クロマトグラフィー樹脂を含むメインカラム1と、第1のガードカラム2と、第2のガードカラム3とを備えるクロマトグラフィーシステムであって、前記第1のガードカラム2は前記メインカラム1の第1の端部4に接続され、前記第2のガードカラム3は前記メインカラムの第2の端部5に接続される、クロマトグラフィーシステム。前記第1のガードカラム2及び前記第2のガードカラム3のベッド体積はそれぞれ、前記メインカラム1のベッド体積の約25未満、又は約15未満など約50未満である、請求項1記載のクロマトグラフィーシステム。第1の濃度検出器6は、前記メインカラム1の前記第1の端部4と前記第1のガードカラム2の間に接続され、第2の濃度検出器7は前記メインカラム1の前記第2の端部5と前記第2のガードカラム3の間に接続される、請求項1又は請求項2記載のクロマトグラフィーシステム。前記第1及び第2の濃度検出器6、7は、紫外線吸収検出器である、請求項3記載のクロマトグラフィーシステム。前記第1及び第2の濃度検出器に電気接続され、前記メインカラムの一端部4、5に与えられる供給液材料の組成を示している供給液信号、及び前記メインカラムの他端部5、4からの溶出液を示している溶出液信号を検出する決定ユニット18をさらに備える、請求項3又は請求項4記載のクロマトグラフィーシステム。前記決定ユニット18は、前記メインカラム1の漏出点及び/又は飽和点を決定する、請求項5記載のクロマトグラフィーシステム。前記第1のガードカラム2は、供給液タンク8又は廃棄物レセプタクル9のいずれかに第1のバルブ10を介して接続され、前記第2のガードカラム3は、供給液タンク15又は廃棄物レセプタクル16のいずれかに第2のバルブ17を介して接続されるが、但し、前記第1のガードカラムが供給液タンクに接続される場合、前記第2のガードカラムは廃棄物レセプタクルに接続され、前記第1のガードカラムが廃棄物レセプタクルに接続される場合、前記第2のガードカラムは供給液タンクに接続される、請求項1乃至請求項6のいずれか1項記載のクロマトグラフィーシステム。決定ユニット18は、前記第1及び第2のバルブに電気接続され、前記第1及び第2のバルブの位置を制御する、請求項7記載のクロマトグラフィーシステム。流体を前記メインカラム1から溶出液タンク11、又は前記廃棄物レセプタクル16に迂回させる、前記メインカラム1と前記第1のガードカラム2の間の第3のバルブ12と、流体を前記メインカラム1から溶出液タンク13、又は前記廃棄物レセプタクル16に迂回させる、前記メインカラム1と前記第2のガードカラム3の間の第4のバルブ14とをさらに備えるクロマトグラフィーシステムであって、前記決定ユニット18は、前記第3及び第4のバルブの位置を制御する、請求項8記載のクロマトグラフィーシステム。前記第1及び第2のガードカラムは、前記メインカラム内の前記クロマトグラフィー樹脂と基本的に同じ選択性を有するクロマトグラフィー樹脂を含む、請求項1乃至請求項9のいずれか1項記載のクロマトグラフィーシステム。前記メインカラム及び前記第1及び第2のガードカラムは、Fc断片結合親和性リガンドを備えるクロマトグラフィー樹脂を含む、請求項1乃至請求項10のいずれか1項記載のクロマトグラフィーシステム。前記第1及び第2のガードカラムは、前記メインカラム内の前記クロマトグラフィー樹脂の体積平均粒径より高い、約25又は約50以上など約10以上での体積平均粒径を有するクロマトグラフィー樹脂を含む、請求項1乃至請求項11のいずれか1項記載のクロマトグラフィーシステム。目標物質のクロマトグラフィー分離方法であって、a供給液を供給液タンク8から第1のガードカラム2を介してメインカラム1及び第2のガードカラム3を通して廃棄物レセプタクル16に運ぶことによって、メインカラム1上に前記目標物質を充填する段階と、b洗浄流体を前記第1のガードカラム2を介して前記メインカラム1及び前記第2のガードカラム3を通して運ぶことによって、前記カラムを洗浄する段階と、c溶出流体を前記第1のガードカラム2又は前記第2のガードカラム3を介して前記メインカラム1を通して、溶出液タンク11、13に運ぶことによって、前記目標物質を溶出させる段階とを含む方法。d供給液を供給液タンク15から前記第2のガードカラム3を介して前記メインカラム1及び前記第1のガードカラム2を通して廃棄物レセプタクル9に運ぶことによって、前記メインカラム1上に前記目標物質を充填する段階をさらに含む、請求項13記載の方法。段階aはさらに、前記メインカラムから出る前記流体内の目標物質の濃度を測定する段階と、前記濃度が所定の値に到達した場合に段階aを終了させる段階とを含む、請求項13又は請求項14記載の方法。段階aはさらに、前記メインカラムの漏出点又は飽和点を決定する段階と、前記漏出点又は飽和点に到達した場合に段階aを終了させる段階とを含む、請求項13乃至請求項15のいずれか1項記載の方法。段階bはさらに、前記メインカラムから出る前記流体内の目標物質の濃度を測定する段階と、前記濃度が所定の値より低い場合に段階bを終了させる段階とを含む、請求項13乃至請求項16のいずれか1項記載の方法。前記第1及び第2のガードカラムは、前記メインカラム内のクロマトグラフィー樹脂と基本的に同じ選択性を有するクロマトグラフィー樹脂を含む、請求項13乃至請求項17のいずれか1項記載の方法。前記メインカラム及び前記第1及び第2のガードカラムは、Fc断片結合親和性リガンドを備えるクロマトグラフィー樹脂を含む、請求項13乃至請求項18のいずれか1項記載の方法。前記第1及び第2のガードカラムは、前記メインカラム内の前記クロマトグラフィー樹脂の体積平均粒径より高い、約25又は約50以上など約10以上での体積平均粒径を有するクロマトグラフィー樹脂を含む、請求項13乃至請求項19のいずれか1項記載の方法。前記第12及び第23のガードカラムのベッド体積はそれぞれ、前記メインカラム1のベッド体積の約25未満、又は約15未満など約50未満である、請求項13乃至請求項20のいずれか1項に記載の方法。本発明の一態様は、生体分子の大規模クロマトグラフィー分離のための効率的なプロセスを提供することである。これは、請求項1で定義されるクロマトグラフィーシステム、及び請求項13で定義されるクロマトグラフィー法で達成される。かかるシステム及び方法での1つの利点は、クロマトグラフィー媒体の結合容量が効率的に利用されることである。別の利点は、クロマトグラフィー媒体の寿命が延長されることである。これらの効果は共に、クロマトグラフィー分離の経済性の改善に貢献する。本発明の別の適切な実施形態は、添付の特許請求の範囲に記載されている。本明細書中で供給液という用語は、クロマトグラフィーシステムに供給される液体であって、精製すべき目標物質を含む液体を意味する。目標物質は、モノクローナル抗体など生体分子であってもよい。供給液の例としては、清澄化発酵ブロス、生体液などと、前の分離段階から生じ、一部精製された目標物質を含む液体を挙げることができる。本明細書中でガードカラムという用語は、メインクロマトグラフィーカラムに直列に接続され、メインカラムよりも容積が格段に小さいクロマトグラフィーカラムを意味する。図1に示す一態様では、本発明は、クロマトグラフィー樹脂を含むメインカラム1と、第1のガードカラム2と、第2のガードカラム3とを備えるクロマトグラフィーシステムを開示しており、第1のガードカラム2はメインカラム1の第1の端部4に接続され、第2のガードカラム3はメインカラムの第2の端部5に接続される。すなわち、1つのガードカラムが、メインカラムの各端部に接続される。メインカラムの各端部に接続された1つのガードカラムを有することの利点は、クロマトグラフィー樹脂の容量利用度を改善して分離を行なうことが可能であることである。特定の実施形態では、第1及び第2のガードカラムのベッド体積はそれぞれ、メインカラム1のベッド体積の約25未満、約15未満、又は約10未満など約50未満である。この利点は、クロマトグラフィー樹脂がより効率的に使用されることである。樹脂容量利用度を高めることが重要な場合、例えば、生物薬剤の分離のための大規模予備クロマトグラフィーにおいて本発明を利用する特定の利点があるので、メインカラムのベッド体積は、10L以上、又は100L以上など、1L以上である可能性がある。いくつかの実施形態では、第1の濃度検出器6は、メインカラム1の第1の端部4と第1のガードカラム2の間に接続され、第2の濃度検出器7はメインカラム1の第2の端部5と第2のガードカラム3の間に接続される。第1及び第2の濃度検出器は、例えば、タンパク質の濃度を検出するのに好都合な、紫外線吸収検出器とすることができる。しかし、例えば、非UV吸収物質を検出するために使用することができる屈折率検出器であってもよく、又は様々な目標物質又は汚染物質に対する特定の検出器であってもよい。これらの位置に検出器を備える利点は、上向及び下向方向の両方でメインカラムの漏出点を監視して、漏出点が検出されるとシステムを通して流路を制御することが可能になることである。漏出点の監視は、手動で又は自動で行なうことができ、流路の制御を手動で又は自動で行なうことができる。一実施形態では、クロマトグラフィーシステムはまた、第1の濃度検出器6及び第2の濃度検出器7に電気接続され、メインカラムの一端部4、5に与えられる供給液材料の組成を示している供給液信号、及びメインカラムの他端部5、4からの溶出液を示している溶出液信号を検出する決定ユニット18を備えている。決定ユニット18は、一実施形態では、メインカラム1の漏出点及び/又は飽和点を決定するように適合させることができる。決定ユニット18は、コンピュータ、プログラマブル論理制御装置、又は濃度検出器信号から算出された関数によってバルブを制御することが可能なあらゆる他のタイプのデジタル又はアナログユニットであってもよい。漏出点は、第1の検出器6及び第2の検出器7上で測定された信号を比較することによって算出することができる。第1の検出器6上で測定された信号は、UV検出器の場合供給液内に存在する全てのUV吸収成分、すなわち、第1のガードカラム2に結合するもの、及び通過するものの両方の濃度を示している。信号は、非吸収物質がガードカラム2を通り抜ける場合に、第1の平坦域に到達し、第1のガードカラム2が飽和となった場合に、第2の平坦域に到達する。第2の平坦域は、供給液流内に存在する全ての物質の合計濃度を示している。第2の検出器7は、カラム1からの溶出液流内の物質の濃度を監視する。第2の検出器上で測定された信号間の差が、第1の検出器上で測定された第2の平坦域と第2の検出器上で測定された第1の平坦域の間の差の例えば1の所定の値に到達した場合に、第1の漏出点に到達する。飽和点と呼ばれる、第2の漏出点は、2つの検出器上で測定された信号間の差が、別の値、例えば70に到達した場合を除いて、アナログで決定される。特定の実施形態では、第1のガードカラム2は、供給液タンク8又は廃棄物レセプタクル9のいずれかに第1のバルブ10を介して接続され、第2のガードカラム3は、供給液タンク15又は廃棄物レセプタクル16のいずれかに第2のバルブ17を介して接続されるが、但し、第1のガードカラムが供給液タンクに接続される場合、第2のガードカラムは廃棄物レセプタクルに接続され、第1のガードカラムが廃棄物レセプタクルに接続される場合、第2のガードカラムは供給液タンクに接続される。一実施形態では、決定ユニット18は、第1及び第2のバルブに電気接続され、前記第1及び第2のバルブの位置を制御する。この構成の利点は、決定ユニットが漏出点又は飽和点を検出した場合、出口流れをメインカラムから、例えば供給液タンクに自動的に迂回させることができることである。いくつかの実施形態では、クロマトグラフィーシステムはまた、流体をメインカラム1から溶出液タンク11、又は廃棄物レセプタクル16に迂回させる、メインカラム1と第1のガードカラム2の間の第3のバルブ12と、流体をメインカラム1から溶出液タンク13、又は廃棄物レセプタクル16に迂回させる、メインカラム1と第2のガードカラム3の間の第4のバルブ14とを備えており、決定ユニット18は、第3及び第4のバルブの位置を制御する。この構成の1つの利点は、決定ユニットが洗浄サイクルの完了を検出した場合に、溶出サイクルを自動的に開始させることである。この構成の第2の利点は、決定ユニットが漏出点を検出した場合に、自動的に第2のガードカラム3をメインカラム1と直列に接続させることができることである。これにより、第2のガードカラム3が、製品劣化供給液流に露出されるのを防ぐ。特定の実施形態では、前記第1及び第2のガードカラムは、メインカラム内のクロマトグラフィー樹脂と基本的に同じ選択性を有するクロマトグラフィー樹脂を含む。これは、ガードカラム及びメインカラム内の樹脂は、イオン強度、pHなど所与の条件で同じ物質と結合することを意味する。同じ選択性を与えるために、樹脂を、好適にはほぼ同じリガンド含有量を有する、又はリガンド含有量の約20未満の差を有する、同じタイプのリガンドと置換することができる。基本的に同じ選択性を有する利点は、メインカラムからのあらゆる目標物質漏出点が、メインカラムの後にガードカラムでキャプチャされることである。いくつかの実施形態では、前記メインカラム及び前記第1及び第2のガードカラムは、Fc断片結合親和性リガンドを備えるクロマトグラフィー樹脂を含む。かかるリガンドは一般的に、モノクローナル抗体処理のキャプチャ段階で使用され、その高いコストが段階効率、及び樹脂の寿命の増大に圧力を与える。これらは、抗体に対する非常に高い選択性を有し、本発明の方法及びシステムに特に有利である、溶出に対する単一段階勾配の使用が可能になる。親和性リガンドは、例えば、プロテインA、例えば、EP1485407B1、WO2008039141、WO2010080065、EP2202310A2、EP2157099A1、特開2006-304633号、米国特許出願公開第2010/0168395号、CN101337986、WO2009146755などに記載されているようなプロテインAの変異種、プロテインG又は例えば、WO2009011572に記載されているようなFc結合単一ドメイン抗体断片など、タンパク性リガンドであってもよい。あるいは、親和性リガンドは、ペプチド、核酸、又は有機小分子であってもよい。樹脂のリガンド含有量は、例えば、1~15mg/mlの範囲の樹脂であってもよい。いくつかの実施形態では、前記第1及び第2のガードカラムは、メインカラム内のクロマトグラフィー樹脂の体積平均粒径より高い、約25以上又は約50以上など約10以上での体積平均粒径を有するクロマトグラフィー樹脂を含む。メインカラム樹脂の平均粒径は、80~95μmなど約50~100μmであってもよく、ガードカラム樹脂の平均粒径は、130~210μmなど約100~250μmであってもよい。樹脂の平均粒径は有利には、第1及び第2のガードカラムを通して同じである可能性がある。特定の例では、メインカラムに、85μm平均粒径のプロテインA機能MabSelect樹脂GEHealthcareLifeSciencesを充填させることができ、ガードカラムに、例えば、EP873353B1に記載されているような当技術分野で知られている方法により、プロテインAで官能基化された200μmの平均粒径のSepharoseBigBeadsGEHealthcareLifeSciencesを充填させることができる。ガードカラム内のより大きな粒径樹脂を有する利点は、背圧がより低く、ガードカラムをその漏出点の近傍で使用しなくてもよいので、より大きな粒子に通常関連する漏出点曲線のより低い勾配は問題にならないことである。図2に示す一態様では、本発明は、目標物質のクロマトグラフィー分離方法であって、a供給液を供給液タンク8から第1のガードカラム2を介してメインカラム1を通して、i廃棄物レセプタクル16に、又はii第2のガードカラム3を介して廃棄物レセプタクル16に運ぶことによって、メインカラム1上に目標物質を充填する段階と、b洗浄流体を第1のガードカラム2を介してメインカラム1及び第2のガードカラム3を通して運ぶことによって、カラムを洗浄する段階と、c溶出流体を第1のガードカラム2又は第2のガードカラム3を介してメインカラム1を通して、溶出液タンク11、13に運ぶことによって、目標物質を溶出させる段階とを含む方法を開示している。充填段階aでは、目標物質、例えば、タンパク質、免疫グロブリン、IgG又はモノクローナル抗体など生体分子を、第1のガードカラム内又はメインカラム内でクロマトグラフィー樹脂に結合させることができ、それによって、劣化供給液のみが、廃棄物レセプタクルに運ばれる。これは、メインカラムが製品漏出点を示すまで、続く可能性がある。この時点で、第2のガードカラムを、メインカラムに接続させることができ、メインカラム上に結合されていない目標物質はその後、第2のガードカラム上で吸着される。このプロセスは、第1のガードカラム及びメインカラムが飽和となり、いくつかの目標物質が第2のガードカラム内のクロマトグラフィー樹脂に結合されるまで、続く可能性がある。流れをその後、段階bで洗浄モードに変更することができ、洗浄流体は、好ましくは段階aと同じ方向であるが、あらゆる方向に3つのカラム全てを通して運ばれ、メインカラムから浸出するあらゆる目標物質は、メインカラムの後にガードカラムによってキャプチャされる。洗浄が完了すると、流れを、段階cで溶出モードに変更することができ、溶出流体は、第2のガードカラム、その後メインカラムを通して溶出液タンクまでなど、好ましくは段階aと同じ方向であるが、任意の方向にガードカラム及びメインカラムの1つを通して運ばれ、ここで分離された目標物質が収集される。この方法の利点は、メインカラムからのあらゆる漏出点目標物質を、充填及び洗浄の両方の最中にガードカラムによってキャプチャすることができ、溶出の最中に回収することができることである。特定の実施形態では、方法はさらに、d供給液を供給液タンク15から第2のガードカラム3を介してメインカラム1を通して、i廃棄物レセプタクル9に、又はii第1のガードカラム2及び廃棄物レセプタクル9に運ぶことによって、メインカラム1上に目標物質を充填する段階を含む。この充填段階は、充填段階aと反対の方向で行なわれ、例えば、段階a、b、及びcのシーケンスの後にその順番で行なわれる可能性がある。この利点は、第1のガードカラムは、漏出点を通過するメインカラムを通り抜け始めるあらゆる製品をキャプチャする準備ができていることである。特定の実施形態では、段階b及びcは段階dの後に繰り返され、繰り返された段階b及びcの流れは、元の段階b及びcでの流れと反対の方向に流される。繰り返された段階cの流れは、第2のガードカラムを通して、その後、メインカラムを通して溶出液タンク13に流される。いくつかの実施形態では、段階aはさらに、メインカラムから出る流体内の目標物質の濃度を測定する段階と、前記濃度が所定の値に到達した場合に段階aを終了させる段階とを含む。特定の実施形態では、段階aはさらに、メインカラムの漏出点又は飽和点を決定する段階と、前記漏出点又は飽和点に到達した場合に段階aを終了させる段階とを含む。この利点は、メインカラム内の樹脂が効率的に利用され、基本的に全ての漏出点目標物質がガードカラムによってキャプチャされることである。いくつかの実施形態では、段階bはさらに、メインカラムから出る流体内の目標物質の濃度を測定する段階と、前記濃度が所定の値より低い場合に段階bを終了させる段階とを含む。この利点は、洗浄流体の消費が最小限に抑えられることである。本明細書では、本発明を最良の形態を含めて開示するとともに、装置又はシステムの製造使用及び方法の実施を始め、本発明を当業者が実施できるようにするため、例を用いて説明してきた。本発明の特許性を有する範囲は、特許請求の範囲によって規定され、当業者に自明な他の例も包含する。かかる他の例は、特許請求の範囲の文言上の差のない構成要素を有しているか、或いは特許請求の範囲の文言と実質的な差のない均等な構成要素を有していれば、特許請求の範囲に記載された技術的範囲に属する。