"シスプラチンミセルの生成方法であって、aシスプラチン混合物を形成するために、シスプラチン及びホスファチジルグリセロール脂質誘導体を、1:1~1:2の範囲で組合し;そしてbシスプラチンミセルを形成するために、前記段階aの混合物と、少なくとも30濃度のエタノール溶液のシスプラチンミセルを形成するために有効な量とを一緒にする;ことを含んで成る方法。シスプラチンミセルの生成方法であって、aシスプラチンと、少なくとも30濃度のエタノール溶液のシスプラチンエタノール溶液を形成するために有効な量とを一緒にし:そしてbシスプラチンミセルを形成するために、前記溶液と、ホスファチジルグリセロール脂質誘導体とを、1:1~1:2の範囲で一緒にする;ことを含んで成る方法。前記ホスファチジルグリセロール脂質誘導体が、ジパルミトイルホスファチジルグリセロールDPPG、ジミリストイルホスファチジルグリセロールDMPG、ジカプロイルホスファチジルグリセロールDCPG、ジステアロイルホスファチジルグリセロールDSPG及びジオレイルホスファチジルグリセロールDOPGから成る群から選択される請求項1又は2記載の方法。前記モル比が1:1である請求項1又は2記載の方法。有効量の遊離フソゲンペプチド、フソゲンペプチド-脂質接合体又はフソゲンペプチド-PEG-HSPC接合体を、前記段階aの混合物と一緒にすることを含んで成り、ここで前記フソゲンペプチドは、N又はC-末端で一連の1~6個の負に荷電されたアミノ酸により誘導体化され、そして従って、静電的にアクアプラチンに結合できる請求項1又は2記載の方法。前記フソゲンペプチド又はフソゲンペプチド脂質接合体が、DOPE又はDOPEカチオン性脂質を含んで成る請求項5記載の方法。請求項1又は2記載の方法により得られるシスプラチンミセル。請求項5記載の方法により得られるシスプラチンミセル。シスプラチンミセルを封入するための方法であって、有効量の小胞形成脂質と請求項1又は2記載のシスプラチンミセルを混合することを含んで成る方法。請求項9記載の方法により得ることができる封入されたシスプラチン。前記脂質が、コレステロール10~60、水素された大豆ホスファチジルコリンHSPC40~90及びポリエチレンリコール-HSPC1~7から構成される予備製造された中性リポソーム、又は溶液での脂質、粉末での脂質及びPEG-DSPEから選択される請求項10記載の方法。前記脂質が、10~60のコレステロールを含んで成る請求項10記載の方法。対象に投与される場合、その免疫系のマクロファージ及び細胞を回避できるシスプラチン脂質複合体を得るための方法であって、有効量の請求項9記載のシスプラチンミセルと、有効量のPEG-DSPE、PEG-DSPC又はヒアルロン酸-DSPEとを混合することを含んで成る方法。前記シスプラチンミセルからのエタノールの除去をさらに含んで成る請求項1又は2記載の方法。前記エタノールの除去が、エタノールを除去するための透析膜を通してのミセルの透析による請求項14記載の方法。請求項11記載の方法により得られる封入されたシスプラチン。請求項13記載の方法により得られる封入されたシスプラチン。細胞にシスプラチンを供給するための方法であって、前記細胞と、請求項15記載の封入されたシスプラチンとを接触せしめることを含んで成る方法。細胞にシスプラチンを供給するための方法であって、前記細胞と、請求項17記載の封入されたシスプラチンとを接触せしめることを含んで成る方法。対象における腫瘍の増殖を阻害するための方法であって、有効量の請求項16記載の封入されたシスプラチンを前記対象に投与することを含んで成る方法。対象における腫瘍の増殖を阻害するための方法であって、有効量の請求項17記載の封入されたシスプラチンを前記対象に投与することを含んで成る方法。対象における固形腫瘍及び転移を標的化するための方法であって、有効量の請求項16又は17記載の封入されたシスプラチンの静脈内投与を含んで成る方法。対象における腫瘍の細胞膜を侵入するための方法であって、請求項7記載の方法により得られる有効量のシスプラチンミセルを投与することを含んで成る方法。対象における腫瘍増殖を阻害するための方法であって、有効量の請求項10記載の封入されたシスプラチン、及びp53、pax5及びHSV-tk遺伝子から成る群から選択された遺伝子を前記対象に投与することを含んで成る方法。有効量の封入されたガンシクロビルを投与することをさらに含んで成る請求項24記載の方法。シスプラチンと組合されるべき遺伝子が、封入されたIL-2、IL-4、IL-7、IL-12、GM-CSF,IFN-γ、TNF-α、RB、BRCA1、E1A、シトシンデアミナーゼ、並びに封入された5-フルオロシトシン、bcl-2、MDR-1、p21、p16、bcl-xsE2FIGFIVEGFTGF-β及び同様のもののいずれか又はそれらの組合せである請求項24記載の方法。請求項10記載の封入されたシスプラチン、及び封入されたオリゴヌクレオチド、リボザイム、三重体triplex又はPNAを含んで成る組成物。請求項10記載の封入されたシスプラチン、及びドキソルビシン、フルオロデオキシウリジン、ブレオマイシン、アドリアマイシン、ビンブラスチン、プレドニゾン、ビンクリスチン及びタキソールから成る群から選択された薬剤を含んで成る組成物。本発明の実施は、特にことわらない限り、免疫学、分子生物学、微生物学、細胞生物学及び組換えDNAの従来の技法を用いるであろう。それらの方法は、次の出版物に記載されている。例えば、SambrookなどMolecularCloningALaboratoryManual2ndeditionCurrentProtocolsinMolecularBiologyTheseriesMethodsinEnzymologyPCRAPracticalApproavhPCR2APracticalApproachAntibodiesALaboratoryManual及びAnimalCellCultureを参照のこと。本明細書及び請求の範囲において使用される場合、単数形不定冠詞及び定冠詞は、特にことわらない限り、複数の参照も包含する。例えば、用語細胞とは、多くの細胞、例えばその混合物も包含する。用語含んで成るとは、組成物及び方法が列挙される要素を包含するが、しかし他の排除するものではない。組成物及び方法を定義するために使用される場合、~から実質的に成るとは、いずれかの必須の重要な他の要素の排除を意味するであろう。従って、要素から実質的に成る組成物は。方法及び医薬的に許容できるキャリヤー、例えばリン酸緩衝溶液、保存剤及び同様のもの。~からなるとは、他の成分中の微量元素の排除及び本発明の組成物の投与のための実質的な方法段階を意味するのであろう。個々のそれらの推移用語により定義される態様は、本発明の範囲内である。用語ポリヌクレオチド及び核酸分子とは、いずれかの長さのヌクレオチドのポリマー形を言及するために交換可能的に使用される。ポリヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド及び又はそれらの類似体を含むことができる。ヌクレオチドは、いずれかの三次元構造を有し、そしていずれかの知られているか又は未知の機能を行うことができる。用語ポリヌクレオチドとは、例えば一本鎖、ニ本鎖及び三本鎖ヘリックス分子、遺伝子又は遺伝子フラグメント、エキソン、イントロン、mRNAtRNAリボザイム、cDNA組換えポリヌクレオチド、枝分かれポリヌクレオチド、プラスミド、ベクター、いずれかの配列の単離されたDNA、いずれかの配列の単離されたRNA、核酸プローブ及びプライマーを包含する。核酸分子はまた、修飾された核酸分子を包含することができる。遺伝子とは、転写され、そして翻訳された後、特定のポリペプチド又はタンパク質をコードすることができる少なくとも1つの読み取り枠を含むポリヌクレオチドを言及する。組成物とは、活性剤、及び他の不活性例えば、検出剤又はラベル、又は医薬的に許容できるキャリヤー又は活性化合物又は組成物、例えばアジュバントの組合せを意味する。医薬組成物とは、インビトロ、インビボ又はエクスビボでの診断又は治療的使用のために組成物を適切にする不活性又は活性キャリヤーと活性剤との組合せを包含する。本明細書において使用される場合、用語医薬的に許容できるキャリヤーとは、標準の医薬キャリヤー、例えばリン酸緩衝溶液、水及びエマルジョン、例えば油水又は水油エマルジョン、及び種々のタイプの湿潤剤のいずれかを包含する。組成物はまた、安定剤及び保存剤も含むことができる。キャリヤー、安定剤及びアジュバントの例に関しては、MartinRemington’ssti15thEdを参照のこと。有効量とは、有益な又は所望の結果をもたらすのに十分な量である。有効量は、1又は複数回の投与、適用又は用量で投与され得る。哺乳類は、ネズミ、サル、ヒト、家畜、スポーツ用動物、及びペットを包含するが、但しそれらだけには限定されない。対照とは、比較目的のための実験に使用される他の対象又はサンプルである。対照は、正又は負であり得る。例えば、実験の目的が特定型の癌と遺伝子の変更された発現レベルとの相互関係を決定するためである場合、正の対照そのような変更を担持し、そしてその疾病の症候特徴を示す対象又は対象からのサンプル、及び負の対照変更された発現及びその疾病の臨床学的症候を欠いている対象又は対象からのサンプルを使用することが一般的に好ましい。遺伝子供給ビークルとは、宿主細胞中に挿入されたポリヌクレオチドを担持することができるいずれかの分子として定義される。遺伝子供給ビークルの例は、リポソーム、カチオン性リポソーム、ウィルス、例えばバキュロウィルス、アデノ関連ウィルス、及びレトロウィルス、バクテリオファージ、コスミド、プラスミド、菌類ベクター、及び種々の真核及び原核宿主における発現のために記載された、及び遺伝子療法及び単純なタンパク質発現のために使用され得る、当業界において典型的に使用される他の組換えビークルである。ウィルスベクターとは、インビトロ、エクスビボ又はインビボのいずれかで、宿主細胞中に供給されるべきポリヌクレオチドを含んで成る、組換え的に生成されたウィルス又はウィルス粒子として定義される。ウィルスベクターの例は、レトロウィルスベクター、アデノウィルスベクター、アデノ関連ウィルスベクター及び同様のものを包含する。遺伝子移行レトロウィルスベクターにより仲介される観点においては、ベクター構造体は、レトロウィルスゲノム又はその一部を含んで成るポリヌクレオチド、及び挿入されたポリヌクレオチドを言及する。本明細書において使用される場合、レトロウィルス仲介された遺伝子移行又はレトロウィルストランスダクションは、同じ意味を担持し、そして遺伝子又は核酸配列が細胞に侵入し、そしてそのゲノムを宿主細胞ゲノム中に組み込むウィルスにより宿主細胞中に安定して移行される工程を言及する。ウィルスは、感染のその通常の機構を通して宿主細胞中に侵入し、又はそれが異なった宿主細胞表面受容体又は細胞に侵入するリガンドに結合するよう修飾され得る。本明細書において使用される場合、レトロウィルスベクターとは、ウィルス又はウィルス様侵入機構を通して細胞中に外因性核酸を導入することができるウィルス粒子を言及する。レトロウィルスは、RNAの形でそれらの遺伝子情報を担持するが、しかしながら、ウィルスが細胞を感染すると、そのRNAは、感染された細胞のゲノムDNA中に組み込まれるDNA形に逆転写される。その組み込まれたDNA形は、プロウィルスと呼ばれる。アデノウィルAd又はアデノ関連ウィルスAAVおいては、ベクター構造体は、ウィルスゲノム又はその一部、及び挿入されるべきポリヌクレオチドを含んで成るポリヌクレオチドを言及する。デノウィルスAdsは、50以上の血清型を包含する、比較的十分に特徴づけられたウィルスの均質グループである例えば、WO9527071号を参照のこと。Adsは、容易に増殖し、そして宿主細胞ゲノム中への組み込みを必要としない。組換えAd-由来のベクター、特に、野生型ウィルスの組換え及び生成のための可能性を低くするそれらのベクターがまた構成されている。WO9500655号;WO9511984号を参照のこと。野生型AAVは、宿主細胞ゲノム中に組み込む高い感染性及び特異性を有する。HermonlandMuzyczkaPNASUSA8164666470LebkowskiなどMolCellBiol839883996を参照のこと。プロモーター、及びポリヌクレオチドが操作可能的に結合され得るクローニング部位の両者を含むベクターは、当業界において良く知られている。そのようなベクターは、インビトロ又はインビボでRNAを転写することができ、そして例えばStratagene及びPromegaBiotechから市販されている。発現及び又はインビトロ転写を最適化するためには、特別の可能性ある不適切な他の翻訳開始コドン、又は転写又は翻訳のレベルで、発現を妨害し、又は低めることができる他の配列を排除するためにクローンの5’及び又は3’未翻訳部分を除去し、付加し、又は変更することが必要である。他方では、コンセンサンリボソーム結合部位が、発現を増強するために開始コドンの5’側にすぐに挿入され得る。遺伝子供給ビークルはまた、いくつかの非ウィルスベクター、例えばDNAリポソーム複合体及び標的化されたウィルスタンパク質DNA複合体を包含する。また標的抗体又はそのフラグメントを含んで成るリポソームも本発明の方法に使用され得る。細胞への供給を増強するためには、本発明の核酸又はタンパク質は、細胞表面抗原、例えばTCR、CD3又はCD4を結合する抗体又はその結合フラグメントに結合され得る。ポリヌクレオチドは、当業界において良く知られている方法を用いて、ベクターゲノム中に挿入される。例えば、挿入体及びベクター分子は、お互い対合し、そしてリガーゼにより連結され得る個々の分子上に相補的末端を創造するために制限酵素と、適切な条件下で接触せしめられ得る。他方では、合成核酸リンカーが、制限されたポリヌクレオチドの末端に連結され得る。それらの合成リンカーは、ベクターDNAにおける特定の制限部位に対応する核酸配列を含む。さらに、終結コドン及び適切な制限部位を含むオリゴヌクレオチドは、選択マーカー遺伝子、例えば哺乳類細胞における安定した又は過渡的なトランスフェクタントの選択のためのネオマイシン遺伝子;高レベルの転写のためのヒトCMVの即時初期遺伝子からのエンハンサープロモーター配列;mRNA安定性のためのSV46からの転写終結及びRNAプロセッシングシグナル;複製のSV40ポリオーマ起点及び適切なエピソーム複製のためのColEI;種々の多クローニング部位;挿入されたポリヌクレオチドの3’側の安定化要素;及びセンス及びアンチセンスRNAのインビトロ転写のためのT7及びSP6RNAプロモーターであり得る。他の手段は当業界において良く知られており、そして入手できる。宿主細胞とは、ベクター、又は外因性ポリヌクレオチド、ポリペプチド及び又はタンパク質の組み込みのための受容体であり得るいずれかの個々の細胞又は細胞培養物を意味する。それはまた、単一の細胞の子孫も包含し、そしてその子孫は、天然、突然又は意図的な突然変異誘発のために、元の親細胞と完全に同一である必要はない形態学的又はゲノム又は全体のDNA補体において。細胞は、原核又は真核細胞であり得、そして細菌細胞、酵母細胞、植物細胞、昆虫細胞、動物細胞及び哺乳類細胞、例えばネズミ、ラット、サル又はヒトを包含するが、但しそれらだけには限定されない。本明細書において使用される場合、用語新形成細胞、新形成、腫瘍、腫瘍細胞、癌及び癌細胞交換可能的に使用されるとは、比較的自主増殖を示す細胞を言及し、その結果、それらは細胞増殖の制御の有意な損失すなわち、規則解除された細胞分裂により特徴づけられる異常増殖表現を示す。新形成細胞は、悪性又は良性であり得る。抑制する腫瘍増殖とは、対照細胞に比較される場合、縮小される増殖状態を示す。腫瘍細胞増殖は、当業界において知られているいずれかの手段、例えば腫瘍サイズの測定、腫瘍細胞が増殖するかどうかの3H-チミジン組み込みアッセイを用いての決定、又は腫瘍細胞の計数により評価され得るが、但しそれらだけには限定されない。抑制する腫瘍細胞増殖とは、次の状態のいずれか又はすべてを意味する:遅延及び停止する腫瘍増殖、並びに腫瘍縮小。発明の態様:ミセル、リポソーム及びそれらを得るための方法:体積単位当たりシスプラチンの含有率を増強し、その毒性を低め、静脈内注入の後、一次腫瘍及びそれらの転移を標的化することができ、そして腫瘍の縮小及びSCIDマウス担持のヒト腫瘍の完全な治療を示す、シスプラチンを脂質中に閉じ込めるための新規方法が提供される。シスプラチンは、そのニ価形で遷移重金属白金の1つの原子に結合されるシス位置に2個の塩素原子及び2個のアミノ基を含む重金属複合体である。それはニ官能価のアルキル化剤及びDNA合成を阻害するDNAインターカレーターである。1つの形においては、シスプラチンは、3001の分子量及び水における1mgmlの制限された溶解性の黄色の粉末である。それは、しばしば、アドリアマイシン、ビンプラスチン、ブレオマイシン、プレドニゾン、ビンクリスチン、タキソール及び他の抗腫瘍薬物、並びに放射線療法と組合して、癌患者、特に精巣癌、リンパ腫、子宮内膜癌、膀胱癌、卵巣癌、頭及び首の鱗状細胞癌、乳癌及び多くの他の悪性腫を有する患者の処理のために広く使用される。本発明者は、その脂質閉じ込めの形でのその溶解性の上昇のために、患者の処理のために必要とされる合計のシスプラチン体積の低下を主張する。静脈内注入のために使用される体積は通常、24時間の注入の場合、多く投与される成人患者当たり約180ml、又は約20~120mgm2。それは、25~80分の急速相、続く58~73時間の遅い二次相における血漿から明らかであり;それは血漿タンパク質により結合され、そして腎臓により排泄される処理された患者における重度の腎毒性を説明する。用量関連の腎毒性は、強い水和化、マンニトール、フロセミド及び他の薬剤により一部克服され得る。シスプラチンにより付与される他の毒性は、耳毒性、吐気及び嘔吐、貧血及び軽い骨髄抑制を包含するTheMerckManualofDiagnosisandTherapy。本発明は、従来技術の方法及び組成物の限界を克服する。従って、1つの観点においては、本発明は、シスプラチン混合物を形成するために、シスプラチン及びホスファチジルグリセロール脂質誘導体PGL誘導体を、1:1~1:21の範囲で組合すことによって、シスプラチンミセルを生成するための方法を提供する。他の態様においては、シスプラチン:PGL誘導体の範囲は、1:12;1:14;1:15;1:16;1:18;1:19;1:20又は1:21の範囲である。次に、混合物は、シスプラチンミセルを形成するために、有効量の少なくとも20の有機溶媒、例えばエタノール溶液と組合される。ミセルを形成する能力を有するいずれかの脂質誘導体、及び負に荷電された実効ヘッド基を有する。これは、ジパルミトイルホスファチジルグリセロールDPPG、ジミリストイルホスファチジルグリセロール及びジカプリルホスファチジルグリセロールを包含するが、但しそれらだけには限定されない。1つの観点においては、10~28個の炭素原子を有し、そして不飽和脂肪測鎖を有するホスファチジル誘導体は、本発明の範囲内である。正1:1、中性1:2又はわずかに負1:21の実効電荷を粒子に付与するモル比での変動を有する負に荷電されたホスファチジルグリセロール脂質によるシスプラチンの複合体化は、投与の後、身体における異なった組織の標的化を可能にするであろう。しかしながら、負に荷電されたPGLによるシスプラチンの複合体化は、シスプラチンの溶解性を増強することが示されており、従って、効果的な抗腫瘍治療のために必要とされる薬剤の体積を減じる。さらに、シスプラチン及び負に荷電されたPGLの複合体化は、製造工程の間、薬剤損失を最少にする非常に高い封入効率を進行せしめる。それらの複合体は、安定しており、沈殿物を形成せず、そして4°Cでの少なくとも4ヶ月間の貯蔵の後、治療効能を保持する。本明細書において使用される場合、用語シスプラチンとは、類似体を包含する。例としては、次のものを包含する:カルボプラチン、オルマプラチン、オキサプラチン、2-アミノメチルピロリジン1,1-シクロブタンジカルボキシレート白金、ロバプラチン、1-シクロブタン-ジカルボキシレート2-2-メチル-1,4-ブタンジアミン-N,N’白金、ゼニプラチン、エンロプラチン、254-Sネダプラチン及びJM-216ビス-アセテート-アミン-ジクロロヘキシルアミン-白金IV。必ずしも明白に言及されないが、他の正に荷電された薬剤、例えば抗腫瘍薬物ドキソルビシン但し、これだけには限定されないがシスプラチンに変わって置換され得ることは理解されるべきである。他方では、中性である他の型の薬剤は、正に荷電された基による誘導体化による正に荷電された薬剤へのそれらの転換に基づいて使用され得る。中性又は負に荷電された抗癌又は他のタイプの薬剤の正に荷電された分子への修飾は、有機合成において十分に確立されている多くの方法により達成され得る。これは、例えば薬剤におけるヒドロキシル基をアミノ基又はトリメチルアミノ基により置換し、従って化合物に正の電荷を導入することによって達成され得る。アミノ基による環ヒドロキシル基の置換は、1998年11月17日に発行されたアメリカ特許第5837868号Wangなどに論じられている。上記方法は、その段階が上記に示される順序で行われることを必要としない。例えば、前記方法は、溶液を形成するために、シスプラチンと有効量の少なくとも20の有機溶媒溶液とを組合すことによって実施され得る。上記溶液はシスプラチンミセルを形成する。上記のように、シスプラチン:PGL誘導体の範囲は、1:12;1:14;1:15:1:16;1:18;1:19:1:20;又は1:21の範囲である。いずれかの有機溶媒又はエタノールの配合物、又は二層システムを形成しないいずれか他のアルコール、又は20アルコールに相溶性である他の有機溶媒すなわち、クロロホルムが、本明細書に記載される方法において有用である。例えば、アルコール溶液は、少なくとも30,35,40,45~90それらの間でのいずれかの増大を包含するのいずれかであり得る。好ましくは、アルコール溶液は、DPPGに関して、30エタノールであり、そして他の脂質に関しては、最適なは異なることができる。1つの態様においては、負の実効電荷を有するペプチドによるDPPG分子の部分置換は、標的物の細胞膜を通過できるフソゲン性質を有するシスプラチン複合体を付与する。フソゲンペプチドはまた、それらの良好な暴露のためにPEGの遊離端で共有結合され得る。最終シスプラチンDPPG複合体での水性シスプラチンの正の電荷を置換する少量のカチオン性脂質はまた、フソゲン性質を複合体に付与し;カチオン性脂質例えば、DDAP:ジメチルジオクタデシルアンモニウムブロミド;DMRIE:N-[1-2,3-ジミリスチルオキシプロピル]-NN-ジメチル-N-2-ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド;DMTAP:1,2-ジミリストイル-3-トリメチルアンモニウムプロパン;DOGS:ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン;DOTAP:N-1-2,3-ジオレオイルオキシプロピル-N,N,N-トリメチルアンモニウムクロリド;DPTAP:1,2-ジパルミトイル-3-トリメチルアンモニウムプロパン;DSTAP:1,2-ジステロイル-3-トリメチルアンモニウムプロパンにより置換される正の荷電のは、カチオン脂質の毒性のために低い。いくつかの配合物は、ミセルにおいて多量のフソゲン両親媒性脂質DOPEを含む。さらなる観点においては、シスプラチンミセルは、例えば薬剤供給への使用のためには、小胞形成脂質中に封入される。脂質封入されたシスプラチンは、種々のヒト固形腫瘍、例えば乳癌、前立腺癌、多形グリア芽腫、非小肺細胞癌、膵臓癌、頭及び首の鱗状細胞癌及びT-細胞リンパ腫但し、それらだでには限定されないの根絶に高い治療効能を有する。従って、もう1つの観点においては、本発明は、それらの内部及び外部膜二層間に異なった脂質組成を有するリポソーム中に封入されたシスプラチン又は他方では、他の正に荷電された抗腫瘍薬剤を用いての種々のヒト悪性疾患の処理方法を提供する。リポソーム封入された薬剤は、動物及びヒトへの静脈内注入の後、一次腫瘍及びそれらの転移部分に達することができる。抗腫瘍薬剤は、シスプラチンのみよりも高い治療効果を有する。また、封入されたシスプラチンと多くの抗癌遺伝子、例えばp53、IL-2,IL-12,アンジオスタチン及び類似するタイプのリポソーム中に封入されるオンコスタチンとの組合せ、及び封入されたシスプラチンとHSV-tk及び封入されたガンシクロビルとの組合せは、癌根絶において高い治療効能を有する。さらなる観点においては、本発明は、封入されたシスプラチンと次の遺伝子との組み合わせを提供する:iCMV、β-アクチン又は他のプロモーターの制御下での野生型wtp53cDNA発現ベクター、及びp53遺伝子の長期発現を維持することができる複製のヒト起点;ウィルス複数イニシエータータンパク質、例えばT抗原を必要とする複製の起点は、p53タンパク質がT抗原と強く相互作用するために、p53遺伝子の移行のためには適切でない。iiPAX5cDNA発現ベクター、すなわちp53遺伝子のイントロン1内の短い10個のヌクレオチド調節領域と相互作用する既知のp53遺伝子wt及び変異体p53遺伝子の両者の唯一のサプレッサー。p53遺伝子療法における主要欠点は、腫瘍においては、過剰発現され、そしてwtp53タンパク質と四重体化できるp53の内因性突然変異誘発された形によるwtp53タンパク質の不活性化であり;前記内因性p53遺伝子は、Pax5すなわちp53遺伝子の可能性ある転写リプレッサーの発現により抑制されるであろう。Wtp53cDNAベクターは、イントロン1及び結果的には、抑制性PAX5結合領域を欠いている。内因性変異体p53遺伝子発現を抑制し、そして癌細胞から変異体p53を排除し、アポプトミス及び腫瘍抑制の誘発を増強することが重要である。iii単純ヘルペスウィルスチミジンキナーゼHSV-tk遺伝子。単純ヘルペスウィルスチミジンキナーゼHSV-tk自殺遺伝子はまた、動物モデル及びヒト患者のガンシクロビルGCV処理の後、DNA合成の中断を引き起こすp53及びPax5遺伝子の組合せに包含され;これは、癌細胞における鎖の分裂を高め、そして鎖分裂に結合し、そしてDNA部位に損傷を与えることが知られているp53の腫瘍サプレッサー機能を増強することが予測される。もう1つの態様においては、ガンシクロビルが組合され、そしてリポソーム中に封入される。遺伝子療法は、患者の体細胞中への治療遺伝子の導入を意図する生物医学的研究の新時代であるBoulilas1998aMartinandBoulikas1998により再考される。2種の腫瘍障害が、体細胞遺伝子移行の好結果をもたらす適用を妨げる:1インビボ注入から約3~7日後での治療遺伝子。第1の問題は、i遺伝子を担持する供給ビークルの標的細胞表面に達することの無能性からリポソーム-DNA複合体の大部分が血液循環から急速に排除される:ii細胞膜を通過することの困難性から、及びiii細胞によるインターナリゼーションの後、エンドゾームからのDNAの開放の困難性から;iv核中への無能な取り組みから生じる。他は、数日間、循環に存続し、そして腫瘍において濃縮する秘密リポソームMartinandBoulikas1998aを使用して来た。しかしながら、従来の秘密リポソームは、癌細胞により摂取されない。リポソームインターナリゼーションフソゲンペプチドを増強することが企画される方法が、本明細書に開示される。第2の問題は、子孫細胞間での細胞増殖の間、それらの希釈を導くヌクレアーゼ分解及び自律的に複製することの失敗による、又は宿主細胞の染色体中への組み込みの後、外来性DNAの不活性化による核におけるプラスミドの損失に起因する。しかしながら、延長された期間、プラスミドの染色体外複製を維持することができるヒト配列の使用TeniBoulikasによるCloningmthodfortroppinghumanoriginsofreplicationと称するアメリカ特許第5894060号を参照のことは、この制限を克服するであろう。封入されたシスプラチンLipoplatin商標と称する又は封入されたドキソルビシン、及びそれらの薬剤と遺伝子、例えばp53、PAX5及びHSV-tk封入されたガンシクロビル、IL-2,IL-12,GM-CSF,アンジオスタチン、IL-4,IL-7,IFN-γ,TNF-α,RB,BRCA1,E1A,封入された5-フルオロシトシンと組合してのシトシンデアミナーゼ、bcl-2MDR-1,p21,p16baxbcl-xsE2FIGF-1VEGF,TGF-β遺伝子及び同様のものとの組合せの供給の後、動物モデル及びヒトにおける腫瘍の緩和及び乳癌、前立腺癌及び他の癌の腫瘍質量体積の低下がまた、本明細書に請求されている。従って、本発明は、本発明の方法により得られる封入された薬剤又は他の中間体と細胞とを接触することを含んで成る、シスプラチン又は他の治療剤を細胞に供給するための方法をまた提供する。本発明の方法により得られる封入された薬剤の有効量を対象に投与することを含んで成る、対象における腫瘍の増殖を阻害するための方法がまた、本発明により提供される。前記方法は、インビトロ、エクスビボ又はインビボにおいて実施され得る。従って、本発明はまた、封入された薬剤及びポリヌクレオチドを用いての組合せ治療も提供する。本明細書において使用される場合、ポリヌクレオチドは、遺伝子類を包含するが、但しそれらだけには限定されない。組合せ治療は、2種の機構が異なっており、そして相乗性を達成できるので、いずれか1つの処理よりも癌の根絶においてより効果的である。例えば、損傷されたDNA領域及びDNAの遊離端に結合するp53タンパク質の性質は知られており、そして重度に損傷された細胞におけるアポプトシスの機構を開始する性質も知られているBoulikas1998aにより再考された。癌細胞におけるDNAの遊離端は、移行されたwtp53の発現によりそれらの細胞におけるアポプトシス経路の誘発を増強するシスプラチンにより、損傷の後に生成されることが予測される多くの腫瘍は、突然変異誘発されたp53を有し、そしてこの経路を効果的に誘発することはできない。治療用ポリヌクレオチドはまた、ミセル中に導入する前、遺伝子移行ベクター中に挿入され得る。野生型p53遺伝子の移行は、多くの研究において、インビボ及び細胞培養において腫瘍細胞増殖を延長するために都合良く使用されて来た。アデノウィルスp53ベクターを用いての腫瘍内注入は、最近の臨床試験において肺腫瘍に対してRothなど1996及び動物モデルにおいて前立腺腫に対してBoulikas,1998aにより再考される、効果的であることが示されている。しかしながら、腫瘍内注入方法は、癌の後期段階にしばしば関連する転移に対して適用できない。封入されたシスプラチンによるp53遺伝子の全身性供給及び身体のいずれかの領域における腫瘍の標的化は、癌治癒のための効果的な処理である。本発明者は、動物モデル及び臨床試験において試験される患者における種々のヒト癌への、封入された5-フルオロシトシン、bcl-2,MDR-1p21p16baxbclxsE2FIGF-1VEGFTGF-β,アンジオスタチン及び他の遺伝子と組合して、wtp53pax5HSV-tk,GM-CSFIL-12,IL-2,IL-4,IL-7,IFN-γ,TMF-α,RB,BRCA1,E1A,シトシンデアミニアーゼ,並びに封入されたシスプラスチン及び他の薬剤のリポゾーム供給を用いて、好都合な体細胞遺伝子移行のための4種の重要障害を緩和するか又は部分的に克服するために手段を提供する。それらは、iそれらの毒性を低めるリポソーム中への薬剤及び遺伝子小球の濃縮及び封入化;iiポリエチレングリコールPEG、ヒアルロン酸又は他のポリマーによる複合体の表面の被覆による固形腫瘍及び転移の標的化;iiiフソゲンペプチド又は低いのカチオン性脂質のために、癌細胞による薬剤及びプラスミドの摂取の増強;及びiv治療遺伝子のエピソーム複製又は長期発現及び高レベルの発現を維持することができる複製のヒト起点ORIを用いての遺伝子の維持された発現を包含する。さらなる態様においては、ポリヌクレオチド又は遺伝子はさらに、数日よりもむしろ数ヶ月間、遺伝子の発現を維持する調節DNA配列を含んで成る。この強い治療効果は、抗癌遺伝子の高レベルの発現のためであり;弱い調節DNAの制御下に配置されるその同じ遺伝子は無効果であろう。癌処理のためのいくつかの実験方法が、p53遺伝子供給を用いて企画されており;本発明の新規性は、ヒト前立腺悪性腫瘍、特に進行した前立腺癌の半分以上で過剰発現される内因性変異体p53形がPAX5発現ベクターを用いて制御されることにある。p53の突然変異誘導された形は主にそれらのDNA結合ドメインにおけるアミノ酸置換を有するが、しかしwtp53形とまだ四量体化することができ;p53はテトラマーとして作用し、そしてヒト癌細胞における高レベルの内因性変異体p53の存在は、供給されるwtp53の腫瘍サプレッサー機能を妨げる。PAX5は、成長の間、身体構造を決定するホモドメインタンパク質であり;PAX5は哺乳類成長の初期段階で、及び造血幹細胞における分化の間、成人において発現され;p53遺伝子発現は成長する胚における細胞の早い増殖を可能にする成長の初期段階でPAX5サプレッサータンパク質により排除される。PAX5は、成人の後期段階でスイッチオフし、p53の発現を可能にし、そしてその腫瘍抑制機能の付与及び特に造血細胞系におけるアポプトシスの調節を可能にする。多くの供給システムが体細胞遺伝子移行に使用され、それらの個々は利点及び欠点に関連している。組換えアデノウィルスは効果的に複製せず;組換えネズミレトロウィルスはランダムに組み込み、そしてクロマチン取り囲み不活性化され;組換えAAVはランダムに組み込み、そして臨床学的有用性のために高い力価を達成することはできない。すべては、パッケージング制限のために、35~75kbの外来性DNAの最大能力を有する。裸のDNAは、全身性供給の後、急速に分解される半減期5分。カチオン性リポソームは、毒性であり、心博以上には循環において生存せず、そして主に肺、肝臓及び心臓の内皮を標的化する。秘密stealthリポソームのみが、腫瘍部位また、肝臓及び脾臓において濃縮することができ、そして血液循環において延長された期間、生存することが証明されている例えば、非秘密中性リポソームに関して数分、及びカチオン性リポソームに関して数秒に比較して、1日。しかしながら、秘密リポソームは、それらが、溶菌の後、数日間にわたってそれらの荷重を開放する細胞外空間に残存する腫瘍細胞により容易に摂取されずMartinandBoulikas1998により再考されている;しかしながら、下記式の本発明の観点は、フソゲンペプチドにより、又はそれらの内部二層で部分的カチオン性の脂質組成物又はDOPEを提供することにより秘密リポソームを変性する。秘密リポソームにより動物における固形腫瘍において薬剤及び遺伝子小球の濃縮及び摂取を達成すると、第2段階は、本発明の薬剤及び遺伝子標的化アプローチの効力である。MDAndersonCancerCenterでのヒト臨床試験は、非細胞肺癌を有し、そしてシスプラチンを組合して腫瘍の部位でのAd5CMVp53組換えアデノウィルスの局部注入を用いて、それらの腫瘍にp53突然変異を有することが示されている患者における野生型p53遺伝子の移行を使用する。この臨床試験の第1の結果は、p53の腫瘍内注入の後、有望であるRothなど1996Boulikas1998aにより再考されている。しかしながら、局部注入は、進行した段階の悪性腫にしばしば関連する転移には適用できず;特に、前立腺癌は、特に細胞により分泌されるインスリン-様成長因子IIGF-Iによる前立腺腫瘍増殖における刺激に関する機構により骨への転移を付与する。従って、全身性注入の後、腫瘍細胞塊状物中に濃縮することができる、本明細書において提案される供給システムは、たぶん一次腫瘍のみならず、またその転移を処理する。提案されたシスプラチンリポソームは、本発明者の供給システムの性質のために、主に腫瘍を標的化するであろう。組換え治療における遺伝子は、複製DNA中に組み込むHSV-tk及びガンシクロビルの使用のために、分裂細胞を主に標的化し、そして秘密リポソームの使用のために、血管形成腫瘍を主に標的化する。従って、秘密リポソームにより到達される肝臓及び脾臓細胞は、殺害されないであろう。さらなる態様においては、本明細書に記載されるリポソーム封入された薬剤は、有効量のフソゲンペプチドをさらに含んで成る。フソゲンペプチドは、長いヘリックス軸にそって疎水性グラジエンドにより特徴づけられるヘリックス両親媒性ペプチドの種類に属する。この疎水性グラジエントは、膜におけるペプチドの偏向された挿入を引き起こし、従って、脂質コアを不安定化し、そしてそれにより、膜融合を増強するDecoutなど1999。赤血球凝集素HAは、インフルエンザウィルスのホモトリマー表面糖タンパク質である。感染においては、それは低pHで、ウィルス膜とエンドソーム膜との間での膜融合を誘発する。個々のモノマーは、受容体-結合HA1ドメイン及び膜-相互作用HA2ドメインから成る。HA2ドメインのNH2-末端領域アミノ酸1~127、いわゆる融合ペプチドは、標的膜中に挿入し、そしてウィルス膜とエンドソーム膜との間での融合の誘発において決定的な役割を演じる。システインによる領域5~14における8個のアミノ酸の置換及び回転ラベリング電子常磁性共鳴に基づけば、それは、ホスフェート基から15オングストロームÅの最大の深さを有する膜の水平面上に存在するMacoskoなど1997。インフルエンザウィルス赤血球凝集素HA-2からのフソゲンペプチドの使用は、細胞によるトランスフェリン-ポリリシン-DNA複合体摂取の効率を非常に増強し;この場合、ペプチドはポリリシンに結合され、そして複合体はトランスフェリン-介在性エンドサイトーシスにより供給されたBoulikas1998aにより再考される。このペプチドは、配列:GLFEAIAGFIENGWEGMIDGGGYC配列番号1を有し、そして酸性pHで高い卵黄ホスファチジルコリンにより調製されたリポソームからの蛍光色素カルセインの開放を誘発することができ;このペプチドはまた、培養におけるCEM-SSリンパ球を用いて、01~1mMの濃度で、アンチセンスオリゴヌクレオチドの抗-HIV能力を10培まで高めることができた。このペプチドは、エンドソーム膜を不安定化し、そして分解するエンドソームのわずかにより酸性の環境下でコンホメーションを変えるBoulikas1998aにより再考される。膜における負に荷電された脂質の存在は、いくつかのペプチドのフソゲン性質の明示のために重要であり;ところが、フェルチリン、すなわち精子-卵融合に関与する精子表面タンパク質の推定上の融合ドメインを表すペプチドのフソゲン作用は、負に荷電された脂質の存在に依存する。しかしながら、HIV2ペプチドのその作用は依存しなかったMartinandRuysschaert1997。例えば、インフルエンザウィルス赤血球凝集素HAのフソゲンペプチド上の2種のドメインを分析するために、HAの細胞質末端及び又はトランスメンブランドメインがセンダイウィルスのフソゲン糖タンパク質Fのその対応するドメインにより置換されたHA-キメラが企画された。細胞質末端がヒトニューロフィブロミンタイプI残基1441~1518又はc-Raf-1残基51~131のペプチドにより置換されたHAの構造体が製造された。この構造体は、ワクシニアウィルス-T7ポリメラーゼ過渡的発現システムを用いることによって、CV-1細胞において発現された。CV-1細胞と、親又はキメラHAタンパク質により仲介される結合されたヒト赤血球RBCとの間の膜融合は、pHが低められた後、タンパク質-発現CV-1細胞の細胞質中への予備荷動されRBCからの水性蛍光団カルセインの流れが生じたことを示した。これは、膜融合が脂質二層の両葉状器官を包含し、そして水性融合孔の形式を導くことを示したSchroth-Diezなど1998。注目すべき発現は、HIVのTATタンパク質が細胞膜を通過することができGreenandLoewenstein1988、そしてTATの36個のアミノ酸ドメインが、異種タンパク質に化学的に架橋される場合、細胞をトランスダクトする能力を付与したことであった。配列番号2は、核局在化シグナルであるBoulikas,1998bを参照のこと。HIVのもう1つのタンパク質、すなわち糖タンパク質gp41は、フソゲンペプチドを含む。gp41エクトドメインの膜近位領域に由来する線状ペプチドは、抗-HIV剤としての可能性ある用途を有し、そしてヘリックスコンホメーションを採用することによって感染性を阻害するJudiceなど1997。HIV-1gp41の23個のアミノ酸残基N-末端ペプチドは、負に荷電された大きな単層小胞を不安定化する能力を有する。カチオンの不在下で、主要構造は孔形成α-ヘリックスであり、そしてCa2の存在下で、そのコンホメーションは、卓越して延長されたフソゲンβ-型構造に転換した。HIValaR22A置換を担持するの融合活性は70低められ、ところが第2置換V2Eが包含される場合、フソゲン性は完全に破壊され、このことは、それがα-ヘリックスではなく、しかしコレステロール含有の電気的に中性の膜を活性的に不安定化するHIV-1融合ペプチドにより採用される延長された構造であることを立証するPereiraなど1997。プリオンタンパク質PrPは、ニューロン及びグリア細胞の表面で通常見出される未知の機能の糖タンパク質である。それは、疾病、例えばウシ海綿状脳障害、及びヒトにおけるCreutzfeldt-Jakob病に包含され、ここでPrPは、変更された形PrPScと称するに転換される。コンピューターモデリング計算によれば、PrPの120~133及び118~135ドメインは、脂質二層中に斜行手段で挿入し、そして封入されたカルセインの漏れを誘発するためにリボソームと相互反応できる傾斜された脂質結合ペプチドであるPillotなど1997b。アルツハイマーアミロイドペプチドのC-末梢フラグメントアミノ酸29~40及び29~42は、インビトロでリポソームの融合を誘発するウィルスタンパク質の融合ペプチドの性質に関連する性質を有する。それらの性質は、細胞膜とアミロイドペプヂドとの直接的な相互作用を仲介し、そしてアミロイドペプチドの細胞毒性の一部を説明することができた。アルツハイマー病の病理学とアポリポタンパク質E多彩現象との間の疫学的及び生化学的連鎖の観点においては、アミロイドペプチドの3種の共通するapoEイソ形とC-末端フラグメントとの間の可能性ある相互作用の試験は、apoE2及びapoE3のみがapoE4ではない、アミロイドペプチドフソゲン及び凝集性質の可能性あるインヒビターであることを示した。アミロイド凝集体の形成に対するapoEの保護効果は、安定したapoEアミロイドペプチド複合体の形成により介在されると思われたPillotなど1997a;Linsなど1999。11個のアミノ酸残基のペプチドは、そのペプチドがリポソーム膜に結合される場合、強く促進され;ペプチドの融合活性はpH及び膜融合に無関係であるように思われ、そして標的膜は、リシン結合されたホスファチジルエタノールアミンPE-Kを組み込むことによって提供される正の電荷を必要とした。結合されたペプチドはPE-Kとの非特異的静電相互作用を通して小胞の凝集を引き起こすが、その遊離ペプチドはPE-K小胞の凝集を誘発しなかったPecheurなど1997。多くの研究は、細胞又はリポソームの膜における脂質二層への挿入の後、ペプチドのα-ヘリックス二次構造の安定化がペプチドの膜融合性質を担当することを示唆し;Zn2が、α-ヘリックス構造を安定化するので、ペプチドのフソゲン活性を増強する。例えば、ヒスタチン-5、すなわち認識される亜鉛結合モチーフのC-末端の機能的ドメインに位置する唾液抗微生物ペプチドのHEXXHドメインは、らせん形コンホメーション形で存在するMartinなど1999Melinoなど1999Curtainなど1999。融合ペプチドは、ペプチド基材の遺伝子供給システムを創造するために、DNAプラスミドにより配合されて来た。プラスミドを40~200nmの超微粒子に縮合するために使用されるYKAKnWKペプチドと、エンドソームからのプラスミドの開放を促進するよう企画されたpH-感受性溶解剤であるGLFEALLELLESLWELLLEA配列番号3両親媒性ペプチドとの組合せが、β-ガラクトシダーゼレポーター遺伝子を含む発現システムを増強したDuguidなど1998。DOPEジオレイルホスファチジルエタノールアミンはフソゲン脂質であり;N-メトキシ-スクシニル-Ala-Ala-Pro-Val-DOPEのエラスターゼ分解は、封入された蛍光プローブ、すなわちカルセインを細胞質中に供給するために、この誘導体をDOPE全体的に正の電荷に転換したPakなど1999。β-エンドフィンmRNAの領域に対して相補的な30個の塩基のオリゴデオキシヌクレオチド配列は、それがフソゲン性質を付与されたジパルミトイル-DL-α-ホスファチジル-L-セリンを含む小さな単層小胞50nm内に封入された後、細胞培養物におけるβ-エンドフィン生成の濃度-依存性阻害を誘発したFrestaなどNephrotoxicitymechanismofcisplatinumdiaminedichlorideinmiceToxicolLett711618BellonSFColemanJHandLippardSJDNAUnwindingProducedbySiteSpecificIntrastrandCrossLinksoftheAntitumorDrugcisDiamminedichlopoplatinumBiochemistry3080268035BongartzJPAubertinAMMilhaudPGandLebleuBImprovedbiologicalactivityofantisenseoligonucleotidesconjugatedtoafusogenicpeptideNucleicAcidsRes2246814688BoulikasTEvolutionaryconsequencesofpreferentialdamageandrepairofchromatindomainsJMol35156180BoulikasTThenonuniformrepairofactiveandinactivchromatindomainsIntJOncol86575BoulikasTAunifiedmodelexplainingthepreferentialrepairofactiveoverinactivegenesandofthetranscribedoverthenontranscribedstrandaleadingrolefortranscriptionfactorsandmatrixanchorageIntJOncol87784BoulikasTDNAIesionrecognizingproteinsandthep53connectionAnticancerRes16225242BoulikasTStatusofgeneofgenetherapyin1997molecularmechanismsdiseasetargetsandclinicalapplicationsGeneTherMolBiol11172BoulikasTNucleocytoplasmictraffickingimplicationsforthenuclearimportofplasmidDNAduringgenetherapyGenetherMolBiol713740BrownSJKellettPJandLippardSJIxrlaYeastProteinThatBindstoPlatinatedDNAandConfersSensitivitytoCisplatinScience261603605BrutnSLPilPMEssigrnanJMHousmanDEandLippardSJIsolationandcharacterizationofhumancDNAclonesencodingahighmobilitygroupboxproteinthatrecognizesstructuraldistortionstoDNAcausedbybindingoftheanticanceragentcisplatinProcNatlAcadSciUSA8923072311BuchananRLandGrallaJDCisplatinResistanceandMechanisminaViralTestSystemSV40IsolatesThatResistInhibitionbytheAntitumorDrugHaveLostRegulatoryDNABiochemistry2934363442NeuritisduringsystemiccisplatinandcarboplatinchemotherapyActaNeurolScand962601ChaoCCKHuangSLandLinChaoSCa2mediatedinhibitionofanuclearproteinthatrecognizesUVdamagedDNAandisconstitutivelyoverexpressedinresistanthumancellsDNAbindingassayNucleicAcidsResNucleicAcidsRes1964136418ChuGandChangEXerodermaPigmentosumGroupECellsLackaNuclearFactorThatBindstoDamagedDNAScience242564567ChuGandChangECisplatinresistantcellsexpressincreasedlevelsofafactorthatrecognizesdamagedDNAProcNatlAcadSciUSA8733243327ClugstonCKMclaughlinKKennyMKandBrownRBindingofHumanSinglesStrandedDNABindingProteintoDNADamagedbytheAnticancerDrugcisDiamminedichloroplatinumCancerRes5263756379CreuzenetCDurandCHaertleTInteractionofalphas2andbetacaseinsignalpeptideswithDMPCandDMPGliposomesPeptides1846372CutainCSeparovicFNielsenKCrainkDZhongYKirkpatrickATheinteractionsoftheNterminalfosogenicpeptideofHIVIgp41withneutralphospholipidsEurBiophysJ28427036DecoutALabeurCVanlooBGoethalsMVandekerckhoveJBrasseurRRosseneuMContributionofthehydrophobicitygrandienttothesecondarystructureandactivityoffusogenicpeptidesMolMembrBiol1623746DonahueBAAugotMBellonSFTreiberDKToneyJHLippardSJandEssigmannJMCharacterizationofaDNADamageRecogitionProteinfromMammalianCellsThatBindsSpecificallytoIntrastranddanddDNAAdductsoftheAnticancerDrugCisplatinBiochemistry2958725880DugnidJGLiCShimLoganMJAlilaHRollandATomlinsonESparrowJTSmithLCAphysicochemicalapproachforpredictingtheeffectivenessofpeptidebasedgenedeliverysystemsforuseinplasmidbasedgenetherapyBiophysJ74280214EapenSGreenMIsmailIMKineticstudiesonthediaquaformofcisplatinandvariousnucleobasesJInorgBiochem242327EliopoulosAGKerrDJHerodJHodgkinsLKrajewskiSReedJCYoungLSThecontrolofapoptosisanddrugresistanceinovariancancerinfluenceofp53andBcl2Oncogene11121728ThecmycbutnotthecHraspromoterbyplatinumcompoundsBiochemPharmacol50338FarhoodHGaoXSonKYangYYLazoJSHuangLBarsoumJBottegaREpandRMCationicliposomesfordirectgenctransferintherapyofcancerandotherdiseasesAnnNYAcadSci7162334discussion345FrestaMChillemiRSpampinatoSSciutoSPuglisiGLiposomaldeliveryofa30merantisenseoligodeoxynucleotidetoinhibitproopiomelanocortinexpressionJPharmSci8761625GhoshJKShaiYDirectEvidencethattheNTerminalHeptadRepeatofSendaiVirusFusionProteinParticipatesinMembraneFusinJmolBiol292531546GreenMandLoewensteinPMAutonomousfunctionaldomainsofchemicallysynthesizedhumanimmunodeficiencyvirustattransactivatorproteinCell5511791188GuptaDKothekarV500picosecondmoleculardynamicssimulationofamphiphilicpolypeptideAc4NHEtwith12dimysristoylsnglycero3phosphorylcholinemoleculesIndianJBiochemBiophys3450111HollerEbauerRBerngesFMonofunctionalDNAplatinumadductsblockfrequentlDNApolymerasesNucleicAcidsRes1992May1120230712HughesENEngelsbergBNandBillingsPCPurificationofNuclearProteinsThatBindtoCisplatindamagedDNAJBiolChem2671252012527JudiceJKTomJYHuangWWrinTVennariJPetropoulosCJMcDowellRSInhibitionofHIVtype1infectivitybyconstrainedalphahelicalpeptidesimplicationsfortheviralfusionmechanismProcNatlAcadSciUSA941342630KimJCLeeMHChoiSKSynthesisandantitumorevaluationofcisdichlopoplatinumcomplexeslinkedto5and6methyleneuracilanduridineanaloguesArchPharmRes214659KonoKNishiiHTakagishiTFusionactivityofanamphiphilicpolypeptidehavingacidicaminoacidresiduesgenerationoffusionactivitybyalphahelixformationandchargeneutralizationBiochembiophysActa11648190LambertGDecoutAVanlooBRouyDDuvergerNKalopissisAVandekerckhoveJChambazJBrasseurRRosseneuMTheCterminalhelixofhumanapolipoproteinallpromotesthefusionofunilamellarliposomesanddisplacesapolipoproteinAIfromhighdensitylipoproteinsEurJBiochem25332838WithdifferentalphahelicalcontentsonliposomefusionBiochimBiophysActa110315762LelkesPILazaroviciPPardaxininducesaggregationbutnotfusionofphosphatidylserinevesiciesFEBSLett2301316LinsLThomasSounarmonAPillotTVandekerchkhoveJRosseneuMBrasseurRMoleculardeterminantsoftheinteractionbetweentheCterminaldomainofAlzheimer’sbetaamyloidpeptideandapolipoproteinEalphahelicesJNeurochem7375869MacoskoJCKimCHShinYKThemembranetopologyofthefusionpeptideregionofinfluenzahemagglutinindeterminedbyspinlabelingEPRJMolBiol267113948MacreadieIGLoweMGCurtainCCHewishDAzadAACytotoxicityresultingfromadditionofHIV1NefNterminalpeptidestoyeastandbacterialcellsBiochemBiophysResCommun23270711MartinFandBoulikasTThechallengeofliposomesingenetherapyGeneTherMolBiol1173214MartinIPecheurEIRuysschaertJMHoekstraDMembranefusioninducedbyashortfusogenicpeptideisassessedbyitsinsertionandorientationintotargetbilayersBiochemistry38933747MartinIRuysschaertJMComparisonoflipidvesiclefusioninducedbytheputativefusionpeptideoffertilinandtheNH2terminaldomainoftheHIV2gp41FEBSLett4053515MassariSColonnaRGramicidininducedaggregationandsizeincreaseofphosphatidylcholinevesiclesChemPhysLipids3920320McLaughlinKCorenGMastersJBrownRBindingactivitiesofcisplatindamagerecognitionproteinsinhumantumourcelllinesIntJCancer536626MelinoSRufiniSSetteMMoreroRGrottesAPaciMPetruzzelliRZnionsselectivelyinduceantimicrobialsalivarypeptidehistatin5tofusenegativelychargedvesiclesIdentificationandcharacterizationofazincbindingmotifpresentinthefunctionaldomainBiochemistry38962633MidouxPmonsignyMEfficientgenetransferbyhistidylatedpolylysinepDNAcomplexesBioconjugChem1040611Syntesisofplatinumcomplexesof2aminomethylpyrrolidinederivativesforuseascarrerligandsandtheirantitumoractivitiesChemPharmBull389305MorikawaKHondaMEndohKMatsumotoTAkamatsuKMitsuiHKozumiMSynthesisofplatinumcomplexesof2aminomethypyrrolidinederivativesforuseascarrierligandsandtheirantitumoractivitiesChemPharmBull389305MurataMKagiwadaSHishidaRIshiguroROhnishiSTakahashiSModificationoftheNterminusofmembranefusionactivepeptidesblocksthefusionactivityBiochemBiophysResCommun17910505MymrykJSZaniewskiEandArcherTKCisplatininhibitschromatinremodelingtranscriptionfactorbindingandtranscriptionfromothemousemammarytumorviruspromoterinvivoProcnatlAcadSciUSA9220762080NiidomeTKimuraMChibaTOhmoriNMiharaHAoyagiHMembraneinteractionofsynteticpeptidesrelatedtoheputativefusogenicregionofPH30alphaaproteininspermeggfusionJPeptRes495639OliverTandMeadGTesticalarcancerCurrOpinOncol5559567OrmerodMGO’NeillCRobertsonDKellandLRHarrapKRcisDiamminedichloroplatinuminducedcelldeaththroughapoptosisiinsensitiveandresistanthumanovariancarcinomacelllinesCancerChemotherPharmacol3746371PakCCErukullaRKAhlPLJanoffASMeersPElastaseactivatedliposomaldeliverytonucleatedcellsBiochimBiophysActa141911126PapadopoulouMVJiMBloomerWDNLCQ1anovelhypoxiccytotoxinpotentiationofmelphalancisDDPandcyclophosphamideinvivoIntJRadiatOncolBiolPhys427759ParenteRANirSSzokaFCJrpHdependentfusionofphosphatidylcholinesmallvesiclesInductionbyasyntheticamphipathicpeptideJBiolChem263472430PartidosCDVohraPStewardMWPrimingofmeaslesvirusspecifficCTLresponsesafterimmunizationwithaCTLepitopelinkedtoafusogenicpeptideVirology21510710PecheurEIHoekstraDSainteMarieJMaurinLBienvenueAPhilippotJRMembraneanchoragebringsaboutfusogenicpropertiesinashortsyntheticpeptideBiochemistry36377381VinaimontNVerheeADuvergerNBrasseurRVandekerckhoveJTavernierJRosseneuMCharacterizationoffunctionalresiduesintheinterfacialrecognitiondomainoflecithincholesterolacyltransferaseProteinEng12718PereiraFBGoniFMMugaANievaJLPermeabilizationandfusionofunchargedlipidvasiclesinducedbytheHIV1fusionpeptideadoptinganextendedconformationdoseandsequenceeffectsJ73197786PilPMandLippardSJSpecificBindingofChromosomalProteinHMGItoDNADamagedbytheAnticancerDrugCisplatinScience256234237PillotTDrouetBQueilleSLabeurCVandekerchkhoveJRosseneuMPinconRaymondMChambazJThenonfibrillaramyloidbetapeptideinducesapoptoticneuronalcelldeathinvolvementofitsCterminalfusogenicdomainJNeurochem73162634PillotTGoethalsMVanlooBLinsLBrasseurRVandekerckhoveJRosseneuMSpecificmodulationofthefusogenicpropertiesoftheAlzheimerbetaamyloidpeptidebyapolipoproteinEisoformsEurJBiochem2436509PillotLinsLGoethalsMVanlooBBeattJVandekerckhoveJRosseneuMBrasseurRThe118135PeptideofthehumanprionproteinformsamylordfibritsandinducesliposomefusionJMolBiol27438193PrasadKNHernandezCEdwardsPresadJNelsonJRobinsonWAModificationofthetamoxifencisplatinDTICandinterferonalpha2bonhumanmelanomacellsinculturebyamixtureofvitaminsNutrCancer2223345RodriguezCrespoIGomezGutierrezJNietoMPetersonDLGavilanesFPredictionofaputativefusionpeptideintheSproteinofhepatitisBvirusJGenVirol756379RodriguezCrespoINunezEYelamosBGomezGutierrezJAlbarJPPetersonDLGavilanesFFusogenicactivityofhepadnaviruspeptidescorrespondingtosequencesdownstreamoftheputativecleavagesiteVirology26113342RothJAなどRetroviusmediatedwildtypep53genetransfertotumorsofpatientswithlungcancerNatureMed2985991SchrothDiezBPonimaskinERevereyHSchmidtMFHermannAFusionactivityoftransmembraneandcytoplasmicdomainchimerasoftheinfluenzavirusglycoproteinhemagglutininJVirol7213341AssecondlinetreatmentinpatientswithadvancednonsmallcelllungcancersrefractorytocisplatinOncolRcp6797800SuenagaMLesSParkNGAoyagiHKatoTUmedaAAmakoKBasicamphipathichelicalpeptidesinducedestabilizationandfusionofacidicandneutralliposomesBiochimBiophysActa98114350ToneyJHDonahueBAKellettPJBruhnSLEssigmannJMandLippardSJIsolationofcDNAsencodingahumanproteinthatbindsselectivelytoDNAmodifiedbytheanticancerdrugcisdiamminsdichloroplatinumProcNatlAcadSciUSA8683288332ToumoisHFabrieCHBurgerKNManderslootJHilgersPvanDalenHdeGierJdeKruijffBgramicidinAinducedfusionoflargeunilamellardioleoylphosphatidylcholinevesiclesanditsrelationtotheinductionoftypeIInonbilayerstructuresBiochemistry298297307UlrichASTichelaarWForsterGZschomigOWeinkaufSMeyerHWUltrastructuralcharacterizationofpeptideinducedmembranefusionandpeptideselfassemblyinthelipidbilayerBiophysj7782941VergoteIHimmelmannAFrankendalBscheistroenMVlachosKTropeCHexamethylmelamineassecondlinetherapyinplatinresistantovariancancerGynecolOncol47282286VilpoJAVilpoLMSzymkowskiDeO’DonovanAandWoodRDAnXPGDNArepairdefectcausingmutagenhypersensitivityinmouseleukemiaL1210cellsMolCellBiol15290297VonrcheVCallebautIKettmannRBrasseurRbumyAPortetelleDThe1927aminoacidsegmenntoofgp51adoptsanamphiphilicstructureandplaysakeyroleinthefusioneventsinducedbybovineleukemiavirusJBiolChem267151937ZhangYQJiangXTSunQRZhangGQWangYStudiesonCDDPalbuminmicrospheresforhepaticarterialchemoembolizationYaoHsuehPao305438ArticleinChinese"