"固定生物学的試料からの生体分子の単離、抽出または精製のためのターゲット細胞または組織を決定するための方法であって、前記方法は:1前記固定生物学的試料の少なくとも1つの部分を少なくとも1つの支持体に載置する工程、2必要に応じて、前記試料の少なくとも1つの部分を試料処理剤で処理する工程であって、前記処理を工程6より前の手順の任意の段階で実行することができる、工程、3少なくとも1つの支持体に載置された前記固定生物学的試料の少なくとも1つの部分を染色する工程、4工程3において染色された前記少なくとも1つの部分を検討して、対象となる生体分子を含むターゲット細胞または組織を決定する工程、5相応のターゲット細胞または組織を、前記支持体に載置された前記固定試料の残部から分離する工程、6分離された前記細胞または組織から前記生体分子を単離する工程を包含する、方法。前記生体分子がRNAを含む、請求項1に記載の方法。前記固定生物学的試料が、蝋包埋試料、好ましくはパラフィン包埋試料、好ましくは非ホルマリン固定パラフィン包埋試料非FFPE-試料であり、かつ前記試料処理剤が、以下:脱蝋剤、好ましくは、トルエン、キシレン、線状C6~C16アルカン、分岐C6~C16アルカンおよび環式C6~C16アルカン、線状ジアルキルエーテル、分岐ジアルキルエーテルおよび環式ジアルキルエーテルここで、各アルキル鎖は6から16個の炭素原子を含むおよび室温23±2°Cで液体の油を含む群から選択される、さらに好ましくはC13~C16アルカン、一般式OCnH2n12式中のnは8から12の整数であるのジアルキルエーテル、室温より下の融点を有する、好ましくは室温より下の融点を有する、鉱油、シリコン油およびパラフィンを含む群から選択される、ならびに最も好ましくはキシレンまたは市販のキシレン代用品またはヘキサデカン、ジオクチルエーテル、ヘプタンまたはそれらの混合物を含む群から選択される脱パラフィン剤から選択される、請求項1または2に記載の方法。前記支持体が透明である、好ましくは、前記支持体がガラスまたは透明ポリマーから作製されている、請求項1から3のいずれか一項に記載の方法。工程4における前記試料単数または複数が、ライトまたはバックライトのもとで、好ましくは顕微鏡のもとで検討される、請求項1から4のいずれか一項に記載の方法。前記ターゲット細胞または組織が、工程5において顕微解剖、レーザー捕捉顕微解剖、擦過または切り出しによって分離される、請求項1から5のいずれか一項に記載の方法。固定生物学的試料、好ましくは蝋包埋非ホルマリン固定パラフィン包埋試料非FFPE-試料、さらに好ましくは非ホルマリン固定パラフィン包埋試料の0,5から12μm厚の少なくとも1つの切片、を染色するための方法であって、前記方法は:前記試料を60秒以下、好ましくは45秒未満、さらに好ましくは30秒未満、最も好ましくは15秒未満、少なくとも1つの組織染色剤と接触させる工程、前記試料を水ですすぐ工程、およびその後、必要に応じて、前記試料を10秒未満、さらなる組織染色剤と接触させる工程を包含する、方法。前記試料を、30秒以下ヘマトキシリンと接触させ、かつ3秒未満、好ましくは1秒、エオシンと接触させる、請求項7に記載の方法。請求項1から6のいずれか一項に記載の方法であって、ここで、固定生物学的試料を0,5から12μm厚の切片に分割し、かつ工程1において、元の試料中では互いに隣接していた前記切片のうちの少なくとも2つをそれぞれ別々の透明支持体上に載置する、蝋包埋試料を使用した場合には、必要に応じて、前記手順の任意の段階において、互いに独立して、前記切片を工程2に従って脱蝋剤で処理する、工程3において、前記切片のうちの少なくとも1つを少なくとも1つの組織染色剤と接触させ、隣接切片を染色しない、工程4において、染色された前記試料切片中の対象となる細胞または組織を決定して印を付け、染色していない前記試料切片を有する前記透明支持体を、染色されかつ印が付けられた前記試料切片の頂部に前記元の試料の場合と同じ配向で積み重ねる、工程5において、染色された前記試料の印の付いたエリアの頂部にある染色していない前記試料の前記細胞または組織を、染色していない前記試料の残部から分離し、前記残部を捨て、そして染色された前記試料の印の付いた前記エリアに対応する細胞/組織を保持する、工程6において、工程5において保持された前記細胞から核酸を単離または抽出する、方法。請求項1から6のいずれか一項に記載の方法であって、ここで、固定生物学的試料を0,5から12μm厚の切片に分割し、かつ工程1において、前記切片のうちの少なくとも1つを透明支持体に載置する、工程2において、蝋包埋試料を使用した場合には前記切片を脱蝋剤で処理する、工程3において、請求項7または8に記載の方法に従って前記切片を少なくとも1つの組織染色剤で処理する、工程4において、染色された前記試料切片中の対象となる細胞または組織を決定する、工程5において、対象となる前記細胞または組織を、染色された前記試料の残部から分離し、前記残部を捨てる、工程6において、工程5において得られた前記細胞から核酸を単離または抽出する、方法。請求項7または8に記載の方法に従って染色された組織の使用であって、前記使用は、前記組織の少なくとも一部分から生体分子を単離するためのものである、使用。前記生体分子の単離が、RNA単離を含む、請求項1から6、9もしくは10のいずれか一項に記載の方法または請求項11に記載の使用。固定生物学的試料中のターゲット細胞または組織を含む生体分子を、前記ターゲット細胞または組織から生体分子を抽出、単離および/または精製するための方法の間、視覚化するためのキットであって、前記キットは:b.任意選択の、少なくとも1つの透明支持体c.任意選択の、少なくとも1つの組織染色剤d.任意選択の、少なくとも1つの請求項3に記載の試料処理剤e.請求項7、8、9または10に記載の方法のための指示書f.生体分子、好ましくは核酸、最も好ましくはRNAを含むもの、を単離するための少なくとも1つの緩衝液および/または器具を含む、キット。生物学的試料から生体分子を抽出、単離および/または精製するためのキットであって、前記キットは:i任意選択の、前記生物学的試料を固定するための指示書ii任意選択の、ホルマリンを含まない固定剤または混合物iii任意選択の、少なくとも1つの透明支持体iv任意選択の、少なくとも1つの組織染色剤v任意選択の、少なくとも1つの請求項3に記載の試料処理剤vi請求項7、8、9または10に記載の方法のための指示書vii生体分子、好ましくは核酸、最も好ましくはRNAを含むもの、を単離するための少なくとも1つの緩衝液および/または器具を含む、キット。本出願の目的は、固定生物学的試料から生体分子を抽出および単離するための方法を提供することであり、取得可能な生体分子は、該試料の対象となる細胞または組織ターゲット細胞の生体分子パターンを表示している。この目的は、固定生物学的試料からの生体分子の単離、抽出または精製のためのターゲット細胞または組織を決定および/または選択するための方法によって達成され、この方法は、以下の工程を含む:1固定生物学的試料の少なくとも1つの部分を少なくとも1つの支持体に載置するmount工程、2必要に応じて、前記試料の少なくとも1つの部分を試料処理剤で処理する工程であって、該処理を工程6より前の手順の任意の段階で実行することができる、工程、3少なくとも1つの支持体に載置された前記固定生物学的試料の少なくとも1つの部分を染色する工程、4工程2において染色された少なくとも1つの部分を検討して、対象となる生体分子を含むターゲット細胞または組織を決定する工程、5相応のaccordingターゲット細胞または組織を、前記支持体に載置された前記固定試料の残部から分離する工程、6分離された細胞または組織から生体分子を単離する工程。好ましくは、本発明に従って前記工程を提供した順序で実行し、ここで、工程2を工程1より後かつ工程6より前の任意の段階で実行する。好ましくは、工程2を工程3の前に実行する。工程1から5、特に工程3から5は、主として、-好ましくは染色された試料の視覚的検討により-対象となる生体分子をおそらく含む細胞の決定および/または選択を可能にすることに役立ち、その後、工程6に従って前記生体分子を単離する。本発明によると、生体分子を単離する前にターゲット細胞の決定/選択を実行することが特に好ましい。前記生物学的試料は、生物全体であってもよく、生物の一部分、特に、ヒト、動物または植物に由来する組織断片または組織切片または培養細胞もしくは組織であってもよく、あるいは微生物であってもよい。細胞培養物から単離された包埋細胞も使用することができる。適する生物学的試料は、例えば、細胞含有体液、例えば血液、精子、脳脊髄液、唾液、痰もしくは尿、白血球画分、バフィーコート、糞便、表面生検材料、吸引液、皮膚断片、生物全体、後生動物の、好ましくは昆虫および哺乳類の、特にヒトの、器官および組織、例えば剖検材料、生検材料、微細針吸引液または組織切片の形態のもの、単離された細胞、例えば付着または浮遊細胞培養物の形のもの、植物、植物の部分、植物組織または植物細胞、細菌、ウイルス、酵母および真菌などの、固定に適するすべての生物学的試料である。用語固定すること、固定または固定されたは、生物学的試料が、形態学的および/または組織学的構造の安定化、特に、該試料に含有されている生体分子の安定化をもたらす結果となる薬剤または組成物で処理されることを意味する。当該技術水準から公知のそのような薬剤または組成物の例を上に記載している。好ましい実施形態では、ホルマリンを含まない組成物で生物学的試料を固定した。本発明によると、この試料を非ホルマリン固定試料と記述する。好ましくは、上に記載したような市販の非架橋組成物、例えばカーノイズ、メタカーン、Umfix、Finefix、RCL2、Boonfix、またはドイツ特許出願公開第19928820号明細書に記載されているような固定剤で、生物学的試料を固定した。特に好ましい実施形態では、欧州特許出願公開第1965190号明細書に記載されている手順に従って、市販のPAXgene登録商標TissueキットPreAnalytixGmbH、スイス、Hombrechtikonによって固定されている生物学的試料を用いて、本発明の方法を実行する。固定により、生物学的構造を生きているような様式で実質的に保存して、現実的な評価realassessmentを可能にすることを意図している。固定のさらなる利点は、検体を長期間、記録として保管することができることである。さらに、多くの形態学的調査は、固定された材料に基づいてのみ可能である。用語生体分子は、生物学的試料の任意のタイプの核酸およびタンパク質を含む。本発明による好ましい生体分子は、核酸である。前記生体分子について、安定化は、好ましくは、該生体分子の分解、修飾または誘導の阻害を意味することを意図したものである。生体物質の組織学的分析の場合、用語安定化は、好ましくは、試料の形態の有意な変化の防止を意味することを意図したものである。本方法による核酸は、当業者に公知のすべての核酸、例えば、天然または合成核酸を含み、ならびに人工的に試料に導入された核酸、一本鎖および二本鎖核酸、直鎖、分岐または環式核酸、特に、任意のタイプのDNAおよびRNA、好ましくはRNA、特にmRNA、tRNA、hnRNA、siRNA、miRNA、snRNAまたはリボザイム、およびDNA、特に、ゲノムもしくはプラスミドDNAまたは細胞小器官からのDNAも含み、ならびにまたは感染源の核酸も含む。好ましくは、本発明によると、核酸は、前に述べたタイプのうちの少なくとも1つのタイプのRNAを含む。核酸含有試料であって、該試料からRNAを単離するのに十分に安定化された試料からは、通常、DNAの単離も可能である。なぜなら、RNAと比較してDNAはより安定しており、従って、分解されにくいからである。用語タンパク質は、例えば構造タンパク質、受容体タンパク質、酵素、細胞質の可溶性タンパク質、膜タンパク質、抗体、ホルモンまたは任意のさらなるタンパク質のような、生物学的試料中に天然に存在するまたは人工的に含められた、グリコシル化されたまたはグリコシル化されていない、任意のタンパク質またはペプチドを意味する。本発明について、生物学的試料の固定後にその固体された材料を蝋、通常はパラフィン、に包埋する工程いわゆる固定、パラフィン包埋FPE材料が続くことは、必須ではないが、長期保存のために非常に一般的である。前記包埋媒体の主目的は、顕微鏡適用および/または組織化学的適用のために天然の状態での検体の切片作製および載置を可能にすることである。しかし、多くの適用について、試料から、例えば該試料の組織学的染色の前に、包埋媒体を除去することが必要である、または少なくとも有利である。本発明については、公知の包埋材料のいずれを使用してもよく、特に、任意の蝋、寒天、エステルまたはポリエステル蝋、樹脂、例えばエポキシ樹脂またはニトロセルロースを使用することができ、ならびに寒天-パラフィン、寒天-エステル蝋またはニトロセルロース-パラフィン蝋での二重包埋法を用いてもよい。そのような蝋は、通常、高級炭化水素の複合混合物から成り、さらなる成分、例えば、高級脂肪酸のエステルおよび/またはグリコールならびにこれらに類するものを含むこともある。前記蝋は、天然および/または合成由来のもの、例えばポリエステル蝋ポリエチレングリコールジステアラートと1-ヘキサデカノールの混合物であることもあり、その試料包埋特性を強化する添加剤、例えばDMSOまたは高級ポリオレフィンなど、を追加で含有することもある。好ましくは、前記蝋は、パラフィンであって、室温で固体の主として飽和炭化水素の混合物であり、典型的には石油の蒸留によって調製されるものであるパラフィンを表すだろう。必要に応じて、前記パラフィン蝋は、任意の添加剤を含有することがある。本方法の工程1に従って、固定生物学的試料の少なくとも1つの部分を少なくとも1つの支持体に載置する。前記生物学的試料を、例えばガラスまたは任意の透明ポリマーから作製された透明支持体に載置することが好ましい。そのような支持体は、例えば、ガラスプレート、例えば顕微鏡スライド、プレキシグラス製もしくは透明ポリマー例えば、PET製のプレート、細胞培養皿またはこれに類するものである。勿論、試料の幾つかの部分もしくは切片を1つの支持体に載置してもよく、または幾つかの切片もしくは部分を幾つかの支持体に載置してもよい。例えば細胞培養物の細胞のように試料自体がそれ相応の厚みを有さないまたはそれより薄い厚みを有する場合には、好ましくは、固定されたおよび場合により包埋された生物学的試料を、0,5から12μmの厚みを有する部分で切片を作製する。ライトまたはバックライトのもとで、例えば顕微鏡のもとで、詳細に検討することができるほど透明である切片に試料を薄切りにするまたは切断することが特に好ましい。好ましくは、厚みは、1から10μmであり、2から8μmがさらに好ましく、および4から6μmが最も好ましい。本発明において蝋包埋試料を使用する場合、好ましくは、該試料を試料処理剤を使用して工程2に従って処理する。前記試料処理剤は、好ましくは脱蝋剤de-waxingagentまたは組成物、さらに好ましくは脱パラフィン剤de-paraffinizingagentまたは組成物である。伝統的に、脱蝋または脱パラフィンは、芳香族溶媒、例えばトルエンおよび特にキシレン、の使用を伴う。一方、水と不混和性の少なくとも1つの有機溶媒/化合物を含む非毒性薬剤または組成物を使用することができる。この蝋可溶化剤wax-solubilizingagentは、少なくともそれを試料と接触させる瞬間は、液体であり得る。好ましくは、前記溶媒は、線状、分岐および環式C6~C16アルカン、線状、分岐および環式ジアルキルエーテルこの場合の各アルキル鎖は6から16個の炭素原子を含む、ならびに室温23±2°Cで液体の油を含む群から選択することができ、さらに好ましくは、C7~C16アルカン、一般式OCnH2n12式中のnは8から12の整数であるのジアルキルエーテル、室温より低い、好ましくは15°Cより低い融点を有する鉱油、シリコーン油siliconoilおよびパラフィンを含む群から選択することができ、ならびに最も好ましくは、キシレンまたは市販キシレン代用品、例えばShandonキシレン代用品ThermoFisherScientific、米国Walthamなど、ヘプタン、ヘキサデカン、ジオクチルエーテル、またはそれらの混合物を含む群から選択することができる。純粋な形態でのまたは溶媒の混合物としてのいずれかでそれぞれ蝋包埋試料に適用される任意の溶媒の融点は、25°Cより下、好ましくは室温より下であり得る。本明細書において、用語純粋な形態は、事前に希釈されることなく、および/または他の溶媒と混合されることなく、蝋を溶解するために蝋包埋試料に適用される溶媒を指す。しかし、この用語は、溶媒に相当しないさらなる化合物の存在に関して、特定の純度グレードには言及しない。溶媒が純粋な形態で試料に適用される場合、その溶媒は、好ましくは、室温より下の融点を有する。しかし、室温より上の融点を有する溶媒を、それらが室温で液体である溶媒の混合物の状態で存在する場合には、蝋包埋試料に適用することができる。上記溶媒のすべてが、室温で数秒以内にまたは長くとも数分好ましくは約15秒から約15分以内に固体パラフィンを溶解することができる。典型的には、脱蝋剤または脱パラフィン剤または組成物が入っている浴、例えばキシレン浴など、に、パラフィンが可溶化されるまで支持体載置試料を浸漬する。その後の工程で、その脱パラフィンされた試料を、水を使用する最終洗浄の前に、漸減アルコール濃度の一連のアルコール溶液によって洗浄して脱蝋剤を除去して、水性の反応物/試薬の溶液、例えば染色溶液または溶解緩衝液など、がその試料に接近できるようにすることができる。固定包埋生物学的試料の少なくとも1つの部分を、本発明の方法の間に工程3に従って染色すること、およびそのために染色前に脱蝋することが好ましい。一方、生体分子を単離する前に試料の一部分または切片を染色しない場合には、その試料のその部分の脱蝋を本方法の工程3、4または5のいずれの後に実行してもよい。染色された切片または部分を生体分子単離には使用しないが、生体分子単離に使用される切片または部分の参照として使用する場合、その試料の少なくとも1つの部分または切片の染色を任意の公知組織学的染色法によって実行することができる。もう一方で、染色された切片を、その後、生体分子単離に使用することとなっている場合には、特にRNA分解を最小にするために迅速染色法として下で説明する染色方法を使用することが特に好ましい。標準的な染色法によると、支持体に載置された試料を、脱蝋ならびにアルコール溶液および水でのすすぎ後、染色剤の供給業者の指示書に従って染色溶液中でインキュベートする。標準的な染色法についての一例は、試料を1分間~3分間、例えばヘマトキシリンMerckのような第一の染色剤中で染色すること、その後、前記試料を3分間~5分間、水道水ですすぐこと、前記試料を1分間~2分間、例えばエオシンMerckのような第二の染色溶液中で染色すること、前記試料を3分間~5分間、水道水ですすぐこと、その染色された試料を1分間80エタノールと、2分間96エタノールと、3分間100エタノールと、および5分間キシレンと接触させることである。このまたは任意の匹敵する方法によって染色された試料を、下で説明するような生体分子単離に使用する試料の参照として使用することができる。新たに開発された迅速染色法によると、試料を、場合により脱蝋およびアルコール溶液でのすすぎおよび水中での短期インキュベーション好ましくは、数秒、例えば5秒またはほんの1秒間だけの後、60秒以下、好ましくは45秒未満、さらに好ましくは30秒未満、最も好ましくは15秒未満、少なくとも1つの細胞染色剤または組織染色剤で染色し、前記試料を水で好ましくは、数秒、例えば、5秒またはほんの1秒間だけすすぎ、その後、場合により前記試料を60秒以下、好ましくは45秒未満、最も好ましくは10秒未満、さらなる細胞染色剤または組織染色剤と接触させる。好ましくは、この方法では、第一の染色剤を試料と最長15秒間接触させ、第二の染色剤を試料と最長3秒間、例えば1秒間、接触させる。水での試料のすすぎは、好ましくは、試料を水に1秒間~2秒間、浸すことによって実行する。染色剤の例は、第一の染色剤についてはヘマトキシリンMerck7,11b-ジヒドロインデノ[2,1-c]クロメン-3,4,6a,9,106H-ペントール、C16H14O6および第二の染色剤についてはエオシンMerckである。さらなる適する染色剤は、トルイジンブルー、アザン、PAS過ヨウ素酸シッフ染色であるが、ヘマトキシリン/エオシンでの染色のほうが好ましい。エオシンY:2’,4’,5’,7’-テトラブロモ-3’,6’-ジヒドロキシスピロ[2-ベンゾフラン-3,9’-キサンテン]-1-オン-二ナトリウム塩。C20H6Br4Na2O5。好ましい実施形態では、前記固定試料は、ホルマリンを含まない組成物で固定された蝋包埋試料非ホルマリン固定パラフィン包埋非FFPE試料であり、従って、迅速法は、好ましくは、支持体に載置された試料を脱蝋する工程、および脱蝋後、染色前に、漸減量のアルコールを含む一連の組成物でその試料をすすぐ工程をさらに含む。この新たな方法によって染色された試料をRNA単離に使用することになっている場合、すべての組成物染色組成物、アルコール含有組成物の調製に、およびすすぐ工程に、RNase不含水を使用することが好ましい。この迅速染色法を用いることにより、染色された試料切片から生体分子、特に核酸、を抽出/単離することが可能である。詳細には、染色に基づいて核酸の単離のために、目的の細胞または組織領域を選択すること、およびその後、前記の選択された細胞または領域から核酸を単離することが可能である。本発明の工程4において、工程3に従って染色された試料の少なくとも1つの部分を、好ましくはライトまたはバックライトのもとで、例えば顕微鏡のもとで、詳細に検討する。染色された試料を、例えば視覚的に、検討することによって、異なる組織または細胞タイプを区別および同定すること、ならびにその試料が特定の対象となる細胞もしくは組織領域、例えば腫瘍細胞、対象となる細胞もしくは組織区画、外来組織または類似物を含むかどうかを決定することが可能である。そのような細胞または組織は、生体分子単離のためのターゲット細胞または組織として役立つ。本発明の方法により、2つの特定の実施形態を実行することができる。生体分子を染色していない試料から単離する;染色された試料はそのための参照として役立つ。または、生体分子を染色された試料から単離する;そのとき、好ましくは迅速染色法を使用するべきである。最初の場合では、前記方法を次の手順によって実行することが好ましい:固定生物学的試料を0,5から12μm厚の切片薄片に分割する、工程1において、元の試料中では互いに隣接していた前記切片のうちの少なくとも2つをそれぞれ別々の透明支持体に載置する、蝋包埋試料を使用した場合、場合によっては、前記手順の任意の工程において、互いに独立して、前記切片を工程2に従って脱蝋剤で処理する、工程3において、前記切片のうちの少なくとも1つを少なくとも1つの組織染色剤で染色し、隣接切片は染色しない、工程4において、染色された試料切片中の対象となる細胞または組織を決定して印を付け、染色していない試料切片を有する透明支持体を、その染色され印が付けられた試料切片の頂部に元の試料と同じ配向で積み重ねる、工程5において、前記染色された試料の印の付いたエリアの頂部の染色していない試料の細胞または組織を該染色していない試料の残部から分離し、該残部を捨て、該染色された試料の印の付いたエリアに対応する細胞/組織を保持する、工程6において、工程5において保持された細胞から核酸を単離または抽出する。後者の場合では、前記方法を次の手順に従って実行することが好ましい:固定生物学的試料を0,5から12μm厚の切片薄片に分割する、工程1において、前記切片のうちの少なくとも1つを透明支持体に載置する、工程2において、蝋包埋試料を使用した場合には前記切片を脱蝋剤で処理する、工程3において、上で説明したような迅速染色法に従って前記切片を少なくとも1つの組織染色剤で染色する、工程4において、染色された試料切片の中の対象となる細胞または組織を決定する、工程5において、対象となる細胞または組織をその染色された試料の残部から分離し、該残部を捨てる、工程6において、工程5において得られた細胞から核酸を単離または抽出する。このように、ターゲット細胞または組織の検討を、生体分子の単離にさらに使用される試料に関して行うか、参照試料隣接または対応する試料において、この場合、対象となる細胞または組織を決定することができ、および非染色試料における対応する細胞を見つけ、細胞または組織の残部から分離することができる。その後、分離されたターゲット細胞または組織から生体分子を単離する。工程5による細胞の分離は、当該技術水準の任意の公知の方法、例えば、非選択細胞もしくは組織の擦過除去、ターゲット細胞もしくは組織の切り出し、ターゲット細胞のピッキング、ターゲット細胞の吸引、顕微解剖、レーザー切開例えば、レーザー捕捉顕微解剖または任意の同様の方法によって実行することができる。ターゲット細胞または組織を分離するための好ましい方法は、ターゲット細胞または組織の顕微解剖、および非選択細胞または組織の擦過除去または拭き取りwipingawayである。分離された選択細胞または組織から生体分子を抽出/単離する工程を公知の生体分子単離法のいずれによって実行してもよい。用いる単離方法は、有効な方法を用いて有効な様式での前記生体分子の単離が可能である限り、本発明を制限するものではない。しかし、小試料からの核酸の単離に適する単離方法の使用が好ましい。前記単離方法の最初の工程で、選択された細胞または組織を溶解するための溶液、好ましくは水溶液を、細胞または組織に添加する。溶解溶液として、細胞含有材料中の細胞を溶解/破壊することができる、従って、生体分子を溶液中に放出させることができる、任意の溶液、好ましくは任意の水溶液、を使用することができる。本発明の方法に使用することができる多くの水性の溶解緩衝液または消化緩衝液が、当該技術水準から公知である。試料の選択部分が依然として支持体に載置されている例えば、非選択部分を顕微解剖後に擦過除去した場合、溶解溶液を支持体上で直接ターゲット細胞または組織と接触させることができる例えば、該溶液を該ターゲット試料の頂部にピペッティングすることにより。ターゲット細胞または組織を、例えばピッキング、吸引または擦過によって、支持体から剥離させた場合、例えばカップまたはチューブの中で、溶解溶液を該ターゲット試料部分と接触させることができる。ターゲット細胞または組織を溶解溶液と接触させた後、その混合物を、例えばピペットに吸い上げて吐出すpipettingupanddownことにより、ボルテックスにかけることにより、または任意の他の適する方法により、均質化することができる。ターゲット試料部分を支持体上で溶解溶液と接触させた場合、ターゲット試料部分と溶解溶液の混合物全体を、好ましくはインキュベーション後、さらなる加工処理に適する容器、例えばカップまたはチューブなど、に移す。公知溶解溶液のどれがターゲット細胞または組織の溶解に適切であるかは、主として、溶解すべき細胞に左右される。使用する溶解溶液は、例えば、カオトロピックchoatropic塩含有溶解緩衝液、界面活性剤含有溶解緩衝液、タンパク質分解化合物を含む溶解緩衝液、または前記化合物の幾つかもしくは混合物を含む溶解緩衝液であり得るが、これらに限定されない。本発明の方法は、当該技術水準から公知の広範な溶解溶液および溶解プロトコルを用いて実行することができる。溶解溶液は、例えば、緩衝剤、好ましくはTris、Mops、Mes、Hepesおよびクエン酸塩を含む群から選択される緩衝剤、場合により洗剤、好ましくは非イオン性、カチオン性、アニオン性および両性イオン性洗剤を含む群から選択される洗剤、さらに好ましくはアニオン性洗剤、最も好ましくはドデシル硫酸ナトリウムを含む群から選択される洗剤を含み得る。非イオン性洗剤は、例えば、多価アルコールのエトキシル化脂肪酸エステルなどのエチレンオキシド縮合生成物であり得る。好ましい非イオン性洗剤は、SigmaChemicalCo.から商品名TWEEN登録商標20で販売されているポリオキシエチレンソルビタンモノラウラートである。他のTWEEN登録商標洗剤も適する。Triton洗剤オクチルフェノキシポリエトキシエタノールの群からの他の適する洗剤、有利にはTritonX-100同じくSigmaから入手できる、を採用してもよい。前記洗剤は、細胞を溶解するために有効な量で含まれ、1.5~20v/vの範囲が代表的に有効である。前記洗剤は、核酸とミセルおよび他の複合体を形成することもあり、それによって、他のメカニズムによってDNAを保護する。前記溶解溶液は、1つ以上の追加の物質を含むことがあり、該物質は、好ましくは、キレート剤、還元剤、無機塩を含む群から選択され、かつ好ましくは、5から11の、好ましくは6から8の、最も好ましくは6から7の、範囲のpHを有し得る。溶解溶液に加えて、タンパク質分解剤を溶解溶液とターゲット細胞または組織の混合物に添加してもよい。タンパク質分解剤は、試料に添加される溶解溶液に既に含まれていることもあり、または細胞もしくは組織を溶解溶液と接触させた後に添加されることもある。前記タンパク質分解剤は、好ましくは、プロテアーゼおよび非酵素的タンパク質分解化合物を含む群から選択することができ、好ましくは、プロテイナーゼK、トリプシン、キモトリプシン、パパイン、ペプシン、プロナーゼ、エンドプロテイナーゼLys-C、ブロモシアンbromocyaneまたはそれらの混合物を表し得る。試料へ溶解溶液を添加した後に得られた混合物をインキュベートする工程を、好ましくは、2°C~95°Cの、好ましくは15°C~70°Cの、および最も好ましくは室温~60°Cの、範囲の温度で実行することができる。このインキュベーションを、好ましくは10秒間~10時間、さらに好ましくは45秒間~5時間、および最も好ましくは1分間~2時間、実行することができる。しかし、インキュベーションの温度および時間の両方は、試料の種類、量および生じてからの時間age、ならびに利用される溶解溶液によって様々であり得る。これは当業者には周知であり、特にインキュベーション時間および温度に関する最適な溶解条件を当業者は慣例的実験によって容易に決定することができる。ターゲット細胞または組織から放出されて、その後溶解混合物に含まれている生体分子を単離および/または精製する工程を、好ましくは、当該技術水準の公知方法のいずれかによって実行することができる。好ましくは、シリカビーズまたは膜へのカオトロープまたは非カオトロープ媒介吸着、ゲル濾過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィーおよびカオトロープなしの親和性結合吸着を含む群から好ましくは選択される少なくとも1つのクロマトグラフィーおよび/または固相ベースの方法によって、核酸を単離する。DNAおよびRNAを含む生体分子の単離のための幾つかの市販キットが、市場で入手できる。さらに、固定生物学的試料から核酸を単離するための幾つかのキットが開発されており、それらの大部分が、脱パラフィン剤、溶解緩衝液、ならびに核酸を抽出、単離および精製するためのさらなる緩衝液および器具を含む。そのような市販キットの例は、PreAnalytixスイスHombrechticonからのPAXgene登録商標Tissueキット、QIAGENドイツHildenからのRNeasy、AllPrep、DNeasyおよびQIAampキット、RocheAppliedScienceドイツMannheimからのHighPureKits、Invitrogen米国CarlsbadからのPureLinkKits、AppliedBiosystems米国FosterCityからのRecoverAllKitsである。本発明の特に好ましい実施形態では、試料の固定、場合により試料の脱蝋および核酸単離のためにPAXgeneTissueContainerの化合物および組成物をPreAnalytixからのPAXgene登録商標TissueRNA、miRNAまたはDNAキットと組み合わせて使用することができ、試料部分の染色をヘマトキシリンおよびエオシンで実行し、そしてRNA単離のために試料部分を本明細書中で説明する迅速染色法によって染色する。DNAはRNAより安定しているので、ほんの少ししか分解されていないRNAのみが単離可能な試料からは良好な結果でDNAを単離できることが特に指摘される。本発明に従って、固定生物学的試料中のターゲット細胞または組織を含む生体分子を、該ターゲット細胞または組織から生体分子を抽出、単離および/または精製するための方法の間、視覚化するためのキットも提供し、このキットは、以下のものを含む:a.任意選択の、少なくとも1つの透明支持体b.任意選択の、少なくとも1つの組織染色剤c.任意選択の、少なくとも1つの、上で説明したような、試料処理剤d.請求項7、8または9に記載の方法のための指示書e.生体分子、好ましくは核酸、最も好ましくはRNAを含むもの、を単離するための少なくとも1つの緩衝液および/または器具。好ましい実施形態において、前記キットは、構成要素dおよびeと組み合わせて、構成要素a、bおよびcのうちの少なくとも1つ、好ましくは少なくとも2つ、より好ましくは3つすべてを含む。さらに、本発明に従って、上で説明したような方法を用いることにより生物学的試料から生体分子を抽出、単離および/または精製するためのさらなるキットを提供し、このキットは、以下のものを含む:i任意選択の、生物学的試料を固定するための指示書ii任意選択の、ホルマリンを含まない固定剤または混合物iii任意選択の、少なくとも1つの透明支持体iv任意選択の、少なくとも1つの組織染色剤v任意選択の、少なくとも1つの、上で説明したような、試料処理剤viターゲット細胞または組織を場合により染色および選択するための方法についての指示書vii生体分子、好ましくは核酸、最も好ましくはRNAを含むもの、を単離するための少なくとも1つの緩衝液および/または器具。好ましい実施形態において、前記キットは、構成要素viおよびviiと組み合わせて、構成要素i、ii、iii、ivおよびvのうちの少なくとも1つ、好ましくは少なくとも2つ、より好ましくは少なくとも3つ、さらに好ましくは少なくとも4つ、そして最も好ましくはすべてを含む。実施例実験手順:組織固定:PAXgene登録商標TissueFixPreAnalytixによる固定:検討する組織検体を5mLの固定試薬に沈めた。室温で2~4時間インキュベーションを行い、その後、PAXgene登録商標TissueStabilizer溶液に移した。ホルマリンによる固定:室温で保持した5mLの中性緩衝化ホルマリンに組織を沈め、室温で24時間、固定した。組織加工処理およびパラフィン包埋:固定組織検体を固定溶液から標準ヒストカセットstandardhistocasetteに移した。生体分子の保存のために、PAXgene登録商標TissueContainerハンドブックにおいて推奨されているようなプロトコル15分70、30分80、60分90そして2回99エタノール、2回60分100イソプロパノール、2回60分100キシレン、その後、50°Cで60分キシレン-パラフィン50-50、そして56°Cで2回60分パラフィンでの脱水を用いて、Leica組織プロセッサTP1020で加工処理を行った。パラフィンとして、低融点Paraplast-XTRASPIが供給を使用した。加工処理後、前記インキュベーションについてのものと同じパラフィンを使用して、パラフィンブロックに組織を包埋した。スライドガラスに載置した組織のヘマトキシリンおよびエオシン染色:スライドに載置した4~6μm切片の、キシレン中で5分間、続いて96、80、70、60エタノール中で各3分間のインキュベーション、水道水中で3分間のインキュベーション、ヘマトキシリンMerck、使用準備済み中で1分間のインキュベーション、3分水道水、エオシンMerck、使用準備済み中で1分間のインキュベーション、3分水道水、1分80、2分96、3分100エタノールそして5分1005キシレンにより、手作業でヘマトキシリンおよびエオシン染色を行った。最後に、それらの切片にエンテランMerckを上塗りし、カバーガラスをかぶせた。スライドガラスに載置した組織を染色するためのヘマトキシリンおよびエオシンを使用する改変された迅速染色法:スライドに載置した4~6μm切片のキシレン中で5分、続いて96、80、70エタノール中で各1~3分間のインキュベーション、RNase不含水中で2~10秒間のインキュベーション、ヘマトキシリンGillに従って調製したもの中で30秒間のインキュベーション、RNase不含水中で1秒間タッピング、エオシンRNase不含水中0.5中で1秒間のインキュベーション、RNase不含水中で1秒間タッピング、1分80、2分96、3分100エタノールおよび5分キシレンにより、手作業でヘマトキシリンおよびエオシン染色を行った。顕微鏡検査だけのために、それらの切片を5分キシレン中でさらにインキュベートし、エンテランMerckを上塗りし、カバーガラスで封止した。新鮮な染色溶液の調製:Gillによるヘマトキシリン溶液2gヘマトキシリン、0.2gヨウ素酸ナトリウムおよび17.6g硫酸アルミニウム18H2Oを250gエチレングリコールと730mLRNase不含水の混合物に溶解した。20mL氷酢酸を添加し、2時間、室温で攪拌した。Harrisによるヘマトキシリン溶液100gカリウムミョウバンalaunを攪拌および加熱により950mLRNase不含水に溶解した。水浴中で加熱しながら5gヘマトキシリンを50mLエタノールに溶解した。そのヘマトキシリン溶液を前記高温ミョウバンalaun溶液に添加し、沸騰させた。熱から外した後、370mgヨウ素酸ナトリウムを添加した。4mL氷酢酸を添加し、得られた溶液を使用前に濾過した。エオシンY溶液0.5水溶液5gエオシンYを1000mLRNase不含水に添加し、2時間、室温で攪拌した。攪拌しながら2mL氷酢酸を添加した。DEPC処理水水100mLあたり0.1mLDEPCピロ炭酸ジエチルを添加した。DEPCを溶液にするために、それを激しく攪拌し、12時間37°Cでインキュベートし、15分間オートクレーブ処理して残留DEPCを低減させた。参照試料からのRNA抽出:PAXgene登録商標TissueRNAプロトコルPurificationofTotalRNAfromSectionsofPAXgeneTreated,Paraffin-EmbeddedTissueに述べられているようにキシレンおよびエタノール中でのインキュベーションにより、4~6μm厚を有する切片からパラフィンを除去したLeicaRM2245Microtomで行った。キシレンおよびエタノールの除去後、ペレットを溶解緩衝液TR1、水で溶解し、10分間、55°Cで消化した。PAXgene登録商標Shredderを使用して、均質化を行った。前記プロトコルに従って、エタノールを添加した後、溶解産物をPAXgene登録商標MinEluteカラムに移し、緩衝液TR2で洗浄し、そのカラム上でDNaseと共にインキュベートし、TR3および80エタノールで洗浄した。RNAを15μL~40μLの緩衝液TR4で溶離した。スライドガラスに載置した組織の全切片または精査するエリアからのRNA抽出:スライドガラスに載置した組織切片を5分間キシレン中および3分間100エタノール中でのインキュベーションによって脱パラフィンした。組織の染色および/または望ましくないエリアの除去後、そのスライド上の選択された組織に、プロテアーゼ、水および緩衝液TR1150μLTR1、10μLプロテアーゼ、290μL水を含有する150μLの溶解用混合物を上塗りした。室温での10分のインキュベーションの後、ピペッティングによってその混合物および組織を微量遠心管に移した。残りの溶解用混合物を添加し、その後、10分、55°Cでのインキュベーションを行った。PAXgene登録商標-Shredderを使用して、均質化を行った。前記プロトコルに従って、エタノールを添加した後、溶解産物をPAXgene登録商標MinEluteカラムに移し、緩衝液TR2で洗浄し、そのカラム上でDNaseと共にインキュベートし、TR3および80エタノールで洗浄した。RNAを15μL~40μLの緩衝液TR4で溶離した。RNA分析:RNAを15μL~40μLの緩衝液TR4で溶離した。純度および収量の分光光度分析をNanodrop光度計で行った。RNA6000Nanoアッセイを用いてAgilentBionanalyzerでRNA完全性を測定した。QuantitectProbeRTMixQIAGENと、ヒトベータアクチン遺伝子の294bpフラグメントを増幅および検出するためのプライマーおよびプローブとを使用して、一工程アプローチでのTaqMan7700AppliedBiosystems上でリアルタイムRT-PCRを行った。実施例1スライドに載置した肝臓組織からのRNA単離最大3mm厚の小片に切断したラット肝臓を3時間、PAXgene登録商標TissueFix中でおよび52時間、PAXgene登録商標TissueStabilizer中で固定した。加工処理およびパラフィン包埋後、6μm切片を、PAXgene登録商標TissueRNAキットハンドブックに従って微量遠心管の中での直接RNA抽出に使用したか、スライドガラスに載置した。スライドガラスに載置した切片を脱パラフィンし、漸増する試料の部分切片の50、75および90をセルスクレーパで除去した。スライドに載置した切片からのRNA抽出のために改変したプロトコルでPAXgene登録商標TissueRNAキットを使用して、残りの組織元の切片の50、25、10からRNAを精製した。前記プロトコルは、スライドガラスに載置された残りの試料の頂部への溶解緩衝液の少なくとも一部の直接添加、そして10分のインキュベーション後、全組織を含む溶解用混合物の微量遠心管への移入、その後、前記キットハンドブックによるさらなる加工処理によって改変した。RNAを、収量についてはNanodrop登録商標SpectrophotometerThermoScientific、米国Wilmingtonで分光光度法によって、完全性についてはRNA6000NanoAssayを用いるAgilent登録商標BioanalyzerAgilentTechnologies、米国SantaClaraで、および定量的RT-PCRにおいてTaqMan7700AppliedBiosystemsでのβ-アクチンについてのプライマー/プローブアッセイを使用して分析した。分析の結果を図1収量、2完全性および3定量的RT-PCRにおける性能に示す。この実施例は、スライドに載置されたPAXgene登録商標Tissue処理試料の切片から高品質RNAを単離できることを実証する。脱パラフィン後、ターゲット組織または細胞を、例えば切片の望ましくないエリアを除去することによって、選択することができる。このRNAを、切片を微量遠心管に直接移し、PAXgene登録商標TissueRNAプロトコルに従って加工処理した参照と、品質および収量に関して比較できる。リアルタイムRT-PCRのような要求の厳しい下流での適用にRNAを使用することができる。CT値は、参照と比較できる、すなわち、CT値は、RNA投入量減少と相関して線形に増加する図3参照。実施例2ヘマトキシリンおよびエオシンでの染色後の組織の切片からのRNA単離および組織形態学的分析ラット腎臓を最大4mm厚の小片に切断し、PAXgene登録商標Tissueシステムで処理した。加工処理およびパラフィン包埋後、1つの4μm切片の三連の試料を、PAXgene登録商標TissueRNAキットを使用する直接RNA抽出に使用した、またはスライドガラスに載置してヘマトキシリンおよびエオシンで染色した。染色中のRNA分解を避けるために、ヘマトキシリンでの60秒染色およびエオシンでの1秒染色染色1またはヘマトキシリンでの30秒染色およびエオシンでの1秒染色染色2を含む、迅速染色法を用いた。染色後、染色された切片からRNAを直接単離した。RNAを、収量についてはNanodrop登録商標SpectrophotometerThermoScientific、米国Wilmingtonで分光光度法によって、完全性についてはRNA6000NanoAssayを用いるAgilentBioanalyzerAgilentTechnologies、米国SantaClaraで、および定量的RT-PCRにおいてTaqMan7700AppliedBiosystemsでのβ-アクチンについてのプライマー/プローブアッセイを使用して分析した。標準的な方法に従ってヘマトキシリンおよびエオシンで4μm切片を染色することにより、組織形態を評価した。この実施例は、PFPEPAXgene登録商標固定パラフィン包埋組織切片の好酸性特性に起因して、ヘマトキシリンでの60秒間または30秒間およびエオシンでの1秒間だけの染色で十分であることを実証する。細胞質および核のようなすべての関連細胞構造が見えるようになり、それらを使用して精査のための特別な細胞または組織エリアを選択することができる。染色された切片中のRNAは、依然として保存されており、上で説明したような改変型プロトコルでPAXgene登録商標TissueRNAキットを使用してそれらを単離することができる。このRNAを、切片を微量遠心管に直接移し、PAXgene登録商標TissueRNAプロトコルに従って加工処理した参照と、品質および収量に関して比較できる。リアルタイムRT-PCRのような要求の厳しい下流での適用にRNAを使用することができ、かつCT値は、参照と比較できる。"