"SorLAおよびGFRα1の間の相互作用を調節または阻害することにより、必要とされる患者の脳におけるGDNFの細胞外レベルを高める方法。GDNFの内在化および/または分解が阻害される、請求項1に記載の方法。SorLAおよびGFRα1の間の相互作用を調節することによるドーパミン作動性ニューロンなどのニューロンの生存を高める方法。傷害誘発神経細胞死、脊髄傷害、末梢神経損傷、脳虚血、運動ニューロン疾患、筋萎縮性側索硬化症、慢性疼痛、神経因性疼痛、てんかん、がん、パーキンソン病、大うつ病、統合失調症、注意欠陥および多動性障害ADHD、薬物乱用、不安障害、および/または双極性障害躁うつ病からなる群から選択される疾患を治療するための請求項1から3のいずれか1項に記載の方法。SorLAおよびGFRα1の間の相互作用を調節および/または阻害するために使用される薬剤がSorLAまたはGFRα1に対する抗体である、請求項1から4のいずれか1項に記載の方法。抗体がSorLAまたはGFRα1の細胞外ドメイン上の1つまたは複数の結合部位に結合する、請求項5に記載の方法。結合部位が配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6および/または配列番号7を含むか、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6および/または配列番号7に対して少なくとも80、例えば、少なくとも85、90、95または98の配列同一性を有する、請求項6に記載の方法。抗体がポリクローナルまたはモノクローナルである、請求項5に記載の方法。抗体が単離されているか、組換えである、請求項5に記載の方法。抗体がヒト化抗体、キメラ抗体または単鎖抗体である、請求項5に記載の方法。請求項5~10のいずれか1項に記載の抗体および担体を含む医薬組成物。請求項5~10のいずれか1項に記載の抗体または請求項11に記載の医薬組成物の有効量を投与することによる、ドーパミン作動性ニューロンなどのニューロンの喪失に伴った疾患の治療のため、および/またはドーパミン作動性ニューロンなどのニューロンの生存もしくは保護のための方法。傷害誘発神経細胞死、脊髄傷害、末梢神経損傷、脳虚血、運動ニューロン疾患、筋萎縮性側索硬化症、慢性疼痛、神経因性疼痛、てんかん、がん、パーキンソン病、大うつ病、統合失調症、注意欠陥および多動性障害ADHD、薬物乱用、不安障害、および/または双極性障害躁うつ病からなる群から選択される疾患を治療するための請求項12に記載の方法。SorLAおよびGFRα1の間の相互作用を調節することにより患者の脳におけるGDNFの細胞外レベルを高めるための、請求項5~10のいずれか1項に記載の抗体または請求項11に記載の医薬組成物。GDNFの内在化および/または分解が阻害される、請求項14に記載の抗体または医薬組成物。ドーパミン作動性ニューロンなどのニューロンの喪失に伴った疾患を治療するため、および/またはドーパミン作動性ニューロンなどのニューロンの生存もしくは保護のための、請求項5~10のいずれか1項に記載の抗体または請求項11に記載の医薬組成物。傷害誘発神経細胞死、脊髄傷害、末梢神経損傷、脳虚血、運動ニューロン疾患、筋萎縮性側索硬化症、慢性疼痛、神経因性疼痛、てんかん、がん、パーキンソン病、大うつ病、統合失調症、注意欠陥および多動性障害ADHD、薬物乱用、不安障害、および/または双極性障害躁うつ病からなる群から選択される疾患を治療するための請求項14~16に記載の抗体または医薬組成物。請求項14~17のいずれか1項に記載の疾患を治療するための薬を調製するための、請求項5~10のいずれか1項に記載の抗体または請求項11に記載の医薬組成物の使用。本発明は、SorLAとGDNFファミリーリガンド受容体例えば、GFRα1、2、3および/または4受容体の間の相互作用を調節することにより、ドーパミン作動性ニューロンなどのニューロンの生存を高める方法に関する。一実施形態によれば、それの必要な患者の脳のGDNFの細胞外レベルを、SorLAとGFRα1の間の相互作用を調節するか阻害することにより増加させることができるか、あるいは、GDNFの内在化および/または分解が阻害される。特に、本発明は、SorLAとGDNFファミリーリガンド受容体の間の相互作用を調節するために用いられる薬剤がタンパク質、ペプチド、抗体または小型有機化合物から選択される方法に関する。また本発明は、そのような薬剤を1つまたは複数の医薬的に許容される担体もしくは希釈剤と組み合わせて、またはアジュバントと組み合わせて含む医薬組成物に関する。さらに、本発明は、特に傷害誘発性神経細胞死、脊髄傷害、末梢神経損傷、脳虚血、運動ニューロン疾患、筋萎縮性側索硬化症、慢性疼痛、神経因性疼痛、てんかん、がん、パーキンソン病、大うつ病、統合失調症、注意欠陥および多動性障害ADHD、薬物乱用、不安障害axietydisorder、および/または双極性障害躁うつ病を含む疾患の中で、ニューロン例えばドーパミン作動性ニューロンの生存を高めるためのそのような薬剤または医薬組成物の使用に関する。最後に、本発明は、SorLAとGDNFファミリーリガンド受容体の間の相互作用を阻害することが可能な薬剤を同定するための各種アッセイに関する。SorLA:GFRα1複合体のデモンストレーションSorLAおよびGFRα1をコードしているプラスミドで安定的にトランスフェクトされたHEK293細胞をDSPPierceと架橋結合させ、続いて溶解させた。細胞溶解物は、GammabindビーズGEHealthcareに結合されているSorLAまたはGFRα1に対する抗体RDSystemsとインキュベートした。沈殿した複合体を、SDSローディングバッファーを用いて洗浄ビーズから溶出させた。ウエスタンブロット解析は、SorLA:GFRα1複合体の存在下で明らかにされた図5A。SorLAおよびGFRα1の細胞外ドメインの直接的相互作用も、標準泳動バッファーとしてCaHBS10mMHEPES、pH7.4、140mMNaCl、2mMCaCl2、1mMEGTA、0.005Tween-20を使用する、表面プラズモン共鳴Biacore、Swedenを使用して証明した。BiacoreCM5、カタログ番号BR-1000-14製のバイオセンサーチップは、供給元により説明されているようにNHS/EDC法を使用して活性化し、その後、SorLAでコーティングした図5C。SorLA:GFRα2複合体のデモンストレーションSorLAおよびGFRα2をコードしているプラスミドで安定的にトランスフェクトされたHEK293細胞をDSPPierceと架橋結合させ、続いて溶解させた。細胞溶解物を、GammabindビーズGEHealthcareに結合されているGFRα2に対する抗体RDSystemsとインキュベートした。沈殿した複合体を、SDSローディングバッファーを用いて洗浄ビーズから溶出させた。ウエスタンブロット解析は、SorLA:GFRα2複合体の存在下で明らかにされた図11A。SorLAおよびGFRα2の細胞外ドメインの直接的相互作用も、標準泳動バッファーとしてCaHBS10mMHEPES、pH7.4、140mMNaCl、2mMCaCl2、1mMEGTA、0.005Tween-20を使用する、表面プラズモン共鳴Biacore、Swedenを使用して証明した。BiacoreCM5、カタログ番号BR-1000-14製のバイオセンサーチップは、供給元により説明されているようにNHS/EDC法を使用して活性化し、その後、SorLAでコーティングした。SorLA:GFRα3複合体のデモンストレーションSorLAおよびGFRα3をコードしているプラスミドで安定的にトランスフェクトされたHEK293細胞をDSPPierceと架橋結合させ、続いて溶解させた。細胞溶解物を、GammabindビーズGEHealthcareに結合されているGFRα3に対する抗体RDSystemsとインキュベートした。沈殿した複合体を、SDSローディングバッファーを用いて洗浄ビーズから溶出させた。ウエスタンブロット解析は、SorLA:GFRα3複合体の存在下で明らかにされた図11A。SorLAおよびGFRα3の細胞外ドメインの直接的相互作用も、標準泳動バッファーとしてCaHBS10mMHEPES、pH7.4、140mMNaCl、2mMCaCl2、1mMEGTA、0.005Tween-20を使用する、表面プラズモン共鳴Biacore、Swedenを使用して証明した。BiacoreCM5、カタログ番号BR-1000-14製のバイオセンサーチップは、供給元により説明されているようにNHS/EDC法を使用して活性化し、その後、SorLAでコーティングした。SorLA:GFRα4複合体のデモンストレーションSorLAおよびGFRα4をコードしているプラスミドで安定的にトランスフェクトされたHEK293細胞をDSPPierceと架橋結合させ、続いて溶解させた。細胞溶解物を、GammabindビーズGEHealthcareに結合されているGFRα4に対する抗体RDSystemsとインキュベートした。沈殿した複合体を、SDSローディングバッファーを用いて洗浄ビーズから溶出させた。ウエスタンブロット解析は、SorLA:GFRα4複合体の存在下で明らかにされた図11A。SorLAおよびGFRα4の細胞外ドメインの直接的相互作用も、標準泳動バッファーとしてCaHBS10mMHEPES、pH7.4、140mMNaCl、2mMCaCl2、1mMEGTA、0.005Tween-20を使用する、表面プラズモン共鳴Biacore、Swedenを使用して証明した。BiacoreCM5、カタログ番号BR-1000-14製のバイオセンサーチップは、供給元により説明されているようにNHS/EDC法を使用して活性化し、その後、SorLAでコーティングした。SorLA:GDNF複合体のデモンストレーションSorLAおよびGDNFの細胞外ドメインの直接的相互作用も、標準泳動バッファーとしてCaHBS10mMHEPES、pH7.4、140mMNaCl、2mMCaCl2、1mMEGTA、0.005Tween-20を使用する、表面プラズモン共鳴Biacore、Swedenを使用して証明した。BiacoreCM5、カタログ番号BR-1000-14製のバイオセンサーチップは、供給元により説明されているようにNHS/EDC法を使用して活性化し、その後、SorLAでコーティングした図3。SorLAおよびGFRα1を含む複合体を調節する、受容体アンタゴニスト/アゴニストを同定するための細胞系スクリーニング方法。Vps10pドメイン受容体ファミリーのメンバーによる、結合、内在化またはシグナル伝達の測定は、細胞系において行うことができる。例えば、それぞれ、SorLAおよびGFRα1およびGDNFの3つの受容体をすべてコードしているプラスミドでトランスフェクションした後のSorLAおよびGFRα1およびGDNFを発現する細胞を、候補薬剤阻害剤/アンタゴニスト化合物とインキュベートする。前記薬剤は、例えば、リガンド、例えば、SorLAプロペプチド、またはそれぞれの受容体の断片を結合している、受容体SorLAおよびGFRα1のいずれか1つに対する抗体を意味し得る。インキュベーション後、細胞を洗浄し、タンパク質複合体をジチオビス[スクシンイミジルプロピオナート]DSP、Pierceと架橋結合させ、続いて、プロテイナーゼ阻害剤Complete、RocheAppliedScience、Switzerlandを含有するTNE緩衝液10mMTris-HCl、150mMNaCl、1mMEDTA、1ノニデスnonidesP-40、pH8中で溶解させた。細胞溶解物を、セファロースビーズGEHealthcareに結合されているSorLAまたはGFRα1に対する抗体RDSystemsとインキュベートする。沈殿した複合体を洗浄ビーズから溶出させる酸性緩衝液およびその後の中和。溶離液中のSorLAおよびGFRα1をウエスタンブロット解析することにより、候補化合物がSorLA:GFRα1複合体形成を阻害することが可能かどうかについて明らかにする。GFRα1および/またはSorLAとGDNFの相互作用を阻害する薬剤を同定するためのインビトロアッセイ固定化タンパク質へのリガンド、例えば、小型有機分子、ペプチドまたはSorLA、GFRα1およびGDNFを含むただしこれらに限定されるものではない可溶性受容体の直接結合の測定は、例えば、標準泳動バッファーとしてCaHBS10mMHEPES、pH7.4、140mMNaCl、2mMCaCl2、1mMEGTA、0.005Tween-20を使用する、表面プラズモン共鳴Biacore、Swedenにより行うことができる。そのような薬剤は、成熟GDNFのN末端図17またはGFRα1ドメイン1図16から得ることができる。BiacoreCM5、カタログ番号BR-1000-14製のバイオセンサーチップは、供給元により説明されているようにNHS/EDC法を使用して活性化し、その後、SorLAでコーティングした。いくつかの様々な手法を用いることができる:候補薬剤は、結合シグナル応答単位を受容体の1つで固定化したチップと比較し、このシグナルを空のフローセルと比較することにより同定することができる。別の手法においては、既知リガンドの阻害は、推定阻害剤の不在下または存在下でモニターすることができる。シグナルの差は、アンタゴニストの阻害ポテンシャルを表す。回収されたデータは、Biaevaluationバージョン3.1プログラムを使用して、親和性評価および阻害ポテンシャルに関するセンサーグラムを適合することにより分析することができる。表面プラズモン共鳴アッセイは、Vps10pドメイン受容体、リガンドまたは推定阻害剤が固相上に固定化される、別のアッセイへと容易に変換することができる。例えば、受容体は、50mMNaHCO3、pH9.6中、4°Cで16時間インキュベーションすることにより、例えばNunc製のMaxisorpマイクロタイターウェルカタログ番号439454に固定化することができる。室温で2時間、5ウシ血清アルブミンSigma、カタログ番号A9647を使用してブロッキングした後、ウェルをMB緩衝液10mMHEPES、pH7.4、140mMNaCl、220mMCaCl2、および1mMMgCl2で3回洗浄し、各種濃度の候補阻害剤の不在下または存在下において、標識リガンド例えば、ヨウ素化とインキュベーションすることができる。インキュベーション例えば4°Cで一晩の後、MB緩衝液で洗浄し、結合放射活性は10SDSを添加することにより遊離される。ウシ血清アルブミンのみでコーティングしたウェルへのトレーサーの非特異的結合を測定し、結合実験で測定された値から減じることができる。結合データポイントは、GraphPad製のプリズムソフトウェアバージョン4を使用して、結合方程式に合わせることができる。同様に、アンタゴニストも標識化することが可能であり、固定化受容体への結合を直接測定することができる。さらに別の構成において、受容体、リガンドまたはアンタゴニストはシンチレーションビーズ上に固定化することが可能であり、受容体結合分子が放射活性を用いて標識化されている結合をシンチレーション近接アッセイにおいて測定することができる。SorLAを阻害することが可能な薬剤を同定するための細胞系スクリーニング方法SorLA:GFRα1:GDNFレセプター複合体の実体に対するアンタゴニストは、複合体全体の阻害剤として作用することができる。したがって、例えばVps10pドメイン受容体実体に結合することが可能な薬剤についてスクリーニングすることに関連する。そのような方法は、本実施例に記載されている。Vps10pドメイン受容体ファミリーのメンバーによる結合、内在化またはシグナル伝達の測定は、細胞系で行うことができる。内生的に、または、例えば受容体のcDNAを含有するプラスミドとのトランスフェクション後に、受容体の1つを発現する細胞は、候補阻害剤/アンタゴニスト化合物の不在下および存在下のそれぞれにおいて、放射標識したリガンドとインキュベートすることができる。インキュベーション後、細胞を洗浄して非特異的結合を除去し、続いて回収することができる。候補アンタゴニスト/阻害剤の受容体への結合の程度は、当業者に公知の慣用の放射リガンドアッセイを使用することにより測定する。例えば、BylundandToewsAmJPhysiol265L4219entitledRadioligandbindingmethodspracticalguideandtipsを参照。同様に、細胞内取込/内在化は、NykjaeretalFEBS30013、およびNielsenetalEMBOJに記載されているようにして測定することができる。SorLAによってGFRα受容体の逆行性ソーティングを調節することが可能な薬剤を同定するための細胞系スクリーニング方法。SorLAおよびGFRα受容体の両方を発現する細胞において、表面に局所するGFRα受容体を蛍光タグまたは蛍光抗体のいずれかにより標識化し、30分の間、SorLAアゴニスト/アンタゴニストとインキュベートした。続いて、内在化されられたGFRα受容体の量は、図6および図11に示すような共焦点顕微鏡法を使用して評価することができる。Retリン酸化を高めることが可能な薬剤を同定するための細胞系スクリーニング方法SY5Y神経芽細胞腫細胞は、SorLAアンタゴニストまたはアゴニストの不在下または存在下において、所定の時間GDNFの濃度を高めることにより刺激した。細胞を溶解させ、細胞溶解物は、GammabindビーズGEHealthcareに結合されたRetRDSystemsに対する抗体とインキュベートした。沈殿タンパク質を洗浄ビーズから溶出させ酸性緩衝液、続いて中和、リン酸化Retを、抗ホスホチロシンMiliporeを使用して、ウェスタンブロッティングにより視覚化した図9に示すとおり。細胞生存を高めることが可能な薬剤を同定するための細胞系スクリーニング方法SY5Y神経芽細胞腫細胞をトリプシン-EDTA処理により回収し、その後、1グルタマックスならびに1P/Sペニシリンおよびストレプトマイシンを含有するフェノールレッドLONZAを含まないDMEMに再懸濁させた。細胞を、50μlの最終容量で96ウェルプレートのウェルあたり20000個細胞でプレーティングした。翌日、細胞を、SorLAアンタゴニストまたはアゴニストの不在下または存在下において、GDNF濃度を高めることにより刺激した。GDNFなどを添加した後の最終容量は100μlであった。各種類の試料は四連として調製した。細胞は、それらの通常のインキュベーター中で72時間インキュベートした。72時間後、MultiTox-FluorMultiplex細胞毒性試験試薬Promegaを調製し、製造者の添付技術書類による指示のとおり細胞に加えた。簡潔に説明すると、各試料について、アッセイバッファー100μl、GF-AFC基質0.1μlおよびビス-AAF-R110基質0.1μlを混合し、ウェルに加えた。240rpmの揺動シェーカーIka登録商標KS260Basic上で1分間混合した後、プレートを37°Cで30分間インキュベートした。その後、蛍光をWallacVICTOR3TM1420多重標識カウンターPerkinElmerTMLifesciencesで測定した。生存能力は400nmEx/505nmEmで測定した。シグナルは生存に正比例する。別法において、生存を試験するとは96ウェルプレートの代わりにカバーガラス上で細胞を成長させることである。72時間後、細胞を室温で30分間、PBS中の4パラホルムアルデヒドPFAに固定させ、DAPIを含有するマウント培地を用いてスライド上にマウントすることができた。DAPI染色された細胞は、蛍光顕微鏡で直接カウントすることができた図9Dに示すとおり。SorLAアンタゴニスト/アゴニストによる主要ニューロン細胞培養におけるGDNFファミリーリガンド活性の調節主要ニューロンの培養物は野生型マウスの脳から調製する。生後0~2日で脳を切開し、細胞を分離し、SorLAアンタゴニストまたはアゴニストの存在下または不在下において、例えば10ng/mlのGDNFの存在下でプレーティングする。インビトロで1~2週間培養物を成熟させた後、生存ニューロンの数を記録した。SorLAアンタゴニスト/アゴニストによる主要ドーパミン作動性ニューロンにおけるGDNF活性の調節P0~P2ラットの腹側被蓋領域から調製された主要ドーパミン作動性ニューロン。ラットの子の頭部を除去し、脳を単離し、冷却PBSに入れた。脳は腹側を下にして置いた。最初に脳全体の後ろから中脳屈曲部を切開し、二番目に吻側から屈曲部へ切開し、切片を平面に置いた。切片の腹面端部は視床下部の頂部に沿って切開され、次に、切片の腹面端部と脳室間孔のほぼ中間を切開した。組織をより小さな区分に切り、冷却L15培地Gibco、Invitrogenに置いた。組織を37°Cで30分間、加温パパイン溶液L15培地、2mMEDTA、20単位/mlパパインTMWorthington、Medinova、0.5mMキヌレン酸およびNaOHpHを約7に調整とインキュベートした。培地を除去し、組織をニューロン培地L-グルタミンを含まないNeurobasalTM培地Gibco、Invitrogen、FBS、B-27Invitrogen、glutamaxInvitrogen、primocinAmaxa、5-フルオロデオキシウリジンSigmaおよびウリジンSigma中で穏やかに摩砕することにより粉砕した。ニューロンを沈降させ800rpm、5分、ペレットをニューロン培地で希釈し、10ng/mlのGDNFの存在下であって、SorLAアンタゴニストまたはアゴニストの存在下または不在下において、皮質グリア細胞の層上に置いた。ニューロンをインビトロで1週間37°Cにてインキュベートし、その後、これらを室温で30分間、PBS中の4パラホルムアルデヒドPFAで固定した。その後、これらを、0.1トリトンX-100を含有するPBS中で15分間2回洗浄し、続いて、20分間PBS中の10FBSとインキュベーションした。その後、カバーガラスを4°Cで一晩、10FBSのPBS中の抗チロシンヒドロキシラーゼ抗体Pelfreeze、1:1000とインキュベートした。翌日、カバーガラスを0.1トリトンX-100含有PBSで3回洗浄し、4°Cで一晩、10FBSのPBS中のAlexa-fluor登録商標488ヤギ抗ウサギIgGInvitrogen、1:1000とインキュベートした。その後、カバーガラスをPBS中の0.1トリトンX-100で2×15分、PBSで1×15分、水で1×15分洗浄した。カバーガラスをDakoFlurescentMountingMediumDako、Denmarkとともにスライド上にマウントした。生存ニューロンの数を、チロシンヒドロキシラーゼのポジティブニューロンの数をカウントすることにより記録した図12に示すとおり。アンフェタミン誘導機能促進に対するSorLAアンタゴニスト/アゴニストの効果マウスをSorLAアンタゴニストまたはアゴニストで1~30日間前処理し、透明なPlexiglas領域40×40×35cmから構成されているオープンフィールド試験において、アンフェタミン誘導機能促進に関して試験した。領域は、Any-mazeトラッキングシステムの制御下のコンピューター連結ビデオカメラ下に、薄暗い部屋でセットアップした。マウスを領域の隅に置き、図13に示すように、それらマウスの活動を40分間セッションの間記録した。アンフェタミン0.1~10mg/kgを腹腔内または静脈内に投与した。不安神経症関連挙動に対するSorLAアンタゴニスト/アゴニストの効果野生型のSorLAトランスジェニックマウスの挙動を、高架型十字迷路において、不安神経症関連挙動に関して試験した。高架型十字迷路は、うつ病、躁病および不安神経症の関連挙動に関する実験モデルとして使用される。抗うつ薬または抗不安薬でマウスを治療すると、通常、移動距離、ライン交差の数、および入場回数および壁のない走行路での経過時間が増える。高架型十字迷路は床より40cm上に設定されており、15cmの高い不透明な壁のある2つの向かい合う壁のある走行路と同じ大きさ35×5cmの2つの向かい合う壁のない走行路から構成されている。高架型十字迷路は、Any-mazeトラッキングシステム制御下でコンピューター連結ビデオカメラの下に、薄暗い明かりのついた部屋でセットアップした。10分間の試験セッションを各マウスについて実施し、図14に記載したように、入場回数と、壁のない走行路における滞在時間を測定した。マウスをSorLAアンタゴニストまたはアゴニストで1~30日間事前処置した、類似の実験を実施する。アンフェタミン誘導感作に対するSorLAアンタゴニスト/アゴニストの効果5日間1日おきに1回、成体マウスを4mg/kgのアンフェタミンまたは生理食塩水で前処理し、また一方でSorLAアンタゴニストまたはアゴニストを用いて処置し、オープンフィールドでの自発運動に関して試験した。最後のアンフェタミン前処置の後、SorLAアンタゴニスト/アゴニストによる処置を1週間継続した。16日目に、すべてのマウスがアンフェタミン2mg/kgの投与注射を受ける感作に関する試験を実施し、オープンフィールドにおける自発運動について試験した。マウスにおけるMPTP誘導神経毒性に対するSorLAアンタゴニスト/アゴニストの保護作用成体マウスに、20mg/kgのMPTP1-メチル-4-フェニル-1,2,3,6-テトラヒドロピリジン、ドーパミン作動性ニューロンに選択的に毒性のある薬剤をSorLAアンタゴニスト/アゴニストと一緒に、またはSorLAアンタゴニスト/アゴニストを使用せずに注射した。注射の1日前、および注射終了の2日後に、透明なPlexiglas領域40×40×35cmからなるオープンフィールド試験において、運動活性を記録した。領域は、Any-mazeトラッキングシステムの制御下でコンピューター連結ビデオカメラ下の薄暗い部屋でセットアップした。マウスを領域の隅に置き、マウスの活動を60分のセッションの間記録した。最後に、免疫組織化学を使用して各種の形態学的マーカー例えば、チロシンヒドロキシラーゼおよびドーパミン輸送体を評価するために、マウスに4パラホルムアルデヒドを潅流した。細胞分化を増進することが可能な薬剤を同定するための細胞系スクリーニング方法神経芽細胞腫細胞をトリプシン-EDTA処理で回収した。10FBSならびに1P/Sペニシリンおよびストレプトマイシンを含有するDMEM-F12培地に細胞を再懸濁し、6ウェルプレートに播種した。翌日、培地を除去し、SorLAアンタゴニストまたはアゴニストの不在下または存在下において、GDNFの濃度を上昇させる新しい培地で細胞をインキュベートした。細胞は、それらの通常のインキュベーター中で72時間インキュベートし、この後、カメラを連結した実体顕微鏡ライカDC300で細胞を視覚化した。神経突起伸長は、細胞直径より2倍長いプロセスとして神経突起を定義することにより記録した。治療方法結果として、使用前に溶解される凍結乾燥されたもの、または、非経口投与経路例えば、静脈内I.V.、筋肉内I.M.もしくは皮下S.C.で投与可能であるような直ぐに使用可能な溶液としてのペプチド/ポリペプチド性質可能な抗体系の活性剤が開発された。固体投与形態の粘膜施用もまた、この場合における可能性を示す。得られた開発活性剤が化学的性質である場合、経口投与用の製剤ならびに例えばS.C.またはI.M.で使用するための有望な経路用の製剤が調製される。開発された薬は、予防的目的で使用されるか、長期治療のために長期間投与される。この場合、活性剤は、精神障害および行動障害の症状に至る、起こる分子的事象のプロセスに干渉し、それにより阻害する。薬が使用されるべきである精神障害および行動障害を発症する傾向にある患者を分析するために遺伝子検査が開発される場合においては、そのような診断法と関連して可能である。精神障害および行動障害が発症した場合、薬を利用する長期の治療は別の可能性を示す。論理的根拠は、その病気の症状に至る分子的事象をコンスタントに抑制することができることである。最後に、本薬は、神経系障害または精神障害および行動障害の慣用の治療法、例えば、抗精神病薬、抗うつ薬またはリチウムと一緒に併用投与することが可能である。SorLAによるGDNFファミリーリガンドGFLの内在化および分解を調節することが可能な薬剤を同定するための細胞系スクリーニング方法GDNFまたは別のGFLは、2~120分間、SorLAアゴニスト/アンタゴニスト例えば抗体の存在下または不在下において、SorLAおよびGFRα受容体の両方を発現する細胞とインキュベートした。GDNFまたは別のGFLは、蛍光タグまたは蛍光抗体のいずれかにより標識化した。続いて、図6および図11および図21に示したように、内在化GDNFまたはGFLの量を、共焦点顕微鏡法を使用して評価した。[配列表]"