PCV-2のORF1、PCV-2のORF2、PCV-1のORF1およびPCV-1のORF2から成る群の中から選択される遺伝子をコ-ドし、発現するプラスミドと、この遺伝子の発現産物に対する免疫応答を増加することができる要素とからなる免疫原製剤またはワクチン。免疫応答を増加させることができる要素が下記の[式1]のカチオン脂質から成るアジュバントである請求項1に記載の免疫原製剤またはワクチン:ここで、R1は12~18の炭素原子を有する飽和または不飽和の直鎖脂肪族基を表し、R2は2~3の炭素原子を有する他の脂肪族基を表し、Xは水酸基またはアミン基を表すカチオン脂質がDMRIENNNジメチル23ビス1プロパンアンモニウムである請求項2に記載の免疫原製剤またはワクチン。DMRIEと中性脂質とを組み合わせた請求項3に記載の免疫原製剤またはワクチン。DMRIEとDOPEジオレイルホスファチジルエタノールアミンとを組み合わせた請求項4に記載の免疫原製剤またはワクチン。免疫応答を増加させることができる要素がカルボマ-から成るアジュバントを含む請求項1に記載の免疫原製剤またはワクチン。免疫応答を増加させることができる要素がブタサイトカインを含む請求項1に記載の免疫原製剤またはワクチン。ブタサイトカインがGM-CSFである請求項7に記載の免疫原製剤またはワクチン。ブタサイトカインをコ-ドし、発現するプラスミドを含む請求項7または8に記載の免疫原製剤またはワクチン。免疫応答を増加させることができる要素がブタサイトカインと、DMRIE、DMRIEDOPEおよびカルボマ-から成る群の中から選択されるアジュバント化合物とを含む請求項1に記載の免疫原製剤またはワクチン。他のブタの免疫原をコ-ドし、発現するプラスミドを含む請求項1~10のいずれか一項に記載の免疫原製剤またはワクチン。本発明はPCV-2免疫原をコ-ドし、発現するプラスミド構造物がブタのPMWS症候群に対する免疫力があることを見い出した。PCV-2免疫原はPCV-1免疫原と一緒にしてPCV-2に対して動物を免疫するために使うことができる。好しくはないが、PCV-1免疫原単独で用いることもできる。本発明の対象は、PCV-1またはPCV-2免疫原、特にPCV-1の転写解読枠ORF1および/または2と、PVC-2のORF1および/または2とをコ-ドし、発現するプラスミド構造物にある。ORFは転写解読枠openreadingframeを意味する。本発明が上記と均等なヌクレオチド配列をコ-ドし、発現するプラスミド、すなわち、対応する遺伝子またはこの遺伝子でコー度されるポリペプチドの機能性や株特異性タイプ1型の菌株およびタイプ2型の菌株を変えない配列を含むということは言うまでもない。コ-ドの縮重によって違っている配列ももちろん含まれる。実施例で使われるPCV-2配列はMeehan達から供給された菌株Imp1010、ORF1ヌクレオチド398-1342、ORF2ヌクレオチド1381-314、これらはそれぞれ特許文献11998年9月25日出願の米国特許第09/161092号に記載のORF4およびORF13に対応し、特許文献2国際特許第WO-A-9918214号公報のCOL4およびCOL13に対応する。米国特許出願第09/161092号1998年9月25日出願国際特許第WO-A-9918214号公報他のPCV-2菌株およびそれらの配列は特許文献2国際特許第WO-A-9918214号公報に開示されており、ImplO08、Imp999、Imp1011-48285およびImplO11-48121とよばれている非特許文献12組織プラスミノ-ゲンアクチベ-タ遺伝子でコ-ドされる蛋白質のシグナル配列NNジメチル123ビステトラデシルオキシ1プロパンアンモニウム、WO-A-9634109であり、中性脂質、例えばDOPEジオレイルホスファチジルエタノールアミンと組み合わされてDMRIE-DOPEの形になるのが好ましい。このアジュバントとのプラスミド混合物は使用の直前に作るのが好ましく、複合体ができるまで得られた混合物を動物へ投与する前に10~60分間、特に30分間放置しておくのが好ましい。DOPEが存在する場合のDMRIE:DOPEのモル比は95:5~5:95、特に1:1にするのが好ましい。プラスミド:DMRIEまたはDMRIE-DOPEアジュバントの重量比は50:1~1:10、特に10:1~の1:5、好ましくは1:1~1:2にする。本発明の他の有利な型式では、アジュバントとしてアクリルまたはメタアクリル酸のポリマーおよび無水マレイン酸やアルケニル誘導体とのコポリマーから選択されるアジュバント化合物を用いることができる。アクリルまたはメタアクリル酸と砂糖のポリアルケニルエ-テルまたは多価アルコ-ルとの架橋したポリマ-が特に好ましい。これらの化合物はカルボマ-Pharmeuropavol8No21996年6月の用語で公知である。当業者は特許文献4も参照できる。米国特許第US-A-2909462号明細書この特許にはポリヒドロキシル化された化合物と架橋されたアクリル重合体が記載されている上記は引用したものとする。このアクリル重合体は少なくとも3つ、好ましくは8以下のヒドロキシル基を有し、少なくとも3つのヒドロキシルの水素原子は少なくとも2つの炭素原子を有する不飽和脂肪族基で置換できる。好ましい基は2~4つの炭素原子を含むもの、例えばビニル、アリルおよび他のエチレン性不飽和基である。不飽和基自身が他の置換基例えばメチルを含むことができる。カルボポルの名称でGFグッドリッチ974P、934Pおよび971Pが挙げられる。無水マレイン酸とアルケニル誘導体とのコポリマ-としてはEMAsは下記の式の基礎単位を有するのが好ましい:JFieldsetalNature186778-7804June1960ここで、R1とR2はHまたはCH3-を表し、互いに同一でも異なっていてもよく、x=0または1、好ましくはx=1であり、y=1または2で、xy=2EMAs登録商標ではx=0、y=2であり、カルボマーではx=y=1である。水にこのポリマ-を溶解すると酸性溶液になるので、好ましくは、実際のワクチンが取り入れられるアジュバント溶液を与えるために、生理学的なpHに中和する。ポリマ-のカルボキシル基は部分的にCOO-形になっている。本発明のアジュバント溶液、特にカルボマ-の溶液では、好ましくは塩化ナトリウム存在下で蒸留水に溶かす。得られる溶液は酸性pHである。この原液に必要な量の水を加えて所望の最終濃度まで薄めてアジュバントの溶液を調製するのが好ましい。または、好ましくは生理的食塩水、好ましくはNaClを添加した生理的食塩水とNaOHで中和pH73~74する。生理学的なpHのこの溶液は凍結乾燥するか、液状で凍った状態で保存され、プラスミドと混合するためにそのままに扱われる。最終的なワクチン組成物のポリマ-濃度は001~2wv、特に006~1wv、好ましくは01~06wvである。本発明の一つの実施例の免疫原またはワクチン製剤は、PCV-2ORF1およびORF2をコ-ドし、発現するプラスミドのプラスミドまたは混合物から成る。本発明はさらに、ブタサーコウイルスに対する予防接種と、ブタの他の病原体特に、PMWS症候群と関連する病原体に対する予防接種とを結合することを提供する。例としては以下が挙げられる:仮性狂犬病ウイルス、ブタインフルエンザウィルス、PRRS、ブタパルボウィルス、豚コレラウイルス、アクチノバチルスプルーポニューモニアActinobacilluspleuropneumoniae。本発明の対象は、少なくとも一つの本発明のプラスミドと、下記の中から選択されるブタ免疫原をコ-ドし、発現する少なくとも一つの他のプラスミドとを含むプラスミド混合物にある:例えば、仮性狂犬病ウイルスのグリコプロテインgBおよびgD、仮性狂犬病ウイルスまたはPRV、ヘムアグルチニン、ブタインフルエンザウィルスH1N1、ヘムアグルチニンおよびブタインフルエンザウィルスH3N2、ORF5およびLelystadおよびUSA菌株のPRRSウィルス、ブタパルボウィルスのVP2蛋白質、E1および豚コレラウイルスHCV、apxI、apxIIおよびアクチノバチルスプルーポニューモニアActinobacilluspleuropneumoniaeからのapxIII遺伝子のE2蛋白質類のORF3遺伝子のヌクレオプロテインのヌクレオプロテインWO-A-9803658のプラスミドを参照。これらのプラスミド混合物は獣医学上許容されるビヒクルまたは希釈剤に溶かし、必要な場合にはさらに、上記の獣医学上許容されるアジュバントと一緒にして、免疫原製剤または多価DNAワクチンを形成する。これらの製剤または多価ワクチンはカチオン脂質、特に、DMRIEと配合され、さらには中性脂質、DOPEと一緒に用いて、DMRIE-DOPEを形成するのが好ましい。上記のようにアジュバントと配合した本発明の製剤または一価または多価のDNAワクチンにはブタ起源のサイトカイン、特にブタGM-CSFを補うのが好ましい。このブタGM-CSF顆粒球マクロファ-ジ-コロニ-形成刺激因子、非特許文献17、18は製剤中に添加するか、ワクチンまたはブタGM-CSF蛋白質またはブタGM-CSF遺伝子をコ-ドし、発現するプラスミド非特許文献19に添加することがきる。ClarkSCetalScience19872301229GrantSMetalDrugs199253516InumaruSandTakamatsuHImmunolCellBiol199573:474-476ブタGM-CSF遺伝子はPCV免疫原または他のブタ免疫原をコ-ドするものとは異なるプラスミド中に挿入するのが好ましい。ブタGM-CSFをコ-ドし、発現するプラスミドは特にプラスミドpJP058図5にすることができる。本発明の免疫原の製剤および一価または多価のDNAワクチンはさらに、少なくとも一つの従来のワクチン弱毒化、不活化またはサブユニットまたは互いに異なるか同一の少なくとも一つのブタ病原体に対する組換え型ワクチンウイルス性ベクタ-と組み合わせることができる。本発明は特に、アジュバントを含む従来のワクチン弱毒化、不活化またはサブユニットと組み合わせることができる。不活化またはサブユニットワクチンでは特に、アジュバントとしてのサポニンと混合したアルミナゲルを含むもの、水中油乳濁液の形の配合物が挙げられる。本発明のさらに他の対象は、本発明のサーコウイルスに対してブタの免疫応答を誘発することが可能な免疫化方法にある。その対象はブタに対して特に効果的なワクチン接種法である。この免疫化および予防接種方法は上記の製剤または一価または多価のDNAワクチンを投与することから成る。この免疫化および予防接種方法は上記製剤またはDNAワクチンを一回または連続して投与することから成る。この免疫化方法またはポリヌクレオチド予防接種は上記製剤およびDNAワクチンを従来技術で提案されている種々の投与経路および公知の投与方法、例えば、筋肉内および皮内への注射針を用いた注射、液体ジェット非特許文献20や、DNAで被覆された金粒子の投射非特許文献21によって、投与できる。FurthetalAnalyticalBioch1992205365-368TangetalNature1992356152-154本発明方法は大人のブタだけでなく、若いブタや妊娠した雌ブタにも投与できる。後者の場合には新生児に受身免疫母性の抗体を授けることができる。雌ブタには増殖の前に予防接種し、および/または、妊娠前、および/または、妊娠中に予防接種するのが好ましい。好ましくは妊娠前に少なくとも1回接種し、妊娠中にさらに接種を行う。例えば、妊娠中期妊娠の6-8週間頃および/または妊娠後期妊娠の11-13週間頃に接種するのが好ましい。従って、有利な飼育は妊娠前の接種と妊娠中のブ-スタ接種である。その後は妊娠前の接種および/または妊娠中および/または妊娠後期に再接種する。子豚例えば予防注射した雌例えば上記の接種した雌から生まれた子豚は生まれてから数週以内に予防接種する。例えば、生まれてから1週間および/または2週間および/または3週間および/または4週間および/または5週間明細書に接種する。好ましくは子豚に生まれてから1週以内に接種するか、第3週以内例えば、離乳時に予防接種する。それから2~4週間後に子豚にブースター投与をするのが好ましい。本発明のワクチンにおいて使われるDNAの量は約50μg~約1000μgが好ましく、特に約10μg~約2000μgが好ましい。当業者は、正確に各免疫化または予防接種プロトコルのために使われるDNAの効果量を定義することができる。投与量容積は05~5mlにすることができ、特に2~3mlが好ましい。免疫化または予防接種の好ましい方法は筋肉経路で本発明のDNAワクチンを投与する方法である。以下、本発明を実施例を用いて詳細に説明するが、本発明が下記実施例に限定れるものではない。クロ-ニングORFsで使うPCV-2菌株は、たとえばECACCで寄託された受入れ番号V97100219Impl008V97100218ImplOlOおよびV971G0217Imp999、V98011608ImplO1148285およびV98011609これは1998年1月16日に寄託された菌株である。以下の実施例は菌株Imp1010を使用して作った。当業者は他のPCV-2菌株に適応させることが可能である。実施例1プラスミドpJP109の構築EcoRI断片の形でPCV-2ウィルスのゲノムを含むプラスミドpGEM7Z-Impl010Stoon-EcoRINo14をEcoRIで消化し、アガロ-スゲル電気泳動の後、1768の塩基対bpのEcoRIEcoRI断片を分離した。この断片を自己リゲ-トした。PCV-2ウィルス菌株1010-Stoonは、自己リゲ-トしたEcoRI-EcoRI断片から成るひな型を用い、下記オリゴヌクレオチドのPCR法PCR法により増殖した:JP779配列番号135mer:5CATCATCATGTCGACATGACGTATCCAAGGAGGCG3JP780配列番号236mer:5TACTACTACAGATCTTTAGGGTTTAAGTGGGGGGTC3730bpPCR断片を得る。この断片をSalIおよびBglIIで消化し、アガロ-スゲル電気泳動の後、715bpSalI-BglII制限断片を単離する。この断片はプラスミドpVR1012HartikkaJwtalHumanGeneTherapy199671205-1217でリゲ-トされ、予めSalIおよびBglIIで消化して、プラスミドにpJP1095567pb図1を得る。実施例2プラスミドpJP111の構築プラスミドpGem7Z-Impl010-StoonExample1を参照についてPCR法を実行し、下記オリゴヌクレオチドを用いた:JP781配列番号335mer:5CATCATCATGTCGACATGCCCAGCAAGAAGAATGG3JP782配列番号436mer:5TACTACTACAGATCTTCAGTAATTTATTTCATATGG3PCV-2ウィルスのORF1遺伝子を含む970bpPCR断片を得た。この断片をSalIおよびBglIIで消化し、アガロ-スゲル電気泳動の後、955bpSalI-BglII制限断片を単離した。この断片をプラスミドpVR1012実施例1でリゲ-トして、プラスミド実施例2を得た。実施例3プラスミドpJP120PCV-1ORF2の構築プラスミドpPCVlについてPCR法を実行し、下記オリゴヌクレオチドを用いた:JP783配列番号535mer:5CATCATCATGTCGACATGACGTGGCCAAGGAGGCG3JP784をPstIで消化し、アガロ-スゲル電気泳動の後、1759塩基対bpPstI-PstI断片を分離する。この断片を自己リゲ-トする。PCV-1ウィルス菌株PK-15のORF1遺伝子EMeehanetalJGenVirol199778221-227、GenBank配列寄託番号U49186は、自己リゲ-トされたPst-pst断片から成るひな型を用い、下記オリゴヌクレオチド2からPCR法PCRで増殖した:JP785配列番号735mer:5CATCATCATGTCGACATGCCAAGCAAGAAAAGCGG3JP786配列番号836mer:5TACTACTACAGATCTTCAGTAATTTATTTTATATGG3PCV-1ウィルス菌株PK-15のORF1遺伝子を含む955bpPCR断片を得る。この断片をSalIおよびBglIIで消化し、アガロ-スゲル電気泳動後、946bpSaiI-BglII制限断片を分離する。この断片をプラスミドpVR1012実施例1でリゲ-トし、プラスミドpJP1215804bp図4を得る。実施例5プラスミドpJP058ブタGM-CSFの構築頸静脈からEDTAを含んでいる管を通じてブタ血液を集める。単核化した細胞をフィコ-ル勾配の遠心分離で回収し、RPMI1640培地Gibco-BRLでインビトロで培養する。約5μochgの終濃度培地mlにconcanavalineAシグマを添加して刺激する。72時間刺激した後、リンパ芽球を回収し、細胞の全RNAを抽出キットMicroScaleTotalRNASeparatorKitでこのメーカの推薦方法に従って抽出する。逆転写反応はキットlst-StrandcDNASynthesisKitを用いて行い、リンパ芽球から抽出される全RNAに下記オリゴヌクレオチドを用いてPCR法を実行した:RG97233mer配列番号9:5TATGCGGCCGCCACCATGTGGCTGCAGAACCTG3RG97334mer:配列番号105TATGCGGCCGCTACGTATCACTTCTGGGCTGGTT3約450の塩基対bpのPCR断片を得る。この断片をNotIで消化し、アガロ-スゲル電気泳動後、450bpNotI-NotI断片を分離する。この断片を好ましくはNotIでリゲートしたプラスミドpVR1012実施例1で消化し、脱ホスホリル化し、プラスミドpJP0585405bp図5を得る。pGM-CSF遺伝子配列をプラスミドpJP058でクロ-ニングし、検査した結果、GenBankデ-タベ-ス寄託番号D21074で入手可能なものと同一であることがわかる。実施例6ブタ予防接種用精製プラスミドの生産大腸菌K12バクテリアの菌株DH10BまたはSCS1を実施例1~5のプラスミドpJP109、pJPlll、pJP058、pJP120およびpJP121で変性する。5つのプラスミドから得られる5つの形質転換クロ-ンを37°CでLuria-Broth培地で振盪培養する。培養細菌を対数期の終わりに収穫し、プラスミドをアルカリ溶解技術に従って抽出する。抽出されたプラスミドをSambrooketal、Gibco-BRL、Catalogue、10964-013を用い、メーカ推薦の方法に従ってCHO-K1中国HamsterOvary細胞ATCC番号CCL-61に形質移入した。48時間トランスフェクションの後、トランスフェクション細胞を蒸留水に通し、3分間の氷温の95アセトン溶液で室温で固定した。PCV-2ORF1蛋白質類F1991D3GAおよびF2107G5GDおよびORF2蛋白質類F1904C7CF、F1902B1BCおよびF1903A8BCのための5つのモノクロ-ナル抗体特性を最初の抗体として用いた。抗マウス免疫グロブリンG接合体Cy3でラベル化を用いて特異的な標識付けをした。APCV-2特異的な蛍光はプラスミドpJP109で形質移入した細胞の3つのPCV-2ORF2モノクロ-ナルで観測されたが、プラスミドpJPlllで形質移したものでは観測されなかった。これとは対照的にプラスミドpJPlllで形質移入された細胞では二つのPCV-2ORF1モノクロ-ナルでPCV-2特異的な蛍光が観測され、プラスミドpJP109で形質移入された細胞で観測されなかった。プラスミドpVR1012だけで形質移入したCHO細胞または非形質移入のCHO細胞ではPCV-2モノクロ-ナルでの蛍光は検出されなかった。PCV-2ウィルスのためのポリクロ-ン性の血清特性でも同じ発現結果が得られた。この場合、フルオレセインのラベルが付いた坑ブタ免疫グロブリンG接合体を用いて特異的な蛍光を検出した。プラスミドpVR1012のみを形質移入したCHO細胞または非形質移入のCHO細胞ではこのポリクロ-ン性の血清での蛍光は検出されなかった。実施例8ブタへの裸DNAの予防接種81誕生1日目の子豚カーサリアンで得たブタのグループをプロトコルのDO一日目に分離単位に置いた。これらの子豚には2日にプラスミドの各種ワクチン溶液を筋肉内経路で予防注射した。ワクチン溶液は無菌生理的食塩水09NaClに原液を薄めて調製した。各子豚には下記を予防注射した:プラスミドpJP109単独プラスミドpJP109およびpJP111の混合物プラスミドpJP109およびpJP058の混合物プラスミドpJP109、pJP111およびpJP058の混合物ワクチン溶液は各プラスミドの500μgから成る。容積:ワクチン溶液は、2mlの全容積を筋肉内経路で注射する。予防接種1-2日では子豚の首の各側面に2×1ml注射した。二回のワクチン注射は2週の間隔で実行したすなわちプロトコルのD2とD14。抗原投与はビルレントなPCV-2菌株のプロトコルまたはウイルスのサスペンションを鼻噴投与したD21。その後、離乳後多臓器消耗症候群の特異的な臨床徴候を観察するために子豚を3週間モニターした。モニタ-した徴候は以下の通り:直腸温:最初の14日、その後は抗原投与後第3週まで毎日測定。重量:抗原投与直前と、抗原投与後3週間、1週間に1回子豚を秤量。ウイルス血症/抗体検査用血液サンプルの収集:D2、D14、D21、D28、D35、D42に血液サンプルを採取。検死:生き残ったブタは病変を捜すためにD42に屠殺し、病理解剖し、肝臓、リンパ節、脾臓、腎臓および胸腺から組織を取り、組織の障害を調べた。825~7周齢のブタ5~7周齢の子豚PCV-2ウィルスに対する母性特異的抗体はもはやないへ筋肉内の経路で予防注射した:プラスミドpJP109だけプラスミドpJP109およびpJP111の混合物プラスミドpJP109andpJP058の混合物プラスミドpJP109、pJP111およびpJP058の混合物これらのワクチンの投与量は実施例81と同じであるプラスミドにつき500μg。ワクチンの溶液は2mlの容積を筋肉内の経路で注射した首筋への2mlの単独投与。二回の予防接種は、21日の間隔DOおよびD21で実行される。抗原投与は、最後の予防接種D35から14日後に、ビルレントなPCV-2菌株のウイルスのサスペンションを筋内投与して行った。それから子豚の多臓器消耗症候群の特異的な臨床徴候を見るために各ブタを8週間モニタ-した。観測の全持期間は8週間であることを除いては、抗原投与の後の子豚の臨床監視結果は実施例81に記載されているそれに同一である。実施例9DMRIE-DOPEを用いて配合しDNAのブタの予防接種実施例8に記載の裸のプラスミドDNA溶液の代わりに、DMRIE-DOPEを用いたプラスミドDNAの溶液を使用することができる。DNA溶液実施例6の一種以上のプラスミドを含むを1mgml、09NaCl中に調製する。滅菌蒸留水中に適切な容積のDMRIE-DOPE生理食塩水を取り、075mMのDMRIE-DOPE溶液を調製する。プラスミドDNA-カチオン脂質複合体を、09NaCl中の1mgmlのDNA溶液を等量のDMRIE-DOPE溶液中に075mMに希釈して形成した。気泡を避けるためにカチオン脂質溶液を収容した小びんの内壁に沿って26G針を取付けた注射器を用いてDNA溶液を徐々に導入した。二つの溶液の混合後直ちに穏やかに攪拌する。最後に得られる組成物は0375mMのDMRIE-DOPEと500μgmlのDNAとから成る。上記の全ての操作で、全ての溶液は室温で使用するのが望ましい。DNADMRIE-DOPE複合体はブタへの免疫の30分前に室温で作った。それからブタに実施例81および82に記載の条件で予防注射する。実施例10子豚の予防接種とその結果第1実験:3~4匹の子豚caesarianから入手の0日をアイソレ-タに入れた。子豚には日2にpJP109単独またはpJP109pJP111プラスミド混合物を予防注射した。対照群には生理学溶液を投与した。各プラスミドは無菌の生理溶液NaCl09に250μgμl最終濃度で希釈した。2点で2ml容積を筋肉経路で注射した首の各側面に1mlづつ。ワクチンまたはプラセボの第2の注射を日14に投与した。DNAの予防接種は子豚に寛容で、予防接種の副作用の兆候は見られない。子豚には日21にPCV-2ウイルス性サスペンションを口鼻投与各外鼻孔の1mlして抗原投与した。抗原投与後、週に一度子豚の重さを量る。直腸温は日1721222427293134374144に記録する。日44の糞便のスワブは各子豚PCV-2排泄物から集めた。ウィルスを検出し、PCRで定量化した。日45に剖検を実行し、組織サンプルを集め、ウィルスを単離した。臨床症状グル-プ間で平均体重増加または平均体温に有意差はない。最終時にブタに見られた総所見は気管支リンパ節症である。剖検病変:病変は下記基準で記録した。0=見えるような大きなリンパ節はない。1=気管支リンパ節に限られる小さなリンパ節がある。2=気管支リンパ節に限られる大きなリンパ節がある。3=気管支submandibullarprescapsularおよびinguinallymph節へ延びた大きなリンパ節がある。stdは標準偏差の省略である。Nは各グル-プの動物の数である。N=各グル-プの子豚の数pJP109で免疫した4匹中3匹の子豚と、pJP109およびpJP111プラスミド混合物で免疫した3匹中田の1匹の子豚でリンパ節病変の低下が観測された。標準偏差stdの高い値であるので、この相違は有意でないp005。リンパ節組織中のウィルス負荷:気管支および腸間膜のリンパ節から調製したホモゲネ-ト組織で量的なウィルスre-isolationを実行した。示したデ-タはlog10変換後のホモゲネ-ト組織のウィルス力価に対応する。気管支のリンパ節が感染ウィルスを最も含むようである。pJP109またはpJP109pJP111プラスミド混合物で免疫した子豚では気管支および腸間膜リンパ節でのウイルス負荷の低下が観測される。この低下は有意であるプラスミド混合物の場合p005。第2実験14週齢の通常の子豚各グル-プ毎に8匹を二回の投与で免疫したpJP109と、pJPlllプラスミドDMRIEDOPE混合物とを日0および日20。各投与では2mlを筋注経路で耳の後の首側に注射した。ワクチン組成物は生理学溶液09NaClおよび0375mMDMRIEDOPEのmlに対して各プラスミド250μgを含む。対照群の子豚には生理学溶液を注射した。子豚には日32に口鼻経路で5mlのPCV-2ウイルス性サスペンションを抗原投与した各外鼻孔に注射器で1056TCID50mlタイタ-。子豚の臨床症状、へばり、おう吐、呼吸困難、咳、食欲不振、高体温直腸温をポスト抗原投与後、28日間毎日記録、体重減少子豚の重さを日32、40、46、53、60に計量をモニタ-した。徴候は下記基準で記録した:付属書11匹の子豚のための評点は、観測の異なる日に対応する評点の合計に等しい。日60に剖検を実行して、病変を下記基準で記録した:付属書21匹の子豚のための評点は観測される各器官に対応する評点の合計に等しい。組織サンプル、特にリンパ節を回収した。ウイルス排出を調べるために直腸スワブを回収した日32、39、42、46、49、53、56、60。臨床症状:免疫された子豚のグル-プで対照と比較して臨床的症状の有意な低下が観測される。対照群1はPMWS徴候で死んだが、予防注射をされた子豚グル-プは死ななかった。Kruskal-Wallisテストp001免疫された子豚グル-プにおいて抗原投与高体温の持続期間での有意な低下が観測されるp:005。予防注射をされたグル-プおよび対照グル-プの間で抗原投与後の毎日の体重増加に差はない。病変検死:免疫された子豚において対照と比較して病変の有意な差が特にリンパ節症p≦0005で観測される。リンパ節組織のウィルス負荷:腸間膜のおよび縦隔のリンパ節のウィルス負荷を免疫化学で求めた。以下の基準が、評点のために使われる:0蛍光なし1いくつかの器官スライド上にいくらかの蛍光が見える。2約1つの器官が蛍光。3全てが螢光性器官。ウィルス負荷の有意な差が免疫されたグル-プp05に観測される。ウイルス排出PCV-2排泄物のPCRで排出スワブを調べた。結果は、以下の基準で記録した:0=PCV-2なし1=PCV-2存在免疫されたグル-プの大便中の38にPCV-2が存在するのに対して、対照群の子豚の排出物では88。ウイルス性排出の持続期間は対照と比較して予防注射をされたグル-プでは大幅に減少している。本発明が実施例に限定されるものではなく、本発明の精神を逸脱しない限り、種々変更できるということは理解されなければならない。ANNEXE1:ANNEXE2:添付配列表は下記を表す:配列番号1:オリゴヌクレオチドJP779配列番号2:オリゴヌクレオチドJP780配列番号3:オリゴヌクレオチドJP781配列番号4:オリゴヌクレオチドJP782配列番号5:オリゴヌクレオチドJP783配列番号6:オリゴヌクレオチドJP784配列番号7:オリゴヌクレオチドJP785配列番号8:オリゴヌクレオチドJP786配列番号9:オリゴヌクレオチドRG972配列番号10:オリゴヌクレオチドRG973