"Her2/neuに結合するリガンドおよび第2のドメインを含む結合体であって、ここで、該第2のドメインは、から選択されるペプチドを含む12~100アミノ酸の配列、または、から選択されるペプチドを含む12~100アミノ酸の配列であって、FもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のK残基、K、AもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のF残基、またはK、FもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のA残基を有する、12~100アミノ酸の配列からなる、結合体。Her2/neuに結合するリガンドおよび第2のドメインを含む結合体であって、ここで、該第2のドメインは、から選択されるアミノ酸配列;またはから選択されるアミノ酸配列であって、FもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のK残基、K、AもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のF残基、またはK、FもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のA残基を有する、アミノ酸配列からなる、結合体。Her2/neuに結合する前記リガンドが、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、核酸または炭水化物を含む、請求項1または2に記載の結合体。Her2/neuに結合する前記リガンドが、線状構造または環状構造を有する、請求項1または2に記載の結合体。Her2/neuに結合する前記リガンドが、抗体または抗体フラグメントを含む、請求項1または2に記載の結合体。前記抗体フラグメントが、Fab、Fab’、Fab’2、Fv、Fd、一本鎖FvscFv、ジスルフィド連結されたFvsdFv、VL、VH、ラクダIg、V-NAR、VHH、三重特異性Fab3、二重特異性Fab2、ダイアボディVL-VH2またはVH-VL2、トリアボディ三価、テトラボディ四価、ミニボディscFV-CH32、二重特異性一本鎖FvBis-scFv、IgGデルタCH2、scFv-Fc、scFv2-Fc、アフィボディ、アプタマー、アビマーまたはナノボディを含む、請求項5に記載の結合体。Her2/neuに結合する前記リガンドが、ホルモンまたは成長因子を含む、請求項1または2に記載の結合体。前記ホルモンまたは前記成長因子が、ホルモンアナログまたは成長因子アナログ、ホルモンまたはホルモンアナログまたは成長因子または成長因子アナログのフラグメントであって、Her2/neuに結合する、フラグメントを含む、請求項7に記載の結合体。前記リガンドが、アゴニストまたはアンタゴニストを含む、請求項1または2に記載の結合体。前記抗体が、モノクローナル抗体を含む、請求項5に記載の結合体。前記抗体が、哺乳動物抗体を含む、請求項5に記載の結合体。前記抗体が、ヒト抗体、ヒト化抗体、霊長類化抗体またはキメラ抗体を含む、請求項5に記載の結合体。前記抗体が、トラスツズマブまたはペルツズマブを含む、請求項5に記載の結合体。前記Her2/neuが、細胞上に発現されている、請求項1または2に記載の結合体。前記細胞が、過剰増殖性細胞である、請求項14に記載の結合体。前記細胞が、乳房、卵巣、子宮、子宮頸部、胃、肺、胃部、結腸、膀胱、グリア、血液学的または子宮内膜の細胞である、請求項14に記載の結合体。Her2/neuに結合する前記リガンドまたは前記第2のドメインが、約1~10、10~20、15~20、20~30、30~40、40~50、60~70、70~80、80~90、90~100またはそれ以上のアミノ酸のアミノ酸配列からなるか、または該アミノ酸配列を含む、請求項1または2に記載の結合体。前記第2のドメインが、約10~約50アミノ酸の配列からなる、請求項1または2に記載の結合体。前記第2のドメインが、約10~約28アミノ酸の配列からなる、請求項1または2に記載の結合体。前記第2のドメインが、15、16、17、18、19または20アミノ酸を有する配列からなる、請求項1または2に記載の結合体。Her2/neuに結合する前記リガンドが、前記第2のドメインに対してNH2末端に位置する、請求項1または2に記載の結合体。前記第2のドメインが、Her2/neuに結合する前記リガンドに対してNH2末端に位置するか、または該第2のドメインが、Her2/neuに結合する該リガンドに対してC末端に位置するか、またはHer2/neuに結合する該リガンドが、該第2のドメインに対してNH2末端に位置するか、またはHer2/neuに結合する該リガンドが、該第2のドメインに対してC末端に位置する、請求項1または2に記載の結合体。Her2/neuに結合する前記リガンドまたは前記第2のドメインが、1つ以上のD-アミノ酸を有する、請求項1または2に記載の結合体。前記第2のドメインが、両親媒性アルファ-ヘリックスを形成する、請求項1または2に記載の結合体。Her2/neuに結合する前記リガンドと前記第2のドメインとが、共有結合によって接続されている、請求項1または2に記載の結合体。Her2/neuに結合する前記リガンドと前記第2のドメインとが、ペプチドリンカーまたは非ペプチドリンカーによって接続されている、請求項1または2に記載の結合体。Her2/neuに結合する前記リガンドと前記第2のドメインとが、1~25アミノ酸残基を有するペプチド配列または線状炭素鎖によって接続されている、請求項1または2に記載の結合体。第3、第4、第5、第6または第7のドメインをさらに含む、請求項1または2に記載の結合体。前記結合体が、単離されているか、または精製されている、請求項1または2に記載の結合体。前記結合体が、混合物を含む、請求項1または2に記載の結合体。請求項1または2に記載の結合体を含む組成物。請求項1または2に記載の結合体を含む薬学的組成物。請求項1または2に記載の結合体、および抗細胞増殖剤または免疫刺激剤を含む組成物。望ましくない細胞増殖または過剰増殖性障害を有する被験体を処置するのに有効な量で、請求項1または2に記載の結合体を含む単位用量剤。新形成、腫瘍またはがんを有する被験体を処置するのに有効な量で、請求項1または2に記載の結合体を含む単位用量剤。請求項1または2に記載の結合体、および細胞の増殖を減少させるかもしくは阻害するため、過剰増殖細胞の増殖を減少させるかもしくは阻害するため、新形成、腫瘍もしくはがんの細胞の増殖を減少させるかもしくは阻害するため、過剰増殖性障害を有する被験体を処置するため、または新形成、腫瘍もしくはがんを有する被験体を処置するための指示書を備えるキット。請求項1または2に記載の結合体をコードする核酸分子。請求項37に記載の核酸分子を含むベクター。請求項37に記載の核酸または請求項38に記載のベクターで形質転換された宿主細胞。請求項1または2に記載の結合体を発現する細胞。細胞の増殖を減少させるかまたは阻害する方法であって、細胞と、該細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量の請求項1または2に記載の結合体とを接触させる工程を包含する、方法。細胞増殖を減少させるかまたは阻害する方法であって、細胞と、細胞増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量の請求項1または2に記載の結合体とを接触させる工程を包含する、方法。過剰増殖細胞の増殖を減少させるかまたは阻害する方法であって、細胞と、過剰増殖細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量の請求項1または2に記載の結合体とを接触させる工程を包含する、方法。新形成、腫瘍、がんまたは悪性の細胞の増殖を減少させるかまたは阻害する方法であって、該細胞と、該新形成、腫瘍、がんまたは悪性の細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量の請求項1または2に記載の結合体とを接触させる工程を包含する、方法。前記細胞が、Her2/neuを発現している、請求項41~44のいずれかに記載の方法。Her2/neuを発現している細胞の増殖を選択的に減少させるかまたは阻害する方法であって、該細胞と、Her2/neuを発現している該細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量の請求項1または2に記載の結合体とを接触させる工程を包含する、方法。Her2/neuを発現している過剰増殖細胞の増殖を選択的に減少させるかまたは阻害する方法であって、該細胞と、Her2/neuを発現している該過剰増殖細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量の請求項1または2に記載の結合体とを接触させる工程を包含する、方法。レセプターまたは抗原を発現している新形成、腫瘍、がんまたは悪性の細胞の増殖を選択的に減少させるかまたは阻害する方法であって、該細胞と、Her2/neuを発現している該新形成、腫瘍、がんまたは悪性の細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量の請求項1または2に記載の結合体とを接触させる工程を包含する、方法。過剰増殖性障害を有する被験体を処置する方法であって、該過剰増殖性障害を処置するのに十分な量の請求項1または2に記載の結合体を該被験体に投与する工程を包含する、方法。新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患を有する被験体を処置する方法であって、該新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量の請求項1または2に記載の結合体を該被験体に投与する工程を包含する、方法。前記新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患が、転移性、非転移性または良性である、請求項48または50に記載の方法。前記新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患が、固形細胞塊を含む、請求項48または50に記載の方法。前記新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患が、造血細胞を含む、請求項48または50に記載の方法。前記新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患が、がん腫、肉腫、リンパ腫、白血病、アデノーマ、腺がん、メラノーマ、神経膠腫、神経膠芽腫、髄膜腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、星状細胞腫、乏突起膠細胞腫、中皮腫、細網内皮性、リンパ性または造血性の新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患を含む、請求項48または50に記載の方法。前記肉腫が、リンパ肉腫、脂肪肉腫、骨肉腫、軟骨肉腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫または線維肉腫を含む、請求項54に記載の方法。前記造血性の新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患が、骨髄腫、リンパ腫または白血病を含む、請求項54に記載の方法。前記新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患が、肺、甲状腺、頭頸部、鼻咽頭、咽頭、鼻または洞、脳、脊柱、乳房、副腎、脳下垂体、甲状腺、リンパ、胃腸口腔、食道、胃、十二指腸、回腸、空腸小腸、結腸、直腸、泌尿生殖路子宮、卵巣、子宮頸部、子宮内膜、膀胱、精巣、陰茎、前立腺、腎臓、膵臓、肝臓、骨、骨髄、リンパ、血液、筋肉または皮膚、ウィルムス、胆管、B-ALLまたは血液学的な新形成、腫瘍またはがんを含む、請求項48または50に記載の方法。前記肺の新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患が、小細胞肺がんまたは非小細胞肺がんを含む、請求項57に記載の方法。前記新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患が、幹細胞の新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患を含む、請求項48または50に記載の方法。前記新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患の再発または進行を阻害するかまたは減少させる、請求項48または50に記載の方法。抗細胞増殖、抗新形成、抗腫瘍、抗がんまたは免疫増強の処置または治療を適用する工程をさらに包含する、請求項48または50に記載の方法。前記処置または治療が、外科的切除、放射線療法、電離もしくは化学放射線治療、化学療法、免疫療法、局所もしくは領域温熱療法加温療法またはワクチン接種を含む、請求項61に記載の方法。前記結合体が、前記抗細胞増殖、抗新形成、抗腫瘍、抗がんまたは免疫増強の処置または治療の適用の前、該適用と実質的に同時に、または該適用の後に投与される、請求項61に記載の方法。前記被験体が、外科的切除、化学療法、免疫療法、電離もしくは化学放射線療法、局所もしくは領域温熱療法加温療法またはワクチン接種を受けたことがある、請求項48または50に記載の方法。前記被験体が、外科的切除、化学療法、免疫療法、電離もしくは化学放射線療法、局所もしくは領域温熱療法加温療法またはワクチン接種の候補である、請求項48または50に記載の方法。前記被験体が、外科的切除、化学療法、免疫療法、電離もしくは化学放射線療法、局所もしくは領域温熱療法加温療法またはワクチン接種の候補ではない、請求項48または50に記載の方法。前記処置が、新形成、腫瘍、がんもしくは悪性の細胞の質量、体積、サイズもしくは細胞数の部分的もしくは完全な消失をもたらすか、新形成、腫瘍、がんもしくは悪性の細胞のネクローシス、溶解もしくはアポトーシスを刺激するか、誘導するかもしくは増加させるか、新形成、腫瘍、がんもしくは悪性疾患の体積、サイズ、細胞質量を減少させるか、新形成、腫瘍、がんもしくは悪性疾患の進行もしくはそれらの体積、質量、サイズもしくは細胞数の増加を阻害するかもしくは予防するか、または寿命の延長をもたらす、請求項48または50に記載の方法。前記処置が、新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患に関連するかまたはそれによって引き起こされる有害な症状または合併症の重症度、持続時間または頻度を減少させるかまたは低減させる、請求項48または50に記載の方法。前記処置が、疼痛、不快、悪心、脱力もしくは嗜眠を減少させるかもしくは低減させるか、またはエネルギーの増加、食欲の増加、運動性の改善もしくは心理的に良好な状態をもたらす、請求項48または50に記載の方法。前記被験体が、哺乳動物である、請求項48または50に記載の方法。前記被験体が、ヒトである、請求項48または50に記載の方法。要旨本発明は、本明細書中で結合体または融合構築物と呼ばれる、Her2/neuErbB-2としても知られるヒト上皮成長因子レセプター2に結合するリガンドに融合されたまたは結合体化された溶解性ドメインに少なくとも部分的に基づく。細胞と溶解性ドメインとの接触は、細胞死をもたらす細胞膜の破壊を引き起こすと考えられる。Her2/neuに結合するリガンドは、Her2/neuに結合するリガンドおよび/または溶解性ドメインによる破壊のために、Her2/neuを発現している細胞望ましくないまたは異常な増殖細胞または過剰増殖細胞例えば、非転移性および転移性の新形成、がん、腫瘍および悪性疾患を含むを標的にする。いくつかの非転移性および転移性の新形成、がん、腫瘍および悪性の細胞は、レセプターまたはリガンドを過剰発現している。例えば、多くの非転移性および転移性の新形成、がん、腫瘍および悪性疾患が、上記結合体または融合構築物の標的として使用され得るHer2/neuを発現している。結合体は、Her2/neuを発現している任意の細胞または細胞集団を標的にするように設計され得る。抗体およびそのフラグメント、ホルモン、成長因子、サイトカインなどを含む、Her2/neuに結合するリガンドは、Her2/neuを発現しているかまたはそれを含む細胞の標的化された殺滅を提供する溶解性ドメインに連結され得、それによって、細胞の増殖または成長を減少させるかまたは阻害する。結合体は、標的細胞を殺滅するために、細胞が分裂することを必要としない。さらに、その結合体は、比較的小さいサイズに作製され得るので、免疫原性である可能性は低い。さらに、その結合体は、多剤耐性細胞を殺滅する。本発明によると、第1ドメインおよび第2のドメインを含む結合体が提供される。1つの実施形態において、結合体は、成るHer2/neuに結合するリガンド、および10~120アミノ酸フラグメントからなる第2のドメイン例えば、から選択されるペプチド配列、あるいはFもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のK残基、K、AもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のF残基、またはK、FもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のA残基を有する、から選択されるペプチドを含む配列を含む、例えば、L-またはD-アミノ酸配列を含むかまたはそれらからなる。別の実施形態において、結合体は、Her2/neuに結合するリガンド、ならびにから選択されるL-またはD-アミノ酸配列、あるいはFもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のK残基、K、AもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のF残基、またはK、FもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のA残基を有する、から選択されるペプチドを含む配列からなる第2のドメインを含むかまたはそれらからなる。さらなる実施形態emodimentにおいて、結合体は、Her2/neuに結合するリガンド、ならびにから選択されるL-またはD-アミノ酸配列、あるいはFもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のK残基、K、AもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のF残基、またはK、FもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のA残基を有する、から選択されるペプチドを含む配列からなる第2のドメインを含む。本発明によると、Her2/neuに結合するリガンドおよび第2のドメインを含むかまたはそれらからなる、単離され、精製されたペプチドも提供される。様々な実施形態において、第2のドメインは、である。追加の実施形態において、第2のドメインは、FもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のK残基、K、AもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のF残基、またはK、FもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のA残基を有する、である。結合体は、Her2/neuに結合するリガンドを含む。リガンドは、アゴニストまたはアンタゴニストであり得る、Her2/neuErbB-2としても知られるヒト上皮成長因子レセプター2に結合する分子を含むかまたはそれからなる。リガンドまたは溶解性ペプチドは、線状構造もしくは環状構造を含み得るか、またはそれからなり得る。リガンドは、抗体および抗体フラグメントを含む。リガンドの特定の非限定的な例としては、1つ以上のアミノ酸例えば、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、核酸および炭水化物が挙げられる。リガンドの特定の非限定的なクラスとしては、ホルモン、成長因子、ホルモンおよび成長因子のアナログ、ならびにホルモン、ホルモンアナログ、成長因子、成長因子アナログのフラグメント、成長因子およびアナログのフラグメント、ならびにHer2/neuに結合する抗体および抗体のフラグメントが挙げられる。抗体フラグメントの特定の非限定的な例としては、Fab、Fab’、Fab’2、Fv、Fd、一本鎖FvscFv、ジスルフィド連結されたFvsdFv、VL、VH、ラクダIg、V-NAR、VHH、三重特異性Fab3、二重特異性Fab2、ダイアボディVL-VH2またはVH-VL2、トリアボディtriabody三価、テトラボディtetrabody四価、ミニボディminibodyscFV-CH32、二重特異性一本鎖FvBis-scFv、IgGデルタCH2、scFv-Fc、scFv2-Fc、アフィボディaffibody例えば、ZHer2-neu:2、ZHer2-neu:4、ZHer2-neu:7、ZHer2-neu:8、アフィボディ、アプタマー、アビマーavimerまたはナノボディnanobodyが挙げられる。Her2/neuおよび/またはリガンドは、必要に応じて細胞上に発現され得る。Her2/neuを発現している細胞または本発明の方法に従って標的化され得る細胞には、過剰増殖性細胞が含まれる。Her2/neuを発現している細胞または本発明の方法に従って標的化され得る細胞としては、例えば、乳房、卵巣、子宮、子宮頸部、胃stomach、肺、胃部gastric、結腸、膀胱、グリア、血液および子宮内膜の細胞が挙げられる。Her2/neuに結合するリガンドおよび第2のドメインは、アミノ酸またはアミノ酸配列を含み得るか、またはそれからなり得る。特定の態様において、第1ドメインまたは第2のドメインは、約1~10、10~20、15~20すなわち、15、16、17、18、19または20アミノ酸、20~30、30~40、40~50、60~70、70~80、80~90、90~100またはそれ以上のアミノ酸残基を有する。Her2/neu結合リガンドおよび第2のドメインは、互いに対してNH2末端またはC末端のいずれかまたはその両方に位置し得る。したがって、1つの実施形態では、第1結合リガンドドメインは、第2溶解性ペプチドドメインに対してNH末端に位置し、別の実施形態では、第2溶解性ペプチドドメインは、第1結合リガンドドメインに対してC末端に位置し、さらなる実施形態では、第1結合リガンドドメインは、第2溶解性ペプチドドメインに対してC末端に位置し、なおも別の実施形態では、第2溶解性ペプチドドメインは、第1結合リガンドドメインに対してNH末端に位置する。そのような第2溶解性ペプチドドメインは、C末端、NH末端またはC末端とNH末端の両方に位置し得る。したがって、そのような複数の第2溶解性ペプチドドメインが、本発明の結合体内に含められ得る。Her2/neu結合リガンドおよび第2のドメインは、1つ以上のD-アミノ酸を含み得るか、またはそれらからなり得る。特定の態様において、第1ドメインは、例えば、任意のK、FまたはA残基において、D-アミノ酸を有する。Her2/neu結合リガンドおよび第2のドメインは、共有結合性の例えば、ペプチドまたは非ペプチド結合によって接続され得る。例えば、第1ドメインと第2のドメインとは、ペプチドリンカーまたは非ペプチドリンカーによって接続され得る。特定の態様において、Her2/neu結合リガンドと第2のドメインとは、約1~25アミノ酸残基を有するかまたは線状炭素鎖を有するペプチド配列によって接続される。より特定の態様において、Her2/neu結合リガンドと第2のドメインとは、1つ以上のA、SもしくはGアミノ酸残基を含むかまたはそれらからなるペプチド配列によって接続される。さらに特定の態様において、Her2/neu結合リガンドと第2のドメインとは、ペプチド配列によって接続され、第1ドメインと第2のドメインとは、GSGGS、ASAASまたはCCCCCCなどの線状炭素鎖を含むかまたはそれらからなるペプチド配列によって接続される。他のペプチドリンカーとしては、様々な長さにおけるGS、AF、FK、VK、FFK、FA、GSGRSA、RVRRSV、SS、Cit-V、F-Citが挙げられるがこれらに限定されない。チオエーテル、N-スクシニジル-3-2-ピリジロチオプロピオネート、チオエーテル結合例えば、SIAB[N-スクシンイミジル4-ヨードアセチルアミノベンゾエート]、SMCC[スクシンイミジル-4-N-マレイミドメチルシクロヘキサン-1-カルボキシレート]、MBSm-マレイミドベンゾイル-N-ヒドロキシスクシンイミドおよびSMPB[スクシンイミジル-4-p-マレイミドフェニルブチレート]、マレイミドおよびヒドラゾンリンカー。Her2/neu結合リガンドおよび第2のドメインは、追加のドメインをさらに含み得るか、またはそれらからなり得る。したがって、様々な態様において、結合体は、第3、第4、第5、第6、第7ドメインなどを含む。結合体は、単離され精製された形態を含むか、またはそれらからなる。結合体はまた、混合物を含むか、またはそれからなる。そのような混合物は、組成物例えば、被験体への投与もしくは被験体とのインビボでの接触にとって適切な薬学的に許容され得るキャリアもしくは賦形剤と結合体との混合物、または結合体と抗細胞増殖剤もしくは免疫刺激剤との混合物を含む。結合体は、単位剤形を含むか、またはそれからなる。1つの実施形態において、結合体は、望ましくない細胞増殖または過剰増殖性障害を有する被験体を処置するのに有効な量の単位用量剤unitdosageである。別の実施形態において、結合体は、新形成、腫瘍またはがんを有する被験体を処置するのに有効な量の単位用量剤である。追加の実施形態において、結合体は、被験体の繁殖可能性を低下させるのに有効な量の単位用量剤である。結合体は、キット内に、必要に応じて、方法を実施するための指示書と共に、含められ得る。1つの実施形態において、キットは、結合体、および細胞の増殖を減少させるためもしくは阻害するため、過剰増殖細胞の増殖を減少させるためもしくは阻害するため、新形成、腫瘍もしくはがん細胞の増殖を減少させるためもしくは阻害するため、過剰増殖性障害を有する被験体を処置するため、新形成、腫瘍もしくはがんを有する被験体を処置するため、または動物の繁殖可能性を低下させるための指示書を備える。本発明によると、結合体をコードする核酸も提供される。1つの実施形態において、核酸は、Her2/neuに結合するリガンドおよび第2のドメイン、ならびに例えば、から選択されるペプチド配列、あるいはFもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のK残基、K、AもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のF残基、またはK、FもしくはL残基のいずれかで置換された1つ以上のA残基を有する、から選択されるペプチドを含む配列を含むかまたはそれらからなる結合体をコードする。別の実施形態において、核酸は、Her2/neuに結合するリガンドおよび第2のドメイン、ならびにから選択されるL-またはD-アミノ酸配列からなるペプチドを含むかまたはそれらからなる結合体をコードする。核酸は、ベクター例えば、細胞内で発現されるとき結合体をコードする発現ベクター内に含められ得る。宿主細胞は、ベクターとしての核酸で形質転換され得、その結果、その細胞は、その核酸によってコードされる結合体を発現する。結合体は、とりわけ、細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するため、細胞増殖を減少させるかまたは阻害するため、過剰増殖細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するため、新形成、腫瘍、がんまたは悪性の細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するため、および望ましくないまたは異常な細胞増殖例えば、過剰増殖細胞または過剰増殖性障害を処置するために有用である。過剰増殖性障害の非限定的な例としては、良性の過形成、非転移性および転移性の新形成、がん、腫瘍および悪性疾患が挙げられる。本発明によると、細胞の増殖を減少させるかまたは阻害する方法;細胞増殖を減少させるかまたは阻害する方法;過剰増殖細胞の増殖を減少させるかまたは阻害する方法;および新形成、腫瘍、がんまたは悪性の細胞の増殖を減少させるかまたは阻害する方法がさらに提供される。様々な実施形態において、方法は、細胞と結合体とを、その細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量で接触させる工程;細胞と結合体とを、細胞増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量で接触させる工程;細胞と結合体とを、過剰増殖細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量で接触させる工程;および細胞と結合体とを、新形成、腫瘍、がんまたは悪性の細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量で接触させる工程を包含する。本発明によると、Her2/neuを発現している細胞の増殖を選択的に減少させるかまたは阻害する方法;Her2/neuを発現している過剰増殖細胞の増殖を選択的に減少させるかまたは阻害する方法;およびHer2/neuを発現している新形成、腫瘍、がんまたは悪性の細胞の増殖を選択的に減少させるかまたは阻害する方法がさらに提供される。様々な実施形態において、方法は、細胞と結合体とを、その細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量で接触させる工程;細胞と結合体とを、過剰増殖細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量で接触させる工程;および細胞と結合体とを、新形成、腫瘍、がんまたは悪性の細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量で接触させる工程を包含し、ここで、その結合体のリガンドは、その細胞によって発現されるHer2/neuに結合する。本発明の方法に従って標的化される細胞には、Her2/neuを発現している細胞が含まれる。ゆえに、本発明の方法に従って標的化される細胞としては、例えば、乳房、卵巣、子宮、子宮頸部、胃、肺、胃部、結腸、膀胱、グリア、血液および子宮内膜の細胞が挙げられる。実施される方法は、とりわけ、細胞例えば、過剰増殖細胞または望まれずに増殖している細胞の増殖、生存、分化、死または活性の阻害、減少または予防を必要とする被験体と接触させる工程を包含する。例示的な被験体としては、望ましくないもしくは異常な細胞増殖を有するかもしくは有するリスクのある被験体;良性の過形成;または非転移性もしくは転移性の新形成、がん、腫瘍もしくは悪性疾患例えば、乳房、卵巣、子宮、子宮頸部、胃、肺、胃部、結腸、膀胱、グリア、血液または子宮内膜の細胞のいずれかにおける固形腫瘍または液体腫瘍liquidtumorを有するかもしくは有するリスクのある被験体が挙げられる。本発明によると、過剰増殖性障害を有する被験体を処置する方法、および新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患転移性、非転移性または良性のものを有する被験体を処置する方法がさらに提供される。様々な実施形態において、方法は、過剰増殖性障害を処置するのに十分な量の結合体を被験体に投与する工程;および新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量の結合体を被験体に投与する工程を包含する。方法は、転移を有するかまたは有するリスクのある被験体を処置する工程を包含する。例えば、被験体内の他の部位、位置または領域への腫瘍、がんまたは新形成の拡散または播種を減少させるかまたは阻害するのに有効な量の結合体。様々な実施形態において、方法は、1つ以上の他の部位への原発腫瘍または原発がんの転移、1つ以上の他の部位、位置または領域における転移の形成または確立を減少させるかまたは阻害し、それによって、腫瘍もしくはがんの再発または腫瘍もしくはがんの進行を減少させるかまたは阻害する。さらなる実施形態において、方法は、潜在的に転移を起こすかもしくは転移を起こす腫瘍もしくはがん細胞例えば、播種性腫瘍細胞の成長、増殖、移動性もしくは浸潤性を減少させるかもしくは阻害するか;原発腫瘍もしくは原発がんとは異なる1つ以上の他の部位、位置もしくは領域への、原発腫瘍もしくは原発がんから生じる転移の形成もしくは確立を減少させるかもしくは阻害するか;転移が形成された後もしくは確立された後に、原発腫瘍もしくは原発がんとは異なる1つ以上の他の部位、位置もしくは領域における転移の成長もしくは増殖を減少させるかもしくは阻害するか;または転移が形成された後もしくは確立された後に、追加の転移の形成もしくは確立を減少させるかもしくは阻害する。なおも別の実施形態において、方法は、新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患の再発または進行を減少させるか、または阻害する。本発明によると、新形成、腫瘍、がんもしくは悪性疾患の他の部位への転移、または原発性の新形成、腫瘍、がんもしくは悪性疾患から遠位の他の部位における転移性の新形成、腫瘍、がんもしくは悪性疾患の形成もしくは確立を減少させるかまたは阻害する方法がなおもさらに提供される。様々な実施形態において、方法は、新形成、腫瘍、がんもしくは悪性疾患の他の部位への転移、または原発性の新形成、腫瘍、がんもしくは悪性疾患から遠位の他の部位における転移性の新形成、腫瘍、がんもしくは悪性疾患の形成もしくは確立を減少させるかまたは阻害するのに十分な量の結合体を被験体に投与する工程を包含する。本発明に従って処置可能な新形成、腫瘍、がんおよび悪性疾患には、固形細胞塊、造血細胞またはがん腫、肉腫例えば、リンパ肉腫、脂肪肉腫、骨肉腫、軟骨肉腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫または線維肉腫、リンパ腫、白血病、アデノーマ、腺がん、メラノーマ、神経膠腫、神経膠芽腫、髄膜腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、星状細胞腫、乏突起膠細胞腫oligodendrocytoma、中皮腫、細網内皮性、リンパ性または造血性例えば、骨髄腫、リンパ腫または白血病の新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患が含まれる。本発明に従って処置可能な新形成、腫瘍、がんおよび悪性疾患は、肺小細胞肺がんまたは非小細胞肺がん、乳房、卵巣、子宮、子宮頸部、胃、肺、胃部、結腸、膀胱、グリア、血液、子宮内膜、リンパ、血液、筋肉または皮膚の細胞の新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患に存在し得るか、またはそれらを冒し得る。方法は、他の処置または治療例えば、外科的切除、放射線療法、電離もしくは化学放射線治療、化学療法、免疫療法、局所もしくは領域温熱療法加温療法またはワクチン接種とともに実施され得る。そのような処置または治療は、結合体の投与の前、それと実質的に同時に別個にまたは混合物として、またはその後に、適用され得る。1つの実施形態において、方法は、抗細胞増殖、抗新形成、抗腫瘍、抗がんまたは免疫増強の処置または治療を適用する工程を包含する。さらなる実施形態において、方法は、アルキル化剤、抗代謝産物、植物抽出物、植物アルカロイド、ニトロソ尿素、ホルモン、ヌクレオシドアナログまたはヌクレオチドアナログ;シクロホスファミド、アザチオプリン、シクロスポリンA、プレドニゾロン、メルファラン、クロラムブシル、メクロレタミン、ブスルファン、メトトレキサート、6-メルカプトプリン、チオグアニン、5-フルオロウラシル、シトシンアラビノシド、5-アザシチジン5-AZCおよび5-アザシチジン関連化合物、ブレオマイシン、アクチノマイシンD、ミトラマイシン、マイトマイシンC、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ストレプトゾトシン、ヒドロキシ尿素、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチンoxiplatin、ミトタン、プロカルバジン、ダカルバジン、タキソール、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ドキソルビシンまたはジブロモマンニトール、トポイソメラーゼインヒビター、イリノテカン、トポテカン、エトポシド、テニポシド、ゲムシタビン、ペメトレキセドpemetrexedなどを投与する工程を包含する。細胞療法または免疫療法には、リンパ球、形質細胞、マクロファージ、樹状細胞、T細胞、NK細胞またはB細胞;抗体、細胞成長因子、細胞生存因子、細胞分化因子、サイトカインまたはケモカイン例は、インターロイキンIL-2、IL-1α、IL-1β、IL-3、IL-6、IL-7、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子GMCSF、IFN-γ、IL-12、TNF-α、TNFβ、MIP-1α、MIP-1β、RANTES、SDF-1、MCP-1、MCP-2、MCP-3、MCP-4、エオタキシン、エオタキシン-2、またはリンホタクチンであるなどが含まれる。結合体とともに適用可能な追加の薬剤は、標的化薬物または生物製剤例えば、抗体または小分子である。モノクローナル抗体の非限定的な例としては、とりわけ本発明に係る結合体と組み合わせて使用され得る、リツキシマブRituxan登録商標、トラスツズマブHerceptin、ペルツズマブpertuzumab、セツキシマブErbitux、イピリムマブipilimumab、ザルツムマブzalutumumab、ダロツズマブdalotuzumab、フィギツムマブfigitumumab、ラムシルマブramucirumab、ガリキシマブgaliximab、ファルレツズマブfarletuzumab、オクレリズマブocrelizumab、オファツムマブofatumumab、アレムツズマブCampath、パニツムマブVectibix、イブリツモマブチウキセタンZevalin、トシツモマブBexxarなどが挙げられる。結合体とともに使用する場合に適用可能な他の標的化薬物は、イマチニブGleevec、ゲフィチニブIressa、ボルテゾミブbortzomibVelcade、ラパチニブlapatinibTykerb、スニチニブsunitinibSutent、ソラフェニブsorafenibNevaxar、ニロチニブTasignaなどである。本発明の方法は、被験体に利益を提供する工程を包含する。特定の実施形態において、処置方法は、新形成、腫瘍、がんまたは悪性の細胞の質量、体積、サイズまたは細胞数の部分的または完全な消失をもたらすか、新形成、腫瘍、がんまたは悪性の細胞のネクローシス、溶解またはアポトーシスを刺激するか、誘導するかまたは増加させるか、新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患の体積、サイズ、細胞質量を減少させるか、新形成、腫瘍、がんもしくは悪性疾患の進行またはそれらの体積、質量、サイズもしくは細胞数の増加を阻害するかまたは予防するか、あるいは寿命の延長をもたらすか;新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患に関連するかまたはそれによって引き起こされる有害な症状または合併症の重症度、持続時間または頻度を減少させるかまたは低減させるか;疼痛、不快、悪心、脱力または嗜眠を減少させるかまたは低減させるか;あるいはエネルギーの増加、食欲の増加、運動性の改善または心理的に良好な状態をもたらす。上記方法に従って処置可能な被験体には、哺乳動物が含まれる。特定の実施形態において、被験体は、ヒトである。詳細な説明本発明は、第2溶解性ドメインに接続されたまたは融合された、Her2/neuに結合するリガンドを含む結合体に少なくとも部分的に基づく。代表的な配置において、結合体の第1ドメインは、Her2/neuに結合するリガンドを含み、第2のドメインは、細胞に対して直接または間接的に毒性であり、それにより、細胞の増殖もしくは生存を減少させ得るか、または細胞死、殺滅もしくはアポトーシスを刺激し得るか、誘導し得るか、増加させ得るかもしくは増強し得る、溶解性部分を含む。本発明によると、Her2/neuに結合する第1リガンドドメインを含むかまたはそれからなり、かつ第2の溶解性または毒性ドメインを含むかまたはそれからなる、結合体が提供される。1つの実施形態において、結合体は、Her2/neuに結合するリガンド、およびペプチド配列リジン=K、フェニルアラニン=Fおよびアラニン=Aなどのアミノ酸から選択される、例えば、を含む12~100残基のL-またはD-アミノ酸配列からなる第2のドメインを含む。別の実施形態において、結合体は、Her2/neuに結合する第1リガンドドメイン、ならびにから選択されるL-またはD-アミノ酸配列からなる第2のドメインを含む。本明細書中で使用されるとき、用語結合体または融合構築物およびそれらの文法上のバリエーションは、その構築物が、互いに異なりかつ通常天然では一緒に存在しない、2つの異なる分子実体に由来するか、それらから得られるかもしくは単離されるか、またはそれらに基づくかもしくはそれらをモデルにしている、一部または区分を含むことを意味する。つまり、例えば、その結合体の一部は、Her2/neuに結合するリガンドを含むかまたはそれからなり、その結合体の第2の部分は、溶解性の部分を含むかまたはそれからなり、第1ドメインおよび第2のドメインの各々は、構造的に異なる。結合体は、融合構築物とも呼ばれ得、ここで、その結合体は、Her2/neuに結合する第2のドメインリガンドおよび第2のドメイン溶解性部分を含むかまたはそれからなる。結合体の第1ドメインおよびまたは第2のドメインは、アミノ酸配列ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、レクチン、核酸DNA、RNAおよび炭水化物糖類、シアル酸、ガラクトース、マンノース、フコース、アセチルノイラミン酸などを含むか、またはそれらからなる。用語アミノ酸配列、タンパク質、ポリペプチドおよびペプチドは、アミド結合もしくは等価物によって共有結合的に連結された2つ以上のアミノ酸または残基のことを指すために本明細書中で交換可能に使用される。アミノ酸配列は、非天然および非アミド化学の結合例えば、グルタルアルデヒド、N-ヒドロキシスクシンイミドエステル、二官能性マレイミドまたはN、N’-ジシクロヘキシルカルボジイミドDCCを用いて形成されるものを含むによって連結され得る。非アミド結合としては、例えば、ケトメチレン、アミノメチレン、オレフィン、エーテル、チオエーテルなどが挙げられる例えば、を参照のこと。結合体または融合構築物の第1ドメインおよび第2のドメインは、L-アミノ酸配列、D-アミノ酸配列、およびL-アミノ酸とD-アミノ酸との混合物を含むアミノ酸配列を含む。第1ドメインおよび第2のドメインのアミノ酸配列は、線状構造または環状構造であり得、異なる部分例えば、第3、第4、第5、第6、第7ドメインなどと結合体化され得、分子内または分子間のジスルフィド結合を形成し得、また、同じもしくは異なるアミノ酸配列または他の分子と高次多量体またはオリゴマーを形成し得る。結合体の例示的な長さは、約5~15、20~25、25~50、50~100、100~150、150~200もしくは200~300またはそれ以上のアミノ酸残基長である。特定の実施形態において、第1ドメインまたは第2のドメインは、約1~10、10~20、15~20、20~30、30~40、40~50、60~70、70~80、80~90、90~100またはそれ以上の残基のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる。より特定の実施形態において、第1ドメインは、15、16、17、18、19、20、28またはそれ以上の残基のアミノ酸配列からなる。第1ドメインおよび第2のドメイン、必要に応じて、Her2/neuに結合するリガンド溶解性ドメインまたは第2溶解性ドメインを有する結合体は、両親媒性アルファ-ヘリックスを形成する。両親媒性アルファ-ヘリックスは、アルファ-ヘリックスの片側に主に親水性アミノ酸を含み、他方の側は、主に疎水性アミノ酸を含む。アルファヘリックスは、3.6残基ごとに完全に回転するので、両親媒性アルファヘリックスのアミノ酸配列では、親水性残基と疎水性残基とが3~4残基ごとに互い違いになる。PNNPNNP反復パターンまたはモチーフは、両親媒性アルファ-ヘリックスを形成すると予測され、ここで、Pは、正に帯電したアミノ酸残基を表し、Nは、中性のアミノ酸残基を表す。PNNPNNP反復パターンは、膜の相互作用/貫入のための負に帯電した細胞膜および疎水性部位に、溶解性ペプチドに対する陽イオン性結合部位を提供する。ゆえに、結合体は、両親媒性アルファ-ヘリックスを形成し得る、中断なしの1つ以上のPNNPNNP反復パターンもしくはモチーフまたは中断ありの1つ以上のPNNPNNP反復パターンもしくはモチーフを有する第2のドメインを含む。例えば、15または18残基のアミノ酸配列例えば、KFAKFAKKFAKFAKKおよびKFAKFAKKFAKFAKKFAKが、中断なしおよび中断ありのPNNPNNP反復モチーフを有する。結合体の第1ドメイン例えば、Her2/neuに結合するリガンドは、リガンド、抗体、ホルモン、成長因子またはそれらのアナログもしくはフラグメントを含むかまたはそれからなる。Her2/neuは、代表的には、細胞によって、または細胞上に例えば、膜レセプターまたは細胞内で、発現される。Her2/neuは、細胞膜表面と会合し得るか、または細胞膜を貫通し得る。例えば、Her2/neuは、必要に応じて細胞質もしくは細胞外またはその両方である部分とともに、細胞膜を貫通する膜貫通ドメインを有し得る。ゆえに、Her2/neuは、細胞外、膜貫通または細胞質の部分を含む完全長のインタクトな天然Her2/neu、ならびにその切断型またはフラグメント例えば、Her2/neu単独のまたは組み合わせにおける、細胞外、膜貫通もしくは細胞質の部分または部分配列を含む。例えば、可溶性Her2/neuは、代表的には膜貫通を欠き、必要に応じて、天然の細胞外または細胞質の領域の全部または一部も欠き得る天然のHer2/neuに存在する場合。そのような切断型およびフラグメントは、リガンドに対して少なくとも部分的な結合性を保持し得る。Her2/neuに結合する結合体のリガンドは、Her2/neuに特異的または非特異的に結合する任意の実体を含むか、またはそれからなる。ゆえに、リガンドの非限定的な例としては、抗体、抗体フラグメント、ホルモン、ホルモンアナログ、Her2/neuに結合するホルモンまたはホルモンアナログのフラグメント、成長因子、成長因子アナログ、Her2/neuに結合する成長因子または成長因子アナログのフラグメントなどが挙げられる。Her2/neuに結合する例示的なリガンドとしては、アフィボディ例えば、ZHer2-neu:2、ZHer2-neu:4、ZHer2-neu:7、ZHer2-neu:8およびFab63が挙げられる。例示的なアフィボディ配列は、以下のとおりである:Her2/neuに結合するリガンドとして有用な例示的な成長因子としては、上皮成長因子および上皮成長因子アナログが挙げられる。Her2/neuリガンドおよび結合部分としては、さらに、抗体および抗体フラグメントが挙げられる。抗体とは、任意のモノクローナルまたはポリクローナル免疫グロブリン分子例えば、IgM、IgG、IgA、IgE、IgDおよびそれらの任意のサブクラスのことを指す。IgGに対する例示的なサブクラスは、様々なグリコシル化パターンを有する操作された抗体サブクラスおよび組換え抗体を含む、IgG1、IgG2、IgG3およびIgG4である。抗体には、B細胞などの細胞によって産生された抗体もしくはそれらの細胞上に発現された抗体、または他の細胞、例えば、CHO細胞によって合成された抗体もしくは産生されるように操作された抗体が含まれる。そのような抗体には、改善された特徴例えば、高い血清安定性および/またはインビボでの長い半減期、高いPKなど例えば、AntibodyEngineeringVol1,KontermanRおよびDuebelS,eds.,2010,Springer、WO2006/130834およびHortonら、CancerRes68:80492008に記載されているようなものを有する抗体が含まれる。Fcにおける非限定的な変異としては、例えば、I253A、H310A、H435R、H435Q、G236R、L328R、S239D、I332Eが挙げられる。IgG1における非限定的な変異は、Fc領域の残基におけるものであり得る。抗体フラグメントまたは部分配列とは、対照の完全長抗体の少なくとも部分的な抗原結合能を保持する完全長抗体の一部のことを指す。例示的な抗体フラグメントとしては、Fab、Fab’、Fab’2、Fv、Fd、一本鎖FvscFv、ジスルフィド連結されたFvsdFv、VL、VH、ラクダIg、V-NAR、VHH、三重特異性Fab3、二重特異性Fab2、ダイアボディVL-VH2またはVH-VL2、トリアボディ三価、テトラボディ四価、ミニボディscFV-CH32、二重特異性一本鎖FvBis-scFv、IgGデルタCH2、scFv-Fc、scFv2-Fc、アフィボディ、アプタマー、アビマー、ナノボディまたは他の抗原結合フラグメントが挙げられる。例示的な抗体は、Her2/neu上に存在するエピトープに結合する。例示的なHer2/neuエピトープHer2エピトープのアミノ酸の位置の番号は、pの後のアラビア数字によって言及されるとしては、が挙げられる。例示的な抗体としては、米国特許第5,821,337号に記載されているようなヒト化抗ErbB2抗体であるhuMAb4D1-1、huMAb4D5-1、huMAb4D5-2、huMAb4D5-3、huMAb4D5-4、huMAb4D5-5、huMAb4D5-6、huMAb4D5-7およびhuMAb4D5-8HERCEPTINTM;米国特許第7,097,840号に記載されているようなヒト化520C9WO93/21319およびヒト化2C4ペルツズマブならびにUS2009/0285837A1に記載されているようなペルツズマブバリアントが挙げられる。様々な特性を有する追加の抗ErbB2抗体は、に記載されている。結合体は、アミノ末端に第1ドメインおよびカルボキシル末端に第2のドメインを有する結合体を含む。結合体は、カルボキシル末端に第1ドメインおよびアミノ末端に第2のドメインを有する結合体も含む。追加のドメインが存在する場合例えば、第3、第4、第5、第6、第7ドメインなど、第1ドメインは、第2のドメインに対してNH2末端に位置するか、または第2のドメインは、第1ドメインに対してNH2末端に位置する。本明細書中に示される様々な配列、例えば、またはHer2/neuに結合するリガンドの部分配列およびアミノ酸置換もまた含められる。特定の実施形態において、第1ドメインまたは第2のドメインの部分配列は、少なくとも5~10、10~15、15~20、20~25、25~30、30~35、35~40、40~50、50~60、60~70、70~80、80~90、90~100またはそれ以上のアミノ酸残基を有する。ゆえに、本発明は、改変またはバリエーション例えば、第1ドメインもしくは第2のドメインまたは第1ドメインと第2のドメインの両方の置換、付加または欠失を含む。したがって、保存的または非保存的アミノ酸置換が、第1ドメインまたは第2のドメインの活性Her2/neu結合性または溶解性を破壊しない限り、第1ドメインまたは第2のドメインのペプチド配列を含む結合体は、任意の数のそのような置換を組み込み得る。したがって、例えば、Her2/neuに結合する改変されたリガンドまたは第2の溶解性部分ドメインは、改変されていない第2のドメインの少なくとも部分的なHer2/neu結合性または溶解活性例えば、細胞殺滅またはアポトーシスを保持し得る。保存的置換は、1つのアミノ酸を生物学的、化学的または構造的に類似の残基によって置き換えることである。生物学的に類似とは、その置換が、生物学的活性、例えば、溶解活性と適合可能であることを意味する。構造的に類似とは、それらのアミノ酸が、類似の長さの側鎖例えば、アラニン、グリシンおよびセリンもしくは類似のサイズを有する側鎖を有するか、または第1、第2もしくは追加のドメインの構造例えば、両親媒性アルファヘリックスが維持されることを意味する。化学的に類似とは、それらの残基が、同じ電荷を有するか、または親水性および疎水性であることを意味する。特定の例としては、1つの疎水性残基例えば、イソロイシン、バリン、ロイシンまたはメチオニンの、別のものに対する置換、または1つの極性残基の、別のものに対する置換例えば、リジンに対するアルギニン、アスパラギン酸に対するグルタミン酸、またはアスパラギンに対するグルタミン、トレオニンに対するセリンの置換などが挙げられる。通例のアッセイを用いることにより、結合体のバリアントが、活性、例えば、結合活性または溶解活性を有するかを判定することができる。特定の例としては、ペプチドの第1ドメインまたは第2のドメインの1つ以上のアミノ酸例えば、1~3、3~5、5~10、10~20またはそれ以上の残基の置換または欠失が挙げられる。改変された結合体は、参照配列例えば、第1ドメイン例えば、Her2/neuに結合するリガンドまたは第2のドメイン例えば、に対して50、60、70、75、80、85、90、95、96、97、98またはそれ以上の同一性を有するペプチド配列を有し得る。特定の実施形態において、結合体は、Her2/neuに結合するリガンドを含むかまたはそれからなるペプチドの第1ドメイン、ならびにFもしくはL残基で置換された1つ以上のK残基、K、AもしくはL残基で置換された1つ以上のF残基またはK、FもしくはL残基で置換された1つ以上のA残基を有する、から選択されるペプチドを含むL-またはD-アミノ酸配列を含むかまたはそれからなる第2の溶解性ドメインを含む。別の特定の実施形態では、結合体は、Her2/neuに結合するリガンド、ならびにFもしくはL残基で置換された1つ以上のK残基、K、AもしくはL残基で置換された1つ以上のF残基またはK、FもしくはL残基で置換された1つ以上のA残基例えば、12、13、15、16、17、18、19、20、22、23、24、25、26、27または28残基長を有する、から選択されるL-またはD-アミノ酸配列からなる第2のドメインを含む。用語同一性および相同性ならびにそれらの文法上のバリエーションは、言及されている2つ以上の実体が同じであることを意味する。したがって、2つのアミノ酸配列が同一である場合、それらは、同じアミノ酸配列を有する。同一性の範囲、領域またはドメインは、言及されている2つ以上の実体の一部が同じであることを意味する。したがって、2つのアミノ酸配列が、1つ以上の配列領域にわたって同一または相同である場合、それらは、これらの領域において同一性を共有する。用語相補性は、核酸配列に対する言及において使用されるとき、言及されている領域が、100の相補性である、すなわち、ミスマッチなしに100の塩基対形成を示すことを意味する。構造的に関係するタンパク質と機能的に関係するタンパク質との間の配列保存の量のばらつきに起因して、機能または活性例えば、Her2/neu結合性または溶解性を保持するために必要とされる配列同一性の量は、そのタンパク質、領域、およびその領域の機能または活性に依存する。例えば、溶解性ペプチド配列の場合、複数のPNNPNNP配列反復パターンまたはモチーフが存在し得るが、中断ありまたは中断なしの1つ以上のPNNPNNP配列反復パターンまたはモチーフは存在する必要はない。2つの配列間の同一性の程度は、当該分野で公知のコンピュータプログラムおよび数学的アルゴリズムを用いて確かめることができる。パーセント配列同一性相同性を計算するそのようなアルゴリズムは、一般に、比較領域にわたる配列のギャップおよびミスマッチを説明する。例えば、BLAST例えば、BLAST2.0検索アルゴリズム例えば、Altschulら、J.Mol.Biol.215:4031990を参照のこと、NCBIから公的に入手可能は、以下のとおりの例示的な検索パラメータを有する:ミスマッチ-2;ギャップオープン5;ギャップ伸長2。ポリペプチド配列を比較する場合、代表的には、BLASTPアルゴリズムが、スコア行列例えば、PAM100、PAM250、BLOSUM62またはBLOSUM50と組み合わせて使用される。FASTA例えば、FASTA2およびFASTA3およびSSEARCH配列比較プログラムもまた、同一性の程度を定量するために使用されるPearsonら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:24441988;Pearson,MethodsMolBiol.132:1852000;およびSmithら、J.Mol.Biol.147:1951981。Delaunayベースのトポロジカルマッピングを用いてタンパク質の構造的類似性を定量するためのプログラムもまた開発されているBostickら、BiochemBiophysResCommun.304:3202003。個別の残基、ならびに第1、第2および追加のドメインは、共有結合または非共有結合によって接続され得る。共有結合の非限定的な例は、アミド結合、非天然および非アミドの化学結合であり、それらとしては、例えば、グルタルアルデヒド、N-ヒドロキシスクシンイミドエステル、二官能性マレイミド、N,N’-ジシクロヘキシルカルボジイミドDCCまたはN,N’-ジイソプロピルカルボジイミドDICが挙げられる。アミド結合に代わる連結基としては、例えば、ケトメチレン例えば、-C=O-NH-に代わる-C=O-CH2-、アミノメチレンCH2-NH、エチレン、オレフィンCH=CH、エーテルCH2-O、チオエーテルCH2-S、テトラゾールCN4-、チアゾール、レトロアミド、チオアミドまたはエステルが挙げられる例えば、Spatola1983ChemistryandBiochemistryofAminoAcids,PeptidesandProteins,Vol.7,pp267-357PeptideandBackboneModificationsMarcelDecker,NYを参照のこと。第1ドメインおよび第2のドメインは、共有結合または非共有結合によって互いに直接隣接して融合され得るか、または接続され得る。第1ドメインおよび第2のドメインは、第1ドメインと第2のドメインとの間に位置する介在領域例えば、ヒンジ、スペーサーまたはリンカーによって分断され得る。1つの実施形態において、第1ドメインおよび第2のドメインは、炭素鎖例えば、CCCCCによって接続される。多炭素鎖には、グルタル酸、コハク酸およびアジピン酸などのカルボン酸例えば、ジカルボン酸が含まれる。別の実施形態において、第1ドメインおよび第2のドメインは、第1ドメインと第2のドメインとの間に位置する、アミノ酸、ペプチドまたは非ペプチドのヒンジ、スペーサーまたはリンカーによって接続される。ペプチドのヒンジ、スペーサーまたはリンカー配列は、任意の長さであり得るが、代表的には、約1~10、10~20、20~30、30~40または40~50アミノ酸残基の範囲であり得る。特定の実施形態において、第1ドメインと第2のドメインとの間に位置するペプチドのヒンジ、スペーサーまたはリンカーは、1~5、1~10、1~20、1~25個のL-もしくはD-アミノ酸残基または1~6個のL-もしくはD-アミノ酸残基である。第1ドメインと第2のドメインとの間に位置する配列に含められる特定のアミノ酸残基は、1つ以上のC、A、SもしくはGアミノ酸残基を含む。第1ドメインと第2のドメインとの間に位置するペプチドの特定の非限定的な例としては、GSGGS、ASAASまたは炭素鎖例えば、CCCCCC内の、またはそれらとして示される配列が挙げられる。第1ドメインと第2のドメインとの間にアミノ酸およびペプチドの誘導体が位置され得る。アミノ酸誘導体の特定の非限定的な例は、リジン誘導体、または6炭素リンカー例えば、α-アミノ-カプロン酸である。ヒンジ、スペーサーもしくはリンカーまたは第3、第4、第5、第6、第7などのドメインを含むかまたは含まない結合体は、全体的に、天然のアミノ酸、または合成アミノ酸、非天然アミノ酸もしくはアミノ酸アナログから構成され得るか、あるいは誘導体化された形態を含み得る。様々な実施形態において、結合体は、第1ドメイン内または第2のドメイン内に、L-アミノ酸に対して置換された1つ以上のD-アミノ酸、D-アミノ酸とL-アミノ酸との混合物、または全体的にD-アミノ酸残基から構成される配列を含む。結合体は、代表的に3つの構造上の基:a天然のアミド結合ペプチド結合以外の残基結合基;b天然に存在するアミノ酸残基の代わりの非天然の残基;またはc二次構造の模倣を誘導する残基すなわち、二次構造、例えば、アルファヘリックスコンフォメーションを誘導するかまたは安定化する残基に由来する非天然の構造上の構成要素の任意の組み合わせを含み得る。結合体は、環状構造例えば、分子のアミノ末端とカルボキシ末端との間の末端と末端とのアミド結合、または分子内もしくは分子間ジスルフィド結合を含む。結合体は、例えば、糖または炭水化物残基、リン酸基、脂肪酸、脂質などを含むように、インビトロまたはインビボにおいて改変され得る例えば、翻訳後に改変され得る。追加の特定の例としては、第3、第4、第5、第6または第7ドメインが挙げられる。ゆえに、第1ドメインおよび第2のドメインを有する結合体は、異なるまたは補完的な機能または活性を付与する、それに共有結合的に連結される1つ以上の追加のドメイン第3、第4、第5、第6、第7などを含む。例示的な追加のドメインとしては、単離を容易にするドメインが挙げられ、それらとしては、例えば、金属キレートペプチド例えば、固定化された金属上での精製を可能にするポリヒスチジントラクトおよびヒスチジン-トリプトファンモジュール;固定化された免疫グロブリン上での精製を可能にするプロテインAドメイン;ならびにFLAGS伸長/親和性精製系ImmunexCorp,SeattleWAにおいて利用されるドメインが挙げられる。必要に応じて、切断可能な配列例えば、Xa因子またはエンテロキナーゼを精製ドメインと結合体との間に含めることが、精製を容易にするために使用され得る。例えば、発現ベクターは、6ヒスチジン残基に続いてチオレドキシンおよびエンテロキナーゼ切断部位に連結された、結合体をコードする核酸配列を含み得る。そのヒスチジン残基は、結合体の検出および精製を容易にし、エンテロキナーゼ切断部位は、その残りのタンパク質から構築物を精製するための手段を提供する例えば、Kroll,DNACell.Biol.12:4411993を参照のこと。結合体の活性は、様々な因子によって影響され得るので、結合体は、これらの因子の1つ以上を考慮に入れることによって、設計され得るか、または最適化され得る。そのような因子としては、例えば、細胞に毒性をもたらし得る長さが挙げられる。溶解性ペプチドドメインを形成するアルファヘリックスの細胞殺滅活性は、そのヘリックスの安定性にも左右され得る。ヒンジおよびスペーサーは、第1ドメインとペプチド溶解性ドメインのヘリックス構造との膜相互作用に影響し得る。溶解性ペプチドドメインに存在する特定のアミノ酸残基によって部分的に決定されるそのドメインの電荷もまた、細胞殺滅効力に影響する。Her2/neuに結合するリガンドの、溶解性ドメインに対する位置NまたはC末端もまた、結合体の細胞殺滅活性に影響し得る。結合体のインビボ半減期は、1つ以上の天然に存在しないアミノ酸または誘導体を用いてペプチドドメインを構築することによって延長され得る。例えば、D-アミノ酸を有する結合体例えば、すべての残基の、最大30、40、50、60またはそれ以上がD-エナンチオマーであるは、血清タンパク質分解に対して耐性があり、ゆえに、より長時間にわたって活性であり得、それによって、インビボでの効力が高まり得る。さらに、1つ以上の天然に存在しないアミノ酸または誘導体を用いてペプチドドメインを構築することにより、溶血活性が低下し得る。そのようなD-エナンチオマーを有する結合体はまた、溶液中で単量体である傾向がより高く、それらは、有意に凝集しない。ペプチドおよびペプチド模倣物は、当該分野で公知の方法を用いて生成され得、単離され得る。ペプチドは、当該分野で公知の化学的方法を用いて全体的または部分的に合成され得る例えば、Caruthers1980.NucleicAcidsRes.Symp.Ser.215;Horn1980;およびBanga,A.K.,TherapeuticPeptidesandProteins,Formulation,ProcessingandDeliverySystems1995TechnomicPublishingCo.,Lancaster,PAを参照のこと。ペプチド合成は、様々な固相法を用いて行われ得例えば、RobergeScience269:2021995;Merrifield,MethodsEnzymol.289:31997を参照のこと、自動化された合成が、例えば、ABI431APeptideSynthesizerPerkinElmerを製造者の指示書に従って用いることにより、達成され得る。ペプチドおよびペプチド模倣物は、コンビナトリアル法を用いても合成され得る。合成残基、および模倣物を組み込んでいるポリペプチドは、当該分野で公知の種々の手順および方法を用いて合成され得る例えば、OrganicSynthesesCollectiveVolumes,GilmanらEdsJohnWileySons,Inc.,NYを参照のこと。改変されたペプチドは、化学修飾法例えば、Belousov,NucleicAcidsRes.25:34401997;Frenkel,FreeRadic.Biol.Med.19:3731995;およびBlommers,Biochemistry33:78861994を参照のことによって生成され得る。本発明はさらに、本発明の結合体をコードする核酸および結合体をコードする核酸を含むベクターを提供する。本明細書中で遺伝子、ポリヌクレオチド、ヌクレオチド配列、プライマー、オリゴヌクレオチドまたはプローブとも呼ばれ得る核酸は、任意の長さの天然のまたは改変されたプリン含有ポリマーおよびピリミジン含有ポリマー、ポリリボヌクレオチドもしくはポリデオキシリボヌクレオチドまたは混合されたポリリボ-ポリデオキシリボヌクレオチドおよびそれらのα-アノマー型のことを指す。2つ以上のプリン含有ポリマーおよびピリミジン含有ポリマーは、代表的には、リン酸エステル結合またはそのアナログによって連結される。それらの用語は、デオキシリボ核酸DNAおよびリボ核酸RNAを含む、すべての形態の核酸のことを指すために交換可能に使用され得る。それらの核酸は、一本鎖、二本鎖または三本鎖の線状または環状であり得る。核酸には、ゲノムDNA、cDNAおよびアンチセンスが含まれる。RNA核酸は、スプライシングされたもしくはスプライシングされてないmRNA、rRNA、tRNAまたはアンチセンスであり得る。核酸には、天然に存在するもの、合成のもの、ならびにヌクレオチドのアナログおよび誘導体が含まれる。遺伝暗号の縮重の結果として、核酸は、本発明の結合体をコードする配列に対して縮重した配列を含む。したがって、結合体をコードする縮重核酸配列が提供される。核酸は、種々の公知の標準的なクローニング法および化学合成法のいずれかを用いて生成され得、部位特異的突然変異誘発または当業者に公知の他の組換え手法によって意図的に変更され得る。ポリヌクレオチドの純度は、配列決定、ゲル電気泳動、UV分光法によって測定され得る。核酸は、核酸構築物に挿入されている場合があり、ここで、その核酸の発現は、本明細書中で発現カセットと呼ばれる発現調節エレメントによって影響されるかまたは制御される。用語発現調節エレメントとは、それと作動可能に連結された核酸配列の発現を制御するかまたはそれに影響する1つ以上の核酸配列エレメントのことを指す。発現調節エレメントは、必要に応じ、プロモーター、エンハンサー、転写ターミネーター、遺伝子サイレンサー、タンパク質をコードする遺伝子の前の開始コドン例えば、ATGなどを含み得る。核酸配列に作動可能に連結された発現調節エレメントは、転写、および必要に応じ、その核酸配列の翻訳を調節する。用語作動可能に連結されたとは、言及されている構成要素が、意図された様式で機能するのを可能にする関係性で存在している並列のことを指す。代表的には、発現調節エレメントは、その遺伝子の5’または3’末端に並べられるが、イントロンでもあり得る。発現調節エレメントは、転写を構成的に活性化するエレメント、すなわち、誘導可能であるすなわち、活性化のために外部シグナルを必要とするかまたは抑制解除可能であるすなわち、転写を止めるためにシグナルを必要とする;そのシグナルがもはや存在しなくなると、転写が活性化されるかまたは抑制解除されるエレメントを含む。特定の細胞型または組織に対して遺伝子発現を調節可能にするのに十分な調節エレメントすなわち、組織特異的調節エレメントも、本発明の発現カセットに含まれる。代表的には、そのようなエレメントは、コード配列の上流または下流すなわち、5’および3’に配置される。プロモーターは、代表的には、コード配列の5’に位置する。組換えDNA法または合成法によって生成されるプロモーターは、本発明のポリヌクレオチドの転写を提供するために使用され得る。プロモーターは、転写を指示するのに十分な最小配列エレメントのことを意味する。核酸は、宿主細胞への伝播のため、および所望であれば、その後の遺伝的操作のためにプラスミドに挿入され得る。プラスミドは、宿主細胞において安定的に増幅され得る核酸であり;プラスミドは、その核酸の発現を駆動するために、必要に応じて発現調節エレメントを含んでもよい。ベクターは、本明細書中でプラスミドの同意語として使用され、宿主細胞において発現するための発現調節エレメントも含み得る。プラスミドおよびベクターは、一般に、細胞内で増幅するための複製起点およびプロモーターを少なくとも含む。ゆえに、プラスミドおよびベクターは、例えば、核酸をコードする結合体の遺伝的操作のため、結合体またはアンチセンス核酸を生成するため、ならびに宿主細胞および生物において結合体を発現するために有用である。細菌系プロモーターとしては、T7および誘導性プロモーター例えば、バクテリオファージλのpL、plac、ptrp、ptacptrp-lacハイブリッドプロモーターおよびテトラサイクリン応答性プロモーターが挙げられる。昆虫細胞系プロモーターとしては、構成的または誘導性のプロモーター例えば、エクジソンが挙げられる。哺乳動物細胞の構成的プロモーターとしては、SV40、RSV、ウシパピローマウイルスBPVおよび他のウイルスのプロモーター、または哺乳動物細胞のゲノムに由来する誘導性プロモーター例えば、メタロチオネインIIAプロモーター;熱ショックプロモーターもしくは哺乳動物ウイルスに由来する誘導性プロモーター例えば、アデノウイルス後期プロモーター;誘導可能なマウス乳がんウイルス長末端反復配列が挙げられる。あるいは、レトロウイルスゲノムが、適切な宿主細胞において結合体を導入するためおよびその発現を指示するために遺伝的に改変され得る。発現系はさらに、インビボで使用するために設計されたベクターを含む。特定の非限定的な例としては、アデノウイルスベクター米国特許第5,700,470号および同第5,731,172号、アデノ随伴ベクター米国特許第5,604,090号、単純ヘルペスウイルスベクター米国特許第5,501,979号、レトロウイルスベクター米国特許第5,624,820号、同第5,693,508号および同第5,674,703号、BPVベクター米国特許第5,719,054号およびCMVベクター米国特許第5,561,063号が挙げられる。酵母ベクターには、構成的および誘導性のプロモーターが含まれる例えば、を参照のこと。ADHもしくはLEU2などの構成的酵母プロモーター、またはGALなどの誘導性プロモーターが、使用され得るR.Rothstein:DNACloning,APracticalApproach,Vol.11,Ch.3,ed.D.M.Glover,IRLPress,Wash.,D.C.,1986。例えば、相同組換えによる酵母染色体への外来核酸配列の組み込みを促進するベクターが当該分野で公知である。挿入されるポリヌクレオチドが、より従来のベクターにとって大きすぎるとき例えば、約12Kbより大きいとき、代表的には酵母人工染色体YACが使用される。選択圧または識別可能なマーカー例えば、ベータ-ガラクトシダーゼに対する耐性を付与することによって、そのベクターを有する細胞の選択、成長および増加を可能にする選択可能なマーカーも発現ベクターは含み得る。あるいは、選択可能なマーカーは、結合体をコードする核酸を含む第1ベクターとともに宿主細胞に同時にトランスフェクトされる第2ベクター上に存在し得る。選択系としては、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ遺伝子Wiglerら、Cell11:2231977、ヒポキサンチン-グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ遺伝子Szybalskaら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA48:20261962およびアデニンホスホリボシルトランスフェラーゼLowyら、Cell22:8171980遺伝子それぞれ、tk-、hgprt-またはaprt-細胞において使用され得るが挙げられるがこれらに限定されない。さらに、代謝拮抗物質耐性が、メトトレキサートに対する耐性を付与するdhfrO’Hareら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA78:15271981;ミコフェノール酸に対する耐性を付与するgpt遺伝子Mulliganら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA78:20721981;アミノグリコシドG-418に対する耐性を付与するネオマイシン遺伝子Colberre-Garapinら、J.Mol.Biol.150:11981;ピューロマイシン;およびハイグロマイシンに対する耐性を付与するハイグロマイシン遺伝子Santerreら、Gene30:1471984に対する選択の根拠として使用され得る。さらなる選択可能な遺伝子としては、細胞がトリプトファンの代わりにインドールを利用することを可能にするtrpB;細胞がヒスチジンの代わりにヒスチノールを利用することを可能にするhisDHartmanら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:80471988;およびオルニチンデカルボキシラーゼインヒビターである2-ジフルオロメチル-DL-オルニチン,DFMOに対する耐性を付与するODCオルニチンデカルボキシラーゼMcConlogue1987CurrentCommunicationsinMolecularBiology,ColdSpringHarborLaboratoryが挙げられる。結合体を発現する宿主細胞、ならびに結合体をコードする核酸および結合体をコードする核酸を含むベクターで形質転換された宿主細胞もまた提供される。1つの実施形態において、宿主細胞は、原核細胞である。別の実施形態において、宿主細胞は、真核細胞である。様々な態様において、真核細胞は、酵母または哺乳動物例えば、ヒト、霊長類などの細胞である。本明細書中で使用されるとき、宿主細胞は、発現される結合体を伝播し得るか、転写し得るかまたはコードし得る核酸が導入された細胞である。この用語は、宿主細胞の任意の子孫またはサブクローンも包含する。宿主細胞は、結合体を発現する細胞を含む。宿主細胞としては、微生物例えば、細菌および酵母;ならびに植物、昆虫および哺乳動物の細胞が挙げられるがこれらに限定されない。例えば、組換えバクテリオファージ核酸、プラスミド核酸またはコスミド核酸発現ベクターで形質転換された細菌;組換え酵母発現ベクターで形質転換された酵母;組換えウイルス発現ベクター例えば、カリフラワーモザイクウイルス,CaMV;タバコモザイクウイルス,TMVに感染したまたは組換えプラスミド発現ベクター例えば、Tiプラスミドで形質転換された植物細胞系;組換えウイルス発現ベクター例えば、バキュロウイルスに感染した昆虫細胞系;および組換えウイルス発現ベクター例えば、レトロウイルス、アデノウイルス、ワクシニアウイルスに感染した動物細胞系、または一過性もしくは安定的な増幅もしくは発現のために操作された形質転換された動物細胞系。結合体、結合体をコードする核酸、ベクター、ならびに結合体を発現するかまたは結合体をコードする核酸およびアンチセンスで形質転換された宿主細胞は、単離された形態および精製された形態を含む。用語単離されたは、本発明の組成物の修飾語として使用されるとき、その組成物が、人間の手によって作製されたか、または天然に存在するインビボ環境から実質的に完全にもしくは少なくとも部分的に分離されていることを意味する。一般に、単離された組成物は、それが通常天然において関連する1つ以上の材料、例えば、1つ以上のタンパク質、核酸、脂質、炭水化物、細胞膜を実質的に含まない。用語単離されたは、その組成物の代替の物理的形態例えば、多量体/オリゴマー、バリアント、改変、または誘導体化された形態もしくは人間の手によって作製された宿主細胞において発現される形態を除外しない。用語単離されたは、その中に組み合わせそのうちのいずれか1つが人間の手によって作製されたものであるが存在する形態例えば、薬学的製剤および組み合わせ組成物も除外しない。単離された組成物は、それが通常天然において関連する材料のいくつか、相当数、ほとんどまたはすべてを含まないとき、精製された組成物でもあり得る。したがって、実質的に純粋でもある単離された結合体は、何百万の他の配列の中に存在するポリペプチドまたはポリヌクレオチド例えば、タンパク質ライブラリーのタンパク質、またはゲノムライブラリーもしくはcDNAライブラリーにおける核酸を含まない。精製された組成物は、1つ以上の他の分子と併用され得る。本発明によると、結合体の混合物および組み合わせ組成物が提供される。1つの実施形態において、混合物は、1つ以上の結合体および薬学的に許容され得るキャリアまたは賦形剤を含む。別の実施形態において、混合物は、1つ以上の結合体、および抗細胞増殖、抗腫瘍、抗がんまたは抗新形成の処置または薬剤を含む。さらなる実施形態において、混合物は、1つ以上の結合体および免疫増強剤を含む。組み合わせ例えば、薬学的に許容され得るキャリアまたは賦形剤中の1つ以上の結合体と、抗細胞増殖、抗腫瘍、抗がんまたは抗新形成の処置または薬剤および免疫増強の処置または薬剤の1つ以上との組み合わせもまた提供される。本発明の結合体例えば、Her2/neuに結合する第1リガンドHer2/neu結合部分ドメインおよび第2溶解性ドメインを含むアミノ酸配列を有するポリペプチドを用いることにより、溶解、細胞死またはアポトーシスのために細胞を標的にすることができる。そのような細胞は、選択的に標的化され得る。例えば、Her2/neuを発現している細胞は、結合体によって標的化され得、それによって、Her2/neuを発現していないかまたはほとんど発現していない細胞と比べて優先的に殺滅され得る。本発明によると、Her2/neuを発現している細胞の増殖を減少させるかまたは阻害する方法、および細胞増殖を減少させるかまたは阻害する方法が提供される。1つの実施形態において、方法は、細胞と結合体とを、その細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量で接触させる工程を包含する。別の実施形態において、方法は、細胞と結合体とを、細胞増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量で接触させる工程を包含する。Her2/neuを発現している過剰増殖性細胞の増殖を減少させるかまたは阻害する方法、およびHer2/neuを発現している過剰増殖細胞の増殖を減少させるかまたは阻害する方法もまた提供される。1つの実施形態において、方法は、過剰増殖性細胞または過剰増殖細胞と結合体とを、増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量で接触させる工程を包含する。Her2/neuを発現している非転移性または転移性の新形成、がん、腫瘍および悪性の細胞の増殖を減少させるかまたは阻害する方法がさらに提供される。1つの実施形態において、方法は、新形成、がん、腫瘍または悪性の細胞と結合体とを、その細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量で接触させる工程を包含する。Her2/neuを発現している休止中または非分裂性の非転移性または転移性の新形成、がん、腫瘍および悪性の細胞の増殖を減少させるかまたは阻害する方法がなおもさらに提供される。1つの実施形態において、方法は、休止中または非分裂性の新形成、がん、腫瘍または悪性の細胞と結合体とを、その休止中または非分裂性の細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量で接触させる工程を包含する。Her2/neuを発現している細胞例えば、過剰増殖細胞の増殖を選択的に減少させるかまたは阻害する方法がさらに提供される。1つの実施形態において、方法は、その細胞と結合体とを、その細胞例えば、過剰増殖細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量で接触させる工程を包含し、ここで、その結合体は、その細胞によって発現されているHer2/neuに結合する。Her2/neuを発現している発現している新形成、腫瘍、がんまたは悪性の細胞の増殖を選択的に減少させるかまたは阻害する方法がなおもさらに提供される。1つの実施形態において、方法は、その細胞と結合体とを、その新形成、腫瘍、がんまたは悪性の細胞の増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量で接触させる工程を包含し、ここで、その結合体は、その細胞によって発現されているHer2/neuに結合する。用語接触は、2つ以上の実体間例えば、結合体と細胞との間の直接または間接的な結合または相互作用のことを意味する。本明細書中で使用される接触は、溶液、固相、インビトロ、エキソビボ、細胞およびインビボにおけるものを含む。インビボでの接触は、投与する、または投与もしくは送達と呼ばれ得る。非選択的または選択的に増殖を減少させるかまたは阻害するために標的化する細胞には、Her2/neuを発現している細胞が含まれる。非限定的な例示的な細胞としては、乳房、卵巣、子宮、子宮頸部、胃、肺、胃部、結腸、膀胱、グリア、血液および子宮内膜の細胞が挙げられる。したがって、標的細胞には、Her2/neuを発現している細胞が含まれる。本発明の結合体および方法は、Her2/neuを発現している細胞を含む、望ましくないまたは異常な細胞増殖および過剰増殖性障害の処置にも適用可能である。したがって、本発明によると、望ましくないまたは異常な細胞増殖および過剰増殖性障害を処置する方法が提供される。1つの実施形態において、方法は、その望ましくないもしくは異常な細胞増殖または過剰増殖性障害を処置するのに十分な量の結合体を被験体処置を必要とする被験体に投与する工程を包含する。用語過剰増殖性障害とは、任意の望ましくないまたは異常な細胞の生存例えば、プログラム細胞死またはアポトーシスを起こすのに失敗したもの、成長または増殖のことを指す。そのような障害には、良性の過形成、非転移性および転移性の新形成、がん、腫瘍および悪性疾患が含まれる。望ましくないまたは異常な細胞増殖および過剰増殖性障害は、被験体内の任意の細胞、組織、器官に影響し得る。望ましくないまたは異常な細胞増殖および過剰増殖性障害は、被験体内に、局部的に、領域性にまたは全身性に、存在し得る。過剰増殖性障害は、多数の組織および器官乳房、肺例えば、小細胞または非小細胞、甲状腺、頭頸部、脳、鼻咽頭、咽頭、鼻または洞、リンパ系、副腎、脳下垂体、甲状腺、リンパ、胃腸口腔、食道、胃、十二指腸、回腸、空腸小腸、結腸、直腸、泌尿生殖路子宮、卵巣、膣、子宮頸部、子宮内膜、ファロピウス管、膀胱、精巣、陰茎、前立腺、腎臓、膵臓、肝臓、骨、骨髄、リンパ、血液血液学、脳グリア、筋肉、皮膚および幹細胞が挙げられるがこれらに限定されないから生じ得、それらは、他の二次的な部位、領域または位置に転移するかもしれないし、しないかもしれない。本発明の結合体および方法は、任意の細胞、器官または組織起源の転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成にも適用可能である。そのような障害は、実質的に任意の細胞または組織タイプに影響し得る例えば、がん腫、肉腫、メラノーマ、神経性および細網内皮性または造血性の新形成障害例えば、骨髄腫、リンパ腫または白血病。本明細書中で使用されるとき、用語新形成および腫瘍とは、その成長、増殖または生存が、対応する正常細胞の成長、増殖または生存よりも高い細胞または細胞の集団、例えば、細胞増殖障害または細胞分化障害のことを指す。腫瘍は、異なる質量または成長を形成した新形成である。がんまたは悪性疾患とは、隣接する空間、組織または器官を浸潤し得る新形成または腫瘍のことを指す。転移とは、その原発部位から被験体内の1つ以上の二次的な部位、位置または領域に播種したまたは拡散した新形成、腫瘍、がんまたは悪性疾患のことを指し、ここで、その部位、位置または領域は、原発腫瘍または原発がんと異なる。そのような細胞のすべてまたは一部が、Her2/neuを発現し得るので、本発明に係る結合体を用いて標的化され得る。新形成、腫瘍、がんおよび悪性の細胞転移性または非転移性には、休止中のまたは残存する新形成、腫瘍、がんおよび悪性の細胞が含まれ、それらのすべてまたは一部は、Her2/neuを発現する。そのような細胞は、代表的には、分裂していないG0-G1停止レムナント腫瘍細胞からなる。これらの細胞は、原発部位に存続し得るか、または微小残存病変として播種性の新形成、腫瘍、がんもしくは悪性の細胞として存続し得る。これらの休止中の新形成、腫瘍、がんまたは悪性の細胞は、無症候性のままであるが、これらの休止中の細胞は、いったん増殖すると、重篤な症状および死をもたらし得る。本発明の方法を用いることによって、休止中の新形成、腫瘍、がんまたは悪性の細胞の増殖を減少させるかまたは阻害することができ、そしてそれにより、腫瘍もしくはがんの再発、または腫瘍もしくはがんの転移もしくは進行が阻害され得るかまたは減少し得る。本発明によると、転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成を有する被験体を処置する方法が提供される。1つの実施形態において、方法は、その転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成を処置する例えば、増殖を減少させるかまたは阻害するのに十分な量の結合体を被験体処置を必要とする被験体に投与する工程を包含する。上記転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成は、任意のステージ、例えば、初期または進行期例えば、ステージI、II、III、IVまたはVの腫瘍であり得る。その転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成は、前処置に供されたことがあってもよいし、安定化されていてもよいし進行していなくてもよいし、緩解になっていてもよい。転移に関して、本発明の方法を用いることにより、原発腫瘍もしくは原発がんの他の部位への転移、または原発腫瘍もしくは原発がんから遠位の他の部位における転移性の腫瘍もしくはがんの形成もしくは確立を減少させるかまたは阻害することができ、それによって、腫瘍もしくはがんの再発または腫瘍もしくはがんの進行が阻害されるかまたは減少する。したがって、本発明の方法は、とりわけ、1潜在的に転移するかまたは転移する腫瘍またはがん細胞例えば、播種性腫瘍細胞,DTCの成長、増殖、移動性または浸潤性を減少させるかまたは阻害する工程;2原発腫瘍または原発がんから、その原発腫瘍または原発がんとは異なる1つ以上の他の部位、位置または領域に生じる転移の形成もしくは確立を減少させるかまたは阻害する工程;3転移が形成された後または確立された後に、原発腫瘍または原発がんとは異なる1つ以上の他の部位、位置または領域における転移の成長または増殖を減少させるかまたは阻害する工程;および4転移が形成された後または確立された後に、追加の転移の形成または確立を減少させるかまたは阻害する工程を包含する。転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成の細胞その全部または一部が、Her2/neuを発現するは、固形細胞塊に凝集され得るか、または分散され得るか、もしくは拡散され得る。固形腫瘍とは、代表的には一緒に凝集して塊を形成する、がん、新形成または転移のことを指す。特定の非限定的な例としては、乳房、卵巣、子宮、子宮頸部、胃、肺、胃部、結腸、膀胱、グリアおよび子宮内膜の腫瘍/がんが挙げられる。がん腫上皮または内分泌の組織の悪性疾患のことを指すには、呼吸器系がん腫、胃腸系がん腫、泌尿生殖路系がん腫、精巣がん腫、乳房がん腫、前立腺がん腫、内分泌系がん腫およびメラノーマが含まれる。例示的ながん腫としては、子宮、子宮頸部、肺、前立腺、乳房、頭頸部、結腸、膵臓、精巣、副腎、腎臓、食道、胃、肝臓および卵巣から形成されるがん腫が挙げられる。その用語は、がん肉腫例えば、がん性および肉腫性の組織から構成される悪性の腫瘍を含むも包含する。腺がんには、腺組織のがん腫、またはその腫瘍が腺様構造を形成するがん腫が含まれる。肉腫とは、間葉系細胞起源の悪性の腫瘍のことを指す。例示的な肉腫としては、例えば、リンパ肉腫、脂肪肉腫、骨肉腫、軟骨肉腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫および線維肉腫が挙げられる。神経性の新形成には、神経膠腫、神経膠芽腫、髄膜腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、星状細胞腫および乏突起膠細胞腫が含まれる。液体腫瘍liquidtumorは、代表的には固体塊を形成しない、性質上、分散性または拡散性の新形成のことを指す。特定の例としては、細網内皮性または造血系の新形成例えば、リンパ腫、骨髄腫および白血病が挙げられる。白血病の非限定的な例としては、急性および慢性のリンパ芽球性、骨髄芽球性myeolblasticおよび多発性の骨髄腫が挙げられる。代表的には、そのような疾患は、未分化型急性白血病、例えば、赤芽球性白血病および急性巨核芽球性白血病から発生する。特定の骨髄性障害としては、急性前骨髄性白血病APML、急性骨髄性白血病AMLおよび慢性骨髄性白血病CMLが挙げられるが、これらに限定されない。リンパ系の悪性疾患としては、急性リンパ芽球性白血病ALLB細胞性ALLB-ALLおよびT細胞性ALLT-ALLを含む、慢性リンパ性白血病CLL、前リンパ球性白血病PLL、ヘアリーセル白血病HLLおよびワルデンシュトレームWaldenstroem’sマクログロブリン血症WMが挙げられるが、これらに限定されない。特定の悪性リンパ腫としては、非ホジキンリンパ腫および亜型、末梢T細胞リンパ腫、成人T細胞白血病/リンパ腫ATL、皮膚T細胞性リンパ腫CTCL、大顆粒リンパ性白血病LGF、ホジキン病およびリードシュテルンベルク病が挙げられる。本明細書中に開示されるように、望ましくないまたは異常な細胞増殖または過剰増殖性障害は、子宮、乳房、膣、子宮頸部、子宮内膜およびファロピウス管に生じ得る。したがって、本発明によると、子宮、乳房、膣、子宮頸部、子宮内膜およびファロピウス管の過剰増殖性障害を処置する方法が提供される。1つの実施形態において、方法は、子宮、乳房、膣、子宮頸部、子宮内膜またはファロピウス管の過剰増殖性障害を処置するのに十分な量の結合体を被験体に投与する工程を包含する。抗細胞増殖活性または抗細胞増殖作用を有する任意の組成物、処置、プロトコル、治療またはレジメンが、結合体と併用され得るか、または本発明の方法と組み合わせて使用され得る。ゆえに、本発明の結合体および方法は、抗増殖性、抗腫瘍、抗がん、抗新形成および抗転移性の処置、プロトコルおよび治療を含み、それらは、過剰増殖性障害例えば、腫瘍、がん、悪性または新形成の成長、進行、転移、増殖もしくは生存、またはインビトロもしくはインビボでの悪化を阻害するか、低減させるか、遅らせるか、遅延させるか、減少させるか、または予防する、他の任意の組成物、処置、プロトコルまたは治療レジメンを含む。抗増殖性例えば、腫瘍治療の特定の非限定的な例としては、化学療法、免疫療法、放射線療法電離または化学、局所温熱療法加温療法、外科的切除およびワクチン接種が挙げられる。結合体は、抗細胞増殖、抗新形成、抗腫瘍、抗がん、抗転移性または免疫増強の処置または治療の適用の前、それと実質的に同時に、またはその後に、投与され得る。結合体は、抗細胞増殖、抗新形成、抗腫瘍、抗がん、抗転移性または免疫増強の処置または治療、転移性もしくは非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成との組み合わせ組成物として投与され得る。抗増殖性、抗新形成、抗腫瘍、抗がんおよび抗転移性の組成物、治療、プロトコルまたは処置には、細胞周期の進行または細胞増殖を予防するか、妨害するか、中断するか、阻害するかもしくは遅延させるもの;アポトーシスもしくは細胞死を刺激するかもしくは増強するもの、核酸もしくはタンパク質の合成もしくは代謝を阻害するもの、細胞分裂を阻害するもの、あるいは細胞生存または必要な細胞生存因子、成長因子またはシグナル伝達経路細胞外または細胞内の産生もしくは利用を低減させるか、減少させるかまたは阻害するものが含まれる。抗細胞増殖、抗新形成、抗腫瘍、抗がんおよび抗転移性の活性を有する化学剤のクラスの非限定的な例としては、アルキル化剤、抗代謝産物、植物抽出物、植物アルカロイド、ニトロソ尿素、ホルモン、ヌクレオシドアナログおよびヌクレオチドアナログが挙げられる。抗細胞増殖、抗新形成、抗腫瘍、抗がんおよび抗転移性の活性を有する薬物の特定の例としては、シクロホスファミド、アザチオプリン、シクロスポリンA、プレドニゾロン、メルファラン、クロラムブシル、メクロレタミン、ブスルファン、メトトレキサート、6-メルカプトプリン、チオグアニン、5-フルオロウラシル、シトシンアラビノシド、AZT、5-アザシチジン5-AZCおよび5-アザシチジン関連化合物例えば、デシタビンdecitabine5-アザ-2’デオキシシチジン、シタラビン、1-ベータ-D-アラビノフラノシル-5-アザシトシンおよびジヒドロ-5-アザシチジン、ブレオマイシン、アクチノマイシンD、ミトラマイシン、マイトマイシンC、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ストレプトゾトシン、ヒドロキシ尿素、シスプラチン、ミトタン、プロカルバジン、ダカルバジン、タキソール、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ドキソルビシンおよびジブロモマンニトールなどが挙げられる。結合体および方法とともに適用可能な追加の薬剤は、当該分野で公知であり、それらを使用することができる。例えば、生物製剤例えば、抗体、細胞成長因子、細胞生存因子、細胞分化因子、サイトカインおよびケモカインが投与され得る。モノクローナル抗体の非限定的な例としては、リツキシマブRituxan登録商標、トラスツズマブHerceptin、ペルツズマブOmnitarg、ベバシズマブAvastin、セツキシマブErbitux、アレムツズマブCampath、パニツムマブVectibix、イブリツモマブチウキセタンZevalin、トシツモマブBexxarなどが挙げられ、それらは、とりわけ、本発明に係る結合体と組み合わせて使用され得る。その結合体とともに使用するために適用可能な他の標的化薬物は、イマチニブGleevec、ゲフィチニブIressa、ボルテゾミブVelcade、ラパチニブlapatinibTykerb、スニチニブsunitinibSutent、ソラフェニブsorafenibNevaxar、ニロチニブTasignaなどである。細胞成長因子、細胞生存因子、細胞分化因子、サイトカインおよびケモカインの非限定的な例としては、IL-2、IL-1α、IL-1β、IL-3、IL-6、IL-7、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子GMCSF、IFN-γ、IL-12、TNF-α、TNFβ、MIP-1α、MIP-1β、RANTES、SDF-1、MCP-1、MCP-2、MCP-3、MCP-4、エオタキシン、エオタキシン-2、およびリンホタクチンが挙げられる。追加の非限定的な例としては、細胞に基づく治療を含む、免疫増強の処置および治療が挙げられる。特に、免疫増強の処置および治療は、リンパ球、形質細胞、マクロファージ、樹状細胞、NK細胞およびB細胞の投与を含む。転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成を処置する方法、転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成を有するかまたはそれを有するリスクがあることに起因して処置を必要とする被験体を処置する方法、および有効性を高めるかまたは抗増殖性、抗腫瘍、抗がん、抗新形成もしくは抗悪性疾患の治療を改善する方法が提供される。それぞれの実施形態において、方法は、転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成を有するかまたはそのリスクのある被験体に、その転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成を処置するのに十分な量の結合体を投与する工程;その被験体を処置するのに十分な量の結合体をその被験体に投与する工程;および転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成の治療を受けているかまたはそれを受けた被験体に、抗増殖性、抗腫瘍、抗がん、抗新形成または抗悪性疾患の治療の有効性を高めるのに十分な量の結合体を投与する工程を包含する。本発明の方法は、望ましくないもしくは異常な細胞増殖または過剰増殖性の障害、疾患もしくは状態のエビデンス例えば、1つ以上の症状が出現し始める前にすなわち、予防、それと同時に、またはその後に、実施され得る。望ましくないもしくは異常な細胞増殖または過剰増殖性障害の症状を発症する前、それと同時、またはその直後の結合体の投与は、その被験体における望ましくないもしくは異常な細胞増殖または過剰増殖性の障害、疾患もしくは状態の1つ以上の症状の出現、頻度、重症度、進行または持続時間を減少させ得る。さらに、望ましくないもしくは異常な細胞増殖または過剰増殖性の障害、疾患もしくは状態の1つ以上の症状を発症する前、それと同時、またはその直後の結合体の投与は、被験体内の他の部位、領域、組織もしくは器官への過剰増殖細胞の拡散もしくは播種例えば、転移、または被験体内の他の部位、領域、組織もしくは器官における過剰増殖細胞の確立例えば、転移を阻害し得るか、減少させ得るか、または予防し得る。本発明の結合体および方法例えば、処置方法は、検出可能または測定可能な治療的な利益または改善を被験体に提供し得る。治療的な利益または改善は、その被験体に対する、任意の測定可能もしくは検出可能な、客観的もしくは主観的な、一過性、一時的もしくはより長期間の利益、またはその被験体の組織、器官、細胞もしくは細胞集団における、状態、障害もしくは疾患、有害な症状、結果もしくは根本原因の任意の程度の改善である。治療的な利益および改善としては、障害、疾患もしくは状態に関連する1つ以上の症状もしくは合併症の出現、頻度、重症度、進行もしくは持続時間、またはその障害、疾患もしくは状態の根本原因もしくは結果として起こる作用を減少させるかまたは低減させることが挙げられるが、これらに限定されない。ゆえに、本発明の結合体および方法は、治療的な利益または改善を被験体に提供することを含む。治療的な利益または改善が所望の結果である本発明の方法において、本発明の結合体は、それを必要とする被験体に十分量または有効量で投与され得る。十分な量または有効な量とは、単回投与または複数回投与において、単独で、または1つ以上の他の組成物化学療法chemotheraputic薬または免疫刺激薬などの治療薬、処置、プロトコルもしくは治療レジメンの薬剤と組み合わせて、任意の長さの持続時間長期間または短期間の検出可能な応答、任意の測定可能もしくは検出可能な程度のまたは任意の長さの持続時間にわたる例えば、数時間、数日間、数ヶ月間、数年間にわたるまたは治癒するまでの、被験体における所望の結果または被験体に対する利益を提供する量のことを指す。処置のための例えば、治療的な利益または改善を提供するための用量または十分量または有効量は、代表的には、障害、疾患もしくは状態、またはその障害、疾患もしくは状態の1つ、複数もしくはすべての有害な症状、結果もしくは合併症を、測定可能な程度にまで回復させるのに有効であるが、その障害、疾患もしくは状態または症状の進行または悪化を減少させるかまたは阻害することが、良好な結果と考えられる。用語回復させるは、被験体の状態の検出可能な客観的または主観的な改善を意味する。検出可能な改善には、障害、疾患もしくは状態によって引き起こされるかもしくはそれに関連する症状の出現、頻度、重症度、進行もしくは持続時間の主観的もしくは客観的な減少、その障害、疾患もしくは状態の根本原因もしくは結果の改善、またはその障害、疾患もしくは状態の逆転が含まれる。ゆえに、処置は、障害、疾患もしくは状態または関連する症状もしくは結果あるいは根本原因を阻害し得るか、減少させ得るか、または予防し得るか;障害、疾患、状態、症状もしくは結果または根本原因の進行もしくは悪化を阻害し得るか、減少させ得るか、または予防し得るか;あるいはその障害、疾患状態または症状の1つ以上の追加の症状のさらなる増悪または出現を阻害し得るか、減少させ得るか、または予防し得る。したがって、成功した処置結果は、治療効果もしくは利益、または被験体における1つ以上の症状または根本原因または状態、障害、疾患もしくは症状の結果の出現、頻度、重症度、進行もしくは持続時間の阻害、減少もしくは予防をもたらす。ゆえに、その状態、障害、疾患または症状の1つ以上の根本原因に影響する処置方法は、有益であると考えられる。障害または状態の進行または悪化の安定化または阻害もまた、成功した処置結果である。ゆえに、治療的な利益または改善は、上記状態、障害または疾患に関連するいずれか1つ、ほとんどまたはすべての症状、合併症、結果または根本原因の完全な消失である必要はない。したがって、良好なエンドポイントは、短いまたは長い持続時間数時間、数日間、数週間、数ヶ月間などにわたって、被験体の状態が漸増的に改善するとき、あるいは1つ以上の関連する有害な症状もしくは合併症または結果もしくは根本原因の出現、頻度、重症度、進行もしくは持続時間が部分的に減少するかまたはそれらが阻害されるかもしくは逆転するとき、その障害または疾患の生理学的な、生化学的なまたは細胞の徴候または特徴の1つ以上の悪化または進行例えば、その状態、障害または疾患の1つ以上の症状または合併症の安定化が部分的に減少するかまたはそれらが阻害されるかもしくは逆転するとき、達成される。特定の実施形態において、処置方法は、転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性または新形成の細胞の質量、体積、サイズまたは細胞数の部分的または完全な消失をもたらすか;転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性または新形成の細胞のネクローシス、溶解またはアポトーシスを刺激するか、誘導するかまたは増加するか;転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性または新形成の体積、サイズ、細胞質量を減少させるか;転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性もしくは新形成の進行またはその体積、質量、サイズもしくは細胞数の増加を阻害するかまたは予防するか;被験体内の他の二次的な部位、領域、組織もしくは器官への過剰増殖細胞の拡散もしくは播種例えば、転移、または被験体内の他の二次的な部位、領域、組織もしくは器官における過剰増殖細胞の確立例えば、転移を阻害するかまたは減少させるか;あるいは被験体の寿命を延長する。追加の特定の実施形態において、処置方法は、転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成に関連するかまたはそれによって引き起こされる有害な症状または合併症の重症度、持続時間または頻度を減少させるかまたは低減させる。十分量または有効量は、単回投与で提供され得るが、そのように提供される必要はなく、単独で、または別の組成物例えば、化学療法剤または免疫増強剤もしくは免疫刺激剤、処置、プロトコルもしくは治療レジメンと組み合わせて、投与され得るが、そのように投与される必要はない。例えば、その量は、被験体の要求、処置される障害、疾患もしくは状態の状況または処置の副作用によって示されるのと比例的に増加され得る。さらに、所与の被験体において有効であるかまたは十分であると考えられるために、十分量または有効量より多いそれらを超える追加の用量、量もしくは持続時間、または追加の組成物例えば、化学療法剤または免疫刺激剤、処置、プロトコルもしくは治療レジメンを含めてもよいので、第2の組成物例えば、化学療法剤または免疫刺激剤、処置、プロトコルまたは治療レジメンなしで単回投与または複数回投与で投与される場合、そのような十分量または有効量は、十分であるかまたは有効である必要はない。十分であると考えられる量には、別の処置、治療レジメンまたはプロトコルの使用を減少させる量も含まれる。十分量または有効量は、処置される各々のおよびすべての被験体においても、所与の群または集団内の処置される被験体の大部分においても、予防的にまたは治療的に有効である必要はない。処置または治療方法にとって代表的であるように、一部の被験体は、所与の処置、治療レジメンまたはプロトコルに対してより高いまたは低い応答を示し得る。十分量または有効量とは、特定の被験体における十分性または有効性のことを指し、群または一般集団における十分性または有効性のことを指すわけではない。そのような量は、処置される状態例えば、望ましくないもしくは異常な細胞増殖または過剰増殖性障害例えば、転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成のタイプまたはステージ、所望の治療効果、ならびに個別の被験体例えば、その被験体内のバイオアベイラビリティ、性別、年齢などに部分的に依存し得る。望ましくないまたは異常な細胞増殖例えば、過剰増殖性障害例えば、転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成に対する治療的な利益または改善の特定の非限定的な例としては、細胞のサイズ、質量または体積の減少、細胞のサイズ、質量または体積の増加の阻害、悪化または進行の遅延または阻害、細胞のネクローシス、溶解またはアポトーシスの刺激、新形成または腫瘍の悪性度または転移の減少または阻害、死亡率の低下、および被験体の寿命の延長が挙げられる。したがって、細胞のサイズ、質量、体積の増加または転移安定化の阻害または遅延は、転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成の完全な消失が起きなかったとしても、たとえたった数日間、数週間または数ヶ月間でも寿命を延長し得る死亡率を低下させ得る。減少され得るかまたは低減され得る過剰増殖性障害例えば、転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成に関連する有害な症状および合併症としては、例えば、疼痛、悪心、不快、食欲不振、嗜眠および脱力が挙げられる。ゆえに、望ましくないまたは異常な細胞増殖例えば、過剰増殖性障害例えば、転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成の症状の出現、頻度、重症度、進行または持続時間の減少例えば、主観的な感覚の改善例えば、エネルギー増加、食欲増加、悪心の減少、運動性の改善または心理的に良好な状態などはすべて、治療的な利益または改善の例である。例えば、結合体の十分量または有効量は、その投与によって、望ましくないまたは異常な細胞増殖例えば、過剰増殖性障害例えば、転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成の処置に必要な化学療法薬、放射線照射または免疫療法がより少なくなる場合に、治療効果を有すると考えられる。用語被験体とは、動物、代表的には、哺乳動物、例えば、ヒト、非ヒト霊長類類人猿、テナガザル、チンパンジー、オランウータン、マカク、家庭内の動物イヌおよびネコ、家畜ウマ、ウシ、ヤギ、ヒツジ、ブタおよび実験動物マウス、ラット、ウサギ、モルモットのことを指す。被験体には、動物疾患モデル、例えば、インビボにおいて結合体を解析するための、望ましくないまたは異常な細胞増殖例えば、過剰増殖性障害例えば、転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成の動物モデルが含まれる。処置にとって適切な被験体は、転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性または新形成の細胞を有するかまたはそれを有するリスクのある被験体、抗増殖性の例えば、転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成の治療を受けている被験体、ならびに、それを受けているかまたはそれを受けた被験体その腫瘍が緩解状態である被験体を含むを含む。リスクのある被験体は、代表的には、望ましくないまたは異常な細胞の増殖、過形成例えば、腫瘍の発症に関連する危険因子を有する。リスクのある被験体または被験体候補の特定の例としては、結合体が結合し得るHer2/neuを発現している細胞を有する者が挙げられ、ここで、特に、ネクローシス、溶解、殺滅または破壊のために標的化される細胞は、非標的細胞よりも多い数または多い量のHer2/neuを発現している。そのような細胞は、ネクローシス、溶解または殺滅のために選択的または優先的に標的化され得る。リスクのある被験体には、外科的切除、化学療法、免疫療法、電離もしくは化学放射線療法、局所もしくは領域温熱療法加温療法またはワクチン接種の候補およびそれを受けた被験体も含まれる。ゆえに、本発明は、転移性もしくは非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患もしくは新形成、または例えば安定もしくは緩解の期間の後の転移性もしくは非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患もしくは新形成の再出現または再成長に起因する、転移性もしくは非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患もしくは新形成に関連する合併症のリスクのある被験体の処置に適用可能である。危険因子としては、性別、生活習慣食事、喫煙、職業医療および臨床の職員、農業および畜産業、環境要因発がん性物質への曝露、家族歴自己免疫障害、糖尿病など、遺伝的素因などが挙げられる。例えば、メラノーマを発症するリスクのある被験体には、過度の日光曝露紫外線照射、色白の皮膚、多数の母斑異形成母斑、患者の表現型、家族歴または以前のメラノーマの病歴が含まれる。ゆえに、がんを発症するリスクのある被験体は、生活習慣、職業、環境要因、家族歴、および腫瘍関連遺伝子、遺伝子欠失または遺伝子変異に対する遺伝的スクリーニングによって同定され得る。乳がんを発症するリスクのある被験体は、例えば、Brca1を欠く。結腸がんを発症するリスクのある被験体は、例えば、早期もしくは高頻度のポリープ形成を有するか、または欠失したまたは変異したがん抑制遺伝子を有する例えば、大腸腺腫性ポリポーシスAPC。被験体には、他の処置から除外された被験体も含まれる。例えば、ある特定の被験体は、外科的切除、化学療法、免疫療法、電離もしくは化学放射線療法、局所もしくは領域温熱療法加温療法またはワクチン接種に対しては優良な候補でない場合がある。したがって、本発明に係る処置の被験体候補には、外科的切除、化学療法、免疫療法、電離もしくは化学放射線療法、局所もしくは領域温熱療法加温療法またはワクチン接種の候補でない者が含まれる。結合体は、単位用量または単位剤形に製剤化され得る。特定の実施形態において、結合体は、望ましくないもしくは異常な細胞増殖または過剰増殖性障害を有する被験体を処置するのに有効な量で存在する。追加の特定の実施形態において、結合体は、転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成を有する被験体を処置するのに有効な量で存在する。例示的な単位用量は、約25~250、250~500、500~1000、1000~2500または2500~5000、5000~25,000、5000~50,000ng;および約25~250、250~500、500~1000、1000~2500または2500~5000、5000~25,000、5000~50,000μgの範囲である。本発明の組成物および方法は、インビトロ、エキソビボまたはインビボにおいて、接触され得るか、または提供され得る。組成物は、単回投与量または複数回投与量として、例えば、有効量または十分量で、意図される効果をもたらすように投与され得る。例示的な用量は、連日、または1日おきに、または断続的に、約25~250、250~500、500~1000、1000~2500または2500~5000、5000~25,000、5000~50,000pg/kg;約50~500、500~5000、5000~25,000または25,000~50,000ng/kg;および約25~250、250~500、500~1000、1000~2500または2500~5000、5000~25,000、5000~50,000μg/kgの範囲である。単回用量または複数回用量が、連日、1日おきに、または断続的に、投与され得る。任意の経路による、全身投与、領域投与または局部投与によって、組成物が投与され得、方法が実施され得る。例えば、結合体は、全身性に、領域性にまたは局部性に、静脈内に、経口的に例えば、経口摂取または吸入、筋肉内に、腹腔内に、皮内に、皮下に、腔内に、頭蓋内に、経皮的に局所的に、非経口的に、例えば、経粘膜的に、または直腸に投与され得る。薬学的製剤を含む本発明の組成物および方法は、マイクロカプセル送達系を介して投与され得るか、または投与用の埋没物中に詰められ得る。本発明はさらに、結合体および方法を提供し、ここで、その結合体は、薬学的組成物中に含められる。薬学的組成物とは、薬学的に許容され得るおよび生理的に許容され得るキャリア、希釈剤または賦形剤のことを指す。本明細書中で使用されるとき、用語薬学的に許容され得るおよび生理的に許容され得るは、キャリア、希釈剤または賦形剤に対して言及しているとき、薬学的投与およびその製剤の他の構成要素と適合性の、溶媒水性または非水性、界面活性剤、溶液、エマルジョン、分散媒、コーティング、等張剤および吸収促進剤または吸収遅延剤を含む。そのような製剤は、錠剤コーティングされているかまたはコーティングされていない、カプセル硬または軟、マイクロビーズ、エマルジョン、散剤、顆粒剤、結晶、懸濁液、シロップ剤またはエリキシル剤中に含められ得る。薬学的組成物は、特定の投与経路と適合性であるように製剤化され得る。非経口、皮内または皮下投与用の組成物は、滅菌された希釈剤例えば、水、食塩水溶液、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒を含み得る。その調製物は、微生物の成長を防止するために1つ以上の保存剤例えば、ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなどの抗菌剤;アスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウムなどの酸化防止剤;エチレンジアミン四酢酸などのキレート剤;酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩などの緩衝剤、および塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの張度を調整するための薬剤を含み得る。注射用の薬学的組成物には、滅菌された水溶液水溶性の場合または分散液、および滅菌された注射可能な溶液または分散液の即時調製用の滅菌された粉末が含まれる。静脈内投与の場合、好適なキャリアとしては、生理食塩水、静菌水、CremophorELTMBASF,Parsippany,NJまたはリン酸緩衝食塩水PBSが挙げられる。そのキャリアは、例えば、水、エタノール、ポリオール例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよびポリエチレングリコールおよびそれらの好適な混合物を含む溶媒または分散媒であり得る。流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングを使用すること、または界面活性物質を使用することによって、維持され得る。抗菌剤および抗真菌剤としては、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸およびチメロサールが挙げられる。吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを含めることによって、注射可能な組成物の吸収が延長し得る。追加の薬学的製剤および送達系は、当業者に公知であり、本発明の方法において適用可能である例えば、を参照のこと。本発明は、好適な包装材料に包装された、本発明の結合体、組み合わせ組成物およびそれらの薬学的製剤を備えるキットを提供する。キットは、必要に応じて、構成要素の説明を含むラベルもしくは添付文書、またはその中の構成要素をインビトロ、インビボもしくはエキソビボにおいて使用するための指示書を備える。例示的な指示書としては、細胞の増殖を減少させるかもしくは阻害するための指示書、望ましくないもしくは異常な細胞例えば、過剰増殖細胞の増殖を減少させるかもしくは阻害するための指示書、転移性もしくは非転移性の腫瘍、がん、悪性もしくは新形成の細胞の増殖を減少させるかもしくは阻害するための指示書、過剰増殖性障害を有する被験体を処置するための指示書、転移性もしくは非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患もしくは新形成を有する被験体を処置するための指示書、または動物の繁殖可能性を低下させるための指示書が挙げられる。キットは、そのような構成要素の一群、例えば、2つ以上の結合体を単独でまたは別の治療的に有用な組成物例えば、抗増殖薬または免疫増強薬と組み合わせて備え得る。用語包装材料とは、キットの構成要素を収容する物理的構造のことを指す。その包装材料は、その構成要素を無菌に維持し得、そのような目的のために通常使用される材料例えば、紙、段ボールcorrugatedfiber、ガラス、プラスチック、泊、アンプル、バイアル、チューブなどから作製され得る。本発明のキットは、ラベルまたは挿入文書insertを備え得る。ラベルまたは挿入文書には、印刷物、例えば、紙もしくは厚紙、あるいは構成要素、キットもしくは包装材料例えば、箱とは別個のものもしくはそれらに貼付されたもの、またはキットの構成要素を含むアンプル、チューブもしくはバイアルに接着されたものが含まれる。ラベルまたは挿入文書には、コンピュータ可読媒体例えば、ディスク例えば、フロッピー登録商標ディスケット、ハードディスク、ZIPディスク、光ディスク例えば、CD-またはDVD-ROM/RAM、DVD、MP3、磁気テープまたは電気的記憶媒体例えば、RAMおよびROMまたはこれらのハイブリッド例えば、磁気/光学式記憶媒体、FLASHメディアまたはメモリータイプカードがさらに含まれ得る。ラベルまたは挿入文書は、その中の1つ以上の構成要素の識別情報、用量、活性成分の臨床薬理学作用機序、薬物動態および薬力学を含むを含み得る。ラベルまたは挿入文書は、製造者情報、ロット番号、製造者の所在地および日付を特定する情報を含み得る。ラベルまたは挿入文書は、キットの構成要素を使用してもよい状態、障害、疾患または症状に関する情報を含み得る。ラベルまたは挿入文書は、方法、処置プロトコルまたは治療レジメンにおいて、そのキットの構成要素の1つ以上を使用するための臨床医または被験体に対する指示を含み得る。指示には、投与の量、頻度または持続時間、および本明細書中に示される方法、処置プロトコルまたは治療レジメンのいずれかを実施するための指示が含まれ得る。例示的な指示としては、望ましくないまたは異常な細胞増殖、過剰増殖細胞および障害例えば、転移性または非転移性の腫瘍、がん、悪性疾患または新形成を処置するための指示が挙げられる。ゆえに、本発明のキットは、本明細書中に記載される本発明の方法処置方法を含むのいずれかを実施するためのラベルまたは指示書をさらに備え得る。ラベルまたは挿入文書は、構成要素が提供し得る任意の利益例えば、予防的または治療的な利益に関する情報を含み得る。ラベルまたは挿入文書は、潜在的な有害な副作用に関する情報例えば、特定の組成物を使用するのに適切でない可能性がある状況に関する被験体または臨床医に対する警告を含み得る。有害な副作用は、被験体が、組成物と適合しない可能性がある1つ以上の他の医薬を摂取していたとき、摂取することになっているとき、もしくは同時に摂取するとき、または被験体が、組成物と適合しない可能性がある別の処置プロトコルまたは治療レジメンを受けていたとき、受けることになっているとき、もしくは同時に受けるときにも起き得るので、指示書は、そのような不適合性に関する情報を含み得る。本発明のキットは、他の構成要素をさらに備え得る。そのキットの各構成要素は、個別の容器の中に封入され得、その様々な容器のすべてが、単一の包装の中に入れられ得る。本発明のキットは、冷蔵保存用に設計され得る。本発明のキットは、さらに、本発明の結合体を発現するかまたは結合体をコードする核酸を含む宿主細胞を含むように設計され得る。そのキット内の細胞は、その細胞を使用する準備が整うまで、適切な保存条件下で維持され得る。例えば、1種以上の細胞を備えるキットは、それらの細胞が解凍され得、増殖され得るように、適切な細胞保存培地を備え得る。別段定義されない限り、本明細書中で使用されるすべての専門用語および科学用語は、本発明が属する分野の当業者が通常理解している意味と同じ意味を有する。本明細書中に記載される方法および材料と類似または等価な方法および材料を本発明の実施または試験において使用することができるが、好適な方法および材料が本明細書中に記載される。本明細書中に引用されるすべての出願、刊行物、特許および他の参考文献、GenBank引用およびATCC引用は、それらの全体が参考として援用される。矛盾する場合、定義を含む本明細書が支配するものとする。本明細書中で使用されるとき、単数形a、およびおよびtheは、文脈が明らかに別のことを示さない限り、複数の指示対象を含む。したがって、例えば、結合体またはHer2/neuに結合するリガンドまたは溶解性ドメインに対する言及は、複数のそのような結合体、リガンドまたは溶解性ドメインなどを含む。本明細書中で使用されるとき、数値は、本文書全体を通じてしばしば範囲の形式で示される。範囲の形式の使用は、単に便宜のためおよび簡潔さのためであり、文脈が明らかに別のことを示さない限り、本発明の範囲に対する確固たる限定と解釈されるべきでない。したがって、ある範囲の使用は、文脈が明らかに別のことを示さない限り、すべての可能性のある部分的な範囲、その範囲内のすべての個別の数値、ならびにその範囲内の整数およびその範囲内の値の分数または整数を含むすべての数値または数値範囲を明確に含む。この解釈は、その範囲の幅に関係なく、かつ本特許文書全体のすべての文脈において、適用される。したがって、例えば、90~100の範囲に対する言及は、91~99、92~98、93~95、91~98、91~97、91~96、91~95、91~94、91~93などを含む。90~100の範囲に対する言及はまた、91、92、93、94、95、95、97など、ならびに91.1、91.2、91.3、91.4、91.5など、92.1、92.2、92.3、92.4、92.5なども含む。さらに、1~5,000倍の範囲に対する言及は、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20倍など、ならびに1.1、1.2、1.3、1.4、1.5倍など、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5倍など、およびそのような範囲内の任意の数値範囲例えば、1~2、5~10、10~50、50~100、100~500、100~1000、500~1000、1000~2000、1000~5000などを含む。さらなる例において、KD10-5M~約KD10-13Mの範囲に対する言及は、そのような値以内のまたはそのような値を包含する任意の数値または数値範囲を含む。本明細書中で使用されるように、一連の範囲が本文書全体を通じて開示される。一連の範囲の使用は、別の範囲を提供するより高い範囲およびより低い範囲の組み合わせを含む。この解釈は、その範囲の幅に関係なく、かつ本特許文書全体のすべての文脈において、適用される。したがって、例えば、5~10、10~20、20~30、30~40、40~50、50~75、75~100、100~150および150~171などの一連の範囲に対する言及は、5~20、5~30、5~40、5~50、5~75、5~100、5~150、5~171および10~30、10~40、10~50、10~75、10~100、10~150、10~171および20~40、20~50、20~75、20~100、20~150、20~171などの範囲を含む。本発明は、通常、多数の実施形態を記載するために肯定的な言語を用いて本明細書中に開示される。本発明はまた、特定の主題例えば、物質もしくは材料、方法の工程および条件、プロトコル、手順、アッセイまたは解析が全部または部分的に排除される実施形態を明確に含む。したがって、本発明は、本発明が含まないものに関して本明細書中に広く表現されなかったとしても、それにもかかわらず、本発明に明白に含まれない態様が、本明細書中に開示される。本発明のいくつかの実施形態が記載されている。それにもかかわらず、本発明の精神および範囲から逸脱することなく様々な改変が行われ得ると理解されるだろう。したがって、以下の実施例は、請求項に記載される本発明の範囲を限定するのではなく、例証すると意図される。実施例1インビトロ研究において組換え的に生成された抗体の細胞傷害性を測定するために抗体として、Her-2レセプターに対するscFv-CH3を、溶解性ペプチドであるPhor-18KFAKFAKKFAKFAKKFAKまたはKLAKLAK2KLAKに結合体化した。様々なリンカーGSおよびNRVRRS、および抗体分子1つあたり1または2分子の溶解性ペプチドを研究した。研究されたペプチドは:Phor18-scFv-CH3-Phor-182分子のPhor-18が抗体のNおよびC末端に接続されたもの、scFV-CH3-GS-Phor-181分子のPhor-18がC末端においてGSリンカーによって抗体に接続されたもの、scFV-CH3-GS-KLAKLAK2KLAK1分子のKLAKLAK2KLAKがC末端においてGSリンカーによって抗体に連結されたもの、scFV-CH3--NRVRRS-Phor-181分子のPhor-18がC末端においてNRVRRSリンカーによって抗体に連結されたもの、およびscFV-CH3-NRVRRS-KLAKLAK2KLAK1分子のKLAKLAK2KLAKがC末端においてNRVRRSリンカーによって抗体に連結されたものだった。Her-2レセプター陽性細胞SKBR-3およびSKOV-3、それぞれヒト乳がん細胞およびヒト卵巣がん細胞およびHer-2レセプター陰性乳がん細胞MDA-MB-231において、細胞傷害性を裸の抗体溶解性ペプチドを有しない抗体と比較した。実施例2この実施例では、本明細書中に記載される研究において使用された様々な材料および方法を記載する。材料:組換えDNA法を用いることにより、抗Her2抗体を組換え抗体として大腸菌において合成した。scFV-CH3抗体OlafsenT.ら、ProteinEngineering,DesignSelection17,315-323,2004を、表1に記載されるようにペプチドリンカーを介してまたはリンカーなしで、Phor-18または両親媒性アルファ-ヘリックス溶解性ペプチドKLAKLAK2KLAKのいずれかに結合体化し、インビトロにおいて細胞傷害性について解析した。そのプラスミドは、遺伝子のコドン最適化によって得た。その遺伝子を、N-Hisタグ配列とともに合成し、そのプラスミドを大腸菌発現ベクターpUC57にサブクローニングした。発現の最適化および評価の後、His-タグ産物を選択し、1Lの細菌発現産物を、1工程の親和性精製において精製した。各構築物に対するプラスミド遺伝子挿入物の配列を、表1に記載する。表1:組換えHer2/neu抗体および抗体結合体の各々を生成するためのプラスミド挿入物のヌクレオチド配列。モノクローナル抗Her2抗体IgG1MAbへのPhor-18の化学的結合体化:リン酸緩衝食塩水PBS中の精製された抗体を、およそ2mg/mLの濃度に濃縮する。N-スクシニジル-3-2-ピリジロチオプロピオネートSPDPの20mM溶液を、新たにジメチルスルホキシドDMSO中に調製し、その抗体溶液に20倍過剰で加える。その混合物を室温で約30分間インキュベートすることにより、抗体-リンカー中間体を生成する。過剰な未反応のSPDPをサイズ排除により除去する。システインを含む細胞傷害性分子を、10倍過剰のレダクタクリルreductacryl試薬との反応によって完全に還元した後、抗体-リンカー構築物と10倍過剰で混合する。その反応物を室温で18時間インキュベートし、次いで、脱塩することにより、未反応の細胞毒分子を除去する。その溶液を、貯蔵前に濾過滅菌する。インビトロ:組換え抗体調製物結合体化されたものおよび結合体化されていないものの細胞傷害性を測定するために、インビトロ細胞傷害性研究を行い、溶解性ペプチドPhor-18をコントロールインキュベーションにおいて使用した。96ウェルプレートにおいて2,000細胞/ウェルで細胞を調製し、48時間にわたって接着させた。凍結乾燥された形態のPhor-18を新たに食塩水に溶解し、0、0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1、10、25および100μMと濃度を上げながらマルチウェルプレートに加えた。Tris/HCL緩衝液中の、Her2抗体-Phor-18結合体Phor18-scFV-CH3-Phor-18、scFV-CH3-GS-Phor-18、scFV-CH3-NRVRRS-Phor-18、Her2抗体-KLAKLAK2KLAKscFV-CH3-GS-KLAKLAK2KLAKおよびscFV-CH3-NRVRRS-KLAKLAK2KLAKまたはscFV-CH3-レセプター抗体裸を、食塩水で希釈し、0、0.0012、0.012、0.12、1.2、6.0、12.0、120、360および720nMと濃度を上げながら細胞に加えた。37°Cにおいて48時間インキュベーションを行った。ホルマザン変換アッセイMTTアッセイを用いて細胞生存率を測定した。コントロールは、0および100細胞死に対する参照として、それぞれUSP食塩水または0.1TritonX-100TMを含んだ。すべてのデータを、GraphPadPrizm4TMソフトウェアGraphPadPrizm,Incを用いて処理し、解析した。実施例3この実施例では、抗Her2-Phor-18抗体結合体がher2発現乳がん細胞を殺滅したことを示唆する研究を記載する。表2に示されるように、抗Her2-Phor-18抗体結合体Phor18-scFV-CH3-Phor-18、scFV-CH3-GS-Phor-18、scFV-CH3-NRVRRS-Phor-18は、48時間後までにHer2陽性のヒト乳がんSKBR-3およびヒト卵巣がんSKOV-3細胞株を殺滅した一方で、Her2陰性ヒト乳がんMDA-MB-231細胞株は、殺滅されなかった。細胞傷害性の証拠は、インキュベーションの24時間後でも顕微鏡によって観察された。予想どおり、結合体化されていないPhor-18は、適度の細胞傷害性しか示さなかった。Phor-18に結合体化されたHER2抗体は、溶解性ペプチドKLAKLAK2KLAKに結合体化された抗体よりも有意に細胞傷害性だった図1、表2。Her2陰性MDA-MB-231細胞が、いずれの組換え抗体-溶解性ペプチド結合体によっても殺滅されなかったことから、それらの抗体の細胞傷害性は、Her2/neuレセプターによって媒介されたことが示唆される。裸の結合体化されていない抗体scFV-CH3は、3つすべての細胞株において細胞傷害性でなかったことから、その抗体-溶解性ペプチド結合体の細胞殺滅特性が、溶解性ペプチドの負荷の存在および溶解性ペプチドの配列に起因したと示唆される。また、予想どおり、結合体化されていないPhor-18は、すべての細胞株において非常に最小の非特異的な細胞傷害性しか示さなかった表2。表2:Her2レセプター陽性SKOV-3、SKBR-3およびHer2レセプター陰性MDA-MB-231がん細胞における、抗Her2-Phor-18抗体結合体scFV-CH3-Phor-18および-scFV-CH3-KLAKLAK2KLAK結合体、Her2/neuscFV-CH3ならびに結合体化されていないPhor-18のインビトロ細胞傷害性。値は、nMの単位で表わされるIC50である。上記の結果は、組換え的に生成されたHer2抗体scFV-CH3-Phor-18およびHer2抗体scFV-CH3-KLAKLAK2KLAK結合体が、Her2/neuレセプター発現細胞株に対してナノモルの範囲において活性であることを示唆している。結合体化されていない抗体または遊離溶解性ペプチドPhor-18は、効果がなかったことから、Her2/neuレセプターに結合するリガンド例えば、抗体に対する溶解性ペプチドの結合体化が、細胞傷害性の効力を増強すると示唆される。実施例4この実施例には、溶解性ペプチドPhor-18KFAKFAKKFAKFAKKFAKに結合体化された、Her-2レセプターに対する組換え的に生成された抗体scFV-CH3-GS-Phor-18、および化学的に結合体化されたMAb-Phor18結合体の、Her2陽性卵巣がん細胞株SKOV-3に対するインビトロ細胞傷害性研究の説明が含まれる。96ウェルプレートにおいて5,000細胞/ウェルで細胞を調製し、48時間にわたって接着させた。MAb-Phor18、scFV-CH3-GS-Phor-18、scFV-CH3を食塩水に希釈し、0、0.0012、0.012、0.12、1.2、6.0、12、120、360および720nMと濃度を上げながら加えた濃度1つあたりN=8データポイント。37°Cにおいて24時間インキュベーションを行った。ホルマザン変換アッセイMTTアッセイを用いて細胞生存率を測定した。コントロールは、0および100細胞死に対する参照として、それぞれUSP食塩水または0.1TritonX-100TMを含んだ。GraphPadPrizm4TMソフトウェアGraphPadPrizm,Incを用いてデータを処理し、解析した。有意性に対する統計解析を両側のスチューデントのT検定によって行った。ホールMAb-Phor-18では、60.53±3.8nMのIC50値をもたらし、scFV-CH3-GS-Phor-18は、59.8±3.8nMだった。裸の結合体化されていない抗体MAbおよびscFV-CH3は、細胞傷害性でなかった。インビトロにおいて、化学的に連結されたHER2抗体MAb-Phor18および組換えPhor18結合体scFV-CH3-GS-Phor-18は、SKOV-3細胞に対して類似の毒性を示した一方で、裸の組換え抗体scFV-CH3は、毒性でなかった。実施例5この実施例では、様々な用量の抗Her2-Phor-18抗体結合体scFV-CH3-GS-Phor-18、MAb-Phor18、裸のホール抗体MAbおよび裸の組換え抗体scFV-CH3での処置を用いた、ヒト卵巣がんのマウス異種移植片モデルにおけるインビボ研究を記載する。雌Nu/Nuマウスの皮下にSKOV-3/Matrigel懸濁液4×106細胞を注射した。42日目に殺傷されたマウスの腫瘍重量をベースラインとした。簡潔には、130.3±10.25mm3という腫瘍体積の中央値の腫瘍に対して腫瘍細胞注射後の43日目に処置を開始し、処置を外側尾静脈への単回のボーラス注射として47、50、54、57および60日目に続けた。この研究全体にわたって、腫瘍の体積を1週間に2回測定し、体重を計測した。最後のネクロプシーを、腫瘍細胞注射後の64日目に行い、腫瘍を切除し、計量し、組織学的評価のためにホルマリン中で固定した。処置は:食塩水コントロール、裸のモノクローナルホール抗Her2抗体であるMAb3mg/kg、裸の組換えHer2抗体scFV-CH33mg/kg、scFV-CH3-GS-Phor-180.3および3mg/kg、MAb-Phor-180.3および3mg/kgだった。処置開始時に屠殺されたマウスの腫瘍を、Her2/neuレセプターの免疫組織化学評価に供した。各群は、8~9匹のマウスからなった。マウスのすべての群が、注射を十分許容した。マウスは、注射の結果として死亡することはなかった。抗体に結合体化されたPhor-18の注射および裸の抗体の、最初の腫瘍に対する作用体積および腫瘍重量、図2A、2Bおよび3および体重に対する作用を図4に図示する。図2Aおよび2Bは、研究経過中の腫瘍体積の中央値、ならびに食塩水コントロール、ならびにMAb裸3mg/kg、scFV-CH33mg/kg、scFV-CH3-GS-Phor-180.3および3mg/kg、MAb-Phor-180.3および3mg/kgで処置されたマウスの各個別の処置群に対する64日目の平均腫瘍重量を示している。腫瘍の体積および重量は、3mg/kgの化学的に連結されたMAb-Phor-18p<0.04または組換え的に生成されたscFV-CH3-Phor-18結合体p<0.02で処置されたすべての動物において有意に減少した。裸のMAbまたはscFV-CH3は、3mg/kgの用量において、食塩水コントロールと比べて腫瘍体積または腫瘍重量を減少させなかった図2A、2Bおよび3。Graphpadprizm4においてウィルコクソンの符号順位検定を用いて統計解析を行った。体重は、すべての処置群およびコントロール動物において安定していた図4。実施例6この実施例では、溶解性ペプチドPhor-18KFAKFAKKFAKFAKKFAKに結合体化された、Her-2レセプターに対する組換え的に生成された抗体の、卵巣がん細胞に対するインビトロ細胞傷害性研究を記載する。scFv-CH2-CH3-GS-Phor-181分子のPhor-18が、VL--Gリンカー--VH-CH2-CH3--Gリンカー-CH3-CH2--VH---Gリンカー-VL-GS-Phor-18からなるGSリンカーによってC末端において抗体に接続されたもの。Her-2レセプター陽性細胞SKOV-3,ヒト卵巣がん細胞における裸の抗体scFv-CH2-CH3;溶解性ペプチドなしの抗体と細胞傷害性を比較した。材料:組換えDNA法を用いることにより、抗Her2抗体をscFv-CH2-CH3抗体として大腸菌において合成した。その抗体OlafsenT.ら、ProteinEngineering,DesignSelection17,315-323,2004を、ペプチドリンカーを介していずれかのPhor-18に結合体化し、インビトロにおける細胞傷害性について解析した。そのプラスミドは、遺伝子のコドン最適化によって得た。その遺伝子を、N-Hisタグ配列とともに合成し、そのプラスミドを大腸菌発現ベクターpUC57にサブクローニングした。発現の最適化および評価の後、His-タグ産物を選択し、1Lの細菌発現産物を、1工程の親和性精製において精製した。各構築物に対するアミノ酸配列を、表3に記載する。表3:各組換え抗体、AscFv-CH2-CH3;および抗体結合体BscFv-CH2-CH3-GS-Phor-18を生成するためのアミノ酸配列インビトロ細胞傷害性研究を行うことにより、組換え抗体調製物scFv-CH2-CH3、scFV-CH3およびscFv-CH2-CH3-GS-Phor-18、scFV-CH3-GS-Phor-18の細胞傷害性を測定した。Her-2レセプター陽性SKOV-3細胞を、96ウェルプレートにおいて2,000細胞/ウェルで調製し、48時間にわたって接着させた。Tris/HCL緩衝液中のHer2抗体-Phor-18結合体scFv-CH2-CH3-GS-Phor-18、scFV-CH3GS-Phor-18または裸の抗体scFv-CH2-CH3、scFV-CH3を、食塩水で希釈し、0、0.0012、0.012、0.12、1.2、6.0、12.0、120、360および720nMと濃度を上げながら細胞に加えた。37°Cにおいて48時間インキュベーションを行った。CellTiterGlo発光細胞生存率アッセイPromegaを用いて細胞生存率を測定した。コントロールは、0および100細胞死に対する参照として、それぞれUSP食塩水または0.1TritonX-100TMを含んだ。すべてのデータを、GraphPadPrizm4TMソフトウェアGraphPadPrizm,Incを用いて処理し、解析した。Phor-18に結合体化されたHer2抗体scFv-CH2-CH3、scFV-CH3は、scFV-CH3-Phor18の場合は53.7±0.63nMおよびscFv-CH2-CH3-Fv-Phor-18の場合は56.7±0.92nMというIC50値をもたらした。裸の結合体化されていない抗体であるscFv-CH2-CH3、scFV-CH3は、細胞傷害性でなかった。インビトロにおける組換えPhor-18結合体は、SKOV-3細胞に対して類似の毒性を示す。"