"ヘモグロビン含有試料に、界面活性剤存在下に、タンパク質分解酵素を作用させた後、フルクトシルペプチド酸化酵素を作用させる反応において、当該反応をイソチアゾリノン誘導体存在下に行い、生成した過酸化水素を測定することを特徴とする、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンの測定方法。イソチアゾリノン誘導体が、下記式Iで表わされる化合物である請求項1記載の測定方法。式中、A1は、水素原子、又は、置換若しくは非置換のアルキルを表し、A2とA3は、同一又は異なって、水素原子、置換若しくは非置換のアルキル、ハロゲン原子を表すか、または、一緒になって環構造を形成する式Iで表わされる化合物が、2-アルキル-4-イソチアゾリン-3-オン、1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン、及び、2-アルキル-4,5-ジハロゲノ-4-イソチアゾリン-3-オンからなる群より選ばれるイソチアゾリノン誘導体である請求項2記載の測定方法。過酸化水素の測定が、過酸化水素測定試薬により行われる、請求項1~3のいずれかに記載の測定方法。過酸化水素測定試薬が、ペルオキシダーゼとロイコ型色原体とを含む試薬である請求項4記載の測定方法。ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンを測定するための試薬であって、タンパク質分解酵素、フルクトシルペプチド酸化酵素、イソチアゾリノン誘導体、及び、界面活性剤を含むことを特徴とする糖化ヘモグロビン測定試薬。イソチアゾリノン誘導体が、下記式Iで表わされる化合物である請求項6記載の測定試薬。式中、A1は、水素原子、又は、置換若しくは非置換のアルキルを表し、A2とA3は、同一又は異なって、水素原子、置換若しくは非置換のアルキル、ハロゲン原子を表すか、または、一緒になって環構造を形成する式Iで表わされる化合物が、2-アルキル-4-イソチアゾリン-3-オン、1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン、及び、2-アルキル-4,5-ジハロゲノ-4-イソチアゾリン-3-オンからなる群より選ばれるイソチアゾリノン誘導体である請求項7記載の測定試薬。さらに、過酸化水素測定試薬を含む、請求項6~8のいずれかに記載の測定試薬。過酸化水素測定試薬が、ペルオキシダーゼとロイコ型色原体とを含む試薬である請求項9記載の試薬。ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンを測定するためのキットであって、タンパク質分解酵素、イソチアゾリノン誘導体、及び、界面活性剤を含む第1試薬と、フルクトシルペプチド酸化酵素を含む第2試薬とを含むことを特徴とする糖化ヘモグロビン測定キット。ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンを測定するためのキットであって、タンパク質分解酵素、及び、界面活性剤を含む第1試薬と、フルクトシルペプチド酸化酵素、及び、イソチアゾリノン誘導体を含む第2試薬とを含むことを特徴とする糖化ヘモグロビン測定キット。イソチアゾリノン誘導体が、下記式Iで表わされる化合物である請求項11または12記載の測定キット。式中、A1は、水素原子、又は、置換若しくは非置換のアルキルを表し、A2とA3は、同一又は異なって、水素原子、置換若しくは非置換のアルキル、ハロゲン原子を表すか、または、一緒になって環構造を形成する式Iで表わされる化合物が、2-アルキル-4-イソチアゾリン-3-オン、1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン、及び、2-アルキル-4,5-ジハロゲノ-4-イソチアゾリン-3-オンからなる群より選ばれるイソチアゾリノン誘導体である請求項13記載の測定キット。さらに、ペルオキシダーゼ及びロイコ型色原体が、それぞれ第1試薬と第2試薬、又は、第2試薬と第1試薬に含まれる、請求項11~14のいずれかに記載の測定キット。本発明の目的は、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンを、ヘモグロビンの影響を受けることなく、正確、かつ、高感度に測定するための方法及び試薬を提供することにある。本発明者らは鋭意検討したところ、界面活性剤存在下に、ヘモグロビン含有試料にタンパク質分解酵素を作用させた後、フルクトシルペプチド酸化酵素を作用させる反応において、当該反応をイソチアゾリノン誘導体存在下に行い、生成した過酸化水素を測定することにより、ヘモグロビンの影響を受けることなく、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンを正確、かつ、高感度に測定できる、という知見を見出し、本発明を完成させた。すなわち、本発明は、以下の[1]~[15]に関する。[1]ヘモグロビン含有試料に、界面活性剤存在下に、タンパク質分解酵素を作用させた後、フルクトシルペプチド酸化酵素を作用させる反応において、当該反応をイソチアゾリノン誘導体存在下に行い、生成した過酸化水素を測定することを特徴とする、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンの測定方法。[2]イソチアゾリノン誘導体が、下記式Iで表わされる化合物である[1]記載の測定方法。式中、A1は、水素原子、又は、置換若しくは非置換のアルキルを表し、A2とA3は、同一又は異なって、水素原子、置換若しくは非置換のアルキル、ハロゲン原子を表すか、または、一緒になって環構造を形成する[3]式Iで表わされる化合物が、2-アルキル-4-イソチアゾリン-3-オン、1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン、及び、2-アルキル-4,5-ジハロゲノ-4-イソチアゾリン-3-オンからなる群より選ばれるイソチアゾリノン誘導体である[2]記載の測定方法。[4]過酸化水素の測定が、過酸化水素測定試薬により行われる、[1]~[3]のいずれかに記載の測定方法。[5]過酸化水素測定試薬が、ペルオキシダーゼとロイコ型色原体とを含む試薬である[4]記載の測定方法。[6]ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンを測定するための試薬であって、タンパク質分解酵素、フルクトシルペプチド酸化酵素、イソチアゾリノン誘導体、及び、界面活性剤を含むことを特徴とする糖化ヘモグロビン測定試薬。[7]イソチアゾリノン誘導体が、下記式Iで表わされる化合物である[6]記載の測定試薬。式中、A1は、水素原子、又は、置換若しくは非置換のアルキルを表し、A2とA3は、同一又は異なって、水素原子、置換若しくは非置換のアルキル、ハロゲン原子を表すか、または、一緒になって環構造を形成する[8]式Iで表わされる化合物が、2-アルキル-4-イソチアゾリン-3-オン、1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン、及び、2-アルキル-4,5-ジハロゲノ-4-イソチアゾリン-3-オンからなる群より選ばれるイソチアゾリノン誘導体である[7]記載の測定試薬。[9]さらに、過酸化水素測定試薬を含む、[6]~[8]のいずれかに記載の測定試薬。[10]過酸化水素測定試薬が、ペルオキシダーゼとロイコ型色原体とを含む試薬である[9]記載の試薬。[11]ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンを測定するためのキットであって、タンパク質分解酵素、イソチアゾリノン誘導体、及び、界面活性剤を含む第1試薬と、フルクトシルペプチド酸化酵素を含む第2試薬とを含むことを特徴とする糖化ヘモグロビン測定キット。[12]ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンを測定するためのキットであって、タンパク質分解酵素、及び、界面活性剤を含む第1試薬と、フルクトシルペプチド酸化酵素、及び、イソチアゾリノン誘導体を含む第2試薬とを含むことを特徴とする糖化ヘモグロビン測定キット。[13]イソチアゾリノン誘導体が、下記式Iで表わされる化合物である[11]又は[12]記載の測定キット。式中、A1は、水素原子、又は、置換若しくは非置換のアルキルを表し、A2とA3は、同一又は異なって、水素原子、置換若しくは非置換のアルキル、ハロゲン原子を表すか、または、一緒になって環構造を形成する[14]式Iで表わされる化合物が、2-アルキル-4-イソチアゾリン-3-オン、1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン、及び、2-アルキル-4,5-ジハロゲノ-4-イソチアゾリン-3-オンからなる群より選ばれるイソチアゾリノン誘導体である[13]記載の測定キット。[15]さらに、ペルオキシダーゼ及びロイコ型色原体が、それぞれ第1試薬と第2試薬、又は、第2試薬と第1試薬に含まれる、[11]~[14]のいずれかに記載の測定キット。本発明により、ヘモグロビンの影響を受けることなく、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンを正確、かつ、高感度に測定するための方法、試薬及びキットが提供される。1ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンの測定方法本発明の、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンの測定方法は、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンに、界面活性剤存在下に、タンパク質分解酵素を作用させた後、フルクトシルペプチド酸化酵素を作用させる反応において、当該反応をイソチアゾリノン誘導体存在下に行い、生成する過酸化水素を測定する方法である。イソチアゾリノン誘導体は、フルクトシルペプチド酸化酵素を作用させる反応に存在させても、タンパク質分解酵素を作用させる反応とフルクトシルペプチド酸化酵素を作用させる反応の両方の反応に存在させてもよい。具体的には、以下の工程を含む測定方法が例示される。<測定方法1>1ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンに、界面活性剤存在下に、タンパク質分解酵素を作用させる工程;2工程1で得られる反応生成物に、イソチアゾリノン誘導体存在下に、フルクトシルペプチド酸化酵素を作用させ、過酸化水素を生成させる工程;3工程2で生成した過酸化水素を測定する工程;及び、4既知濃度の糖化ヘモグロビンを用いて予め作成した、過酸化水素量と糖化ヘモグロビン濃度との関係を表す検量線に基づき、工程3で測定した過酸化水素量から、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビン濃度を決定する工程。<測定方法2>1ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンに、イソチアゾリノン誘導体及び界面活性剤の存在下に、タンパク質分解酵素を作用させる工程;2工程1で得られる反応生成物に、フルクトシルペプチド酸化酵素と反応させ、過酸化水素を生成させる工程;3工程2で生成した過酸化水素を測定する工程;及び、4既知濃度の糖化ヘモグロビンを用いて予め作成した、過酸化水素量と糖化ヘモグロビン濃度との関係を表す検量線に基づき、工程3で測定した過酸化水素量から、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビン濃度を決定する工程。また、本発明のヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンの測定方法は、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビン量の総ヘモグロビンすなわち、ヘモグロビンと糖化ヘモグロビンを合わせた総ヘモグロビン量に対する割合を算出する方法をも包含する。この場合、本発明のヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンの測定方法は、具体的には、以下の工程を含む測定方法である。<測定方法3>1ヘモグロビン含有試料中の総ヘモグロビンすなわち、ヘモグロビンと糖化ヘモグロビンを合わせた総ヘモグロビン量を決定する工程;2ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンに、界面活性剤存在下、タンパク質分解酵素を作用させる工程;3工程2で得られる反応生成物に、イソチアゾリノン誘導体存在下に、フルクトシルペプチド酸化酵素を作用させ、過酸化水素を生成させる工程;4工程3で生成した過酸化水素を測定する工程;及び、5既知量の糖化ヘモグロビンを用いて予め作成した、過酸化水素量と糖化ヘモグロビン量との関係を表す検量線に基づき、工程4で測定した過酸化水素量から、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビン量を決定する工程;及び、6工程1で決定した総ヘモグロビン量と、工程5で決定した糖化ヘモグロビン量から、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビン量の総ヘモグロビン量に対する割合を算出する工程。上記工程1の総ヘモグロビン量の決定は、工程2の後に行うこともできる。<測定方法4>1ヘモグロビン含有試料中の総ヘモグロビンすなわち、ヘモグロビンと糖化ヘモグロビンを合わせた総ヘモグロビン量を決定する工程;2ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンに、イソチアゾリノン誘導体と界面活性剤存在下、タンパク質分解酵素を作用させる工程;3工程2で得られる反応生成物に、フルクトシルペプチド酸化酵素を作用させ、過酸化水素を生成させる工程;4工程3で生成した過酸化水素を測定する工程;及び、5既知量の糖化ヘモグロビンを用いて予め作成した、過酸化水素量と糖化ヘモグロビン量との関係を表す検量線に基づき、工程4で測定した過酸化水素量から、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビン量を決定する工程;及び、6工程1で決定した総ヘモグロビン量と、工程5で決定した糖化ヘモグロビン量から、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビン量の総ヘモグロビン量に対する割合を算出する工程。上記工程1の総ヘモグロビン量の決定は、工程2の後に行うこともできる。本発明の測定方法におけるヘモグロビン含有試料は、ヘモグロビンを含有し、本発明の糖化ヘモグロビンの測定方法が適用可能な試料であれば特に制限はなく、例えば全血、血球、血球に血漿が混在した試料、これらの試料を溶血処理した試料等が挙げられる。溶血処理としては、全血、血球、血球に血漿が混在した試料を溶血させる処理であれば特に制限はなく、例えば物理的方法、化学的方法、生物学的方法等が挙げられる。物理的方法としては、例えば蒸留水等の低張液を用いる方法、超音波を用いる方法等が挙げられる。化学的方法としては、例えばメタノール、エタノール、アセトン等の有機溶媒を用いる方法、ポリオキシエチレン系界面活性剤を用いる方法等が挙げられる。生物学的方法としては、例えば抗体や補体を用いる方法等が挙げられる。本発明における糖化ヘモグロビンは、ヘモグロビンにグルコース等の糖が結合して生成したものであり、ヘモグロビンA1a、ヘモグロビンA1b、ヘモグロビンA1c等が挙げられ、ヘモグロビンA1cが好ましい。本発明におけるイソチアゾリノン誘導体としては、本発明の糖化ヘモグロビンの測定方法を可能とするイソチアゾリノン誘導体であれば特に制限はないが、例えば、下記式Iで表わされる化合物[以下、化合物Iという]が挙げられる。式中、A1は、水素原子、又は、置換若しくは非置換のアルキルを表し、A2とA3は、同一又は異なって、水素原子、置換若しくは非置換のアルキル、ハロゲン原子を表すか、または、一緒になって環構造を形成する化合物IにおけるA1は置換若しくは非置換のアルキルを表し、A2とA3は、同一又は異なって、水素原子、置換若しくは非置換のアルキル、ハロゲン原子を表すか、または、一緒になって環構造を形成する。置換若しくは非置換のアルキルにおけるアルキルとしては、例えば炭素数1~20の直鎖アルキル、炭素数3~20の分岐アルキル等が挙げられる。炭素数1~20の直鎖アルキルとしては、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシルラウリル、トリデシル、テトラデシルミリスチル、ペンタデシル、ヘキサデシルセチル、ヘプタデシル、オクタデシルステアリル、ノナデシル、イコシル等が挙げられる。炭素数3~20の分岐アルキルとしては、例えばイソプロピル、イソブチル、イソペンチル、イソヘキシル、イソヘプチル、イソオクチル、イソノニル、イソデシル、イソウンデシル、イソドデシル、イソトリデシル、イソテトラデシル、イソペンタデシル、イソヘキサデシル、イソヘプタデシル、イソオクタデシル、イソノナデシル、イソイコシル、オクチルドデシル等が挙げられる。ハロゲン原子としては、例えば塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等が挙げられる。置換アルキルにおける置換基としては、例えばフェニル基、水酸基、スルホ基、シアノ基、ハロゲン原子等が挙げられる。ハロゲン原子としては、例えば前述のハロゲン原子等が挙げられる。A2とA3とが一緒になって形成される環構造としては、例えばベンゼン環、ナフタレン環等が挙げられる。化合物Iの具体例としては、例えば2-アルキル-4-イソチアゾリン-3-オン、1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン、2-アルキル-4,5-ジハロゲノ-4-イソチアゾリン-3-オン等が挙げられる。市販の化合物Iとしては、例えば2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オン東京化成社製、1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン和光純薬工業社製、4,5-ジクロロ-2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オンハイケム社製等が挙げられる。本発明の糖化ヘモグロビンの測定方法において、イソチアゾリノン誘導体の反応液中の濃度としては、本発明の糖化ヘモグロビンの測定方法を可能とする濃度であれば、特に制限はないが、通常0.005~20mmol/Lであり、好ましくは0.01~10mmol/Lである。本発明における界面活性剤としては、本発明の糖化ヘモグロビンの測定方法を可能とする界面活性剤であれば特に制限はなく、例えば陽イオン性界面活性剤、陰イオン性界面活性剤、両性界面活性剤、非イオン性界面活性剤等が挙げられる。陽イオン性界面活性剤としては、例えば第四級アンモニウム塩、ピリジニウム塩、ホスホニウム塩、イミダゾリウム塩、イソキノリニウム塩等が挙げられ、第四級アンモニウム塩、ピリジニウム塩、ホスホニウム塩が好ましい。第四級アンモニウム塩としては、炭素数8~20の直鎖アルキルを少なくとも1つ有する第四級アンモニウム塩が好ましい。炭素数8~20の直鎖アルキルとしては、例えばオクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシルラウリル、トリデシル、テトラデシルミリスチル、ペンタデシル、ヘキサデシルセチル、ヘプタデシル、オクタデシルステアリル、ノナデシル、イコシル等が挙げられる。第四級アンモニウム塩の具体例製品としては、例えばデシルトリメチルアンモニウムクロライド、デシルトリメチルアンモニウムブロマイド以下、C10TMAと記す、ドデシルトリメチルアンモニウムクロライド、ドデシルトリメチルアンモニウムブロマイド、ヘキサデシルトリメチルアンモニウムクロライド、ヘキサデシルトリメチルアンモニウムブロマイド、ジデシルジメチルアンモニウムクロライド、ジデシルジメチルアンモニウムブロマイド、ジドデシルジメチルアンモニウムクロライド、ジドデシルジメチルアンモニウムブロマイドいずれも、東京化成社製等が挙げられる。ピリジニウム塩としては、以下の一般式IIで表わされるピリジニウム塩[以下、化合物IIという]が使用される。式中、R1は、置換若しくは非置換のアルキル、又は置換若しくは非置換のアルケニル、Raは、水素原子、置換若しくは非置換のアルキル、又は置換若しくは非置換のアルケニル、nは、1~5の整数、X-は、1価のアニオンをそれぞれ表す。R1において、置換若しくは非置換のアルキルにおけるアルキルとしては、例えば炭素数1~20の直鎖アルキル、炭素数3~20の分岐アルキル等が挙げられ、炭素数8~20の直鎖アルキル、炭素数8~20の分岐アルキルが好ましい。炭素数1~20の直鎖アルキルとしては、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシルラウリル、トリデシル、テトラデシルミリスチル、ペンタデシル、ヘキサデシルセチル、ヘプタデシル、オクタデシルステアリル、ノナデシル、イコシル等が挙げられる。炭素数3~20の分岐アルキルとしては、例えばイソプロピル、イソブチル、イソペンチル、イソヘキシル、イソヘプチル、イソオクチル、イソノニル、イソデシル、イソウンデシル、イソドデシル、イソトリデシル、イソテトラデシル、イソペンタデシル、イソヘキサデシル、イソヘプタデシル、イソオクタデシル、イソノナデシル、イソイコシル、オクチルドデシル等が挙げられる。炭素数8~20の直鎖アルキルとしては、例えば前述の炭素数8~20の直鎖アルキル等が挙げられる。炭素数8~20の分岐アルキルとしては、例えばイソオクチル、イソノニル、イソデシル、イソウンデシル、イソドデシル、イソトリデシル、イソテトラデシル、イソペンタデシル、イソヘキサデシル、イソヘプタデシル、イソオクタデシル、イソノナデシル、イソイコシル、オクチルドデシル等が挙げられる。R1において、置換若しくは非置換のアルケニルにおけるアルケニルとしては、例えば炭素数2~20のアルケニル等が挙げられ、炭素数8~20のアルケニルが好ましい。炭素数2~20のアルケニルとしては、例えばビニル、プロペニル、アリル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル、ウンデセニル、ドデセニル、テトラデセニル、ペンタデセニル、ヘキサデセニル、ヘプタデセニル、オクタデセニル、オレイル、ノナデセニル、イコセニル等が挙げられる。炭素数8~20のアルケニルとしては、例えばオクテニル、ノネニル、デセニル、ウンデセニル、ドデセニル、テトラデセニル、ペンタデセニル、ヘキサデセニル、ヘプタデセニル、オクタデセニル、オレイル、ノナデセニル、イコセニル等が挙げられる。R1において、置換アルキル及び置換アルケニルにおける置換基としては、例えばフェニル基、水酸基、スルホ基、シアノ基、ハロゲン原子等が挙げられる。ハロゲン原子としては、例えば塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等が挙げられる。Raにおいて、置換もしくは非置換のアルキルにおけるアルキルとしては、例えば炭素数1~20の直鎖アルキル、炭素数3~20の分岐アルキル等が挙げられる。炭素数1~20の直鎖アルキルとしては、例えば前述の炭素数1~20の直鎖アルキル等が挙げられる。炭素数3~20の分岐アルキルとしては、例えば前述の炭素数3~20の分岐アルキル等が挙げられる。Raにおいて、置換もしくは非置換のアルケニルにおけるアルケニルにとしては、例えば炭素数2~20のアルケニル等が挙げられる。炭素数2~20のアルケニルとしては、例えば前述の炭素数2~20の直鎖アルケニル等が挙げられる。Raにおいて、置換アルキル及び置換アルケニルにおける置換基としては、例えばフェニル基、水酸基、スルホ基、シアノ基、ハロゲン原子等が挙げられる。フェニル基置換アルキルとしては、例えばベンジル、1-フェニルエチル等が挙げられる。ハロゲン原子としては、例えば塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等が挙げられる。ピリジン環上に2つ以上の置換基がある場合、置換基は同じであっても異なっていてもよい。化合物IIにおけるX-は、1価のアニオンを表す。1価のアニオンとしては、例えばハロゲンイオン、OH、PF6、BF4、CH3CH2OSO3、2N等のアニオンが挙げられる。ハロゲンイオンとしては、例えばCl、Br、I等が挙げられる。化合物IIの具体例製品としては、例えば1-ドデシルピリジニウムクロライド以下、C12pyと記す;東京化成社製、1-セチルピリジニウムクロライド、1-セチル-4-メチルピリジニウムクロライド東京化成社製、N-オクタデシル-4-スチルバゾールブロミド東京化成社製等が挙げられる。ホスホニウム塩としては、以下の一般式IIIで表わされるホスホニウム塩[以下、化合物IIIという]が使用される。式中、R2~R5は、同一又は異なって、置換若しくは非置換のアルキルを表わす、Y-は、1価のアニオンをそれぞれ表す。R2において、置換若しくは非置換のアルキルにおけるアルキルとしては、例えば炭素数8~20の直鎖アルキル、炭素数8~20の分岐アルキル等が挙げられる。炭素数8~20の直鎖アルキルとしては、例えば前述の炭素数8~20の直鎖アルキル等が挙げられる。炭素数8~20の分岐アルキルとしては、例えば前述の炭素数8~20の分岐アルキル等が挙げられる。置換アルキルにおける置換基としては、例えばフェニル基、水酸基、スルホ基、シアノ基、ハロゲン原子等が挙げられる。フェニル基置換アルキルとしては、例えばベンジル、1-フェニルエチル等が挙げられる。ハロゲン原子としては、例えば塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等が挙げられる。R3~R5において、置換若しくは非置換のアルキルにおけるアルキルとしては、例えば炭素数1~20の直鎖アルキル、炭素数3~20の分岐アルキル等が挙げられる。炭素数1~20の直鎖アルキルとしては、例えば前述の炭素数1~20の直鎖アルキル等が挙げられる。炭素数3~20の分岐アルキルとしては、例えば前述の炭素数3~20の分岐アルキル等が挙げられる。置換アルキルにおける置換基としては、例えばフェニル基、水酸基、スルホ基、シアノ基、ハロゲン原子等が挙げられる。フェニル基置換アルキルとしては、例えばベンジル、1-フェニルエチル等が挙げられる。ハロゲン原子としては、例えば塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等が挙げられる。Y-は、1価のアニオンを表す。1価のアニオンとしては、例えばハロゲンイオン、OH、PF6、BF4、CH3CH2OSO3、2N、B4、ベンゾトリアゾレート等のアニオンが挙げられる。ハロゲンイオンとしては、例えばCl、Br、I等が挙げられる。化合物IIIの具体例製品としては、例えばテトラオクチルホスホニウムブロマイド東京化成社製、トリブチルオクチルホスホニウムブロマイド東京化成社製、トリブチルドデシルホスホニウムブロマイド、トリブチルヘキサデシルホスホニウムブロマイド等が挙げられる。イミダゾリウム塩としては、以下の一般式IVで表わされるイミダゾリウム塩[以下、化合物IVという]が使用される。式中、R6とR8は同一又は異なって、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニルを表し、R7、R9、R10は、水素原子、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換アルケニルを表し、Z-は、1価のアニオンを表す。R6において、置換若しくは非置換のアルキルにおけるアルキルとしては、例えば炭素数8~20の直鎖アルキル、炭素数8~20の分岐アルキル等が挙げられる。炭素数8~20の直鎖アルキルとしては、例えば前述の炭素数8~20の直鎖アルキル等が挙げられる。炭素数8~20の分岐アルキルとしては、例えば前述の炭素数8~20の分岐アルキル等が挙げられる。R6において、置換若しくは非置換のアルケニルにおけるアルケニルとしては、例えば炭素数8~20のアルケニル等が挙げられる。炭素数8~20のアルケニルとしては、例えば前述の炭素数8~20のアルケニル等が挙げられる。R6において、置換アルキル及び置換アルケニルにおける置換基としては、例えばフェニル基、水酸基、スルホ基、シアノ基、ハロゲン原子等が挙げられる。フェニル基置換アルキルとしては、例えばベンジル、1-フェニルエチル等が挙げられる。ハロゲン原子としては、例えば塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等が挙げられる。R7、R8、R9及びR10において、置換若しくは非置換のアルキルにおけるアルキルとしては、例えば炭素数1~20の直鎖アルキル、炭素数3~20の分岐アルキル等が挙げられる。炭素数1~20の直鎖アルキルとしては、前述の炭素数1~20の直鎖アルキル等が挙げられる。炭素数3~20の分岐アルキルとしては、例えば前述の炭素数3~20の分岐アルキル等が挙げられる。R7、R8、R9及びR10において、置換若しくは非置換のアルケニルにおけるアルケニルとしては、例えば炭素数2~20のアルケニル等が挙げられる。炭素数2~20のアルケニルとしては、例えば前述の炭素数2~20のアルケニル等が挙げられる。R7、R8、R9及びR10において、置換アルキル及び置換アルケニルにおける置換基としては、例えばフェニル基、水酸基、スルホ基、シアノ基、ハロゲン原子等が挙げられる。フェニル基置換アルキルとしては、例えばベンジル、1-フェニルエチル等が挙げられる。ハロゲン原子としては、例えば塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等が挙げられる。Z-は、1価のアニオンを表す。1価のアニオンとしては、例えばハロゲンイオン、OH、PF6、BF4、CH3CH2OSO3、2N、2PO、B4、FeCl4、CF3BF3、CF3SO3、2N、CH32OSO3、CH3CH2OSO3、HSO4、pCH3C6H4SO3等のアニオンが挙げられる。ハロゲンイオンとしては、例えばCl、Br、I等が挙げられる。化合物IVの具体例製品としては、例えば1-メチル-3-オクチルイミダゾリウムブロマイド東京化成社製、1-メチル-3-オクチルイミダゾリウムクロライド東京化成社製、1-ドデシル-2-メチル-3-ベンジルイミダゾリウムクロライド等が挙げられる。イソキノリニウム塩としては、以下の一般式Vで表わされるイソキノリニウム塩[以下、化合物Vという]が使用される。式中、R11は、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニルを表し、W-は、1価のアニオンを表す。R11において、置換若しくは非置換のアルキルにおけるアルキルとしては、例えば炭素数8~20の直鎖アルキル、炭素数8~20の分岐アルキル等が挙げられる。炭素数8~20の直鎖アルキルとしては、例えば前述の炭素数8~20の直鎖アルキル等が挙げられる。炭素数8~20の分岐アルキルとしては、例えば前述の炭素数8~20の分岐アルキル等が挙げられる。R11において、置換若しくは非置換のアルケニルにおけるアルケニルとしては、例えば炭素数8~20のアルケニル等が挙げられる。炭素数8~20のアルケニルとしては、例えば前述の炭素数8~20のアルケニル等が挙げられる。R11において、置換アルキル及び置換アルケニルにおける置換基としては、例えばフェニル基、水酸基、スルホ基、シアノ基、ハロゲン原子等が挙げられる。フェニル基置換アルキルとしては、例えばベンジル、1-フェニルエチル等が挙げられる。ハロゲン原子としては、例えば塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等が挙げられる。W-は、1価のアニオンを表す。1価のアニオンとしては、例えばハロゲンイオン等のアニオンが挙げられる。ハロゲンイオンとしては、例えばCl、Br、I等が挙げられる。化合物Vの具体例製品としては、例えばN-ラウリルイソキノリニウムクロライド日油社製、N-ラルリルイソキノリニウムブロマイド日油社製等が挙げられる。陰イオン性界面活性剤としては、例えば硫酸エステル塩、カルボン酸塩、スルホン酸塩、リン酸エステル塩、スルホコハク酸塩、N-メチルタウリン塩、N-アルカノイル-N-メチルタウリン塩等が挙げられる。両性界面活性剤としては、例えば第三級アミンオキサイド、アルキルカルボキシベタイン等が挙げられる。非イオン性界面活性剤としては、例えばポリオキシエチレンアルキルアミン、ポリオキシエチレンアルケニルアミン、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルケニルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、エチレンジアミンテトラポリオキシエチレン、ポリグリセリン脂肪酸エステル等が挙げられ、ポリオキシエチレンアルキルアミン、ポリオキシエチレンアルキルエーテルが好ましい。ポリオキシエチレンアルキルアミンにおけるアルキルとしては、例えば炭素数8~20のアルキル等が挙げられる。炭素数8~20のアルキルとしては、例えばオクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシルラウリル、トリデシル、テトラデシルミリスチル、ペンタデシル、ヘキサデシルセチル、ヘプタデシル、オクタデシルステアリル、ノナデシル、イコシル等が挙げられる。ポリオキシエチレンアルケニルアミンにおけるアルケニルとしては、例えば炭素数8~20のアルケニル等が挙げられる。炭素数8~20のアルケニルとしては、例えばオクテニル、ノネニル、デセニル、ウンデセニル、ドデセニル、テトラデセニル、ペンタデセニル、ヘキサデセニル、ヘプタデセニル、オクタデセニル、オレイル、ノナデセニル、イコセニル等が挙げられる。ポリオキシエチレンアルキルエーテルにおけるアルキルとしては、例えば炭素数8~20のアルキル等が挙げられる。炭素数8~20のアルキルとしては、例えば前述の炭素数8~20のアルキル等が挙げられる。ポリオキシエチレンアルケニルエーテルにおけるアルケニルとしては、例えば炭素数8~20のアルケニル等が挙げられる。炭素数8~20のアルケニルとしては、例えば前述の炭素数8~20のアルケニル等が挙げられる。ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテルにおけるアルキルとしては、例えば炭素数8~20のアルキル等が挙げられる。炭素数8~20のアルキルとしては、例えば前述の炭素数8~20のアルキル等が挙げられる。総ヘモグロビン量は、公知の方法、例えばシアンメトヘモグロビン法、オキシヘモグロビン法、SLS-ヘモグロビン法等によって決定することができる。総ヘモグロビン量は、ヘモグロビン含有試料そのもののみならず、ヘモグロビン含有試料にイソチアゾリノン誘導体及び/又は界面活性剤を添加して得られる試料、ヘモグロビン含有試料にイソチアゾリノン誘導体及び/又は界面活性剤とタンパク質分解酵素とを添加して得られる試料に対して、シアンメトヘモグロビン法、オキシヘモグロビン法、SLS-ヘモグロビン法を適用することによっても決定することができる。ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンに、上記界面活性剤存在下、タンパク質分解酵素を作用させる反応は、上記界面活性剤存在下にタンパク質分解酵素が糖化ヘモグロビンに作用し得る条件であれば、いかなる条件下でも行うことができる。ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンと、タンパク質分解酵素との反応は、水性媒体中で行われることが好ましい。水性媒体としては後述の水性媒体等が挙げられる。ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンと、タンパク質分解酵素との反応における反応温度は、通常10~50°Cであり、20~40°Cが好ましく、反応時間は、通常1分間~3時間であり、2.5分間~1時間が好ましい。タンパク質分解酵素の濃度としては、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンと、タンパク質分解酵素との反応が進行する濃度であれば特に制限はなく、通常50~25000kU/Lであり、好ましくは250~10000kU/Lである。タンパク質分解酵素としては、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンに作用し、糖化ヘモグロビンから糖化ペプチドを生成させる酵素であれば特に制限はなく、例えばセリンプロテアーゼキモトリプシン、スブチリシン等、システインプロテアーゼパパイン、カスパーゼ等、アスパラギン酸プロテアーゼペプシン、カテプシンD等、メタロプロテアーゼサーモリシン等、N-末端スレオニンプロテアーゼ、グルタミン酸プロテアーゼ等が挙げられる。本発明においては、市販のタンパク質分解酵素も使用することができ、市販品としては例えばプロテアーゼPアマノ3G、プロテアーゼKアマノ以上、天野エンザイム社製、アクチナーゼAS、アクチナーゼE以上、科研ファルマ社製、サーモリシン大和化成社製、スミチームMP等が挙げられる。上記タンパク質分解酵素を作用させる反応における界面活性剤の濃度としては、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンと、タンパク質分解酵素との反応が進行する濃度であれば特に制限はなく、通常0.0001~10であり、好ましくは0.0005~5である。ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンと、タンパク質分解酵素との反応により、糖化ペプチドを含む反応生成物が生成する。次いで、この反応生成物中の糖化ペプチドに、フルクトシルペプチド酸化酵素と反応し、過酸化水素が生成する。糖化ペプチドとフルクトシルペプチド酸化酵素との反応は、水性媒体中で行われることが好ましい。水性媒体としては後述の水性媒体等が挙げられる。糖化ペプチドとフルクトシルペプチド酸化酵素との反応における反応温度は、通常10~50°Cであり、20~40°Cが好ましく、反応時間は、通常1分間~3時間であり、2.5分間~1時間が好ましい。フルクトシルペプチド酸化酵素の濃度としては、糖化ヘモグロビンとフルクトシルペプチド酸化酵素との反応が進行する濃度であれば特に制限はなく、通常0.1~30kU/Lであり、好ましくは0.2~15kU/Lである。フルクトシルペプチド酸化酵素としては、糖化ペプチドに作用して過酸化水素を生成させる酵素であれば特に制限はなく、例えば糸状菌由来、酵母由来、放線菌由来、バクテリア由来、古細菌由来のフルクトシルペプチド酸化酵素等が挙げられる。本発明においては、市販のフルクトシルペプチド酸化酵素も使用することができ、市販品としては例えばFPOX-CEキッコーマン社製、FPOX-EEキッコーマン社製、FPOX-CETキッコーマン社製等が挙げられる。生成した過酸化水素の測定方法としては、例えば電極を用いる方法、過酸化水素測定用試薬を用いる方法等が挙げられ、過酸化水素測定用試薬を用いる方法が好ましい。過酸化水素測定用試薬は、過酸化水素を検出可能な物質に変換するための試薬である。検出可能な物質としては、例えば色素、光発光、蛍光等が挙げられ、色素が好ましい。検出可能な物質が色素の場合、過酸化水素測定用試薬は、ペルオキシダーゼ等の過酸化活性物質と酸化発色型色原体を含む試薬等が挙げられる。酸化発色型色原体としては、酸化カップリング型色原体、ロイコ型色原体等が挙げられ、ロイコ型色原体が好ましい。ロイコ型色原体としては、例えばフェノチアジン系色原体、トリフェニルメタン系色原体、ジフェニルアミン系色原体、o-フェニレンジアミン、ヒドロキシプロピオン酸、ジアミノベンジジン、テトラメチルベンジジン等が挙げられ、フェノチアジン系色原体が好ましい。フェノチアジン系色原体としては、例えば10-N-カルボキシメチルカルバモイル-3,7-ビスジメチルアミノ-10H-フェノチアジンCCAP、10-N-メチルカルバモイル-3,7-ビスジメチルアミノ-10H-フェノチアジンMCDP、10-N-カルボキシメチルアミノカルボニル-3,7-ビスジメチルアミノ-10H-フェノチアジンナトリウム塩DA-67等が挙げられる。フェノチアジン系色原体の中でも、10-N-カルボキシメチルアミノカルボニル-3,7-ビスジメチルアミノ-10H-フェノチアジンナトリウム塩DA-67が特に好ましい。トリフェニルメタン系色原体としては、例えばN,N,N’,N’,N’’,N’’-ヘキサ3-スルホプロピル-4,4’,4’’-トリアミノトリフェニルメタンTPM-PS等が挙げられる。ジフェニルアミン系色原体としては、例えばN-カルボキシメチルアミノカルボニル-4,4’-ビスジメチルアミノジフェニルアミンナトリウム塩DA-64、4,4’-ビスジメチルアミノジフェニルアミン、ビス3-ビス4-クロロフェニルメチル-4-ジメチルアミノフェニルアミンBCMA等が挙げられる。検出可能な物質が光発光の場合、過酸化水素測定用試薬は、ペルオキシダーゼ等の過酸化活性物質と化学発光物質を含む試薬等が挙げられる。化学発光物質としては、例えばルミノール、イソルミノール、ルシゲニン、アクリジニウムエステル等が挙げられる。検出可能な物質が蛍光の場合、過酸化水素測定用試薬は、ペルオキシダーゼ等の過酸化活性物質と蛍光物質を含む試薬等が挙げられる。蛍光物質としては、例えば4-ヒドロキシフェニル酢酸、3-4-ヒドロキシフェニルプロピオン酸、クマリン等が挙げられる。2ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビン測定試薬本発明の、ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビン測定試薬は、タンパク質分解酵素、フルクトシルペプチド酸化酵素、イソチアゾリノン誘導体、及び、界面活性剤を含む試薬であり、本発明のヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンの測定方法に用いられる。本発明の測定試薬は、さらに、過酸化水素測定試薬を含んでいてもよい。本発明の測定試薬におけるタンパク質分解酵素、フルクトシルペプチド酸化酵素、イソチアゾリノン誘導体、界面活性剤、及び、過酸化水素測定試薬としては、例えば、それぞれ、前述のタンパク質分解酵素、フルクトシルペプチド酸化酵素、イソチアゾリノン誘導体、界面活性剤、及び、過酸化水素測定試薬等が挙げられる。本発明の測定試薬におけるタンパク質分解酵素の濃度は、通常50~25000kU/Lであり、好ましくは250~10000kU/Lである。本発明の測定試薬におけるフルクトシルペプチド酸化酵素の濃度は、通常0.1~30kU/Lであり、好ましくは0.2~15kU/Lである。本発明の測定試薬におけるイソチアゾリノン誘導体の濃度は、通常0.005~20mmol/Lであり、好ましくは0.01~10mmol/Lである。本発明の測定試薬における界面活性剤の濃度は、通常0.0001~10であり、好ましくは0.0005~5である。本発明の測定試薬には、必要に応じて、水性媒体、安定化剤、防腐剤、塩類、干渉物質消去剤、有機溶媒等が含有されてもよい。水性媒体としては、例えば脱イオン水、蒸留水、緩衝液等が挙げられ、緩衝液が好ましい。水性媒体のpHは、例えばpH4~10である。水性媒体として緩衝液を用いる場合には、設定するpHに応じた緩衝剤を用いることが望ましい。緩衝液に用いる緩衝剤としては、例えばトリスヒドロキシメチルアミノメタン緩衝剤、リン酸緩衝剤、ホウ酸緩衝剤、グッドの緩衝剤等が挙げられる。グッドの緩衝剤としては、例えば2-モルホリノエタンスルホン酸MES、ビス2-ヒドロキシエチルイミノトリスヒドロキシメチルメタンBis-Tris、N-2-アセトアミドイミノ二酢酸ADA、ピペラジン-N,N’-ビス2-エタンスルホン酸PIPES、N-2-アセトアミド-2-アミノエタンスルホン酸ACES、3-モルホリノ-2-ヒドロキシプロパンスルホン酸MOPSO、N,N-ビス2-ヒドロキシエチル-2-アミノエタンスルホン酸BES、3-モルホリノプロパンスルホン酸MOPS、N-トリスヒドロキシメチルメチル-2-アミノエタンスルホン酸TES、2-4-2-ヒドロキシエチル-1-ピペラジニルエタンスルホン酸HEPES、3-N,N-ビス2-ヒドロキシエチルアミノ-2-ヒドロキシプロパンスルホン酸DIPSO、N-トリスヒドロキシメチルメチル-2-ヒドロキシ-3-アミノプロパンスルホン酸TAPSO、ピペラジン-N,N’-ビス2-ヒドロキシプロパンスルホン酸POPSO、3-4-2-ヒドロキシエチル-1-ピペラジニル-2-ヒドロキシプロパンスルホン酸HEPPSO、3-4-2-ヒドロキシエチル-1-ピペラジニルプロパンスルホン酸HEPPS、N-トリスヒドロキシメチルメチルグリシンTricine、N,N-ビス2-ヒドロキシエチルグリシンBicine、N-トリスヒドロキシメチルメチル-3-アミノプロパンスルホン酸TAPS、N-シクロヘキシル-2-アミノエタンスルホン酸CHES、N-シクロヘキシル-3-アミノ-2-ヒドロキシプロパンスルホン酸CAPSO、N-シクロヘキシル-3-アミノプロパンスルホン酸CAPS等が挙げられる。緩衝液の濃度は、通常0.001~2.0mol/Lであり、0.005~1.0mol/Lが好ましい。安定化剤としては、例えばエチレンジアミン四酢酸EDTA、シュークロース、塩化カルシウム、酢酸カルシウム、硝酸カルシウム、フェロシアン化カリウム、牛血清アルブミンBSA、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル等のポリオキシエチレン系界面活性剤等が挙げられる。防腐剤としては、例えばアジ化ナトリウム、抗生物質等があげられる。塩類としては、例えば塩化ナトリウム、硝酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、ギ酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化カリウム、硝酸カリウム、硫酸カリウム、炭酸カリウム、ギ酸カリウム、酢酸カリウム、等が挙げられる。干渉物質消去剤としては、例えばアスコルビン酸の影響を消去するためのアスコルビン酸オキシダーゼ等が挙げられる。有機溶媒としては、例えばロイコ型色原体の水性媒体への溶解補助剤のためのジメチルホルムアミドDMF、ジメチルスルホキサイドDMSO、ジオキサン、アセトン、メタノール、エタノール等が挙げられる。3ヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビン測定キット本発明のヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビン測定試薬は、キットの形態で保存、流通及び使用されてよい。本発明のヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビン測定キットは、本発明のヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビンの測定方法に用いられる。本発明の測定キットとしては、例えば2試薬系のキット、3試薬系のキット等が挙げられ、2試薬系キットが好ましい。本発明のヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビン測定キットは、本発明のヘモグロビン含有試料中の糖化ヘモグロビン測定方法を可能とするキットであれば、特に制限はなく、2試薬系キットの場合は、例えばタンパク質分解酵素を含む第1試薬と、フルクトシルペプチド酸化酵素、イソチアゾリノン誘導体、及び、界面活性剤を含む第2試薬とを含むキットや、タンパク質分解酵素、イソチアゾリノン誘導体、及び、界面活性剤を含む第1試薬と、フルクトシルペプチド酸化酵素を含む第2試薬とを含むキット等が挙げられる。さらに、本発明の糖化ヘモグロビン測定キットとして、これらのキットの第1試薬、第2試薬のいずれか又は両方に過酸化水素測定試薬が含まれるキットが挙げられる。特に、過酸化水素測定試薬として、ペルオキシダーゼとロイコ型色原体とを含む試薬を用いる場合は、ペルオキシダーゼとロイコ型色原体とは別々の試薬に含まれることが好ましい。すなわち、ペルオキシダーゼとロイコ型色原体とが、それぞれ第1試薬と第2試薬に、又は、第2試薬と第1試薬に含まれることが好ましい。本発明の測定キットを構成する試薬中のタンパク質分解酵素の濃度は、通常100~30000kU/Lであり、好ましくは500~10000kU/Lである。本発明の測定キットを構成する試薬中のフルクトシルペプチド酸化酵素の濃度は、通常0.5~100kU/Lであり、好ましくは1~50kU/Lである。本発明の測定キットを構成する試薬中のイソチアゾリノン誘導体の濃度は、通常0.005~20mmol/Lであり、好ましくは0.01~10mmol/Lである。本発明の測定キットを構成する試薬中の界面活性剤の濃度は、通常0.0001~40であり、好ましくは0.0005~20である。以下、実施例により本発明をより詳細に説明するが、これらは本発明の範囲を何ら限定するものではない。尚、本実施例、比較例及び試験例においては、下記メーカーの試薬及び酵素を使用した。Bis-Tris同仁化学研究所社製、ADA同仁化学研究所社製、MES同仁化学研究所社製、塩化カルシウム2水和物和光純薬工業社製、酢酸カルシウム和光純薬工業社製、硝酸カルシウム和光純薬工業社製、DA-67和光純薬工業社製、1-ドデシルピリジニウムクロライドC12py[化合物II;東京化成社製]、デシルトリメチルアンモニウムブロマイドC10TMA第四級アンモニウム塩;東京化成社製、NIKKOLLMTLMT[N-アルカノイル-N-メチルタウリン塩N-ラウロイル-N-メチルタウリンナトリウム塩;日光ケミカルズ社製]、アノンBL[アルキルカルボキシベタインラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン;日本油脂社製]、2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オンイソチアゾリノン誘導体;東京化成社製、1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オンイソチアゾリノン誘導体;和光純薬工業社製、4,5-ジクロロ-2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オンハイオム社製、サーモリシンタンパク質分解酵素;大和化成社製、アクチナーゼEタンパク質分解酵素;科研ファルマ社製、FPOX-CEフルクトシルペプチド酸化酵素;キッコーマン社製、FPOX-CETフルクトシルペプチド酸化酵素;キッコーマン社製、ペルオキシダーゼ東洋紡績社製、トリトンX-405ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル;シグマ-アルドリッチ社製。以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LC12py1.6g/L2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オン0.2g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/Lペルオキシダーゼ40kU/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/LDA-6760μmol/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LC12py1.6g/L1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン0.4g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/Lペルオキシダーゼ40kU/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/LDA-6760μmol/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LC10TMA16g/L2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オン0.2g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/Lペルオキシダーゼ40kU/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/LDA-6760μmol/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LC10TMA16g/L1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン0.2g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/Lペルオキシダーゼ40kU/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/LDA-6760μmol/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LLMT5g/L2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オン0.4g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/Lペルオキシダーゼ40kU/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/LDA-6760μmol/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LLMT5g/L1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン0.2g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/Lペルオキシダーゼ40kU/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/LDA-6760μmol/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LアノンBL5g/L2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オン0.2g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/Lペルオキシダーゼ40kU/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/LDA-6760μmol/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LアノンBL5g/L1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン0.4g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/Lペルオキシダーゼ40kU/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/LDA-6760μmol/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LC12py1.6g/L2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オン0.4g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/Lペルオキシダーゼ120kU/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LC12py1.6g/L1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン0.2g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/Lペルオキシダーゼ120kU/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LC10TMA16g/L2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オン0.4g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/Lペルオキシダーゼ120kU/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LC10TMA16g/L1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン0.2g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/Lペルオキシダーゼ120kU/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LLMT5g/L2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オン0.2g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/Lペルオキシダーゼ120kU/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LLMT5g/L1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン0.2g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/Lペルオキシダーゼ120kU/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LアノンBL5g/L2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オン0.4g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/Lペルオキシダーゼ120kU/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LアノンBL5g/L1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン0.4g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/Lペルオキシダーゼ120kU/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬MESpH6.020mmol/LC12py1.2g/L2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オン0.2g/L酢酸カルシウム10mmol/L硝酸ナトリウム100mmol/LアクチナーゼE340kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CET2.5kU/LトリトンX-4057.1g/Lペルオキシダーゼ120kU/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬MESpH6.020mmol/LC12py1.2g/L1,2-ベンゾイソチアゾール-32H-オン0.04g/L酢酸カルシウム10mmol/L硝酸ナトリウム100mmol/LアクチナーゼE340kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CET2.5kU/LトリトンX-4057.1g/Lペルオキシダーゼ120kU/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬MESpH6.520mmol/LC12py1.6g/L2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オン0.2g/L硝酸カルシウム10mmol/L硝酸ナトリウム100mmol/Lサーモリシン1800kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CET6kU/LトリトンX-4057.1g/Lペルオキシダーゼ120kU/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬MESpH6.520mmol/LC12py1.6g/L4,5-ジクロロ-2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オン0.04g/L硝酸カルシウム10mmol/L硝酸ナトリウム100mmol/Lサーモリシン1800kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CET6kU/LトリトンX-4057.1g/Lペルオキシダーゼ120kU/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬MESpH6.520mmol/LC12py1.6g/L2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オン0.2g/L硝酸カルシウム10mmol/L硝酸ナトリウム100mmol/LアクチナーゼE340kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CET6kU/LトリトンX-4057.1g/Lペルオキシダーゼ120kU/L以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬MESpH6.520mmol/LC12py1.6g/L4,5-ジクロロ-2-オクチル-4-イソチアゾリン-3-オン0.04g/L硝酸カルシウム10mmol/L硝酸ナトリウム100mmol/LアクチナーゼE340kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CET6kU/LトリトンX-4057.1g/Lペルオキシダーゼ120kU/LHbA1c測定キットとして、実施例1のキットを、試料として、糖尿病が疑われる10名の被験者由来の全血を用いて、以下の手順により、各試料におけるHbA1c濃度量の総ヘモグロビン濃度量に対する割合[HbA1c]を決定した。1総ヘモグロビン濃度決定のための検量線の作成測定キットとして、総ヘモグロビン測定用キットであるヘモグロビンB-テストワコーSLS-ヘモグロビン法和光純薬工業社製を用いて、検体として、ヘモグロビンB-テストワコーに付属の標準品ヘモグロビン濃度:15.3mg/mLを用いて、ヘモグロビン濃度と吸光度との関係を示す検量線を作成した。2HbA1c濃度決定のための検量線の作成ラテックス免疫凝集法と、血球画分の総ヘモグロビン値とから、HbA1c濃度が2.77μmol/L、6.33μmol/Lと値付けされた2つの血球画分について、実施例1のHbA1c測定キットを用いて測定し、各血球画分に対する吸光度を測定した。当該血球画分の代わりに生理食塩水を用いて、生理食塩水に対するHbA1c濃度を測定した。当該血球画分に対するそれぞれの吸光度から、生理食塩水に対する吸光度を差し引いて算出した値を、当該血球画分に対するブランク補正吸光度とした。当該血球画分に対するブランク補正吸光度と、生理食塩水に対するブランク補正吸光度0Absとから、HbA1c濃度μmol/Lと吸光度との間の関係を示す検量線を作成した。3各血球画分におけるヘモグロビン濃度の決定各試料に対して、25°C、3000rpmで5分間遠心分離を行い、血球画分を得た。各血球画分について、ヘモグロビンB-テストワコーを用いて測定し、得られた測定値と1の検量線とから、各血球画分中のヘモグロビン濃度μmol/Lを決定した。4各血球画分におけるHbA1c濃度の決定各血球画分について、実施例1の測定キットを用いて測定し、得られた測定値と2の検量線とから、各血球画分中のHbA1c濃度μmol/Lを決定した。5HbA1c=HbA1c濃度のヘモグロビン濃度に対する割合の決定上記3で決定した各血球画分におけるヘモグロビン濃度μmol/Lと、上記4で決定した各血球画分におけるHbA1c濃度μmol/Lとから、以下の式により、日本糖尿病学会JapanDiabetesSociety;JDS値のHbA1cを算出した。6同一血球画分中のHbA1cの免疫測定法での決定上記5でのHbA1cの決定に使用した血球画分と同一の血球画分を用いて、各血球画分中のHbA1cを、デタミナーLHbA1c協和メデックス社製を用いる免疫測定法により、デタミナーLHbA1cの添付文書に記載の方法に従って決定した。7本発明の測定方法と免疫測定法との相関本発明の測定方法を用いて、上記5で決定したHbA1cと、免疫測定法を用いて、上記6で決定したHbA1cとから、本発明の測定方法と免疫測定法との間の相関関係を検証し、相関係数を決定した。同様に、実施例1の測定キットの代わりに、実施例2~22の測定キットを用いて、デタミナーLHbA1c協和メデックス社製を用いた測定との間の相関係数を決定した。その結果を第1表に示す。第1表に示す通り、実施例1~22の測定キットを用いる本発明の測定方法と、免疫測定法との間に良好な相関関係が認められた。従って、実施例1~22の測定キットを用いる本発明の測定方法により、試料中のHbA1cを正確、かつ、高感度に測定できることが明らかとなった。[比較例1]以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LC12py1.6g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/Lペルオキシダーゼ40kU/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/LDA-6760μmol/L[比較例2]以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LC10TMA16g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/Lペルオキシダーゼ40kU/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/LDA-6760μmol/L[比較例3]以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LLMT5g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/Lペルオキシダーゼ40kU/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/LDA-6760μmol/L[比較例4]以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LアノンBL5g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/Lペルオキシダーゼ40kU/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/LDA-6760μmol/L[比較例5]以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LC12py1.6g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/Lペルオキシダーゼ120kU/L[比較例6]以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LC10TMA16g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/Lペルオキシダーゼ120kU/L[比較例7]以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LLMT5g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/Lペルオキシダーゼ120kU/L[比較例8]以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬Bis-TrispH6.810mmol/LアノンBL5g/L塩化カルシウム2水和物10mmol/Lサーモリシン1800kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CE6kU/Lペルオキシダーゼ120kU/L[比較例9]以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬MESpH6.020mmol/LC12py1.2g/L酢酸カルシウム10mmol/L硝酸ナトリウム100mmol/LアクチナーゼE340kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CET2.5kU/LトリトンX-4057.1g/Lペルオキシダーゼ120kU/L[比較例10]以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬MESpH6.520mmol/LC12py1.6g/L硝酸カルシウム10mmol/L硝酸ナトリウム100mmol/Lサーモリシン1800kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CET6kU/LトリトンX-4057.1g/Lペルオキシダーゼ120kU/L[比較例11]以下の第1試薬及び第2試薬からなるHbA1c測定キットを調製した。第1試薬MESpH6.520mmol/LC12py1.6g/L硝酸カルシウム10mmol/L硝酸ナトリウム100mmol/LアクチナーゼE340kU/LDA-6720μmol/L第2試薬ADApH7.050mmol/LFPOX-CET6kU/LトリトンX-4057.1g/Lペルオキシダーゼ120kU/L[試験例1]イソチアゾリノン誘導体の効果11溶血検体の調製ヒト血液を遠心分離して得られた血球画分を、ヘモグロビン測定試薬であるネスコートヘモキット-Nアルフレッサファーマ社製を用いて測定し、該血球画分のヘモグロビン濃度を決定した。次いで、この値付けされた該血球画分を精製水で希釈して溶血させ、ヘモグロビン濃度が2mg/mL、4mg/mL、6mg/mL、8mg/mL及び10mg/mLの各溶血検体を調製した。2溶血検体に対する反応吸光度の測定キットとして、実施例1のキットを用いて、検体として、生理食塩水ヘモグロビン濃度が0mg/mL及び1で調製した溶血検体を用いて、以下の方法により、各検体に対する反応吸光度を測定した。反応セルへ、検体9.6μLと、実施例1のキットの第1試薬120μLとを添加し、37°Cで5分間加温し第一反応、反応液の吸光度E1を主波長660nm、副波長800nmで測定し、次いでこの反応液に第2試薬40μLを添加しさらに37°Cで5分間加温し第二反応、反応液の吸光度E2を主波長660nm、副波長800nmで測定し、E2からE1を差し引いた吸光度差△E=E2-E1を、各検体に対する反応吸光度とした。キットとして、実施例1のキットの代わりに,実施例2及び比較例1の各キットを用いて、同様の方法により、各検体に対する反応吸光度を測定した。その結果を第1図に示す。第1図から明らかな様に、イソチアゾリノン誘導体を含む実施例1及び2のキットを用いる本発明の測定方法においては、ヘモグロビン濃度に比例して反応吸光度が上昇したが、イソチアゾリノン誘導体を含まない比較例1のキットを用いる測定方法においては、ヘモグロビン濃度と反応吸光度との間に比例関係が認められなかった。測定に用いた溶血検体は、同一のヒト血液より調製されたものであるため、HbA1c濃度はヘモグロビン濃度に依存して高くなる。従って、イソチアゾリノン誘導体を含まない比較例1のキットを用いる測定方法は、ヘモグロビンの影響を強く受け、HbA1cの正確な測定が困難であるのに対して、イソチアゾリノン誘導体を含む実施例1及び2のキットを用いる本発明の測定方法は、ヘモグロビンの影響を受けず、HbA1cの正確な測定が可能であることが分かった。さらに、キットとして、実施例1のキットの代わりに、実施例9、10及び比較例5の各キットを用いて、同様の方法により、各検体に対する反応吸光度を測定した。その結果を第2図に示す。第2図から明らかな様に、イソチアゾリノン誘導体を含む実施例9及び10のキットを用いる本発明の測定方法においては、ヘモグロビン濃度に比例して反応吸光度が上昇したが、イソチアゾリノン誘導体を含まない比較例5のキットを用いる測定方法においては、ヘモグロビン濃度と反応吸光度との間に比例関係が認められなかった。測定に用いた溶血検体は、同一のヒト血液より調製されたものであるため、HbA1c濃度はヘモグロビン濃度に依存して高くなる。従って、イソチアゾリノン誘導体を含まない比較例5のキットを用いる測定方法は、ヘモグロビンの影響を強く受け、HbA1cの正確な測定が困難であるのに対して、イソチアゾリノン誘導体を含む実施例9及び10のキットを用いる本発明の測定方法は、ヘモグロビンの影響を受けず、HbA1cの正確な測定が可能であることが分かった。[試験例2]イソチアゾリノン誘導体の効果2キットとして、実施例1のキットを、検体として、試験例1の1で調製した溶血検体を用いて測定を行い、得られた測定値を基に、実施例9の2で作成したHbA1c濃度μmol/Lと吸光度との間の関係を示す検量線から、各検体中のHbA1c濃度μmol/Lを決定した。一方、各検体中のヘモグロビン濃度を、ヘモグロビンB-テストワコーを用いて測定し、得られた測定値と実施例9の1で作成した検量線とから、各検体中のヘモグロビン濃度μmol/Lを決定した。決定した各検体中のHbA1c濃度μmol/Lとヘモグロビン濃度μmol/Lとから、以下の式により、日本糖尿病学会JapanDiabetesSociety;JDS値のHbA1cを算出した。キットとして、実施例1のキットの代わりに、実施例2~13、15、17~22及び比較例1~11の各キットを用いて同様の測定を行い、それぞれのキットに対して、各検体中のHbA1c濃度を測定した。ヘモグロビン濃度が6mg/mLである検体でのHbA1c濃度を基準0とし、その基準からの各検体のHbA1c濃度の差[△HbA1c濃度]を算出した。その結果を第2表に示す。前述の通り、測定に用いた溶血検体は、同一のヒト血液より調製されたものであるため、総ヘモグロビンに対するHbA1cの割合は、ヘモグロビン濃度に拠らず一定である。従って、△HbA1c濃度が0に近い程、HbA1c測定方法がヘモグロビン濃度の影響を受けない、ということになる。第2表から明らかな通り、イソチアゾリノン誘導体を含む本発明のキットでは、イソチアゾリノン誘導体を含まない比較例のキットに比較して、ヘモグロビン濃度の影響を受けないことが判明した。[試験例3]イソチアゾリノン誘導体の効果3キットとして、実施例7,8及び比較例4の各キットを、検体として、試験例1の1で調製した溶血検体を用いて、試験例1と同様の方法により、それぞれのキットにおいて、各検体に対する反応吸光度を測定した。その結果を第3図に示す。同様に、キットとして、実施例15、16及び比較例8の各キットを、検体として、試験例1の1で調製した溶血検体を用いて、試験例1と同様の方法により、それぞれのキットにおいて、各検体に対する反応吸光度を測定した。その結果を第4図に示す。同様に、キットとして、実施例21、22及び比較例11の各キットを、検体として、試験例1の1で調製した溶血検体を用いて、試験例1と同様の方法により、それぞれのキットにおいて、各検体に対する反応吸光度を測定した。その結果を第5図に示す。第3図及び第4図から明らかな通り、本発明のキット及び比較例のキットのいずれのキットにおいても、ヘモグロビン濃度に比例して反応吸光度が上昇したが、イソチアゾリノン誘導体を含む本発明のキットを用いる場合は、イソチアゾリノンを含まない比較例のキットを用いる場合に比較して、同一濃度のヘモグロビンの検体すなわち、同一濃度のHbA1cの検体において、反応吸光度が高いことが判明した。前述の通り、測定に用いた溶血検体は、同一のヒト血液より調製されたものであるため、HbA1c濃度はヘモグロビン濃度に依存して高くなる。同一濃度のHbA1cの検体においては、反応吸光度が高い程、ヘモグロビンの影響を受けず、測定データとしての信頼度が高いことになる。特に、低濃度のHbA1cの検体においては、高い反応吸光度が得られることが重要となる。実施例7及び8のキットを用いる場合は、比較例4のキットを用いる場合に比較して、同一濃度のHbA1cの検体において、高い反応吸光度が得られた。同様に、実施例15及び16のキットを用いる場合は、比較例8のキットを用いる場合に比較して、実施例21及び22のキットを用いる場合は、比較例11のキットを用いる場合に比較して、同一濃度のHbA1cの検体において、高い反応吸光度が得られた。従って、イソチアゾリノン誘導体を含む本発明のキットを用いる測定方法は、イソチアゾリノン誘導体を含まない比較例のキットを用いる測定方法と比較して、ヘモグロビンの影響を受けず、かつ、高感度なHbA1cの測定が可能となることが判明した。"