試料中に存在する少なくとも1つの微生物を検出する方法であって、-微生物に対して特異的な少なくとも1種のリガンドおよびリガンドの親和性よりも微生物に対する親和性が低い少なくとも1種のセンサーの存在下において、液体培地中で試料を培養するステップであって、リガンドへの化合物の結合によって第1の測定可能なシグナルが産生され、センサーへの化合物の結合によって第2の測定可能なシグナルが産生されるステップ、-少なくとも1つの培養時間について、第1および第2シグナル値を決定するステップを含み、ここで、同一培養時間に関して第1シグナルおよび第2シグナルの値が異なる場合に、試料は微生物を含むと推定される、方法。培養時間が微生物の世代時間の少なくとも2倍である、請求項1に記載の検出方法。微生物が細菌、真菌、藻類、原生動物および後生動物の分離細胞からなる群から選択される、請求項1または2に記載の検出方法。リガンドが抗体、抗体断片、scFv、アプタマーDNA、RNA、タンパク質または糖タンパク質、バクテリオファージまたはウイルスの全体場合により不活性化されたバクテリオファージまたはウイルス断片およびバクテリオファージまたはウイルスタンパク質からなる群から選択される、請求項1から3のうちの一項に記載の方法。試料が生物試料、食品試料、水試料、土壌試料および大気試料からなる群から選択される、請求項1から4のうちの一項に記載の方法。リガンドおよび/またはセンサーが、リガンドおよび/またはセンサーへの化合物の結合によって生じるシグナルを伝達するための支持体に取り付けられる、請求項1から5のうちの一項に記載の方法。第1および第2シグナルがリアルタイムで測定される、請求項1から6のうちの一項に記載の方法。シグナルが顕微鏡検査、表面プラズモン共鳴、共振ミラー、インピーダンス測定、水晶振動子マイクロバランス、フレキシブルビーム、光吸収測定または蛍光微生物の蛍光測定によって測定される、請求項1から7のうちの一項に記載の方法。シグナルが、表面プラズモン共鳴によってリアルタイムで測定される、請求項1から8のうちの一項に記載の方法。本発明による測定可能なシグナルが、本発明によるリガンドおよびセンサー以外の、培地中に存在するまたは培地に添加されたメディエーターからまたはマーカーから生じない、請求項1から9のうちの一項に記載の方法。試料が微生物を含む場合は、培養開始時に試料中に存在する微生物の量もまた、培養時間の関数としての第1シグナル値の変化から決定される、請求項1から10のうちの一項に記載の方法。試料が微生物を含む場合は、少なくとも1種の抗菌剤に対する微生物の感受性が、抗菌剤を培養物に入れた後の培養時間の関数としての第1シグナル値の変化から決定される、請求項1から11のうちの一項に記載の方法。試料中のいくつかの異なる微生物の存在または量が決定される、請求項1から11のうちの一項に記載の方法。請求項1から13のうちの一項に記載の方法を実施するのに適した装置であって、液体培地中での微生物培養に適した少なくとも1つのチャンバーを備え、このチャンバーは微生物に対して特異的な少なくとも1種のリガンドおよびリガンドの親和性よりも微生物に対する親和性が低い少なくとも1種のセンサーを備え、リガンドへの化合物の結合によって第1の測定可能なシグナルが産生され、センサーへの化合物の結合によって第2の測定可能なシグナルが産生され、液体培養培地と接触するようにリガンドおよびセンサーが支持体に取り付けられている、装置。微生物を含む可能性のある液体の収集および/または微生物培養を目的とする容器に備えられる、請求項14に記載の装置。本発明は、微生物培養とリガンドが微生物に特異的に結合することにより発生する差動シグナルの測定との連結すなわち、培養と差動シグナルの測定が同時に行われるが、通常技術と比較して、微生物検出の閾値を低下させ有意に解析時間を減少させることを可能にしたという本発明者らの知見に基づく。したがって、本発明は、試料中に存在する少なくとも1つの微生物を検出するための方法であって、-微生物に対して特異的な少なくとも1種のリガンドおよびリガンドの親和性よりも微生物に対する親和性が低い少なくとも1種のセンサーの存在下で、液体培地中で試料を培養するステップであって、リガンドへの化合物の結合によって第1の測定可能なシグナルが産生され、センサーへの化合物の結合によって第2の測定可能なシグナルが産生されるステップ、-少なくとも1つの培養時間について第1および第2シグナル値を決定するステップを含み、ここで、同一培養時間に関して第1シグナルおよび第2シグナルの値が異なる場合に、試料は微生物を含むと推定される、方法に関する。本発明による方法の特定の実施形態では、試料が微生物を含む場合は、培養開始時に試料中に存在する微生物の量もまた、培養時間の関数としての第1シグナル値の変化から決定される。本発明による方法の別の実施形態では、試料が微生物を含む場合は、少なくとも1種の抗菌剤に対する微生物の感受性が、抗菌剤を培養物に入れた後の培養時間の関数としての第1シグナル値の変化から決定される。本発明は、上記で定義されたような方法を実施するのに適した装置であって、液体培地中での微生物培養に適した少なくとも1つのチャンバーを備え、このチャンバーは微生物に対して特異的な少なくとも1種のリガンドおよび微生物に対して親和性を持たない少なくとも1種のセンサーを備え、リガンドへの化合物の結合によって第1の測定可能なシグナルが産生され、センサーへの化合物の結合によって第2の測定可能なシグナルが産生され、調査する液体培地と接触するようにリガンドおよびセンサーが支持体に取り付けられている、装置にも関する。本明細書で理解されるように、微生物は、好ましくは単細胞または多細胞の原核生物または真核生物である。しかし、微生物が多細胞の場合は、多細胞微生物を構成する細胞は分化の観点から好ましくは均一であり、すなわち微生物は、種々の特殊化した細胞を含まない。好ましくは、本発明に係る微生物は生きている微生物であり、すなわち微生物は増殖することができる。さらに、本発明に係る微生物は、好ましくは単細胞微生物である。この点で、その発達または生殖段階によって、本発明に係る微生物は単細胞形態の多細胞生物でもよい。加えて、本発明に係る微生物はまた、後生動物の分離細胞または分離組織断片から構成されていてもよい。したがって本発明に係る微生物はまた、哺乳動物細胞、特にヒト細胞、例えば腫瘍細胞または血液細胞、例えばリンパ球または末梢血単核球でもよい。したがって、好ましくは本発明に係る微生物は、細菌、真菌、酵母、藻類、原生動物および後生動物の分離細胞からなる群から選択される微生物、特に単細胞微生物である。特に好ましくは、本発明に係る微生物は細菌、特にStreptococcusまたはEscherichia属の細菌である。本発明に係る試料は、それが微生物を含み得る限りにおいてどのような種類でもよい。好ましくは、本発明に係る試料は、生物試料、食品試料、水試料、特に排水、淡水もしくは海水試料、土壌試料、汚泥試料または大気試料からなる群から選択される。本発明に係る生物試料は、生きている生物または生きていた生物に由来し、特に動物または植物のものである。動物、特に哺乳動物に由来する試料は、液体でもよいし固体でもよく、特に、血液、血漿、血清、脳脊髄液、尿、糞便、滑液、精液、膣分泌物、口内分泌物、特に肺、鼻もしくは咽頭由来の呼吸器検体、膿汁、腹水または皮膚もしくは結膜漿液の検体を含む。好ましくは、本発明に係る食品試料は、特に未加工の、料理されたもしくは調理された食品、食品原料、香辛料または前もって調理された食事に由来する。さらに好ましくは、本発明に係る試料は、本発明による培養にかけられる前に精製または濃縮されない。当業者に明らかなように、本発明による液体培地中での培養は、培養にかけられる試料中に存在する可能性がある、検出を目的とする微生物を増殖させるために行われる。液体培地中での微生物培養に関する技術および条件は当業者に周知であり、当業者なら、それぞれの微生物に関して、特に、適切な栄養培地、最適な生育温度例えば哺乳動物に対して病原性のある多くの細菌については37°C、さらに本発明に係る微生物の増殖に必要とされる雰囲気の決め方を知っている。さらに、弱い選択培養培地、すなわち、異なる種類の多数の微生物の生育を可能にする培地が優先的に使用される。培養時間は、その生育速度およびその世代時間、すなわち微生物が2つの娘微生物に分裂するのに必要な時間によって、それぞれの微生物に適合させることもできる。好ましくは、本発明による培養時間は、娘微生物の連続的な少なくとも2世代をもたらすのに必要な時間以上であり、したがって、このことにより、少なくとも1回の4倍増、すなわち、検出される微生物数の4倍の増殖が可能になる。当業者は、培養において微生物数の4倍増を実際に観察する必要はないことを容易に理解するであろう。なぜならば、被検出微生物は本発明に係る試料にいなくてもよいが、培養時間は、本発明の方法の条件と同一条件下で行われる実際に微生物を含む培養において微生物数の4倍増を得る時間に少なくとも相当するからである。したがって、本発明による培養時間については、被検出微生物の世代時間または倍加時間の2倍と少なくとも等しくなることも好ましい。当業者がよく理解するように、本発明による世代または倍加時間は、本発明による培養条件下で得ることができるものである。一般に、培養時間は72時間、48時間または24時間未満である。加えて、求める情報、すなわち、検出、量の決定、または抗菌剤に対する感受性を得ることが可能になり次第、培養を止めてもよい。有利には、本発明の方法は感度がよく、通常、特にバイオセンサーを使用して直接的に検出不可能な低濃度の微生物、例えば1に等しいまたは10、102もしくは103微生物/ml未満を含む試料中の微生物の存在を検出することを可能にする。したがって、本発明の方法は、106、105、104、103、102もしくは10微生物/ml以下または1微生物/mlに等しい濃度で被検出微生物を含むことが疑われる試料に好ましくは適用される。本発明によるリガンドは、微生物またはいくつかの関連微生物に特異的に結合することを可能にする任意の種類のものである。特にそれは以下のものでもよい。-微生物に対する天然のレセプター。例えば、多糖類の糖または複合脂質、すなわち少なくとも1つの非脂質基を含む、特にタンパク質、炭水化物、リン含有または窒素含有型の脂質;タンパク質または糖タンパク質、例えばプラスミノーゲン例えばそれはStreptococcus属のいくつかの細菌種に結合する;バクテリオファージまたはウイルスの全体場合により不活性化されたバクテリオファージもしくはウイルスの断片またはバクテリオファージもしくはウイルスのタンパク質、-免疫グロブリン。例えば、プロテインAまたはT細胞受容体TCR断片を含むStaphylococcus属の細菌によって結合され得る、特異的に抗原を標的化する可変部または定常部を含む抗体およびその断片、特に可変部を含むその断片。-合成化合物、特に、特に1から100個の炭素原子を含む有機低分子、scFv単鎖可変断片などのペプチド性化合物、アプタマーなどのポリヌクレオチド性化合物、または多糖類性化合物、-生きている生物または組織の粉砕した材料、ライセートまたは抽出物;-微生物を吸着する表面を有する合成材料、または-上記で定義された2つ以上のリガンドを含む混合物。したがって、本発明によるリガンドは、抗体、抗体断片、scFv、アプタマー、タンパク質または糖タンパク質、バクテリオファージの全体場合により不活性化されたバクテリオファージ断片およびバクテリオファージタンパク質からなる群から好ましくは選択される。本発明によるセンサーは、ネガティブコントロールとして働く。したがって、センサーはリガンドの性質と類似している性質が好ましい。さらに、本発明によるセンサーは、被検出微生物に対する親和性がリガンドのものよりも低い。すなわち本発明によれば、センサーは、微生物に対するリガンドの親和性よりも少なくとも10倍低い、特に少なくとも100倍、1000倍、10000倍、100000倍または1000000倍低い微生物に対する親和性を好ましくは有する。特に、微生物に対するリガンドの親和性およびセンサーの親和性は、同一実験条件下におけるスキャッチャードの方法によって決定することができる。より好ましくは、本発明によるセンサーは微生物に対して親和性を持たない。好ましくは、第1シグナルと第2シグナルの差の値が測定したバックグラウンドノイズシグナルの2倍以上である場合は、同一培養時間に対する第1シグナルおよび第2シグナルの値は異なると本発明によってみなされる。測定したバックグラウンドノイズシグナルは、特に微生物非存在で測定した第1シグナルに相当する。本明細書で理解されるように、本発明による測定可能なシグナルは、化合物、特に微生物がリガンドまたはセンサーに付着または結合することによって直接的に発生する。特に、本発明による測定可能なシグナルは、本発明によるリガンドおよびセンサー以外の、培地中に存在するまたは培地に添加された、酸化還元プローブなどのメディエーター、またはマーカーから好ましくは生じない。したがって、好ましくは、本発明による測定可能なシグナルは、微生物に対して特異的なマーカーがリガンドまたはセンサーに既に結合している微生物へさらに付着することからは生じない。シグナルは、少なくとも2つのシグナルの同時測定に適した任意の技術によって測定されてもよく、これは、特に直接的であり、および特に顕微鏡検査、表面プラズモン共鳴、共振ミラー、インピーダンス測定、水晶振動子マイクロバランスまたはフレキシブルビームなどのマイクロエレクトロメカニカルシステムMEMS、光、特に紫外光または可視光の吸収の測定、さもなければ特に微生物がそれ自体蛍光性の場合は蛍光測定、によるものであり、これらは当業者に周知である。この点で、当業者に明らかなように、上記で定義されたマーカーは本発明に係る微生物を意味しない。したがって、微生物がリガンドまたはセンサーに結合している場合は、本発明によるシグナルは微生物から生じてもよい。表面プラズモン共鳴が本発明で特に好ましい。好ましくは、リガンドおよびセンサーは支持体に取り付けられる。より好ましくは、特にシグナルが上述の技術で測定され得るように、支持体は、リガンドおよび/またはセンサーへの化合物の結合によって産生されるシグナルの伝達を可能にする。そうした支持体は当業者に周知であり、特に、連続的なまたは不連続な金属表面で覆われている、表面プラズモン共鳴による測定に適する透明な基材を備える。したがって、本発明の好ましい実施形態では、リガンドおよびセンサーは、それ自体バイオチップを構成している同一または異なる支持体に取り付けられる。さらに、本発明によるリガンドおよびセンサーまたは支持体複数可または装置は、微生物を含む可能性のある液体の収集を目的とするまたは微生物培養を目的とする容器、例えば血液培養フラスコまたはストマッカーバッグなどに備えられ得る。さらに好ましくは、特にシグナルを測定するために培養試料を採集することを必要とせずに、シグナルはリアルタイムで測定される。測定シグナルは、例えば時間の関数としての測定シグナルの強度を示す曲線の形で好ましくは記録される。リガンドおよびセンサーの微生物による占有レベルまたは程度を決定するために、本発明によるリガンドおよびセンサーが取り付けられた支持体の画像を記録することも可能である。本発明の特定の実施形態では、本発明による方法は、いくつかの異なる微生物の存在を検出すること、試料中に存在する様々な微生物の量を決定すること、または1種または複数の抗菌剤に対する様々な微生物の感受性を決定することを可能にし、その場合は、それぞれ様々な微生物に対して特異的ないくつかのリガンドを使用する必要がある。その後、こうした方法は多重方法といわれる。本明細書で理解されるように、用語抗菌剤は、微生物の生育を抑制する、またはその増殖を減らす任意の抗菌性化合物を指し、特に、エリスロマイシンなどの任意の抗生、殺菌または静菌性の化合物を指す。さらに、用語抗菌剤は、特に本発明に係る微生物が腫瘍細胞である場合は、微生物を破壊するまたはその増殖を減らすことが意図された任意の抗癌性の、特に化学療法の化合物も指す。好ましくは、少なくとも1種の抗菌剤に対する微生物の感受性が本発明によって決定される場合、培養時間の関数としての第1シグナル値の変化は、微生物の分裂に必要とされる時間、すなわち世代時間の変動に部分的にまたは完全に由来し、ひいては第1のリガンドに結合する微生物数の経時変化に由来する。当業者なら理解するように、微生物の世代時間が有意に増加するならば、微生物数の変動は、抗菌剤なしで得られる変動よりも小さいであろう。したがって、好ましくは、第1シグナル値の変化は、本発明による第1のリガンドに付着した微生物の抗菌剤による破壊によるものではない。試料中の微生物の検出バイオチップの構築Grosjeanら2005AnalyticalBiochemistry347:193~200によって説明されているように、遊離ピロールの存在下でタンパク質-ピロールコンジュゲートを用いて、金でコーティングされたプリズム作用電極として使用される上にタンパク質を電気重合する方法を使用して、プロテインバイオチップを調製した。手短に述べると、遊離ピロールの、およびピロール-NHSに連結されたタンパク質の電気重合を、対電極として働く白金ロッドを含むピペットチップを用いて行い、重合を、特にGuedonら2000Anal.Chem.72:6003~6009によって説明されているように、作用電極と対電極間の100ms2.4Vという急速電気パルスによって行う。方法の再現性を評価するために、各プロテインエンティティを、金でコーティングされたプリズム表面に3重で配置した。使用したリガンドは以下のものである。-Streptococcuspneumoniaeを認識するリガンド。iAttaliら2008Infect.Immuno.76:466~76に従って調製した抗CbpE抗体、iiヒトプラスミノーゲンSigmaAldrich。-ネガティブコントロール用のセンサー。iii精製したウサギIgGSigmaAldrichまたは抗ボツリヌス毒素モノクローナルIgG、ivピロールTokyokasei、TCI。これら全ての生成物をピロールに連結し、次いで、微生物培養用容器の形状に適した配置計画に従って、金でコーティングされたプリズム上にスポットの形で配置した。各容器は、1つはコントロールである2つの異なる試料を含むことができる、2つの独立したコンパートメントを備える。細菌培養の調製pneumococciR6-株をToddHewitt培養培地MastDiagnosticのTH中で培養した。培養を、細菌の最適生育フェーズの間で、すなわち約108細菌/mlの細菌濃度に相当する600nmOD600で測定した0.4の光学密度で止めた。TH培地で連続希釈を行い、102から104細菌/mlの濃度を得た。表面プラズモン共鳴イメージングSPRiによる測定GenopticsOrsay、FranceのSPRi-Labシステムを用いて、SPRイメージングによる測定を行った。バイオチップを、1ウシ血清アルブミンBSAを含むPBS緩衝液で15分間、前もってブロッキングした。細菌を含んでいる可能性がある0.5ミリリットルの試料を試料コンパートメントに設置し、一方pneumococciが存在しない培養培地をコントロールコンパートメントに設置する。このシステムを、37°Cに温めたSPRi装置のチャンバーに設置する。容器にふたをして、撹拌なしで行われる生育中に培養培地が蒸発するのを防止した。並行して、生育コントロールを行った。103細菌/mlの1mlの培養液を含むチューブをいくつか調製し、インキュベーター中で37°Cでインキュベートした。時間の関数としての細菌の生育変化をモニターするために、およびそれをSPRi生育曲線と比較するために、OD600を毎時間測定した。細菌は16時間培養した。選択性試験500細菌を注入後、抗CbpE抗体によるまたプラスミノーゲンによる細菌の捕獲と関係がある第1シグナルが約300分後に検出可能であることが、図2で観察される。400分を過ぎると、ネガティブコントロール非特異的な付着を含有するスポットに対するシグナルが見えるようになる。細菌を接種していないコントロール容器中で得られたシグナルcは陰性のままである。表1によると、300から400分の間にも有意な細菌の生育が観察された。より小さな量50細菌、図1の細菌の注入およびより大きな量500細菌、図3の注入も、目に見えるシグナルの増加をもたらす。観察された時間の遅れは、約30分の世代時間に明らかに一致する。出発試料中に存在する細菌の定量化図4は、抗CbpE抗体で機能化されたスポットおよびピロールのみを含むネガティブコントロールスポットに関して観察され、SPRイメージングΔRSPRによって測定した反射率の変動の経時変化を示す。実験上のノイズによってシグナルの変化がマスクされる期間である約400分の遅滞期の後、反射率の増大が明らかに指数関数的であることを理解することができる。この点で、図4はまた、Streptococcuspneumoniaeに関する集団倍加時間に典型的であるτについての30分の値を用いて、抗CbpE抗体で機能化されたスポットに関して観察されたΔRSPRの変化をモデル化する関数ΔRSPR=RO2t/τ-ROの代表的な曲線も示す。増殖係数ROは、試料中に最初に存在する微生物数に比例する。したがって、この係数の決定によって、試料中に最初に存在する細菌の定量評価が可能になる。550分から、この指数関数的システムからの逸脱がある。当業者なら気づくように、この生育速度の低下は、培養培地の変化、特に細菌の生育に著しく影響を及ぼしやすい培地の枯渇によってもたらされる制限に起因し得る。ネガティブコントロールの曲線は、600分までゼロに近いままである。Streptococcuspneumoniaeとスポット表面との間におけるコントロールの非特異的相互作用に起因し得るΔRSPRの増大が始まり、引き続いて観察することができる。抗生物質添加による生育抑制図5は、pneumococciを標的にする抗生物質ABTエリスロマイシン、Aldrichを40mg/mlの終濃度で、およびエタノールEtOHを0.08の終濃度で培養してから250分後に添加することの、103細菌/mlで接種したStreptococcuspneumoniae培養物の反射率に対する影響を示す。抗生物質の添加によって、反射率を示す曲線の傾きが明らかに低下することが観察され、これは、抗CbpE抗体およびプラスミノーゲンを含有するスポットで特に顕著である。したがって、この低下は、細菌生育の抑制に関連する。さらに、同一のエタノール濃度でコントロール溶液を添加した場合は、減少は観察されないことから、先に観察された細菌生育の抑制は、抗生物質の作用に直接的に起因し得、溶媒の影響に起因し得ないことが示される。したがって、細菌生育を定量する本発明の方法は、耐性記録を確立するのに有用である。