"下記式を有する化合物:式中、R1は、ヒドロキシ及び生理的に加水分解可能なそのエステル、-O-カルボキサミド、-SH、-OCOR7、-O-CO-NR8R9及び-NR8R9からなる群より選択され、ここで、R7は置換又は無置換のヒドロカルビルであり、R8及びR9は独立に、水素及び置換又は無置換のヒドロカルビルからなる群より選択され;R2及びR3は独立に、水素及び置換又は無置換のヒドロカルビルからなる群より選択され;R4は各々独立に、ハロゲン及び置換又は無置換のヒドロカルビルからなる群より選択され、nは0~4の整数であり;R5は各々独立に、ハロ及び置換又は無置換のヒドロカルビルからなる群より選択され、mは0~3の整数であり;R6は置換又は無置換のシクロヘキシルである、及び、医薬的に許容可能なその塩。R1が-OCOR7であり、ここでR7は置換又は無置換のヒドロカルビルである、請求項1に記載の化合物。R1がO-カルボキサミドである、請求項1に記載の化合物。R2及びR3が独立に、C1-C3アルキル及びHから選択される、請求項1~3の何れか一項に記載の化合物。R6が無置換のシクロヘキシルである、請求項1~4の何れか一項に記載の化合物。R4及びR5が各々独立に、ハロゲン及び置換又は無置換のC1-C3アルキルから選択される、請求項1~5の何れか一項に記載の化合物。R7が置換又は無置換のC1-C3アルキルである、請求項1~6の何れか一項に記載の化合物。R1が生理的に加水分解可能なエステルである、請求項1~7の何れか一項に記載の化合物。R1がヒドロキシであり、R2及びR3の少なくとも一方が水素である、請求項1に記載の化合物。R1がヒドロキシであり、R2及びR3が共にが水素である、請求項1に記載の化合物。mが0である、請求項1~10の何れか一項に記載の化合物。nが0である、請求項1~11の何れか一項に記載の化合物。mとnとの合計が1、2、又は3である、請求項1~12の何れか一項に記載の化合物。下記式を有する:請求項1に記載の化合物、及び、医薬的に許容可能なその塩。請求項1~14の何れか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。請求項1~14の何れか一項に記載の化合物の、哺乳類においてFAAHを阻害するための薬剤の製造における使用。哺乳類が、疼痛、炎症性疾患、又は免疫障害の処置を必要とする、請求項16に記載の使用。疼痛が侵害受容性、炎症性又は神経障害性の疼痛である、請求項17に記載の使用。哺乳類が炎症又は免疫障害を有する、請求項17に記載の使用。末梢の脂肪酸アミドヒドロラーゼFattyAcidAmideHydrolase:FAAHを選択的に阻害するための医薬組成物であって、請求項1~14の何れか一項に記載の化合物と、医薬的に許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物。疼痛、炎症、及び免疫障害から選択される状態を処置する医薬組成物であって、請求項1~14の何れか一項に記載の化合物と、医薬的に許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物。疼痛及び/又は炎症を処置する方法であって、処置を必要とする哺乳類に、治療有効量の請求項1~14の何れか一項に記載の化合物を投与することによる方法。炎症が処置される、請求項22に記載の方法。疼痛が処置される、請求項22に記載の方法。疼痛、炎症、及び免疫障害からなる群より選択される状態を処置する方法であって、処置を必要とする哺乳類に、治療有効量の請求項1~14の何れか一項に記載の化合物を投与することによる方法。アナンダミド、オレオイルエタノールアミドoleoylethanolamide:OEA、パルミチルエタノールアミドpalmitylethanolamide:PEA、又はステアロイルエタノールアミドstearoylethanolamide:SEAの末梢レベルを上昇させる方法であって、処置を必要とする哺乳類に、治療有効量の請求項1~14の何れか一項に記載の化合物を投与することによる方法。OEA、PEA、SEA又はアナンダミドが哺乳類内因性である、請求項26に記載の方法。OEA、PEA、SEA又はアナンダミドの投与が、前記化合物の投与の前に、投与と共に、又は投与の後に行われる、請求項26に記載の方法。OEA、PEA、SEA又はアナンダミドの投与が、前記化合物の投与と同時に行われる、請求項26に記載の方法。哺乳類が疼痛、炎症又は免疫障害の処置を必要とする、請求項26~29の何れか一項に記載の方法。第1の側面によれば、本発明は、下記式を有する化合物:式中、R1は、ヒドロキシ及び生理的に加水分解可能なそのエステル、-O-カルボキサミド、-SH、-OCOR7、-O-CO-NR8R9及び-NR8R9からなる群より選択され、ここで、R7は置換又は無置換のヒドロカルビルであり、R8及びR9は独立に、水素及び置換又は無置換のヒドロカルビルからなる群より選択され;R2及びR3は独立に、水素及び置換又は無置換のヒドロカルビルからなる群より選択され;R4は各々独立に、ハロゲン及び置換又は無置換のヒドロカルビルからなる群より選択され、nは0~4の整数であり;R5は各々独立に、ハロ及び置換又は無置換のヒドロカルビルからなる群より選択され、mは0~3の整数であり;R6は置換又は無置換のシクロヘキシルである、及び医薬的に許容可能なその塩、並びに当該化合物の医薬組成物を提供する。好ましい態様によれば、当該化合物は、受容者体内での分布が末梢に制限される。第2の側面によれば、本発明は、治療有効量の本発明に係る化合物を含む医薬組成物を提供する。当該組成物は、経口及び非経口経路を含む任意の投与経路様に製剤することができる。更に、当該組成物は単位用量形態としてもよい。第3の側面によれば、本発明は、末梢に制限されたFAAH阻害剤例えば本発明に係るFAAH阻害化合物を必要とする対象を処置する方法を提供する。好ましい態様によれば、対象はヒトである。ある態様によれば、対象は、疼痛、炎症、又は免疫障害の処置を必要とする。ある態様によれば、疼痛は、侵害受容性、炎症性、又は神経障害性の疼痛である。好ましくは、末梢に制限されたFAAH阻害化合物は、本発明の化合物である。第4の側面によれば、本発明は、内因的に産生され即ち、アナンダミド、N-アラキドノイルドーパミン等のエンドカンナビノイド或いは細胞外から供給されるカンナビノイド脂肪酸アミドの対象における末梢活性を、本発明に係る化合物を投与することにより増強する方法を提供する。好ましくは、脂肪酸アミドはアナンダミド、Nアラキドノイルドーパミン、オレオイルエタノールアミド、ステアロイルエタノールアミド、又はパルミトイルエタノールアミドである。脂肪酸エタノールアミドが細胞外から供給される場合、脂肪酸エタノールアミドの対象への投与は、本発明に係る化合物の投与の前でも、後でも、或いは一緒でもよい。ある態様によれば、対象は、疼痛、炎症、又は免疫障害の処置を必要とする。好ましい態様によれば、疼痛は、侵害受容性、炎症性、又は神経障害性の疼痛である。第5の側面によれば、本発明は、乳癌耐性タンパク質breastcancerresistanceprotein:BCRP輸送系を通じて脳から排出され得る化合物をスクリーニングする方法を提供する。URB937や本発明に係る化合物の骨格と類似する骨格を、BCRPの基質として使用することができる。従って、ある態様によれば、本発明は、URB937類似体及び/又は本発明に係る化合物を、BCRP輸送系によって輸送される能力に基づいて、インビトロinvitroでアッセイする方法を提供する。末梢カンナビノイド受容体は、疼痛の開始に対して強力な抑制制御を示すが、この内在的な鎮痛作用に通常どの内因性カンナビノイドシグナルが関与しているかは知られていない。本発明者等は、エンドカンナビノイドであるアナンダミドの分解に関与する酵素、脂肪酸アミドヒドロラーゼFAAHに対する、末梢に制限された新規な阻害剤を開発した。この化合物、通称URB937は、FAAH活性を抑制し、中枢神経系centralnervoussystem:CNS外のアナンダミドレベルを上昇させる。URB937は脳や脊髄に到達できないしかも当該化合物は、驚くべきことに、輸送系により脳から排出され易い、齧歯類の炎症及び末梢神経損傷のモデルにおいて、持続痛の指標となる行動応答を減衰させ、侵害受容工程に関与する脊髄領域の侵害刺激誘発性ニューロン活性化を抑制する。CB1受容体を遮断するとこれらの作用が阻止される。これらの結果は、疼痛情報のCNSへの伝達が、末梢CB1受容体におけるアナンダミド媒介性シグナル伝達によって制御されていることを示している。このゲーティング機構を強化する脳非透過性のFAAH阻害剤は、疼痛治療に対する新たなアプローチとなる。痛覚は、CNS内で作用する神経伝達物質によって、効果的に制御することが可能である。斯かる調節の特徴が顕著なのは、脊髄の後角である。ここは、侵害受容性痛覚線維により伝えられた刺激を、脳に伝達する前に処理する部位である。これらの中心的な機構に加え、CNS外の求心性神経線維の末端では、疼痛伝達の内因性制御が生じ得る。末梢調節の顕著な例の一つは、内因性オピオイドによるものである。内因性オピオイドは、炎症時に活性化された免疫細胞から放出され、感覚神経終末に局在するオピオイド受容体と相互作用することにより、疼痛の開始を抑制する12。当該化合物URB937は、強力なFAAH阻害剤であるが、CNS内に容易には侵入しないため、主に末梢組織のみで、アナンダミドの不活性化を妨害する。このように作用範囲が限定されているにもかかわらず、URB937は、急性及び持続痛の齧歯類モデルにおいて、顕著な抗侵害受容作用を引き起こした。斯かる作用は、CB1カンナビノイド受容体の遮断によって妨害された。これらの知見は、末梢FAAH活性を阻害することで、発生した侵害受容性刺激の脊髄や脳への伝達を調節する内因性鎮痛作用が増強されることを示唆している。この機構はアナンダミドや、別の内因性脂肪酸アミドであるカンナビノイドによって媒介されている可能性が高い。理論に束縛されるものではないが、末梢アナンダミドのシグナル伝達は、損傷組織に生じることにより、疼痛刺激の強度を調節する拡散パラクリン系diffuseparacrinesystemとして機能するものと考えられる。この考えは二種類の証拠によって支持されている。第1に、炎症及び神経損傷によって生じたシグナルにより、アナンダミドの局所放出が誘発される。例えば、感覚ニューロンの培養物では、膜の脱分極及びTRPV-1チャネルの活性化の各々により、アナンダミドの産生が刺激される25のに対し、マクロファージでは、炎症促進受容体であるトールToll様受容体4の活性化により、同様の作用が生じる26。これらのシグナルは、おそらくは未だ特定されていない他のシグナルと共に、脊髄神経損傷及び炎症の動物モデルについて報告されている末梢アナンダミドの上昇や811、ヒトにおける複合性局所疼痛症候群9や関節炎10等の疼痛状態に寄与しているものと考えられる。第2に、CB1受容体は、とりわけ脳に豊富に存在するものの、哺乳類の種々の組織や器官に広く分布している。特に、大型一次感覚ニューロンにおいて発現され、末梢神経終末に輸送される2728。ここでは、通常の疼痛閾値を維持する必要がある一方で8、顕著な抗侵害受容作用を十分に発揮することができる36。痛覚末端のCB1受容体は、局所的に産生されたアナンダミドの鎮痛作用を媒介していると考えられる。また、興奮性神経ペプチドの放出に対する阻害的影響を通じて、この脂質メディエーターの抗炎症活性にも関与している可能性がある29。それにもかかわらず、他のカンナビノイドやカンナビノイド様受容体も、直接又は間接的に、損傷に対する応答時のアナンダミドシグナル伝達に寄与していると推測するのが妥当である。可能性の高い候補としては、アナンダミド又は2-AGの何れかによって活性化され得るCB2受容体30、及び、PEAや他の脂質由来メディエーターによって活性化されるα型ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体72021の2つが挙げられる。これらの受容体及びその内因性リガンドは、末梢感覚ニューロン及び免疫細胞に存在し、侵害受容及び炎症の調節への関与が指摘されてきた213132。非神経細胞において選択的にFAAHを欠失させる一方、末梢及び中枢ニューロンではFAAHを保存した突然変異マウスは、通常の侵害受容性伝達に伴って、炎症促進性のトリガーに対する応答性が低下するという、顕著な表現型を示す33。斯かる知見について考えられる説明として、これは今回の結果にも整合するが、末梢侵害受容器におけるアナンダミドのシグナル伝達活性が、隣接する非神経細胞よりも、侵害受容器に局在するFAAH自体によって調節されている、ということが考えられる。っ斯かる説明は、末梢軸索切断によって大型感覚ニューロンにおけるFAAH発現が誘発される、という観察結果とも整合する。斯かる応答は、FAAHとCB1受容体との共局在を拡大するものと予測される34。動物及びヒトの実験疼痛モデルにおいて、オピオイド受容体の直接作動性アゴニストは、強力な鎮痛作用を発揮する235。本発明者等の結果は、侵害受容の恒常性維持に関与するアナンダミド系機構の活性を増強することによっても、著しい鎮痛を達成することが可能であることを示すものである。これらの知見は、疼痛の内因性制御に対する新たな洞察を提供するものであり、これを治療に応用すれば、中枢への副作用が大幅に低減された効果的な鎮痛剤を開発することが可能となる。定義まず、本明細書及び添付の特許請求の範囲において、単数形表現英文のa、an、theに相当には、別途明確な記載がない場合、複数形も含まれるということに留意されたい。FAAHは、哺乳類の脂肪酸アミドヒドロラーゼfattyacidamidehydrolaseを意味する。例としては、これらに限定されるものではないが、ヒト、ラット、及びマウス型の当該酵素が挙げられる。米国特許第6,271,015号は、FAAHの単離精製型を開示する。ある群の態様によれば、対象化合物のFAAHIC50は、生理的に適切な状態下におけるラット酵素の阻害に基づいて定義される。脂肪酸アミドヒドロラーゼFAAHDeutschDGetalProstaglandinsLeukotEssentFattyAcid66201210は、脂質エタノールアミドの分解に関与する酵素であるFowlerCJetalBiochemPharmacol62517526PatricelliMPetalVitamHorm62663674。例としてアナンダミドAEA、1、図1、DevaneWAetalScience25819461949、オレオイルエタノールアミドRodriguezdeFonsecaFetalNature414209212FuJetalNature4259093及びパルミトイルエタノールアミドCalignanoAetalNature394277281LambertDMetalCurrMedChem9663674が挙げられる。斯かる生化学過程は、AEAの場合の細胞内への選択的輸送と共にDiMarzoVNature372686691BeltramaMetalScience27710941097PiomelliDetalProcNatlAcadSciUSA、これらのオータコイドの細胞効果の停止をもたらす。脂肪酸エタノールアミドの多様且つ重要な生理学的役割ゆえに、FAAH又はFAAHを遮断し得るが、他のエンドカンナビノイド代謝酵素には結合しない種々の小分子化合物、例えばモノグリセリドリパーゼmonoglyceridelipase:MGLDinhTPetalProcNatlAcadSciUSA991081910824やカンナビノイド受容体が、薬理ツールとしても、薬物開発プロジェクトのプロトタイプとしても有用であるPiomelliDetalTrendsPharmacolSci21218224BisognoTetalCurrPharmDes8533547YarnellAChemEngNews8032SmithANatRevDrugDiscov292WendelerMetalAngewChemIntEd4229382941。医薬的に許容可能な担体pharmaceuticallyacceptablecarrierという語は、任意の標準的な医薬担体、緩衝剤及び賦形剤、例えばリン酸緩衝食塩水、水、及びエマルション例えば油/水又は水/油エマルション、並びに種々の湿潤剤及び/又はアジュバントを包含する。適切な医薬担体及びその製剤例は、RemingtonsPharmaceuticalSciencesMackPublishingCoEaston19thed1995に記載されている。好ましい医薬担体は、意図される活性剤の投与方法に応じて異なる。典型的な投与方法を以下に記す。有効量effectiveamountは、表示の障害、状態、又は精神状態に関して、所望の結果をもたらすのに十分な投与量を意味する。所望の結果には、例えば、当該投与の需要者における主観的又は客観的な改善が含まれる。疼痛に関して言えば、斯かる改善としては、疼痛の兆候又は症状の低減が挙げられる。処置treatment、治療therapy等には、限定されるものではないが、受容者の健康状態に有益な変化を生じさせる方法及び操作が含まれる。変化は主観的なものでも客観的なものでもよく、処置対象の疾患、障害又は状態の症状や兆候等の特徴に関するものでもよい。例えば、患者の感じる疼痛が低減されれば、疼痛の処置に成功したことになる。例えば、腫脹の量が減少すれば、炎症を有益に処置できたことになる。同様に、臨床医が客観的な変化例えば可動域の改善等に気付けば、それまで動作を妨げていた疼痛や炎症を有益に処置できたことになる。受容者の状態の悪化を防止することもこの用語に含まれる。治療利益therapeuticbenefitには、本明細書で議論するような、有益な応答や処置対象の状態の改善を示す種々の主観的又は客観的因子が含まれる。医薬的に許容可能なpharmaceuticallyacceptable又は治療上許容可能なtherapeuticallyacceptableは、ある物質がその使用される量において、活性成分の有効性又は生物活性と干渉せず、また、宿主に対して毒性を有しないことをいう。ここで宿主とは投与対象を指し、ヒトでも動物でもよい。治療有効量therapeuticallyeffectiveamountとは、活性剤が所望の生物学的又は臨床上の結果を引き起こすのに十分な量をいう。ここでいう結果とは、疾患の兆候、症状、又は原因の軽減でもよく、生体系における他の所望の変更でもよい。本明細書において治療有効量とは、対象に投与した場合に、疾患、障害又は状態に実質的な改善を生じさせる製剤の量を指す。斯かる量は、処置対象の状態、状態の進行段階、適用する製剤の種類や濃度等に応じて異なる。所与の事例における適切な量は、当業者であれば容易に把握できるか、定型的な実験によって決定することができる。予防的処置prophylactictreatmentとは、神経的又は精神的な障害や状態の兆候を示していない対象や、初期又は軽度の兆候しか示していない対象に対して、病理の発現や障害や状態の悪化のリスクを低減することを目的として施される処置をいう。本発明の化合物は、不要又は不所望の不安又はパニック発作を防止するための予防的処置として用いてもよく、不安レベルの悪化が生じるリスクを低減するために用いてもよい。本明細書で使用される対象subjectという語は、処置を施される任意の動物を含む。例としては、限定されるものではないが、ヒトを含む哺乳類例えばラット、マウス、ネコ、イヌ等が挙げられる。本明細書で使用されるヒドロカルビルhydrocarbylという語は、C1-C8炭化水素ラジカル、即ち、C1-C8アルキル、C1-C8アルケニル、C3-C8シクロアルキル、C3-C8シクロアルケニル、C1-C8ヘテロアルキル、C1-C8ヘテロアルケニル、C3-C8ヘテロシクロアルキル、又はC3-C8ヘテロシクロアルケニルラジカルを指す。より好ましくは、各事例におけるヒドロカルビルは、置換又は無置換のC1~C6、C1~C3、又はC1~C2ヒドロカルビル、更に好ましくは無置換のC1~C3アルキルである。より一層好ましくは、各事例におけるヒドロカルビルは、メチル又はエチル又はトリフルオロメチルである。また、ヒドロカルビルという語は、上述のヒドロカルビル基のうち最大1、2、又は3原子がヘテロ原子で置換された基も含む。但し、ヒドロカルビルのヘテロ原子はたがいに隣接しておらず、且つ、ヒドロカルビルが化合物の残部に対して、ヒドロカルビルのヘテロ原子を介して結合していないことを条件とする。本明細書で使用されるアルキルalkylという語は、単独であるか、他の置換基の一部であるかによらず、別途記載しない限り、直鎖又は分岐鎖の飽和の炭化水素ラジカルであって、指定された数の炭素原子を有する即ちC1-C6は1~6の炭素を意味する。アルキル基の例としては、メチル、エチル、n-プロピル、isoプロピル、n-ブチル、t-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、n-ペンチル、n-ヘキシル、n-ヘプチル、n-オクチル等が挙げられる。本明細書で使用されるアルコキシalkoxyという語は、分子の残部に酸素原子を介して結合されたアルキル部分を指す。即ち、アルコキシの例としては、限定されるものではないが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ等が挙げられる。本明細書で使用されるアルケニルalkenylという語は、対応するアルキル基から誘導されるが、1又は2以上の二重結合を有する点で異なる基を指す。同様に、アルキニルalkynyl基という語は、対応するアルキル基に応じて命名されるが、1又は2以上の三重結合を有する点で異なる基を指す。斯かる不飽和アルケニル基及びアルキニル基の非限定的な例としては、ビニル、2-プロペニル、クロチル、2-イソペンテニル、2-ブタジエニル、2,4-ペンタジエニル、3-1,4-ペンタジエニル、エチニル、1-及び3-プロピニル、3-ブチニル、及び、更に高次の同族体homolog及び異性体isomersを意味する。本明細書で使用されるヘテロアルキルheteroalkylという語は、対応するアルキル基に基づき命名されるが、N、O、及びSから独立に選択される1、2、又は3つのヘテロ原子を、当該アルキル基の炭素の代わりに含む点で異なる基を指す。ヘテロ原子である窒素及び硫黄原子は任意により酸化されていてもよく、窒素原子は任意により四級化されていてもよい。ヘテロアルキル基は分子の残部に対してヘテロアルキル基の炭素原子を介して連結される。また、ヘテロアルキルのヘテロ原子は他のヘテロ原子とは隣接しない。ヘテロアルケニルheteroalkenylという語は、対応するアルケニル基に基づき命名されるが、1、2、又は3つのヘテロ原子を、当該アルケニル基の炭素の代わりに含む点で異なる基を指す。ヘテロ原子である窒素及び硫黄原子は任意により酸化されていてもよく、窒素原子は任意により四級化されていてもよい。ヘテロ原子は炭素原子と二重結合を形成していてもよい。ヘテロアルケニル基は分子の残部に対してヒドロカルビル炭素原子を介して連結される。また、ヒドロカルビルのヘテロ原子は他のヘテロ原子とは隣接しない。本明細書で使用されるシクロアルキルcycloalkylという語は、約3~約8の炭素原子、より好ましくは3~6の炭素原子を含む飽和単環式炭化水素ラジカルを指す。シクロアルケニルcycloalkenylという語は、約5~約6の炭素原子を含み、少なくとも1つの二重結合を有する単環式非芳香族炭化水素ラジカルを指す。シクロアルキル基及びシクロアルケニル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプタ-1,3-ジエニル等が挙げられる。本明細書で使用されるヘテロシクロアルキルheterocycloalkylという語は、約3~約8の炭素原子、より好ましくは3~6の炭素原子を含む飽和又は部分的に不飽和の単環式炭化水素ラジカルであって、O、N、又はSから独立に選択されるヘテロ原子によって、1、2又は3つの炭素原子が独立に置換されたラジカルを指す。窒素及び硫黄原子は任意により酸化されていてもよく、窒素原子は任意により四級化されていてもよい。硫黄はチオ、スルフィニル又はスルホニルの何れの酸化状態でもよい。ヘテロシクロアルケニルheterocycloalkenylという語は、少なくとも1つの二重結合を有するヘテロシクロアルキル基を指す。ヘテロシクロアルキル又はヘテロシクロアルケニル基は分子の残部に対して、それぞれヘテロシクロアルキル又はヘテロシクロアルケニル基の炭素原子を介して結合する。また、ヘテロシクロアルキル又はヘテロシクロアルケニルのヘテロ原子は、ヘテロシクロアルキル又はヘテロシクロアルケニルの別のヘテロ原子とは隣接しない。本明細書で使用されるヘテロ原子heteroatomは、酸素O、窒素N、及び硫黄Sを含む意である。本明細書で使用されるハロゲンhalogen又はハロhaloという語は、ヨウ素I、臭素Br、塩素Cl、及び/又は、フッ素Fを指す。上述のヒドロカルビル、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、シクロヘテロアルキル、及びシクロヘテロアルケニルラジカルは各々、無置換のC1-C6又はC1-C3アルキル、無置換のC1-C6又はC1-C3アルコキシ、無置換のアミノ、無置換のC1-C6又はC1-C3アルキルアミノ、2つの無置換のC1-C6又はC1-C3アルキルアミノ、ヒドロキシ、ハロ、無置換のカルボキサミド、無置換のC1-C6又はC1-C3アルキルカルボキサミド、オキソ、及びニトロから独立に選択される1、2又は3つの置換基で置換されていてもよい。アルコキシ基の非限定的な例としては、メトキシ、エトキシ、t-ブトキシ、シクロペンチルオキシ、トリフルオロメトキシ等が挙げられる。本明細書で使用されるオキソoxoという語は=Oを指す。本明細書で使用されるアミノaminoという語はNH2を指す。ある態様によれば、ヒドロカルビル基は各々無置換である。ある態様によれば、ヒドロカルビル、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、シクロヘテロアルキル、及びシクロヘテロアルケニル基は各々無置換である。末梢に制限された化合物peripherallyrestrictedcompoundとは、血液脳関門を殆ど通過せず、或いはより迅速に脳から排出される化合物をいう。従って、末梢に制限された本発明に係る化合物は、末梢において中枢例えば脳よりも遥かに高い濃度で、FAAH活性を阻害する投与量で投与することができる。ある態様によれば、本発明に係るFAAH阻害剤は、マウスに皮下、静脈内、又は経口投与した場合に、末梢FAAH活性例えば肝臓等を阻害するED50が、脳FAAH活性を阻害するED50の1/4、1/8、又は1/10以下である。好ましくは、末梢に制限されたFAAH阻害剤とは、試験哺乳類の末梢でのFAAH活性の低減が、中枢例えば脳におけるFAAH活性の低減の少なくとも3、4、5、7、8、又は10倍である剤をいう。例えば、末梢におけるFAAH活性レベルが80阻害されるベースライン又はFAAH活性の非阻害レベルの20が残存するのに対して、中枢FAAH活性が10阻害されるベースライン又はFAAH活性の非阻害レベルの90が残存する場合には、FAAH阻害の差異は80/10又は8倍となる。生理的に開裂し得るエステルphysiologicallycleavableesterは、インビボinvivoでカルボキシエステラーゼの基質となるエステルをいう。生理的に開裂し得るエステルは通常、迅速に加水分解されて、血液又は血漿におけるエステルの濃度よりも対応するアルコールの濃度の方が高くなる。例えば、生理的に開裂し得るエステルは、インビボ迅速に加水分解されて対応するアルコール及び酸となり、治療関連投与量においてその半減期は、1/2、1、2又は3時間未満である。本発明の化合物本発明の化合物は、下記式の化合物:式中、R1は極性基であり、ある態様によれば、R1は、ヒドロキシ及び生理的に加水分解可能なそのエステル、-O-カルボキサミド、-SH、-OCOR7、-O-CO-NR8R9及び-NR8R9からなる群より選択され、ここで、R7は置換又は無置換のヒドロカルビルであり、R8及びR9は独立に、水素及び置換又は無置換のヒドロカルビルからなる群より選択され;R2及びR3は独立に、水素及び置換又は無置換のヒドロカルビルからなる群より選択され;R4は各々独立に、ハロゲン及び置換又は無置換のヒドロカルビルからなる群より選択され、nは0~4の整数であり;R5は各々独立に、ハロ及び置換又は無置換のヒドロカルビルからなる群より選択され、mは0~3の整数であり;R6は置換又は無置換のシクロヘキシルである。、及び、医薬的に許容可能なその塩である。ある態様によれば、R2、R3、R7、R8、及びR9は各々独立に、水素及び無置換のヒドロカルビルから選択される。更なる態様によれば、R2、R3、R7、R8、及びR9は各々独立に、水素又は無置換のC1~C3ヒドロカルビルから選択される。更なる態様によれば、R4及びR5の各基は各々独立に、ハロゲン又はC1~C3ヒドロカルビルである。好ましくは、上述の本発明の化合物は、末梢に制限される。上記の何れかに適用可能な更なる態様によれば、mは0であり、nは0、1、2、3、又は4である。別の更なる態様によれば、mは1であり、nは0、1、2、3、又は4である。更に別の態様によれば、mは2であり、nは0、1、2、3、又は4である。別の更なる態様によれば、mは3であり、nは0、1、2、3、又は4である。更に別の態様によれば、mとnとの合計は、0、1、2、又は3である。別の更なる態様によれば、上述の各々において、各ヒドロカルビル基は無置換である。好ましくは、R1は、ヒドロキシ、又は、ヒドロキシの生理的に加水分解可能なエステルである。これらのエステルには、たとえば式-OCOR7のものが含まれ、ここでR7は、置換又は無置換のヒドロカルビル、より好ましくは置換又は無置換のアルキル、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロシクロアルケニル、及びシクロアルケニルであり、更に好ましくは、置換又は無置換のC1-C3アルキル例えばメチル、エチル、プロピル、トリフルオロメチル等、或いは、置換又は無置換のC1-C3ヒドロカルビルであり、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロシクロアルケニル、及びシクロアルケニルから選択されるものが挙げられる。これらの態様の更なるものとしては、mが0であり、nが0、1、2である態様、mが1であり、nが0、1、又は2である態様、又は、mが2であり、nが0、1、又は2である態様が挙げられる。上記の何れかに適用可能な更なる態様によれば、R2及びR3は、水素、或いは、置換又は無置換のC1-C3ヒドロカルビルであって、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロシクロアルケニル、及びシクロアルケニルから選択されるものが挙げられる。これらの態様の更なるものとしては、mが0であり、nが0、1、又は2である態様、mが1であり、nが0、1、又は2である態様、或いは、mが2であり、nが0、1、又は2である態様が挙げられる。斯かる太陽の更なるものによれば、R2及びR3の一方又は両方が水素である。これらの態様の更なるものとしては、mが0であり、nが0、1、2である態様、mが1であり、nが0、1、2である態様、又はmが2であり、nが0、1、2である態様が挙げられる。更に別の態様によれば、R2及び/又はR3のヒドロカルビル基は無置換である。上記の何れかに適用可能な更なる態様によれば、R1はヒドロキシであり、R2及びR3の少なくとも一方は水素である。斯かる態様の更に別のものによれば、R2及びR3の一方又は両方が水素である。R1がヒドロキシである他の態様によれば、R2及びR3は独立に、置換又は無置換のC1-C3アルキル例えばメチル、エチル、プロピル等及びHから選択される。これらの態様の更なるものとしては、mが0であり、nが0、1、2である態様、mが1であり、nが0、1、2である態様、或いは、mが2であり、nは0、1、2である態様が挙げられる。上記の何れかに適用可能な更に別の態様によれば、R6は置換又は無置換のシクロヘキシルである。シクロヘキシルの置換基としては、アルキル例えばメチル、エチル等、ハロF、Cl、I、Br、好ましくはF又はCl、及びトリフルオロメチルが挙げられる。これらの態様の更に別のものとしては、mが0であり、nが0、1、2である態様、mが1であり、nが0、1、2である態様、或いは、mが2であり、nは0、1、2である態様が挙げられる。上記の何れかに適用可能な更なる態様によれば、R4は、置換又は無置換のアルキル、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロシクロアルケニル、又はシクロアルケニルであり、より一層好ましくは、置換又は無置換のC1-C3アルキル例えばメチル、エチル、プロピル、トリフルオロメチル等、或いは、置換又は無置換のC1-C3ヒドロカルビルであって、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロシクロアルケニル、及びシクロアルケニルから選択されるものが挙げられる。別の態様によれば、R4はC1-C3アルキル例えばメチル、エチル、プロピル等から選択され、nは0、1、2、又は3である。更に別の斯かる態様によれば、R4は各々ハロゲン又はハロアルキル例えばトリフルオロメチル等である。更に別の斯かる態様によれば、R4は各々ハロゲン又は無置換のC1-C3アルキル例えばメチル、エチル、プロピル等である。更なる斯かる態様によれば、mは0又は1である。上記の何れかに適用可能な更なる態様によれば、R5は、置換又は無置換のアルキル、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロシクロアルケニル、又はシクロアルケニルであり、より一層好ましくは、置換又は無置換のC1-C3アルキル例えばメチル、エチル、プロピル、トリフルオロメチル等、或いは、置換又は無置換のC1-C3ヒドロカルビルであって、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロシクロアルケニル、及びシクロアルケニルから選択されるものが挙げられる。上述の何れかの別の態様によれば、R5は、C1-C3アルキル例えばメチル、エチル、プロピル等から選択され、mは1、2、又は3である。更に別の斯かる態様によれば、R5は各々、ハロゲン又はハロアルキル例えばトリフルオロメチル等である。更に別の斯かる態様によれば、R5は各々、ハロゲン又は無置換のC1-C3アルキル例えばメチル、エチル、プロピル等である。更なる斯かる態様によれば、nは0又は1である。特に好ましい態様によれば、R1は、ヒドロキシ、或いは、生理的に加水分解可能なそのエステルであって、加水分解によって対応する化合物を放出するものであり、ここで、R1はヒドロキシであり、R6は無置換のシクロヘキシルであり、mは0であり、nは0、1、2であるか、或いはmが1であり、nが0、1、又は2であるか、或いはmが2であり、nが0、1、又は2である。斯かる態様の別のものによれば、式-OCOR7のエステルにおいて、R7は置換又は無置換のヒドロカルビルであり、より好ましくは置換又は無置換のアルキル、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロシクロアルケニル、及びシクロアルケニルであり、より一層好ましくは、置換又は無置換のC1-C3アルキル例えばメチル、エチル、プロピル、トリフルオロメチル等又は置換又は無置換のC1-C3ヒドロカルビルであって、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロシクロアルケニル、及びシクロアルケニルから選択される。更なる態様によれば、R7は無置換のヒドロカルビル、無置換のアルキル、無置換のアルケニル、無置換のシクロアルキル、無置換のヘテロアルキル、無置換のヘテロシクロアルキル、無置換のヘテロアルケニル、無置換のヘテロシクロアルケニル、又は無置換のシクロアルケニルであるか、或いは無置換のC1-C3アルキル例えばメチル、エチル、プロピル、トリフルオロメチル等、又は無置換のC1-C3ヒドロカルビルであって、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロシクロアルケニル、及びシクロアルケニルから選択されるものが挙げられる。特に好ましい態様によれば、上記化合物は、以下の式を有する化合物3’-カルバモイル-6-ヒドロキシビフェニル-3-イルシクロヘキシルカルバメート、又は、生理的に加水分解可能なそのエステルであって、加水分解によって、3’-カルバモイル-6-ヒドロキシビフェニル-3-イルシクロヘキシルカルバメート又は医薬的に許容可能なその塩を法主するエステルである。好ましい態様によれば、上記化合物の何れかは、末梢に制限された化合物である。本発明の化合物は1以上の不斉中心を含んでいてもよい。この場合、ラセミ体やラセミ混合物、単一のエナンチオマー、ジアステレオマー混合物、及び個々のジアステレオマー等が存在し得る。本発明は、本発明に係る化合物の斯かる異性体形を全て包含することが意図される。本発明の化合物は、任意のジアステレオマーや、任意のエナンチオマー対を包含する。例えばジアステレオマーは、分別結晶によって、例えばメタノール、酢酸エチル、その混合物等の適切な溶媒から得ることができる。このように得られたエナンチオマー対を、光学活性な酸を分割剤として用いる従来の手法により、個々の立体異性体へと分割してもよい。あるいは、本発明の斯かる化合物の任意のエナンチオマーは、既知の立体配置を有する光学上純粋な出発原料を用いて、立体特異的合成によって得ることもできる。本発明の化合物は、その1以上の原子について、同位体の比率が天然の比率とは異なっていてもよい。例えば、化合物はトリチウムや炭素14等の放射性同位体で標識されていてもよい。本発明の化合物のあらゆる同位体の変形例は、放射性か非放射性かによらず、何れも本発明の範囲内である。本発明の化合物は、医薬的に許容可能なその酸付加塩例えば無機及び有機酸の使用に由来する塩の形態で単離されてもよい。斯かる酸の例としては、塩酸、硝酸、硫酸、リン酸、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、マレイン酸、琥珀酸、マロン酸等が挙げられる。さらに、酸性官能基を含む特定の化合物は、その無機塩の形態を有していてもよい。この場合、対イオンは、ナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム等、更には有機塩基からも選択することができる。医薬的に許容可能な塩pharmaceuticallyacceptablesaltsという語は、医薬的に許容可能な無毒な塩基又は酸から調製される塩を意味する。ここで、塩基又は酸には、無機塩基又は酸、及び、有機塩基又は酸が含まれる。また、本発明は、本発明の化合物のプロドラッグも包含する。プロドラッグとは、投与した場合に代謝過程による化学変換を受けて、活性薬学物質になる化合物をいう。一般に、斯かるプロドラッグとしては、インビボで本発明の機能的な化合物へ容易に変換され得る本発明の化合物の誘導体が挙げられる。適切なプロドラッグ誘導体を選択及び調製するための従来の手順は、例えばDesignofProdrugsHBundgaarded編、Elsevier、1985年に記載されている。また、本発明は、本発明の化合物の活性代謝産物も包含する。本明細書に記載の化合物の一部はオレフィン二重結合を含むが、これらは別途記載する場合を除き、E及びZ幾何異性体の両方を含むことが意図される。本明細書に記載された化合物の一部は、水素の結合点が異なる異性体、通称互変異性体ととして存在していてもよい。斯かる例としては、ケトン-エノール互変異性体と呼ばれる、ケトン及びそのエノール型が挙げられる。個々の互変異性体、更にはそれらの混合物も、本発明の式に包含される。ハイスループットFAAH阻害アッセイ本明細書に記載された化合物のアッセイはハイスループットスクリーニングに適している。斯かるアッセイとしては、FAAHへの阻害剤の結合、或いは、基質例えばオレオイルエタノールアミドやアナンダミド等の加水分解により発生する反応生成物例えば脂肪酸アミドやエタノールアミン等の放出を検出するものが好ましい。放出される反応生成物の検出を容易にするために、基質を標識してもよい。特別の反応生成物の存在、不在、又は定量化のためのハイスループットアッセイは、当業者には周知である。即ち、例えば米国特許第5,559,410号には、タンパク質のハイスループットスクリーニング法が開示されている。また、米国特許第5,576,220号及び第5,541,061号には、リガンド/抗体結合のハイスループットスクリーニング法が開示されている。更に、市販のハイスループットスクリーニングシステムが入手可能である例えばZymarkCorpHopkintonMA;AirTechnicalIndustriesMentorOH;BeckmanInstrumentsIncFullertonCA;PrecisionSystemsIncNatickMA等を参照。斯かるシステムによれば通常、全サンプル及び試薬のピペッティング、液体の分注、時間管理下でのインキュベーション、更にはアッセイ用検出器のマイクロプレートの最終的な読み取り等、全ての工程が自動化される。斯かる設定可能なシステムによれば、ハイスループット及び迅速なスタートアップ、更には高度のフレキシビリティー及びカスタマイゼーションが提供される。斯かるシステムのメーカーからは、種々のハイスループット用の詳細なプロトコールが提供されている。即ち、例えばZymark社は、遺伝子転写の調節、リガンドの結合等を検出するためのスクリーニングシステムを説明する技術情報を提供している。抗侵害受容活性を有する化合物のスクリーニング法FAAH阻害剤を抗侵害受容作用に基づいてスクリーニングする方法は、当業者に周知である。例えば、マウスホットプレートテストおよびマウスホルマリンテストでは、試験化合物を対象動物に投与し、組織の熱又は化学損傷に対する侵害受容反応が測定される。また、抗侵害受容活性のスクリーニング法を教示する米国特許第6,326,156号も参照。CravattetalProcNatlAcadSciUSA9893719376参照。医薬組成物また、本発明は上記の抹消に制限されたFAAH阻害化合物の医薬組成物を提供する。ここで、医薬組成物等における組成物compositionという語は、1又は2以上の活性成分と、担体を構築する1又は2以上の不活性成分とを含む製品、並びに、上記成分のうち任意の2以上の組み合わせ、複合体形成又は凝集から、或いは上記成分のうち1又は2以上の解離から、或いは上記成分のうち1又は2以上の他の種類のの反応又は相互作用から、直接又は間接的に得られる製品を包含する意である。従って、本発明の医薬組成物は、本発明の化合物及び医薬的に許容可能な担体の混合により作製される任意の組成物を包含する。医薬組成物pharmaceuticalcompositionという語は、動物やヒトを含む対象における医薬用途に適した組成物を示す。医薬組成物は一般に、有効量の活性成分と、医薬的に許容可能な担体とを含む。本組成物は、経口、直腸、局所、非経口例えば皮下、筋肉内、及び静脈内等、眼内において、同社ウェブサイトhttpwwwcerepfrに概要を示すプロトコールに従って実施した。組織分析。本発明者等は、既報に従って組織抽出及びエンドカンナビノイドの液体クロマトグラフィー/質量分析を行なった38。更に下に詳述するように、同様の手順に従って、URB937の組織抽出及びLC/MS定量化を行った。Fos発現。本発明者等は、オスのスプローグドーリーSpragueDawleyラット由来の腰部L4/L5脊髄の切片のを用い、定量的免疫細胞化学5によってFosタンパク質レベルを測定した。手術。本発明者等は、以前ラット24について報告した手順に小さな修正39を加えて、オスのスイスマウスの坐骨神経の結紮を行なった。行動試験。本発明者等は、オスのスイスマウス及びC57Bl6野生型又はFAAH欠損マウスへの酢酸のi.p.注射40、オスのスイスマウスでのカラギーナンの包埋放出intraplantarinjection20、オスのスプローグドーリーSpragueDawleyラットでのホルマリンの包埋放出intraplantarinjection41、及び、オスのスイスマウスでの坐骨神経の結紮39により、誘発された侵害防御応答を測定した。FAAH阻害剤の合成。URB937は概ね既報の手順に従って合成された36。本化合物は、3-ブロモ-4-ヒドロキシベンズアルデヒドを出発物質として、5つの工程を経て合成した。まず出発物質をベンジル化しBzClDMFCsCO3rt3h、次にこれを酸化及び加水分解してmCPBACH2Cl240°C72hNaOMeEtOHrt1h、4-ベンジルオキシ-3-ブロモフェノールを得た。これを、鈴木カップリング[3-カルバモイルフェニルボロン酸、トルエン、PdPPh34、Na2CO3/H2O、還流、2h]、カルバモイル化c-C6H11CNO、Et3N、トルエン/CH3CN1:1、還流、18h、及び水素付加脱保護によって修飾し、所望の化合物を得た。N-シクロヘキシル-O-ビフェニル-3-イルカルバメート1c~eは、適切な3’-カルバモイル-4-置換フェノールとシクロヘキシルイソシアネートとの反応によって合成した。一方、化合物1fは、適切なフェノール誘導体から生じた対応するニトロカルバメート前駆体を、Pd/C触媒下で水素化することにより合成した。ビフェノールは全て、3-カルバモイルフェニルボロン酸と、対応する3-ブロモ-4-置換フェノール前駆体1c、dの場合又は3-クロロ-4-フルオロフェノール前駆体1eの場合との鈴木クロスカップリング反応によって合成した。全化合物の詳細な合成手順は別途報告する。シクロヘキシルカルバミン酸3’-カルバモイル-6-ヒドロキシビフェニル-3-イルエステルURB937の合成。シクロヘキシルカルバミン酸3’-カルバモイル-6-ベンジルオキシビフェニル-3-イルエステル222mg;0.5mmolのEtOAc2.5mL及びEtOH2.5mL中懸濁液を撹拌しながら、10Pd/C22mgを加えた。混合物を4気圧、50°Cで4h水素化し、冷却し、セライトCeliteで濾過し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーシクロヘキサン/EtOAc1:9及び再結晶化で精製することにより、URB937を白色固体として得た。収率920.163g。Mp:128~130°CCH2Cl2/n-ヘキサン。MSmz35521HNMRδ113202355513585659674695707734741756768775ppmIRnmax333317011655cm1他の化学物質。[3H]-アナンダミドはAmericanRadiolabeledChemicalsIncから購入した。2-[2H8]-AG及びAM630はCaymanChemicalから得た。アナンダミド、[2H4]-アナンダミド及びPEAは、実験室で合成した42。リモナバン及びNシクロヘキシルビフェニル3イルアセトアミドはそれぞれ米国国立薬物乱用研究所NationalInstituteonDrugAbuse及びKadmusPharmaceuticalsIncから譲り受けた。動物。本発明者等は、オスのスイスウェブスターSwissWebsterマウスCharlesRiver、20~30g、オスのC57Bl/6JacksonLaboratory、20~25g、C57Bl/6バックグラウンドに10回以上戻し交配を行ったオスのFAAH欠損マウス25~35g、オスのヴィスターWistarラットCharlesRiver、250~300g、及びオスのスプレーグドーリーSpragueDawley:SDラットHarlanLaboratories、275~350gを用いた。マウス及びヴィスターラットは、標準ケージ内で、室温、12:12h明暗サイクルの下で集団飼育した。水及び標準食餌ペレットへのアクセスは無制限とした。ヴィスターラットはFAAH研究に広く使用されてきた。実験は全て、実験動物の飼育及び使用に関する米国国立衛生研究所NationalInstitutesofHealthのガイドラインを充足し、カリフォルニア大学アーバイン校の委員会及びジョージア大学アセンズ校の治験動物飼育及び使用委員会InstitutionalAnimalCareandUseCommitteeによって承認され、ヨーロッパ共同体理事会指令86609EECに従った。また、実験のプロトコールはイタリアの規則DL116/92に従って実施した。組織抽出。マウスをイソフルランで屠殺し、組織を採取して、迅速に液体窒素で冷凍した。冷凍組織を秤量し、内部標準として[2H4]アナンダミド、[2H4]-PEA、[2H8]2-AG及びN-シクロヘキシルビフェニル-3-イルアセトアミドを含むメタノール1mL中でホモジネートした。分析物をクロロホルム2倍量で抽出し、水1倍量で洗浄した。有機相を収集し、窒素下で乾燥した。未分画の有機抽出物を、URB937の定量化に使用した。他の分析のために、有機抽出物を既報の開放床シリカゲルカラムクロマトグラフィーで分画した43。簡潔に記すと、抽出物をクロロホルムに溶解し、シリカゲルG60A230400MeshASTM;WhatmanCliftonNJを充填した小型ガラスカラムにロードした。アナンダミド、PEA及び2-AGをクロロホルム/メタノール体積比9:1で溶出した。血清抽出。斬首したマウスから幹血液を採集し、凝血させて、氷上に放置した。血餅を4°Cで、18,000×g、10分間の遠心分離に供した。血清をガラスバイアルに移し、蒸留水で1mLに希釈した。タンパク質を、内部標準としてN-シクロヘキシルビフェニル-3-イルアセトアミドを含む氷冷アセトン1mLで沈殿させた。沈殿物を4°C、3000×g、10分間の遠心分離によって除去した。サンプルを窒素下で乾燥してアセトンを除去し、上述のようにクロロホルム/メタノールで抽出した。液体クロマトグラフィー/質量分析LC/MS。アナンダミド、PEA、2-AG及びURB937の組織レベルは、1946A-MS検出器AgilentTechnologiesIncPaloAltoCAを連結し、エレクトロスプレイイオン化インターフェースを装備した1100-LC系を用いて決定した。URB937及びN-シクロヘキシルビフェニル-3-イルアセトアミドm/z=294は、XDBEclipseC18カラム50×4.6mm内径、1.8μm、Zorbaxを用い、流量1.0mL-min-1で3分間かけてBに対するAの比率を60から100に変化させる線形勾配下で溶出させた。移動相Aは、0.25酢酸及び5mM酢酸アンモニウムを含むメタノールからなり、移動相Bは、0.25酢酸及び5mM酢酸アンモニウムを含む水からなる。アナンダミド、2-AG及びPEAは、流量1.0mL-min-1で2.5分間かけて水対メタノールの勾配メタノール85から90まで下で溶出させた。カラム温度は40°Cで維持した。MSの検出は陽イオン化モードで行い、キャピラリー電圧は3kVに設定した。分画装置の電圧は120Vから140Vまで変更した。乾燥ガスとして窒素を用い、流量13Lmin-1、温度350°Cで乾燥した。ネビュライザー圧力は60psiに設定した。分析物及び内部標準のNa付加物[MNa]を、選択的イオン監視モードでモニターした。定量限界は0.4pmolであった。薬物輸送アッセイ。輸送アッセイはCerepIncで実施した。細胞透過性は、1のジメチルスルホキシドdimethylsulfoxide:DMSOを含むハンクス緩衝食塩水Hanksbufferedsaltsolution中に10μMの化合物が存在する状態で、心尖Aから基底B方向及びAからB方向について決定した。流出比率effluxratiosはB-A透過性のA-B透過性に対する比率として計算した。Fos免疫組織化学。ラット背側脚部にホルマリン注射を行い、2時間後にネンブタール50mg-mL-1の致死量を投与した。その後、1ヘパリン処理リン酸緩衝生理食塩水PBS100mL、次いで氷冷4パラホルムアルデヒド300mLにより、心臓を通じて潅流した。脊髄の腰部仙骨領域を各ラットから採取した。脊髄を4パラホルムアルデヒドで4°C、24時間かけて固定し、次に30ショ糖で4°C、24~48時間かけて凍結保護した。脊髄から腰膨大L4/L5のレベルで40μm横断面のクリオスタット切片を作製した。切片は交互に浮遊させた状態で、PBSを充填した一連のウェル内に維持した。同一の細胞を2度カウントすることがないよう、4切片ごとにFos免疫反応性の処理を行った。過酸化水素中でインキュベートすることにより、内因性ペルオキシダーゼを不活性化した。非特異的結合を防ぐために切片をヤギ血清でブロックし、0.4トライトンを含むPBSで希釈したFos一次抗体120000AbcamCambridgeMAUSAの存在下で37°Cで1h、次に4°Cで48hインキュベートした。次に組織を、ビオチン化ヤギ抗ウサギIgG1600VectorLaboratoriesBurlingameCAUSA二次抗体の存在下、37°Cで1hインキュベートした。その後、切片をVectastainEliteABC試薬1200VectorLaboratories中で1hインキュベートし、続いて2ニッケル強化ジアミノベンジジン中で5分間インキュベートした。切片をスライドガラス上に載置し、風乾し、エタノール濃度を上昇させて脱水し、キシレン中で洗浄し、Permount付のガラスカバースリップで保護した。免疫染色操作の違いによって生じるばらつきを抑制するため、同一の実験では全ての条件を同時に処理した。免疫染色の特異性は、免疫染色プロトコールから一次抗体を省略し、ペプチド抗血清によりブロックされた特異的染色との前吸着を確認することにより決定した5。免疫活性化定量。顕微鏡観察により、質的に最も多くのFos陽性細胞を示した3つのL4切片を定量化のために選択した。切片の選択及びFos陽性細胞数の定量化は、実験条件を知らない観察者が行った。DMLB光学顕微鏡及び1,300ディジタルカメラを用いて、切片を倍率5×でキャプチャーした。バックグラウンドの染色状態が同程度であることを示すため、同様の明度対比設定下で実施した。全切片に対して、イメージJソフトウェアUSNationalInstitutesofHealthBethesdaMarylandUSAを用いてラミナ細分割を行った。脊髄灰白質の細別割区画を、表面ラミナラミナI及びII、固有核ラミナIII及びIV、後角頸部ラミナV及びVI、及び前角ラミナVII、VIII、IX及びXとして定義した44。脊髄灰白質の細分割区画を、表面ラミナラミナI及びII、固有核ラミナIII及びIV、後角頸部ラミナV及びVI、及び前角ラミナVII、VIII、IX及びX44として定義した。イメージJを使用して、染色強度によらず各細分割区画について、実験処置を知らない観察者がFos発現細胞を計数した。評定者内の信頼性は、表面ラミナが93であったのに対し、全ラミナ細分割区画を通じた値は81と、ばらつきがあった。インビボ実験のための薬物調製。薬物をポリエチレングリコール400/Tween-80/食塩水体積比1/1/18に溶解させ、i.p.5~10mL-kg-1又はs.c.注射10mL-kg-1で投与した。外側脳室注射については、URB937を100DMSOに溶解し、5μL量を注射した。手術。手術は何れも無菌条件下で実施した。脳室内i.c.v.薬物投与用カニューレの留置。ケタミン70mgkg-1、i.p.及びキシラジン9.33mgkg-1、i.p.の混合物を用いてSDラットを麻酔した。定位フレームに載置し、耳棒DavidKopfInstrumentsTujungaCAUSA及び水平面下2.4mmに設置した門歯棒で安定化した。22ゲージのステンレス鋼ガイドカニューレを、実験7日前に右側脳室にインプラントしておいた。インプラント座標ブレグマに対して前後方向-0.9mm、内外方向-1.5mm、頭蓋骨表面下方3.8mmは、PaxinosWatsonラット脳地図を用いて決定した45。3本のステンレス鋼ねじ及び歯科用セメントを用いてガイドカニューレを頭蓋骨に係留し、ダミーのスタイレットの挿入による注射まで維持した。注射に際しては、スタイレットを除去し、薬物又はビヒクル5μLを、10μLのハミルトンマイクロシリンジを用いて注射した。シリンジは、PBSで満たしたPTFE24GカテーテルSmallpartsIncLogansportINを介して、ガイドカニューレの先端から1mm突出する28ゲージのステンレス鋼注射器に接続した。PTFE24Gカテーテルの遠位端から小気泡3μLを吸引し、注射された溶液をPBSから分離すると共に、注射を目視で確認した。注射は1分間かけて行い、逆流による漏出を防ぐために、更に1分間注射器を維持した。実験の終わりに、トリパンブルー5μLの注射によってカニューレの設置を確認し、その後にラットを安楽死させた。適切な配置を有する動物のみを試験対象とした。実験の前に7~10日間ラットを回復させた。スイスマウスに対し、Bennett及びXieの方法を準用して、坐骨神経結紮を実施した24。キシラジン10mgkg-1、i.p.及びケタミン100mgkg-1、i.p.でマウスを麻酔した。左腿を剃毛し、ベタジンBetadine登録商標で洗浄した。左腿中央を小さく切開し長さ2cm、坐骨神経を露出させた。神経の離れた2つの部位2mm間隔で配置で、縫合糸7-0を使用して神経全周を緩く縛った。手術領域にストレプトマイシン粉末を振り掛け、1か所の筋肉縫合と2箇所の皮膚クリップで閉止し、最後にベタジンBetadine登録商標で洗浄した。偽手術動物では、神経を露出したが、縛らずに放置した。動物は覚醒時まで熱ランプ下に放置した。行動試験。若干の変更を加えて記載するように、スイスのマウス又はC57Bl6マウス野生型及びFAAH欠損において、酢酸により誘発されるライジングwrithing反応を測定した。簡潔に述べると、マウスを実験室で2h順応させた。各動物に酢酸150μL、0.6食塩水中を注射し、ガラスシリンダーに入れた。酢酸注射5分後から20分間、腹部の伸張身体及び後足の伸展を係数した。酢酸の1h前にURB937、リモナバン及びAM630をs.c.注射で投与した。行動は処置条件を知らない観察者が評価した。スプレーグドーリーSpragueDawleyラットを用いて、ホルマリンにより誘発される侵害受容を、既報に従って評価した41。ラットは個々に収籠され、共有の維持室内で、1212hの明暗サイクル下で維持した。食物及び水に対するアクセスは自由とし、試験前に一週間設備に順応させた。ホルマリン投与1h前に、ラットにビヒクル、URB9371mgkg-1、i.p.、リモナバン2mgkg-1i.p.又はURB937及びリモナバンの組み合わせをi.p注射した。観察用コンテナ透明なプレキシガラス箱、29×29×25cm内で15分間順応させた後、右後肢背側表面へホルマリン50μL、5食塩水中を注射した。ホルマリン注射後すぐ、ラットを観察用コンテナ内に戻し、侵害防御行動をビデオカメラで60分間記録した。録画は処置条件を知らない観察者が分析した。侵害防御行動は60分間連続的に測定した41。動物が3つの異なる行動カテゴリー0、1、2に費やした総時間を、5分間単位で記録した。0ラットは正常な姿勢を示す。1注射された脚部を上げる。2注射された脚部を舐め、揺らし、又は噛む。各5分間のビンについて、各々1注射された脚部を上げる行動、及び、2注射された脚部を舐め、又は噛む行動に費やした時間を分析した。侵害防御行動の分析は、複合疼痛スコアで重み付けしたスコア技術CPSWST12を用いて、観察の全時0~60分、並びに、行動応答の第1相0~10分及び第2相10~60分を計算することにより行った46。台形規則を用いて、CPSWST12に対応する曲線下面積areaunderthecurve:AUCを計算した。1λ-カラゲーニン含有無菌食塩水50μLをマウス右後肢へ注射することにより、足浮腫を誘発した。脚部体積はplethysmometerUgoBasileMilanItalyを用いて測定した。ビヒクル又はURB9371mgkg-1、i.p.はカラギーナンの直前に注射した。リモナバン及びAM6301mgkg-1、i.p.はカラギーナンの30分前に注射した。機械的痛覚過敏の評価は、一定の機械的圧力を背側表面に印加し、足を退避させる反応の潜時sを測定することにより行った。15-g調整ガラスシリンダー棒直径=10mmに円錐先端直径=3mmを形成し、これを用いて機械的外力を印加した。スタンドに取り付けた2つの輪の間で体重を垂直に係留し、垂直に方向の移動は自由とした。カットオフ時間は3分とした。熱痛覚過敏の評価は、既報に従って47、市販の装置を用いて足裏表面に放射熱焦点を印加し熱強度:赤外線3.0、後脚を退避させるまでの潜時を測定して行った。カットオフ時間は30秒とした。機械的異痛allodyniaの評価は、DynamicPlantarAnesthesiometerUgoBasileを用い、VonFreyフィラメントで後脚裏表面に段階的な力を印加することにより行った。カットオフ力は50gとした。統計分析。結果を平均±標準偏差で表す。統計的有意性の検証は、スチューデントt検定、一元又は二元分散分析analysisofvariance:ANOVAにより、更には適宜、ボンフェローニBonferroni事後解析を加えて行った。曲線下面積により測定されるホルマリン誘導性侵害防御行動に対して、個々に単変量分散分析を行い、実験処置による影響を決定した。ホルマリン誘発性の複合疼痛スコアについては、反復測定処置x時間[反復因子]分散分析を行った。グリーンハウスガイザーGreenhouseGeisser修正を反復因子に適用した。Fos発現細胞数に対する実験処置の影響を決定するために、脊髄のL4/L5における個々のラミナ細分割区画について、単変量分散分析を行った。行動及びFos免疫染色データに対しては、各々フィッシャーFisherLSD及びチューキーTukey事後試験を実施した。事後比較が等分散仮定に合致しない場合は、自由度の微小調節によって修正した。分析は、SPSSの統計ソフトウェアバージョン17.0SPSSIncorporatedChicagoILUSAを用いて行った。結果末梢に制限されたFAAH阻害剤の発見。現在のFAAH阻害剤は容易に脳血液関門を通過してしまう12。CNSへのアクセスが制限された阻害剤を生産するために、本発明者等は、O-アシルカルバメートURB5971314表1、1aの近位フェニル環に対し、小型の親水性置換基であれば生物活性15を害しないと予想される位置に、極性を変更する化学基を追加した。この新たな化合物は、ラット脳FAAHの膜調製物を用いて試験した場合に、同等の活性を有しており、マウス1mgkg-1、腹腔内、i.p表1、1b~1fに全身投与した場合にも、肝臓FAAH活性の阻害に同程度の有効性を示した。しかし、CNSへのアクセス能においては、大きく異なっていた。特に、p-ヒドロキシフェニル誘導体URB937表1、1bは、マウス及びラットの末梢組織中のFAAH活性を抑えたが、脳FAAH活性には影響しなかった表1、表2。マウスにおける服用量探索試験によれば、脳のFAAH阻害のためのURB937の50有効量ED50が、肝臓のFAAH阻害のためのED50の200倍にもなることが示された図1a。更に、全身投与の後、URB9371mgkg-1、i.p.は血清及び肝臓に急速に分配したが、脳組織では検出されなかった図1b。共有結合機構を通じてFAAHと相互作用することが知られている他のO-アリールカルバメートのように1316、URB937は末梢FAAH活性をインビボで迅速且つ持続的に阻害した表1c。末梢限定の機構。探索的構造活性関係分析によれば、p-ヒドロキシフェニル部分の極性こそが、URB937が末梢に限定される主な原因と考えられる。表1によれば、置換基Rが弱極性又は無極性である類似体化合物1c、1d及び1eが、マウスでの全身投与後に容易に脳に侵入したのに対し、Rが極性のアミノ基からなる類似体化合物1fは、その大部分が排出されている。しかし、URB937は比較的高い親油性を有する分配係数、LogDoctpH74URB937、3.030.01;URB597、3.71±0.01;平均±標準偏差、n=3ことから、当該分子はCNS内に受動拡散してしまうはずである。よって、斯かる過程に対する積極的な反作用が存在するはずである。斯かる考えを検証するために、本発明者等はまず、脳からの薬物の排出に関与する様々なタンパク質輸送体を発現するヒト上皮TC7細胞の極性化単層を用いて、URB937の浸透と流出との比率を決定した17。URB937の分布は、受動拡散で移動する脂溶性分子に予想されるような、TC7単層の心尖区画Aと基底区画Bとを通じて均等な分布は示さなかった。むしろ、化合物はA区画に蓄積された[透過性、nm-s-1回収A-B、3883;B-A、37195;流出比、9.8;2つの独立した実験の平均]。しかし、この機構は、透過性糖タンパク質Pgp阻害剤ベラパミル100μMに対しては無反応であった[B-A透過性、nm-s-1回収:32294]。これらの所見は、URB937がPgpとは薬理学的に異なる輸送系によってCNSから排出されることを示唆している。この解釈と一致するように、ネズミの外側脳室にURB9370.1mgkg-1の最大に近い服用量を注射したところ、1h以内に、肝臓FAAHがほぼ完全に阻害された残余活性:対照の11.3±1.9;平均±標準偏差、n=3。反対に、10倍高用量の薬物を全身投与したところ1mgkg-1、i.p、ラットの脳のFAAHには検出可能な影響は表れなかった表2。CNSからのURB937の排出に関与する輸送系の正体を調べるために、本発明者等はラットに対して、脳浸透25mgkg-1、i.p.を達成しないURB937の最も高い全身服用量と共に、脳血液関門トランスポーターの様々な薬理的な阻害剤を投与した図1a。乳癌耐性タンパク質BCRP、ABCG1の阻害剤である化合物Ko-143を共投与したところ、URB937の脳へのアクセスの用量依存的な増加が見られた。対照的に、浸透性糖タンパク質Pgp阻害剤であるベラパミル、あるいは有機陰イオントランスポータータンパク質阻害剤であるプロベネシッドの共投与には、そのような効果はなかった。これらの結果は、URB937が、BCRPと薬理学的に識別不可能なトランスポータータンパク質によってCNSから排出されることを示唆する。末梢アナンダミドシグナル伝達の強化。URB9371mgkg-1、i.pのマウスへの投与は、前脳部や視床下部ではなく、抹消のアナンダミドレベルを増加させた図1d、図6。この作用はFAAH活性の選択的な阻害によって生じたものである。なぜなら、iこの作用に伴ってパルミトイルエタノールアミドPEA等の他の内因性FAAH基質の上昇が見られた上に図1d、ii相同組換でfaah遺伝子発現を欠損させた突然変異マウスでは斯かる作用は観察されなかったからである図1e。重要なことに、URB937は、インビトロではモノアシルグリセロールリパーゼ活性に影響を与えずメジアン阻害濃度、IC50、>100μM;n=3、インビボではエンドカンナビノイド基質2-AGの組織内濃度を変更しなかった図1f。内臓疼痛の調節。脳に侵入するFAAH阻害剤は、齧歯類において、侵害刺激に対する行動反応を減ずる。これは通常、脳及び脊髄のアナンダミドシグナル伝達を増大する能力に起因する特性である12,13。末梢アナンダミドがこれらの作用に寄与するか否かを調べるために、本発明者等は、マウス腹膜腔への酢酸注射によって誘発された侵害防御疼痛回避応答に対するURB937の影響を検討した。URB937を皮下投与したところ、酢酸によって誘発されたライジングwrithing反応は低減され、ED50は0.1mgkg-1となった図2a、データは示さず。この作用は、i強力な非ステロイド性鎮痛剤インドメタシン1mgkg-1、s.cにより誘発される作用と薬効において匹敵し図2a、ii末梢FAAH阻害の度合いと相関を示しピアソンの相関係数、r=0.96、図2b、iii突然変異FAAH欠損マウスでは不在だった図2c。URB937の抗侵害受容作用は、CB1アンタゴニストであるリモナバンによって遮断されたが、CB2アンタゴニストであるAM630では阻害されなかった各々1mgkg-1、s.c図2d。アナンダミドはバニロイド1型一過性受容器電位TRPV-1チャンネルのアゴニストであるが19、URB937を単独で投与されたところ1mgkg-1、検出可能な侵害防御行動は誘発されなかった図2a。これは、末梢のFAAH阻害に続く内因性アナンダミドによって達した組織濃度では、TRPV-1チャンネルを活性化できないことを示唆する。さらに、α型ペルオキシゾーム増殖因子活性化受容体の刺激は、PEAによって誘発することが可能であるが20,21図1d、CB1受容体を遮断すると斯かる作用が防止されることから図2d、URB937の抗侵害受容作用の説明にはなり得ないであろう。組織損傷誘導性疼痛の調節。別の一連の実験において、本発明者等は、ラット背面後足へのホルマリン投与によって生じた持続痛の組織傷害モデルを用いて、URB9371mgkg-1、i.pの影響を評価した。ホルマリン注射は著しい侵害防御反応を誘発した。斯かる反応は、ビヒクル、リモナバン2mgkg-1、i.p、あるいはリモナバン及びURB937図2eの組み合わせと比べ、URB937によって経時的に減少した。更なる分析によれば、以下が明らかになった。iURB937によれば、他のすべての処置群に比べて、ホルマリン誘発性疼痛行動の曲線下面積が減少した図2f。iiこの作用は主に、ホルマリン応答の後期第2相の縮小によるものである図2g。この段階は、進行中の一次求心性線維活性に付随して、炎症及び脊髄の侵害受容回路の中枢性増感が生じる段階である2223。末梢アナンダミド活性の増強が侵害受容入力の脊髄での処理を変更するか否かを調べるために、本発明者等は、行動試験に供したのと同じ動物を用いて、ホルマリン誘発性Fos発現を測定した。URB937は、ホルマリン図3a、bに対するFos反応を低下させるとともに、表面後角ラミナ、I、II、固有核ラミナIII、IV、後角の頸部領域ラミナV、VI、及び前角のFos陽性細胞数を減少させた図3d。この作用はCB1アンタゴニストであるリモナバン2mgkg-1、i.pによって防止されたが、URB937なしで投与した場合には、Fosレベルは有意に変更されなかった図3c、d。URB937がCNSに透過しないにもかかわらず、脊髄での侵害受容処理を抑える能力を有するという事実は、疼痛入力が脊髄に侵入する前に末梢アナンダミドが疼痛入力を調整することを示唆している。炎症及び神経障害性疼痛の調節。また、本発明者等は、FAAH活性の末梢での阻害が、炎症や神経損害によって生じた持続痛応答に影響を及ぼすか否かを検討した。本発明者等は、マウスの後足の片方に多糖カラゲーニンを注入し、炎症反応を引き起こした。これによって、機械的及び熱痛覚過敏侵害刺激に対する増感に加え、局所的浮腫が発症した図4。カラゲーニンと同時に、URB9371mgkg-1、i.p.を単一回注射で全身投与したところ、カラゲーニン処置図4a、bから4h及び24h後の評価において、機械的及び温熱性痛覚過敏の著しい減少を引き起こした。また、当該薬物によれば、カラゲーニンの24h後の測定において、機械的異痛非侵害刺激による疼痛が抑制された図4c。これらの作用は炎症を起こした足に限定され図7、CB1アンタゴニストであるリモナバンによって阻害されたが、CB2アンタゴニストであるAM630では阻害されなかった各々1mgkg-1、i.p.図4a~c。URB937は、カラゲーニン注射から4h後の足浮腫には影響を与えなかったが、注射の24h後には逆転が生じ、その機構はCB1及びCB2受容体遮断の両方に感受性を示した図4d。別の群のマウスにおいて、本発明者等は、左の坐骨神経を緩く縛ることにより、末梢神経損害を生じさせた24。手術から1週間後に、URB937を単会投与したところ1mgkg-1、i.p.試験2h前、熱痛覚過敏が軽減されるとともに、手術した足の機械的痛覚過敏症及び機械的異痛が抑制された図5a~c。特に、この作用には、手術されていない足の反応の変化が伴わなかった。この結果は、URB937が、神経損傷によって変更された機械的刺激や熱刺激の閾値を、選択的に標準化したことを示している図5a~c。最後に、本発明者等は、神経結紮3日後から毎日1回4日間、URB937を反復注射し1mgkg-1、i.p.試験2h前、その影響を調べた。斯かる処置によれば、単回投薬により誘発される抗侵害受容作用と識別し得ない抗侵害受容作用が誘発された図5d~f。この結果は、URB937が、耐性を誘発することなく、持続的なニューロパシー疼痛を緩和することを示している。参考文献1SteinCSchaferMMachelskaHAttackingpainatitssourcenewperspectivesonopioidsNatMed9100310082SteinCZollnerCOpioidsandsensorynervesHandbExpPharmacol4955183CalignanoALaRanaGGiuffridaAPiomelliDControlofpaininitiationbyendogenouscannabinoidsNature3942772814JaggarSISellaturaySRiceASTheendogenouscannabinoidanandamidebutnottheCB2ligandpalmitoylethanolamidepreventstheviscerovisceralhyperreflexiaassociatedwithinflammationoftheraturinarybladderNeurosciLett2531231265NackleyAGSuplitaRL2ndHohmannAGAperipheralcannabinoidmechanismsuppressesspinalfosproteinexpressionandpainbehaviorinaratmodelofinflammationNeuroscience1176596706DziadulewiczEKetalNaphthalen1ylmethanoneapotentorallybioavailablehumanCB1CB2dualagonistwithantihyperalgesicpropertiesandrestrictedcentralnervoussystempenetrationJMedChem50385138567AnandPWhitesideGFowlerCJHohmannAGTargetingCB2receptorsandtheendocannabinoidsystemforthetreatmentofpainBrainResRev602552668AgarwalNetalCannabinoidsmediateanalgesialargelyviaperipheraltype1cannabinoidreceptorsinnociceptorsNatNeurosci108708799KaufmannIetalEnhancedanandamideplasmalevelsinpatientswithcomplexregionalpainsyndromefollowingtraumaticinjuryapreliminaryreportEurSurgRes4332532910RichardsonDetalCharacterisationofthecannabinoidreceptorsysteminsynovialtissueandfluidinpatientswithosteoarthritisandrheumatoidarthritisArthritisResTher10R4311MitrirattanakulSetalSitespecificincreasesinperipheralcannabinoidreceptorsandtheirendogenousligandsinamodelofneuropathicpainPain12610211412SchlosburgJEKinseySGLichtmanAHTargetingfattyacidamidehydrolasetotreatpainandinflammationAAPSJ11394413KathuriaSetalModulationofanxietythroughblockadeofanandamidehydrolysisNatMed9768114PiomelliDetalPharmacologicalprofileoftheselectiveFAAHinhibitorKDS4103CNSDrugRev12213815ClapperJRetalAsecondgenerationofcarbamatebasedfattyacidamidehydrolaseinhibitorswithimprovedactivityinvivoChemMedChem41505151316AlexanderJPCravattBFMechanismofcarbamateinactivationofFAAHimplicationsforthedesignofcovalentinhibitorsandinvivofunctionalprobesforenzymesChemBiol121179118717LoscherWPotschkaHBloodbrainbarrieractiveeffluxtransportersATPbindingcassettegenefamilyNeuroRx2869818CravattBFetalSupersensitivitytoanandamideandenhancedendogenouscannabinoidsignalinginmicelackingfattyacidamidehydrolaseProcNatlAcadSciUSA989371937619StarowiczKNigamSDiMarzoVBiochemistryandpharmacologyofendovanilloidsPharmacolTher114133320LoVermeJLaRanaGRussoRCalignanoAPiomelliDThesearchforthepalmitoylethanolamidereceptorLifeSci771685169821SagarDRKendallDAChapmanVInhibitionoffattyacidamidehydrolaseproducesPPARalphamediatedanalgesiainaratmodelofinflammatorypainBrJPharmacol1551297130622CoderreTJMelzackRThecontributionofexcitatoryaminoacidstocentralsensitizationandpersistentnociceptionafterformalininducedtissueinjuryJNeurosci123665367023PuigSSorkinLSFormalinevokedactivityinidentifiedprimaryafferentfiberssystemiclidocainesuppressesphase2activityPain6434535524BennettGJXieYKAperipheralmononeuropathyinratthatproducesdisordersofpainsensationlikethoseseeninmanPain338710725AhluwaliaJYaqoobMUrbanLBevanSNagyIActivationofcapsaicinsensitiveprimarysensoryneuronesinducesanandamideproductionandreleaseJNeurochem8458559126LiuJetalAbiosyntheticpathwayforanandamideProcNatlAcadSciUSA103133451335027HohmannAGHerkenhamMLocalizationofcentralcannabinoidCB1receptormessengerRNAinneuronalsubpopulationsofratdorsalrootgangliaadoublelabelinsituhybridizationstudyNeuroscience9092393128HohmannAGHerkenhamMCannabinoidreceptorsundergoaxonalflowinsensorynervesNeuroscience921171117529RichardsonJDKiloSHargreavesKMCannabinoidsreducehyperalgesiaandinflammationviainteractionwithperipheralCB1receptorsPain7511111930MackieKCannabinoidreceptorsastherapeutictargetsAnnuRevPharmacolToxicol4610112231LoVermeJetalRapidbroadspectrumanalgesiathroughactivationofperoxisomeproliferatoractivatedreceptoralphaJPharmacolExpTher3191051106132GuindonJHohmannAGCannabinoidCB2receptorsatherapeutictargetforthetreatmentofinflammatoryandneuropathicpainBrJPharmacol15331933433CravattBFetalFunctionaldisassociationofthecentralandperipheralfattyacidamidesignalingsystemsProcNatlAcadSciUSA101108211082634LeverIJetalLocalizationoftheendocannabinoiddegradingenzymefattyacidamidehydrolaseinratdorsalrootganglioncellsanditsregulationafterperipheralnerveinjuryJNeurosci293766378035TegederIetalPeripheralopioidanalgesiainexperimentalhumanpainmodelsBrain1261092110236MorMetalCyclohexylcarbamicacid3or4substitutedbiphenyl3ylestersasfattyacidamidehydrolaseinhibitorssynthesisquantitativestructureactivityrelationshipsandmolecularmodelingstudiesJMedChem474998500837KingARetalURB602inhibitsmonoacylglycerollipaseandselectivelyblocks2arachidonoylglyceroldegradationinintactbrainslicesChemBiol141357136538AstaritaGAhmedFPiomelliDIdentificationofbiosyntheticprecursorsfortheendocannabinoidanandamideintheratbrainJLipidRes49485739RussoRetalThefattyacidamidehydrolaseinhibitorURB597reducesneuropathicpainafteroraladministrationinmiceJPharmacolExpTher32223624240CalignanoALaRanaGPiomelliDAntinociceptiveactivityoftheendogenousfattyacidamidepalmitylethanolamideEurJPharmacol41919119841TjolsenABergeOGHunskaarSRoslandJHHoleKTheformalintestanevaluationofthemethodPain5151742FegleyDetalCharacterizationofthefattyacidamidehydrolaseinhibitorcyclohexylcarbamicacid3carbamoylbiphenyl3ylestereffectsonanandamideandoleoylethanolamidedeactivationJPharmacolExpTher31335235843CadasHdiTomasoEPiomelliDOccurrenceandbiosynthesisofendogenouscannabinoidprecursorNarachidonoylphosphatidylethanolamineinratbrainJNeurosci171226124244PresleyRWMenetreyDLevineJDBasbaumAISystemicmorphinesuppressesnoxiousstimulusevokedFosproteinlikeimmunoreactivityintheratspinalcordJNeurosci1032333545PaxinosGWatsonCTheratbraininstereotaxiccoordinates6thed46RudaMALingQDHohmannAGPengYBTachibanaTAlterednociceptiveneuronalcircuitsafterneonatalperipheralinflammationScience28962863147HargreavesKDubnerRBrownFFloresCJorisJAnewandsensitivemethodformeasuringthermalnociceptionincutaneoushyperalgesiaPain32778848GreenhouseandGeisser1959Psychometrika2495112"