式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型、該ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩、並びに該化合物及びそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ及び溶媒和物。請求項1に記載の式Iの化合物及び/又はそのヒドロキシ酸型及び/又は該ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩及び/又は該化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物と、少なくとも1種の医薬として許容されるアジュバント、担体及び/又はビヒクルとを含む、医薬組成物。医薬品として使用するための、請求項1に記載の式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型又は該ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩及び/又は該化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物。a.神経変性疾患、b.認知障害、c.望ましくない酸化に関連する疾患、d.加齢に伴う病理過程及び早老症、e.アテローム性動脈硬化、心房細動、脂質異常症、高コレステロール血症、高脂血症及び高トリグリセリド血症のような心血管疾患、f.炎症若しくは炎症性過程、又はg.てんかん、てんかん発作及びけいれんの予防用並びに/又は治療用の、請求項1に記載の式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型又は該ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩並びに/又は該化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物。前記神経変性疾患が、アルツハイマー病、ハンチントン病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症ALS又は多発性硬化症である、請求項4に記載の式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型又は該ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩及び/又は該化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物。式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型、該ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩及び/又は該化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物の、医薬品の調剤における使用。前記医薬品が、a.神経変性疾患、b.認知障害、c.望ましくない酸化に関連する疾患、d.加齢に伴う病理過程及び早老症、e.アテローム性動脈硬化、心房細動、脂質異常症、高コレステロール血症、高脂血症及び高トリグリセリド血症のような心血管疾患、f.炎症若しくは炎症性過程、又はg.てんかん、てんかん発作及びけいれんの予防並びに/又は治療に用いられる、請求項6に記載の使用。seladin-1/DHCR24遺伝子発現の増加に使用するための、請求項1に記載の式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型又は該ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩及び/又は該化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物。seladin-1/DHCR24遺伝子に関連する疾患の予防及び/又は治療に使用するための、請求項1に記載の式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型又は該ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩及び/又は該化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物。神経変性疾患、望ましくない酸化に関連する疾患又は加齢に伴う病的課程に関連する神経細胞死を予防及び/又は治療する、請求項9に記載の式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型又は該ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩並及び/又は該化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物。seladin-1/DHCR24遺伝子発現の増加によって特徴付けられる医薬品の調剤における、請求項1に記載の式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型又は該ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩及び/又は該化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物の使用。seladin-1/DHCR24遺伝子に関連する疾患の予防用及び/又は治療用医薬品の調剤における、請求項1に記載の式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型又は該ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩及び/又は該化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物の使用。スタチン類の神経保護効果の可能性に関する文献は存在するが、本発明者らは、市販されていないモナコリンJの誘導体、具体的には、2-プロピルペンタン酸-123788a-ヘキサヒドロ-37-ジメチル-8-2--テトラヒドロ-4-ヒドロキシ-6-オキソ-2H-ピラン-2イルエチル-1-ナフタレニルエステル時に、本特許出願ではNST0060とも特定されるが、高い血液脳関門BBB通過能力、並びにコレステロール値の低下、具体的にはHMGRの阻害において、並びにてんかん、てんかん発作及びけいれんに対する保護において高い有効性を有することに加えて、驚くほどの神経保護可能性を有する薬剤であることを見出した。更に、また驚くべきことに、この化合物は、市販のスタチン類よりも安全であり、最高の生物学的安全性レベルを示すスタチンであるシンバスタチンのレベルを下回る毒性レベルを示す。加えて、これは、モナコリンJ分子に付加される側鎖が低コストのため、合成が安上がりな化合物である。酸化ストレス、プロテインホスファターゼ-1の阻害、コハク酸デヒドロゲナーゼの阻害、小胞体ストレス及びアポトーシスを引き起こす様々な種類の攻撃によりコリン作動性起源のヒト細胞株で神経細胞死を引き起こす様々な攻撃に対して、前記化合物の神経保護活性が明確に示された実施例2、図1~6。前記実施例は、神経変性疾患例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、てんかん重積症、ハンチントン病等に関連する神経細胞死又は望ましくない酸化に関連する疾患又は加齢に伴う病理過程の予防及び又は治療における前記化合物の使用の可能性を明確に示す。この化合物の作用メカニズムを研究するため、またその神経保護効果を確かめるため、ADに関与する遺伝子であるseladin-1/DHCR24遺伝子の発現に対する前記化合物の修飾を研究し実施例3、図7、化合物NST0060が、コリン作動性起源のヒト細胞株において用量依存的様式でこの神経保護遺伝子のmRNAレベルを増加できることを観察した。化合物NST0060の血液脳関門通過をよりよく定義する目的で、本発明者らは、実施例4に記載するように、理論的脂溶性、通過率及び有効透過率のような様々なパラメータを分析して図8及び表1、NST0060は、用いた陽性コントロールベラパミルに非常に近い、高いBBB通過率を有すると判断した。前記化合物の脂質低下活性は、市販のスタチンであるシンバスタチンと比較してHMGRの阻害を測定することによって明確に示された実施例5、図9。前記化合物のコレステロール低下効果をより良く定義する目的で、本発明者らは、実施例5に記載するように、ヒト肝細胞株におけるコレステロールの低減を分析すること図10によって、コレステロール低下作用を更に詳しく分析した。前記実施例は、心血管疾患例えば、心筋梗塞、アテローム性動脈硬化、先天性心臓病、後天性心臓病、虚血性心臓病、高血圧性心臓病、心弁膜症、心筋症、血液疾患等に関連する高コレステロール血症の予防及び/又は治療における前記化合物の使用の可能性を明確に示す。化合物NST0060の生物学的安全性は、その毒性をゼブラフィッシュ胚モデルにおいて市販のスタチンであるシンバスタチンと比較して評価することによって明確に示され、NST0060は、より低い死亡率実施例6、表2、実験の最後における健康な幼生の高い割合実施例6、図11、及びシンバスタチンよりも少ない心拍の途絶実施例6、図12をもたらすことから、様々な濃度でシンバスタチンよりも毒性が少ないことが観察された。前記化合物の抗炎症活性は、リポ多糖LPSの腹腔内注射によって発生させたマウスの全身性炎症モデルで明確に示された実施例7、図13~17。前記実施例は、炎症及び関連疾患、中でも神経変性疾患又は心血管疾患が認められるものの予防及び/又は治療における前記化合物の使用の可能性を明確に示す。前記化合物の抗てんかん及び抗けいれん活性は、マウスのてんかんモデルにおいて、てんかん発作及びけいれんに対する保護を測定することによって、明確に示された実施例8、図18及び19。前記実施例は、てんかん及びてんかん発作又はけいれんの予防及び/又は治療におけるこの化合物の使用の可能性を明確に示す。前記化合物の生体内抗酸化活性は、興奮毒性物質を接種したマウスの脳で引き起こされる酸化ストレスに対する保護を測定することによって、明確に示された実施例9、図20及び21。前記実施例は、望ましくない酸化に関連する疾患の予防及び/又は治療における前記化合物の使用の可能性を明確に示す。NST0060の保護効果は、マウスの死を引き起こす興奮毒性損傷後の生存レベルを測定することによって、明確に示された実施例10、図22。前記実施例は、神経変性疾患のような興奮毒性症候群に関連する疾患の予防及び/又は治療における前記化合物の使用の可能性を明確に示す。従って、本発明の一態様は、式Iの化合物[本特許出願において、時にNST0060とも特定される]:、そのヒドロキシ酸型、前記ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩、並びに前記化合物及びそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ及び溶媒和物に関する。本発明の別の態様は、式Iの化合物及び/又はそのヒドロキシ酸型及び/又は前記ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩及び/又は前記化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物と、少なくとも1種の医薬として許容されるアジュバント、担体及び/又はビヒクルとを含む、医薬組成物である。本発明の別の態様は、医薬品として使用するための、式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型、又は前記ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩、及び/又は前記化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物に関する。別の態様によると、本発明は、特にa.神経変性疾患例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、てんかん重積症、ハンチントン病等、より具体的には、酸化ストレス、プロテインホスファターゼ-1の阻害、コハク酸デヒドロゲナーゼの阻害、小胞体ストレス及び前記慢性神経変性疾患に関連するアポトーシス過程に対する保護剤として、b.認知障害、c.望ましくない酸化に関連する疾患、d.加齢に伴う病理過程及び早老症、e.アテローム性動脈硬化、心房細動、脂質異常症、高コレステロール血症、高脂血症及び高トリグリセリド血症のような心血管疾患、f.炎症、炎症性過程、及び炎症と共に示されるか若しくは炎症によって引き起こされる疾患、又はg.てんかん、てんかん発作及びけいれんの予防用並びに/又は治療用の、神経保護薬として使用するための、式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型、又は前記ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩、及び/又は前記化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物に関する。本発明の一態様は、医薬品の製造における、式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型、前記ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩、及び/又は前記化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物の使用に関する。特定の実施形態によると、前記医薬品は、特にa.神経変性疾患例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、てんかん重積症、ハンチントン病等、より具体的には、酸化ストレス、プロテインホスファターゼ-1の阻害、コハク酸デヒドロゲナーゼの阻害、小胞体ストレス及び前記慢性神経変性疾患に関連するアポトーシス過程に対する保護剤として、b.認知障害、c.望ましくない酸化に関連する疾患、d.加齢に伴う病理過程及び早老症、e.アテローム性動脈硬化、心房細動、脂質異常症、高コレステロール血症、高脂血症及び高トリグリセリド血症のような心血管疾患、f.炎症、炎症性過程、及び炎症と共に示されるか若しくは炎症によって引き起こされる疾患、又はg.てんかん、てんかん発作及びけいれんの予防及び/又は治療において、神経保護剤として使用されるためのものである。本発明の別の態様は、seladin-1/DHCR24遺伝子発現の増加に使用するための、式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型、又は前記ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩、及び/又は前記化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物である。本発明の別の態様は、seladin-1/DHCR24遺伝子に関連する疾患の予防及び/又は治療に使用するための、式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型、又は前記ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩、及び/又は前記化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物である。本発明の別の態様は、seladin-1/DHCR24遺伝子発現の増加によって特徴付けられる医薬の製造における、式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型、又は前記ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩、及び/又は前記化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物の使用に関する。別の態様において、本発明は、治療上有効量の式Iの化合物、そのヒドロキシ酸型、又は前記ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩、及び/又は前記化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物を対象者に投与する工程を具える、治療を必要とする対象者において、神経変性疾患、認知障害、望ましくない酸化に関連する疾患、加齢に伴う病理過程及び早老症、アテローム性動脈硬化、心房細動、脂質異常症、高コレステロール血症、高脂血症及び高トリグリセリド血症のような心血管疾患、てんかん、てんかん発作及びけいれん、又は炎症によって特徴付けられる若しくは引き起こされる疾患を予防及び/又は治療する方法に関する。[定義]本特許出願の発明の目的の理解を助けるため、本発明の文脈上使用される幾つかの用語及び表現の意味を以下で説明する。本明細書中で使用する神経保護という用語は、既知若しくは知られるようになるあらゆるメカニズムによって、例えば、壊死、アポトーシス、自己消化、酸化損傷、興奮毒性、小胞体損傷、副産物の蓄積、細胞骨格の崩壊、電子伝達系の阻害、細胞構造の損失等による神経細胞の変性若しくは死の影響の減衰若しくは消失をもたらすことができるあらゆる物質、又はそれらの副作用の低減若しくは消失を指す。本明細書中で使用するスタチンという用語は、コレステロール生合成の律速段階を触媒する3-ヒドロキシ-3-メチルグルタリル-補酵素AレダクターゼHMGR酵素の阻害剤を指し、あらゆる天然、合成又は半合成スタチンを包含する。幾つかのスタチンは、閉じた形態ラクトン又は開いた形態ヒドロキシ酸をとり得る。ヒドロキシ酸開いた形態は、例えば、メタノール中で水酸化ナトリウムを用いる、テトラヒドロフラン-水中で水酸化ナトリウムを用いる等といった通常の加水分解によって、対応するラクトンから調製することができる。開いた形態ヒドロキシ酸では、スタチンは反応して、医薬として許容される金属と有機又は無機塩基から形成されるアミンカチオンとを有する塩を形成する。スタチンの医薬として許容される塩は、対応する遊離酸と、溶解度及び融点のような幾つかの物理的特性において異なり得るが、それらは、本発明の目的について遊離酸型と等価であると考えられる。スタチンの開いた遊離型ヒドロキシ酸は、塩形態から、必要に応じて、その塩を塩酸等のような酸の希釈水溶液と接触させることによって、再生成させることができる。スタチンの閉じた形態ラクトンは、開いた形態ヒドロキシ酸を、例えば、トルエン、ベンゼン、酢酸エチル等のような未希釈溶媒に、およそ0°Cからおよそ溶媒の沸点までの温度で溶解させることによって、典型的には必然ではないが、強酸、例えば、塩酸等を用いる生成した水及び触媒の同時分離で、再生成させることができる。さらに、スタチンは、溶媒和型又は非溶媒和型で存在することができ、かかる形態は、本発明の目的について非溶媒和型と等価である。本明細書中で使用する心臓保護という用語は、既知若しくは知られるようになるあらゆるメカニズムによって、例えば、壊死、アポトーシス、虚血、酸化損傷、不整脈、副産物の蓄積、細胞構造の損失等による心血管疾患若しくは心臓病又は心臓障害の元となる影響の減衰若しくは消失をもたらすことができるあらゆる物質、又はそれらの副作用の低減若しくは消失を指す。本明細書で使用する脂質低下という用語は、血中脂質レベル又は他の組織中の脂質レベルを低減する特性を有する薬理学的に活性なあらゆる物質を指す。これら物質の重要性は、過剰な幾つかの種類の脂質コレステロール若しくはトリグリセリド又はリポタンパク質が心血管疾患の主要な危険因子の一つであるという事実のためである。本明細書で使用するコレステロール低下という用語は、血中コレステロール値又は他の組織中のコレステロール値を低減する特性を有する薬理学的に活性なあらゆる物質を指す。本明細書中で使用する抗炎症という用語は、炎症過程、急性炎症、慢性炎症若しくは全身性炎症の減衰、例えば、長さ及び/若しくは強度における減衰、又は炎症過程、急性炎症、慢性炎症若しくは全身性炎症の消失、又はそれらの副作用の低減若しくは消失を指す。本明細書中で使用する生物学的に安全という用語は、毒性的影響、腫瘍の発生、胚発生障害催奇性又は他の悪影響が存在しないことを指す。本明細書で使用する神経変性疾患という用語は、時間をかけて機能障害又は機能低下を引き起こす、神経組織の、特に神経細胞の変性又は劣化に起因する疾患を包含する;変性という用語は、細胞の生存能力の損失、細胞機能の損失及び/又は神経細胞又はその他の細胞数の損失を包含する。例示的で非限定的な神経変性疾患の例としては、アルツハイマー病、ハンチントン病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症ALS、多発性硬化症等が挙げられる。特定の実施形態では、前記神経変性疾患が、例えば、酸化ストレス又は小胞体ストレス又はアポトーシス又は興奮毒性又は細胞骨格の崩壊又は電子伝達系の阻害又は一般的な神経細胞死を引き起こす物質によって引き起こされる神経細胞死に関連する疾患である。本明細書中で使用する望ましくない酸化に関連する疾患という用語は、望ましくない酸化例えば、過度の酸化により引き起こされるか又は前記望ましくない酸化が症状である疾患を指す。前記望ましくない酸化は、関与する特定のフリーラジカルや標的にかかわりなく、タンパク質、DNA及び/又は脂質に対してフリーラジカルにより引き起こされる損傷の結果であり得る。望ましくない酸化は、細胞、組織又は器官の機能障害を引き起こし得る、またその結果、疾患の潜在的メカニズムを形成し得る、フリーラジカルの過剰な発生に関与する。特定の実施形態では、前記望ましくない酸化が、年齢老化によって又は神経変性過程によって引き起こされ、それ自体によって又は他の因子と組み合わさって幾つかの疾患の発症を引き起こし得る。特定の実施形態では、前記望ましくない酸化が、酸化ストレスを引き起こす物質によって引き起こされた酸化損傷に関する。本明細書中で使用する加齢に伴う病理過程という用語は、細胞代謝機能障害、ストレス過程、病原体による感染、遺伝子変化、遺伝的感受性、外傷、虚血、てんかん等を含む、神経組織の細胞生存能力の損失、又は神経組織の細胞の感作、細胞機能の損失及び/又は神経細胞又はその他の細胞数の損失を引き起こす、加齢に伴うあらゆる事象又は事象の組み合わせを指す。本明細書中で使用する心血管疾患という用語は、心臓又は残りの心血管系又は血液のあらゆる疾患又は機能障害又は変化を指す。本明細書中で使用する炎症という用語は、環境的攻撃への非特異的応答、又は炎症性因子細菌、ウイルス、寄生虫、真菌、アポトーシス若しくは壊死のような細胞死過程、尿酸、ヌクレオチド、核酸若しくは毒物のような炎症性応答を活性化させる分子、外傷、異物、物理的因子、血管障害、変性過程、免疫性及び自己免疫性障害、過敏症等によって生じた応答を指す。本明細書中で使用する認知障害という用語は、持続的に徐々に影響を受ける社会活動及び人間の相互作用を妨げる、記憶、方向、言語、視覚認識若しくは行為のような精神機能の損失又は変化を指す。本明細書中で使用するてんかんという用語は、脳神経細胞による神経インパルスの過剰な高共時的放電による再発性発作によって特徴付けられ、最終的には様々な臨床的及びパラクリニカルな兆候に関連する、様々な原因を有する慢性脳症候群を指す。てんかん性発作は、けいれん性又は非けいれん性であり得る。てんかんは、数多くの原因を有する;幾つかの事例では、様々な種類の脳損傷例えば、脳外傷、髄膜炎の後遺症、腫瘍等のためであり得る;他の事例では、損傷は存在しないが、発作に対する遺伝的素因が存在する;他の事例では、てんかんの病因が、環境的なもの、薬理学的処置によるもの、興奮毒性、外傷、ストレス過程、老化、発達障害、神経疾患、心理的危機、妊娠期間中の問題、出産中の問題等によるものであり得る。本明細書中で使用するてんかん又はけいれんという用語は、例えば、遺伝的、環境的、薬理学的処置によるもの、興奮毒性によるもの、外傷によるもの、ストレス過程によるもの、老化によるもの、発達障害によるもの、神経疾患によるもの、心理的危機によるもの、妊娠期間中の問題によるもの、出産中の問題によるもの等といった、あらゆる病因のあらゆるてんかん性発作又はけいれんを指す。てんかん性発作は、脳内の異常な電気活動が身体の運動又は機能、感覚の不随意変化を引き起こすときに、警戒する能力又は行動として起こり、部分性又は全般性けいれん性又は非けいれん性であり得る。本明細書中で使用する対象者という用語は、哺乳動物種の一員を指し、限定しないが、家畜、霊長類及びヒトが挙げられる;好ましくは、対象者は、あらゆる年齢又は人種の人間の男性又は女性である。特定の実施形態では、前記対象者は、老化のような加齢に伴う病理過程又は慢性神経変性疾患のような神経変性疾患に苦しむか又は苦しんでいることが疑われる哺乳動物である。本明細書中で使用する医薬として許容されるという用語は、化合物が、生理学的に容認でき、対象者に投与したときに、アレルギー反応、又は、例えば胃障害、めまい等といった類似の好ましくない反応を一般に引き起こさないという事実を指す;前記医薬として許容されるという用語は、好ましくは、政府の規制官庁によって承認されたこと又は合衆国薬局方若しくは別の一般的に認知されている動物用薬局方例えば、ヨーロッパ薬局方等に収載されていることを意味する。本明細書中で使用する医薬として許容される塩という用語は、医薬として許容されるアミン塩の他に医薬として許容される金属塩を包含する。医薬として許容される金属塩という用語は、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン、アルミニウムイオン、鉄イオン又は亜鉛イオンで形成される塩を意図する。医薬として許容されるアミン塩という用語は、カルボン酸で塩を形成するのに充分に強いアンモニア塩基及び有機窒素塩基を有する塩を意図する。前記医薬として許容される塩は、当業者に既知の通常の方法によって得ることができる。化合物2-プロピルペンタン酸-123788a-ヘキサヒドロ-37-ジメチル-8-2--テトラヒドロ-4-ヒドロキシ-6-オキソ-2H-ピラン-2イルエチル-1-ナフタレニルエステルは、米国特許第4866090号で同族の他の化合物について記載されたもののような半合成法によって得ることができる。本発明者らによって行われた多数のアッセイは、酸化ストレスを引き起こす物質の作用に対する化合物NST0060の神経保護効果、細胞骨格の崩壊を引き起こす物質に対する前記化合物の神経保護効果、電子伝達系の阻害を引き起こす物質に対する前記化合物の神経保護効果、小胞体ストレスを引き起こす物質の作用に対する前記化合物の神経保護効果、及びヒトのコリン作動性ニューロンのアポトーシスを引き起こす物質の作用に対する前記化合物の神経保護効果を明確に示した。キサンチン/キサンチンオキシダーゼXXOのような、酸化ストレスを引き起こす物質の作用に対する神経保護効果を、実施例2で説明する。前記実施例において、化合物NST0060は、酸化ストレスによって引き起こされる神経細胞死を有意に且つ定量的に低減できることが観察された。このことは、前記化合物の神経保護能力を明確に示す図1。前記化合物の神経保護効果をより良く定義する目的で、本発明者らは、プロテインホスファターゼ-1の阻害による細胞骨格の崩壊によって死を引き起こすオカダ酸OAの作用によって引き起こされる神経細胞死を解析することによって、神経変性過程をより詳細に解析し、化合物NST0060が細胞骨格の崩壊によって引き起こされる神経細胞死を定量的且つ有意に低減できることを突き止めた。このことは、前記化合物の神経保護能力を明確に示す図2前記化合物の神経保護効果をより良く定義する目的で、本発明者らは、ハンチントン病のモデルとして受け入れられているコハク酸デヒドロゲナーゼの阻害による電子伝達系の阻害によって死を引き起こす3-ニトロプロピオン酸3-NPの作用によって引き起こされる神経細胞死を解析することによって、神経変性過程をより詳細に解析し、化合物NST0060が電子伝達系の阻害によって引き起こされる神経細胞死を定量的且つ有意に低減できることを突き止めた。このことは、前記化合物の神経保護能力を明確に示す図3。前記化合物の神経保護効果をより良く定義する目的で、本発明者らは、小胞体ストレスを引き起こす物質ツニカマイシンの作用によって引き起こされる神経細胞死を解析することによって、神経変性過程をより詳細に解析し、化合物NST0060が小胞体ストレスによって引き起こされる神経細胞死を定量的且つ有意に低減できることを突き止めた。このことは、前記化合物の神経保護能力を明確に示す図4。前記化合物の神経保護効果をより良く定義する目的で、本発明者らは、アポトーシスを引き起こす物質カンプトテシン、CPTの作用によって引き起こされる神経細胞死を解析することによって、神経変性過程をより詳細に解析し、化合物NST0060がアポトーシスを引き起こすエフェクターカスパーゼ3/7の活性化を定量的且つ有意に低減できることを突き止めた。このことは、前記化合物の神経保護能力を明確に示す図5。更に、前記化合物の神経保護効果をより良く定義する目的で、本発明者らは、フローサイトメトリーを用いて、アポトーシスにより引き起こされる神経細胞死及びその阻害を、アポトーシスによる神経細胞死の特異的阻害剤であるZ-VAD-fmkと比較して解析することによって、神経変性過程をより詳細に解析し、アポトーシスにより引き起こされる神経細胞死を化合物NST0060が定量的且つ有意に低減できることを突き止めた図6。加えて、アルツハイマー病に関してseladin-1/DHCR24遺伝子発現の増加の神経保護効果が実証されているためCechiらJCellMolMed2008;12:1990-2002、化合物NST0060がseladin-1/DHCR24遺伝子発現を増加させる能力を調べた。seladin-1/DHCR24遺伝子の産物は、カスパーゼ-3の阻害による抗アポトーシス効果によって、またデルモステロールからのコレステロール合成を制御することによって、その神経保護作用を発揮することが報告されておりGreeveら、JNeurosci2000;20:7345-52、このことは、神経毒攻撃に対するバリアの生成を実証し、βアミロイドの産生を予防する。これら作用メカニズムは、seladin-1/DHCR24遺伝子発現の増加が包括的な神経保護効果を有することを示し、従って、この遺伝子の発現の増加をもたらすこれら薬物が、神経変性疾患例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、てんかん重積症、ハンチントン病等に関連する神経細胞死若しくは酸化に関連する疾患若しくは加齢に伴う病理過程の予防及び/又は治療に使用できる可能性がある。NST0060の投与によりseladin-1/DHCR24遺伝子発現を増加させる能力は、実施例3で説明する。前記実施例では、化合物NST0060がseladin-1/DHCR24遺伝子発現を定量的且つ有意に且つ用量依存的な様式で増加させることができることが観察され、これは、リアルタイム定量PCRを用いた相対発現量解析によって実証された。これらの結果は、化合物NST0060の神経保護能力を明確に示す図7。化合物NST0060の血液脳関門通過をより良く定義する目的で、本発明者らは、実施例4に説明するように、理論的脂溶性、通過率及び有効透過率のような様々なパラメータを分析した図8及び表1。化合物NST0060は、驚くべきことに、陽性コントロールベラパミルのものと実質的に同一であり、最も高いBBB通過率を有する既知のスタチンよりもかなり高いBBB通過率を生み出した。更に、化合物NST0060の性質のため、3-ヒドロキシ-3-メチルグルタリル補酵素AレダクターゼHMGR酵素の阻害能力を調べた。驚くべきことに、実施例5に示すように、その結果は、化合物NST0060が明らかなコレステロール低下効果を有することを実証した。観察された結果で分かるように、また図9で示されるように、化合物NST0060のHMGRに対する阻害活性は、ヒト集団においてコレステロール値を低減するのに通常用いられる市販のスタチンシンバスタチンのものに近い。前記化合物のコレステロール低下効果をより良く定義する目的で、本発明者らは、ヒト肝細胞株におけるコレステロール低減を分析することによって、コレステロール低下活性をより詳細に分析した。得られた結果で分かるように、また図10で示されるように、化合物NST0060のコレステロール低下活性は、市販のスタチンシンバスタチンのものに近い。化合物を人間集団に投与するために、その無害性及び安全性が実証されなければならない。この目的で、本発明者らは、実施例6で説明するように、OECDC.15プロトコルに記載された方法論に従って、広く用いられる毒物学的モデルであるゼブラフィッシュ胚で化合物NST0060の生物学的安全性を分析した。このモデルにおいて、本発明者らは、前記化合物の副作用をより良く定義することができるように、前記胚で明確な損傷を引き起こす目的で、臨床診療で使用される用量よりも高い濃度で、前記化合物の影響をシンバスタチンと比較した。そして、高用量のNST0060の投与は、同用量のシンバスタチンを用いて検出されたものよりも少ない死亡率をもたらした表2。前記化合物の生物学的安全性をより良く定義する目的で、実験の最後で健常な幼生の割合をシンバスタチンと比較して調べ、シンバスタチンと比較して、NST0060を用いた処理でより多くの健常な幼生が観察された図11。前記化合物の生物学的安全性をより良く定義する目的で、使用した用量による心拍の割合をNST0060とシンバスタチンとで比較して調べ、最高評価用量のシンバスタチンでNST0060のものよりも多い心拍数の低下が観察された図12。このことは、化合物NST0037の高い生物学的安全性を示している。化合物NST0060の抗炎症活性を、それ自体で、また既知のスタチンシンバスタチンと比較しても調べた。得られた結果は、化合物NST0060が高い抗炎症性の可能性を有することを示し、これは、マウスにおけるLPSの注射によって引き起こされた影響だけでなく、TNFαレベル及びIL-1βレベルの有意な低下をもたらしたため図13~17、驚くべきことにシンバスタチンよりも有意に良好であった。また、知られているように、興奮毒性物質の投与は幾つかの事例では動物においてけいれんの急性発症及びてんかんを誘導する;このため、本発明者らは、化合物NST0060の神経保護効果が、興奮毒性物質によって引き起こされるものに対する抗てんかん及び抗けいれん効果図18及び19、興奮毒性物質によって引き起こされる望ましくない酸化に対する神経保護効果図20及び21、興奮毒性物質によって引き起こされる死に対する神経保護効果図22を伴うかを分析し、NST0060の投与がこれらすべてのパラメータの低下をもたらしたことを観察した。本発明によって提供される医薬組成物は、1種又は2種以上の医薬として許容されるアジュバント、ビヒクル若しくは賦形剤と共に、化合物NST0060及び/又はそのヒドロキシ酸型及び/又は前記ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩及び/又は前記化合物若しくはそのヒドロキシ酸型の医薬として許容されるプロドラッグ若しくは溶媒和物を含有することができる。医薬として許容される塩、プロドラッグ又は溶媒和物という用語は、被投与者に投与されたときに本明細書で説明するように化合物を直接的又は間接的に提供できる、医薬として許容されるあらゆる塩、溶媒和物又は他のあらゆる化合物を指す。にもかかわらず、医薬として許容されない塩もまた、医薬として許容される塩の調整に有用であり得ることから、本発明の範囲内に含まれる。前記塩及びプロドラッグは、本技術分野で既知の方法によって調製することができる。式Iの化合物の又はそのヒドロキシ酸型のプロドラッグであるあらゆる化合物は、本発明の範囲内である。プロドラッグという用語は、その最も広い意味で用いられ、生体内で本発明の化合物に転換される誘導体を包含する。かかる誘導体は、当業者にとって明白であり、本発明の次の誘導体:エステル、アミノ酸エステル、リン酸エステル、金属スルホン酸塩エステル、カルバメート及びアミドを含み得る。本発明の化合物は、結晶形態で又は遊離化合物として又は溶媒和物例えば、水和物として存在することができ、どちらの形態も本発明の範囲内であることを意図する。溶媒和の方法は一般に当業者に知られている。特定の実施形態では、溶媒和物が水和物である。化合物NST0060、又はそのヒドロキシ酸型又は前記ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩を含有する医薬組成物は、選択された投与経路、例えば、経口、非経口皮下、筋肉内、静脈内、腹腔内等、局所、直腸経路等による投与に適するあらゆる医薬剤形に調剤することができる。非限定的例示として、本発明により提供される医薬組成物は、経口経路によって投与される固体医薬剤形例えば、顆粒剤、錠剤、カプセル剤等、経口経路によって投与される液体医薬剤形例えば、液剤、懸濁液、エマルション等、非経口経路によって投与される医薬剤形例えば、液剤、懸濁液、エマルション等に調剤することができる。そのため、各事例において、選択された医薬剤形及び投与経路に適する医薬として許容されるビヒクル及び賦形剤、例えば、固体医薬剤形の調剤用の結合剤、希釈剤、崩壊剤、滑沢剤、湿潤剤等及び液体医薬剤形の調剤用の緩衝剤、界面活性剤等が選択されるであろう。前記ビヒクル及び賦形剤は、医薬として許容され且つ薬理学的に容認されなければならず、治療される対象者に対していかなる悪影響も発揮せずに処方の他の成分と組み合わせることができなければならない。前記有効成分の前記医薬剤形に関する情報の他に、前記ビヒクル及び賦形剤に関する情報も、ガレンGalenの調剤学論にみることができる。薬物一般のさまざまな医薬剤形の概説及びそれらの調製方法は、書籍TreateddeFarmaciaGale ́nicaCFauli ́iTrillo1stEdition1993Luza ́n5SAdeEdicionesにみることができる。本発明によって提供される医薬組成物は、治療上有効量で、化合物NST0060又はそのヒドロキシ酸型又は前記ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩を含む。この説明に用いる意味において、治療上有効量という表現は、所望の効果をもたらすように計算された化合物量に関する。対象者に投与される化合物NST0060、又はそのヒドロキシ酸型又は前記ヒドロキシ酸の医薬として許容される塩の用量は、数多くの要因に左右されて広範な範囲内で変化し、前記要因の中でも、使用される化合物の特性、例えば、その生物学的半減期及び活性、医薬組成物中の前記化合物の濃度、対象者の臨床像、病態の重症度、選択された医薬剤形等が挙げられる。本発明によって提供される医薬組成物は、予防又は治療の目的で1日に1回又は2回以上投与することができる、あるいは、毎日必要ではないが、毎週的確な回数、等の他の投与計画に従うことができる。必要に応じ、本発明によって提供される医薬組成物は、本発明によって提供される医薬組成物の有効性を高める目的で、他の薬物、例えば、神経変性疾患、認知障害、望ましくない酸化に関連する疾患、加齢に伴う病理過程及び早老症、てんかん、てんかん性発作、けいれん、炎症若しくは炎症過程又は心血管疾患の治療に有用な薬物と共に使用することができる、従って、併用療法を行うことができる。この追加の薬物は、同じ医薬組成物の一部とすることができ、あるいは、別個の医薬組成物として、本発明によって提供される医薬組成物の投与に関し、本発明によって提供される医薬組成物と同じときに同時投与又は異なるときに連続投与提供することができる。以下の実施例は、本発明を説明するのに役立つものであり、本発明を限定するものと見なしてはならない。[2-プロピルペンタン酸-123788a-ヘキサヒドロ-37-ジメチル-8-2--テトラヒドロ-4-ヒドロキシ-6-オキソ-2H-ピラン-2イルエチル-1-ナフタレニルエステルの合成]NST0060として特定されるこの化合物を、Hoffmanらの論文JMedChem198629849-852で類似化合物について報告された方法論に従って、調製した。[1.1.ロバスタチンの精製]ヘキサン及び酢酸エチルグラジエントを溶離液として用いたカラムクロマトグラフィによって、ロバスタチンを天然起源の抽出物から精製した。[1.2.モナコリンJの入手]0.5mLの水に0.7gの水酸化カリウムを含む溶液を調製し、3mLのメタノールを少しずつ加えた。0.5gのロバスタチンを連続して加え、溶液を還流下21時間放置した。反応物の処理後、モナコリンJと開環生成物との50混合物が得られた。[1.3.保護誘導体の調製]10mLのジクロロメタンに0.5gのモナコリンJを含む溶液を調製した。0.4345gのイミダゾールを加えて、溶解するまで攪拌した。次いで、5mLのジクロロメタンに溶解した0.4835gのtert-ブチル-ジメチルシランクロリドを加え、24時間攪拌を続けた。この反応物に、ジクロロメタン-メタノール10:1を溶離液として用いてTLCを行った。収率:96。[1.4.アシル化誘導体の調製]先で得られた保護誘導体0.3gをフラスコ中で不活性雰囲気下2mLのピリジンに溶解させた。2mLのピリジンに溶解させた0.06gのDMAPを連続して加えた。反応フラスコを氷浴中に置き、0.378mLの2-エチルブチリルクロリドを加えた。次いで、0°Cで1時間と室温で18時間撹拌した。この反応物に、溶離液としてヘキサン-酢酸エチル2:1を用いてTLCを行った。収率:95。[1.5.最終化合物の合成]先で得られた誘導体0.368gを2mLのTHFに溶解させた。次いで、0.16mLの酢酸と2.16mLの1Mフッ化テトラブチルアンモニウムとの溶液を反応媒体に加えた。この反応混合物を室温で16時間撹拌した。この反応物に、溶離液としてジクロロメタン-アセトン6:1を用いてTLCを行った。収率:75。[様々な攻撃:酸化ストレス、プロテインホスファターゼ-1の阻害、コハク酸デヒドロゲナーゼの阻害、小胞体ストレス及びアポトーシスによって誘導される神経細胞死に対するNST0060による保護][2.1.酸化ストレスによって誘導される神経細胞死に対するNST0060による保護]アメリカ合衆国培養細胞系統保存機関ATCC由来の培養下のヒト神経芽細胞腫SK-N-MC株で、アッセイを行った。全ての事例において、無菌の厳格な規則に従い、欧州標準EN12469に従って、第二種バイオセーフティキャビネット中で操作を行った。細胞を、次の培地中で維持した:1mMのピルビン酸ナトリウム、2mMのL-グルタミン、0.1mMの非必須アミノ酸類、0.05mg/mLのゲンタマイシン及び10のウシ胎児血清を補充したイーグル最小必須培地MEM。細胞死を起こす酸化損傷を発生させる過酸化水素、スーパーオキシドアニオン、ヒドロキシルラジカルのようなフリーラジカルを生じるキサンチン/キサンチンオキシダーゼでの処理によって引き起こされる細胞死に対し、化合物NST0060によりもたらされる阻害を分析した。15代継代を超えていない前記細胞を、接着細胞用に処理した96ウェルプレート上に5×104細胞/ウェルの細胞濃度で播種した;プレートのうち3ウェルを各アッセイ条件用に播種した。24時間の細胞インキュベーション37°C、5CO2後、下記条件について、100μLの総容積で細胞の処理を行った:コントロール:培地培養液キサンチン/キサンチンオキシダーゼXXO:10μMのキサンチン/60mUmLのキサンチンオキシダーゼを加えた培地、50の細胞死を引き起こす。XXOプラスNST0060:NST0060を1、4、10、20、40又は100μMで加えた、XXO10μM/60mUmL添加培地。これら処理薬と共に細胞を22時間インキュベート37°C、5CO2し、その後、WST-1試薬ロシュ社を加えた。このWST-1試験は、代謝活性の測定に基づく。細胞損傷は、細胞がその代謝機能及び細胞増殖を維持するのに必要なエネルギーを得る能力の損失を引き起こし、よって、代謝的に活性な生きている細胞は、ミトコンドリア呼吸鎖のコハク酸-テトラソリウムレダクターゼ系によってテトラゾリウム塩をホルマザンへ還元した。形成したホルマザンは、440nmの吸光度を有するため、比色分析で検出することができる。試薬を加えて2時間後にプレートリーダーで440nmの測定値を読み取った。得られた結果を、図1に示されるように、XXOによって引き起こされる死に対する各処理の細胞死の割合として示す。死に対する保護を1~40μMの濃度のNST0060で観察し、XXOに関する相違はスチューデントt検定によって統計的に有意であり、10μMで80の最大保護に到達した。これらの結果は、化合物NST0060が、酸化ストレスによって引き起こされる神経細胞起源のヒト細胞の死に対して保護効果を示すことを表す。[2.2.プロテインホスファターゼ-1PP1の阻害によって誘導される神経細胞死に対するNST0060による保護]第2.1節で説明したように維持した培養下のヒト神経胚SK-N-MCに対して、アッセイを行った。プロテインホスファターゼ-1PP1の活性を阻害するオカダ酸OAでの処理によって引き起こされる細胞死に対し、化合物NST0060によってもたらされる阻害を分析した。OAは、ADの病因及び進行に関係するタウタンパク質のリン酸化メカニズムの研究用に最も広く用いられている薬物の一つである。PPIの阻害は、細胞骨格変化及びミトコンドリア損傷を引き起こす。15代継代を超えていない前記細胞を、接着細胞用に処理した96ウェルプレート上に5×104細胞/ウェルの細胞濃度で播種した;プレートのうち3ウェルを各アッセイ条件用に播種した。24時間の細胞インキュベーション37°C、5CO2後、下記条件について、100μLの総容積で細胞の処理を行った:コントロール:培地培養液オカダ酸OA:20nMのオカダ酸を加えた培地、50の細胞死を引き起こす。OAプラスNST0060:NST0060を1、4、10、40又は100μMで加えた、OA20nM添加培地。これら処理薬と共に細胞を22時間インキュベート37°C、5CO2し、その後、WST-1試薬ロシュ社を加えた。このWST-1試験は、代謝活性の測定に基づく第2.1節で説明した方法。得られた結果を、図2に示されるように、OAによって引き起こされる死に対する各処理の細胞死の割合として示す。4μM及び10μMのNST0060で死に対して統計的に有意な保護が観察され、10μMで83に到達した。これらの結果は、化合物NST0060が、PPIの阻害によって引き起こされる神経細胞起源のヒト細胞の死に対して保護効果を示すことを表す。[2.3.コハク酸デヒドロゲナーゼの阻害によって誘導される神経細胞死に対するNST0060による保護]第2.1節で説明したように維持した培養下のヒト神経胚SK-N-MCに対して、アッセイを行った。3-ニトロプロピオン酸3-NPでの処理によって引き起こされる細胞死に対する化合物NST0060によりもたらされる阻害を分析した。3-NPは、コハク酸デヒドロゲナーゼ酵素の不可逆的阻害剤であり、動物モデルにおいて、酸化ストレス及び線条体におけるアポトーシス細胞死を引き起こし、ハンチントン病HDに関連する神経化学的変化及び解剖学的変化を模倣する。15代継代を超えていない前記細胞を、接着細胞用に処理した96ウェルプレート上に5×104細胞/ウェルの細胞濃度で播種した;プレートのうち3ウェルを各アッセイ条件用に播種した。24時間の細胞インキュベーション37°C、5CO2後、下記条件について、100μLの総容積で細胞の処理を行った:コントロール:培地培養液3-ニトロプロピオン酸3-NP:30μMの3-NPを加えた培地、50の細胞死を引き起こす。3-NPプラスNST0060:NST0060を1、4、10、40又は100μMで加えた、3-NP30μM添加培地。これら処理薬と共に細胞を22時間インキュベート37°C、5CO2し、その後、WST-1試薬ロシュ社を加えた。このWST-1試験は、代謝活性の測定に基づく第2.1節で説明した方法。得られた結果を、図3に示すように、3-NPによって引き起こされる死に対する各処理についての細胞死の割合として示す。4μM~40μMの範囲のNST0060で死に対する統計的に有意な保護が観察され、40μMで32に到達した。これらの結果は、化合物NST0060が、コハク酸デヒドロゲナーゼの阻害によって引き起こされる神経細胞起源のヒト細胞の死に対して保護効果を示すことを表す。[2.4.小胞体ストレスによって誘導される神経細胞死に対するNST0060による保護]第2.1節で説明したように維持した培養下のヒト神経胚SK-N-MCに対して、アッセイを行った。小胞体ストレスを発生させるツニカマイシンでの処理によって引き起こされる細胞死に対し、化合物NST0060によりもたらされる阻害を分析した。ツニカマイシンは、タンパク質のN-グリコシル化の阻害剤であり、小胞体において異常なタンパク質フォールディングを引き起こし、よって、そのようなタンパク質が蓄積してストレスを引き起こし、細胞死に至る。15代継代を超えていない前記細胞を、接着細胞用に処理した96ウェルプレート上に5×104細胞/ウェルの細胞濃度で播種した;プレートのうち3ウェルを各アッセイ条件用に播種した。24時間の細胞インキュベーション37°C、5CO2後、下記条件について、100μLの総容積で細胞の処理を行った:コントロール:培地培養液ツニカマイシンTM:24μMのツニカマイシンを加えた培地、50の細胞死を引き起こす。TMプラスNST0060:NST0060を1、4、10、40又は100μMで加えた、TM24μM添加培地。これら処理薬と共に細胞を22時間インキュベート37°C、5CO2し、その後、WST-1試薬ロシュ社を加えた。このWST-1試験は、代謝活性の測定に基づく第2.1節で説明した方法。得られた結果を、図4に示すように、TMによって引き起こされる死に対する各処理の細胞死の割合として示す。1μM~40μMの範囲のNST0060で死に対する統計的に有意な保護が観察され、4μMで42に到達した。これらの結果は、化合物NST0060が、小胞体ストレスによって引き起こされる神経細胞起源のヒト細胞の死に対して保護効果を示すことを表す。[2.5.NST0060での処理は、アポトーシスの細胞モデルにおけるカスパーゼ3/7の活性化を阻害する]第2.1節で説明したように維持した培養下のヒト神経胚SK-N-MCに対して、アッセイを行った。培養下の細胞に対するアポトーシスの誘導は、細胞のアポトーシスの活性化を誘発するカンプトテシンCPTを用いて行った。アポトーシスをエフェクターカスパーゼであるカスパーゼ3又はカスパーゼ7の活性化の測定によって定量化し、そのために、活性カスパーゼ3/7の蛍光検出用キットApo-ONEホモジーニアスカスパーゼ-3/7、プロメガ社を用いた。細胞の活性なカスパーゼ3又は7は、蛍光光度計によって読み取られる蛍光発光を生じる。従って、SK-N-MC細胞において50μMのカンプトテシンCPTによって引き起こされるカスパーゼ3/7の活性化に対する化合物NST0060の10μM及び40μMでの予備処理の効果を分析した。15代継代を超えていない前記細胞を、接着細胞用に処理した96ウェルプレート上に5×104細胞/ウェルの細胞濃度で播種した;プレートのうち3ウェルを各アッセイ条件用に播種した。24時間の細胞インキュベーション37°C、5CO2後、10μM及び40μMのNST0060で予備処理を行った。24時間後、下記条件について、100μLの総容積で細胞の処理を行った:コントロール:培地培養液カンプトテシンCPT:50μMのCPTを加えた培地は、10μM及び40μMのNST0060で予備処理した両アッセイにおいて、並びに予備処理していない細胞で、アポトーシスを引き起こす。CPTプラスZ-VAD-fmk:Z-VAD-fmkを50μMで加えた、CPT上述の条件と同じ濃度添加培地、カスパーゼの活性化の阻害の陽性コントロール。これら処理薬と共に細胞を6時間インキュベート37°C、5CO2し、その後、細胞溶解バッファーと製造元によって指定された濃度のカスパーゼ基質とを加えた;これを室温で30分間インキュベートし、次いで、-20°Cで一晩凍結させた。翌日、蛍光を測定した499/521nm、Exci/Emi。図5は、様々な処置のコントロール細胞に関し、カスパーゼ3/7の活性化の割合を示す。NST0060の10μM及び40μMで58及び32のカンプトテシンに関してカスパーゼ3/7の阻害が観察され、このことは、かかる化合物の機能的抗アポトーシス効果を実証する。Z-VAD-fmkは、カスパーゼ阻害剤として、カスパーゼ3/7の活性化を完全に阻害した。[2.6.NST0060での処理は、アポトーシスの細胞モデルにおいてDNA断片化を阻害する]本実施例の先の節で得られた及び表された結果のため、本発明者らは、DNA断片化を測定することによって、アポトーシスの新たな細胞モデルにおけるNST0060の効果を分析することを決めた、第2.1節で説明したように維持した培養下のヒト神経胚SK-N-MCに対して、アッセイを行った。トポイソメラーゼI酵素を阻害し、DNA複製を妨げ、アポトーシス性細胞死を誘発するカンプトテシンCPTでの処理によって引き起こされるアポトーシスに対して、化合物NST0060により阻害がもたらされる。15代継代を超えていない前記細胞を、接着細胞用に処理した6ウェルプレート上に7×105細胞/ウェルの細胞濃度で播種した;プレートのうち2ウェルを各アッセイ条件用に播種した。24時間の細胞インキュベーション37°C、5CO2後、10μM及び40μMのNST0060で細胞の予備処理を24時間行った;続いて、これらを50μMのCPTで6時間処理した。更に、Z-VAD-fmkを50μMで阻害についての陽性コントロールとして用いた。処理の後、細胞を培地と一緒に集め、300×gで5分間、遠心分離した。培地を除去し、PBSで洗滌を行い、-20°Cで500μLの70エタノールを用いて2分間固定した。固定したら、これらを400×gで5分間、遠心分離し、PBSで洗滌し、サイクリングバッファー0.1クエン酸ナトリウム、0.3ノニデットP-40及び0.02mg/mLのRNAseに希釈した0.05mg/mLのヨウ化プロピジウムを加えて、37°Cで1時間インキュベートした。この後、これらをフローサイトメトリーにより解析して、DNA量に関してヨウ化プロピジウムの蛍光と比較した。それぞれの条件のサブG1領域に関して、アポトーシスの割合を測定した。得られた結果を、図6に示すように、CPTによって引き起こされるアポトーシスに対する各処理のDNAの断片化によるアポトーシスの割合として示す。10μMのNST0060で41の最大保護が観察された。そして、Z-VAD-fmkは、CPTにより引き起こされるアポトーシスを特異的に阻害した。これらの結果は、化合物NST0060が神経細胞起源のヒト細胞におけるアポトーシスに対して保護効果を示すことを表す。[NST0060での処理による24-デヒドロコレステロールレダクターゼ遺伝子Seladin-1/DHCR24の細胞発現の誘導]アメリカ合衆国培養細胞系統保存機関ATCC由来の培養下のヒト神経芽細胞腫SK-N-MC株で、アッセイを行った。全ての事例において、無菌の厳格な規則に従い、欧州標準EN12469に従って、第二種バイオセーフティキャビネット中で操作を行った。細胞を、次の培地中で維持した:1mMのピルビン酸ナトリウム、2mMのL-グルタミン、0.1mMの非必須アミノ酸類、0.05mg/mLのゲンタマイシン及び10のウシ胎児血清を補充したイーグル最小必須培地MEM。リアルタイム定量RT-PCRを用いて、Seladin-1/DHCR24遺伝子の発現を分析した。SK-N-MC細胞を、NST0060の不存在下コントロール又は1、4、10若しくは40μMのNST0060の存在下で24時間処理した。HighPureRNAIsolationキットロシュ社によって、全RNAを抽出し、Infinite200NanoQuantシステムTecan社によって、そのRNAの量及び品質を分析した。RT-PCRを2段階によって行い、最初に、RNAtocDNAキットアプライドバイオシステムズ社を用いて、mRNAをcDNAに形質転換し、続いて、7500FastReal-TimePCRSystem装置アプライドバイオシステムズ社で、双方ともヒト特異的である、Seladin-1/DHCR24について有用性が確認されているHs00207388_m1プローブとGAPDHについて有用性が確認されているHs99999905_m1プローブ結果の正規化に用いるとを用い、TaqManプローブ法によって、遺伝子発現を分析した。アッセイは、3連で行った。SDSv2.1.1ソフトウエアアプライドバイオシステムズ社でΔΔCt法を用いることによって、相対的な遺伝子発現量を測定した;GAPDHの発現量を用いて、結果を正規化した。得られた結果は、図7に示され、試験した全ての濃度のNST0060での処理でSeladin-1/DHCR24遺伝子発現の増加が観察され、4μMのNST0060ではコントロールに対して2.5倍の増加をもたらした。これらの結果は、NST0060での処理が、Seladin-1/DHCR24遺伝子発現の増加をもたらし、コレステロール生合成及び抗アポトーシス能力に関係することを表す。[試験管内アッセイにおいてシンバスタチンと比較したNST0060の血液脳関門通過]このアッセイの目的は、化合物NST0060が血液脳関門BBBを通過できるか否かを予測することであった。そのため、受動拡散による化合物の通過を考慮したサンドイッチシステムを使用した、いわゆるPAMPA平行人工膜透過アッセイを用い、細胞を用いずに前記化合物を評価することを可能にする試験管内系において、BBBを模倣した。高い透過率を有する化合物であるベラパミルを陽性コントロールとして用い、一方、BBBを通過しない化合物であるテオフィリンを陰性コントロールとして用いた。類似構造を有し、ある程度はBBBを通過できることが既に知られている化合物であるシンバスタチンをNST0060と一緒に試験した。血液脳関門を形成するものと非常に類似するリン脂質組成を有し且つPBLブタ脳極性脂質としても知られるブタ脳由来の市販の脂質混合物を用いて、血液脳関門を模倣した。この混合物を、ガラスバイアル中でドデカンに100μg/mLにて溶解して-20°Cで保存した。ベラパミル及びテオフィリンをDMSOで10mMに調製した。NST0060の酸型及びシンバスタチンの酸型を水中で調製し、0.1NのNaOHで4°Cにて12時間活性化させた。アッセイの時点で、評価する化合物及びコントロール1.5mLを調製した。全事例において、リン酸一ナトリウム0.41M及びリン酸二カリウム0.287Mを含有するpH7.4のリン酸バッファー中に100μMで前記ストックを含んだ。そのため、化合物の1/100希釈を行って、DMSO含有量を全事例で1にした。100μg/mLの凍結ストックから調製した20μg/mLのPBLを5μL、PVDF膜及び45μmの孔径を有する96ウェルフィルタープレートMAIPAN4550、ミリポア社に加えた。2分後、化合物を希釈するのに用いたリン酸バッファー300μLを加えた。このプレートをアクセプタープレートと考え、サンドイッチの上部に置いた。300μLの前記化合物を別の96ウェルプレートに3連で100μMにて加えて、先のプレートと組み立てたMATRANP550、ミリポア社。更に、ブランクは、1DMSOを含む使用したリン酸バッファーのみを含んだ。このプレートをドナープレートと呼んだ。アクレプタープレートをドナープレート上に置いてサンドイッチシステムを形成した。研究対象の化合物は、ドナープレートのウェルからアクセプタープレートの対応するウェルへと18時間拡散し、この間このシステムをそのままにした。準備した残りの化合物を、プレートによって形成したサンドイッチシステムと同じ湿度、温度及び暗所条件で保存した。その後、ドナープレート及びアクセプタープレートのウェルから100μLを特別なUV測定用96ウェルプレートに移した。更に、アッセイを行うために準備して同じように保存した化合物100μLをそのプレートに3連で移した基礎ウェル。UVプレートを分光光度計に挿入し、4nmごとに230~498nmのUVで測定してスキャンを行った。血液脳関門通過率及び有効透過率Peを分光光度データから算出した。下記式は、を算出するのに適用される。式中、であり、Drugacceptor=アクセプターウェルの吸光度であり、Drugequilibrium=基礎ウェルの平均値の吸光度/2であり、VA=アクセプターウェルの容積=0.3cm3であり、VD=ドナーウェルの容積=0.3cm3であり、Area=0.24cm3であり、Time=64000秒であった。cLogPと略されるオクタノール/水分配係数の対数を計算することによって、化合物の脂容性の理論的計算値を得ることができ、これは、CLOGPプログラムOSIRISPropertyExplorerを用いて、化学構造をこのソフトウエアに入力することによって計算した。図8は得られた結果を示し、ヒドロキシ酸型の化合物NST0060は、陽性コントロールベラパミルに非常に近く且つシンバスタチンのものよりもはるかに高いBBB透過度を有することが分かる。このデータは、化合物NST0060の高い脂容性と相関する。下記表表1は、この研究で得られたパラメータ平均値±標準偏差を示し、これは、血液脳関門通過BBB通過率、有効透過率Pe、実験を行った数n及び理論的脂容性の計算値CLOGPを用いて理論的に計算される。cLogPを示す。驚くべきことに、この実施例で示された結果は、化合物NST0060の高い効率的BBB通過を明確に示す。[化合物NST0060のコレステロール低下効果][5.1.シンバスタチンと比較したNST0060による試験管内での3-ヒドロキシ-3-メチルグルタリル補酵素AレダクターゼHMGR酵素の活性化の阻害]このアッセイの目的は、細胞内コレステロール合成及びその合成の生理学的制御における重要な酵素であるHMGRの化合物NST0060による阻害の度合いを測定することであった。この化合物の効果を、HMGRに対する強力な阻害効果が既に報告されているスタチンであるシンバスタチンの効果と比較した。反応の間、HMGRは、NADPHを還元剤として、3-ヒドロキシ-3-メチルグルタリル補酵素Aを基質として使用する。それに続く反応の基質として用いられコレステロール合成を継続するメバロチン酸が、反応生成物として得られる。研究対象の酵素反応は、下に図式化される.HMGCoA2NADPH2H→メバロチン酸2NADPCoASHこの試験管内アッセイは、HMGCoAレダクターゼ基質の存在下でHMGRの触媒サブユニットによるNADPHの酸化を表わす340nmでの吸光度の低下の分光光度測定に基づく。研究対象の化合物を超純水で10mMに調製し、0.1NのNaOHで12時間、4°Cで活性化させた。アッセイを、96ウェルプレートで200μLの合計反応容積にて行った。反応を行ったときに反応バッファー50mMのKH2PO4、1MのKCl、2mg/mLのウシ胎児血清BSA及び5mMのDTT、pH=7.3を調製し、37°Cで維持した。下記のものがアッセイに含まれた:ブランク:HMGRを欠き、反応の間のNADPHの安定性について報告する。コントロール:反応の成分を全て含有するが、被験化合物を含まない。被験化合物:NAT0060又はシンバスタチンが様々な濃度で反応バッファー中に溶解されている。両化合物の効果を、5つのアッセイにおいて2連で、また両化合物について並行して、0.0004μM、0.001μM、0.004μM、0.01μM、0.04μM、0.1μM、0.4μM、1μM、4μM、10μM及び40μMで評価した。被験化合物をプレート中の反応バッファーに加え、DMSO濃度を、反応の間に不干渉であることが既に実証されている10μLで統一した。反応混合物に関与する試薬の濃度は次のとおりであり、表記した順番で反応バッファーに加えて溶解させた:HMGCoA:0.2mMHMGRGSTタンパク質に結合する触媒ドメイン:3μU/反応NADPH:0.2mM。NADPHは反応誘起化合物であり、よって、これを全てのウェルに同時に加えた。NADPHを加えるごとに、ブランク及びコントロールを含めた。簡単に振盪した後、20秒ごとに1200秒間読み取らせる動態プログラムを用いて、分光光度計で、340nm、37°Cにてプレートを読み取った。340nmでの吸光度の低下は、コントロールに対するHMGR酵素活性の割合の計算を可能にするため、HMGR酵素活性に対する様々な化合物の阻害能力を、図9に示す曲線に基づいて50阻害定数IC50を決定することによって算出した。IC50は、TrimmedSpearman-Karber法バージョン1.5により決定した。この結果は、HMGRに対するシンバスタチンの阻害効果を裏づけIC50:83.3±24.3nM、2連で行った5つの独立アッセイ、一方、驚くべきことにNST0060は前記酵素に対して高い阻害能力を示したIC50:126.0±34.6nM、2連で行った5つの独立アッセイ。[5.2.ヒト肝細胞株における細胞内総コレステロール値に対するNST0060及びシンバスタチンの塩形態での効果]先の節の結果に基づき、本発明者らは、化合物NST0060に関するHMGR酵素の阻害活性がヒト肝細胞株における総コレステロールの変化と一致するか否かを調べることに決めた。このため、活性型の化合物NST0060がヒト肝細胞癌株HepG2において総コレステロール値を修飾できるか否かを決定する目的を有するアッセイを行った。NST0060の効果を、既知のスタチンであるシンバスタチンの効果と比較した。このアッセイを行うため、化合物を超純水で10mMに調製し、0.1NのNaOHにより4°Cで12時間活性化させた。化合物は、使用するまで-20°Cで保存した。アメリカ合衆国培養細胞系統保存機関ATCCからHepG2株を入手した。継代で維持したこの細胞を、10FBS、2mMのL-グルタミン、1mMのピルビン酸ナトリウム、0.1mMの非必須アミノ酸類及び0.05mg/mLのゲンタマイシンを補充したMEM中で96ウェルプレートに播種した4×104細胞/ウェル。播種の24時間後、細胞から8時間FBSを奪った。次いで、細胞を様々な濃度の処理薬と共に20時間インキュベートした。インキュベーション時間の後、細胞をPBSで洗滌し、0.5のトリトンX-100を含むリン酸バッファーで溶解させた。2回凍結融解により、溶解を完了させた。酵素手法及び蛍光手法により、総コレステロールを定量化した。25μLの各溶解液を、標準コレステロール曲線0.08μg/mLから10μg/mLまでと共に96ウェルプレートに移した。コレステロールオキシダーゼ0.5U/mL、コレステロールエステラーゼ0.8U/mL、ホースラディッシュパーオキシダーゼ4U/mL及びAmplifluレッド20μg/mLを含有する0.05MMESpH6.5をベースとして調製した反応混合液75μLを試料に加えて、37°Cで15分間インキュベーションを行った。蛍光分光器により530nmの励起及び580nmの発光で蛍光強度を測定した。結果を、BCA法を用いて決定したタンパク質量により標準化した。図10は、驚くべきことに、NST0060が、シンバスタチンによって発揮されたのと同様に前記細胞においてどれほど総コレステロールの低下をもたらしたかを示す。このデータは、HMGRに対して発揮され且つ先の節で示された阻害の結果として、NST0060のコレステロール低下能力を裏付ける。[ゼブラフィッシュ胚における化合物NST0060の生物学的安全性の研究][6.1.シンバスタチン処理と比較したNST0060処理後のゼブラフィッシュ胚における生存率の分析。急性毒性アッセイ]化合物NST0060の生物学的安全性を評価するため、OECDC.15プロトコル魚、胚及び嚢に対する短期間毒性試験-稚魚段階半止水式法に準拠して安全性パラメータを測定することにより、ゼブラフィッシュ胚モデルに対するその毒性学的影響を分析した。ゼブラフィッシュダニオレリオ、AB系統の自然交配により、受精卵を得た。各交配に合計8~10ペアを用い、1ペアあたり平均して合計200~250個の卵が産まれた。産卵直後に卵を集め、OECD法C.1のEC規則440/2008に準拠して、pH7.8±0.2に調整した希釈水0.29g/LのCaCl22H2O2、0.12g/LのMgSO47H2O2、0.065g/LのNaHCO3、0.006g/LのKClで洗滌し、ペトリ皿に置いた。発生の最初期段階での曝露を確実にするために、試験する化合物の溶液を用いて、卵を素早く別のペトリ皿に移した1条件あたり最低限50個。続いて、ピペットを用いて、受精卵のみ1実験条件あたり30個をペトリ皿から曝露チャンバーM96マイクロタイタープレートに移し、希釈水コントロール又は様々な濃度の処理薬1~100mg/kgを用いて、評価する物質NST0060及びシンバスタチンに曝露した。追加の通気なしに適切な温度25±1°Cで、胚をインキュベートした。更に、操作プロセスの間の汚染を防ぐため厳格な予防策を講じた。実験は、処理後72時間で行い、処理は毎日新しくし、これにより半止水式アッセイを行った。3個の胚それぞれの10の複製を用い、次の処理計画に従って、各実験を行った:30のコントロール動物、希釈水をアッセイの終了まで毎日取り替えて処理した;30の化合物NST0060処理動物3個の胚全てについて10個の複製、希釈水で1~100mg/kgの用量に希釈した化合物NST0060で処理し、アッセイが継続する日数の間、毎日その物質を取り替えた;30のシンバスタチン処理動物3個の胚全てについて10の複製、希釈水で1~100mg/kgの用量に希釈したシンバスタチンで処理し、アッセイが継続する日数の間、毎日その物質を取り替えた。研究対象物質に対する曝露の期間の後、幼生の死亡率成績を決定し、その結果を下記表2に示す。この表は、実験に使用した幼生の数、mg/Kg動物の体重での用量、処理期間、及び全体に対して死亡した幼生数を示す。研究の結果は、両化合物が、ゼブラフィッシュ幼生で死亡を誘導するパラメータに関して非常に類似した毒物学的プロフィールを有することを示し、NST0060群では10mg/Kgの用量で30動物のうち7匹の死が観察され、シンバスタチンを同じ用量及び期間で用いて16匹の死亡が観察された。両方の処理群の間で統計的に有意な相違は検出されなかったスチューデントt検定。上記表に現した結果は、驚くべきことに、化合物NST0060が少なくともシンバスタチンと同程度に安全であることを示す。[6.2.シンバスタチンと比較した化合物NST0060への曝露後の健常な幼生の割合の分析。急性毒性アッセイ。]先の節の結果に基づき、本発明者らは、処理に起因する死亡率の変化が、外部病態生理学的異常形態的及び/行動的の症状を示さない生きた幼生の数として定義される健常な幼生の割合の測定によって裏付けられるか否かを調べることに決めた。後者は、研究対象物質の生物学的安全性を決定するパラメータであり、生存率を補完するものである。図11に示すように、評価した2つの処理薬間で、1mg/Kg及び3mg/Kgの用量で健常な幼生の割合に相違が観察され、1mg/Kgの用量で化合物NST0060は100±0.0及びシンバスタチンは50.0±22.4であり、3mg/Kgの用量で化合物NST0060は86.7±6.2及びシンバスタチンは50.0±22.4に到達し、驚くべきことに、ゼブラフィッシュ幼生モデルにおいて化合物NST0060のより良い生物学的安全性が示された。これらの結果は、NST0060がシンバスタチンよりも良好な生物学的安全性プロフィールを有することを示す。[6.3.シンバスタチンと比較した化合物NST0060の心毒性の用量に応じた変化の分析]先の節の結果に基づき、本発明者らは、様々な化合物を用い様々な用量で処理した後の心毒性を分析することにより、シンバスタチンと比較して化合物NST0060の高い生物学的安全性が裏付けられるかを調べることに決めた。このパラメータ心毒性の研究は、動物の心拍数を測定するだけでなく、心拍の変化頻脈、徐脈等又は心臓の発達異常心膜炎、萎縮、肥大等も決定することを可能にする。ゼブラフィッシュ胚又は幼生の心拍の測定は、視覚的に行われる。心拍手動カウンターの助けによりを、拡大鏡4~40×拡大により15秒間計測した。1処理当たり使用した合計で30動物のうちの12の心拍を計測した。得られた心拍数に4をかけて、動物の1分あたりの心拍数を得た。結果は図12に示され、胚又は幼生の心拍数のコントロールに対する割合は、使用する用量に依存することが分かる。72hptで、3mg/Kg及び10mg/Kgの用量のシンバスタチンで処理した幼生のコントロールに対する心拍数の有意な現象が観察される。NST0060について、10mg/Kgの用量では心拍数の減少が例外的に検出されるが、驚くべきことに3mg/Kgでは検出されない。加えて、NST0060及びシンバスタチンについて1mg/Kg及び3mg/Kgの用量での心拍数の比較は、NST0060がシンバスタチンよりも生物学的に安全であることを示す。従って、概して、NST0060は心毒性研究においてシンバスタチンよりも良好に機能した。[マウスの全身性炎症モデルにおけるNST0060の抗炎症効果][7.1.NST0060及びシンバスタチンの抗炎症効果の比較研究]本発明者らは、当該分子の特徴及び特性を前提として、コレステロール低下活性及び神経保護活性に関して別の活性を評価する必要を考えた。この理由のため、化合物NST0060の抗炎症能力を、抗炎症効果が報告されている化合物であるシンバスタチンと比較して評価した。この活性を評価するため、サイトカイン媒介性、主としてTNF-α媒介性の炎症応答を誘導するグラム陰性細菌の構成成分であるリポ多糖LPSによって誘導されるマウスの全身性ショックモデルを用いた。実験過程の間に含まれる動物は全て12週齢のオスのC57BL6マウスであった。実験は、動物の操作に関する手引きと題された基準に厳しく準拠して行った。動物は、それぞれの検疫期間を経て、処置及び取り扱いの間の汚染の可能性を最小限にするために最大限の予防策を講じて処理された。マウスを3群に分けた:コントロール群n=8;シンバスタチン群n=8;NST0060群n=8。50mg/Kgのシンバスタチン又はNST0060を12時間の間隔を空けて2用量、マウスに腹腔内投与した。両事例において、0.5メチルセルロースを含む生理食塩水を、ビヒクルとして用い、同じ投与計画でコントロール群のマウスに投与した。8mg/KgのLPSの単回腹腔内注射による最終処理1時間後に、末梢全身性炎症が誘導された。2時間後血液を採取し、血漿を得て用い、ELISAでTNFαの血漿中濃度を分析することにより、抗炎症効果を評価した。図13は、LPSの接種2時間後にTNFαの血中レベルが劇的に増加することを示す。そして、シンバスタチン及びNST0060双方の投与が、コントロール群に対して有意に、TNFαの血中レベルの大きな低下をもたらす。化合物NST0060は、このレベルで驚くほど強力であり、シンバスタチン群に対して統計的に有意なTNFα血漿中レベルの低下をもたらした。従って、概して、NST0060はシンバスタチンよりも良好な抗炎症性能を示した。[7.2.マウスの全身性ショックモデルにおける全体症状評価による、炎症マーカー、生存率及び炎症応答に関するNST0060の効果]化合物NST0060の驚くべき抗炎症能力を実証して、本発明者らは、前記抗炎症効果を更に研究すること並びに同じ全身性ショックモデルにおいて処理薬の生存率及び全体症状に対する化合物NST0060の効果を判断することが好都合であると考えた。そのため、含まれる動物全てが12週齢のオスのC57BL6マウスである追加のアッセイを行った。実験は、動物の操作に関する手引きと題された基準に厳しく準拠して行った。動物は、それぞれの検疫期間を経て、処置及び取り扱いの間の汚染の可能性を最小限にするために最大限の予防策を講じて処理された。マウスを3群に分けた:コントロール群n=8;コントロールLPS群n=16;NST0060LPS群n=16。50mg/KgのNST0060そのラクトン形態でを12時間の間隔を空けて2用量、マウスに腹腔内投与した。0.5メチルセルロースを含む生理食塩水を、ビヒクルとして用い、同じ投与計画でコントロール群のマウスに投与した。8mg/KgのLPSの単回腹腔内注射による最終処理1時間後に末梢全身性炎症が誘導された。マウスの半分に全身性ショックが誘導されコントロールLPS群の8動物及びNST0060LPS群の8動物、LPSの接種2時間後に屠殺した。血液を採取し、血漿を得て、両方とも凍結させた。LPSで処理した動物の残り半分から、LPSの注射4時間後に血液を採取し、血漿を得た。これら動物をその後15日間観察し、死亡率を決定し、0~30=全身症状なし;1=中程度の嗜眠及び低体温;2=深刻な嗜眠、下痢及び震え;3=完全な不動のスコア順位付けにより、損傷を評価した。LPSの代わりに生理食塩水の腹腔内投与を行ったコントロール動物は、その後の結果の比較のために2hpi及び4hpiで血液を採取した後、研究の最後に屠殺した。得られた血漿中の炎症サイトカインTNFα及びIL-1βの濃度を、ELISAを用いて評価した。図14は、様々な処理群に対応する動物の生存率を表し、LPSによって誘導される死亡がNST0060の投与によって統計的に有意な様式で妨げられ、このことは化合物NST0060の抗炎症活性を示す。この神経保護効果は、LPSの注射後に生存している動物によって示された全身症状に関連するスコア24時間で統計的に有意であったを示す図15で分かるように、全身性ショック過程の低い重症度にも反映される。加えて、図16で分かるように、NST0060での処理は、LPSの2時間後及び4時間後の両方で炎症応答の低下をもたらした。NST0060での処理は、更に、図17に示すように、LPSの2時間後に血漿中のサイトカインIL-1βレベルの統計的に有意な低下をもたらした。従って、概して、化合物NST0060は、シンバスタチンのものよりも驚くほど高い、高度な抗炎症活性を有する。[興奮毒性物質の作用に対するNST0060の抗てんかん効果]動物における神経毒性物質の投与は、動物に時折てんかん性発作及びけいれんを誘導することが知られている。従って、本発明者らは、NST0060の神経保護効果が興奮毒性物質によって引き起こされるてんかんに対する抗てんかん効果を伴うか否か研究することを決めた。実験過程の間に含まれる動物は全て、FVB/NHan系統由来の12週齢のオスであった。実験は、動物の操作に関する手引きと題された基準に厳しく準拠して行った。動物は、それぞれの検疫期間を経て、処置及び取り扱いの間の汚染の可能性を最小限にするために最大限の予防策を講じて処理された。動物に、PBSで溶解した25mg/Kgのカイニン酸の塩又はエステルKAを腹腔内接種した。14匹の動物に、KA接種の24時間30分前で、0.25のメチルセルロースを含むPBSを腹腔内注射して予備処理しビヒクルKA投与計画、14匹に、KA接種の24時間30分前で、50mg/Kgの用量の化合物NST0060を腹腔内注射して予備処理したNST0060KA投与計画。接種の後、動物を別々のトレーで飼育してモニターした。観察の間、少なくとも接種後120分間m.p.i.のあいだ10分毎に動物のてんかんの最高レベルをRacineスケールに従って記録した。続いて、ビヒクルでの処理ビヒクルKAとNST0060での処理NST0060KAとの間で、てんかん発作現象の比較研究を行った。下記表表3に示すように、てんかん重積症に突入した、すなわち、強直関代性発作を提示する動物の割合に相違が観察され、ビヒクルKA群は9314匹のうちの13匹であるのに対しNST0060KA群の中では3614匹のうちの5匹であり、このことは、化合物NST0060が抗けいれん薬であることを実証した。更に、少なくとも30分休みなしに続くてんかん重積症に突入した、すなわち、強直関代性発作を提示する動物の割合に相違が観察され、ビヒクルKAで処理した処理計画群は7914匹のうちの11匹であるのに対しNST0060KA群の中では2914匹のうちの4匹であり、このことは、化合物NST0060が抗けいれん薬に加えて抗てんかん薬であることを実証した。これらの結果のため、本発明者らは、NST0060の抗てんかん効果が潜伏期最初のけいれんが起こる時期の遅延を伴うか否か調べることを決めた。図18に示すように、両方の群の間で潜伏時間に相違が観察され、NST0060KA群では100分を上回り、これはビヒクルKA処理計画の場合45.7±7.5分よりも統計的に有意な様式でp<0.05長く、化合物NST0060の抗てんかん特性及び抗けいれん特性を裏付けた。これらの結果に基づき、本発明者らは、その抗てんかん及びこうけいれん効果が、KAの接種2時間後に観察されるてんかんのレベル及び症状の重症度で確認されるか否か調べることを決めた。図19に示すように、ビヒクルKA投与計画を用いた群の動物は、やがて、特に40分後の、様々な時点において、Racineスケールで4を上回るてんかんレベルに到達し、一方、NST0060KA投与計画は、どの時点においてもRacineスケールで3より大きな平均てんかんレベルを引き起こさなかった。実際、KAによって引き起こされるてんかん発作症状の発症速度及び重症度が、NST0060での処理とビヒクルでの処理との間で統計的に有意な様式で異なるF=6.8016;p=0.0149;ANOVA検定とNewman-Keuls事後検定による一般分散分析。これらの結果は、興奮毒性物質の投与に対する化合物NST0060の抗てんかん及び抗けいれん能力を決定的に示す。[興奮毒性物質により誘導された脳の酸化ストレスに対するNST0060の生体内抗酸化効果]興奮毒性物質の作用に対する化合物NST0060の抗てんかん及び抗けいれん能力を知って、本発明者らは、興奮毒性物質をマウスに投与したときに、興奮毒性に対してNST0060により示されるこの神経保護効果が、脳内で発生する酸化ストレスの低下を伴うか否か調べることを決めた。実験過程の間に含まれる動物は全て、酸化ストレスにより調節され、ホタルルシフェラーゼレポーター遺伝子に結合した遺伝子のプロモーター有する遺伝子構築物のキャリアであるFVB/N系統由来の12週齢のオスであった。実験は、動物の操作に関する手引きと題された基準に厳しく準拠して行った。動物は、それぞれの検疫期間を経て、処置及び取り扱いの間の汚染の可能性を最小限にするために最大限の予防策を講じて処理された。動物に、PBSで溶解した25mg/Kgのカイニン酸の塩又はエステルKAを腹腔内接種した。7匹のマウスに、KA接種の24時間30分前と、続いて接種後毎日最長7日目まで、0.25のメチルセルロースを含むPBSをビヒクルとして腹腔内注射して予備処理しビヒクルKA投与計画、別の7匹に、KA接種の24時間30分前と、続いて接種後毎日最長7日目まで、50mg/Kgの用量の化合物NST0060を腹腔内注射して予備処理したNST0060KA投与計画。接種の後、動物を別々のトレーで飼育してモニターした。加えて、コントロールとして役立つように、3匹のマウスを全ての投与でビヒクルのみ用いて処理して、KA注射を受けさせなかった。脳内の酸化ストレスは、IVISLuminaシステムCliperLSを用いて生体内生物発光技術によりモニターした。実験群の全てにおいて-1dpiベースラインシグナル及び1dpi、2dpi、3dpi、4dpiで画像取得を行った。画像取得に先立って、動物に150mg/KgのD-ルシフェリンを腹腔内接種した。次いで、マウスを3ノイソフルオランで2分間麻酔した。IVISLuminaシステム内に収容してから、画像取得時間中、1.5イソフルオラン、0.2L/分/マウスのO2及び2L/分/マウスの圧縮空気を用いてマウスを麻酔したままにした。D-ルシフェリンの投与15分後に、5分の取得時間、高感度位置で、光子放出画像を撮影した。異なる実験群の光子放出動態の画像を示す図20に示されるように、KAの投与は、1dpiから4dpiまで脳内の酸化ストレスの有意な増加を誘導し、その時点で、脳内の遺伝子発現の大きな増加が記録された。驚くべきことに、KAを接種してNST0060で処理した動物は、研究した動態全体を通じて、酸化ストレスに関連する前記遺伝子発現の有意な増加を示さなかった。異なる実験群に対応する対象者全ての平均シグナルの定量化を表す図21に示されるように、KAの投与は、1dpiから4dpiまで脳内の酸化ストレスの有意な増加を誘導し、その時点で、脳内の遺伝子発現の大きな増加が記録された。驚くべきことに、KAを接種してNST0060で処理した動物は、研究した動態全体を通じて、酸化ストレスに関連する前記遺伝子発現の有意な増加を示さなかった。これらの結果は、化合物NST0060が抗酸化特性を有することと、脳の場合において、この化合物が、興奮毒性物質の投与によって引き起こされる酸化ストレスに対して保護することを示す。[マウスにおける興奮毒性物質の急性投与により引き起こされる死に対するNST0060の保護効果]マウスにおける興奮毒性物質の作用に対する化合物NST0060の抗てんかん、抗けいれん及び抗酸化能力を知って、本発明者らは、興奮毒性に対してNST0060により示されるこの保護効果が、マウスにおける興奮毒性物質により引き起こされる死のレベルの低下を伴うか否か調べることを決めた。実験過程の間に含まれる動物は全て、FVB/NHan系統由来の12週齢のオスであった。実験は、動物の操作に関する手引きと題された基準に厳しく準拠して行った。動物は、それぞれの検疫期間を経て、処置及び取り扱いの間の汚染の可能性を最小限にするために最大限の予防策を講じて処理された。動物に、PBSで溶解した25mg/Kgのカイニン酸の塩又はエステルKAを腹腔内接種した。14匹の動物に、KA接種の24時間30分前と、続いて接種後毎日最長7日目まで、0.25のメチルセルロースを含むPBSをビヒクルとして腹腔内注射して予備処理しビヒクルKA投与計画、14匹に、KA接種の24時間30分前と、続いて接種後毎日最長7日目まで、50mg/Kgの用量の化合物NST0060を腹腔内注射して予備処理したNST0060KA投与計画。接種の後、動物を別々のトレーで飼育してモニターした。加えて、コントロールとして役立つように、8匹のマウスを全ての投与でビヒクルのみ用いて処理して、KA注射を受けさせなかった。実験全体を通して異なる処理群における死亡を記録し、このデータを用いて、図22に示す対応生存曲線を確立した。この結果は、25mg/Kgの用量の腹腔内KA投与がマウスの死亡の統計的に有意な増加を引き起こすことを示した。驚くべきことに、KAの接種の前後のNST0060での処理は、観察される死亡率を統計的に有意な様式P<0.05で低減する。これらの結果は、化合物NST0060が、興奮毒性物質により引き起こされる死亡について生存個体を増加させることを示す。