架橋結合マトリックスを形成するために互いに反応することができる少なくとも二つの機能的に活性化されたPEG成分と、βシートを形成して該架橋結合マトリックスをさらに安定化することができる少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロインとを含む組成物を混合する段階を含む、架橋結合ポリマーマトリックスを調製する方法。架橋結合マトリックスを形成するために互いに反応することができる少なくとも二つの機能的に活性化されたPEG成分と、βシートを形成して該架橋結合マトリックスをさらに安定化することができる少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロインとを含む組成物を混合する段階;および架橋結合ポリマーマトリックスを形成するために該組成物の該成分を架橋結合する段階を含む、架橋結合ポリマーマトリックスを調製する方法。架橋結合する段階が、混合物をアルコール処理または水アニーリング処理に曝露することを伴う、請求項2記載の方法。機能的に活性化されたPEG成分と混合する前に、絹フィブロインからセリシンを枯渇させる、請求項1~3のいずれか一項記載の方法。マトリックスがヒドロゲルである、請求項1~4のいずれか一項記載の方法。各PEG成分が4アームPEGである、請求項1~5のいずれか一項記載の方法。PEG成分の一つがマレイミジル基で機能的に活性化される、請求項1~6のいずれか一項記載の方法。PEG成分の一つがチオール基で機能的に活性化される、請求項1~7のいずれか一項記載の方法。PEG成分の一つがマレイミジル基で機能的に活性化され、該PEG成分の別の一つがチオール基で機能的に活性化される、請求項1~8のいずれか一項記載の方法。前記組成物の少なくとも一つの成分が水溶液に懸濁または溶解される、請求項1~9のいずれか一項記載の方法。少なくとも絹フィブロインが水溶液中にあり、該絹フィブロインの濃度が少なくとも約10重量である、請求項10記載の方法。水溶液が二価のイオンを含まない、請求項10または11記載の方法。水溶液が脱イオン水である、請求項12記載の方法。各PEG成分が少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロイン溶液に懸濁または溶解される、請求項1~13のいずれか一項記載の方法。水溶液のpHが約6から約8の範囲である、請求項1~14のいずれか一項記載の方法。前記組成物中の各PEG成分の濃度が約25重量から約15重量の範囲である、請求項1~15のいずれか一項記載の方法。前記組成物中の絹フィブロインの濃度が約10重量から約30重量の範囲である、請求項1~16のいずれか一項記載の方法。前記組成物中の絹フィブロインの濃度が約15重量から約25重量の範囲である、請求項1~17のいずれか一項記載の方法。架橋結合ポリマーマトリックスが前記組成物の初期重量の約70未満膨張する、請求項1~18のいずれか一項記載の方法。架橋結合ポリマーマトリックスが、混合する段階後1時間以内に実質的に膨張しない、請求項19記載の方法。少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロインが、架橋結合ポリマーマトリックスの接着強度を少なくとも約10Paまで高める、請求項1~20のいずれか一項記載の方法。前記組成物が、細胞、タンパク質、ペプチド、核酸、核酸類似体、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド、ペプチド核酸、アプタマー、抗体またはその断片もしくは部分、抗原またはエピトープ、ホルモン、ホルモンアンタゴニスト、成長因子または組換え型成長因子ならびにその断片および変異型、細胞接着調節物質、サイトカイン、酵素、抗生物質または抗菌性化合物、ウイルス、毒素、プロドラッグ、化学療法物質、小分子、薬物、ならびにそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される活性物質をさらに含む、請求項1~21のいずれか一項記載の方法。活性物質が、始原細胞または幹細胞、平滑筋細胞、骨格筋細胞、心筋細胞、上皮細胞、内皮細胞、尿路上皮細胞、神経細胞、生殖細胞、結合組織細胞、ホルモン分泌細胞、腱細胞、線維芽細胞、筋芽細胞、神経芽細胞、グリア芽細胞、口の細胞、軟骨細胞、軟骨芽細胞、骨芽細胞、破骨細胞、ケラチノサイト、腎尿細管細胞、腎基底膜細胞、外皮細胞、骨髄細胞、肝細胞、胆管の細胞、膵島細胞、甲状腺の細胞、上皮小体の細胞、副腎の細胞、視床下部の細胞、下垂体の細胞、卵巣の細胞、精巣の細胞、唾液腺の細胞、脂肪細胞、前駆細胞、およびそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される細胞である、請求項22記載の方法。活性物質が抗生物質である、請求項22記載の方法。前記組成物が、トロンビン、フィブリン、フィブリノーゲン、ゼラチン、コラーゲン、多糖類、セルロース、血液因子、およびそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される止血物質をさらに含む、請求項1~24のいずれか一項記載の方法。架橋結合ポリマーマトリックスが、少なくとも10日間にわたって生理学的条件下でその当初の体積を保持する、請求項1~25のいずれか一項記載の方法。請求項1~26のいずれか一項記載の方法によって作製される、架橋結合ポリマーマトリックス。請求項27記載の架橋結合ポリマーマトリックスを含む、組織封止剤または接着剤。架橋結合マトリックスを形成するために互いに反応することができる少なくとも二つの機能的に活性化されたPEG成分と、βシートを形成して該架橋結合マトリックスを安定化することができる少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロインとを含む組成物を対象の標的部位に投与する段階;および該成分を架橋結合して組織封止剤または接着剤を該標的部位において形成するために該組成物の該成分を混合する段階を含む、対象の標的部位において組織封止剤または接着剤を形成する方法。各PEG成分が4アームPEGである、請求項29記載の方法。PEG成分の一つがマレイミジル基で機能的に活性化される、請求項29または30記載の方法。PEG成分の一つがチオール基で機能的に活性化される、請求項29~31のいずれか一項記載の方法。PEG成分の一つがマレイミジル基で機能的に活性化され、該PEG成分の別の一つがチオール基で機能的に活性化される、請求項29~32のいずれか一項記載の方法。少なくとも一つの成分が水溶液に懸濁または溶解される、請求項29~33のいずれか一項記載の方法。少なくとも、少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロインが水溶液中にある、請求項34記載の方法。水溶液が二価のイオンを含まない、請求項35記載の方法。各PEG成分が少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロイン溶液に懸濁または溶解される、請求項29~36のいずれか一項記載の方法。前記組成物の総重量に基づく各PEG成分の重量パーセントが約25重量から約15重量の範囲である、請求項29~37のいずれか一項記載の方法。前記組成物の総重量に基づく絹フィブロインの重量パーセントが約10重量から約30重量の範囲である、請求項29~38のいずれか一項記載の方法。前記組成物の総重量に基づく絹フィブロインの重量パーセントが約15重量から約25重量の範囲である、請求項29~39のいずれか一項記載の方法。組織封止剤または接着剤が前記組成物の初期重量の約70重量未満膨張する、請求項29~40のいずれか一項記載の方法。前記組成物が活性物質をさらに含む、請求項29~41のいずれか一項記載の方法。前記組成物が止血物質をさらに含む、請求項29~42のいずれか一項記載の方法。標的部位の表面が前記組成物中の成分の少なくとも一つと架橋結合する、請求項29~43のいずれか一項記載の方法。対象が移植片である、請求項29~44のいずれか一項記載の方法。対象が組織または臓器である、請求項29~45のいずれか一項記載の方法。組織または臓器が圧力感受性構造物の近傍にある、請求項46記載の方法。組織または臓器が開放性の創傷を有する、請求項46または47記載の方法。二つのPEG成分が対象に別々に投与され、それによって、インビボにおいて組織封止剤または接着剤が形成される、請求項29~48のいずれか一項記載の方法。第一の区画が第一の機能的に活性化されたPEG成分を含み、第二の区画が架橋結合マトリックスを形成するために機能的に活性化された第一の該PEG成分と反応することができる第二の機能的に活性化されたPEG成分を含み、第一および第二の該区画の少なくとも一つが、βシートを形成して該架橋結合マトリックスをさらに安定化することができる少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロインをさらに含む、少なくとも二つの区画を含むハウジングを含む、予め充填された送達装置。第一の機能的に活性化されたPEG成分が少なくとも一つのマレイミジル基を含む、請求項50記載の送達装置。第二の機能的に活性化されたPEG成分が少なくとも一つのチオール基を含む、請求項50記載の送達装置。シリンジである、請求項50~52のいずれか一項記載の送達装置。シリンジが針をさらに含む、請求項53記載の送達装置。シリンジがカテーテルをさらに含む、請求項53または54記載の送達装置。少なくとも一つの送達装置に予め充填された少なくとも三つの成分を含むマトリックス形成組成物であって、少なくとも三つの該成分が、架橋結合マトリックスを形成するために互いに反応することができる少なくとも二つの機能的に活性化されたPEG成分と、βシートを形成して該架橋結合マトリックスをさらに安定化することができる少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロインとを含む、マトリックス形成組成物、ならびに該マトリックス形成組成物を混合するための溶媒を含む少なくとも一つの容器を含む、キット。送達装置が少なくとも二つの別々の外筒を含み、それぞれの該外筒がマトリックス組成物の異なる成分を充填される、請求項56記載のキット。少なくとも一つの成分が別個の送達装置に予め充填される、請求項56記載のキット。溶媒が水溶液である、請求項56~58のいずれか一項記載のキット。溶媒が脱イオン水である、請求項56~59のいずれか一項記載のキット。PEG成分が、送達装置の別個の外筒または異なる送達装置に別々に予め充填される、請求項56~60のいずれか一項記載のキット。PEG成分が絹フィブロインとブレンドされる、請求項56~61のいずれか一項記載のキット。発明の詳細な説明本発明は、絹フィブロインおよび多成分性のゲル化系例えば、二成分性のゲル化系を含む絹含有複合物を調製するための方法、組成物およびキットに関する。二成分性のゲル化系の例には、アルギナート構築系、フィブリン膠例えば、フィブリノーゲンおよびフィブリンならびにフィブリン膠様の系、自己組織化ペプチド、合成ポリマー系例えば、PEG系、ならびにそれらの任意の組み合わせを含むが、これらに限定されるものではない。ゲル化系の成分例えば、少なくとも二つの機能的に活性化されたPEG成分は、ゲルを形成するために互いに迅速に架橋結合することができ、絹フィブロインは絹βシート形成を介して架橋結合したネットワークを安定化することができる。いくつかの態様において、本発明は、絹のβシート形成を介してさらに安定化される、異なる化学基を持つ化学的に反応性の活性ポリエチレングリコールPEG例えば、チオールおよびマレイミド官能基を含むPEGによる架橋結合を介した、絹-PEGをベースとする生体材料の調製のための方法、組成物、およびキットに関する。架橋結合した絹-PEG生体材料は、強力な接着特性を示し、この特性は、絹-PEG材料中の絹の濃度に応じて、現在の先行するPEGをベースとした封止剤と同等またはそれよりも優れたものとなる。さらに、絹-PEGをベースとする生体材料は細胞適合性であり、膨張挙動が低く、かつ分解時間が長く、それにより、これら絹-PEGをベースとする生体材料は、現在利用可能な組織封止剤の製品が禁忌である可能性のある止血の適用に適切となる。マトリックス形成組成物本発明の一つの局面は、絹フィブロインと少なくとも二つの機能的に活性化されたPEG成分とを含む少なくとも三つの成分を含む、マトリックス形成組成物に関する。絹フィブロインは、例えば、約5重量から約30重量または約10重量から約30重量までの範囲のように、組成物中に任意の濃度で存在してよい。一つの態様において、絹フィブロインは少なくとも約10重量の濃度で存在する。二つの機能的に活性化されたPEG成分は、架橋結合したマトリックスを形成するために互いに反応することができ、本マトリックスは、絹フィブロインのβシート形成によってさらに安定化することができる。典型的には、二つのPEG成分はマトリックスの形成前に予め混合されない。いくつかの態様において、各PEG成分は、マトリックスの形成前に絹フィブロイン例えば、少なくとも約10重量の濃度にてとブレンドされ得る。機能的に活性化されたPEG成分:各PEG成分は一つまたは複数の官能基で活性化される。活性化されたPEG成分という用語は、共有結合を形成して、それによって架橋結合したマトリックスを形成するように同一または異なるPEG成分の他の官能基と化学的に反応することができる、二つまたはそれよりも多い官能基を有するように化学的に修飾されているPEG成分を指す。本明細書において、PEG成分は、典型的には多機能性に活性化されて、即ち、二つまたはそれよりも多い官能基を含む例えば、二機能性に活性化される、四機能性に活性化される、または星状分岐した。PEG成分の少なくとも一つは、マルチアームのPEG誘導体例えば、2アーム、4アーム、8アーム、および12アームなどであり得る。いくつかの態様において、各PEG成分は、マルチアームPEG誘導体例えば、2アーム、4アーム、8アーム、および12アームなどであり得る。本明細書で記載されるマルチアームPEG誘導体という用語は、少なくとも約2本、少なくとも約4本、少なくとも約6本、少なくとも約8本、少なくとも約12本のPEGポリマー鎖もしくはその誘導体アームまたはそれよりも多くを持つ分岐したポリエチレングリコールを指す。マルチアームまたは分岐PEG誘導体には、フォーク型PEGおよびペンダント型PEGが含まれるが、これらに限定されるものではない。フォーク型PEGの一つの例はPEGYCHZ2によって示すことができ、Yはリンク基であり、Zは所定の長さの原子の鎖によってCHに連結する活性化された末端基である。参照により全体が本明細書に組み入れられる国際特許出願第WO9945964号は、本発明のいくつかの態様において使用され得る様々なフォーク型PEGの構造を開示する。Z官能基を分岐炭素原子に連結する炭素鎖は、係留基として機能することができ、例えばアルキル鎖、エーテル鎖、エステル鎖、アミド鎖、およびそれらの組み合わせを含み得る。ペンダント型PEGは、PEG鎖の末端ではなくPEGセグメントの長さに沿って共有結合により接続したカルボキシルのような官能基を有し得る。ペンダント型の反応基は、直接またはアルキレンのような連結分子を介して、PEGセグメントに接続し得る。参照により内容が全体として本明細書に組み入れられる米国特許第5932462号に開示されたようなさらなるマルチアームまたは分岐PEG誘導体も、本明細書の目的のために使用することができる。いくつかの態様において、マルチアームPEG誘導体は、8アームPPOPEGブロックコポリマーおよび8アームPLAPEGブロックコポリマーなどの多分岐PEGブロックコポリマーを内包し得るが、これらに限定されるものではない。このようなマルチアームPEGブロックコポリマーを生成するための方法は、当技術分野において周知である。例示的なマルチアームPEGブロックコポリマーおよびその作製方法については、例えば、米国特許出願第US20050147681号を参照されたい。本明細書に記載されるマトリックス形成組成物において、各PEG成分は同一または異なる数のアームを持つことができる。マルチアームのPEG誘導体、例えば少なくとも4アームPEG誘導体は、典型的には架橋結合反応においてより有効である。本明細書に記載される架橋結合したポリマーマトリックスの架橋結合の数または機械的な特性は、PEGのアームおよび/または官能基の数によって調節することができる。一つの態様において、4アームPEG誘導体は絹-PEGの架橋結合したマトリックスを形成するために用いられる。別の態様において、8アームPEG誘導体は絹-PEGの架橋結合したマトリックスを形成するために用いられる。いくつかの態様において、PEG成分は異なるアームの数を持つPEG誘導体の組み合わせであってもよい。PEG成分の異なるアームは、同一または異なる数またはタイプの官能基を持ってもよい。架橋結合反応においてPEG成分を活性化するために、様々な官能基が用いられ得る。本明細書に記載される通り、官能基Aおよび官能基Bは、一般に、互いに化学的に反応することができ、従って、架橋結合反応におけるPEG成分の活性化のために用いられる官能基の対を指すために用いられる。例えば、官能基AはNH2、チオールSH、S、OH、PH2、CONHNH2、およびそれらの任意の組み合わせであり得、官能基BはNHS、アクリラート、ビニルスルホン、マレイミド、CO2N2、CO2H、CHO、CHOCH2、NCO、SO2CHCH2、N2、SS、およびそれらの任意の組み合わせであり得る。当業者に公知であるその他の官能基も用いることができる。一つの態様において、PEG成分における官能基の対はチオール/マレイミドである。一つの態様において、PEG成分における官能基の対はチオール/アクリラートである。別の態様において、PEG成分における官能基の対はアミン/Nヒドロキシサクシニミドである。いくつかの態様において、本明細書で用いられるPEG成分の対はマルチアームPEGチオールおよびマルチアームPEGマレイミドである。一つの態様において、本明細書で用いられるPEG成分の対は4アームPEGチオールおよび4アームPEGマレイミドである。マトリックス形成組成物における機能的に活性化された異なるPEG成分の割合は、各PEG成分中の官能基の数に依存し得る。単なる例として、機能的に活性化された二つのPEG成分は、約10:1から約1:10まで約10:1および約1:10を含む、または約5:1から約1:5まで約5:1および約1:5を含むの範囲の割合で組み合わせられ得る。いくつかの態様において、一つのPEG成分は架橋結合反応後に過剰に存在する可能性がある。一つの態様において、機能的に活性化された二つのPEG成分は1:1の割合で混合することができる。当業者は、反応化学量論および化学反応のタイプに基づいて、機能的に活性化された異なるPEG成分の割合を決定することができる。架橋結合したネットワークの形成における機能的に活性化されたPEGの反応は、PEGに接続する基の官能性に応じて、多くの異なる化学反応によって生じ得る。例えば、ゲルはマイケル型の付加反応または縮合反応によって形成され得る。一般に、マイケル型の付加反応はα、β未飽和カルボニルと求核試薬の反応を伴う。マイケル型の付加反応はpH6またはそれよりも高いpH、例えば、pH6、pH7、pH8、pH9またはそれよりも高いpHにおいて起こり得る。マイケル付加反応は当業者に周知である。マイケル付加反応を受け得る機能化されたPEG上の部分の例には、PEGマレイミドと組み合わされたPEGSH、およびPEGアクリラートと組み合わされたPEG-SHが含まれるが、これらに限定されるものではない。いくつかの態様において、反応は約4よりも高いpHを持つ緩衝液、様々なアミン、またはそれらの組み合わせの触媒作用的な量を用いて活性化され得る。縮合反応は、二つの分子または部分が反応して、小分子、しばしば水、メタノール、または塩化水素のようなハロゲン化水素のタイプを同時に消失することによって、互いに共有結合性に結合を形成する化学反応である。高分子化学では、一連の縮合反応が生じると、それによってモノマーまたはモノマーの鎖が互いに付加してより長い鎖を形成し得る。縮合反応を受け得る活性化されたPEGの官能基の例には、PEGNHSエステルおよびPEGNH2が含まれるが、これらに限定されるものではない。理論によって拘束されることを意図するものではないが、チオールと活性化されたエステルの反応からは、加水分解的に対してより不安定であるチオエステル結合が形成されるのに比して、チオエーテル結合が形成されることから、マイケル付加反応は形成される架橋結合ネットワークのより長期の安定性に貢献し得る。マトリックス形成組成物中のPEG成分は、粉末、懸濁液、または溶液として提供され得、または一つの成分は粉末として提供され、かつ別の成分は懸濁液もしくは溶液として提供される。同様に、マトリックス形成組成物中の絹フィブロインも、粉末、懸濁液、または溶液として提供することができる。一つの態様において、マトリックス形成組成物中のすべての成分が粉末である。一つの態様において、少なくとも一つの成分が水溶液に懸濁または溶解される。一つの態様において、少なくとも絹フィブロインは水溶液中で提供される。一つの態様において、絹フィブロインは、絹フィブロイン溶液を調製するために水に溶解または懸濁される。別の態様において、PEG成分は、絹フィブロイン溶液に懸濁または溶解され得る。いくつかの態様において、マトリックス形成組成物は、二価のイオンの非存在の水溶液、例えば一価のイオンを含む緩衝溶液に、懸濁または溶解される。一つの態様において、マトリックス形成組成物は水に懸濁または溶解される。マトリックス形成組成物の成分例えば、PEG成分および/または絹フィブロインは、酸性、中性、または塩基性の溶液即ち、任意のpHにおいてそれぞれに調製して保存することができる。架橋結合したポリマーマトリックスを形成するために成分を一つの組成物に混合する前に、成分のpHを、各々、架橋結合反応のための所望のpH、例えばpH7、pH8、pH9、またはそれよりも高いpHを含むpH6またはそれよりも高いpHに調整してよい。または、マトリックス形成組成物の最終的なpHは、すべての成分が一つに混合された後にpH7、pH8、pH9、またはそれよりも高いpHを含むpH6またはそれよりも高いpHに達してよい。従って、混合の結果、例えばpH6、pH7、pH8、pH9、またはそれよりも高いpHなどの所望のpHとなるように、少なくとも一つの成分を酸性の溶液として調製し、その他の成分を塩基性または中性の溶液として調製してもよい。拘束されることを意図するものではないが、その他の多成分性のゲル化系例えば、二成分性のゲル化系は、絹フィブロインがβシートを形成して架橋結合したネットワークを安定化するのであれば、本明細書に記載されるマトリックス形成組成物において、PEGゲル化系を代替するために用いられてもよく、または含まれてもよい。二成分性のゲル化系の例には、アルギナート構築系、フィブリン膠例えば、フィブリノーゲンおよびトロンビンならびにフィブリン膠様の系、自己組織化ペプチド、合成ポリマー系例えば、PEG系、ならびにそれらの任意の組み合わせが含まれるが、これらに限定されるものではない。いくつかの態様において、二成分性ゲル化系はフィブリン膠を含む。フィブリン膠は二つの主な成分であるフィブリノーゲンおよびトロンビンからなる。等量ずつ混合すると、トロンビンは酵素作用によってトロンビンの濃度によって決定される速度で、フィブリノーゲンをフィブリンに転換する。生成物は、約5から約60秒の間でゲル化する生体適合性ゲルである。このような態様において、絹フィブロインは、絹βシート形成を介してフィブリンをさらに安定化することができる。フィブリン膠様の系の例には、Tisseel商標Baxter、BeriplastP商標AventisBehring、Biocol登録商標LFBFrance、Crosseal商標OmrixBiopharmaceuticalsLtd、HemaseelHMN登録商標HaemacureCorp、BolhealKaketsukenPharmaJapanおよびCoStasis登録商標AngiotechPharmaceuticalsが含まれるが、これらに限定されるものではない。いくつかの態様において、二成分性のゲル化系は合成ポリマー系である。本明細書に記載される通りのPEGに加えて、合成ポリマーのその他の例には、ポリアミノ酸、多糖類、ポリアルキレンオキシド、およびそれらの任意の組み合わせが含まれるが、それらに限定されるものではない。これらの合成ポリマー系では、合成ポリマー系の少なくとも二つの成分は、架橋結合したネットワークを形成するために合成ポリマー系のこれらの二つの成分が互いに反応するように、当技術分野において公知の反応化学を用いて機能的に活性化することができる。様々な態様において、PEG成分またはその他の合成ポリマーのそれぞれの分子量は、所望の適用に応じて個々に変化し得る。いくつかの態様において、分子量MWは約100Da~約100000Da、約1000Da~約20000Da、または約5000Da~約15000Daである。いくつかの態様において、PEG成分の分子量は約10000Daである。絹フィブロイン:本明細書で用いられる通り、絹フィブロインという用語は、カイコのフィブロインおよび昆虫またはクモの絹タンパク質を含む。例えば、Lucasetal13AdvProteinChem107を参照されたい。任意のタイプの絹フィブロインを用いることができる。カイコガBombyxmoriのようなカイコによって産生される絹フィブロインがもっとも一般的であり、地球に優しい再生可能な資源である。例えば、絹フィブロインはカイコガの繭からセリシンを抽出することによって得ることができる。有機体のカイコの繭は市販もされている。しかし、クモの絹例えば、アメリカジョロウグモNephilaclavipesから得られる、遺伝子組み換えによる絹、遺伝子工学により作出された絹、例えば細菌、酵母、哺乳動物細胞、遺伝子組み換え動物、または遺伝子組み換え植物に由来する絹例えば、WO9708315;米国特許第5245012号を参照されたいおよびその変異型を含む、使用することができる多くの異なる絹がある。水性絹フィブロイン溶液は、当技術分野において公知の手法を用いて調製することができる。絹フィブロイン溶液を調整するために適切な過程は、例えば米国特許出願第11247358号;WO2005012606およびWO2008127401に開示されている。例えば、脱イオン水における絹フィブロイン溶液約20wvの調製については実施例1を参照されたい。絹フィブロイン溶液は、脱イオン水を用いてより低い濃度に希釈してよく、または例えば、所望ならば約30wvに濃縮してもよい。つまり、より低濃度の絹フィブロイン溶液は、所望の濃度になるために十分な期間、PEG、アミロース、またはセリシンのような吸湿性ポリマーに対して透析してよい。例えば、WO2005012606を参照されたい。さらに、絹フィブロインは、絹タンパク質の物理的特性および機能性を変化させるために、例えば、ジアゾニウムもしくはカルボジイミドカップリング反応、アビジン-ビオジン相互作用、または遺伝子修飾などを介して、溶液中の活性物質を用いて化学的に修飾され得る。例えば、PCTUS0964673;PCTUS1041615;PCTUS1042502;米国特許出願第12192588号を参照されたい。絹フィブロイン溶液は、本明細書に記載されるように、ポリエチレンオキシド、コラーゲン、フィブロネクチン、ケラチン、ポリアスパラギン酸、ポリリジン、アルギナート、キトサン、キチン、ヒアルロン酸などのような一つまたは複数の生体適合性ポリマー、または細胞、酵素、タンパク質、核酸、抗体、抗生物質、止血物質などのような一つまたは複数の活性物質と組み合わせることもできる。例えば、WO2004062697およびWO2005012606を参照されたい。いくつかの態様において、絹フィブロイン溶液またはマトリックス形成組成物は、架橋結合したポリマーマトリックスに多孔性の構造を作製するために、塩粒子または水溶性の粒子のような孔形成物質porogenをさらに含んでもよい。このような態様において、孔形成物質は、架橋結合したポリマーマトリックスが形成された後に水または水溶液中に塩の粒子または水溶性の粒子を浸出することによって回収され得る。絹における多孔性構造作製のための方法は当業者に公知である。絹の水溶液は、適切な条件において、絹のゲル、絶縁保護のコーティングまたは層、マット、スポンジ、三次元の足場、線維、およびその他の材料形態のような絹マトリックスに加工することができる。架橋結合したポリマーマトリックス例えば、絹-PEGをベースとするマトリックスを調製する方法本発明の別の局面は、架橋結合したポリマーマトリックスを調製する方法に関し、本方法は、本明細書に記載されるマトリックス形成組成物を混合する工程、および架橋結合したポリマーマトリックスを形成するために組成物の成分を架橋結合する工程を含む。組成物は、架橋結合したマトリックスを形成するために互いに反応することができる少なくとも二つの機能的に活性化されたPEG成分、および架橋結合したマトリックスをさらに安定化するためにβシートを形成することができる絹フィブロインを含む。組成物のPEG成分および絹フィブロインの態様は本明細書に記載されている。いくつかの態様において、本明細書で用いられる絹フィブロインは当技術分野で公知の任意の方法、例えば、限定的されるものではないが、実施例1に記載される方法を用いてセリシンを枯渇させることができる。マトリックス形成組成物の成分を混合する際に、水溶液例えば、水、もしくはイオンを含まない水溶液または溶媒例えば、有機溶媒を使用することができる。一つの態様において、マトリックス形成組成物の成分を溶解または懸濁して、混合するために、水または脱イオン水が用いられる。いくつかの態様において、マトリックス形成組成物の成分を溶解または懸濁して、混合するために、緩衝溶液を用いることができる。このような態様において、緩衝溶液は、例えば一価のイオンを含む緩衝溶液のように、二価のイオンを除外することができる。または、組成物の一つまたは複数の成分が懸濁液または溶液として提供されるならば、その他の成分は、追加の溶液または溶媒を用いてまたは用いずに懸濁液または溶液と混合してもよい。絹-PEG架橋結合マトリックスを調製するために、組成物中の絹フィブロインおよびPEG成分の幅広いパーセント範囲を用いることができる例えば、マトリックス形成組成物中の絹フィブロインおよびPEG成分の重量またはwv。例えば、溶液中の絹フィブロインの濃度は混合前に約30重量またはwv未満であることができる;溶液中の各PEG成分の濃度はPEG溶液の溶解性および粘度に応じて、混合前に約30重量またはwv未満であり得る。絹フィブロイン溶液およびPEG溶液の粘度は投与毎に選択することができる。一つの態様において、混合前の絹フィブロインの濃度は約5から約30、または約10から約30もしくは約15から約25の範囲であってよい。絹の濃度が10を超えて増加すると、得られる絹-PEG架橋結合マトリックスの接着特性が増強され得る。一つの態様において、混合前の各PEG成分の濃度は約1から約20、または約5から約15までの範囲である。PEG成分の濃度が増加すると、架橋結合に必要な時間の量を短縮することができる。PEG成分の濃度は、PEGの官能基の分子量および性状などの要因にも依存し得る。従って、例えば、8アームのPEGは4アームの対応物よりも小さな重量パーセントで存在して、ほぼ等しい量の時間で同じ程度の架橋結合を得ることができる。当業者は、例えば、組織接着剤または組織封止剤などの様々な適用のために、絹フィブロインまたはPEG成分の濃度を至適化することができる。PEG成分間の化学的な架橋結合は、二つまたはそれよりも多いPEG成分の官能基の間の化学的な反応を介した迅速なゲル形成を伴い得る。この段階は水溶液中の二つのPEG成分を混合後、数秒以内に生じることができ、ゲル形成のこの段階はPEG成分中での絹の存在または非存在のいずれでも生じ得る。絹フィブロインは、タンパク質の大部分がアラニンおよびグリシンを豊富に含む疎水性のドメインに組織化され、大きな側鎖アミノ酸が鎖末端の親水性のブロックに集塊した、独特なアミノ酸配列を有する。構造的には疎水性のブロックは結晶性の領域へと組織化されて、親水性のブロックは非晶質の領域を形成する。Zhouetal44Proteins11922。絹フィブロインの結晶性領域は、分子内および分子間の水素結合および疎水性の相互作用を介して、結晶性のβシートへと組織化する能力を有する。絹フィブロイン鎖のβシート形成は、脱水、機械的な力、または熱力学的な処理のような様々な処理によって誘発することができる。脱水処理は、空気中または窒素ガスのような脱水性の気体または例えばメタノールもしくはエタノールなどのアルコールもしくは塩化ナトリウムのような脱水性の溶媒の流れの中での乾燥、または水アニーリング処理を指すことができる。例えば、WO2004062697、WO2008127404を参照されたい。機械的な力は剪断力または伸長力を含み、これらは超音波処理または強振盪などの処理を介して適用され得る。米国特許出願公開第20100178304号;およびPCTUS2010036841を参照されたい。βシート形成の誘発におけるその他の要因は、温度、pH、およびイオン強度の変化を含むが、これらに限定されるものではない。Wangetal36IntlJBiolMacromol6670Kimetal5Biomacromol78692Matsumotoetal110JPhysChemB2163038。絹フィブロインの迅速なβシート形成を誘発するための記載された処理を行わなければ、溶液中の絹フィブロインの転移は生理学的な条件下で生じることができないか、あるいは極めてゆっくりと生じる。一つの態様において、架橋結合の段階は、ランダムコイルおよびαらせんを豊富に含む構造からβシート構造に絹フィブロインの構造転移を誘発して、架橋結合したポリマーマトリックスをさらに安定化するために、混合した成分をアルコール処理例えば、メタノールもしくはエタノールまたは水アニーリング処理に曝露する段階を伴う。理論によって拘束されるものではないが、マトリックス形成組成物の架橋結合は、ゲル、マット、フィルム、スポンジ、三次元の足場、線維、およびその他の材料の形態を含む様々な材料の形態を形成することができる。一つの態様において、PEG成分および絹フィブロインの架橋結合は、ヒドロゲル絹-PEGヒドロゲルと呼ばれるを形成する。ヒドロゲルは一般に、親水性で、時に内部で水が分散媒である膠質ゲルとして見出されるポリマー鎖のネットワークである。ヒドロゲルは高吸湿性でありそれらは水分を99よりも多く含むことができる、天然例えば、絹または合成のポリマー、例えばPEGで構成され得る。単に例として、絹-PEGヒドロゲルは二段階の過程で形成することができる:4アームPEG成分のマレイミドおよびチオール官能基の間の共有結合性の化学的架橋結合;ならびに形成されたネットワークをさらに安定化するための絹フィブロイン鎖間のβシート形成。生成される絹-PEGヒドロゲルは、強力な接着特性、良好な生体適合性、副産物を含まない化学、迅速な架橋結合、およびゆっくりとした生分解性という組織封止剤としての適用に望ましい特性を示す。絹-PEGヒドロゲルの特性について調べるために、ヒドロゲルをインビトロにおいて特徴決定して、現在市販されているCOSEAL登録商標の製品を絹-PEGゲルの性能について調べるための参照として選択した。実施例1~7;図1A~8Bを参照されたい。COSEAL登録商標は食品医薬品局FDAの承認を得た物であり、チオールPEG成分およびサクシニミドPEG成分、希塩酸、ならびにリン酸ナトリウム/炭酸ナトリウム溶液を含む。COSEAL登録商標の製品は、混合すると、止血を達成するために成分が5~10秒以内に架橋結合を形成する二成分性例えば、液体および粉末のエポキシ様のシリンジを含むキットとして入手可能である。臨床試験では、患者はCOSEAL登録商標に対して十分な耐用性を示して、その使用では、標準的な治療法で治療された場合の26に比して、患者の50において浸出性の創傷が封止される。活発な出血においては、標準的な治療法で治療された3に比して、COSEAL登録商標は症例の41で有効であった。但し、この製品は、使用前の調製/再溶解が面倒であること、および膨張比が大きいことなど、一定の欠点を有する。例えば、COSEAL登録商標の再溶解は、成分が完全に溶解するまで2本のシリンジ間で少なくとも20回、前後に混合されるために、PEG成分は粉末として供給されなければならない。さらに、COSEAL登録商標の製品はその元々のサイズ/重量の約400膨張し、従って、その適用は神経圧迫が問題とならない領域に限定される。COSEAL登録商標パッケージ添付文書理論により拘束されるものではないが、絹-PEGヒドロゲルの接着特性はCOSEAL登録商標と同等またはそれよりも優れてさえいると考えられる。スチールの基質に対する接着傾向が生体膜ウシの腸に対して観察されたそれと十分な相関性を示すことを確認した上で、スチールの基質を用いて、インビトロにおける接着の特徴決定を実施した。10~15wv絹フィブロインを含む絹-PEG試料は、COSEAL登録商標の対照と同等の接着値を示し、一方20wv絹フィブロインを含む絹-PEG試料は、COSEAL登録商標の対照に比して少なくとも約50の接着性の向上を示した。実施例1および6、ならびに図6A~7Eを参照されたい。いくつかの態様において、絹フィブロイン溶液の濃度を少なくとも約10重量、少なくとも約15重量、少なくとも約20重量、またはそれよりも高い濃度まで高めると、得られる架橋結合したポリマーマトリックスの接着強度は、少なくとも約10Pa、少なくとも約15Pa、少なくとも約20Pa、少なくとも約30Pa、少なくとも約40Pa、少なくとも約50Pa、少なくとも約60Pa、少なくとも約70Pa、少なくとも約80Pa、少なくとも約90Pa、少なくとも約100Pa、またはそれよりも高い値まで増強することができる。絹-PEGをベースとする生体材料中の絹の濃度は3重量から50重量、約10重量から約40重量、約15重量から約40重量、約20重量から約30重量までの範囲であり得る。絹の濃度が低下すると、一般に粘度の低い溶液が得られ、より少ない原料を必要とする;しかし、絹-PEG材料の接着特性は一般に、約10またはそれよりも高い絹の濃度において一般により良好である。これらの絹の濃度において、絹の溶液の粘度は依然、注入に適切であり得る。絹-PEG材料を調製する際の絹およびPEGの溶液のpHは、幅広い範囲例えば、1~15であってよい。医用での使用に適した絹-PEG材料を作製するために、pHは典型的には生理学的な範囲内例えば、6~8である。理論によって拘束されるものではないが、中性または若干酸性例えば、pH6のpHで調製される絹-PEG材料は、より良好な接着特性を示し得る。例えば、実施例6および図7Aを参照されたい。さらに、絹-PEGヒドロゲルは、顕著な膨張およびインビボにおける短い滞留時間のような、COSEAL登録商標に附随する欠点のいくつかを克服することができる。絹-PEG封止剤の膨張比は60~70の間であり、COSEAL登録商標は適用後すぐにそのサイズが最高400まで増大する。実施例1および4、ならびに図4Aおよび4Bを参照されたい。絹-PEGヒドロゲルのこの特性は絹-PEGの封止剤としての適用スペクトルを拡大して、COSEAL登録商標の使用が禁忌である閉鎖された間隙または神経などの圧力感受性の構造物の近傍での使用を可能とすることができる。絹-PEGヒドロゲルは、PEG成分間の化学的な架橋結合によって少なくともある程度は安定化され、それはCOSEAL登録商標と同等であり、絹フィブロインのβシート形成を伴う二次的な物理的架橋結合反応を介して時間と共にさらに強化される。これは組織封止剤としての用途において魅力的な特徴であるインビボにおける長い滞留時間を提供する。COSEAL登録商標は約1~2週間で分解するがWallaceetal2001、絹-PEGをベースとする材料は著しく長い時間存在し得Horanetal2005、材料が完全に吸収される前に完全な治癒、またはより完全な治癒を可能とする。実施例1および5、ならびに図5Aおよび5Bも参照されたい。PEG成分単独の化学的な架橋結合に基づくCOSEAL登録商標とは対照的に、絹-PEGをベースとする材料は、二重の特徴即ち、二種類の高分子であるPEG成分および絹フィブロインの組み入れを示して、二段階の架橋結合メカニズムを介して形成され、これは一連の利点を提供して幅広い適用を可能とする。例えば、絹フィブロインの多用途の特性および材料の形態は、絹-PEGをベースとする材料に様々な機能性を付与する。絹フィブロインは異なる材料の形態に加工することができるので、同じく絹-PEGも当技術分野において公知の手法によってゲル、マット、スポンジ、線維、およびその他の材料の形態に加工することができる。Altmanetal23Biomaterials413141;Kimetal5Biomacromolecules78692;Lietal27Biomaterials311524;Nazarovetal5Biomacromolecules71826を参照されたい。これらはすべて、参照によりそれらの全体が本明細書に組み入れられる。さらに、絹-PEGをベースとする材料の細胞適合性の結果は、絹-PEGをベースとする材料が細胞伸展を促進せず、これにより本材料は抗瘢痕形成系の成分として適切となることを示している。例として、実施例1および3;ならびに図3を参照されたい。多用途の加工性と組み合わせて、この特徴は、これらの材料の適用スペクトルも拡大する例えば、抗接着性のシートまたはフィルムの産生を可能とすることができる。同様に、絹-PEGをベースとする材料は出血を制御するための止血材料として適している。本発明の架橋結合したポリマーマトリックス例えば、絹-PEGをベースとするマトリックス本発明の別の局面は、マトリックス形成組成物の混合から形成される架橋結合したポリマーマトリックスに関する。架橋結合したポリマーマトリックスは、絹フィブロイン例えば、少なくとも約10重量の濃度にてと、架橋結合したマトリックスを形成するために互いに反応している少なくとも二つの機能的に活性化されたPEG成分とを含み、絹フィブロインは架橋結合したマトリックスを安定化するためにβシートを形成している。一つの態様において、絹-PEG生体材料は少なくとも一つの活性な物質を含むことができる。これらの材料を形成するために、絹フィブロインまたはPEG成分は、マトリックスを形成する前に活性物質と混合されてよく、またはこの活性物質は、絹-PEG生体材料が形成された後にこれに添加されても良い。活性物質は、絹-PEG生体材料に内包されることができる任意の材料であり得る。例えば、活性物質は、細胞幹細胞を含む、タンパク質、ペプチド、核酸例えば、DNA、RNA、siRNA、核酸類似体、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、ペプチド核酸PNA、アプタマー、抗体またはその断片もしくは部分例えば、パラトープまたは相補性決定領域、抗体様分子、抗原もしくはエピトープ、ホルモン、ホルモンアンタゴニスト、成長因子もしくは組換え型成長因子、ならびにその断片および変異型、細胞接着調節物質RGDなど、サイトカイン、酵素、小分子、薬物、色素、アミノ酸、ビタミン、抗酸化剤、抗生物質もしくは抗菌性化合物、抗炎症物質、抗真菌剤、ウイルス、抗ウイルス剤、毒素、プロドラッグ、化学療法物質、止血物質、またはそれらの組み合わせのような、治療用の物質、即ち生体材料であってよい。例えば、PCTUS0944117;米国特許出願第61224618号を参照されたい。活性物質は、上記の任意の物質の組み合わせであってもよい。カプセル化された製品は、多くの生物医学的目的に使用することができるため、治療用物質もしくは生物学的材料、またはそれらの組み合わせのいずれかのカプセル化が望ましい。いくつかの態様において、活性物質は、真菌、植物、動物、細菌、またはウイルスバクテリオファージを含むのような生物であってもよい。さらに、活性物質は、神経伝達物質、ホルモン、細胞内シグナル伝達物質、薬学的に活性な物質、有毒物質、農薬、化学的毒素、生物学的毒素、微生物、ならびにニューロン、肝細胞および免疫系細胞のような動物細胞を含んでもよい。活性物質は、薬学的な材料、ビタミン、鎮静剤、催眠剤、プロスタグランジンおよび放射性医薬品のような治療用の化合物を含むこともできる。本明細書における用途に適切な例示的な細胞には、前駆細胞または幹細胞、平滑筋細胞、骨格筋細胞、心筋細胞、上皮細胞、内皮細胞、尿路上皮細胞、線維芽細胞、筋芽細胞、口の細胞、軟骨細胞、軟骨芽細胞、骨芽細胞、破骨細胞、ケラチノサイト、腎尿細管細胞、腎基底膜細胞、外皮細胞、骨髄細胞、肝細胞、胆管の細胞、膵島細胞、甲状腺、上皮小体、副腎、視床下部、下垂体、卵巣、精巣、唾液腺の細胞、脂肪細胞、および前駆細胞が含まれるが、これらに限定されるものではない。活性物質は、上記の任意の細胞の組み合わせであってもよい。WO2008106485;PCTUS2009059547;WO2007103442も参照されたい。絹フィブロインに組み入れることができる例示的な抗体には、アブシキシマブ、アダリムマブ、アレムツズマブ、バシリキシマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、セルトリズマブペゴール、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、ゲムツズマブ、イブリツモマブチウキセタン、インフリキシマブ、ムロモナブCD3、ナタリズマブ、オファツムマブオマリズマブ、パリビズマブ、パニツムマブ、ラニビズマブ、リツキシマブ、トシツモマブ、トラツズマブ、アルツモマブペンテテート、アルキツモマブ、アトリズマブ、ベクツモマブ、ベリムマブ、ベシレソマブ、ビシロマブ、カナキヌマブ、カプロマブペンジチド、カツマキソマブ、デノスマブ、エドレコロマブ、エフングマブ、エルツマクソマブ、エタラシズマブ、ファノレソマブ、フォントリズマブ、ゲンツズマブオゾガミシン、ゴリムマブ、イゴボマブ、イムシロマブ、ラベツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、ニモツズマブ、ノフェツモマブメルペンタン、オレゴボマブ、ペムツモマブ、ペルツズマブ、ロベリズマブ、ルプリズマブ、スレソマブ、タカツズマブテトラキセタン、テフィバズマブ、トシリズマブ、ウステキヌマブ、ビシリズマブ、ボツムマブ、ザルツムマブ、およびザノリムマブが含まれるが、これらに限定されるものではない。活性物質は、上記の任意の抗体の組み合わせであってもよい。例示的な抗生物質には、アクチノマイシン;アミノグリコシド例えば、ネオマイシン、ゲンタマイシン、トブラマイシン;βラクタマーゼ阻害剤例えば、クラブラン酸、スルバクタム;糖ペプチド例えば、バンコマイシン、テイコプラニン、ポリミキシン;アンサマイシン;バシトラシン;カルバセファム;カルバペネム;セファロスポリン例えば、セファゾリン、セファクロール、セフジトレン、セフトビプロール、セフロキシム、セフォタキシム、セフィペム、セファドロキシル、セフォキシチン、セフプロジル、セフジニル;グラミシジン;イソニアジド;リネゾリド;マクロリド例えば、エリスロマイシン、クラリスロマイシン、アジスロマイシン;ムピロシン;ペニシリン例えば、アモキシリン、アムピシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、フルクロキサシリン、オキサシリン、ピペラシリン;オキソリン酸;ポリペプチド例えば、バシトラシン、ポリミキシンB;キノロン例えば、シプロフロキサシン、ナリジクス酸、エノキサシン、ガチフロキサシン、レバキン、オフロキサシンなど;スルホンアミド例えば、スルファサラジン、トリメトプリム、トリメトプリムスルファメトキサゾールコトリモキサゾール、スルファジアジン;テトラサイクリン例えば、ドキシサイクリン、ミノサイクリン、テトラサイクリンなど;アズトレオナムのようなモノバクタム;クロラムフェニコール;リノマイシン;クリンダマイシン;エタムブトール;ムピロシン;メトロニダゾール;ペフロキサシン;ピラジナミド;チアンフェニコール;リファンピシン;チアンフェニクル;ダプソン;クロファジミン;キヌプリスチン;メトロニダゾール;リネゾリド;イソニアジド;ピラシル;ノボビオシン;トリメトプリム;ホスホマイシン;フシジン酸;またはその他の局所抗生物質が含まれるが、これらに限定されるものではない。任意で、抗生物質は、フェデンシン、マゲイニンおよびニシンのような抗細菌性のペプチド、または溶菌性バクテリオファージであってもよい。抗生物質は、上記の任意の物質の組み合わせであってもよい。PCTUS2010026190も参照されたい。本明細書での用途に適した例示的な酵素には、ペルオキシダーゼ、リパーゼ、アミロース、有機リン酸デヒドロゲナーゼ、リガーゼ、制限エンドヌクレアーゼ、リボヌクレアーゼ、DNAポリメラーゼ、グルコースオキシダーゼ、ラッカーゼなどが含まれるが、これらに限定されるものではない。成分間の相互作用も、例えば、アビジンおよびビオチンの間の特異的相互作用を介して絹フィブロインに機能性を持たせるために用いることができる。活性物質は、上記の任意の酵素の組み合わせであってもよい。例えば、PCTUS2010042585を参照されたい。治療用物質または生物学的材料を、絹-PEG生体材料に導入する場合、当技術分野で公知のその他の材料も本物質と共に加えてもよい。例えば、活性物質の増殖を促進するため生物学的材料の場合、絹-PEG生体材料から放出された後に本物質の機能性を促進するため、または絹-PEG生体材料に内包されている期間中にその物質の有用性を残存または保持する能力を高めるための材料を付加することが望ましい可能性がある。細胞の増殖を促進することが公知である材料には、ダルベッコ改変イーグル培地DMEMのような細胞培養培地、ウシ胎児血清FBS、可欠アミノ酸および抗生物質が含まれ、線維芽細胞成長因子FGF、トランスフォーミング成長因子TGF、血管内皮成長因子VEGF、上皮成長因子EGF、インスリン様成長因子IGFI、骨形成成長因子BMP、神経成長因子、および関連するタンパク質のような成長因子および形態形成因子が用いられ得る。成長因子は当技術分野において公知であり、例えばRosenThiesCELLULARMOLECULARBASISBONEFORMATIONREPAIRを参照されたい。絹-PEG生体材料を介する送達のためのさらなる選択肢には、DNA、siRNA、アンチセンス、プラスミド、リポソーム、および遺伝物質の送達のための関連する系;細胞のシグナル伝達カスケードを活性化するためのペプチドおよびタンパク質;石灰化または細胞からの関連する事象を促進するペプチドおよびタンパク質;絹-PEG-組織の界面を改善するための接着ペプチドおよびタンパク質;抗菌性ペプチド;ならびにタンパク質および関連する化合物が含まれる。コラーゲン、フィブロネクチン、ケラチン、ポリアスパラギン酸、ポリリジン、アルギナート、キトサン、キチン、ヒアルロン酸、ペクチン、ポリカプロラクトン、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリヒドロキシアルカノエート、デキストラン、ポリ酸無水物、グリセロールPCTUS2009060135を参照されたい、およびその他の生体適合性ポリマーWO20040000915を参照されたいのようなさらなる生体適合性物質も、絹-PEG生体材料にブレンドすることができる。または、絹をヒドロキシアパタイトと混合することができるPCTUS0882487を参照されたい。本明細書に記載する通り、絹フィブロインは組換え由来であってよく、これは、有機-無機の複合物を形成するために用いられる線維性タンパク質ドメインおよび石灰化ドメインを含む融合ポリペプチドの包含など、絹のさらなる修飾を提供する。これらの有機-無機複合物は、用いられる線維性タンパク質融合ドメインのサイズに応じて、ナノからマクロのスケールで構築することができる。WO2006076711を参照されたい。米国特許出願第12192588号も参照されたい。活性物質または生物学的材料を包埋された絹-PEG生体材料は、活性物質の長期の保存および安定化に適切であり得る。細胞および/または活性物質は、絹-PEG生体材料に組み入れられると、室温即ち、22°C~25°Cおよび体温37°Cにおいて少なくとも30日間、安定である即ち、少なくとも50の残効性を維持することができる。従って、いくつかの抗生物質または止血物質のように温度感受性の活性物質は、冷蔵することなく絹-PEG生体材料中で保存することができる。重要な点として、温度感受性の生理活性物質は、絹-PEG生体材料を介して体内に例えば、注入を介して送達可能であり、これまで予想されていたよりもより長期間、活性を維持することができる。例えば、PCTUS2010026190を参照されたい。包埋された活性物質例えば、治療用物質を伴う絹-PEG生体材料は、生体送達に適切であり得る。絹フィブロインを生体送達装置として使用するための手法は、例えば米国特許出願第10541182号;第11628930号;第11664234号;第11407373号;PCTUS07020789;PCTUS0855072;PCTUS0944117に見出すことができる。本発明のいくつかの態様は、医療用移植片、組織封止剤、および組織修復剤における潜在的な有用性のための薬剤送達系としての、治療用物質または生物学的材料が包埋された絹-PEG生体材料の有用性に関する。絹-PEG架橋結合マトリックスの構造は、包埋された活性物質例えば、治療用物質または生物学的材料の送達の制御された放出を可能とする。制御された放出は、投薬量を制御された放出キネティクスで、経時的に投与することを可能とする。いくつかの例において、治療用物質または生物学的材料の送達が、例えば数週間にわたって治療が必要な部位に継続される。例えば、数日間もしくは数週間、またはより長い期間にわたる経時的な制御された放出は、好ましい治療を得るために、治療用物質または生物学的材料の継続的な送達を可能とする。制御された送達媒体は、治療用物質または生物学的材料を、体液および組織中で、例えばプロテアーゼによるインビボでの分解から保護するため、有利である。例えば、PCTUS0944117を参照されたい。絹-PEG架橋結合マトリックスからの生理活性物質の制御された放出は、例えば、約12時間または24時間よりも長期間、1カ月もしくは2カ月、または5カ月以上にわたって経時的に生じるように設計することができる。放出時間は、例えば、約12時間から24時間、または約12時間から1週間の期間を通して生じるように選択することができる。別の態様において、放出は、例えば、約1ヶ月~2ヶ月約1ヶ月および2ヶ月を含むのオーダーで生じ得る。制御された放出時間は治療される状態に基づいて選択してよい。例えば、持続的な放出および高い局所投与量が望ましい場合は、特定の放出プロフィールがより有効であり得る。カプセル化された生理活性物質例えば、治療用物質を有する絹-PEGヒドロゲルを含む薬学的調製物を調製することができる。この調製物を、絹-PEGヒドロゲル内にカプセル化されている特定の活性物質を必要とする患者に投与することができる。薬学的調製物は、局所、経口、点眼、経鼻、経皮または非経口的静脈内、腹腔内、筋肉内、および皮下注射、ならびに鼻腔内または吸入投与、および移植を含む、当技術分野において公知の様々な経路によって投与することができる。送達は、全身性、領域性または局所性であってよい。さらに、送達は、例えば、中枢神経系への送達のようにくも膜下腔内であってもよい。治療用物質の量は、用いようとする特定の薬剤および治療しようとする医学的状態に依存する。例えば、薬剤の量は、材料の重量に基づいて、約0001~約70、または約0001~約50、または約0001~約20であってよい。体液または体組織に接触すると直ちに、薬剤が放出される。望まれる場合は、活性物質を含む絹-PEGヒドロゲルは、ターゲティングリガンドまたは前駆物質ターゲティングリガンドを含むことができる。ターゲティングリガンドは、インビボおよび/またはインビトロにおいて組織および/またはレセプターへの薬学的調製物のターゲティングを促進することができる任意の材料または物質を指す。ターゲティングリガンドは、合成、半合成、または天然であってよい。ターゲティングリガンドとして用いることができる材料または物質は、例えば、抗体、抗体の断片、ホルモン、ホルモン類似体、糖タンパク質およびレクチンを含むタンパク質、ペプチド、ポリペプチド、アミノ酸、糖、単糖類および多糖類を含む糖類、炭水化物、ビタミン、ステロイド、ステロイド類似体、ホルモン、補因子、ならびにヌクレオシド、ヌクレオチド、ヌクレオチド酸構成物、ペプチド核酸PNA、アプタマー、およびポリヌクレオチドを含む遺伝物質を含む。本発明のその他のターゲティングリガンドは、例えば、サイトカイン、インテグリン、カドヘリン、免疫グロブリンおよびセレクチンである細胞接着分子CAMを含む。ターゲティングリガンドへの前駆物質は、ターゲティングリガンドに転換され得る任意の材料または物質を指す。このような転換は、例えば、前駆物質をターゲティングリガンドに係留する段階を伴ってよい。例示的なターゲティング前駆物質の部分は、マレイミド基、オルトピリジルジスルフィドのようなジスルフィド基、ビニルスルホン基、アジド基、およびヨードアセチル基を含む。インビボでの適用のための調製において、絹-PEGヒドロゲルを含む調製物は賦形剤を含むように調製することができる。例示的な賦形剤には、望ましい特定の投与剤形に適した希釈剤、溶媒、緩衝液、またはその他の液体の媒体、溶解剤、分散物質もしくは懸濁物質、等張物質、粘性制御物質、結合剤、潤滑剤、界面活性剤、保存剤、安定剤などが含まれる。調製物は増量物質、キレート化物質および抗酸化剤をさらに含んでもよい。非経口的な調製物が用いられる場合は、調製物は追加でまたは代替として、糖、アミノ酸または電解質を含んでもよい。より具体的には、薬学的に許容される担体として用いることができる材料の例には、ラクトース、グルコース、およびスクロースのような糖;コーンスターチおよび馬鈴薯デンプンのようなデンプン;カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロースのようなセルロースおよびその誘導体;粉末化トラガカント;麦芽;ゼラチン;タルク;落花生油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油、および大豆油のような油;オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルのようなエステル;寒天;ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムのような無毒の適合性潤滑剤;例えば、トレハロース、マンニトールおよびポリエチレングリコールのように約70000kDよりも小さな分子量のポリオールが含まれるが、これらに限定されるものではない。例えば、米国特許第5589167号を参照されたい。例示的な界面活性剤には、Tween界面活性剤のような非イオン性の界面活性剤、ポリソルベート20または80などのようなポリソルベート、およびポロキサマー184または188のようなポロキサマー、ならびにその他のエチレン/ポリプロピレンブロックポリマーなどが含まれる。適切な緩衝液には、Tris、クエン酸、コハク酸、酢酸またはヒスチジンの緩衝液が含まれる。適切な防腐剤には、フェノール、ベンジルアルコール、メタクレゾール、メチルパラベン、プロピルパラベン、塩化ベンズアルコニウム、および塩化ベンゼトニウムが含まれる。その他の添加物にはカルボキシメチルセルロース、デキストランおよびゼラチンが含まれる。適切な安定化物質には、ヘパリン、ペントサンポリサルフェート、およびその他のヘパリノイド、ならびにマグネシウムおよび亜鉛のような二価の陽イオンが含まれる。調製者または当業者の判断に基づいて、着色物質、放出物質、コーティング物質、甘味料、香料および芳香物質、防腐剤、ならびに抗酸化剤も本組成物に存在してよい。様々な態様において、本明細書に記載される架橋結合したポリマーマトリックスは特定の条件下で膨張する可能性がある。例えば、生理学的条件に曝露すると、架橋結合したポリマーは、架橋結合したポリマーマトリックスの初期の重量またはサイズの90重量未満、80重量、70重量未満、60重量未満、50重量未満、40重量未満、またはそれよりも低い値だけ膨張する可能性がある。本明細書で用いられるように、生理学的な条件とは、典型的にはインビボにおいて生存可能な対象または有機体例えば、哺乳動物の対象に存在する温度、pH、イオン強度、粘度、および/またはその他の生物学的パラメータを指す。本明細書で用いられる通り架橋結合したポリマーマトリックスの初期の重量またはサイズという用語は、生理学的な条件に曝露する前に固体の状態ゲルの状態を含むにおいて架橋結合したポリマーマトリックスの重量またはサイズ例えば、体積を指すことができる。いくつかの態様において、本明細書で用いられる通り、架橋結合したポリマーマトリックスの初期の重量またはサイズという語句は、それぞれのマトリックス形成組成物の重量またはサイズ例えば、体積を指すことができる。本明細書で記載されるこのような架橋結合したポリマーマトリックスの膨張比は、FDAの承認を得た組織封止剤であるCOSEAL登録商標対象への投与後直ちにその当初のサイズ/重量の約400膨張するよりも著しく小さい。従って、本明細書に記載される架橋結合したポリマーマトリックスは、神経圧迫が問題となるような例えば神経の近傍など、圧力感受性の領域の近傍の組織または臓器の領域に用いる場合、COSEAL登録商標よりも優れた生体材料であり得る。いくつかの態様において、架橋結合したポリマーマトリックスは、特定の条件下でその体積を保持することができる。例えば、インビボにおいて適用すると、架橋結合したポリマーマトリックスは、一定期間、その当初の体積の少なくとも約30、少なくとも約40、少なくとも約50、少なくとも約60、少なくとも約70、少なくとも約80、少なくとも約90、少なくとも約90を保持することができる。本明細書で用いられるように当初の体積という用語は、インビボにおける適用前の架橋結合したポリマーマトリックスの体積またはサイズを指すことができる。いくつかの態様において、本明細書で用いられるように当初の体積という用語は、架橋結合したポリマーマトリックスの対象への投与体積を指すことができる。様々な態様において、架橋結合したポリマーマトリックスは、少なくとも約5日、少なくとも約10日、少なくとも約15日、少なくとも約20日、少なくとも約1カ月、少なくとも約2カ月、少なくとも約3カ月、少なくとも約4カ月、少なくとも約5カ月、少なくとも約6カ月、少なくとも約1年、少なくとも約2年、またはそれよりも長い期間、当初の体積の少なくとも一部を保持することができる。いくつかの態様において、架橋結合したポリマーマトリックスは、創傷の治癒が完了するまで、例えば、連続したバリア例えば、完全な皮膚を形成するために創傷の側面または輪郭が再結合するまで、当初の体積の少なくとも一部を保持することができる。いくつかの態様において、本明細書に記載される架橋結合したポリマーマトリックスは接着能を持つことができる。所望の適用に応じて、架橋結合したポリマーマトリックスの接着強度は、これらに限定されるものではないが、例えば、架橋結合したポリマーマトリックスを調製するために用いられる絹フィブロインの濃度、pH値および/または溶媒などの様々な要因によって調整することができる。いくつかの態様において、架橋結合したポリマーマトリックスは、少なくとも約5Pa、少なくとも約10Pa、少なくとも約15Pa、少なくとも約20Pa、少なくとも約30Pa、少なくとも約40Pa、少なくとも約50Pa、少なくとも約60Pa、少なくとも約70Pa、少なくとも約80Pa、少なくとも約90Pa、少なくとも約100Pa、またはそれよりも高い接着強度を有するように適合させることができる。いくつかの態様において、架橋結合したポリマーマトリックスは、例えば少なくとも約10Paなど、COSEAL登録商標のそれと同等の接着強度を有するように適合させることができる。本明細書で用いられるように接着強度という用語は、一般に、架橋結合したポリマーマトリックスとその架橋結合したポリマーマトリックスが適用された基質の間の接触を切断するための引っ張り力の強さを指す。いくつかの態様において、基質は組織または臓器の少なくとも一部の表面であり得る。いくつかの態様において、基質は移植片の表面であり得る。別の態様において、基質は金属例えば、スチールの表面またはプラスチックの表面であり得る。異なる材料間の接着強度を測定するための方法は当技術分野において周知である。接着強度を測定するための例示的な方法も実施例1に含まれる。本明細書に記載される架橋結合したポリマーマトリックスの適用絹-PEGヒドロゲルは、強力な接着特性、良好な生体適合性、副産物を含まない化学的性質、迅速な架橋結合、およびゆっくりとした生分解性という組織封止剤または接着剤として適用に望ましい特性を示す。従って、絹-PEGヒドロゲルは、例えば、対象の開放性の創傷など、対象の標的部位において組織の封止剤または接着剤を形成する方法に用いることができる。本方法は、架橋結合したマトリックスを形成するために互いに反応することができる少なくとも二つの機能的に活性化されたPEG成分と、架橋結合したマトリックスを安定化するためにβシートを形成することができる絹フィブロインとを含む少なくとも一つの組成物を、対象の標的部位例えば、開放性の創傷に投与する工程、ならびに成分を架橋結合して標的部位例えば、創傷において組織封止剤または接着剤を形成するために組成物の成分を混合する工程を含む。一つの態様において、二つのPEG成分は、対象の傷ついた部位に別々に投与されて、それによってインビボにおいて組織封止剤を形成する。絹-PEGをベースとする組織封止剤は、組織または臓器であり得る創傷への適用後直ちに形成され得る。このような態様において、架橋結合したポリマーマトリックスまたは組織封止剤はインサイチューにおいて形成される。その他の態様において、架橋結合ポリマーマトリックスは、例えば、移植による対象への適用前に形成されてもよい。絹-PEGをベースとする組織封止剤は、移植片において、または、移植片と周辺の組織または臓器を架橋結合するために形成されることもできる。対象において組織封止剤を形成する際に、創傷のある部位の表面を少なくとも一つの成分と架橋結合してもよい。いくつかの態様において、本明細書に記載される少なくとも一つの活性物質は、PEG成分および/または絹フィブロインの対象の標的部位への投与の前に、投与と同時に、または投与の後に送達されてもよい。いくつかの態様において、活性物質は本明細書に記載されるマトリックス形成組成物の少なくとも一つの成分と混合することができる。いくつかの態様において、活性物質は本明細書に記載されるマトリックス形成組成物の成分とは別に送達されてもよい。治療される創傷には開放性もしくは閉鎖性、または起源において急性もしくは慢性のいずれも含まれる。一つの態様において、絹-PEGをベースとする組織封止剤は開放性の創傷を治療するために用いられる。開放性の創傷には、切開創または切開された創傷;裂傷または何らかの鈍的外傷によって生じる不規則な裂傷のような創傷;剥離;皮膚の最上層表皮が擦り取られる表層の創傷のような擦過傷擦り傷;皮膚を穿刺する物質によって生じる傷のような穿刺による創傷;皮膚に侵入し出てくる物質によって生じる貫通による創傷;および銃創が含まれるが、これらに限定されるものではない。本明細書において治療されるべき創傷は、挫傷、血腫、挫滅による損傷、慢性または急性の創傷のような閉鎖性の創傷も含み得る。止血物質は典型的には出血を停止するために作用して、組織封止剤は組織中の欠陥部位に結合して閉鎖することができるので、創傷部位で形成される絹-PEGをベースとする組織封止剤は止血物質をさらに含んでもよい。従って、絹-PEGをベースとする組織封止剤に止血物質を組み合わせることは、組織の再建を促進することに加えて、出血を予防または止めるための外科的修復中に望ましい特徴を示すことができる。本明細書での使用に適した例示的な止血物質には、トロンビン、フィブリン、フィブリノーゲン、ゼラチン、コラーゲン、多糖類、セルロース、出血因子、およびそれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されるものではない。絹-PEGをベースとする組織封止剤は、顕著な膨張などの、市販の組織封止剤に附随する欠点のいくつかを克服することができる。本明細書に記載される通り、絹-PEG封止剤の膨張比は、例えば、COSEAL登録商標に比して著しく低い。従って、絹-PEGヒドロゲルは閉鎖された間隙または神経のような圧力感受性の構造物の近傍で使用することができる。いくつかの態様において、架橋結合ポリマーマトリックス例えば、絹-PEGをベースとするマトリックスは細胞もしくは薬剤送達のため、または細胞が増殖するためのプラットフォームとして使用することができる。本発明は、本明細書に記載されるすべての方法を実施するためのマトリックス形成組成物および説明書を含むキットおよび装置をさらに提供する。本明細書に記載されるマトリックス形成組成物は、絹フィブロインと少なくとも二つの機能的に活性化されたPEG成分とを含む少なくとも三つの成分を含む。組成物の絹フィブロインおよびPEG成分の態様は本明細書に記載される。キットは、止血物質のような一つまたは複数の活性物質をさらに含むことができる。キットは一つまたは複数の容器または混合ツール例えば、バイアル、アンプル、シリンジ、またはその他の適切な保存容器を含むことができる。絹フィブロイン、PEG成分、活性物質、または架橋結合に必要である可能性のある試薬は、別々に封入された各成分と共に、または混合物例えば、PEGを絹フィブロイン溶液に懸濁または溶解してもよいとして容器または混合ツールに封入することができる。いくつかの態様において、マトリックス形成組成物は、例えば、二連の注射外筒の注入装置のような送達装置に予め充填してもよい。このような態様において、単なる例として、絹フィブロインと混合された一つのPEG成分を送達装置の一方の注射外筒に予め充填してもよく、絹フィブロインと任意で混合される別のPEG成分を送達装置の別の注射外筒に予め充填してもよい。注射外筒内部の成分は粉末として存在してよく、この粉末は使用時に溶液に懸濁されるか、または溶液に予め懸濁されてもよい。その他の態様において、マトリックス形成組成物の成分は、別々の送達装置、例えばシリンジに予め充填することができる。本発明を実施するためのキットの使用に関するキット内の説明書は、一般に、本発明の方法を実施するためにキットの内容をどのように使用するかが記載される。説明書は、試料の情報例えば、剤形、サイズ、絹-PEG架橋結合マトリックスを形成するために必要な工程、および条件などを含み得る。キット内に提供される説明書は、ラベルまたは添付文書での書面による説明書例えば、キット内に含まれる1枚の紙、または機械で読み取り可能な説明書例えば、磁気的または光学的記録ディスクに保存された説明書を含む。本発明は、本明細書に記載される特定の方法、プロトコール、および試薬などに限定されるものではなく、従って、変化し得ることが理解されるべきである。本明細書で用いられる用語は特定の態様のみを説明する目的のためであり、本発明の範囲を限定することを意図するものではなく、本発明は専ら特許請求の範囲によって定義される。本明細書および特許請求の範囲において用いられるように、単数形は、文脈からそうでないことが明示される場合を除いて、複数の指示物を含み、逆も同様である。操作上の例における以外、または特記される場合は、本明細書で用いられる成分の量または反応条件を表すすべての数値は、約という用語によってすべての場合において修正されるものとして理解されるべきである。特定されるすべての特許およびその他の刊行物は、例えば、このような刊行物において説明される方法であって、本発明に関連して用いられる可能性がある方法を説明および開示する目的のために、参照により本明細書に特別に組み入れられる。これらの刊行物は、単にそれらの開示が本出願の出願日よりも前であるために示されるものである。先行発明という理由で、またはその他の何らかの理由において、本発明者らがこのような開示に先行する権利が与えられないということを承認するものとして解釈されるべきではない。これらの資料の内容に関する日付または表示に関する記述はすべて本発明者らに利用可能な情報に基づくものであり、これらの資料の日付または内容の正確さに関して何ら承諾をなすものではない。別途定義される場合を除いて、本明細書で用いられるすべての技術的および科学的な用語は、本発明が属する技術分野の業者によって一般的に理解されるものと同一の意味を持つ。本発明の実践または試験においては公知の任意の方法、装置および材料が用いられ得るが、この点に関しての方法、装置および材料は本明細書において説明される。次の実施例は本発明のいくつかの態様および局面を例証する。当業者には、本発明の精神または範囲を変更することなく様々な修正、追加、置き換えなどが実施可能であり、このような修正および変更は以下の特許請求の範囲において定義される本発明の範囲に内包されることは、明らかである。以下の例は、いかなる点においても本発明を制限するものではない。本発明は以下の番号を振った項目のいずれか一つにおいて定義され得る:1.架橋結合マトリックスを形成するために互いに反応することができる少なくとも二つの機能的に活性化されたPEG成分と、βシートを形成して該架橋結合マトリックスをさらに安定化することができる少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロインとを含む組成物を混合する段階を含む、架橋結合ポリマーマトリックスを調製する方法。2.架橋結合マトリックスを形成するために互いに反応することができる少なくとも二つの機能的に活性化されたPEG成分と、βシートを形成して該架橋結合マトリックスをさらに安定化することができる少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロインとを含む組成物を混合する段階;および架橋結合ポリマーマトリックスを形成するために該組成物の該成分を架橋結合する段階を含む、架橋結合ポリマーマトリックスを調製する方法。3.架橋結合する段階が、混合物をアルコール処理または水アニーリング処理に曝露することを伴う、項目2記載の方法。4.機能的に活性化されたPEG成分と混合する前に、絹フィブロインからセリシンを枯渇させる、項目1~3のいずれか一項記載の方法。5.マトリックスがヒドロゲルである、項目1~4のいずれか一項記載の方法。6.各PEG成分が4アームPEGである、項目1~5のいずれか一項記載の方法。7.PEG成分の一つがマレイミジル基で機能的に活性化される、項目1~6のいずれか一項記載の方法。8.PEG成分の一つがチオール基で機能的に活性化される、項目1~7のいずれか一項記載の方法。9.PEG成分の一つがマレイミジル基で機能的に活性化され、該PEG成分の別の一つがチオール基で機能的に活性化される、項目1~8のいずれか一項記載の方法。10.前記組成物の少なくとも一つの成分が水溶液に懸濁または溶解される、項目1~9のいずれか一項記載の方法。11.少なくとも絹フィブロインが水溶液中にあり、該絹フィブロインの濃度が少なくとも約10重量である、項目10記載の方法。12.水溶液が二価のイオンを含まない、項目10または11記載の方法。13.水溶液が脱イオン水である、項目12記載の方法。14.各PEG成分が少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロイン溶液に懸濁または溶解される、項目1~13のいずれか一項記載の方法。15.水溶液のpHが約6から約8の範囲である、項目1~14のいずれか一項記載の方法。16.前記組成物中の各PEG成分の濃度が約25重量から約15重量の範囲である、項目1~15のいずれか一項記載の方法。17.前記組成物中の絹フィブロインの濃度が約10重量から約30重量の範囲である、項目1~16のいずれか一項記載の方法。18.前記組成物中の絹フィブロインの濃度が約15重量から約25重量の範囲である、項目1~17のいずれか一項記載の方法。19.架橋結合ポリマーマトリックスが前記組成物の初期重量の約70未満膨張する、項目1~18のいずれか一項記載の方法。20.架橋結合ポリマーマトリックスが、混合する段階後1時間以内に実質的に膨張しない、項目19記載の方法。21.少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロインが、架橋結合ポリマーマトリックスの接着強度を少なくとも約10Paまで高める、項目1~20のいずれか一項記載の方法。22.前記組成物が、細胞、タンパク質、ペプチド、核酸、核酸類似体、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド、ペプチド核酸、アプタマー、抗体またはその断片もしくは部分、抗原またはエピトープ、ホルモン、ホルモンアンタゴニスト、成長因子または組換え型成長因子ならびにその断片および変異型、細胞接着調節物質、サイトカイン、酵素、抗生物質または抗菌性化合物、ウイルス、毒素、プロドラッグ、化学療法物質、小分子、薬物、ならびにそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される活性物質をさらに含む、項目1~21のいずれか一項記載の方法。23.活性物質が、始原細胞または幹細胞、平滑筋細胞、骨格筋細胞、心筋細胞、上皮細胞、内皮細胞、尿路上皮細胞、神経細胞、生殖細胞、結合組織細胞、ホルモン分泌細胞、腱細胞、線維芽細胞、筋芽細胞、神経芽細胞、グリア芽細胞、口の細胞、軟骨細胞、軟骨芽細胞、骨芽細胞、破骨細胞、ケラチノサイト、腎尿細管細胞、腎基底膜細胞、外皮細胞、骨髄細胞、肝細胞、胆管の細胞、膵島細胞、甲状腺の細胞、上皮小体の細胞、副腎の細胞、視床下部の細胞、下垂体の細胞、卵巣の細胞、精巣の細胞、唾液腺の細胞、脂肪細胞、前駆細胞、およびそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される細胞である、項目22記載の方法。24.活性物質が抗生物質である、項目22記載の方法。25.前記組成物が、トロンビン、フィブリン、フィブリノーゲン、ゼラチン、コラーゲン、多糖類、セルロース、血液因子、およびそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される止血物質をさらに含む、項目1~24のいずれか一項記載の方法。26.架橋結合ポリマーマトリックスが、少なくとも10日間にわたって生理学的条件下でその当初の体積を保持する、項目1~25のいずれか一項記載の方法。27.項目1~26のいずれか一項記載の方法によって作製される、架橋結合ポリマーマトリックス。28.項目27記載の架橋結合ポリマーマトリックスを含む、組織封止剤または接着剤。29.架橋結合マトリックスを形成するために互いに反応することができる少なくとも二つの機能的に活性化されたPEG成分と、βシートを形成して該架橋結合マトリックスを安定化することができる少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロインとを含む組成物を対象の標的部位に投与する段階;および該成分を架橋結合して組織封止剤または接着剤を該標的部位において形成するために該組成物の該成分を混合する段階を含む、対象の標的部位において組織封止剤または接着剤を形成する方法。30.各PEG成分が4アームPEGである、項目29記載の方法。31.PEG成分の一つがマレイミジル基で機能的に活性化される、項目29または30記載の方法。32.PEG成分の一つがチオール基で機能的に活性化される、項目29~31のいずれか一項記載の方法。33.PEG成分の一つがマレイミジル基で機能的に活性化され、該PEG成分の別の一つがチオール基で機能的に活性化される、項目29~32のいずれか一項記載の方法。34.少なくとも一つの成分が水溶液に懸濁または溶解される、項目29~33のいずれか一項記載の方法。35.少なくとも、少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロインが水溶液中にある、項目34記載の方法。36.水溶液が二価のイオンを含まない、項目35記載の方法。37.各PEG成分が少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロイン溶液に懸濁または溶解される、項目29~36のいずれか一項記載の方法。38.前記組成物の総重量に基づく各PEG成分の重量パーセントが約25重量から約15重量の範囲である、項目29~37のいずれか一項記載の方法。39.前記組成物の総重量に基づく絹フィブロインの重量パーセントが約10重量から約30重量の範囲である、項目29~38のいずれか一項記載の方法。40.前記組成物の総重量に基づく絹フィブロインの重量パーセントが約15重量から約25重量の範囲である、項目29~39のいずれか一項記載の方法。41.組織封止剤または接着剤が前記組成物の初期重量の約70重量未満膨張する、項目29~40のいずれか一項記載の方法。42.前記組成物が活性物質をさらに含む、項目29~41のいずれか一項記載の方法。43.前記組成物が止血物質をさらに含む、項目29~42のいずれか一項記載の方法。44.標的部位の表面が前記組成物中の成分の少なくとも一つと架橋結合する、項目29~43のいずれか一項記載の方法。45.対象が移植片である、項目29~44のいずれか一項記載の方法。46.対象が組織または臓器である、項目29~45のいずれか一項記載の方法。47.組織または臓器が圧力感受性構造物の近傍にある、項目46記載の方法。48.組織または臓器が開放性の創傷を有する、項目46または47記載の方法。49.二つのPEG成分が対象に別々に投与され、それによって、インビボにおいて組織封止剤または接着剤が形成される、項目29~48のいずれか一項記載の方法。50.第一の区画が第一の機能的に活性化されたPEG成分を含み、第二の区画が架橋結合マトリックスを形成するために機能的に活性化された第一の該PEG成分と反応することができる第二の機能的に活性化されたPEG成分を含み、第一および第二の該区画の少なくとも一つが、βシートを形成して該架橋結合マトリックスをさらに安定化することができる少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロインをさらに含む、少なくとも二つの区画を含むハウジングを含む、予め充填された送達装置。51.第一の機能的に活性化されたPEG成分が少なくとも一つのマレイミジル基を含む、項目50記載の送達装置。52.第二の機能的に活性化されたPEG成分が少なくとも一つのチオール基を含む、項目50記載の送達装置。53.シリンジである、項目50~52のいずれか一項記載の送達装置。54.シリンジが針をさらに含む、項目53記載の送達装置。55.シリンジがカテーテルをさらに含む、項目53または54記載の送達装置。56.少なくとも一つの送達装置に予め充填された少なくとも三つの成分を含むマトリックス形成組成物であって、少なくとも三つの該成分が、架橋結合マトリックスを形成するために互いに反応することができる少なくとも二つの機能的に活性化されたPEG成分と、βシートを形成して該架橋結合マトリックスをさらに安定化することができる少なくとも約10重量の濃度の絹フィブロインとを含む、マトリックス形成組成物、ならびに該マトリックス形成組成物を混合するための溶媒を含む少なくとも一つの容器を含む、キット。57.送達装置が少なくとも二つの別々の外筒を含み、それぞれの該外筒がマトリックス組成物の異なる成分を充填される、項目56記載のキット。58.少なくとも一つの成分が別個の送達装置に予め充填される、項目56記載のキット。59.溶媒が水溶液である、項目56~58のいずれか一項記載のキット。60.溶媒が脱イオン水である、項目56~59のいずれか一項記載のキット。61.PEG成分が、送達装置の別個の外筒または異なる送達装置に別々に予め充填される、項目56~60のいずれか一項記載のキット。62.PEG成分が絹フィブロインとブレンドされる、項目56~61のいずれか一項記載のキット。実施例1:例示的な材料および方法材料:4アームのポリエチレングリコールマレイミド4アームPEGマレイミドおよび4アームのポリエチレングリコールチオール4アームPEGSHは、NanocsIncNewYorkNYから購入した。カイコの繭は、SchoolofMaterialsEngineeringSoochowUniversitySuzhouChinaから入手した。絹フィブロイン溶液の調製:絹フィブロイン水溶液は既述の通り得た。Sofiaetal54JBiomedMaterRes13948を参照されたい。つまり、カイコガの繭を洗浄して、小片に刻んだ。その後のデガミングの過程において、カイコガの繭をNa2CO3の02M水溶液中で30分ないし60分間煮沸して、生の絹フィブロインフィラメントに結合した水溶性の糖タンパク質を絹の線維から回収した。続いて、20wvの絹フィブロイン溶液を生成するために、絹フィブロインを9MLiBr溶液中、60°Cで1時間、溶解した。LiBrを除去するために、溶液をSlideALyzer登録商標3500MWCO透析カセットPierceChemicalsRockfordILで水に対して72時間、透析した。ゲルの形成およびβシート含有量の測定:絹-PEGをベースとするヒドロゲルは、表1または2に示されている調製物を用いて、溶媒としてpH6~8の1×PBSこの範囲は架橋結合反応のpH特異性に基づいて評価されたを用いて調製した。いくつかの態様において、本明細書で用いられるPBSは、カルシウムイオンのような二価のイオンを含まない。例えば、PEG成分のみを含む対照試料の調製のため、4アームPEGSHおよび4アームPEGマレイミドを、それぞれ、10の濃度に達するように1×PBSpH6~8に各々溶解した。続いて、異なるPEG成分を含む二つの各溶液を一つに混合した。同様に、X絹-PEGXは絹の濃度の値を示すと記載される絹-PEGをベースとする試料の調製のため、絹フィブロインを濃度Xに達するように1×PBSpH6~8に溶解し、続いて、4アームPEGSHおよび4アームPEGマレイミドをそれぞれ、X絹フィブロイン溶液に溶解し、各PEG成分の最終濃度は溶液全体の10に達した。続いて、異なるPEG成分を含む二つの絹の各溶液を一つに混合した。ゲル化は、改変した試験管転倒法により評価した。Shuetal3Biomacromol130411を参照されたい。具体的には、二つまたはそれ以上の成分を混合した後に上下転倒したバイアル/試験管の底部に材料の流動性または液体の蓄積が観察されない場合、ゲルが形成されたと判断した。溶液の混合は、室温で軽くボルテックスにかけることによって達成した。βシートの形成を評価するために、試料に1×PBSpH74を重層するかまたは例えば無水エタノールなどのアルコールで処理して、37°Cで15分間インキュベートし、FTIREquinox55ATRFTIRBrukerOpticsIncBillericaMAで分析した。表1例示的な絹-PEG材料調製物の調製表2例示的な絹-PEG材料調製物の最終組成物COSEALの調製:COSEALは製造業者の説明書に従って調製した。キットは、シリンジ内に粉末として提供される二つの合成ポリエチレングリコールPEG、および2本のシリンジ1本は希塩酸、1本はリン酸ナトリウム/炭酸ナトリウム溶液を含む液体ポーチを含んだ。2本のシリンジは、粉末のシリンジが正しい液体例えば、緩衝液と混合されることを可能とするように設計されたハウジングへと予め組み立てられて供給された。続いて、プランジャーを力強く押し込むことによって、液体を粉末内に移動させた。固体が完全に溶解するまで、内容物を少なくとも20回、シリンジ間で前後に混合した。続いて、溶解した粉末の入ったシリンジおよびもう一方の液体例えば、希塩酸の入ったシリンジを、二つの溶液が同時に分散することを可能とする提供されたエポキシ様のアダプターにセットした。分散した液体の架橋結合およびゲル化は5~10秒以内に起こる。膨張比の測定:絹-PEGをベースとするゲルを、Transwell登録商標の8μmポアメンブレンを持つインサートCorningIncCorningNYに予めキャストして例えば、溶媒への最大表面アクセスを確保するため、重量を測定した後、1×PBSpH74を重層した。次に、ゲル試料を含むプレートを37°Cで50rpmにてインキュベートした。時々、過剰な溶媒を除去するために、ゲル試料内の緩衝液をデカントで捨ててゲルを吸い取った。次いで、残ったゲルおよびインサートの重量を測定した。インビトロにおける分解:絹-PEGをベースとするゲルは、膨張比の測定における絹-PEGをベースとするゲルの調製のための手順と同様に調製した。ゲル重量のわずかな変化の検出を可能とするために、体積を増加させた。分解は、1×PBSpH74中の予めキャストしたゲル01mLを、1mgml5UmgのプロテアーゼXIVSigmaAldrichStLouisMOを加えた場合または加えない場合について、37°Cにおいて50rpmでインキュベートして測定した。次に、約10日間ないし2週間、インキュベート後のゲルを毎日重量測定することによって、ゲル材料の分解を測定した。接着試験:COSEAL登録商標および絹-PEGをベースとする生体材料の、腸またはスチールに対する接着力を評価および比較するために、TAInstrumentsのRSAIIIを用いたマルチプルエクステンションモードMEMで、動的機械分析DMAを実施した。すべての測定において、取り付け具の間のギャップは1mmに設定し、最大許容引っ張り力は2gまたは005Nとした。使用したスチール取り付け具は直径8mmであった。すべての運転において、試料平衡の工程に続いて、低歪み振幅1Hzにおいて1~5の歪みにて歪み制御方式の動的時間依存性測定を実施した。次いで、完全に材料-基質の密封が破綻するまで、5mm分の一定トランスデューサー速度にて過渡引っ張り試験を収集した。各試料の接着を特徴決定するために、3回の測定の平均値を求めた。COSEAL登録商標または絹-PEGをベースとする生体材料の腸粘膜に対する接着の測定には、ソーセージのケーシングを使用した。測定のためのソーセージケーシングは、WholeFoodsMarketから入手して、小さな長方形に刻み、次にこれをスチールのプレートに載せた。試験はすべて、常温常湿で実施して、組織の試料は実験に必要となるまで無菌のPBS中に維持した。組織片を手に取って湿った状態PBSの存在下でカットし、その後、取り付け具にセットして試験まで30秒ないし1分間、固化させた。細胞適合性アッセイ:初代ヒト頸部線維芽細胞の8回継代細胞3x105個ウェルを、組織培養プレートを用いて無血清の条件下で培養した。ウェルを、1×PBSpH6中で調製したPEG単独のヒドロゲルおよび10絹-PEGヒドロゲル表1または2に示すでコーティングした。続いて、ゲルの試料を含むプレートを、37°C/5CO2にて48時間インキュベートした。細胞生存性は、LIVEDEAD登録商標CellViabilityAssaysを用いることによって評価した。100倍の倍率の蛍光顕微鏡LeicaMicrosystemsWetzlarGermanyを用いて画像を収集した。皮下注入:試料各200μLをBALBcマウスn=4の背部に皮下注入して、局所の組織の反応および分解時間を2週間にわたってフォローした。組織学的評価に備えて注入部位の組織を加工して、ヘマトキシリンおよびエオジンHEで染色した。動物試験はTuftsIACUCに承認されたプロトコールに従って実施された。統計学的解析:数値は平均値±標準偏差SDとして表し、Studentのt検定両側、タイプ3を用いて比較し、p<005またはp<001を統計学的有意と見なして、p<0005は極めて有意と見なした。多重データ比較にはANOVA一因子解析を用いた。実施例2.ゲルの形成およびβシート含有量の測定絹-PEGをベースとするヒドロゲルにおける様々な調製物は、表1または2に記載の通り得られた。図1Aまたは1Bに示す通り、架橋結合したポリマーマトリックスを形成するために2段階のゲル化の過程が生じ得る。第一のフェーズは二つのPEG間の化学反応を介した迅速なゲル形成を伴い得る。この工程は、それぞれ、4アームPEGSHおよび4アームPEGマレイミドを含む二つの試料を混合後、数秒以内のゲル形成によって確認されて、ゲル形成のこの工程は試料中の絹の存在下または非存在下において生じたVanderhooftetal8Biomacromolecules288389。図2の差し込み図。ブレンドしたPEG調製物中での絹のβシート形成を評価するため、対照PEG単独および絹含有10絹-PEGの試料をエタノールβシート形成を惹起する外的促進物質として公知で処理し、対照試料をバックグラウンドとして用いてFTIRによりモニターした。アルコール処理例えば、エタノール処理の結果として特徴的なβシートのピーク1625cm1の出現が観察され、ブレンドされた形成物中の絹フィブロインはβシート形成能を維持しており図2、しかも、形成される絹-PEG架橋結合ポリマーマトリックスは絹フィブロインのβシート形成によってさらに安定化されることが示された。生理学的条件下アルコール処理を伴わないでは、24時間後に対照試料PEG単独または絹含有試料例えば、10絹-PEGにβシートは検出されず、これにより絹のβシート形成を介したさらなるネットワーク安定化は、仮に生じたとしても、時間の点ではゆっくりと生じるデータは示さずことが示される。注意すべき点として、エタノールは下記の実施例に記載される実験では使用されなかった。実施例3.絹-PEGをベースとする生体材料の生体適合性絹-PEG架橋結合ポリマーマトリックスの生体適合性は、絹-PEGゲルを型にはめて、事前の洗浄を行わずにそれらに細胞を播種することによって評価した。このような実験条件は、マトリックス形成組成物中の異なる成分絹、異なるPEG成分がインビボにおいて追加の洗浄工程を行うことなく架橋結合する状況を密接に擬似することができる。対照試料および絹-PEG試料において48時間培養した初代頸部線維芽細胞は高い生存性を示したが、絹マトリックスに関する既報のデータSofiaetal2001と一致して、双方の材料において球形の形態を示した図3A~3B。この形態は、例えば、ポリマーマトリックスに細胞特異的な接着部位がないことによって説明され得る。材料のこのような特性は、インビボにおける外科的な細胞接着の防止および瘢痕組織形成の予防に用いられ得る。図3A~3Bに示す通り、対照試料および絹-PEG材料の双方の全体の細胞数はほぼ等しかった。画像の視野図3A~3Bが最小限のバックグラウンド蛍光に基づいて選択されたことを考慮すると、対照試料および絹-PEG材料の局所的な細胞数は同一ではない。実施例4.絹-PEGをベースとする生体材料の膨張挙動絹-PEG架橋結合ポリマーマトリックスの生理学的条件下での膨張挙動を評価するために、試料をTranswell登録商標のインサートにキャストして、緩衝生理食塩液を重層して静かに振盪しながら37°Cでインキュベートした。2時間以内に対照試料PEG単独および10絹-PEG試料がそれぞれの当初のサイズの最大約70だけ膨張し、20絹-PEGの試料は最大約60だけ膨張したのみであった図4A~4B。試料の膨張はインキュベート5日目までモニターしたが、最初に観察された値からの変動は、その後は観察されなかった。10および20試料の間の膨張比の差は、試料調製物および膨張アッセイの装置に関する可能性がある。試料は水、例えば脱イオン水に溶解したが、膨張に関するアッセイは生理学的条件を擬似するためにPBSにて実施した。20絹試料は10絹試料に比して水が少なく、従って、イオン平衡後の10試料の最終重量値は20試料よりも高い値であった。実施例5.絹-PEGをベースとする生体材料の安定性および分解性絹-PEG架橋結合ポリマーマトリックスの安定性についても、プロテアーゼXIVの存在下および非存在下で分解実験を実施することによって評価した。哺乳動物の系は絹特異的な分解酵素を発現しないので、プロテアーゼXIVが品質保証された絹分解酵素として一般的に用いられている。HoranetalBiomaterials263385。インビボでの事象の発生には湿潤状態でのシナリオがより関連するので、試料の乾燥重量の分解は避けた。分解をモニターして、分解パーセントは、膨張した試料の重量/サイズ最大重量/サイズ記録値に対する最終の重量/サイズ記録値を正規化することによって求めた。試料の初期の膨張は、プロテアーゼ非存在の対照PBS単独およびプロテアーゼ存在の双方の条件で認められた。プロテアーゼ非存在下の対照実験では、いずれの試料対照PEG単独、10絹-PEG、および20絹-PEGの試料においても14日間の実験過程中、顕著な加水分解は認められなかった図5A。同様に、プロテアーゼXIVの存在下では、絹の低濃度3および6wvにおいて絹マトリックスに関する刊行済みの報告Horanetal26Biomaterials338593に一致する若干の分解約10が14日目までに認められたものの、顕著な酵素分解は、14日間の実験過程中、いずれの試料対照、10絹-PEG、および20絹-PEGの試料にも認められなかった図5B。これらの結果は、絹-PEGヒドロゲルがインビボにおいて非常にゆっくりと分解されて、分解前に数ヶ月間存在することを示している。Horanetal2005。この材料の特徴は、傷を負った部位において組織接着剤の消失前に創傷の治癒が完全に生じ得ることを保証できることである。実施例6.絹-PEGをベースとする生体材料の接着特性絹-PEG架橋結合ポリマーマトリックスの接着能を、DMA測定装置においてCOSEAL登録商標と比較した。絹-PEG材料の接着性は、例えば、図6Aに示す装置を用いて封止剤と基質の間の接触を切断するために必要な引っ張り力に基づいて測定することができる。接着のための生体膜モデルとしてウシの腸ソーセージケーシングが用いられた。しかし、生体膜は非常に腐敗しやすく、取り扱いに不便である。スチールは腸のより使いやすい代替であり、腸で得られる接着傾向はスチールで得られる接着傾向と同等であった。全体的な接着の値は腸よりもスチールにおいて大幅に低いCOSEAL登録商標および絹含有試料の双方において約18倍ものの、結果は、双方の基質における同様の接着傾向がCOSEAL登録商標および絹-PEGゲルで見出され得ることを示した図6B~6C。従って、スチールは、COSEAL登録商標および絹-PEGゲルの接着特性を比較するための基質として用いることができる。理論によって拘束されることを意図するものではないが、PEG上にあるチオールおよびマレイミド官能基の間の化学反応はpH感受性である塩基性のpH値はチオエーテルよりもジスルフィド結合の形成に有利であるため、次に絹含有PEG試料例えば、10絹-PEG試料および対照における接着のpH依存性を調べることが求められた。COSEAL登録商標の成分の一つはやや酸性のpH値を持ち、これはCOSEAL登録商標の二つの成分を混合した後に約7に中和されることが明らかにされた。絹-PEG材料調製物において試験したpH値は生理学的な範囲内60~80であり、1×PBSpH60において調製された絹PEG材料はより高い接着特性を示した。pH61×PBSで調製された絹-PEG試料について、スチールに対する接着値はCOSEAL登録商標の値と同等であり、pH7またはpH8の緩衝液中で調製された絹-PEG試料のスチールに対する接着値はCOSEAL登録商標の方が上回っていた図7A。いくつかの態様において、本明細書で用いられるPBSはカルシウムイオンのような二価のイオンを含まない。絹-PEG材料が化学的に架橋結合した後にはβシート形成のpH依存性は検出されずデータは示さない、これは、pH値は物理的な架橋結合の工程例えば、βシート形成よりも化学的な架橋結合の工程に対してより大きな影響を及ぼし得ることを示している。低いpHは4アームPEGSHのフリーチオール官能基の保存を促進することができ、つまり、低いpHは、チオールが4アームPEGSHの4アームPEGマレイミドのマレイミド官能基との反応能を低下させる分子内または分子間のジスルフィド結合を形成することを阻止すると考えられている。絹-PEG架橋結合ポリマーマトリックスの接着能に対する、絹の濃度の影響についても分析した。COSEAL登録商標、10絹-PEG、および15絹-PEGの試料において、同等の接着値が得られた。5絹-PEG試料ではより低い接着性p<0005が観察され、20絹-PEG試料はCOSEAL登録商標よりも優れておりp<0005、接着性の点で約50の向上を示した図7B。これらの結果は、10wvまたはそれよりも高い絹フィブロインを含む絹-PEG架橋結合ポリマーマトリックスが、組織封止剤としての適用により適切であり得るということを示していると思われる。絹-PEG材料の接着能に対する溶媒の影響を評価するために、評価目的のためにカルシウムイオンのような二価のイオンを含む1×PBSpH74または水例えば、脱イオン水で試料を調製した。記載したすべての調製物対照、3絹、6絹、および10絹において、CoSealはスチールに対してより優れた接着性を示したその他のすべての試料の2Pa~4Paに対して、CoSealでは約10Paの垂直応力図7D~7E。しかし、水例えば、脱イオン水で調製された試料はスチールに対して強い接着性を示した。例えば、水中でキャストされた10絹-PEG試料について評価したところ、COSEAL登録商標と同等のスチールに対する接着値が得られた図7C。10絹含有試料を水を用いて調製した場合、絹含有PEG試料においてCOSEAL登録商標と同等のスチールに対する接着特性が見出された。このように、絹-PEG試料の調製に用いられる溶媒例えば、水対リン酸緩衝生理食塩液は、材料の接着特性に影響を及ぼす可能性がある。理論によって拘束されることを意図するものではないが、生理食塩液中にCa2のような二価のイオンが存在すると、絹において時期尚早の段階でβシート形成が惹起されてKimetalBiomacromolecules5786参照、材料の接着性が低下する可能性がある。しかし、水をベースとする試料中にイオンが存在しないと、材料の膨張特性が変化する可能性がある。従って、いくつかの態様において、絹-PEG生体材料の調製において用いられる水溶液は水、例えば脱イオン水とすることができる。その他の態様において、絹-PEG生体材料の調製に用いられる水溶液は、例えば一価のイオンのみを含む緩衝系など、二価のイオンを除外してよい。実施例7:絹-PEGをベースとする生体材料のインビボにおける適合性絹-PEGブレンドのインビボにおける適合性を評価した。続いて、材料COSEAL登録商標および絹-PEGをベースとする材料、例えば5絹/PEGを、BALBcマウスの背部に皮下注入して、2週間後に組織学的な解析のために回収した。双方の材料が固有の組織と十分に一体化し、COSEAL登録商標についてこれまでに報告された顕著な炎症性反応は惹起されず、通常のレベルの線維症が惹起された図8。WallaceetalJBiomedMaterRes58545を参照されたい。マウスにおける皮下注入において、絹をベースとする封止剤の組織適合性はCoSealと同等であった。双方の材料が2週間後にも依然、存在した。先行の試験は、予め作製されたゲルのウサギにおける皮下移植において、COSEAL登録商標が約2週間後に完全に分解または吸収されることを報告した。WallaceetalJBiomedMaterRes58545を参照されたい。分解速度に認められた相違は、異なる実験条件移植対注入;予め作製されたゲル対インサイチューでの架橋結合;ウサギ対マウスに起因する可能性がある。それにも関わらず、本明細書に示されるデータは、絹-PEGをベースとする複合物のいくつかの態様が、出血の制御において止血および/または封止特性を有し得ることを示している。参考文献開示される態様に対する様々な変更および修正は当業者には明らかであり、本発明の精神および範囲から逸脱することなく加えられ得る。さらに、特定されるすべての特許および刊行物は、例えばこのような刊行物において説明される方法であって、本発明に関連して用いられる可能性がある方法を、説明および開示する目的のために、参照により本明細書に特別に組み入れられる。これらの刊行物は、単にそれらの開示が本出願の出願日よりも前であるために示されるものである。先行発明という理由で、またはその他の何らかの理由において、本発明者らがこのような開示に先行する権利が与えられないということを承認するものとして解釈されるべきではない。これらの資料の内容に関する日付または表示に関する記述はすべて、本発明者らに利用可能な情報に基づくものであり、これらの資料の日付または内容の正確さに関して何ら承諾をなすものではない。