"細胞膜透過ペプチドおよびホウ素化合物を含む細胞膜透過型ホウ素ペプチド。前記細胞膜透過ペプチドが、アルギニン3~13残基が連続したアミノ酸配列からなるペプチド、TAT配列番号1、HIV-1Rev34-50配列番号2、FHVCoat35-49配列番号3、BMVGag7-25配列番号4、HTLV-IIRex4-16配列番号5、CCMVGag7-25配列番号6、P22N14-30配列番号7、λN1-22配列番号8、φ21N12-29配列番号9および酵母PRP6129-144配列番号10からなる群より選択される請求項1記載の細胞膜透過型ホウ素ペプチド。前記細胞膜透過ペプチドが、アルギニン9~13残基が連続したアミノ酸配列からなるペプチドである請求項1または2記載の細胞膜透過型ホウ素ペプチド。前記ホウ素化合物が、アミノ酸と結合可能な官能基を有するホウ素クラスターである請求項1~3のいずれか1項に記載の細胞膜透過型ホウ素ペプチド。前記ホウ素化合物が、メルカプトウンデカハイドロドデカボレートである請求項4記載の細胞膜透過型ホウ素ペプチド。細胞膜透過ペプチド1分子に対してメルカプトウンデカハイドロドデカボレート1~8分子を含む請求項5記載の細胞膜透過型ホウ素ペプチド。核内に集積されることを特徴とする請求項1~6のいずれか1項に記載の細胞膜透過型ホウ素ペプチド。請求項1~7記載の細胞膜透過型ホウ素ペプチドおよび少なくとも1つの薬学的に許容され得る賦形剤を含むホウ素製剤。本発明の目的は、細胞膜を透過し細胞内、とりわけ核に局在する細胞膜透過型ホウ素製剤を提供することである。ホウ素化合物BSHに細胞膜透過ペプチドと呼ばれるペプチドを用いて修飾を行ったところ、これまで細胞内への導入が困難であったホウ素化合物BSHを細胞内部に導入することが可能となり、さらには、時間経過によりホウ素化合物が、細胞の中心に局在する核へ集積することを見出し、本発明が完成された。本発明は、細胞膜透過ペプチドおよびホウ素化合物を含む細胞膜透過型ホウ素ペプチドに関する。本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドにおいて、細胞膜透過ペプチドは、アルギニン3~13残基が連続したアミノ酸配列からなるペプチド、TAT配列番号1:GRKKRRQRRR、HIV-1Rev34-50配列番号2:TRQARRNRRRRWRERQR、FHVCoat35-49配列番号3:RRRRNRTRRNRRRVR、BMVGag7-25配列番号4:KMTRAQRRAAARRNRWTAR、HTLV-IIRex4-16配列番号5:TRRQRTRRARRNR、CCMVGag7-25配列番号6:KLTRAQRRAAARKNKRNTR、P22N14-30配列番号7:NAKTRRHERRRKLAIER、λN1-22配列番号8:MDAQTRRRERRAEKQAQWKAAN、φ21N12-29配列番号9:TAKTRYKARRAELIAERRおよび酵母PRP6129-144配列番号10:TRRNKRNRIQEQLNRKからなる群より選択されることが好ましい。本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドにおいて、細胞膜透過ペプチドは、アルギニン9~13残基が連続したアミノ酸配列からなるペプチドであることが好ましい。本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドにおいて、ホウ素化合物が、アミノ酸と結合可能な官能基を有するホウ素クラスターであることが好ましい。本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドにおいて、ホウ素化合物は、メルカプトウンデカハイドロドデカボレートであることがさらに好ましい。本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドにおいては、細胞膜透過ペプチド1分子に対してメルカプトウンデカハイドロドデカボレート1~8分子を含むことができる。本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドは、好ましくは核内に集積されることを特徴とする。本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドは、少なくとも1つの薬学的に許容され得る賦形剤と組み合わせてホウ素製剤とすることができる。本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドは、腫瘍組織内に選択的に取り込まれ、24時間後にも安定に残留し、従来のホウ素製剤と比べて15~50倍もの高濃度のホウ素を腫瘍細胞内に、さらには核内に蓄積させることができる。また、本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドは、たとえば、ペプチドとホウ素化合物との間のリンカーにリジンとシステインの組合せを利用することにより、1つの分子で複数個のホウ素化合物を運ぶことが可能であり、効率的にホウ素化合物を細胞の核内に局在させることができる。本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドを用いることにより、効率的にホウ素化合物を細胞内、とりわけ核内に集積することができ、実際に従来のホウ素製剤BSHと比較して、極めて高い腫瘍殺傷効果が得られる。本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドを用いることにより、ホウ素製剤が細胞膜周辺に留まる場合と比較して数十倍から数百倍の腫瘍殺傷効果をもたらすことが可能となる。また、さらに細胞の中心部に存在する核に局在させた場合には、さらに腫瘍殺傷効果を誘導することが可能となる。本発明に使用する細胞膜透過ペプチドは、細胞膜を透過し細胞内へ内在化する能力を有するアルギニンに富むアミノ酸配列を有する塩基性ペプチドを意味する。このようなペプチドとしては、細胞膜透過能が知られている既知の塩基性ペプチド、たとえばTAT配列番号1、アルギニン3~3残基が連続したアミノ酸配列からなるペプチド、HIV-1Rev34-50配列番号2、FHVCoat35-49配列番号3、BMVGag7-25配列番号4、HTLV-IIRex4-16配列番号5、CCMVGag7-25配列番号6、P22N14-30配列番号7、λN1-22配列番号8、φ21N12-29配列番号9および酵母PRP6129-144配列番号10などが挙げられる。これらのペプチドには、もちろん各起源のタンパク質の対応する配列のアミノ酸を1~10個、好ましくは1~5個、より好ましくは1~3個伸長したものや、アルギニンやリジンを1~20個、好ましくは1~10個、より好ましくは1~5個加えたものも同様に使用することができる。これらのなかでも、細胞膜透過能の点からTAT配列番号1、アルギニン3~3残基が連続したアミノ酸配列からなるペプチド、HIV-1Rev34-50配列番号2、FHVCoat35-49配列番号3、BMVGag7-25配列番号4、HTLV-IIRex4-16配列番号5、CCMVGag7-25配列番号6またはP22N14-30配列番号7が好ましく、TAT配列番号1、アルギニン3~3残基が連続したアミノ酸配列からなるペプチド、HIV-1Rev34-50配列番号2、FHVCoat35-49配列番号3、BMVGag7-25配列番号4またはHTLV-IIRex4-16配列番号5がより好ましい。また、TAT配列番号1またはアルギニン3~13残基が連続したアミノ酸配列からなるペプチドがより効果的に使用でき、核への局在化に優れていることが確認された点からアルギニン3~13残基が連続したアミノ酸配列からなるペプチドが最も好ましい。このアルギニン3~13残基が連続したアミノ酸配列からなるペプチドにおいては、連続するアルギニンの残基数が9~13が好ましく、11が最も好ましい。アルギニン残基が2以下または14以上であると、薬物の導入効率が悪くなる傾向がある。アルギニン3~13残基が連続したアミノ酸配列からなるペプチドは、細胞増殖に影響を及ぼすことなく、また細胞障害性も示さないため、安全な薬剤である。本発明に使用するホウ素化合物としては、従来から粒子線治療に用いられている種々の物を使用することができる。たとえば、ペプチドと結合させることができる官能基、チオール基、水酸基、カルボキシル基、アミノ基、アミド基、アジド基、ハロゲン基F、Cl、Br、Iなど、リン酸基などを有するホウ素含有化合物であれば、本発明のホウ素化合物として使用することができる。そのなかでも、ホウ素原子を一分子に多く含むことからクラスター分子であることが好ましい。具体的なホウ素化合物としては、BPA、BSHなどが挙げられる。本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドは、前述のホウ素化合物に細胞膜透過ペプチドを付加することにより製造することができる。ここで、本明細書において付加するとの記載は、ホウ素化合物と細胞膜透過ペプチドとを、共有結合、ペプチド-ペプチドによる疎水性相互作用、イオン性相互作用イオン結合、水素結合等により結合させることを意味する。結合の方法は、特に限定されるものではないが、ホウ素化合物および細胞膜透過ペプチドそれぞれの活性を損なわない限り、たとえば、システインなどのアミノ酸や他の化合物を介して行なうことができ、細胞膜透過ペプチドとホウ素化合物の間には、たとえば1~20個、または1~10個、または1~3個のアミノ酸残基が挿入されていてもよい。システインを利用する場合には、たとえば反応性のニトロピリジンスルフェニルNPYS基などを用いて様々なホウ素化合物を容易にS-S結合により連結することができる。さらに、ホウ素化合物を結合させるためのシステインと細胞膜透過ペプチドとの間に、リジンなどを介在させることにより、1つのペプチド分子に複数個、たとえば2~8個のホウ素化合物を結合させることができる。細胞膜透過ペプチドは、通常の人工合成法、たとえばペプチドの固相合成法などによって、または一般に市販されている人工合成機を用いて、当業者により容易に製造することができる。たとえば、ペプチド合成において使用する保護ペプチド樹脂担体としては、ベンズヒドリルアミン樹脂、アミノメチル樹脂、4-ベンジルオキシベンジルアルコール樹脂、4-メチルベンズヒドリルアミン樹脂、4-ヒドロキシメチルメチルフェニルアセトアミドメチル樹脂、ポリアクリルアミド樹脂、4-2’,4’-ジメトキシフェニル-ヒドロキシメチルフェノキシ樹脂などが挙げられる。ペプチドの固相合成法において、アミノ酸は、保護基によって分子内のアミノ基を予め保護して用いられる。保護基としては、たとえば、9-フルオレニル-メトキシカルボニルFmoc基、tert-ブチルオキシカルボニルBoc基などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。なお、アミノ酸は、必要に応じて、側鎖の官能基を当該官能基に応じた保護基により保護して用いることができる。なお、本明細書において、アミノ基や側鎖の官能が保護されているアミノ酸を保護アミノ酸という。縮合には、一般的なペプチド合成に用いられる活性化試薬などが用いられる。縮合の際の反応温度は、ペプチドの合成において一般的な温度であればよい。通常、反応温度は、約-20°C~50°Cの範囲から適宜選択される。所望の細胞膜透過ペプチド配列に相当する配列からなるペプチドを合成した後、ホウ素化合物との結合に使用するための官能基を有するアミノ酸、たとえばシステインを縮合させ、ホウ素化合物との結合に使用する官能基を導入することができる。得られた生成物がその分子内に保護基を有する場合、常法にしたがって、たとえば酸処理、アルカリ処理、触媒の存在下での水素気流中での接触還元などにより行なうことができる。なお、保護基の導入と脱保護に関しては、例えば、グリーンズプロテクティブグループスインオーガニックシンセシス第4版ペーターG.M.ワッツPeterGMWutsおよびテオドラ.W.グリーンTheodoraWGreeneGreenesProtectiveGroupsinOrganicSynthesis2006に記載の方法にしたがって行なうこともできる。化合物の製造後、必要に応じて、得られた生成物の単離や精製を行なってもよい。生成物の単離や精製は、例えば、逆相高速液体クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィーなどのクロマトグラフィーによって行なうことができる。つぎに、得られた官能基を導入した細胞膜透過ペプチドにホウ素化合物を導入し、精製し、目的の細胞膜透過型ホウ素ペプチドを得ることができる。たとえば、ホウ素化合物がBSHの場合、ペプチドの固相合成によりアミノ酸を1残基ずつカルボキシル末端側から結合させ、所望の細胞膜透過型ペプチド配列を得た後、必要に応じて、リジン残基を導入し、ニトロピリジンスルフェニルNPYS基などの反応性の側鎖を有するシステイン残基を対応残基数導入する。その後定法にて脱保護および精製したのち純水、または適当な緩衝液または有機溶媒に溶解し、BSHと反応させ、HPLCなどで反応を追跡し、原料ペプチドの消失を確認したのち、分取用HPLCにて目的とする細胞膜透過型BSHペプチドを得ることができる。また、本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドには、有効成分であるホウ素化合物以外に、研究モデルに使用する場合など、細胞内、さらには核内に導入されたことを確認するためのマーカーを含有しても良い。マーカーは、特に限定されるものではなく、たとえば、フルオレセインイソチオシアネート以下、FITCと略称する、ローダミンなどの蛍光色素、およびGFPなどの蛍光タンパク質を使用することができる。さらに、本発明細胞膜透過型ホウ素ペプチドには、有効成分であるホウ素化合物以外に、腫瘍に対する選択性を高めるために、いわゆる腫瘍マーカーを含有させることができる。このような腫瘍マーカーとしては、特に限定されるものではなく、たとえば腫瘍に多く発現しているEGFR上皮成長因子受容体やCD133癌幹細胞マーカーなどといった、癌表面に特異的に多く発現しているマーカーに対して結合するペプチド等のリガンドを使用することができる。本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドは、適当な薬学的に許容され得る賦形剤、担体、溶媒、ゲル形成剤、酸化防止剤、希釈剤、等張化剤、pH安定化剤など、本技術分野において通常用いられている添加剤を配合し、ホウ素製剤とすることができる。これらの添加剤は、通常当業者により適宜選択される。このようなホウ素製剤は、溶液、懸濁液、注射剤、カプセル、ゲル、軟膏、クリーム、エマルジョンなど、種々の剤形に調製することができる。つまり、生理食塩水、等張液や一般臨床で用いられる注射液用の添加剤と共に注射剤とすること、カプセル化しての内服薬やゲル化剤や皮膚科薬剤と混ぜて経皮的導入薬剤などとすることも可能である。本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドは、経静脈的、経動脈的に投与されることが一般的である。その他、内服薬による投与、筋肉注射による投与、経皮的投与なども有効に使用することができる。本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドは、治療に有効な量腫瘍細胞内に蓄積できる濃度および量で投与される。腫瘍組織部において最終的に25ppm以上のホウ素濃度となるように投与することが好ましい。そのような投与量としては、BSH8分子を付加した細胞膜透過ペプチドの場合、0.05~1g/kgを投与することが好ましい。以下、実施例によって、本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドをさらに詳細に説明するが、本発明はその趣旨と適用範囲から逸脱しない限りこれらに限定されるものではない。実施例1~4:BSH-細胞膜透過ペプチドの製造A保護ペプチド樹脂の構築ペプチド自動合成機433A、アプライドバイオシステムAppliedBiosystems社製を用いて添付のソフトにしたがい、固相合成法により1個ずつアミノ酸をカルボキシル末端側から結合させBoc-CysNpys-[ArgPbf]11-樹脂の合成を定法にて行なった。RinkAmideMBHAResin0.34mmol/g、0.25mmolを出発樹脂担体として使用し、通常の9-フルオレニル-メトキシカルボニル以下、Fmoc-と略称するペプチド合成法に使われる各Fmoc-アミノ酸誘導体を原料として、配列にしたがって逐次ペプチド鎖の延長を行った。Fmoc-アミノ酸誘導体を上記ペプチド合成機の反応容器にセットし、合成機に添付されているソフトウェアにしたがって、活性化剤として、1-[ビスジメチルアミノメチレン]-1H-ベンゾトリアゾリウム-3-オキシド-ヘキサフルオロホスフェートHBTU、1-ヒドロキシベンゾトリアゾールHOBtとN-メチルピロリドンに溶解して反応槽に加えて縮合反応させた。得られた樹脂をピペリジン含有N-メチルピロリドン中で緩やかに攪拌してFmoc基を除いて次のアミノ酸誘導体の縮合に進めた。使用したFmocアミノ酸誘導体は、側鎖に官能基のあるFmoc-ArgPbf、Fmoc-LysBoc、Boc-CysNpysを用いた。配列にしたがって、逐次Fmoc-ArgPbfを延長して最終ArgPbf残基の縮合後、最後にBoc-CysNpysを水溶性カルボジイミドを用いて縮合し、相当するBoc-CysNpys-[ArgPbf]11-RinkAmideMBHA保護ペプチド樹脂を得た。引き続き脱保護、精製処理を行った。B脱保護と樹脂からの切り出し得られた保護ペプチド樹脂をトリフルオロ酢酸TFAを用いる定法のTFA/トリイソプロピルシランTIS/H2O95/2.5/2.5、v/v脱保護条件で、室温にて2時間処理し、Nyps以外の脱保護と樹脂からのペプチドの切り離しを同時におこなった。反応液から担体樹脂をろ別した後、TFAを留去した。残渣にエーテルを加えて得られるCysNpys-Arg11-NH2粗生成物の沈殿をろ取し、HPLCおよび質量分析にて生成を確認したのち、つぎのBSHとのジスルフィド形成反応に供した。CCysBSH-Arg11-NH2BSH-11Rの合成Bで得られた、CysNpys-[Arg]11-NH277.9mgを純水24mlに溶解し、BSHNa2B12H11SH;4.2mg、0.83当量/NH2をアルゴン気流中で室温にて攪拌しながら添加した。一昼夜反応後、反応溶液を直接分取精製に供した。得られた粗生成物をHPLC分取装置LC-8A-1、島津製作所製、カラム:ODS30×250mmを用いて0.1トリフルオロ酢酸を含む水-アセトニトリルの系で分取精製し、目的のペプチド誘導体の分画を得、アセトニトリルを留去した後、凍結乾燥粉末とし、目的物であるBSHのペプチド誘導体BSH-11Rと略称する56mgをトリフルオロ酢酸塩として得た純度92.8。構造は質量分析にて確認した。CysBSH-Arg11-NH2分子量:2001.37C69H152B12N46O12S2MS:mz6684mz7065mz7823D[CysBSH]8-Lys7-Arg11-NH28BSH-11Rの合成枝分かれしたBoc-[CysNpys]m-Lysn-Arg11表1保護ペプチド樹脂の構築は、前記AのArg11保護ペプチドの構築後、Fmoc-LysFmocを適宜順次繰り返し縮合させ、さらにBoc-CysNpysを定法に従って縮合させることにより表1に示すような枝分かれ構造を有するペプチドの合成を行った。上記bと同様に脱保護と樹脂からの切り出しを行ない、[CysNpys]8-Lys7-Arg11-NH2を得た。得られた[CysNpys]8-Lys7-Arg11-NH261.8mgを純水3ml、MeOH1.5mlに溶解し、BSH19.8mg、0.9当量/NH2をアルゴン気流中で室温にて攪拌しながら加えて反応させた。5.5時間の反応後、反応溶液を直接、分取精製に供した。上記bと同様に分取精製し、目的物であるBSHのペプチド誘導体8BSH-11Rと略称する15.8mgをトリフルオロ酢酸塩として得た純度97.8。構造は質量分析にて確認した。[CysBSH]8-Lys7-Arg11-NH2分子量:4771.95C132H355B96N67O26S16MS:mz15918mz3989mz4869mz6488E[CysBSH]2-Lys-Arg11-NH22BSH-11Rの合成縮合させるリジンを1つとし、Npys-Cysを2つ付けた保護ペプチドを製造、使用した以外は前記Dと同様にして合成、精製し目的物であるBSHのペプチド誘導体2BSH-11Rを得た純度94.5。[CysBSH]2-Lys-Arg11-NH2分子量:2394.1C78H177B24N49O14S4MS:mz3989F[CysBSH]4-Lys3-Arg11-NH24BSH-11Rの合成縮合させるリジンを2つとし、Npys-Cysを4つ付けた保護ペプチドを製造、使用した以外は前記Dと同様にして合成、精製し目的物であるBSHのペプチド誘導体2BSH-11Rを得た純度92.8。[CysBSH]4-Lys3-Arg11-NH2分子量:3181.4C98H231B48N55O18S8MS:mz3994mz3762実施例5:CysBHS-Tyr-Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg-NH2BSH-TATの製造A保護ペプチド樹脂の構築ペプチド自動合成機433A、アプライドバイオシステムAppliedBiosystems社製を用いて添付のソフトにしたがい、固相合成法により1個ずつアミノ酸をカルボキシル末端側から結合させ保護ペプチド樹脂の合成を定法にて行なった。RinkAmideMBHAResin0.36mmol/g、0.25mmolを出発樹脂担体として使用し、通常Fmoc-ペプチド合成法に使われる各Fmoc-アミノ酸誘導体を原料として、配列にしたがって逐次ペプチド鎖の延長を行った。Fmoc-アミノ酸誘導体を上記ペプチド合成機の反応容器にセットし、合成機に添付されているソフトウェアにしたがって、活性化剤として、HBTU、HOBtとN-メチルピロリドンに溶解して反応槽に加えて縮合反応させた。得られた樹脂をピペリジン含有N-メチルピロリドン中で緩やかに攪拌してFmoc基を除いて次のアミノ酸誘導体の縮合に進めた。使用したFmocアミノ酸誘導体は、側鎖に官能基のあるFmoc-ArgPbf、Fmoc-GlnTrt、Fmoc-LysBoc、Fmoc-TyrOBut、Boc-CysNpysを用いた。配列にしたがって、逐次Fmoc-ArgPbfから延長して最終Boc-CysNpysを水溶性カルボジイミドを用いて縮合し、相当するBoc-CysNpys-TyrOBut-Gly-ArgPbf-LysBoc-LysBoc-ArgPbf-ArgPbf-GlnTrt-ArgPbf-ArgPbf-ArgPbf-RinkAmideMBHA保護ペプチド樹脂を得た。引き続き脱保護、精製処理を行った。B脱保護と樹脂からの切り出し前記実施例1~4のBと同様の方法により脱保護と樹脂からの切り出しを行なった。CCysBSH-Tyr-Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg-NH2BSH-TATの合成Bで得られた、CysNpys-Tyr-Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg-NH280mgと、純水4ml、BSH/2Na8.3mg、0.9当量を使用した以外は、実施例1~4のCと同様の方法により、目的物であるBSHのTATペプチド誘導体BSH-TATと略称する70mgをトリフルオロ酢酸塩として得た純度99.9。構造は質量分析にて確認した。CysBSH-Tyr-Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg-NH2分子量:1826.3C67H136B12N34O12S2MS:mz6100mz4579mz6480比較例1:CysBSH-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-ValBSH-NLSの製造A保護ペプチド樹脂の構築ペプチド自動合成機433A、アプライドバイオシステムAppliedBiosystems社製を用いて添付のソフトにしたがい、固相合成法により1個ずつアミノ酸をカルボキシル末端側から結合させ保護ペプチド樹脂の合成を定法にて行なった。Boc-Val-PAMResin0.5mmol/g、0.5mmolを出発樹脂担体として使用し、通常t-ブトキシカルボニル以下Boc-ペプチド合成法に使われる各Boc-アミノ酸誘導体を原料として、配列にしたがって逐次ペプチド鎖の延長を行った。Boc-アミノ酸誘導体を上記ペプチド合成機の反応容器にセットし、合成機に添付されているソフトウェアにしたがって、活性化剤として、N,N’-ジシクロヘキシルカルボジイミドDCC、HOBtとN-メチルピロリドンに溶解して反応槽に加えて縮合反応させた。得られた樹脂をプログラムにしたがってトリフルオロ酢酸処理によりBoc基を除いて次のアミノ酸誘導体の縮合に進めた。使用したBocアミノ酸誘導体は、側鎖に官能基のあるBoc-ArgTos、Boc-GlnTrt、Boc-LysCl-Z、Boc-CysNpysを用いた。配列にしたがって、逐次Boc-Val樹脂から延長して最終Boc-CysNpysまで縮合し、相当するBoc-CysNpys-Pro-LysCl-Z-LysCl-Z-LysCl-Z-ArgPbf-LysCl-Z-Val-保護ペプチド樹脂を得た。引き続き脱保護、精製処理を行った。B脱保護と樹脂からの切り出し得られた保護ペプチド樹脂を無水フッ化水素を用いる定法のHF-pCresole8:2、v/v脱保護条件で、-2~-5°Cで1時間処理し、Nyps以外の脱保護と樹脂からのペプチドの切り離しを同時におこなった。反応液から担体樹脂をろ別した後、HFを留去した。残渣にエーテルを加えて得られるCysNpys-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-NH2粗生成物の沈殿をろ取し、HPLCおよび質量分析にて生成を確認したのち、つぎのBSHとのジスルフィド形成反応に供した。CCysBSH-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-ValBSH-NLSの合成Bで得られた、CysNpys-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val114mgを純水4mlに溶解し、BSH/2Na15mg、0.9当量をアルゴン気流中で室温にて攪拌しながら加え反応させた。一昼夜反応後、反応溶液を直接分取精製に供した。得られた粗生成物をHPLC分取装置LC-8A-1、島津製作所製、カラム:ODS30×250mmを用いて0.1トリフルオロ酢酸を含む水-アセトニトリルの系で分取精製し、目的のペプチド誘導体の分画を得、アセトニトリルを留去した後、凍結乾燥粉末とし、目的物であるBSHのNLSペプチド誘導体BSH-NLSと略称する23mg10をトリフルオロ酢酸塩として得た純度99.9。構造は質量分析にて確認した。CysBSH-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-NH2分子量:1148.6C43H93B12N15O9S2MS:mz5761試験例1:細胞内へのBSH導入60mmディッシュにて培養したヒト神経膠芽腫細胞株U87deltaEGFR1×106個細胞に対して終濃度がそれぞれ0.01、0.1、1および10μMとなるように、BSH、実施例1BSH-11R、実施例5BSH-TATおよび比較例1BSH-NLS:陰性対照のホウ素ペプチド各群n=6をそれぞれ培養上清中に添加し、37度、恒温槽で培養した。添加後12時間に免疫染色を行なった。同時に核染色も行い、さらに導入されたBSHを抗マウスBSH抗体にて染色し、共焦点レーザー顕微鏡にて観察した。濃度1μMでの結果を図1Aに示す。aはヘキストによる核1の染色青、bはホウ素化合物2の染色赤のグレースケールデータである。aとbをcの重ね合わせ図と見比べ、さらに図1Bを参照すると分かるように、実施例1および5のホウ素ペプチドの多くは細胞内へと導入された。細胞内導入能をもたないNLSを付けた比較例1のホウ素ペプチドは、細胞内に導入されなかった。これにより実施例1および5の本発明の細胞膜透過型ホウ素ペプチドは、細胞内にBSHを局在化できることが証明された。つまり、従来のBSHとは異なり、細胞内でホウ素中性子捕捉反応を呈し、非常に高い抗腫瘍効果をもたらすことが期待できる。また、各群における添加後12時間での細胞内に導入されたホウ素濃度を、ICP-AES誘導結合プラズマ発光分光分析装置にて測定した。結果を図2に示す。BSHのみおよび比較例1BSH-NLSでは、細胞膜に接着しているホウ素を検出していると考えられる。したがって、BSHのみ、比較例1BSH-NLSでは、濃度を上げても、10~20ng10B/106cellsにとどまっていたが、細胞膜透過作用を有する11RおよびTATを付けた群、すなわち実施例1および実施例5においては、10μMで適用した場合、細胞内ホウ素濃度は、150~220ng10B/106cellsという値になった。以上より、実施例1BSH-11Rおよび実施例5BSH-TATは、通常のBSHと比較して10倍以上の細胞内導入量を示し図2、導入されたBSHはすべて細胞内に局在していた図1Aおよび図1B。試験例2:ペプチド1分子中のBSHの分子数の影響実施例2~42BSH-11R、4BSH-11R、8BSH-11Rのホウ素ペプチドを、60mmディッシュにて培養したヒト神経膠芽腫細胞株U87deltaEGFR1×106個細胞に対して終濃度が0.1、1、10μMとなるように投与した。添加後12時間で共焦点レーザー顕微鏡にて観察した図3濃度1μM群。実施例4については、添加後、0.5、3、6および24時間と経時的に観察した図4A濃度1μM群。図3において、aはBSH2緑、bはaのBSH緑にf-アクチン3赤の染色を重ねたもの、cはbにヘキストによる核1の染色青を重ねたもののグレースケールデータである。図3のaとbおよびcを見比べることにより、実施例2および3では、添加後12時間でいずれも細胞内へと導入され核へと強く局在していたことがわかる。また、図4Aにおいて、aがBSH2染色緑、ヘキストによる核1染色青およびアクチン3染色赤を重ねたもののグレースケールデータであり、bがBSH2染色緑のみのグレースケールデータである。図4Aのaのアクチンによる細胞輪郭と核を示すスケッチを示す図4Bを参考にaおよびbを見比べると、添加の0.5時間後には細胞質へと導入され、この時点では核へはあまり導入されていないが、その後、3時間後には核へと局在化したことがわかる。つまり、導入されたBSHは、経時的に細胞質より核へと局在していき、最終的には多くのBSHが核へと局在している。試験例1と同様に、濃度10μMで適用した場合の細胞内のホウ素濃度を比較すると、細胞外膜へ接着しているBSHは、10~20ng10B/106cells、実施例22BSH-11Rは250~350ng10B/106cells、実施例34BSH-11Rは500~600ng10B/106cells、実施例48BSH-11Rは5000ng10B/106cellsと高度の集積を認めた図5。試験例3:ヌードマウス雌性、8~10週齢、清水実験材料に対してヒト神経膠芽腫細胞株U87デルタEGFRを3×105個、ブレグマより外側2mm、前方1mm、深さ3mmの位置に定位的に細胞移植し、14日後にマウス尾静脈より8BSH-11R3.5mgの8BSH-11Rを含むPBS200μLを投与し、6時間後および24時間後に脳組織を摘出し、免疫染色を行い8BSH-11Rの局在をみたところ、腫瘍組織および腫瘍細胞への特異的な集積を認めた図6。図6において、aはヒトGFAPによる脳腫瘍染色赤とヘキストによる核染色青、bはBSH緑、cはaとbを重ねたものであり、a、bおよびcを見比べると、投与後6時間で腫瘍組織へと集積していたホウ素化合物BSHは、24時間経過しても、腫瘍組織および腫瘍細胞内に留まっていた。8BSH-11R投与6時間後の免疫染色した腫瘍中心部、腫瘍周縁部および正常部を比較した共焦点レーザー顕微鏡写真データを図7に示す。図7aがヒトGFAPによる脳腫瘍染色赤とヘキストによる核染色青、bはBSH緑、cはaとbを重ねたものである。bにおいて、明るく見えるところがBSHの導入された部分であり、aと見比べcを参照すると、腫瘍中心部においてBSHが細胞質に多く局在し、腫瘍周縁部では核へと局在していることが良く観察される。正常部においては、BSHはほとんど存在せず、腫瘍組織特異的に送達されたことが確認される。試験例4:細胞毒性評価コンフルエント状態まで培養したヒト神経膠芽腫細胞株U87deltaEGFRを回収し、96ウェルプレートに1000細胞/ウェルで撒いた。翌日、ホウ素製剤を終濃度10μM、100μMになるようにそれぞれに加えた。投与後、1、2、3、4日後に各プレートに対して、CellProliferationReagentロッシュ社を10μl/ウェルで加えた。37°Cで1時間インキュベートしたのち、MICROPLATEREADERMTP300、コロナ電気で各サンプルの吸光度450nmおよび690nmを測定した。結果を図8に示す。比較例1、実施例1および実施例5のいずれのホウ素製剤にも、細胞に対する明らかな毒性は認められない。参考例1:細胞内局在による細胞の核へのエネルギー付与率の違い細胞内でのホウ素分布が、核へのエネルギー付与率にどのような影響を与えるかを、シミュレーションにより解析した。シミュレーションの条件は、つぎのとおりである。1核内に対するホウ素10と中性子との反応による直接エネルギー付与のみを考える。2細胞は半径5μmの球と仮定する。3核も球とし、その中心は細胞の中心と一致すると仮定する。4細胞膜、核膜の実効厚さホウ素が分布する厚さは、0.1μmと仮定する。5熱中性子フルエンスを1.00E13cm2、平均ホウ素濃度を1ppmとする。このとき、平均吸収線量は0743Gyとなる。6核膜については、半径2μm、2.5μm、3μmの3通りについてシミュレーションを行なった。結果は、細胞全体に均一にB10が分布している場合、細胞核でのエネルギー付与は、細胞全体のエネルギー付与の5.4核半径2μm、10.9核半径2.5μm、19.4核半径3μmとなり、核の体積に応じたものである。一方、核内や核膜に分布している場合、細胞全体でみれば同じ線量でも核でのエネルギー付与は均一に分布している場合に比べて非常に大きいことが分かる。均一分布の場合の核へのエネルギー付与を100とした場合の各分布条件での核へのエネルギー付与率を図9に示す。このグラフにおいて、たとえば、核半径2μmの場合、細胞膜のみに分布する群を1とすると、核のみに分布する群は、57.6倍の核へのエネルギー付与が起こり、核へのダメージも同様に57.6倍となる図9。"