"両性イオン性緩衝液を含む核酸抽出用試薬を、被検試料と接触させる工程を含む、核酸抽出方法。核酸抽出用試薬が、タンパク質分解酵素および/または界面活性剤を含む、請求項1に記載の核酸抽出方法。タンパク質分解酵素が、プロテアーゼKである、請求項2に記載の核酸抽出方法。核酸抽出用試薬中におけるタンパク質分解酵素の濃度が、0.09~45U/mLである、請求項2または3に記載の核酸抽出方法。界面活性剤が、ステロイド骨格を有する界面活性剤である、請求項2~4のいずれか一項に記載の核酸抽出方法。界面活性剤が、グリココール酸またはその塩である、請求項2~5のいずれか一項に記載の核酸抽出方法。核酸抽出用試薬中における界面活性剤の濃度が、0.009~9mmol/Lである、請求項2~6のいずれか一項に記載の核酸抽出方法。両性イオン性緩衝液が、グッド緩衝液である、請求項1~7のいずれか一項に記載の核酸抽出方法。両性イオン性緩衝液が、トリシンを含む、請求項1~8のいずれか一項に記載の核酸抽出方法。核酸抽出用試薬中における緩衝剤の濃度が、9~364mmol/Lである、請求項1~9のいずれか一項に記載の核酸抽出方法。被検試料が、細胞壁を有する生物由来の試料である、請求項1~10のいずれか一項に記載の核酸抽出方法。細胞壁を有する生物が、グラム陽性菌、真菌または酵母である、請求項1~11のいずれか一項に記載の核酸抽出方法。被検試料から核酸としてDNAおよび/またはRNAが、抽出される、請求項1~12のいずれか一項に記載の核酸抽出方法。被検試料と接触させ、被検試料から核酸を抽出した核酸抽出用試薬は、核酸増幅反応に供されるものである、請求項1~13のいずれか一項に記載の核酸抽出方法。両性イオン性緩衝液を含む、核酸抽出用試薬。核酸抽出用試薬を構成する両性イオン性緩衝液と各構成成分とを含む、核酸抽出試薬キット。したがって、本発明が解決しようとする課題は、多種多様な被検試料に適用可能であり、PCR法やRT-PCR法等の遺伝子増幅反応に直接使用可能な核酸鋳型を、簡便かつ迅速に、好ましくは温和な条件で、調製する方法を提供することにある。本発明者らは、上記問題点に鑑み鋭意検討する中で、両性イオン性緩衝液を含む核酸抽出用試薬を用いることにより、DNAおよびRNAとともに抽出される夾雑成分によって遺伝子増幅反応が妨害されることが抑制されることを見出し、さらに研究を進めた結果、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は、以下に関する。1両性イオン性緩衝液を含む核酸抽出用試薬を、被検試料と接触させる工程を含む、核酸抽出方法。2核酸抽出用試薬が、タンパク質分解酵素および/または界面活性剤を含む、1に記載の核酸抽出方法。3タンパク質分解酵素が、プロテアーゼKである、2に記載の核酸抽出方法。4核酸抽出用試薬中におけるタンパク質分解酵素の濃度が、0.09~45U/mLである、2または3に記載の核酸抽出方法。5界面活性剤が、ステロイド骨格を有する界面活性剤である、2~4のいずれかに記載の核酸抽出方法。6界面活性剤が、グリココール酸またはその塩である、2~5のいずれかに記載の核酸抽出方法。7核酸抽出用試薬中における界面活性剤の濃度が、0.009~9mmol/Lである、2~6のいずれかに記載の核酸抽出方法。8両性イオン性緩衝液が、グッド緩衝液である、1~7のいずれかに記載の核酸抽出方法。9両性イオン性緩衝液が、トリシンを含む、1~8のいずれかに記載の核酸抽出方法。10核酸抽出用試薬中における緩衝剤の濃度が、9~364mmol/Lである、1~9のいずれかに記載の核酸抽出方法。11被検試料が、細胞壁を有する生物由来の試料である、1~10のいずれかに記載の核酸抽出方法。12細胞壁を有する生物が、グラム陽性菌、真菌または酵母である、1~11のいずれかに記載の核酸抽出方法。13被検試料から核酸としてDNAおよび/またはRNAが、抽出される、1~12のいずれかに記載の核酸抽出方法。14被検試料と接触させ、被検試料から核酸を抽出した核酸抽出用試薬は、核酸増幅反応に供されるものである、1~13のいずれかに記載の核酸抽出方法。15両性イオン性緩衝液を含む、核酸抽出用試薬。16核酸抽出用試薬を構成する両性イオン性緩衝液と各構成成分とを含む、核酸抽出試薬キット。本発明により、被検試料の種類や夾雑成分の有無を考慮することなく、ごく少量の被検試料から、一定の操作方法で、簡便かつ迅速に核酸を抽出することができ、さらに、PCRおよびRT-PCR法に供するための鋳型を調製することができる。また、食中毒や感染症等の検査市場において、日々、遺伝子検査の需要が高まっているが、本発明を用いることで、これまでネックとなっていた検体調製PCRおよびRT-PCR用鋳型の調製の作業の、大幅な短縮および省力化が可能となる。特に、RNAは、抽出、精製作業中に容易に分解するため、従来技術では取り扱いが難しかったが、本発明によれば、精製操作を省略することも可能となり精製操作時におけるRNAの損傷、分解が防止されるため、このようなRNAも好適に抽出ができる。さらに、本発明で調製されたRNAは、従来技術により得られたものとは異なり、保存安定性に優れており、再測定等が必要な際にも信頼性のあるデータを得ることが可能である。さらに、本願発明は、核酸の抽出段階で、遺伝子増幅反応における夾雑物による悪影響を予め防止することが可能であるから、遺伝子増幅反応においてその目的に適した緩衝液を利用することが可能であり、例えば、特許文献1に記載の方法のように遺伝子増幅反応において特定の緩衝液に制限されない。また、特に、核酸抽出用試薬が界面活性剤およびタンパク質分解酵素、特にグリココール酸およびプロテアーゼKを組み合わせて含む場合には、細胞壁を有する細胞を被検試料とした場合であっても、好適に核酸を抽出することができ、本発明は、より広範な被検試料に対し適用可能となる。以下、本発明の好適な実施態様に基づき、本発明を詳述する。本発明の核酸抽出方法の説明に先立ち、まず、本発明の核酸抽出用試薬および核酸抽出試薬キットについて説明する。本発明の核酸抽出用試薬は、被検試料中の核酸、特にDNAおよび/またはRNAの抽出に用いられるものである。そして、本発明の核酸抽出用試薬は、例えば、被検試料中から核酸が抽出した後に、核酸増幅反応に供される遺伝子増幅反応用核酸抽出試薬である。なお、別段の記載がない限り、本発明において、核酸とは、核酸とは、天然由来のDNAデオキシリボ核酸およびRNAリボ核酸、またはその誘導体メチル化体、酸化体、2量体、人工的に作成されたDNAおよびRNAの模倣物プライマー、非天然型核酸塩基を含む等、修飾体チオリン酸エステル体、チオール化体、リン酸化体、アミノ化体、ビオチン化体、蛍光標識体等をいう。また、別段の記載がない限り、本発明において、抽出とは、生体膜細胞壁、細胞膜、核膜、ミトコンドリア膜等で外界と隔絶された殻状体の中に格納されている物質内容物を、その殻状体に対し液体を接触させることによりその構造を破壊し、内容物と液体との親和性及び溶解性に基づいて液体中に内容物を移行させることをいう。また、本発明の核酸抽出用試薬は、両性イオン性緩衝液を含む。両性イオン性緩衝液は、緩衝剤として両性イオン性化合物を含むものであり、一定のpH範囲において、当該化合物は、正電荷と負電荷とを同時に有する両性イオンとして両性イオン性緩衝液中に存在する。核酸抽出試薬がこのような両性イオン性緩衝液を含むことにより、抽出および遺伝子増幅反応における検体試料中に含まれる夾雑成分による影響を低減することができ、この結果、被検試料の種類や夾雑成分の有無を考慮することなく、核酸を抽出することができるとともに、核酸抽出後における精製作業の省略が可能となる。このような効果が得られる理由は完全に解明されていないが、例えば、負電荷を有する核酸等に付着することで、核酸がDNAポリメラーゼと結合することを妨害すると考えられている陽イオン性の夾雑物を、両性イオン性化合物が、その負電荷により捕獲するとともに、DNAポリメラーゼが活性化する際に必須な2価の陽イオンマグネシウムイオン等を電気的に中和することで、DNAポリメラーゼの活性を阻害すると考えられている陰イオン性の夾雑物を、両性イオン性化合物が、その正電荷により捕獲し、これらの夾雑物を凝集、沈降させる結果、夾雑物による核酸やポリメラーゼ等への影響を低減できるためであると考えられる。核酸抽出用試薬に含まれる両性イオン性緩衝液としては、特に限定されず、例えば、グッド緩衝液を用いることができる。具体的には、緩衝剤として、2-モルホリノエタンスルホン酸MES、N-2-アセトアミドイミノ二酢酸ADA、N-2-アセトアミド-2-アミノエタンスルホン酸ACES、N,N-ビス2-ヒドロキシエチル-2-アミノエタンスルホン酸BES、N,N-ジ2-ヒドロキシエチルグリシンビシン、ビス2-ヒドロキシエチルイミノトリスヒドロキシメチルメタンBis-Tris、N-シクロヘキシル-3-アミノプロパンスルホン酸CAPS、N-シクロヘキシル-2-アミノエタンスルホン酸CHES、3-[4-2-ヒドロキシエチル-1-ピペラジニル]プロパンスルホン酸EPPS、2-[4-2-ヒドロキシエチル-1-ピペラジニル]エタンスルホン酸HEPES、2-ヒドロキシ-3-[4-2-ヒドロキシエチル-1-ピペラジニル]プロパンスルホン酸HEPPSO、3-モルホリノプロパンスルホン酸MOPS、2-ヒドロキシ-3-モルホリノプロパンスルホン酸MOPSO、ピペラジン-1,4-ビス2-エタンスルホン酸PIPES、ピペラジン-1,4-ビス2-ヒドロキシ-3-プロパンスルホン酸POPSO、N-トリスヒドロキシメチルメチル-3-アミノプロパンスルホン酸TAPS、2-ヒドロキシ-N-トリスヒドロキシメチルメチル-3-アミノプロパンスルホン酸TAPSO、N-トリスヒドロキシメチルメチル-2-エタンスルホン酸TES、N-[トリスヒドロキシメチルメチル]グリシントリシン、N,N,N-トリメチル-2-アミノエタンアミニウムクロリドコラミン塩酸、アセトアミドグリシン、グリシンアミドまたはこれらの塩から選択される1種または2種以上を含む緩衝液が挙げられ、好ましくは、緩衝剤としてN,N-ジ2-ヒドロキシエチルグリシンビシン、ビス2-ヒドロキシエチルイミノトリスヒドロキシメチルメタンBis-Tris、N-トリスヒドロキシメチルメチル-3-アミノプロパンスルホン酸TAPS、2-ヒドロキシ-N-トリスヒドロキシメチルメチル-3-アミノプロパンスルホン酸TAPSO、N-トリスヒドロキシメチルメチル-2-エタンスルホン酸TES、N-[トリスヒドロキシメチルメチル]グリシントリシン、2-[4-2-ヒドロキシエチル-1-ピペラジニル]エタンスルホン酸HEPESから選択される1種または2種以上を含む緩衝液を用いることができ、より好ましくは、緩衝剤として、ビシン、トリシン、2-[4-2-ヒドロキシエチル-1-ピペラジニル]エタンスルホン酸から選択される1種または2種以上を含む緩衝液を用いることができ、さらに好ましくは、緩衝剤としてトリシンを含む緩衝液を用いることができる。また、両性イオン性緩衝液は、上述したような両性イオン性化合物以外の緩衝剤を含んでいてもよい。このような緩衝剤としては、核酸抽出に関与する酵素の活性が至適になるように、中性から弱アルカリ性に調整できるものであれば良く、特に限定されないが、好ましくは、トリスヒドロキシアミノメタン、リン酸、ホウ酸、3,3-ジメチルグルタル酸、マレイン酸、イミダゾール、トリエタノールアミン、ジエタノールアミン、ピロリン酸、グリシン、またはこれらの塩例えばNa塩、K塩、塩酸塩等が挙げられ、これらのうち1種または2種以上を組み合わせて用いることができる。核酸抽出用試薬中における緩衝剤の濃度は、その緩衝剤の種類によって異なり、特に限定されないが、陽イオンおよび/または陰イオン性の夾雑物を十分に中和することができるように、夾雑成分に対して過剰量の緩衝剤が両性イオン性緩衝液中に存在し、かつ緩衝剤自身が遺伝子増幅反応を阻害しない濃度に設定する必要があるとの観点から、好ましくは、9~364mmol/Lであり、より好ましくは、91~182mmol/Lである。特に、両性イオン性化合物、好ましくはトリシンの濃度が上記範囲内であると、本願の効果はより顕著に発揮される。また、核酸抽出用試薬は、好ましくは、タンパク質分解酵素および/または界面活性剤を含む。これにより、比較的温和な条件において、細胞壁、細胞膜、核膜等を十分に破壊することができ、核酸の抽出をより容易にすることができる。さらに好ましくは、核酸抽出用試薬は、タンパク質分解酵素および界面活性剤を含み、これにより、タンパク質分解酵素および界面活性剤が協調して作用し、細胞壁、細胞膜、核膜等をより好適に破壊することができる。このようなタンパク質分解酵素としては、被検試料の核酸が抽出される程度に、細胞壁、細胞膜および核膜真核生物の場合を破壊できるようタンパク質を分解する能力を有するものであれば、特に限定されず、例えば、セリンプロテアーゼに属しているプロテアーゼK、トリプシン、キモトリプシン、スブチリシン等、アスパラギン酸プロテアーゼに属しているペプシン、カテプシンD等、システインプロテアーゼに属しているパパイン、カテプシン、カスパーゼ、カルパイン等が挙げられ、これらのうち1種または2種以上を用いることができるが、好ましくは、タンパク質の基質特異性が広く、かつキレート剤や変性剤の存在下でも活性を保つプロテアーゼKを用いる。また、核酸抽出用試薬中におけるタンパク質分解酵素の濃度は、タンパク質分解酵素の種類により、特に限定されないが、好ましくは、0.09~45U/mLであり、さらに好ましくは、0.9~45U/mLである。これにより、核酸の抽出時における細胞壁、細胞膜および核膜の破壊が促進され、核酸の抽出を効率的に行うことができ、遺伝子増幅反応時における核酸配列の増幅量を十分なものとすることができる。特に、核酸抽出用試薬がタンパク質分解酵素としてプロテアーゼKを上述した濃度含む場合には、顕著に上述した効果が得られるまた、界面活性剤としては、細胞壁、細胞膜および核膜の破壊に寄与するものであれば特に限定されないが、好ましくは、ステロイド骨格を有する界面活性剤を用いることができ、具体的には、デオキシコール酸、グリココール酸、またはこれらの塩例えば、Na、K塩等を挙げることができ、これらのうち1種または2種以上を組み合わせて用いることができる。さらに好ましくは、界面活性剤として、グリココール酸またはその塩例えば、Na、K塩を用いる。核酸抽出用試薬中における界面活性剤の濃度は、界面活性剤の種類により異なるが、例えばグリココール酸の場合は、好ましくは、0.009~9mmol/Lであり、より好ましくは、0.9~9mmol/Lである。デオキシコール酸の場合は、好ましくは0.009~9mmol/Lであり、より好ましくは、0.9~9mmol/Lである。これにより、核酸の抽出時における細胞壁、細胞膜および核膜の破壊が促進され、核酸の抽出を効率的に行うことができ、遺伝子増幅反応時における核酸配列の増幅量を十分なものとすることができる。特に、核酸抽出用試薬が界面活性剤としてグリココール酸またはその塩を上述した濃度含む場合には、顕著に上述した効果が得られる。また、核酸抽出用試薬は、上述した以外の成分を含んでもよい。このような成分としては、特に限定されないが、例えば、エチレンジアミン四酢酸EDTA、O,O’-ビス2-アミノフェニルエチレングリコール四酢酸BAPTA、trans-1,2-ジアミノシクロヘキサン四酢酸CyDTAおよびそれらの塩等のキレート剤、酢酸カルシウム、ギ酸カルシウム、塩化カルシウム等のカルシウム塩、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸ナトリウム等の非特異吸着抑制剤、グリセリン等の凍結防止剤等が挙げられ、タンパク質分解酵素例えばプロテアーゼKおよびDNA分解酵素例えばDNaseIの酵素反応および遺伝子増幅反応例えばPCR用DNAポリメラーゼを妨害しない範囲で、これらのうち1種または2種以上を組み合わせて用いることができる。また、核酸抽出用試薬が界面活性剤およびタンパク質分解酵素を同時に含む場合には、界面活性剤としてグリココール酸を、タンパク質分解酵素としてプロテアーゼKを含むことが好ましい。このような組み合わせにより、十分に温和な条件下において、検体試料中の細胞壁、細胞膜、核膜等をより容易かつ迅速に破壊することができ、核酸をより効率的に抽出することが可能となる。また、核酸抽出用試薬の20°CにおけるpHは、特に限定されないが、タンパク質分解酵素例えばプロテアーゼKおよびDNA分解酵素例えばDNaseIの酵素反応および遺伝子増幅反応例えばPCR用DNAポリメラーゼの活性が全て維持されるよう、好ましくは7.5~8.7であり、より好ましくは、8.0~8.5である。本発明の核酸抽出試薬キットは、少なくとも上述したような核酸抽出用試薬を構成する両性イオン性緩衝液と各構成成分とを含む。核酸抽出試薬は、核酸抽出試薬キットにおいて、その各構成成分が混合された状態で存在してもよいし、保存安定性の向上、製造コストの低減等の観点から、必要に応じて、これらの成分が分離して存在してもよい。また、核酸抽出試薬キットは、その目的に応じ、他の試薬を有していてもよい。例えば、核酸抽出試薬キットは、目的とする核酸以外の核酸を分解するための核酸分解試薬例えば、DNA分解試薬、RNA分解試薬、RNA分解酵素の活性を阻害するタンパク質RNaseInhibitor、PCR等の遺伝子増幅試薬DNAポリメラーゼ、プライマー、核酸塩基、Mg含有緩衝液、遺伝子増幅産物を検出するための電気泳動関連試薬アガロースゲル、分子量マーカー、移動度マーカー、検出試薬等を、1種または2種以上組み合わせて有することができる。また、本発明の核酸抽出試薬キットは、後述する核酸の抽出方法を実施するための器具例えば、密閉容器等を備えていてもよい。上述したような本発明の核酸抽出用試薬および核酸抽出試薬キットは、以下に説明する本発明の核酸抽出方法に好適に適用することができる。次に、本発明の核酸抽出方法について説明する。図1に、本発明の核酸抽出方法の好適な実施態様の一例を示すフローチャート図を示す。なお、図中に記載された試薬中の構成成分や反応条件等については、あくまでも本発明の実施態様の一例を示すものであり、本発明はこれに限定されるべきではない。本発明の核酸抽出方法は、両性イオン性緩衝液を含む核酸抽出用試薬試薬1を、被検試料と接触させる工程を含む。本実施態様においては、まず、被検試料を上述した核酸抽出用試薬と混合して混合液を得、これにより被検試料と核酸抽出用試薬とを接触させる。本発明の核酸抽出方法では、被検試料として核酸を含む細胞微生物、動物、植物またはウイルスを用いる。このような被検試料としては、特に限定されないが、好ましくは、被検試料は、細胞壁を有する生物真核生物または原核生物由来の試料であり、より好ましくはグラム陽性菌、真菌または酵母であり、さらに好ましくは、黄色ブドウ球菌または出芽酵母である。これらの被検試料を含む検体の由来は、特に限定されず、いかなるものであってもよい。例えば、微生物およびウイルス試料を含む検体としては、血液、尿、糞便、粘液例えば、膣、子宮頚、口腔、鼻腔等、食品、作物、上下水道、天然水例えば、河川水、湖沼水、地下水、雨水、海水、土壌等が挙げられ、それぞれに適した方法で採取された一次検体を直接または培養によって増殖させたものが使用できる。また、例えば、動物試料を含む検体としては、血液、尿、糞便、粘液例えば、膣、子宮頚、口腔、鼻腔等、皮膚、毛根、食品肉類、手術で摘出された生検試料等が挙げられ、それぞれに適した方法で採取された一次検体を直接または培養によって増殖させたものが使用できる。また、これらの検体中の細胞を凍結させたもの、パラフィン包埋切片としたものについても使用できる。また、例えば、植物由来の検体としては、種子、果実、種皮、茎、葉、根等が挙げられる。なお、本発明の核酸抽出方法では、上述したような被検試料に夾雑物が含まれていた場合であっても、好適に核酸の抽出が可能である。すなわち、夾雑物が含まれ得る検体試料について、その有無を検討することなく、本発明の方法を適用することも可能である。本願明細書中において、夾雑物とは、分子サイズに限らず、正もしくは負に荷電している化合物、タンパク質分解酵素例えばプロテアーゼKおよびDNA分解酵素例えばDNaseIおよび遺伝子増幅用酵素例えばPCR用DNAポリメラーゼの活性を阻害する化合物、またはこれらの安定性を低減させる化合物、等を1種または2種以上含む組成物をいう。このような夾雑物としては、特に限定されないが、例えば、血清、血球、尿、便、粘液、髄液、唾液、土壌、細胞断片、培地、タンパク質、脂質、油脂、多糖、オリゴ糖、色素、金属塩、酸性塩、塩基性塩、抗生物質、薬物、界面活性剤等が挙げられる。上述した中でも、血清、尿、粘液、細胞断片、培地、金属塩、酸性塩および塩基性塩は、抽出後の抽出液に存在することにより、核酸増幅反応を妨害しやすいが、このような夾雑物が存在した場合であっても、本発明によれば、このような妨害を抑制できる。被検試料と核酸抽出用試薬との混合方法は、特に限定されず、適宜被検試料の状態に適した方法を採用することができる。例えば、被検試料が懸濁液であった場合には、混合は、被検試料に核酸抽出用試薬を添加することにより行うことができる。また、例えば、被検試料がコロニーや固形物を大量に含む場合には、混合は、生化学的実験で汎用される緩衝液例えば、PBS、生理食塩水等にこれらを懸濁させ、これに対し核酸抽出用試薬を添加することにより行うことができる。また、被検試料と核酸抽出用試薬との混合を、密閉可能な容器中で行うことができる。このような場合、例えば、ピペット、点眼瓶等の器具を用いて、被検試料および核酸抽出用試薬の容器への輸送を行うことができる。混合液中における被検試料と核酸抽出用試薬との混合比体積比は、特に限定されないが、例えば、1:1000~1:10、好ましくは、1:100~1:10とすることができる。次に、混合液を、所定の温度に調節し、一定時間静置する。混合液の温度は、例えば、核酸抽出用試薬にタンパク質分解酵素が含まれる場合には、この至適温度付近例えば、至適温度より5°C低い温度から、至適温度より5°C高い温度範囲内とすることができる。また、核酸抽出用試薬にタンパク質分解酵素が含まれない場合には、混合液の温度は、25~70°Cとすることができる。また、静置時間は、特に限定されないが、例えば、5~30分、好ましくは、5~10分とすることができる。次に、核酸抽出用試薬に、タンパク質分解酵素が含まれる場合には、この失活温度付近例えば、失活温度より2°C低い温度から、失活温度より2°C高い温度範囲内にて、一定時間静置する。静置時間は、特に限定されないが、例えば、3~15分、好ましくは、3~5分とすることができる。以上の操作により、検体試料から混合液中に核酸が抽出された抽出液が得られる。こうして得られた抽出液は、遺伝子増幅反応に供される。増幅の対象の核酸がDNAの場合には、得られた抽出液をそのまま遺伝子増幅反応におけるDNAの鋳型として用い、PCR法に供することも可能であるが、遠心分離や濾過操作等により沈殿物を除去した後の上澄をPCR法に用いることもできる。増幅の対象の核酸がRNA由来のものである場合には、さらに、混合液中のDNAを分解して、分解処理後の混合液をRT-PCR法に供する。このような場合、図1にあるように、本実施態様では、さらにDNA分解試薬試薬2を抽出液に接触させる工程を有する。上記工程としては、例えば、核酸抽出試薬キットに含まれるDNA分解試薬を抽出液に添加し、抽出液を所定の温度に調節し、一定時間静置することにより行うことができる。このような温度としては、例えば、DNA分解試薬中に含まれるDNA分解酵素の至適温度付近例えば、至適温度より2°C低い温度から、至適温度より2°C高い温度範囲内とすることができる。また、静置時間は、DNAが十分に分解可能な時間であれば特に限定されないが、例えば、10~30分、好ましくは、10~15分とすることができる。次に、DNA分解酵素の失活温度付近例えば、失活温度より2°C低い温度から、失活温度より2°C高い温度範囲内にて、抽出液を一定時間静置する。静置時間は、特に限定されないが、例えば、5~30分、好ましくは、5~15分とすることができる。以上の操作により、DNAが除去され、かつRNAを含む抽出液を得ることができる。そして、この処理後の抽出液中に残存するRNAをRT-PCR法の鋳型として使用することが可能となる。以上、本発明について好適な実施態様に基づき詳細に説明したが、本発明はこれに限定されず、各構成は、同様の機能を発揮し得る任意のものと置換することができ、あるいは、任意の構成を付加することもできる。以下、本発明を、実施例をあげてさらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。まず、核酸の抽出に用いる試薬として、以下の組成の試薬1および試薬2を調製し、試薬1および試薬2からなる核酸抽出試薬キットを準備した。試薬1本発明の核酸抽出用試薬プロテアーゼK18U/mLTris-HClpH7.50.9mM酢酸カルシウム0.09mMグリココール酸ナトリウム9mMEDTA2Na0.9mMトリシンpH8.5182mM塩化ナトリウム9mMグリセリン5v/v試薬2DNA分解試薬DNaseI1U/μLTris-HClpH7.520mM塩化マグネシウム50mMグリセリン50v/vなお、別段の記載がない限り、以下で述べる試薬1および2の組成は上記のとおりである。また、本実施例において、試薬1および試薬2は、核酸の抽出において、原則以下のように使用することとした。増幅対象がDNAに由来する場合:検体1μLを試薬1100μLで懸濁し、65°Cで6分間、94°Cで3分間連続的に加温する。その後、遠心操作10,000×g、5分で上清を回収して抽出液を得、これをPCR法の鋳型として使用する。増幅対象がRNAに由来する場合:DNAの場合と同様に被検試料1μLと試薬1100μLを懸濁し、加温操作と遠心操作を経て上清を回収する。この上清5μLに5μLの試薬2と45μLの超純水を加え、37°Cで15分間、75°Cで5分間連続的に加熱して抽出液を得、これをRT-PCR法の鋳型として使用する。実施例1プロテアーゼK濃度が異なる試薬1を用いたDNAの抽出出芽酵母Saccharomycescerevisiae、ATCC9763をサブローブドウ糖寒天培地に播種し、37°Cで一晩好気培養した。得られたコロニーを被検試料とした。プロテアーゼKのみ0~45U/mLの範囲で段階的に濃度を変更した上記試薬1を用いて、増幅対象をDNAとして被検試料から核酸の抽出を行い、PCR法の鋳型を調製した。次に、939bpのPCR産物を得るために、センスプライマー配列番号1:URA3U、5’GCACAGAACAAAAACCT3’およびアンチセンスプライマー配列番号2:URA3L、5’TCATTACGACCGAGATT3’を用いてURA3遺伝子配列をPCR法により増幅した。まず、10μMフォワードプライマー1μL、10μMリバースプライマー1μL、5×AptaTaqDNAMasterロシュ4μL、上記鋳型2μLおよび超純水12μLを混合して全量20μLのPCR反応混合液を調製した。そして、PCRを次のような温度条件で行った:94°C、30秒→48°C、90秒→72°C、60秒×30回→72°C、7分。増幅産物をアガロースゲル電気泳動に供した結果を図2に示す。図中、各レーンの実験において、試薬1中のプロテアーゼK濃度を以下のように構成した。レーン1:0U/mLレーン2:0.009U/mLレーン3:0.09U/mLレーン4:0.9U/mLレーン5:9U/mLレーン6:45U/mLレーンM:100bpDNALadder図2に示された結果において、いずれの方法で行った被検試料についても、DNAが抽出され、また増幅されたことが確認できた。また、試薬1中のプロテアーゼKの濃度が0.09~45U/mLの範囲の場合には、増幅産物量が比較的多いことが確認できた。実施例2グリココール酸濃度が異なる試薬1を用いたDNAの抽出出芽酵母Saccharomycescerevisiae、ATCC9763をサブローブドウ糖寒天培地に播種し、37°Cで一晩好気培養した。得られたコロニーを被検試料とした。グリココール酸Naのみ0~9mmol/Lの範囲で段階的に濃度を変更した上記試薬1を用いて、増幅対象をDNAとして被検試料から核酸の抽出を行い、PCR法の鋳型を調製した。次に、939bpのPCR産物を得るために、センスプライマー配列番号1:URA3U、5’GCACAGAACAAAAACCT3’およびアンチセンスプライマー配列番号2:URA3L、5’TCATTACGACCGAGATT3’を用いてURA3遺伝子配列をPCR法により増幅した。まず、10μMフォワードプライマー1μL、10μMリバースプライマー1μL、5×AptaTaqDNAMasterロシュ4μL、上記鋳型2μLおよび超純水12μLを混合して全量20μLのPCR反応混合液を調製した。そして、PCRを次のような温度条件で行った:94°C、30秒→48°C、90秒→72°C、60秒×30回→72°C、7分。増幅産物をアガロースゲル電気泳動に供した結果を図3に示す。図中、各レーンの実験において、試薬1中のグリココール酸Na濃度を以下のように構成した。レーンM:100bpDNALadderレーン1:0mmol/Lレーン2:0.009mmol/Lレーン3:0.09mmol/Lレーン4:0.9mmol/Lレーン5:9mmol/L図3に示された結果において、試薬1中のグリココール酸Naの濃度が0.009~9mmol/Lの範囲の場合には、増幅産物量が比較的多いことが確認できた。実施例3トリシン濃度の異なる試薬1を用いたDNAの抽出出芽酵母Saccharomycescerevisiae、ATCC9763をサブローブドウ糖寒天培地に播種し、37°Cで一晩好気培養した。得られたコロニー1μLをヒトプール血清10μLに懸濁し、この全量を被検試料とした。トリシンのみ0~364mmol/Lの範囲で段階的に濃度を変更した上記試薬1を用いて、増幅対象をDNAとして被検試料から核酸の抽出を行い、PCR法の鋳型を調製した。なお、トリシンを含まない試薬1は、対照として用いた。次に、939bpのPCR産物を得るために、センスプライマー配列番号1:URA3U、5’GCACAGAACAAAAACCT3’およびアンチセンスプライマー配列番号2:URA3L、5’TCATTACGACCGAGATT3’を用いてURA3遺伝子配列を増幅した。まず、10μMフォワードプライマー1μL、10μMリバースプライマー1μL、5×AptaTaqDNAMasterロシュ4μL、鋳型2μLおよび超純水12μLを混合して全量20μLのPCR反応混合液を調製した。そして、PCRを次のような温度条件で行った:94°C、30秒→48°C、90秒→72°C、60秒×30回→72°C、7分。増幅産物をアガロースゲル電気泳動に供した結果を図4に示す。図中、各レーンの実験において、試薬1中のトリシン濃度を以下のように構成した。レーン1:0mmol/Lレーン2:9mmol/Lレーン3:91mmol/Lレーン4:182mmol/Lレーン5:364mmol/LレーンM:100bpDNALadder図4に示された結果において、試薬1中のトリシンの濃度が9~364mmol/Lの範囲の場合には、増幅産物由来のバンドが十分に認められた。実施例4本発明の核酸抽出試薬キットを用いた、黄色ブドウ球菌グラム陽性菌、大腸菌O157グラム陰性菌、真菌出芽酵母からのDNAの抽出黄色ブドウ球菌Staphylococcusaureus、NBRC102141と大腸菌O157Escherichiacoli、ATCC35150とをSCD寒天培地に、出芽酵母Saccharomycescerevisiae、ATCC9763をサブローブドウ糖寒天培地にそれぞれ播種し、37°Cで一晩好気培養した。得られた各コロニーを被検試料として、上記試薬1を用いて、増幅対象をDNAとして被検試料から核酸の抽出を行い、PCR法の鋳型を調製した。また、本発明試薬1の代わりに超純水を用いて同様の操作を行い、これを対照の鋳型とした。次に、各鋳型について、10μMフォワードプライマー1μL、10μMリバースプライマー1μL、5×AptaTaqDNAMasterロシュ4μL、各鋳型2μLおよび超純水12μLを混合して全量20μLのPCR反応混合液をそれぞれ調製し、これをPCR反応によるDNAの増幅反応に供した。黄色ブドウ球菌については、324bpのPCR産物を得るために、センスプライマー配列番号3:S4F、5’GACAACTAGAGATAGAGCCTTCC3’およびアンチセンスプライマー配列番号4:S4R、5’AGTCGAGTTGCAGACTAC3’を用いて16SrRNAの配列をPCR法により増幅した。PCRは次のような温度条件で行った:94°C、30秒→54°C、90秒→72°C、60秒×30回→72°C、7分。O157については、180bpのPCR産物を得るために、センスプライマー配列番号5:stx1F、5’ATAAATCGCCATTCGTTGACTAC3’およびアンチセンスプライマー配列番号6:stx1R、5’AGAACGCCCACTGAGATCATC3’を用いてベロ毒素1遺伝子配列をPCR法により増幅した。PCRは次のような温度条件で行った:94°C、30秒→62°C、90秒→72°C、60秒×30回→72°C、7分。出芽酵母については、939bpのPCR産物を得るために、センスプライマー配列番号1:URA3U、5’GCACAGAACAAAAACCT3’およびアンチセンスプライマー配列番号2:URA3L、5’TCATTACGACCGAGATT3’を用いてURA3遺伝子配列をPCR法により増幅した。PCRは次のような温度条件で行った:94°C、30秒→48°C、90秒→72°C、60秒×30回→72°C、7分。各増幅産物をアガロースゲル電気泳動に供した結果を図5に示す。図中、黄色ブドウ球菌、腸管出血性大腸菌O157、出芽酵母のいずれについても、各レーンは下記の構成とした。レーンM:100bpDNALadderレーン1:本発明の試薬1を用いて調製したPCR用鋳型レーン2:本発明の試薬1の代わりに超純水を用いて調製したPCR用鋳型対照図5に示された結果において、3種全ての被検試料において増幅産物に由来するバンドが検出されたことが確認された。特に、黄色ブドウ球菌や出芽酵母に対しては、対照よりも多くの増幅産物が得られることが確認された。比較例1従来の核酸抽出試薬キットを用いた、黄色ブドウ球菌グラム陽性菌、大腸菌O157グラム陰性菌、真菌出芽酵母からのDNAの抽出本発明の核酸抽出試薬キットに変えて、既存製品シカジーニアスDNA抽出試薬、関東化学社製を用い、核酸の抽出およびPCR法の鋳型の調製を同製品の製品マニュアルに従って行った以外は、前記実施例4と同様にして、PCR法の鋳型を調製し、当該鋳型の増幅を行った。増幅産物をアガロース電気泳動に供した結果を図6に示す。図中、黄色ブドウ球菌、腸管出血性大腸菌O157、出芽酵母のいずれについても、各レーンは下記の構成とした。レーンM:100bpDNALadderレーン1:従来の核酸抽出試薬キットシカジーニアスDNA抽出試薬、関東化学社製を用いて調製した試料レーン2:上記試薬に代えて超純水を用いて調製した試料対照図6に示された結果において、黄色ブドウ球菌およびO157の被検試料においては、実施例4図5と同等の増幅産物由来のバンドが検出されたが、出芽酵母の被検試料においては、増幅産物量が有意に少ないことが確認された。実施例5および参考例1本発明の核酸抽出試薬キットまたは既存製品セルイーズマウステールを用いた、動物細胞からのDNAの抽出マウステールを約3mm切り取ったものを動物細胞の被検試料として用いた。試薬1を用いて、増幅対象をDNAとして被検試料から核酸の抽出を行い、PCR法の鋳型を調製した実施例5。一方、既存製品セルイーズマウステール;関東化学のマニュアルに従って被検試料から核酸の抽出を行い、PCR法の鋳型を調製し、これを対照として用いた参考例1。次に、494bpのPCR産物を得るために、センスプライマー配列番号7:bGloF、5’CCAATCTGCTCACACAGGATAGAGAGGGCAGG3’およびアンチセンスプライマー配列番号8:bGloR5’CCTTGAGGCTGTCCAAGTGATTCAGGCCATCG3’を用いてβ-グロビン遺伝子を増幅した。まず、10μMフォワードプライマー0.4μL、10μMリバースプライマー0.4μL、25mMMgCl21.6μL、各2.5mMdNTPMixture1.6μL、10×ExTaqBufferMg2free、タカラバイオ2μL、TaKaRaExTaqタカラバイオ0.1μL、超純水で3倍に希釈された鋳型1.2μLおよび超純水12.7μLを混合して全量20μLのPCR反応混合液を調製した。そして、PCRを次のような温度条件で行った:94°C、1分→94°C、30秒→60°C、30秒→72°C、30秒×35回→72°C、4分。各増幅産物をアガロースゲル電気泳動に供した結果を図7に示す。図中、本発明の核酸酸抽出キットおよび既存製品セルイーズマウステール;関東化学のいずれについても、各レーンは下記の構成とした。レーンM:100bpDNALadderレーン1:本発明の試薬1もしくは既存製品を用いて調製した試料レーン2:本発明の試薬1もしくは既存製品の代わりに超純水を用いて調製した試料対照図7に示された結果において、本発明の核酸抽出試薬キットを用いた場合実施例5の増幅産物量は、マウステール、牛肉、豚肉等の生体試料動物細胞に対象を特化した既存製品セルイーズマウステール;関東化学の場合参考例1と同等以上であったことが確認された。実施例6黄色ブドウ球菌グラム陽性菌、大腸菌O157グラム陰性菌、真菌出芽酵母からのRNAの抽出黄色ブドウ球菌Staphylococcusaureus、NBRC102141と大腸菌O157Escherichiacoli、ATCC35150をSCD寒天培地に、出芽酵母Saccharomycescerevisiae、ATCC9763をサブローブドウ糖寒天培地に播種し、37°Cで一晩好気培養した。得られた各コロニーを被検試料として、上記試薬1および試薬を用いて、増幅対象をRNAとして被検試料から核酸の抽出を行い、RT-PCR法の鋳型を調製した。2μMリバースプライマーPCR反応混合液調製時に使用するものと同じ0.5μL、5×PrimeScriptBufferforRealTimeタカラバイオ2μL、PrimeScriptRTEnzymeMixIタカラバイオ0.5μL、鋳型5μLおよび超純水2μLを混合して全量10μLの逆転写反応混合液を調製した。次に、逆転写反応を次のような温度条件で行った:42°C、15分→85°C、5秒。これにより逆転写反応済みの鋳型を調製した。次に、10μMフォワードプライマー1μL、10μMリバースプライマー1μL、5×AptaTaqDNAMasterロシュ4μL、逆転写反応済みの鋳型2μL、超純水12μLを混合して全量20μLのPCR反応混合液を調製し、これをPCR反応によるDNAの増幅反応に供した。それぞれの被検試料におけるプライマーと温度条件を以下に示す。黄色ブドウ球菌については、324bpのRT-PCR産物を得るために、センスプライマー配列番号3:S4F、5’GACAACTAGAGATAGAGCCTTCC3’およびアンチセンスプライマー配列番号4:S4R、5’AGTCGAGTTGCAGACTAC3’を用いて16SrRNAの配列を増幅した。PCRは次のような温度条件で行った:94°C、30秒→54°C、90秒→72°C、60秒×30回→72°C、7分。O157については、180bpのRT-PCR産物を得るために、センスプライマー配列番号5:stx1F、5’ATAAATCGCCATTCGTTGACTAC3’およびアンチセンスプライマー配列番号6:stx1R、5’AGAACGCCCACTGAGATCATC3’を用いてベロ毒素1遺伝子配列を増幅した。PCRは次のような温度条件で行った:94°C、30秒→62°C、90秒→72°C、60秒×30回→72°C、7分。出芽酵母については、756bpのRT-PCR産物を得るために、センスプライマー配列番号9:ACT1f、5’TACGTTTCCATCCAAGCCGTT3’およびアンチセンスプライマー配列番号10:ACT1r、5’AACATACGCGCACAAAAGCAGA3’を用いてURA3遺伝子配列を増幅した。PCRは次のような温度条件で行った:94°C、30秒→53°C、90秒→72°C、60秒×30回→72°C、7分。増幅産物をアガロースゲル電気泳動に供した結果を図8に示す。図中、黄色ブドウ球菌、腸管出血性大腸菌O157、出芽酵母のいずれについても、各レーンは下記の構成とした。レーンM:100bpDNALadderレーン1:本発明の試薬1および試薬2を用いて調製した試料PrimeScriptRTEnzymeMixIを添加した状態レーン2:本発明の試薬1および試薬2を用いて調製した試料PrimeScriptRTEnzymeMixIを添加しなかった状態レーン3:本発明の試薬1を超純水に置き換え、さらに試薬2を用いて調製した試料PrimeScriptRTEnzymeMixIを添加した状態レーン4:本発明の試薬1を超純水に置き換え、さらに試薬2を用いて調製した試料PrimeScriptRTEnzymeMixIを添加しなかった状態図8に示された結果において、3種全ての被検試料において増幅産物由来のバンドが確認された。実施例7および比較例2血液成分が混入した真菌出芽酵母試料における核酸の抽出出芽酵母Saccharomycescerevisiae、ATCC9763をサブローブドウ糖寒天培地に播種し、37°Cで一晩好気培養した。得られたコロニー1μLをヒトプール血清10μLに懸濁し、この全量を被検試料とした。この被検試料について、DNAの抽出およびPCR法を実施例4と同様に、RNAの抽出およびRT-PCR法を実施例6と同様に行い、増幅産物を得た実施例7。対照として、本発明の核酸抽出試薬キットに変えて既存製品シカジーニアスDNA抽出試薬;関東化学を用いて、比較例1と同様に、PCR用の鋳型を調製した。なお、RNAは同既存製品の適用外のためRT-PCR鋳型の調製は実施していない。増幅産物をアガロースゲル電気泳動に供した結果を図9PCRおよび図10RT-PCRに示す。図9において、本発明の核酸抽出試薬キットおよび既存製品シカジーニアスDNA抽出試薬;関東化学のいずれについても、各レーンは下記の構成とした。レーンM:100bpDNALadderレーン1:本発明の試薬1もしくは既存製品を用いて調製した試料レーン2:本発明の試薬1もしくは既存製品の代わりに超純水を用いて調製した試料また、図10において、各レーンは下記の構成とした。レーンM:100bpDNALadderレーン1:本発明の核酸抽出試薬キット試薬1および試薬2を用いて調製した試料PrimeScriptRTEnzymeMixIを添加した状態レーン2:本発明の核酸抽出試薬キット試薬1および試薬2を用いて調製した試料PrimeScriptRTEnzymeMixIを添加しなかった状態レーン3:本発明の試薬1を超純水に置き換え、さらに試薬2を用いて調製した試料PrimeScriptRTEnzymeMixIを添加した状態レーン4:本発明の試薬1を超純水に置き換え、さらに試薬2を用いて調製した試料PrimeScriptRTEnzymeMixIを添加しなかった状態図9および図10に示される結果において、本発明の核酸抽出試薬キットを用いた場合には、血清血液成分が混入していてもDNAやRNAが検出できた。一方、既存製品を用いた対照実験では、DNAは検出されなかった。これにより、夾雑物の有無にかかわらず、本発明の方法により、核酸の抽出およびそれに引き続く対象となる核酸配列の増幅が可能となることが確認できた。以上により、本発明の核酸抽出試薬キットおよび本発明の核酸抽出方法を用いた場合には、多種多様な被検試料に適用可能であり、PCR法やRT-PCR法等の遺伝子増幅反応に直接使用可能な核酸鋳型を、簡便かつ迅速に、好ましくは温和な条件で、調製することができることが確認できた。"