哺乳類の血液から病原体又は該病原体由来の毒素を除去する方法であって、該病原体は、炭疽菌、緑膿菌、及び黄色ブドウ球菌から成る群より選択されるメンバーであり、a.該病原体又は毒素に対する結合親和性を有する、中実基体上に固定された炭水化物に、血液試料を、該中実基体が血液試料中の該病原体又は毒素に結合することができる条件で接触させる工程と、b.該試料を該基体から分離し、それにより、該病原体若しくは該毒素が少なくとも部分的に保持されるか、又は該基体と除去した試料に含まれる該病原体若しくは毒素の量が減少する工程とを含む方法。該病原体が炭疽菌である、請求項1に記載の方法。該基体が、シンデカン上のヘパリン硫酸セグメントに結合可能な毒素に対する親和性をもつ、請求項1に記載の方法。該基体が、炭疽毒の防御抗原に対する親和性をもつ、請求項1に記載の方法。該中実基体が、ガラス、セルロース、酢酸セルロース、キチン、キトサン、架橋デキストラン、架橋アガロース、ポリウレタン、ポリメタクリル酸メチル、ポリエチレン又はエチレンと他の単量体との共重合体、ポリエチレンイミン、ポリプロピレン、ポリスルホン、ポリアクリロニトリル、シリコーン及びポリイソブチレンから成る群より選択される、少なくとも1種のメンバーから構成されている、請求項1~4のいずれか1項に記載の方法。該炭水化物がヘパリンである、請求項1~5のいずれか1項に記載の方法。少なくとも1種の病原体又は該病原体由来の毒素を血液から除去する方法であって、該病原体が、炭疽菌、緑膿菌、及び黄色ブドウ球菌から成る群より選択されるメンバーであり、血液又は血清の試料を、高表面積の中実基体に50ml/分以上の流速で流して通過させる工程を含み、該中実基体の表面は、該病原体又は毒素に対する結合親和性をもつヘパリンを含み、該基体は、該血液中の吸着質が吸着の前に該基体中の細孔を通過する必要がないように十分に無孔であり、かつ、該基体の個々の部分の間の間隙流路空間の大きさと間隙基体表面積の量が、該血液流又は血清流が50ml/分以上の流速で該基体に接触した場合に、該病原体又は毒素が該ヘパリンに結合して該血液又は血清から分離され、かつ、該基体を通過する該血液又は血清及びそれに含まれる吸着質の輸送がブラウン拡散輸送を上回る対流輸送の手段によるようになっているものである、方法。該基体が、無孔の硬質ビーズ若しくは粒子で充填したカラム、硬質な網状発泡体で充填したカラム、内部流路をもつ焼結ビーズ製の硬質なモノリス床で充填したカラム、硬質な織布若しくは不織布で充填したカラム、硬質な糸又は中空であってもよい単繊維で充填したカラム、螺旋状のカートリッジ、又はビーズ、硬質な網状発泡体、焼結ビーズ、布、糸及び単繊維から成る群より選択される少なくとも2種のメンバーの組み合わせを含む、請求項7に記載の方法。該中実基体が、1種以上の多糖類でコーティングされたポリエチレンビーズを含む、請求項7に記載の方法。少なくとも1種の該多糖類が、ヘパリン、ヒアルロン酸、サリチル酸及びキトサンから成る群より選択される、請求項9に記載の方法。血液から少なくとも1種の病原体又は該病原体由来の毒素を除去する方法であって、該病原体が炭疽菌、緑膿菌、及び黄色ブドウ球菌から成る群より選択されるメンバーであり、血液試料を、容器に入った硬質ポリエチレンビーズに接触させて50ml/分以上の流速で流す工程を含み、該ビーズの表面は、該病原体又は毒素に対する結合親和性をもつヘパリンを含み、該ビーズは、血液が該基体中の細孔を通過しないように十分に硬質であり、かつ、個々の該ビーズ間の間隙流路空間の大きさと該ビーズの間隙表面積の量は、該血液を該基体に50ml/分以上の流速で流して接触させた場合に、該病原体又は毒素が該ヘパリンに結合して該血液から分離し、かつ該基体を通過する該血液の流動輸送がブラウン拡散輸送法を上回る対流輸送手段によるようになっているものである、方法。血液又は血清の流速が、およそ150~2000mL/分の範囲である、請求項7~11のいずれか1項に記載の方法。該ビーズがポリエチレンの重合体を含む、請求項2~12のいずれか1項に記載の方法。該ビーズの直径が、100~450ミクロンの範囲である、請求項2~13のいずれか1項に記載の方法。該ビーズの平均直径が0.3mmである、請求項14に記載の方法。該ビーズが、ビーズ1グラム当たり0.5~10mgのヘパリンでコーティングされている、請求項2~15のいずれか1項に記載の方法。該ビーズが、ビーズ1グラム当たり2±0.5mgのヘパリンでコーティングされている、請求項16に記載の方法。該ヘパリンの平均分子量が約8kDaである、請求項1~17のいずれか1項に記載の方法。該ヘパリンが、末端での共有結合で該ビーズに結合している、請求項1~18のいずれか1項に記載の方法。該基体が、炭疽菌致死毒素、炭疽菌防御抗原、炭疽菌浮腫因子、炭疽菌致死因子、炭疽菌ポリグルタミン酸カプセル、アンスラリシンanthralysinO、アンスラリシンanthralysinB、黄色ブドウ球菌α-毒素、黄色ブドウ球菌β-毒素、及び緑膿菌LasAから成る群より選択される少なくとも1種のメンバーに結合する、請求項1~19のいずれか1項に記載の方法。炭疽菌の治療を、そのような治療を必要としている哺乳類において行う方法であって、a哺乳類由来の血液試料を、容器に入った硬質なポリエチレンビーズを含む中実基体に、少なくともおよそ150ml/分の流速で流して接触させる工程と、b該中実基体から該血液を分離する工程を含み、該ビーズの表面は、炭疽菌又はそれ由来の毒素に結合親和性をもつヘパリンを含み、該ビーズは、血液が該基体中の細孔を通過しないように十分に硬質であり、かつ、個々の該ビーズ間の間隙流路空間の大きさと該ビーズの間隙表面積の量は、該血液を少なくともおよそ150ml/分の流速で流して該基体に接触させた場合に、該炭疽菌又は該毒素が該ヘパリンに結合して該血液から分離され、該基体を通過する該血液の流動輸送がブラウン拡散輸送法を上回る対流輸送手段によるようになっているものである、方法。該血液を同じ哺乳類から採取して戻す、請求項21に記載の方法。サイトカイン又は病原体を除去するための該方法を、該血液の少なくとも1種の別の体外治療と併用して行う、請求項1~22のいずれか1項に記載の方法。該少なくとも1種の別の体外治療が、心肺バイパスCPB、血液透析、及び酸素化から成る群より選択される少なくとも1種のメンバーを含む、請求項23に記載の方法。1.血液からの病原体又は毒素の除去本発明の第一の側面は、中実基体例えばヘパリンでコーティングした基体に血液を接触させることにより、哺乳類の血液などの血液から、病原体及び/又は毒素を除去する方法を提供する。この方法では、ヘパリンを基体の表面に固定する。発明者らは、表面に固定したヘパリンが、多量の病原体、毒素及び/又は毒性因子を血液から除去するのに効果があることを発見した。毒性因子とは、炭疽菌、黄色ブドウ球菌、及び緑膿菌などの病原体から放出され、それらの宿主細胞中でのコロニー形成、宿主の免疫反応からの回避、宿主細胞への侵入及び宿主細胞からの脱出、並びに細胞から栄養素の獲得を可能にする毒素である。多くの毒性因子は、細胞表面のシンデカンであるヘパラン硫酸などのプロテオグリカンを標的とする。ヘパリンはヘパラン硫酸と構造が非常によく似ており、ヘパリンもまた毒性因子に結合する。さらに、ヘパリンのような炭水化物を表面に結合させた高表面積のカートリッジに感染した血液を通過させることで、通常は内皮細胞の表面を傷つけてコロニー形成を誘導する毒性因子を除去することができる。これらの毒性因子を除去することによって内皮細胞の表面はより保護され、従来型の抗生物質が感染を引き起こしている有害な細菌を殺すことができる。シンデカンは、ヘパラン硫酸プロテオグリカンセグメントHSPGを含む膜貫通型タンパク質であり、大部分の細胞型に存在する。HSPGが、凝固カスケードから、成長因子のシグナル伝達、リパーゼの結合と活性、ECMへの細胞接着とそれに続く細胞骨格形成、微生物による細胞の感染過程までの範囲の、多様な生物学的過程を制御することが以前から知られている。それらは、特定のコアタンパク質をもつ複合体分子であり、コアタンパク質には様々な数のグリコサミノグリカンGAG鎖が結合している。鎖の数が異なるだけではない。シンデカンは主にヘパラン硫酸GAGをもつが、いくつかはさらに、コンドロイチン/デルマタン硫酸鎖をもつ。さらに、ヘパラン硫酸鎖の長さ、グルクロン酸からイズロン酸へのエピマー化、鎖の全体的な硫酸化、及び単糖のスルホン化の位置は異なる場合がある。AnneWoodsJClinInvest2001107935941参照により本明細書に組み込まれる。内皮細胞面で最も一般的なシンデカンであるSynd1は結合に関与しており、かつ、多数の分子を制御している。これらには、成長因子及びサイトカインが含まれる。シンデカン-1は、このファミリー中で、同定クローニングされた最初のHSPGであった。これは主に上皮細胞に限定されているが、発達の間には凝集している間葉細胞でも見られ、また、前駆Bリンパ球及び血漿細胞でも見られる。シンデカン-1が上皮の側底部に分布していることは接着に関する役割と矛盾が無く、シンデカン-1に対するアンチセンスmRNAを上皮細胞に導入すると、上皮-間葉転換が起こり、細胞のコラーゲンゲルへの侵入が活性化されることから、シンデカン-1は上皮の形態を制御していると考えられている。これに付随してこれらの細胞で起こるE-カドヘリンの消失は、シンデカン-1とE-カドヘリンの連動した制御を示唆しており、実際に、E-カドヘリンの発現が低下すると、シンデカン-1の生産もまた低下する。初期の研究から、シンデカン-1がECMへの細胞接着に関与している可能性が示された。通常はこのシンデカンを欠損しているシュワン細胞にシンデカン-1を導入すると、接着斑とストレスファイバーの伸展が増大し、形成が促進される。伸展している間シンデカン-1は、膜の微細繊維系に共局在して界面活性剤不溶性になるが、接着斑には局在しない。実際に、シンデカン-1が接着斑に存在しているとの報告は1つしかない。興味深いことに、通常は細胞骨格への結合を示していると考えられる界面活性剤不溶性は、細胞質ドメインの存在を必要としない。ごく最近の研究から、シンデカン-1の膜貫通型ドメインは、特殊な型のエンドサイトーシスとして、界面活性剤に不溶性の脂質ラフトと関連していることが分かった。AnneWoodsJClinInvest2001107935941参照により本明細書に組み込まれる。シンデカンはまた、形態形成、宿主防御、及び組織修復に役立つ。シンデカンは、コロニー形成及び、細菌やウイルスの細胞への侵入の阻止を助けることができ、病原体による毒性の潜在的機序は、病原体がシンデカンにあるヘパリン硫酸セグメントに結合する毒性因子を放出した時に開始され、その後細胞表面からのシンデカンの切断を促進すると考えられている。これによって、その後、細胞表面上に細菌細胞やウイルスがコロニーを形成し、細胞内に侵入することが可能になる。この機序は、炭疽菌Banthracis、黄色ブドウ球菌Saureasu、及び緑膿菌Paeruginosaを含む複数の病原体について提示されており、これらの菌については、発症している間にSynd1を打ち消すことが分かっている。これらの病原体が、上皮細胞からのSynd1の細胞外ドメインの切断を促進し、それによって上皮バリアの完全性を構成していることが分かった。PopvaTetalBMCMicrobiology2006687February2006Accelerationofepithelialcellsyndecan1sheddingbyanthraxhemolyticvirulencefactor参照により本明細書に組み込まれる。3種類の病原体は全て、synd1を標的としていると考えられている。ChenmYetalMolCells26415426Nov302008MicrobialSubversionofHeparanSulfateProteoglycans参照により本明細書に組み込まれる。本発明では、ヘパリンを表面に結合させた高表面積の血液ろ過/吸着カートリッジを用い、感染血液を体外循環によってこの表面を通過させる。血液中に排出された毒性因子は表面結合したヘパリンに結合するため、血液から毒性因子を除去することができる。高濃度の毒性因子を血液から除去することにより、コロニー形成及び内皮細胞表面の損傷が低減し、標準的な抗菌治療を行う期間を延ばすことができる。加えて、高表面積のヘパリンカートリッジに血液中の細菌が接触した場合には、細菌が放出する毒性因子は、表面結合したヘパリンに直接結合する。この治療法はさらに、炭疽菌、黄色ブドウ球菌、及び緑膿菌の血液感染のような、重篤な感染症の治療に用いることができる。3種類の病原体のいずれかによって引き起こされた感染を、本発明に従って治療することにより、以下の毒素を部分的に又は完全に、血液から除去することができる。a炭疽菌について防御抗原PA、浮腫因子EF、致死因子LF、ポリグルタミン酸カプセル、アンスラリシンAnthralysinOAnlO、アンスラリシンAnthralysinBAnlB、致死性毒素LTを含む、3種類のタンパク質で構成される毒素炭疽菌毒素b黄色ブドウ球菌についてα-毒素β-毒素c緑膿菌についてLasA体外血液循環に特有の流速では、安全に操作するために、比較的速い流速が可能になるように吸着床を設計する必要がある。本発明の一側面では、大幅な圧力損失を起こすことなく、基体を通過する血液の流速を大きくできるように、基体は十分に大きな間隙容積をもつように設計される。すなわち、哺乳類患者から血液を採取し、吸着質の吸着床表面への送達が主に強制対流によることを特徴とする一定の流速で、血液を基体に通す。これは、非常に多孔質な媒体例えば多孔質シリカ、セファデックス、架橋ポリスチレン製サイズ排除媒体、緻密な若しくは微多孔質の中空繊維、又はシート状の膜などを用いた場合、例えばサイズ排除クロマトグラフィー、又は他の形態の親和性治療での、非常にゆっくりとした分子の拡散特徴の過程とは対照的である。本発明のこの側面は、臨床での体外血液循環、例えば透析、心肺バイパス、及び体外膜型血液酸素化で一般的に用いられる、安全な流速の範囲内での十分な吸着能を提供する。このことは、吸着質が吸着媒体の上又は媒体中にある結合部位に結合する前に、微多孔膜及び/又は吸着媒体中の顕微鏡レベルの細孔に拡散する必要があり、そのため、通過している間に各血液を十分に分離するためには流速を非常に遅くする必要がある、多くの多孔質の吸着媒体で一般的な吸着質の非常に遅い拡散輸送とは正反対である。対流輸送の間に起こる病原体及び毒素のヘパリンへの結合は、体外血液循環の安全な操作で一般的に用いられる、比較的高流速な条件、例えば約>50mL/分から好ましくは>150mL/分しかし約2000mL/分未満で特に効果的である。一方、微多孔質媒体中の細孔での吸着では、実用的な大きさの吸着媒体を通過させて血液を十分に分離又は精製するためには、より遅い流速、すなわち50mL/分未満から1mL/分未満程度にすることが必要になる場合がある。厳密に言えば、吸着質が吸着部位に移動するために媒体中での及び/又は微多孔膜を通過する拡散輸送が必要とされる媒体では、吸着カラム上での滞留時間を非常に長くする必要があるが、それと比較して、吸着質を強制対流によって本質的に無孔の媒体上の結合部位へ運ぶ場合には滞留時間がより短くて済むと考えられている。しかしながら、安全、かつ、有効な吸着カートリッジ、カラム、フィルターなどの実用化には、大きさの制限、特にそれらが保持できる血液の最大容量、及び吸着媒体を通過する血液又は血清の流速に制限がある。このような理由から、吸着デバイスを通過する平均流速が重要な設計変数であると考えられている。血流からサイトカイン又は病原体を除去する際の対流及び拡散の動力学を比較することができる。拡散輸送に依存する吸着媒体には通常、顕微鏡レベルの細孔が存在するために、内部表面積が非常に大きい多孔質材料が用いられる。一方、対流輸送に適した媒体は通常、粒子、ビーズ、繊維、網状の発泡体、又は螺旋状のカートリッジのような、中実な、すなわち本質的に無孔の材料間の、顕微鏡レベルの流路又は目に見えるレベルの間隙に依存している。強制対流輸送に依存している媒体は通常、高流速により適しているが、より遅い拡散輸送に依存している媒体は、高流速で滞留時間が短い場合には効果が非常に低い。このため、体外血液ろ過デバイスでは、吸着質が吸着媒体中の細孔にゆっくりと拡散する必要のない吸着媒体がより好ましい。血液を、人工材料から作られた回路にポンプを用いて通す場合、血液の滞留を防ぎ、凝固のリスクを低減させるために、比較的高血流速を採用するのが一般的である。一方で極端な高流速は、血液細胞を破裂させる高剪断力や衝撃損傷に血液細胞を曝す可能性があるため、避けなければならない。そのため本発明は、対流輸送の好ましい特性とその望ましくより速い動態を用いて、血液からサイトカイン又は病原体を除去する方法及びデバイスを提供する。これは、吸着分子、例えばヘパリンを表面処理したことにより、血液から除去することが望まれるサイトカイン又は病原体と結合することができるようになった、本質的に無孔の基体に血液を流すことによって行われる。移植可能なデバイスもまた、体の外で実施される体外治療の手段ではあるが、本発明の方法は主に、酸素、抗凝血剤、麻酔などのような所望の産物を体液に添加することができる、体外での治療又は手技に用いられることを目的としている。逆に、特定の種類の体外回路を用いることにより、天然の毒素又は毒物のような、望ましくない産物を除去することができる。例としては、血液の老廃物を除去するための代表的な技術である、血液透析及び血液ろ過が挙げられる。血液感染性毒物などの除去には、活性炭素表面への吸着が用いられてきた。本発明では、哺乳類由来の全血及び血清を用いることができる。特許請求した方法で用いることができる血液又は血清の量を制限する意図はない。その範囲は1mL未満から1Lを超えてもよく、途切れることなく血液を患者に再循環させる場合には、患者の血液の全量まで、及び全量を含んでいてもよい。必要な場合には、吸着床を通る1つ以上の管を使用してもよい。血液は、ヒト又は動物の血液であってよい。血液から病原体又は毒素を除去するために表面をヘパリン化した吸着媒体を、50mL/分未満、好ましくは約150~2000mL/分の範囲の流速で従来型の体外血液循環で使用するために、本発明に従って最適化することができる。そのような高流速により、吸着カラム中での滞留時間が短くなり、かつ、対流輸送がブラウン拡散輸送を上回る。このことは、TNF-αなどの分子量の大きいタンパク質又はサイトカインやウイルス、細菌及び寄生虫などのより大きい粒子を結合させるためには、それらが非常にゆっくりと拡散するため、特に重要である。本発明では、病原体及び毒素を除去することができる吸着部位は主に、血液が流れる又は強制対流によって送達される媒体床中の間隙の表面に存在する。血液治療用の間隙流路の大きさは、直径の平均が6ミクロンである赤血球が移動できる程度に十分大きい必要がある。充填済みの吸着カートリッジを高血流速で用いる体外循環に設置可能にするためには、間隙流路は赤血球の直径の数倍の大きさでなくてはならない。これにより、溶血を引き起こす高剪断速度を防止し、同時に、充填床又はカートリッジを通過する血流の圧力損失を最小限に抑えることができる。加えて媒体は、フィルターカートリッジを塞ぐ圧縮による変形を最小限にするために、剛性をもつことが好ましい。これらの適性に基づいて、例えば、高流速の体外血液循環によってサイトカインを十分に除去できるように、最適化した硬質媒体の間隙流路の大きさと全表面積の釣り合いを取る。2.本発明で使用する基体。本発明では、形及び組成が多様な材料を基体として用いることができる。好適な基体はどれも広い表面積を提供し、主に強制対流輸送により、吸着質のそれらが吸着する吸着部位への移動を促進する。媒体は通常、媒体が血流中に流れ出ないように媒体漏出とも呼ばれている、かつ、血液が本質的に全媒体表面を通過できるように、媒体を保持するように設計されたカラムのような容器中に充填されて提供される。吸着媒体を作成するための有用な基体としては、無孔の硬質ビーズ若しくは粒子、微粒子、網状の発泡体、硬質モノリシック床例えば焼結ビーズ又は粒子から成形した、織布又は不織布で充填したカラム、糸又は中実若しくは中空で緻密な微多孔質ではない単繊維で充填したカラム、平坦なフィルム若しくは緻密な膜から形成した螺旋状のカートリッジ、あるいはビーズと布を組み合わせたカートリッジのような媒体の併用が挙げられる。本発明での使用に好適な基体は例えば、最初は微多孔質であるが、表面の加工過程の際に本質的に無孔になる基体でもよい。本発明の特定の実施形態では、前記中実基体の材料は、ガラス、セルロース、酢酸セルロース、キチン、キトサン、架橋デキストラン、架橋アガロース、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリスルホン、ポリアクリロニトリル、シリコーン、テフロン又はポリウレタンであってよい。中実基体上のヘパリンの表面濃度は、1~10μg/cm2の範囲であってよい。本発明のカラム型の吸着/ろ過床は、血液又は血清に対する高表面積を提示し、同時に大幅な圧力損失と高剪断力を防止する、マクロ多孔質構造をもつ。大幅な圧力損失は溶血による血液損傷の可能性に加えて、圧力損失に応答して自動的に停止する装置を備えた体外回路を停止させる可能性があるため避けなくてはならない。2.1.基体としてのビーズ有用な基体の1つは、中実なビーズ又は粒子の形態である。遭遇する流速による変形/圧縮に耐える十分な剛性をもつ材料からビーズを作成することができる。変形に耐える力は、自由体積を維持し、それに続く充填床接触器の圧力損失を低くするために必要である。基体のバルクには実質的に細孔がないため、吸着質が吸着の前に細孔中に拡散する必要がない。本発明の吸着部位は主に媒体表面にあるため、主に強制対流輸送によって表面に送達される血液中の吸着質が到達しやすい位置にある。好適な基体は、その表面が完全に平坦である必要はない。というのは、凹凸は、例えばヘパリンを共有結合又はイオン結合によって、結合部位として接着させるための表面積の望ましい増加を生じるからである。一方、吸着質が結合部位に結合する前に細孔中に拡散する必要性を排除するために、分子大の内部細孔の大部分を避ける。本発明では、様々な種類のビーズを使用することができる。有用なビーズは、この方法で使用している最中の変形/圧縮を避けるための十分な硬さ、並びにこの方法で使用するためにヘパリンでコーティングすることができる、十分な表面積をもつ必要がある。臨床で通常用いる流速で水又は生理食塩水をおよそ1時間流す間に、吸着床の圧力損失が有意に上昇しないことが、例えば、同様の流速の例えば生理食塩水を測定した場合に、最初の圧力損失流動早々に測定すると比較して、圧力損失の上昇が10~50未満であることが、十分に硬質であることの証拠となる。ビーズ又は他の高表面積基体を、ガラス、セルロース、セルロース酢酸、キチン、キトサン、架橋デキストラン、架橋アラニーズ、ポリウレタン、ポリメタクリル酸メチル、ポリエチレン又はエチレンと他単量体との共重合体、ポリエチレンイミン、ポリプロピレン、ポリスルホン、ポリアクリロニトリル、シリコーン及びポリイソブチレンを含む、本質的に漏出する不純物を含まない、重合体又は非重合性材料などの生体適合性材料から作成してもよい。有用な基体の例としては、無孔の超高分子量ポリエチレンUHMWPEが挙げられる。他の適したビーズには、ポリスチレン、高密度及び低密度ポリエチレン、シリカ、ポリウレタン、及びキトサンがある。そのようなビーズ自体の作成方法は当該分野において既知である。ポリエチレンビーズ及び他のポリオレフィンビーズは、合成過程を通じて直接生産され、しばしば、さらなる修正をせずに使用することができる。上述のように、本発明の方法で使用するためには、カートリッジの入口と出口の間での大幅な圧力損失を防ぐように、血液細胞が個々のビーズの間を高流速環境で安全に通過できるように、また、血液中のサイトカイン又は病原体が吸着するヘパリンを結合させるための適切な間隙表面積を提供するように、体外血液ろ過用の流路の大きさ又は個々のビーズ間の間隙を最適化する必要がある。300ミクロンのビーズを密に充填した床の適切な間隙細孔の大きさは、直径約68ミクロンである。有用なビーズのサイズは、直径100~500ミクロンの範囲である。ビーズサイズの平均は、150~450ミクロンであってもよい。例えば、DSMPTG以前のPolymerTechnologyGroup、バークリー、カリフォルニア州のポリエチレンビーズの直径の平均は0.3mmであり、好適である。間隙細孔はビーズの大きさの関数である。使用にあたっては、好適なビーズをカラムのような容器中に充填する。2.2.基体に適した他の形状網状の発泡体は連通気泡構造をもち、例えば、ポリウレタン及びポリエチレンから製造することができる。製造方法を制御することにより、細孔径を制御することができる。通常、網状の発泡体は1インチ当たり3~100個の細孔をもつことができ、表面積は最大66cm2/cm3になる可能性がある。ビーズを化学的又は物理的いずれかの手段を用いて焼結し、モノリス多孔質構造にすることができる。ポリエチレンビーズをカートリッジ中で、加圧しながらその融点を超える温度で加熱することにより、焼結させることができる。得られた間隙細孔径は、ビーズを充填した床の間隙細孔径よりもやや小さい。カラムを織布又は不織布のいずれかで充填することもできる。布の繊維サイズを制御することにより、間隙細孔の大きさを制御することができる。不織布はフェルトとしても知られており、様々な方向を向いた繊維が互いにからみあって接着している。織布は、一定の、不均一でない構造をもつ。カラムを繊維又は繊維製の糸で充填してもよい。ポリエチレンや他の繊維を、細くて中空な又は中実な繊維に延伸してもよく、それらを標準的な血液透析用カートリッジと同様のカートリッジ中に充填することができる。加えて、これらの繊維を糸になるように織ってもよい。DyneemaPurity登録商標は、UHMWPE製の、強度の高い織布である。Dyneema繊維をヘパリン化してカートリッジ中に充填してもよく、これはサイトカイン及び病原体を除去するための広い表面積の支持体を提供する。螺旋状のカートリッジは、隣接した表面が接触するのを防ぐための任意のスペーサー材料と共に密に巻いた、薄い膜を含む。膜を、ポリウレタン、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリスルホン、ポリカーボネート、PET、PBTなどのような重合体から作成することができる。2.3.ヘパリンの結合本発明の吸着媒体は、中実基体の表面に共有結合したヘパリンを含む場合がある。Wendel及びZiemerの総説に記載された方法のような、それ自体が既知の様々な方法を用いてヘパリンを所望の基体に結合させることができるHPWendelandGZiemerEuropeanJournalofCardiothoracicSurgery16342350。一態様ではヘパリンを、末端共有結合で中実基体に結合させる。この方法では、血流に入る可能性があるヘパリンの基体表面からの放出が低減又は排除されるため、デバイスの安全性が高まる。ヘパリンの血液による又は血液への漏出により、出血及びヘパリン誘導性血小板減少症のリスクが高まるため、これを避けなければならない。ヘパリンを中実基体へ共有結合させることにより、非共有結合と比較して、固定化した分子の表面密度及び配向のようなパラメータの制御がより容易になる。発明者らは、これらのパラメータが、サイトカイン又は病原体を固定化した炭水化物分子に最適に結合させるために重要であることを示してきた。中実基体上でのヘパリンの表面濃度は、1~10μg/cm2の範囲となろう。末端共有結合とは、ヘパリン分子の末端残基を介して、ヘパリンを中実基体に共有結合させることを意味する。ヘパリンはまた、複数の位置でも結合することができる。末端結合が好ましい。ビーズを用いる場合、それらを親水性にしてから、ヘパリン又は他の化合物を結合させてもよい。ビーズの調製に用いることができる方法には、酸腐食、プラズマ処理、及び過マンガン酸カリウムのような強い酸化剤への露出が挙げられる。2.4.基体1グラム当たりのヘパリンの量基体1グラム当たりのヘパリンの量は変えてもよい。ビーズを用いる場合、ビーズ1グラム当たりのヘパリンの量は、用いる層の数によって、及びビーズの大きさによっても決定される。ビーズが大きくなればなるほど、ビーズ1グラム当たりのヘパリンは少なくなる。中実基体上でのヘパリンの表面濃度は、1~10μg/cm2の範囲となろう。MBTH方法での1つの好ましい量は、ビーズ1グラム当たり、ヘパリン2.0±0.5mgである。特許請求した方法で用いるヘパリンの分子量は変わり得る。例えば、天然ヘパリンの平均分子量は22kDaである。硝酸分解したヘパリンの分子量は8kDaである。本発明に有用な基体はまた、公開されている、米国特許出願第2009/0136586A1号に記載されている方法によっても調整することができ、その全体は参照により本明細書に組み込まれる。3.本発明の方法で使用するためのデバイス本発明の別の側面は、哺乳類の血液からサイトカイン又は病原体を体外へ除去するための、サイトカイン又は病原体に結合親和性もつヘパリンで加工した中実基体を含むデバイスの使用を提供する。本発明での使用及び方法で記載したデバイスは、患者、例えば腎不全を患っている患者の血液及び血清を体外治療するための標準的なデバイスを含んでいてもよい。体外循環では、医療機器に接触している血液の局所的な血流パターンが、剪断の活性化を介した血栓形成と停滞域での血小板の凝集に影響することが知られている。従って、本発明の様々な態様で使用するデバイスは、これらの問題を生じない方法で設計しなければならない。本発明のいくつかの実施形態で使用するデバイスは例えば、以下の特性を有していてもよい。血流が150~2000ml/分の範囲にある。流れ抵抗が低い。基体の表面積が広く、例えばおよそ1~40m2であり、その基体表面に炭水化物が固定化されている。コーティングが安定しているそれに接触しても血液中に炭水化物が漏出しない。デバイス中停滞域以外ででの血行動態特性が適切である。生体適合性が最適である。本発明による使用又は方法で用いることができる、そのようなデバイスの非限定的な例には、サイトカイン分子を除去するための、高流速に適応したExtheraMedical社製の体外血液ろ過デバイスのような、小児用血液透析器がある。PrismaM10ヘモフィルター/ダイアライザーGambroAB、スウェーデンのような、血液又は血清の体外治療用の、他のモデル又は型のデバイスもまた使用することができる。高流速条件とは、拡散限界を超える血流と定義することができる。4.病原体本発明は、上述の方法で開示した中実基体に哺乳類の血液を接触させて、哺乳類の血液から病原体及び/又は毒素を除去することによって疾患を治療する方法を提供する。本発明の、ヘパリン化した基体を用いて血液から除去することができる病原体の例としては、細菌、すなわち炭疽菌、緑膿菌及び黄色ブドウ球菌がある。上述のように、本発明で治療する疾患の一例は炭疽病である。早期治療は、多くの症例で炭疽病を治癒することができる。皮膚皮膚炭疽は、ペニシリン、テトラサイクリン、エリスロマイシン及びシプロフロキサシンシプロのような一般的な抗生物質で治療することができる。肺型の炭疽は医学的な緊急事態である。初期段階での、かつ、継続した抗生物質を用いた静脈内治療により、救命できる場合がある。生物テロによって攻撃された場合、症状が現れる前に炭疽菌に曝された患者に抗生物質を投与することになる。ワクチンは存在するが、まだ一般市民には使用できない。炭疽菌によって引き起こされる疾患には、皮膚皮膚炭疽、肺炭疽inhalationanthrax及び胃腸腸炭疽の3種類の症状がある。肺炭疽は非常に重篤な疾患であり、残念ながら、罹患した患者のほとんどが、適切な抗生物質の投与を受けても死に至る。抗生物質は細菌を殺すのには効果があるが、炭疽菌から既に放出された致死毒素を破壊することはない。本発明の方法を、抗生物質の投与のような他の標準的な治療の前後いずれにも実施することができる。5.本発明と、別のろ過/分離工程の併用本発明による治療方法のある実施形態では、血液の採取と再導入を、対象の血液の一部分を含む切れ目のないループを用いて行ってもよい。さらなる側面では、上述した方法を、哺乳類の血液をろ過又は治療する他の方法と組み合わせても良い。例えば、対流力学に基づくカートリッジを、CPB、血液透析、及び酸素化のような、一連の標準的な体外回路の中で使用することができる。6.実施例本発明の様々な態様を、以下の実施例でさらに記載する。これらの実施例は限定を意図してはいない。6.1.実施例1-ヘパリンカラムの調製平均直径が0.3mmのポリエチレンPEビーズロット番号:180153はPolymerTechnologyGroupバークリー、米国から供給され、カラムMobicol、1mLはMoBiTecドイツから入手した。ヘパリンとポリエチレンイミンPEIはそれぞれ、ScientificProteinLaboratoriesワナキー、ウィスコンシン、米国及びBASFルートヴィヒスハーフェン、ドイツから購入した。化合物は全て、分析グレード又はそれ以上の等級のものを使用した。LarmらLarmOLarssonROlssonPAnewnonthrombogenicsurfacepreparedbyselectivecovalentbindingofheparinviaamodifiedreducingterminalresidueBiomaterMedDevicesArtifOrgans198311161173によって記載されたように、ヘパリンをビーズ上に固定化した。以下に記載した一般的な方法により、重合体表面をヘパリン化した。数種類の反応性官能基-SO3H、-OH、-C=O、-C=C-を用いて重合体表面に親水特性を導入するために、酸化剤過マンガン酸カリウム、ペルオキソ二硫酸アンモニウムを用いて重合体表面をエッチングする。表面をプラズマ又はコロナによりエッチングすることもできる。例えば、PE-ビーズを酸化剤でエッチングする過マンガン酸カリウムの硫酸溶液。これらの親水性ビーズ、とりわけOH-基と二重結合を含むビーズはこれ以降、対照として用いる。ポリアミン、ポリエチレンイミンPEI又はキトサンを用いた処理により、反応性アミノ官能基を導入する。いくつかの目的のためには、クロトンアルデヒド又はグルタルアルデヒドなどの二官能性試薬を用いて架橋することにより、ポリアミンを表面に安定化させてもよい。コーティングをさらに、硫酸化多糖硫酸デキストラン又はヘパリンを用いたイオン架橋により安定化させる。必要であればこれらの工程を繰り返して、サンドイッチ構造を構築する。各工程と工程との間では、注意深くすすぎを行う必要がある水、適切な緩衝液。PEI又はキトサンの最後の添加を行った後、天然ヘパリンの還元末端残基もつアルデヒド機能を用いた還元アミノ化により、アミノ化した表面に天然ヘパリンを末端結合EPAさせる。ヘパリンの部分的な亜硝酸分解により、還元末端残基がより多くの反応性アルデヒド機能をもつようにすることができる。これにより反応時間が短縮されるが、固定化したヘパリンの分子量は小さくなる。このカップリングは還元アミノ化シアノボロヒドリド、CNBH3-により、水溶液中で行われる。この代替法では、アミノ化媒体を酢酸緩衝液800ml、0.1M、pH4.0に懸濁し、その後4.0gの亜硝酸分解したヘパリンPharmacia、スウェーデンから入手したヘパリンを添加した。30分間撹拌した後、NaBH3CN0.4gを添加した。反応混合物を24時間撹拌し、その後上述のように処理してヘパリン化媒体を得た。1~10μg/cm2のヘパリンを、ガラス、セルロース、キチンなど全ての親水性表面、及びポリ塩化ビニル、ポリエチレン、ポリカーボネート、ポリスチレン、PTFEなどのほとんど全ての疎水性重合体にカップリングさせることができる。得られた、ヘパリンが末端で共有結合したPEビーズをエチレンオキシドETOで滅菌し、0.9塩化ナトリウム及び超純粋ですすぐ。MBTH方法によって結合させたヘパリンの測定値はビーズ1グラム当たり2.0mgであったLarmOLarssonROlssonPAnewnonthrombogenicsurfacepreparedbyselectivecovalentbindingofheparinviaamodifiedreducingterminalresidueBiomaterMedDevicesArtifOrgans198311161173及びRiesenfeldJRodenLQuantitativeanalysisofNsulfatedNacetylatedandunsubstitutedglucosamineaminogroupsinheparinandrelatedpolysaccharidesAnalBiochem1990188383389。ポリエチレンビーズの平均直径は0.3mmであり、末端を介した共有結合によってヘパリン分子をその表面に結合させることで、炭水化物鎖がヘパリン/ヘパリン硫酸に親和性をもつタンパク質により接近しやすくなることを保障する技術によりヘパリン化されている。固定化したヘパリンの平均分子量は約8kDaであり、ビーズ1グラム当たり2mgおよそ360IUと等しいのヘパリンが結合している。非ヘパリン化ビーズではなくヘパリン化したビーズに流した血液で、アンチトロンビンAT濃度の75が期待していたとおりに除去されたことから、この表面の完全性を確認した。6.2.実施例2-毒素の除去患者の血液透析器から動脈血を採取する。血液をEDTA入りの真空採血管を用いて採取し、その内の1mLを予め調製しておいたカラムにすぐに充填し、その後ローラーポンプを用いて、例えば1、5又は10mL/分のいずれかでカラム内を通過させる。カラムを通過した血液をすぐに、もう一方の端から回収し、低温で遠心分離する4500G。その後上清を回収し、後の解析のために-80°Cで凍結させる。簡単に説明すると、ヘパリン化ビーズを通過させることで、非ヘパリン化ビーズと比較して、血液中の毒素が非常に大幅に減少する。6.3.実施例3:生体外での炭疽菌防御抗原の除去細菌上清:炭疽菌7702又は9131を、ルリア培地LB中、37°Cで、250RPMで振とうしながら一晩培養した。pH8に調製した1MのHEPESで0.8の重炭酸ナトリウムNaHCO3を含む20mLのLBに、7702の一晩培養1mLを播種し、250RPMで振とうしながら、37°Cで、対数増殖期後期まで生育させたおよそ7時間。培養を3500RPMで5分間遠心分離して細菌細胞と破片を除去した。上清を回収し、0.2μmのフィルターに通してすぐに使用するか、又は-20°Cで保存した。ビーズの調製:1gのヘパリン又は対照ビーズを、底部にフィルターを設置したシリンジに添加し、ビーズの上にもフィルターを設置した。実験の前に、2mLのトリス緩衝食塩水TBSを添加してビーズを前処理した。ウシ胎仔血清FBSを用いた場合には、2mLのTBSを添加してビーズを前処理した後に、2mLのFBSを5回ビーズに通した。TBS又はFBSの液滴がシリンジから放出されなくなってから、細菌上清を通した。上清を通す:2mLの細菌上清をビーズに負荷した。通過させた後、上清を回収して、さらに4回通した。上清の液滴がシリンジから出てこなくなったら上清を回収して、-20°Cで保存した。酵素免疫測定法ELISA:100μLの上清をImmulon4HBX高結合マイクロタイタープレートのそれぞれのウェルに入れ、振とう機にかけて室温で2時間インキュベートした。上清を除去し、その後、0.05のツイーンを含むTBSTBSTでウェルを3回洗浄した。ウェルを2ウシ血清アルブミンで、振とう機を用いて室温で1時間ブロッキングした。ウェルを再度洗浄した。ウェルにヤギ抗PAListBiologicalLaboratoriesTBSを用いて1/2000に希釈したを加え、振とう機を用いて室温で1時間インキュベートした。ウェルを記載した通りに洗浄した。ウェルにウサギ抗ヤギ-HRPInvitrogenTBSを用いて1/2000に希釈したを加え、振とう機を用いて室温で1時間インキュベートした。ウェルを記載した通りに洗浄した。ウェルにSigmaFastOPDSigmaのdH2O溶液を加え、室温でおよそ30分間発色させた。吸収を450nmで測定した。ウェスタンブロット:記載したように細菌上清を調製し、2.5μL又は5μL容量を、メタノールとその後TBSを用いて3分間前処理したPVDF膜BioTraceに乗せた。5分後、膜を2脱脂粉乳のTBST溶液中、室温で30分間ブロッキングした。膜をTBSTで3回洗浄し、1/3000に希釈したヤギ抗PAを加えて、室温で45分間インキュベートした。膜を3回洗浄し、1/3000に希釈したウサギ抗ヤギ-アルカリホスファターゼを加えて室温で45分間インキュベートした。膜に1stepNBTNCIPPiercenetを加えて発色させた。結果ウェスタン/ドットブロットアッセイにより、我々の培養条件で毒素が生産されたことが初めて確認された。防御抗原PAは、5CO2雰囲気を加えて又は加えずに37°Cで培養した7702の一晩培養及び8時間培養の両方で検出された。FBSを抗体検出のバックグラウンドの対照として用いた。7702と9131の上清を対照及びヘパリン化ビーズに通した。対照及びヘパリン化ビーズを通すと、およそ75が減少することが分かった図1B。繰り返し実験結果からは、これまでに、予浸なしでは43.3、また予浸後にヘパリン化ビーズを使用すると75減少することが分かっている。75減少すると、PAの測定値は9131のバックグランドレベルまでに下がり、このことは、これが100の減少である可能性を示している。PAの減少は、上清をもう一度ビーズに通すことで回復する。複数回通過させることは、PAの減少には効果がない。6.4.実施例4:ヘパリン化ビーズによる細胞保護の証明この試験では、PA上清とビーズの調製は、実施例3で概要を示したように行った。7702と9131の上清を10倍まで濃縮した。この上清を次に、DMEM細胞用培地-フェノールレッドを用いて、所望の濃度に希釈した。マクロファージを培養し、計数し、1×106細胞/mLになるように再懸濁した。500μlのDMEMFBSに1x105個の細胞を加えて各ウェルに入れ、37°C、5CO2条件で一晩インキュベートした。0.05gのビーズを各ウェルに加えた。次にDMEM/-FBS又はFBSを100μlずつトランスウェルに通した合計300μl。その後培地を培養ウェルから除去し、ビーズをDMEMで1回洗浄した。次に、希釈した上清500μlを各トランスウェルに入れた。このウェルをその後、37°C、5CO2で20時間培養した。それぞれのトランスウェルから50mlを採取し、LDHレベルを測定した細胞毒性。図2に結果を示す。上清の希釈倍率にかかわらず、マクロファージ細胞死の有意な低下が測定された。FBSとDMEMで処理したビーズでは、細胞死はバックグランドレベルまで低下した。6.5.実施例5:メチシリン耐性黄色ブドウ球菌、USA300株のα-毒素の除去。実施例3に概要を示した方法に従って、USA300株から、USA300型MRSAのα-毒素を含む上清を調製した。ヘパリン化ビーズもまた、実施例3に概要を示した方法に従って調製した。結果を図3に示す。ELISA型検定で測定すると、上清の希釈倍率にかかわらず、α-毒素の濃度が有意に減少した。