"化合物のレパートリー中において、所望の活性を有する1以上の化合物を識別する方法であって、a任意の1つのマイクロカプセルにおいて、レパートリーのサブセットのみが複数のコピーで示されるように、化合物をマイクロカプセル中にコンパートメント化するステップと;b所望の活性を有する化合物を識別するステップとを含む方法。ステップaが、個々の化合物を含む個別のエマルジョンコンパートメントを形成するステップと、エマルジョンコンパートメントを混合して、エマルジョン化された化合物レパートリーを形成するステップであって、任意の1つのマイクロカプセルにおいて、レパートリーのサブセットが複数のコピーで示される、ステップとを含む、請求項1に記載の方法。ステップaが、c任意の1つのマイクロビーズ上において、レパートリーのサブセット1つのみが示されるように、化合物レパートリーをマイクロビーズ上に付着させるステップと;d任意の1つのマイクロカプセルにおいて、レパートリーのサブセットが複数のコピーで示されるように、マイクロビーズをマイクロカプセルにコンパートメント化するステップとを含む、請求項1に記載の方法。所望の活性が、結合活性および標的の活性のモジュレーションからなる群より選択される、請求項1~3のいずれかに記載の方法。結合活性が、標的に対する結合である、請求項4に記載の方法。モジュレートされた活性が、結合活性である、請求項4に記載の方法。モジュレートされた活性が、触媒活性である、請求項4に記載の方法。化合物が標的と反応して反応生成物を生成する、請求項1から3のいずれかに記載の方法。化合物が、切断不能なリンカーを介してマイクロビーズへ結合している、請求項3またはそれに従属するいずれかに記載の方法。化合物が、切断可能なリンカーを介してマイクロビーズへ結合している、請求項3またはそれに従属するいずれかに記載の方法。化合物が、光化学的に切断可能なリンカーを介してマイクロビーズへ結合している、請求項10に記載の方法。化合物が、切断可能なリンカーおよび切断不能なリンカーの組み合わせによってマイクロビーズへ結合している、請求項3またはそれに従属するいずれかに記載の方法。標的が、化合物と一緒にマイクロカプセルにコンパートメント化される、請求項1~12のいずれかに記載の方法。所望の活性を有する化合物が、それに関連するマイクロビーズもしくはマイクロカプセルにおける、マイクロビーズもしくはマイクロカプセルの識別、分類または選択を可能とする変化を引き起こす、請求項1~13のいずれかに記載の方法。化合物がマイクロビーズに結合しており、マイクロビーズの単離が可能となるように、マイクロカプセル内の所望の活性が、直接的または間接的に、化合物が付着しているマイクロビーズの修飾をもたらす、請求項14に記載の方法。標的がマイクロビーズに結合しており、マイクロビーズの単離が可能となるように、マイクロカプセル内で所望の活性を有する化合物が、直接的または間接的に、標的に結合する、請求項15に記載の方法。マイクロビーズがアフィニティー精製によって単離される、請求項15または請求項16に記載の方法。基質がマイクロカプセル内に存在し、マイクロカプセル内の化合物の所望の活性が、直接的または間接的に、基質の生成物への転換の調節をもたらす、請求項7に記載の方法。基質が、標的の触媒作用によって生成物へ転換させられる、請求項18に記載の方法。基質および生成物が、相違する光学特性を有する、請求項18または19に記載の方法。基質および生成物が、相違する蛍光特性を有する、請求項20に記載の方法。基質がマイクロビーズへ結合しており、マイクロカプセル内の化合物の所望の活性が、直接的または間接的に、基質の生成物への転換の調節をもたらし、生成物がマイクロビーズの一部に残存し、その識別、および任意選択的にその単離を可能にする、請求項18に記載の方法。生成物、および任意選択的に未反応基質が、その後マイクロカプセル内のマイクロビーズと複合体化される、請求項18に記載の方法。所望の活性が、生成物への基質の転換を増強する、請求項18に記載の方法。所望の活性が、生成物への基質の転換を阻害する、請求項18に記載の方法。マイクロカプセル内の化合物の所望の活性が、直接的または間接的に、生成物の生成をもたらし、生成物が、その後マイクロビーズと複合体化し、その単離を可能にする、請求項7に記載の方法。所望の活性を有する化合物が、マイクロカプセルの識別、分類または選択を可能にするマイクロカプセルの変化をもたらす、請求項1から14のいずれかに記載の方法。マイクロカプセル内の化合物の所望の活性が、マイクロカプセルの光学特性の変化をもたらす、請求項1~27のいずれかに記載の方法。マイクロカプセルが、それらの蛍光の変化の検出によって識別される、請求項28に記載の方法。蛍光の変化が、蛍光共鳴エネルギー転移FRETに起因する、請求項29に記載の方法。マイクロカプセル内の化合物が、マイクロカプセルの光学特性の相違によって識別される、請求項28に記載の方法。マイクロカプセルの光学特性の相違が、蛍光の相違である、請求項31に記載の方法。マイクロカプセルの蛍光の相違が、量子ドットの存在に起因する、請求項32に記載の方法。化合物が、相違するマイクロカプセルにおいて相違する濃度で存在する、請求項1~33のいずれかに記載の方法。マイクロカプセル内の化合物の濃度が、マイクロカプセルの光学特性の相違によって識別される、請求項34に記載の方法。マイクロカプセルの光学特性の相違が、蛍光の相違である、請求項35に記載の方法。マイクロカプセルの蛍光の相違が、量子ドットの存在に起因する、請求項36に記載の方法。マイクロカプセル内の標的が、マイクロカプセルの光学特性の相違によって識別される、請求項28に記載の方法。マイクロカプセルの光学特性の相違が、蛍光の相違である、請求項38に記載の方法。マイクロカプセルの蛍光の相違が、量子ドットの存在に起因する、請求項39に記載の方法。マイクロカプセルの識別が、フローサイトメトリーによる、請求項28から40のいずれかに記載の方法。マイクロカプセルの分類が、蛍光活性化セルソーターFACSを用いて実施される、請求項41に記載の方法。マイクロカプセルが、油中水型エマルジョンから水中油中水型エマルジョンへの転換後に蛍光活性化セルソーターFACSを用いて分類される、請求項42記載の方法。マイクロビーズの修飾が、その光学特性の変化を含む、請求項15に記載の方法。マイクロビーズの光学特性の相違が、蛍光の相違である、請求項44に記載の方法。マイクロビーズ上の化合物が、マイクロビーズの光学特性の相違によって識別される、請求項44に記載の方法。マイクロビーズの光学特性の相違が、蛍光の相違である、請求項46に記載の方法。マイクロビーズの蛍光の相違が、量子ドットの存在に起因する、請求項47に記載の方法。マイクロビーズが、非磁性、磁性または常磁性である、請求項3に記載の方法。マイクロビーズが、それらの蛍光の変化の検出によって分類される、請求項45に記載の方法。マイクロビーズの識別が、フローサイトメトリーによる、請求項50に記載の方法。マイクロビーズの分類が、蛍光活性化セルソーターFACSを用いて実施される、請求項50に記載の方法。蛍光の変化が、蛍光共鳴エネルギー転移FRETに起因する、請求項50に記載の方法。マイクロビーズの修飾により、マイクロビーズの光学特性の変化を誘導するように、マイクロビーズがマイクロカプセルの外側でさらに修飾されることが可能になる、請求項45に記載の方法。マイクロビーズの光学特性の変化が、特徴的なの光学特性を有する化合物のマイクロビーズへの結合に起因する、請求項45に記載の方法。マイクロビーズの光学特性の変化が、化合物の特徴的なの光学特性を有する標的への結合に起因する、請求項45または46に記載の方法。マイクロビーズの光学特性の変化が、標的に結合したときの化合物の光学特性の変化に起因する、請求項45または46に記載の方法。マイクロビーズの光学特性の変化が、化合物が結合したときの標的の光学特性の変化に起因する、請求項45または46に記載の方法。マイクロビーズの光学特性の変化が、結合している標的および化合物両方の光学特性の変化に起因する、請求項45または46に記載の方法。所望の活性を有する化合物が、標的の変化を引き起こすように作用し、マイクロビーズの光学特性の変化が、標的と標的に対する化合物の作用での生成物との相違する光学特性に起因する、請求項45または46に記載の方法。所望の活性を有する化合物が、光学特性を変化させずに標的の変化を引き起こすように作用し、標的ではなく作用での生成物だけがマイクロビーズと結合または反応し、それによってマイクロビーズの光学特性を変化させる、請求項45または46に記載の方法。別の試薬が、マイクロビーズに結合した調節された反応の基質ではなく生成物に特異的に結合または特異的に反応し、それによってマイクロビーズの光学特性を変化させる、請求項45また46に記載の方法。別の試薬が、マイクロビーズに結合した調節された反応の基質生成物ではなくに特異的に結合特異的に反応し、それによってマイクロビーズの光学特性を変化させる、請求項45また46に記載の方法。化合物の非所望の活性が、所望の活性から生じる変化とは区別しえるマイクロビーズもしくはマイクロカプセルの変化をもたらす、請求項1~63のいずれかに記載の方法。非所望の活性の結果として生じる変化が、マイクロビーズまたはマイクロカプセルを消極的に選択するために使用される、請求項64に記載の方法。反応特異性を向上させるために、消極的な選択を積極的な選択と組み合わせる、請求項65に記載の方法。改良された反応特異性が、結合特異性における改良である、請求項66に記載の方法。改良された反応特異性が、標的に対する位置選択性および/または立体選択性の改良である、請求項66に記載の方法。所望の化合物の活性によって直接的または間接的に修飾されたマイクロビーズが、さらにチラミドシグナル増幅TSA;NEN社によって修飾されて、マイクロビーズの光学特性の変化を直接的または間接的に生じさせ、それによりそれらの識別および任意選択的に単離が可能となる請求項45から68のいずれかに記載の方法。各マイクロビーズまたはマイクロカプセルが、2以上の化合物を含み、マイクロビーズまたはマイクロカプセルを選択するために、各化合物が所望の活性を有していなければならない、請求項1~69のいずれかに記載の方法。1以上の化合物が、低分子量化合物である、請求項1~70のいずれかに記載の方法。レパートリーのサブセットが、単一化合物である、請求項1~71のいずれかに記載の方法。各マイクロカプセルまたはマイクロビーズが、それと結合した単一化合物の複数の分子を有する、請求項72に記載の方法。ステップaからdの1つ以上を反復して繰り返すステップをさらに含む、請求項1~73のいずれかに記載の方法。マイクロカプセル化が、油中水型エマルジョンを形成するステップによって達成される、請求項1~74のいずれかに記載の方法。油中水型エマルジョンが、微小流体システムを用いて作成される、請求項75に記載の方法。エマルジョンが、不混和性液体の共流動ストリーム内の水性液滴の破裂によって形成される、請求項76に記載の方法。微小流体チャネル内の油のストリーム内に分散した水性微小液滴の層流によって、マイクロカプセルが分析のために輸送される、請求項76に記載の方法。マイクロカプセルが、微小流体チャネル内の油のストリーム内に分散した水性微小液滴である、請求項76に記載の方法。マイクロカプセル内の化合物が、微小流体チャネル内の他の微小液滴に対するマイクロカプセルの相対的位置によって識別される、請求項76に記載の方法。マイクロカプセル内の化合物の濃度が、微小流体チャネル内の他の微小液滴に対するマイクロカプセルの相対的位置によって識別される、請求項76に記載の方法。マイクロカプセル内の標的が、微小流体チャネル内の他の微小液滴に対するマイクロカプセルの相対的位置によって識別される、請求項76に記載の方法。識別されたマイクロカプセルが、微小流体デバイスを用いて分類される、請求項1~82のいずれかに記載の方法。マイクロカプセル化が、フッ化炭素中水型または過フッ化炭素中水型エマルジョンを形成するステップによって達成される、請求項75に記載の方法。フッ化炭素が、ペルフルオロオクチルブロミドまたはペルフルオロオクチルエタンである、請求項84に記載の方法。エマルジョンが、F-アルキルジモルホリノホスフェートを用いて形成される、請求項84に記載の方法。F-アルキルジモルホリノホスフェートが、一般式CnF2n1CmH2mOPO[NCH2CH22O]2を有する、請求項86に記載の方法。F-アルキルジモルホリノホスフェートが、C8F17C11H22OPO[NCH2CH22O]2である、請求項87に記載の方法。マイクロカプセルの内部環境が、油相へ1以上の試薬を添加することによって修飾される、請求項1~88のいずれかに記載の方法。化合物が、相違する光学特性を有するビーズへカップリングされている、請求項1~89のいずれかに記載の方法。ビーズが、相違する蛍光特性を有する、請求項90に記載の方法。ビーズの相違する光学特性が、ビーズへの相違するレベルの2以上の蛍光色素の取り込みに起因する、請求項90に記載の方法。ビーズの相違する光学特性が、相違する発光スペクトルを有する量子ドットの相違する数での取り込みに起因する、請求項90に記載の方法。ビーズの相違する光学特性が、ビーズへ結合した化合物を識別するために使用される、請求項90に記載の方法。単離されたビーズ上の化合物が、ビーズから化合物を放出させ、直接分析することによって識別される、請求項1~94のいずれかに記載の方法。単離されたビーズ上の化合物が、質量分光法によって識別される、請求項95に記載の方法。請求項1~96のいずれかの方法によって単離された生成物。化合物を調製する方法であって、a任意の1つのマイクロカプセルにおいて、レパートリーのサブセットのみが複数のコピーで示されるように、化合物をマイクロカプセルにコンパートメント化するステップと;b所望の活性を有する化合物を識別するステップと、c所望の活性を有する化合物を識別および生成するステップとを含む方法。化合物を調製する方法であって、a任意の1つのマイクロカプセルにおいて、レパートリーのサブセットのみが複数のコピーで示されるように、化合物をマイクロカプセルにコンパートメント化するステップと;b所望の活性を有する1以上の化合物を含有するマイクロカプセルを、それらの光学特性の変化を用いて識別、および任意選択的に分類するステップと;c所望の活性を有する化合物を識別および生成するステップとを含む方法。標的の活性をモジュレートさせることのできる1以上の化合物をスクリーニングする方法であって、a任意の1つのマイクロカプセルにおいて、レパートリーのサブセットのみが複数のコピーで示されるように、化合物をマイクロカプセルにコンパートメント化するステップと;b所望の活性を有する1以上の化合物を含有するマイクロカプセルを、それらの光学特性の変化を用いて識別、および任意選択的に分類するステップと;c所望の活性を有する標的を1以上の化合物と接触させ、1以上の化合物による標的の活性のモジュレーションを監視するステップとを含む方法。標的を調製する方法であって、a標的に対する合成プロトコールを供するステップであって、少なくとも1つのステップが化合物によって促進される、ステップと;bこのステップを促進する化合物の変異体を調製するステップと;c任意の1つのマイクロカプセルにおいて、レパートリーのサブセットのみが複数のコピーで示されるように、化合物をマイクロカプセルにコンパートメント化するステップと;d所望の活性を有する1以上の化合物を含有するマイクロカプセルを、それらの光学特性の変化を用いて識別、および任意選択的に分類するステップと;e合成における関連するステップを促進するために、dにおいて識別された化合物を用いて標的を調製するステップとを含む方法。化合物がマイクロビーズに結合しており、任意選択的に化合物がマイクロカプセル内のマイクロビーズから放出させられる、請求項98から102のいずれかに記載の方法。化合物および標的が最初は、その後に融合される相違するマイクロカプセルに存在する、請求項13に記載の方法。化合物を含有するマイクロカプセルが、分割して2つ以上のマイクロカプセルを生成する、請求項1~96および98~103のいずれかに記載の方法。標的を含有するマイクロカプセルが、分割して2つ以上のマイクロカプセルを生成する、請求項13に記載の方法。1つ以上の細胞が、マイクロカプセル内に存在する、請求項1~96および98~103のいずれかに記載の方法。化合物が、細胞内の標的の活性をモジュレートする、請求項106に記載の方法。化合物が、細胞の活性をモジュレートする、請求項107に記載の方法。[実施例1:酵素タンパク質チロシンホスファターゼ1BPTP1Bの阻害剤のスクリーニング]PTP1Bはインスリンおよびレプチンのシグナル伝達の負の調節物質である。インスリンおよびレプチンに対する耐性はII型真性糖尿病および肥満の指標であり、従ってPTP1Bは糖尿病および肥満の治療のための魅力的な薬剤標的である。2種の油中水エマルジョンを以下の通り作成した。デカン中の1w/vSpan60および1w/vコレステロールの溶液は、デカン7.84mlにSpan60を80mg、コレステロールを80mg溶解することにより製造する。デカンを45に加熱し、界面活性剤およびコレステロールの完全な可溶化を可能とする。界面活性剤/デカンの溶液を200μlバッチに渡り分割し、37のブロックヒーター中に入れる。手操作押し出し装置を製造元の取扱説明書に従って組み立てる。押し出しのためには、平均孔径14高フシングルの19mmのTrackEtchポリカーボネートフィルターをミニ押出機の内部に装着する。2本の気密性1mlハミルトンシリンジを押し出しに使用する。デカン1mlをにハミルトンシリンジ1本にロードしてシリンジをミニ押出機の一端に置き押出機の他方上の空のハミルトンシリンジ内にフィルターを経由してそれを押し出すことにより、デカン3ラ1mlで押出機を前洗浄した。第1のエマルジョンは、PTP1B活性に適合した緩衝液25mMHEPES、pH7.4、125mMNaCl、10グリセロール、1mMEDTA中のビス-ジフルオロメチレンホスホネートを有しており公知のPTP1B阻害剤である100l化合物2図150Johnsonetal2002、5mU/mlの標的酵素ヒト組み換えPTP1B、残基1~322;BiomolResearchLaboratoriesInc、蛍光発生PTP1B基質6,8-ジフルオロ-4-メチルウンベリフェリルホスホネートDiFMUPおよび100lテキサスレッドSigma;励起/発光最大595/615nm;赤色蛍光をハミルトンシリンジの1本に、予備加熱したデカン/界面活性剤混合物を他のハミルトンシリンジにロードすることにより作成する。シリンジを押出機のフィルターホルダーの両側の開口部内に装着する。化合物混合物を強制的にフィルターホルダーを通してデカン/界面活性剤混合物の入った別のシリンジ内に入れ、直接強制的に元のシリンジに戻すことにより、押し出しの1往復を完了する。合計で7.5往復の押し出しを完了する。充填されたシリンジを押出機から取り外し、1.7mlAxygen試験管内にあける。第2の油中水エマルジョンは化合物2の代わりにPTP1B阻害剤ではない化合物である100lヒドロケイヒ酸を、テキサスレッドの代わりに100lカルセインSigma;励起/発光最大470/509nm;緑色蛍光を含有する以外は上記エマルジョンと同一に作成する。1:1000~1:1化合物2エマルジョン:ヒドロケイヒ酸エマルジョンの範囲の比で2種のエマルジョンを振とうすることにより混合し、30分間37でインキュベートする。阻害剤は脱ホスホリル化生成物DiFMU;励起/発光最大358/452nm;青色蛍光に変換される非蛍光基質DiFMUPの量を低減する。次に油中水エマルジョンを以下の通り水中油中水ダブルエマルジョンに変換する。押出機上記参照を分解し、石鹸および逆浸透水で十分洗浄し、再度組み立てる。平均孔径8高フシングルの19mmTrackEtchポリカーボネートフィルターを装着する。押出機をリン酸緩衝食塩水PBS3×1mlで予備洗浄する。0.5w/vTween80を含有するPBS750μlを1mlの気密性ハミルトンシリンジにロードし、押出機に装着する。油中水エマルジョン250μlを別の1mlハミルトンシリンジにロードし、押出機に装着する。エマルジョンを強制的にフィルターを通してPBS/0.5Tween80の入った別のシリンジ内に入れ、即座に強制的に元のシリンジに戻すことにより、押し出しの1サイクルを完了する。合計で4.5サイクルの押し出しを完了する。充填されたシリンジを押出機から取り外し、1.7mlAxygen試験管内にあける。形成された水中油中水のダブルエマルジョンを氷上に置く。次にダブルエマルジョンをMoFloフローサイトメトリーを用いた多色フローサイトメトリーにより分析する。主に、緑色蛍光を示すヒドロケイヒ酸を含有するマイクロカプセルがPTP1BによるDiFMUPの脱ホスホリル化により青色蛍光も示す。主に、赤色蛍光を示す化合物2を含有するマイクロカプセルがPTP1Bの阻害により青色蛍光は殆どまたは全く示さない。[実施例2]2種の水性混合物を氷上反応を防止するためにおいて作成する。第1の混合物はPTP1B活性に適合した緩衝液25mMHEPES、pH7.4、125mMNaCl、10グリセロール、1mMEDTA中のビス-ジフルオロメチレンホスホネートを有しており知られたPTP1B阻害剤である100l化合物2図1、5mU/mlの標的酵素ヒト組み換えPTP1B、残基1~322;BiomolResearchLaboratoriesInc、蛍光発生PTP1B基質6,8-ジフルオロ-4-メチルウンベリフェリルホスホネートDiFMUPおよび100lテキサスレッドSigma;励起/発光最大595/615nm;赤色蛍光を含有する。第2の混合物は化合物2の代わりにPTP1B阻害剤ではない化合物である100lヒドロケイヒ酸を、テキサスレッドの代わりに100lカルセインSigma;励起/発光最大470/509nm;緑色蛍光を含有する以外は上記と同一に作成する。化合物混合物の各々の50μlを順次、実施例1に記載したとおり作成し37に保持したデカン中1w/vSpan60および1w/vコレステロールの溶液に添加し、その間5mmの分散ツールでUltraTurraxT8ホモゲナイザーを用いながら25000rpmでホモゲナイズする。ホモゲナイズは第2の小分量を添加した後3分間継続する。次に生成した粗野なエマルジョンを実施例1の通り押し出し、微小な油中水エマルジョンを作成し、30分間37でインキュベートする。阻害剤は脱ホスホリル化生成物DiFMU;励起/発光最大358/452nm;青色蛍光に変換される非蛍光基質DiFMUPの量を低減する。次に油中水エマルジョンを水中油中水ダブルエマルジョンに変換し、実施例1に記載の通り多色フローサイトメトリーで分析する。主に、緑色蛍光を示すヒドロケイヒ酸を含有するマイクロカプセルがPTP1BによるDiFMUPの脱ホスホリル化により青色蛍光も示す。主に、赤色蛍光を示す化合物2を含有するマイクロカプセルがPTP1Bの阻害により青色蛍光は殆どまたは全く示さない。[実施例3:化合物ライブラリからのPTP1B阻害剤のスクリーニング]実施例1に記載の通り100種の油中水エマルジョンを氷上反応を防止するためにおいて作成する。第1のエマルジョンは、ビス-ジフルオロメチレンホスホネートを有しており知られたPTP1B阻害剤である100l化合物2、5mU/mlの標的酵素ヒト組み換えPTP1B、残基1~322;BiomolResearchLaboratoriesInc、蛍光発生PTP1B基質6,8-ジフルオロ-4-メチルウンベリフェリルホスホネートDiFMUPおよび発光最大585nm、655nmおよび705nmを有する予備設定された比のQdot商標ストレプトアビジンコンジュゲートの混合物をPTP1B活性に適合した緩衝液25mMHEPES、pH7.4、125mMNaCl、10グリセロール、1mMEDTAに分散することにより作成する。99種の他の油中水エマルジョンは、化合物2の代わりにカルボン酸有機ビルディングブロックライブラリ由来の99種のカルボン酸のうちの1つ、および、発光最大585nm、655nmおよび705nmを有する異なる比のQdot商標ストレプトアビジンコンジュゲートを各々が含有する以外は上記と同一である。全てのエマルジョンにおいて、705nmQdot商標ストレプトアビジンコンジュゲートの濃度は100nMであり、585nmおよび655nmQdot商標ストレプトアビジンコンジュゲートの濃度は0、11、22、33、44、55、66、77、88または100nMの何れかとする。従って、10010ラ10通りのQdot商標ストレプトアビジンコンジュゲートの濃度があることになり、これにより、705nm、585nmおよび655nmにおける蛍光の蛍光比を測定することにより読み取られる独特の蛍光シグネチャーを各化合物を含有するマイクロカプセルが保有できるようになる。100種のエマルジョンを振とう攪拌により等しい比で混合し、温度を30分間25まで上昇させる。阻害剤は脱ホスホリル化生成物DiFMU;励起/発光最大358/452nm;青色蛍光に変換される非蛍光基質の量を低減する。次に油中水エマルジョンを水中油中水ダブルエマルジョンに変換し、実施例1に記載の通り多色フローサイトメトリーで分析する。化合物2を含有するマイクロカプセルのQdot蛍光シグネチャーのものを除き、主に、全てのマイクロカプセルはPTP1BによるDiFMUPの脱ホスホリル化により青色蛍光を示す。[実施例4:化合物ライブラリからのPTP1B阻害剤のスクリーニング]100種の水性混合物を氷上反応を防止するためにおいて作成する。第1の混合物は、PTP1B活性に適合した緩衝液25mMHEPES、pH7.4、125mMNaCl、10グリセロール、1mMEDTA中のビス-ジフルオロメチレンホスホネートを有しており知られたPTP1B阻害剤である100l化合物2図1、5mU/mlの標的酵素ヒト組み換えPTP1B、残基1~322;BiomolResearchLaboratoriesInc、蛍光発生PTP1B基質6,8-ジフルオロ-4-メチルウンベリフェリルホスホネートDiFMUPおよび発光最大585nm、655nmおよび705nmを有する予備設定された比のQdot商標ストレプトアビジンコンジュゲートを含有する。99種の他の水性混合物は、化合物2の代わりにカルボン酸有機ビルディングブロックライブラリ由来の99種のカルボン酸のうちの1つ、および、発光最大585nm、655nmおよび705nmを有する異なる比のQdot商標ストレプトアビジンコンジュゲートを各々が含有する以外は上記と同一である。全ての混合物において、705nmQdot商標ストレプトアビジンコンジュゲートの濃度は100nMであり、585nmおよび655nmQdot商標ストレプトアビジンコンジュゲートの濃度は0、11、22、33、44、55、66、77、88または100nMの何れかとする。従って、10010ラ10通りのQdot商標ストレプトアビジンコンジュゲートの濃度があることになり、これにより、705nm、585nmおよび655nmにおける蛍光の蛍光比を測定することにより読み取られる独特の蛍光シグネチャーを各化合物を含有するマイクロカプセルが保有できるようになる。化合物混合物の各々0.5μlを順次、実施例1に記載したとおり作成し37に保持したデカン中1w/vSpan60および1w/vコレステロールの溶液に添加し、その間5mmの分散ツールでUltraTurraxT8ホモゲナイザーIKAを用いながら25000rpmでホモゲナイズする。ホモゲナイズは第2の小分量を添加した後3分間継続する。次に生成した粗野なエマルジョンを実施例1の通り押し出し、微小な油中水エマルジョンを作成し、30分間37でインキュベートする。阻害剤は脱ホスホリル化生成物DiFMU;励起/発光最大358/452nm;青色蛍光に変換される非蛍光基質DiFMUPの量を低減する。次に油中水エマルジョンを水中油中水ダブルエマルジョンに変換し、実施例1に記載の通り多色フローサイトメトリーで分析する。化合物2を含有するマイクロカプセルのQdot蛍光シグネチャーのものを除き、主に、全てのマイクロカプセルはPTP1BによるDiFMUPの脱ホスホリル化により青色蛍光を示す。[実施例5:微小流体システムにおけるマイクロカプセルを使用したPTP1B阻害剤のスクリーニング]微小チャンネルはポリジメチルシロキサンPDMS中の急速なフォトタイピングを用いて長方形の断面を有するように加工し、SongandIsmagilov2003に記載の通り疎水性を付与する。シリンジポンプを用いて流動を起こしたHarvardApparatusPHD2000Infusionポンプ。水溶液については、取り外し可能な27ゲージ針のついた50μlのハミルトンガスタイトシリンジ1700シリーズ、TLLを30ゲージのテフロン登録商標チューブと共に使用した。キャリア流体に対しては、1mlハミルトンガスタイトシリンジ1700シリーズ、TLLをハミルトンの1ハブを有する30ゲージのテフロン登録商標針と共に使用した。キャリア流体はパーフルオロデカリンPFD中9v/vのC6F11C2H4OHとする。全ての水溶性試薬はPTP1B活性に適合した緩衝液25mMHEPES、pH7.4、125mMNaCl、1mMEDTA中に溶解した。50mU/mlの標的酵素ヒト組み換えPTP1B、残基1~322;BiomolResearchLaboratoriesIncの溶液、および、aビス-ジフルオロメチレンホスホネートを有しており知られたPTP1B阻害剤である100l化合物2図1またはbPTP1B阻害剤ではない化合物である100lヒドロケイヒ酸を不活性の中心ストリーム25mMHEPES、pH7.4、125mMNaCl、1mMEDTAを有する2本の層流ストリームとしてのマイクロチャンネル中を流動させることにより、これらを分離し、酵素と化合物が液滴マイクロカプセル形成よりも前に接触することを防止する。これらの3ストリームを連続的に水非混和性のフッ化炭素キャリア流体PFD中9v/vC6F11C2H4OH中に注入する。水溶液用の導入チャンネルは50SUP2の広さとし、PFD用チャンネルは28黒揩ニする。0.6:0.3、1.0:0.6、12.3:3.7、10:6および20:6を含む種々のPFD/水の計量的流量分を使用でき、得られる流量はそれぞれ10、19、190、190および300mm/秒となる。チャンネルの全幅を占有する水性マイクロカプセルはPFDストリーム中の液滴の破壊により形成する。化合物2またはヒドロケイヒ酸の何れかを含有するマイクロカプセルは、化合物2およびヒドロケイヒ酸を含有するシリンジを用いた注入を切り替えながら行うことにより形成できる。液滴形成地点のすぐ下流のチャンネルは1mmの距離に渡りピーク間の距離50高ナ旋廻している。これにより混乱移流によるマイクロカプセルの内容物の急速な混合が起こる。この地点の後、マイクロカプセルは長さ60cmのマイクロチャンネルを経由して1分間まで流動するこれにより阻害剤の結合を可能とする。次にこのマイクロチャンネルを上記した通り形成したPFD中9v/vC6F11C2H4OH中に水性マイクロカプセルを含有する60ラ50SUP2マイクロチャンネルと合流させる。これらのより大きいマイクロカプセルは25mMHEPES、pH7.4、125mMNaCl、1mMEDTA中の蛍光発生PTP1B基質6,8-ジフルオロ-4-メチルウンベリフェリルホスホネートDiFMUPを含有する。マイクロチャンネルの間の注入の後、拡張した主チャンネルは100ラ50SUP2であり、マイクロカプセルはチャンネルをブロックせず、大型のマイクロカプセルDiFMUPを含有が小型のマイクロカプセルPTP1Bおよび化合物を含有と合体するまで異なる速度で移動する。大型および小型のマイクロカプセルの生成の頻度は、各大型マイクロカプセルが融合すべき小型マイクロカプセルを有するように、等しくする。融合したマイクロカプセルは長さ60cmのマイクロチャンネルを経由して2分間まで流動する。DiFMUP励起/発光最大358/452nm;青色蛍光の生成によるマイクロカプセルの蛍光はエピ蛍光顕微鏡を用いて測定する。主に、青色蛍光を示すマイクロカプセルがヒドロケイヒ酸を含有するものであり、化合物2を含有するマイクロカプセルはPTP1Bの阻害により低い蛍光を示す。[実施例6:マイクロビーズへの化合物ライブラリの結合]表面上にカルボキシレート官能基を有する直径5.5高フポリスチレンマイクロビーズはオレンジ色585nmおよび赤色>650nmの蛍光色素の厳密な比の取り込みの結果として光学的にタグ付けされた形態で市販されている。各々が独特の光学的シグネチャーを有するこのようなビーズ100個のセットを過剰なエチレンジアミンおよびEDC塩酸1-エチル-3-3-ジメチルアミノプロピルカルボジイミドでHermanson1996に記載の通り修飾し、表面に第1アミノ基を形成した。次に上記した通りEDCを用いてアミド結合を形成することにより、光分解性のリンカー4-4-ヒドロキシメチル-2-メトキシ-5-ニトロフェノキシブタン酸をビーズに結合させる。次に、リンカーアルコールと反応させることによりカルボン酸有機ビルディングブロックライブラリ由来の100種の異なるカルボン酸をビーズにカップリングさせてカルボキシレートエステルを形成し、100種の異なる光学的にタグ付けされたビーズの各々が異なるカルボン酸にカップリングし、そして各ビーズがカルボン酸~106分子で誘導体化されるようにする。B100AP354nmUVランプUVPを用いて~5cmの距離から氷上4分間照射することによりカルボン酸としてビーズから化合物を放出させる。[実施例7:マイクロビーズに結合した化合物を用いた酵素タンパク質チロシンホスファターゼ1BPTP1Bの阻害剤のスクリーニング]PTP1Bはインスリンおよびレプチンのシグナル伝達の負の調節物質である。インスリンおよびレプチンに対する耐性はII型真性糖尿病および肥満の指標であり、従ってPTP1Bは糖尿病および肥満の治療のための魅力的な薬剤標的である。表面上にカルボキシレート官能基を有する直径5.5高フポリスチレンマイクロビーズはオレンジ色585nmおよび赤色>650nmの蛍光色素の厳密な比の取り込みの結果として光学的にタグ付けされた形態で市販されている。まず、マイクロビーズ上のカルボキシレート官能基を実施例6の場合と同様にエチレンジアミンおよびEDCを用いて第1アミンに変換する。次にPTP1Bのホスホペプチド基質であるウンデカペプチドEGFR988998DADEpYLIPQQGをEDCを用いて表面アミノ基を介してマイクロビーズの両方のセットにカップリングさせる。このペプチドはカルボキシレート-O-アリルエステルを用いた側鎖カルボキシレート基上の直角保護を用いてSieberAmide樹脂9-Fmoc-アミノ-キサンテン-3-イルオキシ-Merrifield樹脂上の固相合成により作成する。テトラデカンジ酸からなるリンカーをN末端にカップリングし、1TFAを用いてビーズからペプチドを脱離させ、C末端アミドを有するペプチドを得る。ペプチドをリンカーを介してビーズにカップリングさせEDC使用、ビーズ当たり~105ペプチドを得る。次に実施例6に記載の通り光化学分解性リンカー4-4-ヒドロキシメチル-2-メトキシ-5-ニトロフェノキシブタン酸を結合することにより残余の表面アミノ基を修飾する。次にペプチドの側鎖カルボキシレート上の保護基をPdPh34/CHCl3/HOAc/N-メチルモルホリンを用いて脱離させる。第1のセットのマイクロビーズを知られたPTP1B阻害剤である化合物である3-4-ジフルオロホスホノメチルフェニルプロパン酸化合物1、図1で誘導体化する。第1のセットのビーズとは別の光学的タグを有する第2のセットのビーズはPTP1B阻害剤ではない化合物であるヒドロケイヒ酸で誘導体化する。各々の場合において、実施例6に記載の通り、化合物はリンカーアルコールと反応させることによりカップリングしてカルボキシレートエステルを形成する。各マイクロビーズは~106分子で誘導体化する。次にマイクロビーズを図2に示す方法を用いてスクリーンする。2セットのマイクロビーズを1:100~1:1化合物1ビーズ:ヒドロケイヒ酸ビーズの範囲の比で混合し、合計108マイクロビーズをPTP1B活性に適合した緩衝液25mMHEPES、pH7.4、125mMNaCl、10グリセロール、1mMEDTA中、氷上反応を防止するためで、10nMの濃度の標的酵素ヒト組み換えPTP1B、残基1~322;BiomolResearchLaboratoriesIncと混合する。次にシングルのビーズおよび標的酵素PTP1Bを、油中水エマルジョンを形成やはり氷上することによりマイクロカプセル内に共局在化させる。ビーズの濃度は大部分のマイクロカプセルが1個または0個のビーズを含有するようにする。化合物を光化学的実施例6に記載に放出させ、温度を25に上昇させる。阻害剤は生成物脱ホスホリル化ペプチドに変換される基質の量を低減する。エマルジョンを4に冷却し、GriffithsandTawfik2003に記載の通り破壊して100lバナジン酸塩中にいれ、反応を停止させる。製造元の取扱説明書に従って緑色530nm蛍光色素フルオレセインイソチオシアネートで標識した抗基質抗ホスホチロシン抗体マウスモノクローナルIgG2bPY20,で標識した後、FACScan、FACScaliburまたはMoFloフローサイトメトリーを用いて3色フローサイトメトリーによりビーズを分析し、阻害の程度およびビーズ上の化合物を同時に測定する。主に、PTP1B阻害剤でコーティングされたマイクロビーズ上のみペプチドの脱ホスホリル化が観察され、他のマイクロビーズでは観察されなかった。[実施例8:マイクロビーズに結合した化合物ライブラリからのPTP1B阻害剤のスクリーニング]表面上にカルボキシレート官能基を有し、各々がオレンジ色585nmおよび赤色>650nmの蛍光色素の厳密な比の取り込みの結果として独特の光学的シグネチャーを有する直径5.5高フポリスチレンマイクロビーズ100個のセットをPTP1Bのホスホペプチド基質であるウンデカペプチドEGFR988998DADEpYLIPQQGおよび光化学的に切断できるリンカーを介して各々結合した100種の異なるカルボン酸を用いて、実施例7に記載の通り誘導体化する。これらのカルボン酸の1つは知られたPTP1B阻害剤である化合物である3-4-ジフルオロホスホノメチルフェニルプロパン酸化合物1、図1である。他の99種のカルボン酸は実施例6と同様にカルボン酸有機ビルディングブロックライブラリ由来である。次に100ビーズセットの各々の等しい数量を混合し、実施例7に記載の通りスクリーニングする。主に、PTP1B阻害剤の3-4-ジフルオロホスホノメチルフェニルプロパン酸化合物1、図1でコーティングされたマイクロビーズ上のみペプチドの脱ホスホリル化が観察され、他の化合物でコーティングされたマイクロビーズでは観察されなかった。[実施例9:フッ化炭素中水エマルジョンにおける小型分子のコンパートメント化]95v/vパーフルオロオクチルブロミド、溶液中目的の分子を含有する5v/vリン酸塩緩衝食塩水、および、界面活性剤としての2w/vC8F17C11H22OPO[NCH2CH22O]2F8H11DMPを含有するフッ化炭素中水エマルジョンを14tィルターを通過させる押し出し15回によるか、または、5mmの分散ツールでUltraTurraxT8ホモゲナイザーIKAを用いながら25000rpmで5分間ホモゲナイズすることにより、本質的にSadtleretal1996に記載の通り形成した。100香2mMの濃度で水相中に溶解した一連の小型蛍光分子を含有するエマルジョンを作成した。カルセイン、テキサスレッド、フルオレセイン、クマリン102、7-ヒドロキシクマリン-3-カルボン酸および7-ジエチルアミノ-4-メチルクマリンクマリン1を含むこれらの分子は、分子量203~625DaおよびSRCのLogKowKowWinプログラムを用いて計算した場合に0.49~4.09の範囲のLogP値を有していた。異なる色の蛍光色素を含むエマルジョンを振とう攪拌により混合した。混合されたエマルジョンのエピ蛍光顕微鏡観察によればコンパートメント化が観察された。混合後24時間にはコンパートメント間の交換は観察されなかった図3参照。上記した本明細書において言及した全ての出版物および該出版物中に引用されている参考文献は参照により本明細書に組み込まれる。本発明の記載した方法および系の種々の変更および変形は本発明の範囲および精神を逸脱することなく当業者には明らかとなる。本発明は特定の好ましい実施形態との関連において説明してきたが、請求項に記載した本発明はそのような特定の実施形態に限定されない。実際、分子生物学または関連の分野の当業者には自明である本発明の実施のための記載した様式の種々の変更は添付する請求項の範囲内であることを意図するものである。"