カイコの卵および眼を変色させる活性を有するタンパク質をコードする、下記a~eのいずれかに記載のDNA。a配列番号:2または4に記載のアミノ酸配列からなるタンパク質をコードするDNAb配列番号:1または3に記載の塩基配列のコード領域を含むDNAc配列番号:2または4に記載のアミノ酸配列において1もしくは複数のアミノ酸が置換、欠失、付加、および/または挿入されたアミノ酸配列からなるタンパク質をコードするDNAd配列番号:1または3に記載の塩基配列からなるDNAとストリンジェントな条件でハイブリダイズするDNAe配列番号:1または3に記載の塩基配列からなるDNAと相同性が90以上の塩基配列からなるDNAカイコの卵および眼を変色させる活性を有するタンパク質をコードする、下記a~cのいずれかに記載のDNA。a請求項1に記載のDNAの転写産物と相補的な二重鎖RNAをコードするDNAb請求項1に記載のDNAの転写産物と相補的なアンチセンスRNAをコードするDNAc請求項1に記載のDNAの転写産物を特異的に開裂するリボザイム活性を有するRNAをコードするDNA請求項1または2に記載のDNAを含むベクター。請求項1または2に記載のDNAが導入された細胞。請求項1または2に記載のDNAが導入されたカイコ。請求項5に記載のカイコの卵、子孫またはクローン。卵および眼が変色されたカイコの生産方法であって、請求項1または2に記載のDNAをカイコに導入することを特徴とする方法。遺伝子組換えカイコの生産方法であって、任意のDNAと請求項1または2に記載のDNAをカイコに導入し、卵および眼が変色した個体を選抜することを特徴とする方法。本発明は、このような状況に鑑みてなされたものであり、その目的は、カイコのre遺伝子を同定することにある。また、本発明の目的は、同定したre遺伝子を利用して、カイコの卵および眼の着色を改変することにある。さらなる本発明の目的は、同定したre遺伝子を遺伝子マーカーとして利用して、遺伝子組換えカイコを選抜することにある。本発明者らは、上記課題を解決すべく、まず、ポジショナルクローニングの手法によりre遺伝子が存在する領域の絞り込みを行った結果、202kbにまで絞り込むことに成功した。次いで、本発明者らは、絞り込まれた領域において5つの予測遺伝子を見出し、それらの卵における発現解析を行い、データベース上で正常にアノテーションされていないBGIBMGA0034971が卵の着色に先立って発現していることを見出した。さらに、本発明者らは、BGIBMGA0034971の構造の解析を行ったところ、re変異系統ではORF内部に重大な欠損が存在することが判明した。BGIBMGA0034971は、12回膜貫通型のMajorFacilitatorSuperfamilyに属するトランスポーターをコードしていると考えられ、この欠損は、膜貫通領域に存在していた。以上から、本発明者らは、BGIBMGA0034971がre遺伝子の本体であり、カイコの卵および眼における赤色の着色が、この遺伝子の機能が喪失によって標準型の色素が合成されないことにより生じていることを見出した。さらに、本発明者らは、当該遺伝子を利用することにより、カイコの卵および眼の色の改変を行うことが可能であり、さらには、このような形質の変化を指標として、効率的に遺伝子組換えカイコを選抜することが可能であることを見出した。本発明は、より詳しくは、以下の発明を提供するものである。1カイコの卵および眼を変色させる活性を有するタンパク質をコードする、下記a~eのいずれかに記載のDNA。a配列番号:2または4に記載のアミノ酸配列からなるタンパク質をコードするDNAb配列番号:1または3に記載の塩基配列のコード領域を含むDNAc配列番号:2または4に記載のアミノ酸配列において1もしくは複数のアミノ酸が置換、欠失、付加、および/または挿入されたアミノ酸配列からなるタンパク質をコードするDNAd配列番号:1または3に記載の塩基配列からなるDNAとストリンジェントな条件でハイブリダイズするDNAe配列番号:1または3に記載の塩基配列からなるDNAと相同性が90以上の塩基配列からなるDNA2カイコの卵および眼を変色させる活性を有するタンパク質をコードする、下記a~cのいずれかに記載のDNA。a1に記載のDNAの転写産物と相補的な二重鎖RNAをコードするDNAb1に記載のDNAの転写産物と相補的なアンチセンスRNAをコードするDNAc1に記載のDNAの転写産物を特異的に開裂するリボザイム活性を有するRNAをコードするDNA31または2に記載のDNAを含むベクター。41または2に記載のDNAが導入された細胞。51または2に記載のDNAが導入されたカイコ。65に記載のカイコの卵、子孫またはクローン。7卵および眼が変色されたカイコの生産方法であって、1または2に記載のDNAをカイコに導入することを特徴とする方法。8遺伝子組換えカイコの生産方法であって、任意のDNAと1または2に記載のDNAをカイコに導入し、卵および眼が変色した個体を選抜することを特徴とする方法。本発明によって、カイコの卵および眼の着色に関与するre遺伝子が同定され、該遺伝子の染色体上の位置および構造が解明された。本発明により見出されたカイコのre遺伝子は、色素の合成に関与する蛋白質をコードし、その機能の有無により、卵および眼の色が変色する。本発明のre遺伝子を用いれば、カイコの卵や眼の色を変色させることが可能であり、当該遺伝子は、遺伝子組換え体の選抜のためのマーカーとして好適に利用することができる。現在最も早く組換え体の判別ができるEGFP等のマーカーでは、蛍光顕微鏡を用いて産卵後7日目の胚の眼の蛍光を観察することにより遺伝子組換え体を判別している。一方、本発明において同定されたre遺伝子を用いれば、産卵後3日目に遺伝子組換え体を選抜することが可能であり、従来よりも遺伝子組換え体の識別時期が4日間早い。しかも、この識別は肉眼で行うことが可能であり、高価な蛍光顕微鏡などを必要としない。また、肉眼で識別が可能な遺伝子マーカーとして、KMO遺伝子マーカーも用いられてはいるが、母性遺伝のために遺伝子組換え体の卵は全て着色され、卵では組換え個体の識別が不可能である。このように、本発明によれば、従来技術に比して、カイコの遺伝子組換え体の選抜を効率的に行うことができる。<カイコの卵および眼を変色させる活性を有するタンパク質をコードするDNA>本発明は、カイコの卵および眼を変色させる活性を有する活性を有するタンパク質をコードするDNAを提供する。本発明者らにより同定された、カイコの卵および眼を変色させる活性を有するタンパク質をコードする野生型系統P50T、C108のrecDNAの塩基配列をそれぞれ配列番号:1、3に、これらDNAがコードするタンパク質のアミノ酸配列をそれぞれ配列番号:2、4に示す。ここでカイコの卵および眼を変色させる活性とは、典型的には、カイコの卵を藤鼠色に、成虫の眼を黒色に変色させる活性を意味する。本発明のDNAの1つの態様は、配列番号:2または4に記載のアミノ酸配列からなるタンパク質をコードするDNA典型的には、配列番号:1または3に記載の塩基配列のコード領域を含むDNAである。現在の技術水準においては、当業者であれば、特定の野生型系統例えば、P50T、C108におけるre遺伝子の塩基配列情報が得られた場合、その塩基配列を改変し、そのコードするアミノ酸配列は異なるが、同様の活性を有するタンパク質をコードするDNAを取得することが可能である。また、自然界においても、塩基配列の変異によりコードするタンパク質のアミノ酸配列が変異することは起こり得ることである。従って、本発明は、これら野生型系統におけるタンパク質のアミノ酸配列配列番号:2または4において1もしくは複数のアミノ酸が置換、欠失、付加、および/または挿入されたアミノ酸配列からなり、カイコの卵および眼を変色させる活性を有するタンパク質をコードするDNAをも含むものである。ここで複数とは、改変後のタンパク質がカイコの卵および眼を変色させる活性を維持する範囲における、アミノ酸の改変数であり、通常、50アミノ酸以内、好ましくは30アミノ酸以内、さらに好ましくは10アミノ酸以内例えば、5アミノ酸以内、3アミノ酸以内、2アミノ酸である。さらに、現在の技術水準においては、当業者であれば、特定の野生型系統例えば、P50T、C108からre遺伝子が得られた場合、そのDNAの塩基配列情報を利用して、カイコまたは他の生物から、同様の活性を有するタンパク質をコードするDNAを取得することが可能である。従って、本発明は、これら野生型系統例えば、P50T、C108におけるre遺伝子配列番号:1または3とストリンジェントな条件でハイブリダイズするDNAであって、カイコの卵および眼を変色させる活性を有するタンパク質をコードするDNAをも含むものである。こうして得られた変異DNAや相同DNAが、カイコの卵および眼を変色させる活性を有するタンパク質をコードするか否かは、例えば、被検DNAを、re変異系統卵および眼が赤色となる系統に導入し、卵が藤鼠色に変色するか否か、あるいは、成虫の眼が黒色に変色するか否かにより、判定することができる。本発明のDNAは、その導入により、カイコの卵および眼を変色させることが可能であるという意味において、カイコの卵および眼を変色させるための薬剤である。なお、上記した変異DNAを作製するための、DNAへの人為的な変異の導入は、例えば、部位特異的変異誘発sitedirectedmutagenesis法KramerWFritzHJMethodsEnzymol1543503671987により行うことができる。また、上記した相同遺伝子を単離するための方法としては、例えば、ハイブリダイゼーション技術SouthernEMJournalofMolecularBiology985031975やポリメラーゼ連鎖反応PCR技術SaikiRKetalScience230135013541985、SaikiRKetalScience2394874911988が挙げられる。相同遺伝子をコードするDNAを単離するためには、通常ストリンジェントな条件下でハイブリダイゼーション反応を行なう。ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件としては、6M尿素、04SDS、05xSSCの条件またはこれと同等のストリンジェンシーのハイブリダイゼーション条件を例示できる。よりストリンジェンシーの高い条件、例えば、6M尿素、04SDS、01xSSCの条件を用いれば、より相同性の高いDNAの単離を期待することができる。単離されたDNAは、核酸レベルあるいはアミノ酸配列レベルにおいて、少なくとも50以上、さらに好ましくは70以上、さらに好ましくは90以上例えば、95、96、97、98、99以上の配列の同一性を有する。配列の相同性は、BLASTN核酸レベルやBLASTXアミノ酸レベルのプログラムを利用して決定することができる。該プログラムは、KarlinおよびAltschulによるアルゴリズムBLASTに基づいている。BLASTNによって塩基配列を解析する場合には、パラメーターは例えばscore100、wordlength12とする。また、BLASTXによってアミノ酸配列を解析する場合には、パラメーターは例えばscore50、wordlength3とする。また、GappedBLASTプログラムを用いて、アミノ酸配列を解析する場合は、AltschulらNucleicAcidsRes25338934021997に記載されているように行うことができる。BLASTとGappedBLASTプログラムを用いる場合には、各プログラムのデフォルトパラメーターを用いる。これらの解析方法の具体的な手法は公知である。本発明のreタンパク質をコードするDNAとしては、その形態に特に制限はなく、cDNAの他、ゲノムDNA、および化学合成DNAが含まれる。ゲノムDNAおよびcDNAの調製は、当業者にとって常套手段を利用して行うことが可能である。ゲノムDNAは、例えば、カイコからゲノムDNAを抽出し、ゲノミックライブラリーベクターとしては、プラスミド、ファージ、コスミド、フォスミド、BAC、PACなどが利用できるを作成し、これを展開して、re遺伝子例えば、配列番号:1または3に記載のDNAの塩基配列を基に調製したプローブを用いてコロニーハイブリダイゼーションあるいはプラークハイブリダイゼーションを行うことにより調製することが可能である。また、re遺伝子に特異的なプライマーを作成し、これを利用したPCRを行うことによって調製することも可能である。また、cDNAは、例えば、鱗翅目昆虫から抽出したmRNAを基にcDNAを合成し、これをλZAP等のベクターに挿入してcDNAライブラリーを作成し、これを展開して、上記と同様にコロニーハイブリダイゼーションあるいはプラークハイブリダイゼーションを行うことにより、また、PCRを行うことにより調製することが可能である。<カイコのre遺伝子の発現を抑制するために用いるDNA>また、本発明は、上記した本発明の野生型系統のre遺伝子の発現を抑制するために用いるDNAを提供する。本発明においては、re遺伝子の機能が喪失することにより、カイコの卵および眼が変色することが見出された。従って、re遺伝子の発現を抑制する活性を有するDNAの導入により、カイコの卵および眼を変色させることが可能である。この意味において、re遺伝子の発現を抑制するために用いるDNAは、カイコの卵および眼を変色させるための薬剤である。ここでre遺伝子の発現の抑制には、遺伝子の転写の抑制およびタンパク質への翻訳の抑制の双方が含まれる。また、発現の抑制には、発現の完全な停止のみならず発現の減少も含まれる。また、カイコの卵および眼を変色させる活性とは、典型的には、カイコの卵および成虫の眼を赤色に変色させる活性を意味する。被検DNAが、カイコの卵および成虫の眼を赤色に変色させる活性を有するか否かは、例えば、当該DNAを、野生型異系統卵が藤鼠色および眼が黒色となる系統に導入し、卵および成虫の眼が赤色に変色するか否かにより、判定することができる。re遺伝子の発現を抑制するために用いるDNAの一つの態様は、re遺伝子の転写産物と相補的なdsRNA二重鎖RNAをコードするDNAである。標的遺伝子配列と同一もしくは類似した配列を有するdsRNAを細胞内に導入することにより、導入した外来遺伝子および標的内因性遺伝子の発現がいずれも抑制される、RNAiRNA干渉、RNAinterferenceと呼ばれる現象を引き起こすことができる。細胞に約40~数百塩基対のdsRNAが導入されると、ヘリカーゼドメインを持つダイサーと呼ばれるRNaseIII様のヌクレアーゼが、ATP存在下で、dsRNAを3末端から約21~23塩基対ずつ切り出し、siRNAshortinterferenceRNAが生じる。このsiRNAに、特異的なタンパク質が結合して、ヌクレアーゼ複合体RISC:RNAinducedsilencingcomplexが形成される。この複合体はsiRNAと同じ配列を認識して結合し、RNaseIII様の酵素活性によってsiRNAの中央部で標的遺伝子の転写産物mRNAを切断する。また、この経路とは別にsiRNAのアンチセンス鎖がmRNAに結合してRNA依存性RNAポリメラーゼのプライマーとして作用し、dsRNAが合成される。このdsRNAが再びダイサーの基質となって、新たなsiRNAを生じて作用を増幅する経路も考えられている。本発明のdsRNAをコードするDNAは、標的遺伝子の転写産物mRNAのいずれかの領域に対するアンチセンスRNAをコードしたアンチセンスDNAと、該mRNAのいずれかの領域のセンスRNAをコードしたセンスDNAを含み、該アンチセンスDNAおよび該センスDNAより、それぞれアンチセンスRNAおよびセンスRNAを発現させることができる。また、これらのアンチセンスRNAおよびセンスRNAよりdsRNAを作成することができる。本発明のdsRNAの発現システムをベクター等に保持させる場合の構成としては、同一のベクターからアンチセンスRNAおよびセンスRNAを発現させる場合と、異なるベクターからそれぞれアンチセンスRNAとセンスRNAを発現させる場合がある。同一のベクターからアンチセンスRNAおよびセンスRNAを発現させる構成としては、例えば、アンチセンスDNAおよびセンスDNAの上流にそれぞれpolIII系のような短いRNAを発現し得るプロモーターを連結させたアンチセンスRNA発現カセットとセンスRNA発現カセットをそれぞれ構築し、これらカセットを同方向にあるいは逆方向にベクターに挿入する構成である。また、異なる鎖上に対向するように、アンチセンスDNAとセンスDNAとを逆向きに配置した発現システムを構成することもできる。この構成では、アンチセンスRNAコード鎖とセンスRNAコード鎖とが対となった一つの二本鎖DNAが備えられ、その両側にそれぞれの鎖からアンチセンスRNAとセンスRNAとを発現し得るようにプロモーターを対向して備える。この場合には、センスRNAとアンチセンスRNAの下流に余分な配列が付加されることを避けるために、それぞれの鎖アンチセンスRNAコード鎖、センスRNAコード鎖の3末端にターミネーターをそれぞれ備えることが好ましい。このターミネーターは、Aアデニン塩基を4つ以上連続させた配列などを用いることができる。また、このパリンドロームスタイルの発現システムでは、二つのプロモーターの種類は異なっていることが好ましい。また、異なるベクターからアンチセンスRNAおよびセンスRNAを発現させる構成としては、例えば、アンチセンスDNAおよびセンスDNAの上流にそれぞれpolIII系のような短いRNAを発現し得るプロモーターを連結させたアンチセンスRNA発現カセットとセンスRNA発現カセットとをそれぞれ構築し、これらカセットを異なるベクターに保持させる構成である。本発明に用いるdsRNAとしては、siRNAが好ましい。siRNAは、細胞内で毒性を示さない範囲の短鎖からなる二重鎖RNAを意味する。標的re遺伝子の発現を抑制することができ、かつ、毒性を示さなければ、その鎖長に特に制限はない。dsRNAの鎖長は、例えば、15~500塩基対である。本発明のdsRNAをコードするDNAとしては、標的配列のインバーテッドリピートの間に適当な配列イントロン配列が望ましいを挿入し、ヘアピン構造を持つダブルストランドRNAを作るようなコンストラクトSmithNAetalNature4073192000、WesleySVetalPlantJ275812001、PiccinAetalNucleicAcidsRes29E552001を用いることが好ましい。本発明のdsRNAをコードするDNAは、標的re遺伝子の塩基配列と完全に同一である必要はないが、少なくとも70以上、好ましくは80以上、さらに好ましくは90以上例えば、95、96、97、98、99以上の配列の同一性を有する。配列の同一性は上述した手法BLASTプログラムにより決定できる。dsRNAにおけるRNA同士が対合した二重鎖RNAの部分は、完全に対合しているものに限らず、ミスマッチ対応する塩基が相補的でない、バルジ一方の鎖に対応する塩基がないなどにより不対合部分が含まれていてもよい。本発明においては、dsRNAにおけるRNA同士が対合する二重鎖RNA領域中に、バルジおよびミスマッチの両方が含まれていてもよい。re遺伝子の発現を抑制するために用いるDNAの他の態様は、re遺伝子の転写産物と相補的なアンチセンスRNAをコードするDNAアンチセンスDNAである。アンチセンスDNAが標的遺伝子の発現を抑制する作用としては、三重鎖形成による転写開始阻害、RNAポリメラーゼによって局部的に開状ループ構造がつくられた部位とのハイブリッド形成による転写抑制、合成の進みつつあるRNAとのハイブリッド形成による転写阻害、イントロンとエキソンとの接合点でのハイブリッド形成によるスプライシング抑制、スプライソソーム形成部位とのハイブリッド形成によるスプライシング抑制、mRNAとのハイブリッド形成による核から細胞質への移行抑制、キャッピング部位やポリ付加部位とのハイブリッド形成によるスプライシング抑制、翻訳開始因子結合部位とのハイブリッド形成による翻訳開始抑制、開始コドン近傍のリボソーム結合部位とのハイブリッド形成による翻訳抑制、mRNAの翻訳領域やポリソーム結合部位とのハイブリッド形成によるペプチド鎖の伸長阻止、および核酸とタンパク質との相互作用部位とのハイブリッド形成による遺伝子発現抑制などが挙げられる。これらは、転写、スプライシング、または翻訳の過程を阻害して、標的遺伝子の発現を抑制する。本発明で用いられるアンチセンスDNAは、上記のいずれの作用で標的re遺伝子の発現を抑制してもよい。一つの態様として、標的遺伝子のmRNAの5端近傍の非翻訳領域に相補的なアンチセンス配列を設計すれば、遺伝子の翻訳阻害に効果的であると考えられる。また、コード領域もしくは3側の非翻訳領域に相補的な配列も使用し得る。このように、遺伝子の翻訳領域だけでなく非翻訳領域の配列のアンチセンス配列を含むDNAも、本発明で利用されるアンチセンスDNAに含まれる。使用されるアンチセンスDNAは、適当なプロモーターの下流に連結され、好ましくは3側に転写終結シグナルを含む配列が連結される。アンチセンスDNAは、本発明のre遺伝子例えば、配列番号:1または3に記載の塩基配列からなるDNAの配列情報を基にホスホロチオネート法SteinNucleicAcidsRes16320932211988などにより調製することが可能である。調製されたDNAは、後述する公知の方法で、カイコへ導入できる。アンチセンスDNAの配列は、カイコが持つ内因性のre遺伝子の転写産物と相補的な配列であることが好ましいが、遺伝子の発現を有効に阻害できる限り、完全に相補的でなくてもよい。転写されたRNAは、標的とする遺伝子の転写産物に対して好ましくは90以上例えば、95、96、97、98、99以上の相補性を有する。効果的に標的遺伝子の発現を阻害するには、アンチセンスDNAの長さは、少なくとも15塩基以上であり、好ましくは100塩基以上であり、さらに好ましくは500塩基以上である。通常、用いられるアンチセンスDNAの長さは5kbよりも短く、好ましくは25kbよりも短い。re遺伝子の発現を抑制するために用いるDNAの他の態様は、re遺伝子の転写産物を特異的に開裂するリボザイム活性を有するRNAをコードするDNAである。リボザイムには、グループIイントロン型や、RNasePに含まれるM1RNAのように400ヌクレオチド以上の大きさのものもあるが、ハンマーヘッド型やヘアピン型と呼ばれる40ヌクレオチド程度の活性ドメインを有するものもある。例えば、ハンマーヘッド型リボザイムの自己切断ドメインは、G13U14C15のC15の3側を切断するが、活性にはU14が9位のAと塩基対を形成することが重要とされ、15位の塩基はCの他にAまたはUでも切断されることが示されている。リボザイムの基質結合部を標的部位近傍のRNA配列と相補的になるように設計すれば、標的RNA中のUC、UUまたはUAという配列を認識する制限酵素的なRNA切断リボザイムを作出することが可能である。また、ヘアピン型リボザイムも、本発明の目的のために有用である。ヘアピン型リボザイムは、例えばタバコリングスポットウイルスのサテライトRNAのマイナス鎖に見出される。このリボザイムも、標的特異的なRNA切断を起こすように設計できることが示されている。標的を切断できるよう設計されたリボザイムは、カイコ細胞中で転写されるようにアクチンプロモーターなどのプロモーターおよび転写終結配列に連結される。このような構成単位をタンデムに並べ、標的遺伝子内の複数の部位を切断できるようにして、より効果を高めることもできる。このようなリボザイムを用いて標的となるre遺伝子の転写産物を特異的に切断し、該遺伝子の発現を抑制することができる。<ベクター、形質転換細胞、形質転換カイコ>本発明は、また、上記本発明のDNAre遺伝子、およびre遺伝子の発現を抑制するためのDNAを含むベクター、上記本発明のDNAが導入された細胞、上記本発明のDNAが導入されたカイコを提供する。上記本発明のDNAが導入される細胞としては、特に制限はなく、目的に応じて種々の細胞を用いることができる。例えば、組換えタンパク質生産の目的であれば、カイコ細胞の他、例えば、大腸菌、酵母、動物細胞、植物細胞などを用いることができる。遺伝子組換えカイコを製造する場合には、カイコ細胞が用いられる。本発明のベクターとしては、例えば、自律複製可能なベクターまたは染色体中に相同組換え可能なベクターを使用することができる。カイコ卵に対して本発明のDNAの導入を行う場合、例えば、カイコの発生初期卵へ、トランスポゾンをベクターとして注射する方法TamuraTetalNatureBiotechnology188184に従って行うことができる。例えば、トランスポゾンの逆位末端反復配列HandlerAMetal1998ProcNatlAcadSciUSA951375205の間に上記DNAを挿入したベクターとともに、トランスポゾン転移酵素をコードするDNAを有するベクターヘルパーベクターをカイコ卵に導入する。ヘルパーベクターとしては、pHA3PIGTamuraTetalNatureBiotechnology188184が挙げられるが、これに限定されるものではない。本発明におけるトランスポゾンとしては、piggyBacが好ましいが、これに限定されるものではなく、マリーナmariner、ミノスminos等を用いることもできるShimizuKetal2000InsectMolBiol9277281;WangWetal2000InsectMolBiol9214555。また、本発明では、バキュロウイルスベクターを使用することにより形質転換カイコを作出することも可能であるYamaoMetalGenesDev13511516。ベクターに用いるプロモーターとしては、例えば、アクチンプロモーター、AcNPVのhr5IE1プロモーター、3xP3プロモーターなどを用いることができる。カイコ細胞へのベクターの導入は、例えば、リン酸カルシウム沈殿法、電気パルス穿孔法CurrentprotocolsinMolecularBiologyeditAusubeletalPublishJohnWileySons.Section9199、リポフェクタミン法GIBCOBRL社製、マイクロインジェクション法などの公知の方法で行うことが可能である。一旦、染色体内に上記本発明のDNAが導入されたカイコが得られれば、該カイコから、卵、子孫、あるいはクローンを得て、それらを基にカイコを繁殖させることも可能である。本発明には、上記本発明のDNAが導入されたカイコおよびその卵、子孫およびクローンが含まれる。<卵および眼が変色されたカイコの生産方法>本発明は、また、卵および眼が変色されたカイコの生産方法であって、上記本発明のDNAre遺伝子、およびre遺伝子の発現を抑制するためのDNAをカイコに導入することを特徴とする方法を提供する。本発明の方法の一つの態様は、野生型のre遺伝子をre変異系統のカイコに導入して、卵が藤鼠色に、成虫の眼が黒色に変色されたカイコを生産する方法である。本発明の方法の他の一つの態様は、re遺伝子の発現を抑制するためのDNAを野生型カイコに導入して、卵および眼が赤色に変色されたカイコを生産する方法である。<遺伝子組換えカイコの生産方法>本発明は、また、遺伝子組換えカイコの生産方法であって、任意のDNAと上記本発明のDNAre遺伝子、およびre遺伝子の発現を抑制するためのDNAをカイコに導入し、卵および眼が変色した個体を選抜することを特徴とする方法を提供する。カイコに導入する任意のDNAとしては、特に制限はない。例えば、医薬品や検査薬の原料となる有用タンパク質をコードするDNA、高機能シルクの生産に有用な蛋白質をコードするDNA、ヒトの病態のモデルカイコを作製するために有用なDNAが挙げられる。任意のDNAと上記本発明のDNAは、一つのベクターに配置してカイコに導入することが好ましいが、それぞれを異なるベクターに配置してカイコに導入することも可能である。任意のDNAと上記本発明のDNAは、ベクター上では、カイコにおいて発現を保証するプロモーター例えば、アクチンプロモーターに発現可能に連結されている。任意のDNAとre遺伝子が導入されたre変異系統カイコは、その卵が藤鼠色に変色し、成虫においては眼が黒色に変色する。また、任意のDNAとre遺伝子の発現を抑制するためのDNAが導入された野生型カイコは、その卵が赤色に変色し、成虫においては眼が赤色に変色する。この変色を指標に、遺伝子組換えカイコを選抜することができる。特に、卵においては、産卵後3日目には変色するため、従来よりも早期に、かつ、肉眼で、遺伝子組換え体を判別することが可能である。以下、実施例および比較例に基づいて本発明をより具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。実験材料と方法1カイコの飼育カイコは人工飼料日本農産工業で25度~27度で飼育した。C108系統は、研究室で累代飼育しているもの、911系統は農業生物資源研究所内で累代飼育しているもの、e28系統はナショナルバイオリソースプロジェクトで累代飼育している系統九州大学を取り寄せて実験に用いた。2ポジショナルクローニングreの表現型の責任領域のマッピングのため、C108と911を交配して生まれたF1のオスのカイコと、911のメスの交配を行った。この交配により生まれたBF1卵正常着色282、赤卵114、計396から孵化した1零幼虫からゲノムDNAをDNAzolInvitrogenを用いて抽出した。抽出したDNAに用いて、SNPマーカー表1を用い、文献非特許文献7と類似の方法で連鎖解析を行い、reの表現型の責任領域を絞り込んだ。SNPマーカーの一部はYamamotoKetalGenomeBiol9R21で使用されているものである。3遺伝子の発現解析P50T、C108、911、e28について、産下直後、24時間後、48時間後、72時間後の卵からtotalRNAをIsogenを用いて抽出し、FirstStrandcDNASynthesisKitを用いてcDNAを合成した。RTPCRは、絞り込み範囲内に存在した予測遺伝子BGIBMGA003497、003498、003499、003494、003695についてプライマー表2を設計し、totalRNA05ng分のcDNAを鋳型に用いて行った。PCRで増幅した断片の配列決定は、BigDyeVer31AppliedBiosystemsとABI3130xlAppliedBiosystemsを用いて行い、配列解析はVectorNTIver11Invitrogenを用いて行った。4膜貫通ドメイン予測膜貫通ドメインはSOSUIプログラムで予測した。5分子系統解析BGIBMGA0034971と相同性が予測された100個の遺伝子について、MEGA5ソフトウェアを用い、アミノ酸配列のアラインメント及び近隣接合法で分子系統解析を行った。実施例1re遺伝子の同定1ポジショナルクローニングによるre遺伝子の存在領域の絞り込みreの責任領域の絞り込みのため、まず、C108のメスと911のオスを掛け合わせ、F1を得た。F1のオスrereを911のメスに掛け、戻し交配し、BF1個体卵を得た。BF1卵には正常着色卵と赤卵が存在した。BF1正常着色卵から生まれた幼虫282個体、BF1赤卵から生まれた幼虫114個体からそれぞれゲノムDNAを抽出し、5番染色体上に作成した40個のSNPマーカー表1を用いてジェノタイピングを行った。その結果、reの責任領域はSNPマーカーre071119R2F1とre080104RR12F1の間の202kbに絞り込まれた表1、図3A。2re遺伝子の候補の発現解析ポジショナルクローニングより絞り込んだ領域には、5つの予測遺伝子BGIBMGA003497、003498、003499、003494、003695が存在した。これらの配列をNCBIのデーターベースに対し検索を行ったところ、BGIBMGA003497の5’側はMajorFacilitatorsuperfamilyに属する遺伝子に、3’側はChromodomainhelicaseDNAbindingproteinという全く異なる遺伝子にホモロジーが検出されたため、2つの遺伝子が融合して1つの遺伝子として誤って予測されていることが考えられた。そこで、BGIBMGA003497の5’側と3側を仮にBGIBMGA0034971とBGIBMGA0034972とした。reの責任領域範囲内の予測遺伝子の発現を調べるため、BGIBMGA003498、003499、003494、003695にはそれぞれ1セットずつ、BGIBMGA003497については、BGIBMGA0034971とBGIBMGA0034972に1セットずつ、プライマーを設計した。カイコの卵は、産卵後40時間頃に薄茶色に着色し始め、この時期には野生型系統とre系統を見分けにくいが、72時間頃になると、野生型は藤鼠色になるのに対し、re系統は薄オレンジ色または赤色を呈し、それ以降はそれぞれの色が濃くなる。このため、reの原因遺伝子は、主に産卵後72時間より前に働いていることが考えられた。そこで、標準型の卵色と複眼色を示すP50TとC108の2つの系統について産下直後、1日後、2日後、3日後の卵における遺伝子の発現をRTPCRにより調べた。その結果、BGIBMGA003499はC108で発現が見られたが、p50Tではその発現が非常に弱くなっていた。003498、003494、003695では発現を示すバンドが検出できなかった。BGIBMGA0034972は発現が検出されたが、特に、p50T系統では一様に発現していた。興味深いことに、BGIBMGA0034971は2448時間後に発現がピークになり、72時間後には発現量が下がっており、卵の着色に先立って発現していると考えられた。BGIBMGA0034971とBGIBMGA0034972では発現パターンが異なることから、この二つは独立の遺伝子であることが考えられた。3BGIBMGA0034971の構造の解析BGIBMGA0034971のORF配列を調べるため、カイコのESTライブラリーとゲノム配列にBlastN検索をかけたところ、アラタ体と神経由来のESTライブラリーから対応するESTが得られた。これらのEST配列を基にORF全長を野生型の卵およびre系統の卵のcDNAから単離し、遺伝子構造の比較を行った。P50T系統、C108系統共に、BGIBMGA0034971は、495アミノ酸のORFをコードする転写産物が発現していた図4、図5、図6。911系統、e28系統では、BGIBMGA0034971は正常な転写産物が検出されず、exon9の一部を失ったType1および、exon9全体を失った転写産物Type2の2種類の異常な転写産物が検出された図4~6、配列番号:5~8。Type1では76塩基が、Type2では100塩基が欠損しており、野生型とType1、Type2がコードする蛋白質のアミノ酸配列を比較すると、Type1、Type2では、欠損部位よりもC末側は野生型のアミノ酸配列よりも短く、また、フレームシフトの結果全く異なる配列になっていた図6。BGIBMGA0034971は小さい溶質を通すトランスポーターのファミリーであるMajorFacilitatorsuperfamilyに属する遺伝子にホモロジーを持っていた。MajorFacilitatorsuperfamilyは一般に12回膜貫通型もしくは14回膜貫通型の構造をとるため、BGIBMGA0034971のコードする蛋白質の膜貫通ドメインをSOSUIプログラムで予測した。その結果、野生型の遺伝子では12回膜貫通型になると予測され、Type1、Type2の欠損は10番目と11番目の膜貫通部位の間及び、10番目の膜貫通部位に生じていることが判明した。re系統の転写産物がコードする蛋白質の膜貫通ドメインを予測すると、野生型とは異なり、11回膜貫通型構造をとることが予測された図8。以上から、re系統では、異常な構造のBGIBMGA0034971蛋白質が発現していると考えられる。上述のように、reの責任領域範囲内の遺伝子では、卵の着色に先立って発現が上昇しているものは、BGIBMGA0034971のみであることから、BGIBMGA0034971がreの原因遺伝子であることが強く示唆された。また、C108、p50Tの野生型系統2種類と、911、e28のre系統2種類において、BGIBMGA0034971のexon9近傍のゲノム配列を決定した。その結果、911、e28は共に、exon9内部に541bpの配列が挿入しており、この挿入がスプライシング異常を引き起こしていることが考えられた。911、e28はでは同じ位置に同じ配列の挿入が見られたため、911はe28と由来が同じであることが強く示唆された。4他の生物種におけるBGIBMGA0034971の探索他の生物種におけるBGIBMGA0034971re遺伝子のホモログをNCBIのデーターベースでBlastP検索を行ったところ、脊椎動物から植物まで幅広い種でホモログが存在した。昆虫種で見ると、双翅目昆虫のアカイエカ、ハマダラカ、ネッタイシマカ、膜翅目昆虫のミツバチ、キョウソヤドリコバチ、オオアリ、ジャンプアリ、鞘翅目昆虫のコクヌストモドキ、シラミ目のコロモジラミ、半翅目昆虫のアブラムシでホモログが存在した図9。このことから、re遺伝子は、幅広い昆虫種でオモクローム合成系に寄与していることが考えられる。しかしながら、Blast検索で抽出されたホモログのもので、その機能が報告されているものは1つも存在しなかった。NCBIのデーターベースでBlastP検索でも、flybaseのBlast検索でも、ショウジョウバエ12種ではホモログが検出されなかった。このことから、ショウジョウバエ12種では、re遺伝子は失われている可能性が強く示唆される。