"下記の一般式IおよびIIで表される化合物、該化合物のエナンチオマー、ならびに医薬として許容されるそれらの化合物の塩からなる群より選択される1または複数の化合物を有効成分として含有することを特徴とする抗酸菌生育阻害剤。なお、上記式IにおいてX1は、-CH2-P=OOY2、-Z-S=O2-OY、-Z-P=SOY2からなる群より選択される基であり、上記式IIにおいてX2は、-Z-P=OOY2、-Z-S=O2-OY、-Z-P=SOY2からなる群より選択される基であり、Yは、Hまたは炭素数1~5のアルキル基であり、Zは、O、S、またはCH2である。下記の式I-1、I-2、およびII-1で表される化合物、該化合物のエナンチオマー、ならびに医薬として許容されるそれらの化合物の塩からなる群より選択される1または複数の化合物を有効成分として含有することを特徴とする請求項1記載の抗酸菌生育阻害剤。上記の式I-1、I-2、およびII-1で表される化合物ならびに該化合物のエナンチオマーの炭素数1以上10以下の直鎖または分岐鎖アルキル基、あるいはシクロアルキル基を有する一級アンモニウム塩からなる群より選択される1または複数の化合物を有効成分として含有することを特徴とする請求項2記載の抗酸菌生育阻害剤。前記一級アンモニウム塩がシクロヘキシルアンモニウム塩であることを特徴とする請求項3記載の抗酸菌生育阻害剤。LMおよび/またはLAMの生合成経路は複数の反応からなるが、特許文献1記載のスクリーニング方法では、特定の反応に限定せず、そのいずれかを阻害する物質全般を広くスクリーニング対象としているため、スクリーニング効率が低いという課題が存在する。また、LMおよびLAMの前駆体であるホスファチジルイノシトールPIの生合成経路には、抗酸菌と真核生物に共通する反応も存在するため、特許文献1記載のスクリーニング方法で得られる化合物の中には、治療対象である真核生物の生理機能にも悪影響を及ぼすものが含まれるおそれがある。本発明は上記課題に鑑みてなされたものであり、抗酸菌の生育を選択的に阻害し、ヒト等の真核生物に対しては無害である抗酸菌生育阻害剤を提供することを目的とする。本発明者らは、抗酸菌におけるホスファチジルイノシトールの生合成経路について鋭意検討を行った結果、真核生物におけるそれとは一部異なる反応経路を有することを新たに見いだし、その反応をターゲットとすることにより、真核生物の生理機能に悪影響を与えることなく抗酸菌の生育を選択的に阻害する抗酸菌生育阻害剤の候補化合物を高効率でスクリーニングする方法を確立し、これを用いて新規な抗酸菌生育阻害剤を発見するに至った。すなわち、本発明は、次の態様に係るものである。[1]下記の一般式IおよびIIで表される化合物、該化合物のエナンチオマー、並びに医薬として許容されるそれらの化合物の塩からなる群より選択される1または複数の化合物を有効成分として含有する抗酸菌生育阻害剤。なお、上記式IにおいてX1は、-CH2-P=OOY2、-Z-S=O2-OY、-Z-P=SOY2からなる群より選択される基であり、上記式IIにおいてX2は、-Z-P=OOY2、-Z-S=O2-OY、-Z-P=SOY2からなる群より選択される基であり、Yは、Hまたは炭素数1~5のアルキル基であり、Zは、O、S、またはCH2である。[2]下記の式I-1、I-2、およびII-1で表される化合物、該化合物のエナンチオマー、ならびに医薬として許容されるそれらの化合物の塩からなる群より選択される1または複数の化合物を有効成分として含有する上記[1]記載の抗酸菌生育阻害剤。[3]上記の式I-1、I-2、およびII-1で表される化合物ならびに該化合物のエナンチオマーの炭素数1以上10以下の直鎖または分岐鎖アルキル基、あるいはシクロアルキル基を有する一級アンモニウム塩からなる群より選択される1または複数の化合物を有効成分として含有する上記[2]記載の抗酸菌生育阻害剤。[4]前記一級アンモニウム塩がシクロヘキシルアンモニウム塩である上記[3]記載の抗酸菌生育阻害剤。本発明によれば、ヒト等の真核生物に対しては無害であり、抗酸菌の生育を選択的に阻害する抗酸菌生育阻害剤およびそれを有効成分とする医薬組成物が提供される。次に、本発明の第1の実施の形態に係る抗酸菌生育阻害剤以下、抗酸菌生育阻害剤と略称する場合がある。について説明する。本実施の形態に係る抗酸菌生育阻害剤は、下記の一般式IおよびIIで表される化合物、該化合物のエナンチオマー、ならびに医薬として許容されるそれらの化合物の塩からなる群より選択される1または複数の化合物を有効成分として含有している。なお、上記式IにおいてX1は、-CH2-P=OOY2、-Z-S=O2-OY、-Z-P=SOY2からなる群より選択される基であり、上記式IIにおいてX2は、-Z-P=OOY2、-Z-S=O2-OY、-Z-P=SOY2からなる群より選択される基であり、Yは、Hまたは炭素数1~5のアルキル基、好ましくはH、メチル基またはエチル基であり、Zは、O、S、またはCH2、好ましくはOまたはCH2である。抗酸菌生育阻害剤として、上記一般式IまたはIIで表される化合物、またはそれらのエナンチオマーの、医薬として許容される塩であってもよい。塩の具体例としては、NH4塩、一級、二級、三級または四級アンモニウム塩、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩等が挙げられるが、抗酸菌の細胞膜透過性を向上させるために、疎水性を有し、あまり嵩高くないシクロヘキシルアンモニウム塩等の、炭素数1以上10以下の直鎖または分岐鎖アルキル基、あるいはシクロアルキル基を有する一級アンモニウム塩が好ましく用いられる。従来、抗酸菌におけるホスファチジルイノシトールの生合成経路は、真核生物におけるホスファチジルイノシトールの生合成経路と同様、下記の1~3の反応化4参照からなると考えられていた例えば、SalmanMLonsdaleJTBesraGSandBrennanPJBiochimBiophysActa1436437450参照。1グルコース6-リン酸→1L-myo-イノシトール1-リン酸21L-myo-イノシトール1-リン酸→myo-イノシトールリン酸3myo-イノシトールCDP-ジアシルグリセロール→ホスファチジルイノシトールPICMPなお、式中、R1およびR2は、それぞれ飽和または不飽和炭化水素基を表す。生体内において、ジアシルグリセロールはホスファチジン酸を経由して合成されるため、通常、R1は飽和炭化水素基であり、R2は不飽和炭化水素基である。しかしながら、本発明者は、抗酸菌におけるホスファチジルイノシトールの生合成経路について再検討を行った結果、正しくは、下記の1、2’および3’の反応化5参照からなることを見いだした。1グルコース6-リン酸→1L-myo-イノシトール1-リン酸2’1L-myo-イノシトール1-リン酸CDP-ジアシルグリセロール→ホスファチジルイノシトールリン酸PIPCMP3’PIP→ホスファチジルイノシトールPIリン酸上記の一般式IまたはIIで表される化合物は、上記2’の反応PIPの合成を選択的に阻害するため、抗酸菌の宿主となる真核生物のPIの生合成に悪影響を与えることなく、抗酸菌におけるPIPの生合成を選択的に阻害することで、抗酸菌の生育を阻害できる。PIPの合成の阻害機構については必ずしも明らかではないが、上記の化合物が、PIP合成酵素抗酸菌に特有なもので、真核生物には存在しない。の基質である1L-myo-イノシトール1-リン酸と構造が類似することから、これらの化合物がPIP合成酵素の阻害剤として作用していると考えられる。真核生物に存在し、上記の反応3を触媒するCDP-ジアシルグリセロール-イノシトール3-ホスファチジルトランスフェラーゼEC2.7.8.11はPIP合成酵素とは異なるものである。上記の一般式IまたはIIで表される化合物のうち、抗酸菌生育阻害剤として好ましく用いることができる化合物としては、下記の式I-1、I-2、およびII-1で表される化合物、該化合物のエナンチオマー、ならびに医薬として許容されるそれらの化合物の塩からなる群より選択される1または複数の化合物が挙げられる。これらの化合物は、任意の方法を用いて合成できるが、例えば、上記の式I-1およびI-2で表される化合物は、下記のスキームに従い合成することができる。なお、これらの化合物は1-D体および1-L体の混合物として得られるが、下記のスキームでは一方の異性体のみ記載している以下同様である。抗酸菌生育阻害剤の標的となる抗酸菌の種類について特に制限はないが、好ましくは、ヒトや動物に対し病原性を有するものであり、その具体例としては、結核菌Mycobateriumtuberculosis、らい菌Mycobacteriumleprae、非結核性抗酸菌Mycobacteriumavium、Mycobacteriumkansasii等が挙げられる。抗酸菌生育阻害剤におけるPIP合成酵素阻害活性を評価する方法としては、抗酸菌生育阻害剤の存在下および非存在下でPIP合成酵素の活性を測定し、それぞれの場合における酵素活性の比から阻害活性を評価する方法が挙げられる。抗酸菌生育阻害剤におけるPIP合成酵素阻害活性をinvitroで評価するための評価系アッセイ系に用いられるPIP合成酵素は、抗酸菌の菌体から単離精製したものであってもよく、菌体をホモジナイズしたものをそのまま用いてもよく、あるいは、PIP合成酵素をコードする遺伝子を大腸菌等に導入し発現させたものを用いてもよい。抗酸菌としては、治療対象となる疾患の原因となる抗酸菌を用いてもよいが、Msmegmatis等の病原性を有しない抗酸菌を用いてもよい。酵素活性反応速度または被検化合物の阻害活性は、一定時間後に反応液中に含まれる基質濃度または生成物PIP濃度により求めることができる。被検化合物の存在下および非存在下にLineweaverBurkプロットの比較より、被検化合物の阻害機構を判定することもできる。基質濃度または生成物濃度は、基質にラジオアイソトープを用いた生成物の放射能測定、高速液体クロマトグラフィー等の任意の公知の手段を用いて行うことができる。本発明の作用効果を確認するために行った実施例について説明する。[1]1-デオキシ-1-ジヒドロキシホスホリルメチル-myo-イノシトールおよび1-デオキシ-1-ジエトキシホスホリルメチル-myo-イノシトール上記のスキーム化7参照にしたがって標記化合物を合成した。1,4-ジ-O-ベンゾイル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール窒素雰囲気下、室温でmyo-イノシトール25g、138.8mmolのN,N-ジメチルホルムアミド100mL溶液に2,2-ジメトキシプロパン75mL、612.1mmolとp-トルエンスルホン酸一水和物0.5g、2.6mmolを加え、100°Cで2時間攪拌した。溶液を氷浴で冷やし、トリエチルアミン5mLを加えた。濾過した後、トルエン12.5mLを加え、40°Cで減圧濃縮し低沸点溶媒を取り除いた。そのN,N-ジメチルホルムアミド100mL溶液にピリジン75mL、929.2mmolを加えた後、氷浴で冷やしながら塩化ベンゾイル100mL、860.8mmolを15分かけて一滴ずつ滴下し2時間攪拌した。析出した固体を吸引濾過し、ピリジン、水、アセトン、ジエチルエーテルの順で洗浄することで1,4-ジ-O-ベンゾイル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール1を白色固体16.2g収率25で得た。1HNMRδ1301441511643734364414795435617437497557628098162,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール窒素雰囲気下、室温で水酸化ナトリウム0.41g、10.17mmolのメタノール21.7mL溶液に1,4-ジ-O-ベンゾイル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール11.02g、2.17mmolを加え、5時間過熱還流した。溶液を氷浴で冷やし、緩衝溶液を加えて反応を止めた。ジクロロメタンで10回抽出し、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。無水硫酸ナトリウムをろ過し、減圧濃縮することで粗生成物を得た。得られた粗生成物をヘキサンと酢酸エチルを用いて再結晶することで2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール2を結晶434.4mg収率77で得た。1HNMRδ1381461481542342403333833883934014094491-O-ベンジル2,3:5,6ジ-O-イソプロピリデン-myoイノシトール窒素雰囲気下、室温で2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール23.13g、12.0mmolのN,N-ジメチルホルムアミド120mL溶液に水素化ナトリウム0.58g、24.0mmolを加え、1時間攪拌した。その溶液にベンジルブロミド1.44mL、12.0mmolを加え室温で2時間攪拌し、緩衝溶液を加えて反応を止めた。酢酸エチルで2回抽出し、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。無水硫酸ナトリウムをろ過し、減圧濃縮することで粗生成物を得た。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン:酢酸エチル=1:1で精製することで1-O-ベンジル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール3を白色固体2.21g収率53で得た。1HNMRδ1341461491552383273793873903913954054324814897267431-O-ベンジル-4-O-tert-ブチルジメチルシリル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトールアルゴン雰囲気下、室温で1-O-ベンジル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール31.39g、3.96mmolのN,N-ジメチルホルムアミド8mL溶液に1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデセンDBU、1.19mL、7.92mmol、4-ジメチルアミノピリジン0.048g、0.396mmol、tert-ブチルジメチルシリルクロリド0.896g、5.94mmolを加え、60°Cで3時間攪拌した。緩衝溶液を加えて反応を止め、酢酸エチルで2回抽出し、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。無水硫酸ナトリウムをろ過し、減圧濃縮することで粗生成物を得た。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン:酢酸エチル=5:1で精製することで1-O-ベンジル-4-O-tert-ブチルジメチルシリル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール4を1.80g収率98,黄色のオイルで得た。1HNMRδ0100090891331411441523193723813883984264804877267424-O-tert-ブチルジメチルシリル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール水素雰囲気下、室温で1-O-ベンジル-4-O-tert-ブチルジメチルシリル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール41.80g、3.88mmolのエタノール4.4mL溶液に水酸化パラジウム0.180g,10wt,トリエチルアミン0.674、0.4.84mmolを加え、3日間攪拌した。溶液をセライトろ過し、減圧濃縮することで粗生成物を得た。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン:酢酸エチル=2:1で精製することで4-O-tert-ブチルジメチルシリル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール5を1.43g収率99,白色固体で得た。1HNMRδ0100110911361411441512303253763793954004024432,3,5/4,6-4-O-tert-ブチルジメチルシリル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-2,3,4,5,6-ペンタヒドロキシシクロヘキサノンアルゴン雰囲気下、0°CでN-クロロスクシンイミド1.01g、7.56mmolのトルエン8mL溶液にジメチルスルフィド0.56mL、7.56mmolを加え、-25°Cまで温度を下げた。-25°Cで混合溶液に4-O-tert-ブチルジメチルシリル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール50.470g、1.26mmolのトルエン4mL溶液を一滴ずつ加え、-25~-35°Cで3時間攪拌した。その溶液にトリエチルアミン1.57mL、11.30mmolを加えた後、冷却浴を外し、室温にもどした。0°Cで飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液を加えて反応を止め、エーテルで抽出し、飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液、水、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、無水硫酸ナトリウムをろ過し、減圧濃縮することで2,3,5/4,6-4-O-tert-ブチルジメチルシリル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-2,3,4,5,6-ペンタヒドロキシシクロヘキサノン6を384.6mg収率<82、ブラウンオイルで得られた。1HNMRδ0140160931341441471543644144244304574-O-tert-ブチルジメチルシリル-1-ジエトキシホスホリルメチリデン-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-2,3,4,5,6-シクロヘキサンペントールアルゴン雰囲気下、0°Cでメチレンジリン酸ジエチル2.6mL、4.12mmolのテトラヒドロフラン5mL溶液にn-ブチルリチウム1.58Mヘキサン溶液、2.6mL、4.12mmolを加え、0.5時間攪拌した。その混合溶液に2,3,5/4,6-4-O-tert-ブチルジメチルシリル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-2,3,4,5,6-ペンタヒドロキシシクロヘキサノン6384.6mg、1.03mmolのテトラヒドロフラン5mL溶液を一滴ずつ加え、0°Cで2時間攪拌した。緩衝溶液を加えて反応を止め、酢酸エチルで2回抽出し、水と飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。無水硫酸ナトリウムをろ過し、減圧濃縮することで粗生成物を得た。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン:酢酸エチル=1:1で精製することで4-O-tert-ブチルジメチルシリル-1-ジエトキシホスホリルメチリデン-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-2,3,4,5,6-シクロヘキサンペントール7を389.0g収率74,黄色のオイルで得た。1HNMRδ0110120911301361461493443884044184384424465901HNMRδ0090881321351381531553754044264544574775225256014-O-tert-ブチルジメチルシリル-1-デオキシ-1-ジエトキシホスホリルメチル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール水素雰囲気下、室温で4-O-tert-ブチルジメチルシリル-1-ジエトキシホスホスホリルメチリデン-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-2,3,4,5,6-シクロヘキサンペントール735.9mg、0.071の酢酸エチル1.0mL溶液に酸化白金7.18mg、20wtを加え、21時間攪拌した。溶液をセライトろ過し、減圧濃縮することで粗生成物を得た。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン:酢酸エチル=1:1で精製することで4-O-tert-ブチルジメチルシリル-1-デオキシ1-ジエトキシホスホリルメチル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール8を29.5g収率81,黄色のオイルで得た。1HNMRδ0100901321341371391462122192262363263503734074134501-デオキシ-1-ジエトキシホスホリルメチル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトールアルゴン雰囲気下、0°Cで4-O-tert-ブチルジメチルシリル-1-デオキシ-1-ジエトキシホスホリルメチル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール814.9mg、0.029mmolのテトラヒドロフラン溶液1mLにテトラブチルアンモンミウムフルオリド1Mテトラヒドロフラン溶液、0.087mL、0.087mmolを加え、0°Cで0.5時間攪拌した後、室温で5時間攪拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて反応を止め、酢酸エチルで2回抽出し、水と飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。無水硫酸ナトリウムをろ過し、減圧濃縮することで粗生成物を得た。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー酢酸エチルのみ、Rf=0.08で精製することで1-デオキシ-1-ジエトキシホスホリルメチル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール9を10.5g収率92,黄色のオイルで得た。1HNMRδ1341351421441492142202332423353573834004074164561-デオキシ-1-ジヒドロキシホスホリルメチル-myo-イノシトール窒素雰囲気下、室温で1-デオキシ-1-ジエトキシホスホリルメチル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール9172.8mg、0.44mmolのアセトニトリル4.4mL溶液に乾燥させたヨウ化ナトリウム426.7mg、2.85mmolとトリメチルシリルクロリド0.36mL、2.85mmolを加え、遮光して67時間攪拌した。水を加えて反応を止め、水層をヘキサンとエーテルで洗浄し減圧濃縮し、陽イオン交換カラムを行った。水を凍結乾燥することで1-デオキシ-1-ジヒドロキシホスホリルメチル-myo-イノシトール10を45.0mg<34,白色固体で得た。1HNMRδ1801952022153263373513574171-デオキシ-1-ジエトキシホスホリルメチル-myo-イノシトール窒素雰囲気下、室温で4-O-tert-ブチルジメチルシリル-1-デオキシ-1-ジエトキシホスホリルメチル-2,3:5,6-ジ-O-イソプロピリデン-myo-イノシトール8135.5mg、0.266mmolの溶液溶媒トリフルオロ酢酸:水=2:1を3時間攪拌し、減圧濃縮し凍結乾燥することで1-デオキシ-1-ジエトキシホスホリルメチル-myo-イノシトール11を83.6mg収率quant、白色固体で得た。1HNMRδ133181190206214217231327338356361406422上記の[1]で合成した1-デオキシ-1-ジヒドロキシホスホリルメチル-myo-イノシトールおよび1-ジエトキシホスホリルメチル-myo-イノシトールを含む下記の化合物を用いて、PIP合成酵素の阻害活性および抗酸菌生育阻害活性を検討した。[2]PIP合成酵素の阻害活性の測定1遺伝子組換え操作によるPIP合成酵素の発現結核菌MtuberculosisのAIP合成酵素と同一のアミノ酸配列を有するBCGMbovisのPIP合成酵素の遺伝子を組み込んだプラスミドpET21aBCGPIPSを構築し、これを大腸菌Ecoliに導入し、PIP合成酵素を発現させた。2酵素活性測定CDP-ジアシルグリセロールと[14C]イノシトール1-リン酸に緩衝液を加え、酵素として1にしたがいPIP合成酵素を発現させたEcoliのホモジネートを加えて反応させた後、有機溶媒可溶性生成物の放射能を測定した。3PIP合成酵素活性測定0.2mMCDP-ジアシルグリセロール、0.04mM[14C]イノシトール1-リン酸8Ci/mol8nmol、2381Bq/アッセイ、50mMBicine緩衝液pH8.5、5mM2-メルカプトエタノール、10mMMgCl2、1.0CHAPS、酵素溶液タンパク量20μg全容量0.2mLを37°Cで10分間反応させた。脂質基質は[14C]イノシトール1-リン酸と1.0CHAPSと酵素溶液以外の反応溶液中で室温、20分間超音波処理して懸濁した。反応後、0.1MHCl/メタノールと1MMgCl2pH2を加え、Bligh-Dyer法の比率で水層とクロロホルム層に分画し、クロロホルム可溶性生成物の放射能を測定した。[3]抗酸菌生育阻害活性の検討1ウェルに×2普通ブイヨン培地Nutrientbroth100μg/mLアンピシリンを100μL、2ウェルから12ウェルまではNutrientbroth50μg/mLアンピシリンを100μL加える。1ウェルに阻害剤を100μL加え、10ウェルまで2倍段階希釈した各ウェルの阻害剤濃度は次のとおりである。1ウェル:10mM、2ウェル:5mM、3ウェル:2.5mM、4ウェル:1.25mM。以下同様。。Mycobacteriumsmegmatismc21551小川培地3日培養菌をPBSにケン濁後5μmフィルターを通し単個菌3.9×107CFU/mLにしたものを菌液とし、10μLずつ1~11ウェルに加える。これをプレートミキサーに掛け、37°Cで3日間培養後、判定を行った表1。抗酸菌は菌同士が接着しプレートの底に沈むため、96ウェルマイクロプレートの結果を濁度OD600で示すことは困難である。そこで、各ウェルの菌液を採取し、寒天培地でのコロニー形成能をみた。具体的には、96ウェルマイクロプレートでの結果判定後、滅菌つまようじを用い、各ウェルの液を混和後、普通寒天培地へ接種し37°Cで4日間培養した図1。[4]結果結果を表1および図1に示す。表1は各種化合物のPIP合成酵素相対活性およびMsmegmatisの増殖阻害試験の結果である。の数は、増殖の程度を、-は菌の増殖が認められなかったことを示す。また、図1は、増殖阻害試験に使用したマイクロプレートより、普通寒天培地に菌を接種し、コロニー形成能を検討した結果を示す写真である。図1において明らかなように、マイクロプレート法の増殖阻害試験結果表1と同様の結果が得られた。いずれの化合物についても、invitroでPIP合成酵素活性の阻害を示したが、Ino-C-COOHおよびDL-Ino-C-POH2は、Msmegmatisの増殖を阻害することができなかった。後者については、シクロヘキシルアンモニウム塩とすることで、高い増殖阻害活性を示すことが認められた。シクロヘキシルアンモニウム塩酸塩のみを20mM加えてもMsmegmatisの増殖が認められた。従って、疎水性カチオンとの塩にすることにより、DL-Ino-C-POH2の細胞膜透過性が増大し、菌体内への取り込みが促進されたためと考えられる。"