"治療、予防および/または寛解を必要とするヒトにおける少なくとも1つの心血管障害を治療、予防および/または寛解する方法であって、前記ヒトに、少なくとも1つのGLP‐1活性を有する少なくとも1つのポリペプチドおよび/または少なくとも1つのGLP‐1アゴニストを含んでなる医薬組成物を投与することを含んでなる方法。ヒトにおける心臓組織におけるグルコース代謝を制御する方法であって、少なくとも1つのGLP‐1活性を有する少なくとも1つのポリペプチドおよび/または少なくとも1つのGLP‐1アゴニストを含んでなる医薬組成物を、前記ヒトに投与することを含んでなる方法。ヒトにおける心機能を増加する方法であって、前記ヒトに、少なくとも1つのGLP‐1活性を有する少なくとも1つのポリペプチドおよび/または少なくとも1つのGLP‐1アゴニストを含んでなる医薬組成物を投与することを含んでなる方法。ヒトにおける心筋梗塞サイズを減少する方法であって、少なくとも1つのGLP‐1活性を有する少なくとも1つのポリペプチドおよび/または少なくとも1つのGLP‐1アゴニストを含んでなる医薬組成物を投与することを含んでなる方法。前記少なくとも1つのGLP‐1活性を有する少なくとも1つのポリペプチドおよび/または少なくとも1つのGLP‐1アゴニストが、配列番号1を含んでなる、請求項1~4のいずれか一項に記載の方法。前記医薬組成物が、皮下に投与される、請求項1~5のいずれか一項に記載の方法。前記医薬組成物が、前記ヒトにおける心臓組織からの乳酸流出を減少する、請求項1~6のいずれか一項に記載の方法。前記医薬組成物が、前記ヒトの心筋組織におけるグルコース取り込みを増加する、請求項1~7のいずれか一項に記載の方法。前記医薬組成物が、少なくとも1つの第2の強心剤と、同時投与される、請求項1~8のいずれか一項に記載の方法。前記医薬組成物が、1投与量当たり約4.0mg未満の配列番号1を含んでなる、請求項1~9のいずれか一項に記載の方法。前記医薬組成物が、1投与量当たり約2.0mg未満の配列番号1を含んでなる、請求項1~10のいずれか一項に記載の方法。前記医薬組成物が、低い投与量にて、週に1回投与される、請求項1~11のいずれか一項に記載の方法。前記医薬組成物が、前記ヒトにおける心臓効率を改善する、請求項1~12のいずれか一項に記載の方法。前記医薬組成物が、前記ヒトにおける血管拡張を増加し、および/またはNO含有量もしくは供給を増加する、請求項1~13のいずれか一項に記載の方法。前記医薬組成物が、前記ヒトにおける運動能力または運動耐容能を改善する、請求項1~14のいずれか一項に記載の方法。前記医薬組成物が、前記ヒトにおける心疾患の症状を減少するか、またはクオリティオブライフを改善する、請求項1~15のいずれか一項に記載の方法。前記医薬組成物が、前記ヒトにおける生存を改善する、請求項1~16のいずれか一項に記載の方法。前記ヒトが、慢性の心臓の状態を有する、請求項1~17のいずれか一項に記載の方法。前記ヒトが、急性の心臓の状態を有する、請求項1~18のいずれか一項に記載の方法。前記医薬組成物が、6ヶ月未満の期間にわたって、週に1回投与される、請求項1~19のいずれか一項に記載の方法。前記医薬組成物が、少なくとも1つのボーラス注入として投与される、請求項1~20のいずれか一項に記載の方法。前記ヒトが、虚血性うっ血性心不全を有する、請求項1~21のいずれか一項に記載の方法。前記ヒトが、非虚血性うっ血性心不全を有する、請求項1~21のいずれか一項に記載の方法。前記ヒトが、急性心筋梗塞AMIを有する、請求項1~23のいずれか一項に記載の方法。前記ヒトが、左室機能不全もしくは右室機能不全;左心不全もしくは右心不全;低心拍出量もしくは高心拍出量;急性非代償性心不全;慢性うっ血性心不全;限定されないが遺伝的要因、冠動脈疾患、心筋梗塞、人工弁疾患、感染症、先天性心疾患、高血圧症、アルコール消費、糖尿病、左室肥大、心筋炎、アミロイドーシス、ヘモクロマトーシス、糖原病、代謝障害、グルコースもしくは脂質代謝障害、炎症性疾患に起因する心筋症を含むいかなる原因の心筋症;冠動脈疾患;心筋虚血;急性心筋梗塞;急性冠症候群もしくは不安定狭心症;肺水腫;左室肥大もしくは右室肥大;心停止;心筋炎;限定されないが遺伝的要因、末梢血管疾患、悪液質、がん、慢性心不全、慢性肺疾患、炎症性疾患に起因する骨格筋機能障害もしくは骨格筋症;運動能力障害;および/または末梢血管疾患を有する、請求項1~24のいずれか一項に記載の方法。前記ヒトが、2型糖尿病を有する、請求項1~25のいずれか一項に記載の方法。前記ヒトが、高血糖症を有する、請求項1~26のいずれか一項に記載の方法。前記医薬組成物が、前記ヒトにおける以下の機能:心筋グルコース利用、心筋効率、左室機能、および/または運動耐容能の少なくとも1つを改善する、請求項1~27のいずれか一項に記載の方法。少なくとも1つのGLP‐1活性を有するポリペプチドおよび/または少なくとも1つのGLP‐1アゴニストを含んでなる医薬組成物の、ヒトにおける少なくとも1つの心血管疾患または障害を治療、寛解または予防するための使用。ヒトに心血管保護を提供する方法であって、前記ヒトに、アルビグルタイドを含んでなる医薬組成物を投与することを含んでなる方法。該医薬組成物が、約3.75mg、15mgまたは30mgのアルビグルタイドを含んでなる、請求項30の方法。該医薬組成物が、約4mg以下のアルビグルタイドを含んでなる、請求項30の方法。該医薬組成物が、アルビグルタイドを、1mg、1.5mg、1.88mg、2.0mg、2.5mg、3.0mg、3.25mg、3.5mg、3.75mgおよび4mgから選択される量で含んでなる、請求項32の方法。前記アルビグルタイドを含んでなる医薬組成物が、前記ヒトに皮下注射として、週に1回投与される、請求項30~33のいずれか一項の方法。前記ヒトが、2型糖尿病を有する、請求項30~34のいずれか一項の方法。アルビグルタイドを、1mg、1.5mg、1.88mg、2.0mg、2.5mg、3.0mg、3.25mg、3.5mg、3.75mg、4mg、15mg、および30mgから選択される量で含んでなる医薬組成物の、心血管保護を提供するための使用。以下の例により、本発明のさまざまな非限定的な態様を説明する。例1心筋虚血モデルにおけるアルビグルタイドの心機能への前臨床評価本研究において、本発明者らは、アルビグルタイドが心筋虚血再かん流傷害のげっ歯類モデルにおいて心保護的な効果があるという仮説を立てた。ラット心筋虚血再かん流傷害モデルは、臨床的に関連のある、翻訳可能な動物モデルである。また、そのモデルは潜在的な心不全治療の化合物の初期テストに広く使用されているモデルである。GLP‐17~36および9~36ならびに同模倣剤エキセンディン‐4およびリラグルチドはすべて、虚血再かん流傷害のげっ歯類モデルにおいて心保護性であることが示されている。雄スプラーグドーリーSprague‐Dawleyラット~300g体重を本研究に使用した。以下の5つの試験群を研究に含めた:群1:ビヒクルビヒクルで処置した虚血/再かん流傷害ラット;n=8~10群2:rHSArHSAで処置した虚血/再かん流傷害ラット;n=8~10群3:アルビグルタイドアルビグルタイド、1mg/kgで処置した虚血/再かん流傷害ラット;n=8~10群4:アルビグルタイドアルビグルタイド、3mg/kgで処置した虚血/再かん流傷害ラット;n=8~10群5:アルビグルタイドアルビグルタイド、10mg/kgで処置した虚血/再かん流傷害ラット;n=8~10実験プロトコール心筋虚血‐再かん流I/R傷害を、麻酔ネンブタール、60mg/kg、IP下で行った。絶食していないラットを、開胸手術に供し、心筋I/R傷害を、左前下行LAD動脈を30分間閉塞し、続いて24時間再かん流することによって誘発した。図2に示すように、ラットをビヒクル、組み換えヒトアルブミンrHSAまたはアルビグルタイドで3日間、前処置した。ラットに、虚血の48時間、24時間および2時間前に、皮下注射で2.7mg/kgの投与量にてrHSAを投与し、次に30分間の虚血および24時間の再かん流に供した。他のラットに、虚血の48時間、24時間および2時間前に、皮下注射で1mg/kg、3mg/kg、または10mg/kgの投与量にてアルビグルタイドを投与し、次に30分間の虚血および24時間の再かん流に供した。血液試料を、虚血の直前および再かん流の24時間後に採集した図2。右頸動脈を経て左室に挿入した1.8FMillarMikro‐Tip圧カテーテルトランスデューサーを使用して、30分間の虚血および24時間の再かん流障害後に心機能を評価した。研究終了時に、ラットの心臓を摘出し、1の塩化トリフェニルテトラゾリウムTTCリン酸緩衝溶液でかん流し、壊死および生存心筋の境界を明示した。続いて、LAD動脈を前の閉塞箇所で再び結び、心臓にエバンスブルー染料をかん流し、リスク領域および非虚血性の領域の境界を明示した。心臓を、横に5つの切片に切り、それら切片をデジタルカメラ使用して写真に撮った。梗塞サイズおよびリスク領域を、Image-ProPlusを使用して測定した。インスリンは、MDSラットインスリンキットを使用して測定した。血中グルコースおよび乳酸は、オリンパスOlympusAU640臨床化学分析器を使用して測定した。血行動態測定および死後分析I/R研究終了時再かん流後24時間に、動物をイソフルレン酸素中2で麻酔し、2FMillarMikro‐tipカテーテルトランスデューサーを右頸動脈を経て左室に挿入し、以前に報告18,19されているように、左室内圧、生じたピーク圧上昇および下降の変化それぞれ、dP/dtmaxおよび-dP/dtminを測定した。血行動態測定後、心臓を摘出し、生理食塩水でかん流し、残存血液を大動脈カニューレ18ゲージ針を通して洗い流した。生存心筋から梗塞した組織の境界を明示するために、次に心臓を、リン酸バッファー中の2,3,5‐塩化トリフェニルテトラゾリウムTTCの1溶液pH7.4、37°Cでかん流した。生存心筋が赤に染色され、梗塞した心筋が白に染色された。リスク領域虚血性の領域の境界を明示するために、次に冠動脈を前の閉塞箇所で結び、大動脈起始部を、通常の生理食塩水中の1Evansブルー染料シグマ社でかん流した。この手順の結果として、先に閉塞した冠動脈リスク領域によって供給されたLVの部分が特定された一方で、残りのLVが紺青色に染色された。両心房および右室組織を切除した後、心臓を凍結した。LVを、横薄片に切り、それらをデジタルカメラ使用して写真に撮った。心臓画像の梗塞、虚血性、非虚血性の領域の境界を明らかにし、Image-ProPlusを使用して測定し、これら測定値から梗塞サイズを虚血性の領域の割合として計算した。虚血性の領域を、LV領域の割合として計算した。生体内心臓エネルギー評価心I/R傷害後の心臓エネルギープロフィール例えば、ATP、PCr、ATP/PCrへの、アルビグルタイドの効果を検討するために、上記のように、ラットを、ビヒクルまたはアルビグルタイド10mg/kg/日、3日間で処置した各群n=10。ラットを、30分間の虚血、続いて24時間の再かん流に供し、疑似手術したラットを対照としてこの試験に含めたn=5。再かん流の24時間後、磁気共鳴画像法MRI/スペクトロスコピーMRS実験のために、ラットを2.0のイソフルレンアボットラボラトリーズAbbottLaboratories、シカゴ、イリノイ州で麻酔した。生体内MRI/S実験のすべては、9.4T/30cmBrukerBiospecシステムBillerica、マサチューセッツ州上で、複調doubletune1H、31Pコンセントリック表面高周波RFコイル設定を使用して行った。コンセントリック表面RFコイルM2MImagingCorp、オハイオ州デザインは、外側の400.44MHzに合わせられる1Hちょう形コイル35mm、および内側の162.10MHzに合わせられる31P円形コイル25mmからなる。トリパイロットtripilotグラディエントエコー画像の後、短軸心臓画像を、後ろ向き心電同期retrospectivelycardiacgatedfastlowangleshotFLASHシーケンスを使用して得た。シネループが、心周期をカバーするのに十分な数の遅延をもってして、心室を通して各イメージング薄片に対して生成された。イメージングパラメーターは、次の通りであった:マトリックス寸法、128×128;TR/TE、7/1.5ms;薄片の厚さ、2.0mm;FOV、5.0cm;繰り返し数、250;シネループ、10画像。左室LV機能パラメーターを分析したAnalyzeAVWソフトウェア、AnalyzeDirect、Lenexa、カンザス州。イメージング直後に、31PMRSを、同一のRFハードウェアを使用して行い、心臓の空間的に局在したスペクトロスコピーを、外体積抑制TR=4s、NS=512、SW=10kHz、1kデータをもつ3次元イメージ選択生体内スペクトロスコピー3-DImageSelectedInVivoSpectroscopyISISシーケンスを使用して行った。目的サイズのスペクトロスコピーのボクセルは、15.8×11×17mmであり、全3直交方向に斜面でLVをカバーするように位置を合わせた。31PNMRスペクトルを、指数フィルターおよびベースライン平低化を使用して処理した。ホスホクレアチンPCrピークを0ppmに設定し、~4.9~5.3ppmの無機リン酸Piピーク細胞内および細胞外両方のPiを含むおよび-16ppmのβ‐アデノシン三リン酸ATPピークを、それぞれ、PCr/PiおよびPCr/ATP比を計算するために取り込んだNutsNMR処理ソフトウェア、AcornNMRInc.、Fremont、カリフォルニア州。細胞内のpHを、以前に記載されているように、細胞内のPiおよびPCr間の化学シフト差を使用して計算したTayloretalMagnResonMed1986February34454。心代謝関連遺伝子発現分析定量TaqMan逆転写RTポリメラーゼ連鎖反応PCR分析を、上記のようにビヒクルまたはアルビグルタイド10mg/kg/日、3日間で処置されたSDラットの亜群subgroup各群n=8におけるLVから抽出した全RNAで行った。24の鍵となる代謝、ミトコンドリア、およびストレス関連遺伝子を、正常LVならびにI/R実験からの虚血性および非虚血性のLVにおいて評価した。これらの遺伝子は、ACSL1、CPT1B、GAPDH、IGF1R、SLC2A4、HK2、GYS1、ESSRA、HIF1A、PPARGC1A、PDHA1、ALDOC、GSK3B、AKT1、SLC2A1、PYGL、PRKAA2、PPARG、HK1、PDK1、UCP2、ACTB、LDHA、UCP3からなる。遺伝子発現データを、OmicsStudio商標ソフトウェアを使用して正規化した。その後、一元配置分散分析one‐wayANOVAおよびPCAを行った。統計的分析データは、平均値±SEMとして示す。群間の差を、対応のある、および対応のないスチューデントStudentt検定、または一元配置分散分析one‐wayANOVAによって比較し、続いてボンフェローニBonferroniテストで多重比較した。<0.05のp値を、統計的に有意とみなした。試料採集:血液試料を、ベースライン時虚血前および再かん流の24時間後に、EDTAチューブを使用して集めた。動物飼料:通常のげっ歯類飼料以下の薬物物質を、研究に使用した:1アルビグルタイド2rHSA組み換えヒト血清アルブミン3ビヒクル10mMリン酸ナトリウム、153mMマンニトール、117mMトレハロース、0.01w/vポリソルベート80、pH7.2ラットに、虚血の48時間、24時間および2時間前に、皮下注射で1mL/kgの投与量にてrHSAを投与し、次に30分間の虚血および24時間の再かん流に供した。調製ビヒクル/薬/試薬:約900mLのHPLCグレード水を、ビーカーに加えた。無菌の撹拌子を加え、次のものをマグネチック撹拌プレート上で混ぜた:0.41±0.01gのリン酸二水素ナトリウム一水和物、0.99±0.01gの無水リン酸水素二ナトリウム、44.26±0.1gのD‐トレハロース無水、27.87±0.1gのマンニトール、および10mLの1ポリソルベート80ストック溶液。pHを測定し、必要に応じて、1N水酸化ナトリウムまたはリン酸を使用して、pHを7.2に調整した。溶液を、1000mL容メスフラスコに移し、HPLCグレード水を1000mLの最終容積に達するまで加えた後、20分間撹拌した。緩衝液を、0.2ミクロンフィルターユニット組立体を通してろ過した。フラスコを、アルミホイルで包むことによって光から保護して、4°Cに保存した。-20°Cの冷凍庫に保存したrHSA粉末を、ビヒクルに溶かし、2.7mg/mLの濃度の投与溶液dosingsolutionとした。-80°Cの冷凍庫に保存したストック溶液131mg/mLを、ビヒクルで希釈し、3mg/mLまたは30mg/mLのアルビグルタイドの作業溶液にした。SDラットにおけるアルビグルタイ薬物動態分析試料採集:SDラットの別の群n=4において、アルビグルタイド15mg/kg、皮下注射のCmax、AUC、t1/2などを得るために、PK試験を行った。処置の0、0.5、1、3、6、8、および24時間後に、血液試料を、EDTAチューブ250μL/チューブを使用して集めた。分析方法:ラット血漿試料を、試料希釈に基づいた分析方法を使用して、アルビグルタイドについて分析し、続いて免疫アッセイ分析をした。ラット血漿の100μL分注を使用して、アルビグルタイドの定量下限LLQは、100ng/mLであり、定量上限HLQは、2500ng/mLであった。この試験においてデータの取得および定量に使用したコンピューターシステムは、Wallac1420ワークステーションバージョン3.0改訂Revision5およびSMS2000バージョン2.1を含んだ。適用分析実行は、所定の実行受け入れ基準を満たした。データ分析データは、平均値±SEMとして示す。群間の差を、対応のある、および対応のないスチューデントStudentt検定、または一元配置分散分析one‐wayANOVAによって比較し、続いてボンフェローニBonferroniテストで多重比較した。<0.05のp値を、統計的に有意とみなした。結果初めに、15mg/kgのアルビグルタイドの単回皮下投薬後の血液薬物動態を評価した。1、3および10mg/kg投与量のモデリングに基づき、心保護試験の投与量を、アルビグルタイドで達成される臨床的な投与量と比較して選択した。図1は、pk試験で評価した実際の血液濃度、ならびに15mg/kg投与量のモデリングを、図解している。心保護試験に関しては、I/R傷害の48時間、24時間、および2時間前に、動物に投薬した図2。T左冠動脈前下行枝を、30分間閉塞した後、24時間再かん流した。試験の終了時に、リスク領域および梗塞サイズ決定のために心臓を摘出した。心臓の5つのTTC染色された心臓切片の代表的な写真を、図3に示す。心筋梗塞は白に染色されTTC陰性、虚血性の領域は赤に染色され、非虚血性の領域は紺青色に染色された。また、代表的な薄片中の梗塞領域を手作業で分けたトレースmanuallysegmentedtraceを示す。5つの薄片すべての梗塞サイズの合計を使用して、全体的なリスク領域および虚血性の領域を左室リスク領域の割合として求めた。30分間の虚血および24時間の再かん流障害後のリスク領域は、群の間で類似しており、動物は類似した虚血性傷害に供された図4、表1。心筋梗塞サイズを、30分間の虚血および24時間の再かん流後の左室リスク領域のとして表わした図4、表1。30分間虚血‐24時間再かん流プロトコール後のビヒクルと比較したとき、低い投与量1mg/kgでは、アルビグルタイドは、梗塞サイズに僅か~14NSの減少をもたらした一方で、3および10mg/kgの投与量は、リスク領域に対して正規化された梗塞サイズに26の減少P<0.01をもたらした。組み換えヒト血清アルブミンrHSAを、アルビグルタイドに対するさらなる対照として検討した。使用した投与量は、2.7mg/kg3mg/kgのアルビグルタイドに相当する投与量であり、図2に概略を示したように投与した。このヒト血清アルブミン相当投与量は、いかなる観察される心保護をもたらさなかった図5。くわえて、心拍数は、アルビグルタイドによって影響を受けなかった一方で、左室収縮性dP/dtは、3mg/kgの投与量のアルビグルタイドで顕著に増加し、10mg/kgの投与量では、dP/dt、-dP/dt、およびEDPのすべてが改善した表1。表1アルビグルタイドの梗塞サイズおよび左室血行動態への効果。データは、各群n=8~10であり、平均値±SEMとして示す。t検定を用いて、p<0.05対ビヒクル;p<0.01対ビヒクル血漿グルコース、乳酸、およびインスリンの臨床化学測定値を、虚血前虚血手術時および再かん流の24時間後試験の終了の両方に測定した。虚血性傷害前に測定したとき、アルビグルタイドは、すべての投与量にて血漿グルコースの減少、およびインスリンの増加を、投与量に関係なくもたらした表2。また、乳酸は、3および10mg/kgの投与量で増加した。しかしながら、再かん流の24時間後、アルビグルタイドのグルコースおよびインスリンへの効果は失われ、一方で乳酸レベルは、変わらず増加した表2。表2アルビグルタイドの体重、臨床化学、および最終pkへの効果。データは、各群n=8~10であり、平均値±SEMとして示す。t検定を用いてp<0.05対ビヒクル;p<0.01対ビヒクルアルビグルタイド投薬の2日後、ラットは、ビヒクル群表2、図6と比較して摂餌量および体重増加の減少の点で投与量線形応答を有した。試験終了時のアルビグルタイドの最終血漿濃度は、1mg/kg、3mg/kg、および10mg/kgの投与量に対して、それぞれ、574ng/mL、1238ng/mL、および8636ng/mLであった表2。心臓の虚血性のおよび非虚血性の領域におけるcAMPレベルを、動物の別の群で測定した。非虚血性のLVでは、cAMP濃度はアルビグルタイド処置10mg/kg後に上昇していなかった一方で、虚血性の領域では、cAMPレベルは、正常化されていた。代謝関連遺伝子転写10mg/kgのアルビグルタイドでの処置の3日後、グルコースおよび脂肪代謝の調節に関与する24の遺伝子の精密なパネルを使用して、自然のおよびI/R心臓組織の両方において、Taqman商標RT-PCR分析を行った。ACSL1、CPT1B、GAPDH、IGF1R、SLC2A4、HK2、GYS1、ESSRA、HIF1A、PPARGC1A、PDHA1、ALDOC、GSK3B、AKT1が、アルビグルタイドでの処置後の心臓において顕著に増加していた表3。数少ない遺伝子GYS1、SLC2A4が、I/R心臓の虚血性の領域において著しく上方制御されていたが、解糖およびグリコーゲン生成に関連する幾つかの遺伝子ALDOC、CPT1B、IGF1R、PDHA1、GSK3B、GYS1、SLC2A1が、アルビグルタイドでの処置後のI/R心臓の非虚血性の領域において著しく増加していた。3つの心臓組織試料のすべてから集めた遺伝子発現データの主成分分析PCAは、アルビグルタイドでの処置後の正常および非虚血性のデータの両方のクラスター形成を示唆し、それは、心臓の自然および非虚血性の領域におけるグルコースおよび脂肪代謝遺伝子の調節での明確な変化と一致する。表3:心臓におけるアルビグルタイドの代謝性遺伝子転写変化への効果心臓のエネルギー心MRIを使用して、I/R傷害の24時間後にLV機能を評価した。疑似と比較して、ビヒクルで処置したラットでは、顕著にLV駆出分画率が減少し、LV収縮期末の容積が増加していたが、アルビグルタイド処置は、有害な心臓リモデリングおよび機能低下を防いだ図7A、B。31PMRSスペクトロスコピーを行い、心臓での高エネルギーリン酸ピークPCr、ATP、Piを測定した。PCr/ATP比率はさまざまであり、ビヒクル群ではより低いように見えたが、その傾向は、有意ではなかった図7C。しかしながら、疑似に対してビヒクル群ではPCr/Pi比率および細胞内pHが減少p<0.05していた一方、アルビグルタイドは、これらのパラメーターの変化を防いだそれぞれ、図7D、E。くわえて、疑似およびアルビグルタイドで処置した心臓と比較して、ビヒクルで処置した心臓では、絶対総心臓ATPおよびPCr濃度が、著しく低かった図7F、G。考察アルビグルタイドは、投与量依存的に心筋虚血再かん流傷害後の心筋梗塞サイズを顕著に減少した。また、アルビグルタイドは、虚血後の左室心機能を改善した。アルビグルタイドが観察された心保護を提供する厳密な機序を、本研究では検討していないが、この保護は、少なくとも部分的に、虚血後のインスリン分泌の増加およびグルコース代謝に関連しうる。アルビグルタイドで観察された体重の減少は、飼料摂取の減少、および満腹を増すことに関するGLP‐1アゴニストの予想された薬理と一致した。これらのデータは、アルビグルタイドが、冠動脈疾患をもつ患者に安全であると思われることだけではなく、アルビグルタイドが、急性MIまたは慢性心不全をもつ患者に有益な効果を有しうることを示唆する。例2アルビグルタイドは、インスリン非依存的に心臓のグルコース取り込みおよび代謝を増加する。方法生体内2‐デオキシグルコース実験留置頸動脈および頸静脈カテーテルをもつ、チャールスリバーCharlesRiver社から購入した雄Sprague‐Dawleyラット体重、~250~350gを、研究に使用した。次の試験群を研究に含めた:群1:ビヒクル;n=15群2:アルビグルタイド10mg/kg;n=16生体外ランゲンドルフ心臓かん流実験チャールスリバー社から購入した雄Sprague‐Dawleyラット体重、~250~300gを、研究に使用した。次の試験群を研究に含めた:群1:ビヒクル;n=13群2:アルビグルタイド10mg/kg;n=13実験プロトコール生体内2‐デオキシグルコース実験目的:[3h]‐2‐デオキシグルコースのトレーサー量体重100g当たり10μciを使用して、心臓組織によるグルコース取り込みの量を推定すること。動物プロトコール:1.頸静脈および頸動脈カニューレを所定の位置にもつ、チャールスリバー社から購入したラット。2‐デオキシグルコース2‐DG実験の48時間、24時間および2時間前に、ラットに、1mL/kgの容積にて、ビヒクルまたは10mg/kgのアルビグルタイドを皮下注射で投与した。ラットを一晩絶食させ、その後2‐DG投与を開始した図8。2.2‐[3H]DG、~30μCi、体重1kg当たり100μCiを、頸静脈カテーテルを通して、頸静脈にボーラスとして注入した。3.トレーサー注入の直前、ならびにその5、10および20分後に、血液~200μLを、同じカテーテルからサンプリングした。4.最終血液1mLを、トレーサー注入の30分後に採った。5.血液を、抗凝固剤を含有する注射器に集め、マイクロ遠心分離チューブに移し、遠心分離して血漿を分離した。試料を-80°C冷凍庫に保存した。6.研究完了後、全心臓を、迅速にバラバラに切断し、液体窒素で瞬間凍結した。7.後日、これら試料の放射能を評価した。組織抽出プロトコール:血漿グルコース濃度の決定:血漿60μLを、水540μLで希釈し、0.3NのBaOH2および0.3NのZnSO4を各300μL加えることによってタンパク質を除去し、10,000gで4°Cにて10分間遠心分離した。血漿2‐[3H]DGおよび組織2‐[3H]DG‐6‐Pの決定:脱タンパクされた血漿200μL中の3H含有量を、1mLのOptiphasesupermix中でのシンチレーション測定によって決定し、200μLのこの放射性混合物を、Micorbetaunitでカウントした。生のカウントrawcountsが示された。組織の一部200~300mgを計量し、組織溶解器lyzer上で、6mmセラミックビーズを使用して、500μLの0.5M氷冷過塩素酸中でホモジナイゼーションした。ホモジナイゼーションしたものを、遠心分離し10,000で10分間、結果として得られた上澄みを、pH試験紙を用いて、5MKOHと0.5M塩酸トリエタノールアミンで中和pH~7.4し、遠心分離した10,000gで10分間。論文で示されていたのとは異なって、手順のほとんどを室温にて行った。中和した抽出物の一部200μLを、1mLのOptiphasesupermixに再溶解し、200μLのこの放射性混合物を、Micorbetaunitでカウントし、全放射能2‐[3H]DGと2‐[3H]DG‐6‐Pにアクセスした。別の分注200μLを、200μLの0.3NのBaOH2および0.3NのZnSO4と混ぜた。この混合物を、遠心分離し、上澄みを使用して、非リン酸化2‐[3H]DGのレベルを決定し、中和した抽出物の一部200μLを、1mLのOptiphasesupermixに再溶解し、200μLのこの放射性混合物を、Micorbetaunitでカウントした。この時点では、クエンチ補正をしなかった。組織2‐[3H]DG‐6‐Pを、合計と2‐[3H]DG値との間の差として計算した。抽出物のpHの調整:ほとんどの抽出物を、40μL4滴、200μLピペットチップの5NKOH、および200μL50または100μLの0.5N塩酸トリエタノールアミンで中和した。グルコース処理流量の決定:グルコース処理流量の決定は、以下の方程式、ならびにその主要な成分すなわち平均血漿グルコース濃度PGC平均、心臓組織放射能HR終期、および血漿グルコース糖放射能AUCPR合計グルコース濃度曲線下面積に基づいた。生体外ランゲンドルフ心臓かん流実験目的:この研究の目的は、アルビグルタイドが心臓において直接的にグルコース代謝を促進することができるかどうかを決めることである。生体内心グルコース取り込み測定生体内における心臓のグルコース処理に関するアルビグルタイドの役割を検討するために、上記のように、ラットにビヒクルまたはアルビグルタイド10mg/kg/日、3日間を投与した各群n=14~15。次に、ラットに、2‐[3H]デオキシグルコース2‐[3H]DGを静注した。血漿試料を、30分まで5分毎に集めて、血漿の放射能クリアランスを決定した。心臓をフリーズクランプし、過塩素酸で抽出した。タンパク質を取り除いた血漿200μLを、1mLのOptiphasesupermixに加え、3H含有量を、MicrobetaTriluxUnitパーキンエルマーPerkinElmer社、モデル1450‐02を使用するシンチレーション測定によって決定した。生のカウントrawcountsが示された。組織2‐[3H]DG‐6‐Pを、全放射能と2‐[3H]DG値との間の差として計算した。グルコース処理流量を、平均血漿グルコース濃度、最終的な心臓組織放射能、および血漿グルコース糖放射能AUC濃度曲線下面積を使用して、以前に記載されているように決定したKraegen、etalAmJPhysiol1985March248E353E362。ランゲンドルフかん流心臓における直接心グルコース取り込み測定心臓のグルコース処理に関するアルビグルタイドの直接的な役割を検討するために、かん流心臓における生体外測定の前に、ラットにビヒクルまたはアルビグルタイド10mg/kg/日、3日間を、上記のように投与した各群n=13。ランゲンドルフかん流心臓調製は、以前に記載されているWilletteetalJPharmacolExpTher2008August32644352。安定化期間15分の後、ベースライン溶液を集め、心臓を、定圧75mmHg下にて、ビヒクルまたはアルビグルタイド0.12μMを含有する再循環溶液~60mLを用いてかん流する前のベースライングルコースおよび乳酸濃度を決定した。かん流時間30分終了時に、かん流溶液を集め、容積ならびにグルコースおよび乳酸濃度を測定した。グルコースおよび乳酸は、オリンパスAU640分析器米国オリンパス社OlympusAmericaInc.、Melville、ニューヨーク州を使用して測定した。グルコース流量は、グルコースの濃度初期-濃度最終×かん流容積/心臓湿重量g/時間時として決定し、乳酸流量は、乳酸の濃度最終-濃度初期×かん流容積/心臓湿重量g/時間時として決定した。心代謝流量評価心中間代謝を検討するために2つの別々の実験を行った。1遊離脂肪酸酸化に対する相対的な炭水化物酸化を、生体内グルコースクランプ実験後に評価し、ならびに2乳酸流量および酸化をランゲンドルフかん流心臓において評価した。両実験では、ラットを、上記のように、ビヒクルまたはアルビグルタイド10mg/kg/日、3日間で処置した。グルコースクランプ実験に関しては、ラット各群n=5を、120分間継続する正常インスリン‐高血糖クランプ頸静脈を経た連続[1-13C]グルコース8mg/kg/分/ソマトスタチン1.5μg/分注入に供した。この時間は、解糖およびトリカルボン酸回路中間体に十分であり、定常状態の濃縮を達成した。クランプ実験終了時に、心臓を迅速に摘出し、液体N2中に置いた。過塩素酸抽出物を、凍結した心臓組織から調製し、KOHで中和し、凍結乾燥し、続いて500μLのD2Oに溶かした。組織抽出物中の代謝産物13C濃縮のPOCEProtonObserveCarbonEnhanced1HMRS測定を、9.4T分光計で、以前に報告されているように行ったYueetalJPharmacolExpTher2008May32546674JuckeretalAmJPhysiol1997July273E139E148JuckeretalJBiolChem1997April182721046473andYueetalCirculation2003November1110823939。アセチルCoA酸化への相対的な基質寄与の点から、相対的な心臓の炭水化物グルコース、グリコーゲン、ピルビン酸、および乳酸を含む酸化ならびに遊離脂肪酸FFA/ケトン酸化を、代謝産物プール濃縮から次のように評価した:相対的な炭水化物酸化率は、4‐13Cグルタミン酸濃縮/3‐13Cアラニン濃縮として計算し、相対的な脂肪酸化は、1‐4‐13Cグルタミン酸濃縮/3‐13Cアラニン濃縮として計算した。乳酸酸化および流量を評価することに関しては、かん流心臓実験を、その実験では、3-13C乳酸を乳酸酸化測定のための前駆体として使用した。パラダイムに続いて、ラット各群n=10を、ネンブタール60mg/kg、腹腔内注射で麻酔し、ヘパリンナトリウム200U/kg、腹腔内注射で凝血防止した。心臓を、迅速に切除し、118.5mMNaCl、4.7mMKCl、1.2mMCaCl2、1.2mMMgSO4、25mMNaHCO3、1.2mMKH2PO4、11mMグルコースからなる、pH7.4の氷冷緩衝クレブスヘンゼライトKH溶液に移した。スチール大動脈カニューレを使用して、大動脈にカニューレを挿入した後、ランゲンドルフ装置IsolatedHeartSize1IH‐1;ハーバードアパレイタス社HarvardApparatussInc.、Holliston、マサチューセッツ州に接続し、70mmHgの定圧にて、KH溶液37°Cを用い、ガラスフリットを通して95O2、5CO2のガスを供給してかん流した。安定化時間の後、アルビグルタイド120nMまたはビヒクルを、118.5mMNaCl、4.7mMKCl、1.2mMCaCl2、1.2mMMgSO4、25mMNaHCO3、1.2mMKH2PO4、11mMグルコース、3BSA本質的に脂肪酸を含まない、1mM3‐13C乳酸ナトリウム、0.1mMピルビン酸ナトリウムおよび0.4パルミチン酸ナトリウムからなる、pH7.4の改変KH溶液に加えた。心臓を60分間かん流し、その間、流入および流出試料を集め、乳酸濃度をオリンパスAU640分析器を使用して分析した。流入および流出3-13C乳酸濃縮および心臓組織3-13C乳酸に加えて、3-13Cアラニンおよび4-13Cグルタミン酸濃縮を、NMRスペクトロスコピーによって測定し、アセチルCoAへの基質寄与としての相対的乳酸酸化を、4-13Cグルタミン酸濃縮/3-13Cアラニン濃縮として計算した。動物プロトコール:心臓を摘出し、再循環緩衝溶液でかん流する48時間、24時間および2時間前に、ラットに、1mL/kgの容積にて、ビヒクルまたは10mg/kgのアルビグルタイドを皮下注射で投与した図11。心臓の摘出時のアルビグルタイドの予想される血漿濃度に従って、アルビグルタイド0.12μMをかん流溶液に加えた。ラットを、ネンブタール60mg/kg、腹腔内注射で麻酔し、ヘパリンナトリウム200U/kg、腹腔内注射で凝血防止した。心臓を、迅速に切除し、118.5mMNaCl、4.7mMKCl、1.2mMCaCl2、1.2mMMgSO4、25mMNaHCO3、1.2mMKH2PO4、11mMグルコースからなる、pH7.4の氷冷緩衝クレブスヘンゼライトKH溶液に移した。スチール大動脈カニューレを使用して、大動脈にカニューレを挿入した。大動脈にカニューレを挿入した後、ランゲンドルフ装置IsolatedHeartSize1IH‐1;ハーバードアパレイタス社HarvardApparatussInc.、Holliston、マサチューセッツ州に接続し、70mmHgの定圧にて、KH溶液37°Cを用い、ガラスフリットを通して95O2、5CO2のガスを供給してかん流した。安定化時間の後、ベースライン緩衝溶液を集め、ベースライングルコースおよび乳酸濃度を決定し、次に心臓を、再循環緩衝溶液~60mLで1時間、定圧75mmHgでかん流した。かん流終了時に、かん流緩衝溶液を集め、その容積ならびにグルコースおよび乳酸濃度を測定した。心臓湿重量も測定した。グルコースおよび乳酸は、オリンパスAU640分析器を使用して、臨床化学研究室で測定した。グルコース流量は、グルコースの濃度初期-濃度最終×かん流容積/心臓湿重量g/時間時として決定し、乳酸流量は、乳酸の濃度最終-濃度初期×かん流容積/心臓湿重量g/時間時として決定した。飼料:通常のげっ歯類飼料分析測定:インスリンは、MDSラットインスリンキットを使用して測定した。血中グルコースおよび乳酸は、オリンパスAU640臨床化学分析器を使用して決定した。血漿グルコースは、グルコースアッセイキット192ウェル:CatNo:10009582、LotNo:0414573を使用して測定した。生体内実験の間、血中グルコースを、ACCUCHECKAdvantageCat/Type:3288650:Accu-checkcomfortcurve100テストストリップ、ロシュ社Roche、LotNo:551017を使用して測定した。薬および材料次の薬物質を、本試験で使用した:1アルビグルタイド2ビヒクル10mMリン酸ナトリウム、153mMマンニトール、117mMトレハロース、0.01w/vポリソルベート80、pH7.2ビヒクル/薬/試薬調製:約900mLのHPLCグレード水を、ビーカーに加えた。無菌の撹拌子を加え、次のものを、マグネチック撹拌プレート上で混ぜた:0.41±0.01gのリン酸二水素ナトリウム一水和物、0.99±0.01gの無水リン酸水素二ナトリウム、44.26±0.1gのD‐トレハロース無水、27.87±0.1gのマンニトール、および10mLの1ポリソルベート80ストック溶液。pHを測定し、必要ならば、1N水酸化ナトリウムまたはリン酸を使用して、pHを7.2に調整した。溶液を、1000mL容メスフラスコに移し、HPLCグレード水を1000mLの最終容積に達するまで加えた後、20分間撹拌した。緩衝液を、0.2ミクロンフィルターユニット組立体を通してろ過した。フラスコを、アルミホイルで包むことによって光から保護して、4°Cに保存した。-80°Cの冷凍庫に保存したストック溶液131mg/mLを、ビヒクルで希釈し、3mg/mLまたは30mg/mLのアルビグルタイドの作業溶液にした。データ分析データは、平均値±SEMとして示す。群間の差を、対応のある、および対応のないスチューデントStudentt検定によって比較した。P<0.05のp値を、統計的に有意とみなした。グラブス外れ値検定を、生体内2‐DG取り込み実験の主要成分すなわち、平均グルコース濃度、心臓組織放射能、およびAUC血漿放射能について使用した。z外れ値>z_棄却critical2.6のとき、明らかな外れ値があると決定した。結果処置群では、体重が顕著に減少した図9。また、ビヒクル群は、実験前一晩絶食の結果として、多少の体重減少を示した。心グルコース取り込み測定における観察されたばらつきを最小限にするために、平均血漿グルコース、心臓組織放射能、および血漿グルコース放射能AUCを含む生体内2‐DG実験のすべての主成分を、本研究における統計的外れ値について注意深く検討した。グラブス検定を使用して、グルコース流量測定の主要な成分を外れ値について検討したとき、1頭のビヒクル動物で、心臓組織放射能に明らかな外れ値z3.2>z_棄却critical2.6があると決定された。くわえて、1頭のアルビグルタイドで処置した動物の平均血漿グルコースが、高いことが判明したz2.7>z_棄却critical2.6。1頭のビヒクル動物および1頭のアルビグルタイドで処置した動物を除いて、ビヒクル処理N=14と比較して、アルビグルタイドN=15での処置後に、心臓での2-DG取り込みが顕著に増加した70、P=0.022図10。アルビグルタイド投薬後の2日、血漿グルコース、乳酸、非エステル化脂肪酸、またはインスリンに関して、群の間に有意差はなかった。生体外グルコース処理グルコース取り込みおよび乳酸流出を、ランゲンドルフ心臓かん流設定で、生体内2‐DG試験に使用されたものと同じ生体内投薬プロトコールを使用して評価し、続いて120nM生体内試験終了時の到達血漿濃度でのアルビグルタイドの連続かん流した図10。ランゲンドルフ逆行性かん流調製における再循環槽の概略図を、図12に示す。生体内2‐DG実験の場合もそうであったように、アルビグルタイドで処置したラットでは、投薬パラダイムの間、重量が減少した。ビヒクルで処置した心臓と比較して、グルコース処理は、アルビグルタイドで処置した心臓において59P<0.05増加した図13一方で、乳酸流出は、アルビグルタイドで処置した心臓において減少した↓55、P<0.05図13。心グルコース中間代謝アルビグルタイドの心臓の中間グルコース代謝への効果を決定するために、代謝基質利用を、1‐13Cグルコース正常インスリン‐高血糖クランプを使用して評価した。ビヒクル‐およびアルビグルタイド‐処置心臓の間のアラニンおよび乳酸濃縮には、差がなかった図14A。しかしながら、TCA回路の中間体である4‐13Cグルタミン酸の濃縮は、ビヒクル‐処置心臓と比較してアルビグルタイド‐処置心臓で顕著に高く、TCA回路への解糖流量の増加を示している図14A。さらに、アラニンのアイソトポマー分析およびグルタミン酸濃縮図14Bによって計算されるように、アルビグルタイドでの処置は、脂肪酸化に対する炭水化物酸化の相対的な比率の顕著な増加をもたらした↑112、p<0.05対ビヒクル。心グリコーゲン濃度は、アルビグルタイドおよびビヒクルで処置した心臓の両方で類似していたそれぞれ、12.2±1.7対11.4±3.5μmol/g。しかしながら、アルビグルタイドは、虚血性の心臓における代謝プロフィールを変えなかった。アルビグルタイド処置の心臓の乳酸代謝への効果をさらに調べるために、3‐13C乳酸心臓流量および酸化を、生理的状態の基質供給可能性すなわち、生理的レベルでのグルコース、乳酸、ピルビン酸、FFAの包含の下でランゲンドルフかん流心臓において評価した。アルビグルタイドは、30分間にわたって、かん流心臓への乳酸流入を一時的に増加したが図15A負の流出、この実験での心臓の乳酸濃度に影響はなかった図15B。しかしながら、アイソトポマー分析によって評価すると、標識されたグルコースを前駆体として使用した前の生体内知見と一致して、ビヒクルと比較してアルビグルタイド処置は、相対的乳酸酸化の増加をもたらした↑63、p<0.05、図15C。考察アルビグルタイドは、正常心臓における心臓のグルコース取り込みの顕著な増加を、2つの異なる測定方法生体内2‐デオキシグルコース取り込み、および生体外ランゲンドルフかん流心臓を使用して確かめた。データは、心臓によるグルコース取り込みにおけるこの増加は、GLP‐1注入を用いて以前に示されているように、インスリン非依存的機序に媒介されることを示唆している1106。くわえて、かん流心臓設定における乳酸流出の減少によって示されたように、正常な心臓において、非酸化例えば、グリコーゲン合成または酸化好気的解糖グルコース処理のいずれかがアルビグルタイドで刺激された。アルビグルタイドで観察された体重の減少は、飼料摂取の減少、および満腹を増すことに関するGLP‐1アゴニストの予想された薬理と一致した。これらのデータは、アルビグルタイドで処置した、虚血再かん流傷害を受けたラットにおいて観察された心保護が、部分的には、心臓によるグルコース処理および代謝の増加よって説明されうることを示唆する。例3非虚血性心筋症およびNYHAクラスII/IIIうっ血性心不全をもつ患者におけるアルビグルタイドの安全性、ならびにその心筋代謝、心筋機能および運動耐容能への効果を評価するための多施設、プラシーボ対照試験正常なヒト心筋では、心機能のためのエネルギーの大部分60~90が、脂肪酸酸化FAOに由来し、残り10~40がグルコース酸化GOに由来する。正常な心臓は、基質利用可能性に応えて心筋のFAOとGOの割合を、動的に調節することができ、次いで心臓は、高エネルギーリン酸、特にATPおよびホスホクレアチンの形態でエネルギーを保存することができる。これにより、心臓は基本的な機能を維持することおよび需要の増加に応えて収縮性を増加することの両方のために、十分なエネルギー貯蔵の維持を確かにする。しかしながら、拡張型心筋症をもつ患者では、約20のエネルギーしかFAOにより供給されず、残りはGOにより供給される。グルコース優先のこの代謝基質シフトは、部分的には、脂肪と比べてグルコースがエネルギー的により高い効率より低い酸素使用であるという結果でありうる。しかしながら、グルコースへの相対的により高い依存にもかかわらず、グルコース取り込みおよび利用が損なわれること、心筋のインスリン耐性がこれら患者において持続することの両方の証拠がある。脂肪酸およびグルコースを代謝する能力のこの減少は、心筋のATP含有量の減少および全体的な高エネルギーリン酸利用可能性の減少に関連し、この損なわれたエネルギー状態が、疾患を特徴付ける心筋機能障害に寄与する可能性が高い。総合して、これらの観察は、拡張型心筋症およびCHFをもつ患者において、心筋のグルコース代謝の活性化またはグルコースの心筋への利用可能性の増加が、心筋のエネルギーの改善および心機能の改善をもたらしうるという仮説を示唆している。よって、GLP‐1アゴニストのような治療は、心筋のインスリン作用を増加し、グルコース酸化の改善、最終的には心室の効率および運動耐容能の改善をもたらしうる。グルカゴンGlucogan様ペプチド‐1GLP‐1は、栄養摂取に応答して腸L細胞によって分泌されるインクレチンホルモンである。GLP‐1は、インスリン分泌を刺激すること、グルカゴン分泌を阻害すること、胃内容排出を遅延すること、満腹を増進ずることによって、グルコースホメオスタシスを制御する。GLP‐1の主要な生理作用は、血糖管理と関連するが、GLP‐1が心血管生理においても重要な役割を果たしうること示す証拠が増えてきている。また、GLP‐1受容体は、心血管組織にも発現され、アゴニストによるGLP‐1受容体の活性化は、広範囲の心血管系作用をもたらす。GLP‐1は、心臓においてインスリン模倣剤として機能することが示されており、心臓でのグルコース代謝を直接的に調節することができるBanetalCirculation20081172340。GLP‐1が、生体外BanetalCirculation20081172340および生体内BoseetalCirculation20081172340の両方において、心筋虚血再かん流傷害に対して心臓を保護することが示された。最も大切なこととして、72時間のGLP‐1の短期注入が、心不全患者における心機能を顕著に改善することが報告されており、GLP‐1および模倣剤が心不全の新規の治療方法として使用されうることを示唆しているNikolaidisetalCirculation20041099625。この試験では、本発明者らは、FDG‐PETを使用して、心筋のインスリン作用およびグルコース酸化の代わりの尺度として、心筋のグルコース取り込みを測定するであろう。グルコース取り込みは、左心効率および運動耐容能の変化と相関付けられるであろう。末期の心不全が、心臓の2つの主要な代謝基質である脂肪酸およびグルコースを代謝する能力の障害により特徴付けられることを示す証拠が増加している。低下した心筋のATPおよびホスホクレアチン含有量の形での、結果として生じる心筋のエネルギー枯渇は、心室機能障害および心拍出量の減少に寄与する有力なものであると考えられている。特に、心筋のインスリン耐性は、糖尿病に関連する心不全の発症において重要な役割をすると見られている。多数の急性の心筋傷害および慢性心不全の動物モデルの研究は、GLP‐1受容体アゴニストの投与が、心筋傷害の減少および心筋機能の改善をもたらすことを示しているTimmersLetalJAmCollCardiol200953501NoyanAshrafMetalDiabetes200958975BanKetalCirculation20081172340NikolaidisLCirculation2004110955。本明細書の実施例1に示すように、ラットの急性心筋虚血/再かん流傷害モデルにおいて、アルビグルタイドは、顕著に梗塞サイズを減少する。また、本明細書の実施例1および2に示すように、梗塞サイズの顕著な減少は、投与量依存的であった。虚血後の左室心機能もまた、改善した。げっ歯類モデルにおいて、アルビグルタイドが心保護可能である厳密な機序は調査されなかったが、増加したインスリン分泌の間接的な効果、または心筋上のGLP‐1受容体作動の直接的な効果であると仮定されることができる。心筋のグルコース取り込みを検討するための進行中の実験では、予備データは、GLP‐1ペプチドおよびアルビグルタイドの両方の、生体内およびインビトロでのグルコース取り込みを増加する能力を示している。GLP‐1受容体作動の心筋機能への効果は、GLP‐1ペプチドの連続注入を使用する幾つかの予備的臨床研究で調査されている。これらの研究により、GLP‐1ペプチド注入が、慢性心不全をもつ対象における運動耐容能を増加すること、急性心筋梗塞をもつ患者における左心駆出分画を改善すること、および心臓手術後の患者における昇圧薬の静脈内投与の必陽性を減少することが報告されている。各ケースにおいてGLP‐1投与が心機能に有益な効果を生み出す主要な機序は、心筋のインスリン耐性の寛解および心筋グルコース利用の改善を通してであると考えられている。GLP‐1ペプチドがGLP‐1アゴニストの心筋機能への有益な効果をサポートするという既存の前臨床データおよび臨床的な証拠に基づいて、本発明者らは、アルビグルタイドの投与が、慢性心不全および心室機能障害をもつ患者における心筋のグルコース取り込みおよび利用/酸化を促進し、心筋のインスリン作用の増加することによって、全体的な心臓エネルギー効率を改善することおよび心機能を増強すると仮定する。概念研究のこの調査報告は、慢性の非虚血性の拡張型心筋症に伴う、安定なニューヨーク心臓協会NewYorkHeartAssociationNYHAクラスII~III心不全をもつ患者で行われるであろう。主要評価項目は、アルビグルタイド投与が、FDG‐PETによって測定される心筋におけるグルコース取り込みおよび利用を増加し、心筋効率の増加および運動耐容能の増加をもたらすという仮説をテストすることに向けられている。1つ以上の主要評価項目への統計的に有意な効果、または心筋の生理への臨床的に関連する効果を示唆する総合的なシグナルのいずれかとして定義される肯定的な結果は、慢性心不全集団におけるさらなる発症に、進行可能性の証拠を提供することになる。投与量理論的根拠この第II相概念実証研究は、プラシーボと比較して、アルビグルタイドの投与量の範囲の投与量応答、有効性、安全性、および忍容性を、12週間の治療期間にわたって、NYHAクラスII/III心不全をもつ患者において評価するであろう。週1回皮下注射として投与される予定される投与量は、3.75mg、15mg、および30mgである。投与量範囲は、以前の研究からのアルビグルタイドに関する安全性および忍容性データ、うっ血性心不全をもつ患者における心機能へのGLP‐1の効果を評価した既報の臨床研究からのその有効性データ、および前臨床実験におけるアルビグルタイドに関する薬力学データに基づいて選択された。有効性の標的濃度を確立するために、既報のデータを、慢性心不全をもつ患者SokosetalJCardiacFailure200612684および成功した再かん流後の急性心筋梗塞および左心機能不全をもつ患者NikoladisetalCirculation2004109962965におけるGLP‐1の心機能への効果および臨床転帰を検討した2つの研究から精査した。これらの研究では、~50~100pMの範囲内のGLP‐1血漿濃度が、肯定的な結果を生み出した。Sokosらは、標準的治療にくわえてGLP‐1の5週間注入2.5pmol/kg/分を使用して、NYHAクラスIII/IV慢性心不全をもつ患者n=12において、GLP‐1の使用を調べたSokosetalJCardiacFailure200612684。長期のGLP‐1治療は、左心駆出分画率21±3から27±3、p<0.01、最大心筋酸素消費10.8±0.9mL/O2/分/kgから13.9±0.6mg/O2/分/kg、p<0.001、6分間歩行距離232±15mから286±12m、p<0.001およびミネソタ心不全MinnesotaLivingwithHeartFailureクオリティオブライフスコア64±4から44±5、p<0.01の顕著な改善をもたらした。対照患者n=9では、顕著な効果は、これらパラメーターのいずれにも見られなかった。2つ目の研究では、GLP‐1投与1.5pmol/kg/分、72時間は、標準的治療を受けた対照群と比較して、成功した直接的血管形成術後の急性心筋梗塞をもつ10患者における左心駆出分画率29±2から39±2、p<0.01の顕著な改善をもたらした。くわえて、心室全体の壁運動スコアおよび局所的な壁運動スコア指数の改善が、観察されたそれぞれ、1.94±0.11から1.63±0.09、p<0.01、および2.53±0.08から2.02±0.11、p<0.01NikoladisetalCirculation2004109962965。この場合も先と同様に、これら肯定的な効果は、対照群n=11では見られなかった。インビトロ細胞培養研究により、アルビグルタイドは、GLP‐1受容体アゴニストとしての効力がGLP‐1より約10倍弱いことが示された。既報の臨床研究で達成されたGLP‐1濃度から決定した有効性に必要とされるGLP‐1範囲の上限を使用し、効力および分子量の違いを考慮して、約77ng/mLのアルビグルタイドの標的濃度が、左心LV機能への臨床的に重要な効果を生み出すのに必要であると予想された。しかしながら、必要標的濃度のこの推定に不確実な可能性があるため、以前の研究2型糖尿病対象においてアルビグルタイドをバイエッタ商標と比較する、16週間投与量決定試験によって開発された薬物動態モデルを使用してシミュレーションを行い、この研究で提案された投与量範囲が、自然のGLP‐1の潜在的効力と比較して、広い範囲のアルビグルタイドの潜在的効力で与えられた推定標的濃度を満足するかどうかを評価した。ありうる投与量およびありうる効力の差の範囲についての標的達成率を、表4に示す。自然のGLP‐1に対する想定効力範囲の範囲内で、アルビグルタイドの効力が、自然のGLP‐1の効力より10~100倍低い場合、この研究の提案した投与量範囲は、効果のある濃度を達成する高い可能性を有する。アルビグルタイドのCHFに対する効力が、これより低い場合、標的濃度に達する確率はかなり低く、30mgより高い投与量が恐らく必要とされることになる。週30mgより高い投与量は、重篤なGI有害事象に関連するので、週30mgの現行最高開始投与量が選択された。アルビグルタイドが、週1回30mgとして投与されたとき、吐き気および/または嘔吐の頻度は29.0であったRosenstocketalDiabetesCare20093218801886。それに比較して、2週間毎に50mgまたは毎月100mgとして投与されたとき、頻度は54.3および55.9であった。50mgの投与量に伴う消化管GI事象は、その後の投薬とともに減退したので、必要に応じて、30mgより高い投与量に漸増することが可能である。最低投与量は、インビトロ効力データに基づいて予想90標的達成率を達成するために3.75mgとして選択された。1.88mgおよび7.5mgの投与量は、この研究に選択されなかった。1.88mgの投与量は、自然のGLP‐1と比較して1/10のアルビグルタイド効力で、予想標的達成率90を達成しない。7.5mg投与量は、3.75mg投与量と比較して、投与量応答カーブを描くのに役立つさらなる情報を少ししか提供しないことが予想される。表4GLP‐1ペプチドに相対的なアルビグルタイド想定効力の範囲に基づく、定常状態での平均血漿濃度の標的達成率Cpavess目的一次プラシーボと比較したアルビグルタイドの投与量の、NYHAクラスII/III心不全をもつ患者における心筋のグルコース取り込みへの治療効果を3ヵ月間にわたって決定すること。プラシーボと比較したアルビグルタイドの投与量の、NYHAクラスII/III心不全をもつ患者における心筋効率への治療効果を3ヵ月間にわたって決定すること。プラシーボと比較したアルビグルタイドの投与量の、NYHAクラスII/III心不全をもつ患者における運動能力への治療効果を3ヵ月間にわたって決定すること。二次プラシーボと比較したアルビグルタイドの投与量の、左室機能への治療効果を、心エコー検査を使用して決定すること。単施設で行われるサブスタディでは、プラシーボと比較したアルビグルタイドの投与量の、左および右心室容積、駆出分画率および心筋重量への治療効果を、心磁気共鳴画像法CMRを使用して決定すること。プラシーボと比較したアルビグルタイドの投与量の、6分間歩行距離への治療効果を決定すること。プラシーボと比較したアルビグルタイドの投与量の、CHFの重症度の指標である血清BNPへの治療効果を決定すること。プラシーボと比較したアルビグルタイドの投与量の、グルコース代謝のバイオマーカーへの治療効果を決定すること。プラシーボと比較したアルビグルタイドの投与量の、グルコース代謝のバイオマーカーへの治療効果を決定すること。プラシーボと比較したアルビグルタイドの投与量の、クオリティオブライフ尺度への治療効果を決定すること。NYHAクラスII/III心不全をもつ患者におけるアルビグルタイドの安全性および忍容性を3ヶ月治療期間にわたって評価すること。診査薬物動態/薬力学分析も、アルビグルタイドのトラフ血漿濃度を使用して行われうる。評価項目一次FDG-PETイメージングによって評価した心筋のグルコース利用安静時に評価した心筋の効率遂行作業/MVO2:心エコーにより計算されるSV11C‐アセテートPETイメージングによって評価されるMVO2自転車心肺運動負荷試験によって評価したピーク酸素取り込みVO2max二次全施設での、心エコー図によって評価した左心室機能LVEF、心収縮期および心拡張期におけるLV容積また、単施設で行われるサブスタディでは、LVおよびRV機能も心磁気共鳴画像法CMRによって評価されるであろうLVEF、心収縮期および心拡張期におけるLVおよびRV容積、LV質量6分間歩行試験によって評価される運動耐容能血清NT‐BNPレベルグルコース、インスリン、遊離脂肪酸の血漿レベル;HOMA指標ミネソタ心不全質問表MinnesotaLivingwithHeartFailureQuestionnaireによって評価されるクオリティオブライフAUC、CMAXおよびCtを含むこれらに限定されない診査のPKパラメーターが測定されうる。安全性評価項目:以下を含むがこれらに限定されない安全性評価項目:a.大動脈駆出音Aesの発生率および重症度b.全原因死亡率c.心不全による入院治験計画研究デザイン/概略これは、無作為に選ばれた、約120名の慢性の非虚血性の拡張型心筋症に伴う安定NYHAクラスII~III心不全をもつ対象を登録する、多施設、無作為化、プラシーボ対照、単盲検の対象および治験責任医師は内容を知らされないであろう、並行群間デザインであろう。無作為に選ばれた対象について~20の無作為化後脱落率を仮定し、この数から、各治療群プラシーボ、3.75mg、15mgおよび30mgアルビグルタイドで~25名の評価対象となるであろう。対象は、音声自動応答システムIVRSを用いて性別の層別化をする研究に、最適に無作為化され、以下に列挙される治療計画の1つを受けるであろう。A:アルビグルタイド3.75mgB:アルビグルタイド15mgC:アルビグルタイド30mgD:アルビグルタイドに整合したプラシーボアルビグルタイドまたはプラシーボに無作為に選ばれた対象は、病院を訪れ、現場スタッフによる毎週皮下注射を受けるであろう。安全性、PKおよびPD分析用血液試料、ならびにイメージング、運動試験、安全性および忍容性評価AE、バイタルサイン、ECG、などを含むは、計画予定表に示された試験のための訪問時に採集/評価されるであろう。この試験の間、第1週と第13週の2回の一泊の滞在があり、イメージングと運動試験が可能であろう。その一泊の滞在の詳細は、試験手順マニュアルSPMに概説されるであろう。追跡調査の訪問は、試験薬の最終投薬の28日±3日後に行われるであろう。対象が時期尚早に中止する場合、治験責任医師と相談して治験依頼者の裁量で追加の対象が登録されうる。追加のデータが、安全性、忍容性の確立、またはPKおよびPDパラメーターもしくは試験追加投与量レベルのより良い特徴付けに必要であるならば、進行中の安全性、PKおよびPDデータに基づいて、追加の対象は所定のレベルにて投薬されうる。この試験への参加の期間は、審査から追跡調査まで約20週間であると予想されている。CMRサブスタディまた、単施設に登録される資格のある対象は、ベースライン第1週にCMRスキャニングを受けた後、アルビグルタイドまたはアルビグルタイドに整合したプラシーボの最初の投与を受け、第13週の試験の治療期間の終わりに、CMRスキャニングを受けるであろう。治療割り当て対象は、有効な内部ソフトウェアを使用して、試験の開始前に、DiscoveryBiometricsによって作製された無作為化スケジュールに従って、並行治療群列に割り当てられるであろう。対象は、音声自動応答システムIVRSを用いて、試験に無作為化され、以下に列挙された治療計画の1つを受ける。投与量調整/中止有効性基準現行の投与量レベルの効果、および十分な薬力学効果を達成しない投与量レベルへの継続した無作為化の利用を評価するために、中間の分析がこの試験に計画される。この試験の適格性基準は、以下を含むであろう:対象は、以下の基準のすべてに当てはまる場合のみ、この試験に含まれる資格があるであろう:非虚血性起源の慢性拡張型心筋症審査/ベースライン訪問の少なくとも3ヶ月間の最適治療法での臨床的安定直近12ヶ月の任意の測定によって評価された左心室駆出分画率≦35登録の最短6ヶ月間のNYHAクラスII/III心不全同意書にサインする時点で年齢21歳以上75歳以下の男性または女性。しかしながら、この試験の最適な年齢範囲は、年齢40~65歳と思われる。女性対象は、以下の場合、参加する資格がある:文書で記録された卵管結紮もしくは子宮摘出を受けた閉経期前の女性として定義される妊娠可能性がない、または12月間の自然な無月経として定義される閉経後である疑わしい症例では、血液試料で、卵巣刺激ホルモンFSH>40MlU/mLおよびエストラジオール<40pg/mL<140pmol/Lを同時に確認。ホルモン置換治療HRTを受けており、閉経に関する状態が不確かな女性は、試験中にHRTを継続したいならば、1つの避妊方法を使用することが求められるであろう。そうでなければ、彼女らは、試験登録前に閉経期後の状態を確認できるようにHRTを中止しなければならない。たいていの形態のHRTについて、治療の休止と採血との間は、少なくとも2~4週間経るであろう。この間隔は、HRTのタイプおよび投与量に依存する。彼女らの閉経期後状態の確認に続いて、彼女らは、試験中、避妊方法の使用なしにHRTの使用を再開することができる。妊娠可能性があり、適切な製品ラベルまたは治験責任医師により決定された期間の間、その時点での妊娠の恐れを十分に最小限にするための1つの避妊方法の使用に同意する。女性対象は、最終投薬の~28日後の追跡調査の訪問まで、避妊薬を使用することに同意しなければならない。同意書に列挙される必要および制限事項へのコンプライアンスを含む、書面インフォームドコンセントを付与する能力。脚ブロックをもつ対象では、QTcBもしくはQTcF<450msec;またはQTc<480msecの確認。ASTおよびALT<2×ULN;アルカリホスファターゼおよいビリルビン>1.5×ULNビリルビンが分画され、直接ビリルビン<35である場合、単離ビリルビン>1.5xULNは許容可能。対象は、能力/運動試験を行うことができなければならない。以下の基準のいずれかが適応される場合、対象は、この試験に含まれる資格がないであろう:審査前3ヶ月以内、試験前B型肝炎表面抗原陽性またはC型肝炎抗体結果陽性薬物/アルコール依存歴HIV抗体テスト陽性カルシトニン>100pg/mLトリグリセリド>850mg/dL胃バイパスおよび胃バンディング術、幽門洞切除術、ルーワイRoux-en-Yバイパス、胃迷走神経切離術、小腸切除術、または上部消化管機能に大きく影響すると考えられる手術を含む重大な消化管手術歴以下で定義される試験6ヶ月以内の通常アルコール摂取歴:英国用:平均の毎週の摂取、男性、>21ユニットまたは、女性、>14ユニット。1ユニットは、8gのアルコール:半パイント~240mLのビール、1杯125mLのワイン、または125mL量りmeasureのスピリッツに相当する。米国用:平均の毎週の摂取、男性、>14杯drinksまたは女性、>7杯。1杯drinkは、12gのアルコール:12オンス360mLのビール、5オンス150mLのワイン、または1.5オンス45mLの80プルーフ蒸留スピリッツに相当する。対象は、臨床試験に参加し、現試験の最初の投薬日前に以下の期間に治験薬を受け取る:30日、5半減期、または治験薬の生物学的作用の2倍の期間どちらか長い方。最初の投薬日前12ヶ月以内の4つより多い新しい化学物質への暴露アルビグルタイド、他のいずれかのGLP‐1類似体、またはパン酵母に対する、既知のアレルギーまたは感受性の既往歴試験に参加した際、56日の期間内に、血液または血液生成物を、500mLを超えて提供する結果になる。審査時または投薬前に血清または尿hCG試験陽性により決定された妊娠女性授乳中の女性プロトコールに概略された手順に従うことを避けようとすることまたは従うことができないこと例えば、精神障害に関連して。対象が、精神的または法的無能力である。既知の糖尿病の診断、空腹時グルコース>140mg/dL、またはHbA1c>7異常甲状腺刺激ホルモンTSHとしての未矯正の甲状腺疾患兆候審査時、基準範囲外1年未満の平均余命の他の医学的問題以下を含む心筋症または左心機能不全他の原因:i.未矯正の原発性の閉塞性または逆流性弁膜症ii.アミロイドーシス、ヘモクロマトーシス、サルコイドーシスまたは他の原因による拘束型心筋症iii.壁厚>1.5cmの心肥大iv.アルコールにより誘発される心筋症v.出産後12ヶ月間に心不全をもつ女性vi.複雑心奇形vii.アントラサイクリンに誘発される心筋症骨格筋の遺伝障害例えば、デュシェンヌ型筋ジストロフィーをもつ対象臨床的に重大な心膜疾患ステータス1Aまたは1Bとして心膜移植待機リストに載る深部静脈血栓症または既知の凝固障害の既往歴膵炎の既往歴甲状腺髄様癌の既往歴または家族歴多発性内分泌腫瘍症2型の既往歴または家族歴以下のいずれかを含む臨床的に重大なCADの既往歴:i.区域壁運動異常につながる前STEMIii.前冠動脈造影からの構造に基づいた>70主要血管の障害のあるCADの存在iii.過去6ヶ月以内の不安定狭心症による入院iv.PIの判断でのCADをもつ高いリスク審査時、推定GFR<60mL/分の腎機能障害の既往歴安静時収縮期血圧<85mmHg、もしくは>170mmHg;または審査時、拡張期血圧>110mgHg患者が、イメージング評価の完了に、延べ合計最高4時間、横たわることができない。以下を含むがそれらに限定されないMRIスキャニングへの禁忌を有する対象は、CMRサブスタディを行う単施設に登録されないであろう:適切な手術立体構造をもつ頭蓋内動脈瘤クロップ杉田Sugitaクリップの除く眼窩内の金属片の既往歴ペースメーカーまたは非MR適合心臓弁内耳埋め込み治験責任医師により重大と見なされる閉所恐怖症の既往歴心筋のグルコース取り込み[18F]フルオロ‐2‐デオキシ-グルコース陽電子放射断層撮影FDG‐PETイメージングが、ベースラインおよび治療終了時第13週に行われ、心筋のグルコース取り込みを評価するであろう。対象は、各イメージング/注入試験の前の夕方に、各イメージング施設のそれぞれの研究ユニットまたはそのコンポーネントに収容されるであろう。18:00時に、対象は、体重1kg当たり約12kcalを含有する標準的な食事を摂る。炭水化物、脂肪、およびタンパク質は、総エネルギー摂取量のそれぞれ約55、30、および15に相当するであろう。20:00時に、対象は、~250kcal、40gの炭水化物、6.1gの脂肪、および8.8gのタンパク質を含有する規定の液体調合軽食を摂るであろう。この軽食後、対象は全員、翌日の試験の完了まで絶食するであろう。概日リズムの心筋代謝への影響を最小にするために、すべての試験は、~8:00時に開始されるであろう。心筋効率心筋効率の1つの尺度は、Lindnerらで検討されたworkmetabolicindexWMIである。11C-アセテートを使用するMVO2測定:TCA回路を通した総合的な心筋の酸化の流量を表わす心筋の11C‐活性のクリアランスの速度を測定することによって、各試験について、心筋の酸素消費MVO2が推定されるであろう2。心筋の11C活性のクリアランスに単一指数関数を適合することによって、各心筋の関心領域ROIについて、速度定数Km分-1が測定されるであろう。11C‐アセテート曲線の直線部の外側のデータポイントを含むことを防ぐために、直線部の最初および最後のデータポイントは、データを適合する前に作業者によって視覚的に選択されるであろう。所定の試験について、Kmの平均値およびSDは、3つの心室中部前外側のROIから得られるKm値を平均することによって計算されるであろう。このKm値は、前方LV仕事の心エコー測定と併せて使用されるであろう。酸素取り込み:ピーク酸素取り込みは、ベースラインおよび第13週に測定されるであろう。患者は、自転車エルゴメータで、呼吸困難または疲労が現れない程度の最大運動試験を行うであろう。安静期間の後、作業負荷は、3分毎に25ワットづつ段階的に増加するであろう。運動中ずっと、呼吸毎のガス交換および心拍数が、測定されるであろう。各3分作業負荷の間、ボルグRPEおよび血圧が得られるであろう。ピークの運動時、心拍数、血圧、およびボルグRPEが記録されるであろう。ガス交換評価項目は、ピークVO2、Ve/VCO2スロープ、RER、運動時間、ならびに換気閾値でのVO2ならびに時間を含む。左心駆出分画率診査CMRサブスタディは、LV容積、RV容積、両室EFおよびLV質量のさらなる測定を含むであろう。サブスタディは、正式に動いていておらず、採用は、実現可能性に基づくであろう。しかしながら、CMRの精度は、心エコー検査法のそれより実質的に高い。Bellengerら2000年は、心エコー検査に対して駆出分画率での同等の変化の測定に関して標本の大きさの80もの減少を推定している。左心駆出分画率心エコー検査法心エコー検査法が、ベースラインおよび第13週に、脈波、連続波、組織ドップラーを使用して行なわれるであろう。評価項目は、左室構造および機能:左室拡張期末および収縮期末容積2D、左心駆出分画率2D、心拍出量、心指標およびTDIによるEm拡張機能の測定からなるであろう。左心駆出分画率CMRIベースラインおよび3ヶ月処置段階後に、非コントラストCMRが、運動試験後安静期間に続いて行われるであろう。Kramerら2008年により推奨された順序を含めて3TMRI検査が、LV構造および機能の評価のために、総検査時間が約90分を超えないように行われるであろう。測定は、Cerqueiraら2002年の推奨に一致して、定量的容積分析法を使用してなされ、報告されるであろう。6分間歩行試験6MWT6分間歩行試験が、ベースラインおよび試験終了時第13週に行われるであろう。患者全員が標準的な指示を受け、歩行距離が測定されるであろう。評価項目の組み合わせ単一の一次評価項目または評価項目の組み合せが、薬力学的機序の証明に導くことができる複数のシナリオがある。例えば、LVEFまたは6MWTの増加と連動した心筋効率における観察された有効性は、1つのそのようなシナリオである。例4:GLP‐1および心血管保護序論:以前の研究は、グルカゴン様ペプチド‐1GLP‐1が、その末梢血糖管理における役割に非依存的な心血管有益性を引き起こすことを示している。しかしながら、心保護に関する正確な機序は、未解決のままである。この例は、GLP‐1が、ラットにおいて、心筋グルコース利用を増強すること、およびエネルギー的に好ましい代謝基質の切り換えを促進することによって、直接的な心保護の役割を果たすことを示す。方法:スピローグドーリーSpragueDawleySDラットを、無作為化し、ビヒクルもしくは4.8pmol/kg/分のGLP-1を、30分間の心虚血、それに続く24時間の再かん流心I/R傷害の間に投与するか、または300pmol/kg/分のGLP-1を最高3.5時間基質切り換え投与した。正常またはI/R傷害心臓における相対的な炭水化物酸化および脂肪酸酸化を、1‐13CグルコースクランプおよびNMRをベースにしたアイソトポマー分析の後に測定した。O2消費は、成体ラット心室筋細胞ARVMで測定した。グルコース利用および乳酸生産は、正常な心臓において、[3H]‐2‐デオキシグルコースまたはランゲンドルフかん流を使用して評価した。結果:GLP‐1は、I/R傷害心臓において心筋梗塞サイズを減少し↓27虚血性の領域の、p<0.05、N=6、収縮性を増加した↑20のdP/dt、p<0.05、N=6。また、GLP‐1は、LV非虚血性境界域における脂肪酸化に対する炭水化物酸化の比率を増加する↑14、p<0.01、N=6ことによって、代謝基質の切り換えを誘導した。cAMP↑106、p<0.05、N=5および乳酸↑121、p<0.01、N=6の増加にもかかわらず、LV虚血性域では、基質の切り換えは起こらなかった。また、GLP‐1は、正常な心臓における生体内グルコース取り込み↑64、p<0.05、N=8をグリコーゲンレベルに影響を及ぼすことなく増加し、ランゲンドルフかん流心臓におけるグルコース取り込みおよび乳酸生産をそれぞれ1.9倍および2.6倍増加した。GLP‐1処置ARVM↓23、p<0.05、N=4では、酸素消費の減少が観察され、これは、脂肪酸化から炭水化物酸化への切り換えと一致する。結論:これらの結果は、観察された心保護が、GLP‐1の心筋への直接的な役割に由来しうることを示す。嫌気的解糖は、虚血性の心保護に寄与しうるが、健康な、非虚血性の心筋における、よりエネルギー的に好ましい炭水化物酸化へのシフトは心収縮性の維持に有益な役割を果たしうる。本出願が優先権を主張するあらゆる特許出願はまた、特定の刊行物および参照文献について上記に記載した方法で、参照によりその全体が本明細書に取り込まれる。"