図2Aに示されたアミノ酸配列を有するヒトAnx-A1タンパク質に対して高められた結合性を有する特異性結合性分子。請求項1記載の特異性結合性分子であって、該特異性結合性分子の相補性決定領域CDRsのVLCDR1、VLCDR2、VLCDR3、VHCDR1、VHCDR2、およびVHCDR3を含む特異性結合性分子、またはそれぞれのCDRsと少なくとも70同一なアミノ酸配列。相補性決定領域CDRsのVLCDR1、VLCDR2、VLCDR3、VHCDR1、VHCDR2、およびVHCDR3を含む請求項2記載の特異性結合性分子であって、VLCDR1はKASENVVTYVS、VLCDR2はGASNRYT、VLCDR3はGQGYSYPYT、VHCDR1はGYTFTNYWIG、VHCDR2はDIYPGGDYTNYNEKFKG、VHCDR3はWGLGYYFDY、または、それらと少なくとも70同一なアミノ酸配列である。該特異性結合性分子は、抗体またはそのフラグメントである、請求項1から3のいずれか1項記載の特異性結合性分子。該抗体がモノクローナル抗体である、請求項4記載の特異性結合性分子。モノクローナル抗体が人間化される、請求項5記載の特異性結合性分子。該フラグメントがFab、Fab’2またはFvフラグメント、またはscFv分子である、請求項4記載の特異性結合性分子。図11および/または図13に示されたアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む、請求項1から5、または7のいずれか1項記載の特異性結合性分子。2010年6月3日にアクセションナンバー10060301として欧州細胞カルチャーコレクションECACCに寄託されたハイブリドーマ細胞系によって製造される、請求項1から5のいずれか1項記載の特異性結合性分子。図2Aに示されたアミノ酸配列を有するヒトAnx-A1タンパク質に対して高められた結合性を有する特異性結合性分子を製造するハイブリドーマ細胞系。2010年6月3日にアクセションナンバー10060301として欧州細胞カルチャーコレクションECACCに寄託された、請求項10記載のハイブリドーマ細胞系。請求項1から9のいずれか1項記載の特異性結合性分子を含む製薬組成物。さらに別の治療的活性薬を含む、請求項12記載の製薬組成物。薬剤における使用のための、請求項1から9のいずれか1項記載の特異性結合性分子。T細胞媒介性疾患の治療における使用のための、請求項1から9のいずれか1項記載の特異性結合性分子。前記T細胞媒介性疾患が移植対宿主病、移植拒否反応、アテローム性動脈硬化、HIV、AIDS、乾癬、流産、および自己免疫疾患患から成る群から選択される、請求項15記載の特異性結合性分子。前記自己免疫疾患がリウマチ性関節炎RA、多発性硬化症MS、全身性エリテマトーデスSLE、アジソン病、甲状腺機能亢進症、強皮症、多発性筋炎、糖尿病、自己免疫性ぶどう膜網膜炎、潰瘍性大腸炎、尋常性天疱瘡、炎症性腸疾患、自己免疫性甲状腺炎、ぶどう膜炎、ベーチェット病、およびシェーグレン症候群候群から成る群から選択される、請求項16記載の特異性結合性分子。前記自己免疫疾患がリウマチ性関節炎RA、多発性硬化症MS、および全身性エリテマトーデスであるSLEから成る群から選択される、請求項17記載の特異性結合性分子。前記自己免疫疾患は、リウマチ性関節炎RAまたは多発性硬化症MSである、請求項18記載の特異性結合性分子。前記T細胞媒介性疾患がアテローム性動脈硬化、HIV、AIDS、および乾癬から成る群から選択される、請求項16記載の特異性結合性分子。請求項1から9のいずれか1項記載の特異性結合性分子の、T細胞媒介性疾患の治療における使用のための医薬の製造での使用。請求項1から9のいずれか1項記載の特異性結合性分子を対象に投与することを含む、必要とされる対象における、T細胞媒介性疾患の治療方法。発明の要約本発明者は有害な細胞傷害効果なしでT細胞活性化を特異的に阻害する点で素晴らしい特性を持っているモノクローナル抗体を同定した。この抗体はT細胞仲介疾病、たとえば慢性関節リウマチまたは多発性硬化症の治療に有用である。従って、本発明は図2Aに示されるアミノ酸配列を有するヒトAnx-A1タンパク質に対する向上した結合性を有する特異性結合性分子specificbindingmoleculeを提供する。定義本明細書において使用される時、特異性結合性分子は、互いに結合特異性を持っている1組の分子のメンバーである。特異性結合性組のメンバーは、天然由来か、または完全または部分的に人工的に製造することができる。分子対の1つメンバーは、その表面に突出部またはくぼみであることができる領域を有する。これは分子組の他のメンバーの特定の空間的または極性部分と特異的に結合し、したがってそれと補足的であることができる。したがって、組のメンバーは互いに特異的に結合する能力を有している。特異的結合性組のタイプの例は、抗原-抗体、ビオチン-アビジン、ホルモン-ホルモンレセプタ、受容体-配位子、酵素-基質である。一般に、本発明は抗原-抗体タイプの反応に関する。本発明の特異性結合性分子はAnx-A1へ、他の分子類より大きな親和性で結合する、すなわち、特異的にAnx-A1に結合する。Anx-A1に結合する特異性結合性分子は、アンチAnx-A1抗体とアプタマーを含んでいる。本発明の特異性結合性分子は典型的には抗体である。本発明機能の抗-Anx-A1抗体は、投与された際にT細胞活性化を妨害し、その結果、典型的にはT細胞活性化の異常により引き起こされるT細胞媒介性疾病の治療に使用されることができる。用語抗体は本明細書で用いられる場合には免疫グロブリン分子および免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な部位、すなわち、ある抗原と特異的に結合する抗原結合性部位を含む分子を意味し、天然由来か、または完全または部分的に人工的に製造することができる。この用語はまた、抗体結合ドメインであるかまたはそれと相同である結合領域を持っているすべてのポリペプチドまたはタンパク質を包含する。天然源からこれらを得るか、または一部または完全に人工的にそれらを製造できる。抗体は、典型的には2つの同じ重鎖と、重鎖よりも短い2つの同じ軽鎖を含むポリペプチドである。哺乳類には、2つのタイプの軽鎖である、ラムダλおよびカッパκと呼ばれる鎖がある。重鎖と軽鎖のそれぞれは可変領域と不変領域で構成される。重鎖可変領域はVH領域と呼ばれ、軽鎖可変領域はVL領域と呼ばれる。また、カッパ軽鎖に関しては、可変領域はVK領域とも呼ばれる。重鎖と軽鎖のそれぞれの可変領域は3つの相補性決定領域CDRs、CDR1、CDR2およびCDR3を含む。これらはそれぞれVLCDR1、VLCDR2、VLCDR3、VHCDR1、VHCDR2、およびVHCDR3と命名される。抗体の例としては、免疫グロブリンアイソタイプ例えば、IgG、IgE、IgM、IgD、およびIgAとそれらのアイソタイプサブクラス;FabF2FvscFvdAbFdのような、抗原結合領域を含むフラグメント;および二特異性抗体diabodyがあげられる。抗体は、ポリクローナル、またはモノクローナルであることができる。モノクロナール抗体は、本明細書においてmAbと呼ぶことがある。発明の詳細な説明アネキシンは、カルシウム-、およびりん脂質-結合細胞性蛋白質の群であり、また、リポコルチンとして知られている。アネキシンファミリーには、アネキシンAl、アネキシンA2、およびアネキシンA5を含む13のメンバーがある。また、アネキシン-A1はアネキシン-1としても知られ、本明細書ではAnx-A1とも呼ばれる。アネキシン-1Anx-A1は、37kDaの蛋白質であり、元々、グルココルチコイド類の作用のメディエータとして記述された。ここ数年間にわたって、証拠は、Anx-A1が順応性免疫系、特にT細胞におけるT細胞レセプタTCRシグナリングの強度を調節することにより恒常性の役割を果たすことを示している。Anx-A1は先天性免疫反応の細胞における炎症の内因のダウンレギュレータとして生体内で機能する。図1Aは、Anx-A1の三次元構造を示しているリボンダイヤグラムである。Anx-A1をコード化する8つのヒトヌクレオチド配列がある。もちろん、4つだけが翻訳されるので、ANXA1-002、ANXA1-003、ANXA1-004およびANXA1-006と指定されたAnx-A1の4つのアイソフォームがある。これらの配列は、Ensemblウェブサイトwwwensemblorgから利用可能であり、OTTHUMT00000052664ANXA1-002、OTTHUMT00000052665ANXA1-003、OTTHUMT00000052666ANXA1-004およびOTTHUMT00000052668ANXA1-006と指定される。ヒトアネキシン-1Anx-A1の1つのアイソフォームのANXA1-003のアミノ酸とヌクレオチド配列は図2Aに示される。ANXA1-002、ANXA1-004、およびANXA1-006のアイソフォームのアミノ酸配列は図2B、2C、および2Dにそれぞれ示されている。図2から見られるように、アイソフォームANXA1-002、ANXA1-004、およびANXA1-006はANXA1-003のショートスプライス変形または少ない数のアミノ酸変化があるANXA1-003の変形のどちらかである。多くの研究が、Ac.2-26と名付けられたAnx-A1のN末端基ペプチドが全蛋白質のバイオ活性代用薬として作用することを示した例えば、LimetolProcNatlAcadSciUSA951453591998を参照されたい。図1Bはアネキシン反復とこのバイオ活性配列の位置の略図である。ペプチドAc.2-26は図2に示されたAnx-A1の全長アミノ酸配列のアミノ酸残基2-26の配列を有するアセチル化ペプチドである。ペプチドAc.2-26の配列は、図1Cに示されていて、以下の通りである:CH3CO-AMVSEFLKQAWFIENEEQEYVQTVKAnx-A1とそのN末端基から誘導された生理活性ペプチドは、ホルミルペプチド受容体FPRファミリーのメンバーを通してそれらの生体学的効果を仲介する。Anx-A1はホルミルペプチド受容体ライク-1formylpeptidereceptorlike1:FPRL-1のファミリーの1つのメンバーの直接結合と活性化により、好中球の血管外遊出と先天性免疫への逆-調節性作用counterregulatoryactionsを生む。本発明者は以前に、hrAnx-A1の存在下でのT細胞の刺激が、FPRL-1の刺激を介してT細胞活性化を増加させることを見いだした。本発明の特異性結合性分子はアネキシン-1Anx-A1に結合する。特異性結合性分子が結合するAnx-A1は、図2Aに示されたポリペプチド配列を持っているヒトAnx-A1である。本発明の第1の態様では、図2Aに示されたアミノ酸配列を有するヒトAnx-A1タンパク質に対して向上された、特異性結合性分子を提供する。また本発明のこの態様は、本発明の第1の態様の特異性結合性分子の相補性決定領域ComplementarityDeterminingRegionsCDRsのVLCDR1、VLCDR2、VLCDR3、VHCDR1、VHCDR2、およびVHCDR3を含む特異性結合性分子、またはそれぞれのCDRsと少なくとも70同じアミノ酸配列を含む特異性結合性分子を提供する。特異性結合性分子は典型的には抗体である。1つの実施態様では、特異性結合性分子は相補性決定領域VLCDR1、VLCDR2、VLCDR3、VHCDR1、VHCDR2、およびVHCDR3を含み、それぞれは以下のアミノ酸配列を含む。VLCDR1はKASENVVTYVS。VLCDR2はGASNRYT。VLCDR3はGQGYSYPYT。VHCDR1はGYTFTNYWIG。VHCDR2はDIYPGGDYTNYNEKFKG。VHCDR3はWGLGYYFDY。または、少なくとも70が同じアミノ酸配列である。CDRsは、保存配列定義部KabatetalinSequencesofProteinsofImmunologicalInterestNatlInstHealthBethesdaMDと構造定義部ChothiasとLeskJMolBiol19690117の組み合わせにより指定される。これらの定義はカーター他でも記載されるProcNat’AcadSciUSA8942859。また、本発明は上記のペプチド配列の変異体も含む。本明細書において使用される時、変異体という用語は同様のアミノ酸配列を有し、および/または同じ機能を有するタンパク質をいう。例えば、変異体という用語は1以上のアミノ酸の付加、欠失、置換または同様のものを含むタンパク質またはポリペプチドを包含する。本発明の変異体の例は上で定義されたタンパク質、たとえば融合たんぱく質であり、ペプチドを含み、1種以上のアミノ酸類の他の1種以上のアミノ酸類での置換を有することができる。当業者は、様々なアミノ酸類が同様の特性を有することを意識している。1種以上のそのようなアミノ酸類物質は、その物質の希望の活性を取り除かずに、他の1種以上のそのようなアミノ酸類によってしばしば置換されることができる。したがって、しばしば互いにアミノ酸類のグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、およびイソロイシンは互いに置換されることができる脂肪族側鎖を有するアミノ酸類。これらの可能な置換では、グリシンとアラニンが互いに置き換えをすることが好ましくそれらには比較的短い側鎖を有するので、バリン、ロイシン、およびイソロイシンが互いに置き換えをすることが好ましい疎水性であるより大きい脂肪族側鎖を有するので。互いにしばしば置換されることができる他のアミノ酸類としては:フェニルアラニン、チロシン及びトリプトファン芳香族側鎖を有するアミノ酸;リシン、アルギニン及びヒスチジン塩基性の側鎖を有するアミノ酸;アスパラギン酸およびグルタミン酸酸性の側鎖を有するアミノ酸;アスパラギンおよびグルタミンアミド側鎖を有するアミノ酸;システインとメチオニン硫黄含有側鎖を有するアミノ酸が挙げられる。この種の置換はしばしば保守的または準保守的なアミノ酸置換と呼ばれる。したがって、本発明は上記のアミノ酸配列を有するCDRsを含み、CDRs中に1以上の保守的な置換基、たとえば上記のものと少なくとも70同じであるCFRsのアミノ酸配列を含む特異性結合性分子に及ぶ。例えば、それぞれのCDRが上記のCDRsのアミノ酸配列と比較して、1、2、3、4または5の保守的置換基CDRに依存するを持つことができる。例えば、上記のVLCDR1のアミノ酸配列内に1、2または3の保守的置換基が存在することができ、上記のVLCDR2のアミノ酸配列内に1または2の保守的置換基が存在することができ、上記のVLCDR3のアミノ酸配列内に1または2の保守的置換基が存在することができ、上記のVHCDR1のアミノ酸配列内に1、2または3の保守的置換基が存在することができ、上記のVHCDR2のアミノ酸配列内に1、2、3、4または5の保守的置換基が存在することができ、上から出されたVLCDR2のアミノ酸配列、上記のVHCDR3のアミノ酸配列内に1、2または3の保守的置換基が存在することができ、そして、配列は上記のCDR配列と少なくとも70の同一性を保有するだろう。3文字と1文字コードを使用して、以下の通りアミノ酸類について言及できる:グリシンGまたはGly、アラニンAまたはAla、バリンVまたはVal、ロイシンLまたはLeu、イソロイシンIまたはIle、プロリンPまたはPro、フェニルアラニンFまたはPhe、チロシンYまたはTyr、トリプトファンWまたはTrp、リシンKまたはLys、アルギニンRまたはArg、ヒスチジンHまたはHis、アスパラギン酸DまたはAsp、グルタミン酸EまたはGlu、アスパラギンNまたはAsn、グルタミンQまたはGln、システインCまたはCys、メチオニンMまたはMet、セリンSまたはSer、およびトレオニンTまたはThr、残基がアスパラギン酸またはアスパラギンの場合、シンボルはAsxまたはBが使用できる。残基がグルタミン酸またはグルタミンの場合、シンボルはGlxまたはZが使用できる。文脈がそうでないことを示さない限り、アスパラギン酸の参照としてはアスパラギン酸塩を含み、およびグルタミン酸はグルタミン酸塩を含む。アミノ酸欠失または挿入も、上記の融合たんぱく質のようなタンパク質のアミノ酸配列に対して起こることができる。したがって、たとえばポリペプチドの活性に実質的効果を持っていないか、または少なくともそのような活性を取り除かないアミノ酸類を欠失することができる。そのような欠失は利益がある。なぜなら、ポリペプチドの全長と分子量を、活性を保有しつつ、減少することができるからである。これは特定の目的のために必要であるポリペプチドの量の低減を可能にし、例えば、投与量レベルを減少できる。また、上記の融合たんぱく質の配列に対するアミノ酸挿入も行うことができる。本発明の物質の特性を変更するためにこれを行うことができる例えば、先に融合たんぱく質と関連して説明したような識別、精製または発現を補助するために。上に与えられた配列に対するアミノ酸変化は、例えば、部位特異的突然変異誘発または固体状態合成のような、任意の適当なテクニックを使用して行われることができる。本発明の範囲内で、アミノ酸の置換または挿入を、天然由来または非天然由来のアミノ酸類を使用することで行うことができることが理解されるべきである。天然の、または合成のアミノ酸類が使用されるか否かに関わりなく、L-アミノ酸類だけが存在しているのが好ましい。当技術分野で知られている同一性は、二個以上のポリペプチド配列または二以上のポリヌクレオチド配列の間の相関であり、配列を比較することによって決定する。また、当技術分野で同一性は、そのような配列のストリングの間の同一性により決定される、ポリペプチド配列またはポリヌクレオチド配列の間の配列の関連性の度合いも意味する。2つのポリペプチド配列または2つのポリヌクレオチド配列の間の同一性を測定する多くの方法が存在しているが、同一性を決定するのに一般的に使われている方法は、コンピュータプログラムによるものである。2つの配列の間の同一性を決定する好ましいコンピュータプログラムとしては、GCGプログラムパッケージBLASTPBLASTNandFASTAがあげられるが、これに限定されない。アミノ酸配列を比較するのにCLUSTALプログラムなどのプログラムを使用することもできる。適宜にいずれかの配列に空間を挿入することによって、このプログラムはアミノ酸配列を比較して、最適アラインメントを見いだす。最適なアラインメントのためにアミノ酸同一性または類似性について計算アミノ酸タイプの同一性と保守性することが可能である。BLASTxのようなプログラムは、類似配列の最も長い広がりを並べて、適合性の値を割り当てるだろう。その結果、それぞれが異なったスコアを有するいくつかの領域の類似が見いだされる領域について、比較することが可能である。同一性分析の両方のタイプが本発明で想定される。2つのアミノ酸配列または2つの核酸配列の同一性パーセントは、最適の比較目的のために配列を並べ例えば、最も良い配列のために第1の配列にギャップを導入することができる、対応する位置でアミノ酸残基またはヌクレオチドを比較することによって決定する。最も良い並びは、最も高いパーセントの同一性をもたらす2つの配列の並びである。パーセントの同一性は配列中の同じアミノ酸残基またはヌクレオチドの数で比較して決定するすなわち、同一性=同じ位置/位置の総数×100の値と等しい。2つの配列の間のパーセントの同一性の決定は、当業者に公知の数学的アルゴリズムを使用することで実行される。2つの配列を比較するための数学的アルゴリズムの例はカーリンとアルツチュルのアルゴリズム、KarlinandAltschulProcNatlAcadSciUSA8722642268、およびKarlinandAltschulProcNatlAcadSciUSA9058735877で改良されたものである。AltschuletalJMolBiol215403410の、NBLASTとXBLASTプログラムは、そのようなアルゴリズムを取り入れた。BLASTヌクレオチド検索はNBLASTプログラムで、スコア=100、語長=12で実行されて、本発明の核酸分子と相同のヌクレオチド配列を得る。BLASTタンパク質検索はXBLASTプログラム、スコア=50、語長=3で実行されて、本発明のタンパク質分子と相同のアミノ酸配列を得る。比較目的のためのギャップを有する配列を得るために、GappedBLASTがAltschulらに記載されているようにして利用されるAltschuletalNucleicAcidsRes2533893402。別法として、PSI-Blastが、分子間の距離関係を検出する繰り返された検索を実行するのに使用される同上。BLAST、GappedBLAST、およびPSI-Blastプログラムを利用するとき、それぞれのプログラム例えば、XBLASTとNBLASTのデフォルトパラメータ類が使用される。httpwwwncbinlmnihgovを参照されたい。配列の比較に利用された数学的アルゴリズムの別の例はマイアーズとミラーCABIOS1989のアルゴリズムである。CGC配列アラインメントソフトウェアパッケージの一部であるALIGNプログラムバージョン2.0はそのようなアルゴリズムを取り入れている。当技術分野で知られている配列分析のための他のアルゴリズムとしては、トレリスとロボッティに記載されているADVANCEとADAMTorellisandRobottiComputApplBiosci1035、およびFASTAPearsonandLipmanProcNatlAcadSci8524448があげられる。FASTAでは、ktupは、検索の感受性と速度を設定する制御オプションである。典型的に、本発明の特異性結合性分子のCDRsのアミノ酸配列は、HGMPHumanGenomeMappingProjectによって提供されたBLASTコンピュータプログラムAtschul他、JMoLBiol215403410のデフォルトパラメータ類を使用して、アミノ酸値で、上記で説明したCDRsのアミノ酸配列と少なくとも70の同一性がある。より典型的には、CDR配列は、少なくとも75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98または少なくとも99の、アミノ酸値で、上記で説明したCDRsのアミノ酸配列と同一性がある。典型的には、本発明の特異性結合性分子のCDR配列のそれぞれは、アミノ酸値で、上記で説明したCDRsのアミノ酸配列とこのレベルの同一性を有する。あるいはまた、本発明の特異性結合性分子のCDRの任意の1、2、34または5は、上記で説明したCDRsのアミノ酸配列とこのレベルの同一性を有する。本発明の特異性結合性分子は典型的に抗体であり、より典型的にモノクローナル抗体である。1つの実施態様では、本発明のモノクローナル抗体はヒト化される。本発明のモノクローナル抗体は、抗体のアミノ酸配列を変更することによって、ヒト化される。本発明の特異性結合性分子の免疫原性を減少させる方法は、例えば、部位特異的突然変異誘発または他の一般的に使用される分子生物学的手法により、適当な抗体フレームワーク足場または変化する表面残基リモデリングにCDRを移植することを含むRoguska他、ProteinEng9895904。他の利用可能な方法としては、分子の中の潜在的T細胞エピトープの識別、および例えば部位特異的突然変異誘発反-免疫によるこれらの引き続く取り出しを含む。特異性結合性分子のヒューマニゼーションは、分子が治療薬として使用される時に望ましいことがある。CDR領域または周囲のフレームワーク配列のヒューマニゼーションが所望により行われる。オリジナルの抗体の特異性を保持したまま、他の抗体またはキメラ分子を製造するために、モノクローナルと他の抗体を採取して、DNA組換え技術を使用することが可能である。そのようなテクニックは、抗体の免疫グロブリン可変領域、または相補性決定領域CDRsを、異なった免疫グロブリンの不変部、または不変部フレームワーク領域にコード化するDNAを挿入することを含むことができる。例えばEP-A-184187、GB2188638AまたはEP-A-239400を参照されたい。抗体を製造するハイブリドーマまたは他の細胞が、製造された抗体の結合特異性を変更するかまたはしない遺伝子変異または他の変化に供されることができる。抗体は多くの方法で変成されることができる。抗体という用語は必要な特異性の結合領域を有するすべての特異結合メンバーまたは物質をカバーするものとして理解されるべきである。すなわち、この用語は天然物か、完全に又は一部合成物であるかに関わりなく、すべての免疫グロブリン結合領域を含む全てのポリペプチドをはじめとした、抗体のフラグメント、誘導体、機能的な同等物、および抗体の相同体、ヒト化された抗体をカバーする。免疫グロブリン結合ドメインを含むキメラ分子、または同等物、他のポリペプチドとの融合体も含まれる。キメラ抗体のクローニングと発現はEP-A-0120694およびEP-A-0125023に記載されている。ヒト化された抗体humanisedantibodyは非人間の、例えばネズミの抗体の可変部とヒト抗体の不変部を有する変成抗体であることができる。ヒト化された抗体を作るための方法は例えば、米国特許第5225539号に記載されている。本発明の特異性結合性分子は抗体のフラグメントであることができる。全体の抗体のフラグメントが抗原を結合する機能を実行できることが示されている。結合フラグメントの例はiVL、VH、CLおよびCH1ドメインから成るFabフラグメント;iiVH、およびCH1ドメインから成るFdフラグメント;iii単一抗体のVLおよびVHドメインから成るFvフラグメント;ivVHドメインから成るdAbフラグメントWardESetalNature341544546;v分離CDR領域;vi2つの結合したFabフラグメントを含む2価のフラグメントであるFab’2フラグメント;vii;単一鎖Fv分子scFvであって、VHドメインとVLドメインがペプチドリンカーによって結合され、2つのドメインが会合し抗原結合部位を形成することを許容するものHustonetalPNASUSA8558795883viii二重特異性bispecific単一鎖Fv二量体PCT/US92/09965およびix遺伝子融合により構成されたジアボディズdiabodies、多価性またはマルチスペシフィックフラグメントWO9413804PHollingeretalProcNatlAcadSciUSA9064446448である。典型的には、フラグメントはFab、Fab’2、またはFvフラグメントまたはscFv分子である。ジアボディズはポリペプチドのマルチマーmultimerである。それぞれのポリペプチドは、免疫グロブリン軽鎖の結合領域を含む第1のドメインと、免疫グロブリン重鎖の結合領域を含む第2のドメインとを含み、2つのドメインは例えば、ペプチドリンカーにより結合されるが、互いに会合して抗原結合部位を形成することはできない。抗原結合部位はマルティマー内の1つのポリペプチドの第1のドメインと、マルティマー内の他のポリペプチドの第2のドメインとの会合により形成されるWO94/13804。二重特異抗体が使用される場合、それらは従来の二重特異抗体であることができ、これらは種々の方法で製造することができ、たとえば化学的に製造することができ、またはハイブリッドハイブリドーマから製造することができ、または上記の二重特異抗体フラグメントの任意のものであることができる。抗体全体ではなくむしろscFv二量体またはジアボディを使用することが望ましいかもしれない。デアボディとscFvはFc領域なしで構成され、可変ドメインだけを使用して、潜在的に抗イディオタイプ反応の効果を減少させる。他の形式の二重特異抗体はTrauneckeretalEMBOJournal1036553659で説明された単一鎖Janusinsを含んでいる。二重特異性の全体の抗体と対照的に、それらが容易に構成されて大腸菌内で発現されるので、二重特異性のジアボディズもまた有用である場合がある。適切な結合特異性のジアボディズおよび抗体フラグメントなどの他の多くのポリペプチドは、ライブラリからファージディスプレイWO94/13804を使用することで容易に選択される。ジアボディズの1つのアームが一定に保たれるなら、例えば抗原Xに対する特異的な指向を有するなら、ライブラリはもう片方のアームが変化できるとしてライブラリを作ることができ、適切な特異性の抗体が選択される。モノクローナル抗体VJ-4B6はハイブリドーマ細胞系VJ-4B6-E5-B10-D4によって分泌され、2010年6月3日に欧州細胞カルチャーコレクションECACC、ヘルスプロテクションエージンシー、センターフォーエマージェンシープリペアードネスアンドレスポンス、ポートンダウン、サリスバリィSP40JG、英国に、プタペスト条約に基づき寄託され、アクセションNo.10060301により指定された。寄託は、クイーンメリーアンドウェストフィールドカレッジ、センターフォアバイオケミカルファーマコロジー、チャーターハウススクエア、ロンドン、EC1M6BQのフルビオダクイストFulvioD’Acquistoにより行われた。寄託者は、出願人が出願中に寄託物について言及するのを認可され、欧州特許条約の規則31ldにより公衆にとって利用可能にされる寄託物に、予約不要の取り消せない同意を与えた。ハイブリドーマ細胞系VJ-4B6-E5-B10-D4は特異的にアネキシン-A1に結合するモノクローナル抗体VJ-4B6を生成する。本発明のモノクローナル抗体VJ-4B6はIgG2bアイソタイプのものである。抗体VJ-4B6は図2Aに示されるアミノ酸配列を有する全長のヒトAnx-A1プロテインに対して増大された結合性を有する。抗体VJ-4B6の軽鎖可変領域のDNAとアミノ酸配列は図11に示される。図12は、CDRsでアノテートされたVJ-4B6VJ4B6withtheCDRsannotatedの軽鎖可変領域のアミノ酸配列を示す。また、図12はVJ-4B6の軽鎖不変部の最初のいくつかのアミノ酸も示す。抗体VJ-4B6の重鎖可変領域のDNAとアミノ酸配列は図13に示される。図14は、CDRsでアノテートされたVJ-4B6の重鎖可変領域のアミノ酸配列を示す。また、図14はVJ-4B6の重鎖不変部の最初のいくつかのアミノ酸も示す。抗体VJ-4B6のCDRsは以下の通りである:VLCDR1はKASENVVTYVS。VLCDR2はGASNRYT。VLCDR3はGQGYSYPYT。VHCDR1はGYTFTNYWIG。VHCDR2はDIYPGGDYTNYNEKFKG。VHCDR3はWGLGYYFDY。本発明は抗体VJ-4B6のCDRsを有する特異性結合性分子に及び、抗体VJ-4B6のCDRsの一つ以上と少なくとも70の同一性を有するCDRsを有する特異性結合性分子にも及ぶ。また、本発明は抗体VJ-4B6の軽鎖可変領域、重鎖可変領域または軽鎖可変領域と重鎖可変領域の両方を有する特異性結合性分子のいずれかに及ぶ。本発明の具体的な実施態様では、図11および/または図13に示されているようなアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む本発明の第1の態様による特異性結合性分子を提供する。また、本発明のこの実施態様は、図11に示されているアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、および/または図13に示されているアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含むある特定の抗体フラグメントに及ぶ。例えば、この実施態様は、Fab、Fab’2、またはFvフラグメントおよびscFv分子に及ぶ。本発明は図12および/または図14に示されているアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む本発明の第1の態様による特異性結合性分子を包含する。本発明の具体的な実施態様では、2010年6月3日にアクセッション番号10060301として欧州細胞カルチャーコレクションECACCに寄託されたハイブリドーマ細胞系によって生成される本発明の第1の態様による特異性結合性分子を提供する。第2の態様では、本発明は図2Aに示されてたアミノ酸配列を有するヒトAnx-A1プロテインに対して増大された特異性を有する結合性分子を生成するハイブリドーマ細胞系を提供する。本発明の具体的な実施態様では、2010年6月3日にアクセッション番号10060301として欧州細胞カルチャーコレクションECACCに寄託された本発明の第2の態様によるハイブリドーマ細胞系が提供される。第3の態様では、本発明は本発明の特異性結合性分子を含む製薬組成物を提供する。本発明のこの態様による組成物は使用のために任意の便利なルートにより配合されることができる。通常、本発明の製薬の組成物は本発明の特異性結合性分子に加えて、薬学的に許容可能な担体、賦形剤、希釈剤、助剤、ビヒクル、バッファまたは安定剤を含む。かかる担体としては、限定するものではないが、生理食塩水、衝生理食塩水、デキストロース、リポソーム、水、グリセロール、ポリエチレングリコール、エタノール、及びそれらの組合せが挙げられる。患者に投薬する希望の方法に応じて、製薬の組成物は任意の適当な形にすることができる。それは投与単位形状で提供することができ、一般に、密封容器内に包装して提供され、キットの一部として提供できる。必ずではないが、通常、そのようなキットは使用上の注意を含んでいるだろう。それは複数の前記の投与単位を含むことができる。製薬組成物は投与のために任意の適切なルートで適合させる。例えば、経口口腔剤または舌下剤を含む、直腸、鼻、局所的口腔剤、舌下剤または経皮剤を含む、経膣または非経口的皮下、筋肉内、静脈内または、皮内を含むルートにより投与されることができる。そのような組成物は製薬の技術分野で知られている任意の方法で調製されることができ、例えば、無菌状態の下でキャリアまたは賦形剤と有効成分を混合することによって調製されることができる。経口投与のために適合させられた製薬組成物は、カプセル剤またはタブレット;粉剤または果粒;溶液、シロップまたは懸濁液水溶性または非水性液体;または、可食性の泡またはホイップ;または乳濁液などの個々の単位として存在することができる。タブレットまたは硬ゼラチンカプセルのための適当な賦形剤としては、乳糖、とうもろこし澱粉、それらの誘導体、ステアリン酸またはそれの塩があげられる。軟ゼラチンカプセルにおける使用のための適当な賦形剤としては、例えば植物油、ワックス、脂肪、半固体もしくは液体のポリオールなどがあげられる。溶液およびシロップの製剤のために使用される賦形剤としては、例えば水、ポリオール、および糖類があげられる。懸濁液の製剤において、油例えば、植物油が水中油滴または油中水滴懸濁液を提供するために使用されることができる。経皮投与のために適合された製薬の組成物は、長期間受容者の表皮に親密な接触のままで残っていることを意図する個々のパッチとして存在することができる。例えば、パッチから一般に、ファーマシューティカルリサーチ36:3181986に記載されているイオン泳動で有効成分を送達することができる。局所投与のために適合された製薬の組成物は、軟膏剤、クリーム、懸濁液、ローション、粉末、溶液、ペースト、ゲル、スプレー、エアゾール剤または油として配合されることができる。望ましくは、眼または他の外部の組織、例えば、口のおよび皮膚の感染病に関しては、組成物は局所軟膏またはクリームとして適用される。軟膏剤として配合されると、有効成分はパラフィン系または水混和性軟膏基剤のどちらかと共に使われる。別法として、有効成分はクリームの中に、水中油クリーム基剤または油中水型基剤とともに配合される。眼への局所投与のために適合された製薬の組成物としては、適当なキャリア特に水性溶媒中に有効成分が溶解されるか、または懸濁された点眼剤があげられる。口への局所投与のために適合された製薬の組成物としては、トローチ、香錠、および口内洗剤があげられる。直腸投与のために適合された製薬の組成物としては、坐剤または浣腸剤として存在することができる。キャリアが固体である鼻への投与に適合された製薬の組成物は、例えば、粒度が20~500ミクロンの範囲の粗い粉末を含み、鼻吸入法により投与される。すなわち、鼻の近くに保持された粉末の容器からの鼻腔を通る急速な吸入法により投与される。鼻噴霧または点鼻液として投与するための、キャリアが液体である適当な組成物は、有効成分の水溶性または油溶液を含んでいる。吸入法での投与のために適合された製薬の組成物は、微粒子粉またはミストを含み、これらは加圧されたエアゾール剤、噴霧装置または注入器のような各種タイプの計量投与器具によって発生することができる。膣内投与のために適合された製薬の組成物は、膣坐剤、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォームまたはスプレー配合物として提供されることができる。非経口投与のために適合された製薬の組成物は、抗酸化剤、バッファ、静菌薬および溶質を含むことができる水溶性または非水性の無菌注射液であることができ、該溶質は配合物を投与が意図される患者の血液と実質的にアイソトニックにする。また懸濁剤と増粘剤を含むことができる水性および非水性の無菌懸濁液であることもできる。注射液に使用されることができる添加剤としては、水、アルコール類、ポリオール、グリセリン、および植物油があげられる。組成物は、単位服用量または複数適用量容器中に提供されて、例えば、密封されたアンプルおよびバイアル中に提供され、使用直前に無菌の液体キャリア、たとえば注射用蒸留水の添加だけを必要とする凍結乾燥された条件で貯蔵されることができる。注射液および懸濁液は、無菌粉剤、果粒、およびタブレットから即座に調製されることができる。製薬の組成物は保存薬剤、可溶化薬剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、甘味剤、着色剤、香料、塩類、本発明の物質自分が、医薬的に許容され得る塩の形で提供できる、バッファ、コーティング剤または酸化防止剤を含むことができる。また、本発明の製薬の組成物は本発明の分子に加えて他の1種以上の治療的活性薬を含むことができる。いくつかの実施態様では、活性薬物濃縮物の配合物は医薬的に許容され得る等張化剤、緩衝薬、および医薬的に許容され得る界面活性剤を含むことができる。別法として、配合物は有効成分とリン酸水素ナトリウム一塩基酸、リン酸水素ナトリウム二塩基酸、塩化ナトリウム、ポリソルベート80またはポリソルベート20撹はんにより誘発される集合の危険を最小とする表面活性剤、水USP/Ph.Eurを含むことができ、任意に約6.0~7.0、例えば約6.5にpHを調整することができる。活性薬物濃縮物は凍結乾燥することも、凍結乾燥しないこともできる。他の配合物は緩衝薬として酢酸ナトリウム三水和物、張度調整剤として塩化ナトリウム、pH調節剤として酢酸、および注射用の蒸留水を含むことができる。本発明の組成物の用量は治療される疾病または障害、患者の年齢および状態に応じて広い範囲で変化し、医師が最終的に適切な使用用量を決定する。この投与は適宜繰り返される。副作用が起こった場合には、通常の臨床実務にしたがって、投与量の量、そして/または頻度を減少することができる。哺乳動物、特に人間への投与において、活性薬の日毎の投与量は、体重当たり、1マイクロg/kgから10mg/kg、典型的には約10マイクロg/kgから1mg/kgまでであると予想される。医師はともあれ、患者の年齢、体重、性別および反応をはじめとする要因に応じて、個人に最も適した実際の投与量を決定するだろう。上記の用量は平均的な場合での例示である。もちろん、より高いかまたは低い用量が投与されることができ、これらも本発明の範囲内である。本発明の特異性結合性分子は医薬として、例えば、T細胞媒介性疾患Tcellmediateddiseasesの治療に使用することができる。したがって、4番目の態様では、本発明は医薬における使用のための本発明の特異性結合性分子を提供する。5番目の態様では、本発明はT細胞媒介性疾患の治療における使用のための本発明の特異性結合性分子を提供する。したがって、本発明のこの態様は対象者、典型的にはそれを必要とする対象者における、本発明の特異性結合性分子を対象者に投与することを含むT細胞媒介性疾患の治療の治療法を含む。したがって、本発明はまた、T細胞媒介性疾患の治療のために使用される医薬の製造における本発明の特異性結合性分子の使用、またはT細胞媒介性疾患の治療のための医薬の製造における本発明の特異性結合性分子の使用を含む。治療方法は人間または動物の治療方法であることができ、本発明は人間そして/または獣医薬の両者に及ぶ。望ましくは、治療的有効性量対象に利益を示すに十分な量において対象に本発明の特異性結合性分子が投与される。本明細書において使用される時、治療は人間、または人間以外の動物、望ましくは哺乳動物に利益になる全ての領域を含む。治療は、既存の条件に関するか、または予防的であることができる予防的な処置。本発明のこの態様では、本発明の特異性結合性分子は、T細胞によって媒介されるさまざまな疾病を治療するのに使用される。本明細書の文脈において、T細胞媒介性疾患Tcellmediateddiseaseとは、T細胞が疾病または状態の病因または発展において役割を果たす全ての疾病または状態をいう。T細胞媒介性疾患は異所性T細胞活性化aberrantTcellactivationで典型的に引き起こされる。従って、そのような疾病は、本明細書に示されるように、モノクローナル抗体VJ-4B6によって効果を発するAnx-A1の活性を妨げることによってT細胞の活性化を防ぐことによって、治療されることができる。典型的には、本発明で治療されたT細胞媒介性疾患は、Th1細胞が役割を果たす疾病である。T細胞媒介性疾患としては、移植対宿主病graftversushostdisease、移植拒否反応、アテローム性動脈硬化、HIV、そして/または、AIDS、乾癬、流産、およびいくつかの自己免疫疾患が挙げられるがこれらに限定されない。本発明に従って治療される自己免疫疾患としては、リウマチ性関節炎RA、多発性硬化症MS、全身性エリテマトーデスSLE、アジソン病、甲状腺機能亢進症、強皮症、多発性筋炎、糖尿病、特にいくつかの型の糖尿病たとえば若年型糖尿病、自己免疫性ぶどう膜網膜炎、潰瘍性大腸炎、尋常性天疱瘡、炎症性腸疾患、自己免疫性甲状腺炎、ぶどう膜炎、ベーチェット病、およびシェーグレン症候群があげられる。T細胞媒介性疾患は、典型的にはリウマチ性関節炎、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、アテローム性動脈硬化、HIV、AIDSまたは乾癬である。より典型的には、T細胞媒介性疾患は、リウマチ性関節炎または多発性硬化症である。また、本明細書に定義されるT細胞媒介性疾患は、流産を含んでいる。本明細書に定義されるように、治療は予防予防的な処置であることができる。その結果、本発明の特異性結合性分子は、流産を予防するために使用できる。流産に非制御のTh1反応が関係されることが知られており、Th2の増加は妊娠に良好な反応を与える。T細胞媒介性疾患は典型的にはリウマチ性関節炎rheumatoidarthritisである。リウマチ性関節炎RAでは、T細胞が滑膜内の細胞を抗原提示細胞と認識して、相互作用するものと考えられている。いったん活性化されると、これらの細胞はサイトカインとエフェクタ分子を製造する。このシーケンシャルなサイトカインの拡大した生産はサイトカインカスケードcytokinecascadeを構成し、マクロファージの活性化と起炎プロセスの誘発に帰結し、軟骨と骨の分解と融食作用に至る。時間がたつにつれて、骨浸食、軟骨の破壊、および関節の完全な破壊が起こる。結局、多臓器システムが影響を受けることとなる。別の実施態様では、T細胞媒介性疾患は多発性硬化症MSである。別の実施態様では、T細胞媒介性疾患はアテローム性動脈硬化である。炎症は冠状動脈病と他のアテローム性動脈硬化の発現で重要な役割を果たす。免疫細胞は初期のアテローム性動脈硬化症を支配している。それらのエフェクタ分子は病巣の進行を加速し、炎症の活性化は急性冠状動脈症候群を顕在化させる。適応免疫はアテローム発生に非常に大きくかかわる。なぜならメタボリックの危険要因と相互作用して、動脈樹内の病巣を開始し、繁殖させ、活性化することが示されているからである。別の実施態様では、T細胞媒介性疾患は全身性エリテマトーデスSLEである。Anx-A1の、Th1細胞を好ましく分化する能力に関連して、本発明はまた、例えば、細胞内病原に対する非制御の保護的な細胞Th1反応を制限して、Th1分化を抑圧しTh2分化を促進することによって細胞外の感染病Th2反応を治療するためにも使用される。本発明の2番目の、そして引き続く態様のための好ましい特徴は第1の態様のそれに必要な変更がされる。1つの実施態様では、本発明は図2Aに示されたアミノ酸配列を有する、全長ヒトAnx-A1タンパク質に対して向上した特異性を有する結合性分子を提供する。そのような特異性結合性分子の1つの例は、2010年6月3日にアクセションNo.10060301として欧州細胞カルチャーコレクションECACCに寄託されたハイブリドーマ細胞系によって製造されたモノクローナル抗体VJ-4B6である。1つの実施態様では、本発明は以下のアミノ酸配列を持っているモノクローナル抗体VJ-4B6のCDRsを持っている特異性結合性分子を提供する:VLCDR1はKASENVVTYVS。VLCDR2はGASNRYT。VLCDR3はGQGYSYPYT。VHCDR1はGYTFTNYWIG。VHCDR2はDIYPGGDYTNYNEKFKG。VHCDR3はWGLGYYFDYである。1つの実施態様では、本発明はモノクローナル抗体VJ-4B6のVHおよび/またはVL領域を有する特異性結合性分子を提供する。これらはそれぞれ図11と13に示される。1つの実施態様では、本発明は2010年6月3日にアクセションNo.10060301として欧州細胞カルチャーコレクションECACCに寄託されたハイブリドーマ細胞系VJ4B6E5B10D4を提供する。モノクローナル抗体VJ-4B6は図3Aに記載された方法で製造された。簡潔にいえば、図2Aに示された配列を持っている全長ヒトAnx-A1をコード化するcDNAが、発現ベクター内にクローンされ細胞表層での発現が確認された。そして、金粒子に吸着されたベクタDNAのいくつかの皮内投与をネズミに施した。マウス細胞は免疫ベクタを取り込み、cDNAコード蛋白質を発現し、免疫反応を刺激した。マウスリンパ球はついでネズミのミエローマ細胞と融合し、ハイブリドーマを製造した。次に、特異性試験が行われ、ハイブリドーマがクローンされ、モノクローナル抗体が製造された。モノクローナル抗体VJ-4B6を製造するのに使用されるアプローチは、細胞表面に全分子を発現するAnx-A1相補DNAトランスフェクト細胞を使用する。したがって、タンパク質は生体内で見つけられる四次天然構造と同じ型である。抗体作成のためのこのアプローチは、Anx-A1タンパク質によりネズミを免疫することによって生成するか、または非天然の全長のタンパク質であるAnx-A1の他の商業的に利用可能な抗体の生産とは異なる。本発明の抗体はリウマチ性関節炎や多発性硬化症などのT細胞媒介性疾患の治療で特に役に立つ。本発明は、例示の目的のみで示される以下の実施例を参照し、さらに詳細に説明される。実施例では、多くの図が参照される。