"粒子であって、a複数の疎水性部分;b複数の親水性-疎水性ポリマー;c任意に、複数の陽イオン性部分;およびd複数の核酸製剤であって、前記複数の核酸製剤のうちの少なくとも一部分が、i疎水性部分、例えばaの疎水性ポリマーまたはbの親水性-疎水性ポリマーのいずれかと共有結合されるか、あるいはiiaの疎水性部分またはbの親水性-疎水性ポリマーのいずれかと共有結合される核酸と二重鎖を形成する複数の核酸製剤を含む、粒子。複数の陽イオン性部分を含む請求項1記載の粒子。前記疎水性部分が疎水性ポリマーである請求項1記載の粒子。前記疎水性部分が疎水性ポリマーであり、そしてaの疎水性ポリマーの少なくとも一部分がdの核酸製剤と、各々共有結合される請求項1記載の粒子。dの核酸製剤の少なくとも一部分が、リンカーを介して疎水性ポリマーと共有結合される請求項4記載の粒子。aの疎水性ポリマーの少なくとも一部分が、核酸製剤の5’位置を介してdの核酸製剤と各々共有結合される請求項4記載の粒子。粒子であって、a複数の核酸製剤-ポリマー複合体であって、その各々が、i疎水性ポリマーと結合されるか、あるいはii疎水性ポリマーと共有結合される核酸と二重鎖を形成する核酸製剤を含む核酸製剤-ポリマー複合体;b複数の親水性-疎水性ポリマー;およびc任意に、複数の陽イオン性部分を含む、粒子。複数の陽イオン性部分を含む請求項7記載の粒子。疎水性ポリマーをさらに含む請求項7記載の粒子であって、前記疎水性ポリマーが核酸製剤と結合されない粒子。核酸製剤が、リンカーを介して疎水性ポリマーと共有結合される請求項7記載の粒子。粒子であって、a複数の疎水性部分;b複数の核酸製剤-親水性-疎水性ポリマー複合体であって、その各々の核酸製剤が、i前記親水性-疎水性ポリマーと共有結合されるか、またはii親水性-疎水性ポリマーと共有結合される核酸と二重鎖を形成する核酸製剤-親水性-疎水性ポリマー複合体;およびc任意に、複数の陽イオン性部分を含む、粒子。複数の陽イオン性部分を含む請求項11記載の粒子。粒子であって、a複数の疎水性ポリマー;b複数の親水性-疎水性ポリマー;c複数の陽イオン性部分であって、その少なくとも一部分がaの疎水性ポリマーまたはbの親水性-疎水性ポリマーのいずれかと結合される複数の陽イオン部分;およびd複数の核酸製剤を含む、粒子。aの前記複数の疎水性ポリマーの少なくとも一部分がcの陽イオン部分またはdの核酸製剤と共有結合されない請求項13記載の粒子。aの前記複数の疎水性ポリマーの少なくとも一部分がcの陽イオン部分と各々共有結合される請求項13記載の粒子。前記陽イオン性部分がスペルミンまたはテトラメチル化スペルミンである請求項13記載の粒子。粒子であって、a複数の疎水性ポリマー;b任意に、複数の親水性-疎水性ポリマー;c複数の陽イオン性部分;およびd複数の核酸製剤であって、その少なくとも一部分が親水性ポリマーと共有結合されるか、または親水性ポリマーと共有結合される核酸と二重鎖を形成する複数の核酸製剤を含む、粒子。前記核酸製剤が親水性ポリマーと共有結合される請求項17記載の粒子。前記親水性ポリマーがポリエチレングリコールPEGである請求項17記載の粒子。前記親水性ポリマーが脂質と共有結合される請求項17記載の粒子。疎水性-親水性ポリマーを実質的に有さない請求項17記載の粒子。粒子であって、a複数の疎水性ポリマー;b複数の親水性-疎水性ポリマー;およびc複数の核酸製剤-陽イオン性ポリマー複合体を含む、粒子。前記陽イオン性ポリマーがPVAである請求項22記載の粒子。前記核酸製剤-陽イオン性ポリマー複合体がsiRNA-陽イオン性PVA複合体である請求項22記載の粒子。粒子であって、a複数の疎水性ポリマー;b複数の親水性-疎水性ポリマー;c任意に、複数の陽イオン性部分;およびd複数の核酸製剤を含む粒子であって、cの陽イオン性部分の大部およびdの核酸製剤の大部が疎水性ポリマーまたは親水性-疎水性ポリマーと共有結合されない、粒子。前記核酸製剤または陽イオン性部分が粒子中に埋め込まれる請求項25記載の粒子。複数の陽イオン性部分を含む請求項25記載の粒子。前記陽イオン性部分が陽イオン性ポリマーである請求項27記載の粒子。前記疎水性部分または疎水性ポリマーがPLGAである請求項1~28のいずれかに記載の粒子。前記PLGAが反応性基によって末端で修飾される請求項29記載の粒子。前記親水性-疎水性ポリマーがPEG-PLGAである請求項1~20および22~29のいずれかに記載の粒子。前記陽イオン性部分が少なくとも1つの第一級、第二級、第三級または第四級アミンを含む請求項1~31のいずれかに記載の粒子。前記核酸製剤がsiRNAである請求項1~32のいずれかに記載の粒子。界面活性剤をさらに含む請求項1~33のいずれかに記載の粒子。約-20mV~約20mVのゼータ電位を有する請求項1~34のいずれかに記載の粒子。請求項1~35のいずれかに記載の複数の粒子を含む組成物。薬学的組成物である請求項36記載の組成物。前記粒子が200nm未満のDv90を有する請求項36記載の組成物。請求項1~35のいずれかに記載の複数の粒子または請求項36~39のいずれかに記載の組成物を含むキット。請求項1~35のいずれかに記載の複数の粒子または請求項36~39のいずれかに記載の組成物を含む単一投薬単位。障害を有する対象の治療方法であって、有効量の請求項1~35のいずれかに記載の粒子または請求項36~39のいずれかに記載の組成物を前記対象に投与し、それにより対象を治療することを包含する方法。疎水性ポリマーと共有結合される核酸製剤を含む核酸製剤-疎水性ポリマー複合体であって、前記核酸製剤が、センス鎖の5’末端を介してポリマーに結合されるsaRNAである複合体。前記核酸製剤が、リンカーを介して疎水性ポリマーと共有結合される請求項42記載の複合体。親水性-疎水性ポリマーと共有結合される核酸製剤を含む核酸製剤-親水性-疎水性ポリマー複合体。前記核酸製剤が前記親水性-疎水性ポリマーの親水性部分と結合される請求項44記載の複合体。前記核酸製剤が前記親水性-疎水性ポリマーの疎水性部分と結合される請求項44記載の複合体。核酸製剤を含む粒子の製造方法であって、a核酸製剤-疎水性ポリマー複合体ここで、各核酸製剤-疎水性ポリマー複合体は、疎水性ポリマーと共有結合される核酸製剤を含み、前記核酸製剤-疎水性ポリマー複合体は陽イオン性部分と会合される;b複数の親水性-疎水性ポリマー;およびc複数の疎水性ポリマーを、粒子の形成を可能にする条件下で極性溶媒中で、合わせ、それにより粒子を形成することを包含する方法。対象に投与される場合、a粒子または複合体以外の処方物中で対象に投与される核酸製剤を用いて観察される標的遺伝子の発現における低減より;あるいはb核酸製剤または他の治療薬の投与の非存在下での標的遺伝子の発現より、少なくとも10、20、50、75、80、90、100、200または500大きい標的遺伝子の発現における低減を生じる請求項36~39のいずれかに記載の組成物。請求項42~46のいずれかに記載の複合体、請求項1~29のいずれかに記載の粒子、あるいは請求項36~39のいずれかに記載の組成物の保存方法であって、a容器中に前記複合体、粒子または組成物を提供すること;b前記複合体、粒子または組成物を保存すること;およびc前記容器を第二の場所に移動するかまたは前記複合体、粒子または組成物の全部またはアリコートを前記容器から取り出すことを包含する方法。保存される前記複合体、粒子または組成物が再構成処方物である請求項49記載の方法。発明の要旨本発明に記載されるのは、例えば、核酸剤の送達において用いられ得る、粒子である。典型的には、この粒子は、核酸剤、および少なくともカチオン性部分、疎水性部分、例えば、ポリマー、または親水性-疎水性ポリマーのうちの1つを含む。いくつかの実施形態では、この粒子は、核酸剤およびカチオン性部分、ならびに少なくとも疎水性部分、例えば、ポリマー、または親水性-疎水性ポリマーのうちの1つを含む。いくつかの実施形態では、この粒子は、核酸剤、カチオン性部分、および疎水性部分、例えば、ポリマー、および親水性-疎水性ポリマーの両方を含む。他の実施形態では、この粒子は、核酸剤、カチオン性部分、およびi疎水性部分、例えば、ポリマー、またはii親水性-疎水性ポリマーのいずれかを含み、この一方が存在する場合、他方は実質的に存在しないか、または2つのうち一方が、例えば、粒子の量で決定した場合、または粒子を作製するために用いた材料の量で決定した場合、他方の5、2または1重量未満で存在する。ある実施形態では、疎水性部分例えば、疎水性ポリマー、親水性-疎水性ポリマー、カチオン性部分、または核酸剤の1つ以上が、別の部分、例えば、上でまたは本明細書の他のいずれの部分にも列挙される別の部分に結合されてもよい。例えば、ある実施形態では、カチオン性部分および/または核酸剤は、疎水性部分例えば、疎水性ポリマー、および/または親水性-疎水性ポリマーに結合されてもよい。この粒子はまた、他の構成要素、例えば、界面活性剤または親水性ポリマー例えば、親水性ポリマー、例えばPEGであり、これは脂質とさらに結合され得るを含んでもよい。また本明細書では、複合体、例えば、核酸剤-ポリマーの複合体、この粒子または複合体を含む混合物、組成物および剤形、この粒子を用いる方法例えば、障害を治療するため、この核酸剤-ポリマーの複合体および粒子を備えているキット、核酸剤-ポリマーの複合体および粒子を作製する方法、この粒子を保管する方法、ならびにこの粒子を分析する方法も記載される。本明細書に開示される粒子は、核酸剤、例えば、siRNAまたはRNAiを促進する剤の送達を提供する。従って、一態様では、本開示は、以下を含む粒子を特徴とする粒子である:a複数の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマー;b複数の親水性-疎水性ポリマー;c必要に応じて、複数のカチオン性部分;およびd複数の核酸剤であって、ここでこの複数の核酸剤の少なくとも一部がi疎水性部分、例えば、aの疎水性ポリマーもしくはbの親水性-疎水性ポリマーのいずれかに共有結合されるか、またはii疎水性部分、例えば、aの疎水性ポリマーもしくはbの親水性-疎水性ポリマーのいずれかに対して共有結合される核酸との二重鎖例えば、ヘテロ二重鎖を形成する、核酸剤。いくつかの実施形態では、この粒子は、カチオン性部分を含む。ある実施形態では、この粒子は、ナノ粒子である。いくつかの実施形態では、この疎水性部分は、疎水性ポリマーである。いくつかの実施形態では、この疎水性部分は、ポリマーではない。いくつかの実施形態では、aの疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーの少なくとも一部は、核酸剤に対して共有結合されていない。いくつかの実施形態では、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部は、カチオン性部分に対して共有結合されていない。いくつかの実施形態では、cのカチオン性部分の実質的に全ては、疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーに共有結合されておらず、bのポリマーに対する共有結合はない。いくつかの実施形態では、複数の疎水性ポリマーの少なくとも一部は、cのカチオン性部分またはdの核酸剤のうち1つまたは両方への共有結合がない。いくつかの実施形態では、aの疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーの少なくとも一部は、dの核酸剤に対して各々共有結合される。いくつかの実施形態では、aの疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーの少なくとも一部は、dの単一の核酸剤に対して各々共有結合される。いくつかの実施形態では、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、dの複数の核酸剤に対して共有結合される。いくつかの実施形態では、aの疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、dの核酸剤に対して例えば、疎水性ポリマーのカルボキシ末端またはヒドロキシル末端で直接共有結合される例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしで。いくつかの実施形態では、dの核酸剤の少なくとも一部は、リンカーを介して疎水性ポリマーに共有結合される。例示的なリンカーとしては、クリックケミストリーを用いて形成される結合を含むリンカー例えば、WO2006/115547に記載、およびアミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、オキシム、カルバミン酸塩、炭酸塩、シリルエーテル、またはトリアゾールを含むリンカー例えば、アミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、またはトリアゾールが挙げられる。いくつかの実施形態では、リンカーは、生理学的条件下で切断可能な結合のような官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で切断可能な結合のような複数の官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、官能基、例えば、リンカーの末端でこのリンカーを通じて連結される第一または第二の部分のいずれに対しても直接結合されないが、リンカーに対して内部である、本明細書に記載の結合または官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で加水分解性であるか、このリンカーは、生理学的条件下で酵素的に切断可能であるか、またはこのリンカーは、生理学的条件下で還元され得るジフルフィドを含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下では切断されず、例えば、このリンカーは、核酸剤が活性であるために切断される必要のない十分な長さであり、例えば、このリンカーの長さは、少なくとも約20Å例えば、少なくとも約24Åである。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、疎水性ポリマーに結合される核酸と二重鎖を形成する。例えば、この核酸剤例えば、siRNAまたはRNAiを促進する剤は、疎水性ポリマーに結合されるDNAと二重鎖例えば、ヘテロ二重鎖を形成し得る。いくつかの実施形態では、aの疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、核酸剤の3’および/または5’位置を通じてdの核酸剤に共有結合される。いくつかの実施形態では、aの疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーの少なくとも一部は、各々が、dの核酸剤の2’位置を通じてその核酸剤に共有結合される。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、dの核酸剤に対して共有結合される例えば、その疎水性ポリマーのカルボキシ末端もしくはヒドロキシル末端で、または親水性ポリマーの末端で。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、dの単一の核酸剤に対して共有結合される。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、dの複数の核酸剤に対して共有結合される。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、dの核酸剤に対して例えば、その疎水性ポリマーのカルボキシ末端もしくはヒドロキシル末端で、または親水性ポリマーの末端で直接共有結合される例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしに。いくつかの実施形態では、核酸剤の少なくとも一部は各々が、リンカーを介して親水性-疎水性ポリマーに対して共有結合される。例示的なリンカーとしては、クリックケミストリーを用いて形成される結合を含むリンカー例えば、WO2006/115547に記載およびアミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、オキシム、カルバミン酸塩、炭酸塩、シリルエーテル、またはトリアゾールを含むリンカー例えば、アミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、またはトリアゾールが挙げられる。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で切断可能な結合などの官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で切断可能な結合のような複数の官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーとしては、官能基、例えば、リンカーの末端でこのリンカーを通じて連結される第一または第二の部分のいずれに対しても直接結合されないが、リンカーに対して内部である、本明細書に記載の結合または官能基が挙げられる。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で加水分解性であるか、このリンカーは、生理学的条件下で酵素的に切断可能であるか、またはこのリンカーは、生理学的条件下で還元され得るジフルフィドを含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下では切断されず、例えば、このリンカーは、核酸剤が活性であるために切断される必要のない十分な長さであり、例えば、このリンカーの長さは、少なくとも約20Å例えば、少なくとも約24Åである。いくつかの実施形態では、核酸剤が疎水性ポリマーに結合される核酸と二重鎖を形成する。例えば、核酸剤例えば、RNAiが疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーに結合されるDNAと二重鎖例えば、ヘテロ二重鎖を形成し得る。いくつかの実施形態では、核酸剤が親水性-疎水性ポリマーに結合される核酸と二重鎖を形成する。例えば、核酸剤例えば、RNAiは、疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーに結合されたDNAと二重鎖例えば、ヘテロ二重鎖を形成し得る。いくつかの実施形態では、bの複数の親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、核酸剤の3’および/または5’位置を通じてその核酸剤に共有結合される。いくつかの実施形態では、bの複数の親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、核酸剤の2’位置を通じてこの核酸剤に対して共有結合される。いくつかの実施形態では、aの疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、cのカチオン性部分、例えば、複数の疎水性部分の少なくとも一部に対して共有結合され、例えば、aの疎水性ポリマーは各々が、cのカチオン性部分に対して直接共有結合される例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしで。いくつかの実施形態では、aの複数の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、cのカチオン性部分に対してアミド、エステル、チオエーテル、またはエーテルを介して例えば、疎水性ポリマーのカルボキシ末端で共有結合される。いくつかの実施形態では、aの複数の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、cのカチオン性部分に対してその疎水性ポリマーの末端で共有結合される。いくつかの実施形態では、cの単一のカチオン性部分は、aの単一の疎水性ポリマーに対して例えば、その疎水性ポリマーの末端で共有結合される。いくつかの実施形態では、aの単一の疎水性ポリマーは、cの複数のカチオン性部分に対して共有結合される。いくつかの実施形態では、cの複数のカチオン性部分の少なくとも一部は各々が、aの疎水性ポリマーの骨格に対して結合される。いくつかの実施形態では、aの複数の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、cのカチオン性部分に対して共有結合され、およびaの複数の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、dの核酸剤に対して共有結合される。いくつかの実施形態では、この粒子は、cのカチオン性部分を含み、かつさらに複数の追加のカチオン性部分を含み、ここでこの追加のカチオン性部分は、cのカチオン性部分とは異なる。この追加のカチオン性部分は、例えば、カチオン性ポリマー例えば、PEI、カチオン性PVA、ポリヒスチジン、ポリリジン、またはポリ2-ジメチルアミノエチルメタクリレートであってもよい。いくつかの実施形態では、複数の追加のカチオン性部分の少なくとも一部各々が、aの複数の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーの少なくとも一部および/またはbの複数の親水性-疎水性ポリマーに結合される。いくつかの実施形態では、複数の追加のカチオン性部分の少なくとも一部は、aの複数の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーの少なくとも一部に結合される。いくつかの実施形態では、この粒子はさらに、複数の追加の核酸剤を含み、ここでこの追加の核酸剤は、dの複数の核酸剤とは、例えば、構造において、例えば、配列、長さ、オーバーハングの長さ、または核酸剤の誘導体化例えば、糖または塩基の修飾が異なる。いくつかの実施形態では、複数の追加の核酸剤の少なくとも一部は、aの複数の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーおよび/またはbの複数の親水性-疎水性ポリマーのいずれかの少なくとも一部に結合される。いくつかの実施形態では、複数の追加の核酸剤の少なくとも一部は、aの複数の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーの少なくとも一部に結合される。本明細書に開示される粒子は、核酸剤、例えば、siRNAのようなRNAiを促進する剤の送達を提供し、ここでこの核酸剤は、疎水性ポリマーに結合されるか、または疎水性ポリマーに結合される核酸と二重鎖を形成する。従って、別の態様では、本開示は、粒子であって:a複数の核酸剤-ポリマーの複合体であって、その各々が核酸剤を含み、この核酸剤が、i疎水性ポリマーに結合されるか、またはii疎水性ポリマーに共有結合される核酸と二重鎖例えば、ヘテロ二重鎖を形成する、複合体と;b複数の親水性-疎水性ポリマーと;c必要に応じて、複数のカチオン性部分と;を含む粒子を特徴とする。いくつかの実施形態では、粒子は、カチオン性部分を含む。ある実施形態では、この粒子は、ナノ粒子である。いくつかの実施形態では、この粒子はさらに、疎水性ポリマーを含み、例えば、ここで、この疎水性ポリマーは、核酸剤のような核酸に結合されていない。いくつかの実施形態では、この粒子はcの複数のカチオン性部分を含み、その少なくとも一部は各々が、疎水性ポリマー例えば、核酸剤のような核酸に結合されていない疎水性ポリマーに共有結合されている。例示的なカチオン性部分-疎水性ポリマーの複合体としては、N1-PLGA-N5、N10、N14-テトラメチル化-スペルミンが挙げられる。いくつかの実施形態では、この粒子は、cの複数のカチオン性部分を含み、かつbの複数の親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、cのカチオン性部分に共有結合されている。いくつかの実施形態では、cの複数のカチオン性部分の少なくとも一部は各々が、bの親水性-疎水性ポリマーの疎水性部分に共有結合される例えば、アミド、エステルまたはエーテルのような本明細書に記載されるリンカーを通して。いくつかの実施形態では、cの複数のカチオン性部分の少なくとも一部は各々が、bの親水性-疎水性ポリマーの親水性部分に対して共有結合される。いくつかの実施形態では、核酸剤は、リンカーを介して疎水性ポリマーに対して共有結合される。例示的なリンカーとしては、クリックケミストリーを用いて形成される結合を含むリンカー例えば、WO2006/115547に記載およびアミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、オキシム、カルバミン酸塩、炭酸塩、シリルエーテル、またはトリアゾールを含むリンカー例えば、アミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、またはトリアゾールが挙げられる。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で切断可能な結合などの官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で切断可能な結合のような複数の官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーとしては、官能基、例えば、リンカーの末端でこのリンカーを通じて連結される第一または第二の部分のいずれに対しても直接結合されないが、リンカーに対して内部である、本明細書に記載の結合または官能基が挙げられる。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で加水分解性であるか、このリンカーは、生理学的条件下で酵素的に切断可能であるか、またはこのリンカーは、生理学的条件下で還元され得るジフルフィドを含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下では切断されず、例えば、このリンカーは、核酸剤が活性であるために切断される必要のない十分な長さであり、例えば、このリンカーの長さは、少なくとも約20Å例えば、少なくとも約24Åである。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、疎水性ポリマーに結合される核酸と二重鎖を形成する。例えば、この核酸剤例えば、siRNAまたはRNAiを促進する剤は、疎水性ポリマーに結合される核酸例えば、RNAまたはDNAと二重鎖例えば、ホモ二重鎖またはヘテロ二重鎖を形成し得る。いくつかの実施形態では、この粒子は、cのカチオン性部分を含み、かつさらに複数の追加のカチオン性部分を含み、ここでこの追加のカチオン性部分は、cの複数のカチオン性部分とは、例えば、分子量、粘度、荷電または構造が異なる。いくつかの実施形態では、複数の追加のカチオン性部分の少なくとも一部は、疎水性ポリマー、および/またはbの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部に結合される。いくつかの実施形態では、複数の追加のカチオン性部分の少なくとも一部は、疎水性ポリマーに結合される。いくつかの実施形態では、この粒子はさらに、複数の追加の核酸剤を含み、ここでこの追加の核酸剤は、aの複数の核酸剤とは、例えば、構造において、例えば、配列、長さ、オーバーハングの長さ、または核酸剤の誘導体化例えば、糖または塩基の修飾が異なる。いくつかの実施形態では、複数の追加の核酸剤の少なくとも一部は、疎水性ポリマーおよび/またはbの複数の親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部に結合される。いくつかの実施形態では、複数の追加の核酸剤の少なくとも一部は、疎水性ポリマーに結合される。本発明の粒子は、親水性-疎水性ポリマーに対して、核酸剤、例えば、siRNAまたはRNAiを促進する剤の結合を提供する。疎水性部分およびカチオン性部分もまた、例えば、下記のように含まれる。従って、別の態様では、本発明は、粒子であって:a複数の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーと;b複数の核酸剤-親水性-疎水性ポリマーの複合体であって、ここで、この複数の核酸剤-親水性-疎水性ポリマーの複合体の核酸剤が、i親水性-疎水性ポリマーに共有結合されるか、またはii親水性-疎水性ポリマーに共有結合される核酸との二重鎖例えば、ヘテロ二重鎖を形成する、複合体と;c必要に応じて、複数のカチオン性部分と;を含む粒子を特徴とする。いくつかの実施形態では、この粒子は、複数のカチオン性部分を含む。ある実施形態では、この粒子は、ナノ粒子である。いくつかの実施形態では、この粒子はまた、複数の親水性-疎水性ポリマーを含み、ここでこの親水性-疎水性ポリマーは、核酸剤のような核酸に共有結合されない。いくつかの実施形態では、この粒子は、cの複数のカチオン性部分を含み、そしてcの複数のカチオン性部分の少なくとも一部は、親水性-疎水性ポリマーに対して共有結合され、例えば、cのカチオン性部分は、核酸剤に結合されていない親水性-疎水性ポリマーに対して共有結合される。いくつかの実施形態では、この粒子は、cの複数のカチオン性部分を含み、かつこの複数の親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は、この親水性-疎水性ポリマーの疎水性部分を通じて例えば、アミド、エステルまたはエーテルを通じてcのカチオン性部分に共有結合される。いくつかの実施形態では、aの複数の疎水性ポリマーの少なくとも一部は、cのカチオン性部分に対して共有結合される例えば、アミド、エステルまたはエーテルを通じて。いくつかの実施形態では、bの複合体の疎水性-親水性ポリマーは、リンカーを介して核酸剤に共有結合される。例示的なリンカーとしては、クリックケミストリーを用いて形成される結合を含むリンカー例えば、WO2006/115547に記載、およびアミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、オキシム、カルバミン酸塩、炭酸塩、シリルエーテル、またはトリアゾールを含むリンカー例えば、アミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、またはトリアゾールが挙げられる。いくつかの実施形態では、リンカーは、生理学的条件下で切断可能な結合のような官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で切断可能な結合のような複数の官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーとしては、官能基、例えば、リンカーの末端でこのリンカーを通じて連結される第一または第二の部分のいずれに対しても直接結合されないが、リンカーに対して内部である、本明細書に記載の結合または官能基が挙げられる。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で加水分解性であるか、このリンカーは、生理学的条件下で酵素的に切断可能であるか、またはこのリンカーは、生理学的条件下で還元され得るジフルフィドを含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下では切断されず、例えば、このリンカーは、核酸剤が活性であるために切断される必要のない十分な長さであり、例えば、このリンカーの長さは、少なくとも約20Å例えば、少なくとも約24Åである。いくつかの実施形態では、この粒子は、cのカチオン性部分を含み、かつさらに複数の追加のカチオン性部分を含み、ここでこの追加のカチオン性部分は、cのカチオン性部分とは、例えば、分子量、粘度、電荷、または構造が異なる。いくつかの実施形態では、複数の追加のカチオン性部分の少なくとも一部は、aの複数の疎水性ポリマーおよび/または複数の親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部に結合される。いくつかの実施形態では、複数の追加のカチオン性部分の少なくとも一部は、aの複数の疎水性ポリマーの少なくとも一部に結合される。いくつかの実施形態では、この粒子はさらに、複数の追加の核酸剤を含み、ここでこの追加の核酸剤は、bの複数の核酸剤とは、例えば、構造において、例えば、配列、長さ、オーバーハングの長さ、または核酸剤の誘導体化例えば、糖または塩基の修飾が異なる。いくつかの実施形態では、複数の追加の核酸剤の少なくとも一部は、aの疎水性ポリマーおよび/またはb複数の親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部に結合される。いくつかの実施形態では、複数の追加の核酸剤の少なくとも一部は、aの複数の疎水性ポリマーの少なくとも一部に結合される。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、aの複数の疎水性ポリマーの少なくとも一部に結合される核酸と二重鎖を形成する。例えば、核酸剤例えば、siRNAまたはRNAiを促進する剤は、疎水性ポリマーに結合された核酸例えば、RNAまたはDNAと二重鎖例えば、ホモ二重鎖またはヘテロ二重鎖を形成し得る。本発明の粒子は、本明細書に記載されるように、具体的には、ポリマーに結合されるカチオン性部分を含む、核酸剤、例えば、siRNAまたはRNAiを促進する剤の送達を提供する。従って、別の態様では、本発明は、粒子であって:a複数の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーと;b複数の親水性-疎水性ポリマーと;c複数のカチオン性部分であって、ここで、この複数のカチオン性部分の少なくとも一部が、aの疎水性ポリマー、またはbの親水性-疎水性ポリマーのいずれかに結合される、カチオン性部分と;d複数の核酸剤と;を含む粒子を特徴とする。いくつかの実施形態では、複数の疎水性部分の少なくとも一部、例えば、aのポリマーは、cのカチオン性部分に共有結合されない。いくつかの実施形態では、aの複数の疎水性ポリマーの少なくとも一部は、dの核酸剤に共有結合されない。ある実施形態では、この粒子はナノ粒子である。いくつかの実施形態では、dの複数の核酸剤の実質的に全ては、ポリマー例えば、aまたはbのポリマーに共有結合されない。いくつかの実施形態では、aの複数の疎水性ポリマーの少なくとも一部は、cのカチオン性部分またはdの核酸剤に共有結合されない。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、PEGポリマーのような親水性ポリマーに対して共有結合される。いくつかの実施形態では、PEGは、脂質に結合されるかおよび/または末端においてメチル基で修飾される。いくつかの実施形態では、aの複数の疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、cのカチオン性部分に対して共有結合され、例えば、複数の疎水性ポリマーは、テトラメチル化スペルミン例えば、N1-PLGA-N5、N10、N14テトラメチル化-スペルミンに対して共有結合される。いくつかの実施形態では、aの複数の疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、cのカチオン性部分に対して、アミド、エステルまたはエーテルを通じて例えば、疎水性ポリマーのカルボキシ末端で共有結合される。いくつかの実施形態では、aの複数の疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、cのカチオン性部分に対して、疎水性ポリマーの末端で共有結合される。いくつかの実施形態では、cの複数のカチオン性部分の少なくとも一部は、aの疎水性ポリマーに対して例えば、その疎水性ポリマーのカルボキシ末端またはヒドロキシル末端で、直接共有結合される例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしで。いくつかの実施形態では、cの複数のカチオン性部分の少なくとも一部は、aの疎水性ポリマーに対してリンカーを介して例えば、その疎水性ポリマーのカルボキシ末端またはヒドロキシル末端で共有結合される。いくつかの実施形態では、このリンカーは、クリックケミストリーを用いて形成される結合を含む例えば、WO2006/115547に記載されるような。いくつかの実施形態では、このリンカーは、アミド、エステル、ジスルフィド、スルフィドすなわち、チオエーテル結合、ケタール、コハク酸塩、オキシム、カルバミン酸塩、炭酸塩、シリルエーテル、またはトリアゾールを含む。いくつかの実施形態では、cの単一のカチオン性部分は、aの単一の疎水性ポリマーに対して例えば、その疎水性ポリマーの末端で共有結合される。いくつかの実施形態では、cの複数のカチオン性部分の少なくとも一部は、アミド、エステル、チオエーテル、またはエーテル結合を介して疎水性部分を通じてbの親水性-疎水性ポリマーに共有結合される。いくつかの実施形態では、aの単一の疎水性ポリマーは、cの複数のカチオン性部分に対して共有結合される。いくつかの実施形態では、cの複数のカチオン性部分の少なくとも一部は、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部の骨格に結合される。いくつかの実施形態では、bの複数の親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は、cのカチオン性部分に共有結合される。いくつかの実施形態では、cの複数のカチオン性部分の少なくとも一部は、bの親水性-疎水性ポリマーに対して例えば、その疎水性ポリマーのカルボキシ末端またはヒドロキシル末端で直接共有結合される例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしで。いくつかの実施形態では、cの複数のカチオン性部分の少なくとも一部は、aの親水性-疎水性ポリマーに対して、リンカーを介して例えば、その疎水性ポリマーのカルボキシ末端またはヒドロキシル末端で共有結合される。いくつかの実施形態では、このリンカーは、クリックケミストリーを用いて形成される結合を含む例えば、WO2006/115547に記載されるような。いくつかの実施形態では、このリンカーは、アミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、オキシム、カルバミン酸塩、炭酸塩、シリルエーテル、またはトリアゾールを含む。いくつかの実施形態では、cの単一のカチオン性部分は、bの単一の親水性-疎水性ポリマーに対して例えば、その親水性-疎水性ポリマーの末端で共有結合される。いくつかの実施形態では、cの複数のカチオン性部分の少なくとも一部は、疎水性部分を通じてbの親水性-疎水性ポリマーに共有結合される。いくつかの実施形態では、cの複数のカチオン性部分の少なくとも一部は、疎水性部分を通じてbの親水性-疎水性ポリマーに共有結合される。いくつかの実施形態では、cの複数のカチオン性部分の少なくとも一部は、アミド、エステルまたはエーテル結合を介して、疎水性部分を通じてbの親水性-疎水性ポリマーに対して共有結合される。いくつかの実施形態では、bの単一の親水性-疎水性ポリマーは、cの複数のカチオン性部分に対して共有結合される。いくつかの実施形態では、cの複数のカチオン性部分の少なくとも一部は、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部の骨格に対して結合される。いくつかの実施形態では、aの複数の疎水性ポリマーの少なくとも一部は、dの核酸剤に共有結合される。いくつかの実施形態では、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部は、dの単一の核酸剤に共有結合される。いくつかの実施形態では、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部は、dの複数の核酸剤に共有結合される。いくつかの実施形態では、dの核酸剤は、aの疎水性ポリマーに対して例えば、親水性-疎水性ポリマーのヒドロキシル末端で、直接共有結合される例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしで。いくつかの実施形態では、核酸剤は、aの疎水性ポリマーに対してリンカーを介して例えば、親水性-疎水性ポリマーのヒドロキシル末端で共有結合される。例示的なリンカーとしては、クリックケミストリーを用いて形成される結合を含むリンカー例えば、WO2006/115547に記載されるような、およびアミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、オキシム、カルバミン酸塩、炭酸塩、シリルエーテル、またはトリアゾールを含むリンカー例えば、アミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、またはトリアゾールが挙げられる。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で切断可能な結合のような官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で切断可能な結合のような複数の官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーとしては、官能基、例えば、リンカーの末端でこのリンカーを通じて連結される第一または第二の部分のいずれに対しても直接結合されないが、リンカーに対して内部である、本明細書に記載の結合または官能基が挙げられる。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で加水分解性であるか、このリンカーは、生理学的条件下で酵素的に切断可能であるか、またはこのリンカーは、生理学的条件下で還元され得るジフルフィドを含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下では切断されず、例えば、このリンカーは、核酸剤が活性であるために切断される必要のない十分な長さであり、例えば、このリンカーの長さは、少なくとも約20Å例えば、少なくとも約24Åである。いくつかの実施形態では、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部は、核酸剤の3’および/または5’位置を通じてdの核酸剤に共有結合される。いくつかの実施形態では、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部は、dの核酸剤の2’位置を通じてその核酸剤に共有結合される。いくつかの実施形態では、核酸剤は、aの複数の疎水性ポリマーの少なくとも一部に結合される核酸と二重鎖を形成する。例えば、核酸剤例えば、siRNAまたはRNAiを促進する剤は、疎水性ポリマーに結合された核酸例えばRNAまたはDNAと二重鎖例えば、ホモ二重鎖またはヘテロ二重鎖を形成し得る。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は、dの核酸剤に対して共有結合される。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、dの単一の核酸剤に対して共有結合される。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、dの複数の核酸剤に対して共有結合される。いくつかの実施形態では、dの核酸剤の少なくとも一部は、bの親水性-疎水性ポリマーに対して例えば、親水性-疎水性ポリマーのヒドロキシル末端で、直接共有結合される例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしで。いくつかの実施形態では、dの核酸剤の少なくとも一部は各々が、bの親水性-疎水性ポリマーに対して、リンカーを介して例えば、親水性-疎水性ポリマーのヒドロキシル末端で共有結合される。例示的なリンカーとしては、クリックケミストリーを用いて形成される結合を含むリンカー例えば、WO2006/115547に記載されるような、およびアミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、オキシム、カルバミン酸塩、炭酸塩、シリルエーテル、またはトリアゾールを含むリンカー例えば、アミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、またはトリアゾールが挙げられる。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で切断可能な結合のような官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で切断可能な結合のような複数の官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーとしては、官能基、例えば、リンカーの末端でこのリンカーを通じて連結される第一または第二の部分のいずれに対しても直接結合されないが、リンカーに対して内部である、本明細書に記載の結合または官能基が挙げられる。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で加水分解性であるか、このリンカーは、生理学的条件下で酵素的に切断可能であるか、またはこのリンカーは、生理学的条件下で還元され得るジフルフィドを含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下では切断されず、例えば、このリンカーは、核酸剤が活性であるために切断される必要のない十分な長さであり、例えば、このリンカーの長さは、少なくとも約20Å例えば、少なくとも約24Åである。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、核酸剤の3’および/または5’位置を通じてdの核酸剤に共有結合される。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は、dの核酸剤の2’位置を通じてその核酸剤に共有結合される。いくつかの実施形態では、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部は、cのカチオン性部分に対して共有結合され、そしてaの疎水性ポリマーの少なくとも一部は、dの核酸剤に対して結合される。いくつかの実施形態では、この粒子はさらに、複数の追加のカチオン性部分を含み、ここで、追加のカチオン性部分は、cのカチオン性部分とは、例えば、分子量、粘度、電荷、または構造が異なる。いくつかの実施形態では、複数の追加のカチオン性部分の少なくとも一部は、aの疎水性ポリマーおよび/またはbの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部に結合される。いくつかの実施形態では、複数の追加のカチオン性部分の少なくとも一部は、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部に結合される。いくつかの実施形態では、この粒子はさらに、複数の追加の核酸剤を含み、ここでこの追加の核酸剤は、dの核酸剤とは、例えば、構造において、例えば、配列、長さ、オーバーハングの長さ、または核酸剤の誘導体化例えば、糖または塩基の修飾が異なる。いくつかの実施形態では、複数の追加の核酸剤の少なくとも一部は、aの疎水性ポリマーおよび/またはb複数の親水性-疎水性ポリマーのいずれかの少なくとも一部に結合される。いくつかの実施形態では、複数の追加の核酸剤の少なくとも一部は、aの複数の疎水性ポリマーの少なくとも一部に結合される。本発明の粒子は、核酸剤例えば、siRNAまたはRNAiを促進する剤の送達を提供し、ここでこの核酸剤は、疎水性ポリマーに共有結合されるか、または親水性ポリマーに共有結合された核酸と二重鎖を形成する。従って、別の態様では、本発明は、粒子であって:a複数の疎水性部分例えば、疎水性ポリマーと;b必要に応じて複数の親水性-疎水性ポリマーと;c複数のカチオン性部分と;d複数の核酸剤であって、ここでこの複数の核酸剤の少なくとも一部が、親水性ポリマーに共有結合されるか、または親水性ポリマーに共有結合される核酸と二重鎖例えば、ヘテロ二重鎖を形成する粒子を特徴とする。ある実施形態では、この粒子はナノ粒子である。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、親水性ポリマー例えば、PEGを含んでいるに対して共有結合される。いくつかの実施形態では、PEGは、約2kDaという分子量を有する。いくつかの実施形態では、このポリマー、例えば、親水性ポリマーは、脂質例えば、1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン-N-[PDPポリエチレングリコール-2k]に共有結合される。例示的な脂質は、DSPEのように本明細書に記載される。一実施形態では、ポリマーは、脂質に共有結合されたPEG、例えば、1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン-N-[PDPポリエチレングリコール-2kDa]に共有結合されたPEGである。ある実施形態では、この粒子は、実質的に疎水性-親水性ポリマーを含まない。ある実施形態では、疎水性-親水性ポリマーは、存在する場合、粒子を作製するための出発材料中で、または出発材料として用いられる、組成物、例えば、ポリマーの重量あたり5、2、または1重量未満の量である。いくつかの実施形態では、この疎水性部分は、疎水性ポリマー、例えば、PLGAである。いくつかの実施形態では、親水性-疎水性ポリマーは、PEG-PLGポリマーである。本発明の粒子は、核酸剤、例えば、siRNAまたはRNAiを促進する剤の送達をもたらし、ここでこの核酸剤は、ポリマーまたは親水性-疎水性ポリマーのような疎水性部分に対して結合例えば、共有結合されるされず、かつポリマーまたは親水性-疎水性ポリマーのような疎水性部分に対して結合される例えば、共有結合される核酸と二重鎖を形成しない。代替的に、いくつかの粒子では、粒子を作製するための出発材料中で、または出発材料として用いられる、核酸剤の重量あたり5、2、または1重量未満が、このようなポリマーに結合される。従って、別の態様では、本発明は、粒子であって:a複数の疎水性部分例えば、疎水性ポリマーと;b複数の親水性-疎水性ポリマーと;c複数の核酸剤-カチオン性ポリマーの複合体と;を含む、粒子を特徴とする。ある実施形態では、この粒子はナノ粒子である。ある実施形態では、この核酸剤は、疎水性ポリマー、または親水性-疎水性ポリマーに対して、結合されず、例えば、共有結合されない。ある実施形態では、粒子を作製するための出発材料中で、または出発材料として用いられる、核酸剤の重量あたり5、2、または1重量未満の量が、疎水性ポリマー、または親水性-疎水性ポリマーに結合される。いくつかの実施形態では、カチオン性ポリマーは、PVAであり、例えば、核酸剤-カチオン性ポリマーの複合体は、siRNA-カチオン性PVA複合体である。いくつかの実施形態では、この疎水性部分は、PLGAのような疎水性ポリマーである。いくつかの実施形態では、この親水性-疎水性ポリマーは、PEG-PLGポリマーである。本発明の粒子は、核酸剤、例えば、siRNAまたはRNAiを促進する剤の送達をもたらし、ここで、核酸剤もカチオン性ポリマーも、疎水性ポリマーもしくは親水性-疎水性ポリマーに結合されず、例えば共有結合されないか、またはここで独立して、粒子を作製するための出発材料中で、または出発材料として用いられる、核酸剤およびカチオン性部分の重量あたり5、2、または1重量未満が、このようなポリマーに結合される。このような粒子の核酸剤、およびカチオン性部分、例えば、この粒子の核酸剤およびカチオン性部分の実質に全てが、ポリマー成分に共有結合されるのとは対照的に、この粒子内に包含される。従って、別の態様では、本発明は、粒子であって:a複数の疎水性部分例えば、疎水性ポリマーと;b複数の親水性-疎水性ポリマーと;c必要に応じて、複数のカチオン性部分と;d複数の核酸剤と;を含み、ここで、cのカチオン性部分の実質的に一部、およびdの核酸剤の実質的に一部が、疎水性ポリマーにも、親水性-疎水性ポリマーにも共有結合されない、粒子を特徴とする。例えば、核酸剤またはカチオン性部分は、この粒子中に封入される。いくつかの実施形態では、この粒子は、複数のカチオン性部分を含む。ある実施形態では、この粒子はナノ粒子である。ある実施形態では、独立して、この粒子を作製するための出発材料中で、または出発材料として用いられる核酸剤の重量あたり5、2または1未満が、このようなポリマーに結合され、そして、この粒子を作製するための出発材料中で、または出発材料として用いられるカチオン部分の重量あたり5、2または1未満が、このようなポリマーに結合される。いくつかの実施形態では、このカチオン性部分は、カチオン性ポリマーである。例示的なカチオン性ポリマーとしては、カチオン性PVA、例えば、本明細書に記載されるカチオン性PVAまたはスペルミン、例としては、修飾スペルミン例えば、テトラメチル化スペルミンが挙げられる。核酸剤は、本明細書に記載されるカチオン性ポリマーのようなカチオン性部分と複合体を形成し得る。カチオン性部分と複合体化された核酸剤は、粒子中に封入され得る。いくつかの実施形態では、核酸剤の骨格の電荷に対するカチオン性部分の電荷の比は、約2:1~約1:1例えば、約1.5:1~約1:1である。いくつかの実施形態では、この疎水性部分は、疎水性ポリマー、例えば、PLGAである。いくつかの実施形態では、この親水性-疎水性ポリマーは、PEG-PLGポリマーである。本明細書に記載される粒子は、以下の特性のうちの1つ以上を有し得る。一実施形態では、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部は、カルボキシ末端を有する。一実施形態では、カルボキシ末端のような末端は、修飾される例えば、本明細書に記載される反応基を含む反応基による。一実施形態では、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部は、ヒドロキシル末端を有する。一実施形態では、ヒドロキシル末端は、例えば、反応基で修飾される。一実施形態では、ヒドロキシル末端を有するaの疎水性ポリマーの少なくとも一部は、ヒドロキシル末端キャップを有する例えば、アシル部分でキャップされた。一実施形態では、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部は、カルボキシ末端およびヒドロキシル末端の両方を有する。一実施形態では、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部は、乳酸および/またはグリコール酸のモノマーを含む。一実施形態では、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部は、PLAまたはPGAを含む。一実施形態では、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部は、乳酸およびグリコール酸のコポリマーすなわち、PLGAを含む。一実施形態では、ポリマー多分散性係数は、約2.5未満例えば、約1.5未満である。一実施形態では、aの疎水性ポリマーの一部は、約25:75~約75:25という乳酸対グリコール酸の比を有するPLGAを含む。一実施形態では、aの疎水性ポリマーの一部は、約50:50という乳酸対グリコール酸の比を有するPLGAを含む。一実施形態では、aの疎水性ポリマーは、約4~約66kDa、例えば約4~約12kDa、約8~約12kDaという分子量を有する。一実施形態では、aの疎水性ポリマーは、約4~約12kDa例えば、約4~約8kDaという重量平均分子量を有する。一実施形態では、aの疎水性ポリマーは、この粒子を作製するための出発材料中で、または出発材料として用いられる重量あたり、約35~約90重量例えば、約35~約80重量を含む。一実施形態では、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、単一のカチオン性部分に共有結合され、aの疎水性ポリマーの一部が、複数のカチオン性部分に結合される。一実施形態では、aの疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、単一の核酸剤に共有結合され、aの疎水性ポリマーの一部は、複数の核酸剤に結合される。本明細書に記載される粒子のさらなる特性としては以下が挙げられる。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーは、ブロックコポリマーである。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーは、ジブロックコポリマーである。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部の疎水性部分は、ヒドロキシル末端を有する。いくつかの実施形態では、ヒドロキシル末端を有するbの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部の疎水性部分は、ヒドロキシル末端のエンドキャップを有する例えば、アシル部分でキャップされた。いくつかの実施形態では、ヒドロキシル末端を有するbの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部の疎水性部分は、アシル部分でキャップされたヒドロキシル末端を有する。本明細書に記載される粒子のさらなる特性としては以下が挙げられる。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部の疎水性部分は、乳酸およびグリコール酸のコポリマーすなわち、PLGAを含む。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部の疎水性部分は、約25:75~約75:25という乳酸対グリコール酸の比を有するPLGAを含む。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部の疎水性部分は、約50:50という乳酸対グリコール酸の比を有するPLGAを含む。本明細書に記載される粒子のさらなる特性としては、以下が挙げられる。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部の疎水性部分は、約4~約20kDa例えば、約4~約12kDa、約6~約20kDaまたは約8~約15kDaという重量平均分子量を有する。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部の親水性部分は、約1~約8kDa例えば、約2~約6kDaという重量平均分子量を有する。いくつかの実施形態では、bの複数の親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は、粒子を作製するための出発材料中で、または出発材料として用いられる重量あたり約2~約30重量例えば、約4~約25重量である。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの親水性部分の少なくとも一部は、PEG、ポリオキサゾリン、ポリビニルピロリジン、ポリヒドロキシルプロピルメタクリルアミド、またはポリシアル酸例えば、PEGを含む。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの親水性部分の少なくとも一部は、メトキシで終わる。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、単一のカチオン性部分に対して共有結合され、bの親水性-疎水性ポリマーの一部は、複数のカチオン性部分に結合される。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーの少なくとも一部は各々が、単一の核酸剤に対して共有結合され、かつbの親水性-疎水性ポリマーの一部は、複数の核酸剤に対して共有結合される。本明細書に記載される粒子のさらなる特性としては以下が挙げられる。いくつかの実施形態では、cのカチオン性部分の少なくとも一部は、少なくとも1つのアミン例えば、一級、二級、三級または四級のアミンを含む。いくつかの実施形態では、cのカチオン性部分の少なくとも一部は、複数のアミン例えば、一級、二級、三級または四級のアミンを含む。いくつかの実施形態では、カチオン性部分の少なくとも1つのアミンは、二級または三級のアミンである。いくつかの実施形態では、cのカチオン性部分の少なくとも一部は、ポリマー、例えば、ポリエチレンイミンまたはポリリジンを含む。ポリマーのカチオン性部分は、種々の分子量を有する例えば、約500~約5000Da、例えば、約1~約2kDaまたは約2.5kDaにおよぶ。いくつかの実施形態では、cのカチオン性部分の少なくとも一部は、カチオン性のPVA例えば、CM-318またはC-506のようにKurarayから提供されるを含む。他の例示的なカチオン性部分としては、ポリアミノ酸、ポリヒスチジンおよびポリ2-ジメチルアミノエチルメタクリレートが挙げられる。いくつかの実施形態では、カチオン性部分は、5以上というpKaを有する。いくつかの実施形態では、アミンは、酸性のpHで正に荷電される。いくつかの実施形態では、アミンは、生理学的なpHで正に荷電される。いくつかの実施形態では、cのカチオン性部分の少なくとも一部は、硫酸プロタミン、臭化ヘキサジメトリンhexademethrinebromide、臭化セチルトリメチルアンモニウム、スペルミン例えば、テトラメチル化スペルミン、およびスペルミジンからなる群より選択される。いくつかの実施形態では、cのカチオン性部分の少なくとも一部は、テトラアルキルアンモニウム部分、トリアルキルアンモニウム部分、イミダゾリウム部分、アリールアンモニウム部分、イミニウム部分、アミジニウム部分、グアニジウム部分、チアゾリウム部分、ピラゾリリウム部分、ピラジニウム部分、ピリジニウム部分およびホスホニウム部分からなる群より選択される。いくつかの実施形態では、cのカチオン性部分の少なくとも一部は、カチオン性脂質である。いくつかの実施形態では、cのカチオン性部分の少なくとも一部は、非重合性の疎水性部分例えば、コレステロールまたはビタミンETPGSに対して複合体化される。いくつかの実施形態では、cの複数のカチオン性部分は、粒子を作製するための出発材料中で、または出発材料として用いられる重量あたり約0.1~約60重量、例えば、粒子の重量あたり約1~約60重量である。いくつかの実施形態では、複数のカチオン性部分の電荷、対、複数の核酸剤の電荷の比は、約1:1~約50:1例えば、1:1~約10:1または1:1~5:1、約1.5:1または約1:1である。カチオン性部分が窒素含有部分である実施形態では、この比は、N/P比と呼ばれ得る。本明細書に記載される粒子のさらなる特性としては以下が挙げられる。いくつかの実施形態では、核酸剤の少なくとも一部は、DNA剤である。いくつかの実施形態では、核酸剤の少なくとも一部は、RNA剤例えば、siRNAもしくはマイクロRNAまたはRNAiを促進する剤である。いくつかの実施形態では、核酸剤の少なくとも一部は、siRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、マイクロRNAmiRNA、shRNA、アンタゴmirantagomir、アプタマー、ゲノムDNA、cDNA、mRNA、およびプラスミドからなる群より選択される。いくつかの実施形態では、複数の核酸剤の少なくとも一部は、化学的に修飾され例えば、1つ以上の骨格の修飾、塩基の修飾、および/または糖に対する修飾を含む核酸剤の安定性が増大する。いくつかの実施形態では、複数の核酸剤は、粒子を作製するための出発材料中で、または出発材料として用いられる重量あたり約1~約50重量例えば、約1~約20、約2~約15、約3~約12である。本明細書に記載される粒子のさらなる特性としては以下が挙げられる。いくつかの実施形態では、この粒子はまた、界面活性剤を含む。いくつかの実施形態では、この界面活性剤はポリマー、例えば、PVAである。いくつかの実施形態では、PVAは、約2~約27cPの粘度を有する。いくつかの実施形態では、この界面活性剤は、粒子を作製するための出発材料中で、または出発材料として用いられる重量あたり約0~約40重量例えば、約15~約35重量である。いくつかの実施形態では、この粒子の直径は、約200nm未満例えば、約200~約20nm、約150~約50nm、または約150nm未満である。いくつかの実施形態では、この粒子の表面は、実質的に、PEG、PVA、ポリオキサゾリン、ポリビニルピロリジン、ポリヒドロキシルプロピルメタクリルアミド、またはポリシアル酸例えば、PEGでコーティングされる。いくつかの実施形態では、この粒子は、標的化剤を含む。いくつかの実施形態では、この粒子の表面は実質的に核酸剤を含まない。本明細書に記載される粒子のさらなる特性としては以下が挙げられる。いくつかの実施形態では、dの複数の核酸剤は実質的に完全なままである。いくつかの実施形態では、この粒子のゼータ電位は、約-20~約50mV例えば、約-20~約20mV、約-10~約10mV、または中性である。いくつかの実施形態では、この粒子は、摂氏23度の温度でかつ60の湿度パーセントを含む、条件下で、少なくとも1日例えば、少なくとも7日、少なくとも14日、少なくとも21日、少なくとも30日化学的に安定である。いくつかの実施形態では、この粒子は、凍結乾燥された粒子である。いくつかの実施形態では、この粒子は、薬学的組成物に処方される。いくつかの実施形態では、この粒子の表面は実質的に標的化剤を含まない。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される粒子は、対象における標的とされる遺伝子の発現が、対象へのこの粒子の投与後ほぼ72時間、96時間、120時間、144時間、168時間、192時間、216時間、240時間、264時間で、少なくとも20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95またはそれ以上減少されるような核酸剤の有効量を送達し得る。一実施形態では、本明細書に記載される粒子は、対象における標的とする遺伝子の発現が、対象へのこの粒子の投与後ほぼ120時間で、少なくとも50、55、60、65、70、75、または80まで減少されるような核酸剤の有効量を送達し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される粒子または組成物を投与された対象における標的遺伝子発現のレベルが、この核酸剤が、粒子または複合体以外の処方物ですなわち、粒子中でなく、例えば、粒子中に封入されることもなく、ポリマー、例えば、本明細書に記載される粒子に複合体化されることもなく投与された場合に見られる標的遺伝子の発現のレベル、または核酸剤も他の治療剤の投与もなしで見られる標的遺伝子の発現と比較される。いくつかの実施形態では、この粒子は、疎水性ポリマーを含み、例えば、ここでは、核酸剤は、aの疎水性ポリマーに結合され、ここで、この疎水性ポリマー、または核酸剤-疎水性ポリマーの複合体は、以下の特性のうちの1つ以上を有する:i核酸剤に結合された疎水性ポリマーは、ホモポリマーであっても、または2種以上のモノマーサブユニットからできているポリマーであってもよい;ii核酸剤に結合された疎水性ポリマーは、約4~約20kDaという重量平均分子量を有する;iii疎水性ポリマーは、第一種および第二種のモノマーサブユニットからできており、かつこの剤に結合された疎水性ポリマー中の第一種のモノマーサブユニット対第二種のモノマーサブユニットの比は、約25:75~約75:25、例えば、約50:50である;iv疎水性ポリマーは、PLGAである;v核酸剤は、粒子の重量あたり約1~約20重量である;vi複数の核酸剤-疎水性ポリマーの複合体は、粒子の重量あたり約10重量である。いくつかの実施形態では、核酸剤に結合される疎水性ポリマーは、約4~約12kDa、例えば、約6~約12kDaまたは約8~約12kDaという重量平均分子量を有する。いくつかの実施形態では、bの親水性-疎水性ポリマーは、以下の特性のうち1つ以上を有する:i親水性部分は、約1~約6kDa例えば、約2~約6kDaという重量平均分子量を有する、ii疎水性ポリマーは、約4~約15kDaという重量平均分子量を有する;iii複数の親水性-疎水性ポリマーは、この粒子の約25重量である;iv親水性ポリマーは、PEGである;v疎水性ポリマーは、第一種および第二種のモノマーサブユニットからできており、かつこの剤に結合された疎水性ポリマー中の第一種のモノマーサブユニット対第二種のモノマーサブユニットの比は、約25:75~約75:25、例えば、約50:50である;ならびにvi疎水性ポリマーは、PLGAである。いくつかの実施形態では、親水性部分の重量平均分子量は、約1~約3kDa、例えば、約2kDaであり、親水性部分の重量平均分子量の疎水性部分の重量平均分子量に対する比は、1:3~1:7であり、かつ親水性部分の重量平均分子量が、約4~約6kDa、例えば、約5kDaである場合、親水性部分の重量平均分子量の疎水性部分に対する重量平均分子量の比は、1:1-1:4である。いくつかの実施形態では、親水性部分は、約2~約6kDaという重量平均分子量を有し、かつ疎水性部分は、約8~約13kDaという重量平均分子量を有する。いくつかの実施形態では、親水性-疎水性ポリマーの親水性部分は、メトキシで終わる。いくつかの実施形態では、核酸剤は、疎水性ポリマーに結合され、ここで、この核酸剤-疎水性ポリマーの複合体は、以下の特性のうち1つ以上を有する:i核酸剤に結合される疎水性ポリマーは、ホモポリマーであっても、または2種以上のモノマーサブユニットからできているポリマーであってもよい;ii核酸剤に結合される疎水性ポリマーは、約4~約15kDaという重量平均分子量を有する;iii疎水性ポリマーは、第一種および第二種のモノマーサブユニットからできており、かつこの剤に結合された疎水性ポリマー中の第一種のモノマーサブユニット対第二種のモノマーサブユニットの比は、約25:75~約75:25、例えば、約50:50である;ivこの疎水性ポリマーは、PLGAである;vカチオン性部分の核酸剤に対する電荷比は、約1:1~約4:1である;vi複数の核酸剤-疎水性ポリマーの複合体は、粒子の重量あたり約10重量である。いくつかの実施形態では、この粒子はまた、界面活性剤例えば、PVAを含む。別の態様では、本発明は、本明細書に記載される複数の粒子を含む組成物を特徴とする。いくつかの実施形態では、この組成物は薬学的組成物である。いくつかの実施形態では、組成物中の粒子の少なくとも50、60、70、80、90、95、99または全てが、約200nm未満の直径を有する。いくつかの実施形態では、この粒子は、200nm未満例えば、約200~約20nm、約150~約50nm、または約150nm未満というDv90を有する。いくつかの実施形態では、この組成物は、約1kDa未満の分子量例えば、約500Da未満を有するポリマーを実質的に含まない。いくつかの実施形態では、この組成物は、実質的に遊離の核酸剤すなわち、粒子中に封入されることも、結合されることもない核酸剤を含まない。いくつかの実施形態では、この組成物はさらに、標的化剤を含む。いくつかの実施形態では、この組成物は、実質的にカチオン性部分すなわち、粒子中の成分に封入されることもなく、結合されることもないカチオン性部分を含まない。いくつかの実施形態では、組成物は、摂氏23度の温度でかつ60の湿度パーセントを含む、条件下で、少なくとも1日例えば、少なくとも7日、少なくとも14日、少なくとも21日、少なくとも30日化学的に安定である。いくつかの実施形態では、この組成物は、凍結乾燥された組成物である。いくつかの実施形態では、この粒子は、薬学的組成物中に処方される。別の態様では、本発明は、本明細書に記載される複数の粒子または本明細書に記載される組成物を備えているキットを特徴とする。別の態様では、本発明は、本明細書に記載される複数の粒子、または本明細書に記載される組成物を含んでいる、単位剤形を特徴とする。別の態様では、本発明は、障害を有する対象を治療する方法であって、有効量の本明細書に記載される粒子、または本明細書に記載される組成物を対象に投与して、それによって対象を治療することを包含する方法を特徴とする。一実施形態では、この障害は増殖性障害、例えば、進行の遅い増殖障害である。一実施形態では、増殖障害は癌、例えば、本明細書に記載される癌である。一実施形態では、この癌は、進行の遅い癌、例えば、固形腫瘍または白血病である。例えば、進行の遅い癌とは、ステージIまたはステージIIの固形腫瘍であり得る。例示的な癌としては限定するものではないが、膀胱癌加速型、および転移性膀胱癌を含む、乳癌例えば、エストロゲン受容体陽性乳癌;エストロゲン受容体陰性乳癌;HER-2陽性乳癌;HER-2陰性乳癌;プロゲステロン受容体陽性乳癌;プロゲステロン受容体陰性乳癌;エストロゲン受容体陰性、HER-2陰性、およびプロゲステロン受容体陰性乳癌すなわち、三重陰性乳癌;炎症性乳癌、結腸癌結腸直腸癌を含む、腎癌、肝癌、肺癌小細胞肺癌および非小細胞肺癌、肺腺癌、および扁平上皮癌を含む、泌尿生殖器癌、例えば、卵巣癌ファロピウス管癌および腹膜癌を含む、子宮頚癌、前立腺癌および精巣癌、リンパ系癌、直腸癌、喉頭癌、膵癌外分泌膵癌を含む、食道癌、胃癌、胆嚢癌、甲状腺癌、皮膚癌扁平上皮癌を含む、脳癌多形神経膠芽腫を含む、および頭頚部癌が挙げられる。好ましい癌としては、乳癌例えば、転移性乳癌または局所進行性乳癌、前立腺癌例えば、ホルモン不応性前立腺癌、腎細胞癌、肺癌例えば、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肺腺癌、および扁平上皮癌、例えば、進行性非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肺腺癌、および扁平上皮癌膵癌、胃癌例えば、転移性胃腺癌、直腸結腸癌、直腸癌、頭頚部の扁平上皮癌、リンパ腫ホジキンリンパ腫または非ホジキンリンパ腫、腎細胞癌、尿路上皮癌、軟部組織肉腫、神経膠種、黒色腫例えば、進行性または転移性の黒色腫、胚細胞腫瘍、卵巣癌例えば、進行性卵巣癌、例えば、進行性ファロピウス管癌または腹膜癌および胃腸癌が挙げられる。別の態様では、本発明は、対象、例えば、標的とする遺伝子の発現を減少することによって処置され得る障害を有している対象における標的遺伝子発現を減少する方法を特徴とする。この方法は、有効量の本明細書に記載される粒子、または本明細書に記載される組成物を投与することを包含し、ここで、この粒子によって送達される核酸剤は、対象における標的とする遺伝子の発現を、その粒子の投与後、ほぼ72時間、96時間、120時間、144時間、168時間、192時間、216時間、240時間、264時間後に少なくとも20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95以上減少させる。一実施形態では、この粒子によって送達される核酸剤は、対象における標的とする遺伝子の発現を、この粒子の投与のほぼ120時間後、少なくとも50、55、60、65、70、75または80減少させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される粒子または組成物を投与された対象における標的遺伝子発現のレベルは、核酸剤が、粒子または複合体以外の処方物ですなわち、粒子中でなく、例えば、粒子中に封入されることも、ポリマー、例えば、本明細書に記載の粒子に複合体化されることもなく投与された場合に見られる標的遺伝子の発現のレベル、または核酸剤もしくは他の治療剤の投与なしで見られる標的遺伝子の発現と比較される。別の態様では、本発明は、核酸剤-疎水性ポリマーの複合体であって、疎水性ポリマーに共有結合された核酸剤、または疎水性ポリマーに共有結合される核酸と二重鎖例えば、ヘテロ二重鎖を形成する核酸剤を含んでいる、核酸剤-疎水性ポリマーの複合体を特徴とする。いくつかの実施形態では、核酸剤は、核酸剤の2’、3’および/または5’末端を介して疎水性ポリマーに共有結合される。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、ポリマーの末端でこの疎水性ポリマーに共有結合される。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、疎水性ポリマーの骨格上のポリマーに対して共有結合される。いくつかの実施形態では、単一の核酸剤が、単一の疎水性ポリマーに対して共有結合される。いくつかの実施形態では、複数の核酸剤は各々が、単一の疎水性ポリマーに対して共有結合される。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、疎水性の疎水性ポリマーに対して例えば、エステルを介して、直接共有結合される例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしで。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、リンカーを介して、疎水性ポリマーに共有結合される。例示的なリンカーとしては、クリックケミストリーを用いて形成される結合を含むリンカー例えば、WO2006/115547に記載されるような、およびアミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、オキシム、カルバミン酸塩、炭酸塩、シリルエーテル、またはトリアゾールを含むリンカー例えば、アミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、またはトリアゾールが挙げられる。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で切断可能な結合のような官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で切断可能な結合のような複数の官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーとしては、官能基、例えば、リンカーの末端でこのリンカーを通じて連結される第一または第二の部分のいずれに対しても直接結合されないが、リンカーに対して内部である、本明細書に記載の結合または官能基が挙げられる。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で加水分解性であるか、このリンカーは、生理学的条件下で酵素的に切断可能であるか、またはこのリンカーは、生理学的条件下で還元され得るジフルフィドを含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下では切断されず、例えば、このリンカーは、核酸剤が活性であるために切断される必要のない十分な長さであり、例えば、このリンカーの長さは、少なくとも約20Å例えば、少なくとも約24Åである。いくつかの実施形態では、この疎水性ポリマーは、末端のヒドロキシル部分を有する。いくつかの実施形態では、この疎水性ポリマーは、キャップされている例えば、アシル部分で末端のヒドロキシル部分を有する。いくつかの実施形態では、この疎水性ポリマーは、以下の特性のうち1つ以上を有する:i核酸剤に結合される疎水性ポリマーは、ホモポリマー、または2種以上のモノマーサブユニットからできているポリマーである;ii核酸剤に結合される疎水性ポリマーは、約4~約15kDa例えば、約4~約12kDa、約6~約12kDa、または約8~約12kDaという重量平均分子量を有する;iii疎水性ポリマーは、第一種および第二種のモノマーサブユニットからできており、この剤に結合された疎水性ポリマー中の第一種のモノマーサブユニット対第二種のモノマーサブユニットの比は、約25:75~約75:25、例えば、約50:50である;ivこの疎水性ポリマーは、PLGAである。ある実施形態では、この核酸剤は、RNA、DNAまたはRNAおよびDNAの混合ポリマーである。ある実施形態では、RNAは、mRNAまたはsiRNAである.ある実施形態では、DNAはcDNAまたはゲノムDNAである。ある実施形態では、核酸剤は、一本鎖であり、かつ別の実施形態では、これは二本鎖を含む。ある実施形態では、核酸剤は、2つ以上の分子由来の鎖からできている、二重鎖の領域を有し得る。ある実施形態では、この核酸剤は、遺伝子発現を阻害する剤、例えば、RNAiを促進する剤である。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、siRNA、shRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、またはマイクロRNAmiRNAからなる群より選択される。ある実施形態では、この核酸剤は、アンタゴmirantagomirまたはアプタマーである。別の態様では、本発明は、本明細書に記載される複数の核酸剤-疎水性ポリマーの複合体を含んでいる組成物を特徴とする。いくつかの実施形態では、この組成物は、薬学的組成物である。いくつかの実施形態では、この組成物は反応混合物である。いくつかの実施形態では、この組成物は実質的に、非複合体型の核酸剤を含まない。いくつかの実施形態では、核酸剤-ポリマーの複合体上の核酸剤の少なくとも約50が完全なままである。いくつかの実施形態では、この組成物は実質的に、約1kDa未満例えば、約500Da未満という分子量を有する疎水性ポリマーを含まない。別の態様では、本発明は、核酸剤-疎水性ポリマーの複合体を作製する方法であって:核酸剤およびポリマーを提供することと;この核酸剤およびポリマーを、このポリマーに対する核酸剤の共有結合をもたらす条件に供することと、を包含する方法を特徴とする。いくつかの実施形態では、この方法は、反応混合物中で行われる。いくつかの実施形態では、この反応混合物は、単一の溶媒を含む。いくつかの実施形態では、この反応混合物は、複数の溶媒を含んでいる溶媒系を含む。いくつかの実施形態では、この複数の溶媒は、混和性である。いくつかの実施形態では、この溶媒系は、水および極性の溶媒、例えば、本明細書に記載される溶媒例えば、DMF、DMSO、アセトン、ベンジルアルコール、ジオキサン、テトラヒドロフラン、またはアセトニトリルを含む。いくつかの実施形態では、この溶媒系は、水性の緩衝液例えば、リン酸緩衝液PBS、4-2-ヒドロキシエチル-1-ピペラジンエタンスルホン酸HEPES、TE緩衝液、または2-N-モルホリノエタンスルホン酸緩衝液MESを含む。いくつかの実施形態では、この溶媒系は、二相性である例えば、有機相および水相を含む。いくつかの実施形態では、少なくとも1つの核酸剤またはポリマーのうちの少なくとも1つが、不溶性基質に結合される。いくつかの実施形態では、ポリマーが不溶性基質に結合される。いくつかの実施形態では、この方法は、クリックケミストリーを用いて形成される結合の形成を生じる例えば、WO2006/115547に記載されるような。いくつかの実施形態では、この方法は、アミド、ジスルフィド、スルフィド、エステル、ケタール、コハク酸塩、オキシム、カルバミン酸塩、炭酸塩、シリルエーテル、および/またはトリアゾールの形成を生じる。いくつかの実施形態では、この疎水性ポリマーは、約1mg/ml未満の水溶性を有する。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、この核酸剤の2’、3’および/または5’末端を介して疎水性ポリマーに共有結合される。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、このポリマーに対して、その疎水性ポリマーの末端で共有結合される。いくつかの実施形態では、この疎水性ポリマーは、ヒドロキシルおよび/またはカルボン酸末端を有する。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、このポリマーに対して疎水性ポリマーの骨格上で共有結合される。いくつかの実施形態では、単一の核酸剤が単一の疎水性ポリマーに対して共有結合される。いくつかの実施形態では、複数の核酸剤が、各々、単一の疎水性ポリマーに対して共有結合される。いくつかの実施形態では、この方法は、複数の少なくとも約80例えば、少なくとも約85、少なくとも約90、少なくとも約95、少なくとも約99の純度を有する核酸剤-疎水性ポリマーの複合体を生じる。いくつかの実施形態では、この方法は、少なくとも約100mgの核酸剤-疎水性ポリマーの複合体例えば、少なくとも約1gを生成する。別の態様では、本発明は、本明細書に記載の方法によって作製される核酸剤-疎水性ポリマーの複合体を特徴とする。別の態様では、本発明は、親水性-疎水性ポリマーに対して共有結合される核酸剤、または親水性-疎水性ポリマーに対して共有結合される核酸と二重鎖例えば、ヘテロ二重鎖を形成する核酸剤を含んでおり、ここでこの親水性-疎水性ポリマーは、疎水性部分に結合された親水性部分を含む、核酸剤-親水性-疎水性ポリマーの複合体を特徴とする。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、親水性-疎水性ポリマーの親水性部分に結合される。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、この親水性-疎水性ポリマーの疎水性部分結合される。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、この親水性-疎水性ポリマーに対して、この核酸剤の2’、3’および/または5’末端を介して共有結合される。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、この親水性-疎水性ポリマーに対して、そのポリマーの末端で共有結合される。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、このポリマーに対して、親水性-疎水性ポリマーの骨格上で共有結合される。いくつかの実施形態では、単一の核酸剤は、単一の親水性-疎水性ポリマーに対して共有結合される。いくつかの実施形態では、複数の核酸剤は各々が、単一の親水性-疎水性ポリマーに対して共有結合される。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、疎水性-疎水性ポリマーの疎水性部分に対して、例えば、エステルを介して直接共有結合される例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしで。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、親水性-疎水性ポリマーの親水性部分に対して例えば、エステルを介して直接共有結合される例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしで。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、親水性-疎水性ポリマーに対して、リンカー例えば、このポリマーの親水性部分、またはこのポリマーの疎水性部分を介して結合される。例示的なリンカーとしては、クリックケミストリーを用いて形成される結合を含むリンカー例えば、WO2006/115547に記載されるような、およびアミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、オキシム、カルバミン酸塩、炭酸塩、シリルエーテル、またはトリアゾールを含むリンカー例えば、アミド、エステル、ジスルフィド、スルフィド、ケタール、コハク酸塩、またはトリアゾールが挙げられる。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で切断可能な結合のような官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で切断可能な結合のような複数の官能基を含む。いくつかの実施形態では、このリンカーとしては、官能基、例えば、リンカーの末端でこのリンカーを通じて連結される第一または第二の部分のいずれに対しても直接結合されないが、リンカーに対して内部である、本明細書に記載の結合または官能基が挙げられる。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下で加水分解性であるか、このリンカーは、生理学的条件下で酵素的に切断可能であるか、またはこのリンカーは、生理学的条件下で還元され得るジフルフィドを含む。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下では切断されず、例えば、このリンカーは、核酸剤が活性であるために切断される必要のない十分な長さであり、例えば、このリンカーの長さは、少なくとも約20Å例えば、少なくとも約24Åである。いくつかの実施形態では、この親水性-疎水性ポリマーは、以下の特性のうち1つ以上を有する:iこの親水性部分は、約1~約6kDa例えば、約2~約6kDaという重量平均分子量を有する、iiこの疎水性ポリマーは、約4~約15kDa例えば、約4~約12kDa、約6~約12kDa、または約8~約12kDaという重量平均分子量を有する;iiiこの親水性ポリマーは、PEGである;ivこの疎水性ポリマーは、第一種および第二種のモノマーサブユニットからできており、かつ核酸剤に結合される疎水性ポリマーにおける第一種のモノマーサブユニット対第二種モノマーサブユニットの比は、約25:75~約75:25、例えば、約50:50である;v疎水性ポリマーは、PLGAである。いくつかの実施形態では、親水性-疎水性ポリマーの親水性部分の重量平均分子量が、約1~約3kDa、例えば、約2kDaである場合、親水性部分の重量平均分子量の疎水性部分に対する重量平均分子量の比は、1:3~1:7であり、親水性部分の重量平均分子量が、約4~約6kDa、例えば、約5kDaである場合、親水性部分の重量平均分子量の疎水性部分に対する重量平均分子量の比は、1:1~1:4である。いくつかの実施形態では、この親水性部分は、約2~約6kDaという重量平均分子量を有し、かつ疎水性部分は、約8~約13kDaという重量平均分子量を有する。いくつかの実施形態では、親水性-疎水性ポリマーの親水性部分は、メトキシで終わる。ある実施形態では、この核酸剤は、RNA、DNAまたはRNAおよびDNAの混合ポリマーである。ある実施形態では、RNAは、mRNAまたはsiRNAである。ある実施形態では、DNAは、cDNAまたはゲノムDNAである。ある実施形態では、この核酸剤は、一本鎖であり、かつ別の実施形態では、これは2つの鎖を含む。ある実施形態では、この核酸剤は、1つまたは2つの分子由来の鎖からできている、二重鎖の領域を有し得る。ある実施形態では、この核酸剤は、遺伝子発現を阻害する剤、例えば、RNAiを促進する剤である。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、siRNA、shRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、またはマイクロRNAmiRNAからなる群より選択される。ある実施形態では、この核酸剤は、アンタゴmirantagomirまたはアプタマーである。別の態様では、本発明は、本明細書に記載される複数の核酸剤-親水性-疎水性ポリマーの複合体を含む組成物を特徴とする。いくつかの実施形態では、この組成物は、反応混合物である。いくつかの実施形態では、この組成物は、薬学的組成物である。いくつかの実施形態では、この組成物は、実質的に非複合体型の核酸剤を含まない。いくつかの実施形態では、核酸剤-ポリマーの複合体上でこの核酸剤の少なくとも約50は完全なままである。いくつかの実施形態では、この組成物は実質的に、約1kDa未満の分子量を有する親水性-疎水性ポリマーを含まない。別の態様では、本発明は、本明細書に記載される核酸剤-親水性-疎水性ポリマーの複合体を作製する方法であって:核酸剤およびポリマーを提供することと;この核酸剤およびポリマーを、核酸剤のポリマーへの共有結合をもたらす条件に供することと;を包含する、方法を特徴とする。いくつかの実施形態では、この方法は、ある反応混合物中で行われる。いくつかの実施形態では、この反応混合物は、単一の溶媒を含む。いくつかの実施形態では、この反応混合物は、複数の溶媒を含んでいる溶媒系を含む。いくつかの実施形態では、この複数の溶媒は、混和性である。いくつかの実施形態では、この溶媒系は、水および極性の溶媒例えば、DMF、DMSO、アセトン、ベンジルアルコール、ジオキサン、テトラヒドロフラン、またはアセトニトリルを含む。いくつかの実施形態では、この溶媒系は、水性緩衝液例えば、リン酸緩衝溶液PBS、4-2-ヒドロキシエチル-1-ピペラジンエタンスルホン酸HEPES、TE緩衝液、または2-N-モルホリノエタンスルホン酸緩衝液MESを含む。いくつかの実施形態では、この溶媒系は、二相性例えば、有機相および水相である。いくつかの実施形態では、核酸剤またはポリマーのうちの少なくとも1つは、不溶性基質に結合される。いくつかの実施形態では、ポリマーが不溶性基質に結合される。いくつかの実施形態では、この方法は、クリックケミストリーを用いて結合を形成することを包含する例えば、WO2006/115547に記載されるような。いくつかの実施形態では、この方法は、アミド、ジスルフィド、スルフィド、エステル、オキシム、炭酸塩、カルバミン酸塩、シリルエーテル、および/またはトリアゾールの形成を生じる。いくつかの実施形態では、この親水性-疎水性ポリマーは、約50mg/ml未満の水溶性を有する。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、この核酸剤の2’、3’および/または5’末端を介して疎水性-親水性ポリマーに共有結合される。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、疎水性-親水性ポリマーに対して、そのポリマーの末端で共有結合される。いくつかの実施形態では、核酸剤は、この疎水性-親水性ポリマーに対して、そのポリマーの疎水性部分で共有結合される。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、疎水性-親水性ポリマーに対して、そのポリマーの疎水性部分で共有結合される。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、疎水性-親水性ポリマーに対して、そのポリマーの骨格で共有結合される。いくつかの実施形態では、単一の核酸剤は、単一の疎水性-親水性ポリマーに対して例えば、親水性部分または疎水性部分に対して共有結合される。いくつかの実施形態では、複数の核酸剤は各々が、単一の疎水性-親水性ポリマーに対して共有結合される。いくつかの実施形態では、この方法は、複数の少なくとも約80例えば、少なくとも約85、少なくとも約90、少なくとも約95、少なくとも約99の純度を有する核酸剤-親水性-疎水性ポリマーの複合体を生じる。いくつかの実施形態では、この方法は、少なくとも約100mgの核酸剤-疎水性ポリマーの複合体例えば、少なくとも約1gを生成する。別の態様では、本発明は、本明細書に記載の方法によって作製される核酸剤-親水性-疎水性ポリマーの複合体を特徴とする。別の態様では、本発明は、粒子であって、複数の核酸剤-ポリマーの複合体と;複数のカチオン性ポリマーまたは脂質と;複数のポリマーまたは脂質であって、実質的に、複数の核酸剤-ポリマーの複合体を囲む、ポリマーまたは脂質と、を含む粒子を特徴とする。いくつかの実施形態では、この粒子は自己集合される。別の態様では、本発明は、粒子を作製する方法であって:a複数の核酸剤-ポリマーの複合体を含んでいる粒子を形成することと;bこの粒子と複数のカチオン性の多価ポリマーまたは脂質とを接触させることと;cbの生成物と複数のポリマーまたは脂質とを接触させることであって、ここで、この複数のポリマーまたは脂質が実質的にbの生成物を取り囲んで粒子を形成することと;を包含する、方法を特徴とする。別の態様では、本発明は、核酸剤、例えばsiRNA部分を含む粒子、例えば、ナノ粒子を作製する方法であって、極性の溶媒例えば、DMF、DMSO、アセトン、ベンジルアルコール、ジオキサン、テトラヒドロフラン、またはアセトニトリル中で、粒子の形成を可能にする条件下で、例えば、沈殿によって、a核酸剤-疎水性ポリマーの複合体であって、各々の核酸剤-疎水性ポリマーの複合体が、疎水性ポリマーに共有結合された、核酸剤、例えばsiRNA部分を含んでおり、ここで、カチオン性部分と会合される、核酸剤-疎水性ポリマーの複合体と、b複数の親水性-疎水性ポリマー、例えば、PEG-PLGAと、c複数の疎水性ポリマー核酸剤に対して共有結合されないと、を合わせ、それによって粒子を形成する、方法を特徴とする。いくつかの実施形態では、この合わせることは、アセトンを含んでいる溶媒系で行われる。いくつかの実施形態では、この溶媒は、混合された溶媒系例えば、水性/有機の溶媒系、例えば、アセトニトリルおよび水性の緩衝液系である。いくつかの実施形態では、この方法は:i複数の核酸剤であって、各々の核酸剤、例えば、アセトニトリル/TE緩衝液例えば、約90/10~約50/50重量、例えば、約90/10~約70/30重量、例えば、約80/20重量中で、疎水性ポリマーとカップリングして、カチオン性部分と会合している、siRNAまたは他の核酸剤;とii複数の親水性-疎水性ポリマー、例えば、アセトニトリル/TE緩衝液例えば、約90/10~約50/50重量、例えば、約90/10~約70/30重量、例えば、約80/20重量中の、PEG-PLGA、および複数の疎水性ポリマー核酸剤とカップリングしていないと;を合わせることを包含する。別の態様では、本発明は、ステップaの反応混合物、またはその組成物もしくは薬学的調製物を特徴とする。別の態様では、本発明は、ステップiの反応混合物またはその組成物もしくは薬学的調製物を特徴とする。別の態様では、本発明は、ステップiiの反応混合物またはその組成物もしくは薬学的調製物を特徴とする。別の態様では、本発明は、上記のプロセスによって作製される粒子を特徴とする。別の態様では、本発明は、上記のプロセスによって作製される粒子を含む組成物例えば、薬学的組成物を特徴とする。別の態様では、本発明は、水溶性の核酸剤、例えば、siRNA部分、疎水性-親水性ポリマー、および疎水性ポリマーを含む、粒子、例えばナノ粒子を作製する方法であって、a例えば、水性溶媒中で、i第一の複数の疎水性-親水性ポリマー、例えば、PEG-PLGAと、ii第一の複数の疎水性ポリマー、例えば、PLGAであって、各々が、第一の反応性部分、例えば、スルフヒドリル部分を有するポリマーと;を接触させて、水溶性の中間粒子を形成することと;b例えば、水性溶媒中でこの中間粒子と、複数の水溶性の核酸剤、例えば、siRNA部分であって、各々が、第二の反応性部分、例えば、SH部分を有する核酸剤とを、中間複合体例えば、約100nm未満の直径を有する、例えば、核酸剤にカップリングされた、親水性-疎水性ポリマーおよび疎水性ポリマーを含む中間構造の形成を可能にする条件下で接触させることと;c例えば、非水性の溶媒、例えば、DMF、DMSO、アセトン、ベンジルアルコール、ジオキサン、テトラヒドロフラン、またはアセトニトリル中で、中間複合体と、第二の複数の親水性-疎水性ポリマー、例えば、PEG-PLGA、および第二の複数の疎水性ポリマー、例えば、PLGAとを、粒子の形成を可能にする条件下で接触させることと;を包含し、これによって粒子を形成する方法を特徴とする。別の態様では、本発明は、粒子、例えば、ナノ粒子を形成する方法であって、a例えば、アセトニトリル/TE緩衝液例えば、約90/10~約50/50重量、例えば、約90/10~約70/30重量、例えば、約80/20重量中でi第一の複数の親水性-疎水性ポリマー、例えば、PEG-PLGAと、ii第一の複数の疎水性ポリマー、例えば、PLGA各々が、第一の反応性部分、例えば、スルフヒドリル部分を有すると;を接触させて、中間粒子例えば、約100nm未満の直径を有するを形成し、いくつかの実施形態では、この中間粒子が、例えば、水溶液中で可溶性であるように十分な親水性部分を有することに起因して、水溶液中で機能的に可溶性であることと;b例えば、アセトニトリル/TE緩衝液例えば、約90/10~約50/50重量、例えば、約90/10~約70/30重量、例えば、約80/20重量中で、中間粒子と、複数の薬物部分、例えば、siRNAまたは他の核酸薬物部分各々が、第二の反応性部分、例えば、SH部分を有するとを、中間複合体例えば、薬物部分にカップリングされた、親水性-疎水性ポリマーおよび疎水性ポリマーを含んでいる中間構造の形成を可能にする条件下で接触させることと;c例えば、アセトニトリル/TE緩衝液例えば、約90/10~約50/50重量、例えば、約90/10~約70/30重量、例えば、約80/20重量中で、中間複合体と、第二の複数の親水性-疎水性ポリマー、例えば、PEG-PLGA、および第二の複数の疎水性ポリマー、例えば、PLGAとを、粒子の形成を可能にする条件下で接触させることと、を包含し、これによって粒子を形成する方法を特徴とする。いくつかの実施形態では、この中間粒子aの直径は、100nm未満である。いくつかの実施形態では、この粒子の直径は、150nm未満である。いくつかの実施形態では、疎水性ポリマーに対して共有結合される複数のカチオン性部分が、ステップbにおいて加えられる。別の態様では、本発明は、ステップaの反応混合物、またはその組成物もしくは薬学的調製物を特徴とする。別の態様では、本発明は、ステップbの反応混合物、またはその組成物もしくは薬学的調製物を特徴とする。別の態様では、本発明は、上記のプロセスによって作製される粒子を特徴とする。別の態様では、本発明は、上記のプロセスによって作製される粒子を含む組成物例えば、薬学的組成物を特徴とする。別の態様では、本発明は、本明細書に記載される組成物例えば、薬学的組成物であって、対象に投与された場合、対象に対して、粒子または複合体以外の処方物すなわち、粒子中でなく、例えば、粒子中に封入されることもなく、ポリマーに複合体されることもない、例えば、本明細書に記載される粒子中で投与される核酸剤でみられる標的遺伝子の発現の減少、または核酸剤もしくは他の治療剤の投与もなしで見られる標的遺伝子の発現よりも、少なくとも10、20、50、75、80、90、100、200、または500大きい標的遺伝子の発現の減少を生じる組成物を特徴とする。ある実施形態では、この核酸剤は、RNA、DNAまたはRNAおよびDNAの混合ポリマーである。ある実施形態ではRNAは、mRNAまたはsiRNAである。ある実施形態では、DNAは、cDNAまたはゲノムDNAである。ある実施形態では、この核酸剤は、一本鎖であって、別の実施形態では、この核酸剤は2つの鎖を含む。ある実施形態では、この核酸剤は、1つまたは2つの分子由来の鎖から構成される二重鎖の領域を有し得る。ある実施形態では、この核酸剤は、遺伝子発現を阻害する剤、例えば、RNAiを促進する剤である。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、siRNA、shRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、またはマイクロRNAmiRNAからなる群より選択される。ある実施形態では、この核酸剤は、アンタゴmirantagomirまたはアプタマーである。いくつかの実施形態では、この減少とは、組成物または単独核酸剤で処理されていない対照試料に比べての減少である。いくつかの実施形態では、この組成物および核酸剤単独投与は、同じ条件下で投与される。いくつかの実施形態では、対象に投与されるこの粒子組成物中の核酸剤の量は、例えば、分子の重量または数に関して、単独投与の核酸剤の量と同じである。いくつかの実施形態では、標的遺伝子は、蛍光タンパク質、例えば、GFPまたはRFPである。いくつかの実施形態では、標的遺伝子は、標識、例えば、蛍光部分、例えば、GFPまたはRFPを含む融合タンパク質をコードする融合遺伝子である。いくつかの実施形態では、この減少は、ある用量の組成物または単独の核酸剤投与の1分、10分、60分、2時間、12時間、24時間、2日または7日後に測定される。いくつかの実施形態では、この対象は、マウス、ラット、イヌまたはヒトのいずれかである。いくつかの実施形態では、この対象は、マウスであり、標的遺伝子はGFPであり、このGFPは、マウスに移植されたHeLa細胞中で発現される。いくつかの実施形態では、標的遺伝子は、マウスに移植されたMDA-MB-231GFPまたはMDA-MB-468GFP細胞中で発現される。別の態様では、本発明は、本明細書に記載される組成物例えば、薬学的組成物であって、培養細胞と接触された場合、対象に対して核酸剤これは、DNA剤、RNA剤、例えば、RNAiを促進する剤、またはマイクロRNA、siRNA、shRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、アンタゴmirantagomir、アプタマー、ゲノムDNA、cDNA、mRNA、またはプラスミドであり得るを単独投与される場合にみられる減少よりも少なくとも10、20、25、30、40、50、60、60、80、90、100、200、300、400または500大きい標的遺伝子の発現の減少を生じる、組成物を特徴とする。いくつかの実施形態では、この減少とは、組成物または単独核酸剤で処理されていない対照試料に比べての減少である。いくつかの実施形態では、この組成物および核酸剤単独投与は、同様の条件下で投与される。いくつかの実施形態では、培養細胞と接触される粒子組成物中の核酸剤の量は、例えば、分子の重量または数に関して、単独で接触される量と同じである。いくつかの実施形態では、標的遺伝子は、蛍光タンパク質、例えば、GFPまたはRFPである。いくつかの実施形態では、標的遺伝子は、標識、例えば、蛍光部分、例えば、GFPまたはRFPを含む融合タンパク質をコードする融合遺伝子である。いくつかの実施形態では、この減少は、培養された細胞との接触の10分、60分、2時間、12時間、24時間、2日または7日後に測定される。いくつかの実施形態では、この培養細胞は、HeLa細胞である。いくつかの実施形態では、この培養された細胞は、MDA-MB-231GFPまたはMDA-MB-468GFP細胞である。いくつかの実施形態では、標的遺伝子は、GFPであり、標的遺伝子発現の減少は、組成物のアリコートと、GFPでトランスフェクトされた培養されたHeLA細胞とを接触させること、単独の核酸剤のアリコートとGFPでトランスフェクトされた培養されたHeLA細胞とを接触させること、および各々においてGFP活性のレベルを評価することによって決定される。別の態様では、本発明は、本明細書に記載される組成物例えば、薬学的組成物であって、血清、または細胞溶解液中でインキュベートされ、次いで培養された細胞と接触された場合、粒子の対照組成物、例えば、血清または細胞溶解液とインキュベートされていない、例えば、生理学的pHの緩衝液中の条件でそれ以外は同様の条件下でインキュベートされた、培養細胞と接触された場合、標的遺伝子の発現を低下する組成物の能力の少なくとも10、20、25、30、40、50、60、60、80、90、または100を保持する組成物を特徴とする。いくつかの実施形態では、この減少とは、組成物または単独の核酸剤で処理されていない対照試料に比較した減少である。いくつかの実施形態では、血清または細胞溶解液中のインキュベーションは、10分、20分、30分、1時間、2時間、5時間、24時間、2日、3日、5日、または10日である。いくつかの実施形態では、標的遺伝子は、蛍光タンパク質、例えば、GFPまたはRFPである。いくつかの実施形態では、標的遺伝子は、標識、例えば、蛍光部分、例えば、GFPまたはRFPを含む融合タンパク質をコードする融合遺伝子である。いくつかの実施形態では、標的遺伝子は、GFPであり、標的遺伝子発現の減少は、組成物のアリコートとGFPでトランスフェクトされた培養されたHeLA細胞とを接触すること、単独の核酸剤のアリコートと、GFPでトランスフェクトされた培養されたHeLA細胞とを接触させること、および各々におけるGFP活性のレベルを評価することによって決定される。いくつかの実施形態では、組成物および核酸剤これは、DNA剤、RNA剤、例えば、anRNAiを促進する剤、マイクロRNA、siRNA、shRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、アンタゴmirantagomir、アプタマー、ゲノムDNA、cDNA、mRNA、またはプラスミドであってもよい単独投与は、同様の条件下で細胞と接触される。いくつかの実施形態では、培養された細胞と接触された粒子組成物中の核酸剤の量は、例えば、分子の重量または数に関して、単独で接触される量と同じである。いくつかの実施形態では、この培養された細胞は、HeLa細胞である。いくつかの実施形態では、この培養された細胞は、MDA-MB-231GFPまたはMDA-MB-468GFP細胞である。別の態様では、本発明は、本明細書に記載される組成物例えば、薬学的組成物であって、血清中でインキュベートされ、次いで培養された細胞と接触される場合、以下の特性のうちの少なくとも1つを有する、組成物を特徴とする:a粒子の対照組成物、例えば、血清とインキュベートされていない、例えば、生理学的pHの緩衝液中でそれ以外は同様の条件下でインキュベートされ、培養された細胞と接触された場合、標的遺伝子の発現を低下する、組成物の能力の少なくとも10、20、25、30、40、50、60、60、80、90もしくは100を保持するか;またはb粒子の対照組成物、例えば、血清とインキュベートされていない、例えば、生理学的pHの緩衝液中でそれ以外は同様の条件下でインキュベートされ、完全なままの核酸剤を放出する、組成物の能力の少なくとも10、20、25、30、40、50、60、60、80、90もしくは100を保持する。いくつかの実施形態では、血清中のインキュベーションは、10分、20分、30分、1時間、2時間、5時間、24時間、2日、3日、5日または10日である。いくつかの実施形態では、粒子または複合体すなわち、粒子中でなく、例えば、粒子中に封入されることもなく、本明細書に記載される粒子中でポリマーに複合体されることもない以外の処方物中で投与される組成物および核酸剤は、細胞と同様の条件下で接触される。いくつかの実施形態では、培養された細胞と接触された粒子組成物中の核酸剤の量は、例えば、分子の重量または数に関して、単独での接触の量と同じである。ある実施形態では、この核酸剤は、RNA、DNAまたはRNAおよびDNAの混合ポリマーである。ある実施形態では、RNAは、mRNAまたはsiRNAである。ある実施形態では、DNAは、cDNAまたはゲノムDNAである。ある実施形態では、この核酸剤は、一本鎖であり、別の実施形態ではこの核酸剤は2つの鎖を含む。ある実施形態では、この核酸剤は、1つまたは2つの分子由来の鎖から構成される二重鎖の領域を有し得る。ある実施形態では、この核酸剤は、遺伝子発現を阻害する剤、例えば、RNAiを促進する剤である。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、siRNA、shRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、またはマイクロRNAmiRNAからなる群より選択される。ある実施形態では、この核酸剤は、アンタゴmirantagomirまたはアプタマーである。別の態様では、本発明は、複合体、粒子または組成物を保管する方法であって:この複合体、粒子または組成物を、容器、例えば、気密または液密の容器、例えば、本明細書に記載される容器、例えば、不活性ガス、例えば、アルゴンまたは窒素を頭部空間に充填されている容器中に入れて提供することと;この複合体、粒子または組成物を、例えば、事前に選択された条件下で、例えば、温度、例えば、本明細書に記載される温度で保管することと;この容器を第二の位置に移動するか、またはこの容器から、この複合体、粒子または組成物の全てもしくはアリコートを取り出すことと;を包含する、方法を特徴とする。ある実施形態では、この複合体、粒子または組成物は、例えば、核酸剤の安定性または活性、物理的特性、例えば、色、凝集、流れるかもしくは注がれる能力、または粒子のサイズもしくは電荷を評価される。この評価は、標準に対して比較されてもよく、必要に応じて、この標準の複合体、粒子または組成物に対する応答は、分類される。ある実施形態では、複合体、粒子または組成物は、再構成された処方物として保管される例えば、液体中に、溶液または懸濁物として。詳細な説明本発明は、その適用において、以下の詳細な説明に示されるか、または図面に例示される、構築物および構成要素の配置の詳細に限定されない。本発明は、種々の方法で、他の実施形態であってもよく、かつ実施されるかまたは遂行されてもよい。本明細書で用いられる語法および用語はまた、説明目的のためであり、限定するとしてみなされるべきではない。本明細書における~を含むこと、~を包含することincluding、~を含むこと、~を備えることcomprising、または~を有することhaving、~を含有することcontaining、~を包含することinvolvingおよびそれらの変形の使用は、その後に列挙される項目およびそれらの等価物、ならびに追加的な項目を包含することを意図する。粒子、複合体例えば、核酸剤-ポリマーの複合体および組成物が本明細書に記載される。また、複合体、粒子、および組成物を含む剤形;例えば、障害を治療するためにこの複合体、粒子、および組成物を用いる方法;この複合体、粒子、および組成物を備えるキット;この複合体、粒子、および組成物を製造する方法;この複合体、粒子、および組成物を保管する方法;ならびに粒子およびこの粒子を含む組成物を分析する方法も開示される。見出し、および他の識別子、例えば、a、b、iなどは、単に本明細書および特許請求の範囲を読むことを容易にするために示す。本明細書または特許請求の範囲における見出しまたは他の識別子の使用は、このステップまたは要素が、アルファベット順、または数字順、または示される順序で行われることを必要とはしない。定義本明細書で使用する場合、大気条件という用語は、別段示さない限り、約1大気圧、50の相対湿度、および約25°Cの周囲条件を指す。第一部分の第二部分に対する関係、例えば、ポリマーに対する薬剤の結合に関して本明細書で用いる場合、結合するという用語は、第一部分と第二部分の間の共有結合の形成を指す。同じ文脈で、結合という名詞は、第一部分と第二部分の間の共有結合を指す。例えば、ポリマーに結合された核酸剤は、ポリマー例えば、本明細書に記載される疎水性ポリマーに共有結合された治療剤、この場合は核酸剤である。結合は、例えば、第一部分の第二部分への直接的な結合を通じての直接的な結合であってもよく、またはリンカーを通じてであってもよい例えば、第一部分と第二部分の間に配置される1つ以上の原子の共有結合鎖を通じて。例えば、リンカーを通じて結合する場合、第一部分例えば、薬剤は、リンカーに共有結合し、次にこのリンカーが第二部分例えば、本明細書に記載される疎水性ポリマーに共有結合される。生分解性という用語は、使用中に分解することを意図している本明細書で記載のような、ポリマー、組成物、および処方物を包含する。生分解性ポリマーは典型的には、これが使用中に分解し得る点で、非性分解性ポリマーとは異なる。特定の実施形態において、このような使用は、インビボ治療法などのインビボでの用途を包含し、他のある実施形態において、このような用途はインビトロでの用途を包含する。一般に、生分解性に起因する分解は、生分解性ポリマーの、その構成要素サブユニットへの分解、またはポリマーのより小さな非ポリマーサブユニットへの、例えば生化学的プロセスによる消化を包含する。特定の実施形態において、2つの異なる種類の生分解が一般に特定され得る。例えば、1種類の生分解は、ポリマー骨格における結合共有結合であろうと他の結合であろうとの切断が関与し得る。このような生分解において、モノマーおよびオリゴマーが典型的には結果として生じ、さらにより典型的には、このような生分解は、ポリマーのサブユニットの1つ以上を結合する結合の切断によって生じる。対照的に、別の種類の生分解は、側鎖に対して内部の、または側鎖をポリマー骨格に結合する結合共有結合であろうと他の結合であろうとの切断と関与し得る。特定の実施形態では、その生分解の1つもしくは他方、またはその両方の一般的な種類が、ポリマーの使用の間に生じ得る。本明細書で使用する場合、生分解という用語は、上記の生分解の両方の一般的な種類を包含する。生分解ポリマーの分解速度は、任意の分解に寄与する連結の化学的性質が何であるか、このようなポリマーの分子量、結晶化度、生体安定性biostability、および架橋度、ポリマーの物理的特徴例えば、形状および大きさ、ポリマーもしくは粒子の集合、ならびに投与の様式および位置を含む、種々の因子に一部は依存する場合が多い。例えば、より大きな分子量、より高い結晶化度、および/またはより大きな生体安定性は通常、より遅い生分解をもたらす。カチオン性部分という用語は、pKa5以上例えば、5以上のpKaを有するルイス塩基および/または以下の条件のうちの少なくとも1つの陽性電荷を有する部分を指す:本明細書に記載される粒子の生成の間、本明細書に記載される粒子に処方されたとき、またはその後の対象に対して本明細書に記載の粒子の投与、例えば、対象における循環の間、および/またはエンドソームにおける循環の間。例示的なカチオン性部分としては、アミン含有部分例えば、荷電されたアミン部分、例えば、四級アミン、グアニジン含有部分例えば、荷電されたグアニジン、例えば、グアニジニウム部分、および複素環式および/または複素環式芳香族部分例えば、荷電部分、例えば、ピリジニウムまたはヒスチジン部分が挙げられる。カチオン性部分としては、ポリマー種、例えば、2つ以上の電荷を有する部分例えば、ある部分例えば、カチオン性PVAおよび/またはポリアミンの反復する存在によって寄与されるが挙げられる。カチオン性部分としてはまた、陽性荷電および陰性荷電の両方を有する化合物例えば、アミノ酸、例えば、アルギニン、リジン、またはヒスチジンを意味する双性イオンを包含する。カチオン性ポリマーという用語、例えば、ポリアミンは、本明細書に記載される粒子に処方された場合、複数の正の電荷すなわち、少なくとも2を有するポリマーポリマーという用語は、本明細書で下に記載されるを指す。いくつかの実施形態では、カチオン性ポリマー、例えば、ポリアミンは、少なくとも3、4、5、10、15、または20の正の電荷を有する。生理学的条件下で切断可能という句は、生理学的な条件に供された場合、約50または100時間未満の半減期を有する結合を指す。例えば、酵素分解は、生理学的条件例えば、約4~約8のpH、および約25°C~約37°Cの温度を有する水溶液に対する暴露の際、約5年、1年、6カ月、3カ月、1カ月、15日、5日、3日、または1日未満の期間にわたって生じ得る。有効量または有効な量とは、細胞を治療し、または障害の症状を治癒させ、緩和させ、軽減し、または改善する上での対象への単回または複数回の用量の投与の際に有効なポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物の量を指す。組成物の有効量は、個体の疾患状態、年齢、性別、および体重、ならびに個体における所望の応答を誘発させる化合物の能力などの要因に応じて変動し得る。有効量とはまた、組成物の任意の毒性のまたは有害な効果を、治療的に有益な効果が上回るものでもある。本明細書で使用する場合、用語封入するは、第一部分と第二部分との、例えば、核酸剤またはカチオン性部分とポリマーとの間の非共有結合性の相互作用の形成による、第二の部分とのまたは第二の部分内の第一部分の配置を指す。いくつかの実施形態では、粒子内に封入された部分を指す場合、その部分例えば、核酸剤またはカチオン性部分は、ファンデルワールス相互作用、疎水性相互作用、水素結合、双極子間相互作用、イオン相互作用、およびπスタッキングpistackingなどの1つ以上の非共有結合性相互作用を通じてポリマーまたは粒子の他の成分と結合し、この部分とポリマーまたは粒子の他の成分との間の共有結合は、存在しない。封入された部分は、これが封入されるポリマーまたは粒子によって完全にまたは部分的に取り囲まれ得る。本明細書で用いる場合、疎水性という用語は、生理学的イオン強度で水溶液に約0.05mg/mL未満好ましくは約0.01mg/mL以下の程度までしか溶解することのできない部分を指す。本明細書で用いる場合、親水性という用語は、生理学的なイオン強度で水溶液において少なくとも約0.05mg/mL以上の溶解度を有する部分を指す。本明細書で用いる場合、親水性-疎水性ポリマーという用語は、疎水性部分に対して結合された親水性部分を含むポリマーを指す。例示的な親水性-疎水性ポリマーとしては、例えば、親水性ポリマーおよび疎水性ポリマーのブロック-コポリマーが挙げられる。本明細書で用いる場合、ヒドロキシ保護基は、当該分野で周知であり、その内容全体が参照により本明細書に援用されるProtectingGroupsinOrganicSynthesis,T.W.GreeneおよびP.G.M.Wuts,第3版,JohnWileySons,1999において詳細に説明されたものを含む。好適なヒドロキシ保護基としては、例えば、アシル例えば、アセチル、トリエチルシリルTES、t-ブチルジメチルシリルTBDMS、2,2,2-トリクロロエトキシカルボニルTroc、およびカルボベンジルオキシCbzが挙げられる。本明細書において用いる場合、完全なままという用語は、核酸剤が、その標的遺伝子を効果的にサイレンシングするのに必要な構造の十分量を保持することを意味する。標的遺伝子は、その発現が、完全なままの核酸剤と接触された場合、少なくとも90、80、70、60、50、40、30、20または少なくとも10まで減少される場合に、効果的にサイレンシングされている。典型的には、核酸剤、例えば、siRNAの完全なままの調製では、核酸剤分子のうち少なくとも60、70、80、90、または全てが、完全なままの核酸剤分子の同じ分子量または長さを有する。本明細書で用いる場合、不活性雰囲気とは、本明細書に記載されるポリマー-薬剤の複合体、粒子、組成物、または混合物と化学的に反応しない不活性ガスから主として構成される雰囲気を指す。不活性ガスの例は、窒素N2、ヘリウム、およびアルゴンである。本明細書で用いる場合、リンカーとは、2つ以上の部分例えば、核酸剤またはカチオン性部分およびポリマー、例えば、疎水性または親水性-疎水性または親水性のポリマーを一緒に接続する部分である。リンカーは少なくとも2つの官能基を有する。例えば、2つの官能基を有するリンカーは、核酸剤、カチオン性部分、疎水性部分例えば、本明細書に記載のポリマーまたは親水性-疎水性ポリマーのような部分の上の官能基と反応し得る第一の官能基と、本明細書に記載の核酸剤のような第二の部分上の官能基と反応し得る第二の官能基とを有し得る。リンカーは、3つ以上の官能基例えば、3、4、5、6、7、8、9、10、またはそれより多くの官能基を有してもよく、この官能基は、例えば複数の剤をポリマーに連結するように、またはリンカー内の生体切断性biocleavable部分を提供するように、用いられ得る。いくつかの実施形態では、例えば、リンカーが、3つ以上の官能基を有し、例えば、このリンカーは、第一の部分を第二の部分に接続する2つの官能基に加えて、官能基を含み、この追加の官能基例えば、第三の官能基は、第一の基と第二の基との間に位置してもよく、いくつかの実施形態では、例えば、生理学的条件下で切断され得る。例えば、リンカーは、の形態であってもよく、式中、f1は、第一の官能基、例えば、核酸剤、カチオン性部分、疎水性部分例えば、本明細書に記載のポリマーまたは親水性-疎水性ポリマーのような部分の上の官能基と反応し得る官能基であり、f2は、第二の官能基、例えば、本明細書に記載の核酸剤のような第二の部分上の官能基と反応し得る官能基であり;f3は、生体切断性官能基、例えば、本明細書に記載される生体切断性の結合であり、は、官能基、例えば、アルキレン二価のアルキル基を接続するスペーサーであり、ここで必要に応じて、アルキレンリンカーの1つ以上の炭素原子が、1つ以上のヘテロ原子例えば、以下の基のうちの1つ以上を生じる:チオエーテル、アミノ、エステル、エーテル、ケト、アミド、シリルエーテル、オキシム、カルバミン酸塩、炭酸塩、ジスルフィド、複素環式、または複素環式芳香族で置換されている。文脈に応じて、リンカーとは、第一の部分もしくは第二の部分例えば、核酸剤もしくはポリマーのいずれかへの結合の前のリンカー部分、1つの部分へ結合した後だが、第二の部分への結合の前のリンカー部分、または第一および第二の部分の両方に結合した後に存在するリンカーの残基を指してもよい。本明細書で用いる場合、凍結保護剤という用語は、凍結乾燥した調製物中に存在する物質を指す。典型的には、凍結保護剤は、凍結乾燥加工前に存在し、結果として生じる凍結乾燥した調製物において持続する。典型的には、凍結保護剤は、粒子の形成後に添加される。例えば、粒子の形成と凍結乾燥との間に、濃縮ステップが存在する場合、凍結保護剤は、この濃縮ステップの前に添加されても後に添加されてもよい。凍結保護剤は、凍結乾燥中に、粒子を保護するために、例えば、凝集、粒子の崩壊、および/または他の種類の損傷を低減または防止するために、用いられてもよい。ある実施形態では、凍結保護剤は、抗凍結剤である。ある実施形態では、凍結保護剤は、炭水化物である。本明細書で用いる場合、炭水化物という用語は、単糖類、二糖類、オリゴ糖類、および多糖類を指し、かつ包含する。ある実施形態では、凍結保護剤は単糖である。本明細書で用いる場合、単糖という用語は、より単純な炭水化物単位へと加水分解できない単一の炭水化物単位例えば、単純な糖を指す。例示的な単糖凍結保護剤としては、グルコース、フルクトース、ガラクトース、キシロース、リボースなどが挙げられる。ある実施形態では、凍結保護剤は、二糖である。本明細書で用いる場合、二糖という用語は、グリコシド連鎖を通じて、例えば、1~4の連鎖または1~6の連鎖を通じて結合した2個の単糖単位によって形成される化合物または化学部分を指す。二糖は、2つの単糖類へと加水分解され得る。例示的な二糖凍結保護剤としては、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトースなどが挙げられる。ある実施形態では、凍結保護剤は、オリゴ糖である。本明細書で用いる場合、オリゴ糖という用語は、グリコシド連鎖を通じて、例えば1~4の連鎖または1~6の連鎖を通じて互いに結合されて、直鎖の、分岐鎖の、または環状の構造を形成する3~約15の、好ましくは3~約10の単糖単位によって形成される化合物または化学部分を指す。例示的なオリゴ糖凍結保護剤としては、シクロデキストリン、ラフィノース、メレチトース、マルトトリオース、スタキオースアカルボース、などが挙げられる。オリゴ糖は、酸化されてもよいし、または還元されてもよい。ある実施形態では、凍結保護剤は、環状オリゴ糖である。本明細書で用いる場合、環状オリゴ糖という用語は、グリコシド連鎖を通じて、例えば、1~4の連鎖、または1~6の連鎖を通じて、互いに結合されて環状構造を形成する3~約15、好ましくは6、7、8、9、または10の単糖単位によって形成される化合物または化学部分を指す。例示的な環状オリゴ糖凍結保護剤としては、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、またはγシクロデキストリンなどの別々の化合物である環状オリゴ糖類が挙げられる。他の例示的な環状オリゴ糖凍結保護剤としては、環状オリゴ糖部分を含むポリマーなど、より大きな分子構造におけるシクロデキストリン部分を含む化合物が挙げられる。環状オリゴ糖は、酸化されても、または還元されてもよく、例えば酸化されてジカルボニルの形態となってもよい。本明細書で用いる場合、シクロデキストリン部分という用語は、ポリマーなど、より大きな分子構造へと組み込まれた、またはその一部であるシクロデキストリン例えば、α、β、またはγシクロデキストリン基を指す。シクロデキストリン部分は、直接的にまたは任意のリンカーを通じて1つ以上の他の部分に結合することができる。シクロデキストリン部分は、酸化されてもまたは還元されてもよく、例えば、酸化されてジカルボニルの形態となってもよい。炭水化物の凍結保護剤、例えば、環状オリゴ糖凍結保護剤は、誘導体化された炭水化物であってもよい。例えば、ある実施形態では、凍結保護剤は、誘導体化された環状オリゴ糖、例えば、誘導体化されたシクロデキストリン、例えば、2ヒドロキシプロピル-βシクロデキストリン、例えば、その内容が参照により本明細書に援用されている米国特許第6,407,079号において開示される、部分的にエーテル化したシクロデキストリン例えば、部分的にエーテル化したβシクロデキストリンである。誘導体化されたシクロデキストリンの別の例は、β-シクロデキストリンスルホブチルエーテルナトリウムである。例示的な凍結保護剤は、多糖である。本明細書で用いる場合、多糖という用語は、グリコシド連鎖を通じて、例えば、1~4の連鎖、または1~6の連鎖を通じて互いに結合されて、直鎖の、分岐鎖の、または環状の構造を形成し、その骨格構造の一部として多糖類を含むポリマーを包含する少なくとも16の単糖単位によって形成される化合物または化学部分を指す。骨格において、多糖は、直鎖であってもまたは環状であってもよい。例示的な多糖保護剤としては、グリコーゲン、アミラーゼ、セルロース、デキストラン、マルトデキストリンなどが挙げられる。誘導体化された炭水化物という用語は、該当の誘導体化していない炭水化物とは少なくとも1つの原子が異なる実体を指す。例えば、誘導体化していない炭水化物に存在する-OHの替わりに、誘導体化された炭水化物は-OXを有してもよく、この式中で、XはH以外である。誘導体は、化学的機能化および/または置換を通じて、あるいは新規合成を通じて得てもよく、誘導体という用語は、過程に基づく限定を意味することはない。ナノ粒子という用語は、任意の1つの寸法の大きさ例えば、x、y、およびzのデカルト寸法が約1マイクロメーターミクロン未満、例えば、約500nm未満、または約200nm未満、または約100nm未満、かつ約5nm超である材料の構造を指すために本明細書で用いられる。ある実施形態では、この大きさは、70nm未満であるが、約20nmよりは大きい。ナノ粒子は、種々の幾何学的形状、例えば、球状、楕円体などを有することができる。ナノ粒子nanoparticlesという用語は、ナノ粒子nanoparticleという用語の複数形として用いられる。核酸剤という用語は、2つ以上のヌクレオチド残基を含む、任意の合成または天然に存在する治療剤を指す。ある実施形態では、この核酸剤は、RNA,DNAまたはRNAおよびDNAの混合ポリマーである。一実施形態では、RNAは、mRNAまたはsiRNAである。ある実施形態では、DNAはcDNAまたはゲノムDNAである。ある実施形態では、この核酸剤は、一本鎖であり、別の実施形態ではこの核酸剤は2つの鎖を含む。ある実施形態では、この核酸剤は、1つまたは2つの分子由来の鎖から構成される二重鎖の領域を有し得る。ある実施形態では、この核酸剤は、遺伝子発現を阻害する剤、例えば、RNAiを促進する剤である。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、siRNA、shRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、またはマイクロRNAmiRNAである。ある実施形態では、この核酸剤は、アンタゴmirantagomirまたはアプタマーである。本明細書で用いる場合、粒子多分散指数PDIまたは粒子多分散性とは、粒子の大きさの分布の幅を指す。粒子のPDIは、PDI=2a2/a12の等式から算出することができ、式中、a1は、強度により加重されたZ平均サイズを算出するために用いられる第一の累積率またはモーメントであり、a2は、多分散指数PdIとして定義されるパラメータを算出するために用いられる第二のモーメントである。1の粒子PDIは、理論的最大値であり、完全に平らなサイズ分布プロットであろう。本明細書で説明される粒子の組成物は、0.5未満、0.4未満、0.3未満、0.2未満、または0.1未満という粒子PDIを有し得る。本明細書で用いる場合、薬学的に許容される担体またはアジュバントとは、本明細書で説明されたポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物とともに患者に投与され得、その薬理学的活性を破壊せず、治療量の粒子を送達するのに十分な用量で投与される場合に非毒性である担体またはアジュバントを指す。薬学的に受容可能な担体として機能することのできる材料のいくつかの例としては、以下が挙げられる:1ラクトース、グルコース、マンニトール、およびスクロースなどの糖類;2トウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプンなどのデンプン;3カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、および酢酸セルロースなどのセルロースおよびその誘導体;4トラガカント粉末;5麦芽;6ゼラチン;7滑石;8ココアバターおよび坐剤用ワックスなどの賦形剤;9ピーナッツ油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、およびダイズ油などの油;10プロピレングリコールなどのグリコール;11グリセリン、ソルビトール、マンニトール、およびポリエチレングリコールなどのポリオール;12オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなどのエステル;13寒天;14水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤;15アルギン酸;16発熱物質非含有水;17等張性生理食塩水;18リンゲル溶液;19エチルアルコール;20リン酸緩衝溶液;ならびに21薬学的組成物において採用される他の非毒性適合性物質。本明細書で用いる場合、ポリマーという用語は、当該分野で使用される通常の意味、すなわち、共有結合によって接続される1つ以上の反復単位モノマーを特徴とする分子構造という意味を与えられる。反復ユニットは、すべて同一であり得、またはいくつかの場合、ポリマー内に存在する2種類以上の反復単位であり得る。ポリマーは、天然であっても、または天然でない合成のポリマーであってもよい。ポリマーは、2つ以上のモノマーを含んでいるホモポリマーであっても、またはコポリマーであってもよい。ポリマーは直鎖であっても、または分岐されてもよい。2種以上の反復単位がポリマー内に存在するならば、このポリマーはいわばコポリマーである。ポリマーを使用する任意の実施形態において、採用されるポリマーはコポリマーであってもよいことが理解されるべきである。コポリマーを形成する反復単位は、任意の様式で配置され得る。例えば、反復単位は、無作為な順序で、交互の順序で、またはブロックコポリマーとして、すなわち、第一の反復単位例えば、第一のブロックを各々含む1つ以上の領域、および第二の反復単位例えば第二のブロックを各々含む1つ以上の領域、などを含んで配置されてもよい。ブロックコポリマーは、2個ジブロックコポリマー、3個トリブロックコポリマー、またはそれより多数の別個のブロックを有してもよい。配列の点で、コポリマーは、無作為、ブロックであってもよく、または無作為およびブロックの配列の組み合わせを含んでもよい。いくつかの場合、ポリマーは、生物から得られ、すなわち、生体高分子である。生体高分子に関する非限定的な例としては、ペプチドもしくはタンパク質すなわち、種々のアミノ酸のポリマーまたはDNAもしくはRNAなどの核酸が挙げられる。本明細書で用いる場合、ポリマー多分散指数PDIまたはポリマー多分散性とは、所与のポリマー試料における分子質量の分布を指す。算出されたポリマーPDIは、重量平均分子量を数平均分子量で割ったものである。ポリマーPDIは、ポリマーのバッチにおける個々の分子質量の分布を示す。ポリマーPDIは、典型的には1より大きい値を有するが、ポリマー鎖が一律の鎖の長さに近づくと、PDIは均一1に近づく。本明細書で用いる場合、対象への薬剤の投与の文脈で用いられる予防するまたは予防することという用語は、対象に投与計画、例えば、ポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物の投与を与えて、その結果、障害の少なくとも1つの症状の発症が、この投与計画の不在下でみられるであろうものと比較して遅延されることを指す。本明細書で用いる場合、対象という用語は、ヒトおよび非ヒト動物を含むことを意図する。例示的なヒト対象は、障害、例えば、本明細書で説明される障害を有するヒト患者、または健常な対象を含む。非ヒト動物という用語には、すべての脊椎動物、例えば、非哺乳類ニワトリ、両生類、爬虫類など、ならびに非ヒト霊長類、飼うための動物、および/または農業的に有用な動物、例えばヒツジ、イヌ、ネコ、ウシ、ブタなどの哺乳類を包含する。本明細書で用いる場合、障害を有する対象を治療するまたは治療することという用語は、投与計画、例えば、ポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物を対象へ投与し、その結果、その障害の少なくとも1つの症状が治療されcured、治癒されhealed、軽減され、緩和され、変化され、治癒されremedied、寛解され、または改善されることを指す。治療することは、障害または障害の症状を軽減するか、緩和するか、変化させるか、治癒するか、寛解するか、改善するか、または影響するのに有効な量を投与することを包含する。治療は、障害の症状の増悪または悪化を阻害し得る。アシルという用語は、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、アリールカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、またはヘテロアリールカルボニル置換基を指し、それらのうちのいずれもさらに置換されてもよい例えば、1つ以上の置換基によって。例示的なアシル基としては、アセチルCH3CO-、ベンゾイルC6H5CO-、およびアセチルアミノ酸例えば、アセチルグリシン、CH3CONHCH2CO-が挙げられる。アルコキシという用語は、酸素ラジカルの結合した、以下に定義されるようなアルキル基を指す。代表的なアルコキシ基としては、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、tert-ブトキシ、などが挙げられる。カルボキシという用語は、-COOHまたはその塩を指す。ヒドロキシおよびヒドロキシルは、交換可能に用いられて、-OHを指す。置換基という用語は、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、ヘテロシクリル基、ヘテロシクロアルケニル基、シクロアルケニル基、アリール基、またはヘテロアリール基において、その基の任意の原子において置換された基を指す。任意の原子を置換され得る。好適な置換基としては、限定するものではないが、アルキル例えば、C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12の直鎖または分岐鎖アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル例えば、CF3などのペルフルオロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、ヘテロシクリル、アルケニル、アルキニル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルケニル、アルコキシ、ハロアルコキシ例えば、OCF3などのペルフルオロアルコキシ、ハロ、ヒドロキシ、カルボキシ、カルボキシラート、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、SO3H、スルファート、ホスファート、メチレンジオキシ-O-CH2-O-、この中で、酸素は近接する原子に結合している、エチレンジオキシ、オキソ、チオキソ例えば、C=S、イミノアルキル、アリール、アラルキル、SOnアルキル式中、nは0~2である、SOnアリール式中、nは0~2である、SOnヘテロアリール式中、nは0~2である、SOnヘテロシクリル式中、nは0~2である、アミンモノ-、ジ-、アルキル、シクロアルキル、アラルキル、ヘテロアラルキル、アリール、ヘテロアリール、およびこれらの組み合わせ、エステルアルキル、アラルキル、ヘテロアラルキル、アリール、ヘテロアリール、アミドモノ-、ジ-、アルキル、アラルキル、ヘテロアラルキル、アリール、ヘテロアリール、およびこれらの組み合わせ、スルホンアミドモノ-、ジ-、アルキル、アラルキル、ヘテロアラルキル、およびこれらの組み合わせが挙げられる。一態様において、1つの基における置換基は独立して、上記の置換基の任意の単一の置換基または任意のサブセットである。別の態様において、置換基はそれ自体、上記の置換基の任意の1つと置換されてもよい。粒子この粒子は、一般には、核酸剤、および少なくとも1つのカチオン性部分、疎水性部分、例えば、ポリマー、または親水性-疎水性ポリマーを含む。いくつかの実施形態では、この粒子は、核酸剤およびカチオン性部分、ならびに疎水性部分、例えば、ポリマー、または親水性-疎水性ポリマーのうちの少なくとも1つを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される粒子は、疎水性部分、例えば、疎水性ポリマー、または脂質例えば、疎水性ポリマー、親水性部分および疎水性部分を含むポリマー、核酸剤、およびカチオン性部分を含む。いくつかの実施形態では、この核酸剤および/またはカチオン性部分は、ある部分に結合される。例えば、この核酸剤および/またはカチオン性部分は、ポリマー、例えば、疎水性ポリマー、または親水性部分および疎水性部分を含んでいるポリマーに結合されてもよいし、またはこの核酸剤は、ポリマーに結合される核酸と二重鎖を形成する。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、ポリマー、例えば、疎水性ポリマー、または親水性部分および疎水性部分を含んでいるポリマーに結合され、およびカチオン性部分は、ポリマーに結合されない例えば、このカチオン性部分は、粒子に封入される。いくつかの実施形態では、この核酸剤およびカチオン性部分は、両方ともポリマー、例えば、疎水性ポリマー、または親水性部分および疎水性部分を含んでいるポリマーに結合されるか、またはこの核酸剤は、ポリマーに結合される核酸と二重鎖を形成し、カチオン性部分はポリマーに結合される。いくつかの実施形態では、このカチオン性部分はポリマー例えば、疎水性ポリマーまたは親水性部分および疎水性部分を含んでいるポリマーに結合され、およびこの核酸剤は、ポリマーに結合されない例えば、この核酸剤は、この粒子中に封入される。いくつかの実施形態では、核酸剤およびカチオン性部分のいずれもポリマーに結合されない。この核酸剤および/またはカチオン性部分はまた、他の部分に結合されてもよい。例えば、核酸剤は、カチオン性部分に結合されてもよいし、または親水性ポリマー、例えば、PEGに結合されてもよい。疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーまたは脂質例えば、疎水性ポリマー、親水性部分および疎水性部分を含んでいるポリマー、核酸剤、およびカチオン性部分に加えて、本明細書に記載される粒子は、1つ以上の追加の成分、例えば、追加の核酸剤または追加のカチオン性部分を包含し得る。本明細書に記載される粒子はまた、少なくとも1つの酸性部分、例えば、カルボン酸基を有する化合物を包含し得る。この化合物は、小分子であっても、または少なくとも1つの酸性部分を有するポリマーであってもよい。いくつかの実施形態では、この化合物は、ポリマー、例えば、PLGAである。いくつかの実施形態では、この粒子は、対象に投与された場合、予め選択された区画で、核酸剤、例えば、siRNAの優先的な遊離があるように構成される。この予め選択された区画は、標的部位、位置、組織型、細胞型、例えば、疾患特異的な細胞型、例えば、癌細胞、または細胞内区画、例えば、サイトゾルであってもよい。ある実施形態では、ある粒子は、他の区画、例えば、非腫瘍区画、例えば、末梢血液ではなく、腫瘍において優先的な遊離をもたらす。核酸剤、例えば、siRNAがポリマーまたはカチオン性部分に結合される実施形態では、この核酸剤は、対象の非腫瘍区画、例えば、末梢血液において腫瘍より大きい程度まで放出される例えば、リンカーの還元切断を通じて。いくつかの実施形態では、この粒子は、対象に投与された場合、対象の区画、例えば、腫瘍に対して、核酸剤が単独に投与された場合よりも多くの核酸剤、例えば、siRNAを送達するように構成される。いくつかの実施形態では、この粒子は、賦形剤、例えば、炭水化物成分、または安定化剤もしくは凍結保護剤、例えば、本明細書に記載の炭水化物成分、安定化剤または凍結保護剤と会合される。理論によって束縛されるものではないが、炭水化物成分は、安定化剤または凍結保護剤として機能し得る。いくつかの実施形態では、炭水化物成分、安定化剤または凍結保護剤は、1つ以上の炭水化物例えば、本明細書に記載される1つ以上の炭水化物、例えば、例えば、スクロース、シクロデキストリンまたはシクロデキストリンの誘導体例えば、2-ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン、時にはHP-β-CDと呼ばれる、塩、PEG、PVPまたはクラウンエーテルを含む。いくつかの実施形態では、炭水化物成分、安定化剤または凍結保護剤は、2つ以上の炭水化物、例えば、本明細書に記載される2つ以上の炭水化物を含む。一実施形態では、この炭水化物成分、安定化剤または凍結保護剤としては、環状の炭水化物例えば、シクロデキストリンまたはシクロデキストリンの誘導体、例えば、α-、β-、またはγ-、シクロデキストリン例えば、2-ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリンおよび非環状の炭水化物が挙げられる。例示的な非環状のオリゴ糖類としては、10、8、6または4個の単糖類サブユニット例えば、単糖類または二糖類例えば、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトースまたはそれらの組み合わせが挙げられる。ある実施形態では、炭水化物成分、安定化剤または凍結保護剤は、第一のおよび第二の構成要素、例えば、環状炭水化物および非環状炭水化物、例えば、単糖類、二糖類または四糖類を含む。一実施形態では、粒子と会合する環状炭水化物の非環状炭水化物に対する重量比は、本明細書に記載される重量比、例えば、0.5:1.5~1.5:0.5である。ある実施形態では、炭水化物成分、安定化剤または凍結保護剤は、以下のような第一のおよび第二の構成要素ここでは、AおよびBと命名を含む:Aは環状炭水化物を含み、そしてBは二糖類を含む;Aは2つ以上の環状炭水化物、例えば、β-シクロデキストリン本明細書では時には、β-CDと呼ばれるまたはβ-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、そしてBは二糖類を含む;Aは環状炭水化物、例えば、β-CDまたはβ-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、そしてBは2つ以上の二糖類を含む;Aは2つ以上の環状炭水化物、およびBは2つ以上の二糖類を含む;Aはシクロデキストリン、例えば、β-CDまたはβ-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、そしてBは二糖類を含む;Aはβ-シクロデキストリン、例えば、β-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、およびBは二糖類を含む;Aはβ-シクロデキストリン、例えば、β-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、およびBはスクロースを含む;Aはβ-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、およびBはスクロースを含む;Aはβ-シクロデキストリン、例えば、β-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、およびBはトレハロースを含む;Aはβ-シクロデキストリン、例えば、β-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、およびBはスクロースおよびトレハロースを含む。AはHP-β-CDを含み、およびBはスクロースおよびトレハロースを含む。ある実施形態では、成分AおよびBは、0.5:1.5~1.5:0.5の比で存在する。ある実施形態では、構成要素AおよびBは、以下の比で存在する:3-1:0.4-2;3-1:0.4-2.5;3-1:0.4-2;3-1:0.5-1.5;3-1:0.5-1;3-1:1;3-1:0.6-0.9;および3:1:0.7。ある実施形態では、構成要素AおよびBは、以下の比で存在する:2-1:0.4-2;3-1:0.4-2.5;2-1:0.4-2;2-1:0.5-1.5;2-1:0.5-1;2-1:1;2-1:0.6-0.9;および2:1:0.7。ある実施形態では、構成要素AおよびBは以下の比で存在する:2-1.5:0.4-2;2-1.5:0.4-2.5;2-1.5:0.4-2;2-1.5:0.5-1.5;2-1.5:0.5-1;2-1.5:1;2-1.5:0.6-0.9;2:1.5:0.7。ある実施形態では、構成要素AおよびBは以下の比で存在する:2.5-1.5:0.5-1.5;2.2-1.6:0.7-1.3;2.0-1.7:0.8-1.2;1.8:1;1.85:1および1.9:1。ある実施形態では構成要素Aは、シクロデキストリン、例えば、β-シクロデキストリン、例えば、β-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、およびBはスクロースを含み、ならびにそれらは以下の比で存在する:2.5-1.5:0.5-1.5;2.2-1.6:0.7-1.3;2.0-1.7:0.8-1.2;1.8:1;1.85:1および1.9:1。いくつかの実施形態では、この粒子はナノ粒子である。いくつかの実施形態では、ナノ粒子は、約220nm以下例えば、約215nm、210nm、205nm、200nm、195nm、190nm、185nm、180nm、175nm、170nm、165nm、160nm、155nm、150nm、145nm、140nm、135nm、130nm、125nm、120nm、115nm、110nm、105nm、100nm、95nm、90nm、85nm、80nm、75nm、70nm、65nm、60nm、55nmまたは50nm以下の直径を有する。ある実施形態では、このナノ粒子は、少なくとも10nm例えば、少なくとも約20nmの直径を有する。本明細書に記載される粒子は、標的化剤または脂質例えば、この粒子の表面上にを含み得る。本明細書に記載される複数の粒子の組成物は、約50nm~約500nm例えば、約50nm~約200nmの平均直径を有し得る。複数の粒子の組成物粒子は、約50nm~約500nm例えば、約75nm~約220nmから約50nm~約220nm例えば、約75nm~約200nmという中央粒子サイズDv50粒子の体積の50がそれ未満で存在する粒子サイズを有し得る。複数の粒子の組成物は、約50nmから約500nm例えば、約75nm~約200nmというDv90粒子の体積の90がそれ未満で存在する粒子サイズを有し得る。いくつかの実施形態では、複数の粒子の組成物は、約150nm未満のDv90を有する。複数の粒子の組成物は、0.5未満、0.4未満、0.3未満、0.2未満、または0.1未満という粒子PDIを有し得る。本明細書に記載される粒子は、水中で測定した場合、約-20mV~約50mVにおよぶ表面ゼータ電位を有してもよい。ゼータ電位は、粒子の表面電位の測定値である。いくつかの実施形態では、粒子は、水中で測定した場合、約-20mV~約20mV、約-10mV~約10mV、または中性におよぶ表面ゼータ電位を有してもよい。ある実施形態では、本明細書に記載される、粒子、または複数の粒子を含む組成物は、例えば、インビボのモデル系で投与した場合例えば、物理的特性、例えば、分子量の関数によって測定した場合、効果例えば、ノックダウンを観察するのに十分な量の核酸剤例えば、siRNAを有する。ある実施形態では、本明細書に記載される、粒子、または複数の粒子を含む組成物は、その核酸剤、例えば、数量または重量で、siRNAの少なくとも30、40、50、60、70、80、または90が完全なままである例えば、物理的特性、例えば、分子量の関数によって測定した場合組成物である。ある実施形態では、本明細書に記載される、粒子、または複数の粒子を含む組成物は、その核酸剤、例えば、数量または重量で、siRNAの少なくとも30、40、50、60、70、80、または90が、その粒子の表面で曝されるのではなく内側である組成物である。ある実施形態では、本明細書に記載の粒子、または複数の粒子を含む組成物は、50/50のマウス/ヒト血清中でインキュベートされた場合、凝集をほとんど示さないか、または全く示さない。例えば、インキュベートされた場合、数量または重量で30、20、または10未満の粒子が凝集する。ある実施形態では、本明細書に記載の粒子、または複数の粒子を含む組成物は、25°C±2°C/60相対湿度±5相対湿度で、開放、または閉鎖された容器中で、20、30、40、50または60日間保管された場合、例えば、インビボのモデル系例えば、本明細書に記載される任意のモデル系のようなマウスモデルで測定した場合、その活性の少なくとも30、40、50、60、70、80、90、または95を保持し得る。ある実施形態では、本明細書に記載の粒子、または複数の粒子を含む組成物は、インビボのモデル系例えば、本明細書に記載される任意のモデル系のようなマウスモデルで1または3mg/kgの単回用量で投与した場合、少なくとも20、30、40、50または60のタンパク質減少および/またはmRNAノックダウンを生じ得る。ある実施形態では、本明細書に記載される粒子、または複数の粒子を含む組成物は、インビボのモデル系例えば、本明細書に記載される任意のモデル系のようなマウスモデルで投与された場合例えば、1または3mg/kgの単回用量として、タンパク質またはmRNAで測定した場合、オフターゲット遺伝子の20、1、5未満、またはそのノックダウンを生じ得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される粒子は、対象における標的とする遺伝子の発現を、対象に対するその粒子の投与後、ほぼ72時間、96時間、120時間、144時間、168時間、192時間、216時間、240時間、264時間後に少なくとも20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95以上減少させるのに有効な量の核酸剤を送達し得る。一実施形態では、本明細書に記載の粒子は、対象における標的とする遺伝子の発現を、対象に対するこの粒子の投与のほぼ120時間後、少なくとも50、55、60、65、70、75または80まで低下するのに有効な量の核酸剤を送達し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される粒子または組成物を投与された対象における標的遺伝子発現のレベルが、核酸剤が、粒子または複合体以外の処方物すなわち、粒子中でなく、例えば、粒子中に封入されることも、ポリマーに複合体されることもない、例えば、本明細書に記載の粒子中で投与される場合に見られる標的遺伝子の発現のレベルまたは核酸剤もしくは他の治療剤の投与もなしで示される標的遺伝子の発現と比較される。ある実施形態では、本明細書に記載される、粒子、または複数の粒子を含む組成物は、標的遺伝子mRNAと接触された場合、mRNAの切断を生じる。ある実施形態では、本明細書に記載される、粒子、または複数の粒子を含む組成物は、インビボのモデル系例えば、本明細書に記載される任意のモデル系のようなマウスモデルで投与された場合例えば、1または3mg/kgの単回用量として、2、5、または10倍未満のサイトカイン誘導を生じる。例えば、投与は、以下:腫瘍壊死因子α、インターロイキン-1α、インターロイキン1β、インターロイキン-6、インターロイキン-10、インターロイキン-12、ケラチノサイト由来サイトカインおよびインターフェロンγのうち1つ以上、例えば、2つ、3つ、4つ、5つ、6つもしくは7つまたは全ての2、5または10倍未満の誘導を生じる。ある実施形態では、本明細書に記載される、粒子または複数の粒子を含んでいる組成物は、インビボのモデル系例えば、本明細書に記載される任意のモデル系のようなマウスモデルで投与された場合例えば、1または3mg/kgの単回用量として、アラニンアミノトランスフェラーゼALTおよびアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼASTの2、5または10倍未満の増大を生じる。ある実施形態では、本明細書に記載される、粒子または複数の粒子を含んでいる組成物は、インビボのモデル系例えば、本明細書に記載されるようなマウスモデルで、3mg/kgの2用量の投与48時間後に、血球の有意な変化を生じない。ある実施形態では、粒子は、非極性の有機溶媒例えば、ヘキサン、クロロホルムまたはジクロロメタンのうちのいずれかで安定である。例えば、この粒子は、実質的に不活性であり、例えば、存在する場合、外層は、内部移行しないか、またはかなりの量の表面構成要素が、水性溶媒中でそれらの構成に対して内部移行する。ある実施形態では、構成要素の分布は実質的に、非極性の有機溶媒中で、および水性溶媒中で同じである。ある実施形態では、粒子は、ミセルの少なくとも1つの構成要素を欠き、例えば、これはコアを欠き、親水性の構成要素を実質的に含まない。ある実施形態では、この粒子のコアは、かなりの量の親水性構成要素を含む。ある実施形態では、この粒子のコアは、この粒子のうちかなりの量、例えば、少なくとも重量または数量で10、20、30、40、50、60または70の核酸剤、例えば、siRNAを含む。ある実施形態では、この粒子のコアは、この粒子のうちかなりの量、例えば、少なくとも重量または数量で10、20、30、40、50、60または70のカチオン性部分、例えば、ポリカチオン性部分を含む。本明細書に記載される粒子は、少量の残留溶媒、例えば、この粒子を調製するのに用いられる溶媒、例えば、アセトン、tert-ブチルメチルエーテル、ベンジルアルコール、ジオキサン、ヘプタン、ジクロロメタン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、酢酸エチル、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、エタノール、メタノール、イソプロピルアルコール、メチルエチルケトン、酢酸ブチル、または酢酸プロピル例えば、イソプロピルアセテートを含んでもよい。いくつかの実施形態では、この粒子は、5000ppm未満の溶媒例えば、4500ppm未満、4000ppm未満、3500ppm未満、3000ppm未満、2500ppm未満、2000ppm未満、1500ppm未満、1000ppm未満、500ppm未満、250ppm未満、100ppm未満、50ppm未満、25ppm未満、10ppm未満、5ppm未満、2ppm、または1ppm未満を含んでもよい。いくつかの実施形態では、この粒子は、実質的に、UnitedStatesDepartmentofHealthandHumanServicesFoodandDrugAdministrationQ3c-TablesandListが定義するクラスIIまたはクラスIIIの溶媒を含まない。いくつかの実施形態では、この粒子は、5000ppm未満のアセトンを含む。いくつかの実施形態では、この粒子は、5000ppm未満のtert-ブチルメチルエーテルを含む。いくつかの実施形態では、この粒子は、5000ppm未満のヘプタンを含む。いくつかの実施形態では、この粒子は、600ppm未満のジクロロメタンを含む。いくつかの実施形態では、この粒子は、880ppm未満のジメチルホルムアミドを含む。いくつかの実施形態では、この粒子は、5000ppm未満の酢酸エチルを含む。いくつかの実施形態では、この粒子は、410ppm未満のアセトニトリルを含む。いくつかの実施形態では、この粒子は、720ppm未満のテトラヒドロフランを含む。いくつかの実施形態では、この粒子は、5000ppm未満のエタノールを含む。いくつかの実施形態では、この粒子は、3000ppm未満のメタノールを含む。いくつかの実施形態では、この粒子は、5000ppm未満のイソプロピルアルコールを含む。いくつかの実施形態では、この粒子は、5000ppm未満のメチルエチルケトンを含む。いくつかの実施形態では、この粒子は、5000ppm未満の酢酸ブチルを含む。いくつかの実施形態では、この粒子は、5000ppm未満の酢酸プロピルを含む。本明細書に記載される粒子は、粒子を作製するための出発材料の重量あたり、または出発材料として用いられて、約20~約90重量例えば、約20重量~約80重量、約25重量~約75重量、または約30重量~約70重量などの種々の量の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマーを含んでもよい。本明細書に記載される粒子は、粒子を作製するための出発材料の重量あたり、または出発材料として用いられて、例えば、最大約50重量例えば、約4から約50重量、約5重量、約8重量、約10重量、約15重量、約20重量、約23重量、約25重量、約30重量、約35重量、約40重量、約45重量または約50重量のいずれかまでという、種々の量のポリマー親水性部分および疎水性部分を含むを含み得る。例えば、この粒子の疎水性-親水性ポリマーの重量パーセントは、約3~30、約5~25または約8~23である。本明細書に記載される粒子では、疎水性ポリマーの疎水性-親水性ポリマーに対する比は、疎水性部分および親水性部分を有する粒子を作製するための出発材料の重量あたり、または出発材料として用いられて、この粒子が少なくとも5重量、8重量、10重量、12重量、15重量、18重量、20重量、23重量、25重量、または30重量のポリマーを含むような比である。本明細書に記載される粒子は、粒子を作製するための出発材料の重量あたり、または出発材料として用いられて、例えば、約0.1~約60例えば、約1~約60、約2~約20、約3~約30、約5~約40、約または約10~約30という種々の量のカチオン性部分を含んでもよい。カチオン性部分が窒素含有部分である場合、粒子中の窒素部分の、粒子中の核酸剤骨格由来のリン酸塩に対する比すなわち、N/P比は、約1:1~約50:1例えば、約1:1~約25:1、約1:1~約10:1、約1:1~約5:1、または約1:1~約1.5~1:1であり得る。本明細書に記載される粒子は、粒子を作製するための出発材料の重量あたり、または出発材料として用いられて、例えば、約0.1重量~約50重量例えば、約1~約50、約0.5~約20、約2~約20、約または約5~約15の種々の量の核酸剤を含んでもよい。この粒子が界面活性剤を含む場合、この粒子は、粒子を作製するための出発材料の重量あたり、または出発材料として用いられて、例えば、最大、約40重量、または約15~約35または約3~約10の種々の量の界面活性剤を含んでもよい。いくつかの実施形態では、この界面活性剤は、PVAであり、かつカチオン性部分は、カチオン性PVAである。いくつかの実施形態では、この粒子は、約2~約5のPVA例えば、約4、および約0.1~約3のカチオン性PVA例えば、約1を含んでもよい。本明細書に記載される粒子は、実質的に、標的化剤を例えば、粒子中の構成要素に共有結合された標的化剤、例えば、標的の生物学的実態例えば、膜成分、細胞表面レセプター、前立腺特異的膜抗原などに結合するかそうでなければ会合することができる標的化剤を含まなくてもよい。本明細書に記載される粒子は、核酸アプタマー、成長因子、ホルモン、サイトカイン、インターロイキン、抗体、インテグリン、フィブロネクチンレセプター、p-糖タンパク質レセプター、ペプチドおよび細胞結合配列から選択される標的化剤を実質的に含まなくてもよい。いくつかの実施形態では、粒子内に、標的化部分に複合体化されるポリマーはない。本明細書に記載される粒子は、例えば、対象における標的に高い親和性および比親和性を有する粒子上の部分の使用によって、対象中の部位に対して粒子を選択的に標的する目的のための部分を添加されないかもしれない。いくつかの実施形態では、この粒子は、脂質を含まず、例えば、リン脂質を含まない。本明細書に記載される粒子は、ナノ粒子への水の浸透を軽減する両親媒性層を実質的に含まなくてもよい。本明細書に記載される粒子は、脂質、例えば、リン脂質を5または10未満例えば、w/w、v/vとして決定含んでもよい。本明細書に記載される粒子は、ナノ粒子への水の浸透を例えば軽減する、脂質層、例えば、リン脂質層を実質的に含まなくてもよい。本明細書に記載される粒子は、実質的に脂質を含まなくてもよく、例えば、リン脂質を実質的に含まない。本明細書に記載される粒子は実質的に、放射性医薬品、例えば、放射性治療薬、放射性診断薬、予防薬または他の放射性同位体を含まなくてもよい。本明細書に記載される粒子は実質的に、免疫調節薬、例えば、免疫調節剤または免疫抑制剤を含まなくてもよい。本明細書に記載される粒子は実質的に、ワクチンも免疫原も、例えば、ペプチド、糖、脂質ベースの免疫原、B細胞抗原またはT細胞抗原も含まなくてもよい。本明細書に記載される粒子は実質的に、水溶性の疎水性ポリマー、例えば、PLGA、例えば、PLGA約1kDa未満例えば、約500Da未満の分子量を有するを含まなくてもよい。例示的な粒子1つの例示的な粒子としては、以下を含む粒子が挙げられる:a複数の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマー;b複数の親水性-疎水性ポリマー;c必要に応じて、複数のカチオン性部分;およびd複数の核酸剤であって、ここで複数の核酸剤の少なくとも一部がi以下のいずれか疎水性部分、例えば、aの疎水性ポリマーもしくはbの親水性-疎水性ポリマーに対して共有結合されるか、または、ii疎水性部分、例えば、aの疎水性ポリマー、またはbの親水性-疎水性ポリマーbのいずれかに対して共有結合される核酸と二重鎖例えば、ヘテロ二重鎖を形成する、核酸剤。別の例示的な粒子としては、以下を含む粒子が挙げられる:a複数の核酸剤-ポリマーの複合体であって、各々が核酸剤を含み、この核酸剤が、i疎水性ポリマーに結合されるか、またはii疎水性ポリマーに対して共有結合される核酸と二重鎖例えば、ヘテロ二重鎖を形成する、核酸剤;b複数の親水性-疎水性ポリマー;およびc必要に応じて、複数のカチオン性部分。別の例示的な粒子としては、以下を含む粒子が挙げられる:a複数の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマー;b複数の核酸剤-親水性-疎水性ポリマーの複合体であって、この複数の核酸剤-親水性-疎水性ポリマーの複合体の各々の核酸剤が、i親水性-疎水性ポリマーに対して共有結合されるか、またはii親水性-疎水性ポリマーに共有結合される核酸と二重鎖例えば、ヘテロ二重鎖を形成する、複数の核酸剤-親水性-疎水性ポリマーの複合体;およびc必要に応じて、複数のカチオン性部分。別の例示的な粒子としては、以下を含む粒子が挙げられる:a複数の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマー;b複数の親水性-疎水性ポリマー;c複数のカチオン性部分であって、ここでこの複数のカチオン性部分の少なくとも一部が、aの疎水性ポリマーまたはbの親水性-疎水性ポリマーのいずれかに結合される、複数のカチオン性部分;およびd複数の核酸剤。別の例示的な粒子としては、以下を含む粒子が挙げられる:a複数の疎水性部分例えば、疎水性ポリマー;b複数の親水性-疎水性ポリマー;c必要に応じて、複数のカチオン性部分;およびd複数の核酸剤;ここでcのカチオン性部分の実質的な部分、およびdの核酸剤の実質的な部分は、疎水性ポリマーまたは親水性-疎水性ポリマーに対して共有結合されない。例えば、核酸剤またはカチオン性部分は、この粒子に封入される。別の例示的な粒子としては、以下を含む粒子が挙げられる:a複数の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマー;b必要に応じて複数の親水性-疎水性ポリマー;c複数のカチオン性部分;およびd複数の核酸剤であって、ここで複数の核酸剤の少なくとも一部が、親水性ポリマーに対して共有結合されるか、または親水性ポリマーに対して共有結合される核酸と二重鎖例えば、ヘテロ二重鎖を形成する、複数の核酸剤。別の例示的な粒子としては、以下を含む粒子が挙げられる:a複数の疎水性部分、例えば、疎水性ポリマー;b複数の親水性-疎水性ポリマー;およびc複数の核酸剤-カチオン性ポリマーの複合体。ある実施形態では、この核酸剤は、疎水性ポリマー、または親水性-疎水性ポリマーに対して、結合、例えば、共有結合されない。ある実施形態では、粒子を作製するための出発材料の重量あたり、または出発材料として用いられて、5、2、または1重量未満の核酸剤が、疎水性ポリマーまたは親水性-疎水性ポリマーに結合される。別の例示的な粒子は、複数の核酸剤-ポリマーの複合体;複数のカチオン性ポリマーまたは脂質;および複数のポリマーまたは脂質を含み、ここで、このポリマーまたは脂質は実質的に、複数の核酸剤-ポリマーの複合体を囲み、例えば、このような核酸剤は、実質的に、粒子の内側であり、粒子の表面にはない。疎水性部分疎水性ポリマー本明細書に記載される粒子は、疎水性ポリマーを含み得る。疎水性ポリマーは、核酸剤および/またはカチオン性部分に結合して複合体例えば、核酸剤-疎水性ポリマーの複合体またはカチオン性部分-疎水性ポリマーの複合体を形成し得る。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、疎水性ポリマーに結合される核酸剤と二重鎖を形成する。いくつかの実施形態では、この疎水性ポリマーは、別の部分に結合されない。粒子は、複数の疎水性ポリマーを含んでもよく、例えば、ここでは、いくつかが、核酸剤および/またはカチオン性部分のような別の部分に結合され、いくつかは結合されない。例示的な疎水性ポリマーとしては以下が挙げられる:アクリラート、例としては、アクリル酸メチル、アクリル酸エチル、アクリル酸プロピル、アクリル酸n-ブチルBA、アクリル酸イソブチル、アクリル酸2-エチル、およびアクリル酸t-ブチル;メタクリラート、例としては、メタクリル酸エチル、メタクリル酸n-ブチルおよびメタクリル酸イソブチル;アクリロニトリル;メタクリロニトリル;ビニル、例としては、酢酸ビニル、ビニルベルサタート、ビニルプロピオナート、ビニルホルムアミド、ビニルアセトアミド、ビニルピリジン、およびビニルイミダゾール;アミノアルキル類、例としては、アミノアルキルアクリラート類、アミノアルキルメタクリラート、およびアミノアルキルメタアクリルアミド;スチレン;セルロースアセタートフタラート;セルロースアセタートスクシナート;フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース;ポリD,L-ラクチド;ポリD,L-ラクチド-コ-グリコリド;ポリグリコリド;ポリヒドロキシブチラート;ポリアルキルカルボナート;ポリオルトエステル;ポリエステル類;ポリヒドロキシ吉草酸;ポリジオキサノン;ポリエチレンテレフタラート;ポリリンゴ酸;ポリタルトロン酸;ポリ酸無水物類;ポリホスファゼン類;ポリアミノ酸類およびそれらのコポリマー一般的には、Svenson,S編,PolymericDrugDelivery:第I巻:ParticulateDrugCarriers.2006;ACSSymposiumSeries;Amiji,M.M編,NanotechnologyforCancerTherapy.2007;TaylorFrancisGroup,LLP;Nairら、Prog.Polym.Sci.200732:762-798参照;疎水性ペプチドに基づくポリマーおよびポリL-アミノ酸に基づくコポリマー;Lavasanifar,A.,ら、AdvancedDrugDeliveryReviews200254:169-190;ポリエチレン-酢酸ビニルEVAコポリマー;シリコーンゴム;ポリエチレン;ポリプロピレン;ポリジエンポリブタジエン、ポリイソプレン、およびこれらポリマーの水素付加型;ビニルメチルエーテルおよび他のビニルエーテル類のマレイン酸無水物コポリマー;ポリアミド類ナイロン6,6;ポリウレタン;ポリエステルウレタン類;ポリエーテルウレタン類;およびポリエステル-尿素。本明細書に記載されるポリマー-薬剤の複合体または粒子を調製する上で有用な疎水性ポリマーとしてはまた、生分解性ポリマーが挙げられる。生分解性ポリマーの例としては、ポリラクチド類、ポリグリコリド類、カプロラクトンベースのポリマー、ポリカプロラクトン、ポリジオキサノン、ポリ酸無水物類、ポリアミン類、ポリエステルアミド類、ポリオルトエステル類、ポリジオキサノン類、ポリアセタール類、ポリケタール類、ポリカルボナート類、ポリホスホエステル類、ポリエステル類、ポリブチレンテレフタラート、ポリオルトカルボナート類、ポリホスファゼン類、スクシナート類、ポリリンゴ酸、ポリアミノ酸類、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリヒドロキシセルロース、多糖類、キチン、キトサン、およびヒアルロン酸、ならびにこれらのコポリマー、ターポリマーおよび混合物が挙げられる。生分解性ポリマーとしてはまた、カプロラクトン系のポリマー、ポリカプロラクトンおよびポリブチレンテレフタラートを含むコポリマーを含めたコポリマーが挙げられる。いくつかの実施形態において、ポリマーは、D,L-ラクチド、D-ラクチド、L-ラクチド、D,L-乳酸、D-乳酸、L-乳酸、グリコリド、グリコール酸、ε-カプロラクトン、ε-ヒドロキシヘキサン酸、γ-ブチロラクトン、γ-ヒドロキシ酪酸、δ-バレロラクトン、δ-ヒドロキシ吉草酸、ヒドロキシ酪酸、およびリンゴ酸からなる群より選択されるモノマーから合成されたポリエステルである。コポリマーはまた、本明細書に記載されるポリマー-薬剤の複合体または粒子においても用いられ得る。いくつかの実施形態において、ポリマーは、乳酸およびグリコール酸の生分解性のランダムコポリマーであるPLGAであり得る。PLGAポリマーは、例えば、約0.1:99.9~約99.9:0.1例えば、約75:25~約25:75、約60:40~40:60、または約55:45~45:55の範囲で変動する比の乳酸:グリコール酸を有し得る。いくつかの実施形態において、例えば、PLGAにおいて、乳酸モノマーのグリコール酸モノマーに対する比は、50:50、60:40、または75:25である。特定の実施形態において、ポリマー-薬剤の複合体または粒子のPLGAポリマーにおけるグリコール酸モノマーに対する乳酸の比を最適化することによって、水の取り込み、薬剤放出例えば、徐放、およびポリマー分解動態などのパラメーターが最適化され得る。さらに、比を調整することはまた、コポリマーの疎水性に影響するであろうし、このことが次には薬物負荷に影響し得る。生分解性ポリマーがまた、核酸剤または他の物質例えば、それに結合するカチオン性部分、またはそれに結合して核酸と二重鎖を形成する核酸剤を有する特定の実施形態において、このようなポリマーの生分解速度は、このような物質の放出速度によって特徴づけられ得る。このような状況において、生分解速度は、ポリマーが化学的に何であるかおよび物理的特徴だけでなく、結合する物質が何であるかにも依存し得る。対象の組成物の分解は、例えば酸化および/または加水分解による分子内結合の切断だけでなく、外来封入宿主との競合的複合体形成による宿主/ゲスト複合体の解離など、分子内結合の撹乱も含む。いくつかの実施形態において、放出は、粒子における追加の成分、例えば、少なくとも1つの酸性部分例えば、遊離酸PLGAを有する化合物によって影響され得る。特定の実施形態において、疎水性ポリマーのような1つ以上のポリマーを含む粒子は、所望の適用において許容される期間内で生分解する。インビボ治療法などの特定の実施形態において、このような分解は、通常約5年未満、1年、6ヶ月、3ヶ月、1ヶ月、15日、5日、3日、または1日の期間でさえ、25°C~37°Cの温度を有するpH4~8の生理学的溶液への曝露の際に生じる。他の実施形態において、ポリマーは、所望の適用に応じて、約1時間~数週間の期間で分解する。ポリマーが、インビボで核酸剤の送達に用いられる場合、ポリマー自体が非毒性であること、これらが、体液によってポリマーが浸食される際に非毒性の分解産物へと分解することが重要である。しかしながら、多くの生分解性ポリマーは、インビボでの浸食の際に、周囲の組織と有害な相互作用をするオリゴマーおよびモノマーを生じるD.F.Williams,J.Mater.Sci.12331982。完全なままのポリマー担体およびその分解産物の毒性を最小化するために、ポリマーは、天然に存在する代謝産物に基づいて設計されている。例示的なポリマーとしては、乳酸および/またはグリコール酸に由来するポリエステル類、ならびにアミノ酸に由来するポリアミド類が挙げられる。多数の生分解性ポリマーが公知であり、医薬製剤の徐放に用いられる。このようなポリマーは、例えば、各々が全体として参照により本明細書に援用される米国特許第4,291,013号;第4,347,234号;第4,525,495号;第4,570,629号;第4,572,832号;第4,587,268号;第4,638,045号;第4,675,381号;第4,745,160号;および第5,219,980号、ならびにPCT公報WO2006/014626において記載されている。本明細書に記載される疎水性ポリマーは、種々の末端基を有し得る。いくつかの実施形態において、例えば、ポリマーの末端基がカルボン酸、ヒドロキシ基、またはアミノ基である場合、このポリマーの末端基はさらに修飾されない。いくつかの実施形態において、この末端基はさらに修飾されてもよい。例えば、ヒドロキシル末端基を有するポリマーは、アシル基で誘導体化されて、アシル-キャッピングポリマー例えば、アセチル-キャッピングポリマーまたはベンゾイルキャッピングポリマーを、アルキル基で誘導化されて、アルコキシキャッピングポリマー例えば、メトキシキャッピングポリマーを、またはベンジル基で誘導体化されて、ベンジルキャッピングポリマーを生じ得る。この末端基はまたさらに、官能基と反応されて、例えば、核酸剤、カチオン性部分、または不溶性基質などの別の部分に対する連結を提供し得る。いくつかの実施形態では、粒子は、官能化された疎水性ポリマー、例えば、疎水性ポリマー、例えば、PLGA例えば、50:50PLGA、ある部分で官能化された、例えば、N-2-アミノエチルマレイミド、2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ、またはスクシンイミジニル-N-メチルエステル別の部分、例えば、核酸剤と反応されなかったを含む。疎水性ポリマーは、約1kDa~約70kDa例えば、約4kDa~約66kDa、約2kDa~約12kDa、約6kDa~約20kDa、約5kDa~約15kDa、約6kDa~約13kDa、約7kDa~約11kDa、約5kDa~約10kDa、約7kDa~約10kDa、約5kDa~約7kDa、約6kDa~約8kDa、約6kDa、約7kDa、約8kDa、約9kDa、約10kDa、約11kDa、約12kDa、約13kDa、約14kDa、約15kDa、約16kDa、または約17kDaの範囲の重量平均分子量を有し得る。本明細書に記載される疎水性ポリマーは、約2.5以下例えば、約2.2以下、または約2.0以下、または約1.5以下のポリマー多分散指数PDIを有し得る。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される疎水性ポリマーは、約1.0~約2.5、約1.0~約2.0、約1.0~約1.7、または約1.0~約1.6のポリマーPDIを有し得る。本明細書に記載される粒子は、粒子の例えば、約10重量~約90重量例えば、約20~約80、約25~約75、または約30~約70の様々な量の疎水性ポリマーを含み得る。本明細書に記載される疎水性ポリマーは、例えば、BASF、BoehringerIngelheim、DurcetCorporation、PuracAmerica、およびSurModicsPharmaceuticalsなどの商業的供給元から市販され得る。本明細書に記載されるポリマーはまた合成されてもよい。ポリマーを合成する方法は、当該分野で公知である例えば、PolymerSynthesis:TheoryおよびPracticeFundamentals,Methods,Experiments.D.Braunら、第4版,Springer,Berlin,2005参照。このような方法としては、例えば、重縮合、ラジカル重合、イオン重合例えば、陽イオンまたは陰イオン重合、または開環メタセシス重合が挙げられる。市販のまたは合成されたポリマー試料はさらに、ポリマー-薬剤の複合体の形成または本明細書に記載される粒子もしくは組成物への組み込みの前に精製されてもよい。いくつかの実施形態において、精製は、ポリマー試料の多分散を低下させ得る。ポリマーは、溶液からの沈殿、またはセライトなどの固形物上での沈殿によって精製され得る。ポリマーはまた、サイズ排除クロマトグラフィーSECによってさらに精製されてもよい。他の疎水性部分本明細書に記載される粒子の他の適切な疎水性部分としては、例えば、リン脂質が挙げられる。例示的な脂質としては、レシチン、ホスファチジルエタノールアミン、リゾレシチン、リゾホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、スフィンゴミエリン、卵スフィンゴミエリンESM、セファリン、カルジオリピン、ホスファチジン酸、セレブロシド類、リン酸ジセチル、ジステアロイルホスファチジルコリンDSPC、ジオレオイルホスファチジルコリンDOPC、ジパルミトイルホスファチジルコリンDPPC、ジオレオイルホスファチジルグリセロールDOPG、ジパルミトイルホスファチジルグリセロールDPPG、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミンDOPE、パルミトイルオレオイル-ホスファチジルコリンPOPC、パルミトイルオレオイル-ホスファチジルエタノールアミンPOPE、パルミトイルオレオイル-ホスファチジルグリセロールPOPG、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン4-N-マレイミドメチル-シクロヘキサン-1-カルボキシレートDOPE-mal、ジパルミトイル-ホスファチジルエタノールアミンDPPE、ジミリストイル-ホスファチジルエタノールアミンDMPE、ジステアロイル-ホスファチジルエタノールアミンDSPE、モノメチル-ホスファチジルエタノールアミン、ジメチル-ホスファチジルエタノールアミン、ジエライドイル-ホスファチジルエタノールアミンDEPE、ステアロイルオレオイル-ホスファチジルエタノールアミンSOPE、リゾホスファチジルコリン、およびジリノレオイルホスファチジルコリンが挙げられる。他の例示的な疎水性部分としては、コレステロールおよびビタミンETPGSが挙げられる。ある実施形態では、疎水性部分は、脂質ではない例えば、リン脂質ではないし、脂質を含むこともない。疎水性-親水性ポリマー本明細書に記載される粒子は、親水性部分および疎水性部分を含むポリマー、例えば、疎水性-親水性ポリマーを含んでもよい。この親水性-疎水性ポリマーは、別の部分、例えば、核酸剤例えば、親水性部分または疎水性部分を通じておよび/またはカチオン性部分に対して結合されてもよく、または核酸剤は、疎水性-親水性ポリマーに結合した核酸と二重鎖を形成し得る。いくつかの実施形態では、疎水性-親水性ポリマーは結合されないすなわち、別の部分に結合されない。粒子は、複数の疎水性-親水性ポリマーを含んでもよく、例えば、ここでいくつかは、別の部分、例えば、核酸剤および/またはカチオン性部分に結合され、いくつかは結合されない。親水性部分および疎水性部分を含むポリマーは、疎水性ブロックとカップリングされた親水性ブロックのコポリマーであり得る。これらのコポリマーは、約5kDa~約30kDa例えば、約5kDa~約25kDa、約10kDa~約22kDa、約10kDa~約15kDa、約12kDa~約22kDa、約7kDa~約15kDa、約15kDa~約19kDa、または約11kDa~約13kDa、例えば、約9kDa、約10kDa、約11kDa、約12kDa、約13kDa、約14kDa、約15kDa、約16kDa、約17kDa、約18kDaまたは約19kDaの重量平均分子量を有し得る。親水性部分および疎水性部分を含むポリマーは、薬剤へ結合し得る。ポリマーの好適な疎水性部分の例としては、上記の疎水性部分が挙げられる。コポリマーの疎水性部分は、約1kDa~約20kDa例えば、約8kDa~約15kDa、約1kDa~約18kDa、17kDa、16kDa、15kDa、14kDa、または13kDa、約2kDa~約12kDa、約6kDa~約20kDa、約5kDa~約18kDa、約7kDa~約17kDa、約8kDa~約13kDa、約9kDa~約11kDa、約10kDa~約14kDa、約6kDa~約8kDa、約6kDa、約7kDa、約8kDa、約9kDa、約10kDa、約11kDa、約12kDa、約13kDa、約14kDa、約15kDa、約16kDa、または約17kDaの重量平均分子量を有し得る。ポリマーの適切な親水性部分の例としては、以下が挙げられる:カルボン酸、例としては、アクリル酸、メタクリル酸、イタコン酸、およびマレイン酸;ポリオキシエチレン類または酸化ポリエチレンPEG;ポリアクリルアミド類例えば、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミド、ならびにそれらとジメチルアミノエチルメタクリラート、ジアリルジメチルアンモニウムクロリド、ビニルベンジルトリメチルthrimethylアンモニウムクロリド、アクリル酸、メタクリル酸、2-アクリルアミド-2-メチルプロパンスルホン酸およびスルホン酸スチレンとのコポリマー、ポリビニルピロリドン、ポリオキサゾリン、ポリシアル酸、デンプンおよびデンプン誘導体、デキストランおよびデキストラン誘導体類;ポリペプチド類、例えば、ポリリシン類、ポリアルギニン類、ポリグルタミン酸類;アルギン酸類、ポリラクチド類、ポリエチレンイミン類、ポリイオネン類、ポリアクリル酸類、およびポリイミノカルボン酸、ゼラチン、ならびに不飽和エチレン性のモノまたはジカルボン酸。好適な親水性ポリマーの列挙は、HandbookofWater-SolubleGumsおよびResins,R.Davidson,McGraw-Hill1980に見ることができる。コポリマーの親水性部分は、約1kDa~約21kDa例えば、約1kDa~約3kDa、例えば、約2kDa、または約2kDa~約6kDa、例えば、約3.5kDa、または約4kDa~約6kDa、例えば、約5kDaの重量平均分子量を有し得る。一実施形態では、親水性部分は、PEGであり、重量平均分子量は、約1kDa~約21kDa例えば、約1kDa~約8kDa、約1kDa~約3kDa、例えば、約2kDa、または約2kDa~約6kDa、例えば、約3.5kDa、または約4kDa~約6kDa、例えば、約5kDaである。一実施形態では、親水性部分は、PVAであり、重量平均分子量は、約1kDa~約21kDa例えば、約1kDa~約8kDa、約1kDa~約3kDa、例えば、約2kDa、または約2kDa~約6kDa、例えば、約3.5kDa、または約4kDa~約6kDa、例えば、約5kDaである。一実施形態では、親水性部分は、ポリオキサゾリンであり、重量平均分子量は、約1kDa~約21kDa例えば、約1kDa~約8kDa、約1kDa~約3kDa、例えば、約2kDa、または約2kDa~約6kDa、例えば、約3.5kDa、または約4kDa~約6kDa、例えば、約5kDaである。一実施形態では、親水性部分は、ポリビニルピロリジンであり、重量平均分子量は、約1kDa~約21kDa例えば、約1kDa~約8kDa、約1kDa~約3kDa、例えば、約2kDa、または約2kDa~約6kDa、例えば、約3.5kDa、または約4kDa~約6kDa、例えば、約5kDaである。一実施形態では、親水性部分は、ポリヒドロキシルプロピルメタクリルアミドであり、重量平均分子量は、約1kDa~約21kDa例えば、約1kDa~約8kDa、約1kDa~約3kDa、例えば、約2kDa、または約2kDa~約6kDa、例えば、約3.5kDa、または約4kDa~約6kDa、例えば、約5kDaである。一実施形態では、親水性部分は、ポリシアル酸であり、重量平均分子量は、約1kDa~約21kDa例えば、約1kDa~約8kDa、約1kDa~約3kDa、例えば、約2kDa、または約2kDa~約6kDa、例えば、約3.5kDa、または約4kDa~約6kDa、例えば、約5kDaである。親水性部分および疎水性部分を含むポリマーは、ブロックコポリマー、例えば、ジブロックまたはトリブロックコポリマーであってもよい。いくつかの実施形態において、このポリマーは、親水性ブロックおよび疎水性ブロックを含むジブロックコポリマーであり得る。いくつかの実施形態において、このポリマーは、疎水性ブロック、親水性ブロック、および別の疎水性ブロックを含むトリブロックコポリマーであり得る。2つの疎水性ブロックは、同じ疎水性ポリマーであっても、または異なる疎水性ポリマーであってもよい。本明細書で用いられるブロックコポリマーは、様々な親水性部分、対疎水性部分の比を有してもよく、例えば、重量で1:1~1:40の範囲に及ぶ例えば、重量で約1:1~約1:10、重量で約1:1~約1:2、または重量で約1:3~約1:6。親水性部分および疎水性部分を含むポリマーは、種々の末端基を有し得る。いくつかの実施形態において、末端基は、ヒドロキシ基またはアルコキシ基であり得る例えば、メトキシ。いくつかの実施形態において、ポリマーの末端基はさらに修飾されていない。いくつかの実施形態において、末端基はさらに修飾され得る。例えば、末端基は、アルキル基でキャッピングされて、アルコキシでキャッピングされたポリマー例えば、メトキシでキャッピングされたポリマーを生じてもよく、標的化剤例えば、葉酸塩もしくは色素例えば、ローダミンと誘導体化されてもよく、または官能基と反応されてもよい。親水性部分および疎水性部分を含むポリマーは、コポリマーの2つのブロック間にリンカーを含み得る。このようなリンカーは、例えば、アミド連結、エステル連結、エーテル連結、アミノ連結、カルバメート連結、またはカーボネート連結であってもよい。本明細書に記載される親水性部分および疎水性部分を含むポリマーは、約2.5以下のポリマー多分散指数PDIを有し得る例えば、約2.2以下、または約2.0以下、または約1.5以下。いくつかの実施形態において、ポリマーPDIは、約1.0~約2.5、例えば、約1.0~約2.0、約1.0~約1.8、約1.0~約1.7、または約1.0~約1.6である。本明細書に記載される粒子は、親水性部分および疎水性部分を含む種々の量のポリマー、であって、例えば粒子の重量あたり最大約50重量を含み得る例えば、約4~約50重量、約5重量、約10重量、約15重量、約20重量、約25重量、約30重量、約35重量、約40重量、約45重量、または約50重量。例えば、粒子内の第二のポリマーの重量パーセントは約3~30、約5~25、または約8~23である。本明細書に記載される親水性部分および疎水性部分を含むポリマーは、市販されている場合があるし、または合成されてもよい。ポリマーを合成する方法は、当該分野で公知である例えば、PolymerSynthesis:TheoryおよびPracticeFundamentals,Methods,Experiments.D.Braunら、,第4版,Springer,Berlin,2005を参照のこと。そのような方法としては、例えば、重縮合、ラジカル重合、イオン重合例えば、陽イオンまたは陰イオン重合、または開環メタセシス重合が挙げられる。ブロックコポリマーは、2つのポリマー単位を別個に合成した後、2つの部分を確立された方法を用いて複合体化することによって調製され得る。例えば、ブロックは、EDC1-エチル-3-3-ジメチルアミノプロピルカルボジイミドヒドロクロリドなどのカップリング剤を用いて連結され得る。複合体化の後、2つのブロックは、アミド連結、エステル連結、エーテル連結、アミノ連結、カルバメート連結、またはカーボネート連結を介して連結され得る。市販のまたは合成されたポリマー試料はさらに、ポリマー-薬剤の複合体の形成または本明細書に記載される粒子もしくは組成物への組み込みの前に精製され得る。いくつかの実施形態において、精製は、濾過できないポリマー試料をもたらし得る、より低分子量のポリマーを除去し得る。ポリマーは、溶液からの沈殿またはセライトなどの固形物への沈殿によって精製され得る。ポリマーはまた、サイズ排除クロマトグラフィーSECによってさらに精製されてもよい。カチオン性部分本明細書に記載される粒子および複合体における使用のための例示的なカチオン性部分としては、アミン類、例としては、例えば、一級、二級、三級および四級のアミン類、ならびにポリアミン類例えば、分岐したおよび直鎖のポリエチレンイミンPEIまたはその誘導体、例えば、ポリエチレンイミン-PLGA、ポリエチレンイミン-ポリエチレングリコール-N-アセチルガラクトサミンPEI-PEG-GALまたはポリエチレンイミン-ポリエチレングリコール-トリ-N-アセチルガラクトサミンPEI-PEG-トリGAL誘導体が挙げられる。いくつかの実施形態では、カチオン性部分は、カチオン性脂質例えば、1-[2-オレオイルオキシエチル]-2-オレイル-3-2-ヒドロキシエチルイミダゾリニウムクロライドDOTIM,ジメチルジオクタデシルアンモニウムブロミド、1,2ジオレイルオキシプロピル-3-トリメチルアンモニウムブロミド、DOTAP、1,2-ジミリスチルオキシプロピル-3-ジメチル-ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド、1,2-ジミリストイル-sn-グリセロ-3-エチルホスホコリンEDMPC、エチル-PC、1,2-ジオレオイル-3-ジメチルアンモニウム-プロパンDODAP、DC-コレステロール、およびMBOP、CLinDMA、1,2-ジリノレイルオキシ-3-ジメチルアミノプロパンDLinDMA、pCLinDMA、eCLinDMA、DMOBA、およびDMLBAを含む。例えば、カチオン性部分がポリアミンであるいくつかの実施形態では、ポリアミンは、ポリアミノ酸例えば、ポリリジン、ポリヒスチジン、およびポリアルギニンおよび誘導体類例えば、ポリリジン-PLGA、イミダゾール修飾ポリリジンまたはポリビニルピロリドンPVPを含む。例えば、カチオン性部分が、複数のアミンを含んでいるポリマーである、いくつかの実施形態では、アミン類は、このアミン類が約4~約10Å例えば、約5~約8または約6~約7離れるように、ポリマーにそって配置され得る。いくつかの実施形態では、このアミン類は、核酸剤上のリン酸塩と合致するようにポリマーにそって配置され得る。カチオン性部分は、5以上のpKaを有してもよく、および/または生理学的なpHで正に荷電されてもよい。いくつかの実施形態では、このカチオン性部分は、少なくとも1つのアミン例えば、一級、二級、三級または四級のアミン、または複数のアミン類各々が、独立して一級、二級、三級または四級のアミンを含む。いくつかの実施形態では、このカチオン性部分は、ポリマー、例えば、1つ以上の二級または三級のアミン類を有し、例えばカチオン性ポリビニルアルコールPVA例えば、Kurarayによって提供される、例えば、CM-318またはC-506、キトサン、ポリアミン-分岐およびスターstarPEGおよびポリエチレンイミンである。カチオン性PVAは、例えば、その内容が参照によって本明細書に援用される米国特許出願公開第2002/0189774号に記載のような、酢酸ビニル/N-ビニルホルムアミドコポリマーを重合することによって、例えば、作製され得る。カチオン性PVAの他の例としては、米国特許第6,368,456号およびFatehiCarbohydratePolymers792010423-428その内容が参照によって本明細書に援用されるが挙げられる。いくつかの実施形態では、カチオン性部分は、窒素含有の複素環式部分または複素環式芳香族部分例えば、ピリジニウム、イミダゾリウム、モルホリニウム、ピペリジニウムなどを含む。いくつかの実施形態では、カチオン性ポリマーは、窒素含有複素環式部分または複素環式芳香族部分、例えば、ポリビニルピロリジンまたはポリビニルピロリジノンを含む。いくつかの実施形態では、カチオン性部分は、グアナジニウム部分例えば、アルギニン部分を含む。いくつかの実施形態では、カチオン性部分は、界面活性剤、例えば、カチオン性PVA、例えば、本明細書に記載されるカチオン性PVAである。さらなる例示的なカチオン性部分としては、アガマチン、硫酸プロタミン、ヘキサデメチリンブロミドhexademethrinebromide、セチルトリメチルアンモニウムブロミド、1-ヘキシルトリエチル-アンモニウムホスフェート、1-ドデシルトリエチル-アンモニウムホスフェート、スペルミン例えば、スペルミンテトラヒドロクロライド、スペルミジン、およびその誘導体例えば、N1-PLGA-スペルミン、N1-PLGA-N5、N10、N14-トリメチル化-スペルミン、N1-PLGA-N5、N10、N14、N14-テトラメチル化-スペルミン、PLGA-glu-ジ-トリCbz-スペルミン、トリCbz-スペルミン、アンフィポルamiphipole、PMAL-C8、およびアセチル-PLGA5050-glu-ジN1-アミノ-N5、N10、N14-スペルミン、ポリ2-ジメチルアミノエチルメタクリレート、ヘキシルデシルトリメチルアンモニウムクロライド、ヘキサジメチリンブロミド、およびアテロコラーゲンならびに例えば、WO2005007854、米国特許第7,641,915号、およびWO2009055445その各々の内容が参照によって本明細書に援用されるに記載されるものが挙げられる。ある実施形態では、カチオン性部分とは、その存在が、本明細書に記載される粒子において、粒子の外側上で、核酸剤、例えば、siRNAの50、40、30、20、または10未満重量または数としての存在を伴うものである。ある実施形態では、カチオン性部分は、脂質ではなく例えば、リン脂質ではなく、脂質を含むこともない。核酸剤核酸剤は、本明細書に記載の粒子、複合体、または組成物を用いて送達され得る。適切な核酸剤の実施例としては、限定するものではないが、ポリヌクレオチド、例えば、siRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、マイクロRNAsmiRNAs、アンタゴmirantagomir類、アプタマー類、ゲノムDNA、cDNA、mRNA、およびプラスミドが挙げられる。核酸剤因子は、目的の種々の遺伝子、例えば、過剰発現が疾患または障害と伴う遺伝子を標的とし得る。本明細書に記載されるポリマー-核酸剤の複合体、粒子または組成物を用いて送達される核酸剤は、単独で投与されても、または組み合わせて投与されてもよい例えば、同じ処方物または別々の処方物中で。一実施形態では、複数の薬剤、例えば、siRNAが、疾患または障害の処置のための同じ遺伝子上の異なる部位を標的するために投与される。別の実施形態では、複数の剤、例えば、siRNAを、疾患または障害の治療のために2つ以上の異なる遺伝子を標的するために投与する。siRNA本明細書に記載されるポリマー-核酸剤の複合体、粒子または組成物による送達に適切な治療剤核酸は、低分子干渉RNAまたはsiRNAであってもよい。本明細書において用いる場合、siRNAとは、RNA干渉RNAiまたは遺伝子サイレンシングを配列特異的方式で媒介することによって、遺伝子発現またはウイルス複製を阻害または下方制御し得る任意の核酸分子を指す。例えば、siRNAは、自己相補性のセンス領域およびアンチセンス領域を含む二本鎖核酸分子であってもよく、ここでこのアンチセンス領域は、標的核酸分子またはその一部におけるヌクレオチド配列に対して相補性であるヌクレオチド配列、および標的核酸配列またはその一部に対応するヌクレオチド配列を有するセンス領域を含む。一実施形態では、本明細書に記載される複合体、粒子または組成物とともに送達するために適切な治療用siRNA分子は、標的遺伝子の発現の阻害を生じる方式で、標的遺伝子のヌクレオチド配列と相互作用する。siRNAは、二本鎖構造を含み、これは典型的には、15~50塩基対、例えば、19~25、19~23、21~25、21~23、または24~29塩基対を含み、かつ細胞内で発現された標的遺伝子またはRNAに対して同一またはほぼ同一のヌクレオチド配列を有している。siRNAは、2つのアニーリングされたポリヌクレオチドまたヘアピン構造を形成するは単一のポリヌクレオチドから構成されてもよい。一実施形態では、治療用のsiRNAは、本明細書に記載される複合体、粒子または組成物にパッケージングされている、発現ベクターの形態で提供され、ここでこのベクターは、対象に対する投与後、siRNAを生成する1つ以上の転写生成物を生成するように転写されるコード配列を有する。siRNAは、2つの別々のオリゴヌクレオチドから組み立てられてもよく、ここでは、1つの鎖がセンス鎖であり、かつ他方がアンチセンス鎖であり、このアンチセンス鎖およびセンス鎖は、自己相補性でありすなわち、各々の鎖が、他の鎖におけるヌクレオチド配列に対して相補性であるヌクレオチド配列を含む;例えば、ここでこのアンチセンス鎖およびセンス鎖は、二重鎖または二本鎖構造を形成し、例えば、この二本鎖領域は、約15~約30塩基対、例えば、約15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29または30塩基対であり;このアンチセンス鎖は、標的核酸分子におけるヌクレオチド配列またはその一部に対して相補性であるヌクレオチド配列を含み、およびこのセンス鎖は、標的核酸分子に対応するヌクレオチド配列またはその一部を含む例えば、siRNA分子の約15~約25以上のヌクレオチドは、標的核酸またはその一部に相補性である。あるいは、siRNAは、単一のオリゴヌクレオチドから組み立てられ、ここでこのsiRNAの自己相補性のセンスおよびアンチセンス領域を、核酸ベースのリンカーまたは非核酸ベースのリンカー単数または複数によって連結する。特定の実施形態では、siRNA分子の少なくとも1つの鎖は、約1~約6ヌクレオチド長の3’オーバーハングを有するが、2~4ヌクレオチド長であってもよい。典型的には、この3’オーバーハングは、1~3ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態では、1つの鎖は、3’オーバーハングを有し、他の鎖は、平滑末端であるか、またはオーバーハングも有する。オーバーハングの長さは、お互いの鎖について同じであってもまたは異なってもよい。siRNAの安定性をさらに向上するために、3’オーバーハングを、分解に対して安定化してもよい。siRNAは、標的RNAに対して有意な配列類似性を有し、その結果、siRNAは、標的RNAに対合して、RNA干渉機構を通じて標的RNAの配列特異的な分解を生じ得る。必要に応じて、siRNA分子は、3’ヒドロキシル基を含む。一実施形態では、RNAは、プリンヌクレオチド、例えば、アデノシンまたはグアノシンヌクレオチドを含むことによって安定化される。あるいは、修飾アナログによるピリミジンヌクレオチドの置換、例えば、2’-デオキシチミジンによるウリジンヌクレオチド3’オーバーハングの置換は、耐容され、RNAiの有効性に影響することはない。2’-ヒドロキシルの非存在は、組織培養培地におけるオーバーハングのヌクレアーゼ耐性を有意に増強し、かつインビボで有益であり得る。siRNAは、二重鎖、非対称性二重鎖、ヘアピンまたは非対称性ヘアピン二次構造を有するポリヌクレオチドであってもよく、自己相補性センスおよびアンチセンス領域を有し、ここでこのアンチセンス領域は、別々の標的核酸分子におけるヌクレオチド配列またはその一部に対して相補性であるヌクレオチド配列を含み、そしてこのセンス領域は、標的核酸配列に対応するヌクレオチド配列またはその一部を有している。siRNAは、環状の一本鎖のポリヌクレオチドであってもよく、これは2つ以上のループ構造およびステムを有し、これは自己相補性センスおよびアンチセンス領域を含んでおり、ここでこのアンチセンス領域は、標的核酸分子におけるヌクレオチド配列またはその一部に対して相補性であるヌクレオチド配列を含み、およびこのセンス領域は、標的核酸配列またはその一部に対応するヌクレオチド配列を有しており、およびここでこの環状ポリヌクレオチドは、RNAiを媒介できる活性なsiRNA分子を生成するためにインビボまたはインビトロのいずれかで処理されてもよい。siRNAはまた、標的核酸分子におけるヌクレオチド配列またはその一部に対して相補性のヌクレオチド配列を有する一本鎖のポリヌクレオチドを含んでもよく例えば、ここでこのようなsiRNA分子は、標的核酸配列に対応するヌクレオチド配列またはその一部のsiRNA分子内に存在する必要はない、ここでこの一本鎖のポリヌクレオチドはさらに、末端のリン酸基、例えば、5’-リン酸塩例えば、Martinezら、,2002,Cell.,110,563-574およびSchwarzら、,2002,MolecularCell,10,537-568を参照のこと、または5’,3’-二リン酸塩を含んでもよい。特定の実施形態では、本発明のsiRNA分子は、別々のセンスおよびアンチセンス配列または領域を含み、ここで、このセンスおよびアンチセンス領域は、当該分野で公知であるヌクレオチドまたは非ヌクレオチドリンカー分子によって共有結合されるか、あるいは、イオン相互作用、水素結合、ファンデルワールス相互作用、疎水性相互作用、および/またはスタッキング相互作用によって非共有結合的に連結される。siRNAは、RNAiを媒介する能力を有する天然のRNAと十分に同様であることだけを必要とする。従って、siRNAは、遺伝子変異、株多様性または進化的分岐に起因して予期され得る配列の変動に耐容し得る。標的配列とRNAi構築物の配列との間の耐容されるヌクレオチドミスマッチの数は、5塩基対中1以下、または10塩基対中1以下、または20塩基対中1以下、または50塩基対中1以下である。いくつかの実施形態では、この剤は、少なくとも15ヌクレオチド、少なくとも17ヌクレオチド、または少なくとも18または19~約21~23または24~29ヌクレオチド長の配列のような、15~29ヌクレオチド長の間の評価のウインドウにわたって標的転写物と少なくとも約70、例えば、少なくとも約80、84、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、または100の正確な配列相補性を有する鎖を含む。言い換えれば、約19~25ヌクレオチド長のsiRNAでは、およそ4個以下のミスマッチを有するsiRNAが一般に耐容され、3ミスマッチ、2ミスマッチおよび/または1ミスマッチ以下を有するsiRNAも同様である。siRNA二重鎖の中心におけるミスマッチは、許容されにくく、本質的に標的RNAの切断を無効にし得る。対照的に、siRNAの3’ヌクレオチド例えば、siRNAアンチセンス鎖の3’ヌクレオチドは典型的には、標的認識の特異性に対して有意に寄与しない。詳細には、標的RNAに対して相補的であるsiRNA配列の3’残基例えば、ガイド配列は一般には、標的RNA切断にそれほど重要ではない。本明細書に記載される複合体、粒子または組成物による送達に適切なsiRNAは、標的遺伝子転写物の一部とハイブリダイズできるヌクレオチド配列またはオリゴヌクレオチド配列を含むと機能的に定義され得る例えば、400mMのNaCl、40mMのPIPESpH6.4、1mMのEDTA、50°Cまたは70°Cのハイブリダイゼーション12~16時間;続いて洗浄。追加の好ましいハイブリダイゼーション条件としては、70°Cで、1×SSC中、または50°Cで1×SSC中でのハイブリダイゼーション、50のホルムアミド、続いて、70°Cで0.3×SSCで洗浄、または70°Cで4×SSC中で、または50°Cで4×SSC中でのハイブリダイゼーション、50ホルムアミド、続いて67°Cで1×SSC中の洗浄が挙げられる。50塩基対長未満であると予想されるハイブリッドのためのハイブリダイゼーション温度は、ハイブリッドの融点Tmよりも5~10°C下でなければならず、ここでTmは、以下の式によって決定される。18塩基対長未満のハイブリッドに関して、Tm°C=2AT塩基の数4GC塩基の数である。18~49塩基対長のハイブリッドに関して、Tm°C=81.516.6log10[Na]0.41GC600/Nであり、ここで、Nは、ハイブリッドの塩基数であり、そして[Na]は、ハイブリダイゼーション緩衝液中のナトリウムイオンの濃度である1×SSCのための[Na]=0.165Mついて。ポリヌクレオチドハイブリダイゼーションのためのストリンジェンシー条件のさらなる例は、Sambrook,J.,ら、1989,MolecularCloning:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,N.Y.,chapters9および11、およびCurrentProtocolsinMolecularBiology,1995,F.M.Ausubel,ら、編集,JohnWileySons,Inc.,sections2.10および6.3-6.4参照によって本明細書に援用されるに提供される。同一のヌクレオチド配列の長さは、少なくとも約10、12、15、17、20、22、25、27、30、32、35、37、40、42、45、47または50塩基であってもよい。本明細書に用いる場合、siRNA分子は、RNAのみを含む分子に限定される必要はなく、さらに、化学的に修飾されたヌクレオチドおよび非ヌクレオチドを包含してもよい。特定の実施形態では、治療用のsiRNAは、ヌクレオチドを含有する2’-ヒドロキシ2’-OHを欠く。特定の実施形態では、治療用siRNAは、RNAiを媒介するために2’-ヒドロキシ基を有するヌクレオチドの存在を必要とせず、従って、siRNAは、なんらリボヌクレオチド例えば、2’-OH基を有するヌクレオチドを含まない。RNAiを支持するためにリボヌクレオチドの存在を必要としない、このようなsiRNA分子は、しかし、結合したリンカー単数または複数、または他の結合するかもしくは会合した基、部分もしくは鎖2’-OH基を有する1つ以上のヌクレオチドを含有するを有してもよい。必要に応じて、siRNA分子は、ヌクレオチド位置の約5、10、20、30、40、または50でリボヌクレオチドを含んでもよい。他の有用な治療用siRNAオリゴヌクレオチドは、ホスホロチオエート骨格およびヘテロ原子骨格を有するオリゴヌクレオチド、ならびに具体的には米国特許第5,489,677号に教示されるような、CH2NHOCH2、CH2NCH3OCH2、CH2ONCH3CH2、CH2NCH3NCH3CH2、およびONCH3CH2CH2ここで天然のホスホジエステル骨格は、OPOCH2として示される、および米国特許第5,602,240号に開示されるアミド骨格を有してもよい。置換糖部分がまた、修飾されたオリゴヌクレオチドに含まれてもよい。本明細書に記載される複合体、粒子または組成物による送達のための治療用アンチセンスオリゴヌクレオチドは、2’位置で以下のうち2つ以上を含んでもよい:OH;F;O--、S--、またはN-アルキル;O--、S--、またはN-アルケニル;O--、S--、またはN-アルキニル;またはO-アルキル-O-アルキル。ここで、このアルキル、アルケニルおよびアルキニルは、置換または非置換のC1~C10アルキルまたはC2~C10アルケニルおよびアルキニルであってもよい。有用な修飾としてはまた、O[CH2nO]mCH3、OCH2nOCH3、OCH2nNH2、OCH2nCH3、OCH2nONH2、およびOCH2nON[C2nCH3]2を挙げることができ、ここでnおよびmは、1~約10である。さらに、オリゴヌクレオチドは、2’位置で以下のうちの1つを含んでもよい:C1~C10低級アルキル、置換低級アルキル、アルカリル、アラルキル、O-アルカリルまたはO-アラルキル、SH、SCH3、OCN、Cl、Br、CN、CF3、OCF3、SOCH3、SO2CH3、ONO2、NO2、N3、NH2、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルカリル、アミノアルキルアミノ、ポリアルキルアミノ、置換シリル、RNA切断基、レポーター基、インタカレーター、オリゴヌクレオチドの薬物動態または薬理学的特性を改善するための基、および同様の特性を有する他の置換基。他の有用な置換基としては、アルコキシアルコキシ基、例えば、2’-メトキシエトキシ2’-OCH2CH2OCH3、ジメチルアミノオキシエトキシ基2’-OCH22ONCH32、またはジメチルアミノ-エトキシエトキシ基2’-OCH2OCH2NCH22が挙げられる。他の修飾としては、2’-メトキシ2’-OCH3、2’-アミノプロポキシ2’-OCH2CH2CH2NH2、または2’-フルオロ2’-Fが挙げられる。同様の修飾がまた、オリゴヌクレオチド内の他の位置で、例えば、3’末端ヌクレオチド上の、または2’-5’連結オリゴヌクレオチド中の糖の3’位置、および5’末端ヌクレオチドの5’位置で行われ得る。オリゴヌクレオチドはまた、ペントフラノシル基の代わりにシクロブチル部分のような糖模倣物を有してもよい。このような置換糖部分の調製を教示する引用文献としては、米国特許第4,981,957号および同第5,359,044号が挙げられる。本明細書に記載されるポリマー-核酸剤の複合体、粒子または組成物で処方されたsiRNAとしては、天然に存在するヌクレオシド類例えば、アデノシン、チミジン、グアノシン、シチジン、ウリジン、デオキシアデノシン、デオキシチミジン、デオキシグアノシン、およびデオキシシチジン、ヌクレオシド類似体例えば、2-アミノアデノシン、2-チオチミジン、イノシン、ピロロ-ピリミジン、3-メチルアデノシン、C5-プロピニルシチジン、C5-プロピニルウリジン、C5-ブロモウリジン、C5-フルオロウリジン、C5-ヨードウリジン、C5-メチルシチジン、7-デアザアデノシン、7-デアザグアノシン、8-オキソアデノシン、8-オキソグアノシン、O6-メチルグアニン、および2-チオシチジン、化学的に修飾された塩基、生物学的に修飾された塩基例えば、メチル化塩基、インターカレート塩基、修飾された糖類例えば、2’-フルオロリボース、リボース、2’-デオキシリボース、アラビノース、およびヘキソースを挙げることができる。適切な修飾された核酸塩基類としては、他の合成のおよび天然の核酸塩基類、例えば、5-メチルシトシン5-me-C、5-ヒドロキシメチルシトシン、キサンチン、ヒポキサンチン、2-アミノアデニン、アデニンおよびグアニンの6-メチルおよび他のアルキル誘導体、アデニンおよびグアニンの2-プロピルおよび他のアルキル誘導体、2-チオウラシル、2-チオチミンおよび2-チオシトシン、5-ハロウラシルおよびシトシン、5-プロピニルウラシルおよびシトシン、6-アゾウラシル、シトシンおよびチミン、5-ウラシルシュードウラシル、4-チオウラシル、8-ハロ、8-アミノ、8-チオール、8-チオアルキル、8-ヒドロキシルおよび他の8-置換のアデニン類およびグアニン類、5-ハロ特に5-ブロモ、5-トリフルオロメチルおよび他の5-置換ウラシルおよびシトシン、7-メチルグアニンおよび7-メチルアデニン、8-アザグアニンおよび8-アザアデニン、7-デアザグアニンおよび7-デアザアデニンおよび3-デアザグアニンおよび3-デアザアデニンが挙げられる。他の有用な核酸塩基類としては、例えば、米国特許第3,687,808号に開示されるものが挙げられる。本明細書に記載されるポリマー-核酸剤の複合体、粒子または組成物への組み込みのための治療用siRNAは、長い二本鎖RNAまたはヘアピンRNAから化学的に合成されても、またはそれに由来してもよい。siRNAは、酵素的に、または部分的/全体的有機合成によって生成されてもよく、任意の修飾されたリボヌクレオチドを、インビトロの酵素的合成または有機合成によって導入してもよい。少なくとも一部はRNAから構成される一本鎖の種は、siRNAアンチセンス鎖として機能してもよいし、またはプラスミドベクターから発現されてもよい。RNA干渉またはRNAiとは、当該分野で概して公知であるように細胞中の遺伝子発現を阻害または下方制御するプロセスであって、低分子干渉核酸分子によって媒介されるプロセスを意味する。さらに、本明細書において用いる場合、RNAiという用語は、配列特異的なRNA干渉、例えば、転写後遺伝子サイレンシング、翻訳阻害、転写阻害、または後成的遺伝学を記載するために用いられる他の用語に等価的であることが意図される。例えば、本明細書に記載される複合体、粒子または組成物による送達のために適切な治療用siRNA分子は、転写後レベルまたは転写前レベルの両方で遺伝子を後成的にサイレンシングし得る。非限定的な実施例では、本発明のsiRNA分子による遺伝子発現の後成的な調節は、遺伝子発現を変更するためのクロマチン構造またはメチル化パターンのsiRNA媒介性の修飾から生じ得る。別の非限定的な実施例では、siRNA分子による遺伝子発現の調節は、RISCを介したRNAコードRNAまたは非コードRNAのいずれかのsiRNA媒介性切断、または当該分野で公知のような翻訳阻害から生じ得る。別の実施形態では、本発明のsiRNA分子による遺伝子発現の調節は、転写阻害から生じ得る。RNAiはまた、マイクロRNAまたはマイクロRNAのように作用するsiRNAによる翻訳抑制も含む。RNAiは、低分子干渉性RNAsiRNAの誘導またはsiRNAの細胞内の産生例えば、プラスミドまたは導入遺伝子由来によって開始されて、1つ以上の標的遺伝子の発現をサイレンシングし得る。あるいは、RNAiは、細胞中に天然に存在して、外来のRNA類例えば、ウイルスのRNA類を除去する。天然のRNAiは、他の同族のRNA配列に対して分解機構を指向する、前駆体dsRNAのダイサー指向性dicer-directed断片化を介して進行する。本明細書に用いる場合、siRNAという用語は、配列特異的RNAiを媒介し得る核酸分子を記載するために用いられる他の用語と等価であることを意味し、かつ例えば、低分子干渉性RNAsiRNA、二本鎖のRNAdsRNA、短いヘアピンRNAshRNA、低分子干渉性オリゴヌクレオチド、低分子干渉性核酸、低分子干渉性の修飾されたオリゴヌクレオチド、化学的に-修飾されたsiRNA、転写後遺伝子サイレンシングRNAptgsRNAなどを包含する。miRNA一実施形態では、本明細書に記載されるポリマー-核酸剤の複合体、粒子または組成物による送達に適切な治療用核酸は、マイクロRNAmiRNAである。マイクロRNAまたはmiRNAとは、mRNA切断、翻訳抑制/阻害または異質染色質のサイレンシングのいずれかによる標的メッセンジャーRNAの発現を調節する低分子二本鎖RNAを意味する例えば、Ambros,2004,Nature,431,350-355;Bartel,2004,Cell,116,281-297;Cullen,2004,VirusResearch.,102,3-9;Heら、,2004,Nat.Rev.Genet.,5,522-531;およびYingら、,2004,Gene,342,25-28を参照のこと。マイクロRNA類miRNA類は、約22ヌクレオチド長の低分子非コードポリヌクレオチドであって、それらのmRNA標的の直接破壊または翻訳抑制を指向する。一実施形態では、治療用マイクロRNAは、miRNA分子のセンス鎖もしくはセンス領域と、アンチセンス鎖もしくはアンチセンス領域の間、またはmiRNA分子のアンチセンス鎖もしくはアンチセンス領域と、対応する標的核酸分子との間で部分的な相補性すなわち、100未満の相補性を有する。例えば、部分的な相補性は、二本鎖の核酸分子内に、種々のミスマッチまたは非塩基対のヌクレオチド例えば、1、2、3、4、5またはそれ以上のミスマッチまたは塩基対でないヌクレオチド、例えば、ヌクレオチドバルジを含んでもよく、その構造は、miRNA分子のセンス鎖もしくはセンス領域と、アンチセンス鎖もしくはアンチセンス領域の間、またはmiRNA分子のアンチセンス鎖もしくはアンチセンス領域と、対応する標的核酸分子との間で生じる、バルジ、ループ、またはオーバーハングを生じ得る。マイクロRNA翻訳抑制経路を介して作用する剤は、標的と形成された二重鎖中に少なくとも1つのバルジおよび/またはミスマッチを含む。特定の実施形態では、ガイド鎖および標的転写物によって形成される二重鎖中のGUまたはUG塩基は、RNAi剤が、転写物に標的されるか否かを決定する目的に関してミスマッチとはみなされない。一実施形態では、本明細書に記載されるポリマー-核酸剤の複合体、粒子または組成物による送達のために適切な治療用核酸は、アンタゴmirantagomirであり、これは、例えば、それらの分解を促進することによって、相補的なmiRNAの阻害をし得る化学的に修飾されたオリゴヌクレオチドである例えば、Krutzfeldtら、,Nature,438:685-689,2005を参照のこと。アンチセンスオリゴヌクレオチド治療用のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるポリマー-核酸剤の複合体、粒子または組成物を介する送達に適切である。オリゴヌクレオチドという用語は、リボ核酸RNAまたはデオキシリボ核酸DNAまたはそれらのアナログ類のオリゴマーまたはポリマーを指す。この用語は、天然に存在する核酸塩基類、糖類および共有結合のヌクレオシド間骨格連結、ならびに、同様に機能する天然には存在しない部分を有するオリゴヌクレオチドから構成されるオリゴヌクレオチドを包含する。このような修飾されたまたは置換されたオリゴヌクレオチドは、所望の特性、例えば、細胞取り込みの向上、核酸標的に対するの親和性の向上、およびヌクレアーゼの存在下での安定性の増大のおかげで、天然型よりも好ましい場合が多い。治療用のアンチセンスオリゴヌクレオチドは典型的には、約10~約50ヌクレオチド長例えば、12~40、14~30、または15~25ヌクレオチド長である。15~23ヌクレオチド長であるアンチセンスオリゴヌクレオチドが特に有用である。しかし、10ヌクレオチド未満しか含まないアンチセンスオリゴヌクレオチド例えば、好ましいアンチセンスオリゴヌクレオチドのうちの1つの一部は、標的遺伝子の発現を阻害する所望の活性を示す限りは、本発明内に包含されると理解される。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、標的核酸中の接近可能な領域と特異的にハイブリダイズするヌクレオチド配列から本質的になり得る。しかし、このようなアンチセンスオリゴヌクレオチドは、いずれかの末端で5~10ヌクレオチドの追加の隣接する配列を含み得る。隣接配列としては、例えば、標的核酸の追加の配列、増幅プライマーに対して相補性の配列、または制限酵素部位に対応する配列を挙げることができる。有効性を最大化するために、アンチセンスオリゴヌクレオチドの設計にさらなる基準を適用してもよい。このような基準は、当該分野で周知であり、かつ例えば、オリゴヌクレオチドプライマーの設計に広く用いられる。これらの基準としては、潜在的なアンチセンスオリゴヌクレオチドの予想の二次構造の欠失、適切なGおよびCヌクレオチドの含量例えば、ほぼ50、および、例えば、単一ヌクレオチドリピートのような配列モチーフ例えば、GGGGランがないことが挙げられる。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、アンチセンス化合物の好ましい形態であるが、本発明は、限定するものではないが、下に記載されるようなオリゴヌクレオチドアナログを含む、他のオリゴマーのアンチセンス化合物を包含する。当該分野で公知のように、ヌクレオシドは、塩基-糖の組み合わせであり、ここで塩基部分は通常は複素環式塩基である。このような複素環式塩基の2つの最も一般的な分類は、プリン類およびピリミジン類である。ヌクレオチドは、ヌクレオシドの糖部分に共有結合されたリン酸基をさらに含むヌクレオシドである。ペントフラノシル糖を含むヌクレオシドに関しては、リン酸基は、糖の2’、3’または5’ヒドロキシル部分のいずれかに連結され得る。オリゴヌクレオチドの形成において、リン酸基は、隣接するヌクレオシドをお互いに共有結合して、直鎖状ポリマー分子を形成する。この直鎖状ポリマー分子のそれぞれの末端は、環状分子を形成するようにさらに結合され得るが、直鎖状分子が一般には好ましい。オリゴヌクレオチド分子内では、リン酸基は通常、オリゴヌクレオチドのヌクレオシド間骨格を形成するとされる。RNAおよびDNAの正常な連結または骨格は、3’~5’ホスホジエステル連結である。本明細書に記載されるポリマー-核酸剤の複合体、粒子または組成物による送達のために適切な治療用のアンチセンスオリゴヌクレオチドとしては、修飾された骨格または天然ではないヌクレオシド間連結を含むオリゴヌクレオチドが挙げられる。本明細書において用いる場合、修飾された骨格を有するオリゴヌクレオチドとしては、骨格中にリン原子を有するもの、および骨格中にリン原子を有さないものが挙げられる。本明細書の目的に関して、および当該分野で時に言及されるとおり、それらのヌクレオシド間骨格中にリン原子を有さない修飾オリゴヌクレオチドはまた、オリゴヌクレオチドであるとみなされ得る。修飾されたオリゴヌクレオチド骨格としては、例えば、ホスホロチオエート類、鏡像異性のホスホロチオエート類、ホスホロジチオエート類、ホスホトリエステル類、アミノアルキルホスホトリエステル類、メチルおよび他のアルキルホスホネート類例えば、3’-アルキレンホスホネート類および鏡像異性のホスホネート類、ホスフィン酸塩類、ホスホロアミド酸類例えば、3’-アミノホスホロアミド酸およびアミノアルキルホスホロアミド酸類、チオノホスホロアミド酸類、チオノアルキルホスホネート類、チオノアルキルホスホトリエステル類、およびボラノリン酸塩類正常な3’-5’連結を有する、ならびにこれらの2’-5’連結されたアナログ類、および逆の極性を有するものここでヌクレオシド単位の隣接する対は、3’-5’から5’-3’に、または2’-5’から5’-2’に連結される。種々の塩、混合塩および遊離の酸型もまた含まれる。このような骨格オリゴヌクレオチドの調製を教示する文献は、例えば、米国特許第4,469,863号および同第5,750,666号に示される。その中にリン原子を含まない修飾されたオリゴヌクレオチド骨格を有する治療用のアンチセンス分子は、短鎖アルキルまたはシクロアルキルヌクレオシド間連結、混合ヘテロ原子およびアルキルまたはシクロアルキルヌクレオシド間連結、または1つ以上の短鎖ヘテロ原子のまたは複素環式ヌクレオシド間連結によって形成される骨格を有してもよい。これらとしては、モルホリノ連結を有するものヌクレオシドの糖部分から一部は形成される;シロキサン骨格;スルフィド、スルホキシドおよびスルホン骨格;ホルムアセチルおよびチオホルムアセチル骨格;メチレンホルムアセチルおよびチオホルムアセチル骨格;アルケン含有骨格;スルファミン酸塩骨格;メチレンイミノおよびメチレンヒドラジノ骨格;スルホナートおよびスルホンアミド骨格;アミド骨格;および混合のN、O、SおよびCH2構成要素部分を有するその他のものが挙げられる。このような修飾された骨格オリゴヌクレオチドの調製を教示する引用文献は、例えば、米国特許第5,235,033号および同第5,596,086号に提供される。別の実施形態では、治療用のアンチセンス化合物は、オリゴヌクレオチドアナログであり、ここではヌクレオチド単位の糖およびヌクレオシド間連結すなわち、骨格の両方が新規な基で置き換えられているが、塩基単位は、適切な核酸標的とのハイブリダイゼーションのために維持されている。優れたハイブリダイゼーション特性を有することが示されたこのようなオリゴヌクレオチドアナログの1つは、ペプチド核酸PNAと呼ばれる。PNA化合物では、オリゴヌクレオチドの糖-骨格は、アミド含有骨格例えば、アミノエチルグリシン骨格で置き換えられている。核酸塩基類は、保持され、かつ骨格のアミド部分のアザ窒素原子に直接または間接的に結合される。このような修飾された骨格オリゴヌクレオチドの調製を教示する引用文献は、例えば、Nielsenら、,Science254:1497-15001991、および米国特許第5,539,082号に示される。他の有用な治療用のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ホスホロチオエート骨格およびヘテロ原子骨格を有するオリゴヌクレオシド類、ならびに具体的には、米国特許第5,489,677号に教示されるようなCH2NHOCH2、CH2NCH3OCH2、CH2ONCH3CH2、CH2NCH3NCH3CH2、およびONCH3CH2CH2ここで天然のホスホジエステル骨格は、OPOCH2として示される、および米国特許第5,602,240号に開示されるアミド骨格を有し得る。置換された糖部分はまた、修飾されたオリゴヌクレオチドに含まれ得る。本明細書に記載されるポリマー-核酸剤の複合体、粒子または組成物による送達のための治療用アンチセンスオリゴヌクレオチドは2’位置で以下のうちの1つ以上を含んでもよい:OH;F;O--、S--、またはN-アルキル;O--、S--、またはN-アルケニル;O--、S--、またはN-アルキニル;またはO-アルキル-O-アルキル。ここで、このアルキル、アルケニルおよびアルキニルは、置換または非置換のC1~C10アルキルまたはC2~C10アルケニルおよびアルキニルであってもよい。有用な修飾としてはまた、O[CH2nO]mCH3、OCH2nOCH3、OCH2nNH2、OCH2nCH3、OCH2nONH2、およびOCH2nON[C2nCH3]2を挙げることができ、ここでnおよびmは、1~約10である。さらに、オリゴヌクレオチドは、2’位置で以下のうちの1つを含んでもよい:C1~C10低級アルキル、置換低級アルキル、アルカリル、アラルキル、O-アルカリルまたはO-アラルキル、SH、SCH3、OCN、Cl、Br、CN、CF3、OCF3、SOCH3、SO2CH3、ONO2、NO2、N3、NH2、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルカリル、アミノアルキルアミノ、ポリアルキルアミノ、置換シリル、RNA切断基、レポーター基、インタカレーター、オリゴヌクレオチドの薬物動態または薬理学的特性を改善するための基、および同様の特性を有する他の置換基。他の有用な置換基としては、アルコキシアルコキシ基、例えば、2’-メトキシエトキシ2’-OCH2CH2OCH3、ジメチルアミノオキシエトキシ基2’-OCH22ONCH32、またはジメチルアミノ-エトキシエトキシ基2’-OCH2OCH2NCH22が挙げられる。他の修飾としては、2’-メトキシ2’-OCH3、2’-アミノプロポキシ2’-OCH2CH2CH2NH2、または2’-フルオロ2’-Fが挙げられる。同様の修飾がまた、オリゴヌクレオチド内の他の位置で、例えば、3’末端ヌクレオチド上の、または2’-5’連結オリゴヌクレオチド中の糖の3’位置、および5’末端ヌクレオチドの5’位置で作製され得る。オリゴヌクレオチドはまた、ペントフラノシル基の代わりにシクロブチル部分のような糖模倣物を有してもよい。このような置換糖部分の調製を教示する引用文献としては、米国特許第4,981,957号および同第5,359,044号が挙げられる。治療用のアンチセンスオリゴヌクレオチドはまた、核酸塩基修飾または置換を含んでもよい。本明細書に用いる場合、修飾されていないまたは天然の核酸塩基は、プリン塩基アデニンAおよびグアニンG、およびピリミジン塩基チミンT、シトシンC、およびウラシルUを含む。修飾された核酸塩基類としては、他の合成のおよび天然の核酸塩基類、例えば、5-メチルシトシン5-me-C、5-ヒドロキシメチルシトシン、キサンチン、ヒポキサンチン、2-アミノアデニン、アデニンおよびグアニンの6-メチルおよび他のアルキル誘導体、アデニンおよびグアニンの2-プロピルおよび他のアルキル誘導体、2-チオウラシル、2-チオチミンおよび2-チオシトシン、5-ハロウラシルおよびシトシン、5-プロピニルウラシルおよびシトシン、6-アゾウラシル、シトシンおよびチミン、5-ウラシルシュードウラシル、4-チオウラシル、8-ハロ、8-アミノ、8-チオール、8-チオアルキル、8-ヒドロキシルおよび他の8-置換のアデニン類およびグアニン類、5-ハロ特に5-ブロモ、5-トリフルオロメチルおよび他の5-置換ウラシルおよびシトシン、7-メチルグアニンおよび7-メチルアデニン、8-アザグアニンおよび8-アザアデニン、7-デアザグアニンおよび7-デアザアデニンおよび3-デアザグアニンおよび3-デアザアデニンを挙げることができる。他の有用な核酸塩基類としては、例えば、米国特許第3,687,808号に開示されるものが挙げられる。特定の核酸塩基置換は、本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドの結合親和性を増大するために特に有用であり得る。例えば、5-メチルシトシン置換は、0.6~1.2°Cで核酸二重鎖安定性を増大することが示されているSanghviら、編集、AntisenseResearchandApplications,pp.276-278,CRCPress,BocaRaton,Fla.1993。他の有用な核酸塩基置換としては、5-置換ピリミジン類、6-アザピリミジン類およびN-2、N-6およびO-6置換プリン類、例えば、2-アミノプロピルアデニン、5-プロピニルウラシルおよび5-プロピニルシトシンが挙げられる。所定のアンチセンスオリゴヌクレオチドにおける全ての核酸塩基について均一に修飾されることは必須ではない。上述の修飾のうちの2つ以上が、単一のオリゴヌクレオチドに組み込まれても、またはオリゴヌクレオチド内の単一のヌクレオシドに組み込まれてさえもよい。本明細書に記載される複合体、粒子または組成物による送達に適切な治療用の核酸はまた、キメラのオリゴヌクレオチドであるアンチセンスオリゴヌクレオチドを含む。キメラのアンチセンスオリゴヌクレオチドは、各々が少なくとも1つのモノマー単位からできている、2つ以上の化学的に別個の領域を含んでもよい例えば、オリゴヌクレオチドの場合にはヌクレオチド。キメラのオリゴヌクレオチドは典型的には、少なくとも1つの領域を含み、ここで、このオリゴヌクレオチドは、例えば、ヌクレアーゼ分解に対する耐性の増大、細胞取り込みの増大、および/または標的核酸に対する親和性の増大を付与するように修飾される。例えば、キメラのオリゴヌクレオチドの領域は、標的mRNAとアンチセンスのオリゴヌクレオチドとの間で形成されるようなRNA:DNAのRNA鎖を切断し得る、RNaseHのような酵素のための基質として機能し得る。従って、RNaseHによるこのような二重鎖の切断は、アンチセンスオリゴヌクレオチドの有効性を大きく向上し得る。治療用のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、インビトロで合成され得る。本発明によって用いられるアンチセンスオリゴヌクレオチドは、例えば、固相合成のような、公知の方法を通じて都合よく産生され得る。同様の技術がまた、修飾されたオリゴヌクレオチド、例えば、ホスホロチオエート類またはアルキル化誘導体を調製するために用いられ得る。アンチセンスポリヌクレオチドとしては、遺伝子またはmRNAに相補的である配列を含む。アンチセンスポリヌクレオチドとしては、限定するものではないが以下が挙げられる:モルホリノ類、2’-O-メチルポリヌクレオチド、DNA、RNAなど。ポリヌクレオチド-ベースの発現インヒビターは、インビトロで重合化された組み換え体であってもよく、キメラの配列を含んでもよく、またはこれらの基の誘導体であってもよい。このポリヌクレオチドベースの発現インヒビターは、標的のRNAおよび/または遺伝子が阻害されるような、リボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド、合成のヌクレオチド、または任意の適切な組み合わせを含んでもよい。本明細書において用いる場合、ハイブリダイゼーションという用語は、水素結合を意味し、これは、相補性ヌクレオシドとヌクレオチド塩基との間の、ワトソン-クリック、フーグスティーン、または逆フーグスティーン水素結合であり得る。例えば、アデニンとチミン、およびグアニンとシトシンは、それぞれ、水素結合の形成を通じて対合する、相補的な核酸塩基類当該分野ではしばしば、単に塩基と呼ばれるである。本明細書において用いる場合、相補性の、相補的なとは、2つのヌクレオチドの間の正確な対合の能力を指す。例えば、オリゴヌクレオチドの特定の位置でのヌクレオチドが、標的核酸分子中のヌクレオチドと水素結合し得るならば、オリゴヌクレオチドおよび標的核酸は、その位置でお互いに相補性であるとみなされる。オリゴヌクレオチドおよび標的核酸は、お互いの分子中の対応する位置の十分な数が、お互いと水素結合し得るヌクレオチドによって占有される場合、お互いに相補的である。従って、特異的にハイブリダイズ可能とは、オリゴヌクレオチドと標的核酸との間で安定かつ特異的な結合が生じるような十分な程度の相補性または正確な対合を指すものである。アンチセンスオリゴヌクレオチドの配列は、特異的にハイブリダイズ可能であるその標的核酸の配列に対して100相補性である必要はないことが当該分野では理解される。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、a標的核酸に対するオリゴヌクレオチドの結合が、標的核酸の正常な機能を妨害し、およびb特異的な結合が所望される条件下において、すなわち、インビトロアッセイが行われる条件下、またはインビボアッセイもしくは治療用途のための生理学的条件下で、非標的配列に対するアンチセンスオリゴヌクレオチドの非特異的な結合を回避するのに十分な相補性がある場合、特異的にハイブリダイズ可能である。インビトロのストリンジェンシー条件は、温度、時間および塩濃度に依存する例えば、Sambrookら、,MolecularCloning:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratoryPress,NY1989を参照のこと。典型的には、高度から中度のストリンジェンシーを、インビトロの特異的なハイブリダイゼーションに用い、その結果、実質的に同様の核酸の間でハイブリダイゼーションが生じるが、類似でない核酸の間では生じない。特異的なハイブリダイゼーション条件は、5×SSC0.75Mの塩化ナトリウム/0.075Mのクエン酸ナトリウムで1時間40°Cでのハイブリダイゼーション、続いて、1×SSC中で40°Cで10回、および1×SSC中で室温で5×の洗浄である。インビボのハイブリダイゼーションは、標的配列とのアンチセンスオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションを管理する細胞内条件例えば、生理学的なpHおよび細胞内イオン条件からなる。インビボ条件は、比較的低ストリンジェンシーの条件によってインビトロで模倣され得る。例えば、ハイブリダイゼーションは、インビトロで2×SSC0.3Mの塩化ナトリウム/0.03Mのクエン酸ナトリウム、0.1のSDS中で37°Cで行われ得る。4×SSC、0.1SDSを含有する洗浄溶液は、1×SSC中で45°Cでの最終洗浄によって、37°Cで用いられ得る。アンチセンス分子とその標的核酸との特異的なハイブリダイゼーションは、標的核酸の正常な機能を妨害し得る。標的DNA核酸については、アンチセンス技術は、複製および転写を中断し得る。標的DNA核酸については、アンチセンス技術は、例えば、タンパク質翻訳の部位に対するRNAの転位、RNAからのタンパク質の転位、1つ以上のmRNA種を生じるRNAのスプライシング、およびRNAの触媒活性を混乱させ得る。標的核酸機能でのこのような干渉の全体的な効果は、標的遺伝子をコードする核酸の場合、標的遺伝子の発現の阻害である。本発明の状況では、標的遺伝子の発現阻害とは、標的ポリペプチドのレベルの減少、または標的ポリペプチドの完全な非存在を生じる標的核酸配列の転写および/または翻訳を撹乱することを意味する。アンチセンスオリゴヌクレオチド、例えば、siRNAのアンチセンス鎖は好ましくは、標的核酸分子内の特異的な標的で指向され得る。標的化プロセスは、アンチセンス相互作用が生じ得、その結果、所望の効果、例えば、標的遺伝子発現の阻害が生じる標的核酸分子内の部位単数または複数の特定を包含する。伝統的に、アンチセンスオリゴヌクレオチドに好ましい標的部位は、遺伝子のオープンリーディングフレームORFの翻訳開始または終止コドンを包含する領域を含んだ。さらに、ORFは、アンチセンス技術で効果的に標的とされ、5’および3’非翻訳領域も同様である。さらに、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、イントロン領域およびイントロン-エキソン接合領域で首尾よく指向されている。しかし、標的核酸の配列およびドメイン構造例えば、翻訳開始コドン、エキソンまたはイントロンの位置の単純な知識では、一般には、特定の領域に指向されるアンチセンスオリゴヌクレオチドが標的核酸の転写および/または翻訳に効率的に結合して阻害することを保証するのに十分ではない。その天然の状態では、mRNA分子は、複雑な二次構造および三次構造に折り畳まれ、このような構造の内部にある配列は、アンチセンスオリゴヌクレオチドに接近できない。有効性を最大化するために、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、最も接近できる標的mRNAの領域、すなわち、折り畳まれたmRNA分子の表面または近位の領域に対して指向され得る。mRNA分子の接近可能な領域は、RiboTAG商標、またはmRNA接近可能部位標的AccessibleSiteTaggingMAST、技術を用いることを含めて、当該分野で公知の方法によって特定され得る。RiboTAG商標技術は、PCT出願番号SE01/02054で開示される。一旦、1つ以上の標的部位が特定されれば、標的に対して十分に相補性であるすなわち、所望の効果を得るために十分な強度および特異性でハイブリダイズするアンチセンスオリゴヌクレオチドを合成することができる。標的核酸の発現を阻害するためのアンチセンスオリゴヌクレオチドの効果は、例えば、ノーザンブロット、RT-PCR、ウエスタンブロット、ELISA、または免疫組織化学染色を用いて、標的mRNAまたはタンパク質のレベルを測定することによって評価され得る。いくつかの実施形態では、これは、標的核酸の複数の接近可能な領域を標的するために有用であり得る。このような実施形態では、お互いが特異的に、異なる接近可能領域にハイブリダイズする複数のアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いてもよい。複数のアンチセンスオリゴヌクレオチドを一緒にまたは順次用いてもよい。いくつかの実施形態では、これは、複数の標的核酸の複数の接近可能領域を標的するために有用であり得る。アプタマー本明細書に記載されるポリマー-核酸剤の複合体、粒子または組成物による送達のために適切な治療用核酸は、アプタマーこれはまた、核酸リガンドまたは核酸アプタマーとも呼ばれるであってもよく、アプタマーとは、標的分子に対して特異的に結合するポリヌクレオチドであり、ここで、その天然の設定で標的分子によって認識される配列とは別個である配列を核酸分子が有するポリヌクレオチドである。あるいは、アプタマーは、標的分子に結合する核酸分子ここで標的分子は核酸に天然には結合しないであってもよい。この標的分子は、目的の任意の分子であってもよい。この標的分子は、例えば、ポリペプチド、炭水化物、核酸分子または細胞であってもよい。アプタマーの標的は、このアプタマーに結合する三次元の化学構造である。例えば、核酸を標的するアプタマー例えば、RNAまたはDNAは、ヘアピンループのような他の構造で遮断される核酸標的に対して相補的なワトソンクリック塩基対合を介して結合する領域を含んでもよい。別の実施形態では、アプタマーは、リガンド-結合ドメインで標的タンパク質に結合し、それによって天然に存在するリガンドと標的タンパク質との相互作用を妨げる。一実施形態では、アプタマーは、特定の発達段階または特定の疾患状態にある細胞または組織に結合する。標的は、細胞の表面上の抗原、例えば、細胞表面受容体、インテグリン、膜貫通タンパク質、イオンチャネルまたは膜輸送タンパク質である。一実施形態では、標的は、腫瘍マーカーである。腫瘍マーカーは、正常組織に存在せず、腫瘍に存在する抗原であってもよいし、または正常組織よりも腫瘍に広く存在する抗原であってもよい。核酸リガンドを形成する核酸は、天然に存在するヌクレオシド類、修飾されたヌクレオシド類、1つ以上のヌクレオシド類の間に挿入された炭化水素リンカー例えば、アルキレンまたはポリエーテルリンカー例えば、PEGリンカーを有する天然に存在するヌクレオシド類、1つ以上のヌクレオシド類の間に挿入された、炭化水素またはPEGリンカーを有する修飾されたヌクレオシド類、あるいはそれらの組み合わせから構成され得る。一実施形態では、核酸リガンドのヌクレオチドまたは修飾されたヌクレオチドは、炭化水素リンカーまたはポリエーテルリンカーで置換されてもよく、ただし、この核酸リガンドの結合親和性および選択性は、置換によって実質的に低減されない例えば、標的のためのアプタマーの解離定数は典型的には、約1×10-6M以下であることを条件とする。アプタマーは、任意の方法、例えば、SystemicEvolutionofLigandsbyExponentialEnrichmentSELEXによって調製され得る。核酸リガンドを得るためのSELEXプロセスは、その教示全体が、参照によって本明細書に援用される、米国特許第5,567,588号に記載される。本明細書に記載される粒子内では、核酸剤は、別の部分、例えば、上記のポリマー、本明細書に記載されるカチオン性部分、または親水性ポリマー、例えば、PEGに結合されてもよい。核酸剤はまた、結合されない状態であってもよく、このことは、別の部分に結合されないことを意味する。粒子が複数の核酸剤を含む場合、いくつかの核酸剤は別の部分に結合されてもよく、いくつかは結合されなくてもよい。例えば、特定の実施形態では、粒子中の核酸剤因子は、粒子のポリマーに結合される、この核酸剤は、粒子中の任意のポリマー、例えば、疎水性ポリマー、または親水性部分および疎水性部分を含んでいるポリマーに結合されてもよい。特定の実施形態では、核酸は、粒子中で結合されていない。核酸剤は、1つ以上の非共有結合的な相互作用、例えば、ファンデルワールス相互作用、疎水性相互作用、水素結合、双極子-双極子相互作用、イオン性相互作用、およびπスタッキングを通じて粒子のポリマーまたは他の構成要素と会合され得る。核酸剤は、本明細書に記載されるポリマー-核酸剤の複合体、粒子または組成物の種々の量で存在し得る。粒子中に存在する場合、核酸剤は、ある量、例えば、この粒子の約0.1~約50重量例えば、この粒子の約1~約50重量、約1~約30重量、この粒子の約1~約20重量、この粒子の約4~約25重量、またはこの粒子の約5~約13、14、15、16、17、18、19または20重量で存在してもよい。追加の構成要素いくつかの実施形態では、この粒子はさらに、界面活性剤または界面活性剤の混合物を含む。いくつかの実施形態では、この界面活性剤は、PEG、ポリビニルアルコールPVA、ポリビニルピロリドンPVP、ポロキサマー、ヘキシルデシルトリメチルアンモニウムクロライド、ポリソルベート、ポリオキシエチレンエステル、PEG-脂質例えば、PEG-セラミド、d-α-トコフェリルポリエチレングリコール1000コハク酸塩、1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-[ホスホ-rac-1-グリセロール]、レシチン、またはそれらの混合物を含む。いくつかの実施形態では、この界面活性剤は、PVAであり、およびこのPVAは、約3kDa~約50kDa例えば、約5kDa~約45kDa、約7kDa~約42kDa、約9kDa~約30kDa、または約11~約28kDaであり、最大で約98まで加水分解される例えば、約75~95、約80~90加水分解され、または約85加水分解される。いくつかの実施形態では、PVAは、約2~約27cPの粘度を有する。いくつかの実施形態では、PVAは、カチオン性PVA例えば、上記のようなであり、例えば、カチオン性部分、例えば、カチオン性PVAはまた、界面活性剤としても機能し得る。いくつかの実施形態では、この界面活性剤は、ポリソルベート80である。いくつかの実施形態では、この界面活性剤は、Solutol登録商標HS15である。いくつかの実施形態では、この界面活性剤は、脂質例えば、リン脂質ではなく、または脂質を含まない。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、この粒子の最大約35重量まで例えば、最大で約20重量または最大で約25重量まで、約15~約35重量、約20~約30重量、または約23~約26重量の量で存在する。いくつかの実施形態では、この粒子は、賦形剤、例えば、炭水化物成分、または安定化剤または凍結保護剤、例えば、本明細書に記載される炭水化物成分、安定化剤または凍結保護剤を伴う。理論によって束縛されることは望まないが、炭水化物成分は、安定化剤または凍結保護剤として作用し得る。いくつかの実施形態では、炭水化物成分、安定化剤または凍結保護剤は、1つ以上の糖類、糖アルコール類、炭水化物類例えば、スクロース、マンニトール、シクロデキストリンまたはシクロデキストリンの誘導体例えば、2-ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン、時には、本明細書では、HP-β-CDと呼ばれる、またはスルホブチル-CD、時にはCYTOSOLと呼ばれる、塩、PEG、PVPまたはクラウンエーテルを含む。いくつかの実施形態では、炭水化物成分、安定化剤または凍結保護剤は、2つ以上の炭水化物、例えば、本明細書に記載される2つ以上の炭水化物を含む。一実施形態では、この炭水化物成分、安定化剤または凍結保護剤は、環状炭水化物例えば、シクロデキストリンまたはシクロデキストリンの誘導体、例えば、α-、β-、またはγ-、シクロデキストリン例えば、2-ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリンおよび非環状炭水化物を含む。例示的な非環状オリゴ糖類は、10、8、6または4個未満の単糖類サブユニット例えば、単糖類または二糖類例えば、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトースまたはそれらの組み合わせのものを含む。いくつかの実施形態では、凍結保護剤は、単糖類、例えば、糖アルコール例えば、マンニトールである。ある実施形態では、炭水化物成分、安定化剤または凍結保護剤は、第一のおよび第二の構成要素、例えば、環状炭水化物および非環状炭水化物、例えば、単糖、二糖または四糖を含む。一実施形態では、粒子に会合する環状炭水化物の非環状炭水化物に対する重量比は、本明細書に記載される重量比、例えば、0.5:1.5~1.5:0.5である。ある実施形態では、この炭水化物成分、安定化剤または凍結保護剤は、以下のように、第一のおよび第二の構成要素ここでは、AおよびBと命名を含む:Aは環状炭水化物を含み、かつBは二糖類を含む;Aは2つ以上の環状炭水化物、例えば、β-シクロデキストリン時には、本明細書では、β-CDと呼ばれるまたはβ-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、およびBは二糖類を含む;Aは環状炭水化物、例えば、β-CDまたはβ-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、およびBは2つ以上の二糖類を含む;Aは2つ以上の環状炭水化物を含み、およびBは2つ以上の二糖類を含む;Aはシクロデキストリン、例えば、β-CDまたはβ-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、およびBは二糖類を含む;Aはβ-シクロデキストリン、例えば、β-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、およびBは二糖類を含む;Aはβ-シクロデキストリン、例えば、β-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、およびBはスクロースを含む;Aはβ-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、およびBはスクロースを含む;Aはβ-シクロデキストリン、例えば、β-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、およびBはトレハロースを含む;Aはβ-シクロデキストリン、例えば、β-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、およびBはスクロースおよびトレハロースを含む。AはHP-β-CDを含み、およびBはスクロースおよびトレハロースを含む。ある実施形態では構成要素AおよびB以下の比で存在する:0.5:1.5~1.5:0.5。ある実施形態では、構成要素AおよびBは、以下の比で存在する:3-1:0.4-2;3-1:0.4-2.5;3-1:0.4-2;3-1:0.5-1.5;3-1:0.5-1;3-1:1;3-1:0.6-0.9;および3:1:0.7。ある実施形態では、構成要素AおよびBは、以下の比で存在する:2-1:0.4-2;3-1:0.4-2.5;2-1:0.4-2;2-1:0.5-1.5;2-1:0.5-1;2-1:1;2-1:0.6-0.9;および2:1:0.7。ある実施形態では、構成要素AおよびBは、以下の比で存在する:2-1.5:0.4-2;2-1.5:0.4-2.5;2-1.5:0.4-2;2-1.5:0.5-1.5;2-1.5:0.5-1;2-1.5:1;2-1.5:0.6-0.9;2:1.5:0.7。ある実施形態では、構成要素AおよびB以下の比で存在する:2.5-1.5:0.5-1.5;2.2-1.6:0.7-1.3;2.0-1.7:0.8-1.2;1.8:1;1.85:1および1.9:1。ある実施形態では、構成要素Aは、シクロデキストリン、例えば、β-シクロデキストリン、例えば、β-CD誘導体、例えば、HP-β-CDを含み、およびBは、スクロースを含み、それらは、以下の比で存在する:2.5-1.5:0.5-1.5;2.2-1.6:0.7-1.3;2.0-1.7:0.8-1.2;1.8:1;1.85:1および1.9:1。いくつかの実施形態では、この粒子の表面は、実質的に、界面活性剤またはポリマー、例えば、PVA、ポリオキサゾリン、ポリビニルピロリジン、ポリヒドロキシルプロピルメタクリルアミド、ポリシアル酸、またはPEGで被覆されてもよい。複合体粒子の構成要素のうちの1つ以上は、複合体の形態であってもよく、すなわち、別の部分に結合されてもよい。例示的な複合体としては、核酸剤-ポリマーの複合体例えば、核酸剤-疎水性ポリマーの複合体、核酸剤-疎水性-親水性ポリマーの複合体、または核酸剤-親水性ポリマーの複合体、カチオン性部分-ポリマーの複合体例えば、カチオン性部分-疎水性ポリマーの複合体またはカチオン性部分-疎水性-親水性ポリマーの複合体、核酸剤-カチオン性ポリマーの複合体、および核酸剤-疎水性部分複合体が挙げられる。本明細書に記載される核酸剤-ポリマーの複合体は、ポリマー、例えば、疎水性ポリマー、親水性ポリマー、または親水性-疎水性ポリマー、および核酸剤を含む。本明細書に記載される核酸剤は、例えば、直接例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしで、またはリンカーを通じて、本明細書に記載されるポリマーに結合され得る。核酸剤は、疎水性ポリマー例えば、PLGA、親水性ポリマー例えば、PEGまたは親水性-疎水性ポリマー例えば、PEG-PLGAに結合され得る。核酸剤は、ポリマーの末端に結合されてもよく、ポリマーの両方の末端に結合されてもよく、またはポリマー鎖にそった点に結合されてもよい。いくつかの実施形態では、複数の核酸剤は、ポリマー鎖にそった点に結合されてもよく、または複数の核酸剤が、多機能性のリンカーを介してポリマーの末端に結合されてもよい。核酸剤は、この核酸剤の2’、3’、または5’位置を通じて本明細書に記載のポリマーに結合されてもよい。核酸剤が二重鎖である実施形態では例えば、siRNA、この核酸剤は、センス鎖またはアンチセンス鎖を通じて結合され得る。本明細書に記載されるカチオン性部分-ポリマーの複合体は、ポリマー、例えば、疎水性ポリマー、または親水性部分および疎水性部分を含んでいるポリマーおよびカチオン性部分を含む。本明細書に記載されるカチオン性部分は、本明細書に記載されるポリマーに対して、例えば、直接例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしで、またはリンカーを通じて結合され得る。カチオン性部分は、疎水性ポリマー例えば、PLGAまたは疎水性部分および親水性部分を有するポリマー例えば、PEG-PLGAに結合され得る。カチオン性部分は、ポリマーの末端に、ポリマーの両方の末端に、またはポリマー鎖に沿った点に結合され得る。いくつかの実施形態では、複数のカチオン性部分は、ポリマー鎖に沿った点に結合されてもよく、または複数のカチオン性部分は、多機能性のリンカーを通じてポリマーの末端に結合されてもよい。本明細書に記載の核酸剤-カチオン性ポリマーの複合体は、カチオン性ポリマー例えば、PEI、カチオン性PVA、ポリヒスチジン、ポリリジン、またはポリ2-ジメチルアミノエチルメタクリレートおよび核酸剤を含む。本明細書に記載される核酸剤は、本明細書に記載されるポリマーに対して、例えば、直接例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしで、またはリンカーを通じて結合され得る。核酸剤は、疎水性ポリマー例えば、PLGA、親水性ポリマー例えば、PEGまたは疎水性部分および親水性部分を有しているポリマー例えば、PEG-PLGAに対して結合され得る。核酸剤は、ポリマーの末端に結合されても、ポリマーの両方の末端に結合されても、またはポリマー鎖に沿った点に結合されてもよい。いくつかの実施形態では、複数の核酸剤は、ポリマー鎖に沿った点に結合されてもよいし、または複数の核酸剤は、多機能性のリンカーを介してポリマーの末端に結合されてもよい。いくつかの実施形態では、複合体は、本明細書に記載されるポリマーに結合される核酸剤と二重鎖を形成する核酸剤を含んでもよい。例えば、本明細書に記載されるポリマーは、核酸オリゴマー例えば、一本鎖DNAに結合され得、これが、核酸剤とハイブリダイズして、二重鎖を形成する。二重鎖は、切断されて、インビボで、例えば細胞のヌクレアーゼで核酸剤が遊離され得る。結合の方式本明細書に記載される核酸剤またはカチオン性部分は、直接例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしで、本明細書に記載されるポリマーまたは疎水性部分例えば、ポリマーに結合され得る。この結合は、ポリマーの末端であっても、またはポリマーの骨格にそってもよい。核酸剤は、例えば、この核酸剤が、二本鎖である場合、センス鎖またはアンチセンス鎖を通じてポリマーまたはカチオン性部分に結合され得る。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、このポリマーに対する結合点で修飾され;例えば、核酸剤の末端ヒドロキシ部分例えば、5’または3’末端ヒドロキシル部分は、ポリマーと反応される官能基に変換される例えば、ヒドロキシル部分は、チオール部分に変換される。核酸剤またはカチオン性部分の反応性官能基は、直接例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしで、ポリマー上の官能基に結合され得る。核酸剤またはカチオン性部分は、種々の連結、例えば、アミド、エステル、スルフィド例えば、マレイミドスルフィド、ジスルフィド、スクシンイミド、オキシム、シリルエーテル、炭酸塩またはカルバミン酸塩連結を介してポリマーに結合され得る。例えば、一実施形態では、核酸剤またはカチオン性部分のヒドロキシ基は、ポリマーのカルボン酸基と反応されて、核酸剤またはカチオン性部分とポリマーとの間の直接エステル結合を形成し得る。別の実施形態では、核酸剤またはカチオン性部分のアミノ基は、ポリマーのカルボン酸基に連結されて、アミド結合を形成し得る。ある実施形態では、チオール修飾された核酸剤は、ポリマーの末端上の反応性部分例えば、アクリレートPLGA、またはピリジニル-SS-活性化PLGA、またはマレイミド活性化PLGAと反応されて、スルフィドもしくはジスルフィドまたはチオエーテル結合すなわち、スルフィド結合を形成し得る。例示的な結合方式としては、クリックケミストリーから生じるもの例えば、アミド結合、エステル結合、ケタール、コハク酸塩、またはトリアゾールおよびWO2006/115547に記載のものが挙げられる。いくつかの実施形態では、核酸剤またはカチオン性部分は、直接例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしで、ポリマーの末端に結合されてもよい。例えば、その末端でカルボン酸部分を有しているポリマーは、核酸剤またはカチオン性部分のヒドロキシ、チオール、またはアミノ部分に共有結合されて、エステル、チオエステル、またはアミド結合を形成し得る。別の実施形態では、核酸剤またはカチオン性部分は、直接例えば、介在するスペーサー部分由来の原子の存在なしで、ポリマーの骨格に沿って結合され得る。核酸剤は、例えば、核酸剤が、二本鎖である場合、センス鎖またはアンチセンス鎖を通じてポリマーまたはカチオン性部分に結合され得る。特定の実施形態では、特定の所望の複合体の形成を容易にするために適切な保護基が、他のポリマー末端上で、または薬剤上の他の反応性置換基の上で必要であり得る。例えば、ヒドロキシ末端を有するポリマーは、例えば、シリル基の群例えば、トリメチルシリルまたはアシル基例えば、アセチルで保護され得る。核酸剤またはカチオン性部分は、例えば、アセチル基または他の保護基で保護されてもよい。いくつかの実施形態では、ポリマーに対する核酸剤またはカチオン性部分の結合のプロセスは、同じポリマーおよび同じ核酸剤またはカチオン性部分を有する複合体の混合物を含む組成物を生じ得るが、これは、核酸剤またはカチオン性部分とポリマーとの間の連結の性質が異なる。例えば、核酸剤またはカチオン性部分が、ポリマーと反応し得る複数の反応性部分を有する場合、核酸剤またはカチオン性部分およびポリマーの反応の生成物は、複合体であって、ここで、この核酸剤またはカチオン性部分がこのポリマーに対して、1つの反応性部分を介して結合されている複合体、および複合体であって、ここで、この核酸剤またはカチオン性部分がこのポリマーに対して、別の反応性部分を介して結合されている複合体を含んでもよい。例えば、核酸剤が、ポリマーに結合される場合、この反応の生成物は、複合体であって、核酸剤のある程度が核酸剤の3’末端を通じてポリマーに結合されており、核酸剤のある程度は、核酸剤の5’末端を通じてポリマーに結合されている複合体を含み得る。例えば、二本鎖の領域を有する核酸剤が、ポリマーに結合される場合、この反応の生成物は、複合体であって、二本鎖領域を有する核酸剤のある程度がセンス末端を通じてポリマーに結合されており、および二本鎖領域を有する核酸剤のある程度がアンチセンス末端に結合されている複合体を含み得る。同様に、カチオン性部分が、複数のアミンのような複数の反応基を有する場合、この反応の生成物は、複合体であって、カチオン性部分のある程度がこのポリマーに対して、第一の反応基を通じて結合されており、カチオン性部分のある程度がこのポリマーに対して、第二の反応基を通じて結合されている複合体を含み得る。いくつかの実施形態において、核酸剤またはカチオン性部分をポリマーに結合させるプロセスは、保護基の使用を包含し得る。例えば、核酸剤またはカチオン性部分が、ポリマーと反応し得る複数の反応性部分を有する場合、この核酸剤またはカチオン性部分は、特定の反応性位置において保護され得、それによりポリマーは、特定された位置を介して結合される。一実施形態では、この核酸または核酸剤は、ポリマーに結合される場合、この核酸剤の3’または5’末端で保護され得る。一実施形態では、二本鎖領域を有する核酸剤は、ポリマーに結合されるとき、センスまたはアンチセンス末端上で保護され得る。いくつかの実施形態において、上で記載されたものなどの選択的にカップリングされた生成物を組み合わせて、ポリマー-薬剤の複合体の混合物を形成してもよい。例えば、核酸剤の3’末端を通じて核酸剤に結合されるPLGA、および核酸剤の5’末端を通じて核酸剤に結合されるPLGAが組み合わされて、2つの複合体の混合物を形成し得、かつこの混合物は、粒子の調製物中で用いられ得る。別の実施形態では、センス末端例えば、センス鎖の5’末端を通じてsiRNAに結合されるPLGA、およびアンチセンス末端を通じてsiRNAに結合されるPLGAが組み合わされて、2つの複合体の混合物を形成し得、かつこの混合物は、粒子の調製物中で用いられ得る。ポリマー-薬剤の複合体は、ポリマーに結合した単一の核酸剤またはカチオン性部分を含み得る。この核酸剤またはカチオン性部分は、ポリマーの末端に、またはポリマー鎖に沿ったポイントに結合され得る。いくつかの実施形態において、複合体は、ポリマーに結合した複数の核酸剤またはカチオン性部分を含み得る例えば、2、3、4、5、6、またはそれ以上の薬剤が、ポリマーに結合され得る。核酸剤またはカチオン性部分は、同じであってもまたは異なってもよい。いくつかの実施形態において、複数の核酸剤またはカチオン性部分は、多機能性リンカーに結合し得る例えば、ポリグルタミン酸リンカー。いくつかの実施形態において、複数の核酸剤またはカチオン性部分は、ポリマー鎖に沿ったポイントに結合され得る。リンカー核酸剤またはカチオン性部分は、ある部分、例えば、ポリマー、または疎水性部分、例えば、脂質に対して、またはお互いに対して、本明細書に記載のリンカーのようなリンカーを介して結合され得る。例えば:疎水性ポリマーは、カチオン性部分に結合され得;疎水性ポリマーは、核酸剤に結合され得;親水性-疎水性ポリマーは核酸剤に対して結合され得;親水性ポリマーは、核酸剤に結合され得;親水性ポリマーは、カチオン性部分に結合され得;または疎水性部分は、カチオン性部分に結合され得、もしくは核酸剤はカチオン性部分に結合され得る。核酸剤は、ある部分、例えば、本明細書に記載されるポリマーに対して、核酸剤の2’、3’、または5’位置、例えば、核酸剤の末端の2’、3’、または5’位置に対して例えば、本明細書に記載されるリンカーを通じて結合され得る。核酸剤が、二本鎖例えば、siRNAである実施形態では、核酸剤は、センス鎖またはアンチセンス鎖を通じて結合され得る。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、ポリマー例えば、PLGポリマー、ここでこの結合は、ヒドロキシル末端またはカルボキシ末端であるの末端を通じて結合される。ある特定の実施形態では、複数のこのリンカー部分がポリマーに結合されて、リンカーを通じたこのポリマーへの複数の核酸剤またはカチオン性部分の結合を可能にし、例えば、ここでは、このリンカーは、ポリマー骨格に沿うようなポリマー上の複数の位置で結合される。いくつかの実施形態では、リンカーは、複数の第一部分がリンカーを通じて第二の部分に連結されることを可能にするように構成され、例えば、複数の核酸剤が、分岐リンカーを介したPLGAポリマーのような単一のポリマーに連結され得、ここでこの分岐したリンカーは、これを通じて核酸が結合され得る複数の官能基を含む。いくつかの実施形態では、この核酸剤またはカチオン性部分は、生物学的条件下すなわち、切断可能な生理学的条件下でリンカーから遊離される。別の実施形態では、単一のリンカーがポリマーに、例えば、ポリマーの末端で結合される。リンカーは、例えば、アルキレン二価アルキル基を含んでもよい。いくつかの実施形態では、アルキレニルリンカーの1つ以上の炭素原子が、1つ以上のヘテロ原子または官能基例えば、チオエーテル、アミノ、エーテル、ケト、アミド、シリルエーテル、オキシム,カルバミン酸塩、炭酸塩、ジスルフィド、または複素環式または複素環式芳香族部分で置換され得る。例えば、アクリレートポリマー例えば、アクリレートPLGAは、チオール修飾された核酸剤例えば、チオール修飾されたsiRNAと反応して、スルフィド結合例えば、チオプロピオン酸塩連結を通じて結合された核酸剤-ポリマーの複合体を形成することができる。アクリレートは、塩化アクリルアシルとポリマーのヒドロキシル末端との反応によってポリマーの末端に結合され得る例えば、PLGポリマーのヒドロキシル末端、例えば、50:50のPLGポリマー。いくつかの実施形態では、リンカーは、第二の部分に対する第一の部分の結合を可能にする官能基に加えて、追加の官能基を有する。いくつかの実施形態では、追加の官能基は、生理学的条件下で切断され得る。そのようなリンカーは、例えば、第一の活性化部分、例えば、核酸剤またはカチオン性部分、例えば、本明細書に記載の核酸剤またはカチオン性部分と、第二の活性化部分、例えば、ポリマー、例えば、本明細書に記載されるポリマーとの反応によって、形成され得、ポリマーに対する核酸剤またはカチオン性部分を結合することによって形成される官能基を含むリンカーを生成し得る。任意で、追加の官能基は、追加の結合のための部位を提供するか、または生理学的条件下での切断を可能にし得る。例えば、この追加の官能基は、生理学的条件下で切断可能な、ジスルフィド、エステル、オキシム、炭酸塩、カルバミン酸塩、またはアミド結合を含み得る。いくつかの実施形態では、第一部分または第二部分に対してリンカーを結合する官能基の1つまたは両方が、エステル類、アミド類、またはジスルフィド類のような生理学的条件下で切断可能であり得る。いくつかの実施形態では、追加の官能基は、複素環式または複素環式芳香族部分である。核酸剤は、リンカー例えば、本明細書に記載されるリンカーのような2つまたは3つの官能基を含むリンカーを通じて、本明細書に記載されるポリマーのような部分に対して、核酸剤の2’、3’、または5’位置、例えば、核酸剤の末端2’、3’、または5’位置を通じて結合され得る。核酸剤が二本鎖である実施形態では例えば、siRNA、核酸剤は、センス鎖またはアンチセンス鎖を通じて結合され得る。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、ポリマーの末端を通じて結合される例えば、PLGポリマー、ここでは結合は、ヒドロキシル末端またはカルボキシ末端である。いくつかの実施形態では、このリンカーとしては、リンカー中の官能基の反応性を調節し得る部分例えば、生物学的な条件下で、例えば、官能基の反応性を増大または減少し得る、別の官能基または原子を包含する。例えば、図1A~図1Cに示されるとおり、核酸剤NA、例えば、第一の反応基を有するRNAは、ポリマーに対して核酸剤を結合するための第二の反応基を有しており、一方で生物切断可能な官能基を提供するポリマーと反応され得る。得られたリンカーは、第一のスペーサー、例えば、結合からすなわち、共有結合の形成によって生じる官能基に対して核酸剤を結合するアルキレンスペーサー、および第二のスペーサー、例えば、結合から生じる官能基にポリマーを結合するアルキレンスペーサー例えば、約C1~約C6を含む。図1A~図1Cに示されるとおり、核酸剤NAは、やはり生分解性である、部分Yを介して第一のスペーサーに結合され得る。Yは、例えば、-O-、-S-、または-NH-であってもよい。いくつかの実施形態では、第二のスペーサーは、脱離基X-、例えば、ハロ例えば、クロロまたはN-ヒドロキシスクシンイミジルNHSに結合され得る。第二のスペーサーは、このポリマーに対して、ポリマー末端、例えば、ポリマーの末端の-OH、-CO2H、-NH2、または-SH、例えば、PLGAの末端の-OHまたは-CO2Hと連結する追加の官能基Zを介して結合され得る。この追加の官能基Zは、例えば、-O-、-OC=O-、-OC=OO-、-OC=ONR-、-NR-、-NRC=O-、-NRC=OO-、-NRC=ONR’-、-NRS=O2-、-S-、-S=O-、-S=O2-、-C=OO-、または-C=ONR-であってもよく、反応性、例えば、結合または切断のための追加の部位を提供する。核酸剤は、核酸剤の2’、3’、または5’位置、例えば、核酸剤の末端2’、3’、または5’位置を通じて結合され得る。核酸剤が、二本鎖である実施形態では例えば、siRNA、この核酸剤は、センス鎖またはアンチセンス鎖を通じて連結され得る。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、ポリマーの末端に対してスペーサーを通じて結合される例えば、PLGポリマー、ここで、この結合は、ヒドロキシル末端またはカルボキシ末端である。ある実施形態では、例えば、図1Aに示されるように、チオール修飾された核酸剤例えば、チオール修飾されたsiRNAが、ピリジニル-SS-活性化ポリマー例えば、ピリジニル-SS-活性化PLGA、例えば、ピリジニル-SS-活性化5050PLGAと反応して、ジスルフィド結合を通じて結合された核酸剤-ポリマーの複合体を形成し得る。ある実施形態では、チオール修飾された核酸剤例えば、チオール修飾されたsiRNAは、マレイミド-活性化ポリマー例えば、マレイミド-活性化PLGA、例えば、マレイミド-活性化5050PLGAと反応されて、マレイミドスルフィド結合を通じて結合された核酸剤-ポリマーの複合体を形成し得る。ある実施形態では、チオール修飾された核酸剤例えば、チオール修飾されたsiRNAは、アクリレート-活性化ポリマー例えば、アクリレート-活性化PLGA、例えば、アクリレート-活性化5050PLGAと反応して、メルカプトプロピオン酸塩結合を通じて核酸剤-ポリマーの複合体を形成し得る。核酸剤は、核酸剤の2’、3’、または5’位置、例えば、核酸剤の末端の2’、3’、または5’を通じて結合され得る。核酸剤が、二本鎖である実施形態では例えば、siRNA、核酸剤は、センス鎖またはアンチセンス鎖を通じて結合され得る。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、ポリマーの末端に対してスペーサーを通じて結合される例えば、PLGポリマー、ここでこの結合は、ヒドロキシル末端またはカルボキシ末端である。ある実施形態では、例えば、図1Bに示されるように、アミン修飾された核酸剤例えば、アミン修飾されたsiRNAを、活性化カルボン酸またはエステル例えば、活性化カルボン酸PLGA、例えば、活性化カルボン酸5050PLGA、例えば、SPA活性化カルボン酸PLGA、例えば、SPA活性化カルボン酸5050PLGAを有するポリマーと反応させて、アミド結合を通じて結合された核酸剤-ポリマーの複合体を形成してもよい。ある実施形態では、アミン修飾された核酸剤例えば、アミン修飾されたsiRNAを、活性化ポリマー例えば、活性化PLGA、例えば、-活性化5050PLGAと反応させて、カルバミン酸塩結合を通じて結合された核酸剤-ポリマーの複合体を形成してもよい。ある実施形態では、アミン修飾された核酸剤例えば、アミン修飾されたsiRNAは、活性化ポリマー例えば、活性化PLGA、例えば、活性化5050PLGAと反応されて、カルバミド結合尿素を通じて結合された核酸剤-ポリマーの複合体を形成し得る。ある実施形態では、アミン修飾された核酸剤例えば、アミン修飾されたsiRNAは、活性化ポリマー例えば、活性化PLGA、例えば、活性化5050PLGAと反応されて、アミノアルキルスルホンアミド結合を通じて結合された核酸剤-ポリマーの複合体を形成し得る。この核酸剤は、核酸剤の2’、3’、または5’位置、例えば、核酸剤の末端の2’、3’、または5’を通じて結合され得る。核酸剤が二本鎖である実施形態では例えば、siRNA、核酸剤は、センス鎖またはアンチセンス鎖を通じて結合され得る。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、ポリマーの末端に対してスペーサーを通じて結合される例えば、PLGポリマー、ここでこの結合は、ヒドロキシル末端またはカルボキシ末端である。ある実施形態では、例えば、図1Cに示されるとおり、ヒドロキシルアミン修飾された核酸剤例えば、ヒドロキシルアミン修飾されたsiRNAが、アルデヒド-活性化ポリマー例えば、アルデヒド-活性化PLGA、例えば、アルデヒド-活性化5050PLGA、例えば、ホルムアルデヒド-活性化PLGA、例えば、ホルムアルデヒド-活性化5050PLGAと反応されて、アルドキシム結合を通じて結合された核酸剤-ポリマーの複合体を形成し得る。この核酸剤は、核酸剤の2’、3’、または5’位置、例えば、核酸剤の末端の2’、3’、または5’を通じて結合され得る。核酸剤が二本鎖である実施形態では例えば、siRNA、この核酸剤は、センス鎖またはアンチセンス鎖を通じて結合され得る。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、ポリマーの末端に対してスペーサーを通じて結合される例えば、PLGポリマー、ここで、この結合は、ヒドロキシル末端またはカルボキシ末端である。ある実施形態では、例えば、図1Cに示されるとおり、アルキレン修飾された核酸剤例えば、アルキレン修飾されたsiRNA、例えば、アセチレン修飾されたsiRNAは、アジド-活性化ポリマー例えば、アジド-活性化PLGA、例えば、アジド-活性化5050PLGAと反応されて、トリアゾール結合を通じて結合された核酸剤-ポリマーの複合体を形成し得る。この核酸剤は、、核酸剤の2’、3’、または5’位置、例えば、核酸剤の末端の2’、3’、または5’を通じて結合され得る。核酸剤が二本鎖である実施形態では例えば、siRNA、この核酸剤は、センス鎖またはアンチセンス鎖を通じて結合され得る。いくつかの実施形態では、この核酸剤は、ポリマーの末端に対してスペーサーを通じて結合される例えば、PLGポリマー、ここで、この結合は、ヒドロキシル末端またはカルボキシ末端である。いくつかの実施形態において、薬剤およびポリマーに結合する前のリンカーは、以下の官能基の1つ以上を有し得る:アミン、アミド、ヒドロキシル、カルボン酸、エステル、ハロゲン、チオール、マレイミド、炭酸、またはカルバミン酸。いくつかの実施形態において、官能基は、リンカーを通じた第一および第二の部分の結合の後、リンカー配列中に残る。いくつかの実施形態では、このリンカーは、官能基の反応性を調節する1つ以上の原子または基を含む例えば、この結果、この官能基は、加水分解によって、または生理学的条件下の還元によってなどで切断する。いくつかの実施形態では、このリンカーは、リンカー内にアミノ酸またはペプチドを含んでもよい。頻繁に、そのような実施形態では、ペプチドリンカーは、加水分解によって、還元条件下で、または特定の酵素によって例えば、生理学的な条件下で切断され得る。このリンカーが、二価の有機分子の残基である場合、リンカーの切断は、リンカー自体内にあってもよいし、または、リンカーを複合体の残りと、例えば、核酸剤またはポリマーのいずれかとカップリングする結合の1つにあってもよい。いくつかの実施形態では、リンカーは、以下の1つから選択されてもよく、またはリンカーは以下のうちの1つを含んでもよい:式中、mは1~10であり、nは1~10であり、pは1~10であり、かつRはアミノ酸側鎖である。リンカーは、クリックケミストリー例えば、アミド結合、エステル結合、ケタール、コハク酸塩、またはトリアゾールおよびWO2006/115547に記載されるものから生じる結合を含み得る。リンカーは、例えば、加水分解、減少反応、酸化的反応、pHシフト、光分解、またはそれらの組み合わせによって;または酵素反応によって切断され得る。このリンカーはまた、酸化的または還元条件下で切断可能であるか、または酸に感受性であり得る結合を含んでもよい。いくつかの実施形態では、このリンカーは、生理学的条件下では切断されず、例えば、このリンカーは、核酸剤が活性であるために切断される必要のない十分な長さのものであり、例えば、このリンカーの長さは、少なくとも約20Å例えば、少なくとも約24Åである。複合体を作製する方法複合体は、本明細書に記載されるものを含む、種々の方法を用いて調製され得る。いくつかの実施形態において、核酸剤またはカチオン性部分をポリマーに共有結合させるために、ポリマーまたは薬剤は、当該分野で公知の技術を用いて化学的に活性化され得る。次に、ポリマーと薬剤との間で共有結合を形成させるのに好適な条件下で、活性化されたポリマーを薬剤と混合するか、または活性化された薬剤をポリマーと混合する。いくつかの実施形態において、薬剤上のチオール、ヒドロキシル基、またはアミノ基などの求核試薬が、求電子試薬例えば、活性化されたカルボニル基を攻撃して、共有結合を形成する。核酸剤またはカチオン性部分は、種々の連結、例えば、アミド連結、エステル連結、スクシンイミド連結、炭酸連結、またはカルバミン酸連結を介してポリマーに結合され得る。いくつかの実施形態において、核酸剤またはカチオン性部分は、リンカーを介してポリマーに結合され得る。このような実施形態において、リンカーはまず、ポリマーに共有結合され得、次に、核酸剤またはカチオン性部分に結合され得る。他の実施形態において、リンカーはまず、核酸剤またはカチオン性部分に結合され得、次にポリマーに結合され得る。いくつかの実施形態では、この方法は、核酸剤-ポリマーの複合体、例えば、核酸剤-疎水性ポリマーの複合体または核酸剤-疎水性-親水性-ポリマーの複合体を形成することを包含し、ここでこの核酸剤およびポリマーの溶解度は、有意に異なる。例えば、この核酸剤は、高度に水溶性であり得、このポリマー例えば、疎水性ポリマーは、低い溶解度例えば、約1mg/mL未満を有し得る。このような反応は、単一の溶媒中で行われてもよく、または複数の溶媒例えば、混和性溶媒を含む溶媒系で行われてもよい。この溶媒系は、水例えば、水性緩衝液系および極性の溶媒、例えば、ジメチルホルムアミドDMF、ジメチルスルホキシドDMSO、ジメチルアセトアミンDMA、N-メチルピロリジンNMP、ヘキサメチルホスホラミドHMPA、フルロイソプロパノール、トリフルオロエタノール、プロピレン炭酸塩、アセトン、ベンジルアルコール、ジオキサン、テトラヒドロフランTHF、またはアセトニトリル例えば、ACNを含んでもよい。例示的な水性緩衝液としては、リン酸緩衝液PBS、4-2-ヒドロキシエチル-1-ピペラジンエタンスルホン酸HEPES、TE緩衝液、または2-N-モルホリノエタンスルホン酸緩衝液MESが挙げられる。溶媒系は、二相性であってもよい例えば、有機相および水相を有する。いくつかの実施形態では、極性溶媒例えば、orgの水例えば、水性緩衝液系に対する比は、約90/10~約40/60例えば、約80/10~約50/50、約80/10~約60/40、約80/20、約60/40または約50/50である。疎水性ポリマーに対して核酸剤を結合するために用いられ得る例示的な溶媒系としては、下の表1の溶媒系が挙げられる。上記の表は、10mg/mLポリマーの濃度についての表である。Orgとは、有機溶媒を指す。TEとは、緩衝液としてTEを有する水性緩衝液を指すすなわち、1mMTris、HClおよび1mMのEDTAでpH8.0にされるPBSとは、緩衝液としてPBSを有する水性緩衝液を指すすなわち、リン酸緩衝化生理食塩水。疎水性-親水性ポリマーに対して核酸剤を結合するために用いられ得る例示的な溶媒系としては、以下の表2のものが挙げられる。上記の表は、10mg/mLポリマーの濃度についての表である。Orgとは、有機溶媒を指す。TEとは、緩衝液としてTEを有する水性緩衝液を指すすなわち、1mMのTris、HClおよび1mMのEDTAでpH8.0にPBSとは、緩衝液としてPBSを有する水性緩衝液を指すすなわち、リン酸緩衝化生理食塩水。本明細書に記載される方法は、過剰の1つ以上の試薬を用いて行われ得る。例えば、核酸剤ポリマーの複合体を形成する場合、この反応は、過剰のポリマー、または核酸剤のいずれかを用いて行われ得る。本明細書に記載される方法は、少なくとも1つの核酸剤またはポリマーが不溶性基質例えば、ポリマーに結合されて行われ得る。本明細書に記載される方法は、少なくとも約80例えば、少なくとも約85、少なくとも約90、少なくとも約95、少なくとも約99の純度を有する核酸剤-ポリマーの複合体を生じ得る。いくつかの実施形態では、方法は、少なくとも約100mgの核酸剤-ポリマーの複合体例えば、少なくとも約1gを生じる。複合体の組成物上記の複合体の組成物例えば、核酸剤-ポリマーの複合体またはカチオン性部分-ポリマーの複合体は、生成物の混合物を含み得る。例えば、ポリマーに対する核酸剤またはカチオン性部分の複合体化は、収率100未満であってもよく、従って、複合体を含む組成物はまた、非複合体型のポリマー、非複合体型の核酸剤、および/または非複合体型のカチオン性部分を含み得る。複合体の組成物核酸剤-ポリマーの複合体またはカチオン性部分-ポリマーの複合体はまた、同じポリマー、および同じ核酸剤および/またはカチオン性部分を有し、かつ核酸剤および/またはカチオン性部分とポリマーとの間の連結の性質が異なる複合体も含み得る。例えば、いくつかの実施形態では、複合体が核酸剤-ポリマーの複合体である場合、この組成物は、核酸剤上に存在する異なるヒドロキシル基例えば、2’、3’、または5’ヒドロキシル基、例えば、3’または5’を介して核酸剤に結合されるポリマーを含んでもよい。複合体がカチオン性部分-ポリマーの複合体であり、かつカチオン性部分が複数の反応基を含む場合、この組成物は、カチオン性部分に存在する異なる反応性基を介してカチオン性部分に結合されるポリマーを含んでもよい例えば、異なる反応性アミン。この複合体は、種々の量で組成物に存在し得る。例えば、複数の利用可能な結合ポイントを有する核酸剤および/またはカチオン性部分がポリマーと反応されるとき、得られる組成物は、より多くの反応性基例えば、第一のヒドロキシル基またはアミノ基を介して複合体された生成物を多く含み得、かつ少ない反応性基例えば、第二のヒドロキシル基またはアミノ基を介して結合される生成物を少なく含み得る。さらに、複合体の組成物は、2つ以上のポリマー鎖に結合される核酸剤および/またはカチオン性部分を含んでもよい。例えば、核酸剤-ポリマーの複合体の場合、核酸剤は、3’ヒドロキシルを通じて第一のポリマー鎖、および、5’ヒドロキシルを通じて第二のポリマー鎖に結合され得る。例えば、カチオン性部分が複数の反応性基を含む、カチオン性部分-ポリマーの複合体の場合、カチオン性部分は、第一の反応性基例えば、第一のアミンを通じて第一のポリマー鎖に、および第二の反応性基例えば、第二のアミンを通じて第二のポリマー鎖に結合され得る。粒子および組成物を作製する方法本明細書に記載される粒子は、粒子、例えば、ナノ粒子を調製するための、当該分野で公知の任意の方法を用いて調製され得る。例示的な方法としては、噴霧乾燥、エマルジョン例えば、エマルジョン-溶媒蒸発または二重エマルジョン、沈殿例えば、ナノ沈殿および位相反転が挙げられる。一実施形態では、本明細書に記載の粒子は、沈殿例えば、ナノ沈殿によって調製され得る。この方法は、粒子の組成物すなわち、1つ以上のポリマー、任意の追加の構成要素単数または複数、カチオン性部分および核酸剤を、個々に、または組み合わせて、1つ以上の溶媒中に溶解して、1つ以上の溶液を形成することを包含する。例えば、1つ以上の構成要素を含有する第一の溶液は、1つ以上の構成要素を含有する第二の溶液中に適切な速度またはスピードで注いでもよい。この溶液は、例えば、シリンジポンプ、MicroMixer、または活発な制御された混合を可能にする任意のデバイスを用いて組合され得る。いくつかの場合には、ナノ粒子は、第一の溶液が第二の溶液と接触するにつれて形成され得、例えば、接触の際のポリマーの沈殿によってポリマーがナノ粒子を形成する。このような粒子形成の制御は、容易に最適化され得る。1組の実施形態では、この粒子は、1つ以上のポリマーおよび追加の構成要素を含有する1つ以上の溶液を提供すること、ならびにこの溶液を特定の溶媒と接触させて粒子を生成することによって形成される。非限定的な実施例では、疎水性ポリマー例えば、PLGAを、核酸剤またはカチオン性部分に複合体して、複合体を形成する。このポリマーの複合体、親水性部分および疎水性部分を含んでいるポリマー例えば、PEG-PLGA、核酸剤および/またはカチオン性部分、および必要に応じて第三のポリマー例えば、生分解性ポリマー、例えば、PLGAは、部分的に水混和性の有機溶媒例えば、アセトンに溶解される。この溶液は、界面活性剤を含有する水溶液に添加され、所望の粒子が形成される。これらの2つの溶液は、混合/沈殿の前に個々に濾過滅菌され得る。形成されたナノ粒子は、溶媒の除去のため、またはナノ粒子の精製のためにさらなる処理技術に曝されてもよい例えば、透析。上述のプロセスの目的のために、水混和性の溶媒としては、アセトン、エタノール、メタノール、およびイソプロピルアルコールが挙げられ;および部分的に水混和性の有機溶媒としては、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、イソプロピルアルコール、イソ酢酸プロピルまたはジメチルホルムアミドが挙げられる。本明細書に記載される粒子を生成するために用いられ得る別の方法は、Johnson,B.K.ら,AlChEJournal200349:2264-2282および米国特許出願公開第2004/0091546号各々がその全体として参照によって本明細書に援用されるで記載されるようにナノ粒子急速沈殿flashnanoprecipitationと呼ばれるプロセスである。このプロセスは、制御されたサイズの、ポリマー安定化および保護されたナノ粒子の疎水性有機物を高い負荷でかつ収率で生成し得る。このナノ粒子急速沈殿技術は、両親媒性ジブロックコポリマー停止核生成および疎水性有機物の成長に基づく。適切な溶媒に溶解される両親媒性ジブロックコポリマーは、ブロックの溶媒の質が低下されるとき、ミセルを形成し得る。このような溶媒の質の変化を達成するために、接線方向流混合セルtangentialflowmixingcellボルテックスミキサーを用いる。ボルテックスミキサーは、封じ込め容積チャンバconfinedvolumechamberから構成され、ここでは、水-混和性溶媒中に溶解されるジブロックコポリマーおよび核酸剤を含有する1つのジェットストリームを、水を含有する別のジェットストリーム、核酸剤およびコポリマーの疎水性ブロックについては抗溶媒と高速度で混合する。このプロセスに関与する高速の混合、および高エネルギーの散逸は、核生成および粒子の成長よりも短いタイムスケールを提供し、これが他の技術では提供されない核酸剤負荷含量およびサイズ分布を伴うナノ粒子の形成をもたらすナノ粒子急速沈殿を介するナノ粒子の形成の際、混合は、凝集の発生の前に、全ての構成要素の高い過飽和が達成されることを可能にするのに十分速く生じる。従って、核酸剤単数または複数およびポリマーは同時に沈殿し、かつ遅い溶媒変化例えば、透析に基づく広範に用いられる技術で見いだされる低い活性剤の組み込みおよび凝集の限界を克服する。このナノ粒子急速沈殿のプロセスは、構成要素の化学的特異性に対して非感受性であり、これによって普遍的なナノ粒子形成技術となる。本明細書に記載される粒子はまた、ミキサー技術、例えば、スタティックミキサーまたはマイクロミキサー例えば、分離-再結合split-recombineマイクロ-ミキサー、スリット-インターデジタルslit-interdigitalマイクロ-ミキサー、スターラミネーターインターデジタルstarlaminatorinterdigitalマイクロ-ミキサー、スーパーフォーカスインターデジタルsuperfocusinterdigitalマイクロ-ミキサー、液-液マイクロ-ミキサー、またはインピンジングジェットimpingingjetマイクロ-ミキサーを用いて調製され得る。分離-再結合マイクロミキサーは、ストリームを分けること、お互いの上に折り畳み/ガイドすること、およびそれらをお互いの混合ステップについて組み合すことを包含する混合原理を用い、これはこのような8~12のステップからなる。最終的に混合することは、多段階の流路の残留時間を除いて、ミリ秒内の拡散を介して生じる。さらに高速での流速では、乱流がこの混合効果に加わり、全体の混合の質がさらに改善される。スリットインターデジタルマイクロミキサーは、液体の混合を高速にさせる幾何学的焦点を有する多重の積層によって創出される規則的な流動パターンを組み合わせる。この二重ステップの混合に起因して、スリットミキサーは、広範な種々のプロセスに適切である。本明細書に記載される粒子はまた、MicrofluidicsReactionTechnologyMRTを用いて調製され得る。MRTの中心部は、少なくとも50lit/分まで拡張可能な、連続の、インピンジングジェットマイクロリアクターである。このリアクターでは、高速液体反応物を、マイクロリットルスケールの体積内で相互作用するように強制する。この反応物は、高い剪断応力および乱流に曝されるのでナノメートルのレベルで混合する。MRTは、供給速度の正確な制御および反応物の混合位置を提供する。これは、核の生成および成長の過程の制御を確実にし、均一な結晶成長および安定化速度を生じる。本明細書に記載される粒子はまた、エマルジョンによって調製されてもよい。例示的な乳化方法は、参照によって本明細書に援用される、米国特許第5,407,609号に開示される。この方法は、溶解された壁形成剤を含有する溶媒中に、薬剤、液体または固体を溶解するかそうでなければ分散すること、処理培地中に核酸剤/ポリマー溶媒混合物を分散して、エマルジョンを形成すること、および全てのエマルジョンを、より大きい体積の処理媒体または他の適切な抽出媒体に直ちに移して、エマルジョン中の微小液滴から溶媒を直ちに抽出し、マイクロカプセルまたはマイクロスフェアのような微小カプセル化生成物を形成することを包含する。ポリマー送達ビヒクル処方物を調製するために用いられる最も一般的な方法は、溶媒乳化蒸発方法である。この方法は、ポリマーおよび薬物を、水と完全に非混和性である有機溶媒例えば、ジクロロメタン中に溶解することを包含する。この有機混合物は、安定化剤、最もよくあるのはポリビニルアルコールPVAを含有する水に添加し、次いで典型的には超音波処理する。この粒子の調製後、それらを、濾過、ふるい、押し出しまたは超遠心分離によって分画して、特定のサイズ範囲内の粒子を回収してもよい。1つのサイジング法は、選択した均一な細孔サイズを有する一連のポリカーボネート膜を通じて粒子の水性懸濁物を押し出すことを包含する;膜の細孔サイズは、その膜を通じた押し出しによって産生される粒子の最大サイズにほぼ対応する。例えば、参照によって本明細書に援用される、米国特許第4,737,323号を参照のこと。別の方法は、規定のサイズの画分を単離するための、規定の速度の連続的な超遠心分離例えば、8,000、10,000、12,000、15,000、20,000、22,000、および25,000rpmである。別の方法は、接線流濾過であり、ここでは、粒子を含有する溶液を、膜の表面に接線方向に沿ってポンピングする。適用される圧力は、膜を通じて液体の一部を濾液側へ強制するように働く。膜の細孔を通過するには大きすぎる粒子は、上流側で保持される。保持される成分は、正常な流量濾過でのように膜の表面では蓄積されず、代わりに接線流によって掃引される。従って、接線流濾過を用いて、水溶液に存在する過剰の界面活性剤を除去しても、または透析濾過によって溶液を濃縮してもよい。本明細書に記載される粒子を作製する例示的な方法は、極性の溶媒例えば、DMF,DMSO、アセトン、ベンジルアルコール、ジオキサン、テトラヒドロフラン、またはアセトニトリルを、例えば、沈殿によって、粒子の形成を可能にする条件下で、a核酸剤-疎水性ポリマーの複合体であって、各々の核酸剤-疎水性ポリマーの複合体が、核酸剤、例えば、siRNA部分疎水性ポリマーに対して共有結合されるを含み、ここで、この核酸剤-疎水性ポリマーの複合体が、カチオン性部分と会合される、複合体、b複数の親水性-疎水性ポリマー、例えば、PEG-PLGA、およびc複数の疎水性ポリマー核酸剤に対して共有結合されないと合わせて、それによって粒子を形成することを包含する。合わせることは、極性の溶媒中で、例えば、アセトン、または混合溶媒系例えば、組み合わせの水性/有機の溶媒系、例えば、アセトニトリルおよび水性の緩衝液系中で行ってもよい。この方法はまた以下を含み得る:i複数の核酸剤であって、各々の核酸剤が、核酸剤、例えば、siRNAまたは他の核酸剤疎水性ポリマーにカップリングされ、カチオン性部分に会合されるを、アセトニトリル/TE緩衝液例えば、80/20重量中に含んでいる、核酸剤と;iiアセトニトリル/TE緩衝液例えば、80/20重量中の複数の親水性-疎水性ポリマー、例えば、PEG-PLGA、および複数の疎水性ポリマー核酸剤とカップリングしていない。本明細書に記載される粒子を作製する別の例示的な方法は以下を包含する:a例えば、水性溶媒中で、i第一の複数の疎水性-親水性ポリマー、例えば、PEG-PLGAと、ii第一の複数の疎水性ポリマー、例えば、PLGA各々が、第一の反応性部分、例えば、スルフヒドリル部分を有するとを接触させて;水溶性の中間粒子例えば、約100nm未満の直径を有するを形成することと;b例えば、水性溶媒中で、中間粒子と、複数の水溶性の核酸剤、例えば、siRNA部分各々が、第二の反応性部分、例えば、SH部分を有するとを、中間複合体、例えば、薬物部分にカップリングされた、親水性-疎水性ポリマーおよび疎水性ポリマーを含む中間構造の形成を可能にする条件下で接触させることと;c例えば、非水性溶媒、例えば、DMF,DMSO、アセトン、ベンジルアルコール、ジオキサン、テトラヒドロフラン、またはアセトニトリル中で、中間複合体と第二の複数の親水性-疎水性ポリマー、例えば、PEG-PLGA、および第二の複数の疎水性ポリマー、例えば、PLGAとを、粒子の形成を可能にする条件下で接触させて、これによって粒子ここで形成された粒子は、中間粒子よりも大きいを形成すること。本明細書に記載の粒子を作製する別の例示的な方法は以下を包含する:a例えば、アセトニトリル/TE緩衝液例えば、80/20重量中で、i第一の複数の親水性-疎水性ポリマー、例えば、PEG-PLGAと、ii第一の複数の疎水性ポリマー、例えば、PLGA各々が、第一の反応性部分、例えば、スルフヒドリル部分を有するとを接触させて、中間粒子例えば、約100nm未満の直径を有するを形成することとここで、いくつかの実施形態では、この中間粒子は、例えば、これが水溶液中で可溶性であるのに十分な親水性部分を有することに起因して、水溶液中で機能的に可溶性である;bこの中間粒子と複数の核酸剤、例えば、siRNAまたは他の核酸剤各々が、第二の反応性部分、例えば、SH部分を有するとを、中間複合体、例えば、核酸剤にカップリングされた親水性-疎水性ポリマーおよび疎水性ポリマーを有する中間構造の形成を可能にする条件下で接触させることと、cこの中間複合体と第二の複数の親水性-疎水性ポリマー、例えば、PEG-PLGA、および第二の複数の疎水性ポリマー、例えば、PLGAとを、粒子の形成を可能にする条件下で接触させて、それによって粒子例えば、ここでこの粒子の直径は、150nm未満であるを形成すること。複数のカチオン性部分は、b由来の疎水性ポリマーに対して共有結合され得る。本明細書に記載の粒子を作製する別の例示的な方法は、カチオン性-PLGAおよび核酸-複合体された5050-O-アセチル-PLGAを溶液中に溶解することを包含する。得られた溶液を水に添加して、ナノ粒子懸濁物を形成する。脂質混合物例えば、DOTAP、コレステロールおよびDOPE-PEG2kを含むは、この脂質混合物が粒子を被覆することを可能にする条件下で、粒子懸濁物に添加される。本明細書に記載される粒子を作製する別の例示的な方法は、核酸-複合体された5050-O-アセチル-PLGAMw約23.7kDaを溶液中に溶解することを包含する。得られた溶液を、水に添加して、ナノ粒子懸濁物を形成する。カチオン性ポリマー例えば、ポリヒスチジン、ポリリジン、ポリアルギニン、ポリエチレンイミン、およびキトサンの60重量をアセトン中に溶解して、1のポリマー溶液を形成し、ポリマー混合物が粒子を被覆することを可能にする条件下で粒子懸濁物に添加する。本明細書に記載される粒子を作製する別の例示的方法は、複数の核酸剤-ポリマーの複合体を含む粒子を形成し、この粒子と複数のカチオン性多価ポリマーまたは脂質とを接触することと、bの生成物と複数のポリマーまたは脂質とを接触することとを包含し、ここでこの複数のポリマーまたは脂質は実質的に、bの生成物を囲んで粒子を形成する。いくつかの実施形態では、この粒子ははさらに処理、例えば、精製される。精製の例示的な方法は、ゲル電気泳動、キャピラリー電気泳動、ゲル浸透クロマトグラフィー、透析、接線流濾過例えば、300kDaフィルターを用いる、およびサイズ排除クロマトグラフィーを包含する。粒子の精製後、それらは、溶液中にある間に、濾過滅菌されてもよい例えば、0.22ミクロンのフィルターを用いる。特定の実施形態では、この粒子は、選択されたサイズ範囲内で、サイズが実質的に均一であるように調製される。この粒子は好ましくは、その最大直径で30nm~300nm例えば、約30nm~約250nmの範囲である。この粒子は、動的光散乱および/または電子顕微鏡例えば、透過電子顕微鏡または走査電子顕微鏡のような当該分野で公知の技術によって分析されてこの粒子のサイズが決定され得る。この粒子はまた、核酸剤負荷および/または不純物例えば、残留溶媒の有無について試験され得る。凍結乾燥本明細書に記載される粒子は、凍結乾燥freeze-dryingとして一般的に公知の凍結乾燥lyophilizationを介して、乾燥保存のために調製され得る。凍結乾燥は、溶液から水を抽出して顆粒状の固形物または粉末を形成する過程である。この過程は、溶液を凍結することおよびその後、真空下での昇華によってすべての水または湿気を抽出することによって行われる。凍結乾燥の利点としては、物質の品質の維持、および治療用化合物の分解の最小化が挙げられる。凍結乾燥は、再構成され注射によって患者に投与される医薬製剤、例えば非経口薬剤生成物を開発するの特に有用であり得る。あるいは、凍結乾燥は、経口薬剤製剤、特に迅速に融解するかまたは急速に溶解する処方物を開発するのに有用である。凍結乾燥は、凍結保護剤、例えば、本明細書に記載される凍結保護剤の存在下で行ってもよい。いくつかの実施形態では、凍結保護剤は、炭水化物例えば、スクロース、シクロデキストリン、またはシクロデキストリンの誘導体例えば、2-ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリンのような本明細書に記載される炭水化物、塩、PEG、PVP、またはクラウンエーテルである。いくつかの実施形態では、凍結乾燥の間のPEG化PEGylated粒子の凝集は、環状オリゴ糖を含む凍結保護剤の使用によって減少または最小化され得る。適切な凍結保護剤を用いることで、保管期間が延長した凍結乾燥調製物が得られる。本開示は、環状オリゴ糖を含む液体の処方物および凍結乾燥調製物を特徴とする。いくつかの実施形態では、この液体処方物または凍結乾燥調製物は、少なくとも2つの炭水化物、例えば、環状オリゴ糖例えば、シクロデキストリンまたはその誘導体および非環状のオリゴ糖例えば、10、8、6または4個の単糖の長さ未満の非環状オリゴ糖、例えば、単糖類または二糖類を含んでもよい。いくつかの実施形態では、この液体処方物はまた、再構成の試薬も含む。適切な環状オリゴ糖の例としては、限定するものではないが、α-シクロデキストリン類、β-シクロデキストリン類、例えば、2-ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン類、β-シクロデキストリンスルホブチルエーテルナトリウム類、γ-シクロデキストリン類、その任意の誘導体、およびそれらの任意の組み合わせが挙げられる。特定の実施形態では、環状炭水化物、例えば、環状オリゴ糖は、ポリマーのようなより大きい分子構造に含まれ得る。適切なポリマーは、この粒子のポリマー組成物に関して本明細書に開示される。このような実施形態では、環状オリゴ糖は、ポリマーの骨格内に組み込まれてもよい。例えば、米国特許第7,270,808号および米国特許第7,091,192号を参照のこと、これは、本発明に従って用いられ得るポリマー骨格にシクロデキストリン部分を含む例示的なポリマーを開示する。米国特許第7,270,808号および米国特許第7,091,192号の全体的な教示は、参照によって本明細書に援用される。いくつかの実施形態では、この環状オリゴ糖は、少なくとも1つの酸化された存在を含み得る。環状オリゴ糖を含んでいる凍結保護剤は、それらの凍結乾燥および/または保管の間PEGのような親水性ポリマーを含む粒子の分子間凝集の速度を阻害し得、従って延長した保管期間が得られる。理論によって束縛されることは望まないが、粒子凝集を妨げる環状オリゴ糖の機構は、環状オリゴ糖が、凍結乾燥の間の粒子中に存在するPEGのような親水性ポリマーの結晶化を減少する、または防止することに起因し得る。これは、環状オリゴ糖と親水性ポリマー例えば、PEGとの間の封入複合体の形成を通じて起こり得る。このような複合体は、シクロデキストリンと例えば、ポリエチレングリコールの鎖との間で形成され得る。シクロデキストリンの内腔は親油性であるが、シクロデキストリンの外側は、親水性である。これらの特性は、本明細書に記載の粒子の他の構成要素と封入複合体の形成を可能にし得る。凍結乾燥の間の処方物の安定化の目的のために、ポリエチレングリコール鎖は、シクロデキストリンの腔内に適合し得る。環状オリゴ糖が粒子分解を減少、最小化、防止することを可能にし得る追加の機構は、凍結乾燥の間の環状オリゴ糖と親水性ポリマーPEGとの間の水素結合の形成に関連する。例えば、シクロデキストリンとポリエチレングリコール鎖との間の水素結合は、結晶のような秩序的なポリエチレングリコール構造を妨げ得る。環状オリゴ糖は、本明細書に記載される処方物中に種々の量で存在し得る。ある特定の実施形態では、環状オリゴ糖の液体処方物に対する比は、重量として約0.75:1~約3:1の範囲である。好ましい実施形態では、この環状オリゴ糖の総ポリマーに対する比は、重量として約0.75:1~約3:1の範囲である。好ましい態様では、この処方物は、2つ以上の炭水化物類、例えば、環状オリゴ糖および非環状炭水化物、例えば、非環状オリゴ糖、例えば、非環状オリゴ糖10、8、6、4以下の単糖類単位を有するを含む。本明細書に記載のとおり凍結乾燥されるべき液体処方物中に、非環状炭水化物、例えば、非環状オリゴ糖を含むことで、得られた凍結乾燥された調製物による水の取り込みが促進され、かつ凍結乾燥された調製物の分解が促進され得る。好ましい態様では、凍結乾燥された処方物または液体処方物は、環状オリゴ糖、例えば、α-シクロデキストリン、β-シクロデキストリン、γ-シクロデキストリン、それらの任意の誘導体、およびそれらの任意の組み合わせ、および非環状オリゴ糖、例えば、本明細書に記載の非環状オリゴ糖を含む。いくつかの好ましい実施形態では、凍結保護剤は、環状オリゴ糖、例えば、α-シクロデキストリン、β-シクロデキストリン、γ-シクロデキストリン、それらの任意の誘導体、ならびにそれらの任意の組み合わせを含む、この非環状オリゴ糖は、二糖類、例えば、スクロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、およびそれらの誘導体、および単糖類、例えば、グルコースを含む。1つの好ましい実施形態では、この凍結保護剤は、β-シクロデキストリンまたはそれらの誘導体、例えば、2-ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリンまたはβ-シクロデキストリンスルホブチルエーテルを含み;およびこの非環状オリゴ糖は、二糖類、例えば、スクロースである。β-シクロデキストリンまたはそれらの誘導体および非環状オリゴ糖は、任意の適切な関連の量で存在し得る。好ましくは、環状オリゴ糖の非環状オリゴ糖に対する比w/wは、約0.5:1.5~約1.5:0.5、およびさらに好ましくは0.7:1.3~1.3:0.7である。いくつかの例では、環状オリゴ糖の非環状オリゴ糖に対する比w/wは、0.7:1.3、1:0.7、1:1、1.3:1または1.3:0.7である。液体または凍結乾燥された処方物が本明細書に記載される粒子を含む場合、環状オリゴ糖に加えて非環状オリゴ糖のポリマーに対する比w/wは、約1:1~約10:1、および好ましくは、約1.1~約3:1である。ある特定の実施形態では、凍結乾燥された調製物は、再構成試薬で再構成され得る。いくつかの実施形態では、適切な再構成試薬は、任意の生理学的に許容される液体であってもよい。適切な再構成試薬としては、限定するものではないが、水、5デキストロース注射液DextroseInjection、乳酸リンゲルLactatedRinger’sおよびデキストロース注射液DextroseInjection、または無水アルコールDehydratedAlcohol,米国薬局方および非イオン性界面活性剤、例えば、ポリオキシエチル化キャスターオイル界面活性剤GAFCorporation,MountOlive,N.J.,から、CremophorEL.の商標で入手可能の体積で等部の混合物が挙げられる。再構成された溶液中の界面活性剤の量を最小化するために、十分な量のビヒクルのみを提供して、凍結乾燥された調製物の溶液を形成し得る。一旦、凍結乾燥された調製物の溶解が得られれば、得られた溶液をさらに、適切な非経口的希釈物で注射の前に希釈してもよい。このような希釈液は、当業者に周知である。これらの希釈液は一般には、臨床施設で利用可能である。代表的な希釈物の例としては、限定するものではないが、乳酸リンゲル注射液LactatedRinger’sInjection、5デキストロース注射液DextroseInjection、滅菌注射用水SterileWaterforInjectionなどが挙げられる。しかし、そのpH範囲が狭いpH6.0~7.5ために、乳酸リンゲル注射液が最も典型的である。100mLあたり、乳酸リンゲル注射液は、塩化ナトリウム米国薬局方0.6g、乳酸ナトリウム0.31g、塩化カリウム米国薬局方0.03gおよび塩化カルシウム2H2O米国薬局方0.02gを含む。浸透圧は、275mOsmol/Lであり、これは等張性に極めて近い。従って、液体処方物は、再懸濁されても、または再水和され凍結乾燥された調製物であってもよい適切な再構成試薬中で。適切な再構成の試薬としては、生理学的に許容される担体、例えば、本明細書に記載のような生理学的に許容される液体が挙げられる。好ましくは、凍結乾燥された調製物の再懸濁または再水和は、凍結乾燥の前に、実質的に同じ特性例えば、平均粒子径Zave、サイズ分布DV90、Dv50、多分散性、薬物濃度および本発明の液体処方物中のもとの粒子の形態を有する粒子の溶液または懸濁物を形成し、さらに凍結乾燥の前にもとの液体の治療剤対ポリマー比を維持する。ある特定の実施形態では、再懸濁または再水和された凍結乾燥調製物中の、約50~約100、好ましくは約80~約100の粒子が、もとの液体処方物中で、粒子のサイズ分布、および/または薬物対ポリマー比を維持する。好ましくは、凍結乾燥された調製物を再懸濁することによって生成される処方物中の粒子のZave、Dv90、および多分散性は、凍結乾燥前のもとの溶液または懸濁物における粒子のZave、Dv90、および多分散性とは、約5を超えて、約10を超えて、約15を超えて、約20を超えて、約15を超えて、約30を超えて、約35を超えて、約40を超えて、約45を超えて、または約50を超えて異なることはない。好ましくは、この態様の液体処方物は、粒子を含み、かつ、1つ以上の炭水化物類例えば、環状オリゴ糖および/または非環状オリゴ糖を含む凍結保護剤のいずれかを用いて、凍結乾燥され、再懸濁できるのよりも、より高いポリマー濃度粒子を形成するポリマー単数または複数の濃度で特徴づけられる。例えば、このポリマー濃度は、少なくとも約20mg/mL、少なくとも約25mg/mL、少なくとも約30mg/mL、少なくとも約31mg/mL、少なくとも約32mg/mL、少なくとも約33mg/mL、少なくとも約34mg/mL、少なくとも約35mg/mL、少なくとも約36mg/mL、少なくとも約37mg/mL、少なくとも約38mg/mL、少なくとも約39mg/mL、少なくとも約40mg/mL、少なくとも約45mg/mL、少なくとも約50mg/mL、少なくとも約55mg/mL、少なくとも約60mg/mL、少なくとも約65mg/mL、少なくとも約70mg/mL、少なくとも約75mg/mL、少なくとも約80mg/mL、少なくとも約85mg/mL、少なくとも約90mg/mL、少なくとも約95mg/mLであってもよく、少なくとも約100mg/mLである。例えば、この液体処方物は、再構成され、凍結乾燥された調製物であり得る。粒子および組成物の保管の方法別の態様では、本発明は、複合体、粒子または組成物、例えば、薬学的組成物を保管する方法を特徴とする。ある実施形態では、本明細書に記載される複合体、粒子、または組成物を保管する方法は、例えば、以下のステップを包含する:a容器中に複合体、粒子または組成物を配置するステップ;bそのような複合体、粒子または組成物を保管するステップ;および必要に応じて、cこのような容器を、第二の位置に移動するステップ、またはこのような複合体、粒子または組成物の全てもしくはアリコートを、このような容器から取り出すステップ。この複合体、粒子または組成物は、液体でも、乾燥でも、凍結乾燥されても、または再構成された例えば、溶液または懸濁液として液体中処方物または形態であってもよい。この複合体、粒子または組成物は、単一用量であっても、または複数回用量で保管されてもよく、例えば、これは、少なくとも2、5、10、または100回の投薬に十分な量で保管されてもよい。ある実施形態では、この方法は、この複合体、粒子または組成物を、透析、希釈、濃縮、乾燥、凍結乾燥、またはパッケージングすること例えば、容器中に物質を配置することを包含する。ある実施形態では、この方法は、この複合体、粒子または組成物と別の構成要素、例えば、賦形剤,凍結保護剤、または不活性物質、例えば、不活性ガスと組み合わせることを包含する。ある実施形態では、この方法は、複合体、粒子または組成物の調製物を、アリコートに分けること、および必要に応じて複数のアリコートを複数の容器にいれることを包含する。ある実施形態では、複合体、粒子または組成物、例えば、薬学的組成物は、本明細書に開示される期間保管される。ある実施形態では、保管の期間後、保管された複合体、粒子または組成物は、例えば、凝集、色、または他のパラメーターについて評価される。ある実施形態では、本明細書に記載される複合体、粒子または組成物は、例えば、容器中に、少なくとも約1時間例えば、少なくとも約2時間、4時間、8時間、12時間、24時間、2日、1週間、1ヶ月、2ヶ月、3ヶ月、4ヶ月、5ヶ月、6ヶ月、1年、2年、または3年保管され得る。従って、本明細書に記載されるのは、本明細書に記載される複合体、粒子、または組成物を含む容器である。ある実施形態では、複合体、粒子、または組成物は、大気条件、または本明細書に記載の他の条件を含めて種々の条件下で保管され得る。ある実施形態では、複合体、粒子、または組成物は、低温、例えば、約5°C以下の温度例えば、約4°C以下または約0°C以下で保管される。複合体、粒子、または組成物はまた、約0°C未満の温度例えば、-80°C~-20°Cで凍結および保管され得る。複合体、粒子、または組成物はまた、不活性雰囲気、例えば、窒素またはアルゴンなどの不活性ガスを含む雰囲気の下で保管され得る。そのような雰囲気は、大気酸素および/または他の反応性ガスを実質的に含まないものであり得、ならびに/あるいは湿気を実質的に含まないものであり得る。いくつかの実施形態では、複合体、粒子、または組成物は、再構成された処方物として保管され得る例えば、液体中で、溶液または懸濁液中で。ある実施形態では、本明細書に記載の複合体、粒子、または組成物は、琥珀色amberバイアルなどの遮光性容器を含む種々の容器に保管され得る。容器は、バイアル、例えばゴムまたはシリコーン封鎖例えば、ポリブタジエンまたはポリイソプレンでできた封鎖を有する密封バイアルであってもよい。容器は、大気酸素および/または他の反応性ガスを実質的に含まないものであり得、ならびに/あるいは湿気を実質的に含まないものであり得る。別の態様では、本発明は、容器、例えば、本明細書に記載の容器中に、例えば、本明細書に記載の量、形態または処方物中で入れられた、複合体、粒子または組成物を特徴とする。粒子および組成物を評価する方法別の態様では、本発明は、例えば、本明細書に記載される特性について、粒子または粒子の調製を評価する方法を特徴とする。ある実施形態では、この特性は、物理的特性、例えば、平均直径である。別の実施形態では、この特性は、機能的な特性、例えば、本明細書に記載されるアッセイで測定されるような、例えば、標的遺伝子のノックダウンを媒介する能力である。この方法は:1つ以上のこのような粒子を含む試料を、例えば、組成物、例えば、薬学的組成物として提供することと;例えば、物理的試験によって、本明細書に記載される特性を評価して、その特性について測定した値を得ることと、を包含し、これによって粒子または粒子の調製物を評価する。ある実施形態では、この方法は、以下のうちの1つまたは両方を含む:a測定した値と参照値または標準値、例えば、ある範囲の値例えば、本明細書に開示されるか、または規制当局、製造業者もしくは有識者が設定する値とを比較することと、あるいはbこのような決定または比較に対応して、このような粒子を分類することと。ある実施形態では、このような決定または比較に対応して、決定またはステップを行い、例えば、粒子を作製するためのプロセスでの産生パラメーターが変更されるか、試料が分類され、選択され、受け入れられるかもしくは廃棄され、発売されるかもしくは差し控えられ、医薬品へ加工され、運搬され、異なる位置へ移動され、処方され、例えば、別の物質例えば、賦形剤で処方され、ラベルが付され、パッケージングされ、上市されるか、または販売されるかもしくは販売に付される。ある実施形態では、特性に関する決定された値を、参照値と比較して、この比較に対応して、この粒子または粒子の調製物を、例えば、ヒト対象での使用に適切であるか、ヒト対象での使用に適切でないか、販売に適切であるか、発売の仕様に合致するか、または発売の仕様に合致しないかに分類する。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、測定して、不純物または残留溶媒が存在するか否かを決定するか例えば、ガスクロマトグラフィーGCを介する、1つ以上の成分の相対的な量を決定するか例えば、高性能液体クロマトグラフィーHPLCを介する、粒子の大きさを測定するか例えば、動的光散乱および/または走査型電子顕微鏡を介する、または表面成分の有無を決定する。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、組成物中の粒子の平均直径について評価する。ある実施形態では、物理的測定を含む実験を行って、平均値を決定する。次いで、組成物の平均直径を、参照値と比較してもよい。ある実施形態では、粒子の平均直径は、約50nm~約500nm例えば、約50nm~約200nmである。複数の粒子の組成物粒子は、約50nm~約500nm例えば、約75nm~約220nmから、約50nm~約220nm例えば、約75nm~約200nmという中央粒子粒子サイズDv50粒子の体積の50がそれ未満で存在する粒子サイズを有し得る。複数の粒子の組成物は、約50nm~約500nm例えば、約75nm~約220nmというDv90粒子の体積の90がそれ未満で存在する粒子サイズを有し得る。いくつかの実施形態では、複数の粒子の組成物は、約150nm未満というDv90を有する。複数の粒子の組成物は、0.5未満、0.4未満、0.3未満、0.2未満、または0.1未満という粒子PDIを有し得る。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、動的光散乱に供して、例えば、サイズまたは直径を決定する。粒子は、レーザーを用いて照明され得、散乱した光の強度は、より小さな粒子が溶媒分子によってさらにキックされ、蹴られkickedることにより迅速に動くので、粒子の大きさに応じた速度で変動する。これらの強度の揺らぎの分析によって、ブラウン運動の速度が得られ、それゆえ、ストークス-アインシュタイン関係を用いて粒子の大きさが得られる。動的光散乱において測定された直径は、水力学的直径と呼ばれ、粒子が流体内でどのように拡散するかを指す。この技術によって得られた直径は、測定されている粒子と同じ移動拡散係数を有する球の直径である。ある実施形態において、粒子または粒子の調製物は、クリオ走査電子顕微鏡Cryo-SEMを用いて評価されて、例えば、構造または組成物が決定される。SEMは、ラスター走査パターンで電子の高エネルギービームを用いて走査することによって試料表面が撮像される1種の電子顕微鏡である。電子は、試料を構成する原子と相互作用して、試料表面の形状、組成、および導電性などの他の特性についての情報を含む信号を生じる。クリオ-SEMについて、SEMは、クリオ顕微鏡についての冷却ステージが装備されている。凍結固定を用いてもよく、低温走査電子顕微鏡を低温保管固定された検体に関して実施してもよい。凍結固定された検体は、特殊な装置において真空下で凍結破砕して、内部構造を明らかにして、スパッターコーティングしてもよく、なおも凍結したままで、SEM凍結ステージへと移動してもよい。ある実施形態において、粒子または粒子の調製物は、透過型電子顕微鏡TEMを用いて評価して、例えば、構造または組成物を決定する。この技術において、電子ビームは、極薄の検体を通じて透過され、ビームが通過する際に検体と相互作用する。画像は、検体を通じて伝達された電子の相互作用から形成され;この画像は、写真フィルムの層において、蛍光スクリーンなど、撮像装置へと拡大および焦点合わせされるか、または電荷結合素子CCDカメラなどのセンサーによって検出される。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、表面ゼータ電位について評価する。ある実施形態では、物理的測定を含む実験を行って、平均値の表面ゼータ電位を決定する。次いで、この表面ゼータ電位を、参照値と比較することができる。ある実施形態では、この表面ゼータ電位は、水中で測定した場合、約-20mV~約50mVである。ゼータ電位とは、粒子の表面電位の測定である。いくつかの実施形態では、粒子は、水中で測定した場合、約-20mV~約20mV、約-10mV~約10mV、または中性におよぶ表面ゼータ電位を有し得る。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、それが含む核酸剤例えば、siRNAの有効量について評価する。ある実施形態では、粒子は、例えば、インビボのモデル系例えば、本明細書に記載の任意のモデルのようなマウスモデルにおいて投与され、効果のレベル例えば、ノックダウンが観察される。ある実施形態では、レベルを、参照標準と比較する。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物は、その表面上での核酸剤の存在について評価される。例えば、インターカレート剤、例えば、RIBOGREEN、またはHPLCを用いて、粒子の表面上の二本鎖核酸剤の存在または量例えば、siRNAの存在または量を決定することができる。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、粒子の表面に露出されるのではなく、内部にある核酸剤、例えば、siRNAの量について評価する。ある実施形態では、レベルを参照標準と比較する。ある実施形態では、粒子中の、核酸剤、例えば、siRNAの数または重量あたり、少なくとも30、40、50、60、70、80、または90がこの粒子の内部にある。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、核酸剤の構造または機能について情報を提供するアッセイ例えば、消化アッセイを用いて評価する。例えば、この粒子は、核酸剤が標的の発現を調節する能力例えば、ノックダウンを評価する実験で評価することができる。この粒子はまた、それが障害を治療する、例えば、腫瘍増殖を調節する能力について評価され得る。いくつかの実施形態では、この評価は、インビトロまたはインビボのアッセイ例えば、異種移植片モデルである。この評価は、標準と比較し、および必要に応じてこの標準に対応し得、この粒子が分類される。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、核酸剤、例えば、siRNAインビトロで、例えば、実験動物、例えば、マウスで標的遺伝子をノックダウンするを送達する能力について評価する。組成物の活性は、等しい量の単独の核酸剤の活性と比較され得る。いくつかの実施形態では、標的遺伝子はGFPであり、このGFPはHeLA細胞で発現される。例えば、アッセイは、参照によって本明細書に援用される、Bertrandら、,2002,BBRC296:1000-1004に記載の、抗-GFPsiRNA、GFPプラスミド、HeLA-GFP細胞、マウスおよびGFP発現アッセイを用いることができる。複合体、粒子、および組成物を評価するための他の例示的な細胞としては、MDA-MB-435およびMDA-MB-468GFPの細胞が挙げられる。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物は、核酸剤、例えば、siRNA標的遺伝子をインビトロで、例えば、培養された細胞中でノックダウンするを送達する能力について評価する。組成物の活性は、等しい量の単独の核酸剤のものと比較し得る。いくつかの実施形態では、標的遺伝子はGFPであり、およびこの培養された細胞は、GFPでトランスフェクトされたHeLA細胞である。例えば、このアッセイは、参照によって本明細書に援用される、Bertrandら、,2002,BBRC296:1000-1004に記載の、抗-GFPsiRNA、GFPプラスミド、HeLA-GFP細胞、細胞培養条件、およびGFP発現アッセイを用いることができる。本明細書に記載される粒子および組成物を評価するための他の零時的な細胞としては、MDA-MB-435およびMDA-MB-468GFPの細胞が挙げられる。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物は、血清または細胞溶解液中でのインキュベーション後、核酸剤、例えば、siRNA標的遺伝子をインビトロで、例えば、培養された細胞中でノックダウンするを送達する能力について評価する。処理された組成物の活性を、等しい量の単独の核酸剤のものと比較され得る。いくつかの実施形態では、標的遺伝子はGFPであり、およびこの培養された細胞は、GFPでトランスフェクトされたHeLA細胞である。例えば、このアッセイは、参照によって本明細書に援用される、Bertrandら、,2002,BBRC296:1000-1004に記載の、抗-GFPsiRNA、GFPプラスミド、HeLA-GFP細胞、細胞培養条件、GFP発現アッセイ、および細胞溶解液を用いるアッセイの場合には、HeLa細胞溶解液を用いることができる。あるいは、参照によって本明細書に援用される、Hu-Lieskovanら、,2005,CancerRes.65:8984-8992に記載のマウス発現系を用いて、組成物の能力を評価することができる。Hu-Lieskovanらの標的遺伝子および構築物、または他の標的遺伝子および構築物を、Hu-lieskovanらに記載のマウス系で用いることができる。本明細書に記載される粒子および組成物を評価するための他の例示的な細胞としては、MDA-MB-435およびMDA-MB-468GFPの細胞が挙げられる。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、RNase例えば、RNaseAのような消化因子から核酸剤を防御する能力について評価する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される組成物は、未処理の核酸剤例えば、遊離のsiRNAに対してsiRNAのような核酸剤に対する防御を付与し得る。この評価は、組成物および/または単独の核酸剤がRNaseのような消化因子とインキュベートされ、組成物および単独の核酸が、種々の時点にわたって、例えば、ゲルクロマトグラフィーを用いて評価されるアッセイを包含し得る。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、それが含む完全なままの核酸剤例えば、siRNAのレベルについて評価する。ある実施形態では、この完全性intactnessは、物理的特性の存在、例えば、分子量によって、または、例えば、インビボのモデル系例えば、本明細書に記載の任意のモデルのようなマウスモデルで、機能性によって決定され得る。一実施形態では、このレベルは、参照の標準と比較される。ある実施形態では、粒子中で、数または重量で、核酸剤、例えば、siRNAの少なくとも30、40、50、60、70、80または90が完全なままであり得る。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物は、それが凝集する傾向に関して評価される。例えば、凝集は、予め選択された媒体、例えば、50/50のマウス/ヒト血清中で測定され得る。50/50のマウスヒト血清をインキュベートする場合の実施形態では、粒子は、凝集をわずかにしか示さないか、または全く示さない。例えば、粒子の数または重量の30、20または10未満が凝集する。ある実施形態では、このレベルは、参照標準と比較される。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、安定性、例えば、選択された条件での安定性、例えば、25°C±2°C/60の相対湿度±5の相対湿度で、例えば、開口容器または閉鎖容器中での安定性について評価する。ある実施形態では、25°C±2°C/60相対湿度±5相対湿度で、開口容器または閉鎖容器中で、20、30、40、50または60日間保管した場合、この粒子は、インビボでモデル系、例えば、マウスモデル、例えば、本明細書に記載されるようなで決定した場合、その活性の少なくとも30、40、50、60、70、80、90、または95を保持する。ある実施形態では、保持された活性のレベルを、参照標準と比較する。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、例えば、予め選択された投薬量で、タンパク質および/またはmRNAを減少する能力について評価する。例えば、粒子は、インビボでモデル系、例えば、本明細書に記載されるモデルの1つのようなマウスモデルで1または3mg/kgの単回用量としての投与によって評価してもよい。本明細書に記載される粒子は、タンパク質またはmRNAのノックダウンにおいて、少なくとも20、30、40、50、または60の減少を生じ得る。ある実施形態では、このレベルを参照標準と比較する。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、例えば、予め選択した投与量で、標的遺伝子のタンパク質および/またはmRNAを減少する能力について評価する。例えば、粒子は、インビボでモデル系例えば、本明細書に記載される任意のモデルのようなマウスモデルで1または3mg/kgの単回用量として投与によって評価され得る。本明細書に記載される粒子は、タンパク質および/またはmRNAのノックダウンにおいて少なくとも20、30、40、50または60の減少を生じ得る。ある実施形態では、このレベルを参照標準と比較する。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、例えば、予め選択した投薬量で、オフターゲット遺伝子のタンパク質および/またはmRNAの減少について評価する。例えば、粒子は、インビボのモデル系例えば、本明細書に記載される任意のモデルのようなマウスモデルで、1または3mg/kgの単回用量として、投与によって評価され得る。本明細書に記載される粒子または調製物は、インビボでモデル系,例えば、本明細書に記載される任意のモデルのようなマウスモデルで投与された場合例えば、1または3mg/kgの単回用量として、タンパク質またはmRNAによって測定して、結果として20、10、5未満のノックダウンを生じ得るかまたはノックダウンを生じない場合がある。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、mRNAを切断する能力について評価する。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、サイトカインを誘導する能力について評価する。本明細書に記載される粒子または調製物は、インビボのモデル系例えば、本明細書に記載される任意のモデルのようなマウスモデルで投与された場合例えば、1または3mg/kgの単回用量として、2、5または10倍未満のサイトカイン誘導を生じ得る。例えば、投与によって、以下のうちの1つ以上、例えば、2、3、4、5、6または7つまたは全ての2、5または10倍未満の誘導が生じる:腫瘍壊死因子-α、インターロイキン-1α、インターロイキン-1β、インターロイキン-6、インターロイキン-10、インターロイキン-12、ケラチノサイト由来サイトカインおよびインターフェロン-γ。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物は、アラニンアミノトランスフェラーゼまたはアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼASTを、インビボのモデル系例えば、本明細書に記載される任意のモデルのようなマウスモデルで例えば、1または3mg/kgの単回用量として投与した場合、増大する能力について評価される。ある実施形態では、粒子または調製物は、2、5または10倍未満の増大を生じる。ある実施形態では、粒子または粒子の調製物を、血球数を変更する能力について評価する。ある実施形態では、粒子または調製物は、血球数の変化を生じず、例えば、インビボのモデル系例えば、本明細書に記載される任意のモデルのようなマウスモデルでは3mg/kgの2回投与の48時間後に変化を生じない。本明細書に記載される粒子は、いくつかの分析方法に供することができる。例えば、本明細書に記載される粒子は、不純物または残留溶媒が存在するか否かを決定するため例えば、ガスクロマトグラフィーGCによる、1つ以上の成分の相対量を決定するため例えば、高速液体クロマトグラフィーHPLCを介して、粒子サイズを測定するため例えば、動的光散乱および/または走査電子顕微鏡を介して、または表面構成要素の有無を決定するための測定に供され得る。本明細書に開示される組成物は、核酸剤、例えば、siRNAインビボで、例えば、実験動物、例えば、マウスで標的遺伝子をノックダウンするを送達する能力について評価され得る。組成物の活性を、等しい量の単独の核酸剤の活性と比較してもよい。いくつかの実施形態では、標的遺伝子はGFP例えば、EGFPであり、このGFPは、HeLA細胞で発現され。例えば、このアッセイは、参照によって本明細書に援用される、Bertrandら、2002,BBRC296:1000-1004に記載の、抗-GFPsiRNA、GFPプラスミド、HeLA-GFP細胞、マウス、およびGFP発現アッセイを用いてもよい。本明細書に記載される粒子および組成物を評価するための他の例示的な細胞としては、MDA-MB-435およびM4A4GFPの細胞が挙げられる。本明細書に開示される組成物は、核酸剤、例えば、siRNA,標的遺伝子をインビトロで、例えば、培養された細胞中でノックダウンするを送達する能力について評価され得る。この組成物の活性を、等しい量の単独の核酸剤の活性と比較してもよい。いくつかの実施形態では、標的遺伝子はGFPであり、この培養される細胞は、GFPでトランスフェクトされたHeLA細胞である。例えば、このアッセイは、参照によって本明細書に援用される、Bertrandら、2002,BBRC296:1000-1004に記載の、抗-GFPsiRNA、GFPプラスミド、HeLA-GFP細胞、細胞培養条件、およびGFP発現アッセイを用いてもよい。本明細書に記載される粒子および組成物を評価するための他の例示的な細胞としては、MDA-MB-435およびM4A4GFPの細胞が挙げられる。本明細書に開示される組成物は、血清または細胞溶解液中でのインキュベーション後、核酸剤、例えば、siRNA標的遺伝子をインビトロで、例えば、培養された細胞中でノックダウンするを送達する能力について評価され得る。処理された組成物の活性は、等しい量の単独の核酸剤の活性と比較され得る。いくつかの実施形態では、この標的遺伝子はGFPであり、この培養される細胞は、GFPでトランスフェクトされたHeLA細胞である。例えば、このアッセイは、参照によって本明細書に援用される、Bertrandら、2002,BBRC296:1000-1004に記載の、抗-GFPsiRNA、GFPプラスミド、HeLA-GFP細胞、細胞培養条件、GFP発現アッセイを用いても、細胞溶解液を用いるアッセイの場合は、HeLa細胞溶解液を用いてもよい。あるいは、参照によって本明細書に援用される、Hu-Lieskovanら、,2005,CancerRes.65:8984-8992に記載のマウス発現系を用いて、組成物の能力を評価してもよい。Hu-Lieskovanらの標的遺伝子および構築物、または他の標的遺伝子および構築物を、Hu-lieskovanらに記載のマウス系で用いてもよい。本明細書に記載される粒子および組成物を評価するための他の例示的な細胞としては、MDA-MB-435およびM4A4GFPの細胞が挙げられる。本明細書に開示される組成物を、RNase例えば、RNaseAのような消化因子から核酸剤を防御する能力について評価してもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される組成物は、未処理の核酸剤例えば、単独のsiRNAに対してsiRNAのような核酸剤に対する防御を付与し得る。この評価は、組成物および/または遊離の核酸剤がRNaseのような消化因子とインキュベートされ、組成物および単独の核酸が、種々の時点にわたって、例えば、ゲルクロマトグラフィーを用いて評価されるアッセイを包含し得る。薬学的組成物本明細書で、本明細書に記載される複数の粒子および薬学的に許容される担体またはアジュバントを含む組成物、例えば、薬学的組成物を提供する。いくつかの実施形態では、薬学的組成物は、本明細書に記載される化合物、例えば、複合体の薬学的に許容される塩を含んでもよい。本明細書に記載される化合物の薬学的に許容される塩としては、薬学的に許容される無機および有機の酸および塩基由来の塩が挙げられる。適切な酸塩の例としては、酢酸塩、アジピン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グリコール酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、2-ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、パルモアートpalmoate、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、およびウンデカン酸塩が挙げられる。適切な塩基に由来する塩としては、アルカリ金属例えば、ナトリウム、アルカリ土類金属例えば、マグネシウム、アンモニウム、およびN-アルキル4塩が挙げられる。本発明はまた、本明細書に記載される化合物の任意の塩基性窒素含有基の四級化も想定する。水溶性もしくは油溶性または分散性生成物は、このような四級化によって得られてもよい。ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムなどの湿潤剤、乳化剤、および滑沢剤、ならびに着色料、放出剤、コーティング剤、甘味料、調味料および香料、保存料、ならびに抗酸化剤も組成物中に存在し得る。薬学的に許容される抗酸化剤の例としては以下が挙げられる:1水溶性の抗酸化剤、例えば、アスコルビン酸、塩酸システイン、重硫酸ナトリウム、メタ重硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなど;2油溶性の抗酸化剤、例えば、パルミチン酸アスコルビル、ブチルヒドロキシアニソールBHA、ブチルヒドロキシトルエンBHT、レシチン、没食子酸プロピル、α-トコフェロールなど;ならびに3金属キレート剤、例えば、クエン酸、エチレンジアミン四酢酸EDTA、ソルビトール、酒石酸、リン酸など。組成物は、複合体、粒子、または組成物を懸濁するのに用いられる液体を含んでもよく、この液体は、複合体、粒子、または組成物に適応する任意の液体溶液であってもよく、また、薬学的に許容される非毒性液体のような、薬学的組成物において用いられるのに適切である。適切な懸濁液体としては、水、水性スクロースシロップ、トウモロコシシロップ、ソルビトール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、D5W、およびこれらの混合物からなる群より選択される懸濁液を含むが、これらに限定されない。本明細書に記載される組成物としてはまた、抗酸化剤、抗菌剤、緩衝液、増量剤、キレート剤、不活性ガス、等張剤、および/または粘性剤など、別の成分を含んでもよい。一実施形態において、ポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物は、凍結乾燥された形態で提供され、対象への投与の前に再構成される。凍結乾燥されたポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物は、塩または生理食塩水溶液など、例えば、pH6~9を有する塩化ナトリウム溶液、乳酸リンゲル注射溶液、またはPLASMA-LYTEAInjectionpH7.4登録商標Baxter,Deerfield,ILなどの市販の希釈剤などの希釈溶液によって再構成されてもよい。一実施形態において、凍結乾燥された処方物は、凍結保護剤または安定剤を含み、凍結乾燥の間の結晶形成および融合過程に由来する損傷から、粒子および活性を保護することによって物理的および化学的安定性を維持する。凍結保護剤または安定剤は、ポリエチレングリコールPEG、PEG液体複合体例えば、PEG-セラミドまたはD-α-トコフェリルポリエチレングリコール1000スクシナート、ポリビニルアルコールPVA、ポリビニルピロリドンPVP、ポリオキシエチレンエステル、ポリオキサマー、ポリソルベート、ポリオキシエチレンエステル、レシチン、糖類、オリゴ糖類、多糖類、炭水化物、シクロデキストリン例えば、2-ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリンおよびポリオール例えば、トレハロース、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、スクロース、グルコース、およびデキストラン、塩、ならびにクラウンエーテルのうちの1つ以上であり得る。いくつかの実施形態において、凍結乾燥したポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物は、水、5デキストロース注射液、乳酸リンゲルおよびデキストロース注射液、または無水アルコール米国薬局方および、CremophorELの商標の下でGAFCorporation,MountOlive,N.J.から入手可能なポリオキシエチレン化したヒマシ油界面活性剤などの非イオン界面活性剤の体積での等量部の混合物で再構成される。凍結乾燥した生成物および再構成用のビヒクルは、適切に遮光されたバイアル中に別個にパッケージングしてもよい。再構成された溶液における界面活性剤の量を最小化するために、十分量のビヒクルのみを提供して、ポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物の溶液を形成してもよい。一旦薬剤の溶解を達成すると、得られる溶液はさらに、好適な非経口希釈剤によって注射の前に希釈される。このような希釈剤は、当業者に周知である。これらの希釈剤は一般的に、臨床施設において入手可能である。しかしながら、対象のポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物を、十分な非経口希釈剤を含む第三のバイアルでパッケージングして、投与のための最終濃度を調製することは本発明の範囲内である。代表的な希釈剤は、乳酸リンゲル注射液である。再構成されたポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物の最終的な希釈は、類似の有用性を有する他の調製物、例えば、5デキストロース注射液、乳酸リンゲルおよびデキストロース注射液、注射用滅菌水などを用いて行ってもよい。しかしながら、その狭いpH範囲pH6.0~7.5に起因して、乳酸リンゲル注射液が最も代表的である。100mLあたり、乳酸リンゲル注射液は、塩化ナトリウム米国薬局方0.6g、乳酸ナトリウム0.31g、塩化カリウム米国薬局方0.03g、および塩化カルシウム2H2O米国薬局方0.02gを含む。モル浸透圧濃度は、275mOsmol/Lであり、等張に非常に近い。組成物は、単位剤形で簡便に与えられてもよく、医薬の分野で周知の任意の方法によって調製され得る。薬学的に許容される担体と組み合わされて単一の剤形を生じ得る核酸剤の量は、治療されている宿主、特定の投与様式に応じて変動する。薬学的に許容される担体と組み合わせて単一剤形を生じることのできる活性薬の量とは一般的に、治療効果を生じる化合物の量である。投与の経路本明細書に記載される薬学的組成物は、経口的に、非経口的に例えば、静脈内、皮下、皮内、筋肉内、関節内、動脈内、滑膜内、胸骨内、くも膜下腔内、病巣内、眼内または頭蓋内注射、局所的に、粘膜に例えば、直腸にまたは膣に、鼻腔内に、頬側に、眼に、吸入スプレーを介して投与されてもよく例えば、噴霧、噴霧剤、または乾燥粉末装置を介して送達される、またはインプラントのリザーバーを介して投与されてもよい。非経口投与に適切な薬学的組成物は、1つ以上の薬学的に許容される滅菌等張性水性または非水性の溶液、分散液、懸濁液もしくはエマルジョン、または使用直前に滅菌注射溶液または分散液中に再構成され得る滅菌粉末と組み合わせて、1つ以上のポリマー-薬剤の複合体単数または複数、粒子単数または複数、または組成物単数または複数を含み、これは、抗酸化剤、緩衝液、静菌剤、意図されるレシピエントの血液で製剤が等張となる溶質、または懸濁剤もしくは増粘剤を含んでもよい。薬学的組成物において採用され得る適切な水性および非水性担体の例としては、水、エタノール、ポリオール例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど、および適切なそれらの混合物、オリーブ油などの植物油、およびオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルが挙げられる。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング材料の使用によって、分散液の場合、必要な粒子の大きさの維持によって、および界面活性剤の使用によって維持することができる。これらの組成物はまた、保存料、湿潤剤、乳化剤、および分散剤などのアジュバントを含んでもよい。微生物の作用の防止は、種々の抗菌薬および抗真菌薬、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などの封入によって確実にされ得る。糖類、塩化ナトリウムなどの等張化剤を組成物に含むこともまた望ましい場合がある。さらに、注射可能な医薬形態の長期吸収が、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなど、吸収を遅延させる薬剤の封入によってもたらされ得る。いくつかの場合、核酸剤の効果を長期化するために、皮下または筋肉内注射からの薬剤の吸収を遅延させることが望ましい。このことは、水溶性に乏しい結晶または非晶質材料の液体懸濁液の使用によって達成され得る。次に、複合体、粒子、または組成物の吸収速度は、その溶解速度に依存し、溶解速度は次に、結晶の大きさおよび結晶形態に依存し得る。あるいは、非経口的に投与される剤形の遅延した吸収は、油性ビヒクルに複合体、粒子、または組成物を溶解または懸濁することによって達成される。経口投与に適切な薬学的組成物は、カプセル、サシェcachet、丸剤、錠剤、ガム、トローチ剤lozenge香味基剤、通常、スクロースおよびアカシアまたはトラガカントを用いる、散剤、顆粒剤の形態であっても、または水性もしくは非水性液体における溶液もしくは懸濁液として、または水中油型もしくは油中水型液体エマルジョンとして、またはエリキシル剤もしくはシロップ剤として、またはトローチpastillesとしてゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアカシアなどの不活性基剤を用いる、および/または口腔洗浄薬などの形態であってもよく、各々が既定の量の薬剤を活性成分として含む。組成物はまた、ボーラスbolus、舐剤、ペーストとしても投与されてもよい。錠剤は、圧縮または成形によって、必要に応じて1つ以上の付属成分とともに製造され得る。圧縮された錠剤は、結合剤例えば、ゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース、滑沢剤、不活性希釈剤、保存料、崩壊剤例えば、デンプングリコール酸ナトリウム、または架橋されたカルボキシメチルセルロースナトリウム、界面活性剤、または分散剤を用いて調製されてもよい。成形された錠剤は、不活性液体希釈剤で湿潤された粉末状ペプチドまたはペプチド模倣薬の混合物を適切な機械において成形することによって製造されてもよい。錠剤、ならびに糖衣錠、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤などの他の固形剤形は必要に応じて、切れ目を入れられてもよいし、または腸溶性コーティングおよび医薬製剤分野で周知の他のコーティングのような、コーティングおよびシェルを用いて調製されてもよい。錠剤および他の固形剤形はまた、例えば、所望の放出特性を提供するために、様々な比のヒドロキシプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、リポソームおよび/またはミクロスフェアを用いて、その内部にある活性成分の緩徐な放出または徐放を提供するよう製剤されてもよい。これらは、例えば、細菌保持フィルターを通じた濾過によって、または滅菌水、もしくはいくつかの他の滅菌注射可能媒体において使用直前に溶解することのできる滅菌固形組成物の形態で滅菌薬を組み込むことによって滅菌されてもよい。これらの組成物はまた、必要に応じて不透明化薬を含んでもよく、活性成分単数または複数のみを、または優先的に、胃腸管の特定の部分において、必要に応じて遅延された様式で放出する組成物であってもよい。使用することのできる包埋組成物の例としては、ポリマー物質およびワックスが挙げられる。活性成分はまた、適宜、上記の賦形剤の1つ以上とともにマイクロ封入された形態であってもよい。経口投与のための液体剤形としては、薬学的に許容されるエマルジョン、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁剤、シロップ剤、およびエリキシル剤が挙げられる。ポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物に加えて、液体剤形は、例えば、水または、他の溶媒、安定化剤、および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、1,3-ブチレングリコール、油類特に、綿実油、ピーナッツ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、およびゴマ油、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにこれらの混合物など、当該分野で通常用いられる不活性希釈剤を含んでもよい。不活性希釈剤の他に、経口組成物はまた、湿潤剤、乳化および懸濁剤、甘味料、調味料、着色料、香料、および保存料などのアジュバントも含んでもよい。懸濁液は、ポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物に加えて、例えば、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶性セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天、およびトラガカント、ならびにこれらの混合物のような懸濁剤を含んでもよい。局所投与に適切な薬学的組成物は、所望の処置が局所適用によって容易に接近可能な領域または臓器に関与する場合に有用である。皮膚へ局所的に適用するために、薬学的組成物は、担体に懸濁または溶解された活性成分を含む適切な軟膏を用いて処方されるべきである。本明細書に記載される粒子の局所投与のための担体としては、限定するものではないが、鉱油、液化石油、白色石油、プロピレングリコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン化合物、乳化ワックス、および水が挙げられる。あるいは、薬学的組成物は、適切な乳化剤とともに担体において懸濁または溶解される活性粒子を含む適切なローションまたはクリームを用いて製剤してもよい。適切な担体としては、限定するものではないが、鉱油、ソルビタンモノステアラート、ポリソルベート60、セチルエステルワックス、セテアリールアルコール、2-オクチルドデカノール、ベンジルアルコール、および水が挙げられる。また、本明細書に記載される薬学的組成物は、直腸坐剤処方物によってまたは適切な浣腸処方物において下位腸管に局所的に適用され得る。局所性経皮パッチもまた本明細書に含まれる。本明細書に記載される薬学的組成物は、鼻内エアロゾルまたは吸入によって投与され得る。このような組成物は、医薬製剤の分野において周知の技術に従って調製され、ベンジルアルコールもしくは他の適切な保存料、バイオアベイラビリティを向上する吸収促進剤、フルオロカーボン、および/または当該分野で公知の他の可溶化剤もしくは分散剤を使用して、生理食塩水の溶液として調製され得る。本明細書に記載される薬学的組成物はまた、直腸または膣内投与のための坐剤の形態で投与されてもよい。坐剤は、本明細書に記載される1つ以上のポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物を、室温で固形物だが体温で液体である1つ以上の適切な非刺激性賦形剤と混合することによって調製され得る。従って、組成物は、直腸腔または膣腔において融解し、ポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物を放出する。このような材料としては、例えば、ココアバター、ポリエチレングリコール、坐剤用ワックス、またはサリチル酸塩が挙げられる。膣内投与に適切な本発明の組成物としてはまた、当該分野で適切であることが公知のこのような担体を含むペッサリー、タンポン、クリーム、ジェル、ペースト、泡状物、またはスプレー処方物が挙げられる。眼科用の処方物、眼の軟膏、散剤、溶液などもまた、本発明の範囲内であると意図される。眼の組織例えば、眼の深部皮質領域、核上性supranuclear領域、または水性体液領域は、眼科用処方物と接触されてもよく、この眼科用処方物はレンズへと分布させられる。本発明の眼科用処方物の投与または適用の任意の適切な方法単数または複数例えば、局所、注射、非経口、風媒性などが使用されてもよい。例えば、接触することは、局所投与を介して行われても、または注射を介して行われてもよい。薬用量および薬用量投与計画複合体、粒子および組成物は、当業者に公知の従来法によって薬学的に許容される剤形へと処方することができる。本発明の薬学的組成物における活性成分の実際の投薬量レベルは、特定の対象、組成物、および投与様式について、対象に対して毒性であることなく、所望の治療応答を達成するのに有効な量の活性成分を得るために変動されてもよい。一実施形態において、複合体、粒子、または組成物は、例えば0.001~300mg/m2、約0.002~200mg/m2、約0.005~100mg/m2、約0.01~100mg/m2、約0.1~100mg/m2、約5~275mg/m2、約10~250mg/m2、例えば、0.001、0.002、0.005、0.01、0.05、0.1、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290mg/m2の投薬量で対象に投与される。投与は、例えば、1、2、3、4もしくは5日ごと、または毎週、または2、3、4、5、6もしくは7もしく8週毎に一定間隔であってもよい。この投与は、約10分~約6時間、例えば、約30分~約2時間、約45分~90分、例えば、約30分、45分、1時間、2時間、3時間、4時間、5時間、またはそれより長い期間にわたってであり得る。一実施形態において、ポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物は、例えば15分、10分、5分、またはそれより短い期間にわたってボーラス注入または静脈内注入として投与される。一実施形態において、複合体、粒子、または組成物は、このような所望の用量の薬剤が投与されるような量で投与される。好ましくは、複合体、粒子、または組成物の用量は、本明細書に記載される用量である。一実施形態において、対象は、1、2、3、最大10、最大12、最大15回、もしくはそれより多くの処置を、または障害もしくは障害の症状が治癒cured、治癒healed、軽減、緩和relieved、変化、治療、寛解、緩和palliated、改善、または影響されるまで受ける。例えば、対象は、障害もしくは障害の症状が治癒cured、治癒healed、軽減、緩和relieved、変化、救済、寛解、緩和palliated、改善、または影響されるまで、1、2、3、または4週ごとに1回注入を受ける。好ましくは、投薬スケジュールは、本明細書に記載される投薬スケジュールである。複合体、粒子、または組成物は、一次療法として、例えば単独でまたは追加の薬剤単数または複数との併用で投与されてもよい。他の実施形態において、複合体、粒子、または組成物は、対象が、一次療法に対して耐性を発現するか、この治療法に応答することができないか、またはこの治療法の後に再発した後に投与される。この複合体、粒子、または組成物は、第二の薬剤との併用で投与され得る。好ましくは、この複合体、粒子、または組成物は、本明細書に記載される第二の薬剤との併用で投与される。第二の薬剤は、粒子中の核酸剤と同じであっても、または異なってもよい。キット本明細書に記載される複合体、粒子、または組成物は、キットにおいて提供され得る。このキットには、本明細書に記載される複合体、粒子、または組成物、ならびに必要に応じて、容器、薬学的に許容される担体、および/または資料を備える。この資料は、説明資料、指示資料、販売資料、または本明細書に記載される方法および/もしくは本明細書に記載される方法に関して粒子の使用と関連する他の資料であってもよい。キットの資料は、その形態で制限されることはない。一実施形態において、資料は、この複合体、粒子、または組成物の製造、この複合体、粒子、または組成物の物理的特性、濃度、使用期限、バッチまたは製造場所情報などについての情報を含んでもよい。一実施形態において、資料は、複合体、粒子、または組成物を投与する方法に関する。一実施形態において、資料は、本明細書に記載される複合体、粒子、組成物を、本明細書に記載される方法を実施するのに適切な様式で、例えば、適切な用量、剤形、または投与様式例えば、本明細書に記載される用量、剤形、または投与様式で投与するための説明書を含んでもよい。別の実施形態において、資料は、本明細書に記載される複合体、粒子、または組成物を、適切な対象、例えば、ヒト、例えば、本明細書に記載される障害を罹患しているかまたはその危険にあるヒトに投与するための説明書を含んでもよい。別の実施形態において、資料は、本明細書に記載される複合体または粒子を薬学的に許容される組成物へ再構成するための説明書を含んでもよい。一実施形態において、キットは、対象の治療などのための複合体、粒子、または組成物を使用するための説明書を備える。この説明書は、複合体、粒子、または組成物を、特定の対象を用いてまたは特定の化学治療薬との併用で使用するために再構成または希釈する方法を含んでもよい。説明書はまた、ポリマーの複合体組成物を、静脈内注入などによる特定の投与手段を用いて使用するために再構成または希釈する方法も含んでもよい。別の実施形態において、このキットは、特定の適応症を有する対象を処置するための説明書を備える。このキットの資料は、その形態で限定されることはない。多くの場合、資料、例えば説明書は、印刷物、例えば、印刷されたテキスト、図、および/または写真、例えば、ラベルまたは印刷されたシートにおいて提供される。しかしながら、資料はまた、点字、コンピュータ可読材料、ビデオ録画、またはオーディオ録音など、他の形式で提供されてもよい。別の実施形態において、キットの資料は、連絡先、例えば、実際の住所、電子メールアドレス、ウェブサイト、または電話番号であり、そこでキットのユーザーは、本明細書に記載される粒子および/または本明細書に記載される方法におけるその使用についての実質的な情報を得ることができる。この資料はまた、任意の組み合わせの形態で提供されてもよい。本明細書に記載される複合体、粒子、または組成物に加えて、キットの組成物は、他の成分、例えば、界面活性剤、凍結保護剤もしくは安定剤、抗酸化剤、抗菌薬、増量剤、キレート剤、不活性ガス、等張化剤および/もしくは粘性剤、溶媒もしくは緩衝液、安定剤、保存料、香味料例えば、苦味アンタゴニストもしくは甘味料、香料、例えば、キットにおける1つ以上の成分を染色または着色するための色素もしくは着色料、または他の見かけを良くする成分、薬学的に許容される担体、ならびに/あるいは、本明細書に記載される病態または障害を治療するための第二の薬剤などを含んでもよい。あるいは、他の成分が、キットに含まれてもよいが、ただし本明細書に記載される粒子とは異なる組成物または容器においてである。このような実施形態において、キットは、本明細書に記載される複合体、粒子、もしくは組成物および他の成分を混合するための、または本明細書に記載される複合体、粒子、もしくは組成物を他の成分とともに用いるための説明書を備えてもよい。別の実施形態において、キットには、第二の化学治療薬を備える。一実施形態において、この第二の剤は、凍結乾燥型または液体型である。一実施形態において、複合体、粒子、または組成物および第二の治療薬は別個の容器にあり、別の実施形態においては、複合体、粒子、または組成物および第二の治療薬は、同じ容器にパッケージングされる。いくつかの実施形態において、キットの成分は、例えばゴムまたはシリコーン封鎖例えば、ポリブタジエンまたはポリイソプレン封鎖によって密封されたバイアル中に保存される。いくつかの実施形態において、キットの成分は、不活性条件下で保存される例えば、窒素またはアルゴンなど別の不活性ガスの下。いくつかの実施形態において、キットの成分は、無水条件下例えば、乾燥剤を用いるで保存される。いくつかの実施形態において、キットの成分は、コハク色のバイアルなどの遮光容器に保存される。本明細書に記載される複合体、粒子、または組成物は、任意の形態、例えば、液体、凍結、乾燥、または凍結乾燥した形態において提供されてもよい。本明細書に記載される複合体、粒子、または組成物は、実質的に純粋であるか、および/または無菌であることが好ましい。いくつかの実施形態では、複合体、粒子、または組成物は無菌である。本明細書に記載される複合体、粒子、または組成物が液体溶液で提供される場合、この液体溶液は好ましくは水溶液であり、無菌の水溶液が好ましい。一実施形態において、複合体、粒子、または組成物は、凍結乾燥型で提供され、必要に応じて希釈溶液は、凍結乾燥した薬剤を再構成するために提供される。希釈剤としては例えば、塩、または生理食塩水溶液、例えば、pH6~9を有する塩化ナトリウム溶液、乳酸リンゲル注射溶液、D5W、またはPLASMA-LYTEAInjectionpH7.4登録商標Baxter,Deerfield,ILを含んでもよい。このキットは、本明細書に記載される複合体、粒子、または組成物を含む組成物のための1つ以上の容器を備えてもよい。いくつかの実施形態において、キットは、組成物および資料のための別個の容器、分割器、または区画を備える。例えば、組成物は、ボトル、バイアル、静脈用混合バッグ、静脈用注入セット、ピギーバックセット、またはシリンジに含まれてもよく、資料は、プラスチックスリーブまたはパケットに含まれてもよい。他の実施形態において、キット別個の要素が、単一の分割されていない容器内に含まれる。例えば、組成物は、ラベルの形態で資料が添付されたボトル、バイアル、またはシリンジに含まれる。いくつかの実施形態において、キットは、複数例えば、パックの個々の容器を含み、各々が、本明細書に記載されるポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物のうち1つ以上の単位剤形例えば、本明細書に記載される剤形を含む。例えば、キットは、複数のシリンジ、アンプル、ホイルパケット、またはブリスターパックを備え、各々が本明細書に記載される粒子の単一の単位用量を含んでいる。キットの容器は、気密性、防水性例えば、湿気または蒸発における変化に不透過性であるであっても、および/または遮光性であってもよい。キットには必要に応じて、組成物の投与に適切な器具、例えば、シリンジ、吸入装置、ピペット、ピンセット、計量スプーン、滴下装置例えば、点眼装置、スワブ例えば、綿スワブまたは木製スワブ、または任意のそのような送達デバイスを備える。一実施形態において、このデバイスは、例えば、外科的挿入のためにパッケージングされた医用インプラントデバイスである。粒子および組成物を用いる方法本明細書に記載されるポリマー-薬剤の複合体、粒子、および組成物は、培養物中の細胞へ、例えばインビトロもしくはエクスビボで、または対象へ、例えばインビボで投与して、種々の疾患または障害例えば、癌例えば、固形腫瘍、自己免疫障害、心血管系障害、炎症性障害、代謝性障害、感染性疾患などを治療または予防することができる。従って、別の態様では、本発明は、対象における疾患または障害を治療または予防する方法であって、この疾患または障害が、癌例えば、固形腫瘍、自己免疫障害、心血管系障害、炎症性障害、代謝性障害、または感染性疾患である方法、を特徴とする。この方法は、本明細書に記載される有効量の複合体、粒子、または組成物を投与して、これによって疾患または障害を治療することを包含する。ある実施形態では、この複合体、粒子、および組成物は、第一選択、第二選択、または補助療法の一部として用いられてもよく、また単独でまたは1つ以上の追加の処置投与計画と併用して用いられてもよい。ある実施形態では、本明細書に開示される複合体例えば、ポリマー-核酸剤の複合体、粒子または組成物は、広範な種々の疾患または障害を処置または予防するために用いてもよいし、核酸剤を、例えば、その必要な対象に、例えば、アンチセンスまたはsiRNAを送達するために用いられても;以下の表A、BもしくはCに列挙されるものを含む、癌、炎症性疾患もしくは自己免疫性疾患、または心血管系疾患のような本明細書に記載される疾患または障害を治療するために用いられてもよい。実施形態では、ポリマー-核酸剤の複合体、粒子および組成物は、第一選択、第二選択、または補助療法の一部として用いられてもよく、また単独でまたは1つ以上の追加の処置投与計画と併用して用いられてもよい。癌従って、別の態様では、本発明は、対象における疾患または障害を治療または予防する方法であって、この疾患または障害が、癌例えば、固形腫瘍である方法、を特徴とする。この方法は、本明細書に記載される有効量の複合体、粒子、または組成物を投与して、これによってこの疾患または障害を治療することを包含する。ある実施形態では、この複合体、粒子、および組成物は、第一選択、第二選択、または補助療法の一部として用いられてもよく、また単独でまたは1つ以上の追加の処置投与計画と併用して用いられてもよい。ある実施形態では、この開示されたポリマー-薬剤の複合体、粒子、および組成物は、増殖性障害を治療または予防するために、例えば、腫瘍およびその転移を治療するために用いられ、ここでは、この腫瘍またはその転移は、本明細書に記載される癌である。いくつかの実施形態において、ここでは薬剤は、本明細書に記載される診断薬、ポリマー-薬剤の複合体、粒子、および組成物を用いて、癌を評価または診断するために用いられてもよい。ある実施形態では、増殖性障害は、固形腫瘍、軟部組織腫瘍、または液体腫瘍である。例示的な固形腫瘍としては、脳、肺、乳房、リンパ系、胃腸管例えば、結腸、および尿生殖器例えば、腎臓、尿路上皮性、または精巣の腫瘍管、咽頭、前立腺、および卵巣のものなど、種々の臓器系の悪性腫瘍例えば、肉腫および細胞腫例えば、腺癌または有棘細胞癌が挙げられる。例示的な腺癌としては、結腸直腸癌、腎細胞癌、肝癌、肺の非小細胞癌、および小腸の癌が挙げられる。ある実施形態では、この方法は、腱、筋肉または脂肪、および液体腫瘍のものなど、軟部腫瘍を評価または治療することを包含する。ある実施形態では、癌とは、任意の癌、例えば、米国国立癌研究所NationalCancerInstituteが記載するものである。癌は、癌腫、肉腫、骨髄腫ミエローマ、白血病、リンパ腫、または混合型であり得る。米国国立癌研究所によって記載される例示的な癌としては以下が挙げられる:消化性/胃腸管系癌、例えば、肛門癌;胆管癌;肝外胆管癌;虫垂癌;カルチノイド腫瘍;胃腸癌;結腸癌;小児期結腸直腸癌を含む結腸直腸癌;小児期胃食道癌を含む胃食道癌;胆嚢癌;小児期胃癌を含む胃癌;成人性原発性肝細胞肝癌および小児期原発性肝細胞肝癌を含む肝細胞肝癌;小児期膵癌を含む膵癌;肉腫、横紋筋肉腫;島細胞膵癌;直腸癌;および小腸癌;内分泌癌、例えば、島細胞癌内分泌膵臓;小児期副腎皮質癌を含む副腎皮質癌;胃腸細胞腫瘍;副甲状腺癌;クロム親和性細胞腫;下垂体腫瘍;小児期甲状腺癌を含む甲状腺癌;小児期多発性内分泌腫瘍症候群;および小児期細胞腫瘍;眼癌、例えば、眼内黒色腫;および網膜芽細胞腫;筋骨格癌、例えば、ユーイングファミリーの腫瘍;骨肉腫/骨の悪性線維性組織球腫;小児期横紋筋肉腫;成人期および小児期軟部組織肉腫を含む軟部組織肉腫;腱鞘の透明細胞肉腫;および子宮肉腫;乳癌、例えば、小児期および男性乳癌を含む乳癌ならびに妊娠;神経癌、例えば、小児期脳幹神経膠腫;脳腫瘍;小児期脳星状細胞腫;小児期脳星状細胞腫/悪性神経膠腫;小児期上衣腫;小児期髄芽腫;小児期松果体およびテント上原始神経外胚葉性腫瘍;小児期視覚路および視床下部神経膠腫;他の小児期脳癌;副腎皮質細胞腫;原発性中枢神経系リンパ腫;小児期脳星状細胞腫;神経芽腫;頭蓋咽頭腫;脊髄腫瘍;中枢神経系非定型奇形腫/ラブドイド腫瘍;中枢神経系胚芽腫;ならびに小児期テント上原始神経外胚葉性腫瘍および下垂体腫瘍;尿生殖器癌、例えば、小児期膀胱癌を含む膀胱癌;腎細胞腎癌;小児期卵巣癌を含む卵巣癌;卵巣上皮癌;卵巣低悪性潜在的腫瘍;陰茎癌;前立腺癌;小児期腎細胞癌を含む腎細胞癌;腎盂および尿管の移行細胞癌;精巣癌;尿道癌;膣癌;外陰癌;子宮頚癌;ウイルムス腫瘍および他の小児期腎腫瘍;子宮内膜癌;ならびに妊娠性絨毛性腫瘍;胚細胞性癌、例えば、小児期頭蓋外胚細胞性腫瘍;性腺外胚細胞性腫瘍;卵巣胚細胞性腫瘍;および精巣癌;頭頸部癌、例えば、口唇および口腔の癌;小児期口腔癌を含む口腔癌oralcancer;下咽頭癌;小児期喉頭癌を含む喉頭癌;潜在性原発性の転移性扁平上皮頚部癌;口腔癌;鼻腔および副鼻腔癌;小児期鼻咽頭癌を含む鼻咽頭癌;口腔咽頭癌;副甲状腺癌;咽頭癌;小児期唾液腺癌を含む唾液腺癌;咽喉癌;ならびに甲状腺癌;血液/血液細胞癌、例えば、白血病例えば、成人期および小児期急性リンパ性白血病を含む急性リンパ性白血病;成人期および小児期急性骨髄性白血病を含む急性骨髄性白血病;慢性リンパ性白血病;慢性骨髄性白血病;およびヘアリーセル白血病;リンパ腫例えば、AIDS関連リンパ腫;皮膚T細胞リンパ腫;成人期および小児期ホジキンリンパ腫ならびに妊娠中のホジキンリンパ腫を含むホジキンリンパ腫;成人期および小児期非ホジキンリンパ腫ならびに妊娠中の非ホジキンリンパ腫を含む非ホジキンリンパ腫;菌状息肉症;セザリー症候群;ワルデンシュトレームマクログロブリン血症;ならびに原発性中枢神経系リンパ腫;および他の血液癌例えば、慢性骨髄増殖性疾患;多発性骨髄腫/形質細胞腫瘍;骨髄異形成症候群;ならびに骨髄異形成/骨髄増殖性障害;肺癌、例えば、非小細胞肺癌;および小細胞肺癌;呼吸器系癌、例えば、成人期悪性中皮腫;小児期悪性中皮腫;悪性胸腺腫;小児期胸腺腫;胸腺癌;小児期気管支腺腫/カルチノイドを含む気管支腺腫/カルチノイド;胸膜肺芽細胞腫;非小細胞肺癌;および小細胞肺癌;皮膚癌、例えば、カポジ肉腫;メルケル細胞癌;黒色腫;および小児期皮膚癌;AIDS関連悪性腫瘍;他の小児期癌、小児期の通常ではない癌、および未知の原発性部位の癌;ならびに、上記の癌の転移もまた、本明細書に記載される方法に従って治療または予防することができる。本明細書に記載されるポリマー-薬剤の複合体、化合物、または組成物は、膀胱癌、膵癌、前立腺癌、腎癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、黒色腫、結腸直腸癌、および乳癌の加速性または転移性の癌を治療するのに特に適切である。一実施形態において、ポリマー-薬剤の複合体、化合物、または組成物および第二の治療薬を用いた治療などによる癌の併用療法のための方法が提供される。種々の組み合わせが、本明細書に記載される。この組み合わせは、腫瘍の発達を低減するか、腫瘍の負荷を低減するか、または哺乳類宿主における腫瘍の退縮を生じることができる。ある実施形態では、核酸剤-ポリマーの複合体、粒子または組成物例えば、表Aに列挙される遺伝子を標的するsiRNAを含むを投与して、例えば、表Aに列挙される関連の疾患を治療または予防する。炎症および自己免疫疾患別の態様では、本発明は、対象における疾患または障害を治療または予防する方法であって、ここでこの疾患または障害が炎症性または自己免疫性の疾患である方法を特徴とする。この方法は、本明細書に記載される複合体、粒子または組成物の有効量を投与し、それによってその疾患または障害を治療することを包含する。ある実施形態では、この複合体、粒子および組成物は、第一選択、第二選択、または補助療法の一部として用いられてもよく、また単独でまたは1つ以上の追加の治療投与計画と併用して用いられてもよい。ある実施形態では、本明細書に記載されるポリマー-薬剤の複合体、粒子、組成物および方法は、炎症と関連した疾患または障害を治療または予防するために用いられ得る。ある実施形態では、本明細書に説明されるポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物は、炎症の開始の前に投与されても、開始時に投与されても、開始後に投与されてもよい。ある実施形態では、予防的に用いられる場合、ポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物は、任意の炎症性の応答または症状に先立って提供される。ある実施形態では、ポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物の投与は、炎症性の応答または症状を予防または減弱させ得る。例示的な炎症性の病態としては、例えば、多発性硬化症、関節リウマチ、乾癬性関節炎、変性関節疾患、脊椎関節症spondouloarthropathy、痛風性関節症、全身性エリテマトーデス、若年性関節炎、関節リウマチ、変形性関節症、骨粗鬆症、糖尿病例えば、インスリン依存性糖尿病または若年発症糖尿病、月経性痙攣、嚢胞性線維症、炎症性腸疾患、過敏性腸症候群、クローン病、粘液結腸炎、潰瘍性大腸炎、胃炎、食道炎、膵炎、腹膜炎、アルツハイマー病、ショック、強直性脊椎炎、胃炎、結膜炎、膵炎急性および慢性、多発性臓器不全症候群例えば、敗血症または外傷に対して二次性、心筋梗塞、アテローム動脈硬化症、脳卒中、再灌漑流障害例えば、心臓肺バイパスまたは腎臓透析による、急性糸球体腎炎、血管炎、温熱損傷すなわち、日焼け、壊死性腸炎、顆粒球輸液関連症候群、および/またはシェーグレン症候群が挙げられる。皮膚の例示的な炎症性の病態としては、例えば、湿疹、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、じんましん、強皮症、乾癬、および急性の炎症成分を有する皮膚炎が挙げられる。別の実施態様において、本明細書に記載されるポリマー-薬剤の複合体、粒子、組成物、または方法を用いて、喘息、気管支炎、肺線維症、アレルギー性鼻炎、酸素毒性、肺気腫、慢性気管支炎、急性呼吸促迫症候群、および任意の慢性閉塞性肺疾患COPDを含むアレルギーおよび呼吸器系の病態を治療または予防し得る。このポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物を用いて、B型肝炎およびC型肝炎を含む慢性肝炎感染を治療してもよい。ある実施形態では、本明細書に記載されるポリマー-薬剤の複合体、粒子、組成物、または方法を用いて、臓器-組織自己免疫疾患例えば、レイノー症候群、強皮症、重症筋無力症、移植片拒絶、エンドトキシンショック、敗血症、乾癬、湿疹、皮膚炎、多発性硬化症、自己免疫性甲状腺炎、ぶどう膜炎、全身性エリテマトーデス、アジソン病、自己免疫性多腺性疾患自己免疫性多腺性症候群としても公知、およびグレーブス病などの自己免疫疾患および/または自己免疫疾患と関連した炎症を治療してもよい。ある実施形態では、核酸剤-ポリマーの複合体、粒子または組成物例えば、表Bに列挙される遺伝子を標的するsiRNAを含むを投与して、例えば、表Bに列挙される関連の疾患を治療または予防する。心血管系疾患別の態様では、本発明は、対象における疾患または障害を治療または予防する方法であって、ここでこの障害が心血管系疾患である方法を特徴とする。この方法は、本明細書に記載される複合体、粒子または組成物の有効量を投与して、これによってこの疾患または障害を治療することを包含する。ある実施形態では、この複合体、粒子および組成物は、第一選択、第二選択、または補助療法の一部として用いられてもよく、また単独でまたは1つ以上の追加の処置投与計画と併用して用いられてもよい。ある実施形態では、この開示された方法は、心血管系疾患の予防および治療に有用であり得る。本明細書に記載されるポリマー-薬剤の複合体、粒子、組成物および方法を用いて治療または予防され得る心血管系疾患としては、心筋症または心筋炎:例えば、特発性心筋症、代謝性心筋症、アルコール性心筋症、薬剤誘発性心筋症、虚血性心筋症、および高血圧性心筋症が挙げられる。本明細書に記載されるポリマー-薬剤の複合体、粒子、組成物、および方法を用いて治療可能または予防可能な疾患はまた、大動脈、冠動脈、頚動脈、脳血管性動脈、腎動脈、腸骨動脈、大腿動脈、および膝窩動脈などの主要血管のアテローム性障害大血管性疾患でもある。ある実施形態では、治療または予防することのできる他の脈管系疾患としては、血小板凝集、網膜細動脈、糸球体細動脈、神経栄養血管、心細動脈に関連したもの、ならびに眼の毛細血管床、腎臓、心臓、ならびに中枢および末梢神経系と関連したものが挙げられる。本明細書に記載されるポリマー-薬剤の複合体、粒子、組成物、および方法はまた、個体の血漿におけるHDLレベルの上昇に用いられ得る。本明細書に記載されるポリマー-薬剤の複合体、粒子、組成物、および方法を用いて治療され得るさらに他の障害としては、例えば、冠動脈介入後の再狭窄、ならびに高密度および低密度コレステロールの異常なレベルと関連した障害が挙げられる。ある実施形態では、ポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物は、血管形成術を受けているかまたは受けたことのある対象に投与されてもよい。一実施態様において、ポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物は、ステント設置を用いる血管形成術を受けているか、または受けた対象に投与される。いくつかの実施態様において、ポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物は、ステントのコーティングとして用いられてもよい。ある実施形態では、ポリマー-薬剤の複合体、粒子、または組成物は、ステントのインプラントの間に、例えば別個の静脈内投与として、ステントのためのコーティングとして用いてもよい。ある実施形態では、核酸剤-ポリマーの複合体、粒子または組成物、例えば、表Cに列挙される遺伝子を標的するsiRNAを含むを投与して、例えば、表Cに列挙される関連の疾患を治療または予防する。本発明の少なくとも1つの実施態様に関するいくつかの態様を記載してきたが、当業者には、種々の変更、改変、および改良が容易に行われることが、認められるべきである。そのような変更、改変、および改良は、本開示の一部であることが意図され、本発明の精神および範囲内であることが意図される。従って、上記の説明および図は、単なる例に過ぎない。別段の定義がない限り、本明細書で用いられるすべての技術用語および科学用語は、本発明の属する技術分野における当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書で言及されるすべての刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は、そのすべての内容が全体として参照によって援用される。矛盾がある場合、定義を含めた本明細書が支配するものとする。加えて、材料、方法、および実施例は、説明のために過ぎず、限定と意図されるものではない。実施例実施例1:5050PLGAの精製および特徴付けステップA:機械的撹拌器を装備した3L丸底フラスコに、5050PLGA300g、Mw:7.8kDa;Mn:2.7kDaおよびアセトン900mLを投入した。混合物を室温で1時間撹拌して、透明黄色溶液を生成した。ステップB:機械的撹拌器を装備した底に出口を有する22Lジャケット反応器に、MTBE9.0L、5050PLGAの質量に対して30体積を投入した。セライト登録商標795gを、約200rpmでオーバーヘッド撹拌しながら溶液に付加して、懸濁液を生成した。この懸濁液に、ステップAからの溶液を1時間に亘って徐々に付加した。ポリマー溶液の付加後、混合物をさらに1時間掻き混ぜて、ポリプロピレンフィルターを通して濾過した。濾過ケーキをMTBE3×300mLで洗浄し、0.5時間状態調節して、残留MTBEが5重量以下1HNMR解析により測定になるまで、周囲温度で風乾した典型的には12時間。ステップC:機械的撹拌器を装備した底に出口を有する12Lジャケット反応器に、アセトン2.1L、5050PLGAの質量に対して7体積を投入した。ステップBからのポリマー/セライト登録商標複合体を、約200rpmでオーバーヘッド撹拌しながら反応器に投入して、懸濁液を生成した。懸濁液を周囲温度でさらに1時間撹拌し、ポリプロピレンフィルターを通して濾過した。濾過ケーキをアセトン3×300mLで洗浄し、併合濾液を0.45mM直列フィルターを通して清澄化して、透明溶液を生成した。この溶液を、約1000mLに濃縮した。ステップD:機械的撹拌器を装備した底に出口を有する22Lジャケット反応器に、水9.0L、30体積を投入し、冷却装置を用いて0~5°Cに温度を下げた。ステップCからの溶液を、約200rpmでオーバーヘッド撹拌しながら2時間掛けて徐々に付加した。溶液の付加後、混合物をさらに1時間撹拌して、ポリプロピレンフィルターを通して濾過した。濾過ケーキを1時間状態調節して、周囲温度で1日風乾し、次いで、3日間真空乾燥して、精製5050PLGAを白色粉末として生成した258g、収率86。1HNMR解析は所望の生成物のものと一致し、そしてカールフィッシャー分析は、0.52重量の水を示した。HPLCAUC、230nmおよびGPCAUC、230nmにより、生成物を分析した。当該プロセスは、より狭い多分散性、すなわちMw:8.8kDaおよびMn:5.8kDaを生じた。実施例2.5050PLGAラウリルエステルの精製および特徴付け機械的撹拌器を装備した12L丸底フラスコに、MTBE4Lおよびヘプタン0.8Lを投入した。混合物を約300rpmで掻き混ぜて、これに、アセトン300mL中の5050PLGAラウリルエステル65gの溶液を滴下した。ゴム状固体が時間経過とともに生成され、最後に、フラスコの底に固まった。上清をデカントして除去し、固体を、25°Cで24時間、真空乾燥して、40gの精製5050PLGAラウリルエステルを白色粉末として得た収率:61.5。1HNMRCDCl3、300MHz:δ525516486468418169150126088。1HNMR解析は、所望の生成物のものと一致した。GPCAUC、230nm:6.02~9.9分、tR=7.91分。実施例3.7525PLGAの精製および特徴付け機械的撹拌器を装備した22L丸底フラスコに、12LのMTBEを投入し、これに、ジクロロメタンDCM、750mL中の7525PLGA150g、約6.6kDの溶液を約300rpmで撹拌して1時間かけて滴下して、ゴム状固体を得た。上清をデカントして除去し、ゴム状固体をDCM3L中に溶解した。溶液を丸底フラスコに移して、濃縮して残渣を得て、これを25°Cで40時間真空乾燥して、94gの精製7525PLGAを白色発泡体として得た収率62.7。1HNMRδ524515491468322160155119。1HNMR解析は、所望の生成物のものと一致した。GPCAUC、230nm:6.02~9.9分、tR=7.37分。実施例4.O-アセチル-5050-PLGAの合成、精製および特徴付けオーバーヘッド撹拌器を装備した2000mL丸底フラスコに、精製5050PLGA220g、Mn:5700およびDCM660mLを投入した。混合物を10分間撹拌して、透明溶液を得た。Ac2O11.0mL、116mmolおよびピリジン9.4mL、116mmolを溶液に付加すると、約0.5°Cの小発熱を生じた。反応を周囲温度で3時間撹拌し、約600mLに濃縮した。溶液を、約200rpmでオーバーヘッド撹拌しながら1時間掛けて、MTBE6.6L、30体積中のセライト登録商標660gの懸濁液に付加した。懸濁液をポリプロプレンフィルターに通して濾過し、濾過ケーキを周囲温度で1日風乾した。それを、1時間オーバーヘッド撹拌しながら、アセトン1.6L、約8体積中に懸濁した。スラリーをフリットガラス漏斗粗目に通して濾過し、濾過ケーキをアセトン3×300mLで洗浄した。併合濾液をセライト登録商標パッドに通して清澄化して、透明溶液を得た。それを約700mLに濃縮して、200rpmで2時間に亘ってオーバーヘッド撹拌しながら、冷水7.0L、0~5°Cに付加した。懸濁液を、ポリプロピレンフィルターに通して濾過した。濾過ケーキを水3×500mLで洗浄し、1時間状態調節して、543gの湿潤ケーキを得た。それを2つのガラストレーに移して、周囲温度で一晩風乾して、338gの湿潤性生物を得て、これを次に、25°Cで2日間、一定重量に真空乾燥して、201gの生成物を白色粉末として得た収率:91。1HNMR解析は、所望の生成物のものと一致した。生成物をHPLCにより分析したAUC、230nmならびにGPCMw:9.0kDaおよびMn:6.3kDa。実施例5.フォレート-PEG-PLGA-ラウリルエステルの合成、精製および特徴付け葉酸-PEG-PLGA-ラウリルエステルの合成は、葉酸とPEGビスアミンSigmaAldrich、n=75、MW3350Daとの直接的カップリングを伴う。低分子量アミンが生成物中に存在する、という可能性のため、PEGビスアミンを精製した。4.9gのPEGビスアミンをDCM25mL、5体積中に溶解し、次いで、激しく掻き混ぜながらMTBE250mL、50体積中に移した。ポリマーが白色粉末として沈澱した。次に、混合物を濾過し、固体を真空下で乾燥して、4.5gの生成物を得た92。固体の1HNMR分析は、きれいなスペクトルを提供した;しかしながら、アミン基へのα-メチレンの統合に基づいて、すべてのアルコール基がアミンに変換されるというわけではなかった63ビスアミン、37モノアミン。精製PEGビスアミンを用いて、フォレート-γCO-NH-PEG-NH2を合成した。葉酸100mg、1.0当量を熱DMSO4.5mL、PEGビスアミンに対して3体積中に溶解した。溶液を周囲温度に冷却し、2-7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル-1,1,3,3-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートHATU、104mg、1.2当量およびN,N-ジイソプロピルエチルアミンDIEA、80μL、2.0当量を付加した。その結果生じた黄色溶液を30分間撹拌し、DMSO3mL、2体積中のPEGビスアミン1.5g、2当量を付加した。過剰量のPEGビスアミンを用いて、PEGビスアミンの二付加物の考え得る生成を回避し、葉酸の変換を改良した。反応物を20°Cで16時間撹拌し、C18カラムRediSep、43g、C18を用いてCombiFlash登録商標により直接精製した。生成物を含有する分画を併合し、CH3CNを真空下で除去した。残留水溶液約200mLをクロロホルム200mL×2で抽出した。合わせたクロロホルム相を約10mLに濃縮し、MTBE中に移して、生成物を黄色粉末として沈澱させた。物質中のあらゆる非反応PEGビスアミンを完全に除去するために、黄色粉末をアセトン200mLで3回洗浄した。残りの固体を真空下で乾燥して、黄色半固体生成物120mgを得た。HPLC分析は純度97を示し、そして1HNMR解析は、生成物が不純物を含有しないことを示した。葉酸-γCO-NH-PEG-NH2を、p-ニトロフェニル-COO-PLGA-CO2-ラウリルと反応させて、葉酸-PEG-PLGA-ラウリルエステルを得た。p-ニトロフェニル-COO-PLGA-CO2-ラウリルを調製するために、PLGA5050ラウリルエステル10.0g、1.0当量およびp-ニトロフェニルクロロホルメート0.79g、2.0当量をDCM中に溶解した。溶解ポリマー溶液に、1部のTEA3.0当量を付加した。その結果生じた溶液を、20°Cで2時間撹拌した。1HNMR解析は、完全変換を示した。次に、反応溶液を4:1MTBE/ヘプタン50体積の溶媒混合物中に移した。生成物は沈澱し、ゴム状になった。上清をデカントして除去し、固体をアセトン20体積中に溶解した。その結果生じたアセトン懸濁液を濾過し、濾液を濃縮、乾燥して、生成物を白色発泡体として得た7.75g、78、Mn=4648GPCを基礎にして。1HNMR解析は、精製物質を示し、検出可能なp-ニトロフェノールは認められなかった。葉酸-γCO-NH-PEG-NH2120mg、1.0当量を、DMSO5mL中に溶解し、TEA3.0当量を付加した。反応混合物のpHは、8~9であった。DMSO1mL中のp-ニトロフェニル-COO-PLGA-CO2-ラウリル158mg、1.0当量を付加し、反応をHPLCによりモニタリングした。16.1分での新規のピーク約40、AUC、280nmが、1時間でHPLCクロマトグラムから観察された。反応混合物の小試料を過剰量の1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデク-7-エンDBUで処理すると、色が直ぐに暗黄色に変わった。この試料のHPLC分析は、p-ニトロフェニル-COO-PLGA-CO2-ラウリルおよび16.1分ピークの完全消失を示した。その代わりに、葉酸-γCO-NH-PEG-NH2の右側におけるピークが出現した。p-ニトロフェニル-COO-PLGA-CO2-ラウリルおよび考え得る生成物は強塩基性条件下では安定でなかった、と結論づけられ得る。16.1分での新規のピークを特定するために、反応混合物の約1/3をCombiFlash登録商標により精製した。当該物質を、最終的に、1:4DMSO/CH3CNの溶媒混合物で溶離した。この物質は黄色であることが観察されたが、これが葉酸含量を示し得る。大量のDMSOが存在したため、この物質は溶液から単離されなかった。非反応の葉酸-γCO-NH-PEG-NH2を含有する分画を合わせ、濃縮して、残渣を得た。この残渣のニンヒドリン試験は陰性結果を生じたが、これは、PEGの末端でのアミン基の欠如を暗示し得る。この観察は、反応の不完全な変換も説明し得る。残りの反応溶液を、CombiFlash登録商標により精製した。前の精製と同様に、推測された黄色生成物がカラムに保持された。0.5TFAを含有するMeOHを用いて、当該物質を溶離した。考え得る生成物を含有する分画を合わせ、濃縮乾燥した。この試料の1HNMR分析は、葉酸塩、PEGおよびラウリル-PLGAの存在を示し、そしてこれらのセグメントの統合は、3つの構成成分すべての1:1:1比という所望の値に近かった。高純度が、HPLCおよびGPC分析の両方から観察された。GPCに基づいたMnは、8.7kDaであった。DMSO中の試料を、MTBE中の沈降により回収した。実施例6.PLGA-PEG-PLGA-核酸製剤複合体の合成トリブロックコポリマーPLGA-PEG-PLGAは、ZentneretalJournalofControlledRelease722001203215により開発された方法を用いて合成される。この方法を用いて得られるPLGAの分子量は、約3kDaである。ChenetalInternationalJournalofPharmaceutics2882005207218により報告された同様の方法が、1~7kDaの範囲のPLGA分子量を合成するために用いられる。LA/GA比は、典型的には、1:1の比であるが、これに限定されない。最小PEG分子量は2kDaで、上限は30kDaである。PEGの好ましい範囲は、3~12kDaである。PLGAの分子量は、最小値4kDaおよび最大値30kDaである。PLGAの好ましい範囲は、7~20kDaである。核酸製剤、例えばRNA製剤は、適切なリンカーすなわち、実施例で列挙されるようなものを介してPLGAと複合体化されて、ポリマー核酸製剤複合体を形成する。さらに、同一の核酸製剤または異なる核酸製剤が、もう一方のPLGAと結合されて、2つの同一核酸製剤または2つの異なる核酸製剤を有する二元性核酸製剤-ポリマー複合体を形成し得る。粒子は、PLGA-PEG-PLGA単独から、あるいはこのトリブロックコポリマーからなる単一核酸製剤-または二元性核酸製剤-ポリマー複合体から形成され得る。実施例7.ポリカプロラクトン-ポリエチレングリコール-ポリカプロラクトンPCL-PEG-PCL-核酸製剤複合体の合成トリブロックPCL-PEG-PCLは、HuetalJournalofControlledRelease1182007717で報告されたような、触媒すなわち、第一スズオクトアートの存在下での開環重合法を用いて合成される。この合成から得られるPCLの分子量は、2~22kDaの範囲である。GeetalJournalofPharmaceuticalSciences91200214631473による論文で示された非触媒法も、PCL-PEG-PCLを合成するために用いられる。この特定の合成から得られるPCLの分子量は、9~48kDaの範囲である。同様に、CerraietalPolymer301989338343により開発された別の無触媒法は、1~9kDaの範囲のPCLの分子量を有するトリブロックコポリマーを合成するために用いられる。最小PEG分子量は2kDaで、上限は30kDaである。PEGの好ましい範囲は、3~12kDaである。PCL分子量は、最小値4kDaおよび最大値30kDaである。PCLの好ましい範囲は、7~20kDaである。核酸製剤、例えばRNA製剤は、適切なリンカーすなわち、実施例で列挙されるようなものを介してPCLと複合体化されて、核酸製剤-ポリマー複合体を形成する。さらに、同一核酸製剤または異なる核酸製剤が、もう一方のPCLと結合されて、2つの同一核酸製剤または2つの異なる核酸製剤を有する二元性核酸製剤-ポリマー複合体を形成し得る。粒子は、PCL-PEG-PCL単独から、あるいはこのトリブロックコポリマーからなる単一核酸製剤-または二元性核酸製剤-ポリマー複合体から形成され得る。実施例8.ポリラクチド-ポリエチレングリコール-ポリラクチドPLA-PEG-PLA-核酸製剤複合体の合成トリブロックPLA-PEG-PCLコポリマーは、ChenetalPolymersforAdvancedTechnologies142003245253で報告された触媒すなわち、第一スズオクトアートを用いる開環重合法を用いて合成される。生成され得るPLAの分子量は、6~46kDaの範囲である。低分子量範囲すなわち、1~8kDaは、ZhuetalJournalofAppliedPolymerScience39199019により示された方法を用いることにより達成され得る。最小PEG分子量は2kDaで、上限は30kDaである。PEGの好ましい範囲は、3~12kDaである。PLA分子量は、最小値4kDaおよび最大値30kDaである。PLAの好ましい範囲は、7~20kDaである。核酸製剤、例えばRNA製剤は、適切なリンカーすなわち、実施例で列挙されるようなものを介してPLAと複合体化されて、核酸製剤-ポリマー複合体を形成する。さらに、同一核酸製剤または異なる核酸製剤が、もう一方のPLAと結合されて、2つの同一核酸製剤または2つの異なる核酸製剤を有する二元性核酸製剤-ポリマー複合体を形成し得る。粒子は、PLA-PEG-PLA単独から、あるいはこのトリブロックコポリマーからなる単一核酸製剤-または二元性核酸製剤-ポリマー複合体から形成され得る。実施例9.p-ジオキサノン-コ-ラクチド-ポリエチレングリコール-p-ジオキサノン-コ-ラクチドPDO-PEG-PDO-核酸製剤複合体の合成トリブロックPDO-PEG-PDOは、BhattarietalPolymerInternational522003614により開発された方法を用いて、触媒第一スズ2-エチルヘキサノエートの存在下で合成される。この合成から得られるPDOの分子量は、2~19kDaの範囲である。最小PEG分子量は2kDaで、上限は30kDaである。PEGの好ましい範囲は、3~12kDaである。PDO分子量は、最小値4kDaおよび最大値30kDaである。PDOの好ましい範囲は、7~20kDaである。核酸製剤、例えばRNA製剤は、適切なリンカーすなわち、実施例で列挙されるようなものを介してPDOと複合体化されて、核酸製剤-ポリマー複合体を形成する。さらに、同一核酸製剤または異なる核酸製剤が、もう一方のPDOと結合されて、2つの同一核酸製剤または2つの異なる核酸製剤を有する二元性核酸製剤-ポリマー複合体を形成し得る。粒子は、PDO-PEG-PDO単独から、あるいはこのトリブロックコポリマーからなる単一核酸製剤-または二元性核酸製剤-ポリマー複合体から形成され得る。実施例10.多官能性PLGA/PLAベースのポリマーの合成容易に生分解可能であり、その構成成分がすべて生体許容可能構成成分であるすなわちヒトにおいて安全であることが知られているポリマー鎖全体を通して分散される官能基を有するPLGA/PLA関連ポリマーを合成し得る。具体的には、3-S-[ベンキシルオキシカルボニルメチル]-1,4-ジオキサン-2,5-ジオンBMDから得られるPLGA/PLA関連ポリマーが合成され得る下記の構造参照下記の構造は、カッコ内に示されたモノマー単位のランダムコポリマーを表すよう意図される。R基の例としては、負電荷、H、アルキルおよびアリールアルキルが挙げられる。1.BMDから得られるPLGA/PLA関連ポリマー2.BMDおよび3,5-ジメチル-1,4-ジオキサン-2,5-ジオンビス-DL-乳酸環状ジエステルを有するPLGA/PLA関連ポリマー3.BMDおよび1,4-ジオキサン-2,5-ジオンビス-グリコール酸環状ジエステルを有するPLGA/PLA関連ポリマー好ましい一実施形態では、BMDおよびビス-DL-乳酸環状ジエステルから得られるPLGA/PLAポリマーは、BMDおよびラクチドの割合を変えることにより、多数の異なるペンダント官能基を有して調製される。参照のために、各ポリマーが8kDaという数平均分子量Mnを有するとされる場合には、BMDから得られる100重量であるポリマーは、約46個のペンダントカルボン酸基を有する1個の酸基/0.174kDa。同様に、BMDから得られる25重量および3,5-ジメチル-1,4-ジオキサン-2,5-ジオンビス-DL-乳酸環状ジエステルから得られる75重量であるポリマーは、約11個のペンダントカルボン酸基を有する1個の酸基/0.35kDa。これは、官能化されない8kDaPLGAポリマーに関するちょうど1個の酸基と、線状PLGA/PLAポリマーの末端基の官能化中に付加される4部位が存在する場合の1個の酸基/2kDa、あるいは4kDa分子が結合される4個の官能基を有する場合の1個の酸基/1kDaに匹敵する。具体的には、BMDから得られるPLGA/PLA関連ポリマーは、KimuraetalMacromolecules21198833383340による方法を用いて開発される。このポリマーは、各単位上にペンダントカルボン酸基を伴うグリコール酸とリンゴ酸の反復単位を有するROCOCH2OCOCHR1OnH:ここで、RはHであるか、あるいはアルキルまたはPEG単位等であり、R1はCO2Hである。各174質量単位に関して1個のペンダントカルボン酸基が存在する。ポリマーの分子量およびポリマー多分散性は、異なる反応条件すなわち、開始剤の種類、温度、加工処理条件に伴って変わり得る。Mnは、2~21kDaの範囲であり得る。さらにまた、ポリマー中の2つのモノマー構成成分すべてに関してペンダントカルボン酸基が存在し得る。前に引用された参考文献に基づいて、NMR解析は、エステル交換または他の機序により検出可能量のβ-マレートポリマーは生成されない、ということを示した。BMDおよび3,5-ジメチル-1,4-ジオキサン-2,5-ジオンビス-DL-乳酸環状ジエステルから得られる別の型のPLGA/PLA関連ポリマーは、KimuraetalPolymer19933417411748により開発された方法を用いて合成される。彼等は、利用された最高BMD比率は15molであり、これは、14mol16.7重量のBMD由来単位を含有するポリマーということになることを示した。BMD組入れのこのレベルは、約8個のカルボン酸残基/8kDaポリマー1個のカルボン酸残基/ポリマー1kDaを表す。BMD単独の使用と同様に、β-マレート由来ポリマーは検出されなかった。さらにまた、Kimura等は、高ポリマー分子量36~67kDaの使用にもかかわらず、ガラス転移温度Tgは低20°C台である、と報告した。Tg’は、カルボン酸が遊離していてもまたは依然としてベンジル基であっても、これらのポリマーに関して20~23°Cであった。より堅くなる要素すなわち、強力な水素結合を形成し得るカルボン酸の含有は、Tgを増大するはずである。この具体的ポリマーから得られるポリマー薬剤複合体から形成される任意の粒子の凝集の考え得る防止は、考え得るより低いTg値のため、評価されなければならない。種々の量のグリコール酸リンゴ酸ベンジルエステルを含有するPLA-PEGポリマーを合成するための別の方法は、LeeetalJournalofControlledRelease942004323335により報告された3,5-ジメチル-1,4-ジオキサン-2,5-ジオンビス-DL-乳酸環状ジエステルの存在下でのBMDの重合を包含する。彼等は、重合に用いられるBMDの重量によって、合成ポリマーが、約5~8kDaのPLA鎖中に1.3~3.7カルボン酸単位を含有する総ポリマー重量は約11~13kDaで、PEGは5kDaである、ということを報告した。一ポリマー中には、3.7カルボン酸単位/疎水性ブロックが存在し、この場合、BMDは疎水性ブロックの重量の約19重量を表す。BMDのラクチドに対する比は、KimuraetalPolymer19933417411748により観察されたものと同様であり、酸残基は、その結果生じるポリマーにおいて類似していた約1酸単位/疎水性ポリマー1kDa。より容易に加水分解可能であるBMDで官能化されるポリマーは、KimuraetalInternationalJournalofBiologicalMacromolecules251999265271により開発された方法を用いて調製される。彼等は、加水分解の速度が存在する遊離酸基の数に関係したポリマーがより多くの酸基を有するほど、加水分解は速い、ということを報告した。ポリマーは、約5または10molのBMD含量を有した。さらにまた、LeeetalJournalofControlledRelease942004323335による参考文献では、ポリマーの加水分解速度は、最高濃度のペンダント酸基で最速であった19.5重量のBMDを含有するポリマーに関しては6日、0重量のBMDを含有するポリマーに関しては20日。核酸製剤、例えばDNA製剤またはRNA製剤は、PLGA/PLA関連ポリマーBMD含有と共役され得た上記実施例を参照。同様に、粒子は、このような核酸製剤-ポリマー複合体から調製され得た。実施例11.リンゴ酸ベンジルエステルのβ-ラクトンを用いて調製されるポリマーの合成WangetalColloidPolymerSci2006285273281により開発されたように、MePEGOHを、DL-ラクチド乳酸の環状ジエステルを有するRS-β-ベンジルマロラクトネートβ-ラクトンと重合して、MePEG乳酸リンゴ酸MeOCH2CH2O[OCCCHCH3O]m[COCH2CHCO2HO]を含有するポリマーを得ることにより、ポリマーを調製し得る。これらのポリマーは、抗レベルの酸性基を含有するためより速く分解する可能性がある。β-ラクトンの使用は、3-[ベンジルオキシカルボニルメチル]-1,4-ジオキサン-2,5-ジオンを用いて得られるものとは異なるポリマーを生成する、ということに留意すべきである。これらのポリマーにおいて、カルボン酸基は、メチレンスペーサーを伴わずに、ポリマー鎖に直接的に結合される。β-ラクトンから直接的に調製され得る別のポリマーは、OuhibetalChDesMonoeresPolym2005125により報告された。その結果生じるポリマーすなわち、ポリ-3,3-ジメチルリンゴ酸は、遊離酸として水溶性であり、ポリマー鎖の各単位上にペンダントカルボン酸基を有しており、その上、3,3-ジメチルリンゴ酸は非毒性分子である、と報告されている。CoulembieretalMacromolecules20063940014008により示されたように、3,5-ジメチル-1,4-ジオキサン-2,5-ジオンDDDおよびβ-ブチロラクトンの存在下で、4-ベンジルオキシカルボニル-,3,3-ジメチル-2-オキセタノンを重合して、ペンダントカルボン酸基を有するブロックコポリマーを生成し得る。この重合反応を、エチレングリコールの存在下で、カルベン触媒を用いて実行した。用いた触媒は、トリアゾールカルベン触媒であったが、これは、狭い多分散性を有するポリマーをもたらす。実施例12.2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミンの合成、精製および特徴付け25mL丸底フラスコ中で、2,2’-ジチオジピリジン2.0g、9.1mmolを、酢酸0.3mLを有するメタノール8mL中に溶解した。システアミン塩酸塩520mg、4.5mmolをメタノール5mL中に溶解し、12時間掛けて混合物中に滴下した。混合物を一晩撹拌した。次いで、それを真空下で濃縮して、黄色油を得た。その油をメタノール5mL中に溶解し戻して、次に、ジエチルエーテル100mL中に沈澱させた。沈殿物を濾し取り、乾燥した。次いでそれをメタノール5mL中に再溶解して、ジエチルエーテル100mL中で再沈澱させた。この手順をさらに2回反復した。淡黄色固体を濾し取り、乾燥して、最終生成物を得て0.74g、収率74、これをさらに精製することなく用いた。1HNMR解析は、所望の生成物のものと一致した。実施例13.3-2-ピリジン-2-イルジスルファニルプロピオン酸の合成、精製および特徴付け250mL丸底フラスコ中で、2,2’-ジピリジルジスルフィド8.3g、38mmolを、酢酸1.5mLを有するメタノール100mL中に溶解した。3-メルカプトプロピオン酸2.0g、19mmolをその溶液に付加し、周囲温度で18時間撹拌した。溶媒を真空下で除去して、黄色油および固体混合物を得た。反応混合物を、DCM:MeOH30:1を用いてフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。次に、それを再結晶化によりさらに精製して、白色結晶を得た1.2g、29。1HNMR解析は、所望の生成物のものと一致した。実施例14.スクシネート-5050PLGA-mPEG2kの合成、精製および特徴付け50mL丸底フラスコ中で、mPEG2k-5050PLGA9kMW=11k、5.0g、0.45mmol、無水コハク酸91mg、0.91mmolおよびDMAP56mg、0.45mmolをジクロロメタン15mL中に溶解し、周囲温度で18時間撹拌した。ジエチルエーテル100mL中のセライト登録商標15gの懸濁液中で、ポリマーを沈澱させた。セライト登録商標を濾し取り、一晩乾燥させた。アセトン50mLをセライト登録商標に付加し、12時間撹拌した。次にそれを濾過し、アセトンで洗浄して、約5mLに真空濃縮した。それを、ジエチルエーテル50mL中で析出させて、褐色脂性固体を褐色ゴムとともに得た。そのゴムを、固化するまで約15分冷凍庫-20oC中に保持した。次いで、真空下で乾燥して、薄褐色固体を得た3.2g、収率58。1HNMR解析は、所望の生成物のものと一致した。実施例15.N,N-ジエチルジエチレントリアミン-スクシンアミド-5050PLGA-mPEG2kの合成、精製および特徴付け50mL丸底フラスコ中で、mPEG2k-5050PLGA9k-スクシネート2.0g、0.26mmolをDCM10mL中に溶解した。反応混合物に、N,N-ジエチルジエチレントリアミン210mg、1.3mmol、NHS61mg、0.53mmolおよびEDC82mg、0.53mmolを付加した。次にそれを、室温で4時間撹拌した。反応混合物にEt2O100mLを付加して、ポリマーを析出させた。次いで、それをEt2O20mLですすぎ、真空乾燥して、薄褐色固体を得た1.9g、収率95。1HNMR解析は、所望の生成物のものと一致した。実施例16.2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ-5050-PLGA-O-アセチルの合成、精製および特徴付け50mL丸底フラスコ中で、5050PLGA6.3k-O-アセチル2.0g、0.32mmol、NHS66mg、0.57mmolおよびEDC122mg、0.63mmolをDMF12mL中に溶解した。反応混合物に、DMF6mL中の2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミン127mg、0.57mmolおよびジイソプロピルエチルアミン82mg、0.63mmolを付加した。次に、反応混合物を室温で4時間撹拌した。水40mLを反応混合物に付加して、ゴム状固体を得た。ゴム状固体をDCM15mL中に溶解し、0.1HCl水溶液50mL×2で2回、その後ブライン100mLで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥して、さらに、冷エーテル100mL中での沈澱により精製した。溶媒を除去し、物質を真空下で乾燥して、白色固体を得た1.4g、収率68。1HNMR解析は、所望の生成物のものと一致した。実施例17.N,N-ジエチルジエチレントリアミン5050PLGA-O-アセチルの合成、精製および特徴付け50mL丸底フラスコ中で、5050PLGA-O-アセチルMw:16kDa、2.0g、0.13mmolをDCM10mL中に溶解した。反応混合物に、N,N-ジエチルジエチレントリアミン100mg、0.63mmol、NHS29mg、0.25mmolおよびEDC39mg、0.25mmolを付加した。次に、それを室温で4時間撹拌した。冷Et2O100mLを反応混合物に付加して、ポリマーを沈澱させた。沈澱ポリマーを真空下で乾燥して、白色発泡体を得た。1HNMR解析は、所望の生成物のものと一致した。実施例18.スクシニミジル-N-ヒドロキシエステル5050PLGA-O-アセチルの合成、精製および特徴付け50mL丸底フラスコ中で、5050PLGA9k-O-アセチル2.0g、0.33mmolをDCM12mL中に溶解した後、NHS78mg、0.67mmolおよびEDC100mg、0.67mmolを付加した。反応混合物を、室温で4時間撹拌した。ポリマーをDCM中で溶媒和化して、冷エーテル中で3回沈澱させることにより50×3mL、精製した。固体を真空下で乾燥して、1HNMRにより解析した。実施例19.2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ-mPEG10kの合成、精製および特徴付けアミン基末端化mPEG10k5.5mg、0.0053mmolを、PBS緩衝液pH7.2中で3時間、N-スクシニミジル3-2-ピリジルジチオプロピオネート1.12mg、0.032mmolと反応させて、透析膜分子量カットオフ:3500により精製する。精製物質を凍結乾燥して、1HNMRにより解析する。実施例20.2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルプロパノエート-5050-PLGA-mPLGA2kの合成、精製および特徴付け50mL丸底フラスコ中で、5050PLGA9k-O-mPEG2kMw:11kDa、1.0g、0.09mmolをDCM8mL中に溶解した。反応混合物に、3-2-ピリジン-2-イルジスルファニルプロピオン酸30mg、0.14mmol、NHS20mg、0.1mmolおよびEDC22mg、0.17mmolを付加した。次に、それを室温で4時間撹拌した。冷Et2O100mLを反応混合物に付加して、ポリマーを析出させた。沈澱ポリマーを真空下で乾燥して、白色発泡体を得た。1HNMR解析は、所望の生成物のものと一致した。実施例21.アジド末端化-PEGリンカー-5050-PLGA-O-アセチルの合成、精製および特徴付け50mL丸底フラスコ中で、5050PLGA-O-アセチル2.0g、0.13mmolをDCM10mL中に溶解する。反応混合物に、アジド-PEG8-OH40mg、0.13mmol、NHS29mg、0.25mmolおよびEDC39mg、0.25mmolを付加する。次いでそれを、室温で4時間撹拌する。次に冷Et2O100mLを反応混合物に付加して、ポリマーを析出させる。沈澱ポリマーを真空下で乾燥して、白色発泡体を得る。1HNMR解析を実行して、所望の生成物の同一性を確定する。実施例21a.グルタミン酸-PLGA5050-O-アセチルの合成、精製および特徴付け500mL丸底フラスコに、5050PLGA-O-アセチル40g、5.88mmol、ジベンジルグルタメート3.74g、7.35mmolおよびDMF120mL、3体積を投入し、10分間混合させて透明溶液を得た。CMPI2.1g、8.23mmolおよびTEA2.52mLを付加し、溶液を周囲温度で3時間撹拌した。黄色っぽい溶液を、0.5時間に亘ってオーバーヘッド撹拌しながら、MTBE2.0L中のセライト登録商標120gの懸濁液に付加した。固体を濾過し、MTBE300mLで洗浄して、25°Cで16時間、真空乾燥した。次に、固体をアセトン400mL、10体積中に懸濁して、0.5時間撹拌し、濾過して、濾過ケーキをアセトン3×100mLで洗浄した。合わせた濾液を150mLに濃縮して、0.5時間に亘ってオーバーヘッド撹拌しながら、冷水3.0L、0~5oCに付加した。その結果生じた懸濁液を2時間撹拌し、PPフィルターを通して濾過した。濾過ケーキを3時間風乾し、次いで、28°Cで16時間真空乾燥して、生成物ジベンジルグルタメート5050PLGA-O-アセチルを得た40g、収率:95。1HNMR解析は、ベンジル芳香族陽子のラクチドのメタン陽子に対する比が10:46であることを示した。HPLC分析は純度96AUC、227nmを示し、そしてGPC分析はMw8.9kDaおよびMn6.5kDaを示した。ジベンジルグルタメート5050PLGA-O-アセチル40gを酢酸エチル400mL中に溶解して、黄色っぽい溶液を得た。木炭10gを混合物に付加し、周囲温度で1時間撹拌した。溶液をセライト登録商標60mLのパッドを通して濾過して、無色濾液を得た。濾過ケーキを酢酸エチル3×50mLで洗浄して、合わせた濾液を400mLに濃縮した。活性炭上パラジウムPd/C、5重量、4.0gを付加し、混合物を1分間真空除去して、バルーンを用いてH2で満たし、反応を周囲温度で3時間撹拌した。溶液をセライト登録商標パッドを通して濾過し100mL、濾過ケーキをアセトン3×50mLで洗浄した。併合濾液は灰色を有し、これを200mLに濃縮した。溶液を、0.5時間に亘ってオーバーヘッド撹拌しながら、MTBE2.0L中のセライト登録商標120gの懸濁液に付加した。懸濁液を周囲温度で1時間撹拌し、PPフィルターを通して濾過した。濾過ケーキを、周囲温度で16時間乾燥し、アセトン400mL中に懸濁して、0.5時間撹拌した。溶液をPPフィルターを通して濾過し、濾過ケーキをアセトン3×50mLで洗浄した。あらゆる残留Pdを除去するために、マクロ多孔性ポリスチレン-2,4,6-トリメルカプトトリアジン樹脂MP-TMT、2.0g、Biotage、能力:0.68mmol/gを、オーバーヘッド撹拌しながら周囲温度で16時間、付加した。溶液を、セライト登録商標パッドを通して濾過して、薄灰色溶液を得た。溶液を200mLに濃縮し、0.5時間に亘ってオーバーヘッド撹拌しながら、冷水3.0L、0~5oCに付加した。その結果生じた懸濁液を5°C未満で1時間撹拌し、PPフィルターを通して濾過した。濾過ケーキを12時間風乾し、2日間真空乾燥して、半ガラス質固体を得たグルタミン酸-PLGA5050-O-アセチル、38g、収率:95。HPLC分析は99.6の純度を示しAUC、227nm、そしてGPC分析はMw8.8kDaおよびMn6.6kDaを示した。実施例21b.ビス-N1-スペルミングルタミド-5050PLGA-O-アセチルの合成および精製グルタミン酸-PLGA5050-O-アセチル1.4g、0.26mmol、N1-PLGA-N5,N10,N14-トリ-Cbz-スペルミン630mg、1.0mmol、DCC160mg、0.77mmol、NHS89mg、0.77mmolおよびTEA160mg、1.5mmolをDCM50mL中に溶解し、室温で一晩撹拌した。DCMを真空除去した。DMF溶液をジエチルエーテル50mLに付加して、黄色物質を単離した。次いで、それをMeOH25mLで2回洗浄し、その後、水25mLで洗浄した。次にそれを凍結乾燥して、白色固体ビス-N1-PLGA-N5,N10,N14-トリ-Cbz-スペルミングルタミド-5050PLGA-O-アセチル1.3g、収率93を得た。ビス-N1-PLGA-N5,N10,N14-トリ-Cbz-スペルミングルタミド-5050PLGA-O-アセチル1.0g、0.15mmol、MW6,600を、酢酸5mL中の33HBr中に溶解して、透明褐色溶液を得て、反応混合物を室温で2時間撹拌した。次にそれを、ジエチルエーテル100mLに付加した。固体をMeOH30mLですすいだ。それをデカントし、水30mLで再洗浄した。次いでそれを凍結し、凍結乾燥して、淡黄色固体を得た0.79g、収率79。実施例22.オリゴヌクレオチド-C6-SS-5050PLGA-O-アセチルの合成、精製および特徴付けC6-チオール修飾オリゴヌクレオチドsiRNA、0.2mg、14.7nmolを、95:5DMSO:TE緩衝液1mLの溶媒混合物中の実施例16で調製したような2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ-5050-PLGA-O-アセチル10mg、1.58μmolと複合体化させた。反応混合物を、65°Cで2時間、撹拌した。オリゴヌクレオチド-5050-PLGA-O-アセチル複合体を、逆相HPLCおよびゲル電気泳動により分析した。実施例22a.オリゴヌクレオチド-C6-SS-5050PLGA-O-アセチルの合成、精製および特徴付けEGFP配列の一部分と実質的に同一のヌクレオチド配列を有し、UUオーバーハングを有する19塩基対長であり、そして相補的アンチセンス鎖を有するセンス鎖を伴う13.2kDaのMwを有するEGFP増強化緑色蛍光タンパク質に対するC6-チオール修飾オリゴヌクレオチドsiRNA、20mg、1.51μmolを、95:5DMSO:TE緩衝液10mLの溶媒混合物中の実施例16で調製したような2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ-5050-PLGA-O-アセチル85mg、11μmolと複合体化させた。反応混合物を65°Cで3時間撹拌した。オリゴヌクレオチド-5050-PLGA-O-アセチル複合体を逆相HPLCおよびゲル電気泳動により分析した。実施例22b.オリゴヌクレオチド-C6-SS-5050PLGA-O-アセチルの合成、精製および特徴付けルシフェラーゼ配列の一部分と実質的に同一のヌクレオチド配列を有する、UUオーバーハングを有する19塩基対長である、そして相補的アンチセンス鎖を有するセンス鎖を伴うルシフェラーゼに対するC6-チオール修飾オリゴヌクレオチドsiRNA、20mg、1.51μmol、Mw13.6kDaを、95:5DMSO:TE緩衝液10mLの溶媒混合物中の実施例16で調製したような2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ-5050-PLGA-O-アセチル85mg、11μmolと複合体化させた。反応混合物を65°Cで3時間撹拌した。オリゴヌクレオチド-5050-PLGA-O-アセチル複合体を逆相HPLCおよびゲル電気泳動により分析した。実施例23.オリゴヌクレオチド-C6-SS-5050PLGA-O-mPEG2kの合成、精製および特徴付けC6-チオール修飾オリゴヌクレオチドsiRNAまたはDNA、2mg、0.13μmol実施例22で使用を、溶媒混合物20:80、PBS:ACN、pH8、0.6mL中の2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ-5050PLGA-mPEG2k6.9mg、0.625μmolと複合体化させる。反応混合物を、室温で48時間、アルゴン下で撹拌する。オリゴヌクレオチド-5050-PLGA-mPEG2k複合体を、分取陰イオン交換および逆相HPLCにより分析し、精製する。実施例24.粒子形成を介したオリゴヌクレオチド-C6-SS-5050PLGA-O-アセチルの合成、精製および特徴付けC6-チオール修飾オリゴヌクレオチドsiRNAまたはDNA、2mg、0.13μmol実施例22で使用を、緩衝液PBS、pH8、0.4mL中の2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ-5050-PLGA-O-アセチル4mg、0.625μmolを含有する予成形粒子と複合体化させる。反応混合物を、室温で48時間、アルゴン下で撹拌する。オリゴヌクレオチド-5050-PLGA-mPEG2k複合体を、分取陰イオン交換および逆相HPLCにより分析し、精製する。実施例25.オリゴヌクレオチド-C12-アミド-5050PLGA-O-アセチルの合成、精製および特徴付けC12-アミノ修飾オリゴヌクレオチドsiRNAまたはDNA、2mg、0.13μmolを、溶媒混合物20:80、PBS:ACN、pH8、0.4mL中のスクシニミジル-N-ヒドロキシエステル5050PLGA-O-アセチル4mg、0.625μmolと複合体化させる。反応混合物を、室温で48時間、アルゴン下で撹拌する。オリゴヌクレオチド-C12アミド5050-PLGA-O-アセチル複合体を、分取陰イオン交換および逆相HPLCにより分析し、精製する。実施例26.オリゴヌクレオチド-PEG-エステル-5050PLGA-O-アセチルの合成、精製および特徴付けPEG修飾オリゴヌクレオチドsiRNAまたはDNA、2mg、0.13μmolを、DMAP0.625mmolを有するDMSO0.4mL中のスクシニミジル-N-ヒドロキシエステル5050PLGA-O-アセチル4mg、0.625μmolと複合体化させる。反応混合物を、室温で48時間、アルゴン下で撹拌する。オリゴヌクレオチド-C18PEG5050PLGA-O-アセチル複合体を、分取陰イオン交換および逆相HPLCにより分析し、精製する。実施例27.オリゴヌクレオチド-SS-mPEGの合成および精製C6-チオール修飾オリゴヌクレオチドsiRNAまたはDNA、2mg、0.13μmol実施例22で使用を、緩衝液PBS、pH8、0.4mL中の2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ-mPEG10k6.5mg、0.625μmolと複合体化させる。反応混合物を、室温で48時間、アルゴン下で撹拌する。反応混合物を、Superdex登録商標カラムを用いてHPLCにより分析し、精製する。実施例28.オリゴヌクレオチド-C12-アミド-5050PLGA-mPEG2kの合成、精製および特徴付けC12-アミノ修飾オリゴヌクレオチドsiRNAまたはDNA、2mg、0.13μmol実施例25で使用を、溶媒混合物50:50、PBS:ACN、pH8、0.4mL中のmPEG2k-5050PLGA-スクシネート4mg、0.625μmolと複合体化させる。反応混合物を、室温で48時間、アルゴン下で撹拌する。オリゴヌクレオチド-C12アミド5050-PLGA-mPEG2k複合体を、分取陰イオン交換および逆相HPLCにより分析し、精製する。実施例29.オリゴヌクレオチド-PEG-エステル-5050PLGA-mPEG2kの合成、精製および特徴付けPEG修飾オリゴヌクレオチドsiRNAまたはDNA、2mg、0.13μmol実施例26で使用を、DMAP0.625mmolを有する溶媒混合物50:50、PBS:ACN、pH8、0.4mL中のmPEG2k-5050PLGA-スクシネート4mg、0.625μmolと複合体化させる。反応混合物を、室温で48時間、アルゴン下で撹拌する。オリゴヌクレオチド-C18PEG5050PLGA-mPEG2k複合体を、分取陰イオン交換および逆相HPLCにより分析し、精製する。実施例30.オリゴヌクレオチド-C6-トリアゾール-PEG-5050PLGA-O-アセチルの合成、精製および特徴付け10μLの予錯化CuIを、C6-アルキン修飾オリゴヌクレオチドsiRNAまたはDNA1~4pmolsiRNAまたはDNA、10mMトリスおよびアジド末端化-PEG-5050PLGA-O-アセチル溶液10μL;5mM10mMTrisで希釈:DMSO中0.1Nのストックからの5tBuOHを有する実施例21の反応混合物に付加する10mM;1mgCuBr99.99を、tert-BuOH:DMSO1:3中の10mMTBTAトリスベンジルトリアゾリルメチルアミンリガンド700μL中に溶解。試料を、室温で2時間撹拌する。反応混合物を、陰イオン交換および逆相HPLCにより分析し、精製する。実施例31.オリゴヌクレオチド-PEG-トリアゾール-PEG-5050PLGA-O-アセチルの合成、精製および特徴付け10μLの予錯化CuIを、アルキン-PEG-修飾オリゴヌクレオチドsiRNAまたはDNA1~4pmolsiRNAまたはDNA、10mMトリスおよびアジド末端化-PEG-5050PLGA-O-アセチル溶液10μL;5mM10mMTrisで希釈:DMSO中0.1Nのストックからの5tBuOHを有する実施例21の反応混合物に付加する10mM;1mgCuBr99.99を、tert-BuOH:DMSO1:3中の10mMTBTAトリスベンジルトリアゾリルメチルアミンリガンド700μL中に溶解。試料を、室温で2時間撹拌する。反応混合物を、陰イオン交換および逆相HPLCにより分析し、精製する。実施例31a.トリメチルプロパンアミニウムPVA陽イオン性PVAの合成、精製および特徴付けPVA0.056mmol、80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichを65°CでDMSO5mL中に溶解し、その後、水素化ナトリウム12.5mmolを付加した。反応混合物を1時間撹拌し、その後、グリシジルトリメチルアンモニウムクロリド13mmolを付加した以下のスキーム参照。反応混合物を、65°Cで一晩撹拌した。反応混合物を5日間透析し、凍結乾燥して、薄褐色生成物を得た。その生成物を、1HNMRにより解析した。陽イオン性PVA、例えば陽イオン性PVACM-318KurarayC10H21N2O.C4H6O2.C2H4O.Cl×1-プロパンアミニウム、N,N,N-トリメチル-s-[2-メチル-1-オキソ-2-プロペン-1-イルアミノ]-クロライド1:1、エタノールおよび酢酸エテニルを有するポリマーも、Kurarayから購入し得る。実施例32.陽イオン性PVAを含む、ナノ沈澱を介したsiRNA含有ペギル化粒子の処方および特徴付けO-アセチル5050PLGA60mg、54.5重量実施例4、コポリマーmPEG2k-PLGA40mg、36.4重量、Mw11kDaおよびsiRNA10mg、Mw14,929を、トリス-EDTA緩衝液:アセトニトリルの溶媒混合物中に、1:4の比で溶解した。ポリマーの総濃度は、1.0重量であった。別個の溶液で、0.3w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPsおよび0.2w/v陽イオン性PVAKuraray実施例65のコメント参照86~91加水分解化、粘度17~27cPsを水に溶解した。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。有機溶媒を、溶液を2~3時間撹拌することにより除去した。次に、粒子を10体積の緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。RiboGreen登録商標蛍光検定を用いて、siRNAの負荷を定量した実施例70b参照。RiboGreen登録商標試薬に関する較正曲線を作成するための標準として、RNAを用いた。励起波長480nmおよび発光波長520nmで、siRNAの蛍光を測定した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=119nmPDI=0.142Dv50=94.9nmDv90=191nmsiRNA負荷:1w/w実施例32a.陽イオン性PVAを含む、ナノ沈澱を介したsiRNA含有ペギル化粒子の処方および特徴付けポリマーO-アセチルPLGA5050120mg、57.1重量実施例4、コポリマーmPEG2k-PLGA80mg、38.1重量、Mw11kDaおよびsiRNA10mg、4.8重量、Mw13.0kDaEGFP配列の一部分と実質的に同一のヌクレオチド配列を有し、UUオーバーハングを伴う19塩基対長であり、そして相補的アンチセンス鎖を有するセンス鎖を伴うを、トリス-EDTA緩衝液:アセトニトリルの溶媒混合物中に、1:4の比で溶解した。ポリマーの総濃度は、1.0重量であった。別個の溶液で、0.3w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPsおよび0.2w/v陽イオン性PVA86~91加水分解化、粘度17~27cPsを水に溶解した。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。次に、粒子を10体積の緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。RiboGreen登録商標蛍光検定を用いて、siRNAの負荷を定量し、標準としてRNAを用いた。励起波長480nmおよび発光波長520nmで、siRNAの蛍光を測定した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=131.5nmPDI=0.156Dv50=123nmDv90=202nmsiRNA負荷:1.1w/w実施例32b.陽イオン性PVAを含む、ナノ沈澱を介したsiRNA含有ペギル化粒子の処方物および特徴付けsiRNA含有ペギル化粒子を、実施例32aに記載されたように調製した。実施例32で用いられるEGFPsiRNAの代わりに、ルシフェラーゼ配列の一部分と実質的に同一のヌクレオチド配列を有し、UUオーバーハングを伴う19塩基対長であり、そして相補的アンチセンス鎖を有するセンス鎖を伴うルシフェラーゼsiRNAMw=13617Daを用いた。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=114.1nmPDI=0.163Dv50=103nmDv90=182nmsiRNA負荷:1.4wt/wt実施例32c.陽イオン性種を伴わないDNA含有ペギル化粒子の生成および特徴付けO-アセチルPLGA505057重量、Mw10kDaおよびmPEG2k-PLGA38重量、Mw11kDaを溶解して、アセトン中の総濃度を1.0ポリマーとした。別個の溶液で、21塩基対を有するDNA5重量、Mw12835を、水中の0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichの溶液中に溶解した。ポリマーアセトン溶液を、239mL/分の総流量でナノ沈澱を介して、撹拌しながら付加した有機対水性相のv/v比=1:8。溶液を2~3時間撹拌することにより、アセトンを除去した。次に、粒子を10体積の水で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=50cm2を用いて濃縮した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=217nmPDI=0.12Dv50=233nmDv90=413nmゼータ電位:-22mV薬剤濃度=0.22mg/mL実施例33.界面活性剤としてPVAを用いた、ナノ沈澱を介した陽イオン性PLGAを含むsiRNA含有ペギル化粒子の生成陽イオン性PLGA60mg、54.5実施例17、mPEG2k-PLGA40mg、36.4重量、Mw11kDaおよびdTdTオーバーハングを伴う22塩基対を有するsiRNA10mg、Mw14929.06を溶解して、溶媒混合物トリス-EDTA緩衝液:アセトニトリル2:8中の総濃度1.0のポリマーを生成した。別個の溶液で、水中の0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichを調製した。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。溶液を2~3時間撹拌することにより、有機溶媒を除去した。次に、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。実施例34.界面活性剤としてPVAを用いた、硫酸プロタミンを含むsiRNA含有ペギル化粒子の生成および特徴付け5050PLGA-O-アセチル60mg、54.5、mPEG2k-5050PLGA9k40mg、36.4重量、Mw11kDaおよびsiRNA実施例3110mg、Mw14929.06を溶解して、溶媒混合物トリス-EDTA緩衝液:アセトニトリル2:8中の総濃度1.0のポリマーを生成した。別個の溶液で、水中に0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichおよび1w/v硫酸プロタミンを調製した。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。溶液を2~3時間撹拌することにより、有機溶媒を除去した。粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=116.9nmPDI=0.220Dv50=98.1nmDv90=144nm実施例35.界面活性剤としてPVAを用いた、ナノ沈澱を介した、N1-PLGA-N5,N10N14-テトラメチル化スペルミンを含むsiRNA含有ペギル化粒子の生成および特徴付けN1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミン60mg、57.1重量、Mw5.3kDa、mPEG2k-PLGA40mg、38.1重量、Mw11kDaおよびdTdTオーバーハングを伴う22塩基対を有するsiRNA5mg、4.8重量、Mw14929.06を溶解して、溶媒混合物トリス-EDTA緩衝液:アセトニトリル2:8中の総濃度1.0のポリマーを生成した。別個の溶液で、水中の0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichを調製した。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。次に、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=118.5nmPDI=0.13Dv50=102nmDv90=162nmゼータ電位=-18.4mV実施例36.二段階法を用いた、N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンを含むDNA含有ペギル化粒子の処方物および特徴付けPLGA-O-アセチル20重量、Mw10kDa、mPEG2k-5050PLGA9k39重量、Mw11kDaおよびN1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミン39重量、Mw8.3kDaを溶解して、アセトン中の総濃度を1.0ポリマーとした。別個の溶液で、21塩基対を有するDNA2重量、Mw12835を、水中に溶解した。ポリマーアセトン溶液を、335mL/分の総流量でナノ沈澱を介して、撹拌しながら付加した有機対水性相のv/v比=1:10。溶液を2~3時間撹拌することにより、アセトンを除去した。次に、粒子を10体積の水で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=50cm2を用いて濃縮した。PVA粘度2.5~3.5cp、SigmaAldrichを粒子に付加して、2~3時間撹拌させた。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=108nmPDI=0.24Dv50=84nmDv90=163nmゼータ電位:10.8mV実施例37.界面活性剤としてPVAを用いた、ナノ沈澱を介した、siRNA含有ペギル化粒子の生成および特徴付けdTdTオーバーハングを伴う22塩基対を有するsiRNA5mg、4.5重量、Mw14.9kDa、5050-O-アセチル-PLGA60mg、54.5重量、Mw10kDa、mPEG2k-PLGA40mg、36.4重量、Mw11kDaおよびスペルミン四塩酸塩5mg、4.5重量、Mw348Daを溶解して、溶媒混合物水:アセトニトリル2:8中の総濃度1.0のポリマーを生成した。別個の溶液で、水中の0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichを調製した。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。次に、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=210.6nmPDI=0.27Dv50=193nmDv90=323nmゼータ電位=-23.3mV実施例38.ナノ沈澱を介した、スペルミンを含むsiRNA含有ペギル化粒子の生成および特徴付けC6-チオール修飾オリゴヌクレオチド実施例22で使用siRNA、5mg、0.37μmol、2.9重量、Mw13.6kDaを、mPEG2k-5050PLGA9k67mg、39重量、Mw11kDaを伴う溶媒混合物95:5、DMSO:TE、10mL中の2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ-5050PLGA-O-アセチル100mg、15.8μmol、58.1重量、Mw6.3kDaと複合体化させた。別個の溶液で、水中の0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichおよび0.3w/vのスペルミン四塩酸塩を調製した。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。次に、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=143.2nmPDI=0.21Dv50=119nmDv90=200nmゼータ電位=-11.5mV実施例39.ナノ沈澱を介した、N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンを含むsiRNA含有ペギル化粒子の生成および特徴付けC6-チオール修飾オリゴヌクレオチド実施例22で使用siRNA、2mg、0.37μmol、0.8重量、Mw13.6kDaを、mPEG2k-5050PLGA9k100mg、39.7重量、Mw11kDaおよびN1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミン100mg、39.7重量、Mw5.3kDaを伴う溶媒混合物95:5、DMSO:TE、10mL中の2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ-5050PLGA-O-アセチル50mg、15.8μmol、19.8重量、Mw6.3kDaと複合体化させた。別個の溶液で、水中の0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichを調製した。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。次に、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=135.4nmPDI=0.12Dv50=120nmDv90=208nmゼータ電位=-8.39mV実施例39a.界面活性剤としてPVAを用いた、ナノ沈澱を介した、ビス-N1-スペルミングルタミド-5050PLGA-O-アセチルを含むsiRNA含有ペギル化粒子の処方および特徴付けビス-N1-スペルミングルタミド-5050PLGA-O-アセチル67重量およびmPEG2k-PLGA28重量、Mw11kDaを溶解して、アセトン中で総濃度1.0のポリマーを生成した。別個の溶液で、dTdTオーバーハングを伴う22塩基対を有するsiRNA2重量、Mw14929.06を、水中の0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichの溶液に溶解した。陽イオン性アミノ基のsiRNAリン酸基に対するモル比N/P比は、4.4:1で、例えば、それぞれビス-N1-スペルミングルタミド-5050PLGA-O-アセチルおよびsiRNAの比であった。ポリマーアセトン溶液を、335mL/分の総流量で、ナノ沈澱を介して、撹拌しながら付加した有機対水性相のv/v比=1:8。溶液を2~3時間撹拌することにより、アセトンを除去した。次いで、粒子を10体積の水で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=50cm2を用いて濃縮した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=61nmPDI=0.16Dv50=43nmDv90=72nmゼータ電位=-2.6mV薬剤濃度:3.1重量実施例39b.二段階法を用いた、ビス-N1-スペルミングルタミド-5050PLGA-O-アセチルを含むsiRNA含有ペギル化粒子の処方および特徴付けビス-N1-スペルミングルタミド-5050PLGA-O-アセチル68重量およびmPEG2k-5050PLGA9k29重量、Mw11kDaを溶解して、アセトン中で総濃度1.0のポリマーを生成した。別個の溶液で、dTdTオーバーハングを伴う22塩基対を有するsiRNA2重量、Mw14929.06を、水中に溶解した。陽イオン性アミノ基のsiRNAリン酸基に対するモル比N/P比は、11:1で、例えば、それぞれビス-N1-スペルミングルタミド-5050PLGA-O-アセチルおよびsiRNAの比であった。ポリマーアセトン溶液を、335mL/分の総流量で、ナノ沈澱を介して、撹拌しながら付加した有機対水性相のv/v比=1:8。溶液を2~3時間撹拌することにより、アセトンを除去した。次いで、粒子を10体積の水で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=50cm2を用いて濃縮した。PVA粘度2.5~3.5cp、SigmaAldrichを粒子に付加して、2~3時間撹拌させた。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=132nmPDI=0.18Dv50=101nmDv90=226nmゼータ電位=-1.6mV薬剤濃度:4.6重量実施例39c.界面活性剤としてPVAを用いた、ナノ沈澱を介した、ビス-N1-スペルミングルタミド-5050PLGA-O-アセチルを含むsiRNA含有ペギル化粒子の処方および特徴付け実施例22bに示したようなC6-チオール修飾オリゴヌクレオチドsiRNA、10mg、0.755μmol、4.2重量、Mw13.2kDaを、mPEG2k-5050PLGA9k100mg、42.1重量、Mw11kDaおよびビス-N1-スペルミングルタミド-5050PLGA-O-アセチル85mg、35.8重量を伴う溶媒混合物95:5、DMSO:TE、10mL中の、実施例16に示したような2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ-5050PLGA-O-アセチル42.5mg、6μmol、17.9重量、Mw6.9kDaと複合体化させた。別個の溶液で、水中の0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPsを調製した。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。次に、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。RNAを標準としてRiboGreen登録商標蛍光検定を用いて、siRNAの負荷を定量した。励起波長480nmおよび発光波長520で、siRNAの蛍光を測定した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=130.1nmPDI=0.205Dv50=96.5nmDv90=165nmゼータ電位=-14.7mV薬剤濃度:1.8重量実施例39d.界面活性剤としてPVAを用いた、ナノ沈澱を介した、ビス-N1-スペルミングルタミド-5050PLGA-O-アセチルを含むsiRNA含有ペギル化粒子の処方および特徴付けビス-N1-スペルミングルタミド-5050PLGA-O-アセチル60mg、57.1重量、mPEG2k-PLGA40mg、38.1重量、Mw11kDaおよびsiRNA5mg、4.8重量、Mw13029.2を、1:4の比率のトリス-EDTA緩衝液:アセトニトリルの溶媒混合物中に溶解した。ポリマーの総濃度は、1.0重量であった。別個の溶液で、0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPsを水に溶解した。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で、注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら水溶液に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。次いで、粒子を10体積の緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。RNAを標準としてRiboGreen登録商標蛍光検定を用いて、siRNAの負荷を定量した。励起波長480nmおよび発光波長520で、siRNAの蛍光を測定した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=67.35nmPDI=0.366Dv50=43.4nmDv90=75.1nmゼータ電位=17.6mVsiRNA負荷:1.8重量実施例39e.界面活性剤を用いずに、ナノ沈澱を介した、ビス-N1-スペルミングルタミド-5050PLGA-O-アセチルを含むsiRNA含有ペギル化粒子の処方および特徴付けビス-N1-スペルミングルタミド-5050PLGA-O-アセチル60mg、57.1重量、mPEG2k-PLGA40mg、38.1重量、Mw11kDaおよびsiRNA5mg、4.8重量、Mw13029.2を、1:4の比率のトリス-EDTA緩衝液:アセトニトリルの溶媒混合物中に溶解した。ポリマーの総濃度は、1.0重量であった。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で、注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら水に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。次いで、粒子を10体積の緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。RNAを標準としてRiboGreen登録商標蛍光検定を用いて、siRNAの負荷を定量した。励起波長480nmおよび発光波長520で、siRNAの蛍光を測定した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=74.75nmPDI=0.233Dv50=53nmDv90=85.6nmゼータ電位=20mVsiRNA負荷:2.4重量実施例40.界面活性剤としてPVAを用いた、ナノ沈澱を介した、陽イオン性ポリマーを含む核酸製剤含有ペギル化粒子の生成5050-O-アセチル-PLGA60mg、60重量および核酸複合体化mPEG2k-PLGA実施例2340mg、40重量、Mw約25.7kDaを溶解して、溶媒混合物トリス-EDTA:DMSO5:95または代替的にはトリス-EDTA:アセトニトリル中の総濃度1.0のポリマーを生成する。別個の溶液で、水中に0.3w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichおよび0.2w/v陽イオン性PVA86~91加水分解化、粘度17~27cPs、Kurarayを調製する。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加するポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。次いで、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮する。いくつかの場合には、粒子は凍結乾燥して、粉末形態にする。実施例41.界面活性剤としてPVAを用いた、ナノ沈澱を介した、陽イオン性部分を含む核酸製剤含有ペギル化粒子の生成5050PLGA60mg、54.5、mPEG2k-PLGA40mg、36.4重量、Mw11kDaおよび核酸複合体化mPEG2k-PLGA実施例2310mg、Mw約25.7kDaを溶解して、溶媒混合物トリス-EDTA:アセトニトリル2:8中の総濃度1.0のポリマーを生成する。別個の溶液で、0.1mM~50mMの陽イオン性部分例えば、スペルミン四塩酸塩、ヘキシルデシルトリメチルアンモニウムクロリド、ヘキサジメトリンブロミド、硫酸プロタミンおよび陽イオン性ポリマー、例えばポリヒスチジン、ポリリシン、ポリアルギニン、ポリエチレンイミンおよびキトサンを含有する水中に0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichを調製し得る。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加するポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。溶液を2~3時間撹拌することにより、有機溶媒を除去し得る。次いで、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮する。いくつかの場合には、粒子は凍結乾燥して、粉末形態にする。実施例42.界面活性剤としてPVAを用いた、ナノ沈澱を介した、陽イオン性mPEG2k-PLGAを含む核酸製剤含有ペギル化粒子の生成5050PLGA60mg、60重量、陽イオン性mPEG2k-PLGA実施例1530mg、30重量、Mw11kDaおよび核酸複合体化mPEG2k-PLGA実施例2310mg、Mw約25.7kDaを溶解して、溶媒混合物トリス-EDTA:アセトニトリル2:8中の総濃度1.0のポリマーを生成する。別個の溶液で、水中に0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichを調製する。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加するポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。溶液を2~3時間撹拌することにより、有機溶媒を除去する。次いで、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮する。いくつかの場合には、粒子は凍結乾燥して、粉末形態にする。実施例43.界面活性剤としてPVAを用いた、ナノ沈澱を介した、陽イオン性PLGAを含む核酸製剤含有ペギル化粒子の生成陽イオン性PLGA60mg、60および核酸複合体化mPEG2k-PLGA実施例2340mg、40重量、Mw約25.7kDaを溶解して、溶媒混合物トリス-EDTA:アセトニトリル2:8中の総濃度1.0のポリマーを生成する。別個の溶液で、水中に0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichを調製する。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加するポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。溶液を2~3時間撹拌することにより、有機溶媒を除去する。次いで、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮する。いくつかの場合には、粒子は凍結乾燥して、粉末形態にする。実施例44.界面活性剤としてPVAを用いた、ナノ沈澱を介した、核酸製剤含有ペギル化粒子の生成陽イオン性PLGA60mg、60、Mw実施例68および核酸複合体化mPEG10k実施例2740mg、40重量、Mw約26.7kDaを溶解して、溶媒混合物トリス-EDTA:アセトニトリル2:8中の総濃度1.0のポリマーを生成する。別個の溶液で、水中に0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichを調製する。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加するポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。溶液を2~3時間撹拌することにより、有機溶媒を除去する。次いで、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮する。いくつかの場合には、粒子は凍結乾燥して、粉末形態にする。実施例45.陽イオン性部分を有する予備処方中間体粒子の表面生体共役化を介した核酸製剤含有ペギル化粒子の生成2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ-5050-PLGA-O-アセチル90mg、90重量およびmPEG2k-PLGA10mg、10重量、Mw11kDaを溶解して、アセトン中の総濃度1.0のポリマーを生成する。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加するポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。溶液を2~3時間撹拌することにより、有機溶媒を除去する。C6-チオール修飾オリゴヌクレオチド実施例22で使用siRNAまたはDNA、2mg、0.13μmolを、緩衝液PBS、pH8、0.4mL中の2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ-5050-PLGA-O-アセチル予備成形粒子4mg、0.625μmolと複合体化させるこれは、非ペギル化であるかまたは≦10重量ペギル化され得る。反応混合物を、室温で48時間、アルゴン下で撹拌する。反応混合物を、陰イオン交換および逆相HPLCにより分析する。粒子60mg、60重量を、凍結乾燥して粉末形態にする。粒子60mg、60重量およびmPEG2k-PLGA40mg、40重量を、アセトンまたは適切な水性/有機溶媒混合物トリス-EDTA緩衝液:アセトニトリル2:8中に溶解して、1ポリマー濃度とする。別個の溶液で、0.1mM~50mMの陽イオン性部分例えば、スペルミン四塩酸塩、ヘキシルデシルトリメチルアンモニウムクロリド、ヘキサジメトリンブロミド、硫酸プロタミン、あるいは陽イオン性ポリマー、例えばポリヒスチジン、ポリリシン、ポリアルギニン、ポリエチレンイミンまたはキトサンを含有する水中に0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichを調製する。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加するポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。溶液を2~3時間撹拌することにより、有機溶媒を除去し得る。次いで、核酸製剤官能化粒子を10体積の水で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮する。いくつかの場合には、粒子は凍結乾燥して、粉末形態にする。実施例46.脂質被覆核酸製剤含有ペギル化粒子の生成陽イオン性PLGA60mg、60実施例68および核酸複合体化5050-O-アセチル-PLGA40mg、40重量、Mw約23.7kDaを溶解して、アセトンまたは溶媒混合物トリス-EDTA緩衝液:アセトニトリル2:8中の総濃度1.0のポリマーを生成する。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水に付加してポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10、粒子懸濁液を生成する。溶液を2~3時間撹拌することにより、有機溶媒を除去する。エタノール中のDOTAP、コレステロールおよびDOPE-PEG2kの脂質混合物を、1mL/分の流量で注射器ポンプを介して粒子懸濁液に付加して、最終濃度を70エタノールとする。最終処方物を水で10倍に希釈して、5体積の水で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮する。いくつかの場合には、粒子は凍結乾燥して、粉末形態にする。実施例47.核酸製剤含有ペギル化粒子の生成核酸複合体化5050-O-アセチル-PLGAMw約23.7kDaを溶解して、アセトンまたは溶媒混合物トリス-EDTA緩衝液:アセトニトリル2:8中の総濃度1.0のポリマーを生成する。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水に付加してポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10、粒子懸濁液を生成する。溶液を2~3時間撹拌することにより、有機溶媒を除去する。陽イオン性ポリマー例えば、ポリヒスチジン、ポリリシン、ポリアルギニン、ポリエチレンイミンまたはキトサン、60重量およびmPEG2k-PLGA40重量を、水混和溶媒、例えばアセトン中に溶解して、1ポリマー溶液を生成し、1mL/分の流量で注射器ポンプを介して粒子懸濁液に付加する。最終処方物を水で10倍に希釈して、5体積の水で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮する。いくつかの場合には、粒子は凍結乾燥して、粉末形態にする。実施例48.界面活性剤としてPVAを用いた、ナノ沈澱を介した、陽イオン性部分を含むsiRNA含有ペギル化粒子の処方5050PLGA60mg、54.5、mPEG2k-PLGA9k40mg、36.4重量、Mw11kDa、siRNA10mg、Mw14.9kDaおよび陽イオン性部分例えば、スペルミン四塩酸塩、ヘキシルデシルトリメチルアンモニウムクロリド、ヘキサジメトリンブロミド、アガマチンまたは陽イオン性脂質、例えばDOTAPを溶解して、溶媒混合物トリス-EDTA緩衝液:アセトニトリル2:8中の総濃度1.0のポリマーを生成する。別個の溶液で、水中で0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichを調製する。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加するポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。溶液を2~3時間撹拌することにより、有機溶媒を除去する。次いで、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮する。いくつかの場合には、粒子は凍結乾燥して、粉末形態にする。実施例49.界面活性剤としてPVAを用いた、ナノ沈澱を介した、陽イオン性部分を含む核酸製剤含有ペギル化粒子の処方5050PLGA60mg、54.5、mPEG2k-PLGA9k40mg、36.4重量、Mw11kDaおよび核酸複合体化5050PLGA10mg、Mw約23.7kDaを溶解して、溶媒混合物トリス-EDTA緩衝液:アセトニトリル2:8中の総濃度1.0のポリマーを生成する。別個の溶液で、0.1w/vの陽イオン性部分例えば、スペルミン四塩酸塩、ヘキシルデシルトリメチルアンモニウムクロリド、ヘキサジメトリンブロミド、アガマチン、あるいは陽イオン性ポリマー、例えばポリヒスチジン、ポリリシン、ポリアルギニン、ポリエチレンイミンまたはキトサンを含有する水中で0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichを調製する。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加するポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。溶液を2~3時間撹拌することにより、有機溶媒を除去し得る。次いで、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮する。いくつかの場合には、粒子は凍結乾燥して、粉末形態にする。実施例50.界面活性剤としてPVAを用いた、ナノ沈澱を介した、陽イオン性部分を含む核酸製剤含有ペギル化粒子の生成5050PLGA60mg、54.5、mPEG2k-PLGA9k40mg、36.4重量、Mw11kDa、核酸複合体化5050PLGA10mg、Mw約23.7kDaおよび陽イオン性部分例えば、アガマチン、スペルミン四塩酸塩、ヘキシルデシルトリメチルアンモニウムクロリド、ヘキサジメトリンブロミド、または陽イオン性脂質、例えばDOTAPを溶解して、溶媒混合物トリス-EDTA緩衝液:アセトニトリル2:8中の総濃度1.0のポリマーを生成する。別個の溶液で、水中で0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichを調製する。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加するポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。溶液を2~3時間撹拌することにより、有機溶媒を除去し得る。次いで、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮する。いくつかの場合には、粒子は凍結乾燥して、粉末形態にする。実施例51.アクリレート5050PLGAの合成、精製および特徴付け5050PLGA5.0g、0.94mmol、MW5.3kDaおよびピリジン200mg、2.5mmolを、ジクロロメタンDCM、20mL中に溶解した。塩化アクリロイル230mg、2.5mmolを12時間に亘って滴下し、さらに3時間撹拌した。次にそれをジエチルエーテル50mL中に注ぎ入れて、ポリマーを析出した。ポリマーをジエチルエーテル25mLですすぎ、真空下で乾燥して、白色粉末を得た。アセトン20mL中に固体を溶解し、12時間に亘って5°Cの冷水400mL中で沈澱させることにより、さらに精製した。次に、混合物をさらに2時間撹拌した。濾過によりポリマーを取り出して、凍結乾燥して、白色固体を得た3.8g、収率76。1HNMRにより、生成物を確証した。実施例52.2-2-アミノエトキシエタノールアクリレート5050PLGA-O-アセチルの合成、精製および特徴付けBoc-2-2-アミノエトキシエタノールの合成2-2-アミノエトキシエタノール5.0g、48mmolを、テトラヒドロフランTHF、50mL中に溶解した。混合物に、2N水酸化ナトリウム24mLを付加し、全溶液を氷浴中で冷却した。ジ-tert-ブチルジカルボネート10g、48mmolをTHF50mL中に溶解し、それを、氷浴中で1時間に亘って混合物に滴下した。反応を室温にして、2.5日間撹拌した。THFを、真空除去した。水溶液を、濃硫酸でpH3に調整した。次にそれを、酢酸エチルEtOAc、75mLで2回抽出した。有機層を水25mLで2回、そしてブライン25mLで1回、洗浄した。次に、それを硫酸マグネシウムMgSO4上で乾燥した。EtOAcを真空下で除去して、透明油を得た4.1g、収率42。1HNMRにより、生成物を確証した。2-2-アミノエトキシエタノールアクリレートTFAの合成2-2-アミノエトキシエタノール1.0g、4.9mmolおよびトリエタノールアミンTEA、0.54g、5.4mmolを、DCM50mL中に溶解した。混合物を氷浴中で冷却した。塩化アクリロイル0.49g、5.4mmolをDCM10mL中に溶解し、それを、12時間に亘って氷浴中の混合物に滴下した。反応を室温にして、一晩撹拌した。反応混合物は、黄色に変わった。次にそれを、0.1N塩酸15mLで2回、そしてブライン15mLで2回、洗浄して、MgSO4上で乾燥した。次にそれをポンプダウンして、黄色油を得た0.54g、収率43。黄色油を、さらに精製することなく用いた。それをDCM:TFA1:1、10mLの混合物中に溶解し、室温で1時間撹拌した。溶媒を真空下で除去して、黄色油を得た0.50g、収率94。1HNMRにより、生成物を確証した。2-2-アミノエトキシエタノールアクリレート5050PLGA-O-アセチルの合成5050PLGA-O-アセチル2.0g、0.37mmol、MW5.3kDaおよび2-2-アミノエトキシエタノールアクリレートTFA190mg、0.75mmol、EDC120mg、0.75mmol、NHS87mg、0.75mmolおよびTEA76mg、0.75mmolをDCM10mL中に溶解し、室温で3時間撹拌した。その工程中、溶媒DCMを除去した。ポリマーをアセトン10mL中に溶解し、次いで、5°Cの冷水400mLに付加して、沈殿物を得た。ポリマーを凍結乾燥して、白色固体を得た1.2g、収率60。1HNMRにより、生成物を確証した。実施例53.N-2-アミノエチルマレイミド5050PLGA-O-アセチルの合成、精製および特徴付け5050PLGA-O-アセチル3.0g、0.57mmol、MW5.3kDa、NHS100mg、0.91mmolおよびDCC190mg、0.91mmolを、DCM15mL中に付加した。1時間撹拌後、N-2-アミノエチルマレイミドトリフルオロアセテート230mg、0.91mmolおよびTEA180mg、1.8mmolを付加し、さらに3時間撹拌した。沈殿物を濾過により取り出し、DCMを真空下で除去した。次にそれをアセトン30mL中に再溶解して、5°Cで水400mL中で析出させた。沈殿物を凍結乾燥して、白色固体を得た2.3g、収率77。1HNMRにより、生成物を確証した。実施例54.オリゴヌクレオチド-C6-S-N-2-アミノエチルマレイミド5050PLGA-O-アセチルの合成C6-チオール修飾オリゴヌクレオチド実施例22で使用siRNA、5.0mg、0.37μmol、3重量、Mw13.6kDaルシフェラーゼ配列の一部分と実質的に同一のヌクレオチド配列を有し、UUオーバーハングを伴う19塩基対長であり、そして相補的アンチセンス鎖を有するセンス鎖を伴うを、N-2-アミノエチルマレイミド5050PLGA-O-アセチル100mg、18.9μmol、57重量、Mw5.3kDaと、DMSO:TE緩衝液95:5、10mLの溶媒混合物中で、複合体化させた。反応混合物を、65°Cで3時間、アルゴン下で撹拌した。この混合物を室温に冷却させた。実施例54a.オリゴヌクレオチド-C6-S-N-2-アミノエチルマレイミド5050PLGA-O-アセチルの合成C6-チオール修飾オリゴヌクレオチドsiRNA、20mg、1.51μmol、Mw13.2kDaEGFP配列の一部分と少なくとも90同一であるヌクレオチド配列を有し、UUオーバーハングを伴う19塩基対長であり、そして相補的アンチセンス鎖を有するセンス鎖を伴うを、N-2-アミノエチルマレイミド5050PLGA-O-アセチル85mg、16.1μmol、Mw5.3kDaと、DMSO:TE緩衝液95:5、10mLの溶媒混合物中で、複合体化させた。反応混合物を、65°Cで3時間、アルゴン下で撹拌した。この混合物を室温に冷却させた。実施例55.ナノ沈澱を介した、界面活性剤としてPVAおよび陽イオン性PVAの配合物を用いたsiRNA含有ペギル化粒子の処方および特徴付けSi-RNA-C6-S-N-2-アミノエチルマレイミド5050PLGA-O-アセチル実施例54を、DMSO6.7mL中のmPEG2k-5050PLGA9k67mg、40重量、Mw11kDaと混合した。別個の溶液で、0.3w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichおよび0.2w/v陽イオン性PVACM-31886~91加水分解化、粘度17~27cPs、Kurarayを水167mL中で調製した。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で、注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながらPVA/陽イオン性PVA溶液に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。次いで、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。負荷は、0.92siRNAw/wであると確定された。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=103.3nmPDI=0.229Dv50=83.3nmDv90=157nmゼータ電位=16.6mV実施例55a.ナノ沈澱を介した、界面活性剤としてPVAおよび陽イオン性PVAの配合物を用いたsiRNA含有ペギル化粒子の処方物および特徴付けN-2-アミノエチルマレイミド5050PLGA-O-アセチル実施例54aと複合体化されたC6-チオール修飾オリゴヌクレオチドsiRNA、20mg、1.51μmol、Mw13.2kDaを、DMSO6.7mL中のmPEG2k-5050PLGA9k67mg、40重量、Mw11kDaと混合した。別個の溶液で、0.3w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichおよび0.2w/v陽イオン性PVACM-31886~91加水分解化、粘度17~27cPs、Kurarayを水167mL中で調製した。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で、注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、C6-S-N-2-アミノエチルマレイミド5050PLGA-O-アセチル実施例54の溶液に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。次いで、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。負荷は、3siRNAw/wであると確定された。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=127nmPDI=0.244Dv50=76.5nmDv90=222nmゼータ電位=10.7mV実施例56.オリゴヌクレオチド-C6-SS-DSPE-PEG2kの合成、精製および特徴付けC6-チオール修飾オリゴヌクレオチド実施例22で使用siRNA、0.2mg、14.7μmolを、TE緩衝液1mL中で、1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン-N-[PDPポリエチレングリコール-2k]4mg、1.36μmolと複合体化させた。反応混合物を、65°Cで2時間、撹拌した。オリゴヌクレオチド-C6-SS-DSPE-PEG2k複合体を、逆相HPLCおよびゲル電気泳動により分析した。実施例57.オリゴヌクレオチド-C6-チオエーテル-DSPE-PEG2kの合成、精製および特徴付けC6-チオール修飾オリゴヌクレオチド実施例22で使用siRNA、0.2mg、14.7μmolルシフェラーゼ配列の一部分と実質的に同一のヌクレオチド配列を有し、UUオーバーハングを伴う19塩基対長であり、そして相補的アンチセンス鎖を有するセンス鎖を伴うを、PBS緩衝液1mL中で、1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン-N-[マレイミドポリエチレングリコール-2k]4mg、1.36μmolと複合体化させた。反応混合物を、65°Cで2時間、撹拌した。オリゴヌクレオチド-C6-チオエーテル-DSPE-PEG2000複合体を、逆相HPLCおよびゲル電気泳動により分析した。実施例58.陽イオン性PVAを含むペギル化粒子中のsiRNAで処理される細胞の生存度陽イオン性PVAを含むペギル化粒子中のsiRNA実施例32参照が細胞死を引き起こすか否かを確定するために、CellTiter-Glo登録商標発光細胞生存度検定CTGを用いた。検定は、存在するATPの量子化に基づいているが、これは、代謝的に活性ナ細胞の存在を示す。MDA-MB-231EGFP細胞を、5CO2で37°Cで、完全培地DMEM、高グルコース、10HI-FBS、0.1mMMEM非必須アミノ酸、2mML-グルタミンおよび1抗生物質/抗真菌剤溶液中で、75cm2フラスコ中で85~90集密に増殖させた継代数<20。MDA-MB-231EGFP細胞を、200μL/ウェルで、1500細胞/ウェルの濃度で、96-ウェル不透明-透明底プレートに付加した。細胞を、37°Cで5CO2で24時間、インキュベートした。翌日、陽イオン性PVAを含むペギル化粒子中の2倍濃縮siRNAの連続希釈液を、完全培地を有する12-ウェルレザバー中に作って、最終濃度を5000nM~0.05nMsiRNAとした。プレート中の培地を、二重反復実験で、100μLの新鮮な完全培地および100μLのそれぞれの連続希釈処理に取り替えた。二重反復実験処理を用いて、3組のプレートを調製した。37°Cで5CO2でのインキュベーションの24、48および72時間後、プレート中の培地を100μLの新鮮な完全培地および100μLのCTG溶液に取り替えて、次に、450rpmに設定した室温でのプレート振盪器上で5分間インキュベートして、15分間休止させた。ルミネッセンスに設定された微量滴定プレート読取器で、生存可能細胞を測定した。以下に示すように、データを、生存度対濃度としてプロットして、非処理細胞に対して正規化した。実施例59.陽イオン性PVAを含むペギル化PVA粒子中のsiRNAのノックダウン活性陽イオン性PVIを含むペギル化粒子実施例32中のsiRNAのノックダウン活性を測定するために、MDA-MB-231EGFP細胞を、5CO2で37°Cで、完全培地DMEM、高グルコース、10HI-FBS、0.1mMMEM非必須アミノ酸、2mML-グルタミンおよび1抗生物質/抗真菌剤溶液中で、75cm2フラスコ中で85~90集密に増殖させた継代数<20。3000細胞/ウェルを、100μL/ウェルで、96-ウェル不透明-透明底プレートに付加し、37°Cで5CO2で24時間、増殖させた。翌日、1000~0.1nMsiRNAの濃度を用いて、陽イオン性PVAを含む粒子中の連続希釈siRNAの、二重反復実験での、100μLに、培地を取り替えた。処理細胞を、37°Cで5CO2で48時間、インキュベートした。次いで、細胞をPBSで1回洗浄して、氷上で20分間、60μL/ウェルのM-Per哺乳動物タンパク質抽出物試薬完全プロテアーゼ阻害剤カクテルを補足で溶解した。細胞溶解物を、4~5分間、ピペッティングした後、励起488nmおよび発光535nmに設定した蛍光計で測定した。処理細胞のEGFPノックダウンを、以下に示すように、非処理対照と比較した。実施例60.siRNA含有ペギル化粒子によるルシフェラーゼ活性のノックダウンルシフェラーゼを発現するB16F10-luc2細胞を、5CO2で37°Cで、完全培地RPMI、10HI-FBSおよび1抗生物質/抗真菌剤溶液中で、増殖させた。5000細胞/ウェルを、100μL/wellで、96ウェルプレートに付加し、37°Cで5CO2で24時間、増殖させた。別個の反応物において、細胞を、ペギル化粒子中に埋め込まれたsiRNAで、またはsiRNA-PLGA0.01μM~7.5μM複合体ペギル化粒子で、各々48時間、処理した。Bright-Glo登録商標ルシフェラーゼ検定系Promegaを用いて、ルシフェラーゼ活性に関して細胞を分析した。ルシフェラーゼノックダウン活性を有する細胞のパーセンテージを、非処理細胞のルシフェラーゼ活性と比較した。ルシフェラーゼノックダウン活性を、細胞の生存度に適合させた。実施例60で用いた粒子は、以下のとおりである:1これらの粒子は、本質的には実施例32に記載されるとおりに調製されたが、但し、核酸製剤はルシフェラーゼを標的にするEGFPではない本明細書中に記載されるように測定された粒子特性:Zavg=131、Dv90=232、ゼータ=15.1。2これらの粒子は、本質的には実施例33に記載されるとおりに調製された本明細書中に記載されるように測定された粒子特性:Zavg=130、Dv90=231、ゼータ=15.9。3これらの粒子は、実施例55に記載されるとおりに調製された。4これらの粒子は、実施例62に記載されるとおりに調製された1:1N/P比に対応する。5これらの粒子は、実施例62に記載されるとおりに調製された1.5:1N/P比に対応する。6実施例68に記載されるとおり。本明細書中に記載される粒子に関するノックダウン実験の結果を、以下に示す。実施例61.ナノ沈澱を介した、界面活性剤としてのPVAおよび陽イオン性PVAの配合物を含むsiRNA含有ペギル化粒子の処方および特徴付けC6-チオール修飾オリゴヌクレオチド実施例22で使用siRNA、5mg、0.37μmol、3重量、Mw13.6kDaを、mPEG2k-5050PLGA9k70mg、40重量、Mw11kDaを伴う95:5DMSO:TE10mLの溶媒混合物中の2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ-5050PLGA-O-アセチル100mg、15.8μmol、57重量、Mw6.3kDa実施例16と複合体化させた。別個の溶液で、水中の0.3w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPsおよび0.2w/vの陽イオン性PVA86~91加水分解化、粘度17~27cPsを調製した。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。次に、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=94.0nmPDI=0.17Dv50=79.8nmDv90=139nmゼータ電位=9mV実施例61a.ナノ沈澱を介した、界面活性剤としてのPVAおよび陽イオン性PVAの配合物を含むsiRNA含有ペギル化粒子の処方物および特徴付けC6-チオール修飾オリゴヌクレオチドsiRNA、20mg、1.51μmol、11.6重量、Mw13.2kDa実施例22aで使用を、mPEG2k-5050PLGA9k67mg、39重量、Mw11kDaを伴う95:5DMSO:TE10mLの溶媒混合物中の2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ-5050PLGA-O-アセチル85mg、12μmol、49.4重量、Mw6.9kDa実施例16と複合体化させた。別個の溶液で、水中の0.3w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPsおよび0.2w/vの陽イオン性PVA86~91加水分解化、粘度17~27cPsを調製した。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。次に、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。標準としてRNAを用いたRiboGreen登録商標蛍光検定を用いて、siRNAの負荷を定量した。励起波長480nmおよび発光波長520nmで、siRNAの蛍光を測定した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=84.09nmPDI=0.23Dv50=64.3nmDv90=96.8nmゼータ電位=7.78mVsiRNA負荷:4.2重量実施例61b.ナノ沈澱を介した、界面活性剤としてのPVAおよび陽イオン性PVAの配合物を含むsiRNA含有ペギル化粒子の処方および特徴付けC6-チオール修飾オリゴヌクレオチドsiRNA、20mg、1.51μmol、11.6重量、Mw13617Da実施例22bで使用を、mPEG2k-5050PLGA9k67mg、39重量、Mw11kDaを伴う95:5DMSO:TE10mLの溶媒混合物中の2-2-ピリジン-2-イルジスルファニルエチルアミノ-5050PLGA-O-アセチル85mg、12μmol、49.4重量、Mw6.9kDa実施例16と複合体化させた。別個の溶液で、水中の0.3w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPsおよび0.2w/vの陽イオン性PVA86~91加水分解化、粘度17~27cPsを調製した。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。次に、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。標準としてRNAを用いたRiboGreen登録商標蛍光検定を用いて、siRNAの負荷を定量した。励起波長480nmおよび発光波長520nmで、siRNAの蛍光を測定した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=84.42nmPDI=0.167Dv50=62.8nmDv90=112nmゼータ電位=10.5mVsiRNA負荷:2.97重量実施例62.二段階法を用いた、N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンを含むsiRNA含有ペギル化粒子の処方および特徴付けPLGA-O-アセチル11~19重量、Mw10kDa、mPEG2k-5050PLGA9k38~48重量、Mw11kDaおよびN1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミン37~38重量、Mw8.3kDa実施例68に記載を溶解して、アセトン中の総濃度を1.0ポリマーとした。別個の溶液で、dTdTオーバーハングを伴う22塩基対を有するsiRNA5~6重量、Mw14929.06を、水中に溶解した。用いられるN1-PLGA-N5、N10、N14-テトラメチル化スペルミンおよびsiRNAの量を変えることにより、陽イオンアミノ基のsiRNAリン酸基に対するモル比N/P比を1:1から1.5:1まで調整した。ポリマーアセトン溶液を、335mL/分の総流量でナノ沈澱を介して、撹拌しながら付加した有機対水性相のv/v比=1:10。溶液を2~3時間撹拌することにより、アセトンを除去した。次に、粒子を10体積の水で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=50cm2を用いて濃縮した。PVA粘度2.5~3.5cp、SigmaAldrichを粒子に付加して、2~3時間撹拌させた。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:実施例62a.N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンを含むペギル化粒子中のsiRNAで処理した細胞の生存度N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンを含むsiRNA含有ペギル化粒子の細胞生存度を測定するために、MDA-MB-231/GFP細胞を、296-ウェル白色不透明-透明底プレート中で、10,000細胞/ウェルの密度で培養した。粒子で処理する前に、変法完全培地;DMEM、10ウシ胎仔血清、0.1mMMEM非必須アミノ酸、2mML-グルタミンおよび1ペニシリンストレプトマイシンすべて、LifeTechnologiesから中で、37°Cで5CO2で、細胞を一晩培養した。次に、三重反復実験で、N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンを含む5~0.01μMの封入siRNA含有ペギル化粒子で、細胞を処理し、それぞれ、37°C、5CO2で、24および48時間、インキュベートした。インキュベーション後、20μLのCellTiter96登録商標AQueousOne商標生存度試薬Promegaを、100μLの培地±封入CPX1310/PLGA/PEGを含有する各ウェルに付加した。次いで、プレートを37°Cで2時間、インキュベートした。SpectraMax登録商標M5MolecularDevicesプレート読取器を用いて、490nMで吸光度を測定することにより、生存度を確定した。以下に示すように、処理された生存可能細胞のパーセントを、同様の時点で処理されなかった細胞と直接比較した。実施例62b.N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンを含むペギル化粒子中のsiRNAによるsiRNAのノックダウン活性N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンを含むsiRNA含有ペギル化粒子によるsiRNAのEGFPノックダウン活性を測定するために、MDA-MB-231EGFP細胞を、296-ウェル白色不透明-透明底プレート中で、10,000細胞/ウェルの密度で培養した。変法完全培地;DMEM、10ウシ胎仔血清、0.1mMMEM非必須アミノ酸、2mML-グルタミンおよび1ペニシリンストレプトマイシンすべて、LifeTechnologiesから中で、37°Cで5CO2で、MDA-MB-231EGFP細胞を一晩増殖させた。翌日、処方物の体積に対応する培地の体積を、各ウェルから取り出した。次いで、三重反復実験で、N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンを含む5~0.01μMのsiRNA含有ペギル化粒子で、細胞を処理した。処理細胞を、それぞれ、37°Cで5CO2で24および48時間、インキュベートした。指示時点24時間および48時間で、細胞をPBSで1回洗浄して、氷上で15分間、M-PER哺乳動物タンパク質抽出物試薬、ThermoFisherHALT登録商標プロテアーゼ阻害剤カクテルThermoFisherを補足で溶解した後、軌道平板振盪器200rpm上で室温で10分間、インキュベートした。励起488nmおよび発光535nmに設定され、カットオフを535nmで指示されたSpectraMax登録商標M5蛍光プレート読取器を用いて、EGFP測定を完了した。処理細胞のノックダウンを、以下に示すように、同様の時点からの非処理対照と比較した場合のEGFPシグナルの減少から得た。実施例62c.N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンおよびO-アセチルPLGAを含むペギル化粒子中のsiRNAで処理した細胞の生存度N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンおよびO-アセチルPLGAを含むsiRNA含有ペギル化粒子によるsiRNAの細胞生存度を測定するために、MDA-MB-231EGFP細胞を、296-ウェル白色不透明-透明底プレート中で、10,000細胞/ウェルの密度で培養した。粒子で処理する前に、変法完全培地;DMEM、10ウシ胎仔血清、0.1mMMEM非必須アミノ酸、2mML-グルタミンおよび1ペニシリンストレプトマイシンすべて、LifeTechnologiesから中で、37°Cで5CO2で、細胞を一晩培養した。次に、三重反復実験で、N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンおよびO-アセチルPLGAを含む5~0.01μMのsiRNA含有ペギル化粒子で、細胞を処理し、それぞれ、37°C、5CO2で、24および48時間、インキュベートした。インキュベーション後、20μLのCellTiter96登録商標AQueousOne商標生存度試薬Promegaを、100μLの培地±封入CPX1310/CPX1025/PLGA-mPEGを含有する各ウェルに付加した。次いで、プレートを37°Cで2時間、インキュベートした。SpectraMax登録商標M5MolecularDevicesプレート読取器を用いて、490nmで吸光度を測定することにより、生存度を確定した。以下に示すように、処理された生存可能細胞のパーセントを、同様の時点に処理されなかった細胞と直接比較した。実施例62d.N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンおよびO-アセチルPLGAを含むペギル化粒子中のsiRNAによるsiRNAのノックダウン活性N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンおよびO-アセチルPLGAを含むペギル化粒子中のsiRNAのEGFPノックダウン活性を測定するために、MDA-MB-231EGFP細胞を、296-ウェル白色不透明-透明底プレート中で、10,000細胞/ウェルの密度で培養した。変法完全培地;DMEM、10ウシ胎仔血清、0.1mMMEM非必須アミノ酸、2mML-グルタミンおよび1ペニシリンストレプトマイシンすべて、LifeTechnologiesから中で、37°Cで5CO2で、MDA-MB-231EGFP細胞を一晩増殖させた。翌日、処方物の体積に対応する培地の体積を、各ウェルから取り出した。次いで、三重反復実験で、N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンおよびO-アセチルPLGAを含むペギル化粒子中の5~0.01μMのsiRNAで、細胞を処理した。処理細胞を、それぞれ、37°Cで5CO2で24および48時間、インキュベートした。指示時点24時間および48時間で、細胞をPBSで1回洗浄して、氷上で15分間、M-PER哺乳動物タンパク質抽出物試薬、ThermoFisherHALT登録商標プロテアーゼ阻害剤カクテルThermoFisherを補足で溶解した後、軌道平板振盪器200rpm上で室温で10分間、インキュベートした。励起488nmおよび発光535nmに設定され、カットオフを535nmで指示されたSpectraMax登録商標M5蛍光プレート読取器を用いて、EGFP測定を完了した。処理細胞のノックダウンを、以下に示すように、同様の時点からの非処理対照と比較した場合のEGFPシグナルの減少から得た。実施例63.ナノ沈澱を介した、界面活性剤としてのPVAおよび陽イオン性PVAの配合物を含むsiRNA含有ペギル化粒子の処方および特徴付けC6-チオール修飾オリゴヌクレオチド実施例22で使用siRNA、5mg、0.37μmol、3重量、Mw13.6kDaを、8:2アセトニトリル:TE14mLの溶媒混合物中のmPEG2k-5050PLGA9k60mg、28重量、Mw11kDaおよび5050PLGA-O-アセチル40mg、41重量の付加を伴うトリス-EDTA緩衝液中の1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン-N-[PDPポリエチレングリコール-2k]40mg、13.4μmol、28重量、Mw2.98kDa実施例56と複合体化させた。別個の溶液で、水中の0.3w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPsおよび0.2w/vの陽イオン性PVACM-31886~91加水分解化、粘度17~27cPsを調製した。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加したポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。溶液を2~3時間撹拌することにより、有機溶媒を除去した。次いで、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=124.9nmPDI=0.118Dv50=112nmDv90=196nmゼータ電位=8mV実施例64.界面活性剤としてPVAを用いた、ナノ沈澱を介した、陽イオン性ポリマーを含む核酸製剤含有ペギル化粒子の生成5050-O-アセチル-PLGA60mg、60重量および核酸複合体化mPEG2k-PLGA実施例2340mg、40重量、Mw約25.7kDaを溶解して、溶媒混合物トリス-EDTA:DMSO5:95または代替的にはトリス-EDTA:アセトニトリル中の総濃度1.0のポリマーを生成する。別個の溶液で、水中に0.3w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPs、SigmaAldrichおよび0.2w/v陽イオン性PVA86~91加水分解化、粘度17~27cPs、Kurarayを調製する。ポリマー溶液を、1mL/分の流量で注射器ポンプを用いて、500rpmで撹拌しながら、水溶液に付加するポリマー溶液対水性相のv/v比=1:10。次いで、粒子を10体積のTE緩衝液で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=150cm2を用いて濃縮する。実施例65.ナノ沈澱を介した、1-ヘキシルトリエチル-アンモニウムホスフェートQ6および界面活性剤としてのPVAを含むsiRNA含有ペギル化粒子の生成PLGA-O-アセチル11~19重量、Mw10kDa、mPEG2k-5050PLGA9k38~48重量、Mw11kDaおよび1-ヘキシルトリエチル-アンモニウムホスフェート37~38重量、Mw8.3kDaを溶解して、アセトン中の総濃度1.0のポリマーを生成した。別個の溶液で、dTdTオーバーハングを伴う22塩基対を有するsiRNA5~6重量、Mw14929.06を、水に溶解した。陽イオン性アミノ基のsiRNAリン酸基に対するモル比N/P比は、15:1であった具体的には、用いられる1-ヘキシルトリエチル-アンモニウムホスフェートおよびsiRNAの量。ポリマーアセトン溶液を、335mL/分の総流量で、ナノ沈澱を介して、撹拌しながら付加した有機対水性相のv/v比=1:10。溶液を2~3時間撹拌することにより、アセトンを除去した。次いで、粒子を10体積の水で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=50cm2を用いて濃縮した。PVA粘度2.5~3.5cp、SigmaAldrichを粒子に付加し、2~3時間撹拌させた。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=98nmPDI=0.41Dv50=34nmDv90=68nmゼータ電位=-11.5mVsiRNA薬剤負荷=1.51重量実施例66.酵素消化検定を用いた陽イオン性PVAを伴うペギル化粒子非共役化中に埋め込まれたsiRNAの特徴付け0.5μgのsiRNAを含有するペギル化粒子実施例32のアリコートを、4つの時間30分、1時間、4時間および18時間の各々に関してRNアーゼA1μgとともに、37°Cでインキュベートした。各反応を、プロテイナーゼK0.07mgおよびSDS0.2mgでクエンチして、さらに、37°Cで30分間インキュベートした。次いで、試料を凍結し、臭化エチジウム染色で20PAGEにより分析した。遊離siRNAを用いて、同一プロトコールを反復した。結果を、図2に示す。レーン2~5では、RNアーゼによりsiRNAが消化されて、より短い生成物になったため、物質のかすかな帯域が観察された。より短い種へのsiRNAの完全消化はsiRNAをRNアーゼとともにインキュベートした30分後に観察されたレーン2参照。レーン7~10では、レーン1の非消化siRNAのものと同様の移動を有するより強い強度の帯域が、レーン2~5における消化生成物のものと同様の移動を有するかすかな拡散性の帯域の上に観察された。非消化siRNAレーン1のものと同様の移動を有する高分子量帯域が、粒子に含有されるsiRNAに関して全ての時間で観察されたレーン7~10。RNアーゼAによる消化の18時間後に、抗分子量帯域が依然として観察されたレーン7~10。実施例67.酵素消化検定を用いた陽イオン性PVAを伴うsiRNA-ポリマー複合体粒子の特徴付け26μgのsiRNA-S-S-PLGAを含有するペギル化粒子実施例58のアリコートを、4つの時間30分、1時間、4時間および18時間の各々に関してRNアーゼA50μgとともに、37°Cでインキュベートした。各反応を、プロテイナーゼK0.28mgおよびSDS0.8mgでクエンチして、さらに、37°Cで30分間インキュベートした。次いで、試料を凍結し、臭化エチジウム染色を伴って20PAGEにより分析した。単独siRNAを用いて、同一プロトコールを反復した。結果を、図3に示す。単独siRNAをRNアーゼとともにインキュベートするとレーン3~6、siRNAはすべて、各インキュベーション時間で消化される、ということが示された。siRNA-SS-PLGA粒子レーン7~10に関しては、siRNAに対応するかすかな帯域が依然として可視的であったが、これは、粒子がRNアーゼAによるsiRNAの消化を遅くしたことを示している。実施例68.N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンの合成、精製および特徴付け内部温度プローブ、機械的撹拌器および添加漏斗を装備した3L三首丸底フラスコを窒素でフラッシュ洗浄して、スペルミン9.60g、47.44mmolおよびMeOH670mLを投入した。溶液を、-20°Cに冷却した。その後、MeOH100mL中のエチルトリフルオロアセテート6.74g,47.44mmolの溶液を、添加漏斗を用いて90分間、滴下した。混合物を14時間撹拌して、温度を室温に上げさせた。MS[直接注射ESI]により、反応の進行をモニタリングした。混合物は、スペルミン、N1-トリフルオロアセテート-スペルミンおよび化合物1を含有した。N1-トリフルオロアセテート-スペルミンが主要ピークであった。その後、有機溶媒を真空下で除去して、油残渣を得て、これを、1,2-ジクロロエタンDCE、950mL中の溶液として、内部温度プローブ、機械的撹拌器および添加漏斗を装備した3L三首丸底フラスコ中に付加した。混合物を0°Cに冷却し、ホルムアミド19.2g、237.3mmolの37重量水溶液を15分で付加した。混合物を0°Cで30分撹拌し、次いで、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム60.3g、281.5mmolを、固体として15分に亘って3回に分けて付加した。混合物を14時間撹拌して、温度を室温に上げさせた。MS[直接注射ESI]により、反応の進行をモニタリングした。混合物は、N1-トリフルオロアセテート-N5,N10,N14-テトラメチル化-スペルミン、化合物2、3を含有したが、前ステップからの物質は含有しなかった。反応混合物を1-L分液漏斗に移して、飽和重炭酸ナトリウム150mLで洗浄した。層を分離し、水性層を塩化メチレン3×100mLで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過して、真空濃縮した。水性層を、500mL丸底フラスコ中に投入し、一晩凍結乾燥した。残渣を、塩化メチレン250mLおよびトリエチルアミン25mLの溶液で希釈し、それを機械的撹拌器で30分間撹拌した。その後、混合物を濾過し、濾過ケーキをフラスコに戻して、塩化メチレン250mLおよびトリエチルアミン25mLの溶液で希釈した。記載された方法を、2回反復した。塩化メチレン/TEA抽出物を、分離からの塩化メチレン抽出物と合わせて、硫酸ナトリウム上で乾燥して、濾過し、真空濃縮して、残渣約15gを得た。溶離液としてDCM/MeOH/TEA6/3/1v/v/vの混合物用いられる総溶媒2Lを用いて、残渣を、シリカゲル350g上のカラムクロマトグラフィーにより精製した。画分を、ホスホモリブデン酸染料により可視化した。生成物を含有する画分Rf=0.41を取り出し、真空濃縮して、N1-トリフルオロアセテート-N5,N10,N14-テトラメチル化-スペルミン約7gを得た。磁気撹拌器を装備した500mL一首丸底フラスコに、N1-トリフルオロアセテート-N5,N10,N14-テトラメチル化-スペルミン7.00g、19.7mmol、MeOH70mLおよびNH4OH濃縮、210mLを投入した。混合物を、室温で14時間撹拌した。その後、[直接注射ESI]は、反応の完了を示した。混合物を真空濃縮して、シリカカラム350gシリカ上で乾燥負荷した。カラムを、THF/MeOH/濃NH4OH7/2/1の比1.5Lで溶離した。エタノール中2ニンヒドリン染料で、画分を可視化した。生成物を含有する画分Rf=0.6を取り出し、真空濃縮して、N1-アミノ-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミン740mgを得て、その構造を、1HNMRおよびMSESIにより確証した。合わせた混合画分を濃縮し、シリカカラム350gシリカ上に負荷し、乾燥-負荷した。カラムを、THF/MeOH/濃度NH4OH3/1/1の比1.5Lで溶離した。500mL丸底フラスコに、アセチル-PLGA5050-7K15.00g、2.83mmol:Mn5300Daを基礎にして、DCM40mLおよびトルエン100mLを投入した。内容物を真空濃縮して、残留水を除去した。その後、同一フラスコに、DCC877mg、4.25mmol、1.5当量、DMAP69mg、0.57mmol、0.2当量、N1-アミノ-N5,N10,N14-テトラメチル化-スペルミン1.10g、4.25mmol、1.5当量およびDCM125mLを投入した。混合物は、徐々に混濁した。7時間撹拌後、混合物をDCM100mLで希釈し、濾過した。濾過ケーキを、新鮮なDCM30mLで洗浄した。DCM溶液を合わせ、500mL分液漏斗中に移して、0.0001NNaOH溶液100mL、pH=10で静かに洗浄した。多少の乳濁液形成を観察した。乳濁液を30分間静置して、層を分離させた。有機層を分離し、水性層をDCM2×50mLで抽出した。有機層を併合し、Na2SO4上で乾燥して、セライト登録商標パッドを通して濾過し、真空下で濃縮した。残渣をアセトン100mL中に溶解し、真空濃縮した。残渣をアセトン100mL中に再溶解し、0.2μmPTFEフィルターを通して濾過し、機械的撹拌器を装備し、0°Cに冷却された2L三首丸底フラスコを用いて、MTBE中に沈澱させた。アセトン中の粗製N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンの溶液を、絶えず撹拌しながらフラスコ中に滴下した。ポリマーが、粘着性物質として直ぐに沈澱し始めた。その結果生じた懸濁液を0°Cで30分間、次いで室温で30分間撹拌した。液体をデカントして除去し、残渣をアセトン中に再溶解して、固体物質の移動を可能にし、次に、真空濃縮して、所望の生成物を得た12.0g、80。1HNMR解析は、N1-アミノ-N5,N10,N14-テトラメチル化スペルミンとポリマーとの複合体化、ならびにDMAPの非存在を示した。N1-PLGA-N5,N10,N14-テトラメチル化-スペルミンの負荷は、1HNMR解析により概算した場合、4.3重量理論的負荷の92:MW5.3kDaを基礎にしてであった。HPLC分析は、純度96.9AUC、230nmを示した。実施例69.N1-アミノ-N5,N10,N14-トリ-Cbz-スペルミンの合成、精製および特徴付けアセチル-PLGA5050-7K8.7g、1.65mmolをDCM22mL、2.5体積中に溶解し、トルエン61mL、7.0体積で希釈した。粘性混合物を、回転蒸発器を用いて、40°Cの浴温度で、濃縮、乾燥して、白色固体物質を得た。固体をDCM70mL、8.0体積およびDCC0.51g、2.48mmol中に溶解し、その後、DMAP40mg、0.33を付加した。次いで、DCM9mL中のN1-アミノ-N5,N10,N14-トリ-Cbz-スペルミン1.5g、2.48mmolを付加し、その時点で、沈澱の形成が観察された。そのバッチを、20~25°Cで16.5時間、撹拌した。不均質反応混合物を、HPLCによりモニタリングしたが、これは、調製した前のバッチのものと同様であった。バッチをDCM61mLで希釈し、0.3μm直列フィルターを通して濾過して、DCUを除去した。フィルターを、DCM15mLですすいだ。濾液を、冷却2MHCl溶液0~5°C、2×61.0mLで洗浄した水性廃液流のHPLC分析は、N1-アミノ-N5,N10,N14-トリ-Cbz-スペルミンが除去されなかったことを示した。混合物をDCM61mLで希釈し、活性化Dowex商標50WX820g湿重量とともに3時間撹拌した。バッチを濾過し、HPLCにより分析したが、これは、N1-アミノ-N5,N10,N14-トリ-Cbz-スペルミンの濃度が有意に低減された、ということを示した。N1-アミノ-N5,N10,N14-トリ-Cbz-スペルミンは35.8AUCで存在したが、一方、生成物は、205nmで64.1AUCで存在した。濾液を濃縮、乾燥して、粗製物をオフホワイト色発泡体として得た10.0g。粗製物を、アセトン150mL中に溶解した。セライト登録商標40g、4体積をバッチに付加した。次いで、オーバーヘッド撹拌器でバッチを掻き混ぜながら、MTBE400mLを付加した。スラリーを2時間撹拌して、濾過した。濾液を取り出して置き、生成物をセライト登録商標と混合して、DCM350mLですすいだ。濾液をHPLCにより分析したが、これは、微量のN1-アミノ-N5,N10,N14-トリ-Cbz-スペルミンを示した。濾液を濃縮、乾燥して、セライト登録商標の存在下でのアセトン/MTBE混合物中での沈降により、N1-PLGA-N5,N10,N14-トリ-Cbz-スペルミンを二次精製した。二次沈降は、N1-アミノ-N5,N10,N14-トリ-Cbz-スペルミンを完全に除去した。バッチを濾過し、濾液を廃棄した。セライト登録商標をDCM350mLですすぎ、次いで濾液を濃縮、乾燥して、高真空下で一晩乾燥して、生成物を白色発泡体として得た5.4g。バッチのHPLC分析は、N1-アミノ-N5,N10,N14-トリ-Cbz-スペルミンが完全に除去された、ということを示した。1HNMRに基づいて、負荷は848.5重量負荷であった。そのバッチのGPC分析は、11.9DaのMP分子量ピークを示した。実施例70.N14-アセチルPLGA-スペルミンの合成、精製および特徴付け250mLオートクレーブ中に、N1-PLGA-N5,N10,N14-トリ-Cbz-スペルミン5.1g、DCM76.5mL、15体積、MeOH38mL、2MHCl1.7mLおよび10Pd/C1.0gを付加した。反応混合物を、N23×15psigで、その後H225psigで浄化した。次いで、水素添加が、20~25°Cで、25psigH2圧で、始まった。反応を4および6.5時間後にモニタリングしたが、しかし残存する出発物質は少量であった。8.5時間後、残存する出発物質は微量であった。次に、混合物をセライト登録商標床を通して濾過し、DCM2×20mLですすいだ。濾液を濃縮、乾燥して、粗生成物をオフホワイト色発泡体として得た5.08g。粗製物のGPC分析は、MP分子量ピークが10.6Daであるということを示した。N14-アセチルPLGA-スペルミンを、DCM/MTBE中での沈降により精製した。実施例70a.界面活性剤としてPVAを用いた、ナノ沈澱を介した、N14-アセチルPLGA-スペルミンを含むsiRNA含有ペギル化粒子の生成および特徴付けN14-アセチルPLGA-スペルミン68重量、Mw10.7kDaおよびmPEG2k-PLGA29重量、Mw11kDaを溶解して、アセトン中の総濃度1.0のポリマーを生成した。別個の溶液で、dTdTオーバーハングを伴う22塩基対を有するsiRNA3重量、Mw14929.06を、水中の0.5w/vPVA80加水分解化、粘度2.5~3.5cPsの溶液に溶解した。陽イオン性アミノ基のsiRNAリン酸基に対するモル比N/P比は、1.8:1であった例えば、それぞれ、N14-アセチルPLGA-スペルミンおよびsiRNAの比。ポリマーアセトン溶液を、335mL/分の総流量で、ナノ沈澱を介して、撹拌しながら付加した有機対水性相のv/v比=1:8。溶液を2~3時間撹拌することにより、アセトンを除去した。次いで、粒子を10体積の水で洗浄して、接線流濾過系300kDaMWカットオフ、膜面積=50cm2を用いて濃縮した。粒子特性上記の方法で製造される結果的に生じる複数の粒子を用いて評価:Zavg=69nmPDI=0.24Dv50=43nmDv90=78nmゼータ電位=-7.8mV薬剤負荷=1.27重量実施例70b.mPEG-PLGA/PVA粒子におけるsiRNA負荷を特徴付けする方法mPEG-PLGA分析:標準としてのmPEG2k-PLGAおよび凍結乾燥試料を、90°Cで2.5時間、水酸化ナトリウム1Nで温浸して、次に、それらを、HPLC分析のために蟻酸1Nで中和した。ELSD検出器を、すべての分析のために用いた。この分析方法に基づいて、siRNA粒子におけるmPEG-PLGAの範囲は、8~15重量の範囲である。PVA検定:粒子処方物およびPVA標準を、比色検定ヨウ素検定を用いて分析した。試料を、60°Cで20分間、2mlの水酸化ナトリウム0.5Nで温浸した。次いで、それらを、0.9mlの塩酸1Nで中和した。3mlのホウ酸0.65Mおよび0.5mlのヨウ素/ヨウ化カリウム0.05M/0.15Mを中和試料に付加した。分析物を水で希釈し、次に、UV分光光度計で690nmで測定した。この分析方法に基づいて、siRNA粒子におけるmPEG-PLGAの範囲は、35~55重量の範囲である。siRNA負荷に関するRiboGreen登録商標検定:RiboGreen登録商標検定を用いて、RNA-陽イオン性PVA粒子のRNA含量を、標準としてRNAを用いて定量した。RNA標準を、異なる濃度2μg/ml~0.01μg/mlでのTE緩衝液中に希釈した。試料を480nmで励起して、蛍光発光強度を520nmで測定した。蛍光分析のために、粒子試料を緩衝液で希釈した。実施例71.EGFPのinvivosiRNAノックダウンEGFPを発現するよう遺伝子工学処理された培養MDA-MB-231乳癌細胞を、ヌードマウスの乳房脂肪パッド中に移植した。移植後8日目に、6つの群群1~6、9匹/群の各々におけるマウスに、表AAに記載するように、対照またはsiEGSPを投与した。群1のマウスに、ビヒクル10スクロースの処方物を投与したが、これは、無ノックダウンの陽性対照を提供した。群2のマウスには、実施例32bに従って調製した粒子を投与したが、これは、非標的化ルシフェラーゼ遺伝子に対する対照siRNA粒子を提供した。群6におけるマウスには、リポ多糖LPS0111:B4、SigmaAldrichの処方物を投与したが、これは、追加の対照群としてサイトカイン放出を刺激した。群3、4および5におけるマウスには、尾静脈中に10mL/kgボーラスとしてsiEGFP粒子の処方物を投与した。処方物を、1日おきに静脈内投与した各マウスに関する2回の投与の合計。投与量mg/kgでおよび投与される処方物の体積を、表AAに示す。群1~6の各々において、2回目最終投与後24時間、72時間および168時間の各々で、3匹のマウスから腫瘍試料を収集した。収集腫瘍物質を、分析のために3つの個々の小片に切断した。切片を直接ドライアイス上に置くか、RNAlater登録商標LifeTechnologiesに入れるか、またはリン酸塩緩衝生理食塩水5ウシ胎仔血清および0.1アジ化ナトリウムを補足で単一細胞に解離した。腫瘍細胞におけるEGFPノックダウンに及ぼす処理の影響を、FACS解析、EGFP蛍光およびEGFPRNAレベルにより分析した。FACScan商標血球計算を用いて、収集腫瘍試料から単離された個々の細胞における蛍光を測定した。FACScan商標フローサイトメーターは、データ収集ソフトウェアとしてCellQuest商標を利用し、10,000で設定された所望数の事象を有する。収集データ内の細胞の特定集団を考慮するために、2つのゲートを作成した。非経口ゲートを非EGFP細胞株を用いて確定し、同時に、蛍光ゲートをビヒクル対照単離細胞を用いて選択した。ゲートの性質は、処理後にもはや蛍光性でないか、または処理による影響を受けないとして、細胞をスコアした。EGFP蛍光分析では、最初に、収集腫瘍の試料中のEGFP蛍光のレベルを総タンパク質に関して正規化した。BCA検定キットThermoFisherを用いて、総タンパク質を確定した。総タンパク質の算定後、蛍光プレート読取器により50μgのタンパク質を蛍光に関して測定した励起波長=488、発光波長=535。ビヒクル対照と比較した場合の蛍光出力における減少パーセントを確定することにより、EGFP蛍光に関するノックダウン値を算定した。RNA解析では、EGFP特異的プローブとのハイブリダイゼーションならびに分枝プローブとのサンドイッチ核酸ハイブリダイゼーションを用いた検出により、収集腫瘍からの抽出RNAの試料において、EGFPmRNAのレベルを確定した。標識プローブとのハイブリダイゼーションにより作り出される発光の減少を決定することにより、EGFPmRNAに関するノックダウン値を算定した。この前に、試料を、ヒトGAPDHグリセルアルデヒド3-ホスフェートデヒドロゲナーゼに対して正規化したが、これは、EGFPハイブリダイゼーション段階と並行して完了した。ヒト遺伝子は、注入腫瘍細胞の比較を可能にし、マウスからのあらゆる夾雑を防止した。結果を、表BBに示す。5’-RLM-RACEPCRを用いて、EGFPmRNAにおける低減が、部位特異的siRNA-特異的切断のためであることを確証した。siEGFPによるsiRNA-特異的切断は、RNアーゼを活性化し、RNAを切断する多重タンパク質複合体による遺伝子のヌクレオチド414および415間の特異的切断を生じる。次に、腫瘍試料から抽出された精製RNA24時間時点を、GeneRacer商標AdvancedRACEキットInvitrogen,L1502-01で用いた。遺伝子特異的プライマー5’TCAGGTTCAGGGGGAGGTGTGG-3’を用いて、試料を逆転写して、順方向GeneRacer商標5’プライマー特異的結紮化RNAオリゴのために設計された5’CGACTGGAGCACGAGGACACTGA-3’および逆方向遺伝子特異的プライマー5’CGCCGATGGGGGTGTTCTGC-3’を用いて、PCR増幅を起こさせた。標準PCR条件を用いて、25サイクルの増幅を完了した。増幅生成物を図4に示すが、これは、PCE生成物の4アガロースゲルを表しており、そして24時間試料に関する5’RLMRACE-PCRによるノックダウンの確証を示している。予測プライマー長は、333塩基対であった。レーンは、以下の通りである:1、マーカー100bpDNAラダー;Promega;2、ビヒクル;3、LPS;4、siLUC;5、実施例61aに従って調製された粒子;6、実施例55aに従って調製された粒子;および7、実施例32aに従って調製された粒子。レーン5、6および7は、レーン1、マーカーレーンにおける300塩基対帯域と同一移動度を有する顕著な帯域を示す。したがって、300bpに関する予測長の帯域を有するレーン5、6および7における大帯域のアラインメントは、それぞれ実施例61a、55aおよび32aに記載されたような粒子形状におけるRNAi切断部位の存在を確証する。実施例71で用いた方法MDA-MB-231/GFP細胞MDA-MB-231/GFPヒト乳癌細胞株CellBiolabsIncを、レンチウイルスベクタープラスミド上でないを用いて、増強EGFP遺伝子を伴うゲノム中に安定的にトランスフェクトした。細胞培養MDA-MB-231/EGFP細胞を、完全培地DMEM、10FBS、ペニシリン/ストレプトマイシン溶液、0.1mMMEM非必須アミノ酸、2mML-グルタミン中で、37°C、5CO2で、増殖させた。第7継代すなわち、フラスコが集密になったら、細胞培養フラスコから新しいフラスコ中に取り出すための細胞の第7次トリプシン処理細胞を、ヌードマウスにおける乳房脂肪パッド中に移植した。フローサイトメトリー腫瘍を切断後、リン酸塩緩衝生理食塩水PBS、5ウシ胎仔血清FBSおよび0.1アジ化ナトリウムからなる解離緩衝液を利用して、組織解離を完了した。手でもてる大きさの乳棒と乳鉢を用いて組織を解離して、無傷細胞が通過するのに十分な隙間を作った。等体積の氷冷2パラホルムアルデヒド溶液を、単離細胞を固定するために付加し、FACS分析まで4°Cで保存した。BectonDickinsonFACScan商標フローサイトメーターを利用して、2×106細胞を分析した。MDA-MB-231親細胞非EGFPを用いて、EGFP細胞と比較した非EGFP細胞の適正なゲート開閉を確定した。蛍光タンパク質分析ドライアイス上で即時凍結された腫瘍試料を、T-PERThermoFisherの存在下で解凍させて、HALT登録商標プロテアーゼ阻害剤ThermoFisherを補足した。次に、2mLのT-PER中でTissuemiserThermoFisherを利用して、試料を均質化した。メーカーの記載どおりにBCAタンパク質検定ThermoFisherを用いて、総タンパク質濃度を測定して、マイクロプレート手順を用いて完了させた。2mg/mLのストック濃度からアルブミン標準曲線を調製することにより、タンパク質濃度を決定した。SpectraMax登録商標M5MolecularDevicesを用いて、50μgの総タンパク質/ウェルを付加して、EGFP蛍光を検出した。RNA抽出および定量腫瘍試料を、加工処理するまで-20°Cで1.5mLのRNAlater登録商標LifeTechnologies中に保存した。手でもてる大きさの微量遠心分離管乳棒を用いて溶解緩衝液を均質化して、その後、12,000gで1分間、遠心分離して、あらゆる破砕屑を除去した。次いで、上清を微量遠心分離管に移した。次に、メーカーの記載どおりに示唆されたプロトコールを用いて、RNAを溶解物から抽出した。その後、精製RNA試料を、さらなる定量および下流解析まで、-80°Cで保存した。RiboGreen登録商標RNA定量化キットLifeTechnologiesを用いて定量を完了したが、これは、96-ウェルプレート蛍光ベースのRNA定量検定である。RNA確定は、標準曲線を作成するために提供されたRNA標準に基づいている。蛍光シグナルを、バックグラウンドを差し引いたRNA濃度に対してプロットした。試料はすべて、三重反復実験で完了した。示唆されたプロトコールに対する変法は、総体積低減に限定され、メーカーの記載どおりに、高範囲標準曲線を調製した。SpectraMax登録商標M5を利用して、蛍光を測定した。QuantiGene登録商標2.0QuantiGene登録商標2.0試薬系および検定キットAffymetrixを用いて、標的特異的RNA、特にEGFPおよびGAPDHを定量した。次いで、ハウスキーピング遺伝子からのシグナルを用いて、収集された全データ試料全体の遺伝子発現を正規化する。それぞれ、EGFPのGAPDHに対する比を用いて、各試料を正規化した。その時点と比較した場合の、各試料の変化パーセントから、ノックダウンを算定した。5’RLMRACE-PCRcDNA末端ポリメラーゼ連鎖反応の5’RNA-リガンド媒介性迅速増幅5’RLMRACE-PCRを、InvitrogenGeneRacer商標マニュアルに記載されたとおりにわずかな修正を加えて、実施した。簡潔に述べると、T4RNAリガーゼ5Uを用いて、37°Cで1時間、100ngの総単離RNAを、GeneRacer商標RNAアダプター5’-CGACUGGAGCACGAGGACACUGACAUGGACUGAAGGAGUAGAAA-3’と直接ライゲーションを行った。ウシ腸ホスファターゼによるRNAの脱リン酸化、ならびにmRNAキャップ構造の除去とを省いた。フェノール抽出および沈澱後、GeneRacer商標キットのSuperScript商標IIIモジュールおよびEGFP遺伝子特異的逆プライマー5’-TCAGGTTCAGGGGGAGGTGTGG-3’を用いて、試料を逆転写した。切断生成物を検出するために、RNAアダプターGR5’:5’-CTCTAGAGCGACTGGAGCACG-3’と相補的なプライマーを、EGFPプライマーEGFP1:5’-AGCCCCTCTAGAGTCGCGGC-3’EGFP2:5’-CGCCGATGGGGGTGTTCTGC-3’EGFP3:5’-CGGTTCACCAGGGTGTCGCC-3’とともに用いて、PCRを実施した。4E-Gel登録商標EXLifeTechnologies電気泳動により増幅生成物を分解して、E-Gel登録商標試料負荷緩衝液LifeTechnologiesで可視化した。実施例72.EGFPのinvivosiRNAノックダウンEGFPを発現するよう遺伝子工学処理された培養MDA-MB-231乳癌細胞MDA-MB-231/GFP、CellBiolabsIncを、ヌードマウスの乳房脂肪パッド中に移植した。13の群9匹/群の各々におけるマウスに、表WWWに記載するように、対照またはsiEGSP処方物を投与した。群1のマウスに、ビヒクル10スクロースの処方物を投与したが、これは、無ノックダウンの対照を提供した。群2のマウスには、実施例61bに従って調製した粒子を投与したが、これは、非標的化ルシフェラーゼ遺伝子に対する対照siRNA粒子を提供した。群3~13におけるマウスには、尾静脈中に10mL/kgボーラスとして表WWWで参照される実施例に記載したように調製したsiEGFP粒子の処方物を投与した。粒子の特性を、下記の表VVVに示す。実施例61aによる粒子の2つのバッチを、同一構成成分および方法を用いて調製したが、但し、siRNAEGFPに対するは、綿花亜空の2つの異なるバッチから得た。投与後24時間、72時間および120時間の各々で、3匹のマウスから腫瘍試料を収集した。次いで、収集した腫瘍物質を、分析のために3つの個々の小片に切断した。切片を、1.5mLのRNAlater登録商標LifeTechnologiesに入れるか、直接ドライアイス上に置くか、またはリン酸塩緩衝生理食塩水5ウシ胎仔血清および0.1アジ化ナトリウムを補足で細胞に解離した。EGFPノックダウンに及ぼす処理の影響を、EGFP蛍光の分析により確定した。EGFP蛍光分析では、T-PER完全プロテアーゼ阻害剤カクテルThermoFisherを補足を利用して、腫瘍試料から総タンパク質を抽出した。均質化の前に、1.5mLのT-PERの存在下で、凍結腫瘍を解凍した。BCA検定キットThermoFisherを用いて、総タンパク質を確定した。総タンパク質の算定後、SpectraMax登録商標M5MolecularDevices蛍光プレート読取器を用いて、50μgのタンパク質をEGFP蛍光に関して測定したフィルターを励起波長=488、発光波長=535に設定。指示カットオフ:535nm。下記の表XXXに示すように、同一時点からの非処理ビヒクルタンパク質試料と直接比較した場合のEGFPシグナルの減少から、腫瘍タンパク質のノックダウン値を算定した。対照粒子で処理された群2のマウスと比較すると、群3~13の粒子のすべてが、ノックダウンの増大を示した例えば、72時間目に、ビヒクル対照群および群2の対照粒子と比較した場合。実施例61aに従って調製された粒子は、最大ノックダウンパーセンテージを示した。実施例72a.EGFPのinvivosiRNAノックダウンMDA-MB-468/GFP細胞CellBiolabsIncを、継代10まで、RPMI-1640/10FBS/1ペニシリン/ストレプトマイシン抗生物質すべてInvitrogenから中で増殖させた。MDA-MB-468/GFPモデルは、緩徐増殖腫瘍モデルすなわち、実施例72で用いた迅速増殖腫瘍モデルであるMDA-MB-231/GFPと比較した場合である。同型接合雌NCRnu/nuヌードマウスTaconicFarmsに関して、以下のinvivo試験を実施した:1日目に、5×106細胞MDA-MB-468/GFP-継代10、上記参照を、100μLの50RPMI-1640/50マトリゲルBDBiosciencesInc中に混合し、各マウスの乳房脂肪パッド中に移植した。13日目に、体重20.4~26.4g、平均腫瘍体積57~69mm3のマウスを、2つの群ビヒクルおよび粒子に分け、各群は、測定される3つの時点、すなわち24、72および120時間の各々に関するマウスを有した。各腫瘍保有マウスに、ビヒクルトリスEDTA緩衝液中10スクロースまたは実施例61aに従って調製された粒子2.2mg/kgの単一回処置を施し、10mL/kgの用量体積で尾静脈中に静脈内投与した。24時間14日目、72時間16日目および120時間18日目時点で、各処理群から腫瘍を取り出した。次いで、収集した腫瘍物質を、分析のために3つの個々の小片に切断した。切片を、1.5mLのRNAlater登録商標LifeTechnologiesに入れるか、直接ドライアイス上に置くか、またはリン酸塩緩衝生理食塩水5ウシ胎仔血清および0.1アジ化ナトリウムを補足で細胞に解離した。タンパク質およびEGFP確定のために加工処理するまで、-80°Cで凍結試料を保存した。EGFP蛍光を分析することにより、実施例61aに従って調製した粒子による処置の影響を確定した。T-PERThermoFisherの存在下で、凍結腫瘍を解凍し、HALT登録商標プロテアーゼ阻害剤カクテルThermoFisherを補足した。次に、補足T-PER400μL中で、手で持てる大きさの乳鉢および乳棒を用いて試料を均質化した。BCA検定キットThermoFisherを用いて、総タンパク質を確定したが、この場合、タンパク質濃度は、2mg/mLのストックからアルブミン標準曲線を調製することにより確定した。総タンパク質の算定後、50μgのタンパク質を100μLのPBS中に希釈し、SpectraMax登録商標M5MolecularDevices蛍光プレート読取器を用いて、蛍光に関して測定した励起波長=488、発光波長=535。下記の表YYYに示すように、同一時点からのビヒクル対照と直接比較した場合のEGFPシグナルの減少を確定することにより、EGFP蛍光に関するノックダウン値を算定した。表YYYで分かるように、実施例61aに従って調製された粒子で処理されたMDA-MB-468/GFPマウスは、同一時点でMDA-MB-231/GFP腫瘍対比して、実施例72参照で観察されたノックダウンレベルよりはるかに大きいレベルで、EGFPノックダウン延長を示した。この結果は、実施例61aに従って調製された粒子への曝露後の、細胞のinvitro生存度試験においてMDA-MB-231/GFPおよびMDA-MB-468/GFP細胞株間に測定可能な変動は認められなかったため、生理学的基礎を有すると思われる。さらに、MDA-MB-468/GFPモデルにおける全体的腫瘍体積は、処理とは無関係であると思われた。すなわち、ビヒクル処理および粒子処理腫瘍はともに、0~72時間で体積を増大し、次いで、120時間時点までに体積を低減した。EGFPノックダウンは腫瘍増殖とは関連しないため、ビヒクルおよび粒子群は、同様の腫瘍増殖特質を有すると予期された。実施例73.マウスにおけるsiRNA粒子の耐容性雄C57BL/6マウスに、遊離siEGFP溶液、実施例61bに記載したようなsiLUCジスルフィド粒子、実施例32aに記載したようなsiEGFP粒子、実施例55aに記載したようなsiEGFP粒子、または実施例61aに記載したようなsiEGFP粒子を投与した表VVV参照。投与は、3mg/kgの用量で、q2d×2の肩に、静脈内投与であったすなわち、試験初日および試験3日目に、すなわち1日目および3日目に、すなわち2日置いて2回処置。2回目最終の処理後48時間に、血液を採取した。白血球数、赤血球数、ヘモグロビン、ヘマトクリット、平均血球体積、平均血球ヘモグロビン濃度、好中球WBC数の、リンパ球、単球、好酸球、好塩基球、血小板概算値、多染性、赤血球不同症、絶対好中球数、絶対リンパ球数、絶対単球数、絶対好酸球数、絶対好塩基球数に関して、血液を分析した。遊離siEGFP溶液またはsiEGFP粒子処方物のいずれを摂取しているマウスにおいても、これらのパラメーターにおける有意の変化は認められなかった。血液から血清を分離し、アルカリ性ホスファターゼ、SGPT、SGOT、CPK、アルブミン、総タンパク質、グロブリン、総ビリルビン、直接的ビリルビン、間接的ビリルビン、BUN、クレアチニン、コレステロール、グルコース、カルシウム、リンおよび重炭酸塩に関して分析した。遊離siEGFP溶液またはsiEGFP粒子処方物のいずれかを摂取しているマウスにおいて、これらのパラメーターにおける有意の変化は認められなかった。処理動物の血清において普通に分析される追加のパラメーターは、塩化物、カリウムおよびナトリウムであるが、しかし分析されるべきこれらのパラメーターにのために、マウスから採取された血清は十分でなかった。血清化学における変化がないという見地から、siEGFP粒子処方物による塩化物、カリウムおよびナトリウムに及ぼす任意の作用が存在したとは考えられない。実施例74.マウスにおける循環サイトカイン濃度雄C57BL/6マウスに、実施例32aに記載したようなsiEGFP粒子;実施例55aに記載したようなsiEGFP粒子;または実施例61aに記載したようなsiEGFP粒子を投与した表VVV参照。処理は、3mg/kgの用量での単一回静脈内投与であった。陽性対照であるリポ多糖LPS0111:B4、SigmaAldrichを、0.1mg/kgの用量で静脈内投与した。粒子対照は、結合されていない非ポリマー結合siEGFP溶液およびsiLUC粒子実施例61b記載で、各々、3mg/kgの用量で静脈内投与した。処理後2時間および6時間に、血液を採取した。2時間時点からの血清を、腫瘍壊死因子-アルファ、インターロイキン-ラムダ、インターロイキン-1ベータ、インターロイキン-6、インターロイキン-10、インターロイキン-12、ケラチノサイト誘導性サイトカインおよびインターフェロン-ガンマに関して分析した。この試験の結果を、表EEEに示す。陽性対照リポ多糖処理は、測定したサイトカインのすべてにおいて、有意の増大を伴った。粒子対照遊離非ポリマー結合siEGFP溶液およびsiLUC粒子実施例61b記載、ならびに粒子処方物、すなわち実施例32aに記載したようなsiEGFP粒子、実施例55aに記載したようなsiEGFP粒子、または61aに記載したようなsiEGFP粒子は、測定したサイトカインのいずれにおける増大も刺激しなかった。6時間時点からの血清を、同一サイトカインに関して分析した。陽性対照リポ多糖処理は、6時間時点で測定したサイトカインのすべてにおいて有意の増大を伴ったが、しかしその濃度は2時間時点より低かった。遊離非粒子結合siEGFP溶液、実施例32aに記載したようなsiEGFP粒子、実施例55aに記載したようなsiEGFP粒子、または61aに記載したようなsiEGFP粒子は、測定したサイトカインのいずれにおける増大も刺激しなかった。実施例61bに記載したようなsiLUC粒子は、6時間時点でのインターフェロン-ガンマにおいてのみ有意の増大を刺激したが、測定した他のサイトカインのいずれにおいても刺激しなかった。実施例61bに記載したようなsiLUC粒子により刺激される循環インターフェロン-ガンマにおける増大は、siLUCのオフターゲット効果であり得る。実施例75.マウスにおけるsiRNA粒子処方物の耐容性非腫瘍保有雄C57BL/6マウス体重22.5~26.5gに、表FFFにおける処方物を尾静脈を介して静脈内注射した。注射後1日目、3日目および5日目に、体重における変化に関してマウスを査定した。表FFFは、群、投与処方物、用量、レジメンおよび群当たりのマウス数を記載する。表GGGに示すように、3mg/kgの用量で、q2d×21日目および3日目に投与でのsiEGFP粒子処方物の投与は、マウスにおいて体重損失を引き起こさなかった。実施例76.siRNA粒子処方物によるヒト血液における補体活性化に関する検定ヒト全血を、実施例61aおよび実施例32aに従って調製された粒子に曝露して、粒子が血液中の補体C3aまたはBbを活性化したか否かを確定した。ヘパリン処理非と全血の3つの試料を、BioreclamationLLCから入手して、入手後約1日で分析した。被験者は、36、49および52歳男性であった。血液を12ウェル細胞培養プレート上のプレート中に、各個体血液に関して1プレートで入れた。2mLの血液を8ウェル/プレートの各々に入れたすなわち、すべてのプレートウェルを用いたわけではない。各々2mLの血液アリコートを、以下の表HHHに従って処理した。したがって、各処理群は、n=3を有した。リポ多糖LPSを、陽性対照として用いた。各対応ウェルに処理を加えた後、プレートを覆い、卓上型インキュベーター/振盪器中に入れて、37°Cで中等度にゆっくり150rpm振盪した。1時間後、各ウェルからの1mLの血液を、1.5mLエッペンドルフ管に移して、10,000rpmで10分間、遠心分離した。MicroVue商標補体EIAキットQuidelCorpSanDiegoCAで、補体活性化の古典的および代替的経路のマーカーとしてのC3aに関して、ならびに補体活性化の代替的経路のマーカーとしてのBbに関して、血漿を直ちに分析した。それぞれのMicroVue商標補体EIAキットに含まれた使用説明書に従って、C3aおよびBbを測定した。図5に示すように、C3aおよびBbのレベルは変化せず、正常の生理学的範囲内のままであった。粒子処方物は何れも補体C3aまたはBbを活性化しなかったが、これは、siEGFP粒子がヒト全血中の補体を活性化しないことを示唆している。他の実施形態は、特許請求の範囲に示される。"