生細胞を含む疑いのあるサンプルにメタノールを添加して生細胞内のATPを増加させる第一工程、細胞内のATPを抽出する第二工程、及び抽出したATPを発光させる第三工程を含む、サンプル中の細胞の測定方法。第一工程において、さらに糖及びアラニンから選択される物質をサンプルに添加する、請求項1に記載の方法。第一工程において、ATP分解酵素を同時に添加する、請求項1又は2に記載の方法。第一工程後、フィルターによるろ過で細胞をフィルターへ捕捉し、メタノールを含む溶液を除去した後に、第二工程及び第三工程を実施する、請求項1~3のいずれか1項に記載の方法。サンプルをフィルターでろ過した後、第一工程及び第二工程をフィルター上で実施し、その後、フィルターから回収したATP抽出サンプルを発光させる第三工程を実施する、請求項1~3のいずれか1項に記載の方法。メタノール濃度が50未満である、請求項1~5のいずれか1項に記載の方法。糖が、グルコース、フルクトース及びスクロースからなる群より選択される少なくとも1つである、請求項2~6のいずれか1項に記載の方法。糖の最終濃度が08mM以下である、請求項2~7のいずれか1項に記載の方法。アラニンの最終濃度が05mM以下である、請求項2~8のいずれか1項に記載の方法。メタノールの最終濃度が1であり、糖の最終濃度が01mMであり、アラニンの最終濃度が01mMである、請求項2~9のいずれか1項に記載の方法。測定方法を保証するための陽性コントロールとして、バチルスBacillus属、シュードモナスPseudomonas属、メチロバクテリウムMethylobacterium属、エッシェリヒアEscherichia属、スタフィロコッカスStaphylococcus属、クロストリジウムClostridium属、カンジダCandida属、及びアスペルギルスAspergillus属からなる群より選択される少なくとも1種の菌体を使用する、請求項1~10のいずれか1項に記載の方法。測定方法を保証するための陽性コントロールとして、枯草菌Bacillussubtilis、緑膿菌Pseudomonasaeruginosa、蛍光菌Pseudomonasfluorescence、メチロバクテリウムエクストルケンスMethylobacteriumextorquens、大腸菌Escherichiacoli、黄色ブドウ球菌Staphylococcusaureus、クロストリジウムスポロゲネスClostridiumsporogenes、カンジダアルビカンスCandidaalbicans、及びクロコウジカビAspergillusnigerからなる群より選択される少なくとも1種の菌体を使用する、請求項1~11のいずれか1項に記載の方法。メタノールを含むことを特徴とする、請求項1~12のいずれか1項に記載の細胞の測定方法を実施するための試薬。さらに糖及びアラニンを含む、請求項13に記載の試薬。ATP分解酵素、ATP抽出液及び発光試薬からなる群より選択される少なくとも1種の試薬と共に供給される、請求項13又は14に記載の試薬。従来のATP発光計測法では、サンプル中の細胞数が少ない場合や、細胞中のATP数が少ない場合は、細胞、特に生細胞が計測できない課題があった。一方で、グルコースを添加することでEcoliやLbrevis、Saureus、BsubtilisのATPは増加することが公知である特許文献2。またアラニンを添加することでBsubtilisの芽胞の発芽が誘導されることも公知である特許文献3。しかしながら、特許文献2はアミノ酸によるATPの増加についても示しているにも拘らずアラニンは例示されておらず、アラニンのATP増加作用を認めていない。また、特許文献3ではグルコースやアラニンのATP増加作用は全く示されていないことから、これら2つの公知例からアラニンのATP増加作用を予想することは極めて困難だった。このように従来技術やこれらの従来技術の組み合わせでは、細菌や真菌酵母カビ、芽胞や胞子、非芽胞、好気性や嫌気性、グラム陰性やグラム陽性など複数種の様々な細胞を1つのATP発光計測法で同時に計測するには不十分であった。そこで本発明の課題は、ATP発光計測法により複数種の細胞特に生細胞を同時かつ高感度に計測可能な方法及び手段を提供することである。本発明者は上記課題を解決するため鋭意検討を行った結果、ATP発光計測法において、メタノールが生細胞生菌内のATPの増加に寄与することを見出し、メタノールをATP抽出工程の前に使用することによって複数種の細胞特に生細胞を同時にかつ高感度に測定できるという知見を得、本発明を完成するに至った。すなわち本発明は、以下の[1]~[15]である。[1]生細胞を含む疑いのあるサンプルにメタノールを添加して生細胞内のATPを増加させる第一工程、細胞内のATPを抽出する第二工程、及び抽出したATPを発光させる第三工程を含む、サンプル中の細胞の測定方法。[2]第一工程において、さらに糖及びアラニンから選択される物質をサンプルに添加する、[1]に記載の方法。[3]第一工程において、ATP分解酵素を同時に添加する、[1]又は[2]に記載の方法。[4]第一工程後、フィルターによるろ過で細胞をフィルターへ捕捉し、メタノールを含む溶液を除去した後に、第二工程及び第三工程を実施する、[1]~[3]のいずれかに記載の方法。[5]サンプルをフィルターでろ過した後、第一工程及び第二工程をフィルター上で実施し、その後、フィルターから回収したATP抽出サンプルを発光させる第三工程を実施する、[1]~[3]のいずれかに記載の方法。[6]メタノール濃度が50未満である、[1]~[5]のいずれかに記載の方法。[7]糖が、グルコース、フルクトース及びスクロースからなる群より選択される少なくとも1つである、[2]~[6]のいずれかに記載の方法。[8]糖の最終濃度が08mM以下である、[2]~[7]のいずれかに記載の方法。[9]アラニンの最終濃度が05mM以下である、[2]~[8]のいずれかに記載の方法。[10]メタノールの最終濃度が1であり、糖の最終濃度が01mMであり、アラニンの最終濃度が01mMである、[2]~[9]のいずれかに記載の方法。[11]測定方法を保証するための陽性コントロールとして、バチルスBacillus属、シュードモナスPseudomonas属、メチロバクテリウムMethylobacterium属、エッシェリヒアEscherichia属、スタフィロコッカスStaphylococcus属、クロストリジウムClostridium属、カンジダCandida属、及びアスペルギルスAspergillus属からなる群より選択される少なくとも1種の菌体を使用する、[1]~[10]のいずれかに記載の方法。[12]測定方法を保証するための陽性コントロールとして、枯草菌Bacillussubtilis、緑膿菌Pseudomonasaeruginosa、蛍光菌Pseudomonasfluorescence、メチロバクテリウムエクストルケンスMethylobacteriumextorquens、大腸菌Escherichiacoli、黄色ブドウ球菌Staphylococcusaureus、クロストリジウムスポロゲネスClostridiumsporogenes、カンジダアルビカンスCandidaalbicans、及びクロコウジカビAspergillusnigerからなる群より選択される少なくとも1種の菌体を使用する、[1]~[10]のいずれかに記載の方法。[13]メタノールを含むことを特徴とする、[1]~[12]のいずれかに記載の細胞の測定方法を実施するための試薬。[14]さらに糖及びアラニンを含む、請求項[13]に記載の試薬。[15]ATP分解酵素、ATP抽出液及び発光試薬からなる群より選択される少なくとも1種の試薬と共に供給される、[13]又は[14]に記載の試薬。本発明により、ATP発光計測法に基づいてサンプル中の複数種の細胞特に生細胞を同時かつ高感度に測定するための方法及び試薬が提供される。本発明の方法及び試薬を用いることにより、細菌や真菌酵母カビ、芽胞や胞子、非芽胞、好気性や嫌気性、グラム陰性やグラム陽性など複数種の細胞について、1つの計測方法で1amolCFUを超えるATP内包量の計測が可能である。サンプル中の細胞数が少ない場合や、細胞中のATP量が少ない場合でも、細胞の検出や細胞数の計測が可能である。本発明は、各種医薬品製造分野化粧品製造分野臨床医学基礎生化学等の現場に適応でき、特に製薬用水の管理など貧栄養環境下の細胞及び菌体の検出に有効である。以下、本発明を詳細に説明する。本発明は、ATP発光計測法に基づくサンプル中の細胞の測定方法に関する。本発明のATP発光計測法141図1では、複数種の細胞例えば菌体を1つのATP発光計測方法で同時にかつ高感度に計測が可能となる。本発明では、生細胞内ATP増加150、生細胞外のATP除去143のため、細胞内のATPの抽出工程144より前で、複数種の細胞を含むサンプル142へメタノール及びさらにグルコース、アラニン、ATP分解酵素145を添加する。本発明の好ましい実施形態では、生細胞内のATPの増加工程150と生細胞外のATPの除去工程143を同時に実施する。本発明の特徴は、メタノールが生細胞生菌内のATPの増加に寄与することを見出したことである。これは、特許文献2や特許文献3には示されていない本発明者らが独自に見出したものである。ATP発光計測法におけるメタノールの利用形態としては、細胞内のATPの抽出工程144で利用している従来技術があり、この従来法では、メタノールをATP抽出工程において使用し、細胞の細胞壁を破壊して細胞菌体を死滅させ、細胞内からATP抽出させている特許文献4。一方、本発明では、メタノールを細胞内のATPの抽出工程144より前で使用することで、細胞が生存している条件下で、細胞内のATP量を増加させることを特徴としており、ATP抽出工程で利用しているメタノールとは得られる効果が全く異なる例えば実施例3。またメタノールは酵素などタンパク質を変性させる酵素変性作用を有するが、本発明者は、メタノールの濃度を、ATP分解酵素の活性を保持させる濃度、かつ生細胞を生存させる濃度で使用することができる点も確認した実施例1及び2。このようにメタノールは酵素変性作用を有するため、必要であれば細胞内のATPの抽出工程144より前でメタノールを除いて、発光計測してもよい。本発明では、まず複数種の生細胞や死細胞ATP、遊離ATPを含むサンプル142へ最終濃度が001~30のメタノールと、グルコース、アラニン、ATP分解酵素145を接触させる。生細胞外ATP除去工程143生細胞内ATP増加工程150では、生細胞内のATPを増加させ、生細胞外のATPを分解させるため、約5~360分間、25~50°Cで加熱する。その後、必要であればメタノールやグルコース、アラニン、ATP分解酵素をフィルターでろ過して除いてもよい。続いて、細胞の細胞壁を破壊して細胞内からATPを抽出し、ATP分解酵素を失活させるため、ATP抽出液147を加える。抽出したATPは、発光試薬148と接触させ発光反応149を生じさせ、その発光量を定量することでサンプル中の生細胞数を定量できる。従って、本発明に係るサンプル中の細胞の測定方法では、生細胞を含む疑いのあるサンプルにメタノールを添加して生細胞内のATPを増加させる第一工程、細胞内のATPを抽出する第二工程、及び抽出したATPを発光させる第三工程を行う。サンプルは、測定対象の生細胞を含む疑いのあるサンプルであれば特に限定されるものではなく、液体、固体若しくは気体サンプル、又はこれらの混合サンプルであってよい。液体サンプルは、そのまま、又は溶媒で希釈若しくは濃縮して使用することができる。固体サンプルは、溶媒に懸濁するか、粉砕機などによりホモジナイズするか、あるいは溶媒と共に攪拌して得られる上清を使用してもよい。例えば綿棒などのスティックを無菌水で湿らせ、測定箇所をふき取った後に、溶媒の中ですすぎ、得られる液体をサンプルとしてもよい。溶媒としては、例えば、蒸留水、生理食塩水、リン酸緩衝液、トリス緩衝液などが挙げられる。さらには、サンプルをフィルターでろ過し、サンプル成分細胞を捕捉したフィルターを用いることも可能である。そのようなフィルターは、細胞を捕捉できるサイズであれば特に限定されない。サンプルは、具体的には、例えば飲食品製造、臨床検査尿、糞便、血液など、医薬品製造、化粧品製造、排水処理、細菌検査海水、河川水、工業用水、土壌など、抗菌性試験、清浄度試験などにおける任意のサンプルを含む。サンプルの調製は、ATP発光計測法において慣用的に用いられている方法及び手段を用いて、当業者であれば適宜行うことができる。本発明において測定対照となる細胞は、ATPを含む細胞であれば特に限定されるものではない。本発明は、測定対象サンプルに細胞が含まれているかどうかを測定することを目的としているが、含まれている細胞は未知であり、特定することは困難である。そこで本測定法を使用する場合には、本測定法が正常であることを確認してから未知のサンプルを測定することが望ましい。これらの考え方は精度管理と呼ばれる考え方であり、陰性コントロールと陽性コントロールを使用して測定法を保証するのが一般的である。この中で陽性コントロールとして、バチルスBacillus属、シュードモナスPseudomonas属、メチロバクテリウムMethylobacterium属、エッシェリヒアEscherichia属、スタフィロコッカスStaphylococcus属、クロストリジウムClostridium属、カンジダCandida属、及びアスペルギルスAspergillus属からなる群より選択される少なくとも1種類の菌体を使用することが好ましい。具体的には、例えば以下のような細胞を陽性コントロールとして使用することができ、また本発明に従って測定することができる:細菌:グラム陽性細菌、例えば好気性芽胞細菌の枯草菌Bacillussubtilis、好気性細菌の黄色ブドウ球菌Staphylococcusaureus、好気性細菌のリステリアモノサイトゲネスとし、各混合液を37°Cで30分間加熱した。なお比較例1として、試薬セットの説明書記載のプロトコルとしてグルコースとアラニンの添加を除いた。加熱後の混合液100μLに対してATP抽出液100μLを加え、ATP抽出後のサンプル50μLを発光試薬50μLへ添加し、生じた発光を計測した。結果を以下の表1に示す。表1に示すように、比較例1の方法の場合、注射用水という貧栄養下で芽胞を形成したBsubtilisのATP内包量は0004amolCFUと低い値であり、この方法では1CFUの検出は極めて困難であった。そこで、芽胞の発芽を促進することが知られていたグルコース及びアラニンを既報JBacteriolVol81p2041961年に従って、それぞれ100mMグルコース、50mMアラニンを添加したところ比較例2、BsubtilisのATP内包量は30000と飛躍的に増加し、1CFUの検出が可能なレベルに達した。一方、製薬用水の管理として日本薬局方に規定されている培地性能試験に使用されるMethylobacteriumextorquensを同じプロトコールで測定した場合、MextorquensのATP内包量は従来法比較例1の3割まで低下した。したがって、この条件下では、Mextorquensを高感度に計測することはできず、またBsubtilisとMextorquensを1つのATP発光計測法で同時かつ高感度に計測することは困難であった。Mextorquensはメタノール資化性菌であることから、後述する実施例では、メタノールのATP増加効果を検討することとした。[参考例2]メタノールのATP発光反応への影響後述する実施例においてメタノールのATP増加効果を検討するにあたり、まずメタノールのATP発光反応への影響を確認した。ATP溶液1mL2x105amolATPmL、キッコーマンバイオケミファ社ルシフェールATP標準試薬セットと100メタノール和光純薬社10μL~5mLを混合し、さらに水インビトロジェン社加えて、メタノールの最終濃度が01~50のATPメタノール溶液10mLを作製したATP濃度:2x104amolATPmL。続いて、ATPメタノール溶液50μLと発光試薬50μLキッコーマンバイオケミファ社ルシフェールHSセット付属を混合して発光反応を生じさせ、光電子増倍管を用いてフォトンカウンティングにより発光量を計測した。一方、比較のため、メタノールを含まないATP溶液1mL2x104amolATPmLを作製した。続いてATP溶液50μLと発光試薬50μLを混合して発光反応を生じさせ、発光量を計測した。メタノール濃度に対するATPルシフェラーゼルシフェリン反応の発光量を表2に示す。表2では、01~50メタノールを含むATP溶液サンプルNo2~5と、メタノールを含まないATP溶液サンプルNo1と、発光試薬との混合による発光量の比較を示している。01メタノールを含むATP溶液サンプルNo2と1メタノールを含むATP溶液サンプルNo3、メタノールを含まないATP溶液サンプルNo1の発光量は、それぞれ12703CPSCountpersecondと10200CPS、11534CPSで発光比は88~110を示した。一方、10メタノールを含むATP溶液サンプルNo4では発光比は29まで減少し、50メタノールを含むATP溶液サンプルNo5では発光はほぼ示さなかった。この結果、ATP発光反応計測工程に混入するメタノールの濃度は1以下が望ましいと考えられた。[実施例1]本実施例では、ATP分解酵素の活性保持が可能なメタノール濃度を検討した。ATP分解酵素を含むATP消去液キッコーマンバイオケミファ社ルシフェールHSセット付属ATP消去試薬10μLと濃度調整済みのメタノール80μLを混合した。そこへATP溶液2x106amol10μLを加えて37°Cで30分間静置した。なおメタノールの最終濃度は01~80へ調整した。上記混合液を発光試薬へ添加して残存ATP量を計測するため、ATP発光反応へ影響しないメタノール濃度01以下まで水で混合液を希釈した参考例2、表2。続いてこの希釈液50μL1x103amolATP50μLを発光試薬50μLへ添加して発光量を計測した。なおATP分解酵素を加えていないATP溶液1x103amol50μLを作製し、このATP溶液に対する発光量も計測した。ATP分解酵素が加わっていないATP溶液の発光量は、ATP分解酵素の活性が無くなった後にATPを加えた時のATP溶液の発光量とほぼ同じとみなせるため、この発光量を残存ATP分解酵素活性0と定義した。図2に、ATP分解酵素の残存活性とメタノール濃度を示す。0~50メタノールの存在下でのATP分解酵素とATP溶液の混合液からATP発光反応は計測されなかった。これはATP分解酵素が0~50メタノールの濃度幅で活性を保持し、加えられたATPを分解したことを示す。一方、メタノール濃度が50を超えるとATP分解酵素の活性は減少し始め、メタノール濃度が80で酵素活性が20まで減少した。この結果、メタノール濃度50以下であれば、ATP分解酵素を失活させず、生細胞外のATPの分解が可能であることが明らかとなった。[実施例2]本実施例では、メタノールが本来殺菌効果を有することから評価菌に対するメタノール濃度の影響を検討した。菌懸濁液10μLと濃度調整済みのメタノール90μLを混合し100μLの菌メタノール懸濁液を作製した。メタノールの最終濃度は0~80とし、菌としてBacillussubtilis細菌、芽胞、ATCC6633、Staphylococcusaureus細菌、好気性、ATCC6538、Candidaalbicans真菌、酵母、ATCC10231を使用した。菌懸濁液とメタノールを混合して1分間静置した後、細菌の場合はR2A培地日水製薬へ塗り広げ25°Cで7日間培養した。真菌の場合はPDA培地日水製薬へ塗り広げ25°Cで5日間培養した。培養後、各メタノール濃度に対するコロニー数を計測した。0メタノールのコロニー数を生存度100として、各濃度のメタノールに対する菌の生存度を調べた。図3に、各メタノール濃度に対する菌の生存度を示す。Bsubtilisは80メタノールへ曝されても生存率100を示した。一方、SaureusとCalbicansは30以下のメタノールで生存率90以上を示した。この結果、30以下のメタノールでは、BsubtilisとSaureus、Calbicansの3種類の菌が共に細胞内で生命活動に必要な恒常性が保たれていることを示す。[実施例3]本実施例では、Mextorquensに対するメタノールのATP増加効果を検討した。Mextorquensの菌懸濁液は、次の手順に従い作製された。MextorquensをSCD液体培地日水製薬社5mL中で72時間、25°Cで振盪培養した。培養液培地をチューブへ分注し、10分間、10000rpmで遠心して菌をチューブの底へ集めた。上澄み液を除き、代わりに水を加えて菌を懸濁し、再び10分間、10000rpmで遠心して菌をチューブの底へ集めた。この工程を3回繰り返して、培地成分を除いた菌懸濁液を作製した。続いて注射用水中で3日間、37°Cで振盪培養して、ATP発光計測用の菌懸濁液とした。菌のコロニー数を計測するため、必要であれば各菌試料を水で希釈した後、菌懸濁液をR2A寒天培地へ塗布して25°Cで培養し、培養開始96時間後から168時間後までコロニー数を計測した。以下、作製した菌懸濁液を用いた第1形態を示す。第1形態は各種試薬の混合のみによる発光計測である。Mextorquensの菌懸濁液50μLへグルコース和光純薬社とアラニン和光純薬社、ATP分解酵素、10メタノール、リン酸緩衝液pH74インビトロジェン社をそれぞれ10μL加えて全量を100μLの混合液を調整し、グルコースやアラニン、メタノールを加えない場合はリン酸緩衝液で全量を100μLへ調整した表3、サンプルNo1~5。混合液を37°Cで30分間加熱した後、生細胞外ATP除去生細胞内ATP増加工程において、混合液100μLへATP抽出液100μLを添加した表3、サンプルNo1~4。一方、メタノールのATP抽出効率を比較するため、ATP抽出工程において、混合液100μLへ1メタノールを含むATP抽出液100μLを混合した表3、サンプルNo5。ATP抽出後のサンプル50μLを発光試薬50μLへ添加し、生じた発光を計測した。以下、作製した菌懸濁液を用いた第2形態を示す。第2形態と第1形態の違いは、第2形態ではろ過を採用している点であり、集菌とメタノール除去の目的でろ過を使用している。Mextorquensの菌懸濁液50μLをウルトラフリーMCミリポア社、孔径045μm、ポリビニリデンフロライド製メンブレンフィルターで遠心ろ過1分間2000rpmし、フィルター上へ菌を集めた。フィルター上へグルコースとアラニン、ATP分解酵素、10メタノールをそれぞれ10μL、リン酸緩衝液pH7470μLを加えて、全量100μLの混合液を調製した。グルコースとアラニンの最終濃度を01mMとし、ATP分解酵素とメタノールの最終濃度をそれぞれ10と1とした表3、サンプルNo6。フィルター上の混合液を37°Cで30分間加熱した。加熱後、メタノールを含む混合液を除くため、混合液全てをウルトラフリーMCで遠心ろ過1分間2000rpmし、ろ液である混合液を破棄した。続いて水200μLをフィルター上へ加えて、ろ過してフィルターを洗浄した。なお洗浄は5回繰り返した。洗浄後、フィルター上へATP抽出液100μLを加えて、5分間静置後、遠心ろ過2000rpm、1分間してろ液を回収した。各ATP抽出後のサンプル50μLを発光試薬50μLへ添加し、生じた発光を計測した。表3に、細胞内ATP発光計測法におけるMextorquensの1CFU当りのATP内包量amolCFUを示す。サンプルNo1とサンプルNo2は実施例1と同じ結果である。サンプルNo2の結果から、Mextorquensに対してアラニンとグルコースによる阻害が認められたので、阻害を低減するためアラニンとグルコースの濃度を低下させることにした。01mMアラニンと01mMグルコースにしたサンプルNo3の場合、MextorquensのATP量は09amolCFUへ増加し、阻害を回避するとともに従来法参考例1の比較例1よりも約3割ATP量を増加させる濃度を見出した。さらに、メタノールによるATP増加効果を検討するために、最終濃度1になるようにメタノールを加えたところ、サンプルNo4に示すとおり、ATP量は12amolCFUへ増加し、従来法参考例1の比較例1よりも約7割ATP量を増加させることができた。このメタノールの添加効果が細胞中のATP量を増加させた効果なのか、それとも特許文献4特許第3811616号に示されているATP抽出に対するメタノールの効果なのかを確認するために、サンプルNo5に示すように生細胞外ATP除去生細胞内ATP増加工程ではなくATP抽出工程に1メタノールを添加した場合の効果を検証した。その結果、サンプルNo5のATP量は08amolCFUとサンプルNo3と同レベルであり、1メタノールはATP抽出に対しては効果がないことが確認された。さらに、サンプルNo6の条件のように、生細胞外ATP除去生細胞内ATP増加工程に1メタノールを添加し、その後、ろ過洗浄によりATP抽出工程へのメタノールやグルコース、アラニンの持込をなくした場合においても、ATP量は12amolCFUを維持したことから、生細胞外ATP除去生細胞内ATP増加工程での1メタノール添加は、生細胞内でのATP内包量の増加に効果があることを明らかにした。[実施例4]本実施例では、Mextorquensのグルコース及びアラニン量に対するATP量の関係を調べた。Mextorquensの菌懸濁液は、次の手順に従い作製された。MextorquensをSCD液体培地日水製薬社5mL中で72時間、25°Cで振盪培養した。培養液培地をチューブへ分注し、10分間、10000rpmで遠心して菌をチューブの底へ集めた。上澄み液を除き、代わりに水を加えて菌を懸濁し、再び10分間、10000rpmで遠心して菌をチューブの底へ集めた。この工程を3回繰り返して、培地成分を除いた菌懸濁液を作製した。続いて注射用水中で3日間、37°Cで振盪培養して、ATP発光計測用の菌懸濁液とした。菌のコロニー数を計測するため、必要であれば各菌試料を水で希釈した後、菌懸濁液をR2A寒天培地へ塗布して25°Cで培養し、培養開始96時間後から168時間後までコロニー数を計測した。Mextorquensの菌懸濁液50μLへ、グルコースとアラニン、ATP分解酵素、また必要に応じて10メタノールをそれぞれ10μLを加えた。最終的にリン酸緩衝液pH74インビトロジェン社を加えて全量を100μLへ調整した。グルコースとアラニンの最終濃度を01~100mMとし、ATP分解酵素とメタノールの最終濃度をそれぞれ10と1とし、各混合液を37°Cで30分間加熱した。加熱後の混合液100μLへATP抽出液100μLを加え、ATP抽出後のサンプル50μLを発光試薬50μLへ添加し、生じた発光を計測した。図4Aは、1メタノールと100mMグルコースの存在下、アラニンの濃度を01~50mMまで変化させた際の1CFU当りのMextorquensのATP内包量amolCFUである。ATP内包量はアラニンの濃度が10mM以下から増大し、1mM以下では09amolCFUを示した。図4Bは、1メタノールと50mMアラニンの存在下、グルコースの濃度を01~100mMまで変化させた際の1CFU当りのATP内包量amolCFUである。ATP内包量は、グルコース濃度を変化させても約05amolCFUで推移した。図4Cは、メタノール存在下又は非存在下でグルコースとアラニンの濃度を同時に01mM、5mM、50mMへと変化させた際の1CFU当りのATP内包量を示す。ATP内包量はメタノール非存在下で各濃度が5mM以下から急に増加し、01mMで09amolCFUを示した。この結果は、01mMアラニンと100mMグルコース、1メタノールの組合せの結果と同じである図4A。しかしながら01mMアラニンと01mMグルコースへ、1メタノールを加えると、ATP内包量は12amolCFUまで増大した。これはアラニンとグルコースを共に5mM未満にし、さらにメタノールを加えることでATP量が増大することを示す。特許文献3特開2006174751号公報には、グルコースとアラニンに有芽胞細菌の発芽促進に効果があることが示されているが、ATP増加効果に関しては何ら示されておらず、さらに図4の結果のようにグルコースとアラニンそれぞれ又は組み合わせにより、ATP増加効果に対して至適な濃度領域があることは本発明者が見出したことである。[実験例5]本実施例では、メタノール濃度に対するATP内包量の増減の効果を調べた。Mextorquensの菌懸濁液は、次の手順に従い作製された。MextorquensをSCD液体培地日水製薬社5mL中で72時間、25°Cで振盪培養した。培養液培地をチューブへ分注し、10分間、10000rpmで遠心して菌をチューブの底へ集めた。上澄み液を除き、代わりに水を加えて菌を懸濁し、再び10分間、10000rpmで遠心して菌をチューブの底へ集めた。この工程を3回繰り返して、培地成分を除いた菌懸濁液を作製した。続いて注射用水中で3日間、37°Cで振盪培養して、ATP発光計測用の菌懸濁液とした。菌のコロニー数を計測するため、必要であれば各菌試料を水で希釈した後、菌懸濁液をR2A寒天培地へ塗布して25°Cで培養し、培養開始96時間後から168時間後までコロニー数を計測した。Mextorquensの菌懸濁液50μLへ、グルコースとアラニン、ATP分解酵素、メタノールをそれぞれ10μL加えた。最終的にリン酸緩衝液pH74インビトロジェン社を加えて全量を100μLへ調整した。グルコースとアラニンの最終濃度を01mMとし、ATP分解酵素の最終濃度を10とし、メタノールの最終濃度を0~80とした。各混合液を37°Cで30分間加熱した。加熱後、メタノールを含む混合液を除くため、混合液全てをウルトラフリーMCで遠心ろ過1分間2000rpmし、ろ液である混合液を破棄した。続いて水200μLをフィルター上へ加えて、ろ過してフィルターを洗浄した。なお洗浄は5回繰り返した。洗浄後、フィルター上へATP抽出液100μLを加えて、5分間静置後、遠心ろ過2000rpm、1分間してろ液を回収した。各ATP抽出後のサンプル50μLを発光試薬50μLへ添加し、生じた発光を計測した。図5Aは、0~10メタノール濃度に対するMextorquensのATP内包量を示す。MextorquensのATP内包量はメタノール濃度05で最大値15amolCFUを示し、メタノール濃度0では60減少07amolCFUした。メタノール濃度01~20では最大値に対して70以上のATP内包量11amolCFUを示した図5A及びB。一方、メタノール濃度30以上ではATP内包量は90減少015amolCFUした図5B。[実施例6]日本薬局方によると製薬用水の管理や無菌検査に使用する培地が適切であるかを確認するための培地試験に使用する菌体として、以下の延べ9種類の菌種が規定されている:好気性芽胞細菌グラム陽性BacillussubtilisATCC6633、好気性細菌グラム陰性PseudomonasaeruginosaNBRC13275、好気性細菌グラム陰性PseudomonasfluorescenceNBRC15842、好気性細菌グラム陰性MethylobacteriumextorquensNBRC15911、好気性細菌グラム陰性EscherichiacoliATCC11775、好気性細菌グラム陽性StaphylococcusaureusATCC6538、嫌気性芽胞細菌グラム陽性ClostridiumsporogenesATCC11437、真菌酵母CandidaalbicansATCC10231、真菌カビ胞子AspergillusnigerATCC16404。なお、ATCCとは、AmericanTypeCultureCollectionのカタログ番号を表し、NBRCとはNITEBiologicalResourceCenterの受託番号を表している。本実施例では、上記の日本薬局方記載指標菌9種の細胞内ATP計測を行った。非芽胞形成菌Paeruginosa、Pfluorescence、Mextorquens、Saureus、Ecoli、Calbicansの菌懸濁液を次の手順に従い作製した。各菌をSCD液体培地5mLに加えて48時間振盪培養した。培養温度は日本薬局方を基準としてSaureus、Ecoliでは37°C、Pfluorescence、Paeruginosa、Mextorquens、Calbicansでは25°Cとした。培養後の培養液をチューブへ分注し、10000rpmで10分間遠心してチューブの底へ菌を集めた。すべての菌について、各成分を含む上澄み液を除き、代わりに水を加えて懸濁して、10000rpmで10分間遠心してチューブの底へ再び菌を集めた。この工程を3回繰り返して、各成分を除き水と置き換えた。続いて注射用水中で3日間、37°Cで振盪培養して、ATP発光計測用の菌懸濁液とした。各菌のコロニー数を計測するため、必要であれば各菌試料を水で希釈した後、Mextorquensの懸濁液をR2A寒天培地へ塗布して25°Cで培養し、培養開始96時間後から168時間後までコロニー数を計測した。Bsubtilis、Paeruginosa、Pfluorescence、Ecoli、Saureus、Csporogenesの細菌懸濁液を標準寒天培地へ塗布して25°Cで培養し、培養開始96時間後から168時間後までコロニー数を計測した。Calbicans、Anigerの真菌懸濁液をPDA培地へ塗布し、各培地上の菌を20°Cで培養し、培養開始120時間後のコロニー数を計測した。各菌懸濁液50μLへ、グルコースとアラニン、ATP分解酵素、10メタノールをそれぞれ必要に応じてそれぞれ10μLずつ加え、リン酸緩衝液pH74を加えて全量100μLの混合液を調製した。グルコースとアラニンの最終濃度を01mMとし、ATP分解酵素とメタノールの最終濃度をそれぞれ10と1とした。各混合液を37°Cで30分間加熱した。加熱後の混合液100μLに対してATP抽出液100μLを加えた。各ATP抽出後のサンプル50μLを発光試薬50μLと混合し、生じた発光を計測した。ATP発光計測法における、上述の公定菌9菌種に対するメタノール、グルコース及びアラニンのATP増加効果を表4に示す。Bsubtilisについて参考例1に示したように、比較例1では1CFUの検出が困難であったため、ATP増加効果をもたらす100mMグルコースと50mMアラニン条件下での各菌種におけるATP内包量を検討した比較例2。Bsubtilisに対しては劇的な効果が認められ、Pfluorescens、Paeruginosa、Csporogenesについても同等から15倍程度のATP増加効果が認められたものの、その他の菌体に対しては阻害が認められた。そこで、グルコースとアラニンの濃度をそれぞれ01mMに低減した結果実施例61、比較的ATP内包量の低いMextorquens、Saureus、Pfluorescens、Paeruginosa、Csporogenesに対してATP増加効果が認められ、BsubtilisのATP内包量は維持された。また、ATP高含有のAniger、Calbicansについては、グルコースとアラニンの阻害からの回復は認められなかったものの、1CFUを検出するには問題ないレベルのATP量であった。さらに、最終濃度1になるようにメタノールを加えたところ実施例62、MextorquensのATP内包量は従来法比17倍、Saureus、Pfluorescens、Paeruginosaは3倍弱、Csporogenesは4倍弱、Ecoli及びBsubtilisは同レベルであった。一方Aniger、Calbicansはそれぞれ3割強と8割強となったが、ATPの絶対量が多く、1CFUに検出には問題ないレベルのATP内包量であることが明らかとなった。この様にメタノール資化菌のMextorquensのみならず、多くの菌種に対してメタノールがATP増加効果を有するという驚くべき効果を見出した。またこれらの結果から、上述の9種類の菌体は、本測定法に従って検出可能であることが証明されたので、これらの菌種は、精度管理のための陽性コントロールとして使用可能であることが確認された。したがってこれら9種類の菌群から選択される少なくとも1種類の菌を陽性コントロールとして使用することが可能である。従来法で細胞数特に生細胞数を計測するには、複数の培地と培養温度、培養時間を必要とし、同時計測は困難であるか知られていなかった。本発明は、細菌や真菌酵母カビ、芽胞や胞子、非芽胞、好気性や嫌気性、グラム陰性やグラム陽性など複数種の菌について、極めてATP内包量が少ない細胞についても、同時かつ高感度に検出することを可能とするものである。なお、本発明は上記した実施例に限定されるものではなく、様々な変形例が含まれる。例えば、上記した実施例は本発明をわかりやすく説明するために詳細に説明したものであり、必ずしも説明した全ての構成を備えるものに限定されるものではない。また、ある実施例の構成の一部を他の実施例の構成に置き換えることが可能であり、また、ある実施例の構成に他の実施例の構成を加えることも可能である。また、各実施例の構成の一部について、他の構成の追加、削除又は置換を行うことが可能である。