"皮膚老化、炎症および瘢痕の処置において使用するための、脱分化した誘発されていないアルガン細胞のインビトロ培養物に由来する調製物。細胞懸濁液、バイオマス、粉砕バイオマス、粉砕バイオマス浮遊物または培養浮遊物の形態の、請求項1に記載の調製物。活性成分として、請求項1または2に記載の誘発されていない脱分化したアルガン細胞の培養物に由来する調製物を、美容上または皮膚科学的に許容される賦形剤とともに含んでなる、美容組成物または皮膚科学的組成物。前記調製物の量が、組成物の総重量の0.1~10である、請求項3に記載の組成物。皮膚老化、炎症および瘢痕の処置において使用するための、請求項3または4に記載の組成物。前記調製物を得るための方法であって、以下の工程:a植物材料の滅菌b細胞の脱分化cエリシターを含まない培養培地での細胞懸濁液の調製dエリシターを含まない培養培地を用いた、バイオマスの増殖および生産培養、ならびに前記調製物の取得を含んでなる、方法。請求項3~5のいずれか一項に記載の組成物の使用を含む、皮膚老化の美容的処置のための方法。以下の実施例は、非限定的な例として与えられる。本発明による調製物を生成するための実施例実施例1:新鮮バイオマス/エルレンマイヤー内で行われるプロセス好ましくは3~4月齢のアルガン葉を、いくつかの槽によって順に滅菌する:1分間の70アルコール、3分間の2次亜塩素酸ナトリウム、次いで2つの連続する脱塩水槽で8分間および10分間にわたってすすぐ。0.5mg/Lのカイネチンおよび0.75mg/Lの2-4ジクロロ-フェノキシ酢酸2.4-Dが補充され、pH6に調整された後、121°C1barでの20分間オートクレーブされた30g/Lのスクロース、8g/Lの寒天を含むMurashigeandSkoog培地Murashige,T.,Skoog,F.1962.Arevisedmediumforrapidgrowthandbioassayswithtobaccotissuecultures.Physiol.Plant15:473-496から構成される寒天培地と滅菌された葉外植片の向軸面とを接触させて置く。外植片を含むペトリ皿を暗黒下、28°Cで放置してインキュベートし、もろい安定化されたカルスが得られるまで、増殖させる。200mlのオートクレーブされた培地その組成は上で述べた表1に記載されているを含む500mlのエルレンマイヤーに約40gのもろいカルスを入れることによって、最初の細胞懸濁液を生成する。その培養物を、29°Cの暗黒下、115RPMの振盪台上で1週間放置する。次いで、カルスのかたまりを残しつつ、ピペットを用いて細胞浮遊物を回収する。得られた細胞懸濁液を、15日間培養し、次いで、新しい培地への1:5希釈によって同じ期間にわたって増殖させる。次いで、その懸濁液を真空下で濾過し、バイオマスを回収する。得られた新鮮なバイオマスの収率は、168g/Lである。そのバイオマスを-20°Cで維持する。実施例2:乾燥バイオマス実施例2a:乾燥バイオマス/バッチ培養におけるバイオリアクター内で行われるプロセス実施例1に記載されたように得られた4つの500ml細胞懸濁液エルレンマイヤーを、接種デバイス内でひとまとめにし、それらは、10Lのバイオリアクターに無菌的に注ぎ込まれる2Lの接種材料を形成する。このバイオリアクターは、30mg/Lの予め滅菌された消泡剤によって補完された8Lの最適培地表1を参照のことで満たされ、次いで、冷却され、バイオリアクターケーシング内の閉鎖経路におけるサーモスタット制御型水循環によって29.5°Cで維持される。酸素プローブは、飽和状態によって較正され、コンピュータ化されたpO2制御デバイスにデータをリアルタイムで入力する。このデバイスは、通気システムに無菌の純酸素を注入することによってpO2を80で維持する。このバイオリアクターは、排出ガスヘッドスペースにオンラインのCO2測定デバイスも備え、それは同時に、コンピュータ化されたpCO2制御デバイスにデータを入力することにより、pCO2を6に維持する。これは、酸素と混合される通気デバイスに無菌の空気を注入することによって行われる。そのバイオリアクターは、細胞懸濁液を撹拌し、それが沈降するのを防ぐ、75RPMで回転するプロペラ式の撹拌システムも備える。自動のデバイスが、そのバイオリアクターのアウトプット側に設置されることにより、バイオマスの無菌的なサンプリングおよびモニタリングが可能になる。バッチ培養物は、15~17日間にわたってこれらの一定温度、溶解ガス条件下で維持されることにより、280~320g/Lという新鮮バイオマスの細胞密度に達する。このバッチ培養が完了した後、そのバイオリアクターは空にされ、そのバイオマスは、ブフナー漏斗を用いて濾紙による濾過により回収される。同体積の蒸留水に溶解された回収された新鮮バイオマスは、超音波洗浄器を用いて冷却粉砕され、次いで、凍結乾燥される。実施例2b:乾燥バイオマス/流加培養10.0.0.1におけるバイオリアクター内で行われるプロセス4つの500ml細胞懸濁液エルレンマイヤーを、実施例2aに記載されたような接種材料として使用した。バイオリアクターは、実施例2aに示されたように調製される。溶解ガス、温度および撹拌制御システムは、実施例2aに示されたように調製される。最初の培養物は、280~320g/Lという新鮮バイオマスの細胞密度が達成されるまで、15~17日間にわたってこれらの一定温度および溶解ガス条件下で維持される。この最初の培養が完了した後に、10Lバイオリアクターの含有量の80が、取り出される。次いで、8Lの細胞懸濁液が回収される。この懸濁液中のバイオマスは、ブフナー漏斗を用いて濾紙による濾過により回収される。2240g~2560gの新鮮バイオマスが回収される。同体積の蒸留水に溶解された回収された新鮮バイオマスは、冷却されたら、超音波洗浄器を用いて粉砕され、次いで、凍結乾燥される。100~130gの凍結乾燥バイオマスが得られる。80の部分的な回収が行われるのと同時に、8Lの予めオートクレーブされ冷却されたARGMS培地を、そのバイオリアクターに注ぎ込み、次いで、培養体積を10Lに戻すために2Lの細胞懸濁液を含める。その流加培養物は、280~320g/Lという新鮮バイオマスの細胞密度が達成されるまで、5~7日間にわたってこれらの一定温度および溶解ガス条件下で維持される。そのバイオマスが、持続性の生理学的細胞分裂状態にあり、新しい栄養培地の注入が、24時間未満の潜時期およびそのバイオマスの速やかな増大によって特徴付けられるので、この培養は、最初の培養よりも速いより生産率が高い。この流加培養の終わりに、10Lのバイオリアクターの80を取り出す。次いで、8Lの細胞懸濁液を回収する。この懸濁液のバイオマスは、ブフナー漏斗を用いて濾紙による濾過により回収される。次いで、培養が前述同様に再開される。実施例2c:乾燥バイオマス/連続培養バイオリアクターにおいて行われるプロセス4つの500ml細胞懸濁液エルレンマイヤーを、実施例2aに記載されたような接種材料として使用する。バイオリアクターは、実施例2aに示されたように調製される。溶解ガス、温度および撹拌制御デバイスは、実施例2aに示されたように調製される。最初の培養物は、150g/Lという細胞密度および0.2d-1という即時的な新鮮バイオマス増殖速度が達成されるまで、10日間にわたってこれらの一定温度および溶解ガス条件下で維持される。この段階において、10Lのバイオリアクターの含有量の1.2が、1時間20分ごとに取り出される。同体積の新しいARGMS培地をそのバイオリアクターに注ぎ込むことによって、これらのサンプルは、自動的に埋め合わされる。この方法は、それらの細胞を一定の生理学的条件および細胞密度で維持する。次いで、100~120mlの細胞懸濁液が回収される。この懸濁液中のバイオマスは、ブフナー漏斗を用いて濾紙による濾過により回収される。各サンプルについて15g~18gの新鮮バイオマスが回収される。同体積の蒸留水に溶解された回収された新鮮バイオマスは、超音波洗浄器を用いて冷却粉砕され、次いで、凍結乾燥される。得られる結果は、各回収物について0.71~0.85gの凍結乾燥バイオマスである。したがって、その培養物は、少なくとも60日間維持される。それを無期限に維持することが理論上可能である。以前の様式に対する連続培養の利点は、洗浄および滅菌を必要とするバイオリアクターを再度調製する必要がないという点、ならびに細胞の潜時期がないという点である。細胞懸濁液の1~1.5を自動的に取り出した後、バイオリアクターにおいて新しい培地で埋め合わせることにより、そのバイオリアクター内の進行中の培養液の組成のばらつきが最小になる。したがって、この細胞集団では、他の培養様式で見られるバイオマス体積の生産性の喪失に関与する潜時期について一切、代謝的な再調整が行われない。実施例3:新鮮バイオマス浮遊物前記バイオマスは実施例2aに記載されたように得られる実施例2aに記載されたように得られる20gの新鮮粉砕バイオマスを、15分間にわたって10000gで遠心分離し、浮遊物を回収する。次いで、それを凍結乾燥する。平均収量は、新鮮バイオマス1gあたり30mgの凍結乾燥浮遊物である。美容組成物の実施例:実施例4:H/E処方実施例5:E/H処方実施例6:抗酸化活性の評価化学発光この方法は、光化学的シグナルによってフリーラジカルスーパーオキシドラジカルO2O-を発生する。酸化の強度は、通常の条件下で得られる強度よりも1000倍高い。検出は、化学発光によって行われ、それを用いることにより、脂溶性または水溶性の抗酸化抽出物または抗酸化分子が評価される。結果は、等量のビタミンCまたはトロロクス6-ヒドロキシ-2,5,7,8-テトラメチルクロマン-2-カルボン酸として表される。感度は、1ナノモルの程度である。結果の解析は、2つの基準、すなわち、曲線の形状積分、およびソフトウェアによって与えられるナノモル単位の数値IgorPopovandGudrunLewin.Methodsinenzymology[44]vol300.437-456;MaibachIHowardandcoll.JournalofCosmeticDermatologyVol7296-1002008に依存する。結果は、1μgの標準物質=トロロクスACLKitに対して検出される活性と等しい活性を得るのに必要なサンプルのμgとして表される。結果:本研究における抗酸化活性は、化学発光によってスーパーオキシドアニオンを特異的に捕捉する能力に相当する。実施例2aに従って調製された凍結乾燥バイオマスおよび実施例3に従って調製された粉砕凍結乾燥バイオマスの浮遊物は、全体的に等しい抗ラジカル捕捉活性を有する。278μgの凍結乾燥バイオマスが、1μgのトロロクスについて検出された活性と等しい活性:参照抗酸化分子であるコエンザイムQ10と等しい活性を得るために必要である。171μgの粉砕凍結乾燥バイオマス浮遊物が、1μgのトロロクスについて検出された活性と等しい活性を得るために必要である。外部からの攻撃冷気、汚染、タバコ、UVの結果としてその生成が増加するフリーラジカルは、皮膚細胞のDNAだけでなく細胞膜およびミトコンドリア膜DNAへの損傷に関与する。これらのフリーラジカルは、炎症プロセスにおいても非常に重要な役割を果たす。これらの非常に反応性の代謝産物は、細胞酸化ストレスのシグナル伝達のセカンドメッセンジャーであり、ゆえに炎症の初期のメディエーターであるA.VanDerVlietandcoll,ChemBiolInteraction85:95-1161992。実施例2aおよび3に記載される調製物の抗ラジカル活性は、内因性および外因性の皮膚老化および炎症に対する抵抗を助ける。実施例7:細胞外マトリックスを形成するコラーゲンに対するメタロプロテアーゼ活性の阻害の評価細胞外マトリックスECMは、組織に対して構造的な役割および制御する役割を有する動的構造である。細胞外マトリックスは、皮膚に張りおよび力学的特性を与える。表皮では、細胞外マトリックスは、細胞間隙を占め、表皮構造に対して支持を提供する。細胞外マトリックスはまた、表皮細胞間の交換を調節し、細胞活性に関与する。細胞外マトリックスは、繊維特にコラーゲンおよび基本的な物質水、塩類、糖タンパク質、グリコサミノグリカンから構成される。コラーゲンは、共有結合性の水素結合によって接続される3つのポリペプチド鎖同一であっても異なっていてもよいから形成される繊維状タンパク質である。コラーゲンは、繊維状のネットワークの必須の構成要素を形成し、皮膚に抵抗性および弾性を提供する力学的役割を果たす。細胞が老化しているとき、ECMのほとんどの成分が、マトリックスメタロプロテアーゼMMPと呼ばれる亜鉛リッチなエンドペプチダーゼ型酵素によって分解されているHideakiNagase§andJ.FrederickWoessner.JBiolChem,Vol.274,Issue31,21491-21494,July30,1999。それらは、膜型または分泌型である。すべてのMMPが、強い配列相同性および構造相同性を有するが、基質特異性は異なる。MMP1または間質コラゲナーゼは、主にI型コラーゲン正常な皮膚の真皮において80の含有量を分解し、II、VII、VIIIおよびX型コラーゲンも分解する。特異的なペプチド基質Mca-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-DPA-Ala-Arg-NH2を用いるヒト組換え酵素のモデルにおいて、本発明者らは、蛍光定量的定量DavidLeppertdandcoll,AnalyticalBiochemistry3282004166-17によって、直接的な酵素活性について抽出物の作用を解析した。その活性化された酵素を、種々の調製物とともにプレインキュベートし、次いで、その基質の存在下に置く。その酵素は、ペプチドを切断して、クエンチャーDpaN-3-2,4-ジニトロフェニル-L-2,3ジアミノプロピオニルからMcaフルオロフォア7メトキシクマリン-4-イルアセチルを分離する。次いで、そのペプチドは、320nmで励起されると、405nmの波長の蛍光を発する。このように、MMP-1の酵素活性が測定され、その活性は、放出される蛍光に比例する。このintubo試験を用いるとき、本発明者らは、コラーゲンの分解の惹起において重要な役割を有する酵素であるMMP1の活性の潜在的な阻害剤を検出することができる。本発明者らは、MMP1活性阻害のパーセンテージを測定する。その阻害剤または生成物に関する酵素阻害のパーセンテージの算出は、以下のとおりである:阻害=100×最大正味酵素活性-阻害剤の存在下における正味酵素活性/最大正味酵素活性結果:実施例3に従って調製された浮遊物は、60~500μg/mlにおいて用量依存的にMMP1活性を有意に阻害する。実施例2aに従って調製された凍結乾燥バイオマスを、60~1000μg/mlにおいて試験した。概してそのバイオマスの物理化学的な干渉に起因して、本発明者らは、阻害活性を測定することができなかった。しかしながら、非常に類似の抽出物を試験したところ、それは、60μg/ml~1000μg/mlにおいて有意な阻害を示した。実施例3に従って調製された抽出物は、老化が生じているとき、MMPの高い活性に抵抗することができ、コラーゲンの力学的役割の維持に寄与することができるので、皮膚に対して抵抗性および弾性を提供する。実施例8:HaCaTケラチノサイトにおけるTGF-β1の合成の測定TGF-β1トランスフォーミング成長因子-ベータ1は、種々の細胞型によって分泌され、細胞の成長の調節ならびに複数の細胞反応および生物学的プロセスの制御において重要な役割を果たす、TGF-βのスーパーファミリーに属する。このスーパーファミリーのサイトカインの主な活性は、それらが、ほとんどの細胞の増殖を調節すること、線維芽細胞の増殖を刺激すること、および細胞外マトリックスの形成を増加させることであるLawrence,1996。TGF-β1は、特に、細胞骨格アクチンの再編成を誘導すること、および上皮細胞の移動を促進することBolandetal.,1996によって、瘢痕形成プロセスである損傷の修復にも関わるCullenetal.,1997。皮膚組織を最も代表する細胞集団は、ケラチノサイト集団である。それは、皮膚細胞すなわち線維芽細胞の挙動を調節し得、それに影響し得る成長因子の重要な供給源を形成するGhaharyetal.,2001。装置および方法実施例2aに係る誘発されていないバイオマスの生成誘発されたバイオマスの調製物成長因子カイネチンおよび24Dを含まないMurashigeSkoog培地を調製する。KOHを加えることによってこの培地をpH6に調整した後、121°Cp=1barで20分間オートクレーブする。次いで、この培地を、増殖培養物に由来する細胞懸濁液を用いて1:5の体積で接種する。その直後に、カイネチンDMSOに6-ベンジルアミノプリンBAPまたはN-フェニルメチル-7H-プリン-6-アミンおよびエリシター剤アセチルサリチル酸およびジャスモン酸メチルの濃縮溶液を無菌的に加えることによって、誘発条件をもたらす。結果は、EMS誘発培地である表4を参照のこと。次いで、その誘発された培養物を、115RPMおよび29°C、暗黒下の振盪台上で15日間維持する。次いで、新鮮バイオマスを回収し、ブフナー漏斗上で乾燥した後、粉砕および遠心分離を行い、浮遊物を凍結乾燥することによって安定化する。5時間にわたってHaCaTケラチノサイトを種々の抽出物で処理し、次いで、それらの細胞を37°CのDMEM中で24時間インキュベートする。ELISAキットを用いて培養浮遊物中のTGF-β1を投与する。ヒトHaCaTケラチノサイトにおけるTGF-β1の合成に対する、実施例2aに従って調製された誘発されていないアルガンバイオマスおよび誘発後に得られたアルガンバイオマスの作用を、添付の図1に示す。それらは、HaCaTケラチノサイトにおいて、実施例2aに従って調製された誘発されていないアルガンバイオマス50μg/mLが、TGF-β1の合成を48刺激するが、誘発されたアルガンバイオマスは、TGF-β1の合成を26阻害することを示している。実施例9:ヒトケラチノサイトの増殖および細胞移動の測定実施例9.a:ヒトケラチノサイトの細胞増殖の測定損傷の瘢痕形成は、組織の正常な修復における多くの局所的および全身性の因子の相互作用を含む複雑かつダイナミックな生物学的プロセスである。瘢痕形成の進行は、4つの相互依存的な段階:止血、炎症、増殖およびリモデリングを含む。増殖は、3つの明らかに観察可能なプロセス、すなわち、肉芽化、収縮および再上皮化を包含する。肉芽化では、修復プロセスの残りの部分に関わり得る細胞の増殖が、損傷床へのこれらの細胞の移動とともに、観察される。これらの細胞には、マクロファージ、線維芽細胞および内皮細胞が含まれる。マクロファージは、恒常的に走化性因子および成長因子を放出している。線維芽細胞は、損傷の底部の細胞の増殖に必要な新しい細胞マトリックスを構築する。この足場材料は、細胞移動を容易にする。損傷の収縮は、損傷のサイズを減少させるための機構であり、線維芽細胞が、この収縮において主導的役割を果たす。再上皮化は、有色素であり得る、損傷を覆う表皮を再生して外部環境に対する有効な障壁を再形成すること、ならびにその知覚機能および免疫機能を回復することからなる。ゆえに、再上皮化は、ケラチノサイトの細胞移動プロセスおよび増殖プロセスだけでなく、新しい上皮の分化および真皮と表皮とを再び接続する基底膜の修復も包含する。損傷の中心にむかって基底細胞が移動することにより、その損傷の2つの面が結合できると、細胞の有糸分裂が相次いで生じることにより、その移動によって残された空間が埋まり、3次元の再生において上皮組織に対して細胞が供給される。ケラチノサイト細胞、線維芽細胞および内皮細胞の増殖工程は、活性成分の瘢痕形成活性を確かにする機能的な現象の1つであると考えられ得る。線維芽細胞または内皮細胞の増殖の増加は、真皮の瘢痕形成に関与し得る一方、ケラチノサイトの増殖の増加は、再上皮化に関与し得る。装置および方法:細胞増殖用いられる手法は、S期の細胞のDNAへのヌクレオチドチミジンのアナログである5-ブロモ-2’-デオキシウリジンBrdUの取り込みを測定する。手術後に廃棄される皮膚から単離されたケラチノサイトを、完全KSFMBPE25μg/ml;EGF1.5mg/ml中で培養する。その細胞を、37°C、5CO2雰囲気において48時間にわたって、分子の存在下においてインキュベートすることにより評価する。細胞増殖速度に比例するBrdUの取り込みは、ペルオキシダーゼに結合された抗BrdU抗体の系によって評価される。ペルオキシダーゼの基質を加えることにより、有色の反応が起きるBiotrakElisaSystem。対応する吸光度DOを450nmにおいて測定する。ゆえに、このデータは、細胞増殖速度に比例する。次いで、増殖パーセントを、以下の式を用いて算出する:増殖=DO処置-DOtコントロールmin/DOtコントロールmax-DOtコントロールmin×100ここで:コントロールmin=最少培地とともにインキュベートされた細胞コントロールmax=完全培地とともにインキュベートされた細胞したがって、コントロールminは、0増殖に対応し、コントロールmaxは、100増殖に対応する。実施例2aに従って調製されたアルガンバイオマスの、ヒトケラチノサイトの増殖に対する作用を図示している図2に、細胞増殖に対する結果を示す。それらは、実施例2aに従って調製された0.1μg/mLのアルガンバイオマスが、ヒトケラチノサイトの増殖を25刺激することを示している。そのバイオマスが0.01μg/mLで試験されたときは、作用は測定されない。実施例9.b:ヒトケラチノサイトの細胞移動の測定装置および方法:HaCaTケラチノサイトの細胞移動細胞移動を調べるために使用されるプロトコルは、96ウェルキットの使用に基づく。この試験の原理は、ウェル96ウェルプレートの中心への細胞の移動を調べることからなる。これを行うために、直径2mmの検出ゾーンが得られるように、各ウェルの中心に妨害物を置く。次いで、HaCaT細胞をこの妨害物の周りに播種する。細胞がその妨害物の周りの表面に十分に結合したら、その妨害物を取り除き、それにより、細胞は検出ゾーンに移動できる。妨害物なし活性成分ありの状態でプレートを、DMEM0SVF中において37°Cで24時間インキュベートする。次いで、細胞の移動を評価するために、妨害物が位置していたゾーンに存在する細胞の量を解析する。その細胞をHoechst33342で標識し、カバーを用いてこのゾーンに存在する細胞だけを観察し、計数する。各条件について、8ウェルを平均する。結果は、-蛍光強度IF、移動した細胞の量に比例する-コントロール0SVFに対する活性パーセント:IF処理-IF0移動/IFtコントロール0SVF-IF0移動×100として表され、ここで:IF0移動は、妨害物を含むウェルのIF蛍光強度、ゆえにバックグラウンドノイズに対応する。図3は、細胞移動の結果を示しており、実施例2aに従って調製されたアルガンバイオマスの、HaCaTケラチノサイトの移動に対する作用を図示している。それらは、実施例2aに従って調製された0.01または0.03μg/mLのアルガンバイオマスが、HaCaTケラチノサイトの移動をそれぞれ79および73刺激することを示している。"