"以下の式で表される環状デプシペプチドであって;式中、R1およびR2がそれぞれHまたはC1C6アシル基であり、R3R11はそれぞれHまたはC1C6アルキル基である環状デプシペプチド。R1およびR2がプロピオニル基であり、R3、R6、R8、R10がメチル基、R4、R5、R7、R9、R11がHである、請求項1に記載の環状デプシペプチド。多能性幹細胞を多能性を維持しつつ培養する方法であって、請求項1または2に記載の環状デプシペプシドを含む培地で多能性幹細胞を培養することを含む方法。人工多能性幹細胞の樹立効率を改善する方法であって、核初期化物質が導入された体細胞を請求項1または2に記載の環状デプシペプシドを含む培地で培養することを含む方法。本発明を以下に詳細に説明する。本発明は、ウスボヤ科ホヤ由来の新規環状デプシペプチドおよびこれを用いて多能性幹細胞を多能性を維持しつつ培養する方法に関する。本発明において、デプシペプチドとは、少なくとも2つのα-アミノ酸と少なくとも1つのα-ヒドロキシカルボン酸との配列を含有し、少なくとも1つのペプチド結合と,ヒドロキシカルボン酸から誘導されたエステル結合を介して結合した化合物である。環状デプシペプチドとは、少なくとも1つの環構造を有するデプシペプチドである。本発明において好ましい環状デプシペプチドは、式1式中、R1およびR2がそれぞれHまたはC1C6アシル基であり、R3R11はそれぞれHまたはC1C6アルキル基であるで表される。ここで、C1C6アシル基は、例えば、ホルミル基、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、バレリル基、イソバレリル基、ピバロイル基等が挙げられる。C1C6アルキル基は、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、n-ブチル基、sec-ブチル基、tert-ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基等が挙げられる。より好ましい環状デプシペプチドは、サメウラミドと命名された式2で表された化合物である。本発明において、前記式1で示される環状デプシペプチドは立体異性体、又はラセミ体を含む。本発明の環状デプシペプチドは、ウスボヤ科のホヤより抽出することができる。例えば、ホヤを室温にてメタノール中に浸漬し、得られたメタノール抽出液から分離することができる。分離手段としては、通常の方法を用いることができ、例えば、溶剤抽出法、イオン交換樹脂法、吸着または分配カラムクロマト法、ゲルろ過法、透析法、沈殿法等を単独でまたは適宜組み合わせて抽出精製することができる。例えば、メタノール抽出液から、水クロロホルム混合溶媒中の水層より抽出することができる。該環状デプシペプチドをさらに精製するには、オクタデシルシリルODSシリカゲルを用いたクロマトグラフィーが例示される。この時、溶媒として、メタノール、エタノール、プロパノール、アセトニトリルおよびクロロホルム等の有機溶媒もしくはこれらの有機溶媒と水との混合溶媒を用いてもよい。本発明において、さらに精製するために、ODSシリカゲル以外の逆相HPLC等を用いることもできる。この時、メタノール、エタノール、プロパノール、アセトニトリルおよびクロロホルム等の有機溶媒と水の混合比率を変化させて、目的の化合物の保持時間を調節することができる。以上のような方法により、あるいはこれらを適宜組み合わせることにより、高純度の該環状デプシペプチドを得られる。上述のように得られた環状デプシペプチドは、多能性幹細胞の維持培養に用いることができる。本発明において、多能性幹細胞とは、外胚葉、中胚葉および内胚葉の3胚葉すべての細胞に分化可能である能力多能性を有し、かつ、増殖能をも併せもつ幹細胞であり、それには、限定されないが、例えば胚性幹細胞MJEvansandMHKaufmanNature292154156JAThomsonetalScience28211451147JAThomsonetalProcNatlAcadSciUSA9278447848JAThomsonetalBiolReprod55254259JAThomsonandVSMarshallCurrTopDevBiol38133165、核移植により得られるクローン胚由来の胚性幹細胞TadaMetalCurrBiol11155382001CowanCAetalScience2005Aug26309136973、精子幹細胞BiolReprod69612616KShinoharaetalCell11910011012、胚性生殖細胞Cell70841847JLResnicketalNature359550551、人工多能性幹細胞KTakahashiandSYamanakaCell126663676KTakahashietalCell131861872JYuetalScience31819171920MNakagawaetalNatBiotechnol26101106国際公開WO2007069666などが含まれる。好ましい多能性幹細胞は、ES細胞、ntES細胞、およびiPS細胞である。本発明の方法において、多能性幹細胞は多能性を維持した状態で培養される。本発明の方法において、多能性幹細胞が多能性を維持していることは、特に限定されないが、アルカリホスファターゼ、Oct34またはNanogなどに例示される遺伝子マーカーの発現、コロニーの形成もしくはテラトーマの形成後の3胚葉組織への分化などを指標として確認することができる。多能性幹細胞の培養においては、基本培地へ本発明の環状デプシペプチドを添加した培地を用いて行うことができる。基礎培地としては、例えばDoulbecco’smodifiedEagle’sMedium培地、GlasgowMinimumEssentialMedium培地、Ham’sF12培地、およびこれらの混合培地などが包含される。培地には、さらに血清が含有されていてもよいし、あるいは無血清でもよい。好ましくは無血清である。必要に応じて、例えば、アルブミン、トランスフェリン、KnockoutSerumReplacement、脂肪酸、インスリン、コラーゲン前駆体、微量元素、2メルカプトエタノール、3’チオールグリセロールなどの1つ以上の血清代替物を含んでもよいし、ならびに、脂質、アミノ酸、非必須アミノ酸、ビタミン、増殖因子、サイトカイン、抗生物質、抗酸化剤、ピルビン酸、緩衝剤、無機塩類などの1つ以上の物質も含有しうる。該環状デプシペプチドの濃度は、多能性が維持される限り特に限定されないが、005nM以上、01nM以上、05nM以上、06nM以上、07nM以上、08nM以上、09nM以上、または10nM以上であり、100μM以下、50μM以下、40μM以下、30μM以下、20μM以下または10μM以下であればよい。好ましくは10nMから10μMである。より好ましくは、10nMである。さらに本発明では、上述のように得られた環状デプシペプチドを用いて、iPS細胞の樹立効率を改善することができる。iPS細胞は、ある特定の核初期化物質を、DNA、RNAまたはタンパク質の形態で体細胞に導入することによって作製することができる。このとき核初期化物質と共に培地へ該環状ポリデプシペプチドを加えることによって、iPS細胞の作製効率を上げることができる。該環状ポリデプシペプチドは、初期化物質と同時に添加されてもよく、初期化物質を細胞へ導入した後に添加されてもよい。なお、初期化物質が導入された体細胞をiPS細胞が樹立されるまで環状ポリデプシペプチドを含む培地で培養し続けてもよいし、初期化物質が導入された体細胞を一定期間環状ポリデプシペプチドを含む培地で培養した後、環状ポリデプシペプチドを含まない培地で培養を継続し、iPS細胞を樹立してもよい。iPS細胞の作製効率は、同じ細胞数で環状ポリデプシペプチドを用いる以外の条件を同じにした場合に、作製されるiPS細胞数もしくはそのコロニー数から算出することができる。ここで、核初期化物質は、ES細胞に特異的に発現している遺伝子またはES細胞の未分化維持に重要な役割を果たす遺伝子もしくはその遺伝子産物であればよく、特に限定されないが、例えば、Oct34Klf4Klf1Klf2Klf5Sox2Sox1Sox3Sox15Sox17Sox18cMycLMycNMycTERTSV40LargeTantigenHPV16E6HPV16E7BmilLin28Lin28bNanogEsrrbまたはEsrrgが例示される。これらの初期化物質は、iPS細胞樹立の際には、組み合わされて使用されてもよい。例えば、上記初期化物質を、少なくとも1つ、2つもしくは3つ含む組み合わせであり、好ましくは4つを含む組み合わせである。上記の各核初期化物質のマウスおよびヒトcDNAのヌクレオチド配列並びに該cDNAにコードされるタンパク質のアミノ酸配列情報は、WO2007069666に記載のNCBINationalCenterforBiotechnologyInformationwwwncbinlmnihgovのaccessionnumbersとして示される。LMyc、Lin28、Lin28b、EsrrbおよびEsrrgのマウスおよびヒトのcDNA配列およびアミノ酸配列情報については、それぞれ下記のNCBIaccessionnumbersとして示される。当業者は、当該cDNA配列またはアミノ酸配列情報に基づいて、常法により所望の核初期化物質を調製することができる。遺伝子名マウスアクセション番号ヒトアクセション番号LMycNM008506NM001033081Lin28NM145833NM024674Lin28bNM001031772NM001004317EsrrbNM011934NM004452EsrrgNM011935NM001438これらの核初期化物質は、タンパク質の形態で、例えばリポフェクション、細胞膜透過性ペプチドとの結合、マイクロインジェクションなどの手法によって体細胞内に導入してもよいし、あるいは、DNAの形態で、例えば、ウイルス、プラスミド、人工染色体などのベクター、リポフェクション、リポソーム、マイクロインジェクションなどの手法によって体細胞内に導入することができる。ウイルスベクターとしては、レトロウイルスベクター、レンチウイルスベクター以上、Cell126pp6636762006Cell131pp8618722007Science318pp191719202007、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター、センダイウイルスベクターProcJpnAcadSerBPhysBiolSci85348622009などが例示される。また、人工染色体ベクターとしては、例えばヒト人工染色体、酵母人工染色体、細菌人工染色体などが含まれる。プラスミドとしては、哺乳動物細胞用プラスミドを使用しうる。ベクターには、核初期化物質が発現可能なように、プロモーター、エンハンサー、リボゾーム結合配列、ターミネーター、ポリアデニル化サイトなどの制御配列を含むことができる。使用されるプロモーターとしては、例えばEF1αプロモーター、CAGプロモーター、SRαプロモーター、SV40プロモーター、LTRプロモーター、CMVサイトメガロウイルスプロモーター、RSVラウス肉腫ウイルスプロモーター、MoMuLVモロニーマウス白血病ウイルスLTR、HSVTK単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼプロモーターなどが用いられる。なかでも、EF1αプロモーター、CAGプロモーター、MoMuLVLTR、CMVプロモーター、SRαプロモーターなどが好ましい。さらに、必要に応じて、薬剤耐性遺伝子、チミジンキナーゼ遺伝子、ジフテリアトキシン遺伝子などの選択マーカー配列、緑色蛍光タンパク質、βグルクロニダーゼ、FLAGなどのレポーター遺伝子配列などを含むことができる。また、上記ベクターには、体細胞への導入後、核初期化物質をコードする遺伝子もしくはプロモーターとそれに結合する核初期化物質をコードする遺伝子を共に切除するために、それらの前後にloxP配列を有してもよい。別の好ましい一実施態様においては、トランスポゾンを用いて染色体に導入遺伝子を組み込んだ後に、プラスミドベクターもしくはアデノウイルスベクターを用いて細胞に転移酵素を作用させ、導入遺伝子を完全に染色体から除去する方法が用いられ得る。好ましいトランスポゾンとしては、例えば、鱗翅目昆虫由来のトランスポゾンであるpiggyBac等が挙げられるKajiKetalNature458771775、WoltjenetalNature458766770、WO2010012077。さらに、ベクターには、染色体への組み込みがなくとも複製されて、エピソーマルに存在するように、リンパ指向性ヘルペスウイルス、BKウイルスおよびウシパピローマウイルスの起点とその複製に係る配列を含んでいてもよい。例えば、EBNA1およびoriPもしくはLargeTおよびSV40ori配列を含むことが挙げられるWO2009115295、WO2009157201およびWO2009149233。また、複数の核初期化物質を同時に導入するために、ポリシストロニックに発現させる発現ベクターを用いてもよい。ポリシストロニックに発現させるためには、遺伝子をコードする配列の間は、IRESまたは口蹄病ウイルスFMDV2Aコード領域により結合されていてもよいScience3229499532008およびWO20090920422009152529。iPS細胞樹立のための基本培地としては、例えば10~15FBSを含有するDMEM、DMEMF12またはDME培地これらの培地にはさらに、LIF、penicillinstreptomycin、puromycin、Lグルタミン、非必須アミノ酸類、βメルカプトエタノールなどを適宜含むことができる。、bFGFまたはSCFを含有するES細胞培養用培地、例えばマウスES細胞培養用培地または霊長類ES細胞培養用基本培地例えば霊長類ヒトサルES細胞用培地、リプロセル、京都、日本などが含まれる。培養法の例としては、たとえば、37°C、5CO2存在下にて、10FBS含有DMEMまたはDMEMF12培地上で体細胞と核初期化物質を接触させ約4~7日間培養し、その後、細胞をフィーダー細胞上にまきなおし、体細胞と核初期化物質の接触から約10日後からbFGF含有霊長類ES細胞培養用培地で培養し、該接触から約30~約45日またはそれ以上ののちにiPS様コロニーを生じさせることができる。また、iPS細胞の誘導効率を高めるために、510と低い酸素濃度の条件下で培養してもよい。あるいは、その代替培養法として、フィーダー細胞上で10FBS含有DMEM培地これにはさらに、LIF、ペニシリンストレプトマイシン、ピューロマイシン、Lグルタミン、非必須アミノ酸類、βメルカプトエタノールなどを適宜含むことができる。で培養し、約25~約30日またはそれ以上ののちにES細胞様コロニーを生じさせることができる。上記培養の間には、培養開始2日目以降から毎日1回新鮮な培地と培地交換を行う。また、核初期化に使用する体細胞の細胞数は、限定されないが、培養ディッシュ100cm2あたり約5×103~約5×106細胞の範囲である。マーカー遺伝子として薬剤耐性遺伝子を含む遺伝子を用いた場合は、対応する薬剤を含む培地選択培地で培養を行うことによりマーカー遺伝子発現細胞を選択することができる。またマーカー遺伝子が蛍光タンパク質遺伝子の場合は蛍光顕微鏡で観察することによって、発光酵素遺伝子の場合は発光基質を加えることによって、また発色酵素遺伝子の場合は発色基質を加えることによって、マーカー遺伝子発現細胞を検出することができる。本明細書中で使用する体細胞は、哺乳動物例えば、ヒト、マウス、サル、ブタ、ラット等由来の生殖細胞以外のいかなる細胞であってもよく、例えば、角質化する上皮細胞例、角質化表皮細胞、粘膜上皮細胞例、舌表層の上皮細胞、外分泌腺上皮細胞例、乳腺細胞、ホルモン分泌細胞例、副腎髄質細胞、代謝貯蔵用の細胞例、肝細胞、境界面を構成する内腔上皮細胞例、I型肺胞細胞、内鎖管の内腔上皮細胞例、血管内皮細胞、運搬能をもつ繊毛のある細胞例、気道上皮細胞、細胞外マトリックス分泌用細胞例、線維芽細胞、収縮性細胞例、平滑筋細胞、血液と免疫系の細胞例、Tリンパ球、感覚に関する細胞例、桿細胞、自律神経系ニューロン例、コリン作動性ニューロン、感覚器と末梢ニューロンの支持細胞例、随伴細胞、中枢神経系の神経細胞とグリア細胞例、星状グリア細胞、色素細胞例、網膜色素上皮細胞、およびそれらの前駆細胞等が挙げられる。細胞の分化の程度や細胞を採取する動物の齢などに特に制限はなく、未分化な前駆細胞であっても、最終分化した成熟細胞であっても、同様に本発明における体細胞の起源として使用することができる。ここで未分化な前駆細胞としては、たとえば神経幹細胞、造血幹細胞、間葉系幹細胞、歯髄幹細胞等の組織幹細胞体性幹細胞が挙げられる。本発明において、体細胞を採取する由来となる哺乳動物個体は特に制限されないが、好ましくはヒトである。本発明を以下の実施例でさらに具体的に説明するが、本発明の範囲はそれら実施例に限定されないものとする。実験方法<細胞培養>マウスES細胞CCEは、ゼラチンコートしたディッシュまたは96穴マイクロプレートにて、1000UmLのLIFを含むES細胞維持用血清培地{knockoutDMEM2mMLグルタミン、100μM非必須アミノ酸、100μM2メルカプトエタノール、5000UmLペニシリンストレプトマイシンを含むとウシ胎仔血清FBSを8515の割合で混合したもの}を用いることで、未分化状態を維持したまま培養を行った。低血清培地として、GMEM、1非必須アミノ酸、1ピルビン酸、100μM2メルカプトエタノール、50UmLペニシリン、50mgmLストレプトマイシン、1FBS、15Knockoutserumreplacementを混合したものを用いた。<コロニー維持活性試験>96穴プレートに01ゼラチン溶液を50μLwell分注し、20分間放置してディッシュをゼラチンコートする。ゼラチン溶液を除去後、LIFを含まないES細胞維持培地を200μL添加し、ES細胞400個wellを播種する。ここに各サンプルを添加して、4日間インキュベート37°C、5CO2したのちに顕微鏡下にて形態変化を観察し、コロニー維持活性を検討した。<免疫染色ならびにフローサイトメトリー>免疫染色ではOct34、NanogおよびSSEA1を、フローサイトメトリーではSSEA1の発現を検討した。免疫染色は4PFAで固定した後、05tritonX含有PBSで浸透化処理を行い、1次抗体にantimouseOct34抗体、antihumanNanog抗体を用い、2次抗体でantimouseIgGAlexa546antirabbitIgGAlexa488抗体を用いて染色を行った。PhycoerythrinconjugatedantiSSEA1抗体を用いた場合、2次抗体は用いなかった。全てDAPIと共染色を行った。フローサイトメトリーは05mMEDTAにて細胞を培養皿より回収し、PhycoerythrinconjugatedantiSSEA1抗体を用いて染色し、FACSAriaIIを用いて、発現を評価した。実施例1:サメウラミドの単離宮城県石巻市鮫浦湾で採集したウスボヤDidemnidae科の群体ボヤ27gを室温にて3時間以上メタノール100mL×2に浸漬させ抽出し、濃縮後、水100mLとクロロホルム50mL×2で二層分配を行った。得られた水層をODSカラムクロマトグラフィー{φ12×15cm;50MeOH、70MeOH、70MeCN、85MeCN、100MeOH、CHCl3MeOHWaterを示した。各種NMRデータ図2および図3およびHRESIMS図4から、サメウラミドの分子式はC50H77N7O15と決定した{MNa、mz10385454C50H77N7NaO15、calc10385375}。赤外吸光測定図5により、OH基およびNH基3349cm1、エステル1749cm1、およびアミド1642cm1の存在が示唆された。1HNMRスペクトル図2aでは、δH8565に5つの交換可能なシグナルが観察され、13CNMR図2bではδC176164にかけて10個のエステルもしくはアミドと思われるカルボニル炭素が認められたことから、サメウラミドはペプチドであることが示唆された。一方、δH5535付近にアミノ酸のαプロトンと思われる複数のシグナルが観察されたが、このうちδH525、509、357についてはそれぞれが結合する炭素のシグナルδC781、786、790が低磁場シフトしていたことから、これらはオキシメチンであることが確認された。COSY図3a、HMQC図3bおよびHMBC図3cスペクトルの解析の結果、これらはそれぞれ、βヒドロキシロイシンβHyLeu1、2、3のβ位のメチンシグナルであるとアサインされた。なお、βHyLeu1のα位δH514とβ位δH509のプロトンについては、近接したケミカルシフトのため明瞭なCOSY相関が確認できず、この間の結合を証明するHMBC相関も観察されなかったが、それぞれの1Hシグナルが互いにJ19Hzでカップリングしていることから、互いに結合していることがわかった。また、それぞれのβ位の1Hケミカルシフト値から、βHyLeu1および2ではβ位の酸素原子はエステル結合しδH509および525、βHyLeu3では水酸基δH357になっていると考えられた。このことはCOSYスペクトルにおいて、βHyLeu3ではヒドロキシプロトンδH691とβ位のメチンプロトンδH357の間に相関が認められたことからも確認された。NOジメチルトレオニンNOMe2ThrのN、Oメチル基はそれぞれ、Nメチルからα炭素、Oメチルからβ炭素へのHMBC相関が認められたことから確認された。サメウラミドのNMRスペクトルには2つのアラニン様のスピン系が認められたが、一つはアラニンAlaでもう1つはNメチルプロトンδH282からアラニン様のスピン系CHCH3のα炭素へのHMBC相関が観測されたことから、NメチルアラニンNMeAlaであると確認された。また、δH526および517の互いに小さな結合定数J22Hzを示しているプロトンはδC1075の炭素に結合していることから、エキソメチレンプロトン由来であることがわかった。これらのプロトンからδC1467および1647の炭素シグナルにHMBC相関が認められることと、NメチルプロトンδH320、δC370からδC1467のシグナルにもHMBC相関が認められることから、この残基はNメチルデヒドロアラニンNMeDhaであることが明らかになった。これらのアミノ酸残基以外にも、フェニルアラニン様のスピン系が観察されていたが、α炭素の化学シフトδC7223からオキシ酸であるフェニル乳酸Plaであることが明らかになった。また、2つのプロピオン酸ユニットが、それぞれβHyLeu1および3のアミノ基に結合していることが明らかになった。以上、COSY、HMQC、HMBCを含む2次元NMRスペクトルの解析から、サメウラミドには7つのアミノ酸:βhydroxyleucine1βHyLeu1、βhydroxyleucine2βHyLeu2、βhydroxyleucine3βHyLeu3、NOdimethylthreonineNOMe2Thr、NmethyldehydroalanineNMeDha、alanineAla、NmethylalanineNMeAla、1つのオキシ酸3phenyllacticacid:Plaおよび2つのプロピオニル基からなる環状デプシペプチドである事が分かった図6aおよび図7。これらの各残基間の配列はHMBC相関の詳細な解析により明らかになった。NHもしくはNMeのプロトンから隣のカルボニル基の炭素へのHMBC相関は、NMeAlaからAla、AlaからNMeDha、NMeDhaからPla、βHyLeu3からPr2、NOMe2ThrからβHyLeu2、βHyLeu2からNMeAla、βHyLeu1からPr1があり、βHyLeu2、3のエステル結合はβプロトンから隣の部位のカルボニル基の炭素へのHMBC相関から、βHyLeu3からNOMe2Thr、βHyLeu2からβHyLeu1へと繋がっていることが分かった。PlaとβHyLeu3の相関は確認できなかったが、ヒドロキシ基のNMRスペクトルが1つしかないことや分子量を考慮すると、ここでエステル結合していると考えられる。以上より、サメウラミドの平面構造は図6bのように示された。実施例3:サメウラミドによるコロニー維持活性ならびに未分化マーカーの発現について得られたサメウラミド1nMをLIFの代わりに添加した培地中でES細胞を培養し、2日ごとに継代すると、7日目にはコロニー数が減少し、13日目には極小さいコロニーが観察されるかもしくは全くコロニーは観察されなくなる。しかし、サメウラミドの投与下で、同様に継代しつつ培養を継続すると、19日目頃から再び同程度の大きさのコロニーが確認され、その後はサメウラミド1nMを加えたLIFを含まないES細胞未分化維持培地中でコロニーの維持が可能であることが確認された図8。さらに、未分化マーカーの発現を確認したところ、血清および低血清のいずれの培地においてもNanog、Oct34、およびSSEA1の発現が認められた図9。この結果より、サメウラミドをLIFの代わりとして添加することでES細胞の未分化状態を維持したまま培養することが可能であることが確認された。実施例4:テラトーマ形成と3胚葉への分化の確認マウスES細胞CCEをサメウラミドの存在下1nMで培養し、約3ヵ月間維持した。得られた細胞をヌードマウス皮下に移植した。4週間後にマウスからテラトーマを回収、パラフィン切片の作製、HE染色を行った。すると、未分化な部分は少なく、分化した細胞が観察された。外胚葉神経上皮、角化上皮、中胚葉骨格筋、心筋、内胚葉粘液産生性上皮への組織学的な分化を認めたことから図10、サメウラミド存在下で培養したマウスES細胞は多分化能を有していることが確認された。"