活性化ナチュラルキラー細胞の集団を産生する方法であって造血幹細胞又は前駆細胞の集団が拡大し、かつ該拡大することの間に、該造血幹細胞又は前駆細胞の集団内の複数の造血幹細胞又は前駆細胞がNK細胞に分化するように、インターロイキン15、並びに任意に幹細胞因子及びインターロイキン7のうちの1つ又は複数を含み、ここで、該IL15並びに任意のSCF及びIL7が該培地の不確定成分に含まれない、第一の培地中に、該集団を播種すること並びに工程由来の細胞をインターロイキン2を含む第二の培地中で拡大して、活性化NK細胞の集団を産生することを含む、前記方法。活性化ナチュラルキラー細胞の集団を産生する二工程方法であって、該方法の第一の工程が、幹細胞因子、インターロイキン7、及びインターロイキン15のうちの1つ又は複数を含む第一の培地中で、造血幹細胞又は前駆細胞の集団を拡大することを含み、ここで、該SCF、IL7、及びIL15が該培地の不確定成分に含まれず、かつここで、該拡大することの間に、該造血幹細胞又は前駆細胞の集団内の複数の造血幹細胞又は前駆細胞がNK細胞に分化しかつ該方法の第二の工程が、該第一の工程由来の細胞をインターロイキン2を含む第二の培地中で拡大して、活性化NK細胞を産生することを含む、前記方法。前記第一の培地が、Fms様チロシンキナーゼ3リガンド、トロンボポエチン、インターロイキン2、又はヘパリンのうちの1つ又は複数を更に含む、請求項1記載の方法。前記第一の培地が、胎仔ウシ血清又はヒト血清を更に含む、請求項3記載の方法。前記SCFが、前記第一の培地中、約1~約150ngmLの濃度で存在する、請求項3記載の方法。前記Flt3Lが、前記第一の培地中、約1~約150ngmLの濃度で存在する、請求項3記載の方法。前記IL2が、前記第一の培地中、約50~約1500IUmLの濃度で存在する、請求項3記載の方法。前記IL7が、前記第一の培地中、約1~約150ngmLの濃度で存在する、請求項3記載の方法。前記IL15が、前記第一の培地中、1~約150ngmLの濃度で存在する、請求項3記載の方法。前記Tpoが、前記第一の培地中、約1~約150ngmLの濃度で存在する、請求項3記載の方法。前記ヘパリンが、前記第一の培地中、約01~約30UmLの濃度で存在する、請求項3記載の方法。前記第二の工程における前記IL2が、前記第二の培地中、50~約1500IUmLの濃度で存在する、請求項1記載の方法。該第二の培地が、胎仔ウシ血清、トランスフェリン、インスリン、エタノールアミン、オレイン酸、リノール酸、パルミチン酸、ウシ血清アルブミン、及びフィトヘマグルチニンのうちの1つ又は複数を更に含む、請求項1記載の方法。前記造血幹細胞又は前駆細胞がCD34である、請求項1記載の方法。前記造血幹細胞又は前駆細胞が、ヒト胎盤灌流液由来の造血幹細胞又は前駆細胞、及び臍帯由来の造血幹細胞又は前駆細胞を含み、ここで、該胎盤灌流液及び該臍帯血が同じ胎盤に由来するものである、請求項1記載の方法。工程のフィーダー細胞が、マイトマイシンC処理した末梢血単核細胞、K562細胞、又は組織培養物接着性幹細胞を含む、請求項1記載の方法。前記NK細胞が、CD3CD56CD16である、請求項1記載の方法。前記NK細胞が更にCD94CD117である、請求項17記載の方法。前記NK細胞が更にCD161である、請求項17記載の方法。前記NK細胞が更にNKG2Dである、請求項17記載の方法。前記NK細胞が更にNKp46である、請求項17記載の方法。前記NK細胞が更にCD226である、請求項17記載の方法。造血幹細胞又は前駆細胞の集団が拡大し、かつ該拡大することの間に、該造血幹細胞又は前駆細胞の集団内の複数の造血幹細胞又は前駆細胞がNK細胞に分化するように、インターロイキン15、並びに任意に幹細胞因子及びインターロイキン7のうちの1つ又は複数を含み、ここで、該IL15並びに任意のSCF及びIL7が該培地の不確定成分に含まれない、第一の培地中に、該集団を播種すること並びに工程由来の細胞をインターロイキン2を含む第二の培地中で拡大して、活性化NK細胞の集団を産生することを含む方法によって得られる活性化NK細胞の集団。腫瘍細胞の増殖を抑制する方法であって、該腫瘍細胞を複数のCD94CD117NK細胞と接触させることを含み、ここで、該NK細胞が、請求項1記載の方法によって産生されたものである、前記方法。前記腫瘍細胞が、原発性腺管癌細胞、膠芽腫細胞、白血病細胞、急性T細胞白血病細胞、慢性骨髄リンパ腫細胞、急性骨髄性白血病細胞、慢性骨髄性白血病細胞、肺癌細胞、結腸腺癌細胞、組織球性リンパ腫細胞、多発性骨髄腫細胞、結腸直腸癌細胞、結腸直腸腺癌細胞、前立腺癌細胞、又は網膜芽腫細胞である、請求項24記載の方法。造血細胞、例えば、造血幹細胞又は前駆細胞からNK細胞を産生し、それを拡大する新規の方法が本明細書で提供される。NK細胞を産生するために用いられる造血細胞を、任意の供給源、例えば、限定するものではないが、胎盤、臍帯血、胎盤血、末梢血、脾臓、又は肝臓から単離してもよい。ある実施態様では、NK細胞を、拡大された造血細胞、例えば、造血幹細胞及び又は造血前駆細胞から産生する。一実施態様では、造血細胞を、そのような細胞の供給源、例えば、胎盤灌流液、臍帯血、胎盤血、末梢血、脾臓、肝臓、及び又は骨髄から回収する。具体的な実施態様では、造血細胞を、フィーダー細胞を用いないで、第一の培地中で、連続的に拡大し、分化させる。その後、該細胞を、フィーダー細胞の存在下、第二の培地中で培養する。そのような単離、拡大、及び分化は、中心施設で実施することができ、それにより、使用地点、例えば、病院、軍事基地、軍部の前線などでの分散的な拡大及び分化のための輸送用の拡大された造血細胞が提供される。本明細書に開示された方法において有用な造血細胞は、NK細胞に分化することができる任意の造血細胞、例えば、前駆細胞、造血前駆細胞、造血幹細胞などであることができる。造血細胞は、例えば、骨髄、臍帯血、胎盤血、末梢血、肝臓など、又はそれらの組合せなどの組織源から得ることができる。造血細胞は、胎盤から得ることができる。具体的な実施態様では、造血細胞は、胎盤灌流液から得られる。胎盤灌流液由来の造血細胞は、胎児造血細胞と母親造血細胞の混合物、例えば、母親細胞が造血細胞の総数の5超を含む混合物を含むことができる。好ましくは、胎盤灌流液由来の造血細胞は、少なくとも約90、95、98、99、又は995の胎児細胞を含む。別の具体的な実施態様では、TSNK細胞が産生される造血細胞、例えば、造血幹細胞又は前駆細胞を、胎盤灌流液、臍帯血、又は末梢血から得る。別の具体的な実施態様では、TSNK細胞が産生される造血細胞、例えば、造血幹細胞又は前駆細胞は、胎盤灌流液及び臍帯血、例えば、該灌流液と同じ胎盤由来の臍帯血に由来する組み合わされた細胞である。別の具体的な実施態様では、該臍帯血を、該胎盤灌流液が得られる胎盤以外の胎盤から単離する。ある実施態様では、該組み合わされた細胞は、該臍帯血及び胎盤灌流液をプールするか又は組み合わせることによって得ることができる。ある実施態様では、該臍帯血及び胎盤灌流液を、容積で1001、955、9010、8515、8020、7525、7030、6535、6040、55455050、4555、4060、3565、3070、2575、2080、1585、1090、595、1001、951、901、851、801、751、701、651、601、551、501、451、401、351、301、251、201、151、101、51、11、15、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195、1100などの比率で組み合わせて、該組み合わされた細胞を得る。具体的な実施態様では、該臍帯血及び胎盤灌流液を、101~110、51~15、又は31~13の比率で組み合わせる。別の具体的な実施態様では、該臍帯血及び胎盤灌流液を、101、51、31、11、13、15、又は110の比率で組み合わせる。より具体的な実施態様では、該臍帯血及び胎盤灌流液を、8515の比率で組み合わせる。ある実施態様では、該臍帯血及び胎盤灌流液を、全有核細胞含有量で1001、955、9010、8515、8020、7525、7030、6535、6040、55455050、4555、4060、3565、3070、2575、2080、1585、1090、595、1001、951、901、851、801、751、701、651、601、551、501、451、401、351、301、251、201、151、101、51、11、15、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195、1100などの比率で組み合わせて、該組み合わされた細胞を得る。具体的な実施態様では、該臍帯血及び胎盤灌流液を、101~110、51~15、又は31~13の比率で組み合わせる。別の具体的な実施態様では、該臍帯血及び胎盤灌流液を、101、51、31、11、13、15、又は110の比率で組み合わせる。別の具体的な実施態様では、該TSNK細胞が産生される造血細胞、例えば、造血幹細胞又は前駆細胞は、臍帯血と胎盤灌流液の両方に由来するものであるが、その場合、該臍帯血は、該胎盤灌流液が得られる胎盤以外の胎盤から単離される。ある実施態様では、造血細胞はCD34細胞である。具体的な実施態様では、本明細書に開示された方法において有用な造血細胞は、CD34CD38又はCD34CD38である。より具体的な実施態様では、該造血細胞は、CD34CD38Linである。別の具体的な実施態様では、該造血細胞は、CD2、CD3、CD11b、CD11c、CD14、CD16、CD19、CD24、CD56、CD66b、及び又はグリコフォリンAのうちの1つ又は複数である。別の具体的な実施態様では、該造血細胞は、CD2、CD3、CD11b、CD11c、CD14、CD16、CD19、CD24、CD56、CD66b、及びグリコフォリンAである。別のより具体的な実施態様では、該造血細胞は、CD34CD38CD33CD117である。別のより具体的な実施態様では、該造血細胞は、CD34CD38CD33CD117CD235CD36である。別の実施態様では、該造血細胞はCD45である。別の具体的な実施態様では、該造血細胞はCD34CD45である。別の実施態様では、該造血細胞はThy1である。具体的な実施態様では、該造血細胞はCD34Thy1である。別の実施態様では、該造血細胞はCD133である。具体的な実施態様では、該造血細胞は、CD34CD133又はCD133Thy1である。別の具体的な実施態様では、該CD34造血細胞はCXCR4である。別の具体的な実施態様では、該CD34造血細胞はCXCR4である。別の実施態様では、該造血細胞は、KDRが陽性である。具体的な実施態様では、該造血細胞は、CD34KDR、CD133KDR、又はThy1KDRである。ある他の実施態様では、該造血細胞は、アルデヒドデヒドロゲナーゼが陽性であり、例えば、該細胞はCD34ALDHである。ある他の実施態様では、該CD34細胞はCD45である。具体的な実施態様では、該CD34細胞、例えば、CD34、CD45細胞は、miRNAのhsamiR380、hsamiR512、hsamiR517、hsamiR518c、hsamiR519b、及び又はhsamiR520aのうちの1つもしくは複数、又は全てを発現する。ある実施態様では、該造血細胞はCD34である。該造血細胞はまた、系譜の確定又は発生的な未感作性の欠如を示す特定のマーカーを欠如していてもよい。例えば、別の実施態様では、該造血細胞はHLADRである。具体的な実施態様では、該造血細胞は、CD34HLADR、CD133HLADR、Thy1HLADR、又はALDHHLADRである。別の実施態様では、該造血細胞は、系譜マーカーCD2、CD3、CD11b、CD11c、CD14、CD16、CD19、CD24、CD56、CD66b、及びグリコフォリンAのうちの1つ又は複数、好ましくは、その全てが陰性である。従って、造血細胞は、未分化状態を示すマーカーの存在に基づくか、又は少なくともいくつかの系譜分化が起こったことを示す系譜マーカーの不在に基づいて、本明細書に開示された方法での使用のために選択することができる。特定のマーカーの存在又は不在に基づいて、造血細胞を含む細胞を単離する方法は、例えば、下の第612節で詳細に論じられている。本明細書で提供される方法で用いられる造血細胞は、実質的に均一な集団、例えば、単一の組織源由来の少なくとも約95、少なくとも約98、もしくは少なくとも約99の造血細胞を含む集団、又は同じ造血細胞関連細胞マーカーを示す造血細胞を含む集団であることができる。例えば、様々な実施態様では、該造血細胞は、骨髄、臍帯血、胎盤血、末梢血、又は胎盤、例えば、胎盤灌流液由来の少なくとも約95、98、又は99の造血細胞を含むことができる。本明細書で提供される方法で用いられる造血細胞を、単一の個体から、例えば、単一の胎盤から、又は複数の個体から得ることができ、例えば、プールすることができる。該造血細胞を複数の個体から得て、プールする場合、該造血細胞を同じ組織源から得てもよい。従って、様々な実施態様では、プールされた造血細胞は全て、胎盤、例えば、胎盤灌流液由来のもの、全て胎盤血由来のもの、全て臍帯血由来のもの、全て末梢血由来のものなどである。本明細書に開示された方法で用いられる造血細胞は、ある実施態様では、2以上の組織源由来の造血細胞を含むことができる。例えば、ある実施態様では、2以上の源由来の造血細胞を本明細書中の方法での使用のために組み合わせる場合、TSNK細胞を産生するために用いられる複数の造血細胞は、胎盤、例えば、胎盤灌流液由来の造血細胞を含む。様々な実施態様では、TSNK細胞を産生するために用いられる造血細胞は、胎盤由来及び臍帯血由来の胎盤及び末梢血由来の胎盤及び胎盤血由来の、又は胎盤及び骨髄由来の造血細胞を含む。好ましい実施態様では、該造血細胞は、臍帯血由来の造血細胞と組み合わせた胎盤灌流液由来の造血細胞を含み、ここで、該臍帯血及び胎盤は、同じ個体に由来するものであり、すなわち、該灌流液及び臍帯血はマッチしている。造血細胞が2つの組織源由来の造血細胞を含む実施態様では、該源由来の造血細胞は、例えば、110、29、38、47、56、65、74、83、92、110、19、18、17、16、15、14、13、12、11、21、31、41、51、61、71、81、又は91の比率で組み合わせることができる。ある実施態様では、本明細書で提供される方法で用いられる造血細胞は胎盤造血細胞である。本明細書で使用されるように、胎盤造血細胞は、胎盤それ自体から得られる造血細胞であって、胎盤血からも臍帯血からも得られないものを意味する。一実施態様では、胎盤造血細胞はCD34である。具体的な実施態様では、該胎盤造血細胞は、主にCD34CD38細胞である。別の具体的な実施態様では、該胎盤造血細胞は、主にCD34CD38細胞である。胎盤造血細胞は、当業者に公知の任意の手段によって、例えば、灌流によって、分娩後の哺乳動物胎盤から得ることができる。別の実施態様では、該胎盤造血細胞はCD45である。具体的な実施態様では、該造血細胞はCD34CD45である。別の具体的な実施態様では、該胎盤造血細胞はCD34CD45である。本方法によるNK細胞の産生は、造血細胞の集団を拡大することを含む。細胞拡大の間に、該造血細胞集団内の複数の造血細胞はNK細胞に分化する。一実施態様では、活性化ナチュラルキラー細胞の集団を産生する方法であって造血幹細胞又は前駆細胞の集団が拡大し、かつ該拡大することの間に、該造血幹細胞又は前駆細胞の集団内の複数の造血幹細胞又は前駆細胞がNK細胞に分化するように、インターロイキン15、並びに任意に幹細胞因子及びインターロイキン7のうちの1つ又は複数を含み、ここで、該IL15並びに任意のSCF及びIL7が該培地の不確定成分に含まれない、第一の培地中に、該集団を播種すること並びに工程由来の細胞をインターロイキン2を含む第二の培地中で拡大して、活性化NKの集団を産生することを含む、方法が本明細書で提供される。別の実施態様では、本明細書で提供されるNK細胞は、NK細胞の拡大分化及び成熟の二工程プロセスによって産生される。第一の工程及び第二の工程は、該細胞を独特な組合せの細胞因子を含む培地中で培養することを含む。ある実施態様では、該プロセスは、造血細胞の集団を、該造血細胞集団内の複数の造血幹細胞又は前駆細胞がNK細胞に分化する、第一の培地中で培養し、拡大すること及び工程由来のNK細胞を、該NK細胞が更に拡大され、分化し、かつ該NK細胞が成熟する、第二の培地中で拡大することを含む。ある実施態様では、該方法は、工程との間の中間工程、工程の前の追加の培養工程、及び又は工程の後の追加の工程を含まない。ある実施態様では、本明細書で提供される方法は、造血細胞の集団を、該造血細胞集団内の複数の造血幹細胞又は前駆細胞がNK細胞に分化する、第一の培地中で培養し、拡大する第一の工程を含む。任意のパラメータ、メカニズム、又は理論に束縛されることを望まないが、本明細書で提供されるような造血細胞の培養は、該造血細胞の連続的拡大及び該細胞からのNK細胞の分化をもたらす。ある実施態様では、本明細書で提供される方法で用いられる造血細胞、例えば、幹細胞又は前駆細胞を、フィーダー層を用いて、第一の工程で拡大し、分化させる。他の実施態様では、造血細胞、例えば、幹細胞又は前駆細胞を、フィーダー層を用いないで、第一の工程で拡大し、分化させる。造血細胞のフィーダー細胞非依存的な拡大及び分化は、細胞の培養及び拡大と適合する任意の容器、例えば、フラスコ、チューブ、ビーカー、ディッシュ、マルチウェルプレート、バッグなどの中で生じることができる。具体的な実施態様では、造血細胞のフィーダー細胞非依存的な拡大は、バッグ、例えば、可撓性で、ガス透過性のフルオロカーボン培養バッグの中で生じる。具体的な実施態様では、造血細胞を拡大する容器は、例えば、拡大されたNK細胞を更に拡大し、分化させる、病院又は軍事区域などの場所への輸送に好適である。ある実施態様では、造血細胞を、例えば、第一の培養培地中で、連続的な様式で、拡大し、分化させる。一実施態様では、該第一の培養培地は、動物成分不含培地である。本明細書で提供される方法において有用な例示的な動物成分不含培地としては、イーグル基本培地、ダルベッコ改変イーグル培地、グラスゴー最小必須培地、ダルベッコ改変イーグル培地栄養混合物F12ハム、最小必須培地、イスコフ改変ダルベッコ培地、栄養混合物F10ハム、栄養混合物F12ハム、RPMI1640培地、ウィリアム培地E、STEMSPAN、Glycostem基本成長培地、AIMV培地、XVIVO10、XVIVO15、OPTMIZER、STEMSPANH3000、CELLGROCOMPLETE、もしくは任意の改変型変種、又はそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。好ましい実施態様では、第一の培養培地は、培地添加物のうちの1つ又は複数を含む。本明細書で提供される方法での使用に好適な培地添加物としては、例えば、限定するものではないが、血清、例えば、ヒト血清AB、胎仔ウシ血清、もしくは胎仔ウシ血清、ビタミン、ウシ血清アルブミン、アミノ酸、脂肪酸、インスリン、トランスフェリン、βメルカプトエタノール、幹細胞因子、Fms様チロシンキナーゼ3リガンド、サイトカイン、例えば、インターロイキン2、インターロイキン7、インターロイキン15、トロンボポエチン、ヘパリン、又はOアセチルカルニチンが挙げられる。具体的な実施態様では、本明細書で用いられる培地は、ヒト血清ABを含む。別の具体的な実施態様では、本明細書で用いられる培地は、FBSを含む。別の具体的な実施態様では、本明細書で用いられる培地は、OACを含む。ある実施態様では、第一の培地は、顆粒球コロニー刺激因子、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、インターロイキン6、マクロファージ炎症性タンパク質1α、又は白血病抑制因子のうちの1つ又は複数を含まない。従って、一態様では、NK細胞を産生する二工程方法が本明細書で提供され、ここで、該第一の工程は、フィーダー細胞の非存在下、第一の培養培地中で、造血細胞の集団を拡大し、分化させることを含み、該造血細胞の集団内の複数の造血細胞は、該拡大することの間にNK細胞に分化し、該培地は、約1~約150ngmLの濃度のSCF、約50~約1500IUmLの濃度のIL2、約1~約150ngmLの濃度のIL7、1~約150ngmLの濃度のIL15、及び約01~約30IUmLの濃度のヘパリンを含み、該SCF、IL2、IL7、IL15、及びヘパリンは、該培地の不確定成分に含まれない。ある実施態様では、該培地は、Oアセチルカルニチン、又はミトコンドリアでアセチルCoA循環に影響を及ぼす化合物、チアゾビビン、Y27632、ピインテグリン、Rhoキナーゼ阻害剤、カスパーゼ阻害剤、もしくは他の抗アポトーシス化合物ペプチド、NOVARS、又は他の小分子成長促進剤のうちの1つ又は複数を含む。ある実施態様では、該培地は、ニコチンアミドを含む。ある実施態様では、該培地は、約05mM~10mMのOACを含む。一実施態様では、該培地は、StemspanH3000、及び又はDMEMF12、及び約05、1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10mMのOACを含む。該方法の具体的な実施態様では、該培地は、GBGMである。別の具体的な実施態様では、該培地は、StemspanH3000及び約5mMのOACを含む。別の具体的な実施態様では、該培地は、DMEMF12及び約5mMのOACを含む。該OACは、本明細書で提供される培養方法の間、いつでも添加することができる。ある実施態様では、該OACは、第一の培地に及び又は第一の培養工程の間に添加される。いくつかの実施態様では、該OACは、培養0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21日目に、第一の培地に添加される。具体的な実施態様では、該OACは、第一の培養工程の7日目に、第一の培地に添加される。より具体的な実施態様では、該OACは、培養の7日目に、第一の培地に添加され、第一の培養工程及び第二の培養工程の間中、存在する。ある実施態様では、該OACは、第二の培地に及び又は第二の培養工程の間に添加される。いくつかの実施態様では、該OACは、培養22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35日目に、第二の培地に添加される。別の具体的な実施態様では、該培地は、約5~20のBSA、約1~10μgmLの組換えヒトインスリン、約10~50μgmLの鉄飽和ヒトトランスフェリン、及び約10~50μMのβメルカプトエタノールが補充されたIMDMである。別の具体的な実施態様では、該培地は、IL11、IL3、ホメオボックスB4、及びもしくはメチルセルロースのうちの1つもしくは複数、又はそのいずれをも含まない。他の具体的な実施態様では、該培地は、約01~約500ngmL約5~約100ngmL又は約20ngmLの濃度のSCFを含む。他の具体的な実施態様では、該培地は、約10~約2000IUmL又は約100~約500IUmL又は約200IUmLの濃度のIL2を含む。他の具体的な実施態様では、該培地は、約01~約500ngmL約5~約100ngmL又は約20ngmLの濃度のIL7を含む。他の具体的な実施態様では、該培地は、約01~約500ngmL約5~約100ngmL又は約10ngmLの濃度のIL15を含む。他の具体的な実施態様では、該培地は、約005~約100UmL又は約05~約20Uml又は約15UmLの濃度のヘパリンを含む。該方法の更に他の具体的な実施態様では、該培地は更に、約1~約150ngmLの濃度のFms様チロシンキナーゼ3リガンド、約1~約150ngmLの濃度のトロンボポエチン、又は両方の組合せを含む。他の具体的な実施態様では、該培地は、約01~約500ngmL約5~約100ngmL又は約20ngmLの濃度のFlt3Lを含む。他の具体的な実施態様では、該培地は、約01~約500ngmL約5~約100ngmL又は約20ngmLの濃度のTpoを含む。該方法のより具体的な実施態様では、第一の培養培地は、約20ngmLのSCF、約20ngmLのIL7、約10ngmLのIL15を含むGBGMである。該方法の別のより具体的な実施態様では、第一の培養培地は、約20ngmLのSCF、約20ngmLのFlt3L、約200IUmLのIL2、約20ngmLのIL7、約10ngmLのIL15、約20ngmLのTpo、及び約15UmLのヘパリンを含むGBGMである。別の具体的な実施態様では、該第一の培養培地は更に、10のヒト血清又は胎仔血清を含む。別の実施態様では、造血細胞を、免疫調節化合物と接触させていない同等数の造血細胞と比較して、所与の時間にわたる該造血細胞の増殖の検出可能な増加をもたらすのに十分な時間及び量で、例えば、該第一の培地中で、免疫調節化合物、例えば、TNFα阻害化合物と接触させて培養することによって、該細胞を拡大する。例えば、米国特許出願公開第20030235909号を参照されたく、その開示は、その全体が引用により本明細書に組み込まれる。ある実施態様では、免疫調節化合物は、アミノ置換イソインドリンである。好ましい実施態様では、免疫調節化合物は、3ピペリジン26ジオン31ピペリジン26ジオン42イソインドリン13ジオン又は4アミノ2イソインドール13ジオンである。別の好ましい実施態様では、免疫調節化合物は、ポマリドミド、又はレナリドミドである。別の実施態様では、該免疫調節化合物は、以下の構造を有する化合物、又は医薬として許容し得るその塩、水和物、溶媒和物、包摂化合物、エナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ化合物、もしくは立体異性体の混合物であり、式中、X及びYのうちの一方はCOであり、X及びYのうちのもう一方は、CO又はCH2であり、R2は、水素もしくは低級アルキルである。別の実施態様では、該免疫調節化合物は、以下の構造を有する化合物、又は医薬として許容し得るその塩、水和物、溶媒和物、包摂化合物、エナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ化合物、もしくは立体異性体の混合物であり、式中、X及びYのうちの一方はCOであり、X及びYのうちのもう一方は、CH2又はCOでありR1は、H、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、ベンジル、アリール、アルキルヘテロシクロアルキル、アルキルヘテロアリール、CR3、CR3、COR4、アルキルN2、アルキルOR5、アルキルCOR5、CNHR3、CNHR3、CNR3R3、CNR3R3、又はアルキルOR5でありR2は、H、F、ベンジル、アルキル、アルケニル、又はアルキニルでありR3及びR3は、独立に、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、ベンジル、アリール、アルキルヘテロシクロアルキル、アルキルヘテロアリール、アルキルN2、アルキルOR5、アルキルCOR5、アルキルOR5、又はCOR5でありR4は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキルOR5、ベンジル、アリール、アルキルヘテロシクロアルキル、又はアルキルヘテロアリールでありR5は、アルキル、アルケニル、アルキニル、ベンジル、アリール、又はヘテロアリールでありR6の各々の出現は、独立に、H、アルキル、アルケニル、アルキニル、ベンジル、アリール、ヘテロアリール、もしくはアルキルCOR5であるか、又はR6基は結合して、ヘテロシクロアルキル基を形成することができnは0又は1でありかつは、キラル炭素中心を表す。別の実施態様では、該免疫調節化合物は、以下の構造を有する化合物、又は医薬として許容し得るその塩、水和物、溶媒和物、包摂化合物、エナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ化合物、もしくは立体異性体の混合物であり、式中X及びYのうちの一方はCOであり、もう一方は、CH2又はCOでありRは、H又はCH2OCORでありR1、R2、R3、もしくはR4の各々は、他のものとは独立に、ハロ、炭素原子1~4個のアルキル、もしくは炭素原子1~4個のアルコキシであるか、又はR1、R2、R3、もしくはR4のうちの1つは、ニトロもしくはNHR5であり、かつR1、R2、R3、もしくはR4のうちの残りは水素でありR5は、水素又は炭素1~8個のアルキルでありR6は、水素、炭素原子1~8個のアルキル、ベンゾ、クロロ、又はフルオロでありRはR7CHR10NでありR7は、mフェニレン又はpフェニレン又はであり、ここで、nは0~4の値を有しR8及びR9の各々は、他方とは独立に、水素もしくは炭素原子1~8個のアルキルであるか、又はR8及びR9は一緒になって、テトラメチレン、ペンタメチレン、ヘキサメチレン、もしくはCH2CH2X1CH2CH2であり、ここで、X1は、O、S、もしくはNHでありR10は、水素、炭素原子~8個のアルキル、又はフェニルでありかつは、キラル炭素中心を表す。具体的な実施態様では、造血細胞の拡大は、20BITS、SCF、Flt3リガンド、IL3、及び42イソインドリン13ジオンが補充されたIMDM中で行なわれる。より具体的な実施態様では、約5×107個の造血細胞、例えば、CD34細胞を、該培地中で、約5×1010細胞~約5×1012細胞まで拡大し、これを100mLのIMDMに再懸濁して、拡大された造血細胞の集団を産生する。拡大された造血細胞の集団は、輸送しやすくするために凍結保存されることが好ましい。様々な具体的な実施態様では、造血細胞の少なくとも50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、97、98、又は99をNK細胞に分化させる。ある実施態様では、本明細書に記載されているような、造血細胞の拡大及び分化の方法は、該造血細胞を含む細胞集団を、拡大及び分化の間、1ミリリットル当たり約2×104~約2×105細胞で維持することを含む。ある他の実施態様では、本明細書に記載されているような、造血細胞の拡大及び分化の方法は、該造血細胞を含む細胞集団を1ミリリットル当たり約1×105細胞以下で維持することを含む。造血細胞の拡大、及びNK細胞への分化にかかる時間は、例えば、約3日~約120日であり得る。一実施態様では、分化時間は、約7日~約75日である。別の実施態様では、分化時間は、約14日~約50日である。具体的な実施態様では、分化時間は、約21日~約28日である。本明細書で提供される方法では、造血細胞、例えば、幹細胞又は前駆細胞、及び第一の工程から得られる、ナチュラルキラー細胞を、例えば、フィーダー層を用いないで、又はフィーダー細胞の存在下、第二の工程で更に拡大し、分化させる。本明細書で提供されているような細胞の培養は、第一の工程由来のNK細胞の連続的な拡大、分化、及び成熟をもたらす。第二の工程では、該NK細胞を、例えば、該第一の培地とは異なるサイトカイン及び又は生体活性分子を含む第二の培養培地中で、連続的な様式で、拡大し、分化させ、かつ成熟させる。ある実施態様では、第二の培養培地は、動物成分不含培地である。例示的な動物成分不含細胞培養培地は、上の第621節に記載されている。従って、一態様では、NK細胞を産生する方法であって、上記の第一の工程由来のNK細胞を、フィーダー細胞の存在下で、かつインターロイキン2と接触させて、第二の培地中で拡大することを含む、方法が本明細書で提供される。具体的な実施態様では、該第二の培地は、IL2、例えば、10IUmL~1000IUmL、及びヒト血清、胎仔ウシ血清、もしくは胎仔ウシ血清、例えば、5~15FCSvvトランスフェリン、例えば、10μgmL~50μgmLインスリン、例えば、5μgmL~20μgmLエタノールアミン、例えば、5×104~5×105Mオレイン酸、例えば、01μgmL~5μgmLリノール酸、例えば、01μgmL~5μgmLパルミチン酸、例えば、005μgmL~2μgmLウシ血清アルブミン、例えば、1μgmL~5μgmL及び又はフィトヘマグルチニン、例えば、001μgmL~1μgmLのうちの1つ又は複数を含む細胞成長培地を含む。より具体的な実施態様では、該第二の培地は、FBS又はFCS、例えば、10FCSvv、IL2、トランスフェリン、インスリン、エタノールアミン、オレイン酸、リノール酸、パルミチン酸、ウシ血清アルブミン、及びフィトヘマグルチニンを含む細胞成長培地を含む。より具体的な実施態様では、該第二の培地は、イスコフ改変ダルベッコ培地、10のFBS又はFCS、400IUのIL2、35μgmLのトランスフェリン、5μgmLのインスリン、2×105Mのエタノールアミン、1μgmLのオレイン酸、1μgmLのリノール酸、02μgmLのパルミチン酸、25μgmLのBSA、及び01μgmLのフィトヘマグルチニンを含む。ある実施態様では、第二の培地は、顆粒球コロニー刺激因子、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、インターロイキン6、マクロファージ炎症性タンパク質1α、又は白血病抑制因子のうちの1つ又は複数を含まない。該方法に加えて、組成物としての上記の培地のいずれかが本明細書で提供される。フィーダー細胞は、使用するときに、様々な細胞型から樹立することができる。これらの細胞型の例としては、限定するものではないが、線維芽細胞、幹細胞、血液細胞、及び癌細胞細胞、例えば、K562が挙げられる。具体的な実施態様では、該第二の培地中で該培養することは、例えば、フィーダー細胞、例えば、K562細胞及び又は末梢血単核細胞を、該第二の培地中で起こしたとき、その1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10日後に、該細胞を用いて培養することを含む。ある実施態様では、フィーダー細胞は、任意に、それらが支持している細胞と異なる種に由来するものである。例えば、ヒトNK細胞は、マウス胚性線維芽細胞によって支持することができる。ある実施態様では、フィーダー細胞を、任意に、放射線照射又は抗有糸分裂剤、例えば、マイトマイシンCによる処理によって不活化し、それらが支持している細胞よりもそれらが成長するのを防ぐが、NK細胞を支持する重要な因子の合成は可能にする。例えば、細胞に、増殖を阻害するが、ヒト胚性幹細胞を支持する重要な因子の合成を可能にする用量で放射線照射する。第二の工程のためのNK細胞の培養は、細胞の培養及び拡大と適合する任意の容器、例えば、フラスコ、チューブ、ビーカー、ディッシュ、マルチウェルプレート、バッグなどの中で生じることができる。具体的な実施態様では、NK細胞のフィーダー細胞依存的な培養は、バッグ、例えば、可撓性で、ガス透過性のフルオロカーボン培養バッグの中で生じる。具体的な実施態様では、NK細胞を培養する容器は、例えば、拡大されたNK細胞を更に拡大し、分化させ、かつ成熟させる、病院又は軍事区域などの場所への輸送に好適である。工程1由来の細胞のTSNK細胞への分化は、例えば、フローサイトメトリーによって、NK細胞特異的マーカーを検出することによって評価することができる。NK細胞特異的マーカーとしては、CD56、CD94、CD117、及びNKp46が挙げられるが、これらに限定されない。分化は、NK細胞の形態的特徴、例えば、大きいサイズ、数多くの小胞体における高いタンパク質合成活性、及び又は予め形成された顆粒によって評価することもできる。工程1由来の細胞の拡大、及びTSNK細胞への分化にかかる時間は、例えば、約3日~約120日であり得る。一実施態様では、分化時間は、約7日~約75日である。別の実施態様では、分化時間は、約14日~約50日である。具体的な実施態様では、分化時間は、約10日~約21日である。造血細胞のNK細胞への分化は、例えば、フローサイトメトリーによって、マーカー、例えば、CD56、CD94、CD117、NKG2D、DNAM1、及びNKp46を検出することによって評価することができる。分化は、NK細胞の形態的特徴、例えば、大きいサイズ、数多くの小胞体における高いタンパク質合成活性、及び又は予め形成された顆粒によって評価することもできる。NK細胞の成熟は、1以上の機能的に関連のあるマーカー、例えば、CD94、CD161、NKp44、DNAM1、2B4、NKp46、CD94、KIR、及びNKG2ファミリーの活性化受容体を検出することによって評価することができる。NK細胞の成熟は、異なる発生段階の間に特異的なマーカーを検出することによって評価することもできる。例えば、一実施態様では、プロNK細胞は、CD34、CD45RA、CD10、CD117、及び又はCD161である。別の実施態様では、プレNK細胞は、CD34、CD45RA、CD10、CD117、及び又はCD161である。別の実施態様では、未成熟NK細胞は、CD34、CD117、CD161、NKp46、及び又はCD94NKG2Aである。別の実施態様では、CD56brightNK細胞は、CD117、NKp46、CD94NKG2A、CD16、及び又はKIRである。別の実施態様では、CD56dimNK細胞は、CD117、NKp46、CD94NKG2A、CD16、及び又はKIRである。具体的な実施態様では、NK細胞の成熟は、CD161、CD94、及び又はNKp46であるNK細胞のパーセンテージによって決定される。より具体的な実施態様では、成熟NK細胞の少なくとも10、20、25、30、35、40、50、55、60、65、又は70はNKp46である。別のより具体的な実施態様では、成熟NK細胞の少なくとも10、20、25、30、35、40、45、又は50はCD94である。別のより具体的な実施態様では、成熟NK細胞の少なくとも10、20、25、30、35、40、45、又は50はCD161である。ある実施態様では、造血細胞のNK細胞への分化を、例えば、CD3、CD7もしくはCD127、CD10、CD14、CD15、CD16、CD33、CD34、CD56、CD94、CD117、CD161、NKp44、NKp46、NKG2D、DNAM1、2B4、又はTOPRO3の発現レベルを、例えば、これらの細胞マーカーのうちの1つ又は複数に対する抗体を用いて検出することによって評価する。そのような抗体は、例えば、蛍光標識、例えば、FITC、RPE、PerCP、PerCPCy55、APC、APCCy7、又はAPCH7のような、検出可能な標識にコンジュゲートすることができる。ナチュラルキラー細胞を単離する方法は当技術分野で公知であり、該方法を用いて、TSNK細胞を単離することができる。ナチュラルキラー細胞は、組織源、例えば、末梢血由来の細胞をCD56及びCD3に対する抗体で染色し、かつCD56CD3細胞を選択することによって単離又は濃縮することができる。TSNK細胞は、市販のキット、例えば、NK細胞単離キットを用いて単離することができる。TSNK細胞は、該TSNK細胞を含む細胞の集団内のNK細胞以外の細胞の除去によって単離又は濃縮することもできる。例えば、TSNK細胞は、例えば、CD3、CD4、CD14、CD19、CD20、CD36、CD66b、CD123、HLADR、及び又はCD235aのうちの1つ又は複数に対する抗体を用いた非NK細胞マーカーを示す細胞の除去によって単離又は濃縮することができる。陰性単離は、市販のキット、例えば、NK細胞陰性単離キットを用いて実行することができる。これらの方法によって単離される細胞を更に選別して、例えば、CD16及びCD16細胞を分離することができる。細胞分離を、例えば、フローサイトメトリー、蛍光活性化細胞選別、又は好ましくは、特異的抗体とコンジュゲートされたマイクロビーズを用いる磁気細胞選別によって達成することができる。該細胞は、例えば、1以上の特異的抗体、例えば、抗CD56抗体を含む磁気ビーズに結合するその能力に基づいて粒子を分離する方法である、磁気活性化細胞選別技術を用いて単離することができる。磁気細胞分離は、例えば、AUTOMACSセパレーターを用いて実施し、自動化することができる。特定の細胞表面分子又はハプテンを特異的に認識する抗体の共有結合的付加を含む、種々の有用な修飾を、磁気マイクロスフェアに対して行なうことができる。その後、ビーズを該細胞と混合し、結合させておく。その後、細胞を磁場に通して、特定の細胞表面マーカーを有する細胞を完全に分離する。一実施態様では、その後、これらの細胞を単離し、更なる細胞表面マーカーに対する抗体と結合した磁気ビーズと再び混合することができる。該細胞を再び磁場に通して、両方の抗体に結合した細胞を単離する。その後、そのような細胞を希釈して、別々のディッシュ、例えば、クローン単離用のマイクロタイターディッシュに入れることができる。TSNK細胞は、任意の供給源、例えば、胎盤組織、胎盤灌流液、臍帯血、胎盤血、末梢血、脾臓、肝臓などに由来する造血細胞、例えば、造血幹又は前駆細胞から産生することができる。ある実施態様では、該造血幹細胞は、胎盤灌流液由来及び該胎盤灌流液を生成させるために用いられる同じ胎盤に由来する臍帯血由来の組み合わされた造血幹細胞である。例えば、その開示がその全体として引用により本明細書中に組み込まれる、米国特許第7045148号及び第7468276号に開示された方法によって得ることができる胎盤灌流液細胞を含む胎盤灌流液。例えば、本明細書で提供されるような、TSNK細胞と組み合わせて、造血幹もしくは前駆細胞をそこから単離し得るか、或いは腫瘍抑制、又は腫瘍細胞、癌、もしくはウイルス感染を有する個体の治療において有用な、胎盤灌流液及び灌流液細胞は、胎盤細胞回収組成物を用いる、哺乳動物、例えば、ヒトの分娩後胎盤の灌流によって回収することができる。灌流液は、任意の生理的に許容し得る溶液、例えば、生理食塩水溶液、培養培地、又はより複雑な細胞回収組成物を用いる胎盤の灌流によって、胎盤から回収することができる。胎盤の灌流に、並びに灌流液細胞の回収及び保存に好適な細胞回収組成物は、その全体が引用により本明細書中に組み込まれている、関連米国特許出願公開第20070190042号に詳細に記載されている。細胞回収組成物は、幹細胞の回収及び又は培養に好適な任意の生理的に許容し得る溶液、例えば、生理食塩水溶液、培養培地などを含むことができる。細胞回収組成物は、回収の時点から培養の時点まで、胎盤細胞を保存する、すなわち、胎盤細胞の死を防止するか、又は胎盤細胞の死を遅延させるか、死滅する細胞の集団内の胎盤細胞の数を低下させるなどの傾向がある1以上の成分を含むことができる。そのような成分は、例えば、アポトーシス阻害剤血管拡張剤、副腎皮質刺激ホルモン、副腎皮質刺激ホルモン放出ホルモン、ニトロプルシドナトリウム、ヒドララジン、アデノシン三リン酸、アデノシン、インドメタシン、もしくは硫酸マグネシウム、ホスホジエステラーゼ阻害剤など壊死阻害剤3ペンチルアミノマレイミド、ピロリジンジチオカルバメート、もしくはクロナゼパムTNFα阻害剤及び又は酸素担持ペルフルオロカーボンであることができる。細胞回収組成物は、1以上の組織分解酵素、例えば、メタロプロテアーゼ、セリンプロテアーゼ、中性プロテアーゼ、ヒアルロニダーゼ、RNアーゼ、又はDNアーゼなどを含むことができる。そのような酵素としては、コラゲナーゼに由来するコラゲナーゼなどディスパーゼ、サーモリシン、エラスターゼ、トリプシン、LIBERASE、ヒアルロニダーゼなどが挙げられるが、これらに限定されない。細胞回収組成物は、殺菌又は静菌有効量の抗生物質を含むことができる。ある非制限的な実施態様では、抗生物質は、マクロライド、セファロスポリン、クラリスロマイシン、エリスロマイシン、ペニシリン、又はキノロン、テトラサイクリン、ストレプトマイシンなどである。特定の実施態様では、抗生物質は、グラム及び又はグラム細菌、例えば、緑膿菌、黄色ブドウ球菌などに対して活性がある。細胞回収組成物は、以下の化合物のうち1つ又は複数を含むこともできるアデノシンDグルコースマグネシウムイオン一実施態様では、内皮の完全性及び細胞の生存能力を維持するのに十分な量で存在する、分子量20000ダルトン超の巨大分子酸化防止剤還元剤細胞内へのカルシウム進入を防止する薬剤ニトログリセリン一実施態様では、残留血液の凝固の防止を助けるのに十分な量で存在する抗凝血剤又はアミロライド含有化合物。通常、ヒトの胎盤を、出産後のその娩出後すぐに回収する。好ましい実施態様では、インフォームドコンセント後、及び患者の全病歴を取得して、該胎盤と関連付けた後、胎盤を患者から回収する。好ましくは、この病歴は分娩後も続く。灌流液の回収前に、臍帯血及び胎盤血を除去する。ある実施態様では、分娩後、胎盤内の臍帯血を回収する。胎盤は、従来の臍帯血の回収プロセスに供することができる。通常、針又はカニューレを用い、重力の助けを借りて、胎盤を放血させる。針又はカニューレを、通常、臍帯静脈内に留置し、胎盤を穏やかにマッサージして、胎盤からの臍帯血の排出を助けることができる。そのような臍帯血の回収は、商業的に、例えば、LifeBankInc、CedarKnollsNJ、ViaCord、CordBloodRegistry、及びCryoCellにより行なわれてもよい。好ましくは、臍帯血を回収する間の組織破壊を最小限に抑えるために、胎盤を、それ以上操作することなく、重力排出させる。通常、臍帯血の回収及び灌流液の回収のために、胎盤を、分娩室又は出産室から別の場所、例えば、実験室まで輸送する。例えば、胎盤を、近位臍帯をクランプしたまま、滅菌されたジップロック式プラスチックバッグの中に入れ、その後、このプラスチックバッグを断熱容器内に入れることによって、胎盤を滅菌された断熱輸送装置に入れて輸送することが好ましい。別の実施態様では、米国特許第7147626号に実質的に記載されているように、胎盤を臍帯血回収キットに入れて輸送する。好ましくは、胎盤を、分娩から4~24時間後に、実験室に移送する。ある実施態様では、臍帯血の回収前に、近位臍帯を、好ましくは、胎盤への挿入部から4~5cm以内のところでクランプする。他の実施態様では、臍帯血の回収後、しかし、それ以上の胎盤の処理前に、近位臍帯をクランプする。胎盤を、灌流液の回収前に、滅菌条件下、かつ室温又は5~25°Cの温度のいずれかで保存することができる。胎盤を灌流して残留臍帯血を除去する前に、胎盤を、48時間よりも長い時間、好ましくは4~24時間、保存してもよい。胎盤は、5~25°Cの温度で、抗凝血剤溶液に入れて保存することが好ましい。好適な抗凝血剤溶液は当技術分野で周知である。例えば、ヘパリン又はワルファリンナトリウム溶液を用いることができる。好ましい実施態様では、抗凝血剤溶液は、ヘパリン溶液を含む。放血された胎盤は、胎盤灌流液を回収する前に、36時間を超えない時間、保存することが好ましい。哺乳動物の胎盤を灌流する方法及び胎盤灌流液を得る方法は、例えば、その各々の開示が、その全体として引用により本明細書中に組み込まれている、Haririの米国特許第7045148号及び第7255879号、並びに米国特許出願公開第20070190042号及び第20070275362号に開示されている。灌流液を、灌流溶液、例えば、生理食塩水溶液、培養培地、又は上記の細胞回収組成物を、胎盤血管系に通すことによって得ることができる。一実施態様では、哺乳動物の胎盤を、灌流溶液を臍帯動脈と臍帯静脈のどちらか又は両方に通すことによって灌流する。胎盤を通る灌流溶液の流れを、例えば、胎盤の中への重力流を用いて達成することができる。好ましくは、灌流溶液を、ポンプ、例えば、蠕動ポンプを用いて、胎盤に強制的に通す。臍帯静脈に、例えば、滅菌チューブなどの滅菌された接続装置に接続されている、カニューレ、例えば、TEFLON又はプラスチックカニューレを挿入することができる。この滅菌された接続装置は、灌流マニフォールドに接続されている。灌流に備えて、臍帯動脈及び臍帯静脈が胎盤の最も高い地点に位置するような形で、胎盤を配置することが好ましい。灌流溶液を胎盤血管系に通すか、又は胎盤血管系及び周辺組織に通すことによって、胎盤を灌流することができる。一実施態様では、臍帯動脈及び臍帯静脈を、可撓性コネクタを介して灌流溶液のリザーバに接続されているピペットに同時に接続する。灌流溶液を臍帯静脈及び臍帯動脈に通す。灌流溶液は、血管壁から滲出し、かつ又は血管壁を通って胎盤の周辺組織に入り、妊娠中に母体の子宮に付着していた胎盤表面から好適な開放容器に回収される。灌流溶液を、臍帯開口部を介して導入し、母体子宮壁と接触していた胎盤壁の開口部から流出又は浸出させることもできる。別の実施態様では、灌流溶液を、臍帯静脈に通し、臍帯動脈から回収するか、又は臍帯動脈に通し、臍帯静脈から回収する、すなわち、胎盤血管系のみに通す。一実施態様では、例えば、臍帯動脈及び臍帯静脈を、例えば、可撓性コネクタを介して灌流溶液のリザーバに接続されているピペットに同時に接続する。灌流溶液を臍帯静脈及び臍帯動脈に通す。灌流溶液は、血管壁から滲出し、かつ又は血管壁を通って胎盤の周辺組織に入り、妊娠中に母体の子宮に付着していた胎盤表面から好適な開放容器に回収される。灌流溶液を、臍帯開口部を介して導入し、母体子宮壁と接触していた胎盤壁の開口部から流出又は浸出させることもできる。受け皿法と呼ぶことができるこの方法によって回収される胎盤細胞は、通常、胎児細胞と母親細胞の混合物である。別の実施態様では、灌流溶液を臍帯静脈に通し、臍帯動脈から回収するか、又は臍帯動脈に通し、臍帯静脈から回収する。閉回路法と呼ぶことができるこの方法によって回収される胎盤細胞は、通常、ほとんど胎児のものしかない。閉回路灌流法を、一実施態様では、次のように実施することができる。分娩後胎盤を、出産後、約48時間以内に得る。臍帯をクランプし、クランプの上方で切断する。臍帯は、廃棄することができるか、又は例えば、臍帯幹細胞を回収するために、及びもしくは生体材料の産生用に臍帯膜を処理するために、処理することができる。羊膜を灌流中保持することができるか、又は例えば、指を用いる鈍的剥離を用いて、絨毛膜から分離することができる。羊膜を灌流前に絨毛膜から分離する場合、それを、例えば、廃棄するか、又は例えば、酵素的消化によって幹細胞を得るために、もしくは例えば、羊膜生体材料、例えば、米国特許出願公開第20040048796号に記載されている生体材料を産生するために、処理することができる。例えば、滅菌ガーゼを用いて、全ての目に見える血の塊及び残留血液を胎盤から除去した後、例えば、臍帯膜を一部切断して、臍帯の断面を露出させることにより、臍帯血管を露出させる。血管を確認し、それを、例えば、閉じたアリゲータークランプを各々の血管の切断端に通して前進させることによって広げる。その後、装置、例えば、灌流装置又は蠕動ポンプに接続されたプラスチックチューブを胎盤動脈の各々に挿入する。ポンプは、この目的に好適な任意のポンプ、例えば、蠕動ポンプであることができる。その後、滅菌された回収リザーバ、例えば、250mL回収バッグなどの血液バッグに接続されたプラスチックチューブを胎盤静脈に挿入する。或いは、ポンプに接続されたチューブを胎盤静脈に挿入し、回収リザーバに接続されたチューブを胎盤動脈の一方又は両方に挿入する。その後、胎盤を、一定の容積の灌流溶液、例えば、約750mlの灌流溶液で灌流する。その後、灌流液中の細胞を、例えば、遠心分離によって回収する。一実施態様では、灌流中、近位臍帯をクランプし、より好ましくは、胎盤への臍帯挿入部から4~5cm以内のところで、近位臍帯をクランプする。放血プロセスの間の哺乳動物の胎盤からの灌流液の最初の回収物は、通常、臍帯血及び又は胎盤血の残留赤血球のために色が付いている。該灌流液は、灌流が進み、残留臍帯血細胞が胎盤から洗い流されるにつれて、より無色になっていく。通常、最初に胎盤から血液を洗い流すためには、30~100mLの灌流液で十分であるが、観察された結果次第で、より多くの又はより少ない灌流液を用いることができる。胎盤を灌流するために用いられる灌流液の容積は、回収しようとする胎盤細胞の数、胎盤の大きさ、単一の胎盤から行なわれる回収の回数などによって異なり得る。様々な実施態様では、灌流液の容積は、50mL~5000mL、50mL~4000mL、50mL~3000mL、100mL~2000mL、250mL~2000mL、500mL~2000mL、又は750mL~2000mLであることができる。通常、放血後、胎盤を700~800mLの灌流液で灌流する。胎盤を、数時間又は数日間かけて、複数回灌流することができる。胎盤を複数回灌流しようとする場合、それを、容器又は他の好適な容器中、無菌条件下で維持又は培養し、細胞回収組成物、或いは標準的な灌流溶液を含むかもしくは含まない、及び又は抗微生物剤ストレプトマイシン、ペニシリン、アンフォテリシンBなどの抗生物質を含むかもしくは含まない生理食塩水溶液、例えば、リン酸緩衝生理食塩水で灌流することができる。一実施態様では、単離された胎盤を、灌流及び灌流液の回収前に、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、もしくは24時間、又は2もしくは3日間、又はそれより長い間、維持又は培養するように、該胎盤を、灌流液を回収しないで、しばらくの間、維持又は培養する。灌流された胎盤を、更にもう1回以上、例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24時間、又はそれより長い時間、維持し、例えば、700~800mLの灌流液で再び灌流することができる。胎盤を、1、2、3、4、5回、又はそれより多く、例えば、1、2、3、4、5、又は6時間に1回、灌流することができる。好ましい実施態様では、回収された有核細胞の数が100細胞mlを下回るまで、胎盤の灌流、及び灌流溶液、例えば、胎盤細胞回収組成物の回収を繰り返す。異なる時点の灌流液を更に個別に処理して、細胞、例えば、全有核細胞の時間依存的な集団を回収することができる。異なる時点からの灌流液をプールすることもできる。通常、単回の胎盤灌流由来の胎盤灌流液は、約1億~約5億個の有核細胞を含み、これには、本明細書に開示された方法によってTSNK細胞を産生し得る造血細胞が含まれる。ある実施態様では、該胎盤灌流液又は灌流液細胞は、CD34細胞、例えば、造血幹細胞又は前駆細胞を含む。そのような細胞は、より具体的な実施態様では、CD34CD45幹細胞もしくは前駆細胞、CD34CD45幹細胞もしくは前駆細胞、又は同様の細胞を含むことができる。ある実施態様では、該灌流液又は灌流液細胞は、それから造血細胞を単離する前に凍結保存される。ある他の実施態様では、該胎盤灌流液は、胎児細胞のみ、もしくは胎児細胞と母親細胞の組合せを含むか、又は該灌流液細胞は、胎児細胞のみ、もしくは胎児細胞と母親細胞の組合せを含む。一態様では、TSNK細胞、本明細書に記載の方法によって産生されるNK細胞が本明細書で提供される。本明細書に記載の方法によって産生されるTSNK細胞を含む細胞の集団が本明細書で更に提供される。具体的な実施態様では、該NK細胞はCD3CD56である。具体的な実施態様では、該NK細胞はCD3CD56CD16である。別の具体的な実施態様では、該NK細胞は更にCD94CD117である。別の具体的な実施態様では、該NK細胞は更にCD161である。別の具体的な実施態様では、該NK細胞は更にNKG2Dである。別の具体的な実施態様では、該NK細胞は更にNKp46である。別の具体的な実施態様では、該該NK細胞は更にCD226である。ある実施態様では、該TSNK細胞の50、60、70、80、90、92、94、96、98超は、CD56及びCD16である。他の実施態様では、該TSNK細胞の少なくとも50、60、70、80、82、84、86、88、又は90は、CD3及びCD56である。他の実施態様では、該TSNK細胞の少なくとも50、52、54、56、58、又は60はNKG2Dである。他の実施態様では、該細胞の30、20、10、9、8、7、6、5、4、又は3未満はNKB1である。ある他の実施態様では、該TSNK細胞の30、20、10、8、6、4、又は2未満はNKAT2である。ある他の実施態様では、該TSNK細胞の30、20、10、8、6、4、又は2未満は、CD56及びCD16である。より具体的な実施態様では、該CD3、CD56TSNK細胞の少なくとも10、20、25、30、35、40、50、55、60、65、又は70はNKp46である。他のより具体的な実施態様では、該CD3、CD56TSNK細胞の少なくとも10、20、25、30、35、40、50、55、60、65、70、75、80、又は85はCD117である。他のより具体的な実施態様では、該CD3、CD56TSNK細胞の少なくとも10、20、25、30、35、40、45、又は50はCD94である。他のより具体的な実施態様では、該CD3、CD56TSNK細胞の少なくとも10、20、25、30、35、40、45、又は50はCD161である。他のより具体的な実施態様では、該CD3、CD56TSNK細胞少なくとも10、12、14、16、18、又は20はCD226である。より具体的な実施態様では、該CD3、CD56TSNK細胞の少なくとも20、25、30、35、又は40はCD7である。より具体的な実施態様では、該CD3、CD56TSNK細胞の少なくとも30、35、40、45、50、55、又は60はCD5である。様々な他の実施態様では、TSNK細胞を、例えば、組織源から単離されているが、拡大されていないNK細胞組織源から単離され、拡大されたNK細胞、又は異なる方法によって産生されたNK細胞、例えば、CD56CD16ナチュラルキラー細胞と、例えば、約110、29、38、47、56、65、74、83、92、110、19、18、17、16、15、14、13、12、11、21、31、41、51、61、71、81、又は約91の比率で、組み合わせることができる。この文脈で使用される場合、単離されたは、細胞がその通常の組織環境から取り出されていることを意味する。TSNK細胞は、胎児の遺伝子型又は母親の遺伝子型を有することができる。例えば、TSNK細胞を産生するのに好適な造血細胞の供給源としての分娩後胎盤は、胎児由来の組織及び細胞並びに母親由来の組織及び細胞を含むので、胎盤灌流液は、胎児細胞のみ、もしくは胎児細胞の実質的大部分を含むことができるか、又は胎児細胞と母親細胞の混合物を含むことができる。一実施態様では、TSNK細胞は、胎児胎盤造血細胞、例えば、胎盤の閉回路灌流から得られる細胞のみに由来しており、ここで、該灌流は、胎児胎盤造血細胞の実質的大部分、又は胎児胎盤造血細胞のみを含む灌流液を生じさせる。別の実施態様では、TSNK細胞は、胎児細胞及び母親細胞、例えば、受け皿法による灌流によって得られる細胞に由来しており、ここで、該灌流は、胎児細胞と母親胎盤細胞の混合物を含む灌流液を生じさせる。従って、一実施態様では、胎盤由来中間ナチュラルキラー細胞の集団が本明細書で提供され、その実質的大部分は、胎児の遺伝子型を有する。別の実施態様では、胎児の遺伝子型を有するナチュラルキラー細胞及び母親の表現型を有するナチュラルキラー細胞を含む胎盤由来中間ナチュラルキラー細胞の集団が本明細書で提供される。本明細書に記載の方法によって産生されないナチュラルキラー細胞を含むTSNK細胞の集団も本明細書で提供される。例えば、一実施態様では、臍帯血、末梢血、骨髄、もしくは前述のもののうちの2つ以上の組合せから単離されたナチュラルキラー細胞も含むTSNK細胞、又は本明細書に記載の方法以外の方法によって拡大されたNK細胞の集団が本明細書で提供される。そのようなTSNK細胞の集団は、TSNK細胞及び他のNK細胞を、例えば、約110、29、38、47、56、65、74、83、92、101、19、18、17、16、15、14、13、12、11、21、31、41、51、61、71、81、91、1001、955、9010、8515、8020、7525、7030、6535、6040、55455050、4555、4060、3565、3070、2575、2080、1585、1090、595、1001、951、901、851、801、751、701、651、601、551、501、451、401、351、301、251、201、151、101、51、11、15、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195、又は約1100などの比率で含むことができる。ある実施態様では、単離されたナチュラルキラー細胞又はナチュラルキラー細胞が濃縮された集団は、1以上の機能的に関連するマーカー、例えば、CD94、CD161、NKp44、DNAM1、2B4、NKp46、CD94、KIR、及びNKG2ファミリーの活性化受容体を検出することによって評価することができる。いくつかの実施態様では、単離された又は濃縮されたナチュラルキラー細胞の純度は、CD56、CD3、及びCD16のうちの1つ又は複数を検出することによって確認することができる。任意に、単離された又は濃縮されたナチュラルキラー細胞の細胞傷害活性は、例えば、腫瘍細胞、例えば、培養されたK562、LN18、U937、WERIRB1、U118MG、HT29、HCC2218、KG1、又はU266腫瘍細胞などの細胞を標的細胞として用いる細胞傷害性アッセイで評価することができる。例えば、腫瘍細胞又は複数の腫瘍細胞の増殖の抑制で用いるための、胎盤灌流液、胎盤灌流液細胞、及び又は接着性胎盤細胞と組み合わせたTSNK細胞を含む組成物が本明細書で更に提供される。TSNK細胞と胎盤灌流液及び又は胎盤灌流液細胞の組合せを含む組成物が本明細書で更に提供される。一実施態様では、例えば、TSNK細胞が補充された、一定の容積の胎盤灌流液が本明細書で提供される。具体的な実施態様では、例えば、胎盤灌流液の各ミリリットルに、約1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108個、又はそれより多くのTSNK細胞を補充する。別の実施態様では、胎盤灌流液細胞にTSNK細胞を補充する。ある他の実施態様では、胎盤灌流液細胞をTSNK細胞と組み合わせる場合、該胎盤灌流液細胞は、通常、細胞の総数の約50、45、40、35、30、25、20、15、10、8、6、4、2、もしくは1超、又は細胞の総数の約50、45、40、35、30、25、20、15、10、8、6、4、2、もしくは1未満を含む。ある他の実施態様では、TSNK細胞を複数の胎盤灌流液細胞及び又は組み合わされたナチュラルキラー細胞と組み合わせる場合、該NK細胞は、通常、細胞の総数の約50、45、40、35、30、25、20、15、10、8、6、4、2、もしくは1超、又は細胞の総数の約50、45、40、35、30、25、20、15、10、8、6、4、2、もしくは1未満を含む。ある他の実施態様では、TSNK細胞を用いて胎盤灌流液を補充する場合、細胞を懸濁する溶液の容積は、灌流液細胞の全容積の約50、45、40、35、30、25、20、15、10、8、6、4、2、もしくは1超、又は灌流液細胞の全容積の約50、45、40、35、30、25、20、15、10、8、6、4、2、もしくは1未満を含み、その場合、TSNK細胞は、補充前の1ミリリットル当たり約1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108個、又はそれより多くの細胞になるように懸濁される。他の実施態様では、細胞の上記の組合せのいずれかを更に、臍帯血又は臍帯血由来の有核細胞と組み合わせる。2以上の供給源、例えば、2以上の胎盤から得られ、混合された、例えば、プールされた、プール胎盤灌流液が本明細書で更に提供される。そのようなプール灌流液は、各々の供給源に由来するほぼ等容積の灌流液を含むことができるか、又は各々の供給源に由来する異なる容積を含むことができる。各々の供給源に由来する相対的な容積は、無作為に選択することができるか、或いは例えば、1以上の細胞因子、例えば、サイトカイン、成長因子、ホルモンなどの濃度もしくは量各々の供給源に由来する灌流液中の胎盤細胞の数又は各々の供給源に由来する灌流液の他の特徴に基づくことができる。同じ胎盤の複数回の灌流に由来する灌流液を同様にプールすることができる。同様に、2以上の供給源、例えば、2以上の胎盤から得られ、プールされた胎盤灌流液細胞及び胎盤由来中間ナチュラルキラー細胞が本明細書で提供される。そのようなプール細胞は、2以上の供給源に由来するほぼ同等数の細胞を含むことができるか、又はプール供給源のうちの1つ又は複数に由来する異なる数の細胞を含むことができる。各々の供給源に由来する細胞の相対的な数は、例えば、プールされるべき細胞における1以上の特定細胞型の数、例えば、CD34細胞の数などに基づいて選択することができる。検定し、例えば、所与の数のTSNK細胞、又は所与の容積の灌流液から期待される腫瘍抑制の程度又は量を決定した、TSNK細胞、及びTSNK細胞と胎盤灌流液及び又は胎盤灌流液細胞との組合せが本明細書で更に提供される。例えば、アリコート又はサンプル数の細胞を、そうでなければ腫瘍細胞が増殖するであろう条件下で既知数の腫瘍細胞と接触させ、胎盤灌流液、灌流液細胞、胎盤ナチュラルキラー細胞、又はそれらの組合せの存在下における経時的な腫瘍細胞の増殖速度を、灌流液、灌流液細胞、胎盤ナチュラルキラー細胞、又はそれらの組合せの非存在下における同等数の腫瘍細胞の増殖と比較する。該細胞の効力は、例えば、腫瘍細胞成長を、例えば、約10、15、20、25、30、35、40、45、50、又は同様の程度を抑制するために必要とされる細胞の数又は溶液の容積として表すことができる。ある実施態様では、TSNK細胞は、医薬品等級の投与可能なユニットとして提供される。そのようなユニットは、個別の容積、15mL、20mL、25mL、30nL、35mL、40mL、45mL、50mL、55mL、60mL、65mL、70mL、75mL、80mL、85mL、90mL、95mL、100mL、150mL、200mL、250mL、300mL、350mL、400mL、450mL、500mLなどで提供することができる。そのようなユニットは、指定された数の細胞、例えば、1ミリリットル当たり1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108個、もしくはそれより多くの細胞、又は1ユニット当たり1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108、1×109、5×109、1×1010、5×1010、1×1011個、もしくはそれより多くの細胞の、例えば、TSNK細胞のみ、又は他のNK細胞もしくは灌流液細胞と組み合わせたTSNK細胞を含むように提供することができる。具体的な実施態様では、該ユニットは、1ミリリットル当たり約、少なくとも約、もしくは多くとも約1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106個、もしくはそれより多くのTSNK細胞、又は1ユニット当たり約、少なくとも約、もしくは多くとも約1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108、1×109、5×109、1×1010、5×1010、1×1011個、もしくはそれより多くの細胞を含むことができる。そのようなユニットは、指定された数のTSNK細胞、及び又は他の細胞のうちのいずれかを含むように提供することができる。上記の実施態様では、TSNK細胞、又はTSNK細胞と他のNK細胞、灌流液細胞、もしくは灌流液との組合せは、レシピエントにとって自己のものであることができるか、又はレシピエントにとって同種異系であることができる。ある実施態様では、各々のユニットの細胞に表示を付けて、容積、細胞の数、細胞のタイプ、該ユニットが特定のタイプの細胞について濃縮されているかどうか、及び/又は該ユニット中の所与の細胞数、もしくは該ユニットの所与のミリリットル数の効力、すなわち、該ユニット中の細胞が、特定のタイプの腫瘍細胞の増殖の測定可能な抑制を引き起こすかどうかを明記する。他の実施態様では、単独の又は胎盤灌流液もしくは胎盤灌流液細胞と組み合わせたTSNK細胞に、例えば、その開示がその全体として引用により本明細書中に組み込まれている、Haririらの米国特許第7045148号及び第7255879号、並びに米国特許出願公開第20070275362号に記載されているような、単離された接着性胎盤細胞、例えば、胎盤幹細胞及び胎盤寡能性細胞を補充する。接着性胎盤細胞は、該細胞が、組織培養物表面、例えば、組織培養プラスチックに接着することを意味する。本明細書に開示された組成物及び方法において有用な接着性胎盤細胞は、栄養芽細胞でも、胚性生殖細胞でも、胚性幹細胞でもない。ある実施態様では、接着性胎盤幹細胞を、上記のようなプロセスでフィーダー細胞として用いる。単独の又は胎盤灌流液もしくは胎盤灌流液細胞と組み合わせたTSNK細胞に、例えば、1ミリリットル当たり1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108個、もしくはそれより多くの接着性胎盤細胞、又は1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108、1×109、5×109、1×1010、5×1010、1×1011個、もしくはそれより多くの接着性胎盤細胞を補充することができる。該組合せ中の接着性胎盤細胞は、例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、もしくは40回の集団倍加、又はそれより長い間、培養された、例えば、接着性胎盤細胞であることができる。単離された接着性胎盤細胞は、初代培養で培養するか又は細胞培養で拡大したとき、組織培養基材、例えば、組織培養容器表面に接着する。培養下の接着性胎盤細胞は、通常、線維芽細胞のような星状の外観をしており、いくつかの細胞質突起が中央の細胞体から伸びている。しかしながら、接着性胎盤細胞は、線維芽細胞が示すよりも多くのそのような突起を示すので、接着性胎盤細胞は、同じ条件下で培養された線維芽細胞と形態的に区別することができる。形態的には、接着性胎盤細胞は、造血幹細胞からも区別することができ、造血幹細胞は、通常、培養下では、より丸みを帯びた、又は敷石状の形態をとる。本明細書で提供される組成物及び方法において有用な、単離された接着性胎盤細胞、及び接着性胎盤細胞の集団は、該接着性胎盤細胞を含む細胞、又は該接着性胎盤細胞を含む細胞の集団を同定及び又は単離するために用いることができる複数のマーカーを発現する。本明細書で提供される組成物及び方法において有用な、接着性胎盤細胞、及び接着性胎盤細胞集団には、胎盤、又は任意のその部分から直接的に得られる接着性胎盤細胞及び接着性胎盤細胞含有細胞集団が含まれる。接着性胎盤幹細胞集団は、一実施態様では、培養下の接着性胎盤幹細胞の集団、例えば、容器、例えば、バッグの中の集団である。接着性胎盤細胞は、通常、マーカーCD73、CD105、及びCD200、並びに又はOCT4を発現し、かつCD34も、CD38も、CD45も発現しない。接着性胎盤幹細胞は、HLAABC及びHLADRを発現することもできる。これらのマーカーを用いて、接着性胎盤細胞を同定し、かつ該接着性胎盤細胞を他の細胞型と区別することができる。接着性胎盤細胞は、CD73及びCD105を発現することができるので、それらは、間葉系幹細胞様の特徴を有することができる。CD34、CD38、及び又はCD45の発現の欠如により、接着性胎盤幹細胞は非造血幹細胞とみなされる。ある実施態様では、本明細書に記載の単離された接着性胎盤細胞は、癌細胞増殖又は腫瘍成長を検出可能な程度に抑制する。ある実施態様では、単離された接着性胎盤細胞は、単離された胎盤幹細胞である。ある他の実施態様では、単離された接着性胎盤細胞は、単離された胎盤寡能性細胞である。具体的な実施態様では、単離された接着性胎盤細胞は、フローサイトメトリーで検出した場合、CD34、CD10、及びCD105である。より具体的な実施態様では、該単離されたCD34、CD10、CD105接着性胎盤細胞は、胎盤幹細胞である。別のより具体的な実施態様では、該単離されたCD34、CD10、CD105胎盤細胞は、寡能性接着性胎盤細胞である。別の具体的な実施態様では、該単離されたCD34、CD10、CD105胎盤細胞は、神経表現型の細胞、骨形成表現型の細胞、又は軟骨形成表現型の細胞に分化する潜在能力を有する。より具体的な実施態様では、該単離されたCD34、CD10、CD105接着性胎盤細胞は更に、CD200である。別のより具体的な実施態様では、該単離されたCD34、CD10、CD105接着性胎盤細胞は更に、フローサイトメトリーで検出した場合、CD90又はCD45である。別のより具体的な実施態様では、該単離されたCD34、CD10、CD105接着性胎盤細胞は更に、フローサイトメトリーで検出した場合、CD90又はCD45である。より具体的な実施態様では、該CD34、CD10、CD105、CD200接着性胎盤細胞は更に、フローサイトメトリーで検出した場合、CD90又はCD45である。別のより具体的な実施態様では、該CD34、CD10、CD105、CD200接着性胎盤細胞は、フローサイトメトリーで検出した場合、CD90及びCD45である。別のより具体的な実施態様では、該CD34、CD10、CD105、CD200、CD90、CD45接着性胎盤細胞は更に、フローサイトメトリーで検出した場合、CD80及びCD86である。一実施態様では、単離された接着性胎盤細胞は、CD200、HLAGである。具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、CD73及びCD105である。別の具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、CD34、CD38、又はCD45である。より具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、CD34、CD38、CD45、CD73、及びCD105である。別の実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞は、胚様体様体の形成を可能にする条件下で培養したときに、1以上の胚様体様体を産生する。別の実施態様では、単離された接着性胎盤細胞は、CD73、CD105、CD200である。該集団の具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、HLAGである。別の具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、CD34、CD38、又はCD45である。別の具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、CD34、CD38、及びCD45である。より具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、CD34、CD38、CD45、及びHLAGである。別の具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞は、胚様体様体の形成を可能にする条件下で培養したときに、1以上の胚様体様体を産生する。別の実施態様では、単離された接着性胎盤細胞は、CD200、OCT4である。具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、CD73及びCD105である。別の具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、HLAGである。別の具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、CD34、CD38、及びCD45である。より具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、CD34、CD38、CD45、CD73、CD105、及びHLAGである。別の具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、胚様体様体の形成を可能にする条件下で培養したときに、1以上の胚様体様体を産生する。別の実施態様では、単離された接着性胎盤細胞は、CD73、CD105、及びHLAGである。具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、CD34、CD38、又はCD45である。別の具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、CD34、CD38、及びCD45である。別の具体的な実施態様では、該接着性幹細胞はまた、OCT4である。別の具体的な実施態様では、該接着性幹細胞はまた、CD200である。より具体的な実施態様では、該接着性幹細胞はまた、CD34、CD38、CD45、OCT4、及びCD200である。別の実施態様では、単離された接着性胎盤細胞は、CD73、CD105幹細胞であり、ここで、該細胞は、胚様体様体の形成を可能にする条件下で1以上の胚様体様体を産生する。具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、CD34、CD38、又はCD45である。別の具体的な実施態様では、単離された接着性胎盤細胞はまた、CD34、CD38、及びCD45である。別の具体的な実施態様では、単離された接着性胎盤細胞はまた、OCT4である。より具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、OCT4、CD34、CD38、及びCD45である。別の実施態様では、接着性胎盤幹細胞は、OCT4幹細胞であり、ここで、該接着性胎盤幹細胞は、胚様体様体の形成を可能にする条件下で1以上の胚様体様体を産生し、かつ該幹細胞は、癌細胞増殖又は腫瘍成長を検出可能な程度に抑制するとみなされている。様々な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞の少なくとも10、少なくとも20、少なくとも30、少なくとも40、少なくとも50、少なくとも60、少なくとも70、少なくとも80、少なくとも90、又は少なくとも95は、OCT4である。上記の集団の具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、CD73及びCD105である。別の具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、CD34、CD38、又はCD45である。別の具体的な実施態様では、該幹細胞はCD200である。より具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞はまた、CD73、CD105、CD200、CD34、CD38、及びCD45である。別の具体的な実施態様では、該単離された接着性胎盤細胞は、拡大されたもの、例えば、少なくとも1回、少なくとも3回、少なくとも5回、少なくとも10回、少なくとも15回、又は少なくとも20回継代されたものである。上記の実施態様のいずれかのより具体的な実施態様では、単離された接着性胎盤細胞は、ABCp53379を参照されたいを発現する。別の実施態様では、単離された接着性胎盤細胞は、CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD200、CD34、及びCD133である。別の実施態様では、単離された接着性胎盤細胞は、IL6、IL8、及び単球走化性タンパク質を構成的に分泌する。上で参照されている単離された接着性胎盤細胞の各々は、哺乳動物胎盤から直接得られ、単離された細胞、又は培養され、少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18、20、25、30回、もしくはそれより多くの回数、継代された細胞、又はそれらの組合せを含むことができる。腫瘍細胞抑制性の複数の上記の単離された接着性胎盤細胞は、約、少なくとも、又は高々1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108、1×109、5×109、1×1010、5×1010、1×1011個、又はそれより多くの単離された接着性胎盤細胞を含むことができる。TSNK細胞及び更に馴化培地を含む組成物であって、腫瘍抑制性であるか、又は癌もしくはウイルス感染の治療において効果がある、組成物の使用も本明細書で提供される。上の第662節に記載されているような接着性胎盤細胞を用いて、腫瘍細胞抑制性、抗癌性、又は抗ウイルス性である馴化培地、すなわち、検出可能な腫瘍細胞抑制効果、抗癌効果、又は抗ウイルス効果を有する細胞によって分泌又は排出される1以上の生体分子を含む培地を産生することができる。様々な実施態様では、馴化培地は、該細胞が、少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14日、又はそれより長い間、その中で増殖した培地を含む。他の実施態様では、馴化培地は、そのような細胞が、少なくとも30、40、50、60、70、80、90コンフルエンス、又は100コンフルエンスにまでその中で成長した培地を含む。そのような馴化培地を用いて、細胞、例えば、胎盤細胞、又は別の種類の細胞の別々の集団の培養を支援することができる。別の実施態様では、本明細書で提供される馴化培地は、単離された接着性胎盤細胞、例えば、単離された接着性胎盤幹細胞又は単離された接着性胎盤寡能性細胞、及び単離された接着性胎盤細胞以外の細胞、例えば、非胎盤幹細胞又は寡能性細胞がその中で培養された培地を含む。そのような馴化培地を、TSNK細胞、胎盤灌流液、胎盤灌流液細胞のいずれか、又はTSNK細胞、胎盤灌流液、胎盤灌流液細胞の任意の組合せと組み合わせて、腫瘍細胞抑制性、抗癌性、又は抗ウイルス性である組成物を形成させることができる。ある実施態様では、該組成物は、容積で半分未満の、例えば、容積で約50、45、40、35、30、25、20、15、10、5、4、3、2、もしくは1、又は約50、45、40、35、30、25、20、15、10、5、4、3、2、もしくは1未満の馴化培地を含む。従って、一実施態様では、TSNK細胞及び単離された接着性胎盤細胞の培養物由来の培養培地を含む組成物であって、該単離された接着性胎盤細胞が、基材に接着しかつCD34、CD10、及びCD105であり腫瘍細胞の成長もしくは増殖を検出可能な程度に抑制するか、又は抗癌性もしくは抗ウイルス性である、組成物が本明細書で提供される。具体的な実施態様では、単離された接着性胎盤細胞は、フローサイトメトリーで検出した場合、CD34、CD10、及びCD105である。より具体的な実施態様では、該単離されたCD34、CD10、CD105接着性胎盤細胞は、胎盤幹細胞である。別のより具体的な実施態様では、該単離されたCD34、CD10、CD105胎盤細胞は、寡能性接着性胎盤細胞である。別の具体的な実施態様では、該単離されたCD34、CD10、CD105胎盤細胞は、神経表現型の細胞、骨形成表現型の細胞、又は軟骨形成表現型の細胞に分化する潜在能力を有する。より具体的な実施態様では、該単離されたCD34、CD10、CD105接着性胎盤細胞は更に、CD200である。別のより具体的な実施態様では、該単離されたCD34、CD10、CD105胎盤細胞は更に、フローサイトメトリーで検出した場合、CD90又はCD45である。別のより具体的な実施態様では、該単離されたCD34、CD10、CD105胎盤細胞は更に、フローサイトメトリーで検出した場合、CD90又はCD45である。より具体的な実施態様では、該CD34、CD10、CD105、CD200接着性胎盤細胞は更に、フローサイトメトリーで検出した場合、CD90又はCD45である。別のより具体的な実施態様では、該CD34、CD10、CD105、CD200接着性胎盤細胞は更に、フローサイトメトリーで検出した場合、CD90及びCD45である。別のより具体的な実施態様では、該CD34、CD10、CD105、CD200、CD90、CD45接着性胎盤細胞は更に、フローサイトメトリーで検出した場合、CD80及びCD86である。別の実施態様では、TSNK細胞及び単離された接着性胎盤細胞の培養物由来の培養培地を含む組成物であって、該単離された接着性胎盤細胞が、基材に接着しかつCD200及びHLAGを発現するか、又はCD73、CD105、及びCD200を発現するか、又はCD200及びOCT4を発現するか、又はCD73、CD105、及びHLAGを発現するか、又はCD73及びCD105を発現し、かつ胎盤幹細胞を含む胎盤細胞の集団を胚様体様体の形成を可能にする条件下で培養したときに、該集団内の1以上の胚様体様体の形成を促進するか、又はOCT4を発現し、かつ胎盤幹細胞を含む胎盤細胞の集団を胚様体様体の形成を可能にする条件下で培養したときに、該集団内の1以上の胚様体様体の形成を促進し腫瘍細胞の成長もしくは増殖を検出可能な程度に抑制するか、又は抗癌性もしくは抗ウイルス性である、組成物が本明細書で提供される。具体的な実施態様では、該組成物は更に、複数の該単離された胎盤接着性細胞を含む。別の具体的な実施態様では、該組成物は、複数の非胎盤細胞を含む。より具体的な実施態様では、該非胎盤細胞はCD34細胞、例えば、造血前駆細胞、例えば、末梢血造血前駆細胞、臍帯血造血前駆細胞、又は胎盤血造血前駆細胞を含む。該非胎盤細胞は、幹細胞、例えば、間葉系幹細胞、例えば、骨髄由来間葉系幹細胞を含むこともできる。該非胎盤細胞は、1種類以上の成体細胞又は細胞株であることもできる。別の具体的な実施態様では、該組成物は、抗増殖剤、例えば、抗MIP1α又は抗MIP1β抗体を含む。具体的な実施態様では、上記の細胞又は細胞組合せのうちの1つによって馴化された培養培地は、約11、約21、約31、約41、又は約51の単離された接着性胎盤細胞対腫瘍細胞の比率で複数の腫瘍細胞と共培養した複数の単離された接着性胎盤細胞から得られる。例えば、馴化された培養培地又は上清は、約1×105個の単離された接着性胎盤細胞、約1×106個の単離された接着性胎盤細胞、約1×107個の単離された接着性胎盤細胞、もしくは約1×108個の単離された接着性胎盤細胞、又はそれより多くのものを含む培養物から得ることができる。別の具体的な実施態様では、馴化された培養培地又は上清は、約1×105~約5×105個の単離された接着性胎盤細胞及び約1×105個の腫瘍細胞約1×106~約5×106個の単離された接着性胎盤細胞及び約1×106個の腫瘍細胞約1×107~約5×107個の単離された接着性胎盤細胞及び約1×107個の腫瘍細胞又は約1×108~約5×108個の単離された接着性胎盤細胞及び約1×108個の腫瘍細胞を含む共培養物から得られる。細胞、例えば、TSNK細胞、又は造血幹細胞もしくは前駆細胞を含む胎盤灌流液細胞を保存する、すなわち、長期保存を可能にする条件下、又は例えば、アポトーシスもしくは壊死による細胞死を阻害する条件下に置くことができる。胎盤灌流液は、細胞回収組成物を、胎盤の少なくとも一部に、例えば、胎盤血管系に通すことによって産生することができる。細胞回収組成物は、灌流液内に含まれている細胞を保存するように作用する1以上の化合物を含む。そのような胎盤細胞回収組成物は、その開示がその全体として引用により本明細書中に組み込まれている、関連米国特許出願公開第20070190042号に記載されているような、アポトーシス阻害剤、壊死阻害剤、及び又は酸素担持ペルフルオロカーボンを含むことができる。一実施態様では、灌流液又は胎盤細胞の集団は、該灌流液又は該細胞の集団を、アポトーシスの阻害剤及び酸素担持ペルフルオロカーボンを含む細胞回収組成物と接触させることにより、哺乳動物、例えば、ヒトの分娩後胎盤から回収され、ここで、該アポトーシスの阻害剤は、該アポトーシスの阻害剤と接触させていない細胞の集団と比較して、胎盤細胞、例えば、接着性胎盤細胞、例えば、胎盤幹細胞又は胎盤寡能性細胞の集団におけるアポトーシスを低下させるか又は防止するのに十分な量及び時間で存在する。例えば、該胎盤を該細胞回収組成物で灌流することができ、胎盤細胞、例えば、全有核胎盤細胞をそれから単離する。具体的な実施態様では、該アポトーシスの阻害剤は、カスパーゼ阻害剤である。別の具体的な実施態様では、該アポトーシスの阻害剤は、JNK阻害剤である。より具体的な実施態様では、該JNK阻害剤は、接着性胎盤細胞、例えば、接着性胎盤幹細胞又は接着性胎盤寡能性細胞の分化も増殖も調節しない。別の実施態様では、該細胞回収組成物は、分離相中に該アポトーシスの阻害剤及び該酸素担持ペルフルオロカーボンを含む。別の実施態様では、該細胞回収組成物は、エマルジョン中に該アポトーシスの阻害剤及び該酸素担持ペルフルオロカーボンを含む。別の実施態様では、該細胞回収組成物は更に、乳化剤、例えば、レシチンを含む。別の実施態様では、該アポトーシス阻害剤及び該ペルフルオロカーボンは、該胎盤細胞と接触させるときに、約0°C~約25°Cである。別のより具体的な実施態様では、該アポトーシス阻害剤及び該ペルフルオロカーボンは、該胎盤細胞と接触させるときに、約2°C~10°C、又は約2°C~約5°Cである。別のより具体的な実施態様では、該接触させることは、該細胞の集団の輸送の間に行なわれる。別のより具体的な実施態様では、該接触させることは、該細胞の集団の凍結及び解凍の間に行なわれる。別の実施態様では、胎盤灌流液及び又は胎盤細胞を、該灌流液及び又は細胞をアポトーシスの阻害剤及び臓器保存化合物と接触させる方法によって回収及び保存することができ、ここで、該アポトーシスの阻害剤は、該アポトーシスの阻害剤と接触させていない灌流液又は胎盤細胞と比較したとき、該細胞のアポトーシスを低下させるか又は防止するのに十分な量及び時間で存在する。具体的な実施態様では、臓器保存化合物は、UW溶液としても知られているもの;Southardらの文献251257も参照されたい、又はSternらの米国特許第5552267号に記載されている溶液であり、これらの文献の開示は、その全体が引用により本明細書中に組み込まれる。別の実施態様では、該臓器保存化合物は、ヒドロキシエチルスターチ、ラクトビオン酸、ラフィノース、又はそれらの組合せである。別の実施態様では、胎盤細胞回収組成物は更に、2相状態にあるか又はエマルジョンとしてかのいずれかの、酸素担持ペルフルオロカーボンを含む。本方法の別の実施態様では、胎盤細胞を、灌流の間、アポトーシス阻害剤及び酸素担持ペルフルオロカーボン、臓器保存化合物、又はそれらの組合せを含む細胞回収組成物と接触させる。別の実施態様では、胎盤細胞を、灌流による回収の後に、該細胞回収化合物と接触させる。通常、胎盤細胞の回収、濃縮、及び単離時に、低酸素及び機械的ストレスによる細胞ストレスを最小限に抑えるか、又はそれらを排除することが好ましい。本方法の別の実施態様では、それゆえ、胎盤灌流液、又は胎盤細胞の集団は、回収、濃縮、又は単離時に、該保存時に6時間未満の間、低酸素状態に曝され、ここで、低酸素状態は、正常な血中酸素濃度を下回る酸素濃度である。より具体的な実施態様では、該灌流液又は胎盤細胞の集団は、該保存時に2時間未満の間、該低酸素状態に曝される。別のより具体的な実施態様では、該胎盤細胞の集団は、回収、濃縮、又は単離時に、1時間未満、もしくは30分未満の間、該低酸素状態に曝されるか、又は低酸素状態に曝されない。別の具体的な実施態様では、該胎盤細胞の集団は、回収、濃縮、又は単離時に、剪断ストレスに曝されない。細胞、例えば、胎盤灌流液細胞、造血細胞、例えば、CD34造血幹細胞NK細胞、例えば、TSNK細胞本明細書で提供される単離された接着性胎盤細胞を、例えば、小型の容器、例えば、アンプル又はセプタムバイアル中の凍結保存培地に入れて凍結保存することができる。ある実施態様では、本明細書で提供される細胞を、1mL当たり約1×104~5×108細胞の濃度で凍結保存する。具体的な実施態様では、本明細書で提供される細胞を、1mL当たり約1×106~15×107細胞の濃度で凍結保存する。より具体的な実施態様では、本明細書で提供される細胞を、1mL当たり約1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、15×107細胞の濃度で凍結保存する。好適な凍結保存培地としては、生理食塩水、例えば、成長培地を含む培養培地、又は細胞凍結培地、例えば、市販の細胞凍結培地、例えば、C2695、C2639、もしくはC6039CryoStorCS2、CryoStorCS5、もしくはCryoStorCS10が挙げられるが、これらに限定されない。凍結保存培地は、好ましくは、例えば、約1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10の濃度のDMSOを含む。凍結保存培地は、追加の薬剤、例えば、メチルセルロース、デキストラン、アルブミン、トレハロース、及び又はグリセロールを含んでいてもよい。ある実施態様では、凍結保存培地は、約1~10のDMSO、約25~75のデキストラン、及び又は約20~60のヒト血清アルブミンを含む。ある実施態様では、凍結保存培地は、約1~10のDMSO、約25~75のトレハロース、及び又は約20~60のヒトHSAを含む。具体的な実施態様では、凍結保存培地は、5のDMSO、55のデキストラン、及び40のHSAを含む。より具体的な実施態様では、凍結保存培地は、5のDMSO、55のデキストラン、及び40のHSAを含む。別の具体的な実施態様では、凍結保存培地は、5のDMSO、55のトレハロース、及び40のHSAを含む。より具体的な実施態様では、凍結保存培地は、5のDMSO、55のトレハロース、及び40のHSAを含む。別の具体的な実施態様では、凍結保存培地は、CryoStorCS5を含む。別の具体的な実施態様では、凍結保存培地は、CryoStorCS10を含む。本明細書で提供される細胞は、種々の方法のいずれかによって、かつ細胞の培養、拡大、又は分化のいずれかの段階で凍結保存することができる。例えば、本明細書で提供される細胞は、もとの組織もしくは器官、例えば、胎盤灌流液もしくは臍帯血から単離した直後、又は上で概説した方法の第一の工程もしくは第二の工程のいずれかにおいて、又は該第一の工程もしくは第二の工程のいずれかの後に、凍結保存することができる。ある実施態様では、造血細胞、例えば、造血幹細胞又は前駆細胞は、該もとの組織もしくは器官からの単離後、約1、5、10、15、20、30、45分以内に、又は約1、2、4、6、10、12、18、20、もしくは24時間以内に凍結保存される。ある実施態様では、該細胞は、該もとの組織もしくは器官からの単離後、1、2、又は3日以内に凍結保存される。ある実施態様では、該細胞は、上の第621節に記載されているように、第一の培地中で培養された後、約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、又は28日間、凍結保存される。いくつかの実施態様では、該細胞は、上の第621節に記載されているように、第一の培地中で培養された後、約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、又は28日間、及び上の第621節に記載されているように、第二の培地中で、約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、又は28日間、凍結保存される。一態様では、NK細胞、例えば、TSNK細胞の集団を凍結保存する方法が本明細書で提供される。一実施態様では、該方法は造血幹細胞又は前駆細胞の集団が拡大し、かつ該拡大することの間に、造血幹細胞又は前駆細胞の集団内の複数の造血幹細胞又は前駆細胞がNK細胞に分化するように、インターロイキン15、並びに任意に幹細胞因子及びインターロイキン7のうちの1つ又は複数を含み、ここで、該IL15並びに任意のSCF及びIL7が該培地の不確定成分に含まれない、第一の培地中に、該集団を播種すること工程由来の細胞をインターロイキン2を含む第二の培地中で拡大して、活性化NK細胞の集団を産生すること、並びに工程由来のNK細胞を凍結保存培地中で凍結保存することを含む。具体的な実施態様では、該工程は更に、細胞懸濁溶液を調製すること凍結保存培地を工程由来の細胞懸濁溶液に添加して、凍結保存細胞懸濁液を得ること工程由来の凍結保存細胞懸濁液を冷却して、凍結保存試料を得ること及び該凍結保存試料を80°C未満で保存することを含む。ある実施態様では、該方法は、工程との間、及び工程との間の中間工程を含まず、かつ又は工程の前の追加の培養工程を含まない。別の実施態様では、NK細胞、例えば、TSNK細胞の集団を凍結保存する該方法は幹細胞因子、IL2、インターロイキン7、インターロイキン15、及びヘパリンのうちの1つ又は複数を含む第一の培地中で、造血幹細胞又は前駆細胞の集団を拡大すること、ここで、該SCF、IL2、IL7、及びIL15は該培地の不確定成分に含まれず、かつここで、該拡大することの間に、造血幹細胞又は前駆細胞の集団内の複数の造血幹細胞又は前駆細胞はNK細胞に分化する工程由来の細胞をインターロイキン2を含む第二の培地中で拡大して、活性化NK細胞を産生すること並びに工程由来のNK細胞を凍結保存培地中で凍結保存することを含む。具体的な実施態様では、該工程は更に、細胞懸濁溶液を調製すること凍結保存培地を工程由来の細胞懸濁溶液に添加して、凍結保存細胞懸濁液を得ること工程由来の凍結保存細胞懸濁液を冷却して、凍結保存試料を得ること及び該凍結保存試料を80°C未満で保存することを含む。ある実施態様では、該方法は、工程との間、及び工程との間の中間工程を含まない。本明細書で提供される細胞を、速度制御フリーザーで、例えば、凍結保存時に、約01、03、05、又は1°C分で冷却することが好ましい。好ましい凍結保存温度は、約80°C~約180°C、好ましくは約125°C~約140°Cである。凍結保存した細胞を液体窒素に移した後、使用のために解凍することができる。いくつかの実施態様では、例えば、アンプルが約90°Cに達したら、それを液体窒素保存領域に移す。凍結保存した細胞を、約25°C~約40°Cの温度で、好ましくは約37°Cの温度にして解凍することが好ましい。ある実施態様では、凍結保存した細胞を、約1、2、4、6、10、12、18、20、もしくは24時間、又は約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、もしくは28日間凍結保存した後に解凍する。ある実施態様では、凍結保存した細胞を、約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、又は28カ月間凍結保存した後に解凍する。ある実施態様では、凍結保存した細胞を、約1、2、3、4、5、6、7、8、9、又は10年間凍結保存した後に解凍する。好適な解凍培地としては、生理食塩水、例えば、成長培地、例えば、RPMI培地を含む、プラズマライト培養培地が挙げられるが、これらに限定されない。好ましい実施態様では、解凍培地は、培地添加物のうちの1つ又は複数を含む。本明細書で提供される細胞を解凍するのに好適な培地添加物としては、例えば、限定するものではないが、血清、例えば、ヒト血清AB、胎仔ウシ血清、もしくは胎仔ウシ血清、ビタミン、ヒト血清アルブミン、ウシ血清アルブミン、アミノ酸、脂肪酸、インスリン、トランスフェリン、βメルカプトエタノール、幹細胞因子、Fms様チロシンキナーゼ3リガンド、サイトカイン、例えば、インターロイキン2、インターロイキン7、インターロイキン15、トロンボポエチン、又はヘパリンが挙げられる。具体的な実施態様では、本明細書で提供される方法において有用な解凍培地は、RPMIを含む。別の具体的な実施態様では、該解凍培地は、プラズマライトを含む。別の具体的な実施態様では、該解凍培地は、約05~20のFBSを含む。別の具体的な実施態様では、該解凍培地は、約1、2、5、10、15、又は20のFBSを含む。別の具体的な実施態様では、該解凍培地は、約05~20のHSAを含む。別の具体的な実施態様では、該解凍培地は、約1、25、5、10、15、又は20のHSAを含む。より具体的な実施態様では、該解凍培地は、RPMI及び約10のFBSを含む。別のより具体的な実施態様では、該解凍培地は、プラズマライト及び約5のHSAを含む。本明細書で提供される凍結保存法を、長期保存を可能にするか、又は例えば、アポトーシスもしくは壊死による細胞死を阻害する条件下となるように最適化することができる。一実施態様では、解凍後細胞は、例えば、自動細胞カウンター又はトリパンブルー法で測定した場合に、生細胞の60、65、70、75、80、85、90、95、又は98超を含む。別の実施態様では、解凍後細胞は、死細胞の約05、1、5、10、15、20、又は25を含む。別の実施態様では、解凍後細胞は、初期アポトーシス細胞の約05、1、5、10、15、20、又は25を含む。別の実施態様では、解凍後細胞の約05、1、5、10、15、又は20は、例えば、アポトーシスアッセイで測定した場合、解凍されてから1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、又は28日後に、アポトーシスを経る。ある実施態様では、解凍後細胞を、本明細書で提供される方法を用いて、培養するか、拡大するか、又は分化させた後に、再び凍結保存する。本明細書で提供されるTSNK細胞は、癌を有する個体、例えば、固形腫瘍細胞及びもしくは血液癌細胞を有する個体、又はウイルス感染を有する人を治療する方法で用いることができる。本明細書で提供されるTSNK細胞は、腫瘍細胞の増殖を抑制する方法で用いることもできる。一実施態様では、癌、例えば、血液癌又は固形腫瘍を有する個体を治療する方法であって、該個体に、治療的有効量のTSNK細胞を投与することを含む、方法が本明細書で提供される。ある実施態様では、該個体は、ナチュラルキラー細胞の欠損、例えば、該個体の癌に対して活性があるNK細胞の欠損を有する。具体的な実施態様では、該方法は更に、該個体に、単離された胎盤灌流液又は単離された胎盤灌流液細胞、例えば、治療的有効量の胎盤灌流液又は単離された胎盤灌流液細胞を投与することを含む。別の具体的な実施態様では、該方法は更に、該個体に、有効量の免疫調節化合物、例えば、上の第621節に記載の免疫調節化合物、又はサリドマイドを投与することを含む。本明細書で使用されるように、有効量は、例えば、該個体が罹患している癌の1以上の症状の検出可能な改善、該症状の進行の軽減、又は該症状の消失をもたらす量である。具体的な実施態様では、癌は、血液癌、例えば、白血病又はリンパ腫である。より具体的な実施態様では、癌は、急性白血病、例えば、急性T細胞白血病、急性骨髄性白血病、急性前骨髄球性白血病、急性骨髄芽球性白血病、急性巨核芽球性白血病、前駆B急性リンパ芽球性白血病、前駆T急性リンパ芽球性白血病、バーキット白血病、もしくは急性混合型白血病慢性白血病、例えば、慢性骨髄リンパ腫、慢性骨髄性白血病、慢性単球性白血病、慢性リンパ球性白血病小リンパ球性リンパ腫、もしくはB細胞前リンパ球性白血病有毛細胞リンパ腫T細胞前リンパ球性白血病又はリンパ腫、例えば、組織球性リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、脾辺縁帯リンパ腫、形質細胞新生物、節外辺縁帯B細胞リンパ腫、節辺縁帯B細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫、縦隔大細胞型B細胞リンパ腫、血管内大細胞型B細胞リンパ腫、原発性滲出液リンパ腫、T細胞大型顆粒リンパ球性白血病、侵攻性NK細胞白血病、成人T細胞白血病リンパ腫、鼻型の節外NKT細胞リンパ腫、腸症型T細胞リンパ腫、肝脾T細胞リンパ腫、芽球性NK細胞リンパ腫、菌状息肉腫、原発性皮膚CD30陽性T細胞リンパ増殖性障害、血管免疫芽球性T細胞リンパ腫、非特定型の末梢T細胞リンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、もしくは結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫である。別の具体的な実施態様では、癌は、多発性骨髄腫又は骨髄異形成症候群である。ある他の具体的な実施態様では、癌は、固形腫瘍、例えば、癌、例えば、腺癌、副腎皮質癌、結腸腺癌、結腸直腸腺癌、結腸直腸癌、腺管癌、肺癌、甲状腺癌、上咽頭癌、黒色腫、非黒色腫皮膚癌、又は詳細不明の癌類腱腫線維形成性小円形細胞腫瘍内分泌腫瘍ユーイング肉腫胚細胞腫瘍肝芽腫肝細胞癌神経芽腫非横紋筋肉腫軟部組織肉腫骨肉腫網膜芽腫横紋筋肉腫又はウィルムス腫瘍である。別の実施態様では、固形腫瘍は、膵癌又は乳癌である。他の実施態様では、固形腫瘍は、聴神経腫星状細胞腫脊索腫頭蓋咽頭腫神経膠腫膠芽腫髄芽腫髄膜腫転移性脳腫瘍乏突起膠腫松果体芽腫下垂体部腫瘍未分化神経外胚葉性腫瘍又は神経鞘腫である。別の実施態様では、癌は前立腺癌である。ある実施態様では、癌、例えば、血液癌又は固形腫瘍を有する個体、例えば、ナチュラルキラー細胞の欠損を有する個体は、該投与することの前に骨髄移植を受けた個体である。ある実施態様では、該骨髄移植は、該癌の治療でのものであった。ある他の実施態様では、該骨髄移植は、該癌以外の状態の治療でのものであった。ある実施態様では、個体は、該骨髄移植に加えて、免疫抑制剤を受容した。ある実施態様では、骨髄移植を受けた個体は、該投与のときに、移植片対宿主病の1以上の症状を示している。ある他の実施態様では、骨髄移植を受けた個体に、移植片対宿主病の症状が現われる前に、該細胞を投与する。ある具体的な実施態様では、癌、例えば、血液癌を有する個体は、該投与することの前に、少なくとも1用量のTNFα阻害剤、例えば、ETANERCEPTを受容した。具体的な実施態様では、該個体は、該癌の診断から1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、又は12カ月以内に、該用量のTNFα阻害剤を受容した。具体的な実施態様では、一定用量のTNFα阻害剤を受容した個体は、急性骨髄性白血病を示している。より具体的な実施態様では、一定用量のTNFα阻害剤を受容し、かつ急性骨髄性白血病を示している個体は更に、血液細胞の第5番染色体の長腕の欠失を示す。別の実施態様では、癌、例えば、血液癌を有する個体は、フィラデルフィア染色体を示す。ある他の実施態様では、該個体の癌、例えば、血液癌又は固形腫瘍は、1以上の抗癌薬に不応性である。具体的な実施態様では、癌は、GLEEVECに不応性である。ある実施態様では、該個体の癌、例えば、血液癌は、少なくとも1つの抗癌薬に応答しこの実施態様では、胎盤灌流液、単離された胎盤灌流液細胞、単離されたナチュラルキラー細胞、例えば、胎盤ナチュラルキラー細胞、例えば、胎盤由来中間ナチュラルキラー細胞、単離され、組み合わされたナチュラルキラー細胞、及び又はそれらの組合せ、並びに任意に免疫調節化合物を、補助治療として又は該抗癌薬との併用療法として追加する。ある他の実施態様では、癌、例えば、血液癌を有する個体は、少なくとも1つの抗癌薬で治療されたことがあり、かつ該投与することの前に、再発している。一態様では、多発性骨髄腫を有する個体を治療する方法であって、該個体に、レナリドミドメルファラン及び拡大されたNK細胞を投与することを含み、ここで、該NK細胞が、該個体の多発性骨髄腫を治療するのに有効である、方法が本明細書で提供される。具体的な実施態様では、該NK細胞は、臍帯血NK細胞、又は臍帯血造血細胞、例えば、造血幹細胞から産生されるNK細胞である。別の実施態様では、該NK細胞は、NK細胞を産生するための、例えば、TSNK細胞を産生するための、本明細書に記載の方法のいずれかによって産生されたものである。別の実施態様では、該NK細胞は、該投与することの前に拡大されたものである。別の実施態様では、該レナリドミド、メルファラン、及び又はNK細胞は、互いに別々に投与される。多発性骨髄腫を有する個体を治療する方法のある具体的な実施形態では、該NK細胞は、幹細胞因子、IL2、インターロイキン7、インターロイキン15、及びヘパリンのうちの1つ又は複数を含む第一の培地中で、造血幹細胞又は前駆細胞の集団を拡大すること、ここで、該SCF、IL2、IL7、及びIL15は該培地の不確定成分に含まれず、かつここで、該拡大することの間に、造血幹細胞又は前駆細胞の集団内の複数の造血幹細胞又は前駆細胞はNK細胞に分化する並びに工程由来の細胞をインターロイキン2を含む第二の培地中で拡大することを含む、方法によって産生される。別の態様では、慢性リンパ球性白血病を有する個体を治療する方法であって、該個体に、治療的有効量のレナリドミドメルファランフルダラビン及び拡大されたNK細胞、例えば、TSNK細胞を投与することを含み、ここで、該NK細胞が、該個体で該CLLを治療するのに有効である、方法が本明細書で提供される。具体的な実施態様では、該NK細胞は、臍帯血NK細胞、又は臍帯血造血幹細胞から産生されたNK細胞である。別の実施態様では、該NK細胞は、NK細胞を産生するための、例えば、TSNK細胞を産生するための、本明細書に記載の方法のいずれかによって産生されたものである。上記の方法のいずれかの具体的な実施態様では、該NK細胞は、該投与することの前に少なくとも10日間拡大されたものである。上記の方法のいずれかの具体的な実施態様では、該レナリドミド、メルファラン、フルダラビン、及び拡大されたNK細胞は、該個体に別々に投与される。CLLを有する個体を治療する方法のある具体的な実施形態では、該NK細胞は、幹細胞因子、IL2、インターロイキン7、インターロイキン15、及びヘパリンのうちの1つ又は複数を含む第一の培地中で、造血幹細胞又は前駆細胞の集団を拡大すること、ここで、該SCF、IL2、IL7、及びIL15は該培地の不確定成分に含まれず、かつここで、該拡大することの間に、造血幹細胞又は前駆細胞の集団内の複数の造血幹細胞又は前駆細胞はNK細胞に分化する並びに工程由来の細胞をインターロイキン2を含む第二の培地中で拡大して、活性化NKを産生することを含む、方法によって産生される。腫瘍細胞の増殖を抑制する方法であって、該腫瘍細胞をTSNK細胞と接触させることを含む、方法が本明細書で更に提供される。任意に、該腫瘍細胞及び又はTSNK細胞を、単離された胎盤灌流液又は単離された胎盤灌流液細胞と接触させる。別の具体的な実施態様では、該腫瘍細胞及び又はTSNK細胞を、該腫瘍細胞の増殖が、TSNK細胞と接触させていない同じタイプの腫瘍細胞と比較して、検出可能な程度に低下するように、免疫調節化合物、例えば、上の第621節に記載の免疫調節化合物、又はサリドマイドと更に接触させる。任意に、免疫調節化合物と接触させた腫瘍細胞及び又はTSNK細胞を、単離された胎盤灌流液又は単離された胎盤灌流液細胞と接触させる。本明細書で使用されるように、細胞に関連して、接触させることは、一実施態様では、胎盤灌流液、胎盤灌流液細胞、ナチュラルキラー細胞、例えば、TSNK細胞、及び又は単離され、組み合わされたナチュラルキラー細胞と腫瘍細胞との直接的で物理的な、例えば、細胞間の接触を包含する。別の実施態様では、接触させることは、同じ物理的空間内での存在を包含し、例えば、胎盤灌流液、胎盤灌流液細胞、ナチュラルキラー細胞、例えば、胎盤中間ナチュラルキラー細胞、及び又は単離され、組み合わされたナチュラルキラー細胞は、腫瘍細胞と同じ容器、例えば、培養ディッシュ、マルチウェルプレートに入れられる。別の実施態様では、胎盤灌流液、胎盤灌流液細胞、組み合わされたナチュラルキラー細胞、又は胎盤中間ナチュラルキラー細胞と腫瘍細胞とを接触させることは、例えば、該胎盤灌流液、又は細胞、例えば、胎盤灌流液細胞、組み合わされたナチュラルキラー細胞、もしくはナチュラルキラー細胞、例えば、胎盤中間ナチュラルキラー細胞を、個体、例えば、腫瘍細胞を含むヒト、例えば、癌患者に注射又は注入することによって達成される。免疫調節化合物及び又はサリドマイドとの関連における接触させることは、例えば、細胞と免疫調節化合物及び又はサリドマイドとを、互いに直接的に物理的に接触させるか、又は同じ物理的容積内に入れることを意味する。具体的な実施態様では、腫瘍細胞は、血液癌細胞、例えば、白血病細胞又はリンパ腫細胞である。より具体的な実施態様では、癌は、急性白血病、例えば、急性T細胞白血病細胞、急性骨髄性白血病細胞、急性前骨髄球性白血病細胞、急性骨髄芽球性白血病細胞、急性巨核芽球性白血病細胞、前駆B急性リンパ芽球性白血病細胞、前駆T急性リンパ芽球性白血病細胞、バーキット白血病細胞、もしくは急性混合型白血病細胞慢性白血病細胞、例えば、慢性骨髄リンパ腫細胞、慢性骨髄性白血病細胞、慢性単球性白血病細胞、慢性リンパ球性白血病小リンパ球性リンパ腫細胞、もしくはB細胞前リンパ球性白血病細胞有毛細胞リンパ腫細胞T細胞前リンパ球性白血病細胞又はリンパ腫細胞、例えば、組織球性リンパ腫細胞、リンパ形質細胞性リンパ腫細胞、脾辺縁帯リンパ腫細胞、形質細胞新生物細胞、節外辺縁帯B細胞リンパ腫細胞、節辺縁帯B細胞リンパ腫細胞、濾胞性リンパ腫細胞、マントル細胞リンパ腫細胞、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫細胞、縦隔大細胞型B細胞リンパ腫細胞、血管内大細胞型B細胞リンパ腫細胞、原発性滲出液リンパ腫細胞、T細胞大型顆粒リンパ球性白血病細胞、侵攻性NK細胞白血病細胞、成人T細胞白血病リンパ腫細胞、節外NKT細胞リンパ腫鼻型細胞、腸症型T細胞リンパ腫細胞、肝脾T細胞リンパ腫細胞、芽球性NK細胞リンパ腫細胞、菌状息肉腫、原発性皮膚CD30陽性T細胞リンパ増殖性障害細胞、血管免疫芽球性T細胞リンパ腫細胞、末梢T細胞リンパ腫非特定型細胞、未分化大細胞リンパ腫細胞、ホジキンリンパ腫細胞もしくは結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫細胞である。別の具体的な実施態様では、腫瘍細胞は、多発性骨髄腫細胞又は骨髄異形成症候群細胞である具体的な実施態様では、腫瘍細胞は、固形腫瘍細胞、例えば、癌細胞、例えば、腺癌細胞、副腎皮質癌細胞、結腸腺癌細胞、結腸直腸腺癌細胞、結腸直腸癌細胞、腺管癌細胞、肺癌細胞、甲状腺癌細胞、上咽頭癌細胞、黒色腫細胞、非黒色腫皮膚癌細胞、もしくは詳細不明の癌細胞類腱腫細胞線維形成性小円形細胞腫瘍細胞内分泌腫瘍細胞ユーイング肉腫細胞胚細胞腫瘍細胞肝芽腫細胞肝細胞癌細胞神経芽腫細胞非横紋筋肉腫軟部組織肉腫細胞骨肉腫細胞網膜芽腫細胞横紋筋肉腫細胞又はウィルムス腫瘍細胞である。別の実施態様では、腫瘍細胞は、膵癌細胞又は乳癌細胞である。他の実施態様では、固形腫瘍細胞は、聴神経腫細胞星状細胞腫細胞脊索腫細胞頭蓋咽頭腫細胞神経膠腫細胞膠芽腫細胞髄芽腫細胞髄膜腫細胞転移性脳腫瘍細胞乏突起膠腫細胞松果体芽腫細胞下垂体部腫瘍細胞未分化神経外胚葉性腫瘍細胞又は神経鞘腫細胞である。別の実施態様では、腫瘍細胞は、前立腺癌細胞である。本明細書で使用されるように、治療的に有益な及び治療的利益には、例えば、腫瘍のサイズの低下腫瘍の拡大の軽減又は停止単位容積当たりの、組織試料、例えば、血液試料中の癌細胞の数の低下該個体が有する特定の癌又は腫瘍の任意の症状の臨床的改善、該個体が有する特定の癌の任意の症状の悪化の軽減又は停止などが含まれるが、これらに限定されない。本明細書に記載のTSNKを用いた、癌を有する個体の治療は、1以上の他の抗癌剤を含む抗癌治療レジメンの一部であることができる。そのような抗癌剤は当技術分野で周知である。TSNK細胞、及び任意に灌流液、灌流液細胞、TSNK細胞以外のナチュラルキラー細胞に加えて、癌を有する個体、例えば、腫瘍細胞を有する個体に投与し得る具体的な抗癌剤としては、限定するものではないがアシビシンアクラルビシン塩酸アコダゾールアクロニンアドゼレシンアドルシルアルデスロイキンアルトレタミンアンボマイシン酢酸アメタントロンアムサクリンアナストロゾールアントラマイシンアスパラギナーゼアスペルリンアバスチンアザシチジンアゼテパアゾトマイシンバチマスタットベンゾデパビカルタミド塩酸ビサントレンジメシル酸ビスナフィドビゼレシン硫酸ブレオマイシンブレキナルナトリウムブロピリミンブスルファンカクチノマイシンカルステロンカラセミドカルベチマーカルボプラチンカルムスチン塩酸カルビシンカルゼレシンセデフィンゴールセレコキシブクロラムブシルシロレマイシンシスプラチンクラドリビンメシル酸クリスナトールシクロホスファミドシタラビンダカルバジンダクチノマイシン塩酸ダウノルビシンデシタビンデキソルマプラチンデザグアニンメシル酸デザグアニンジアジコンドセタキセルドキソルビシン塩酸ドキソルビシンドロロキシフェンクエン酸ドロロキシフェンプロピオン酸ドロモスタノロンデュアゾマイシンエダトレキセート塩酸エフロミチンエルサミトルシンエンロプラチンエンプロメートエピプロピジン塩酸エピルビシンエルブロゾール塩酸エソルビシンエストラムスチンリン酸エストラムスチンナトリウムエタニダゾールエトポシドリン酸エトポシドエトプリン塩酸ファドロゾールファザラビンフェンレチニドフロクスウリジンリン酸フルダラビンフルオロウラシルフルロシタビンホスキドンフォストリエシンナトリウムゲムシタビン塩酸ゲムシタビンヒドロキシ尿素塩酸イダルビシンイホスファミドイルモホシンイプロプラチンイリノテカン塩酸イリノテカン酢酸ランレオチドレトロゾール酢酸ロイプロリド塩酸リアロゾールロメトレキソールナトリウムロムスチン塩酸ロソキサントロンマソプロコールメイタンシン塩酸メクロレタミン酢酸メゲストロール酢酸メレンゲストロールメルファランメノガリルメルカプトプリンメトトレキセートメトトレキセートナトリウムメトプリンメツレデパミチンドミドマイトカルシンマイトクロミンマイトギリンマイトマルシンマイトマイシンマイトスペルミトタン塩酸ミトキサントロンミコフェノール酸ノコダゾールノガラマイシンオルマプラチンオキシスランパクリタキセルペガスパルガーゼペリオマイシンペンタムスチン硫酸ペプロマイシンペルホスファミドピポブロマンピポスルファン塩酸ピロキサントロンプリカマイシンプロメスタンポルフィマーナトリウムポルフィロマイシンプレドニムスチン塩酸プロカルバジンピューロマイシン塩酸ピューロマイシンピラゾフリンリボプリンサフィンゴール塩酸サフィンゴールセムスチンシムトラゼンスパルホセートナトリウムスパルソマイシン塩酸スピロゲルマニウムスピロムスチンスピロプラチンストレプトニグリンストレプトゾシンスロフェヌルタリソマイシンテコガランナトリウムタキソテールテガフール塩酸テロキサントロンテモポルフィンテニポシドテロキシロンテストラクトンチアミプリンチオグアニンチオテパチアゾフリンチラパザミンクエン酸トレミフェン酢酸トレストロンリン酸トリシリビントリメトレキセートグルクロン酸トリメトレキセートトリプトレリン塩酸ツブロゾールウラシルマスタードウレデパバプレオチドベルテポルフィン硫酸ビンブラスチン硫酸ビンクリスチンビンデシン硫酸ビンデシン硫酸ビネピジン硫酸ビングリシネート硫酸ビンロイロシン酒石酸ビノレルビン硫酸ビンロシジン硫酸ビンゾリジンボロゾールゼニプラチンジノスタチン及び塩酸ゾルビシンが含まれる。他の抗癌薬としては、限定するものではないが20epi125ジヒドロキシビタミンD35エチニルウラシルアビラテロンアクラルビシンアシルフルベンアデシペノールアドゼレシンアルデスロイキンALLTKアンタゴニストアルトレタミンアンバムスチンアミドックスアミホスチンアミノレブリン酸アムルビシンアムサクリンアナグレリドアナストロゾールアンドログラフォリド血管形成阻害剤アンタゴニストDアンタゴニストGアンタレリクス抗背方化形態形成タンパク質1抗アンドロゲン、前立腺癌抗エストロゲン剤アンチネオプラストンアンチセンスオリゴヌクレオチドアフィジコリングリシネートアポトーシス遺伝子調節物質アポトーシス調節因子アプリン酸araCDPDLPTBAアルギニンデアミナーゼアスラクリンアタメスタンアトリムスチンアキシナスタチン1アキシナスタチン2アキシナスタチン3アザセトロンアザトキシンアザチロシンバッカチンIII誘導体バラノールバチマスタットBCRABLアンタゴニストベンゾクロリンベンゾイルスタウロスポリンβラクタム誘導体βアレチンβクラマイシンBベツリン酸bFGF阻害剤ビカルタミドビサントレンビスアジリジニルスペルミンビスナフィドビストラテンAビセレシンブレフレートブロピリミンブドチタンブチオニンスルホキシミンカルシポトリオールカルホスチンCカンプトサールカンプトテシン誘導体カペシタビンカルボキサミドアミノトリアゾールカルボキシアミドトリアゾールCaRestM3CARN700軟骨由来阻害剤カルゼレシンカゼインキナーゼ阻害剤カスタノスペルミンセクロピンBセトロレリクスクロルルンクロロキノキサリンスルホンアミドシカプロストシスポルフィリンクラドリビンクロミフェン類似体クロトリマゾールコリスマイシンAコリスマイシンBコンブレタスタチンA4コンブレタスタチン類似体コナゲニンクラムベスシジン816クリスナトールクリプトフィシン8クリプトフィシンA誘導体クラシンAシクロペンタントラキノンシクロプラタムシペマイシンシタラビンオクホスフェート細胞溶解因子サイトスタチンダクリキシマブデシタビンデヒドロジデンミンBデスロレリンデキサメタゾンデキシホスファミドデクスラゾキサンデクスベラパミルジアジコンジデムニンBジドックスジエチルノルスペルミンジヒドロ5アザシチジンジヒドロタキソール、9ジオキサマイシンジフェニルスピロムスチンドセタキセルドコサノールドラセトロンドキシフルリジンドキソルビシンドロロキシフェンドロナビノールデュオカルマイシンSAエブセレンエコムスチンエデルホシンエドレコロマブエフロルニチンエレメンエミテフルエピルビシンエプリステリドエストラムスチン類似体エストロゲンアゴニストエストロゲンアンタゴニストエタニダゾールリン酸エトポシドエキセメスタンファドロゾールファザラビンフェンレチニドフィルグラスチムフィナステリドフラボピリドールフレゼラスチンフルアステロンフルダラビン塩酸フルオロダウノルニシンフォルフェニメックスフォルメスタンフォストリエシンフォテムスチンガドリニウムテキサフィリン硝酸ガリウムガロシタビンガニレリクスゼラチナーゼ阻害剤ゲムシタビングルタチオン阻害剤ヘプスルファムヘレグリンヘキサメチレンビスアセトアミドヒペリシンイバンドロン酸イダルビシンイドキシフェンイドラマントンイルモホシンイロマスタットイマチニブ、イミキモド免疫刺激性ペプチドインスリン様成長因子1受容体阻害剤インターフェロンアゴニストインターフェロンインターロイキンイオベングアンヨードドキソルビシンイポメアノール、4イロプラクトイルソグラジンイソベンガゾールイソホモハリコンドリンBイタセトロンジャスプラキノリドカハラリドFラメラリンNトリアセテートランレオチドレイナマイシンレノグラスチム硫酸レンチナンレプトルスタチンレトロゾール白血病阻害因子白血球αインターフェロンロイプロリドエストロゲンプロゲステロンリュープロレリンレバミソールリアロゾール直鎖ポリアミン類似体脂溶性二糖ペプチド脂溶性白金化合物リッソクリナミド7ロバプラチンロンブリシンロメトレキソールロニダミンロソキサントロンロキソリビンルルトテカンルテチウムテキサフィリンリソフィリン溶解性ペプチドマイタンシンマンノスタチンAマリマスタットマソプロコールマスピンマトリライシン阻害剤マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤メノガリルメルバロンメテレリンメチオニナーゼメトクロプラミドMIF阻害剤ミフェプリストンミルテホシンミリモスチムマイトグアゾンマイトラクトールマイトマイシン類似体ミトナフィドマイトトキシン線維芽細胞成長因子サポリンミトキサントロンモファロテンモルグラモスチムErbitux、ヒト絨毛性性腺刺激ホルモンモノホスホリル脂質Aミオバクテリウム細胞壁skモピダモールマスタード抗癌剤ミカペルオキシドBマイコバクテリア細胞壁抽出物ミリアポロンNアセチルジナリンN置換ベンズアミドナファレリンナグレスチップナロキソンペンタゾシンナパビンナフテルピンナルトグラスチムネダプラチンネモルビシンネリドロン酸ニルタミドニサマイシン一酸化窒素調節物質窒素酸化物酸化防止剤ニトルリンオブリメルセンO6ベンジルグアニンオクトレオチドオキセノンオリゴヌクレオチドオナプリストンオンダンセトロンオンダンセトロンオラシン経口サイトカイン誘導因子オルマプラチンオサテロンオキサリプラチンオキサウノマイシンパクリタキセルパクリタキセル類似体パクリタキセル誘導体パラウアミンパルミトイルリゾキシンパミドロン酸パナキシトリオールパノミフェンパラバクチンパゼリプチンペガスパルガーゼペルデシンペントサンポリ硫酸ナトリウムペントスタチンペントロゾールペルフルブロンペルホスファミドペリリルアルコールフェナジノマイシン酢酸フェニルホスファターゼ阻害剤ピシバニール塩酸ピロカルピンピラルビシンピリトレキシムプラセチンAプラセチンBプラスミノーゲン活性化因子阻害剤白金錯体白金化合物白金トリアミン錯体ポルフィマーナトリウムポルフィロマイシンプレドニゾンプロピルビスアクリドンプロスタグランジンJ2プロテアソーム阻害剤プロテインAに基づく免疫調節物質タンパク質キナーゼC阻害剤タンパク質キナーゼC阻害剤、微細藻類性タンパク質チロシンホスファターゼ阻害剤プリンヌクレオシドホスホリラーゼ阻害剤プルプリンピラゾロアクリジンピリドキシル化ヘモグロビンポリオキシエチレン抱合体rafアンタゴニストラルチトレキセドラモセトロンrasファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤ras阻害剤rasGAP阻害剤脱メチル化レテリプチンレニウムRe186エチドロネートリゾキシンリボザイムRIIレチナミドロヒツキンロムルチドロキニメックスルビギノンB1ルボキシルサフィンゴールサイントピンSarCNUサルコフィトールAサルグラモスチムSdi1模倣剤セムスチン老化誘導阻害剤1センスオリゴヌクレオチドシグナル伝達阻害剤シゾフィランソブゾキサンナトリウムボロカプテイト酢酸フェニルナトリウムソルベロールソマトメジン結合タンパク質ソネルミンスパルホス酸スピカマイシンDスピロムスチンスプレノペンチンスポンギスタチン1スクアラミンスチピアミドストロメライシン阻害剤スルフィノシン超活性血管作用性小腸ペプチドアンタゴニストスラジスタスラミンスワインソニンタリムスチンタモキシフェンメチオジドタウロムスチンタザロテンテコガランナトリウムテガフールテルラピリリウムテロメラーゼ阻害剤テモポルフィンテニポシドテトラクロロデカオキシドテトラゾミンタリブラスチンチオコラリントロンボポイエチントロンボポイエチン模倣剤チマルファシンチモポイエチン受容体アゴニストチモトリナン甲状腺刺激ホルモンスズエチルエチオプルプリンチラパザミン二塩化チタノセントプセンチントレミフェン翻訳阻害剤トレチノイントリアセチルウリジントリシリビントリメトレキセートトリプトレリントロピセトロンツロステリドチロシンキナーゼ阻害剤チルホスチンUBC阻害剤ウベニメクス尿生殖洞由来成長阻害因子ウロキナーゼ受容体アンタゴニストバプレオチドバリオリンBVectibixベラレソールベラミンベルジンベルテポルフィンビノレルビンビンキサルチンビタキシンボロゾールWelcovorinXelodaザノテロンゼニプラチンジラスコルブ及びジノスタチンスチマラマーが挙げられる。別の実施態様では、ウイルス感染を有する個体を治療する方法であって、該個体に、治療的有効量のTSNK細胞を投与することを含む、方法が本明細書で提供される。ある実施態様では、該個体は、ナチュラルキラー細胞の欠損、例えば、該個体のウイルス感染に対して活性があるNK細胞の欠損を有する。ある具体的な実施態様では、該投与することは、該個体に、単離された胎盤灌流液、単離された胎盤灌流液細胞、単離されたナチュラルキラー細胞、例えば、胎盤ナチュラルキラー細胞、例えば、胎盤由来中間ナチュラルキラー細胞、単離され、組み合わされたナチュラルキラー細胞、及び又はそれらの組合せのうちの1つ又は複数を投与することを更に含む。ある具体的な実施態様では、該投与することの前に、該TSNK細胞を、免疫調節化合物、例えば、上の第621節に記載の免疫調節化合物、又はサリドマイドと接触させる。ある他の具体的な実施態様では、該投与することは、該TSNK細胞に加えて、免疫調節化合物、例えば、上の第621節に記載の免疫調節化合物、又はサリドマイドを、該個体に投与することを含み、ここで、該量は、例えば、該ウイルス感染の1以上の症状の検出可能な改善、該症状の進行の軽減、又は該症状の消失をもたらす量である。具体的な実施態様では、ウイルス感染は、アデノウイルス科、ピコルナウイルス科、ヘルペスウイルス科、ヘパドナウイルス科、フラビウイルス科、レトロウイルス科、オルトミクソウイルス科、パラミクソウイルス科、パピローマウイルス科、ラブドウイルス科、又はトガウイルス科ファミリーのウイルスによる感染である。より具体的な実施態様では、該ウイルスは、ヒト免疫不全ウイルス、コクサッキーウイルス、A型肝炎ウイルス、ポリオウイルス、エプスタインバーウイルス、単純ヘルペスウイルス1型、単純ヘルペスウイルス2型、ヒトサイトメガロウイルス、ヒトヘルペスウイルス8型、帯状疱疹ウイルスもしくは帯状疱疹ウイルス、B型肝炎ウイルス、C型肝炎ウイルス、D型肝炎ウイルス、E型肝炎ウイルス、インフルエンザウイルス、麻疹ウイルス、流行性耳下腺炎ウイルス、パラインフルエンザウイルス、パピローマウイルス、狂犬病ウイルス、又は風疹ウイルスである。他のより具体的な実施態様では、該ウイルスは、アデノウイルス種A、血清型12、18、もしくは31アデノウイルス種B、血清型3、7、11、14、16、34、35、もしくは50アデノウイルス種C、血清型1、2、5、もしくは6種D、血清型8、9、10、13、15、17、19、20、22、23、24、25、26、27、28、29、30、32、33、36、37、38、39、42、43、44、45、46、47、48、49、もしくは51種E、血清型4又は種F、血清型40もしくは41である。ある他のより具体的な実施態様では、該ウイルスは、アポイウイルス、アロアウイルス、バガザウイルス、バンジウイルス、ブブイウイルス、カシパコレウイルス、カレイ島ウイルス、カウボーンリッジウイルス、デングウイルス、エッジヒルウイルス、ガジェッツガリーウイルス、イルヘウスウイルス、イスラエルターキー髄膜脳脊髄炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、ジュグラウイルス、ジュチアパウイルス、カダムウイルス、ケドゥグウイルス、ココベラウイルス、コウタンゴウイルス、キャサヌル森林病ウイルス、ランガトウイルス、メアバンウイルス、モドックウイルス、モンタナ筋炎白質脳炎ウイルスウイルス、マレー渓谷脳炎ウイルス、ウンタヤウイルス、オムスク出血熱ウイルス、ポワサンウイルス、リオブラボーウイルス、ロイヤルファームウイルス、サボヤウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、サルビエハウイルス、サンペルリタウイルス、ソーマレズリーフウイルス、セピックウイルス、テンブスウイルス、ダニ媒介型脳炎ウイルス、チュレニーウイルス、ウガンダSウイルス、ウスツウイルス、ウェセルスブロンウイルス、西ナイルウイルス、ヤウンデウイルス、黄熱病ウイルス、ヨコセウイルス、又はジカウイルスである。他の実施態様では、TSNK細胞、及び任意に胎盤灌流液及び又は灌流液細胞を、ウイルス感染を有する個体に、1以上の他の抗ウイルス剤を含む抗ウイルス治療レジメンの一部として投与する。ウイルス感染を有する個体に投与し得る具体的な抗ウイルス剤としてはイミキモド、ポドフィロックス、ポドフィリン、インターフェロンアルファ、レチコロス、ノノキシノール9、アシクロビル、ファムシクロビル、バラシクロビル、ガンシクロビル、シドフォビルアマンタジン、リマンタジンリバビリンザナマビル及びオセルタミビルプロテアーゼ阻害剤、例えば、インジナビル、ネルフィナビル、リトナビル、もしくはサキナビルヌクレオシド逆転写酵素阻害剤、例えば、ジダノシン、ラミブジン、スタブジン、ザルシタビン又はジドブジン並びに非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤、例えば、ネビラピンもしくはエファビレンツが挙げられるが、これらに限定されない。細胞、例えば、胎盤灌流液細胞、例えば、胎盤灌流液由来の有核細胞、組み合わされたナチュラルキラー細胞、及び又は単離されたナチュラルキラー細胞、例えば、TSNK細胞の数の決定、並びに免疫調節化合物、例えば、上の第621節の免疫調節化合物、又はサリドマイドの量の決定は、互いに独立に行なうことができる。ある実施態様では、TSNK細胞を、ウイルス感染、癌、又は腫瘍細胞を有する個体、例えば、腫瘍細胞、固形腫瘍、又は血液癌を有する個体、例えば、癌患者に対して検出可能な治療的利益をもたらす任意の量又は数、例えば、有効量で、該個体に用いる、例えば、投与する。そのような細胞を、そのような個体に、細胞の絶対数で投与することができ、例えば、該個体に、約、少なくとも約、又は多くとも約1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108、1×109、5×109、1×1010、5×1010、又は1×1011個のTSNK細胞で投与することができる。他の実施態様では、TSNK細胞を、そのような個体に、細胞の相対数で投与することができ、例えば、該個体に、該個体のキログラム当たり約、少なくとも約、又は多くとも約1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108、1×109、5×109、1×1010、5×1010、又は1×1011個のTSNK細胞で投与することができる。TSNK細胞を、いくつかのTSNK細胞、並びに任意にTSNK細胞以外の胎盤灌流液細胞及び又はナチュラルキラー細胞と、該個体内のいくつかの腫瘍細胞との近似比率に従って、そのような個体に投与することができる。例えば、TSNK細胞を、個体内の腫瘍細胞の数に対して約、少なくとも約、又は多くとも約11、11、31、41、51、61、71、81、91、101、151、201、251、301、351、401、451、501、551、601、651、701、751、801、851、901、951、又は1001の比率で、該個体に投与することができる。そのような個体内の腫瘍細胞の数は、例えば、該個体由来の組織の試料、例えば、血液試料、生検などにおける腫瘍細胞の数を計数することによって推定することができる。例えば、固形腫瘍についての具体的な実施態様では、該計数することを、腫瘍のイメージングと組み合わせて行ない、おおよその腫瘍容積を得る。具体的な実施態様では、TSNK細胞、任意にTSNK細胞以外の胎盤灌流液細胞及び又はナチュラルキラー細胞に加えて、免疫調節化合物又はサリドマイド、例えば、有効量の免疫調節化合物又はサリドマイドを個体に投与する。ある実施態様では、例えば、個体内の腫瘍細胞の増殖を抑制する方法個体のナチュラルキラー細胞の欠損を有する個体の治療又はウイルス感染を有する個体の治療又は癌を有する個体、例えば、腫瘍細胞、血液癌、もしくは固形腫瘍を有する個体の治療は、該腫瘍細胞を、TSNK細胞と胎盤灌流液及びもしくは胎盤灌流液細胞のうちの1つもしくは複数の組合せと接触させること、又は該個体に、TSNK細胞と胎盤灌流液及びもしくは胎盤灌流液細胞のうちの1つもしくは複数の組合せを投与することを含む。具体的な実施態様では、該方法は更に、腫瘍細胞を免疫調節化合物もしくはサリドマイドと接触させること、又は該個体に免疫調節化合物もしくはサリドマイドを投与することを含む。具体的な実施態様では、例えば、個体のナチュラルキラー細胞の欠損を有する個体の治療或いは癌又はウイルス感染を有する個体の治療、或いは腫瘍細胞増殖の抑制は、該腫瘍細胞を、単離された胎盤灌流液細胞もしくは胎盤灌流液が補充されたTSNK細胞と接触させること、又は該個体に、単離された胎盤灌流液細胞もしくは胎盤灌流液が補充されたTSNK細胞を投与することを含む。具体的な実施態様では、1ミリリットル当たり約1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108個、もしくはそれより多くのTSNK細胞、又は1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108、1×109、5×109、1×1010、5×1010、1×1011個、もしくはそれより多くのTSNK細胞に、1ミリリットル当たり約、又は少なくとも約1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108個、もしくはそれより多くの単離された胎盤灌流液細胞、又は1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108、1×109、5×109、1×1010、5×1010、1×1011個、もしくはそれより多くの単離された胎盤灌流液細胞を補充する。他のより具体的な実施態様では、1ミリリットル当たり約1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108個、もしくはそれより多くのTSNK細胞、又は1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108、1×109、5×109、1×1010、5×1010、1×1011個、もしくはそれより多くのTSNK細胞に、約、もしくは少なくとも約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、もしくは1000mLの灌流液、又は約1ユニットの灌流液を補充する。別の具体的な実施態様では、個体のナチュラルキラー細胞の欠損を有する個体の治療癌を有する個体の治療ウイルス感染を有する個体の治療、又は腫瘍細胞増殖の抑制は、該腫瘍細胞をTSNK細胞と接触させること、又は該個体にTSNK細胞を投与することを含み、ここで、該細胞には、接着性胎盤細胞、例えば、接着性胎盤幹細胞又は寡能性細胞、例えば、CD34、CD10、CD105、CD200組織培養プラスチック接着性胎盤細胞が補充される。具体的な実施態様では、TSNK細胞に、1ミリリットル当たり約1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108個、もしくはそれより多くの接着性胎盤幹細胞、又は1×104、5×104、1×105、5×105、1×106、5×106、1×107、5×107、1×108、5×108、1×109、5×109、1×1010、5×1010、1×1011個、もしくはそれより多くの接着性胎盤細胞、例えば、接着性胎盤幹細胞もしくは寡能性細胞を補充する。別の具体的な実施態様では、個体のナチュラルキラー細胞の欠損を有する個体の治療癌を有する個体の治療ウイルス感染を有する個体の治療、又は腫瘍細胞増殖の抑制を、TSNK細胞と組み合わせた免疫調節化合物又はサリドマイドを用いて行ない、ここで、該細胞には、馴化培地、例えば、CD34、CD10、CD105、CD200組織培養プラスチック接着性胎盤細胞で馴化された培地、例えば、灌流液1ユニット当たり、又は104、105、106、107、108、109、1010、もしくは1011個のTSNK細胞当たり、01、02、03、04、05、06、01、08、09、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10mLの幹細胞馴化培養培地が補充される。ある実施態様では、該組織培養プラスチック接着性胎盤細胞は、その開示がその全体として引用により本明細書中に組み込まれている、米国特許第7468276号及び米国特許出願公開第20070275362号に記載の寡能性接着性胎盤細胞である。別の具体的な実施態様では、該方法は更に、該腫瘍細胞を免疫調節化合物もしくはサリドマイドと接触させるか、又は該個体に免疫調節化合物もしくはサリドマイドを投与することを含む。別の具体的な実施態様では、該TSNK細胞に胎盤灌流液細胞が補充される、個体のナチュラルキラー細胞の欠損を有する個体の治療癌を有する個体の治療ウイルス感染を有する個体の治療、又は腫瘍細胞増殖の抑制では、該灌流液細胞を、該接触させることの前に、一定期間、インターロイキン2と接触させる。ある実施態様では、該一定期間は、該接触させることの前の約、少なくとも、又は多くとも1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、又は48時間である。TSNK細胞、及び任意に灌流液又は灌流液細胞を、一連の抗癌療法の間に1回、ウイルス感染を有する個体、癌を有する個体、もしくは腫瘍細胞を有する個体に投与することができるか或いは治療の間に複数回、例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、もしくは23時間に1回、又は1、2、3、4、5、6、もしくは7日に1回、又は1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、24、36週間、もしくはそれより長い期間に1回投与することができる。細胞及び免疫調節化合物又はサリドマイドを用いる実施態様では、該免疫調節化合物又はサリドマイド、及び細胞又は灌流液を、該個体に、一緒に、例えば、同じ製剤中で別々に、例えば、別々の製剤中で、ほぼ同時に投与することができるか又は別々に、例えば、異なる投与スケジュールで、もしくは1日の異なる時間に投与することができる。同様に、細胞及び抗ウイルス化合物もしくは抗癌化合物を用いる実施態様では、該抗ウイルス化合物又は抗癌化合物、及び細胞又は灌流液を、個体に、一緒に、例えば、同じ製剤中で別々に、例えば、別々の製剤中で、ほぼ同時に投与することができるか又は別々に、例えば、異なる投与スケジュールで、もしくは1日の異なる時間に投与することができる。TSNK細胞、及び灌流液又は灌流液細胞を、TSNK細胞、灌流液、又は灌流液細胞が過去に該個体に投与されたことがあるかどうかということには関係なく、投与することができる。ヒト胎盤灌流液及び臍帯血細胞を、通常、Ficoll又は塩化アンモニウムのいずれかを用いて精製し、全有核細胞を得た。その後、TNCを陽性選択手順で用い、製造業者のプロトコルに従って抗CD34ビーズ及びRoboSepを用いて、CD34細胞を単離した。この実験では、CD34細胞を90を超える純度で単離した。或いは、EasySepヒト前駆細胞濃縮キットを陰性選択手順で用い、以下のヒト細胞表面抗原CD2、CD3、CD11b、CD11c、CD14、CD16、CD19、CD24、CD56、CD66b、及びグリコフォリンAに対するモノクローナル抗体を含むヒト前駆細胞濃縮カクテルを用いることによって、系譜が確定した細胞を除去した。陰性選択を用いて、90のCD34細胞を原材料から回収した。回収されたHSCの細胞組成を表1にまとめた。CD34細胞を以下の培地製剤中で最大48日間培養し、細胞のアリコートを、細胞数、細胞生存率の評価、ナチュラルキラー細胞分化の特徴付け、及び機能的評価のために採取した。penstrep、20ngmLSCF、10ngmLFlt3リガンド、20ngmLTPO、20ngmLIL7、200IUmLIL2、及び10ngmLIL15が補充されたGBGM。2mMLグルタミン、1penstrep、20ヒト血清AB、5ngmL亜セレン酸ナトリウム、50μMエタノールアミン、25μMβメルカプトエタノール、20mgmLアスコルビン酸、5ngmLIL3、20ngmLSCF、10ngmLFlt3リガンド、20ngmLIL7、及び10ngmLIL15が12で補充されたDMEMハムF12。penstrep、10ヒト血清AB、及び500IUmLIL2が補充されたXvivo20。10ヒト血清AB、1penstrep、20ngmLSCF、10ngmLFlt3リガンド、20ngmLTPO、20ngmLIL7、200IUmLIL2、10ngmLIL15、及び15IUmLヘパリンが補充されたGBGM。2mMLグルタミン、1penstrep、20ヒト血清AB、5ngmL亜セレン酸ナトリウム、50μMエタノールアミン、25μMβメルカプトエタノール、20μgmLアスコルビン酸、5ngmLIL3、20ngmLSCF、10ngmLFlt3リガンド、20ngmLIL7、及び10ngmLIL15が12で補充されたDMEMハムF12。2mMLグルタミン、1penstrep、20ヒト血清AB、5ngmL亜セレン酸ナトリウム、50μMエタノールアミン、25μMβメルカプトエタノール、20μgmLアスコルビン酸、200IUmLIL2、20ngmLSCF、10ngmLFlt3リガンド、20ngmLIL7、及び10ngmLIL15が12で補充されたDMEMハムF12。10FBS、2mMLグルタミン、1penstrep、50ngmLSCF、50ngmLFlt3リガンド、100IUmLIL2、20ngmLIL7、及び20ngmLIL15が補充されたRPMI1640。1μM合成グルココルチコイドデキサメトゾン、40ngmLインスリン様成長因子1、100ngmLSCF、40μgmL脂質、5ngmLIL3、200IUmLIL2、20ngmLIL7、及び20ngmLIL15が補充された無血清培地。異なる時点で回収された細胞をRPMI1640及び5FBSで2回洗浄し、蛍光コンジュゲート抗体で4°Cで15分間標識し、フローサイトメトリー及びFlowJoサイトメトリーソフトウェアで解析した。PKH26TOPRO3標識を用いた細胞傷害性アッセイ。標的腫瘍細胞を、その親油性脂肪族残基を介して細胞形質膜に挿入する色素であるPKH26で標識し、その後、96ウェルのU底組織培養プレートに入れ、10FBSが補充された200μlのRPMI1640中で、様々なエフェクター標的比率で、拡大されたNK細胞とともにインキュベートした。培養物を、37°C、5CO2で、4時間インキュベートした。インキュベーション後、細胞を回収し、膜不透過性DNA染料であるTOPRO3を培養物に添加し、その後、FACS解析を行なった。細胞傷害性を、全PKH26標的腫瘍細胞内の死細胞のパーセンテージとして表した。CD34細胞の拡大及びNK細胞への分化の最適化。試験した培地製剤NK1、NK2、及びNK3の中で、NK1培地は、21日目に500倍の拡大を示した。NK2培地もNK3培地も、細胞増殖も分化も維持しなかった。更なる培地最適化をNK1培地について行ない、後継培地をNK2A、NK2B、NK2C、及びNK2Dと命名した。NK2A培地を用いて培養されたCD34細胞は、55日目に105倍の拡大を示した。NK1、NK2、及びNK3培地からの拡大倍率、分化、及び細胞傷害性の結果に基づいて、第二のバッチのNK2A、NK2B、NK2C、及びNK2D培地の調剤を行ない、D55に、105倍の拡大が達成された。NK2B培地は、約3×104倍の拡大を示した。NK2C培地中での培養は、21日で3×102倍の拡大をもたらし、その後、細胞生存率を低下させた。NK2D培地は、実験期間の最初から最後まで、細胞を維持しなかった。48日目に、NK2A培地中NK細胞の約90は、CD56CD3であった。CD56CD3集団内で、細胞の98超はCD56CD16であったが、58は活性化受容体NKG2Dを発現し、68はNKp46であり、17はCD226であった。更に、NK2A培地中で培養された細胞の978、及びNK2B培地中で培養された細胞の931は、培養21日でCD56CD16であった。27日目に、NK2A培地中で培養されたCD34細胞を、以下の培地のうちの1つの中で更に培養したCNK培地及び維持培地を含む、二段階培地。CNK培地は、10のFCS、200IUmLのIL2、35μgmLのトランスフェリン、5μgmLのインスリン、2×105Mのエタノールアミン、1μgmLのオレイン酸、1μgmLのリノール酸、02μgmLのパルミチン酸、25μgmLのBSA、及び01μgmLのフィトヘマグルチニンが補充されたIMDMである。NK2A培地中で培養されたCD56CD3NK細胞を、細胞培養液で処理した24ウェルプレートもしくはT字フラスコ中のCNK培地に25×105個の生細胞mLで再懸濁した。マイトマイシンC処理した同種異系PBMC及びK562細胞を両方とも、フィーダー細胞として、1mL当たり1×106個の最終濃度になるようCNK培地に添加した。NK細胞を、37°C、5CO2で、5~6日間培養した。5~6日後、及びその後は3~4日毎に、等容積の維持培地を該培養物に添加した。フィーダー細胞としてのマイトマイシンC処理したCD34、CD10、CD105、CD200組織培養プラスチック接着性胎盤幹細胞を含むNK2A培地フィーダー細胞としてのマイトマイシンC処理した間葉系幹細胞を含むNK2A培地又は対照としてのフィーダー不含NK2A培地。二段階培地は、特に、27日から48日の間に、NK2A、NK2A、及びNK2Aと比較して、CD34細胞の拡大倍率を高めた。図3を参照されたい。35日目までに、CD34細胞の割合は、既に、約4にまで減少していたが、CD56CD3の割合は、二段階培地中で約80にまで増加していた。45日目に、二段階培地中で培養された細胞は、NK2A、NK2A、及びNK2A中で培養されたNK細胞と比較して、最も高い細胞傷害性を示した。41日での表現型の特徴付けは、細胞内でのNKp46及びCD226の発現の増加を示し、細胞傷害性の増強についての考えられる説明を示した。D41では、CD226細胞の割合は、NK2A培地中09±08から二段階培地中13±4に増加しNKp46細胞の割合は、NK2A培地中554±87から二段階培地中80±785に増加した。D48では、CD226細胞の割合は、NK2A培地中173±143から二段階培地中523±1164に増加しNKp46細胞の割合は、NK2A培地中679±54から二段階培地中86±4に増加した。試験した条件間で、NKG2D発現の有意差はなかった。CD226及びNKp46の発現の変化を下の表5に示す。に由来するナチュラルキラー細胞の比較二段階培地中で培養されたNK細胞を、Wollらの文献60946101の方法によって産生される、胚性幹細胞由来のNK細胞と比較した。具体的には、両方の該細胞型の培養のプロセスの間、CD94及びCD117の発現レベルの違いを観察した。図6は、CD117の発現が、7日から35日まで、二段階NK細胞で高いか、又はであったのに対し、CD94の発現が徐々に増加したことを示している。35日目に、CD56CD3細胞の約44はCD94CD117細胞であり、CD56CD3細胞の376はCD94CD117であり、該CD56CD3細胞の147はCD94CD117であった。従って、二工程方法によって産生されるNK細胞は、ESC由来のNK細胞と区別可能であり、該ESC由来のNK細胞の78は、培養14日~35日までCD117lowのままであった。下の実施例6に記載するように、CD117NK細胞は、様々な組織由来の腫瘍細胞株に対して細胞傷害性であるので、このCD117発現の違いは有用である。これらの結果は、TSNK細胞の分化の経過がESC由来NK細胞とは異なること、及びTSNK細胞がESC由来NK細胞と区別可能であることを示唆している。造血幹細胞のナチュラルキラー細胞への分化に対するCD10、CD34、CD105、CD200組織培養プラスチック接着性胎盤幹細胞の効果を評価するために、HSCを、0日目及び21日目に、101のPDACMSCHSCの比率で、マイトマイシンC処理したPDAC又は骨髄由来間葉系幹細胞で刺激し、一方、フィーダー不含培養物を対照として用いた。NK2A培地を培養培地として用いた。PDACは、培地のみと比較して、培養NK細胞の拡大倍率を高めることが分かった。しかしながら、フィーダー層ありで成長した細胞又はフィーダー層なしで成長した細胞の間で細胞傷害性の有意な差は見られなかった。図7に示すように、MSCで処理された細胞は、最も高い拡大倍率を示したが、最も低い細胞傷害性を示した。この実施例は、上記の二段階プロセスを用いて拡大し、分化させたCD34細胞から産生されるNK細胞が、腫瘍細胞株にとって細胞傷害性であることを示す。乳酸脱水素酵素放出アッセイ。LDH放出アッセイをCYTOTOX96非放射性細胞傷害性アッセイキットを用いて行なった。このアッセイでは、ドナーとマッチするヒト胎盤灌流液と臍帯血のユニットに由来する培養NK細胞をエフェクター細胞として用い、一方、特定の腫瘍細胞株細胞を標的細胞として用いた。この試験で用いた3つのユニットから、HPP細胞のパーセンテージは566±283であった。エフェクター細胞及び標的細胞を96ウェルのU底組織培養プレートに入れ、2ヒトAB血清が補充された100μlのフェノールレッド不含RPMI1640中で、様々なエフェクター標的比率でインキュベートした。培養物を、37°C、5CO2で、4時間インキュベートした。インキュベーション後、50μlの上清を酵素アッセイプレートに移し、LDH活性を、製造業者によって提供されているように検出し、吸収を、ELISAリーダー中で、490nmで測定した。細胞傷害性を以下の方程式に従って計算した細胞傷害性=100、ここで、エフェクター自然は、エフェクター細胞からのLDHの自然な放出の対照であり標的自然は、標的細胞からのLDHの自然な放出の対照でありかつ標的最大は、本質的に100の細胞が溶解されたときの最大LDH放出の対照である。ヒト胎盤灌流液CD34細胞及び臍帯血CD34細胞の単離。HPP細胞及びUCB細胞を、Ficoll又は塩化アンモニウムのいずれかを用いて精製し、全有核細胞を得た。その後、TNCを陽性選択手順で用いて、製造業者によって提供されているプロトコルに従って抗CD34ビーズ及びRoboSepを用いて、CD34細胞を単離した。この実験では、CD34細胞を90を超える純度で単離した。培養二段階NK細胞に対する腫瘍細胞感受性の研究。ヒト乳癌、ヒト結腸直腸腺癌、ヒト慢性骨髄性白血病、ヒト急性骨髄性白血病、ヒト膠芽腫、ヒト多発性骨髄腫、ヒト組織球性リンパ腫、並びにヒト網膜芽腫を含む、腫瘍細胞株を二段階NK細胞と共培養した。二段階培養NK細胞には、NK2A培地中で21日間培養され、その後、CNK培地中で21日間培養されたNK細胞と、NK2A培地中で28日間培養され、その後、CNK培地中で14日間培養されたNK細胞とが含まれた。NK細胞の細胞傷害性を、4時間の共培養後に、乳酸脱水素酵素放出アッセイで測定した。101のエフェクター対標的比率で、後者は、通常、前者よりも高い細胞傷害性を示した。腫瘍細胞株のうち、LN18が、NK媒介性の死滅に対して最も感受性が高く、K562、U937、WERIRB1、U118MG、HT29、HCC2218、KG1、及びU266がそれに続いた。従って、TSNK細胞は、様々な癌細胞株に対して顕著な細胞傷害性を示した。更に、NK細胞傷害性は、NK2A培地中での培養期間を21日から28日に延長することによって改善することができるように思われる。ヒト胎盤灌流液CD34細胞及び臍帯血CD34細胞のマイクロRNAプロファイリング。ドナーとマッチする純化されたHPPCD34細胞及びUCBCD34細胞を、MIRVANAmiRNA単離キットを用いるマイクロRNA調製に供した。CD34細胞を変性溶解バッファー中で破壊した。その後、この試料を酸フェノールクロロホルム抽出に供して、低分子RNA種が高度に濃縮されたRNAを単離した。100エタノールを添加して、該試料を25エタノールにした。このライセートエタノール混合物をガラス繊維フィルターに通すと、高分子RNA種は固相化され、低分子RNA種は濾液中に回収された。その後、該濾液のエタノール濃度を55に増大させ、該混合物を、第二のガラス繊維フィルターに通し、その中で、低分子RNAが固相化されるようになった。このRNAを数回洗浄し、低イオン強度溶液中で溶出させた。回収された低分子RNAの濃度及び純度を、260nm及び280nmでのその吸光度を測定することによって決定した。試験した全てのドナーのHPPCD34細胞に特有であることが分かったmiRNAには、hsamiR380、hsamiR512、hsamiR517、hsamiR518c、hsamiR519b、及びhsamiR520aが含まれた。この実施例は、プールされた臍帯血及びヒト胎盤灌流液からのCD34細胞の単離を示す。UCBHPPプール比率を評価するために、3つの異なるプール比率の並列比較を以下のように行なった最大プール1×UCB1×HPPHPPの部分プール1×UCB033×HPP及びHPPの部分プール1×UCB010×HPP。合計N3の実験反復を実施した。初期のTNC及び容積を記録した。その後、プール試料をCD34細胞について純化し、CD34純度を解凍後に決定した。その後、最適プール比率を、解凍後のCD34純度対容積又は細胞カウント比率プロットからグラフによって決定した。図8に示すように、終点CD34純度は、HPP容積含有量とはよく相関するが、HPPTNC含有量とはそれほど相関しない。全体としては、UCB85vv、HPP15vvが、80以上の純度のCD34細胞を得るための最適プール比率であることが分かった。ベースの培地を用いるNK細胞培養の比較この実施例は、2つのGBGMベースの培地を用いるNK細胞培養プロセスの比較を示す。この2つのプロセスを表10にまとめる。両プロセスとも、胎盤起源のNK細胞及びCD34細胞の分化のための基本培地としてGBGMを利用した。実験パラメータを以下のように概説する新鮮なUCB由来のCD34細胞N6新鮮な組合せ由来のCD34細胞N2凍結保存された組合せ由来のCD34N8マルチウェルディッシュからT25、最大で複数のT75フラスコまで、1~80mLの培養容積二段階プロセス三段階プロセスフィーダーなし不活化したK562及びPBMCフィーダーを21日目に培養物に添加20000~50000細胞mL新鮮なUCB又は新鮮な組合せのいずれかに由来するCD34細胞を生成させ、実施例7、10、及び11に記載の方法で凍結保存した。培養物を、37°C、>90湿度、及び5CO2のインキュベーター中で維持した。細胞成長を最初から最後までモニタリングし、培地交換を週に2回行なって、細胞濃度を1mL当たり5×104~1×106個の範囲内に維持した。分化を21日目及び35日目に表現型解析でモニタリングした。フィーダーを用いる場合、NK培養の21日目に、新鮮な3日培養K562及び解凍後アロPBMCをマイトマイシンCで不活化し、1mL当たり1×106個で二段階プロセス条件に添加した。分化途中のNKを1mL当たり05×106個になるよう規格化した。35日目に、最後の細胞カウントを行なった後、新たに培養し、PKH標識したK562細胞を用いるフローサイトメトリーベースの細胞傷害性アッセイを行なって、NKの機能性を評価した。2つのプロセスを用いて新鮮なUCBから得られるCD34細胞のTNC拡大倍率の中央値は、35日で同程度であった。二段階プロセスは、新鮮な組合せから得られるCD34細胞について、三段階プロセスよりも高いTNC拡大倍率を生じさせるように思われた。全体的なTNC拡大倍率は、両プロセスを用いて解凍後の組合せから得られるCD34細胞について同程度であったが、新鮮なUCB又は新鮮な組合せから得られるCD34細胞よりも有意に少なかった。まとめると、三段階プロセスと二段階プロセスは両方とも、培養の最後に同様の細胞収率をもたらした。21日では、UCB又は組合せから生じた細胞に表現型の顕著な違いはなかった。二段階プロセスは、三段階プロセスよりも高いパーセンテージのCD56CD3NK細胞を生じさせた。分化度は、ドナー依存的であるように見えた。CD3CD56集団とCD3CD56集団の両方のパーセンテージは、全ての場合においてごくわずかであった。35日では、両プロセスは、高い終点CD56CD3純度レベルから明らかなように、NK細胞を分化させるのに効果的であることが分かった。二段階プロセスにおけるフィーダーの添加は、NK表現型の純度を高めるように見えたが、三段階プロセスの場合、NK純度に対するフィーダーの観察可能な利益は見られなかった。培養NK細胞は、そのCD16表現型をずっと維持した。二段階プロセスは、フィーダーの非存在下で、他の条件よりもわずかに多いCD56CD3細胞を生じさせるように見えた。両プロセスにおけるPBMCフィーダー及びK562フィーダーの存在は、NK細胞集団上の特定のNK機能マーカーを有意に上方調節活性化した。全体としては、NK純度及び機能マーカー発現プロファイルは、フィーダー条件が同一であるとき、2つのプロセス間で同程度であることが分かった。4時間のインビトロのK562細胞傷害性アッセイで決定した場合の、培養NK細胞の機能性は、フィーダー条件が同一であるとき、2つのプロセス間で同程度であることが分かった。フィーダーによって活性化されたNK細胞は、インビトロでK562細胞を死滅させるのに極めて効果的であり、平均比溶解は、二段階プロセス及び三段階プロセスについて、それぞれ、932及び936比溶解であった。まとめると、二段階プロセス及び三段階プロセスは、同じフィーダー条件を用いたとき、NK細胞について、同程度の成長、表現型、並びにインビトロ機能性を生じさせることが分かった。二段階プロセスは、三段階プロセスと比較して、NK細胞の培養の簡便性及び利便性を提供する。この研究は、異なる基本培地を用いてCD34由来NK細胞の分化及び拡大を評価することを目的としている。実験条件を表11にまとめる。細胞を実施例11に記載の通りに培養した。実験は全て、マルチウェルディッシュTフラスコの規模で準備し、37°C、>90湿度、及び5CO2のインキュベーター中で維持した。細胞成長を最初から最後までモニタリングし、培地交換を週に2回行なって、細胞濃度を1mL当たり5×104~1×106個の範囲内に維持した。分化を21日及び35日での表現型解析によりモニタリングした。21日で、新鮮な3日間培養K562及び解凍後アロPBMCを不活化し、成長途中のNK細胞培養物に1mL当たり1×106個で添加した。NK細胞を1mL当たり05×106個になるよう規格化した。35日で、最後の細胞カウントを行なった後、新たに培養し、PKH標識したK562細胞を用いるフローサイトメトリーベースの細胞傷害性アッセイを行なって、NKの機能性を評価した。StemspanH3000及びOpTmizerは、35日でGBGMと同程度の成長収率を示した。Cellgro、XVIVO15、AIMV、XVIVO10、DMEMF12、5mMのOACを含むDMEMF12は、GBGMよりも低い成長収率を示した。35日で、GBGMは、約80の純度のCD56CD3細胞を生じさせた。OpTmizer及びStemspanH3000は、約50の純度のCD56CD3細胞を生じさせた。DMEMF12は、約35の純度のCD56CD3細胞を生じさせた。AIMV、XVIVO10、XVIVO15、及びCellgro培地は、約30未満の純度のCD56CD3細胞を生じさせた。培養時のDMEMF12基本培地へのOACの添加は、終点NK純度を大いに高めることが分かり培養35日でのCD56CD3のパーセンテージは、35から72に増大した。培養時のDMEMF12基本培地への5mMのOACの添加は、NK細胞の活性化状態及びインビトロ機能性を大いに高めることが分かった。OACの添加はまた、NK活性化マーカーNKp46、NKG2D、DNAM1、及びCD94のレベルを有意に増大させた。35日のNK細胞のインビトロ機能性も同様に、214から971に大幅に増大した。全体として、NK細胞特性は、5mMのOACの添加によって有意に強化された。この実施例は、NK細胞を保存及び凍結保存する方法を示す。ヒト胎盤灌流液及び臍帯血細胞から単離されたCD34造血幹細胞を、先の実施例に記載されたプロトコルを用いて拡大し、NK細胞に分化させた。細胞を、HPP及び臍帯血から単離された直後に、又はNK細胞の最初の成長期の間に凍結保存した。該細胞を以下の凍結保存製剤製剤1デキストラン凍結培地5DMSO、55デキストラン、40HAS製剤2トレハロース凍結培地5DMSO、55トレハロース、40HSA製剤3CryoStorCS2製剤4CryoStorCS5製剤5CryoStorCS10製剤6無血清凍結培地製剤7グリセロール凍結培地又は製剤8DMSO及び無血清凍結培地中で凍結保存した。異なる時点で回収された細胞を培養培地又は生理食塩水溶液で数回洗浄した。その後、該細胞を遠心分離して、細胞ペレットを得た。上清を除去し、細胞ペレットを、1ミリリットル当たり約1×106~15×107個又はそれより多くの細胞になるように凍結保存培地で懸濁した。該細胞懸濁液を1mL又は2mLのセプタムバイアルに分注し、2~8°Cで約10分間インキュベートした。その後、該細胞を、速度制御フリーザー中、05°C分で凍結させた。凍結バイアルを液体窒素蒸気中での保存のために低温フリーザーに移した。凍結保存したNK細胞は、目に見える氷が全て融解するまで試料を穏やかに旋回させて、37°Cの水浴中で急速解凍することができる。細胞試料は、予め温めた培養培地で希釈することができる。この実施例は、NK細胞を保存及び凍結保存する別の方法を示す。ヒト胎盤灌流液及び臍帯血細胞から単離されたCD34造血幹細胞を、上記のプロトコルを用いて拡大し、NK細胞に分化させた。細胞を、HPP及び臍帯血から単離した直後に、又はNK細胞の最初の成長期の間に凍結保存した。細胞懸濁溶液は、デキストラン40とHSAを60デキストラン40vv、40HSAvvの比率で組み合わせることにより調製した。2×凍結溶液は、50デキストラン40vv、40HSAvv、10DMSOvvを用いて調製した。まず、DMSOをデキストラン40にゆっくりと添加し、よく混合した。その後、HSAの25溶液を混合しながら該溶液にゆっくりと添加した。得られた溶液をよく混合し、室温にした後、使用した。細胞数を推定し、細胞懸濁液として細胞懸濁溶液中15×106個になるよう規格化した。細胞懸濁液の容積を決定し、等容積の新たに調製した2×凍結溶液をゆっくりと添加し、混合した。凍結溶液中の最終的な細胞懸濁液容積を記録し、いくつかのバイアルに分配した。マイコプラズマ汚染を検出するために、取っておいた培養上清に対してMycoAlert検査を行なった。解凍後の生存率、細胞回復、及び細胞特徴を決定するために、留保しておいた1本のバイアルに対して解凍後試験を行なった。生存率アッセイ。実施例10又は11に見られるような様々な製剤中で凍結保存されたNK細胞を解凍した。細胞を2×106~3×107細胞mLの密度で凍結させた。解凍したNK細胞を、新鮮な細胞又は凍結前の細胞と比較して、解凍0日、3日、及び18日後に、Countess自動細胞カウンターを用いて、細胞生存率について評価した。簡潔に述べると、10μlの細胞試料を10μlのトリパンブルーと混合した。該細胞混合物をピペッティングして、Countessチャンバースライドに入れた。該スライドを装置に挿入し、細胞をカウントした。凍結解凍後細胞は、凍結保存製剤の違いによって、約80~90超の生存率の細胞生存率を示した。アポトーシスアッセイ。解凍したNK細胞を、解凍0日、3日、及び18日後に、BDAnnVPIアポトーシスアッセイキットを用いて、アポトーシスについても評価した。簡潔に述べると、細胞を1×冷PBSで2回洗浄し、1×結合バッファー、14MNaCl、25mMCaCl2。1×希釈液の場合、9部の蒸留水に対して1部の10×バッファーに再懸濁した。約100000個の細胞を含む100μLの細胞懸濁液をFACSチューブに移した。100μLの1×結合バッファー、5μLのAnnVFITC、及び5μLのPIPEを該チューブに添加した。その後、該チューブを軽くボルテックス処理し、暗所で15分間インキュベートした。その後、400μLの1×結合バッファーを添加した。試料を1時間以内に解析した。象限及びゲートを設定するために用いられた対照は、染色していない細胞、AnnVFITCのみで染色し、PIで染色していない細胞、及びPIのみで染色し、AnnVで染色していない細胞であった。アポトーシス細胞を、サイズ散乱プロット上で細胞としてゲートをかけた事象の集団のとして定量した。凍結解凍後細胞は、凍結保存製剤の違いによって、約5~25の死細胞後期アポトーシス細胞及び10~25の初期アポトーシス細胞を示した。全体として、製剤1、40HAS、製剤2、40HSA、製剤4CryoStorCS5、及び製剤5CS10は、他の製剤と比較して、より高い細胞生存率及びより少ないアポトーシス細胞を示した。この実施例は、プロセス内凍結保存細胞バンキングの評価を示す。HSAB又はFBSのいずれかを血清供給源として用い、Spanholtzらの文献e9221に記載されているような方法を用い、UCBCD34細胞を用いて、細胞培養を開始した。細胞濃度を決定し、調整し、必要に応じて培地を補充した。7日、9日、10日、又は14日で、約106~3×106個の細胞を細胞培養物から除去し、遠心分離し、凍結保存培地に再懸濁した。該細胞を速度制御フリーザーで凍結させ、凍結保存用の液相窒素保存場所に移した。約1mLの細胞の各バイアルを、1mL当たり106~107個の範囲の濃度で凍結保存した。残りの培養物は、終点まで持ち越され、新鮮と呼ばれた。表現型解析を細胞培養21日目、28日目、及び35日目に行なった。インビトロ機能性を培養35日で評価した。プロセス内凍結保存した培養物試料の解凍後性能を以下のように評価した。細胞バンクバイアルを37°Cの水浴中で急速解凍した。その後、該細胞をRPMIFBS培地で希釈し、遠心分離し、再懸濁し、培養培地に播種した。その後、培養条件の各々を、培養過程の開始から累算して35日まで持ち越した。解析を、その新鮮対応物と同じやり方で行なった。9日、10日、及び14日のプロセス内凍結保存試料は全て、プロセス内時点又は細胞濃度にかかわらず、優れた解凍後生存率をもたらした。プロセス内バンキングは、培養終了時の収率損失に対して負の影響を及ぼさなかった。HSAB又はHSABのいずれかを血清供給源とした、解凍9日後又は解凍14日後のいずれかの条件と新鮮条件の間の最終的な細胞収率は、同程度である。212835日の時点での成熟途中のNK細胞の表現型プロファイルは、それぞれ、新鮮培養物と解凍後培養物の間で全く同等であることが分かった。表現型純度も同じく同等であることが分かった。特定のNK機能マーカーの発現は、測定間のばらつきのために若干異なっていた。K562細胞傷害性アッセイでは、解凍後914日の培養NK細胞は、プロセス内凍結保存していない培養NK細胞と比較して、約0~20より低い比K562溶解計測値を出すことが分かった。しかしながら、NK細胞傷害機能に関する表面マーカーの発現レベルが同時には低下しなかったこと考慮すると、ドナー及びアッセイ反復を追加して、その傾向を確認する必要があるであろう。全体として、培養914日でのプロセス内凍結保存は、プロセスの結果にごくわずかな影響しか及ぼさなかった。この実施例は、動物におけるNK細胞投与のための解凍後媒体の開発を示す。NK細胞の生存率、細胞傷害性、細胞回復、及び凝集塊形成に対する注射媒体及び細胞密度の効果を試験した。生存率はトリパンブルー染色により評価し細胞傷害性はFACSにより評価し、凝集塊形成は顕微鏡アッセイにより評価した。結果を、様々なタイプの注射媒体及び細胞密度について表9~12に示す。これらの結果は、プラズマライト1HSA注射媒体が、PBS1FBS注射媒体よりも良好な生存率及び細胞傷害性を有するNK細胞を維持することを示した。また、細胞傷害性は、細胞を注射媒体に懸濁した後、時間とともに減少した。細胞をプラズマライト1HSAに懸濁した場合、生存率及び細胞傷害性に対する細胞密度効果は観察されなかった。また、NK細胞は、1時間後に、PBS1FBS媒体又はプラズマライト1HSA媒体中で沈殿したが細胞は、凝集しないようであった。最後に、凍結解凍プロセスから、細胞回復及び生存率の明らかな損失は観察されなかった。NK細胞の生存率、細胞傷害性、細胞回復、及び凝集塊形成に対する様々なHSA濃度の効果も試験した。実施例19から同じ方法を利用した。結果を、様々なタイプの注射媒体及び細胞密度について表14~16に示す。これらの結果は、生存率が、試験した3つ全ての注射媒体で、解凍後4時間にわたって十分に維持されたことを示す。また、細胞傷害性は、3つ全ての注射媒体で時間とともに減少した。しかしながら、低下のレベルは、より高濃度のHSAでより小さかったのに対し、プラズマライト5HSAは最も高い細胞傷害性を維持した。NK細胞が3つ全ての注射媒体中で凝集しないことも観察された。全体として、プラズマライトは、PBSよりも良好な注射媒体候補であるように思われる。この実施例は、IL2の非存在下でのNK細胞の培養を示す。細胞培養を実施例11に記載の二段階プロセスで行なった。第一の培地中の5つの異なる濃度0、200、500、1000、2000UmLのIL2を試験した。結果は、培養下の発生途中のNK細胞が、成長時にIL2に応答しないようであったことを示す。NK細胞の純度は、IL2に依存しないようでありNK細胞は、IL2の非存在下でCD56CD3表現型に分化する。インビトロでのNK細胞発生には、IL7とIL15とSCFの組合せで十分であるように思われた。等価物本発明は、本明細書に記載の具体的な実施態様によって範囲が限定されるべきではない。実際、記載された変更に加えて、本発明の様々な変更が、上の説明及び添付の図面から当業者に明白となるであろう。そのような変更は、添付の特許請求の範囲内に含まれることが意図される。本明細書で引用された全ての参考文献は、各々の個々の刊行物、特許、又は特許出願が、あらゆる目的のために、その全体として引用により具体的かつ個別に組み込まれることが示される場合と同じ程度に、あらゆる目的のために、その全体として引用により本明細書中に組み込まれる。任意の刊行物の引用は、出願日前のその開示を目的としたものであり、本発明が先行発明を理由としてそのような刊行物に先行する資格がないという承認と解釈されるべきではない。