"ナノ抗体をコードするDNAが導入され、ナノ抗体がコメに発現しているトランスジェニックイネ。ナノ抗体が水溶性の形態でコメに蓄積している、請求項1に記載のトランスジェニックイネ。請求項1または2に記載のトランスジェニックイネから採取されたコメ。請求項3に記載のコメの、ナノ抗体を含有する水溶性画分。請求項3に記載のコメまたは請求項4に記載の水溶性画分の、ナノ抗体を含有する加工物。請求項3に記載のコメ、請求項4に記載の水溶性画分、または請求項5に記載の加工物を含有する、組成物。ナノ抗体の製造方法であって、aナノ抗体をコードするDNAをイネに導入し、ナノ抗体がコメに発現しているトランスジェニックイネを作出する工程、b工程aで作出されたトランスジェニックイネのコメから水溶性画分を得る工程、を含む方法。本発明は、上記従来技術の有する課題に鑑みてなされたものであり、その目的は、コメにおいて抗体が水溶性の形態で蓄積しているトランスジェニックイネを提供することにある。さらなる本発明の目的は、このようなトランスジェニックイネを利用して効率的に抗体を製造する方法を提供することにある。通常、ヒトの抗体は重鎖2本と軽鎖2本から構成されているが、ラマやラクダなどのラクダ科の動物には、重鎖と軽鎖からなる4本鎖抗体だけでなく、重鎖のみからなる2本鎖抗体が存在し、4本鎖抗体同様に標的抗原を認識結合できることが1993年に報告された非特許文献3。さらに、この2本鎖抗体の可変領域のみvariabledomainofllamaheavy-chain;VHHを断片化して取り出したところ、正常な抗体同様の抗原への結合親和力を有していることも判明した。このVHHは、現在、抗原への結合親和力を持つ最小の抗体であることから、ナノ抗体と呼ばれている。ナノ抗体は、小型で、酸や熱に対して耐性で高い安定性を有しており非特許文献4、また、分子量が小さいことから様々な宿主において組換え蛋白質として生産されている非特許文献5。本発明者らは、これまで水溶性の形態で蛋白質をコメに蓄積させることに成功していないイネ発現系にナノ抗体を適用して発現させたところ、意外にも、ナノ抗体が、水溶性の形態でコメにおいて蓄積されることを見出した。ナノ抗体のコメにおける局在の解析により、この水溶性の特質においては、コメの蛋白質貯蔵体以外細胞質へのナノ抗体の局在が、主要な要因の一つとなっていると考えられた。さらに、本発明者らは、可溶化したナノ抗体が、その本来の性能である耐熱性と安定性を保持していることを見出した。また、ナノ抗体は単量体よりも多量体の方が抗原に対する中和効果が高いことも見出した。このように、本発明者らは、抗体をナノ抗体としてイネ発現系に適用することにより、抗体を水溶性の形態で、かつ、抗体の本来の特性を失わせることなく、コメに蓄積させることに世界で初めて成功し、本発明を完成するに至った。本発明は、より詳しくは、以下の発明を提供するものである。1ナノ抗体をコードするDNAが導入され、ナノ抗体がコメに発現しているトランスジェニックイネ。2ナノ抗体が水溶性の形態でコメに蓄積している、1に記載のトランスジェニックイネ。31または2に記載のトランスジェニックイネから採取されたコメ。43に記載のコメの、ナノ抗体を含有する水溶性画分。53に記載のコメまたは4に記載の水溶性画分の、ナノ抗体を含有する加工物。63に記載のコメ、4に記載の水溶性画分、または5に記載の加工物を含有する、組成物。7ナノ抗体の製造方法であって、aナノ抗体をコードするDNAをイネに導入し、ナノ抗体がコメに発現しているトランスジェニックイネを作出する工程、b工程aで作出されたトランスジェニックイネのコメから水溶性画分を得る工程、を含む方法。本発明により、ナノ抗体を、その本来の特性を失わせることなく、水溶性の形態でコメに蓄積させることが可能となった。本発明によれば、大量のナノ抗体を安価かつ安定な形態で製造することができる。ナノ抗体を蓄積させたコメやその水溶性画分、あるいはそれらの加工物は、安全な組成物として、医薬や飲食品などに応用することができる。本発明は、ナノ抗体をコードするDNAが導入され、ナノ抗体がコメに発現しているトランスジェニックイネを提供する。本発明においてイネとは、Oryzasativaに属する植物を意味し、遺伝子組換えの対象となるイネの品種は、Oryzasativaに属する限り、特に限定されるものではない。本発明においてナノ抗体とは、抗体重鎖の可変領域Variabledomainofaheavy-chainantibody又はVHHとも称すからなり、抗原を認識することができる抗体を意味する。ナノ抗体は、典型的には、ラクダ科の動物例えば、ヒトコブラクダ、フタコブラクダ、ラマ、アルパカ、ビクーニャに由来する抗体である。本発明におけるナノ抗体は、VHHをモノマーとして用いることができるが、ダイマー以上の多重抗体としても用いることができる。ダイマー以上の多重抗体としては、同一のVHHを連結したもの例えば、二量体である場合はホモダイマーであってもよく、異なる分子や同じ分子内の異なるエピト―プを認識する二つ以上のVHHが連結されているもの例えば、二量体である場合はヘテロダイマーであってもよい。かかるVHHの連結方法としては特に制限されることなく、公知の手法を用いることができる。例えば、スぺーサー配列を介してVHH間が連結されている抗体をコードするDNAを含むベクターを構築し、トランスジェニックイネのコメにおいて発現させる方法が挙げられる。また、コメにおいて単一のVHHを発現させ、水溶性画分から精製し、その後、精製されたVHH同士を結合することにより、ダイマー以上の多重抗体を作製することもできる。本発明におけるナノ抗体は、所望の抗原に対するナノ抗体を用いることができる。抗原としては、例えば、1病原性ウィルス例えば、ロタウィルス、A型肝炎ウィルス、B型肝炎ウィルス、C型肝炎ウィルス、ノーウオークノロウィルス、狂犬病ウィルス、RSウィルス、サイトメガロウィルス、口蹄疫ウィルス、伝染性胃腸炎ウィルス、風疹ウィルス、ATLウィルス、アデノウィルス、マンプスおたふく風邪ウィルス、コクサッキーウィルス、エンテロウィルス、ヘルペスウィルス、天然痘ウィルス、ポリオウィルス、麻疹ウィルス、日本脳炎ウィルス、テング熱ウィルス、黄熱ウィルス、西ナイルウィルス、SARSコロナウィルス、インフルエンザウィルス、HIVAIDSウィルス、エボラ出血熱ウィルスフィロウィルス、マールブルグウィルスフィロウィルス、ラッサ熱ウィルス、ハンタウィルス、ニパウィルス等に由来する蛋白質などの抗原、2病原性細菌例えば、コレラ菌、病原性大腸菌、インフルエンザ菌、肺炎球菌、百日咳菌、ジフテリア菌、ペスト菌、破傷風菌、ボツリヌス菌、炭ソ菌、野兎病菌、大腸菌O157、サルモネラ菌、MRSA黄色ブドウ球菌、VRE腸球菌、結核菌、赤痢菌、腸チフス菌、パラチフス菌、クラミジア菌、アメーバ赤痢、レジオネラ菌、ライム病ボレリア菌、ブルセラ病波状熱菌等に由来する蛋白質などの抗原、3リケッチャ例えば、Q熱リケッチャ、クラミジア等に由来する蛋白質などの抗原、4原虫マラリア原虫、トリパノソーマ等に由来する蛋白質などの抗原、5サイトカイン例えば、TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8、IL-12、IL-18、IL-21、INF-γ、及びそれらのレセプターなど、6ケモカイン例えば、CCL17とそのレセプターCCR4、CXCL10とそのレセプターCXCR3、CXCR4など、7成長因子及びホルモン例えば、EGFepidermalGrowthfactor、FGFFibroblastgrowthfactor、hCGhumanChorionicgonadotropin、およびそれらのレセプターなど、8腫瘍抗原例えば、CEAcarcinoembryonicantigen等の大腸がん腫瘍抗原、Her2等の乳がん腫瘍抗原、PSAprostatespecificantigen等の前立腺がん腫瘍抗原など、9細胞抗原例えばCD3、CD25、RANKLなど、10その他例えばフォンヴィレブランド因子vonWillebrandfactor:vWF血小板凝集因子などが挙げられる。ナノ抗体をコードするDNAに含まれるコドンは、植物型コドンに改変されていることが好ましい。植物型コドンに改変されることにより、コメイネ胚乳細胞内におけるナノ抗体の発現効率を向上させることができる。ナノ抗体をコメにおいて発現させるための、ナノ抗体をコードするDNAを含むベクターにおいては、イネ胚乳特異的に機能するプロモーターおよびターミネーターを利用することが好ましい。ベクターにおいては、ナノ抗体をコードするDNAの上流に当該プロモーターが連結され、ナノ抗体をコードするDNAの下流に当該ターミネーターが連結される。イネ胚乳特異的に機能するプロモーターおよびターミネーターとしては、例えば、イネ胚乳貯蔵タンパク質をコードする遺伝子のプロモーターおよびターミネーターが挙げられる。イネ胚乳貯蔵タンパク質をコードする遺伝子のプロモーター及びターミネーターを利用することにより、コメにおいてナノ抗体を効率よく発現させることができる。ここでイネ胚乳貯蔵タンパク質とは、イネ胚乳細胞内で特異的に発現し、イネ胚乳細胞内に蓄積されるタンパク質を意味し、その種類は特に限定されるものではない。イネ胚乳貯蔵タンパク質としては、例えば、グルテリン、プロラミン、グロブリン等が挙げられる。イネ胚乳貯蔵タンパク質をコードする遺伝子のプロモーターは、グルテリンGluB-1遺伝子又はプロラミン13K遺伝子のプロモーターであることが好ましい。これら遺伝子のプロモーターは、その他のイネ胚乳貯蔵タンパク質をコードする遺伝子のプロモーターよりもプロモーター活性が高い点で有利である。イネ胚乳特異的プロモーターは、イネ胚乳特異的プロモーター活性を有する限り、天然型プロモーター及び変異型プロモーターのいずれであってもよい。変異型プロモーターとは、天然型プロモーターの塩基配列において1若しくは複数個の塩基が置換、欠失又は付加した塩基配列からなり、イネ胚乳特異的プロモーター活性を有するプロモーターを意味する。イネ胚乳特異的ターミネーターについても同様である。また、コメにおいてナノ抗体を効率的に蓄積させるために、コメの貯蔵タンパク質の発現を抑制する処理を行うことが好ましい。このような処理としては、例えば、RNAi法により13Kプロラミン又はグルテリンの発現のどちらか一方を抑制する、または13Kプロラミン及びグルテリンの発現を両方とも抑制2重抑制する発現抑制カセットをイネに導入することが挙げられる。イネ細胞へのベクターの導入方法は特に限定されるものではないが、例えば、アグロバクテリウムツメファシエンス、アグロバクテリウムリゾゲネス等を利用した間接導入法Hiei,Y.etal.,PlantJ.,6,271-282,1994;Takaiwa,F.etal.,PlantSci.111,39-49,1995;日本特許第3141084号、エレクトロポレーション法Tada,Y.etal.Theor.Appl.Genet,80,475,1990、ポリエチレングリコール法Datta,S.K.etal.,PlantMolBiol.,20,619-629,1992、パーティクルガン法Christou,P.etal.,PlantJ.2,275-281,1992、Fromm,M.E.,Bio/Technology,8,833-839,1990等の直接導入法が挙げられる。イネ細胞を培養してイネ植物体を再生させる方法は特に限定されるものではなく、公知の方法に従えばよい。トランスジェニックイネは、例えば、イネ細胞に、ナノ抗体をコードするDNAを発現させるためのベクターを導入した後、形質転換イネ細胞を培養してイネ植物体を再生させることにより作出することができる。ベクターを導入するイネ細胞の形態は、植物体に再生可能である限り特に限定されるものではなく、例えば、培養細胞、プロトプラスト、苗条原基、多芽体、毛状根、カルス等が挙げられる。ベクターとしてプラスミドを用いる場合は、ベクターが導入されたイネ細胞を効率よく選択することができるように、ハイグロマイシン、テトラサイクリン、アンピシリン等の薬剤耐性遺伝子を含有させておくことが好ましい。なお、経口剤として、発現米から精製することなしに医薬品に用いる場合は、特に安全性が確保されてないハイグロマイシンは、コトランスフェクション法等の公知の方法で除く必要がある。こうして作出されたトランスジェニックイネのコメにおいては、ナノ抗体が、水溶性の形態で、かつ、その本来の特性例えば、抗原への結合性、ナノ抗体の耐熱性や安定性を失うことなく蓄積されている。従って、本発明は、ナノ抗体の製造方法であって、aナノ抗体をコードするDNAをイネに導入し、ナノ抗体がコメに発現しているトランスジェニックイネを作出する工程、およびb工程aで作出されたトランスジェニックイネのコメから水溶性画分を得る工程、を含む方法をも提供するものである。さらに、本発明は、本発明のトランスジェニックイネから採取したコメおよびそのナノ抗体を含有する水溶性画分をも提供するものである。ここでコメとは、胚乳を含有する組織又はその部分を意味し、籾、玄米、種子、白米、これらの部分等が含まれる。また、水溶性画分とは、界面活性剤や還元剤など蛋白質を可溶化するための薬剤を含まない水や緩衝液で溶出しうるコメの画分を意味する。抗体を含め蛋白質を水溶性の形態でコメに蓄積させることは、これまで不可能であり、本発明において世界で初めて成功したことである。この水溶性の特質は、ナノ抗体が、主としてコメの蛋白質貯蔵体PB以外すなわち、細胞質に蓄積することが原因の一つになっていると考えらえる。また、本発明は、上記コメや水溶性画分の加工物をも提供するものである。ここで加工物には、ナノ抗体を含有する限りいかなる加工物も含まれる。施す加工としては、例えば、脱穀、粉末化、ナノ抗体を含む所望の画分の抽出、抽出された画分の精製等が挙げられる。こうして調製されたコメ、その水溶性画分、あるいはそれらの加工物は、安全性の高い組成物として利用することができる。組成物の形態は特に制限はなく、医薬組成物、飲食品、動物用飼料などが含まれる。医薬組成物は、例えば、経口用組成物として利用することができる。コメの水溶性画分やその加工物は、例えば、注射用組成物などとしても利用することができる。本発明の組成物を投与もしくは摂取させる動物としては、例えば、ヒト及びその他の脊椎動物例えば、哺乳類、鳥類、両性類、魚類、爬虫類等が挙げられる。本発明における組成物は、公知の製剤学的方法により製剤化することもできる。これら製剤化においては、薬理学上もしくは飲食品や動物飼料として許容される担体、具体的には、滅菌水や生理食塩水、植物油、溶剤、基剤、乳化剤、懸濁剤、界面活性剤、安定剤、香味剤、芳香剤、賦形剤、ベヒクル、防腐剤、結合剤、希釈剤、等張化剤、無痛化剤、増量剤、崩壊剤、緩衝剤、コーティング剤、滑沢剤、着色剤、甘味剤、粘稠剤、矯味矯臭剤、溶解補助剤あるいはその他の添加剤等と適宜組み合わせることができる。本発明の組成物を投与もしくは摂取する場合、その投与量または摂取量は、対象の年齢、体重、組成物の種類医薬品、飲食品、動物飼料などなどに応じて、適宜選択される。例えば、1回当たりの投与量または摂取量は、一般に、0.001mg/kg体重~100mg/kg体重である。以下、実施例及び比較例に基づいて本発明をより具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。実施例1VHH1発現米MucoRice-VHH1の作出ロタウィルスに対するナノ抗体VHH1の遺伝子情報は公知の公開情報を用いたhttp://igitur-archive.library.uu.nl/dissertations/2004-0419-094105/c4.pdf。VHH1は、アカゲザルロタウィルスRRV血清型G3をラクダ科のラマに免疫して得られたH鎖のみの抗体の抗原結合部位である。VHH1をコードする遺伝子を、イネが利用しやすいコドンをもとに再構築し人工合成した。導入遺伝子の設計については、公開された特許情報WO2004/056993A1で示されたように、選抜マーカーカセット、外来遺伝子の過剰発現カセット、種子内在性貯蔵タンパク質遺伝子に対する発現抑制カセット、の3者を1つのT-DNAバイナリーベクターpZH2B/35SNos上に連結して同時に導入する方法を参考にした。すなわち、まず選抜マーカーカセットは、ハイグロマイシン耐性遺伝子mHPTをCaMV35Sプロモーター及びNosターミネターに連結した。次に、外来遺伝子カセットは胚乳細胞特異的プロラミン13Kプロモーター10Kプロラミンシグナルとプロラミン13Kプロラミンターミネターとの間にVHH1をコードする遺伝子を挿入した。さらに、貯蔵タンパク質遺伝子に対する発現抑制カセットは、RNAi法により13Kプロラミン及びグルテリンの発現を2重抑制するものを構築した。具体的には、イネアスパラギン酸プロテアーゼRAPイントロンの両端に、13KプロラミンcDNAの一部45bpとグルテリンAのcDNAの一部129bpをセンスおよびアンチセンス方向に連結し、これをユビキチンプロモーターとNosターミネターの間に挿入することで、ヘアピン型RNAを発現する構造とした。これらすべてを連結したVHH1遺伝子発現用T-DNAバイナリーベクターを、アグロバクテリウムを介した定法によってイネ日本晴に導入し、VHH1発現米を作出した。実施例2MucoRice-VHH1におけるVHH1発現解析VHH1遺伝子の導入を行ったイネの種子以下、MucoRice-VHH1とも称するがVHH1を発現しているかどうかに関して、SDS-PAGE、Westernblotおよび免疫染色の手法を用いて解析した。脱穀後の種子MucoRice-VHH1および野生株を粉砕化し、米粉末をサンプルバッファー2SDS、5β-メルカプトエタノール、50mMTris-HCl、20グリセロール、pH6.8に懸濁し、抽出液ならびに陽性コントロールとして大腸菌由来のリコンビナントVHH1以下、rVHH1と略すを12ポリアクリルアミドゲルを用いて電気泳動により分離した。分離後のゲルはCBBクーマシーブリリアントブルー染色を行った。その結果、野生株の種子にはrVHH1と同サイズの蛋白を認めなかったのに対して、MucoRice-VHH1にはrVHH1と同サイズの蛋白が発現していることが確認された図1中a。また、分離後のゲルをPVDFメンブレンに転写し、rVHH1をウサギに免疫して作製した抗VHH1ポリクローナル抗体を用いてWesternblot解析を行った。その結果、抗体特異的なバンドをリコンビナント蛋白と同位置に認めた図1中a。さらに、種子におけるVHH1の発現を抗VHH1ポリクローナル抗体を用いた免疫染色により解析を行った。具体的には、開花後14日目の種子を採取切断し、4パラフォルムアルデヒド溶液PFAに浸漬固定し、スクロース浸漬後に凍結包埋を行い、3μmの凍結切片を作成、抗VHH1ポリクローナル抗体を反応させ、その後HRP標識ロバ抗ウサギIgG抗体を反応させ、3,3’-diaminobenzidineDABにより発色、ヘマトキシリンによるカウンター染色を行った。その結果、野生株の種子には抗VHH1抗体特異的な染色像は見られなかったが、MucoRice-VHH1においては抗VHH1抗体特異的染色像が種子全域に認められた図1中b。実施例3MucoRice-VHH1由来のVHH1の構造解析米に発現したVHH1の構造を明らかにするため、構造解析を行った。MucoRice-VHH1米粉末をサンプルバッファー2SDS、5β-メルカプトエタノール、50mMTris-HCl、20グリセロール、pH6.8に懸濁し、抽出液ならびに陽性コントロールとしてrVHH1を12ポリアクリルアミドゲルを用いて電気泳動により分離した。分離後のゲルはCBB染色を行い、VHH1に該当するバンドを切り出し、CBB脱色脱水後にトリプシンによるゲル消化を行い、ペプチドを抽出した。抽出したペプチドはnanoLCによる分離を行い、2種類の質量分析計QSTAREliteおよびLTQOrbitrapを用いて解析した。なお、QSTAREliteの解析結果を配列番号:1に示し、LTQOrbitrapの解析結果を配列番号:2に示し、また、これらをまとめて図2に示す。その結果、図2に示すように、2種類の質量分析計の結果を合わせて完全なアミノ酸配列を解読することができた。またこの結果から、VHH1の完全な配列に加え、N末端に米特有の配列であるSRセリンアルギニンを持つことが示されたが、米の発現系を用いたことによるアスパラギンやセリン等への糖鎖付加のような修飾は認められなかった。実施例4MucoRice-VHH1からのVHH1抽出条件検討MucoRice-VHH1からのVHH1抽出条件を検討した。100mgのMucoRice-VHH1米粉末にリン酸緩衝液以下、PBSと略す1mLあるいは8M尿素入りPBS1mLを加え、懸濁後すみやかに遠心し、上清および陽性コントロールとしてrVHH1をサンプルバッファー2SDS、5β-メルカプトエタノール、50mMTris-HCl、20グリセロール、pH6.8に懸濁し、12ポリアクリルアミドゲルを用いて電気泳動により分離した。分離後のゲルはCBB染色を行った。その結果、図3に示すように、PBS単独で8M尿素入りPBSと同程度のVHH1がMucoRice-VHH1から抽出されることが明らかとなった。このことは米粉末中のVHH1が水溶性であることを示している。比較例11本鎖抗体を発現するMucoRiceと可溶化マウスM細胞に特異性をもつモノクローナル抗体NKM-16-2-4T.Nochiet.al.J.Exp.Med.204.2789-27962007から抗体遺伝子をクローニングし、その1本鎖抗体scFvをコードする遺伝子を、イネが利用しやすいコドンをもとに再構築し人工合成した。米発現用に改変したscFv遺伝子は、実施例1において用いたT-DNAバイナリーベクターの胚乳細胞特異的プロモーター下に挿入し、最終的にアグロバクテリウムを介してイネ日本晴の形質転換を行い、定法によりscFv発現米を作出した。このscFvを発現する米粉末は実施例4の条件で、図4に示すように、PBSではまったく可溶化できず、尿素SDSでのみ可溶化された。実施例5MucoRice-VHH1におけるVHH1の局在免疫電子顕微鏡により種子におけるVHH1の局在を調べた。開花後14日目の種子を採取し、0.5~1.0μm程度の切片を作製し、4PFAで固定後、LR-ホワイト樹脂に浸漬包埋した。その後100μmの超薄切片を作製しグリッドに載せ、抗VHH1ポリクローナル抗体を反応させ、洗浄後18nm金コロイド標識抗ウサギIgG抗体を反応させた。その後、洗浄し、1グルタルアルデヒドで固定し、2酢酸ウラニルと鉛溶液による電子2重染色を行い、電子顕微鏡による観察を行った。その結果、VHH1は、PB-IIに顕著に観察され、PB-Iには外表付近に軽度観察されたが、これらPB以外の細胞質に多くのVHH1の蓄積が見られた図5。MucoRice-VHH1の抽出検討でみられたVHH1の水溶性は、特に、高い水溶性を示す細胞質への局在に依存していることが考えられた。実施例6ロタウィルスに対するMucoRice-VHH1の中和効果の評価細胞感染実験MA104細胞アカゲザル腎臓由来株化細胞を96穴プレートに播種し、約2日後、ウェル内に十分増殖した上で、無血清MEM培地で洗浄を行った。トリプシン処理37°C、30分を行ったアカゲザルロタウィルス以下、RRVと略す液無血清MEM培地使用を準備した。また、MucoRice-VHH1粉末および野生米粉末100mgに無血清MEM1mLを加え懸濁し、遠心後の上清を0.22umフィルターを通して無菌化したものを段階希釈した。様々な濃度の米抽出液に200ffufocusformingunits、フォーカス形成単位のトリプシン処理されたRRVを加え、さらにその混合液を96穴プレートのMA104細胞上に加えた。陰性コントロールとして無血清MEM培地のみ、陽性コントロールとしてRRVのみを各ウェルに加えた。約1時間37°CでCO2インキュベーターで反応させた後、無血清MEM培地で洗浄を繰り返し、10FCS入りMEM培地を加えて、CO2インキュベーター37°Cで12時間培養を行った。その後、無血清MEM培地で洗浄、さらにPBSで洗浄し、4PFAで固定を行った。洗浄後、感染細胞内で増殖することの知られているVP6RRVの構成蛋白の一種に対するマウスモノクローナル抗体を反応させた。洗浄後、HRP標識ヤギ抗マウスIgGポリクローナル抗体を反応させ、洗浄後発色させた。感染細胞は赤茶色に発色することから、顕微鏡下で感染細胞数を測定し、RRVのみを反応させたウェルの感染細胞数を100とした。その結果、図6に示すように、MucoRice-VHH1由来のVHH1は、RRV単独あるいはRRVと野生米抽出液の混合液と比較して有意に感染率を減少させ、RRVに対する中和効果を証明しているVHH1濃度は1ug/mL。また1年間室温で保存したMucoRice-VHH1は収穫直後のMucoRice-VHH1と同程度の中和効果を持つことが明らかとなり、MucoRice-VHH1の長期室温保存性が証明された。実施例7消化管内におけるMucoRice-VHH1の安定性分布の評価MucoRice-VHH1粉末と純水との懸濁液を遠心した後、上清を回収し、100μg/mL濃度のVHH1溶液40μlを日齢4日のBalb/cマウスの胃内に投与した。1、3、4、9時間後に胃空腸回腸大腸の内容物を回収し、PBS500uLに懸濁した。その後、同液をサンプルバッファー2SDS、5β-メルカプトエタノール、50mMTris-HCl、20グリセロール、pH6.8に懸濁し、12ポリアクリルアミドゲルを用いて電気泳動により分離し、抗VHH1ポリクローナル抗体を用いてウェスタンブロット解析を行った。その結果、図7に示すように米由来のVHH1は投与4時間後までは胃から大腸までの全消化管に認められた。また、投与9時間後では約50のマウスに空腸から大腸にかけて米由来VHH1が認められた。実施例8ロタウィルスに対するMucoRice-VHH1の中和効果の評価幼若動物を用いた感染実験1日齢4日目のBalb/cマウスに、トリプシン処理37°C、30分を行ったRRV2x107ffuMEM20ulに含有を胃内に投与すると、約24時間後から水様性下痢が認められ図8、3~4日後に自然軽快する。この感染モデルを用い、MucoRice-VHH1のRRVに対する中和効果下痢抑制効果を検証した。MucoRice-VHH1とPBSを懸濁して遠心後に得られた上清VHH1濃度200ug/mLをRRV投与6時間前あるいは6時間後に20μLVHH1量4μg投与し、以後12時間毎に胃内投与を投与4日目RRV投与日を0日とするまで繰り返した。投与4日目までの下痢の発症頻度を計測した。その結果、RRV投与前および投与後に米由来VHH1を投与した両群で、下痢の発症率は有意に低値であった図9、10。このことから、MucoRice-VHH1はRRVに対する中和効果下痢抑制効果を有し、その効果は予防的投与だけでなく、RRV暴露後でも認められることが分かった。実施例9ロタウィルスに対するMucoRice-VHH1の中和効果の評価幼若動物を用いた感染実験2実施例8と同様にして、幼若マウスを用いてロタウィルス感染モデルを調製し、実施例8において指標とした下痢の状態の代わりに、小腸組織の切片の状態及びロタウィルス量の増加を指標としてロタウィルスに対するMucoRice-VHH1の中和効果を評価した。すなわち、小腸組織切片を定法にてHematoxylin/Eosin染色して観察した。得られた結果は図11に示す。また、ロタウィルス量は小腸組織からの全RNAを抽出し、定法でcDNAを調製し、Pantらの方法Pant,N.ら、J.Infect.Dis.、2006年、194巻、1580~1588ページに記載の方法にてロタウィルスのVP7をコードするmRNAをリアルタイムPCRで定量することによって、ロタウィルスの増減を評価した。得られた結果は図12に示す。図11に示した結果から明らかなように、実施例8と同様の条件にて、ロタウイルスを感染2x107ffuRRVさせ、MucoRice-VHH1を投与した幼若マウスの小腸組織においては、上皮細胞腸管上皮細胞に異常は認められなかった図11のIII参照。一方、ロタウイルスを感染させた幼若マウスの小腸組織図11のII参照及びロタウイルスを感染させ、WT-Rice日本晴を投与した幼若マウスの小腸組織図11のIV参照において、これらのマウスの上皮細胞には多数の空胞が観察された。また、図12に示した結果から明らかなように、ウイルス感染のみのマウス小腸及びロタウイルスに感染し、WT-Rice日本晴を投与したマウス小腸に比して、ロタウイルスに感染し、MucoRice-VHH1を投与した幼若マウスの小腸におけるロタウイルスRRAのVP7RNAのコピー数は有意に低下していた。実施例10ロタウィルスに対するMucoRice-VHH1の中和効果の評価免疫不全動物を用いた感染実験免疫不全マウスであるSCIDマウスを用いてMucoRiceVHH1の抗RRV-VHH1の効果を評価した。すなわち、SCIDマウスにロタウイルス2x107ffuRRVを感染させた後、MucoRice-VHH1200mg1.7mgVHH1含有を7日間毎日2回経口投与し、継時的に下痢の臨床状況と小腸のウイルス量をリアルタイムPCRによるVP7RNA量で評価した。得られた結果を図13及び14に示す。なお、図13の下痢スコアは、下痢が認められない場合は0とし、弱い下痢が認められる場合は1とし、下痢が認められる場合は2として評価した結果に基づく。図13及び14に示した結果から明らかなように、MucoRice-VHH1投与により免疫不全マウスにおいても下痢の状況は有意の好転し、同時にウイルス量は有意に低下した。従って、実施例8及び9に示したような小児のみならず、ワクチンを投与できない免疫不全患者にも、MucoRice-VHH1はロタウイルス感染に効果があることが示された。実施例11TNF-αVHH発現米MucoRice-mTNFαVHHの作出TNF-αに対するナノ抗体VHHの遺伝子情報は公知の情報を用いたArthritisRheum.54,1856-18662006、J.Biotechnol.142:170-1782009。マウスTNFαVHHモノマーmTNFαVHHモノマーをコードする遺伝子を、イネが利用しやすいコドンをもとに再構築し人工合成した。また、TNFαVHHダイマーmTNFαVHHダイマーをコードする遺伝子は、当該VHHモノマーどうしを適当なリンカーアミノ酸配列[GGGGSGGGGSGGGGS]からなるスぺーサー配列を介して結合させダイマーとし、調製した。そして、実施例1において用いたT-DNAバイナリーベクターpZH2B/35SNosの胚乳細胞特異的プロモーター下に、米発現用に改変したmTNFαVHHモノマー又はダイマーをコードする遺伝子を挿入し、最終的にアグロバクテリウムを介してイネ日本晴の形質転換を行い、定法によりTNF-αVHH発現米MucoRice-mTNFαVHH:MucoRice-mTNFαVHHモノマー及びMucoRice-mTNFαVHHダイマーを作出した。実施例12MucoRice-mTNFαVHHからのmTNFαVHH抽出MucoRice-mTNFαVHHモノマー及びMucoRice-mTNFαVHHダイマーからのmTNFαVHHモノマー及びmTNFαVHHダイマーの各々の抽出について、SDS-PAGE及びWesternblotを用いて調べた。すなわち、先ず100mgのMucoRice-mTNFαVHH米粉末にPBS1mLを加えて懸濁した後、1時間4°Cで撹拌して遠心を行った。次いで、上清及び陽性コントロールのrmTNFαVHHはサンプルバッファー2SDS、5β-メルカプトエタノール、50mMTris-HCl、20グリセロール、pH6.8に懸濁した。また、沈殿は尿素入りサンプルバッファー2SDS、5β-メルカプトエタノール、50mMTris-HCl、20グリセロール、8MUrea、pH6.8に懸濁した。このようにして得られた、それぞれのサンプルを12ポリアクリルアミドゲルを用いてSDS-PAGE電気泳動により分離し、分離後のゲルはCBB染色に供した。また、電気泳動後のゲルをPVDFメンブレンに転写し、rmTNFαVHHをマウスに免疫して得られた抗mTNFαVHHポリクローナル抗体を用いてWesternblotを行った。その結果、VHHモノマー及びVHHダイマー共に、抗体特異的なバンドが上清サンプルにおいて認められたことから、米で発現するmTNFαVHHはモノマーに限らずダイマーにおいてもPBSで可溶化できることがわかった図15。実施例13MucoRice-mTNFαVHHにおけるmTNFαVHHタンパク量の定量MucoRice-mTNFαVHHにおいて発現しているmTNFαVHHタンパク質量を算出するため、SDS-PAGEを用いて調べた。すなわち、MucoRice-mTNFαVHH米粉末をPBSで可溶化し、得られた上清及びrmTNFαVHH標準品は、サンプルバッファー2SDS、5β-メルカプトエタノール、50mMTris-HCl、20グリセロール、pH6.8に懸濁し、12ポリアクリルアミドゲルを用いてSDS-PAGE電気泳動により分離した。次いで、分離後のゲルはCBB染色に供した。さらに、CBB染色後のゲルはデンシトメーターBIO-RAD社製により定量を行った。その結果、MucoRice-mTNFαVHHに含まれるmTNFαVHHは、VHHモノマーにおいて米粉末重量あたり平均0.82、VHHダイマーにおいて平均0.47に達しており、VHHはモノマーのみならずダイマーにおいても高発現高蓄積していることが判明した図16。実施例14mTNFαに対するMucoRice-mTNFαVHHの阻害効果の評価細胞死抑制試験WEHI164細胞マウス線維芽細胞を10FCSを含むRPMI164培地で96穴プレートに2×104個/ウェルに播種し、5CO2インキュベーター37°Cで24時間培養した。培養後、培地を除去し、培地のみ陰性コントロール、2ng/mLrmTNFαRDsystems社製のみを添加した培地陽性コントロール又は2ng/mLrmTNFαとMucoRice-mTNFαVHH由来PBS抽出液とを混合した培地を100μL添加し、24時間培養した。そして、培養終了の2時間前にWST-8同仁化学研究所製10μLを加えて培養し、450nmで吸光度を測定して生細胞数を評価した。また、得られた測定値を用いて、mTNFαに対するmTNFαVHHの阻害率を、陽性コントロールの阻害率を0、陰性コントロールの阻害率を100として評価した。得られた結果を図17に示す。なお、rmTNFαの添加量2ng/mLは、WEHI164細胞の生存率が50となる量とした。すなわち、前記同様に、WEHI164細胞を所定量0.5~4ng/mLのrmTNFαを添加した培地にて培養し、WST-8アッセイに供し、得られた生細胞数から、生存率が50になるrmTNFαの添加量を算出した図18参照。図17に示した結果から明らかなように、MucoRice-mTNFαVHH由来のmTNFαVHHは、mTNFαを著しく阻害した。また、その阻害効果はVHHダイマーの方がVHHモノマーより50~100倍高いことが明らかになった。実施例15MucoRice-mTNFαVHHにおけるmTNFαVHHの局在免疫電顕による観察種子におけるmTNFαVHHモノマー及びダイマーの局在を免疫電顕法にて解析した。すなわち、第二世代目にあたるMucoRice-mTNFαVHHモノマー及びダイマーの開花後14日目の種子を採取し、およそ0.5~1.0μmの切片を作製した。次いで、これらの切片を4PFAに4°Cで4時間振とうさせながら浸漬固定した。エタノールEtOH系列での脱水後、4°Cで2日間かけて段階的にLR-White樹脂を浸透させていき、最終的に100LR-White樹脂に浸漬包埋し、50°Cで二晩重合させた。重合後の樹脂ブロックから、ウルトラミクロトームにより80~100nmの超薄切片を作製し、フォルムバール支持膜を貼ったニッケルグリッド載物網に回収して免疫染色用のサンプルとした。免疫染色は、10ヤギ血清GoatSerumで室温30分のブロッキングを施した後、プロテインGカラムによってアフィニティー精製した抗mTNFαVHH抗体家兎を5μg/ml濃度にて室温1時間反応させた。次いで、洗浄後18nm金コロイド標識抗ウサギIgG抗体を反応させた。そして、二次抗体を反応させた後に再び洗浄し、1グルタルアルデヒドで室温5分間固定を行った後、2酢酸ウラニルで5分間次いで鉛塩で5分間の二重電子染色を行った。そして、透過電子顕微鏡により、このようにして免疫染色したサンプルを観察した。その結果、mTNFα-VHH米においては、mTNFαVHHモノマー及びダイマー共に、細胞質に顕著に局在しており、イネ蛋白質貯蔵体であるPB-IIProteinbody-II内部にもこれらの局在は観察された図19のA及びB、並びに及び図20のA及びB。一方、対照の家兎IgGを反応させたmTNFα-VHH米図19のC、図20のC及びmTNFαVHH抗体を反応させたWT日本晴米図19のD、図20のDでは、細胞質及びPB-IIのいずれにもmTNFαVHHは観察されなかった。従って、図15及び16において示されたmTNFαVHHの水溶性の特質は、ナノ抗体のモノマー及びダイマーともに、主としてコメの蛋白質貯蔵体PB以外すなわち、細胞質に蓄積することに依ることが要因の一つとして推測される。"