ酸配列である。図3に、配列番号2~23に示されるアミノ酸配列について、アライメント解析を行った結果が示されている。図3に示される配列は、上から順に、配列番号3、2、4~23に示すアミノ酸配列である。上記の通り、配列番号2~23に示されるNS4Bのアミノ酸配列は、上記遺伝子型サブタイプの特定のHCVに由来するものであるが、上記以外の遺伝子型サブタイプのHCVが多数存在し、さらに、同じ遺伝子型サブタイプの中でも塩基配列及びアミノ酸配列が異なるものも存在する。本発明のタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号2~23に基づいて設計してもよいが、その他公知のNS4Bのアミノ酸配列に基づいて設計してもよい。本発明において、Bに規定されるタンパク質は、Aに規定されるタンパク質において、配列番号2における上記第50番から第73番までのアミノ酸配列の領域ポリペプチドaに存在する領域、及び/又は上記第218番から第261番までのアミノ酸配列の領域ポリペプチドbに存在する領域中に1もしくは数個のアミノ酸が、欠失、置換及び/又は付加されたアミノ酸配列からなり、かつ脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質である。ここで、1もしくは数個の範囲は、本発明のタンパク質が脂肪滴への特異的局在性を示す限り、特に限定されない。例えば、上記第50番から第73番までのアミノ酸配列の領域ポリペプチドaに存在する領域について言えば、1から20個、好ましくは1から9個、より好ましくは1から5個、特に好ましくは1から4個、1から3個、1から2個、1個とすることができる。一方、上記第218番から第261番までのアミノ酸配列の領域ポリペプチドbに存在する領域について言えば、例えば、1から40個、好ましくは1から30個、より好ましくは1から20個、さらに好ましくは1から9個、特に好ましくは1から5個、1から4個、1から3個、1から2個、1個とすることができる。さらに、本発明のタンパク質Bにおいて上記第50番から第73番までのアミノ酸配列の領域、及び/又は上記第218番から第261番までのアミノ酸配列の領域中に、このようなアミノ酸の欠失、置換及び/又は付加がある場合において、アミノ酸配列X1n及びX2mの好ましい配列は、上記タンパク質Aについて記載した通りである。さらに、図3のアライメント解析の結果を考慮すると、Bに規定されるタンパク質は、例えば、配列番号2における上記第50番から第70番までのアミノ酸配列の領域において、第51番目のアラニンAがヒスチジンH、グルタミンQ、アルギニンR、チロシンY又はトレオニンTに置換され;第52番目のリシンKがグルタミンQに置換され;第53番目のヒスチジンHがグルタミンQに置換され;第54番目のメチオニンMがロイシンLに置換され;第58番目のイソロイシンIがバリンVに置換され;及び/又は第73番目のアスパラギンNがセリンSに置換されたものが挙げられる。また、図3のアライメント解析の結果を考慮すると、Bに規定されるタンパク質は、例えば、配列番号2における上記第218番から第261番までのアミノ酸配列の領域において、第218番目のバリンVがグリシンGに置換され;第219番目のセリンSがアラニンAに置換され;第221番目のトレオニンTがアラニンAに置換され;第225番目のプロリンPがトレオニンT又はアラニンAに置換され;第227番目のセリンSがトレオニンTに置換され;第229番目のアラニンがトレオニンTに置換され;第230番目のアラニンAがセリンSに置換され;第231番目のアラニンAがバリンV、グルタミンQ、リシンK、アスパラギンN又はアルギニンRに置換され;第232番目のアルギニンRがリシンK、アスパラギンN、アラニンA又はグルタミンQに置換され;第233番目のバリンVがイソロイシンIに置換され;第234番目のトレオニンTがメチオニンMに置換され;第235番目のグルタミンQがヒスチジンH、アラニンA、リシンK、アスパラギンN、トレオニンT又はセリンSに置換され;第236番目のイソロイシンIがロイシンLに置換され;第238番目のセリンSがトレオニンT又はグリシンGに置換され;第242番目のイソロイシンIがバリンVに置換され;第244番目のグルタミンQがセリンS又はアルギニンRに置換され;第246番目のロイシンLがプロリンPに置換され;第247番目のリシンKがアルギニンRに置換され;第248番目のアルギニンRがリシンKに置換され;第251番目のグルタミンQがバリンV、アスパラギンN、アラニンA、トレオニンT、リシンK、グルタミン酸E又はヒスチジンHに置換され;第253番目のイソロイシンIがバリンVに置換され;第254番目のアスパラギンNがセリンS、トレオニンT、グリシンG又はヒスチジンHに置換され;第255番目のグルタミン酸EがセリンS、グリシンG又はトレオニンTに置換され;第256番目のアスパラギン酸Dがグルタミン酸Eに置換され;第257番目のシステインCがチロシンY、トレオニンT又はトリプトファンWに置換され;第258番目のセリンSがトレオニンT、プロリンP又はアラニンAに置換され;及び/又は第259番目のトレオニンTがアラニンA、イソロイシンI、バリンV又はセリンSに置換されたものが挙げられる。本発明において、Cに規定されるタンパク質は、上記Aに規定されるタンパク質のアミノ酸配列に対して少なくとも60の配列相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつ脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質である。Cに規定されるタンパク質は、脂肪滴への特異的局在性を示すタンパク質であって、上記Aに規定されるタンパク質のアミノ酸配列に対して、好ましくは70以上、より好ましくは80以上、より好ましくは90以上、91以上、92以上、93以上、94以上、95以上、96以上、97以上、98以上、99以上の配列相同性を有する。本発明において配列相同性という語は、2以上のアミノ酸配列の互いに対する同一性の程度を指す。したがって、ある二つのアミノ酸配列の相同性が高い程、それらの配列の同一性又は類似性は高い。2種類のアミノ酸配列が相同性を有するか否かは、配列の直接の比較によって解析することが可能であり、具体的には、市販の配列解析ソフトウェア等を用いて解析することができる。さらに、本発明のタンパク質は、上記タンパク質A、B又はCと、標識タンパク質及び/又はアフィニティタグとの融合タンパク質を含む。本発明の融合タンパク質において、標識タンパク質及び/又はアフィニティタグは、上記タンパク質A、B又はCのN末端側及び/又はC末端側に位置し得る。また、本発明の融合タンパク質は、当該タンパク質が脂肪滴への特異的局在性を有する限りにおいて、複数種の標識タンパク質及び/又はアフィニティタグも含み得る。本発明の融合タンパク質において、上記タンパク質A、B又はCと標識タンパク質及び/又はアフィニティタグとは直接連結していてもよいし、各種リンカーを介して結合していてもよい。上記標識タンパク質としては、蛍光タンパク質が挙げられ、その具体例としては、GFP、EBFP、EGFP、EYFP、ECFP、RFP、mWasabi、AmCyan、ZsGreen、ZsYellow、DsRed、AsRed、HcRed、JRed、mCherry、mRuby、mStrawberry、mPlum、mOrange、mBanana、Dendra2、E2-Crimson、mRasberry、tdTomatoなどが挙げられる。上記アフィニティタグの例としては、Hisタグ、HAタグ、mycタグ、FLAGタグ、グルタチオンSトランスフェラーゼ、マルトース結合タンパク質MBP、Eタグ、Sタグ、HSVタグ、Haloタグ等が挙げられる。さらに、本発明のタンパク質は、上記タンパク質A、B若しくはC、又は上記融合タンパク質が被導入物質により修飾されたものを含む。標的細胞において所望の被導入物質を脂肪滴に局在させることが可能となるからである。被導入物質の具体例としては、脂肪を分解する物質例えば、各種リパーゼ、ビオチン等のタンパク質標識化合物、蛍光化合物等が挙げられる。脂肪を分解する物質で修飾された本発明のタンパク質の用途としては、例えば、肥満の治療又は予防が想定される。蛍光化合物により標識された本発明のタンパク質の用途としては、細胞内における脂肪滴の可視化イメージングが想定される。蛍光化合物の具体例としては、フルオロセインfluorescein、ローダミンrhodamine、Cy色素例えば、Cy3、Cy5、アレクサ色素等が挙げられる。本発明のタンパク質は、公知の各種遺伝子工学的技術により製造してもよいし、化学合成により製造してもよい。本発明者は、後述の実施例に示す通り、1b型であるHCV-O株の全長を含むプラスミドpONC5BKE1350-1359を鋳型DNAとして、NS4Bコード領域のうち、そのN末端領域及びC末端領域をPCRによりそれぞれ増幅し、オーバーラップPCRにより各断片を連結した。次いで、連結した断片を、各種発現ベクターに増幅断片を導入することにより、本発明の一例であるタンパク質をコードする哺乳動物発現プラスミドを作成した。しかしながら、本発明のタンパク質を遺伝子工学的に作成する上で、出発材料は上記プラスミドに限定されるものでもなく、その具体的な発現系の構築方法も上記方法に限定されるものではない。上述のタンパク質A、B若しくはC、又は上記融合タンパク質をコードする核酸DNA又はRNAを作成し、公知の各種発現ベクターに組み込むことにより、本発明のタンパク質を発現させることができる。本発明のタンパク質をコードする核酸を作成する上で、アミノ酸の欠失、置換及び/または付加を施すためには、例えば、エラープローンPCR法、DNAシャッフリング法、各種部位特異的変異導入法などにより、任意の塩基の欠失、置換及び/または挿入を行うことができる。本発明において用いられる発現ベクターの種類は特に限定されず、細菌例えば、大腸菌Escherichiacoli、枯草菌Bacillussubtilis、真菌類例えば、酵母類等の微生物、植物、昆虫細胞、哺乳細胞などのホストにおいてタンパク質の発現を可能とする各種発現ベクターを用いることができ、ウイルスベクターファージベクターを含むでもプラスミドベクターであってもよい。あるいは、ウサギ網状赤血球ライセート、小麦胚芽ライセート、大腸菌ライセート等を用いた無細胞タンパク質合成系を用いて、本発明のタンパク質を製造することもできる。このうち、本発明のタンパク質を用いて哺乳細胞の脂肪滴を観察又は解析する場合には、哺乳細胞発現用のプラスミドベクター又はウイルスベクターを用いることが好ましい。哺乳細胞において本発明のタンパク質を発現させると、発現した本発明のタンパク質は細胞内の脂肪滴に特異的に局在する。したがって、本発明のタンパク質をコードする核酸を哺乳細胞発現用のプラスミドベクター又はウイルスベクターに組み込み、該プラスミドベクター又はウイルスベクターを哺乳細胞で形質転換すれば、本発明のタンパク質を哺乳細胞において直接発現させることが可能であり、発現した本発明のタンパク質は細胞内の脂肪滴に特異的に局在し、哺乳細胞の脂肪滴を観察又は解析することができる。また、脂肪滴は、哺乳細胞だけでなく、広く真核生物植物を含むや原核生物例えば、細菌にも存在することが知られているMurphyDJProgLipidRes403254382001。細胞内に脂肪滴を有する生物種をホストとして、それらの生物種に応じた各種タンパク質発現ベクターを用い、本発明のタンパク質を発現させてもよい。各種生物種において発現した本発明のタンパク質は、細胞内の脂肪滴に局在し、それら生物種の脂肪滴を観察又は解析することができる。また、上記タンパク質A、B又はCと蛍光タンパク質との融合タンパク質を、所望の哺乳細胞において発現させれば、直接的に、脂肪滴を可視化することができる。また、上記タンパク質A、B又はCとアフィニティタグとの融合タンパク質を遺伝子工学的に発現させた場合には、各種アフィニティ精製法により、本発明のタンパク質を精製することが可能となる。本発明のタンパク質は、上記の通り、所望の哺乳細胞において直接発現させることにより、脂肪滴の解析等に用いることも可能である。しかしながら、各種公知の方法により精製した本発明のタンパク質を、所望の哺乳細胞における脂肪滴の解析等に用いることもできる。具体的には、精製した本発明のタンパク質を所望の哺乳細胞へ導入することにより、細胞内脂肪滴の解析等を行うことができる。精製した本発明のタンパク質を所望の哺乳細胞へ導入するためには、例えば、脂質ベースのタンパク質導入試薬等を用いることができる。このようなタンパク質導入試薬は、試薬メーカーから入手可能である例えば、LSin;ProDeliverIN;BioPORTERProteinDeliveryReagent;アパキャリー1;AbDeliverIN。本発明のタンパク質は、細胞内脂肪滴に特異的な局在性を示すことから、生細胞又は固定細胞において、脂肪滴の可視化イメージングツールとして用いることができる。具体的には、上記タンパク質A、B若しくはCに対する抗体、又はそれに融合させる標識タンパク質若しくはアフィニティタグに対する抗体を用いて、本発明のタンパク質を導入した細胞を免疫染色すれば、脂肪滴を可視化することができる。免疫染色の方法は公知の手法を用いることができる。また、本発明のタンパク質に蛍光タンパク質を融合させたものを細胞で発現させ、共焦点レーザー顕微鏡等を用いて該細胞を観察すれば、細胞内脂肪滴の精彩なイメージングが可能となる。さらに、本発明のタンパク質を蛍光化合物等で修飾したものを細胞に導入することによっても、同様に細胞内脂肪滴の精彩なイメージングが可能となる。さらに、本発明のタンパク質は細胞内脂肪滴に特異的な結合能力を有することから、脂肪分解物質例えば、リパーゼ等の被導入物質で修飾した本発明のタンパク質を脂肪細胞などの標的細胞に導入し、細胞内脂肪滴を分解することにより、肥満などの疾患の治療又は予防を行うことも可能となる。上述の通り、本発明のタンパク質は、細胞内脂肪滴の可視化ツール、薬物を含む被導入物質を脂肪滴に送達させるための薬物送達ツール等として用いることができる。また、本発明の別の態様は、以下のタンパク質に関する1配列番号2~10及び12~23のいずれかに表されるアミノ酸配列の第1番から第73番までのアミノ酸配列において、第43番、第46番、第50番、第57番、第61番及び第64番のアミノ酸のうちの少なくとも一つのアミノ酸が独立にアラニン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、グルタミン、アスパラギン、グルタミン酸、アスパラギン酸又はプロリンに変異したタンパク質;又は配列番号11に表されるアミノ酸配列の第1番から第72番までのアミノ酸配列において、第43番、第49番、第56番、第60番及び第63番のアミノ酸のうちの少なくとも一つのアミノ酸が独立にアラニン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、グルタミン、アスパラギン、グルタミン酸、アスパラギン酸又はプロリンに変異したタンパク質。2配列番号2~10及び12~23のいずれかに表されるアミノ酸配列の第192番から第261番までのアミノ酸配列において、第242番、第246番、第249番及び第253番のアミノ酸のうちの少なくとも一つのアミノ酸が独立にアラニン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、グルタミン、アスパラギン、グルタミン酸、アスパラギン酸又はプロリンに変異したタンパク質;又は配列番号11に表されるアミノ酸配列の第191番から第260番までのアミノ酸配列において、第241番、第245番、第248番及び第252番のアミノ酸のうちの少なくとも一つのアミノ酸が独立にアラニン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、グルタミン、アスパラギン、グルタミン酸、アスパラギン酸又はプロリンに変異したタンパク質。3配列番号2~10及び12~23のいずれかに表されるアミノ酸配列の第1番から第73番までのアミノ酸配列のC末端に、配列番号2~10及び12~23のいずれかに表されるアミノ酸配列の第192番から第261番までのアミノ酸配列のN末端が結合してなるアミノ酸配列において、第43番、第46番、第50番、第57番、第61番、第64番、第242番、第246番、第249番及び第253番のアミノ酸のうちの少なくとも一つのアミノ酸が独立にアラニン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、グルタミン、アスパラギン、グルタミン酸、アスパラギン酸又はプロリンに変異したタンパク質;又は配列番号11に表されるアミノ酸配列の第1番から第72番までのアミノ酸配列のC末端に、配列番号11に表されるアミノ酸配列の第191番から第260番までのアミノ酸配列のN末端が結合してなるアミノ酸配列において、第43番、第49番、第56番、第60番、第63番、第241番、第245番、第248番及び第252番のアミノ酸のうちの少なくとも一つのアミノ酸が独立にアラニン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、グルタミン、アスパラギン、グルタミン酸、アスパラギン酸又はプロリンに変異したタンパク質。上記1のタンパク質において、例えば、第43番、第46番及び第50番第49番のアミノ酸が独立にアラニン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、グルタミン、アスパラギン、グルタミン酸、アスパラギン酸又はプロリンに置換されていてもよいし、第57番第56番、第61番第60番及び第64番第63番が独立にアラニン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、グルタミン、アスパラギン、グルタミン酸、アスパラギン酸又はプロリンに置換されていてもよいし、あるいは、第43番、第46番、第50番第49番、第57番第56番、第61番第60番及び第64番第63番のアミノ酸が独立にアラニン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、グルタミン、アスパラギン、グルタミン酸、アスパラギン酸又はプロリンに置換されていてもよい。上記2のタンパク質において、例えば、第242番第241番、第246番第245番、第249番第248番及び第253番252番のアミノ酸が独立にアラニン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、グルタミン、アスパラギン、グルタミン酸、アスパラギン酸又はプロリンに置換されていてもよい。上記3のタンパク質において、例えば、第43番、第46番、第50番第49番、第57番第56番、第61番第60番及び第64番第63番のアミノ酸が独立にアラニン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、グルタミン、アスパラギン、グルタミン酸、アスパラギン酸又はプロリンに置換されていてもよいし、第43番、第46番、第50番第49番、第57番第56番、第61番第60番、第64番第63番、第242番第241番、第246番第245番、第249番第248番及び第253番252番のアミノ酸が独立にアラニン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、グルタミン、アスパラギン、グルタミン酸、アスパラギン酸又はプロリンに置換されていてもよいし、あるいは、第43番、第46番、第50番第49番、第242番第241番、第246番第245番、第249番第248番及び第253番252番のアミノ酸が独立にアラニン、グリシン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、グルタミン、アスパラギン、グルタミン酸、アスパラギン酸又はプロリンに置換されていてもよい。上記1、2及び3のタンパク質において、各基準となるアミノ酸配列は配列番号2から選ばれることが好ましい。さらに、上記1、2及び3のタンパク質において、上記したアミノ酸の変異は、アラニンによる変異であることが好ましい。さらに、本発明は、上記1、2又は3のタンパク質をコードする核酸に関する。さらに、本発明は上記核酸を含む、発現用ベクターに関する。また、本発明は、前記発現用ベクターにより形質転換体に関する。以下、本発明について、実施例により具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。1.C型肝炎ウイルスO株の配列本実施例では、1b型のHCV-O株DDBJEMBLGenBankAccessionnumberAB191333IkedaetalBiochemBiophysResCommun329135013592005の配列を用いた。NS4Bはこの配列のヌクレオチド番号5475~6257によってコードされるタンパク質であり、261アミノ酸から成る。HCV-O株NS4Bのヌクレオチド配列を図1及び配列番号1に示す。また、HCV-O株NS4Bのアミノ酸配列を図2及び配列番号2に示す。2.NS4Bの機能領域ドメインの設定NS4Bは小胞体ER;endoplasmicreticulumに局在する膜タンパク質であり、その中央部がER膜に埋め込まれ、N末端側の一部とC末端側の一部が細胞質側に出ていると考えられている。つまり、NS4Bタンパク質は、N末端側細胞質ドメイン4BN、膜貫通ドメイン4BTM、及びC末端側細胞質ドメイン4BCの三つの領域に分類することができる図4参照。現在、NS4Bの結晶構造解析が為されていないため、正確な立体構造は不明である。4BNと4BTMの境界はアミノ酸残基70~75番付近と考えられているが定まっていない。複数のタンパク質二次構造予測プログラムでアミノ酸残基74番からαへリックスが始まることが予測されているGouttenoireetalJVirol83625762682009。そこで、このαへリックスを最初の膜貫通αへリックスと考え、アミノ酸残基1~73を4BNとした。4BTMと4BCの境界は配列の特徴からおおむねコンセンサスが得られており、4BTMはアミノ酸残基74~191、4BCはアミノ酸残基192~261とした。下記の通り、これらの各領域と蛍光タンパク質との融合タンパク質を作出した。さらに、NS4Bの全長アミノ配列アミノ酸残基1~261からなる4Bfull、アミノ酸残基1~25からなる4B14BNの一部、アミノ酸残基26~49からなる4B24BNの一部、アミノ酸残基50~73からなる4B34BNの一部、アミノ酸残基1~49からなる4B1-24BNの一部、アミノ酸残基26~73からなる4B2-34BNの一部、アミノ酸残基192~217からなる4B94BCの一部、アミノ酸残基218~239からなる4B104BCの一部、アミノ酸残基240~261からなる4B114BCの一部、アミノ酸残基192~239からなる4B9-104BCの一部、アミノ酸残基218~261からなる4B10-114BCの一部についても、同様に蛍光タンパク質との融合タンパク質を作出した。蛍光タンパク質として例えばmCherryを用いる場合、各融合タンパク質は、Cherry-に領域名を付してCherry4BNなどの名前で表す。3.4Bfull、4BN、4BTM、4BC、4B1、4B2、4B3、4B1-2、4B2-3、4B9、4B10、4B11、4B9-10、4B10-11をコードする遺伝子断片の作製NS4Bの各領域をPCRにより増幅した。各増幅断片を蛍光タンパク質発現ベクターに組み込むために、PCRに用いたプライマーには制限酵素認識配列を付加したU側:BglIIサイトR側:EcoRIサイト。また、R側プライマーでは4B配列の最後に終止コドンを挿入した。鋳型として、HCV-O株の全長を含むプラスミドpONC5BKE1350-1359又は以下に示す各プラスミドを用い、DNAポリメラーゼは高フィデリティのPrimeSTARHSDNApolymeraseを用いた。以下に、各プライマーの配列を示す。4Bfull用プライマーU側5TTTAGATCTGCCTCGCACCTCCCTTAC3配列番号244BN用U側プライマーR側5TTTGAATTCTTAGCATGGCGTGGAGCAGTC3配列番号294BC用R側プライマー4BN用プライマーU側5TTTAGATCTGCCTCGCACCTCCCTTAC3配列番号24R側5TTTGAATTCTTAGTTCCCAGGCAGAGTGGA3配列番号254BTM用プライマーU側5TTTAGATCTCCCCCGATAGCTTCACTG3配列番号26R側5TTTGAATTCTTACAGTATTGCCGCGCACAC3配列番号274BC用プライマーU側5TTTAGATCTCGCCGGCACGTGGGC3配列番号28R側5TTTGAATTCTTAGCATGGCGTGGAGCAGTC3配列番号294B1用プライマーU側:4BN用U側プライマーR側:5TTTGAATTCTTACAGCAACCCGAGCGCCTT3配列番号30鋳型:Cherry4BNプラスミド4B2用プライマーU側:4B2-3用U側プライマーR側:5TTTGAATTCTTAAAAGGCCTCAAGGGCTTGC3配列番号31鋳型:Cherry4BNプラスミド4B3用プライマーU側5TTTAGATCTTGGGCGAAGCACATGTGG3配列番号32R側4BN用のR側プライマー4B12用プライマーU側:4BN用U側プライマーR側:4B2用R側プライマー鋳型:Cherry4BNプラスミド4B2-3用プライマーU側5TTTAGATCTCAAGCAGCCACCAAGCAAG3配列番号33R側4BN用のR側プライマー4B9用プライマーU側:4BC用U側プライマーR側:5TTTGAATTCTTAATGGTTACCCCGCGAAGCG3配列番号34鋳型:Cherry4BCプラスミド4B10用プライマーU側:4B10-11用U側プライマーR側:5TTTGAATTCTTAGCTGGAGAGGATCTGAGTG3配列番号35鋳型:Cherry4BCプラスミド4B11用プライマーU側:5TTTAGATCTCTTACCATCACCCAGCTGTT3配列番号36R側:4BC用R側プライマー鋳型:Cherry4BCプラスミド4B910用プライマーU側:4BC用U側プライマーR側:4B10用R側プライマー鋳型:Cherry4BCプラスミド4B10-11用プライマーU側5TTTAGATCTGTTTCCCCCACGCACTATG3配列番号37R側4BC用のR側プライマー反応液の組成PSバッファー10μL、dNTP4μL、U側プライマー0.4μL、R側プライマー0.4μL、鋳型プラスミド10ng、PS0.5μL、残部を超純水とし、最終容量を50μLとしてPCR反応を行った。PCR反応それぞれのプライマーペアを含む上記の反応液を作製し4Bfull用、4BN用、4BTM用、4BC用、4B1用、4B2用、4B3用、4B1-2用、4B2-3用、4B9用、4B10用、4B11用、4B9-10用、4B10-11用、98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C5秒、72°C30秒}を25サイクル繰返した。4.4BNCをコードする遺伝子断片の作製4BNCとは、4BNと4BCを連結した配列である図5参照。4BNの3’側と4BCの5’側で配列が一部重複するような二つの断片を作製すれば、その二つの断片を直接PCRで連結できる。これら二つの断片を以下に示すプライマーを用いて、PCRにより作成した。4BN側断片用プライマーU側4BN用のU側プライマーR側5CTCCCCCGGGCCCACGTGCCGGCGGTTCCCAGGCAGAGTGGA3配列番号384BC側断片用プライマーU側5CGCCGGCACGTGGGCC3配列番号39R側4BC用のR側プライマーまず、4BN側断片と4BC側断片を各々PCRで作成する。上記に示すプライマーを使用した以外、反応液組成及び反応条件は上記3.に準じたものである。PCR反応後、MARLIGEN社RapidPCRpurificationsystemキットを用いて反応産物を精製した。次に各断片の連結PCRを行った。各断片の連結PCRのための反応液PSバッファー10μL、dNTP4μL、4BN側精製断片200ng、4BC側精製断片200ng、PS0.5μLとし、超純水で最終容量を50μLとしてPCR反応を行った。連結PCRの反応条件98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C20秒、72°C60秒}を6サイクル繰返した。このPCR反応により、4BN側断片と4BC側断片を連結した。上記の連結PCRの後、反応液に、直接、以下のプライマーを加え、増幅PCRを行う。U側プライマー4BN用のU側プライマー0.4μLR側プライマー4BC用のR側プライマー0.4μL増幅PCRの反応条件98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C5秒、72°C60秒}を8サイクル繰り返した。この反応により、4BNCをコードするDNA断片を得た。5.各NS4B断片の蛍光タンパク質発現プラスミドへの組み込み蛍光タンパク質発現用ベクターは、pmCherryC1とpEGFPC1とを用いた。ベクターは定法によりBglIIおよびEcoRIで消化後、CalfintestinealkalinephosphataseTOYOBO社で処理し、さらにアガロースゲル電気泳動を行い、ゲルよりベクターDNAを切り出し、QIAGEN社MinElutegelextractionkitによって精製した。TEバッファーでDNA濃度が50ngμLになるように調整した。上記の各PCR産物4Bfull、4BN、4BTM、4BC、4B1、4B2、4B3、4B1-2、4B2-3、4B9、4B10、4B11、4B9-10、4B10-11、4BNCは、MARLIGEN社RapidPCRpurificationsystemキットで精製した。次いで、各PCR産物について、定法によりBglIIおよびEcoRIで消化し、さらにアガロースゲル電気泳動を行い、DNAを切り出してQIAGEN社MinElutegelextractionkitによって精製した。TEバッファーでDNA濃度が50ngμlになるように調整する。上記の処理後ベクター0.5μL25ng、処理後PCR断片0.5μL25ng、LigationHigh1μLTOYOBO社を混合し、16°Cで、30分間ライゲーション反応を行った。ライゲーションしたDNAを、エレクトロポレーションにより、TG1株大腸菌にトランスフォームした。トランスフォームした菌体はカナマイシン25μgmLを含むLBプレート上で選択し、得られたコロニーを1mlスケールで培養し、プラスミドDNAをMarligen社Rapidplasmidminiprepsystemにより抽出した。BigDyeTerminatorv31cyclesequencingkitによりベクターに挿入されたNS4B各断片のヌクレオチド配列が正しいことを確認した。塩基配列の決定には、以下のプライマーを用いた。pmCherryC1用U側5GTGGAACAGTACGAACGC3配列番号40R側5TGTGGGAGGTTTTTTAAAGC3配列番号41pEGFPC1用U側5AGCGCGATCACATGGTCC3配列番号42R側5CTCTACAAATGTGGTATGGC3配列番号43正しい配列を確認した後、50mlの培養スケールで形質転換体を培養し、MacheryNagel社NucleobondPC500キットでプラスミドを抽出した。得られたプラスミドを定法によりフェノール抽出、クロロホルム抽出、エタノール沈殿し、1μgμLの濃度になるようにTEバッファーに溶解した。6.各コンストラクトの細胞へのトランスフェクション各コンストラクトは便宜上、以下の名前で表す。Cherry4Bfull、Cherry4BN、Cherry4BTM、Cherry4BC、Cherry4B1、Cherry4B2、Cherry4B3、Cherry4B12、Cherry4B23、Cherry4B9、Cherry4B10、Cherry4B11、Cherry4B910、Cherry4B1011、Cherry4BNC、EGFP4BN、EGFP4BTM、EGFP4BC、EGFP4B23、EGFP4B3、EGFP4B1011、EGFP4BNC実験には脂肪滴を豊富に持つOc細胞を用いた。蛍光顕微鏡で観察可能なガラス底の24ウェルプレートEZViewカルチャープレートLBガラスボトム、IWAKI社に70~80コンフルエントになるようOc細胞を播き、Lipofectamin2000を用いてプロトコールに従い、各プラスミドをトランスフェクションした。1ウェルあたりプラスミ1.6μg、Lipofectamin2000を4.0μL使用した。トランスフェクションの24時間または48時間後に、各Oc細胞を観察した。7.細胞の固定、染色細胞をTBS20mMTrisClpH74015MNaClでリンスした後、4パラフォルムアルデヒドで15分間固定した。全ての反応はシーソーシェーカー上で行った。上記Cherry融合タンパク質を発現させた細胞については、脂肪滴をBodipy493503で20分間染色したOhsakietalHistochemCellBiol1244454522005。上記EGFP融合タンパク質を発現させた細胞については、脂肪滴膜を抗ADRP抗体で染色した。固定後001digitoninTBSで30分インキュベートし、1BSATBSで1時間ブロッキングした。抗ADRP抗体Acris社/1BSATBS抗体終濃度5μgmLで1時間インキュベートし、次に2次抗体として抗mouseIgGAlexaFluor6471000倍希釈/1BSATBSで30分間インキュベートした。いずれの場合も、核をHechst33342色素終濃度5μgmLTBSで20分間染色した。8.顕微鏡観察上記細胞を、共焦点レーザー走査型顕微鏡FV1000オリンパス社を用いてシークエンシャルスキャンモードで鏡検した。9.NS4B-Cherry融合タンパク質の脂肪滴局在についての定量的解析の方法細胞数あたりどれぐらいの頻度で、Cherry4Bfull、Cherry4BN、Cherry4BTM、Cherry4BC、Cherry4B1、Cherry4B2、Cherry4B3、Cherry4B12、Cherry4B23、Cherry4B9、Cherry4B10、Cherry4B11、Cherry4B910、Cherry4B1011、Cherry4BNCが脂肪滴膜へ局在するかをカウントした。各サンプルで10~20視野鏡検し、Cherry融合タンパク質を発現しているすべての細胞について次の基準で判定した。1カテゴリーA:Cherry融合タンパク質が脂肪滴膜のみに局在する。2カテゴリーB:Cherry融合タンパク質が脂肪滴膜および他の部位例えば細胞質、ERなどに局在する。3カテゴリーC:Cherry融合タンパク質が脂肪滴膜には局在せず、他の部位に局在する。共焦点顕微鏡による撮影は、PLAPO100XOTIRFM対物レンズにて、126852μm×126852μmを一視野1024×1024pixelの画像として撮影し解析した。共焦点顕微鏡は、4種類の励起用レーザー405nm、488nm、543nm、633nm;各々青色蛍光用、緑色蛍光用、赤色蛍光用、赤外部蛍光用を持ち、各レーザー光によって励起されてサンプルより発せられる各蛍光を独立に撮像する。撮像後に、コンピュータによって各蛍光画像を作成した。なお、蛍光像は適宜色を選択して着色像を描くことができる。各融合タンパク質が脂肪滴に局在するか否かの判定は、すべてコンピュータの画像上で赤色蛍光像、緑色蛍光像、さらに両者のマージmerge像合成像を比較することにより行った。Cherry融合タンパク質を発現させた場合は、脂肪滴内部を染色するBodipyによる円形の緑色蛍光を縁取る、リング状の赤色蛍光像が得られた場合に、脂肪滴膜にCherry融合タンパク質が局在するものと判定した。EGFP融合タンパク質を発現させた場合は、EGFPの緑色蛍光とBodipyの緑色蛍光が区別できないため、脂肪滴膜を抗ADRP抗体およびローダミン赤色蛍光ラベル二次抗体で染色した後、蛍光の撮像を行った。この場合には、EGFP由来の緑色蛍光像として示されるリング状構造と、抗ADRP抗体で染色される脂肪滴膜のリング状の赤色蛍光像とが一致した場合に、EGFP融合タンパク質が脂肪滴膜に局在するものと判定した。<結果>1.4BNの細胞内局在Cherry4BNをOc細胞にトランスフェクションし、24時間後に共焦点顕微鏡観察を行った。図6に、観察された典型的細胞像を、Cherry4BNを赤、Bodipy493503を緑、コンピュータ上で赤と緑を重ね合わせた像merge像に核染色青を加えて示した。Cherry4BNは緑で描出される脂肪滴の周囲に集積する明るい赤色の輪として描出されるつまり、脂肪滴膜に結合している他、細胞質、細胞質の網状構造ERと推定される、核に分布する。なお、48時間後の観察でもほぼ同様の結果が得られたが、トランスフェクションのダメージと思われる細胞の変性が著しかった。以下24時間後の観察のみ示す。また、EGFP4BNでもほぼ同様の結果を得たデータ省略。データには示さないが、Cherryタンパク質単体では細胞全体核に若干強いに分布し、EGFPタンパク質単体も細胞全体に分布する。従って、図6の観察結果から、蛍光タンパク質に4BNを融合させることによって、脂肪滴膜およびERへ局在する性質が新たに生じたことがわかり、4BNは脂肪滴膜およびERに親和性を持つものと推定された。2.4BCの細胞内局在Cherry4BCをOc細胞にトランスフェクションし、24時間後に共焦点顕微鏡観察を行った。図7に、観察された典型的細胞像を、Cherry4BCを赤、Bodipy493503を緑、コンピュータ上で赤と緑を重ね合わせた像merge像に核染色青を加えて示した。Cherry4BCはCherry4BNと同様に脂肪滴周囲に集積する他、細胞質、細胞質の網状構造ERと推定されるに分布した。EGFP4BCでもほぼ同様の結果を得たデータ省略。上記4BNと同様に、4BCは脂肪滴膜およびERに親和性を持つものと推定される。3.4BTMの細胞内局在Cherry4BTMをOc細胞にトランスフェクションし、24時間後に共焦点顕微鏡観察を行った。図8に、観察された典型的細胞像を、Cherry4BTMを赤、Bodipy493503を緑、コンピュータ上で赤と緑を重ね合わせた像merge像に核染色青を加えて示した。Cherry4BTMは細胞質内で輪状の構造を示すが、この可視化された輪状構造は緑で示す脂肪滴とは全く無関係であった。EGFP4BTMでもほぼ同様の結果が得られたデータ省略。4BTMの局在部位は正確には同定できないが、おそらく4BTMによって形態変化を受けたERではないかと推定される。4.4B2-3の細胞内局在EGFP4B23をOc細胞にトランスフェクションし、24時間後に共焦点顕微鏡観察を行った。色の関係上Bodipy493503が使えないため、脂肪滴膜局在タンパク質のADRPに対する抗体を用いて脂肪滴の染色を行った。観察の結果、細胞内において、EGFP4B23は、脂肪滴周囲への集積が認められたが、細胞質やERと推定される網目状構造にも分布した。5.4B3の細胞内局在EGFP4B3をOc細胞にトランスフェクションし、24時間後に共焦点顕微鏡観察を行った。色の関係上Bodipy493503が使えないため、脂肪滴膜局在タンパク質のADRPに対する抗体を用いて脂肪滴の染色を行った。観察の結果、細胞内において、EGFP4B3は、脂肪滴周囲への集積が認められたが、細胞質やERと推定される網目状構造にも分布した。6.4B10-11の細胞内局在EGFP4B1011をOc細胞にトランスフェクションし、24時間後に共焦点顕微鏡観察を行った。色の関係上Bodipy493503が使えないため、脂肪滴膜局在タンパク質のADRPに対する抗体を用いて脂肪滴の染色を行った。観察の結果、細胞内において、EGFP4B1011は、脂肪滴周囲への集積が認められたが、細胞質やERと推定される網目状構造にも分布した。7.4BNCの細胞内局在Cherry4BNCをOc細胞にトランスフェクションし、24時間後に共焦点顕微鏡観察を行った。図9に、観察された典型的細胞像を、Cherry4BNCを赤、Bodipy493503を緑、コンピュータ上で赤と緑を重ね合わせた像merge像に核染色青を加えて示した。Cherry4BNCは輪状に描出され、かつその位置は緑で示される脂肪滴と完全に一致していた。細胞内の他の部位にはほとんどCherry4BNCの分布は見られなかった。Cherry4BNCは脂肪滴の周囲に限局して分布し、すなわち脂肪滴膜に高度に特異的に結合することがわかった。EGFP4BNCをOc細胞にトランスフェクションし、24時間後に共焦点顕微鏡観察を行った。色の関係上Bodipy493503が使えないため、脂肪滴膜局在タンパク質のADRPに対する抗体を用いて脂肪滴の染色を行った。図10に、観察された典型的細胞像を、EGFP4BNCを緑、ADRPをマゼンタ色で示した。EGFP4BNCとADRPの分布はほぼ完全に一致し、脂肪滴膜へのEGFP4BNCの結合を示すとともに、EGFP4BNCの方がADFP抗体より精彩に脂肪滴膜を描出することがわかった。脂肪滴の乏しい他の細胞の例として、ヒト腎由来のHEK293細胞に脂肪酸stearicacid50μMを添加して脂肪滴を誘導し、Cherry4BNCを用いて上記同様の観察を行った。図11に、観察された典型的細胞像を、Cherry4BNCを赤、Bodipy493503を緑、コンピュータ上で赤と緑を重ね合わせた像merge像に核染色青を加えて示した。この観察結果から異なる細胞種においても高い特異性をもってCherry4BNCが脂肪滴膜に結合することがわかった。図9、10、及び11に示す結果から、4BNCは脂肪滴膜のみに特異的に結合することが示された。8.NS4B-Cherry融合タンパク質の脂肪滴局在についての定量的解析細胞数あたりどれぐらいの頻度でCherry4Bfull、Cherry4BN、Cherry4BTM、Cherry4BC、Cherry4B1、Cherry4B2、Cherry4B3、Cherry4B12、Cherry4B23、Cherry4B9、Cherry4B10、Cherry4B11、Cherry4B910、Cherry4B1011、Cherry4BNCが脂肪滴膜へ局在するかをカウントした結果は、以下の通りである。なお、各コンストラクトの構造は図12に示す。1Cherry4BfullカテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:1220カテゴリーC:47802Cherry4BNカテゴリーA:17細胞数25カテゴリーB:5075カテゴリーC:003Cherry4BCカテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:3041カテゴリーC:44594Cherry4BTMカテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:00カテゴリーC:481005Cherry4B1カテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:00カテゴリーC:621006Cherry4B2カテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:00カテゴリーC:621007Cherry4B3カテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:56カテゴリーC:73948Cherry4B9カテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:12カテゴリーC:51989Cherry4B10カテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:00カテゴリーC:6010010Cherry4B11カテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:12カテゴリーC:529811Cherry4B12カテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:00カテゴリーC:4310012Cherry4B23カテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:3861カテゴリーC:243913Cherry4B910カテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:00カテゴリーC:6210014Cherry4B1011カテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:46カテゴリーC:669415Cherry4BNCカテゴリーA:62細胞数95カテゴリーB:35カテゴリーC:00上記の結果によれば、4BNCは、9565細胞のうち62細胞という高い確率で脂肪滴膜のみに特異的に結合することが示された。一方、Cherry4BNについては、脂肪滴膜に局在性を示すものの、その他の部位にも局在性を示した細胞の方が多かった75。さらに、Cherry4BCに関しては、脂肪滴にのみ局在性を示した細胞の数は0であり、脂肪滴膜には局在せずに他の部位への局在が認められた細胞カテゴリーCが過半数を超えた59。これらの結果からも、4BNCは脂肪滴膜のみに特異的に結合することが実証された。なお、NS4B全長をCherryに融合させたCherry-4Bfullは20の細胞で脂肪滴への局在が観察された。図13に、観察された典型的細胞像を、Cherry-4Bfullを赤、Bodipy493503を緑、コンピュータ上で赤と緑を重ね合わせた像merge像に核染色青を加えて示した。Cherry4Bfull、Cherry4BN、Cherry4BTM、Cherry4BC、Cherry4B1、Cherry4B2、Cherry4B3、Cherry4B12、Cherry4B23、Cherry4B9、Cherry4B10、Cherry4B11、Cherry4B910、Cherry4B1011についての上記定量的解析の結果を図14に要約した。<NS4Bにおける脂肪滴との相互作用に重要なアミノ酸残基の同定>上記の結果から、NS4Bにおいて脂肪滴局在のために重要なアミノ酸配列は、N末端領域では4B3部位より強い局在を示すのは4B23部位に存在し、C末端領域では4B1011部位に存在することが推定できる図14参照。最近の報告において、タンパク質が脂肪滴に局在するときに、amphipathicαhelixαへリックスを軸方向から見たときに、一方の側に疎水性アミノ酸残基が、他方の側に親水性アミノ酸残基が偏って存在する構造が重要な働きをすることが示唆されているBoulantetalJBiolChem28122236222472006ShavinskayaetalJBiolChem28237158371692007。NS4Bにおいて脂肪滴局在のために重要なアミノ酸配列が存在するものと推定される上記部位、すなわち4B23および4B1011部位にもそれぞれ一つずつのamphipathicαhelixが存在することが知られているElazaretalJVirol7811393114002004GouttenoireetalJVirol8311378113842009。当該部位をNS4B全体と対比させて図15に示す。そこで、上記の二つのamphipathicαhelixにおいて脂肪滴膜と相互作用する可能性のある疎水性残基を、長軸方向から見たアミノ酸配置図図16を参考にして選び出し、アラニンに置換する変異体を作製した。対象として選んだアミノ酸残基は43W46L50W57F61I64L242I246L249L253I,計10残基であった。ちなみにαへリックスにおいては、アミノ酸が1残基進むとちょうど100度長軸方向から見た角度がずれる。つまりアミノ酸36残基ごとに長軸方向からみて同じ位置に残基が出現する。従っておおむね3~4残基ごとのアミノ酸が同じ側に存在する。実施したアラニン置換は4B23領域ではW43AL46AW50AF57AI61AL64Aの全部または前半ないし後半の3残基ずつであり、4B1011領域ではI242AL246AL249AI253Aの全部である。これら変異をCherry4BN、Cherry4BCまたはCherry4BNCに導入して脂肪滴への局在を共焦点顕微鏡によって解析した。細胞数あたりどれぐらいの頻度で各変異体が脂肪滴膜へ局在するかをカウントした結果を以下に示す図17及び18を参照。1Cherry4BN変異1Cherry4BNにW43AL46AW50AF57AI61AL64Aの変異を入れたものカテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:00カテゴリーC:581003Cherry4BN変異2カテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:1835カテゴリーC:33654Cherry4BN変異3カテゴリーA:3細胞数5カテゴリーB:5595カテゴリーC:005Cherry4BC変異1カテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:00カテゴリーC:651006Cherry4BNC変異1カテゴリーA:9細胞数17カテゴリーB:4177カテゴリーC:367Cherry4BNC変異2カテゴリーA:0細胞数0カテゴリーB:58カテゴリーC:54928Cherry4BNC変異3カテゴリーA:15細胞数20.3カテゴリーB:5574.3カテゴリーC:45.4Cherry4BNにW43AL46AW50AF57AI61AL64Aの変異を入れたCherry4BN変異1では脂肪滴への局在は全く見られなくなった。次に、この前半3残基のみの変異体つまりCherry4BN変異2では、脂肪滴への局在は若干見られるもののCherry4BNよりは大幅に減少していた。一方、後半3残基のみの変異体、つまりCherry4BN変異3では、Cherry4BNよりも若干脂肪滴への局在が弱まる程度であった。Cherry4BCはCherry4BNより弱いが脂肪滴への局在を示す。Cherry4BCにI242AL246AL249AI253Aの変異を入れたCherry4BC変異1は、脂肪滴への局在を全く示さなかった。本発明によるCherry4BNCは特異的な脂肪滴への局在を示す。Cherry4BNCにW43AL46AW50AF57AI61AL64Aの変異を入れたCherry4BNC変異1は相対的に強い脂肪滴への局在を示した。これらの変異をCherry4BNに入れた場合すなわちCherry4BN変異1は大幅に局在が弱まるのに対し、Cherry4BNCにこれらの変異を入れた場合の影響は少なかった。つまりC末端領域4B1011がかなり強い作用を持つことが推測された。そこで上記の変異に加え、C末端領域の4残基にも変異を入れたCherry4BNC変異2を作製して解析したところ、ほぼ完全に脂肪滴への局在が無くなった。念のため、N末端領域の前半3残基とC末端領域の4残基に変異を入れたCherry4BNC変異3についても観察を行ったが、脂肪滴への局在は相対的に強かったつまり変異によって脂肪滴への局在が完全には阻害されなかった。以上の結果から、αへリックスの一方の側に連続して出現してくる3ないし4つの疎水性アミノ酸を一つのクラスターとすると、43W46L50Wから成るクラスターが単独では最も強い脂肪滴局在能を持つと考えられる。単独では57F61A64Lのクラスターと242I246L249L253Iのクラスターは脂肪滴への局在能は強くないと考えられる。しかしながら、Cherry4BNCにおいては、3つのクラスターを全て変異させないと脂肪滴への局在能は無くならないことから、単独では作用の強くないこれらのクラスター57F61A64Lおよび242I246L249L253Iが、43W46L50Wから成るクラスターと協調的に作用することによって、全体としてはきわめて強い脂肪滴への局在を示すものと考えられる。なお、Cherry4BNCにおいて上記3つのクラスターを変異させても、ごくわずか脂肪滴への局在活性が残っており、未同定の残基による弱い相互作用も推定される。上記の通り同定したアミノ酸残基43W46L50W57F61A64L242I246L249L253Iは、HCVの各サブタイプ間で高度に保存されている図19参照。一部のサブタイプにおいて置換が見られるが、出現するアミノ酸残基は性質の類似した疎水性アミノ酸に限られている。従って、これらの残基によって仲介されるNS4Bと脂肪滴との相互作用NS4Bの脂肪滴膜への局在は、HCVが増殖する過程において極めて重要な役割を負っていることが推定される。このことは、逆にこれらのアミノ酸残基をターゲットにして脂肪滴への局在を阻害する方法を講じてやれば、HCVの増殖を抑制できることを示唆する。上記各変異体の作製方法については、以下に記載の通りである。<変異体作製方法>アラニン残基のコドンには、すべて真核細胞でのコドン使用率の最も高いGCCを用いた。所定の位置にヌクレオチドの変異を含ませたプライマーを用いて適切なPCR断片を作製し、既述のように重複部分を利用して断片同志をさらにPCRで連結し、目的のDNA断片を作製した。以降は既述の方法に準じ制限酵素消化などの処理の後pmCherryC1ベクターに断片を挿入し、完成コンストラクトを得た。全てのコンストラクトについて、プラスミドを精製し、DNAシークエンシングを行って所定の変異が成功していることを確認した。以下各コンストラクトの断片の作製方法を述べる。プライマー配列の下線部はアラニン置換変異に該当する部位を表す。1Cherry4BN変異1W43AL46AW50AF57AI61AL64A断片Aアミノ酸1-48作製PCRU側:4BN用U側プライマーR側:5GGCCTCGGCGGCTTGGGCCTTGGACTCCACCACGGG3配列番号44Cherry4B12プラスミド1ngを鋳型とし、98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C5秒、72°C30秒}の反応を28サイクル繰り返した。反応後、MARLIGEN社RapidPCRpurificationsystemキットを用いて反応産物を精製した。断片Bアミノ酸43-64作製PCRU側:5GCCCAAGCCGCCGAGGCCTTTGCCGCGAAGCACATGTGGAAT3配列番号45R側:5GGCGTACTGGGCCCCGCTGATGGCATTCCACATGTGCTTCGCG3配列番号46両者のプライマーが一部相補的配列を持つように設計してあり、鋳型を加えずに98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、50°C20秒、72°C30秒}の反応を10サイクル繰り返し、プライマーダイマーを形成させた。断片A、B連結及び増幅断片A10μL,断片B4μL、PSバッファー10μL,dNTP,PS05μL,超純水で50μLとした反応液で98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、50°C20秒、72°C30秒}のPCR反応を10サイクル繰り返して断片A,Bを連結した。連結反応後、反応液に次のプライマー01mMを04μLずつ加え、断片にさらに配列を付加しつつ増幅した。U側:4BN用U側プライマーR側:5TTTGAATTCTTAGTTCCCAGGCAGAGTGGACAAGCCTGCGGCGTACTGGGCCCCGCT3配列番号4798°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C5秒、72°C30秒}のPCR反応を20サイクル繰り返した。反応後、MARLIGEN社RapidPCRpurificationsystemキットを用いて反応産物を精製した。2Cherry4BN変異2W43AL46AW50A断片Cアミノ酸1-50作製PCRU側:4BN用U側プライマーR側:5GGCAAAGGCCTCGGCGGCTTGGGCCTTGGACTCCACCACGGG3配列番号48pcDNA4BFLAGプラスミド1ngを鋳型とし、98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C5秒、72°C45秒}のPCR反応を30サイクル繰り返した。反応後、MARLIGEN社RapidPCRpurificationsystemキットを用いて反応産物を精製した。上記pcDNA4BFLAGプラスミドは、pcDNA31ベクターInvitrogen社に、NS4B全長配列とそのC末端部位にアミノ酸配列DYKDDDDKFLAGタグを付加した配列を挿入してあるプラスミドである。断片Dアミノ酸43-73作製PCRU側:断片B用U側プライマーR側:4BN用R側プライマーpcDNA4BFLAGプラスミド1ngを鋳型とし、98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C5秒、72°C45秒}のPCR反応を30サイクル繰り返した。断片C,D連結及び増幅断片C10μL、断片D5μL、PSバッファー10μL,dNTP,PS05μL,超純水で50μLとした反応液で98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C20秒、72°C60秒}のPCR反応を10サイクル繰り返して断片C,Dを連結した。連結反応後、反応液に次のプライマー01mMを04μLずつ加え、PCRで増幅した。U側:4BN用U側プライマーR側:4BN用R側プライマー98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C5秒、72°C60秒}のPCR反応を10サイクル行い、MARLIGEN社RapidPCRpurificationsystemキットを用いて反応産物を精製した。3Cherry4BN変異3断片Eアミノ酸1-64作製PCRU側:4BN用U側プライマーR側:5GGCGTACTGGGCCCCGCTGATGGCATTCCACATGTGCTTCGC3配列番号49pcDNA4BFLAGプラスミド1ngを鋳型とし、98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C5秒、72°C45秒}のPCR反応を30サイクル繰り返した。反応後、MARLIGEN社RapidPCRpurificationsystemキットを用いて反応産物を精製した。断片Fアミノ酸57-73作製PCRU側:5GCCATCAGCGGGGCCCAGTACGCCGCAGGCTTGTCCACTCTG3配列番号50R側:4BN用R側プライマーpcDNA4BFLAGプラスミド1ngを鋳型とし、98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C5秒、72°C45秒}のPCR反応を30サイクル繰り返した。断片E,F連結及び増幅断片E5μL,断片F5μL、PSバッファー10μL,dNTP,PS05μL,超純水で50μlとした反応液で98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C20秒、72°C60秒}のPCR反応を10サイクル繰り返して断片E,Fを連結した。連結反応後、反応液に次のプライマー01mMを04μLずつ加え、PCRで増幅した。U側:4BN用U側プライマーR側:4BN用R側プライマー98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C5秒、72°C60秒}のPCR反応を10サイクル行い、MARLIGEN社RapidPCRpurificationsystemキットを用いて反応産物を精製した。4Cherry4BC変異1I242AL246AL249AI253A断片Gアミノ酸192-261作製PCRU側:4BC用U側プライマーR側:5TTTGAATTCTTAGCATGGCGTGGAGCAGTCCTCATTGGCCCACTGGTGGGCTCTCTTGGCCAGCTGGGTGGCGGTAAGGCTGGAGAGGAT3配列番号51Cherry4Bfullプラスミド10ngを鋳型とし、98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C20秒、72°C60秒}のPCR反応を27サイクル行い、MARLIGEN社RapidPCRpurificationsystemキットを用いて反応産物を精製した。5Cherry4BNC変異1W43AL46AW50AF57AI61AL64A断片Hアミノ酸1-73作製PCRU側:4BNU側プライマーR側:5GTTCCCAGGCAGAGTGGACAA3配列番号52Cherry4BN変異1プラスミド10ngを鋳型として、98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C5秒、72°C30秒}のPCR反応を25サイクル行い、MARLIGEN社RapidPCRpurificationsystemキットを用いて反応産物を精製した。断片Iアミノ酸65-73および192-217作製PCRU側:5GCAGGCTTGTCCACTCTGC3配列番号53R側:4BC用R側プライマーCherry4BNCプラスミド10ngを鋳型として、98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C5秒、72°C60秒}のPCR反応を25サイクル行い、MARLIGEN社RapidPCRpurificationsystemキットを用いて反応産物を精製した。断片H,Iの連結及び増幅断片H200ng,断片I200ng、PSバッファー10μL,dNTP,PS05μL,超純水で50μLとした反応液で98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C20秒、72°C60秒}のPCR反応を10サイクル繰り返して断片H,Iを連結した。連結反応後、反応液に次のプライマー01mMを04μLずつ加え、PCRで増幅した。U側:4BN用U側プライマーR側:4BC用R側プライマー98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C5秒、72°C60秒}のPCR反応を8サイクル行い、MARLIGEN社RapidPCRpurificationsystemキットを用いて反応産物を精製した。6Cherry4BNC変異2W43AL46AW50AF57AI61AL64AI242AL246AL249AI253A断片Jアミノ酸1-73及び192-261作製PCRU側プライマー:4BN用U側プライマーR側プライマー:断片G用R側プライマーCherry4BNC変異1プラスミド10ngを鋳型として、98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C20秒、72°C60秒}のPCR反応を27サイクル行い、MARLIGEN社RapidPCRpurificationsystemキットを用いて反応産物を精製した。7Cherry4BNC変異3W43AL46AW50AI242AL246AL249AI253A断片Kアミノ酸1-73作製PCRU側:4BN用U側プライマーR側:断片H用R側プライマーCherry4BN変異2プラスミド10ngを鋳型として、98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C5秒、72°C30秒}のPCR反応を28サイクル行い、MARLIGEN社RapidPCRpurificationsystemキットを用いて反応産物を精製した。断片Lアミノ酸65-73および192-217作製PCRU側:断片I用U側プライマーR側:断片G用R側プライマーCherry4BNC変異2プラスミド10ngを鋳型として、98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C5秒、72°C30秒}のPCR反応を28サイクル行い、MARLIGEN社RapidPCRpurificationsystemキットを用いて反応産物を精製した。断片K,Lの連結及び増幅断片K200ng,断片L200ng、PSバッファー10μL,dNTP,PS05μL,超純水で50μlとした反応液で98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C20秒、72°C30秒}のPCR反応を10サイクル繰り返して断片K,Lを連結した。連結反応後、反応液に次のプライマー01mMを04μLずつ加え、PCRで増幅した。U側:4BN用U側プライマーR側:断片G用R側プライマー98°C10秒の変性反応の後、{98°C10秒、55°C5秒、72°C30秒}のPCR反応を8サイクル行い、MARLIGEN社RapidPCRpurificationsystemキットを用いて反応産物を精製した。"