"次の式Iのインビボイメージング剤。式中、X1は直接結合又はリンカー-Ln-式中、各Lは独立に-C=O-、-CR2-、-CR=CR-、-C≡C-、-CR2CO2-、-CO2CR2-、-NR-、-NRCO-、-CONR-、-NRC=ONR-、-NRC=SNR-、-SO2NR-、-NRSO2-、-CR2OCR2-、-CR2SCR2-又は-CR2NRCR2-であり、各R基はH又はC16アルキルである。を表し、Ch1-M1は金属イオン錯体式中、Ch1はキレート剤であり、M1はインビボイメージングに適した金属イオンである。である。インビボイメージングに適した前記金属イオンが放射性金属イオン又は常磁性金属イオンである、請求項1記載のインビボイメージング剤。前記放射性金属イオンが、99mTc、111In、113mIn及び67Gaから選択されるγ線放出型放射性金属イオンである、請求項2記載のインビボイメージング剤。前記放射性金属イオンが99mTcである、請求項3記載のインビボイメージング剤。前記放射性金属イオンが、64Cu、48V、52Fe、55Co、94mTc及び68Gaから選択される陽電子放出型放射性金属イオンである、請求項2記載のインビボイメージング剤。前記常磁性金属イオンが、GdIII、MnII、CuII、CrIII、FeIII、CoII、ErII、NiII、EuIII及びDyIIIから選択される、請求項2記載のインビボイメージング剤。Ch1が以下のものから選択される、請求項1記載のインビボイメージング剤。aジアミンジオキシム、bチオールトリアミドドナーセットを有するN3Sリガンド、cジアミンジチオールドナーセットを有するN2S2リガンド、dテトラアミン、アミドトリアミン又はジアミドジアミンドナーセットを有する開鎖又は大環状リガンドであるN4リガンド、及びeジアミンジフェノールドナーセットを有するN2O2リガンド。請求項1乃至請求項7のいずれか1項記載のインビボイメージング剤を薬学的に許容されるキャリヤーと共に含んでなる医薬組成物。次の式IIの前駆体化合物。式中、X2は請求項1でX1に関して定義した通りであり、Ch2は請求項1又は請求項7でCh1に関して定義した通りである。請求項1乃至請求項7のいずれか1項記載のインビボイメージング剤の製造方法であって、i請求項9に記載した式IIの前駆体化合物を用意する段階、及びii前記前駆体化合物を、請求項1乃至請求項6のいずれか1項に記載したインビボイメージングに適した金属イオンの供給源と反応させる段階を含んでなる方法。インビボイメージングに適した金属イオンの前記供給源が99mTcの供給源である、請求項10記載の方法。99mTcの前記供給源が過テクネチウム酸イオンである、請求項11記載の方法。請求項10乃至請求項12のいずれか1項記載の方法を実施するためのキットであって、請求項9記載の前駆体化合物を含むバイアルを含んでなるキット。被験体内に存在する結核菌MycobacteriatuberculosisMTBの位置及び/又は量を決定するための方法であって、a請求項1乃至請求項7のいずれか1項記載のインビボイメージング剤を、インビボイメージングに適した量で前記被験体に投与する段階、b投与したインビボイメージング剤を前記被験体内に存在するMTBに結合させる段階、c前記インビボイメージング剤中に含まれる、インビボイメージングに適した前記金属イオンから放出される信号を適当なインビボイメージング操作によって検出する段階、d前記信号の位置及び/又は量を表す画像を生成する段階、並びにe前記信号の位置及び/又は量を前記被験体内に存在するMTBの位置及び/又は量に帰因させる段階を含んでなる方法。前記投与段階が静脈内注射によって実施される、請求項14記載の方法。前記インビボイメージング剤が請求項8記載の医薬組成物として投与される、請求項14又は請求項15記載の方法。前記被験体に関する治療計画の進行中に繰り返して実施される請求項14乃至請求項16のいずれか1項記載の方法であって、前記計画がMTBによって引き起こされるTBと戦うための薬物の投与を含む方法。被験体内に存在するMTBの位置及び/又は量を決定するための、請求項14乃至請求項17のいずれか1項記載の方法で使用するための、請求項8記載の医薬組成物。請求項14乃至請求項17のいずれか1項記載の方法で使用するための、請求項8記載の医薬組成物の製造における、請求項1乃至請求項7のいずれか1項記載のインビボイメージング剤の使用。本発明は、インビボイメージング方法を用いてマイコバクテリアmycobacteriaの存在を決定するために有用な新規インビボイメージング剤を提供する。本発明のインビボイメージング剤は、マイコバクテリア感染症に対する治療薬として良好な性質を有することが知られている非標識小分子の放射性標識誘導体である。本発明のインビボイメージング剤は、関連する非標識化合物と同様な又は改善された生物学的性質を有している。また、本発明のインビボイメージング剤の合成において有用な前駆体化合物、及び前記前駆体化合物を用いて本発明のインビボイメージング剤を得るための方法も本発明によって提供される。本発明のインビボイメージング剤が使用できるインビボイメージング方法及び診断方法も提供される。インビボイメージング剤一態様では、本発明は次の式Iのインビボイメージング剤を提供する。式中、X1は直接結合又はリンカー-Ln-式中、各Lは独立に-C=O-、-CR2-、-CR=CR-、-C≡C-、-CR2CO2-、-CO2CR2-、-NR-、-NRC=O-、-C=ONR-、-NRC=ONR-、-NRC=SNR-、-SO2NR-、-NRSO2-、-CR2-O-CR2-、-CR2-S-CR2-又は-CR2-NR-CR2-であり、各R基は独立にH又はC16アルキルである。を表し、Ch1-M1は金属イオン錯体式中、Ch1はキレート剤であり、M1はインビボイメージングに適した金属イオンである。である。本発明の文脈中におけるインビボイメージング剤とは、インビボイメージング操作における画像の生成を容易にする標識化合物である。本明細書中で使用するインビボイメージングという用語は、被験体の内部構造の全部又は一部の画像を非侵襲的に生成する技法をいう。本明細書中で使用するリンカーという用語は、10~100の原子、好ましくは10~50の原子を有する二価の鎖をいう。特に除外されるのは、2以上のカルボニル基が互いに結合したリンカー、又は2以上のヘテロ原子が互いに結合したリンカーである。当業者には理解される通り、これらは化学的に実現できないか、或いは過度の反応性又は不安定性を有するため本発明の分野で使用するのに適さない。式IのX1がリンカー-Ln-を表す場合、好ましいL基は-C=O-、-CH2-、-NH-、-NHC=O-、-C=ONH-及び-CH2-O-CH2-から選択される。特に好ましいリンカー基は式-CH2m-式中、mは1~6、好ましくは2~4である。を有するものである。金属錯体という用語は、金属イオンが周囲の一連の分子又は陰イオン本発明では、これらはキレート剤Ch1中に含まれると結合してなる配位錯体を意味すると考えられる。本発明の金属錯体は、キレート交換に耐えること即ち、金属配位座に関して他の潜在的に競合するリガンドとのリガンド交換を受けにくいことが極めて好ましい。潜在的に競合するリガンドには、インビボイメージング剤自体に加えて、インビトロでは製剤中の他の賦形剤例えば、製剤中に使用される放射線防護剤又は抗菌防腐剤があり、インビボでは内因性化合物例えば、グルタチオン、トランスフェリン又は血漿タンパク質がある。キレート剤とは、2以上のドナー原子を介して金属イオンとの配位結合を形成し得る有機化合物である。本発明に適する典型的なキレート剤では、2~6好ましくは2~4の金属ドナー原子が金属ドナー原子を結合する炭素原子又は非配位ヘテロ原子の非配位主鎖を有することで五員又は六員のキレート環を生じるように配列されている。キレート剤の一部として金属イオンとよく結合するドナー原子種の例は、アミン、チオール、アミド、オキシム及びホスフィンである。例えば、インビボイメージングに適する金属が99mTcである場合には99mTcCO3放射化学を用いるように、他の配列も想定される。キレート交換に耐える金属錯体を形成するテクネチウム用の好適なキレート剤の例には、特に限定されないが、以下のものがある。aジアミンジオキシム、bチオールトリアミドドナーセットを有するN3Sリガンド、cジアミンジチオールドナーセットを有するN2S2リガンド、dテトラアミン、アミドトリアミン又はジアミドジアミンドナーセットを有する開鎖又は大環状リガンドであるN4リガンド、及びeジアミンジフェノールドナーセットを有するN2O2リガンド。上述したキレート剤は、インビボイメージングに適する金属イオンがテクネチウム例えば、94mTc又は99mTcである場合に特に好適であり、JurissonetalChem.Rev.1999;99:2205-2218によって一層詳しく記載されている。これらのキレート剤は、銅64Cu又は67Cu、バナジウム例えば、48V、鉄例えば、52Fe或いはコバルト例えば、55Coのような他の金属に対しても有用である。他の好適なキレート剤はSandozの国際公開第91/01144号に記載されており、これらはインジウム、イットリウム及びガドリニウムに対して特に好適である。かかる好適なキレート剤の例には、1,4,7,10-テトラアザシクロドデカン-1,4,7,10-四酢酸DOTA及びジエチレントリアミン五酢酸DTPAがある。ガドリニウムの非イオン性即ち、中性金属錯体が知られており、米国特許第4885363号に記載されている。さらに上記に特筆された通り、放射性金属イオンが99mTcである場合、放射性金属錯体は、Technetium-99mPharmaceuticals:PreparationandQualityControlinNuclearMedicine2007Springer;Zolle,Ed.の第2.2章にSchibliが一層詳しく記載しているような99mTcCO3放射化学を用いて形成することもできる。この化学の利点は、それがピラジンアミド活性部分に対する99mTcの非特異的結合の可能性をさらに低下させ得ることである。したがって、この化学を用いた放射性金属錯体は、99mTcCO3に結合した三座キレートの形態を有するであろう。リンカー基の役割は、金属配位後に生じる比較的バルキーな金属錯体をピラジンアミドの活性部位から遠ざけることで、例えば基質の結合が損なわれないようにすることであると想定される。これは、バルキーな基が活性部位から離れて位置する自由を与えるような柔軟性例えば、単純アルキル鎖及び/又は金属錯体が活性部位から離れるように向きを定める剛性例えば、シクロアルキル又はアリールスペーサーの組合せによって達成できる。リンカー基の性質はまた、得られるコンジュゲートのテクネチウム錯体の体内分布を変化させるためにも使用できる。即ち、例えばリンカー中にエーテル基を導入することは、血漿タンパク質の結合を最小限に抑えるために役立つ。或いは、ポリアルキレングリコール、特にポリエチレングリコールPEGのようなポリマーリンカー基の使用は、インビボで血液中のインビボイメージング剤の寿命を延ばすために役立ち得る。ピラジンアミドは、結合が血液中において容易に代謝を受けないようにしてキレーターに結合していることが極めて好ましい。それは、本発明のインビボイメージング剤が所望のインビボ標的部位に到達する前に、かかる代謝がイメージング金属錯体の切断をもたらすからである。インビボイメージングに適した金属イオンとは、被験体に投与した後、インビボイメージング技法によって外部から検出できる金属イオンを意味する。好ましくは、式Iのインビボイメージングに適した前記金属イオンは、放射性金属イオン又は常磁性金属イオンである。金属イオンが放射性金属イオンである場合、それはγ線放出型放射性金属イオン又は陽電子放出型放射性金属イオンである。好ましいγ線放出型放射性金属イオンは99mTc、111In、113mIn及び67Gaから選択され、99mTcが最も好ましい。好ましい陽電子放出型放射性金属イオンは64Cu、48V、52Fe、55Co、94mTc及び68Gaから選択される。金属イオンが常磁性金属イオンである場合、それは好ましくはGdIII、MnII、CuII、CrIII、FeIII、CoII、ErII、NiII、EuIII及びDyIIIから選択され、GdIIIが最も好ましい。本発明のインビボイメージングに適した最も好ましい金属イオンはγ線放出型放射性金属イオン、特に99mTcである。本発明のイメージング剤のレニウム誘導体に関して予備的インビトロ評価を実施した実施例5参照。得られたデータは、レニウム錯体が少なくともPZAと同等の活性を有し、恐らくはPZAより好ましい活性を有することを示唆している。医薬組成物好ましくは、本発明のインビボイメージング剤は、薬学的に許容されるキャリヤーと共に医薬組成物として提供される。薬学的に許容されるキャリヤーとは、医薬組成物が生理学的に認容され得るようにして即ち、毒性又は過度の不快感なしに哺乳動物体に投与できるようにしてインビボイメージング剤を懸濁又は溶解するための流体特に液体である。薬学的な許容されるキャリヤーは、好適には、無菌のパイロジェンフリー注射用水、有利には注射用の最終生成物が等張性又は非低張性になるように平衡させ得る食塩水のような水溶液、或いは1種以上の張度調整物質例えば、血漿陽イオンと生体適合性対イオンとの塩、糖例えば、グルコース又はスクロース、糖アルコール例えば、ソルビトール又はマンニトール、グリコール例えば、グリセロール又は他の非イオン性ポリオール物質例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコールなどの水溶液のような注射可能なキャリヤー液体である。薬学的な許容されるキャリヤーはまた、エタノールのような生体適合性有機溶媒を含んでいてもよい。かかる有機溶媒は、親油性の高い化合物又は配合物を可溶化するために有用である。好ましくは、生体適合性キャリヤー媒質はパイロジェンフリー注射用水、等張食塩水又はエタノール水溶液である。静脈内注射用生体適合性キャリヤーのpHは、好適には4.0~10.5の範囲内にある。本発明の医薬組成物は、好適には、無菌保全性を維持しながら皮下注射針による1回又は数回の穿刺に適したシール例えば、クリンプオン式セプタムシール蓋を備えた容器に入れた状態で供給される。かかる容器は1回分又は複数回分の患者用量を含み得る。好ましい複数用量容器は、複数の患者用量を含む例えば、容積10~30cm3の単一のバルクバイアルからなり、したがって臨床的状況に合わせて製剤の実用寿命中に様々な時間間隔で1回分の患者用量を臨床グレードの注射器に抜き取ることができる。予備充填注射器は1回分のヒト用量又は単位用量を含むように設計され、したがって好ましくは臨床用に適した使い捨て注射器又は他の注射器である。医薬組成物が放射性医薬組成物である場合即ち、金属イオンがγ放射体又は陽電子放射体である場合、予備充填注射器には、施術者を放射線量から防護するための注射器シールドを任意に設けることができる。好適なかかる放射性医薬品注射器シールドは当技術分野で公知であり、好ましくは鉛又はタングステンからなっている。本発明の医薬組成物は、本発明の追加の態様で以下に記載されるようにキットから製造できる。別法として、それを無菌製造条件下で製造することで所望の無菌生成物を得ることができる。医薬組成物を非無菌条件下で製造し、次いで例えばγ線照射、オートクレーブ処理、乾熱又は例えば、エチレンオキシドによる化学処理を用いて終末滅菌を施すこともできる。好ましくは、本発明の医薬組成物はキットから製造される。前駆体化合物別の態様では、本発明は次の式IIの前駆体化合物を提供する。式中、X2はX1に関して本明細書中に定義した通りであり、Ch2はCh1に関して本明細書中に定義した通りである。X1及びCh1の好適な実施形態及び好ましい実施形態は、X2及びCh2に等しく適用できる。前駆体化合物は、金属イオンがキレート剤によって錯化されていない式Iのインビボイメージング剤の誘導体からなる。かかる前駆体化合物は、通例、好都合な化学形態の金属イオンとの化学反応が部位特異的に起こり、最小数の段階理想的にはただ1つの段階で反応を実施でき、かつ格別の精製の必要なしに理想的にはいかなる追加の精製も必要なしに所望のインビボイメージング剤が得られるように設計されている。部位特異的な反応を容易にするため、本発明の前駆体化合物は適当な保護基を任意に含むことができる。保護基という用語は、望ましくない化学反応を阻止又は抑制するが、分子の残部を変質させない十分に温和な条件下で問題の官能基から脱離させて所望の生成物を得るのに十分な反応性を有するように設計された基を意味する。保護基は当業者にとって公知であり、‘ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis’,TheorodoraW.GreeneandPeterG.M.WutsFourthEdition,JohnWileySons,2007に記載されている。本発明の前駆体化合物は、例えば以下のスキーム1に示されるように、商業的に入手可能なピラジン誘導体を所望キレートの適当な誘導体とカップリングすることで直截的に得ることができる。式中、X3及びCh3はそれぞれX1及びCh1に関して本明細書中に好適なもの及び好ましいものとして定義した通りである。カップリング反応に適した反応条件は、有機化学分野の当業者にとって公知であるMarchsAdvancedOrganicChemistry6thEdition;Wiley:SmithandMarch,Eds.を参照されたい。本発明の前駆体化合物は、理想的には無菌で非発熱性の形態で提供される。したがって前駆体化合物は、本発明の上述した医薬組成物の製造に使用できると共に、以下に一層詳しく記載されるような、かかる医薬組成物を製造するためのキット中に一成分として含めるためにも使用できる。製造方法さらに別の態様では、本発明は、本明細書中に記載したインビボイメージング剤の製造方法であって、i本明細書中に記載したような式IIの前駆体化合物を用意する段階、及びii前記前駆体化合物を、本明細書中に記載したような、インビボイメージングに適した金属イオンの供給源と反応させる段階を含んでなる方法を提供する。前駆体化合物をインビボイメージングに適した金属イオンの供給源と反応させる段階は、できるだけ高い放射化学収率RCYで所望のインビボイメージング剤を生成するのに適した反応条件下で2種の反応体を合わせることを含んでいる。本発明の特定のインビボイメージング剤を得るための合成経路を以下の実験セクションに示す。金属イオンの供給源という用語は、本発明の前駆体化合物と単一の段階で反応して式Iの金属キレート-CH1-M1をを生成する化学形態の金属イオンをいう。例えば、金属イオンがテクネチウムである場合、標識のための通常のテクネチウム供給源は、テクネチウムがTcVII酸化状態にある過テクネチウム酸イオン即ち、TcO4である。過テクネチウム酸イオン自体は容易に錯体を形成せず、したがってテクネチウム錯体の製造には、第一スズイオンのような適当な還元剤を添加してテクネチウムの酸化状態を低い酸化状態通常はTcI乃至TcVに還元することで錯化を容易にすることが通常必要である。溶媒は、有機溶媒又は水性溶媒或いはこれらの混合物であり得る。溶媒が有機溶媒を含む場合、有機溶媒は好ましくはエタノール又はジメチルスルホキシドDMSOのような生体適合性溶媒である。好ましくは、溶媒は水性溶媒であり、最も好ましくは等張食塩水である。GdIIIで標識することが所望される場合には、Gd2O3を本発明の前駆体化合物と反応させることができる。インビボイメージング剤に関する当業者は、本発明における用途に適した金属イオンの他の供給源に精通しているであろう。さらなる詳細については、読者は、HandbookofRadiopharmaceuticals2003;WelchandRedvanly,Eds及びContrastAgents:MagneticResonanceImaging2002;Springer-Verlag:KrauseEdを参照されたい。本発明のこの態様に適用される、本発明のインビボイメージング剤及び本発明の前駆体化合物の好適な実施形態及び好ましい実施形態は、上記に記載した通りである。キットさらに別の態様では、本発明は、本発明のインビボイメージング剤を製造するため、好ましくは本発明の医薬組成物を製造するための上記方法を実施するためのキットであって、本明細書中に記載した本発明の前駆体化合物を含むバイアルを含んでなるキットを提供する。本発明の前駆体化合物は、好ましくは無菌で非発熱性の形態で本発明のキット中に供給される。したがって、適当な金属イオンの無菌供給源と反応させることにより、最小数の操作で所望の医薬品が得られる。かかる考慮事項は、放射性医薬品特に、放射性同位体が比較的短い半減期を有する放射性医薬品の場合において、取扱いを容易にし、したがって放射性薬剤師に対する放射線量を低減させるために特に重要である。かくして、かかるキットの再構成用の反応媒質は好ましくは上記に定義したような薬学的に許容されるキャリヤーであり、最も好ましくは水性のものである。好適なキット容器は、注射器による溶液の追加及び抜取りを許しながら、無菌保全性及び/又は放射能安全性の維持、さらに任意には不活性ヘッドスペースガス例えば、窒素又はアルゴンの維持を可能にする密封容器を含んでいる。好ましいかかる容器は、気密クロージャーを通例はアルミニウムからなるオーバーシールと共にクリンプ加工したセプタムシールバイアルである。かかる容器は、例えばヘッドスペースガスの交換又は溶液のガス抜きのために所望される場合、クロージャーが真空に耐え得るという追加の利点を有している。キット中に使用する場合、本発明の前駆体化合物の好ましい態様は、本明細書中に記載した通りである。キット中に使用するための前駆体化合物を無菌製造条件下で使用すれば、所望の無菌で非発熱性の材料を得ることができる。また、前駆体化合物を非無菌条件下で使用し、続いて例えばγ線照射、オートクレーブ処理、乾熱又は例えば、エチレンオキシドによる化学処理を用いる終末滅菌を施すこともできる。好ましくは、前駆体化合物は無菌で非発熱性の形態で使用される。最も好ましくは、無菌で非発熱性の前駆体化合物は上述したような密封容器に入れて使用される。99mTcに関しては、キットは好ましくは凍結乾燥され、99mTc放射性同位体ジェネレーターからの無菌の99mTc-過テクネチウム酸イオンTcO4を用いて再構成することで、それ以上の操作なしにヒトへの投与に適した溶液を与えるように設計されている。好適なキットは、未錯化キレート剤を、薬学的に許容される還元剤例えば、亜ジチオン酸ナトリウム、重亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸、ホルムアミジンスルフィン酸、第一スズイオン、FeII又はCuI及び弱有機酸と薬学的に許容される陽イオンとからなる1種以上の塩と共に収容した容器例えば、セプタムシールバイアルを含んでいる。薬学的に許容される陽イオンという用語は、イオン化して負に帯電した基と共に塩を形成する正に帯電した対イオンを意味する。この場合、前記正に帯電した対イオンも無毒性であり、したがって哺乳動物体特に人体への投与に適している。好適な薬学的に許容される陽イオンの例には、アルカリ金属であるナトリウム及びカリウム、アルカリ土類金属であるカルシウム及びマグネシウム、並びにアンモニウムイオンがある。好ましい薬学的に許容される陽イオンはナトリウム及びカリウムであり、最も好ましくはナトリウムである。99mTcイメージング剤製造用のキットは、任意にはさらに、トランスキレーターとして機能する第2の弱有機酸又はそれと生体適合性陽イオンとの塩を含むことができる。トランスキレーターは、テクネチウムと迅速に反応して弱い錯体を形成し、次いでキットのキレーターによって置換される化合物である。これは、テクネチウム錯化と競合する過テクネチウム酸イオンの迅速な還元によって還元加水分解テクネチウムRHTが生成するリスクを最小限に抑える。好適なかかるトランスキレーターは上述した弱有機酸及びその塩であり、好ましくは酒石酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩又はホスホン酸塩、好ましくはホスホン酸塩、最も好ましくはジホスホン酸塩である。好ましいかかるトランスキレーターは、MDP即ち、メチレンジホスホン酸又はそれと生体適合性陽イオンとの塩である。99mTcキットに関してはまた、キットはキレーターの非放射性金属錯体を任意に含むことができる。これは、テクネチウムを添加すると、金属交換反応即ち、リガンド交換を受けて所望の生成物を与える。好適なかかる金属交換反応用錯体は銅又は亜鉛錯体である。99mTcイメージング剤キット中に使用される薬学的に許容される還元剤は、好ましくは塩化第一スズ、フッ化第一スズ又は酒石酸第一スズのような第一スズ塩であり、無水状態又は水和状態のいずれであってもよい。第一スズ塩は、好ましくは塩化第一スズ又はフッ化第一スズである。キットはさらに、放射線防護剤、抗菌防腐剤、pH調整剤又はフィラーのような追加成分を任意に含むことができる。放射線防護剤という用語は、水の放射線分解から生じる含酸素遊離基のような高反応性遊離基を捕捉することで分解反応例えば、レドックス過程を阻止する化合物を意味する。本発明の放射線防護剤は、好適には、アスコルビン酸、p-アミノ安息香酸即ち、4-アミノ安息香酸、ゲンチシン酸即ち、2,5-ジヒドロキシ安息香酸及びこれらと薬学的に許容される陽イオンとの塩から選択される。薬学的に許容される陽イオン及びその好ましい実施形態は、上述した通りである。抗菌防腐剤という用語は、潜在的に有害な微生物例えば、細菌、酵母又はかびの増殖を阻止する薬剤を意味する。抗菌防腐剤はまた、用量に応じ、多少の殺菌性を示すこともある。本発明の抗菌防腐剤の主な役割は、再構成後の医薬品組成物中におけるこのような微生物の増殖を阻止することである。しかし、抗菌防腐剤は、再構成前のキットの1種以上の成分中における潜在的に有害な微生物の増殖を阻止するためにも任意に使用できる。好適な抗菌防腐剤には、パラベン類即ち、メチル、エチル、プロピル又はブチルパラベン或いはこれらの混合物、ベンジルアルコール、フェノール、クレゾール、セトリミド及びチオメルサールがある。好ましい抗菌防腐剤はパラベン類である。pH調整剤という用語は、再構成されたキットのpHがヒト又は哺乳動物への投与に許容し得る範囲およそpH4.0~10.5内にあることを保証するために有用な化合物又は化合物の混合物を意味する。好適なかかるpH調整剤には、トリシン、リン酸塩又はTRIS即ち、トリスヒドロキシルメチルアミノメタンのような薬学的に許容される緩衝剤、及び炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム又はこれらの混合物のような薬学的に許容される塩基がある。前駆体化合物を酸性塩の形態で使用する場合には、pH調整剤を任意には独立のバイアル又は容器に入れて供給することができ、その結果としてキットのユーザーは多段操作の一部としてpHを調整することができる。フィラーという用語は、製造及び凍結乾燥中における材料の取扱いを容易にすることができる薬学的に許容される増量剤を意味する。好適なフィラーには、塩化ナトリウムのような無機塩、及びスクロース、マルトース、マンニトール又はトレハロースのような水溶性糖又は糖アルコールがある。臨床使用本発明のインビボイメージング剤は、結核菌MycobacteriatuberculosisMTBによって引き起こされる感染症の診断及びモニタリングにおいて使用できる。したがって本発明は、被験体内に存在するMTBの位置及び/又は量を決定するための方法であって、a本明細書中に記載したインビボイメージング剤を、インビボイメージングに適した量で前記被験体に投与する段階、b投与したインビボイメージング剤を前記被験体内に存在するMTBに結合させる段階、c前記インビボイメージング剤中に含まれる、インビボイメージングに適した前記金属イオンから放出される信号を適当なインビボイメージング操作によって検出する段階、d前記信号の位置及び/又は量を表す画像を生成する段階、並びにe前記信号の位置及び/又は量を前記被験体内に存在するMTBの位置及び/又は量に帰因させる段階を含んでなる方法を提供する。インビボイメージング剤を投与する段階は、好ましくは非経口的に実施され、最も好ましくは静脈内に実施される。静脈内経路は、インビボイメージング剤を被験体の身体全域に送達するための最も効率的な方法であると共に、被験体の身体に対して実質的な物理的介入を及ぼさない。実質的なという用語は、実施するために職業的な医学専門技術を必要とするか、或いは所要の職業的医療及び専門技術をもって実施した場合でも実質的な健康リスクを伴う介入を意味する。本発明のインビボイメージング剤は、好ましくは本明細書中に記載される本発明の医薬組成物として投与される。本発明のインビボイメージング方法はまた、本発明のインビボイメージング剤を予め投与した被験体に関して実施される上述の段階b~eを含むものとしても理解できる。投与段階後かつ検出段階前に、インビボイメージング剤を前記被験体内に存在するMTBに結合させる。例えば、被験体がインタクトな哺乳動物である場合、インビボイメージング剤は哺乳動物の身体を通って動的に移動し、体内の様々な組織に接触する。ひとたびインビボイメージング剤がMTBに接触すれば、2種の実体が結合する結果、MTBが存在する組織からのインビボイメージング剤のクリアランスは、MTBが存在しない組織又はMTBが少ない組織よりも長い時間がかかる。一定の時点に達すれば、MTBをもった組織に結合したインビボイメージング剤とMTBをもたない組織に結合したインビボイメージング剤との比の結果として、MTBに特異的に結合したインビボイメージング剤の検出が可能となる。これが検出段階を実施するための最適時点である。本発明の方法の検出段階は、放射性同位体から放出される信号を、前記信号に対して感度を有する検出器によって検出することを含んでいる。この検出段階はまた、信号データの取得として理解することもできる。γ線放出型金属イオンに関しては単光子放出断層撮影SPECTが使用され、陽電子放出型金属イオンに関しては陽電子放出断層撮影PETが使用され、常磁性金属イオンに関しては磁気共鳴イメージングMRIが使用される。本発明の方法の生成段階は、取得された信号データに再構築アルゴリズムを適用してデータセットを得るコンピューターによって実施される。次いで、このデータセットを操作することで、インビボイメージング剤中に含まれる金属イオンから放出される信号の位置及び/又は量を示す画像が生成される。放出される信号はMTBの存在と直接に相関する結果、生成された画像を評価することで決定段階を行うことができる。本発明の被験体は、任意のヒト又は動物被験体であり得る。好ましくは、本発明の被験体は哺乳動物である。最も好ましくは、前記被験体はインタクトな哺乳動物生体である。特に好ましい実施形態では、本発明の被験体はヒトである。本インビボイメージング方法は、MTBによって引き起こされるTBを有することが知られ又は疑われる被験体において使用できる。本発明のインビボイメージング方法は、前記被験体に関する治療計画の進行中に繰り返して実施することができ、前記計画はMTBによって引き起こされるTBと戦うための薬物の投与を含んでいる。別の態様では、本発明は、被験体内に存在するMTBの位置及び/又は量を決定するための、本明細書中に前述した方法で使用するための本発明の医薬組成物を提供する。さらに本発明は、被験体内に存在するMTBの位置及び/又は量を決定するための、本明細書中に前述した方法で使用するための本発明の医薬組成物の製造における、本発明のインビボイメージング剤の使用を提供する。実施例の簡単な説明実施例1は、本発明の前駆体を製造するための出発原料の合成を記載している。実施例2は、本発明の特定の前駆体化合物を得るための方法を記載している。実施例3は、実施例1からの前記化合物をレニウムで標識するための方法を記載している。実施例4は、実施例1の前記化合物を99mTcで放射性標識して本発明のインビボイメージング剤を得るための方法を記載している。実施例5は、本発明の化合物のレニウム誘導体のインビトロ評価を記載している。実施例中で使用される略語のリストDCMジクロロメタンEDTAエチレンジアミン四酢酸HPLC高速液体クロマトグラフィーMeOHメタノールmgミリグラムmLミリリットルmmolミリモルMS質量分析MSAメタンスルホン酸NMR核磁気共鳴RT室温THFテトラヒドロフラン実施例1:N’-[2-4-メトキシ-ベンジルスルファニル-エチル]-N’-{2-[4-メトキシ-ベンジルスルファニル-エチルアミノ]-エチル}-プロパン-1,3-ジアミン11a2-4-メトキシ-ベンジルスルファニル-エチルアミンの合成窒素ブランケット下でナトリウム1.50g、65.2mmolを少量約100mgずつ、激しく撹拌したメタノール50ml、HPLCグレードに添加した。発泡が止んだ時、2-アミノエタンチオール塩酸塩3.6g、31.6mmolを一度に添加したところ、溶液から塩化ナトリウムが沈殿した。p-メトキシベンジルクロリド5.0g、32.0mmolを一度に添加し、混合物を75~80°Cで30分間加熱還流した。冷却後、固体を濾過によって除去し、濾過ケークをメタノール15mlで洗浄した。有機抽出液を合わせ、揮発分を減圧10mmHg、40°C下で除去することで、塩化ナトリウム結晶を含む無色の油状物を得た。この残留物をDCM25mlに再溶解し、水25ml×3で抽出し、MgSO4で乾燥し、濾過し、溶媒を除去して無色の油状物を得た。この物質はほとんど95が所望の化合物からなり、それ以上は精製しなかった。収量5.4g87。1H-NMRCDCl3δ1.252H,bs,NH2,2.422H,t,J=7Hz,SCH2,2.732H,t,J=7Hz,CH2N,2.732H,s,SCH2Ar,3.743H,s,OCH3,6.772H,d,J=7Hz,CHx2,7.152H,d,J=7Hz,CHx2。1bN-{4-メトキシ-ベンジルスルファニル-エチル}-2-クロロアセトアミドの合成2-4-メトキシ-ベンジルスルファニル-エチルアミン1.0g、5mmol及びトリエチルアミン600mg、5.9mmolを乾燥DCM20mlに溶解した氷浴冷却0~5°C溶液に、乾燥DCM5ml中のクロロアセチルクロリド630mg、5.6mmolを撹拌しながら5分かけて滴下した。滴下後、冷却浴を取り除き、撹拌を30分間続けた。溶液を水50ml×2で抽出し、MgSO4で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させて淡黄褐色の固体を得た。収量1.30g95。この物質はそれ以上の精製を必要としなかった。1H-NMRCDCl3:δ2.542H,t,J=7Hz,SCH2,3.392H,t,J=7Hz,NCH2,3.662H,s,SCH2Ar,3.993H,s,OCH3,6.822H,d,J=8Hz,CHx2,6.901H,bs,NH,7.212H,d,J=8Hz,CHx2。1cメチル3-[4-メトキシ-ベンジルスルファニル-エチルアミノ]プロパノエート2-4-メトキシ-ベンジルスルファニル-エチルアミン1.0g、5mmolをメタノール5mlに溶解した撹拌溶液に、メタノール1ml中のアクリル酸メチル440mg、5.1mmolを一度に添加した。無色の溶液をRTで2時間撹拌した。揮発分を回転蒸発によって除去することで、生成物を約95の純度を有する無色の粘稠な油状物として得た。収量1.35g96。DCM/MeOH98:2で溶出するシリカ上でのクロマトグラフィーによって分析試料を得た。生成物は無色の粘稠な油状物として単離されたrf=0.2。1H-NMRCDCl3δ1.671H,bs,NH,2.452H,t,J=7Hz,CH2C=O,2.532H,t,J=7Hz,SCH2,2.722H,t,J=7Hz,NCH2,2.812H,t,J=7Hz,NCH2,3.642H,s,SCH2-C-N,3.663H,s,OCH3ester,3.753H,s,OCH3メトキシ,6.802H,d,J=8Hz,CHx2,7.202H,d,J=8Hz,CHx2。1d3-[2-4-メトキシベンジルスルファニル-エチルアミノ]プロパンアミドメチル3-[4-メトキシ-ベンジルスルファニル-エチルアミノ]プロパノエート1.35g、4.8mmol、メタノール15ml及びアンモニア溶液25mlをRTで16時間撹拌した。揮発分を減圧10mmHg、50°C下で除去かることで、静置後に凝固する粘稠な油状物を得た。収量1.28g99。この物質は約95の純度を有し、次の段階で使用できる。DCM/メタノール80:20で溶出するシリカ上でのクロマトグラフィーによる精製後に分析試料を得た。生成物はrf=0.15を有し、白色の固体として単離それた。1H-NMRCDCl3δ2.542H,t,J=7Hz,CH2C=O,2.652H,t,J=7Hz,SCH2-C-N,2.912H,t,J=7Hz,NCH2,3.002H,t,J=7Hz,NCH2,3.842H,s,SCHPh,3.953H,s,OCH3,7.002H,d,J=8Hz,CHx2,7.482H,d,J=8Hz,CHx2。1e3-[2-4-メトキシ-ベンジルスルファニル-エチル]-{[2-4-メトキシ-ベンジルスルファニル-エチルカルバモイル]-メチル}-アミノプロピオンアミド3-[2-4-メトキシベンジルスルファニル-エチルアミノ]プロパンアミド670mg、2.5mmol、N-{4-メトキシ-ベンジルスルファニル-エチル}-2-クロロアセトアミド680mg、2.5mmol、トリメチルアミン300mg、3mmol及びアセトニトリル5mlを70°Cで16時間加熱還流した。溶媒を減圧下で除去して橙色/褐色の残留物を得、これをDCM25mlに再溶解し、水25ml×2で抽出し、MgSO4で乾燥し、濾過し、溶媒をロータリーエバポレーターで蒸発させた。残留物をDCM/メタノール95:5で溶出するシリカ上で精製することでrf=0.15、無色の粘稠な油状物を得た収量450mg、36。1H-NMRCDCl3δ2.272H,t,J=7Hz,CH2CO,2.512H,t,J=7Hz,SCH2,2.552H,t,J=7Hz,SCH2,2.622H,t,J=7Hz,NCH2,2.762H,t,J=7Hz,NCH2,3.042H,s,NCH2CO,3.392H,q,J=6Hz,H2CNH,3.622H,s,SCH2Ph,3.652H,s,SCH2Ph,3.766H,s,OMex2,5.521Hbs,NH,5.971H,bs,NH,6.814H,bd,J=8Hz,CHx4,7.182H.d,J=8Hz,CHx2,7.202H,d,J=8Hz,CHx2,7.701H,bt,J=6Hz,HNCO。1fN’-[2-4-メトキシ-ベンジルスルファニル-エチル]-N’-{2-[4-メトキシ-ベンジルスルファニル-エチルアミノ]-エチル}-プロパン-1,3-ジアミン13-[2-4-メトキシ-ベンジルスルファニル-エチル]-{[2-4-メトキシ-ベンジルスルファニル-エチルカルバモイル]-メチル}-アミノプロピオンアミド450mg、0.89mmolに、THF中の1.0Mボラン12ml、12mmolを窒素雰囲気下で注射器によって添加した。得られた無色の溶液を70°Cで加熱還流した。約40分後に白色のガム状物が沈殿したが、加熱をさらに16時間続けた。RTに冷却した後、水2mlを滴下して激しい発泡を停止させた。溶媒を減圧下で除去してろう状の固体を得、これに希HCl2、20mlを添加し、混合物を100°Cで3時間加熱還流した。冷却後、pH10~11に達するまで水酸化ナトリウムを添加した。この混合物をDCM25ml×3で抽出し、画分を合わせ、MgSO4で乾燥し、濾過し、溶媒を蒸発させてろう状の固体を得た。この物質を13CNMRで分析したところ、一還元及び二官能性生成物の混合物であることが判明した。この物質を、DCM/MeOH/NH4OH90:10:1で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーに付した。生成物はrf=0.35で溶出し、無色の油状物として単離された。収量180mg42。1H-NMRCDCl3δ1.482H,五重線,J=7Hz,-CH2-,2.29-2.5215H,SCH2x24xCH2NNH2NH,m,2.642H,t,J=7Hz,NCH2,2.672H,t,J=7Hz,NCH2,3.594H,s,SCH2Phx2,3.706H,s,OCH3x2,6.764H,d,J=9Hz,CHx4,7.154H,d,J=9Hz,CHx4。実施例2:前駆体化合物14-ヒドラジンカルボニル-N-3-2-4-メトキシベンジルチオエチル2-2-4-メトキシベンジルチオエチルアミノエチルアミノプロピルピコリンアミドジメチルホルムアミド中のピラジン酸2,15.4mg、0.125mmol、1-エチル-3-[3-ジメチルアミノプロピル]カルボジイミド塩酸塩30mg、0.156mmol、ヒドロキシベンゾトリアゾール2.8mg、0.02mmol及びトリエチルアミン21mg、0.208mmolの混合物に、150mg、0.104mmolをゆっくりと添加し、RTで一晩撹拌した。反応混合物を濃縮し、酢酸エチルに溶解し、水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、コンビフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。収量、21mg29。1HNMRCDCl3:δ9.37s,1H,8.73-8.77d,1H,8.5s,1H,7.17-2.27dd,4H,6.77-6.87dd,4H,3.78s,6H,3.72s,2H,3.66s,2H,3.52-3.6m,2H,2.48-3.02m,14Hand1.72-1.82m,2H。MSm/z:584.6MH。実施例3:前駆体化合物1のRe標識ZhenetalJMedChem1999;42:2805-2815によって記載された方法を、前駆体化合物1をレニウムで標識するために改変した。70mg0.117mmolの前駆体化合物1を1mLのトリフルオロ酢酸TFAに溶解し、1滴のアニソール及び0.2mLのMSAを添加した。反応混合物を窒素雰囲気下60°Cで90分間撹拌した。その後、それを真空下で2時間濃縮してTFA/アニソール/MSAを除去した。得られた塊状物を14mLのCH3OH:THF7:1中に取り、加熱還流した。塩化スズII49mg、0.25mmol、300μLの0.1MHCl中を添加し、続いて直ちに過レニウム酸ナトリウム70mg、0.25mmol、300μLの蒸留水中の溶液を添加した。還流を16時間続けた後、溶液を濾過して濃縮した。生成物を分取HPLCによって99の純度に精製した。MSm/z:558.3MH。実施例4:前駆体化合物1の99mTc標識MeegallaetalJMedChem1998;41:428-436によって記載された99mTc標識条件を使用すれば、前駆体化合物1を99mTcで標識することができる。要約すれば、上記実施例3に示した手順に従い、前駆体化合物10.2~0.4μmolをTFA/アニソール/MSAで処理する。揮発分の除去後、残留物を100μLのEtOH及び100μLのHCl1Nに溶解する。HCl500μL、1N、1mLのSn-グルコヘプトネート溶液136μgのSnCl2及び200μgのグルコヘプトン酸Naを含むもの、pH6.67及び50μLのEDTA溶液0.1Nを順次に添加する。次いで、食塩溶液中の[99mTc]過テクネチウム酸イオン100~200μL、1~20mCiを添加する。反応混合物を100°Cで30分間又はオートクレーブ内において121°Cで30分間加熱し、RTに冷却し、飽和NaHCO3溶液で中和する。錯体を酢酸エチル1×3mL、2×1.5mLで水性反応媒質から中和し、小さいNa2SO4カラムを通した後、酢酸エチル抽出液をN2流下で濃縮する。残留物を200μLのEtOHに溶解し、HPLCによって精製する。実施例5:インビトロ評価既知化合物の性質を本発明のインビボイメージング剤のレニウム誘導体と共に測定するため、一連のインビトロ試験を実施した。これらの試験は、MicroplateAlamarBlueAssayMABAFranzblauSetal.,JClinMicrobiol1998,36,362-366、LowOxygenRecoveryAssayLORAChoetal.,AntimicroAgentsChemother2007,51,1380-1385、及びIC50を決定するためのVEROcellcytotoxicityassayCoryAHetal.,CancerCommun1991,3,207-12であった。5aMicroplateAlamarBlueAssayMABA最初のスクリーンは、MicroplateAlamarBlueAssayMABAを用いて、BACTEC12B培地中のMycobacteriumtuberculosisH37RvATCC27294に対して行った。10の2倍希釈液通例100μg/mL~0.19μg/mL、pH6.8中で化合物を試験した。MIC90は、対照に比べて蛍光を90低減させる濃度として定義される。この値は、曲線当てはめプログラムを用いて用量-応答曲線から求めた。5bLowOxygenRecoveryAssayLORAこのアッセイは、単一濃度通例≧10μM又はμg/mlで、ルシフェラーゼ遺伝子を有する低酸素順応M.tuberculosisH37Rvに対して行った。嫌気条件下で試験化合物に10日間暴露し、発光の阻止を読み取った。5cIC50を決定するための方法VEROcellcytotoxicityassayは、TBDoseResponseassayと並行して行った。72時間の暴露後、存在するATPの定量化に基づいて培養物中の生存可能な細胞の数を決定するための均質方法であるPromega’sCellTiterGloLuminescentCellViabilityAssayを用いて生存可能性を評価した。曲線当てはめプログラムを用いて、用量-応答曲線から細胞毒性をIC50として求めた。以下の表1は、親PZA化合物、上記実施例1fの方法で得られたキレーター、実施例2の方法で得られた、前記キレートにコンジュゲートされたPZA、及び実施例3の方法で得られた、前記キレートにコンジュゲートされたPZAのレニウム錯体に関して得られたデータを示している。"