式式中、R1はC1-6アルコキシ-C1-4-アルキル、C1-6直鎖アルキル、C3-6分枝鎖アルキルおよび-C3-6シクロアルキルから選択され;R2はHおよびC1-6直鎖アルキルから選択され;R3は-0-3置換または非置換ピロリジニルであり;R4は-C-CH2OH、-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、-C-非置換モルホリニルおよび3個までのアルキル基で置換されている-C-モルホリニルから選択され;R5は置換または非置換ベンジルから選択され、ここで、置換基はCl、F、BrおよびIから選択され;R6は3個までのハロゲン原子で置換されているフェニルから選択される。の化合物。R1がC1-6直鎖アルキル、C3-6分枝鎖アルキルおよび-C3-6シクロアルキルから選択される、請求項1に記載の化合物。R1がC1-6アルコキシ-C1-4-アルキルである、請求項1に記載の化合物。R1がC3-6分枝鎖アルキルから選択され;R2がHであり;R3が-1-3置換ピロリジニルであり;R4が-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、3個までのアルキル基で置換されている-C-モルホリニルから選択され;R5がベンジルまたは2個までのフルオロ原子で置換されているベンジルであり;R6が2個までのハロゲン原子で置換されているフェニルから選択される、請求項1に記載の化合物。R1がt-ブチルであり;R3が--フルオロ-ピロリジニルであり;R4が-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、-C-26-ジメチルモルホリニルから選択され;R5がベンジルまたは1個のフルオロ原子で置換されているベンジルであり;R6が2個までのフルオロ原子で置換されているフェニルから選択される、請求項2に記載の化合物。R3が-CH2-3-フルオロ-ピロリジニルであり;R4が-C-2-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、-C-26-ジメチルモルホリニルである、請求項4または5に記載の化合物。R3がであり;R4が-C-CH-OHおよびから選択される、請求項6に記載の化合物。R5がであり;R6がである、請求項7に記載の化合物。R4が:から選択される、請求項1~8のいずれかに記載の化合物。次のものから選択される、請求項1に記載の化合物:N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-26-ジメチルモルホリン-4-カルボキサミド;N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-26-ジメチルモルホリン-4-カルボキサミド;-N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチルテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド;-N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチルテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド;-N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-2-ヒドロキシプロパンアミド;および-N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-2-ヒドロキシプロパンアミド;およびこれらの化合物のいずれかの薬学的に許容される塩類。およびそれらの化合物の薬学的に許容される塩類から選択される、式の化合物。式:式中、R1はC1-6アルコキシ-C1-4-アルキル、C1-6直鎖アルキル、C3-6分枝鎖アルキルおよび-C3-6シクロアルキルから選択され;R3は-0-3置換または非置換ピロリジニルまたは3個までのアミノおよびハロから選択される基で置換されているC3-5アルキルであり;R4は-C-CH2OH、-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、-C-非置換モルホリニルおよび3個までのアルキル基で置換されている-C-モルホリニルから選択され;R5は置換または非置換ベンジルから選択され、ここで、置換基はCl、F、BrおよびIから選択され;R6は3個までのハロゲン原子で置換されているフェニルから選択される。の化合物。R1がC1-6アルコキシ-C1-4-アルキル、C3-6分枝鎖アルキルおよびC3-6シクロアルキルから選択され;R3が-0-3置換ピロリジニルまたは-CH2-CH2-CH-CH2Fであり;R4が-C-CH2OH、-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、-C-非置換モルホリニルおよび3個までのアルキル基で置換されている-C-モルホリニルから選択され;R5が置換または非置換ベンジルから選択され、ここで、置換基はCl、F、BrおよびIから選択され;R6が3個までのハロゲン原子で置換されているフェニルから選択される、請求項12に記載の化合物。R1がメトキシ置換C1-4アルキルである、請求項12または13に記載の化合物。R1が2-メトキシ-2-プロピルである、請求項14に記載の化合物。R2がHであり;R3が-1-3置換ピロリジニルまたは-CH2-CH2-CH-CH2Fであり;R4が-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OHおよび3個までのアルキル基で置換されている-C-モルホリニルから選択され;R5がベンジルまたは2個までのフルオロ原子で置換されているベンジルであり;R6が2個までのハロゲン原子で置換されているフェニルから選択される、請求項12~15のいずれかに記載の化合物。R1が2-メトキシ-2-プロピルであり;R3が--フルオロ-ピロリジニルまたは-CH2-CH2-CH-CH2Fであり;R4が-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OHおよび-C-26-ジメチルモルホリニルから選択され;R5がベンジルまたは1個のフルオロ原子で置換されているベンジルであり;R6が2個までのフルオロ原子で置換されているフェニルから選択される、請求項16に記載の化合物。R3が-1-3-フルオロ-ピロリジニルまたは-CH2-CH2-CH-CH2Fであり;R4が-C-2-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OHおよび-C-26-ジメチルモルホリニルである、請求項17に記載の化合物。R3がであり;R4が-C-CH-OH、から選択され;R5がであり;R6がである、請求項18に記載の化合物。R4が:から選択される、請求項12~19のいずれかに記載の化合物。次のものからなる群から選択される、請求項12に記載の化合物:およびその薬学的に許容される塩類。治療有効量の請求項1~21のいずれかに記載の化合物および薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。さらに少なくとも1種の付加的癌処置剤を含む、請求項22に記載の組成物。付加的癌処置剤がイリノテカン、トポテカン、ゲムシタビン、イマチニブ、トラスツマブ、5-フルオロウラシル、ロイコボリン、カルボプラチン、シスプラチン、ドセタキセル、パクリタキセル、テザシタビン、シクロホスファミド、ビンカアルカロイド、アントラサイクリン系、リツキシマブおよびトラスツマブから成る群から選択される、請求項23に記載の組成物。哺乳動物患者における少なくとも一部KSPにより仲介される障害を処置する方法であって、該処置を必要とする哺乳動物患者に治療有効量の請求項1~24のいずれかに記載の化合物または医薬組成物を投与することを含む、方法。障害が細胞増殖性疾患である、請求項25に記載の方法。細胞増殖性疾患が癌である、請求項26に記載の方法。癌が肺および気管支;前立腺;乳;膵臓;結腸および直腸;甲状腺;胃;肝臓および肝内胆管;腎臓および腎盂;膀胱;子宮体;子宮頸;卵巣;多発性骨髄腫;食道;急性骨髄性白血病;慢性骨髄性白血病;リンパ性白血病;骨髄球性白血病;脳;口腔および咽頭;喉頭;小腸;非ホジキンリンパ腫;黒色腫;および絨毛結腸腺腫から成る群から選択される、請求項27に記載の方法。付加的癌処置剤がイリノテカン、トポテカン、ゲムシタビン、イマチニブ、トラスツマブ、5-フルオロウラシル、ロイコボリン、カルボプラチン、シスプラチン、ドセタキセル、パクリタキセル、テザシタビン、シクロホスファミド、ビンカアルカロイド、アントラサイクリン系、リツキシマブおよびトラスツマブから成る群から選択される、請求項28に記載の方法。哺乳動物患者におけるKSPを阻害する方法であって、該患者に有効なKSP阻害量の請求項1~21のいずれかに記載の化合物を投与することを含む、方法。治療に使用するための、請求項1~21のいずれかに記載の化合物。化合物を細胞増殖性障害の処置に使用する、請求項31に記載の化合物。細胞増殖性障害が肺および気管支;前立腺;乳;膵臓;結腸および直腸;甲状腺;胃;肝臓および肝内胆管;腎臓および腎盂;膀胱;子宮体;子宮頸;卵巣;多発性骨髄腫;食道;急性骨髄性白血病;慢性骨髄性白血病;リンパ性白血病;骨髄球性白血病;脳;口腔および咽頭;喉頭;小腸;非ホジキンリンパ腫;黒色腫;および絨毛結腸腺腫から成る群から選択される癌である、請求項32に記載の方法。フッ素化ピロリジンの製造方法であって、式のtrans-34-二置換保護ピロリジンとフッ素化剤を反応させて、式:の化合物を得て、式の化合物を酸化して、式:のアルデヒドを得ることを含む、方法。さらに式の化合物を式:式中、R1はC1-6アルコキシ-C1-4-アルキル、C1-6直鎖アルキル、C3-6分枝鎖アルキルおよび-C3-6シクロアルキルから選択され;R2はHおよびC1-6直鎖アルキルから選択され;R5は置換または非置換ベンジルから選択され、ここで、置換基はCl、F、BrおよびIから選択され;R6は3個までのハロゲン原子で置換されているフェニルから選択されるの化合物で還元的アミノ化して、式:の化合物を得る工程を含む、請求項34に記載の方法。さらに式の化合物を式のエポキシドから、該エポキシドを式式中、RはHまたは場合により置換されていてよいアルキルまたはアリール基であり、MはLi、MgXおよびZnXから選択される金属基であり、ここで、Xはハロゲンである。の有機金属反応材で開環させることにより合成する工程を含む、請求項34に記載の方法。有機金属反応材が式中、XはCl、BrまたはIである。である、請求項36に記載の方法。本発明の態様の詳細な記載本発明の化合物は、式:式中、R1はC1-6アルコキシ-C1-4アルキル、C1-6直鎖アルキル、C3-6分枝鎖アルキルおよびC3-6シクロアルキルから選択され;R2はHおよびC1-6直鎖アルキルから選択され;R3は-CH2-ピロリジニルのような-0-3-置換または非置換ピロリジニル、でありR4は-C-CH2OH、-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、-C-非置換モルホリニルおよび3個までのアルキル基で置換されている-C-モルホリニルから選択され;R5は置換または非置換ベンジルから選択され、ここで、置換基はCl、F、BrおよびIから選択され;R6は3個までのハロゲン原子で置換されているフェニルから選択される。の化合物またはその薬学的に許容される塩、エステルまたはプロドラッグを含む。式の化合物において、R1はしばしば分枝鎖アルキルまたはアルコキシアルキルであり、R2はしばしばHである。好ましい態様において、式の化合物は次の異性体である:これらの化合物において、R5はしばしばベンジルであり、それは場合によりベンジル基のフェニル環を3個までのハロゲン基で置換されていてよい。R5は非置換でよい;それが置換されているとき、それはしばしば1個または2個のフッ素原子で置換されている。R6は典型的に場合により置換されていてよいフェニル環である;ある態様において、それは1~2個のハロ基で置換されているフェニルである。好ましい態様において、R6はフルオロフェニルまたはジフルオロフェニル、特に25-ジフルオロフェニルである。これらの式の化合物のある態様において、R1はC1-6直鎖アルキル、C3-6分枝鎖アルキルおよび-C3-6シクロアルキルから選択される。本発明の特定の態様は:R1がC1-6アルコキシ-C1-4アルキル、好ましくはメトキシ置換C1-4アルキルから選択され;R2がHであり;R3が-1-3置換ピロリジニルであり;R4が-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、3個までのアルキル基で置換されている-C-モルホリニルから選択され;R5がベンジルまたは2個までのフルオロ原子で置換されているベンジルであり;R6が2個までのハロゲン原子で置換されているフェニルから選択される式の化合物を提供する。本発明のさらに好ましい態様は:R1がC3-6分枝鎖アルキルから選択され;R2がHであり;R3が-1-3置換ピロリジニルであり;R4が-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、3個までのアルキル基で置換されている-C-モルホリニルから選択され;R5がベンジルまたは2個までのフルオロ原子で置換されているベンジルであり;R6が2個までのハロゲン原子で置換されているフェニルから選択される式の化合物を提供する。本発明のさらに好ましい態様は:R1がt-ブチルであり;R3が--フルオロ-ピロリジニルであり;R4が-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、-C-26-ジメチルモルホリニルから選択され;R5がベンジルまたは1個のフルオロ原子で置換されているベンジルであり;R6が2個までのフルオロ原子で置換されているフェニルから選択される式の化合物を提供する。本発明のさらに好ましい態様は:R1がメトキシ-C1-4アルキルであり;R3が--フルオロ-ピロリジニルであり;R4が-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、-C-26-ジメチルモルホリニルから選択され;R5がベンジルまたは1個のフルオロ原子で置換されているベンジルであり;R6が2個までのフルオロ原子で置換されているフェニルから選択される式の化合物を提供する。他の好ましい態様は、R3が-1-3-フルオロ-ピロリジニルであり;R4が-C-2-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、-C-26-ジメチルモルホリニルである式の化合物を提供する。特に好ましい態様において、R4は:から選択される。これらのR4基はラセミ体でも光学活性体でもよい;好ましい態様において、R4は、ここに記載する絶対立体化学を有する光学活性基である。典型的に、それは一つのエナンチオマーであり、その逆のエナンチオマーを実質的に有さず、すなわち、R4基は少なくとも90およびしばしば少なくとも95のエナンチオマー過剰率を有する。本発明のさらに別の好ましい態様は:R3が-4-フルオロピロリジン-3-イルメチル基であり;R4が-C-CH-OH、から選択される、式の化合物を提供する。特に好ましい態様において、R4は:から選択される。本発明のさらに好ましい態様は:R5がであり;R6がである、式の化合物を提供する。他の態様において、本発明は、式:式中、R1はC1-6アルコキシ-C1-4-アルキル、C1-6直鎖アルキル、C3-6分枝鎖アルキルおよび-C3-6シクロアルキルから選択でき;R3は-0-3置換または非置換ピロリジニルまたは3個までのアミノおよびハロから選択される基で置換されているC3-5アルキルであり;R4は-C-CH2OH、-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、-C-非置換モルホリニルおよび3個までのアルキル基で置換されている-C-モルホリニルから選択され;R5は置換または非置換ベンジルから選択され、ここで、置換基はCl、F、BrおよびIから選択され;R6は3個までのハロゲン原子、好ましくはFまたはClまたはその両方で置換されているフェニルから選択される。の化合物を提供する。式の化合物において、R5またはR6が置換されているとき、好ましい置換基はFおよびClである。式の化合物において、R1はしばしばメトキシのようなアルコキシ基で置換されている分枝鎖アルキルであり、R2はしばしばHである。好ましい態様において、式の化合物は、下に示す絶対立体化学を有するこの異性体であり得る:式の化合物の特に好ましい態様において、R4は:から選択される。好ましくは、これらの基は光学活性であり、示す絶対立体化学を有する。本発明のさらに別の好ましい態様は、R3がである、式の化合物を提供する。これらのR3基はラセミ体でも光学活性体でもよい;好ましい態様において、R3は、ここに記載する絶対立体化学を有する光学活性基である。典型的に、それは一つのエナンチオマーであり、その逆のエナンチオマーを実質的に有さず、すなわち、R3基は少なくとも90およびしばしば少なくとも95のエナンチオマー過剰率を有する。式の化合物において、R5はしばしばベンジルであり、それは場合によりベンジル基のフェニル環を3個までのハロゲン基で置換されていてよい。R5は非置換でよい;それが置換されているとき、それはしばしば1個または2個のフッ素原子で置換されている。式の化合物において、R6は典型的に場合により置換されていてよいフェニル環であり;ある態様において、それは1~2個のハロ基で置換されているフェニルである。好ましい態様において、R6はフルオロフェニルまたはジフルオロフェニル、特に25-ジフルオロフェニルである。これらの式の化合物のある態様において:R1はC1-6アルコキシ-C1-4-アルキル、C3-6分枝鎖アルキルおよびC3-6シクロアルキルから選択され;R3は-4-フルオロピロリジン-3-イルメチル基のような-0-3置換ピロリジニル基または好ましくはである-CH2-CH2-CH-CH2Fであり;R4は-C-CH2OH、-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、-C-非置換モルホリニルおよび3個までのアルキル基で置換されている-C-モルホリニルから選択され;R5は置換または非置換ベンジルから選択され、ここで、置換基はCl、F、BrおよびIから選択され;R6は3個までのハロゲン原子で置換されているフェニルから選択される。式の化合物のある態様において、R1はメトキシ置換C1-4アルキルである。これらの化合物の好ましい態様において、R1は2-メトキシ-2-プロピルである。式の化合物において、R3は置換ピロリジニルを含み得る;例えば、それは例えば-4-フルオロピロリジン-3-イルメチル基のような-1-2置換ピロリジニルである。ピロリジニルは環の任意の位置で結合してよく、典型的に炭素原子で、および好ましくは窒素原子を1位として番号付けしたとき3位で結合する。ピロリジニル基はハロ、低級アルキルおよび低級アルコキシのような基で置換できる。好ましくは、ピロリジニル環は、環炭素原子を少なくとも1個のハロで、一般的にFで置換されている;加えて、それは場合により低級アルキル、典型的にMeまたはEtで置換されてよく、場合により低級アルキルはN上にある。上記の式の化合物の全ての好ましい態様において、R3はのような-CH2-CH2-CH-CH2Fまたは-1-2置換ピロリジニル、であり、ここで、基-1-2置換ピロリジニルは、例えば:であり得る。好ましくは、ピロリジニル基はここに示す絶対立体化学配置を有し、すなわち、それは、式中、RがH、Me、Et、イソプロピルまたはn-プロピルである-4-フルオロピロリジン-3-イルメチル基である。式の化合物の好ましい態様において、R4は-C-CH-OH、から選択される。特にこれらの化合物の好ましい態様において、R4は:から選択される。また好ましくはこれらの化合物において、R5はであり;このような態様のいくつかにおいて、R6はである。本発明の特に好ましい態様は、次のものから選択される式またはの化合物を提供する:N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-26-ジメチルモルホリン-4-カルボキサミド;N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-26-ジメチルモルホリン-4-カルボキサミド;-N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチルテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド;-N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチルテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド;-N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-2-ヒドロキシプロパンアミド;および-N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-2-ヒドロキシプロパンアミド。本発明の他の特に好ましい態様は、次のものから選択される式またはの化合物:およびそれらの化合物の薬学的に許容される塩類を提供する。本発明の他の面は、治療有効量の式またはの化合物および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。本発明のこの面の好ましい態様は、さらに少なくとも1種の付加的癌処置剤を含む組成物を提供する。さらに好ましい態様で提供されるのは、付加的癌処置剤がイリノテカン、トポテカン、ゲムシタビン、イマチニブ、トラスツマブ、5-フルオロウラシル、ロイコボリン、カルボプラチン、シスプラチン、ドセタキセル、パクリタキセル、テザシタビン、シクロホスファミド、ビンカアルカロイド、アントラサイクリン系、リツキシマブおよびトラスツマブから成る群から選択される、組成物である。本発明のさらに別の面で提供されるのは、哺乳動物患者における少なくとも一部KSPにより仲介される障害の処置方法であって、当該処置を必要とする哺乳動物患者に治療有効量の式またはの化合物を含む組成物を投与することを含む、方法である。好ましい態様は、哺乳動物患者における少なくとも一部KSPにより仲介される障害の処置方法であって、当該処置を必要とする哺乳動物患者に、治療有効量の上記式またはの化合物のいずれかの態様の化合物および少なくとも1種の付加的癌処置剤を含む組成物を投与することを含む、方法である。本発明のこの面の好ましい態様は、哺乳動物患者における、細胞増殖性疾患である、少なくとも一部KSPにより仲介される障害の処置方法である;好ましくは細胞増殖性疾患は癌である。本発明のこの面のさらに好ましい態様は上記の細胞増殖性疾患の処置方法を提供し、ここで、細胞増殖性疾患は、肺および気管支;前立腺;乳;膵臓;結腸および直腸;甲状腺;胃;肝臓および肝内胆管;腎臓および腎盂;膀胱;子宮体;子宮頸;卵巣;多発性骨髄腫;食道;急性骨髄性白血病;慢性骨髄性白血病;リンパ性白血病;骨髄球性白血病;脳;口腔および咽頭;喉頭;小腸;非ホジキンリンパ腫;黒色腫;および絨毛結腸腺腫から成る群から選択される癌である。本発明のこの面のさらに別の好ましい態様は、付加的癌処置剤がイリノテカン、トポテカン、ゲムシタビン、イマチニブ、トラスツマブ、5-フルオロウラシル、ロイコボリン、カルボプラチン、シスプラチン、ドセタキセル、パクリタキセル、テザシタビン、シクロホスファミド、ビンカアルカロイド、アントラサイクリン系、リツキシマブおよびトラスツマブから成る群から選択される方法を提供する。この面の特に好ましい態様は、哺乳動物患者においてKSPを阻害する方法であって、該患者に有効なKSP阻害量のここに記載する態様のいずれかに従う式またはの化合物を投与することを含む、方法を提供する。ある態様において、本方法は上記式またはの化合物;例えば:R1がC1-6直鎖アルキル、C3-6分枝鎖アルキルおよび-C3-6シクロアルキルから選択され;R2がHおよびC1-6直鎖アルキルから選択され;R3が-0-3置換または非置換ピロリジニルであり;R4が-C-CH2OH、-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、-C-非置換モルホリニルおよび3個までのアルキル基で置換されている-C-モルホリニルから選択され;R5が置換または非置換ベンジルから選択され、ここで、置換基はCl、F、BrおよびIから選択され;R6が3個までのハロゲン原子で置換されているフェニルから選択される、式の化合物を使用する。当該方法の対象は一般的にヒトであり、典型的にこれらの方法の開始前に当該処置が必要であると診断されている。他の好ましい態様は、患者に有効なKSP阻害量の上記態様のいずれかに従う式またはの化合物を投与することを含む、方法を提供する。ある態様において、本方法は:R1がC3-6分枝鎖アルキルから選択され;R2がHであり;R3が-1-3置換ピロリジニルであり;R4が-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、3個までのアルキル基で置換されている-C-モルホリニルから選択され;R5がベンジルまたは少なくとも2個のフルオロ原子で置換されているベンジルであり;R6が2個までのハロゲン原子で置換されているフェニルから選択される、式の化合物を使用する。さらに特に好ましい態様は:R1がt-ブチルであり;R3が--フルオロ-ピロリジニルであり;R4が-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、-C-26-ジメチルモルホリニルから選択され;R5がベンジルまたは1個のフルオロ原子で置換されているベンジルであり;R6が2個までのフルオロ原子で置換されているフェニルから選択される、式の化合物を投与することを含む、方法を提供する。さらに好ましい態様は:R1が2-メトキシ-2-プロピルであり;R3が--フルオロ-ピロリジニルまたは-CH2-CH2-CH-CH2Fであり;R4が-C-テトラヒドロフラニル、-C-CH-OH、-C-26-ジメチルモルホリニルから選択され;R5がベンジルまたは1個のフルオロ原子で置換されているベンジルであり;R6が2個までのフルオロ原子で置換されているフェニルから選択される、式の化合物を投与することを含む方法を提供する。さらに別の特に好ましい態様は、癌のような状態の処置のために式またはの化合物を投与する方法を含む。本方法は、上記態様のいずれかに従う化合物を使用でき:R3がであり;R4が-C-CH-OH、から選択され;R5がであり;R6がである、式またはの化合物を含む。上記処置方法の特に好ましい態様は、哺乳動物患者におけるKSPの阻害方法であって、該患者に有効なKSP阻害量の次のものから選択される式の化合物を投与することを含む、方法を提供する:N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-26-ジメチルモルホリン-4-カルボキサミド;N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-26-ジメチルモルホリン-4-カルボキサミド;-N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチルテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド;-N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチルテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド;-N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-2-ヒドロキシプロパンアミド;および-N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-2-ヒドロキシプロパンアミド。他の特に好ましい態様は、哺乳動物患者におけるKSPを阻害する方法であって、該患者に有効量なKSP阻害量の次のものから選択される式またはの化合物を投与することを含む、方法を提供する:またはこれらの化合物の一つの薬学的に許容される塩。他の面において、本発明は、ある式またはの化合物およびおよびその合成のための重要な中間体の製造方法を提供する。本明細書のスキーム2は、上記のような化合物のための好ましいピロリジン環部分を形成する当該方法の一つを記載する。このこのフッ素化ピロリジンの合成法は、下記のとおり、式のtrans-34-二置換ピロリジンをフッ素化して、式のcis-フッ素化ビニルピロリジン化合物を得て、式の化合物のオレフィンを酸化して、式のアルデヒドを得ることを含む:これらの変換はラセミ化合物または光学活性化合物で行うことができる;ある態様において、式またはまたはの化合物は光学活性体であり、ここに示す絶対立体化学を、少なくとも90のエナンチオマー過剰率で示す。式~の化合物において、RはHまたは場合により置換されていてよいC1-C6アルキルまたはアリールであり、PGは脂肪族窒素原子で使用するのに適当な保護基である。ある態様において、RはHであり、式の化合物を、例えば、被保護3-ピロリンのエポキシドから、該エポキシドとグリニャール試薬の反応により製造できる。式のtrans-ヒドロキシ基を、キラル中心の反転を達成するためのSN2交換を提供する任意の適当な試薬を使用して、式またはHF-ピリジンのようなフルオライド塩を、本反応条件に不活性な適当な溶媒中、アルキルまたはC1-C6ペルフルオロアルキルスルホニルフルオライドのようなアリールスルホニルフルオライドと共に使用して、立体化学反転を伴い、ヒドロキシルをFに変換できる。式の化合物のビニル性基を、四酸化オスミウムおよび過ヨウ素酸ナトリウムでの処理またはオゾンの使用のような種々の慣用法を使用してアルデヒドに酸化し、式の化合物を得ることができる。この変換の方法は当分野で既知である。次いで、式の化合物を、ここに記載する還元的アミノ化反応;または当該アルデヒド類および所望の標的化合物に適当な求核性炭素基を使用する当分野で既知の種々の求核性付加反応を含む種々の方法により式の化合物に取り込むことができる。一つの態様において、式の化合物を、スキーム3に示すとおり還元的アミノ化により式の化合物に結合させて、下に示す式の化合物を提供する。R3がHである式の化合物は、保護を必要とする遊離アミンまたはヒドロキシルのような基を含むならば、場合により保護されている。これらの反応および中間体で使用する適当な保護基は、アミド類およびカルバメート類を含む。アミド類およびカルバメート類は、一般式-C-L-Aまたは-O-であり、Aは場合により置換されていてよいアルキルまたはアリールである;またはLが結合であるとき、AはHであり得るのものである。ある態様において、この方法は、さらに式の化合物を式:式中、R1はC1-6アルコキシ-C1-4アルキル、C1-6直鎖アルキル、C3-6分枝鎖アルキルおよび-C3-6シクロアルキルから選択され;R2はHおよびC1-6直鎖アルキルから選択され;R5は置換または非置換ベンジルから選択され、ここで、置換基はCl、F、BrおよびIから選択され;R6は3個までのハロゲン原子で置換されているフェニルから選択される。の化合物で還元的アミノ化して、式:の化合物を得ることを含む。ある態様において、前記合成方法のいずれも、式のエポキシドを、該エポキシドを式式中、RはHまたは場合により置換されていてよいアルキルまたはアリール基であり、MはLi、MgXおよびZnXから選択される金属基であり、ここで、Xはハロゲンである。の有機金属反応材で開環して、式の化合物を得る、式の化合物の合成を含む。この工程について、好ましい有機金属反応材は:式中、XはCl、BrまたはIである。である。それ故に、本発明は、上記式およびの新規中間体、ならびに式またはの化合物の製造のためのこれらの中間体の使用方法を提供する。これらの方法で使用するおよび製造される化合物はラセミ体でよく、または少なくとも1個のキラル中心を有するいずれの化合物も、適宜単一エナンチオマーまたは単一ジアステレオマーに分割してよい。本発明において、好ましくは式またはの化合物を製造するために単一エナンチオマーで使用するために、式またはの化合物の2個のエナンチオマーを分割することがある。ある態様において、式またはの化合物をラセミ体で製造し、次いでキラルクロマトグラフィーまたは他の慣用の手段で分割して、好ましくは本質的にそのエナンチオマーがない、光学活性化合物を得る。好ましい態様において、式またはの化合物は光学活性体であり、ここに記載する絶対立体化学である。この態様のいくつかにおいて、それは逆のエナンチオマーを実質的に含まない。代表的本発明の化合物本発明の範囲内の具体的化合物を表1および実験の章に例示する。B定義および大要上記のとおり、本発明は、一部新規置換トリアゾール化合物に関する。ここで使用する用語は単に特定の態様を述べる目的であり、本発明の範囲を限定しないことは当然である。本明細書でおよび特許請求の範囲で、単数表現は、文脈から他の解釈が必要でない限り複数も含むことは注意すべきである。本明細書および添付する特許請求の範囲において、次の意味を有すると定義する多くの用語をについて述べる:ここで使用するアルキルまたは直鎖アルキルは、1~6個の炭素原子およびより好ましくは1~3個の炭素原子を有する一価飽和脂肪族ヒドロカルビル基に関する。本用語はメチル、エチル、n-プロピル、n-ペンチルなどのような基により例示される。ここで使用する用語分枝鎖アルキルは、3~6個の炭素原子を有する一価飽和分枝鎖アルキル基に関する。本用語はi-ブチル、i-プロピル、t-ブチルなどのような基により例示される。シクロアルキルは、3~6個の炭素原子を有し、3個以上の炭素原子が互いに環状構造を形成するように結合しているアルキル基を意味する。説明的例はシクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基およびシクロヘキシル基を含む。ここで使用するアルコキシアルキルは、少なくとも1個のアルコキシ基で置換されているアルキル基を意味する。特にことわらない限り、アルコキシアルキル基は最大10個の炭素原子をアルコキシ基に有し、最大10個の炭素原子をアルキル基に有する。それは、基本骨格にアルキル基を介して結合する。いくつかの例では、これらの基を、例えばC1-C6アルコキシ基で置換された1~4個の炭素原子を有するアルキル基を意味するC1-6アルコキシ-C1-4-アルキルのようにアルコキシ基および/またはアルキル基中の炭素原子数に従い記載する。適当なアルコキシアルキル基はメトキシメチル;メトキシエチル;エトキシメチル;エトキシエチル;メトキシプロピル;およびメトキシ-イソプロピルを含む。ハロまたはハロゲンはフルオロ、クロロ、ブロモおよび/またはヨードを意味し、好ましくはフルオロまたはクロロである。ここで使用する生物学的活性は、実施例12~14のいずれかに概説したアッセイの少なくとも1種で試験したときおよび、少なくともその一つの例で定義したとおり、阻害濃度を意味する。ここで使用する用語薬学的に許容される塩類は、式またはの化合物の非毒性酸塩類またはアルカリ土類金属塩類を意味する。これらの塩類は、式またはの化合物の最終の単離および精製中にインサイチュでまたは別途塩基または酸と適当な有機または無機酸または塩基をそれぞれ反応させることにより、製造できる。代表的塩類は次のものを含むが、これらに限定されない:酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、ジグルコン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、グルコヘプト酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、2-ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、2-ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、3-フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩およびウンデカン酸塩。また、塩基性窒素含有基を、アルキルハライド類、例えばメチル、エチル、プロピルおよびブチルの塩化物、臭化物およびヨウ化物;ジメチル、ジエチル、ジブチルおよびジアミルの硫酸エステルのような硫酸ジアルキル、長鎖ハライド類、例えばデシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリルの塩化物、臭化物およびヨウ化物、ベンジルおよびフェネチルの臭化物のようなアラルキルハライド類などのような試薬で4級化できる。それにより、水または油可溶性または分散性生成物を得る。薬学的に許容される酸付加塩類の製造に用い得る酸類の例は、塩酸、硫酸およびリン酸のような無機酸類およびシュウ酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、コハク酸およびクエン酸のような有機酸類を含む。塩基付加塩類は、式またはの化合物の最終単離および精製中にインサイチュでまたは別途カルボン酸基と適当な薬学的に許容される金属カチオンの水酸化物、炭酸塩または重炭酸塩またはアンモニアまたは有機1級、2級または3級アミンのような塩基を反応させることにより、製造できる。薬学的に許容される塩類は、アルカリ金属およびアルカリ土類金属に基づくカチオン、例えばナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アルミニウム塩類など、ならびにアンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミンなどを含むが、これらに限定されないアンモニウム、4級アンモニウムおよびアミンカチオンを含むが、これらに限定されない。塩基付加塩類の形成に有用な他の代表的有機アミン類は、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジンなどを含む。ここで使用する用語薬学的に許容されるエステルは、インビボで加水分解可能なエステル類を意味し、ヒト体内で分解して親化合物、その塩または薬学的に活性な代謝物を遊離するものを含む。適当なエステル基は、例えば、薬学的に許容される脂肪族カルボン酸類、特にアルカン酸、アルケン酸、シクロアルカン酸およびアルカンジオイック酸由来のものを含む。特定のエステル類の代表例は、ギ酸エステル類、酢酸エステル類、プロピオン酸エステル類、酪酸エステル類、アクリル酸エステル類およびエチルコハク酸エステル類を含むが、これらに限定されない。ここで使用する用語薬学的に許容されるプロドラッグは、合理的な医学的判断の範囲内で、ヒトおよび下等動物組織と接触させる使用に、合理的な利益/リスク比に釣り合い、過度の毒性、刺激、アレルギー応答などがなく適当であり、その意図する使用に有用である本発明の化合物のプロドラッグ、ならびに可能であるならば本発明の化合物の双性イオン形態を意味する。用語プロドラッグは、インビボで急速に、血中の加水分解により変換されて、例えば上記式の親化合物または薬学的に活性な代謝物を生じる化合物を意味する。THiguchiandVStellaProdrugsasNovelDeliverySystemsVol14oftheACSSymposiumSeriesおよびEdwardBRocheedBioreversibleCarriersinDrugDesignAmericanPharmaceuticalAssociationandPergamonPress1987に議論されており、これらのいずれも引用により本明細書に包含させる。ここで使用する抗癌剤または癌の処置用医薬は、例示のためだけであるが、アポトーシス誘発剤;ポリヌクレオチド類;ポリペプチド類;薬物;生物学的模倣剤;アルカロイド類;アルキル化剤;抗腫瘍抗生物質;代謝拮抗剤;ホルモン類;白金化合物;抗癌剤、毒素および/または放射性核種とコンジュゲートしたモノクローナル抗体;生物学的応答調節剤;養子免疫療法剤;造血増殖因子;腫瘍細胞分化誘発剤;遺伝子治療剤;アンチセンス治療剤およびヌクレオチド類;腫瘍ワクチン;血管形成阻害剤などを含む。多くの他の薬剤が当業者の専門に十分に入る。上に定義した全ての置換基において、置換基とそれらについての置換基を定義することにより到達する重合体は、本発明に包含することを意図しないことは理解すべきである。この場合、そのような置換基の最大数は3個である。例えば、置換アリール基の別の2個の置換アリール基での連続置換は、-置換アリール--置換アリールに限定される。同様に、上の定義は許容されない置換パターン。このような許容されない置換パターンは当業者に周知である。本発明の化合物は、化合物中の1個所以上の不斉またはキラル中心の存在により、立体異性を示し得る。本発明は種々の立体異性体およびそれらの混合物を意図する。ある本発明の化合物は、不斉に置換された炭素原子を含む。かかる不斉に置換された炭素原子は、特定の不斉に置換された炭素原子での立体異性体混合物または単一立体異性体を含む本発明の化合物を生じ得る。結果として、本発明の化合物のラセミ混合物、ジアステレオマー混合物、単一エナンチオマー、ならびに単一ジアステレオマーが本発明に包含される。ここで使用する用語SおよびR配置は、IUPAC1974RECOMMENDATIONSFORSECTIONEFUNDAMENTALSTEREOCHEMISTRYPureApplChem4513301976により規定される。所望のエナンチオマーは、市販のキラル出発物質から当分野で既知の方法によるキラル合成により得ることができまたはエナンチオマー混合物から、既知方法を使用して所望のエナンチオマーを分離することにより得ることができる。本発明の化合物はまた幾何異性も示し得る。幾何異性体は、アルケニル基またはアルケニレニル基を有する本発明の化合物のcisおよびtrans形態を含む。本発明はココの幾何異性体および立体異性体およびそれらの混合物を含む。C化合物製造本発明の化合物は容易に入手可能な出発物質から、下記の一般的方法および手順を使用して製造できる。特記しない限り、出発物質は市販されており、当分野で周知である。典型的なまたは好ましい工程条件が記載されているとき、特記しない限り、他の工程条件も使用できることは当然である。最適な反応条件は、使用する特定の反応物または溶媒により変わるが、かかる条件は、日常的な最適化方法により当業者が決定できる。さらに、当業者には当然であるが、ある官能基が望まない反応を受けることを阻止するために慣用の保護基を必要とすることがある。種々の官能基のための適当な保護基ならびに特定の官能基の保護および脱保護のための適当な条件は当分野で既知である。例えば、多くの保護基がTWGreeneandPGMWutsProtectingGroupsinOrganicSynthesisSecondEditionWileyNewYork1991およびその中に引用された文献に記載されている。さらに、本発明の化合物は1個所以上のキラル中心を含み得る。従って、所望により、かかる化合物を純粋立体異性体として、すなわち、個々のエナンチオマーまたはジアステレオマーとしてまたは立体異性体富化混合物として製造または単離できる。すべてのかかる立体異性体は、特記しない限り本発明の範囲に含まれる。純粋立体異性体は、例えば、当分野で既知の光学活性出発物質または立体選択的試薬を使用して製造できる。あるいは、かかる化合物のラセミ混合物を、例えば、キラルカラムクロマトグラフィー、キラル分割剤などを使用して分割できる。本発明の化合物は当分野で既知の、および、さらにここに記載する方法により製造できる。例えば、式の化合物の製造方法は、公開公報PCT/US2007/084154に記載されている。式の化合物の晴雨増に適用可能なさらなる合成法の例をここに提供する。ある種の式のKSP阻害剤の製造例を、下のスキーム1に示す。ブチルグリシン11をクロロギ酸エチルで処理して、混合無水物12を形成する。ベンゾニトリル13を硫化アンモニウムで処理して、チオアミド14を形成し、それを次いでヒドラジンで処理して、式15のヒドラジドを得る。ヒドラジド15を12およびトリエチルアミンと反応させて、カルバメート16を得る。次いで、カルバメート16をキシレン中酢酸アンモニウムと還流して、トリアゾール17を得る。17とフッ化臭化ベンジルメチルブロマイドまたはメチルブロマイドおよびCs2CO3のジメチルホルムアミド中での反応により、18をその位置異性体と共に得る。18をトリフルオロ酢酸で処理して、18のTFA塩を得て、次いで、NaOH/メタノール溶液で滴定したとき、それを遊離塩基に変換できる。11および13からの18の形成は、フッ素化臭化ベンジルではなく臭化ベンジルを使用した類似の方法で、高収率および高純度および高光学純度で進む。化合物19をアルデヒド27と還元的アミノ化条件下に反応させて、2級アミン31を得ることができ、次いで、これをアシル化して、式の化合物を得ることができる。スキーム2は、式の化合物、特に式の化合物を製造するための還元的アミノ化工程に使用できるアルデヒド27の製造を説明する。環状アミン21をCbz基で保護して、化合物22を得る。エポキシド23を、化合物22のMCPBAエポキシド化により得る。エポキシドは、ビニルマグネシウムブロマイドおよび臭化銅の反応によりアルコール24のラセミ混合物となる。単一エナンチオマーとしてのアルコール25をキラルカラムクロマトグラフィーにより得る。アルコール25をフッ素化条件に付して、ビニルフルオロピロリジン26を得る。ビニルフルオロピロリジン26を続いて、ジヒドロキシル化/酸化的開裂して、アルデヒド27を得る。フルオロピロリジン部分の結合後、環状アミンを既知アシル化剤および条件を使用してアシル化して式の化合物を得て、その後、ピロリジン環の窒素上の保護基および/またはアシル化部分の保護基を脱保護する。スキーム3は、2級アミン31を得るための還元的アミノ化を説明する。アミン31のアシル化と、続くCbz基の脱保護および遊離ヒドロキシル基上の保護基の除去により、化合物34を得る。ピロリジン環窒素の適当な保護基は、例えば、加水素分解により除去できるベンジルカルバメート類およびトリメチルシリルアイオダイドまたは酸のような反応材で選択的に除去できるt-ブチルカルバメート類である。スキーム4は、2級アミン31からのウレア形成の一般的記載である。2級アミン31をホスゲンまたはトリホスゲンと反応させてクロロ化合物41を得て、それを直接アミンと反応させて式のウレア化合物を得て、その後ピロリジン環の窒素上の保護基を脱保護する。スキーム4は、2級アミン31をクロロカルボニル化して化合物41を得て、それを直ぐにモルホリンと反応させ、その後Cbz基を除去して化合物42を得ることを説明する。本分子のキラル中心の絶対立体化学を、既知出発物質または中間体のキラリティーに基づき同定することは注意すべきである。HPLCおよびnmrデータは、上記方法が単一異性体として本化合物を提供するとの結論を支持する。アシル化工程のための適当なアシル化剤および酸類は、適当な構造参照を有するアシルハライド類、無水物および酸類を含む。適当なアミドカップリング条件は、カルボジイミド類N-N’-ジシクロヘキシルカルボジイミド、N-N’-ジイソプロピルカルボジイミドおよび1-エチル-3-カルボジイミドのようなアミド結合を形成するための種々のアミドカップリング剤を含む。カルボジイミド類を、ジメチルアミノピリジンまたは7-アザ-1-ヒドロキシベンゾトリアゾール、1-ヒドロキシベンゾトリアゾールおよび6-クロロ-1-ヒドロキシベンゾトリアゾールのようなベンゾトリアゾール類と組み合わせて使用してよい;かかるアミド結合形成のための条件は当分野で既知である。さらなるアミドカップリング剤はまたアミニウムおよびホスホニウムベースの反応材を含む。アミニウム塩類はN--1H-123-トリアゾロ45-bピリジン-1-イルメチレン-N-メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートN-オキシド、N-メチレン-N-メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートN-オキシド、N-メチレン-N-メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートN-オキシド、N-メチレン-N-メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレートN-オキシドおよびN-メチレン-N-メチルメタンアミニウムテトラフルオロボレートN-オキシドを含む。ホスホニウム塩類はベンゾトリアゾール-1-イル-オキシ-トリス--ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート、7-アザベンゾトリアゾール-1-イル-N-オキシ-トリスホスホニウムヘキサフルオロホスフェートおよびベンゾトリアゾール-1-イル-N-オキシ-トリスホスホニウムヘキサフルオロホスフェートを含む。アミド形成工程を、ジメチルホルムアミドのような極性溶媒中で行ってよく、またジイソプロピルエチルアミンまたはジメチルアミノピリジンのような有機塩基を含んでよい。表1中の次の化合物を上に概説した方法の一つを使用して製造した。表Iはまた、種々の実施例化合物のIC50値も記載する。D医薬製剤医薬として用いるとき、本発明の化合物は通常医薬組成物の形態で投与される。これらの組成物は、経口、非経腸、経皮、局所、直腸および鼻腔内を含む多様な経路で投与できる。これらの化合物は、例えば、注射用組成物および経口組成物の両方として、有効である。かかる組成物は医薬分野で周知の方法により製造し、少なくとも1種の活性化合物を含む。本発明はまた活性成分として、1種以上の上記本発明の化合物を薬学的に許容される担体と共に含む医薬組成物も含む。本発明の組成物の製造に際し、活性成分を通常添加物と混合するか、添加物で希釈するかまたはカプセル、小袋、紙もしくは他の容器の形であり得るかかる担体に包含させる。用いる添加物は、典型的にヒト対象または他の哺乳動物への投与に適当な添加物である。添加物が希釈剤として提供されるとき、それは活性成分の賦形剤、担体または媒体として作用する固体、半固体または液体物質であり得る。故に、組成物は錠剤、丸剤、散剤、ロゼンジ剤、サシェ剤、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁液剤、エマルジョン剤、溶液剤、シロップ剤、エアロゾル剤、例えば、最大10重量の活性化合物を含む軟膏剤、軟および硬ゼラチンカプセル剤、坐剤、滅菌注射用液および滅菌封入粉末の形であり得る。製剤の製造において、他の成分と合わせる前に、活性化合物を粉砕して、適当な粒子径とすることが必要であり得る。活性化合物が実質的に不溶性であるとき、通常200メッシュ未満の粒子径に粉砕する。活性化合物が実質的に水溶性であるとき、粒子径は通常製剤に実質的に均一な分散を提供するために粉砕により調節し、例えば、約40メッシュである。適当な添加物の数例は、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン類、アカシアガム、カルシウムホスフェート、アルギネート類、トラガカント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、滅菌水、シロップおよびメチルセルロースを含む。製剤はさらに:タルク、ステアリン酸マグネシウムおよび鉱油のような滑剤;湿潤剤;乳化剤および懸濁化剤;ヒドロキシ安息香酸メチルおよびヒドロキシ安息香酸プロピルのような防腐剤;甘味剤;および風味剤を含む。本発明の組成物は、当分野で既知の方法を用いることにより、患者への投与後に活性成分の急速な、持続したまたは遅延した放出を提供するように製剤できる。本発明の化合物である活性のその医薬組成物および単位投与量形態中の量は、特定の適用、特定の化合物の効果および望む濃度によって、変えても調節してもよい。本組成物は、好ましくは単位投与量形態に製剤し、各投与量は約1~約500mg、通常約5~約100mg、時々約10~約30mgの活性成分を含む。用語単位投与量形態は、ヒト対象および他の哺乳動物への単一の投与量として適当な物理的に分けられた単位であり、各単位は、所望の治療効果を生じるように計算された予定量の活性物質を適当な医薬添加物と共に含む。好ましくは、上記本発明の化合物を、医薬組成物の約20重量未満、より好ましくは約15重量未満で用い、残りは薬学的に不活性な担体である。活性化合物は広範囲の投与量範囲で有効であり、一般的に薬学的にまたは治療的に有効な量で投与する。しかしながら、実際に投与する化合物の量は、処置する状態、処置する状態の重症度、選択した投与経路、実際に投与する化合物、個々の患者の年齢、体重および応答、患者の症状の重症度などを含む関連する状況を考慮して、医師により決定されることは当然である。哺乳動物における癌の処置または癌と闘うための治療的使用において、化合物またはその医薬組成物を、処置を受けている哺乳動物における、活性成分の治療的効力のある濃度、すなわち量または血中レベルを達成し、維持するための投与量で、経口、局所、経皮および/または非経腸のような任意の適当な経路で投与する。一般的に、活性成分のかかる治療有効量の投与量は約01~約100、より好ましくは約10~約50mg/kg体重/日の範囲である。固体組成物、例えば錠剤の製造のために、主活性成分を医薬添加物と混合して、本発明の化合物の均一混合物を含む固体予備処方組成物を形成する。これらの予備処方組成物を均一と言うとき、本組成物を容易に錠剤、丸剤およびカプセル剤のような等しく有効な単位投与量形態に分配し得るように、活性成分が組成物全体に均一に分散されていることを意味する。次いで、この固体予備処方を、例えば、01~約500mgの本発明の活性成分を含む、上記タイプの単位投与量形態に分配する。本発明の錠剤または丸剤は長期作用の利益を提供する投与量形態を提供するようにコーティングするかまたは別の方法で調合してよい。例えば、錠剤または丸剤は、内部投与量および外部投与量成分を有し、後者は前者を覆う外皮の形である。2成分を、胃での分解に抵抗するために働き、内部成分を無傷で十二指腸まで通過させるかまたは放出を遅延させる腸溶層で分離し得る。多様な物質をかかる腸溶層またはコーティングに使用でき、かかる物質は多くの重合酸類および重合酸類とシェラック、セチルアルコールおよび酢酸セルロースのような物質の混合物を含む。本発明の新規組成物を経口または注射により投与するために包含させ得る液体形態は、水溶液剤、適当に風味付けされたシロップ剤、水性または油性懸濁液およびコーン油、綿実油、ゴマ油、ココナッツ油またはピーナツ油のような食用油を含む風味付けされたエマルジョン剤、ならびにエリキシル剤および類似の医薬賦形剤を含む。吸入または吹き入れ用組成物は、薬学的に許容される水性または有機溶媒またはそれらの混合物中の溶液および懸濁液および粉末を含む。液体または固体組成物は、前記の適当な薬学的に許容される添加物を含む。好ましくは本組成物を、局所または全身作用のために経口または経鼻呼吸器経路で投与する。好ましくは薬学的に許容される溶媒中の組成物を、不活性ガスの使用により霧化し得る。霧化溶液は、噴霧装置から直接吸入してよくまたは噴霧装置をフェースマスクテントもしくは間欠的陽圧人工呼吸器に接続してよい。溶液、懸濁液または粉末組成物を、好ましくは経口的または経鼻的に、適当な方法で製剤を送達するデバイスから投与し得る。次の製剤例は、本発明の代表的医薬組成物を説明する。製剤例1次の成分を含む硬ゼラチンカプセルを製造する:上記成分を混合し、硬ゼラチンカプセルに340mg量で充填する。製剤例2錠剤製剤を次の成分を使用して製造する:これら成分を混合し、各240mg重量の錠剤に圧縮する。製剤例3次の成分を含む乾燥粉末吸入製剤を、製造する:活性成分をラクトースと混合し、混合物を乾燥粉末吸入装置に添加する。製剤例4それぞれ30mgの活性成分を含む錠剤を次のとおり製造する:活性成分、デンプンおよびセルロースを、米国20番メッシュ篩を篩過させ、徹底的に混合する。ポリビニルピロリドンの溶液を得られた混合物と混合し、米国16メッシュ篩を篩過させる。そうして製造した顆粒を50°C~60°Cで乾燥させ、米国16メッシュ篩を篩過させる。予め米国30番メッシュ篩を篩過させたナトリウムカルボキシメチルデンプン、ステアリン酸マグネシウムおよびタルクを顆粒に添加し、混合後、打錠機で圧縮して、各120mg重量の錠剤を得る。製剤例5それぞれ40mgの医薬を含むカプセルを次のとおり製造する:活性成分、デンプンおよびステアリン酸マグネシウムを混合し、米国20番メッシュ篩を篩過させ、150mg量で硬ゼラチンカプセルに充填する。製剤例6それぞれ25mgの活性成分を含む坐剤を次の通り製造する:活性成分を米国60番メッシュ篩を篩過させ、予め必要最小限の加熱で融解させた飽和脂肪酸グリセリド類に懸濁する。混合物を、名目上20g容量の坐剤鋳型に注ぎ、冷ます。製剤例7それぞれ50mL投与量あたり50mgの医薬を含む懸濁液を次のとおり製造する:活性成分、スクロースおよびキサンタンゴムを混合し、米国10番メッシュ篩を篩過させ、予め製造した微結晶性セルロースおよびナトリウムカルボキシメチルセルロースの水溶液と混合する。安息香酸ナトリウム、風味剤および着色剤を幾分かの水で希釈し、撹拌しながら添加する。次いで、必要量とするのに十分な量の水を添加する。製剤例8活性成分、デンプンおよびステアリン酸マグネシウムを混合し、米国20番メッシュ篩を篩過させ、4250mg量で硬ゼラチンカプセルに充填する。製剤例9皮下製剤を次のとおり製造し得る:製剤例10局所製剤を次のとおり製造し得る:白色軟パラフィンヲ融解するまで加熱する。液体パラフィンおよび乳化蝋を入れ、溶解するまで撹拌する。活性成分を添加し、分散するまで撹拌を続ける。次いで、混合物を固体になるまで冷ます。製剤例11静脈内製剤の説明的例を次のとおり製造し得る:本発明の方法に用いる他の好ましい製剤は、経皮送達デバイスを用いる。かかる経皮パッチを、本発明の化合物の制御された量での連続的または断続的注入に使用し得る。薬剤の送達のための経皮パッチの構築および使用は当分野で既知である。例えば、引用により本明細書に包含させる、1991年6月11日公開の米国特許5023252参照。かかるパッチは、薬剤の連続的な、脈動的なまたは必要に応じた送達のために構築し得る。しばしば、医薬組成物を脳に直接的または間接的に通過させることが望ましいまたは必要である。直接的技術は、通常、医薬送達カテーテルを宿主脳室系に設置して血液-脳関門を迂回することを含む。生物学的因子を体の特定の解剖学的領域に輸送するために使用する一つのかかる植え込み型送達系は、本明細書に引用して包含する米国特許5011472に記載されている。一般的に好ましい間接的技術は、通常、親水性薬物を脂質可溶性薬物に変換することによる薬物潜在化を提供するための組成物の製剤を含む。潜在化は、一般的に薬物に存在するヒドロキシ基、カルボニル基、スルフェート基および1級アミン基をブロックして、薬物をより脂質可溶性にして、血液-脳関門を超える輸送を可能とすることにより達成する。あるいは、親水性薬物の送達を、血液-脳関門を一過性に開放できる高張溶液の動脈内輸液により亢進できる。本発明で使用するための他の適当な製剤は、RemingtonsPharmaceuticalSciencesMackPublishingCompanyPhiladelphiaPA17thedに見ることができる。E投与量および投与上記のとおり、ここに記載する化合物は、上に記載する多様な医薬送達系で使用するのに適当である。加えて、投与された化合物のインビボ血清半減期を延長するために、化合物をカプセル封入してよく、リポソームの内腔に導入してよく、コロイドとして製造してよくまたは本化合物の長い清半減期を提供する他の慣用の技術を用い得る。例えば、Szokaetal、米国特許番号4235871、4501728および4837028に記載のとおり、多様な方法がリポソームの製造に利用可能である。本発明の化合物は少なくとも一部KSPの活性により仲介される障害の阻止または処置に有用である。一つの面において、少なくとも一部KSPにより仲介される障害は細胞増殖性障害である。用語細胞性増殖性障害または細胞増殖性障害は、例えば、癌、腫瘍、過形成、再狭窄、心肥大、免疫障害および炎症のような疾患を含む。本発明は、処置を必要とするヒトまたは哺乳動物対象を処置する方法であって、治療有効量の式またはの化合物を、単独でまたは他の抗癌剤と組み合わせて対象に投与することを含む、方法を提供する。本発明の化合物は、インビトロまたはインビボで癌細胞の増殖阻害に有用である。用語癌は、例えば、肺および気管支;前立腺;乳;膵臓;結腸および直腸;甲状腺;胃;肝臓および肝内胆管;腎臓および腎盂;膀胱;子宮体;子宮頸;卵巣;多発性骨髄腫;食道;急性骨髄性白血病;慢性骨髄性白血病;リンパ性白血病;骨髄球性白血病;脳;口腔および咽頭;喉頭;小腸;非ホジキンリンパ腫;黒色腫;および絨毛結腸腺腫を含む癌疾患を意味する。癌はまた、癌腫、腺癌、肉腫および血液系腫瘍から成る群から選択される腫瘍または新生物も含む。加えて、癌のタイプは固形腫瘍/悪性腫瘍、粘液型および円形細胞癌、局所的に進行した腫瘍、ヒト軟組織癌、癌転移、扁平上皮細胞癌、食道扁平上皮細胞癌、口腔癌、皮膚T細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、副腎皮質の癌、ACTH産生腫瘍、非小細胞癌、乳癌、消化器癌、泌尿器科癌、女性生殖系の悪性腫瘍、男性生殖系の悪性腫瘍、腎臓癌、脳の癌、骨の癌、皮膚癌、甲状腺癌、網膜芽細胞腫、神経芽腫、腹水、悪性胸水、中皮腫、ウィルムス腫瘍、胆嚢癌、栄養芽細胞新生物、血管外皮腫およびカポジ肉腫の増殖からなる群から選択できる。本発明の化合物または組成物は哺乳動物に経口、静脈内、非経腸、経皮、局所、直腸または鼻腔内のような適当な経路で投与し得る。哺乳動物は、例えば、ヒトおよび他の霊長類、イヌおよびネコのようなペットまたはコンパニオンアニマル、ラット、マウスおよびウサギのような実験動物およびウマ、ブタ、ヒツジおよびウシのような家畜を含む。腫瘍または新生物は、細胞の増殖が制御されず、かつ進行性である組織細胞の増殖を含む。ある種のかかる増殖は良性であるが、他は悪性と呼ばれ、生物を死に至らしめ得る。悪性新生物または癌は、攻撃的細胞増殖を示すのに加えて、周囲組織に浸潤でき、転移できる点で良性増殖と区別される。さらに、悪性新生物は、互いにおよび周囲組織と比較して、大きな分化喪失および器質化喪失を示すことにより特徴付けられる。この特性は退形成と呼ばれる。所望の生物学的活性を有する化合物は、薬理学的特性の改善または診断的適用における検出能のような所望の特性を提供するために必要に応じて修飾され得る。安定性は、ペプチダーゼ類またはヒト血漿または血清とのインキュベーション中の化合物の半減期測定のような多様な方法でアッセイできる。診断目的で、広範な標識を化合物に結合でき、それは、直接的または間接的に、検出可能なシグナルを提供し得る。故に、本発明の化合物および/または組成物は、なお生物学的活性を維持したまま、多様な最終目的のために多様な方法で修飾してよい。加えて、粒子、固体基質、高分子などと結合させるために種々の反応部位を導入してよい。標識化合物を多様なインビボまたはインビトロ適用に使用できる。放射性核種、蛍光物質、酵素群、酵素基質、酵素補因子、酵素阻害剤、化学発光化合物、生物発光化合物などのような広範な標識を用い得る。当業者は、複合体に結合させるための他の適当な標識を知っているかまたは日常的な実験を使用してそのようなものを確認できる。これらの標識の結合は、当業者に慣用の標準法を使用して達成する。本発明の医薬組成物は、多様な医薬送達系に使用するための適当である。本発明で使用するのに適当な製剤はRemingtonsPharmaceuticalSciencesMacePublishingCompanyPhiladelphiaPa17thedに見られる。患者に投与する量は何を投与するか、予防であるか治療であるかのような投与の目的、患者の状態、投与方法などにより変わる。治療適用においては、本組成物を既に疾患を有している患者に、該疾患およびその合併症を治癒するかまたは少なくとも一部進行を阻止するのに十分な量で投与する。これを達成する適切な量を治療有効量と定義する。この使用に有効な量は処置する疾患状態ならびに疾患、障害または状態の重症度、患者の年齢、体重および一般的状態などのような因子による担当医の判断による。患者に投与する本化合物は、典型的に上記の医薬組成物の形態でる。これらの組成物は慣用の滅菌法により滅菌されていてよくまたは滅菌濾過してよい。得られた水溶液をそのまままたは凍結乾燥して使用のために包装してよく、凍結乾燥製剤は、投与前に滅菌水性担体と合わせる。化合物製剤のpHは、典型的に約3~11、より好ましくは約5~9および最も好ましくは約7~8である。前記のある添加物、担体または安定化剤の使用が医薬的塩類の形成をもたらすことは理解されよう。本発明の化合物および/または組成物の治療投与量は、例えば、処置を行う特定の使用、化合物の投与方法、患者の健康状態および担当医の判断により変わる。例えば、経口投与について、投与量は典型的に約5μg~約50mg/kg体重/日、好ましくは約1mg~約10mg/kg体重/日の範囲である。あるいは、静脈内投与について、投与量は典型的に約5μg~約50mg/kg体重、好ましくは約500μg~約5000μg/kg体重の範囲である。意図される別の投与経路は、鼻腔内、経皮、吸入、皮下および筋肉内を含むが、これらに限定されない。有効量は、インビトロまたは動物モテル系に由来する用量-応答曲線から外挿できる。一般に、本発明の化合物および/または組成物を、類似の有用性を提供する薬剤について承認されている投与方法のいずれかで、治療有効量を投与する。かかる化合物の毒性および治療効果は、例えば、LD50およびED50を決定するための、細胞培養または実験動物における標準的薬事的方法により決定できる。毒性と治療効果の量の比は治療指数であり、比LD50/ED50として表すことができる。大きい治療指数を示す化合物が好ましい。細胞培養アッセイおよび動物試験で得たデータを、ヒトに使用する投与量の定式化に使用できる。かかる化合物の投与量は、好ましくは、毒性がほとんどまたは全くなく、ED50を含む循環濃度の範囲内に入る。投与量はこの範囲内で用いる投与形態および利用する投与経路により代わり得る。本発明の方法で使用するいずれの化合物および/または組成物についても、治療有効量は、最初に細胞培養アッセイから推定できる。投与量を、細胞培養で決定したIC50を含む循環血漿濃度範囲を達成するために動物モデルで定式化できる。かかる情報を使用して、ヒトで有用な投与量をより正確に決定できる。血漿レベルは、例えば、高速液体クロマトグラフィーにより測定できる。次の合成および生物学的実施例は、本発明を説明するために提供し、決して本発明の範囲を限定すると解釈してはならない。下の実施例に関して、本発明の化合物をここに記載の方法でまたは当業者に周知の他の方法で合成した。製造または分析していない化合物を、ここに記載の方法でまたは当業者に周知の他の方法で製造または分析し得ることは当然である。化合物および/または中間体は、WatersMilleniumクロマトグラフィー系と2690SeparationModuleを使用する高速液体クロマトグラフィーにより特徴付けした。分析カラムは、AlltechのAlltimaC18逆相、46×250mmであった。典型的に5アセトニトリル/95水から出発し、40分間かけて100アセトニトリルへと進む勾配を使用した。全ての溶媒は01トリフルオロ酢酸を含んだ。化合物を、220nmまたは254nmの紫外線吸収により検出した。HPLC溶媒はBurdickandJacksonまたはFisherScientificであった。いくつかの例で、純度を薄層クロマトグラフィーで、例えば、BakerFlexSilicaGel1B2F軟質シートのような、裏板がガラスまたはプラスチックのシリカゲルプレートを使用して評価した。TLC結果は、紫外線光下でまたは周知のヨウ素蒸気および他の種々の染色技術を用いて、直ぐに可視的に検出した。質量分光分析は2種のLC/MS装置:WatersSystemアセトニトリル水溶液;流速08mL/分;分子量範囲500~1500;コーン電圧20V;カラム温度40°CまたはHewlettPackardSystemの一方で行った。全ての質量をプロトン化親イオンのものとして記載した。GC/MS分析をHewlettPackard装置で行う。核磁気共鳴分析を、いくつかの化合物で、Varian300MHzNMRで行った。参照スペクトルは、TMSまたは溶媒の既知化学シフトであった。いくつかの化合物サンプルを、高いサンプル溶解性を促進するために高温で流した。本発明化合物のいくつかの純度を元素分析により評価する。融点をLaboratoryDevicesMelTemp装置で決定する。予備分離をFlash40クロマトグラフィー系およびKPSil、60Aまたはシリカゲル充填材を使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーまたはC-18逆相カラムを使用するHPLCにより行った。Flash40Biotage系およびフラッシュカラムクロマトグラフィーに使用する典型的溶媒は、ジクロロメタン、メタノール、EtOAc、ヘキサン、アセトン、ヒドロキシアミン水溶液およびトリエチルアミンであった。逆相HPLCに用いる典型的溶媒は、種々の濃度のアセトニトリルおよび01トリフルオロ酢酸含有水であった。特記しない限り、全ての温度は摂氏度である。また、これらの実施例および他の場所で、略語は次の意味を有する:実施例1-N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチルテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド方法25-ジヒドロ-1H-ピロールのCbz保護25-ジヒドロ-1H-ピロールのジオキサン溶液に、CbzOSuを添加した。室温で18時間撹拌後、反応混合物を約300mLまで濃縮し、1000mLのEtOAcで希釈した。有機層を水および塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。所望の25-ジヒドロ-1H-ピロール-1-カルボン酸ベンジルを91収率で無色油状物として、フラッシュカラムクロマトグラフィーにより得た。Rf=06。1HNMRδ732580577422LCMSMH20421601086min。25-ジヒドロ-1H-ピロール-1-カルボン酸ベンジルのエポキシド化25-ジヒドロ-1H-ピロール-1-カルボン酸ベンジルのジクロロメタンの溶液に、MCPBAを添加した。反応混合物を室温で18時間撹拌後、500mLの飽和Na2CO3水溶液を添加し、得られた混合物を室温で1時間撹拌した。有機層を分離し、水および塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。黄色油状物としての所望の生成物を83収率でフラッシュカラムクロマトグラフィーにより得た。1HNMRδ338368387511733LCMSMH2200069min。6-オキサ-3-アザビシクロ310ヘキサン-3-カルボン酸ベンジルの開環6-オキサ-3-アザビシクロ310ヘキサン-3-カルボン酸ベンジルおよびCuBrSMe2の無水THF溶液に、-40°Cでビニルマグネシウムブロマイドをゆっくり添加した。反応混合物を-20°Cまで2時間かけて温めた。飽和NH4Cl水溶液で反応停止後、反応混合物をEtOAcで抽出した。有機層を水および塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。所望の3-ヒドロキシ-4-ビニルピロリジン-1-カルボン酸trans--ベンジルのラセミ混合物を48収率で黄色油状物として、フラッシュカラムクロマトグラフィーにより得た。Rf=02。1HNMRδ271328372411514516523569733LCMSMH2480078min。3-ヒドロキシ-4-ビニルピロリジン-1-カルボン酸trans--ベンジルの分割3-ヒドロキシ-4-ビニルピロリジン-1-カルボン酸trans--ベンジルのラセミ混合物を、キラルHPLCを使用して分割した。所望のエナンチオマー富化された3-ヒドロキシ-4-ビニルピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルおよび不所望の3-ヒドロキシ-4-ビニルピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルを、92回収率で得た。3-ヒドロキシ-4-ビニルピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルのフッ素化3-ヒドロキシ-4-ビニルピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルのPhCF3溶液に、NN-ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミントリヒドロフルオライドおよびペルフルオロ-1-ブタンスルホニルフルオライドを添加した。得られた混合物を室温で撹拌した。60分間および120分間後、さらにペルフルオロ-1-ブタンスルホニルフルオライドを添加した。18時間後、反応混合物を分液漏斗に移し、50mLの10NHClで2回、飽和NaHCO3水溶液で2回およびH2Oおよび塩水で1回洗浄した。有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、濃縮して、粗褐色油状物を得た。純粋3-フルオロ-4-ビニルピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルを81収率で黄色油状物として、フラッシュカラムクロマトグラフィーにより得た。Rf=055。1HNMRδ73772559524514503393535328313CNMRδ1547154613661318913183128481280212794119001189495239447934292676699669453165294528352604817480247914783472471LCMSMH2500093min。ビニルフルオロピロリジンの酸化的開裂3-フルオロ-4-ビニルピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルのCH3OHおよびH2O溶液に、OsO4のH2O溶液を添加した。NaIO4を一度に添加し、得られた混合物を室温で撹拌した。2時間後、混合物を濾過して、沈殿した白色固体を除去し、フィルターケーキをEtOAcで洗浄した。濾液を真空で濃縮して、有機溶媒の大部分を除去した。残留物をEtOAcで3回抽出し、合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗3-フルオロ-4-ホルミルピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルを、さらに精製せずに次工程に使用した。LCMSMH20822520069min。25-ジフルオロベンゾチオアミドの合成撹拌中の25-ジフルオロベンゾニトリルのピリジン溶液を、20wt硫化アンモニウム水溶液およびトリエチルアミンで処理した。反応混合物を50°Cで5時間、反応が完了するまで撹拌した。室温に冷却後、混合物を冷水で希釈し、EtOAcで抽出した。有機層を分離し、H2O、塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させて、粗生成物を得た。シリカゲルカラムで精製して、25-ジフルオロベンゾチオアミドを黄色固体として得た。1HNMRδ712790808LCMSMH1740064min。25-ジフルオロベンズイミドヒドラジドの合成撹拌中の25-ジフルオロベンゾチオアミドのEtOH溶液に、ヒドラジンを添加した。室温で30分間撹拌後、LC/MSによると反応は完了し、白色固体が沈殿した。沈殿を濾過し、ヘキサンで洗浄して、25-ジフルオロベンズイミドヒドラジドを得た。25-ジフルオロベンズイミドヒドラジドのアシル化N-Boc-D-tert-ブチルグリシンを、クロロギ酸エチル、Et3Nの無水THF溶液を-5°C~0°Cで添加することにより混合無水物に変換した。混合物を-5°Cで30分間撹拌した。得られた固体を濾別し、さらに無水THFを添加して、沈殿を洗浄した。得られた反応溶液を25-ジフルオロベンズイミド-ヒドラジドのTHF溶液に-5°Cで添加した。反応物を室温まで徐々に温め、一夜撹拌した。反応が完了したら、混合物をEtOAcおよびH2Oに分配した。有機層を分離し、H2O、塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させて、粗生成物を得て、それをシリカゲルカラムで精製して、1-メチルヒドラジニル-33-ジメチル-1-オキソブタン-2-イルカルバミン酸-tert-ブチルを得た。Rf=04。LCMSMH3853065min。1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルの合成1-メチルヒドラジニル-33-ジメチル-1-オキソブタン-2-イルカルバミン酸-tert-ブチルをキシレンに溶解した。DeanStarkトラップを据え付け、反応混合物を150°Cに加熱した。反応が完了したら、混合物を室温に冷却し、EtOAcおよび飽和NaHCO3水溶液に分配した。有機層を分離し、飽和NaHCO3水溶液、H2Oおよび塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、減圧下蒸発させて、1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルを得て、それをさらに精製せずに次工程に使用した。LCMSMH3672098min。臭化ベンジルによる1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルのアルキル化撹拌中の1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルおよびCs2CO3のDMF懸濁液に臭化ベンジルを添加した。有機層を分離し、H2O、塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、真空で蒸発させて、1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-カルバミン酸-tert-ブチルを得た。所望の位置異性体をシリカゲルカラムで得た。構造を1HNMRnOe実験で確認した。所望の異性体、-1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルについて:結晶、LCMSMH4572136min1HNMRδ778729739700718553520483141091。不所望の異性体、-1H-124-トリアゾール-3-イル-22-ジメチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルについて:無色油状物、LCMSMH4572125min1HNMRδ725715705545528485143097。1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルの脱保護1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルをTFAのCH2C12溶液で処理した。反応が完了したら、反応物を真空で濃縮し、EtOAcおよび飽和NaHCO3水溶液に分配した。有機物を分離し、H2O、塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、減圧下蒸発させて、-1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロパン-1-アミンを得て、それをさらに精製せずに直接次工程に使用した。LCMSMH3571082min。還元的アルキル化-1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロパン-1-アミンのCH2Cl2溶液に、粗3-フルオロ-4-ホルミルピロリジン-1-カルボン酸-ベンジル-ベンジルから得たのCH2Cl2溶液およびNaBH3を添加した。反応混合物を16時間、室温で撹拌した。飽和NaHCO3水溶液で反応停止後、反応混合物をEtOAcで抽出した。有機層を水および塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗還元的アミノ化生成物は、HF除去アルケン生成物で汚染されており、それはシリカカラムクロマトグラフィーまたは分取逆相HPLCで分離不可能であった。それ故、粗混合物をアセトンおよび水に溶解した。4-メチルモルホリンN-オキシドおよびOsO4をこの反応混合物に添加し、これを週末の間室温で撹拌した。アセトンを真空で除去後、得られた水層をEtOAcで抽出した。有機層を水および塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、濃縮した。所望の3--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルアミノメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルをシリカカラムクロマトグラフィーで得た。LCMSMH5923097min。還元的アルキル化-1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロパン-1-アミンのCH2Cl2溶液に、粗3-フルオロ-4-ホルミルピロリジン-1-カルボン酸-ベンジル-ベンジルから得たのCH2Cl2溶液およびNaBH3を添加した。反応混合物を16時間、室温で撹拌した。飽和NaHCO3水溶液で反応停止後、反応混合物をEtOAcで抽出した。有機層を水および塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗還元的アミノ化生成物は、HF除去アルケン生成物で汚染されており、それはシリカカラムクロマトグラフィーまたは分取逆相HPLCで分離不可能であった。それ故、粗混合物をアセトンおよび水に溶解した。4-メチルモルホリンN-オキシドおよびOsO4をこの反応混合物に添加し、これを週末の間室温で撹拌した。アセトンを真空で除去後、得られた水層をEtOAcで抽出した。有機層を水および塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、濃縮した。所望の3--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルアミノメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルをシリカカラムクロマトグラフィーで得た。LCMSMH5923097min。酸クロライドの製造-テトラヒドロフラン-2-カルボン酸をSOCl2に溶解した。反応混合物を30分間還流した。揮発物を真空で除去後、粗-テトラヒドロフラン-2-カルボニルクロライドを次工程に使用した。アミド結合形成3--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルアミノメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルのジクロロメタン溶液に、室温でトリエチルアミンを添加した。粗-テトラヒドロフラン-2-カルボニルクロライドを2分間かけて滴下した。得られた溶液を室温で一夜撹拌した。反応混合物をH2Oで反応停止させ、EtOAcで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。揮発性有機物を真空で除去後、所望の3--N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルテトラヒドロフラン-2-カルボキサミドメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルをフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製した0~100、EtOAcのヘキサン溶液。LCMSMH6905135min。脱保護3--N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルテトラヒドロフラン-2-カルボキサミドメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルの脱気EtOAc溶液に、Pd/Cを無水N2雰囲気下に添加した。水素ガスを通気後、水素ガスバルーンを付して反応混合物を室温で一夜撹拌した。反応混合物をセライトパッドで濾過し、それをEtOAcで洗浄した。揮発性有機濾液を真空で除去して粗生成物を得て、それを分取逆相HPLCで精製した。合わせた生成物のフラクションを飽和NaHCO3溶液で中和し、それをEtOAcで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。乾燥生成物をアセトニトリルおよび水に溶解し、48時間凍結乾燥させた。白色粉末状-N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチルテトラヒドロフラン-2-カルボキサミドを279収率で遊離アミンとして得た。1HNMRδ782753735727714706614545485472421397383302280233180125101099LCMSMH5564099min。実施例2N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-26-ジメチルモルホリン-4-カルボキサミド方法ウレア形成3--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルアミノメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルのジクロロメタン溶液にトリエチルアミンを添加し、20ホスゲンのトルエン溶液を室温で添加した。得られた溶液を室温で15分間撹拌後-1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルアミノメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルについてはLCMSMH6543137min、26-ジメチルモルホリンを添加し、40°Cで一夜加熱した。反応混合物をH2Oで反応停止させ、EtOAcで抽出した。有機層をNaHCO3溶液および塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。揮発性有機物を真空で除去後、粗生成物を分取逆相HPLCで精製した。合わせた生成物のフラクションを飽和NaHCO3溶液で中和し、それをEtOAcで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮して、所望の3--N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-26-ジメチルモルホリン-4-カルボキサミドメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルを得た。LCMSMH7335141min。脱保護3--N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-26-ジメチルモルホリン-4-カルボキサミドメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルの脱気エタノール溶液に、Pd/Cを無水N2雰囲気下に添加した。水素ガスを通気後、水素ガスバルーンを付して反応混合物を室温で45分間撹拌した。反応混合物をセライトパッドで濾過し、それをEtOAcで洗浄した。揮発性有機濾液を真空で除去して粗生成物を得て、それを分取逆相HPLCで精製した。合わせた生成物のフラクションを飽和NaHCO3溶液で中和し、それをEtOAcで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。乾燥生成物をアセトニトリルおよび水に溶解し、48時間凍結乾燥させた。白色粉末状-N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-26-ジメチルモルホリン-4-カルボキサミドを94収率で遊離アミンとして得た。1HNMRδ7837527347277087045945413923623603453172582572372352041851200908LCMSMH5995106min。実施例3N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-26-ジメチルモルホリン-4-カルボキサミド方法1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルの臭化3-フルオロベンジルでのアルキル化撹拌中の1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルおよびCs2CO3のDMF懸濁液に臭化3-フルオロベンジルを添加した。反応が完了したら、混合物をEtOAcおよびH2Oに分配した。有機層を分離し、H2O、塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、真空で蒸発させて、1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルを得た。所望の極性の低い位置異性体をシリカゲルカラムにより得た。所望の異性体である1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルについて:LCMS4752135min。不所望の異性体である1--1--1H-124-トリアゾール-3-イル-22-ジメチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルについて。LCMSMH4752124min。1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルの脱保護1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルをTFAのCH2C12溶液で処理した。反応が完了したら、反応物を真空で濃縮し、EtOAcおよび飽和NaHCO3水溶液に分配した。有機物を分離し、H2O、塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、減圧下蒸発させて、-1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロパン-1-アミンを得て、それをさらに精製せずに直接次工程に使用した。LCMSMH3751083min。還元的アルキル化-1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロパン-1-アミンのCH2Cl2溶液に、粗3-フルオロ-4-ホルミルピロリジン-1-カルボン酸-ベンジル-ベンジルから得たのCH2Cl2溶液およびNaBH3を添加した。反応混合物を16時間、室温で撹拌した。飽和NaHCO3水溶液で反応停止後、反応混合物をEtOAcで抽出した。有機層を水および塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗還元的アミノ化生成物は、HF除去アルケン生成物で汚染されており、それはシリカカラムクロマトグラフィーまたは分取逆相HPLCで分離不可能であった。それ故、粗混合物をアセトンおよび水に溶解した。4-メチルモルホリンN-オキシドおよびOsO4をこの反応混合物に添加し、これを週末の間室温で撹拌した。アセトンを真空で除去後、得られた水層をEtOAcで抽出した。有機層を水および塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、濃縮した。所望の3--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルアミノメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルをシリカカラムクロマトグラフィーで得た。LCMSMH6102099min。ウレア形成3--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルアミノメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルのジクロロメタン溶液に、トリエチルアミンを添加し、20ホスゲンのトルエン溶液を室温で添加した。得られた溶液を室温で15分間撹拌後-1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルアミノメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルについてLCMSMH6543137min、26-ジメチルモルホリンを添加し、15分間、室温で撹拌した。反応混合物をH2Oで反応停止させ、EtOAcで抽出した。有機層をNaHCO3溶液および塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。揮発性有機物を真空で除去後、粗生成物を分取逆相HPLCで精製した。合わせた生成物のフラクションを飽和NaHCO3溶液で中和し、それをEtOAcで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮して、所望の3--N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-26-ジメチルモルホリン-4-カルボキサミドメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルを得た。LCMSMH7515139min。脱保護3--N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-26-ジメチルモルホリン-4-カルボキサミドメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルの脱気エタノールに、Pd/Cを無水N2雰囲気下に添加した。水素ガスを通気後、水素ガスバルーンを付して反応混合物を室温で一夜撹拌した。反応混合物をセライトパッドで濾過し、それをEtOAcで洗浄した。揮発性有機濾液を真空で除去して粗生成物を得て、それを分取逆相HPLCで精製した。合わせた生成物のフラクションを飽和NaHCO3溶液で中和し、それをEtOAcで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。乾燥生成物をアセトニトリルおよび水に溶解し、48時間凍結乾燥させた。白色粉末状-N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-26-ジメチルモルホリン-4-カルボキサミドを63収率で遊離アミンとして得た。1HNMRδ78473269557953645839137236535030429726525323621812009084LCMSMH6175106min。実施例4-N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-2-ヒドロキシプロパンアミド方法アミド結合形成3--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルアミノメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルのジクロロメタン溶液に、室温でトリエチルアミンを添加した。酢酸-1-クロロ-1-オキソプロパン-2-イルを2分間かけて滴下した。得られた溶液を室温で一夜撹拌した。反応混合物をH2Oで反応停止させ、EtOAcで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。揮発性有機物を真空で除去後、所望の3--2-アセトキシ-N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-プロパンアミドメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルをフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製した。LCMSMH7065134min。包括的脱保護3--2-アセトキシ-N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルプロパンアミドメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルの脱気EtOAc溶液にPd/Cを無水N2雰囲気下に添加した。水素ガスを通気後、水素ガスバルーンを付して反応混合物を室温で一夜撹拌した。反応混合物をセライトパッドで濾過し、それをEtOAcで洗浄した。揮発性有機濾液を真空で除去して、粗アミンMH5724111minを得た。粗生成物をMeOHに溶解し、無水炭酸カリウムを添加した。反応物を15分間、室温で撹拌した。白色沈殿を濾過により除去後、有機濾液を真空で濃縮した。粗生成物を分取逆相HPLCで精製した。合わせた生成物のフラクションを飽和NaHCO3溶液で中和し、それをEtOAcで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。乾燥生成物をアセトニトリルおよび水に溶解し、48時間凍結乾燥させた。白色粉末状-N--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-2-ヒドロキシプロパンアミドを655収率で遊離アミンとして得た。1HNMRδ782752734725716707609544461439378360292256216144122099042LCMSMH5303105min。実施例5-N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチルテトラヒドロフラン-2-カルボキサミド方法アミド結合形成3--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルアミノメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルのジクロロメタン溶液に、室温でトリエチルアミンを添加した。粗-テトラヒドロフラン-2-カルボニルクロライドを2分間かけて滴下した。得られた溶液を室温で一夜撹拌した。反応混合物をH2Oで反応停止させ、EtOAcで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。揮発性有機物を真空で除去後、所望の3--N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルテトラヒドロフラン-2-カルボキサミドメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルをフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製した。LCMSMH7084135min。脱保護3--N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルテトラヒドロフラン-2-カルボキサミドメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルの脱気EtOAc溶液に、Pd/Cを無水N2雰囲気下に添加した。水素ガスを通気後、水素ガスバルーンを付して反応混合物を室温で一夜撹拌した。反応混合物をセライトパッドで濾過し、それをEtOAcで洗浄した。揮発性有機濾液を真空で除去して粗生成物を得て、それを分取逆相HPLCで精製した。合わせた生成物のフラクションを飽和NaHCO3溶液で中和し、それをEtOAcで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。乾燥生成物をアセトニトリルおよび水に溶解し、48時間凍結乾燥させた。白色粉末状-N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチルテトラヒドロフラン-2-カルボキサミドを104収率で遊離アミンとして得た。1HNMRδ782734725722715707698610544486419396386305305237170135102099LCMSMH5744098min。実施例6-N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-2-ヒドロキシプロパンアミドアミド結合形成3--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルアミノメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルのジクロロメタン溶液に、室温でトリエチルアミンを添加した。酢酸-1-クロロ-1-オキソプロパン-2-イルを2分間かけて滴下した。得られた溶液を室温で一夜撹拌した。反応混合物をH2Oで反応停止させ、EtOAcで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。揮発性有機物を真空で除去後、所望の3--2-アセトキシ-N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルプロパンアミドメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルをフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製した。LCMSMH7244134min。包括的脱保護3--2-アセトキシ-N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピルプロパンアミドメチル-4-フルオロピロリジン-1-カルボン酸-ベンジルの脱気EtOAc溶液に、Pd/Cを、無水N2雰囲気下に添加した。水素ガスを通気後、水素ガスバルーンを付して反応混合物を室温で一夜撹拌した。反応混合物をセライトパッドで濾過し、それをEtOAcで洗浄した。揮発性有機濾液を真空で除去して、粗アミンを得た。粗生成物をMeOHに溶解し、無水炭酸カリウムを添加した。反応物を15分間、室温で撹拌した。白色沈殿を濾過により除去後、有機濾液を真空で濃縮した。粗生成物を分取逆相HPLCで精製した。合わせた生成物のフラクションを飽和NaHCO3溶液で中和し、それをEtOAcで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。乾燥生成物をアセトニトリルおよび水に溶解し、48時間凍結乾燥させた。白色粉末状-N--1--1--1H-124-トリアゾール-5-イル-22-ジメチルプロピル-N--4-フルオロピロリジン-3-イルメチル-2-ヒドロキシプロパンアミドを57収率で遊離アミンとして得た。1HNMRδ781740716706612544477387282228217195143122091LCMSMH5483094min。実施例7KSP活性測定用アッセイ本実施例は、インビトロでKSP活性を測定するための代表的インビトロアッセイを提供する。ウシ脳から得た精製微小管をCytoskeletonIncから購入した。ヒトKSPのモータードメインをクローン化し、発現させ、95以上の均一性となるまで精製した。BiomolGreenをBIOMOLInternationalLPから購入した。微小管を、37°Cで10分間急速に融解し、希釈した。微小管およびKSPモータータンパク質をアッセイ緩衝液、1mMMgCl2、10mMDTTおよび0125BSAに最終濃度50μg/mL微小管および3nMKSPまで希釈した。125μLの阻害剤または試験化合物のDMSO溶液を含む試験プレートの各ウェルに、25μLのATP溶液および25μLの上記微小管/KSP溶液を添加した。プレートをRTで2時間インキュベートした。インキュベーション後、65μLのBiomolGreenと0015Tween20を各ウェルに添加した。プレートをさらに15~20分間インキュベートし、650nmでの吸光度をMolecularDevices分光光度計を使用して測定した。650nmの吸光度の量は、サンプル中のKSP活性の量に比例する。各阻害剤または試験化合物のIC50を、各濃度での650nmの吸光度の低下に基づき、Excel用XLFitまたはGraphPadSoftwareIncのPrismデータ解析ソフトウェアを使用して、非線形回帰により決定した。好ましい本発明の化合物は、実施例7に記載のアッセイプロトコールで測定して、約1mM未満のIC50の生物学的活性を有し、好ましい態様は約25μM未満の生物学的活性を有し、特に好ましい態様は約1000nM未満の生物学的活性を有し、最も好ましい態様は、約100nM未満の生物学的活性を有する。表1は本発明を代表する説明的例の化合物についての構造、IC50値、マススペクトルデータおよび保持時間を示す。さらなる本発明の化合物は下の表2にある。これらの化合物を、上に記載のものに準じて製造し、R1にアルコキシ基を挿入した。これらの化合物のアルコキシ含有部分は次の実施例に説明のとおり製造できる。実施例9-2-アミノ-3-ヒドロキシ-3-メチルブタン酸のメチル化鉱油中の水素化ナトリウム懸濁液の乾燥THF溶液に、-2-アミノ-3-ヒドロキシ-3-メチルブタン酸のTHF溶液を0°Cでゆっくり添加した。1時間、室温で撹拌後、ヨードメタンを添加した。反応混合物を室温で一夜撹拌した。水で反応停止後、反応混合物をエーテルで抽出した。水層を、6NHClの添加によりpH=3まで酸性化し、EtOAcで抽出した。有機層を塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、ブフナー漏斗で濾過し、濃縮して、粗-2-アミノ-3-メトキシ-3-メチルブタン酸を得て、それをさらに精製せずに次工程の反応に使用した。LCMSMH1601068min。25-ジフルオロベンズイミドヒドラジドのアシル化粗-2-アミノ-3-メトキシ-3-メチルブタン酸を、Et3N、クロロギ酸エチルの無水THFを-5°C~0°Cで添加することにより混合無水物に変換した。混合物を-5°Cで30分間撹拌した。得られた固体を濾別し、さらに無水THFを添加して、沈殿を洗浄した。得られた反応溶液を25-ジフルオロベンズイミド-ヒドラジドのTHF溶液に-5°Cで添加した。反応物を室温まで徐々に温め、一夜撹拌した。反応が完了したら、混合物をEtOAcおよびH2Oに分配した。有機層を分離し、H2O、塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させて、粗生成物を得て、それをシリカゲルカラムで精製して、メチルヒドラジニル-3-メトキシ-3-メチル-1-オキソブタン-2-イルカルバミン酸-tert-ブチルを得た。LCMSMH4012061min。-1H-124-トリアゾール-5-イル-2-メトキシ-2-メチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルの合成1-メチルヒドラジニル-33-ジメチル-1-オキソブタン-2-イルカルバミン酸-tert-ブチルをキシレンに溶解した。DeanStarkトラップを据え付け、反応混合物を160°Cに加熱した。反応が完了したら、混合物を室温に冷却し、EtOAcおよび飽和NaHCO3水溶液に分配した。有機層を分離し、飽和NaHCO3水溶液、H2Oおよび塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、減圧下蒸発させて、-1H-124-トリアゾール-5-イル-2-メトキシ-2-メチルプロピルカルバミン酸-tert-ブチルを得て、それをさらに精製せずに次工程に使用した。LCMSMH383209min。このタイプの代表的化合物のNMRデータをここに提供する:実施例8KSP阻害剤で処置した腫瘍細胞株における細胞増殖阻害細胞を、96ウェルプレートに約500細胞/96ウェルプレートウェルの密度で播種し、24時間増殖させる。次いで、細胞を種々の濃度の化合物で72時間処理する。100μlのCellTiterGlo溶液を添加する。CellTiterGloアッセイは、細胞溶解後にウェルに存在するATPの量を測定する;遊離されたATPは、酵素ルシフェラーゼおよびその基質ルシフェリンを含む酵素反応に使用される。発光の量はATPの量に比例し、それはさらにウェル中の生存細胞数に比例する。LuminescentCellViabilityAssay参照。次いで、細胞を暗所で30分間インキュベートする。発光の量を、ウェルあたりの細胞数と相関するWallacTriluxプレートリーダーを使用して各ウェルで測定する。DMSOのみを入れたウェル中の生存細胞数は0阻害の指標として働き、細胞なしのウェルを細胞増殖の100阻害として働く。50増殖阻害を生じる化合物濃度を、連続72時間化合物暴露後に、ログ変換した用量値対細胞数のシグモイド用量-応答曲線からグラフ的に決定する。細胞を、96ウェルプレートに約500細胞/96ウェルプレートウェルの密度で播種し、24時間増殖させる。次いで、細胞を種々の濃度の化合物で72時間処理する。100μlのCellTiterGlo溶液を添加する。CellTiterGloアッセイは、細胞溶解後にウェルに存在するATPの量を測定する;遊離されたATPは、酵素ルシフェラーゼおよびその基質ルシフェリンを含む酵素反応に使用される。発光の量はATPの量に比例し、それはさらにウェル中の生存細胞数に比例する。LuminescentCellViabilityAssay参照。次いで、細胞を暗所で30分間インキュベートする。発光の量を、ウェルあたりの細胞数と相関するWallacTriluxプレートリーダーを使用して各ウェルで測定する。DMSOのみを入れたウェル中の生存細胞数は0阻害の指標として働き、細胞なしのウェルを細胞増殖の100阻害として働く。50増殖阻害を生じる化合物濃度を、連続72時間化合物暴露後に、ログ変換した用量値対細胞数のシグモイド用量-応答曲線からグラフ的に決定する。使用した細胞株を下に上げる。細胞増殖アッセイを上記のとおり行う。好ましい本発明の化合物は、GI50で測定して、記載するアッセイで約1mM未満の生物学的活性を有し、ある態様は約25μM未満の生物学的活性を有し、他の態様は約1000nM未満の生物学的活性を有し、さらに別の態様は約100nM未満のGI50を有する。実施例9クローン形成性軟寒天アッセイプロトコールヒト癌細胞を、6ウェルプレートに3×105細胞/ウェルで播種する。翌日、ある濃度の目的の化合物を各ウェルに添加する。24時間および48時間インキュベーション後、細胞を回収し、洗浄し、計数する。以下の工程をMultimek96ロボットを使用して行う。ウェル辺り500個の生存細胞を、細胞がウェル底に接着することを防止するためにPolyHemaでコートした96ウェルプレートに播種する。アガロースを融解し、温媒体で希釈し、細胞に最終濃度05で添加する。軟寒天が固化した後、プレートを37°Cで6日間インキュベートする。アラマーブルー色素を添加し、プレートをさらに6時間インキュベートする。光学密度の変化をプレートリーダーで測定し、それは軟寒天に形成したコロニー数と相関する。癌性細胞は本寒天上で増殖でき、故に光学密度の増加を示す。光学密度読み取り値の減少は、癌細胞が阻害されていることを意味する。本発明の化合物は光学密度の減少を示すことが企図される。