高分子および第1のフェノール含有部分の第1の結合体ならびにゼラチンまたはコラーゲンおよび第2のフェノール含有部分の第2の結合体を含む複合材料であって、高分子は、第1の結合体が第2の結合体よりも低い細胞接着性であるように選択され、第1および第2の結合体の少なくとも1つが架橋されてマトリックスを形成し、かつ前記複合材料は、第1および第2の結合体の一方に富む不連続領域を含む、複合材料。複合材料ヒドロゲルである、請求項1記載の複合材料。高分子がヒアルロン酸、ポリ、またはデキストランを含む、請求項1または請求項2記載の複合材料。第1のフェノール含有部分および第2のフェノール含有部分の少なくとも1つがチラミンまたはヒドロキシフェニルプロピオン酸を含む、請求項1~3のいずれか一項記載の複合材料。第2の結合体がゼラチンを含む、請求項1~4のいずれか一項記載の複合材料。第2の結合体がゼラチンおよびチラミンの結合体、ならびにゼラチンおよびヒドロキシフェニルプロピオン酸の結合体を含む、請求項1~5のいずれか一項記載の複合材料。第1の結合体が高分子およびチラミンの結合体、ならびに高分子およびヒドロキシフェニルプロピオン酸の結合体を含む、請求項1~6のいずれか一項記載の複合材料。不連続領域は第2の結合体に富む、請求項1~7のいずれか一項記載の複合材料。不連続領域が約10nm~約500μmの平均サイズを有し、かつ隣接する不連続領域間の平均距離が約5nm~約500μmである、請求項1~8のいずれか一項記載の複合材料。第1の結合体が細胞に対して非接着性である、請求項1~9のいずれか一項記載の複合材料。複合材料を形成させるための溶液中で第1および第2の結合体の前駆物質を混合する段階ならびに溶液中に触媒を分散させて第1および第2の結合体の少なくとも1つの架橋を触媒し、マトリックスを形成させる段階を含む、請求項1~10のいずれか一項記載の複合材料を形成させる方法。第1および第2の結合体の一方が、予め選択された範囲のサイズを有する不連続領域中で濃縮されるように、触媒が、架橋の速度を制御するように選択された量で、溶液中に分散される、請求項11記載の方法。触媒が西洋ワサビペルオキシダーゼおよびH2O2の少なくとも1つを含む、請求項11または12記載の方法。触媒が西洋ワサビペルオキシダーゼおよびH2O2を含む、請求項11または13記載の方法。溶液中の西洋ワサビペルオキシダーゼの濃度が架橋の速度を制御するように選択される、請求項14記載の方法。溶液中のH2O2の濃度が複合材料の剛度を制御するように選択される、請求項14または請求項15記載の方法。高分子およびゼラチンまたはコラーゲンを含む複合材料であって、高分子およびゼラチンまたはコラーゲンの少なくとも1つがフェノール含有部分と結合され、高分子がゼラチンまたはコラーゲンよりも低い細胞接着性であり、高分子およびゼラチンまたはコラーゲンの少なくとも1つが架橋されてマトリックスを形成し、かつ前記複合材料は、高分子およびゼラチンまたはコラーゲンの1つに富む不連続領域を含む、複合材料。複合材料を形成させるための溶液中で高分子およびゼラチンまたはコラーゲンを混合する段階であって、高分子およびゼラチンまたはコラーゲンの少なくとも1つはフェノール含有部分と結合される、段階ならびに溶液中に触媒を分散させて高分子およびゼラチンまたはコラーゲンの少なくとも1つの架橋を触媒し、マトリックスを形成させる段階を含む、請求項17記載の複合材料を形成させる方法。詳細な説明複合材料は第1の結合体および第2の結合体を含む。1つの態様において、第1の結合体は高分子および第1の部分、好ましくはフェノール含有部分から形成される。第2の結合体はゼラチンまたはコラーゲンおよび第2の部分、好ましくはフェノール含有部分から形成される。複合材料は複合材料ヒドロゲルの形成でありうる。理解されるように、ヒドロゲルは、水のような液体を吸収できる高分子マトリックスを含む。本明細書において用いられる場合、ヒドロゲルは、吸収された任意の液体を有する高分子マトリックス、またはその乾燥状態にある高分子マトリックスのいずれかをいうことができる。本明細書において用いられる場合、結合体は、少なくとも1つの化学結合、例えば共有結合、または非共有結合、例えばイオン結合、および水素結合によって結合されている、少なくとも2つの成分を含むことができる。第1の結合体の高分子は、第1の結合体が第2の結合体よりも低い細胞接着性であるように選択される。選択される態様において、第1の結合体は細胞に対して非接着性である。細胞接着は材料の表面への細胞の結合を伴う。材料は、細胞が材料と結合するのにより低い親和性を有する傾向があるなら、より低い細胞接着性である。材料は、細胞が材料と結合する傾向がない場合、細胞に対して非接着性と考えられる。より低い細胞接着性の材料は陽イオン性の電荷またはリガンド、例えばRGDペプチド配列を含むことができない。細胞に対する材料の接着性は、一定期間、材料表面上で細胞を培養する段階、および培養細胞が表面に接着するかどうか観察する段階によって測定することができる。例えば、材料上に細胞を播種した後に、材料を所定の期間インキュベートする。次いで培地を新鮮な培地に交換し、その後、材料に対する細胞接着性を当業者に公知の任意の適用可能な方法によって測定する。選択される態様において、第1の結合体における高分子はヒアルロン酸でありうる。いくつかの態様において、高分子はポリでありうる。いくつかの態様において、高分子はデキストランでありうる。高分子はそれ自体が結合体でありうる。適当な高分子はアルデヒド末端、カルボキシル末端、アミノ末端もしくはスクシンイミド末端ポリ、アルデヒト誘導体化もしくはアミノ誘導体化ヒアルロン酸、ヒアルロン酸アミノアセチルアルデヒドジエチルアセタール結合体、シクロトリホスファゼンコアフェノキシメチルデンドリマー、チオホスホリルコアフェノキシメチルデンドリマー、アルデヒド誘導体化、カルボキシル誘導体化、アミノ誘導体化もしくはスクシンイミド誘導体化デキストランなどを含むことができる。結合体におけるフェノール含有部分は、結合体を架橋するための架橋性フェノール基を提供できる任意の適当な部分であってよい。第1のフェノール含有部分および第2のフェノール含有部分は同じであってもまたは異なってもよい。例えば、チラミン、ヒドロキシフェニルプロピオン酸、カテキンに基づくフラボノイドなどをフェノール含有部分に含めることができる。フェノール含有部分はHPAおよびTyrを含むことができる。いくつかの態様において、第1のフェノール含有部分および第2のフェノール含有部分の少なくとも1つがTyrおよびまたはHPAを含む。いくつかの態様において、第1の結合体におけるフェノール含有部分はチラミンを含むことができ、第2の結合体におけるフェノール含有部分は34ヒドロキシフェニルプロピオン酸などの、ヒドロキシフェニルプロピオン酸を含むことができる。いくつかの態様において、第1の結合体のフェノール含有部分は、第1の結合体が高分子およびHPAの結合体、ならびにまたは高分子およびTyrの結合体を含むような、34HPAなどのHPA、およびまたはTyrを含むことができる。いくつかの態様において、第2の結合体のフェノール含有部分は、第2の結合体がゼラチンおよびHPAの結合体ならびにまたはゼラチンおよびTyrの結合体を含むような、34HPAなどのHPA、およびまたはTyrを含むことができる。選択される態様において、フラボノイドをフェノール含有部分として用いることもできる。フラボノイドは、コアのフェニルベンジルピロン構造に由来する分子の一般的なクラスからの任意のフラボノイドであることができ、フラボン、イソフラボン、フラボノール、フラバノン、フラバン3オール、カテキン、アントシアニジンおよびカルコンを含むことができる。特定の態様において、フラボノイドはカテキンまたはカテキンに基づくフラボノイドであることができる。カテキンまたはカテキンに基づくフラボノイドは、カテキンとして一般的に公知のクラスに属する任意のフラボノイドであり、エピカテキン、エピガロカテキン、カテキン、エピカテキンガラートおよびエピガロカテキンガラートを含めて、ならびにカテキンまたはカテキンに基づくフラボノイドの可能な全ての立体異性体を含めて、カテキンおよびカテキン誘導体を含む。選択される特定の態様において、カテキンに基づくフラボノイドは、カテキンまたはエピガロカテキンガラートである。いくつかの応用において、エピガロカテキンガラートが選択されうる。というのは、おそらく、このフラボノイドのトリヒドロキシB環およびC3位のガラートエステル部分により、カテキンに基づくフラボノイドの中で最も高い活性を有すると期待されるからである。例えば、第1の結合体における部分としてEGCGを含めることができる。1つの態様において、第1の結合体はHATyr結合体である。別の態様において、第1の結合体はPEGEGCG結合体、PEGTyr結合体またはPEGHPA結合体である。いくつかの態様において、第1の結合体は2006年11月23日付で公開されたZhouらのWO2006124000に記述されている結合体であることができ、その内容全体が参照により本明細書に組み入れられる。いくつかの態様において、第1の結合体はデキストランTyrまたはデキストランHPA結合体であることができる。いくつかの態様において、HATyr結合体が好ましい。第1の結合体は、ゼラチンまたはコラーゲンおよび第2のフェノール含有部分の第2の結合体がゲルを形成できる限り、PEG、HAおよびデキストランのような未改変の高分子であることもできる。選択される態様において、第2の結合体はゼラチンを含むことができる。他の態様において、第2の結合体はコラーゲンを含むことができる。いくつかの態様において、第2の結合体は、ゼラチンであってもよい、ゼラチン部分を含むことができ、またはゼラチンの変種もしくは誘導体を含むことができる。いくつかの態様において、ゼラチン部分はゼラチンおよび1つまたは複数の他の成分を含むことができる。第2の結合体は、高分子および第1のフェノール含有部分の第1の結合体がゲルを形成できる限り、未改変のゼラチンまたはコラーゲンであることもできる。第1および第2の結合体は、2010年3月25日付で公開されたKurisawaらのUS20100074956に記述されている1つまたは複数の結合体を含むことができ、その内容全体が参照により本明細書に組み入れられる。例えば、結合体は水溶性であってよく、十分な結合度、例えば約6の結合度、または結合率、例えば約90の結合で、フェノール化合物と結合できる官能基を有してもよい。結合度または結合率はNMR測定のような、公知の方法によって好都合に測定することができる。例として、HATyr結合体の場合、結合度はHAの100繰り返し単位中に結合されたチラミンの数と定義され、これはNMR測定によって容易に判定することができる。ゼラチンHPA結合体の場合、結合前後のアミノ官能基の数をNMR測定によって評価する。結合度または結合率は、ヒドロゲルを形成でき、およびまたはヒドロゲル上での細胞付着を維持できれば、十分である。適当な結合体はヒドロキシル、アミノ、カルボキシルまたはスクシンイミド基などのような官能基を有することができる。さらなる適当な結合体はデキストラン、キチン、キトサン、ヘパリンなどを含むこともできる。結合体の任意の特定の組み合わせにおいて、結合体の一方は他方の結合体よりも低い細胞接着性でなければならない。例えば、選択される態様において、第2の結合体は、細胞接着性であるように選択され、第1の結合体は、細胞非接着性であるように選択される。別の態様において、第1の結合体は高分子から形成されることができ、第2の結合体はゼラチンまたはコラーゲンから形成されることができ、第1および第2の結合体の1つだけが、フェノール含有部分であってよい、部分を含む。この態様において、複合材料は高分子およびゼラチンまたはコラーゲンを含み、ここで高分子およびゼラチンまたはコラーゲンの少なくとも1つがフェノール含有部分と結合され、高分子がゼラチンまたはコラーゲンよりも低い細胞接着性であり、高分子およびゼラチンまたはコラーゲンの少なくとも1つが架橋されてマトリックスを形成し、かつ複合材料が、高分子およびゼラチンまたはコラーゲンの1つに富む不連続領域を含む。複合材料における第1および第2の結合体の少なくとも1つが架橋されてマトリックスを形成する。結合体の分子は結合体におけるフェノール基を通じて架橋することができる。いくつかの態様において、第1の結合体の分子が架橋されてマトリックスを形成することができる。いくつかの態様において、第2の結合体の分子が架橋されてマトリックスを形成することができる。いくつかの態様において、両方の結合体の分子が架橋されてマトリックスを形成することができる。選択される態様において、例えば、第1および第2の結合体の1つがフェノール含有部分を含まない場合、マトリックスは相互貫通高分子ネットワークであることができる。選択される態様において、第1の結合体および第2の結合体の両方がフェノール含有部分を含む場合、2つの高分子ネットワークが共有結合され、IPNではない複合材料ヒドロゲルを形成することができる。いくつかの態様において、複合材料は、1種類の結合体に富む不連続領域ともいわれるを含むことができる。いくつかの態様において、複合材料は、第2の結合体においてゼラチンまたはコラーゲンに富んだ不連続領域を含むことができる。不連続領域は、不連続領域における材料Mの濃度が不連続領域周辺の隣接領域におけるよりもかなり高い場合、Mに富む。領域におけるMの濃度が隣接領域におけるよりもかなり低い場合、領域はMが不十分な領域である。Mが不十分な領域はMを実質的に含まない可能性がある。不連続領域における結合体は局所的に架橋され、不連続領域において別個のヒドロゲルを形成してもよい。いくつかの態様において、不連続領域における結合体は隣接領域における結合体と架橋してもよい。不連続領域がより高濃度の第1の結合体を有する場合、それらは細胞に対して低い接着性である。不連続領域がより高濃度の第2の結合体を有する場合、それらは細胞に対して高い接着性である。高分子が細胞に対して非接着性である場合、高分子に富んだ領域は細胞に対して非接着性であることができる。例えば、HAに富んだ領域は細胞に対して一般的に非接着性であり、ゼラチンに富んだ領域またはコラーゲンに富んだ領域は細胞に対して一般的に接着性である。不連続領域は異なる形状を有することができ、2次元領域または3次元領域をいうことができる。不連続領域は不規則な形状を有することができ、サイズが異なることができる。不連続領域が一般的に、球形状または円形状を有する場合、不連続領域のサイズはその直径によって測定することができる。非球形の、または非円形の不連続領域のサイズは領域のうちの最長の長さをいうことができ、あるいは必要とされる応用、利便性または精度に依り、当該の不連続領域と同じ面積または容積を有する円形または球形の参照領域の直径として計算することができる。不連続領域のサイズおよびその間の距離は、約ナノメートルからマイクロメートルであることができる。いくつかの態様において、不連続領域は約10nm~約500μm、例えば約10nm~約100μmの平均サイズを有することができる。2つの隣接する不連続領域間の距離は異なることもできる。隣接する不連続領域間の平均距離は約5nm~約500μm、例えば約5nm~約50μmであることができる。理解されるように、領域間の距離および領域のサイズは例えば、共焦点像のような、複合材料の画像の観察により、または動的レーザー測定により、測定または推定することができる。理解されるように、不連続領域のサイズおよび隣接する不連続領域間の距離は複合材料における相分離度を反映する。複合材料は、第1の結合体から形成される相および第2の結合体から形成される相を有するものと考えることができる。以下でさらに論じられるように、複合材料は異なる相分離度で形成させることができる。例えば、形成過程によっては、2つの結合体が架橋されて、2相の間に明らかな分離のない統合ネットワークを形成することもありうる。2つの結合体が架橋されて、相分離された構造を有する複合材料を形成することもある。好都合には、例示的な複合材料は、異なる細胞接着性を有する異なる領域を有する。以下でさらに記述されるように、不連続領域のサイズおよび領域間の距離、換言すれば、相分離度は、形成過程中に好都合に制御することができる。したがって、例示的な複合材料は、異なるかつ所望とされる微小環境を細胞に与えるように好都合に適合させることができる。複合材料は、その応用に依存して、薬物、タンパク質または細胞のような他の所望の添加物をさらに含有しうる。薬物は治療用タンパク質を含みうる。例えば、インターフェロン、ハーセプチンなどを複合材料に含めてもよい。αアミラーゼ、リゾチームなどのような、非治療用タンパク質を溶液中に含めてもよい。細胞はヒト間充織幹細胞のような、幹細胞を含んでもよい。他の添加物の量は、特定の応用に依存して選択されうる。しかしながら、他の添加物の添加は、形成される複合材料ヒドロゲルの機械的強度または他の特性に影響を及ぼすことがあり、またはゲル化率のような、形成過程に影響を及ぼすことがあることに留意すべきである。したがって、どのようなおよびどのくらいの他の添加物を含めるかに依存して、H2O2もしくは西洋ワサビペルオキシダーゼまたはその両方のような、触媒の濃度を、そのような影響を相殺するように調節する必要がありうる。本発明の別の例示的な態様は上記の複合材料を形成させる方法に関する。複合材料を他の方法によって調製または形成できることも理解すべきである。例示的な方法において、複合材料を形成させるための溶液中で第1および第2の結合体の前駆物質を混合し、溶液中に触媒または触媒の組み合わせを加え、分散させて第1および第2の結合体の少なくとも1つの架橋を触媒し、ヒドロゲルマトリックスを形成させる。マトリックスの架橋はこのようにして、化学的におよびまたは酵素的に開始される。前駆物質は、架橋される所望の結合体に基づいて選択されうる。前駆物質の選択およびその調製、ならびに結合体の架橋は、使用される特定の化合物に依存して改変の有無にかかわらず、ZhouおよびKurisawaに記述されているように行うことができる。特定の態様において、第1および第2の結合体は、カルボジイミド活性エステル媒介カップリング反応を通じて、それぞれ形成されうる。結合体は、触媒の存在によって触媒されうる、結合体におけるフェノール基の酸化カップリングを通じて架橋されてもよい。例示的な態様において、触媒は西洋ワサビペルオキシダーゼおよびH2O2を含みうる。選択される態様において、西洋ワサビペルオキシダーゼおよびH2O2の両方を用いうる。理解されるように、フェノールは芳香環のオルト位炭素間のCC連結またはオルト位炭素とフェノール性酸素との間のCO連結のいずれかを通じて架橋することができる。選択される態様において、ゲル化溶液は、結合体を架橋して複合材料ヒドロゲルを形成させるために有効量のHRPを含有する。HRPの量は、典型的には、単位で規定または測定される。HRPの1単位は標準的な条件の下、1分で1μmolの基質の反応を触媒するHRPの量である。例えば、ゲル化溶液は、約001~約20単位ml、または約002~約02単位mlのHRPを含有することができる。HRPの濃度はgmlで代替的に表現することもできる。例えば、HRPは100Umgで利用可能でありえ、その場合、溶液は約01~約20μgml、例えば約02~約20μgmlのHRPを含有すると考えられる。HRPの濃度はKurisawaにおいて説明されているように、所定の時間でゲル化点に到達するように選択されうる。いくつかの態様において、最適なHRP濃度は、第1および第2の結合体の重量比ならびにH2O2の濃度をともに固定したところで複合材料ヒドロゲルの所望の剛度、所望のゲル化時間ならびにその結果、所望の相分離を達成するように選択されうる。例えば、反応溶液は約0062単位mlのHRPを含有することができる。第1および第2の結合体の重量比ならびにH2O2定数の濃度を保持しながら、より高い、例えば1つの態様では約02単位ml超の、HRP濃度で、より高い剛度、より少ないゲル化時間およびより少ない相分離を有する複合材料ヒドロゲルを得ることができる。理解されるように、HRP濃度を変化させることで、ゲル化率速度および架橋効率を変化させることができ、これによって今度は、複合材料ヒドロゲルにおける相分離に影響を与えることができる。好都合には、溶液中に分散された触媒の1つまたは複数が、例えば不連続領域のサイズおよび不連続領域間の距離に反映される、相分離度を制御するために、架橋の速度を制御して結合体の1つが不連続領域中で濃縮することを可能とするように選択された量を有してもよい。例えば、HRP濃度は、架橋の速度を制御して、予め選択された範囲のサイズを有する不連続領域を得るように選択されうる。このために、溶液中の、HRPなどの触媒の濃度と、2つの相の1つから形成された不連続領域のサイズとの間の相関関係は、例えば事前試験を通じて、得ることができる。触媒の量または濃度を次いで、この相関関係に基づき相分離度を制御するように選択することができる。相関関係はグラフ、表、方程式として、またはデータベース中で表現することができる。同様に好都合には、HRPおよびH2O2の両方が用いられる場合、溶液中のH2O2の濃度は、形成される複合材料の剛度を制御するように選択することができる。その結果、ゲル化溶液中のHRPおよびH2O2の濃度を調節することにより、複合材料の相分離度および剛度の両方を好都合に制御することができる。いくつかの態様において、結合体は水溶性であってもよい。異なる態様において、第1の結合体と第2の結合体との重量比は、約91から約19まで変化しうる。異なる態様において、重量比は91、82、8515または73である。今や理解されるように、例示的な方法において、H2O2もしくはHRPまたはその両方の濃度を変化させることで、複合材料の剛度を制御することができる。複合材料における相分離度は、適切なHRP濃度の選択を通じて、ゲル化率を調節することにより制御することができる。具体的には、HRP濃度を増加させることによって相分離度を低減することができる。いずれかの特定の理論に限定されるものではないが、ゲル化速度が速い場合、架橋される分子はサイズを大きくするための、およびその分子量を増やすための時間が少ないものと予想される。より小さな分子量を有する分子は、異なる相へ分離する可能性が低いものと予想される。したがって、より速いゲル化速度は相分離の低減をもたらしうるものと予想することができる。本明細書において記述される例示的な複合材料を用いれば、リソグラフ過程、または光開始架橋を用いることなく、細胞接着領域および細胞非接着領域の表面パターンを好都合に提供および制御することができる。複合材料を用いて、注入可能な系または活性薬剤送達性の担体を提供することができ、制御された微小環境を提供することができる。異なる相分離度を有する複合材料ヒドロゲルを形成させるために、異なる結合体重量比およびまたは異なるHRP濃度を用いることができる。1つの態様において、GlnHPA結合体、HATyr結合体、HRPおよびH2O2を混合してGlnHPAHATyr複合材料ヒドロゲルを形成させる。GlnHPA結合体およびHATyr結合体を混合の前に、蒸留水にそれぞれ溶解する。1つの態様において、重量比GlnHPAHATyr91、別の態様において、重量比GlnHPAHATyr82、別の態様において、重量比GlnHPAHATyr8515、別の態様において、重量比GlnHPAHATyr7030である。HRPの濃度は約001~約20単位mlまたは約002~約02単位mlに及ぶ。H2O2の濃度は0175mM、088mM、85mMまたは17mMのような、約1mM~約17mMの範囲でありうる。複合材料ヒドロゲルの形成のための一般的なスキームをスキームIに示す。スキームI同様に好都合には、相分離度は複合材料における第1および第2の結合体の組成または重量比を変化させずに制御できるので、複合材料は、より好都合に形成されることができ、異なる剛度および異なる細胞接着性を含め、多種多様の特性で形成されることができる。複合材料は、GtnHPAのような、第2の結合体から形成されたヒドロゲルにおける細胞増殖と比べて、複合材料における細胞増殖を増強するように特異的にデザインおよび形成されてもよい。いくつかの態様において、細胞接着領域および細胞非接着領域の両方の存在により、複合材料における細胞増殖を改善することができる。結果として、複合材料の剛度が比較的低い場合でさえ、満足のいく細胞増殖を依然として達成することができる。比較して、第2の結合体から形成されるヒドロゲルにおいては、剛度の減少は細胞増殖の低減をもたらしうる。流動学的方法を用いて、ヒドロゲルの粘弾性挙動について調べることができる。具体的には、剪断歪に対する貯蔵弾性率を測定する振動流量計を用いて、ヒドロゲルの剛度およびゲル化時間を測定することができる。ゲル化過程において、形成された複合材料に対するG値を経時的に得ることができ、G値が実質的に一定になる場合、架橋が完了したものと予想することができる。触媒の添加の時間からプラトーに達するGの時間までをゲル化時間と考えることができる。反応溶液中の第1および第2の結合体の重量比によって、複合材料ヒドロゲルの剛度およびゲル化時間も変わることがある。例示的な態様において、GtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲルは純粋なGtnHPAヒドロゲルと比べてさらに低いGを有することができる。反応溶液中のHRPおよびH2O2の量濃度が一定に保たれる場合、複合材料ヒドロゲルの剛度は、複合材料ヒドロゲルにおけるHATyrの割合の増加とともに減少しうる。複合材料ヒドロゲルの剛度はまた、反応溶液中のHRP濃度の増加とともに増加しうる。一般に、ゲル化時間は、反応溶液中のHRP濃度が下げられると、長くなるものと予想することができる。類似の効果をH2O2について予想することができる。より高いHRP濃度は、より高い剛度およびより少ないゲル化時間を有する複合材料ヒドロゲルを生ずるものと予想することができる。剛度は、H2O2濃度を増加させることによって低下させることもできる。これは、過剰量のH2O2によるHRPの非活性化に起因する可能性が最も高い。共焦点像を用いて、複合材料ヒドロゲルにおける相分離について調べることができる。そのような像を得るには、結合体前駆物質の各々をまず初めに、複合材料ヒドロゲルにおける不連続ドメインを標識するために異なるフルオロフォアと結合させてもよい。異なる色の励起フルオロフォアをもたらすために異なるフルオロフォアを用い、複合材料ヒドロゲルにおける異なる相の観察を可能にする。蛍光分子を有する結合体が結合体の水溶性を低下させず、相分離された構造の観察に関して制約とならない限り、いずれのフルオロフォアが用いられてもよい。例えば、GtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲルでは、GtnHPA結合体をローダミンと結合させ、その一方でHATyr結合体をフルオレセインと結合させる。フルオロフォア結合前駆物質は、Kurisawaに記述されている手順または当技術分野において公知の他の手順にしたがい改変を加えてまたは加えず調製することができる。相分離に及ぼすフルオロフォアとの付加的な結合の影響は、フルオロフォア結合度を05未満にまで最適化することによって最小限に抑えることができる。フルオロフォア結合度を判定する方法は一般に、当業者に周知である。例えば、フルオロフォア結合度は、フルオロフォアを含有する標準物質のセットに対してフルオロフォアが蛍光を発する波長で、フルオロフォア結合前駆物質の吸光度値を比較することにより推定することができる。例示的な態様において、GtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲルの形成の前に、GtnHPAをローダミンとおよびHATyrをフルオレセインと、どちらも5未満の度合いまで結合させる。所与の結合体含量で、より低いHRP濃度にて、不連続ドメインが複合材料ヒドロゲル中に生じることができ、HRP濃度が低いほど、それだけドメインサイズは大きいものと予想することができる。いずれかの特定の理論に限定されるものではないが、触媒濃度とゲル化時間との間には相関関係が存在していること、ならびに複合材料ヒドロゲルを形成させるためのゲル化過程中に、相分離過程とゲル化過程の両方が起こりえることが予想される。より遅いゲル化速度は相分離に対してのより多くの時間を意味し、より大きな不連続ドメインが複合材料内に生じうる。対照的に、より速いゲル化速度は、より小さなサイズのドメインをもたらしうる。結合体の含量も、相分離および結果的に生じる相分離された構造に影響を与えることがある。例えば、所与の結合体の含量が高い場合、結合体は、複合材料の全体にわたって架橋されたネットワークを形成する可能性が高い。所与の結合体の含量が低い場合、結合体は複合材料中に不連続ドメインを生じることがあり、より遅いゲル化速度はより大きな不連続ドメインの形成をもたらすことができ、より速いゲル化速度はより小さなドメインを生ずることができ、この場合に、ドメインは他の結合体により形成された連続的なネットワークに分布している。したがって、複合材料ヒドロゲル中の異なる結合体の割合を変化させることで、異なる相分離構造を生じえることに留意すべきである。これは、少なくとも部分的には、反応における結合体前駆物質の比率がゲル化速度に影響を与えうるという事実によるものでありうる。ゲル化速度に影響を与えうる別の要因は、反応温度である。例示的な態様において、反応温度は約25°Cから約37°Cまで変化しうる。ゲル化速度に影響を与えうるさらなる要因は、結合体の前駆物質の分子量である。選択される態様において、前駆物質の分子量はHATyrの場合には約5kDa~約10000kDa、GtnHPAの場合には約10kDa~約500kDaでありうる。いくつかの態様において、GtnHPAの前駆物質の分子量は約80kDa~約140kDaでありうる。しかしながら、反応温度、前駆物質の重量比、および前駆物質の分子量を変化させることで、結果的に生じる複合材料ヒドロゲルの他の変化をもたらすことができるが、これは所望ではないこともある。そのような場合、他の考慮に基づきこれらのパラメータの値を選択すること、およびHRPのような触媒の濃度を調節することによってゲル化速度を制御することが好都合であろう。今や理解されるように、本明細書において記述される例示的な態様に対する変形および変更が可能である。例えば、3種より多くの結合体を複合材料に含めることができる。第1および第2の結合体が、他の成分を含むことができる。例えば、2種またはそれ以上の適当な細胞非接着性の高分子を第1の結合体に含めることができる。好都合には、例示的な複合材料は、治療的応用、組織工学応用、細胞培養応用などのような、生物医学的応用を含む、さまざまな分野および応用において有用でありうる。さらに、複合材料を応用によっては細胞外マトリックスとして用いることができる。複合材料を用いて細胞周囲の微小環境を制御することができ、または複合材料を好都合に改変してさまざまな目的のために異なる微小環境を形成させることができる。複合材料はインサイチューで形成されてもよく、複合材料を形成させるための反応溶液が生体への注入のために注入可能な系として提供されてもよい。例えば、複合材料溶液および細胞の混合物をヒトまたは動物の体内の部位へ注入することができる。いくつかの態様において、選択した複合材料を用いて細胞を培養することができ、細胞増殖、付着、機能制御、および長期生存の改善をもたらすことができる。例示的な複合材料をまた、インプラント中でまたはインプラントとして用いることができる。それらは、細胞またはタンパク質などをカプセル化した移植可能なヒドロゲルをもたらすことができ、組織、器官などを再生するために用いることができる。それらは、制御された3D環境での培養を含め、細胞培養の応用で用いることができる。それらはインビボでまたはインビトロで用いることができる。それらは初代細胞培養に適当でありうる。当業者によって理解されうるように他の使用および応用も可能である。本明細書において記述される場合、いくつかの態様において、細胞増殖は、適切なHRP濃度を選択することによって調製できる、第2の結合体のさらに大きなドメインを有する複合材料ヒドロゲルにおいて増強されうる。したがって、複合材料ヒドロゲルにおける細胞増殖は、適切なHRP濃度を選択することによって独立的に制御することができる。例えば、複合材料ヒドロゲル中で細胞を増殖させる方法において、複合材料ヒドロゲルは、第1の結合体、第2の結合体および触媒を含有する前駆物質の複合材料溶液から形成され、細胞はその後、前駆物質の複合材料溶液中に分散される。複合材料の前駆物質溶液中の触媒濃度は、細胞増殖のために望ましい異なる微小環境を得るように選択される。いくつかの態様において、タンパク質分泌は、第2の結合体だけを含有するヒドロゲルと比べて複合材料ヒドロゲルではより良好に維持されうる。タンパク質分泌はまた、より低い割合の第1の結合体を含有するものと比べて、より高い割合の第1の結合体を含有する複合材料ヒドロゲルでは増強されうる。好都合には、複合材料ヒドロゲルはタンパク質産生のために用いることができ、複合材料の適切な組成を選択することにより所望の量のタンパク質を所望の速度で産生することができる。複合材料ヒドロゲルを用いたタンパク質産生の例示的な方法において、複合材料ヒドロゲルは、第1の結合体、第2の結合体および触媒を含有する前駆物質の複合材料溶液から形成され、前駆物質の複合材料溶液中に肝細胞が分散される。複合材料の前駆物質溶液中の触媒濃度および複合材料ヒドロゲルの組成は、所望の速度で産生される所望の量のタンパク質を得るように独立的に選択することができる。例示的な複合材料をインサイチューで形成させることができ、複合材料を形成させるための反応溶液を、ゲル化が体内で主に行われるように、生体へ注入することができる。身体は組織、生物、ヒト身体、動物身体、または別の種類の生体でありうる。ゲル化の前におよび溶液が体内へ注入される前に、薬物またはタンパク質または細胞を反応溶液に加えることができる。例えば、1つの態様において、蒸留水中にGtnHPA、HATyr、HRPおよびH2O2を含有する反応溶液を生体へ速やかに注入する。特定の応用に依存して、HRP、H2O2およびGtnHPAHATyr比の、選択した量を加えて、反応溶液を形成させることができる。本発明の態様は細胞増殖、タンパク質産生、組織再生、または薬物送達に加えて、広範な応用のなかで有利に利用することができる。本発明の例示的な態様を、限定するものであると意図されない、以下の実施例によってさらに例証する。実施例において用いられる材料は、具体例において別段の定めがない限り以下のように得られた。ゼラチンおよび西洋ワサビペルオキシダーゼは、WakoPureChemicalIndustriesから入手した。過酸化水素はLancasterから入手した。34ヒドロキシフェニルプロピオン酸、チラミン塩酸塩、Nヒドロキシスクシンイミド、1エチル3カルボジイミド塩酸塩、ローダミンBイソチオシアネートおよび5アミノフルオレセインはSigmaAldrichから購入した。ヒト包皮線維芽細胞はATCCから入手した。ダルベッコ改変イーグル培地、ヘパトザイム培地、ウシ胎仔血清およびストレプトマイシンはInvitrogenから購入した。コラゲナーゼおよびデキサメタゾンはSigmaから購入した。レポーター溶解緩衝液はPromegaから購入した。実施例I実施例IAGtnHPA結合体の合成GtnHPA結合体は、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるLWangetalInjectablebiodegradablehydrogelswithtunablemechanicalpropertiesforthestimulationofneurogenesicdifferentiationofhumanmesenchymalstemcellsin3DcultureBiomaterials201031114857に記述されている手順にしたがって調製した。34HPAを蒸留水およびNNジメチルホルムアミドの混合物250mlに溶解して、初期溶液を形成させた。初期溶液に、NHSおよびEDCHClを加えた。反応混合物を室温で5時間撹拌し、混合物のpHを47に維持した。その後、水性Gtn溶液150mlを反応混合物に加え、このようにして形成された混合物をpH47にて室温で終夜撹拌した。溶液を、1000Daの分子カットオフ値を有する透析管に移し入れた。この管を2日間100mM塩化ナトリウム溶液に対して透析した1日目には蒸留水およびエタノールの混合物を用い、2日目には蒸留水を用いた。精製した溶液を凍結乾燥して、GtnHPA結合体を得た。サンプルIAを調製するための一般的な反応経路をスキームIIに示す。スキームII実施例IBGtnHPAローダミン結合体の合成透析を含めて反応全体を暗所中で行った。蒸留水中の、実施例IAから得たGtnHPA結合体の水溶液へ、ローダミンBイソチオシアネートを加え、反応混合物を室温で終夜撹拌した。このようにして形成された溶液を2日間、透析膜を用いることにより蒸留水中で透析した。精製した溶液を凍結乾燥して、GtnHPAローダミン結合体を得た。TecanInfiniteM200マイクロプレートリーダーを用いて1mgmlのローダミン結合GtnHPA溶液の570nmでの吸光度値をローダミン標準物質のセットと比較することにより、結合したローダミンの度合いを推定した。ローダミンの置換度は03であった。実施例IIHATyr結合体の合成HATyr結合体は、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるFLeeetalAninjectableenzymaticallycrosslinkedhyaluronicacidtyraminehydrogelsystemwithindependenttuningofmechanicalstrengthandgelationrateSoftMatter4880887に記述されている手順にしたがって調製した。HAを蒸留水100mlに溶解し、初期溶液を形成させた。TyrHClを最初に、この溶液に加えた。次にEDCHClおよびNHSを加えて、結合反応を開始させた。反応が進行した際に、混合物のpHを01MNaOHで47に維持した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、その後、pHを70にした。溶液を、1000Daの分子カットオフ値を有する透析管に移し入れた。この管を2日間100mM塩化ナトリウム溶液に対して透析した1日目には蒸留水およびエタノールの混合物を用い、翌日には蒸留水を用いた。精製した溶液を凍結乾燥して、HATyr結合体を得た。サンプルIIを調製するための一般的な反応経路をスキームIIIに示す。スキームIII実施例IIIHATyrフルオレセイン結合体の合成HATyrフルオレセイン結合体は、Leeに記述されている手順にしたがって調製した。透析を含めて反応全体を暗所中で行った。HAを蒸留水100mlに溶解して、初期溶液を形成させた。初期溶液に、TyrHClおよび5アミノフルオレセインを加えた。次にEDCHClおよびNHSを加え、混合物のpHを01MNaOHで47に維持した。反応液を室温で終夜撹拌し、次いでpHを70にした。溶液を1等級のWhatmanセルロースろ紙でろ過して、沈殿していた未結合のアミノフルオレセインを除去した。ろ液を、3500Daの分子カットオフ値を有する透析管へ回収した。上記の実施例IAに記述したGtnHPAのための透析および凍結乾燥の手順を続けて行った。TecanInfiniteM200マイクロプレートリーダーを用いて1mgmlのアミノフルオレセイン結合HATyr溶液の490nmでの吸光度値をアミノフルオレセイン標準物質のセットと比較することにより、結合したアミノフルオレセインの度合いを推定した。アミノフルオレセインの置換度は04であった。実施例IVGtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲルの流動学的測定GtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲルの形成の流動学的測定は、HAAKERheoscope1レオメータにより、直径35mmおよびコーン角度0945°のコーンアンドプレートジオメトリーを用いて行った。測定は、1の一定変形および1Hzの周波数で、動的振動モードにおいて37°Cで行った。測定中のサンプルの滑りを回避するため、粗面ガラス製の下部プレートを用いた。それぞれ実施例IAおよびIIにおいて調製した、GtnHPAおよびHATyrの溶液は、各結合体をリン酸緩衝生理食塩水に溶解することによって調製し、その際にGtnHPA溶液およびHATyr溶液の各々の最終濃度を5wtとした。GtnHPA溶液をHATyr溶液と混合することにより、GtnHPAおよびHATyrを91または82の重量比で含有する水溶液を調製した。代表的な流動学的測定では、HRPのPBS溶液およびH2O2のPBS溶液を、上記の段落にしたがって調製した、GtnHPAおよびHATyrを含有する水溶液に連続的に加えて、サンプル溶液を形成させた。複合材料ヒドロゲルを調製するための一般的な反応スキームは、上記のスキームIに提供されている。次いでサンプル溶液をボルテックスし、下部プレートへ直ちに適用した。次いで上部コーンを測定ギャップ0024mmまで下げ、シリコンオイルの層をコーン周りに注意深く適用し、実験中の溶媒蒸発を防いだ。測定パラメータは、予備実験における線形粘弾性領域内にあるように決定した。1Hzの周波数および1の剪断歪を適用して、線形粘弾性を維持した。測定を37°Cで行った。G値およびそれに到達するのにかかった時間を記録した。流動学的測定を測定し、その際にHRPの濃度は002単位ml~02単位mlの範囲にわたり、H2O2の濃度は85mMまたは17mMのいずれかであった。調製したサンプルGtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲルの成分を表Iにまとめる。表IサンプルGtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲル比較として、HATyrの添加のないGtnHPAヒドロゲルのG値およびゲル化時間も測定した。代表の流動学的測定結果を図1、2、3および4に示す。図1はHRP濃度に対するGtnHPAHATyr複合材料ゲルの剛度の依存性を示し、これは85mMの固定したH2O2濃度でHRP濃度の関数としてサンプルIV1およびサンプルIV2のG値で表示されている。図2はHRP濃度に対するGtnHPAHATyr複合材料ゲルのゲル化時間の依存性を示し、これは85mMの固定したH2O2濃度でHRP濃度の関数としてサンプルIV1およびサンプルIV2のゲル化時間で表示されている。図3はHRP濃度に対するGtnHPAHATyr複合材料ゲルの剛度の依存性を示し、これは17mMの固定したH2O2濃度でHRP濃度の関数としてサンプルIV3およびサンプルIV4のG値で表示されている。図4はHRP濃度に対するGtnHPAHATyr複合材料ゲルのゲル化時間の依存性を示し、これは17mMの固定したH2O2濃度でHRP濃度の関数としてサンプルIV3およびサンプルIV4のゲル化時間で表示されている。図1および3から分かるように、固定したHRPおよびH2O2濃度で、GtnHPA結合体へのHATyr結合体の添加は、GtnHPAヒドロゲルだけでのG値と比べた場合にGtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲルではいっそう低いG値をもたらした。さらに、複合材料ヒドロゲルのG値は002単位mlから02単位mlまでのHRP濃度の増加とともに増加した。図2および4に示される通り、固定したHRPおよびH2O2濃度で、GtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲルのゲル化時間はHATyrの割合の増加とともに増加した。さらに、これらの結果は、固定したH2O2濃度でHRP濃度の減少により、ゲル化時間が一般的に長くなることを示す。したがって、図1、2、3および4から理解できるように、固定したH2O2濃度で、より高いHRP濃度によって、より高い剛度およびより少ないゲル化時間を有するGtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲルが得られたが、複合材料ゲルの全体の剛度は、H2O2を85mMで保持した場合と比べてH2O2を17mMで保持した場合にはより低かった。実施例V相分離GtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲルの共焦点像それぞれ実施例IBおよびIIIにおいて調製した、GtnHPARhoおよびHATyrFluの溶液は、各結合体をリン酸緩衝生理食塩水に溶解することによって調製し、その際にGtnHPARho溶液およびHATyrFlu溶液の各々の最終濃度を5wtとした。GtnHPARhoおよびHATyrFluを91または82の比で含有する水溶液を調製した。GtnHPARho溶液をHATyrFlu溶液と混合した。代表的な共焦点像測定では、HRPのPBS溶液およびH2O2のPBS溶液を、上記の段落にしたがって調製した、GtnHPARhoおよびHATyrFluを含有する水溶液に連続的に加えて、サンプル溶液を形成させた。次いでサンプル溶液をボルテックスし、96ウェルプレートへすぐに移し入れた。複合材料ヒドロゲルを暗所中に終夜セットし、引き続いて共焦点レーザー走査顕微鏡FV300Japanで撮像する前に4時間PBS中での浸漬を行った。共焦点像測定を繰り返し、その際にHRPの濃度は002単位ml~02単位mlの範囲にわたり、H2O2の濃度は85mMまたは17mMのいずれかであった。図5A、5B、5C、5D、5E、5F、6A、6B、6C、6D、6E、6F、7A、7B、7C、7D、7E、8A、8B、8C、8D、8Eおよび8Fは、さまざまなHRP濃度A002単位ml、B0024単位ml、C0032単位ml、D0045単位ml、E005単位mlおよびF01単位mlでのサンプルIV1、サンプルIV2、サンプルIV3およびサンプルIV4の相分離構造の各共焦点蛍光像を示す。GtnHPA相およびHATyr相は、それぞれ、赤色および緑色で検出された。これらの図から分かるように、不連続領域の平均サイズは約001μmから約50μmの範囲にわたり、隣接領域間の平均距離は約001μmから約50μmの範囲にわたった。図5A、5B、5C、5D、5E、5F、6A、6B、6C、6D、6E、6F、7A、7B、7C、7D、7E、8A、8B、8C、8D、8Eおよび8Fにおいて示すことができるように、相分離され形成されたGtnHPAは、H2O2の濃度を85mMまたは17mMのいずれかで固定した場合にさまざまなHRP濃度でパターンを変化させた。サンプルIV1の場合、GtnHPA相はメッシュネットワークとして現れ、その一方でHATyr相は複合材料ヒドロゲルサンプル全体に分散した球体として現れた。相分離度はHRP濃度の増加によって低くなった。対照的に、サンプルIV2の場合、GtnHPA相は球体として表れ、その一方でHATyr相はメッシュネットワークとして現れた。より高濃度のHRPはより小さなサイズのGtnHPA相を粒子として生じた。この所見は複合材料ヒドロゲルのゲル化時間と良好な相関があるように思われた。また、サンプルIV3およびIV4において相分離構造が認められ、そのどちらも17mMH2O2を用いて調製された。サンプルIV3の形態はサンプルIV1の形態と類似の傾向を示した。しかしながら、サンプルIV4の場合、GtnHPA相はHRP濃度の増加に伴ってメッシュネットワークから球体へ移行した。実施例VIHFF1を含有するGtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲル異なる微細構造を有するサンプルGtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲル中でのHFF1の増殖について調べた。凍結乾燥したGtnHPAおよびHATyrを上記の実施例IAおよびIIに記述されている手順にしたがって調製した。凍結乾燥したGtnHPAおよびHATyrを、それぞれ、10FBS、100単位mlのペニシリンおよび100mgmlのストレプトマイシンを補充したフェノールレッド不含DMEMの中に溶解することにより75GtnHPA溶液および75HATyr溶液を作出した。GtnHPAおよびHATyrを82の重量比で含む、75GtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲル溶液を、上記の実施例IVに記述されている手順にしたがって0175mMのH2O2、ならびに濃度00199単位ml、00437単位mlおよび00596単位mlのHRPで調製した。得られたGtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲルは、それぞれサンプルVI1、VI2およびVI3であった。細胞220000個mlの密度でHFF1を有する5GtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲル溶液へ各複合材料ヒドロゲル溶液を希釈するために、適切な容量のフェノールレッド不含DMEM中のHFF1を75GtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲル溶液の各々に加えた。上記で調製されたHFF1を含有する5複合材料ヒドロゲル溶液の液滴50μlを48ウェルプレートDenmarkの中に無菌条件の下で移し入れ、37°Cの細胞インキュベータ内で、5CO2および95の湿度で終夜放置してゲル化させた。翌日、新鮮なDMEMを各ウェルに加えた。培地を2日ごとに交換した。HFF1の増殖を、各複合材料ヒドロゲルに播種した、QuantiTPicoGreendsDNAKitを用いて4週間、毎週分析して、その増殖を評価した。毎週末に、HFF1を含有する複合材料ヒドロゲルを、05mgmlのコラゲナーゼを用いて溶解し、1500rpmで5分間遠心分離した。上清を除去し、レポーター溶解緩衝液200μlを、HFF1を含有する各複合材料ヒドロゲルに加えた。得られた細胞混合物の各々を30秒間ボルテックスし、20°Cで貯蔵し、融解し、氷上で30分間超音波処理し、4°Cで20分間60rpmで遠心分離した。得られたサンプル上清の各々を回収し、PicoGreenDNAアッセイ法に用いた。DNA標準物質を100μgmlのDNA溶液および1×TE緩衝液から調製した。PicoGreendsDNAQuantitation試薬は、濃縮色素溶液の1200希釈液を1×TE緩衝液中で作出することによって調製した。適切に希釈したサンプル上清100μlを96ウェルプレートの各ウェルの中に加えた。次いで、PicoGreen試薬100μlを各ウェルに加えた。サンプルを480nmで励起し、TecanInfiniteM200マイクロプレートリーダーを用いて520nmで蛍光強度を測定した。蛍光強度はHFF1の数に比例する。DNA標準曲線およびHFF1標準曲線をプロットした。各複合材料ヒドロゲル上に付着した細胞の数を標準曲線から計算した。図9A、9Bおよび9Cは、不連続GtnHPA領域の平均サイズがHRP濃度の増加とともに増加したことを示すサンプル複合材料ヒドロゲルの、共焦点レーザー顕微鏡FV300Japanを用いて撮った、共焦点像である図9A、図9Bおよび図9Cに用いたHRPの濃度は、それぞれ00199単位ml、00437単位mlおよび00596単位mlであった。共焦点像を撮る前に、GtnHPAを上記の実施例IBに記述した手順にしたがってローダミンと結合させ、その一方でHATyr部分を上記の実施例IIIに記述した手順にしたがってFITCと結合させた。図10は、不連続GtnHPA領域の平均サイズに対するHFF1増殖の依存性を示す。より多くのHFF1がより大きな不連続GtnHPA領域に付着したことが認められた。実施例VIIGtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲルおよび初代ラット肝細胞のアルブミン分泌初代ラット肝細胞のアルブミン分泌に及ぼすサンプルGtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲルの組成の影響について調べた。上記の実施例IAおよびIIの手順にしたがって調製した、凍結乾燥GtnHPAおよびHATyrを、それぞれ、01mMのデキサメタゾン、100単位mlのペニシリンおよび100mgmlのストレプトマイシンを補充したフェノールレッドおよびFBS不含のヘパトザイム培地の中に溶解することにより5GtnHPA溶液および5HATyr溶液を作出した。異なる組成のGtnHPAおよびHATyrを有するが、しかし同じ剛度を有するサンプルGtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲル溶液を、上記の実施例IVに記述されている手順にしたがって、それぞれ088mMのH2O2およびさまざまな量のHRPを加えることにより調製した。その成分を表IIにまとめる。表IIサンプルGtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲルサンプルGtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲル溶液を無菌条件の下で48ウェルプレートの中に沈着し、37°Cの細胞インキュベータ内で終夜放置してゲル化させた。初代ラット肝細胞を1ウェルあたり細胞10000個で播種し、その後、5CO2および95の湿度で37°Cにてインキュベートした。12時間のインキュベーションの後、付着していない肝細胞をPBSによって洗い流し、新鮮な培地を加えた。培地を24時間ごとに交換し回収して、分泌されたアルブミンの量を、ImmunologyConsultantsLaboratoryのラットアルブミン酵素免疫アッセイ定量化キットを用いて評価した。図11A、11B、11C、11D、11Eおよび11Fは、サンプル複合材料ヒドロゲルVII2A、VII2B、VII2C、VII3A、VII3BおよびVII3Cの、共焦点レーザー顕微鏡FV300Japanを用いて撮った、共焦点像である。共焦点像を撮る前に、各サンプル中のGtnHPAを上記の実施例IBに記述した手順にしたがってローダミンと結合させ、赤色で出現させたのに対し、各サンプル中のHATyrを上記の実施例IIIに記述した手順にしたがってFITCと結合させ、緑色で出現させた。図11A、11B、11C、11D、11Eおよび11Fから、固定したGtnHPAおよびHATyr組成で、サンプル複合材料ヒドロゲルにおける相分離度は00388単位mlから0135単位mlまでのHRP濃度の増加とともに減少したことが認められた。さらに、重量比GtnHPAHATyr8515の場合、GtnHPA相はマトリックスネットワークとして現れたのに対し、HATyr相はドメインとして現れ、GtnHPAマトリックスネットワークはHRP濃度の増加とともに密になった。重量比GtnHPAHATyr73の場合、GtnHPA相はドメインとして現れたのに対し、HATyr相はマトリックスネットワークとして現れ、GtnHPAドメインはHRP濃度の増加とともに小さくなった。図12は、G3340Paの場合の、4日目および8日目の時点のサンプルGtnHPAヒドロゲルVII1Cとの比較時の初代ラット肝細胞サンプル複合材料ヒドロゲルVII2CおよびVII3Cによるアルブミン分泌を描く。所与のGで、複合材料ヒドロゲル中のさらに多量のHATyrにより、肝細胞によるアルブミン分泌が増強されることが認められた。複合材料ヒドロゲルの各々がGtnHPAヒドロゲルのみと比べた場合に、肝細胞によるさらに多くのアルブミンの分泌をもたらすことも認められたことから、GtnHPAHATyr複合材料ヒドロゲルが純粋なGtnHPAヒドロゲルと比べて、肝細胞機能の維持でいっそう良好であることが示唆された。比較実施例初代ラット肝細胞を含有するGtnHPAヒドロゲルのアルブミン分泌初代ラット肝細胞のアルブミン分泌に及ぼすGtnHPAヒドロゲルの剛度の影響について調べた。上記の実施例IAにおける手順にしたがって調製した凍結乾燥GtnHPAを、10FBS、01mMのデキサメタゾン、100単位mlのペニシリンおよび100mgmlのストレプトマイシンを補充したフェノールレッド不含ヘパトザイム培地の中に溶解することにより5GtnHPAを作出した。G231Paおよび2118Paを有するGtnHPA溶液を、それぞれ088mMのH2O2ならびに00198単位mlおよび00356単位mlのHRPを加えることにより調製した。GtnHPAヒドロゲルを無菌条件の下で48ウェルプレートの中で調製し、37°Cのインキュベータ内で終夜放置してゲル化させた。ゲル250μlを各ウェルに加えた。次に、肝細胞を1ウェルあたり細胞10000個で播種し、その後、5CO2および95の湿度で37°Cにてインキュベートした。12時間後、付着していない肝細胞をPBSによって洗い流し、新鮮な培地を加えた。培地を24時間ごとに交換し回収して、産生されたアルブミンの量を、ImmunologyConsultantsLaboratoryのラットアルブミン酵素免疫アッセイ定量化キットを用いて評価した。図13は、GtnHPAヒドロゲルの剛度に対するアルブミン分泌の依存性を示す。GtnHPAヒドロゲルは組織培養プレート対照と比べて肝細胞増殖のために良好な基材であることが認められた。加えて、肝細胞はさらに剛度の高いGtnHPAヒドロゲルと比べて、さらに柔軟なGtnHPAヒドロゲル上での増殖時にはさらに長い期間その機能性を維持することができた。本明細書における任意の値域は所与の範囲内の任意の中間値または部分的範囲を具体的に含むものと意図され、このような全ての中間値および部分的範囲が個別的かつ具体的に開示されているものと理解されよう。aまたはanという語句は1つまたは複数のまたは少なくとも1つのを意味するものと意図され、単数形のいずれも本明細書では複数形を含むものと意図されることも理解されよう。含むという用語は、その任意の変化形を含めて、非制限的であると意図され、そうでないことが他に具体的に示されない限り、含むが、限定されることはないを意味するものとさらに理解されよう。項目リストが最後の項目の前のまたはを伴って本明細書において与えられる場合、列挙された項目のいずれか1つまたは列挙された項目の2つもしくはそれ以上の任意の適当な組み合わせを選択および使用することができる。当然ながら、上記の態様は一例にすぎず、決して限定するものではないことが意図される。記述した態様は形態、部分の配置、詳細および操作順序の多くの改変を受け入れる余地がある。本発明は、むしろ、特許請求の範囲によって定義される、本発明の範囲内のそのような全ての改変を包含するように意図される。