"以下の式Iの構造を有するフルクトシル化プエラリン。I式中、R1とR2はそれぞれ独立して水素、メチル基、エチル基、ホルミル基、アセチル基、メチルアミノ基及び硫酸基から選択され、;Rはフルクトースモノグリコシルまたは2~5のフルクトースが接続したオリゴサッカリルであり、その構造は式IIに示す通りである:II式中、n=0~4である。フルクトシル化酵素活性を有する発酵液若しくは発酵液上澄み、または純化したフルクトシル化酵素若しくはその組換発現たんぱく質を使用して、プエラリンを含む変換液について生体内変換反応を行い、プエラリンをフルクトシル化プエラリンに変換することを含む、請求項1記載のフルクトシル化プエラリンの調製方法。変換終了後、変換液の中の菌体細胞または菌体たんぱく質などの不純物を除去し、その後樹脂精製により得られた目標留分を回転蒸発または冷凍乾燥し、フルクトシル化プエラリン粉末または結晶体を得ることを含む、請求項2に記載の調製方法。前記発酵液または発酵液上澄みが、フルクトシル化プエラリン活性を有する微生物の発酵により得られる;好ましいのは、前記微生物がアルスロバクタニコチアナエCCTCCNo.:M2010164である、請求項2または3に記載の調製方法。前記フルクトシル化酵素またはその組換発現たんぱく質がβ-D-フルクトフラノシダーゼまたはその組換発現たんぱく質であり;好ましいのは、前記β-D-フルクトフラノシダーゼは関節胞子菌属細菌から由来し、その分子量は約60kDa、N端前の5個のアミノ酸配列はそれぞれATEPVであることである、請求項2~4のいずれか1項に記載の調製方法。微生物の発酵に用いられる発酵培養基は以下を含み:サッカロース5~80g/L、ペプトン5~50g/L、KH2PO40.4~4g/L、CaCl20.5~5g/L、MnSO40.1~2g/L、pH6~8であり;好ましいのは、発酵条件が:25~40°C、10~400rpm振とうフラスコで振盪または発酵槽で撹拌して通気し、回転速度通気量は1~6vvm、10~400rpm、発酵時間は6~48時間であり;更に好ましいのは、発酵培養基がサッカロース15g/L、ペプトン25g/L、KH2PO42g/L、CaCl22g/L、MnSO40.2g/Lを含み、pH7.5であり;発酵条件が更に好ましいのが:30°C、240rpmで振とうフラスコで16時間振盪または発酵槽で撹拌して通気し、回転速度通気量は4vvm、300rpmで、6時間発酵することである、請求項2~5のいずれか1項に記載の調製方法。前記生体内変換反応が水相または非水相において行われ;好ましいのは、前記水相変換が以下を含むことであり:10~400rpm振とうフラスコで振盪または発酵槽で撹拌し、プエラリン濃度は0.1g/Lを上回る数値から飽和までであり、グリコシル供与体はフルクトースまたはサッカロースまたは2つの混合物であり、プエラリンとグリコシル供与体モル比は1:1~1:200であり、反応系の10~50を占めるフルクトシル化酵素10-100U/mLの発酵液または発酵液上澄みを加え、任意の1種類pH4~8の緩衝溶液の中で行い、変換温度は25~40°C、反応時間は6~96時間であり;好ましい条件は以下の通りであり:10g/Lプエラリン、100g/Lサッカロースをグリコシル供与体とし、20のフルクトシル化酵素30U/mLを含む発酵液上澄みを、1/15mol/L、pH6.86のリン酸塩緩衝溶液の5L発酵槽の中に加え、30°C、300rpmで12時間撹拌変換し;好ましいのは、前記非水相変換条件に以下を含むことであり:10~400rpm振とうフラスコで振盪または発酵槽で撹拌し、5~50のジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、メタノール、アセトンまたはエタノールから選択した1種または数種の親水性有機溶剤を使い、プエラリン濃度は5~200g/Lであり、プエラリン濃度は5~120g/L、グリコシル供与体はフルクトースまたはサッカロースまたは2つの混合物であり、プエラリンとグリコシル供与体のモル比は1:1~1:200であり、反応系の10~50を占めるフルクトシル化酵素10-100U/mLを含む発酵液または発酵液上澄みを加え、反応時間は6~96時間であり;好ましい条件は以下の通りであり:20のフルクトシル化酵素30U/mLを含む発酵液上澄みを、1/15mol/L、pH6.86のリン酸塩緩衝溶液の5L発酵槽に加え、30°C、300rpmで72時間撹拌変換する、請求項2~6のいずれか1項に記載の調製方法。前記樹脂精製はフルクトシル化プエラリンを含む変換液をAB-8マクロ孔質樹脂の吸着により、選択として、例えば非水相変換であり、前記吸着は変換液における有機溶剤を低温蒸発して除去または有機溶剤を2未満の体積比まで希釈した条件の下で行い;吸着後はまず溶離液で残りのグリコシル供与体を洗い落とし、また溶離液で勾配溶離または段階溶離してそれぞれフルクトシル化プエラリンを得て;さらに10倍カラムベッド体積でpH4~4.5の蒸留水を使用して残りのグリコシル供与体を洗い落とし、その後5~30のメタノールまたはエタノール溶液で勾配溶離または段階溶離してそれぞれフルクトシル化プエラリンを得る、請求項2~7のいずれか1項に記載の調製方法。溶離液を使用し残りのプエラリンを洗い落として回収し;好ましいのは、100のメタノールまたはエタノールを使用して残りのプエラリンを洗い落として回収する、請求項2~8のいずれか1項に記載の調製方法。請求項1記載のフルクトシル化プエラリンの脳心血管関連疾病および/または腫瘍関連疾病の治療用薬物の製造における使用。プエラリンは水溶性が比較的劣っていることから、生体内変換法を使用してプエラリングリコシル化改変を行う時、変換前のプエラリン濃度はおしなべて比較的低くいずれも10g/L以下、生成物のモル転換率も比較的低くいずれも70以下、これらの限界性は得られた充分な生成物に脳心血管および腫瘍関連の疾病の薬理実験を行い、且つ後期の工業化生産にかなりの難易度をもたらした。前記技術問題を解決するため、本発明の目的は新型のフルクトシル化プエラリンを提供することである。本発明のもう1つの目的は、前記フルクトシル化プエラリンの調製方法であり、具体的に、アルスロバクタニコチアナエラテン語学名:ArthrobacternicotianaeXM6、分類名:アルスロバクタニコチアナエXM6、2010年6月29日に中国典型培養物保存センターに保存、住所:中国武漢武漢大学、郵便番号:430072、保存番号:CCTCCNO:M2010164で水相または非水相においてフルクトシル化プエラリンを生体内変換する。本発明のまたもう1つの目的は、前記フルクトシル化プエラリンを脳心血管関連の疾病を治療する薬物の調製に提供する用途である。本発明のさらにもう1つの目的は前記フルクトシル化プエラリンを腫瘍関連の疾病を治療する薬物の調製に提供する用途である。本発明の目的は以下の技術法案により実現する。一方で、本発明はフルクトシル化プエラリンを提供し、前記フルクトシル化プエラリンは以下の式Iが示す構造である:I式中、R1とR2はそれぞれ独立して水素、メチル基、エチル基、ホルミル基、アセチル基、メチルアミノ基及び硫酸基から選択され、;Rはフルクトースモノグリコシルまたは2~5のフルクトースが接続したオリゴサッカリルであり、その構造は式IIに示す通りである:II式中、n=0~4である。もう一方で、本発明は前記フルクトシル化プエラリンの調製に用いる方法を提供し、前記方法にはフルクトシル化酵素活性を有する発酵液または発酵液上澄みまたは純化したフルクトシル化酵素またはその組換発現たんぱく質を使用して、プエラリンを含む変換液について生体内変換反応を行い、プエラリンをフルクトシル化プエラリンに変換することを含む。好ましいのは、前記方法はまた変換終了後、変換液の中の菌体細胞または菌体たんぱくなどの不純物を除去し、樹脂精製により得られた目標留分を回転蒸発または冷凍乾燥後にフルクトシル化プエラリン粉末または結晶体を得ることを含むことである。好ましいのは、前記発酵液または発酵液上澄みはフルクトシル化プエラリン活性を有する微生物の発酵により得ることであり;さらに好ましいのは、前記微生物がアルスロバクタニコチアナエArthrobacternicotianaeXM6CCTCCNO:M2010164であることである。好ましいのは、微生物の発酵に用いられる発酵培養基には以下のものが含まれることである:サッカロース5~80g/L、ペプトン5~50g/L、KH2PO40.4~4g/L、CaCl20.5~5g/L、MnSO40.1~2g/L、pH6~8;発酵条件は以下の通りであることが好ましく:25~40°C、10~400rpm振とうフラスコで振盪または発酵槽で撹拌して通気し、回転速度通気量は1~6vvm、10~400rpmで、発酵時間は6~48時間であり;さらに好ましいのは、発酵培養基はサッカロース15g/L、ペプトン25g/L、KH2PO42g/L、CaCl22g/L、MnSO40.2g/Lを含み、pH7.5を含み;発酵条件はさらに以下の通りが好ましく:30°C、240rpmで振とうフラスコで16時間振盪または発酵槽で撹拌して通気し、回転速度通気量は4vvm、300rpmで、発酵時間は6時間である。好ましいのは、前記生体内変換反応は水相または非水相において行うことで;そのうち、前記水相変換条件には以下を含む:10~400rpmで振とうフラスコで振盪または発酵槽で撹拌し、プエラリン濃度は0.1g/Lより上から飽和までとし、グリコシル供与体はフルクトースまたはサッカロースまたは2つの混合物とし、プエラリンとグリコシル供与体モル比は1:1~1:200、反応系の10~50を占める発酵液または発酵液上澄みフルクトシル化酵素10~100U/mLを含むを加え、任意の一種類pH4~8の緩衝溶液の中で行い、変換温度は25~40°Cであり、反応時間は6~96時間あり;好ましい条件は以下の通りである:10g/Lプエラリン、100g/Lサッカロースをグリコシル供与体とし、20の発酵液上澄みフルクトシル化酵素30U/mLを含むを、1/15mol/Lリン酸塩緩衝溶液pH6.86の5L発酵槽の中に加え、30°C、300rpmで12時間撹拌変換を行う。前記非水相変換条件は以下のものが含まれる:10~400rpm振とうフラスコで振盪または発酵槽で撹拌し、5~50のジメチルスルホキシドDMSO、ジメチルホルムアミドDMF、アセトニトリル、メタノール、アセトンまたはエタノールから選択した一種または数種の親水性有機溶剤を使い、プエラリン濃度は5~200g/Lとし、好ましいプエラリン濃度は5~120g/Lとし、グリコシル供与体はフルクトースまたはサッカロースまたは2つの混合物とし、プエラリンとグリコシル供与体のモル比は1:1~1:200、10~50の発酵液または発酵液上澄みフルクトシル化酵素10~100U/mLを含むを加え、任意の一種類pH4~8の緩衝溶液の中で、変換温度は25~40°Cで、反応時間は6~96時間とし;好ましい条件は以下の通り:20のDMSO、107.5g/Lプエラリンを使用し、350g/Lサッカロースをグリコシル供与体とし、20の発酵液上澄みフルクトシル化酵素30U/mLを含むを1/15mol/Lリン酸塩緩衝溶液pH6.86の5L発酵槽に加え、30°C、300rpmで72時間撹拌変換する。好ましいのは、前記樹脂精製はフルクトシル化プエラリンを含む変換液をAB-8マクロ孔質樹脂の吸着により、選択として、例えば非水相変換であり、前記吸着は変換液における有機溶剤を低温蒸発して除去または有機溶剤を2未満の体積比まで希釈した条件の下で行い;吸着後はまず溶離液で残りのグリコシル供与体を洗い落とし、また溶離液で勾配溶離または段階溶離してそれぞれフルクトシル化プエラリンを得ることであり;さらに好ましいのは、10倍カラムベッド体積でpH4~4.5の蒸留水を使用して残りのグリコシル供与体を洗い落とし、その後5~30のメタノールまたはエタノール溶液で勾配溶離または段階溶離してそれぞれフルクトシル化プエラリンを得ることである。好ましいのは、前記方法がまた溶離液で残りのプエラリンを洗い落として回収することを含むことであり;さらに好ましいのは、100メタノールまたはエタノールで残りのプエラリンを洗い落として回収することである。好ましいのは、前記フルクトシル化酵素またはその組換発現たんぱく質はβ-D-フルクトフラノシダーゼまたはその組換発現たんぱく質であることである。さらに好ましいのは、前記β-D-フルクトフラノシダーゼは関節胞子菌属細菌から由来し、その分子量は約60kDa、N端前の5個のアミノ酸序列はそれぞれATEPVであることである。もう一方で、本発明はまた前記フルクトシル化プエラリンを脳心血管関連の疾病を治療する薬物を調製する用途を提供する。さらにもう一方で、本発明は前記フルクトシル化プエラリンを腫瘍関連の疾病を治療する薬物を調製する用途を提供する。好ましいのは、前記薬物は注射剤または内服製剤であることである。以下は本発明の詳細な説明であり:本発明の目的に達するため、本申請は以下の技術法案を採用する:本発明の実施方法に基づき、本発明は式Iが示す新型のフルクトシル化プエラリンを提供する:I式中、R1とR2のそれぞれ選択された置換基は水素基、メチル基、エチル基、ホルミル基、アセチル基、メチルアミノ基と硫酸基の中の一種類である。式Iの中の、Rは式IIが示す通りである:式中、n=0~4。Rはフルクトースモノグリコシルまたは2から5のフルクトースが接続したオリゴサッカリルである。前記化合物は酵素法により調製され、例えばクロマトグラフ、液体抽出、再結晶方法といった各種の通常方法を用い、純化を行うことができる。前記化合物の構造は元素分析、赤外線スペクトル、可視紫外スペクトル、核磁気共鳴、単結晶X線回折の手段により表すことができる。本発明のもう1つの実施方法に基づき、本発明はフルクトシル化プエラリンを生体内変換する方法を提供する。本発明はプエラリンフルクトシル化酵素活性を有する発酵液、または発酵液上澄み細胞外酵素、または前記酵素の組換発現たんぱく質を使用し、プエラリンを含む水相または非水相変換液の中に加え、プエラリンをフルクトシル化プエラリンに変換し;変換が終了後、変換液の中の菌体細胞または菌体酵素たんぱく質は加熱により沈殿し、遠心除去し;その後変換液はAB8マクロ孔質樹脂により分離を行い、目標留分を回転蒸発または冷凍乾燥後にフルクトシル化プエラリン粉末または結晶体を得る。前記プエラリンフルクトシル化活性を有する微生物菌種は全てのフルクトシル化プエラリンの微生物またはグリコシドヒドロラーゼ、特にアルスロバクタニコチアナエArthrobacterniconianaeXM6CCTCCNO:M2010164でよい。前記プエラリンフルクトシル化活性を有する細胞外酵素、または前記酵素の組換発現たんぱく質はβ-D-フルクトフラノシダーゼまたはβ-D-フルクトフラノシダーゼ組換発現たんぱく質である。前記β-D-フルクトフラノシダーゼは関節胞子菌属細菌から発生する。前記培養基の栄養物質には特別な制限がなく、微生物の生長に適したあらゆる栄養媒質でもよく、例えばあらゆるでんぷん、グルコース、トウモロコシ粉、サッカロースを炭素源とし、コーンスチープリカー、大豆ケーキ粉、落花生ケーキ粉などを窒素源の培養基としてもよい。前記発酵培養に用いる培養基は:サッカロース5-80g/L、ペプトン5-50g/L、KH2PO40.4-4g/L、CaCl20.5-5g/L、MnSO40.1-2g/L、pH6-8である。前記発酵培養に用いる条件は:25~40°C、10~400rpm振とうフラスコで振盪または5L発酵槽で撹拌して通気し、回転速度通気量は1~6vvm、10~400rpmで、発酵時間は6-48時間である。前記生体内変換法、変換反応は水相または非水相の中で行ってもよく、変換温度の範囲は25~40°Cで、10~400rpm振とうフラスコで振盪または5L発酵槽で撹拌し、反応時間は6~96時間である。1水相変換条件は以下の通り:プエラリン濃度は0.1g/Lより上から飽和まで、グリコシル供与体はフルクトースまたはサッカロースまたは2つの混合物、プエラリンとグリコシル供与体のモル比は1:1~1:200、任意の1種のpH4~8の緩衝溶液における;2非水相変換条件は以下の通り:5~50の親水性有機溶剤ジメチルスルホキシドDMSO、ジメチルホルムアミドDMF、アセトニトリル、メタノール、アセトン、エタノールを使用し、プエラリン濃度は5~200g/L、好ましいプエラリン濃度は5~120g/L、グリコシル供与体はフルクトースまたはサッカロースまたは2つの混合物、プエラリンとグリコシル供与体のモル比は1:1~1:200、任意の1種のpH4~8の緩衝溶液における;前記フルクトシル化プエラリンを含む変換液はAB-8マクロ孔質樹脂の吸着により、変換液中の有機溶剤を低温蒸発して除去または有機溶剤を2より低い体積比まで希釈した条件の下で吸着を行い;第一溶離液は10倍のカラムベッド体積でpH4~4.5の蒸留水酢酸はpHを調節するで残りのグリコシル供与体を洗い落とし、第二溶離液は5~30のメタノールまたはエタノール溶液で勾配溶離または段階溶離でそれぞれフルクトシル化プエラリンを得て、第三溶離液は100のメタノールまたはエタノールで残りのプエラリンを洗い落として回収する。前記樹脂精製を経て得られたフルクトシル化プエラリン溶液について、回転蒸発または冷凍乾燥の後にフルクトシル化プエラリン粉末または結晶を得る。本発明のもう一種類の実施方法に基づき、本発明は新型プエラリングリコシル化誘導体を脳心血管関連の疾病を治療する薬物を調製する用途を提供する。本発明のモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンを用いあらゆる薬剤学で説明される剤型の薬物を製造することができ;前記で説明されている剤型の中で注射剤または内服製剤であることが好ましい。本発明の化合物モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンを用いたラット心筋虚血T波振幅変化試験は以下の通り示している:被験サンプルのモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンの用量はそれぞれ12.5mg/kg、25mg/kgと50mg/kgでありいずれも脳下垂体後葉より誘発されるT波振幅を顕著に減少することができ、且つT波の減少幅はプエラリンより小さいことについて、被験サンプルモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンがプエラリンと比べてより有効に心筋虚血作用を防止することができることを説明している。本発明の化合物モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンを使用して心筋虚血のラットに対する心拍数の実験結果は、脳下垂体後葉に注射後2分以内に各グループのラットはいずれも心拍数が明らかに下降し、2~10分で各グループの心拍数が回復を始めていることを示している。対照グループと比べて、被験サンプルのモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンの異なる用量のグループはいずれも心筋虚血ラットの心拍数の回復を速めることができ、且つモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンの低用量のグループの回復時間はプエラリングループよりも速い。被験サンプルのモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンは心筋虚血が引き起こす心拍数異常に対し一定の治療効果があることを説明している。本発明が説明しているフルクトシル化プエラリンは脳心血管疾病を治療する薬物を調製することができる。本発明のもう一種類の実施方法に基づき、本発明は新型プエラリングリコシル化誘導体を腫瘍関連の疾病を治療する薬物を調製する用途を提供する。本発明のモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンを用いあらゆる薬剤学で説明される剤型の薬物を製造することができ;説明される剤型の中で注射剤または内服製剤であることが好ましい。本発明の化合物モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンを使用しヒトの乳腺癌細胞株MDA-MB-231とヒトの慢性骨髄性白血病細胞株K562の体外増殖抑制に対する試験は以下の通り示している:モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンは作用してから48時間後にいずれもMDA-MB-231細胞の細胞数を減らすことができる。同じ時間における対照グループを比較すると、モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンの容量が50μmol/Lに達する時に差異がありP<0.05、用量が10μmol/Lの時に顕著的な差異がありP<0.01、用量が150と200μmol/Lに達する時に前記差異は極めて顕著であり、MDA-MB-231細胞の抑制率はそれぞれ44.04と59.42達し、モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンは明らかにヒトの乳腺癌細胞株MDA-MB-231の増殖を抑制することができ、且つ抑制率は用量の増加に伴い増加することを説明している。モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンが作用してから48時間後にいずれもK562細胞の細胞数を減少させることができる。同じ時間における対照グループを比較すると、モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンの容量が低用量1μmol/Lの時にその結果には顕著な差異がありP<0.05、用量が100、150と200μmol/Lの時に前記差異は極めて顕著でP<0.001、K562細胞の抑制率はそれぞれ16.41と29.84と46.41に達することについて、モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンが明らかにヒトの慢性骨髄性白血病細胞株K562の増殖を抑制することができ、且つ抑制率は用量の増加に伴い増加することを説明している。被験サンプルのモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンは体外で腫瘍細胞に対し一定の抑制効果を有することを説明している。本発明が説明しているフルクトシル化プエラリンは腫瘍疾病を治療する薬物を調製することができる。従来の技術と比べ、本発明が有する有益な効果は以下の通りである:まず、本発明者は新しいフルクトシル化プエラリンを発明し、実験によりこれらの新型プエラリン誘導体は心筋虚血により起こる心拍異常に対し一定の治療作用を有し、有効的に脳心血管の疾病の治療に用いることができることを証明し、且つ実験は同時に新型プエラリン誘導体が体外でヒトの乳腺癌細胞株MDA-MB-231とヒトの慢性骨髄性白血病細胞株K562に対し顕著な抑制作用があり、腫瘍の疾病の治療に用いることができることを証明し、これはプエラリングリコシル化誘導体を薬物とする由来を豊富にするが、従来のプエラリングリコシル化誘導体でのこの方面の報道は見られない;次に、プエラリンと比べて、この新型フルクトシル化プエラリンの溶解度はよりよく、薬理活性が高く、プエラリン製品の欠陥を補っており、薬の使用の安全性は向上し、治療効果が向上し、よりよい発展の見込みを有する新薬製品であり;さらに、本発明者は前記新型フルクトシル化プエラリンの生体内変換法を提供している。従来の生体内変換法を使用しプエラリングリコシル化の改変を行う時、プエラリンの水溶性が比較的劣っているため、プエラリン濃度はおしなべて比較的低くいずれも10g/L以下、製品のモル転換率も比較的低いがいずれも70以下、本発明の生体内変換法を使用すると、得られるモノフルクトシル基-β2,6-プエラリン濃度は111.7g/Lに達し、基質変換率は90以上に達し、従来の技術に存在する技術課題を解決し、前記生成物を使用して脳心血管および腫瘍関連の疾病の薬理試験および後期の工業化生産を行うことに有利である。生体材料の保存情報学名:ArthrobacterniconianaeXM6、分類名:アルスロバクタニコチアナエXM6、2010年6月29日に中国典型培養物保存センタに保存、住所:中国武漢武漢大学、郵便番号:430072、保存番号:CCTCCNO:M2010164。理解できるのは、ここで説明する特定の実施方法は例を挙げた方法により表すもので、それを決して本発明に対する制限とはしない。本発明の範囲に乖離しない状況の下で、本発明の主な特徴は各種実施方法に用いることができる。本分野の技術者は、通常の実験を用いるだけで、多くの同等物が全て本文で説明する特定の手順に応用できることを意識または確認できるであろうこれらの同等物は本発明の範囲内にあると認識され、且つ特許請求によりカバーされる。以下の実施例において、詳細に説明されていない各種のプロセスと方法は本分野における周知の通常の方法である。使用した試薬の由来、商品名およびその構成成分を列挙する必要のあるものは、いずれも最初に現れる際に記し、その後同様の試薬の使用で特に説明がない場合は、いずれも最初に記した内容と同じである。実施例1:水相生体内変換プエラリンを使用しフルクトシル化プエラリンを得た40mL発酵培養の培養基2培養基の構成については表1を参照のことを250mLの三角フラスコに入れ、121°Cの高圧蒸気で20分間滅菌後、アルスロバクタニコチアナエArthrobacterniconianaeXM6CCTCCNO:M2010164。に組み込み、30°C、180rpmで16時間振盪、発酵培養し植種液として5Lの発酵槽に接種し、接種量は5体積、発酵槽に入れる液量は3L、発酵槽の滅菌方法は振とうフラスコと同様とした。30°C、300rpmで発酵培養し、通気量は3vvmで、6時間発酵培養ODは約10前後した後、8000rpmで20分間遠心し、上澄み酵素液を収集し、上澄み酵素液内に含まれているフルクトシル化酵素30U/mLを測定した。そのうち、酵素活性の測定には以下の方法を採用した:基質溶液の調製は:0.4gプエラリン、10gサッカロースを100mL、1/15mol/Lのリン酸塩緩衝溶液pH6.86に充分溶解させた。反応系:2mL、1/15mol/Lのリン酸塩緩衝溶液pH6.86を取り18mLの基質溶液に加え、30°Cの中に置いて10分間反応させた後、直ちに100μLを取り出し900μLのメタノールに加えて反応を終止させ、ブランクコントロールとした。同時に別途2mLの酵素液を取って18mLの基質溶液に加え、30°Cの中に置いて10分間反応させた後、直ちに100μLを取り出して900μLのメタノールに加えて反応を終止させ、サンプルとした。その後HPLCで測定を行った。酵素活性単位の定義は:30°Cの条件の下、毎分1μmolプエラリンを変換するのに必要な酵素量を1活力単位1Uは即ち1μmol/minとする。比活性の定義はU/mL:単位体積mL酵素液中に具有する酵素活性Uの数である。600mLの上澄み酵素液を総体積3000mLに10g/Lプエラリン南京沢朗医薬科技有限責任公司から購入、100g/Lサッカロース、1/15mol/Lリン酸塩緩衝溶液pH6.86を含む5L発酵槽の中に加え、30°C、300rpmでプエラリングリコシル化反応を行い、12時間後、45°Cで2時間加熱して変換反応を終止させた。変換液はHPLCにより検出され、フルクトシル化プエラリンの変換率は95に達した。結果参考図1。前記フルクトシル化プエラリンを含む変換液はAB-8マクロ孔質樹脂の吸着クロマトグラフィーカラム40×600mm、流速10mL/minを経て、その後10倍のカラムベッド体積でpH4~4.5の蒸留水氷酢酸はpHを調節で残りのグリコシル供与体を洗い落とし、続いて5~30のメタノール溶液で勾配溶離し、それぞれフルクトシル化プエラリン純度>97を得て、最後に100のメタノールで洗い落とし色素とプエラリンを除去した。純度>97のフルクトシル化プエラリンをそれぞれ45°Cで回転蒸発または冷凍乾燥させた後にモノフルクトシル基-β2,6-プエラリン粉末または結晶7.9g、ジフルクトシル基-β2,6-プエラリン粉末または結晶16.8g、トリフルクトシル基-β2,6-プエラリン粉末または結晶3.3g、テトラフルクトシル基-β2,6-プエラリン粉末または結晶3.2g、ペンタフルクトシル基-β2,6-プエラリン粉末または結晶2.2gを得た。測定により、25°Cの時、モノフルクトシル基-β2,6-プエラリン溶解度は26.0g/L、ジフルクトシル基-β2,6-プエラリンの溶解度は280.8g/Lであり、それぞれ同じ条件の下でのプエラリンの溶解度5.2g/Lの5倍と54倍であった。前記モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンは:HR-MS:m/z577.1563[M-H]-、元素構成はC27H29O14図7で、M-H計算値は577.1557で;DMSOの1H-NMRと13C-NMR化学シフトの特徴はそれぞれ以下の通り:1HNMRδ829793698740680948481393396379389348361329342図3、図5、図613CNMRδ174916091571152613001262123012251149112511681041821797784767751734707703623615611図4。プエラリンの1H-NMRと13C-NMR化学シフトの特徴はそれぞれ以下の通り:1HNMRδ833797701741683952485405352375326336図813CNMRδ175116121572152713011264123212261170115191127818788736710706615図9。前記ジフルクトシル基-β2,6-プエラリンは:HR-MS:m/z739.2080[M-H]-、元素構成はC33H39O19図14で、M-H計算値は739.2086で;DMSOの1H-NMRと13C-NMR化学シフトの特徴はそれぞれ以下の通り:1HNMRδ829795697740680948481392399369387348358,325342図10、図12、図13。13CNMRδ1747160715691524129812601229122411661148112310421040819801796783763760755751733706704627624620,611608図11。トリフルクトシル基-β2,6-プエラリンは:ESI-MS:m/z925.3[MNa]で、元素構成はC39H50O24Na図15;テトラフルクトシル基-β2,6-プエラリンは:ESI-MS:m/z1064.3[M-H]-で、元素構成はC45H59O29図16;ペンタフルクトシル基-β2,6-プエラリンは:ESI-MS:m/z1226.5[M-H]-で、元素構成はC51H69O34図17である。実施例2:非水相生体内変換プエラリンを使用しフルクトシル化プエラリンを得た40mLの発酵培養した培養基2培養基構成は表1を参照のことを250mLの三角フラスコに入れ、121°Cの高圧蒸気で20分間滅菌した後、アルスロバクタニコチアナエArthrobacternicotianaeXM6CCTCCNO:M2010164に組み込み、30°C、180rpmで16時間振盪、発酵培養し植種液として5Lの発酵槽に接種し、接種量は5、発酵槽に入れる液量は3Lとし、発酵槽の滅菌方法は振とうフラスコと同様の30°C、300rpm発酵培養で、通気量3vvmで、6時間発酵培養をしたODは約10前後後、8000rpmで20分間遠心し、上澄み酵素液を収集して、上澄み酵素液に含まれるフルクトシル化酵素30U/mLを測定した。600mL上澄み酵素液を総体積3000mLに107.5g/Lプエラリン、350g/Lサッカロース、20DMSOを含む1/15mol/Lリン酸塩緩衝溶液pH6.86の5L発酵槽に加え、30°C、300rpmで振盪変換させ、72時間後、45°Cで2時間加熱して変換反応を終止させた。変換液はHPLCにより検出され:モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンは111.7g/Lに達し、ジフルクトシル基-β2,6-プエラリンは28.3g/Lに達し、トリフルクトシル基-β2,6-プエラリンは2.3g/Lに達し、フルクトシル化プエラリン誘導体の生体内変換率は90に達した。結果参考図2。前記フルクトシル化プエラリンを含む変換液を10倍に希釈後、AB-8マクロ孔質樹脂の吸着クロマトグラフィーカラム40×600mm、流速10mL/minを経て、その後10倍のカラムベッド体積でpH4~4.5の蒸留水氷酢酸はpHを調節で残りのグリコシル供与体を洗い落とし、続いて5~30のメタノール溶液で勾配溶離し、それぞれフルクトシル化プエラリン純度>97を得て、最後に100のメタノールで洗い落とし色素とプエラリンを除去した。純度>97のフルクトシル化プエラリンをそれぞれ45°Cで回転蒸発または冷凍乾燥後モノフルクトシル基-β2,6-プエラリン粉末または結晶270g、ジフルクトシル基-β2,6-プエラリン粉末または結晶68g、トリフルクトシル基-β2,6-プエラリン粉末または結晶5gを得た。実施例3:非水相生体内変換プエラリンを使用しフルクトシル化プエラリンを得た40mLの発酵培養した培養基2培養基構成は表1を参照のことを250mLの三角フラスコに入れ、121°Cの高圧蒸気で20分間滅菌した後、アルスロバクタニコチアナエArthrobacternicotianaeXM6CCTCCNO:M2010164に組み込み、30°C、180rpmで16時間振盪して発酵培養後ODは約10前後、8000rpmで20分間遠心し、上澄み酵素液を収集して、上澄み酵素液に含まれるフルクトシル化酵素は30U/mLであった。4mLの上澄み酵素液を総体積20mLに107.5g/Lプエラリン、350g/Lサッカロース、20DMSOを含むリン酸塩緩衝溶液pH6.86の250mL共栓三角フラスコに加え、30°C、180rpmで振盪変換させ、72時間後、45°Cで2時間加熱して変換反応を終止させた。変換液はHPLCにより検出され:モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンは111.7g/Lに達し、ジフルクトシル基-β2,6-プエラリンは28.3g/Lに達し、トリフルクトシル基-β2,6-プエラリンは2.3g/Lに達し、フルクトシル化プエラリン変換率は90に達した。前記フルクトシル化プエラリンを含む変換液を10倍に希釈後、AB-8マクロ孔質樹脂の吸着クロマトグラフィーカラム20×600mm、流速10mL/minを経て、その後10倍のカラムベッド体積でpH4~4.5の蒸留水氷酢酸はpHを調節で残りのグリコシル供与体を洗い落とし、続いて5-30のメタノール溶液で勾配溶離し、それぞれフルクトシル化プエラリン純度>97を得て、最後に100のメタノールで洗い落とし色素とプエラリンを除去した。純度>97のフルクトシル化プエラリンをそれぞれ45°Cで回転蒸発または冷凍乾燥後モノフルクトシル基-β2,6-プエラリン粉末または結晶1.8g、ジフルクトシル基-β2,6-プエラリン粉末または結晶0.5g、トリフルクトシル基-β2,6-プエラリン粉末または結晶0.03gを得た。実施例4:異なる発酵と変換条件が生成物形成に与える影響40mLの発酵培養した培養基培養基構成は表1を参照のことを250mLの三角フラスコに入れ、121°Cの高圧蒸気で20分間滅菌した後、アルスロバクタニコチアナエArthrobacternicotianaeXM6CCTCCNO:M2010164に組み込み、異なる発酵条件の下発酵条件は表2を参照のこと振盪して発酵培養後、8000rpmで20分間遠心し、上澄み酵素液を収集して、上澄み酵素液に含まれるフルクトシル化酵素は10-100U/mLであった。20の上澄み酵素液を変換システムに加え、異なる変換条件の下変換条件は表2を参照のこと、振盪して変換した後に45°Cで2時間加熱して変換反応を終止させ、変換液をHPLCにより検出させた。異なる菌種の発酵条件および変換条件は、プエラリングリコシル化生成物の形成にいずれも異なる影響を与え、表1と表2では異なる条件の下でプエラリングリコシル化反応を行う時に主な生成物、モノフルクトシル化プエラリンとジフルクトシル化プエラリンのモル転換率の変化について列挙している。表2の結果から分かる通り、非水相変換の長所は変換システムにおいてプエラリン濃度が120g/Lまで増やせることにあり、好ましい非水相変換条件の下、非水相変換率は90にまで達することができ、変換生成物の濃度は顕著に向上し107.5g/Lプエラリンの時、変換総生成物は140g/L以上に達することが可能、且つ溶剤の選択と変換生成物の比率調整により、非水相変換のこれらの優勢が工業化生産に有利に働くことが可能になる。実施例5:モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンの血液における代謝動態学実験1.測定器具とクロマトグラムの条件HPLC分析はDIONEXを採用し、クロマトグラフカラムはDiscoveryHSC18カラム250×4.6um,5umで、サンプリング体積は20μL、カラム温度は30°Cで、検出器はUVD170Uで、検出波長は254nmで、移動相は:A、水、B、クロマトグラム級メタノール、A:B=80:20、流速1mL/minである。2.実験動物Sprague-DawleyラットSDラット、体重180-220g、雌雄各半分、南通大学医学実験センターより提供、生産許可証明番号:SCXK蘇20080010。3.実験方法3.1サンプル採集SDラットを無作為に2組に分け、各組5匹、実験前には12時間絶食させた。プエラリンおよびモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンはそれぞれ20の1,2プロピレングリコール生理食塩水に溶解させ、50mg/kgの用量に基づきラットの尾にプエラリンとモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンを静脈注射した。服用後、t=0min、4min、7min、17min、40min、60min、120min、180minの後、目のふちで0.5mLの血液を採集しヘパリンナトリウム処理をした遠心分離管に置き、直ちに3000rpmの条件の下で15min遠心分離し、血漿を分離して分析に備えた。3.2サンプル処理精密に血漿100μLを取り試験管の中に入れ、さらに400μLメタノールを加えてたんぱく質を沈殿し、ボルテックスミキサーで5分間混合し、その後10000rpmで10分間遠心し、上澄み液をHPLC分析に用いた。3.3データ分析3.2で調製したプエラリンおよびモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンサンプルの血漿濃度に基づき外部標準法を使用し計算して得られた。得られたデータは薬物代謝動態学統計ソフトを用いて分析した。4結果プエラリンおよびモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンの主な代謝動態学パラメータ表3から分かる通り、モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンのt1/2、Mrt0-tとMRT0-∞の値は明らかにプエラリンを上回り、プエラリン誘導体生物が血液中に留まる時間がプエラリンと比べて延長できており、従ってそれが体内において比較的長い作用時間を有することに有益となっていることが明らかになった。同時にプエラリン誘導体のAUC0-tとAUC0-∞値は顕著にプエラリンを上回っており、プエラリン誘導体がプエラリンと比べてより高い生体利用度を有することが明らかになった。実施例6:モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンのラットの急性心筋虚血に対する保護作用の実験1.実験材料脳下垂体後葉注射液は南京新百薬業有限公司から購入し、生理食塩水注射液は南京小営薬業有限公司から購入し、ジメチルスルホキシド、プロピレングリコール、無水エタノールはいずれもクロマトグラフィックグレードを使用した。プエラリンは南京沢朗医薬科技有限責任公司から購入し、モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンは本発明方法により調製し、高速液体クロマトグラフにより検出した純度は99以上であった。2.実験動物Sprague-DawleyラットSDラット、体重180-220g、雌雄各半分、南通大学医学実験センターより提供、生産許可証明番号:SCXK蘇20080010。3.実験方法脳下垂体後葉に敏感なSDラット50匹を選んで適応飼育を3日した後、無作為に溶剤グループ、プエラリングループとモノフルクトシル基-β2,6-プエラリン低、中、高3グループに分け、各グループのSDラットは10匹とした。与える薬物はいずれも10のプロピレングリコール溶液を用いて溶解し、いずれも0.5mL投薬し、溶剤グループはプロピレングリコール生理食塩水溶液を使用し、プエラリングループはプエラリンプロピレングリコール生理食塩水溶液を使用し、用量は50mg/kgとし、モノフルクトシル基-β2,6-プエラリングループはプロピレングリコール生理食塩水溶液を使用し、用量は12.5mg/kg、25mg/kg、50mg/kgとした。投薬してから5分後、各グループのラットの静脈にPit0.5U/kgをゆっくりと注射して急性心筋虚血のモデルを作り、Pitの注射後15s、30s、1min、5min、10minの時の各グループのラットの心電図変化を観察し、以上の各時点での心拍数とT波の振幅変化を計算した。4.統計方法データは表示を使用し、t検査を使用した。P<0.05、差異が顕著的であることを示し;P<0.01の場合、差異は非常に顕著であることを示し;P<0.001の場合、差異が極めて顕著であることを示している。5.結果5.1プエラリン誘導体がラットの心筋虚血のT波振幅変化に与える影響実験結果により、被験サンプルのモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンの用量はそれぞれ12.5mg/kg、25mg/kgと50mg/kgでありいずれも脳下垂体後葉から誘発されるT波振幅が顕著的に減少し、且つT波の減少幅がプエラリンを下回っていることについて、被験サンプルのモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンはプエラリンと比べてより有効的に心筋虚血を防止できる作用があることが分かった。5.2プエラリン誘導体の心筋虚血ラットの心拍数に与える影響実験結果により、脳下垂体後葉に注射後2分以内に各グループのラットにいずれも心拍数の明らかな下降が現れ、2~10分で各グループの心拍数は回復し始めたことが分かった。対照グループと比べて、被験サンプルのモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンの異なる用量のグループはいずれも心筋虚血ラットの心拍数の回復を速めることができ、且つモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンの低用量のグループの回復時間はプエラリングループよりも速かった。被験サンプルのモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンは心筋虚血が引き起こす心拍数異常に対し一定の治療効果があることを説明している。実施例7:モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンの腫瘍細胞増殖に対する抑止作用の実験1.細胞株と薬品ヒトの乳腺癌細胞株MDA-MB-231は、上海復蒙基因遺伝子生物科技有限公司より購入し;ヒトの慢性骨髄性白血病細胞株K562は、中国科学院上海細胞研究所細胞庫より購入し;プエラリンは、南京沢朗医薬科技有限責任公司より購入し;モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンは本発明の方法により調製し、高速液体クロマトグラフにより検出した純度は99以上であった。2.実験薬物と溶剤調製薬液の貯蔵:8.32mgのプエラリン粉末を秤取し、2mLのDMSOに溶かして、10mmol/Lのプエラリンを調製し;11.56mgのモノフルクトシル基-β2,6-プエラリン粉末を秤取し、2mLのDMSOに溶かして、10mmol/Lのモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンを調製し;0.22μmのフィルタで濾過して、1000μL/doffで個別方法して、-20°Cで保存して、同時に0.22μmフィルタで高濃度DMSOを濾過し、対照グループのために備える。細胞培養液:RPMI-1640培養基粉剤を1包取って、800mLの三回蒸留水に溶かし、マグネチックスターラーで少なくとも30分、完全に溶解するまで撹拌し、NaHCO3を2g追加し、充分に溶解後1Lに定容した。0.22pm孔径のフィルタで濾過して除菌し、血清を加え、血清の最終濃度を10にして、4°Cで保存した。PBSリン酸塩緩衝溶液:800mL蒸留水の中に8gのNaCl、0.2gのKCl、1.44gのNa2PO4と0.24gのKH2PO4を溶解し、HClを使用して溶液のpH値を7.4に調節し、水を加えて1Lに定容し、高圧蒸気で20分滅菌し、低温で保存する。MTT応用液:500mgのMTT粉剤を秤取して、100mLのPBSに溶かし、撹拌して溶解後、0.22pm孔径のフィルタで濾過して除菌し、個別包装の後、4°Cで光を避けて保存する。ライシス溶液lysissolution:SDSを25g、イソプロパノールを12.5mL、濃塩酸を2.5mL取り、三回蒸留水を使用して1Lに定容し、低温で保存する。3.主要な試薬と測定器具高速液体クロマトグラフアメリカダイアナ型番:P600;マイクロプレートリーダMolecularDevices社型番:spectraMAX190/GEMINIXS;CO2培養器Forma社型番:3111;低速遠心機Thermostat型番:PICO-17;倒立顕微鏡leica社型番:DMLL;オービタルシェーカー南京大学儀器測定器具公司型番:TY-80S;ウシ胎児血清Hyclone社;仔牛血清GibacoBRL社;RPMI1640アメリカGibco社;ペニシリンGナトリウム塩AMRESCO社;硫酸ストレプトマイシンAMRESCO社;TrypsinAMRESCO社;MTTAMRESCO社。4.細胞培養MDA-MB-231細胞は体積分率が10不活化ウシ胎児血清、100UペニシリンとストレプトマイシンのRPMI-1640完全培養基を含んでおり、37°Cで5のCO2飽和湿度の培養器で培養した。K-562細胞は体積分率が10の不活化仔牛血清、100UペニシリンとストレプトマイシンのRPMI-1640完全培養基を含んでおり、37°Cで5のCO2飽和湿度の培養器で培養した。5.実験方法5.1MDA-MB-231細胞毒性試験対数増殖期のMDA-MB-231細胞使い捨て培養ビンを取り、培養液を捨てた。10mLのPBSを加えて1回洗い、PBSを捨てた後、3mL0.25のトリプシン-0.04のEDTAを加えて、37°Cで3分間消化後、その中に5mLの完全培養基を加え中和反応し、吹き付けた後に細胞を15mL遠心分離管に入れ、1000rpmで3分間遠心した。細胞懸濁液を調合し、適量の完全培養基で細胞濃度を3×104/mLに調整した。細胞を96穴培養プレートに加え、各穴に細胞懸濁液180μLずつを加え、培養プレートを細胞培養器37°C、5、CO2に入れルーチン培養した。細胞が50-70に増殖してから各濃度の薬液を加えた。10mmol/Lプエラリンとモノフルクトシル基-β2,6-プエラリン貯蔵液を取り、PBSを用いて薬液を1000、500、100、50、10、5、1と0.1μmol/Lまで段階希釈し、各穴に薬を20μL加えて、薬物の最終濃度をそれぞれ100、50、10、5、1、0.5、0.1と0.01μmol/Lとした。DMSO溶剤対照グループを20μLPBS中に相応する薬物を含む溶剤に加え、ブランクコントロールグループに2μLのPBSを加えた。各薬物濃度に6個の複孔を設けた。培養プレートを細胞培養器に戻して、48時間後に20μLのMTT5mg/mL溶液を加え、引き続き培養器の中で4時間培養後、逆さにして上澄みを捨て、吸水紙で叩いて乾かし、各穴に200μLのDMSOを加え、振動機で光を避けて15分間振動させ、結晶体を充分に溶解させた。全自動マイクロプレートリーダを使用して490nmの下で吸光度を測定し、平均抑制率を計算し、抑制率=対照グループA490-実験グループA490/対照グループA490とし、重複して3回実験を行った。5.2K562細胞毒性試験対数増殖期のK-562細胞を取り濃度を1×105個/mLに調整して、96穴培養プレートに接種して、各孔に細胞懸濁液90uLを加えて、実験グループは異なる最終濃度1、5、10、20、50、100、150、200μmol/Lのプエラリンとモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンで処理し、各穴に薬を10uL加えて、DMSO溶剤対照グループを20μLPBS中に相応する薬物を含む溶剤に加え、ブランクコントロールグループに2μLのPBSを加えた。各薬物濃度に6個の複孔を設けた。培養プレートを細胞培養器に戻し、48時間後に20μLのMTT5mg/mL溶液を加え、引き続き培養器の中で4時間培養後、各穴にライシス溶液lysissolution100uLを加え、一晩結晶が充分溶解するのを待った。振とう器で20分間振とうして全自動マイクロプレートリーダを使って490nmの下で吸光度を測定し、平均抑制率を計算し、抑制率=対照グループA490-実験グループA490/対照グループA490とし、重複して3回実験を行った。6.統計処理MicrosoftExcel2003ソフト内の関連分析とStudenttを使用して検査をし、データはx±SD表示を採用した。7.実験結果7.1プエラリン誘導体がヒトの乳腺癌細胞株MDA-MB-231の増殖に与える影響MTT法で分析後の統計結果表6を参照のことは、プエラリンとモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンが作用してから48時間後にいずれもMDA-MB-231細胞の細胞数が減少することを説明している。同じ時間における対照グループを比較すると、モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンの容量が50μmol/Lの時に差異がありP<0.05、用量が100μmol/Lの時に顕著な差異がありP<0.01、用量が150と200μLの時に前記差異は極めて顕著でありP<0.001、MDA-MB-231細胞の抑制率はそれぞれ44.04と59.42に達し、モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンが明らかにヒトの乳腺癌細胞株MDA-MB-231の増殖を抑制し、且つ抑制率は用量の増加に従い増加することを説明している。7.2プエラリン誘導体のヒトの慢性骨髄性白血病細胞株K562の増殖に与える影響MTT法で分析後の統計結果表7を参照のことは、プエラリンとモノフルクトシル基-β2,6-プエラリンが作用してから48時間後にいずれもK562細胞の細胞数が減少することを説明している。同じ時間における対照グループを比較すると、モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンの容量が低用量の1μmol/Lの時にその結果に顕著的な差異がありP<0.05、用量が100、150と200μmol/Lの時に前記差異は極めて顕著性がありP<0.001、K562細胞の抑制率はそれぞれ16.41と29.84と46.41に達し、モノフルクトシル基-β2,6-プエラリンは明らかにヒトの慢性骨髄性白血病細胞株K562の増殖を抑制することができ、且つ抑制率は用量の増加に伴い増加することを説明している。"