"化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物を含む組成物であって、化合物1および化合物2が該組成物中の唯一の該併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が該組成物中の唯一の該併用化合物ではないことを条件とする組成物。化合物1を含み、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4である、請求項2に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物5である、請求項2に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物6である、請求項2に記載の組成物。化合物2を含み、化合物1、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4である、請求項6に記載の組成物。化合物3を含み、化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1である、請求項8に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物5である、請求項8に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物6である、請求項8に記載の組成物。化合物4を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物5、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1である、請求項12に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2である、請求項12に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3である、請求項12に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物6である、請求項12に記載の組成物。化合物5を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1である、請求項17に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3である、請求項17に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物6である、請求項17に記載の組成物。化合物6を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物7からなる群から選択される第2の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1である、請求項21に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2である、請求項21に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3である、請求項21に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4である、請求項21に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物5である、請求項21に記載の組成物。化合物7を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6からなる群から選択される第2の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。化合物1を含み、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3である、請求項28に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4である、請求項28に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物5である、請求項28に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物6である、請求項28に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項28に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項28に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項28に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項29に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項28に記載の組成物。化合物2を含み、化合物1、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4である、請求項38に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項38に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項38に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項38に記載の組成物。化合物3を含み、化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1である、請求項43に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物5である、請求項43に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物6である、請求項43に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項43に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項43に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項43に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物5であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項43に記載の組成物。化合物4を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1である、請求項51に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2である、請求項51に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3である、請求項51に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物6である、請求項51に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物2である、請求項51に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物3である、請求項51に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項51に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項51に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項51に記載の組成物。化合物5を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1である、請求項61に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3である、請求項61に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物6である、請求項61に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項61に記載の組成物。化合物6を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1である、請求項66に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2である、請求項66に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3である、請求項66に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4である、請求項66に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物5である、請求項66に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物2である、請求項66に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物3である、請求項66に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項66に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項66に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項66に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物5である、請求項66に記載の組成物。化合物1を含み、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3である、請求項78に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4である、請求項78に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物5である、請求項78に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物6である、請求項78に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項78に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項78に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項78に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項78に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項78に記載の組成物。化合物2を含み、化合物1、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4である、請求項88に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項88に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項88に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項88に記載の組成物。化合物3を含み、化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1である、請求項93に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物5である、請求項93に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物6である、請求項93に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項93に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項93に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項93に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物5であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項93に記載の組成物。化合物4を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1である、請求項101に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2である、請求項101に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3である、請求項101に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物6である、請求項101に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物2である、請求項101に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物3である、請求項101に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項101に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項101に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項101に記載の組成物。化合物5を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1である、請求項111に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3である、請求項111に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物6である、請求項111に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項111に記載の組成物。化合物6を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4および化合物5からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1である、請求項116に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2である、請求項116に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3である、請求項116に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4である、請求項116に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物2である、請求項116に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物3である、請求項116に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項116に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項116に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項116に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物5である、請求項116に記載の組成物。化合物7を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。化合物1を含み、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2である、請求項128に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3である、請求項128に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4である、請求項128に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物5である、請求項128に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物6である、請求項128に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項128に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項128に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項128に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項128に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項128に記載の組成物。化合物2を含み、化合物1、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4である、請求項139に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項139に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項139に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項139に記載の組成物。化合物3を含み、化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1である、請求項144に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物5である、請求項144に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物6である、請求項144に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項144に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項144に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項144に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物5であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項144に記載の組成物。化合物4を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1である、請求項152に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2である、請求項152に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3である、請求項152に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物6である、請求項152に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物2である、請求項152に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物3である、請求項152に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項152に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項152に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項152に記載の組成物。化合物5を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1である、請求項162に記載の方法。前記第2の化合物が化合物3である、請求項162に記載の方法。前記第2の化合物が化合物6である、請求項162に記載の方法。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物6である、請求項162に記載の組成物。化合物6を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1である、請求項167に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2である、請求項167に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3である、請求項167に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物4である、請求項167に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物2である、請求項167に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物3である、請求項167に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物1であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項167に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物2であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項167に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物4である、請求項167に記載の組成物。前記第2の化合物が化合物3であり、前記第3の化合物が化合物5である、請求項167に記載の組成物。化合物7を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物をさらに含む、請求項1に記載の組成物。前記組成物が化合物1および化合物6を含む、請求項1に記載の組成物。前記組成物が化合物1、化合物3および化合物6を含む、請求項1に記載の組成物。前記組成物が化合物3および化合物5を含む、請求項1に記載の組成物。前記組成物が化合物3および化合物6を含む、請求項1に記載の組成物。前記組成物が化合物3、化合物5および化合物6を含む、請求項1に記載の組成物。1種または複数の薬学的に許容される希釈剤またはキャリアをさらに含む、請求項1から183のいずれか一項に記載の組成物。毎日1回投与のための単位剤形として製剤化される、請求項1から184のいずれか一項に記載の組成物。経口投与のために製剤化される、請求項1から185のいずれか一項に記載の組成物。錠剤として製剤化される、請求項1から186のいずれか一項に記載の組成物。ヒトでのHCV感染を処置する方法であって、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物を前記ヒトに投与するステップを含むが、化合物1および化合物2が投与される唯一の併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が投与される唯一の併用化合物ではないことを条件とする方法。請求項1から187のいずれか一項に記載の組成物を前記ヒトに投与する、請求項188に記載の方法。ヒトでのHCV感染の1種または複数の症状を改善する方法であって、該方法は、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物を該ヒトに投与するステップを含み、化合物1および化合物2が、投与される唯一の該併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が、投与される唯一の該併用化合物ではないことを条件とする、方法。請求項1から187のいずれか一項に記載の組成物を前記ヒトに投与する、請求項190に記載の方法。HCVを有するヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法であって、該方法は、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物を該ヒトに投与するステップを含み、化合物1および化合物2が、投与される唯一の該併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が、投与される唯一の該併用化合物ではないことを条件とする、方法。請求項1から187のいずれか一項に記載の組成物を前記ヒトに投与する、請求項192に記載の方法。ヒトにおいて共投与される経口抗ウイルス薬に対して耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法であって、該方法は、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物を該ヒトに投与するステップを含み、化合物1および化合物2が、投与される唯一の該併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が、投与される唯一の該併用化合物ではないことを条件とする、方法。請求項1から187のいずれか一項に記載の組成物を前記ヒトに投与する、請求項194に記載の方法。インターフェロンを前記ヒトに投与するステップをさらに含む、請求項188から195のいずれか一項に記載の方法。インターフェロンを前記ヒトに投与しない、請求項188から195のいずれか一項に記載の方法。リバビリンを前記ヒトに投与するステップをさらに含む、請求項188から195のいずれか一項に記載の方法。リバビリン、インターフェロン、α-グルコシダーゼ1阻害薬、肝臓保護薬、TLR-7アゴニスト、シクロフィリン阻害薬、HCVウイルス侵入阻害薬、HCV成熟阻害薬およびHCVIRES阻害薬から選択される1種または複数の追加の薬剤を前記ヒトに投与するステップをさらに含む、請求項188から195のいずれか一項に記載の方法。医学的療法における併用化合物である化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物の使用であって、化合物1および化合物2が、選択される唯一の該併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が、選択される唯一の該併用化合物ではないことを条件とする、使用。医学的療法における、請求項1から187のいずれか一項に記載の組成物の使用。HCV感染を予防的または治療的処置するための、併用化合物である化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物の使用であって、化合物1および化合物2が、選択される唯一の該併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3、が選択される唯一の該併用化合物ではないことを条件とする、使用。HCV感染を予防的または治療的処置するための請求項1から187のいずれか一項に記載の組成物の使用。ヒトでのHCV感染を処置するための医薬品を調製するための化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物の使用であって、化合物1および化合物2が、選択される唯一の該併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が、選択される唯一の該併用化合物ではないことを条件とする、使用。ヒトでのHCV感染を処置するための医薬品を調製するための請求項1から187のいずれか一項に記載の組成物の使用。ヒトでのHCV感染の1種または複数の症状を改善するための医薬品を調製するための化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物の使用であって、化合物1および化合物2が、選択される唯一の該併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が、選択される唯一の該併用化合物ではないことを条件とする、使用。ヒトでのHCV感染の1種または複数の症状を改善するための医薬品を調製するための請求項1から157のいずれか一項に記載の組成物の使用。ヒトでのウイルス負荷を減少させるための医薬品を調製するための化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物の使用であって、化合物1および化合物2が、選択される唯一の該併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が、選択される唯一の該併用化合物ではないことを条件とする、使用。ヒトでのウイルス負荷を減少させるための医薬品を調製するための請求項1から187のいずれか一項に記載の組成物の使用。ヒトにおいて共投与される経口抗ウイルス薬に対して耐性を有するHCV準種の出現を減じるための医薬品を調製するための、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物の使用であって、化合物1および化合物2が、選択される唯一の該併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が、選択される唯一の該併用化合物ではないことを条件とする、使用。ヒトにおいて共投与される経口抗ウイルス薬に対して耐性を有するHCV準種の出現を減じるための医薬品を調製するための請求項1から187のいずれか一項に記載の組成物の使用。残念なことに、HCVの別の遺伝子型は、PEG-IFN/リバビリン療法に対して異なって応答し;例えば、HCV遺伝子型1型は、2型および3型よりも療法に対して耐性がある。加えて、HCVのための多くの現行の処置は、望ましくない副作用を生じる。したがって、現在、新たな抗ウイルス療法が必要とされている。詳細には、望ましくない副作用がより少ないか、幅広いHCV遺伝子型に対してより有効であるか、またはより複雑でない投与スケジュールを有する、即ち、一日の間により少ない回数での薬剤の投与を必要とする新たな抗ウイルス療法が必要とされている。発明の要旨本発明は、ウイルス感染例えばHCVを処置するために有用な組成物および治療方法を提供する。本発明のある種の組成物および方法は、望ましくない副作用がより少なく、幅広いHCV遺伝子型に対してより有効であり、耐性選択によるウイルスリバウンドの可能性を減少させ、現在利用可能な療法よりも短縮された、複雑でない投与スケジュールを有する。したがって、一実施形態では、本発明は、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の化合物を含む組成物を提供する。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのHCV感染を処置する方法を提供し、その方法は、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の化合物をヒトに投与するステップを含む。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのHCV感染の1種または複数の症状を改善するための方法を提供し、その方法は、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の化合物をヒトに投与するステップを含む。他の実施形態では、本発明は、HCVを有するヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法を提供し、その方法は、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の化合物をヒトに投与するステップを含む。他の実施形態では、本発明は、ヒトにおいて共投与される経口抗ウイルス薬に対して耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を提供し、その方法は、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の化合物をヒトに投与するステップを含む。他の実施形態では、本発明は、医学的療法における化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の化合物の使用を提供する。他の実施形態では、本発明は、ウイルス例えばHCV感染を予防的または治療的処置するための化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の化合物の使用を提供する。他の実施形態では、本発明は、ウイルス例えばHCV感染を予防的または治療的処置するための本発明の組成物の使用を提供する。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのウイルス例えばHCV感染を処置するための医薬品を調製するための化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の化合物の使用を提供する。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのウイルス例えばHCV感染を処置するための医薬品を調製するための本発明の組成物の使用を提供する。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのウイルス例えばHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための医薬品を調製するための化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の化合物の使用を提供する。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのウイルスHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための医薬品を調製するための本発明の組成物の使用を提供する。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのウイルス負荷を減少させるための医薬品を調製するための化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の化合物の使用を提供する。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのウイルス負荷を減少させるための医薬品を調製するための本発明の組成物の使用を提供する。他の実施形態では、本発明は、ヒトにおいて共投与される経口抗ウイルス薬に対して耐性を有するHCV準種の出現を減少させるための医薬品を調製するための化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の化合物の使用を提供する。他の実施形態では、本発明は、ヒトにおいて共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減少させるための医薬品を調製するための本発明の組成物の使用を提供する。他の実施形態では、本発明は、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種、3種、4種または5種の併用化合物を含む組成物を提供するが、但し、化合物1および化合物2が組成物中における唯一の併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が組成物中における唯一の併用化合物ではないことを条件とする。他の実施形態では、本発明は、化合物1および化合物6を含む組成物を提供する。他の実施形態では、本発明は、化合物1、化合物3および化合物6を含む組成物を提供する。他の実施形態では、本発明は、化合物3および化合物5を含む組成物を提供する。他の実施形態では、本発明は、化合物3および化合物6を含む組成物を提供する。他の実施形態では、本発明は、化合物3、化合物5および化合物6を含む組成物を提供する。他の実施形態では、本発明は、前記の組成物が1種または複数の薬学的に許容される希釈剤またはキャリアをさらに含むことを提供する。他の実施形態では、本発明は、前記の組成物が毎日1回投与のための単位剤形として製剤化されることを提供する。他の実施形態では、本発明は、前記の組成物が経口投与のために製剤化されることを提供する。他の実施形態では、本発明は、前記の組成物が錠剤として製剤化されることを提供する。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのHCV感染を処置する方法を提供し、その方法は、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物をヒトに投与するステップを含むが、但し、化合物1および化合物2が投与される唯一の併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が投与される唯一の併用化合物ではないことを条件とする。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのHCV感染の1種または複数の症状を改善するための方法を提供し、その方法は、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物をヒトに投与するステップを含むが、但し、化合物1および化合物2が投与される唯一の併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が投与される唯一の併用化合物ではないことを条件とする。他の実施形態では、本発明は、HCVを有するヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法を提供し、その方法は、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物をヒトに投与するステップを含むが、但し、化合物1および化合物2が投与される唯一の併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が投与される唯一の併用化合物ではないことを条件とする。他の実施形態では、本発明は、ヒトにおいて共投与される経口抗ウイルス薬に対して耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を提供し、その方法は、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物をヒトに投与するステップを含むが、但し、化合物1および化合物2が投与される唯一の併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が投与される唯一の併用化合物ではないことを条件とする。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのHCV感染を処置するための方法、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有するヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法およびヒトにおいて共投与される経口抗ウイルス薬に耐性を有するHCV準種の出現を減少させる方法が、インターフェロンをヒトに投与するステップをさらに含むことを提供する。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのHCV感染を処置するための方法、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有するヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法およびHCV準種の出現を減少させるための方法であって、インターフェロンをヒトに投与しない方法を提供する。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのHCV感染を処置するための方法、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有するヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法およびヒトにおいて共投与される経口抗ウイルス薬に耐性を有するHCV準種の出現を減少させるための方法が、リバビリンをヒトに投与するステップをさらに含むことを提供する。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのHCV感染を処置するための方法、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有するヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法およびヒトにおいて共投与される経口抗ウイルス薬に耐性を有するHCV準種の出現を減少させるための方法が、リバビリン、インターフェロン、α-グルコシダーゼ1阻害薬、肝臓保護薬hepatoprotectant、TLR-7アゴニスト、シクロフィリン阻害薬、HCVウイルス侵入阻害薬、HCV成熟阻害薬およびHCVIRES阻害薬から選択される1種または複数の追加の薬剤をヒトに投与するステップをさらに含むことを提供する。他の実施形態では、本発明は、医学的療法における併用化合物である化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物の使用を提供するが、但し、化合物1および化合物2が選択される唯一の併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が選択される唯一の併用化合物ではないことを条件とする。他の実施形態では、本発明は、HCV感染を予防的または治療的処置するための併用化合物である化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物の使用を提供するが、但し、化合物1および化合物2が選択される唯一の併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が選択される唯一の併用化合物ではないことを条件とする。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのHCV感染を処置するための医薬品を調製するための化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物の使用を提供するが、但し、化合物1および化合物2が選択される唯一の併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が選択される唯一の併用化合物ではないことを条件とする。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのHCV感染の1種または複数の症状を改善するための医薬品を調製するための化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物の使用を提供するが、但し、化合物1および化合物2が選択される唯一の併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が選択される唯一の併用化合物ではないことを条件とする。他の実施形態では、本発明は、ヒトでのウイルス負荷を減少させるための医薬品を調製するための化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物の使用を提供するが、但し、化合物1および化合物2が選択される唯一の併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が選択される唯一の併用化合物ではないことを条件とする。他の実施形態では、本発明は、ヒトにおいて共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減少させるための医薬品を調製するための化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7ならびに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される2種以上の併用化合物の使用を提供するが、但し、化合物1および化合物2が選択される唯一の併用化合物ではないことを条件とし、さらに化合物1および化合物3が選択される唯一の併用化合物ではないことを条件とする。本発明の組成物および方法は、相乗作用および相乗効果をもたらし得、即ち、活性成分2種以上の併用化合物を包含が一緒に使用される場合に達成される効果は、それらの化合物を別々に使用することで生じる効果の合計よりも大きい。本発明の組成物および方法は、幅広い範囲のHCV遺伝子型のための処置を提供するので、かつ現行のHCV療法例えば、インターフェロンの投与を包含する処置よりも、もたらされる副作用の数が少ないか、またはもたらされる副作用の重症度が低いので、本発明の組成物および方法は有益である。発明の詳細な説明定義別段に述べられていない限り、次の用語および語句は本明細書で使用される場合、次の意味を有することが意図されている。特定の用語または語句が具体的には定義されていないという事実は、不明確であることや、または明瞭性の欠如と関係づけられるべきではなく、むしろ、用語は本明細書中において、それらの通常の意味の範囲内で使用されている。商品名が本明細書中で使用されている場合、出願人は、商品名の製品および商品名の製品の医薬品活性成分複数可を独立に包含することを意図している。本明細書で使用される場合、併用化合物という用語は、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7を指す。本明細書で使用される場合、化合物1は下式:である。化合物1はまた、5-6-2,4-ビストリフルオロメチルフェニルピリダジン-3-イルメチル-2-2-フルオロフェニル-5H-イミダゾ[4,5-c]ピリジンまたは5H-イミダゾ[4,5-c]ピリジン、5-[[6-[2,4-ビストリフルオロメチルフェニル]ピリダジン-3-イル]メチル]-2-2-フルオロフェニルとも称され得る。本明細書で使用される場合、化合物2は下式:である。化合物2はまた、2R,6S,13aR,14aS,16aS-2-8-クロロ-2-2-イソプロピルアミノチアゾール-4-イル-7-メトキシキノリン-4-イルオキシ-6-シクロペンチルオキシカルボニルアミノ-5,16-ジオキソオクタデカヒドロシクロプロパ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアザシクロペンタデシン-14a-イル2,6-ジフルオロベンジルdiflurobenzylホスフィン酸とも称され得る。本明細書で使用される場合、化合物3は下式:である。本明細書で使用される場合、化合物4は下式:である。本明細書で使用される場合、化合物5は下式:である。本明細書で使用される場合、化合物6は下式:である。本明細書で使用される場合、化合物7は下式:である。本明細書で使用される場合、化合物8は下式:である。リバビリンに関しては、リバビリンに関する製造のためのプロセス、さらには命名法に関して参照によって本明細書に組み込まれる欧州特許第0093401B1号が参照される。本明細書で使用される場合、リバビリンは下式:を指す。リバビリンはまた、1-β-D-リボフラノシル-1H-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキサミド、1-β-D-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド;1-β-D-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキサミド;COPEGUSRoche;DRG-0028;HSDB6513;ICN1229;MegaRibavirin例えば、リバビリン100mg/mLの製剤で;NSC163039;RAVANEXBioPartners;REBETOLSchering-Plough;Aesca;BayerScheringPharma;Essex;Pfizer;TradingPharma;ZuelligPharma;Ribamide;RIBAMIDILBiopharma、Russia;RIBASPHEREThreeRiversPharmaceuticals;Ribavarin;Ribavirina;Tribavirin;VILONAValeantPharmaceuticals;ICNPharmaceuticals;VIRAMIDICNPharmaceuticals;AlfaWassermann;VIRAZOLEValeantPharmaceuticals;およびVIRIZADOLEUci-farma、SaoBernardodoCampo、SaoPaulo、Brazilとも称される。加えて、本明細書で使用される場合、リバビリンには、タリバビリンVIRAMIDINE、ICN3142を包含するリバビリンの類似体が包含される。インターフェロンという用語には、1インターフェロン、例えば、ペグ化rIFN-α2bPEG-Intron、MerckCo.,Inc.、ペグ化rIFN-α2aPEGASYS、Hoffmann-LaRocheInc.、rIFN-α2bINTRON登録商標A、MerckCo.,Inc.、rIFN-α2aRoferon登録商標-A、Hoffmann-LaRocheInc.、インターフェロンαMULTIFERON登録商標ViranativeABCorporation、OPC-18、Alfaferone、Alfanative、スバリンsubalin、インターフェロンアルファコンalfacon-1Valeant、インターフェロンα-n1Wellferon商標、GlaxoWellcome、インターフェロンα-n3ALFERON登録商標-HemispherxBiopharma、Inc.、インターフェロン-β-1aAVONEX登録商標BiogenIdec、DL-8234DaiichiPharmaceuticalCo.Ltd、インターフェロン-オメガomegaDUROS登録商標、AlzaCorporation、IntarciaTherapeutics,Inc.;Biomed510、IntarciaTherapeutics,Inc.、アルブインターフェロンalbinterferonα-2bALBUFERON登録商標、HumanGenomeSciences,INC.、IFNα-2bXL、BLX-883LOCTERON登録商標、BiolexTherapeutics,INC.、DA-3021、グリコシル化インターフェロンα-2bAVI-005、PEG-INFERGEN登録商標、Amgen,Inc.、ペグ化インターフェロンラムダ-1III型ペグ化IL-29およびBELEROFON登録商標、NautilusBiotechが包含される。併用療法という用語は、併用化合物のうちの2種以上が組み込まれている組成物または方法または使用などを意味する。併用療法はまた、併用化合物のうちの2種以上に加えて、これらに限られないが:リバビリン、インターフェロン、α-グルコシダーゼ1阻害薬、肝臓保護薬、Toll様受容体TLR-7アゴニスト、シクロフィリン阻害薬、HCVウイルス侵入阻害薬、HCV成熟阻害薬およびHCVIRES阻害薬を包含する他の活性成分を組み込こんでいてもよい。活性成分という用語は、併用化合物、リバビリン、インターフェロン、α-グルコシダーゼ1阻害薬、肝臓保護薬、TLR-7アゴニスト化合物8など、シクロフィリン阻害薬、HCVウイルス侵入阻害薬、HCV成熟阻害薬およびHCVIRES阻害薬のうちのいずれかを包含する、薬学的効果を発揮するか、または発揮し得る併用療法の構成要素を意味する。処置という用語およびその文法的に同等な用語は、疾患を処置する文脈において使用される場合、疾患の進行を遅延もしくは停止させること、または疾患の症状の少なくとも1つを改善すること、より好ましくは疾患の1つを超える症状を改善することを意味する。例えば、HCV患者は、HCV感染に随伴し得る次の症状のうちの1つまたは全ての改善を経験し得る:発熱、頭痛、筋肉痛、黄疸、疲労、食欲不振、悪心、嘔吐および下痢。C型肝炎ウイルス感染の処置には、HCVに感染しているヒトにおけるHCVウイルス負荷の減少が包含され得る。ある種の本明細書に記載されている化合物は、1つまたは複数のキラル中心を含有するか、または他にも、複数の立体異性体として存在し得る。本発明の範囲には、立体異性体の混合物、さらには精製された鏡像異性体または鏡像異性的/ジアステレオ異性的に富化された混合物が包含される。他にも、本発明の範囲内には、本明細書に示されている式によって表される化合物の個々の異性体、さらには全部または一部のその平衡混合物のいずれもが包含される。本発明はまた、本明細書に示されている式によって表される化合物の個々の異性体を、1つまたは複数のキラル中心が反転しているその異性体との混合物として包含する。本明細書において使用される立体化学の定義および規則は一般に、参照によってその全体が本明細書に組み込まれるS.P.Parker編、McGraw-HillDictionaryofChemicalTerms1984年、McGraw-HillBookCompany、NewYork;およびEliel,E.およびWilen,S.、StereochemistryofOrganicCompounds1994年JohnWileySons,Inc.、NewYorkに従う。多くの有機化合物が、光学的に活性な形態で存在し、即ち、それらは、平面偏光の面を回転する能力がある。光学的に活性な化合物を記載する場合、接頭辞のDおよびLまたはRおよびSを使用して、そのキラル中心複数可に対する分子の絶対配置を示す。接頭辞のdおよびlまたはおよび-を使用して、化合物による平面偏光の回転の符号を示すが、その際、-またはlは、化合物が左旋性であることを意味している。またはdの接頭辞を有する化合物は、右旋性である。特定の立体異性体は他にも、鏡像異性体とも称され得、そのような異性体の混合物は多くの場合に、鏡像異性体混合物と呼ばれる。鏡像異性体の50:50混合物は、ラセミ混合物またはラセミ化合物と称され、それらは、化学反応またはプロセスにおいて立体選択または立体特異性が存在しない場合に生じ得る。ラセミ混合物およびラセミ化合物という用語は、光学活性のない2種の鏡像異性体種の等モル混合物を指す。組合せ本発明は、併用化合物のうちの2種以上の組合せを包含する。本発明の化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7の可能な二元組合せ1~21、三元組合せ22~56、四元組合せ57~92および五元組合せ93~113組合せを示している表Iを下記に提供する:組成物本発明の一態様は、化合物1を含み、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。本発明の具体的な一実施形態では、第2の化合物は、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5または化合物6であり得る。他の実施形態では、第2の化合物は化合物2でも化合物3でもない。本発明の他の態様は、化合物2を含み、化合物1、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。本発明の具体的な一実施形態では、第2の化合物は、化合物4であり得る。他の実施形態では、第2の化合物は化合物1ではない。本発明の他の態様は、化合物3を含み、化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。本発明の具体的な一実施形態では、第2の化合物は、化合物1または化合物4または化合物5または化合物6であり得る。他の実施形態では、第2の化合物は化合物1ではない。本発明の他の態様は、化合物4を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物5、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。本発明の具体的な一実施形態では、第2の化合物は、化合物1または化合物2または化合物3または化合物6であり得る。本発明の他の態様は、化合物5を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。本発明の具体的な一実施形態では、第2の化合物は、化合物1または化合物3または化合物6であり得る。本発明の他の態様は、化合物6を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物7からなる群から選択される第2の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。本発明の具体的な一実施形態では、第2の化合物は、化合物1、化合物2、化合物3または化合物4または化合物5であり得る。本発明の他の態様は、化合物7を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6からなる群から選択される第2の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。本発明の他の態様は、化合物1を含み、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物3または化合物4または化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、化合物2を含み、化合物1、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、化合物3を含み、化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物1または化合物4または化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物5であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、化合物4を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物1、化合物2、化合物3または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、化合物5を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物1または化合物3または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、化合物6を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物1、化合物2、化合物3または化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物5であってよい。本発明の他の態様は、化合物7を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。本発明の他の態様は、化合物1を含み、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物3、化合物4、化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、化合物2を含み、化合物1、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、化合物3を含み、化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物1または化合物4または化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物5であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、化合物4を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物1、化合物2、化合物3または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、化合物5を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物1または化合物3または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、化合物6を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物1、化合物2、化合物3または化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物5であってよい。本発明の他の態様は、化合物7を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。本発明の他の態様は、化合物1を含み、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物3、化合物4、化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、化合物2を含み、化合物1、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、化合物3を含み、化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物1または化合物4または化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物5であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、化合物4を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物1、化合物2、化合物3または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、化合物5を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物1または化合物3または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、化合物6を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。第2の化合物は化合物1、化合物2、化合物3および化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物5であってよい。本発明の他の態様は、化合物7を含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物をさらに含む組成物、例えば薬学的組成物を包含する。塩併用化合物および他の活性成分は、塩の形態であり得る。典型であって、絶対ではないが、併用化合物および他の活性成分の塩は、薬学的に許容される塩である。薬学的に許容される塩という用語に包含される塩は、併用化合物および/または他の活性成分の非毒性の塩を指す。適切な薬学的に許容される塩の例には、塩化物、臭化物、硫酸塩、リン酸塩および硝酸塩などの無機酸付加塩;酢酸塩、ガラクタル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、乳酸塩、グリコール酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、メタンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩およびアスコルビン酸塩などの有機酸付加塩;アスパラギン酸塩およびグルタミン酸塩などの酸性アミノ酸との塩;ナトリウム塩およびカリウム塩などのアルカリ金属塩;マグネシウム塩およびカルシウム塩などのアルカリ土類金属塩;アンモニウム塩;トリメチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ピリジン塩、ピコリン塩、ジシクロヘキシルアミン塩およびN,N’-ジベンジルエチレンジアミン塩などの有機塩基塩;ならびにリシン塩およびアルギニン塩などの塩基性アミノ酸との塩が包含される。塩は、場合によっては、水和物またはエタノール溶媒和物であってよい。医薬製剤併用化合物および/または他の活性成分は、通常の実施に従って選択され得る慣用のキャリアまたは賦形剤と共に製剤化することができる。錠剤は典型的には、賦形剤、流動促進剤、充填剤、結合剤などを含有する。水性製剤は、滅菌形態で調製することができ、経口投与以外によって送達することが意図されている場合には一般に、等張性である。全ての製剤は必要に応じて、その全体が参照によって本明細書に組み込まれるHandbookofPharmaceuticalExcipients1986年に示されているものなどの賦形剤を含有する。賦形剤には、アスコルビン酸および他の抗酸化剤、EDTAなどのキレート化剤、デキストリンなどの炭水化物、ヒドロキシアルキルセルロース、ヒドロキシアルキルメチルセルロース、ステアリン酸が包含される。製剤のpHは、約3から約11の範囲であるが、通常は、約7から10である。活性成分を単独で投与することは可能であるが、1種または複数の活性成分を医薬製剤として提示することが好ましいことがある。本発明の製剤は、獣医学用途およびヒト用途の両方について、少なくとも1種の活性成分を、1種または複数の許容されるキャリアおよび必要に応じて他の治療成分と一緒に含む。キャリア複数可は、製剤の他の成分と相容性であり、その受容者に対して生理学的に無害であるという意味において許容されなければならない。製剤には、下記に示されている投与経路に適したものが包含される。製剤は、好都合なように単位剤形で提示され得、薬学の分野で周知の方法のいずれかによって調製され得る。技術および製剤は一般に、その全体が参照によって本明細書に組み込まれるRemington’sPharmaceuticalSciencesMackPublishingCo.,Easton,Pa.に見出すことができる。そのような方法は、活性成分を、1種または複数の補助的成分を構成するキャリアと会合させるステップを包含する。一般に、製剤は、1種または複数の活性成分を、液体キャリアもしくは微粉固体キャリアまたはその両方と均一かつ密接に会合させ、次いで、必要ならば、生成物を成形することによって調製することができる。経口投与に適した本発明の製剤は、所定の量の活性成分をそれぞれ含有するカプセル剤、カシェ剤または錠剤などの別個の単位として;散剤もしくは顆粒剤として;水性もしくは非水性液体での液剤または懸濁剤として;または水中油型液体乳剤または油中水型液体乳剤として提示することができる。活性成分はまた、ボーラス剤、舐剤またはペースト剤として投与することもできる。錠剤は、必要に応じて1種または複数の補助的成分と一緒に、圧縮または成形することによって作製することができる。圧縮錠剤は、適切な装置machineで、必要に応じて結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、保存剤、界面活性剤または分散剤と混合された粉末または顆粒などの易流動性形態の活性成分を圧縮することによって調製することができる。成形錠剤は、適切な装置で、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末化活性成分の混合物を成形することによって作製することができる。錠剤を必要に応じて、コーティングするか、または刻み目を入れることができ、必要に応じて、活性成分の緩慢放出または制御放出が得られるように製剤化することができる。眼または他の外部組織、例えば、口腔および皮膚に投与するためには、製剤を好ましくは、活性成分複数可を例えば0.075から20w/w0.6w/w、0.7w/wなど、0.1w/wの増分で0.1から20の間の範囲で活性成分複数可を包含する、好ましくは0.2から15w/w、および最も好ましくは0.5から10w/wの量で含有する局所軟膏剤またはクリーム剤として塗布することができる。軟膏剤で製剤化する場合には、活性成分を、パラフィン系または水混和性軟膏基剤のいずれかと共に使用することができる。別法では、活性成分を、水中油型クリーム基剤と共に、クリームで製剤化することができる。所望の場合には、クリーム基剤の水性相は、例えば、少なくとも30w/wの多価アルコール、即ち、プロピレングリコール、ブタン1,3-ジオール、マンニトール、ソルビトール、グリセロールおよびポリエチレングリコールPEG400を包含およびその混合物などの2個以上のヒドロキシル基を有するアルコールを含んでよい。局所製剤は望ましくは、皮膚または他の罹患部位を介しての活性成分の吸収または透過を増強する化合物を含み得る。そのような皮膚透過促進剤の例には、ジメチルスルホキシドdimethylsulphoxideおよび関連類似体が挙げられる。併用化合物および/または他の活性成分の乳剤の油性相は、公知の成分から公知の方法で構成され得る。相は乳化剤別段にはエマルゲントemulgentとして公知のみを含み得るが、望ましくは、少なくとも1種の乳化剤と脂肪もしくは油との、または脂肪および油の両方との混合物を含む。好ましくは、親水性乳化剤は、安定剤として作用する親油性乳化剤と一緒に包含される。他にも、油および脂肪の両方を包含することが好ましい。安定剤複数可を伴うか、伴わない乳化剤複数可は一緒に、いわゆる乳化ろうを構成し、そのろうは油および脂肪と一緒に、クリーム製剤の油性分散相を形成するいわゆる乳化軟膏基剤を構成する。本発明の製剤において使用するために適したエマルゲントおよび乳化安定剤には、Tween登録商標60ICIAmericasInc.、Span80、セトステアリルアルコール、ベンジルアルコール、ミリスチルアルコール、グリセリルモノステアレートおよびラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。製剤に適した油または脂肪の選択は、所望の美容特性の達成に基づく。クリーム剤は好ましくは、チューブまたは他の容器からの漏れを回避するのに適した粘稠度を有する脂ぎっておらず、非着色性で、洗浄可能な生成物であるべきである。ジイソアジペート、ステアリン酸イソセチル、ココヤシ脂肪酸のプロピレングリコールジエステル、ミリスチン酸イソプロピル、オレイン酸デシル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、パルミチン酸2-エチルヘキシルまたはCrodamolCAPとして公知の分枝鎖エステルのブレンドなどの直鎖または分枝鎖の一塩基性または二塩基性アルキルエステルを使用することができ、ここで、最後の3種が好ましいエステルである。これらは、必要とされる特性に応じて単独で、または組合せて使用することができる。別法では、白色軟質パラフィンおよび/または流動パラフィンまたは他の鉱油などの高融点脂質を使用することができる。本発明による医薬製剤は、1種または複数の活性成分を1種または複数の薬学的に許容されるキャリアまたは賦形剤および必要に応じて、他の治療薬と一緒に含む。活性成分を含有する医薬製剤は、意図されている投与方法に適した任意の形態であってよい。経口用途で使用する場合には例えば、錠剤、トローチ剤、ロゼンジ剤、水性もしくは油性懸濁剤、分散性散剤もしくは顆粒剤、乳剤、硬質もしくは軟質カプセル剤、シロップ剤またはエリキシル剤を調製することができる。経口用途が意図されている組成物は、薬学的組成物を製造するために当技術分野で公知の任意の方法に従って調製することができ、そのような組成物は、味の良い調製物を提供するための甘味剤、香味剤、着色剤および保存剤を含めた1種または複数の剤agentを含有し得る。錠剤を製造するために適した非毒性の薬学的に許容される賦形剤と混合されている活性成分を含有する錠剤が許容される。これらの賦形剤は、例えば、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウム、ラクトース、ラクトース一水和物、クロスカルメロースナトリウム、ポビドン、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤;トウモロコシデンプンまたはアルギン酸などの造粒剤および崩壊剤;セルロース、微晶質セルロース、デンプン、ゼラチンまたはアラビアゴムなどの結合剤;ならびにステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクなどの滑沢剤であってよい。錠剤は、コーティングされていなくてもよく、または胃腸管での崩壊および吸着を遅延させて、長期間にわたる持続作用をもたらすためのマイクロカプセル化を包含する公知の技術によってコーティングされていてよい。例えば、モノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリンなどの時間遅延物質を単独で、または蝋と共に使用することができる。経口用途のための製剤はまた、活性成分複数可が不活性固体希釈剤、例えばリン酸カルシウムもしくはカオリンと混合されている、硬質ゼラチンカプセル剤として、または活性成分が水またはラッカセイ油、流動パラフィンもしくはオリーブ油などの油媒体と混合されている、軟質ゼラチンカプセル剤として提示することができる。本発明の水性懸濁液は、水性懸濁剤を製造するために適した賦形剤と混合されている活性物質を含有する。そのような賦形剤には、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴムおよびアラビアゴムなどの懸濁化剤ならびに天然に存在するリン脂質例えば、レシチン、アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物例えば、ポリオキシエチレンステアレート、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール、エチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来する部分エステルとの縮合生成物例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートなどの分散化剤または湿潤剤が挙げられる。水性懸濁剤はまた、エチルまたはn-プロピルp-ヒドロキシ-ベンゾエートなどの1種または複数の保存剤、1種または複数の着色剤、1種または複数の香味剤およびスクロースまたはサッカリンなどの1種または複数の甘味剤を含有してよい。油懸濁剤は、活性成分をラッカセイ油、オリーブ油、ゴマ油もしくはヤシ油などの植物油に、または流動パラフィンなどの鉱油に懸濁させることによって、製剤化することができる。経口懸濁剤は、蜜蝋、硬質パラフィンまたはセチルアルコールなどの増粘剤を含有してよい。本明細書に示されているものなどの甘味剤および香味剤を、味の良い経口調製物を提供するために加えることができる。これらの組成物は、アスコルビン酸などの抗酸化剤を加えることによって保存することができる。水を加えることによって水性懸濁剤を調製するために適した本発明の分散性散剤および顆粒剤は、分散化剤または湿潤剤、懸濁化剤および1種または複数の保存剤と混合されている活性成分を提供する。適切な分散化剤または湿潤剤および懸濁化剤は、上記に開示されているものによって例示される。追加の賦形剤、例えば甘味剤、香味剤および着色剤もまた存在してよい。本発明の薬学的組成物はまた、水中油型乳剤の形態であってもよい。油相は、オリーブ油またはラッカセイ油などの植物油、流動パラフィンなどの鉱油またはこれらの混合物であってよい。適切な乳化剤には、アラビアゴムおよびトラガカントゴムなどの天然に存在するゴム、ダイズレシチンなどの天然に存在するリン脂質、ソルビタンモノオレエートなどの脂肪酸およびヘキシトール無水物から誘導されるエステルまたは部分エステルならびにポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートなどのこれらの部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物が挙げられる。乳剤はまた、甘味剤および香味剤を含有してよい。シロップ剤およびエリキシル剤は、グリセロール、ソルビトールまたはスクロースなどの甘味剤と共に製剤化することができる。そのような製剤はまた、粘滑剤、保存剤、香味剤または着色剤を含有してよい。本発明の薬学的組成物は、滅菌注射用水性または油性懸濁剤などの滅菌注射用調製物の形態であってよい。この懸濁剤は、公知の技術に従って、本明細書において述べられている適切な分散化剤または湿潤剤および懸濁化剤を使用して製剤化することができる。滅菌注射用調製物はまた、1,3-ブタン-ジオール中の溶液など、非毒性の非経口で許容される希釈剤もしくは溶媒中の滅菌注射用溶液または懸濁液であってもよいか、または凍結乾燥粉末として調製されていてよい。使用することができる許容されるビヒクルおよび溶媒には、水、リンゲル液および等張性塩化ナトリウム溶液がある。加えて、滅菌不揮発性油を、溶媒または懸濁媒として慣用的に使用することができる。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含めた任意の無刺激の不揮発性油を使用することができる。加えて、オレイン酸などの脂肪酸も同様に、注射剤を調製する際に使用することができる。単一剤形を生成するためにキャリア物質と組み合わせることができる活性成分の量は、処置されるホストおよび特定の投与方式に応じて変動する。例えば、ヒトへの経口投与が意図されている時間放出製剤は、活性物質約1から1000mgを、組成物全体の約5から約95重量:重量まで変動し得る適切かつ簡便な量のキャリア物質と混合されて含有してよい。薬学的組成物は、投与のために容易に計測可能な量を提供するために調製することができる。例えば、静脈内注入が意図されている水性液剤は、約30mL/時間の速度で適切な体積の注入が生じ得るように、液剤1ミリリットル当たり活性成分約3から500μgを含有してよい。眼に投与するのに適した製剤には、活性成分が活性成分用の適切なキャリア、特に水性溶媒に溶解または懸濁されている点眼剤が挙げられる。活性成分は好ましくは、0.5から20、有利には0.5から10、特には約1.5w/wの濃度でそのような製剤中に存在する。口腔中への局所投与に適した製剤には、香味のある基剤、通常はスクロースおよびアカシアまたはトラガカント中に活性成分を含むロゼンジ剤;ゼラチンおよびグリセリンまたはスクロースおよびアカシアなどの不活性基剤中に活性成分を含む香錠;ならびに適切な液体キャリア中に活性成分を含む洗口剤が包含される。直腸投与用の製剤は、例えばカカオバターまたはサリチレートを含む適切な基剤を用いる坐剤として提示することができる。肺内または鼻投与に適した製剤は、例えば0.1から500μmの範囲の粒径を有し0.5μm、1μm、30μm、35μmなどの増分で0.1から500μmの間の範囲の粒径を含む、これを、鼻通路を介して急速に吸入するか、または口腔を介して吸入することによって投与して、肺胞嚢に達するようにする。適切な製剤には、活性成分の水性または油性液剤が挙げられる。エアロゾルまたは乾燥粉末投与に適した製剤は、慣用の方法に従って調製することができ、本明細書に記載されている感染を処置または予防する際に使用される従来の化合物などの他の治療薬と共に送達することができる。膣投与に適した製剤は、活性成分に加えて、適切であると当技術分野で公知であるようなキャリアを含有する膣坐剤、タンポン剤、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、泡剤または噴霧製剤として提示することができる。非経口投与に適した製剤には、抗酸化剤、緩衝剤、静菌薬および意図されている受容者の血液と製剤を等張性にする溶質を含有し得る水性および非水性滅菌注射液剤;ならびに懸濁化剤および増粘剤を含み得る水性および非水性滅菌懸濁剤が挙げられる。製剤は、単位用量または複数用量容器、例えば密閉アンプルおよびバイアルで提示することができ、使用直前に滅菌液体キャリア、例えば注射用の水を加えることだけを必要とするフリーズドライ凍結乾燥された状態で貯蔵することができる。即時注射液剤および懸濁剤は、前記した種類の滅菌散剤、顆粒剤および錠剤から調製することができる。好ましい単位投与製剤は、活性成分の、本明細書中の上記で列挙されたような一日用量もしくは一日用量未満の単位または適切なそのフラクションを含有するものであってよい。上記で詳細に述べられた成分に加えて、併用化合物および/または他の活性成分の製剤は、該当する製剤のタイプに関連して、例えば香味剤を含み得る経口投与に適したものを有する当技術分野で慣用の他の薬剤を含み得ることは理解されるべきである。併用化合物および他の活性成分はまた活性成分の制御放出を提供するように製剤化され、投与頻度を少なくするか、または活性成分の薬物動態または毒性プロファイルを改善することができる。したがって、本発明はまた、持続放出または制御放出のために製剤化された、2種以上の併用化合物を含む組成物を提供する。投薬量活性成分の有効な用量は、処置される状態の性質、毒性、化合物が予防的により低い用量、または活動性の疾患もしくは状態に対して使用されるかどうか、送達方法および医薬製剤に少なくとも左右され、臨床家が慣用の用量漸増研究を使用して決定することができる。例として、本発明の組成物例えば錠剤は、有効な用量をもたらすように製剤化することができる。例えば、化合物1または薬学的に許容されるその塩については、組成物は、1.0mgから100mg、5mgから40mg、30mgから50mg、または20mgもしくは40mgを含んでよく、化合物2、化合物3、化合物6、化合物4、化合物5および化合物7のうちの任意の1種または複数と組み合わせて、投与を必要とするヒトに、毎日1回または複数回投与されるように適合させることができる。化合物2または薬学的に許容されるその塩については、組成物は、25mgから800mg、50mgから400mg、または60mgから300mg、または70mgから200mgを含んでよいか、または150mgであってよく、化合物1、化合物3、化合物6、化合物4、化合物5および化合物7のうちの任意の1種または複数と組み合わせて、投与を必要とするヒトに、毎日1回または複数回投与されるように適合させることができる。化合物3または薬学的に許容されるその塩については、組成物は、10mgから1000mg、または50から400mg、または100mgから400mgまたは200mgから400mgを含んでよく、化合物1、化合物2、化合物6、化合物4、化合物5および化合物7のうちの任意の1種または複数と組み合わせて、投与を必要とするヒトに、毎日1回または複数回投与されるように適合させることができる。化合物4または薬学的に許容されるその塩については、組成物は、25mgから400mg、または25mgから200mgを含んでよく、化合物1、化合物2、化合物3、化合物6、化合物5および化合物7のうちの任意の1種または複数と組み合わせて、投与を必要とするヒトに、毎日1回または複数回投与されるように適合させることができる。化合物5または薬学的に許容されるその塩については、組成物は50mgから1000mg、または100mgから750mgを含んでよく、化合物1、化合物2、化合物3、化合物6、化合物4および化合物7のうちの任意の1種または複数と組み合わせて、投与を必要とするヒトに、毎日1回または複数回投与されるように適合させることができる。化合物6または薬学的に許容されるその塩については、組成物は、1mgから500mg、または3mgから300mg、または3mgから200mg、または3mgから100mg、または10mgから90mg、または30mgから90mgを含んでよく、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物7のうちの任意の1種または複数と組み合わせて、投与を必要とするヒトに、毎日1回または複数回投与されるように適合させることができる。化合物7または薬学的に許容されるその塩については、組成物は、100マイクログラムから3000mgまで、25mgから2000mgまで、または50mgから1000mgまでを含んでよく、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6のうちの任意の1種または複数と組み合わせて、投与を必要とするヒトに、毎日1回または複数回例えば1日4回投与されるように適合させることができる。共投与される化合物1~7についての投薬量は、潜在的な薬物-薬物相互作用を考慮して調節される必要があり得る。例えば、化合物1は、薬物代謝システムに影響を及ぼさないのは明らかであるが、化合物2は、化合物1の曝露を約2~3倍に上昇させる効果を有するようである。したがって、化合物1を化合物2と組み合わせる場合には、化合物1の用量減少例えば2倍~3倍が予想される。化合物6と組み合わせると、化合物2は、化合物6の曝露を約5倍に上昇させる効果を有するようなので、化合物6を化合物2と共に投与する場合には、化合物6の用量減少例えば3倍~5倍が予想される。したがって、化合物2と共投与される場合化合物6の10mg用量は、30mg用量に近い。2種以上の併用化合物を、1日当たり約800mg、1000mgまたは1200mgの量で単回または複数回投薬例えば約400mg、500mgまたは600mgを1日2回のリバビリンと組み合わせて投与することができる。本発明の組合せの使用本発明のこの態様の実施では、併用化合物を、上記に示されている投薬量で使用することができる。本発明の一態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物1を含み、ここで、化合物1を、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は化合物3、化合物4、化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物はまた、化合物4、化合物5または化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物2を含み、ここで、化合物2を、化合物1、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は化合物4であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物3を含み、ここで、化合物3を、化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は化合物1または化合物4または化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物はまた化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物4を含み、ここで、化合物4を、化合物1、化合物2、化合物3、化合物5、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は化合物1または化合物2または化合物3または化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物5を含み、ここで、化合物5を、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は化合物1、化合物3または化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物6を含み、ここで、化合物6を、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物7からなる群から選択される第2の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は化合物1、化合物2、化合物3または化合物4であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物7を含み、ここで、化合物7を、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6からなる群から選択される第2の化合物と組み合わせて使用する。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物1を含み、ここで、化合物1を、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物3または化合物4または化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は、化合物4または化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物2を含み、ここで、化合物2を、化合物1、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物3を含み、ここで、化合物3を、化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物1または化合物4または化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物5であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物4を含み、ここで、化合物4を、化合物1、化合物2、化合物3、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物1、化合物2、化合物3または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物5を含み、ここで、化合物5を、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物1または化合物3または化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物6を含み、ここで、化合物6を、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物1、化合物2、化合物3または化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物7を含み、ここで、化合物7を、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物と組み合わせて使用する。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物1を含み、ここで、化合物1を、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物3、化合物4、化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物2を含み、ここで、化合物2を、化合物1、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物3を含み、ここで、化合物3を、化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物1または化合物4または化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物5であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物4を含み、ここで、化合物4を、化合物1、化合物2、化合物3、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物1、化合物2、化合物3または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物5を含み、ここで、化合物5を、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物1であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物6を含み、ここで、化合物6を、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物1、化合物2、化合物3または化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物5であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物7を含み、ここで、化合物7を、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物と組み合わせて使用する。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物1を含み、ここで、化合物1を、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物3、化合物4、化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物2を含み、ここで、化合物2を、化合物1、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物3を含み、ここで、化合物3を、化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物1または化合物4または化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物5であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物4を含み、ここで、化合物4を、化合物1、化合物2、化合物3、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物1、化合物2、化合物3または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物5を含み、ここで、化合物5を、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物1または化合物3または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物6を含み、ここで、化合物6を、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物と組み合わせて使用する。第2の化合物は、化合物1、化合物2、化合物3または化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物5であってよい。本発明の他の態様は、HCV感染を処置する方法において使用するための化合物7を含み、ここで、化合物7を、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物と組み合わせて使用する。本発明の一態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物1を投与するステップを含み、ここで、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物3、化合物4、化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物はまた、化合物4、化合物5、化合物6または化合物7であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物2を投与するステップを含み、化合物1、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物4であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物3を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物1または化合物4または化合物5または化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物4を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物5、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物1または化合物2または化合物3または化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物5を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物6および化合物7からなる群から選択される第2の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物1または化合物3または化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物6を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物7からなる群から選択される第2の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物1、化合物2、化合物3または化合物4であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物7を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6からなる群から選択される第2の化合物を投与するステップをさらに含む。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物1を投与するステップを含み、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物3または化合物4または化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物2を投与するステップを含み、化合物1、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物3を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物1または化合物4または化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物5であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物4を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物1、化合物2、化合物3または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物5を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物1または化合物3または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物6を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物1、化合物2、化合物3または化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物5であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物7を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物および第3の化合物を投与するステップをさらに含む。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物1を投与するステップを含み、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物3、化合物4、化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物2を投与するステップを含み、化合物1、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物3を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物1または化合物4または化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物5であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物4を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物1、化合物2、化合物3または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物5を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物1または化合物3または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物6を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物1、化合物2、化合物3または化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物5であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物7を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物および第4の化合物を投与するステップをさらに含む。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物1を投与するステップを含み、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物3、化合物4、化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物2を投与するステップを含み、化合物1、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物3を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物1または化合物4または化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物4であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物5であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物4を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物5、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物1、化合物2、化合物3または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物5を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物6および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物1または化合物5または化合物6であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物6であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物6を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物7からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物を投与するステップをさらに含む。第2の化合物は、化合物1、化合物2、化合物3および化合物4であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物2であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物3であってよい。第2の化合物は化合物1であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物2であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物4であってよい。第2の化合物は化合物3であってよく、第3の化合物は化合物5であってよい。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法、ヒト被験体においてHCVを処置する方法および共投与される経口抗ウイルス薬に対する耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、それぞれの方法は、化合物7を投与するステップを含み、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6からなる群からそれぞれ選択される第2の化合物、第3の化合物、第4の化合物および第5の化合物を投与するステップをさらに含む。投与経路および方式化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7のうちの2種以上ならびに併用療法の任意の他の構成要素を、処置される状態に適した任意の経路によって投与されるように適合させることができる。適切な経路には、経口、直腸、鼻、局所頬側および舌下を含む、膣および非経口皮下、筋肉内、静脈内、皮内、髄腔内および硬膜外を含むなどが挙げられる。好ましい経路は例えば、受容者の状態に伴って変動し得ることは理解される。活性成分が:1共製剤化されco-formulated例えば単一剤形で、組合せ製剤で同時に投与または送達されるか;2別々の製剤として交互にまたは並行して送達されるか;または3いくつかの他のレジメンによる場合に、相乗効果は達成され得る。交互療法で送達される場合、化合物が例えば別々の錠剤、丸剤もしくはカプセル剤で、または別々のシリンジ中の異なる注射剤によって、逐次的に投与または送達される場合に、相乗効果は達成され得る。一般に、交互療法の間は、有効な投薬量のそれぞれの活性成分を、逐次的に、即ち連続して投与するが、併用療法では、有効な投薬量の2種以上の活性成分を一緒に投与する。1種の併用化合物と1種または複数の併用化合物との共投与は一般に、治療有効量の2種以上の併用化合物が、患者の体内に存在するような1種または複数の併用化合物の同時または逐次的投与を指す。場合によっては、併用化合物例えば2種、3種または4種の併用化合物を、同時に投与することができるように共製剤化する。場合によっては、共製剤化された併用化合物を、1種または複数の追加の併用化合物と共投与することができる。共投与はまた、単位投薬量の併用化合物を、単位投薬量の1種または複数の他の活性成分の投与、例えば、2種以上の併用化合物の投与の前または後に、1種または複数の他の活性成分の投与から数秒、数分または数時間以内に投与することを包含する。例えば、単位用量の併用化合物を初めに投与し、続いて数秒または数分以内に、単位用量の第2の併用化合物を投与し、続いて数秒または数分以内に、単位用量の1種または複数の他の活性成分を投与することができる。別法では、単位用量の1種または複数の他の活性成分を初めに投与し、続いて数秒または数分以内に、単位用量の併用化合物を投与し、続いて数秒または数分以内に、単位用量の第2の併用化合物を投与することができる。場合によっては、単位用量の併用化合物を初めに投与し、続いて数時間例えば、1~12時間後に、単位用量の第2の併用化合物を投与し、続いて数時間例えば、1~12時間後に、単位用量の1種または複数の他の活性成分を投与することが望ましいことがある。他の場合には、単位用量の1種または複数の他の活性成分を初めに投与し、続いて数時間例えば、1~12時間後に、単位用量の併用化合物を投与し、続いて数時間例えば、1~12時間後に、単位用量の第2の併用化合物を投与することが望ましいことがある。3種以上の併用化合物を1種または複数の追加の活性成分と共に投与する場合には、併用化合物を、前後して互いに数秒、数分または数時間例えば、1~12時間以内に投与することができ、1種または複数の追加の活性成分を、併用化合物の投与の前、その間またはその後に投与することができる。併用化合物を共製剤化する場合には、それらを、1種または複数の追加の活性成分の投与と同時に、またはその前に、またはその後に投与することができる。別段に規定されていない限り、併用療法は、それぞれの活性成分を有する別々の剤形として投与することができ、一緒に、または別々に、逐次的に、または同時に、互いに時間的に近接して、または時間を空けて投与することができる。処置過程は、例えば、約12週間から約48週間、もしくはそれより長く、例えば、約12週間から約24週間に及び得る。本発明は、これらに限られないが、悪心、嘔吐、食欲不振、疲労、黄疸、嘔吐、下痢、脱水、腹痛、肝硬変を含む、ヒトでのHCV感染の少なくとも1つの症状を改善するための、治療上有効な構成要素の組合せを包含する。加えて、一部のHCV感染した個体では、併用療法の使用は、感染者の体内に存在するHCVウイルス粒子のウイルス負荷を統計的に有意な量まで減少させるのに有効である。例えば、COBASTaqManHCVアッセイRocheMolecularSystemsを使用して、例えば、血漿HCVRNAレベルを測定することによって、ウイルス負荷を測定することができる。典型的には、併用化合物で本発明に従って処置されるHCV感染者は、HCV感染に随伴する症状のうちの1つまたは全てにおいて改善を経験する。併用化合物のうちの2種以上と、インターフェロンではなくリバビリンとの組合せ物上記で検討されたとおり、一部の現行のHCV処置は、インターフェロンの投与を包含するが、この処置は典型的には、望ましくない副作用を生じる。したがって、インターフェロンの投与を必要としない有効なHCV処置を見出すことが望ましい。本発明の一態様は、HCVを処置するための組成物、方法、使用などを提供し、それらは、1種または複数のインターフェロンを投与することなく、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上およびリバビリンを投与することを含む。本発明のこの態様は特に有用であり得る。それというのも、それによって、1種または複数のインターフェロンの投与に随伴する副作用を伴うことなく、HCVを有効に処置することができるためである。本発明の一実施形態では、リバビリンおよび併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩の組み合わせた量は、必要に応じて1種または複数の追加の薬剤と共に、HCV感染を処置するために有効である。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1種または複数の症状を改善するための方法を包含し、その方法は、1種または複数のインターフェロンを同時に投与することなく、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上およびリバビリンを投与するステップを含む。このことに関して、本発明は、1種または複数のインターフェロンを投薬する可能性を除外するものではない。むしろ、本発明は、実際には1種または複数のインターフェロンを含めた他の療法と一緒に使用することができる。本発明の一態様は、1種または複数のインターフェロンを必要とすることのないリバビリンでのHCVの有効な処置を包含する。本発明の他の態様は、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法を包含し、その方法は、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上およびリバビリンは投与するが、1種または複数のインターフェロンは投与しないステップを含む。本発明の他の態様は、ヒト被験体においてHCVを処置するための方法を包含し、その方法は、リバビリンを、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上と共に投与するステップから本質的になる。本発明の他の態様は、共投与される経口抗ウイルス薬に対して耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、その方法は、1種または複数のインターフェロンを同時に投与することなく、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上およびリバビリンを投与するステップを含む。同様に、本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための組成物、例えば薬学的組成物を包含し、その組成物は、1種または複数のインターフェロンを含まずに、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上およびリバビリンを含む。本発明の他の態様は、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための組成物を包含し、その組成物は、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上およびリバビリンは含むが、1種または複数のインターフェロンは含まない。本発明の他の態様は、ヒト被験体においてHCVを処置するための組成物を包含し、その組成物は、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上と共に、リバビリンから本質的になる。本発明の他の態様は、リバビリンをベースとするHCV療法のための組成物を包含し、その組成物は、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上を含むが、但し、前記組成物は、1種または複数のインターフェロンを含まない。本発明の他の態様は、共投与される経口抗ウイルス薬に対して耐性を有するHCV準種の出現を減じるための組成物を包含し、その組成物は、1種または複数のインターフェロンを含まずに、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上およびリバビリンを含む。前記のうちの各々では、組成物が、化合物1および化合物2が唯一の併用化合物ではなく、さらに化合物1および化合物3が唯一の併用化合物ではない組成物を包含し得ることをさらに条件とする。同様に、本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1種または複数の症状を改善するための医薬品を製造する際の、1種または複数のインターフェロンを使用することのない併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上およびリバビリンの使用;さらに、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための医薬品を製造する際の、1種または複数のインターフェロンを使用することのない併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上およびリバビリンの使用;さらに、ヒト被験体においてHCVを処置するための医薬品を製造する際の、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上に加えてリバビリンの使用であって、ここで、前記使用が1種または複数のインターフェロンを含まない使用;さらに、リバビリンをベースとするHCV療法のための医薬品を製造する際の、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上の使用であって、ここで、前記使用が、1種または複数のインターフェロンの投与を回避する使用;さらに、共投与される経口抗ウイルス薬に対して耐性を有するHCV準種の出現を減じるための医薬品を製造する際の、1種または複数のインターフェロンを使用することのない併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上およびリバビリンの使用を包含する。前記のうちの各々では、それぞれの使用が、化合物1および化合物2が唯一の併用化合物ではなく、さらに化合物1および化合物3が唯一の併用化合物ではない使用を包含し得ることをさらに条件とする。本発明の他の態様は、リバビリンおよび、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上を含む組合せ物であって、1種または複数のインターフェロンを実質的に含まない組合せ物を包含する。一実施形態では、組合せ物は、一緒に、または別々に、逐次的に、または同時に、そして、互いに時間的に近接して、または時間を空けて投与される、それぞれの活性成分を含む別々の剤形として存在し得る。前記のうちの各々では、組合せ物が、化合物1および化合物2が唯一の併用化合物ではなく、さらに化合物1および化合物3が唯一の併用化合物ではない組合せ物を包含し得ることをさらに条件とする。本発明の他の態様は、キットを包含し、そのキットは、リバビリンと、併用化合物のうちの2種以上と、HCVを処置するか、HCVのウイルス負荷を減少させるか、またはHCVの発症もしくは進行を遅延させるための処置レジメンに関する指示とを含み、ここで、その処置レジメンは、1種または複数のインターフェロンの投与なしで、併用化合物の2種以上およびリバビリンを投与することを包含する。一実施形態では、そのようなキットは他にも、ブリスターバックなどのパッケージングを含んでよい。別法では、そのようなキットは、別々にパッケージングされた医薬品pharmaceuticsとしてのそれぞれの構成要素の個々の処方および投薬のために提供され得るが、HCVを処置するか、HCVのウイルス負荷を減少させるか、またはHCVの発症もしくは進行を遅延させるための処置レジメンに関する指示と組み合わされる場合には、そのようなものは、本発明の範囲内であることが意図されている。前記のキットの各々では、そのようなキットが、化合物1および化合物2が唯一の併用化合物ではなく、化合物1および化合物3が唯一の併用化合物ではないキットを含み得ることをさらに条件とする。本発明の他の態様は、リバビリン;併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上および1種または複数の薬学的に許容されるキャリアを含む薬学的組成物を包含する。一実施形態では、薬学的組成物は、単一剤形であってよい。前記のうちの各々では、組成物が、化合物1および化合物2が唯一の併用化合物ではなく、化合物1および化合物3が唯一の併用化合物ではない組成物を包含し得ることをさらに条件とする。別段に規定されていない限り、リバビリンとの併用療法は、投与されるそれぞれの活性成分を有する別々の剤形併用化合物を含むとして投与することができるか、一緒に例えば、錠剤などの単位投薬量の形態で、または別々に、逐次的に、もしくは同時に、そして、互いに時間的に近接して、または時間を空けて投与することができる。別々に投与する場合には、それぞれの化合物を他のもの複数可と同時にか、または他のもの複数可のそのような投与の前または後のいずれかに投与することができる。活性成分は、毎日投与することができる。一実施形態では、活性成分の日用量を、1日当たり1回、2回、3回または4回などの別々の用量未満で投与する。有利には、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩およびリバビリンの日用量は、1日1回で投与することができる。本発明は、2種以上の併用化合物または薬学的に許容されるその塩;およびリバビリンは投与するが、1種または複数のインターフェロンは投与しないことを含む、HCVを処置するための組成物、方法、使用などを包含するが、本発明は、ヒトに1種または複数のインターフェロンを投薬する可能性を除外するものではない。むしろ、本発明は、実際には1種または複数のインターフェロンを含む、他の適用のための他の療法と共に使用することができる。併用化合物のうちの2種以上と、リバビリンおよびインターフェロンとの組合せ物本発明の他の態様は、HCVを処置するために、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上およびリバビリンならびに1種または複数のインターフェロンを投与することを含む組成物、方法、使用などを提供する。さらなるインターフェロンの投与は、併用化合物およびリバビリンの投与に対して時間的関連を有し得る。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための方法を包含し、その方法は、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上と、リバビリンと、1種または複数のインターフェロンとを投与するステップを含む。本発明の他の態様は、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための方法を包含し、その方法は、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上を、リバビリンおよび1種または複数のインターフェロンと共に投与するステップを含む。本発明の他の態様は、リバビリンをベースとするHCV療法の方法を包含し、その方法は、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上を、リバビリンおよび1種または複数のインターフェロンと共に投与するステップを含む。本発明の他の態様は、共投与される経口抗ウイルス薬に対して耐性を有するHCV準種の出現を減じるための方法を包含し、その方法は、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上を、リバビリンおよび1種または複数のインターフェロンと共に投与するステップを含む。本発明の他の態様は、ヒトでのHCV感染の1つまたは複数の症状を改善するための医薬品を製造する際の、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上と、リバビリンと、1種または複数のインターフェロンとの使用を包含する。本発明の他の態様は、HCVを有すると診断されたヒトでのウイルス負荷を減少させるための医薬品を製造する際の、リバビリンおよび1種または複数のインターフェロンに加えて併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上の使用を包含する。本発明の他の態様は、ヒト被験体においてHCVを処置するための医薬品を製造する際の、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上に加えてリバビリンの使用であって、前記使用が、1種または複数のインターフェロンの使用を含む使用を包含する。本発明の他の態様は、リバビリンをベースとするHCV療法のための医薬品を製造する際の、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上の使用であって、前記使用が、1種または複数のインターフェロンの投与を含む使用を包含する。本発明の他の態様は、共投与される経口抗ウイルス薬に対して耐性を有するHCV準種の出現を減じるための医薬品を製造する際の、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上と、リバビリンと、1種または複数のインターフェロンとの使用を包含する。本発明の他の態様は、リバビリンおよび併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上を含む組合せ物であって、その組合せが、1種または複数のインターフェロンを含む組合せ物を包含する。本発明の他の態様は、リバビリンと、併用化合物のうちの2種以上と、1種または複数のインターフェロンと;HCVを処置するか、HCVのウイルス負荷を減少させるか、またはHCVの発症もしくは進行を遅延させるための処置レジメンに関する指示とを含むキットであって、その処置レジメンが、併用化合物の2種以上と、リバビリンとの投与および1種または複数のインターフェロンの投与を含むキット包含する。一実施形態では、そのようなキットは他にも、ブリスターバックなどのパッケージングを含んでよい。別法では、そのようなキットは、別々にパッケージングされた医薬品としてのそれぞれの構成要素の個々の処方および投薬のために提供されていてよいが、HCVを処置するか、HCVのウイルス負荷を減少させるか、またはHCVの発症もしくは進行を遅延させるための処置レジメンに関する指示と組み合わされる場合には、そのようなものは、本発明の範囲内であることが意図されている。本発明の他の態様は、併用化合物または薬学的に許容されるそれらの塩のうちの2種以上と、リバビリンと、1種または複数のインターフェロンと;1種または複数の薬学的に許容されるキャリアとを含む薬学的組成物を包含する。一実施形態では、薬学的組成物は、単一剤形であってよい。別段に規定されていない限り、リバビリンおよび1種または複数のインターフェロンとの併用療法は、別々の剤形として、患者に投与される1種または複数のインターフェロンと共に投与することができ、併用療法で使用されるそれぞれの残りの活性成分併用化合物を含むは、一緒に例えば、錠剤などの単一投薬量の形態で、または別々に、逐次的に、もしくは同時に、そして、互いに時間的に近接して、または時間を空けて投与される。別々に投与する場合には、それぞれの活性成分を他のもの複数可と共に同時にか、または他のもの複数可のそのような投与の前もしくは後のいずれかに投与することができる。活性成分は、毎日投与することができる。一実施形態では、日用量を、1日当たり1回、2回、3回または4回などの別々の用量未満で投与する。追加の治療剤を含む併用療法他の実施形態では、適切な組合せの非限定的例には、化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物6および化合物7のうちの2種以上これらに限られないが、化合物1および化合物2が唯一の併用化合物ではなく、化合物1および化合物3が唯一の併用化合物ではない組合せを含むと、HCVNS3プロテアーゼ阻害薬、α-グルコシダーゼ1阻害薬、肝臓保護薬、HCVNS5Bポリメラーゼのヌクレオシドまたはヌクレオチド阻害薬、HCVNS5Bポリメラーゼの非ヌクレオシド阻害薬、HCVNS5A阻害薬、TLR-7アゴニスト、シクロフィリン阻害薬、HCVIRES阻害薬、HCV侵入阻害薬、HCV成熟阻害薬および薬物動態促進剤、さらにHCVを処置するための他の薬物を包含する1種または複数の追加の活性成分との組み合わせが包含される。より具体的には、1種または複数の本発明の化合物は、iHCVNS3プロテアーゼ阻害薬、例えば、ボセプレビルSCH-503034、SCH-7、テラプレビルVX-950TMC-435IUPACN-[2R,3aR,10Z,11aS,12aR,14aR-2-[2-4-イソプロピルチアゾール-2-イル-7-メトキシ-8-メチルキノリン-4-イルオキシ]-5-メチル-4,14-ジオキソ-1,2,3,3a,4,5,6,7,8,9,11a,12,12a,13,14,14a-ヘキサデカヒドロシクロペンタ[c]シクロプロパ[g][1,6]ジアザシクロテトラデシン-12a-イルカルボニル]シクロプロパンスルホンアミド];iiα-グルコシダーゼ1阻害薬、例えば、セルゴシビルMX-3253およびミグリトール;iii肝臓保護薬、例えば、エメリカサンIDN-6556、ME-3738、シリビリンおよびMitoQ;ivHCVNS5Bポリメラーゼのヌクレオシドまたはヌクレオチド阻害薬、例えば、ヴァロピシタビンNM-283;vHCVNS5Bポリメラーゼの非ヌクレオシド阻害薬、例えば、フィリブビルPF-868554VCH-796ネスブビル;viHCVNS5A阻害薬;viiTLR-7アゴニスト、例えば、イミキモドおよび化合物8;viiiシクロフィリン阻害薬;ixHCVIRES阻害薬;x薬物動態促進剤、例えば、ロキシスロマイシン;xiHCV侵入阻害薬;xiiHCV成熟阻害薬およびxiiiHCVを処置するための他の薬物、例えば、チモシンα1Zadaxin、ニタゾキサニドAlinea、NTZ、BIVN-401ビロスタットvirostat、PYN-17アルチレックスaltirex、アクチロンCPG-10101、シバシル、タルバシン、バビツキシマブ、MDX-1106ONO-4538、オグルファニドおよびVX-497メリメポジブmerimepodibからなる群から選択される1種または複数の化合物と組み合わせ得る。合成実施例化合物1、2、3、6、7および8を調製するための合成プロトコルは、文献において公知である。加えて、併用化合物それぞれを調製するための合成プロトコルを、下記の実施例において提供する。化合物1は、米国特許第7,754,720号に記載されているものなどの合成方法および中間体を使用して調製することができる。化合物1はまた、次の実施例に記載されているとおりに調製することができる。実施例15-{6-[2,4-ビストリフルオロメチルフェニル]ピリダジン-3-イル}メチル-2-2-フルオロフェニル-5H-イミダゾ[4,5-c]ピリジン1化合物104を、ジメトキシエタンDMEに溶かした。この溶液に、2,4-ビストリフルオロメチルtrifluromethylフェニルボロン酸105および2NのNa2CO3水溶液を加えた。生じた二相の混合物に、PdPPh34を加え、次いで、反応物を80°Cで72時間加熱した。反応物を室温に冷却し、Celiteで濾過し、そのCeliteをEtOAcで洗浄した。濾液を真空濃縮した。残渣をSiO26g上で、MeOH/CH2Cl2を使用して精製して、化合物を溶離した。そうして得られた化合物は、PPh3Oで汚染されていた。生成物を、1mmChromatotronプレート上で、1のステップで0から5のMeOH/CH2Cl2を用いて再精製した。純粋なフラクションを合わせ、真空濃縮し、次いで高真空で12時間乾燥させた。PPh3汚染のない、化合物1の遊離塩基11.8mgを得た。1HNMR300MHz,CD3ODδ6.20s,2,7.32m,3,7.52m,1,7.78d,1,7.89d,1,7.95s,2,8.15m,3,8.35d,1,9.12s,1;LC/MSMH=518。中間体化合物104を次のとおりに調製した。a.化合物102の調製市販の出発物質101のCHCl3中の溶液に、トリクロロイソシアヌル酸TCCAを60°Cで加えた。次いで、溶液を1.5時間撹拌し、冷却し、そしてHiFlo-Celiteで濾過した。濾液を濃縮し、真空で乾燥させた。収量は、化合物1025.037gであった。b.化合物104の調製化合物103のDMFジメチルホルムアミド中の溶液に、NaOHを加えた。化合物102をDMF20mLに溶かし、該溶液に徐々に加えた。反応物を3時間撹拌し、水で希釈し、EtOAcで抽出した。有機層をNa2SO4で乾燥させた。溶媒を除去し、生成物をジクロロメタンで再結晶化させた。収量は化合物1045.7gであった。米国特許出願第12/202319号米国特許出願公開第20100051763A1号に記載されているものなどの合成方法および中間体を使用して、化合物2は調製することができる。化合物2はまた、次の実施例に記載されているとおりに調製することができる。実施例2化合物2の調製ホスフィン酸エステル20623.7g、24.05mmolをCH3CN240mLに溶かし、0°Cに冷却した。ヨードトリメチルシラン17.4mL、122.3mmolを迅速な滴下ペースで加え、続いて、10分後に、2,6-ルチジン17.0mL、146.4mmolを加えた。反応混合物を室温に徐々に加温し、1時間撹拌し、次いで、0°Cに再び冷却し、2,6-ルチジン11.1mL、95.6mmolを、続いてMeOH24mLを加えた。溶液を真空濃縮し、粗製の残渣をHPLCによって精製して、化合物212.68gを収率55で得た。1HNMR300MHz,CDCl3δ8.35d,J=9.3Hz,1H,8.28s,1H,7.85s,1H,7.64d,J=9.6Hz,1H,7.35-7.22m,1H,7.02-6.89m,2H,5.85bs,1H,4.82-4.71m,2H,4.33bs,1H,4.28-3.99m,3H,4.16s,3H,3.57-3.28m,2H,2.90-2.78m,1H,2.63-2.50m,1H,2.08-1.91m,1H,1.91-170m,2H,1.70-1.13m,22H,1.37d,J=6.9Hz,6H;31PNMR121.4MHz,CD3ODδ42.4;LCMSM1:957.35g。中間体化合物206を、次のとおりに調製した。a.化合物203の調製化合物20117.42g、28.30mmolをTHF136mLに溶かし、0°Cに冷却した。溶液に、N-メチルモルホリン4.7mL、42.7mmolを加えた。0°Cでの10分の後に、i-ブチルクロロホルメート4.05mL、30.96mmolを滴加した。さらに1時間の後に、1-アミノ-2-ビニル-シクロプロピル-2,6-ジフルオロ-ベンジル-ホスフィン酸エチルエステル2028.94g、29.70mmolを、THF20mL中の溶液として徐々に加えた。懸濁物を室温に加温し、2時間後に、これをH2O400mLと酢酸エチル200mLとに分配した。水性層を酢酸エチル200mL×2で抽出し、合わせた有機層をHCl1N、225mLおよびH2O200mLで洗浄した。酸洗浄液および水洗浄液を合わせ、酢酸エチル175mL×2、100mL×2で逆抽出した。合わせた有機層をブライン400mLで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、真空濃縮して、ジエン20325.06gを粗製物の収率98.5として得た。LCMSM1:898.06。b.化合物204の調製化合物20312.91g、14.36mmolをCH2Cl21440mLに溶かし、溶液を30分間脱気した。溶液を40°Cに加熱し、グラブスGrubb’sG1触媒2.95g、3.59mmolを加えた。反応物を17時間還流させ、その後、トリス-ヒドロキシメチルホスフィン22.3g、18.0mmol、TEA50mL、35.9mmolおよびH2O400mLを加え、反応混合物をさらに16時間加熱還流した。反応混合物を室温に冷却し、2層を分離した。有機層をH2O400mLおよびブライン300mLで洗浄し、MgSO4で乾燥し、濃縮した。粗製の残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、大環状オレフィン2048.30gを収率66で得た。LCMSM1:870.09。c.化合物205の調製大環状オレフィン2047.34g、8.42mmolを酢酸エチル105mLに溶かし、アルミナに担持されているロジウムrhodiumonalumina5重量、2.945g、0.40重量を加えた。系を排気し、H21atm、3×でフラッシュした。3時間後にその系に、さらなるアルミナに担持されているロジウム5重量、842mg、0.10重量を加え、排気し、H21atm、3×でフラッシュした。さらに1時間の後に、懸濁物を濾過し、真空濃縮して、還元大環状化合物2056.49gを粗製収率88で得た。LCMSM1:872.04。d.化合物206の調製ブロシレート大環状化合物2056.49g、7.67mmolをN-メチルピロリジノン25.0mLに溶かし、8-クロロ-2-2-イソプロピルアミノ-チアゾール-4-イル-7-メトキシ-キノリン-4-オール2072.564g、7.33mmolを、続いてCs2CO34.40g、13.50mmolを加えた。混合物を65°Cに6時間加熱し、次いで、酢酸エチル200mLで希釈し、LiCl5、250mLで洗浄した。水性層を酢酸エチル100mL×2で抽出し、合わせた有機層をブライン150mLで洗浄し、Na2SO4/MgSO4で乾燥し、真空濃縮した。粗製の残渣をシリカゲルクロマトグラフィー酢酸エチル-メタノールを介して精製して、アミノチアゾール2064.39gを収率58で得た。LCMSM1:985.28。中間体化合物201は、次のとおりに調製することができる。e.化合物209の調製化合物2087.00g、28.55mmolおよびDABCO5.13g、45.94mmolをトルエン30mLに溶かした。塩化ブロシル10.22g、40.01mmolのトルエン11mL溶液を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応物をEtOAc210mLで希釈し、0.5NのHCl200mLを加えた。2層を分離し、水性層をEtOAc2×200mLで抽出した。合わせた有機層をブライン200mLで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗製の生成物をコンビフラッシュによって精製して、化合物20912.23gを収率92で得た。f.化合物210および212の調製化合物20912.2g、26.3mmolを4NのHCl/1,4-ジオキサン60mLで処理し、1時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、真空下で20分間乾燥させた。化合物210の粗製のアミンHCl塩をDMF150mLに溶かし、酸21114.2g、52.6mmolを加えた。HATU20.0g、52.6mmolおよびNMM13.5g、131.5mmolを加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応物をEtOAc300mLで希釈し、1NのHCl200mL、飽和NaHCO3、ブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濃縮した。粗製の生成物をコンビフラッシュによって精製して、化合物21215.1gを収率93で得た。g.化合物213の調製21212.8g、20.7mmolのCH2Cl250mL中の溶液に、1,4-ジオキサン中4NのHCl50mL、200mmolを加えた。反応混合物を室温で2時間撹拌し、濃縮し、真空下で20分間乾燥させ、次いでCH3CN50mLに溶かした。H2O中の飽和NaHCO350mLを加え、5分間撹拌した。新たに調製されたTHF50mL中のシクロペンチルクロロホルメートを加えた。反応は1時間以内に完了した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をEtOAcで希釈した。1NのHClを用いて、混合物をpH=2にし、2層を分離した。有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、そして濃縮して、粗製の化合物2133.18gを得た。h.化合物201の調製粗製のエステル2133.18g、5.07mmolをTHF25mL、H2O25mLに溶かし、次いで、MeOH6mLおよびLiOH660mg、25.4mmolを加えた。反応混合物を室温で1時間撹拌し、EtOAcで希釈した。1NのHClを用いて、反応混合物をpH2まで酸性化し、2層を分離した。水性層をEtOAc2×で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濃縮し、真空下で乾燥させて、酸2013.09gを得た。中間体8-クロロ-2-2-イソプロピルアミノ-チアゾール-4-イル-7-メトキシ-キノリン-4-オール207は、次のとおりに調製することができる。i.8-クロロ-4-ヒドロキシ-7-メトキシキノリン-2-カルボン酸215の調製メチル8-クロロ-4-ヒドロキシ-7-メトキシキノリン-2-カルボキシレート21436.5g、0.145molの、1:1のMeOH:THFの混合物全部で160mL中の溶液に、LiOH30.5g、0.725molのH2O80mL中の溶液を加えた。混合物を1時間室温で撹拌したが、そのとき、LCMS分析によって、カルボン酸への完全な変換が示された。揮発性物質を除去し、6Nの水性HClを使用して溶液のpHを6に調節することによって、反応物を後処理した。生じたゴム状の残渣を濾過し、凍結乾燥機で2日間乾燥させて、化合物21534.4g99.6を白色の固体として得た。EIMSm/z253.9[MH]。j.2-2-ジアゾ-l-オキソ-8-クロロ-7-メトキシキノリン-4-イルイソブチルカルボネート216の調製8-クロロ-4-ヒドロキシ-7-メトキシキノリン-2-カルボン酸21510.2g、0.04molのTHF400mL中の溶液に、トリエチルアミン12.3mL、0.088molおよびi-ブチルクロロホルメート11.6mL、0.088molを0°Cでアルゴン雰囲気下で加えた。混合物を0°Cで1時間撹拌したが、そのとき、LCMS分析によって、反応の完了が証明されて、所望の混合無水酸が得られた。EIMSm/z454.0[MH]。無水物の反応混合物に、ジエチルエーテル中の1Mのジアゾメタン溶液121mL、0.121molを、プラスチック製漏斗を介して0°Cで加えた。この混合物を室温まで加温させながらさらに2時間撹拌した。LCMSによる混合物の分析によって、反応の完了が証明された。隔膜を除去し、反応物をさらに20分間撹拌し、その後、溶媒を除去した。残渣をさらに高真空下で乾燥させて、化合物216を得、これを次のステップへと続けた。EIMSm/z377.9[MH]。k.8-クロロ-2-2-イソプロピルアミノチアゾール-4-イル-7-メトキシキノリン-4-オール207の調製0°Cに冷却された2-2-ジアゾ-l-オキソ-8-クロロ-7-メトキシキノリン-4-イルイソブチルカルボネート21615.2g、0.040molのTHF268mL中の溶液に、48HBr23mL、0.201molを15分間にわたって徐々に加えた。溶液を0°Cでさらに40分間撹拌したが、そのとき、LCMS分析によって、反応の完了が証明された。0°Cで1NのNaOH水溶液180mLを加えて水性層のpHを9に調節することによって、反応物を後処理した。層を分離して、水性層をEtOAc2×200mLで洗浄した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、MgSO4で乾燥した。溶媒を真空で除去して、黄色の固体17.7gを得た。EIMSm/z431.9[MH]。上記の反応から得られたブロモケトンの溶液をi-プロパノール270mLおよびイソプロピルイソ尿素9.4g、0.080molに懸濁させた。反応混合物を72°Cで32時間加熱した。反応物のLCMS分析によって、所望の生成物への完全な変換が証明された。反応物を室温に冷却し、生成物を溶液から沈殿させた。反応物を0°Cに12時間さらに冷却し、その後、濾過した。濾液をエーテルで洗浄し、凍結乾燥機で乾燥させて、化合物2078.03gをオレンジ色の固体として得た。1HNMR500MHz,CDCl3:δ8.21d,J=9Hz,1H,7.74s,1H,7.44d,J=10Hz,1H,7.07s,1H,4.05s,3H,3.92五重線,J=6Hz,1H,1.25d,J=7Hz,6H:EIMSm/z350.0[MH]。化合物3は、米国特許出願第12/215,605号米国特許出願公開第20090257978A1号に記載されているものなどの合成方法および中間体を使用して調製することができる。化合物3もまた、次の実施例に記載されているとおりに調製することができる。実施例3化合物3の調製化合物31512g、13mmolをTHF200mlに溶かし、H2O200ml中のLiOH11g、260mmolを、続いてMeOH200mlを加えた。混合物を室温で20時間撹拌し続けた。反応が完了したら、0°CでH2O中4NのHClを加えて、pHを7に調節した。混合物をEtOAc2×400mlで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させNa2SO4、真空濃縮して、化合物3を黄色の固体11g、93として得た。LC/MS=911.52M1。1HNMR300MHz,CD3ODδ7.95d,1H,7.90s,1H,7.48s,1H,7.31d,1H,5.42s,1H,4.37dd,1H,4.20m,2H,3.83-3.56m,7H,3.50m,2H,3.39m,2H,2.45m,1H,2.27m,1H,1.62m,2H,1.50m,1H,1.33m,2H,1.18m,1H,1.05m,8H,0.90m,3H,0.76m,11H,0.14-0.04m,2H。中間体化合物315を次のとおりに調製した。a.化合物301の調製アルゴンでパージされた乾燥している三つ口丸底フラスコ1000mLに、無水ジクロロメタン100mLおよびEt2Zn28mL、273mmolを0°Cで加えた注意:アルゴン供給源は、ニードルからであってはならない。適切なガラスアダプターだけを使用すること。第2の気泡管をフラスコに装着して、過剰な圧力形成を防ぐこともできる。次いで、シクロペンテン-3-オール10.0mL、119mmolをフラスコに滴加し大量のエタンガスが生じた、反応混合物を、ガスの発生が止まるまで撹拌した。次いで、ジヨードメタン22mL、242mmolを30分間にわたって滴加した。反応物を室温に加温し、アルゴンの正流下で一晩撹拌し続けたが、その時点で、TLC分析によって、出発アルコールの完全な消失が示された。次いで、反応物をCH2Cl2で希釈し、2MのHCl白色の沈澱物を完全に溶かすべきであるでクエンチした。二相の混合物を分離漏斗に注ぎ、有機層を収集した。化合物301を含有する物質100mLが残るまで、溶媒を減圧下で除去した。b.化合物302の調製無水ジクロロメタン525mLをフラスコに加え、続いて、トリエチルアミン34mL、245mmolを滴加した。反応物を窒素の正流下で室温で撹拌し続けたが、その時点で、ジスクシンイミジルカルボネート40.7g、159mmolをフラスコに少量ずつ加えた。TLC分析によって出発物質の完全な消失が示されるまで、反応物を撹拌した2~3日間。完了したら、反応混合物を1MのHCl200mL×2でクエンチし、H2O200mL×2で洗浄した。所望の物質を、CH2Cl2を使用して抽出し、合わせた有機層を、無水MgSO4を使用して乾燥させ、シリカプラグに通した。溶媒を減圧下で除去し、粗製物質を、フラッシュクロマトグラフィーを使用して精製してRf=0.33、1:1のHex/EtOAc、化合物30222g、75を得た:1HNMR300MHz,CDCl3:δ5.24t,1H,3.82s,4H,2.24m,2H,2.03d,2H,1.38m,2H,0.48m,1H,0.40m,1H。c.化合物304の調製2L三つ口丸底フラスコ内で機械攪拌機および添加漏斗を用いて、N-t-Boc-cis-4-ヒドロキシ-L-プロリンメチルエステル303100.0g、407.7mmolおよびDABCO1.5当量、68.6g、611.6mmolを無水トルエン200mLに溶かした。溶液を0°CにN2下で冷却した後に、4-ブロモ-ベンゼンスルホニルクロリド1.3当量、135.6g、530.0mmolのトルエン300mL中の溶液を添加漏斗を介して60分間かけて加えた。反応混合物を撹拌し、室温に一晩16時間加温した。混合物を1MのNa2CO3水溶液2Lにゆっくりと注ぎ、生成物をEtOAc2Lで抽出した。有機相を0.5NHCl2L、H2O1Lおよびブライン1Lで洗浄した後に、乾燥させMgSO4、濃縮して、黄色の油性のブロシレート生成物195.45gを得た。上記のブロシレート407.7mmolのジクロロメタン300mL中の溶液に、ジオキサン中4.0MのHCl500mL、5当量を徐々に加え、生じた溶液を室温で2時間撹拌した。エーテル500mLを反応混合物に加えた後に、混合物を15分間撹拌し、濾過によって、白色の沈澱物を収集した。固体をエーテルおよびヘキサンで洗浄し、次いで、真空下で一晩乾燥させて、化合物304のHClアミン塩153.0g、381.8mmolを2ステップで収率94で得た。d.化合物305の調製Boc-tert-ブチル-グリシン97.0g、420.0mmolのDMF200mLおよびDCM200mL中の溶液に、HATU217.76g、572.7mmolおよびHunig塩基126mL、1145.4mmolを室温で加えた。混合物を室温で20分間撹拌した後に、上記のHCl塩153.0g、381.8mmolおよびHunig塩基126mL、1145.4mmolのDMF200mLおよびジクロロメタン200mL中の溶液を上記の酸混合物に一度に加えた。LCMSによって監視しながら、反応混合物を室温で3時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを減圧下で除去し、形成した白色の固体を濾別した。残りのDMF溶液を酢酸エチル1Lで希釈し、3LiCl水溶液3×650mL、飽和NH4Cl2×500mL、0.5NのHCl水溶液2×600mL、ブライン500mL、飽和NaHCO33×500mLおよびブライン500mLで連続的に洗浄した。生じた有機フラクションを乾燥させMgSO4、濃縮して、化合物305111gを得た。e.化合物306の調製メチルエステル305120g、207.8mmolのTHF300mL、MeOH75mL中の溶液に、LiOH26.18g、623.4mmolのH2O150mL中の溶液を加えた。溶液を室温で4時間撹拌した。混合物を氷浴中で冷却し、その間に、3NのHClを用いてpH約5.5に酸性化し、10分間撹拌し、生じた白色の固体を濾過によって収集した。固体をさらなる水、エーテルおよびヘキサンで洗浄した。固体を真空下、40°Cで一晩乾燥させて、酸30695.78g82を得た。f.化合物307の調製カルボン酸30681.4g、144.27mmolのDMF200mLおよびジクロロメタン200mL中の溶液に、HATU82.3g、216.4mmolおよびHunig塩基47.5mL、432.8mmolを室温で加えた。混合物を20分間室温で撹拌した後に、アミン158.7mmolおよびHunig塩基47.5mL、1145.4mmolのDMF200mLおよびジクロロメタン200mL中の溶液を、上記の酸混合物に一度に加えた。反応混合物を室温で3時間撹拌し、LCMSによって監視した。混合物を減圧下で濃縮してジクロロメタンを除去した後に、形成した白色の固体を濾別した。残りのDMF溶液を酢酸エチル600mLで希釈し、3LiCl水溶液2×550mL、飽和NH4Cl500mL、1NのHCl水溶液500mL、飽和NaHCO3500mLおよびブライン300mLで連続的に洗浄した。生じた有機フラクションを乾燥させNa2SO4、濃縮して化合物307111gを得た。g.化合物308の調製化合物307を、ジオキサン中4NのHCl300mLに室温で溶かし、2時間撹拌した。次いで、これを真空下で濃縮し、ジクロロメタン2×200mLと共蒸発させてco-evaporated乾燥させた。残渣をEtOAc600mLおよび飽和NaHCO3水溶液1Lに溶かした。これを激しく撹拌した。10分後に、炭酸ビシクロ[3.1.0]ヘキサ-3-イルエステル2,5-ジオキソ-ピロリジン-1-イルエステル30241.4g、173.1mmolを一度に加えた。生じた混合物をさらに30分間撹拌した後に、有機層を収集し、ブライン500mLで洗浄し、乾燥させNa2SO4、濃縮した。酢酸エチル/ヘキサンを用いるシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーによって、粗製の生成物を精製して、化合物30894.44g92を得た。h.化合物310の調製1-2-アミノ-3-クロロ-4-ヒドロキシ-フェニル-エタノン30970.7g、354mmolを48HBr水溶液500mL中、110°Cで72時間撹拌した。撹拌しながら、混合物を0°Cに冷却した後に、固体を濾過し、水で洗浄した。生じた固体を飽和NaHCO3溶液約350mLで摩砕し、濾過し、水で洗浄し、真空下で乾燥させて、粗製310約40g61を暗茶色の固体として得た。LC/MS=186M1。i.化合物311の調製1-2-アミノ-3-クロロ-4-ヒドロキシ-フェニル-エタノン31040g、215mmolをDMF360mlに溶かした。炭酸セシウム140g、430mmolを、続いて、ブロモアセトアルデヒドジメチルアセタール54.5g、323mmolを加えた。次いで、混合物を65°Cで24時間激しく撹拌した。室温に冷却したら、EtOAc1LおよびH2O1Lを混合物に加えた。有機層をEtOAc1×400mlで抽出した。合わせた有機層を3LiCl水溶液2×1L、ブラインで洗浄し、乾燥させNa2SO4、真空濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、化合物311を白色の固体39g、67として得た。j.化合物312の調製1-[2-アミノ-3-クロロ-4-2,2-ジメトキシ-エトキシ-フェニル]-エタノン31113g、47.5mmolおよびイソプロピルアミノチアゾール-4-カルボン酸臭化水素酸塩12.64g、47.5mmolのピリジン150ml中の混合物に、オキシ塩化リン9.47g、61.8mmolを-40°Cで徐々に加えた。次いで、混合物を0°Cで4時間撹拌した。反応が完了したら、H2O30mlを混合物に滴加した。次いで、混合物を0°Cでさらに15分間撹拌した。混合物を真空濃縮した。残渣をEtOAcで希釈し、飽和NaHCO3水溶液で洗浄した。有機層を乾燥させNa2SO4、真空濃縮した。残渣をCH2Cl2に溶かし、ヘキサンを溶液に徐々に加えると、黄色の固体が急に析出し始めた。もはや母液中に生成物が残されていなくなるまで、さらなるヘキサンを加えて、化合物31218g、85を得た。k.化合物313の調製2-イソプロピルアミノ-チアゾール-4-カルボン酸[6-アセチル-2-クロロ-3-2,2-ジメトキシ-エトキシ-フェニル]-アミド31218g、40.7mmolをトルエン400mlに懸濁させた。NaH2.4g、61mmolを激しく撹拌されている混合物に加えたが、その間、H2発生を監視した。混合物は、加熱還流している間に透明な溶液になった。3時間還流させた後に、反応が完了した。混合物を室温に冷却した。AcOH69.2mmolのH2O中の溶液3容を、混合物に加えた。0°Cで1時間激しく撹拌した後に、濾過によって、固体を収集し、H2Oですすいだ。湿ったケーキを高真空下で恒量まで乾燥させて、化合物31315g、86を得た。l.化合物314の調製ブロシレート中間体30315g、35mmolおよび化合物31327.5g、38.5mmolのNMP200ml中の混合物に、炭酸セシウム25.1g、77mmolを加えた。混合物を65°Cで5時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、EtOAc600mlおよび3LiCl水溶液600mlを混合物に加えた。有機層を3水性LiCl1×600ml、ブラインで洗浄し、乾燥させNa2SO4、真空濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、所望のメチルエステルを黄色の固体23.6g、75として得た。LC/MS=900.13M1。m.化合物315の調製メチルエステル31423.6g、26mmolを氷酢酸200mlに溶かし、H2O中1.4NのHCl75mlを溶液に加えた。混合物を60°Cで1時間撹拌した。反応が完了したら、混合物を濃縮して溶媒を除去し、トルエン×2と共に共蒸発させて、残りの酢酸を除去した。次いで、残渣をEtOAc500mlおよび飽和NaHCO3水溶液混合物を中和するのに十分なほどに溶かしたが、その間、CO2発生を監視した。有機層をブラインで洗浄し、乾燥させNa2SO4、かつ真空濃縮した。残渣を高真空下で1時間さらに乾燥させて、そのまま次のステップのために使用した。粗製物をCH2Cl2360mlに溶かし、モルホリン3.4g、39mmolおよびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム7.2g、34mmolを混合物に0°Cで加えた。次いで、氷酢酸0.47g、7.8mmolを混合物に滴加した。反応は0°Cでは10分間で完了した。飽和NaHCO3水溶液を加えて、反応物をクエンチした。さらに20分間撹拌した後に、有機層をブラインで洗浄し、乾燥させNa2SO4、真空濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、所望のアミン生成物315を黄色の固体12g、50として得た。LC/MS=924.63M1。化合物4は、次の実施例に記載されているとおりに調製することができる。実施例4化合物4の調製ジアステレオ異性体混合物414をヘプタンおよびイソプロパノール70:30、混合溶媒4.5mL中に230mgに溶かし、次の条件下でキラルカラム分離に供した:カラム:ChiralcelOD-H、2×25cm溶媒系:ヘプタン70およびイソプロパノール30流速:6mL/分1ラン当たりの負荷体積:2.5mL化合物4は、20分の保持時間を有した。1HNMR300MHz,CDCl3:δ8.00s,1H,7.1-7.3m,5H,6.83d,1H,6.71d,1H,6.09brs,2H,5.95s,1H,5.04m,2H,4.67q,1H,4.35-4.52m,2H,4.00m,2H,2.74m,1H,1.40d,3H,1.2-1.312H,0.98s,3H。31PNMR121.4MHz,CDCl3:δ2.72s。続いて、化合物4を、X線品質の結晶のために、MTBEから再結晶化させた。化合物4aは、保持時間50分を有した。1HNMR300MHz,CDCl3:δ7.98s,1H,7.1-7.3m,5H,6.83d,1H,6.73d,1H,6.02brs,2H,5.95s,1H,5.08d,1H,5.00m,1H,4.68q,1H,4.38-4.56m,2H,3.98m,2H,2.74m,1H,1.40d,3H,1.2-1.312H,0.99s,3H。31PNMR121.4MHz,CDCl3:δ2.61s。中間体ジアステレオ異性体混合物414を次のとおりに調製した。a.化合物402の調製化合物40122.0g、54.9mmol、J.O.C.、2004年、6257頁に記載されている手順に従って調製のメタノール300mL中の溶液に、塩化アセチル22mLを0°Cで、滴下漏斗を使用して、30分間かけて滴加し、次いで、室温で16時間撹拌した。混合物を濃縮し、酢酸エチル400mLに再び溶かし、氷冷の2NのNaOHで洗浄し、乾燥するまで濃縮して、粗製のメチルエーテル402をオイルとして得た。MS=437.2MNa。b.化合物403の調製化合物402のメタノール300mL中の溶液に、メタノール中0.5Mのナトリウムメトキシド溶液20mL、10mmolを加え、室温で16時間撹拌した。反応物をジオキサン中4.0NのHCl溶液2.5mL、10mmolでクエンチした。次いで、混合物を濃縮し、粗製の化合物403を得た。MS=201.0MNa。c.化合物404の調製化合物403、TritronX-405水中70、6.0g、50KOH水中、85gのトルエン500mL中の混合物を、Dean-Starkトラップを取り付けて加熱還流した。水25mLを1時間収集した後に、塩化ベンジル33g、260mmolを加え、撹拌しながら16時間還流を続けた。次いで、混合物を冷却し、酢酸エチル400mLと水300mLとに分配した。有機層を水300mLで洗浄し、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー20EtOAc/ヘキサンによって精製して、メチルエーテル404をオイル22.0g、3ステップで89として得た。1HNMR300MHz,CDCl3:δ7.3m,15H,4.5-4.9m,7H,4.37m,1H,3.87d,1H,3.56m,2H,3.52s,3H,1.40s,3H。d.化合物405の調製40422.0g、49.0mmolの酢酸110mL中の溶液に、3Mの硫酸濃硫酸4.8gを水24mLと混合することによって調製を加え、70°Cで8時間撹拌した。混合物を20mLの体積まで濃縮し、酢酸エチルと氷冷の2NのNaOHとに分配した。酢酸エチル層を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー約35EtOAc/ヘキサンによって精製して、化合物405をオイル17.0g、80として得た。MS=457.2MNa。e.化合物406の調製化合物40545g、104mmolのDMSO135mL中の溶液に、無水酢酸90mL、815mmolを室温、アルゴン下で滴加した。混合物を室温で16時間撹拌し、次いで、撹拌しながら氷水1Lに注いだ。氷が完全に溶けた後に30分、酢酸エチル500mLを加えた。有機層を分離した。この抽出プロセスを3回3×500mL繰り返した。有機抽出物を合わせ、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー20EtOAc/ヘキサンによって精製して、化合物406をオイル39g、88として得た。1HNMR300MHz,DMSO-d6:δ7.3m,15H,4.4-4.8m,7H,4.08d,J=7.5Hz,1H,3.75dd,J=2,4,11.4Hz,1H,3.64dd,J=5.4,11.4Hz,1H,1.51s,3H。f.化合物407の調製乾燥している、アルゴンパージされた丸底フラスコ100mLに、7-ブロモ-ピロロ[2,1-f][1,2,4]トリアジン-4-イルアミン234mg、1.10mmolWO2007056170号に従って調製および無水THF1.5mLを加えた。次いで、TMSCl276μL、2.2mmolを加え、反応混合物を2時間撹拌した。フラスコをドライアイス/アセトン浴-78°Cに入れ、BuLi2.5mL、4.0mmol、ヘキサン中1.6Mを滴加した。1時間後に、化合物406432.5mg、1.0mmolのTHF中の溶液を0°Cに冷却し、次いで、反応フラスコに滴加した。-78°Cで1時間撹拌した後に、フラスコを0°Cに加温し、飽和NH4Cl5mLを加えて、反応物をクエンチした。有機物を、EtOAc3×10mLを使用して抽出し、合わせた有機層を、MgSO4を使用して乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、粗製物質を、フラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAcを使用して精製した。化合物407560mg90を2種のアノマーの混合物として単離した。LC/MS=567.2MH。1HNMR300MHz,CDCl3:δ7.85m,1H,7.27m,15H,7.01m,1H,6.51m,1H,4.66m,8H,4.40m,2H,3.79m,3H,1.62s、1つのアノマーからの2’-CH3,1.18s、他のアノマーからの2’-CH3。g.化合物408の調製化合物4071g、1.77mmolのCH2Cl220mL中の溶液に0°Cで、TMSCN1.4mL、10.5mmolおよびBF3-Et2O1mL、8.1mmolを加えた。反応混合物を0°Cで0.5時間撹拌し、次いで、室温でさらに0.5時間撹拌した。反応物をNaHCO3で0°Cでクエンチし、CH3CO2Etで希釈した。有機相を分離し、ブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。CH3CO2Et-ヘキサン1:1から2:1で溶離するシリカゲルのクロマトグラフィーによって、残渣を精製して、化合物408620mg、61を異性体混合物として得た。MS=576.1MH。h.化合物409の調製化合物408150mg、0.26mmolのCH2Cl24mL中の溶液に-78°Cで、BCl32mL、CH2Cl2中1Mを加えた。反応混合物を-78°Cで1時間撹拌した。TEA2mLおよびMeOH5mLを滴加することによって、反応物を-78°Cでクエンチした。混合物を室温に加温し、蒸発させ、MeOHと数回、共蒸発させた。残渣をNaHCO3H2O10mL中に1gで処理し、濃縮し、HPLCによって精製して、所望の生成物である化合物40948mg、60を得た。1HNMR300MHz,D2O:δ7.74s1H,6.76d,J=5Hz,1H,6.73d,J=5Hz,1H,4.1m,1H,3.9m,1H,3.8m,2H,0.84s,3H。MS=305.9MH。他のα-アノマーもまた得られた9mg、11:1HNMR300MHz,D2O:δ7.70s1H,6.8d,J=5Hz,1H,6.7d,J=5Hz,1H,4.25d,J=9Hz,1H,4.07m,1H,3.85m,1H,3.7m,1H,1.6s,3H。MS=306.1MH。i.化合物412の調製化合物410市販、4.99g、23.8mmolをジクロロメタン100mLに溶かし、アラニンイソプロピルエステルヒドロクロリド4113.98g、23.8mmolを加えた。生じた透明な溶液を-78°Cに30分間冷却した。トリエチルアミン6.63mL、47.5mmolを15分間かけて滴加した。次いで、混合物を室温に加温した。16時間後に、溶媒をアルゴン流によって除去した。残渣をMTBE25mLに再び溶かし、不溶性物質をアルゴン下で濾過することによって除去した。濾液をアルゴン流によって濃縮し、粗製の生成物412をさらに精製することなく、次の反応で使用した。1HNMR300MHz,CDCl3:7.1-7.4m,5H,5.1m,1H,4.35m,1H,4.15m,1H,1.5d,3H,1.2m,6H.31PNMR121.4MHz,CDCl3:δ7.8および8.42s。j.化合物413の調製化合物4091.03g、3.37mmolのリン酸トリメチル2.0mLおよびTHF20mL中の溶液に、N-メチルイミダゾール1.5g、18.3mmolを0°Cで加えた。化合物4122.5g、8.18mmolのTHF3mL中の溶液を滴加した。生じた混合物を1.5時間にわたって室温に加温した。混合物を酢酸エチルと水とに分配した。酢酸エチル層を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー酢酸エチルから10エタノール/酢酸エチルによって精製して、化合物4131.15g59をリンphosphorousでの1:1のジアステレオ異性体混合物として得た。1HNMR300MHz,CDCl3:δ8.02s,1H,7.1-7.4m,5H,6.82d,1H,6.72d,1H,6.08brs,2H,5.03m,1H,4.6m,1H,4.4m,2H,3.9-4.1m,3H,1.31d,3H,1.2m,6H,0.83s,3H。31PNMR121.4MHz,CDCl3:δ2.78s。MS=575.1MH。k.化合物414の調製化合物413175mg、0.305mmolのアセトニトリル2mL中の溶液に、N,N-ジメチルホルムアミドジメチルアセタール41μL、0.34mmol、1.1当量を加え、室温で1時間撹拌した。反応は完了したLCMSによって。次いで、混合物を乾燥するまで濃縮した。残渣に、DCC250mg、1.21mmol、4当量、アセトニトリル5mLおよびイソ酪酸55mg、58μL、2当量を加えた。混合物を室温で48時間撹拌した。水0.2mLおよびトリフルオロ酢酸0.1mLを0°Cで加え、室温で64時間撹拌した。重炭酸ナトリウム500mgを0°Cで加えた。混合物を室温で0.5時間撹拌し、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー5メタノール/ジクロロメタンによって精製して、化合物414144mg73をリンphosphorusでの1:1ジアステレオ異性体混合物として得た。1HNMR300MHz,CDCl3:δ8.00s,1H,7.1-7.4m,5H,6.83d,1H,6.712d,1H,5.97brs,2H,5.94d,1H,5.072d,1H,5.01m,1H,4.68m,1H,4.4m,2H,4.0m,2H,2.74m,1H,1.42d,3H,1.2-1.312H,0.98および0.992s,3H。31PNMR121.4MHz,CDCl3:δ2.56および2.652s.MS=645.1MH。化合物5は、次の実施例に記載されているとおりに調製することができる。実施例55:5-3,3-ジメチルブタ-1-イン-1-イル-3-[cis-4-ヒドロキシ-4-{[3S-テトラヒドロフラン-3-イルオキシ]メチル}シクロヘキシル{[1R-4-メチルシクロヘキサ-3-エン-1-イル]カルボニル}アミノ]チオフェン-2-カルボン酸5の調製1-メチル-ピロリジン-2-オン3mL中の5-3,3-ジメチル-ブタ-1-イニル-3-[1R-4-メチル-シクロヘキサ-3-エンカルボニル-1-オキサ-スピロ[2.5]オクタ-6-イル-アミノ]チオフェン-2-カルボン酸メチルエステル508132mg、0.28mmolおよびS-テトラヒドロ-フラン-3-オール509247mg、2.8mmolをカリウムtert-ブトキシド251mg、2.24mmolで処理し、密閉し、40°Cに16時間加熱した。冷却した後に、混合物をpH3まで、2MのHClで処理し、酢酸エチルと水とに分配し、分離した。有機層を5塩化リチウム溶液、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過し、濃縮した後に、残渣をCH3CN0.1TFA/H2O0.1TFAを用いるHPLCによって精製して、化合物5107mg収率70を白色の粉末として得た:MSm/z:544.0[MH];HPLC保持時間4.22分2~98のアセトニトリル:水、トリフルオロ酢酸0.05含有。中間体化合物508は、次のとおりに調製した。a.化合物502の調製ジクロロメタン25mL中のS-3-ヒドロキシ-4,4-ジメチルジヒドロフラン-23H-オン2.60g、20mmolおよびジイソプロピルエチルアミン5.2mL、30mmolを-10°Cに冷却し、塩化アクリロイル2.03mL、25mmolで滴下処理し、2時間撹拌した。1MのHCl20mLを加え、有機層を重炭酸ナトリウムおよび水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー10~40EtOAc、ヘキサンによって、所望のS-4,4-ジメチル-2-オキソテトラヒドロフラン-3-イルアクリレート5012.09g収率57を透明なオイルとして得た。ジクロロメタン17.5mLおよびヘキサン2.5mL中のS-4,4-ジメチル-2-オキソテトラヒドロフラン-3-イルアクリレート5012.05g、11.1mmolを-10°Cに冷却し、四塩化チタン2.2mL、ジクロロメタン中1M、2.2mmolで処理した。黄色の溶液を15分間撹拌し、イソプレン1.67mL、16.7mmolで5分間にわたって滴下処理した。2時間撹拌した後に、追加の分割のイソプレン1.67mL、16.7mmolを加え、反応混合物を-10から0°Cで3.5時間撹拌した。反応混合物を塩化アンモニウム飽和水溶液でクエンチした。水および酢酸エチル:ヘキサン1:1を加えた。有機層を分離し、水性層を再び酢酸エチル:ヘキサン1:1で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー10~50EtOAc:Hex、80gカラムによって精製して、R-S-4,4-ジメチル-2-オキソテトラヒドロフラン-3-イル4-メチルシクロヘキサ-3-エンカルボキシレート5021.30g収率46を透明なオイルとして得た。b.化合物503の調製THF10mL、水1mLおよびメタノール1mL中のR-S-4,4-ジメチル-2-オキソテトラヒドロフラン-3-イル4-メチルシクロヘキサ-3-エンカルボキシレート5021.30g、5.15mmolを水酸化リチウム一水和物2.16g、51.5mmolで処理し、撹拌しながら50°Cに加温した。1時間後に、反応混合物を1MのHClで処理した。混合物をヘキサン:THF10:1で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、白色の粉末としてのR-4-メチルシクロヘキサ-3-エンカルボン酸5030.738g定量的収量にした。c.化合物504の調製トルエンから蒸発させることによって共沸乾燥させたR-4-メチルシクロヘキサ-3-エンカルボン酸503371mg、2.65mmolを三塩基性リン酸カリウム1.13g、7.94mmolで処理し、ジクロロメタン7.6mLに懸濁させ、ジメチルホルムアミド4滴で処理した。反応混合物を0°Cに冷却し、塩化オキサリル0.75mL、7.9mmolで滴下処理した。反応混合物を撹拌しながら、周囲温度に2時間加温した。固体を濾過した後に、溶液を濃縮し、ヘキサンで処理し、再び濃縮して、R-4-メチルシクロヘキサ-3-エンカルボニルクロリド504を薄黄色のオイルとして得、これを直ちに次のステップで使用した。d.化合物506の調製R-4-メチルシクロヘキサ-3-エンカルボニルクロリド5042.65mmol、5-3,3-ジメチル-ブタ-1-イニル-3-1,4-ジオキサ-スピロ[4.5]デカ-8-イルアミノ-チオフェン-2-カルボン酸メチルエステル505250mg、0.66mmolおよび三塩基性リン酸カリウム562mg、2.65mmolをジクロロエタン1.7mLに懸濁させ、蓋で密閉し、90°Cに加熱した。16時間後に、反応混合物を冷却し、酢酸エチルと水とに分配した。有機層を分離し、水性層を再び酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー10~40EtOAc:ヘキサンによって、所望の5-3,3-ジメチル-ブタ-1-イニル-3-[1,4-ジオキサ-スピロ[4.5]デカ-8-イル-1R-4-メチル-シクロヘキサ-3-エンカルボニル-アミノ]チオフェン-2-カルボン酸メチルエステル506220mg収率67をベージュ色の泡として得た。e.化合物507の調製5-3,3-ジメチル-ブタ-1-イニル-3-[1,4-ジオキサ-スピロ[4.5]デカ-8-イル-1R-4-メチル-シクロヘキサ-3-エンカルボニル-アミノ]-チオフェン-2-カルボン酸メチルエステル506219mg、0.438mmolをTHF3.5mLに溶かし、4MのHCl1.75mL、7.01mmolで処理した。反応混合物を45°Cに加熱し、2時間撹拌した。酢酸エチルを加え、有機層を分離し、次いで、水、重炭酸ナトリウム飽和水溶液、水およびブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、白色の泡としての所望の5-3,3-ジメチル-ブタ-1-イニル-3-[1R-4-メチル-シクロヘキサ-3-エンカルボニル-4-オキソ-シクロヘキシル-アミノ]-チオフェン-2-カルボン酸メチルエステル5070.190g収率95にした。f.化合物508の調製DMSO1.5mL中のトリメチルスルホキソニウムクロリド79mg、0.62mmolを水素化ナトリウム21mg、60油分散物、0.53mmolで処理し、周囲温度で10分間撹拌した。THF1mL0.5mL中の5-3,3-ジメチル-ブタ-1-イニル-3-[1R-4-メチル-シクロヘキサ-3-エンカルボニル-4-オキソ-シクロヘキシル-アミノ]-チオフェン-2-カルボン酸メチルエステル507を滴加し、反応混合物を45分間撹拌した。オレンジ色の溶液をpH3まで5クエン酸で処理し、水と酢酸エチルとに分配した。有機層を分離し、水性層を再び酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を5LiCl、水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過および濃縮した後に、残渣をフラッシュクロマトグラフィー20~75EtOAc:ヘキサンによって精製して、5-3,3-ジメチル-ブタ-1-イニル-3-[1R-4-メチル-シクロヘキサ-3-エンカルボニル-1-オキサ-スピロ[2.5]オクタ-6-イル-アミノ]-チオフェン-2-カルボン酸メチルエステル5080.134g収率70を白色の粉末として得た。化合物6は、米国特許出願第12/779,023号米国特許出願公開第20100310512A1号に記載されているものなどの合成方法および中間体を使用して調製することができる。化合物6はまた、次の実施例に記載されているとおりに調製することもできる。実施例61-{3-[6-9,9-ジフルオロ-7-{2-[5-2-メトキシカルボニルアミノ-3-メチル-ブチリル-5-アザ-スピロ[2.4]ヘプタ-6-イル]-3H-イミダゾール-4-イル}-9H-フルオレン-2-イル-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル]-2-アザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-カルボニル}-2-メチル-プロピル-カルバミン酸メチルエステル6の調製3-[6-9,9-ジフルオロ-7-{2-[5-2-メトキシカルボニルアミノ-3-メチル-ブチリル-5-アザ-スピロ[2.4]ヘプタ-6-イル]-3H-イミダゾール-4-イル}-9H-フルオレン-2-イル-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル]-2-アザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-カルボン酸tert-ブチルエステル614115mg、0.138mmolをDCM2mLに溶かし、ジオキサン中のHCl4M、2mLを加え、室温での撹拌を続けた。20分後に、全ての揮発性物質を真空で除去した。粗製物質をさらに精製することなく次のステップで使用した。粗製物質をDMF1.5mLに溶かし、DIEA53.4mg、0.414mmolを加えた。2-Lメトキシカルボニルアミノ-3-メチル-酪酸61124.2mg、0.138mmol、HATU52.4mg、0.138mmolおよびDIEA17.8mg、0.138mmolのDMF1mL中の溶液を加えた。反応物を室温で撹拌した。20分後に、反応物をEtOAcで希釈し、重炭酸塩水溶液、LiCl水溶液5、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過し、溶媒を真空で除去して、粗製物質を得、これをRP-HPLC溶離剤:水/MeCN、0.1TFA含有によって精製して、化合物676mgを得た。LCMS-ESI:C49H54F2N8O6での算出値:888.9M;実測値:890.0MH。1H-NMR:300MHz,dmso-d6δ:8.20-7.99m,8H,7.73s,2H,7.37-7.27m,2H,5.25dd,J=7.2Hz,1H,4.78s,1H4.54s,1H,4.16m,1H,4.02m,1H,3.87m,1H,3.74m,1H,3.55s,3H,3.53s,3H,2.75m,1H,2.25m,2H,2.09-2.04m,2H,1.88-1.79m,2H,1.54m,1H,0.94-0.77m,15H0.63m,4Hppm。19F-NMR:282MHz,dmso-d6δ:-109.1ppm[-74.8ppmTFA]。中間体化合物614を次のとおりに調製した。a.化合物4-メチレン-ピロリジン-1,2-ジカルボン酸1-ベンジルエステル2-メチルエステル602の調製4-メチレン-ピロリジン-1,2-ジカルボン酸1-tert-ブチルエステル60110.0g、44mmolをMeOH75mLに室温で溶かし、HClジオキサン中4M、75mLを加えた。室温での撹拌を4時間続けた。全ての揮発性物質を真空で除去し、ベージュ色の固体を得た。粗製物質をDCM100mLに懸濁させ、N-メチルモルホリン13.3g、132mmolを加えた。混合物を0°Cに冷却し、撹拌しながら、クロロギ酸ベンジル8.26g、48.4mmolを加えた。30分後に、反応物を室温に加温し、溶液を水および水性HCl1Mで洗浄した。溶液を硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過し、溶媒を蒸発させて、粗製の生成物を得、これをシリカゲルクロマトグラフィー溶離剤:EtOAc/ヘキサンによって精製して、化合物60210.2gを得た。LCMS-ESI:C15H17NO4での算出値:275.3M;実測値:276.4MH。b.化合物603および604の混合物の調製オーブン乾燥させた三つ口丸底フラスコに、窒素注入口アダプターおよび250mL添加漏斗を備え付けた。3番目の口は、隔膜で密閉した。フラスコに撹拌棒、ジクロロメタンdichlorormethane120mLおよびジエチル亜鉛ヘキサン中1.0M、118mL、118mmolを入れ、次いで、氷浴中で0°Cに冷却した。添加漏斗にジクロロメタン40mLおよびトリフルオロ酢酸9.1mL、118mmolを入れた。ジエチル亜鉛溶液を0°Cに冷却した後に約25分、トリフルオロ酢酸溶液を20分かけて撹拌されている反応混合物に滴加した。0°Cでさらに20分間撹拌した後に、ジヨードメタン9.5mL、118mmolを4分間かけて徐々に加えた。さらに20分後に、4-メチレン-ピロリジン-1,2-ジカルボン酸1-ベンジルエステル2-メチルエステル6028.10g、29.4mmolをジクロロメタン30mL中でカニューレによって加えた。次いで、4-メチレン-ピロリジン-1,2-ジカルボン酸1-ベンジルエステル2-メチルエステルを含有したフラスコをさらなるジクロロメタン10mLですすぎ、この溶液をまた、カニューレによって反応混合物に移した。反応混合物を室温に加温し、110時間約5日間撹拌し、その後、反応物を、飽和水性塩化アンモニウム約150mLでクエンチした。フラスコの内容物を、飽和水性重炭酸ナトリウム800mLを含有する2L分離漏斗に徐々に注いだ。水性相を酢酸エチル300mLで3回抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して、化合物603および604の混合物を得た。c.化合物603の調製サブパートbからの粗製物質を3:1:1のTHF/水/アセトン165mLに溶かし、次いで、N-メチルモルホリン-N-オキシド3.45g、29.4mmolおよび四酸化オスミウム水中4重量、5mL、0.818mmolで処理した。室温で7時間撹拌した後に、反応物を1Mのチオ硫酸ナトリウム水溶液約100mLでクエンチした。次いで、フラスコの内容物を、水約300mLを含有する1L分離漏斗に注いだ。水性相をジクロロメタン300mLで3回抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。粗製の残渣をシリカカラムクロマトグラフィー5から45EtOAc/ヘキサンによって精製して、5-アザ-スピロ[2.4]ヘプタン-5,6-ジカルボン酸5-ベンジルエステル6-メチルエステル603を透明なオイル5.54g、19.15mmol、65として得た。1HNMRCDCl3δ7.36-7.29m,5H,5.21-5.04m,2H,4.56-4.47m,1H,3.75s,1.5H,3.60m,1.5H,03.51-3.37m,2H,2.32-2.25m,1H,1.87-1.80m,1H,0.64-0.51m,4H。d.5-アザ-スピロ[2.4]ヘプタン-5,6-ジカルボン酸5-ベンジルエステル606の調製5-アザ-スピロ[2.4]ヘプタン-5,6-ジカルボン酸5-ベンジルエステル6-メチルエステル603244mg、0.840mmolをTHF2.0mL/MeOH1.5mLに溶かした。LiOH35.5mg、0.84mmolの水溶液を加え、室温での撹拌を続けた。3時間後に、反応物を水性HCl1Mで中和し、有機溶媒を真空で除去した。粗製の混合物を水およびEtOAcで希釈し、有機層を収集した。全ての揮発性物質を真空で除去し、粗製の酸606をさらに精製することなく使用した。LCMS-ESI:C15H17NO4での算出値:275.3M;実測値:276.3MH。e.2,7-ジブロモ-9,9-ジフルオロ-9H-フルオレン608の調製2,7-ジブロモ-フルオレン-9-オン6074.0g、11.8mmolをデオキソフルオルdeoxofluor12mLに室温で懸濁させ、EtOH4滴を添加した。撹拌された懸濁物をT=90°Cで24時間加熱した注意:急速で激しい発熱が生じ得るので、上記のとおりの高温でのデオキソフルオルの使用には注意すること。反応物を室温に冷却し、重炭酸ナトリウムを含有する氷に注いだ。固体が形成し、それを濾過によって収集した。粗製物質をEtOAcに入れ、水性HCl1Mおよびブラインで洗浄した。溶液を硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過し、溶媒を蒸発させて、粗製の生成物を得、これをシリカゲルクロマトグラフィー溶離剤:EtOAc/ヘキサンによって精製して、6083.2gを得た。19F-NMR:282MHz、dmso-d6δ:-111.6ppm。次のステップでその物質を使用する前に、これをEtOAc中の溶液として炭にさらした。f.5-アザ-スピロ[2.4]ヘプタン-5,6-ジカルボン酸5-ベンジルエステル6-[2-7-ブロモ-9,9-ジフルオロ-9H-フルオレン-2-イル-2-オキソ-エチル]エステル609の調製2,7-ジブロモ-9,9-ジフルオロ-9H-フルオレン608372mg、1.04mmol、PdPPh3430.0mg、0.026mmol、PdCl2PPh3218.2mg、0.026mmol、AsPPh335.0mgをジオキサン10mLにアルゴン雰囲気下で溶かした。エトキシビニル-トリブチルスズ376.4mg、1.04mmolを加えた。混合物を140分間85°C油浴で加熱した。反応物を室温に冷却した。N-ブロモスクシンイミド177mg、1.0mmolを、続いて水2mLを加えた。反応物を室温で3時間撹拌し、その後、ジオキサンの大部分を真空で除去した。粗製の反応混合物をEtOAcで希釈し、水で洗浄した。全ての揮発性物質を真空で除去した。トルエンを加え、全ての揮発性物質を真空で、2回目で除去した。粗製物質をDMF/MeCN2mL、1:1に室温で溶かした。N-Cbz-4-シクロプロピルLプロリン6060.84mmolおよびDIEA268mg、2.08mmolのMeCN2mL中の溶液を加え、室温での撹拌を続けた。14時間後に、大部分のMeCNを真空で除去し、粗製の反応混合物をEtOAcで希釈した。混合物を水性HCl1M、LiCl水溶液5、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過し、溶媒を蒸発させて、粗製の反応生成物を得、これをシリカゲルクロマトグラフィー溶離剤:EtOAc/ヘキサンを介して精製して、化合物609176mgを得た。LCMS-ESI:C30H24BrF2NO5での算出値:596.4M;実測値:595.2/597.2MH。g.6-[5-7-ブロモ-9,9-ジフルオロ-9H-フルオレン-2-イル-1H-イミダゾール-2-イル]-5-アザ-スピロ[2.4]ヘプタン-5-カルボン酸ベンジルエステル610の調製5-アザ-スピロ[2.4]ヘプタン-5,6-ジカルボン酸5-ベンジルエステル6-[2-7-ブロモ-9,9-ジフルオロ-9H-フルオレン-2-イル-2-オキソ-エチル]エステル609172mg、0.293mmolをm-キシレン6.0mLに溶かした。酢酸アンモニウム226mg、2.93mmolを加え、反応物を140°Cで60分間、マイクロ波条件下で撹拌した。反応物を室温に冷却し、全ての揮発性物質を真空で除去した。粗製物質をシリカゲルクロマトグラフィー溶離剤:EtOAc/ヘキサンを介して精製して、化合物61080.3mgを得た。LCMS-ESI:C30H24BrF2N3O2での算出値:576.4M;実測値:575.2/577.2MH。h.1-{6-[5-7-ブロモ-9,9-ジフルオロ-9H-フルオレン-2-イル-1H-イミダゾール-2-イル]-5-アザ-スピロ[2.4]ヘプタン-5-カルボニル}-2-メチル-プロピル-カルバミン酸メチルエステル612の調製6-[5-7-ブロモ-9,9-ジフルオロ-9H-フルオレン-2-イル-1H-イミダゾール-2-イル]-5-アザ-スピロ[2.4]ヘプタン-5-カルボン酸ベンジルエステル610800mg、1.38mmolをDCM15mLに溶かし、AcOH中のHBr37、2mLを加え、室温での撹拌を続けた。180分後に、懸濁物をヘキサンで希釈し、固体を濾過を介して収集し、ヘキサンで洗浄し、真空に供した。粗製物質をさらに精製することなく次のステップで使用した。粗製物質をDMF4.0mLに溶かし、DIEA356mg、2.76mmolを加えた。2-L-メトキシカルボニルアミノ-3-メチル-酪酸611242mg、1.38mmol、HATU524mg、1.38mmolおよびDIEA178mg、1.38mmolのDMF1mL中の溶液を加えた。反応物を室温で撹拌した。50分後に、反応物をEtOAcで希釈し、重炭酸塩水溶液、LiCl水溶液5、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過し、溶媒を真空で除去して、粗製物質を得、これをシリカゲルクロマトグラフィー溶離剤:EtOAc/ヘキサンによって精製して、僅かに不純な化合物612878mgを得た。LCMS-ESI:C29H29BrF2N4O3での算出値:599.5M;実測値:598.5/600.5MH。i.3-[6-9,9-ジフルオロ-7-{2-[5-2-メトキシカルボニルアミノ-3-メチル-ブチリル-5-アザ-スピロ[2.4]ヘプタ-6-イル]-3H-イミダゾール-4-イル}-9H-フルオレン-2-イル-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル]-2-アザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-カルボン酸tert-ブチルエステル614の調製1-{6-[5-7-ブロモ-9,9-ジフルオロ-9H-フルオレン-2-イル-1H-イミダゾール-2-イル]-5-アザ-スピロ[2.4]ヘプタン-5-カルボニル}-2-メチル-プロピル-カルバミン酸メチルエステル612840mg、1.4mmol、3-[6-4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル]-2-アザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-カルボン酸tert-ブチルエステル613615mg、1.4mmol、PdPPh34161mg、0.14mmol、K2CO3579mg、4.2mmolをDME15mL/水3mLにアルゴン雰囲気下で溶かした。混合物を85~90°C油浴で120分間加熱した。120分後に、追加のボロン酸エステル61mg、0.14mmolを加え、加熱を続けた。3時間後に、反応物を室温に冷却した。大部分のDMEを真空で除去し、粗製の反応混合物をEtOAcで希釈した。混合物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過し、溶媒を蒸発させて、粗製の反応生成物を得、これをシリカゲルクロマトグラフィー溶離剤:EtOAc/ヘキサンを介して精製して、化合物614878mgを得た。LCMS-ESI:C47H51F2N7O5での算出値:831.9M;実測値:832.7MH。中間体化合物613は、次のとおりに調製することができるj.3-2-アミノ-4-ブロモ-フェニルカルバモイル-2-アザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-カルボン酸tert-ブチルエステル617の調製2-アザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2,3-ジカルボン酸2-tert-ブチルエステル6160.327g、1.36mmol、1当量、4-ブロモ-ベンゼン-1,2-ジアミン6150.507g、2.71mmol、2当量および4-メチルモルホリン0.299mL、2当量のDMF10mL中の溶液に、HATU0.543g、1.05当量を加えた。反応混合物を室温で1時間撹拌し、次いで濃縮した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、希NaHCO3水溶液およびブラインで洗浄した。有機層を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィーシリカゲル、20から80酢酸エチル/ヘキサンによって精製して、位置異性体3-2-アミノ-4-ブロモ-フェニルカルバモイル-2-アザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-カルボン酸tert-ブチルエステル617の混合物を得た。k.3-6-ブロモ-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル-2-アザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-カルボン酸tert-ブチルエステル618の調製位置異性体3-2-アミノ-4-ブロモ-フェニルカルバモイル-2-アザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-カルボン酸tert-ブチルエステル617の上記混合物をエタノールに溶かし、密閉管中で130°Cに一晩加熱し、加熱を170°Cで3日間継続した。LC-MSによって、所望の生成物およびBoc切断された生成物約1:1の比が示された。混合物を濃縮し、DCMに溶かした。二炭酸ジ-tert-ブチルdi-tert-butyldicarbonate0.6当量を加え、反応物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィーシリカゲル、20から80酢酸エチル/ヘキサンによって精製して、3-6-ブロモ-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル-2-アザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-カルボン酸tert-ブチルエステル6180.383g、72をオレンジ色の泡として得た。l.化合物613の調製3-6-ブロモ-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル-2-アザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-カルボン酸tert-ブチルエステル618264mg、0.673mmol、ベンゼン-1,4-ジボロン酸ジピノカルdipinocalエステル5当量、3.36g、6.95mmol、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム5、39mgおよび2Mの炭酸カリウム水溶液3当量、1.01mLのDME5mL中の混合物を90°CにAr下で4時間加熱した。反応混合物を冷却し、酢酸エチル中で希釈し、飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄した。有機層を乾燥させMgSO4、濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィーシリカゲル、20から60酢酸エチル/ヘキサンによって精製して、3-{6-[4-4,4,5,5-テトラメチル-[1,3,2]ジオキサボロラン-2-イル-フェニル]-1H-ベンゾイミダゾール-2-イル}-2-アザ-ビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-カルボン酸tert-ブチルエステル613295mg、収率85を得た。LCMS-ESI-:C30H38BN3O4での算出値:515.45;実測値:516.1MH。化合物7は、米国特許第7,429,572号に記載されているものなどの合成方法および中間体を使用して調製することができる。化合物7はまた、次の実施例に記載されているとおりに調製することもできる。実施例7化合物7の調製化合物701970g、3.74molおよびDMAP50g、0.412molのTHF10L中の氷冷懸濁物に、TEA2.3kg、16.5molおよび水7Lを加えると、透明な溶液が生じる。温度を約0°Cで維持しながら、塩化イソブチリル3当量を撹拌されている混合物に徐々に加える。HPLCによって、反応が実質的に完了まで進行したことが示されるまで、追加の1.2当量、次いで0.7当量の塩化イソブチル全部で約1.95kgを加える。濃HClを用いて、反応混合物を約6.4のpHに酸性化し、有機相をEtOAc2×10Lで洗浄する。合わせた抽出物を水1×15Lで洗浄する。有機相を濾過し、真空濃縮する。残渣をIPA約20kgに溶かし、ヘプタン14.2kgを加える。溶液を約74~75°Cに加熱して、透明な溶液を生じさせ、次いで、約5Lを蒸留によって除去する。生じた溶液を室温に徐々に冷却する。沈澱物が約42~43°Cで形成する。冷却を徐々に5°Cまで継続し、次いで一晩撹拌する。生じた固体を濾過し、濾液をIPA/ヘプタン1:8混合物13.4kgで洗浄し、真空下で約60~70°Cで乾燥させて、化合物71.295kg86.65を得るが、これは、HPLCによると純度99.45である。中間体化合物706は、次のとおりに調製することができる。a.化合物701の調製シチジン100g、0.411molのDMF2.06L中の懸濁物に、無水安息香酸102.4g、0.452molを加える。混合物を室温で20時間撹拌した。DMFを真空で除去し、残渣をジエチルエーテルで摩砕した。生じた固体を吸引濾過によって収集し、ジエチルエーテル2×200mLで洗浄した。真空で、室温でさらに乾燥させて、N4ベンズアミド140.6g、98.3を得た。この物質の一部139.3g、0.401molを無水ピリジン1.2Lに溶かし、1,3-ジクロロ-1,1,3,3-テトライソプロピル-ジシロキサン141.4mL、0.441molで室温で処理した。溶液を室温で一晩撹拌した。混合物をほぼ乾燥するまで真空で濃縮し、トルエン3×200mLと共蒸発させた。残渣をEtOAc1.8Lで処理し、HCl2×200mL、0.05N、NaHCO35、2×400mLで洗浄した。有機層を洗浄し、乾燥させNa2SO4、濾過し、乾燥するまで蒸発させた。化合物701256.5g、100超を白色の泡として単離し、さらに精製することなく使用した。b.化合物702の調製化合物701236.5g、0.40molを無水THF1.22Lに溶かした。無水DMSO180.8mL、2.1molを加え、生じた溶液を-20°Cから-15°Cに冷却した。トリフルオロ酢酸無水物90.6mL、0.64molを45分かけて滴加し、溶液を-20°Cから-15°Cの間で2時間撹拌し、その後、無水トリエチルアミン223.5mL、1.6molを20分かけて加えた。ケトン702を含有する粗製の反応物をEtOAc500mLに溶かし、生じた溶液をH2O3×400mLで洗浄し、乾燥させNa2SO4、溶媒を真空で除去して、黄色の固体を得、これを、ヘキサン中のEt2O0~60の段階的勾配、続くヘキサン中のEtOAc50~100の段階的勾配で溶離するシリカゲルカラムで精製した。そうして得られた粗製のケトン約192gを石油エーテルから結晶化させ、白色の固体としてのケトン702138.91g、シチジンから57.5および黄色の固体としての未反応の出発物質70122gを得た。c.化合物703の調製化合物70248.57g、8.26mmolを無水トルエン約400mLに溶かし、水分を排除しながら溶媒を真空で除去した。次いで、残渣をもう2時間、さらに真空乾燥させたオイルポンプ。水分を厳密に排除しながら、残留した泡を無水ジエチルエーテル1.03Lにアルゴン下で溶かした。生じた溶液を-78°Cにアルゴン下で冷却し、MeLi1.6M、258.0mL、0.413molを添加漏斗を介して滴加した。添加が完了した後に、混合物を-78°Cで2時間撹拌した。1Mの水性NH4Cl500mLを徐々に加えた。室温に加温した後に、混合物をH2O2×500mLで洗浄し、乾燥させNa2SO4、次いで、乾燥するまで濃縮して、茶色の泡約60g、100超を得た。化合物70237.62gおよび56.4gを使用して、反応をさらに2回行った。合わせた粗製の生成物128.0g、0.212molをTHF1.28Lに溶かし、濃HOAc23mL、0.402molで処理した。溶液に、TBAF384.0mL、THF中1Mを加えた。溶液を室温で0.75時間撹拌し、混合物をシリカゲル750gで処理し、乾燥するまで濃縮した。粉末をCH2Cl2中に充填されているシリカゲルカラムに入れた。1:7のEtOH-CH2Cl2で溶離して、暗色のろう状固体を得、それをシリカゲル300g上に予め吸着させ、以前のとおりにクロマトグラフィーを行なった。化合物70346.4g、702から53.0をオフホワイト色の固体として単離した。1HNMRDMSO-d6:δ1.20s,3H,CH3,3.62-3.69m,2H,,3.73-3.78m,2H,,5.19t,1H,J=5.4Hz,OH-5’,5.25s,1H,OH-2’,5.52d,1H,J=5.0Hz,OH-3’,5.99s,1H,H-1’,7.32d,1H,J=5.8Hz,7.50Ψt,2H,J=7.7Hz,7.62Ψ,1H,J=7.3Hz,8.00d,2H,J=7.3Hz,8.14d,1H,J=6.9Hz,11.22s,1H,NH。分析:C17H19N3O60.5H2Oでの計算値:C、55.13;H、5.44;N、11.35。実測値:C、55.21;H、5.47;N、11.33。d.化合物704の調製化合物70346.0g、0.13molを無水ピリジンに溶かし、真空で乾燥するまで濃縮した。生じたシロップを無水ピリジンにアルゴン下で溶かし、撹拌しながら0°Cに冷却した。茶色の溶液を塩化ベンゾイル30mL、0.250molで10分かけて滴下処理した。氷浴を外し、撹拌を1.5時間継続したところ、TLCによって残存する出発物質は示されなかった。混合物を、水5mLを加えることによってクエンチし、乾燥するまで濃縮した。残渣を最小量のCH2Cl2に溶かし、飽和NaHCO31×500mLおよびH2O1×500mLで洗浄した。有機相を乾燥させNa2SO4、濾過し、乾燥するまで濃縮して、EtOAc-ヘキサン25~60の段階的勾配で溶離するシリカゲルのクロマトグラフィーを行い、化合物704を黄色の泡48.5g、67として得た。1HNMRCDCl3:δ1.64s,3H,CH3,4.50m,1H,H-4,4.78-4.85m,2H,H-5’,5a’,5.50d,1H,J=3.4Hz,H-3’,6.42s,1H,H-1’,7.44-7.54m,7H,Ar,7.57-7.66m,3H,Ar,7.94d,2H,J=7.8Hz,8.05-8.09m,4H,Ar,8.21d,1H,J=7.3Hz。分析:C31H27NO8での計算値:C、65.37;H、4.78;N、7.38。実測値:C、65.59;H、4.79;N、7.16。e.化合物705の調製化合物7047.50g、0.013molを無水トルエン150mLにアルゴン下で溶かし、-20°Cに冷却した。DAST2.5mL、18.9mmolを徐々に加え、添加が完了した後に、冷却浴を外した。撹拌を1時間継続し、混合物を飽和NaHCO3100mLに注ぎ、ガスの発生が止まるまで洗浄した。有機相を乾燥させNa2SO4、濃縮し、1:1のEtOAc-ヘキサンで溶離するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。収量は白色の固体としての純粋な7051.22g16.3であった。融点241°CCH2Cl2-ヘキサン;1HNMRCDCl3:δ1.49d,3H,J=22.4Hz,CH3,4.64dd,1H,J=3.44,12.9Hz,H-5’,4.73d,1H,J=9.5Hz,H-4’,4.90dd,1H,J=2.4,12.7Hz,H-5a’,5.56dd,1H,J=8.6,20.7Hz,H-3’,6.52d,1H,J=18.0Hz,H-1’,7.47-7.57m,7H,Ar,7.62-7.71m,3H,Ar,7.89d,2H,J=6.9Hz,8.07-8.11m,5H,Ar,8.67bs,1H,NH。19FNMRCDCl3:δ3.3m。分析:C31H26FN3O70.7H2Oでの計算値:C、63.74;H、4.72;N、7.20。実測値:C、63.71;H、4.54;N、7.20。f.化合物706の調製化合物7056.30g、0.011molをアンモニアのメタノール溶液約7N、150mL中に懸濁させ、室温で一晩撹拌した。溶媒を真空で除去し、メタノール1×20mLと共蒸発させ、シリカゲルに予め吸着させた。白色の粉末をシリカゲルカラムに入れCHCl3中に充填、カラムをCHCl3中9のEtOH、次いでCHCl3中17のEtOH、最後にCHCl3中25のEtOHで溶離した。生成物を含有する画分を濃縮し、0.4μmディスクで濾過し、水から凍結乾燥させて、化合物706、2.18g76を得た。1HNMRDMSO-d6;:δ1.17d,3H,J=22.3Hz,CH3,3.63dd,1H,J=2.7,13.7Hz,H-5’,3.70-3.84m,3H,H-3’,H-4’,H-5a’,5.24apps,1H,OH-3’,5.60d,1H,J=5.4Hz,H-5’,5.74d,1H,J=7.71Hz,H-5,6.07d,1H,J=18.9Hz,H-1’,7.31s,1H,NH2,7.42s,1H,NH2,7.90d,1H,J=7.3Hz,H-6。19FNMRDMSO-d6;:δ2.60m。分析:C10H14FN3O41.4H2Oでの計算値:C、44.22;H、5.95;N、14.77。実測値:C、42.24;H、5.63;N、14.54。水2mL中に溶かし、1MのHClを用いてpHを約3.0に調節することによって、化合物7060.10g、0.386mmolを塩酸塩に変換した。水を真空で除去し、残渣を水性EtOHから結晶化させて、化合物706を塩酸塩71.0mgとして得た。融点243°C分解;1HNMRDMSO-d6;:δ1.29d,3H,J=22.6Hz,CH3,3.65dd,1H,J=2.3,12.7Hz,H-5’,3.76-3.90m,3H,H-3’,H-4’,H-5a’,5.96d,1H,J=17.3Hz,H-1’,6.15d,1H,J=7.9Hz,H-5,8.33d,1H,J=7.9Hz,H-6,8.69s,1.5H,NH,9.78s,1.5H,NH。19FNMRDMSO-d6;:δ1.69m。分析:C10H14FN3O4HClでの計算値:C、40.62;H、5.11;N、14.21。実測値:C、40.80;H、5.09;N、14.23。化合物8は、米国特許出願第12/632,194号に記載されているものなどの合成方法および中間体を使用して調製することができる。化合物8はまた、次の実施例に記載されているとおりに調製することもできる。実施例84-アミノ-2-n-ブトキシ-8-[3’-ピロリジン-1-イルメチル-ベンジル]-5,6,7,8-テトラヒドロプテリジン-6-オン8の調製。R=n-ブチルニトロ化合物807730mg、1.5mmolのMeOH10mL中の溶液に、ラネーニッケル約200μL、H2O中のスラリーを加えた。反応容器をH2でフラッシュし、次いで、H2雰囲気下で1.5時間撹拌した。混合物をセライトで、CH2Cl2およびMeOH1:1を用いて濾過した。濾液を真空下で濃縮し、凍結乾燥機上に一晩放置した。化合物8の遊離塩基を白色の固体として得た。8のHCl塩を得るために、上記の濾液の試料を、1.0MのHClでpH=1~2までスパイクし、凍結乾燥させた。1HNMRCD3OD,300MHz:δ7.65s,1H,7.50m,3H,4.96s,2H,4.44t,J=7Hz,2H,4.40s,2H,4.16s,2H,3.48m,2H,3.19m,2H,2.02-2.17m,4H,1.74m,2H,1.45m,2H,0.94t,J=7Hz,3H-[HCI塩]。LCMS-ESI:C22H31N6O2での算出値:411.5MH;実測値:411.3MH。中間体化合物807を次のとおりに調製した。a.化合物802の調製化合物8012.46g、10.2mmolのTHF34mL中の溶液に-20°Cで、Et3N3.14mL、22.5mmolを、続いて、NH3の溶液MeOH中2.0M、5.4mL、11mmolを加えた。0°Cまで加温しながら、混合物を1.5時間撹拌したLC/MSによって、出発物質の消費が示された。化合物802を含有する反応混合物を後処理せずに次に進めた。b.化合物803の調製3-1-ピロリジニルメチルフェニルメタンアミン8061.95g、10.2mmolのTHF34mL中の溶液に0°Cで、Et3N3.14mmol、22.5mmolを、続いてブロモ酢酸メチル1.04mL、22.3mmolを滴加した。LC/MSによって、出発物質の消費が示されるまで約2時間、反応混合物を撹拌した。化合物803を含有する混合物を後処理せずに次に進めた。c.化合物804の調製化合物803を含有する反応混合物を、化合物802を含有する反応混合物に0°Cで加えた。LC/MSによって化合物802の消費が示されるまで、約45分間、反応混合物を撹拌した。NH4Clの飽和溶液50mLを加えた。層を分離し、水性層をEtOAc2×30mLで抽出した。合わせた有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、化合物8042.11gを得た。1HNMRCD3OD,300MHz:δppm7.32-7.16m,4H,4.69s,2H,4.19q,J=7Hz,2H,4.07s,2H,3.60s,2H,2.49m,4H,2.40s,3H,1.78m,4H,1.23t,3H,J=7Hz。LCMS-ESI:C21H29N6O4Sでの算出値:461.2MH;実測値:461.0MH。d.エチル-Nα-[4-アミノ-2-メタンスルホニル-5-ニトロピリミジン-6-イル],Nα-[3’-ピロリジン-1-イルメチル-ベンジル]-グリシネート805の調製硫化物8043.68g、8.00mmolのEtOH40mL中の溶液懸濁物asolutionasuspensionに0°Cで、タングステン酸ナトリウム二水和物792mg、2.40mmol、酢酸4.6mL、80mmolおよび過酸化水素3.4mL、約40mmol、H2O中35w/wを順次加えた。3時間後に、追加の酢酸4.6mLおよび過酸化水素3.4mLを加えた。反応物を0°Cで16時間維持した。0°Cの間に、Na2SO350mLの飽和溶液を慎重に加え、続いてCH2Cl275mLを加えた。層を分離し、水性層をCH2Cl24×50mLで抽出した。合わせた有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮して、化合物805を含有する物質を得、これをさらに精製することなく使用した。e.化合物807の調製。R=n-ブチルスルホン8051.0g、2.0mmolのn-ブタノール10mL中の溶液に、TFA470μL、6.1mmolを加えた。反応物を100°Cで1時間撹拌した。反応混合物をNaHCO320mLおよびCH2Cl230mLの飽和溶液に注いだ。層を分離し、水性層をCH2Cl230mLで抽出した。合わせた有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。精製をシリカゲルクロマトグラフィー基質substrate1g/SiO210g2~15MeOH/CH2Cl2によって行って、化合物807を得た。生物学的実施例アッセイプロトコルハイスループットレプリコンアッセイHTBSH77遺伝子型1a型またはCon1遺伝子型1b型HCVRNAおよびRenillaルシフェラーゼレポーターを持つレプリコン細胞を384ウェル黒色プレートに、1ウェル当たり細胞1.6×103個の密度で、G-418を除いたDMEM培地90μL中に播種した。BiotekμFlowWorkstationを用いて、化合物を100DMSO中で連続希釈し、細胞に1:225希釈で加えて、全体積90μL中で0.44DMSOの最終濃度を達成した。細胞プレートを37°Cで、5CO2と共に3日間インキュベーションし、その後、培地を除去し、細胞を、複製レベルのマーカーとしてのルシフェラーゼ活性についてアッセイした。Dual-Gloルシフェラーゼアッセイ試薬Promega、Madison、WIを使用して、ルシフェラーゼ発現を測定した。簡単には、Dual-Gloルシフェラーゼ緩衝液20μLを加えて細胞を10分間溶解し、その後、希釈したDual-GloStopGlo基質1:10020μLを各ウェルに加えた。10分間のインキュベーションの後に、ルミネセンスシグナルをPerkinElmerEnvisionPlateReaderで測定した。ルシフェラーゼレベルを未処理の対照100と定義に対する百分率に変換し、XLFit4ソフトウェアIDBS、Emeryville、CAを使用して、データをロジスティック用量反応式y=a/1x/bcに当てはめた。得られた式からEC50値を算出した。別法では、抗ウイルス活性を、HCVNS3プロテアーゼIC50決定によって分析することができる。Talianiの方法そのようなアッセイを行うことに関して参照によって本明細書に組み込まれるTalianiM、BianchiE、NarjesF、FossatelliM、UrbaniA、SteinkuhlerCら、AcontinuousassayofhepatitisCvirusproteasebasedonresonanceenergytransferdepsipeptidesubstrates.AnalBiochem1996年;240巻1号:60~7頁に基づく蛍光共鳴エネルギー転移FRETデプシペプチド基質RETS1、Anaspec、SanJose、CAを使用して、HCVNS3プロテアーゼ活性を監視した。簡単には、2~10nMの精製NS3プロテアーゼドメインを37°Cで10分間、20μMの同質遺伝子型のNS4Aペプチド補因子Sigma、St.Louis、MOと共に、50mMのHEPESpH7.5および10mMのDTTを含む40グリセロール緩衝液中でプレインキュベートした。化合物をDMSO中で1:3で連続希釈し、酵素/補因子混合物と共に10分間インキュベートし、2μMのRETS1基質最終濃度を加えることによって、反応を開始した。1時間にわたって、Victor3V蛍光プレートリーダーPerkinElmer、Waltham、MAを使用して、蛍光の増大を連続的に測定した。最大傾斜アルゴリズムを用いるWorkout1.5ソフトウェアDAZDAQ、EastSussex、UKを使用して、各インヒビター濃度についての初速度を算出した。速度データを未処理の対照100と定義に対する百分率に変換し、非線形回帰を行って50阻害濃度IC50値を算出した。NS3酵素効力potency:精製NS3プロテアーゼをNS4Aペプチドと複合させ、次いで、化合物の連続希釈物溶媒としてDMSOを使用と共にインキュベートする。二重標識されたペプチド基質を加えることによって、反応を開始し、その結果生じる蛍光の動的増大を測定する。速度データの非線形回帰を行って、IC50を算出する。活性を初めに、遺伝子型1b型プロテアーゼに対して試験する。遺伝子型1b型に対して得られた抗力に応じて、追加の遺伝子型1a型、2a型、3型およびまたはプロテアーゼインヒビター耐性酵素D168Y、D168VまたはA156T変異体を試験することができる。全てのアッセイを通じて、BILN-2061を対照として使用する。実施例の化合物をこのアッセイで評価し、約1μM未満のIC50値を有することを見出した。レプリコン効力および細胞毒性:Huh-luc細胞BartenschlagerのI389luc-ubi-neo/NS3-3’/ET遺伝子型1b型レプリコンを安定に複製を、化合物溶媒としてDMSOを使用の連続希釈物で72時間処理する。レプリコンコピー数を生物発光によって測定し、非線形回帰を行って、EC50を算出する。PromegaCellTiter-Glo細胞生存率アッセイを使用して、同じ薬物希釈物で処理された平行プレートを細胞毒性についてアッセイする。1b型レプリコンに対して達成された効力に応じて、化合物を、遺伝子型1a型レプリコンおよび/またはD168YもしくはA156T変異をコードするインヒビター耐性レプリコンに対して試験することができる。全てのアッセイを通じて、BILN-2061を対照として使用する。実施例の化合物をこのアッセイで評価し、約5μM未満のEC50値を有することを見出した。レプリコン効力に対する血清タンパク質の効果レプリコンアッセイを、生理学的濃度のヒト血清アルブミン40mg/mLまたはα-酸糖タンパク質1mg/mLが補充された標準細胞培地DMEM10FBS中で行う。ヒト血清タンパク質の存在下でのEC50を標準培地中でのEC50と比較して、効力におけるシフトの倍率を決定する。酵素選択性:ブタ膵臓エラスターゼ、ヒト白血球エラスターゼ、プロテアーゼ3およびカテプシンDを包含する哺乳動物プロテアーゼの阻害を、それぞれの酵素の個々の基質に対するKmで測定する。それぞれの酵素についてのIC50をNS31bプロテアーゼで得られたIC50と比較して、選択性を算出する。MT-4細胞の細胞毒性:MT4細胞を、化合物の連続希釈物で5日間にわたって処理する。PromegaCellTiter-Gloアッセイを使用して、細胞生存率を処理期間の終了のときに測定し、非線形回帰を行って、CC50を算出する。EC50で細胞に結合する化合物濃度:Huh-luc培養物を、EC50に等しい濃度の化合物と共にインキュベートする。複数の時点で0~72時間、細胞を冷たい培地で2回洗浄し、85アセトニトリルで抽出し;それぞれの時点での培地の試料もまた抽出する。細胞および培地抽出物をLC/MS/MSによって分析して、それぞれの画分における化合物のモル濃度を決定する。溶解性および安定性:10mMのDMSO原液のアリコットaliquotを取り、試験培地溶液PBS、pH7.4および0.1NのHCl、pH1.5中100μMの最終濃度の化合物を1の全DMSO濃度で調製することによって、溶解性を決定する。試験培地溶液を振盪しながら室温で1時間インキュベートする。次いで、溶液を遠心分離し、回収された上清をHPLC/UVでアッセイする。比較される、定義された試験溶液中で検出される化合物の量と、同じ濃度のDMSO中で検出される量とを比較することによって、溶解性を算出することができる。試験培地中、37°Cで1時間インキュベーションした後の化合物の安定性もまた決定する。凍結保存されたヒト、イヌおよびラット肝細胞での安定性:それぞれの化合物を1時間まで、肝細胞懸濁物100μL、1ウェル当たり80,000細胞中、37°Cでインキュベートする。凍結保存された肝細胞を、血清不含のインキュベーション培地中で再構成する。懸濁物を96ウェルプレート50μL/ウェルに移す。化合物をインキュベーション培地中で2μMまで希釈し、次いで、肝細胞懸濁物に加えて、インキュベーションを開始する。インキュベーションの開始から0、10、30および60分目に、試料を採取して、90アセトニトリル/10水中の0.3ギ酸からなる混合物で、反応物をクエンチすることができる。LC/MS/MSを使用して、それぞれの試料中での化合物の濃度を分析する。濃度-時間データを単相指数方程式monobasicexponentialequationに当てはめることによって、肝細胞懸濁物中の化合物の消失半減期を決定する。また、データを拡大して、固有肝クリアランスおよび/または全体肝クリアランスを表す。ヒト、イヌおよびラットからの肝S9画分中での安定性:それぞれの化合物をS9懸濁物500μL、タンパク質3mg/mL中、37°Cn=3で1時間までインキュベートする。化合物をS9懸濁物に加えて、インキュベーションを開始する。インキュベーションの開始から0、10、30および60分目に、試料を採取する。LC/MS/MSを使用して、それぞれの試料中での化合物の濃度を分析する。濃度-時間データを単相指数方程式に当てはめることによって、S9懸濁物中の化合物の消失半減期を決定する。Caco-2透過性:順方向AからBへおよび逆方向BからAへ透過性の両方を測定する。12ウェルCostarTranswell登録商標プレート内で、コラーゲンコーティングされた微孔性ポリカーボネート膜上に、Caco-2単層を集密まで成長させる。化合物を、順方向透過性AからBへでは先端面に投与し、逆方向透過性BからAへでは基底外側上に投与する。細胞を加湿インキュベーター内で、37°C、5CO2でインキュベートする。インキュベーションの開始時、インキュベーションから1時間目および2時間目に、200μLアリコットを受器チャンバーから採取し、新鮮なアッセイ緩衝液に交換する。LC/MS/MSで、それぞれの試料中の化合物の濃度を決定する。見掛け透過性であるPappを算出する。血漿タンパク質結合性:血漿タンパク質結合性を、平衡透析法によって測定する。それぞれの化合物をブランクの血漿に、2μMの最終濃度でスパイクする。スパイクされた血漿およびリン酸緩衝液を、組み合わせた透析セルの反対側に入れ、次いでこれを、37°Cの水浴中でゆっくりと回転させる。インキュベーションの終了時に、血漿およびリン酸緩衝液中での化合物の濃度を決定する。次の式を使用して、未結合のパーセントを算出する:[式中、CfおよびCbはそれぞれ、透析後の緩衝液濃度および血漿濃度として決定された、遊離および結合濃度である]。CYP450プロファイリング:それぞれの化合物を、CYP1A2、CYP2C9、CYP3A4、CYP2D6およびCYP2C19を含む5種の組換えヒトCYP450酵素それぞれと共に、NADPHの存在下、および不在下でインキュベートする。インキュベーションの開始時ならびにインキュベーションを開始してから5、15、30、45および60分目に、連続試料をインキュベーション混合物から採取することができる。LC/MS/MSによって、インキュベーション混合物中での化合物の濃度を決定する。インキュベーションの開始時のサンプリングと比較することによって、インキュベーション後の各時点で残っていた化合物の百分率を算出する。ラット、イヌ、サルおよびヒト血漿中での安定性:化合物を、血漿ラット、イヌ、サルまたはヒト中、37°Cで2時間までインキュベートする。化合物を血漿に、1および10μg/mLの最終濃度で加える。化合物を加えてから0、5、15、30、60および120分目に、アリコットを採取する。それぞれの時点での化合物および主要な代謝産物の濃度をLC/MS/MSによって測定する。化合物6での生物学的データRenillaルシフェラーゼRLucベースのHCVレプリコンレポーターアッセイ-HCV1b型RLucを使用して、抗ウイルス効力[EC50]を決定したは、0.0045nMである。生物学的実施例1:化合物1および化合物2の組合せの抗HCV活性材料および方法化合物1および化合物2は、GileadSciencesFosterCity、CAが合成した。細胞系HCV遺伝子型1b型レプリコン細胞Huh-lucをReblikonMainz、ドイツから得た。これらの細胞におけるレプリコンはI389luc-ubi-neo/NS3-3’/ETと称され、選択的耐性マーカーネオマイシンホスホトランスフェラーゼ、さらにホタルルシフェラーゼレポーター遺伝子をコードする。Huh-luc細胞を、10のウシ胎仔血清FBS;Hyclone、Logan、UTおよび0.5mg/mLのG-418GIBCOが補充されているダルベッコ変法イーグル培地DMEM;GIBCO、Carlsbad、CA中で維持した。細胞を週に2回継代し、サブコンフルエントなレベルで維持した。EC50決定レプリコン細胞を、96ウェルプレートに、1ウェル当たり細胞5×103個の密度で、G-418を除いたDMEM培地100μL中に播種した。化合物1および2を100DMSOSigma中で1:3で連続希釈した。これらの連続希釈物を細胞に1:200希釈で加えて、0.5DMSOの最終濃度を、200μLの全体積で達成した。プレートを37°Cで3日間インキュベートし、その後、培地を除去し、細胞を溶解させ、市販のルシフェラーゼアッセイPromega、Madison、WIを使用して、ルシフェラーゼ活性についてアッセイした。薬物処理された試料のHCV複製レベルを未処理の対照100と定義での値に対する百分率として表し、XLFit4ソフトウェアIDBS、Emeryville、CAを使用して、データをロジスティック用量反応式y=a/1x/bcに当てはめた。以前に記載されたとおりにDelaney,W.E.ら、AntimicrobialAgentsChemotherapy、45巻6号:1705~1713頁2001年、EC50値を、得られた式から算出した。抗ウイルス組合せ研究レプリコン細胞を96ウェルプレートに、1ウェル当たり細胞5×103個の密度で、培地100μL中に播種した。化合物1および2を100DMSO中で上記のとおりに連続希釈し、96ウェルプレートにマトリックス様式で加え、200μLの最終体積および0.5の最終DMSO濃度中に種々の薬物濃度および比を有する定義されたセットを達成した。それぞれ個々の薬物について、EC50値を、試験される濃度範囲の中点として選択した。細胞を3日間インキュベートし、上記に示されているとおりにルシフェラーゼ発現について分析した。組合せ研究のために、2つの独立した実験を3回繰り返して行った。組み合わせデータ分析PrichardおよびShipmanPrichardMN、AseltineKR、ShipmanC,Jr.、MacSynergyTMII、Version1.0.UniversityofMichigan、AnnArbor、Michigan、1993年;PrichardM.N.、ShipmanC.,Jr.、AntiviralRes14巻4~5号:181~205頁1990年;PrichardM.N.、ShipmanC,Jr.、AntivirTher11巻:9~20号1996年;PrichardM.N.ら、AntimicrobAgentsChemother37巻3号:540~5頁1993年によって開発されたMacSynergyIIプログラムを使用して、データを分析した。そのソフトウェアは理論阻害を算出して、薬物間の相加的相互作用を推測しBlissIndependenceモデルに基づく、理論阻害値と観察された阻害値との間の統計的に有意差を定量化する。三次元でこれらの差違をプロットすると、Z面での上昇が化合物間の抗ウイルス相乗作用を表し、低下が抗ウイルス拮抗作用を表す表面が生じる。表面偏差の算出ボリュームは、nM2で表される。PrichardおよびShipmanによると、組合せ効果は次のとおりに定義される:ボリュームが100nM2超であれば、高度に相乗的。ボリュームが50nM2超および100nM2以下であれば、やや相乗的。ボリュームが-50nM2超および50nM2以下であれば、相加的。ボリュームが-100nM2超および-50nM2以下であれば、やや拮抗的。ボリュームが-100nM2以下であれば、拮抗的。結果組合せ実験を開始する前に、Huh-lucレプリコン細胞でのEC50値を化合物1および化合物2について決定し、結果を表IIに示す。両方の化合物が抗ウイルス効果を有した。化合物1および化合物2の組合せの抗ウイルス効果を測定し、相加作用からの有意な偏差を表す表面プロットをもたらすMacSynergyIIを使用して、得られたデータを分析した。相加作用からの統計的に有意な偏差の定量化によって、化合物1および2の組合せは、表IIIに示されているとおりの相加的抗ウイルス効果を示す-50nM2から50nM2の間の相乗作用/拮抗作用ボリュームを有することが示された。表IIIに示されるインビトロ実験の結果は、化合物2が、化合物1と組み合わせた場合に、相加的抗ウイルス活性を有することを示している。生物学的実施例2:化合物3との組合せ材料および方法抗ウイルス化合物化合物1および化合物3は、GileadSciencesFosterCity、CAが合成した。リバビリンおよびIFN-αは、SigmaSt.Louis、MOから購入した。細胞系HCV遺伝子型1b型レプリコン細胞Huh-lucをReblikonMainz、ドイツから得た。これらの細胞におけるレプリコンはI389luc-ubi-neo/NS3-3’/ETと称され、選択的耐性マーカーネオマイシンホスホトランスフェラーゼ、さらにホタルルシフェラーゼレポーター遺伝子をコードする。Huh-luc細胞を、10のウシ胎仔血清FBS;Hyclone、Logan、UTおよび0.5mg/mLのG-418Invitrogenが補充されていて、GlutaMAX商標Invitrogen、Carlsbad、CAを含むダルベッコ変法イーグル培地D-MEM中で維持した。細胞を週に2回継代し、サブコンフルエントレベルで維持した。EC50決定レプリコン細胞を96ウェルプレートに、1ウェル当たり細胞5×103個の密度で、G-418を除いたDMEM10FBS培地100μL中に播種した。化合物を100DMSOSigma中で1:3で連続希釈した。これらの連続希釈物を細胞に1:200希釈で加えて、0.5DMSOの最終濃度を、200μLの全体積で達成した。プレートを37°Cで3日間インキュベートし、その後、培地を除去し、細胞を溶解させ、市販のルシフェラーゼアッセイPromega、Madison、WIを使用して、ルシフェラーゼ活性についてアッセイした。薬物処理された試料でのHCV複製レベルを未処理の対照100と定義での値に対する百分率として表し、XLFit4ソフトウェアIDBS、Emeryville、CAを使用して、データをロジスティック用量反応式y=a/1x/bcに当てはめた。以前に記載されたとおりに、EC50値を、得られた式から算出した。抗ウイルス組合せ研究レプリコン細胞を96ウェルプレートに、1ウェル当たり細胞5×103個の密度で、G-418を除いた培地100μL中に播種した。化合物3および他の化合物を100DMSO中で上記のとおりに連続希釈し、96ウェルプレートにマトリックス様式で加え、200μLの最終体積および0.5の最終DMSO濃度中に種々の薬物濃度および比を有する定義されたセットを達成した。それぞれ個々の薬物についてリバビリンは除外、EC50値を、試験される濃度範囲の中点として選択した。選択的抗ウイルス効果を有さなかったリバビリンでは、6.2μMの最高用量を選択したが、それというのも、これが、細胞毒性が観察され始めた濃度より約3倍低いものであったためである。細胞を薬物と共に3日間インキュベートし、上記に示されているとおりにルシフェラーゼ発現について分析した。それぞれの組合せ研究について、2つの独立した実験を3回繰り返して行った。組み合わせデータ分析PrichardおよびShipmanによって開発されたMacSynergyIIプログラムを使用して、データを分析した。そのソフトウェアは理論阻害を算出して、薬物間の相加的相互作用を推測しBlissIndependenceモデルに基づく、理論阻害値と観察された阻害値との間の統計的に有意差を定量化する。三次元でこれらの差違をプロットすると、Z面での上昇が化合物間の抗ウイルス相乗作用を表し、低下が抗ウイルス拮抗作用を表す表面が生じる。表面偏差の算出ボリュームは、nM2で表される。PrichardおよびShipmanによると、組合せ効果は次のとおりに定義される:ボリュームが100nM2超であれば、強い相乗作用;この量の相乗作用がおそらくインビボでは重要であるボリュームが50nM2超および100nM2以下であれば、中等度の相乗作用;この量の相乗作用がインビボでは重要であり得るボリュームが25nM2超および50nM2未満であれば、弱い相乗作用ボリュームが-25nM2超および25nM2以下であれば、相加作用ボリュームが-25nM2未満および-50nM2超であれば、弱い拮抗作用ボリュームが-100nM2超および-50nM2以下であれば、中等度の拮抗作用;この量の拮抗作用がインビボでは重要であり得るボリュームが-100nM2以下であれば、強い拮抗作用;この量の拮抗作用がおそらくインビボでは重要である。結果Huh-lucレプリコン細胞における個々の化合物についてのEC50値組合せ実験を開始する前に、Huh-lucレプリコン細胞におけるEC50値を、表IVに示されているとおりにそれぞれの化合物について決定した。細胞毒性を示し始めている濃度まで抗ウイルス活性を有さなかったリバビリンを除いて、全ての化合物が抗ウイルス効果を有した。組合せの抗ウイルス効果および薬物相互作用IFN-α、リバビリンおよび化合物1と組み合わせた場合の化合物3の抗ウイルス効果をアッセイした。相加作用からの有意な偏差を表す表面プロットをもたらすMacSynergyIIを使用して、得られたデータを分析した。相加作用からの統計的に有意な偏差の定量化によって、化合物3とIFN-αとの組合せが弱い相乗作用をもたらすことが示されたそれぞれ32および36.5nM2の相乗作用ボリューム;表V。化合物3と非ヌクレオシドNS5Bインヒビターの化合物1との組合せは、相加的抗ウイルス相互作用を示す14.5nM2の相乗作用ボリュームをもたらした。表Vに示されているとおり、化合物のいずれも、化合物3と組み合わせた場合に、相加範囲外-25nM2超の抗ウイルス拮抗作用ボリュームをもたらさなかった。これらのインビトロ抗ウイルス組合せ実験は、新規なHCVNS3プロテアーゼインヒビターの化合物3が、IFN-αと組み合わせた場合には弱い相乗作用を、リバビリンと組み合わせた場合には中等度の相乗作用を有することを示している。これらの結果は、個々の薬物のいずれの有効性も減少させることなくウイルス負荷抑制の増大を達成するために、HCV患者における現行の標準治療PEG-IFN-αおよびリバビリンと組合せて、化合物3が使用される可能性が潜在的にあることを示唆している。化合物3と非ヌクレオシド化合物1NS5Bポリメラーゼインヒビターとの組合せは、相加作用をもたらした。これらの結果は、化合物3が他にも、複数の群の特異的HCVインヒビターからなる薬物組合せを患者において探るのにも適し得ることを示している。生物学的実施例3:化合物4の組合せ材料および方法抗HCV剤化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5および化合物6は、GileadSciencesFosterCity、CAが合成した。ピュロマイシン、IFN-αおよびリバビリンはSigmaSt.Louis、MOから購入した。カルセインAMはAnaspecFremont、CAから購入した。細胞系および細胞培地この研究で使用されるHCV遺伝子型1a型レプリコン細胞系は、以前に記載されている。細胞を、10FBSHyClone、Logan、UT、CatSH30071.03、100単位/mLのペニシリン、100μg/mLのストレプトマイシンGibco、Carlsbad、CA、Cat15140-122および0.1mMの非必須アミノ酸Gibco、Carlsbad、CA、Cat11140-050が補充されている、GlutaMAXGibco、Carlsbad、CA、Cat10569-044を含むダルベッコ変法イーグル培地DMEMを含有する細胞培地中で成長させた。レプリコン細胞を0.5mg/mLのジェネティシンInvitrogen、Carlsbad、CA、Cat10131-035中に維持して、HCVレプリコンの喪失を防いだ。集密に達する前に、細胞を3~4日毎に継代した。EC50、CC50決定および組合せ研究のためのHCVレプリコンアッセイ製造者Sigma、St.Louis、MO、CatI4276が定めた緩衝液中に供給されているIFN-αを除いて、全ての化合物を100DMSOに供給した。セクション3.2に記載されている細胞培地中で連続的に希釈されるIFN-αを除いて、化合物の連続希釈を100DMSO中で行った。BiomekFXWorkstationを使用して、全ての連続希釈を384ウェルポリプロピレンプレートThermoScientific、Hudson、NH、Cat4341で行った。EC50およびCC50の決定については、試験化合物を、384ウェルプレートのカラム3~20で1:3希釈の10のステップで連続希釈した。組合せ研究のために、水平方向へ1:2希釈の9つのステップで化合物1種を連続希釈し、その際、他の化合物は、垂直方向へ1:2希釈の7つのステップで連続希釈した。これによって、種々の薬物濃度および比からなる定義されたセットが達成された。それぞれ個々の薬物のために、EC50値を、試験される濃度範囲の中点として選択した。全ての連続希釈を、同じ384ウェルプレート内の化合物1種当たり4回反復して行った。100DMSOをそれぞれの連続希釈384-ウェルプレートのカラム1~2に加えた。100μMでのHCVプロテアーゼインヒビターITMN-191をカラム23に、HCV複製の100阻害の対照として加える一方で、10mMのピュロマイシンをカラム24に、100細胞毒性の対照として加えた。BiotekμFlowWorkstationを用いて、黒色ポリスチレン384ウェルプレートGreinerBio-one、Monroe、NC、Cat781086、細胞培養処理済みの各ウェルに、2000個の懸濁HCVレプリコン細胞を含有する細胞培地ジェネティシン不含90μLを加えた。細胞培養プレートに化合物を移すために、BiomekFXWorkstationで、化合物連続希釈プレートからの化合物溶液0.4μLを細胞培養プレートに移した。最終アッセイウェル中のDMSO濃度は0.44であった。プレートを37°C、5CO2および湿度85で3日間インキュベートした。HCVレプリコンアッセイは、同じウェルから細胞毒性および抗レプリコン活性の両方を評価することができるマルチプレックスアッセイであった。CC50アッセイを初めに行った。BiotekELX405プレート洗浄機を使用して、384ウェル細胞培養プレート中の培地を吸引し、ウェルをそれぞれ1×PBS100μLで4回洗浄した。BiotekμFlowWorkstationを用いて、1×PBS中400nMのカルセインAMAnaspec、Fremont、CA、Cat25200-056を含有する溶液の50μL体積をプレートの各ウェルに加えた。プレートを室温で30分間インキュベートし、その後、PerkinElmerEnvisionプレートリーダーを用いて、蛍光シグナル励起490nm、発光520nmを測定した。EC50アッセイを、CC50アッセイと同じウェルで行った。BiotekELX405プレート洗浄機を用いて、384ウェル細胞培養プレート中のカルセイン-PBS溶液を吸引した。BiotekμFlowWorkstationを用いて、Dual-Gloルシフェラーゼ緩衝液Promega、Madison、WI、CatE298Bの20μL体積を、プレートの各ウェルに加えた。プレートを室温で10分間インキュベートした。次いで、BiotekμFlowWorkstationを用いて、Dual-GloStopGlo基質Promega、Madison、WI、CatE313BおよびDual-GloStopGlo緩衝液Promega、Madison、WI、CatE314Bの1:100混合物を含有する溶液の20μL体積をプレートの各ウェルに加えた。次いで、プレートを室温で10分間インキュベートし、その後、PerkinElmerEnvisionプレートリーダーを用いて、ルミネセンスシグナルを測定した。データ分析蛍光生成物へのカルセインAMの変換によって、細胞毒性効果を決定した。細胞毒性パーセントを式1によって算出した:[式中、Xcは、化合物処理されたウェルからの蛍光シグナルであり;MBは、ピュロマイシン処理されたウェルからの平均蛍光シグナルであり;MDはDMSO処理されたウェルからの平均蛍光シグナルである]。HCVレプリコンのレポーターrenillaルシフェラーゼから生じたルミネセンスシグナルによって、抗HCV複製活性を決定した。Xcが化合物処理されたウェルからのルミネセンスシグナルであり;MBがITMN-191処理されたウェルからの平均ルミネセンスシグナルであり;MDがDMSO処理されたウェルからの平均ルミネセンスシグナルである式1を使用して、HCVレプリコンでの阻害パーセントを算出した。細胞生存率の50低減をもたらす試験化合物濃度として、CC50値を決定した。HCV複製の50低減をもたらす試験化合物濃度として、EC50値を決定した。PipelinePilot5.0ソフトウェアパッケージAccelrys、SanDiego、CAを使用して、実験データを式2に非線形回帰フィッティングさせることによって、CC50値およびEC50値の両方を得た:[式中、yは、x濃度の化合物で観察されたHCVレプリコンの阻害であり;dは、0の化合物濃度での推定応答であり;aは、無限化合物濃度での推定応答であり;cは、中点濃度CC50またはEC50であり;bは、Hill傾斜因子である]。PrichardおよびShipmanによって開発されたMacSynergyIIプログラムを使用して組合せ研究実験データを分析した。ソフトウェアMacSynergy商標II、UniversityofMichigan、MIは、理論阻害を算出して、薬物間の相加的相互作用を推測しBlissIndependenceモデルに基づく、理論阻害値と観察された阻害値との間の統計的に有意差を定量化する。三次元でこれらの差違をプロットすると、Z面での上昇が化合物間の抗ウイルス相乗作用を表し、低下が化合物間の抗ウイルス拮抗作用を表す表面が生じる。表面偏差の算出ボリュームは、nM2で表される。PrichardおよびShipmanによると、組合せ効果は次のとおりに定義される:強い相乗作用:100nM2超中等度の相乗作用:50nM2超および100nM2以下弱い相乗作用:25nM2超および50nM2以下相加作用:25nM2以下および-25nM2超弱い拮抗作用:-25nM2以下および-50nM2超中等度の拮抗作用:-50nM2以下および-100nM2超強い拮抗作用:-100nM2以下それぞれの組合せ研究について、3つの独立した実験を、それぞれの実験において4回反復して行った。結果HCV遺伝子型1a型レプリコンアッセイにおける個々の化合物の抗ウイルス活性および細胞毒性化合物4および他の化合物の抗HCV活性および細胞毒性を、HCV遺伝子型1a型レプリコンを有するHuh-7細胞で試験した。EC50値およびCC50値を表VIに列挙する。有意な細胞毒性は全ての化合物について、試験された最高濃度まで観察されなかった。他の群の抗HCV剤と組み合わせた化合物4の抗ウイルス活性および細胞毒性HCV遺伝子型1a型レプリコンを使用して、他の抗HCV化合物と組み合わせた化合物4の抗ウイルス効果を評価した。相加作用からの有意な偏差を表す表面プロットをもたらすMacSynergyIIを使用して、結果を分析した。相加性表面からの偏差から算出される相乗作用ボリュームおよび拮抗作用ボリュームnM2を表VIIにまとめる。95の信頼区間で、平均相乗作用ボリュームおよび平均拮抗作用ボリュームは、化合物4をIFN-α、化合物2および化合物6と組み合わせた場合、25から-25nM2の間であり、このことは、それらの化合物との相加的相互作用を示している。さらに、化合物4は、化合物1、化合物5または化合物3と組み合わせた場合、25から50nM2の範囲の相乗作用ボリュームを示し、このことは、弱い相乗的相互作用を示唆している。全ての組み合わせ研究において、細胞生存率は、全ての濃度比で85超であり、全ての薬物組合せは、表VIIIに示されているとおりの細胞毒性に対して相加的効果を示している。しかしながら、化合物4は、リバビリンと組み合わせた場合、-43nM2の拮抗作用ボリュームを示し、このことは、弱いアンタゴニスト相互作用を示唆している。化合物4と共に最も高い拮抗作用を示すリバビリン濃度は、約0.5から1μMであり、これは、800mg/日の用量でヒトで観察されるリバビリンの定常状態血漿濃度6~11μMよりも約10倍低い。リバビリン6~11μMのこの生理学的濃度では、リバビリンと化合物4とのアンタゴニスト相互作用は、広範な化合物4濃度範囲0~0.44μMにわたって最小である。したがって、インビトロレプリコンシステムにおいてリバビリンと化合物4との間で観察された軽度の拮抗作用は、臨床的重要性を有しそうにない。結論化合物4ジアステレオ異性体混合物におけるの抗ウイルス活性を、現行の標準治療IFN-α/リバビリン、さらにはGileadSciencesの内部開発候補化合物1および化合物5非ヌクレオシドNS5Bインヒビター、化合物2および化合物3NS3プロテアーゼインヒビターおよび化合物6NS5Aインヒビターと組み合わせて試験した。表VIIIにまとめたとおり、化合物4は、IFN-α、化合物2および化合物6と組み合わせると相加的抗ウイルス活性を示し、化合物1、化合物5および化合物3とでは弱い相乗作用を示した。化合物4とリバビリンとの組合せは、0.5から1μMの間のリバビリン濃度で弱い拮抗作用をもたらし、これは、ヒト血漿中での定常状態生理学的濃度6~11μMのよりも約10倍低い。臨床的に適切なリバビリン濃度では、2種の化合物間でのアンタゴニスト相互作用は、些少なものとなった。生物学的実施例4:化合物5の組合せ化合物5の抗ウイルス活性をGT-1bHuh-lunet細胞化合物4についてのアッセイにおけるのと実質的に同じ方法を使用で、内部開発化合物の化合物1、化合物2および化合物3NS3プロテアーゼインヒビター、化合物6NS5Aインヒビター、化合物4C-nucNS5Bインヒビター、他にも認可されているHCV治療剤であるPEG-IFN-αおよびリバビリンと組み合わせて試験した。MacSynergyIIソフトウェアを使用して、組合せデータをBlissIndependenceモデルに基づき分析した。組合せアッセイの結果を、3回繰り返して行われた2つの独立した実験から95の信頼度で算出された平均相乗作用ボリュームおよび平均拮抗作用ボリュームnM2として表した。組合せ効果は次のとおりに定義される:ボリュームが100nM2超であれば、強い相乗作用;この量の相乗作用がインビボではおそらく重要であるボリュームが50nM2超および100nM2以下であれば、中等度の相乗作用;この量の相乗作用がインビボでは重要であり得るボリュームが25nM2超および50nM2未満であれば、弱い相乗作用ボリュームが-25nM2超および25nM2以下であれば、相加作用ボリュームが-25nM2未満および-50nM2超であれば、弱い拮抗作用ボリュームが-100nM2超および-50nM2以下であれば、中等度の拮抗作用;この量の拮抗作用がインビボでは重要であり得るボリュームが-100nM2以下であれば、強い拮抗作用;この量の拮抗作用がインビボではおそらく重要である。アロステリックNS5Bインヒビターである化合物1および化合物5の組合せは、レプリコンアッセイにおいて中等度の相乗作用をもたらした。PEG-IFN-αおよびリバビリンを包含する他のHCVインヒビターとの研究によって、相加的から弱い相乗的相互作用が明らかになった。生物学的実施例5:化合物6の組合せ材料および方法化合物化合物1、化合物2、化合物3、化合物6および化合物7は、GileadSciencesFosterCity、CAが合成した。IFN-αおよびリバビリンはSigmaSt.Louis、MOから購入した。細胞系HCV遺伝子型1b型レプリコン細胞Huh-lucをReblikonMainz、ドイツから得た。これらの細胞におけるレプリコンはI389luc-ubi-neo/NS3-3’/ETと称され、選択的耐性マーカーネオマイシンホスホトランスフェラーゼ、さらにホタルルシフェラーゼレポーター遺伝子をコードする。Huh-luc細胞を、10ウシ胎仔血清FBS;Hyclone、Logan、UT、1×ペニシリン/ストレプトマイシン、1×非必須アミノ酸および0.5mg/mLのG-418全てInvitrogen製、Carlsbad、CAが補充されているダルベッコ変法イーグル培地GlutaMaxDMEM;Invitrogen、Carlsbad、CA中で維持した。細胞を週に2回継代し、サブコンフルエントレベルで維持した。アッセイHCVHuh-lucレプリコン細胞での抗ウイルス活性アッセイレプリコン細胞を、96ウェルプレートに、1ウェル当たり細胞7×103個の密度で、G-418を除いたDMEM培地100μL中に播種した。化合物を100DMSO中で1:2で連続希釈した。連続希釈物を細胞に1:200希釈で加えて、0.5DMSOの最終濃度を200μLの全体積で達成した。プレートを37°Cで3日間インキュベートし、その後、培地を除去し、細胞を溶解させ、市販のルシフェラーゼアッセイPromega、Madison、WIを使用して、ルシフェラーゼ活性についてアッセイした。抗ウイルス組合せ研究レプリコン細胞を96ウェルプレートに、1ウェル当たり細胞7×103個の密度で、G-418を除いた培地100μLに播種した。化合物6および他の化合物を100DMSO中で1:2で連続希釈し、96ウェルプレートにマトリックス様式で加え、200μLの最終体積および0.5の最終DMSO濃度中に種々の薬物濃度および比を有する定義されたセットを達成した。それぞれ個々の薬物について、EC50値を、試験される濃度範囲の中点として選択した。細胞を3日間インキュベートし、市販のルシフェラーゼアッセイPromegaを使用して、ルシフェラーゼ発現について分析した。それぞれの組合せ研究のために、2つの独立した実験を3回繰り返して行った。細胞での細胞毒性決定レプリコン細胞を播種し、上記の抗ウイルス組合せ研究について記載されたとおりに薬物で処理した。37°Cでの3日間のインキュベーションの後に、培地を除去し、細胞を溶解させ、製造者の指示に従って、CellTiter-GloLuminescentCellViabilityAssayPromegaを使用して、細胞毒性についてアッセイした。相対光単位を、未処理の対照100と定義に対する百分率に変換した。データ分析EC50算出EC50アッセイに続いて、薬物処理された試料でのルシフェラーゼレベルを、未処理の対照でのレベル100と定義に対する百分率として表した。XLfit4ソフトウェアIDBS、Emeryville、CAを使用して、EC50値を、反復データセットの非線形回帰分析によって算出した。抗ウイルス相乗作用および拮抗作用の算出組合せアッセイに続いて、薬物処理された試料でのルシフェラーゼレベルを、未処理の対照でのレベル100と定義に対する百分率として表した。次いで、PrichardおよびShipmanによって開発されたMacSynergyIIプログラムを使用して、反復データセットを分析した。ソフトウェアMacSynergy商標II、UniversityofMichigan、MIは、理論阻害を算出して、薬物間の相加的相互作用を推測しBlissIndependenceモデルに基づく、理論阻害値と観察された阻害値との間の統計的に有意差を定量化する。三次元でこれらの差違をプロットすると、Z面での上昇が化合物間の抗ウイルス相乗作用を表し、低下が化合物間の抗ウイルス拮抗作用を表す表面が生じる。表面偏差の算出ボリュームは、nM2で表される。PrichardおよびShipmanによると、組合せ効果は次のとおりに定義される:ボリュームが100nM2超であれば、強い相乗作用;この量の相乗作用がインビボではおそらく重要であるボリュームが50nM2超および100nM2以下であれば、中等度の相乗作用;この量の相乗作用がインビボでは重要であり得るボリュームが25nM2超および50nM2未満であれば、弱い相乗作用ボリュームが-25nM2超および25nM2以下であれば、相加作用ボリュームが-25nM2未満および-50nM2超であれば、弱い拮抗作用ボリュームが-100nM2超および-50nM2以下であれば、中等度の拮抗作用;この量の拮抗作用がインビボでは重要であり得るボリュームが-100nM2以下であれば、強い拮抗作用;この量の拮抗作用がインビボではおそらく重要である。結果Huh-lucレプリコン細胞における個々の化合物の抗ウイルス活性組合せ実験を開始する前に、個々の化合物の抗ウイルス活性を、Huh-lucレプリコン細胞において決定した。背景結果と一致するEC50値が、7種全ての化合物で観察された。組合せの抗ウイルス効果および薬物相互作用HCV1b型レプリコンシステムを使用して、他のHCVインヒビターと組み合わせた場合の化合物6の抗ウイルス効果を評価した。相加作用からの有意な偏差を示す表面プロットをもたらすMacSynergyIIを使用して、得られたデータを分析した。2つの独立した実験からの相加作用からの統計的に有意な偏差の定量化を表XIIにまとめる。化合物6とIFN-αまたは化合物1との組合せは、弱い相乗作用を示しているそれぞれ32および34nM2の相乗作用ボリュームをもたらした。リバビリン、化合物2および化合物7は、それぞれ化合物6と組み合わせた場合に、61、52および51の相乗作用ボリュームを与え、これは、化合物6とこれら3種のHCVインヒビターとの間の中等度の相乗的相互作用を示している。化合物6と化合物3との組合せは、強度に相乗的な抗ウイルス相互作用を表す132nM2の相乗作用ボリュームをもたらした。いずれの化合物も、化合物6と組み合わせた場合には、相加的範囲-25nM超外の抗ウイルス拮抗作用ボリュームを与えなかった。他のHCVインヒビターと組み合わされた化合物6での細胞生存百分率抗ウイルス組合せ結果が組合せ細胞毒性によって混乱しないことを保証するために、抗ウイルスアッセイで試験されたのと同じ化合物濃度を使用して、細胞毒性を並行して調査した表XIII。全ての化合物で、細胞生存率は、試験された最高濃度での組合せについて、未処理の対照に対して少なくとも98であった。したがって、化合物6を単独でか、またはこれらの作用物質agentと組み合わせて試験しても、有意なインビトロ細胞毒性は観察されなかった。結論これらのインビトロ実験の結果は、IFN-αまたは非ヌクレオシドNS5Bポリメラーゼインヒビターの化合物1と組み合わせた場合に、化合物6が弱い抗ウイルス相乗作用を有することを示している。化合物6とリバビリン、NS3プロテアーゼインヒビターの化合物2またはヌクレオシドNS5Bポリメラーゼインヒビターの化合物7との組合せは、中等度の抗ウイルス相乗作用をもたらした。強い抗ウイルス相乗作用は、化合物6とNS3プロテアーゼインヒビターの化合物3との間で観察された。これらの薬物組合せを試験している間に、有意なインビトロ細胞毒性は同定されなかった。これらの結果は、化合物6を、現行の標準治療と合理的に組み合わせることができることを示唆している。生物学的実施例6:化合物化合物1、化合物3、化合物4および化合物6は、GileadSciencesFosterCity、CAが合成した。細胞系HCV遺伝子型1b型レプリコン細胞Huh-lucをReblikonMainz、ドイツから得た。これらの細胞におけるレプリコンはI389luc-ubi-neo/NS3-3’/ETと称され、選択的耐性マーカーネオマイシンホスホトランスフェラーゼ、さらにホタルルシフェラーゼレポーター遺伝子をコードする。Huh-luc細胞を、10ウシ胎仔血清FBS;Hyclone、Logan、UT、1×ペニシリン/ストレプトマイシン、1×非必須アミノ酸および0.5mg/mLのG-418全てInvitrogen製、Carlsbad、CAが補充されているダルベッコ変法イーグル培地GlutaMaxDMEM;Invitrogen、Carlsbad、CA中で維持した。細胞を週に2回継代し、サブコンフルエントレベルで維持した。アッセイ6日間の処理にわたって、1~1.5logほどレプリコンRNAを抑制するのに必要な化合物濃度の決定遺伝子型1b型レプリコン細胞をT-75フラスコに、細胞2.5×105個/フラスコの細胞密度でG418を除いて播種した。化合物を個々に、多様な濃度で細胞に加えた:化合物6を1pM、2pM、4pM、6pM、8pMまたは12pMのいずれかの濃度で加え、化合物4を125nM、250nM、375nM、500nMまたは1000nMで加え、化合物1を1.25nM、2.5nM、5nM、2.75nMまたは10nMで加え、化合物3を3.75nM、7.5nM、11.25nM、15nM、30nMまたは60nMの濃度で加えた。フラスコを37°Cでインキュベートし、培地および化合物を2日毎に新しくした。6日間のインキュベーションの後に、レプリコン細胞をRNA抽出およびレプリコンRNAQRT-PCR分析のために収集した。化合物の組合せによるレプリコンのキュアcureアッセイ遺伝子型1b型レプリコン細胞をT-75フラスコに、細胞2.5×105個/フラスコの密度で播種した。化合物をT-75フラスコに、次の濃度で加えた:化合物6は4pMで、化合物4は1000nMで、化合物1は10nMで、かつ化合物3は26.25nMで。フラスコを37°Cでインキュベートし、化合物および培地を2日毎に新しくした。全ての実験を2回繰り返して行い、フラスコ1およびフラスコ2として示す。6日目に、全ての細胞をフラスコ1から、RNA抽出、続くHCVレプリコン特異的QRT-PCR分析のために収集し、フラスコ2からの細胞を、G418の存在下の10cm組織培養ディッシュに蒔いて、14日間、キュアされなかったレプリコン細胞のコロニー形成を記録した。QRT-PCRアッセイ製造者のプロトコルに従って、RiboPureキットAM1924LifeTechnologiesCorporationCarlsbad、CAで、全RNAを抽出した。抽出されたRNA試料を、使用するまで-80°Cで貯蔵した。定量的RT-PCRアッセイのために、製造者のプロトコルに従ってQiagen、ValenciaCA、QiagenOne-stepQRT-PCRキットを使用した。遺伝子型1b型HCVNS3遺伝子特異的プライマーである、フォワードプライマーNS3_180FL5’-CGGCGGACTGTCTATCATGGTGC[FAM]G-’3およびリバースNS3_1805’-GGTCCTGGTCCACATTGGTGT-’3および18SrRNALUX商標[FAM]内在性コントロールプライマーセット115HM-01は、InvitrogencorporationCarlsbad、CAが作製した。リバーストランスクリプターゼステップのために、反応物を44°Cで30分間インキュベートし、次いで、リバーストランスクリプターゼ酵素を、試料を94°Cに10分間加熱することによって分解した。Q-PCRステップは、94°Cで15秒間および58°Cで30秒間の38サイクルを含んだ。結果組合せによるレプリコンのキュア実験を開始する前に、1~1.5logほど遺伝子型1b型レプリコンRNAを抑制するのに必要な化合物濃度を、化合物6、化合物4、化合物1および化合物3について決定した。レプリコンRNAのlog低下は、6日間維持された、DMSO対照処理されたレプリコン細胞におけるRNAレベルに対してのものである。組合せによる遺伝子型1b型レプリコンのキュアアッセイ化合物6、化合物4、化合物1および化合物3の化合物によるレプリコンRNA抑制を6日のアッセイにおいて、個々の化合物として、および様々な2つ、3つおよび4つの組合せ物で決定した。レプリコンRNAのlog低下は、処理フラスコと並んで6日間維持された、DMSO対照処理されたレプリコン細胞におけるRNAレベルに対してのものである。HCVレプリコンからの細胞をキュアするための様々な化合物の組合せの能力を、コロニー形成によって決定した。化合物処理を除いた後に、コロニー形成が生じ、G418の圧迫が14日間再発した。ある化合物の組合せがHCVレプリコンからの細胞集団を完全にキュアするならば、細胞がG418に対する耐性を欠いているので、コロニーは発生しない。結論これらのインビトロ実験の結果は、2種の化合物の組合せは、6日の処理にわたってウイルスRNAのlog低下を増大させ、キュアされたレプリコン細胞の率を増大させることを示している。化合物6と化合物4または化合物3との二重の組合せによって、他の全ての二重の化合物の組合せと比較してより大きなレプリコンRNAのlog抑制と、最も少ない数のキュアされなかったコロニーとが結果として生じる。3種または4種の化合物の組合せは、全てのレプリコン細胞をキュアし、それらの組合せ処理は、レプリコンRNAレベルをアッセイ検出限界まで抑制する。生物学的実施例7:HCVRNA減少アッセイ細胞系:HCV遺伝子型1a型レプリコン細胞Huh7-lunetをReBLIkonGmbHMainz、Germanyから得た。これらの細胞におけるレプリコンは、pCon1/SG-hRluc-Neoと称され、選択的耐性マーカーネオマイシンホスホトランスフェラーゼ、さらにRenillareniformisレポーター遺伝子をコードする参考文献:RobinsonMら2010年、NovelHepatitisCVirusReporterRepliconCellLinesEnableEfficientAntiviralScreeningagainstGenotype1a.Antimicrob.AgentsChemother、54巻8号:3099~3106頁。細胞を、10ウシ胎仔血清FBS;Hyclone、Logan、UT、1×ペニシリン/ストレプトマイシンおよび1×非必須アミノ酸全てInvitrogen製、Carlsbad、CAが補充されているダルベッコ変法イーグル培地GlutaMaxDMEM;Invitrogen、Carlsbad、CA中で維持した。細胞が90~95の集密に達したら、細胞を継代し、サブコンフルエントレベルで維持した。アッセイ:化合物の組合せによるHCVウイルス負荷低下のアッセイ遺伝子型1a型レプリコン細胞をT-75フラスコに、細胞106個/フラスコの細胞密度で播種した。化合物を細胞に、1×EC50、2×EC50、3×EC50、10×EC50または100×EC50に対応する調節可能な濃度で加えた。フラスコを37°Cおよび5CO2でインキュベートし;培地および化合物を3~4日毎に新しくした。細胞が90~95の集密に達するたびに、細胞を分けた。各継代について、106細胞を、新鮮な培地および化合物を有する新たなフラスコ中で維持し、少なくとも1×106細胞を収集し、RNA抽出および後続のHCV特異的QRT-PCR分析のために-80°Cで貯蔵した。細胞を、G418の存在下の10cm組織培養ディッシュに蒔いて、少なくとも14日間、キュアされていないレプリコン細胞のコロニー形成を記録した。QRT-PCRアッセイ:製造者のプロトコルに従ってRNeasyMiniKitカタログ番号74104、Qiagen、Valencia、CAを用いて、RNAを抽出した。抽出されたRNA試料を-80°Cで貯蔵した。定量的RT-PCRアッセイのために、HCV3’UTRを標的とするMultiCode-RTxPCRテクノロジープライマーEraGenBiosciences、Madison、WIを得て、HCV検出および定量化のために使用した参考文献:Mulligan,E.K.ら2009年、DetectionandQuantificationofHepatitisCVirusbyMultiCode-RTxReal-TimePCRTargetingtheHCV3’UntranslatedRegion.JournalofClinMicro.、47巻8号:2635頁。各反応について、RNA5μLを、SuperScriptIIIRTInvitrogen、Carlsbad、CA、チタンTaqDNAポリメラーゼClontech、MountainView、CAおよび2XISOlutionEraGenBiosciences、Madison、WIと共に使用した。RocheLightCycler480Indianapolis、INを使用して、アッセイを行った。逆転写酵素ステップのために、反応物を50°Cで15分間インキュベートした。試料を95°Cに2分間加熱することによって、DNAポリメラーゼを活性化させた。Q-PCRは、95°Cで5秒間、58°Cで10秒間および72°Cで20秒間の50サイクルからなった。結果化合物5、化合物6、化合物3および化合物1の化合物によるレプリコンRNA抑制を、個々の化合物として、および様々な2つ、3つおよび4つの組合せ物で決定した。レプリコンRNAのlog低下は、処理フラスコと並んで維持された、DMSO対照処理されたレプリコン細胞におけるRNAレベルに対するものである。HCVレプリコンからの細胞をキュアするための様々な化合物の組合せの能力を、コロニー形成によって決定した。化合物治療を止めた後に、コロニー形成が生じ、G418の圧迫が14日間再発した。化合物の組合せがHCVレプリコンからの細胞集団を完全にキュアするならば、細胞がG418に対する耐性を欠いているので、コロニーは発生しない。単独か、または組合せでのHCVインヒビターによるHCVRNAおよび耐性コロニーの減少を表XVIに示す。これらのインビトロ実験の結果は、2種の化合物の組合せは、ウイルスRNAのlog低下を増大させ、キュアしたレプリコン細胞の率を増大させることを示している。3種または4種の化合物の組合せは2×EC50または3×EC50で、全てのレプリコン細胞をキュアし、それらの組合せ処理は、レプリコンRNAレベルをアッセイ検出限界まで抑制する。生物学的実施例8:変異レプリコン:Renillaルシフェラーゼレポーターを持つGT1bレプリコンおよびGT1aレプリコンを使用して、変異レプリコンを生じさせた。部位特異的変異誘発によって、変異をレプリコン構成物に導入し、配列決定によって確認した。インビトロ転写によって変異レプリコンRNAをDNAから生じさせ、Huh-7LunetまたはC1細胞に形質移入した。薬物感受性アッセイレプリコンRNAを形質移入した後のHuh-7細胞を96ウェルプレートに、1ウェル当たり細胞5×103個の密度で、DMEM培地100μL中に播種した。化合物を100DMSOSigma中で1:3で連続希釈した。これらの連続希釈物を細胞に1:200希釈で加えて、0.5DMSOの最終濃度を200μLの全体積で達成した。プレートを37°Cで3日間インキュベートし、その後、培地を除去し、細胞を溶解させ、市販のルシフェラーゼアッセイPromega、Madison、WIを使用して、ルシフェラーゼ活性についてアッセイした。Prismを使用して、EC50値を算出した。結果表XVIIおよびXVIIIに、対応する野生型GT1bまたはGT1aと比較しての、変異体のEC50における倍数変化をまとめている。比較のために、0~3の倍数変化は感受性とみなし、3~10の倍数変化は低いとみなし、10~50の倍数変化は中等度とみなし、5超の倍数変化は高いとみなす。結論全ての単一NS3PI耐性変異体が、化合物6、化合物4、化合物1、IFNおよびRBVに対して完全な感受性を保持している。PIおよびNS5Aインヒビターに対する耐性を付与する二重クラス変異体dualclassmutantは、化合物1、化合物4、化合物5、IFNおよびRBVに対しては感受性であった。同様に、PIおよび化合物1に対する耐性を付与する二重クラス変異体は、化合物6、化合物4、化合物5、IFNおよびRBVに対しては感受性であった。最後に、PI、NS5Aおよび化合物1に対する耐性を付与する三重クラス変異体は、化合物4、化合物5、IFNおよびRBVに対しては感受性を維持した。臨床的実施例1:化合物1および化合物2の組合せの抗HCV活性の臨床的試験この臨床的実施例によって、化合物1および化合物2にリバビリンを加えた組合せは、リバビリンを伴わない化合物1と化合物2との組合せよりも、HCVウイルス負荷の減少およびHCVウイルスリバウンドの抑制において有効であることを示す。臨床試験の設計:慢性遺伝子型1型HCV感染を有する処置未経験の被験体における28日間の、化合物2および化合物1単独およびリバビリンと組合せた化合物2および化合物1のフェーズ2無作為化非盲検試験。28日間にわたって、アーム1Arm1の被験体は、両方とも1日2回BID投与される75mgの化合物240mgの化合物1を受け2剤レジメン、アーム2の被験体は、両方ともBID投与される75mgの化合物240mgの化合物1に加えて、BID投与されるリバビリンも受けた3剤レジメン。28日目に、全ての被験体が、PEG/リバビリンを開始することとした。加えて、そのプロトコルは、不十分なウイルス学的応答5日目までにベースラインのHCVRNAからの2log10IU/mL未満の減少またはウイルスリバウンド絶対値が1000IU/mL超であって、5日目以降に存在する2つの時点にわたって確認された最下点からの0.5log10IU/mL超のHCVRNA上昇を有する被験体が、28日目の前にPEG/RIBAを開始することをを要求した。不十分なウイルス学的応答を有する被験体では、ペグ化インターフェロンPEGおよびリバビリンRIBAの組合せを28日目の前に、化合物2化合物1を継続しながら、また継続せずに開始した。結果として、試験の28日目までに、被験体は4つの処置のうちの1つを受けた:i化合物2化合物1ii化合物2化合物1RIBAiii化合物2化合物1PEG/RIBAまたはivPEG/RIBA。全部で31例の被験体を登録し、投薬を開始した16例の被験体がアーム1において2剤レジメンを受け、15例の被験体がアーム2において3剤レジメンを受けた。予備的な被験体の人口統計およびベースラインの特徴表XIXは全般的に、アーム2の方が遺伝子型1b型を有する被験体の人数が多かったことは別として、アーム1と2とで匹敵した。4例の被験体がスクリーニングでHCV遺伝子型1b型と同定されたが1例の被験体は2剤レジメンで、3例の被験体は3重レジメンで、さらに分析したところ、遺伝子型1a型または1b型として確認されず、さらなる評価を進めているところである。重大な有害事象を経験した被験体はいない。試験薬物療法は全般的に耐容性が良好であり、その際、試験薬物の中止に至った唯一の、処置により発現した有害事象であった1例のグレード3の疲労を除いて、全ての有害事象が重症度においてグレード1~2であった。PEG/リバビリンを開始する前に、1例を超える被験体で生じた最も一般的な、処置により発現した有害事象は、アーム1で頭痛n=5および下痢もしくは悪心それぞれn=3、ならびにアーム2で頭痛n=7、下痢もしくは疲労それぞれn=3、悪心、無力症、そう痒症pruritisまたは不眠症それぞれn=2であった。化合物2化合物1を、PEG/RIBAと組み合わせて与え、その際、1人を超える被験体で生じた唯一の有害事象は、両方ともPEG/RIBA療法で一般的な有害事象であるインフルエンザ様疾病n=5および筋肉痛n=3であった。検査値異常laboratoryabnormalityに関しては、28日の処置期間の間に、グレード4の事象はなかった。試験薬物を受けた被験体のうち、リバビリンを含有するアーム2において、2件の、処置により発現した総ビリルビンにおけるグレード3の上昇があった7日目に生じたが、試験薬物の継続投与で解消。他にも、この投薬アームリバビリンを含むにおける他の被験体のうち、総ビリルビンの、2例のグレード-1の上昇および1例のグレード-2の上昇があった。アーム-1リバビリンなしにおける被験体では、4件のグレード-1の総ビリルビン上昇があった。ALT値は、両方のアームにおいて14日目までにベースラインから約40U/L減少した。中央値QTcFは、いずれの試験アームにおいてもベースラインから有意に変化せず、QTc異常によって、試験薬物を中止した被験体はいなかった。予備的安全性データを表XXにまとめる。血漿HCVRNAを週に約2回監視して、PEG/RIBAの早期開始のために、プロトコル規定の診断基準に関連するウイルス学的応答を測定した。HCVRNA値の予備的分析から、HCVRNAにおける最大低下の中央値は、2剤レジメンでは3.9log10IU/mL、3剤レジメンでは5.0log10IU/mLであった。HCVRNAの最大低下までの時間の中央値は、2剤レジメンでは7日間、3剤レジメンでは14日間であり、この際、その差違は、リバビリン含有アームにおけるウイルスブレークスルーの発生および発症の遅延によった。2剤レジメンを受けた15例の被験体のうち3例20および3剤レジメンを受けた13例の被験体のうち10例77は、最低のHCVRNA値≦30IU/mL非GT1被験体は除くを有した。化合物2/化合物1を受けた13例/16例81の被験体および化合物2/化合物1/リバビリンを受けた6例/15例40の被験体は、試験の28日目に予定されていた開始の前に、PEGまたはPEG/リバビリンを開始した。ウイルス学的転帰の追加の詳細は、次に示される。結果化合物2化合物1単独およびRIBAと組み合わせた化合物2化合物1は、PEGまたはPEG/リバビリンを加える前と後の両方で、この試験におけるHCV被験体によって最大28日間にわたり耐容性が良好であった。両方のレジメンがHCVRNAの強力な抑制をもたらし、活性は3薬レジメンでより大きく、かつより持続的であった。表XXIに示されているデータは、リバビリンの不在と比較して、リバビリンの存在下での化合物2化合物1の組合せに応答して、最大HCVRNAレベルの中央値および最大HCVRNAレベルの平均値の両方において約10倍超の低下があったことを示している。他にも、50IU/mL未満のHCVRNA最低値を有する研究対象の人数は、リバビリンの不在下よりも、リバビリンの存在下において多い。これらの結果は、インターフェロンの不在下で、リバビリンが、化合物1および化合物2の組合せの抗ウイルス活性を有意に強化することを示している。加えて、HCVが変異して、抗ウイルス薬物に対する感受性が低くなったときに結果として生じるHCVウイルス負荷の増大の尺度であるHCVブレークスルーまでの平均時間は、リバビリンの不在下よりもリバビリンの存在下でのほうが長い。さらに、ウイルスブレークスルーを示した被験体の人数は、リバビリンの不在下よりもリバビリンの存在下でのほうがかなり少ない。これらの結果は、HCVウイルスが、リバビリンの存在下では化合物1および化合物2の組合せに対して耐性を発生しにくいことを示している。さらに、表XXIに示されているデータは、リバビリンの存在下では急速なウイルス学的応答RVRを達成した患者の人数が、リバビリンの不在下においてよりも有意に多いことを示している。RVRの達成は、HCV感染の治癒と正に相関している。まとめると、表XXIに表されているデータは、化合物1、化合物2およびリバビリンの組合せは、インターフェロンの投与の不在下であっても、HCVウイルス負荷の急速かつ臨床的に有意な減少をウイルスリバウンドの減少と共にもたらすことを示している。本明細書では、本発明の具体的な実施形態を例示し、かつ詳細に記載したが、本発明は、それらの実施形態に限定されない。上記で詳述した記載は、本発明の例示として提供したものであって、本発明の何らかの制限を構成するとは解釈されるべきではない。変更形態は当業者には明白であり、本発明の趣旨から逸脱していない全ての変更形態が、添付の特許請求の範囲に包含されることが意図されている。"