"ヒトC反応性タンパク質遺伝子の遺伝子多型を同定することにより、ガンのリンパ節転移またはそのリスクを判定する方法。SNP識別番号rs1205の遺伝子多型を同定することにより、ガンのリンパ節転移またはそのリスクを判定する請求項1に記載の方法。SNP識別番号rs1205の遺伝子多型がTTタイプであるときに高リスクと判定する請求項2に記載の方法。遺伝子多型の同定をRFLPまたは対応する相補鎖配列との結合により行なう請求項1~3のいずれかに記載の方法。遺伝子多型の同定をPCRRFLPにより行なう請求項4に記載の方法。PCRにおけるプライマーとしてForwardプライマー5CTTATAGACCTGGGCAGT3、Reverseプライマー5GGAGTGAGACATCTTCTTG3を用い、制限酵素としてBst4CIを用いる請求項5に記載の方法。ガンが固形ガンである請求項1~6のいずれかに記載の方法。ヒトC反応性タンパク質遺伝子の塩基配列のSNP識別番号rs1205を含む領域を増幅するためのプライマーとRFLPによりSNP識別番号rs1205の遺伝子多型を判定するための制限酵素を含むガンのリンパ節転移またはそのリスクを判定するためのPCRRFLP用迅速判定キット。プライマー対としてForwardプライマー5CTTATAGACCTGGGCAGT3、Reverseプライマー5GGAGTGAGACATCTTCTTG3を含む請求項8に記載の迅速判定キット。制限酵素Bst4CIを含む請求項9に記載の迅速判定キット。ヒトC反応性タンパク質遺伝子のSNP識別番号rs1205の塩基を解析するための核酸であって、ヒトC反応性タンパク質遺伝子のSNP識別番号rs1205の塩基を含み、かつ配列番号1及び配列番号2のプライマーを用いたPCR法によって増幅され得る領域に由来するDNA断片に対して特異的にハイブリダイズする核酸。ヒトC反応性タンパク質遺伝子の遺伝子多型を同定する際に使用する試料が、全血、白血球、ガン原発巣、リンパ管、リンパ節組織からなる群より選ばれる、請求項1~7に記載の方法。従来公知の分子診断的手法によるガン細胞のリンパ節転移判定法では、特許文献1乃至3の方法に見られるように、リンパ節転移を確実に判定しようとすると、多数の分子マーカーを判定のための因子として総合的に検討する必要性や、患者への負担が大きく、かつ試料の調製に相当な時間と労力を必要とするリンパ節を試料とする必要があった。また、CRPは、そのタンパク濃度が、年齢や喫煙、他の炎症などの影響も受けて容易に変動する上、CRP717TC遺伝子多型がガン細胞のリンパ節転移と関係するとした非特許文献11の結果も後に否定されている。したがって、ガン細胞のリンパ節転移を迅速かつ確実に判定する新たな分子マーカーとそれを用いた分子診断的手法が求められている。上述の通り、血清中の高CRP濃度は特定のCRP遺伝子多型と関連している。しかるに、本発明者らは、血清中の高CRP濃度と関連するCRP遺伝子多型がガン進展因子となり得るという従来の予想からは全く想定されない、SNP識別番号rs1205本明細書においてCRP1846CTと表記することがある遺伝子多型を分子マーカーとして用いればガンのリンパ節転移の判定精度が飛躍的に向上し、極めて有用であるという予想外の事実を見出し、本発明を完成するに至った。ここで、SNP識別番号rs1205CRP1846CTrs1205遺伝子多型は、CRP遺伝子の非転写領域における1塩基変異である一方、血清CRP濃度の減少と相関することが報告されている遺伝子多型である。本発明は、以下の判定方法及び判定キットを提供する。1ヒトC反応性タンパク質遺伝子の遺伝子多型を同定することにより、ガンのリンパ節転移またはそのリスクを判定する方法。2SNP識別番号rs1205の遺伝子多型を同定することにより、ガンのリンパ節転移またはそのリスクを判定する前記1に記載の方法。3SNP識別番号rs1205の遺伝子多型がTTタイプであるときに高リスクと判定する前記2に記載の方法。4遺伝子多型の同定をRFLPまたは対応する相補鎖配列との結合により行なう前記1~3のいずれかに記載の方法。5遺伝子多型の同定をPCRRFLPにより行なう前記4に記載の方法。6PCRにおけるプライマーとしてForwardプライマー5CTTATAGACCTGGGCAGT3、Reverseプライマー5GGAGTGAGACATCTTCTTG3を用い、制限酵素としてBst4CIを用いる前記5に記載の方法。7ガンが固形ガンである前記1~6のいずれかに記載の方法。8ヒトC反応性タンパク質遺伝子の塩基配列のSNP識別番号rs1205を含む領域を増幅するためのプライマーとRFLPによりSNP識別番号rs1205の遺伝子多型を判定するための制限酵素を含むガンのリンパ節転移またはそのリスクを判定するためのPCRRFLP用迅速判定キット。9プライマー対としてForwardプライマー5CTTATAGACCTGGGCAGT3、Reverseプライマー5GGAGTGAGACATCTTCTTG3を含む前記8に記載の迅速判定キット。10制限酵素Bst4CIを含む前記9に記載の迅速判定キット。[11]ヒトC反応性タンパク質遺伝子のSNP識別番号rs1205の塩基を解析するための核酸であって、ヒトC反応性タンパク質遺伝子のSNP識別番号rs1205の塩基を含み、かつ配列番号1及び配列番号2のプライマーを用いたPCR法によって増幅され得る領域に由来するDNA断片に対して特異的にハイブリダイズする核酸。[12]ヒトC反応性タンパク質遺伝子の遺伝子多型を同定する際に使用する試料が、全血、白血球、ガン原発巣、リンパ管、リンパ節組織からなる群より選ばれる、前記1~7に記載の方法。CRPの産生は、各種のサイトカインと関係していることも知られているが、本発明の方法は、各種サイトカイン濃度とも関係なく、それのみでガン細胞のリンパ節転移を有効に予測判定できる。本発明のSNP識別番号rs1205CRP1846CTrs1205遺伝子多型によるガンのリンパ節転移判定法は、従来の方法に比べて簡便であるにも関わらず、極めて精度が高い。すなわち、SNP識別番号rs1205CRP1846CTrs1205遺伝子多型を用いることにより、有意差をもって判定することが可能になった。ガンの進展において重要な事象であるリンパ節転移を有効に予測判定できるため、リンパ節郭清を伴う外科手術、リンパ節郭清を伴わない内視鏡的切除、化学放射線療法、化学療法、放射線療法などの選択肢の中から、最も確実かつ最も低侵襲的な治療法を選択可能とするものであり、治療戦略を決定する上での臨床的意味は極めて大きい。本発明方法は、治療前診断は画像診断に頼らざるを得ないが、現状では精度が低く、その一方、確実な診断は病理診断によりなされるがこれは治療手術後の診断である、という現在のガン細胞のリンパ節転移の診断が有する課題を同時に解決することができる。またさらに、本発明の方法では、SNP識別番号rs1205CRP1846CTrs1205遺伝子多型の検出用試料として、リンパ組織リンパ節やリンパ管であることが必須ではなく、末梢血等を使用することができるため、患者への負担が軽減するとともに試料調製が容易になり検査者側の負担も軽減できる。Aリンパ節転移またはそのリスクの判定方法本発明で用いるCRP遺伝子はCRPに対応する遺伝子である。CRPは、炎症に反応して主として肝細胞によって産生される急性期タンパク質の一種であり、従来、その血清中濃度は、様々な急性または慢性の炎症性疾患のマーカーとして用いられている。その名称は肺炎双球菌のC多糖体と沈降反応を示す血清タンパク質であることに由来し、感染、炎症、組織損傷などによって血中濃度が02μgmLから数百倍から千倍に激増する。CRPは、分子量が約13万で、同一サブユニット5個からなる5量体であり、そのアミノ酸配列は血清アミロイドのPタンパク質、補体C1の一部と相同性がある。CRP遺伝子は、全塩基配列が解明されており、例えば、NCBIのwebサイトからAccessionNoNG013007として確認することができるhttpwwwncbinlmnihgovnuccoreNG0130071reportgbwithpartslogseqviewfrom5000to7300当該全配列については表A参照。表A1taaggcaagagatctaggacttctagcccctgaactttcagccgaatacatcttttccaa61aggagtgaattcaggcccttgtatcactggcagcaggacgtgaccatggagaagctgttg121tgtttcttggtcttgaccagcctctctcatgcttttggccagacaggtaagggccacccc181aggctatgggagagatttgatctgaggtatgggggtggggtctaagactgcatgaacagt241ctcaaaaaaaaaaaaaaaagactgtatgaacagaacagtggagcatccttcatggtgtgt301gtgtgtgtgtgtgtgtgtgtgtgtgtgtgtgtggtgtgtaactggagaaggggtcagtct361gtttctcaatcttaaattctatacgtaagtgaggggatagatctgtgtgatctgagaaac421ctctcacatttgcttgtttttctggctcacagacatgtcgaggaaggcttttgtgtttcc481caaagagtcggatacttcctatgtatccctcaaagcaccgttaacgaagcctctcaaagc541cttcactgtgtgcctccacttctacacggaactgtcctcgacccgtgggtacagtatttt601ctcgtatgccaccaagagacaagacaatgagattctcatattttggtctaaggatatagg661atacagttttacagtgggtgggtctgaaatattattcgaggttcctgaagtcacagtagc721tccagtacacatttgtacaagctgggagtccgcctcagggatcgtggagttctgggtaga781tgggaagcccagggtgaggaagagtctgaagaagggatacactgtgggggcagaagcaag841catcatcttggggcaggagcaggattccttcggtgggaactttgaaggaagccagtccct901ggtgggagacattggaaatgtgaacatgtgggactttgtgctgtcaccagatgagattaa961caccatctatcttggcgggcccttcagtcctaatgtcctgaactggcgggcactgaagta1021tgaagtgcaaggcgaagtgttcaccaaaccccagctgtggccctgaggcccagctgtggg1081tcctgaaggtacctcccggttttttacaccgcatgggccccacgtctctgtctctggtac1141ctcccgcttttttacactgcatggttcccacgtctctgtctctgggcctttgttccccta1201tatgcattgcaggcctgctccaccctcctcagcgcctgagaatggaggtaaagtgtctgg1261tctgggagctcgttaactatgctgggaaacggtccaaaagaatcagaatttgaggtgttt1321tgttttcatttttatttcaagttggacagatcttggagataatttcttacctcacataga1381tgagaaaactaacacccagaaaggagaaatgatgttataaaaaactcataaggcaagagc1441tgagaaggaagcgctgatcttctatttaattccccacccatgacccccagaaagcaggag1501ggcattgcccacattcacagggctcttcagtctcagaatcaggacactggccaggtgtct1561ggtttgggtccagagtgctcatcatcatgtcatagaactgctgggcccaggtctcctgaa1621atgggaagcccagcaataccacgcagtccctccactttctcaaagcacactggaaaggcc1681attagaattgccccagcagagcagatctgctttttttccagagcaaaatgaagcactagg1741tataaatatgttgttactgccaagaacttaaatgactggtttttgtttgcttgcagtgct1801ttcttaattttatggctcttctgggaaactcctccccttttccacacgaaccttgtgggg1861ctgtgaattctttcttcatccccgcattcccaatatacccaggccacaagagtggacgtg1921aaccacagggtgtcctgtcagaggagcccatctcccatctccccagctccctatctggag1981gatagttggatagttacgtgttcctagcaggaccaactacagtcttcccaaggattgagt2041tatggactttgggagtgagacatcttcttgctgctggatttccaagctgagaggacgtga2101acctgggaccaccagtagccatcttgtttgccacatggagagagactrtgaggacagaag2161ccaaactggaagtggaggagccaagggattgacaaacaacagagccttgaccacgtggag2221tctctgaatcagccttgtctggaaccagatctacacctggactgcccaggtctataagcc2281aataaagcccctgtttacttg遺伝子多型とは、遺伝学的には、人口中1以上の頻度で存在している1遺伝子における特定の塩基の変化変異と一般的には定義されるが、CRP遺伝子における遺伝子多型は多数知られており、本発明ではSNP識別番号rs1205の遺伝子多型本明細書において、CRP1846CTrs1205遺伝子多型と記載することがあるを好適に利用できる。SNP識別番号rs1205の遺伝子多型は、前記表Aに記載されたCRP遺伝子の塩基配列上の2148番目の塩基rで示される塩基における多型である。尚、rはGグアニン又はAアデニンであることを意味する。また、前記表Aに記載されたCRP遺伝子の塩基配列の相補的な配列において、SNP識別番号rs1205における多型周辺の配列を次の表Bに示す。表B1CTTTAGTTTTTGCTCCTCAAATTGGAATAATGATAGAATGAGAGTACTAAAACCCCCACA61ACTGGCCCTACATGAATGGCCAGCTATCTCAAAAGAGGGACTGTGCTTGTCAGAGGGAAT121CCCTTCAGGGGACTCTTGGACAGGTTAAAGTGCCATGGATATGTTGTGTAATGGGAAGTG181TAAACTTACAGGGACTTGATTTCAAAGGTCATTAGAGAAGTTAGCCACAACTTCTAAAGC241AACTATCAGAAAACAGCTTGGACTCACTCAAGTAAACAGGGGCTTTATTGGCTTATAGAC301CTGGGCAGTCCAGGTGTAGATCTGGTTCCAGACAAGGCTGATTCAGAGACTCCACGTGGT361CAAGGCTCTGTTGTTTGTCAATCCCTTGGCTCCTCCACTTCCAGTTTGGCTTCTGTCCTC421AYAGTCTCTCTCCATGTGGCAAACAAGATGGCTACTGGTGGTCCCAGGTTCACGTCCTCT481CAGCTTGGAAATCCAGCAGCAAGAAGATGTCTCACTCCCAAAGTCCATAACTCAATCCTT541GGGAAGACTGTAGTTGGTCCTGCTAGGAACACGTAACTATCCAACTATCCTCCAGATAGG601GAGCTGGGGAGATGGGAGATGGGCTCCTCTGACAGGACACCCTGTGGTTCACGTCCACTC661TTGTGGCCTGGGTATATTGGGAATGCGGGGATGAAGAAAGAATTCACAGCCCCACAAGGT721TCGTGTGGAAAAGGGGAGGAGTTTCCCAGAAGAGCCATAAAATTAAGAAAGCACTGCAAG781CAAACAAAAACCAGTCATTTAAGTTCTTGGCAGTAACAACATATTTATACCTAGTGCTTC841ATTTTGCTCTGGAAAAAAAGCAGATCTGCTCTGCTGGGGCAATTCTAATGGCCTTTCCAG901TGTGCTTTGAGAAAGTGGAGGSNP識別番号rs1205は、前記表Bに記載された塩基配列上の422番目の塩基Yで示される塩基における多型である。尚、Yは、Cシトシン又はTチミンであることを意味する。本発明はこの塩基の型が、CCワイルド、CTヘテロ、TTホモのいずれのタイプであるかを同定することにより、ガンのリンパ節転移又はそのリスクを判定するものである。SNP識別番号rs1205は、米国のNCBINationalCenterforBiotechnologyInformationのSNPデータベースdbSNPに登録されているSNPの識別番号であり、rs1205で登録されているSNPの情報はNCBIのサイトhttpwwwncbinlmnihgovprojectsSNPから入手することができる。SNP識別番号rs1205CRP1846CTrs1205遺伝子多型の同定は、遺伝子多型の検出が可能な公知の種々の方法によって行うことができ特に限定されるものではない。例えば、PCRpolymerasechainreaction法を利用したPCRRFLPrestrictionfragmentlengthpolymorphism:制限酵素断片長多型法、PCRSSCPsinglestrandconformationpolymorphism:単鎖高次構造多型法OritaMetalProcNatlAcadSciUSA8627662770等、PCRSSOspecificsequenceoligonucleotide:特異的配列オリゴヌクレオチド法、PCRSSO法とドットハイブリダイゼーション法を組み合わせたASOallelespecificoligonucleotide:アレル特異的オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーション法SaikiNature324163166等、又はTaqManPCR法LivakKJk,GenetAnal14143MorrisTetalJClinMicrobiol342933、Invader法LyamichevetalNatBiotechnol17292、プライマー伸長法を用いたMALDITOFMSmatrix法HaffLASmirnovIPGenomeRes7378、RCArollingcicleamplification法LizardiPMetalNatGenet19225、DNAチップ又はマイクロアレイを用いた方法WangDGetalScience2801077等、プライマー伸長法、サザンブロットハイブリダイゼーション法、ドットハイブリダイゼーション法SouthernEJMolBiol98503517等、公知の解析方法を用いることができる。さらに、当該配列部分を直接シークエンスすることにより解析してもよい。尚、これらの方法は、任意に組み合わせて用いることもできる。また、上記の方法を実施するにあたり、表A又は表Bに記載された塩基配列から適宜プライマーやプローブなどを設計することができる。上記同定方法の実施にあたり、被験DNAが少量の場合には、PCR法を利用したPCRRFLP法等により同定することが検出感度ないし精度の面から好ましい。また、PCR法又はPCR法に準じた遺伝子増幅方法により被験DNAを予め増幅した後、上記いずれかの同定方法を適用することもできる。一方、多数の被験DNAについて同定する場合には、特にDNAチップやマイクロアレイを用いた方法、Invader法、TaqManPCR法、プライマー伸長法を用いたMALDITOFMSmatrix法又はRCA法を用いることが好ましい。上述した同定方法のうち、被験DNAが少量の場合に好適な方法、および多数の被験DNAについて同定する場合に好適な方法についてそれぞれ代表的な方法を例に説明する。被験DNAが少量の場合には好適な方法は、当業者に周知の方法で患者からDNA試料を調製し、次いで、調製したDNA試料を制限酵素により切断し、次いで、DNA断片をその大きさに応じて分離を行い、次いで、検出されたDNA断片の大きさを対照と比較する方法である。一般的には、まず、患者からDNA試料を調製し、次いで、CRP遺伝子を含むDNAを増幅する。さらに、増幅したDNAを制限酵素により切断する。次いで、DNA断片をその大きさに応じて分離し、検出されたDNA断片の大きさを対照と比較する。このような方法としては、例えば、制限酵素断片長多型を利用する方法やPCRRFLP法等が挙げられる。すなわち、制限酵素の認識部位に変異が存在する場合、あるいは制限酵素処理によって生じるDNA断片内に塩基挿入または欠失がある場合、制限酵素処理後に生じる断片の大きさが対照と比較して変化する。この変異を含む部分をPCR法によって増幅し、それぞれの制限酵素で処理することによって、これらの変異を電気泳動後のバンドの移動度の差として検出することができる。あるいは、患者からDNA試料ゲノム染色体DNAが使用できるを調製し、制限酵素によって処理し、電気泳動した後、標的核酸とハイブリダイズし得るプローブDNAを用いてサザンブロッティングを行うことにより、多型変異の有無を検出することができる。用いられる制限酵素は、それぞれの変異に応じて適宜選択することができる。この方法では、ゲノムDNA以外にも患者から調製したRNAを逆転写酵素でcDNAに変換し、これをそのまま制限酵素で切断した後、サザンブロッティングを行うことも可能である。また、このcDNAを鋳型としてPCRでCRP遺伝子を含むDNAを増幅し、それを制限酵素で切断した後、移動度の差を調べることも可能である。本発明において用いるプライマーには、CRP遺伝子を含むDNAを増幅し得るものがすべて含まれる。プライマーの塩基長としては10塩基以上が好ましく、15塩基以上がさらに好ましい。また、各プライマーは、単一のオリゴヌクレオチドであってもよく、複数のオリゴヌクレオチドの混合物であってもよい。PCRにおけるプライマーの例としてForwardプライマー5CTTATAGACCTGGGCAGT3、Reverseプライマー5GGAGTGAGACATCTTCTTG3が挙げられる。また、制限酵素としてBst4CIが挙げられる。PCRにおけるプライマー以外の材料や条件、制限酵素の適用、電気泳動や検出などは慣用の方法と同様でよい。上述したサザンブロッティングの際に使用するプローブDNAは、標的核酸にハイブリダイズし得ることを条件として、特に制限されない。標的核酸にハイブリダイズし得るプローブDNAの例として、ヒトCRP遺伝子のSNP識別番号rs1205の塩基を解析するための核酸であって、ヒトCRP遺伝子のSNP識別番号rs1205の塩基を含み、かつ配列番号1及び配列番号2のプライマーを用いたPCR法によって増幅され得る領域に由来するDNA断片に対して特異的にハイブリダイズする核酸が挙げられる。CRP遺伝子は、患者の血液、末梢血白血球、皮膚細胞、粘膜細胞等の細胞、肝臓、腎臓、副腎、脳、子宮等の組織、毛髪等から公知の抽出方法、精製方法を用いて取得することができる。また、本発明において解析される塩基部分を含むものであれば、全長DNA又は部分DNAの別を問わず、本発明におけるCRP遺伝子として用いることができる。換言すれば、SNP識別番号rs1205の塩基を含む限り任意の長さのDNA断片を用いることができる。多数の被験DNAについて同定する場合に好適な方法は、患者から調製したCRP遺伝子を含むDNA、および該DNAとハイブリダイズするヌクレオチドプローブ上述のプローブDNAと同義が固定された基板を用意し、次いで、該DNAと該基板を接触させた後、さらに、基板に固定されたヌクレオチドプローブにハイブリダイズしたDNA標的核酸を検出することにより、PCR遺伝子多型を検出する方法である。このような方法としては、DNAチップ法マイクロアレイ法が例示できる。患者からのCRP遺伝子を含むDNA試料の調製は、上述と同様、当業者に周知の方法で行うことができる。該DNA試料の調製の好ましい態様においては、上述と同様、患者の血液、末梢血白血球、皮膚細胞、粘膜細胞等の細胞、肝臓、腎臓、副腎、脳、子宮等の組織、毛髪等からから抽出したゲノム染色体DNAを基に調製することができる。ゲノム染色体DNAから本方法のDNA試料を調製するには、例えばCRP遺伝子を含むDNAにハイブリダイズするプライマーを用いて、ゲノム染色体DNAを鋳型としたPCR等によってCRP遺伝子を含むDNAを調製することも可能である。調製したDNA試料には、必要に応じて、当業者に周知の方法によって検出のための標識を施すことができる。DNAチップ法では、ガラスなどの基盤上に多種類のプローブDNAを整列化し、固定し、その上で標識DNAのハイブリダイゼーションを行い、プローブ上の標識蛍光などシグナルを検出する方法を利用して、ハイブリダイゼーションで完全マッチと一塩基ミスマッチを分別検出することで、SNP等の遺伝子多型を検出する方法である。以下、多数の被験DNAについて同定する場合に好適な方法の概要を列記する。TaqManPCR法とは、蛍光標識したアレル特異的オリゴとTaqDNAポリメラーゼによるPCR反応とを利用した方法である。Invader法とは、SNP等の遺伝子多型のそれぞれのアレルに特異的な2種類のレポータープローブ及び1種類のインベーダープローブの鋳型DNAへのハイブリダイゼーションと、DNAの構造を認識して切断するという特殊なエンドヌクレアーゼ活性を有する酵素によるDNAの切断を組み合わせた方法である。プライマー伸長反応を利用する方法として、例えばSniPer法を採用することもできる。SniPer法とは、RCA法と呼ばれる手法を基本原理とするものであり、環状の一本鎖DNAを鋳型としてDNAポリメラーゼがその上を移動しながら相補鎖DNAを連続して合成していくものである。この方法によれば、DNA増幅が起こった場合に生じる発色反応の有無を測定することによってSNP等の遺伝子多型を判定できる。MALDITOF/MS法とは、質量分析機massspectrmeterを用いた方法で、基本的には異なる一塩基の質量の違いを利用してSNPをジェノタイピングする方法である。PCR増幅を利用した方法とmultiplexを利用した方法がある。シークエンス法とは、遺伝子多型を含む領域をPCRにて増幅させ、DyeTerminatorなどを用いてDNA配列をシークエンスすることで、SNP等の遺伝子多型特にSNPの頻度を解析する方法である。本発明の判定方法は、様々な段階で適用可能であるが、特に治療戦略の決定において有用性を有する。たとえば、深達度が粘膜下層程度の食道ガン患者においては、従来の方法ではリンパ節転移の判定が難しい。これに対し、本発明では、高精度でリンパ節転移またはそのリスクを判定できるので、不要なリンパ節郭清などを行なってQOLを低下させることも、必要なリンパ節郭清をせずにガンの進展を放置することも回避できる。本発明の方法が適用できるガンの種類は特に限定されないが、固形ガンにはすべて適用可能である。具体的には原発部位が食道、肺、乳腺、頭頸部、胃、大腸、胆道、膵、子宮、卵巣、膀胱、腎、尿路上皮、前立腺のガンに適用可能である。Bリンパ節転移またはそのリスクの迅速判定キット当業者に周知の方法によって本発明のリンパ節転移又はそのリスクの迅速判定キットを調製することができる。キットの形態として、例えば、本発明のプライマーを用いてCRP遺伝子多型の検出を行う際に必要な各種の試薬類は、予めパッケージングしてキット化することができる。具体的には、本発明のプライマーあるいはループプライマーとして必要な各種のオリゴヌクレオチド、核酸合成の基質となる4種類のdNTP、鎖置換活性を有する上記の鋳型依存性核酸合成酵素、酵素反応に好適な条件を与える緩衝液、補助因子としての塩類、酵素や鋳型を安定化する保護剤、さらに制限酵素、及び必要に応じて反応生成物の検出に必要な試薬類がキットとして提供される。また、標的核酸とハイブリダイズし得るプローブDNAを構成試薬としてキット化してもよい。本明細書の各用語は、通常使用されている意味を有するが、ガンのリンパ節転移またはそのリスクを判定する方法において、リンパ節とはリンパ節及びリンパ管を総称して用いる場合やリンパ組織を意味する場合が含まれ、またリンパ節転移の判定とは、リンパ節におけるガン細胞の存在の可能性の有無高低を判定すること、リンパ節転移のリスクの判定とは、ある個体がガンを罹患した場合に、原発巣からリンパ節にガン細胞が転移する可能性の有無高低を判定することが含まれる。以下、実施例により本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらの例に限定されるものではない。なお、以下の実験検査などを含む研究は、秋田大学医学部倫理委員会の承認を得て行なった。また、すべての患者には事前に説明の上、同意を得て行なった。実施例1この例は、胸部食道扁平上皮癌ガン患者113名について行なった。うち38名は、病理学的診断等により食道ガンを確認した上で2007年4月から1年間の間に食道切除を行なった。残る75名は2000年~2007年の間に食道切除術を施術し、その後の経過の観察を行なった者から無作為に抽出した。疾患の分類は国際対ガン協会による腫瘍リンパ節転移分類第6版により行なった。各患者から末梢血を採取し、QIAampBloodKitを用いてDNAを抽出し、分析まで80°Cで保存した。本発明の実施例であるCRP1846CTのほか、CRP多型としては、CRP717CT、CRP1059GC、CRP1444CTを、腫瘍壊死因子としてはTNFα238GA、TNFα308GA、TNFα1031TC、TNFβ250GA、さらに、INFγ874AT、TGFβ129TC、IL1β31CT、IL1β511CT、IL1受容体アンタゴニスト、IL2330TG、IL4590CT、IL6634GC、IL6受容体48892AC、IL10592AC及びIL12β1188ACの18種類の遺伝子多型についてもガンのリンパ節転移との関係を検討した。標的核酸増幅のためのPCRは、抽出したDNAを95°Cで15分間熱変性を行い、95°Cで30秒、56°Cで30秒、72°Cで30秒の反応を35サイクル行った後、72°Cで5分間加熱して行った。CRP1846CT遺伝子多型増幅用のプライマーとしては、Forwardプライマー5CTTATAGACCTGGGCAGT3、Reverseプライマー5GGAGTGAGACATCTTCTTG3を用いた。この上述操作による得られたPCR増幅産物にBst4CIを添加し、65°Cで8時間インキュベートし、電気泳動にてRFLPを行なった。対照として秋田大学病院内においてガン以外の疾病で処置を受けている139名のCRP多型CRP1846CT遺伝子多型及び上述の3種類の遺伝子多型の計4種類も調べた。多型の出現頻度は、ハーディワインベルグ平衡にあると考えた場合と矛盾しない。また、国立がんセンターにおけるSNP500データベースとも同様の結果であった。調べた113名の食道ガン患者のうち、62名はリンパ節転移をしており、51名ではリンパ節転移がなかった。病理学的にリンパ節転移が確認された患者においては、リンパ節転移がない患者に対して有意にガンの深達度が高かったが、年齢、性別、術前の栄養状態、腫瘍マーカー、腫瘍部位及び腫瘍の大きさ、扁平上皮細胞及び壁内転移とリンパ節転移の有無との間に有意の相関はなかった。表1リンパ節転移を伴う患者又は伴わない患者の臨床的特徴参照各種遺伝子多型と病理学的に確認されたリンパ節転移との関連を解析した結果、本発明の実施例であるCRP1846CT遺伝子多型のみがリンパ節転移と有意に関連した。すなわちCRP1846CTrs1205遺伝子多型においてCCおよびCT遺伝子タイプ患者でリンパ節転移を認めたのは25例、転移を認めなかったのは35例であるのに対し、TT遺伝子タイプ患者ではリンパ節転移を認めたのは37例、転移を認めなかったのは16例であった。表2CRP遺伝子多型とリンパ節転移の相関参照これに対し、CRP1059GC遺伝子多型では、GG遺伝子タイプ患者でリンパ節転移を認めたのは58例、転移を認めなかったのは48例であるのに対し、GC遺伝子タイプ患者ではリンパ節転移を認めたのは4例、転移を認めなかったのは3例であった。また、非特許文献11で検討したCRP717TC遺伝子多型では、CRP717TCおよびCC遺伝子タイプ患者でリンパ節転移を認めたのは12例、転移を認めなかったのは16例であり、CRP1444CT遺伝子多型では、CRP1444CC遺伝子タイプ患者でリンパ節転移を認めたのは56例、転移を認めなかったのは49例であった。表2CRP遺伝子多型とリンパ節転移の相関参照また、CRP1846CTrs1205遺伝子多型とリンパ節転移に関する様々な臨床因子を共変量として多変量ロジスティック解析を行った結果、患者のCRP1846rs1205遺伝子多型がTTタイプであればオッズ比3以上でリンパ節転移を伴うことが判明した。これに対し、術前血清中CRP、血清中SCC、腫瘍サイズ、年齢における同様の解析の結果は、それぞれオッズ比1前後であった。また、腫瘍の深達度での比較ではオッズ比2571でリンパ節転移を伴っていた。表3リンパ節転移の多変量ロジスティック回帰分析参照さらに、術前血清中CRP濃度については、0~5mgLは、CRP1846CTrs1205遺伝子多型においてCCおよびCT遺伝子タイプ患者では43例、TT遺伝子タイプ患者でも43例であり、5mgL超は、CRP1846CTrs1205遺伝子多型においてCCおよびCT遺伝子タイプ患者では16例、TT遺伝子タイプ患者では8例であった。表4CRP1846CTrs1205遺伝子型と術前血清CRPレベル、腫瘍浸潤の深達度、及び関与するリンパ節の数との相関参照対象をリンパ節転移診断が特に難しく、また治療前のリンパ節転移の有無が治療法を大きく左右する粘膜下層食道癌患者33例に限定した場合、その診断能は極めて高かった。最新鋭の画像診断装置CT及び超音波断層法を用いたリンパ節転移診断の感度が50、特異度が79、陽性予測値が54、陰性予測値が68であるのに対し、CRP1846CTrs1205遺伝子多型を用いた診断では感度が64、特異度が79、陽性予測値が69、陰性予測値が75とより良好であった表5CRP1846CTrs1205遺伝子多型又は通常の方法CT及び超音波断層法を用いた場合の粘膜下層食道癌におけるリンパ節の関与の予測参照。実施例2同様に152例の肺癌手術患者に関してCRP1846CT遺伝子多型と病理学的リンパ節転移の関連を検討した結果、食道癌同様に有意な関連を認めた。以上の結果に示されるように、本発明によれば、高精度にリンパ節転移またはそのリスクの判定ができる。また、CRP1846CTrs1205遺伝子多型によれば、CRPの産生に関与する多数のサイトカインの多型と比較して顕著に高精度でリンパ節転移またはそのリスクの判定が可能である。実施例3実施例1の患者113名中、壁深達度がpT12である64名についてCRP1846CTrs1205遺伝子多型とリンパ節転移との関係を解析した。CRP1846CTrs1205遺伝子多型においてCCおよびCT遺伝子タイプ患者でリンパ節転移を認めたのは6例、転移を認めなかったのは35例であるのに対し、TT遺伝子タイプ患者ではリンパ節転移を認めたのは18例、転移を認めなかったのは5例であり、CRP1846CT遺伝子多型とリンパ節転移とは有意に関連した。このように本発明方法では、従来の画像診断方法では見落とされる可能性が考えられる、より早期の癌においても確実にリンパ節転移を判定することができるため、臨床の要求に応え得ることが確認された。実施例4実施例2の患者152名中、リンパ管侵襲に関する所見記載のあった144名についてCRP1846CT遺伝子多型とリンパ管侵襲との関係を解析した。CRP1846rs1205遺伝子多型においてCCおよびCT遺伝子タイプ患者でリンパ管侵襲を認めたのは36例、リンパ管侵襲を認めなかったのは42例であるのに対し、TT遺伝子タイプ患者ではリンパ管侵襲を認めたのは45例、リンパ管侵襲を認めなかったのは21例であり、CRP1846CT遺伝子多型とリンパ管侵襲とは有意に関連した。リンパ管侵襲は原発部位のリンパ管にガン細胞の存在が観察された状態を指し、現にリンパ節転移がない場合でも、将来のリンパ節転移の可能性を示唆している。従って、リンパ節転移のリスク判定より早期の予知にCRP1846CTrs1205遺伝子多型の同定は有用である。"