"コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aとして特徴付けられる3-6-1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボキサミド-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸コンパウンド1の固体形態。コンパウンド1溶媒和物形態Aが、空であるか、または少なくとも一部が溶媒で占められている、複数の反復空洞を含有するコンパウンド1の結晶格子として特徴付けられる、請求項1記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。コンパウンド1溶媒和物形態Aが、複数の空洞が空である複数の反復空隙を含有するコンパウンド1の結晶格子として特徴付けられる、請求項1記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。CuKアルファ線を用いて得られるX-線粉末回折にて、215ないし219°、88ないし92°および108ないし112°での一または複数のピークで特徴付けられる、請求項1、2または3に記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。CuKアルファ線を用いて得られるX-線粉末回折にて、215ないし219°、88ないし92°、108ないし112°、180ないし184°および229ないし233°での一または複数のピークで特徴付けられる、請求項1、2または3に記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。2170、898、1104、1816および2306°での一または複数のピークで特徴付けられる、請求項1、2または3に記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。215ないし219°でのピークで特徴付けられる、請求項1、2または3に記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。2170でのピークで特徴付けられる、請求項1、2または3に記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。88ないし92でのピークで特徴付けられる、請求項1、2または3に記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。898°でのピークでさらに特徴付けられる、請求項6ないし9のいずれか一項に記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。108ないし112°でのピークでさらに特徴付けられる、請求項6ないし10のいずれか一項に記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。1104°でのピークでさらに特徴付けられる、請求項6ないし11のいずれか一項に記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。180ないし184°でのピークでさらに特徴付けられる、請求項6ないし12のいずれか一項に記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。1816°でのピークでさらに特徴付けられる、請求項6ないし13のいずれか一項に記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。229ないし233°でのピークでさらに特徴付けられる、請求項6ないし14のいずれか一項に記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。2306°でのピークでさらに特徴付けられる、請求項6ないし15のいずれか一項に記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。図1に回折パターンと実質的に同じパターンにより特徴付けられる、請求項2記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。溶媒和物が複数の反復空洞に適合するのに十分な大きさの有機溶媒和物からなる群より選択される、請求項2記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。溶媒和物がメタノール、エタノール、アセトン、イソプロパノール、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、酢酸メチル、2-ブタノン、ギ酸エチル、酢酸エチルおよび2-メチルテトラヒドロフランからなる群より選択される、請求項18記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。コンパウンド1溶媒和物形態AがTGAで測定された場合に1ないし10重量の溶媒和物を含む、請求項18記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。コンパウンド1溶媒和物形態AがTGAで測定された場合に2ないし5重量の溶媒和物を含む、請求項20記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。融点が185°Cから190°Cまでである、請求項2記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。P21/n空間群および次の単位セルの寸法:a=16523510Åα=90°b=1274258Åβ=1037364°c=20551213Åγ=90°を有する、請求項2記載のコンパウンド1溶媒和物形態A。CuKアルファ線を用いて得られるX-線粉末回折にて、88ないし92°、173ないし177°および182ないし186°での1または複数のピークにより特徴付けられる、請求項1記載のコンパウンド1HCl塩形態A。CuKアルファ線を用いて得られるX-線粉末回折にて、88ないし92°、173ないし177°、182ないし186°、101ないし105°および158ないし162°での1または複数のピークにより特徴付けられる、請求項1記載のコンパウンド1HCl塩形態A。896、1751および1845°での1または複数のピークにより特徴付けられる、請求項1記載のコンパウンド1HCl塩形態A。896、1751、1845、1033および1601°での1または複数のピークにより特徴付けられる、請求項1記載のコンパウンド1HCl塩形態A。88ないし92°でのピークにより特徴付けられる、請求項1記載のコンパウンド1HCl塩形態A。896°でのピークにより特徴付けられる、請求項1記載のコンパウンド1HCl塩形態A。182ないし186°でのピークによりさらに特徴付けられる、請求項28または29に記載のコンパウンド1HCl塩形態A。1845°でのピークによりさらに特徴付けられる、請求項28ないし30のいずれか一項に記載のコンパウンド1HCl塩形態A。101ないし105°でのピークによりさらに特徴付けられる、請求項28ないし31のいずれか一項に記載のコンパウンド1HCl塩形態A。103°でのピークによりさらに特徴付けられる、請求項28ないし32のいずれか一項に記載のコンパウンド1HCl塩形態A。158ないし162°でのピークによりさらに特徴付けられる、請求項28ないし33のいずれか一項に記載のコンパウンド1HCl塩形態A。1601°でのピークによりさらに特徴付けられる、請求項28ないし34のいずれか一項に記載のコンパウンド1HCl塩形態A。図21の回折パターンと実質的に同じパターンにより特徴付けられる請求項1記載のコンパウンド1HCl塩形態A。図19に記載の二量体として特徴付けられる請求項1記載のコンパウンド1HCl塩形態A。図20に記載のパッキング図により特徴付けられる請求項1記載のコンパウンド1HCl塩形態A。P-1空間群を有し、次の単位セルの寸法:a=1027022Å、b=1087822Å、c=1248213Å、α=67027010°、β=66181010°およびγ=72476010°を有する、請求項1記載のコンパウンド1HCl塩形態A。コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aが01μないし50μの粒径を有する、請求項1記載のコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態A。コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aが01μないし20μの粒径を有する、請求項1記載のコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態A。コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aが01μないし10μの粒径を有する、請求項1記載のコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態A。コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aが01μないし5μの粒径を有する、請求項1記載のコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態A。コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aが20μの粒径D50を有する、請求項1記載のコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態A。請求項1に記載のコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aおよび医薬上許容される担体を含む、医薬組成物。付加的な治療剤をさらに含む、請求項45記載の医薬組成物。有効量の請求項1に記載のコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aを哺乳動物に投与することを含む、該哺乳動物におけるCFTR介在疾患の治療方法。CFTR介在疾患が、嚢胞性線維症、喘息、喫煙誘発性COPD、慢性気管支炎、鼻副鼻腔炎、便秘、膵炎、膵機能不全、先天的な両側の輸精管の不在により惹起される男性不妊症CBAVD、軽度の肺疾患、突発性膵炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症ABPA、肝疾患、遺伝的気腫、遺伝的ヘモクロマトーシス、凝固-線維素溶解欠乏症、プロテインC欠乏症、1型遺伝的血管性浮腫、脂質処理欠乏症、家族性高コレステロール血症、1型乳糜血症、無βリポタンパク血症、リソソーム蓄積症、I-細胞疾患/シュードハーラー、ムコ多糖症、サンドホフ/テイサックス、クリーグラーナジャーII型、多腺性内分泌障害/高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、マイレオペルオキシダーゼ欠乏症、原発性副甲状腺機能低下症、黒色腫、グリカノシスCDG1型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝的低フィブリノゲン血症、ACT欠乏症、尿崩症DI、神経骨端軟骨性DI、神経原性DI、シャルコー-マリー-ツース症候群、ペリツェウス-メルツバッハー病、神経変性疾患s、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上麻痺、ピック病、数種のグルタミン神経障害、ハンチントン病、脊髄小脳変性症I型、脊髄および延髄性筋萎縮、デンタトルバルパリドルイシャン、筋強直性ジストロフィー、海綿状脳症、遺伝的クロインフェルト-ヤコブ病プリオン蛋白の処理異常が原因、ファブリ病、ストロイスラーシャインカー症候群、COPD、ドライアイ疾患、シェーグレン病、骨粗鬆症、骨減少症、ゴルハム症候群、クロリドチャネロパシー、先天性ミオトニートムソンおよびベッカー形態、バーター症候群typeIII、デント病、ビックリ病、てんかん、リソソーム蓄積症、アンジェルマン症候群、原発性線毛運動障害PCD、線毛の構造および/または機能の遺伝的障害、逆位したPCD、逆位していないPCDまたは線毛形成不全より選択される、請求項47記載の方法。CFTR介在疾患が嚢胞性線維症、気腫、COPD、ドライアイ疾患または骨粗鬆症である、請求項48記載の方法。CFTR介在疾患が嚢胞性線維症である、、請求項48記載の方法。患者がΔF508変異の嚢胞性線維症膜貫通受容体CFTRを有する、請求項48ないし50のいずれか一項に記載の方法。患者がR117H変異の嚢胞性線維症膜貫通受容体CFTRを有する、請求項48ないし50のいずれか一項に記載の方法。患者がG551D変異の嚢胞性線維症膜貫通受容体CFTRを有する、請求項48ないし50のいずれか一項に記載の方法。付加的な治療剤を投与することを含む、請求項48ないし50のいずれか一項に記載の方法。請求項1に記載のコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aおよびその使用のための説明書を含む、キット。定義本願明細書にて用いられるように、特記しない限り、以下の定義が当てはまる。本願明細書にて使用されるようなCFTRなる語は、限定されるものではないが、ΔF508CFTRおよびG551DCFTRを含む、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子または制御因子活性能を有するその変異体を意味する例えば、httpwwwgenetsickkidsoncacftrを参照のこと、CFTR変異について、2009年5月28日にアクセスしたのが最後である。本願明細書にて用いられるように、結晶性は、構造単位が固定された幾何学模様または格子模様にて配置されており、その結果、結晶固体が厳格な長距離秩序を有する、化合物または組成物をいう。結晶構造を構成する構造単位は、原子、分子またはイオンであり得る。結晶固体は一定の融点を示す。本願明細書にて用いられるように、実質的に結晶性なる語は、その分子の位置にて主に長距離秩序を有する固体材料をいう。例えば、実質的に結晶性の材料は、85より大きな結晶化度例、約90より大きな結晶化度または約95より大きな結晶化度を有する。実質的に結晶性なる語は、100の結晶化度を有する材料を示す結晶性なる記述子も包含するということである。本願明細書にて用いられるように、制御するなる語は、例えば、活性を測定可能な量で増加または減少させることを意味する。本願明細書にて用いられるように、イソ構造の溶媒和物は、いくつかのまたはすべての空洞が同一または異なる溶媒分子で占められていてもよい複数の反復空洞を有する結晶格子の化合物をいう。DSCなる語は示差走査熱量測定を意味する。TGAなる語は、熱重量分析を意味する。コンパウンド1溶媒和物形態A一の態様において、本願発明は、コンパウンド1溶媒和物形態Aと称される、イソ構造の溶媒和物の形態である、コンパウンド1の固体形態を特徴付ける。本願明細書にて開示されるような、コンパウンド1溶媒和物形態Aは、その結晶格子の空隙が空であるか、適当な溶媒の一または複数の分子で占められているか、または部分的に占められている、コンパウンド1の結晶格子を含む。適当な溶媒は、限定されないが、メタノール、エタノール、アセトン、2-プロパノール、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、酢酸メチル、2-ブタノン、ギ酸エチルおよび2-メチルテトラヒドロフランを包含する。X-線粉末回折、融点およびDSCなどのコンパウンド1のイソ構造の溶媒和物の形態の特定の物理特性は、問題となる特定の溶媒分子により実質的に影響を受けない。一の実施態様において、コンパウンド1溶媒和物形態Aは、CuKアルファ線を用いて得られるX-線粉末回折にて、2150ないし2190°、880ないし920°および1080ないし1120°での1または複数のピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aは、CuKアルファ線を用いて得られるX-線粉末回折にて、2150ないし2190°、880ないし920°、1080ないし1120°、1800ないし1840°および2290ないし2330°での1または複数のピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aは、2170、898および1104°での1または複数のピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aは、2170、898、1104、1816および2306°での1または複数のピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aは、2150ないし2190°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、2170°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、880ないし920°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、898°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、1080ないし1120°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、1104°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、1800ないし1840°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、1816°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、2290ないし2330°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、2306°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、2040ないし2080°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、2063°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、2200ないし2240°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、2222°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、1840ないし1880°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、1857°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、1650ないし1690°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、1666°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、1970ないし2010°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aはさらに、1986°でのピークにより特徴付けられる。ある実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aは、図1の回折パターンと実質的に同様のパターンにより特徴付けられる。ある実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aは、図2の回折パターンと実質的に同様のパターンにより特徴付けられる。他の実施態様にて、化合物Iとの溶媒和物の形態Aを形成する、溶媒和物または溶媒和物の混合物は、コンパウンド1の結晶格子の間隙に適合する十分な大きさの有機溶媒からなる群より選択される。ある実施態様にて、溶媒和物は測定して約100Å3の空隙に適合するのに十分な大きさのものである。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aを形成する溶媒は、メタノール、エタノール、アセトン、2-プロパノール、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、酢酸メチル、2-ブタノン、ギ酸エチルおよび2-メチルテトラヒドロフランからなる群より選択される。回折パターンは、以下のコンパウンド1溶媒和物A形態:メタノール図3、エタノール図4、アセトン図5、2-プロパノール図6、アセトニトリル図7、テトラヒドロフラン図8、酢酸メチル図9、2-ブタノン図10、ギ酸エチル図11および2-メチルテトラヒドロフラン図12について提供される。もう一つ別の実施態様にて、本願発明は、P21/n空間群および次の単位セルの寸法:a=16523510Å、b=1274258Å、c=20551213Å、α=90°、β=1037364°、およびγ=90°を有する結晶性コンパウンド1アセトン溶媒和物形態Aを特徴付ける。もう一つ別の実施態様にて、本願発明は、DSCまたは当業者に既知の同様の分析方法により測定されるような1または複数の相転移を示すコンパウンド1溶媒和物形態Aを提供する。ある実施態様において、コンパウンド1溶媒和物形態AのDSCは図13に示されるDSCトレースと実質的に同じである。この態様のもう一つ別の実施態様にて、DSCは2相転移を示す。もう一つ別の実施態様にて、DSCは3相転移を示す。もう一つ別の実施態様にて、相転移の一は200と207°Cの間を占める。もう一つ別の実施態様にて、相転移の一は204と20°Cの間を占める。もう一つ別の実施態様にて、相転移の一は183と190°Cの間を占める。もう一つ別の実施態様にて、相転移の一は185と187°Cの間を占める。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aの融点は183°Cないし190°Cである。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aの融点は185°Cないし187°Cである。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aは、TGAでの測定により、1ないし10重量wtの溶媒和物を含む。ある実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態AのTGAは図14に示されるTGAトレースと実質的に同じである。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aは、TGAまたは当業者に既知の同様の分析方法によって測定されるように、2ないし5重量の溶媒和物を含む。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1アセトン溶媒和物形態Aの立体配座は、X-線解析を基礎とする、図15の記載の構造と実質的に同じである。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1アセトン溶媒和物形態Aは、P21/n空間群および以下の単位セルの寸法を有する:a=16523510Åα=90°b=1274258Åβ=1037364°c=20551213Åγ=90°コンパウンド1塩酸塩形態Aもう一つ別の態様にて、本願発明は、結晶性塩酸塩である、もう一つ別のコンパウンド1の固体形態を提供する。この固体形態はコンパウンド1HCl塩形態Aと称される。一の態様において、コンパウンド1HCl塩形態Aは、CuKアルファ線を用いて得られるX-線粉末回折にて、880ないし920°、1730ないし1770°および1820ないし1860°での一または複数のピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aは、CuKアルファ線を用いて得られるX-線粉末回折にて、880ないし920°、1730ないし1770°、1820ないし1860°、1010ないし1050および1580ないし1620°での一または複数のピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aは、896、1751および1845°での一または複数のピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aは、896、1751、1845、1033および1601°での一または複数のピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aは、880ないし920°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aは、896°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、1730ないし1770°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aは1751°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、1820ないし1860°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、1845°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、1010ないし1050°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、1033°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、1580ないし1620°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、1601°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、1170ないし1210°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、1194°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、790ないし830°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、814°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、990ないし1030°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、1010°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、1640ないし1680°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、1655°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、930ないし970°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、954°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、1640ないし1680°でのピークにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1HCl塩形態Aはさらに、1655°でのピークにより特徴付けられる。ある実施態様において、コンパウンド1HCl塩形態Aは、図19に示されるように、二量体として特徴付けられる。ある実施態様において、コンパウンド1HCl塩形態Aは図20に示されるパッキング図により特徴付けられる。ある実施態様、コンパウンド1HCl塩形態Aは図21の回折パターンと実質的に同様のパターンにより特徴付けられる。もう一つ別の実施態様にて、本願発明は、P-1空間群および次の単位セルの寸法:a=1027022Å、b=1087822Å、c=1248213Å、α=67027010°、β=66181010°、およびγ=72476010°を有する結晶性コンパウンド1塩酸塩形態Aを特徴付ける。もう一つ別の実施態様にて、本願発明はコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aおよびそのための使用説明書を含むキットを特徴付ける。化合物溶媒和物形態Aおよびコンパウンド1HCl塩形態Aの合成化合物溶媒和物形態Aおよびコンパウンド1HCl塩形態Aとして上記に指定および記載される本願発明の固体形態は、コンパウンド1を含む前駆体から、およびコンパウンド1の他の固体形態から調製され得る。このセクションはコンパウンド1およびコンパウンド1の他の固体形態の合成、ならびにこれら他の固体形態のコンパウンド1、コンパウンド1溶媒和物形態Aおよびコンパウンド1HCl塩形態Aと称される本願発明の固体形態への変換を記載する。スキーム1コンパウンド1の調製に使用される酸塩化物の合成スキーム1は、コンパウンド1を製造するのに使用されるスキーム4を参照のこと、1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボニルクロリドの調製を記載する。出発物質の22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-カルボン酸は、SaltigoLanxessCorporationの関連会社より市販されている。22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-カルボン酸にあるカルボン酸の部分の還元は第一アルコールをもたらし、それは塩化チオニルを用いて対応する第一アルキルクロリドである5-クロロメチル-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソールに変換される。該アルキルクロリドは、その後で、シアン化ナトリウムを用いて置換することで、ニトリルである2-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルアセトニトリルに変換される。該ニトリルを1-ブロモ-2-クロロエタンで塩基の存在下で処理し、1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボニトリルを得る。該ニトリルを1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボン酸に塩基性条件下で変換し、つづいて塩化チオニルで処理し、必要とする酸クロリドを得る。スキーム2必要とする酸クロリドの別の合成法スキーム2は必要な酸クロリドの別の合成法を提供する。化合物の5-ブロモメチル-22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソールをシアノ酢酸エチルとパラジウム触媒の存在下でカップリングさせ、対応するアルファシアノエチルエステルを形成させる。該エステル部分をカルボン酸に鹸化し、シアノエチル化合物を得る。シアノエチル化合物を1-ブロモ-2-クロロエタンを用いて塩基の存在下でアルキル化に付し、シアノシクロプロピル化合物を得る。該シアノシクロプロピル化合物を塩基で処理し、カルボン酸塩を得、それを酸で処理することによりカルボン酸に変換する。次に、カルボン酸の酸クロリドへの変換は塩化チオニルなどの塩素化剤を用いて達成される。スキーム3コンパウンド1を調製するのに使用されるアミンの合成スキーム3は3-6-アミノ-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸tert-ブチルの調製を記載し、それをスキーム4にあるように1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボニルクロリドスキーム1および2を参照のこととカップリングさせ、コンパウンド1を酸付加塩として得る。パラジウム触媒の2-ブロモ-3-メチルピリジンと3-tert-ブトキシカルボニルフェニルボロン酸とのカップリングにより、3-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸tert-ブチルを得、それをその後で一連の工程を介して所望の化合物に変換する。スキーム4コンパウンド1の酸付加塩の形成コンパウンド1はスキーム4に示されるように酸付加塩として調製される。スキーム1または2の酸クロリドと、スキーム3のアミンとの、トリエチルアミンおよび触媒としての4-ジメチルアミノピリジンカップリング等を用いるカップリングは、最初に、コンパウンド1のtert-ブチルエステル前駆体としての、tert-ブチルエステルである、3-6-1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボキサミド-3-メチルピリジン-2-イル-t-ブチルベンゾエートを提供する。tert-ブチルエステルと、HClなどの酸との処理でコンパウンド1の塩酸塩が得られる。コンパウンド1の塩酸塩は、典型的には、結晶固体であり、本願発明の固体形態、コンパウンド1溶媒和物形態Aおよびコンパウンド1HCl塩形態Aを含む、コンパウンド1の他の固体形態を調製するのに使用され得る。コンパウンド1溶媒和物形態Aの、コンパウンド1の塩酸塩からの調製コンパウンド1溶媒和物形態Aは、コンパウンド1の塩酸塩などの塩形態を、適当な溶媒に、効果的な時間、分散または溶解させ、つづいて結晶のコンパウンド1溶媒和物形態Aを濾過により単離することで調製され得る。コンパウンド1HCl塩形態Aのコンパウンド1の塩酸塩からの調製コンパウンド1HCl塩形態Aは、コンパウンド1の塩酸塩を最小量の溶媒に溶かし、溶媒をゆっくりとした蒸発で除去することにより、コンパウンド1の塩酸塩より調製され得る。実施態様において、該溶媒はアルコールである。もう一つ別の実施態様にて、溶媒はエタノールである。ゆっくりとした蒸発は溶媒の蒸発を妨げることで実施される。例えば、一の実施態様にて、ゆっくりとした蒸発は、コンパウンド1の塩酸塩をバイアルに溶かし、該バイアルを一の孔が開けられたパラフィルムで覆うことを含む。コンパウンド1溶媒和物形態Aのコンパウンド1形態Iからの調製コンパウンド1形態1上記されている、および2008年12月4日付け出願の米国特許出願12327902に開示されているが、本願発明の固体形態、特にコンパウンド1溶媒和物形態Aの調製に使用され得る、コンパウンド1のもう一つ別の固体形態である。コンパウンド1形態1は、コンパウンド1の塩酸塩を適当な溶媒に効果的な時間分散または溶解させることで、該塩酸塩より調製され得る。適当な溶媒は、コンパウンド1の塩酸塩の形態が水にほんのわずかに溶解するだけであっても、水または50メタノール/水の混合液などのアルコール/水の混合液であってもよい。あるいはまた、適当な溶媒は水である。コンパウンド1の他の酸付加塩はまた、他の無機または有機酸より誘導される塩などの、コンパウンド1形態1を調製するのに用いられてもよい。他の塩はまた、コンパウンド1のtertブチルエステルの前駆体を酸介在の加水分解に付すことで得られるスキーム4を参照のこと。他の酸より誘導される塩は、例えば、硝酸、硫酸、リン酸、ホウ酸、酢酸、安息香酸およびマロン酸を包含してもよい。これらのコンパウンド1の塩の形態は、使用される溶媒に応じて、可溶性であってもなくてもよいが、溶解性の欠如はコンパウンド1形態Iの形成を妨げない。コンパウンド1形態Iをコンパウンド1の塩から形成するのに効果的な時間は、2時間と24時間の間、またはそれ以上とすることができる。必要な時間は温度と反比例すると認識される。すなわち、温度が高いほど、酸の溶解に影響し、コンパウンド1形態Iを形成するのに必要な時間は短くなる。溶媒が水の場合、その分散液を室温で約24時間攪拌すると、形態Iが約98の收率で得られる。方法の目的のために、コンパウンド1の塩の溶液が望ましい場合、高温を用いてもよい。溶液を高温で効果的な時間攪拌した後、冷却して再結晶させ、実質的に純粋なコンパウンド1形態Iを得る。実質的に純粋なとは、約90以上または約95以上または約98以上または約99以上の純度をいう。選択される温度は、部分的には、使用される溶媒に依存し、十分に当業者が決定しうる範囲内にあり、典型的には室温と約80°Cの間にある。あるいはまた、コンパウンド1形態Iは、コンパウンド1のtertブチルエステル前駆体を、例えばギ酸などの適当な酸と適当な反応条件下で反応させ、コンパウンド1形態Iを得ることにより直接形成され得るスキーム4を参照のこと。例えば、tert-ブチルエステルをギ酸などの適当な酸と、60ないし80°Cで7ないし9時間反応させ、外界温度に冷却し、該反応混合物を水に添加し、再び60ないし80°Cにて効果的な時間加熱する。ついで、コンパウンド1形態1を濾過で単離する。コンパウンド1形態Iは有機溶媒で再結晶されることでさらに精製されてもよい。有機溶媒の例は、限定されるものではないが、トルエン、クメン、アニソール、1-ブタノール、酢酸イソプロピル、酢酸ブチル、酢酸イソブチル、メチルt-ブチルエーテル、メチルイソブチルケトンおよび1-プロパノール-水の混合液を包含する。温度は上記したとおりであってもよい。例えば、コンパウンド1形態Iは、完全に溶解するまで、75°Cで1-ブタノールに溶解される。該溶液を02°Cの速度で10°Cに冷却し、コンパウンド1形態Iの結晶を得、それは濾過により単離されてもよい。上記されるように、コンパウンド1形態1を用いてコンパウンド1溶媒和物形態Aが調製され得る。そこで、適当な溶媒中、十分な濃度で十分な時間にて一定量のコンパウンド1形態Iをスラリーにする。ついで、該スラリーを遠心分離で、または真空下で濾過し、外界条件で十分な時間乾燥させ、コンパウンド1溶媒和物形態Aを得る。ある実施態様にて、約20ないし40mgのコンパウンド1形態Iを約400ないし600μLの適当な溶媒にてスラリーにする。もう一つ別の実施態様にて、約25ないし35mgのコンパウンド1形態Iを約450ないし550μLの適当な溶媒にてスラリーにする。もう一つ別の実施態様にて、約30mgのコンパウンド1形態Iを約500μLの適当な溶媒にてスラリーにする。ある実施態様にて、コンパウンド1形態Iが溶媒でスラリーとなる時間は1時間と4日間の間である。より具体的には、コンパウンド1形態Iが溶媒でスラリーとなる時間は1日と3日の間である。より具体的には、該時間は2日間である。ある実施態様にて、適当な溶媒は、コンパウンド1の結晶格子の空隙に適合するのに十分な大きさの有機溶媒より選択される。他の実施態様において、該溶媒和物は約100Å3の空隙に適合するのに十分な大きさである。他の実施態様にて、該溶媒はメタノール、エタノール、アセトン、2-プロパノール、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、酢酸メチル、2-ブタノン、ギ酸エチルおよび2-メチルテトラヒドロフランからなる群より選択される。他の実施態様にて、これらの溶媒の2またはそれ以上の混合液を用いてコンパウンド1溶媒和物形態Aを得てもよい。あるいはまた、コンパウンド1溶媒和物形態Aは、これらの化合物の1または複数と水とを含む混合液より得てもよい。ある実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aを乾燥するための効果的な時間は1ないし24時間である。より具体的には、該時間は6ないし18時間である。より詳細には、該時間は約12時間である。使用、組成物およい投与医薬上許容される組成物本願発明のもう一つ別の態様において、医薬上許容される組成物が提供され、ここでこれらの組成物は、本願明細書に記載される、コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aを含み、所望により医薬上許容される担体、アジュバントまたはビヒクルを含んでもよい。ある実施態様において、これらの組成物は所望によりさらに一または複数の付加的な治療剤を含んでもよい。上記されるように、本願発明の医薬上許容される組成物は、付加的に、医薬上許容される担体、アジュバントまたはビヒクルを含み、それは、本願明細書にて使用されるように、いずれか、すべての溶媒、希釈剤または他の液体ビヒクル、分散または懸濁助剤、界面活性剤、等張剤、増粘剤または乳化剤、保存剤、固体結合剤、滑沢剤等を、所望の個々の剤形に適するように含む。RemingtonsPharmaceuticalSciences、SixteenthEdition、EWMartinMackPublishingCo、Easton、Pa、1980は、医薬上許容される組成物を処方するのに使用される種々の担体を、およびその既知の調製方法を開示する。通常の担体が、望ましくない生物学的作用を生成するか、さもなければ医薬上許容される組成物の他の成分と有害な方法にて相互作用するなどの、本願発明の化合物と適合しない範囲を除いて、その使用は本願発明の範囲内にあると考えられる。医薬上許容される担体として供することのできる材料の例として、限定されるものではないが、以下の物:イオン交換体;アルミナ;ステアリン酸アルミニウム;レシチン;ヒト血清アルブミンなどの血清蛋白;ホスフェート、グリシン、ソルビン酸またはソルビン酸カリウムなどの緩衝物質;植物性飽和脂肪酸の部分グリセリド混合物;水;塩または電解質、例えば硫酸プロタミン、リン酸水素ジナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカまたは三ケイ酸マグネシウム;ポリビニルピロリドン;ポリアクリレート;ワックス;ポリエチレン-ポリオキシプロピレン-ブロックポリマー;羊毛脂;ラクトース、グルコースまたはシュークロースなどの糖類;コーン澱粉およびイモ澱粉などの澱粉;ナトリウムカルボキシメチルセルロース、エチルセルロースおよび酢酸セルロースなどのセルロースおよびその誘導体;粉末化トラガカント;モルト;ゼラチン;タルク;カカオ脂および坐剤用ワックスなどの賦形剤;落花生油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油または大豆油などの油類;プロピレングリコールまたはポリエチレングリコールなどのグリコール;オレイン酸エチルおよびラウリル酸エチルなどのエステル;寒天;水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤;アルギン酸;発熱物質不含水;セイライン等張液;リンゲル溶液;エチルアルコール;およびリン酸緩衝溶液、ならびに他の非毒性の適合性滑沢剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム、ならびに着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、矯味矯臭剤および香料、保存剤および酸化防止剤が挙げられるが、それらはまた当業者の判断に従って組成物中に配合され得る。方法および処理さらにもう一つ別の態様にて、本願発明は、CFTRにより関連付けられる病状、疾患または障害の治療方法を提供する。ある実施態様において、本願発明は、CFTR活性の欠乏により関連付けられる病状、疾患または障害を治療する方法であって、本願明細書に記載される、コンパウンド1溶媒和物形態Aおよびコンパウンド1HCl塩形態Aより選択されるコンパウンド1の固体形態を含む組成物を、それを必要とする対象に、好ましくは哺乳動物に投与することを含む、方法を提供する。本願明細書にて用いられるように、CFTR介在疾患は、嚢胞性線維症、喘息、喫煙誘発性COPD、慢性気管支炎、鼻副鼻腔炎、便秘、膵炎、膵機能不全、先天的な両側の輸精管の不在により惹起される男性不妊症CBAVD、軽度の肺疾患、突発性膵炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症ABPA、肝疾患、遺伝的気腫、遺伝的ヘモクロマトーシス、凝固-線維素溶解欠乏症、プロテインC欠乏症、1型遺伝性血管性浮腫、脂質処理欠乏症、家族性高コレステロール血症、1型乳糜血症、無βリポタンパク血症、リソソーム蓄積症、I-細胞疾患/シュードハーラー、ムコ多糖症、サンドホフ/テイサックス、クリーグラーナジャーII型、多腺性内分泌障害高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、マイレオペルオキシダーゼ欠乏症、原発性副甲状腺機能低下症、黒色腫、グリカノシスCDGI型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝的低フィブリノゲン血症、ACT欠乏症、尿崩症DI、神経骨端軟骨性neurophysealDI、神経原性DI、シャルコー-マリー-ツース症候群、ペリツェウス-メルツバッハー病、神経変性疾患、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上麻痺、ピック病、数種のポリグルタミン神経障害、ハンチントン病、脊髄小脳変性症I型、脊髄および延髄性筋萎縮、デンタトルバルパリドルイシャンdentatorubalpallidoluysian、筋強直性ジストロフィー、海綿状脳症、遺伝的クロインフェルト-ヤコブ病プリオン蛋白の処理異常が原因、ファブリ病、ストロイスラーシャインカー症候群、COPD、ドライアイ疾患、シェーグレン病、骨粗鬆症、骨減少症、ゴルハムGorham症候群、クロリドチャネロパシーchloridechannelopathy、先天性ミオトニートムソンおよびベッカー形態、バーター症候群III型、デント病、ビックリ病、てんかん、ビックリ病、リソソーム蓄積症、アンジェルマン症候群、原発性線毛運動障害PCD、線毛の構造および/または機能の遺伝的障害、逆位したPCDカールタジュナー症候群としても知られる、逆位していないPCDまたは線毛形成不全より選択される疾患である。ある実施態様にて、本願発明は、ヒトにおけるCFTR介在疾患の治療方法であって、該ヒトに有効量の本願明細書に記載のコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aを含む組成物を投与することを含む方法を提供する。別の好ましい実施態様によれば、本願発明は、ヒトにおける嚢胞性線維症の治療方法であって、該ヒトに有効量の本願明細書に記載のコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aを含む組成物を投与することを含む方法を提供する。もう一つ別の実施態様にて、該ヒトは、ΔF508変異の嚢胞性線維性膜貫通受容体CFTRを有する。もう一つ別の実施態様にて、該ヒトは、R117H変異の嚢胞性線維性膜貫通受容体CFTRを有する。もう一つ別の実施態様にて、該ヒトは、G551D変異の嚢胞性線維性膜貫通受容体CFTRを有する。本願発明によれば、コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはその医薬上許容される組成物の有効量は、上記される疾患を治療するのに、あるいはその重度を和らげるのに効果的な量である。コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aあるいはその医薬上許容される組成物は、上記される一または複数の疾患を治療するのに、あるいはその重度を和らげるのに効果的な量および投与経路を用いて投与されてもよい。ある実施態様にて、本願明細書にて記載される、コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aあるいはその医薬上許容される組成物は、呼吸器の頂端膜にて、および呼吸器以外の上皮にて残りのCFTR活性を示す患者で嚢胞性線維症を治療するか、あるいはその重度を和らげるのに有用である。上皮表面での残りのCFTR活性の存在は、当該分野にて公知の方法、例、標準的電気生理学的、生化学的または組織化学的方法を用いて容易に検出され得る。かかる方法は、インビボまたはエクスビボにて電気生理学的方法を用いてCFTR活性を同定し、汗または唾液中のCl-濃度を測定し、あるいはエクスビボにて生化学的または組織化学的方法を用いて細胞表面密度をモニター観察する。かかる方法の使用で、残りのCFTR活性が、最も一般的な変異、ΔF508についてホモ接合の、またはヘテロ接合の患者を含め、種々の異なる変異についてホモ接合の、またはヘテロ接合の患者にて容易に検出され得る。一の態様において、本願明細書にて記載される、コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aあるいはその医薬上許容される組成物は、残りのCFTR活性を示す特定の遺伝子型、例えば、クラスIII変異制御または開閉の損傷、クラスIV変異伝導度の改変またはクラスV変異合成の減少の範囲内にある患者において、嚢胞性線維症を治療するか、またはその重度を和らげるのに有用であるLeeRChoo-Kang、PamelaL、Zeitlin、TypeI、II、III、IVandVcysticfibrosisTransmembraneConductanceRegulatorDefectsandOpportunitiesofTherapy;CurrentOpinioninPulmonaryMedicine65215292000。残りのCFTR活性を示す他の患者の遺伝子型は、これらのクラスの一つとホモ接合の患者の遺伝子型または他のクラスの変異クラスI変異、クラスII変異または分類されていない変異とヘテロ接合した遺伝子型を包含する。一の態様において、本願明細書にて記載されるような、コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aあるいはその医薬上許容される組成物は、特定の臨床表現型、例えば、上皮の頂端膜での残りのCFTR活性の量と典型的には相互に関連する中程度ないし軽度の臨床表現型の範囲内にある患者にて嚢胞性線維症を治療するか、あるいはその重度を和らげるのに有用である。かかる表現型は膵機能不全を示す患者または突発性膵炎で先天性両側輸精管欠損症と、または軽度の肺疾患と診断された患者を包含する。必要とする正確な量は、対象の種、年齢および一般的状態、感染の重篤度、個々の薬剤、その投与方法等に応じて、対象で変化するであろう。本願発明の化合物は、好ましくは、投与を容易にし、投与量を均一にするために単位剤形に処方される。本願明細書にて使用されるような単位剤形なる語は、処置される患者に適する薬剤の物理的に別個の単位をいう。しかしながら、本願発明の化合物および組成物の一日の総使用量は正当な医学的判断の範囲内にあり、顧問医によって決定されるであろう。個々の患者または生物に対して特異的な有効用量レベルは、治療される障害および該障害の重篤度;利用される特定の化合物の活性;利用される特定の組成物;患者の年齢、体重、総体的な健康、性別および食事;投与期間、投与経路および利用される特定の化合物の排泄速度;処置の持続期間;利用される特定の化合物と組み合わせてまたは同時に使用される薬物を含む、種々の因子、ならびに医学の分野にて周知の同様の因子に依存するであろう。本願明細書にて使用されるような患者または対象なる語は、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを意味する。本願発明の医薬上許容される組成物は、ヒトおよび他の哺乳動物に、治療されるべき感染の重度に応じて、経口、経直腸、非経口、嚢内、膣内、腹腔内、局所粉末、軟膏またはドロップによるなど、バッカル、口腔または経鼻スプレー等により投与され得る。ある実施態様にて、本願発明の化合物は、経口または非経口的に、一日当たり患者の体重1kgに付き約001mgないし約50mg、好ましくは約1mgから約25mgで、一日に1または複数回投与され、所望の治療効果を得る。ある実施態様において、投与単位におけるコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aの投与量は100mgないし1000mgである。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aの投与量は200mgないし900mgである。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aの投与量は300mgないし800mgである。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aの投与量は400mgないし700mgである。もう一つ別の実施態様にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aの投与量は500mgないし600mgである。もう一つ別の実施態様にて、本願発明は、コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aを、01ミクロンと50ミクロンの間の有意な粒径フラクションを有する粒子を生成するのに適する空気圧を用いて、適当な一般的ミル化装置でのジェットミル化に供することを含む。もう一つ別の実施態様にて、粒径は01ミクロンと20ミクロンの間にある。もう一つ別の実施態様にて、該粒径は01ミクロンと10ミクロンの間にある。もう一つ別の実施態様にて、該粒径は10ミクロンと5ミクロンの間にある。さらにもう一つ別の実施態様において、コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aは20ミクロンの粒径D50を有する。注射可能な製剤、例えば、滅菌性注射水性または油性懸濁液は、適当な分散または湿潤剤および沈殿防止剤を用い、既知の方法に従って、処方されてもよい。滅菌性注射製剤はまた、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の滅菌性注射溶液、懸濁液またはエマルジョン、例えば、13-ブタンジオール中溶液であってもよい。なかでも、利用できる許容されるビヒクルおよび溶媒は水、リンガー溶液、USPおよび等張塩化ナトリウム溶液である。加えて、滅菌した固定油は溶媒または懸濁過媒体として利用するのに都合がよい。この目的には、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含め、無菌性の固定油が利用され得る。加えて、オレイン酸などの脂肪酸が注射製剤の調製に用いられる。該注射製剤は、例えば細菌保持フィルターを通して濾過することで、または使用前に滅菌水または他の滅菌注射用媒体に溶解または分散しうる、滅菌固体組成物の形態の滅菌化剤を配合することにより滅菌処理され得る。直腸または膣投与用の組成物は、好ましくは、コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1塩酸塩形態Aを、室温で固体であるが、体温で液体である、カカオ脂、ポリエチレングリコール、または坐剤用ワックスなどの適当な非刺激性賦形剤または担体と混合することで調製され得、それによって直腸または膣腔にて融解し、活性化合物を放出する、坐剤である。経口投与用固体剤形は、カプセル、錠剤、ピル、散剤および顆粒を包含する。かかる固体剤形にて、コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1塩酸塩形態Aを、少なくとも1種の不活性な医薬上許容される賦形剤または担体、例えばクエン酸ナトリウムまたはリン酸ジカルシウムと、および/またはa澱粉、ラクトース、シュークロース、グルコース、マンニトールおよびケイ酸などの増量剤、b例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、シュークロースおよびアカシアなどの結合剤、cグリセロールなどの保湿剤、d寒天、炭酸カルシウム、イモまたはタピオカ澱粉、アルギン酸、あるケイ酸塩および炭酸ナトリウム、eパラフィンなどの溶液遅延剤、f第4アンモニウム化合物などの吸収促進剤、g例えば、セチルアルコールおよびグリセロールモノステアレートなどの湿潤剤、hカオリンおよびベントナイトクレイなどの吸収剤、およびiタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムなどの滑剤およびその混合物と混合する。カプセル、錠剤およびピルの場合には、剤形はまた、緩衝剤を含んでもよい。同種の固体組成物はまた、かかる賦形剤をラクトースまたは乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコール等として用い、ソフトおよびハード充填ゼラチンカプセルにて充填剤として利用されてもよい。錠剤、糖衣錠、カプセル、ピルおよび顆粒の固体剤形は、腸溶性コーティングおよび製薬の分野にて周知の他のコーティングなどのコーティングおよびシェルで調製され得る。該剤形は、所望により、乳白剤を含有してもよく、活性成分だけを、または優先的に、消化管のある部分にて、所望により遅延放出の様式にて放出する組成物とすることもできる。使用することのできる包埋組成物の例はポリマー物質およびワックスを包含する。同種の固体組成物はまた、かかる賦形剤をラクトースまたは乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコール等として用い、ソフトおよびハード充填ゼラチンカプセルにて充填剤として利用されてもよい。活性化合物はまた、上記した1または複数の賦形剤とのマイクロカプセル化形態でもあり得る。錠剤、糖衣錠、カプセル、ピルおよび顆粒の固体剤形は、腸溶性コーティング、放出制御コーティングおよび製薬の分野にて周知の他のコーティングなどのコーティングおよびシェルで調製され得る。かかる固体剤形にて、活性化合物は、シュークロース、ラクトースまたは澱粉などの少なくとも1種の不活性な希釈剤と混合されてもよい。かかる剤形はまた、通常の慣行にあるように、不活性な希釈剤以外の付加的な物質、例えば、錠剤化滑剤およびステアリン酸マグネシウムおよび微結晶セルロースなどの他の錠剤化助剤を含んでもよい。カプセル、錠剤およびピルの場合には、該剤形はまた、緩衝化剤を含んでもよい。該剤形は、所望により、乳白剤を含有してもよく、活性成分だけを、または優先的に、消化管のある部分にて、所望により遅延放出の様式にて放出する組成物とすることもできる。使用することのできる包埋組成物の例はポリマー物質およびワックスを包含する。本願明細書に記載されるようなコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aあるいはその医薬上許容される組成物は併用療法にて利用され得、すなわち、コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aは、1または複数の他の望ましい治療剤または医療と同時に、該治療剤等に先立って、または該治療剤等の後で投与され得る。併用療法にて利用するための療法治療剤または医療の特定の組み合わせは、所望の治療剤および/または医療の適合性および達成されるべき望ましい治療剤作用を考慮するであろう。利用される治療剤は同じ障害について望ましい作用を達成し例えば、本願発明の化合物を同じ障害を治療するのに使用されるもう一つ別の薬剤と同時に投与されてもよい、あるいは異なる作用例えば、副作用の制御を達成するとも考えられる。本願明細書にて用いられるように、特定の疾患または病状を治療または防止するのに通常投与される付加的な治療剤は、治療される疾患または病態に適するものとして公知である。一の実施態様において、付加的な薬剤は、粘液溶解剤、気管支拡張剤、抗生剤、抗感染剤、抗炎症剤、本願発明の化合物以外のCFTR調節剤または滋養剤より選択される。一の実施態様において、付加的な薬剤はR-1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イル-N-1-23-ジヒドロキシプロピル-6-フルオロ-2-1-ヒドロキシ-2-メチルプロパン-2-イル-1H-インドール-5-イルシクロプロパンカルボキサミドである。もう一つ別の実施態様にて、付加的な薬剤はN-5-ヒドロキシ-24-ジ-tert-ブチル-フェニル-4-オキソ-1H-キノリン-3-カルボキサミドである。もう一つ別の実施態様にて、付加的な薬剤は表1より選択される:表1もう一つ別の実施態様にて、付加的な薬剤は上記した薬剤のいずれかの組み合わせである。例えば、該組成物は、コンパウンド1、R-1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イル-N-1-23-ジヒドロキシプロピル-6-フルオロ-2-1-ヒドロキシ-2-メチルプロパン-2-イル-1H-インドール-5-イルシクロプロパンカルボキサミドおよびN-5-ヒドロキシ-24-ジ-tert-ブチル-フェニル-4-オキソ-1H-キノリン-3-カルボキサミドを含む。もう一つ別の例として、該組成物はコンパウンド1、N-5-ヒドロキシ-24-ジ-tert-ブチル-フェニル-4-オキソ-1H-キノリン-3-カルボキサミドおよび表1からの一の化合物、すなわち表1の化合物1ないし14またはそれらの組み合わせを含んでもよい。一の実施態様において、付加的な治療剤は抗生剤である。本願発明にて有用な代表的な抗生剤は、トブラマイシン吸入粉末TIPを含むトブラマイシン、アジスロマイシン、アズトレオナンの噴霧化形態を含むアズトレオナン、アミカシンそのリポソーム製剤を含む、シプロフロキサシン吸入による投与に適するその製剤を含む、レボフラキサシンその噴霧化製剤を含むおよび2種の抗生剤の組み合わせ、例、ホスホマイシンとトブラマイシンの組み合わせを包含する。もう一つ別の実施態様にて、付加的な薬剤は粘液溶解物質である。本願発明にて有用な代表的な粘液溶解物質はプルモザイム登録商標を包含する。もう一つ別の実施態様にて、付加的な薬剤は気管支拡張剤である。代表的な気管支拡張剤は、アルベテロール、硫酸メタプロテネロール、酢酸ピルブテロール、サルメテロールまたは硫酸テトラブリンを包含する。もう一つ別の実施態様にて、付加的な薬剤は肺気道表面を液状に戻すのに効果的である。かかる薬剤は、細胞の内外にある塩の動きを改善し、粘液を肺気道にてさらに水和されるようにし、したがってより容易に清掃される。代表的なかかる薬剤は、高張セイライン、デヌホソールdenufosolテトラナトリウム[[3S、5R-5-4-アミノ-2-オキソピリミジン-1-イル-3-ヒドロキシオキソラン-2-イル]メトキシ-ヒドロキシホスホリル][[[2R3S4R5R-5-24-ジオキソピリミジン-1-イル-3、4-ジヒドロキシオキソラン-2-イル]メトキシ-ヒドロキシホスホリル]オキシ-ヒドロキシホスホリル]水素ホスフェートまたはブロンキトールマンニトールの吸入製剤を包含する。もう一つ別の実施態様にて、付加的な薬剤は抗炎症剤、すなわち、肺における炎症を軽減しうる薬剤である。本願発明にて有用な代表的なかかる薬剤は、イブプロフェン、ドコサヘキサン酸DHA、シルデナフィル、吸入用グルタチオン、ピオグリタゾン、ヒドロキシクロロキンまたはシマバスタチンを包含する。もう一つ別の実施態様にて、付加的な薬剤はコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態A以外のCFTR調節剤、すなわちCFTR活性を調節するのに作用を有する薬剤である。代表的なかかる薬剤は、アタルレンPTC124登録商標;3-[5-2-フルオロフェニル-124-オキサジアゾール-3-イル]安息香酸、シナプルチド、ランコブチド、デペレスタットヒト組換え好中球エラスターゼ阻害剤およびコビプロストン7-2R、4aR、5R、7aR-2-[3S-11-ジフルオロ-3-メチルペンチル]-2-ヒドロキシ-6-オキソオクタヒドロシクロペンタ[b]ピラン-5-イルヘプタン酸を包含する。もう一つ別の実施態様にて、付加的な薬剤は滋養剤である。代表的な滋養剤として、パンクレアーゼ登録商標、パンクレアカルブ登録商標、ウルトラーゼ登録商標またはクレオン登録商標を含むパンクレリパーゼ膵酵素補充療法、リプロトトマーゼ登録商標以前はトリザイテック登録商標、アクアデックス登録商標またはグルタチオン吸入が挙げられる。一の実施態様において、付加的な滋養剤はパンクレリパーゼである。もう一つ別の実施態様にて、付加的な薬剤は、ゲンタマイシン、クルクミン、シクロホスファミド、4-フェニルブチレート、ミグルスタット、フェロジピン、ニモジピン、フィロキンB、ゲニエステイン、アピゲニン、cAMP/cGMP調節剤、例えばロリプラム、シルデナフィル、ミルリノン、タダラフィル、アムリノン、イソプロテレノール、アルブテロールおよびアルメテロール、デオキシスペルグアリン、HSP90阻害剤、HSP70阻害剤、プロテオソーム阻害剤、例えばエポキソマイシン、ラクタシスチン等より選択される。もう一つ別の実施態様にて、付加的な薬剤は、WO2004028480、WO2004110352、WO2005094374、WO2005120497またはWO2006101740に開示されている化合物である。もう一つ別の実施態様にて、付加的な薬剤は、CFTR調節活性を示すベンゾcキノリジニウム誘導体またはCFTR調節活性を示すベンゾピラン誘導体である。もう一つ別の実施態様にて、付加的な薬剤は、US7202262、US6992096、US20060148864、US20060148863、US20060035943、US20050164973、WO2006110483、WO2006044456、WO2006044682、WO2006044505、WO2006044503、WO2006044502またはWO2004091502に開示されている化合物である。もう一つ別の実施態様にて、付加的な薬剤は、WO2004080972、WO2004111014、WO2005035514、WO2005049018、WO2006099256、WO2006127588またはWO2007044560に開示されている化合物である。本願発明の組成物に配合される付加的な治療剤の量は、該治療剤を唯一の活性剤として含む組成物にて通常投与される量よりも少ないであろう。好ましくは、本願明細書にて開示される組成物中の付加的な治療剤の量は、該薬剤を唯一の治療的に活性な薬剤として含む組成物中に通常存在する量の約50から100の範囲にあるであろう。本願明細書に記載されるようなコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aあるいはその医薬上許容される組成物はまた、補綴、人工弁、代用血管、ステントおよびカテーテルなどの移植可能な医学装置をコーティングするための組成物に組み入れてもよい。したがって、本願発明は、もう一つ別の態様にて、本願明細書に記載されるようなコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aまたはその医薬上許容される組成物、および該移植装置を被覆するのに適する担体を含む、移植装置を被覆するための組成物を包含する。さらにもう一つ別の態様にて、本願発明は、本願明細書にて記載されるようなコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aあるいはその医薬上許容される組成物と、該移植用装置を被覆するのに適する担体とを含む組成物で被覆された移植用装置を包含する。適当なコーティングおよび被覆された移植用装置の調製は米国特許第6099562号;第5886026号;および第5304121号に記載されている。コーティングは、典型的には、ヒドロゲルポリマー、ポリメチルジシロキサン、ポリカプロラクトン、ポリエチレングリコール、ポリ乳酸、エチレンビニルアセテートおよびその混合物などの生体適合性ポリマー材料である。所望により、該コーティングはさらに、フルオロシリコーン、多糖類、ポリエチレングリコール、リン脂質またはその組み合わせなどの適当なトップコートでカバーされ、該組成物にて放出特性を発揮してもよい。次に実施例が、本願発明をさらに詳細に理解するために、記載される。これらの実施例は単に説明のために記載されるに過ぎず、如何なる場合も、本願発明を限定するものと解釈されるべきではない。実施例方法および材料示差走査熱量測定法DSCコンパウンド1溶媒和物形態Aについての示差走査熱量測定DSCデータをDSCQ100V9.6Build290TAInstruments、NewCastle、DEを用いて収集した。温度をインジウムで検査し、熱用量をサファイアで検査した。3-6mgのサンプルを1のピンホールでの蓋を用いてクリンプされているアルミニウム製パンにて評量した。サンプルを10°C/分の加熱速度で、50ml/分で窒素気体をパージしながら、25°Cから350°Cまでスキャンした。データをThermalAdvantageQSeries登録商標バージョン220248ソフトウェアで収集し、UniversalAnalysisソフトウェアバージョン41DTAInstruments、NewCastle、DEで解析した。報告されている数字は単分析singleanalysesを示す。ジェットミリングJetMilling記載未微粉化のコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aを篩にかけ、ジェットミルホッパーに入れる前に、塊を分ける。篩はすべて使い捨てであり、使用前にきれいに拭き取る。未微粉化のコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aを加圧窒素気体を用いて供給速度を調節してジェットミルホッパーに加える。気体圧は40-45/45-70ベンチュリ/ミルPSIの範囲にあり、供給速度は05-16kg/時間の範囲にある。コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aを粒子間衝突および粒子壁衝突を介してミルで微粒化し、処理したコンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aを微粉化された生成物の容器に注ぐ。当業者はまた、一部は上記した条件に基づき、ピンミリングを介して、コンパウンド1溶媒和物形態Aまたはコンパウンド1HCl塩形態Aを好ましい粒径とすることを考える。XRPDX-線粉末回折X-線回折XRDデータをBrukerD8DISCOVERまたはBrukerAPEXII粉末回折計のいずれかで収集した。BrukerD8DISCOVER回折計はHI-STAR平面映像検出装置および平坦なグラファイト単色光分光計を備えた。K-アルファ線のCu密封管を40kv、35mAで用いた。サンプルをゼロ-バックグラウンドのシリコーンウェハーに25°Cで置いた。各サンプルには、2つのデータフレームを2種の異なるθ2角:8°および26°で各120秒間集めた。該データをGADDSソフトウェアで積分し、DIFFRACTplusEVAソフトウェアで統合した。報告されたピーク位置の不確実性は±02°である。BrukerII粉末回折計は密封管CuKα源およびApexIICCD検出器を備えた。構造をSHELXプログラムSheldrick、GM、ActaCryst2008A64、112122を用いて明らかにして精密化した。ビトリドVitride登録商標水素化ナトリウムビス2-メトキシエトキシアルミニウム[またはNaAlH2OCH2CH2OCH32]、トルエン中65重量溶液をAldrichChemicalsより購入した。22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-カルボン酸をSaltigoLanxessCorporationの関連会社より購入した。本願明細書にて、化合物名はその化合物の構造を正確に記載していないかもしれないが、その構造は名称に優先するものとする。22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-メタノールの調製市販の22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-カルボン酸10当量をトルエン10倍容量にてスラリーにした。ビトリド登録商標2当量を15ないし25°Cの温度を維持する速度で滴下漏斗で添加した。添加の終わりに、温度を40°Cに上げ、2時間経過後、10w/w水性aqNaOH40当量を温度を40ないし50°Cに滴下漏斗を介して注意して加えた。さらに30分間撹拌した後、層を40°Cで分離した。有機相を20°Cに冷却し、ついで水2x15容量で洗浄し、乾燥させNa2SO4、濾過し、濃縮して粗22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-メタノールを得、それを次の工程にて直接使用した。5-クロロメチル-22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソールの調製22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-メタノール10当量をMTBE5倍容量に溶かした。触媒量の4-NN-ジメチルアミノピリジンDMAP1モルを加え、SOCl212当量を滴下漏斗を介して添加した。SOCl2を反応器にて温度が15ないし25°Cの温度を維持するような速度で添加した。温度を30°Cに上げ、1時間経過した後、20°Cに冷却した。水4倍容量を、温度を30°Cより低く維持しながら、滴下漏斗を介して添加した。さらに30分間撹拌した後、層を分離した。有機層を撹拌し、10w/v水性NaOH44倍容量を添加した。15ないし20分間撹拌した後、層を分離した。ついで、有機相を乾燥させNa2SO4、濾過し、濃縮して粗5-クロロメチル-22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソールを得、それを次の工程にて直接使用した。22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-アセトニトリルの調製5-クロロメチル-22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール1当量のDMSO125倍容量中溶液を、温度を30ないし40°Cに維持しながら、NaCN14当量のDMSO3倍容量中スラリーに加えた。該混合物を1時間撹拌し、ついで水6倍容量を加え、つづいてメチルtert-ブチルエーテルMTBE4倍容量を加えた。30分間撹拌した後、層を分離した。水層をMTBE18倍容量で抽出した。合わせた有機層を水18倍容量で洗浄し、乾燥させNa2SO4、濾過し、濃縮させて粗22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-アセトニトリル95を得、それを次の工程にて直接使用した。22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-1-酢酸エチル-アセトニトリルの合成反応器に窒素をパージし、トルエン900mLでチャージした。窒素拡散を介して溶媒を16時間以上脱気した。ついで、該反応器にNa3PO41557g、9495ミリモルを、つづいてビスジベンジリデンアセトンパラジウム0728g、1266ミリモルを充填した。tertブチルホスフィンのヘキサン中10w/w溶液5123g、2532ミリモルを窒素パージした滴下漏斗より23°Cで10分間にわたって充填した。該混合物を50分間にわたって撹拌し、その時点で5-ブロモ-22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール75g、3165ミリモルを1分間にわたって添加した。さらに50分間撹拌した後、該混合物をシアノ酢酸エチル716g、6330ミリモルを5分間にわたって、つづいて水45mLを一度に充填した。該混合物を70°Cで40分間にわたって加熱し、1ないし2時間毎にHPLCで反応物の生成物への変換割合について分析した。変換の完了が観察された後典型的には、5ないし8時間後に100変換、該混合物を20ないし25°Cに冷却し、セライトパッドを介して濾過した。該セライトパッドをトルエン2x450mLで濯ぎ、合わせた有機液を真空下60-65°Cで300mLに濃縮した。濃縮液にDMSO225mLを充填し、真空下、70ないし80°Cで、溶媒の活発な蒸留が止むまで濃縮した。該溶液を20ないし25°Cに冷却し、工程2の調製にてDMSOで900mLに希釈した。1HNMR500MHz,CDCl3δ716-710m,2H、703d,J=82Hz,1H、463s,1H、419m,2H、123t、J=71Hz,3H。22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-アセトニトリルの合成上記した22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-1-酢酸エチル-アセトニトリルのDMSO溶液に3NHCl6173mL、185モルを内部温度を40°C以下に維持しながら20分間にわたって充填した。ついで、該混合物を1時間にわたって75°Cに冷却し、1ないし2時間毎にHPLCで変換割合について分析した。99より大きな変換が観察されたならば典型的には5ないし6時間後、反応物を20ないし25°Cに冷却し、抽出の間に完全な相分離を可能とするのに十分な時間、MTBE2x525mLで抽出した。合わせた有機抽出液を5NaCl2x375mLで洗浄した。ついで、該溶液を、冷却したリザバーフラスコを備えた15ないし25トールの真空蒸留に適する装置に移した。該溶液を60°C以下の温度で真空下にて濃縮し、溶媒を除去した。ついで、22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-アセトニトリルを、125ないし130°Cオーブン温度および15ないし20トールで得られた油より蒸留した。22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-アセトニトリルを5-ブロモ-22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソールより66収率2工程および915のAUCのHPLC純度95のw/wアッセイに相当するにて透明な油として単離した。1HNMR500MHz、DMSOδ744brs,1H、743d,J=84Hz,1H、722dd,J=82、18Hz,1H、407s,2H。22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-シクロプロパンカルボニトリルの調製22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-アセトニトリル10当量、50重量の水性KOH50当量、1-ブロモ-2-クロロエタン15当量およびOct4NBr002当量を70°Cで1時間加熱した。該反応混合物を冷却し、ついでMTBEおよび水で後処理した。有機相を水およびブラインで洗浄した。溶媒を除去して22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-シクロプロパンカルボニトリルを得た。1-22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-シクロプロパンカルボン酸の調製22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-シクロプロパンカルボニトリルをエタノール5倍容量中6MNaOH8当量を用いて80°Cで一夜加水分解した。該混合物を室温に冷却し、エタノールを真空下で蒸発させた。残渣を水およびMTBEに溶かし、1MHClを加え、層を分離した。ついで、MTBE層をジシクロヘキシルアミンDCHA097当量で処理した。スラリーを0°Cに冷却し、濾過し、ヘプタンで洗浄し、対応するDCHA塩を得た。該塩をMTBEおよび10クエン酸に溶かし、すべての固体が溶解するまで撹拌した。層を分離し、MTBE層を水およびブラインで洗浄した。溶媒をヘプタンと交換し、つづいて濾過し、真空オーブンで50°Cにて一夜乾燥させて1-22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-シクロプロパンカルボン酸を得た。1-22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-シクロプロパンカルボニルクロリドの調製1-22-ジフルオロ-13-ベンゾジオキソール-5-イル-シクロプロパンカルボン酸12当量をトルエン25倍容量でスラリーにし、混合物を60°Cに加熱した。SOCl214当量を滴下漏斗より添加した。トルエンおよびSOCl2を30分後に該反応混合物より蒸留した。付加的なトルエン25倍容量を加え、得られた混合物を再び蒸留し、生成物の酸塩化物を油状物として得、それをさらに精製することなく用いた。3-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸tert-ブチルの調製2-ブロモ-3-メチルピリジン10当量をトルエン12倍容量に溶かした。K2CO348当量を、つづいて水35倍容量を添加した。得られた混合物をN2流下で1時間65°Cに加熱した。ついで、3-t-ブトキシカルボニルフェニルボロン酸105当量およびPddppfCl2CH2Cl20015当量を添加し、該混合物を80°Cに加熱した。2時間後、加熱を止め、水35倍容量を加え、層を分離した。ついで、有機相を水35倍容量で洗浄し、10水性メタンスルホン酸2当量のMsOH、77倍容量で抽出した。水相を50水性NaOH2当量で塩基性にし、EtOAc8倍容量で抽出した。有機層を濃縮して粗3-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸82を得、それを次の工程にて直接使用した。2-3-tert-ブトキシカルボニルフェニル-3-メチルピリジン-1-オキシドの調製3-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸tert-ブチル10当量をEtOAc6倍容量に溶かした。水03倍容量を加え、つづいて尿素-過酸化水素3当量を加えた。次に、無水フタル酸3当量を固体としての混合物に、反応器の温度を45°Cより下の温度を維持する速度で少しずつ添加した。無水フタル酸の添加終了後、該混合物を45°Cに加熱した。付加的に4時間撹拌した後、加熱を止めた。10w/w水性Na2SO315当量を滴下漏斗を介して添加した。Na2SO3添加の完了後、該混合物をさらに30分間撹拌し、層を分離した。有機層を撹拌し、10wt/wt水性Na2CO32当量を加えた。30分間撹拌した後、層を分離した。有機相を13w/v水性NaClで洗浄した。ついで、有機相を濾過し、濃縮して粗2-3-tert-ブトキシカルボニルフェニル-3-メチルピリジン-1-オキシド95を得、それを次の工程にて直接使用した。3-6-アミノ-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸tert-ブチルの調製2-3-tert-ブトキシカルボニルフェニル-3-メチルピリジン-1-オキシド1当量およびピリジン4当量のアセトニトリル8倍容量中溶液を70°Cに加熱した。無水メタンスルホン酸15当量のMeCN2倍容量中溶液を、温度を75°Cより下の温度に維持しながら、50分間にわたって滴下漏斗を介して添加した。添加終了後、該混合物をさらに05時間撹拌した。ついで、該混合物を外界温度に冷却させた。エタノールアミン10当量を滴下漏斗を介して添加した。2時間撹拌した後、水6倍容量を添加し、該混合物を10°Cに冷却した。3時間撹拌した後、該固体を濾過により集め、水3倍容量、2:1のアセトニトリル/水3倍容量およびアセトニトリル2x15倍容量で洗浄した。該固体を乾燥オーブンにて50°CでわずかにN2を供給しながら一定重量1未満の差になるまで乾燥させ、3-6-アミノ-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸tert-ブチルを赤黄色固体53収率として得た。3-6-1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イル-シクロプロパンカルボキサミド-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸t-ブチルの調製上記した粗酸塩化物をトルエン酸塩化物に基づいて25倍容量に溶かし、滴下漏斗を介して3-6-アミノ-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸tert-ブチル1当量、DMAP002当量およびトリエチルアミン30当量のトルエン3-6-アミノ-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸tert-ブチルに基づき4倍容量中混合物に添加した。2時間後、水3-6-アミノ-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸tert-ブチルに基づいて4倍容量を反応混合物に添加した。30分間撹拌した後、層を分離した。ついで、有機相を濾過し、濃縮して3-6-1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボキサミド-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸t-ブチル定量的な粗収率の粘性の油を得た。アセトニトリル粗生成物に基づき3倍容量を加え、結晶化が生じるまで蒸留させた。水粗生成物に基づき2倍容量を加え、該混合物を2時間撹拌した。固体を濾過により集め、1:1容量のアセトニトリル/水粗生成物に基づき2x1容量で洗浄し、フィルター上、真空下で部分的に乾燥させた。固体を真空オーブン中60°CでわずかにN2を供給しながら重量が一定になるまで1未満の差乾燥させ、3-6-1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボキサミド-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸t-ブチルを褐色固体として得た。3-6-1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボキサミド-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸HCl塩の調製3-6-1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボキサミド-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸t-ブチル10当量のMeCN30倍容量中スラリーに、水083倍容量を、つづいて水性濃塩酸083倍容量を添加した。該混合物を45±5°Cに加熱した。24ないし48時間撹拌した後に、反応が完了し、該混合物を外界温度にまで冷却させた。水133倍容量を加え、該混合物を撹拌した。固体を濾過で集め、水2x03倍容量で洗浄し、フィルター上、真空下で部分的に乾燥させた。固体を真空オーブン中60°CでわずかにN2を供給しながら重量が一定になるまで1未満の差乾燥させ、3-6-1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボキサミド-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸HClを灰白色固体として得た。3-6-1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボキサミド-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸形態I方法Aの調製3-6-1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボキサミド-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸HCl1当量の水10倍容量中スラリーを外界温度で撹拌した。24時間撹拌した後、サンプルを採取した。サンプルを濾過し、固体を水で洗浄した2回。固体サンプルをDSC分析に供した。DSC分析が形態Iへの完全な変換を示した場合、該固体を濾過により集め、水2x10倍容量で洗浄し、フィルター上、真空下で部分的に乾燥させた。ついで、該固体を真空オーブン中60°CでわずかにN2を供給しながら重量が一定になるまで1未満の差乾燥させ、形態Iの化合物を灰白色固体として得た98収率。1HNMR400MHz、DMSO-d6914s,1H、799-793m,3H、780-778m,1H、774-772m,1H、760-755m,2H、741-733m,2H、224s,3H、153-151m,2H、119-117m,2H。3-6-1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボキサミド-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸形態I方法Bの調製3-6-1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボキサミド-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸t-ブチル10当量のギ酸30倍容量中溶液を撹拌しながら70±10°Cで8時間加熱した。クロマトグラフィー操作により、3-6-1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボキサミド-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸t-ブチルが10未満のAUCが残っている場合、該反応は完了したものとみなされる。該混合物を外界温度にまで冷却した。該溶液を水6倍容量に加え、50°Cで加熱して撹拌した。ついで、該混合物を、3-6-1-22-ジフルオロベンゾ[d][13]ジオキソール-5-イルシクロプロパンカルボキサミド-3-メチルピリジン-2-イル安息香酸t-ブチルの濃度がわずか08AUCとなるまで、70±10°Cに加熱した。固体を濾過で集め、水2x3倍容量で洗浄し、フィルター上、真空下で部分的に乾燥させた。該固体を真空オーブン中60°CでわずかにN2を供給しながら重量が一定になるまで1未満の差乾燥させ、形態Iの化合物を灰白色固体として得た。コンパウンド1溶媒和物形態Aのコンパウンド1形態Iからの調製コンパウンド1形態I約30mgを500μLの適当な溶媒例えば、メタノール、エタノール、アセトン、2-プロパノール、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、酢酸メチル、2-ブタノン、ギ酸エチルおよびテトラヒドロフランにて2日間でスラリーにした。ついで、該スラリーを遠心分離によりまたは真空下で濾過し、外界温度で一夜放置して乾燥させ、コンパウンド1溶媒和物形態Aを得た。コンパウンド1アセトン溶媒和物形態AのDSCトレースを図13に示し、それは2相転移を示す。コンパウンド1アセトン溶媒和物形態Aの融点は、約188°Cおよび205°Cで起こる。コンパウンド1溶媒和物形態Aの実際のX-線粉末回折パターンを図1に示す。表2は実際の図1のピークを相対強度の降順にて列挙する。表2単結晶X-線解析を基礎とするコンパウンド1アセトン溶媒和物形態Aの立体配座の描写を図15-18に示す。図15は単結晶X-線解析を基礎とするコンパウンド1アセトン溶媒和物形態Aの立体配座の描写を示す。図16は単結晶X-線解析を基礎とするカルボン酸基の間の水素結合を示す二量体としてのコンパウンド1アセトン溶媒和物形態Aの立体配座の描写を提供する。図17はコンパウンド1アセトン溶媒和物形態Aの四量体の立体配座の描写を提供する。図18は単結晶X-線解析を基礎とするコンパウンド1アセトン溶媒和物形態Aの立体配座を提供する。コンパウンド1溶媒和物形態Aおよびアセトンの化学量論は約44:11HNMRから計算して448:1;X-線から438:1である。結晶構造は、単位セル当たり2つの空隙またはポケットを、または宿主分子当たり1つの空隙を有する分子のパッキングを示す。アセトン溶媒和物においては、空隙の約92がアセトン分子で占められる。コンパウンド1溶媒和物形態Aは、次の単位セルの寸法:a=16523510Å、b=1274258Å、c=20551213Å、α=90°、β=1037364°、γ=90°V=420335Å3、=4を有する単斜晶系P21/n空間群である。構造データより計算したコンパウンド1溶媒和物形態Aにおけるコンパウンド1の密度は100Kで1430/cm3である。コンパウンド1アセトン溶媒和物形態Aの固体13CNMRスペクトルを図22に示す。表3は関連するピークの化学シフトを提供する。表3コンパウンド1アセトン溶媒和物形態Aの固体19FNMRスペクトルを図23に示す。星印のピークはスピンニングサイドバンドを示す。表4は関連するピークの化学シフトを提供する。表4コンパウンド1HCl塩形態Aの調製コンパウンド1HCl塩形態Aの無色結晶が、コンパウンド1塩酸塩のエタノール中濃縮溶液をゆっくりと蒸発させることで得られた。030x1/5x015mmの寸法を有する結晶を選択し、鉱油を用いてきれいにし、マイクロマウントMicroMountに取り付け、BrukerAPEXII回折計に集中させた。配向マトリックスおよび初期セルパラメータを提供するのに、逆格子空間にて分けられた40個のフレームの3つのバッチを得た。最終セルパラメータを得、十分なデータに基づいて精緻化した。図19は、単結晶分析に基づく、コンパウンド1HCl塩形態Aの二量体としての立体配座の描写を提供する。図20は、単結晶分析に基づく、コンパウンド1HCl塩形態Aのパッキング図を提供する。結晶構造より計算されたコンパウンド1HCl塩形態AのX-線回折パターンを図21に示す。表5は図21について計算されたピークを相対強度の降順にて含有する。表5アッセイ化合物のΔF508-CFTR修正特性を検出および測定するアッセイ化合物のΔF508-CFTR修飾特性をアッセイするための膜電位光学方法光学膜電位アッセイは、GonzalezおよびTsienGonzalezJEおよびRYTsien1995VoltagesensingbyfluorescenceresonanceenergytransferinsinglecellsBiophysJ694:127280、およびGonzalezJEおよびRYTsien1997ImprovedindicatorsofcellmembranepotentialthatusefluorescenceresonanceenergytransferChemBiol44:26977を参照に記載の電位感受性FRETセンサを、VoltageIonProbeReaderVIPRなどの蛍光変化を測定するための器具類GonzalezJE、KOadesら、1999Cellbasedassaysandinstrumentationforscreeningion-channeltargetsDrugDiscovToday49:431439を参照と組み合わせて利用した。これらの電位感受性アッセイは、膜溶解性で電位感受性の色素、DiSBAC23と、形質膜の外葉に結合し、FRETドナーとして作用する、蛍光性リン脂質、CC2-DMPEの間の蛍光共鳴エネルギー移動FRETにおける変化に基づく。膜電位Vmの変化は負に帯電しているDiSBAC23を形質膜を通って再分配させ、したがって、CC2-DMPEからのエネルギー移動の量を変化させる。蛍光発光の変化は、96-または384-ウェルマイクロタイタープレートにてセルベースのスクリーンを行うように設計されている、一の統合された液体ハンドラおよび蛍光検出器である、VIPR登録商標IIを用いてモニター観察される。1.修正化合物の同定ΔF508-CFTRに関連する輸送障害を修正する小分子を同定するのに、単回添加のHTSアッセイを開発した。細胞を試験化合物の存在または不在負対照にて血清不含培地に37°Cで16時間インキュベートした。正対照として、384ウェルのプレートに置いた細胞を27°Cで16時間インキュベートし、温度修正ΔF508-CFTRとした。その後で細胞をクレブスリンゲル溶液で3回濯ぎ、電位感受性色素を負荷した。ΔF508-CFTRを活性化するのに、10μMホルスコリンおよびCFTR増強剤、ゲニステイン20μMをCl--不含培地と一緒に各ウェルに加えた。Cl--不含培地の添加はΔF508-CFTR活性化に応答してCl-の流出を促進し、得られた膜脱分極はFRETを基礎とする電位センサー色素を用いて所望によりモニター観察されてもよい。2.増強剤化合物の同定ΔF508-CFTRの増強剤を同定するのに、二回添加のHTSアッセイを開発した。第一の添加の間に、Cl--不含培地を試験化合物と共にまたはなしで各ウェルに添加した。22秒後に、2ないし10μMのホルスコリンを含有する第二添加のCl--不含培地を加え、ΔF508-CFTRを活性化した。2回添加した後の細胞外Cl-濃度は28mMであり、それはΔF508-CFTRの活性化に応答してCl-の流出を促進し、得られた膜脱分極は所望によりFRETを基礎とする電位センサー色素を用いてモニター観察された。3.溶液浴溶液1mM:NaCl160、KCl45、CaCl22、MgCl21、HEPES10、NaOHを用いてpH74に調整クロリド不含の浴溶液:浴溶液1中のクロリド塩をグルコン酸塩と置き換えた。DMSO中10mMストック溶液として調製し、-20°Cで貯蔵した。DMSO中10mMストックとして調製し、-20°Cで貯蔵した。4.細胞培養ΔF508-CFTRを安定して発現するNIH3T3マウス線維芽細胞を膜電位の光学測定用に用いる。該細胞を、37°Cで5CO2および90湿度で、2mMグルタミン、10ウシ胎仔血清、1xNEAA、β-ME、1xペン/スウトレプトおよび25mMHEPESを175cm2培養フラスコ中に補足したダルベコ修飾イーグル培地に維持する。すべての光学アッセイについて、細胞を30000/ウェルで384ウェルのマトリゲル被覆プレートに播種し、37°Cで2時間培養し、その後で増強剤アッセイ用に27°Cで24時間培養する。修正アッセイ用に、細胞を27°Cまたは37°Cで、化合物と共にまたはなしで16ないし24時間培養する。化合物のΔF508-CFTR調節特性をアッセイするための電気生理学的アッセイ1.チャンバーアッセイの使用光学アッセイにて同定されたΔF508-CFTRモジュレーターをさらに特徴付けるのに、ΔF508-CFTRを発現する分極された上皮細胞にてチャンバー実験を行った。CostarSnapwell細胞培養インサート上に増殖させたFRTΔF508-CFTR上皮細胞をUssingチャンバーPhysiologicInstrumentsInc、SanDiego、CAに取り付け、単層を電位クランプシステムDepartmentofBioengineering、UniversityofIowa、IA、およびPhysiologicInstrumentsInc、SanDiego、CAを用いて連続して短絡させた。経上皮電気抵抗を2mVのパルスを加えることで測定した。これらの条件下で、FRT上皮は4KΩ/cm2以上の抵抗を示した。該溶液を27°Cで維持し、通気した。電極のオフセット電位および流体の電気抵抗は無細胞インサートを用いて訂正された。これらの条件下、電流は頂端膜にて発現されるΔF508-CFTRを通るCl-の流れを反映する。IscはMP100A-CEインターフェースおよびAcqKnowledgeソフトウェアv326;BIOPACSystems、SantaBarbara、CAを用いてデジタル処理して示された。2.修飾化合物の同定典型的なプロトコルは側底膜から頂端膜へのCl-濃度の勾配を利用した。この勾配をセットアップするのに、側底膜では通常リンゲルを用い、それに対して頂端膜ではNaClを等モル量のナトリウムグルコン酸塩NaOHでpH74と滴定されると置き換え、上皮を横切るCl-濃度の大きな勾配を得た。実験はすべて無傷の単層で行った。ΔF508-CFTRを十分に活性化するのに、ホルスコリン10μMおよびPDE阻害剤、IBMX100μMを適用し、つづいてCFTR増強剤、ゲニステイン50μMを添加した。他の細胞型にて観察されるように、ΔF508-CFTRを安定して発現する、FRT細胞の低温度でのインキュベーションは、原形質膜におけるCFTRの機能密度を増加させる。修飾化合物の活性を測定するために、細胞を10μMの試験化合物と共に37°Cで24時間インキュベートし、その後で3回洗浄して記録した。化合物処理の細胞におけるcAMP-およびゲニステイン-介在のIscを27°Cおよび37°Cの対照に対して正規化し、それは活性の割合として表される。細胞と修正化合物とのプレインキュベーションは、37°Cの対照と比べて、cAMP-およびゲニステイン-介在のIscを顕著に増加させた。3.増強剤としての化合物の同定典型的なプロトコルは側底膜から頂端膜へのCl-濃度の勾配を利用した。この勾配をセットアップするのに、側底膜では通常リンゲルを用い、ナイスタチン360μg/mlで透過処理され、それに対して頂端膜ではNaClを等モル量のナトリウムグルコン酸塩NaOHでpH74と滴定されると置き換え、上皮を横切るCl-濃度の大きな勾配を得た。実験はすべてナイスタチンでの透過処理の30分後に行われた。ホルスコリン10μMおよびすべての試験化合物を細胞培養インサートの両側に加えた。ΔF508-CFTRの推定増強剤の効能を、既知の増強剤、ゲニステインの効能と比較した。4.溶液側底膜溶液mM:NaCl135、CaCl212、MgCl212、K2HPO424、KHPO406、N-2-ヒドロキシエチルピペラジン-N’-2-エタンスルホン酸HEPES10およびデキストロース10。該溶液をNaOHでpH74に滴定した。頂端膜溶液mM:NaClをグルコン酸ナトリウム135で置き換えた以外は、側底膜溶液と同じ。5.細胞培養ΔF508-CFTRFRTΔF508-CFTRを発現するフィッシャーFisherラット上皮FRI細胞を、本願発明者らの光学的アッセイより同定されるΔF508-CFTRの推定モジュレータについてUssingチャンバー実験にて使用した。細胞をCostarSnapwell細胞培養インサートで培養し、5ウシ胎仔血清、100U/mlのペニシリンおよび100μg/mlのストレプトマイシンを補足したコーンCoon修飾ハムHamF-12培地にて37°Cおよび5CO2で5日間培養した。化合物の増強剤活性を特徴付けるのに使用する前に、細胞を27°Cで16ないし48時間インキュベートし、ΔF508-CFTRについて修正した。修正化合物の活性を測定するために、細胞を27°Cまたは37°Cで化合物と共にまたはなしで24時間インキュベートした。6.全細胞の記録ΔF508-CFTRを安定的に発現する温度-および試験化合物-修正のNIH3T3細胞にて巨視的なΔF508-CFTR電流IΔF508を穴あきパッチを用いて全細胞の記録をモニターした。簡単には、IΔF508の電位-クランプ記録をAxopatch200Bパッチクランプ増幅器AxonInstrumentsInc、FosterCity、CAを用いて室温で行った。すべての記録を10kHzのサンプリング周波数で獲得し、1kHzで低域フィルターに供された。細胞内溶液で満たされた場合、ピペットは5ないし6MΩの抵抗性を有した。これらの記録条件下、Cl-について逆転電位の室温での計算値EClは-28mVであった。記録はすべて20GΩよりも大きな密封抵抗および15MΩ未満の直列抵抗を有した。パルス発生、データ収集および分析を、Clampex8AxonInstrumentsIncを繋いだDigidata1320ADインターフェースを備えたPCを用いて行った。該浴は250μl未満のセイラインを含有し、重力駆動かん流システムを用いて2ml/分の速度で連続して精製した。7.修正化合物の同定修正化合物の、原形質膜における機能的ΔF508-CFTRの密度の増加に対する活性を測定するために、上記した穴あきパッチの記録技法を用いて、修正化合物で処理した24時間後の電流密度を測定した。ΔF508-CFTRを十分に活性化するために、10μMホルスコリンおよび20μMゲニステインを該細胞に加えた。本願発明者らの記録条件下で、27°Cで24時間インキュベートした後の電流密度は、37°Cで24時間インキュベートした後に観察される密度よりも高かった。これらの結果は、原形質膜にて、ΔF508-CFTRの密度に対する低温のインキュベーションの既知の効果と一致する。修正化合物のCFTR電流密度に対する効果を測定するために、細胞を10μMの試験化合物と一緒に37°Cで24時間インキュベートし、電流密度を27°Cおよび37°Cの対照と比較した活性。記録する前に、細胞を細胞外記録媒体で3回洗浄し、残りの試験化合物を除去した。10μMの修正化合物とのプレインキュベーションは、37°Cの対照と比較して、cAMP-およびゲニステイン-依存性電流を有意に上昇させた。8.増強剤化合物の同定ΔF508-CFTR増強剤の巨視的なΔF508-CFTRCl-電流IΔF508を増大させる能力を、またΔF508-CFTRを安定して発現するNIH3T3細胞にて、穴あきパッチ記録技法を用いて調べた。光学的アッセイより同定される増強剤は、光学アッセイにて観察されるのと同様の効能および有効性でIΔF508にて用量依存性増加を惹起した。試験したすべての細胞にて、増強剤適用前の、および間の逆電位は、計算したECl-28mVである、約-30mVであった。9.溶液細胞内溶液mM:アスパラギン酸セシウム90、CsCl50、MgCl21、HEPES10および240μg/mlアンホテリシンBCsOHでpHを735に調節細胞外溶液mM:N-メチル-D-グルカミンNMDG-Cl150、MgCl22、CaCl22およびHEPES10HClでpHを735に調節10.細胞培養ΔF508-CFTRを安定して発現するNIH3T3マウス線維芽細胞を全細胞の記録のために使用する。細胞を、37°Cで5CO2および90湿度にて、175cm2培養フラスコ中、2mMグルタミン、10ウシ胎仔血清、1xNEAA、β-ME、1xペン/ストレプ、および25mMHEPESを補足したダルベッコ修飾イーグル培地にて維持する。全細胞を記録するために、2500-5000細胞をポリ-L-リジン被覆のガラスのカバースリップ上に播種し、使用前に27°Cで24ないし48時間培養し、増強剤の活性を試験し、修正剤の活性を測定するために37°Cで修正化合物と共にまたはなしでインキュベートした。11.シングルチャネルの記録NIH3T3細胞にて安定して発現される温度修正のΔF508-CFTRのシングルチャネルの活性および増強剤化合物の活性は、切除した裏返しの膜のパッチを用いて観察された。簡単には、シングルチャネル活性の電位クランプの記録を室温でAxopatch200Bパッチクランプ増幅器AxonInstrumentsIncを用いて行った。すべての記録を10kHzのサンプリング周波数で獲得し、400Hzで低域フィルターに供した。パッチピペットをCorningKovarSealing7052ガラスWorldPrecisionInstruments、Inc、Sarasota、FLより製造し、それは細胞外溶液で満たされた場合に5ないし8MΩの抵抗を有した。ΔF508-CFTRは、切除後に、1mMMg-ATPおよび75nMのcAMP依存性蛋白キナーゼ、触媒性サブユニットPKA;PromegaCorpMadison、WIを添加することで活性化された。チャネル活性が安定した後、重力駆動マイクロかん流システムを用いてかん流させた。流入物をパッチに隣接して置き、1ないし2秒以内に溶液を完全に交換した。迅速なかん流の間のΔF508-CFTR活性を維持するために、非特異的ホスファターゼ阻害剤F-10mMNaFを浴溶液に添加した。これらの記録条件下、チャネル活性はパッチを記録する期間60分間までを通して一定のままであった。細胞内溶液から細胞外溶液に移動する正電荷アニオンは反対方向に移動するにより生成される電流は正電流として知られる。ピペット電位Vpは80mVで維持された。チャネル活性を<2の活性チャネルを含有する膜パッチより分析した。同時に開口される最大数は実験の間の活性チャネルの数を決定した。単一チャネルの電流振幅を測定するために、120秒より記録したΔF508-CFTR活性のデータを100Hzでオフラインのフィルターにかけ、ついでBioPatchAnalysisソフトウェアBioLogicCompFranceを用いてマルチカウス関数と適合する、すべての点の振幅ヒストグラムを作成するのに用いた。総合的巨視的電流および開確率POをチャネル活性の120秒から測定した。POをBioPatchソフトウェアを用いて、または関係式PO=1/iNより決定した;ここでI=平均電流、i=単一チャネル振幅、およびN=パッチにおける活性チャネルの数である。12.溶液細胞外溶液mM:NMDG150、アスパラギン酸150、CaCl25、MgCl22およびHEPES10トリス塩基でpHを735に調節細胞内溶液mM:NMDG-Cl150、MgCl22、EGTA5、TES10およびトリス塩基14HClでpHを735に調節13.細胞培養ΔF508-CFTRを安定して発現するNIH3T3マウス線維芽細胞を切除される膜パッチ-クランプの記録のために使用する。細胞を、37°Cで5CO2および90湿度にて、175cm2培養フラスコ中、2mMグルタミン、10ウシ胎仔血清、1xNEAA、β-ME、1xペン/ストレプ、および25mMHEPESを補足したダルベッコ修飾イーグル培地にて維持する。単一チャネルを記録するために、2500-5000細胞をポリ-L-リジン被覆のガラスのカバースリップ上に播種し、使用前に、27°Cで24ないし48時間培養した。上記した操作を用いて、活性、すなわち、コンパウンド1のEC50を上記した技法により測定し、それを表6に示す。表6本願明細書の開示されているすべての刊行物および特許出願は、たとえ個々の刊行物または特許出願が出典明示により具体的かつ個別的に本願明細書の一部とされるとしても、その同じ内容が出典明示により本願明細書の一部とされる。出典明示により本願明細書の一部とされた特許または刊行物に記載の用語の意味が本願明細書に使用される用語の意味と対立するならば、この開示における用語の意味は統制されるであろう。さらには、上記した記載は、本願発明の単なる例示的実施態様を開示するにすぎない。当業者は、かかる記載よりおよび添付した図面および特許請求の範囲より容易に認識し、添付の特許請求の範囲に記載されるように発明の精神および範囲を逸脱することなく、種々の変化、修飾および変形をなすことができる。"