"血液疾患、特に骨髄性および/またはリンパ性血液疾患、好ましくは骨髄性血液疾患の、好ましくはインビトロでの、診断および/または分類のための方法であって、a被験者の血液試料に含まれる細胞から、好ましくは血液細胞または骨髄細胞を含有する試料から、少なくとも、24遺伝子の群の中から選択される遺伝子のセットに属する6遺伝子のサブグループの遺伝子の発現レベルを測定する工程、ここで、前記24遺伝子の群は配列番号:1~24の核酸配列を含むかまたは前記核酸配列によって構成され、前記6遺伝子は、配列番号:1~6の核酸配列を含むかまたは前記核酸配列によって構成される前記サブグループに属するものとし、b工程aで測定された各遺伝子の発現レベルを、対照試料に含まれる細胞から、好ましくは血液細胞または骨髄細胞を含有する試料からの同じそれぞれの遺伝子の発現レベルと比較して、前記サブグループの各遺伝子ついての遺伝子発現レベル比を確立する工程、ここで、前記対照試料は前記生物学的試料と同じ性質であるものとし、およびc前記生物学的試料の状態を、前記サブグループからの少なくとも3個の遺伝子の任意の組合せの各遺伝子について工程bで確立された比率が≧2または≦0.5のいずれかである場合に、前記生物学的試料は血液疾患細胞を示していると判定する工程、を含む前記方法。工程bで確立された比率が、配列番号:1の核酸配列を含むかまたは前記核酸配列によって構成される遺伝子について、≦0.3、ならびに配列番号:2および3の核酸配列を含むかまたは前記核酸配列によって構成される遺伝子について、≧3.0である場合に、前記生物学的試料は急性骨髄性白血病を示す、請求項1に記載の方法。工程cが次のとおりである:前記サブグループからの3遺伝子の任意の組合せの各遺伝子について工程bで確立された比率が≧2または≦0.5のいずれかである場合、ただし、前記生物学的試料で測定されたおよび前記対照試料で測定された配列番号:1の核酸配列を含むかもしくは前記核酸配列によって構成される遺伝子の発現レベル間の比率が≦0.3ではないか、または前記生物学的試料で測定されたおよび前記対照試料で測定された配列番号:2もしくは3の核酸配列を含むかもしくは前記核酸配列によって構成される遺伝子の各々の発現レベル間の比率が≧0.3ではない場合、前記生物学的試料は、骨髄異形成疾患、特に不応性貧血、不応性血球減少症または芽球増加を伴う不応性貧血、5q-症候群の中から選択される骨髄異形成を示す、請求項1に記載の方法。前記セットが10遺伝子を含み、前記10遺伝子は、配列番号:1~10の核酸配列を含むかまたは前記核酸配列によって構成され、ならびに工程cは次のとおりである:前記サブグループからの3遺伝子の任意の組合せの各遺伝子について工程bで確立された比率が≧2または≦0.5のいずれかである場合、ただし、前記生物学的試料で測定されたおよび前記対照試料で測定された配列番号:1の核酸配列を含むかもしくは前記核酸配列によって構成される遺伝子の発現レベル間の比率が≦0.3ではないか、または前記生物学的試料で測定されたおよび前記対照試料で測定された配列番号:2もしくは3の核酸配列を含むかもしくは前記核酸配列によって構成される遺伝子の各々の発現レベル間の比率が≧0.3ではなく、さらに前記サブグループに属さない前記セットの少なくとも1個の遺伝子について工程bで確立された比率が≧2であり、および前記サブグループに属さない前記セットの少なくとも1個の他の遺伝子の工程bで確立された比率が≦0.5であれば、前記生物学的試料は、芽球増加を伴う不応性貧血または5q-症候群を示す、請求項1または3に記載の方法。前記セットが10遺伝子を含み、前記10遺伝子は、配列番号:1~10の核酸配列を含むかまたは前記核酸配列によって構成され、および工程cは次のとおりである:前記サブグループからの3遺伝子の任意の組合せの各遺伝子について工程bで確立された比率が≧2または≦0.5のいずれかである場合、ただし、前記生物学的試料で測定されたおよび前記対照試料で測定された配列番号:1の核酸配列を含むかもしくは前記核酸配列によって構成される遺伝子の発現レベル間の比率が≦0.3ではないか、または前記生物学的試料で測定されたおよび前記対照試料で測定された配列番号:2もしくは3の核酸配列を含むかもしくは前記核酸配列によって構成される遺伝子の各々の発現レベル間の比率が≧0.3ではなく、ならびに前記サブグループに属さない前記セットの少なくとも1個の遺伝子について工程bで確立された比率が≧2であり、および前記サブグループに属さない前記セットの少なくとも1個の他の遺伝子の工程bで確立された比率が≦0.5であり、さらに前記セットに属さない24遺伝子の群の少なくとも4遺伝子について工程bで確立された比率が≧3であれば、前記生物学的試料は芽球増加を伴う不応性貧血を示す、請求項1に記載の方法。遺伝子の発現レベルを定量的方法、特にRT-qPCRによって測定する、請求項1から5のいずれか一項に記載の方法。少なくとも工程aにおける前記サブグループの遺伝子の発現レベルの測定を、少なくとも配列番号:25~36のヌクレオチド分子を使用することによって実施する、請求項1から6のいずれか一項に記載の方法。配列番号:25~72の核酸配列を含むかまたは前記核酸配列から成る48オリゴヌクレオチドのライブラリの中から選択される少なくとも12のオリゴヌクレオチドを含む組成物。配列番号:25~36の核酸配列を含むかまたは前記核酸配列から成る少なくとも12のオリゴヌクレオチドを含む、請求項8に記載の組成物。血液疾患、特に骨髄性および/またはリンパ性血液疾患、好ましくは骨髄性血液疾患の、好ましくはインビトロでの、診断および/または分類に使用するための、請求項8または9に記載の組成物。配列番号:25~72の核酸配列を含むかまたは前記核酸配列から成る48オリゴヌクレオチドの群の中から選択される少なくとも12のオリゴヌクレオチドを含むキットであって、前記少なくとも12のオリゴヌクレオチドが配列番号:25~36の核酸配列を含むかまたは前記核酸配列から成る、キット。血液疾患の治療の効果を判定するための方法であって、前記治療は患者に投与される傾向があり、a血液疾患、好ましくは骨髄性および/またはリンパ性血液疾患、より好ましくは骨髄性血液疾患に罹患した被験者の生物学的試料を、好ましくはインビトロで、前記血液疾患を治療するために使用される傾向があるかまたは前記疾患を治療する傾向がある薬剤と接触させる工程、b工程aで薬剤と接触させた生物学的試料において、少なくとも、24遺伝子の群の中から選択される遺伝子のセットに属する6遺伝子のサブグループの遺伝子の発現レベルを測定する工程、ここで、前記24遺伝子の群は配列番号:1~24の核酸配列を含むかまたは前記核酸配列によって構成され、前記6遺伝子は、配列番号:1~6の核酸配列を含むかまたは前記核酸配列によって構成される前記サブグループに属し、およびc前記の、少なくとも、工程bで得られた24遺伝子の群の中から選択される遺伝子のセットに属する6遺伝子のサブグループの遺伝子の発現レベルを、前記血液疾患を治療するために使用される傾向があるかまたは前記疾患を治療する傾向がある前記薬剤と接触させていない前記生物学的試料での測定で得られた、前記の、少なくとも、24遺伝子の群の中から選択される遺伝子のセットに属する6遺伝子のサブグループの遺伝子の発現レベルと比較する工程、を含む方法。≪実施例≫予備注釈以下の実施例で使用したすべての試料は、盲検において、最初に本発明に従って試験し、対照試料と比較した。すべてのSMDおよび白血病試料は本発明による方法の条件を満たす、すなわち試料の各々において配列番号:1~6の遺伝子の少なくとも3遺伝子が、対照試料中の同じ対応する遺伝子の発現と比較したそれらの比率が0.5未満または2超のいずれかであるように発現される。実施例1:以下の実施例では、患者の試料および解析遺伝子発現を以下のように分析する。試験材料および方法試料の採取正常骨髄BM試料標準として使用したを、整形外科手術を受けた患者から得た。MDSおよびAML患者からの骨髄試料は、診断の時点およびフォローアップの間に得た。AMLおよびMDS細胞を形態学的、細胞化学的および細胞遺伝学的所見に従って分類した。倫理委員会によって承認された手順に従って患者に通知し、同意を得た。BM試料をヘパリン加シリンジに吸引し、EDTAチューブに移した。赤血球溶解BM3mLについて、EDTA0.12mM、重炭酸カリウムKHCO310mMおよび塩化アンモニウムNH4Cl150mMを含む溶解緩衝液47mL中で溶解を実施した。室温で15分間のインキュベーション後、細胞を700gで10分間遠心分離し、リン酸緩衝生理食塩水PBSInvtrogen20mL中で2回洗浄した。ペレットをTrizol商標Invitrogen1mL/8×106細胞に再懸濁し、15分間激しく混合した。溶解物をRNA抽出工程まで-80°Cで保存した。RNA抽出全RNA抽出をクロロホルム/イソプロパノール/エタノール法に従って実施した。相の分離は、クロロホルムInvitrogenから購入したTrizol商標1mLにつき0.2mLを溶解物に添加することによって得た。50秒間混合した後、溶液を4°Cで15分間、12,000gで遠心分離することによって3つの相に分けた。イソプロパノールTrizol商標1mLにつき0.5mLを添加することによってRNAを水相から沈殿させた。室温で10分間のインキュベーションおよび4°Cで10分間の12,000gでの遠心分離後、RNAを75エタノールTrizol商標1mLにつき1mLで洗浄し、4°Cで5分間、7500gで遠心分離した。この工程を2回実施した。エタノール上清を除去した後、RNAペレットを20分間空気乾燥した。次に、RNAをUltraPure商品名DEPC処理水Invitrogen50μLに溶解し、-80°Cで保存した。RNAの定量化および定性化全細胞RNAを、Nano-Drop1000分光光度計Nano-DropTechnologiesを用いて定量化し、RNA純度を、Agilent2100BioanalyzerAgilentTechnologiesを用いて分析した。逆転写および定量的リアルタイムPCRqRT-PCR分析各試料からの全RNA3μgを、SuperScript商標VILO商品名cDNA合成キットInvitrogenを使用して、供給者のプロトコールに従って逆転写した。遺伝子発現の相対的定量化を、ProbeFinderソフトウェアRocheAppliedScience,www.roche-applied-science.com/sis/rtpcr/upl/ezhome.htmlで設計されたUniversalProbeLibraryアッセイを用いてLightCycler商標480マイクロウェルプレートに基づくサイクラープラットフォームRocheAppliedScienceでのリアルタイムPCRによって実施した。プライマーはInvitrogenから購入し、UniversalProbeLibraryプローブはRocheAppliedScienceから購入した。各標的のプライマーおよびプローブのヌクレオチド配列を表Aに示す。すべての標的を同時に分析した。qRT-PCR反応を、LightCycler商標480ProbesMasterRocheAppliedScienceを用いてcDNA20ngに関して10μLの総容量で実施した。LightCycler商標480を、初期変性95°C、10分、次いで95°C、10秒、60°C、30秒、72°C、1秒および40°C、10秒の最終冷却工程の45サイクルにプログラムした。すべての反応を三重に実施し、平均値を定量化のために使用した。結果を、RocheAppliedScienceからのLightCycler商標480ソフトウェアバージョン1.5.0で決定したサイクル閾値CTを使用して相対定量法ΔΔCT=ΔCT患者-ΔCT標準によって解析した。ヒトグリセルアルデヒド-3-リン酸デヒドロゲナーゼ遺伝子GAPDHを、標的の発現を基準化するための内在性コントロールとして使用したΔCT=CT標的-CT内在性コントロール。患者と標準との間の相対的mRNA発現の変化を、2exp-ΔΔCT法LivakKJandSchmittgenTD.AnalysisofrelativegeneexpressiondatausingrealtimequantitativePCRandthe2exp-ΔΔCTmethod.Methods2001;25:402-408を用いて各標的について決定した。実施例2:骨髄異形成および白血病を診断するための6遺伝子の使用方法の有効性を調べるため、白血病試料であると同定された患者試料を使用し、配列番号:1~配列番号:6によって示される遺伝子の各々の発現レベルを、表4のオリゴヌクレオチドおよびプローブを使用することにより、実施例1で開示したようにRT-qPCRによって評価した。結果を以下の表7に示す:表7は、各AML試料No.1~No.5についての各々の指示されている遺伝子配列番号:1~6の発現レベルの比率を示す。以下の場合、本発明で定義される基準を満たす:配列番号:1~6によって示される遺伝子の中の3遺伝子の任意の組合せの各遺伝子の発現レベルの比率が≧2.0または≦0.5のいずれかである場合、試料は血液疾患を示すとみなされる。考慮される3遺伝子の組合せにかかわらず、上記基準が満たされる。その他の基準は、配列番号:1の比率が≦0.3であり、ならびに配列番号:2および3の両方の比率が≧3.0である場合、試料はAMLを示す。やはり、試験された上記5つのAML試料表7すべてについて、基準が満たされる。試験した試料すべてがAMLに関する基準を満たす。それゆえ、本発明による方法はAMLと骨髄異形成疾患との識別を可能にする。実施例3:白血病細胞株に関する本発明の方法の有効性確認本発明の方法の有効性を確認するため、配列番号:1~6によって示される遺伝子の発現レベルを、FAB分類に従って定義されるほとんどすべてのAMLサブタイプに対応する11の細胞株において評価した。以下の細胞株を試験した:KG1aおよびKG1FABM0/M1、HL60FABM2、KASUMI-1FABM2、ML-2FABM4、MV4-11FABM5、THP-1FABM5、U937FABM5、K562FABM6、TF-1FABM6およびUT7FABM7。発現レベルを以下の表8に示す。表8は、対照試料健常骨髄試料中の対応する遺伝子の発現レベルと比較した、対応する細胞株における指示遺伝子の発現レベルの比率Riを示す。以下の場合、本発明で定義される基準を満たす:配列番号:1~6によって示される遺伝子の中の3遺伝子の任意の組合せの各遺伝子の発現レベルの比率が≧2.0または≦0.5のいずれかである場合、試料は血液疾患を示すとみなされる。考慮される3遺伝子の組合せにかかわらず、上記基準が満たされる。その他の基準は、配列番号:1の比率が≦0.3であり、ならびに配列番号:2および3の両方の比率が≧3.0である場合、試料はAMLを示す。やはり、試験した11の上記細胞株すべてについて表3、基準が満たされ、本発明の方法は、この細胞株に関して得られたこれらの結果が一次白血病細胞で得られる結果に対応することを確認する。実施例4:骨髄異形成試料の分類上記で定義されたように、配列番号:1~24によって示される遺伝子の発現レベルの測定は骨髄異形成症候群のサブタイプを同定することを可能にする。本発明による方法の有効性を確認するために、他の手法によって分類された患者試料のパネルを試験した。3つのRARS、6つのRCMDおよび3つのRAEBを使用して、配列番号:1~24によって示される遺伝子の発現レベルを評価した。結果を以下に提示する:表9:RARS試料表10:RCMD試料表11:RAEB試料試験した試料すべてが、本発明による方法において定義される基準を満たす。実施例5:RARS、RCMD、RAEBおよびAMLの特異的プロフィールの図式的表示上記分類に対応する結果を、決定された試料を示す領域に対応する、アンチオキシドグラムによって図示することができる。配列番号:1~24の各遺伝子の発現を上記で定義したようにqRT-PCRによって測定し、ハウスキーピング遺伝子GAPDHの発現レベルと比較する。図3Aは、発現レベルに従って分類した、GAPDHと比較した配列番号:1~24の各遺伝子の発現の変動を示す。遺伝子番号は上記表1を使用することによって容易に見出される。RARS試料図3B、RCMD試料図3C、RAEB試料図3DおよびAML試料図3Eについてのアンチオキシドグラムを使用して新たな試料を分類することができる。実際に、配列番号:1~24によって示される各遺伝子についての比率を測定することにより、曲線を描くことができる。この曲線を、次に、アンチオキシドグラムと比較することができ、したがって、試験した試料がどのような種類の病変に属するかが容易に決定される。実施例6:分類できない骨髄異形成症候群の分類上記アンチオキシドグラムは、他の分類手法ではうまくいかない骨髄異形成症候群を分類するために用いることができる。配列番号:1~24の遺伝子の各々の発現レベルを本発明に従って測定し、曲線を作製した。この曲線破線を、次に、RARS、RCMD、RAEBおよびAMLの特異的アンチオキシドグラムと比較した。図4は、発現の比率Riの大部分がRCDM試料の特徴である比率に近いことを示す。図5は、分類できない骨髄異形成症候群の2つの独立した試料が配列番号:1~24の遺伝子の類似した発現レベルを示し、したがってRCDM試料の特徴であるものに近いことを示す。実施例7:オキシドグラムを使用することによるMDSの区別慢性骨髄単球性白血病CMMLは、単球増加を特徴とする白血病の形態である。この疾患の類別は論議の的となってきた。CMMLを有する患者は、患者の特定の症状に依存して骨髄異形成症候群または骨髄増殖性腫瘍のいずれかを模倣する、様々な臨床特徴を呈し得る。この論議のために、CMMLは2000年代初期に世界保健機構によって骨髄異形成/骨髄増殖性カテゴリの内科疾患に分類された。本発明によるオキシドグラムは、組織学的分析によるとRAEBに近い、CMML試料の状態を判定するのに役立ち得る。図6に示すように、CMMLを有する2名の患者の試料の配列番号:1~24の遺伝子の発現レベルは、RAEBの配列番号:1~24の遺伝子の発現レベルとは異なる。これらのデータは、CMMLがSDMとは異なることを明らかにする。実施例8:進行性MDSのフォローアップのためのオキシドグラムの使用先に述べたように、MDSは徐々にAMLへと進行する。したがって、この進行が緩やかであるか急速であるかを知ることは重要である。オキシドグラムを使用して、配列番号:1~24の遺伝子の分子発現が診断の時点から所定の日までに進行したかどうかを判定することができる。一例を図7に示す。患者はt=0の時点でRCMDを有すると診断された。診断から12か月後にも、配列番号:1~24の遺伝子の発現レベルを測定した。図7は、診断時と12か月後の発現の間の相違を示す。12か月後に、オキシドグラムは患者がRCMDからRAEBへと進行しつつあることを示すが、組織学的分析はいかなる相違も示さない。実施例9:脱メチル化剤の抗腫瘍作用のインビトロでの測定AMLを治療するために新しい治療薬が積極的に探索されている。これらの化合物は、広範な探索のために、費用がかかり、また残念ながらすべてのAML試料において普遍的に有効というわけではない。AMLサブタイプの平均30が新規治療薬に応答性であり、白血病の進行を遅らせるために患者において有効に使用することができる。しかし、薬剤に対する正または負のインビボ応答は、治療の開始から6~9か月後まで得ることができない。本発明によるオキシドグラムを使用して、配列番号:1~24の遺伝子の発現レベルの変化を調べることにより、薬剤が白血病試料に有効であるかどうかをインビトロで評価することができる。図8は、脱メチル化剤アザシチジンで治療したAML試料の例を示す。この図は、この特定の試料において、治療が遺伝子の発現レベルを変化させ、患者のためにインビボで有効であり得ることを明らかにする。"