"リスペリドン、パリペリドン及びこれらの混合物からなる群から選択される薬学的に活性な抗精神病薬を検出するためのイムノアッセイであって、試料と、前記薬学的に活性な抗精神病薬と選択的に反応性である抗体と、次式を有するリガンド:[式中、Bは、であり、Yは、有機スペーサー基であり、Xは、担体に結合することができる末端官能基であり、pは、0から1までの整数である]との担体のコンジュゲートとを含有する混合物を用意するステップと、前記試料中の薬学的に活性な抗精神病薬及び前記コンジュゲートを前記抗体と結合させるステップと、その後、前記試料中の、前記抗体に結合している又は結合していない前記コンジュゲートの量を測定し、それによって前記試料中の抗精神病薬の存在が検出可能となるステップとを含む上記イムノアッセイ。前記抗体が、リスペリドン及びパリペリドンと反応し、薬理学的に不活性なリスペリドン及びパリペリドンの代謝産物である7-ヒドロキシリスペリドンとの実質的な反応性をほとんど有しておらず、薬理学的に不活性なリスペリドン及びパリペリドンの他の代謝産物と実質的に交差反応しない、請求項1に記載のイムノアッセイ。前記抗体の7-ヒドロキシリスペリドンとの反応性が40未満であり、前記抗体の薬学的に不活性な他の代謝産物との前記交差反応性が5未満であり、前記反応性及び交差反応性が前記抗体のリスペリドン及びパリペリドンの双方との合計の反応性に基づいている、請求項2に記載のイムノアッセイ。前記試料がヒト試料である、請求項3に記載のイムノアッセイ。前記薬学的に活性な抗精神病薬の存在が、前記抗体に結合している又は結合していないコンジュゲートの量を測定することによって定量される、請求項4に記載のイムノアッセイ。薬学的に活性な抗精神病薬が、リスペリドン及びパリペリドンからなる群から選択される、請求項5に記載のイムノアッセイ。前記ヒト試料が、リスペリドンで治療した患者から採取された試料であり、前記イムノアッセイが、前記試料中のリスペリドン及びパリペリドンの量を測定する、請求項6に記載のイムノアッセイ。前記ヒト試料が、パリペリドンで治療した患者から採取された試料であり、イムノアッセイが、前記試料中のパリペリドンの量を測定する、請求項6に記載のイムノアッセイ。前記抗体が、次式のリガンド:[式中、Y、X及びBは、上記の通りである]とコンジュゲートしたポリアミンポリマーを含む免疫原性担体を含む免疫原から作製される、請求項3に記載のイムノアッセイ。前記抗体が固体支持体に結合されている、請求項5に記載のイムノアッセイ。前記固体支持体がマイクロタイタープレートである、請求項10に記載のイムノアッセイ。前記固体支持体がナノ粒子である、請求項10に記載のイムノアッセイ。前記抗体が、マウス、ウサギ、ヒツジ又はラットに由来する、請求項9に記載のイムノアッセイ。前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項13に記載のイムノアッセイ。リスペリドン、パリペリドン及びこれらの混合物からなる群から選択される薬学的に活性な抗精神病薬と選択的に反応性である抗体であって、リスペリドン及びパリペリドンと反応し、薬理学的に不活性なリスペリドン及びパリペリドンの代謝産物である7-ヒドロキシリスペリドンとの実質的な反応性をほとんど有しておらず、薬理学的に不活性なリスペリドン及びパリペリドンの他の代謝産物との実質的な交差反応性を有していない、上記抗体。前記抗体の前記7-ヒドロキシリスペリドンとの反応性が40未満であり、薬学的に不活性な他の前記代謝産物との前記交差反応性が5未満であり、前記反応性及び交差反応性が前記抗体のリスペリドン及びパリペリドンの双方との合計の反応性に基づいている、請求項15に記載の抗体。前記抗体が、次式のリガンド:[式中、Bは、であり、Yは、有機スペーサー基であり、Xは、ポリアミンポリマーを含む免疫原性担体に結合することができる末端官能基であり、pは、0から1までの整数である]とコンジュゲートしたポリアミンポリマーを含む免疫原性担体を含む免疫原から作製される、請求項16に記載の抗体。前記抗体が、マウス、ヒツジ、ウサギ又はラットに由来する、請求項17に記載の抗体。前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項17に記載の抗体。次式の化合物:[式中、Y、B、X及びpは、上記の通りであり、Bは、であり、Yは、有機スペーサー基であり、Xは、担体に結合することができる末端官能基であり、pは、0から1までの整数である]。pが0である、請求項20に記載の化合物。Xが[式中、R3は、水素、ハロゲン化物、ヒドロキシルであるか、又はそれに結合した酸素原子と共に反応性エステルを形成しており、R4は、酸素又は硫黄である]である、請求項21に記載の化合物。Xがである、請求項22に記載の化合物。Xがである、請求項22に記載の化合物。Xがであり、R3がヒドロキシルである、請求項22に記載の化合物。Xがであり、R3が反応性エステルを形成している、請求項22に記載の化合物。形成されているエステルが、低級アルキルエステル、イミドエステル又はアミドエステルである、請求項26に記載の化合物。pが1である、請求項20に記載の化合物。Xが[式中、R3は、水素、ハロゲン化物、ヒドロキシルであるか、又はそれに結合した酸素原子と共に反応性エステルを形成しており、R4は、酸素又は硫黄である]である、請求項28に記載の化合物。Yが、1個から10個までの炭素原子を含むアルキレン、[式中、n及びoは、0から6までの整数であり、mは、1から6までの整数である]である、請求項29に記載の化合物。Yが、1個から6個までの炭素原子を含む低級アルキレンである、請求項30に記載の化合物。Xがであり、R3が上記の通りである、請求項31に記載の化合物。Yが[式中、m及びoは、上記の通りである]である、請求項30に記載の化合物。Xがであり、R3が上記の通りである、請求項33に記載の化合物。次式のリガンド:[式中、Bは、Yは、有機スペーサー基であり、Xは、担体に連結することができる官能リンカー基であり、pは、0から1までの整数である]とコンジュゲートした担体を含むコンジュゲート。前記担体がポリアミンポリマーを含む、請求項35に記載のコンジュゲート。pが0である、請求項36に記載のコンジュゲート。Xが[式中、R3は、水素、ハロゲン化物、ヒドロキシルであるか、又はそれに結合した酸素原子と共に反応性エステルを形成しており、R4は、酸素又は硫黄である]である、請求項37に記載のコンジュゲート。pが1である、請求項36に記載のコンジュゲート。Yが、1個から10個までの炭素原子を含むアルキレン、[式中、n及びoは、0から6までの整数であり、mは、1から6までの整数である]である、請求項39に記載のコンジュゲート。Xが[式中、R3は、水素、ハロゲン化物、ヒドロキシルであるか、又はそれに付加された酸素原子と共に反応性エステルを形成しており、R4は、酸素又は硫黄である]である、請求項40に記載のコンジュゲート。前記ポリアミンポリマーが免疫原性ポリマーである、請求項36に記載のコンジュゲート。Yが、1個から6個までの炭素原子を含むアルキレンである、請求項42に記載のコンジュゲート。Xがであり、R3が上記の通りである、請求項43に記載のコンジュゲート。Yが[式中、m及びoは、上記の通りである]である、請求項39に記載のコンジュゲート。Xがであり、R3が上記の通りである、請求項45に記載のコンジュゲート。患者の試料中のリスペリドン及びパリペリドンからなる群から選択される薬学的に活性な抗精神病薬の存在を決定するためのキットであって、別々の容器中にパッケージングされた別々の試薬を含み、前記試薬のうちの一方が、次式のリガンド:[式中、Bは、であり、Yは、有機スペーサー基であり、Xは、担体に結合することができる末端官能基であり、pは、0から1までの整数である]との担体のコンジュゲートであり、他方の試薬が、リスペリドン及びパリペリドンからなる群から選択される薬学的に活性な抗精神病薬と選択的に反応性である抗体であり、前記抗体が、リスペリドン及びパリペリドンと反応し、薬理学的に不活性なリスペリドン及びパリペリドンの代謝産物である7-ヒドロキシリスペリドンとの実質的な反応性をほとんど有しておらず、薬理学的に不活性なリスペリドン及びパリペリドンの他の代謝産物との実質的な交差反応性を有していない、上記キット。pが1である、請求項47に記載のキット。Bが-O-CH2-である、請求項48に記載のキット。Yが低級アルキレンである、請求項49に記載のキット。Xが[式中、R3は、水素、ハロゲン化物、ヒドロキシルであるか、又はそれに付加された酸素原子と共に反応性エステルを形成しており、R4は、酸素又は硫黄である]である、請求項50に記載のキット。Xがであり、R3が上記の通りである、請求項48に記載のキット。Yがである、請求項47に記載のキット。Yが[式中、m及びoは、上記の通りである]である、請求項49に記載のキット。本発明によれば、リスペリドン及びパリペリドンに対して選択的に反応性であり、薬理学的又は薬学的に不活性なこれらの代謝産物である7-ヒドロキシリスペリドンに対してはほとんど実質的に反応性でなく、N-デアルキルリスペリドン等の薬理学的又は薬学的に不活性なこれらの他の代謝産物に対してはいかなる実質的な交差反応性もないように、リスペリドン及びパリペリドンに対して実質的に選択的に反応性である、新しい一クラスの抗体が作製されている。選択的に反応性とは、この抗体がリスペリドン及びパリペリドンと反応し、薬理学的に不活性なリスペリドン及びパリペリドンの代謝産物である7-ヒドロキシリスペリドンとの実質的な反応性をほとんど有しておらず、薬理学的に不活性なリスペリドン及びパリペリドンの他の代謝産物、特に、N-デアルキルリスペリドンとの実質的な交差反応性を有していないことを意味する。該代謝産物、7-ヒドロキシリスペリドンVは、リスペリドン及びパリペリドンから、この代謝産物を形成するのに使用されるリスペリドン及びパリペリドンの重量を基準として、5重量未満の、きわめて少ない量で生成されるのみであるので、これらの特性は、本発明のイムノアッセイを可能にするために重要であるMannens,etal.,1993,DrugMet.Disp.,216:1134-1141。したがって、ヒト体液試料において、これらのイムノアッセイを行う際に、リスペリドン及びパリペリドンで治療した患者のヒト試料中の7-ヒドロキシリスペリドンは、たとえあるとしても、ほとんどないことになる。これらの抗体には薬学的又は薬理学的に活性でないリスペリドン及びパリペリドンのこれらの代謝産物に対するこうした反応性及び交差反応性があるので、これらの代謝産物が、ヒトの体液中のリスペリドン及びパリペリドンの存在及び量の、イムノアッセイによる、正確な決定を妨げることはない。次式の化合物:[式中、Bは、であり、Yは、有機スペーサー基であり、Xは、担体に結合することができる末端官能基であり、pは、0から1までの整数である]との免疫原性ポリアミンポリマーのコンジュゲートである免疫原を使用することによって、薬理学的に不活性なリスペリドン及びパリペリドンの代謝産物である7-ヒドロキシリスペリドンとの反応性を実質的にほとんど有しておらず、薬理学的に不活性なリスペリドン及びパリペリドンの他の代謝産物、特に、N-デアルキルリスペリドンと実質的に交差反応しないという点でリスペリドン及びパリペリドンに選択的な抗体が産生されることが見出されている。上記のような、リスペリドン及びパリペリドンと実質的に選択的に反応し、薬理学的に不活性なリスペリドン及びパリペリドンの代謝産物とはほとんど又は全く交差反応性を有していない、これらの抗体の提供により、リスペリドン及びパリペリドンで治療している患者の体液試料中のリスペリドン及びパリペリドンをモニタリングするために特異的に検出及び定量することができるイムノアッセイを行うことが可能となる。本発明にさらに含まれるのは、前記イムノアッセイ用の試薬及びキットである。本発明によれば、リスペリドン及びパリペリドンと実質的に選択的に反応し、本明細書中で上述したような代謝産物との実質的な反応性又は交差反応性を有していない又はほとんど有していない、新しい一クラスの抗体が得られる。式IIIのリスペリドンのこれらの誘導体を免疫原として使用することによって本発明の新しい一クラスの抗体が得られることが発見された。これらの抗体を使用することにより、血液、血漿又は他の体液の試料中のリスペリドン及びパリペリドンを検出及び/又は定量するためのこうしたイムノアッセイ用の試薬及びキットを含めて、イムノアッセイが開発された。このイムノアッセイを使用することにより、リスペリドン及びパリペリドンの、これらの治療薬で治療した患者の体液試料中での存在及び量を検出及び/又は定量することができる。この方法では、リスペリドン又はパリペリドンで治療している患者を療法期間中にモニタリングすることができ、前記モニタリングに従ってその患者の治療を調整する。本発明により、治療用抗精神病薬としてリスペリドン又はパリペリドンで治療している精神病患者、特に、統合失調症患者におけるリスペリドン及び/又はパリペリドンの治療薬管理が実現する。検出される治療用抗精神病薬は、式Iのリスペリドン及び/又は薬理学的に活性なその代謝産物である式IIのパリペリドンである。本発明の抗体は、薬学的に活性な抗精神病薬であるリスペリドン及びパリペリドンを検出する方法を可能にする。本発明の抗体は、リスペリドン及びパリペリドンの双方と反応性であるので、リスペリドン及びパリペリドンの双方の検出に利用され得る。したがって、リスペリドンで治療する患者のイムノアッセイ並びにパリペリドンで治療する患者のイムノアッセイのいずれにおいても、これらの抗精神病薬のうちいずれか1種の投与をモニタリングするためにこれらを使用することができる。パリペリドンはリスペリドンの薬学的に活性な代謝産物であるので、これは本当である。このような方法で、リスペリドンで治療する患者をモニタリングして、その患者の試料中のリスペリドン若しくはパリペリドン又は双方の存在を決定することができる。患者をリスペリドンで治療する場合に患者の試料中のこれらの薬剤の双方の量を定量することにより、どのくらいのリスペリドンを患者に投与するべきか、及びどのようにリスペリドン療法を調節するかを決定することになる。パリペリドンについては、リスペリドンの代謝産物であるので、リスペリドンは、パリペリドンで治療した患者のヒト試料中に、たとえあるとしても、ほとんどないであろう。したがって、このイムノアッセイにより、パリペリドンで治療した患者をモニタリングして患者の試料中のパリペリドンの存在を決定することもできる。同様の方法で、患者をパリペリドンで治療する場合に患者の試料中のパリペリドンの量を定量することにより、どのくらいのパリペリドンを患者に投与するべきか、及びどのようにパリペリドン療法を調節するかを決定することになる。本発明のイムノアッセイは、これらの抗精神病薬の一方又は双方で治療した患者の試料を含有する混合物を用意し、この試料を本発明の抗体及び式IIIのリガンドと担体のコンジュゲートと共に含有する混合物を用意することによって行われる。この方法において、薬学的に活性な抗精神病薬及び前記試料中の該コンジュゲートは抗体と結合することになり、この結合から、コンジュゲートの量を決定することから、患者の試料中の抗精神病薬の量を算出することができる。あらゆる患者の試料を使用することができる。一般に、患者の試料は、これらの薬剤の一方又は双方で治療した患者から採取された血液試料であり得ることが好ましい。これにより、これらの抗精神病薬を用いた患者の治療を継続的にモニタリングする簡単な方法が可能となるであろう。本発明のアッセイにおいて利用される試薬は、ポリマー担体と式IIIの化合物とのコンジュゲートである。これらのコンジュゲートは、本発明の抗体との結合について、試料中に存在するリスペリドン及びパリペリドンと競合的な結合パートナーである。したがって、該抗体に結合するコンジュゲート試薬の量は、試料中のリスペリドン及びパリペリドンの量に反比例することになる。本発明によれば、該アッセイは、該抗体に結合している又は結合していない前記コンジュゲートの量を検出及び測定するための従来の任意の測定方法を利用する。前記方法の使用により、結合している又は結合していないコンジュゲートの量を測定することができる。一般に、試料中のリスペリドン及びパリペリドンの量は、試料中のリスペリドン及びパリペリドンによって得られる、結合している又は結合していないコンジュゲートの測定量を、既知量のリスペリドン及び/又はパリペリドンを含有する試料で得られた標準曲線又は較正曲線から決定された、結合している又は結合していないコンジュゲートの値と関連付けることによって決定され、この既知量は、試験する試料について予想される範囲内にある。較正曲線を作成するためのこれらの試験は、試料に使用したのと同様のイムノアッセイ法を使用して決定される。定義本明細書の全体にわたり、以下の定義を理解しておくべきである:本出願の全体にわたり、Phという用語は、フェニル基を意味する。アルキレンという用語は、1から10個までの炭素原子を含む2価の飽和した直鎖又は分岐鎖の炭化水素置換基を意味する。免疫原及び免疫原性という用語は、生物において免疫応答を誘発、生成、又は発生させることができる物質を指す。コンジュゲートという用語は、別々の部分を結合させて一緒にすることから形成されるあらゆる物質を指す。本発明による代表的なコンジュゲートとしては、式IIIの化合物のような小分子と、担体又はポリアミンポリマー、特に、タンパク質のような大分子とを結合させて一緒にすることによって形成されるものが挙げられる。該コンジュゲートにおいて、小分子は、大分子上の1つ又は複数の活性部位で結合され得る。コンジュゲートという用語には、免疫原という用語も含まれる。ハプテンは、部分的又は不完全な抗原である。これらは、タンパク質を含んでいない物質、大抵は低分子量の物質であり、抗体形成を刺激することはできないが、抗体と反応する。後者は、ハプテンを高分子量の免疫原性担体にカップリングさせることと、次いで、このカップリングされた生成物、すなわち、免疫原をヒト又は動物の対象に注射することとによって形成される。本発明のハプテンは、リスペリドンである。本明細書において、スペーサー基又はスペーサーとは、ハプテン、担体、免疫原、標識、又はトレーサーのような2つ以上の部分構造を官能リンカー基を通して連結する化学構造の一部を指す。これらのスペーサー基については、本出願において以下に列挙することになる。スペーサー基の原子及びスペーサー基中の鎖の原子は、それら自体が化学結合によって連結されている。中でも好ましいスペーサーは、直鎖又は分岐状の、飽和又は不飽和の炭素鎖である。これらの炭素鎖は、鎖中又は鎖の末端に1つ又は複数のへテロ原子も含み得る。ヘテロ原子とは、酸素、窒素及び硫黄からなる群から選択される炭素以外の原子を意味する。スペーサー基は、鎖の一部として又は鎖中の原子のうちの1個の上にある置換基として環状又は芳香族の基も含み得る。該スペーサー基中の原子の数は、水素以外の原子を計数することによって決定される。スペーサー基中の鎖中の原子の数は、連結されている部分構造間の最短経路に沿った水素以外の原子の数を計数することによって決定される。官能リンカー基は、ハプテンと標識又は担体若しくはポリアミンポリマーとのコンジュゲートを合成するためのハプテン又はスペーサー基を活性化するために、例えば、その上に利用可能な官能部位を提供するために、使用され得る。本明細書において、免疫原性担体という用語は、この場合にはリスペリドンである、ハプテンと1つ又は複数の部位で結合することができ、それによってこれらのハプテン誘導体が免疫応答を誘導してこれらのハプテンと特異的に結合できる抗体の産生を誘発するのを可能にする、一般的にはタンパク質である、免疫原性物質である。免疫原性担体及びリンカー基については、本出願において以下に列挙することになる。免疫原性担体物質には、異物として認識され、それによって宿主からの免疫応答を誘発する、タンパク質、糖タンパク質、複合ポリアミノ-多糖、粒子、及び核酸が含まれる。ポリアミノ-多糖は、その調製で知られている従来の方法のうちの任意のものを使用して多糖から調製することができる。多様なタンパク質の型も、ポリアミノ酸免疫原性担体として用いられ得る。こうした型としては、アルブミン、血清タンパク質、リポタンパク質等が挙げられる。例示的なタンパク質としては、ウシ血清アルブミンBSA、キーホールリンペットヘモシアニンKLH、卵オボアルブミン、ウシサイログロブリンBTG等が挙げられる。代替的に、合成ポリアミノ酸が利用され得る。免疫原性担体には、単糖の繰り返し縮合によって構築された高分子量ポリマーである、ポリアミノ-多糖も含まれ得る。多糖の例は、デンプン、グリコーゲン、セルロース、アラビアガムのような炭水化物ガム、及び寒天等である。多糖には、ポリアミノ酸残基及び/又は脂質残基も含まれる。免疫原性担体は、単独のポリ核酸、又は上述のポリアミノ酸若しくは多糖のうちの一方とコンジュゲートしたポリ核酸のいずれかであってもよい。免疫原性担体は、固体粒子も含み得る。該粒子は、一般に、直径が、少なくとも約0.02ミクロンμmであり、約100μmを超えず、通常は、約0.05μmから10μmまでである。該粒子は、有機又は無機、膨潤性又は非膨潤性、多孔性又は非多孔性であってもよく、最適には、水に近い、一般に約0.7から1.5g/mLまでの密度を有し、透明、部分的に透明、又は不透明であり得る物質を含んでいてもよい。該粒子は、赤血球、白血球、リンパ球、ハイブリドーマ、連鎖球菌Streptococcus、黄色ブドウ球菌Staphylococcusaureus、大腸菌E.coli、及びウィルス等の非限定的な例を含む、細胞及び微生物のような生体物質であってもよい。該粒子は、有機及び無機のポリマー、リポソーム、ラテックス、リン脂質小胞、又はリポタンパク質も含み得る。ポリアミノ酸又はポリペプチドは、アミノ酸から形成されたポリアミドである。ポリアミノ酸は、分子量の上限を有さず、一般に約2,000の分子量からの範囲に及ぶことになり、普通は10,000,000未満、通常は約600,000ダルトン未満である。免疫原性担体又は酵素が含まれているかどうかによって、通常は異なる範囲もあろう。ペプチドは、アミドペプチド結合による2個以上のアミノ酸の結合によって形成されたあらゆる化合物であり、通常は、NH2末端以外の各アミノ酸残基のα-アミノ基が隣の残基のα-カルボキシル基に直鎖状に結合しているα-アミノ酸のポリマーである。ペプチド、ポリペプチド及びポリアミノ酸という用語は、本明細書において、大きさについて限定することなくこのクラスの化合物を言及するのに同義的に使用される。このクラスの中で最も大きなものはタンパク質と呼ばれる。標識、ディテクター分子、又はトレーサーは、検出可能なシグナルを生成するか、又はその生成を誘導することができるあらゆる分子である。標識は、検体、免疫原、抗体に、又は別の分子、例えば受容体若しくは受容体に結合可能な分子、例えばリガンド、特にハプテン等にコンジュゲートさせることができる。標識の非限定的な例としては、放射性同位体、酵素、酵素断片、酵素基質、酵素阻害剤、補酵素、触媒、フルオロフォア、色素、化学発光体、発光体、又は増感剤;非磁性粒子若しくは磁性粒子、固体支持体、リポソーム、リガンド、又は受容体等が挙げられる。抗体という用語は、抗原の特異的タンパク質結合パートナーを指し、他の物質を排除して抗原に対して特異的な結合親和性を有する、あらゆる物質、又は物質群である。抗体という総称には、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体及び抗体フラグメントが含まれる。誘導体という用語は、1つ又は複数の化学反応によって親化合物から生成された化学的な化合物又は分子を指す。担体という用語は、固体粒子及び/又は、例えば、上述のもののような免疫原性ポリマー等の、高分子ポリマーを指す。担体が固体粒子の場合には、式IIIの化合物中の末端官能基Xに結合するための1つ又は複数の反応部位を提供するために、ポリアミンポリマーが、固体粒子に結合、コーティング、又はそれ以外では付加されていてもよい。試薬キット、又は試験キットという用語は、アッセイを行う際に使用される材料の集合体を指す。試薬は、それらの交差反応性及び安定性に依存して、同一又は別々の容器中に、液体又は凍結乾燥された形態でパッケージングされた組合せで提供されてもよい。キットで提供する試薬の量及び比率は、特定の用途で最適の結果が得られるように選択することができる。本発明の特徴を実現する試薬キットは、リスペリドン及びパリペリドンに特異的な抗体を含む。キットは、検体のリガンド並びに較正物質及び対照物質を更に含んでいてもよい。試薬は、液体の形態のままであってもよく、又は凍結乾燥されていてもよい。較正物質及び対照物質という語句は、既知量の測定する薬剤を含有するあらゆる標準物質又は参照物質を指す。薬剤の濃度は、未知の試料で得られた結果を標準物質で得られた結果と比較することによって算出される。これは、一般的には、較正曲線を作成することによって行われる。生体試料という用語は、生物又は元生物からの任意の量の物質を含むが、これらに限定されない。こうした生物としては、ヒト、マウス、サル、ラット、ウサギ、ウマ、及び他の動物等が挙げられるが、これらに限定されない。こうした物質としては、血液、血清、血漿、尿、細胞、臓器、組織、骨、骨髄、リンパ液、リンパ節、滑膜組織、軟骨細胞、軟骨細胞、滑膜マクロファージ、内皮細胞、及び皮膚等が挙げられるが、これらに限定されない。試薬及び免疫原抗体に基づいたイムノアッセイにおいて、リスペリドンのコンジュゲートは、試料中でその抗体上の結合部位についてリスペリドン及びパリペリドンと競合するように構築される。本発明のイムノアッセイにおいて、式IIIの試薬は、式IIのパリペリドンの9-ヒドロキシル基上に形成された、酸素置換されたリスペリドン誘導体である。式IIIの化合物において、リンカースペーサーは、この分子のY-X部分を構成する。これらのリンカーX及びスペーサーYは、イムノアッセイ用のコンジュゲート及び抗体産生用の免疫原を調製する際の従来型である。イムノアッセイ用のコンジュゲート及び抗体産生用の免疫原を調製するのに利用される従来のスペーサー-リンカー基のうちの任意のものを、式IIIの化合物において利用することができる。こうした従来のリンカー及びスペーサーは、米国特許5,501,987及び米国特許5,101,015に開示されている。該コンジュゲート並びに該免疫原は、式IIの化合物から調製される。ハプテンを有する担体のコンジュゲート又は免疫原において、該担体は、該担体のポリアミンポリマー部分が含む1個又は複数の反応性アミノ基に対して、1つに又は複数の位置で、次式を有するハプテン:[式中、X’は、-CH2又は官能リンカー基であり、B、p及びYは、上記の通りである]に結合される。好ましいスペーサー基の中には、本明細書中で前述したスペーサー基が含まれる。特に好ましいスペーサー基は、1から10までの炭素原子を含むアルキレン、[式中、n及びoは、0から6までの整数であり、mは、1から10までの整数であり、アルキレンがあれば特に好ましいスペーサー基となる]等の基である。式IVの化合物において、式中、X’は、好ましくは高分子担体上の反応性アミン基を通して、スペーサーを結合している官能基である。基X’は、式IIIの化合物中の末端官能基Xが、担体又は免疫原のポリアミンポリマー中の反応性アミノ基に結合した結果である。アミノ基と反応することができるいずれの末端官能基も、式IIIの化合物中の官能基Xとして利用することができる。X中に含まれていることが好ましいこれらの末端官能基は、以下のものである:[式中、R3は、水素、ハロゲン、ヒドロキシルであるか、又は結合した酸素原子と共に反応性エステルを形成しており、R4は、酸素又は硫黄である]。基-N=C=R4は、イソシアネート又はイソチオシアネートであってもよい。R3によって形成される活性エステルとしては、例えばN-ヒドロキシスクシンアミド、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール及びp-ニトロフェニルエステルのような、イミドエステル等が挙げられる。しかし、アミン基と反応可能なあらゆる活性エステルを使用することができる。カルボン酸基及び活性エステルは、従来の方法によって担体又は免疫原性ポリマーに結合される。タンパク質等の、ポリアミンポリマー上のアミン基は、本発明のポリマー、免疫原又は担体及び/又はコンジュゲートにスペーサーを連結するアミド基を生成する。本発明の免疫原及びコンジュゲートにおいて、カルボキシル基を含む式IIIのハプテンと、担体又は免疫原が含むポリアミンポリマー上の反応性アミノ基との間の化学結合は、当業者に知られている多様な方法を使用して形成され得る。アミド結合の形成が好ましいことが多い。アミド結合は、まず、式IIIの化合物中のXを形成するカルボン酸部分を活性化し、次いで、このカルボキシ基を脱離基試薬例えば、N-ヒドロキシスクシンイミド、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール、p-ニトロフェノール等と反応させることによって形成される。ジシクロヘキシルカルボジイミド、及びジイソプロピルカルボジイミド等の任意の活性化試薬を使用することができる。式IIIの化合物中のXを形成するカルボン酸部分は、塩化チオニル、及び臭化チオニル等を使用してそれぞれの酸ハロゲン化物に変換することによっても活性化することができる。次いで、式IIIのリスペリドンハプテン中の活性化型のカルボキシル基を、反応性アミノ基を有する担体を含有する緩衝溶液と反応させる。式IIIの化合物中の、Xがアルデヒド基を含む場合、これらの化合物を、還元的アミノ化によるアミン結合を通して担体上のポリアミンポリペプチドの遊離アミノ基に連結することもできる。アルデヒドをアミンと縮合させるあらゆる従来法、例えば還元的アミノ化を通したものなどを、この結合を形成するのに使用することができる。この場合には、式IVのリガンド部分中のX’は、-CH2-である。一方、Xが、式IIIの化合物中の、末端のイソシアネート基又はチオイソシアネート基-N=C=R4である場合、これらの基は、ポリアミンポリマーの遊離アミンと反応して、X’がポリアミン担体又は免疫原性ポリペプチド上にアミノ基を有する式IVのコンジュゲート又は免疫原を生成する。式IIIの化合物は、これらの化合物を、ポリアミン又はポリペプチドを含む担体と反応させることによって本発明の免疫原及び/又はコンジュゲート試薬に変換することができる。ポリアミン又はポリペプチドが免疫学的に活性であるならば、同一のポリペプチドを、本発明の免疫原において担体として、また免疫原性ポリマーとして利用することができる。しかし、コンジュゲートを形成するために、これらのポリマーは、免疫原に必要とされるような免疫学的応答を生成する必要はない。本発明によれば、式IIIの化合物中でXによって表される多様な官能基は、ポリマー中に含まれるアミノ基に官能基を付加する従来の方法によって、反応性アミノ基を有するポリマーを含む担体にコンジュゲートさせることができる。好ましい一実施形態によれば、式IIIの化合物において、Xは、カルボン酸基又はその活性エステルである。式IIIの化合物は、次式の化合物:から形成され得る。式IIIの化合物は、次式の化合物から形成される。式中、B、Y及びXは、上記の通りである。式IX-Aの化合物を、式中のBが-O-CH2-である式Xの化合物の誘導体に変換する際には、式IX-Aの化合物を、次式の化合物[式中、p、Y及びXは、上記の通りである]と反応させる。これらの誘導体を形成する際に、アルコールを反応させてエーテルを形成するあらゆる従来の方法を、式XI-Aのハロ化合物を式IX-Aの化合物上のヒドロキシ基と縮合させるのに利用することができる。式XI-Aの化合物中のハロゲン化物を使用することにより、アルコールと縮合させることによってエーテルを形成する効率的な方法が可能になる。一方、式XI-Aの化合物が、これらの誘導体を形成するためのこの反応を妨げる可能性のある官能基を含む場合には、これらの官能基を、本明細書中で上記したような反応の後に除去することができる好適な保護基によって保護することもできる。式中のBがである式Xの化合物では、任意の従来のエステル化の方法を利用して、式IX-Aの化合物中の遊離ヒドロキシ基を、次式の化合物[式中、Y、X及びpは、上記の通りである]と反応させる。エステル化の前に、式IX-Aの化合物上のアミノ基を、任意の従来のアミノ保護基を利用して保護することもできる。式中のBがである式Xの化合物の誘導体は、本明細書中で上述したカルボキシレート活性化の任意の従来の方法を使用して式IX-Cの化合物上のカルボキシル基を最初に活性化した後に、式IX-Bの化合物上のカルボキシル基を、次式のアミノ化合物:NH2-CH2-Yp-XXI-C[式中、X、Y及びpは、上記の通りである]と反応させることによって生成される。この反応の前に、式XI-Cの化合物上の反応基を、本明細書中で上記したように従来の保護基で保護することもできる。これらの保護基は、本明細書中で前記したような従来の方法によってこのアミド化の後に除去することができる。アミノ基を保護するあらゆる方法を、式Xの化合物について使用することができる。このアミノ保護基は、従来の方法によって除去することができる。式中のBがである式Xの化合物の誘導体は、本明細書中で上述したカルボキシレート活性化の任意の従来の方法を使用して式IX-Bの化合物上のカルボキシル基を最初に活性化した後に、式IX-Bの化合物上のカルボキシル基を、次式のヒドロキシ化合物:HO-CH2-Yp-XXI-D[式中、X、Y及びpは、上記の通りである]と反応させることによって生成される。この反応の前に、式XI-Dの化合物上の反応基を、本明細書中で上記したように従来の保護基で保護することもできる。これらの保護基は、本明細書中で前記したような従来の方法によってこのエステル化の後に除去することができる。アミノ基を保護するあらゆる方法を、式Xの化合物について使用することができる。このアミノ保護基は、従来の方法によって除去することができる。式中のBがである式Xの化合物の誘導体は、式IX-Cの化合物上のアミン基を、カルボキシレートを含む次式の化合物:HOOC-CH2-Yp-XXI-E[式中、X、Y及びpは、上記の通りである]と反応させることによって生成される。式IX-Cの化合物上のオルト位のアミンは、反応の前に従来の保護基で本明細書中で上記したように選択的に保護されなければならない。このアミド化反応は、本明細書中で上述したカルボキシレート活性化の任意の従来の方法を使用した式XI-Eのカルボキシレートの活性化の後に行われる。この反応の前に、式XI-Eの化合物上の反応基を、本明細書中で上記したように従来の保護基で保護することもできる。これらの保護基は、本明細書中で前記したような従来の方法によってこのアミド化の後に除去することができる。式中のBがである式Xの化合物の誘導体は、式IX-Cの化合物上のアミン基を、イソシアネートisocyante又はイソチオシアネートisothiocyanteを含む次式の化合物:[式中、X、Y及びpは、上記の通りであり、R4は、O又はSである]と反応させることによって生成される。式IX-Cの化合物上のオルト位のアミンは、反応の前に従来の保護基で本明細書中で上記したように選択的に保護されなければならない。この縮合反応は、式XI-Fを化合物IX-Cの緩衝溶液に添加した後に行われる。この反応の前に、式XI-Fの化合物上の反応基を、本明細書中で上記したように従来の保護基で保護することもできる。これらの保護基は、本明細書中で前記したような従来の方法によってこの濃縮の後に除去することができる。式Xの化合物は、式IXの化合物からパリペリドンを合成する方法のうちの任意のものを利用して式IIIの化合物に変換することができる。この方法において、式Xの化合物中の官能基Xは、好適な保護基によって保護され、式IIIの化合物の形成の後に、この保護基を従来の方法によって除去することができる。抗体本発明は、上述の免疫原を利用することによって産生される、リスペリドン及びパリペリドンに対するモノクローナル抗体を含む新規な抗体にも関する。本発明によれば、本発明に従って作製されたこれらの抗体は、リスペリドン及びパリペリドンと選択的に反応することが見出されている。選択的に反応性であることとは、その抗体が、リスペリドン及びパリペリドンと反応し、薬理学的に不活性なリスペリドン及びパリペリドンの代謝産物である7-ヒドロキシリスペリドンとの実質的な反応性をほとんど有しておらず、その反応性は、リスペリドン及びパリペリドンの双方との反応性に基づき、40未満、好ましくは25未満であり、その抗体が、薬理学的に不活性なリスペリドン及びパリペリドンの他の代謝産物、特に、N-デアルキルリスペリドンと実質的に交差反応せず、他の代謝産物に対するその実質的な非交差反応性は、リスペリドン及びパリペリドンの双方との反応性に基づき5未満であることを意味する。患者の体液試料中のリスペリドン及びパリペリドンの存在の検出及び/又は量の定量を正確に行うためのイムノアッセイを行うための抗体が得られるのは、これらの選択的な反応特性による。本発明は、リスペリドン及びパリペリドンに対する新規抗体及びモノクローナル抗体に関する。本発明の抗血清は、本発明の免疫原で宿主動物を免疫化することによって都合よく作製することができる。好適な宿主動物としては、例えば、マウス、ラット、ウサギ、モルモット等のげっ歯動物、又はヤギ、ヒツジ、ウマ等の高等哺乳動物等が挙げられる。初回投与、採血及び追加抗原注射は、動物において免疫応答を誘発するための受け入れられているプロトコルに従って行うことができ、例えば、好ましい一実施形態において、マウスに100μg免疫原/マウス、腹腔内の初回投与及び6ヶ月間にわたり2回以上の50~100μg免疫原/マウスの間のその後の追加抗原注射を行った。定期的な採血を通して、免疫化したマウスの血液試料で、従来のイムノアッセイを利用してリスペリドン及びパリペリドン結合に対する免疫応答の獲得が認められた。これらの方法により、所望の活性を有する抗血清を産生する宿主をスクリーニングする便利な方法が可能となる。該抗体は、リスペリドンの主な代謝産物であるパリペリドンに対してもスクリーニングされ、この化合物に対して実質的に結合することが示された。リスペリドン及びパリペリドンと選択的に反応し、薬理学的に不活性なリスペリドン及びパリペリドンの代謝産物である7-ヒドロキシリスペリドンとの実質的な反応性をほとんど有しておらず、リスペリドン及びパリペリドンの双方との反応性に基づき、40未満、好ましくは25未満の反応性を有し、薬理学的に不活性なリスペリドン及びパリペリドンの他の代謝産物、特に、N-デアルキルリスペリドンと実質的に交差反応せず、他の代謝産物に対する実質的な非交差反応性は、リスペリドン及びパリペリドンの双方との反応性に基づき、5未満である、該抗体は、式IIIの免疫原を利用して、以下に開示しているスクリーニング法によって作製することができる。このスクリーニング法を使用して、リスペリドン及びパリペリドンの化学療法剤の双方と反応性がある抗体を得ることができ、これは、これらの化学療法剤について任意の望ましい相対反応性を有するこれらの化学療法剤に対して特異的且つ選択的である。これらの抗体の調製において、免疫原性担体を、式IIIの免疫原とコンジュゲートさせることができ、例えば、マウス、ラット、ウサギ、モルモット等のげっ歯動物、又はヤギ、ヒツジ、ウマ等の高等哺乳動物等宿主動物の免疫化に使用することができる。式IIIの化合物に対する免疫応答の獲得は、BSAと式IIIの化合物とのコンジュゲートをコーティングしたマイクロタイタープレートを利用してELISAによってモニタリングすることができる。一度免疫応答が十分に獲得されれば、宿主動物の脾細胞を単離して、不死化された細胞系と融合させることができる。モノクローナル抗体の作製に関して、この融合細胞を、96ウェルプレート上に播種して、ハイブリドーマ細胞を選択するための選択培地の存在下で培養することができる。ハイブリドーマ上清及び抗血清を、ELISAによって抗リスペリドン抗体の存在について試験することができる。陽性のELISA結果が得られたウェルからの抗体を、間接的競合マイクロタイタープレートアッセイによってリスペリドン及びパリペリドンの結合について試験することができる。リスペリドン、パリペリドン及びこれらの代謝産物等の検体のIC50値を、このアッセイから算出することができる。アッセイにおける検体のIC5050での阻害濃度は、阻害アッセイにおいてアッセイでのシグナルが検体の存在しないアッセイでの総シグナルの50であるときの試料中のその検体の濃度である。検体の選択的反応性は、としてIC50の表される以下の比率から算出される:100-[IC50-検体/IC50-リスペリドンIC50-パリペリドン]×100。IC50の計算は、D.Wildによって編集され、Elsevier,Amsterdamによって2005に出版された、TheImmunoassayHandbook,pp108-110,3rdedition中で見出される方法に従って行われる。該式からわかるように、検体のIC50は、検体の反応性に反比例する。100又は100付近を示したウェルからの細胞を限界希釈によってサブクローン化して、モノクローナル抗リスペリドン抗体を産生している個々のクローンを単離することができる。リスペリドン及びパリペリドンについて望ましい相対反応性を有するウェルからの細胞を限界希釈によってサブクローン化して、パリペリドンと十分に交差反応性であってこの薬剤にも選択的となるモノクローナル抗リスペリドン抗体を産生している個々のクローンを単離することもできる。モノクローナル抗体は、上記のスケジュールに従ってBalb/cマウスを免疫化し、その後、このマウスに100μgの免疫原を、細胞融合の3日前又は4日前から始めて連続して3日間、腹腔内又は静脈内に注射することによって作製するのが好都合である。抗体の技術分野においてよく知られている他のプロトコルも、当然同様に利用することができる。本明細書中で詳述している完全な免疫化プロトコルは、リスペリドン又は薬理学的に活性なその代謝産物であるパリペリドンに対する抗体の血清抗体応答に最適なプロトコルを実現した。宿主の脾臓、末梢血、リンパ節又は他の組織から得られるBリンパ球を、モノクローナル抗体産生細胞として使用することもできる。最も好ましいのは、脾臓から得られるBリンパ球である。本発明の所望のモノクローナル抗体を産生することができるハイブリドーマは、こうしたBリンパ球を、ハイブリッド細胞に長期間の組織培養安定性を付与する細胞系である不死細胞系と融合することによって得られる。本発明の好ましい実施形態において、不死細胞は、それ自体抗体産生細胞であるが悪性でもある、リンパ芽球腫細胞又は形質細胞腫細胞、例えば、骨髄腫細胞等であってもよい。リスペリドン又は薬理学的に活性なその代謝産物であるパリペリドンに対するモノクローナル抗体を産生する、ネズミ科動物のハイブリドーマは、マウスの骨髄腫細胞と、リスペリドン-タンパク質コンジュゲートに対して免疫化されたマウスからの脾細胞との融合によって形成される。キメラなヒト化モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ細胞からの遺伝子を発現する抗体をクローン化し、当技術分野で現在よく知られている組換えDNA法を用いて、マウスの可変領域の部分配列をヒトの定常領域に結合するか、又はヒトのフレームワーク領域をドナーのマウス又はラットの免疫グロブリンからの相補性決定領域CDRと結合するかのいずれかによって作製することができる。親和性が高められた抗体を提供する、ネズミ科動物のモノクローナル抗体をヒト化するための改良された方法は、国際特許出願WO92/11018に記載されている。一次抗体構造の一部のみを含むポリペプチド断片を作製することもでき、この断片は1種又は複数の免疫グロブリン活性を有する。これらのポリペプチド断片は、当技術分野においてよく知られている方法により、完全な抗体をタンパク分解で切断することによって、又はFabフラグメント又はFab’2フラグメントを作製するための部位特異的変異生成を使用して、抗体遺伝子を含む発現ベクター内の所望の位置に終止コドンを挿入することによって作製することができる。単鎖抗体は、VL領域及びVH領域をDNAリンカーと結合することによって作製することができるHustonetal.,1988,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,85:5879-5883及びBirdetal.,1988,Science,242:423-426を参照されたい。本発明の抗体は、リスペリドン及びパリペリドンに対して実質的に選択的に反応性であり、薬理学的又は薬学的に不活性なこれらの代謝産物である7-ヒドロキシリスペリドンとの実質的な反応性をほとんど有しておらず、N-デアルキルリスペリドン等の薬理学的又は薬学的に不活性なこれらの他の代謝産物に対してはいかなる実質的な交差反応性もない。薬理学的又は薬学的に不活性なこれらの代謝産物である7-ヒドロキシリスペリドンとの実質的な反応性をほとんど有していないこととは、本発明の抗体が、リスペリドン及びパリペリドンの双方に対するその合計の反応性に相対して、40未満、好ましくは25未満の、7-ヒドロキシリスペリドンに対する反応性を有することを意味する。7-ヒドロキシリスペリドン以外の薬理学的又は薬学的に不活性な代謝産物に対して実質的な交差反応性を全く有さないこと又はいかなる実質的な交差反応性もないこととは、本発明の抗体が、リスペリドン及びパリペリドンの双方に対するその合計の反応性に相対して、5未満、好ましくは2未満の、N-デアルキルリスペリドン等の薬理学的又は薬学的に不活性なこれらの他の代謝産物に対する交差反応性を有することを意味する。イムノアッセイ本発明によれば、該コンジュゲート及び式IIIの化合物の免疫原から産生される該抗体は、患者の試料中のリスペリドン及びパリペリドンの決定のための試薬として利用することができる。この決定は、イムノアッセイによって行われる。患者の試料中のリスペリドン及びパリペリドンの存在を決定するために、式IIIの化合物から形成される試薬コンジュゲートが、本発明に従って作製された抗体上の結合部位について、試料中のリスペリドン及びパリペリドンと競合するあらゆるイムノアッセイを利用することができる。リスペリドン及びパリペリドンを含有すると考えられる試料においてリスペリドン及びパリペリドンについてのこうしたアッセイを行う方法には、a水性媒体試料、b本発明に従って作製された、リスペリドン及びパリペリドンに対する抗体、c式IIIの化合物から形成される該コンジュゲート、又はこれらの混合物を組み合わせることが含まれる。試料中のリスペリドン及びパリペリドンの量は、該試料と抗体との混合物に添加された既知量のコンジュゲートの特異的抗体に対する結合の阻害を測定することによって決定することができる。既知量のコンジュゲートのこうした結合の、未知の試料による阻害の結果を、同様のアッセイにおいてリスペリドンの既知の標準溶液を利用することによって得られる結果と比較する。未知の試料中のリスペリドン及びパリペリドンの量を決定する際には、該試料、式IIIの化合物から形成される該コンジュゲート、及び該抗体を、任意の順序で添加することができる。抗体に結合した、式IIIの化合物から形成されたコンジュゲートの量を測定するために、多様な方法を利用することができる。1つの方法は、コンジュゲートが抗体に結合することにより、フルオロフォアコンジュゲートの回転速度の低下が引き起こされるものである。液体混合物中のフルオロフォアコンジュゲートの回転速度の低下量は、米国特許4,269,511及び米国特許4,420,568に開示されているような蛍光偏光技術によって検出することができる。一方、該抗体は、ナノ粒子上にコーティング又は吸収されていてもよく、その結果、これらの粒子が式Vの化合物から形成されるリスペリドンコンジュゲートと反応するときにこれらのナノ粒子が集合体を形成するようになる。しかし、抗体をコーティング又は吸収したナノ粒子が試料中のリスペリドン及びパリペリドンと反応するときには、これらのナノ粒子に結合した試料からのリスペリドン及びパリペリドンは抗体ナノ粒子の集合を引き起こさない。この集合または凝集の量は、アッセイ混合物において吸光度によって測定することができる。一方、これらのアッセイは、抗体又はリスペリドンコンジュゲートのいずれかを、固体支持体、例えばマイクロタイタープレート、又は固体粒子等の他の従来の固体支持体に結合させることによって行うことができる。抗体及びタンパク質をこうした固体粒子に結合させることは、当技術分野においてよく知られている。こうした結合の実施には、任意の従来の方法を使用することができる。多くの場合、測定を補助するために、該抗体と結合している又は結合していない、式IIIの化合物から形成されるコンジュゲートの量を検出する際の補助として、抗体、コンジュゲート又は固体粒子上に、放射性標識又は酵素標識のような標識をつけることもできる。他の好適な標識としては、発色団、フルオロフォア等が挙げられる。便宜上、本発明のアッセイ構成材料は、リスペリドン及びパリペリドンについてのアッセイに使用される所定量の新規試薬を含むパッケージングされた組合せである、キットで提供される。これらの試薬には、本発明の抗体、並びに、式Vの化合物から形成されたコンジュゲートが含まれる。これらの必要な試薬に加えて、補助的な試薬のような添加物、例えば、安定剤、緩衝液等が含まれていてもよい。種々の試薬の相対量は、アッセイの感度を実質的に最適にする試薬の溶液中濃度を得るために幅広く変えることもできる。試薬は、溶液で又は、溶解時に、アッセイを行うのに適切な濃度を有する試薬溶液を提供することになる添加剤を含む、通常は凍結乾燥した、乾燥粉末として提供され得る。実施例において、以下のものを指すのに以下の略語を使用する:MsClメタンスルホニルクロリドDIPEAN-N’-ジイソプロピルエチルアミンTHFテトラヒドロフランTFAトリフルオロ酢酸pTSAp-トルエンスルホン酸HATUO-7-アザベンゾトリアゾル-1-イル-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートDMFジメチルホルムアミドDMSOジメチルスルホキシドs-NHSスルホ-N-ヒドロキシスクシンイミドEDC1-3-ジメチルアミノプロピル-3-エチルカルボジイミドヒドロクロリドKLHキーホールリンペットヘモシアニンBSAウシ血清アルブミンPBSリン酸緩衝生理食塩水NaCl塩化ナトリウムHRPホースラディッシュペルオキシダーゼANS8-アニリノ-1-ナフタレンスルホン酸TMB3,3’,5,5’-テトラメチルベンジジンTRISトリスヒドロキシメチルアミノメタンヒドロクロリドdiH2O脱イオン水リン酸緩衝液の組成には、15.4mM二塩基性リン酸ナトリウムNa2HPO44.6mM一塩基性リン酸ナトリウムNaH2PO4pH=7.2±0.10を含有する水溶液がある。実施例において、以下のスキーム1~2は、実施例における番号によって参照される、調製した特定の化合物を示している。これらのスキームは、以下の通りである:例1リスペリドン9-イルオキシペンタン酸誘導体[9]の調製スキーム1化合物[1]10.0g、90.8mmolを、N2雰囲気下0°Cで無水DMF200mL中に溶解した。撹拌しながら、NaH60、3.62g、90.8mmolを添加して、この混合物を1時間で周囲温度まで温度上昇させた。次いで、この反応混合物にメチル5-ブロモペンタノエート17.72g、90.80mmolを添加して、撹拌を一晩継続した。この反応混合物を水で希釈して、EtOAcで抽出した。この抽出物を、水、次いで、ブラインで洗浄し、乾燥させNa2SO4、溶媒を蒸発させて粗生成物[2]を単離した。20~90のEtOAc/ヘキサンを使用してフラッシュクロマトグラフィーによって不純物を除去して、純化合物[2]12.80g、63を単離した。化合物[2]12.80g、57.14mmol、化合物[3]8.80g、68.57mmol、及びpTSAH2O2.0g、10.5mmolをキシレン300mL中に溶解して、得られた混合物をディーン-スターク条件下で12時間加熱還流した。12時間後、キシレンを減圧下で除去し、残留物に飽和NaHCO3を添加して、スラリーをEtOAcで抽出した。この有機相を、ブラインで洗浄し、乾燥させNa2SO4、蒸発させて粗生成物[4]を単離した。この物質を、エーテル/ヘキサンの1:1混合物で粉末にして純化合物[4]10.40g、55を単離した。化合物[4]9.90g、29.64mmol及びAlCl31.98g、14.85mmolの無水ジクロロエタン中の混合物をN2下95°Cで6時間加熱し、その後、この混合物に別のAlCl31.0g、7.40mmolを添加して、撹拌をさらに5時間継続した。フラスコの内容物を周囲温度まで冷却して、氷冷した水で注意深くクエンチした。飽和NaHCO3を添加して、その水相を5のMeOH/クロロホルムで抽出した。得られた有機相を、ブラインで洗浄し、乾燥させNa2SO4、蒸発させて粗生成物[5]を単離した。この粗物質を、エーテル/ヘキサンの1:1混合物で粉末にして純化合物[5]5.80g、58を単離した。化合物[5]2.0g、6.0mmolをMeOH70mL及び6NのHCl10mLの混合物中に溶解して、Pd-C10重量、0.57gを添加した。MSによってモニタリングされるようにこの反応が完了するまで、撹拌している混合物を通して水素ガスを吹き出させた。次いで、この反応混合物を、セライトのパッドに通して濾過して、パラジウム触媒を除去した。この濾液を蒸発させてメタノールを除去して、この酸性水性混合物を飽和NaHCO3に添加してクエンチし、次いで、10のMeOH/クロロホルムで抽出した。この有機相を、ブラインで洗浄し、乾燥させNa2SO4、蒸発させて所望の生成物[6]1.80g、89を単離した。化合物[6]1.80g、5.32mmolを、N2下0°Cで無水CH2Cl230mL中に溶解した。この撹拌中の溶液にDIPEA1.38g、10.64mmolを添加し、その後、メタンスルホニルクロリド0.67g、5.85mmolを滴下して添加した。この反応混合物を、0°Cで40分間撹拌し、その後、溶媒を除去して粗メシレート中間体を得た。このメシレート中間体を無水MeOH50mL中に溶解し、この溶液に化合物[7]1.76g、7.95mmolを、その後、DIPEA1.80g、5.32mmolを添加した。この混合物を1.5時間加熱還流し、次いで、メタノール溶媒を減圧下で除去し、その残留物をクロロホルム中に溶解した。このクロロホルム有機相を、水、ブラインで洗浄し、乾燥させNa2SO4、蒸発させて粗生成物[8]を単離し、これを、2~5のMeOH/CHCl3を溶離液として使用してフラッシュクロマトグラフィーによって精製して純生成物[8]2.02g、70を単離した。エステル[8]2.0g、3.70mmolを、MeOH/THFの混合物1:3、24mL中に0°Cで溶解して、LiOHH2O0.46g、11.10mmolの水6mL中の溶液を添加した。この混合物を、周囲温度まで温度上昇させて2時間撹拌した。この反応溶液を、EtOAcで希釈し、0.1NのHClで洗浄した。この有機相を除去して置いておき、残りの水相を10のMeOH/CHCl3で抽出した。この抽出物を、置いておいた有機相と合わせて、合わせた有機相を、ブラインで洗浄し、乾燥させNa2SO4、蒸発させて化合物[9]1.91g、99を白色泡沫として得た。例2リスペリドン9-イルオキシペタンカルバモイル-メチル-安息香酸誘導体[14]の調製スキーム2化合物[9]700mg、1.33mmol、化合物[12]440mg、1.46mmol、及びDIPEA0.86g、1.2mL、6.65mmolを、0°CでDMF10mL中に溶解した。HATU1.21g、3.19mmolを添加し、その後、この反応混合物を、周囲温度まで温度上昇させ、一晩撹拌した。その翌日、この反応混合物をEtOAcで希釈して、得られた有機相を、1MのHCl、飽和NaHCO3、水で洗浄し、乾燥させたNa2SO4。溶媒の除去によって粗生成物[13]が得られ、これを2~8のMeOH/CHCl3を用いたフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、純生成物[13]0.52g、55を白色固体として得た。化合物[13]0.50g、0.7mmolを、N2下0°Cで無水CH2Cl210mL中に溶解し、その撹拌中の溶液にTFA10mLを添加した。撹拌を、0°Cで3時間、次いで、周囲温度でさらに20時間継続した。この時間の後に、溶媒を減圧下で除去して、得られた残留物を水中に懸濁し、乾燥状態まで凍結乾燥させて粗酸[14]を得た。この乾燥物質を、2のMeOH/CHCl35mLで溶解し、200mLのエーテルに添加して、酸[14]を溶液から沈澱させた。沈澱した固体を、濾過して、エーテルで洗浄し、40°Cで乾燥させて所望の化合物[14]0.38g、72をオフホワイトの粉末として得た。例3s-NHSで活性化された薬剤誘導体を、対応する酸[9]及び[14]から調製する一般的な方法リスペリドン酸誘導体[9]及び[14]をEDC及びs-NHSで活性化して、タンパク質に対する最終的な結合例4及び5のための、s-NHSで活性化されたリスペリドンのエステル[10]及び[15]を作製した。例3as-NHSで活性化されたエステルリスペリドン9-イルオキシペンタン酸誘導体[10]の調製リスペリドン誘導体[9]、例1、スキーム1、56.8mgを、5.68mLのDMSO中に溶解し、これに、s-NHS66.56mg及びEDC58.58mgを添加した。この反応混合物を、窒素雰囲気下、周囲温度で20時間撹拌して、s-NHSで活性化されたリスペリドンのエステル[10]を作製した。この反応混合物を、例4及び5aにおいて直接使用した。例3bs-NHSで活性化されたエステルリスペリドン9-イルオキシペタンカルバモイル-メチル-安息香酸誘導体[15]の調製リスペリドン誘導体[14]、例2、スキーム225.0mgを、2.5mLのDMSO中に溶解し、これに、s-NHS19.9mg及びEDC17.6mgを添加した。この反応混合物を、窒素雰囲気下、周囲温度で20時間撹拌して、s-NHSで活性化されたリスペリドンのエステル[15]を作製した。この反応混合物を、例5bにおいて直接使用した。例4活性化ハプテン[10]を有するKLH免疫原の調製300mgのKLHを20mLのリン酸緩衝液50mM、pH7.5中に溶解することによってKLHのタンパク質溶液を調製し、その後、例3aにおいて調製した、s-NHSで活性化されたリスペリドン誘導体[10]を4.85mL添加した。KLHと、活性化されたリスペリドン誘導体[10]とのこの反応混合物を、室温で20時間撹拌させてリスペリドン[9]-KLHコンジュゲートを作製した。次いで、このリスペリドン[9]-KLHコンジュゲートを、リン酸緩衝液50mM、pH7.5中の30DMSOに対する透析によって室温で精製した。その後、DMSOの割合を、20、10及び0と段階的に低下させた。最後の透析は、4°Cでリン酸緩衝液に対して行った。このリスペリドン[9]-KLHコンジュゲートを、紫外-可視分光法によって特徴付けした。このコンジュゲートを希釈して、リン酸緩衝液50mM、pH7.5中2mg/mLの最終濃度にした。例5a活性化ハプテン[10]を有するBSAコンジュゲートの調製1gのBSAをリン酸緩衝液50mM、pH7.5中に溶解して50mg/mLの最終濃度にすることによってBSAのタンパク質溶液を調製した。このタンパク質溶液に、例3aにおいて調製した、s-NHSで活性化されたリスペリドン誘導体[10]を0.83mL添加した。BSAのタンパク質溶液に添加する、s-NHSで活性化されたリスペリドン誘導体[10]の量は、リスペリドン[10]の誘導体とBSAとの間で1:1のモル比で算出した。BSAと、活性化されたリスペリドン誘導体[10]とのこの混合物を、室温で18時間撹拌させて、活性化されたリスペリドンエステル[10]とBSAとのコンジュゲートを作製した。次いで、このコンジュゲートを、リン酸緩衝液50mM、pH7.5中の20DMSOに対する透析によって室温で精製した。その後、DMSOの割合を、10及び0と段階的に低下させた。最後の透析は、4°Cでリン酸緩衝液に対して行った。精製したリスペリドン[9]-BSAコンジュゲートを、UV/VIS分光法によって特徴付けした。例5b活性化されたハプテン[15]を有するBSAコンジュゲートの調製1gのBSAをリン酸緩衝液50mM、pH7.5中に溶解して50mg/mLの最終濃度にすることによってBSAのタンパク質溶液を調製した。このBSAのタンパク質溶液10.0mLに、氷上で撹拌しながら、例3bにおいて調製した、s-NHSで活性化されたリスペリドン誘導体[15]を0.620mL添加した。BSAのタンパク質溶液に添加する、s-NHSで活性化されたリスペリドン誘導体[15]の量は、リスペリドン[15]の誘導体とBSAとの間で1:1のモル比で算出した。BSAと、活性化されたリスペリドン誘導体[15]とのこの混合物を、室温で18時間撹拌させて、活性化されたリスペリドンエステル[15]とBSAとのコンジュゲートを作製した。次いで、このコンジュゲートを、リン酸緩衝液50mM、pH7.5中の15DMSOに対する透析によって室温で精製した。その後、DMSOの割合を、10、5、及び0と段階的に低下させた。最後の透析は、4°Cでリン酸緩衝液に対して行った。精製したリスペリドン[14]-BSAコンジュゲートを、UV/VIS分光法によって特徴付けした。例6aリスペリドン[9]に対するポリクローナル抗体の調製10匹の雌のBALB/cマウスを、完全フロイントアジュバント中に乳化させた、例4において調製したような、100μg/マウスのリスペリドン[9]-KLH免疫原で腹腔内に免疫化した。これらのマウスに、初回注射の4週間後に、不完全フロイントアジュバント中に乳化させた100μg/マウスの同一の免疫原で追加免疫を1回行った。追加免疫の20日後に、ポリクローナル抗体を含有する、各マウスからの試験採血を眼窩出血によって得た。この試験採血を、遠心分離によって分画して抗血清を得た。リスペリドン[9]-KLH免疫原に対するポリクローナル抗体を含有する、これらの試験採血からの抗血清を、例8a及び9において評価した。例6bリスペリドン[9]に対するモノクローナル抗体の調製4において調製したリスペリドン[9]-KLHで免疫化した例6aからのマウスを、モノクローナル抗体の産生に使用した。モノクローナル抗体の場合は、融合の3日前から始めて、例4において調製した、PBS/DMSO中の400μg融合の3日前、200μg融合の2日前、及び200μg融合の1日前のリスペリドン[9]-KLHを該マウスに腹腔内注射した。脾細胞を、選択したマウスから単離して、Coligan,J.E.etal.,eds.,CurrentProtocolsinImmunology,2.5.1-2.5.8,1992,WileySons,NYの方法に従って、50のポリエチレングリコール1500を用いて2×107のSP2/0細胞で融合させた。この融合細胞を、10枚の96ウェルプレート上の、20のFetalCloneI、2のL-グルタミン100mM及び2の50XHATを補ったDMEM/F12中に播種した。2週間から3週間後に、このハイブリドーマ上清を、例8bにおけるようなELISAによって抗リスペリドン抗体の存在について試験した。陽性のELISA結果例8bが得られたウェルからの細胞を、24ウェルプレートに展開した。ELISAによって陽性のクローンを、Coligan,J.E.etal.,eds.,CurrentProtocolsinImmunology,2.5.8-2.5.17,1992,WileySons,NY中に開示されている方法に従って、限界希釈によって2回サブクローン化した。選択したサブクローンからのモノクローナル抗体を含有するハイブリドーマ培養液上清を、競合ELISA例9によってリスペリドンの結合について確認した。これらのモノクローナル抗体を、例9に記載のような間接的競合マイクロタイタープレートアッセイによって、リスペリドン結合及び主なリスペリドン代謝産物である7-ヒドロキシリスペリドンに対する交差反応性について試験した。例7aリスペリドン[9]-BSAコンジュゲートでのマイクロタイタープレート感作方法リスペリドン濃度を測定するためのELISA法を、タンパク質結合用に最適化されており、プレートあたり96個のウェルを含む、ポリスチレンマイクロタイタープレートNuncMaxiSorpF8Immunomodules中で行った。各ウェルを、0.05Mの炭酸ナトリウム、pH9.6中に10μg/mLのリスペリドン[9]-BSAコンジュゲートを300μL添加して、室温で3時間インキュベートすることによって、例5aにおけるように調製したリスペリドン[9]-BSAコンジュゲートでコーティングした。これらのウェルを0.05Mの炭酸ナトリウム、pH9.6で洗浄し、次いで、375μLの5ショ糖、0.2カゼインナトリウム溶液で室温で30分間ブロッキングした。後からコーティングした溶液を除去した後に、このプレートを37°Cで一晩乾燥させた。例7bリスペリドン[14]-BSAコンジュゲートでのマイクロタイタープレート感作方法リスペリドン濃度を測定するためのELISA法を、タンパク質結合用に最適化されており、プレートあたり96個のウェルを含む、ポリスチレンマイクロタイタープレートNuncMaxiSorpF8Immunomodules中で行った。各ウェルを、0.05Mの炭酸ナトリウム、pH9.6中に10μg/mLのリスペリドン[14]-BSAコンジュゲートを300μL添加して、室温で3時間インキュベートすることによって、例5bにおけるように調製したリスペリドン[14]-BSAコンジュゲートでコーティングした。これらのウェルを0.05Mの炭酸ナトリウム、pH9.6で洗浄し、次いで、375μLの5ショ糖、0.2カゼインナトリウム溶液で室温で30分間ブロッキングした。後からコーティングした溶液を除去した後に、このプレートを37°Cで一晩乾燥させた。例8a抗体スクリーニング法-力価タイターこの方法は、例9におけるような置換について試験する抗体又は抗血清の希釈率を見出すためのものである。例6において作製したリスペリドン抗体をスクリーニングするためのELISA法を、例7a及び7bにおいて調製したリスペリドン-BSAコンジュゲートで感作したマイクロタイタープレートを用いて行った。抗体スクリーニングアッセイは、ポリクローナルリスペリドン抗体を含有する、例6におけるような試験採血からのネズミ科動物の血清を、0.1のBSA及び0.01のチメロサールを含有するリン酸緩衝生理食塩水中で1:2,000、1:6,000、1:15,000及び1:54,000容積/容積に希釈することによって行った。モノクローナル抗体の評価では、例8bの方法によって抗体の存在について陽性であることが見出された、例6bのハイブリドーマ上清を、0.1のBSA及び0.01のチメロサールを含有するリン酸緩衝生理食塩水中で1:2、1:4、1:16等容積/容積に希釈した。例7a及び7bにおいて調製したリスペリドン-BSAで感作したウェルの各ウェルに、0.1のBSA及び0.01のチメロサールを含有する50μLのリン酸緩衝生理食塩水及び50μLの希釈した抗体を添加し、振盪しながら室温で10分間インキュベートした。このインキュベート中に、抗体が、ウェル中に受動的に吸収されたリスペリドン-BSAコンジュゲート例7a及び7bに結合する。プレートのウェルを、0.02MのTRIS、0.9のNaCl、0.5のTween-80及び0.001のチメロサール、pH7.8で3回洗浄し、結合していない抗体をすべて除去した。ウェル中でリスペリドン-BSAコンジュゲートに結合したリスペリドン抗体の量を検出するために、ネズミ科動物の免疫グロブリンと特異的に結合することができ、基質本例ではTMBと共に培養したときに着色生成物を生成することができる、ヤギの抗マウス抗体-HRP酵素コンジュゲートJacksonImmunoresearchを、0.1のBSA、0.05のANS、0.01のチメロサールを含むPBS中で特定の活性約1/3000まで希釈して、これを各ウェルに100μL添加した。振盪しながら室温で10分間インキュベートし、この間にヤギ抗マウス抗体-HRP酵素コンジュゲートがウェル中でリスペリドン抗体に結合し、その後、これらのプレートを再び3回洗浄して、結合していないヤギ抗マウス抗体-HRP酵素コンジュゲートを除去した。ウェル中で測定可能な発色をさせるために、洗浄後に、HRPの基質であるTMBTMBSubstrate、BioFxを100μL添加して、振盪しながら室温で10分間インキュベートしている間に発色させた。発色のためのインキュベート後に、50μLの停止液diH2O中1.5のフッ化ナトリウムを各ウェルに添加して発色を停止させ、20秒間振盪した後に、650nmにおいて吸光度を決定したMolecularDevicesPlateReader。1ウェル中の抗体の量は、測定された吸光度に比例し、希釈率力価として表され、1.5の吸光度という結果になった。力価は、測定された抗体の抗体希釈率x軸対吸光度650nmy軸をグラフ化して、1.5の吸光度における力価を補間することによって決定した。1.5の吸光度が得られたこの力価により、例9に記載の間接的競合マイクロタイタープレートアッセイにおいて使用する抗体の濃度希釈率を決定した。例8b抗体スクリーニング法-モノクローナルスクリーニング例6bにおいて作製したリスペリドンモノクローナル抗体をスクリーニングするためのELISA法を、例7aに記載のリスペリドン-BSAで感作したマイクロタイタープレートを用いて行った。例7において調製したリスペリドン-BSAで感作したウェルの各ウェルに、0.1のBSA及び0.01のチメロサールを含有する50μLのリン酸緩衝生理食塩水及び次いで50μLのモノクローナル培養液上清を添加し、振盪しながら室温で10分間インキュベートした。このインキュベート中に、抗体が、ウェル中でリスペリドン-コンジュゲートに結合する。プレートのウェルを、0.02MのTRIS、0.9のNaCl、0.5のTween-80及び0.001のチメロサール、pH7.8で3回洗浄し、結合していない抗体をすべて除去した。ウェル中のリスペリドン-BSAコンジュゲートに結合したリスペリドン抗体の量を検出するために、ネズミ科動物の免疫グロブリンと特異的に結合することができ、基質本例ではTMBと共に培養したときに着色生成物を生成することができる、ヤギの抗マウス抗体-HRP酵素コンジュゲートJacksonImmunoresearchを、0.1のBSA、0.05のANS、0.01のチメロサールを含むPBS中で1/3000に希釈して、これを各ウェルに100μL添加した。振盪しながら室温で10分間インキュベートし、この間にヤギ抗マウス抗体-HRP酵素コンジュゲートがウェル中でリスペリドン抗体に結合し、その後、これらのプレートを再び3回洗浄して、結合していないヤギ抗マウス抗体-HRP酵素コンジュゲートを除去した。ウェル中で測定可能な発色をさせるために、洗浄後に、HRPの基質であるTMBTMBSubstrate、BioFxを100μL添加して、振盪しながら室温で10分間インキュベートしている間に発色させた。発色のためのインキュベート後に、50μLの停止液diH2O中1.5のフッ化ナトリウムを各ウェルに添加して発色を停止させ、10秒間振盪した後に、650nmにおいて吸光度を決定したMolecularDevicesPlateReader。1ウェル中の抗体の量は、測定された吸光度に比例した。バックグラウンドの3倍より大きい吸光度を有する試料が陽性であるとされた。例6bに記載のように、最大吸光度を有する50試料を24ウェルプレートに展開した。例9間接的競合マイクロタイタープレートイムノアッセイ法リスペリドンに対する抗体のIC50及び交差反応性の決定IC50値及び交差反応性を決定するためのELISA法を、例7a及び7bに記載のリスペリドン-BSAコンジュゲートで感作したマイクロタイタープレートを用いて行った。検体、すなわちリスペリドン及びパリペリドン、並びにこれらの不活性な代謝産物である7-ヒドロキシリスペリドン及びN-デアルキルリスペリドンを、例7aにおけるようにリスペリドン[9]-BSAマイクロタイタープレートを使用するときには1から10,000ng/mLの濃度範囲にわたって、又は例7bにおけるようにリスペリドン[14]-BSAマイクロタイタープレートを使用するときには0.5から1,000ng/mLにわたって、diH2O中に希釈した。それぞれのアッセイは、50μLの検体溶液を、例4の免疫原で例6aにおいて産生されたポリクローナル抗体から選択される抗血清のうちの1種の50μL又は例6bにおいて産生されたモノクローナル抗体から選択されるうちの1種の50μLと共にインキュベートすることによって行った。これらのアッセイは全て、ウェルのそれぞれにおいて、抗血清又はモノクローナル抗体の濃度を、例8aにおいて決定されたタイターに希釈することによって行った。振盪しながら室温で10分間のインキュベート中に、例7a及び7bにおいて作製したウェル中のリスペリドン-BSAコンジュゲートと、溶液中の検体とに対する抗体結合の競合が生じる。このインキュベート後に、プレートのウェルを、0.02MのTRIS、0.9のNaCl、0.5のTween-80及び0.001のチメロサール、pH7.8で3回洗浄し、結合しなかった物質をすべて除去した。例7a及び7bにおいて作製したウェル中のリスペリドン-BSAコンジュゲートに結合したリスペリドン抗体の量を検出するために、ネズミ科動物の免疫グロブリンと特異的に結合することができ、基質本例ではTMBと共に培養したときに着色生成物を生成することができる、ヤギの抗マウス抗体-HRP酵素コンジュゲートJacksonImmunoresearchを、0.1のBSA、0.05のANS、0.01のチメロサールを含むPBS中で予め決定された特定の活性約1/3000まで希釈して、これを各ウェルに100μL添加した。振盪しながら室温で10分間インキュベートし、この間にヤギ抗マウス抗体-HRP酵素コンジュゲートがウェル中でリスペリドン抗体に結合し、その後、これらのプレートを再び3回洗浄して、結合していない二次コンジュゲートを除去した。ウェル中で測定可能な発色をさせるために、洗浄後に、HRPの基質であるTMBTMBSubstrate、BioFxを100μL添加して、振盪しながら室温で10分間のインキュベートにおいて発色させた。発色のためのインキュベート後に、50μLの停止液diH2O中1.5のフッ化ナトリウムを各ウェルに添加して発色を停止させ、20秒間振盪した後に、650nmにおいて吸光度を決定したMolecularDevicesPlateReader。1ウェル中の抗体の量は、測定された吸光度に比例し、試料中のリスペリドンの量に反比例した。リスペリドン及びパリペリドンのIC50値は、ウェル中の吸光度をウェル中の検体濃度に対してプロットした、用量反応曲線を構築することによって決定した。検体を含有するウェルにおける色の吸光度を検体を含まないものと比較して、標準曲線を作成した。所与の検体のIC50値は、検体を含有しないウェルの吸光度の50を有するのに必要な検体の濃度として定義された。交差反応性は、パリペリドンのIC50に対するリスペリドンのIC50の比として算出しており、百分率として表した。このプールの抗体で測定したときには、リスペリドンと相対したパリペリドンについての百分率での交差反応性は、100±20であった。下記の表Iに、リスペリドンに対するポリクローナル抗体についての結果がある。表IIに、リスペリドンに対するモノクローナル抗体についての結果がある。これらの表からわかるように、本発明の抗体は、活性型のリスペリドンと実質的に選択的に反応性であり、同様に、活性な代謝産物であるパリペリドンと実質的に交差反応性であり、不活性な代謝産物である7-ヒドロキシリスペリドン及びN-デアルキルリスペリドンとの低い交差反応性を有する。"