疼痛、炎症、又は掻痒の治療に有用な化合物のスクリーニングのための、GPR83の使用。GPR83が、配列番号17~20のいずれかで表されるアミノ酸配列からなるポリペプチド;配列番号17~20のいずれかで表されるアミノ酸配列の部分配列を含み、且つHK1受容体活性を有するポリペプチド;配列番号17~20のいずれかで表されるアミノ酸配列を含み、且つHK1受容体活性を有するポリペプチド;~のいずれかのポリペプチドのアミノ酸配列において、1~10個のアミノ酸が欠失、置換、及び/又は付加されたアミノ酸配列からなり、且つHK1受容体活性を有するポリペプチド;又は~のいずれかのポリペプチドのアミノ酸配列と少なくとも90の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、且つHK1受容体活性を有するポリペプチド;である、請求項1に記載の使用。疼痛、炎症、又は掻痒の治療に有用な化合物をスクリーニングする方法であって、HK1受容体機能のアンタゴニストであることが推測される化合物とGPR83とを接触させるステップ;前記化合物の、GPR83への結合及び/又はアンタゴニスト活性を検出するステップ;及び疼痛、炎症、又は掻痒の治療に有用な化合物をスクリーニングするステップ;を含む、上記方法。GPR83を含有する細胞膜を調製するステップ;HK1受容体機能のアンタゴニストであることが推測される化合物と前記細胞膜とを接触させるステップ;及び前記化合物が、GPR83に結合して、アンタゴニスト活性を発揮するかどうかを測定するステップ;を含む、請求項3に記載の方法。GPR83が、配列番号17~20のいずれかで表されるアミノ酸配列からなるポリペプチド;配列番号17~20のいずれかで表されるアミノ酸配列の部分配列を含み、且つHK1受容体活性を有するポリペプチド;配列番号17~20のいずれかで表されるアミノ酸配列を含み、且つHK1受容体活性を有するポリペプチド;~のいずれかのポリペプチドのアミノ酸配列において、1~10個のアミノ酸が欠失、置換、及び/又は付加されたアミノ酸配列からなり、且つHK1受容体活性を有するポリペプチド;又は~のいずれかのポリペプチドのアミノ酸配列と少なくとも90の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、且つHK1受容体活性を有するポリペプチド;である、請求項3又は4に記載の方法。GPR83機能阻害剤前記阻害剤はアンタゴニスト、抗体、アンチセンス、及びsiRNAからなる群から選択されるを含有する、疼痛、炎症、又は掻痒の治療のための医薬組成物。以下の~のいずれかに示されるペプチド又はその製薬上許容される塩:ArgSerArgThrArgNH2配列番号7C末端のArgNH2は、カルボキシル基がアミド化されたArgを示すで表されるアミノ酸配列からなるペプチド;ArgProLysProGlnNH2配列番号6C末端のGlnNH2は、カルボキシル基がアミド化されたGlnを示すで表されるアミノ酸配列からなるペプチド;上記又はのペプチドのアミノ酸配列において、Arg及びLys以外の位置で1又は数個のアミノ酸が欠失、置換又は付加されたアミノ酸配列からなり、且つサブスタンスPに対するアンタゴニスト活性、疼痛抑制活性、炎症抑制活性、及び掻痒抑制活性からなる群から選択される少なくとも1つの活性を有するペプチド但し、ArgProLysProGlnGlnPheNH2配列番号3C末端のPheNH2は、カルボキシル基がアミド化されたPheを示すで表されるアミノ酸配列からなるペプチド;及びArgProLysProGlnGlnPhePheNH2配列番号5C末端のPheNH2は、カルボキシル基がアミド化されたPheを示すで表されるアミノ酸配列からなるペプチドを除く。以下の~のいずれかに示されるペプチド又はその製薬上許容される塩:ArgDTrpArgThrArgNH2配列番号9DTrpはD型のトリプトファンを示し、C末端のArgNH2は、カルボキシル基がアミド化されたArgを示すで表されるアミノ酸配列からなるペプチド;ArgDTrpLysProGlnNH2配列番号8DTrpはD型のトリプトファンを示し、C末端のGlnNH2は、カルボキシル基がアミド化されたGlnを示すで表されるアミノ酸配列からなるペプチド;上記又はのペプチドのアミノ酸配列において、DTrp、Arg及びLys以外の位置で1又は数個のアミノ酸が欠失、置換又は付加されたアミノ酸配列からなり、且つサブスタンスPに対するアンタゴニスト活性、疼痛抑制活性、炎症抑制活性、及び掻痒抑制活性からなる群から選択される少なくとも1つの活性を有するペプチド。請求項7又は8に記載のペプチド又はその製薬上許容される塩からなる、サブスタンスPに対するアンタゴニスト。請求項7又は8に記載のペプチド又はその製薬上許容される塩を有効成分として含有する疼痛治療薬。請求項7又は8に記載のペプチド又はその製薬上許容される塩を有効成分として含有する炎症治療薬。請求項7又は8に記載のペプチド又はその製薬上許容される塩を有効成分として含有する掻痒治療薬。上記の通り、SPのN末端フラグメントSP及びSPがSPに起因する疼痛関連行動を抑制することは知られていた。しかしながら、製剤化の観点からはSPのN末端フラグメントの更なる改良が求められている。また、アンタゴニスト活性、疼痛抑制活性、炎症抑制活性、及び掻痒抑制活性を有する更なるペプチドも求められている。加えて、未だ明らかとなっていないHK1に特異的な受容体を見出すことも求められている。そこで本発明は、SPに対するアンタゴニスト活性、疼痛抑制活性、炎症抑制活性、及び掻痒抑制活性を有するペプチドを提供することを目的としている。また、本発明は、HK1に特異的な受容体を用いた疼痛治療薬、炎症治療薬、及び掻痒治療薬の探索方法を提供することを目的としている。上述の課題を解決するために本発明者らが鋭意検討した結果、タキキニンペプチドに属するSPのN末端フラグメントSP及びHK1のN末端フラグメントHK1SP:ArgProLysProGlnNH2配列番号6HK1:ArgSerArgThrArgNH2配列番号7がそれぞれ、SPに起因する疼痛関連行動ひっかき行動や、ホルマリン投与により誘発される炎症性疼痛を抑制することを見出した。また、SPのN末端フラグメントSP及びHK1のN末端フラグメントHK1におけるL型アミノ酸の一部をD型アミノ酸に置換することによって、前記抑制効果が長時間持続することを見出した。更には、HK1に特異的な受容体がGタンパク質共役受容体GPR83であることを同定するに至った。すなわち、本発明は以下を包含する。1疼痛、炎症、又は掻痒の治療に有用な化合物のスクリーニングのための、GPR83の使用。2疼痛、炎症、又は掻痒の治療に有用な化合物をスクリーニングする方法であって、HK1受容体機能のアンタゴニストであることが推測される化合物とGPR83とを接触させるステップ;前記化合物の、GPR83への結合及び/又はアンタゴニスト活性を検出するステップ;及び疼痛、炎症、又は掻痒の治療に有用な化合物をスクリーニングするステップ;を含む、上記方法。3GPR83を含有する細胞膜を調製するステップ;HK1受容体機能のアンタゴニストであることが推測される化合物と前記細胞膜とを接触させるステップ;及び前記化合物が、GPR83に結合して、アンタゴニスト活性を発揮するかどうかを測定するステップ;を含む、2に記載の方法。4GPR83が、配列番号17~20のいずれかで表されるアミノ酸配列からなるポリペプチド;配列番号17~20のいずれかで表されるアミノ酸配列の部分配列を含み、且つHK1受容体活性を有するポリペプチド;配列番号17~20のいずれかで表されるアミノ酸配列を含み、且つHK1受容体活性を有するポリペプチド;~のいずれかのポリペプチドのアミノ酸配列において、1~10個のアミノ酸が欠失、置換、及び/又は付加されたアミノ酸配列からなり、且つHK1受容体活性を有するポリペプチド;又は~のいずれかのポリペプチドのアミノ酸配列と少なくとも90の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、且つHK1受容体活性を有するポリペプチド;である、1に記載の使用、又は2若しくは3に記載の方法。5GPR83機能阻害剤前記阻害剤はアンタゴニスト、抗体、アンチセンス、及びsiRNAからなる群から選択されるを含有する、疼痛、炎症、又は掻痒の治療のための医薬組成物。6以下の~のいずれかに示されるペプチド又はその製薬上許容される塩:ArgSerArgThrArgNH2配列番号7C末端のArgNH2は、カルボキシル基がアミド化されたArgを示すで表されるアミノ酸配列からなるペプチド;ArgProLysProGlnNH2配列番号6C末端のGlnNH2は、カルボキシル基がアミド化されたGlnを示すで表されるアミノ酸配列からなるペプチド;上記又はのペプチドのアミノ酸配列において、Arg及びLys以外の位置で1又は数個のアミノ酸が欠失、置換又は付加されたアミノ酸配列からなり、且つサブスタンスPに対するアンタゴニスト活性、疼痛抑制活性、炎症抑制活性、及び掻痒抑制活性からなる群から選択される少なくとも1つの活性を有するペプチド但し、ArgProLysProGlnGlnPheNH2配列番号3C末端のPheNH2は、カルボキシル基がアミド化されたPheを示すで表されるアミノ酸配列からなるペプチド;及びArgProLysProGlnGlnPhePheNH2配列番号5C末端のPheNH2は、カルボキシル基がアミド化されたPheを示すで表されるアミノ酸配列からなるペプチドを除く。7以下の~のいずれかに示されるペプチド又はその製薬上許容される塩:ArgDTrpArgThrArgNH2配列番号9DTrpはD型のトリプトファンを示し、C末端のArgNH2は、カルボキシル基がアミド化されたArgを示すで表されるアミノ酸配列からなるペプチド;ArgDTrpLysProGlnNH2配列番号8DTrpはD型のトリプトファンを示し、C末端のGlnNH2は、カルボキシル基がアミド化されたGlnを示すで表されるアミノ酸配列からなるペプチド;上記又はのペプチドのアミノ酸配列において、DTrp、Arg及びLys以外の位置で1又は数個のアミノ酸が欠失、置換又は付加されたアミノ酸配列からなり、且つサブスタンスPに対するアンタゴニスト活性、疼痛抑制活性、炎症抑制活性、及び掻痒抑制活性からなる群から選択される少なくとも1つの活性を有するペプチド。86又は7に記載のペプチド又はその製薬上許容される塩からなる、サブスタンスPに対するアンタゴニスト。96又は7に記載のペプチド又はその製薬上許容される塩を有効成分として含有する疼痛治療薬。106又は7に記載のペプチド又はその製薬上許容される塩を有効成分として含有する炎症治療薬。116又は7に記載のペプチド又はその製薬上許容される塩を有効成分として含有する掻痒治療薬。本発明は更に以下の態様を包含する。12疼痛、炎症、又は掻痒の治療に有用な化合物をスクリーニングするための、GPR83を含むスクリーニング剤。13疼痛、炎症、又は掻痒を治療するための、GPR83機能阻害剤前記阻害剤はアンタゴニスト、抗体、アンチセンス、及びsiRNAからなる群から選択される。14疼痛、炎症、又は掻痒を治療するための医薬の製造における、GPR83機能阻害剤前記阻害剤はアンタゴニスト、抗体、アンチセンス、及びsiRNAからなる群から選択されるの使用。15疼痛、炎症、又は掻痒の治療を必要とする哺乳動物例えば、ヒトに、有効量のGPR83機能阻害剤前記阻害剤はアンタゴニスト、抗体、アンチセンス、及びsiRNAからなる群から選択されるを投与することを含む、掻痒、疼痛、又は炎症の治療方法。16医薬として使用するための、6又は7に記載のペプチド又はその製薬上許容される塩。17疼痛、炎症、又は掻痒を治療するための、6又は7に記載のペプチド又はその製薬上許容される塩。186又は7に記載のペプチド又はその製薬上許容される塩と、製薬上許容される担体とを含む医薬組成物。19疼痛、炎症、又は掻痒を治療するための医薬の製造における、6又は7に記載のペプチド又はその製薬上許容される塩の使用。20疼痛、炎症、又は掻痒の治療を必要とする哺乳動物例えば、ヒトに、有効量の6又は7に記載のペプチド又はその製薬上許容される塩を投与することを含む、疼痛、炎症、又は掻痒の治療方法。本明細書は本願の優先権の基礎である日本国特許出願2010191039号及び米国仮特許出願61471338号の明細書及び/又は図面に記載される内容を包含する。本発明によれば、SPに対するアンタゴニスト活性、疼痛抑制活性、炎症抑制活性、及び掻痒抑制活性からなる群から選択される少なくとも1つの活性を有するペプチドを提供することができる。また、L型アミノ酸の一部をD型アミノ酸に置換することにより、上記活性を長時間持続するペプチドを提供することができる。加えて、HK1特異的受容体であるGPR83を用いる化合物スクリーニングによって、HK1が関与する疼痛、掻痒、掻痒などの治療に有用な化合物を提供することができる。以下、本発明を詳細に説明する。1.ヘモキニン1由来ペプチド及びサブスタンスP由来ペプチド本発明に係るペプチドは、ArgProLysProGlnNH2配列番号6又はArgSerArgThrArgNH2配列番号7C末端のGlnNH2及びArgNH2はそれぞれカルボキシル基がアミド化されたGln及びArgを示すで表されるアミノ酸配列からなる。本発明に係るペプチドをヒトなどの動物に投与することにより、SPに起因する疼痛関連行動、熱痛覚過敏、疼痛、炎症、かゆみなどを抑制することができる。また、ホルマリン投与などにより誘発される炎症性疼痛や痒み誘発物質投与などにより誘発される痒みをも抑制することもできる。また、本発明に係るペプチドは、上記のアミノ酸配列において、Arg及びLys以外の位置で1又は数個例えば、1~3個、好ましくは1又は2個、特に好ましくは1個のアミノ酸が欠失、置換又は付加されたアミノ酸配列からなり、且つSPに対するアンタゴニスト活性、疼痛抑制活性、炎症抑制活性、及び掻痒抑制活性からなる群から選択される少なくとも1つの活性を有するものであってもよい。ここで、SPに対するアンタゴニスト活性とは、SPに起因する疼痛関連行動、熱痛覚過敏、疼痛、炎症、かゆみなどを抑制する活性を意味する。疼痛抑制活性、炎症抑制活性、及び掻痒抑制効果とは、疼痛、炎症、及び掻痒を抑制する活性を意味するが、前記疼痛、炎症、及び掻痒はSPに起因するものに限定されない。例えば、ホルマリンを投与することにより誘発される炎症性疼痛を抑制する活性も含まれる。また、ヒスタミンやセロトニンに代表される痒み誘発物質を投与することにより誘発される痒みを抑制する活性も含まれる。なお、ホルマリン投与により誘発される炎症性疼痛は、広義の神経障害性疼痛モデルと見なすことができる。また、起炎物質のカラゲニンを投与することにより誘発される炎症も広義の神経障害性疼痛モデルと見なすことができる。上記活性は実施例に記載の評価手順に従って評価することができる。本発明に係るペプチドにおいて、L型アミノ酸の一部をD型アミノ酸に置換することによって、ペプチドが生体内で分解されにくくなり、SPに対するアンタゴニスト活性、疼痛抑制活性、炎症抑制活性、及び掻痒抑制活性を長時間持続することができる。すなわち、本発明は、ArgDTrpLysProGlnNH2配列番号8又はArgDTrpArgThrArgNH2配列番号9DTrpはD型のトリプトファンを示し、C末端のGlnNH2及びArgNH2はそれぞれカルボキシル基がアミド化されたGln及びArgを示すで表されるアミノ酸配列からなるペプチドも包含する。また、本発明に係るペプチドは、上記のペプチドのアミノ酸配列において、DTrp、Arg及びLys以外の位置で1又は数個例えば、1又は2個、好ましくは1個のアミノ酸が欠失、置換又は付加されたアミノ酸配列からなり、且つSPに対するアンタゴニスト活性、疼痛抑制活性、炎症抑制活性、及び掻痒抑制活性からなる群から選択される少なくとも1つの活性を有するものであってもよい。本発明に係るペプチドは、製薬上許容される塩の形態であってもよい。製薬上許容される塩としては、例えば、アルカリ金属塩ナトリウム塩、カリウム塩など、アルカリ土類金属塩カルシウム塩、マグネシウム塩など、有機酸付加塩酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩など、無機酸付加塩塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩などを挙げることができる。本発明に係るペプチドは、公知のペプチド合成方法により化学的に合成することができる。あるいは、本発明に係るペプチドをコードするDNAを宿主において導入し、発現した本発明に係るペプチドを回収することで、本発明に係るペプチドを得ることができる。本発明に係るペプチドは、SPの作用に拮抗する作用を有するため、SPに対するアンタゴニストとして使用することができる。SPは多くの症状に関与することが知られている285322。また、ホルマリンは炎症性疼痛を誘発し、ヒスタミンやセロトニンは痒みを誘発する。そのため、SP、ホルマリン、ならびにヒスタミン及びセロトニンにより誘発される症状を抑制することができる本発明に係るペプチドは疼痛治療薬、炎症治療薬、及び掻痒治療薬の有効成分として使用することができる。ここで、治療とは、ある症状を既に有している対象において当該症状を抑制することに加えて、当該症状を有していない対象において当該症状の発症を抑制することすなわち、予防することを包含する。本発明に係るペプチドを有効成分として含有する疼痛治療薬、炎症治療薬、又は掻痒治療薬を使用することで、ヒトにおける以下の疾患状態生理学的な障害、症状又は疾患のうち1以上を治療することができる:疼痛関連障害例えば、片頭痛、神経障害疼痛、手術後疼痛、慢性疼痛症候群、炎症性疾患例えば、関節炎、乾癬及び皮膚障害例えば、アトピー性皮膚炎、接触皮膚炎、帯状疱疹。本発明に係る疼痛治療薬、炎症治療薬、又は掻痒治療薬の剤形としては、特に限定されるものではないが、例えば、錠剤、粉剤、乳剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、液剤、シロップ剤、懸濁剤、エリキシル剤などの経口剤、又は注射剤、点滴剤、坐剤、吸入剤、経皮吸収剤、経粘膜吸収剤、貼付剤、スプレー剤、軟膏剤などの非経口剤が挙げられる。本発明に係るペプチドと組み合わせることができる医薬用成分としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着色剤、香料などが挙げられる。賦形剤としては、例えば、デンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類などが挙げられる。結合剤としては、例えば、結晶セルロース、結晶セルロースカルメロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、カルメロースナトリウム、エチルセルロース、カルボキシメチルエチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、コムギデンプン、コメデンプン、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、デキストリン、アルファー化デンプン、部分アルファー化デンプン、ヒドロキシプロピルスターチ、プルラン、ポリビニルピロリドン、アミノアルキルメタクリレートコポリマーE、アミノアルキルメタクリレートコポリマーRS、メタクリル酸コポリマーL、メタクリル酸コポリマー、ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、ポリビニルアルコール、アラビアゴム、アラビアゴム末、寒天、ゼラチン、白色セラック、トラガント、精製白糖、マクロゴールなどが挙げられる。崩壊剤としては、例えば、結晶セルロース、メチルセルロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルメロース、カルメロースカルシウム、カルメロースナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、コムギデンプン、コメデンプン、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、部分アルファー化デンプン、ヒドロキシプロピルスターチ、カルボキシメチルスターチナトリウム、トラガントなどが挙げられる。界面活性剤としては、例えば、大豆レシチン、ショ糖脂肪酸エステル、ステアリン酸ポリオキシル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、セスキオレイン酸ソルビタン、トリオレイン酸ソルビタン、モノステアリン酸ソルビタン、モノパルミチン酸ソルビタン、モノラウリン酸ソルビタン、ポリソルベート、モノステアリン酸グリセリン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウロマクロゴールなどが挙げられる。滑沢剤としては、例えば、コムギデンプン、コメデンプン、トウモロコシデンプン、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、含水二酸化ケイ素、軽質無水ケイ酸、合成ケイ酸アルミニウム、乾燥水酸化アルミニウムゲル、タルク、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、リン酸水素カルシウム、無水リン酸水素カルシウム、ショ糖脂肪酸エステル、ロウ類、水素添加植物油、ポリエチレングリコールなどが挙げられる。流動性促進剤としては、例えば、含水二酸化ケイ素、軽質無水ケイ酸、乾燥水酸化アルミニウムゲル、合成ケイ酸アルミニウム、ケイ酸マグネシウムなどが挙げられる。本発明に係る疼痛治療薬、炎症治療薬、又は掻痒治療薬の剤形が、液剤、シロップ剤、懸濁剤、乳剤又はエリキシル剤である場合には、矯味矯臭剤、着色剤などを含有してもよい。本発明に係る疼痛治療薬、炎症治療薬、又は掻痒治療薬は、更なる成分を含んでいてもよい。本発明に係る疼痛治療薬、炎症治療薬、又は掻痒治療薬が含むことができる成分としては、例えば、プロピオン酸誘導体系非ステロイド性抗炎症薬として、プロピオン酸誘導体であるイブプロフェン、ケトプロフェン、フルルビロフェン、フルルビロフェンアキセチル、オキサプロジン、フェノプロフェン、チアプロフェン酸、ナプロキセン、プラノプロフェン、ロキソプロフェン、アミノプロフェン、ザルトプロフェン又はこれらの塩、非ピリン系解熱鎮痛薬として、アセトアミノフェン、メシル酸ジメトチアジン又はこれらの塩、抗プラスミン薬として、トラネキサム酸、イプシロンアミノカプロン酸又はこれらの塩、消炎酵素薬として、塩化リゾチーム、セミアルカリプロテイナーゼ、セラペプターゼ、プロメライン又はこれらの塩などが挙げられる。本発明に係る疼痛治療薬、炎症治療薬、又は掻痒治療薬における本発明に係るペプチドの含有量は、投与目的、投与経路、剤形などによって適宜変更し得るが、例えば、0001~1mg、好ましくは0001~001mgである。本発明に係る疼痛治療薬、炎症治療薬、又は掻痒治療薬の投与回数、投与量及び投与期間は、特に限定されるものではなく、例えば、病気の種類、患者の年齢、性別、体重又は症状の程度、あるいは投与方法などに応じて適宜決定することができる。投与回数は、例えば、外用投与で、1日1回~3回、好ましくは1日1回である。本発明に係る疼痛治療薬、炎症治療薬、又は掻痒治療薬に含まれる本発明に係るペプチドの投与量は、インドメタシンでの投与量が外用で50mg、静注で1mgから換算して、例えば静注で1日当たり001mg~1mgkg体重、好ましくは001mg~01mgkg体重であり、外用ではその50倍である。また、投与期間は、例えば1~7日間、好ましくは1~2日間である。本発明に係る疼痛治療薬、炎症治療薬、又は掻痒治療薬の投与経路は、剤形や使用目的に応じて、適宜決定することができるが、例えば、経口投与、非経口投与、及び局所投与が挙げられる。2.HK1特異的受容体を用いたスクリーニング方法HK1は、疼痛、炎症、及び掻痒に関与する物質である。従って、HK1に特異的に結合する受容体を利用し、そのアンタゴニストを探索することにより、疼痛、炎症、又は掻痒の治療に有用な候補物質を見出すことが可能となる。本発明者らは、以下の実施例に示すように、HK1特異的受容体としてGタンパク質共役受容体GPR83を同定した。そして、GPR83を使用して、疼痛、炎症、又は掻痒の治療に有用な化合物をスクリーニングする方法を提供する。GPR83は、ヒトをはじめとし、マウスなどでも同定されており、アミノ酸配列は、GenBankなどのデータベースにて公知である。既に明らかになっているGPR83のアミノ酸配列を配列番号17~20に示す。なお、本発明においてGPR83とは、GPR83タンパク質をコードする遺伝子及びmRNAも包含し、タンパク質、遺伝子、及びmRNAのいずれに対しても使用される。また、GPR83は、前記タンパク質、遺伝子、及びmRNAにおけるアミノ酸又は塩基の一部が変異したタンパク質、遺伝子、及びmRNA、並びにそれらのフラグメントも包含する。本発明に係るスクリーニング方法で用いられるGPR83は、GPR83タンパク質の全長であってもよいが、そのペプチド断片であってHK1受容体活性を有するもの、あるいは全長タンパク質をその断片とするものであってHK1受容体活性を有するものでもよい。更に、これらのポリペプチドのアミノ酸配列において、1~10個のアミノ酸が欠失、置換、及び/又は挿入されたアミノ酸配列、あるいは前記ポリペプチドのアミノ酸配列と少なくとも90以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、HK1受容体活性を有するポリペプチドを用いることも出来る。例えば、本発明におけるGPR83として、以下のものが挙げられる:配列番号17~20のいずれかで表されるアミノ酸配列からなるポリペプチド;配列番号17~20のいずれかで表されるアミノ酸配列の部分配列を含み好ましくは、配列番号17~20のいずれかで表されるアミノ酸配列の部分配列からなり、且つHK1受容体活性を有するポリペプチド;配列番号17~20のいずれかで表されるアミノ酸配列を含み、且つHK1受容体活性を有するポリペプチド;~のいずれかのポリペプチドのアミノ酸配列において、1~10個、好ましくは1~7個、より好ましくは1~4個のアミノ酸が欠失、置換、及び/又は付加されたアミノ酸配列からなり、且つHK1受容体活性を有するポリペプチド;又は~のいずれかのポリペプチドのアミノ酸配列と少なくとも90、好ましくは少なくとも95、より好ましくは少なくとも98の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み好ましくは、~のいずれかのポリペプチドのアミノ酸配列と少なくとも90、好ましくは少なくとも95、より好ましくは少なくとも98の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、且つHK1受容体活性を有するポリペプチド。HK1特異的受容体であるGPR83を使用したスクリーニング方法は、以下のステップを含む。HK1受容体機能のアンタゴニストであることが推測される化合物とGPR83とを接触させるステップ;前記化合物の、GPR83への結合及び/又はアンタゴニスト活性を検出するステップ;及び疼痛、炎症、又は掻痒の治療に有用な化合物をスクリーニングするステップ。より具体的には、以下のステップを含む:GPR83を含有する細胞膜を調製するステップ;HK1受容体機能のアンタゴニストであることが推測される化合物と前記細胞膜とを接触させるステップ;及び前記化合物が、GPR83に結合して、アンタゴニスト活性を発揮するかどうかを測定するステップ。GPR83とHK1受容体機能のアンタゴニストであることが推測される化合物試験化合物との接触は、同じ反応液中に混合すること、培養液に入れること、同じ細胞内で保持することなどの公知のあらゆる手段を用いて行うことができる。反応条件はこれらの手段に応じて適宜最適な条件を選択することができるが、一例を挙げれば、室温や培養に適した温度で、数分から数時間にわたり行うことができる。反応後に試験化合物のGPR83への結合及び/又はアンタゴニスト活性を検出する方法も公知の手段により行うことができる。以下、実施例を用いて本発明をより詳細に説明するが、本発明の技術的範囲はこれにより限定されるものではない。実施例1HK1及びSPのN末端領域からなるペプチドの薬理学的評価11.実験目的先行研究にて、SPのN末端領域とC末端領域では異なる機能を有すると報告されている非特許文献1。そこで、我々の実験系でも同様の効果を有するか否かについて検討した。なお、N末端領域のnHK1HK1及びnSPSP、C末端領域のcHK1HK1及びcSPSPは以下に示すアミノ酸配列である:nHK1:ArgSerArgThrArgNH2配列番号7nSP:ArgProLysProGlnNH2配列番号6cHK1:GlnPheTyrGlyLeuMetNH2配列番号10cSP:GlnPhePheGlyLeuMetNH2配列番号11。2.実験方法及び結果髄腔内にカテーテルを留置したラットにカテーテルを通じて103MのHK1及びSP、N末端領域のnHK1及びnSP、C末端領域のcHK1及びcSPを投与し、投与直後からの行動学的変化を、ペプチド投与5分間のひっかき行動回数を指標として評価した。ここで、103Mのを投与とは、ペプチド例えば、nHK1を10nmol含有する10μlの溶液すなわち103M溶液を、10μl全量投与することを意味する。以下、同様に表記する。結果を図1に示す。なお、これらのグラフは103MのSP及びHK1の単独投与により誘発されるひっかき回数をControlとし、このひっかき回数を100として示している。これらの結果より、N末端領域のnHK1及びnSPの単独投与ではひっかき行動を生じないが、C末端領域のcSP及びcHK1の単独投与ではひっかき行動を生じ、このひっかき回数はSP及びHK1単独投与と同様の効果を有することが認められた。実施例2HK1及びSPのN末端領域からなるペプチドの薬理学的評価21.実験目的先行研究にて、SPのN末端領域はSPに対してアンタゴニスト効果を有するペプチドであると報告されている非特許文献2及び3。そこで、我々の実験系でも同様の効果を有するか否かについて検討した。なお、N末端領域のSPは非特許文献2及び3で用いたペプチドSP及びSPよりアミノ酸配列の短いペプチドSPを用いて評価した。さらに、HK1も同様にN末端領域のペプチドとしてHK1を用いて評価した。今回使用したペプチドnSP及びnHK1がこれまでに報告されたSPフラグメントペプチドSP及びSPよりアミノ酸配列が短くなっているのは、より短いアミノ酸配列の方が製剤化の観点から有益であると推測されたからである。2.実験方法及び結果投与間隔図2は、髄腔内にカテーテルを留置したラットにカテーテルを通じて103MのN末端領域のnSP、nHK1を投与後、103MのSP投与により誘発されるひっかき回数の変化についてnSP及びnHK1とSPとの投与間隔を変化させた結果を示したものである。なお、生理食塩水投与後5分後のSP投与により誘発されるひっかき回数をControlとし、そのひっかき回数を100として示した。nSPとnHK1は、どちらもSPとの投与間隔が5分間の場合に顕著なひっかき回数の抑制を認め、その抑制効果は投与10分後でも有意に示した。しかし、投与間隔15分ではその抑制効果は消失した。従って、SP誘発ひっかき行動に対して、nSPとnHK1は抑制効果を有するペプチドであることが示唆される。投与濃度図3は、髄腔内にカテーテルを留置したラットにカテーテルを通じて105M、104M、103MのN末端領域のnSP、nHK1を投与後、103MのSP投与により誘発されるひっかき回数の変化についてnSP及びnHK1の投与濃度を変化させた結果を示したものである。なお、生理食塩水投与後5分後のSP投与により誘発されるひっかき回数をControlとし、そのひっかき回数を100として示した。なお、図2の結果より、nSPとnHK1はどちらもSPとの投与間隔が5分間の場合に顕著なひっかき回数の抑制が認められたので、以後の実施例においてはその投与間隔を用いた。105M、104M、103MのN末端領域のnSPをそれぞれ前投与するとSP投与によるひっかき行動を抑制し、103Mでは顕著なひっかき回数の抑制効果を示した。一方、105M、104M、103MのN末端領域のnHK1をそれぞれ前投与すると103MのnHK1前投与でSP投与によるひっかき行動の有意な抑制効果を示した。従って、SP誘発ひっかき行動に対して、nSPとnHK1は103Mで顕著な抑制効果があることが示唆される。実施例3HK1及びSPのN末端領域からなるペプチドのSPに対する抑制効果に関与するアミノ酸の同定1.実験目的図2及び図3よりnSP及びnHK1はSP誘発ひっかき行動に対して抑制効果を有するペプチドであることが示唆された。そこで、これらのペプチドの薬理学的効果に関与するアミノ酸を特定することを目的としてnSP及びnHK1のアミノ酸のうちArgとLysをLeuに置換したペプチドを合成し、これらのペプチドの前投与によるSP誘発ひっかき行動の変化の違いを指標に、それぞれの合成ペプチドの薬理学的効果について評価した。2.実験方法及び結果髄腔内にカテーテルを留置したラットにカテーテルを通じて103MのN末端領域のnSP、nHK1及び置換ペプチド:Leu1nSP:LeuProLysProGlnNH2配列番号12Leu3nSP:ArgProLeuProGlnNH2配列番号13Leu1nHK1:LeuSerArgThrArgNH2配列番号14Leu3nHK1:ArgSerLeuThrArgNH2配列番号15Leu5nHK1:ArgSerArgThrLeuNH2配列番号16を投与した5分後に103MのSP投与により誘発されるひっかき回数を評価した。なお、生理食塩水投与後5分後に103MのSP投与により誘発されるひっかき回数をControlとし、そのひっかき回数を100として示した。結果を図4に示す。その結果、nSP及びnHK1前投与ではSP誘発ひっかき行動の顕著な抑制効果を示したが、全ての置換ペプチドの前投与ではnSP及びnHK1で示されたSP誘発ひっかき行動の抑制効果の消失が認められた。従って、ArgとLysをLeuに置換したペプチドでは抑制効果の消失が認められたことから、nSP及びnHK1の抑制効果はArgとLysがその機能の発揮に重要な役割があることが示唆される。実施例4HK1及びSPのN末端領域からなるペプチドのSPに対する抑制効果の持続に関与するアミノ酸の同定1.実験目的図2及び図3よりnSP及びnHK1はSP誘発ひっかき行動に対して抑制効果を有するペプチドであることが示唆された。そこでnSP及びnHK1のペプチドの薬理学的効果をより持続させることを目的としてDTrp2nSP、及びDTrp2nHK1:DTrp2nSP:ArgDTrpLysProGlnNH2配列番号8DTrp2nHK1:ArgDTrpArgThrArgNH2配列番号9を合成し、SP投与により誘発されるひっかき行動をこれらの合成ペプチドの前投与によって変化が生じるか否かを指標に、それぞれの合成ペプチドの薬理学的効果について評価した。また、DTrpを2位に用いた理由として、図4の結果よりnSP及びnHK1の抑制効果はArgとLysがその機能の発揮に重要な役割があることから、Arg及びLysを有し、かつ長期の抑制効果を有するためには、2位にDTrpを置換したペプチドを合成した方がその抑制効果を発揮できると推測されたので、このような合成ペプチドを用いた。2.実験方法及び結果髄腔内にカテーテルを留置したラットにカテーテルを通じて103MのDTrp2nSP及びDTrp2nHK1を投与後に103MのSP投与により誘発されるひっかき回数を評価した。図5は、DTrp2nSP及びDTrp2nHK1とSPとの投与間隔を変化させた結果を示したものである。なお、生理食塩水投与後5分後のSP投与により誘発されるひっかき回数をControlとし、そのひっかき回数を100として示した。DTrp2nSP及びDTrp2nHK1はどちらもSPとの投与間隔が5分間の場合に顕著なひっかき回数の抑制を認め、その抑制効果は投与20分後でも有意に示した。しかし、投与間隔30分ではその抑制効果は消失した。従って、SP誘発ひっかき行動に対して、nSPとnHK1の抑制効果は投与15分後には消失したが、DTrp2nSP及びDTrp2nHK1は投与20分後でも有意な抑制効果を有することから、nSP及びnHK1のアミノ酸配列にDTrpを組み込むことにより、その効果が長期になるということが示唆された。実施例5HK1及びSPのN末端領域からなるペプチドの疼痛抑制効果1.実験目的本実験では、ホルマリン足底投与に伴う疼痛行動に対するnSP及びnHK1の髄腔内への前投与による効果を確認した。2.実験方法及び結果髄腔内にカテーテルを留置したラットにカテーテルを通じて102MのnSP及びnHK1、または食塩水を投与し、5分後に後肢の皮下に2ホルマリンを50μl投与した。ホルマリンを投与してから60分間の疼痛行動足を振るflinching行動を計測し、疼痛の程度を評価した。ホルマリン投与後10分間の期間は、2分に1回、各回1分間かけて疼痛行動を計測した。ホルマリン投与後10~60分間の期間は、疼痛行動を5分に1回、各回1分間かけて計測し、疼痛の程度を評価した。phaseIではホルマリン投与に伴う化学刺激による行動phasicpainが見られ、phaseIIではそれに続く持続疼痛tonicpainが見られる。図6は、ホルマリン投与後の時間を横軸とし、計測された1分間当たりの疼痛行動の回数を縦軸として結果を示す。図7は、phaseI及びphaseIIで計測された疼痛行動の平均回数を示す。nSP及びnHK1では、phaseI及びphaseIIにおいて共に疼痛行動が有意に減少することが確認された。実施例6HK1及びSPのN末端領域からなるペプチドの痒み誘発物質投与に伴う痒みの抑制効果1.実験目的図5の結果より、SPの髄腔内投与により誘発されるひっかき行動に対して、nSPとnHK1の抑制効果は投与15分後には消失したが、DTrp2nSP及びDTrp2nHK1は投与20分後でも有意な抑制効果を有する。従って、nSP及びnHK1のアミノ酸配列にDTrpを組み込むことにより、その効果が長期間維持されることが示唆された。そこで、皮下組織における痒み行動に対するペプチドの髄腔内投与の効果について確認した。髄腔内にカテーテルを留置したラットにカテーテルを通じて102MのDTrp2nSP、及びDTrp2nHK1:DTrp2nSP:ArgDTrpLysProGlnNH2配列番号8DTrp2nHK1:ArgDTrpArgThrArgNH2配列番号9をそれぞれ合成し、頸部の皮下組織に内因性痒み誘発物質として知られているヒスタミンおよびセロトニンをそれぞれ投与した。これらの痒み誘発物質投与に伴う痒み行動に対して、ペプチドの髄腔内への前投与が痒み行動に変化をもたらすか否かを指標に評価した。2.実験方法及び結果髄腔内にカテーテルを留置したラットにカテーテルを通じて102MのDTrp2nSP、DTrp2nHK1、又は食塩水を投与した直後に、痒み誘発物質である103Mヒスタミン、又は113×104M5HTをそれぞれ頸部の皮下に投与し、20分間の痒み行動を計測することで、痒みの程度を評価した。図8及び9は、ヒスタミン及び5HT投与による痒み行動の結果を示し、ヒスタミン及び5HT投与後20分間のひっかき行動の回数を縦軸とし、DTrp2nSP、DTrp2nHK1、及び食塩水の投与を横軸に示す。図8において、ヒスタミン投与による痒み行動は、DTrp2nHK1投与により顕著な減少が認められたが、DTrp2nSP投与では痒み行動は生理食塩水投与と違いが認められなかった。図9の5HT投与による痒み行動も同様に、DTrp2nHK1投与により顕著な減少が認められたが、DTrp2nSP投与では生理食塩水投与と違いが認められなかった。これらの結果より、ヒスタミン及び5HT誘発の痒みはDTrp2nHK1の髄腔内への前投与によって顕著に抑制されることが示唆された。実施例1~5の結果に鑑みると、DTrpを導入しないnHK1も、DTrp2nHK1と同様に、ヒスタミン及び5HT誘発の痒みを抑制することが推定される。[実施例7]BLAST検索によるHK1特異的受容体候補物質の探索1.目的従来のHK1に関する知見より、HK1特異的受容体は、NK1Rとは異なるものの、ある程度の構造類似性があることが示唆される。そこで、GenBankのBLAST検索を実施した。2.実験方法及び結果NK1Rのアミノ酸配列を考慮して、BLAST検索を実施したところ、四つの遺伝子;NK3R、NK2R、GPR83、及びGPR15likeがHK1特異的受容体の候補遺伝子と考えられた。これらの遺伝子のNK1Rとの相同性は、それぞれ、60、50、35、29である。NK3R、及びNK2Rの特異的アゴニストは、それぞれNKB、及びNKAであることが既に分かっているが、GPR83、及びGPR15likeはリガンドが不明なオーファン受容体である。そこで、後者の二つがHK1特異的受容体の候補として考えられる。ここで、GPR83には他の呼称としてGIR、JP05、及びGPR72があり、GIRとタキキニン受容体の一つであるNK1Rとの相同性は31~34となっていることから、GIRはタキキニン受容体ファミリーであると考えられているDWangJPHermanLMPritchardRHSpitzerRLAhlbrandGJKramerFPettyFRSalleeNMRichtandCloningexpressionandregulationofglucocorticoidinducedreceptorinratbraineffectofrepetitiveamphetamineJNeurosci1590279035。それゆえ、GIRのアゴニストはタキキニンペプチドである可能性が高い。[実施例8]NK1Rノックダウン効果1.実験目的はじめに、NK1RsiRNAによるNK1Rノックダウン効果を確認した。2.実験方法及び結果1NK1RsiRNA1sense5’CAACAGGACUUAUGAGAAATT3’配列番号21antisense5’UUUCUCAUAAGUCCUGUUGTT3’配列番号22NK1RsiRNA2sense5’CAUCAGUGCAGGUGAUUAUTT3’配列番号23antisense5’AUAAUCACCUGCACUGAUGTT3’配列番号24NK1RsiRNA3sense5’GCAGAGAACUUCACAGGAATT3’配列番号25antisense5’UUCCUGUGAAGUUCUCUGCTT3’配列番号26MMsiRNA1sense5’AUCCGCGCGAUAGUACGUATT3’配列番号27antisense5’UACGUACUAUCGCGCGGAUTT3’配列番号28MMsiRNA2sense5’UUACGCGUAGCGUAAUACGTT3’配列番号29antisense5’CGUAUUACGCUACGCGUAATT3’配列番号30MMsiRNA3sense5’UAUUCGCGCGUAUAGCGGUTT3’配列番号31antisense5’ACCGCUAUACGCGCGAAUATT3’配列番号32ノックダウン効果の検証HVJEnvelopVectorKit石原産業を用い、当該キットのプロトコールに従ってsiRNAを調製した。髄腔内にカテーテルを留置したラットにカテーテルを通じて10μlのsiRNA溶液を投与した。HVJEのみの投与と、mismatchsiRNAの投与とを対照とし、SP又はHK1によるひっかき行動の回数の経時的な変化を評価すると、SP及びHK1誘発ひっかき回数に変化が認められなかった。従って、HVJE単独投与、又はMMsiRNAを前処理してもSP又はHK1誘発のひっかき行動には影響がほとんどないと見なされる。次に、NK1RsiRNAを髄腔内投与し、4日、7日、10日そして14日後のそれぞれにおいてSPを髄腔内投与すると、SP投与群では経時的なひっかき行動の抑制が認められ、siRNA投与4日後では49±146と顕著な抑制効果を示した図10。SP誘発ひっかき行動の回数はsiRNA投与後に徐々に回復し、siRNA投与4日後ではControllevelの20までひっかき回数は減少したが、siRNA投与7日後ではControllevelの40となり、10日後、及び14日後ではControllevelまでひっかき回数は回復した。これらのデータから、SPの髄腔内投与によるひっかき行動の回数は、NK1RsiRNA投与により、少なくとも、siRNA投与7日後までひっかき行動の抑制効果が認められた。従ってこの結果は、NK1RsiRNAにより脊髄後角におけるNK1Rの発現が抑制されると、SPに対する反応性が減少することを示唆しているだけでなく、SPがNK1Rのアゴニストであることを再評価できた。次に、NK1RsiRNAを髄腔内に投与した後に、HK1投与によるひっかき行動の回数を経時的に評価すると、SP投与によるひっかき行動の経時的変化とは異なる結果となった。具体的には、NK1RsiRNAの投与4日、7日、10日そして14日後のそれぞれの日においてHK1を髄腔内に投与することによるひっかき行動の回数を評価すると、すべての日においてContorlデータと違いがなかった図10。SP投与群では、NK1RsiRNA投与4日及び7日後において顕著なひっかき回数の減少が認められたが、HK1投与群ではその効果は示されなかった。従って、HK1によるひっかき行動の誘発はNK1Rを介して生じていないことが推測され、HK1がNK1Rのアゴニストである可能性は低いと考えられる。また、EKCD前投与によりSP誘発ひっかき行動は抑制されたが、HK1誘発ひっかき行動が抑制されなかったことから、EKCDがNK1R特異的アンタゴニストであることが示唆されているRNaonoTNakayamaTIkedaOMatsushimaTNishimoriLeucineatthecarboxylterminalofendokininCandDcontributestoelicitationoftheantagonisticeffectonsubstancePinratpainprocessingBrainRes11657180。従って、NK1RsiRNAの投与によるNK1Rノックダウンは、EKCD投与の結果と類似している。HK1特異的受容体はまだ不明であるが、HK1とSPとを比較すると、NK1RのアゴニストはHK1よりSPが優位であると考えられる。[実施例9]GPR83ノックダウン効果1.実験目的GPR83siRNAによるGPR83ノックダウン効果を確認した。2.実験方法及び結果1GPR83siRNA1sense5’GCACAUGGGUGUUUGGGAATT3’配列番号33antisense3’UUCCCAAACACCCAUGUGCTT3’配列番号34GPR83siRNA2sense5’CCACUGUGGCCGUGAGUUATT3’配列番号35antisense3’UAACUCACGGCCACAGUGGTT3’配列番号36GPR83siRNA3sense5’GGGAGGAGCUUCAGCCAUATT3’配列番号37antisense3’UAUGGCUGAAGCUCCUCCCTT3’配列番号382ノックダウン効果の検証実施例8と同様にGPR83siRNAを調製し、ラット髄腔内に投与した。GPR83siRNAを投与後、経時的なSP投与によるひっかき行動の回数はほとんど変化しなかった。また、図10にて示したNK1RsiRNAでの結果とは大きく異なり、GPR83siRNAの投与4日、7日、10日そして14日後にSPにより誘発されるひっかき回数はControllevelと有意差がなかった図11。この結果は、GPR83siRNAはSP誘発ひっかき行動にほとんど効果がないことを示唆している。従って、GPR83はSP特異的受容体ではない可能性が示唆された。一方、HK1投与群にGPR83siRNAを投与すると、図10のNK1RsiRNA投与によるHK1誘発ひっかき行動の経時的変化とは異なる結果を示した。HK1誘発ひっかき行動の回数は、GPR83siRNA投与4日後で顕著なひっかき行動の減少が認められ、そのひっかき回数は210±189であった図11。また、この抑制効果はsiRNA投与10日後まで持続し、Controllevelと比較して有意なひっかき回数の減少が認められた。また、GPR83siRNA投与14日後では、HK1誘発ひっかき回数は、Controllevelまで回復した。従って、GPR83はHK1誘発ひっかき行動に関与していることから、GPR83のアゴニストはHK1であると考えられる。さらに、興味深いこととして、SP誘発ひっかき行動を指標としたNK1RsiRNAによるノックダウン効果は7日間持続したが、GPR83siRNAによるノックダウンではHK1誘発ひっかき行動が10日間持続した。このことから、NK1RとGPR83のsiRNAによるノックダウンの効果は持続期間に違いがあることが認められる。また、いずれのsiRNAも同量及び同濃度を単回投与しているため、ノックダウンの効果に違いが生じるのは、GPR83がレセプター表面に現れ、そして細胞内へ戻っていくのに要する時間がNK1Rと異なることを意味している。[実施例10]GPR15likeノックダウン効果1.実験目的GPR15likesiRNAによるGPR15likeノックダウン効果を確認した。2.実験方法及び結果1GPR15likesiRNA1sense5’GAUCAAAGCUGCAAUCAUATT3’配列番号39antisense5’UAUGAUUGCAGCUUUGAUCTT3’配列番号40GPR15likesiRNA2sense5’CCAAUGAAACCAAGGCUAATT3’配列番号41antisense5’UUAGCCUUGGUUUCAUUGGTT3’配列番号42GPR15likesiRNA3sense5’GGACAUUUAUCUUGCUGUATT3’配列番号43antisense5’UACAGCAAGAUAAAUGUCCTT3’配列番号442ノックダウン効果の検証実施例8と同様にGPR15likesiRNAを調製し、ラット髄腔内に投与した。GPR15likesiRNAの投与4日、7日、10日そして14日後におけるSP又はHK1誘発ひっかき行動はControllevelと有意差がなく、全ての日における実験結果は、Controllevelに近い値となっているのGPR83siRNA、対象群として45mMのNK1RsiRNA、45mMのmismatchsiRNA、及び10μlのHVJEsiRNAの導入試薬を投与した4日後に、後肢の皮下に2ホルマリンを50μl投与した。そしてホルマリンを投与してから60分間の疼痛行動足を振るflinching行動を計測し、疼痛の程度を評価した。ホルマリン投与後10分間の期間phaseIと称するは、2分に1回、各回1分間かけて疼痛行動を計測した。ホルマリン投与後10~60分間の期間phaseIIと称するは、疼痛行動を5分に1回、各回1分間かけて計測し、疼痛の程度を評価した。phaseIではホルマリン投与に伴う化学刺激による行動phasicpainが見られ、phaseIIではそれに続く持続疼痛tonicpainが見られる。図13は、ホルマリン投与後の時間を横軸とし、計測された1分間当たりの疼痛行動の回数を縦軸として結果を示す。図14は、phaseI及びphaseIIで計測された疼痛行動の平均回数を示す。その結果、phaseIにおいてGPR83siRNA投与群は、HVJE投与群及びMMsiRNA投与群と比較して疼痛行動の回数に違いが認められなかったが、NK1RsiRNA投与群では疼痛行動の回数が減少していた。一方、phaseIIでは、GPR83siRNA投与群は、HVJE投与群、及びMMsiRNA投与群と比較して、疼痛行動の回数が減少していたが、有意差は認めらなかった。一方、NK1RsiRNA投与群では、HVJE投与群及びMMsiRNA投与群と比較して疼痛行動の抑制効果が見られた。これらの結果より、脊髄細胞におけるGPR83は、疼痛の伝達系への関与がNK1Rより低いことが示唆された。[実施例12]GPR83siRNA髄腔内投与による脊髄細胞でのGPR83ノックダウンにおける痒み誘発物質投与に伴う痒みの抑制効果1.実験目的図11の結果より、GPR83siRNA髄腔内投与による脊髄細胞のGPR83ノックダウン条件下において、SP髄腔内投与により誘発されるひっかき行動は抑制できなかったが、HK1誘発ひっかき行動は抑制することができた。一方、図13及び14の結果より、GPR83siRNA投与群は、ホルマリン皮下投与による疼痛行動を抑制できなかった。そこで、脊髄におけるGPR83の生理学的機能を評価するために、痒みの伝達機構への関与について検討した。具体的には、末梢組織に痒み誘発物質を投与することで生じる痒みに対してGPR83が関与しているか否かを評価するために、ラットの頸部における皮下組織に内因性痒み誘発物質として知られているヒスタミン及びセロトニンをそれぞれ投与し、これらの痒み誘発物質投与に伴う痒み行動に変化をもたらすか否かを指標に評価した。2.実験方法及び結果髄腔内にカテーテルを留置したラットにカテーテルを通じて45mMのGPR83siRNA、対象群として45mMのNK1RsiRNA、及び10μlのHVJEsiRNAの導入試薬を投与した4日後に、痒み誘発物質である103Mヒスタミン、及び113×104M5HTをそれぞれ頸部の皮下に投与し、20分間の痒み行動を計測することで、痒みの程度を評価した。図15及び16は、ヒスタミン及び5HT投与による痒み行動の結果を示し、ヒスタミン及び5HT投与後20分間のひっかき行動の回数を縦軸とし、HVJEsiRNAの導入試薬、GPR83siRNA、及びNK1RsiRNAの投与を横軸に示す。図15において、ヒスタミン投与による痒み行動は、GPR83siRNA、及びNK1RsiRNAのどちらの投与群においても、HVJEと違いがなかったことから、これらの受容体の発現が抑制されても、痒み行動の抑制効果は認められなかった。一方、図16において、GPR83siRNA投与群における5HT投与による痒み行動は、HVJE投与群と比較して、抑制が認められたが、NK1RsiRNA投与群はHVJE投与群と違いが認められなかった。以上の通り、GPR83siRNAの髄腔内投与は、5HTの皮下投与により誘発された痒み行動を抑制できた。そのため、脊髄細胞において発現しているGPR83が、5HTにより誘発される抹消組織の痒みの伝達機構に関与していることが示唆される。[結論]これまでの結果をまとめると、3種の遺伝子を標的としたsiRNAを導入したHVJEの投与後における、SP又はHK1投与によるひっかき行動は、対照的な実験結果をもたらした。実際、SP投与によるひっかき行動はNK1RsiRNA前投与で抑制され、HK1投与によるひっかき行動はGPR83siRNA前投与によって抑制された。一方、GPR15likesiRNAは、SP及びHK1のいずれの投与による引っかき行動も抑制することができなかった。これらの結果より、GPR83がHK1に特異的な受容体である可能性が高まることとなった。また、同様の評価方法により、NK1RのアゴニストがSPであることも確認できた。本明細書で引用した全ての刊行物、特許、及び特許出願をそのまま参考として本明細書に取り入れるものとする。