"tatペプチドにコンジュゲートされたC-末端コア配列ESDVを有するペプチドであって、該tatペプチドが細胞内への該コンジュゲートペプチドの侵入を容易にすることができる前記ペプチド。定義51ここに用いる融合蛋白質又は融合ポリペプチドは複合蛋白質、即ち通常は単一のアミノ酸配列に一つに融合していない2つまたそれ以上のの別個の異種ポリペプチドから作られた単一の連続的アミノ酸配列を意味する。即ち、融合蛋白質は2個の全く別個のアミノ酸配列または2個の類似あるいは同一ポリペプチド配列を含む単一アミノ酸配列を含むことができ、これら配列は天然に見いだされる単一アミノ酸配列中の同一配置中に一緒に見いだされることはない。融合蛋白質は一般に当分野で良く知られている組換え体核酸法、即ち組換え体遺伝子融合産物の転写及び翻訳の結果として融合体が発明のポリペプチドをコードする断片と異種蛋白質をコードする断片を含む方法、または化学合成法のいずれかを使用し調整できる。52ここで用いる融合蛋白質構築体は、融合蛋白質をコードするポリヌクレオチドである。53ここで用いる用語PDZドメインは、脳シナプス蛋白質PSD95、ショウジョウバエ隔壁結合蛋白質DiscsLarge及び上皮タイト結合蛋白質ZO1ZO1に対する相同性を特徴とする約90アミノ酸の蛋白質配列即ちモジュラー蛋白質ドメインを表す。PDZドメインはDiscsLarge相同性リピートDHRs及びGLGFリピートとしても知られる。PDZドメインは一般にはコアコンセンサス配列を維持すると思われているDoyle、DA1996Cell8510671076。PDZドメインはグアニレートキナーゼ相同体のMAGUKファミリーのメンバー、複数の蛋白質フォスファターゼ及びキナーゼ、神経一酸化窒素合成酵素及びシントロフィンと総称される複数のジストロフィン付随蛋白質を含む、多様な膜関連蛋白質に見いだされている。例示的PDZドメイン含有蛋白質及びPDZドメイン配列は表3に示されている。用語PDZドメインはまた表3例えば多形変異体、保存的置換を持つ変異体等の配列の変異体例えば自然発生変異体も包含する。典型的には、PDZドメインは表3に示すドメインと実質同一であり、例えば最大一致を得る様に配列し比較した場合に少なくとも約70、少なくとも約80、又は少なくとも約90のアミノ酸残基同一性を持つ。54ここで用いる場合、用語PDZ蛋白質はPDZドメインを含んでいる天然発生蛋白質、例えばヒト蛋白質を表す。例示のPDZ蛋白質にはCASK、MPP1、DLG1PSD95、NcDLG、TAX33、SYN1a、TAX43、LDP、LIM、LIMK1、LIMK2、MPP2、NOS1、AF6、PTN4、prIL16、418kD、KIAA0559、RGS12、KIAA0316、DVL1、TAX40、TIAM1、MINT1、KIAA0303、CBP、MINT3、TAX2、KIAA0561が含まれる。例示PDZ蛋白質はひょう2及び表3に一覧されている。55ここで用いる場合、用語PDZドメインポリペプチドはPDZドメイン配列、天然発生PDZドメイン又は単離PDZドメインペプチドを含む融合蛋白質の様なPDZドメインを含んでいるポリペプチドを表す。56ここで用いる場合、PL蛋白質又はPDZリガンド蛋白質はPDZドメインと分子複合体を形成する天然発生蛋白質又は完全長蛋白質から分離して発現された場合に例えば425残基、例えば16残基ペプチド断片の様なそのカルボキシ末端がそのような分子複合体を形成する蛋白質を表す。分子複合体はインビトロでは下記Aアッセイ又はGアッセイを使用し、又はインビボにて観察できる。表2掲載の例示PL蛋白質は、特異的PDZ蛋白質を結合することが示されている。この定義は抗PDZ抗体等を包含することを意図しない。57ここで用いるPL配列はPL蛋白のC末端アミノ酸配列例えばC末端2、3、4、5、6,7,8,9、10、12、14、16、20又は25残基C末端PL配列又はPDZドメインに結合することが既知である内部配列内部PL配列を表す。58ここで用いるPLペプチドはPL蛋白質のC末端の配列に由来する、または基づく配列を有するペプチドである。例示PLペプチドビオチン化は表4に掲載されている。59ここで用いるPL融合蛋白質は、融合蛋白質の1ドメインとして、典型的にはC末端ドメインとしてPL配列を有する融合蛋白質である。例示のPL融合蛋白質はtatPL配列融合体である。510ここで使用する場合、用語PL阻害剤ペプチド配列は、PDZドメインポリペプチドとPLペプチド間の相互作用を阻害する例えばAアッセイまたはGアッセイにてPLペプチドのアミノ酸配列ペプチド又はPL融合蛋白質の形をしたを表す。511ここで用いるPDZドメインコーディング配列は、PDZドメインをコードしているポリヌクレオチドの断片を意味する。各種実施態様では、ポリヌクレオチドはDNA、RNA、単鎖又は二本鎖である。512ここで使用する場合、用語アンタゴニスト拮抗剤及び阻害剤は、結合相互作用PDZドメイン配列のPL配列への結合の様なを変調する流れで使用される場合には互換的に使用され、例えばPL配列例えばPLペプチドと例えばPDZドメイン例えばPDZ蛋白質、PDZドメインペプチドの結合を低下する作用物質を表す。513ここで使用する場合、用語アゴニスト及びエンハンサーは、結合相互作用PDZドメイン配列のPL配列への結合の様なを変調する流れで使用される場合には互換的に使用され、例えばPL配列例えばPLペプチドと例えばPDZドメイン例えばPDZ蛋白質、PDZドメインペプチドの結合を増加する作用物質を表す。514ここで使用される場合、用語模擬ペプチド、ペプチドミメティック、及びペプチド類似体は互換的に使用され、発明のPL阻害性またはPL結合性ペプチドと本質的に同一である構造的及び/又は機能的特性を有する合成化合物を表す。模擬体は合成の、非天然型アミノ酸類似体から全体が成るか、又は一部天然ペプチドアミノ酸と一部アミノ酸の非天然類似体から成るキメラ分子のいずれかである。模擬体はまた、それら置換体が模擬体の構造及び/又は阻害的あるいは結合活性を実質変えない範囲の量にて天然アミノ酸の保存的置換を含むこともできる。保存的変異体である発明のポリペプチドを使用する場合、通常の実験が模擬体が発明の範囲内にあるか、即ちその構造及び/又は機能が実質変化していないか決定するだろう。即ち、模擬組成体がPDZドメインに結合でき、及び/又はPLPDZ相互作用を阻害できれば、それは発明の範囲内である。ペプチドミメティック組成体は典型的には3構造グループ:a天然アミド結合ペプチド結合連結以外の残基連結グループ;b天然発生アミノ酸残基の代りの非天然残基;又はc模擬的二次構造を誘導する、即ち二次構造、例えばβターン、γターン、α螺旋立体構造等を誘導または安定化する残基、に由来する非天然構造成分の組合せを含むことができる。ポリペプチドはその残基の全て又は一部が天然のペプチド結合以外の化学的手段により結合されている場合には、模擬体として特徴付けることができる。個々のペプチドミメティック残基はペプチド結合、その他化学的結合又は例えばグルタールアルデヒド、Nヒドロキシスクシンイミドエステル、2官能型マレイミド、NNジシクロヘキシルカルボジイミドDCC又はNNジイソプロピルカルボジイミドDICの様なカップリング手段により結合させることができる。従来のアミド結合ペプチド結合連結に替わることができる連結グループには、例えばケトメチレン例えばCCH2、アミノメチレンCH2NH、エチレン、オレフィンCHCH、エーテルCH2O、チオエーテルCH2S、テトラゾールCH4、チアゾール、レトロアミド、チオアミド又はエステル例えばChemistryandBiochemistryofAminoAcidsPeptidesandProteinsVol7pp267357APeptideBackboneModificationsMarcellDekkerNY中のSpatola1983参照が含まれる。ポリペプチドはまた、天然発生アミノ酸残基に代わる全て、又は幾つかの非天然残基を含むことにより模擬体として特徴付けることができる。非天然残基は科学及び特許文献中によく記述されている:天然アミノ酸残基模擬体として有用である幾つかの例示的非天然組成体及び指針が以下に記載されている。芳香族アミノ酸の模擬体は例えばD又はLナフチルアミン;D又はLフェニルグリシン;D又はL2チエニルアラニン;D又はL1、2、3又は4ピレニルアラニン;D又はL3チエニルアラニン;D又はL2ピリジニルアラニン;D又はLJAmerChemSoc108181182KahnJAmerChemSoc11016381639KempTetLett2950575060KahnJMolecRecognition17579に記載されている。ベータシート模擬構造体は例えばSmithJAmerChemSoc1141067210674に記載されている。例えばシスアミド代用体、15ジ置換型テトラゾールにより誘導されたVI型ベータターンはBeusen1995Biopolymers36181200に記載されている。アキラル性オメガアミノ酸残基の取り込みによるアミド結合に関する置換体としてのポリメチレン単位の生成はBanerjeeBiopolymers39769777に記載されている。ポリペプチドの二次構造は例えば高電界型1HNMRまたは2DNMR分光分析により解析でき、例えばHigginsJPeptRes50421435を参照せよ。またHrubyBiopolymers43219266Balajiら、米国特許第5612895号を参照。515ここで使用する場合、ペプチド変異体及び保存的アミノ酸置換体は同様の特性大きさ、極性、疎水性等を有するアミノ酸残基の置換により参照ペプチド例えば特定されたPL蛋白質のカルボキシ末端の配列を有するペプチドとは異なるペプチドを表す。即ち、発明の範囲に包含される化合物がアミノ酸残基に関し指定された分類で部分的に規定される場合、アミノ酸は一般にアミノ酸側鎖の特性に一次的に依存し、3主要分類;親水性アミノ酸、疎水性アミノ酸及びしステイン様アミノ酸に類別される。これら主要分類はさらに亜分類に分けられるだろう。親水性網の差は酸性、塩基性又は極性側さを有するアミノ酸を含み、そして疎水性アミノ酸は芳香性又は非極性側鎖を有するアミノ酸を含む。非極性アミノ酸はさらに脂肪族アミノ酸等を含む様に分けられるだろう。ここに使用されるアミノ酸の分類の定義は以下の通りである:疎水性アミノ酸は生理学的pHで非荷電であり、水溶液により反発される側鎖を有するアミノ酸を表す。遺伝的にコードされた疎水性アミノ酸の例にはIle、Leu及びValが含まれる。非遺伝的にコードされたアミノ酸例はtBuAを含む。芳香族アミノ酸は共役π電子系を有する環を少なくとも一つ含む側鎖芳香族基を持つ疎水性アミノ酸を表す。芳香族基は更にアルキル、アルケニル、アルキニル、ヒドロキシル、スルファニル、ニトロ及びアミノ基等の様な基と置換してもよい。遺伝的にコードされた芳香族アミノ酸の例には、フェニルグリシン、2ナフチルアラニン、β2チエニルアラニン、1234テトラヒドロイソキノリン3カルボン酸、4クロロフェニルアラニン、2フルオロフェニルアラニン、3フルオロフェニルアラニン及び4フルオロフェニルアラニンが含まれる。非極性アミノ酸は生理学的pHで一般に非荷電状態にあり、非極性である側鎖を有する疎水性アミノ酸を表す。遺伝的にコードされた非極性アミノ酸の例にはGly、Pro及びMetが含まれる。非コード型非極性アミノ酸の例にはChaが含まれる。脂肪族アミノ酸は飽和又は不飽和の直鎖型、分岐型又は環式炭化水素側鎖を有する非極性アミノ酸を表す。遺伝的にコードされた脂肪族アミノ酸の例にはAla、Leu、Val及びIleが含まれる。非コード型脂肪族アミノ酸の例にはNleが含まれる。親水性アミノ酸は水溶液により誘引される側鎖を有するアミノ酸を表す。遺伝的にコードされた親水性アミノ酸の例にはSer及びLysが含まれる。非コード型親水性アミノ酸の例にはCit及びhCysが含まれる。酸性アミノ酸は7未満の側鎖pK値を有する親水性アミノ酸を表す。酸性アミノ酸は典型的には、水素イオンの消失により生理学的pHにて負に荷電した側鎖を有している。遺伝的にコードされた酸性アミノ酸の例にはAsp及びGluが含まれる。塩基性アミノ酸は7より大きい側鎖pKを有する親水性アミノ酸を表す。塩基性アミノ酸は典型的には水素イオンとの結合により、生理学的pHに於いて正に荷電した側鎖を有している。遺伝的にコードされた塩基性アミノ酸の例にはArg、Lys及びHisが含まれる。遺伝的にコードされていない塩基性アミノ酸の例には、非環式アミノ酸オルニチン、23ジアミノプロピオン酸、24ジアミノブチリル酸及びホモアルギニンが含まれる。極性アミノ酸は生理学的pHにて非荷電であるが、2個の原子により共有されている1組の電子が一方の原子により近く保持されている結合を有する親水性アミノ酸を表す。遺伝的にコードされた極性アミノ酸の例にはAsx及びGlxが含まれる。遺伝的にコードされない極性アミノ酸の例にはシトルリン、Nアセチルリジン及び硫酸メチオニンが含まれる。システイン様アミノ酸は他アミノ酸残基の側鎖とジスルフィド結合の様な供給結合を形成できる側鎖を持つアミノ酸を表す。典型的にはシステイン様アミノ酸は一般には少なくとも1個のチオールSH基を含む側鎖を有している。遺伝的にコードされたシステイン様アミノ酸の例にはCysが含まれる。遺伝的にコードされていないシステイン様アミノ酸の例にはホモシステイン及びペニシリンが含まれる。当業者により理解される如く上記分類は絶対ではなく-複数のアミノ酸は1以上の特性を有しており、そのために1以上の分類に含めることができる。例えばチロシンは芳香環及び極性ヒドロキシル基の両方を有している。即ちチロシンは二重に特性を有しており、芳香族及び極性分類の両方に含めることができる。同様に、システインはジスルフィド結合を形成できることに加え非極性の特性も有する。即ち疎水性又は非極性アミノ酸として厳格には分類されていないものの、システインは多くの例でペプチドに疎水性を付与するために使用できる。発明のペプチド及びペプチド類似体に含まれる遺伝的にコードされない特に一般的に見られるアミノ酸にはβアラニンbAla及び3アミノプロピオン酸Dap、23ジアミノプロピオン酸Dpr、4アミノブチリル酸等の様なその他のオメガアミノ酸;αアミノイソブチリル酸Aib;εアミノヘキサノン酸Aha;δアミノ吉草酸Ava;Nメチルグリシン又はサルコシンMeGly;オルニチンOrn;シトルリンCit;tブチルアラニンtButAtブチルグリシンtBuG;NメチルイソロイシンMeIle;フェニルグリシンPhg;シクロヘキシルアラニンCha;ノルロイシンNle;2ナフチルアラニン2Nal;4クロロフェニルアラニンPhe;2フルオロフェニルアラニンPhe;3フルオロフェニルアラニンPhe;4フルオロフェニルアラニンPhe;ペニシラミンPen;1234テトラヒドロイソキノリン3カルボン酸Tic;β2チエニルアラニンThi;硫酸メチオニン;ホモアルギニンhArg;NアセチルリジンAcLys;23ジアミノブチリル酸Dab;23ジアミノブチリル酸;pアミノフェニルアラニン;NメチルバリンMeVal;ホモシステインhCys及びホモセリンhSerが含まれるが、これらに限定されるものではない。これらアミノ酸も随意上記規定の分類に含まれる。上記の遺伝的にコードされた、及び遺伝的にコードされていないアミノ酸の分類は下表1にまとめられている。表1は例示のみを目的としたものであり、ここに記載のペプチド及びペプチド類似体を含むアミノ酸残基の網羅的一覧表を意味するものではない。ここに記載のペプチド及びペプチド類似体を作製する上で有用な他アミノ酸残基は、例えばFasman、1989、CRCPracticalHandbookofBiochemistryandMolecularBiologyCRCPressInc及びここに引用された参考文献中に見いだすことができる。ここに記載されていないアミノ酸は、具体的に特定されたアミノ酸と比較した場合の既知挙動、及び/又はそれらの特徴的な化学上及び/又は物理上の特性に基づき上記分類に随意分類することができる。516ここで用いる検出可能な標識体は当分野通常の意味であり、検出に利用され、又は利用できる例えば物理的あるいは化学的特性に基づき原子例えば放射性核種、分子例えばフルオロセイン又は複合体を表し、分子の存在またはそれと共有結合又はその他結合する他分子と結合できることを示す。用語標識体はまた基質に作用し検出可能な原子、分子又は複合体を産生する共有結合またはその他結合した分子例えば酵素の様な生物分子を表す。本発明での利用に好適な検出可能な標識体には分光光学的、光化学的、生物化学的、免疫化学的、電気的、光学的又は化学的手段により検出可能な組成体を含む。本発明に有用な標識体は、標識化ストレプトアビジン共役体で染色する場合のビオチン、磁性ビーズ例えばDnyabeadsTM、蛍光色素例えばフルオロセイン、テキサスレッド、ローダミン、グリーン蛍光蛋白質、エンハンスドグリーン蛍光蛋白質等、放射性核種例えば3H、125I、35S、14C又は32P、酵素例えばヒドラーゼ、特にアルカリホスファターゼの様なホスファターゼ、エステラーゼ又はグリコシダーゼ、あるいは特に西洋ワサビペルオキシダーゼの様なペルオキシダーゼ、及びその他ELISAsに一般的に使用されているもの、基質、補助因子、阻害剤、化学発光基、発色剤及び金コロイド又は着色ガラスあるいはプラスチック製例えばポリスチレン、ポリプロピレン、ラテックス等ビーズの様な着色標識体が含まれる。これら標識体の使用を教示する特許には米国特許第3817837号;第3850752号;第3939350号;第3996345号;第4277437号;第4275149号;及び第4366241号が含まれる。これら標識体を検出する手段は当業者に良く知られている。即ち、例えば放射線核種及び化学発光標識体は写真フィルム又はシンチレーションカウンターを使用し検出され、蛍光マーカーは放射光線を検出するための光検出器例えば蛍光活性化細胞ソーティングを使用し検出されるだろう。酵素標識体は典型的には酵素に基質を供与し、基質に対する酵素の作用により生じた反応産物を検出することで検出され、着色標識体は着色された標識体を単純に目で見ることで検出される。即ち、標識体は分光光学的、光化学的、生化学的、免疫化学的、電気的、光学的又は化学的手段により検出可能ないずれかの組成体である。標識体は当分野公知の方法に従い所望成分に直接、又は間接的に結合される。非放射活性標識体は間接的手段により結合されることが多い。一般にリガンド分子例えばビオチンは分子に供給結合される。次にリガンドは、元来検出可能であるか又は検出可能酵素、蛍光化合物あるいは化学発光化合物の様なシグナル生成システムに共有結合されている抗リガンド例えばストレプトアビジン分子に結合する。複数のリガンド及び抗リガンドが利用できる。リガンドが天然抗リガンド、例えばビオチン、チロキシン及びコルチゾールを有する場合、それらは標識化天然発生抗リガンドと共に使用することができる。あるいは、ハプテン性又は抗原性化合物を抗体と共に利用することができる。分子はまた例えば酵素又は発蛍光団を結合させることでシグナル生成化合物に直接結合することできる。標識体の検出手段は当業者に良く知られている。即ち、例えば標識体が放射性標識体の場合、検出手段にはシンチレーションカウンター、オートラジオグラフィーの様な写真フィルム、又はストレージ蛍光団イメージングが含まれる。標識体が蛍光標識体の場合には、それは適当な波長光により発蛍光団を励起し、生じた蛍光を検出することで検出されるだろう。蛍光は肉眼、写真フィルムによる手段、電荷結合素子CCDsの様な電子的検出装置又は光電子倍増管の使用により検出される。同様に酵素標識体は、酵素に対し適当な基質を供与し、生じた反応産物を検出することで検出されるだろう。また単純着色標識体は標識体に付随する色彩を観察することで検出されるだろう。発蛍光団の対をアッセイに使用する場合には、多くの場合それらが異なる発光パターンを持ち、それによりそれらを容易に区別できるものが好ましい。517ここで使用する用語本質的に同一は、アミノ酸を比較する場合に於いては、最大一致例に関し比較し整列させた場合に、配列が少なくとも約70、少なくとも約80、又は少なくとも90のアミノ酸同一性を有することを意味する。パーセント配列同一性及び配列類似性を決定するのに好適なアルゴニズムはFASTAアルゴリズムであり、Pearson、WRLipmanDJ1998ProcNatlAcadSciUSA852444に記載されている。またWRPearson1996MethodsEnzymol266227258参照。パーセント同一性を計算するためにDNA列のFASTAアラインメント中に使用される好適パラメータは最適化され、BL50マトリックス15;5ktuple2;ペナルティー40、最適化28;ギャップペナルティー12、ギャプ長ペナルティー=2及び幅16である。518ここで使用する造血細胞にはリンパ球T細胞、B細胞及びNK細胞、単球及び顆粒球を含む白血球即ち好中球、好塩基球、好酸球、マクロファージ、樹状細胞、巨大核細胞、網状赤血球、赤血球及びCD34幹細胞が含まれる。6発明の詳細な説明本発明者はPDZ棚泊質及びPL蛋白質間の相互作用が造血細胞及び免疫反応に関わるその他細胞の生物学的機能に重要かつ広範な役割を果たすことを見いだした。PDZPL相互作用は神経系即ち神経単位では既知であったが、造血細胞機能、特にT細胞及びB細胞の機能に於ける普遍的重要性及び免疫反応の変調に於けるそれらの機能的役割は知られていなかった。特に驚くべきことに本発明者は、造血系での細胞細胞相互作用を伝達する細胞接着分子がPDZ結合蛋白質PL蛋白質であり、PDZ蛋白質に結合することを見いだした。発明者は免疫系細胞に存在するPDZ蛋白質とPL蛋白質間の多数の相互作用を特定し、発明はこれら相互作用を阻害することで免疫系内の生物学的機能に影響する作用物質及び方法を提供する。ここで使用する場合、細胞の文脈中での用語生物学的機能は細胞により通常実施される検出可能な生物学的滑動、例えば増殖、細胞活性化例えばT細胞活性化、B細胞活性化、TB細胞共役形成、サイトカイン放出、脱顆粒、チロシンリン酸化、イオン例えばカルシウム流入、代謝活性、アポトーシス、遺伝子発現の変化、細胞構造の維持、細胞移動、基質への接着、シグナル伝達、細胞細胞相互作用及びここに記したあるいは当分野既知のその他事象の様な表現形の変化を表す。一面において本発明は免疫機能に必要な造血細胞、例えばT細胞及びB細胞、又はその他細胞例えば内皮細胞の生物学的活性を制御するためのペプチド、ペプチド類似体又は模擬体、医薬組成体及びそれら組成体を利用する方法に関する。発明は更に、造血細胞活性及び免疫機能を変調することを目的とした組成体の使用方法、並びにそれら阻害剤に関するアッセイに関する。表2はT細胞及びB細胞での蛋白質相互作用の広範な分析をまとめている。その大部分について免疫系細胞での発現は従来知られていなかったPDZ蛋白質は表2の上列に記載されている。表の第1縦列にはPL蛋白質が記載されている。A又はGの文字が印されたマトリックス位置は、PDZ蛋白質とPL間の相互作用が新規結合アッセイ例えば下記62に詳細記載にて検出されたことを示している。空欄は相互作用が発明のアッセイを使用しても検出されなかったことを意味している。星印はPLPDZ相互作用が既に科学文献中に報告されていることを示している。ここに記した様に表2掲載のPDZ蛋白質はPDZドメインを含む天然発生蛋白質である。本発明は特に造血細胞に於けるPDZ蛋白質とPL蛋白質間相互作用の検出及び変調を目的としている。例示のPL蛋白質は表2に記載されている。特に下記論ずる様に、これらPL蛋白質の多くは、いずれの細胞系でもその様には従来認められていなかった。多様なPL蛋白質分類が知られており、ここに記したPL蛋白質はPL接着蛋白質PLイオンチャンネル蛋白質PLアダプター蛋白質PL細胞内蛋白質及びPLサイトカイン受容体蛋白質として特徴付けることができる。ここで使用される接着蛋白質は、別個の細胞上にある細胞表面分子例えば膜貫通蛋白質又は表面蛋白質と直接接触することで細胞細胞相互作用に関係する細胞表面蛋白質である。即ち、PL接着蛋白質を発現している細胞が適当な別細胞に接触すると、PL接着蛋白質は2細胞の境界面に局在し、第2細胞上の細胞表面分子と直接接する。細胞細胞境界面は2種類の細胞の原形質膜が閉鎖する一般に<10nm、多くは約1nm領域である。典型的には、直接分子接触はヴァンデルワールス力が有意である距離、一般には約1nm未満の距離の分子相互作用を意味する。PL接着蛋白質例にはCD6;CD49Eアルファ4、CD49Fa型、アルファ6;CD138シンデカン;CLASP1;CLASP4;VCAM1;CLASP2;DNAM1;CD83;CD44長型;CD97;CD55L;CD3n;DOCK2;CD34及びFceRIbが含まれる。即ち実施態様の一つでは、発明のPL蛋白質はPL接着蛋白質である。ある実施態様では、発明はここに詳細記す様に、PL接着蛋白質とPDZ蛋白質間の相互作用を阻害し、免疫反応を変調する方法及び作用物質を提供する。ある実施態様では、阻害又は変調は造血細胞内で起こる。関連実施態様では、阻害又は変調は内皮細胞内で起こる。関連実施態様では、阻害又は変調は上皮細胞、ケラチノ細胞、肝細胞、心筋細胞内に起こる。ここで使用する場合、イオンチャンネル蛋白質はそれ自体が脂質二重膜の一方にある水溶液からもう一方にある水溶液へのイオンの通過を触媒する膜貫通蛋白質を意味する例えば膜内に小孔を形成することによる。PLイオンチャンネル蛋白質の1例はKv13である。即ち実施態様の一つでは、発明のPL蛋白質はPLイオンチャンネル蛋白質である。ある実施態様では、発明はここに詳細記す様に、PLイオンチャンネル蛋白質とPDZ蛋白質間の相互作用を阻害し、免疫反応を変調する方法及び作用物質を提供する。ある実施態様では、阻害又は変調は造血細胞内に起こる。関連実施態様では、阻害又は変調は内皮細胞内で起こる。ここで使用する場合、細胞内即ち細胞質蛋白質は当分野一般的な意味を有しており、膜に結合しない蛋白質、例えば膜貫通ドメインを持たない蛋白質を表す。即ち、実施態様の一つでは、発明のPL蛋白質はPL細胞内蛋白質である。PL細胞内蛋白質の例にはグリコフォリンC及びLPAPが含まれる。ある実施態様では、発明はここに詳細記す様にPL細胞質蛋白質とPDZ蛋白質間相互作用を阻害し、免疫反応を変調する方法及び作用物質を提供する。ある実施態様では、阻害又は変調は造血細胞内に起こる。関連実施態様では、阻害又は変調は内皮細胞内で起こる。ここで使用する場合、サイトカイン受容体は当分野一般的な意味を有しており、サイトカインに特異的に結合する細胞外ドメインを持つ膜蛋白質を表す。PLサイトカイン受容体蛋白質の例にはCDW125IL5R、CDW128A細胞例えば造血細胞活性化又は移動を伝達する蛋白質、あるタイプの細胞でのアポトーシスを伝達しない蛋白質G蛋白質にカップリングした7膜貫通螺旋受容体以外の蛋白質、G蛋白質カップリング7膜貫通螺旋受容体であるがサイトカイン受容体でない蛋白質、又はG蛋白質カップリング7膜貫通螺旋受容体でなく、サイトカイン受容体である蛋白質。61造血細胞に発現されたPDZドメイン含有蛋白質の検出上記の如く、本発明者は驚くべきことに複数のPDZ蛋白質が免疫系細胞に発現されており、免疫反応の変調にて基本的な生物学的役割を果たしていることを見いだした。PDZ蛋白質DLG1及びTIAM1は従来T細胞内に報告されている。本発明者はヒトESTデータベースのBLAST検索及び下記実験より、更にT細胞のMPP1、PDLG、VELI1、PSD95、シンテニン及びB細胞でのCASK、DLG1、DLG2、ZIPキナーゼ、シントロフィン2、Pdlg、PSD95及びシンテニンを含む7種類のPDZ蛋白質が造血細胞内に存在していることを見いだした。造血機能に於けるPDZ蛋白質の関与の全範囲を決定するために、発明者はT及びB細胞におけるPDZ蛋白質の体系的な研究に着手した。PDZドメイン含有蛋白質の包括的リストはキーワード検索によりSangerCentreデータベースPfamから取り出された。対応するcDNA配列はNCBIentrezデータベースを使ったGeneBank以後GenBankPDZ蛋白質cDNA配列から取り出された。PDZドメインをコードするDNA部分は、cDNA及び蛋白質配列を、CLUSTALWを使い並列させることで特定された。DNA蛋白質アラインメント情報に基づき、PDZ度面を包含するプライマーが設計された。免疫細胞での特定PDZ含有蛋白質の発現は、免疫細胞由来RNAを逆転写RTして得たcDNAをポリメラーゼチェインリアクションPCRすること即ちRTPCRで検出された。PCR、RTPCR及びその他核酸の分析及び取り扱い方法は良く知られており、Sambrookら、、200uMフェニルメチルスルホニルフルオリドが加えられ、更に20分間インキュベーションされた。細菌細胞溶解体は遠心分離されx20000g、上清は事前に1Xリン酸緩衝化食塩水PBSに膨潤させておいた再水和グルタチオンセファロース4BPharmacia、カタログ番号17076501に加えられた。上清セファロースのスラーリはカラムに注ぎ込まれ、少なくともベッド容積の20倍の1×PBSで洗浄された。GST融合蛋白質は0510mlの5mMグルタチオンを加えることでグルタチオンセファロースより溶出され、別分画として集められた。分画の濃度はBioRadProteinAssayカタログ番号5000006をメーカー指示書通りに用い決定された。最高濃度の融合蛋白質を含むこれら分画をプールし、1×PBS35グリセロールに対し透析された。融合蛋白質はSambrook記載の通りのSDSゲル電気泳動PAGEにより、その大きさ及び質に関しアッセイされた。融合蛋白質の一部はマイナス80°C及びマイナス20°Cに保存された。622候補PL蛋白質の同定及びペプチドの合成幾つかの非造血細胞例えば神経単位、上皮細胞では、特定のPDZドメインがPDZ結合蛋白質のC末端残基により結合されていることが知られている。造血及び上皮細胞で機能しているPL蛋白質を同定するため、細胞表面受容体蛋白質が同定され、各蛋白質のc末端に相当する配列を有するペプチドが合成された。表4にこれら蛋白質が掲載されており、対応するC末端配列及びGeneBank受付番号が提供されている。Clasp1はWO0020434号2000年4月13日公開に記載されている。Clasp2及びClasp4は共に2000年4月11日に提出の同時係属出願USSN09547276号代理人整理番号20054000200及び60196527号代理人整理番号20054000400に記載されている。規定配列例えば指示蛋白質のカルボキシル末端に対応するの合成ペプチドは標準的な樹脂ベース法米国特許第4108846号参照、及びCaruthersら、1980、NucleicAcidsResSympSer215223Hornら、1980、NucelicAcidsResSympSer225232Robergeら、1995、Science269202も参照。ここに記載のアッセイに使用されたペプチドはFMOCGuy及びFields、1997、MethEnz2896783;Wellings及びAtherton、1997、MethEnz2894467参照により調整された。幾つかの例では例えば発明のA及びGアッセイでの使用に関し、ペプチドは触媒量の塩基と共に4倍過剰量のビオチンメチルエステルのジメチルスルホオキシド液との反応によりアミノ末端にビオチンが標識される。ペプチドは適当な酸化防止剤例えばエタンジチオール及び過剰の凍結乾燥溶媒存在下にハロゲン化物含有酸例えばトリフルオロ酢酸を使用して樹脂から切り出される。凍結乾燥後、ペプチドは再溶解され逆相高性能液体クロマトグラフィーHPLCにより精製された。適当なHPLC溶媒系の一つは、水01トリフルオロ酢酸のベース溶媒中のアセトニトリル01トリフルオロ酢酸量を増加させながら5mL分でランニングするBydacC18半調整的カラムを含む。HPLC精製後、ペプチドの特性はMALDIカチオンモードマススペクトロメトリーにより確認された。上記の如く、例示のビオチン化ペプチドが表4に示されている。623PDZPL相互作用の検出免疫系細胞が多くのPDZ蛋白質及び同様の多くの候補PL蛋白質を含むという決定より、これら蛋白質間の特異的PDZPL相互作用の特徴付けにはこれら相互作用に関する信頼できる迅速アッセイが必要であることが発明者に明らかになった。当分野既知の各種アッセイ様式を使用し、特定蛋白質と特異的に反応するリガンドを選択することができる。例えば固相ELISA免疫アッセイ、免疫沈降、Biacore及びウエスタンブロットアッセイを利用し、PDZドメインポリペプチドに特異的に結合するペプチドを特定することができる。上記の如く、PDZPL相互作用を検出するために相補完する2種類のアッセイが開発された。それぞれではPDZPL対の一方の結合相手が固定化され、そして第2結合相手の結合能力が決定された。上記これらアッセイを使用することで数時間に数百から数千の潜在的PDZリガンド相互作用をスクリーニングすることができる。即ち、これらアッセイを利用して造血細胞内の未だ新規であるPDZPL相互作用を特定することができる。更に、それらを利用しPDZPL相互作用のアゴニストを特定することができる下記参照。6231Aアッセイ固定化PLペプチドを利用したPDZリガンド結合の検出一面において発明は、アビジンコーティング表面にビオチン化候補PLペプチドが固定化されているアッセイを提供する。そしてこの表面へのPDZドメイン融合蛋白質の結合が測定される。好適実施態様ではPDZドメイン融合蛋白質はGSTPDZドメイン融合蛋白質であり、アッセイは次の様に実施される:1アビジンが表面、例えば蛋白質結合表面に結合される。実施態様の一つでは、ウエル当たり20ngmLのアビジンPierceのカルシウム及びマグネシウムを含まないリン酸緩衝化食塩水溶液、pH74PBS、GibcoBRL100uLを4°C、12時間添加することで、アビジンはポリスチレン製96ウエルプレート例えばNucnPolysorb標識化ポリクローナルウサギ抗ヤギ免疫グロブリン抗体がプレートに加えられ、20分間、4°Cにて反応させる。プレートを02のTween20を含む50mMTris、pH80にて3回洗浄し、ウエル当たり100uLのHRP基質液TMP、Dakoを20分間、室温RTにて加え、発色さる。HRPとその基質との反応はウエル当たり100uLの1M硫酸を加えることで停止され、プレートの各ウエルの光学密度ODを450nmにて測定した。5PLペプチド及びPDZドメインポリペプチドの特異的結合は、PLペプチド及びPDZドメインポリペプチドが組合わさったウエルからのシグナルとバックグランドシグナルとを比較することで検出される。バックグランドシグナルは陰性コントロールに見いだされるシグナルである。典型的には特異的又は選択的反応はバックグランドシグナルの少なくとも2倍、より典型的にはバックグランドの5倍より高く、最も典型的にはバックグランドシグナルの10又はそれ以上の倍数である。更に、統計有意の反応は少なくとも2標準誤差、より典型的には4標準誤差、最も典型的には6又はそれ以上の標準誤差によりシグナルとバックグランドシグナルとが区別される反応の多重測定を含む。従って、シグナルの反復測定とバックグラントの反復測定とを比較する統計試験例えばT試験のp値は005未満、より典型的にはp値は001未満、最も典型的にはp値は0001未満であろう。上記の如く、Aアッセイの実施態様の一つでは、GSTPDZドメイン融合蛋白質のPLペプチドに暴露されていないアビジン表面への結合からのシグナルは好適な陰性コントロール時にBと称される。PLペプチドに暴露され即ち被覆された、アビジンにてコーティングされた表面へのGSTポリペプチド単独の結合に由来するシグナルは第2の好適陰性コントロール時にBと称されるである。全ての測定は複数回実施されるため即ち最低2回、結合の決定には複数回測定の算術的平均または平均値とも言うが使用され、結合測定の誤差確率の決定には平均の標準誤差が使用される。N回測定の平均の標準誤差は以下の平方根に等しい:各測定値とその平均値との差の平方の合計をとの積で除する。即ち実施態様の一つでは、PDZ蛋白質のプレート結合PLペプチドへの特異的結合は、特定のPLPDZの組合せに関する平均シグナル平均S及びシグナルの標準誤差SEと、平均B1及び/又は平均B2とを比較することで決定される。表2では、結合は1平均Sが平均B1の少なくとも2倍であり、B2の少なくとも2倍であり、そして2平均Sが平均B1及び平均B2の両方に比べ少なくとも6標準誤差6SEである場合に、特異的であるとされるマトリックスではAと記載される。更に表2にまとめた実験では追加の判断基準を加えることで、上記特異的とされた相互作用が試験対象のPDZ融合蛋白質とPLペプチドとを組み合わせることで各通常バックグランドより高いシグナルを生じる傾向が生まれた結果では無いこと確認した。この判断基準は、3平均Sは平均B1と平均B2の積の少なくとも20倍であるというものである。20倍という因数は、B1及びB2の少なくとも一方が01OD単位より小さいことを意味しており、従って平均B1及び平均B2の積の20倍は一般に平均1の2倍と平均B2の2倍より小さくなり、判断基準3の厳密性を判断基準1より低くしている。平均B1及び平均B2が共に01OD単位即ち試験した特定PDZ融合蛋白質及びPLペプチドが通常のバックグランドより高い値を示す傾向があるより大きい極僅かな例でのみ、判断基準3は判断基準1に比べより厳密となる。6232Gアッセイ-固定化PDZドメイン融合蛋白質を用いたPDZリガンド結合の検出一面では発明はGSTPDZドメイン融合蛋白質が表面に固定されているアッセイGアッセイを提供する。ここではこの表面への標識化PLペプチド表4に掲載の結合が測定される。好適実施態様では、アッセイは次の様に実施される:1PDZドメインポリペプチドは表面、例えば蛋白質結合表面に結合される。好適実施態様では、1又はそれ以上のPDZドメインを含むGSTPDZドメイン融合蛋白質がポリスチレン製96ウエルプレートに結合される。GSTPDZドメイン融合蛋白質は当業者既知の各種標準的方法によりプレートに結合させることができるが、プレートへの融合蛋白質の結合の工程がPDZドメインのリガンド結合特性を買えない様に注意しなければならない。実施態様の一つでは、GSTPDZドメイン融合蛋白質は96ウエルプレート上にコーティングされた抗GST抗体を介して結合される。プレートへの適当な結合は次の様にして達成することができる:a.ウエル当たり100uLの5ugmLヤギ抗GSTポリクローナル抗体PiercePBS溶液を、ポリスチレン製96ウエルプレート例えばNuncPolysorbに4°Cで12時間加える。b.ウエル当たり200uLのPBSBSAを2時間、4°Cで加えプレートをブロックする。c.プレートを3回、PBSにて洗浄する。d.ウエル当たり50uLの5ugmLのGSTPDZドメイン融合蛋白質又は陰性コントロールとしてGSTポリペプチドのみ即ち融合蛋白質でないのPBSBSA溶液を2時間、4°Cにてプレートに加える。e.プレートを再度PBSで3回洗浄する。2ウエル当たり50uLの20uMのビオチン化ペプチドPBSBSA液を10分間、4°Cにて加え、更に25°Cにて20分間インキュベーションすることでビオチン化PLペプチド又は候補PLペプチド、例えば表4に示される様なを表面と反応させる。プレートはPBSにて3回洗浄される。3GSTPDZ融合蛋白質表面へのビオチン化ペプチドの結合は、当分野既知の各種方法及び検出装置を使い検出できる。実施態様の一つでは、ウエル当たり100uLのBSAPBSに溶解された05ugmLのストレプトアビジン西洋ワサビHRP標識PSAPBS抗GST抗体が加えられ、4°C、20分間反応させる。続いてプレートは02のTween20を含む50mMTris、pH80にて5回洗浄され、ウエル当たり100uLのHRP基質液TMP、Dakoが20分間、室温RTにて加えられ発色する。HRPとその基質との反応はウエル当たり100uLの1M硫酸を加えることで停止され、プレートの各ウエルの光学密度ODを450nmにて測定する。4PLペプチド及びPDZドメインポリペプチドの特異的結合は、PLペプチド及びPDZドメインポリペプチドが組合わされたウエルからのシグナルとバックグランドシグナルとを比較することで検出される。バックグランドシグナルは陰性コントロールに見いだされるシグナルである。典型的には特異的又は選択的反応はバックグランドシグナルの少なくとも2倍、より典型的にはバックグランドの5倍より高く、最も典型的にはバックグランドシグナルの10又はそれ以上である。更に、統計有意の反応は少なくとも2標準誤差、より典型的には4標準誤差、最も典型的には6又はそれ以上の標準誤差によりシグナルとバックグランドシグナルとが区別される反応の多重測定を含む。従って、シグナルの反復測定とバックグラントの反復測定とを比較する統計試験例えばT試験のp値は005未満、より典型的にはp値は001未満、最も典型的にはp値は0001未満であろう。上記の如くGアッセイの実施態様の一つでは、固定化表面結合された単独GSTポリペプチドに対する上記PLペプチドの結合からのシグナルが好適な陰性コントロール時にB1と称されるである。全ての測定は複数回実施されるため即ち最低2回、結合の決定には複数回測定の算術平均または平均値とも言うが使用され、結合測定の誤差確率の決定には平均の標準誤差が使用される。N快速艇の平均の標準誤差は以下の平方根に等しい:各測定値とその平均値との差の平方の合計をとの積で除する。即ち実施態様の一つでは、PDZ蛋白質のプレート結合ペプチドへの特異的結合は、特定のPLPDZの組合せの平均シグナル平均S及びシグナルの標準誤差SEと、平均B1とを比較することで決定される。表2にまとめられた実験では、結合は1平均Sが平均B1の少なくとも2倍であり、そして2平均Sが平均B1に比べ少なくとも6標準誤差6SEである場合に、特異的であるとされる。例示のGアッセイの結果は図1A1Dに示されている。624アッセイの変型上記の如く、上記アッセイ中の多くの段階を変えることができること、例えばPL及びPDZ含有蛋白質に各種基質を使用することができること;融合蛋白質を含む異なる型のPDZを使用できること;PDZPL相互作用検出に異なる標識体を使用できること;及び異なる検出法が利用できることが理解されるだろう。PDZPL検出アッセイはPL及びPDZ含有蛋白質を結合する各種表面を利用できる。例えば表面は、それへのPL蛋白質又はPDZ含有蛋白質の接着を最適化する素材例えばポリスチレンより形成されたアッセイプレートでよい。一般にアッセイプレートの個々のウエルは高い面積対容積比を有しており、従って好適形状は平底ウエルアッセイの蛋白質が接着される場所である。その他表面には、ポリスチレン製又はガラス製ビーズ、ポリスチレン製又はガラス製スライド等がふくまれるが、これらに限定されない。例えばアッセイプレートはマイクロタイタープレートである。用語マイクロタイタープレートはここで使用する場合には、複数ウエル型アッセイプレート、例えば約30ないし200個の個別ウエル、通常は96個のウエルを有するアッセイプレートを意味する。あるいは、高密度アレーもよく使用され、マイクロタイタープレートの個別ウエルは最大約250ulの容積を保持するだろう。好都合には、アッセイプレートは96ウエル型ポリスチレンプレートBectonDickinsonLabwareLincolnParkNJより発売されている様なであり、自動化及び大量スクリーニングが可能である。その他表面にはNuncMatrisorp、InterMedDenmarkより販売されている様なポリスチレン製マイクロタイターELISAプレートが含まれる。多くはその中に懸濁された水性サンプルを含む緩衝液約50ulないし300ul、より好ましくは100ulないし200ulがアッセイプレートの各ウエルに加えられるだろう。発明の検出可能標識体は分子上記の様なに直接又は間接に標識される検出可能な化合物又は組成体であろう。標識体はそれ自体により例えば放射性同位元素標識体又は蛍光標識体検出可能であるか、又は検出可能な酵素標識体の例では基質化合物又は組成体の化学変化を触媒することができる。好適標識体は非放射性の色試薬の色変化を触媒する酵素標識体である。時に標識体は抗体に間接的に標識される。当業者は間接標識に関する様々な技術を知っている。例えば抗体はビオチンと標識でき、上記標識体のいずれかの分類をアビジンに標識する、またはその逆を行うことができる上記A及びGアッセイ参照。ビオチンはアビジンに選択的に結合し、従って標識体は抗体と間接的に結合できる。ビオチンアビジン結合及び同様アッセイを含む技術の概要についてはAusubel、上記を参照。あるいは、標識体と抗体との間接的結合を達成するために、抗体は小ハプテン例えばジゴキシンで標識され、そして上記標識体とは異なるタイプの標識体が抗ハプテン抗体で標識される例えば抗ジゴキシン抗体。こうして抗体による標識体の間接的標識が達成できる。変化型アッセイには各種洗浄段階も含むことができる。洗浄とは、固相から非結合物質例えば非接着細胞、非接着捕捉体、非結合リガンド、受容体、受容体構築物、細胞溶解物、又はHRP抗体を除く様に固相を水性液通常は緩衝液又は細胞培地にさらすことを意味する。バックグランドノイズを下げるため、洗浄液中に界面活性剤例えばTritonXを含めると好都合である。一般には、水性洗浄液は洗浄後アッセイプレートのウエルよりデカンテーションされる。好都合には、洗浄は自動洗浄装置を使用し実施できる。時に複数洗浄段階例えば約1ないし10洗浄段階が必要とされることがある。各種緩衝液もPDZPLアッセイに使用できる。例えば各種ブロッキング緩衝液を利用してアッセイバックグランドを下げることができる。用語ブロッキング緩衝液は、基質露出面に結合でき、PL又はPDZ含有蛋白質では被覆されないブロッキング化合物を少なくとも1種類含む水性のpH緩衝化液を表す。ブロッキング化合物は通常ウシ血清アルブミンBSA、ゼラチン、カゼイン、又は粉乳の様な蛋白質であり、アッセイ中のいずれの試薬とも交叉反応しない。ブロック緩衝液は通常約7ないし75の間のpHを備えており、好適緩衝作用物質にはリン酸及びTRISが含まれる。各種酵素基質の組合せもPDZPL相互作用の検出に利用できる。酵素基質の組合せの例には、例えば:i基質として過酸化水素を利用し、過酸化水素が色素前駆体例えばオルトフェニレンジアミン[OPD]又は33’55’テトラメチルベンジジン塩酸塩[TMB]を酸化する西洋ワサビペルオキシダーゼHRPO上記の様な、iiパラニトロフェニルリン酸塩を発色基質として利用するアルカリホスファターゼAP、iii発色基質例えばpニトロフェニルβDガラクトシダーゼ又は蛍光原基質4メチルウンベリフェリルβDガラクトシダーゼを利用するβDガラクトシダーゼβDGalを含む。その他多くの酵素基質組合せが当業者に利用可能である。これらの一般的レビューについては、共に参照されここに取り込まれている米国特許第4275149号及び第4318980号を参照。更に、便宜上ではあるが本発明は1次的にはPDZPL相互作用のアンタゴニストを表しているが、PDZPL相互作用のアゴニストもここに開示の方法、又はその容易に明らかになる変型により同定することができることが理解されるだろう。625PDLPL相互作用アッセイの結果上記の表2はここに記載のA及びGアッセイを利用し特異的結合が検出されたアッセイの結果を示している。表の上2行はGSTPDZ融合蛋白質表3参照に使用したPDZドメインの源を表している。第1縦列にはC末端ペプチド配列が由来した細胞表面蛋白質が表示されており、第2縦列コードにはアッセイに使用されたペプチドが表示されている表4参照。第3縦列Seqには、細胞表面蛋白質及びペプチドの4個C末端残基配列が示されている。マトリックス中では、AはAアッセイ中に検出された特異的結合を示している。GはGアッセイ中に検出された特異的結合を示している。星印はPDZ蛋白質及び細胞表面蛋白質またはそれぞれのサブドメイン間の対相互作用が他者により記載されていることを示している。6251新規PLモチーフ上記の如く、表2はPDZ蛋白質及び候補PLペプチド間の結合を検出するアッセイPRISMMATRIXと称するの結果を示している。特異的PDZPL相互作用の数はMATRIX及び主要アミノ酸より特定され、PDZ結合に重要位置PLモチーフはこれら結果より演繹される。MATRIXはPDZPL結合の組合せを包括的に分類するのに役立つばかりでなく、アッセイは更に新規PL蛋白質の迅速発見及び特徴付けを支援し、PLモチーフはPLPDZ相互作用阻害剤の合理的な薬剤設計及び合成にも役立つ。他研究者らは特定のPLモチーフがPDZ結合に重要であること、例えばC末端モチーフSTXVILDLG1に関し及びMPP1に関するYFYFILFを報告しているDoyleら、1996、Cell851067;Songyangら、1997、Science27573参照。しかし報告されたモチーフは十分に特異的でなく即ち数多くの蛋白質がこれら判断基準に合致するものの実際のPDZリガンドではない、少数のPDZ蛋白質のみをカバーするに過ぎなかった約10種類。PRISMMATRIXは、それが特異的PDZ結合をもたらす、又はもたらさないアミノ酸配列を正確に決定できることから、リガンド特異性の決定及びPDZ蛋白質のリガンド結合モチーフの演繹に利用できる。更に、アッセイは新規PDZドメイン結合モチーフ即ちPLモチーフ:CD6のC末端配列、ISAA;CD49EのC末端配列、TSDA;CD49FのC末端配列;TSDA;Clasp1のC末端配列、TSDA;CLASP4のC末端配列、YAEV;CD44のC末端配列、KIGV;IL5RのC末端配列、DSVF;BLR1のC末端配列LTTFの重要性を表している。これら新規PL配列を特定することで新規PLモチーフを定義できる下表5A参照。これら新規モチーフが規定される特異性は、MATRIXが陽性結果即ち特異的結合相互作用を生じるPDZPLの組合せ及び陰性結果即ち特異的結合を生じないPDZPLの組合せの両方を報告するという事実によって高められている。例えば、CD6のC末端配列SAA及びCD49EのC末端配列SDAはPDZドメインポリペプチド418に結合するが、CD166の関連C末端配列TEA及びCD148のC末端配列YIAは結合しない。このことから2位置にセリンを持ちアラニンで終止するポリペプチドの新規PLモチーフ下記モチーフ1が特定され、2位置がスレオニン及びチロシンであるポリペプチドが排除された。従ってものモチーフは従来特定された多くのモチーフよりより特異的である。その他の新規モチーフは表5Aに記載されている。6252結合クラスター表2はPDZGST融合蛋白質及びPLペプチドリガンドが共に相互に構造的類似分子になるような順番に配置されている。表2の作製及び本表を作成するために行った実験に於いて、各GSTPDZ融合蛋白質のPDZドメインについてCLUSTAL複数配列アラインメントソフトウエアーパッケージを利用してアミノ酸配列類似性に関し等級付けした。最大配列類似性を持つ蛋白質はマトリックス無いにて相互に最も近く配置された。PLペプチドリガンドについてはさらにアミノ酸類似性に基き順番付けしたが、PDZ結合に関し重要であると報告された残基に加重したDoyleら、1996、Cell851067。具体的には、ペプチドはまず最C末端残基0位置に基づき以下のアミノ酸の順番に並べた:G、A、C、S、T、N、Q、D、E、H、K、R、V、I、L、M、P、F、Y、W。同一C末端を持つペプチドの場合には、ペプチド結合に関し2番目に重要な残基、2位置の残基について上記に同一の順序付け方法を適用し、更に3位置、1位置と続ける。別方法では蛋白質を並べる場合に、リガンド結合にとって重要であることが既知である残基に追加加重する様にGSTPDZ融合体も並べることができる。表1のある領域に重要な結合相互作用が高密度に集まることは、特定のリガンド構造が特定のPDZドメインファミリーに結合する傾向にあることを示している。結果は、マトリックス中の幾つかのクラスターに多くの有意な結合相互作用が集まり、その他の領域には殆ど有意な結合相互作用がないことから、類似構造を持つPDZドメインが類似結合相互作用により類似構造リガンドと結合することを示している。これらの結果は、異なるPDZ蛋白質とそれらリガンド間に幾つかの構造相関性があることを示している。これら構造相関性を理解することは、特異的PDZ蛋白質にとって有望なリガンドのデータベースをスキャンし、これら新規相互作用の阻害剤設計の迅速化及びそれら阻害剤の副作用プロフィールの推測に利用できる。クラスターの最も顕著な例はマトリックスの縦列15に見られるCASK、MPP1、DLG1、PSD95及びNeDLG由来のPDZドメイン。我々のアッセイでは、CASKは試験したリガンドのうちの1種類、ニューレクシンとのみ有意に結合したこの相互作用は従来神経細胞に同定されていた。使用した順番付けシステムではCASKに最も近いMPP1はニューレクシンを含む5種類のリガンドのセットに結合した。特定されたMPP1リガンドは全て構造的に類似しており、バリンVで終止し、電荷アミノ酸E又はK~をC末端から3の位置に有していたC末端モチーフ;EKXXV。特定された5種類のMPP1リガンドの内4種類は、CASK及びMPP1に次に最も類似している蛋白質DLG1とも結合できる。DLG1はその他2種類の蛋白質、PSD95及びNeDLGとも良く相関している。これら3種類の蛋白質はそれぞれ従来報告のモチーフSTYXVILで終止しているSongyangら、1997、Science27573。興味深いことに、末端リガンド残基がバリンの場合には、従来未特定の2位置の他残基は結合に関し互換的であり、C末端配列AEV及びELVと共に有意な結合を生じる。これは従来未確認であったPDZリガンド結合に於ける柔軟性を反映する一方で、我々のアッセイにて検出された相互作用の特異性は重要でない結合事象を含む縦列15の上部及び下部の広い領域に反映されている。これらの領域は、VIL以外の残基で終止する潜在的リガンドはCASK、MPP1、DLG1、PSD95又はNeDLGに有意に結合しないことを表している。MPP1に関しては、MPP1の既知リガンドである糖蛋白質C、Marfatiaら、1997、JBiolChem27224191は我々の試験ではMPPIに有意に結合しなかったが、バリンによく似たイソロイシンで終止し、C末端の3位置に電荷残基を有しているマトリックス上にあるより小さなクラスターもまた特定PDZドメインのリガンド特異性に関する有益な情報を提供する。例えば5種類のリガンドは、従来研究されていないPDZドメイン含有蛋白質である418kD蛋白質似たいし、G及びAアッセイの両方で有意に結合する。これらリガンドは全てA、V、I又はLで終止しており、5種類の内4種類が2位置にセリンを持ち、このPDZドメインに関するC末端リガンドモチーフはSXAVILである。どうようにKIAA0561に特異的に結合する3種類のリガンドの内2種類が式中のXが非芳香族アミノ酸であるC末端モチーフXSTDEVILに合致する。興味深いことに、これらリガンドの一つはKIAA0561に最も関連するTAX2にも結合する。同様にprIL16と結合する2種類のリガンドは3位置に電荷アミノ酸を、2位置には疎水性アミノ酸を、そして末端位置にはバリンを有している。PDZドメインのリガンド特異性を規定する最後の興味深い例はPTN4である。PTN4に有意に結合する2種類のリガンドはそれらのC末端2残基に関しては密に相関していないが、共にC末端モチーフDESXVILFYに合致する。特定のPDZ蛋白質のリガンド特異性を特徴付けるこれらモチーフは表5Bにまとめられている。これらモチーフにより、これら特定PDZ蛋白質に結合する新規リガンドPL蛋白質に関するデータベース検索が可能になる。これらPDZ蛋白質に結合するPL蛋白質に関する知識により、下記ここに開示の方法を利用し、これら相互作用の阻害剤を設計することができる。更に、特定PDZ蛋白質に結合するPL蛋白質のセットに関する知識を利用することで、このPDZを標的とする化合物の有用性及び副作用を推測することができる。63PDZおよびリガンドの結合親和性本発明のAおよびG検定を用いてPDZリガンドペプチドとPDZドメインポリペプチドの結合の見掛けの親和性を決めることができる。見掛けの親和性は、第二の分子の結合例えば、リガンドと受容体の結合を飽和するのに必要なある分子の濃度に基づいて決められる。PDZ-リガンド結合の見掛けの親和性の定量化のために特に有用な二つのアプローチを下記に提供する。アプローチ1:1GST/PDZ融合タンパク質ならびにネガティブ対照としてのGST単独を、G検定のために上記の記載と同様に、表面例えば、96ウェルプレートと結合させ、その表面をブロックし、洗浄する。2ビオチニル化したPLペプチドの溶液例えば、表4に示すようなを、PBS/BSA中の濃度を増加させて例えば、01uM、033uM、1uM、33uM、10uM、33uM、および100uM表面に1ウェル当たり50uL加える。一実施形態においては、PLペプチドを結合したGST/PDZ融合タンパク質ならびにGST単独のネガティブ対照と4°Cで10分間、続いて25°Cで20分間反応させる。プレートを氷で冷やしたPBSで3回洗浄して結合していない標識されたペプチドを除去する。3PLペプチドと固定化したPDZドメインのポリペプチドの結合を、G検定のために上記の記載と同様に検出する。4ペプチドの各濃度に対する正味の結合信号は、ペプチドのGST/PDZ融合タンパク質との結合からペプチドのGST単独との結合を差し引くことによって決められる。次いで正味の結合信号を、リガンド濃度の関数としてプロットし、そのプロットを下記の式に当てはめる例えば、Kaleidagraphのソフトウェアパッケージの曲線当てはめ用アルゴリズムを用いて。下式で、信号リガンドはPLペプチド濃度リガンドにおける結合信号であり、Kdは結合事象の見掛けの親和性であり、また飽和結合度は実験データに対する適合の最適化のための曲線当てはめ用アルゴリズムによって決まる定数である。上式を高い信頼性で適用するためには、実験的にうまく試験された最高ペプチドリガンド濃度が、計算上のKdよりも大きいかまたは少なくともほぼ同じであることが必要であるすなわち、最大測定結合度は計算上の飽和結合度とほぼ同じであるべきである。上記の基準を満たすことが困難であることが判明した場合には別のアプローチ下記を用いることができる。アプローチ1を用いた場合に得られる結果を図2Aおよび図2Bに例示する。図2は、ビオチニル化したCLASP2図2AまたはFas図2Bの様々な濃度を示す。C末端のペプチドを、固定化したプレートと結合したGSTポリペプチドまたはGDT/PDZ融合タンパク質GST/DLG1、GST/NeDLG、およびGDT/PSD95と複製中に反応させた。信号を正規化し、プロットし、飽和結合曲線に当てはめた結果、DLG1-CLASP2相互作用に対しては見掛けの親和性21uM、NeDLG-CLASP2相互作用に対しては見掛けの親和性75uM、PSD95-CLASP2相互作用に対しては見掛けの親和性45uM、またDLG1-Fas相互作用に対しては見掛けの親和性54uM、NeDLG-Fas相互作用に対しては見掛けの親和性54uM、PSD95-Fas相互作用に対しては見掛けの親和性85uMが得られた。アプローチ2:1PDZドメインのポリペプチド濃度を固定し、標識したPLペプチド例えば、ビオチンまたはフルオレセインで標識する。代表的なペプチドのアミノ酸配列については表4を参照されたいの濃度を増加して混合し、溶液にして反応させた。一実施形態において好ましいペプチド濃度は01uM、1uM、10uM、100uM、および1mMである。様々な実施形態における適切な反応時間は、温度4°Cから37°Cの範囲で10分から2日の範囲にある。幾つかの実施形態においてはその同一の反応を、対照として非PDZドメイン含有タンパク質を用いて行なうこともできる例えば、PDZドメインのポリペプチドが融合タンパク質の場合、その融合の相手を用いることができる。2PDZ-リガンド複合体は、当業界で周知の様々な方法を用いて結合していない標識されたペプチドから分離することができる。例えば複合体は、高性能サイズ排除クロマトグラフィHPSEC、ゲル濾過Rabinowitz等のImmunity9699、アフィニティクロマトグラフィ例えば、グルタチオンセファロースビーズを用いて、および親和吸収例えば、上記に記載のように抗GST被覆プレートと結合させることによりを用いて分離することができる。3PDZ-リガンド複合体は、当業者には周知の様々な方法および検出器を用いてペプチドリガンド上の標識の存在に基づいて検出される。例えば、標識がフレオレセインであり、分離がHPSECを用いて達成される場合、インライン型フレオレセイン検出器を用いることができる。結合はまた、G検定用の上記の記載と同様に検出することもできる。4PTZ-リガンド結合信号をリガンドの濃度の関数としてプロットし、そのプロットを下記の式に当てはめる例えば、Kaleidagraphのソフトウェアパッケージの曲線当てはめ用アルゴリズムを用いて。下式で、信号リガンドはPLペプチド濃度リガンドにおける結合信号であり、Kdは結合事象の見掛けの親和性であり、また飽和結合度は実験データに対する適合の最適化のための曲線当てはめ用アルゴリズムによって決まる定数である。PTZドメインポリペプチドに対する標識されたペプチドリガンドの結合親和性の測定は、この相互作用の親和性すなわち見掛けの親和性の知識が、よく知られている効力を有する相互作用インヒビターの合理的設計を可能にするので役に立つ実施例2を参照されたい。阻害におけるインヒビターの効力は、PDZドメインに対する標識されたペプチドリガンドの結合の見掛けの親和性に類似しているすなわち、その1桁の大きさ以内にあるはずである。64新規なPDZドメイン結合部分を同定するための、またPDZタンパク質-PLタンパク質結合のインヒビターを同定するための検定主にPDZドメインのポリペプチドとPLタンパク質の間の相互作用の同定という観点から上記に記述したが、上記記載の検定法およびその他の検定法もまた、その他の分子例えば、ペプチド模倣物、小分子などとPDZドメインの配列の結合を同定するために用いることができる。例えば、本明細書に開示した検定法を用いて化合物の組合せまたは別のライブラリーをスクリーニングすることができる。ライブラリーのスクリーニングは、様々な一般に知られている方法のいずれかによって達成することができる。例えば、ペプチドのライブラリーについて開示されている下記の参考資料、すなわちParmleyおよびSmithの論文AdvExpMedBiol251215218、ScottおよびSmithの論文Science249386390、Fowlkes等の論文BioTechniques13422427、Oldenburg等の論文ProcNatlAcadSciUSA8953935397、Yu等の論文Cell76933945、Staudt等の論文Science241577580、Bock等の論文Nature355564566、Tuerk等の論文ProcNatlAcadSciUSA8969886992、Ellington等の論文Nature355850852、ladner他の米国特許第5096815号、第5223409号、および第5198346号、RebarおよびPaboの論文Science263671673、ならびに国際特許公開第9418318号を参照されたい。ある特殊な実施形態においてスクリーニングは、ライブラリーのメンバーを固形の支持体上に固定した造血細胞のPDZドメインのポリペプチドと接触させ、タンパク質と結合するこれらライブラリーメンバーを収集することによって行なうことができる例えば、上記でG検定において記述したように。パンニング技法と呼ばれるこのようなスクリーニング法の例は、ParmleyおよびSmithの論文Gene73305318、Fowlkes等の論文BioTechniques13422427、国際特許公開第9418318号、および本明細書で先に引用した参考資料中に例として記載されている。別の実施形態においては、酵母中で相互作用するタンパク質を選別するために二つのハイブリッドシステムFieldsおよびSongの論文Nature340245246、Chien等の論文ProcNatlAcadSciUSA8895789582を用いてPDZドメインを含有するタンパク質と特異的に結合する分子を同定することができる。その上、同定された分子はさらにトランスメンブレン受容体のPDZドメインとの相互作用を阻害する能力が試験される。本発明の一態様においては、PDZタンパク質とPLタンパク質の間の相互作用のアンタゴニストが同定される。一実施形態において、上記に記載したA検定の修正形態を用いてアンタゴニストを同定する。一実施形態において、上記に記載したG検定の修正形態を用いてアンタゴニストを同定する。一実施形態においては、スクリーニング検定を用いて造血細胞中のPDZドメインと特異的に結合する分子を検出する。このような分子はPDZタンパク質が仲介する細胞機能例えば、細胞の活性化、例えばT細胞の活性化;小胞輸送;サイトカインの放出;細胞増殖因子;転写変化;サイトスケレチン配列;細胞運動;化学走性などのアゴニストまたはアンタゴニストとして有用である。一実施形態においてこのような検定は、薬物開発用の白血球活性化インヒビターをスクリーニングするために行なわれる。こうして本発明は、造血細胞中のPDZドメイン含有タンパク質と特異的に結合する分子を検出ための検定法を提供する。例えば、PDZドメインをコード化する核酸を発現する組換え細胞を用いてこれら検定でPDZドメインを産生し、そのドメインと結合する分子をスクリーニングすることができる。分子を結合に導く条件下でPDZドメインまたはその断片と接触させ、次いでそのようなドメインと特異的に結合する分子を同定する。前記を実施するために用いることができる方法は、当業界では一般に知られている。例として、ランダムもしくは組合せペプチドまたは非ペプチドライブラリーなどの多様なライブラリーを、造血細胞中でPDZドメインと特異的に結合する分子を得るためにスクリーニングすることができる。使用することができる多くのライブラリー、例えば化学的に合成されたライブラリー、組換え型例えばファージ表示ライブラリー、およびインビトロ翻訳ベースのライブラリーが当業界で知られている。化学的に合成したライブラリーの例は、Fodor等の論文Science251767773、Houghten等の論文Nature3548486、Lam等の論文Nature3548284、Medynskiの論文BioTechnology12709710、Gallop等の論文JMedicinalChemistry3712331251、Ohlmeyer等の論文ProcNatlAcadSciUSA901092210926、Erb等の論文ProcNatlAcadSciUSA911142211426、Houghten等の論文Biotechniques13412、Jayawickreme等の論文ProcNatlAcadSciUSA9116141618、Salmon等の論文ProcNatlAcadSciUSA901170811712、国際特許公開第9320242号、ならびにBrennerおよびLernerの論文ProcNatlAcadSciUSA8953815383に記載されている。ファージ表示ライブラリーの例は、ScottおよびSmithの論文Science249386390、Devlin等の論文Science249404406、ChristianRB等の論文JMolBiol227711718、Lenstraの論文JImmunolMeth152149157、Kay等の論文Gene1285965、および国際特許公開第9418318号1994年8月18日に記載されている。インビトロ翻訳ベースのライブラリーには、国際特許公開第9105058号1991年4月18日およびMattheakis等の論文ProcNatlAcadSciUSA9190229026に記載のものがあるがこれには限定されない。非ペプチドライブラリーの例としては、ベンゾジアゼピンのライブラリー例えば、Bunin等の論文ProcNatlAcadSciUSA9147084712を参照されたいを使用に適するようにすることができる。またペプチドライブラリーSimon等の論文ProcNatlAcadSciUSA8993679371を使用することもできる。化学的に形質転換された組合せライブラリーを生成するようにペプチド中のアミド官能基が完全メチル化されている使用可能なライブラリーの別の例がOstresh等の論文ProcNatlAcadSciUSA911113811142に記載されている。一実施形態において、周知のまたは候補のアンタゴニストの存在または不在下でAまたはG検定を行なうことによってアンタゴニストが同定されることは普通の当業者ならば理解するはずである。ある化合物の存在下で結合の減少が観察される場合、その化合物はアンタゴニストとして同定される。ある化合物の存在下における結合の増加は、その化合物がアゴニストであることを意味している。例えばある検定において試験化合物は、試験化合物の存在および不在下において、試験化合物が存在しなかったら複合体を形成するはずの条件下でPDZドメインのポリペプチドとPLペプチドを接触させ、試験化合物の存在および不在下における複合体の形成を検出することにより、PDZタンパク質とPLタンパク質の間の結合のインヒビターアンタゴニストとして同定することができる。試験化合物の存在下における複合体の形成が化合物の不在下における複合体の形成よりも少ないことは、試験化合物がPDZタンパク質-PLタンパク質結合のインヒビターであることを示すことが理解されよう。様々な実施形態においてPLペプチドは、PLタンパク質のC末端配列とほぼ等しいアミノ酸配列を含む例えば、CD6、CD49E、CD49F、CD138、Clasp1、Clasp4、VCAM1、Clasp2、CD95、DNAM1、CD83、CD44、CD4、CD97、Neurexin、CD3n、DOCK2、CD34、FceRIb、またはFasLigand。ある実施形態においてはG検定が候補インヒビターの存在または不在下において用いられる。ある実施形態においてはA検定が候補インヒビターの存在または不在下において用いられる。ある実施形態G検定を用いるにおいては、1または複数のPDZドメイン含有GST融合タンパク質を上記に記載のように非融合GSTタンパク質を含む適切に制御された状態で96ウェルプレートのウェル表面と結合させる。適切な制御および統計的分析を行なうことができるように全ての融合タンパク質を複数ウェル中で結合させる。BSA/PBSに溶かした試験化合物一般に複数の異なる濃度でをウェルに加える。その後直ちに関連するPDZドメイン例えば、表2参照と結合させるために検出可能に標識した例えばビオチニル化した既知のペプチド30ulをウェルそれぞれに、例えば約2uMと約40uMの間、一般には約5uM、約15uM、または約25uMの最終濃度で加える。次いでこの混合物を、表面に結合しているPDZ融合タンパク質と4°Cで10分間、続いて25°Cで20分間反応させる。表面を氷で冷やしたPBSで3回洗浄して結合していないペプチドを除去し、試験化合物の存在および不在下におけるペプチドの結合量を決める。通常、結合レベルは、レプリカウェル例えば複製の各組についてこれらウェル中のペプチド結合の生の測定値の平均からGSTのみの背景の平均を差し引くことによって測定される。別の実施形態においては、PL-PDZ相互作用のインヒビターを同定するためにA検定を試験候補の存在および不在下で行なう。ある実施形態においては、1mM以下例えば、500uM、100uM、10uM、1uM、100nM、または1nM以下の試験化合物濃度において、試験化合物の存在下におけるPDZドメインPとPLLの結合が、試験化合物の不在下における結合の約50未満様々な実施形態においては約25未満、約10未満、または約1未満の場合、PとL配列の結合の特異的インヒビターであると判定される。試験化合物の存在下におけるPとLの結合の正味信号プラス試験化合物の存在下における信号の標準誤差の6倍が、試験化合物の不在下における結合信号より小さいことが好ましい。ある実施形態においてインヒビターの検定は、単一のPDZタンパク質-PLタンパク質ペア例えばPDZドメイン融合タンパク質とPLペプチドを用いて行なわれる。関連する実施形態において検定は、表2に列挙した複数の異なるペアなど複数のペアを用いて行なわれる。幾つかの実施形態では、ある決まった濃度において、あるPL-PDZペアの結合を阻害するが、特定の第二のPL-PDZペアの結合を阻害しないまたは阻害の程度が小さい化合物を同定することが望まれる。これらのアンタゴニストは、候補のインヒビターと様々なPL-PDZペア例えば表2のマトリックス中に示したようなを用いて一連の検定を行ない、検定の結果を比較することによって同定することができる。全てのこのようなペア様式の組合せが本発明によって検討されている例えば試験化合物は、PL1とPDZ1の結合を、PL1とPDZ2またはPL2とPDZ2の結合を阻害するよりも高度に阻害する。重要なことは、表2に提供され、本明細書に開示されたデータおよび本明細書に記載の方法を用いて生み出すことができる付加的なデータに基づいて様々な特異性を有するインヒビターを容易に設計することができる点にあるということを理解されよう。PDZ結合部分および本発明のPDZタンパク質-PLタンパク質結合アンタゴニストを用いて細胞例えば、T細胞およびB細胞などの造血細胞、内皮細胞、および本明細書に記載したその他の免疫系細胞の生理学的活性または機能を調節し、またヒトおよび非ヒト動物例えば実験モデルの病および状態を治療する。生理学的活性の例は上記に列挙する。患者に投与される場合、本発明の化合物例えばPL-PDZ相互作用のインヒビターは、炎症性および液素性免疫応答を特徴とする病、例えば炎症、アレルギー例えば全身アナフィラキシー、過敏性反応、薬剤アレルギー、昆虫刺傷アレルギー;炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、回腸炎、および腸炎;乾癬および炎症性皮膚病;強皮症;喘息、アレルギー性鼻炎、過敏性肺疾患などの呼吸アレルギー性疾患;脈管炎;鼻腔適合性;輸血反応;薬剤敏感性;PIH;アトピー性皮膚炎;湿疹;鼻炎;関節炎リウマチ様および乾癬性、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、インスリン依存性糖尿病、糸球体腎炎、強皮症、MCTD、IDDM、橋本病、グッドパスチャー症候群、乾癬などの自己免疫性疾患;骨関節症;多発関節炎;移植片拒絶例えば同種移植片拒絶反応、例えば腎同種移植片拒絶反応、移植片対宿主病、移植拒絶反応心臓、腎臓、肺、肝臓、小腸、角膜、膵臓、死体または自己骨髄、異種移植;アテローマ性動脈硬化症;脈管形成依存性疾患;癌例えば、黒色腫および乳癌、衰弱性癌、白血病、リンパ腫、転移性疾患;感染性疾患例えば、HIV、麻疹、パラインフルエンザ、ウィルス性細胞融合などのウィルス感染;虚血例えば、心筋梗塞後の合併症、関節の外傷、腎臓、強皮症を含む様々な病および状態の治療症状の軽減にとって有用である。表2に列挙したPLタンパク質およびPDZタンパク質は十分に特徴が調べられており、この開示本明細書に記載のPLタンパク質とPDZタンパク質の間の相互作用の発見を含むによって手引きされた当業者は、表2に記載のものなどPDZ-PL相互作用の活性調節因子例えば、エンハンサーまたはインヒビターの多くの使い方について理解するはずである。さらに読者を支援するため、選ばれたPLタンパク質およびその機能の特徴に関する考察を下記に提供する。この考察は包括的なものではなく、決して本発明を限定することを意図するものではないことを理解されたい。さらに、この項のいずれも本発明者等の意図を特定の行動手順に限定するものと解釈されるべきではない。A.CD6上記で示したように、CD6はPDZタンパク質418を結び付ける。CD6は、慢性リンパ球性白血病の胸腺細胞、T細胞、およびB細胞上に発現する。CD6は、T細胞の副刺激において役割を演じ、CD6ネガティブT細胞はCD6ポジティブT細胞よりも自己反応性が低い。CD6とCD6/418の相互作用の阻害は、移植片対宿主病GVHDまたは乾癬の症状を軽減すると予想される。したがって本発明の一実施形態において、ドナーの骨髄細胞を受ける患者のGVHDは、細胞を有効量のアンタゴニストで前処理することにより低減される。CD6-PDZ相互作用のインヒビターは、FK506、Cellcept、またはサイクロスポリンなどの移植後免疫抑制治療と組み合わせると移植患者例えば白血病患者全体の生存を改善することになる。B.CD49eαA4本明細書で報告した実験によって示されるようにCD49eのC末端は、PDZドメイン含有タンパク質418kDと結合する。CD49eは、インテグリンαファミリーインテグリンα5の110kDトランスメンブレンの膜タンパク質である。これは、インテグリンβ1サブユニットと対でVLA5を形成する。VLA5は、主に単核細胞、塩基性染色細胞、T細胞、およびB細胞を含む造血細胞およびリンパ様系統細胞上に発現する。VLA5は、いたるところに発現した接着分子フィブロネクチンに対する受容体である。心筋梗塞などの組織の損傷はフィブロネクチンの可溶性断片を放出する。これら可溶性断片とVLA5の結合は、単核細胞を含む免疫細胞のフィブロネクチン発生源への化学走性、およびこれら細胞上におけるVLA5発現のダウンモジュレーションをもたらす。このようなリガンドが誘発するダウンモジュレーションは、化学走性受容体の普通かつ必要な特徴である。いったん免疫細胞がフィブロネクチンの発生源へ完全に移動すると、フィブロネクチン表面との接着はフィブロネクチン-VLA5相互作用によって高められる。特別の機構によって結合することを意味するものではないが、418/CD49eの相互作用は、それが中断されるとフィブロネクチンを含有する表面への移動および付着も同様に中断され、その結果免疫系細胞のフィブロネクチン発生源への有効な移動と、フィブロネクチンを含有する表面への付着が不能になるため、それはCD49eの適正な膜分布および/またはCD49eの再循環にとって必要であると考えられる。したがってこのような中断は、心筋梗塞後の炎症の低減を含む炎症性反応の望ましい低減をもたらすはずである。治療可能なその他の疾患には関節炎、乾癬、接触アレルギー、クローン病、炎症性腸疾患、湿疹、アトピー性皮膚炎があるがこれには限定されない。C.CD49FVLA6αサブユニット上記で示したように、CD49FはPDZタンパク質418を結び付ける。CD49fは、VLA6を形成するβ1インテグリンサブユニットCD29、またはCD104β4インテグリンサブユニットのいずれかと対になるインテグリンサブユニットとして知られている。インテグリン超遺伝子ファミリーは、胚形成、血栓症、創傷の治癒、腫瘍発生、、および免疫応答を含む多くの異なる生理学的過程にとって重要な多数の細胞表面αβ異種二量体からなる。各β鎖は、様々なα鎖と対になることができる。VLA6およびCD49f/CD104の両者は、非リンパ様組織において上皮上に広く発現する。VLA6はまた、血小板、単核細胞、胸腺細胞、およびTリンパ細胞上で発現し、活性また休止記憶T細胞上では発現が増加する。VLA6と418の間の相互作用の阻害は、転移性癌の予防および治療、ならびに過剰能動免疫の治療など多数の治療機能を有する。例えば、VLA6は衰弱性癌の侵襲と関連しており、乳癌の転移において役割を演じる。衰弱性癌の通常の治療と組み合わせたVLA6機能の阻止は、転移性疾患を予防することによって、より有効な治療となるはずであるCress等の著書CancerMetastasisR参照。PDZの相互作用を介するCD49fの阻止はまた、記憶応答を鈍感にすることによりRh不適合を治療することができ、あるいはケロイドの治療に用いることができる。D.CD138シンデカン-1CD138は、様々な細胞外間質成分に対してリガンド結合ドメインとして機能する細胞外ドメインと、細胞骨格を変え細胞内信号を変換するように機能する細胞内部分とを有するトランスメンブレンのプロテオグリカン受容体である。また、CD138はFGF2を結び付け、FGF2受容体に対するコレセプターである可能性があるYayon等の記述。上記に示したようにCD138は、418kDタンパク質およびTIAM1と相互作用する。CD138のC末端はまた、シンテニンおよびヒトCASKのPDZドメインを結び付けることが報告されているCohen等の論文JCellBiol142129138、Grootjans等の論文PNAS941368313688、Hsueh等の論文JCellBiol142139151。CD138は、プレB細胞、未熟B細胞、形質細胞、神経細胞、上皮細胞の基底面、胎児性の間充繊細胞、血管平滑筋細胞、内皮細胞、および神経細胞だが成熟循環性B細胞でないものの中において発現する。CD138と、418kDタンパク質およびTIAM1タンパク質のPDZドメインとの間の相互作用は、細胞表面のCD138の適正な分布にとって必要であると考えられる。有効量のアンタゴニストの投与による相互作用の中断は、細胞の細胞外間質への移動および付着を妨ぎ、その結果炎症性および体液性の免疫応答を低減させることが期待される。CD138の阻害は、これには限定されないが心筋梗塞後の炎症性損傷、関節の負傷、慢性関節リウマチ、脈管炎、薬物反応、強皮症、SLE、橋本病、グッドパスチャー症候群、若年性インスリン依存性糖尿病、乾癬などの疾患を治療するために用いることができる。E.CD98上記に示したように、CD98はMPP2と相互作用する。CD98は、単核細胞上に高レベルで発現し、またT細胞、B細胞、脾細胞、NK細胞、および顆粒球上に低レベル発現する。CD98は、接着および融合において役割を演じ、L型アミノ酸輸送体である。CD98はまた、ウィルスが仲介する細胞融合例えば、パラミクソウィルス、すなわちパラインフルエンザウィルス2型、ニューキャッスル病ウィルス、およびルブラウィルスと関わっており、CD98機能の拮抗作用はウィルス性感染を治療し、ウィルスの拡散を制限することが期待される。CD98インヒビターは、これには限定されないがパラミクソウィルス、パラインフルエンザ、ニューキャッスル病、およびルブラに対する抗ウィルス性剤である可能性がある。その他の役割には急性白血病の治療がある。F.CLASP1上記に示したようにCLASP1は、DLG1、PSD95、およびNeDLGと相互作用する。CLASP1は、同様の主題をもつ免疫細胞関連タンパク質の超ファミリーのメンバーである国際特許公開第0020434号として公開された国際出願米国特許第PCTUS992299号を参照。CLASP1は、免疫シナプスの維持機能をもつ。CLASP1転写物は、リンパ系器官および神経組織中に存在し、そのタンパク質は、TおよびBリンパ球、ならびに脾臓の周辺帯のMOMA-1サブ領域、すなわちTおよびB細胞の相互作用において重要であることが知られている領域中のマクロファージによって発現する。個々のTおよびB細胞のCLASP1の染色は、B細胞中のボールまたはキャップ構造として組織化され、またT細胞中のリング、ボール、またはキャップ構造を形成する活性化前の構造極性を示す。これら構造の配置は、微小管形成中心MTOCに隣接している。CLASP1抗体の染色は、CLASP1が、分化と完全に関わっているT-B細胞抱合体の境界面にあることを示している。CLASP1の細胞外ドメインに対する抗体もまた、T-B細胞抱合体の形成およびT細胞の活性化を妨げる。CLASP1機能の拮抗作用は、免疫応答例えば、TおよびB細胞活性化、信号の変換、細胞と細胞の相互作用、および膜の組織化を妨げることが期待される。CLASP1アゴニスト/アンタゴニストによって治療することが可能な疾患には、これには限定されないが慢性関節リウマチ、若年性糖尿病、器官拒絶反応、移植片対宿主病、強皮症、多発性硬化症がある。G.CLASP4上記に示したようにCLASP4は、DLG1、PSD95、NeDLG、LDP、AF6、418、およびMINT1と相互作用する。CLASP4は、同様の主題をもつ免疫細胞関連タンパク質の超ファミリーのメンバーである同時係属中の出願日2000年4月11日の米国特許出願第60196527号を参照されたい。CLASP4タンパク質は、主に末梢血液のリンパ球中で発現する。CLASP4とPDZドメインの相互作用の阻害は、免疫応答例えば、TおよびB細胞活性化、信号の変換、細胞と細胞の相互作用、および膜の組織化を妨げるはずである。CLASP4アゴニスト/アンタゴニストによって治療することが可能な疾患には、これには限定されないが慢性関節リウマチ、若年性糖尿病、器官拒絶反応、移植片対宿主病、強皮症、多発性硬化症、急性白血病、白血病芽細胞発症、梗塞後の炎症心臓など、アテローマ性動脈硬化症がある。H.VCAM1血管細胞接着分子1VCAM1、CD106は主に血管の内皮すなわち内皮細胞によって発現するが、マクロファージ、樹枝状細胞、骨髄誘発性細胞、、繊維芽細胞、皮質性胸腺上皮細胞、血管平滑筋細胞、筋原細胞、および筋管中に検出されている。VCAM1は、インテグリンリガンドすなわちVLA4との相互作用を介して接着を仲介し、それはリンパ球、単核細胞、および好酸球によって発現する。VCAM1とVLA4の間の相互作用は、内皮自体が炎症または外傷により活性化するようになったとき、VLA4発現細胞の活性化、横ばい化、および血液溢出にとって重要であるSalomon等の論文Blood8924612471、StPierre等の論文EurJImmunol2620502055、Bell等の論文IntImmunol718611871。上記に示したようにVCAM1のC末端領域は、MPP1、DLG1、NeDLG1、LDP、418タンパク質、TIAM1、およびK303のPDZドメインに対するリガンドである。これらの相互作用は、内皮細胞とインテグリン発現リンパ球の相互作用の機能を仲介すると考えられる。PDZPL相互作用が中断されるとリンパ球の内皮への付着も同様に中断され、結果として例えば炎症の軽減をもたらす。したがってVCAM1のPDZタンパク質との結合の阻害は、腎同種移植拒絶反応、インスリン依存性糖尿病、慢性関節リウマチ、心筋梗塞後の合併症、および全身性慢性エリテマトーデスなどこれらには限定されないがの異常なVCAM1の炎症応答および関連する病状を低減するのに役立つPasloske等の論文AnnRevMed45283、Ockenhouse等の論文JExpMed1761183、Solezk等の論文KidneyInt511476、Tedla等の論文ClinExpImmunol1179299、Kusterer等の論文ExpClinEndocrinolDiabetes107S102107、Bonomini等の論文Nephron79399、Suassuna等の論文KidneyInt46443、Ferri等の論文Hypertension34568。I.CLASP2上記に示したようにCLASP2は、PSD95、NeDLG、およびDLG1と相互作用する。CLASP2は、同様の主題をもつ免疫細胞関連タンパク質の超ファミリーのメンバーである同時係属中の出願日2000年4月11日の米国特許出願第09547276号、出願日2000年4月11日の国際特許公開第0010158号、出願日2000年4月11日の国際特許公開第0010156号を参照されたい。CLASP2の転写物は胎盤中に最も強く、次いで肺、腎臓、および心臓中に存在し、そのタンパク質はTおよびB細胞、ならびに腎臓の上皮細胞中で発現する。CLASP2とPDZドメインの相互作用の阻害はCLASP2の機能を妨げ、その結果TおよびB細胞の機能例えば、TおよびB細胞活性化、信号の変換、細胞と細胞の相互作用、および膜の組織化を妨げることになる。加えてCLASP2は心臓中に存在するので、CLASP2の機能または発現を阻止することにより心臓中の免疫応答を選択的に阻止する例えば、どこか別の場所で免疫を損なうことなく心臓移植拒絶反応またはMI後の炎症に続く、例えば心臓の区画中の免疫応答を選択的に停止することができる。CLASP1アゴニスト/アンタゴニストによって治療することが可能なその他の疾患には、慢性関節リウマチ、若年性糖尿病、器官拒絶反応、移植片対宿主病、強皮症、多発性硬化症があるがこれには限定されない。J.CD95Apo1/FasCD95Fas/Apo1とFasリガンドFasLは、リンパ球の恒常性および末梢性と関係する受容体リガンドのペアである。そのリガンドによるFasの結合は、アポトーシスによる細胞死、すなわち急性炎症反応の分解中に不要の細胞を安全に取り片付けるための重要で主要な仕組みをもたらす。上記に示したようにPSD95は、PDZドメイン、すなわちDLG1、PSD95、NeDLG、および418を結び付ける。CD95とPDZドメインの相互作用の阻害が用いられる。K.Kv13Shaker型Kv13カリウムチャンネル上記に示したようにKv13は、DLG1、PSD95、NeDLG、LIMK、418、RGS12、DVL1、およびMINT1を結び付ける。Kv13は、Tリンパ球の膜電位の調節に関わるShakerに関連したチャンネルタンパク質であるLewisおよびCahalanの論文AnnRevImmunol13623。Kv13チャンネルの阻害は、T細胞膜を長期にわたり脱分極し、細胞膜中でカルシウムにより活性化される放出カルシウムチャンネルを介するカルシウムの侵入を低減し、その結果リンパ球の活性化にとって不可欠なカルシウムの信号伝達経路を阻害する。Hanada等は、Kv13がジャーカットT細胞中のDLG1およびPSD95と対合していることを報告しているJBiolChem27226899。Kv13PDZタンパク質のアゴニスト/アンタゴニストの投与は、T細胞の信号伝達を中断することになり、これらには限定されないが器官の移植、移植片対宿主病、クローン病、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患、慢性関節リウマチ、骨関節症、多発性硬化症、強皮症、混合性の結合組織疾患の治療のために有用な治療薬となる可能性がある。LDNAM1上記に示したようにDNAM1は、MPP2、DLG1、PSD95、NeDLG、LIM、AF6、418、およびRGS12を含む幾つかのPDZタンパク質を結び付ける。DNAM1は、本質的にFynと対合するが、過バナジン酸塩チロシンホスファターゼインヒビターの存在を必要とするShibuya等の論文Immnity11615623を参照されたい。抗CD3またはDNAM1で刺激すると、DNAM1はセリン329においてリン酸化されShibuya等の論文JImmn1616711676、LFA1と対合する。さらにFynは、過バナジン酸塩とは無関係にDNAM1と対合するようになる。FynはY322においてDNAM1をリン酸化するが、DNAM1との結合を続けるのにY322を必要としない。DNAM1自体はSH3結合ドメインを持たず、Y322にSrcリン酸化部位を持つのみなので、DNAM1とFynを架橋するにはアダプター分子が存在しなければならない。PLG1はT細胞中に存在することが文献に記載されているHanada等の論文JBiolChem27226899が、Fynを結び付けない。PSD95はSH3結合部位を持たない。しかしながら別の幾つかのPDZタンパク質は、これには限定されないがNeDLG、RGS12、MPP2を含むSH3結合ドメインを持ち、この機能を満たすことができる。上記で列挙されたこれらのアダプターPDZは、そのPDZドメインを介してDNAM1と結合し、同時にPDZドメインの丁度N末端のそのプロリンを多く含む配列を介してFynのSH3ドメインと結合する。Y139は、FynとDNAM1の対合およびアダプターPDZの制御のためのリン酸化部位の候補である。この分析に基づいて、本発明の試薬を用いたPDZとDNAM1の対合の阻害は、FynとDNAM1の対合と、それに続くY322のリン酸化および細胞障害T細胞の活性化を阻害する。治療することが可能な疾患には、クローン病、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患、移植片対宿主病、若年性糖尿病、橋本病があるがこれらには限定されない。MCD83CD83は、主に活性化した樹枝状細胞DCs、すなわち皮膚中のランゲルハンス細胞上で発現し、また活性化した末梢リンパ球上で若干の弱い発現が検出されるトランスメンブレンの糖タンパク質であり、リンパ様器官のT細胞内の細網細胞を互いに入り込ませるZhouおよびTedderの論文JImmunol15438213835、Zhou等の論文JImmunol149735742。CD83は、未成熟のDCsを活性化させると新たに上向き調節され、主要な識別用標識であって活性化された成熟したDCsに特徴的であるCzemiecki等の論文JImmunol15938233837。DCsは、抗原提示細胞APCsとして機能する。したがってCD83のアップレギュレーションおよび発現は、DCsが成熟しAPCsとして機能するために必要であるらしい。上記に記載した実験によって示されるようにCD83は、DLG1、PSD95、およびNeDLGのPDZドメインと結合する。CD83とPDZドメインの間、ならびにCD83とDLG1、PSD95、およびNeDLGの間のこれら相互作用は、CD83の適正な分布および再循環にとって重要であると考えられる。アゴニストおよびアンタゴニストによるCD83およびPDZタンパク質の中断は、これには限定されないが乾癬、癌、アレルギー、多発性硬化症、全身性慢性エリテマトーデスなどの自己免疫性疾患の治療に用いることができる。NCD44食細胞糖タンパク質1、リンパ球ホーミング受容体、p85、およびHCAMCD44は、代替のスプライシングによる幾つかの異なるイソ型タンパク質を有する一回貫通トランスメンブレンタンパク質である。それは、上皮細胞、内皮細胞、間充繊細胞、および神経細胞を含む造血細胞型および非造血細胞型の両者の上に検出される発現の広範なパターンを有する。CD44Hは、リンパ様細胞、骨髄細胞、および赤芽球細胞中で発現する主要なイソ型タンパク質であるBarclay等の著書TheLeukocyteAntigenFactsBook2ndedAcademicPress中に総覧されている。CD44は、細胞外間質ECMの構成要素であるヒアルロン酸塩HAの受容体である。免疫系においてCD44は、ECM中でHAを結び付ける白血球および赤血球表面の接着分子として機能し、それはまたHAが炎症反応または組織の損傷の間に可溶性になったとき信号を伝える受容体として働く可能性がある。CD44の細胞質領域は、スペクトリンおよびERMエズリン、ラジキシン、およびメオシンファミリーのメンバーとの相互作用を介してアクチン細胞骨格を結び付け、またはそれと対合することをが示されたLesley等の著書、Bajorathの記述Proteins39103111で総覧されている。加えてCD44は、非受容体チロシンキナーゼp56Lckと対合するTaher等の論文JBiolChem27128632867。CD44は、T細胞を活性化させるようにCD3/TCRを連動させる共刺激性分子であるAruffoの記述JClinInvest9821912192で総覧されている。本明細書で報告された実験による上記記述のように、CD44のC末端は、MPP1、prIL16、およびMINT1中に含有されたPDZドメインのリガンドである。CD44とPDZドメインの相互作用、またCD44とMPP1、prIL16、およびMINT1との間の相互作用は、リンパ球構造の維持およびリンパ球の信号伝達において機能すると考えられる。したがってCD44-PDZの相互作用が中断されると、CD44は適正な細胞内信号の変換、およびその表面のCD44の適正な分布の維持に失敗することになり、それは炎症および組織の損傷中のリンパ球と内皮の接着を妨げることになる。したがって、この相互作用のアゴニスト/アンタゴニストの投与は、これには限定されないが組織の虚血および細胞の溶解例えば横紋筋溶解、血管不全症例えば凍傷、乾癬、湿疹、移植片対宿主病、環状肉芽腫、強皮症の間、炎症応答の低下をもたらす。OCD97上記で論じたようにCD97は、DLG1および418のPDZドメインを結び付ける。CD97は、顆粒細胞および単核細胞上に発現し、また休止T細胞およびB細胞上に低レベルで発現する797kDの7スパントランスメンブレンタンパク質である。TまたはB細胞が活性化すると、T細胞およびB細胞中のCD97の発現レベルは急激に増加するEichler等の論文ScandJImmunol39111115、Pickl等の論文LeukocyteTypingV11511153。COS細胞上で発現すると、CD97はリンパ球に、また赤血球に接着性を与える。本発明によればCD97とDLG1および418kDタンパク質との相互作用を、CD97の適正な膜分布および/またはCD97の再循環を妨げるように変えることができる。このような変調は、治療上利益をもたらす細胞のCD97依存性の密着に影響する。CD97-PDZタンパク質相互作用のアゴニストおよびアンタゴニストは、これらには限定されないが慢性関節リウマチ、骨関節症、クローン病、潰瘍性大腸炎、乾癬の治療に用いることができる。P糖タンパク質CGC上記に示したように糖タンパク質CGCのC末端は、ヒトのDLG、PSD95、NeDLG、MMP2、AF6、418、およびMINT1のPDZドメインと先に記載のMint1と相互作用する。糖タンパク質Cは、赤芽球細胞、胸腺、胃、胸、成人および胎児の肝臓、単核細胞、ならびにTおよびB細胞中に発現する膜内在性タンパク質でありLeVanKim等の論文JBiolChem2642040720414、ヒトの赤血球中のその役割についてはよく知られている。それは、MPP1およびタンパク質41と相互作用して赤血球の形状、完全性、および機械的安定性を調節するMarfatia等の論文JBiolChem2722419124197、Reid等の論文Blood6910681072。糖タンパク質CとPDZタンパク質DLG、PSD95、NeDLG、MMP2、AF6、418、およびMINT1との間の相互作用は、それらが発現する細胞の物理的完全性の維持にとって必要であると考えられる。GC-PDZ相互作用の変調はこれらの機能により変わるはずであり、これには限定されないが真性赤血球増加症、球状赤血球症の治療に利用することができる。QCDw128AIL8RA上記に記載したようにCDW128Aは、DLG1およびNeDLGのPDZドメインと結合する。IL8受容体には二つの形態、すなわちIL8RAおよびIL8RBがあり、その両者はGタンパク質結合型受容体の超ファミリーのメンバーでしかもロドプシンファミリーのケモカイン受容体ブランチである。CDw128AおよびCDw128Bの両者は、同一の親和性を有するただしCDw128Bのみは除くIL8を結び付ける。CDw128Bは3つの他のIL8関連のCXCケモカイン、すなわち黒色腫増殖刺激活性GRO/MGSA、好中球活性化ペプチド2NAP2およびENA78を結び付ける。例えば、AhujaSKおよびMuphyPMの論文JBiolChem2712054550を参照されたい。CDw128Aは、あらゆる顆粒細胞、T細胞の構成部分、単核細胞、内皮細胞、角化細胞、赤血球、および黒色腫細胞上で発現する。IL8は、好中球、好塩基球、およびTリンパ球の化学走性を誘発し、好中球および単核細胞の内皮細胞との接着を向上させる。IL8とIL8RAの結合は、細胞内のカルシウム濃度、ホスホリパーゼDの活性化、好中球の呼吸性バースト、および化学走性の一過性の増加を誘発する。この早期炎症応答は、正常な免疫応答において実効的である。CDw128Aのインヒビターは、乾癬、慢性関節リウマチ、多発関節炎の治療にとって、また黒色腫および乳癌などの脈管形成依存性疾患の制御にとって有用である。RCD3ηCD3ηは、CD3ζのスプライス変異型で、かつCD3/TCR複合体の成分であり、それは抗原の認識、信号の変換、およびT細胞の活性化にとって必要であるWeissおよびLittmanの論文Cell76263274。Barclay等の著書TheLeucocyteantigenfactsbooks2ndedAcademicPressを参照されたい。本明細書に報告された実験によって示されるように、CD3ηのC末端領域は、MINT1、418タンパク質、DLG1、およびPSZ95のPDZドメインのリガンドである。CD3ηとPDZドメインの相互作用、ならびにCD3ηとMINT1、418タンパク質、DLG1、およびPSZ95の相互作用は、あらゆる細胞の免疫応答に必要なT細胞の活性化にとって重要であると考えられる。アゴニストおよびアンタゴニストによるこの相互作用の変調は、これに限定されないが急性および慢性の同種移植片拒絶反応、多発関節炎、移植片対宿主病、慢性関節リウマチの治療に用いることができる。SLPAPCD45AP、LSM1LPAPは、休止および活性化したTおよびB細胞上に発現するトランスメンブレンタンパク質である。LPAPはCD45、すなわちT細胞受容体の複合体の一部であるタンパク質と結合することが示されており、CD4、CD2、およびThy1と同じ場所に局在化することが分かっている。LPAPはまた、p56lckおよびZAP70と一緒に免疫沈降する。LPAPの実際の機能は知られていないが、この事実はそれがCD45複合体の構築分子であることを示唆している。上記に示したようにLPAPは、DLG1およびMINT1と結合する。特にDLG1およびMINT1はT細胞中でともに発現する。またDLG1はT細胞中でp56lckと一緒に免疫沈降することが示されている。本明細書に記載の検定はまた、DLG1がCD95およびKV13と結合し、MINT1がKV13と結合することを実証した。これらの分子はすべてTCRによる信号伝達と関わっている。LPAPは、T細胞が活性化しているときCD45による、多分CD45用の基質としてp56lckを補充することによる信号伝達の組織化において機能すると考えられる。CD45の機能を妨げるとT細胞の応答を激しく損なうことが示された。LPAPとPDZタンパク質の間の相互作用を阻害することにより、残りの免疫応答由来のCD45が仲介する経路を変えることが期待される。PL-PDZ結合のアゴニストおよびアンタゴニストは、これに限定されないが慢性関節リウマチ、移植拒絶反応、多発関節炎、強皮症、移植片対宿主病の治療に用いることができる。TCD46補体膜共同因子タンパク質MCPCD46は、赤血球上ではなく、あらゆる核をもつ細胞上で発現される膜タンパク質である。CD46は、補体活性化タンパク質ファミリーのレギュレーターのメンバーである。その主要な機能は、膜に付着したC3b/C4bの補体を不活性化することによる補体の攻撃から細胞を保護することであるLiszewski等の論文AdvImmunol61201283。CD46は、45から70kDの範囲の、ディファレンシャルスプライシングにより生じた8種類を超すイソ型タンパク質中に存在する。また上記の機能に加えてCD46は麻疹ウィルスに対する、またその他の病原性微生物例えばStreptococcuspyogenesに対する受容体として働くManchester等の論文ProcNatlAcadSciUSA912161、Okada等の論文ProcNatlAcadSciUSA9224892493。CD46はまた、ある種の腫瘍に過剰に発現するらしくJurianz等の論文MolImmunol36929939、こうして腫瘍細胞を補体の作用に対して鈍感にする。Barcley等の著TheLeucocyteantigenfactsbook2ndedAcademicPressを参照されたい。上記に示したようにCD46は、DLG1、PSD95、およびNeDLGを結合する。この相互作用は、CD46の適正な膜分布および/またはCD46の再循環にとって必要であると考えられる。CD46-PDZ相互作用の変化は、麻疹ウィルスおよびその他の病原体の細胞侵入能を低下させる可能性があり、CD46発現性腫瘍の補体による攻撃を受けやすくする。CD46-PDZ相互作用のアゴニストおよびアンタゴニストの投与は、これに限定されないが癌およびウィルス感染性疾患の治療に役立つ。UCDw128B上述するように、CDw128Bは、上述のアッセイにおいてDLGI、NeDLG、PSD95、及び41.8のPDZドメインに結合する。IL-8受容体には2つの型、IL-8RACDw128AとIL-8RBCDw128Bがあり、双方共、Gタンパク質結合受容体スーパーファミリー及びロドプシンファミリーのケモカイン受容体分枝群の一員である。CDw128A及びCDw128Bは共に同等の親和性でIL-8に結合するが、CDw128Bのみが他の3つのIL-8関連CXCケモカインである、メラノーマ増殖刺激活性GRO/MGSA、好中球活性化ペプチドNAP-2及びENA-78にも結合する。例えば、Ahuja,SK及びMurphy,PM1996年のJ.Biol.Chem271:20545~50を参照のこと。CDw128Bは、顆粒球のすべて、T細胞のあるサブセット、単球、内皮細胞、角化細胞、赤血球、及びメラノーマ細胞に発現している。IL-8は好中球、好塩基球、及びTリンパ球の走化性を誘導するが、IL-8RAに対しては相対的に低く、好中球及び単球の内皮細胞への接着を高める。IL-8Aのその受容体への結合は、細胞内カルシウムレベルの一過性の上昇及び顆粒の放出を誘導するが、ホスホリパーゼDの活性化又は好中球における呼吸バーストは誘導しない。この炎症誘発性反応は、通常の免疫反応において効果的である。CDw128Bの阻害は、乾癬、慢性関節リウマチ、多発性関節炎の治療に、及びメラノーマや乳癌のような血管形成依存性疾患の制御に有用である。VDOCK2DOCKファミリーは、細胞骨格と相互作用して形態変化に影響を及ぼす形態形成膜貫通タンパク質の一群である。この新しいファミリーの一員には、ショウジョウバエ筋芽細胞シティmbc、DOCK180、DOCK2、DOCK3、DED5、KIAA0209、及びCLASPが挙げられる。原型的分子である、DOCK1又はDOCK180は、C.エレガンス線虫の遺伝子、CED5のヒト相同体であり、CED5はアポトーシス細胞のマクロファージによる飲込み及び貪食に関与している。DOCK2は末梢血リンパ球で見い出され、形質移入によって平坦な細胞を丸い細胞に変換することができるNagaseetalDNARes3321329、1996NishiharaHHokkaidoIgakuZasshi74157。上で示されるように、DOCK2はPLであり、PDZタンパク質に結合する。アダプタとしてPDZタンパク質を用いて、DOCK2はA、B、Cと複合体を形成し、血管循環へのリンパ球の転送に備えて細胞の形状を制御する。急性白血病、急性転化、心筋梗塞後の炎症、傷害後の炎症を治療するのに、PDZタンパク質相互作用の作動薬及び拮抗剤によるDOCK2の調節を用いることができるが、これに限定されない。W.CD34上で示されるように、CD34はDLG1、PSD95及びNeDLGに結合する。CD34は、造血系幹細胞を含む骨髄細胞の小さな亜集団に発現されている。CD34はまた、骨髄間質細胞及び内皮細胞上にも発現されている。セレクチンである、CD62LL-セレクチン及びCD62EE-セレクチンはCD34に結合する。CD34は白血球の接着及びローリングに介在する。CD34の造血系幹細胞における特性には幹細胞の骨髄分化が挙げられる。作動薬及び/又は拮抗剤によるCD34-PDZ相互作用の調節を、骨髄異形成症、白血病、傷害後の炎症、心筋梗塞後の炎症を治療するのに用いることができるが、これに限定されない。X.Fcイプシロン受容体ベータIFcεRβIヒトのIgEに対する高親和性受容体である、FcεRIはα、β及びジスルフィド結合したγヘテロダイマーで構成される。α鎖は、IgEのFc部に結合するが、β鎖は、γ鎖ヘテロダイマーを介して伝達されるシグナルを増幅するように作用する。αβγ2四量体及びαγ2三量体の両方が存在するが、β鎖は、Sykの活性化及びカルシウム動員で測定すると5~7倍、シグナルを増幅する。さらに、FcεRβIは、PDZのリガンドであり、CD20/FcεRβI受容体ファミリーの一員である。上で示されるようにFcεRβIは、MINT1に結合する。IgEの高親和性受容体として、好塩基球及び肥満細胞上のFcεRβIはアレルギー反応の開始において中心的な役割を担っている。IgEに結合した多価アレルゲンの架橋によってFcεRβIを介したシグナル伝達が始まる。結果は、小胞の脱顆粒、ヒスタミンロイコトリエン及び炎症誘発性サイトカインIL-6及びTNFα即時型過敏症の症状に関与する因子の放出である。喘息、アトピー性皮膚炎、湿疹、薬物反応、肥満細胞症、蕁麻疹、好酸球増加筋痛症候群を治療するために、作動薬及び拮抗剤によるPL/PDZ相互作用を標的としたシグナル伝達の改変を用いることができるが、これに限定されないTurnerHNature402SuppB241999。Y.FasリガンドFasLCD95Fas/Apo-1及びFasリガンドFasLは、リンパ球の恒常性と末梢寛容に決定的に関与する受容体-リガンド対である。リガンドによるFasへの結合は、アポトーシス細胞死を招き、それは急性炎症反応を解消する間、不要な細胞を安全に片付ける重要で主要なメカニズムである。FasLは主として活性化T細胞に拘束されており、迅速に誘導される。FasLは、正常な胸部内皮細胞及び良性胸部疾患に比べて乳癌で亢進していることが多い。上で示されるように、FasLは、KIAA0561PDZドメインに結合する。PDZ-PL調節因子は、腫瘍、例えば、従来の化学療法に不応性の腫瘍の治療に有用であるが、これに限定されない。Z.CDW125IL-5R上で示されるように、CDW125はPTN-4及びRGS12と結合する。CDW125は、好酸球及び好塩基球上に発現されているIL-5受容体である。IL-5は、好酸球前駆細胞の増殖と分化を促進し、成熟好酸球を活性化するTakatsuetalAdvImmunol57145190。CDw125の分泌型は、拮抗的な特性を有し、IL-5が誘導する好酸球の増殖及び分化を阻害することができる。喘息、アトピー性皮膚炎、湿疹、薬物反応、蕁麻疹、肥満細胞症、好酸球増加症を治療するために、PDZドメインに結合するCDW125の調節を用いることができるが、これに限定されない。AA.バーキットリンパ腫受容体-1BLR-1;CXCR5BLR-1は、最初にB細胞で検出され、刺激されたT細胞で上方制御されることが示された膜貫通受容体であるDobneretalEurJImmunol22279527991992FlynnetalJExpMed1882973041998。BLR-1は、抗原に対する適正な発生と選択のための、二次リンパ器官の濾胞例えば、脾臓へのB及びT細胞の走化性において機能するForsteretalCell87103710471996。そのリガンドは、Bリンパ球の化学誘引物質BLCであり、パイエル板、脾臓及びリンパ節の濾胞に強く発現されているGunnetalNature3917998031998。その走化性の役割に一致して、成熟した、活性化されたB細胞形質細胞ではBLR-1の発現は下方制御され、それらが濾胞に留まるのを妨げForsteretalCellMolBiol403813871994、Blr-/-B細胞はB細胞濾胞に移動できないことが示されているForsteretal1996。本明細書で報告される実験で示されるように、BLR-1のC末端は、タンパク質MINT1を含有するPDZドメインに結合する。特定のメカニズムに束縛されることを意図せずに、BLR-1とMINT1及びBLR-1とPDZドメインの間の相互作用は、細胞表面上におけるBLR-1の適正な分布及びシグナル伝達に必要である。この相互作用が破綻すると、BLR-1を発現するリンパ系細胞の走化性能も同様に破綻する。そのような破綻の結果、免疫応答が低下し、適正に循環し、抗原への応答を進展させるリンパ球の能力の妨害を生じる。全身性エリテマトーシス、強皮症及びその他の自己免疫疾患を治療するために、この相互作用の作動薬及び拮抗剤を用いることができるが、それに限定されない。BB.CD4CD4は、抗原認識に関与するT細胞受容体TCRを伴った共受容体である。CD4及びTCRは双方共、免疫グロブリンスーパーファミリーに属する。エフェクター細胞及び標的細胞に対するT細胞の親和力を高めることによってT細胞の活性化は増強される。細胞質ドメインは、シグナル伝達及びチロシンキナーゼp56lckとの会合に関与する。CD4は、ほとんどの胸腺細胞、2/3の末梢血Tリンパ球、単球及びマクロファージに発現されている。ヒト免疫不全ウイルス1型HIV-1は、そのエンベロープの糖タンパク質が介在する膜融合によって感染し、CD4とケモカイン共受容体、CCR5又はCXCR4との相互作用によって誘発される。HIV暴露直後のHIV感染、慢性関節リウマチ、多発性硬化症、強皮症、全身性エリテマトーシス、乾癬を治療するために、作動薬及び拮抗剤によるCD4-PDZ相互作用の調節を用いることができるが、これに限定されない。6.5PDZ-PL相互作用の作動薬及び拮抗剤本明細書で記載するように、阻害剤又は拮抗剤の投与によって、細胞例えば、造血系細胞、例えば、T細胞及びB細胞においてPZDタンパク質とPLタンパク質との相互作用を破壊してもよい。本明細書に記載されるスクリーニングアッセイを用いて阻害剤を同定することができる。実施態様において、本明細書に記載されるモチーフを用いて阻害剤を設計する。実施態様の中には、発明の拮抗剤が表2に一覧されるPLドメインタンパク質のC末端残基を基にした構造例えば、ペプチド配列を有するものもある。実施例の中には、発明の拮抗剤が本明細書で開示されたPLモチーフを基にした構造例えば、ペプチド配列を有するものもある。PDZ/PL拮抗剤及び本発明の拮抗剤は、ポリマー例えば、オリゴペプチド、ポリペプチド、オリゴヌクレオチド、及びポリヌクレオチド、小型分子、抗体、糖、脂肪酸、ヌクレオチド及びヌクレオチド類縁体、天然に生じる構造の類縁体例えば、ペプチド模倣体、核酸類縁体など、及び多数のその他の化合物を含めて、天然に生じる及び合成の、有機及び無機の多数の化合物のいずれであってもよい。便宜上、本議論は主としてPDZ-PL相互作用の拮抗剤を引用するが、PDZ-PL相互作用の作動薬も本明細書で開示される方法において使用できることは認識されるだろう。1つの態様では、本発明のペプチド及びペプチド模倣体は、T細胞及びB細胞のような造血系細胞におけるPDZドメインに結合するアミノ酸配列、又は、さもなければ、PLタンパク質とPDZタンパク質の会合を阻害するアミノ酸配列を含有する。1つの実施態様では、拮抗剤は、表2に一覧されたPLタンパク質のカルボキシ末端配列、例えば、表4に一覧されたペプチドに相当する配列を有するペプチドを含む。典型的には、該ペプチドはPLタンパク質の少なくともC末端4残基を含み、阻害性ペプチドは、PLタンパク質C末端からの4を超える残基例えば、少なくとも、5、6、7、8、9、10、12又は15残基を含むことが多い。例えば、下の6.5.1の項を参照のこと。その上、造血系細胞及び内皮細胞によって発現される特異的表面受容体のC末端ドメインをそれ自体、阻害剤として用いてもよく、非ペプチド阻害剤の合理的な設計の基礎として用いてもよい。下の6.6の項を参照のこと。実施態様の中には、拮抗剤がそのような配列を含む融合タンパク質であるものもある。膜貫通トランスポータのアミノ酸配列を含有する融合タンパク質は特に有用である。例えば、下の6.5.2の項を参照のこと。実施態様の中には、阻害剤が阻害活性を有するPLのC末端タンパク質配列の変換変異体であるものもある。下の6.5.3の項を参照のこと。実施態様の中には、拮抗剤がPLのC末端配列のペプチド模倣体であるものもある。下の6.5.4の項を参照のこと。実施態様の中には、阻害剤が小型分子すなわち、1kD未満の分子量を有するであるものもある。下の6.5.5の項を参照のこと。6.5.1ペプチド拮抗剤1つの実施態様では、拮抗剤は、表2に一覧されたPLタンパク質のカルボキシ末端の配列を有するペプチドである。ペプチドは少なくともPLタンパク質のC末端の2つの残基を含み、典型的には、阻害性ペプチドは、PLタンパク質C末端からの2より多い残基例えば、3、4、5、6、7、8、9、10、12又は15残基を含む。PLタンパク質とともに阻害性ペプチドを分かち合う残基はペプチドのC末端で見い出されることが最も多い。しかしながら、実施態様の中には、配列が内部にあるものもある。同様に、阻害性ペプチドが、PLタンパク質のC末端ではないが、近傍であるPL配列からの残基を含むこともあるGeeetalJBiologicalChem2731980871998を参照のこと。例えば、造血系細胞の表面受容体のコアのPDZモチーフ配列はそのC末端において最後の4つのアミノ酸を含有し、造血系細胞においてPDZを標的とするのにこの配列を用いてもよい。PDZモチーフ配列の4アミノ酸コアは、その結合親和性及び/又は安定性をさらに高めるために、そのアミノ末端に追加のアミノ酸を含有してもよい。1つの実施態様では、PDZモチーフ配列のペプチドは4アミノ酸~15アミノ酸であってもよい。配列の長さは6~10アミノ酸であることが好ましい。さらに好ましくは、PDZモチーフ配列は8アミノ酸を含有する。コア配列のアミノ末端における追加のアミノ酸は、各造血系細胞表面の受容体の天然の配列に由来しても、合成リンカーに由来してもよい。保存的に追加のアミノ酸を置換してもよい。C末端から3番目の残基がS、T、又はYである場合、ペプチドを使用する前にこの残基がリン酸化されてもよい。実施態様の中には、ペプチド阻害剤及び非ペプチド阻害剤が小さいもの、例えば、ペプチドであれば、10アミノ酸残基の長さより小さいものもある。さらに、限られた数のリガンドアミノ酸がPDZドメインと直接接触し一般に8未満KozlovetalBiochemistry3925722000DoyleetalCell8510671996、C末端の3アミノ酸ほど短いペプチドがさらに長い>15アミノ酸ペプチドと同様の結合特性を保持することが多いYanagisawaetalJBiolChem27285391997ということが報告されている。図3A~Hは、上で記載されたGアッセイを用いてPL-PDZ相互作用を阻害するためのペプチドの使用を示す。図3A及びBでは、DLG1又はPSD95上の表3を参照のことからのPLドメインを含有するGST融合タンパク質を用いて阻害アッセイが行われた。種々の競合ペプチド濃度100μMにての存在下又は非存在下100の結合と同等にて、Clasp2、CD46、Fas、又はKV1.3表4に一覧されるようにに関するビオチン化PLペプチドの結合を測定した。競合ペプチドは、Clasp2のC末端MTSSSSVV、CD46のC末端REVKFTSL又はFasのC末端RNEIQSLVを有する8アミノ酸ペプチド、KV1.3のC末端配列を有する非標識19アミノ酸ペプチドすなわち、表3に一覧されるような非ビオチン化AA33L、又はヘモグロビンの64~76残基の配列を有するペプチドVidaletalJImmunol16348111999、すなわち、無関係な競合物であった。ビオチン化ペプチドFasとKV1.3については10μM、Clasp2とCD46については20μMのGSTのみに対する結合を融合タンパク質に対する結合から差し引いて、各実験条件に対する正味のシグナルを得た。この正味のシグナルを競合ペプチド非存在下のシグナルで割ることにより標準化し、データをプロットした。エラーバーは2回の測定の標準偏差を示した。Clasp2PL-DLGPDZ結合の特異的阻害は、CLASP2の8アミノ酸、CD46の8アミノ酸、Fasの8アミノ酸及びKV1.3ペプチドと共に認められたが、ペプチド非存在下又は無関係なペプチドを用いては認められなかった。図3C~Fは、阻害するのにさらに短いペプチド例えば、3アミノ酸及び5アミノ酸を用いた同様のアッセイを示す。図3Cは、Clasp2のC末端の配列MolBiotechnil9205223HrubyCurrOpinChemBiol1114119OstergaadMolDivers31727OstreshMethodsEnzymol267220234を参照のこと。6.5.4小型分子実施態様の中には、阻害剤が小型分子すなわち、1kD未満の分子量を有するであることもある。小型分子をスクリーニングする方法は公知であり、上の6.4の項に記載されたようなものを含む。6.6細胞の表面受容体及びPDZドメインの結合配列以下の項は、造血系及び免疫応答系における様々な型の細胞によって発現されている特異的な表面受容体を説明する。このような受容体のC末端は阻害剤として使用され、又は、PDZ-PL相互作用を阻害するのに使用するためにPDZモチーフ配列ペプチド、変異体、融合タンパク質、ペプチド模倣体及び小型分子を設計するための基礎として役に立つ。好ましい実施態様では、本発明のアッセイで阻害活性又は調節活性についてペプチドを調べる表4及び上の議論を参照のこと。6.6.1T細胞表面受容体のPDZモチーフ配列T細胞によって発現される多数の表面受容体がPDZモチーフ配列PL配列を含有する。このような分子には、CD3η、CD4、CD6、CD38、CD49e、CD49f、CD53、CD83、CD90、CD95、CD97、CD98、CDw13741BB、CD166、CDw128IL-8R、DNAM-1、FasリガンドFasL及びLPAPBarclayetal1997TheLeucocyteAntigenFactsBooksecondedditionAcademicPress、CLSSP-1、CLASP-2、CLASP-4、KV1.3及びDOCK2が挙げられる。CD3のC末端コア配列はSSQLSEQIDNO:4である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、SSSQLSEQIDNO:5、SSSSQLSEQIDNO:6、PSSSSQLSEQIDNO:7及びPPSSSSQLSEQIDNO:8も用いてもよい。CD4のC末端コア配列はCSPISEQIDNO9である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、TCSPISEQIDNO:10、KTCSPISEQIDNO:11、QKTCSPISEQIDNO:12及びFQKTCSPISEQIDNO:13も用いてもよい。CD6のC末端コア配列は、ISAASEQIDNO:14である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、DISAASEQIDNO:15、DDISAASEQIDNO:16、YDDISAASEQIDNO:17及びDYDDISAASEQIDNO:18も用いてもよい。CD38のC末端コア配列はTSEISEQIDNO:19である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、CTSEISEQIDNO:20、SCTSEISEQIDNO:21、SSCTSEISEQIDNO:22及びDSSCTSEISEQIDNO:23も用いてもよい。CD49eのC末端コア配列はTSDASEQIDNO:24である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、ATSDASEQIDNO:25、PATSDASEQIDNO:26、PPATSDASEQIDNO:27及びKPPATSDASEQIDNO:28も用いてもよい。CD49fのC末端コア配列はTSDASEQIDNO:29である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、LTSDASEQIDNO:30、RLTSDASEQIDNO:31、ERLTSDASEQIDNO:32及びKERLTSDASEQIDNO:33も用いてもよい。CD53のC末端コア配列はTIGLSEQIDNO:34である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、QTIGLSEQIDNO:35、SQTIGLSEQIDNO:36、TSQTIGLSEQIDNO:37及びKTSQTIGLSEQIDNO:38も用いてもよい。CD83のC末端コア配列はTELVSEQIDNO:248である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、KTELVSEQIDNO:249、HKTELVSEQIDNO:250、PHKTELVSEQIDNO:251及びDTPHKTELVSEQIDNO:252も用いてもよい。CD90のC末端コア配列はFMSLSEQIDNO:39である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、DFMSLSEQIDNO:40、TDFMSLSEQIDNO:41、ATDFMSLSEQIDNO:42及びQATDFMSLSEQIDNO:43も用いてもよい。CD95のC末端コア配列はQSLVSEQIDNO:44である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、IQSLVSEQIDNO:45、EIQSLVSEQIDNO:46、NEIQSLVSEQIDNO:47及びRNEIQSLVSEQIDNO:48も用いてもよい。CD97のC末端コア配列はESGISEQIDNO:49である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、SESGISEQIDNO:50、ASESGISEQIDNO:51、RASESGISEQIDNO:52及びLRASESGISEQIDNO:53も用いてもよい。CD98のC末端コア配列はPYAASEQIDNO:54である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、FPYAASEQIDNO:55、RFPYAASEQIDNO:56、LRFPYAASEQIDNO:57及びLLRFPYAASEQIDNO:58も用いてもよい。CDw137のC末端コア配列はGCELSEQIDNO:59である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、GGCELSEQIDNO:60、EGGCELSEQIDNO:61、EEGGCELSEQIDNO:62及びEEEGGCELSEQIDNO:63も用いてもよい。CD166のC末端コア配列はKTEASEQIDNO:64である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、HKTEASEQIDNO:65、NHKTEASEQIDNO:66、NNHKTEASEQIDNO:67及びENNHKTEASEQIDNO:68も用いてもよい。CDw128のC末端コア配列はSSNLSEQIDNO:69である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、VSSNLSEQIDNO:70、NVSSNLSEQIDNO:71、VNVSSNLSEQIDNO:72及びSVNVSSNLSEQIDNO:73も用いてもよい。DNAM-1のC末端コア配列はKTRVSEQIDNO:74である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、PKTRVSEQIDNO:75、RPKTRVSEQIDNO:76、RRPKTRVSEQIDNO:77及びSRRPKTRVSEQIDNO:78も用いてもよい。FasLのC末端コア配列はLYKLSEQIDNO:79である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、GLYKLSEQIDNO:80、FGLYKLSEQIDNO:81、FFGLYKLSEQIDNO:82及びTFFGLYKLSEQIDNO:83も用いてもよい。LPAPのC末端コア配列はVTALSEQIDNO:84である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、HVTALSEQIDNO:85、LHVTALSEQIDNO:86、GLHVTALSEQIDNO:87及びQGLHVTALSEQIDNO:88も用いてもよい。CLASP-1のC末端コア配列はSAQVSEQIDNO:218である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、SSAQVSEQIDNO:219、SSSAQVSEQIDNO:220、ISSSAQVSEQIDNO:221及びSISSSAQVSEQIDNO:222も用いてもよい。CLASP-2のC末端コア配列はSSVVSEQIDNO:223である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、SSSVVSEQIDNO:224、SSSSVVSEQIDNO:225、TSSSSVVSEQIDNO:226及びMTSSSSVVSEQIDNO:227も用いてもよい。CLASP-4のC末端コア配列はYAEVSEQIDNO:228である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、RYAEVSEQIDNO:229、PRYAEVSEQIDNO:230、SPRYAEVSEQIDNO:231及びGSPRYAEVSEQIDNO:232も用いてもよい。KV1.3のC末端コア配列はFTDVSEQIDNO:238である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、IFTDVSEQIDNO:239、KIFTDVSEQIDNO:240、KKIFTDVSEQIDNO:241及びIKKIFTDVSEQIDNO:242も用いてもよい。DOCK2のC末端コア配列はSTDLSEQIDNO:243である。天然に生じる残基をコア配列に加える場合、T細胞においてPDZドメイン含有タンパク質を標的とするには、LSTDLSEQIDNO:244、SLSTDLSEQIDNO:245、DSLSTDLSEQIDNO:246及びPDSLSTDLSEQIDNO:247も用いてもよい。6.6.2B細胞表面受容体のPDZモチーフ配列B細胞によって発現される多数の表面受容体はPDZドメインのモチーフ配列を含有している。このような分子には、CD38、CD53、CD95、CD97、CD98、CDw137、CD138、CDw125IL-5R、DNAM-1、LPAP、シンデカン-2Barclayetal1997TheleucocyteAntigenFactsBooksecondeditionAcademicPress、及びBLR-1が挙げられるが、これに限定されない。CD38、CD53、CD83、CD95、CD97、CD98、CDw137、DNAM-1、DOCK2、LPAP、CLASP-1、CLASP-2及びCLASP-4の特異的モチーフ配列は前の段落に記載した。CD138のC末端コア配列はEFYASEQIDNO:89である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、B細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、EEFYASEQIDNO:90、QEEFYASEQIDNO:91、KQEEFYASEQIDNO:92及びTKQEEFYASEQIDNO:93も用いてもよい。CDw125のC末端コア配列はDSVFSEQIDNO:94である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、B細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、EDSVFSEQIDNO:95、LEDSVFSEQIDNO:96、TLEDSVFSEQIDNO:97及びETLEDSVFSEQIDNO:97も用いてもよい。シンデカン-2のC末端コア配列はEFYASEQIDNO:258である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、B細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、KEFYASEQIDNO:259、TKEFYASEQIDNO:260、PTKEFYASEQIDNO:261及びAPTKEFYASEQIDNO:262も用いてもよい。BLR-1のC末端コア配列はLTTFSEQIDNO:253である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、B細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、SLTTFSEQIDNO:254、TSLTTFSEQIDNO:255、ATSLTTFSEQIDNO:256及びNATSLTTFSEQIDNO:257も用いてもよい。6.6.3ナチュラルキラー細胞の表面受容体のPDZモチーフ配列NK細胞によって発現される多数の表面受容体がPDZドメインのモチーフ配列を含有する。このような分子には、CD38、CD56、CD98及びDNAM-1が挙げられるが、これに限定されない。CD38、CD98及びDNAM-1の特異的モチーフ配列は前の段落に記載した。CD56のC末端コア配列はESKASEQIDNO:99である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、NK細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、NESKASEQIDNO:100、ENESKASEQIDNO:101、KENESKASEQIDNO:102及びTKENESKASEQIDNO:103も用いてもよい。6.6.4単球の表面受容体のPDZモチーフ配列単球系列単球及びマクロファージの細胞によって発現される多数の表面受容体が、PDZドメインのモチーフ配列を含有する。このような分子には、CD38、CD44、CD46、CD49e、CD49f、CD53、CD61、CD95、CD97、CD98、CD148、CDw128、CDw137、Ly-6、DNAM-1及びFcεRIβが挙げられるが、これに限定されない。CD38、CD49e、CD49f、CD53、CD95、CD97、CD98、CDw128、CDw137、DNAM-1、ガレクチン3Mac-2及びマンノース受容体の特異的モチーフ配列は前の段落に記載した。CD44のC末端コア配列はKIGVSEQIDNO:104である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、単球においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、MKIGVSEQIDNO:105、DMKGIVSEQIDNO:106、VDMKIGVSEQIDNO:107及びNVDMKIGVSEQIDNO:108も用いてもよい。CD46のC末端コア配列はFTSLSEQIDNO:109である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、単球においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、KFTSLSEQIDNO:110、VKFTSLSEQIDNO:111、EVKFTSLSEQIDNO:112及びREVKFTSLSEQIDNO:113も用いてもよい。CD61のC末端コア配列はKSLVSEQIDNO:114である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、単球においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、LKSLVSEQIDNO:115、FLKSLVSEQIDNO:116、RFLKSLVSEQIDNO:117及びGRFLKSLVSEQIDNO:118も用いてもよい。CD148のC末端コア配列はGYIASEQIDNO:119である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、単球においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、NGYIASEQIDNO:120、TNGYIASEQIDNO:121、KTNGYIASEQIDNO:122及びGKTNGYIASEQIDNO:123も用いてもよい。Ly-6のC末端コア配列はQTLLSEQIDNO:124である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、単球においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、LQTLLSEQIDNO:125、LLQTLLSEQIDNO:126、VLLQTLLSEQIDNO:127及びSVLLQTLLSEQIDNO:128も用いてもよい。FcεRIβのC末端コア配列はPIDLSEQIDNO:129である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、単球においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、PPIDLSEQIDNO:130、SPPIDLSEQIDNO:131、MSPPIDLSEQIDNO:132及びEMSPPIDLSEQIDNO:133も用いてもよい。ガレクチン3のC末端コア配列はYTMISEQIDNO:134である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、単球においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、SYTMISEQIDNO:135、ASYTMISEQIDNO:136、SASYTMISEQIDNO:137及びTSASYTMISEQIDNO:138も用いてもよい。マンノース受容体のC末端コア配列はHSVISEQIDNO:139である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、単球においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、EHSVISEQIDNO:140、NEHSVISEQIDNO:141、QNEHSVISEQIDNO:142及びEQNEHSVISEQIDNO:143も用いてもよい。6.6.5顆粒球の表面受容体のPDZモチーフ配列顆粒球によって発現される多数の表面受容体が、PDZドメインのモチーフ配列を含有している。このような分子には、CD53、CD95、CD97、CD98、CD148、CDw125、CDw128、FcεRIβ及びG-CSFRが挙げられるが、これに限定されない。このような分子のほとんどは前の段落に記載した。G-CSFRのC末端コア配列はTSVLSEQIDNO:144である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、単球においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、ITSVLSEQIDNO:145、PITSVLSEQIDNO:146、FPITSVLSEQIDNO:147及びLFPITSVLSEQIDNO:148も用いてもよい。6.6.6内皮細胞の表面受容体のPDZモチーフ配列内皮細胞は造血系細胞ではないが、血管の内層を形成するので造血系と密接に関わる。そういうものとして、内皮細胞は、造血系の細胞と接触する。従って、内皮細胞の機能を調節する能力は造血系細胞の間接的な調節を規定する。内皮細胞によって発現される多数の表面受容体がPDZドメインのモチーフ配列を含有する。このような分子にはCD34、CD46、CD66b、CD66c、CD105、CD106、CD62eE-セレクチン及びVCAM-1が挙げられるが、これに限定されない。CD34のC末端コア配列はDTELSEQIDNO:149である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、内皮細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、ADTELSEQIDNO:150、VADTELSEQIDNO:151、VVADTELSEQIDNO:152及びHVVADTELSEQIDNO:153も用いてもよい。CD66b及びCD66cのC末端コア配列はVALISEQIDNO:154である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、内皮細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、RVALISEQIDNO:155、ARVALISEQIDNO:156、LARVALISEQIDNO:157及びVLARVALISEQIDNO:158も用いてもよい。CD105のC末端コア配列はSSMASEQIDNO:159である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、内皮細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、TSSMASEQIDNO:160、STSSMASEQIDNO:161、CSTSSMASEQIDNO:162及びPCSTSSMASEQIDNO:162も用いてもよい。CD106のC末端コア配列はKSKVSEQIDNO:163である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、内皮細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、SEQIDNO:164、AQKSKVSEQIDNO:165、EAQKSKVSEQIDNO:166及びVEAQKSKVSEQIDNO:167も用いてもよい。CD62eのC末端コア配列はSYILSEQIDNO:168である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、内皮細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、PSYILSEQIDNO:169、KPSYILSEQIDNO:170、QKPSYILSEQIDNO:171及びYQKPSYILSEQIDNO:172も用いてもよい。VCAM-1のC末端コア配列はKSKVSEQIDNO:233である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、内皮細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、QKSKVSEQIDNO:234、AQKSKVSEQIDNO:235、EAQKSKVSEQIDNO:236及びVEAQKSKVSEQIDNO:237も用いてもよい。6.6.7肥満細胞、好塩基球及び好酸球の細胞表面受容体FcεRIβ、CDw125、CDw128及びIL-8RBは、肥満細胞、好塩基球及び好酸球により発現される膜貫通受容体である。このような受容体はこのような細胞の活性において役割を果し、アレルギー反応において脱顆粒及びヒスタミンの放出を招く。FcεRIβのC末端コア配列は、PIDLSEQIDNO:4である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、肥満細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、PPIDLSEQIDNO:5、SPPIDLSEQIDNO:6、MSPPIDLSEQIDNO:7及びEMSPPIDLSEQIDNO:8も用いてもよい。さらに、残基EをGで置換してその結合親和性を高めてもよい。CDw125のC末端コア配列は、DSVFSEQIDNO:9である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、肥満細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、EDSVFSEQIDNO:10、LEDSVFSEQIDNO:11、TLEDSVFSEQIDNO:12及びETLEDSVFSEQIDNO:13も用いてもよい。CDw128のC末端コア配列は、SSNLSEQIDNO:14である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、肥満細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、VSSNLSEQIDNO:15、NVSSNLSEQIDNO:16、VNVSSNLSEQIDNO:17及びSVNVSSNLSEQIDNO:18も用いてもよい。IL-8RBのC末端コア配列は、STTLSEQIDNO:19である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、肥満細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、TSTTLSEQIDNO:20、HTSTTLSEQIDNO:21、GHTSTTLSEQIDNO:22及びSGHTSTTLSEQIDNO:23も用いてもよい。6.6.8その他のPDZモチーフ配列NMDAのC末端コア配列は、ESDVSEQIDNO:263である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、神経細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、IESDVSEQIDNO:264、SIESDVSEQIDNO:265、PSIESDVSEQIDNO:266及びMPSIESDVSEQIDNO:267も用いてもよい。ニューレキシンのC末端コア配列は、EYYVSEQIDNO:268である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、神経細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、KEYYVSEQIDNO:269、DKEYYVSEQIDNO:270、KDKEYYVSEQIDNO:271及びNKDKEYYVSEQIDNO:272も用いてもよい。グリコフォリンCのC末端コア配列は、EYFISEQIDNO:273である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、PDZを含有するタンパク質を標的とするには、KEYFISEQIDNO:274、RKEYFISEQIDNO:275、SRKEYFISEQIDNO:276及びSSRKEYFISEQIDNO:277も用いてもよい。CD148のC末端コア配列は、KTIASEQIDNO:278である。天然に生じる残基をコア配列に付加する場合、上皮細胞又は骨髄細胞においてPDZを含有するタンパク質を標的とするには、GKTIASEQIDNO:279、FGKTIASEQIDNO:280、TFGKTIASEQIDNO:281及びTTFGKTIASEQIDNO:282も用いてもよい。6.7ペプチドの調製6.7.1化学合成ペプチド及びペプチド類縁体の調製のための事実上公知のいかなる技法を用いて、本発明のペプチド又はその類縁体を調製してもよい。例えば、従来の液相又は固相ペプチド合成を用いて線状形態で調製し、樹脂から切断して精製してもよいCreighton1983ProteinStructuresAndMolecularPrinciplesWHFreemanandCoNY。本明細書で記載されるペプチドを合成する方法は公知である。合成ペプチドの組成は、アミノ酸分析又は配列決定で確認してもよい例えば、エドマン分解法及び質量分析計。さらに、ペプチドの類縁体及び誘導体を化学的に合成することができる。本発明のペプチドの各アミノ酸間の結合は、アミド、置換されたアミド又はアミドの等配電子体であってもよい。非古典的なアミノ酸又は化学的なアミノ酸類縁体を置換又は付加として配列に導入づることができる。非古典的なアミノ酸には、通常のアミノ酸のD型異性体、α-アミノイソ酪酸、4-アミノ酪酸、アブ、2-アミノ酪酸、γ-アブ、ε-Ahx、6-アミノヘキサン酸、Aib、2-アミノイソ酪酸、3-アミノプロピオン酸、オルニチン、ノルロイシン、ノルバリン、ヒドロキシプロリン、サルコシン、シトルリン、システイン酸、t-ブチルグリシン、t-ブチルアラニン、フェニルグリシン、シクロヘキシルアラニン、β-アラニン、フルオロアミノ酸、及びβ-メチルアミノ酸、C-メチルアミノ酸、N-メチルアミノ酸のようなデザイナーアミノ酸、及び一般のアミノ酸類縁体が挙げられるが、これに限定されない。さらに、アミノ酸はD右旋体又はL左旋体であってもよい。6.7.2組換え合成ペプチドが全体として遺伝子にコードされたアミノ酸で構成される場合、又はその一部がそのように構成される場合、従来の組換え遺伝子工学技術を用いて、ペプチド又は該当する部分を合成してもよい。組換え製造では、線状形態のペプチドをコードするポリヌクレオチドを適当な発現媒体、すなわち、挿入したコード配列の転写と翻訳に必要な要素、又はRNAウイルスベクターの場合は複製と翻訳に必要な要素を含有するベクターに挿入する。次いで発現媒体を好適な標的細胞に形質移入し、その細胞はペプチドを発現する。使用する発現システムに依存して、当該技術で確立された手法によって発現されたペプチドを、次いで単離する。組換えタンパク質及びペプチドの製造方法は公知である例えば、Maniatisetal1989MolecularCloningALaboratoryManual[分子クローニング:実験室マニュアル]ColdSpringHarborLaboratoryNY及びAusubeletal1989CurrentProtocolsinMolecularBiology[分子生物学の現代プロトコール]GreenePublishingAssociatesandWileyInterscienceNYを参照のこと。本明細書で記載されたペプチドを発現するために多様な宿主-発現ベクター系を利用してもよい。これらには、適当なコード配列を含有する組換えバクテリオファージDNA又はプラスミドDNA発現ベクターによって形質転換された細菌;適当なコード配列を含有する酵母又は真菌発現ベクターによって形質転換された酵母又は糸状菌;適当なコード配列を含有する組換えウイルス発現ベクター例えば、バキュロウイルスを感染させた昆虫細胞システム;適当なコード配列を含有する組換えウイルス発現ベクター例えば、カリフラワーモザイクウイルス又はタバコモザイクウイルスを感染させた植物細胞システム、又は組換えプラスミド発現ベクター例えば、Tiプラスミドによって形質転換された植物細胞システム;又は動物細胞システムが挙げられるが、これに限定されない。発現システムの発現要素はその強度及び特異性において異なる。利用する宿主/ベクターシステムによって、構成的プロモータ及び誘導可能なプロモータを含めて多数の好適な転写及び翻訳要素のいずれを発現ベクターで使用してもよい。例えば、細菌システムでクローニングする場合は、バクテリオファージλのpL、plac、ptacptrp-lacハイブリッドプロモータなどのような誘導可能なプロモータを用いてもよく;昆虫細胞システムでクローニングする場合は、バキュロウイルスの多面体プロモータのようなプロモータを用いてもよく;植物細胞システムでクローニングする場合は、植物細胞のゲノムに由来するプロモータ例えば、熱ショックプロモータ;RUBISCOの小型サブユニットのためのプロモータ;クロロフィルa/b結合タンパク質のためのプロモータ又は植物ウイルスに由来するプロモータ例えば、CaMVの35SRNAプロモータ;TMVの被膜タンパク質プロモータを用いてもよく;哺乳類細胞システムでクローニングする場合は、哺乳類ゲノムに由来するプロモータ例えば、メタロチオネインプロモータ又は哺乳類ウイルスに由来するプロモータ例えば、アデノウイルス後期プロモータ;ワクシニアウイルス7.5Kプロモータを用いてもよく;発現産物の複数コピーを含有する細胞株を集める場合は、適当な選択可能なマーカーと共に、SV40-、BPV-及びEBV-を基にしたベクターを用いてもよい。植物の発現ベクターを用いる場合、本発明のペプチドをコードする配列の発現は、多数のプロモータのいずれに由来してもよい。例えば、CaMVの35SRNA及び19SRNAプロモータBrissonetalNature3105115141984又はTMVの被膜タンパク質プロモータTakamatsuetalEMBOJ63073111987を用いてもよく;別の方法としては、RUBISCOの小型サブユニットCoruzzietalEMBOJ3167116801984BroglieetalScience2248388431984又は熱ショックプロモータ、例えば大豆hsp17.5E若しくはhsp17.3BGurleyetalMolCellBiol65595651986のような植物プロモータを用いてもよい。このようなコンストラクトをTiプラスミド、Riプラスミド、植物ウイルスベクター、直接的DNA形質転換、微量注入法、エレクトロポレーションなどによってplanleucocyteに導入することができる。かかる技法の概説については、WeissbachWeissbach1988MethodsforPlantMolecularBiology[植物の分子生物学のための方法]AcademicPressNYのVIII章、421~463ページ;及びGriersonCorey1988PlantMolecularBiology[植物の分子生物学]第2版BlackieLondonCh79を参照のこと。本発明のペプチドを製造するために使用してもよい昆虫発現システムの1つでは、外来遺伝子を発現するためのベクターとしてAutographacalifornica核ポリヒドローシスウイルスAcNPVを用いる。ウイルスはSpodopterafrugioerda細胞中で増殖する。ウイルスの非必須領域例えば、多面体遺伝子にコード配列をクローニングし、AcNPVプロモータ例えば、多面体プロモータの制御のもとに置いてもよい。コード配列の挿入が上手く行くと、多面体遺伝子の不活化が生じ、非閉塞組換えウイルスすなわち、多面体遺伝子によってコードされるタンパク質様被膜を欠くウイルスが生産される。次いでこのようなウイルスを用いて、SpodopteraFruiperda細胞に感染させ、そこで挿入された遺伝子が発現される例えば、SmithetalJVirol46584米国特許第4,215,051号スミス]を参照のこと。さらに、この発現システムの例は、CurrentProtocolsinMolecularBiologyVol2AusubeletalGreenePublishAssocWileyInterscienceの中で見い出されてもよい。哺乳類の宿主細胞では、多数のウイルスを基にした発現システムが利用される。発現ベクターとしてアデノウイルスを使用する場合、アデノウイルスの転写/翻訳制御複合体、例えば、後期プロモータ及び三部分リーダー配列にコード配列を連結してもよい。次いで、invitro又はinvivoの組換えによってこのキメラ遺伝子をアデノウイルスゲノムに挿入してもよい。ウイルスゲノムの非必須領域例えば、E1又はE3領域における挿入によって、感染した宿主の中で生存可能で、且つペプチドを発現することが可能な組換えウイルスを生じる例えば、LoganDhenkProcNatlAcadSciUSA81365536591984を参照のこと。別の方法としては、ワクシニア7.5Kプロモータを用いてもよい例えば、MackettetalProcNatlAcadSciUSA79741574191982MackettetalJVirol498578641984PanicalietalProcNatlAcadSciUSA7949274931を参照のこと。本発明の線状ペプチドを製造するためのその他の発現システムは当業者には明らかであろう。6.7.3ペプチド及びペプチド類縁体の精製例えば、高速液体クロマトグラフィ、イオン交換クロマトグラフィ、ゲル電気泳動、アフィニティクロマトグラフィなどのような公知の技法によって本発明のペプチド及びペプチド類縁体を精製することができる。特定のペプチド又は類縁体を精製するのに用いる実際の条件は、部分的には、正味の荷電、疎水性、親水性などのような要因に依存しており、当業者には明らかであろう。例えば、放射性標識後のゲル電気泳動、放射性免疫アッセイ、ELISA、バイオアッセイなどを含む、その物理的又は機能的特性に基づいたアッセイによって精製されたペプチドを同定することができる。アフィニティクロマトグラフィ精製については、ペプチド又はペプチド類縁体に特異的に結合するいかなる抗体を使用してもよい。抗体の産生については、ペプチドと共に注射することによって、ウサギ、マウス、ラットなどを含むが、これに限定されない種々の宿主動物を免疫してもよい。側鎖官能基又は側鎖官能基に結合したリンカーによって、BSA又はKLHのような好適なキャリアにペプチドを結合してもよい。宿主の種に依存して、免疫応答を高めるために種々のアジュバントを使用してもよく、それには、フロインド完全及び不完全、水酸化アルミニウムのような無機ゲル、リソレシチンのような界面活性物質、プルロニックポリオール、ポリアニオン、ペプチド、オイルエマルション、カサガイのヘモシアニン、ジニトロフェノール、及びBCGカルメットーゲラン菌並びにCorynebacteriumparvumのような潜在的に有用なヒトアジュバントが挙げられるが、これに限定されない。培養中で維持されている細胞株による抗体分子の産生を供するいかなる技法を用いて、ペプチドに対するモノクローナル抗体を調製してもよい。これらには、元々KoehlerとMilsteinNature2564954971975によって記載されたハイブリドーマ法、ヒトB細胞ハイブリドーマ法KosboretalImmunologyToday4721983CoteetalProcNatlAcadSciUSA80202620301983及びEBVハイブリドーマ法ColeetalMonoclonalantibodiesandCancerTherapyAlanRLissInc7796pp1985が挙げられるが、これに限定されない。さらに、適当な抗原特異性のマウス抗体分子からの遺伝子を適当な生物活性のヒト抗体分子の遺伝子と共にスプライシングすることによるキメラ抗体の産生のために開発された技術を使用することもできるMorrisonetalProcNatlAcadSciUSA81685168551984NeubergeretalNature3126046081984TakedaetalNature3144524541985。別の方法としては、単鎖抗体米国特許第4,946,778号の産生に関して記載された技術をペプチド特異的な単鎖抗体を産生するのに当てはめることができる。既知の技法によって特異的結合部位の欠失を含有する抗体断片を作成してもよい。例えば、かかる断片には、抗体分子のペプシン消化によって産生することができるFab’2断片、及びFab’2断片のジスルフィド結合を還元することによって作成することができるFab断片が挙げられるが、これに限定されない。別の方法としては、関心のあるペプチドに関する所望の特異性で、モノクローナルFab断片を迅速に且つ容易に同定することができるようにFab発現ライブラリを構築してもよいHuseetalScience24612751281。所望のペプチドに特異的な抗体又は抗体断片を、例えば、寒天に結合することができ、抗体-寒天複合体は、本発明のペプチドを精製するための免疫クロマトグラフィで使用することができる。ScopesProteinPurificationPrinciplesandPractice及びLivingstoneMethodsEnzymologyImmunoaffinityChromatographyofProteins347237311974を参照のこと。6.8PDZドメインに結合し拮抗する化合物の使用本発明の1つの態様では、本発明のPDZドメイン結合及びPDZ-PL阻害性化合物は、造血系細胞例えば、T細胞及びB細胞及び免疫応答に関与するその他の細胞の多様な活性を調節するのに有用である。本発明の1つの実施態様では、本発明の化合物は、サイトカインの産生、細胞接着、細胞数の増加、アポトーシス及び細胞傷害を含むがこれに限定されない測定可能な事象で示される白血球の活性化を阻害するために使用される。必然的な結果として、急性並びに慢性の炎症、移植片対宿主病、移植の拒絶、過敏症、及び多発性硬化症、慢性関節リウマチ、歯周病、全身性エリテマトーシス、若年性糖尿病、インスリン非依存性糖尿病、並びにアレルギーのような自己免疫性、及び本明細書に一覧するその他の状態例えば、上の6.4の項を参照のことを含むが、これに限定されない望ましくない白血球の活性化に関連する多様な状態を治療するのに本発明の化合物を用いてもよい。従って、本発明はまた、例えば、細胞傷害、サイトカインの産生、細胞増殖及びアポトーシスによって測定されるような白血球の活性化を調節することにおいて、かかる組成物を使用する方法にも関する。活性化のためのアッセイは周知である。例えば、PDZ/PL相互作用の拮抗剤は以下のように評価することができる:1放射性標識された標的細胞とともに細胞傷害性Tリンパ球をインキュベートし、放射活性の放出によってこのような標的細胞の抗原特異的な細胞融解を検出することができる、2抗原及び抗原提示細胞とともにヘルパーTリンパ球をインキュベートし、常法によりサイトカインの合成及び分泌を測定することができるWindhaganAetalImmunity23738019953タンパク質抗原全体とともに抗原提示細胞をインキュベートし、Tリンパ球の活性化又は生物学的方法のいずれかによってMHC上の該抗原の提示を検出することができるHardingetalProcNatlAcadSciUSA86423041989、Fcイプシロン受容体に架橋する試薬とともに肥満細胞をインキュベートし、酵素免疫アッセイによってヒスタミンの放出を測定することができるSiraganianetalTIPS44324371983。同様に、周知の種々の方法によって、白血球活性化の産物に対するPDZ/PL相互作用の拮抗剤の効果をモデル生物例えば、マウス又はヒト患者のどちらかで評価することができる。例えば、1例えばELISAのような現在臨床検査で使用されている常法によって、ワクチン接種に対する応答における抗体の産生を容易に検出することができる;2皮膚の表面を引っ掻き、無菌容器に入れて引っ掻き部位の移動細胞を捕捉することによって、炎症部位の免疫細胞の移動を検出することができるPetersetalBlood72131051988;33H-チミジンを用いることにより、マイトジェンに対する反応又は混合リンパ球反応における末梢血単核細胞の増殖を測定することができる;標識した粒子とともにウエルの中にPBMCを入れることによって、PBMC中の顆粒球、マクロファージ及びその他の貪食細胞の貪食能を測定することができる。;及び5CD4及びCD8のようなCD分子に対する抗体でPBMCを標識し、このようなマーカーを発現するPBMCの分画を測定することにより、免疫系細胞の分化を測定することができる。例示としてのアッセイの1つでは、invitroでのPDZ/PL相互作用の拮抗剤を調べるために、ヒト末梢血単核細胞PBMC、ヒトT細胞株例えば、ジャーカットE6、ATCCTIB-152、EBVで形質転換されたB細胞株例えば、9D10、ATCCCRL-8752、抗原特異的T細胞クローン又はその株を使用することができる。このような細胞又は細胞株の活性化の阻害をPDZ/PL相互作用の拮抗剤の可能性を評価するのに用いることができる。それによって造血系細胞が免疫応答に特徴的な活性化を受けるように刺激される標準的な方法は、例えば:A免疫応答の抗原特異的な刺激。常法によって、免疫前のマウス又は免疫経験のないマウスの脾細胞を作成することができる。さらに、抗原特異的なT細胞クローン及びハイブリドーマ例えば、MBP特異的及び多数のB細胞リンパ腫細胞株例えば、CH27が予め特徴付けられており、以下で議論するアッセイで利用することができる。抗原特異的な脾細胞又はB細胞を抗原の存在下、抗原特異的なT細胞と混合し、免疫応答を生じることができる。PDZ/PL相互作用の拮抗剤の存在下又は非存在下でこれを行い、PDZ/PL相互作用の拮抗剤が上の免疫応答を調節するかどうかをアッセイすることができる。B非特異的なT細胞の活性化。抗原の非存在下、T細胞を活性化するのに以下の方法を用いることができる:1共刺激分子に対する抗体、例えば、抗CD28とともに受容体活性化分子例えば、TCR、CD3又はCD2に対する抗体を添加することによるT細胞受容体TCRの架橋;2コンカナバリンAConA及び植物凝集素PHAのようなレクチンを用いた非特異的手法における細胞表面受容体の活性化;3タンパク質キナーゼCを活性化する薬剤例えば、ホルボールエステル及び細胞質Ca2を上昇させる薬剤例えば、イオノマイシンを用いた、表面受容体が介在する活性化の模倣。C非特異的なB細胞の活性化。1IgM、CD20又はCD21のような細胞表面分子に対する抗体の適用、2バイパスで受容体刺激を誘発するために、リポ多糖類LPS、ホルボールエステル、カルシウムイオノフォア及びイオノマイシンを用いることもできる。D混合リンパ球反応MLR。提供者のPBMCを受入者のPBMCと混合し、ミスマッチの組織抗原の提示によってリンパ球を活性化するが、それは、一卵性双生児以外いずれの場合でも起きる。E特定の抗原を認識する特異的T細胞のクローン又は株の作成。標準的なアプローチは、最近破傷風毒素の追加注射を受けたことのある提供者から破傷風毒素特異的T細胞を作成することである。細胞株又はT細胞クローンの特異性を維持するために、主要組織適合抗原複合体MHCの一致した抗原提示細胞と破傷風毒素源を用いるLanzavecchiaAetalEurJImmunol137337381983。アッセイの定量化種々の周知の定量化法によって上記アッセイを定量化することができる。例えば:Aチロシンのリン酸化HS1、PLC-γ、ZAP-76及びVavのような早期反応性タンパク質のチロシンのリン酸化は、白血球の活性化に続く早期の生化学的事象である。チロシンがリン酸化されたタンパク質は、リン酸化チロシン残基に対する抗体を用いたウエスタンブロットによって検出することができる。このような早期反応性タンパク質のチロシンのリン酸化は、白血球の活性化に関する標準的なアッセイとして用いることができるJBiolChem27214562145701997。潜在的なPDZ/PL相互作用の拮抗剤の存在下で免疫応答が生じる場合、このようなタンパク質又は関連するタンパク質のリン酸化パターンのいかなる変化も潜在的なPDZ/PL相互作用の拮抗剤を示すものである。B細胞内カルシウムの流入予めカルシウムに感受性の色素を負荷することにより細胞の刺激後、時間を追って細胞内Ca2濃度の動態を測定することができる。フローサイトメータ、溶液フローメータ、及び共焦点顕微鏡を用いて、Ca2指示薬色素例えば、フルオロ-4[分子プローブ]を結合することによる蛍光レベルの上昇が示される。PDZ/PL相互作用の拮抗剤の存在下で免疫応答が生じる場合、カルシウム流入のレベルや時間におけるいかなる変化もこの反応の阻害を示すものである。C早期活性化マーカーの調節フローサイトメータを用いて、蛍光的に標識した抗体により、CD69、IL-2R、MHCクラスII、B7及びTCRのような早期リンパ球活性化マーカーの発現/レベルの調節における増減を一般的に測定する。抗体はすべて市販されている。PDZ/PL相互作用の拮抗剤の存在下で免疫応答が生じる場合、リンパ球活性化マーカーの発現レベルにおけるいかなる変化もこの反応の阻害を示すものである。D代謝活性/酸放出の増加最も知られたシグナル伝達経路の引き金の活性化によって、酸性代謝産物が増加する。この再現可能な生物学的事象は、微量生理機能測定装置分子装置を用いて、酸放出の速度として測定され、潜在的な生物学的療法による細胞の処置を比較する場合、早期活性化マーカーとして用いられるMcConnellHMetalScience257190619121992及びMcConnellHMProcNatlAcadSci92275027541995。対照試料処置なしと比較した、PDZ/PL相互作用の拮抗剤で処置した試料の酸放出におけるいかなる統計的に有意な増減も、生物学的な機能におけるPDZ/PL相互作用の拮抗剤の影響を示唆している。E細胞増殖/細胞生存性のアッセイ13Hチミジンの取り込みinvitroにて抗原又はマイトジェンにリンパ球を暴露してDNA合成及び細胞増殖を誘導する。新しく合成されたDNAへの3Hチミジンの取り込みによる分裂活性の測定は、T細胞活性化を定量するために最も頻繁に用いられるアッセイの1つである。T細胞を活性化するのに用いられた細胞集団と刺激の形態によって、3Hチミジンをパルスした後、invitroにて24~72時間以内に分裂活性を測定することができるMishekkBBShiigiSMSelectedMethodsinCellularImmunologyWHFreemanandCompany1980及びDuttonRWPearceJDNature194931962。対照試料処置なしと比較した、PDZ/PL相互作用の拮抗剤で処置した試料のCPMにおけるいかなる統計的に有意な増減も、生物学的な機能におけるPDZ/PL相互作用の拮抗剤の影響を示唆している。2MTS[5-3-カルボキシメトキシフェニル-2-4,5-ジメチルチアゾリル-3-4-スルホフェニルテトラゾリウム、分子内塩]は、リンパ球の活性化後1~5日間の増殖又は細胞傷害性アッセイにおける生存細胞の数を測定する比色法であるBarltropJABioorgMedChemLett1611。オーエン試薬である、MTSテトラゾリウム化合物は、細胞により生体還元されて、組織培養培地に可溶性の着色したホルマザン産物になる。微量プレートリーダーを用いて、490nmマイナス650nmにて色強度を読み取る。対照試料処置なしと比較した、PDZ/PL相互作用の拮抗剤で処置した試料の色強度におけるいかなる統計的に有意な増減も、生物学的な機能におけるPDZ/PL相互作用の拮抗剤の影響を示唆することができるMosmannTJImmunolmethods65551983及びBarltropJAetal。3ブロモデオキシウリジンBrdU、チミジン類縁体、DNA合成を受けている細胞に容易に組み入れる。酵素を結合した抗BrdU抗体によりBrdUでパルスした細胞を標識するGratznerHGScience2184744751982。BrdUを取り込んだ、増殖している細胞を視覚化するために比色分析用の可溶性基質を用いる。硫酸によって反応を止め、微量プレートリーダーを用いて450nmでプレートを読み取る。対照試料処置なしと比較した、PDZ/PL相互作用の拮抗剤で処置した試料の色強度におけるいかなる統計的に有意な増減も、生物学的な機能におけるPDZ/PL相互作用の拮抗剤の影響を示唆している。FアネキシンVによるアポトーシスプログラム細胞死又はアポトーシスは、異化反応が細胞死を招くカスケードにおける早期の事象である。細胞膜の完全性を喪失することによって蛍光的に共役したホスファチジルセリンの結合ができるようになる。蛍光顕微鏡又はフローサイトメータによって染色された細胞を測定することができるVermesLJImmunolMethods18039521995。1つの実施態様では、対照試料処置なしと比較した、PDZ/PL相互作用の拮抗剤で処置した試料のアポトーシス細胞の数におけるいかなる統計的に有意な増減も、生物学的な機能におけるPDZ/PL相互作用の拮抗剤の影響を示唆する。insituでアポトーシスを評価するために、invivo試験において組織試料における細胞死を評価するためのアッセイを用いることもできる。Gサイトカイン産生の定量化16~48時間、細胞を刺激した後で回収された細胞上清を、サイトカイン産生についてアッセイするまで、又は直接試験するまで、-80°Cにて保存する。各試料について複数のサイトカインアッセイを行うことができる。マウス、ラット及びヒトについて、IL-2、IL-3、IFN-γ及びその他のサイトカインのELISAアッセイが利用できるエンドゲン[Endogen]社及びバイオソース。製造元により記載されているような標準的な2抗体サンドイッチELISAプロトコールを用いてサイトカインの産生を測定する。3,3’5,5’-テトラメチルベンジリジンTMBによって西洋ワサビペルオキシダーゼの存在を検出し、硫酸によって反応を止める。微量プレートリーダーを用いて、450nmにて吸収を測定する。対照試料処置なしと比較した、PDZ/PL相互作用の拮抗剤で処置した試料の色強度におけるいかなる統計的に有意な増減も、生物学的な機能におけるPDZ/PL相互作用の拮抗剤の影響を示唆する。下の実施例1を参照のこと。抗サイトカイン抗体を用いた細胞内サイトカインの検出は、混合された細胞集団に関するサイトカインを測定するさらなる利点を提供する。これによって、浮遊液又は組織におけるサイトカインを産生する細胞型の頻度を測定する表現型決定を行うことができる。H免疫染色によってNF-TAを視覚化することができる。T細胞の活性化は、活性化T細胞の核因子NF-ATの核への移入を必要とする。抗NF-AT抗体で免疫染色することによってNF-TAのこの転移を視覚化することができるCell938518611998。従って、T細胞の活性化をアッセイするのにNF-ATの核転移が用いられてきた。同様に、NF-AT/ルシフェラーゼリポーターアッセイもT細胞活性化の標準的な測定法として用いられてきたMCB12715171601996。対照試料処置なしと比較した、PDZ/PL相互作用の拮抗剤で処置した試料によってもたらされたNF-ATの核転移におけるいかなる統計的に有意な増減も、生物学的な機能におけるPDZ/PL相互作用の拮抗剤の影響を示唆する。本明細書で開示されたペプチド及びペプチド類縁体のヒト被験者での使用を最適化するために、臨床パラメータを決定するのに種々の動物モデルを用いてもよい。例えば、心臓移植のマウスモデルにおいて、様々な投与量、剤形及び投与経路によって本発明の化合物で処置して、固形臓器移植に対する拒絶反応を阻止する能力を最適化してもよいFulmeretalAmJAnat1132731963JockuschetalExpNeurol817491983。T細胞応答の阻害が所望であるような状況では、PDZドメインのCD3、CD4、CD6及びCDw137との相互作用を阻害するために本発明の化合物を使用してもよい。さらに、B細胞においてPDZドメインとCD53及びCD138との相互作用を阻害するのに本発明の化合物を使用してもよい。IgEが介在するアレルギー反応を阻害するために、PDZドメインとFcεRIβ、CDw125及びCDw128との相互作用を阻害するために本発明の化合物を用いてもよい。さらに、リンパ腫のアポトーシスを誘導するためにCD95のPDZモチーフ配列PL配列を用いてもよい。I炎症性メディエイター放出分析IgE介在性の脱顆粒に対する化合物または治療の効果を入手するための炎症性メディエイターの検定法は、この技術において周知である。たとえば、双方とも参考文献として本文に編入されている、Bergerら、1997、MeasuringCellDegranulation細胞脱顆粒の測定の、たとえば第19.6章ImmunologyMethodManual免疫学方法マニュアルアカデミックプレス社、14361440、およびSiraganian、1983、HistamineSecretionfromMastCellsandBasophil肥満細胞および好塩基球からのヒスタミン分泌TIPS4432437、を参照のこと。6.9.製剤および投与経路6.9.1.アゴニストまたはアンタゴニストたとえばペプチドおよび融合タンパク質の細胞への導入一つの観点においては、本発明のPDZ-PLアンタゴニストは、細胞の生物機能または活性を調節するすなわち増大または減少させるべく、細胞内へ導入される。多くの有機低分子は容易に細胞膜を横切るまたは熟練者により、化合物が細胞に入る能力を、たとえば電荷を減じるかまたは除去すること、親油性を増大すること、細胞表面受容体をターゲットとする成分と当該分子を結合させ、当該受容体と相互作用した後に、増加させるべく、慣例的な方法を用いて改造されることが可能である。より大きい分子、たとえばペプチドおよび融合タンパク質を導入する方法も周知であり、たとえば、注射、リポソーム仲介性融合、ヒドロゲル、細胞によってエンドサイトーシスされるターゲティング成分結合体との結合、電気穿孔、およびその他を含む。一つの態様においては、アンタゴニストまたは薬剤は、融合ポリペプチドまたは誘導されたポリペプチドである。融合または誘導されたタンパク質は、当該ポリペプチドが細胞膜を横切る能力を増大させるか、または当該ポリペプチドを特殊化された細胞型たとえば、肝細胞または腫瘍細胞に対して優先的に、あるいは細胞区画たとえば、核区画に対して優先的に送達されるようにするターゲティング成分を含んでもよい。ターゲティング成分の実例は、リピドテイル、アンテナポエディアantenapoediaペプチドまたは核局在化シグナルNLS;たとえばRobbinsら、1991、Cell64615、アフリカツメガエル核原形質といったアミノ酸配列を含む。本発明の一つの態様においては、PDZドメイン-PLタンパク質の結合を阻害するべく決定されたペプチド配列またはペプチド類似体は、本発明の一つの検定法においては、当該配列を原形質膜を通した輸送を促進するアミノ酸配列膜貫通トランスポーター配列に対して結合することにより細胞内へ導入される。本発明のペプチドは、直接使用されるか、または細胞内へのそれらの侵入を促進するべく、膜貫通トランスポーター配列に対して融合されてもよい。かかる融合ペプチドの場合には、各々のペプチドは異種ペプチドと、そのアミノ末端において直接に、または1~3回反復されたペンタマーG-G-G-G-S配列番号1などの可撓性のポリリンカーを用いることにより融合されてもよい。かかるリンカーは、VHとVLとの間に挿入されることにより、単鎖抗体scFvの構築の使用されてきたBirdら、1988、Science242423426;Hustonら、1988、ProcNatlAcadSciUSA8559795883。リンカーは単鎖抗体の可変領域を形成している二つのβシート間の正しい相互作用を可能にするべく設計されている。使用されてもよい他のリンカーは、Glu-Gly-Lys-Ser-Ser-Gly-Ser-Gly-Ser-Glu-Ser-Lys-Val-Asp配列番号2Chaudharyら、1990、ProcNatlAcadSciUSA8710661070およびLys-Glu-Ser-Gly-Ser-Val-Ser-Ser-Glu-Gln-Leu-Ala-Glu-Phe-Arg-Ser-Leu-Asp配列番号3Birdら、1988、Science242423426を含む。当該技術においてはいくつかのペプチド配列が、これらの配列に結合されたペプチドの原形質膜を通した細胞内への侵入を促進することが可能であるとして記述されているDerossiら、1998、TrendsinCellBiol884。本発明の目的のためには、かかるペプチドは集合的に膜貫通トランスポーターペプチドと呼ばれる。このようなペプチドの実例は、HIV由来のtatVivesら、1997、JBiolChem27216010;Nagaharaら、1993、NatMed41449、ショウジョウバエ由来のアンテナペディアDerossiら、1994、JBiolChem26110444、単純ヘルペスウイルス由来のVP22ElliotおよびD’Hare、1997、Cell88223233、抗DNA抗体の相補正決定領域GDR2および3Avrameasら、1998、ProcNatlAcadSciUSA9556015606、70KDaの熱ショックタンパク質Fujihara、1999、EMBOJ18411419、およびトランスポータンtransportanPoogaら、1998、FASEBJ126777を含むが、これに制限されない。本発明の好ましい態様においては、GYGRKKRRQRRRG配列番号173の配列を有する切断されたHIVtatペプチドが用いられる。膜貫通トランスポーター配列は、そのアミノ末端において造血細胞表面の受容体のカルボキシル末端に、リンカーを用いるかまたは用いずに融合されている。一般的に、PDZモチーフ配列PL配列のC末端は、PDZドメインと相互作用するために遊離していなければならない。膜貫通トランスポーター配列は全体で、またはそれが細胞へのペプチドの侵入を促進することが可能である限り部分的に使用されてもよい。本発明の別の態様においては、造血細胞表面の受容体のC末端配列は、それが膜貫通トランスポーター配列の不在下に細胞への侵入を可能にする方法で送達される場合には、単独で用いられてよい。たとえば、当該ペプチドはリポソーム製剤中においてか、またはPDZモチーフのためのコード配列を単独で、あるいは融合分子として送達することによる遺伝子治療アプローチを用いて、標的細胞内に送達されてもよい。本発明の化合物は、当該ペプチド組成物の半減期を増す他に、リンパ組織などの特定の組織に対して当該結合体をターゲットするために役立つか、または感染細胞に対し選択的にターゲットされる、リポソームを経て投与されてもよい。リポソームはエマルジョン、泡沫、ミセル、不溶性単分子層、液晶、リン脂質分散、ラメラ層、およびその他を含む。このような標品中では、送達されるべきペプチドはリポソームの一部として、単独か、またはたとえばCD45抗原と結合するモノクローナル抗体などの、リンパ細胞の間で優勢な受容体と結合する分子と、あるいは他の治療用または免疫原性組成物とともに取り込まれる。したがって、所望のぺプチドまたは本発明の結合体で満たされたリポソームは、リンパ細胞の部位に向けられることが可能であり、次いでリポソームはそこで、選ばれたインヒビター組成物を送達する。本発明において使用するためのリポソームは標準的な小胞形成脂質から形成されるが、それは一般的に中性かつ負に帯電したリン脂質と、コレステロールなどのステロールとを含む。脂質の選択は一般に、たとえばリポソームの大きさ、酸不安定性、および血流中でのリポソームの安定性を考慮することにより進められる。リポソームの調製には、たとえばSzokaら、AnnRevBiophysBioeng94671980、米国特許第4,235,871号、4,501,728号および4、837、028号に記述されたような種々の方法が利用できる。種々のターゲティング薬剤を用いたリポソームのターゲティングは、当該技術において周知であるたとえば、米国特許第4,957,773号および第4,603,044号を参照のこと。免疫細胞に対するターゲティング用には、リポソーム内に取り入れられるリガンドは、たとえば所望の免疫系細胞の細胞表面決定基に特異的な抗体またはそのフラグメントを含むことが可能である。ペプチドまたは結合体を含んでいるリポソーム懸濁物は、静脈内に、局部的に、局所的、その他に、中でも投与の方式、送達される結合体、および治療される疾病の段階に依存して、異なる用量で投与されてよい。PDZモチーフ配列PL配列ペプチドを特別の細胞種内へ特異的に送達するためには当該ペプチドは、成長因子、ホルモン、およびサイトカインなどの多様な白血球表面分子のためのリガンド、ならびに抗体またはそれらの抗原結合フラグメントを含むがこれに限定されない細胞特異ターゲティング成分に結合されてよい。多数の細胞表面受容体が白血球において同定されているため、これらの受容体に特異的なリガンドまたは抗体は、細胞特異ターゲティング成分として用いられてよい。たとえば、インターロイキン2、B7-1CD80、B7-2CD86、およびCD40またはそれらのペプチドフラグメントは、活性化されたT細胞を特異的にターゲットするべく用いられてよいTheLeucocyteAntigenFactsBook、1997、Barclayら、共編、アカデミックプレス。CD28、CTLA-4、およびCD40Lまたはそれらのペプチドは、B細胞を特異的にターゲットするべく用いられてよい。さらにFcドメインは、単球などのFc受容体を発現しているある種の細胞をターゲットするべく用いられてよい。抗体は、それらがどの細胞表面抗原に対しても生成され得るため、最も多目的に使用できる細胞特異ターゲティング成分である。モノクローナル抗体は、ある種のCD抗原などの白血球系統特異マーカーに対して生成されてきた。抗体の可変領域の遺伝子は、当該技術において周知の方法により、ハイブリドーマ細胞から容易に単離されることが可能である。しかしながら、抗体は二つの重鎖と二つの軽鎖との間で構築されるため、本発明においてはscFcが細胞特異ターゲティング成分として用いられることが好ましい。かかるscFcは、可撓性のリンカーペプチドによって一つのポリペプチド鎖に結合されたVhおよびVLドメインから構成される。PDZモチーフ配列PL配列は、膜貫通トランスポーター配列および細胞特異ターゲティング成分に結合されて、三重の融合分子を生じてもよい。この分子は白血球表面分子に結合し、細胞膜を通過し、さらにPDZドメインをターゲットすることが可能である。別法として、PDZモチーフ配列PL配列は、当該融合ペプチドをインターナライズする表面分子に結合する、細胞特異ターゲティング成分に対して結合されてもよい。他の一つのアプローチにおいては、混合アミノ酸の人工ポリマーから成るミクロスフェアプロテイノイドが、薬剤を送達するべく用いられてきた。たとえば、米国特許第4,925,673号は、薬剤を含んでいるプロテイノイドミクロスフェア担体、ならびにそれらの調製法および用途について記述している。このようなプロテイノイドミクロスフェアは、いくつかの活性薬剤の送達にとって有用である。参考文献として本文に編入されている米国特許第5,907,030号および第6,033,884号を参照のこと。6.9.2.ポリヌクレオチドの細胞内への導入表面受容体C末端ペプチドをコードしているポリヌクレオチドは、種々の白血球活性化に関連した異常状態の治療に有用であってよい。細胞内に遺伝子配列を導入することにより、白血球が活性化されて有害な結果を生じる状態を治療するべく、遺伝子療法が用いられることができる。一つの態様においては、本発明のPL配列ペプチドをコードするポリヌクレオチドは、それが発現される細胞内へ導入される。発現されたペプチドは、次に細胞内におけるPDZタンパク質とPLタンパク質との相互作用を阻害する。したがって、一つの態様においては、本発明のポリペプチドは細胞内で、所望のタンパク質またはペプチドをコードしている核酸たとえばDNA発現ベクターまたはmRNAを当該細胞内に導入することにより発現される。発現はベクターおよびプロモーターの選択に依存して、構成性かまたは誘導性のいずれかであってよい。核酸の導入ならびに発現のための方法は当該技術において周知であり、本文に記述されている。一つの特別の態様においては、本文に述べられたペプチドをコードしている配列を含んでいる核酸が、ヒトの患者に投与される。この態様においては、当該核酸はそのコード産物を産生し、それが白血球の活性化を阻害することにより治療効果を取り次ぐ。当該技術において利用可能な遺伝子療法のためのいかなる方法も、本発明に従って使用されることができる。以下に代表的な方法が述べられている。遺伝子療法についての全般的な総説としては、Goldspielら、1993、ClinicalPharmacy12488505;WuおよびWu、1991、Biotherapy38795;Tolstoshev、1993、AnnRevPharmacolToxicol32573596;Mulligan、1993、Science260926932;およびMorganおよびAnderson、1993、AnnRevBiochem62191217;May、1993、TIBTECH115155215参照のこと。使用可能な組換えDNA技術において一般的に知られている方法は、Ausubelら共編、1993、CurrentProtocolsinMolecularBiology、ジョンウィリーサンズ、ニューヨーク州;およびKriegler、1990、GenetransferandExpression、ALaboratoryManual、ストックトンStocktonプレス、ニューヨーク州、に記述されている。本発明の一つの好ましい態様においては、治療用組成物は発現ベクターの部分であるコーディング配列を含む。とくに、かかる核酸は、当該コーディング配列に操作可能に結合されたプロモーターを有しており、前記プロモーターは誘導可能であるかまたは構成性であり、さらに任意で組織特異性である。もう一つの特別の態様においては、一つの核酸分子が用いられており、その中でコーディング配列と他の所望の配列とは、ゲノム内の所望の部位において相同組換えを促進する領域によってフランクされており、したがって当該核酸の染色体内発現が提供されるKollerおよびSmithies、1989、ProcNatlAcadSciUSA8689328935;Zijlstraら、1989、Nature342435438。当該核酸の患者への送達は直接的でよく、この場合には当該患者は当該核酸または核酸を運んでいるベクターに直接暴露されるか、あるいは間接的でよく、この場合にはまず細胞が当該核酸によってインヴィトロでトランスフォームされ、次いで当該患者に移植される。これらの二つのアプローチは、各々インヴィヴォまたはエクスヴィヴォ生体外の遺伝子療法として知られている。一つの特別の態様においては、当該核酸はインヴィヴォにおいてコードされた産物を産生するべく発現される場所に直接投与される。このことは、当該技術において周知のいかなる方法によっても、たとえばそれを適当な核酸発現ベクターの部分として構築すること、およびそれを、たとえば欠損または弱毒化されたレトロウイルスまたは他のウイルスベクターを用いた感染によるか米国特許第4,980,286号参照のこと、むきだしのDNAの直接の注射によるか、微粒子衝撃によるかたとえば、遺伝子銃;バイオリスティックBiolistic、デュポン、脂質または、細胞表面の受容体またはトランスフェクト薬剤を用いたコーティングによるか、リポソーム、微粒子、またはマイクロカプセル内への封入によるか、核に侵入することが知られているペプチドに対してそれを結合させて投与することによるか、または受容体を発現している細胞種を特異的にターゲットするべく用いられることが可能な、受容体仲介エンドサイトーシスを受けやすいリガンドに対してそれを結合させて投与することによりたとえばWuおよびWu、1987、JBiolChem26244294432参照、投与してそれが細胞内となるようにすることにより成就されることが可能である。もう一つの態様においては、核酸ーリガンド複合体が形成されることが可能であり、その中で当該リガンドはエンドソームを破壊するためのフゾジェニック融合原性、fusogenicなウイルスペプチドを含み、当該核酸がリソソームによる分解を回避できるようにする。さらにもう一つの態様においては、特異的な受容体をターゲティングすることにより、当該核酸はインヴィヴォにおいて細胞特異な取り込みおよび発現のためにターゲティングされることが可能であるたとえば、PCT公開、1992年4月16日付けのWO92/06180;1992年12月23日付けのWO92/22635;1992年11月26日付けのWO92/20316;1993年7月22日付けのWO93/14188;1993年10月14日付のWO93/20221を参照のこと。別法として、当該核酸は相同組換えにより細胞内に導入され、かつ発現のため宿主細胞のDNA内に取り込まれることができるKollerおよびSmithies、1989、ProcNatlAcadSciUSA8689328935;Zijlstraら、1989、Nature342435438。本発明の好ましい態様においては、ウイルスベクターとしてアデノウイルスが遺伝子療法に使用されることが可能である。アデノウイルスは非分裂細胞に感染することができるという利点を有するKozarskyおよびWilson、1993、CurrentOpinioninGeneticsandDevelopment3499503。遺伝子療法におけるアデノウイルスの使用の他の例は、Rosenfeldら、1991、Science252431434;Rosenfeldら、1992、Cell68143155;およびMastrangeliら、1993、JClinInvest91225234に見ることができる。さらに、修正された指向性をもつアデノウイルスベクターが細胞特異ターゲティングに用いられてよいWO98/40508。アデノ随伴ウイルスAAVもまた遺伝子療法における使用に向けて提案されているWalshら、1993、ProcSocExpBiolMed204289300。さらに、レトロウイルスベクターMillerら、1993、MethEnzymol217581599は、ウイルスゲノムのパッケージングおよび宿主細胞DNAへの組込みに必要ではないレトロウイルス配列を削除するべく修正されている。遺伝子療法に用いられるコーディング配列はベクター内にクローン化され、それは当該遺伝子の患者への送達を促進する。レトロウイルスベクターについてのさらなる詳細は、Boesenら、1994、Biotherapy6291302に見ることができるが、それは幹細胞を化学療法に対してより抵抗性にする目的で、mdrI遺伝子を造血幹細胞に送達するためのレトロウイルスベクターの使用について記述している。遺伝子療法におけるレトロウイルスベクターの使用を説明している他の参考文献は:Clowesら、1994、JClinInvest93644651;Kiemら、1994、Blood8314671473;SalmonsおよびGunzberg、1993、HumanGeneTherapy4129141;およびGrossmanおよびWilson、1993、GeneticsandDevel3110114におけるCurrOpinである。遺伝子療法へのもう一つのアプローチは、組織培養における細胞へ遺伝子を移入することを含む。通常、移入の方法は当該細胞への選択可能なマーカーの移入を含む。次いで当該細胞は移入された遺伝子を取り込みかつ発現している細胞を単離するための選別下に置かれる。このような細胞は次いで患者に送達される。この態様においては、結果として生じる組換え細胞のインヴィヴォの投与に先立ち、当該核酸が細胞内に導入される。かかる導入は、トランスフェクション、電気穿孔、リポフェクション、マイクロインジェクション、当該核酸配列を含んでいるウイルスまたはバクテリオファージを用いた感染、細胞融合、染色体仲介遺伝子移入、微小核体仲介遺伝子移入、スフェロプラスト融合、その他を含むがこれに制限されない当該技術において周知のいかなる方法によっても行なわれることができる。当該技術においては、外来遺伝子を細胞内に導入するための数多くの技術が周知でありたとえば、LoefflerおよびBehr、1993、MethEnzymol217599618;Cohenら、1993、MethEnzymol217618644Cline、1985、PharmacTher296992を参照のこと、また受容細胞についての必要な発生および生理的機能が破壊されてさえいなければ、本発明に従って使用されてよい。当該技術は細胞への核酸の安定な移入に必要な手段を備えているべきであり、それにより核酸は細胞による発現が可能であり、かつ好ましくは遺伝性であって、その子孫細胞による発現が可能であるようにする。好ましい態様においては、遺伝子療法に用いられる細胞は患者にとって自己由来である。一つの特別の態様においては、遺伝子療法を目的として導入される核酸は、コーディング配列に対して操作可能に結合された誘導性のプロモーターを含んでおり、当該核酸の発現が適当な転写誘導物質の有無を調節することにより制御されることができるようにする。白血球表面受容体のmRNA、特にそのC末端の翻訳を阻害するべく機能するアンチセンスRNAおよびDNA分子などのオリゴヌクレオチド、およびリボザイムもまた本発明の範囲内にある。アンチセンスRNAおよびDNA分子は、ターゲットされたmRNAに結合することおよびタンパク質の翻訳を妨げることにり、mRNAの翻訳を直接阻止するべく作用する。アンチセンスDNAに関しては、翻訳開始部位、たとえば-10と10の間のヌクレオチド配列、に由来するオリゴデオキシリボヌクレオチドが好ましい。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、5-ヨードウラシル、ヒポキサンチン、キサンチン、4-アセチルシトシン、5-カルボキシヒドロキシルメチルウラシル、5-カルボキシメチルアミノメチル-2-チオウリジン、5-カルボキリメチルアミノメチルウラシル、ジヒドロウラシル、β-D-ガラクトシルキューオシン、イノシン、N6-イソペンタニルアデニン、1-メチルグアニン、1-メチルイノシン、2,2-ジメチルグアニン、2-メチルアデニン、2-メチルグアニン、3-メチルシトシン、5-メチルシトシン、N6-アデニン、7-メチルグアニン、5-メチルアミノメチルウラシル、5-メトキシアミノメチル-2-チオウラシル、β-D-マンノシルキューオシン、5 ́-メトキシカルボキシメチルウラシル、5-メトキシウラシル、2-メチルチオ-N6-イソペンテニルアデニン、ウラシル-5-オキシ酢酸v、ワイブトキソジンwybutoxosine、プソイドウラシル、キューオシン、2-チオシトシン、5-メチル-2-チオウラシル、2-チオウラシル、4-チオウラシル、5-メチルウラシル、ウラシル-5-オキシ酢酸メチルエステル、ウラシル-5-オキシ酢酸v、5-メチル-2-チオウラシル、3-3-アミノ-3-N-2-カルボキシプロピルウラシル、acp3w、および2,6-ジアミノプリンを含むがこれに制限されない群より選ばれる、少なくとも一つの修飾された塩基部分を含んでよい。リボザイムは、RNAの特異的な切断を触媒することができる酵素的なRNA分子である。リボザイムの作用機構は、相補的なターゲットRNAに対してのリボザイム分子の配列特異なハイブリダイゼーションと、それに続くエンドヌクレオリティックな切断を含む。白血球表面受容体のRNA配列のエンドヌクオリティックな切断を特異的かつ効率的に触媒する工作されたハンマーヘッドモチーフリボザイム分子は、本発明の範囲内にある。潜在性のRNAターゲット内の特異的なリボザイム切断部位は、まず当該ターゲット分子を以下の配列、GUA、GUU、およびGUCを含むリボザイム切断部位について走査することにより同定される。一旦同定されれば、当該切断部位を含んでいる、ターゲット遺伝子の領域に相当する15と20の間のリボヌクレオチドから成る短いRNA配列が、オリゴヌクレオチド配列を不適当にしてもよい二次構造などの予測された構造上の特徴について査定されてよい。候補ターゲットの適性も、リボヌクレアーゼプロテクションアッセイを用いて、相補的なオリゴヌクレオチドとのハイブリダイゼーションについて、その影響の受けやすさを検査することにより査定されてよい。本発明のアンチセンスRNAおよびDNA分子とリボザイムは、当該技術において核酸分子の合成用として周知のいかなる方法によっても調製されてよい。これらは、たとえば固相ホスホルアミダイト化学合成といった当該技術において周知の、オリゴデオキシリボヌクレオチドの化学合成用の技術を含む。別法として、RNA分子は、当該RNA分子をコードしているDNA配列のインヴィトロおよびインヴィヴォにおける転写により生成されてもよい。かかるDNA配列は、T7またはSP6ポリメラーゼプロモーターなどの、適当なプロモーターを含む種々のベクター内に取り込まれてよい。別法として、用いられたプロモーターに依存して構成性または誘導性にアンチセンスRNAを合成するアンチセンスcDNA構築物が、細胞系内に安定に導入されることができる。細胞内での安定性および半減期の増大のための手段として、DNA分子に対する種々の修飾が導入されてよい。可能な修飾は、オリゴデオキシリボヌクレオチドバックボーン内のホスホジエステラーゼ結合よりもむしろ、当該分子の5 ́および/または3 ́末端に対するリボ-またはデオキシ-ヌクレオチドのフランキング配列の付加か、またはホスホロチオエートまたは2 ́O-メチルの使用を含むがこれに制限されない。6.9.3.他の薬剤組成物本発明の化合物はそれ自体で、または無菌の組成物または薬剤組成物の形状で患者に投与されてよい。本発明の化合物を含んで成る薬剤組成物は、通常の混合、溶解、顆粒化、糖衣作成、研和、乳化、カプセル化、閉じ込めentrapping、または凍結乾燥の工程といった手段により製造されてよい。薬剤組成物は、活性ペプチドまたはペプチド類似体の、薬剤学的に使用可能な製剤への加工を促進する一つまたはそれより多い生理学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤、または佐剤を用いて、通常の方式において製剤されてよい。適切な製剤は、選ばれた投与経路に依存する。局所投与のためには、本発明の化合物は当該技術において周知のような溶液、ゲル、軟膏、クリーム、懸濁液、その他として製剤されてよい。全身用の製剤は、注射、たとえば皮下、静脈内、筋肉内、髄腔内、または腹腔内注射による投与のために設計されたもの、ならびに経皮、経粘膜、経口、または経肺性の投与のために設計されたものを含む。注射用には、本発明の化合物は水溶性の溶液、好ましくはハンクス液、リンガー液、または生理食塩水緩衝液といった生理学的に適した緩衝液において製剤される。当該溶液は、懸濁、安定化および/または分散剤といった製剤用薬剤を含んでもよい。別法として、当該化合物は適当な賦形剤、たとえば、使用の前に発熱性物質なしの滅菌水を用いて構成するための、粉末の形状であってもよい。経粘膜投与のためには、浸透されるべき障壁に適した浸透剤が製剤に使用される。かかる浸透剤は、当該技術において一般的に知られている。この投与経路は、当該化合物を鼻腔へ送達するべく用いられてよい。経口投与には、当該化合物は活性ペプチドまたはペプチド類似体を、当該技術において周知の薬剤学上許容される担体と結びつけることにより、容易に製剤されることが可能である。かかる担体は、本発明の化合物が、治療されるべき患者による経口摂取のための、錠剤、丸剤、糖衣丸、カプセル、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液、およびその他として製剤されることを可能にする。たとえば粉末、カプセル、および錠剤といった経口用の固形の製剤のためには、適当な賦形剤は、ラクトース、スクロース、マンニトール、およびソルビトールなどの糖類;トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および/またはポリビニルピロリドンPVPなどのセルロース標品;顆粒化剤;および結着剤などの賦形剤を含む。所望であれば、架橋されたポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸か、またはアルギン酸ナトリウムなどのそれらの塩といった崩壊剤が添加されてよい。所望であれば、固形の剤形は標準的な技術を用いて糖衣または腸溶性であってよい。たとえば懸濁液、エリキシル剤、および溶液などの、経口用の液体標品用には、適当な担体、賦形剤、または希釈剤は、水、グリコール、油、アルコール、その他を含む。さらに、着香料、保存料、着色剤、およびその他が添加されてよい。バッカル投与用には、当該化合物は通常の方式で製剤された錠剤、トローチ剤、その他の形状で摂取されてよい。吸入による投与のためには、本発明による化合物は、適当な噴射剤、たとえば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロメタン、二酸化炭素、または他の適当なガスの使用とともに、加圧されたパックまたはネブライザーからのエアロゾルスプレイの形状にて便利に送達される。加圧されたエアロゾルの場合には、計測された量を送達するためのバルブを備えることにより、用量単位が決定されてもよい。吸入器および注入器における使用のための、たとえばゼラチンから成るカプセルおよびカートリッジは、当該化合物と、ラクトースまたはデンプンなどの適当な粉末基剤との粉末混合物を含んで製剤されてよい。当該化合物はまた、たとえば、カカオバターまたは他のグリセリドといった通常の坐剤用基剤を含んでいる、坐剤または停留浣腸などの、直腸用または膣用の組成物において製剤されてもよい。先に述べた製剤に加えて、当該化合物はまたデポ製剤として製剤されてもよい。かかる長期間作用性の製剤は、移植たとえば皮下または筋肉内へのによるか、または筋肉内注射により投与されてよい。したがって、たとえば、当該化合物は適当な高分子または疎水性の物質たとえば許容される油中のエマルジョンまたはイオン交換樹脂とともに、あるいはやや溶けにくい誘導体、たとえばやや溶けにくい塩として製剤されてよい。別法として、他の薬剤送達システムが使用されてもよい。リポソームとエマルジョンとは、本発明のペプチドおよびペプチド類似体を送達するべく用いられてよい送達媒体の周知の例である。ジメチルスルホキシドなどの、ある種の有機溶媒もまた用いられるが、通常はより大きい毒性という代償を払っている。さらに、当該化合物は治療用薬剤を含んでいる固形ポリマーから成る半透性物質などの、持続放出システムを用いて送達されてもよい。いくつかの持続放出物質が確立されており、当業者には周知である。持続放出カプセルは、その化学的性質に依存して、数週間にわたり、100日を超えるまで当該化合物を放出する。治療用薬剤の化学的性質と生物学的安定性とに依存して、タンパク質安定化のための付加的な戦略が用いられてよい。本発明の化合物は荷電のある側鎖または末端を含んでよいため、それらは上記のいかなる製剤においても、遊離の酸または塩基として、あるいは薬剤学的に許容される塩として含まれてよい。薬剤学的に許容される塩は、遊離塩基の生物活性を実質的に保持しており、かつ無機酸との反応によって調製されるような塩である。薬剤学的な塩は、水性および他のプロトン性溶媒中では、対応する遊離塩基の形状であるよりもさらに可溶性である。6.10.有効量本発明の化合物は一般的に、意図された目的を遂行するべく有効な量において使用されるであろう。白血球の活性化に関連した疾患を阻害するための使用には、本発明の化合物またはそれらの薬剤学的組成物は、治療上有効な量において投与または適用される。治療上有効な量によって意味されるものは、症状を改善または予防するか、あるいは治療される患者の生存を引き伸ばす有効量である。治療上有効な量の決定は、特に本文において提供された詳細な開示に照らせば、充分に当業者の能力の範囲内にある。PDZ-PL結合阻害剤についての阻害性の量または阻害性の濃度は結合を、少なくとも約40、好ましくは少なくとも約50、しばしば少なくとも約70まで、さらに少なくとも約90までも減じる量である。結合は、インヴィトロでたとえば、A検定またはG検定、あるいはインシトゥで測定されることができる。全身投与用には、治療上の有効量はまずインヴィトロの検定から算定されることが可能である。たとえば、細胞培養において決定されたようなIC50を含む循環濃度範囲を成就するべく、ある用量が動物モデルにおいて処方されることが可能であるすなわち、白血球表面受容体-PDZドメインを含んでいるタンパク質の相互作用を50阻害する被検化合物の濃度。かかる情報は、ヒトにおける有用な用量をさらに正確に決定するべく用いられることが可能である。最初の用量はまた、インヴィヴォのデータ、たとえば動物モデルから、当該技術において周知の技術を用いて算定されることもできる。当該技術において普通の技術を有する者は、動物のデータに基づき、ヒトへの投与を容易に最適化することができるであろう。用量および間隔は、治療効果を維持するべく充分な化合物の血漿レベルを提供するため、個々に調整されてよい。注射による投与のための通常の患者の用量は、約0.1から5mg/kg/日であり、好ましくは約0.5から1mg/kg/日である。治療上有効な血清レベルは、日々複数の用量を投与することにより成就されてもよい。局部投与または選択的な取り込みの場合には、当該化合物の有効な局部濃度は血漿濃度に関係していなくてもよい。当業者は、過度の実験をすることなく、治療上有効な局部濃度を最適化することができるであろう。投与される化合物の量は、当然、治療される患者に、患者の体重に、病気の厳しさ、投与の方式、および処方する医師の判断に依存する。治療は、症状が検出される間は、あるいはそれらが検出されない時であっても、間欠性に反復されてよい。治療は単独で、あるいは他の薬剤と組合せて提供されてもよい。移植拒絶および自己免疫病などの、白血球の活性化に関連した状態の場合には、本発明の化合物と組合せて用いられてよい薬剤は、ステロイドおよび非ステロイド性の抗炎症剤を含むがこれに制限されない。6.10.1.毒性好ましくは、本文において述べられた化合物の治療上の有効量は、実質的な毒性を引き起こすことなく治療上の利点を提供するであろう。本文において述べられた化合物の毒性は、標準的な方法により、細胞培養または実験動物において、たとえば、LD50集団の50に対して致死である用量またはLD100集団の100に対して致死である用量を測定することにより決定されてよい。毒性と治療効果の間の用量の比が治療係数である。高い治療係数を示す化合物が好ましい。このような細胞培養検定法および動物実験から得られたデータは、ヒトにおける使用のために毒性ではない用量範囲を処方する上で用いられることが可能である。本文に述べられた化合物の用量は、好ましくはほとんどまたは全く毒性のない有効量を含む循環濃度の範囲内にある。用量は、この範囲内で、使用された剤形および利用された投与経路に依存して変動してよい。正確な処方、投与経路、および用量は、個々の医師により、患者の状態を考慮して選択されることが可能であるたとえば、Finglら、1975、ThePharmacologicalBasisofTherapeutics、第1章、1頁を参照のこと。6.11.実施例1:TAT-T細胞の表面受容体のカルボキシル末端融合ペプチドはT細胞活性化を阻害した6.11.1.材料および方法6.11.1.1.ペプチド合成すべてのペプチドは、標準的な方法により化学的に合成された。Tat-CD3カルボキシル末端融合ペプチド、GYGRKKRRQRRRGPPSSSSGL、配列番号174;Tat-CLASP1カルボキシル末端融合ペプチド、GYGRKKRRQRRRGSISSSAEV、配列番号175;Tat-CLASP2カルボキシル末端融合ペプチド、GYGRKKRRQRRRGMTSSSSVV、配列番号176;およびTatペプチド、GYGRKKRRQRRRG、配列番号;はPBS、pH7か、またはdH2O中にて1mMに溶解された。ストックMBPAc-16ペプチド、AcASQKRPSQRHGSKYLAは5mMに溶解された。すべてのペプチドはアリコート化され、検査まで-80°Cに貯蔵された。6.11.1.2.細胞培養細胞は、10ウシ胎児血清ハイクローンHyClone、2mMグルタミン、10mMヘペス、100U/mlペニシリン、100μg/mlストレプトマイシン、0.1mM非必須アミノ酸、1mMピルビン酸ナトリウム、および50μMβメルカプトエタノールを補足されたRPMI1640培地において維持および検査された。6.11.1.3.T細胞刺激検定上清は、T細胞系の活性化に続くサイトカイン産生について検定された。マウスのT細胞系は二つの異なる方法、抗原および抗原提示細胞か、または抗マウスCD3のいずれかを用いて刺激された。抗原特異マウスT細胞、BR4.2は、ミエリン塩基性タンパク質MBPAc1-16のN末端の16アミノ酸配列および同系マウスの脾細胞を用いて、96穴プレートにおいて活性化された。マイトマイシンC処理された抗原提示細胞、2x105個のB10.BRは、連続的に希釈された0から200μMに及ぶMBPAc-16の各々の列に添加された。次に、10μMのTat-ペプチドか、または培地のみが各々の列に添加された。最後に、あらかじめ10μMのTat-ペプチド上記を参照を負荷された2x104個のMBPAc-16特異T細胞がすべてのウェルに添加されたRabinowitzら、1992、ProcNatlAcadSciUSA9487028707。細胞は、5CO2、37°Cにおける一晩のインキュベーションの間に活性化された。細胞上清が集められ、サイトカイン産生について検査されるまで-80°Cに貯蔵された。最終的な体積は200μl/ウェルであった。マウスCD3に対する抗体ファ-ミゲンPharmigen145-2C11は、96穴平底Elisaプレートを用いて、PBS中にて希釈され最終濃度0.5μg/mlにおいて、4°Cにて一晩コートされた。使用直前に、プレートは200μl/ウェルのPBSにより3回洗浄され、過剰の抗CD3が除去された。活性化に先立ち、細胞がTat-ペプチドを形質導入するための充分な時間が与えられたことを確かめるため、T細胞5x105細胞/mlは10μMのTat-ペプチドを用いるかまたは用いずに、5CO2、37°Cにおいて2時間前処理され、次いで10μMのTat-ペプチドを用いるかまたは用いない培地中にて、200μlの最終体積においてウェルあたり2x104細胞の最終濃度に希釈された。次いで細胞は、前文に述べたように処理された。6.11.1.4.サイトカインELISAIFNγは、前文に述べた細胞上清から、周囲の温度において、エンドジェン社EndogenInc、ELISAプロトコール3を用いて測定された。手短に言えば、96穴、平底、ハイバインディングELISAプレートが、コーティング抗体MM700とともに一晩プレインキュベートされた。プレートは、50mMトリス、0.2ツイーン20、pH8を用いて洗浄され、さらにPBSプラス2BSAを用いて1時間ブロックされた。洗浄されたプレートは次いで25μlの細胞上清および25μlのブロッキング緩衝液、または50μlのIFNγスタンダードと共に1時間インキュベートされた。IFNγの存在は、ビオチン標識された抗マウスINFγモノクローナル抗体MM700B、エンドジェン社を用いて検出された。検出抗体の定量的な量は、西洋ワサビペルオキシダーゼを結合されたストレプタビジンを用いて明らかにされる。酵素性の、色のついた、HRPの基質である、テトラメチルベンジジンTMBは、30分まで発生され、1.0MのH2SO4を用いて停止された。450nmでの吸収はマイクロタイタープレートリーダーサーモマックスThermoMax、モレキュラーデバイシズMolecularDevicesを用いて測定され、細胞上清からのIFNγの未知の濃度は、SoftmaxPro.ソフトウェアモレキュラーデバイシズによって作成された標準曲線から算定された。6.11.2.結果種々のPLのC末端配列に結合されたTatトランスポーター配列を含んでいるペプチドは、T細胞の活性化を阻害するそれらの能力について検査された。図4Aは、Tat-CD3融合ペプチドが、Tat-ペプチド単独かまたはペプチドなしの対照と比較して、ペプチド:MHCによって仲介されるT細胞の活性化を阻害することを示している。図4Bは、Tat-CLASP2カルボキシル末端融合ペプチドが、Tat-ペプチド単独に比較して、モノクローナル抗CD3によって仲介されるT細胞の活性化を阻害したことを示している。Tat-CLASP1融合ペプチドは、この実験においてはT細胞の活性化を阻害しなかった。これらの結果は、潜在性の阻害配列を含んでいるペプチドが、Tatなどのトランスポーターペプチドを介し、PDZタンパク質によって仲介される表面受容体の構造を破壊するべく、T細胞内に輸送されることが可能であることを示している。PDZに仲介される表面受容体の構造は、抗原に反応したT細胞の活性化の阻止に導く。6.12.実施例2:100Umより大きい力価をもつDLG1-リガンド結合の阻害剤の設計GST/DLG1融合タンパク質表3参照、およびCLASP-2タンパク質のC末端の20アミノ酸に相当するビオチン標識されたペプチド、AA2L表4参照は、上に述べたような、当該技術において周知の標準的な技術によって合成および生成された。このPDZ-リガンドの組合せは、次いでA]検定およびG検定表2参照の双方を用いて特異的に結合することが示された。一度特異的な結合が証明されれば、PDZ-リガンド結合親和性の測定という表題のつけられた章のアプローチ1を用いて、結合相互作用の見かけの親和性が測定された図2A参照。測定された見かけの親和性は21uMであった。このことは、21uMの標識されたCLASP-2ペプチドAA2Lが、DLG1上のCLASP-2用の結合部位の50を満たすことを意味している。したがって、もし所与のリガンドが1DLG1上のQasp~2と同じ部位に対して結合し、かつ2CLASP-2ペプチドの結合を有意に減じるために充分な濃度で添加されていないのであればすなわち、CLASP-2ペプチドのアウトコンピート不能、21uMの未標識のCLASP-2ペプチドは、DLG1に対する所与のリガンドの結合を約50まで阻止することができるはずである。かかる阻害を検出するためには、1同様のDLG1結合特性を保持しており、かつ2阻害を測定するべく選ばれた検定においてそれ自身がシグナルを発生することのない、CLASP2ペプチドAA2Lの類似体を合成することが必要であった。PDZタンパク質とそれらのリガンドとの間のほとんどの分子相互作用は当該リガンドのC末端の6アミノ酸のみに関係することから、CLASP-2ペプチドの8アミノ酸変異体、MTSSSSVVは、20アミノ酸のAA2LCLASP-2ペプチドと同様のDLF1結合特性を保持することが予期された。それゆえこの8アミノ酸のCLASP-2ペプチド機能性の標識を欠くが、上に述べた標準的な方法により合成および精製された。100uMの機能性には未標識8アミノ酸CLASP-2ペプチドと、20uMのビオチン標識されたAA2LCLASP-2ペプチドとが、G検定の変法上に述べたにおいてDLG1に対して同時に添加された場合、標識されたAA2LCLASP-2ペプチドの結合は、予測されたように50よりも多く阻害された図3A。標識されたAA2LCLASP-2ペプチドがもう一つの標識されたDLG1リガンド、標識されたAA13LFasペプチドで置換された類似の実験は、当該8アミノ酸のCLASP-2ペプチドによる同様の阻害を証明した図3A。したがって、既知の力価範囲21uM程度の大きさをもつDLG1-リガンド結合の有効な阻害剤すなわち8アミノ酸CLASP-2ペプチドMTSSSSVVが、親和性についての知識、21uMに基づいて設計され、それを用いて特定の標識されたリガンド、CLASP-2ペプチドAA2LがDLG1と結合した。本発明は、本発明の一つの観点の例証として意図されている代表的な態様によって範囲が限定されるものではなく、機能的に同等ないかなる配列も本発明の範囲内にある。事実、当業者には先の記述および添付の図面から、本文において示されかつ記述されたものに加えて、本発明についての種々の変更が明らかとなるであろう。かかる変更は、添付のクレームの範囲内に入ることが意図されている。本文において引用されたすべての出版物は、ことごとく、またすべての目的のために参考文献に編入されている。本出願もまた、ともに2000年5月12日出願の、同時継続米国特許出願第号MolecularInteractionsinTCellsT細胞における分子相互作用書類番号020054-001300、および第号MolecularInteractionsinAllergyアレルギーにおける分子相互作用書類番号020054-001200により開示全体が参考文献として編入されている。"