"下記式Iの放射性フッ素化された化合物を得るための方法であって、i下記式Iaの前駆体化合物を準備し、ii前記式Iaの前駆体化合物を適切な[18F]-フッ化物源と反応させ、iiiステップiiで得られた反応混合物を精製することを含み、前記精製ステップが、a1以上の固相抽出SPEカートリッジを準備し、ここで吸着物質は10~120μmの直径及び結合された炭化水素を有する粒子を含み、b前記1以上のSPEカートリッジをコンディショニングし、c前記1以上のコンディショニングされたSPEカートリッジに反応混合物をロードし、d前記混合物をロードした前記1以上のSPEカートリッジを、100:0~0:100の範囲の比で水:水混和性有機溶媒を含む第1の溶媒系を使用して洗浄し、e前記洗浄ステップに続いて前記1以上のSPEカートリッジを、70:30~0:100の範囲の比で水:水混和性有機溶媒を含む第2の溶媒系を使用して溶出することを含む方法。式中、R1は水素、ハロ又はC13アルコキシであり、R2及びR3は独立してメチル、エチル又はベンジルであるか、又は結合している窒素と共にピロリジニル、ピペリジニル、アゼパニル、又はモルホリニル環を形成し、Y1はCH2、CH2-CH2、CHCH3-CH2、又はCH2-CH2-CH2であり、nは1、2又は3である。式中、R1a3a、Y1a及びmはそれぞれ式IのR13、Y1及びnについて定義された通りであり、各々それと同一であり、LGはスルホネート脱離基である。R1及びR1aが各々C13アルコキシである、請求項1記載の方法。R1及びR1aが各々メトキシである、請求項2記載の方法。R2、R3、R2a及びR3aが各々メチル又はエチルである、請求項1乃至請求項3のいずれか1項記載の方法。R2、R3、R2a及びR3aが各々エチルである、請求項4記載の方法。Y1及びY1aが各々CH2-CH2である、請求項1乃至請求項5のいずれか1項記載の方法。n及びmが各々2である、請求項1乃至請求項6のいずれか1項記載の方法。LGがトシレート、トリフレート及びメシレートから選択される、請求項1乃至請求項7のいずれか1項記載の方法。LGがメシレートである、請求項8記載の方法。式Iの前記放射性フッ素化された化合物がであり、式Iaの前記前駆体化合物がである、請求項1乃至請求項9のいずれか1項記載の方法。式中、OMsはメシレートである。ステップiiiで使用する前記1以上のSPEカートリッジが900mg~2.0gの吸着物質を含む、請求項1乃至請求項10のいずれか1項記載の方法。前記1以上のSPEカートリッジが1.5~2.0gの吸着物質を含む、請求項11記載の方法。ステップiiで使用する前記SPEカートリッジの吸着物質が35~60μmの直径分布を有する粒子を含む、請求項1乃至請求項12のいずれか1項記載の方法。ステップiiで使用する前記SPEカートリッジの前記吸着物質の前記結合した炭化水素が18又は30の炭素鎖長を有する、請求項1乃至請求項13のいずれか1項記載の方法。前記方法のステップiiで使用する前記第1及び第2の水混和性有機溶媒系の前記水混和性有機溶媒がエタノールEtOH及びアセトニトリルMeCNから選択される、請求項1乃至請求項14のいずれか1項記載の方法。前記水混和性有機溶媒がEtOHである、請求項15記載の方法。前記第1の溶媒系が、各々65:35~60:40の比の水:EtOHを有する水性EtOHの1以上のアリコート、及び水の1以上のアリコートを含む、請求項16記載の方法。前記第2の溶媒系が、各々60:40~0:100の比の水:EtOHを有する水性EtOHの1以上のアリコートを含む、請求項17記載の方法。前記第1の溶媒系が27mLの40EtOHの第1のアリコート、10mLの35EtOHの第2のアリコート、及び5mLの水の第3のアリコートからなり、前記第2の溶媒系が3mLの50EtOHの第1のアリコート、3mLの65EtOHの第2のアリコート及び3mLの100EtOHの第3のアリコートからなる、請求項17又は請求項18記載の方法。前記第1の溶媒系が22mLの40EtOHの第1のアリコート及び10mLの35EtOHの第2のアリコートからなり、前記第2の溶媒系が3.5mLの55EtOHの第1のアリコート、3.5mLの水の第2のアリコートからなる、請求項17又は請求項18記載の方法。自動化された、請求項1乃至請求項20のいずれか1項記載の方法。i請求項1乃至請求項10のいずれか1項記載の方法で定義された式Iaの前駆体化合物を含有する容器、ii容器を適切な[18F]-フッ化物源で溶出する手段、及びiii請求項1、請求項11乃至14のいずれか1項記載の方法で定義された1以上のSPEカートリッジを含む、請求項21記載の方法を実施するためのカセット。さらに、iv過剰の[18F]-フッ化物を除去するためのイオン交換カートリッジを含む、請求項22記載のカセット。精製を含めて全てのステップが自動放射性合成によって行われるように設計された、18F-標識三環式インドール化合物を製造するための最適化された方法があれば望ましいであろう。本発明は、精製がHPLCではなく固相抽出SPEにより行われる18F-標識三環式インドール化合物を製造する方法を提供する。この方法は、自動放射性合成と共に使用するのに適したカセットで放射性フッ素化方法を実施するのに特に適している。放射性フッ素化方法に加えて、本発明は、自動放射性合成で本方法を実施するように設計されたカセットを提供する。1つの実施形態において、本発明は、次式Iの放射性フッ素化された化合物を得る方法に関する。式中、R1は、水素、ハロ又はC13アルコキシであり、R2及びR3は、独立してメチル、エチル又はベンジルであるか、又はこれらが結合している窒素と共にピロリジニル、ピペリジニル、アゼパニル、又はモルホリニル環を形成し、Y1は、CH2、CH2-CH2、CHCH3-CH2、又はCH2-CH2-CH2であり、nは、1、2又は3である。前記方法は、i下記式Iaの前駆体化合物を準備し、ii前記式Iaの前駆体化合物を適切な[18F]-フッ化物源と反応させ、iiiステップiiで得られた反応混合物を精製することを含む。式中、R1a3a、Y1a及びmはそれぞれ式IのR13、Y1及びnについて定義した通りであり、各々式IのR13、Y1及びnと同一であり、LGは式-O-SO2-R4aを有するスルホネート脱離基であり、ここでR4aはハロゲン、直鎖若しくは枝分れ鎖C110アルキル、直鎖若しくは枝分れ鎖C110ハロアルキル、及びC610アリールである。前記精製ステップは、a1以上の固相抽出SPEカートリッジを準備し、ここで吸着物質は10~120μmの直径及び結合した炭化水素を有する粒子を含み、b前記1以上のSPEカートリッジをコンディショニングし、c前記1以上のコンディショニングされたSPEカートリッジに反応混合物をロードし、d前記混合物がロードされた前記1以上のSPEカートリッジを、水:水混和性有機溶媒の比が100:0~0:100の範囲である第1の溶媒系を用いて洗浄し、e前記洗浄ステップ後、前記1以上のSPEカートリッジを、水:水混和性有機溶媒の比が70:30~0:100の範囲である第2の溶媒系を用いて溶出することを含む。用語ハロゲン又はハロは、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素から選択される置換基を意味する。特に断らない限り、用語アルコキシは、エーテル結合を含むアルキル基を意味する。用語アルキルは、一般式CxH2x1を有する直鎖又は枝分れ鎖基、例えばメチル、エチル、及びプロピルを意味する。用語エーテル結合は基-C-O-C-をいう。適切なアルキルオキシ基の例には、メトキシ、エトキシ、エトキシエチル、及びプロポキシがある。用語メチルは、xが1である上記定義の式CxH2x1のアルキル基をいう。用語エチルは、xが2である上記定義の式CxH2x1のアルキル基をいう。用語ベンジルは、一価の芳香族基C6H5CH2-をいう。芳香族基は、π電子の数が4z2に等しい共役炭化水素基であり、ここでzは正の整数又はゼロであるHuckel則。この規則は、sp2-混成炭素原子のみからなる炭化水素化合物に当てはまる。用語ピロリジニルは、分子式C4H8Nを有する、4つの炭素原子と1つの窒素原子を含有する五員脂肪族複素環をいう。脂肪族基は、非環式又は環式であって、芳香族でない。用語ピペリジニルは、分子式C5H10Nを有する、5つの炭素原子と1つの窒素原子を含有する六員の脂肪族複素環をいう。用語アゼパニルは、分子式C6H12Nを有する、5つの炭素原子と1つの窒素原子を含有する七員の脂肪族複素環をいう。用語モルホリニルは、分子式C4H8NOを有する、4つの炭素原子、1つの窒素原子及び1つの酸素原子を含有する六員の脂肪族複素環をいう。前駆体化合物は、放射性標識された化合物の非放射活性の誘導体であって、都合のよい化学的形態の検出可能な標識との化学反応が、位置特異的に起こり、最小数のステップ理想的には単一のステップで行うことができ、しかも有意な程度の精製を理想的にはさらなる精製を全く必要とすることなく、所望のインビボイメージング剤が得られるように設計されている。かかる前駆体化合物は合成品であり、良好な化学的純度で好都合に得ることができる。用語脱離基は、一般に、親核性置換に適した部分をいい、不均一結合開裂において電子対と共に脱離する分子の断片である。本発明においては、前駆体化合物と[18F]-フッ化物の反応の結果、前駆体化合物のスルホネート脱離基の親核性置換が起こる。用語[18F]-フッ化物は、陰イオン18Fを指す。用語固相抽出SPEは、液体移動相といわれるに溶解又は懸濁した溶質の、混合物を目的とする成分と目的としない成分に分離するために試料を通過させる固体固定相又は吸着物質といわれるに対する親和性を利用する化学的分離技術をいう。結果として、試料中の目的とする対象分析物又は目的としない不純物のいずれかが吸着物質上に保持される。吸着物質を通過する部分は、目的とする分析物又は目的としない不純物を含有するか否かに応じて回収又は処分される。吸着物質上に保持された部分が目的とする分析物を含んでいる場合は、吸着物質を適当な溶出液で濯ぐ追加のステップで回収のために分析物を吸着物質から取り出すことができる。吸着物質は通例、細長いカートリッジ本体内の2つの多孔質媒体層の間に詰められて固相抽出SPEカートリッジを形成しており、ここで1以上のSPEカートリッジは自動放射性合成と共に使用するのに適したカセット内に含まれ得る。典型的なSPEカートリッジは医療用プラスチック、例えばポリプロピレンから作成され、ルアーチップを備えた注射筒を含んでおり、フリットが吸着物質を注射筒内に保持している。吸着物質は、特異的な官能基が結合されている、通例シリカ系の粒子を含む。本発明の場合、吸着物質は、10~120μmの直径を有する粒子を含むのが適切である。吸着物質粒子に結合される官能基は可変の長さの炭化水素鎖である。SPEカートリッジ吸着物質として典型的な炭化水素鎖の長さはC2、C8、C18及びC30である。用語コンディショニングは、試料この場合反応混合物をロードする前にSPE吸着物質を溶媒で濯ぐステップをいう。本発明の場合、コンディショニングステップは通例、水混和性の有機溶媒、次に水又は水性緩衝液の適用を含む。用語反応混合物は、式Iaの前駆体化合物と適切な[18F]-フッ化物源との反応の粗生成物をいう。例えば、反応混合物は、1以上のコンディショニングされたSPEカートリッジにロードする前にHPLCのような何らかの精製ステップに付されることはない。従って、精製ステップは、反応混合物に対する全体の精製プロセスである。コンディショニングされたSPEカートリッジに反応混合物をロードするという場合の用語ロードするとは、単に、反応混合物をカートリッジに、又は1より多くのカートリッジの場合は連続したカートリッジの最初のものに適用することをいう。用語精製するとは、所望の化学化合物を不必要な化学化合物と共に含む混合物から所望の化学化合物を分離するプロセスを意味する。本発明において、用語精製するとは、特に、上記定義のSPEにより精製することをいい、HPLCは特に除かれる。精製する目的は、できるだけ多くの不必要な化学化合物とできるだけ少ない所望の化学化合物を除去して、できるだけ高い割合の精製された生成物を含む化学組成で所望の化学化合物を得ることである。特に本発明の場合、精製された生成物は、式Ia:式Iの化合物の比が20:80~0:100の範囲であるのが適切である。実際には、0:100の比は達成できないであろうから、およそ10:90~1:99の比が目標とされ、5:95~1:99の範囲の比が好ましい。最も好ましくは、式Iaの前駆体化合物に加えて他の不純物が除去される。式Iの放射性フッ素化された化合物は陽電子放出断層撮影PETトレーサーとしてインビボでの使用が意図されているので、哺乳類の身体に毒性の影響を有し得るあらゆる不純物を除去する必要がある。また、式Iの放射性フッ素化された化合物がその生物学的標的に最も有効に結合するためには、同じ生物学的標的に対して結合親和性を有するあらゆる不純物をできるだけ多く除去するのが望ましい。精製ステップの結果、できるだけ大きな式Iの放射性フッ素化された化合物の保持率が得られるべきであり、適切には≧75、好ましくは≧90、最も好ましくは≧95である。用語洗浄するとは、反応混合物から不必要な不純物、すなわち本発明の場合反応混合物中の式Iの放射性フッ素化された化合物以外のあらゆる化学化合物を除去するように適合されたSPE手順のステップをいう。特に、式Iaの未反応化合物を全て除去することが望まれる。用語溶媒系は、特定の濃度の単一アリコートの溶媒、又は異なる濃度を有する複数アリコートの溶媒のいずれかをいう。前記第1の溶媒系は、水混和性有機溶媒の濃度が各々の次のアリコートで低下する複数アリコートの溶媒を含むのが適切である。前記第2の溶媒系は、水混和性溶媒の濃度が第1の溶媒系に使用されるアリコートのいずれよりも高い1以上のアリコートを含むのが適切である。本発明の場合アリコートの容量は、適切には1~50mL、通例5~30mLであることができる。用語水混和性有機溶媒とは、室温、大気圧において水と共に均質な溶液を容易に形成する水以外の溶媒をいう。適切な水混和性有機溶媒の例には、エタノール、メタノール、イソプロパノール、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド及びギ酸がある。例えば、溶媒系は、35水性エタノールの1以上のアリコート、また40水性エタノールの1以上のアリコート及び55水性エタノールの1以上のアリコートからなることができよう。用語溶出するとは、SPEカートリッジから対象の化合物式Iの放射性フッ素化された化合物を取り出すが、洗浄ステップで除去されない不純物は残すように設計されたSPE手順のステップをいう。式IのR1はC13アルコキシが好ましく、メトキシが最も好ましい。式IのR2及びR3はいずれもメチル又はいずれもエチルであるのが好ましく、いずれもエチルであるのが最も好ましい。式IのY1はCH2-CH2であるのが好ましい。式Iで、nは2であるのが好ましい。式IaのR1aはC13アルコキシであるのが好ましく、メトキシが最も好ましい。式IaのR2a及びR3aはいずれもメチル又はいずれもエチルであるのが好ましく、いずれもエチルであるのが最も好ましい。式IaのY1aはCH2-CH2であるのが好ましい。式Iaで、mは2であるのが好ましい。式IaのLGは、トルエンスルホン酸トシレート、ニトロベンゼンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸トリフレート、フルオロスルホン酸、メタンスルホン酸メシレート及びペルフルオロアルキルスルホン酸から選択されるのが好ましい。最も好ましい実施形態において、LGはトシレート、トリフレート又はメシレートであり、メシレートが殊に好ましい。式Iの殊に好ましい放射性フッ素化された化合物において、R1はC13アルコキシであり、好ましくはメトキシであり、R2及びR3はいずれもメチル又はいずれもエチルであり、好ましくはいずれもエチルであり、Y1はCH2-CH2であり、nは2である。式Iaの殊に好ましい前駆体化合物において、R1aはC13アルコキシであり、好ましくはメトキシであり、R2a及びR3aはいずれもメチル又はいずれもエチルであり、好ましくはいずれもエチルであり、Y1aはCH2-CH2であり、mは2であり、LGはトルエンスルホン酸トシレート、ニトロベンゼンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸トリフレート、フルオロスルホン酸、メタンスルホン酸メシレート及びペルフルオロアルキルスルホン酸から選択され、好ましくはトシレート、トリフレート又はメシレートであり、最も好ましくはメシレートである。前記式Iの放射性フッ素化された化合物は好ましくは次式化合物1であり、前記式Iaの前駆体化合物は好ましくは次式化合物1aである。式中、OMsはメシレートである。式I及び式Iaの化合物はキラル中心を有しており、上にはそのラセミ体として示してある。特に好ましい実施形態において、式I及び式Iaの化合物は鏡像異性的に純粋な形態で提供され、好ましくはS-エナンチオマーである。化合物IのS-エナンチオマーは次式の通りであり、化合物IaのS-エナンチオマーは次式の通りである。前記1以上のSPEカートリッジの吸着物質の好ましい粒子直径分布は35~120μm、より好ましくは35~60μm、殊に好ましくは35~55μmである。好ましくは、このサイズ分布内で、1以上のSPEカートリッジの吸着物質は35~40μmの直径を有する粒子を少なくとも幾らか含み、より好ましい吸着物質は35~40μmの直径を有する粒子をより大きな割合で含む。さらに、前記吸着物質の結合した炭化水素はC18又はC30の鎖長を有するのが好ましい。また、精製ステップのステップiiiで使用される前記1以上のSPEカートリッジは300mg~3.0gの吸着物質、最も好ましくは1.5~2.0gの吸着物質を含むのが好ましい。この量の吸着物質は一般に1~3のSPEカートリッジ、通例2つのSPEカートリッジとして提供することができる。例えば、特に好ましい実施形態において、各々900mgの吸着物質を有する2つのSPEカートリッジが提供される。本発明の方法の精製ステップで使用するのに適した市販のSPEカートリッジの非限定例には、例えば、WaterstC18SepPakPlus900mg、WatersC18SepPakPlus360mg、VarianBondElute500mg、MachereyNagelC18ec530mg、PrincetonC30950mgがある。これら市販のSPEカートリッジの中で好ましいのはWaterstC18SepPakPlus900mg、VarianBondElute500mg及びPrincetonC30950mgであり、WaterstC18SepPakPlus900mgが最も好ましい。前段落に記載したSPEカートリッジの好ましい実施形態は、本発明の方法が化合物1aの放射性フッ素化により化合物1を得ることに関する場合、特に好ましい。好ましくは、本発明の方法の精製ステップにおいて、前記第1及び第2の水混和性有機溶媒系の前記水混和性有機溶媒はエタノールEtOH、アセトニトリルMeCN、メタノール及びイソプロパノールから選択される。好ましくは、第1の溶媒系は65:35~60:40の水:水混和性有機溶媒の比を有し、すなわち35~40の水性水混和性有機溶媒を有する1以上のアリコートを含み、第1の溶媒系で使用される各々次のアリコートはより低い濃度の水混和性有機溶媒を有し、例えば第1のアリコートが40の水性水混和性有機溶媒で、次の第2のアリコートが35の水性水混和性有機溶媒である。好ましくは、前記第1のアリコートの容量は前記第2のアリコートより大きく、例えば前記第1のアリコートが20~30mLで、前記第2のアリコートが5~15mLである。好ましくは、前記第2の溶媒系は各々が60:40~0:100の比で水:水混和性有機溶媒を有する、すなわち40~100の水性水混和性有機溶媒を有する水性水混和性有機溶媒の1以上のアリコートを含む。最も好ましくは、前記第2の溶媒系は1以上のアリコートを含み、水混和性有機溶媒の濃度は第1の溶媒系内のいずれのアリコートより高い。例えば、前記第2の溶媒系は好ましくは50~80、最も好ましくは50~70、最も好ましくは50~60の範囲の濃度の水混和性有機溶媒を有する1以上のアリコートを含む。前記第1及び第2の溶媒系はまた最終アリコートとして水のアリコートも含み得る。前記第1及び第2の水混和性有機溶媒系の最も好ましい水混和性有機溶媒はEtOHである。最も好ましくは、EtOHが前記水混和性有機溶媒である場合、前記第1の溶媒系において第1のアリコートは40水性水混和性有機溶媒であり、第2のアリコートは35水性水混和性有機溶媒であり、場合によりその次の第3のアリコートが水であり、前記第2の溶媒系において第1のアリコートは50~60水性EtOHであり、場合によりその後の前記第1のアリコートより高いEtOH濃度を有するアリコートが続く。本発明の方法の精製ステップで使用するのに特に好ましい溶媒系の非限定例を下記表に示す値は水中の水混和性有機溶媒であり、前記有機溶媒は好ましくはEtOHである。溶媒系に関する、上の段落に記載した好ましい実施形態は、本発明の方法が化合物1aの放射性フッ素化により化合物1、特にそのS-エナンチオマーを得ることに関する場合特に好ましい。本発明の方法は、主として、反応混合物からできるだけ多くの式Iaの未反応前駆体化合物を除去することを目的とする。好ましい実施形態において、本発明の方法は付加的な不純物も除去する。特に、本発明の方法が化合物1aの放射性フッ素化により化合物1を得ることに関する場合、本発明の方法で90~98の前駆体化合物及び85~90のヒドロキシ不純物が除去され、痕跡量のみのビニル不純物が残ることが実験例によって示された。ヒドロキシ及びビニル不純物はそれぞれ次式の通りである。さらに注目に値する不純物はアセチル不純物であり、これは次式の構造を有する。式Iaの前駆体化合物の製造に適した方法は国際公開第2010/109007号に詳細に記載されている。例えば、LGがメシレートである前駆体化合物は市販の出発材料から次のスキーム1に示す一般的な方法に従って製造することができる。上記スキーム1及び下記スキーム1aにおいて、可変基R1a3a及びY1aは式Iaに関して本明細書で適切にかつ好ましく提供されている通りである。スキーム1中のR5aはCH2CH2OBnを表し、Bnはベンジルであり、Etはエチルであり、OTsはトシレート脱離基を表し、IPAはイソプロピルアルコールを意味し、OMsはメシレート脱離基を表す。また、式Iaの前駆体化合物のR1aが環の頂上位置にある場合、下記スキームIaに示す一般的な合成経路を使用することができる。スキーム1aにおいて、Bnはベンジルであり、THFはテトラヒドロフランであり、KHMDSはカリウムメチルメチルジシラザンであり、eqは当量を意味し、EtAcは酢酸エチルである。得られるヒドロキシル化合物は、例えばメタンスルホネート脱離基の付加のためのメタンスルホニルクロリドとの反応によって式Iaの前駆体化合物に容易に変換することができる。[18F]-フッ化物は通常核反応18Op,n18Fにより水溶液として得られる。フッ化物の反応性を増大し、かつ水の存在の結果得られるヒドロキシル化された副生成物を回避するために、通例反応の前に[18F]-フッ化物から水を除去し、フッ素化反応を無水の反応溶媒Aigbirhioら1995JFluorChem;70:279-87を用いて行う。[18F]-フッ化物からの水の除去は裸の[18F]-フッ化物を作成することといわれる。放射性フッ素化反応のための[18F]-フッ化物の反応性を改良するために使用されるさらなるステップは、水の除去前に陽イオン性対イオンを加えることである。適切には、対イオンは、[18F]-フッ化物の溶解性を維持するのに充分な無水反応溶媒内への溶解性を保有するべきである。従って、通例使用される対イオンには、ルビジウム又はセシウムのような大きいが軟らかい金属イオン、Kryptofix商標のようなクリプタンドと錯体を形成したカリウム、又はテトラアルキルアンモニウム塩があり、Kryptofix商標のようなクリプタンドと錯体を形成したカリウム、又はテトラアルキルアンモニウム塩が好ましい。これらのステップによって反応性にされた[18F]-フッ化物は本発明において適切な[18F]-フッ化物源を意味するものである。特に[18F]-放射性トレーサーは今や自動放射性合成装置で好都合に製造されることが多い。Tracerlab商標及びFASTlab商標GEHealthcareLtdを始めとするかかる装置の幾つかの市販の例がある。かかる装置は一般に、放射性合成を実行するために装置に嵌め込まれて放射化学が行われる、多くの場合使い捨てのカセットを含む。カセットは通常流体通路、反応容器、及び試薬バイアル並びに放射性合成後のクリーンアップステップで使用される固相抽出カートリッジを受容するための口を含んでいる。従って、好ましい実施形態において、本発明の方法は自動化される。さらに、さらなる局面において、本発明は、自動化された合成装置で本発明の方法を実施するためのカセットを提供し、ここで前記カセットは、i本発明の方法に対して本明細書で定義された式Iaの前駆体化合物を含有する容器、ii適切な[18F]-フッ化物源で容器を溶出するための手段、及びiii本発明の方法に対して本明細書で定義された1以上のSPEカートリッジを含む。本発明の方法に関して本明細書に記載した式Iaの前駆体化合物、[18F]-フッ化物及びSPEカートリッジの適切な、好ましい、最も好ましい、殊に好ましい、最も殊に好ましい実施形態の全ては本発明のカセットにも適用される。本発明のカセットは、さらに、iv過剰の[18F]-フッ化物の除去のためのイオン交換カートリッジを含み得る。ここで、以下の非限定実施例によって本発明を例証する。実施例の簡単な説明実施例1は、SPEスクリーニング実験のための添加物入り試料の製造について記載する。実施例2は、SPEスクリーニング実験について記載する。実施例3は、SPE精製実験のための崩壊したFASTLab粗製試料の調製について記載する。実施例4は、粗製物1のSPE精製について記載する。実施例5は、粗製物2のSPE精製について記載する。実施例6は、粗製物3のSPE精製について記載する。実施例7は、粗製物4及び5のSPE精製について記載する。実施例8は、粗製物6のSPE精製について記載する。実施例9は、FASTlabカセットでのSPE精製を含めて、実施した幾つかのFASTlab実験について記載する。実施例で使用する略語のリストaq水性DADダイオードアレイ検出器ESIエレクトロスプレイイオン化EtOHエタノールHPLC高速液体クロマトグラフィーLC-MS液体クロマトグラフィー質量分析MeCNアセトニトリルMS質量分析SPE固相抽出UV紫外実施例1SPEスクリーニング実験用の添加物入り試料の調製非放射活性の化合物1及び化合物1aを、それぞれ国際公開第2010/109007号の実施例2及び1に記載されている方法に従って調製した。各々の添加物入り試料を調製するために、1mgの化合物1aを秤量し、1mLのMeCNに溶解した。次に、100μlの化合物1のストック溶液1mg/mL、50:50のH2O:MeCN中を加えた。その後、下記実施例2に記載する実験に使用する前に、試料を1mLの水で希釈した。実施例2SPEスクリーニング実験~25μgの化合物1式Iの化合物及び1mgの化合物1a式Iaの化合物を含有する試料を調製した。50aqMeCN中の2mLの試料を各実験に使用した。試料の適用前に、3mLのEtOHを用いてカートリッジを活性化し、10mLの水を用いて平衡化し、真空にして乾燥した。洗浄ステップに続いて、カートリッジを真空にすることで乾燥した後、3mLのEtOHを用いて溶出し、再び真空にして乾燥した。様々な画分の分析を、230nm、270nmでのUV検出、DAD検出及びMS検出によるAgilent1100Series,OSLC016を備えたHPLCで行った。使用したカラムはZorbaxStableBondC181.8μm4.6×50mmであり、移動相はA:水中0.1HCOOH、B:80MeCN中0.1HCOOHであった。流量は1mL/minであり、カラムオーブンは40°Cに設定した。次の勾配を使用した。化合物1について作成した標準曲線に基づいて化合物1及び化合物1aの量を見積もった。分析はまた、ESIイオン化モードのAgilent単一TOFLC-UV/MS及び70Vのフラグメンター電圧を用いたLC-MSでも行った。検出は230nm、270nmでのUV、DAD検出及びMS検出でも行った。カラムはZorbaxStableBondC181.8μm4.6×50mmであり、移動相は水中0.1HCOOH、B:80MeCN中0.1HCOOHであった。流量は1.5mL/minであり、カラムオーブンは40°Cに設定した。次の勾配を使用した。下記表に、行った実験及び得られた結果を要約して示す。実施例3SPE精製実験用のFASTLab粗製試料の調製各々のFASTLab粗製試料の調製のために、一般に、FASTLabカセットを、溶出液バイアル、QMAカートリッジ予めコンディショニングした、Waters、前駆体バイアル及びMeCNバイアルと共に組み立てた。FASTLab試料を調製するために、FASTLabプロセスを標識ステップまで行った後、粗製物ほぼ1.3mLのMeCNを分析まで貯蔵するためにバイアルに移した。非放射活性試験のため、フッ化物なしで標識ステップを行った。ここで、各試料に関するさらなる詳細を提供するする。粗製物1GEPETraceサイクロトロンから得られた120.6MBqの[18F]フッ化物を水で1.5mLにし、FASTLab合成器GEHealthcareに導入し、QMAカートリッジ上にトラップした。825μL溶出溶液MeCN/水80/20、v/v中のKHCO3kryptofixを使用して、[18F]フッ化物をQMAカートリッジから反応容器に溶出した。次に、反応容器中の物質を120°Cで10分乾燥した後、1.6mLのMeCNに溶解した4.0mgの化合物1aを反応容器に移した。標識化を100°Cで15分行った。標識化後反応容器の中身1.3mLのMeCN中をバイアルに移し、室温で1日崩壊させた後、分析するまで冷凍室に貯蔵した。500μLのMeCN中の500μLの崩壊した粗製物に40μLの1.1mg/mLの化合物1を添加した後、1mLの水で希釈した。このうち2mLを、実施例4に記載する実験に用いた。粗製物2及び3粗製物1について記載したプロセスを実施した。但し、i18F-フッ化物をQMAカートリッジ上にトラップする代わりに1.5mLの水をQMAカートリッジに通し、ii825μLの溶出溶液ではなく1200μLの溶出溶液を使用し、iii乾燥は100°Cで20分とし、iv標識反応ステップのために1.6mLのMeCN中の3.2mgの化合物1aを反応容器に移した。2つの実験用に試料を調製した。各試料に対して、500μLの粗製物MeCN中に20μLの化合物1溶液50:50H2O:MeCN中1.24mg/mLを添加した後、1mLの水で希釈した。各々の溶液2mLを、実施例5及び6に記載する実験のためにSPEカラムにロードした。粗製物4粗製物2及び3の調製について記載したプロセスを実施した。但し、1.6mLのMeCN中の3.1mgの化合物1aを標識反応ステップに使用した。500μLの粗製物MeCN中に20μLの化合物1溶液50:50H2O:MeCN中1.24mg/mLを添加した後、1mLの水で希釈した。この溶液2mLを、実施例7に記載する実験のためにSPEカラムにロードした。粗製物5粗製物2及び3の調製について記載したプロセスを実施した。但し、1.6mLのMeCN中の4.8mgの化合物1aを標識反応ステップに使用した。500μLの粗製物MeCN中に20μLの化合物1溶液50:50H2O:MeCN中1.24mg/mLを添加した後1mLの水で希釈した。この溶液2mLを実施例7に記載する実験のためにSPEカラムにロードした。粗製物6粗製物2及び3の調製について記載したプロセスを実施した。但し、1.6mLのMeCN中3.5mgの化合物1aを標識反応ステップに使用した。500μLの粗製物MeCN中に20μLの化合物1溶液50:50H2O:MeCN中1.24mg/mLを添加した後1mLの水で希釈した。この溶液2mLを実施例8に記載する実験のためにSPEカラムにロードした。下記表に、この実施例に従って調製し、実施例4~8でSPEカートリッジに適用されるFASTLab粗製試料中の主要な成分の量μgを詳細に示す。実施例4粗製物1のSPE精製2×900mgWaterstC18SPEカートリッジを連続して使用した。カートリッジを3mLのEtOHで活性化し、10mLの水で平衡化し、真空にして乾燥した。次に、2mLの粗製物1実施例3に記載したように調製をカートリッジに適用した。カートリッジをまず27mLの40aqEtOHで、次に10mLの35aqEtOHで、次いで5mLの水で洗浄した。その後カートリッジを真空にして乾燥した後、3mLのEtOHを用いて溶出し、さらに乾燥ステップに付した。様々な画分の分析を、上記実施例2に記載したようにHPLCで行った。下記表に、各々のステップでカートリッジから得られた各々の成分の量をμgで詳細に示す。ほぼ80の化合物1a及び30のヒドロキシが27mLの40aqEtOHでの洗浄中に除去される。他の20の化合物1a及び30のヒドロキシが35EtOH合計10mLでの洗浄中に除去される。小量のみの化合物1a及びヒドロキシが5mLの水による洗浄中に除去される。溶出液にはヒドロキシ/化合物1a/化合物1/ビニルが18/3/36/43の比で残る。予想通り、ビニルは化合物1より遅く溶出するので除去されない。実施例5粗製物2のSPE精製実施例4に記載した方法を2mLの粗製物2実施例3に記載したように調製に対して用いた。但し、溶出は3mLの50aqEtOH、3mLの60aqEtOH、3mLの70aqEtOH及び3mLの80aqEtOHを用いて行った。下記表に、各々のステップでカートリッジから得られた各々の成分の量をμgで詳細に示す。化合物1は主として3mLの60aqEtOHで溶出したが、幾らかの化合物1は3mLの50aqEtOH及び3mLの70aqEtOHでも観察された。85のビニルが3mLの70aqEtOHで、最後の15が3mLの80aqEtOHで溶出した。溶出前かつ5mLの水での洗浄の後の50aqEtOHによる洗浄がヒドロキシの除去に効果的であることが示された。実施例6粗製物3のSPE精製実施例5に記載した方法を使用して2mLの粗製物3実施例3に記載したように調製を精製した。但し、3mLの50aqEtOHステップを、3mLの40aqEtOHステップ、それに続く3mLの65aqEtOH及び3mLの100EtOHに変えた。下記表に、各々のステップ後にカートリッジから得られた各々の成分の量をμgで詳細に示す。ヒドロキシの除去は実施例5に記載した方法と比較して減少するが、化合物1の損失は少ないのが観察された。化合物1は主として3mLの65aqEtOH洗浄で溶出した。実施例7粗製物4及び5のSPE精製粗製物4及び5を、実施例4に記載した方法を用いて精製した。但し、3mLのEtOHステップを、3mLの50aqEtOH、次いで3mLの65EtOH、次に3mLの100EtOHに換え、これらの各ステップに続いて真空の適用により乾燥した。下記表に、粗製物4に関して各々のステップ後カートリッジから得られた各々の成分の量をμgで詳細に示す。下記表に、粗製物5に関して各々のステップ後カートリッジから得られた各々の成分の量をμgで詳細に示す。粗製物4と粗製物5に対する実験は類似の傾向を示した。27mLの40aqEtOHによる洗浄後、ほぼ60~70の化合物1aがほぼ10のヒドロキシ不純物と共に除去された。35aqEtOHによる10mLの洗浄で化合物1aの残りの殆どが除去された。粗製物5注入した試料中の化合物1aの総量は1.7mgでは合計90が除去され、粗製物4注入した試料中の化合物1aの総量は0.9mgでは98が除去された。この洗浄後合計40~50のヒドロキシが除去された。5mLの水により、ヒドロキシ及び化合物1aの両方がさらに洗い流された。3mLの50aqEtOHによる洗浄で、別の35のヒドロキシ及び小量の化合物1aが除去された。3mLの65aqEtOHは、50/50の化合物1/ヒドロキシ並びに微量の化合物1a及びビニルを含有していた。これは、ほぼ85~90のヒドロキシがこの手順中に除去されたことを意味する。ビニル不純物は主としてカートリッジにトラップされ、100のEtOHで溶出される。粗製物5は粗製物4と比べて殆ど二倍のμgの化合物1aを含有するが、結果は同等である。この方法では、両方の粗製物中のほぼ全ての化合物1aを除去することができた。実施例8粗製物6のSPE精製注入された試料に生成物が添加されてないときの溶出液の組成を検討するために実験を行った。SPE精製は、粗製物6実施例3に記載したように調製に対して、粗製物4及び5の精製について実施例7に記載した方法で実施した。下記表に、各々のステップ後カートリッジから得られた各々の成分の量をμgで詳細に示す。表は、溶出液の組成見積もられた量に基づく[μg]がヒドロキシル/前駆体/生成物/ビニル=90/6/4/0であることを示している。表に挙げた比は230nmのピークの下の面積に基づいている。標準曲線に含まれる最も低い値は0.115μgであった。実施例9FASTlab試験化合物1のS-エナンチオマーの幾つかのバッチを生産するためにFASTlabプロセスを実施した。GEPETraceサイクロトロンでH218Oから得られた80GBqまでの[18F]フッ化物をFASTLab合成器GEHealthcareに導入し、QMAカートリッジ上にトラップした。ほぼ475μlの溶出溶液KHCO3kryptofix、MeCN/水80/20v/v中を使用して、[18F]フッ化物をQMAカートリッジから反応容器中に溶出した。次に、反応容器中の物質を120°Cで9分間乾燥した後、1.6mLのMeCNに溶解した4.0mgの化合物1aを反応容器に移した。標識化は100°Cで6分間行った。各々の場合に、標識化の後、反応混合物を、FASTlabカセット上でその場でコンディショニングされた連続する2つの900mgのWaterstC18SPEカートリッジの第1のものに適用し、22mLの40EtOH、続いて10mLの35EtOHからなる第1の溶媒系と、3.5mLの55EtOH及び3.5mLの水からなる第2の溶媒系とを用いてSPE精製プロセスを実施した。図1は、実施した試験の詳細、例えば初期活性、合成の未補正UEOS収率、放射能濃度RAC、放射化学濃度RCP、並びにSPEプロセスで分離された各々の化合物全てS-エナンチオマー化合物の量を提供する。95を超えるRCP値が常に達成された。"