哺乳類の疾患状態を治療する方法であって:前記疾患状態を標的とすることを意図した哺乳類に治療を適用することとここで、前記治療は関連する造血毒性を有している;および1以上の治療上有効な用量のIL12を前記治療適用時の近くで投与することとここで、前記哺乳類へのIL12の投与は、治療の造血毒性を低下させるを備える方法。請求項1記載の方法であって、前記哺乳類がヒトである方法。請求項1記載の方法であって、前記治療が化学療法を含む方法。請求項1記載の方法であって、前記治療が放射線療法を含む方法。請求項1記載の方法であって、前記治療が化学療法および放射線療法を含む方法。請求項2記載の方法であって、IL12の用量が約2000ngkg未満である方法。請求項2記載の方法であって、IL12の用量が約500ngkg未満である方法。請求項2記載の方法であって、IL12の用量が約100ngkg未満である方法。請求項2記載の方法であって、IL12の用量が約10ngkg未満である方法。請求項1記載の方法であって、前記治療が1以上の高用量治療モダリティーを含む方法。請求項1記載の方法であって、前記治療が高密度用量治療措置を適用される方法。請求項1記載の方法であって、前記IL12の投与が前記治療に関連する造血毒性からの骨髄細胞の防護を生じる方法。請求項3記載の方法であって、前記IL12の投与が骨髄細胞の化学防護を生じる方法。請求項12記載の方法であって、前記骨髄細胞が造血再構築細胞、造血幹細胞、または造血前駆細胞を含む方法。請求項1記載の方法であって、前記治療が1以上の固形腫瘍を治療することを標的とする方法。前記疾患状態単独を標的とすることを意図した治療の適用と比較して、1以上の固形腫瘍の緩解の増加を生じる、請求項1記載の方法。請求項1記載の方法であって、前記治療が1以上の造血細胞障害を治療することを標的とする方法。前記疾患状態単独を標的とすることを意図した治療の適用と比較して、1以上の造血細胞障害の緩解の増加を生じる、請求項1記載の方法。請求項1記載の方法であって、前記治療がHIV感染を治療することを標的とする方法。HIV感染又はその関連する症状の減少を生じる、請求項19記載の方法。請求項19記載の方法であって、前記哺乳類の白血球数が増加する方法。請求項19記載の方法であって、前記哺乳類のT細胞数が増加する方法。請求項3記載の方法であって、前記化学療法が1以上の造血細胞のタイプまたは系統における欠乏を生じ、前記IL12の投与が前記欠乏を寛解する方法。請求項3記載の方法であって、前記化学療法治療が2以上の化学療法の適用を含む方法。請求項3記載の方法であって、IL12が前記化学療法の前に投与される方法。請求項3記載の方法であって、IL12が前記化学療法の後に投与される方法。請求項3記載の方法であって、IL12が前記化学療法の前または後に投与される方法。請求項3記載の方法であって、IL12が前記化学療法の前および後に投与される方法。請求項4記載の方法であって、IL12投与が骨髄細胞の放射線防護を生じる方法。請求項29記載の方法であって、前記骨髄細胞が造血再構築細胞、造血幹細胞、または造血前駆細胞を含む方法。請求項4記載の方法であって、前記放射線療法が致死量に近い放射nearlethaldoseofradiationを含む方法。請求項4記載の方法であって、前記放射線療法が亜致死性の放射sublethaldoseofradiationを含む方法。請求項4記載の方法であって、前記放射線療法が高密度用量治療措置を適用される方法。請求項4記載の方法であって、IL12が前記放射線療法の前に投与される方法。請求項4記載の方法であって、IL12が前記放射線療法の後に投与される方法。請求項4記載の方法であって、IL12が前記放射線療法の前または後に投与される方法。請求項4記載の方法であって、IL12が前記放射線療法の前および後に投与される方法。請求項4記載の方法であって、前記放射線療法が1以上の造血細胞のタイプまたは系統における欠乏を生じ、前記IL12の投与が前記欠乏を寛解する方法。請求項10記載の方法であって、前記高用量治療モダリティーが放射線療法の投与を含む方法。請求項11記載の方法であって、前記高密度用量治療措置が放射線療法の投与を含む方法。請求項1記載の方法であって、1以上の治療上有効な用量のIL12が、前記治療の適用の前に、前および後に、または後に、様々な時間間隔で投与される方法。哺乳類を造血における欠乏に関して治療する方法であって:1以上の治療上有効な用量のIL12を、前記欠乏を寛解させるために必要に応じてasneeded投与することを含む方法。請求項42記載の方法であって、前記造血における欠乏が、1以上の造血細胞のタイプまたは系統における欠乏を含む方法。請求項42記載の方法であって、前記哺乳類がヒトである方法。請求項42記載の方法であって、IL12の用量が約2000ngkg未満である方法。請求項42記載の方法であって、IL12の用量が約500ngkg未満である方法。請求項42記載の方法であって、IL12の用量が約100ngkg未満である方法。請求項42記載の方法であって、IL12の用量が約10ngkg未満である方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏が1以上のタイプの骨髄細胞のIL12促進性の増殖によって寛解される方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏が造血再構築細胞、造血幹細胞、または造血前駆細胞のIL12促進性の増殖によって寛解される方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏が化学療法によって悪化する方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏が放射線療法によって悪化する方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏が実質的に疾患状態の結果である方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏がリンパ球減少症を含む方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏が骨髄球減少症を含む方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏が白血球減少症を含む方法。請求項42記載の方法であって、前記白血球減少症が好中球減少症である方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏が赤血球減少症を含む方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏が巨核球減少症を含む方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏が血小板の欠乏を含む方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏が単球の欠乏を含む方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏がリンパ球の欠乏を含む方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏が赤血球の欠乏を含む方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏が好中球の欠乏を含む方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏がT細胞の欠乏を含む方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏が顆粒球の欠乏を含む方法。請求項42記載の方法であって、前記欠乏が樹状細胞の欠乏を含む方法。哺乳類における造血を刺激する又は増強する方法であって、1以上の治療上有効な用量のIL12を、造血の刺激または増強を含む治療効果を達成する期間投与することを備える方法。請求項68記載の方法であって、前記造血の刺激または増強が、Il12促進性の骨髄細胞の増殖に関与する方法。請求項68記載の方法であって、前記造血の刺激または増強が、造血再構築細胞、造血前駆細胞、または造血幹細胞のIL12促進性の増殖に関与する方法。請求項68記載の方法であって、IL12の用量が約2000ngkg未満である方法。請求項68記載の方法であって、IL12の用量が約500ngkg未満である方法。請求項68記載の方法であって、IL12の用量が約100ngkg未満である方法。請求項68記載の方法であって、IL12の用量が約10ngkg未満である方法。請求項70記載の方法であって、前記造血再構築細胞が長期再構築細胞を含む方法。放射線療法の適用を更に含む、請求項68記載の方法。化学療法の適用を更に含む、請求項68記載の方法。請求項68記載の方法であって、前記哺乳類が1以上の造血細胞のタイプまたは系統における欠乏を有する方法。請求項68記載の方法であって、前記哺乳類がリンパ球減少症を含む造血欠乏を有する方法。請求項68記載の方法であって、前記哺乳類が骨髄球減少症を含む造血欠乏を有する方法。請求項68記載の方法であって、前記哺乳類が白血球減少症を含む造血欠乏を有する方法。請求項81記載の方法であって、前記白血球減少症が好中球減少症である方法。請求項68記載の方法であって、前記哺乳類が赤血球減少症を含む造血欠乏を有する方法。請求項68記載の方法であって、前記哺乳類が巨核球減少症を含む欠乏を有する方法。請求項68記載の方法であって、前記哺乳類が血小板の欠乏を含む造血欠乏を有する方法。請求項68記載の方法であって、前記哺乳類が単球の欠乏を含む造血欠乏を有する方法。請求項68記載の方法であって、前記哺乳類がリンパ球の欠乏を含む造血欠乏を有する方法。請求項68記載の方法であって、前記哺乳類が赤血球の欠乏を含む造血欠乏を有する方法。請求項68記載の方法であって、前記哺乳類が好中球の欠乏を含む造血欠乏を有する方法。請求項68記載の方法であって、前記哺乳類がT細胞の欠乏を含む造血欠乏を有する方法。請求項68記載の方法であって、前記哺乳類が顆粒球の欠乏を含む造血欠乏を有する方法。請求項68記載の方法であって、前記哺乳類が樹状細胞の欠乏を含む造血欠乏を有する方法。哺乳類における骨髄の保存または回復のための方法であって、造血再構築細胞、造血前駆細胞、または造血幹細胞を使用することなく、1以上の治療上有効な用量のIL12を骨髄の保存または回復に必要な期間、前記哺乳類に投与することを備える方法。請求項93記載の方法であって、前記哺乳類が骨髄不全を有する方法。請求項93記載の方法であって、前記哺乳類が疾患状態を被り、前記骨髄のほぼ破壊neardestructionが前記疾患状態に対処するための治療措置の副産物である方法。請求項93記載の方法であって、前記の治療上有効な用量のIL12を骨髄の保存または回復に必要な期間、前記哺乳類に投与することが、骨髄移植の必要性を回避する方法。請求項93記載の方法であって、骨髄の保存または回復が造血再構築細胞、造血幹細胞、または造血前駆細胞の増加を含む方法。請求項93記載の方法であって、骨髄の保存または回復が1以上の分化型の造血細胞タイプの増加を含む方法。請求項93記載の方法であって、骨髄の保存または回復が造血支持細胞の増加を含む方法。請求項93記載の方法であって、前記哺乳類が、1以上の造血細胞のタイプまたは系統における欠乏を有する方法。請求項93記載の方法であって、前記哺乳類がリンパ球減少症を含む造血欠乏を有する方法。請求項93記載の方法であって、前記哺乳類が骨髄球減少症を含む造血欠乏を有する方法。請求項93記載の方法であって、前記哺乳類が白血球減少症を含む造血欠乏を有する方法。請求項103記載の方法であって、前記白血球減少症が好中球減少症である方法。請求項93記載の方法であって、前記哺乳類が赤血球減少症を含む造血欠乏を有する方法。請求項93記載の方法であって、前記哺乳類が巨核球減少症を含む欠乏を有する方法。請求項93記載の方法であって、前記哺乳類が血小板の欠乏を含む造血欠乏を有する方法。請求項93記載の方法であって、前記哺乳類が単球の欠乏を含む造血欠乏を有する方法。請求項93記載の方法であって、前記哺乳類がリンパ球の欠乏を含む造血欠乏を有する方法。請求項93記載の方法であって、前記哺乳類が赤血球の欠乏を含む造血欠乏を有する方法。請求項93記載の方法であって、前記哺乳類が好中球の欠乏を含む造血欠乏を有する方法。請求項93記載の方法であって、必要とする前記哺乳類がT細胞の欠乏を含む造血欠乏を有する方法。請求項93記載の方法であって、必要とする前記哺乳類が顆粒球の欠乏を含む造血欠乏を有する方法。請求項93記載の方法であって、必要とする哺乳類が樹状細胞の欠乏を含む造血欠乏を有する方法。請求項93記載の方法であって、IL12の用量が約2000ngkg未満である方法。請求項93記載の方法であって、IL12の用量が約500ngkg未満である方法。請求項93記載の方法であって、IL12の用量が約100ngkg未満である方法。請求項93記載の方法であって、IL12の用量が約10ngkg未満である方法。発明の記載本発明の態様は、特に、必要とする哺乳類amammalinneedにおける造血を刺激する又は増強するために、造血においてインターロイキン12を用いる様々な方法を提供する。本発明は、造血細胞のタイプまたは系統の産生を増加させる、IL12を用いる様々なアプローチを含む。本発明の特定の態様は、哺乳類における疾患状態を治療することに関し、ここで治療モダリティー自体は、治療モダリティーに対する限定的な毒性として、血液新生hematopoisisにおける減少または欠乏を一般的に生じる。本発明の他の態様は、1以上の造血細胞のタイプまたは系統における欠乏に関して哺乳類を一般的に治療する方法、造血を刺激する又は増強するための方法、並びに細胞骨髄を含むを保存および回復させる方法を提供する。本発明の治療方法の治療有効性therapeuticeffectivenessの指標indicationは、致死性に照射された動物の生存を与える、これらの方法の能力によって実証される以下に説明される。致死性照射からの回復は、本発明の方法の治療有効性の指標である。しかしながら、以下の例に示されるとおり、本発明の治療方法は、致死量未満の照射または致死量未満の化学療法剤に直面した際における又は造血の増加が治療上の利点である疾患状態における、造血および造血の回復を促進できる。本発明の方法の第1の態様は、哺乳類を造血の一般的な治療誘発性の欠乏に関して治療することに関与する。本発明の方法の第2の態様は、哺乳類を造血の欠乏に関して治療することに関与するここで、前記欠乏は、実質的に疾患状態の結果であるが、治療モダリティーによって悪化されえる。本発明の両方の態様は、増強した造血および/または造血回復を、インターロイキン12または実質的な均等物を哺乳類に投与することにより提供する。本発明の他の態様は、IL12を用いて、造血に欠乏または欠陥defectを被る哺乳類における造血および/または造血回復を、促進する、刺激する、または増強する方法を提供する。なお他の態様は、骨髄の保存または回復を、本出願中に提供される方法に基づいてIL12を投与することによって提供する。そのうえ、本発明の全ての態様において、IL12促進性、刺激性、又は増強性の造血は、造血再構築、造血幹、または造血前駆細胞の区画compartmentのレベルから大きく産生されているように思われる。更に、本発明の態様におけるIL12の使用は、腫瘍学および血液学の医学分野の治療の方法として特に有用である。定義:以下の定義は、本明細書中で使用される言語に明瞭性clarityを付与するために提供される;定義を明瞭にするために使用される言語は、広く、総称的genericallyに解釈されることを意図している。疾患状態Diseasestateは、哺乳類に存在するコンディションであり、これによって前記哺乳類の健康および福祉が損なわれるcompromised。本発明の特定の態様において、前記疾患状態を標的とすることを意図する治療が、哺乳類に投与される。治療treatmentは、前記疾患状態を標的とし、それに対処することを意図している即ち、前記疾患状態を寛解させる。従って、特定の治療は、標的とされる前記疾患状態並びに医薬療法および治療アプローチの現行の又は将来の状況に依存する。治療は、関連する毒性を有しえる。関連する造血毒性Anassociatedhematopoietictoxicityは、前記哺乳類の造血系に有害な影響をおよぼす、哺乳類に対する治療の適用から実質的に生じる毒性である。この有害効果は哺乳類に広く顕在化されうるものであり、これによって多くの造血細胞タイプが正常レベルと考えられるものから、治療の結果として又は治療および組合された疾患状態の結果として、変更させられる;或いは、前記有害効果は、哺乳類に顕在化されうるものであり、より具体的には、これによって1つのみ又は数種の造血細胞タイプが正常レベルと考えられるものから、治療の結果として又は治療および組合された疾患状態の結果として、変更させられる。インターロイキン12は、本願発明において開示される少なくとも1つの造血特性を産する任意のIL12分子を意味している;これには、当該技術分野において現在既知の又は将来開発される任意の様式で産生される、現在知られている又は将来開発される、本来nativeのIL12分子、バリアントIl12分子、および共有結合性に修飾されたIL12分子が含まれる。一般に、本発明の態様に使用されるIL12分子のアミノ酸配列は、本発明の方法で治療される特定の哺乳類に由来するものである。従って、例として、ヒトに関しては、一般にヒトIL12または組換え型のヒトIL12が、本発明の方法においてヒトに投与されるだろう;そして同様に、ネコに関しては、例えば、ネコIL12または組換え型のネコIL12が、本発明の方法においてネコに投与されるだろう。しかしながら、本発明に同様に含まれるものには、次の特定の態様がある;その態様とは、IL12分子が、そのアミノ酸配列を本発明の治療方法の被験者である哺乳類に由来しない態様である。例としては、ヒトIL12または組換え型のヒトIL12が、ネコ哺乳類felinemammalに利用され得る。本発明のなお他の態様は、次のIL12分子を含む;そのIL12分子とは、IL12の本来のアミノ酸配列が本来の配列から変更されているが、前記IL12分子が機能して本願発明に開示されるIL12の造血特性を生じるものである。IL12の本来の種特異的なアミノ酸配列からの変更には、IL12の一次配列における変化が含まれ、バリアントIL12分子を産する一次アミノ酸配列への欠失および付加が包含される。高度に派生的なIL12分子の例は、Maxygen社により生産された再設計型IL12分子11638であるここで、バリアントIL12分子は、DNAシャッフリング法で生産される。本発明に同様に含まれるものは、修飾型IL12であり、同様に本発明の方法に含まれる;これは、例えば、米国特許第s46408354496689430114446704174791192または4179337に記載される様式における、IL12への共有結合性の修飾であって、その有効期間、半減期、作用強度、溶解度、送達などを増加させるもの、ポリエチレングリコールグループポリエチレングリコールなどの付加である。IL12分子の共有結合性の修飾の1タイプは、前記分子へと導入される;この際に、IL12ポリペプチドの標的アミノ酸残基に、IL12ポリペプチドの選択された側鎖又はNもしくはC末端残基と反応する能力を有する有機の誘導体化剤anorganicderivatizingagentを反応させることによって導入される。本来の配列のIL12およびIL12のアミノ酸配列バリアントの両方が、共有結合性に修飾され得る。本願発明でも言及されたとおり、前記IL12分子は、組換え法を含む当該技術分野において既知の様々な方法によって生産することができる。バリアントIL12ポリペプチドの特性を事前に予測することはしばしば困難であるので、回収されたバリアントの幾つかのスクリーニングが至適なバリアントを選択するために必要とされる。バリアントIL12分子の血液学的な刺激又は増強の特性における変化を評価する好適な方法は、以下に開示される致死性照射レスキュープロトコールを介する方法である。例えば、レドックス若しくは熱安定性、疎水性、タンパク分解に対する感受性、又はキャリアとの若しくは多量体への凝集傾向などの、タンパク質またはポリペプチド特性の他の潜在的な修飾は、当該技術分野において周知の方法によってアッセイされる。1以上の治療上有効な用量のIL12OneormoretherapeuticallyeffectivedoseofIL12は、前記疾患状態を標的とすることを意図した治療に関連する造血毒性を実質的に寛解させることができる及び/又は1以上の造血細胞タイプにおける造血欠乏を実質的に寛解させることができる、或いは造血再構築細胞、造血前駆細胞、または造血幹細胞の増殖を刺激する又は増強することにより造血を刺激する能力を有する、任意の時間間隔および任意の期間で投与される任意の用量である。治療適用時の近くNearthetimeofadministrationofthetreatmentは、治療適用の前および/または後の、任意の妥当reasonableな時間期間でのIL12の投与を意味する例えば、1月、3週、2週、1週、数日、1日、20時間、数時間、1時間、もしくは数分間。治療適用時の近くは、治療およびIL12の同時または同時近くnearsimultaneousの適用すなわち、数分から1日内をも意味し得る。化学療法Chemotherapyは、現在知られる又は医学技術において開発される天然または合成の因子を含む、任意の療法を意味する。化学療法の例には、現在利用可能な、多くの抗癌剤が含まれる。また一方、化学療法には、疾患状態の治療を意図する、天然または合成の任意の薬物も含まれる。本発明の特定の態様において、化学療法は、前記疾患状態の治療を意図する、最新技術の薬物の適用を含み得る。例には、頭部の局所で進行した扁平上皮癌の患者に対するドセタキセル、シスプラチン、および5フルオロウラシルでの混合化学療法1616および不応性の及び再発性の無痛性リンパ腫におけるフルダラビンfludarabineおよびベンダムスチン18211827が含まれる。別の例は、少なくとも3つの抗ウイルス剤を患者にHIV感染に対する治療として投与する、現在HAARTと称されるHTV感染またはAIDSに対する現行の治療である。放射線療法Radiationtherapyは、任意の形態の放射を使用して前記疾患状態を治療する、任意の治療を意味する。放射線療法のための放射を発生する機器は、現行の利用可能な又は将来利用可能な機器である。高用量治療モダリティーHighdosetreatmentmodalitiesは、高亜致死性highsublethalまたは致死性に近いnearlethal治療を意味する。高用量治療モダリティーは、疾患状態に対処する増加した能力を有することを意図するが、一般的に増加した関連する毒性を有することを意図する。更に、一般に高用量治療モダリティーは、従来の治療モダリティーと比較して、造血毒性の増加を呈する。高用量治療モダリティーに関するプロトコールは、現在使用される又は将来使用されるものである。高密度用量治療措置dosedensetreatmentregimenは、一般的には、それによって治療が同時に反復されて、従来の治療措置と比較して、促進的な様式で所望の治療成果が達成される治療措置である。本発明の方法は、高密度用量治療措置の使用を、治療に関連する造血毒性を低下させる又は寛解させることによって促進させる;これによって利用される高密度用量治療措置が認容され、特定の疾患状態の治療の成功率が増加する。1926KeithBetalJClinOncol2004Feb1522749authorreply7513MaurelJetalCancer2004Apr11001498506AtkinsCDJClinOncol2004Feb152274950を参照されたい。化学防護Chemoprotectionまたは放射線防護radioprotectionは、前記疾患状態を標的とすることを意図する治療に関連する造血毒性、からの防護、又は、の明白な減少を意味する。緩解の増加Anincreasedremissionは、特定の疾患状態の1以上の測定可能なパラメータにおける、減少decrease、軽減lessening、低下reduction、収縮shrinking、縮小diminutionなどを意味する。一般に固形腫瘍Solidtumorsは、身体の組織の様々な癌において顕在化され、例えば、肺、乳房、前立腺、卵巣、などに顕在化する固形腫瘍である;そして、血液組織bloodtissue、骨髄、またはリンパ系の癌以外の癌である。一般に、造血障害癌は、造血系の癌例えば、白血病、リンパ腫などの存在を意味する。HIV感染は、HIV感染またはAIDSの徴候の存在にかかわらず、ウイルスの感染または曝露の任意の段階を意味する。更に、本願発明においてHIV感染は、哺乳類の細胞内にHIVウイルスが宿ることharboringを意味する。欠乏を寛解させるAmelioratethedeficiencyは、造血欠乏の低下即ち、現行の医業により規定される、欠乏の改善、または正常状態の部分的または完全な修復を意味する。従って、造血欠乏の寛解は、一般に又は具体的に、造血の増加、刺激、増強、または促進を意味する。造血欠乏の寛解は、一般的なこと、即ち、2以上の造血細胞のタイプまたは系統を増加させること、又は具体的には、即ち、1つの造血細胞のタイプまたは系統を増加させることとして観察することができる。一般に、骨髄細胞は、哺乳類の骨髄区画に居住resideおよび/または帰巣homeする細胞を意味する。骨髄細胞bonemarrowcellsの用語は、造血起源の細胞造血再構築細胞、造血幹細胞および/または前駆細胞を含むが、これらに限定されないだけでなく、一般的に骨髄に居住する任意の細胞、例えば、内皮細胞、間葉細胞mesenchymalcells、骨細胞bonecells、神経細胞neuralcells、支持細胞、これらの細胞および/または他の細胞タイプおよび系統に関する、関連する幹および/または前駆細胞を含むが、これらに限定されない。造血細胞タイプHematopoieticcelltypeは、様々なタイプの分化型の造血細胞を意味するが、特定の造血細胞タイプが由来する造血前駆細胞をも含み得るものであり例えば、様々な芽細胞;同様に、幹細胞、前駆細胞、および様々な系統を含む、血液細胞の産生に関連する全ての細胞タイプ例えば、ミエロイド細胞およびリンパ系細胞を意味する。造血細胞系統Hematopoieticcelllineageは、一般的に、分化型の造血細胞の特定の系統例えば、ミエロイド細胞およびリンパ系細胞を意味するが、より分化した系統例えば、樹状系、赤血球系、などをも意味し得る。細胞のIL12促進性の増殖IL12facilitatedproliferationは、造血の増加、刺激、または増強を意味する;該造血は、細胞における増大または増加に少なくとも部分的に起因する;該細胞は、哺乳類の骨髄に一般的に居住する又は帰巣する細胞であり、例えば、造血前駆および/または幹細胞であるが、骨髄のニッチnicheの微小環境を構成する他の細胞を含む。一般的に造血の刺激または増強は、1以上の造血細胞のタイプまたは系統における増加を意味し、特に哺乳類が1以上の造血細胞のタイプまたは系統において欠乏を有する場合における、1以上の造血細胞のタイプまたは系統の刺激または増強に関する。造血性の長期再構築細胞Hematopoieticlongtermrepopulatingcellsは、一般的に骨髄において最も原始的な血液細胞である;彼らは、様々な血液細胞のタイプおよび系統の生涯にわたる産生を供給することを担う血液幹細胞bloodstemcellsである。造血幹細胞Hematopoieticstemcellsは、一般的に血液幹細胞である;これらには2つのタイプが存在する、即ち:上記の長期再構築longtermrepopulating、および短期再構築shorttermrepopulatingであり、これは前駆細胞progenitorcellsを短期間哺乳類に依存して、週、月、又は時々は年さえも産生することができる;これらは、本願発明において、造血再構築細胞とも称される。造血前駆細胞Hematopoieticprogenitorcellsは、一般的に血液幹細胞から分化即ち、から成熟するする最初の細胞であり;彼らは、次に様々な血液細胞のタイプおよび系統へと分化する。造血支持細胞Hematopoieticsupportcellsは、骨髄の非血液細胞である;これらの細胞は、血液細胞産生に支持を提供する。これらの細胞は、骨髄ストローマ細胞bonemarrowstromalcellsとも称される。骨髄の保存Bonemarrowpreservationは、放射、化学療法、疾患、またはトキシンで傷害された骨髄が、その正常な、又はほぼ正常な状態を維持するプロセスprocessを意味する;骨髄の回復bonemarrowrecoveryは、放射、化学療法、疾患、またはトキシンで傷害された骨髄が、その正常な、ほぼ正常な状態に修復されるプロセス、又は骨髄機能における任意の測定可能な改善が得られるプロセスを意味する;骨髄機能は、様々な血球のタイプまたは系統の適切なレベルが、造血幹細胞から産生されるプロセスである。骨髄不全Bonemarrowfailureは、放射、化学療法、疾患、またはトキシンで傷害された骨髄が、正常に修復させることが不可能であり、それゆえ哺乳類における適切な造血を維持するために十分な血液細胞を産生することに失敗する、病的プロセスpathologicprocessである。造血細胞産生一般的には、米国特許第59685135851984および6159462号を参照されたい。血液中で循環している、形態学的に認識可能で、機能的に能力のある細胞には、赤血球、マクロファージ、単球、好中球性の、好酸球性の、および好塩基球性の顆粒球、B、T、非B、非Tのリンパ球、および血小板が含まれる。これらの成熟造血細胞は、形態学的に認識可能な分裂している先駆細胞precursorcellsに由来する;また、該成熟造血細胞は、該先駆細胞で、要求に応じてondemand、赤血球系に対する赤芽球、マクロファージ単球に対する及び顆粒球系に対する骨髄芽球myeloblasts、前骨髄球promyelocytesおよび骨髄球myelocytes、および血小板に対する巨核球などの各自の系統のために置換される。前記先駆細胞は、2つの主要な亜群即ち、幹細胞および前駆細胞に単純simplisticallyに分裂することができる、より原始的な細胞に由来する。幹および前駆細胞の定義は、操作上operationalの定義であり、機能的な形態学的というよりも判定基準に依存する。幹細胞は広範な自己再生selfrenewalまたは自己維持selfmaintenanceの能力を有しており、これらの細胞の非存在absenceまたは枯渇depletionは、1以上の細胞系統または細胞タイプの完全な枯渇、短時間で疾患および死に至るイベントを生じるであろうから必要である。幾つかの幹細胞は必要に応じて分化するが、幾つかの幹細胞又はそれらの娘細胞は、これらの細胞の貴重なプールを維持するための他の幹細胞を産生する。従って、全能性幹細胞または造血再構築細胞は、彼ら自身の種類を維持することに加え、より限定的な自己再生能力を有するか又は自己複製能力を有さない、幾つかの亜系統の前駆細胞へと分化する能力を有する。これらの前駆細胞は、形態学的に認識可能な先駆細胞を最終的にultimately生じる。前記前駆細胞は、1つ又は2以上の骨髄球性の分化経路に増殖する及び分化する能力を有する1979BloodCells5447。様々な感染因子infectiousagents、遺伝的異常、環境因子、および療法が、1以上の造血細胞タイプにおける欠乏の原因となり得る。例えば、血液学的な異常が、HIV1感染個体ヒト免疫不全症ウイルスは、後天性免疫不全症候群と称される遅効性の退行性の免疫系疾患の主要な原因として関与するにおいて、特に疾患の後期段階において観察される。これらの異常には、CD4T細胞の低下、同様に骨髄の形態異常および前駆細胞成長の欠乏に頻繁に関連する、1以上の造血系統の血球減少cytopeniasが含まれる。特発血小板減少性紫斑病は、血小板数の有意な低下によって特徴付けられ、頻繁にHIVに感染した被験者を悩ませる。ITPの病人における血小板の破壊は、血小板関連性自己抗体plateletassociatedautoantibodiesによって媒介されるように思われるBerchtoldPandWengerM1993Blood811246BallemPJetal1987JClinInvest8033。従って、ITPの管理には免疫抑制が一般的に関与するので、HIV感染患者におけるITPの治療は、HIV感染において極度に有害である。加えて、癌および特定の免疫学的な障害の治療に使用される化学療法および放射線療法が、汎血球減少症pancytopeniasあるいは貧血、好中球減少症、および血小板減少症の合併症の原因となり得る。従って、造血細胞の増加または置換は、係る治療の成功に関してしばしば決定的なものである。血液学的な障害及びそれらの原因の一般的な議論に関しては、例えば、文献HematologyinScientificAmericanMedicineERubensteinandDFedermanedsVolume2chapter5ScientificAmericanNewYorkを参照されたい。さらにまた、再生不良性貧血は重大な臨床コンディションを代表する、というのも再生不良性貧血を有する全患者の全体の死亡率は、幹細胞治療の非存在下で高いからである。前記障害を被っている約60~75の個体は、新しい幹細胞の非存在下で、12ヶ月以内に死亡する。これらの疾患の全体の発生率は、約25新規症例/百万人/年である。単一の病原性の機構が全ての再生不良性貧血の原因であることは極めてありそうもないが、新しい造血幹細胞の供給が永続的な回復を許容するために通常十分であることは明らかである;というのも、再生不良性貧血を有する患者を一卵双生児から又はHLA同一同胞から得られた骨髄で移植することによって、前記疾患を完全に癒すcorrectことができるからである。しかしながら、再生不良性貧血を有する幾人かの患者は、移植された髄を拒絶する。この合併症は、複数回の治療上の輸血の結果、免疫学的に感作されてきた患者の間で特に共通している。多くの血液学的な障害に、同様に化学療法または放射線治療radiotherapyにより生じた内在性の造血細胞の破壊に利用可能な現行の療法は、骨髄移植である。しかしながら、骨髄移植の使用は厳しく制限されている。というのも、同一の双生児が利用可能な場合または緩解にある患者の骨髄細胞が生存可能な凍結状態で貯蔵される場合を除いては、完全に適合する遺伝的に同一ドナーを得ることは極度に稀であるからである。このような自己のケース以外に、ある度合degreeの回避不能な遺伝的なミスマッチが存在し、これによって重大で時々は致死的な合併症が内含することになるentails。これらの合併症は、2面性であるtwofold。第一に、前記患者は、外来性の骨髄の免疫拒絶を避けるために、通常、事前に薬物で免疫学的に無能力化される。第二に、供与された骨髄細胞が樹立された場合、それらは外来として認識される患者を攻撃することができる。緊密に適合した家族のドナーにおいてでさえも、これらの部分的な不適合の合併症は、遺伝的に異なる個体からの骨髄移植に直接的に起因する、実質的な死亡率および罹患率の原因である。末梢血も、造血再構成のための再構築細胞または幹細胞の供給源として、調査されてきた。幾つかの研究において、有望な結果が、様々な白血病およびリンパ腫を有する患者に関して得られてきた。しかしながら、末梢血を用いた他の研究は、再構成に影響することに失敗している。また、幾つかの研究は、造血再構成のための幹細胞供給源として、胎性の肝細胞移植または新生児の脾臓細胞移植の使用を調査している。新生児の胸腺の細胞も、免疫再構成実験immunereconstitutionexperimentsにおいて、移植されている478485HirokawaKetal1982ClinImmunolImmunopathol22297304。インターロイキン12:IL12に関する一般的な記載に関しては、米国特許第557376456480725648467574413257560855853714および6683046号を参照されたい。インターロイキン12は、免疫応答に関与する細胞の活性を制御する炎症性proinflamatoryサイトカインとして一般的に記載される、ヘテロ二量体のサイトカインである。一般にIL12は、ナチュラルキラー細胞およびT細胞からのインターフェロンγの産生を刺激し、Tヘルパー1細胞の分化を支持し、生得的な抵抗性および適応免疫の間のリンクを形成する。また、IL12は、その免疫変調性immunomodulatoryおよび抗血管形成効果を介して、癌成長を阻害することが示されている。IL12は、主に樹状細胞および食細胞によって、病原性の細菌、真菌、または細胞内寄生虫に遭遇することにより一度彼らが活性化されて、産生されるは、主に活性化T細胞およびNK細胞によって発現されると相乗作用して、初期の造血前駆体earlyhematopoieticprogenitorsの増殖および分化を刺激することができることである白血病慢性リンパ性白血病急性骨髄性白血病acutemyelogenousleukemia慢性骨髄性白血病急性悪性骨髄硬化症acutemalignantmyelosclerosis多発性骨髄腫真性多血症polycythemiavera特発性骨髄性異形性agnogenicmyelometaplasiaワルデンシュトレームマクログロブリン血症Waldenstromsmacroglobulinemiaホジキンリンパ腫Hodgkinslymphoma非ホジキンリンパ腫III悪性固形腫瘍を有する患者の免疫抑制悪性黒色腫非小細胞肺癌胃の癌腫carcinoma卵巣癌ovariancarcinoma乳癌breastcarcinoma小細胞肺癌smallcelllungcarcinoma網膜芽細胞腫retinoblastoma精巣癌testicularcarcinomaグリア芽細胞腫glioblastoma横紋筋肉腫rhabdomyosarcoma神経芽細胞腫neuroblastomaユーイング肉腫Ewingssarcomaリンパ腫LymphomaIV自己免疫疾患関節リウマチ糖尿病I型慢性肝炎多発性硬化症multiplesclerosis全身性エリテマトーデスsystemiclupuserythematosusV遺伝性障害貧血家族性の再生不良性貧血ファンコニー症候群Fanconissyndromeブルーム症候群Bloomssyndrome真性赤血球無形成先天性角化不全症dyskeratosiscongenitaブラックファンダイアモンド症候群先天性異常赤血球産生症候群IIVcongenitaldyserythropoieticsyndromesIIVシュワックマンダイアモンド症候群ShwachmannDiamondsyndromeジヒドロ葉酸レダクターゼ欠乏dihydrofolatereductasedeficienciesホルムアミノトランスフェラーゼ欠乏formaminotransferasedeficiencyレッシュ-ナイハン症候群LeschNyhansyndrome先天性球状赤血球症congenitalspherocytosis先天性楕円赤血球症congenitalelliptocytosis先天性有口赤血球症congenitalstomatocytosis先天性Rh陰性疾患congenitalRhnulldisease発作性夜間ヘモグロビン尿症paroxysmalnocturnalhemoglobinuriaG6PDバリアント123ピルビン酸キナーゼ欠乏先天性エリスロポエチン感受性欠乏congenitalerythropoietinsensitivitydeficiency鎌形赤血球疾患および形質sicklecelldiseaseandtrait地中海貧血症αβγmetヘモグロビン血症methemoglobinemia免疫の先天性障害重症複合免疫不全症疾患不全リンパ球症候群barelymphocytesyndromeイオン透過孔応答性複合免疫不全ionophoreresponsivecombinedimmunodeficiencyキャップ形成異常性acappingabnormalityを伴う複合免疫不全ヌクレオシドホスホリラーゼ欠乏nucleosidephosphorylasedeficiency顆粒球アクチン欠乏granulocyteactindeficiency乳児性無顆粒球症infantileagranulocytosisゴーシェ病アデノシンデアミナーゼ欠乏コストマン症候群Kostmannssyndrome細網異形成症reticulardysgenesis先天性白血球機能不全症候群congenitalleukocytedysfunctionsyndromesVI他のもの大理石骨病osteopetrosis脊髄硬化症myelosclerosis後天性溶血性貧血acquiredhemolyticanemias後天性免疫不全一次または二次的な免疫不全性の細菌感染を生じる感染障害寄生虫感染真菌感染リンパ球系細胞セットにおける不釣合disproportionsおよび加齢による損傷性の免疫機能impairedimmunefunctionsが関与する障害食細胞障害コストマン無顆粒球症Kostmannsagranulocytosis慢性肉芽腫症chronicgranulomatousdiseaseチェディアック東症候群ChediakHigachisyndromeWillamsBeuren症候群好中球アクチン欠乏症好中球膜GP180欠乏症neutrophilmembraneGP180deficiency代謝性貯蔵疾患metabolicstoragediseasesムコ多糖症mucopolysaccharidosesムコリピドーシスmucolipidoses免疫機構が関与している種々雑多miscellaneousな障害ウィスコットアルドリック症候群WiskottAldrichSyndromeアルファ1アンチトリプシン欠乏症a正常な血球の産生および成熟の不全または機能不全に起因する疾患本発明の好適な態様において、本発明の方法に基づいてIl12投与を使用して、正常な血球の産生および成熟の不全または機能不全に起因する疾患例えば、再生不良性貧血、血球減少、または低増殖性幹細胞障害が治療される。これらの障害は、正常な数の機能的な血液細胞を供給する骨髄中の幹細胞の不全を内含する。再生不良性貧血は、中間および成熟形態の赤血球、白血球、および血小板を生じさせる幹細胞の不全から生じる。赤血球産生は通常最も重篤に影響されるが、他の成熟血球因子の産生における著明な減少は、白血球および/または血小板の産生に特異的に影響する幾つかの貧血としても観察される。これらの貧血の非常に大多数は、成体生活adultlifeの間に獲得されるものであり、如何なる明白な遺伝的素因anyapparentgeneticpredispositionも有していない。これらの後天性の貧血の約半分は、毒物への暴露、薬物、または幹細胞機能を損傷させる疾患プロセスなどの、任意の明らかな原因因子causativefactorの非存在下で生じる;これらは特発性再生不良性貧血idiopathicaplasticanemiasと称される。残るケースは、極度に多様なアレイarrayの化学物質および薬物への暴露に関連するものであり、また、HIV感染などのウイルス感染の結果、および妊娠後にも生じる。他の特定のタイプの再生不良性貧血は、無顆粒球症または血小板減少症と称されるものであり、それぞれ特定の白血球における又は血小板産生における重篤な欠乏を示す。また、これらの非赤血球性の欠乏は、HIV感染と頻繁に関連する。また、HIV感染と有意に関連しているものは、重篤な血小板欠乏症、特発血小板減少性紫斑病と又は他の感染症例えば、新生児風疹と関連するものである可能性がある。加えて、病原性微生物での一次または二次的な感染の結果による免疫欠乏immunedeficienciesは、本発明に開示される方法によるIL12の投与で治療することができる。本発明の本態様により治療されえる免疫欠乏を生じさせる微生物には、グラム陰性桿菌例えば、ブルセラまたはリステリア、結核の又はハンセン病の病原学的な因子であるマイコバクテリウムmycobacterium、プラスモディウムマラリアの病原学的な因子またはリーシュマニアなどの寄生虫、および真菌類例えば、肺炎および免疫不全に対して二次的な致死性の感染を生じるものが含まれるが、これらに限定されない。本発明の好適な態様において、Il12は、化学療法および/または放射線療法に関連する又はHIV感染に対処する化学療法および/または放射線療法の使用の有り無しwithorwithoutのHIVに関連する血球減少に投与される。HIV感染に関連する造血欠乏には、CD4T細胞および他のリンパ球、赤血球、血小板特に、ITP、および好中球における低下が含まれる。b悪性疾患Malignanciesの治療様々な形態の癌および他の疾患状態に対処するために単一で又は共に使用される、化学療法および放射線療法の双方は、個々の造血系に有毒である。従って、化学療法、放射線療法、又はこれらの2つの療法モダリティーの組合せで治療される個体に関して、個々の血液供給を実質的に枯渇させることが可能である。そのうえ、この血液供給の枯渇は、一般に様々な癌および他の疾患状態に対処する化学療法および/または放射線療法の使用における限定要因であり、それゆえに一般に高用量または高密度用量治療措置の使用は除外precludesされる。以前、IL12が、免疫モジュレーターとして中心的な役割を担うことが報告されている、そしてマウスにおける腫瘍成長を阻害することが以前に示されている;IL12は、癌療法において免疫応答を刺激するその潜在性に関して、第一相および第二相ヒト臨床試験で試験されている。動物毒性試験においても、リンパ球減少症は共通の副作用である自己免疫障害AutoimmuneDisorders多くの慢性の炎症性および退行性degenerativeの疾患は、身体自身の組織に対する、連続的な免疫反応によって特徴付けられる。係る自己免疫障害には、関節リウマチおよび他の炎症性の骨障害osteopathies、糖尿病I型、慢性肝炎、多発性硬化症、および全身性エリテマトーデスが含まれるるが、これらに限定されない。自己免疫障害は、リンパ節照射lymphoidirradiationでしばしば治療することができる。本願発明において開示されるIL12の投与は、放射線治療後に造血系を再構築するために価値がありえる。抗炎症薬例えば、ステロイドは、自己反応性のT細胞によって活性化される炎症細胞inflammatorycellを遅延させるretardが、活性化している新しい炎症細胞からの自己タンパク質を認識するT細胞を阻止しない。自己免疫疾患を治療するための、より直接的なアプローチは、リンパ系組織の照射によるT細胞の根絶に依存し、患者の造血系を再構築する非照射の骨髄からの幹細胞に頼るものである。理論的根拠は、次の事項である;その事項とは、骨髄幹細胞からの成熟T細胞の新しい集団の形成が、自己特異的抗原に反応性を有するT細胞の非存在を生じえるとのことである。この手順は、全リンパ照射と称され、難治性の関節リウマチを治療するために使用されているIL12の投与の方法本発明は、被験者に1以上の有効な用量のIL12を所望の治療上の効果を達成する期間で投与することにより治療する方法を提供する。前記被験者は、好ましくは、動物例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ニワトリ、ネコ、イヌ、などを含む哺乳類であり、最も好ましくはヒトであるが、これらに限定されない。様々な送達系が知られており、この送達系を使用して、本発明の方法に基づいてIL12を投与することができる;この送達系は、例えば、リポソーム中への封入encapsulation、微小粒子microparticles、マイクロカプセル、IL12を発現する能力を有する組換え細胞、レセプター媒介性のエンドサイトーシス、レトロウイルスまたは他のベクターの部分としてIL12に関する遺伝子を具備する核酸の構築、などである。導入の方法には、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、皮下、鼻腔内、硬膜外、および口oralの経路が含まれるが、これらに限定されない。本発明の方法に基づいて、IL12を任意の都合よい経路で投与することができる例えば、輸液または大量瞬時投与bolusinjectionによるもの、上皮性または粘膜皮膚の内張を通した吸収によるものである;また、他の生物学的に活性な因子と共に投与してもよい。投与は、全身性または局所性であってもよい。加えて、IL12を含む薬学的組成物を中枢神経系に任意の適切な経路で導入することが望ましいであろう;脳室内注射は脳室内カテーテル例えば、貯蔵器に接続された、Ommaya貯蔵器などによって促進されえる、肺投与も使用できる例えば、吸入器または噴霧器、およびエアゾール薬剤の処方を使用することにより。IL12を含む薬学的組成物を、治療が必要な領域に局所的に投与することが望ましいであろう;これは、局所的適用で、注射で、カテーテルの手段で、坐剤の手段で、又はインプラントの手段該インプラントは、多孔性、非多孔性またはゼラチン質の物質であり、sialastic膜などの膜またはファイバーが含まれるで達成しえる。IL12投与の他のモードmodesには、ベシクル特に、リポソームでの送達が関与するTreatetalinLiposomesintheTherapyofInfectiousDiseaseandCancerLopezBeresteinandFidlerLissNewYorkpp353365LopezBeresteinibidpp317327を参照のこと;一般的にも同書を参照されたい。IL12投与のなお他のモードには、制御放出システムacontrolledreleasesystemでの送達が関与する。特定の態様において、ポンプを使用しえるBuchwaldetalSurgery88507SaudeketalNEnglJMed321574を参照されたい。加えて、高分子材料を使用できるCRCPresBocaRatonFlaControlledDrugBioavailabilityDrugProductDesignandPerformanceSmolenandBallWileyNYRangerandPeppasJMacromolSciRevMacromolChem2361を参照されたい;また、LevyetalScience228190DuringetalAnnNeurol25351HowardetalJNeurosurg71105を参照されたい、又は徐放システムを、治療上の標的即ち、脳に近接して配置できるので、全身性の用量の僅かなフラクションを要求するのみであるを参照されたい。他の徐放システムは、Langerの総説で議論されている。eIL12の形態および投与量本発明の態様に使用するIL12の適切な剤形dosageformsには、生得的inherentlyに非有毒および非治療的nontherapeuticである、生理的に認容される担体が包含される。係る担体の例には、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質、例えば、ヒト血清アルブミン、緩衝物質、例えば、ホスフェートphosphates、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和の野菜脂肪酸の部分的なグリセリド混合物partialglyceridemixturesofsaturatedvegetablefattyacids、水、塩、または電解質、例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸二水素カリウムpotassiumhydrogenphosphate、塩化ナトリウム、亜鉛塩zincsalts、コロイド珪酸colloidalsilica、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベース物質cellulosebasedsubstances、およびPEGが含まれる。IL12ポリペプチドの局所またはゲルベース形態の担体には、多糖類、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウムまたはメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリアクリレート、ポリオキシエチレンポリオキシエチレンブロックポリマー、PEG、およびウッドワックスアルコールwoodwaxalcoholsが含まれる。全ての投与に関して、従来の持効性形態depotformsが適切に使用される。係る形態には、例えば、マイクロカプセル、ナノ―カプセル、リポソーム、プラスター、吸入形態inhalationforms、鼻スプレー、舌下錠、および徐放性処方sustainedreleasepreparationsが含まれる。IL12ポリペプチドは、約1ugml~100mgmlの濃度で係るビヒクル中に処方される。徐放性処方の適切な例には、前記ポリペプチドを含有している固形疎水性ポリマーの半透性マトリックスが含まれ;このマトリックスは、造形品shapedarticlesの形態のものである例えば、フィルムまたはマイクロカプセル。徐放性マトリックスの例には、Langer等上記およびLanger上記によって記載されたポリエステル、ヒドロゲル例えば、ポリ、またはポリ、ポリラクチド、Lグルタミン酸およびガンマエチルLグルタミン酸のコポリマー、非分解性のエチレンビニルアセテート、分解性の乳酸―グリコール酸コポリマー、例えば、LupronDepotTM、およびポリD3ヒドロキシ酪酸が含まれる。ポリマー例えば、エチレンビニルアセテートおよび乳酸グリコール酸は100日間以上にわたり分子の放出が可能であるが、特定のヒドロゲルは短い時間期間timeperiodsタンパク質を放出する。被包性ポリペプチドencapsulatedpolypeptidesが身体に長い時間残存する場合、水分に37 ゚Cで暴露されると変性または凝集し、生物活性の損失および免疫原性における可能な変化が生じる。合理的な戦略を、関与する機構に依存する安定化に関して考案することができる。例えば、凝集機構がチオジスルフィド相互交換を介した分子間SS形成であることが発見される場合、安定化は、スルフヒドリル残基を修飾すること、酸性溶液から凍結乾燥すること、含水量をコントロールすること、適切な添加物を用いること、および特異的なポリマーマトリックス組成物を開発することdevelopingによって達成しえる。また、徐放性のIL12含有組成物には、リポソーム捕捉ポリペプチドliposomallyentrappedpolypeptidesが含まれる。IL12ポリペプチドを含有しているリポソームは、当該技術分野において既知の方法、例えば、Eppstein等EppsteinetalProcNatlAcadSciUSA8236883692HwangetalProcNatlAcadSciUSA774030および米国特許第4485045および4544545号に記載の方法によって調製される。通常、前記リポソームは小型約200~800オングストロームの単層型のものであり、脂質含有が約30molコレステロールより大きいものであり、選択される比率はILl2療法に関して調整される。循環時間が増強されたリポソームは、米国特許第5013556号に開示されている。疾患の治療に関して、適切な投与量dosageのIL12ポリペプチドは、上記のとおり、治療される疾患のタイプ、前記疾患の重症度および経過、以前の治療、本願発明において開示されるIL12治療方法への患者の臨床歴および応答、主治医の判断discretionに依存する。本発明に基づいて、IL12は、患者に一度で又は一連の治療にわたって適切に投与される。疾患のタイプおよび重症度に依存して、約1ngkg~約2000ngkg好ましくは約10ngkg~約500ngkgのIL12が、患者への投与に対する初期の候補投与量である例えば、1以上の分離投与によってであろうと又は連続的な輸液によってであろうと。ヒトは約500ngkgの反復投与量に耐えうるが、約2000ngkgまでの単一の投与量は易感染性compromisedの造血系に有毒な副作用を産生しないだろう。例えば、用量は、他のサイトカイン例えば、GCSF、GMCSF、およびEPOに関するものと同じであってもよい。数日を超える反復投与に関して、治療は、コンディションに依存して、発生する疾患の症状が望まれる抑制に達するまで維持される。しかしながら、他の投与計画dosageregimenも有用であろう。この療法の進展は、従来の技術およびアッセイで容易にモニターされる。Il12は、他のサイトカインと共に、直接の共投与または連続的な投与によって投与されてもよい。1以上のサイトカインがIL12と共投与される場合、IL12のより低い用量を使用しえる。他のサイトカイン即ち、IL12以外の適切な用量は、約1ngkg~約15mgkgのサイトカインである。例えば、用量は、他のサイトカイン例えば、GCSF、GMCSF、およびEPOに関するものと同じであってもよい。他のサイトカインを、IL12の投与の前に、同時に、又は引続いて投与しえる。サイトカインおよびIL12を混合して、哺乳類への同時投与のための薬学的組成物を形成してもよい。特定の態様において、IL12およびサイトカインの量は、血液細胞の相乗的な再構築または、造血細胞の増殖および/または分化における相乗的な増加がIL12および他のサイトカインの投与に際して哺乳類において発生する量である。換言すれば、血液細胞の再構築又は、造血細胞の増殖/分化に関する2以上の因子即ち、Il12および1以上のサイトカインの協調的作用coordinatedactionは、これらの分子の個々の効果の和よりも大きい。IL12の治療上の組成物は、貯蔵するために、所望の度合の純度を有しているIL12を自由選択で生理的に認容される担体、賦形剤、または安定剤と混合することによって、凍結乾燥されたケーキまたは水性の溶液の形態で調製される。認容される担体、賦形剤、または安定剤は、使用される投与量および濃度でレシピエントに無毒なものであり、次のものが含まれる:緩衝剤、例えば、ホスフェート、シトレート、および他の有機酸アスコルビン酸を含む抗酸化剤低分子量のポリペプチドタンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン親水性のポリマー、例えば、ポリビニルピロリドンアミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、またはリジングルコース、マンノース、またはデキストリンを含む、単糖類、二糖類、および他の炭水化物キレート化剤、例えば、EDTA糖アルコール、例えば、マンニトールまたはソルビトール塩を形成する対イオンsaltformingcounterions、例えば、ナトリウムおよび/または非イオン性の界面活性剤、例えば、TweenRTMPluronicsTMまたはポリエチレングリコールマイクロカプセルによって、コロイド性の薬物送達システムに又はマクロエマルジョンに捕捉されえる。係る技術は、RemingtonsPharmaceuticalSciencesに開示されている。インビボ投与に使用されるIl12は、滅菌されなければならない。これは、凍結乾燥および再構成の前に又は引続いて、滅菌濾過膜sterilefiltrationを通して濾過することによって容易に達成される。Il12は、凍結乾燥形態において又は溶液において通常貯蔵される。治療上のIL12組成物は、一般的に無菌のアクセスポートを有している容器に配置される;これは、例えば、皮下注射針で貫通可能な栓を有している静脈内の溶液バックまたはバイアルである。局所的に適用される場合、Il12は他の構成成分例えば、担体および/またはアジュバントと適切に混合される。係る他の構成成分の性質において次の事項以外には制限はない;その事項とは、それらが、それらの意図する投与に関して生理的に認容され且つ効果的でなければならず、そして前記組成物の活性成分の活性を落すことができないことである。適切なビヒクルの例には、軟膏、クリーム、ゲル、または懸濁剤精製コラーゲンの有り無しでが含まれる。また、組成物は、経皮パッチtransdermalpatches、プラスター、およびバンデージに、好ましくは液体または準液体形態で浸透させてもよい。ゲル処方を得るために、液体組成物に処方されたIL12は、局所的に投与される適切な粘性のゲルを形成する、効果的な量の水溶性のポリ多糖または合成ポリマー例えば、PEGと混合されてもよい。使用されえるポリ多糖には、例えば、セルロース誘導体、例えば、以下に記載されるものを含むエーテル化セルロース誘導体、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、およびアルキルヒドロキシアルキルセルロース、例えば、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、およびヒドロキシプロピルセルロースデンプンおよび分画化デンプンfractionatedstarch寒天アルギン酸およびアルギナートアラビアゴムプルランpullullanアガロースカラゲナンデキストランデキストリンフルクタンイヌリンマンナンキシランアラビナンキトサングリコーゲングルカンおよび合成のバイオポリマー同様に、ゴムgums、例えば、キサンタンゴムグアールゴムイナゴマメゴムアラビアゴムトラガカントゴムおよびカラヤゴム並びにその誘導体および混合物が含まれる。本願発明における好適なゲル化剤は次のもの、即ち、生物学的なシステムに不活性、無毒、調製が単純、そして流れすぎず又は粘稠すぎず、その中に保持されるIL12分子を不安定化しないものである。好ましくは、前記ポリ多糖は、エーテル化セルロース誘導体であり、より好ましくはUSPに規定され、精製されpurified、およびリストされるものであり、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、およびヒドロキシプロピルメチルセルロースである。本願発明において最も好適なものは、メチルセルロースである。典型的には、ゲル化に有用なポリエチレングリコールは、適切な粘性を得るための、低および高分子量のPEGsの混合物である。例えば、PEGの分子量400~600に分子量1500のものを有するものの混合物amixtureofaPEGofmolecularweight400600withoneofmolecularweight1500は、ペーストを得るための適切な比率に混合された場合、この目的に効果的であろう。多糖類およびPEGsに適用される水溶性watersolubleの用語は、コロイド性の溶液および分散剤dispersionsを含むことを意味する。通常、セルロース誘導体の溶解度は、エーテル基の置換の度合によって決定される。そして、本願発明において有用な安定化誘導体stabilizingderivativesは、セルロース鎖中のアンヒドログルコース単位毎に係るエーテル基を十分な量で含有せしめて、前記誘導体を水溶性に変えるべきである。少なくとも035エーテル基/アンヒドログルコース単位のエーテル置換の度合は、一般的に十分である。加えて、前記セルロース誘導体は、アルカリ金属塩例えば、LiNaKまたはCs塩の形態であってもよい。メチルセルロースがゲルに使用される場合、好ましくはそれは約2~5、より好ましくは約3のゲルを含み、そしてIl12は約300~1000mg/ゲルmlの量で存在する。使用されるIL12の効果的な量は、治療の目的物、投与の経路、および患者のコンディションなどに依存する。従って、至適な治療効果を得るために、投与量を滴定titerすること及び投与経路を修飾することがセラピストに要求される。典型的には、臨床医は、投与量が所望の効果を達成するまでIL12を投与する。全身治療に関して典型的な一日の投与量は、上記の要因に依存して、約1ngkg~2000ngkgまで又はそれ以上、好ましくは約10ngkg~約500ngkgの範囲であってもよい。別の一般的な提案として、IL12レセプターが処方され、そして標的の部位または組織へと送達される;その際の投与量は、約01ngccよりも多く、前記組織に効果的であるが過度に有毒ではない最大用量までのIL12レベルを達成する能力を有する投与量である。この組織内濃度は、可能であるならば、経験的に決定される頻度で、連続的な輸液、徐放性放出、局所的適用、または注射によるものを含む投与措置administrationregimeによって、維持すべきである。この療法の進展は、従来のアッセイで容易にモニターされる。実施例1:哺乳類を致死性電離放射線lethalionizingradiationから防護protectする又はレスキューrescueすることへの、IL12の能力を評価するために研究を行った。この結果は図1に示される。マウスは、組換え型のマウスIL12100ngマウス静脈内注射を、致死量放射線の前または後に受けた。コントロール群のマウスは、等容量のPBS緩衝剤を受けた。生存率は、KaplanMeier法で分析された。また、p値はLog順位検定を用いて計算された。IL12処理およびコントロールの生存差survivaldifferenceは、統計学的に有意である。また、放射前にIL12を受けたマウスとコントロールとの間の生存差、および放射後にIL12を受けたマウスとコントロールとの間の生存差は、双方とも統計学的に有意である。実施例2:哺乳類を致死量電離放射線lethaldoseionizingradiationから効果的に防護できる、低用量IL12を評価するために研究を行った。IL12の最小の効果的な放射線防護用量を決定するために、異なる用量のIL12を、致死量電離放射線の前または後に、致死性に照射された動物に投与した。最高の生存率は、5ugkgの用量で得られた放射線適用の前および後の双方において。高用量は、生存の増大を生じなかった。5ugKgの用量は、適切なヒト用量としての約400ngkgへと、ヒト用量がマウス用量の112であるとの一般的な規則を用いて変換することができる。図1に示したとおり、100ngマウスで投与したとき、95および75の動物は、長期間の生存を示したが、全てのコントロール動物は致死量放射線を受けた後に24日以内に死亡した。IL12処理した動物は、コントロール群の動物と比較して、有意によりよい生存を示した。興味深いことに、コントロールと比較して、放射前にIL12を受けた動物および放射後にIL12を受けた動物の差も、有意である。実施例3:IL12を放射24時間前に異なる用量で投与して次の事項が決定された;その事項とは、IL12投与の濃度と致死性照射からの生存との間の用量依存的な関連性が存在するかどうかである。表2に示したとおり、マウスにおける至適な放射線防護radioprotectiveの用量は、約100ngマウスまたは5ugkgである。この用量は、ヒトにおいて約400ngkgに変換できるか又は若干示した。IL12を、致死量放射線の前または後の異なる時間で投与した。そして動物の生存を毎日観察した。表2に示したとおり、放射線防護に関して最高の投与時間は、放射の24時間前または1時間後である。IR:致死性照射実施例5:IL12投与の放射線防護効果が、特異的で、INFγ非依存性であるかどうかを決定するために、試験を実施した。この放射線防護効果がIL12関連サイトカインの共通特性であるかどうか又は前記放射線防護効果がIL12特異的であるかどうかを解明するために、以下のサイトカインを放射線防護アッセイで試験した:1IL23ヘテロ二量体これは同じサブユニットp40をIL12と共有する;また、IL23は同じレセプターサブユニットすなわちIL12RbをIL12と共有する;さらにIL12と類似して、IL23とそのレセプターとの結合は、INFγ産生を生じる;2IL18IL12と同様には、インターフェロンγの放出を誘導することができる;3IL2これは免疫応答においてIL12と相乗的に機能し、T細胞中におけるIL12レセプターの発現を増加させる。4GMCSFGおよびM細胞産生を刺激するサイトカイン。表4に示したとおり、IL12は、マウスを致死量放射線から防護できる唯一の試験されたサイトカインであるおよび5ugkgIL12の用量で、コントロールマウスおよびIL12処理マウスの小腸に有意な差はなかった:小腸は、図3に示されるとおりビラおよび陰窩villaandcryptの形および数に関して無変化intactであったが、1600rad放射を受けたマウスに胃腸管傷害GItractdamageが存在している。しかしながら、骨髄は、図2に示すとおり、異なるプロファイルを提示していた:Il12処理動物は、有意に高い細胞密度cellularityを有する防護された髄marrowを1日目で示し、より保存された骨髄構造および細胞密度を7日目で示し、および有意な骨髄の回復を放射後の14日目で示した。特に7日目で、静脈洞構造venoussinusoidstructuresを、IL12処理マウスの骨髄中に観察することができるが、コントロールマウスにおいてはできない。静脈洞venoussinusesは、骨髄中の造血前駆および造血幹細胞を支持する機能を担うと信じられている。コントロール中の及びIL12処置群中のマウス間に、放射後7日目および10日目で骨髄の組織学的な構造に有意差は認められないようであるがデータ示さず、IL12処理マウスの骨髄細胞密度はコントロールマウスよりも良好であるデータ示さず。しかしながら、コロニーを、IL12処理マウスの骨髄中に放射後12日目で観察した。14日目までに、IL12処理マウスの骨髄細胞密度の完全な回復が認められた。IL12処置群とは異なり、コントロール群のマウスは、試験した全ての時点で骨髄回復の徴候を示さなかった。実施例7:IL12投与が、電離放射線の影響から複数系統の血球の回復を促進させるかどうかを示すため研究を行った。末梢血細胞計数降下は、造血系における電離放射線の障害の指標である。IL12が電離放射線からの放射線防護効果を実証したので、末梢血球の回復を致死量または致死量以下の放射の両方でモニターした。致死量放射線後、IL12処理および無処置のマウスの双方に関して、完全血球計数fullbloodcellcountは最低ポイントに降下した。IL12処理マウスは、放射後14日目で回復を開始したが、コントロール動物は死滅した。IL12処理動物は、正常な血球数に放射後約30日で達した図6に示すとおり。回復が白血球、赤血球、および血小板を含む複数系統であることに注目すべきである。この結果は、上記のような重要な臨床的価値を有することが期待される。図4に示すとおり、亜致死性放射線、IL12は、処理マウスにおいて血球数回復を促進するコントロール動物と比較して。ここでもまた、回復は、広い範囲であり、全ての血液系統および血球タイプを包含している。特に放射後5日目および8日目、IL12処理マウスからの赤血球、血小板、白血球、および単球は、コントロールマウスと比較して統計学的に高い。この効果は、IL12が放射の24時間前に適用された場合、放射後にIl12を適用した場合と比較して、幾分か優れている。実施例8:IL12が骨髄中の幹/前駆細胞を致死量放射線から防護することができるかどうかを評価するために、試験を実施した。レスキュー現象に関してIL12投与により防護される骨髄細胞サブセットを決定するために、CFCおよびCFUS12アッセイを致死量放射線後の異なる時点で実施した。骨髄細胞をIL12処理またはコントロール動物から、CFCおよびCFUS12アッセイのために放射後に直ちに、または79101214および21日目に回収した。前駆細胞がIL12処理から防護される場合、細胞が0日で除去されたときにCFCおよびCFUS12コロニーが検出されるべきである。しかしながら、放射後0または7日目に分離された骨髄細胞は、IL12処理およびコントロール動物においてCFCもCFUS12コロニーも生じさせない。放射後10日目に、IL12処理マウスから分離された骨髄細胞は、CFUS12を発生しはじめたが、検出可能なCFCは発生しない;これは、放射後12日目で分離されたIL12処理骨髄から出現しはじめ、放射後14日目で分離された骨髄から完全に回復する図5Aおよび図5Bに示される。CFCおよびCFUS12コロニーは、放射後14日目にIL12処理動物においてのみ検出された図5Aおよび5Bに示される。これらの結果は次の事項を示唆している;その事項とは、IL12が骨髄前駆体および短期のHSCsを致死量放射線から直接的に防護しないだろうことである。この結果に関する1つの説明は、IL12処理動物骨髄中に致死量放射線から残ったCFCおよびCFUS12コロニー形成細胞はないであろうとのことである。放射後14日目での、CFCおよびCFUS12コロニー形成細胞は、IL12処理でレスキューされた長期再構築幹細胞longtermrepopulatingstemcellsに由来し得る。実験の詳細は以下の通りである。致死量放射線後の異なる時点で、コロニー形成細胞アッセイ、コロニー形成単位脾臓12日アッセイ、および骨髄移植に関して、骨髄細胞をIL12またはPBS緩衝剤を受けたマウスから単離した。レジェンドDO照射後すぐ;IR、照射。BM骨髄。CFUS12、コロニー形成単位―spleen12。図5A:分離された骨髄細胞を、12日目にコロニー形成を検出するために、メチルセルロースプレートに蒔いた。正常マウスからの骨髄細胞を、前記アッセイ系のコントロールとして使用した。コントロールおよびIL12処理マウスの双方で、最初の9日で検出可能なCFC活性は認められない。12日目までに、低レベルCFC細胞活性が、IL12処理マウスにおいて提示されはじめる。CFC活性の完全な回復は、IL12処理マウスにおいて放射後約14日目に観察された。対照的に、コントロールマウス骨髄細胞のCFC細胞活性の回復は、認められなかった。図5B~CIL12処理またはコントロールマウスから分離された骨髄細胞を、第二の致死性に照射されたマウスに移植した。移植後12日目、レシピエントマウスを屠殺した;そして脾臓を、除去し、固定してコロニー形成を計数した。IL12処理およびコントロールマウスの双方の最初の7日に分離された細胞は、CFUS12を発生しなかった。しかしながら、CFUS12活性の完全な回復が、IL12処理マウスにおいて放射後約10日目に分離された細胞で観察された。図5Bは、トータル6マウスでの2実験の概要を示す;図5Cは、IL12処理またはPBS緩衝剤処理骨髄細胞を受けたマウスから分離された脾臓を示す。図5D~F二次的な骨髄移植を使用して、IL12が長期再構築HSCを防護できるかを検出した。致死量放射線およびIL12レスキューの6月後、これらのマウスから骨髄細胞を、分離し、そして第2の致死性に照射されたマウスに移植した。移植4ヶ月後、ドナー細胞を、レシピエントの末梢血で検査した。図5Fに示したとおり、約30の再構築された血液細胞はドナー起源であり、ドナー細胞に由来するTB細胞およびMG細胞を検出することができる;このことはIL12が長期再構築細胞を防護することを示している。IL12は、骨髄前駆細胞または短期の造血幹細胞を致死性照射から防護するようには思われなかった。というのも、照射後直ちに又は7日後に骨髄中でCFCおよびCFU活性が無いか又は僅かしかなかったからである。照射後、CFUに関して10日までまたはCFCに関して14日まで、完全な回復に近いコロニー形成ではなかった。これら後のCFUおよびCFC活性は、彼ら双方が防護された長期の造血幹細胞から由来したことを示している。CFUに関する回復は、CFCよりも約4日早かった。この事項は、LTHSCからSTHSCsにはじまり、次によりコミットした前駆細胞へといたる、正常な骨髄幹細胞の分化段階と一致している。活性なLTHSCsは、致死性に照射されたマウスをレスキューすることだけではなく、造血系をすっかり再構築することもできる。IL12防護LTHSCsは、致死性に照射されたマウスをレスキューする及び造血系を再構築させることだけではなく、長期において機能的な骨髄球性系およびリンパ球系へと分化した。以下に幾つかのさらなる実験の詳細を記載する。致死量放射線からのレスキューの6月後、全骨髄細胞を、分離し、そして1x106細胞を第2の致死性に照射されたマウスに移植した。移植の4ヶ月後、血液細胞を採集し、抗Ly52および抗Mac1抗Gr1抗体、および抗Ly52および抗CD3抗B220抗体および抗Ly52抗体で染色した。IL12レスキュー骨髄細胞は、骨髄球系細胞およびリンパ球系細胞の両方を生じた。IL12レスキュー骨髄ドナー細胞に由来する、約28±1の血液細胞が存在していた。D照射後の日数。実施例9:IL12投与が骨髄細胞増殖を刺激するかどうかを決定するために、試験を実施した。試験の結果は次の事項を明らかにした;その事項とは、IL12が、骨髄細胞をサイクリングcyclingおよび増殖へと促進するコントロールと比較してことである。S期の細胞が放射に比較的耐性であることが信じられている。BrdU取込および細胞サイクリング分析の両方を実施して、IL12が骨髄細胞増殖を刺激できるかどうかを決定した。IL12処理マウスにおいて、コントロール動物と比較して、より多くのS期の骨髄細胞が存在する。そのうえ、コントロール動物と比較して、IL12処理骨髄において、より多くのBrdU陽性細胞が存在する。これらの結果は、図7に示される。IL12投与の24時間後、骨髄細胞をBrdU取込アッセイのために分離した。統計分析は、IL12処理骨髄が、コントロールマウスと比較して高いレベルのBrdU陽性細胞を含有していることを示した。細胞周期分析をプロピジウムヨウ化物染色法で実施した、これによりS期での細胞数の有意な増加が示された。実施例10:IL12投与が、Sca1細胞を放射誘導性のアポトーシスから防護するかどうかを評価するために研究を行った。Sca1は、造血再構築細胞または幹/前駆細胞のマーカーである。IL12投与の24時間後、マウスは、致死量放射線を受けた。放射7時間後、マウスを屠殺し、骨髄細胞を分離し、アネキシンVおよびSca1抗原を検出した。図8に示されるとおり、PBS処理コントロールマウスと比較して、IL12処理マウス中のアネキシンVSca1細胞は、全骨髄中で有意に増加する。全Sca1細胞におけるAnnexinVSca1細胞の比率は、コントロールマウスと比較して、IL12処理動物に関して有意に高かった。IL12投与は、全骨髄中のアネキシンV陰性Sca1陽性細胞のパーセンテージを有意に増加させると思われた。この結果は、次の事項を指摘する;その事項とは、致死性照射後のIL12処理マウス中に、幹マーカーを有する、より活動的な骨髄細胞が存在したことである。実施例11:IL12投与が化学療法薬と共に使用された場合、複数系統の血球の回復を促進させるかどうかを決定するため、試験を行った。この実施例において、IL12の使用は、化学療法による主要な療法に対して、補助的または付属的な療法としてである。IL12を、異なる時間に投与した。この研究においてマウスは、相対的に高用量の化学療法薬Cytoxanを受けた。異なる時間のpostcytoxan処理で、血球計数検査のために、末梢血を尾静脈から採取した。これらのデータは、図9に示される。図9A白血球数B赤血球数C血小板数。限定されたマウス数で、IL12処理マウスは、良好な血球回復を示した。[材料および方法]マウスおよびサイトカイン上記に開示された実験に使用した全てのマウスは、JacksonLabsから購入した。使用した具体的なマウスは、C57BL6J系統の雌マウスであり、一般に6~8週齡であった。マウスは、南カリフォルニア大学の動物管理使用委員会により承認されたプロトコールにしたがって取扱われ、管理された。組換え型のマウスインターロイキン12は、RDSystems社またはPeproTech社から購入され、製造者の推奨にしたがってリン酸緩衝食塩水に、pH74、100ngulの貯蔵濃度に溶解され、70 ゚Cで貯蔵された。他のサイトカインまたはケモカインは、RDSystems社から購入した。放射線防護アッセイマウスは、放射線防護アッセイ前の1週間に酸性水を与えられた。サイトカインリン酸緩衝食塩水pH74に希釈されるを、全身体での致死性照射の前または後の特定時間に、マウスに静脈注射した。コントロール群マウスは、PBS緩衝液を注射された。TBIに関して、マウスは、電離照射を500radの用量で3時間インターバルで2回、又は1000radの用量で1回暴露された;これは、カナダ原子力エネルギー社AtomicEnergyofCanadaLTDのGammacell40machine中で実施された。γ線の照射線量率exposurerateは、1Gyminである。この放射線量は、全てのコントロール群マウスを暴露後30日以内に死亡させる。照射後、マウスは、抗生物質を含有している水を与えられた。生存曲線に関して、KaplanMeier法を使用した。各実験は、3回以上繰り返して行った。末梢血細胞数に関して、6~8週齡の雌C57BL6Jマウスは、致死性または亜致死性照射の前または後に、IL12のiv注射を受けた。1Oul血液を尾から採取し、MASCOTMultispeciesHematologySystems中で血球計数分析を、照射後の異なる日に行った。各群は、少なくとも3マウスを有していた。細胞のサイクリングおよび増殖アッセイ細胞サイクリングアッセイcellcyclingassayに関して、IL12またはPBSをマウスに静脈注射した。注射24時間後、全骨髄細胞を大腿骨から流出させ、溶解緩衝剤で処理して赤血球を破壊した。PBS中での洗浄および20 ゚C純粋エタノール中での少なくとも1時間の固定の後、約5x105骨髄細胞を、RNA分解酵素Aで37 ゚C、30分間処理し、次にシグマから購入したプロピジウムヨウ化物で室温で15~30分間染色し、次に蛍光活性化セルソーティングを用いた細胞サイクリング分析で直接処理した。BrdUアッセイに関して、IL12またはPBSを、マウスに静脈注射した。注射の21時間後、マウスは、5ブロモ2デオキシウリジンを50mgkg用量ip注射された。BrdU注射の3時間後、マウスを屠殺した。そして、全骨髄細胞を大腿骨から分離し、溶解緩衝剤で処理して、赤血球を破壊した。骨髄細胞を、OncogeneResearchProductsから購入したBrdU免疫組織化学システムキットを用いた増殖アッセイのために、サイトスピンでスライドに分散させた。骨髄、脾臓、および小腸の病理学マウスを、IL12またはPBSで、致死性照射を受ける24時間前に処理した。致死性照射後の異なる日に、大腿骨、脾臓、および小腸を除去し、10ホルマリン緩衝剤で24時間固定した。引き続いて、骨髄をRapidDecalcifierで約30分間脱灰した。サンプルおよび組織を、次にルーチンのヘマトキシリンおよびエオシン染色のために5umのミクロ切片にするために、TissuePrep2パラフィンワックスに包埋した。幾つかの小腸を、PAS染色で処理した。長期造血幹細胞におけるIL12放射線防護効果致死性照射の前または後のIL12処理によりレスキューされたLy52系統マウスを、6ヶ月後に屠殺した。ドナー細胞として、これらのマウスからの全骨髄細胞を、全身体で致死性照射を受けたLy51系統マウスへと移植した。移植の4ヶ月後、末梢血細胞を、Ly52細胞と共にT細胞およびB細胞マーカーと共にマクロファージおよび顆粒球細胞マーカーに関してFACSを用いて分析した。全ての抗体は、BDPharmingenから購入した。コロニー形成単位アッセイおよびCFUspleen12アッセイ致死性照射の24時間前、マウスをIL12でiv処理した。そして骨髄細胞を、これらのマウスから致死性照射後の異なる日に分離した。CFUアッセイに関して、2x105骨髄細胞を、1mlメチルセルロース培地MethCultGFM3434StemCellTechnologiesIncよりに十分に混合し、そして35mmディッシュ中で培養した。各サンプルは、繰り返された。12日培養後、コロニーを、顕微鏡下で計数した。CFUspleen12アッセイに関して、ドナーとして2x105骨髄細胞を、致死性照射を受けたレシピエントマウスへと移植した。1ドナーマウスからの細胞を、3レシピエントマウスへと移植した。移植の12日後、レシピエントマウスを屠殺し、脾臓をTellyesniczkys溶液で固定した。脾臓コロニーを計数した。本発明は、特定の好適な態様に関連して、かなり詳細に議論してきたが、他の態様も可能である。従って、添付される特許請求の範囲の範囲は、本開示に含まれる好適な態様の記載に限定されるべきではない。本明細書中で参照される全ての引用文献および特許は、その全体が参照によって援用される。