"少なくとも90の天然ヒト白血球抗原および多くても10の変性ヒト白血球抗原を含む、組成物。前記ヒト白血球抗原が、クラスIヒト白血球抗原、クラスIIヒト白血球抗原およびそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項1に記載の組成物。前記ヒト白血球抗原がクラスIヒト白血球抗原である、請求項2に記載の組成物。前記ヒト白血球抗原のうちの少なくとも90が、同じ対立遺伝子のものである、請求項1に記載の組成物。前記ヒト白血球抗原が固体担体に結合される、請求項1に記載の組成物。前記固体担体が、複数のビーズ、複数のマイクロビーズ、複数の微粒子、複数のマイクロスフィア、ウェル、膜、ポリマー、フィルターおよびマイクロアレイならびにそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項5に記載の組成物。前記固体担体が複数のマイクロビーズである、請求項5に記載の組成物。前記固体担体が、シリカ、金、ラテックス、ポリスチレン、ポリスルホン、ヒドロゲル、ポリ塩化ビニル、ガラスおよびそれらの組み合わせからなる群より選択される材料を含む、請求項5に記載の組成物。前記固体担体が検出可能な標識を含む、請求項5に記載の組成物。前記検出可能な標識が、蛍光色素、放射性標識、磁気標識、バーコードまたはそれらの組み合わせである、請求項9に記載の組成物。前記ヒト白血球抗原が、前記固体担体に共有結合される、請求項5に記載の組成物。複数の前記固体担体を含む、請求項5に記載の組成物であって、ここで、該複数の固体担体のうちのある特定の固体担体に結合した前記ヒト白血球抗原のうちの少なくとも90が、同じ対立遺伝子のものであり、該複数の固体担体のうちの各々の固体担体が、該複数の固体担体のうちのその他の固体担体に関して、異なるヒト白血球抗原対立遺伝子を結合する、組成物。前記天然ヒト白血球抗原および前記変性ヒト白血球抗原がクラスIヒト白血球抗原である、請求項12に記載の組成物。前記複数の固体担体が、4またはそれより多い固体担体を含む、請求項12に記載の組成物。前記複数の固体担体が、8またはそれより多い固体担体を含む、請求項12に記載の組成物。前記複数の固体担体が、16またはそれより多い固体担体を含む、請求項12に記載の組成物。前記複数の固体担体が、32またはそれより多い固体担体を含む、請求項12に記載の組成物。少なくとも90の天然ヒト白血球抗原および多くても10の変性白血球抗原を含む組成物を作製する方法であって、該方法は:a.天然ヒト白血球抗原および変性ヒト白血球抗原を含む第1の組成物と、セリンプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼ、またはアミダーゼとを、該セリンプロテアーゼ、該リパーゼ、該エステラーゼ、または該アミダーゼが、該変性ヒト白血球抗原を消化する条件下で接触させる工程;ならびにb.該セリンプロテアーゼ、該リパーゼ、該エステラーゼ、または該アミダーゼを中和して、少なくとも90の天然ヒト白血球抗原および多くても10の変性白血球抗原を含む結果として生じる組成物を得る工程、を包含する、方法。前記ヒト白血球抗原が、天然クラスIヒト白血球抗原および変性クラスIヒト白血球抗原を含む、請求項18に記載の方法。前記ヒト白血球抗原が、1またはそれより多い固体担体に結合される、請求項18に記載の方法。前記ヒト白血球抗原が、複数のマイクロビーズまたは微粒子に結合される、請求項20に記載の方法。前記第1の組成物を、セリンプロテアーゼと接触させる、請求項18に記載の方法。前記セリンプロテアーゼが、トリプシン、キモトリプシン、エラスターゼ、サブチリシンおよびこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項22に記載の方法。前記第1の組成物をリパーゼと接触させる、請求項18に記載の方法。前記リパーゼがホスホリパーゼである、請求項24に記載の方法。前記第1の組成物を、エステラーゼと接触させる、請求項18に記載の方法。前記エステラーゼが、アセチルコリンエステラーゼである、請求項26に記載の方法。前記エステラーゼが、チオエステラーゼである、請求項26に記載の方法。前記第1の組成物を、アミダーゼと接触させる、請求項18に記載の方法。天然ヒト白血球抗原に結合する抗体をスクリーニングする方法であって、該方法は:a.サンプルと請求項5に記載の組成物とを接触させる工程;b.該組成物への抗体の結合を検出する工程であって、該組成物への抗体の結合は、該天然ヒト白血球抗原に特異的な抗体を示す、工程、を包含する、方法。抗体の結合を検出する前記工程を、フローサイトメトリーを使用して実行する、請求項30に記載の方法。前記抗体の結合を検出する前記工程を、二次抗体を使用して実行する、請求項30に記載の方法。前記二次抗体が、放射性標識、蛍光標識、酵素標識、アビジン標識、ビオチン標識およびそれらの組み合わせからなる群より選択される標識を含む、請求項32に記載の方法。前記組成物が、複数のマイクロビーズまたは微粒子を含む、請求項30に記載の方法。前記組成物が複数のマイクロビーズを含み、該複数のマイクロビーズのうちの各々のマイクロビーズが検出可能な標識を含む、請求項34に記載の方法。前記検出可能な標識が、蛍光色素、放射性標識、磁気標識またはバーコードである、請求項35に記載の方法。請求項5に記載の組成物および該組成物への抗体の結合を検出するための試薬を含む、キット。前記試薬が二次抗体を含む、請求項37に記載のキット。前記二次抗体が、放射性標識、蛍光標識、酵素標識、アビジン標識およびビオチン標識からなる群より選択される標識を含む、請求項38に記載のキット。4.要旨例えば、天然HLAに対する抗体を検出し得る組成物および方法が、本明細書中で提供される。最初の局面において、天然HLAおよび変性HLAを含む組成物が本明細書中で提供され、ここでその天然HLAは、相当量存在する。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも90が天然のものであり、そしてHLAのうちの多くても10が変性している。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも95が天然のものであり、そしてHLAのうちの多くても5が変性している。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも99が天然のものであり、そしてHLAのうちの多くても1が変性している。いくつかの実施形態において、天然HLAおよび変性HLAを、クラスIHLA、クラスIIHLA、およびそれらの組み合わせからなる群より選択する。いくつかの実施形態において、そのHLAはクラスIHLAである。いくつかの実施形態において、そのHLAは、クラスIIHLAである。いくつかの実施形態において、そのHLAは、クラスIHLAおよびクラスIIHLAの組み合わせである。天然HLAおよび変性HLAは、同じ対立遺伝子、または2つ以上の異なる対立遺伝子のものであり得る。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも90が同じ対立遺伝子のものである。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも95が同じ対立遺伝子のものである。他の実施形態において、HLAのうちの少なくとも99が同じ対立遺伝子のものである。いくつかの実施形態において、天然HLAおよび変性HLAは、固体担体solidsubstrateに結合する。そのHLAを、当業者に公知のあらゆる技術によって、その固体担体に結合し得る。いくつかの実施形態において、そのHLAをその固体担体に直接結合する。他の実施形態において、そのHLAをその固体担体に間接的に結合する。その固体担体は、当業者に公知のあらゆる適当な材料から作製され得る。いくつかの実施形態において、その固体担体は、シリカ、金、ラテックス、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリスルホン、ヒドロゲル、ポリ塩化ビニル、ガラス、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される材料を含む。さらに、その固体担体の形態は、当業者によって適当とみなされる任意の形態であり得る。いくつかの実施形態において、その固体担体は、複数のビーズ、複数のマイクロビーズ、複数の微粒子microparticle、複数のマイクロスフィア、ウェル、膜、ポリマー、フィルター、マイクロアレイおよびそれらの組み合わせからなる群より選択される。いくつかの実施形態において、その固体担体は、複数のマイクロビーズである。いくつかの実施形態において、その固体担体は、検出可能な標識を含む。いくつかの実施形態において、その検出可能な標識は、蛍光色素、放射性標識、磁気標識、またはバーコードを含む。ある実施形態において、その検出可能な標識は、蛍光色素である。別の局面において、複数の固体担体を含むパネルが本明細書中で提供され、ここでその複数の固体担体のうちの各固体担体が、HLAに結合している、ここでHLAのうちの少なくとも90が天然のものであり、そしてHLAのうちの多くても10が変性している、ここで複数の固体担体のうち特定の固体担体に結合したHLAの少なくとも90が同じ対立遺伝子のものであり、そしてここで複数の固体担体のうちの各固体担体が、複数の固体担体のうちの他の固体担体に関して、異なるHLAに結合している。いくつかの実施形態において、そのHLAは、クラスIHLA、クラスIIHLA、およびそれらの組み合わせからなる群より選択されるHLAを含む。いくつかの実施形態において、その複数の固体担体は、4個の固体担体、8個の固体担体、16個の固体担体、または32個の固体担体を含む。別の局面において、少なくとも90の天然HLAおよび多くても10の変性HLAを含む組成物を作製するための方法が本明細書中で提供される。その方法は、a天然HLAおよび変性HLAを含む第1の組成物を、セリンプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼ、またはアミダーゼと、そのセリンプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼ、またはアミダーゼが変性HLAを切断する条件下で接触させる工程;ならびにbそのセリンプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼ、またはアミダーゼを中和して、結果としてできる、少なくとも90の天然HLAおよび多くても10の変性HLAを含む組成物を生じる工程を包含する。ある実施形態において、そのHLAは、溶液中に懸濁している。ある実施形態において、そのHLAは1つ以上の固体担体に結合している。特定の実施形態において、そのHLAは、複数のマイクロビーズまたは微粒子に結合している。その方法のいくつかの実施形態において、そのHLAを、セリンプロテアーゼと接触させる。特定の実施形態において、そのセリンプロテアーゼはトリプシンである。いくつかの実施形態において、そのHLAを、リパーゼと接触させる。特定の実施形態において、そのリパーゼはホスホリパーゼである。いくつかの実施形態において、そのHLAを、エステラーゼと接触させる。特定の実施形態において、そのエステラーゼは、アセチルコリンエステラーゼである。他の実施形態において、そのエステラーゼは、チオエステラーゼである。いくつかの実施形態において、そのHLAをアミダーゼと接触させる。別の局面において、天然HLAに対する抗体をスクリーニングする方法が、本明細書中で提供される。この方法は、aサンプルを、固体担体に結合したHLAを含む組成物と接触させる工程であって、ここでHLAのうちの少なくとも90が天然のものであり、そしてHLAのうちの多くても10が変性している、工程;ならびにb抗体の組成物に対する結合を検出する工程を含み、ここで抗体の組成物への結合は、天然HLAに対する抗体を示す。いくつかの実施形態において、そのサンプルは生物学的サンプルである。いくつかの実施形態において、そのサンプルを、ヒト被験体から採取する。いくつかの実施形態において、そのサンプルは、ヒト被験体から採取した血液サンプルである。その組成物に対する抗体の結合の検出を、当業者に公知のあらゆる技術によって行い得る。いくつかの実施形態において、抗体の結合の検出を、フローサイトメトリーを用いて行う。いくつかの実施形態において、抗体の結合の検出を、二次抗体を用いて行う。特定の実施形態において、その二次抗体は、放射性標識、蛍光標識、酵素標識、アビジン標識、ビオチン標識、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される標識を含む。別の局面において、天然HLAに対する抗体を検出するためのキットが、本明細書中で提供される。これらのキットは、a固体担体に結合したHLAを含む組成物であって、ここでHLAのうちの少なくとも90が天然のものであり、そしてHLAのうちの多くても10が変性している、組成物、ならびにbその組成物に対する抗体の結合を検出するための試薬を含む。いくつかの実施形態において、その試薬は、二次抗体を含む。ある実施形態において、その二次抗体は、放射性標識、蛍光標識、酵素標識、アビジン標識、ビオチン標識、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される、検出可能な標識を含む。本明細書中で提供される組成物および方法は、変性HLAに対する抗体の望ましくない検出無しに、天然HLAに対する抗体の検出を有利に可能にする。天然HLAに特異的な抗体の検出は、ある例において、例えば変性ではなく天然HLAに対する抗体の存在が、移植の失敗を予測する場合、有用である。これらの状況下で、本明細書中で提供される組成物および方法は、見込みのあるドナーが、レシピエントにおける変性HLAに対する抗体の検出によって引き起こされる、偽陽性のシグナルに起因して除外されることを防止することを助け得る。6.実施形態の詳細な説明6.1定義本明細書中で使用される場合、天然、天然ヒト白血球抗原および天然HLAという用語は、その天然の状態で、HLAの細胞外部分の構造的および抗原的特性を維持する、HLAまたはその断片を指す。本明細書中で使用される場合、天然クラスIヒト白血球抗原および天然クラスIHLAという用語は、重鎖またはその断片に非共有結合したβ2ミクログロブリンドメインを含む、その天然の状態でクラスIHLAの細胞外部分の構造的および抗原的完全性を維持する、クラスIヒト白血球抗原またはその断片を指す。いくつかの実施形態において、天然クラスIHLAは、W6/32およびBIH抗体OneLambda,Inc.に結合し得る。本明細書中で使用される場合、天然クラスIIヒト白血球抗原および天然クラスIIHLAという用語は、お互いに非共有結合した2つのグリコシル化ポリペプチド鎖を含むヘテロダイマーを含む、その天然の状態でクラスIIHLAの細胞外部分の構造的および抗原的完全性を維持する、クラスIIヒト白血球抗原またはその断片を指す。いくつかの実施形態において、天然クラスIIHLAは、HB-145抗体HLA-DP、HLA-DQ、HLA-DRに対する、およびHB-180抗体HLA-DQおよびHLADRに対するAmericanTypeCulturalCollectionATCCに結合し得る。本明細書中で使用される場合、変性、変性ヒト白血球抗原、および変性HLAという用語は、天然のコンフォメーションconfirmationではない細胞外ドメインを含むHLAを指す。本明細書中で使用される場合、変性クラスIヒト白血球抗原および変性クラスIHLAという用語は、β2ミクログロブリンドメインを欠くクラスIヒト白血球抗原またはその断片を指す。いくつかの実施形態において、変性クラスIHLAは、HC10抗体OneLambda,Inc.およびHB296抗体ATCCに結合し得る。本明細書中で使用される場合、変性クラスIIヒト白血球抗原および変性クラスIIHLAという用語は、モノマーコンフォメーションconfirmationのクラスIIヒト白血球抗原またはその断片を指す。いくつかの実施形態において、変性クラスIIHLAは、HB-298HLA-DRα鎖に対する抗体ATCCに結合し得る。本明細書中で使用される場合、固体担体という用語は、HLAを結合し得、そして本明細書中で提供される方法と適合性である、あらゆる固体担体を指す。固体担体の例は、複数のビーズ、複数のマイクロビーズ、複数の微粒子、複数のマイクロスフィア、ウェル、膜、ポリマー、フィルター、マイクロアレイおよびそれらの組み合わせを含む。本明細書中で使用される場合、同じHLA対立遺伝子という用語は、同様の構造および抗原的特性を共有し、そして同じHLA遺伝子座および対立遺伝子由来である、2つ以上のHLA分子またはその断片を指す。本明細書中で使用される場合、異なるHLA対立遺伝子という用語は、異なる構造および抗原的特性を有し、そして異なるHLA遺伝子座および対立遺伝子由来である、HLA分子またはその断片を指す。6.2天然HLAに対する抗体を検出するための組成物少なくとも90の天然HLAおよび多くても10の変性HLAを含む組成物が、本明細書中で提供される。ある実施形態において、その組成物を、天然HLAに対する抗体を検出するために使用し得る。天然HLAに対する抗体の検出は、例えば移植片拒絶反応の可能性の決定において有用であり得る。ある実施形態において、その組成物はまた、HLAワクチンの開発、およびエフェクターT細胞結合アッセイにおいて有用であり得る。その組成物を、本明細書中で記載される方法を含む、当業者に明らかであるあらゆる技術によって作製し得る。その組成物の各要素を、下記でさらに詳細に議論する。6.2.1.天然HLAいくつかの実施形態において、本明細書中で提供される組成物は、少なくとも90の天然HLAおよび多くても10の変性HLAを含む。いくつかの実施形態において、そのHLAは固体支持体に結合している。他の実施形態において、そのHLAは溶液中である。天然クラスIHLAは、ほとんどの有核ヒト細胞に存在する、57kDaの糖タンパク質である。天然クラスIHLAは、典型的には12kDaのβ2ミクログロブリンドメインを含む軽鎖に結合した、45kDaのポリペプチド重鎖を含む。ある実施形態において、その重鎖は、軽鎖に非共有結合している。その重鎖は、典型的には3つのαサブユニット、膜貫通ドメイン、および細胞質尾部を含む。α1およびα2サブユニットが、ペプチドリガンド結合のための結合溝を形成する。対照的に、変性クラスIHLAは、β2ミクログロブリンドメインを欠く。クラスIHLA重鎖は、3つの主要な遺伝子HLA-A、HLA-B、およびHLA-Cのうちの1つ、または3つのマイナーな遺伝子HLA-E、HLA-F、およびHLA-Gのうちの1つによってコードされる。これらの遺伝子座のそれぞれにおける対立遺伝子バリエーションが、クラスIHLAによって示される多型に寄与することを助ける。特定のクラスIHLAを、遺伝子座、およびそのクラスIHLAが発現する特定の対立遺伝子によって分類し得る。例示的なクラスIHLA対立遺伝子を、表1HLA-A対立遺伝子、表2HLA-B対立遺伝子、および表3HLA-C対立遺伝子に列挙する。天然クラスIIHLAは、専門化抗原提示細胞例えばBリンパ球、樹状細胞、およびマクロファージの表面に存在する、多型性の61kDaヘテロダイマータンパク質である。クラスIIHLAは、3つのサブクラス:HLA-DP、HLA-DQ、およびHLA-DRに分けられる。天然クラスIIHLAは、典型的にはお互いに結合したα鎖およびβ鎖を含む。ある実施形態において、そのα鎖およびβ鎖は、お互いに非共有結合している。対照的に、変性クラスIIHLAは、モノマータンパク質である。クラスIIHLAの各鎖は、細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、および細胞質尾部を含む。6個の主なクラスIIHLA遺伝子HLA-DPA1、HLA-PB1、HLA-DQA1、HLA-DQB1、HLA-DRAおよびHLA-DRB1が存在し、それぞれの遺伝子はα鎖またはβ鎖のいずれかをコードする。クラスIHLA遺伝子と同様、各クラスIIHLA遺伝子は、多くの対立遺伝子を含む。クラスIHLAおよびクラスIIHLAを、Peiら、Transplantation751:43-492003において記載されたような組換えDNA技術を含む、当業者に公知のあらゆる技術を用いて作製し得る。いくつかの実施形態において、その組成物は、相当量の天然HLAを含む。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも90が天然のものであり、そしてHLAのうちの多くても10が変性している。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも95が天然のものであり、そしてHLAのうちの多くても5が変性している。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも99が天然のものであり、そしてHLAのうちの多くても1が変性している。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも99.5が天然のものであり、そしてHLAのうちの多くても0.5のHLAが変性している。これらの組成物を作製するための技術を、下記で記載する。いくつかの実施形態において、その組成物は、クラスIHLA、クラスIIHLA、およびそれらの組み合わせからなる群より選択されるHLAを含む。いくつかの実施形態において、その組成物はクラスIHLAを含む。いくつかの実施形態において、その組成物はクラスIIHLAを含む。いくつかの実施形態において、その組成物は、クラスIHLAおよびクラスIIHLAの組み合わせを含む。その組成物は、全長天然HLA、またはその断片を含み得る。いくつかの実施形態において、その組成物は、全長天然クラスIHLAを含み、各クラスIHLAは、β2ミクログロブリン鎖に非共有結合した重鎖を含む。いくつかの実施形態において、その組成物は、全長クラスIIHLAを含み、各クラスIIHLAは、β鎖に非共有結合したα鎖を含む。いくつかの実施形態において、各HLAは、天然HLA細胞外ドメインの構造上のおよび抗原的完全性を破壊しない、欠失、付加、またはアミノ酸置換のような修飾を含む。いくつかの実施形態において、各HLAは、天然クラスIHLAの細胞外ドメインを含むクラスIHLAである。いくつかの実施形態において、各HLAは、天然クラスIHLAの細胞外ドメインおよび膜貫通ドメインの断片を含むクラスIHLAである。いくつかの実施形態において、各HLAは、天然クラスIHLAの細胞外ドメインおよび膜貫通ドメインを含むクラスIHLAである。いくつかの実施形態において、各HLAは、天然クラスIHLAの細胞外ドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞質尾部の断片を含むクラスIHLAである。いくつかの実施形態において、各HLAは、天然クラスIIHLAの細胞外ドメインを含むクラスIIHLAである。いくつかの実施形態において、各HLAは、天然クラスIIHLAの細胞外ドメインおよび膜貫通ドメインの断片を含むクラスIIHLAである。いくつかの実施形態において、各HLAは、天然クラスIIHLAの細胞外ドメインおよび膜貫通ドメインを含むクラスIIHLAである。いくつかの実施形態において、各HLAは、天然クラスIIHLAの細胞外ドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞質尾部の断片を含むクラスIIHLAである。本明細書中で提供される組成物は、同じ対立遺伝子または2つ以上の異なる対立遺伝子のHLAを含み得る。同じ対立遺伝子のHLAは、同じ構造および抗原的特性を共有し、そして同じHLA遺伝子座および対立遺伝子由来である。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも90が同じ対立遺伝子のものである。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも95が同じ対立遺伝子のものである。他の実施形態において、HLAのうちの少なくとも99が同じ対立遺伝子のものである。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも90が、同じ対立遺伝子のものであり、そしてHLA-AクラスIHLAを含む。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも90が、同じ対立遺伝子のものであり、そして表1に列挙したHLA-AクラスIHLAを含む。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも90が、同じ対立遺伝子のものであり、そしてHLA-BクラスIHLAを含む。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも90が、同じ対立遺伝子のものであり、そして表2に列挙したHLA-BクラスIHLAを含む。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも90が、同じ対立遺伝子のものであり、そしてHLA-CクラスIHLAを含む。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも90が、同じ対立遺伝子のものであり、そして表3に列挙したHLA-CクラスIHLAを含む。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも90が、同じ対立遺伝子のものであり、そしてHLA-DPクラスIIHLAを含む。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも90が、同じ対立遺伝子のものであり、そしてHLA-DQクラスIIHLAを含む。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも90が、同じ対立遺伝子のものであり、そしてHLA-DRクラスIIHLAを含む。6.2.2.固体担体ある実施形態において、本明細書中で提供されるHLAは、固体担体に結合している。固体担体に結合した天然HLAは、組成物が天然HLAに対する抗体に結合することを可能にする。結合した天然HLAに対する抗体を、当業者に公知のあらゆる技術を用いて検出し得る。ある実施形態において、固体担体に結合した相当量のHLAが天然のものである。本明細書中で使用される場合、相当量は、変性HLAに特異的な抗体の有意な結合無しに、天然HLAに対する抗体の結合および検出を可能にするあらゆる量であり得る。この量を、固体担体に結合したHLAの総数に対する天然HLAの総数のパーセンテージとして表し得る。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも75が天然のものである。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも80が天然のものである。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも85が天然のものである。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも90が天然のものである。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも95が天然のものである。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも99が天然のものである。いくつかの実施形態において、HLAのうちの少なくとも99.5が天然のものである。HLAを、当業者に公知のあらゆる技術によって、固体担体に結合し得る。さらに、HLAを固体担体に直接、または間接的に結合し得る。いくつかの実施形態において、HLAを固体担体に直接結合する。いくつかの実施形態において、HLAを、吸収、化学的なカップリングによって、またはHLAに付加した尾部エレメントを介した化学的な連結によって、固体担体に直接結合する。ある実施形態において、HLAを受動的吸収によって、担体に直接結合する。Cantareroら、Anal.Biochem.、105:373-3821980。いくつかの実施形態において、HLAを、連結部分によって固体担体に間接的に結合する。いくつかの実施形態において、その連結部分は、抗体、レクチン、CD8分子、CD4分子、T細胞受容体およびその断片からなる群より選択される。いくつかの実施形態において、その連結部分は、二機能性架橋剤である。有用な二機能性架橋剤は、当業者に公知である。その固体担体は、HLAに結合し得る、当業者に公知のあらゆる材料から作製され得る。固体担体のための周知の材料は、ガラス、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリエチレン、デキストラン、ナイロン、アミラーゼ、天然および修飾セルロース、ポリアクリルアミド、ポリスルホン、ヒドロゲル、ポリビニルおよび磁鉄鉱を含む。いくつかの実施形態において、その固体担体は、シリカ、金、ラテックス、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリスルホン、ヒドロゲル、ポリ塩化ビニル、ガラス、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される材料を含む。さらに、その固体担体は、当業者によって適当であるとみなされるあらゆる構造上の構成を有し得る。固体担体は、複数のビーズ、複数のマイクロビーズ、複数の微粒子、複数のマイクロスフィア、ウェル、膜、ポリマー、フィルター、マイクロアレイおよびそれらの組み合わせを含み得る。いくつかの実施形態において、その固体担体は、複数のマイクロビーズである。有用なマイクロビーズは、Luminex,Inc.、InvirogenCorp.、Polysciences,Inc.およびBangsLaboratories,Inc.等のような供給源から商業的に入手可能である。ある実施形態において、そのマイクロビーズは、直径2μmから8μmである。ある実施形態において、そのマイクロビーズは、直径4μmから6μmである。いくつかの実施形態において、その固体担体は、複数の微粒子である。いくつかの実施形態において、その微粒子は、ナノ結晶nanocrystalまたは量子ドットである。その固体担体はまた、HLAに結合した抗体の同定、分離および分類を可能にし得る、検出可能な標識、またはあらゆる他の同定する特徴を含み得る。例えば、その担体は、マイクロビーズを、フローサイトメトリーを用いて分類することを可能にするフルオロフォアでそれぞれ標識された複数のマイクロビーズであり得る。検出可能な標識は、蛍光色素、放射性標識、磁気標識、バーコードおよびそれらの組み合わせを含み得る。ある実施形態において、その検出可能な標識は、蛍光色素である。ある実施形態において、その検出可能な標識は、放射性標識である。ある実施形態において、その検出可能な標識は、バーコードである。ある実施形態において、その担体は、蛍光色素、放射性標識、磁気標識、バーコード、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される、検出可能な標識を含む。6.3パネル別の局面において、複数の固体担体を含むパネルが本明細書中で提供され、ここでその複数の固体担体のうちの各固体担体は、HLAに結合し、ここで結合したHLAのうちの少なくとも90は天然のものであり、そしてHLAのうちの多くても10が変性している、ここでその複数の固体担体のうち特定の固体担体に結合したHLAのうちの少なくとも90は、同じ対立遺伝子のものであり、そしてここでその複数の固体担体のうちの各固体担体は、複数の固体担体のうちの他の固体担体に関して異なるHLAに結合している。そのパネルは、本明細書中で提供されるHLAのいずれにも結合し得る。パネルは有利に、一度に1つ以上の天然クラスIHLAに対する複数の抗体を検出することを可能にする。いくつかの実施形態において、上記複数の固体担体は、少なくとも2つ以上の固体担体を含む。いくつかの実施形態において、複数の固体担体は、少なくとも4つ以上の固体担体を含む。いくつかの実施形態において、複数の固体担体は、少なくとも8個以上の固体担体を含む。いくつかの実施形態において、複数の固体担体は、少なくとも16個以上の固体担体を含む。いくつかの実施形態において、複数の固体担体は、少なくとも32個以上の固体担体を含む。いくつかの実施形態において、複数の固体担体は、少なくとも64個以上の固体担体を含む。いくつかの実施形態において、複数の固体担体は、少なくとも128個以上の固体担体を含む。いくつかの実施形態において、複数の固体担体は、少なくとも256個以上の固体担体を含む。いくつかの実施形態において、複数の固体担体のうちの各固体担体は、HLA-AクラスIHLAに結合する。いくつかの実施形態において、複数の固体担体のうちの各固体担体は、HLA-BクラスIHLAに結合する。いくつかの実施形態において、複数の固体担体のうちの各固体担体は、HLA-CクラスIHLAに結合する。いくつかの実施形態において、複数の固体担体のうちの各固体担体は、表1、2、および3において見出されるクラスIHLAおよびそれらの組み合わせから選択される、任意のクラスIHLAに結合する。いくつかの実施形態において、複数の固体担体のうちの各固体担体は、HLA-DPクラスIIHLAに結合する。いくつかの実施形態において、複数の固体担体のうちの各固体担体は、HLA-DQクラスIIHLAに結合する。いくつかの実施形態において、複数の固体担体のうちの各固体担体は、HLA-DRクラスIIHLAに結合する。いくつかの実施形態において、そのパネルは、HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DP、HLA-DQ、HLA-DRおよびそれらの組み合わせからなる群より選択されるHLAに結合した、複数の担体を含む。いくつかの実施形態において、特定の固体担体に結合したHLAの少なくとも90が、同じ対立遺伝子のものである。いくつかの実施形態において、特定の固体担体に結合したHLAの少なくとも95が、同じ対立遺伝子のものである。いくつかの実施形態において、特定の固体担体に結合したHLAの少なくとも99が、同じ対立遺伝子のものである。いくつかの実施形態において、特定の固体担体に結合したHLAの少なくとも99.5が、同じ対立遺伝子のものである。6.4天然HLAに対する抗体を検出するために有用な組成物を作製するための方法本発明の別の局面において、少なくとも90の天然ヒト白血球抗原および多くても10の変性ヒト白血球抗原を含む組成物を作製するための方法が、本明細書中で提供される。いくつかの実施形態において、その方法は:a天然HLAおよび変性HLAを含む第1の組成物を、セリンプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼ、またはアミダーゼと、そのセリンプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼ、またはアミダーゼが変性HLAを切断する条件下で接触させる工程;ならびにbそのセリンプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼ、またはアミダーゼを中和して、結果としてできる、少なくとも90の天然ヒト白血球抗原および多くても10の変性ヒト白血球抗原を含む組成物を産生する工程を包含する。その方法を使用して、本明細書中で提供される、少なくとも90の天然HLAおよび多くても10の変性HLAを含むいずれの組成物も作製し得る。6.4.1.天然HLAおよび変性HLAの組成物第1の組成物のHLAは、HLAのうちの1つ以上のクラスを含み得る。いくつかの実施形態において、そのHLAは、クラスIHLA、クラスIIHLA、およびそれらの組み合わせからなる群より選択されるHLAを含む。いくつかの実施形態において、そのHLAはクラスIHLAを含む。いくつかの実施形態において、そのHLAはクラスIIHLAを含む。いくつかの実施形態において、そのHLAはクラスIHLAおよびクラスIIHLAの組み合わせを含む。いくつかの実施形態において、第1の組成物のHLAは、溶液中であり得る。他の実施形態において、そのHLAは固体担体に結合し得る。いくつかの実施形態において、第1の組成物のHLAを、溶液中に懸濁し得る。そのHLAを、当業者に適当とみなされるあらゆる溶液中に懸濁または可溶化し得る。ある実施形態において、その溶液は、緩衝溶液である。ある実施形態において、その溶液は、HLAの非特異的分解を防止するのを助け得るが、変性HLAの特異的切断は可能にする添加物を含む。そのような添加物の例は、プロテアーゼ阻害剤、抗菌薬、金属キレート剤metalchelatorおよび還元剤を含む。いくつかの実施形態において、そのHLAは、リン酸緩衝化溶液phosphatebuffersolutionPBSを含む溶液中にある。いくつかの実施形態において、そのHLAは、金属キレート剤を含む溶液中にある。ある実施形態において、その金属キレート剤は、エチレンジアミン4酢酸EDTAである。いくつかの実施形態において、そのHLAは抗菌薬を含む溶液中にある。ある実施形態において、その抗菌薬はアジ化ナトリウムである。ある実施形態において、その抗菌薬はチメロサールである。ある実施形態において、そのHLAは還元剤を含む溶液中にある。ある実施形態において、その還元剤はジチオスレイトールDTTである。ある実施形態において、その還元剤は2-メルカプトエタノール2-MEである。さらに、いくつかの実施形態において、その溶液は、天然HLAおよび変性HLAの非特異的分解の防止を助けるが、変性HLAの切断は可能にする、プロテアーゼ阻害剤を含み得る。いくつかの実施形態において、その溶液は、酸性プロテアーゼ阻害剤、チオールプロテアーゼ阻害剤、メタロプロテアーゼ阻害剤、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される、プロテアーゼ阻害剤を含む。そのような阻害剤の例は、ペプスタチンA酸性プロテアーゼ阻害剤、ロイペプチンチオールプロテアーゼ阻害剤、アンチパインチオールプロテアーゼ阻害剤、EDTAメタロプロテアーゼ阻害剤、およびEGTAメタロプロテアーゼ阻害剤を含む。いくつかの実施形態において、第1の組成物のHLAは、固体担体に結合している。天然HLAおよび変性HLAに結合する固体担体を、当業者に公知のあらゆる技術を用いて得ることができる。天然HLAおよび変性HLAに結合する固体担体を、例えば、クラスIHLA、クラスIIHLA、またはそれらの組み合わせのいずれかに結合した商業的に入手可能なマイクロビーズ例えばFlowPRAクラスIおよびクラスIIビーズ、LABScreenクラスIおよびクラスIIPRAビーズ、LABScreenMixedビーズ、およびLabScreenSingleAntigenクラスIおよびクラスIIビーズOneLambda,Inc.を含む、商業的な供給源から得ることができる。他の実施形態において、天然HLAおよび変性HLAに結合した固体担体を、組換え天然HLAおよび組換え変性HLAを固体担体に結合することによって作製し得る。組換え天然HLAおよび組換え変性HLAを、例えばPeiら、Transplantation751:43-492003において記載された技術を含む、当業者に公知のあらゆる技術を用いて、作製し、それを固体担体に結合し得る。6.4.2.セリンプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼまたはアミダーゼによる変性HLAの切断いくつかの実施形態において、その方法は、天然HLAおよび変性HLAの第1の組成物を、セリンプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼまたはアミダーゼに、そのセリンプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼまたはアミダーゼが変性HLAを切断する条件下で接触させる工程を含む。変性HLAを切断する、当業者に公知のあらゆるセリンプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼまたはアミダーゼを、その基質と接触し得る。理想的には、そのセリンプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼまたはアミダーゼは、変性HLAを選択的に切断するが、天然HLAはそのままにしておく。さらに、特定のセリンプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼまたはアミダーゼの、選択的に変性HLAを切断する能力は、そのHLAがその特定のセリンプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼまたはアミダーゼと接触した温度および時間によって変動し得る。当業者は、特定のプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼまたはアミダーゼが特定のクラスの変性HLAを切断するために適当な条件が何であり得るかを決定し得る。本方法のいくつかの実施形態において、HLAを、変性HLAを選択的に切断し得るが、天然HLAはそのままにしておくセリンプロテアーゼと接触させる。特定の実施形態において、そのHLAを、トリプシン、キモトリプシン、およびエラスターゼを含む、トリプシン様族clan由来のセリンプロテアーゼと接触させる。特定の実施形態において、そのセリンプロテアーゼはトリプシンである。特定の実施形態において、そのセリンプロテアーゼはキモトリプシンである。特定の実施形態において、そのセリンプロテアーゼはエラスターゼである。他の実施形態において、そのセリンプロテアーゼはサブチリシンである。いくつかの実施形態において、そのHLAを、第1の組成物中の変性HLAを選択的に切断し得るが、天然HLAはそのままにしておくリパーゼと接触させる。特定の実施形態において、そのリパーゼは、ホスホリパーゼである。特定の実施形態において、そのホスホリパーゼは、ホスホリパーゼA、ホスホリパーゼB、ホスホリパーゼCおよびホスホリパーゼDからなる群より選択される。いくつかの実施形態において、そのHLAを、第1の組成物中の変性HLAを選択的に切断し得るが、天然HLAはそのままにしておくエステラーゼと接触させる。特定の実施形態において、そのエステラーゼは、アセチルコリンエステラーゼである。他の実施形態において、そのエステラーゼはチオエステラーゼである。特定の実施形態において、そのチオエステラーゼは、アセチル-coAヒドロラーゼ、パルミトイル-coAヒドロラーゼ、スクシニル-coAヒドロラーゼ、およびアシル-coAヒドロラーゼからなる群より選択される。いくつかの実施形態において、そのHLAを、変性HLAを選択的に切断し得るが、天然HLAはそのままにしておくアミダーゼと接触させる。いくつかの実施形態において、そのアミダーゼはペプチドアミダーゼである。6.4.3.セリンプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼ、またはアミダーゼの中和プロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼまたはアミダーゼによる変性HLAの切断後、そのプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼまたはアミダーゼの酵素活性を中和する。特定のプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼまたはアミダーゼの中和を、当業者に公知のあらゆる技術を用いて行い得る。例えば、特定のプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼまたはアミダーゼを、当該プロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼまたはアミダーゼの阻害剤を含む試薬と接触させることによって、中和を達成し得る。いくつかの実施形態において、プロテアーゼを、1つ以上のプロテアーゼ阻害剤を含む試薬と接触させることによって、中和を達成する。いくつかの実施形態において、そのプロテアーゼ阻害剤は、セリンプロテアーゼ阻害剤である。特定の実施形態において、そのセリンプロテアーゼ阻害剤は、トリプシン阻害剤である。特定の実施形態において、そのトリプシン阻害剤は、アプロチニンである。特定の実施形態において、そのトリプシン阻害剤は、ベンズアミジンである。特定の実施形態において、そのトリプシン阻害剤は、フッ化フェニルメチルスルホニルphenylmethylsufonylPMSFである。特定の実施形態において、そのトリプシン阻害剤は、トリプシン中和溶液Lonza、CC-5002である。特定の実施形態において、そのセリンプロテアーゼ阻害剤は、キモトリプシン阻害剤である。特定の実施形態において、そのキモトリプシン阻害剤は、キモトリプシン阻害剤2である。特定の実施形態において、そのセリンプロテアーゼ阻害剤は、エラスターゼ阻害剤である。いくつかの実施形態において、そのエラスターゼ阻害剤は、アルファ1-アンチトリプシンである。ある実施形態において、そのセリンプロテアーゼ阻害剤は、サブチリシン阻害剤である。ある実施形態において、そのサブチリシン阻害剤は、Streptomycesサブチリシン阻害剤である。いくつかの実施形態において、リパーゼを、1つ以上のリパーゼ阻害剤と接触させることによって中和を達成する。ある実施形態において、そのリパーゼ阻害剤は、リプスタチンlipistatinである。いくつかの実施形態において、エステラーゼを、1つ以上のエステラーゼ阻害剤と接触させることによって中和を達成する。いくつかの実施形態において、そのエステラーゼ阻害剤は、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤である。いくつかの実施形態において、そのアセチルコリンエステラーゼ阻害剤は、有機リン酸塩またはカルバミン酸塩である。いくつかの実施形態において、そのエステラーゼ阻害剤は、チオエステラーゼ阻害剤である。いくつかの実施形態において、そのチオエステラーゼ阻害剤は、5-フラン-2-イルメチレンピリミジン-2,4,6-トリオンである。いくつかの実施形態において、アミダーゼを、1つ以上のアミダーゼ阻害剤と接触させることによって、中和を達成する。いくつかの実施形態において、そのアミダーゼ阻害剤は、ニトリルである。いくつかの実施形態において、そのニトリルは、ビス-p-ニトロフェニルリン酸塩である。6.5天然HLAに対する抗体を検出するための方法別の局面において、天然HLAに対する抗体を検出するための方法が、本明細書中で提供される。天然HLAに対する抗体の検出は、例えば、組織移植または臓器移植の状況において有用であり得、ここでドナーの天然HLAに対する抗体の検出が、移植片拒絶反応のリスクを決定することにおいて有益であり得る。ある実施形態において、これらの方法は:aサンプルを、固体担体に結合したHLAを含む組成物と接触させる工程であって、ここでHLAのうちの少なくとも90が天然のものであり、そしてHLAのうちの多くても10が変性している、工程;およびb抗体の組成物への結合を検出する工程を含み、ここで抗体の固体担体への結合は、サンプル中の天然HLAに特異的な抗体の存在を示す。本明細書で提供される組成物は、固体担体に結合したHLAを含む、あらゆる組成物を含み得、ここでHLAのうちの少なくとも90は天然のものであり、そしてHLAのうちの多くても10は、変性している。ある実施形態において、固体担体に結合したHLAのうちの少なくとも90が同じ対立遺伝子のものである。ある実施形態において、固体担体に結合したHLAのうちの少なくとも95が同じ対立遺伝子のものである。ある実施形態において、固体担体に結合したHLAのうちの少なくとも99が同じ対立遺伝子のものである。ある実施形態において、固体担体に結合したHLAのうちの少なくとも99.5が同じ対立遺伝子のものである。ある実施形態において、そのHLAは、クラスIHLA、クラスIIHLA、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される。ある実施形態において、そのHLAはクラスIHLAである。ある実施形態において、そのHLAはクラスIIHLAである。ある実施形態において、そのHLAはクラスIHLAおよびクラスIIHLAの組み合わせである。ある実施形態において、その組成物は複数の固体担体のうちの当該固体担体を含み、ここで複数の固体担体のうちの特定の固体担体に結合したHLAの少なくとも90は同じ対立遺伝子のものであり、そして複数の固体担体のうちの各固体担体は、複数の固体担体のうちの他の固体担体に関して異なるHLA対立遺伝子に結合している。ある実施形態において、その複数の固体担体は、4つ以上の固体担体を含む。ある実施形態において、その複数の固体担体は、8つ以上の固体担体を含む。ある実施形態において、その複数の固体担体は、16個またはそれ以上の固体担体を含む。ある実施形態において、その複数の固体担体は、32個またはそれ以上の固体担体を含む。生物学的サンプルを含む、当業者に公知のあらゆる有用なサンプルを使用し得る。例示的な有用な生物学的サンプルは、全血、血液誘導体、赤血球濃縮物、血漿、血清、新鮮凍結血漿、全血由来血小板濃縮物、グロブリン、寒冷沈降物cryoprecpitate、脳脊髄液、口腔から採取されたもののような上皮細胞、幹細胞、白血球、好中球および顆粒球のような、組織および細胞を含む。サンプルを、組織、細胞、または臓器移植のヒトドナーまたは当該組織、細胞、または臓器移植の意図されたレシピエントから得ることができる。いくつかの実施形態において、そのサンプルを、腎臓、肝臓、または心臓移植のヒトドナーから得る。いくつかの実施形態において、そのサンプルを、ヒトレシピエントにおける移植のために意図された組織、細胞、または臓器から得る。特定の実施形態において、そのサンプルを、ヒトレシピエントにおける移植のために意図された腎臓、肝臓、または心臓から得る。他の実施形態において、そのサンプルを、輸血のヒトドナーまたはレシピエントから得る。他の実施形態において、そのサンプルを、レシピエントにおける輸血のために意図された血液または血液誘導体から得る。ある実施形態において、そのサンプルを、骨髄移植のヒトドナーまたはレシピエントから得る。当業者に公知の、抗体の担体への結合を検出し得るあらゆるシステムを、抗体の結合を検出するために使用し得る。例えば、天然HLAに対する抗体の結合の検出を、放射性標識、蛍光標識、酵素標識、アビジン標識、ビオチン標識、またはそれらの組み合わせのような、検出可能な標識に結合体化した二次抗体を用いて行い得る。さらに、本明細書中で記載したもののような検出可能な標識を含む担体は、結合した天然HLAに対する抗体の多重化した検出および分類を可能にする。特定の実施形態において、抗体の結合の検出を、酵素結合イムノソルベント検定法ELISAアッセイのような、免疫吸着サンドイッチアッセイを用いて行う。免疫吸着サンドイッチアッセイは、使用する固体担体が、マイクロタイタープレートウェルである場合に特に有用であり得る。膜またはフィルターの固体担体に関して、抗体の結合の検出を、イムノブロッティング技術を用いて行い得る。他の実施形態において、抗体の結合の検出を、フローサイトメトリーを用いて行う。6.6キット別の局面において、天然HLAに対する抗体を検出するためのキットが、本明細書中で提供される。ある実施形態において、そのキットは:a固体担体に結合したHLAを含む組成物であって、ここでHLAのうちの少なくとも90が天然のものであり、そしてHLAのうちの多くても10が変性している、組成物、およびb組成物に対する抗体の結合を検出するための試薬を含む。本明細書で提供される組成物は、固体担体に結合したHLAを含む組成物のいずれも含み得、ここでHLAのうちの少なくとも90が天然のものであり、そしてHLAのうちの多くても10が変性している。ある実施形態において、その組成物は、複数の固体担体のうちの当該固体担体を含み、ここで複数の固体担体のうちの特定の固体担体に結合したHLAの少なくとも90は同じ対立遺伝子のものであり、そして複数の固体担体のうちの各固体担体は、複数の固体担体のうちの他の固体担体に関して、異なるHLA対立遺伝子に結合する。ある実施形態において、その複数の固体担体は、4個またはそれ以上の固体担体を含む。ある実施形態において、その複数の固体担体は、8個またはそれ以上の固体担体を含む。ある実施形態において、その複数の固体担体は、16個またはそれ以上の固体担体を含む。ある実施形態において、その複数の固体担体は、32個またはそれ以上の固体担体を含む。当業者に公知の、抗体の結合を検出するために有用なあらゆる試薬を使用し得る。例えば、ウェスタンブロット、イムノブロット、フローサイトメトリー、ELISAおよびラジオイムノアッセイRIAのようなアッセイにおいて、二次抗体が、抗体の結合を検出するために有用であり得る。いくつかの実施形態において、その試薬は、二次抗体を含む。ある実施形態において、その二次抗体は、抗ヒトIgG抗体である。いくつかの実施形態において、その試薬は、検出可能な標識を含む二次抗体を含む。ある実施形態において、そのキットは、放射性標識、蛍光標識、酵素標識、アビジン標識、ビオチン標識、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される、検出可能な標識を含む。いくつかの実施形態において、そのキットはさらに、洗浄緩衝液、コントロール緩衝液、ゲル、添加緩衝液、分子量マーカー、複数のウェルを含むプレート、およびポジティブコントロールサンプルおよびネガティブコントロールサンプルを含み得る。以下の制限しない実施例が、上記で記載されたある実施形態を説明する。以下の実施例が、本発明の局面をさらに説明するために示される。実施例1は、天然クラスIHLAマイクロビーズの調製を説明する。実施例2は、天然クラスIHLAマイクロビーズ上のクラスIHLAの型を同定するために使用するアッセイ方法を説明する。実施例3は、天然クラスIHLAマイクロビーズの純度を示す分析結果を提供する。実施例4は、天然クラスIHLAマイクロビーズの抗体反応性の結果を示す。これらの実施例において、OneLambda,Inc.の商業的に入手可能なLABScreen製品を使用し、そしてそれらはそのカタログ番号で同定される。7.1実施例1:天然クラスIHLAに結合したマイクロビーズの調製本実施例は、天然クラスIHLAに結合したマイクロビーズ天然クラスIHLAマイクロビーズの例示的な調製を提供する。LABScreenSingleAntigenBeadsLSAB、具体的にはLABScreen登録商標SingleAntigenHLAClassI-CombiカタログID:LS1A04を、OneLambda,Inc.から得た。処理無しで、LSABは、ビーズ表面に結合した天然クラスIHLAおよび変性クラスIHLAの両方を含む。図1A~図1Cは、W6/32およびHC10のLSABとの反応性を示す。モノクローナル抗体W6/32は、天然クラスIHLAに特異的に結合する。モノクローナル抗体HC10は、変性クラスIHLAに特異的に結合する。図1A~図1Cは、A-遺伝子座図1A、B-遺伝子座図1B、およびC-遺伝子座図1CクラスIHLA対立遺伝子に対する特異性に関して、メジアン蛍光強度MFIを示す。検出抗体のMFIのレベルは、天然クラスIHLAまたは変性クラスIHLAいずれかに対する抗体の結合のレベルに対応する。これらの図は、LSABは、W6/32モノクローナル抗体およびHC10モノクローナル抗体の両方に反応性であることを示す。天然クラスIHLAマイクロビーズを調製するために、LSAB上の変性クラスIHLAを、トリプシンセリンプロテアーゼによる選択的タンパク質分解消化に供した。トリプシンを、Lakewood、NewJerseyのWorthingtonBiochemicalCorporationから凍結乾燥形態で購入したカタログコードTRL、カタログ番号LS00372。そのトリプシンを、SantaAna、CaliforniaのIrvineScientificから購入した1×リン酸緩衝化生理食塩水PBS中で、約0.00004から約0.04重量/体積の作業濃度に再構築した。天然クラスIHLAマイクロビーズを、約37°Cで約30分間、トリプシン溶液にさらした。次いでそのトリプシン溶液を、Walkersville、MarylandのLonzaWalkersville,Inc.から購入した、TrypsinNeutralizingSolutionTNSカタログ番号CC-5002を用いて中和した。トリプシンによる約30分の消化後に、体積で約2:1のストックTNSを加えた。他の例において、1×PBS、約0.1のウシ血清アルブミンBSAを含む混合物を用いた急速希釈約1:2によって、中和を達成した。次に、そのマイクロビーズを、約10,000gで約2分間遠心分離し、そして約1mLの1×LABScreen登録商標洗浄緩衝液カタログ番号LSPWABUFで2回洗浄した。続いてそのマイクロビーズを、約2のBSA中、約4°Cで一晩インキュベートした。次いでそのマイクロビーズを、約1mLのLABScreen登録商標洗浄緩衝液で3回洗浄した。7.2実施例2:天然クラスIHLAマイクロビーズのアッセイこの実施例は、本明細書中で記載された方法によって調製した、高純度の例示的なマイクロビーズを示す。タンパク質分解消化が、変性クラスIHLAを除去したことを確認するために、実施例1によって調製したマイクロビーズのパネルを、W6/32またはHC10のいずれかとインキュベートして、それぞれ天然クラスIHLAまたは変性クラスIHLAを検出した。約100μlの約1×PBS中で希釈した約1μlの抗体を、天然クラスIHLAマイクロビーズと、振とう器上で、室温で約30分間インキュベートした。次いでそのマイクロビーズを、約1mLのLABScreen登録商標洗浄液で3回洗浄し、そして次いで約100μlのフィコエリトリン結合体化PE結合体化ヤギ抗マウス二次抗体と、振とう器上で、室温で約30分間インキュベートした。次に、そのマイクロビーズを3回洗浄し、そしてLuminexフローマシンLuminexflowmachineによって分析した。図2A~図2Cは、W6/32天然クラスIHLAに特異的およびHC10変性クラスIHLAに特異的のマイクロビーズとの反応性を提供する。Y軸はMFIを示し、そしてX軸はA-遺伝子座図2A、B-遺伝子座図2B、およびC-遺伝子座図2CクラスIHLA対立遺伝子に対する特異性を示す。ビーズパネルの全ての特異性のMFIから、サンプルネガティブコントロールビーズのMFIを引くことによって、Luminexフローマシンからの生データを正規化して、非特異的またはバックグラウンドシグナルを除去した。1,000MFIを超える全ての正規化した値をポジティブとみなした。これらの図は、天然クラスIHLAマイクロビーズは、HC10と低い反応性を有することを示し、天然クラスIHLAマイクロビーズに低いパーセンテージの変性クラスIHLAしか残っていないことを示す。7.3実施例3:天然クラスIHLAマイクロビーズの純度この実施例は、本明細書中で記載された方法によって調製した、天然クラスIHLAマイクロビーズのいくつかの例示的なサンプルの純度を提供する。下記の表1~表3は、上記の実施例1で提供された調製手順に従って作製し、そして上記の実施例2で提供された手順に従ってアッセイしたマイクロビーズに残った変性クラスIHLAのパーセンテージを示す。変性クラスIHLAのパーセンテージを、以下の式に従って計算した:[HC10MFI/HC10MFIW6/32MFI]100。データを、マイクロビーズの98個のサンプル5バッチから取った。下記の表1は、A-遺伝子座クラスIHLA対立遺伝子の特異性に関する、天然クラスIHLAマイクロビーズサンプルのデータである。そのデータは、0.97の標準偏差を有する、0.81の変性クラスIHLAの平均パーセンテージを示す。下記の表2は、B-遺伝子座クラスIHLA対立遺伝子の特異性に関する、マイクロビーズサンプルのデータである。そのデータは、3.86の標準偏差を有する、3.53の変性クラスIHLAの平均パーセンテージを示す。下記の表3は、C-遺伝子座クラスIHLA対立遺伝子の特異性に関する、マイクロビーズサンプルのデータである。そのデータは、1.24の標準偏差を有する、2.60の変性クラスIHLAの平均パーセンテージを示す。表1~表3の全体的な結果は、天然クラスIHLAマイクロビーズの5個のバッチに対して、3.10の標準偏差を有する、2.51の変性クラスIHLAの平均パーセンテージを示す。これらの結果は、本方法によって、天然クラスIHLAマイクロビーズを高い純度で作製し得ることを示す。実施例4:天然クラスIHLAマイクロビーズの反応性LSABビーズおよび実施例1によって調製したマイクロビーズに対する、非同種免疫化男性血清中の抗体の反応性プロファイルを比較する、さらなる調査を行った。図3A~図3Cは、A-遺伝子座図3A、B-遺伝子座図3B、およびC-遺伝子座図3CHLA対立遺伝子に関する、3つの非同種免疫男性血清のLSABおよび天然クラスIHLAマイクロビーズとの反応性を示す。3つの例全てにおいてA-遺伝子座、B-遺伝子座、およびC-遺伝子座、その結果は、血清中の抗体の、LSABマイクロビーズとの高い陽性の反応性を示すが、天然クラスIHLAマイクロビーズとは示さない。試験したA-遺伝子座対立遺伝子に対する抗体反応性に関して、LSABビーズと比較して、天然クラスIHLAマイクロビーズを使用した場合に、平均98.3のMFIの減少があった。試験したB-遺伝子座対立遺伝子に対する抗体反応性に関して、LSABビーズと比較して、天然クラスIHLAマイクロビーズを使用した場合に、平均94.3のMFIの減少があった。試験したC-遺伝子座対立遺伝子に対する抗体反応性に関して、LSABビーズと比較して、天然クラスIHLAマイクロビーズを使用した場合に、平均89.9のMFIの減少があった。これらの結果は、抗体の結合は主に変性クラスIHLAによるものであり、そして天然クラスIHLAによるものではないことを示す。上記で記載したように、LSABビーズ上の変性クラスIHLAは、偽陽性シグナルを提供し、そして潜在的なドナーの不必要な除外を引き起こし得る。従って、これらの結果は、天然クラスIHLAマイクロビーズは、クラスIHLAのより正確な検出を提供し得ることを示す。本明細書中で引用された全ての参考文献は、個々の出版物または特許または特許出願それぞれが、具体的におよび個々に、全ての目的のためにその全体として参考として援用されると示されたように同じ程度、その全体としておよび全ての目的のために、本明細書中で参考として援用される。本発明は、様々な好ましい実施形態に関して詳細に記載されたが、それに制限することを意図せず、むしろ当業者は、そこに変更および修飾を行い得、それらは本発明の精神および添付の特許請求の範囲内であることを認識する。項目1少なくとも90の天然ヒト白血球抗原および多くても10の変性ヒト白血球抗原を含む、組成物。項目2上記ヒト白血球抗原が、クラスIヒト白血球抗原、クラスIIヒト白血球抗原およびそれらの組み合わせからなる群より選択される、項目1に記載の組成物。項目3上記ヒト白血球抗原がクラスIヒト白血球抗原である、項目2に記載の組成物。項目4上記ヒト白血球抗原のうちの少なくとも90が、同じ対立遺伝子のものである、項目1に記載の組成物。項目5上記ヒト白血球抗原が固体担体に結合される、項目1に記載の組成物。項目6上記固体担体が、複数のビーズ、複数のマイクロビーズ、複数の微粒子、複数のマイクロスフィア、ウェル、膜、ポリマー、フィルターおよびマイクロアレイならびにそれらの組み合わせからなる群より選択される、項目5に記載の組成物。項目7上記固体担体が複数のマイクロビーズである、項目5に記載の組成物。項目8上記固体担体が、シリカ、金、ラテックス、ポリスチレン、ポリスルホン、ヒドロゲル、ポリ塩化ビニル、ガラスおよびそれらの組み合わせからなる群より選択される材料を含む、項目5に記載の組成物。項目9上記固体担体が検出可能な標識を含む、項目5に記載の組成物。項目10上記検出可能な標識が、蛍光色素、放射性標識、磁気標識、バーコードまたはそれらの組み合わせである、項目9に記載の組成物。項目11上記ヒト白血球抗原が、上記固体担体に共有結合される、項目5に記載の組成物。項目12複数の上記固体担体を含む、項目5に記載の組成物であって、ここで、該複数の固体担体のうちのある特定の固体担体に結合した上記ヒト白血球抗原のうちの少なくとも90が、同じ対立遺伝子のものであり、該複数の固体担体のうちの各々の固体担体が、該複数の固体担体のうちのその他の固体担体に関して、異なるヒト白血球抗原対立遺伝子を結合する、組成物。項目13上記天然ヒト白血球抗原および上記変性ヒト白血球抗原がクラスIヒト白血球抗原である、項目12に記載の組成物。項目14上記複数の固体担体が、4またはそれより多い固体担体を含む、項目12に記載の組成物。項目15上記複数の固体担体が、8またはそれより多い固体担体を含む、項目12に記載の組成物。項目16上記複数の固体担体が、16またはそれより多い固体担体を含む、項目12に記載の組成物。項目17上記複数の固体担体が、32またはそれより多い固体担体を含む、項目12に記載の組成物。項目18少なくとも90の天然ヒト白血球抗原および多くても10の白血球抗原を含む組成物を作製する方法であって、該方法は:a.天然ヒト白血球抗原および変性ヒト白血球抗原を含む第1の組成物と、セリンプロテアーゼ、リパーゼ、エステラーゼ、またはアミダーゼとを、該セリンプロテアーゼ、該リパーゼ、該エステラーゼ、または該アミダーゼが、該変性ヒト白血球抗原を消化する条件下で接触させる工程;ならびにb.該セリンプロテアーゼ、該リパーゼ、該エステラーゼ、または該アミダーゼを中和して、少なくとも90の天然ヒト白血球抗原および多くても10の白血球抗原を含む結果として生じる組成物を得る工程、を包含する、方法。項目19上記ヒト白血球抗原が、天然クラスIヒト白血球抗原および変性クラスIヒト白血球抗原を含む、項目18に記載の方法。項目20上記ヒト白血球抗原が、1またはそれより多い固体担体に結合される、項目18に記載の方法。項目21上記ヒト白血球抗原が、複数のマイクロビーズまたは微粒子に結合される、項目20に記載の方法。項目22上記第1の組成物を、セリンプロテアーゼと接触させる、項目18に記載の方法。項目23上記セリンプロテアーゼが、トリプシン、キモトリプシン、エラスターゼ、サブチリシンまたはこれらの組み合わせからなる群より選択される、項目22に記載の方法。項目24上記第1の組成物をリパーゼと接触させる、項目18に記載の方法。項目25上記リパーゼがホスホリパーゼである、項目24に記載の方法。項目26上記第1の組成物を、エステラーゼと接触させる、項目18に記載の方法。項目27上記エステラーゼが、アセチルコリンエステラーゼである、項目26に記載の方法。項目28上記エステラーゼが、チオエステラーゼである、項目26に記載の方法。項目29上記第1の組成物を、アミダーゼと接触させる、項目18に記載の方法。項目30天然ヒト白血球抗原に結合する抗体をスクリーニングする方法であって、該方法は:a.サンプルと項目5に記載の組成物とを接触させる工程;b.該組成物への抗体の結合を検出する工程であって、該組成物への抗体の結合は、該天然ヒト白血球抗原に特異的な抗体を示す、工程、を包含する、方法。項目31抗体の結合を検出する上記工程を、フローサイトメトリーを使用して実行する、項目30に記載の方法。項目32上記抗体の結合を検出する上記工程を、二次抗体を使用して実行する、項目30に記載の方法。項目33上記二次抗体が、放射性標識、蛍光標識、酵素標識、アビジン標識、ビオチン標識およびそれらの組み合わせからなる群より選択される標識を含む、項目32に記載の方法。項目34上記組成物が、複数のマイクロビーズまたは微粒子を含む、項目30に記載の方法。項目35上記組成物が複数のマイクロビーズを含み、該複数のマイクロビーズのうちの各々のマイクロビーズが検出可能な標識を含む、項目34に記載の方法。項目36上記検出可能な標識が、蛍光色素、放射性標識、磁気標識またはバーコードである、項目35に記載の方法。項目37項目5に記載の組成物および該組成物への抗体の結合を検出するための試薬を含む、キット。項目38上記試薬が二次抗体を含む、項目37に記載のキット。項目39上記二次抗体が、放射性標識、蛍光標識、酵素標識、アビジン標識およびビオチン標識からなる群より選択される標識を含む、項目38に記載のキット。"