スフィンゴ糖脂質を定量する方法であって、aスフィンゴ糖脂質を含む検体を水溶液に溶解または分散し、こうして得たスフィンゴ糖脂質含有液にスフィンゴ脂質セラミドデアシラーゼを添加してその中に含まれるスフィンゴ糖脂質を加水分解により脱アシル化して、リゾスフィンゴ糖脂質を遊離させるステップ、および、b該リゾスフィンゴ糖脂質を質量分析法で測定することにより、スフィンゴ糖脂質を定量するステップを含んでなるものである、定量方法。検体が、被験者から採取された腎臓、肝臓その他の臓器の組織、血液、髄液その他の体液、尿、皮膚、筋肉、及び間質組織からなる群から選択されるいずれかから得られたものである、請求項1の定量方法。スフィンゴ糖脂質が、グルコセレブロシド、グロボトリアオシルセラミド、ガラクトセレブロシド、スルファチド、ガングリオシドGM1およびガングリオシドGM2からなる群から選択されるものである、請求項1または2の定量方法。スフィンゴ糖脂質が、グルコセレブロシドまたはグロボトリアオシルセラミドである、請求項1または2の定量方法。スフィンゴ脂質セラミドデアシラーゼが、シュードモナス属由来のSCDase、シェワネラ属由来のSCDase、ストレプトミセス属由来のSCDase、および非醗酵性グラム陰性桿菌AI-2由来のSCDaseからなる群から選択されるものである、請求項1~4のいずれかの定量方法。質量分析方法がタンデム質量分析法MS/MSである、請求項1~5のいずれかの定量方法。質量分析方法が高速液体クロマトグラフタンデム質量分析LC/MS/MSである、請求項1~6のいずれかの定量方法。請求項1~7のいずれかの定量方法を用いて、スフィンゴ糖脂質を定量することによる、スフィンゴ糖脂質の蓄積を病因とする疾患の診断方法。スフィンゴ糖脂質の蓄積を病因とする疾患が、ゴーシェ病、ファブリー病、クラッベ病、異染性ロイコジストロフィー、GM1-ガングリオシドーシスおよびGM2-ガングリオシドーシスからなる群から選択されるものである、請求項8の診断方法。スフィンゴ糖脂質の蓄積を病因とする疾患が、ゴーシェ病またはファブリー病である、請求項8の診断方法。リゾスフィンゴ糖脂質含有液の調製方法であって、aスフィンゴ糖脂質を含む検体を水溶液に溶解または分散し、こうして得たスフィンゴ糖脂質含有液を超音波処理するステップ、b超音波処理した該液を凍結するステップ、c凍結した該液を融解するステップ、および、d融解した該液にスフィンゴ脂質セラミドデアシラーゼを添加して該液中に含まれるスフィンゴ糖脂質を加水分解により脱アシル化して、リゾスフィンゴ糖脂質を遊離させるステップを含んでなるものである、調製方法。検体が、被験者から採取された腎臓、肝臓その他の臓器の組織、血液、髄液その他の体液、尿、皮膚、筋肉、及び間質組織からなる群から選択されるいずれかから得られたものである、請求項11の調製方法。スフィンゴ糖脂質が、グルコセレブロシド、グロボトリアオシルセラミド、ガラクトセレブロシド、スルファチド、ガングリオシドGM1およびガングリオシドGM2からなる群から選択されるものである、請求項11又は12の調製方法。スフィンゴ糖脂質が、グルコセレブロシドまたはグロボトリアオシルセラミドである、請求項11又は12の調製方法。スフィンゴ脂質セラミドデアシラーゼが、シュードモナス属由来のSCDase、シェワネラ属由来のSCDase、ストレプトミセス属由来のSCDase、および非醗酵性グラム陰性桿菌AI-2由来のSCDaseからなる群から選択されるものである、請求項11~14のいずれかの調製方法。スフィンゴ糖脂質の定量方法であって、a請求項11~15のいずれかで調製したリゾスフィンゴ糖脂質含有液を、超音波処理するステップ、b超音波処理した該液に含まれるリゾスフィンゴ糖脂質を質量分析法で測定することにより、スフィンゴ糖脂質を定量するステップを含んでなるものである、定量方法。質量分析方法が、タンデム質量分析法MS/MSである、請求項16の定量方法。質量分析法が、高速液体クロマトグラフタンデム質量分析LC/MS/MSである、請求項16の定量方法。請求項16~18のいずれかの定量方法を用いて、スフィンゴ糖脂質を定量することによる、スフィンゴ糖脂質の蓄積を病因とする疾患の診断方法。スフィンゴ糖脂質の蓄積を病因とする疾患が、ゴーシェ病、ファブリー病、クラッペ病、異染性ロイコジストロフィー、GM1-ガングリオシドーシスおよびGM2-ガングリオシドーシスからなる群から選択されるものである、請求項19の診断方法。スフィンゴ糖脂質の蓄積を病因とする疾患が、ゴーシェ病またはファブリー病である、請求項19の診断方法。リゾスフィンゴ糖脂質含有液の製造方法であって、aスフィンゴ糖脂質を含む材料を水溶液に溶解または分散し、こうして得たスフィンゴ糖脂質含有液を超音波処理するステップ、b超音波処理した該液を凍結するステップ、c凍結した該液を融解するステップ、および、d融解した該液にスフィンゴ脂質セラミドデアシラーゼを添加して該液中に含まれるスフィンゴ糖脂質を加水分解により脱アシル化して、リゾスフィンゴ糖脂質を遊離させるステップを含んでなるものである、製造方法。上記背景の下で、本発明の目的は、スフィンゴ糖脂質の蓄積を病因とする遺伝病において、原因となるスフィンゴ糖脂質、特にグルコセレブロシドおよびグロボトリアオシルセラミドについて、簡便で、経済的で、更に高感度な定量法を提供することである。上記目的に向けた研究において、本発明者らは、スフィンゴ糖脂質をスフィンゴ脂質セラミドデアシラーゼSCDaseで加水分解してそのリゾ体とした後、このリゾ体を質量分析法で分析することにより、高感度にスフィンゴ糖脂質を定量できることを見出した。更に、本発明者らは、スフィンゴ糖脂質を、SCDaseを用いて加水分解する際に、スフィンゴ糖脂質を含む溶液又は懸濁液を超音波処理して一旦凍結した後、融解してからSCDaseを添加して酵素反応に付すること、および、こうして得たリゾスフィンゴ糖脂質含有液を質量分析法により分析する際に、予め該リゾスフィンゴ糖脂質含有液を超音波処理することにより、スフィンゴ糖脂質の定量値が安定し、検出感度が更に上昇することを見出した。本発明はこれらの知見に基づき完成されたものである。すなわち、本発明は以下を提供する。[1]スフィンゴ糖脂質を定量する方法であって、aスフィンゴ糖脂質を含む検体を水溶液に溶解または分散し、こうして得たスフィンゴ糖脂質含有液にスフィンゴ脂質セラミドデアシラーゼを添加してその中に含まれるスフィンゴ糖脂質を加水分解により脱アシル化して、リゾスフィンゴ糖脂質を遊離させるステップ、および、b該リゾスフィンゴ糖脂質を質量分析法で測定することにより、スフィンゴ糖脂質を定量するステップを含んでなるものである、定量方法、[2]検体が、被験者から採取された腎臓、肝臓その他の臓器の組織、血液、髄液その他の体液、尿、皮膚、筋肉、及び間質組織からなる群から選択されるいずれかから得られたものである、上記[1]の定量方法、[3]スフィンゴ糖脂質が、グルコセレブロシド、グロボトリアオシルセラミド、ガラクトセレブロシド、スルファチド、ガングリオシドGM1およびガングリオシドGM2からなる群から選択されるものである、上記[1]または[2]の定量方法、[4]スフィンゴ糖脂質が、グルコセレブロシドまたはグロボトリアオシルセラミドである、上記[1]または[2]の定量方法、[5]スフィンゴ脂質セラミドデアシラーゼが、シュードモナス属由来のSCDase、シェワネラ属由来のSCDase、ストレプトミセス属由来のSCDase、および非醗酵性グラム陰性桿菌AI-2由来のSCDaseからなる群から選択されるものである、上記[1]~[4]のいずれかの定量方法、[6]質量分析方法がタンデム質量分析法MS/MSである、上記[1]~[5]のいずれかの定量方法、[7]質量分析方法が高速液体クロマトグラフタンデム質量分析LC/MS/MSである、上記[1]~[6]のいずれかの定量方法、[8]上記[1]~[7]のいずれかの定量方法を用いて、スフィンゴ糖脂質を定量することによる、スフィンゴ糖脂質の蓄積を病因とする疾患の診断方法、[9]スフィンゴ糖脂質の蓄積を病因とする疾患が、ゴーシェ病、ファブリー病、クラッベ病、異染性ロイコジストロフィー、GM1-ガングリオシドーシスおよびGM2-ガングリオシドーシスからなる群から選択されるものである、上記[8]の診断方法、[10]スフィンゴ糖脂質の蓄積を病因とする疾患が、ゴーシェ病またはファブリー病である、上記[8]の診断方法、[11]リゾスフィンゴ糖脂質含有液の調製方法であって、aスフィンゴ糖脂質を含む検体を水溶液に溶解または分散し、こうして得たスフィンゴ糖脂質含有液を超音波処理するステップ、b超音波処理した該液を凍結するステップ、c凍結した該液を融解するステップ、および、d融解した該液にスフィンゴ脂質セラミドデアシラーゼを添加して該液中に含まれるスフィンゴ糖脂質を加水分解により脱アシル化して、リゾスフィンゴ糖脂質を遊離させるステップを含んでなるものである、調製方法、[12]検体が、被験者から採取された腎臓、肝臓その他の臓器の組織、血液、髄液その他の体液、尿、皮膚、筋肉、及び間質組織からなる群から選択されるいずれかから得られたものである、上記[11]の調製方法、[13]スフィンゴ糖脂質が、グルコセレブロシド、グロボトリアオシルセラミド、ガラクトセレブロシド、スルファチド、ガングリオシドGM1およびガングリオシドGM2からなる群から選択されるものである、上記[11]又は[12]の調製方法、[14]スフィンゴ糖脂質が、グルコセレブロシドまたはグロボトリアオシルセラミドである、上記[11]又は[12]の調製方法、[15]スフィンゴ脂質セラミドデアシラーゼが、シュードモナス属由来のSCDase、シェワネラ属由来のSCDase、ストレプトミセス属由来のSCDase、および非醗酵性グラム陰性桿菌AI-2由来のSCDaseからなる群から選択されるものである、上記[11]~[14]のいずれかの調製方法、[16]スフィンゴ糖脂質の定量方法であって、a上記[11]~[15]のいずれかで調製したリゾスフィンゴ糖脂質含有液を、超音波処理するステップ、b超音波処理した該液に含まれるリゾスフィンゴ糖脂質を質量分析法で測定することにより、スフィンゴ糖脂質を定量するステップを含んでなるものである、定量方法、[17]質量分析方法が、タンデム質量分析法MS/MSである、上記[16]の定量方法、[18]質量分析法が、高速液体クロマトグラフタンデム質量分析LC/MS/MSである、上記[16]の定量方法、[19]上記[16]~[18]のいずれかの定量方法を用いて、スフィンゴ糖脂質を定量することによる、スフィンゴ糖脂質の蓄積を病因とする疾患の診断方法、[20]スフィンゴ糖脂質の蓄積を病因とする疾患が、ゴーシェ病、ファブリー病、クラッペ病、異染性ロイコジストロフィー、GM1-ガングリオシドーシスおよびGM2-ガングリオシドーシスからなる群から選択されるものである、上記[19]の診断方法、[21]スフィンゴ糖脂質の蓄積を病因とする疾患が、ゴーシェ病またはファブリー病である、上記[19]の診断方法、[22]リゾスフィンゴ糖脂質含有液の製造方法であって、aスフィンゴ糖脂質を含む材料を水溶液に溶解または分散し、こうして得たスフィンゴ糖脂質含有液を超音波処理するステップ、b超音波処理した該液を凍結するステップ、c凍結した該液を融解するステップ、および、d融解した該液にスフィンゴ脂質セラミドデアシラーゼを添加して該液中に含まれるスフィンゴ糖脂質を加水分解により脱アシル化して、リゾスフィンゴ糖脂質を遊離させるステップを含んでなるものである、製造方法。本発明によれば、簡便に、経済的に、更に高感度にスフィンゴ糖脂質、特にグルコセレブロシドおよびグロボトリアオシルセラミドを定量することができる。さらに、本発明によれば、該定量に用いるリゾスフィンゴ糖脂質含有液を提供することができる。特に、本発明によるスフィンゴ糖脂質の診断法は、簡便かつ経済的であるので、特定の被験者の診断のみならず、大規模な診断、例えば新生児の大規模スクリーニングに使用することができる。また、特定の患者を定期的に診断することにより、病状を経時的に把握することも可能である。更には、酵素補充療法等の治療の前後で患者を診断することにより、その治療の効果の程度を知ることもできる。本発明において、定量の対象となるスフィンゴ糖脂質は、SCDaseで加水分解することによりリゾスフィンゴ糖脂質を生じるものである限り、特に限定はなく、微生物、植物、動物等の生物由来のものの他、人為的例えば、工業的に合成されたもののいずれでもよい。本発明におけるスフィンゴ糖脂質の好ましい具体例は、グルコセレブロシド、グロボトリアオシルセラミド、ガラクトセレブロシド、スルファチド、ガングリオシドGM1およびガングリオシドGM2である。グルコセレブロシドはゴーシェ病の患者、グロボトリアオシルセラミドはファブリー病の患者、ガラクトセレブロシドはクラッベ病の患者、スルファチドは異染性ロイコジストロフィーの患者、ガングリオシドGM1はGM1-ガングリオシドーシスの患者、およびガングリオシドGM2はGM2-ガングリオシドーシスの患者の体内でそれぞれ蓄積することが知られているスフィンゴ糖脂質である。従って、これらのスフィンゴ糖脂質を定量することにより、スフィンゴ糖脂質の蓄積を病因とする疾患の患者またはその保因者を特定することができる。従って、本発明のスフィンゴ糖脂質の定量法は、スフィンゴ糖脂質の蓄積を病因とする疾患、特にゴーシェ病、ファブリー病、クラッベ病、異染性ロイコジストロフィー、GM1-ガングリオシドーシス、GM2-ガングリオシドーシスの診断法として使用することができる。本発明において、スフィンゴ糖脂質を含む検体またはスフィンゴ糖脂質を含む材料とは、スフィンゴ糖脂質を含む微生物、植物、及び動物ヒトを含むの組織等、並びに人為的例えば、工業的に合成されたスフィンゴ糖脂質を含む試料のいずれをも包含するものである。ここで、動物の組織等とは、腎臓、肝臓その他の臓器の組織、血液、髄液その他の体液、尿、皮膚、筋肉、間質組織等をいう。本発明によるスフィンゴ糖脂質の蓄積を病因とする疾患の診断は、被験者から、腎臓、肝臓その他の臓器の組織、血液、髄液その他の体液、尿、皮膚、筋肉、間質組織等を検体として採取し、これらの中に含まれるスフィンゴ糖脂質を定量して行う。採取の簡便さから、特に血液、尿が検体として採取される。臓器の組織を検体として採取する場合、臓器に針を刺してその一部を採取する針生検が一般に用いられるが、これに限らず、切開生検、摘出生検等、他の方法も用いることができる。定量の結果、得られた定量値が異常な高値を示した場合、被験者はこれら疾患の患者若しくは保因者と推定又は診断できる。本発明において、スフィンゴ糖脂質を含む検体または材料をSCDaseにより処理をするとき、予め検体または材料を水溶液中に溶解または分散ないし懸濁させて、スフィンゴ糖脂質含有液とするが、これをそのままSCDase処理してもよく、または超音波処理して一旦凍結させたものを融解してから、SCDase処理してもよい。このとき、検体または材料を溶解または分散ないし懸濁させる水溶液は、好ましくは緩衝液であり、また、そのpHは好ましくはpH55~65であり、より好ましくはpH58~62であり、特に好ましくは約pH60である。またこのとき用いられる緩衝液は、特に限定はないが、好ましくは酢酸緩衝液またはリン酸緩衝液である。また、ここでスフィンゴ糖脂質含有液とは、スフィンゴ糖脂質が緩衝液中に完全に溶解した状態のみならず、スフィンゴ糖脂質が緩衝液中に分散ないし懸濁等した状態の液体をも含む。該スフィンゴ糖脂質含有液中のスフィンゴ糖脂質の濃度としては、スフィンゴ糖脂質または分散ないし懸濁してスフィンゴ糖脂質含有液が調製出来る限り特に限定はないが、好ましくは、4~2000ng/mLの濃度である。また、スフィンゴ糖脂質含有液の超音波処理は、緩衝液中にスフィンゴ糖脂質を十分に溶解等すなわち、溶解または分散ないし懸濁等させる目的で行うものであるので、この目的が達成でき且つスフィンゴ糖脂質が物理的な分解を受けない限り、いかなる条件で行ってもよく、例えば、超音波処理装置ソニケーター、超音波洗浄器例えば、USK3Rアズワン株式会社等を用いて行うことができる。超音波処理を行う際のスフィンゴ糖脂質含有液の温度は、該液の液相状態が維持されかつスフィンゴ糖脂質が変性等しない限り特に限定はないが、通常、常温例えば、10°C~40°Cで行うことが好ましい。また、超音波処理の時間としては、上記超音波処理の目的が達成される限り特に限定はないが、超音波洗浄器を用いた場合の好ましい時間として、例えば15分~60分、より好ましくは20分~40分が挙げられる。超音波処理後のスフィンゴ糖脂質含有液の凍結は、該液が完全に凍結しかつ内容物であるスフィンゴ糖脂質が変性しない限り特にその条件に限定はない。好ましい凍結温度としては、例えば-20°C~-180°C、より好ましくは-60°C~-100°Cである。また、凍結速度に関しては、例えば、特に管理することなく、所定の凍結温度に設定された冷凍庫に常温のスフィンゴ糖脂質含有液を入れ、そのまま凍結させることなどが挙げられる。凍結したスフィンゴ糖脂質含有液の融解は、内容物であるスフィンゴ糖脂質が変性などの影響を受けない限りその条件に特に限定はないが、例えば、室温に放置することにより実施することができる。本発明において用いるスフィンゴ脂質セラミドデアシラーゼSCDaseとしては、スフィンゴ糖脂質中のアミド結合を特異的に加水分解して脂肪酸を遊離させ、スフィンゴ糖脂質をリゾスフィンゴ糖脂質とすることができる活性を有する限り特に限定はないが、シュードモナス属例えば、シュードモナスエスピー.TK-4由来のSCDase、シェワネラ属例えば、シェワネラアルガNS-589、シェワネラアルガG8由来のSCDase、ストレプトミセス属例えば、ストレプトミセスエスピーH-37FERMP-13822由来のSCDase、非醗酵性グラム陰性桿菌AI-2由来のSCDase等が好適に利用できる。このうち、シュードモナス属由来のSCDaseが好ましい。SCDaseによる加水分解は、常法により実施することができ、例えば、反応温度としては、36°C~40°Cの範囲が好ましく、反応時間としては、10時間~20時間の範囲が好ましい。該酵素反応は、反応後のリゾスフィンゴ糖脂質含有液を加熱して、酵素を失活させることにより、停止させることができる。加熱は、例えば90°C以上の温度を、3~10分間維持することにより、実施することができる。本発明において、SCDase処理をして得られるリゾスフィンゴ糖脂質含有液は、質量分析法により分析をする前に、超音波処理してもよい。超音波処理は、リゾスフィンゴ糖脂質を十分に溶解等させる目的で行うものであるので、この目的が達成でき且つリゾスフィンゴ糖脂質が物理的な分解を受けない限り、いかなる条件で行ってもよく、前記と同様にして実施することができる。本発明において、リゾスフィンゴ糖脂質の分析に用いる質量分析法に関して特に限定はないが、タンデム型質量分析法MS/MSが好適に用いられる。実施例に記載の高速液体クロマトグラフタンデム質量分析法LC/MS/MSはその一例である。高速液体クロマトグラフを行う場合、カラムの選択、その他の各種設定は、常法に従い、適宜行うことができる。また、タンデム型質量分析法MS/MSも常法に従い実施することができ、例えば、リゾスフィンゴ糖脂質をイオン化し親イオン、これをコリジョンガスと衝突させることにより解裂させて各種の娘イオンを生じさせ、このうちの特定の娘イオンのみを選択的に検出することにより、実施することができる。イオン化の手法としては、例えば、エレクトロイオンスプレーイオン化、大気圧化学イオン化、サーモスプレーイオン化などのソフトイオン化法を挙げることができるが、このうち、エレクロイオンスプレーイオン化法を好適に用いることができる。本発明における質量分析法を用いたスフィンゴ糖脂質の定量は、既知の濃度のスフィンゴ糖脂質を含む標準品をSCDase処理し、これを質量分析法により分析してリゾスフィンゴ糖脂質のイオンクロマトグラムのピーク面積を求め、次いでスフィンゴ糖脂質の濃度と該ピーク面積との相関を示す検量線を描き、これに検体または材料を質量分析法で分析して得られたリゾスフィンゴ糖脂質のイオンクロマトグラムのピーク面積を内挿することにより、検体または材料中に含まれるスフィンゴ糖脂質の量を算出して行う。但し、これに限らず、ピーク面積に換えてイオンクロマトグラムのイオン強度の最大値等をパラメーターとして使用することもできる。本発明において、リゾスフィンゴ糖脂質またはリゾ体というときは、スフィンゴ糖脂質のアミド結合を加水分解することにより得られる、スフィンゴ糖脂質から脂肪酸を除いた脱アシル体のことをいう。以下、実施例を参照して本発明を更に詳細に説明するが、本発明が実施例に限定されることは意図しない。グロボトリアオシルセラミド標準溶液の作成16022gのタウロデオキシコール酸ナカライテスクを200mLの50mM酢酸緩衝液pH60に溶解し、022μmメンブランフィルターでろ過し08w/vタウロデオキシコール酸溶液TDC溶液を調整した。100μgのブタ赤血球由来グロボトリアオシルセラミドナカライテスクを、1mLのTDC溶液に溶解し、100μg/mLグロボトリアオシルセラミド溶液GL3標準溶液を調整した。このGL3標準溶液を、TDC溶液を用いて段階希釈し、2000、1000、400、200、40、20、4ng/mLの各GL3標準溶液を調製した。50μLの各GL3標準溶液を、500μL容量PP製試験管アシストに分取し、超音波洗浄器USK3R、アズワン株式会社、主な仕様槽容量:59L、発振周波数:40kHz、発振回路:他励発振方式、発振子:BLTボルト締めランジュバン、出力:120Wを用いて超音波処理を室温25°Cで30分間行った後、80°Cで約15時間凍結させた。グロボトリアオシルセラミド標準溶液のSCDase処理5μL25mUのPseudomonassp由来のSCDaseSphingolipidceramideNdeacylaseタカラバイオを995μLのTDC溶液と混合して2XSCDase溶液とした。上記の各GL3標準溶液50μLを室温に放置して融解後、これに50μLの2XSCDase溶液を加えて混合し、37°Cで約15時間静置し、グロボトリアオシルセラミドを加水分解してリゾ体グロボトリアオシルスフィンゴシンとした。反応後の溶液を90°Cで5分間加熱してSCDaseを失活させた。マウス腎臓からの総脂質の抽出4個体のマウスC57Black6N、24週齢、雄から組織腎臓を採取し、クロロホルム:メタノール=2:1溶液を組織湿重量10mgに対し約1mL添加し、ホモジナイズした後に、遠心分離2000rpm、5分間、室温した。遠沈管に上清を移し、4mLの注射用水を加え、30秒間激しく混和した後に、遠心分離した。下層有機層を回収し、500μLずつガラス試験管に分注し、遠心濃縮機で乾固した。乾固した試料を、測定時まで20°C以下で保存した。これを総脂質画分とした。総脂質画分のSCDase処理上記の総脂質画分に1mLの08TDC溶液を添加して溶解し、これを1.5mLチューブEppendorf社に移し、超音波処理を、超音波洗浄器USK3R、アズワン株式会社を用いて、室温25°Cで、30分間行った。これを08TDC溶液を用いて、4倍希釈した後に、500μL容量PP製試験管アシストに50μL分取し、80°Cの冷凍庫に移しそのまま一晩約15時間保存して、凍結させた。凍結させた試料を室温に放置して融解後、50μLの2XSCDase溶液を加えて混合後、37°Cで一晩反応約15時間させた。反応後の溶液を90°Cで5分間加熱して酵素を失活させた。これを条件1群とした。またこのとき、上記の超音波処理と凍結融解を行わないでSCDase処理をしたものを条件2群とした。SCDase処理は、それぞれの群について、独立して6検体について行った。タンデム質量分析法タンデム質量分析装置として、イオンスプレー部、三つの四重極部Q1Q2Q3及び検出部から構成される、API2000ABI社を用いた。分析条件は、Q1mz7863、Q3mz2823とし、また陽イオンモードとした。この装置に導入された測定試料は、連続的にイオンスプレー部でイオン化される。イオン化された試料は、まずQ1へ導入される。導入された測定試料イオンは、Q1で特定のイオンmz7863のみが選択的にQ2へ導入される。Q2へ導入されたイオンはコリジョンガス窒素と衝突して解裂し、グロボトリアオシルスフィンゴシンを親イオンとする各種の娘イオンが生じる。生じた娘イオンは、次にQ3に導入される。Q3では、特定の娘イオンmz2823のみを、選択的に検出部へ導入することで、グロボトリアオシルスフィンゴシン由来のイオンが特異的に検出される。Q1のmz7863は、グロボトリアオシルスフィンゴシン分子量:7859が1価の陽イオン化した親イオンを、Q3のmz2823は、グロボトリアオシルスフィンゴシンがQ2で解裂して生じた糖鎖部分を欠くスフィンゴシン骨格部分がイオン化した娘イオンを、選択的に検出する条件である。高速液体クロマトグラフタンデム質量分析法LCMSMS法による検量線の作成SCDase処理した標準溶液に、100μLのアセトニトリルを添加して混合後、超音波処理を、超音波洗浄器USK3R、アズワン株式会社を用いて、室温25°Cで、30分間行った。超音波処理後の標準溶液を、HPLC用300μL容量バイアル島津製作所に分注し、LCMSMS法により分析をした。LCMSMS法は、タンデム質量分析装置としてAPI2000ABI社、高速液体クロマトグラフィー装置としてLC20島津製作所を用いて実施した。高速液体クロマトグラフィーには、高速液体クロマトグラフィーカラムとして、ODSCadenzaCDC18、20mmX750mm、Imtaktを用い、予めカラム温度をカラムオーブンで40°Cとし、カラムをメタノール:01ホルミル酸水溶液75:25の混合液で平衡化した。該カラムに超音波処理した上記の標準溶液を20μL添加した。流速を02mL/分とし、試料添加後メタノール:01ホルミル酸水溶液75:25を2分間流した後、メタノール:01ホルミル酸水溶液85:15の混合液に切り替え、次いでメタノールの濃度比を直線的に4分間かけて95まで上昇させ、最後に100メタノールを2分間流した。上記条件にてカラムを通過した溶液を、タンデム質量分析装置へ連続的に導入した。タンデム質量分析装置の測定条件は、Q1mz7863、Q3mz2823とし、陽イオンモードで行うことで、グロボトリアオシルスフィンゴシンリゾ体に由来するイオン強度を測定し、イオンクロマトグラムを作成した。測定は各標準溶液について2回行った。得られたイオンクロマトグラムから、グロボトリアオシルセラミドGL3濃度に対する、グロボトリアオシルスフィンゴシン由来イオンのピーク面積を算出し、検量線を作成した。高速液体クロマトグラフタンデム質量分析法LCMSMS法による検体の分析条件1群については、SCDase処理した試料に、100μLのアセトニトリルを添加して混合後、超音波洗浄器USK3R、アズワン株式会社を用いて超音波処理を、室温25°Cで、30分間実施した。超音波処理後の試料を、HPLC用300μL容量バイアル島津製作所に分注し、LCMSMS法により分析をした。LCMSMS法による分析は、上記の検量線の作成と同様の方法で行い、グロボトリアオシルスフィンゴシンリゾ体に由来するイオン強度を測定し、イオンクロマトグラムを作成した。これと上記で作成した検量線を用いて、検体中に含まれるグロボトリアオシルセラミドの濃度を算出した。一方、条件2群については、超音波処理せずに上記の分析を行った。測定は各群の各検体についてそれぞれ2回行い、平均値を測定値とした。高速液体クロマトグラフタンデム質量分析法LCMSMS法による分析結果グロボトリアオシルセラミド標準溶液2000ngmLを用いて得た、グロボトリアオシルスフィンゴシンリゾ体のイオンクロマトグラムを図4に示す。横軸は保持時間分を、縦軸はイオン強度cps:count/secondである。グロボトリアオシルスフィンゴシン由来のピークは保持時間368分で最大強度となった。横軸とピークに囲まれた領域をピーク面積として算出した。グロボトリアオシルセラミドを段階希釈して調製した標準溶液を用いて作成した検量線を図5に示す。このとき検量線の定量範囲である4~2000ng/mLの範囲でQuadratic法による回帰式を求めたところ、この回帰式に対する測定値の相関係数は0999と算出され、ピーク面積とグロボトリアオシルセラミドの濃度に極めて強い相関関係が見いだされた。この検量線を用いて、マウス腎臓由来総脂質中に含まれるグロボトリアオシルセラミドを定量した。SCDase処理時に超音波処理および凍結融解をし、且つ質量分析法による分析時質量分析時に超音波処理をした群条件1群では、グロボトリアオシルセラミドの6回の定量値は、2772~2868ngの範囲であり、標準偏差は3236、相対標準偏差は115であった表1上段。一方、条件2群の6回の定量値は、2540~3072ngの範囲であり、標準偏差は1975、相対標準偏差は714であった表1下段。条件1群、条件2群のいずれにおいても、検体中に含まれるグロボトリアオシルセラミドを定量することができた。また、条件1群では、条件2群よりも、よりばらつきの少ない定量値を得ることができた表1上段。以上の結果は、検体中に含まれるグロボトリアオシルセラミドをスフィンゴ脂質セラミドデアシラーゼで加水分解してそのリゾ体とした後に、該リゾ体を質量分析法で分析することにより、グロボトリアオシルセラミドを定量できることを示すものである。特に、SCDase処理時に超音波処理および凍結融解をし、且つ質量分析法による分析の際質量分析時に予め検体を超音波処理をすることにより、質量分析法を用いて、4~2000ng/mLの範囲で検体中に含まれるグロボトリアオシルセラミドの量を極めて正確に定量することができることを示すものである。