少なくとも50×106細胞/mLの生存細胞密度および少なくとも5g/Lの細胞に形質移入された少なくとも1つの遺伝子によってコードされる所望の生物学的物質の濃度を有する哺乳類細胞を含んでなる細胞培養物。所望の生物学的物質の濃度が少なくとも10g/Lである、請求項1に記載の細胞培養物。所望の生物学的物質の濃度が少なくとも11g/Lである、請求項1に記載の細胞培養物。哺乳類細胞がE1-不死化HER細胞である、請求項1~3のいずれか一項に記載の細胞培養物。哺乳類細胞がPER.C6細胞である、請求項1~3のいずれか一項に記載の細胞培養物。[実施例][実施例1:バッチ工程、流加工程、および本発明に従った工程間の比較]この実施例では、本発明に従った方法の性能をバッチおよび流加工程と比較した。図1は、工程Aバッチ、B流加、およびC1本発明の工程について、プロセス時間X日間に対してプロットした生存細胞密度Y106.ml-1を示す。図2は、工程Aバッチ、B流加、およびC1本発明の工程について、反応器Z内のIgG濃度工程AのIgG濃度と比較したをプロセス時間X日間に対して示す。全ての発酵は、ザルトリウスバイオスタットBiostatBコントローラーを使用して、温度を36.5°Cに、pHを7.2~6.8の間に、およびDOを50空気飽和率に調節して、200rpmで実施した。同一のIgG産生PER.C6細胞系国際公開第2004/099396号パンフレット参照を全ての実験で使用した。[バッチ工程A]ザルトリウスB5容器内で、4Lの作業容積でバッチ工程を実行した。6mMのL-グルタミンglutaminを添加したSAFCからのVPRO培地に細胞を3×10e5細胞/mLで接種し、続いて17日間培養した。[流加工程B]ザルトリウスB5容器内で、4Lの作業容積で流加工程を実行した。6mMのL-グルタミンGlutaminを添加したSAFCからのVPRO培地に細胞を3×10e5細胞/mLで接種した。培養中にグルコースおよびグルタミンを添加して、上の濃度をそれぞれ15mMおよび1mMに保った。5日目からアミノ酸およびペプチドを添加して、消費されたアミノ酸を補給した。[本発明の方法C1]2Lアプリコン容器内で、本発明の工程を実施した。RefineTechnologyからのATF-2システムを用いて、ATFフローモードで操作される、ゼネラルエレクトリックGEから得られた分画分子量MWCO100kDaの中空繊維膜を使用して、細胞およびIgG生成物を保持した。6mMのL-グルタミンGlutaminを添加したSAFCからのVPRO培地中で、3×10e5細胞/mLで培養を開始した。0.05~0.2nL/細胞/日の間の比流速SFRを使用して、懸濁細胞培養物を通して、6mMのL-グルタミンGlutaminを添加したSAFCからのVPRO培地を灌流した。得られた最大生成物濃度は1.4g/Lであった。下の図1および図2から分かるように、本発明の工程は、言及される培養様式と比較して、より短時間で、生存細胞密度の増大および生成物濃度の増大をもたらした。[実施例2:バッチ工程、流加工程、および本発明に従った工程間の比較]この実施例では、本発明に従った方法を再度バッチおよび流加工程と比較し、工程C2ではCO2圧力を制御して50kDa分離システムを使用した。図3は、工程Aバッチ、B流加、C2本発明の工程について、プロセス時間X日間に対してプロットした生存細胞密度Y106.ml-1を示す。図4は、工程Aバッチ、B流加、およびC2本発明の工程について、反応器Z内のIgG濃度工程AのIgG濃度と比較したをプロセス時間X日間に対して示す。全ての発酵は、ザルトリウスバイオスタットBコントローラーを使用して、温度を36.5°Cに、pHを7.2~6.8の間に、およびDOを50空気飽和率に調節して、200rpmで実施した。同一のIgGおよそ150kDa産生PER.C6細胞系国際公開第2004/099396号パンフレット参照を全ての実験で使用した。[バッチ工程A]ザルトリウスB5容器内で、4Lの作業容積でバッチ工程を実行した。6mMのL-グルタミンglutaminを添加したSAFCからのVPRO培地に細胞を3.105細胞.mL-1で接種し、続いて17日間培養した。[流加工程B]ザルトリウスB5容器内で、4Lの作業容積で流加工程を実行した。6mMのL-グルタミンGlutaminを添加したSAFCからのVPRO培地に細胞を3.105細胞.mL-1で接種した。培養中にグルコースおよびグルタミンを添加して、上の濃度をそれぞれ15mMおよび1mMに保った。5日目からアミノ酸およびペプチドを添加して、消費されたアミノ酸を補給した。[本発明の工程C2]2Lアプリコン容器内で、本発明の工程を実施した。RefineTechnologyからのATF-2システムを用いて、ATFフローモード内で操作される、GEからの分画分子量MWCO50kDaの中空繊維膜を使用して、細胞およびIgG生成物を保持した。6mMのL-グルタミンGlutaminを添加したSAFCからのVPRO培地中で、3×10e5細胞/mLで培養を開始した。0.05~0.2nL.細胞-1.日-1の間のSPRを使用して、懸濁細胞培養物を通して、6mMのL-グルタミンGlutaminを添加したSAFCからのVPRO培地を灌流した。CO2圧力を15未満に制御した。[結果]図3および図4から分かるように、本発明に従った工程は、等しいかそれ以下の時間でバッチ時間の100;流加時間の81、顕著な生存細胞密度の増大および生成物濃度の増大をもたらした2415×バッチ収率;690×流加収率。本発明の工程のg.L-1.日-1の総体的生産性増大は、g.L-1.日-1のバッチ生産性の23.9倍、およびg.L-1.日-1の流加生産性の8.5倍である。本発明の工程C2では、11.1gの生成物/Lが生じた。細胞密度が非常に高くても、保持装置の目詰まりは17日間の間に起きなかった。[実施例3:バッチ工程、流加工程、および本発明に従った工程間の比較]この実施例では、細胞培養物除去を伴う本発明に従った方法の性能を再度バッチおよび流加工程と比較する。工程C3では細胞培養物が除去された。図5は、工程Aバッチ、B流加、C3本発明の工程について、プロセス時間X日間に対してプロットした生存細胞密度Y106.ml-1を示す。図6は、反応器Z中のIgG濃度工程A3のIgG濃度と比較したを、工程A、およびC3のプロセス時間X日間に対して示す。図7は、工程A、BおよびC3について、プロセス時間X日間に対してプロットした累積収率Q工程Aの反応器容積1Lあたり収率と比較したを示す。全ての発酵は、ザルトリウスバイオスタットBコントローラーを使用して、温度を36.5°Cに、pHを7.2~6.8の間に、およびDOを50空気飽和率に調節して、200rpmで実施した。同一のIgGおよそ150kDa産生PER.C6細胞系国際公開第2004/099396号パンフレット参照を全ての実験で使用した。[バッチ工程A]ザルトリウスB5容器内で、4Lの作業容積でバッチ工程を実行した。6mMのL-グルタミンglutaminを添加したSAFCからのVPRO培地に細胞を3.105細胞.mL-1で接種し、続いて17日間培養した。[流加工程B]ザルトリウスB5容器内で、4Lの作業容積で流加工程を実行した。6mMのL-グルタミンGlutaminを添加したSAFCからのVPRO培地に細胞を3.105細胞.mL-1で接種した。培養中にグルコースおよびグルタミンを添加して、上の濃度をそれぞれ15mMおよび1mMに保った。5日目からアミノ酸およびペプチドを添加して、消費されたアミノ酸を補給した。[本発明の工程C3]2Lアプリコン容器内で、本発明の工程を実施した。RefineTechnologyからのATF-2システムを用いて、ATFフローモード内で操作される、GEからの分画分子量MWCO100kDaの中空繊維膜を使用して、細胞およびIgG生成物を保持した。6mMのL-グルタミンGlutaminを添加したSAFCからのVPRO培地中で、3×10e5細胞/mLで培養を開始した。0.05~0.2nL.細胞-1.日-1の間のSPRを使用して、懸濁細胞培養物を通して、6mMのL-グルタミンGlutaminを添加したSAFCからのVPRO培地を灌流した。10.106細胞.mL-1を超えたら1日あたり作業容積の10、生存細胞密度が30.106細胞.mL-1を超えたらそれ以降は1日あたり作業容積の30の細胞培養を除去する。[結果]図5から分かるように、本発明の工程によってより高い生存細胞密度が迅速に達成される。さらに細胞密度が非常に高くても保持装置の目詰まりが起こらなかったため、工程C3は40日間近い期間にわたり作動を維持されたので、図5はまた、本発明の工程によって細胞生存度がより長く維持できることも示す。図6は、本発明の方法では、生成物濃度がバッチ工程の生成物濃度よりもはるかに高いことを示す。生成物を含有する生成物流は、バッチ工程Aの最終濃度のおよそ200~250で工程C3から収集された。図7は、ほとんどの生成物が本発明の方法によって形成され、本発明の工程がバッチ工程Aまたは流加工程Bよりも長く維持できることを示す。17日目には、工程C3の累積収率はバッチ工程A3の累積収率の8.1倍であり、流加工程Bの累積収率の2.1倍である。また17日目には、バッチ工程が終了した。21日目には、工程C3の累積収率は流加工程Bの累積収率の3.0倍である。21日目には、流加工程が終了した。39日後には、工程C3の総累積収率はバッチ工程Aの累積収率の25倍、および流加工程Bの収率の6倍である。この実験から、本発明に従った方法における所望の生体物質の総収率は、細胞密度が特定の高レベルを超えた場合、細胞培養物をブリードすることでさらに改善できると結論できる。[実施例4:CHO細胞の培養およびそれによる生成]この実施例では、IgG産生CHO細胞系に、本発明に従った方法を実施して温度低下を含めて細胞生育を低下させた。図8は、C4本発明の工程について、プロセス時間X日間に対してプロットした細胞数Y106.ml-1を示す。図9は、工程C4本発明の工程の一実施態様について、反応器Z内のIgG濃度最大達成IgG濃度と比較したをプロセス時間X日間に対して示す。発酵は、ザルトリウスバイオスタットBコントローラーを使用して、温度を36.5°Cに、pHを7.1~6.9の間に、およびDOを40空気飽和率に調節して、100rpmで実施した。温度は5日目に32°Cに低下させた。[本発明の工程C4]2Lアプリコン容器内で、本発明の工程を実施した。細胞および生成物保持装置は、RefineTechnologyからのATF-2システムを用いて、ATFフローモードで操作されるゼネラルエレクトリックからの50kD分画分子量MWCO中空繊維膜である。ハイクローンからのMTCM-49培地中で、5.106細胞.mL-1で培養を開始した。0.1~0.4nL.細胞-1.日-1の間のSPRを使用して、懸濁細胞培養物を通して培地を灌流した。CO2圧力は15未満に制御された。[結果]データは、本発明の工程が、タンパク質産生CHO細胞系を使用した場合にも機能することを示す。達成された細胞密度および生成物濃度は、バッチ培養と比較して増大する。データはまた、本発明に従った方法で例えば温度低下によって細胞生育を抑止できる一方、培養システム中の生成物蓄積が継続することも示す。[実施例5:骨髄腫細胞系で実施された本発明の工程]本発明に従った方法はまた、骨髄腫細胞系にも適用できる。この目的でザルトリウスバイオスタットBコントローラーを使用して、温度を36.5°Cに、pHを7.2~6.8の間に、およびDOを40空気飽和率に調節して、100rpmで発酵を実施する。5Lザルトリウス容器内のハイクローンからのSFM4Mab培地に、骨髄腫細胞を3×10e5細胞/mlで接種して細胞培養を開始する。細胞および生成物保持装置は、RefineTechnologyからのATF-4システムを用いて、ATFフローモード内で操作されるゼネラルエレクトリックからの30kD分画分子量MWCO中空繊維膜である。0.1~0.4nL.細胞-1.日-1の間のSPRを使用し、懸濁細胞培養物を通して、ハイクローンからのSFM4Mab培地を灌流させる。CO2圧力は15未満に制御される。[実施例6:MDCK細胞系で実施された本発明の工程]本発明に従った方法はまた、懸濁状態の形質転換MDCK細胞系に適用できる。この目的でザルトリウスバイオスタットBコントローラーを使用して、温度を36.5°Cに、pHを7.2~6.8の間に、およびDOを40空気飽和率に調節して、100rpmで発酵を実施する。5Lザルトリウス容器内のインビトロジェンからのVP-SFM培地に、形質転換MDCK細胞を3×10e5細胞/mlで接種して細胞培養を開始する。細胞および生成物保持装置は、RefineTechnologyからのATF-4システムを用いて、ATFフローモード内で操作されるゼネラルエレクトリックからの30kD分画分子量MWCO中空繊維膜である。0.1~0.4nL.細胞-1.日-1の間のSPRを使用し、懸濁細胞培養物を通して、インビトロジェンからのVP-SFM培地を灌流させる。CO2圧力は15未満に制御される。