全身投与することによる、偏頭痛に付随する知覚過敏症の重症性を軽減しまたは予防するために使用される、ブリモニジン又はその薬学的に許容される塩、互変異性体、溶媒和物、アミド、又はN-オキシド。経口的に投与される、請求項1の使用のための化合物。局所的に投与される、請求項1の使用のための化合物。パッチ剤を用いて投与される、請求項1の使用のための化合物。静脈内に投与される、請求項1の使用のための化合物。ブリモニジンの調製この実施例はブリモニジン、5ブロモ6キノキサリンの調製を記載する。6アミノ5ブロモキノキサリンHBrの調製6アミノキノキサリンを氷酢酸115mlに溶解した。該溶液を水中で冷却し、臭素を氷酢酸15mlに溶解してゆっくりと15分間で加えた。30分間撹拌した後、生成した赤オレンジ色の固体を濾取して乾燥エーテルで十分に洗浄した。固体を減圧下で終夜乾燥し粗生成物444gを得た。該化合物、6アミノ5ブロモキノキサリンHBrは明確な融点を示さなかった。粉末から赤色結晶への相転移が220°C付近で見られた。245°C付近で分解した。この物質を以下の6アミノ5ブロモキノキサリン調製に直接使用した。6アミノ5ブロモキノキサリン上記の未精製6アミノ5ブロモキノキサリンを水中に溶解し、デンプン-ヨウ素試験紙が陰性となるまで飽和硫酸水素ナトリウム水溶液を加えた。その後、2N水酸化ナトリウム水溶液を加えて溶液を塩基性化し、酢酸エチルで徹底的に抽出した。有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥し、減圧下で濃縮して遊離塩基を得た。粗生成物を沸騰ベンゼンから再結晶して黄色の結晶を得た;mp1556°C。種々の分析により、該黄色結晶は6アミノ5ブロモキノキサリンと決定した。収率82。6ブロモ6イソチオシアナトキノキサリン未精製の上記臭化水素酸塩生成物を水60mlに溶解した;激しく撹拌しながら、チオホスゲンを少量ずつ加えた。2時間後、赤色の溶液を捨てた。生成した固体を濾取して十分に水洗した。減圧下250°Cで乾燥し、赤色の結晶の塊338gを得た;mp15780°C、収率90。この物質の一部をカラムクロマトグラフィーで精製して白色結晶を得た;mp15780°C。種々の分析により、この結晶は6ブロモ6イソチオシアナトキノキサリンと決定した。5ブロモ6チオウレイドキノキサリンイソチオシアネートをベンゼン145mlに溶解し、エチレンジアミンをベンゼン18mlに溶解した溶液に250°Cで2時間かけて加えた。さらに30分間撹拌してから、上澄みを除いた。残ったオイルに乾燥エーテルを加えてかき回してから除去し、これを3回繰り返して洗浄してから次の工程に直接用いた。構造確認のため生成物の一部をカラムクロマトグラフィーで精製した。得られた白色結晶は175°Cでガスを発生噴き出したして分解した。この白色固体は5ブロモ6チオウレイドキノキサリンと決定された。5ブロモ6キノキサリン上記の粗生成物を乾燥メタノール100mlに溶解し、硫化水素ガスが発生しなくなるまで褐色の溶液を19時間環流した。混合物を室温にまで冷却し、約50mlにまで濃縮した。黄色の固体を濾取して減圧下で乾燥した;252gの固体を得た;mp24240°C。粗生成物は殆どすべての有機溶媒に不溶であったため、最初に酸塩基抽出による精製を行った。粗生成物を05N塩酸100mlに溶解し、混濁した黄色溶液を濾過して得られた透明な橙黄色溶液を酢酸エチルで2回抽出した。水層を0°Cに冷却し、6N水酸化ナトリウム水溶液を加えて塩基性とした;温度は常に、15°C以下に保った。析出した黄色固体を濾取して、洗浄液がpH試験紙で中性となるまで十分に水洗した。固体を減圧下で終夜乾燥して黄色固体197gを得た;mp24925°C。回収率は約88であった。更なる精製は再結晶により行った。上記の部分的に精製した生成物を100°Cで激しく撹拌しながらNNジメチルホルムアミドに溶解した。溶液を濾過して終夜放冷した。明るい黄色結晶を濾取した;mp252253°C。回収率は6577。種々の分析により、この明るい黄色結晶は5ブロモ6キノキサリンであると決定した。知覚増感のメカニズムが異なるマウスモデルこの実施例は、α2Aおよびα2Cノックアウトマウスで交感神経系が緊張すると、α1受容体活性化により触覚過敏症の誘導が増強されることを示す。Aスルプロストン誘導触覚過敏症の進行は交感神経系によるが、フェニレフリン誘導触覚過敏症は交感神経系の入力とは独立している。知覚過敏症に対する交感神経系の寄与を分析するため、知覚過敏症のメカニズムが異なるマウスモデルを作製した。触覚過敏性は誘導薬をくも膜下腔若しくは腹腔内に投与した後マウスのわき腹を絵筆で軽く撫でその応答をスコア化して測定した。交感神経系の緊張を模倣するためにα1アドレナリン受容体作用薬のフェニレフリンを注射した。Figurelaおよび1bに示すとおり、フェニレフリンのくも膜下腔若しくは腹腔内投与は知覚過敏症を引き起こし、3ngitおよび3ngkgipの用量から有意な応答が認められた。触覚過敏症の誘導はα1受容体に依存的であり、α1受容体拮抗薬の5メチルウラピジルを腹腔内投与すると過敏性応答が阻害され得ることから証明される。EP1EP3受容体に対して選択的な合成プロスタグランディン作用薬であるスルプロストンの活性も試験した。Figure1cに示すとおり、用量を増やしながらスルプロストンをくも膜下腔に投与すると用量依存的な触覚過敏症が誘発された;100ngおよび200ngで有意な過敏症が引き起こされた。特異的なEP1受容体拮抗薬を同時に投与するとスルプロストン誘発触覚過敏症は完全に阻害されることから、スルプロストンはEP1受容体を活性化して触覚過敏症を引き起こすことが示された。第三のマウスモデルとして、NMDAの用量を増やしながらくも膜下腔内に投与して化学感作を引き起こした;NMDAは後シナプス後角神経のNMDAチャネルを活性化することができるWoolfetalScience28817651769。くも膜下腔内投与されたNMDAは用量依存的な触覚過敏症を引き起こし100ngで最大効果を与えた。Figure1dに示すとおり、この過敏症はNMDA拮抗薬のメマンチンで阻害された。これら三つの興奮剤が異なるメカニズムで知覚経路を感作するのかどうか評価するために一組の薬物について触覚過敏症を妨げ若しくは改善し得るか試験した。表1に示すとおり、各受容体拮抗薬5MU、EP1受容体拮抗薬またはメマンチンは相当する受容体作用薬それぞれフェニレフリン、スルプロストンおよびNMDAにより誘導された触覚過敏症のみを阻害した。臨床上、脊髄感作を軽減し神経因性疼痛の緩和に使用されるガバペンチンについても、触覚過敏症阻害効力を試験した。ガバペンチンはスルプロストンおよびNMDAにより誘導される触覚過敏症を阻害したが、フェニレフリン誘発の触覚過敏症は阻害しなかった。これによっても、異なる興奮剤による知覚経路の違いが示された。α2ノックアウトマウスはDrBrianKobilkaから提供を受けたスタンフォード大;LinketalMolPharmacol484855AltmanetalMolPharmacol56154161。該α2ノックアウトマウスはC57BL6の遺伝的背景を有し、ホモ接合型ノックアウトマウスの親から繁殖させた。コントロールは性別と週齢が適合したC57BL6野生型マウスを用いた。スルプロストンおよびNMDAはジメチルスルホキシドに溶解した。EP1受容体拮抗薬は米国特許5843942号の記載にしたがって合成し、これとガバペンチンは50DMSOと50生理食塩水に溶解した。抗ウィルス剤としてよく知られたアマンタジンの類縁体であるメマンチンは米国特許5061703号の記載SchneideretalDtschMedWochenschr109987も参照に準じて合成し、5メチルウラピジル、ブリモニジン、フェニレフリン、クロニジンおよびグアネチジンはシグマ社より購入し、生理食塩水に溶解した。プラゾシンおよびチザニジンは蒸留水に溶解した。薬物の脊髄注射は以下のように行った。HyldenandWilcoxEurJPharmacol67313316に記載のようにマウスのくも膜下腔内に投与した。簡単には、脊椎のL5およびL6の間に、マイクロシリンジについた殺菌した30ゲージ12インチ針を挿入した。片手でマウス後肢帯をしっかりと持ち、他方の手でシリンジを脊柱上約20 ゚の角度で持った。L6棘突起の片側まで針を組織内に挿入し、棘突起と横突起の間にある溝に挿入した。針の角度を約10 ゚にまで小さくし針をゆっくりと前進させると急な衝撃を感じ、尾の蛇行運動が認められた。化合物を当該くも膜下腔に体積5μlでゆっくりと注入した。各化合物につき複数回投与して試験した。その後の実験ではすべて薬物の最小有効量を用いた。小さな絵筆でマウスわき腹を軽く撫でた場合通常は痛みはないのマウスの応答をスコア化することにより、軽い接触に対する過敏性を定量化した。薬物注入15分後から50分後の間、各5分ごとに以下のスケールでマウスを評価した;鳴き声を上げて絵筆に噛み付き、積極的な逃避行動を示すマウスはスコア2を与えた;鳴き声が穏やかで逃避を試みるマウスにはスコア1を与えた;絵筆で撫でても応答しないマウスにはスコア0を与えた。MinamietalPain57217223の記載のように、スコアを合計して0から16の累積スコアを算出した。Studentsの両側t検定を用いてvivo試験の有意差を統計的に計算した。グアネチジンによる交感神経遮断は原則的に下記のとおり行った。動物にグアネチジンMalmbergandBasbaumPain7621522250mgkgを腹腔内投与して24時間後に触覚過敏性のベースラインを評価した。通常の触覚過敏性を示したマウスにつき、触覚過敏症の化学誘導に対する感受性を評価した。交感神経遮断前の応答に戻ったことで示されるように、マウスは6日から8日後には交感神経遮断から回復した。Bα2Aおよびα2Cノックアウトマウスにおける交感神経緊張の増大は、α1受容体活性化による触覚過敏症誘導に対する感受性を増加させる。交感神経緊張が知覚感作の感受性に影響を及ぼすかどうか評価するため、α2Aおよびα2Cノックアウトマウスにおける触覚過敏症の化学誘導に対する感受性を野生型マウスのそれと比較した。α2Aおよびα2Cノックアウトマウスは野生型マウスに比して、触覚過敏症のベースラインを示さなかった。最初に触覚過敏症を引き起こすフェニレフリン濃度をノックアウトマウスと野生型マウスで比較した。Figure2に示したとおり、α2Aおよびα2Cノックアウトマウスの両方において劇的なフェニレフリン用量応答曲線の左方移動があった。これはフェニレフリンの触覚過敏症誘導能が両方のα2ノックアウトマウスにおいて、そしてα2Cノックアウトマウスにおいてはより強力に増強されることを示している。特に、野生型マウスにおいては強力な触覚過敏症誘導用量であるフェニレフリンの30ngkgが、α2Aおよびα2Cノックアウトマウスにおいてはそれぞれ01ngkgおよび03ngkgのフェニレフリンで最大の触覚過敏症をもたらした。さらにFigure2からは、野生型マウスにおいてはゆったりとした二相性の用量応答曲線が両方のノックアウトマウスにおいてはより険しい用量応答曲線となっていることが分かる。グアネチジンの全身投与は、交感神経末端からノルアドレナリンを枯渇させることにより機能的な交感神経遮断をもたらす。α2ノックアウトマウスにおけるフェニレフリン用量応答曲線の移動が交感神経緊張によるものかどうか試験するため、α2Aノックアウトマウスをグアネチジン処理により化学的に交感神経遮断を行い、2430時間後にフェニレフリン誘発感受性を試験した。グアネチジン処理したα2Aマウスにおいては、フェニレフリンに対する感受性増加は部分的に解除されその二相性用量応答曲線は野生型マウスで観察されたものと類似であった。これらの結果により増大した交感神経緊張がα2Aノックアウトマウスにおける知覚感受性を増加させることが確認された。C交感神経系がスルプロストン誘発触覚過敏症を増強する。一次求心性感作に対してノックアウトマウスがより感受性が大かどうか調べるため、野生型およびα2ノックアウトマウスに対して濃度を高めながらスルプロストンをくも膜下腔内に投与した。Figure3に示すとおり、スルプロストンの用量応答曲線は野生型およびα2Cノックアウトマウスでは同等であり、α2Aノックアウトマウスでは左方にシフトしていた。特に、野生型およびα2Cノックアウトマウスでは部分的な過敏症を誘発する用量が100ngであり、最大効果用量が200ngであったのに比較して、α2Aノックアウトマウスでは30ngの用量が最大効果を与えた。グアネチジンによる化学的交感神経遮断はスルプロストンに対するα2Aノックアウトマウスの感受性を減少させた。Figure3に示すとおり、スルプロストン誘発触覚過敏症の用量応答はグアネチジン処理したα2Aノックアウトマウスにおいておよそ10倍右方へシフトした。これらの結果は、交感神経系がスルプロストン感作を増大していることを示す。D交感神経系はNMDA誘発触覚過敏症には寄与しない。NMDAによる後角感作に対してα2ノックアウトマウスがより感受性大かどうか調べるため、野生型およびα2ノックアウトマウスに対して濃度を高めながらNMDAを注射した。Figure4に示すとおり、α2Aおよびα2Cノックアウトマウスはいずれも野生型マウスを超えてNMDAに対する感受性が高いことはなかった。これらの結果は、交感神経系がNMDA誘発触覚過敏症に寄与しているとは思われないことを示す。要約すると、これら結果からα2ノックアウトマウスにおいては交感神経活性が高いレベルにあること、さらに刺激の部位と方法に特異的な感作増強を示すことが明らかになった。α2作用薬のブリモニジンおよびクロニジンの活性比較この実施例は、交感神経系により増強される知覚過敏症を軽減する作用がα交感神経作用薬により異なることを示す。Aクロニジンと異なり、ブリモニジンは交感神経系により増強される触覚過敏症を軽減する。脊髄に投与されたα2アドレナリン作用薬は脊髄上のα2A受容体を介して神経因性疼痛を軽減する。α2ノックアウトマウスにおいて増加した交感神経活性がα2作用薬の鎮痛活性を変化させるかどうか調べるため、幾つかの作用薬の活性を試験した。最初にα2作用薬のブリモニジンおよびクロニジンをNMDAモデルで試験した;該モデルではノックアウトマウスの基礎的交感神経系緊張によっては感作は影響されない。NMDAとクロニジン若しくはブリモニジンをあわせてくも膜下腔内に投与すると野生型およびα2Cノックアウトマウスにおいては触覚過敏症を完全に阻害した。予測されるとおり、α2AノックアウトマウスにおいてはクロニジンもブリモニジンもNMDA誘発触覚過敏症を阻害しなかった;これは脊髄のα2Aアドレナリン受容体サブタイプはα2アドレナリン作用薬の鎮痛活性を媒介するという従来の研究LakhlanietalProcNatlAcadSciUSA9499509955StoneetalJNeurosci1771571765HunteretalBrJPharmacol12213391344と一致する。交感神経緊張に感受性のあるスルプロストン誘発触覚過敏症においてもブリモニジン鎮痛活性の同様のパターンが観察された。対照的に、クロニジンの結果は全く異なる;クロニジンは野生型マウスでは鎮痛活性を示すが、α2Aおよびα2Cノックアウトマウスでは鎮痛活性を示さなかった。これら結果は、α2全作用薬は交感神経的に増強された条件において、ブリモニジンは活性でクロニジンは不活性という異なる活性を示し得ることを示す。Bクロニジンまたはチザニジンと異なり、ブリモニジンは鎮静作用を伴うことなくスルプロストン誘発過敏症を軽減する。鎮静作用はα2作用薬を含む多くの薬物の用途を制限する。そこで、鎮静をもたらす用量と知覚過敏症をもたらす用量との間に差があるか試験してα2作用薬を比較した。三つのα2作用薬チザニジン、クロニジンおよびブリモニジンについて、鎮静効果と触覚過敏症阻害効力を自発運動モデルおよびスルプロストン誘発触覚過敏症をそれぞれ用いて種々の用量で比較した。腹腔内投与15分後および50分後の間5分毎に一群マウス56匹の触覚過敏症をスコアに記録した。基剤のみの動物のスコアは通常約4であった。さらに、一群マウス56匹の自発運動を腹腔内投与30分後の5分間に測定した。基剤処理した動物に対する自発運動を百分率で表した;鎮静は100から自発運動を引き算して計算した。Figure6に示すとおり、試験した三種のαアドレナリン作用薬中、ブリモニジンのみが鎮静と分離し得る鎮痛効果を与えた。この結果から、例えばスルプロストン誘発触覚過敏症のような交感神経的に増強された疾患を鎮静を伴わずに軽減する効力においてはブリモニジンはチザニジンやクロニジンのような他の二つのα2全作用薬とは異なることが示された。Cαアドレナリン全作用薬のα1に対するα2機能選択性の変化α2A、α2C、α1Aおよびα1Bを安定して発現しているセルラインを使用した試験で、αアドレナリン受容体に対するブリモニジンおよびクロニジンの薬学的特性を分析した。以前の研究と一致して、α2Aおよびα2C受容体を安定して発現しているPCl2細胞におけるフォルスコリン誘発cAMP蓄積阻害効力の順序は、デクスメデトミジン≧ブリモニジン>クロニジン>チザニジン≧フェニレフリンであったJasperetalBiochemPharmacol5510351043PihlavistoetalEurJPharmacol385247253。ブリモニジン、クロニジンおよびチザニジンはα2C受容体上よりもα2A受容体上において約10倍強力であった。同じ化合物につき、α1Aおよびα1B受容体を安定して発現しているHEK293細胞中のα1媒介細胞内カルシウム増加効果の官能試験をした。α1Aおよびα1B受容体上における効力の順序は、フェニレフリン>クロニジン>チザニジン=デクスメデトミジン>ブリモニジンであった。α2作用薬のクロニジン、チザニジンおよびデクスメデトミジンは部分作用薬であり、他方、ブリモニジンはα1A受容体上では弱い活性を示しα1B受容体上では非活性であった。こうして、クロニジンおよびチザニジンは結合試験により従前α2選択的作用薬と特徴付けられていたが、官能試験の結果α1およびα2受容体間の活性化において10倍の選択性もなかった。対照的に、デクスメデトミジンは官能試験で約300倍の選択性、ブリモニジンは官能試験で最も高い選択性を有し、α1受容体に比してα2受容体に1000倍より大の選択性を示した表2参照。これらの結果は、ブリモニジンがα1に対してα2に選択的な作用薬であり、ブリモニジンのα2/α1選択性はクロニジンのような他の全作用薬と対照的であることを示す。クロニジンとブリモニジンにおけるα2/α1選択性の違いは、クロニジンのα1作用がα2Cノックアウトマウスにおける交感神経緊張を増強し、スルプロストンモデルにおけるクロニジンの鎮痛作用がマスクされることを説明する。これら結果はα2Cノックアウトマウスにおいてクロニジンとα1拮抗剤のプラゾシンを同時投与するとクロニジンの鎮痛活性が回復することからも支持される。プラゾシンそれ自体は野生型マウスまたはα2Cノックアウトマウスにおいて鎮痛活性を有しない。要約すると、α2Cノックアウトマウスにおいてクロニジンの鎮痛活性が消失し、ブリモニジンの活性が消失しないことはクロニジンのα1作用薬としての結果であり、多くのα2作用薬におけるα1作用活性がストレス関連およびその他の交感神経により増強される疾患の治療効果を妨げ得ることが示される。安定してアドレナリン受容体を発現しているセルラインは、以下のようにして確立された。ウシα1A、ハムスターα1B、ヒトα2Aおよびα2C受容体のcDNA平滑末端をレトロウイルスベクターpCLBABEPuro中のNheIEcoRI部位にサブクローニングした。構成したレトロウイルスを二重鎖DNAシーケンシングで確認した。モロニー白血病ウイルスのGagPolを安定して発現しているHEK293セルラインであるHEK293GPを、適切なレトロウイルスベクターと、水疱性口内炎ウイルス外被タンパクVSVGの発現ベクターであるpMDGでコトランスフェクションして高力価の偽型レトロウイルス粒子を作製した。トランスフェクションの16時間後、メディアを交換した;高力価のメディアを48時間後に細胞収集した。04μMのフィルターで上澄を濾過した。ヒトα2Aおよびα2C受容体の上澄を異なる濃度で未処理のPC12細胞に加え、48時間培養した。形質導入した細胞株を低濃度で新たなプレートに移しピュロマイシン100pgmlを含む培地中で培養した。形質導入されなかった細胞は3日以内に死滅し単一の増殖巣が2ヶ月間成長した。当該増殖巣を取り出して拡大し、ブリモニジン放射性リガンド結合により受容体密度を試験した。α2受容体官能活性はフォルスコリン誘発cAMP蓄積阻害により確認した。ウシα1Aおよびハムスターα1B受容体上澄を未処理のHEK293細胞に加えて48時間培養した。形質導入した細胞株を低濃度で新たなプレートに移しピュロマイシン025μgmlを含む培地中で培養した。3日間以内に有意な細胞死が見られ、単一の増殖巣が2週以内に現れた。当該増殖巣を取り出して拡大した後、拡大されたサブクローンについて、フェニレフリン誘発Ca2蓄積を測定することによりα1受容体の発現を官能的に試験した。受容体密度はプラゾシン放射性リガンド結合試験により測定した。ウシα1Aまたはハムスターα1Bアドレナリン受容体を安定して発現しているHEK293細胞を用いて、細胞内Ca2応答を以下のように測定した。ポリDリジンでコートした96ウエルプレート上で、使用の一日前に10加熱不活性化ウシ胎仔血清、1抗生物質抗真菌剤および025μgmlピュロマイシンを含む02mlDMEM中にウエルあたり40000から50000個の細胞を播いた。10mMHEPES、20mMCaCl2、および25mMプロベネシッドを追加したHBSSで細胞を2回洗浄し、4μMのFluo4を添加して37°Cで60分間培養した。細胞外の染料をプレートより2回洗浄してから、該プレートを蛍光分析画像プレートリーダー上にセットした。リガンドはHBSSで希釈して96ウエルプレート上に等分して加えた。薬物は064nMから10000nMの濃度範囲で試験した。Ca2応答は任意の蛍光単位で得られた。細胞内cAMP測定は以下のように行った。ポリDリジンでコートした96ウエルプレート上で、10ウマ血清、5加熱不活性化ウシ胎仔血清、1抗生物質抗真菌剤および100μgmlピュロマイシンを含む100μlDMEM中にウエルあたり30000個の細胞密度でヒトα2Aまたはヒトα2Cアドレナリン受容体を安定して発現しているPC12細胞を播いた。細胞を37°C、5CO2の条件下で培養した。細胞に対してIBMX最終濃度1mM、フォルスコリン最終濃度10および適当な薬物希釈最終濃度10-5から10-12Mを含む等量のメディアを加えて薬物投与した。10分間培養した後、メディアを吸引して細胞を200μlの溶解緩衝液で溶解した。プレートは試験前20°Cで24時間まで貯蔵した。細胞内cAMPはBiotrakのcAMPイムノアッセイシステムを使用し製造元の指示に従って決定した。プレートはプレートリーダー上で450nmにて測定した。invitro試験の用量応答曲線は、KaleidaGraphSynergySoftwareReadingPAを使用し、最小二乗法で下式に適合させ作製した。有効率は化合物の最大効果を標準の全作用薬α1受容体ではフェニレフリン、α2受容体ではブリモニジンの効果と比較して決定した。上記のすべての雑誌論文、参考文献及び引用特許はその公表の如何にかかわらずその全体をここで引用する。本発明は参照のために実施例を提示して記述したが、本発明の精神から離れることなく種々の変更が可能と理解すべきである。従って、本発明は特許請求の範囲によってのみ制限される。