"プラスチック基質に非共有結合的に固定された結合ポリマーによって少なくとも部分的に直接被覆されたプラスチック基質を含む、分析物を検出するためのデバイスであって、前記結合ポリマーが、-X-CONH-Zの式の芳香族基式中、Xは、1~6個の炭素原子を含む、直鎖または分枝の置換または非置換アルキル鎖を表し、およびZはアリール官能基を表す;および-X-COOHの式のカルボン酸基式中、Xは、1~6個の炭素原子を含む、直鎖または分枝の置換または非置換アルキル鎖を表すを備えた多糖骨格を含む、デバイス。多糖骨格が、分子量が好ましくは15,000~100,000ダルトン、より特に好ましくは30,000~60,000ダルトンであるデキストラン骨格である、請求項1に記載のデバイス。多糖骨格が反応性F基をさらに備え、前記反応性基が、好ましくは-X-CONH-Z’の式である式中、Xは、1~6個の炭素原子を含む、直鎖または分枝の置換または非置換アルキル鎖を表し、Xは、より特に好ましくはCH2であり、およびZ’は、別の分子に結合することができる基を表す、請求項1または2に記載のデバイス。反応性F基が、-X-CONH-X’-N3の基;-X-CONH-NH2の基;式V:の基;式V’:の基;式中、XおよびX’は各々、1~6個の炭素原子を含む置換または非置換アルキル鎖を表し、Pepはペプチドフラグメントを表すから選択される、請求項3に記載のデバイス。XがCH2である;および/またはZが-CH2-Phもしくは-CH2-Ph-パラOHである、請求項1~4のいずれか一項に記載のデバイス。結合ポリマーが、多糖骨格の糖単位につき、0.4~0.8個の芳香族基、好ましくは0.4~0.6個の芳香族基、好ましくは0.45~0.6個の芳香族基;および/または多糖骨格の糖単位につき、0~0.8個の反応性基、好ましくは0~0.6個の反応性基;および/または多糖骨格の糖単位につき、合計で0.5~1.5個の芳香族基、カルボン酸基および反応性基、好ましくは合計で0.9~1.3個の芳香族基、カルボン酸基および反応性基を含む、請求項1~5のいずれか一項に記載のデバイス。基質が、ポリスチレン、ポリカーボネート、ポリメチルメタクリレートまたはポリプロピレンの基質、好ましくはポリスチレンの基質である、請求項1~6のいずれか一項に記載のデバイス。結合ポリマー上に固定化された捕捉エレメントを含み、前記捕捉エレメントが、好ましくは吸着によってまたは反応性F基への共有結合によって結合ポリマー上に固定化されている、請求項1~7のいずれか一項に記載のデバイス。捕捉エレメントが、修飾および/またはコンジュゲートされていてもよい、ポリペプチド;糖類、オリゴ糖類およびリポ多糖類;ウイルスまたはウイルスフラグメントおよび細胞から選択される、請求項8に記載のデバイス。複数の検出領域を含み、該検出領域が、好ましくは異なる捕捉エレメントを含む、請求項1~9のいずれか一項に記載のデバイス。基質が、不透明または透明なスライドガラス、マイクロタイタープレート、一群のビーズ、培養プレート、ストリップまたはスティックである、請求項1~10のいずれか一項に記載のデバイス。化学分子、生物学的分子、細胞または生体物質を検出するためおよび場合により定量化するための、請求項1~11のいずれか一項に記載の分析物を検出するためのデバイスの使用。プラスチック基質を提供すること;該基質を、結合ポリマーを含有する少なくとも1つの溶液と接触させることを含む、請求項1~11のいずれか一項に記載の分析物を検出するためのデバイスを製造する方法。基質を、捕捉エレメントを含有する1以上の溶液と接触させることをさらに含む、請求項13に記載の方法。プラスチック基質を提供すること;該基質を、捕捉エレメントに結合した結合ポリマーを含有する1またはそれ以上の溶液と接触させることを含む、請求項1~11のいずれか一項に記載の分析物を検出するためのデバイスを製造する方法。糖単位につき0.4~0.8個の-X-CONH-Zの式の芳香族基式中、Xは、1~6個の炭素原子を含む、直鎖または分枝の置換または非置換アルキル鎖を表し、およびZはアリール官能基を表す;-X-COOHの式のカルボン酸基式中、Xは、1~6個の炭素原子を含む、直鎖または分枝アルキル鎖を表すを備えた多糖骨格を含む、請求項1~11のいずれか一項に記載のデバイスにおいて使用することができる結合ポリマー。多糖骨格が、分子量が好ましくは15,000~100,000ダルトン、より特に好ましくは30,000~60,000ダルトンであるデキストラン骨格である、上記請求項に記載の結合ポリマー。多糖骨格が反応性F基をさらに備え、前記反応性基が、好ましくは-X-CONH-Z’である式中、Xは、1~6個の炭素原子を含む、直鎖または分枝の置換または非置換アルキル鎖を表し、Xは、より特に好ましくはCH2であり、およびZ’は、別の分子に結合することができる基を表す、請求項17または18に記載の結合ポリマー。反応性F基が、-X-CONH-X’-N3の基;-X-CONH-NH2の基;式V:の基;式V’:の基;式中、XおよびX’は各々、1~6個の炭素原子を含む置換または非置換アルキル鎖を表し、Pepはペプチドフラグメントを表すから選択される、請求項18に記載の結合ポリマー。Xおよび/もしくはX’がCH2である;ならびに/またはXおよび/もしくはX’がCH22である;ならびに/またはZが-CH2-Phもしくは-CH2-Ph-パラOHである、請求項16~19のいずれか一項に記載の結合ポリマー。多糖骨格の糖単位につき、0.4~0.6個の芳香族基、好ましくは0.45~0.6個の芳香族基;および/または多糖骨格の糖単位につき、0~0.8個の反応性基、好ましくは0~0.6個の反応性基;および/または多糖骨格の糖単位につき、合計で0.5~1.5個の芳香族基、カルボン酸基および反応性基、好ましくは合計で0.9~1.3個の芳香族基、カルボン酸基および反応性基を含む、請求項16~20のいずれか一項に記載の結合ポリマー。デキストラン多糖を提供すること;該多糖上にカルボン酸基をグラフトすること;芳香族基を提供するために、グラフトしたカルボン酸基の一部を修飾すること;場合により、反応性基を提供するためにカルボン酸基の一部を修飾することを含む、請求項16~21のいずれか一項に記載の結合ポリマーを製造する方法。そのため、製造が容易であり、堅固で使いやすい、および/または大量の分析物を並行して検出することを可能にする、分析物を検出するためのデバイスを提供することがまだ必要とされている。本発明は、第一に、プラスチック基質に非共有結合的に固定された結合ポリマーで少なくとも部分的に被覆されたプラスチック基質を含み、前記結合ポリマーが芳香族基とカルボン酸基を備えた多糖骨格を含む、分析物を検出するためのデバイスに関する。1つの実施形態によれば、多糖骨格は、分子量が好ましくは15,000~100,000、より特に好ましくは30,000~60,000であるデキストラン骨格である。1つの実施形態によれば、多糖骨格は反応性基をさらに備え、前記反応性基は、好ましくは-X-CONH-Z’式中、Xは、1~6個の炭素原子を含む、直鎖または分枝の置換または非置換アルキル鎖を表し、Xは、より特に好ましくはCH2であり、およびZ’は、別の分子に結合することができる基を表すの形態である。1つの実施形態によれば、カルボン酸基は、-X-COOH式中、Xは、1~6個の炭素原子を含む、直鎖または分枝の置換または非置換アルキル鎖を表し、Xは、好ましくはCH2であるの形態である。1つの実施形態によれば、芳香族基は、-X-CONH-Z式中、Xは、1~6個の炭素原子を含む、直鎖または分枝の置換または非置換アルキル鎖を表し、Xは、好ましくはCH2であり、およびZは、好ましくは6~30個の炭素原子を含む、アリール官能基を表し、Zは、好ましくは-CH2-Phまたは-CH2-Ph-パラOHなどの、置換されていてもよいベンジル官能基であるの形態である。1つの実施形態によれば、結合ポリマーは、-多糖骨格の糖単位につき、0.4~0.8個の芳香族基、好ましくは0.4~0.6個の芳香族基、好ましくは0.45~0.6個の芳香族基;および/または-多糖骨格の糖単位につき、0~0.8個の反応性基、好ましくは0~0.6個の反応性基、および/または-多糖骨格の糖単位につき、合計で0.5~1.5個の芳香族基、カルボン酸基および反応性基、好ましくは合計で0.9~1.3個の芳香族基、カルボン酸基および反応性基を含む。1つの実施形態によれば、基質は、ポリスチレン、ポリカーボネート、ポリメチルメタクリレートまたはポリプロピレンの基質、好ましくはポリスチレンの基質である。1つの実施形態によれば、デバイスは、結合ポリマー上に固定化された捕捉エレメントを含み、前記捕捉エレメントは、好ましくは、修飾および/またはコンジュゲートされていてもよいポリペプチド、糖類、オリゴ糖類またはリポ多糖類、ウイルスまたはウイルスフラグメントおよび細胞から選択され、捕捉エレメントは、好ましくは吸着によってまたは反応性F基への共有結合によって結合ポリマー上に固定化されている。1つの実施形態によれば、デバイスは複数の検出領域を含み、検出領域は、好ましくは異なる捕捉エレメントを含む。1つの実施形態によれば、基質は、不透明または透明なスライドガラス、マイクロタイタープレート、一群のビーズ、培養プレート、ストリップまたはスティックである。本発明はまた、芳香族基、カルボン酸基ならびに式V:式中、XおよびX’は各々、1~6個の炭素原子を含む置換または非置換アルキル鎖を表すの反応性基を備えた多糖骨格を含むポリマーに関する。本発明はまた、芳香族基、カルボン酸基ならびに式V’:式中、XおよびX’は各々、1~6個の炭素原子を含む置換または非置換アルキル鎖を表し、Pepはペプチドフラグメントを表すの反応性基を備えた多糖骨格を含むポリマーに関する。上記2つのポリマーの1つの実施形態によれば、XはCH2を表し、および/またはX’はCH22を表す。本発明はまた、式Vの反応性基を備えた上記ポリマーを製造する方法であって、-多糖を提供すること;-多糖上にカルボン酸基をグラフトすること;次に-芳香族基を提供するためにグラフトしたカルボン酸基の一部を修飾すること;続いてまたはその前に、-式Vの反応性基を提供するためにグラフトしたカルボン酸基の別の一部を修飾し、前記修飾が、多糖と式VII:式中、X’は、1~6個の炭素原子を含む置換または非置換アルキル鎖を表すの化合物との反応を含むことを含む方法に関する。本発明はまた、式V’の反応性基を備えた上記ポリマーを製造する方法であって、-上記式Vのポリマーを提供すること;および-このポリマーをポリペプチドH-Cys-Pep式中、Pepはペプチドフラグメントを表し、Cysはシステイン残基を表すと反応させることを含む方法に関する。上述したデバイスの1つの実施形態によれば、結合ポリマーは上記ポリマー式VまたはV’の反応性基を備えるである。本発明はまた、化学分子、生物学的分子、細胞または生体物質を検出するためおよび場合により定量化するための、上述した分析物を検出するためのデバイスの使用に関する。本発明はまた、-プラスチック基質を提供すること;-基質を、結合ポリマーを含有する少なくとも1つの溶液と接触させることを含む、上述した分析物を検出するためのデバイスを製造する方法に関する。1つの実施形態によれば、この方法は、基質を、捕捉エレメントを含有する1またはそれ以上の溶液と接触させることをさらに含む。本発明はまた、-プラスチック基質を提供すること;-基質を、捕捉エレメントに結合した結合ポリマーを含有する1またはそれ以上の溶液と接触させることを含む、上述した分析物を検出するためのデバイスを製造する方法に関する。本発明は、先行技術の欠点を克服することを可能にする。より詳細には、本発明は、製造が容易であり、堅固で使いやすい、分析物を検出するためのデバイスを提供する。1つの実施形態によれば、これらのデバイスは多数の分析物を並行して検出することを可能にする。特に、本発明は、親水性分子および/または低分子のみならず抗体またはタンパク質もを固定化することを可能にする。これは、多糖骨格を有する結合ポリマーによる表面の官能基化を通して達成される。結合ポリマーは、比較的疎水性の表面への結合ポリマーの非共有結合固定を促進する芳香族基、ならびに結合ポリマーと検出すべき分析物それら自体がしばしば負に荷電しているとの間の非特異的吸着の現象を制限するために結合ポリマーを負に荷電させるためのカルボン酸基を含む。本発明のデバイスにおけるプラスチック、特にポリスチレン表面の使用は、ガラスに関連する問題:ガラスの破損の危険性および付随する人員に対しての危険性、廃棄物処理に関連する費用、ガラスの化学的性質に関連する官能基化の不均一性、基質および特性づけの高いコスト、基質を分離することの難しさを回避することを可能にする。一部の特定の実施形態によれば、本発明はまた、以下に列挙する有利な特徴の1つまたは好ましくは数個を有する。-結合ポリマーは容易に大量に合成され、従来の分析技術NMR、pH測定、微量分析によって特性づけることができ、厳密な製造の管理を可能にする。-結合ポリマーは、簡単な吸着非共有結合によって、特に結合ポリマーの芳香族基によって表面上に固定される。これは、実施が特に簡単で、堅固であり、表面の物理化学的性質の多少の変化に対してあまり感受性ではない固定方法である。いずれの場合も、表面の性質との関連で結合ポリマー中の芳香族基の密度を調整することも可能である。-本発明は、現在広く入手可能で安価な基質:ポリスチレンでできたマイクロタイタープレート、ペトリ皿等から出発して実施することができる。-本発明はまた、バイオチップ、すなわちプラスチック、特にポリスチレン基質に基づく、多数の分析物の並行検出用の、分析物を検出するための小型デバイスを作製するためにも使用できる。-本発明による表面の官能基化は、特に捕捉エレメントが低分子である場合は、共有結合的に結合ポリマー上に存在する反応性基を介して、またはさもなければ非共有結合的に吸着によって、結合ポリマー上に捕捉エレメントまたはプローブを固定することによって実施される。したがって、本発明は適用の高い柔軟性を提供する。-官能基は、好都合にも水分または空気の存在下で安定であるそれらの特性を保存する。本発明を、以下の説明においてより詳細かつ非限定的に述べる。結合ポリマーおよびその製造本発明に関連して使用される結合ポリマーは、カルボン酸基以下Acと略記および芳香族基以下Arと略記を備えた多糖骨格以下Psと略記を含む。1つの実施形態によれば、多糖骨格はまた、上記カルボン酸基とは異なる反応性基以下Fと略記も備えることができる。多糖骨格により、O-オシド結合によって共に連結された、糖または糖単位の集合によって形成される構造体が意味される。この構造体は直鎖または分枝であり得る。構造体は、好ましくは80~600糖単位、より特に好ましくは150~350糖単位を含む。糖単位は、好ましくは環状である。それらはトリオース、テトラオース、ペントース、ヘキソースまたはヘプトースであり得、好ましくは、それらはヘキソースである。置換のレベルまたは置換度は、糖単位当たりの置換基Ac、ArまたはFの平均数である。置換度を決定する方法は実施例の章で述べる。Ac、ArおよびF基はすべて、好ましくは糖単位のヒドロキシル官能基の一部または全部にグラフトされる。多糖骨格の分子量は、好ましくは15,000~100,000、より特に好ましくは30,000~60,000で構成される。多糖骨格は、ホモ多糖型同一糖単位またはヘテロ多糖型異なる糖単位であり得る。ホモ多糖の例として、以下のものが挙げられる:グルコサンまたはグルカンα-グルカンまたはβ-グルカン、例えばデンプン、グリコーゲン、セルロース、デキストラン、プルラン、ヒアルロン酸、キチンまたはキトサンキチンの脱アセチル化形態;アラビナン、キシランおよびペクチン。ヘテロ多糖の例としては、D-ガラクトース、L-アラビノース、L-ラムノースおよびD-グルクロン酸を含む分枝構造体であるゴム、ならびにヘミセルロースが挙げられる。好ましい実施形態によれば、糖単位はグルコースまたはデキストロース単位である。好ましくは、多糖骨格はデキストラン分子であり、すなわち多糖骨格は、α-1,6グリコシド結合によって共に連結されたグルコースの主鎖を有し、α-1,2および/またはα-1,3および/またはα-1,4結合によって主鎖に結合された分枝を有していてもよい。デキストランは大量に入手可能であり、安価で、水に良好な溶解度を有する。説明の残りの部分では、デキストラン型の多糖骨格に言及するが、この説明は他の型の多糖骨格にも同様にあてはまることが理解される。反応性F基を備えていない本発明による結合ポリマーPsAcAr型のポリマーは、-多糖Ps非置換多糖骨格を提供すること;-この多糖上にAc基をグラフトしてPsAc型のポリマーを得ること;-ポリマーPsAcのAc基の一部を修飾してポリマーPsAcArを得ることによって入手できる。したがって、以下の一般式I:を参照すると、出発ポリマーPsは式I式中、R1、R2およびR3基はすべて水素原子を表すのポリマーであり;中間体ポリマーPsAcは、式I式中、一部のR1、R2およびR3基は水素原子を表し、その他のR1、R2およびR3基はカルボン酸官能基を担持する基を表すのポリマーであり;そして結合ポリマーPsAcArは、式I式中、一部のR1、R2およびR3基は水素原子を表し、他のR1、R2およびR3基はカルボン酸官能基を担持する基を表し、ならびにR1、R2およびR3基の3番目で最後の部分は芳香族核を担持する基を表すのポリマーである。カルボン酸Ac基は、-X-COOH式中、Xは、塩素、臭素、ケトン基、フッ素、アルコール基、カルボン酸基および芳香族基特にフェニルから選択される1またはそれ以上の置換基を備えていてもよい、1~6個の炭素原子を含む直鎖または分枝アルキル鎖を表すの形態である。好ましくは、この鎖は直鎖であり、置換されておらず、および/または多くても5個の炭素原子、多くても4個の炭素原子、多くても3個の炭素原子または多くても2個の炭素原子を含む。過度の反応性という起こり得る問題が回避される、好ましい実施形態によれば、Ac基は、-CH2-COOHメチルカルボン酸基の形態である。Ac基は、状況に応じてイオン化型対イオンと結合したCOO-で置換されたCOOHまたは塩化型例えばCOONaで置換されたCOOHであり得ることが理解される。好ましくは、Ac基はすべて同一であるが、異なるAc基のグラフト化を考慮することも可能である。芳香族Ar基は、-Y-Z式中、Yは結合基を表し、Zは、好ましくは6~30個の炭素原子、好ましくは6~24個の炭素原子、より特に好ましくは6~12個の炭素原子、およびハロゲン、-OH、-NH2、-NO2、-OR’、-COOR’、-CONHR’式中、R’は、1~6個の炭素原子を有するアルキル基であるから選択される1またはそれ以上の置換基を含むアリール官能基を表すの形態である。Zは単環式または多環式であり得、複素環式であってもよい。Zは、好ましくはベンゼン誘導体であり、特にフェニル、ベンジルまたはフェノール基である。Yは、好ましくは-X-CONH-式中、Xは、Ac基に関して上記で与えたのと同じ意味を有するの形態のアミド基である。好ましい実施形態によれば、Ar基は、-CH2-CONH-CH2-Ph基式中、Phはフェニル基であるまたは-CH2-CONH-CH2-Ph-パラOH基である。好ましくは、Ar基はすべて同一であるが、異なるAr基のグラフト化を考慮することも可能である。多糖Ps上にAc基をグラフトしてポリマーPsAcを得る段階は、多糖Psを、ハロゲン官能基、好ましくは塩素官能基を担持するカルボン酸化合物と反応させることによって実施できる。例えば、-CH2-COOH形態の好ましいAr基のグラフト化は、多糖Psをモノクロロ酢酸と反応させることによって得られ得る。好ましくは、反応はイソプロパノールの存在下で実施される。ポリマーPsAcのAc基の一部を修飾してポリマーPsAcArを得る段階は、ポリマーPsAcをR-Z型式中、Zは上記と同じ意味を有し、およびRは、カルボン酸官能基と反応性の官能基であるの化合物と反応させることによって実施できる。好ましくは、Rは、Ac基とアミド結合を形成することができる、アミン官能基である。例えば、-CH2-CONH-CH2-Ph型の好ましいAr基は、多糖PsAcをベンジルアミンと反応させることによって入手できる。さらなる例として、-CH2-CONH-CH2-Ph-パラOH型の好ましいAr基は、多糖PsAcをパラヒドロキシベンジルアミンと反応させることによって入手できる。好ましくは、反応は1-シクロヘキシル-3-2-モルホリノエチルカルボジイミドの存在下で実施される。反応性F基を備えた本発明による結合ポリマーPsAcArF型のポリマーは、PsAc型のポリマー上記で得られたようなから出発して、Ac基の一部を、一方ではF基におよび他方ではAr基に修飾することによって入手できる。これらの2つの修飾段階は任意の順序で実施することができる。言い換えると、最初にPsAcAr型のポリマーをポリマーPsAcから生成することができ上述したように、次にPsAcAr型のこのポリマーを修飾してPsAcArF型のポリマーを得ることができる。また、最初にポリマーPsAcからPsAcF型のポリマーを生成し、次にPsAcF型のこのポリマーを修飾してPsAcArF型のポリマーを得ることも可能であるこの2番目の修飾のために使用される方法は、PsAc型のポリマーをPsAcAr型のポリマーに修飾するために使用される方法と同じである。これらの様々な戦略の利点は、より高レベルのAr基またはより高レベルのF基のいずれが必要とされるかに応じて置換度を調節できることである。以下の一般式I:を参照すると、ポリマーPsAcFは、式I式中、一部のR1、R2およびR3基は水素原子を表し、他のR1、R2およびR3基はカルボン酸基を表し、ならびにR1、R2およびR3基の3番目で最後の部分は反応性基カルボン酸基とは異なるを表すのポリマーであり;そしてポリマーPsAcArFは、式I式中、一部のR1、R2およびR3基は水素原子を表し、他のR1、R2およびR3基はカルボン酸基を表し、さらなるR1、R2およびR3基は芳香族基を表し、ならびにR1、R2およびR3基の4番目で最後の部分は反応性基カルボン酸基とは異なるを表すのポリマーである。反応性F基は、-Y-Z’式中、Yは結合基上記と同じ意味を表し、およびZ’は、以下でより詳細に述べる、捕捉エレメントに結合することができる、特に共有結合することができる基を表すの形態である。好ましい実施形態によれば、Z’基はポリペプチドと共有結合を形成することができる。Yは、好ましくは-X-CONH-式中、Xは、Ac基に関して上記で与えたのと同じ意味を有するおよびXは、好ましくはCH2であるの形態のアミド基である。1番目の好ましい実施形態によれば、Z’基はアジド基特にアルキルアジドであり、およびF基は、好ましくは-X-CONH-X’-N3式中、XおよびX’は各々、1~6個の炭素原子を含む置換または非置換アルキル鎖を表すの形態の基であり、F基は、したがって、例えば-CH2-CONH-CH23-N3基であり得る。そのような基は、中間体基として特に有用であり、例えばトリアゾール型の基を得ることを可能にする以下の3番目の実施形態参照。それらはまた、特定の捕捉エレメントに結合することができる。2番目の好ましい実施形態によれば、Z’基はヒドラジド基であり、およびF基は、好ましくは-X-CONH-NH2式中、Xは、1~6個の炭素原子を含む置換または非置換アルキル鎖を表すの形態の基であり、F基は、したがって、例えば-CH2-CONH-NH2基であり得る。これらのF基は、例えばペプチドのアルデヒド官能基に結合することができる。それらはまた、ポリペプチドの吸着非共有結合固定化を促進することができる。3番目の好ましい実施形態によれば、Z’基は、好ましくは1またはそれ以上の、1~6個の炭素原子を含む直鎖または分枝の置換または非置換アルキル鎖で置換された、トリアゾール基であり、およびF基は、したがって、例えば式II:式中、R4は、式III:の基を表すの基であり得る。この型のF基は、一部の特定の捕捉エレメントに結合することができる。上記式II式中、R4は-CH23OHを表すのF基を実施例において陰性対照として使用する。4番目の好ましい実施形態によれば、Z’基は、以下の式IV:式中、X’は、ハロゲン置換基特にClまたはBrを備えていてもよい、1~6個の炭素原子を含む直鎖または分枝アルキル鎖を表すである。好ましくは、X’はCH22である。この4番目の実施形態によれば、F基は、したがって、好ましくは以下の式V:式中、XおよびX’は上記で与えた意味を有するである。特に好ましい実施形態によれば、XはCH2を表し、およびX’はCH22を表す。この4番目の実施形態に対応するF基は、β-アミノチオールまたはγ-アミノチオール官能基を担持する分子、例えばN末端位置にシステインまたはホモシステインを有するポリペプチドと反応して、アミド結合を形成することができる。したがって、この4番目の実施形態に対応する結合ポリマーは、N末端位置にシステインまたはホモシステインを有するポリペプチドによって形成される捕捉エレメントに結合することができる。したがって、システインの場合は、捕捉エレメントに結合したF基が、C末端官能基例えばCOOHまたはCONH2を備えた、式V’:式中、XおよびX’は上記の意味を有し、およびPepはペプチドフラグメントを表す、すなわちポリペプチドの一部は少なくとも1個のアミノ酸残基好ましくは数個のアミノ酸残基の連続を含むである、結合ポリマーが得られる。F基はすべて同一であり得るか、またはさもなければ異なるF基のグラフト化を考慮することができる。ポリマーPsAcそれぞれポリマーPsAcArののAc基の一部を修飾してポリマーPsAcFそれぞれポリマーPsAcArFのを得る段階は、ポリマーPsAcそれぞれポリマーPsAcArのをR-Z’型式中、Z’は上記と同じ意味を有し、およびRは、カルボン酸官能基と反応性の官能基であるの化合物と反応させることによって実施できる。好ましくは、Rは、Ac基とアミド結合を形成することができる、アミン官能基である。最初に中間体反応性F’基をグラフトし、次に別途の反応段階後にF’基を化学修飾してF基を生成することにより、特定のF基をグラフトすることができる。例えば、-CH2-CONH-NH2型のF基は、多糖PsAcまたはポリマーPsAcArをヒドラジンと好ましくは1-シクロヘキシル-3-2-モルホリノエチルカルボジイミドの存在下で反応させることによって入手できる。-CH2-CONH-CH23-N3型のF基は、多糖PsAcまたはポリマーPsAcArを3-アジドプロピルアンモニウム塩酸塩と好ましくは1-シクロヘキシル-3-2-モルホリノエチルカルボジイミドの存在下で反応させることによって入手できる。上記式IIIのF基は、-CH2-CONH-CH23-N3型の反応性基を備えるポリマーPsAcFまたはポリマーPsAcArFを、式VI:の化合物と好ましくは銅IIイオンおよびアスコルビン酸ナトリウムの存在下で反応させることによって入手できる。この場合は、F基がすべて上記式IIであるか、またはF基の一部が上記式IIであり、およびF基の一部が-CH2-CONH-CH23-N3型である式VIの化合物での不完全な置換の場合、ポリマーPsAcFまたはポリマーPsAcArFが得られる。上記式VのF基は、多糖PsAcまたはポリマーPsAcArを、式VII:式中、X’は上記で与えた意味を有するの化合物と好ましくは1-シクロヘキシル-3-2-モルホリノエチルカルボジイミドの存在下で反応させることによって入手できる。式VIIの化合物は、以下で述べる実施例で指示するように製造することができる。一般に、Ac、ArおよびFによる置換度は、一方では基のグラフト化を実施する順序Ac、次にAr、次にFまたはさもなければAc、次にF、次にArに依存して、他方ではグラフト化の条件、特に多糖と問題の基をグラフト化する役割を担う試薬との間のモル比を変化させることによって調整できる。デキストランから誘導され、スルフェート基またはスルホネート基を反応性F基として備える、上記に示した結合ポリマーの一般式に対応するポリマー、ならびに治療目的のためのこれらのポリマーの使用は、国際公開第99/29734号、同第00/76452号、同第00/76562号、同第01/91742号およびフランス特許第2891149号の文書に記載されている。好ましくは、本発明の結合ポリマーは、硫酸官能基またはスルホン酸官能基を有さない。実際に、そのような官能基は非常に多数のタンパク質と相互作用することができ、これは検出にとって有害である。さらに、硫酸官能基またはスルホン酸官能基が存在しないことは、捕捉エレメント自体が硫酸化される場合特にオリゴ糖類、特に有用である。表面の官能基化基質の表面を官能基化するために、本発明による結合ポリマーPsAcArまたはPsAcArF型を前記基質上に沈着させることができる。基質は、好ましくはポリスチレン、ポリカーボネート、ポリメチルメタクリレートおよびポリプロピレンから選択される、プラスチック一般に高温および加圧下で成形される、ポリマー性の固体材料である。したがって、本発明は、例えば透明または不透明なプラスチックスライドガラス、またはさもなければポリスチレンマイクロタイタープレート例えば96穴、ビーズ磁気もしくは非磁気、ポリスチレン培養プレート例えば96穴、ポリスチレンストリップもしくはスティックの表面を官能基化することを可能にする。官能基化は一般に2つの段階を含む:基質の表面上に結合ポリマーを固定する第一段階および結合ポリマー上に捕捉エレメントを固定する第二段階。あるいは、結合ポリマーを捕捉エレメントに結合した後、結合ポリマーを基質の表面に固定することができる特に結合ポリマーと捕捉エレメントとの間の結合が共有結合型である場合。基質の表面への結合ポリマーの固定は、特に平らな表面に関しては、処理すべき表面を、ポリマーPsAcArまたはPsAcArFを含有する溶液に液浸することによって実施する。液体を含有することができる成形された表面例えば96穴滴定プレートについては、単純な充填によって官能基化を実施できる。その後に洗浄および乾燥が一般に考慮される。一般に、ポリマー溶液は0.1~50μg/mL、好ましくは1~10μg/mLの濃度である。特定の理論に拘束されることを望むものではないが、発明人は、結合ポリマーは特にAr基を介して基質の表面に非共有結合的に固定吸着されると考える。結合ポリマー上に固定される捕捉エレメントは、修飾および/またはコンジュゲートされていてもよい、ポリペプチド、糖類、オリゴ糖類またはリポ多糖類、ウイルスもしくはウイルスフラグメントまたはさらには細胞であり得る。例えば、捕捉エレメントは抗体であり得る。本出願に関連して、ポリペプチドという用語は、ペプチド結合によって連結されたアミノ酸残基2またはそれ以上の数の任意の鎖を包含する。本出願の意味内でのポリペプチドは、したがって、例えばオリゴペプチド、ペプチドまたはタンパク質であり得、これらの用語は従来の意味に従う。本発明によるポリペプチド中に存在するアミノ酸残基は、タンパク質を構成するアミノ酸残基またはタンパク質を構成しないアミノ酸残基から選択され得る。好ましくは、それらは20のタンパク質を構成するアミノ酸残基から選択される。結合ポリマーへの捕捉エレメントの固定は、反応性F基を有さない結合ポリマーを使用する場合は吸着によって実施できる。また、反応性F基との共有結合の確立によっても実施できる。また、反応性F基によって促進される吸着によっても実施できる。これは、例えばヒドラジド型の基によって促進される抗体の吸着の場合である。数個の部分を含む捕捉エレメントを考慮することも可能である。例えば、結合ポリマーに固定することができる中間体捕捉エレメント例えばポリペプチドまたは糖化合物または糖ペプチドおよび中間体捕捉エレメントに結合することができる最終捕捉エレメント例えばウイルスもしくはウイルスフラグメントまたは細胞を使用することが可能である。分析物検出のためのデバイスが、1つの分析物または1つの型の分析物を検出することだけを意図されている場合は、基質の有用な表面全体に結合ポリマーおよび捕捉エレメントを沈着させれば十分である。分析物検出のためのデバイスが、別々の捕捉エレメントを有する数個の分析物を検出することを意図されている場合は、数個の別々の検出領域を提供しなければならない。96穴マイクロタイタープレートはこの目的のために特に有用な基質の一例である。この場合、結合ポリマーを基質の有用な表面全体に沈着させ、次に様々な捕捉エレメントを基質の区切られた領域に沈着させる例えば基質の規定された位置に捕捉エレメントを含有する様々な溶液の小さな液滴を沈着させることによってことができるか;または捕捉エレメントに結合した結合ポリマーの様々な溶液を基質の区切られた領域に例えばマイクロタイタープレートのウェルに直接沈着させることができるか;または結合ポリマーの1もしくはそれ以上の溶液を基質の区切られた領域に例えばマイクロタイタープレートのウェルに直接沈着させ、次に捕捉エレメントを含有する様々な溶液を基質の同じ区切られた領域に沈着させることができる。結合ポリマーで被覆された基質の表面の領域は、好ましくは親水性であり、70°またはそれ以下、好ましくは65°またはそれ以下、および理想的には60°またはそれ以下の水の接触角を特徴とする。結合ポリマーで被覆された基質の表面の親水性は、非常に多数の分析物特にタンパク質と基質との非特異的相互作用を最小限に抑えることを可能にする。また、バイオチップを調製するためにナノ液滴を沈着させることも可能にするが、この型の沈着は複雑であり、処理されていないプラスチック基質上に直接実施する場合は再現性が低い。本発明を用いて検出できる分析物は、あらゆる種類の化学的または生物学的材料であり得る:鉱物粒子、有機分子特に農薬または他の汚染物質、生体分子特に糖化合物、修飾されたもしくは修飾されていない、コンジュゲートされたもしくはコンジュゲートされていない、ポリペプチド、ウイルスもしくはウイルスフラグメント、細胞または生物単細胞または多細胞。特に、本発明は、血清型別、エピトープのスクリーニング、生物媒質中のタンパク質の定量化、またはさもなければリガンド-受容体型のペプチド分子間の比率の分析のために有用な、ポリペプチドを有するチップを製造することを可能にする。一般に、本発明による検出デバイスの使用は、結合ポリマーおよび捕捉エレメントで被覆された基質表面を、対象とする分析物例えば環境からの水の試料、食品の試料、尿、血液または血液誘導体製品等のような生物学的試料を含有する可能性がある1またはそれ以上の溶液または懸濁液と接触させることを含む。捕捉エレメントに特異的に固定される可能性がある分析物の検出は、トレーサ成分を用いて実施することができ、トレーサ成分は、例えば蛍光、放射性または化学的に標識することができ、本発明によるデバイス上に保持される分析物に結合することができるかまたは何らかの他の方法で分析物と反応することができる。その後、本発明によるデバイス上に保持されたトレーサ成分を、蛍光の検出、比色定量検出または放射能の検出のためのデバイスを用いて同定することができ、場合により定量化することもできる。また、トレーサ成分と分析物との間、またはさもなければトレーサ成分分析物に固定されたと付加的な試薬との間の化学反応に起因する媒質の変化例えば裸眼で見える着色に基づく検出も可能である。例証として、トレーサ成分は、着色生成物の形成を触媒する酵素を含み得る。また、保持された分析物に結合することができる分子で被覆されたビーズも含み得る。また、分析物上に存在する抗原に結合することができる標識抗体蛍光または放射性を使用することも可能である。本発明によって可能となる分析物の検出および場合により定量化は、特に医学診断人間医学または獣医学に応用される。以下の実施例は本発明を例証するが、本発明を限定するものではない。デキストランの多糖骨格を有する様々なポリマーを以下で述べる実施例において調製する。-CH2COONa型のAc基を含むポリマーPsAc1;-CH2COONa型のAc基および-CH2CONHCH2Ph型のAr基を含むポリマーPsAcAr1;-CH2COONa型のAc基および-CH2CONHCH23N3型のF基を含むポリマーPsAcF1;-CH2COONa型のAc基、-CH2CONHCH2Ph型のAr基および-CH2CONHNH2型のF基を含むポリマーPsAcArF1;-CH2COONa型のAc基、-CH2CONHCH2Ph型のAr基および-CH2CONHCH23N3型のF基を含むポリマーPsAcArF2;-CH2COONa型のAc基および上記式II式中、R4は-CH23OHを表すのF基を含むポリマーPsAcF2;-CH2COONa型のAc基および上記式II式中、R4は上記式IIIを有するのF基を含むポリマーPsAcF3;-CH2COONa型のAc基、-CH2CONHCH2Ph型のAr基および上記式II式中、R4は-CH23OHを表すのF基を含むポリマーPsAcArF3;-CH2COONa型のAc基、-CH2CONHCH2Ph型のAr基および上記式II式中、R4は上記式IIIを有するのF基を含むポリマーPsAcArF4;-CH2COONa型のAc基、-CH2CONHCH2Ph型のAr基および上記式V式中、XはCH2を表し、およびX’はCH22を表すのF基を含むポリマーPsAcArF5。PsAcxの形態は、xに等しいAc基による置換度を含むポリマーを示す。PsAcArx;yの形態は、xに等しいAc基およびAr基による全体的置換度ならびにyに等しいAr基による置換度を含むポリマーを示す。PsAcFx;zの形態は、xに等しいAc基およびF基による全体的置換度ならびにzに等しいF基による置換度を含むポリマーを示す。PsAcArFx;y;zの形態は、xに等しいAc基、Ar基およびF基による全体的置換度、yに等しいAr基による置換度ならびにzに等しいF基による置換度を含むポリマーを示す。ポリマーPsAc1の調製一般的プロトコールデキストランT402g、11.1mmol、1当量を脱イオン水6.4mLに溶解する。イソプロパノール36mLを、非常に激しく撹拌しながらこの溶液に緩やかに添加し、次にソーダ2.4g、60mmol、5.4当量を添加して、反応混合物を60°Cで1時間撹拌する。最後にモノクロロ酢酸3g、31.7mmolを添加し、その後60°Cで一晩撹拌する。得られた白色ペーストを回収し、メタノールから3回沈殿させて、遠心分離する。得られた固体を脱イオン水に溶解し、凍結乾燥して、ポリマーPsAc1を得る。典型的には、このプロトコールは1.2~1.4のAc基による置換度を与える。カルボン酸基による置換度の測定メチルカルボキシレート基による置換度の測定を、加水分解後に1HNMRによって実施する。このために、生成物を以下のように加水分解する:ポリマーPsAc1200mgをD2O2mLに溶解し、次にD2SO4666μLを緩やかに添加する。反応混合物を90°Cで4時間加熱する。混合物を1HNMR300MHzによって分析する。置換度DSを以下の方程式から計算する:DS=A/B、A:1/2×4~4.5ppmのCH2CO2Hのプロトンのシグナルの積分値;およびB:グルコース単位の炭素C1によって担持されるプロトンの積分値、または1/6×3~4ppmの炭素C2~6によって担持されるプロトンの積分値。ポリマーPSAcAr1の調製PsAc11.1100mgを脱イオン水2mLに溶解し、次に1NHCl溶液でpHを4.74に調整する。1-シクロヘキシル-3-2-モルホリノエチルカルボジイミドCMC233mg、0.55mmol、1.1当量を添加し、次に1NHCl溶液でpHを再び4.74に調整する。ベンジルアミンを添加し、反応混合物を周囲温度で一晩撹拌する。その後試料を2MNaCl溶液中で70時間、次に脱イオン水中で100時間透析し、ポリマーPsAcAr1を得る。芳香族基による置換度の測定芳香族基による置換度を、以下の方程式を用いて1HNMR300MHzスペクトルから計算する:DS=B/A/5、A:C1によって担持されるプロトンの積分値;B:フェニル基に起因する芳香族プロトンの積分値。図1は、CH2CONHCH2Ph基による置換度yと、反応において使用されるベンジルアミン当量eqの数利用可能なカルボキシル基による置換度に対して0.3当量、0.6当量、1当量、2当量、5当量および15当量との関係を例証する。2-3-アジドプロピル-イソインドール-1,3-ジオンの合成N-3-ブロモプロピルフタルイミド15g、56.02mmolをジメチルホルムアミド200mLに溶解し、次に窒化ナトリウム7.25g、112.05mmol、2当量を添加する。70°Cで2時間、撹拌を維持する。次に反応混合物を蒸発乾固させ、その後トルエンと共蒸発させて、ジメチルホルムアミドの痕跡を除去する。得られた残留物をジエチルエーテル150mLに可溶化し、有機相を水2×150mLで洗浄する。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥する。溶媒を蒸発させて除去し、2-3-アジドプロピル-イソインドール-1,3-ジオンを白色粉末の形態で得る12.44g、54.1mmol、97。1HNMRCDCl3,300MHz:δppm7.78m,2H,7.65m,2H,3.72t,2H,J=6.9Hz,3.31t,2H,J=6.9Hz,1.90tt,2H,J=6.9Hz.13CNMR75MHzCDCl3:δppm168.28,134.04,131.96,123.31,49.0,35.35,28.0;MALDI-TOF:M計算値=230.08C11H10N4O2,実測値m/z231.1[MH],253.1[MNa].3-アジドプロピルアミンの合成2-3-アジドプロピル-イソインドール-1,3-ジオン3g、12mmolをジクロロメタン10mLに溶解し、次にヒドラジン9.6mL、32mmol、2.6当量を添加する。反応混合物を、撹拌しながら還流下で一晩加熱する。次に塩酸の1N水溶液100mLを添加する。有機相を傾瀉し、次に水相をジクロロメタン3×50mLで洗浄する。飽和炭酸ナトリウム溶液で水相のpHを14に調整する。次に水相をジクロロメタン3×40mLで抽出する。ジクロロメタン相を合わせ、塩酸の1N水溶液3×50mLで抽出する。最後に酸性水溶液を冷凍し、凍結乾燥する。3-アジドプロピルアンモニウム塩酸塩を白色粉末の形態で得る1.49g、10.97mmol、84。1HNMRD2O,300MHz:δppm3.52t,2H,J=6.6Hz,3.11t,2H,J=7.2Hz,1.96tt,2H,J=6.6Hz.13CNMRD2O,75MHz:δppm39.02,26.48,15.67.MALDI-TOF:M計算値=100.07C3H8N4:実測値m/z101.0[MH],123.0[MNa],139.0[MK],107.1[MLi].ポリマーPsAcF1の調製PsAc11.4100mgを脱イオン水2mLに溶解し、次に1NHCl溶液でpHを4.74に調整する。次に1-シクロヘキシル-3-2-モルホリノエチルカルボジイミドCMC296.5mg、0.7mmol、1.1当量を添加し、1NHCl溶液でpHを再び4.74に調整する。塩酸塩の形態の3-アジドプロピルアミンを添加し、次にpHを8.4に調整する。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌する。その後試料を2MNaCl溶液中で70時間、次に脱イオン水中で100時間透析する。最後に、このようにして得られた生成物PsAcF1を冷凍し、凍結乾燥する。反応性基による置換度の測定アジド基による置換度を以下の方程式から計算する:DS=B/A/2、A:炭素C1によって担持されるプロトンの積分値;B:3-アジドプロピルアミンのプロトンのシグナルに起因する強配位子場におけるプロトンの積分値。図2は、アジド基による置換度yと、利用可能なカルボキシル基による置換度に対する、反応において使用される3-アジドプロピルアミンの当量Eqの数との関係を例証する。ポリマーPsAc11.15の調製イソプロパノール90mLを、非常に激しく撹拌しながら、水16mLに溶解したデキストランT405g27.7mmol、1当量の溶液に滴下する。ソーダ6g150mmol、5.4当量を反応混合物に添加し、次にそれを60°Cで1時間撹拌する。次にモノクロロ酢酸7.5g79.36mmol、2.8当量をこの混合物に添加する。その後60°Cで一晩撹拌する。白っぽいペーストを得て、それを水50mLに可溶化する。次に生成物を、非常に激しく撹拌しながら、0°Cに冷却したMeOH500mLから沈殿させる。遠心分離2500r.p.m.、10分間、4°C後に得られたペレットを最少量の水に可溶化し、生成物をMeOH500mLからの2回目の沈殿に供する。2回目の沈殿後に得られたペレットをMeOHで2回洗浄し、次に最少量の水に可溶化して、凍結乾燥する。1.15の置換度を有するPsAc1、すなわちPsAc11.153g15.7mmolを得る。ポリマーPsAcAr11.15;0.64の調製水9.4mLに溶解したPsAc11.15468mg2.44mmol、1当量を含む溶液のpHを、1Nおよび0.1NHClを添加することによって4.74に調整する。CMC1.187g2.806mmolをこの溶液に添加し、pHを再び4.74に調整する。次にベンジルアミン266μL2.44mmol、xに対して1当量を反応混合物に添加し、それを、磁気撹拌機を用いて周囲温度で一晩撹拌する。溶液の最終的なpHは10.2である。次に反応混合物を透析チューブ3500g/mol;1mL/cmに導入し、それを2MNaCl溶液3.5Lに液浸して、5日間溶液中に保持し、次に水3.5Lに液浸して、同じく5日間保持する。次にバッグの内容物をポットに入れ、冷凍して、その後凍結乾燥する。PsAcAr11.15;0.64477mg1.67mmolを得るベンジルアミノ基による置換度0.64。ポリマーPsAcArF11.15;0.64;0.26の調製水2mlに溶解したPsAcAr11.15;0.64256mg0.895mmol、1当量を含む溶液のpHを、1Nおよび0.1NHClを添加することによって4.74に調整する。CMC212.5mg0.502mmolをこの溶液に添加し、pHを再び4.74に調整する。次に24~26のヒドラジンの水溶液870μL4.56mmolを反応混合物に添加し、それを、磁気撹拌機を用いて周囲温度で一晩撹拌する。溶液の最終的なpHは10.28である。次に反応混合物を透析チューブ3500g/mol;1mL/cmに入れ、それを2MNaCl溶液3.5Lに液浸して、5日間溶液中に保持し、次に水3.5Lに液浸して、同じく5日間保持する。次にバッグの内容物をポットに入れ、冷凍して、その後凍結乾燥する。PsAcArF11.15;0.64;0.26235mg0.81mmolをこのようにして得るヒドラジドによる置換度0.26。ポリマーPsAcAr11.2;0.49の調製脱イオン水10mLに溶解した、PsAc11.2513.3mgの溶液のpHを、1N塩酸溶液で4.74に調整する。N-シクロヘキシル-N’-2-モルホリノエチル-カルボジイミドメチルスルホネート931.85mg、2.2mmol、1.1当量を周囲温度で添加し、次に溶液のpHを同じ方法で4.74に調整する。次にベンジルアミン428.6mg、4.0mmol、2当量を滴下し、溶液を周囲温度で16時間撹拌する。反応混合物を2MNaCl溶液中で3日間、次に脱イオン水中で3日間透析することによって精製する。凍結乾燥後、PsAcAr11.2;0.49を無定形白色粉末の形態で得るベンジルアミノ基による置換度0.49。1HNMRD2O,300MHz:δppm:7.21s,ls,Har,5.09s,ls,Hano,4.89s,ls,Hano,4.53-3.39m,ls.ポリマーPsAcF11.2;0.38の調製PsAc11.2513.3mgを脱イオン水10mLに溶解する。溶液のpHを1NHCl溶液で4.74に調整する。N-シクロヘキシル-N’-2-モルホリノエチル-カルボジイミドメチルスルホネート931.85mg、2.2mmol、1.1当量を溶液に添加し、pHを再び4.74に調整する。3-アジドプロピルアンモニウム塩酸塩819.5mg、6mmol、3当量を反応混合物に添加し、次に1NNa2CO3溶液でpHを8.4に調整する。反応混合物を周囲温度で16時間撹拌する。粗生成物を2MNaCl溶液中で3日間、次に脱イオン水中で3日間透析する。凍結乾燥してPsAcF11.2;0.38を無定形白色粉末の形態で得るアジド基による置換度0.38。1HNMRD2O,300MHz:δppm:5.07s,ls,Hano,4.88s,ls,Hano,4.28-3.26m,ls,1.77s,ls,CH2.ポリマーPsAcArF21.2;0.34;0.38の調製脱イオン水5mLに溶解したPsAcF11.2;0.38272.2mgの溶液を1NHCl溶液でpH4.74に調整する。N-シクロヘキシル-N’-2-モルホリノエチル-カルボジイミドメチルスルホネート372.8mg、0.88mmol、1.1当量を添加し、反応混合物のpHを1NHCl溶液で再び4.74に調整する。ベンジルアミン171.4mg、4.6mmol、2当量を添加し、溶液を周囲温度で18時間撹拌する。2NNaCl中で3日間、次に脱イオン水中で3日間透析し、次いで凍結乾燥して、化合物PsAcArF21.2;0.34;0.38を得るベンジルアミノ基による置換度0.34。1HNMRD2O,300MHz:δppm:7.23s,ls,Har,5.05s,ls,Hano,4.84s,ls,Hano,4.33-3.26m,ls,1.68s,ls,CH2.ポリマーPsAcArF21.2;0.49;0.62の調製N-シクロヘキシル-N’-2-モルホリノエチル-カルボジイミドメチルスルホネート372.7mg、0.88mmol、1.1当量を、pH=4.74の脱イオン水5mL中のPsAcAr11.2;0.49224.2mgの溶液に添加する。溶液のpHを1NHCl溶液で4.74に調整し、次に3-アジドプロピルアンモニウム塩酸塩327.8mg、2.4mmol、3当量を添加する。pHを8.4に調整し、次に溶液を周囲温度で17時間撹拌する。2NNaCl中で3日間、次に脱イオン水中で3日間透析し、最後に凍結乾燥して、ポリマーPsAcArF21.2;0.49;0.62を得るアジド基による置換度0.62。1HNMRD2O,300MHz:δppm:7.23s,ls,Har,5.05s,ls,Hano,4.84s,ls,Hano,4.33-3.26m,ls,1.68s,ls,CH2.ペント-4-イニル-α-D-グルコピラノシドの合成式VIIIの生成物を以下で述べるように合成する:D--グルコース360.3mg、2.0mmolを4-ペンチン-1-オール1.01g、12.0mmol、6.0当量に溶解し、溶液を65°Cに加熱する。H2SO4-SiO2120mgを添加し、溶液を65°Cで10時間撹拌する。溶液を周囲温度に冷却し、次に化合物を、CH2Cl2からCH2Cl2-MeOH;9:1までの勾配を溶離液混合物として用いるシリカゲルクロマトグラフィによって精製する。所望生成物を無色の油の形態で、収率79およびα/βアノマー比1.6/1で得る。残留物405.0mg、1.63mmolを周囲温度でピリジン5mLおよび無水酢酸1.33g、13.0mmol、8当量に溶解する。次に0°CでDMAP20mgを添加し、反応混合物を周囲温度で5時間撹拌する。反応混合物を、0°CでMeOH5mLを滴下することによって中和する。溶媒を回転蒸発器において減圧下で除去し、残留溶媒をトルエンと3回共蒸発させる。ペンタン-EtOAc8/2溶離液混合物でのシリカゲルクロマトグラフィによって精製し、総収率98に相当する、α立体配座の所望テトラアセチル化生成物の白色結晶190mgならびに2つのアノマーの混合物450mgを得る:1HNMRD2O,300MHz:δppm:5.47dd,1H,J=10.0,9.6Hz,5.06m,2H,4.87dd,1H,J=10.2,3.7Hz,4.27dd,1H,J=12.3,4.3Hz,4.07m,2H,3.85dt,1H,J=9.9,5.9Hz,3.54dt,1H,J=9.9,6.1Hz,2.34dt,2H,1H,J=6.8,2.7Hz,2.10s,3H,2.07s,3H,2.03s,3H,2.02s,3H,1.97t,1H,J=2.6Hz,1.82q,2H,J=6.5Hz.13CNMRD2O,75MHz:δppm:170.9,170.4,170.3,169.8,96.1,83.3,71.0,70.4,69.4,68.9,68.7,67.4,66.9,62.1,28.4,20.9,20.9,20.8,20.8,15.2.C19H26O10についてのHRMS計算値[MNa]:437.5;実測値m/z:437.1。ペント-4-イニル-α-D-グルコピラノシドの合成式IXの生成物を以下で述べるように合成する:MeOH中0.1MのNaOMe4mLを、MeOH3mLに溶解した、実施例16で得られたテトラアセチル化化合物180mg、0.434mmolの溶液に0°Cで添加し、反応混合物を周囲温度で4時間撹拌する。次に反応混合物をDowex-50W樹脂でpH=7に中和する。次に反応混合物をろ過し、減圧下で蒸発乾固させて、CH2Cl2-MeOH;9:1を溶離液として用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、定量的収率にてα-グルコースの誘導体を無色の油の形態で得る。1HNMRD2O,300MHz:δppm:5.12d,1H,J=3.9Hz,4.08m,2H,4.00m,1H,3.92m,2H,3.82m,1H,3.76m,1H,3.62m,1H,2.55m,3H,2.03m,2H.13CNMRD2O,75MHz:δppm:100.0,87.0,75.1,73.6,73.3,71.6,71.4,68.2,62.4,29.3,16.5.C11H18O6についてのHRMS計算値[MNa]:269.1;実測値m/z:269.0ポリマーPsAcF21.2;0.4の調製ポリマーPsAcF11.2;0.424.8mgおよび4-ペンチン-1-オール水中92.5mg/mLの溶液200μL、0.22mmol、2.2当量を周囲温度にて脱イオン水150μL中で撹拌する。次にアスコルビン酸ナトリウム水中200mg/mLの新鮮調製した溶液50μL、0.05mmol、0.5当量および硫酸銅II五水和物水中25mg/mLの溶液50μL、0.005mmol、0.05当量を反応混合物に添加し、周囲温度で20時間混合する。2MNaCl溶液中で3日間、次に脱イオン水中で3日間透析して精製し、次いで凍結乾燥して、ポリマーPsAcF21.2;0.4を無定形白色粉末の形態で得る。トリアゾールによる置換度は0.4であるすなわち基本的にすべての反応性Ar基が変換された。1HNMRD2O,300MHz:δppm:7.65s,ls,Htriazole,5.03s,ls,Hano,4.85s,ls,Hano,4.30-3.30m,ls,3.13s,ls,CH2,2.61s,ls,CH2,2.01s,ls,CH2,1.75s,ls,CH2.ポリマーPsAcF31.2;0.34の調製アスコルビン酸ナトリウム水中200mg/mLの新鮮調製した溶液50μL、0.05mmol、0.5当量および次に硫酸銅II五水和物水中25mg/mLの溶液50μL、0.005mmol、0.05当量を、周囲温度で脱イオン水900μL中のPsAcF11.2;0.3424.8mgとペント-4-イニル-α-D-グルコピラノシド49.3mg、0.2mmol、2.0当量の混合物に連続的に添加する。20時間後、反応混合物を2MNaCl溶液中で3日間、次に脱イオン水中で2日間透析することによって精製する。凍結乾燥後、ポリマーPsAcF31.2;0.34を無定形白色粉末の形態で得る。トリアゾールによる置換度は0.26であり、すなわち反応性F基の一部だけが変換された。1HNMRD2O,300MHz:δppm:7.74s,ls,Htriazole,5.06s,ls,Hano,4.88s,ls,Hano,4.78s,ls,Hano,4.34-3.16m,ls,2.71s,ls,CH2,2.05s,ls,CH2,1.89s,ls,CH2.ポリマーPsAcArF31.2;0.42;0.38の調製アスコルビン酸ナトリウム水中200mg/mLの新鮮調製した溶液50μL、0.05mmol、0.5当量および次に硫酸銅II五水和物水中25mg/mLの溶液50μL、0.005mmol、0.05当量を、周囲温度で脱イオン水700μL中のPsAcArF21.2;0.42,;0.3828.7mgと4-ペンチン-1-オール水中92.5mg/mLの溶液200μL、0.22mmol、2.2当量の混合物に連続的に添加する。20時間後、反応混合物を2MNaCl溶液中で3日間、次に脱イオン水中で2日間透析することによって精製する。凍結乾燥後、ポリマーPsAcArF31.2;0.42;0.38を無定形白色粉末の形態で得る。トリアゾールによる置換度は0.28である反応性F基の変換度74。1HNMR300MHz,D2Oδppm:7.62s,ls,Htriazole,7.21s,ls,Har,5.04s,ls,Hano,4.89s,ls,Hano,4.29-3.50m,ls,3.13s,ls,CH2,2.58s,ls,CH2,1.96s,ls,CH2,1.73s,ls,CH2.ポリマーPsAcArF41.2;0.42;0.38の調製アスコルビン酸ナトリウムPBS中200mg/mLで100μL、0.05mmol、1当量を、脱イオン水500μL中のPsAcArF21.2;0.42;0.3828.7mgおよびペント-4-イニル-α-D-グルコピラノシド43.8mg、0.178mmol、1.8当量の溶液ならびに0.1MのPBS400μLに添加する。硫酸銅II五水和物PBS中25mg/mLで100μL、0.005mmol、0.1当量を添加し、反応混合物を周囲温度で20時間撹拌する。デキストランを0.5MのEDTA-2Naの水溶液2mL中に取った後、2MNaCl溶液中で3日間、次に脱イオン水中で2日間透析することによって精製する。凍結乾燥して、PsAcArF41.2;0.42;0.38を無定形白色粉末の形態で得る。トリアゾールによる置換度は0.34である反応性F基の変換度89。1HNMR300MHz,D2Oδppm:7.63s,ls,Htriazole,7.21s,ls,Har,5.00s,ls,Hano,4.90s,ls,Hano,4.85s,ls,Hano,4.23-3.22m,ls,3.09s,ls,CH2,2.64s,ls,CH2,1.22s,ls,CH2,1.19s,ls,CH2.ポリスチレンプレートの官能基化および接触角の測定あらかじめ水とエタノールで洗浄したポリスチレンプレートGoodfellowプレート、10cm×10cmを、10μg/mLの濃度のPBS緩衝液中のポリマーの溶液またはPBS単独対照中に周囲温度で一晩、半液浸するポリマーの型につき1プレート。試験するポリマーは上述したものであり、特にPsAc11.2、PsAcAr11.2;0.42、PsAcArF21.2;0.42;0.38およびPsAcArF41.2;0.42;0.270.27の値は、ここではトリアゾールによる置換度だけを表すである。次に溶液と接触するポリスチレン表面を水浴に5分間ずつ2回液浸する。それを窒素下で10分間乾燥させる。次にこれらの表面を接触角の測定のために使用する。溶液と接触しなかった基質の領域を対照として用いる。水1μLの液滴10滴を、処理した表面と処理していない対照表面の中央に沈着させる。結果角の中央値および四分位範囲を図3に示す。多糖PsAcAr1、PsAcArF2およびPsAcArF4によるポリスチレン表面の処理は、未処理のポリスチレンと比較して水の接触角の有意の低下をもたらすことがわかる。これらポリマーは、したがって、ポリスチレンの官能基化を可能にする。リガンドによる96穴ポリスチレンプレートの官能基化この実施例では、ポリスチレンウェルの底部をPsAc、PsAcArまたはPsAcArFの層で完全に覆い、その後リガンドレクチンと共にインキュベートする。次にタンパク質をリガンド官能基化表面と共にインキュベートする。最後に、蛍光検出システムによって標的タンパク質を捕捉したウェルを同定することができる。使用する96穴プレートは、製造業者NuncからのMaxiSorpImmunoplate型である。1PBSpH=7.4中のポリマーの溶液50μg/mL~0.1μg/mL100μLをプレートのウェル中で周囲温度にて16時間インキュベートする。2次にウェルを、0.1Tween20を含むPBSpH=7.43×300μLで3×5分間洗浄する。3次にウェルを、BSA3、1もしくは0.1またはカゼイン0.1を含むPBSpH=7.4Tween200.1の溶液300μLと共に周囲温度で1時間インキュベートする。4ウェルをPBSpH=7.4Tween200.13×300μLで3×5分間洗浄する。5次にウェルを、最終濃度1mMのMnCl2およびCaCl2を含むPBSpH=7.4Tween200.1中のビオチン化レクチン例えば10μg/mL、5μg/mLまたは1μg/mLの溶液200μLと共にインキュベートする。インキュベーションを、撹拌しながら周囲温度で1時間実施する。以下のレクチン市販されているを使用した:コンカナバリンAConA、コムギ胚芽凝集素WGAおよびエリスリナクリスタガリErythrinacristagalliレクチンECL。ConAは末端α-D-グルコースまたはα-D-マンノース残基と相互作用する。WGAはN-アセチル-D-グルコサミンを認識する。ECLは末端α-D-ガラクトース残基を認識する。6ウェルをPBSpH=7.4Tween200.13×300μLで3×5分間洗浄する。7次にウェルを、PBSpH=7.4Tween200.1中のテトラメチルローダミン標識ストレプトアビジン5μg/mLまたは1μg/mLの溶液200μLと共に周囲温度で2時間インキュベートする。8ウェルをPBSpH=7.4Tween200.13×300μLで3×5分間洗浄する。9ウェルを脱イオン水3×300μLで3×5分間洗浄する。10プレートを遠心分離機において10分間乾燥させ、次に窒素下で5分間乾燥させる。11ウェルの底部の蛍光を、共焦点蛍光スキャナーを用いて532nmで測定する。結果を図4および5に示す。図4は、ポリマーPsAcArF41.2;0.42、0.34トリアゾールF基だけに関して0.34の置換度および上記の3つのレクチンで得られた蛍光の強度を示すヒストグラムである。x軸上に示す比率はレクチン/ストレプトアビジン比である。予想されたようにPsAcArF4はConAによって選択的に認識されることが認められ、ポリスチレンプレートの官能基化の品質および標的タンパク質に対するリガンドのアベイラビリティを示す。図5は、同じポリマーPsAcArF41.2;0.42、0.34およびConAで得られた蛍光の強度を示すヒストグラムである。x軸上に示す比率はレクチン/ストレプトアビジン比である。最後の結果Tは多糖を含まない対照である。この実験は、蛍光シグナルの強度とウェルにおいて使用したConAの濃度との関係を例証する。ConA、ストレプトアビジンまたはPsAcArF4を与えられなかったウェルに関連する蛍光は非常に低い。多糖のプリンティングによる96穴プレートのウェルの底部におけるマイクロドットの形成、レクチンとの相互作用この実験では、様々なポリマーを未処理96穴プレートの底部にプリントする。次にこのようにして作製されたバイオチップをタンパク質レクチンと共にインキュベートする。使用する96穴プレートは、製造業者NuncからのMaxiSorpImmunoplate型である。ポリマー溶液PBS中10μg/mL、7.5μg/mL、5μg/mLおよび1μg/mLの濃度300pLを、以下の配置でPackardBioChipArrayerBCA-1装置を用いてプレート上に沈着させる:ポリマーPsAcArF4に関して、0.27の置換度はトリアゾール基だけに対応する。ポリマーPsAcArF3については、0.28の置換度はトリアゾール基だけに対応する。1次にウェルを、BSA3を含むPBSpH=7.4Tween200.1の溶液100μLと共に周囲温度で15分間インキュベートする。2次にウェルを、0.1Tween20を含むPBSpH=7.43×100μLで3×5分間洗浄する。3次にウェルを、PBSpH=7.4Tween200.1中のビオチン化レクチン例えば20μg/mL、10μg/mLまたは5μg/mLの溶液100μLと共に軌道撹拌しながら周囲温度で1時間インキュベートする。レクチンConA、ECLおよびWGAについては、MnCl2およびCaCl2の塩を最終濃度1mMになるように添加する。4ウェルをPBSpH=7.4Tween200.13×100μLで3×5分間洗浄する。5次にウェルを、PBSpH=7.4Tween200.1中のストレプトアビジンテトラメチルローダミン5μg/mLの溶液100μLと共に周囲温度で2時間インキュベートする。6ウェルをPBSpH=7.4Tween200.13×100μLで3×5分間洗浄する。7ウェルを脱イオン水3×100μLで3×5分間洗浄する。8プレートを遠心分離機において10分間乾燥させ、次に窒素下で5分間乾燥させる。9532nmでスキャナーを用いて検出を実施する。図6は得られた結果を要約する。ConAがポリマーPsAcArF4上に選択的に固定され、その他の2つのレクチンはいずれも固定されないことがわかる。ポリスチレンプレートの官能基化および接触角の測定、芳香族置換度の影響ポリマーPsAc11.27、PsAcAr11.27;0.03、PsAcAr11.27;0.39およびPsAcAr11.27;0.54をこの実験のために使用する。あらかじめ水とエタノールで洗浄した5つのポリスチレンプレートGoodfellowプレート、10cm×10cmを、10μg/mLの濃度でPBS緩衝液中に溶解したPsAc1もしくはPsAcAr1の溶液またはPBS単独に周囲温度で一晩、半液浸する。次に溶液と接触するポリスチレン表面を水浴に5分間ずつ2回液浸する。次にそれを窒素下で10分間乾燥させる。次にこれらの表面を接触角の測定のために使用する。溶液と接触しなかった基質の領域を対照として用いる。水1μLの液滴10滴を、処理した表面と処理していない対照表面の中央に沈着させる。結果角の中央値および四分位範囲を図7に示す。最初のバーは即時測定の結果であり、2番目のバーは部分的真空下でデシケーター24時間保存した後の結果である。PsAcAr11.27;0.54は接触角の有意の低下をもたらすことが認められ、未処理ポリスチレンについての86°から、処理したポリスチレンについての56°まで低下させる。PsAcAr11.27;0.54によってポリスチレン表面にグラフトされた官能基は表面をより親水性にし、これは、未処理ポリスチレンと比較して、これらの表面上の水の接触角の低下に反映される。ポリマーPsAcAr11.27;0.54は、したがって、ポリスチレンの化学的官能基化を可能にする。96穴ポリスチレンプレートの官能基化および蛍光ペプチドとのヒドラゾン結合ポリマーPsAcArF11.1;0.75;0.03およびPsAcAr11.1;0.75をこの実験のために使用する。ポリマーPsAcArF11.1;0.75;0.03は、ヒドラジド官能基でウェルの底部を官能基化することを可能にする。この官能基を担持しないポリマーPsAcAr11.1;0.75を対照として用いる。ヒドラジド官能基は、アルデヒド官能基を担持する分子と反応することが公知である。形成される結合はヒドラゾンである。反応の原理は以下のとおりである:2つのペプチドを使用する:式Rho-KR-NHCH23-NH-CHOCOのペプチド1配列番号:1テトラメチルローダミンおよびCHOCO官能基で官能基化されるならびに式Rho-KR-NH2のペプチド2配列番号:2テトラメチルローダミンおよびアミド官能基で官能基化される。これらのペプチドの合成は、Ollivieretal.,Alpha-oxosemicarbazonepeptideoroligodeoxynucleotidemicroarrays,Bioconjug.Chem.14,430-92003に記載されている。プロトコール:96穴ポリスチレンマイクロプレートMaxisorp、Nuncのウェルを、PBS中5μg/mLの濃度のPsAcArF11.1;0.75;0.03またはPsAcAr11.1;0.75の溶液100μLで処理する。処理は、撹拌しながら周囲温度で一晩実施する。次にプレート洗浄機を用いてプレートをPBS/Tween200.05で洗浄する300μL/ウェル、6回洗浄。ペプチド1および2の2つのシリーズの溶液を、酢酸緩衝液pH5.5/0.1BSA中10-6、5×10-7、2.5×10-7、1.25×10-7および6.25×10-8Mの濃度で調製する。各溶液60μLをPsAcArF11.1;0.75;0.03またはPsAcAr11.1;0.75で処理したウェルの底部に沈着させる2ウェル/条件。連結反応を周囲温度で2時間、撹拌しながら実施する。プレートをPBS/Tween200.05300μL/ウェル、6回洗浄および次に脱イオン水300μL/ウェル、3回洗浄で洗浄する。次に遠心分離機における乾燥を実施する2500r.p.m.、5分間、20°C。プレートをTecan蛍光スキャナーで読み取る。結果を図8に示す。灰色のバーはペプチド1に対応し、白色のバーはペプチド2に対応する。Cnは種々の濃度のPsAcArF11.1;0.75;0.03に対応し、C’nは種々の濃度のPsAcAr11.1;0.75に対応し、1=10-6M;2=5×10-7M;3=2.5×10-7M;4=1.25×10-7M;5=6.25×10-8Mである。PsAcArF11.1;0.75;0.03で処理し、次にアルデヒドペプチド1と共にインキュベートしたウェルに関連するシグナルの強度y軸は高いCn、ペプチド1。比較して、PsAcAr11.1;0.75で処理したウェルペプチド1のアルデヒド官能基に対して反応性であるヒドラジド官能基を有さない対照ウェルに関連するシグナルの強度は非常に低いC’n、ペプチド1。すべての場合に、アルデヒド官能基を有さない対照ペプチド2と共にインキュベートしたウェルに関連するシグナルの強度は非常に低いCnまたはC’n、ペプチド2。この実施例は、PsAcArF11.1;0.75;0.03で処理した、アクセス可能なヒドラジド官能基を有するウェルへのアルデヒドペプチド1の化学選択的結合を明らかにする。連結反応のpHを変化させることによって補足的な実験を実施した。この型の化学反応に関して予想されたように、反応のための好ましいpHは5である。96穴ポリスチレンプレートの官能基化、ペプチドのプリンティングによるバイオチップの調製およびインサイチュでの反応この実験では、ウェルを多糖ポリマーで官能基化する。ペプチドをプリントしてバイオチップを形成し、ペプチドはヒドラゾン共有結合の形成によって表面に結合する。この実験において使用するペプチドの合成は、Carionetal.,ChemicalMicropatterningofPolycarbonateforSite-SpecificPeptideImmobilizationandBiomolecularInteractions.Chembiochem8,315-3222007に記載されている。使用するペプチドは:-Ser-HA:H-SGYPYDVPDYAGYPYDVPDYAGYPYDVPDYAS-NH2配列番号:3;-Ser-FLAG:H-SDYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDKGGS-NH2配列番号:4;-CHOCO-HA:CHOCO-GYPYDVPDYAGYPYDVPDYAGYPYDVPDYAS-NH2配列番号:5;-CHOCO-FLAG:CHOCO-DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDKGGS-NH2配列番号:6である。プロトコール:ポリマーPsAcArF110μg/mL、ポリマーPsAcAr110μg/mL、PBS緩衝液で官能基化したまたは未処理の96穴型のプレートへの、pH5.5のPBS緩衝液または酢酸緩衝液中10-4Mの濃度のペプチドSer-HA、CHOCO-HA、Ser-FLAGおよびCHOCO-FLAGのプリンティング。PBS1BSA300μLでのウェルの飽和を撹拌下で30分間実施する。ウェルを手作業にてPBS/0.1Tween20で洗浄する。抗HAおよび抗FLAG抗体のインキュベーションを、PBS/0.1BSA中1μg/mLの濃度で撹拌下に1時間半実施する100μL/ウェル。ウェルを手作業にてPBS/0.1Tween20で洗浄する。テトラメチルローダミン標識抗IgGマウス抗体のインキュベーションを、PBS/0.1BSA中2μg/mLの濃度で撹拌下に1時間実施する100μL/ウェル。ウェルを手作業にてPBS/0.1Tween20で洗浄し、水で3回洗浄して、遠心分離によって乾燥させる2500r.p.m、5分間、20°C。プレートをTecanスキャナーで読み取る焦点オフセット:-1000/MTPゲイン:90/分解能:4μm。抗HA抗体とのインキュベーションの結果を図9に示し、抗FLAG抗体とのインキュベーションの結果を図10に示すy軸に蛍光の強度。ビス{2-[トリフェニルメチルスルファニル]エチル}アミンの調製ビス2-クロロエチルアミン8.4mmol1.50gおよびトリフェニルメタンチオール2当量、16.80mmol4.65gをフラスコに導入し、不活性雰囲気下に置く。無水ジメチルホルムアミドDMF25mLを磁気撹拌しながら添加し、反応混合物を氷浴中で冷却する。1,8-ジアザビシクロ[5,4,0]ウンデク-7-エンDBU4当量を混合物に滴下する。混合物を周囲温度で3時間撹拌し、反応を薄層クロマトグラフィTLC溶離液:シクロヘキサン/酢酸エチル/トリエチルアミン:8/2/0.1によって観測する。この時間後、溶媒を回転蒸発器で蒸発させて除去する。次に得られた白色固体をジクロロメタンDCM50mLに溶解し、生成物を5KH2PO4水溶液で3回抽出する。次に生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ溶離液:シクロヘキサン/EtOAc/トリエチルアミンTEA:8/2/0.1によって精製し、無定形白色固体1.46gを得る収率28。生成物の分析は以下のとおりである:Rf=0.37シリカゲル、シクロヘキサン/EtOAc/TEA:8/2/0.1。1HNMR300MHz,CDCl3δ7.41-7.37m,12H,Trt,7.15-7.29m,18H,Trt,2.23-2.36m,8H,CH2,1.26s,1H,NH.13C75MHz,CDCl3154.1;129.8;128.1;126.9;47.9;32.6;MALDI-TOF:243.1[Trt],622.3[MH],644.3[MNa].Boc-βAla-NCH2CH2STrt2の合成Boc-βアラニン1.908g、10.1mmolをジクロロメタン50mlに溶解し、次に溶液を0°Cに冷却して、N,N-ジシクロヘキシル-カルボジイミド5mmolを添加する。周囲温度で30分間撹拌を維持する。ろ過後、ビス{2-[トリフェニルメチルスルファニル]エチル}アミン2.5g、4mmolを添加する。反応混合物を周囲温度で2時間撹拌する。反応混合物を蒸発乾固させる。得られた残留物にソーダ水溶液1N100mLを添加し、それをジクロロメタン3×100mLで抽出する。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させる。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィシクロヘキサン/酢酸エチル/トリエチルアミン:80/20/0.1、v/v/vによって精製する。生成物Boc-βAla-NCH2CH2STrt2を白色粉末の形態で得る3.1g、3.9mmol、97。反応の概略図は以下のとおりである:融点:53°C。1HNMR300MHz,CDCl3:δppm1.439H,s,CH3;1.942H,t,J=4Hz,CH2S;2.142H,t,J=4Hz,CH2S;2.312H,t,J=4Hz,CH2CON;2.734H,m,CONCH2;3.232H,m,OCONCH2;5.23H,m,CONH;7.10-7.5030HAr,m.13CNMR75MHz,CDCl3:δppm28.50CH3;29.50CH2;30.0CH2;33.0CH2;36.0CH2;45.0CH2;47.0CH2;126.7CH;127.0CH;128.0CH;129.5CH;130.0CH;143.0Cquat;144.5Cquat;145.0Cquat;156.0Cquat;171.0Cquat.MALDI-TOFDHBmatrix:M計算値=792.3C50H52N2O3S2;m/z=815.4[MNa];m/z=831.3[MK].Boc-βAla-ジチアゼパンの合成生成物Boc-βAla-ジチアゼパン3g、3.78mmolをジクロロメタン50mlに溶解し、ヨウ素2.87g、11.3mmolを添加する。周囲温度で30分間撹拌を維持する。過剰のヨウ素をチオ硫酸ナトリウム水溶液3M、100mlで中和する。ジクロロメタン4×100mLで抽出を実施する。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させる。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィヘキサン/酢酸エチル/トリエチルアミン、40/60/0.1、v/v/vによって精製する。生成物Boc-βAla-ジチアゼパンを白色ペーストの形態で得る1.1g、3.6mmol、95。反応の概略図は以下のとおりである:1HNMR300MHz,CDCl3:δppm1.399H,s,CH3;2.482H,t,J=4Hz,CH2CON;2.872H,t,J=4Hz,CH2S;3.042H,t,J=4Hz,CH2S;3.392H,m,OCONCH2;3.762H,t,J=4Hz,CONCH2;3.862H,t,J=4Hz,CONCH2;5.25H,m,NH.13CNMR75MHz,CDCl3:δppm28.5CH3;33.0CH2;36.0CH2;37.0CH2;39.5CH2;50.0CH2;53.0CH2;143.0Cquat;156.0Cquat;172.0Cquat.MALDI-TOFDHBマトリックス:M計算値=306.1C12H22N2OS2;m/z=307.1[MH];m/z=329.1[MNa];m/z=345.1[MK].NH2-βAla-ジチアゼパンの合成生成物Boc-βAla-ジチアゼパン1g、3.26mmolをジクロロメタン5mlに溶解し、トリフルオロ酢酸5mLを添加する。周囲温度で30分間撹拌を維持する。反応混合物を蒸発乾固させる。得られた残留物にソーダ水溶液1Nを添加し、それをジクロロメタン3×100mLで抽出する。有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させる。生成物NH2-βAla-ジチアゼパンを半透明の油の形態で得る628mg、3.04mmol、94。反応の概略図は以下のとおりである:1HNMR300MHz,CDCl3:δppm2.442H,t,J=4Hz,CH2CON;2.60H,m,NH2;2.902H,t,J=4Hz,NH2CH2;3.04H,m,CH2S;3.772H,t,J=4Hz,CONCH2;3.842H,t,J=4Hz,CONCH2.13CNMR75MHz,CDCl3:δppm35.0CH2;35.5CH2;37.5CH2;39.0CH2;50.0CH2;52.0CH2;172.0Cquat.MALDI-TOFDHBマトリックス:M計算値=206.05C7H14N2OS2;m/z=207.0[MH];m/z=229.0[MNa].ポリマーPsAcArF5の合成ポリマーPsAcAr11.1;0.490.20mmol50mgをフラスコ中の脱イオン水1mLに溶解し、次に1NHCl溶液でpHを4.74に調整する。1-シクロヘキシル-3-2-モルホリノエチルカルボジイミドCMC100mg、0.22mmol、1.1当量を添加し、その後pHを4.74に調整する。アミンH2NCH22CONCH2CH2S-275mg、0.36mmol、1.8当量を添加する。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌する。次に反応混合物を透析チューブ3500g/mol;1mL/cmに入れ、2MNaCl溶液2.5Lに液浸して、5日間溶液中に保持し、次に水2.5Lに液浸して、同じく5日間保持する。次にバッグの内容物をポットに入れ、凍結乾燥して、PsAcArF547mgを得る。反応の概略図は以下のとおりである:96穴ポリスチレンプレートの化学的官能基化、蛍光ペプチドとのアミド結合ポリマーPsAcAr1およびPsAcArF5をこの実施例で使用した。ポリマーPsAcArF5は、CONCH2CH2S-2官能基でウェルの底部を官能基化することを可能にする。この官能基を担持しないポリマーPsAcAr1を対照として用いる。CONCH2CH2S-2官能基は、例えばペプチドのN末端位置に存在するシステインなどの、β-アミノチオール官能基を担持する分子と反応することができる。形成される結合はアミド結合である。ポリマーPsAcArF5による固定化の化学を以下の概略図に示す:2つのペプチドを本実施例において使用する:1H-CILKローダミンEPVHGV-NH2配列番号:7;2H-SILKローダミンEPVHGV-NH2配列番号:8。これらの2つのペプチドを以下のプロトコールに従って合成する:ペプチドH-ILKMttEtBuPVHTrtGV-NH2配列番号:9を、MicrowavePeptideSynthesizerCEMおよびFmoc/tert-ブチル戦略を用いてNovasynTGR登録商標樹脂Novabiochem、0.25mmol、0.23mmol/g上に構築する。CH2Cl2中の1TFA溶液17×15mlでMtt基の脱保護を実施する。樹脂をCH2Cl2中の5DIEA溶液で中和し5×2分間、次にCH2Cl2で洗浄して3×2分間、その後DMFで洗浄する3×2分間。次に樹脂をDMF中の56-カルボキシテトラメチルローダミン150.6mg、0.35mmol、HOBT47mg、0.35mmol、HBTU132.7mg、0.35mmolおよびDIEA217.8μl、1.75mmol、5当量と2時間反応させる。その後樹脂をDMFで洗浄する4×2分間。Fmoc末端基をDMF中のピペリジンの20溶液で脱保護する5および15分間。樹脂をDMFで洗浄する4×2分間。樹脂を2つの部分に分け、それぞれFmoc-CysTrt-OHまたはFmoc-SertBu-OHと反応させる。保護されたアミノ酸基4当量、HBTUおよびHOBT4当量ならびにDIEA12当量を用いて手作業でカップリングを実施する。樹脂をDMFで洗浄する4×2分間。Fmoc末端基をDMF中のピペリジンの20溶液で脱保護する5および15分間。次に樹脂をDMF4×2分間、CH2Cl26×2分間、エチルエーテルで洗浄し、その後減圧下で乾燥させる。次にペプチドの脱保護および切断を、ペプチド1に関してはTFA/H2O/EDT/TIS:体積比で94/2.5/2.5/1およびペプチド2に関してはTFA/H2O/TIS:体積比で95/2.5/2.5の溶液で1時間実施する。次にペプチドをEt2O/n-ヘプタン溶液:体積比で1/1から沈殿させ、水に可溶化して、凍結乾燥する。RP-HPLCによって精製し、ペプチド1および2に関してそれぞれ41mg20および28mg14を得る。MALDI-TOFDHBマトリックスペプチド1:M計算値=1505.7C74H104N16O16S;m/z=1506.8[MH];m/z=1528.8[MNa]。MALDI-TOFDHBマトリックスペプチド2:M計算値=1488.7C75H105N15O17;m/z=1489.7[MH];m/z=1511.7[MNa]。ポリマーPsAcAr1およびPsAcArF5を96穴ポリスチレンプレートにおいてPBS中10μg/mLの濃度で撹拌下に周囲温度で一晩インキュベートする100μL/ウェル。次にウェルをPBS/0.1Tween20の溶液で6回洗浄する。プレートを遠心分離機において乾燥させる。ペプチド1および2を、pH7.6で、メルカプトフェニル酢酸MPAA200mMおよびトリスカルボキシエチルホスフィン80mMの存在下でリン酸緩衝液200mMに10-4Mの濃度で可溶化する。これらの溶液を官能基化されたウェルにおいて37°Cで撹拌しながら10分間インキュベートする60μL/ウェル。次にウェルをPBS/0.1Tween20の溶液で6回および脱イオン水で3回洗浄する。プレートを遠心分離機において乾燥させる2500r.p.m.、5分間、20°C。プレートをTecan蛍光スキャナーで分析する。結果を図11に示すy軸に蛍光の強度。この実施例は、ポリマーPsAcArF5によって官能基化されたポリスチレンプレートのウェルは、システインペプチド1の結合を可能にするが、対照セリンペプチド2には結合しないことを明らかにする。2つのペプチドに関して対照ポリマーPsAcAr1で得られた非常に弱いシグナルは、システインペプチド1の結合のためにポリスチレン表面に2,5-ジチアゼパン官能基を有することの重要性を示す。96穴ポリスチレンプレートの底部における、抗体を有するバイオチップの調製この実施例では、ウェルを多糖によって官能基化し、次に抗体をプリントしてバイオチップを形成する。これらのタンパク質は非共有結合の形成によって表面に結合する。次にバイオチップを標的タンパク質と共にインキュベートする。96穴ポリスチレンマイクロプレートMaxisorp、Nunc-ImmunoPlateの8つのウェルを、緩衝液中10μg/mLの濃度のPsAcArF11.15;0.64;0.26100μLで処理する条件A。8つのウェルを緩衝液だけで処理する条件B。撹拌下に周囲温度で一晩処理を実施する。次にプレートを、プレート洗浄機を用いて緩衝液で洗浄し200μL/ウェル、撹拌下で3回洗浄、次にプレート洗浄機を用いて脱イオン水で洗浄する200μL/ウェル、撹拌下で3回洗浄。次に抗ストレプトアビジン抗体ウサギ抗ストレプトアビジンポリクローナル抗体、Antibodies-online、参照番号ABIN107091を、緩衝液に可溶化したウェルの底部にプリントするウェルにつき3スポット、合計24スポットに対して8ウェル。2BSAを含む緩衝液200μLでウェルの飽和を2時間実施する。ウェルを、0.05Tween20を添加した緩衝液を使用して自動洗浄機で洗浄する撹拌下で3サイクル。次にストレプトアビジン-HRPStreptavidin-HRP、参照番号Thermo-Pierce21130を、0.05Tween20および0.2BSAを添加した緩衝液中1:10,000希釈で1時間インキュベートする100μL/ウェル。補足的な実験を対照タンパク質:同じ溶液に1:6000希釈したヤギ抗マウスIgGHRPコンジュゲート、SouthernBiotechに関して実施する。ウェルを、0.05Tween20を含む緩衝液を使用して自動洗浄機で洗浄する3サイクル。次にTMB3,3’,5,5-テトラメチルベンジジンの不溶性溶液と共に周囲温度で12分間インキュベートする。ウェルを脱イオン水200μLで洗浄する。濃淡画像を作成することを可能にするCCDカメラ解像度:3μmを用いて各々のウェルの底部の画像を得る。次にマイクロアレイの定量化のための標準的なソフトウェアによってスポットを定量化する。ストレプトアビジン-HRPとのインキュベーション後のすべてのスポットに関する強度の結果を図12に示すy軸に任意単位の強度;A:PsAcArF11.15;0.64;0.26で処理したウェル;B:未処理対照ウェル。対照タンパク質であるヤギ抗マウスIgGHRPコンジュゲートとのインキュベーションは、いかなる検出可能なシグナルも生じなかった。この図は、ウェルA中の抗ストレプトアビジン抗体のスポットに関して得られた平均強度がウェルBのものよりも有意に高いことを示す。各スポットについてのピクセルの標準偏差についての結果白い円、ならびにすべてのスポットについての平均および四分位偏差を図13に示す。スポッティングの質を特徴づける、スポット内のこの標準偏差は、条件Bと比較すると条件Aに関してはるかに低い。全体として、これらの結果はバイオチップを調製するための処理Aの優位性を示す。"