"親油性カチオン、疎水性部分、およびPET核を含むイメージングプローブ。前記親油性カチオンがトリフェニルホスホニウムTPPであるか、またはトリフェニルホスホニウムTPPを含む、請求項1に記載のイメージングプローブ。前記疎水性部分が、少なくとも5個の炭素原子を含む脂肪族鎖を含む、請求項1または2に記載のイメージングプローブ。前記疎水性部分が、8~15個の炭素原子を含む脂肪族鎖を含む、請求項3に記載のイメージングプローブ。前記疎水性部分が直鎖アルキル鎖を含む、請求項4に記載のイメージングプローブ。前記疎水性部分が、前記親油性カチオンと前記PET核との間のリンカーとして働く、前述の請求項のいずれか一項に記載のイメージングプローブ。前記PET核が以下の群:11C、18F、76Br、123I、124I、131I、13N、または15Oから選択される、前述の請求項のいずれか一項に記載のイメージングプローブ。被験体においてミトコンドリア膜電位を分析するための方法であって、以下の工程:i前述の請求項のいずれか一項に記載のイメージングプローブを被験体に投与する工程;ii該プローブを可視化する工程;およびiiiミトコンドリア膜電位を推定する工程を含む、方法。請求項8に記載の方法によってミトコンドリア膜電位を分析する工程を含む、被験体において腫瘍を可視化するための方法。請求項8に記載の方法によってミトコンドリア膜電位を分析する工程を含む、被験体においてミトコンドリア損傷を調べるための方法。請求項8に記載の方法によってミトコンドリア膜電位を分析する工程を含む、ミトコンドリアのエネルギー状態における変化を伴う病状を診断および/またはモニタリングするための方法。試験化合物を被験体に投与する工程、および請求項8に記載の方法によってミトコンドリア膜電位の任意の変化を分析する工程を含む、試験化合物のミトコンドリア電位への効果を調べるための方法。i請求項8に記載のミトコンドリア膜電位を分析するための方法;ii請求項9に記載の被験体において腫瘍を可視化するための方法;iii請求項10に記載の被験体においてミトコンドリア損傷を調べるための方法;iv請求項11に記載のミトコンドリアのエネルギー状態における変化を伴う病状を診断および/またはモニタリングするための方法;v請求項12に記載の試験化合物のミトコンドリア電位への効果を調べるための方法に用いるための、請求項1~7のいずれか一項に記載のイメージングプローブ。親油性カチオンおよび疎水性部分を含む前駆体分子であって、PET核のアニオン型と反応して、請求項1~7のいずれか一項に記載のイメージングプローブを生成することができる、前駆体分子。前記PET核のアニオン型と反応するメシレート基を含む、請求項14に記載の前駆体分子。請求項14に記載の前駆体分子であって、該前駆体分子は、18F-と反応して18F-フルオロアルキルTPPを形成することができるメシル化アルキルトリフェニルホスホニウム化合物である、前駆体分子。前記PET核のアニオン型を請求項14~16のいずれか一項に記載の前駆体分子と反応させる工程を含む、請求項1~7のいずれか一項に記載のイメージングプローブを生成するための方法。請求項1~7のいずれか一項に記載のイメージングプローブを生成して、被験体に投与するための方法であって、以下の工程:i18F-を合成する工程;ii請求項14~16のいずれか一項に記載の前駆体分子へ18F-を組み込んで、イメージングプローブを生成する工程;ii該イメージングプローブを被験体に投与する工程を含む、方法。トリフェニルホスホニウムTPPカチオンを含むイメージングプローブの取り込みを増加させるための方法であって、該イメージングプローブの疎水性を増加させる工程を含む、方法。トリフェニルホスホニウムTPPカチオンを含むイメージングプローブの組織:循環比を増加させるための方法であって、該イメージングプローブの疎水性を増加させる工程を含む、方法。前記イメージングプローブの疎水性が、少なくとも5個の炭素原子を有するアルキル鎖を組み込むことによって増加させられる、請求項13または14に記載の方法。発明の態様の概要本発明者らは、驚くべきことに、イメージングプローブの疎水性が、例えば、疎水性部分を組み込むことによって、増加した場合には、これは、ミトコンドリア内の蓄積の程度を大いに増加させ、かつ循環からのプローブのクリアランスを増加させて、より大きい組織:循環比をもたらすことを見出した。同時に、これらの因子は、本発明の疎水性ミトコンドリア標的化イメージングプローブが、インビボでのミトコンドリアのエネルギー状態の可視化のために現在用いられているイメージングプローブより、20~100倍感度が高く、かつ組織ローディングおよびコントラスト特性がより良いことを意味する。したがって、第1の態様において、本発明は、親油性カチオン、疎水性部分、およびPET核を含むイメージングプローブを提供する。イメージングプローブは、例えば、ポジトロン放出断層撮影法PETおよび/または単一光子放射型コンピュータ断層撮影法SPECTに用いてもよい。親油性カチオンは、トリフェニルホスホニウムTPPであってもよく、またはそれを含んでもよい。疎水性部分は、脂肪族鎖、例えば、少なくとも5個の炭素原子を含む脂肪族鎖であってもよく、またはそれを含んでもよい。疎水性部分は、直鎖アルカン鎖、例えば、直鎖デシル鎖または直鎖ウンデシル鎖を含んでもよい。PET核は、例えば、18Fであってもよい。疎水性部分は、親油性カチオンとPET核との間のリンカーとして働いてもよい。第2の態様において、本発明は、以下の工程を含む、被験体においてミトコンドリア膜電位を分析するための方法を提供する:i本発明の第1の態様によるイメージングプローブを被験体に投与する工程;iiプローブを可視化する工程;およびiiiミトコンドリア膜電位の絶対的または相対的大きさを推定する工程。ミトコンドリア膜電位は、例えば、腫瘍を可視化するために、ミトコンドリア損傷を調べるために、被験体におけるミトコンドリアのエネルギー状態における変化を伴う病状を診断/モニタリングするために、または試験化合物のミトコンドリア電位への効果を調べるために、分析されてもよい。第3の態様において、本発明は、以下に用いる、本発明の第1の態様によるイメージングプローブを提供する:iミトコンドリア膜電位を分析するための方法;ii被験体において腫瘍を可視化するための方法;iii被験体においてミトコンドリア損傷を調べるための方法;iv被験体において病状を診断および/またはモニタリングするための方法;またはv試験化合物のミトコンドリア電位への効果を調べるための方法。第4の態様において、本発明は、PET核のアニオン型と反応して、本発明の第1の態様によるイメージングプローブを生成することができる、親油性カチオンおよび疎水性部分を含む前駆体分子を提供する。前駆体分子は、PET核のアニオン型と反応するメシレート基を含んでもよい。例えば、前駆体分子は、18F-と反応して18F-フルオロアルキルTPPを形成することができる、メシル化アルキルトリフェニルホスホニウム化合物であってもよい。第5の態様において、本発明は、PET核のアニオン型を本発明の第4の態様による前駆体分子と反応させる工程を含む、本発明の第1の態様によるイメージングプローブを生成するための方法を提供する。本発明はまた、以下の工程を含む、本発明の第1の態様によるイメージングプローブを生成し、被験体に投与するための方法を提供する:i18F-などのPET核のアニオン型を合成する工程;ii本発明の第4の態様のいずれかによる前駆体分子へPET核のアニオン型を組み込んで、イメージングプローブを生成する工程;iiイメージングプローブを被験体に投与する工程。本発明はまた、以下を提供する:iイメージングプローブの疎水性を増加させる工程を含む、トリフェニルホスホニウムTPPカチオンを含むイメージングプローブの取り込みを増加させるための方法;およびiiトリフェニルホスホニウムTPPカチオンを含むイメージングプローブの組織:循環比を増加させるための方法であって、イメージングプローブの疎水性を増加させる工程を含む、方法。イメージングプローブの疎水性は、例えば、少なくとも5個の炭素原子を有するアルキル鎖の組み込みによって増加してもよい。ポジトロン放出断層撮影法PETポジトロン放出断層撮影法PETは、身体における機能的プロセスの3次元イメージまたは写真を生成する核医学イメージング技術である。そのシステムは、生物活性分子上で身体へ導入される、ポジトロン放出放射性核種トレーサーによって、間接的に放射される対のγ線を検出する。その後、身体内の3次元空間におけるトレーサー濃度のイメージが、コンピュータ分析によって再構築される。最新のスキャナーにおいて、この再構築は、同じ機械で、同じセッション中に患者に実施されるCTX線スキャンの助けを借りて達成されることが多い。グルコース類似体フッ素-18F-18フルオロデオキシグルコースFDGは、臨床腫瘍学で広く用いられている、PETのための生物活性分子である。このトレーサーは、グルコース使用細胞によって取り込まれ、ヘキソキナーゼによってリン酸化され、それゆえ、領域的なグルコース取り込みの観点からすれば、イメージングされたトレーサーの濃度は組織代謝活性を示す。ミトコンドリアおよび/またはミトコンドリア膜電位の変化をイメージングするために、負の内膜電位-120~-170mVによりミトコンドリア内に選択的に蓄積する親油性カチオンを用いることが可能である。そのような親油性カチオンには、ローダミン-123Rh123およびテトラフェニルホスホニウム塩が挙げられる。本明細書で用いられる、用語ポジトロン放出断層撮影法PETプローブまたはイメージングプローブは、ポジトロン放出断層撮影法、SPECT、または任意の他のイメージング技術に用いるのに適した分子を意味し、それは、例えば注射によって、患者に投与することができ、目的の組織内に蓄積する。その後、プローブの位置および局所濃度は、PETスキャニングおよび断層撮影法、SPECT、または別の型のイメージング技術を用いて推定することができる。ミトコンドリア標的化イメージングプローブは、おそらく高いミトコンドリア膜電位のために、ミトコンドリア内に選択的に蓄積する。プローブの取り込みは、ΔΨm依存性であり得、それゆえに、プローブはミトコンドリアのエネルギー状態に関する情報を与えることができる。本発明のプローブは、ミトコンドリアの完全性の関数である、身体における分布プロファイルを有し得る。本発明のプローブは、ミトコンドリア表面電位ΔΨmの差異をイメージングし、機能障害性ミトコンドリアを有する細胞または組織をイメージングし、および機能障害性ミトコンドリアに関連した疾患または状態をイメージングまたはモニタリングするのに有用であり得る。本発明のイメージングプローブは、親油性カチオン、疎水性部分、およびPET核を含む。単一光子放射型コンピュータ断層撮影法SPECT単一光子放射型コンピュータ断層撮影法SPECTは、γ線を用いる核医学断層撮影イメージング技術である。それは、ガンマカメラを用いる通常の核医学平面イメージングと非常に似ているが、真の3D情報を提供することができる。この情報は、典型的には、患者を貫く断面スライスとして提示されるが、必要に応じて、自由に再フォーマットまたは操作することができる。基本的技術は、γ放射性同位元素放射性核種とも呼ばれるの患者の血流への注入を必要とする。これは、特定の型の組織への化学結合特性のために、目的のリガンドへのマーカー放射性同位元素の付着を含み得る。この合体により、リガンドと放射性同位元素の組み合わせ放射性医薬品が、身体における目的の場所へ運ばれ、結合されることが可能になり、その後、同位元素のγ放射によりリガンド濃度をガンマカメラによって見ることができる。親油性カチオン本発明のプローブの親油性カチオン部分は、高いミトコンドリア膜電位によりミトコンドリア内に蓄積する任意のカチオンであってもよい。カチオンは、それのミトコンドリアへのΔΨm依存性蓄積およびそれのリン脂質二重層の通過を促進する、非局在化した正電荷を有してもよい。そのようなカチオンの例には、ローダミン-123およびホスホニウムカチオン、トリフェニルホスホニウムおよびテトラフェニルホスホニウム誘導体、アルソニウム誘導体、疎水基を有する四級アミン、例えば、テトラベンジルアンモニウム、ならびにローダミンに類似の非局在化した正電荷を有する疎水性芳香族系が挙げられる。[11C]メチルトリフェニルホスホニウム、223-[18F]フルオロプロピル、および4-[18F]フルオロベンジルトリアリールホスホニウムなどのいくつかの標識ホスホニウムカチオンがミトコンドリア標的剤として用いられている。親油性カチオンは、トリフェニルホスホニウムであってもよく、それは、疎水性部分下記参照と連結した場合、親油性アルキルトリフェニルホスホニウムカチオンを生成する。疎水性部分疎水性部分は、カチオンと、例えば共有結合によって会合した場合、カチオンの全体的な疎水性を増加させる。疎水性部分を含むイメージングプローブのオクタノール/PBS分配係数は、少なくとも50、100、250、500、750、または1000であってもよい。メチルTPPおよびデシルTPPのその係数は、それぞれ、0.35および5000であり、数が大きければ大きいほど高い疎水性を反映する。フルオロウンデシルは740の値を有する。疎水性部分は、例えば、脂肪族鎖であってもよい。脂肪族鎖は、少なくとも2個の炭素原子、例えば、5個から20個、8個から15個、または10個から12個の炭素原子を含んでもよい。脂肪族鎖は10個または11個の炭素原子を有してもよい。疎水性部分は、アルキル鎖を含んでもよく、そのアルキル鎖は、実質的にもしくは完全に直鎖アルキル鎖であってもよく、またはいくつかの分岐を含んでもよい。鎖は、1個または複数のヘテロ原子例えば、O、S、N、Pを内部に、および/または末端に含んでもよい。疎水性部分は、さらに、不飽和成分アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリールを含有してもよく、および/または1個もしくは複数の芳香族挿入物を含んでもよい。疎水性部分は、親油性カチオンに共有結合してもよい。親油性カチオンがトリフェニルホスホニウムTPPである場合、疎水性部分は、図1に示されているように、中心のリンイオンに連結してもよい。理論に縛られるつもりはないが、本発明者らは、疎水性部分を含むイメージングプローブに関連した取り込みの増加が、原形質膜のより迅速な進入、およびミトコンドリア内膜のマトリックス接面への疎水性部分の吸着の増加によるものであると考えている。PET核本発明のプローブ内に用いることができる非放射性元素およびそれらに相当するものには、F-19F-18;C-12C-11;I-127I-125、I-124、I-131、およびI-123;CI-36CI-32、CI-33、CI-34;Br-80Br-74、Br-75、Br-76、Br-77、Br-78;Re-185/187Re-186、Re-188;Y-89Y-90、Y-86;Lu-177、およびSm-153が挙げられる。あるいは、本発明のプローブは、11C、18F、76Br、123I、124I、131I、13N、または15Oなどの1個または複数の放射性同位元素で標識されてもよい。PETスキャニングに用いられる放射性核種は、典型的には、炭素-11約20分、窒素-13約10分、酸素-15約2分、およびフッ素-18約110分などの短い半減期をもつ同位元素である。PET核は18Fを含んでもよい。用語PET核は、PET、SPECT、または他のイメージングプロセスに用いることができる非放射性元素または放射性核種を指す。PET核は、親油性カチオンおよび/または疎水性部分に付着、例えば、共有結合してもよい。例えば、疎水性部分は、親油性カチオンとPET核との間のリンカーとして働いてもよい。プローブは18F-フロオロウンデシルTPPであってもよい。使用のための方法本発明はまた、以下の工程を含む、被験体においてミトコンドリア膜電位を分析するための方法を提供する:i本発明によるイメージングプローブを被験体に投与する工程;iiプローブを可視化する工程;およびiiiミトコンドリア膜電位を推定する工程。イメージング剤を検出およびモニタリングするために用いられるイメージング装置には、ガンマカメラ、PET装置、およびSPECT装置などのイメージングテクノロジーが挙げられる。ミトコンドリア膜電位の分析は、例えば、被験体においてミトコンドリアのエネルギー状態における変化を伴う病状を診断および/またはモニタリングするのに用いられてもよい。ミトコンドリア膜電位の分析は、例えば、腫瘍を可視化するための方法、または被験体においてミトコンドリア損傷を調べるための方法に用いられてもよい。プローブは、直接注射などの当技術分野において知られた任意の適切な技術によって投与されてもよい。注射は静脈内IVであってもよい。投与は、全身性であっても、または腫瘍などの目的の部位へ局所的であってもよい。プローブは、別のプローブ、例えば、特定の組織または腫瘍を可視化する能力があるプローブと共に用いられてもよい。2つまたはそれ以上のプローブは、一緒に、別々に、または順次投与されてもよい。本発明のイメージングプローブは、疾患または状態の進行または処置を診断、評価、またはモニタリングするために用いられてもよい。本発明のイメージングプローブは、試験化合物のミトコンドリアのエネルギー状態への効果を調べるために用いられてもよい。例えば、イメージングプローブは、試験化合物と一緒に投与されてもよく、試験化合物のミトコンドリアのエネルギー状態への効果が、本発明に従った方法を用いて、インビボで、リアルタイムにアッセイされてもよい。疾患疾患または状態は、ミトコンドリアのエネルギー状態における変化によって特徴づけられる場合がある。例えば、ミトコンドリアのエネルギー状態における変化より高いか、またはより低いミトコンドリア膜電位のいずれかは、疾患の症状であり得、または疾患の原因因子であり得、もしくは原因因子の1つであり得る。病因となるミトコンドリアのエネルギー状態の処置後の完全または部分的逆転は、治療効力を示している可能性がある。ミトコンドリアの酸化損傷は、ミトコンドリアが活性酸素種の供給源であり、また、酸化損傷を受けやすいため、多くの病状に関与している。様々ながん、糖尿病、心不全、心血管疾患および肝疾患、AIDS、変性疾患、免疫障害、加齢、ならびに他の筋障害を含む様々な疾患および状態は、機能障害性ミトコンドリアに関連している。本発明は、ミトコンドリアによって取り込まれるプローブを提供し、その取り込みはΔΨmに比例する。このことにより、機能障害性ミトコンドリア、例えば、活性が抑制または増強されたミトコンドリアの検出およびイメージングが可能になる。腫瘍は、一般的に、より高いミトコンドリア膜電位を有するが、組織損傷の領域はより低いΔΨmを有する可能性がある。状態および/またはそれの処置は、アポトーシスの増加または減少によって特徴づけられる場合があり、これは、本発明によるイメージングプローブを用いてモニタリングされる可能性がある。ミトコンドリア膜電位の減少は、アポトーシス促進pro-apoptotic剤によって引き起こされる細胞死における初期事象である。ミトコンドリア制御性アポトーシスは、心不全における細胞消失の基礎であると考えられている。本発明のイメージング方法はまた、がんおよび他の悪性腫瘍を遅延させるか、または破壊するために用いられる化学療法または放射線処置のプロトコールの効力を評価するために用いられてもよい。本発明のイメージング方法は、がん、例えば、肺がん、乳がん、または前立腺がんを診断または評価するために用いられてもよい。がん腫細胞におけるミトコンドリア膜電位差は、正常な上皮細胞より有意に高いことが示されている。例えば、CX-1結腸がん腫細胞系と対照のミドリザル上皮細胞系CV-1との間のΔΨmの差は、約60mVであった腫瘍細胞における163mV対正常細胞における104mV。被験体被験体はヒト被験体または動物被験体であってもよい。被験体は、健康な被験体、または疾患を有する被験体もしくは疾患に罹るリスクがある被験体であってもよい。特に、被験体は、前のセクションで言及された疾患または状態の1つを有してもよく、またはそれに罹るリスクがあってもよい。被験体は、疾患についての処置を受けている最中であってもよい。本発明のイメージングプローブは、疾患または状態の進行または回復に関連しているミトコンドリアのエネルギー状態における変化を調べるために用いられてもよい。被験体は、実験動物、特に前のセクションで言及された疾患または状態の1つの動物モデルであってもよい。プローブ合成PET核、例えば、18Fは、PET核を受け取る能力があるか、または受け取るように適応させられているイメージングプローブの前駆体型へ組み込まれてもよい。例えば、18Fは、当技術分野において知られた方法によってサイクロトロンにおいて合成されてもよい。合成後、18Fは一般的にF-の形をとり、それの110分の半減期を考慮すると、迅速に、イメージングプローブへ組み込まれ、精製され、被験体に投与される必要がある。本発明はまた、PET核を受け取るように適応させられた前駆体分子を提供する。例えば、本発明は、PET核のアニオン型と反応して、本発明によるイメージングプローブを生成することができる、親油性カチオンおよび疎水性部分を含む前駆体分子を提供する。前駆体分子は、例えば、求核置換を受けやすい脱離基を含んでもよい。例えば、前駆体分子は、PET核のアニオン型と反応する、メシレート基、トシレート基、ノシレート基、トリフラート基、またはヨード基を含んでもよい。前駆体分子は、18F-と反応して18F-フルオロアルキルTPPを形成することができる、メシル化アルキルトリフェニルホスホニウム化合物であってもよい。図8は、18F-ウンデシルTPPを形成する、メシル化ウンデシルTPP前駆体の18F-との反応を示している。本発明はまた、PET核のアニオン型をそのような前駆体分子と反応させる工程を含む、イメージングプローブを生成するための方法を提供する。これは、イメージングプローブの生成のための便利な1工程手順を提供する。本発明はまた、以下の工程を含む、本発明のイメージングプローブを生成し、被験体に投与するための方法を提供する:i例えばサイクロトロンにおいて、18F-を合成する工程;ii18F-を前駆体分子へ組み込んで、イメージングプローブを生成する工程;iii任意で、イメージングプローブを精製する工程;およびii任意で精製されたイメージングプローブを被験体に投与する工程。プローブは、それの合成後にできる限り早く、被験体に投与されるべきである。取り込みおよび循環からのクリアランスの増加本発明者らは、疎水性部分のミトコンドリア標的化イメージングプローブへの包含により、それの組織への取り込み、およびそれが循環からクリアランスされる程度が増加することを見出した。バックグラウンドの循環に対する取り込みはより大きくなり、より大きい組織/循環比をもたらす。このことにより、インビボでミトコンドリアのエネルギー状態における変化を検出および可視化するためのこれらのプローブの感度が非常に増強する。したがって、本発明は、イメージングプローブの疎水性を増加させる工程を含む、トリフェニルホスホニウムTPPカチオンを含むイメージングプローブの取り込みを増加させるための方法を提供する。取り込みの速度および/または程度は、疎水性部分を欠く対応する化合物の取り込みと比較した場合、5~50倍、10~40倍、または20~30倍増加する可能性がある。特に、腎臓、筋肉、心臓、肝臓、および脂肪などの特定の組織への取り込みが増加する可能性がある。例えば、投与から1時間後と5時間後との間の取り込みの差を測定してもよい。本発明はまた、トリフェニルホスホニウムTPPカチオンを含むイメージングプローブの組織:循環比を増加させるための方法であって、イメージングプローブの疎水性を増加させる工程を含む、方法を提供する。組織:循環比は、組織例えば、腎臓、肝臓、筋肉、または心臓における化合物の濃度を循環例えば、血液における化合物の濃度と比較することによって得ることができる。イメージングプローブの循環からのクリアランスは、疎水性部分を欠く対応するイメージングプローブのクリアランスと比較した場合、5~50倍、10~40倍、または20~30倍増加する可能性がある。組織/循環比は、疎水性部分を欠く対応する化合物のものより少なくとも50倍、80倍、または100倍高い可能性がある。疎水性部分を有するイメージングプローブの例は、18F-フルオロウンデシルTPPであり、疎水性部分を欠く対応するイメージングプローブは、18F-TPPまたは18F-TPMPである。PET核は、プローブの取り込みまたはクリアランスに影響する可能性が低いため、PETは、疎水性部分およびPET核を欠く対応する分子例えば、TPPまたはTPMPと比較されてもよい。したがって、少なくとも5個、例えば、8個から15個の炭素原子を有するように、トリフェニルホスホニウム親油性カチオンのアルキル側鎖を導入し、またはそのアルキル側鎖の長さを増加させることによって、疎水性を増加させてもよい。アルキル基に側鎖を付加すること、その鎖に芳香族基を付けること、およびトリフェニルホスホニウム部分上のフェニル環に側鎖を付加することによっても疎水性を増加させてもよい。これから、実施例を用いて本発明をさらに記載するつもりであり、その実施例は、当業者が本発明を実施するのを助ける役割を果たすものであって、本発明の範囲を限定することを意図するものでは決してない。実施例1-iv注射後のミトコンドリア標的化アルキルTPP化合物の器官分布の動態の調査どれくらい迅速にアルキルTPP化合物が身体内に分布するかを決定するために、ミトコンドリア標的化抗酸化剤MitoQの取り込みをまず、静脈内iv注射後に評価した図2。これを行うために、100nmolの[3H]MitoQのボーラスを、尾静脈注射によってマウスに投与し、様々な器官における[3H]MitoQの量をその後の48時間に渡って測定した図2。注射1時間後に測定した場合、肝臓および腎臓によるMitoQの大量の取り込みがあった図2A。この時点において、心臓による取り込みはそれほど大量ではなく、筋肉および脂肪組織による取り込みはより少なく、脳による取り込みはほとんどなかった図2B。このMitoQの器官への迅速な取り込みは、それの血液からの初期の減少によって反映された図3A。その後、組織によって蓄積された[3H]MitoQは、肝臓については約2時間の半減期、腎臓については約4時間の半減期、および心臓については約15時間の半減期で徐々に喪失した。48時間以内に、これらの組織から投与された放射能のほとんど完全なクリアランスがあり、iv注射から24時間後に約80のMitoQが排除されたという他の研究と一致した。[3H]MitoQの組織への最初の取り込みを評価するために、注射後の最初の1時間にわたるそれの組織分布に焦点をあてた図2CおよびD。これは、MitoQの組織への取り込みが非常に速く、測定可能な最も早い時点である、注射後5分において、それの最大値に達したことを示した。まとめて考えると、これらのデータは、MitoQが血液からたいていの器官へ迅速に取り込まれるが、異なる器官による取り込みの程度において有意な差異があることを示している。MitoQの循環から器官への迅速な取り込みが、全てのアルキルTPPカチオンの一般的な性質であるのか、またはMitoQに特異的であるのかを見るために、3つのアルキルTPPカチオンである、[3H]デシルTPP、[3H]フルオロウンデシルTPP、および[3H]TPMPのiv注射後の器官分布を次に評価した。これらの化合物は、相対的に親水性の[3H]TPMPオクタノール/PBS分配係数0.35から疎水性の[3H]デシルTPPおよび[3H]フルオロウンデシルTPPそれぞれ、5000および740±100のオクタノール/PBS分配係数まで、疎水性に幅があった。48時間にわたる[3H]デシルTPPの組織分布は図4AおよびBに示されており、5時間にわたる[3H]フルオロウンデシルTPPの組織分布は図4Cに示されている。それらの取り込みプロファイルは、MitoQのそれと類似しており、肝臓、腎臓、および心臓への迅速な取り込みがあり、続いて、肝臓および腎臓から両方の化合物について約3時間の半減期で喪失した。MitoQの場合のように、心臓からの喪失はよりゆっくりとしており、[3H]デシルTPPおよび[3H]フルオロウンデシルTPP、それぞれについて約15時間および約21時間の半減期であった。[3H]デシルTPPおよび[3H]フルオロウンデシルTPPの血液からのクリアランス図3Bは、[3H]MitoQのそれ図3Aと定性的に類似していたが、それらの血液濃度はより低かった。[3H]TPMPの器官分布を、iv注射後の5時間、測定した図5A、B。[3H]TPMP分布は、MitoQ、デシルTPP、およびフルオロウンデシルTPPのそれらと定性的に類似しており、肝臓、心臓、腎臓、および脂肪への迅速な取り込みがあった。しかしながら、TPMP取り込みの程度は、一般的に、脳を除いて、MitoQ、デシルTPP、およびフルオロウンデシルTPPのそれより少なかった。[3H]TPMPの肝臓および腎臓からの喪失についての半減期は、他のTPP化合物と類似して、それぞれ、約3時間および約2時間であった。しかしながら、TPMPの心臓からの喪失についての半減期は、約2時間であり、他のアルキルTPP化合物よりも有意に短かった。[3H]TPMPの血液からのクリアランスは、より疎水性の高いアルキルTPP化合物のそれと定性的に類似していたが、血液中の[3H]TPMPの濃度はより高く留まった図3C。残りの組織からの[3H]TPMPクリアランスについての半減期と他のアルキルTPP化合物のクリアランスについての半減期とを比較することは、取り込まれた化合物が少量であるため、技術的に困難であったが、脂肪および筋肉の両方については、TPMPのクリアランスについての半減期は約1~2時間と見積もられ、一方、デシルTPPおよびフルオロウンデシルTPPについてのそれらは、約7~12時間と有意に長かった。まとめて考えると、これらの実験は、全てのアルキルTPP化合物の血液から器官への大量かつ迅速な取り込みがあったことを示した。実施例2-ある時間にわたる、アルキルTPP化合物の器官への取り込みの程度の比較図2、4、および5におけるデータは、評価された4つのTPP化合物の器官分布が定性的に類似していることを示している。しかしながら、化合物の様々な器官への取り込みの程度の間に有意な定量的差があった。これらの差を評価するために、本発明者らは、iv注射後の15分、1時間、および5時間における4つのTPP化合物の組織含有量をプロットした図6A、C、E。筋肉、脂肪、および脳へ取り込まれた量は、他の器官より低かったが、これらのデータはまた、各パネル内に拡大された挿入図として提示されている。この分析は、腎臓、心臓、および筋肉について、取り込みの程度が、デシルTPP、フルオロウンデシルTPP>MitoQ>TPMPの順番であり、これらの差は、注射後1~5時間に最も明らかであった。これらの差の大きさは大きく、例えば、注射後1時間のデシルTPP、MitoQ、およびTPMPの心臓への取り込みは、17:6:1の比であり、5時間では、この比は32:10:1であった。MitoQ、デシルTPP、およびフルオロウンデシルTPPについての器官分布は類似しており、取り込みは腎臓>肝臓>心臓>筋肉、脂肪>脳の順番であった。TPMPの器官分布は、この化合物について肝臓への取り込みが腎臓より多かったこと、および脳へのより多い取り込みがあったことを除けば、3つのより疎水性の高い化合物のそれと大まかに類似している。アルキルTPP化合物は、ネルンスト式によって記載されているように、原形質膜電位およびミトコンドリア膜電位に応答して組織へ蓄積される。その結果として、その化合物の組織中のミトコンドリア内の濃度は、ミトコンドリア膜電位および原形質膜電位により、ならびに循環中の化合物の濃度により、決定される。これらの膜電位は本明細書に報告された全ての実験について類似しているため、化合物の組織への取り込みの程度の主要な決定因子は、化合物の血中濃度である。これによる器官取り込みの変動を補正するために、本発明者らはまた、器官内の化合物の濃度対循環中の化合物の濃度の比を決定し、iv注射後15分、1時間、および5時間におけるこれらのデータが示されている図6B、D、およびF。これらのデータは図6A、C、およびEの所見を裏付け、取り込みの程度が、デシルTPP、フルオロウンデシルTPP>MitoQ>TPMPの順番であったことを確認している。例えば、注射後1時間のデシルTPP、MitoQ、およびTPMPについての心臓/血液比は、109:11:1の比であり、5時間ではこの比は、248:26:1であった。1つの例外は、MitoQおよびTPMPの肝臓/血液比は類似したが、デシルTPPおよびフルオロウンデシルTPPについてのそれらは有意に大きかったことである。加えて、全ての4つの化合物について脳/血液比の間にほとんど差がなく、このことは、図6A、C、およびEに見られたTPMPの明らかなより高い取り込みは、脳自体におけるTPMPの存在ではなく、閉じ込められた血液中のTPMPの存在により生じている可能性があることを示唆する。まとめて考えると、図6のデータは、全ての4つの化合物についての器官分布が定性的に類似していることを示している。デシルTPPおよびフルオロウンデシルTPPは、MitoQより有意に高い程度で取り込まれ、MitoQは、TPMPよりはるかに高い程度で取り込まれ、かつ保持される。実施例3-インビボでのミトコンドリアによるアルキルTPP化合物の取り込み実施例1および2の結果は、アルキルTPP化合物が、インビボで器官へ迅速に取り込まれることを示している。TPP化合物のミトコンドリアおよび細胞への取り込みは、ミトコンドリア膜電位および原形質膜電位によるものであり、蓄積された化合物の大部分がミトコンドリア内にあることが示されている。したがって、いったんアルキルTPP化合物が組織内に蓄積されたならば、それらは、膜電位によって、主にミトコンドリア内に局在化される。これらの実験においてこれが当てはまるか否かを見るために、インビボでのアルキルTPP化合物の取り込みがミトコンドリア膜電位を低下させることによって減少するか否かを次に決定した。これを行うために、[3H]フルオロウンデシルTPPをマウスにiv注射し、15分後、様々な投与量のミトコンドリアの脱共役剤の2,4-ジニトロフェノールDNPまたは生理食塩水キャリアをマウスにさらに注射し、さらに15分後、器官によって蓄積された[3H]フルオロウンデシルTPPの程度を測定した図7A。用いられたその量のDNPは、毒性なしに、インビボでミトコンドリアの部分的脱共役を引き起こすことが示されている。本発明者らの実験は、DNPが[3H]フルオロウンデシルTPPの器官への取り込みを用量依存性様式で最高40減少させたことを示した図7A。これらの所見は、インビボでの器官内のアルキルTPP化合物の取り込みの程度がミトコンドリア膜電位によって決定されるということと一致している。インビボでのミトコンドリア内のアルキルTPP化合物の局在化を直接示すことは、ミトコンドリア単離に必要とされる組織ホモジナイゼーションにおけるそれらの急速な再分布のために技術的に難しい。これまでこの問題を克服するために、修飾アルキルTPP化合物の4-ヨードブチルTPPIBTPおよび10-ヨードデシルTPPIDTPが用いられている。これらの化合物は、他のアルキルTPP化合物と同じようにミトコンドリアによって蓄積されるが、いったんミトコンドリアマトリックス内に入ると、ヨード部分が、ミトコンドリアのチオールタンパク質によって置換されて、安定なチオエーテル付加体を形成し、その付加体は、TPP部分に対する抗体を用いて可視化することができる。IBTPおよびIDTPのタンパク質チオールとの反応の速度が比較的遅いため、よりチオール反応性の高いヨードアセトアミドIAM部分に付着したTPP化合物IAM-TPP;図7Bを用いるようにこのアプローチを広げた。IAM部分のチオール反応性の増強が、器官からクリアランスされる前に、インビボでのIAM-TPPのミトコンドリアタンパク質チオールとの反応を促進することにより、この分子がミトコンドリアによって蓄積され、そこでミトコンドリアのチオールタンパク質を標識するはずであるということがその意図であった図7B。単離されたミトコンドリアとのインキュベーションにより、IAM-TPPはタンパク質チオールと迅速に反応し、IBTPについて以前示されたように、抗TPP抗体を用いて検出することができたデータは示していない。IAM-TPPの細胞とのインキュベーション、続いて免疫細胞化学法による分析により、ミトコンドリア内のIAM-TPPの脱共役剤感受性局在化が示され図7C、IAM-TPPがミトコンドリアタンパク質を標識したことを確認した。その後、IAM-TPPのボーラスをマウスにiv注射で投与し、1時間後、心臓および肝臓からミトコンドリアを単離した。TPP部分に選択性の抗血清を用いるこれらのミトコンドリア画分のウェスタンブロットにより、心臓および肝臓のミトコンドリアタンパク質のIAM-TPPによる標識が示された図7D。まとめて考えると、これらのデータは、iv注射後、アルキルTPP化合物が、ミトコンドリア膜電位によって、組織内のミトコンドリアによって迅速に取り込まれることを示している。このように、アルキルTPP化合物は、組織において治療的有効量の化合物を与えるiv投与から5分以内にインビボで多くの器官によって蓄積されることが示されている。この組織への取り込みは、その化合物のミトコンドリアへの膜電位依存性蓄積によるものであった。この研究における興味深い所見は、デシルTPPおよびフルオロウンデシルTPP化合物が、TPMPよりはるかに大量に組織へ取り込まれたことであった。これは、ミトコンドリア内膜のマトリックス接面への、より長い鎖のアルキルTPPカチオンのより多い吸着による。重要なことには、TPPカチオンの取り込みの程度の、側鎖を変化させることによる増強は大きく、10~30倍であった。器官内のアルキルTPP化合物の絶対的レベルを上昇させることに加えて、アルキル側鎖をフルオロウンデシル部分またはデシル部分に変更することは、TPMPと比較して100倍を超えて、アルキルTPP化合物の器官/血液濃度比を大いに増強した。この性質は、がんおよび細胞死に関連したミトコンドリア分極の変化を評価するためにインビボでミトコンドリア機能を評価する、より効果的なPETプローブの設計に有用である。本明細書に示されたデータは、長鎖の疎水性アルキルTPPカチオンに基づいたPETプローブが、TPMPと類似した、今日までPETプローブとして開発されているアルキルTPPカチオンより、有意に良い組織ローディングおよびコントラスト特性を有する可能性があることを示唆している。この点において、フルオロウンデシルTPPに関して得られたデータは、19F原子がPET活性18Fによって容易に置換され、かつフルオロウンデシルTPPの取り込みがインビボでミトコンドリア分極の程度に応答することができるため、特に興味深い。実施例4-動物モデルにおいて腫瘍およびミトコンドリア損傷を可視化するための18F-ウンデシルTPPの使用様々なサイズの腫瘍が移植されている免疫不全マウスモデルを用いる。その後、18F-ウンデシルTPPをマウスに投与し、腫瘍を、PETを用いて可視化する。心臓または腎臓虚血再灌流モデルもまた用いて、18F-ウンデシルTPPが、組織内の損傷したミトコンドリアを可視化するために用いられ得ることを示す。最後に、血液脳関門の損傷モデルを用いて、本発明のプローブが、この損傷後に脳へ取り込まれるか否かを調べ、それによって、血液脳関門が損なわれているか否かを示す。材料および方法化学合成[3H]ヨウ化TPMP60Ci/mmolはAmericanRadiolabeledChemicals製であった。[3H]MitoQおよび[3H]デシルTPP調製物を合成し、>97放射性純度までHPLC精製した。11-フルオロウンデシルトリフェニルホスホニウムメシレートフルオロウンデシルTPPを合成するために、アルゴンで洗い流され、スクリューキャップで密封されたKimaxチューブ15mm×150mm中の11-ブロモウンデカノール752.1mg、2.99mmol、フッ化テトラブチルアンモニウム2.34g、7.21mmol、およびH2O162μLの混合物を80°Cで1時間、撹拌した。反応物を少し冷却し、ペンタン25mL中へ抽出した。有機層をH2O30mLで3回洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、-CH2F4.5vs=CH24.9-5共鳴の1HNMR積分から約7の11-フルオロウンデカ-1-エンを含有する茶色がかった油として11-フルオロ-1-ウンデカノールが得られた416mg、2.19mmol、73。1HNMR4.462H,d,tJ=47.3,6.2Hz,-CH2F,3.662H,t,J=6.2Hz,-CH2OH,1.2-1.818H,mppm。19FNMR-218.5t,tJ=47.5,24.6Hzppm。無水CH2Cl210mL中の粗11-フルオロ-1-ウンデカノール333mg、1.75mmol、トリエチルアミン351mg、3.47mmol、484μL、2当量の溶液を約10°Cで10分間、撹拌した。その後、温度を10°C未満に維持しながら、無水CH2Cl21mL中のメタンスルホニルクロリド230mg、2.02mmol、156μLの溶液を加えた。添加後、反応物を室温まで温め、2時間、撹拌した。CH2Cl225mLでの希釈によって反応を生じさせ、有機層をH2O12.5mL、1NaHCO3水溶液12.5mL、飽和NaCl水溶液12.5mLで洗浄し、MgSO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、茶色がかった油444mgが得られた。5エーテル/石油エーテルで調製されたシリカゲル60A40~63μm20gでのカラムクロマトグラフィーによって、粗生成物を精製した。純粋な生成物を20エーテル/石油エーテルで溶出し、減圧下で濃縮し、透明な油として11-フルオロウンデシルメシレートが得られた279.5mg、59。1HNMR4.432H,d,tJ=47.4,6.2Hz,-CH2F,4.222H,t,J=6.6Hz,-CH2O,3.003H,s,CH3SO2,1.6-1.84H,m,1.2-1.414H,mppm。19FNMR-218.4t,tJ=47.4,24.9Hzppm。見出された質量スペクトル:291.1406。C12H25FO3S2Na必要:291.1401。アルゴンで洗い流し、スクリューキャップで密封された、磁気撹拌棒を有する10mm×100mmKimaxチューブ内で、精製された11-フルオロウンデシルメシレート279.5mg、1.041mmolとトリフェニルホスフィン582mg、2.21mmolとを組み合わせた。反応物を加熱し、90°Cで4日間、撹拌した。その後、反応生成物を最小量のCH2Cl2中に溶解し、減圧下で濃縮し、粗製油0.842gが得られた。粗生成物を最小量のCH2Cl2約1mL中に再溶解し、エーテル約50mLで沈殿させた。沈殿物を、冷水浴に置き、透明な液体をデカントした。この溶解/沈殿プロセスを繰り返し、やや不透明な粘着性油として11-フルオロウンデシルトリフェニルホスホニウムメシレートが得られた407.1mg、74。1HNMR:7.69-7.8115H,m,4.412H,d,tJ=47.4,6.2Hz,-CH2F,3.62H,m,-CH2P,2.733H,s,CH3SO2,1.5-1.86H,m,1.2-1.412H,mppm。31PNMR:24.78ppm。19FNMR:-218.4t,tJ=47.4,24.9Hzppm。見出されたMS:435.2627、C29H37FP必要:435.261。[3H]フルオロウンデシルTPPメシレートを合成するために、アルゴンで洗い流し、スクリューキャップで密封された、磁気撹拌棒を有する500μLマイクロ反応チューブ内で、11-フルオロウンデシルメシレート6.8mg、25.3μmolと[3H]トリフェニルホスフィン3.2mg、12.2μmol、372μCiを組み合わせた。反応物を加熱し、90°Cで4日間、撹拌した。その後、反応生成物をCH2Cl240μL中に溶解し、キャップ付き遠心管中のジエチルエーテル2mLに加えた。懸濁物を約160×gで10分間、遠心分離し、溶媒をデカントした。残留物をCH2Cl240μL中に溶解し、エーテル2mLに加え、上記のように遠心分離した。溶媒のデカンテーションにより、油として生成物196μCiが得られた。1:9のメタノール/CH2Cl2におけるシリカゲルでのTLCにより、放射能の99がRf0.2から0.5に含有されることが示された。[5-2-ヨード-アセチルアミノ-ペンチル-トリフェニル-ホスホニウムメシレートIAM-TPPを合成するために、0°Cにおける5-アミノペンチルトリフェニルホスホニウムブロミド臭化水素0.050g、0.098mmolのCH2Cl210mL溶液をトリエチルアミン15mL、0.108mmolに加え、溶液を5分間、撹拌した。溶液を-78°Cまで冷却しアセトン/ドライアイス、固体p-ニトロフェニルヨードアセテート0.030g、0.098mmolを一度に加えた。溶液を20分間、撹拌し、溶媒を-78°C、減圧下で除去した。残留物をアセトン3mL中に溶解し、その後、ヨウ化ナトリウム100mgを加え、溶液を室温で2時間、撹拌した。その後、溶媒を減圧下で除去し、固体をCH2Cl25mL中に再溶解し、蒸留水および10ナトリウムメシレート水溶液で順次洗浄した。有機画分を、減圧下で容積減少させ1mL、ジエチルエーテル20mLへの添加によって沈殿させた。溶解/沈殿手順を2回繰り返して、いかなる残留p-ニトロフェノールも除去した。最終固体を水中に溶解し、凍結乾燥して、黄色の多量の固体0.0465g78が得られた。見出された質量スペクトル高分解能ve516.0938、C25H28INOPは、516.0948を必要とする。1HNMRCD3OD1.5-1.8m,6H,2.69s,3H,3.16m,2H,3.39-3.50m,2H,3.67s,2H,7.70-7.95m,15Hppm。13CNMRCD3OD-1.8,22.7d,J=49Hz,23.1d,J=2Hz,28.5d,J=17Hz,29.2,39.5,40.1,119.9d,J=87Hz,131.5d,J=13Hz,134.8d,J=10Hz,136.3d,J=3Hz,171.4ppm。31PNMRCD3OD-24.8ppm。公開されたオクタン-1-オール分配係数は以下の通りである:TPMP、0.35;MitoQ、2760;デシルTPP、5000。フルオロウンデシルTPP740±100およびIAM-TPP19±1についてのオクタン-1-オール分配係数は、前に記載されているように、本研究において決定された。化合物のマウスへの投与雌C57/BL6マウス20~25gを、標準実験動物用飼料および水に随意にアクセスできる状況で、12時間の明/暗サイクルで維持した。週齢8~10週間の時点で、マウスを拘束チューブ内に置き、10DMSOを追加した100μLの滅菌リン酸緩衝食塩水PBS中の100nmolの[3H]化合物約400~500nCiを尾静脈注射によりiv注射した。比放射能を計算するために、注射された[3H]化合物溶液の試料を保持し、その後、それを用いて、化合物の組織含有量を決定した。注射後の示された時間において、マウスを頚椎脱臼によって屠殺し、約100~200μLの血液試料を心穿刺によって得た。その後、器官を取り出し、血液を除去し、氷上のあらかじめ冷却されたEppendorfチューブに移し、秤量し、処理するまで-80°Cで保存した。採取された組織は、心臓、腎臓、肝臓、脳、骨格筋腓腹筋、および白色脂肪組織皮下であった。この量のMitoQおよび他のTPPカチオンの注射は、無毒であることが以前に示された本明細書においても当てはまる。病状または苦痛がないことを確実にするために、注射後、マウスをモニタリングし、全ての手順をUniversityofOtago動物倫理委員会の承認下で実行した。[3H]化合物の組織からの抽出組織を室温で解凍し、50mLのFalconチューブに移した。氷冷メタノール約4°C;1mL/100mg組織湿重量を組織に加え、Ultraturraxホモジナイザーを用いて、組織をホモジナイズした氷上2×30秒。ホモジネートを1mLバッチとして1.5mLのEppendorfチューブに移し、遠心分離した10,000×g、4°Cで8分間。メタノール抽出物を20mlのガラスシンチレーションバイアルWheatonへデカントし、N2流下、メタノールを蒸発させた。さらなる氷冷メタノール1mL/100mgを組織ホモジネートペレットに加えて、1分間ボルテックスし、上記のように遠心分離し、メタノール抽出物を、新しい20mLガラスシンチレーションバイアルへデカントし、蒸発させた。この手順をさらに3回繰り返し、組織試料あたり5つの抽出物が得られた。5番目の抽出物における放射能の量は、常に無視できた。シンチラントscintillantOptiPhaseHiSafeII;10mLを各バイアルに加え、適切なクエンチ補正を用いるシンチレーションカウンターLKBWallac1217Rackbetaにおいて3HDPM含有量を測定し、試料あたりの放射能の総量を計算した。その後、注射された[3H]化合物の比放射能を用いて、モル化合物/g湿重量組織として組織含有量取り込みを計算した。iv注射後の最初の5時間について、時間に対するln[TPP化合物]の傾きとして測定された、[3H]化合物の器官からの喪失についての一次速度定数から、器官における化合物の半減期を決定した。肝臓、腎臓、および心臓について、蓄積された大量の放射能のため、この手順は堅調であった。しかしながら、他の器官によって蓄積された放射能はより低量であったため、評価がより変わりやすく、それゆえ、それらの器官については、推定値のみが提供されている。IAM-TPPミトコンドリア取り込みの分析インビボでのミトコンドリアによるIAM-TPPの取り込みを評価するために、100μL滅菌PBS中の500nmolのIAM-TPPをマウスに上記のように尾静脈によるivで注射した。1時間後、マウスを頚椎脱臼によって屠殺し、ホモジナイゼーション、続いて分画遠心によって肝臓および心臓のミトコンドリアを調製し、標準としてウシ血清アルブミンを用いるビシンコニン酸アッセイによってタンパク質含有量を決定した。12.5アクリルアミドゲル上での還元SDSポリアクリルアミド電気泳動により、ミトコンドリアタンパク質40μgを分離し、ニトロセルロースに転写し、TPP部分に対するウサギ抗血清、続いて西洋ワサビペルオキシダーゼに結合体化した二次抗ウサギIgGを用いて、増強化学発光による検出でTPP結合タンパク質を検出した。IAM-TPPの細胞内のミトコンドリアへの取り込みを評価するために、C2C12マウス筋芽細胞系EuropeanCollectionofAnimalCellCulturesを、10v/vウシ胎仔血清、ペニシリン100U/ml、およびストレプトマイシン100μg/mlを追加したDMEMDulbecco改変イーグル培地中、6ウェル培養皿における22mmガラスカバースリップにおいて半コンフルエンスまで増殖させた。その後、これらの細胞を、1μMIAM-TPP±10μMFCCPを含む、FCS欠損/XFCSのDMEMを用いて3時間インキュベートした。いくつかのインキュベーションについて、100nMMitoTrackerOrangeMolecularProbesを、インキュベーションの最後の30分間、加えた。インキュベーションの終わりに、ホルムアルデヒドを用いて細胞を固定し、免疫細胞化学法および共焦点顕微鏡のために処理した。OregonGreen結合体化抗ウサギIgGMolecularProbesの二次抗体と共にTPP部分に対するウサギ抗血清を用いて、細胞内のTPPを可視化した。共焦点顕微鏡を用いてイメージが得られた。上記本明細書で言及された全ての刊行物は、参照により本明細書に組み入れられている。記載された本発明の方法および系の様々な改変およびバリエーションは、本発明の範囲および精神から逸脱することなく、当業者にとって明らかであろう。本発明は特定の好ましい実施形態に関して記載されているが、主張されている本発明が、そのような特定の実施形態に不当に限定されるべきではないことは理解されているはずである。実際、ミトコンドリア生物学、放射線学、または関連分野の業者にとって明らかである、本発明を実施するための記載された様式の様々な改変は、以下の特許請求の範囲の範囲内にあるものとする。"