"下記の工程を含む、水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造方法a第1溶媒にフラーレンを分散させて分散物を取得する工程、b前記分散物に触媒剤及び末端にヒドロキシ基を含有するリガンドを混合して混合物を取得する工程、及びc前記混合物を精製して蛍光フラーレン誘導体を製造する工程。前記第1溶媒は、トルエン、ベンゼン、シクロヘキサン、ヘプタン、イソオクタン及びこれらの混合物からなる群から選択される請求項1に記載の水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造方法。前記フラーレンは、炭素数が60~200であるフラーレン及びこれらの混合物からなる群から選択される請求項1に記載の水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造方法。前記末端にヒドロキシ基を含有するリガンドは、エチレングリコール基を含有することを特徴とする請求項1に記載の水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造方法。前記末端にヒドロキシ基を含有するリガンドは、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、テトラエチレングリコール、ヘクサエチレングリコール、分子量が200、300、400及び600であるポリエチレングリコール、エタノールアミン、ジエタノールアミン、2-ベンジルオキシエタノール、2-ブチルアミノエタノール、2-シクロヘキシルオキシエタノール、2-ジブチルアミノエタノール、2-ジイソプロピルアミノエタノール、2-ジエチルアミノエタノール、2-[2-ジメチルアミノエトキシ]エタノール、ジエチレングリコールベンジルエーテル、ジエチレングリコールエチルエーテル、ジエチレングリコールヘキシルエーテル、ジエチレングリコールブチルエーテル、ジエチレングリコールメチルエーテル、ジエチレングリコールモノブチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、2-2-エチルヘキシルオキシエタノール、2-3,4-ジメトキシフェニルエタノール、及びこれらの混合物からなる群より選択される請求項1に記載の水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造方法。前記触媒剤は、水酸化リチウムLiOH、水酸化ナトリウムNaOH、水酸化カリウムKOH、水酸化カルシウム[CaOH2]、水酸化マグネシウム[MgOH2]、水酸化バリウム、水酸化カドミウム、水酸化セシウム、水酸化コバルト、水酸化銅、水酸化ニッケル、水酸化ルビジウム、水酸化アンモニウム、水酸化テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、水酸化テトラブチルアンモニウム、水酸化テトラヘキシルアンモニウム、水酸化ベンジルトリメチルアンモニウム、水酸化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、水酸化ジエチルジメチルアンモニウム及びこれらの混合物からなる群から選択される請求項1に記載の水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造方法。前記工程aの分散物は、フラーレンの濃度が0.0001mg/mL~10mg/mLである請求項1に記載の水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造方法。前記工程bで末端にヒドロキシ基を含有するリガンド及び触媒剤は、前記分散物100重量部に対して、各々0.0001~100重量部及び0.0001~100重量部が使用される請求項1に記載の水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造方法。前記工程cの精製は、前記混合物に第2溶媒を添加した後、蛍光フラーレン誘導体を沈殿させて分離することによって行われる請求項1に記載の水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造方法。前記第2溶媒は、無極性溶媒、極性溶媒、及びこれらの混合溶媒からなる群から選択される請求項9に記載の水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造方法。フラーレンとリガンドが-C-O-に結合している水溶性蛍光フラーレン誘導体。前記水溶性蛍光フラーレン誘導体は、蛍光量子収率が2×10-3~5×10-3である請求項11に記載の水溶性蛍光フラーレン誘導体。前記水溶性蛍光フラーレン誘導体の水に対する溶解度は、25°Cで100mg/mL以下である請求項11に記載の水溶性蛍光フラーレン誘導体。前記リガンドは、末端にヒドロキシ基を含有する請求項11に記載の水溶性蛍光フラーレン誘導体。前記フラーレンは、炭素数が60~200であるフラーレン及びこれらの混合物からなる群から選択される請求項11に記載の水溶性蛍光フラーレン誘導体。本発明の主な目的は、簡単な方法で生体適合性に優れて、親水性であり強い蛍光性を持つフラーレン誘導体を製造する方法及びその方法によって製造される水溶性蛍光フラーレン誘導体を提供することにある。前記のような目的を達成するために、本発明はa第1溶媒にフラーレンを分散させて分散物を取得する工程、b前記分散物に触媒剤及び末端にヒドロキシ基を含有するリガンドを混合して混合物を取得する工程、及びc前記混合物を精製して蛍光フラーレン誘導体を製造する工程を含む、水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造方法及び前記方法によって製造され、末端にヒドロキシ基を含有するリガンドを含む水溶性蛍光フラーレン誘導体を提供する。さらに本発明は、フラーレンとリガンドが-C-O-に結合していることを特徴とする水溶性蛍光フラーレン誘導体を提供する。本発明によると、触媒剤を利用して、混合物を反応させて、蛍光性が強い水溶性フラーレン誘導体を簡単な方法で容易に製造できる。本発明の他の特徴及び具現例は、以下の詳細な説明及び添付された特許請求の範囲からより一層明白になる。他の方式で定義されない限り、本明細書において使用されたあらゆる技術的科学的用語は、本発明が属する技術分野に熟練した専門家によって通常理解されるものと同じ意味を有する。通常、本明細書において使用された命名法及び以下で詳述する実験方法は、本技術分野において周知であり、しかも汎用されるものである。本発明の詳細な説明などにおいて使用される主な用語の定義は、下記の通りである。本明細書において、蛍光フラーレン誘導体とは、光の刺激によって発光する現象を示すフラーレン誘導体をいう。一観点において、本発明はa第1溶媒にフラーレンを分散させて分散物を取得する工程、b前記分散物に触媒剤及び末端にヒドロキシ基を含有するリガンドを混合して混合物を取得する工程、及びc前記混合物を精製して蛍光フラーレン誘導体を製造する工程を含む、水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造方法に関する。より具体的には、本発明に係る水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造方法は、図1に示したように、第1溶媒にフラーレンと末端にヒドロキシ基を含有するリガンドを混合した後、強塩基の触媒剤を利用して、前記混合物を反応させることによって簡単な方法で強い蛍光性を持つ水溶性フラーレン誘導体を製造できるだけでなく、フラーレンの量と触媒剤の種類によって蛍光の強さ及び波長を容易に調節することができる。さらに、前記製造方法によって製造された水溶性蛍光フラーレン誘導体は、生体親和的なリガンドを含有することによって、生物学的蛍光顔料として有用に用いられ、製造される蛍光フラーレン誘導体は、蛍光性を持つと同時に、溶媒に対する溶解度が優れており、生物学的分野、医薬分野、ナノ技術分野等に有用に用いられる。本発明において、フラーレンは、C60の他にC70、C80、C90等のフラーレンファミリー系統のフラーレンが用いられ、前記フラーレンファミリーは、純粋に炭素で形成されており、球形状の対称を成している分子を通称するものであり、一部炭素数が多いフラーレンは、完全対称を成せないこともあり、第1溶媒相にフラーレンが分散しているものが用いられる。前記第1溶媒は、フラーレンを分散させる役割を果たすもので、フラーレンを分散させられる溶媒であれば使用可能で、好ましくはトルエン、ベンゼン等の芳香族有機化合物とシクロヘキサン、ヘプタン、イソオクタン及びこれらの混合物からなる群から選択される。本発明に係る製造方法において、第1溶媒相にフラーレンを分散時、フラーレンの濃度が0.0001mg/mL~10mg/mLになるように分散させる。これは、フラーレンの濃度が0.0001mg/mL未満であると、蛍光の強さが低くて有用性がなく、フラーレンの濃度が10mg/mL超であれば、フラーレンの濃度が高くて触媒による反応性が劣る問題点が発生するからである。また、フラーレンの添加量による蛍光の強さ及び波長の調節は、フラーレンの添加量が多いほど最終取得物である蛍光フラーレンが長波長の蛍光を放出して、蛍光の強さも減少し、第1溶媒相にフラーレンの添加量が少ないほど、最終取得物の蛍光フラーレンが短波長の蛍光を放出し、蛍光の強さも増加することによって第1溶媒相のフラーレンの添加量を加減して蛍光の強さ及び波長を調節することができる。本発明において、末端にヒドロキシ基を含有するリガンドは、好ましくはエチレングリコール基を含有する化合物で、液体性物質であり、エチレングリコールの数は、1から数百まで含むものが用いられるが、必ずしもこれに限定されるのではなく、フラーレンが分散している第1溶媒との溶解度が高く、フラーレンを凝集させず、かつ片側または両側末端に1個以上のヒドロキシ基が含まれた化合物であれば、使用可能である。そこで、本発明に係る末端にヒドロキシ基を含有するリガンドは、好ましくはジエチレングリコールdiethyleneglycol、トリエチレングリコールtriethyleneglycol、テトラエチレングリコールtetraethyleneglycol、ヘクサエチレングリコールhexaethyleneglycol、分子量が200、300、400及び600であるポリエチレングリコールpolyethyleneglycol、エタノールアミンethanolamine、ジエタノールアミンdiethanolamine、2-ベンジルオキシエタノール[2ethanol]、2-ブチルアミノエタノール[2ethanol]、2-シクロヘキシルオキシエタノール[2ethanol]、2-ジブチルアミノエタノール[2ethanol]、2-ジイソプロピルアミノエタノール[2ethanol]、2-ジエチルアミノエタノール[2ethanol]、2-[2-ジメチルアミノエトキシ]エタノール{22ethoxyethanol}、ジエチレングリコールベンジルエーテル[dibenzylether]、ジエチレングリコールエチルエーテル[diethylether]、ジエチレングリコールヘキシルエーテル[dihexylether]、ジエチレングリコールブチルエーテルdiethyleneglycolbutylether、ジエチレングリコールメチルエーテルdiethyleneglycolmethylether、ジエチレングリコールモノブチルエーテルdiethyleneglycolmonobutylether、ジエチレングリコールモノエチルエーテルdiethyleneglycolmonoethylether、ジエチレングリコールモノメチルエーテルdiethyleneglycolmonomethylether、2-2-エチルヘキシルオキシエタノール[2ethanol]、2-3,4-ジメトキシフェニルエタノール[1ethanol]、及びこれらの混合物からなる群より選択される。本発明において、触媒剤は、前記末端にヒドロキシ基を含有するリガンドと第1溶媒相に分散しているフラーレンとの化学的結合を誘導する役割を果たすもので、強塩基であれば制限なく使用可能であるが、好ましくは水酸化リチウムlithiumhydroxide、LiOH、水酸化ナトリウムsodiumhydroxide、NaOH、水酸化カリウムpotassiumhydroxide、KOH、水酸化カルシウム[calciumhydroxide、CaOH2]、水酸化マグネシウム[magnesiumhydroxide、MgOH2]、水酸化バリウムbariumhydroxide、水酸化カドミウムcadminumhydroxide、水酸化セシウムcesiumhydroxide、水酸化コバルトcobalthydroxide、水酸化銅copperhydroxide、水酸化ニッケルnickelhydroxide、水酸化ルビジウムrubidiumhydroxide、水酸化アンモニウムammoniumhydroxide、水酸化テトラメチルアンモニウムtetramethylammoniumhydroxide、水酸化テトラエチルアンモニウムtetraethylammoniumhydroxide、水酸化テトラブチルアンモニウムtetrabutylammoniumhydroxide、水酸化テトラヘキシルアンモニウムtetrahexylammoniumhydroxide、水酸化ベンジルトリメチルアンモニウムbenzyltrimethylammoniumhydroxide、水酸化ヘキサデシルトリメチルアンモニウムhexadecyltrimethylammoniumhydroxide、水酸化ジエチルジメチルアンモニウムdiethyldimethylammoniumhydroxide及びこれらの混合物からなる群から選択される。本発明に係る製造方法において、第1溶媒にフラーレンが分散した分散物に、末端にヒドロキシ基を含有するリガンド及び触媒剤の混合比率は、前記第1溶媒にフラーレンが分散した分散物100重量部に対して、末端にヒドロキシ基を含有するリガンド0.0001~100重量部及び触媒剤0.0001~100重量部である。これは、第1溶媒にフラーレンが分散した分散物100重量部に対して、末端にヒドロキシ基を含有するリガンド0.0001重量部未満で混合される場合、フラーレンと結合するリガンドの含有量が低く、溶媒に対する溶解度を提供できず、100重量部を超える場合には未反応のリガンドが増加する恐れがある。また、第1溶媒にフラーレンが分散した分散物100重量部に対して、触媒剤が0.0001重量部未満で混合される場合、フラーレンとリガンドとの反応を誘導できず、100重量部を超える場合には触媒剤が不安定な反応を誘導する恐れがある。また、本発明において、触媒剤は、触媒剤の種類に応じて蛍光波長を調節することができる。触媒剤の反応性に応じて、リガンドとフラーレンの結合を調節できるが、具体的には反応性が強いほど長波長の蛍光が現れ、反応性が落ちるほど短波長の蛍光が現れる。前述のように製造された混合物は、無極性溶媒、極性溶媒、及びこれらの混合溶媒からなる群から選択される第2溶媒を利用して、最終取得物である水溶性蛍光フラーレン誘導体を沈殿させて、前記水溶性蛍光フラーレン誘導体を未反応のフラーレン及び末端にヒドロキシ基を含有するリガンドから分離する精製過程を経る。前記第2溶媒は、トルエン、ベンゼン、ヘキサンといった無極性溶媒、エタノール、メタノールといった極性溶媒、及びこれらの混合溶媒からなる群から選択され、好ましくはエチルアセテート、エタノールのようなアルコールが用いられる。本発明に係る水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造方法は、簡単な方法で容易に強い蛍光性を持つフラーレン誘導体を製造できるだけでなく、フラーレンの量と触媒剤の種類によって蛍光の強さ及び波長を容易に調節することができる。他の観点において、本発明は、フラーレンとリガンドが-C-O-に結合していることを特徴とする水溶性蛍光フラーレン誘導体に関する。本発明に係る水溶性蛍光フラーレン誘導体は、フラーレンが末端にヒドロキシ基を含有するリガンドと触媒反応する過程でフラーレンの炭素共有結合が崩れ、酸素原子と結合しながらフラーレンとリガンドが-C-O-で結合することになる。そこで、本発明の蛍光フラーレン誘導体は、フラーレンが自主的に持つ紫外線吸収波長220、260及び350nmは消えて、紫外線領域全般にわたって200~400nm強く光を吸収すると同時に350nmで照射した場合、530nmで強い蛍光を放出するだけでなく、優秀な親水性及び水分散性を持つ。本発明に係る蛍光フラーレン誘導体の水に対する溶解度は、室温25°Cで100mg/mL以下であり、好ましくは0.1mg/mL~20mg/mLであり、一般のC60フラーレンが1.3×10-11mg/mLSivaramanNetalJOrgChem19925760776079の溶解度を持つのに対して、本発明で製造されたフラーレン誘導体は、水に対する溶解度が非常に高いことが分かる。また、本発明に係る蛍光フラーレン誘導体の蛍光の強さは、500~550nmの波長領域で200~1000の蛍光の強さを持つものであり、蛍光量子収率fluorescencequantumyieldが2×10-3~5×10-3で、一般のフラーレンの蛍光量子収率1×10-4JAmChemSoc1156378JAmChemSoc1169763と比べて約20~50倍程度高いことが分かった。従って、本発明に係る蛍光フラーレン誘導体は、バイオイメージングのような生物学的分野、医薬分野、ナノ技術分野等に有用である。以下、本発明を実施例を挙げて詳述する。これらの実施例は単に本発明をより具体的に説明するためのものであり、本発明の範囲がこれらの実施例に制限されないことは当分野において通常の知識を有する者にとって自明である。実施例1:C60フラーレンの水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造C60フラーレンMERCo.を2mg/mLになるようにトルエンに分散させ、前記分散物10mLをフラーレンの最終濃度が0.12、0.25、0.5及び1.0mg/mLになるようにテトラエチレングリコールTEGに1:1で各々添加させて撹はんさせた後、前記撹はんされた混合物に水酸化リチウムLiOHを75mMになるよう32mgを溶液に添加して常温で20時間撹はんさせた。このように撹はんされた混合物中ピンク色を帯びたフラーレンがゆっくり茶色に変わったことを確認し、反応が完了するとエチレンアセテートを前記混合物に添加して蛍光フラーレン誘導体の沈殿を誘導させた後、遠心分離を利用して蛍光フラーレン誘導体を分離した。前記蛍光フラーレン誘導体が分離した混合物にエタノールを少量添加して、それにエチレンアセテートを過量添加して沈殿を誘導、分離過程をもう二回進行して、最終的に濃い茶色のC60フラーレンの水溶性蛍光フラーレン誘導体を各々製造した。実施例2:C70フラーレンの水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造実施例1と同様の方法で製造して、C70フラーレンMERCo.の最終濃度が1mg/mLになるようテトラエチレングリコールTEGと混合されたC70フラーレンを用いてC70フラーレン水溶性蛍光フラーレン誘導体を製造した。実施例3:リガンドでジエチレングリコールを用いた水溶性蛍光フラーレン誘導体の製造実施例1と同様の方法で製造して、C60フラーレンの最終濃度が1mg/mLになるようジエチレングリコールと混合されたC60フラーレンを用いて水溶性蛍光フラーレン誘導体を製造した。実験例1:C60フラーレンの水溶性蛍光フラーレン誘導体の特性評価実施例1で製造された水溶性蛍光フラーレン誘導体中C60フラーレンの最終濃度が1mg/mLになるようテトラエチレングリコールTEGと混合されたC60フラーレンを用いて製造された水溶性蛍光フラーレン誘導体を電子顕微鏡SEM、FEI、Sirion、Netherlandで観察した結果、図2に示したように、平均径が10nmであることが分かった。また、図3に示したように、赤外線スペクトルBrukerOpticsIF66で水溶性蛍光フラーレン誘導体の化学構造を測定した結果、C-O-C伸縮振動stretchingvibrationを示す867cm-1とC-O伸縮振動を示す1090cm-1及びO-H伸縮振動を示す3426cm-1で吸収スペクトルが現れたため、芳香族炭素aromaticcarbonに酸素oxygenが結合したことが分かり、図4に示したように、NMR磁気共鳴スペクトルでフラーレン誘導体を分析した結果、エチレングリコールのアルキル構造を示す23.36と、芳香族炭素と酸素の結合構造を示す170.38と、180.52で信号を示しており、赤外線スペクトルの結果と類似することが分かった。実験例2:C60フラーレンの水溶性蛍光フラーレン誘導体の蛍光性測定実施例1で製造されたC60フラーレンの水溶性蛍光フラーレン誘導体を水に分散させた後、UVハンドランプUV.LF104L、UVITEC365nm波長の紫外線を照射して蛍光フラーレン誘導体の蛍光性を測定した。その結果、図5に示したように、可視光線で茶色または、黄色を帯びるC60フラーレンの蛍光フラーレン誘導体は、紫外線照射時添加されたフラーレンの量が多いほど青色から橙色を帯びることから、フラーレンの添加濃度が高いほど長波長の蛍光を放出することが分かり、フラーレンの添加濃度が低いほど短波長の蛍光を放出することが分かった。実施例1で製造されたC60フラーレンの水溶性蛍光フラーレン誘導体の吸収スペクトルと蛍光スペクトルを測定した結果、本発明に係る水溶性蛍光フラーレン誘導体は、短波長の紫外線で光を強く吸収することが示され図6a、350nmの紫外線を照射した場合には、フラーレンの添加濃度が高いほど500nmから550nmまでの蛍光を放出することが分かった図6b。また、本発明に係る水溶性蛍光フラーレン誘導体の蛍光量子収率を測定するために、キニーネ硫酸塩quininesulfate、QS、55×10-2標準物質を用いて比較して測定、計算した。まず、350nm領域で吸光度が0.1以下の実施例1の水溶性蛍光フラーレン誘導体とキニーネ硫酸塩を濃度毎に五つのサンプルを準備して、各濃度で350nmで励起させた後、400~700nmで蛍光スペクトルを測定した。これと同様の方法で標準物質であるキニーネ硫酸塩の蛍光スペクトルを測定して、前記水溶性蛍光フラーレン誘導体と比較して蛍光量子収率を計算した。その結果、本発明に係る水溶性蛍光フラーレン誘導体の蛍光量子収率は、2×10-3であることから、一般のフラーレンの蛍光量子収率1×10-4JAmChemSoc1156378JAmChemSoc1169763により約20倍高いことが分かった。一方、実施例1と同様の方法で水溶性蛍光フラーレン誘導体を製造し、C60フラーレンの最終濃度が1mg/mLになるようテトラエチレングリコールTEGと混合されたC60フラーレンに触媒剤の種類をLiOH、NaOH及びKOHと各々異なるように添加させて製造された水溶性蛍光フラーレン誘導体の蛍光性を測定した。その結果、図7に示したように、触媒の種類によって蛍光の波長が異なるように現れることが分かった。実験例3:C70フラーレンの水溶性蛍光フラーレン誘導体蛍光性測定実施例2で製造されたC70フラーレンの水溶性蛍光フラーレン誘導体蛍光スペクトルを測定した結果、図8に示したようにC70フラーレンを用いた場合も、350nmの紫外線を照射時540nmで800以上の蛍光の強さで光を放出することが示された。実験例4:ジエチレングリコールリガンドを水溶性蛍光フラーレン誘導体の蛍光性測定実施例3で製造されたC60フラーレンの水溶性蛍光フラーレン誘導体蛍光スペクトルを測定した結果、図9に示したようにC70フラーレンを用いた場合も350nmの紫外線を照射時540nmで250以上の蛍光の強さで光を放出することが示された。実験例5:水溶性蛍光フラーレン誘導体の水に対する溶解度測定蛍光フラーレン誘導体の分散性と関して、水に分散している蛍光フラーレン誘導体のゼータ電位zetapotentialをELS-ZOtska,Japanを利用して測定した。C60フラーレンMERCo.の最終濃度が、1mg/mLになるように製造された実施例1の水溶性蛍光フラーレン誘導体を用いてゼータ電位を測定した結果、図10に示したように、約-20mVであることが分かった。これは、水溶性蛍光フラーレン誘導体が負電荷negativechargeを帯びて、極性である水によく分散することが分かり、さらに、濃度を異なるようにして水分散したフラーレン誘導体を観察した時、高濃度20mg/mL以下でかたまる現象はなく、黄色の溶液状態で存在することから、フラーレン誘導体の水分散性や溶解度が非常に高いことを確認することができた。実験例6:水溶性蛍光フラーレン誘導体の細胞イメージング及び細胞安全性測定本発明によって製造した水溶性蛍光フラーレン誘導体のバイオイメージング素材としての可能性を確認するために、実施例3で製造された水溶性蛍光フラーレン誘導体を癌細胞である子宮頸部癌細胞株HeLacell、KCLB10002、韓国細胞株銀行に浸透させて、蛍光顕微鏡写真で観察した。図11aは、水溶性蛍光フラーレン誘導体を含有している細胞の透過写真であり、図11bは、同じ位置で420nm光を励起させ525nmフィルターを利用して得た蛍光写真で、図11bを見ると、図11aと同じ細胞位置で緑色信号である水溶性蛍光フラーレン誘導体を確認することができる。また、水溶性蛍光フラーレン誘導体の細胞安全性を確認するために、MTTassayを実施した。対照群である水溶性蛍光フラーレンがない細胞と水溶性蛍光フラーレン誘導体の濃度を0.06~1.0mg/mLに変化させて、細胞に処理した後、細胞生存率cellviabilityを比較した。その結果、実施した水溶性蛍光フラーレン誘導体の全濃度で細胞安全性が対照群と似ていることから、約10μg/mL以下で細胞安全性を持つ量子点のような無機金属を基盤とするナノ粒子の細胞安全性より本発明に係る水溶性蛍光フラーレン誘導体の細胞安全性が高いことを確認した図11c。"