"哺乳動物の組織中の酸化ストレスを検出するためのマーカーであって、γ-Glu-XXはアミノ酸及びアミンペプチドであることを特徴とする肝臓疾患マーカー。請求項1に記載の肝臓疾患マーカーであって、少なくともグルコサミン、γ-Glu-Ala、メチオニンスルホキシド、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Val、AST、ALT、γ-Glu-Phe、γ-Glu-Met、γ-Glu-Glnを含む組合せであることを特徴とする健常者識別用の肝臓疾患マーカー。請求項1に記載の肝臓疾患マーカーであって、少なくともγ-Glu-タウリン、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Glu、γ-Glu-Gly、γ-Glu-Arg、γ-Glu-Ser、γ-Glu-Phe、γ-Glu-Met、γ-Glu-シトルリンを含む組合せであることを特徴とする薬剤性肝障害識別用の肝臓疾患マーカー。請求項1に記載の肝臓疾患マーカーであって、少なくともγ-Glu-タウリン、γ-Glu-Ala、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Val、AST、γ-Glu-Lys、γ-Glu-Arg、γ-Glu-Met、γ-Glu-Glnを含む組合せであることを特徴とする無症状B型肝炎キャリア識別用の肝臓疾患マーカー。請求項1に記載の肝臓疾患マーカーであって、少なくともγ-Glu-Ala、メチオニンスルホキシド、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Glu、AST、ALT、γ-Glu-Arg、γ-Glu-Ser、γ-Glu-His、γ-Glu-Phe、γ-Glu-Met、γ-Glu-シトルリンを含む組合せであることを特徴とする慢性B型肝炎識別用の肝臓疾患マーカー。請求項1に記載の肝臓疾患マーカーであって、少なくともグルコサミン、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Val、AST、γ-Glu-Gly、γ-Glu-Gln、γ-Glu-シトルリンを含む組合せであることを特徴とするHCV陽性ALT持続正常者識別用の肝臓疾患マーカー。請求項1に記載の肝臓疾患マーカーであって、少なくともグルコサミン、γ-Glu-Lys、γ-Glu-Hisを含む組合せであることを特徴とする慢性C型肝炎識別用の肝臓疾患マーカー。請求項1に記載の肝臓疾患マーカーであって、少なくともグルコサミン、メチオニンスルホキシド、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Val、γ-Glu-Glu、γ-Glu-Gly、γ-Glu-Met、γ-Glu-Gln、γ-Glu-シトルリンを含む組合せであることを特徴とするC型肝硬変識別用の肝臓疾患マーカー。請求項1に記載の肝臓疾患マーカーであって、少なくともγ-Glu-タウリン、γ-Glu-Glu、γ-Glu-Gly、γ-Glu-Ser、γ-Glu-シトルリンを含む組合せであることを特徴とする肝臓がん識別用の肝臓疾患マーカー。請求項1に記載の肝臓疾患マーカーであって、少なくともγ-Glu-タウリン、γ-Glu-Ala、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Val、γ-Glu-Glu、AST、ALT、γ-Glu-Thr、γ-Glu-Glnを含む組合せであることを特徴とする単純脂肪肝識別用の肝臓疾患マーカー。請求項1に記載の肝臓疾患マーカーであって、少なくもグルコサミン、γ-Glu-Ala、γ-Glu-Val、γ-Glu-Gly、γ-Glu-Gln、γ-Glu-シトルリンを含む組合せであることを特徴とする非アルコール性脂肪肝炎識別用の肝臓疾患マーカー。肝臓疾患マーカーとして、サンプル中のγ-Glu-XXはアミノ酸及びアミンペプチドを測定することを特徴とする肝臓疾患マーカーの測定方法。サンプルから分析に適した試料を作成する手段と、試料中のγ-Glu-XXはアミノ酸及びアミンペプチドを、肝臓疾患マーカーとして測定するための分析手段と、を備えたことを特徴とする肝臓疾患マーカーの測定装置。医薬品の投与前及び投与後に採取された血液において、請求項1乃至10のいずれか1項に記載の肝臓疾患マーカーの濃度を測定する工程と、前記測定の結果を、前記医薬品の投与前の血液と投与後の血液とで比較する工程と、を含むことを特徴とする医薬品の検定方法。医薬品を投与された一以上の個体からなる第1の群から採取された血液、及び、前記医薬品を投与されていない一以上の個体からなる第2の群から採取された血液について、請求項1乃至11のいずれか1項に記載の肝臓疾患マーカーの濃度を測定する工程と、第1の群と第2の群との間で、測定された前記肝臓疾患マーカーの濃度を比較する工程と、を含むことを特徴とする医薬品の検定方法。しかしながら、従来は、薬剤性肝障害druginducedliverinjury:DI、無症状B型肝炎キャリアasymptomatichepatitisBcarrier:AHB、慢性B型肝炎chronichepatitisB:CHB、C型肝炎ウィルスキャリアでALTの値が正常なHCV陽性ALT持続正常者hepatitisCwithpersistentlynormalALT:CNALT、慢性C型肝炎chronichepatitisC:CHC、C型肝硬変cirrhosistypeC:CIR、肝臓がんhepatocellularcarcinoma:HCC、非アルコール性脂肪肝炎NASH、単純脂肪肝SS等を一回の検査で識別して特定することは困難であった。本発明は、前記従来の問題点を解消するためになされたもので、血液中の低分子バイオマーカーを測定することによって、薬剤性肝障害DI、無症状B型肝炎キャリアAHB、慢性B型肝炎CHB、HCV陽性ALT持続正常者CNALT、慢性C型肝炎CHC、C型肝硬変CIR、肝臓がんHCC、非アルコール性脂肪肝炎NASH、単純脂肪肝SS等の肝臓疾患を迅速に特定可能とすることを課題とする。前述のように、肝炎、肝硬変、肝臓がんなど多くの肝障害は、酸化ストレスと深い関係があるため、各肝障害でオフタルミン酸濃度が変動することが予想された。そこで、健常者C、薬剤性肝障害DI、無症状B型肝炎キャリアAHB、慢性B型肝炎CHB、HCV陽性ALT持続正常者CNALT、慢性C型肝炎CHC、C型肝硬変CIR、肝臓がんHCC、非アルコール性脂肪肝炎NASH、単純脂肪肝SSの患者から血液を採取し、血清中のオフタルミン酸を測定した。しかし、マウスとは異なり、健常者Cや薬剤性肝障害DI患者からは、オフタルミン酸は殆んど検出されなかった。マウスの血清中のオフタルミン酸の濃度は約2μMであったが、ヒトの血清中の濃度は、約1/20程度であり、健常者Cや薬剤性肝障害DI患者では殆んど検出されなかった。しかし、発明者らは、各肝炎患者の血清中で著しく増加する物質を発見し、それらがγ-Glu-Xペプチド類注:Xはアミノ酸及びアミンを示すであることを同定した。図2に、各種の肝障害患者でγ-Glu-Xペプチド類が生合成されるメカニズムを模式的に示す。さらに血清中の肝機能マーカーであるASTとALTの値とγ-Glu-Xペプチド類を用いて多重ロジスティック回帰MLRモデルによる多変量解析を行うことにより、各種の肝炎患者を他と区別することに成功した。本発見によって、血液中のγ-Glu-Xペプチド類の濃度やAST、ALTの値を測定することによって、健常者C、薬剤性肝障害DI、無症状B型肝炎キャリアAHB、慢性B型肝炎CHB、HCV陽性ALT持続正常者CNALT、慢性C型肝炎CHC、C型肝硬変CIR、肝臓がんHCC、単純脂肪肝SS、非アルコール性脂肪肝炎NASHなどの肝臓疾患を迅速に特定することが可能になった。本発明は、上記知見に基づいてなされたもので、哺乳動物の組織中の酸化ストレスを検出するためのマーカーであって、γ-Glu-XXはアミノ酸及びアミンペプチドであるであることを特徴とする肝臓疾患マーカーである。ここで、複数のγ-Glu-XXはアミノ酸及びアミンペプチドの組合せは、多重ロジスティック回帰MLR分析により選ぶことができる。又、前記の肝臓疾患マーカーであって、後出表2から明らかなように、少なくともGlucosamineグルコサミン、γ-Glu-Ala、Methioninesulfoxideメチオニンスルホキシド、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Val、AST、ALT、γ-Glu-Phe、γ-Glu-Met、γ-Glu-Glnを含む組合せであることを特徴とする健常者C識別用の肝臓疾患マーカーである。又、前記の肝臓疾患マーカーであって、後出表2から明らかなように、オッズ比が1に近いAST、ALT及びγ-Glu-Glyを除いた、少なくともγ-Glu-Taurineタウリン、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Glu、γ-Glu-Arg、γ-Glu-Ser、γ-Glu-Phe、γ-Glu-Met、γ-Glu-Citrullineシトルリンを含む組合せであることを特徴とする薬剤性肝障害DI識別用の肝臓疾患マーカーである。更に、AST、ALT、γ-Glu-Glyの少なくとも1つを加えて、精度を高めることができる。又、前記の肝臓疾患マーカーであって、後出表2から明らかなように、オッズ比が1に近いALTを除いた、少なくともγ-Glu-Taurineタウリン、γ-Glu-Ala、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Val、AST、γ-Glu-Lys、γ-Glu-Arg、γ-Glu-Met、γ-Glu-Glnを含む組合せであることを特徴とする無症状B型肝炎キャリアAHB識別用の肝臓疾患マーカーである。更に、ALTを加えて、精度を高めることができる。又、前記の肝臓疾患マーカーであって、後出表3から明らかなように、少なくともγ-Glu-Ala、Methioninesulfoxideメチオニンスルホキシド、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Glu、AST、ALT、γ-Glu-Arg、γ-Glu-Ser、γ-Glu-His、γ-Glu-Phe、γ-Glu-Met、γ-Glu-Citrullineシトルリンを含む組合せであることを特徴とする慢性B型肝炎CHB識別用の肝臓疾患マーカーである。又、前記の肝臓疾患マーカーであって、後出表3から明らかなように、オッズ比が1に近いALTを除いた、少なくともGlucosamineグルコサミン、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Val、AST、γ-Glu-Gly、γ-Glu-Gln、γ-Glu-Citrullineシトルリンを含む組合せであることを特徴とするHCV陽性ALT持続正常者CNALT識別用の肝臓疾患マーカーである。更に、ALTを加えて、精度を高めることができる。又、前記の肝臓疾患マーカーであって、後出表3から明らかなように、オッズ比が1に近いMethioninesulfoxideメチオニンスルホキシドとALTを除いた、少なくともGlucosamineグルコサミン、γ-Glu-Lys、γ-Glu-Hisを含む組合せであることを特徴とする慢性C型肝炎CHC識別用の肝臓疾患マーカーである。更に、Methioninesulfoxideメチオニンスルホキシド及び/又はALTを加えて、精度を高めることができる。又、前記の肝臓疾患マーカーであって、後出表4から明らかなように、オッズ比が1に近いASTとALTを除いた、少なくともGlucosamineグルコサミン、Methioninesulfoxideメチオニンスルホキシド、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Val、γ-Glu-Glu、γ-Glu-Gly、γ-Glu-Met、γ-Glu-Gln、γ-Glu-Citrullineシトルリンを含む組合せであることを特徴とするC型肝硬変CIR識別用の肝臓疾患マーカーである。更に、AST及び/又はALTを加えて、精度を高めることができる。又、前記の肝臓疾患マーカーであって、後出表4から明らかなように、オッズ比が1に近いMethioninesulfoxideメチオニンスルホキシド、AST及びALTを除いた、少なくともγ-Glu-タウリン、γ-Glu-Glu、γ-Glu-Gly、γ-Glu-Ser、γ-Glu-Citrullineシトルリンを含む組合せであることを特徴とする肝臓がんHCC識別用の肝臓疾患マーカーである。更に、MethioninesulfoxideメチオニンスルホキシドAST、ALTの少なくとも1つを加えて、精度を高めることができる。又、前記の肝臓疾患マーカーであって、後出表4から明らかなように、少なくともγ-Glu-Taurineタウリン、γ-Glu-Ala、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Val、γ-Glu-Glu、AST、ALT、γ-Glu-Thr、γ-Glu-Glnを含む組合せであることを特徴とする単純脂肪肝SS識別用の肝臓疾患マーカーである。又、前記の肝臓疾患マーカーであって、後出表4から明らかなように、オッズ比が1に近いASTとALTを除いた、少なくもGlucosamineグルコサミン、γ-Glu-Ala、γ-Glu-Val、γ-Glu-Gly、γ-Glu-Gln、γ-Glu-Citrullineシトルリンを含む組合せであることを特徴とする非アルコール性脂肪肝炎識別用の肝臓疾患マーカーである。更に、AST及び/又はALTを加えて、精度を高めることができる。本発明は、又、肝臓疾患マーカーとして、サンプル中のγ-Glu-XXはアミノ酸及びアミンペプチドを測定することを特徴とする肝臓疾患マーカー測定方法である。又、サンプルから分析に適した試料を作成する手段と、試料中のγ-Glu-XXはアミノ酸及びアミンペプチドを、肝臓疾患マーカーとして測定するための分析手段と、を備えたことを特徴とする肝臓疾患マーカーの測定装置である。又、医薬品の投与前及び投与後に採取された血液において、前記いずれかの肝臓疾患マーカーの濃度を測定する工程と、前記測定の結果を、前記医薬品の投与前の血液と投与後の血液とで比較する工程と、を含むことを特徴とする医薬品の検定方法である。又、医薬品を投与された一以上の個体からなる第1の群から採取された血液、及び、前記医薬品を投与されていない一以上の個体からなる第2の群から採取された血液について、前記いずれかの肝臓疾患マーカーの濃度を測定する工程と、第1の群と第2の群との間で、測定された前記肝臓疾患マーカーの濃度を比較する工程と、を含むことを特徴とする医薬品の検定方法である。又、本発明に係る、肝臓疾患の診断方法は、診断対象である一以上の個体から採血する工程と、上記いずれかの測定方法によって採血した血液における本発明に係るマーカーの濃度を測定する工程と、そのマーカーの濃度を、一以上の正常個体の血液におけるマーカー濃度と比較する工程と、を含むことを特徴とする。本発明に係る、医薬品の親電子性の毒性副作用医薬品を投与した場合に生じる酸化ストレスの診断方法は、医薬品投与前と医薬品投与後の個体から採血する工程と、上記いずれかの測定方法によって採血した血液における本発明に係るマーカーの濃度を測定する工程と、そのマーカーの濃度を、一以上の正常個体の血液におけるマーカー濃度と比較する工程と、を含むことを特徴とする。ここで、医薬品は如何なる種類でもよい。ここで、マーカーの濃度を測定する工程は、個体から採取した血液を個別に測定することも、複数の個体から採取した血液のプールを測定することも含む。また、測定されたマーカーの濃度を比較する工程は、各測定で得られた濃度を一つずつ比較することも、各測定で得られた濃度の積算値あるいは平均値を比較することも含む。組織中の酸化ストレスを検出するために、マーカーを用いることのできる哺乳動物は、組織における酸化ストレスに従い、血中で本発明に係るマーカーが測定できる哺乳類であれば制限はなく、ヒトであることが好ましい。この診断方法に用いられる血液を採取する哺乳動物は特に制限がないが、上記マーカーのうち少なくとも一つがその血液中に存在する哺乳動物であることが好ましく、マウスやラットなどのげっ歯類や、ヒト、サル、イヌであることが、より好ましい。本発明によれば、血液中のγ-Glu-Xペプチド類の濃度やAST、ALTの値などを測定することによって、健常者C、薬剤性肝障害DI、無症状B型肝炎キャリアAHB、慢性B型肝炎CHB、HCV陽性ALT持続正常者CNALT、慢性C型肝炎CHC、C型肝硬変CIR、肝臓がんHCC、非アルコール性脂肪肝炎NASH、単純脂肪肝SSなどの肝臓疾患を迅速に特定することが可能となる。以下、本発明の実施形態を詳細に説明する。前述のように、肝炎、肝硬変、肝臓がんなど多くの肝障害は、酸化ストレスと深い関係があることが、知られている。そこで、健常者C53名、薬剤性肝障害DI10名、無症状B型肝炎キャリアAHB9名、慢性B型肝炎CHB7名、HCV陽性ALT持続正常者CNALT10名、慢性C型肝炎CHC24名、C型肝硬変CIR10名、肝臓がんHCC19名、非アルコール性脂肪肝炎NASH11名、単純脂肪肝SS9名の血清を測定して、キャピラリー電気泳動-飛行時間型質量分析計CE-TOFMS法を用いて、オフタルミン酸濃度を測定した。しかし、別の物質が各肝炎患者で優位に増加していることを見出し、それらは、いずれもγ-Glu-Xペプチド類注:Xはアミノ酸及びアミンを示すであることを特定した。1.血清から代謝物質の抽出健常者および各種肝炎患者から採取した血清100μlを標準物質入りのメタノール900μlに入れ、酵素を失活させ、代謝の亢進を止めた。400μlの超純水、1000μlのクロロホルムを加えた後、4°Cで5分間、4,600gで遠心した。静置後、分離した水-メタノール相750μlを分画分子量5kDaの遠心限外ろ過フィルターを通過し、除タンパクした。ろ液を凍結乾燥後、Milli-Q水50μlを加え、それをCE-TOFMSおよびLC-MS測定に供した。2.キャピラリー電気泳動-質量分析装置CE-TOFMSによる血清中の代謝物測定CE-TOFMSを用いて、健常者および肝炎患者の血清中の低分子代謝産物を一斉に測定した。CE-TOFMS分析条件a.キャピラリー電気泳動CEの分析条件キャピラリーには、フューズドシリカキャピラリー内径50μm、外径350μm、全長100cmを用いた。緩衝液には、1Mギ酸pH約1.8を用いた。印加電圧は、30kV、キャピラリー温度は20°Cで測定した。試料は、加圧法を用いて50mbarで3秒間約3nl注入した。b.飛行時間型質量分析計TOFMSの分析条件正イオンモードを用い、イオン化電圧は4kV、フラグメンター電圧は75V、スキマー電圧は50V、OctRFV電圧は125Vに設定した。乾燥ガスには窒素を使用し、温度300°C、圧力10psigに設定した。シース液は50メタノール溶液を用い、質量較正用にレゼルピンm/z609.2807を0.5μMとなるよう混入し10μl/minで送液した。レゼルピンm/z609.2807とメタノールのアダクトイオンm/z83.0703の質量数を用いて得られた全てのデータを自動較正した。3.液体クロマトグラフィー-質量分析装置LC-MSMSによる血清中のγ-Glu-Xペプチド類測定高感度に測定するため、血清中のγ-Glu-Xペプチド類はLC-MSMSを用いて測定した。a.液体クロマトグラフィーLCの分析条件分離カラムには、野村化学NomuraChemicalCo社製DevelosilRPAQUEOUSAR3内径2mm×長さ100mm,3μmを用い、カラムオーブンは30°Cに設定した。試料は1μl注入した。移動相Aには0.5ギ酸、Bにはアセトニトリルを用い、B液が00min-15min-1015min-9917min-9919minの流速0.2ml/minのグラジエント溶出法を用いてγ-Glu-Xペプチド類を分離した。b.三連四重極型質量分析計QqQMSの分析条件アプライドバイオシステムAppliedBiosystem社製API3000三連四重極型質量分析計を用い、ポジティブイオンモードのMRMモードで測定した。各質量分析計のパラメータを以下に示した。イオンスプレー電圧:5.5kVネブライザガス圧力:12psiカーテンガス圧力:8psi衝突ガス:8unit窒素ガス温度:550°C各γ-Glu-Xペプチド類をMRMMultipleReactionMoniteringモードで測定するために最適化されたMRMパラメータを表1に示す。4.肝障害バイオマーカーの探索および評価図3に健常者Cと肝臓がんHCC患者の血清中のγ-Glu-Xペプチド類をLC-MSを用いて測定した結果を示し、図4に健常者Cと無症状B型肝炎キャリアAHB患者の血清中のγ-Glu-Xペプチド類をLC-MSを用いて測定した結果を示し、図5に単純脂肪肝SS患者と非アルコール性脂肪肝炎NASH患者の血清中のγ-Glu-Xペプチド類をLC-MSを用いて測定した結果を示す。図3、図4において、1はγ-Glu-Gly、2はγ-Glu-Ala、3はγ-Glu-Ser、4はγ-Glu-Val、5はγ-Glu-Thr、6はγ-Glu-タウリン、7はγ-Glu-Ile、8はγ-Glu-Leu、9はγ-Glu-Asn、10はγ-Glu-Lys、11はγ-Glu-Gln、12はγ-Glu-Glu、13はγ-Glu-Met、14はγ-Glu-His、15はオフタルメートγ-Glu-2AB-Gly、16はγ-Glu-Phe、17はグルタチオン酸化型GSSG、18はγ-Glu-Tyr、19はγ-Glu-Glu-Glyである。多くのγ-Glu-Xペプチド類が、健常者Cに比べ肝臓がんHCC患者や無症状B型肝炎キャリアAHB患者で増加していること、及び、単純脂肪肝SS患者と非アルコール性脂肪肝炎NASH患者で差があることが判明した。また他の肝障害でも、γ-Glu-Xペプチド類の濃度は健常者に比べて有意に高かった。図6に健常者Cおよび各種の肝炎患者の血清中のAST、ALT値およびγ-Glu-Xペプチド類の測定結果を示す。図中、矢印は最大値、最小値を示し、ボックスの上が順位で25の値、ボックスの下が順位で75の値を示し、ボックス中の横線が中央値を示す。従来の肝機能検査値であるAST、ALT値は、薬剤性肝障害DI、慢性B型肝炎CHB、慢性C型肝炎CHCでは上昇したが、他の肝炎では健常者の値と有意差はなかった。しかし、γ-Glu-Ser、γ-Glu-Thrなどのγ-Glu-Xペプチド類は、健常者Cよりも薬剤性肝障害DIで高く、他の肝炎はさらに高値を示した。特に無症状B型肝炎キャリアAHBや無症状C型肝炎キャリアAHCや肝臓がんHCCでも、γ-Glu-Xペプチド類は高値を示した。また詳細に見ると幾つかのγ-Glu-Xペプチド類で、無症状B型肝炎キャリアAHBより無症状C型肝炎キャリアAHCが高かったり、無症状B型肝炎キャリアAHBより慢性B型肝炎CBCが高かったり、同じC型肝炎でも無症状AHC、慢性肝炎CHC、肝臓がんHCCと疾患が進行するにつれて、値が低くなる傾向が見られた。このように、各疾患によって、AST、ALTと各γ-Glu-Xペプチド類の血中濃度が異なっているため、これらの成分の値を用いれば、各疾患を分けられるのではないかと考えた。そこで、各肝臓疾患を区別するためのバイオマーカーの選定を目的に多変量解析手法の多重ロジスティック回帰MLR分析を行った。結果を表2~表4に示す。多重ロジスティック回帰MLR分析では、目的変数である比率pに対して、k個の説明変数x1、x2、x3、...、xkを使って、ln=b0b1x1b2x2b3x3...bkxk1というpの回帰式を求めるが、表2~表4中のパラメータの値が、1式のb0、b1、...bkに入る具体的な値となる。切片は、定数項b0の値を指す。また、症例ごとに確率を計算するときは、例えば薬剤性肝障害DIのグループでは、表中の切片の値-4.12をb0、γ-Glu-Taurineタウリンの値2.34をb1、γ-Glu-Leuの値-17.9をb2、γ-Glu-Gluの値0.322をb3、ASTの値-0.0346をb4、ALTの値0.0521をb5、γ-Glu-Glyの値0.110をb6、γ-Glu-Argの値3.57をb7、γ-Glu-Serの値1.25をb8、γ-Glu-Pheの値7.94をb9、γ-Glu-Metの値10.9をb10、γ-Glu-Citrullineシトルリンの値-6.21をb11、とし、γ-Glu-Taurineタウリンの定量値をx1、γ-Glu-Leuの定量値をx2、γ-Glu-Gluの定量値をx3、ASTの定量値をx4、ALTの定量値をx5、γ-Glu-Glyの定量値をx6、γ-Glu-Argの定量値をx7、γ-Glu-Serの定量値をx8、γ-Glu-Pheの定量値をx9、γ-Glu-Metの定量値をx10、γ-Glu-Citrullineの定量値をx11に代入して具体的な値を出す。推定したパラメータの標準誤差及び95信頼区間も表中に示す。この解析結果から、健常者Cも含めて多くの種類の肝炎患者を選択的に区別できるバイオマーカー候補が見つかった。例えば、健常者Cを識別するバイオマーカーはGlucosamineグルコサミン、γ-Glu-Ala、Methioninesulfoxideメチオニンスルホキシド、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Val、AST、ALT、γ-Glu-Phe、γ-Glu-Met、γ-Glu-Glnであり、これらの値によって、他の肝臓疾患と区別することが可能であることが判明した。この中でも、定量値x1が1増加した場合に確率pがどれだけ変化するのかを表すオッズ比が1を超えて最も大きいγ-Glu-Metの値が健常者Cの判定に最も寄与している。一方、オッズ比が0であるγ-Glu-Leu、γ-Glu-Pheは、これらの物質の増加が、健常者以外非Cと判定することに寄与している。又、図6から、γ-Glu-Ala、γ-Glu-Thr、γ-Glu-シトルリン、メチオニンスルホキシドを用いることもできることがわかる。また薬剤性肝障害DIのバイオマーカーは、γ-Glu-Taurine、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Glu、AST、ALT、γ-Glu-Gly、γ-Glu-Arg、γ-Glu-Ser、γ-Glu-Phe、γ-Glu-Met、γ-Glu-Citrullineであり、これらを組み合わせて、例えば多重ロジスティック回帰MLR分析し、マン-ホイットニー試験のpの値が所定値、例えば0.5より大きいことにより、他の肝臓疾患と区別することができる。この中でも、定量値x1が1増加した場合に確率pがどれだけ変化するのかを表すオッズ比が1を超えて最も大きいγ-Glu-Metの値が薬剤性肝障害DIの判定に最も寄与している。一方、オッズ比が0に近いγ-Glu-シトルリンは、その物質の増加が、健常者Cと判定することに寄与している。ASTとALTはオッズ比がそれぞれ0.96599、1.05346と、変数に増加に伴うpの変化がない1.0に近いため、寄与が小さく、省略できる可能性がある。また、肝臓がんHCCのバイオマーカーはγ-Glu-Taurineタウリン、Methioninesulfoxideメチオニンスルホキシド、γ-Glu-Glu、AST、ALT、γ-Glu-Gly、γ-Glu-Ser、γ-Glu-Citrullineシトルリンであり、これらを組み合わせて、例えば多重ロジスティック回帰MLR分析し、pの値が所定値、例えば0.5より大きいことにより、他の肝臓疾患と区別することができる。この中でもオッズ比が1を超えて最も大きいγ-Glu-シトルリンの値が、肝臓がんHCCの判定に最も寄与している。一方、オッズ比が0に近いγ-Glu-Gluは、この物質の増加に伴って肝臓がん以外非HCCと判定することに寄与している。又、オッズ比が1に近いメチオニンスルホキシド、AST、ALTは、省略できる可能性がある。同様に、他の疾患についても、表2~表4に示したそれぞれのバイオマーカー候補が見つかった。無症状B型肝炎キャリアAHBは、γ-Glu-Taurineタウリン、γ-Glu-Ala、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Val、AST、ALT、γ-Glu-Lys、γ-Glu-Arg、γ-Glu-Met、γ-Glu-Glnであり、慢性B型肝炎CHBは、γ-Glu-Ala、Methioninesulfoxideメチオニンスルホキシド、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Glu、AST、ALT、γ-Glu-Arg、γ-Glu-Ser、γ-Glu-His、γ-Glu-Phe、γ-Glu-Met、γ-Glu-Citrullineシトルリンであり、HCV陽性ALT持続正常者CNALTは、Glucosamineグルコサミン、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Val、AST、ALT、γ-Glu-Gly、γ-Glu-Gln、γ-Glu-Citrullineシトルリンであり、慢性C型肝炎CHCは、Glucosamineグルコサミン、Methioninesulfoxideメチオニンスルホキシド、ALT、γ-Glu-Lys、γ-Glu-Hisであり、C型肝硬変CIRは、Glucosamineグルコサミン、Methioninesulfoxideメチオニンスルホキシド、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Val、γ-Glu-Glu、AST、ALT、γ-Glu-Gly、γ-Glu-Met、γ-Glu-Gln、γ-Glu-Citrullineシトルリンであり、単純脂肪肝SSは、γ-Glu-Taurineタウリン、γ-Glu-Ala、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Val、γ-Glu-Glu、AST、ALT、γ-Glu-Thr、γ-Glu-Glnであり、非アルコール性脂肪肝炎NASHは、Glucosamineグルコサミン、γ-Glu-Ala、γ-Glu-Val、AST、ALT、γ-Glu-Gly、γ-Glu-Gln、γ-Glu-Citrullineシトルリンであった。このうち、オッズ比が1に近いもの、例えば無症状B型肝炎キャリアAHBを判別するときのALT1.083254や、HCV陽性ALT持続正常者CNALTを判別するときのALT0.957388、慢性C型肝炎CHCを判別するときのメチオニンスルホキシド0.989493、ALT0.993806、C型肝硬変CIRを判別するときのAST1.012402、ALT0.973926、非アルコール性脂肪肝炎NASHを判別する時のAST0.949237、ALT1.039583などは省略できる可能性もある。これらのバイオマーカーの寄与率は、症例データの追加によって、モデルを再学習させて、各判別に使うバイオマーカーの組み合わせと多重ロジスティック回帰MLRモデルにおける係数の修正を行い、さらにMLRモデルの精度を高めることもできる。図7に、MLRモデルの開発と評価の一例の手順を示す。バイオマーカー発見段階において、217個の試料をクラスタリングしステップ100、大きな変化を示す要素γ-グルタミルジペプチターゼ、メタボライト、トランスアミナーゼを選択した。選択した要素は、病気又は健常者の試料を他の全てのグループから区別するための重要性に従って、サポートベクトルマシン-要素選択SVM-FS法により、その重要度をランク付けしたステップ102。モデル開発段階において、MLRモデルを、重要度のランクが1位からN位以内の要素を用いて開発し、例えば142個のトレーニングデータを用いて式1の係数と定数項を決定したステップ110、112。MLRの予測精度である受信者動作特性ROC曲線の下面積areaunderthereceiveroperatingcurve:AUCが0.8より大きいか、Nが4になった場合ステップ114の判定結果Yes、そのモデルを最終予測変数として選択した。次に、このMLRモデルの予測精度を、例えば75個の評価データを用いて評価したステップ120。MLRモデルでトレーニングデータと評価データを予測したときの精度、すなわちROC曲線とAUC値を図8~図17に示す。図8~図17中に、ある疾患群と他のすべての疾患群を区別する多重ロジスティック回帰MLRモデルの精度を示した。例えば、薬剤性肝障害DIの場合は、DIとDI以外全ての区別を行う。図8~図17で示したように、すべての疾患でROC曲線下面積areaunderthereceiveroperatingcurve:AUCは、0.855から1.000であり、これらのバイオマーカーによる各肝臓疾患スクリーニング検査は、高精度に各疾患を特定できることが確認された。特に、図8に示した健常者C、図11に示した慢性B型肝炎CHB、図12に示したHCV陽性ALT持続正常者CNALTは、いずれもAUC=1.000で、本発明法により極めて高精度に特定されることがわかった。5.他の疾患でのγ-Glu-Xペプチドの評価γ-Glu-Xペプチド類が他の疾患でも上昇するか確認した。図18に肝臓がんHCC患者と胃がんGC患者の血清中のγ-Glu-Xペプチド類の濃度を示した。胃がんGC患者では、γ-Glu-Xペプチド類の濃度は、健常者Cと同等であり、肝臓がんHCC患者のようなγ-Glu-Xペプチド類の増加は見られなかった。図19に、肝臓がんHCC患者個体数32を慢性C型肝炎CHC患者個体数35やC型肝硬変CIR患者個体数18と区別するためのα-フェトプロテインAFPとMLRの箱ヒゲ図とROC曲線を示す。MLRモデルは、γ-Glu-Ala、γ-Glu-シトルリン、γ-Glu-Thr及びγ-Glu-Pheを用いている。マン-ホイットニー試験によるp値は、AFP、MLR共に0.0001未満であった。AFPの箱ヒゲ図において、HCCグループの6プロットがプロット>500ng/mlの外であった。ROC曲線中の値はROC以下の面積及びその95信頼区間を示す。また糖尿病患者でも血中のγ-Glu-Xペプチド類の濃度は低く、血中のγ-Glu-Xペプチド類の増加は、肝臓疾患特異的に観察された。6.γ-Glu-Xペプチド類の生合成機序の解明マウスを用いて、γ-Glu-Xペプチド類の生合成機序を解明した。図2Bに示したように、活性酸素や親電子物質による酸化ストレス条件下では、これらの物質の除去のためにグルタチオンが枯渇し、それに伴い、γ-グルタミルシステイン合成酵素GCSが活性化され、各種のアミノ酸が基質出発物質となって、γ-Glu-Xジペプチド類やγ-Glu-X-Glyトリペプチド類が生合成されることが判明した。以下に実験手順を示す。a.GCS阻害剤BSOおよび活性化剤DEMのマウスへの投与一晩絶食させたオスのマウスにペントバルビタルナトリウム体重1Kg当たり60mgを腹膜内注射して麻酔後、γ-グルタミルシステイン合成酵素GCS阻害剤であるBSO、親電子物質GCS活性化剤であるDEM、さらに健常として生理食塩水を体重1Kg当たりそれぞれ4mmol/kgBSO888mg、DEM688mgを腹腔内に注射した。投与1時間後にマウスから肝臓約300mgを採取した各5回。b.肝臓から代謝物質の抽出マウスから摘出した肝臓約300mgは直ちに内部標準物質入りのメタノール1mlに入れ、ホモジナイズして酵素を失活させ、代謝の亢進を止めた。500μlの純水を加えた後、300μlの溶液を取り出し、200μlのクロロホルムを加え良く攪拌後、さらに4°Cで15分間、15000rpmで遠心した。静置後、分離した水-メタノール相300μlを分画分子量5kDaの遠心限外ろ過フィルターを通過し、除タンパクした。ろ液を凍結乾燥後、Milli-Q水50μlを加え、それをCE-TOFMS測定に供した。c.酸化ストレスを示すγ-Glu-X、γ-Glu-X-Glyペプチド類バイオマーカーの特定結果生理食塩水健常、BSO、DEM投与後のマウスの肝臓および血清中のアミノ酸、γ-Glu-X、γ-Glu-X-Glyペプチド類の測定結果の一部を図11に示す。左から、それぞれの試薬を投与したマウスの肝臓から検出されたアミノ酸X、γ-Glu-Xペプチド、γ-Glu-X-Glyペプチドの定量結果、右に血清中のアミノ酸X、γ-Glu-Xペプチド、γ-Glu-X-Glyペプチドの定量結果を示す。例えば一番上は、Cys、γ-Glu-Cys、γ-Glu-Cys-Glyグルタチオンの結果である。肝臓中のグルタチオン量は健常に比較し、BSO、DEM投与マウスでは急激に減少したBSO投与ではγ-グルタミルシステイン合成酵素が阻害されるためグルタチオンは減少し、親電子物質DEM投与マウスでは解毒のため消費されるからグルタチオンは減少する。血清からグルタチオン関連物質は検出されなかった。検出されたγ-Glu-X、γ-Glu-X-Glyペプチド類が、グルタチオン生合成経路で合成されていることを以下の方法で確認した。図2に示したように、これらのペプチド類がグルタチオン生合成経路で合成されていれば、肝臓中のγ-Glu-X、γ-Glu-X-GlyペプチドはBSO投与でγ-グルタミルシステイン合成酵素が阻害されるため健常より減少し、親電子物質DEM投与でγ-グルタミルシステイン合成酵素が活性化されるため増加するはずである。図20に、BSO,DEM投与マウスの肝臓の測定結果、図21に、アセトアミノフェンAPAP投与マウスの肝臓の測定結果、図22に、アセトアミノフェンAPAP投与マウスの血清の測定結果を示す。図20~図22のように、グルタチオン関連のγ-Glu-Cys、GSH、γ-Glu-Ser-Gly以外の肝臓中のγ-Glu-X、γ-Glu-X-Glyペプチド類物質は、健常より、BSO投与で減少し、DEM投与で増加しており、確かにグルタチオン生合成経路によって生成されていることが確認された。つまり、これらのγ-Glu-X、γ-Glu-X-Glyペプチド類は、活性酸素や親電子物質などの酸化ストレスによって、グルタチオンが減少した際に肝臓内で生合成されることがわかった。d.スレオニン同位体による生合成経路追跡さらにスレオニンThrの13C、15Nの同位体を腹腔内投与し、親電子物質を生じて酸化ストレスを与えるAPAPを加えたところ、マウスの肝臓からThrの13C、15Nのγ-Glu-Thr、γ-Glu-Thr-Glyが検出され、確かに、酸化ストレス条件下では、Thrからγ-Glu-Thr、γ-Glu-Thr-Glyが生合成されることが確認された。一方、マウスの血清中の物質では、健常より、BSO投与で減少し、電子物質DEM投与で増加するγ-Glu-X、γ-Glu-X-Glyペプチド類は、γ-Glu-2ABとオフタルミン酸γ-Glu-2AB-Glyのみであった図22。したがってマウスの場合は、親電子物質などの酸化ストレスによって、グルタチオンが減少した際に血中で増加するのは、γ-Glu-2ABとオフタルミン酸のみと考えられる。しかし、各種の肝炎患者の血清測定では、γ-Glu-2AB、オフタルミン酸より、他のγ-Glu-Xペプチド類の濃度の方が高かった。この違いは、生物種間で、基質濃度、代謝酵素の基質特異性や活性、トランスポーターの種類、機能、発現量などが異なるからと推定される。本発明による血清中のγ-Glu-Xペプチド類測定による診断法は、肝硬変cirrhosisや非アルコール性脂肪肝疾患NAFLD、単純脂肪肝SS、非アルコール性脂肪肝炎NASHなどの各種の肝障害の診断も可能である。図23~図26に、健常者CとC型肝硬変CIR患者、単純脂肪肝SS患者、非アルコール性脂肪肝炎NASH患者のデータを示す、印で示すp値0.05未満のAST、γ-Glu-Val、γ-Glu-Leu、γ-Glu-Pheにより、単純脂肪肝SSと非アルコール性脂肪肝炎NASHを識別できることがわかる。今回は、各種の肝障害のマーカー候補のAST、ALT、γ-Glu-Xペプチド類の組み合わせの例を記したが、それらに特定されるわけではなく、今後さらに多検体の精査を行うことで、バイオマーカー候補の種類組み合わせは変更される場合もある。また今回は血清中のγ-Glu-Xペプチド類測定には、LC-MS法を用いたが、ガスクロマトグラフィーGC、液体クロマトグラフィーLC、キャピラリー電気泳動CE、チップLCや、チップCE、それらに質量分析計MSを組み合わせたGC-MS、LC-MS、CE-MS法、各種のMS単独の測定法、NMR法、γ-Glu-Xペプチド類を蛍光物質やUV吸収物質に誘導体化してから測定する方法、抗体を作成してELISA法などで測定するなど、測定法にこだわらず、あらゆる分析法で測定することが可能である。本発明に係る医薬品の検定方法は、哺乳動物において、その医薬品が投与された哺乳動物から採取された血液と、投与されていない哺乳動物から採取された血液について、本発明のマーカーの濃度を測定する方法のことである。なお、この検定方法に用いられる血液を採取する哺乳動物は特に制限がないが、上記マーカーのうち少なくとも一つがその血液中に存在する哺乳動物であることが好ましく、マウスやラットなどのげっ歯類や、ヒト、サル、イヌであることが、より好ましい。ここで、医薬品の親電子物質毒性と活性酸素酸化ストレスに対する治療薬としての有効性を検定する場合、医薬品の適用となる対象疾病は、酸化ストレスによって生じる疾病であれば限定されず、上述したような、マーカーの使用対象となる疾病と同様である。また、医薬品の投与によって生じる酸化ストレスの強さを検定する場合、医薬品の種類は全く限定されず、例えば、有害薬物も医薬品に含まれる。なお、本発明に係る検定方法の目的は、酸化ストレスによって生じた疾病に対する治療薬として医薬品の有効性を検定すること、及び医薬品の投与によって生じる酸化ストレスの強さを検定することであるが、具体的には、様々な局面で用いられる。以下に、代表的な使用例を述べるが、本発明の検定方法は、これらの例に限定されない。1治療薬としての有効性の検定以下に、肝炎に対する使用例を述べるが、本発明の検定方法は、これらの例に限定されない。1-1特定個体における薬効検定例えば、本発明の検定方法を用い、ある肝炎治療薬が、特定の患者の肝炎を治療するのに有効であるかどうか、判定することができる。まず、肝炎に罹患した患者に肝炎治療薬を投与する前後で、その患者から血液を採取する。続いて、その血液において、肝炎診断マーカーの濃度を測定する。こうして得られた血液中のマーカー濃度を、肝炎治療薬の投与前後で比較する。この時、肝炎治療薬投与後の血液中マーカー濃度が、投与前と比較して有意に低下していれば、肝炎治療薬がその患者の肝炎を治療するのに有効であると判断できる。1-2一般的な薬効検定さらに、本発明の検定方法を複数のヒト個体に適用することにより、その医薬品の、肝炎治療薬としての一般的な有効性を検定することも可能である。例えば、肝炎を患った複数のヒトにおいて、肝炎治療薬の投与前後で肝炎診断マーカーの濃度を比較することにより、その物質の治療薬としての普遍的効果を調べることができる。あるいは、別態様として、2つの群の間で医薬品としての効果を比較してもよい。まず、肝炎に罹患している患者を2つの群に分ける。一方の群の患者には肝炎治療薬を投与し、もう一方の群の患者にはその治療薬を投与しないか、またはプラセボを投与する。これらの2つの群の患者から血液を採取する。続いて、その血液において、肝炎診断マーカーの濃度を測定する。さらに、この測定により得られた、血液中のマーカー濃度を、2つの群の間で比較する。なお、群は一個体しか含まなくても、複数の個体を含んでもよく、2つの群の個体数が同じであっても、異なっていてもよい。測定は、同じ群の個体から採取した血液をプールし、その血液中のマーカー濃度を測定してもよいが、各個体の血液において別々にマーカー濃度を測定することが好ましい。医薬品の投与の前後や投与の有無といった、複数の血液を含むグループ間でのマーカー濃度の比較は、一血液ずつを対にして比較しても、同じグループに属する複数の血液におけるマーカー濃度の積算値や平均値をグループ間で比較してもよい。この比較は当業者に周知のいずれの統計学的方法を用いて行うことができる。このように比較した結果、治療薬の投与後において、投与前と比較して血液中マーカー濃度が有意に低下していたり、治療薬の投与群において、非投与群と比較して有意に低下していたりすれば、その治療薬が肝炎の治療に有効であると判断できる。また、低下の度合いによって、どの程度の有効性を有するかも判断できる。このように、肝炎治療薬としての一般的な有効性を検定することによって、肝炎治療薬のスクリーニングを行うことができる。また、複数の肝炎治療薬を用い、各肝炎治療薬の異なる濃度について治療効果を調べ、濃度に依存した薬効の違いを比較することにより、各肝炎治療薬の強さを調べることも可能である。2酸化ストレスの強さの検定酸化ストレスが強いと副作用が強く現れるため、以下に、一例として、医薬品の副作用に対する使用例を述べるが、本発明の検定方法は、これらの例に限定されない。2-1特定個体における副作用の強さの検定本発明の検定方法を用い、ある医薬品が、特定の哺乳動物個体に副作用をもたらすかどうかを判定することができる。まず、個体に治療用の医薬品を投与する前後にその個体から血液を採取する。続いて、その血液において、酸化ストレス検出マーカーの濃度を測定する。こうして得られた血液中のマーカー濃度を、医薬品の投与前後で比較する。この時、医薬品投与後の血液中マーカー濃度が、投与前と比較して有意に増加していれば、投与した医薬品がその個体で酸化ストレスを生じ、その個体に副作用をもたらしていると判断できる。2-2一般的な副作用の強さの検定さらに、本発明の検定方法を複数の哺乳動物個体に適用することにより、ある医薬品の、一般的な副作用の強さを検定することも可能である。例えば、ある疾患を患った複数の個体において、当該疾患治療用医薬品の投与前後で酸化ストレス検出マーカーの濃度を比較することにより、その医薬品一般的な副作用の強さを調べることができる。あるいは、別態様として、2つの群の間で副作用の強さを比較してもよい。まず、ある疾患に罹患している哺乳動物を2つの群に分ける。一方の群の個体には当該疾患治療用医薬品を投与し、もう一方の群の個体にはその医薬品を投与しないか、またはプラセボを投与する。これらの2つの群の個体から血液を採取する。続いて、その血液において、酸化ストレス検出マーカーの濃度を測定する。さらに、この測定により得られた、血液中のマーカー濃度を、2つの群の間で比較する。なお、群は一個体しか含まなくても、複数の個体を含んでもよく、2つの群の個体数が同じであっても、異なっていてもよい。測定は、同じ群の個体から採取した血液をプールし、その血液中のマーカー濃度を測定してもよいが、各個体の血液において別々にマーカー濃度を測定することが好ましい。グループ間でのマーカー濃度の比較は、一血液ずつを対にして比較しても、同じグループに属する複数の血液におけるマーカー濃度の積算値や平均値をグループ間で比較してもよい。この比較は当業者に周知のいずれの統計学的方法を用いて行うことができる。このように比較した結果、医薬品の投与後において、投与前と比較して血液中マーカー濃度が有意に上昇していたり、医薬品の投与群において、非投与群と比較して有意に上昇したりすれば、その医薬品に副作用があると判断できる。このように、医薬品としての副作用の強さを検定することによって、副作用の弱い医薬品のスクリーニングを行うことができる。また、複数の医薬品を用い、各医薬品の異なる濃度について医薬品としての効果を調べるとともに、濃度に依存した副作用の違いを比較することにより、各医薬品の治療薬としての適性を比較することも可能である。上述したように、本発明の酸化ストレス検出マーカーは、肝臓疾患治療用医薬品の検定あるいは医薬品の副作用の強さの検定、及び疾病の診断などに用いることができる。その時、複数のマーカーを用いることによって、検定精度や診断精度を上げることができる。また、本発明のマーカー以外の検定方法や診断方法を組み合わせても構わない。"