"リソソーム酸性リパーゼLAL欠乏症を有するヒト患者を治療する方法であって、組み換えヒトLALを前記患者に投与することを含み、前記投与は、肝機能を改善するのに十分である、方法。前記投与は、肝臓試験を正常化するのに十分である、請求項1に記載の方法。前記投与は、肝腫大を最小にするのに十分である、請求項1または2に記載の方法。前記投与は、肝臓の大きさを減少させるのに十分である、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、肝臓トランスアミナーゼの血清レベルを減少させるのに十分である、請求項1~4のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、脂質レベルを減少させるのに十分である、請求項1~5のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、トリグリセリドレベルを減少させるのに十分である、請求項1~6のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、コレステリルエステルを減少させるのに十分である、請求項1~7のいずれか一項に記載の方法。LAL欠乏症を有するヒト患者のLAL活性を増大させる方法であって、組み換えヒトLALを前記患者に投与することを含み、前記投与は、前記患者におけるLAL活性の増大を結果としてもたらす、方法。前記投与は、前記患者のLAL活性を少なくとも約35pmol/mg/分だけ増大させるのに十分である、請求項9に記載の方法。治療を必要とする患者においてLAL欠乏症に関連する状態を治療する方法であって、有効量の外因性LALタンパク質を前記患者に5日に1回~30日に1回投与することを含む、方法。治療を必要とする患者においてLAL欠乏症に関連する状態を治療する方法であって、7日に1回~14日に1回投与される、1キログラム当り0.1mg~50mgの用量の外因性LALを前記患者に投与することを含む、方法。治療を必要とする患者においてLAL欠乏症に関連する状態を治療する方法であって、1キログラム当り約0.1mg~5.0mgの用量の外因性LALを前記患者に投与することを含む、方法。治療を必要とするヒト患者においてウォルマン病またはCESDを治療する方法であって、5日に1回~30日に1回投与される、1キログラム当り約0.1mg~50mgの用量の外因性LALを前記患者に投与することを含む、方法。前記外因性LALは、組み換えヒトLALである、請求項11~14のいずれか一項に記載の方法。前記外因性LALは、少なくとも1つのマンノースまたはマンノース-6-リン酸塩を含む、請求項11~15のいずれか一項に記載の方法。前記LALは、約0.10mg/kg~約5.0mg/kgの量で投与される、請求項1~12または請求項14~16のいずれか一項に記載の方法。前記量は約0.30mg/kgである、請求項17に記載の方法。前記量は約0.35mg/kgである、請求項17に記載の方法。前記量は約1.0mg/kgである、請求項17に記載の方法。前記量は約3.0mg/kgである、請求項17に記載の方法。前記投与は、ほぼ毎週のものである、請求項1~21のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、約2週間に一度のものである、請求項1~21のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、治療前のレベルから少なくとも50だけ血清アスパラギン酸トランスアミナーゼASTのレベルを減少させるのに十分である、請求項1~23のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、治療前のレベルから少なくとも50だけ血清アラニントランスアミナーゼALTのレベルを減少させるのに十分である、請求項1~24のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、約17分未満のLAL半減期t1/2を達成するのに十分である、請求項1~25のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、約6分、約7分、約8分、約9分、約10分、約11分、約12分、約13分、約14分、約15分、約16分、または約17分のLAL半減期t1/2を達成するのに十分である、請求項1~26のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、血清1mL当り少なくとも約200ngのCmaxを達成するのに十分である、請求項1~27のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、血清1mL当り約200ng~血清1mL当り約800ngのCmaxを達成するのに十分である、請求項1~28のいずれか一項に記載の方法。前記LALは、線維芽細胞によって内在化される、請求項1~29のいずれか一項に記載の方法。前記LALは、マクロファージによって内在化される、請求項1~30のいずれか一項に記載の方法。前記LALは、遺伝子導入鳥類によって産生される、請求項1~31のいずれか一項に記載の方法。前記LALは、哺乳類細胞系によって産生される、請求項1~31のいずれか一項に記載の方法。前記哺乳類細胞系は、ヒト細胞系である、請求項33に記載の方法。前記投与は、静脈内のものである、請求項1~34のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、点滴によるものである、請求項35に記載の方法。前記点滴は、約2時間~約4時間にわたるものである、請求項36に記載の方法。前記点滴は、約0.1mg/kg/時間~約4mg/kg/時間の速度である、請求項36または37に記載の方法。前記投与は、前記組み換えヒトLALに対する免疫応答を最小にする、請求項1~38のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、リンパ節腫大を減少させる、請求項1~39のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、血清フェリチンレベルを減少させるのに十分である、請求項1~40のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、血清ヘモグロビンレベルを増大させるのに十分である、請求項1~41のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、小児患者の成長を増進させるのに十分である、請求項1~42のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、体重増加の速度を上昇させるのに十分である、請求項1~43のいずれか一項に記載の方法。投与後の前記患者の成長速度は、前記投与前の前記患者の成長速度の少なくとも約2倍である、請求項1~44のいずれか一項に記載の方法。前記投与は、脂肪組織を増大させるのに十分である、請求項1~45のいずれか一項に記載の方法。前記患者は、1歳未満である、請求項1~46のいずれか一項に記載の方法。前記患者は、少なくとも1歳である、請求項1~46のいずれか一項に記載の方法。前記患者は、ウォルマン病WDと診断された、請求項1~48のいずれか一項に記載の方法。前記患者は、コレステリルエステル蓄積症CESDと診断された、請求項1~49のいずれか一項に記載の方法。前記CESDは、10歳より前に診断された、請求項50に記載の方法。第2の治療薬を投与することをさらに含む、請求項1~51のいずれか一項に記載の方法。前記第2の治療薬は、コレステロール減少剤である、請求項52に記載の方法。前記第2の治療薬は、スタチンである、請求項53に記載の方法。前記第2の治療薬は、エゼチミブである、請求項53に記載の方法前記第2の治療薬は、LALの免疫原性を減少させる、請求項52に記載の方法。前記第2の治療薬は、抗ヒスタミン剤である、請求項52に記載の方法。前記第2の治療薬は、免疫抑制剤である、請求項52に記載の方法。前記抗ヒスタミン剤は、前記LALが投与される前に投与される、薬学的有効用量のジフェンヒドラミンである、請求項57に記載の方法。前記ジフェンヒドラミンの用量は、1キログラム当たり約1mg~約5mgである、請求項59に記載の方法。前記ジフェンヒドラミンは、LALの投与の約20分前~約90分前に投与される、請求項59または60に記載の方法。前記患者の臨床的な提示および病理学的な提示を監視するための評価を完了することをさらに含む、請求項1~61のいずれか一項に記載の方法。前記評価は、脂質分析、胸部X線、肝機能試験、糞便チャート、血漿メバロン酸分析、免疫原性試験、血漿リソソーム酸性リパーゼ分析、キトトリオシダーゼ分析、門脈圧亢進分析、人体測定、肝臓または脾臓の特徴づけ、胃腸管の画像化またはこれらの組み合わせである、請求項62に記載の方法。前記画像化の技術は、超音波、磁気共鳴画像法または核磁気共鳴分光である、請求項63に記載の方法。請求項1~64のいずれか一項に記載の方法にしたがってLALを投与するための組成物。本発明は、患者が外因性LALで正常に投与された最初のヒト臨床例症に基づく。LAL欠乏症ウォルマン病または早発性LAL欠乏症の他の致命的な形態に罹患する乳児が、外因性LALを投与することによって効果的に治療され、LAL酵素置換療法の安全評価が、遅発性LAL欠乏症に罹患するヒト患者群で評価された。早発性LAL欠乏症を有する乳児は、いずれの有害事象または有害反応を引き起こすことなく、毎週低用量を投与された。有効性についての生命徴候および臨床/実験測定値の劇的な改善は、早ければ初期投与後1~2週で観察された。4ヶ月を超える毎週投与後、治療された乳児は、正常な成長を回復し、吸収不良、肝腫大、および肝機能を含むLAL欠乏症に関連する全ての症状において著しい改善を示した。遅発性成人患者も、有害事象の兆しもなく、毎週低量の外因性LALを投与された。したがって、今まで収集された臨床データは、本発明の外因性LALを使用した酵素置換療法がLAL欠乏症に対して安全かつ効果的な治療を提供することを示す。したがって、本発明は、有効量の外因性リソソーム酸リパーゼLALを投与することにより、ヒト患者のLAL欠乏症に関連する疾患または状態を治療する方法を提供する。外因性LALは、少なくとも1つのマンノースおよび/またはマンノース-6-リン酸塩を含むN結合グリカン構造を有する組み換えヒトLALであり得る。外因性LALは、例えばリンパ球、マクロファージ、および/または線維芽細胞のリソソーム中に効果的に内在化される。一部の実施形態では、LAL欠乏症に罹患するヒト患者は、ウォルマン病WDと診断される。一実施形態では、投与は、WD患者の成長を増加させるのに十分である。一実施形態では、投与は、WD患者の正常な成長を回復するのに十分である。他の実施形態では、LAL欠乏症に罹患する患者は、コレステリルエステル蓄積症CESDと診断される。本発明による治療方法は、あらゆる年齢のヒト患者に提供され得る。肝機能を改善するために有効量で組み換えヒトLALを患者に投与することにより、LAL欠乏症に罹患するヒト患者を治療するための方法も、本明細書において提供する。一部の実施形態では、投与は、肝臓試験を正常化するのに十分である。一実施形態では、投与は、肝臓トランスアミナーゼの血清レベルを減少させるのに十分である。例えば、肝臓トランスアミナーゼは、血清アスパラギン酸トランスアミナーゼASTおよび/またはアラニントランスアミナーゼALTを含んでもよい。一実施形態では、投与は、肝腫大を最小にするのに十分である。一実施形態では、投与は、患者の肝臓の大きさを減少させるのに十分である。一実施形態では、投与は、血清フェリチンレベルを減少させるのに十分である。一実施形態では、投与は、例えば、コレステリルエステルCEおよび/またはトリグリセリドTGレベルを含む血清脂質レベルを減少させるのに十分である。LAL欠乏症を有するヒト患者のLAL活性を増加させる方法も提供する。そのような方法は、投与が、例えばリンパ球および/または線維芽細胞で測定され得るLAL活性の増加をもたらすように、組み換えヒトLALを患者に投与することを含む。一実施形態では、5日に1回~30日に1回、有効量の外因性LALタンパク質を患者に投与することにより、ヒト患者のLAL欠乏症に関連する状態を治療する方法を説明する。一部の実施形態では、LAL欠乏症に罹患するヒト患者は、体重1キログラム当り約0.1mg~約50mgの外因性LALを投与される。一実施形態では、ヒト患者は、体重1キログラム当り約0.1mg~約10mgの外因性LALを投与される。一実施形態では、ヒト患者は、体重1キログラム当り約0.1mg~約5mgの外因性LALを投与される。一実施形態では、点滴速度は、約0.1mg/kg/時間~約4mg/kg/時間である。一部の実施形態では、ヒト患者は第2の治療薬で治療される。第2の治療薬は、例えば、コレステロール低下剤例えばスタチンもしくはエゼチミブ、抗ヒスタミン剤例えばジフェンヒドラミン、または免疫抑制剤を含んでもよい。本発明は、外因性リソソーム酸リパーゼの投与に応答する疾患または状態に罹患するヒトを治療するための方法を提供する。定義便宜上、本明細書、実施例、および付属の特許請求の範囲に利用される特定の用語は、本発明を説明するために使用される様々な用語の意味および範囲を図示ならびに定義するために、本明細書に明記される。本明細書で使用されるLALとは、リソソーム酸リパーゼを指し、この2つの用語は、本明細書全体を通して互換的に使用される。LALは、ヒトタンパク質、即ち、ヒトリソソーム酸リパーゼであり得る。本明細書で使用されるSBC-102という用語は、組み換えヒトリソソーム酸リパーゼを指す。LALは、文献において、酸コレステリルエステル加水分解酵素、コレステリルエステラーゼ、リパーゼA、LIPA、およびステロールエステラーゼとも称される。LALは、コレステロール、グリセロール、および遊離脂肪酸を取り除くために、コレステロールエステルおよびトリグリセリドの加水分解を触媒する。よって、LAL活性は、例えば、蛍光基質であるオレイン酸4-メチルウンベリフェリル4MUOの切断により測定され得る。4MUOの切断は、例えば、放出されたフルオロフォアである4-メチルウンベリフェロン4MUの約360nmでの励起、および460nmでの発光により検出され得る。結果は、相対的な蛍光単位RFUで報告され得る。例えば、30分のエンドポイントアッセイで切断された基質の量は、4MU標準曲線に対して定量化され得、活性の1単位Uは、37°Cで1分当り1マイクロモルの4MUOを切断するために必要とされる酵素の量として定義され得る。したがって、LALの機能断片または変異体は、LAL活性、例えばコレステロールエステルおよび/もしくはトリグリセリドを加水分解する能力を有する断片または変異体を含む。本明細書で使用される外因性LALとは、患者によって自然に産生されないLALを指す。例えば、外因性LALは、患者に投与される組み換えLALタンパク質、個人または動物から単離され、患者に投与されるLALタンパク質、ならびにLALをコードするRNAおよび/もしくはDNAの投与または外因性LALタンパク質の発現を増加させる別の治療の結果として患者に産生される即ち、発現するLALタンパク質を含む。多くの場合医学的にIVプッシュIVpushまたはボーラス注入とも称される静脈内注入は、シリンジがIVアクセスデバイスに接続され、薬物が直接、典型的には迅速に、そして静脈の過敏または非常に迅速な作用をもたらすかもしれない場合、最大15分の期間、時折注入される投与経路を指す。薬品がIV管類の液体流の中に注入されると、管類から患者に達することを確実にする何らかの手段がなければならない。通常、これは、液体流を正常に流動させ、それによって、薬品を血流の中に送ることにより達成される。しかしながら、いくつかの場合において、薬品が血流の中に入るのを容易にするために、第1の注入後、時折フラッシュと呼ばれる第2の流体注入が使用される。静脈内点滴とは、薬物が長期間にわたって送達される投与経路を指す。例えば、薬物は、1~8時間の時間期間にわたって患者に送達され得る。薬物はまた、約1時間、約2時間、約3時間、約4時間、約5時間、約6時間、約7時間、または約8時間にわたって患者に送達され得る。静脈内点滴を達成するために、IV重力滴下またはIVポンプが使用され得る。IV点滴は、典型的に、患者が特定の時間にのみ薬物を必要とし、用量が電解質、血糖、および水の損失回復するもの等の、追加の静脈内流体例えば、ナトリウム、塩化物、グルコース、またはそのいずれかの組み合わせを必要としないときに使用される。本明細書に使用される鳥という用語は、これらに限定されないが、ニワトリ、シチメンチョウ、アヒル、ガチョウ、ウズラ、キジ、オウム、フィンチ、タカ、カラス、およびダチョウ、エミュー、およびヒクイドリを含む走鳥類等の、分類学鳥類の生物のいずれの種、亜種、または種族を指す。本用語は、様々な既知のガルスガルス、またはニワトリ例えば、ホワイトレグホーンWhiteLeghorn、ブラウンレグホーンBrownLeghorn、バードロックBarred-Rock、サセックスSussex、ニューハンプシャーNewHampshire、ロードアイランドRhodeIsland、オーストラロープAustralorp、ミノルカMinorca、アムロックスAmrox、カルフォルニアグレイCaliforniaGrayの系統、ならびにシチメンチョウ、キジ、ウズラ、アヒル、ダチョウ、および商業的規模で一般的に飼育される他の家禽の系統を含む。それはまた、胚形成期および胎仔期を含む、全ての発育段階の個々の鳥生物も含む。家禽由来または鳥由来という用語は、家禽から産生された、またはそれから得られた組成物または物質を指す。家禽とは、これらに限定されないが、ニワトリ、アヒル、シチメンチョウ、ウズラ、および走鳥類を含む、家畜として飼育され得る鳥類を指す。例えば、家禽由来とは、ニワトリ由来、シチメンチョウ由来、および/またはウズラ由来を指してもよい。本明細書で使用される患者とは、例えば、医療提供者により医療もしくは治療を受ける、または受けた、または受ける予定のいずれの個人を指す。本明細書で使用される治療有効用量とは、意図される治療応答を産生するのに必要とされる薬物の用量例えば、量および/または間隔を指す。治療有効用量とは、そのような用量を受けなかった対応する対象と比較して、疾患、障害、もしくは副作用の治療、治癒、防止、または軽減の改善、あるいは疾患もしくは障害の発生または進行の速度の減少をもたらす用量を指す。本用語はまた、その範囲内で、生理学的機能を強化するために有効な用量も含む。治療する治療treatingすることおよび治療treatmentという用語は、予防的に、および/または症状が生じた後のいずれかに、疾患もしくは症状を緩和する、寛解する、または軽減する、さらなる症状を防止する、根底にある症状の原因を軽減する、または防止する、疾患もしくは状態を阻害する、疾患もしくは状態の進行を阻止する、疾患もしくは状態を和らげる、疾患もしくは状態の後退をもたらす、疾患もしくは状態によってもたらされた状態を和らげる、または疾患もしくは状態の症状を停止させる方法を指す。特定の用量に関して本明細書で使用されるkg-1、1kg当り/kg、および1キログラム当りとは、哺乳類の体重1キログラム当りを表し、よって、本用語は、互換的に使用され得る。本明細書で使用されるポリペプチドという用語は、単数のポリペプチドならびに複数のポリペプチドを包含することが意図され、アミド結合ペプチド結合としても知られるにより直鎖状に結合されたモノマーアミノ酸から構成される分子を指す。ポリペプチドという用語は、2つ以上のアミノ酸のいずれの鎖または複数の鎖を指し、産物の特定の長さを指すものではない。よって、ペプチド、ジペプチド、トリペプチド、オリゴペプチド、タンパク質、アミノ酸鎖、または2つ以上のアミノ酸の鎖もしくは複数の鎖を指すために使用される他のいずれかの用語は、ポリペプチドの定義内に含まれ、ポリペプチドという用語は、これらの用語のいずれかの代わりに、またはそれと互換的に使用され得る。ポリペプチドという用語は、非限定的に、グリコシル化、アセチル化、リン酸化、アミド化、既知の保護/遮断基による誘導体化、タンパク質分解の切断、または自然に生じないアミノ酸による修飾を含む、ポリペプチドの発現後の修飾の産物を指すことも意図される。ポリペプチドは、自然の生物学的起源に由来するか、または組み換え技術によって産生され得るが、指定された核酸配列から必ずしも翻訳されない。それは、化学合成を含む、いずれの手段で生成され得る。本明細書で使用される2つのアミノ酸配列または2つのヌクレオチド配列間の相同性パーセントは、2つの配列間の同一性パーセントと等しい。2つの配列間の同一性パーセントは、配列によって共有される同一位置の数の関数即ち、相同性=同一位置の/位置の総×100であり、2つの配列の最適な整合のために導入される必要があるギャップの数および各ギャップの長さを考慮する。2つの配列間の配列の比較および同一性パーセントの決定は、非限定的な以下の実施例に記載されるように、数学的アルゴリズムを使用して達成され得る。2つのアミノ酸配列間の同一性パーセントは、PAM120重量残基表、12のギャップ長ペナルティ、および4のギャップペナルティを使用してALIGNプログラムバージョン2.0に組み込まれた、E.MeyersおよびW.MillerComput.Appl.Biosci.,4:11-171988のアルゴリズムを使用して決定され得る。加えて、2つのアミノ酸配列間の同一性パーセントは、Blossom62マトリクスまたはPAM250マトリクスのいずれか、および16、14、12、10、8、6、または4のギャップ重量および1、2、3、4、5、または6の荷重lengthweightを使用して、GCGソフトウェアパッケージhttp://www.gcg.comで入手可能のGAPプログラムに組み込まれた、NeedlemanおよびWunschJ.Mol,Biol.48:444-4531970アルゴリズムを使用して決定され得る。単離されたポリペプチド、またはその断片、変異体、もしくは誘導体により、その自然環境にはないポリペプチドが意図される。特定のレベルの精製は必要ない。例えば、単離されたポリペプチドは、その天然または自然環境から除去される。宿主細胞で発現する、組み換えにより産生されたポリペプチドおよびタンパク質は、いずれの適切な技法により分離、画分、または部分的もしくは実質的に精製された天然または組み換えポリペプチドであるため、本明細書に開示されるように単離されたと考えられる。本明細書で開示される他のポリペプチドは、前述のポリペプチドの断片、誘導体、類似体、または変異体、およびそれらのいずれかの組み合わせである。本明細書に開示されるポリペプチドのいずれかを指すとき、断片、変異体、誘導体、および類似体という用語は、対応する天然のポリペプチド例えば、コレステロールエステルおよび/またはトリグリセリドを加水分解する能力を保持するLALポリペプチド断片、変異体、誘導体、および類似体の活性の少なくとも一部を保持するいずれかのポリペプチドを含む。ポリペプチドの断片は、例えば、タンパク質分解の断片ならびに欠失断片を含む。ポリペプチドの変異体は、上述の断片、およびアミノ酸置換、欠失、または挿入により、変更されたアミノ酸配列を有するポリペプチドも含む。変異体は、自然に生じるか、または自然に生じなくてもよい。自然に生じない変異体は、当該技術分野に公知の変異誘発法を使用して産生され得る。変異体ポリペプチドは、保存もしくは非保存アミノ酸置換、欠失、または付加を含んでもよい。誘導体は、自然ポリペプチドで見られない追加特徴を示すように変更されたポリペプチドである。例としては融合タンパク質が挙げられる。変異体ポリペプチドは、本明細書において、ポリペプチド類似体とも称され得る。本明細書で使用される対象ポリペプチドの誘導体は、官能側基の反応により化学的に誘導された1つ以上の残基を含有してもよい。20の標準アミノ酸のうちの1つ以上の自然に生じるアミノ酸を含有するそれらのペプチドも、誘導体として含まれる。例えば、4-ヒドロキシプロリンはプロリンに代えて置換され得る、5-ヒドロキシリジンはリジンに代えて置換され得る、3-メチルヒスチジンはヒスチジンに代えて置換され得る、ホモセリンはセリンに代えて置換され得る、および/またはオルニチンはリジンに代えて置換され得る。ポリヌクレオチドという用語は、単一核酸ならびに複数の核酸を包含するように意図され、単離された核酸分子または構築物、例えば、メッセンジャーRNAmRNAもしくはプラスミドDNApDNAを指す。ポリヌクレオチドは、従来のリン酸ジエステル結合または特殊結合例えば、ペプチド核酸PNA等に見られるアミド結合を含んでもよい。核酸という用語は、ポリヌクレオチドに存在するいずれかの1つ以上の核酸セグメント、例えば、DNAもしくはRNA断片を指す。単離された核酸またはポリヌクレオチドにより、その天然環境から除去された核酸分子、DNA、またはRNAが意図される。例えば、ベクターに含有されるLALをコードする組み換えポリヌクレオチドは、本発明の目的において単離されたと考えられる。単離されたポリヌクレオチドのさらなる例としては、異種宿主細胞または溶液中の部分的に、または実質的に精製されたポリヌクレオチドに維持される組み換えポリヌクレオチドが挙げられる。単離されたRNA分子は、本発明のポリヌクレオチドの生体内または生体外RNA転写物を含む。本発明による単離されたポリヌクレオチドまたは核酸は、合成的に産生されたそのような分子をさらに含む。加えて、ポリヌクレオチドまたは核酸は、プロモーター、リボソーム結合部位、または転写ターミネーター等の制御エレメントであり得る、またはそれを含んでもよい。本明細書で使用されるコード領域とは、アミノ酸に翻訳されたコドンからなる核酸の一部分である。停止コドンTAG、TGA、またはTAAは、アミノ酸に翻訳されないが、コード領域の一部と考えられてもよい、しかし、いずれの隣接配列、例えばプロモーター、リボソーム結合部位、転写ターミネーター、イントロン等は、コード領域の一部ではない。本発明の2つ以上のコード領域は、例えば単一ベクター上の単一ポリヌクレオチド構築物、または例えば別個の異なるベクター上の別個のポリヌクレオチド構築物に存在してもよい。さらに、いずれのベクターも、単一コード領域を含有するか、または2つ以上のコード領域を含んでもよい。加えて、本発明のベクター、ポリヌクレオチド、または核酸は、LALポリペプチドまたはその断片、変異体、もしくは誘導体をコードする核酸に融合するまたは融合しない、いずれかの異種コード領域をコードすることができる。異種コード領域は、非限定的に、分泌シグナルペプチドまたは異種機能ドメイン等の、特殊エレメントもしくはモチーフを含む。様々な転写調節領域は、当業者に公知である。これらは、これらに限定されないが、サイトメガロウイルスからのプロモーターおよびエンハンサーセグメントイントロンAと共に、即時初期プロモーター、シミアンウイルス40初期プロモーター、およびレトロウイルスラウス肉腫等の、脊椎動物細胞で機能する転写調節領域を非限定的に含む。他の転写調節領域は、アクチン、熱ショックタンパク質、ウシ成長ホルモン、およびウサギβ-グロビン等の脊椎動物遺伝子に由来するもの、ならびに真核生物細胞での遺伝子発現を調節することができる他の配列を含む。さらなる適切な転写調節領域は、組織特異的プロモーターおよびエンハンサーならびにリンホカイン誘発性プロモーター例えば、インターフェロンまたはインターロイキンにより誘発されるプロモーターを含む。同様に、様々な転写調節エレメントが当業者に公知である。これらは、リボソーム結合部位、翻訳開始および終結コドン、ならびにピコルナウイルスに由来するエレメント特に内部リボソーム侵入部位またはIRES、またCITE配列とも称されるを含むが、これらに限定されない。他の実施形態では、本発明のポリヌクレオチドは、例えばメッセンジャーRNAmRNAの形態のRNAである。本発明のポリヌクレオチドおよび核酸コード領域は、本発明のポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドの分泌を指令する、分泌またはシグナルペプチドをコードするさらなるコード領域と関連してもよい。シグナル仮説によると、粗面小胞体にわたって成長タンパク質鎖の輸出が開始されると、哺乳類細胞によって分泌されたタンパク質は、成熟タンパク質から切断されるシグナルペプチドまたは分泌リーダー配列を有する。脊椎細胞によって分泌されたポリペプチドは、一般に、分泌された、または成熟形態のポリペプチドを産生するために、完全または完全長のポリペプチドから切断される、ポリペプチドのN末端に融合したシグナルペプチドを有することを、当業者は認識する。特定の実施形態では、天然のシグナルペプチド、例えばヒトLALのMKMRFLGLVVCLVLWTLHSEG配列番号2シグナルペプチド、またはそれと操作可能に関連するポリペプチドの分泌を指令する能力を保持するその配列の機能性誘導体が使用される。代替的に、異種のシグナルペプチド例えば、異種の哺乳類または鳥のシグナルペプチドまたはその機能性誘導体が使用され得る。例えば、野生型リーダー配列は、ヒト組織プラスミノーゲン活性化因子TPAまたはマウスβグルクロニダーゼのリーダー配列で置換され得る。ベクターとは、一本鎖、二本鎖、環状、または超螺旋DNAもしくはRNAからなるポリヌクレオチドを意味する。典型的なベクターは、機能遺伝子発現を可能にするために適切な距離で操作可能に結合された以下のエレメントから成り得る:複製起源、プロモーター、エンハンサー、5’mRNAリーダー配列、リボソーム結合部位、核酸カセット、終結およびポリアデニル化部位、および選択マーカー配列。これらのエレメントの1つ以上は、特定の用途において省くことができる。核酸カセットは、発現する核酸配列の挿入において制限部位を含んでもよい。機能ベクターにおいて、核酸カセットは、転写開始および終結部位を含む、発現する核酸配列を含有する。任意に、イントロンが構築物に、例えば5’’がコード配列に含まれ得る。ベクターは、特定のコード配列が適切な制御配列を有するベクターに位置するように構築され、調節配列に対して、コード配列が調節または制御配列の調節下で転写されるようなコード配列の位置付けおよび配向である。この目的を達成するために、特定の関心のタンパク質をコードする配列の修飾が望ましい。例えば、一部の場合において、適切な配向を有する調節配列に結合され得るように、配列を修飾する、またはリーディングフレームを維持することが必要であり得る。調節配列および他の制御配列は、ベクターの中に挿入される前にコード配列に結合され得る。代替的に、コード配列は、調節配列を有するリーディングフレームにあり、かつその制御調節下にある調節配列および適切な制御部位を既に含有する発現ベクターの中に直接クローン化され得る。本明細書で使用される発現という用語は、遺伝子が生化学物質、例えばポリペプチドを産生するプロセスを指す。本プロセスは、非制限的に、遺伝子ノックダウンならびに一過性の発現および安定した発現の両方を含む細胞内の機能的な遺伝子の存在のいずれの顕在化を含む。それは、非限定的に、遺伝子のメッセンジャーRNAmRNAへの転写、およびそのようなmRNAのポリペプチド複数可への翻訳を含む。遺伝子の発現は、遺伝子産物を産生する。本明細書で使用される遺伝子産物は、核酸、例えば遺伝子の転写により産生されるメッセンジャーRNA、または転写物から翻訳されるポリペプチドのいずれかであり得る。本明細書に記載される遺伝子産物は、転写後修飾、例えばポリアデニル化を伴う核酸、または転写後修飾、例えばメチル化、グリコシル化、脂質の付加、他のタンパク質サブユニットの会合、タンパク質分解切断等を伴うポリペプチドをさらに含む。本明細書で使用される宿主細胞とは、組み換えDNA技法を使用して構築され、少なくとも1つの異種遺伝子をコードするベクターを持つ細胞を指す。本明細書で使用されるN-グリカン、オリゴ糖、オリゴ糖構造、グリコシル化パターン、グリコシル化プロファイル、およびグリコシル化構造という用語は、基本的に同じ意味を有し、それぞれ、糖残基から形成され、グリコシル化タンパク質に結合される1つ以上の構造を指す。本明細書で使用される薬学的組成物という用語は、本明細書に記載される化合物の、担体、安定剤、希釈剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤、および/または賦形剤等の他の化学成分との混合物を指す。不十分なLAL活性を有する患者本発明をいずれかの特定の状態または状態の群の治療に制限するものではないが、本発明は、患者のリソソーム酸リパーゼLAL欠乏症の治療を含む。本明細書で使用されるLAL欠乏症を有する患者は、不十分なLAL活性を有するあらゆる患者である。患者の不十分なLAL活性は、例えば、低RNAレベル、低タンパク質レベル、または低タンパク質活性の結果であり得る。不十分なLAL活性は、LALコード配列、LAL制御配列、または別の遺伝子例えばLALを制御する遺伝子の変異に起因してもよい。不十分なLAL活性はまた、環境要因の結果であってもよい。本発明は、対象または患者において多様な状態を治療するために使用され得る。したがって、本発明による外因性LALによって有益に治療され得るあらゆる状態が、本発明の範囲内に含まれる。本発明の一実施形態は、リソソーム酸リパーゼの欠乏、特にウォルマン病WDおよびコレステリルエステル蓄積症CESDに起因するリソソーム蓄積症LSDの治療に焦点をあてる。本発明をいずれかの特定の理論または操作機構に制限するものではないが、WDおよびCESDの両方は、LAL遺伝子座の変異によるものであり得、本発明の方法による外因性LALの投与により治療され得る多くの組織のリソソームにおける脂質性物質の大量の蓄積、およびコレステロールおよび脂質の恒常的機序の著しい妨害をもたらす。よって、一実施形態では、本発明により治療されるLAL欠乏症は、WDである。別の実施形態では、本発明により治療されるLAL欠乏症は、CESDである。一部の実施形態では、WDまたはCESDの診断は、遺伝子分析例えば、LALコード配列の機能的変異の識別に基づく。他の実施形態では、WDまたはCESDの診断は、臨床知見例えば、身体検査および/または実験試験に基づく。一部の実施形態では、外因性LALは、非アルコール性脂肪性肝疾患NAFLDおよび非アルコール性脂肪性肝炎NASH等の、様々な状態の合併症を治療するために使用され得る。NAFLDは、過剰なアルコール摂取による肝疾患に類似する組織病理像を有する肝臓の疾患を指す。それは、肝臓の肥大をもたらす大滴性脂肪症を特徴とする。NAFLDは、線維症および肝硬変をもたらす可能性がある炎症ならびに肝臓への損傷に加え、NAFLDに類似する肝疾患を指すNASHに進行する可能性がある。一部の実施形態では、外因性LALは、膵炎、例えば慢性膵炎および/または急性膵炎ならびにアルコール誘発性膵炎等の、アルコール誘発性膵傷害を含む状態を治療するために使用され得る。いずれかの有用な方法によって産生された外因性LALは、これらに限定されないが、肝臓、脾臓、消化管、および心血管組織等の身体組織に脂質エステルの蓄積をもたらす、これらのアルコール誘発性細胞傷害を含むがこれらに限定されないアルコール誘発性細胞傷害による疾患を治療するために使用され得る。本発明によると、吸収不良も外因性LALを投与することにより治療され得る。外因性LALは、タンジール病および家族性低αリポタンパク血症を有する患者の治療にも有用である。タンジール病/家族性低αリポタンパク血症は、外因性LALの投与により治療され得る低HDLレベルと共に、肝脾腫大および/またはリンパ節腫大を伴うマクロファージにおけるコレステロールエステルの蓄積に関連する。例えば、本発明をいずれかの特定の理論または操作機構に制限するものではないが、傷害性LAL活性は、ABCA1発現を減少させてもよく、逆に、タンジール病/家族性低αリポタンパク血症を有する患者に外因性LALを投与することにより得られるLAL活性の増加は、多型の結果として機能的活性の減少を伴うABCA1遺伝子の作用を排除するためにABCA1発現を増加させる。一部の実施形態では、治療前の患者のLAL活性レベルは、LAL活性の正常レベルの約1、約2、約3、約5、約10、約15、約20、約30、約40、約50、約60、約70、または約80である。一実施形態では、治療前の患者のLAL活性レベルは、LAL活性の正常レベルの約50以下である。一実施形態では、治療前の患者のLAL活性レベルは、LAL活性の正常レベルの約40以下である。一部の実施形態では、治療前の患者のLAL活性レベルは、LAL活性の正常レベルの約30以下である。一部の実施形態では、治療前の患者のLAL活性レベルは、LAL活性の正常レベルの約30以下である。一部の実施形態では、治療前の患者のLAL活性レベルは、LAL活性の正常レベルの約20以下である。一部の実施形態では、治療前の患者のLAL活性レベルは、LAL活性の正常レベルの約10以下である。一部の実施形態では、治療前の患者のLAL活性レベルは、LAL活性の正常レベルの約5以下である。一部の実施形態では、患者は、治療前に測定可能なLAL活性を示さない。一部の実施形態では、LAL活性レベルは、LAL欠乏症に罹患するヒト患者より得た培養線維芽細胞中で測定される。一部の実施形態では、LAL活性レベルは、LAL欠乏症に罹患するヒト患者のリンパ球例えば白血球中で測定される。リンパ球は、末梢血単核細胞PMBCを含むが、これに限定されない。測定方法は、例えば、Burtonetal.,1980ClinicaChimicaActa101:25-32およびAndersonetal.,1999Mol.Genet.Metab.,66:333-345に記載されており、その両方はそれらの全体が本明細書に組み込まれる。外因性LALで治療される予定のLAL欠乏患者は、基質としてトリオレインを使用して測定されるように、約30、約20、約10、約5、約4、約3、約2、または約1pmol/mg/分未満である線維芽細胞LAL酵素活性を示してもよい。外因性LALで治療される予定のLAL欠乏患者は、基質としてトリオレインにより測定されるように、約30、約20、約10、約5、約4、約3、約2、または約1pmol/mg/分未満である白血球LAL酵素活性を示してもよい。外因性LALで治療される予定のLAL欠乏患者は、基質としてオレイン酸コレステリルを使用して測定されるように、約30、約20、約10、約5、約4、約3、約2、または約1pmol/mg/分未満である線維芽細胞LAL酵素活性を示してもよい。外因性LALで治療される予定のLAL欠乏患者は、基質としてオレイン酸コレステリルを使用して測定されるように、約30、約20、約10、約5、約4、約3、約2、または約1pmol/mg/分未満である白血球LAL酵素活性を示してもよい。外因性LALの投与本発明は、患者に外因性LALを投与することを含む、外因性LALでヒト患者を治療する方法を提供し、投与は、成長を回復させる、肝機能を改善する、肝臓損傷を減少させる、LALの組織レベルを増加させる、および/または患者のLAL活性を増加させるのに十分である。本発明は、WDおよびCESDを含むLAL欠乏症により生じる状態を治療するのに有用かつ今までに特定されていない外因性LALの投与頻度即ち投与スケジュール、ならびにこれらの状態を治療するための今までに特定されていない投与量を提供する。本発明は、医学分野の専門家により決定された期間の間、5日に1回~30日に1回患者に投与される治療有効用量の外因性LALを提供する。一実施形態では、期間は、患者の余生である。一実施形態では、投与頻度は、5日に1回~25日に1回である。一実施形態では、投与頻度は、5日に1回~21日に1回である。別の実施形態では、投与頻度は、7日に1回~14日に1回である。外因性LALは、5日に1回、6日に1回、7日に1回、8日に1回、9日に1回、10日に1回、11日に1回、12日に1回、13日に1回、または14日に1回投与され得る。一部の実施形態では、外因性LALは、ほぼ毎週投与される。他の実施形態では、外因性LALは、約2週に1回投与される。一実施形態では、投与頻度は、約30日に1回である。状態の治療のために、一般に、投与される外因性LALの量は、受給者の年齢、健康状態、および体重、並行治療の種類、治療の頻度等の既知の要因により変動してもよい。通常活性成分の投与量は、体重1キログラム当り約0.01~約50mgであり得る。一実施形態では、本発明による外因性LALの投与量は、体重1キログラム当り約0.1~約0.5mgである。一実施形態では、用量は、1キログラム当り約0.1mg~約5.0mgである。一実施形態では、用量は、1キログラム当り約0.1mg~約5.0mgである。一実施形態では、用量は、1キログラム当り約0.1、約0.2、約0.25、約0.30、約0.35、約0.40、約0.45、約0.50mgである。一実施形態では、用量は、1キログラム当り約1mg~約5mgである。一実施形態では、用量は、1キログラム当り約1mgである。一実施形態では、用量は、1キログラム当り約3mgである。例えば、体重1キログラム当り0.1mg、体重1キログラム当り0.2mg、体重1キログラム当り0.3mg、体重1キログラム当り0.4mg、体重1キログラム当り0.5mg、体重1キログラム当り1mg、体重1キログラム当り2mg、体重1キログラム当り3mg、体重1キログラム当り4mg、または体重1キログラム当り5mgが投与され得る。一実施形態では、用量は、体重1キログラム当り約1mg~約20mgである。本発明は、本発明の投与スケジュールを利用するとき、他の投与量も含む。例えば、本発明の投与スケジュールによると、体重1キログラム当り約0.1mg~約50mgが患者に投与される。一部の実施形態では、約0.5~約50mgの外因性LALが、例えば1ヶ月~24ヶ月の年齢のウォルマン病を有する患者に投与される。一実施形態では、患者は1歳未満である。別の実施形態では、患者は2歳未満である。一部の実施形態では、約0.1mg、約0.2mg、約0.3mg、約0.4mg、約0.5mg、約1mg、約2mg、約3mg、約5mg、約10mg、約15mg、約20mg、約25mg、約30mg、約35mg、約40mg、約45mgの外因性LALが、ウォルマン病を有する患者に投与される。一部の実施形態では、約0.5~約30mg、約0.5~約20mg、約0.5~約10mg、または約0.5~約5mgが、ウォルマン病を有する患者に投与される。一部の実施形態では、約1~約30mg、約1~約20mg、約1~約10mg、または約1~約5mgが投与される。一部の実施形態では、約1mg~約350mgの外因性LALが、例えばCESDと診断された患者に投与される。よって、一部の実施形態では、約1、5、10、25、50、75、100、125、150、175、200、225、250、275、300、325、または350mgの外因性LALが、CESDを有する患者に投与される。一部の実施形態では、約5~約350mg、約5~約300mg、約5~約250mg、または約5~約200mgが、CESDを有する患者に投与される。一部の実施形態では、約10~約350mg、約10~約300、約10~約250、または約10~約200mgが、CESDを有する患者に投与される。併用治療本明細書に開示される治療用タンパク質は、他の治療剤と組み合わせて使用され得る。本発明は、本発明による外因性LALの投与によって生じ得るいかなるアナフィラキシー反応の可能性を最小にする、または予防するための前治療処置を提供する。一実施形態では、アナフィラキシー反応の可能性を前治療するために、抗ヒスタミン剤例えばジフェンヒドラミンとしても知られるH-1受容体拮抗薬が患者に投与される。一実施形態では、H-1受容体拮抗薬は、体重1キログラム当り約1mg~約10mgの用量で投与される。例えば、抗ヒスタミン剤は、1キログラム当り約5mgの用量で投与され得る。抗ヒスタミン剤の投与は、本発明による外因性LALの投与前であり得る。一実施形態では、H-1受容体拮抗薬は、外因性LALの約10~約90分前、例えば約30~約60分前に投与される。H-1受容体拮抗薬は、血管アクセスポートに接続された携帯型システムを使用して投与され得る。一実施形態では、抗ヒスタミン剤は、外因性LALの投与約90分前に投与される。一実施形態では、抗ヒスタミン剤は、外因性LALの投与約10~約60分前に投与される。別の実施形態では、抗ヒスタミン剤は、外因性LALを投与する約20~約40分前に投与される。例えば、抗ヒスタミン剤は、外因性LALの投与20、25、30、35、または40分前に投与され得る。一実施形態では、投与される抗ヒスタミン剤は、ジフェンヒドラミンである。あらゆる有用な抗ヒスタミン剤が使用され得る。そのような抗ヒスタミン剤は、非限定的に、クレマスチン、ドキシルアミン、ロラタジン、デスロラタジン、フェキソフェナジン、フェニラミン、セチリジン、エバスチン、プロメタジン、クロルフェニラミン、レボセチリジン、オロパタジン、クエチアピン、メクリジン、ジメンヒドリナート、エンブラミン、ジメチンデン、およびデキスクロルフェニルアミンを含む。一実施形態では、抗ヒスタミン剤は、体重1キログラム当り約0.1mg~約10mgの用量で投与される。一実施形態では、抗ヒスタミン剤は、体重1キログラム当り約1mg~約5mgの用量で投与される。例えば、用量は、体重1キログラム当り1mg、2mg、3mg、4mg、または5mgであり得る。抗ヒスタミン剤は、いずれかの有用な方法により投与され得る。一実施形態では、抗ヒスタミン剤は、静脈内投与される。別の実施形態では、抗ヒスタミン剤は、薬学的に許容されるカプセルにおいて投与される。別の実施形態では、静脈内点滴に関して、ランプアッププロトコルを使用して点滴を投与することにより、アナフィラキシー反応の可能性を減少させることができる。これに関して、ランプアッププロトコルは、薬物の点滴に対して患者を脱感作するために、点滴の過程にわたって点滴の速度をゆっくり増加させることを指す。これらに限定されないが、抗ヒスタミン剤、コルチコステロイド、シロリムス、ボクロスポリンvoclosporin、シクロスポリン、メトトレキサート、IL-2受容体指向性抗体、T-細胞受容体指向性抗体、TNF-α指向性抗体、または融合タンパク質例えばインフリキシマブ、エタネルセプト、またはアダリムマブ、CTLA-4-Ig例えばアバタセプト、抗OX-40抗体等の免疫抑制剤は、例えばアナフィラキシー反応または有害免疫応答が予想される、または患者に認められる場合、外因性LAL投与前、投与中、または投与後にも投与され得る。本発明は、1つ以上のコレステロール低下剤例えばHMG-CoAレダクターゼ阻害剤と組み合わせた外因性LAL含有組成物の投与を伴う療法も包含する。そのような薬剤の非限定的な例としては、アトルバスタチンLipitor登録商標およびTorvast登録商標、フルバスタチンLescol登録商標、ロバスタチンMevacor、登録商標Altocor登録商標、Altoprev登録商標、ピタバスタチンLivalo登録商標、Pitava登録商標、プラバスタチンPravachol登録商標、Selektine登録商標、Lipostat登録商標、ロスバスタチンCrestor登録商標、およびシンバスタチンZocor登録商標、Lipex登録商標が挙げられる。外因性LALの作用本発明は、外因性LALでの治療後、疾患関連症状の補正または正常化のために提供される。外因性LALに応答する臨床的進行即ち、状態の改善は、いずれの有用な方法または手順により監視され得る。一部の実施形態では、外因性LALの投与は、約200ng/mL~約1,500ng/mLのCmaxを達成するのに十分である。一部の実施形態では、外因性LALの投与は、約200ng/mL~約1,000ng/mLのCmaxを達成するのに十分である。一部の実施形態では、外因性LALの投与は、約200ng/mL~約800ng/mLのCmaxを達成するのに十分である。一部の実施形態では、外因性LALの投与は、約200ng/mL、約300ng/mL、約400ng/mL、約500ng/mL、約600ng/mL、約700ng/mL、約800ng/mL、約900ng/mL、約1,000ng/mL、約1,250ng/mL、または約1,500ng/mLのCmaxを達成するのに十分である。一部の実施形態では、Cmaxは、点滴中に達する。一部の実施形態では、外因性LALの投与は、40分未満のLAL半減期t1/2を達成するのに十分である。一部の実施形態では、外因性LALの投与は、30分未満のLAL半減期t1/2を達成するのに十分である。一部の実施形態では、外因性LALの投与は、20分未満のLAL半減期t1/2を達成するのに十分である。一部の実施形態では、外因性LALの投与は、15分未満のLAL半減期t1/2を達成するのに十分である。一部の実施形態では、外因性LALの投与は、10分未満のLAL半減期t1/2を達成するのに十分である。一部の実施形態では、外因性LALの投与は、約6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30、35、または40分のLAL半減期t1/2を達成するのに十分である。一部の実施形態では、外因性LALは、患者のLAL活性を増加させる。LAL活性は、例えば、肝臓、脾臓、リンパ腺、大動脈、末梢血白血球、および/または皮膚線維芽細胞で増加することができる。一部の実施形態では、LAL活性は、血液試料から単離されたリンパ球の抽出物において測定される。外因性LALは、LAL活性を、LALの投与前の活性の少なくとも約1.5、約2、約2.5、約3、約4、約5、約6、約7、約8、約9、約10、約15、または約20倍に増加させることができる。外因性LALは、LAL活性を、LALの投与前の活性の少なくとも約10、約11、約12、約13、約14、約15、約16、約17、約18、約19、約20倍に増加させることができる。LAL活性は、例えば、コレステリル1-14C]オレエート、トリオレイングリセロールトリ[1-14C]オレエート、p-ニトロフェニルミリステートまたは4-MUOオレイン酸4-メチルウンベリフェリル基質を使用するアッセイを含む、当該技術分野に公知の方法を使用して評価され得る。一実施形態では、内臓および組織容量ならびに特徴付けは、本発明による外因性LALの投与後の状態の改善を決定するために利用される。一実施形態では、外因性LALの投与後の肝機能/傷害の臨床的進行は、経時的に、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼASTおよび/もしくはアラニントランスアミナーゼALT等の血液トランスアミナーゼの定量化、ならびに/またはアルブミン、アルカリホスファターゼ、およびビリルビン等の他のバイオマーカー直接および総量により監視される。一実施形態では、臨床的進行は、撮像技術を使用して監視される。例えばおよび非限定的に、使用される撮像技術は、超音波、CTスキャン、磁気共鳴映像法、および核磁気共鳴分光法であり得る。一部の実施形態では、本明細書に記載される用量での外因性LALの投与は、ヒト患者の成長を回復させ、かつ/または体重を増加させるのに十分である。外因性LALの投与は、早発性LAL欠乏症に罹患する乳児または小児患者の成長速度即ち、体重増加も増加させることができる。例えば、外因性LALの投与は、投与前に見られる成長速度/速度の少なくとも約10、約20、約30、約40、約50、約60、約70、約80、約90、約100、約200、約300、約400、または約500体重増加の速度を増加させることができる。一部の実施形態では、外因性LALの投与は、約1ヶ月~約24ヶ月の年齢の早発性LAL欠乏症例えばウォルマン病に罹患する小児患者の正常な成長速度を回復させる。この内容において正常とは、医学分野の実施者によって決定される、治療される患者の正常な成長速度を指す。一実施形態では、例えばWDおよびCESDまたは他のLAL欠乏症に関して、肝腫大は顕著に好転し、肝臓の大きさが正常より約1~約60以内の大きさに戻った。この内容において正常とは、医学分野の実施者によって決定される、治療される患者の正常な大きさの肝臓を指す。一実施形態では、肝臓の大きさは、正常より約1~約50大きい大きさに減少する。別の実施形態では、肝臓の大きさは、正常より約1~約40大きい大きさに減少する。一実施形態では、肝臓の大きさは、正常より約1~約30大きい大きさに減少する。別の実施形態では、肝臓の大きさは、正常より約1~約20大きい大きさに減少する。別の実施形態では、肝臓の大きさは、正常より約10~約20大きい大きさに減少する。例えば、肝臓は、正常の大きさより10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、または20大きくてもよい。また別の実施形態では、肝臓の大きさは、正常より約0~約10大きい大きさに減少する。例えば、肝臓は、肝臓の正常な大きさより0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10大きくてもよい。外因性LALを用いた治療は、肝機能も改善することができる。よって、一部の実施形態では、外因性LALを用いた治療は、正常な肝機能を回復し、かつ/または肝臓試験を正常化するのに十分である。一部の実施形態では、外因性LALを用いた治療は、肝臓トランスアミナーゼの血清レベルを、例えば、少なくとも約20、約30、約40、約50、約60、約70、約80、および/または少なくとも約90減少させるのに十分である。一部の実施形態では、外因性LALを用いた治療は、肝臓トランスアミナーゼの血清レベルを少なくとも約40減少させるのに十分である。一部の実施形態では、外因性LALを用いた治療は、肝臓トランスアミナーゼの血清レベルを少なくとも約50減少させるのに十分である。一部の実施形態では、肝臓トランスアミナーゼの血清レベルを少なくとも約60減少させるのに十分である。一部の実施形態では、肝臓トランスアミナーゼの血清レベルを少なくとも約70減少させるのに十分である。一実施形態では、肝臓トランスアミナーゼの血清レベルを少なくとも約80減少させるのに十分である。一実施形態では、肝臓トランスアミナーゼの血清レベルを少なくとも約90減少させるのに十分である。一部の実施形態では、肝臓トランスアミナーゼは、アラニンアミノトランスフェラーゼALTである。一実施形態では、外因性LALの投与は、血清ALTを減少させるのに十分である。例えば、外因性LALの投与は、血清ALTを、例えば、少なくとも約50、60、70、80、または90減少させることができる。血清ALTレベルは、肝傷害の兆候に役立つ。よって、本発明は、血清ALTを減少させるために有効量の外因性LALを投与することにより、LAL欠乏症に罹患するヒト患者の肝傷害を減少させる方法も包含する。一部の実施形態では、肝臓トランスアミナーゼは、血清アスパラギン酸トランスアミナーゼASTである。一実施形態では、外因性LALの投与は、血清ASTを減少させるのに十分である。例えば、外因性LALの投与は、血清ASTを、例えば、少なくとも約50、60、70、80、または90減少させることができる。血清ASTレベルは、肝傷害の兆候に役立つ。よって、本発明は、血清ASTを減少させるために有効量の外因性LALを投与することにより、LAL欠乏症に罹患する患者の肝傷害を減少させる方法も包含する。一部の実施形態では、外因性LALを用いた治療は、血清フェリチンレベルを低下させることができる。よって、一部の実施形態では、外因性LALを用いた治療は、前治療レベルと比較して、血清フェリチンを、例えば、少なくとも約20、30、40、50、60、70、80、90、または95減少させるのに十分である。一実施形態では、外因性LALを用いた治療は、フェリチンの血清レベルを、少なくとも50低下させるのに十分である。さらに別の実施形態では、外因性LALを用いた治療は、フェリチンの血清レベルを少なくとも約60低下させるのに十分である。一実施形態では、外因性LALを用いた治療は、フェリチンの血清レベルを少なくとも約70低下させるのに十分である。一実施形態では、外因性LALを用いた治療は、フェリチンの血清レベルを少なくとも約80低下させるのに十分である。一実施形態では、外因性LALを用いた治療は、フェリチンの血清レベルを少なくとも約90低下させるのに十分である。一実施形態では、外因性LALを用いた治療は、フェリチンの血清レベルを少なくとも約95低下させるのに十分である。一実施形態では、例えばウォルマン病およびCESDまたは他のLAL欠乏症に関して、脾腫大は顕著に好転し、脾臓の大きさが正常より約1~約60以内の大きさに戻った。この内容において正常とは、医学分野の実施者によって決定される、研究される患者の正常な大きさの脾臓を指す。一実施形態では、脾臓の大きさは、正常より約1~約50大きい大きさに減少する。別の実施形態では、脾臓の大きさは、正常より約1~約40大きい大きさに減少する。一実施形態では、脾臓の大きさは、正常より約1~約30大きい大きさに減少する。別の実施形態では、脾臓の大きさは、正常より約1~約20大きい大きさに減少する。別の実施形態では、脾臓の大きさは、正常より約10~約20大きい大きさに減少する。例えば、脾臓は、正常の大きさより10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、または20大きくてもよい。また別の実施形態では、脾臓の大きさは、正常より約0~約10大きい大きさに減少する。例えば、脾臓は、脾臓の正常の大きさより0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10大きくてもよい。一実施形態では、外因性LALの投与は、リンパ節腫大即ち、リンパ節の肥大を減少させるのに十分である。よって、一部の実施形態では、リンパ節は、正常より約1~約60の大きさに減少する。この内容において正常とは、医学分野の実施者によって決定される、研究される患者の正常な大きさのリンパ節を指す。一実施形態では、リンパ節の大きさは、正常より約1~約50大きい大きさに減少する。別の実施形態では、リンパ節の大きさは、正常より約1~約40大きい大きさに減少する。一実施形態では、リンパ節の大きさは、正常より約1~約30大きい大きさに減少する。別の実施形態では、リンパ節の大きさは、正常より約1~約20大きい大きさに減少する。別の実施形態では、リンパ節の大きさは、約10~約20大きい大きさに減少する。例えば、リンパ節は、正常の大きさより10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、または20大きくてもよい。また別の実施形態では、リンパ節の大きさは、正常より約0~約10大きい大きさに減少する。例えば、リンパ節は、リンパ節の正常な大きさより0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10大きくてもよい。別の実施形態では、状態の改善を監視するために、脂質分析が実施される。例えば、脂質分析は、外因性LALの治療効果を評価するために行われ得る。脂質分析は、これらに限定されないが、高性能液体クロマトグラフィー、ガスクロマトグラフィー、質量分光法、もしくは薄層クロマトグラフィー、またはそのいずれかの組み合わせ等の、当業者により適切と判断される有用な方法により、患者の組織試料例えば、血液試料、肝臓生検試料に対して実施され得る。一実施形態では、本発明により実施される脂質分析は、総コレステロール、トリグリセリド、低密度リポタンパク質、高密度リポタンパク質、および/またはコレステリルエステルのレベルを示す。一実施形態では、例えばウォルマン病およびCESDまたは他のLAL欠乏症に関して、本発明により治療される患者の脂質分析は、医学分野の実施者により決定され得る肝臓、脾臓、腸、リンパ節、および/または大動脈の脂質濃度の正常化を示す。脂質レベルは、血漿脂質分析または組織脂質分析を使用して評価され得る。血漿脂質分析において、血漿が採取され得、例えばCOD-PAPキットWakoChemicalsを用いた比色アッセイを使用して総血漿遊離コレステロールレベルが測定され得る、例えばトリグリセリド/GBキットBoehringerMannheimを使用して、総血漿トリグリセリドが測定され得る、および/またはコレステロール/HPキットBoehringerMannheimを使用して、総血漿コレステロールが決定され得る。組織脂質分析において、脂質は、肝臓、脾臓、および/または小腸試料から抽出され得る例えばFolchetal.J.Biol.Chem226:497-5051957に提供されるFolch法を使用する。例えばO-フタルアルデヒドを使用して、総組織コレステロール濃度が測定され得る。一部の実施形態では、外因性LALの投与は、栄養素吸収を増加させるのに十分である。一実施形態では、外因性LALの投与は、血清αトコフェロール、25OHビタミンD、血清レチノール、ジデヒドロレチノイン酸またはトランスサイレチンのレベルによって測定される栄養素吸収を増加させる。一部の実施形態では、例えばWDおよびCESDまたは他のLAL欠乏症に関して、外因性LALの投与は、血清ヘモグロビンレベルHbを増加させるのに十分である。一実施形態では、ヘモグロビンレベルは、外因性LALを用いて投与される前に観察されたものと比較して、少なくとも約10または約20増加する。一部の実施形態では、外因性LALは、副作用を最小にするための方法を使用して投与され得る。例えば、外因性LALの投与は、外因性LALに対する免疫応答を最小にすることができる。外因性LALを含むLALおよび薬学的組成物本発明は、本明細書に記載されるLAL欠乏症関連状態のいずれか、および治療から利益を受けるであろう前述されない他の状態を治療することを包含する。本発明に従い利用される外因性LALは、非限定的に、細胞培養物例えばCHO細胞、COS細胞、大腸菌等の細菌、哺乳類および鳥類例えば、ニワトリ、アヒル、およびシチメンチョウ等の遺伝子導入動物を含むいずれの有用なタンパク質発現系、および植物系例えば、アオウキクサおよびタバコ植物で産生され得る組み換えLALを含む。本発明の一態様は、2006年10月3日に発行された米国特許第7,524,626号、2007年10月10日に出願された米国仮特許第11/973,853号、2007年10月29日に出願された第11/978,360号、および2009年1月7日に出願された第12/319,396号に従い産生された組み換えLALに関し、その開示は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。本発明の一態様は、Duetal.,2005Am.J.Hum.Genet.77:1061-1074およびDuetal.,2008J.LipidRes.,49:1646-1657に記載されるように産生された組み換えLALに関し、その開示は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。有用な実施形態の1つにおいて、外因性LALは、例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる2011年4月23日に出願された第PCT/US2011/033699号に記載される方法により、遺伝子導入鳥例えば遺伝子導入ニワトリの卵管で産生される。一部の実施形態では、組み換えLALは、鳥細胞系で産生される。一部の実施形態では、組み換えLALは、哺乳類例えばヒト細胞系で産生される。一実施形態では、本発明により使用される外因性リソソーム酸リパーゼは、実質的にN-アセチルグルコサミンGlcNAcおよびマンノース終結N結合構造を有するグリカンを含有する。外因性LAL上のGlcNAcおよびマンノース終結グリカンは、マクロファージおよび線維芽細胞により特異的に認識および内在化され得る。タンパク質を、外因性LALの投与によって治療可能な状態に関与する細胞上で発現するGlcNAc/マンノース受容体の標的とすることができるマンノース-6-リン酸塩M6Pも、典型的に、本発明により使用される外因性LAL上に存在する。典型的に、本明細書に説明され、開示される本発明の外因性LALは、ヒトLALである。一実施形態では、外因性LALは、GenbankRefSeqNM_000235.2に提供されるアミノ酸配列を有する。一実施形態では、成熟外因性LALは、以下のアミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、外因性LALは、配列番号1のアミノ酸1-378、配列番号1のアミノ酸3-378、配列番号1のアミノ酸6-378、または配列番号1のアミノ酸7-378を含む。一部の実施形態では、外因性LALは、配列番号1のアミノ酸1-378、配列番号1のアミノ酸3-378、配列番号1のアミノ酸6-378、および配列番号1のアミノ酸7-378からなる群から選択される少なくとも2つのポリペプチドの混合物を含む。一部の実施形態では、外因性LALは、配列番号1のアミノ酸1-378を含むポリペプチド、配列番号1のアミノ酸3-378を含むポリペプチド、および配列番号1のアミノ酸6-378を含むポリペプチドの混合物を含む。一部の実施形態では外因性LALは、配列番号1のアミノ酸1-378、配列番号1のアミノ酸3-378、配列番号1のアミノ酸6-378、または配列番号1のアミノ酸7-378と同一であるポリペプチドを含む。他の実施形態では、外因性LALは、配列番号1のアミノ酸1-378、配列番号1のアミノ酸3-378、配列番号1のアミノ酸6-378、または配列番号1のアミノ酸7-378に少なくとも約70、約75、約80、約85、約90、約95、約96、約97、約98、または約99同一であるポリペプチドを含む。一部の実施形態では、外因性LALは、配列番号1の機能断片、または配列番号1の機能断片に少なくとも約70、約75、約80、約85、約90、約95、約96、約97、約98、または約99同一であるポリペプチドを含む。一部の実施形態では、外因性LALは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、2011年4月23日に出願されたPCT/US2011/033699号に記載される組み換えLALタンパク質である。同一ではないアミノ酸位置は、しばしば、アミノ酸残基が類似する化学特性例えば電荷または疎水性を有する他のアミノ酸残基に代えて置換され、したがって、分子の機能特性を変更しない保存アミノ酸置換基により異なることが認識される。配列が保存的置換において異なる場合、配列同一性パーセントは、置換の保存的性質を補正するために上方に調節され得る。この調節を行うための方法は、当業者に周知である。保存的置換の得点は、例えばMeyersMillers,ComputerApplic.Biol.Sci.4:11-171988のアルゴリズムにより計算され得る。比較ウインドウとは、2つの配列が最適に整合された後に配列を同一数の隣接位置の参照配列と比較してもよい、約25~約400位置、または約50~200位置、または約100~150位置等の連続位置のセグメントを指す。比較用の配列のアライメント方法は、当該技術分野において周知である。比較用の配列の最適なアライメントは、例えば、小域相同性アルゴリズムSmithWaterman,Adv.Appl.Math.2:4821981により、大域アライメントアルゴリズムNeedlemanWunsch,J.Mol.Biol.48:4431970により、類似性法の検索PearsonLipman,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.85:24441988;Altschuletal.,Nucl.AcidsRes.25:3389-4021997により、典型的にはデフォルト設定を使用した、これらのアルゴリズム例えば、GAP、BESTFIT、FASTA、およびBLASTintheWisconsinGeneticsSoftwarePackage,GeneticsComputerGroup,575ScienceDr.,Madison,Wis.のコンピュータ化された実装により、または手動アライメントおよび目視例えば、CurrentProtocolsinMolecularBiology,Ausubeletal.eds.,1994を参照により実施され得る。例えば、BLASTタンパク質検索は、配列番号1のアミノ酸配列またはその断片に80超相同であるアミノ酸配列を得るために、XBLASTプログラム、スコア=50、ワード長=3を使用して実施され得る。有用なアルゴリズム実装の一例はPILEUPである。PILEUPは、プログレッシブペアワイズアライメントprogressivepairwisealignmentを使用して、関連する配列の群から複数の配列アライメントを作製する。それは、アルゴリズムを作製するために使用されるクラスタリング関係を示す系統樹もプロットすることができる。PILEUPは、FengDoolittle,J.Mol.Evol.35:351-3601987のプログレッシブアライメント法の単純化を使用する。使用される方法は、HigginsSharp,CABIOS5:151-31989により説明される方法に類似する。複数のアライメント手順は、最も類似する2つの配列のペアワイズアライメントから始まり、整合させた2つの配列のクラスターを産生する。このクラスターは、次いで、次の最も関連する配列または整合された配列のクラスターに整合され得る。配列の2つのクラスターは、2つの個々の配列のペアワイズアライメントの単純な伸長により整合され得る。繰り返す毎に次第に類似性を失う配列および配列のクラスターを含む一連のそのようなペアワイズアライメントは、最終アライメントを産生する。一部の実施形態では、本発明の外因性LALポリペプチドは、野生型配列の変異体を含む。これらの変異体は、置換、挿入、または欠失変異体の3つのクラスのうちの1つ以上に該当する。これらの変異体は、自然に生じる対立遺伝子または種間変異体であり得るか、またはそれらは、DNAコードタンパク質のヌクレオチドの部位特異的変異誘発により調製され得る。部位特異的変異誘発は、カセット、またはPCR変異誘発、または変異体をコードするDNAを産生するための、当該技術分野において周知の他の技法を使用して実施され、その後、組み換え細胞培養物中でDNAを発現させる。最大約100~150のアミノ酸残基を有する変異体標的タンパク質断片は、確立された技法を使用して、生体外合成により調製され得る。機能的に類似するアミノ酸を提供する保存的置換表は、当該技術分野において周知であるHenikoffHenikoff,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.89:10915-109191992。アミノ酸置換は、典型的に単一残基のものである。かなり長い挿入を許容することができるが、挿入は、通常、およそ約1~約20のアミノ酸である。いくつかの場合では、欠失は非常に長い場合もあるが、欠失は、約1~約20の残基の範囲である。最終誘導体に到達するために、置換、欠失、および挿入、またはそれらのいずれかの組み合わせが使用され得る。一部の実施形態では、外因性LALは、少なくとも約100U/mgの特異的活性を有する。一部の実施形態では、外因性LALは、少なくとも約200U/mgの特異的活性を有する。一部の実施形態では、外因性LALは、少なくとも約250U/mgの特異的活性を有する。一部の実施形態では、外因性LALは、約100~約1,000U/mgの特異的活性を有する。一部の実施形態では、外因性LALは、約100~約500U/mgの特異的活性を有する。一部の実施形態では、外因性LALは、約100~約350U/mgの特異的活性を有する。一部の実施形態では、外因性LALは、約200~約350U/mgの特異的活性を有する。一部の実施形態では、外因性LALは、約250~約350U/mgの特異的活性を有する。一部の実施形態では、外因性LALは、約250U/mgの特異的活性を有する。一部の実施形態では、外因性LALは、約275U/mgの特異的活性を有する。一部の実施形態では、外因性LALは、約300U/mgの特異的活性を有する。ヒトLALは、N結合グリコシル化のためにそのアミノ酸配列に、配列番号1に明記されるAsn36、Asn72、Asn101、Asn161、Asn273、およびAsn321の6つの可能性のある部位を有する。一部の実施形態では、少なくとも1、2、3、4、または5のN結合グリコシル化部位がグリコシル化される。一部の実施形態では、6つのグリコシル化部位全てがグリコシル化される。一部の実施形態では、Asn36、Asn101、Asn161、Asn273、およびAsn321がグリコシル化される。一部の実施形態では、Asn36、Asn101、Asn161、Asn273、およびAsn321がグリコシル化され、Asn72はグリコシル化されない。一部の実施形態では、N-グリジン構造は、N-アセチルグルコサミンGlcNAc、マンノース、および/またはマンノース-6-リン酸塩M6Pを有する2分枝型、3分枝型、および4分枝型構造を含む。一部の実施形態では、外因性LALは、Asn101、Asn161、およびAsn273にM6P修飾されたN-グリカンを含む。一部の実施形態では、外因性LALは、O結合グリカンを含まない。一部の実施形態では、外因性LALは、シアル酸を含まない。一部の実施形態では、外因性LALは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、2011年4月23日に出願された第PCT/US2011/033699号に記載されるグリコシル化パターンを有する。一部の実施形態では、外因性LALの分子量は、約55kDである。特定に実施形態では、対象は、例えばベクターに外因性LALをコードする核酸分子を用いて治療され得る。ポリペプチドをコードする核酸の用量は、患者当り約10ng~1g、100ng~100mg、1μg~10mg、または30~300μgDNAの範囲である。感染ウイルスベクターの用量は、用量当り10~100ビリオン以上まで変動する。本発明の一部の実施形態では、外因性LALは、1LAL、またはその活性断片、変異体、もしくは誘導体を発現する核酸、例えばベクターで移植可能な宿主細胞を形質転換または形質移入する、および2形質転換した宿主細胞を哺乳類に移植することを含む治療法で投与される。本発明の一部の実施形態では、移植可能な宿主細胞を、外因性LALをコードする単離された核酸で一時的に培養された、形質転換された、または形質移入された哺乳類から除去し、それが除去された同じ哺乳類に移植し戻す。必要はないが、細胞は、移植される同じ部位から除去され得る。時折エクスビボ遺伝子療法としても知られるそのような実施形態は、制限された期間の間、連続した外因性LALポリペプチドの供給を提供することができる。本発明で提供される治療用タンパク質である組み換えLALは、未精製の形態で投与することが可能であるが、治療用タンパク質を薬学的製剤の一部として投与することが好ましい。よって、本発明は、鳥由来のグリコシル化された治療用タンパク質またはその薬学的に許容される誘導体、ならびに1つ以上のその薬学的に許容される担体、および任意に、他の治療および/または予防的成分を含む薬学的製剤、ならびにそのような薬学的製剤を投与する方法をさらに提供する。本発明は、哺乳類由来のグリコシル化された治療用タンパク質またはその薬学的に許容される誘導体、ならびに1つ以上のその薬学的に許容される担体、および任意に、他の治療および/または予防的成分を含む薬学的製剤、ならびにそのような薬学的製剤を投与する方法も提供する。担体複数可は、製剤の他の成分と適合可能であり、その受給者に有害ではないという意味で許容可能でなければならない。本発明の薬学的組成物を使用して患者を治療する方法例えば、投与される薬学的タンパク質の量、投与の頻度、および治療期間の継続期間は、当該技術分野の医師に既知の標準的な方法論を使用して決定され得る。薬学的製剤は、経口、直腸、鼻腔、局所頬および舌下を含む、膣、または非経口に適切なものを含む。薬学的製剤は、筋肉内、皮下、および静脈内投与を含む注入による投与に適切なものを含む。薬学的製剤は、吸入または吹送により投与されるものも含む。適切な場合、製剤は、便宜上、別個の投与量単位で提示され得、薬学の分野において周知の方法のいずれかにより調製され得る。薬学的製剤を産生する方法は、典型的に、治療用タンパク質を、液体担体もしくは微粉砕した固体担体または両方と混合し、必要であれば産物を所望の製剤に成形するステップを含む。経口投与に適切な薬学的製剤は、便宜上、それぞれが所定量の活性成分を含有するカプセル、カシェ剤もしくは錠剤等の別個の単位として、粉末もしくは顆粒として、溶液として、懸濁液として、またはエマルジョンとして提示され得る。活性成分も、ボーラス、舐剤、またはペーストとして提示され得る。経口投与用の錠剤およびカプセルは、結合剤、充填剤、潤滑剤、崩壊剤、または湿潤剤等の従来の賦形剤を含有することができる。錠剤は、当該技術分野に周知の方法によりコーティングされ得る。経口液体調製物は、例えば、水性もしくは油性懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップ、またはエリキシル剤の形態であるか、または使用前に水もしくは他の適切なビヒクルで構成するために乾燥産物として提示され得る。そのような液体調製物は、懸濁剤、乳化剤非水性ビヒクル食用油を含む、または防腐剤等の従来の添加剤を含有することができる。本発明の治療用タンパク質は、非経口投与例えば注入、例えば、ボーラス注入または連続点滴用にも製剤化され得、アンプル、前充填シリンジ、少量点滴、または防腐剤添加された多回用量容器の単位用量形態で提示され得る。治療用タンパク質は、例えば皮下注入、筋肉内注入、および静脈内IV点滴もしくは注入により注入され得る。一実施形態では、外因性LALは、いずれの有用な方法により、IV点滴により静脈内投与され得る。一例では、外因性LALは、末梢路を通した静脈内点滴により投与され得る。別の例では、外因性LALは、末梢的に挿入された中央カテーテルを通して静脈内点滴により投与され得る。別の例では、外因性LALは、静脈血管アクセスポートに取り付けられた携帯型点滴機によって促進される静脈内点滴により投与され得る。静脈内点滴の一実施形態では、薬物は、当該技術分野の医師によって決定される、点滴される薬物の量および患者の以前の点滴に関する反応歴により、1~8時間の期間にわたって投与される。別の実施形態では、外因性LALは、IV注入により静脈内投与される。別の実施形態では、外因性LALは、腹腔内注入を介して投与され得る。また別の実施形態では、外因性LALは、治療用タンパク質の薬学的に許容されるカプセルを介して投与される。例えば、カプセルは、腸溶性コーティングされたゼラチンカプセルであり得る。一部の実施形態では、治療用タンパク質は点滴により投与され、点滴は、例えば、30分~10時間の長期間にわたって行われてもよい。よって、点滴は、例えば、約1時間、約2時間、約3時間、約4時間、または約5時間の期間にわたって行われてもよい。点滴はまた、様々な速度で行われてもよい。よって、例えば、点滴速度は、1時間当り1mL~1時間当り約20mLであり得る。一部の実施形態では、点滴速度は、1時間当り5mL~10mLである。一実施形態では、点滴速度は、1時間当り1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、または20mLである。一実施形態では、点滴速度は、0.1~5mg/kg/時間である。一実施形態では、点滴速度は、約0.1、約0.2、約0.3、約0.5、約1.0、約1.5、約2.0、または約3mg/kg/時間である。治療用タンパク質は、油性もしくは水性ビヒクル中の懸濁液、溶液、またはエマルジョンのような形態を取ることができ、懸濁剤、安定剤、および/または分散剤等の製剤用作用物質を含有することができる。治療用タンパク質は、使用前に適切なビヒクル、例えば減菌発熱性物質除去蒸留水を用いて構成するために、減菌固体を無菌単離することにより、または溶液から凍結乾燥することにより得られた粉末形態であり得る。表皮への局所投与において、治療用タンパク質は、軟膏、クリーム、もしくはローションとして、または経皮パッチとして製剤化され得る。軟膏およびクリームは、例えば、適切な増粘剤および/またはゲル化剤を添加することにより、水性または油性基材を用いて製剤化され得る。ローションは、水性または油性基材を用いて製剤化され得、一般に、1つ以上の乳化剤、安定剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤、または着色剤も含有する。口内の局所投与に適切な製剤は、風味基材、通常スクロースおよびアカシアまたはトラガントに活性成分を含むロゼンジ剤、ゼラチンおよびグリセリンまたはスクロースおよびアカシア等の不活性基材に活性成分を含む芳香錠、および適切な液体担体に活性成分を含む口内洗浄液を含む。担体が固体である直腸投与に適した薬学的製剤は、最も好ましくは、単位用量の坐剤として提示される。適切な担体は、ココアバターおよび当該技術分野で通常使用される他の材料を含み、坐剤は、便宜上、活性化合物の、軟化させたまたは融解させた担体複数可との混合物により形成され、その後冷却され、鋳型で成形される。膣投与に適した製剤は、活性成分に加え、適切であることが当該技術分野において公知であるそのような担体を含有する膣坐剤、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、泡状物、またはスプレーとして提示され得る。鼻腔内投与において、本発明の治療用タンパク質は、液体スプレーまたは分散性粉末として、または滴剤の形態で使用され得る。滴剤は、1つ以上の分散剤、可溶化剤、または懸濁剤も含む水性もしくは非水性基材を用いて製剤化される。液体スプレーは、便宜上、加圧パックから送達される。吸入による投与において、本発明による治療タンパク質は、便宜上、吸入器、ネブライザ、もしくは加圧パック、またはエアロゾルスプレーを送達する他の簡便な手段から送達され得る。加圧パックは、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、または他の適切なガス等の適切な推進剤を含んでもよい。加圧エアロゾルの場合において、投与量単位は、計量した量を送達するための弁を提供することにより決定され得る。吸入または吹送による投与において、本発明による治療用タンパク質は、乾燥粉末組成物、例えば、化合物とラクトースもしくはデンプン等の適切な粉末基材の粉末ミックスの形態を取ることができる。粉末組成物は、例えば、カプセルもしくはカートリッジの単位投与量形態で、または粉末が吸入器もしくは吹送器の補助により投与され得るゼラチンもしくはブリスターパックで提示され得る。所望する場合、活性成分を持続放出するように適合された上記の製剤が利用され得る。本発明による薬学的組成物は、抗菌剤または防腐剤等の他の活性成分も含有してもよい。一部の実施形態では、薬学的組成物中の外因性LALの濃度は、約0.5~約10mg/mlである。一部の実施形態では、LALの濃度は、約1~約5mg/mLである。一部の実施形態では、LALの濃度は、約1、約1.5、約2、約2.5、約3、約3.5、約4、約4.5、約5、約5.5、約6、約6.5、または約7.5mg/mLである。一部の実施形態では、外因性LALを含む薬学的組成物は、緩衝液をさらに含む。代表的な緩衝液としては、酢酸、リン酸、クエン酸、およびグルタミン酸緩衝液が挙げられる。代表的な緩衝液としては、クエン酸リチウム、クエン酸ナトリウム、クエン酸カリウム、クエン酸カルシウム、乳酸リチウム、乳酸ナトリウム、乳酸カリウム、乳酸カルシウム、リン酸リチウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、リン酸カルシウム、マレイン酸リチウム、マレイン酸ナトリウム、マレイン酸カリウム、マレイン酸カルシウム、酒石酸リチウム、酒石酸ナトリウム、酒石酸カリウム、酒石酸カルシウム、コハク酸リチウム、コハク酸ナトリウム、コハク酸カリウム、コハク酸カルシウム、酢酸リチウム、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム、酢酸カルシウム、およびそれらの混合物も挙げられる。一部の実施形態では、緩衝液は、クエン酸三ナトリウム二水和物である。一部の実施形態では、緩衝液は、クエン酸一水和物である。一部の実施形態では、薬学的組成物は、クエン酸三ナトリウム二水和物およびクエン酸一水和物を含む。一部の実施形態では、外因性LALを含む薬学的組成物は、安定剤をさらに含む。代表的な安定剤としては、アルブミン、トレハロース、糖類、アミノ酸、ポリオール、シクロデキストリン、塩化ナトリウム、塩化マグネシウム、および塩化カルシウム等の塩類、凍結乾燥保護剤lyoprotectant、ならびにそれらの混合物が挙げられる。一部の実施形態では、薬学的組成物は、ヒト血清アルブミンを含む。特定の例において、本明細書に開示されるように産生された組み換えヒトLALは、1ミリリットル当りに外因性LAL例えば2mgのLAL、クエン酸三ナトリウム二水和物例えば13.7mg、クエン酸一水和物例えば1.57mg、およびヒト血清アルブミン例えば10mgを含有する薬学的製剤に利用され、5.9±0.1等の酸性pHに製剤化される。本発明は、外因性LALの関連内臓および組織のリソソームへの取り込みを促進するいずれの投与形態経路を包含する。以下の特定の実施例は、本発明を図示することが意図され、特許請求項の範囲を制限するものと解釈されるべきではない。実施例1組み換えLALの投与による早発性LAL欠乏症ウォルマン病の治療生まれたとき出生時体重、3.88kgから体重増加不良のため、15週齢の男児が入院した。乳児は、嘔吐、摂食問題、栄養状態の不良、下痢、腹部膨満の増加、および貧血を示した。患者はウォルマン病と診断された。最初の身体検査で、患者の体重は5.62kgであり、年齢別体重の第5パーセンタイルより下であった。15週齢での最初の検査から4週間の間、および19週齢での最初の点滴前には、患者の体重は増加しなかった。推定された成長速度は、年齢別体重の第1パーセンタイル未満であると計算された。腹部は極端に膨満し、顕著な肝腫大および脾腫大を伴った。腹部の超音波およびCTスキャンは、カルシウム沈着を伴う肝脾腫大および両側性の対照的に肥大した副腎を認めた。216U/L正常10~45U/Lのアスパラギン酸トランスアミナーゼASTと同様に、血清アラニントランスアミナーゼALTのレベルは、119U/L正常10~50U/Lに上昇した。治療開始前の炎症のマーカーである血清フェリチンは、約1,500μg/L正常7~144μg/Lであった。患者は、治療前は一貫して貧血であり、ヘモグロビン値は7.2~8.3g/dLの範囲であった。19週齢で、0.2mg/kgの初期用量で、週に1回のrhLALSBC-102のIV点滴を開始した。点滴反応の可能性を相殺するために、患者は、SBC-102点滴の約90分前に1mg/kgのジフェンヒドラミンで前治療された。点滴時間は、約4時間であった。点滴は良好に耐容され、患者は、いずれの有害事象または点滴関連反応を起こさなかった。初期点滴の7日後、2回目の点滴が患者に投与された。患者は、約4時間、0.3mg/kgのSBC-102を投与され、いずれの有害事象の兆しを示すことなく耐容性を示した。治療を開始してから2週間以内に、患者は、鋭敏さおよび反応性を含む一般的な健康において顕著な改善を示した。下痢および嘔吐は安定した。患者の体重は増加し始め、血清トランスアミナーゼ例えばASTおよびALTにおいて、基本的に正常レベルへの著しい減少を示した図1Aおよび1B。患者の成長速度は、急速に正常化した図3および4。腹部膨満は、腹囲の減少と対応して減少した。肝機能試験は、継続的に改善を示した図1Aおよび1B。3回目の来院で、患者は0.5mg/kgのSBC-102を受けた。点滴は、継続的に良好に耐容された。臨床状態は継続的に改善し、治療開始から体重は7日で150g増加し、腕囲は1.5cm増加した図3および4。肝臓試験は安定しており、ヘモグロビンレベルは増加し10~11g/dL、フェリチンレベルは減少し続けた図2。アルカリホスファターゼは、治療前、正常の低範囲の137U/L正常110~300U/Lであったが、治療により増加した204U/L。SBC-102投与によるこの効果は、前臨床疾患モデルで認められた知見と一致した。4回目の点滴を発端に、患者は毎週1.0mg/kgの用量を受け始めた。治療開始2ヶ月後、患者の成長は、実質的に改善し、推定成長速度は、第95パーセンタイルに近かった。この成長増加は、63日で1.25kgまたは2.79ポンドの増加をもたらし、体重が7.21kgとなり、年齢別体重の第30パーセンタイルとなった図3および4。ASTおよびALTの両方のレベルは、最初の点滴後、急速に低下した。治療を経て3ヶ月、ASTおよびALTは正常であった。肝機能の改善に加え、フェリチンの著しい減少も見られた図2。4ヶ月の治療にわたって、患者のGI症状は回復し、患者の栄養状態は良好であった。患者の体重は増加し続け図3および4、正常で健康な乳児の身体徴候を示した。患者は、いずれの点滴反応または他の副作用を示すことなく点滴の耐容性を示し続けた。患者は、外来患者として21回目の1.0mg/kgの用量を受けた。実施例2早発性LAL欠乏症に対する研究設計遺伝子導入ガルス属で産生されたrhLALであるSBC-102が、IV点滴により毎週投与された。研究は、IV点滴により毎週投与されるSBC-102の2用量レジメンの安全性、耐容性、および有効性を評価するために考案される。そのため、この研究における主な結果変数は、LAL欠乏症による成長阻害を有する小児におけるSBC-102の安全性および耐容性を決定し、生命徴候および身体検査所見、臨床実験試験、抗薬物抗体試験、ならびに併用薬物の使用を含む。成長阻害がLAL欠乏症/ウォルマン表現型の共通する臨床特徴であることを考えると、この疾患の良好な療法は、LAL欠乏症により影響を受けた小児に見られる成長阻害に対処することができるはずである。小児の成長および栄養状態に直接関連するパラメータは、二次または探索目的、例えば、漸進的な体重の成長速度、体重増加、および線形の成長速度として評価される。この研究は、薬物動態生物マーカーに対するSBC-102の作用、肝臓および脾臓の大きさ、リンパ節腫大、ヘモグロビンおよび血小板、肝機能および栄養の実験評価、腹囲、中上腕囲、および頭囲も調査する。この研究は、血漿Cmaxおよび推定クリアランスを含むLAL欠乏症による成長阻害を有する小児のSBC-102の予備薬物動態も説明する。対象は、等しい大きさの2つの遂次コホート各4人の対象に参加する。投与は、各コホート内、コホート間、低用量コホートコホート1;開始用量0.35mgkg-1の最初の対象で開始する投与により調整される。コホート1の追加対象の投与および高用量コホートコホート2;開始投与量1mgkg-1の投与の開始は、前の対象の許容可能な安全性および耐容性に基づく。コホート1最初の4人の対象は、コホート1を構成する研究に参加した。このコホートの最初の対象は、0.35mgkg-1の単一用量のSBC-102を受け、少なくとも投与後24時間の間の安全性の検討に基づき投与の継続が許可されれば、対象は、次いで、0.35mgkg-1の2回目の用量のSBC-102を1週間後に受ける。対象が2回目の用量のSBC-102を受けた後、全ての利用可能な安全データが検討され、その時点で、最初の対象の用量を1mgkg-1に上げ、コホート1の他の対象の投与を開始するかどうかに関しての容認性が決定される。コホート1の他の対象3人の投与は、同様の様式で進める。安全性の検討は、0.35mgkg-1から1mgkg-1への対象の用量の増大を保障しないが、対象が開始用量での治療を継続することが安全であると考えられる場合、対象は、0.35mgkg-1の用量を受けるのを継続してもよい。コホート1のいずれかの対象が、1mgkg-1の少なくとも4用量のSBC-102を受けた後に、治療に対して最適以下の応答を示す場合、3mgkg-1へのさらなる用量増大は考慮される。コホート2コホート2の投与開始は、コホート1が完全に参加し、安全性がコホート1で1mgkg-1の2用量以上のSBC-102を受けた少なくとも2人の対象について検討された後である。研究に登録された最後の4人の対象が参加し、コホート2で投与された。このコホートの最初の対象は、1mgkg-1の単一用量のSBC-102を受け、少なくとも投与後24時間の間の安全性の検討に基づき投与の継続が許可されれば、対象は、次いで、1mgkg-1の2回目の用量のSBC-102を1週間後に受ける。対象が2回目の用量のSBC-102を受けた後、全ての利用可能な安全データが以下の容認性に対して検討される:最初の対象の用量を3mgkg-1に上げ、コホート2の他の対象の投与を開始する。コホート2の他の対象3人の投与は、安全性の検討を用いて同様の様式で実施される。安全性の検討は、1mgkg-1から3mgkg-1への対象の用量の増大を容認しないが、対象が開始用量での治療を継続することが安全であると考えられる場合、対象は、1mgkg-1の用量を受けるのを継続してもよい。対象が1mgkg-1の開始用量に耐容性を示さない場合、0.35mgkg-1の低用量が考慮され得る。研究は、約22回の来院予定からなる:来院1回目スクリーニング、来院2回目ベースライン評価、研究薬物の開始~21回目研究薬物の毎週投与、来院22回目研究調査の終了。LAL欠乏症による早発性成長阻害の重篤度および生命を脅かす性質を考慮すると、これらの対象は入院する可能性がある。研究の標的集団は、LAL欠乏症による成長阻害を有する男子および女子である。対象は、以下の基準を満たす場合、この研究に参加する条件を満たす:1対象の親または法廷後見人が、リスクおよび副作用の可能性を含む、完全な研究の性質および目的を理解し、実施されるいずれの研究手順前に書面による同意/許可を提供する、2アッセイを実施するラボの正常範囲に対して文書化されたLAL活性の低下、またはLAL欠乏症の診断を確認する分子遺伝子試験の文書化された結果を持つ男子または女子、および3生後6ヶ月前に発症した成長阻害。安全性主要安全評価項目は、有害事象AEおよび点滴関連反応IRRの発生、生命徴候血圧、心拍数、呼吸数、および体温のベースラインからの変化、身体検査所見および臨床実験試験CBC/血液学検査、血清化学、および尿検査、併用薬物/療法の使用、ならびに血清転換率、血清転換まで時間、中央およびピーク免疫グロブリンGIgGADA力価を含む抗SBC-102抗体ADAの特徴付け、およびピークIgGADA力価までの時間を含む。有効性有効性評価項目は、1肝臓および脾臓の大きさ超音波によるならびに肝臓および脾臓の容量ならびに脂肪含量磁気共鳴映像法[MRI]によるのベースラインからの変化および/またはパーセント変化、ならびに2血清トランスアミラーゼ、血清脂質総コレステロール、トリグリセリド、高密度リポタンパク質[HDL]、および低密度リポタンパク質[LDL]、ヘモグロビン、および血小板数のベースラインからの変化を含む。パーセンタイルおよびzスコアのベースラインからの変化を含む成長パラメータも≦18歳の対象について評価される。これらの成長パラメータは、CentersforDiseaseControlCDC成長チャートに基づき、対象の年齢が<30ヶ月の年齢別体重WFA、身長別体重WFL、年齢別身長LFA、および年齢別頭囲HCFA、ならびに対象が≧36ヶ月~18歳のWFA、年齢別背丈stature-for-ageSFA;注記:背丈とは対象の身長を指す、および背丈別体重WFS、ならびに全対象の体重不足、衰弱wasting、および成長阻害の成長状態の指標を含む。実施例3早発性LAL欠乏症患者の身体評価全身麻酔に耐えるのに十分な臨床的に安定である患者に対して、長期血管アクセスのための中心静脈カテーテル留置が考慮されるべきである。他の手順で全身麻酔および/または鎮静を受ける患者において、ベースライン腹部磁気共鳴映像法MRIスキャンが考慮される。全身麻酔および/または鎮静を必要とする新しい手順の事象において、それが1回目の点滴後3ヶ月以降である場合、調査MRIが考慮される。身体計測体重、身長、腹囲、中上腕囲、および頭囲が測定される。一般的な身体検査が実施される。詳細な身体検査が行われる。検査は、対象の一般的な外見、皮膚、頭、眼、耳、鼻、および喉の評価、心臓、肺、腹部、脚/関節、および精神状態を含む。全ての身体検査は以下も含む。肝臓の大きさ:肝臓の大きさ触診/非触診および肋骨縁からのセンチメートル、規則性平滑/結節性、および感応性敏感/非敏感の臨床評価が行われる。脾臓の大きさ:脾臓の大きさ触診/非触診および肋骨縁からのセンチメートル、規則性平滑/結節性、および感応性敏感/非敏感の臨床評価が行われる。リンパ節腫大:大きさ、位置、およびあらゆる触診可能なリンパ節の特徴の評価が行われる。検査される領域は、頭部後頭部、耳介前、耳後部、頤下、顎下、頚部、鎖骨、腋窩、および鼠径部を含む。いずれの拡大した節は、敏感または非敏感として特徴付けされる。撮影:仰臥位での対象のデジタル画像全長および腹部拡大が撮影される。肝臓/脾臓超音波およびMRI肝臓および脾臓の大きさを測定するために、腹部超音波検査が実施され得る。腹部MRIは、肝臓および脾臓の容量の良好な定量化を提供することができ、ベースラインおよび1回目の点滴の少なくとも3ヶ月後の来院で考慮される。生命徴候生命徴候は、脈拍数、呼吸数、収縮期および拡張期の血圧、ならびに深部体温肛門および口腔を含む。脈拍数および血圧の評価は、対象が仰臥位であった後に取られる。生命徴候は、全ての研究来院で測定される。投与日、生命徴候は、点滴前、点滴中および点滴後2時間の間15分±10毎、次いで、点滴が完了した後2~4時間の間30分±15毎に記録される。実施例4実験評価以下の実験評価は、診断試験および有効性として実施される。1CBC/血圧学検査:白血球数、赤血球数、ヘモグロビン、ヘマトクリット、平均赤血球容積MCV、平均赤血球ヘモグロビン量MCH、平均赤血球ヘモグロビン濃度MCHC、血小板数、好中球、リンパ球、単球、好酸球、好塩基球、細胞形態の検査のための末梢血塗沫標本2化学的パネル:グルコース、尿素窒素、クレアチニン、ナトリウム、カリウム、塩化物、カルシウム総量およびイオン化、マグネシウム、無機リン、総タンパク質、乳酸デヒドロゲナーゼ3肝機能試験:AST/血清グルタミン酸オキサロ酢酸トランスアミナーゼSGOT、ALT/血清グルタミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼSGPT、アルカリホスファターゼ、γ-グルタミルトランスペプチダーゼGGTP、アルブミン、ビリルビン直接、総量4抗薬物抗体:抗SBC-102抗体5尿検査:pH、グルコース、ケトン、血液、タンパク質、亜硝酸塩6凝集研究:白血球顕微鏡検査は、血液、亜硝酸塩、および/または白血球が異常である場合行われ得る7実験栄養評価:血清αトコフェロール:コレステロール比、25OHビタミンD、血清レチノール、ジデヒドロレチノール、トランスサイレチン、血清フェリチン8脂質パネル:総コレステロール、トリグリセリド、HDL、LDL9遺伝子プロファイルタンパク質コード配列ならびに遺伝子転写、メッセンジャーリボ核酸mRNA、安定性および認識され得るタンパク質の有効性を制御する配列の両方を含むDNA配列は、以下を含む:1.リソソーム酸リパーゼLIPA遺伝子2.LAL欠乏症の疾患表現型の一因となる、および/またはそれを修飾してもよい脂質生物学に関与する他のタンパク質をコードする遺伝子、例えば、ABCA13.いずれかのSBC-102に対する脆弱性を修飾してもよい遺伝子10薬物動態評価医原性貧血のリスクを低減するために、PK試料採取は制限され得る。重要度によって、試料は、以下のパラメータを導き出すために収集される:1Cmaxおよび2CLの推定。0日目用量1および105日目用量16のSBC-102の血清レベルの測定のために試料採取が収集される。全ての対象において、試料は、前用量投与の30分以内、点滴開始90±5分後、および点滴開始110±5分後に収集される。BP評価のために点滴をしない腕の加圧帯を膨らませる前に、生命徴候の評価と同じ時点で、全てのPK試料が採取される。他の時間点でのPK試料は、加圧帯の収縮の少なくとも5分後に採取される。実施例5用量調製および点滴SBC-102は、透明な液体として単一用量の10mLのガラスバイアルで提供される。溶液総量10.5mL、5の過剰を含むは、2mgmL-1の濃度である。全てのSBC-102バイアルは、2~8°Cの調節温度で保管された。バイアルは凍結され、保管中、光から保護される。0.9の生理食塩水に希釈されたSBC-102を含有するシリンジは、点滴直前に調製された。SBC-102のシリンジが、前もって調製されたときは、希釈された溶液にはラベルが貼られ、調製の4時間以内に使用された。点滴の朝の投与前に記録され、最も近い0.1kgに四捨五入された患者の体重は、各点滴のSBC-102量を計算するために使用された。研究に使用された総点滴量は、表2に示される投与レジメンに基づく。用量調製および投与は、シリンジ、針、移送管、および二方コックを含むがこれらに限定されない、減菌の非発熱性の使い捨て材料を使用して実施されるべきである。流量制御デバイス上の点滴速度は、表3に示されるように、約120分にわたって総量を投与するように設定されるべきである。実施例6有害事象AE臨床的に顕著な心血管、呼吸器、または他の作用を伴うAEまたは点滴関連反応IRRが認められる患者においては点滴を中断するべきであり、2歳未満の小児における重度の点滴反応管理のための協会のガイドラインにより、対象はアナフィラキシー反応について治療されなければならない。これは、必要な場合、静脈内抗ヒスタミン剤、コルチコステロイド、およびエピネフリンを含んでもよい。関連する生物学的産物において、大半の遅延性IRRは、点滴後24時間超で生じる。症状は、関節痛、筋肉痛、インフルエンザ様症状、頭痛、疲労、および発疹または蕁麻疹を含む。臨床的に示されるように、遅延性反応は、鎮痛剤または抗ヒスタミン剤で治療され得る。IRRは、急性点滴開始24時間以内に生じるまたは遅延性点滴の1~6日後に生じるのいずれかに分類される。過敏反応の治療のための薬物および機器は、予想外の重度の過敏反応の場合の即時使用のために利用可能でなければならない。これらの供給品は、酸素、アセトアミノフェン、抗ヒスタミン剤例えば、ジフェンヒドラミン、非経口、およびPO、コルチコステロイド、エピネフリン、および心肺機能救急蘇生デバイスを含むが、これらに限定されない。類似する生物学的産物において、最も急性のIRRは、点滴の24時間以内に生じるCerezyme登録商標、VPRIV登録商標、Fabrazyme登録商標処方情報。急性IRRの可能性の兆しは、軽度から中程度のIRRに分類され得る:充血、紅潮、発熱および/または悪寒、吐気、そう痒、蕁麻疹、胃腸症状嘔吐、下痢、腹部痙攣。軽度の反応は、一時的な中止または点滴速度の減少後の自己限定性の自然回復反応として定義される。中程度の反応は、単純な措置で回復しない、観察の延長を必要とする、および療法を中断する反応として定義される。重度のIRRは、胸痛、呼吸困難、喘鳴、喘音、低血圧もしくは高血圧、呼吸停止、無呼吸、呼吸困難、徐脈、または頻拍を伴う。上記の兆しおよび症状のいずれか点滴中に観察され、対象が血行動態的に安定している場合、点滴速度を遅くすることができ事象の開始時に行われた速度の半分、例えば10mL時間-1から5mL時間-1に減少させる、点滴時間を延長する。事象が解決されたら、点滴スケジュールの元の速度の75に速度を増加させる前に、点滴は、最低30分間減速で継続するべきである。対象が過敏症の兆しを示し続ける場合、2歳未満の小児の点滴反応管理のための協会ガイドラインにより、IMまたは低IV用量の抗ヒスタミン剤が投与され得る。実施例7遅発性LAL欠乏症を有するヒト患者へのrhLALの投与研究の主な目的は、遅発性LAL欠乏症による肝不全を有する患者におけるSBC-102の安全性および耐容性生命徴候、身体検査、臨床実験試験、免疫原性試験、有害事象評価、併用療法を評価することである。第2の目的は、単一用量および複数用量点滴前および点滴後、0日目および21日目後にIV点滴により送達されたSBC-102の薬物動態を特徴付けするためである。遅発性LAL欠乏症の対象の採択基準は、以下を含む:1.患者がリスクおよび副作用を含む研究の完全な性質および目的を理解し、全ての研究手順に従う意思があり、かつそれに従うことができ、同意を提出する;2.≧18歳から≦65歳の男性または女性;3.アッセイを実施するラボの正常範囲に対して文書化されたLAL活性の低下、またはLAL欠乏症の診断を確認する分子遺伝子試験の文書化された結果、4.臨床像肝腫大および/または実験試験結果ALTまたはAST≧1.5xULNに基づく肝臓関与の証明、5.スタチンまたはエゼチミブを受けている場合、患者は、スクリーニング前の少なくとも4週間の間、安定した用量を受けていなければならない、6.女性は全員、スクリーニング時、血清妊娠試験が陰性でなければならず、また授乳をすることができない、および7.妊娠の可能性がある女性患者は、研究期間中、高度に有効で承認された避妊法複数可を使用することに同意し、最終用量後30日間使用を継続しなければならない。臨床評価は、身体検査、尿検査、臨床化学分析、CBC/血液検査、急性期反応物、凝集研究、12誘導ECG、抗SBC-102抗体、およびCmaxを導き出すためのPK、AUCinf、T1/2、Cl、およびVSSを含む。患者は、毎週1回、2時間にわたり静脈内IV点滴を介して0.35mgkg-1、1mgkg-1、または3mgkg-1のLALを与えられる。最初の対象が投与され、コホートの他の対象への投与を進める前に少なくとも24時間、耐容性について監視される。各対象は、最初のSBC-102の点滴後、24時間入院する。対象は、SBC-102用量のさらなる3用量の毎週1回のIV点滴を継続するが、但し、耐容性および安全性が許容可能であることを条件とする。薬物動態PKデータは、少なくとも1用量の研究薬物を受けた、研究に参加した全ての対象を使用して分析されるが、主なプロトコルの逸脱により影響を受けた可能性がある、あらゆるデータ点を除外する。PK分析は、1つのコンパートメント点滴モデルを使用して実施される。以下のPKパラメータが導き出され、コホートにより提示されるCmax、AUCinf、T1/2、Cl、およびVSS。単一用量および複数用量のPKパラメータは、来院2回目および来院6回目のデータを使用して比較される。この研究の用量間での提案された増分は、3、4、5、または6倍であり得、これは、mgkg-1での6倍の用量範囲にわたって、ヒトにおける最初の安定性、耐容性、および薬物動態の評価を可能にしてもよい。関連のある前臨床ラットモデルにおいて、毎週1回1mgkg-1、2週に1回3mgkg-1、および毎週1回5mgkg-1の薬物動態作用が比較可能である。よって、毎週1回3mgkg-1より多い用量を必要とすることは予想されないが、疾患の重症度により、4、5、6、7、8、9、または10mgkg-1等の、3mgkg-1を超える用量が考慮され得る。研究設計この状態の患者の希少性を考えると、この研究の標的数は、9人の評価可能な対象である。対象は、コホート当り対象3人の3つの遂次コホートに参加する。コホート1に割り当てられた対象は、最初に投与を開始し、続いて、コホート2に割り当てられたもの、次いでコホート3のものが続く。コホート13人の対象が0.35mgkg-1のSBC-102のIV点滴を受ける。最初の対象が投与され、コホートの他の2人の対象への投与を進める前に少なくとも24時間、耐容性について監視される。各対象は、最初のSBC-102の点滴後、24時間入院する。対象は、0.35mgkg-1の3回のさらなるIV点滴を継続するが、但し、耐容性および安全性が許容可能であることを条件とする。コホート23人の対象が1mgkg-1のSBC-102のIV点滴を受ける。コホート2の最初の対象が投与され、コホートの他の2人の対象への投与を進める前に少なくとも24時間、耐容性について監視される。各対象は、最初のSBC-102の点滴後、24時間入院する。対象は、1mgkg-1の3回のさらなるIV点滴を継続するが、但し、耐容性および安全性が許容可能であることを条件とする。コホート33人の対象が3mgkg-1のSBC-102のIV点滴を受ける。コホート3の最初の対象が投与され、コホートの他の対象への投与を進める前に少なくとも24時間、耐容性について監視される。各対象は、最初のSBC-102の点滴後、24時間入院する。対象は、3mgkg-1のさらなる3用量の毎週1回のIV点滴を継続するが、但し、耐容性および安全性が許容可能であることを条件とする。安全委員会SCは、耐容性の不良または安全上のリスクの可能性により、いずれかの時点で、コホート全て、または個々の対象への投与を一時停止してもよい。対象が、来院8回目研究の終了以外の来院予定で、または来院予定外で研究治療を中断する場合、対象は、来院8回目で行われる研究評価の終了のために、最後のSBC-102の用量後7日以降に再来院するべきである。SBC-102は、来院2、4、5、および6日目にIV点滴により投与される。併用療法は、研究中記録される。有害事象は、同意の署名時から記録される。各対象は、合計4用量のSBC-102を毎週受けるが、但し、耐容性および安全性が許容可能であることを条件とする。研究期間研究は、安全性の評価、および後続の臨床試験のための投与スケジュールを支持するために、4週間のSBC-102での投与、および休薬期を伴う。この研究の完了後、対象は、LAL欠乏症/CESD表現型を有する患者のSBC-102の長期安全性および有効性を評価するための別個のプロトコルのもと、SBC-102を再開する対象であってもよい。身体検査一般的な身体検査は医学資格保有者によって実施される。系心血管、呼吸器、胃腸、および神経系を含むがこれらに限定されないが特定され、記録される。検査が行われる各時点で、いかなる異常も記述されるべきである。新しい異常の診断は、適切な場合、有害事象として記録されるべきである。スクリーニング来院で実施される追加の身体検査評価:a肝臓の大きさ:肝臓の大きさ触診/非触診および肋骨縁からのセンチメートル、規則性平滑/結節性、および感応性敏感/非敏感の臨床評価が行われる。bリンパ節腫大:大きさ、位置、およびいずれの触診可能なリンパ節の特徴の評価が行われる。検査される領域は、頭部後頭部、耳介前、耳後部、頤下、顎下、頚部、鎖骨、腋窩、および鼠径部を含む。いずれの肥大した節は、敏感または非敏感として特徴付けされる。c動脈疾患:右側および左側の後脛骨筋および足背動脈の脈拍が臨床的に評価され、右側および左側の足関節上腕血圧比ABIが記録される。ABIは、右側または左側の腕の上腕収縮期圧どちらか高い方で割った足背動脈または後部脛骨動脈の収縮期圧の比として定義される。生命徴候脈拍数、呼吸数、収縮期および拡張期の血圧、および体温を含む生命徴候が測定される。脈拍数および血圧の評価は、対象が少なくとも5分間半仰臥位であった後に取られた。投与日、生命徴候は、点滴前、点滴中および点滴後2時間の間15分±5毎、ならびに点滴が完了した後2~4時間の間30分±10毎に記録される。点滴関連反応IRRの場合には、治験担当医師の判断でさらなる数値が取られてもよい。対象が少なくとも5分間、仰臥であった後、正式記録値を含む12誘導心電図ECGが取られる。実験評価実験試験の試料は、評価スケジュールに示される時間点で収集される。以下の分析ESR、凝集研究、および抗SBC-102抗体を除くが実施される。CBC/血液学検査:白血球数、赤血球数、ヘモグロビン、ヘマトクリット、平均赤血球容積MCV、平均赤血球ヘモグロビン量MCH、平均赤血球ヘモグロビン濃度MCHC、血小板数、好中球、リンパ球、単球、好酸球、好塩基球化学的パネル:グルコース、尿素窒素、クレアチニン、ナトリウム、カリウム、塩化物、カルシウム、マグネシウム、無機リン、総タンパク質、乳酸デヒドロゲナーゼ、尿酸肝機能試験:AST/SGOT、ALT/SGPT、アルカリホスファターゼ、GGTP、アルブミン、ビリルビン直接、総量脂質パネル:総コレステロール、トリグリセリド、HDL、LDL凝集研究:プロトロンビン時間PT国際標準率INR、活性化部分トロンボプラスチン時間aPTT尿検査:グルコース、ケトン、血液、pH、タンパク質、亜硝酸塩、および白血球顕微鏡検査は、血液、タンパク質、亜硝酸塩、および/または白血球が異常である場合にのみ行われるウイルス性肝炎スクリーニング:HBsAgおよびHCV血清学検査スクリーニング時、または試験中に臨床的に示される場合自己免疫肝炎スクリーニング:抗平滑筋抗体ASMA、抗核抗体ANA、抗LKM1抗体、抗SLA抗体抗薬物抗体:抗SBC-102抗体急性期反応物:高感受性C反応性タンパク質CRP、赤血球沈降速度ESR、および血清フェリチン妊娠試験:女性は全員、最低でも月に1回妊娠試験を行う。これらは、来院1日目および来院8日目に血清、ならびに来院2日目および来院6日目に尿を使用して実施される。薬物動態PK評価:PK試料は点滴カニューレとは反対の腕から採取される。0日目用量1、来院2回目および21日目用量4、来院6日目のSBC-102血清レベルを測定するための詳細な試料採取が収集される:前投与直前投与の30分以内、点滴中10±1、15±1、20±1、40±2、60±2、および90±2分、ならびに点滴の終わり約120分、ならびに点滴の完了5±1、10±1、20±1、30±1、40±2、60±2、および120±2分後。SBC-102の調製来院1日目に記録された対象の体重は、各点滴のSBC-102量を計算するために使用される。IV点滴用のSBC-102医薬品は、以下のステップを使用して、希釈により調製される。1.バイアルが冷蔵庫から取り出される。2.バイアルの使用期限が過ぎていないことを確認する。3.投与に必要な計算されたSBC-102の総量が決定される。例:対象の体重kg:70kg対象の用量レベル:3mgkg-1薬物の濃度:2.0mgmL-14.以下の0.9の生理食塩水の点滴袋は、投与群の割り当てに基づき使用される。5.投与に必要なSBC-102の容量に等しい容量上記ステップ3で計算されるは、100mLまたは250mLのいずれかの0.9の生理食塩水の点滴袋から取り出される即ち、上記の例を使用すると、105mLの生理食塩水が250mLの点滴袋から取り出される。6.0.9の生理食塩水に対する計算されたSBC-102の総量が作製され、移される即ち、上記の例を使用すると、105mLのSBC-102溶液が作製され、点滴袋に移される。7.袋を混合するために、ゆっくりした反転を使用する。rhLALの投与1.IV点滴管類が希釈されたSBC-102の袋に取り付けられる。2.管類を準備し、全ての空気を排出する。3.約100分にわたり以下の速度で総量を投与するために、流動制御デバイス上の点滴速度を設定する。4.対象によって変動し、かつ前肘静脈または手首の静脈または中心静脈カテーテルを含んでもよいIV点滴部位が選択される。5.IV管類が血管カテーテルに取り付けられる。開通性を評価し、生理食塩水が容易に流れるかを検証するために、生理食塩水がIV路に注入される。6.IV路は、テープで固定される。7.流動制御でデバイスを使用して、SBC-102点滴が開始される。8.点滴は、定期的に監視される。9.袋が空になったら、注入ポートを使用して、25mLの0.9生理食塩水を直ぐに点滴袋に注入する。10.点滴が完了するまで、ラインを同じ点滴速度で流す0.35mgkg-1および1mgkg-1用量において、1時間当り60mL[1分当り1mL]、そして3mgkg-1用量において、1時間当り150mL[1分当り2.5mL]。点滴の終了は、点滴および流しが完了し、文書化されたときと定義される。点滴反応点滴関連反応IRRは、少なくとも点滴におそらく関連する免疫学的に媒介される有害事象として定義される。IRRは、急性点滴の開始の24時間以内に生じるまたは遅延性点滴後1~14日の間に生じるのいずれかとして分類される。過敏反応の治療のための薬物および機器は、予想外の重度の過敏反応の場合の即時使用のために利用可能でなければならない。これらは、酸素、アセトアミノフェン、抗ヒスタミン剤例えば、ジフェンヒドラミン、非経口、およびPO、コルチコステロイド、エピネフリン、および心肺機能救急蘇生デバイスを含むが、これらに限定されない。急性IRRの可能性の兆しは、充血、紅潮、発熱および/または悪寒、吐気、そう痒、蕁麻疹、胃腸症状嘔吐、下痢、腹部痙攣、胸痛、呼吸困難、喘鳴、喘音、低血圧もしくは高血圧を含む心肺反応であり得る。上記の兆しおよび症状のいずれか点滴中に観察され、対象が血行動態的に安定している場合、点滴速度を遅くするか、または停止しなければならない。対象が過敏症の兆しを示し続ける場合、IMまたは低IV用量の抗ヒスタミン剤を投与するべきである。臨床的に顕著な心血管または呼吸器作用を伴う重度の点滴反応が認められる患者においては、点滴を中断するべきである。そのようなアナフィラキシー反応において、対象は、静脈内抗ヒスタミン剤、コルチコステロイド、およびエピネフリンを用いて治療され得る。実施例8ラットモデルにおける組み換えLALの投与組み換えヒトLALの反復投与の体重、組織トリグリセリドおよびコレステロール、肝腫大、脾腫大、リンパ節腫大、腸管重量、および他のパラメータに対する作用が、YoshidaandKuriyama1990LaboratoryAnimalScience,vol40,p486-489に記載されるLAL欠乏ドンリュウラットにおいて評価されKuriyamaetal1990JournalofLipidResearch,vol31,p1605-1611、Nakagawaetal,1995JournalofLipidResearch,vol36,p2212-2218も参照、その開示は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。LAL欠失LAL-/-にホモ接合性である4週齢のドンリュウラットは、遺伝子導入ニワトリの卵管系で産生された組み換えヒトLALまたは生理食塩水プラセボのいずれかを用いて投与される群に割り当てられた。野生型の同年齢の同腹仔のラットを対照として使用した。LAL-/-ラットは、単一用量として、または30分の間隔をあけて与えられる2等用量で、尾血管注入により、4週間の間、週に1回合計4用量または4週間の間、2週に1回合計2用量を投与された。組み換えLALの用量は、1mg/kgまたは5mg/kgであった。投与スケジュールを表5に示す。アナフィラキシー反応の可能性を相殺するために、ラットをジフェンヒドラミン5mg/kgを用いて前治療されたが、これは、リソソーム蓄積症の治療のための酵素置換療法の動物モデルにおける以前の経験に基づく手順でありShulletal.1994ProceedingsoftheNationalAcademyofScience,vol91,p.12937、Bielickietal.1999TheJournalofBiologicalChemistry,274,p.36335、Vogleretal.1999PediatricResearch,45,p.838.、それらの開示は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。図9は、1週当り1mg/kgの組み換えLAL、もしくは1週当り5mg/kgの組み換えLAL、または2週当り5mg/kgの組み換えLALのいずれかで投与されたラットの体重増加の毎日の進展を示す。2つの用量数と頻度との間の治療的作用には、ほとんど、または全く差がないことが図から分かる。実施例9組み換えLALを用いて治療されたLAL-/-ラットの病理検査実施例8に記載される研究の終了時、研究動物は、人道的に安楽死され、肉眼による病理像、組織病理像、および臨床化学を検査するために剖検された。肉眼による剖検は、身体の外表面、全ての開口部、ならびに頭部、胸部、および腹部空洞、ならびにそれらの内容物の検査を含んだ。内部臓器および組織の塊は、ラットに対して決定され、臓器および組織は、採取され、10の中性-緩衝ホルマリンで固定された。固定後、組織を処理し、ヘマトキシリンおよびエオシン染色切片の組織学的スライドを準備し、評価した。分析された治療された動物の肉眼による病理学的検査は、図10に示される解剖に見られるように、肝臓の大きさおよび色の実質的な正常化を示した。臓器対体重比が決定され、プラセボ治療されたラットと比較して、解剖された良好に治療された動物の肝臓、脾臓、腸間膜組織、十二指腸、空腸、および回腸の相対的な臓器の大きさにおいて減少を示した。分析された組み換えLAL治療されたラットからの肝組織の組織病理像は、プラセボ治療された動物の泡沫状のマクロファージの実質的な蓄積とは好対照に、基本的に正常な肝臓組織像を示す図10。実施例10マクロファージおよび線維芽細胞リソソームにおける組み換えヒトLALの内在化遺伝子導入鳥由来の組み換えヒトLALSBC-102が細胞に結合する、およびリソソームコンパートメントに内在化される能力は、マクロファージおよび線維芽細胞の細胞を使用して、生体外で検証された。マクロファージ細胞と共にインキュベートされるとき、蛍光的に標識されたSBC-102は、リソソームに局在化することが分かった。この作用は、マンノース多糖競合物を使用する、N-アセチルグルコサミン/マンノースGlcNAc/マンノース受容体を認識の機構として関係付ける、およびこれらの細胞による取り込みにより弱毒化され得る。SBC-102は、生体外でインキュベートした後、LAL欠乏ヒト線維芽細胞および正常なマウス線維芽細胞の両方において、細胞関連LAL活性を増加させ、SBC-102への露出が欠乏した酵素活性の実質的な置換をもたらすことができることを示す。マンノース-6-リン酸塩M6Pは、遍在するM6P受容体を介して、リソソーム酵素の広範な細胞の種類への送達に関与することが示されているSBC-102のオリゴ糖構造に存在する。組み換えLALは、遺伝子導入メンドリの卵白から精製された。OregonGreenNHSは、Invitrogen登録商標0-10241から得た。ラット肺胞マクロファージ系のNR8383、およびマウス線維芽細胞系のNIH-3T3は、ATCCから得た。LAL欠乏ウォルマン線維芽細胞は、CoriellInstituteforMedicalResearchから得、LysoTracker登録商標Redは、Invitrogen登録商標から得た。酵素標識:PBS中の4mgの遺伝子導入鳥由来のLALを、製造者の推奨に従いOregonGreenで標識し、続いて反応をPBSに対して透析し、次いで濃縮した。マクロファージの取り込み:蛍光的に標識された遺伝子導入鳥由来のLAL5μg/mLおよびLysoTracker登録商標Redを、2時間、NR8383細胞と共にインキュベートした。488nm、次いで514nmの定順位走査モードを使用して、共焦点蛍光顕微鏡法により細胞を検査した。マンナンを用いた拮抗阻害:蛍光的に標識されたSBC-1025ug/mLおよびマンナンを、2時間、NR8383細胞と共にインキュベートした。細胞をトリプシン処理し、エンドポイントとして中央蛍光強度を使用して、蛍光活性化された細胞選別により組み換えLAL取り込みを測定した。遺伝子導入鳥由来LALが取り込まれ、続いて標的細胞のリソソームの中へ組み込まれる能力は、マクロファージ細胞系のNR8383を使用して検査された。蛍光的に標識された遺伝子導入鳥由来LALおよびリソソームマーカーのLysoTracker登録商標RedInvitrogen登録商標を、2時間、細胞と共にインキュベートした。遺伝子導入鳥由来LALおよびリソソームマーカーの、これらの細胞のリソソームへの共局在化は、続いて、定順位走査モードを使用して、共焦点蛍光顕微鏡法により検査された図11。組み換えLALは、リソソームへの局在化を示し、これは、様々な供給源からの組み換えヒトrhLALを使用した類似する生体外研究と一致する。遺伝子導入鳥由来LALのGlcNAc/マンノース受容体への結合特異性は、マクロファージ細胞系のNR8383を使用して、競合結合アッセイにより評価された図12。5μg/mLの蛍光標識されたOregonGreen遺伝子導入鳥由来LAL、および様々な濃度のマンノース含有オリゴ糖、マンナンを、2時間、細胞と共に同時にインキュベートした。エンドポイントとして中央蛍光強度を使用して、マンナンを含まない対照と比較した、マンナンにより取り込まれた遺伝子導入鳥由来LALの相対阻害が、蛍光活性化された細胞選別分析により定量化された。遺伝子導入鳥由来LAL結合/取り込みにおいて、マンノース用量依存阻害が観察され、これは、遺伝子導入鳥由来LAL:GlcNAcR相互作用と一致する。加えて、線維芽細胞の細胞におけるマンノース-6-リン酸塩媒介取り込みが、マンノース-6-リン酸塩との競合実験により示された。実施例11治療された細胞におけるLAL活性の増加LALは、コレステロール、グリセロール、および遊離脂肪酸を取り除くために、コレステロールエステルおよびトリグリセリドの加水分解を触媒する。よって、LAL活性は、例えば、蛍光基質であるオレイン酸4-メチルウンベリフェリル4MUOの切断により測定され得る。線維芽細胞遺伝子導入鳥由来LALの曝露が細胞のLAL活性を増加させる能力が、生体外で正常細胞およびLAL欠乏細胞の両方を使用して検査された。線維芽細胞をウォルマン患者から単離し、0、0.16、または0.5マイクログラム/mLのいずれかの濃度の遺伝子導入鳥由来LALの存在下で、正常なマウス線維芽細胞NIH-3T3を5時間インキュベートした。次いで、非特異的シグナルを取り除くために細胞を洗浄し、オレイン酸4-メチルインベリフェリル4-MUO基質を使用して、LAL活性について細胞溶解物をアッセイした。図13は、内因性細胞関連LAL活性が、NIH-3T3と比較して、ウォルマン線維芽細胞で低く、遺伝子導入鳥由来LALと共にインキュベートした後のLAL活性の用量依存増加が両方の細胞種において観察されたことを示す図13。白血球血清単核白血球は、投与前および投与後のLAL欠乏症患者から得た。血液試料は、酵素活性を損失することなく冷蔵庫で保管された。単核白血球リンパ球は、フィコールおよびジアトリゾ酸ナトリウムの調製物を使用して、血液から単離された。ハンクス平衡塩溶液で1:1に事前に希釈した4~8mLの血液を、3mLのフィコール-パック上に静かに重ね、遠心分離した。単核細胞環を吸引し、ハンクス溶液で1回、次いで、1~2mLの水にペレットを再懸濁することにより少なくとも2回洗浄した。使用前に-20°Cでペレットを凍結させた。アッセイ前に、ペレットを解凍し、蒸留水に再懸濁し、氷上で超音波処理した。次いで、調製物を20,000×gで15分間、4°Cで遠心分離した。アッセイ前に、上清0.5~1.5mgのタンパク質/mLを含有するを氷上に維持した。酸リパーゼアッセイ用の基質は、ヘキサン中の1mlの10mM4MUOオレイン酸4-メチルウンベリフェリルを、CHCI3中の1mLの16mML-α-ホスファチジルコリンに添加することにより調製された。N2下で溶媒を蒸発させ、水中の25mlの2.4mMタウロデオキシコール酸ナトリウム塩を添加した。混合物を30~40Wで1~2分間、氷上で超音波処理した。アッセイ前に、1容量の基質ストックを7容量の200mM酢酸ナトリウム/酢酸緩衝液pH4.0で希釈した。各2mLの反応キュベットは、100nmolのオレイン酸4-メチルウンベリフェリル、160nmolのL-α-ホスファチジルコリン、および600nmolのタウロデオキシコール酸ナトリウムを含有した。5~100μLの酵素を添加することによって反応を開始させ、分光蛍光光度計を使用して37°Cで監視した。4MUOの切断は、例えば、放出されたフルオロフォアである4-メチルウンベリフェロン4MUの約360nmでの励起、および約460nmでの発光により検出された。経時的な蛍光の変化が記録された。実施例12組み換えヒトLALSBC-102の生体内分析LAL欠乏ヨシダラット即ち、ホモ接合Kuriyamaetal.1990,JournalofLipidResearch,vol.31,p1605-1611、Nakagawaetal.,1995JournalofLipidResearch,vol.36,p2212-2218、およびYoshidaandKuriyama1990LaboratoryAnimalScience,vol.40,p486-489を参照は、4週齢から4週間の間、1回/週でSBC-1025mg/kg、IVまたはプラセボのいずれかで治療された。各投与において、SBC-102は、30分の間隔をあけて2等用量2.5mg/kgでラットの尾血管に注入された。ラットおよび同年齢野生型対照は、最終用量の1週間後に検査された。分析は三つ組で行われた。SBC-102治療された動物の肉眼による病理検査は、臓器の大きさの減少に加え、肝臓の色の正常化を示した。SBC-102治療されたラットは、ビヒクル治療された動物の泡沫状のマクロファージの実質的な蓄積とは好対照に、基本的に正常な肝臓組織像を示した。LAL-/-ラットでは上昇した血清アラニンおよびアスパラギントランスフェラーゼのレベルも、SBC-102治療されたラットでは低下した。内部臓器および組織の塊は、各ラットに対して決定され、そのデータを図14に示す。臓器の大きさは、4週間、5mg/kgのビヒクルまたはSBC-102を毎週投与された後のLAL-/-ラットおよびLAL/ラットにおける、8週齢で決定された体重率として表される。SBC-102またはビヒクル治療されたヨシダラットの体重は、図15に示されるように、野生型ラットと比較された。SBC-1025mg/kgまたはビヒクルは、単一用量として、または分割用量4時間以内の間に与えられるとしてのいずれかで、IV注入によりLAL-/-ラットに投与された。LAL/ラットは、同年齢の同腹仔対照であった。実施例13トリグリセリド分析トリグリセリド分析は、野生型のホモ接合プラセボおよびホモ接合SBC-102治療された動物からの肝臓および脾臓組織に対して実施された。トリグリセリド分析は、標準的な方法論即ち、MBLInternationalのトリグリセリド定量化キット、カタログJM-K622-100を使用して実施され、三つ組で行われた。肝臓基質レベル図16は、4週間、5mgkg-1のビヒクルまたはSBC-102を毎週投与された後のWTおよびLAL欠乏ラットにおける、8週齢で決定された肝臓コレステロール、コレステリルエステル、およびトリグリセリドのレベルを示す。実施例14ラット用量反応研究上記で実施された研究に基づき、LAL-/-ラットにおいて、用量の範囲および投与スケジュールqwおよびqowの薬物動態PD作用を検査した。これらの研究において、4週齢から1ヶ月間、SBC-102が、0.2、1、3、および5mg/kgqow、または0.35、1.0、および5.0mg/kgqwの投与量で、IV注入により投与された。結果は、体重BW増加図17、臓器巨大症図18、および組織基質レベル図19の改善を示す。SBC-102の用量が増加すると、血清トランスアミナーゼレベルも低下し、より高い用量で、レベルは、実質的に野生型レベルに達した。実施例15SBC-102の薬物動態a.試料採取PK試料は、遅発性LAL欠乏症に罹患する成人患者から得た。患者は、2時間、0.35mg/kgを投与された。0日目用量1、来院2回目および21日目用量4、来院6日目の血清試料が、用量直前投与の30分以内、点滴中DI10±1、15±1、20±1、40±2、60±2、および90±2分、ならびに点滴の終わりEOI点滴の開始から約120分、ならびに点滴の完了AI5±1、10±1、20±1、30±1、40±2、60±2、および120±2分後に収集される。b.血清酵素アッセイ-20°Cの冷凍庫に保持された4-MUO4mMを、使用前に、暗所で、4°Cの冷蔵庫で解凍し、暗所で1.5時間、25°Cのインキュベータに設置した。SBC-102医薬品を1.56ng/mLに希釈することにより標準物を調製した。ブランクアッセイ緩衝液を含んだ。第1希釈用に、全ての試料を50ng/mLに希釈した。希釈物を作製した直後に標準物および試料を平板培養した。標準物および試料を調製した後、62.5uLのアッセイ緩衝液0.2mol/L酢酸ナトリウム三水和物、pH5.5を各ウェルに添加した。二つ組で、12.5uLの標準物および試料を各ウェルに添加した。4のトリトンX-100を用いて4-MUO4mMを1.6×に希釈し、ウェル当り25uLを添加した。多穴プレートを軽く数回たたいて混合し、きつく密封し、30分間、37°Cのインキュベータに設置した。インキュベート後、50uLの停止溶液0.77Mトリス、pH8.0を各ウェルに添加し、150uL/ウェルの最終容量を作製した。プレートをマイクロプレートリーダーに設置し、360nmの励起および460nmの発光で、プレートの底部から蛍光のレベルを測定した。表7~11に示されるように、遅発性LAL欠乏症に罹患する成人患者に投与された組み換えLALの血清Cmaxは、約270ng/mL~720ng/mLの範囲であった。半減期t1/2は、7.6分~16.7分の範囲であり、平均t1/2は、約13分標準偏差3.812であった。実施例16免疫原性分析:抗SBC-102の測定各不明の陽性および陰性試料を、1×PBS中の5の粉ミルクに1:20に希釈し、回転器500rpm上で12~18時間、4°Cでインキュベートした。アッセイ前に、試料を2000×gで20分間遠心分離し、上清を新しい1.5ml管に移した。SBC-102を、1XPBS緩衝液中で0.5ug/mLの濃度に希釈し、100uLを96ウェルELISAプレートの各ウェルに設置した。プレートを接着カバーで覆い、室温で8時間または一晩、4°Cでインキュベートした。インキュベート後、ウェルを1×洗浄緩衝液で3回洗浄した。200uLの5BSA-無IgGを各ウェルに添加し、プレートを密封し、4°Cで12~18時間または室温で2時間インキュベートした。インキュベート後、ウェルを1×洗浄緩衝液で3回洗浄した。100uLの各対照試料、不明試料、および陰性試料を三つ組でウェルに添加した。プレートをマイクロプレート振とう器500rpm上で室温で1.5時間インキュベートした。インキュベート後、ウェルを1×洗浄緩衝液で3回洗浄した。希釈緩衝液で100ng/mLの濃度に希釈された100uLのビオチン化したSBC-102を各ウェルに添加し、プレートをマイクロプレート振とう器500rpm上で、室温で1.5時間インキュベートした。インキュベート後、ウェルを1×洗浄緩衝液で洗浄した。希釈緩衝液で1:4000に希釈された100uLのストレプトアビジン-HRP抱合体を各ウェルに添加した。プレートをマイクロプレート振とう器500rpm上で、室温で1.5時間インキュベートした。インキュベート後、ウェルを1×洗浄緩衝液で4回洗浄した。100uLのTMB基質を各ウェルに添加し、プレートを暗所で15分間インキュベートした。50uLの停止溶液0.5NH2SO4を各ウェルに添加し、反応を停止させた。450nmでのODを測定した。表12に一覧にされるように、4週間、0.35mg/kgの用量のSBC-102を毎週受けた患者は、抗SBC-102抗体のレベルの上昇を示さず、SBC-102点滴による酵素置換療法がヒト患者においていずれの顕著な免疫原性を引き起こさないことを示唆する。これらの患者は、いずれの有害事象または点滴関連反応IRRを示さなかった。実施例17組み換えLALの投与によるウォルマン病WDの治療生後以来体重増加困難および発育不良のため、7週齢の女子の患者が入院した。最初の身体検査で、患者の体重は、3.6kg出生時体重3.7kgであり、痩せており、皮下脂肪は緩い。腹部は膨満し、6cmの堅い肝腫大および4cmの脾腫大を伴う。肥大したリンパ節が鼠径部で認められ、筋活動は弱い。最初のヘモグロビンレベルは9.2gm、血小板は506,000、白血球は11,550である。尿検査は正常であり、骨髄塗抹標本から、空胞のあるリンパ球および多数の泡沫状細胞が明らかである。血清化学測定値:総脂質834mg/100ml、リン脂質176mg/100ml、トリグリセリド141mg/100ml、コレステロール129mg/100ml、ビリルビン0.3mg/100ml、アルカリホスファターゼ9.0BU、SGOT90単位、SGPT50単位、コリンエステラーゼ20単位、尿素窒素8.3mg、空腹時の糖45mg/100ml。腹部のCTスキャンは、カルシウム沈着を伴う肝脾腫大および両側性の対照的に肥大した副腎を示す。患者は、投与のための静脈血管アクセスポートを外科的に移植される。ポートを携帯型点滴機に接続した後、アナフィラキシー点滴反応の可能性を相殺するために、患者は、組み換えLAL点滴の前に20分間、1mg/kgのジフェンヒドラミンで前治療される。次いで、患者は、静脈内点滴により5時間にわたり1mg/kgの組み換えLALを投与される。この療法は、無期限で、7日毎に1回繰り返される。最初の用量の組み換えLALを投与してから2週間以内に、患者は、超音波により決定される、体重増加および主要な腹部臓器の大きさについて評価される。患者のリソソーム酸リパーゼ活性を試験する実験結果も実施される。実施例18組み換えLALの投与によるコレステリルエステル蓄積症CESDの治療そう痒性腹部皮疹を伴う3歳の男子が、彼の小児科医によって検査される。腹部検査時、肝腫大が医師によって認められ、超音波によって確認される。この時点では、診断は行われず、患者は定期的に監視される。8歳で、彼は胃腸炎で病院に入院する。肝臓生検の光学顕微鏡法は、肝細胞に細胞質内グリコーゲンおよび小さい脂質滴の増加を示す。電子顕微鏡法は、小さい高電子密度顆粒を伴う膜結合脂質滴を示す。グリコーゲン蓄積症III型脱分枝酵素欠損症の仮診断がなされたが、皮膚線維芽細胞脱分枝活性は正常である。10歳で、肝腫大が持続し、2回目の肝臓生検が行われる。光学顕微鏡法は、軽度の門脈周囲線維症を伴う、細胞質顆粒および空胞を含有する膨満した肝細胞を伴った肝臓軟組織の小葉構造の変化を示す。線維芽細胞酸リパーゼ活性は、正常の7であることが判明し、CESDの診断を確認する。総コレステロールTC、トリグリセリドTG、低密度リポタンパク質コレステロールLDL-Cの血漿濃度は、それぞれ、7.51、3.24、および5.58mmol/Lで、年齢および性別の第95パーセンタイルよりそれぞれ上であるが、一方で、血漿高密度リポタンパク質コレステロールHDL-Cは、0.47mmol/Lで、第5パーセンタイルより下であり、彼は、複合型高脂血症高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、低αリポタンパク血症、および高βリポタンパク血症である。患者は、投与のための静脈血管アクセスポートを外科的に移植される。ポートを携帯型点滴機に接続した後、アナフィラキシー点滴反応の可能性を相殺するために、患者は、組み換えLAL点滴の前に20分間、5mg/kgのジフェンヒドラミンで前治療される。次いで、患者は、静脈内点滴により5時間にわたり5mg/kgの組み換えLALを投与される。この療法は、無期限で、14日毎に1回繰り返される。最初の用量の組み換えLALを投与してから2週間以内に、患者は体重増加および主要な腹部臓器の大きさについて、超音波検査によって決定されたとおりに評価される。患者のリソソーム酸リパーゼ活性を試験する実験結果も実施される。上記明細書の各実施例は、本発明の説明のために提供され、本発明を制限するものではない。実際、様々な修正、組み合せ、追加、除去、および変形が本発明の範囲または趣旨から逸脱することなく本発明になされてもよいことは、当業者には明らかであろう。例えば、一実施形態の一部として図示または説明される特色は、またさらなる実施形態を得るために、別の実施形態に使用されてもよい。本発明は、そのような修正、組み合わせ、追加、除去、および変形を網羅することが意図される。本明細書に引用される全ての刊行物、特許、特許出願、インターネットサイト、および受入番号/データベース配列ポリヌクレオチドおよびポリペプチド配列の両方を含むは、各個別の刊行物、特許、特許出願、インターネットサイト、および受入番号/データベース配列が参照によりそのように組み込まれるように具体的かつ個別に示されるのと同じ程度に、全ての目的において、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。"