"ヒトサイトメガロウイルスHCMVによる哺乳動物細胞の感染後に放出されるウイルス粒子であって、a該粒子が、ウイルス糖タンパク質が包埋されている脂質膜によって包まれ、b該粒子が、ウイルスDNAまたはキャプシドのいずれも含まず、かつ、c該粒子が、T細胞抗原pp65の1つ以上の部分と、少なくとも1つの異種ペプチドとを含有する融合タンパク質を含み、前記少なくとも1つの異種ペプチドが、T細胞抗原pp65のアミノ酸配列のアミノ酸位置W175またはA534に挿入されているウイルス粒子。前記少なくとも1つの異種ペプチドが、T細胞抗原pp65のアミノ酸配列のアミノ酸位置W175に挿入されている、請求項1に記載のウイルス粒子。前記T細胞抗原pp65の前記アミノ酸配列が、配列番号1に従うアミノ酸配列を含む、請求項1または2に記載のウイルス粒子。前記粒子が高度に抗原性である、請求項1~3のいずれか一項に記載のウイルス粒子。前記粒子が中和抗体の形成を誘導することができる、請求項1~4のいずれか一項に記載のウイルス粒子。前記粒子がCD8Tリンパ球応答を誘導することができる、請求項1~5のいずれか一項に記載のウイルス粒子。前記少なくとも1つの異種ペプチドがMHCクラスI提示抗原である、請求項1~6のいずれか一項に記載のウイルス粒子。前記少なくとも1つの異種ペプチドが、pp65とは異なる1つ以上のタンパク質の1つ以上の部分を含む、または、1つ以上の部分から形成される、請求項1~7のいずれか一項に記載のウイルス粒子。前記少なくとも1つの異種ペプチドが、HCMV糖タンパク質の1つ以上の部分を含む、または、1つ以上の部分である、請求項1~8のいずれか一項に記載のウイルス粒子。前記少なくとも1つの異種ペプチドが、HCMV糖タンパク質gBの1つ以上の部分を含む、または、1つ以上の部分である、請求項1~9のいずれか一項に記載のウイルス粒子。前記少なくとも1つの異種ペプチドが、HCMV糖タンパク質gHの1つ以上の部分を含む、または、1つ以上の部分である、請求項1~9のいずれか一項に記載のウイルス粒子。前記少なくとも1つの異種ペプチドが、異なるHCMV株からの特定の糖タンパク質の変異体である少なくとも2つのHCMV糖タンパク質を含む、または、前記少なくとも2つのHCMV糖タンパク質から成る、請求項1~9のいずれか一項に記載のウイルス粒子。前記特定の糖タンパク質の少なくとも2つの変異体の一方が、HCMVのTowne株の変異体であり、前記特定の糖タンパク質の少なくとも2つの変異体の他方が、HCMVのAd169株の変異体である、請求項12に記載のウイルス粒子。前記糖タンパク質が、HCMVのgBタンパク質である、請求項12または13に記載のウイルス粒子。前記少なくとも1つの異種ペプチドが、HCMVタンパク質IE1の1つ以上の部分を含む、または、1つ以上の部分である、請求項1~8のいずれか一項に記載のウイルス粒子。前記少なくとも1つの異種ペプチドが、HCMV糖タンパク質の1つ以上の部分と、前記HCMVタンパク質IE1の1つ以上の部分とを含む、または、1つ以上の部分である、請求項1~8のいずれか一項に記載のウイルス粒子。前記少なくとも1つの異種ペプチドが、HCMV以外のヒト病原体の部分であるタンパク質の1つ以上の部分である、請求項1~8のいずれか一項に記載のウイルス粒子。HCMV以外のヒト病原体の部分である前記タンパク質が、HCMV以外の前記ヒト病原体によるヒトの自然感染時に、それに対する細胞傷害性Tリンパ球がヒトにおいて形成されるタンパク質である、請求項17に記載のウイルス粒子。HCMV以外の前記ヒト病原体が、HIV-1、HBV、HCVおよびインフルエンザを含む群から選択される前記ヒト病原体である、請求項18に記載のウイルス粒子。前記融合タンパク質が、完全長T細胞抗原pp65と、少なくとも1つの異種ペプチドとを含む前記融合タンパク質である、請求項1~19のいずれか一項に記載のウイルス粒子。疾患の治療および/または予防のための薬剤を製造するための、請求項1~20のいずれか一項に記載のウイルス粒子または複数のウイルス粒子。疾患の治療および/または予防のための方法における使用のための、請求項1~20のいずれか一項に記載のウイルス粒子または複数のウイルス粒子。前記疾患が、前記少なくとも1つの異種ペプチドもしくはその誘導体に対する中和抗体の形成によって、または、前記少なくとも1つの異種ペプチドもしくはその誘導体に対するCD8Tリンパ球応答の誘導によって治療および/または予防することができる疾患である、請求項21または22に記載のウイルス粒子。ワクチンの製造のための、請求項1~20のいずれか一項に記載のウイルス粒子または複数のウイルス粒子。前記ワクチンが、HCMV感染の治療および/または予防のためである、請求項24に記載のウイルス粒子。前記ワクチンが、移植の副作用の治療および/または予防のためである、請求項24に記載のウイルス粒子。前記移植が、固形臓器または造血幹細胞の移植である、請求項26に記載のウイルス粒子。前記副作用が、HCMV感染によって引き起こされるまたはHCMV感染に付随している、請求項26または27に記載のウイルス粒子。前記疾患または副作用の治療および/または予防のための薬剤を製造するための、請求項1~20のいずれか一項に記載のウイルス粒子の使用であって、該疾患または副作用が前記請求項のいずれか一項で定義される疾患または副作用である、ウイルス粒子の使用。疾患または副作用の前記治療および/または予防のためのワクチンを製造するための、請求項1~20のいずれか一項に記載のウイルス粒子の使用であって、該疾患または副作用が前記請求項のいずれか一項で定義される疾患または副作用である、ウイルス粒子の使用。図1は、HCMV組換え体に感染した、HFFの間接免疫蛍光分析の結果を示す。細胞を、示されているウイルスに4日間感染させ、その後免疫蛍光分析用に処理した。各々のウイルスによって発現される組換えpp65の形状を顕微鏡写真の下に示す。挿入部位に隣接するpp65のN末端アミノ酸を示す。図2は、pp65融合タンパク質の発現、組換えウイルスの複製、ならびに、ビリオンへの融合タンパク質およびDBへの融合タンパク質のパッケージングの効率を示す。A2日間および4日間感染させたHFFの免疫ブロット分析。細胞を感染多重度2で感染させ、分析のために指示されている時点で収集した。フィルタをpp65特異的モノクローナル抗体65-33でプローブした。各々のレーンのタンパク質の量をβ-アクチンに対して基準化した。B感染HFFの細胞培養上清中のウイルスゲノムの定量的DNA-PCR分析。細胞を10ゲノム/細胞の感染多重度で感染させた。培養上清を指示されている時点で収集し、凍結した。PCR分析を同じアッセイにおいて並行して実施した。CrecDBまたはビリオンにパッケージングされたpp65の免疫ブロット分析。細胞を組換えウイルスまたは野生型RV-HB5に6~7日間感染させた。上清をグリセロール-酒石酸勾配遠心分離に供し、ビリオン画分およびDB画分を収集した。これらの画分を、モノクローナル抗体65-33を使用してまたは、内部標準としてウイルスgBに対するモノクローナル抗体を使用して、免疫ブロット法によって分析した。図3は、recDBで処理した、HLA-A2陽性HFFによるMHCクラスI提示のIFN-γ-Elispot分析の結果を示す。細胞を指示されているDBで処理し、その後、pp65NLV-CTLAまたはIE1TMY-CTLBのいずれかを応答細胞として使用して、IFN-γ-Elispot分析における刺激細胞として用いた。図4は、recDBDで免疫したHHDマウスからのCD8富化脾細胞のエクスビボIFN-γ-Elispot分析の結果を示す。コグネイトペプチドを負荷したRMA-S細胞を刺激細胞として用いた。バーの大きさは、Boehmetal[37]によって述べられている線形回帰分析によって決定された、IFN-γを分泌するCD8T細胞の最も可能性の高い頻度を表す。誤差バーは95信頼区間を示す。<実験材料および方法>1.細胞一次ヒト包皮線維芽細胞、CTL株、およびT2細胞を、以前に記述されているように[23]培養した。RMA-S細胞[24]を、10FCS、2mMのL-グルタミン、50mgゲンタマイシンL-1および5μMのβ-メルカプトエタノールを添加したRPMI-1640培地PAALaboratories,Coelbe,Germanyで増殖させた。2.プラスミドおよびウイルスウイルスDNAの突然変異誘発のために、HCMV細菌人工染色体BACpHB5[25]を使用した。pHB5の突然変異誘発を、別のところで記述されているように[21]galK陽性/陰性選択手順[26]に従って実施した。UL83オープンリーディングフレームに挿入したDNA配列は、正確なプロテアソームプロセシングを可能にするため付加的なアミノ酸によって隣接された、HLA-A2提示ペプチドIE1TMY[IE1297-305]をコードした。pp65に融合した付加的なポリペプチドはTSDACMMTMYGGISLLSEFCであり、HLA-A2提示ノナペプチドに下線を付している。BACクローンからのウイルス再構成をHobometal.[27]に従って実施した。ウイルスストックを作製し、力価を測定して、感染後48時間目にIE1陽性細胞を計数することによって、または、[28]に記述されているように細胞外ウイルスゲノムのTaqManDNAPCR分析によって定量化した。HFFを7日間感染させた。感染多重度0.1での感染により、おおよそ10個の細胞内ウイルスゲノムが生じた。3.高密度体の精製、間接免疫蛍光分析および免疫ブロット法IrmiereandGibson[29]によって最初に公表し、以前に記述されているように[20]、グリセロール-酒石酸勾配超遠心分離法によって後期感染HFFからDBを精製した。間接免疫蛍光分析を[30]に記述されているように実施した。モノクローナル抗体65-33W.Britt,UniversityofAlabama,Birmingham,Alabama,USAの好意により提供されたおよびFITC結合二次抗体DAKO,Hamburg,Germanyを使用してpp65を標識した。核をDAPIで対比染色した。Axiophot-1顕微鏡Zeissを1000倍の倍率で使用して免疫蛍光分析からのデータを収集した。免疫ブロット法のために、タンパク質試料を還元条件下で変性させ、SDS-PAGEによって分離して、400mAで1時間45分間電気ブロッティングすることによってニトロセルロース膜Millipore,Schwalbach,Germanyに転写した。膜をpp65、β-アクチンRockland,Gilbertsville,PA,USAおよび糖タンパク質BgBに対する抗体[31]と共にインキュベートした。ウエスタンブロットを、ALEXAFluor680Invitrogen,Karlsruhe,GermanyまたはIRdye800Rocklandに結合した抗マウスまたは抗ウサギ二次抗体でプローブした。ブロットしたタンパク質を検出し、Odyssey赤外画像システムLI-COR,Lincoln,Nebraska,USAを用いて定量化した。2.4インターフェロンγ-recDBと共にインキュベートしたHFFのElispotアッセイ酵素結合免疫スポットElispotアッセイを以前に述べられているように[23;32]実施した。HLA-A0201A2拘束性HCMV由来ペプチドpp65495-503pp65NLV-CTL[33;34]およびIE1297-305IE1TMY-CTL[35]に特異的なCTL株をこれらの分析において使用した。CTL株は、HLA-A2/huCD8二重トランスジェニックtgマウスを免疫することによって作製しておいた[23]。2.5HLA-A2トランスジェニックマウスモデル8~12週齢のHLA-A2トランスジェニックマウスHHDマウス、[36]を、それぞれRV-HB5DB-HB5、RV-SB3DB-SB3またはRV-SB6DB-SB6のDBを6μg、またはPBSにより腹腔内免疫した。リンパ球を免疫後7日目に脾臓から調製した。CD8T細胞をMACSソーティングによって富化し、IFN-γ分泌細胞の頻度を、ペプチド負荷したRMA-SHHDまたはT2刺激細胞を使用してエクスビボで直接Elispotによって分析した。この設定で、MilliporeSchwalbach/Ts.,GermanyからのElispotプレートを使用した。Elispotアッセイを製造者の推奨に従って実施した。応答細胞の頻度を、Boehmetal[37]によって述べられているように線形回帰分析によって決定した。<挿入部位の選択は細胞質DBの形成のために極めて重要である>この実施例で説明するように、異種ペプチドの挿入部位の選択は細胞質DBの形成のために極めて重要である。さらに開発すべきワクチン候補物の潜在的可能性は、さらなるスケールアップのために達成され得る収率に決定的に依存する。以前の研究において、異種ペプチド配列をテグメントタンパク質pp65に融合することにより、DBをその抗原含量に関して改変できるという証拠を提供することができた[21]。しかし、HCMVのそれぞれの組換え体に感染させた細胞は限られた量のrecDBしか放出しなかった。そこで、pp65内の他の部位における異種ペプチドのアミノ酸配列などの異種配列の挿入がrecDBの収率を高めるという仮説を試験した。分子の異なる部分の5つの部位を挿入のために選択した図1。挿入したペプチドは、HCMVのIE1タンパク質からのHLA-A2提示ノナペプチドTMYGGISLLIE1TMY[35]を包含する20アミノ酸から成った。galKに基づく選択手順[21;22]を用いて、HCMV-BACプラスミドpHB5[25]を改変することによって組換えウイルスを作製した。組換えBACプラスミドを、制限エンドヌクレアーゼ消化および挿入部位のヌクレオチド配列決定により、正確性に関して分析したデータには示されていない。その後、BACプラスミドのHFFへのトランスフェクションによって組換えウイルスの再構成を実施した。生じたウイルスをDB形成に関して試験した。HFFのHCMV感染の1つの顕著な特徴はDBの細胞質蓄積であり、これは間接免疫蛍光分析IFAによって視覚化することができる。続いて、HFFを新たに作製された突然変異体により感染させ、pp65特異的抗体を使用して感染後d.p.i.4日目にIFAを実施した図1。突然変異体RV-SB3およびRV-SB6に感染した細胞だけが、親ウイルス感染細胞の形成に匹敵するように細胞質DBの形成を示した。これに対し、RV-SB2、RV-SB4およびRV-SB5感染細胞ではDBの形成は全くまたはわずかしか認められなかった。これらの細胞では、後期感染HFFで典型的に見られる、pp65の核-細胞質トランスロケーションが減少していたことに留意しなければならない。これらの結果は、pp65内の異種ペプチド配列の挿入のための部位選択がrecDB形成のために極めて重要であることを示した。IFAの結果に基づき、ウイルスRV-SB3およびRV-SB6をさらなる分析のために選択した。<親株とRV-SB3およびRV-SB6の比較>この実施例で示すように、組換えウイルスRV-SB3およびRV-SB6は、pp65発現、ビリオン放出、および粒子へのpp65のパッケージングに関して親株と同等である。RV-SB3およびRV-SB6感染HFFにおけるpp65の発現レベルを免疫ブロット分析によって試験した。細胞をウイルスまたは親RV-HB5にそれぞれ2または4日間感染させた。細胞溶解物を、Odyssey赤外画像システムを用いて定量的免疫ブロット分析に供した。細胞アクチンの量を内部標準とした図2A。RV-SB3およびRV-SB6感染細胞におけるpp65融合タンパク質の発現レベルは、親RV-HB5に感染させた細胞におけるpp65のレベルと比較して、感染後2日目に低下した。しかし、感染後4日目には、2つの融合タンパク質のレベルは、RV-HB5感染細胞におけるpp65のレベルよりもさらに高いと思われた。これは、recDBの合成を指令するのに十分なタンパク質がRV-SB3およびRV-SB6感染細胞において合成されることを指した。HFFにおいて複製する組換え株の能力を試験するため、細胞を感染多重度0.1で感染させ、10ゲノムコピー/細胞を生じさせて、培養上清を感染後7日目まで1日ごとに収集した。上清中に放出されたウイルスDNAを、定量的PCR分析を用いて定量化した図2B。RV-SB3およびRV-SB6の両方が、親RV-HB5と同様のレベルに複製することが判明した。最後に、グリセロール勾配遠心分離によって感染HFF上清から収集した精製ビリオンおよびDBの免疫ブロット分析によって、融合タンパク質のパッケージングを分析した。この場合は、ウイルスエンベロープ糖タンパク質BgBを内部標準として用いて基準化を実施した。組換え株をそれらの親株と比較した場合、ビリオンまたはDBへのpp65のパッケージングに差は認められなかった図2C。合わせて考慮すると、これらの結果は、RV-SB3およびRV-SB6の両方が、感染細胞における発現およびpp65のパッケージングならびに複製に関してRV-HB5と同等であることを示した。<DB-SB3またはDB-SB6で処理したHFFによるpp65NLVおよびIE1TMYの両方の発現>この実施例は、pp65NLVおよびIE1TMYの両方がDB-SB3またはDB-SB6で処理したHFFによって提示されることを示す。ワクチン開発のためにrecDBを使用することの1つの目標は、移植後の患者における細胞傷害性T細胞の再構成を支持することである。これらの細胞は、ウイルスの再活性化および疾患の予防のために決定的に重要であることが示されている[13;15]、[16]において総説されている。そこで、recDBがpp65由来のpp65NLVおよびIE1由来のIE1TMYの両方をHFFのMHCクラスI提示経路に導入することができるかどうかを試験した。したがって、細胞をrecDBで処理し、その後インターフェロンγElispotアッセイに供した図3。応答細胞として、両方のペプチドに対するCTLクローンpp65NLV-CTL;IE1TMY-CTLを使用した[23]。DB-SB3およびDB-SB6処理細胞の両方がIE1TMYおよびpp65NLVを提示した。pp65NLVの提示はrecDBと野生型DBの間で同等であり、IE1由来配列の挿入がHFFにおけるpp65提示を損なわないことを指した。DB-SB3での細胞の処理は、応答性IE1TMY-CTLの数をpp65特異的応答と同等のレベルにした。しかし、DB-SB6での細胞の処理は、IE1特異的アッセイにおいて著明に低い数の陽性スポットをもたらした。これは、DBとのインキュベーション後にIE1ペプチドを提示するHFFの能力が、ペプチドがpp65に挿入される部位に感受性であることを示した。<組換えDBrecDBでの免疫はIE1TMY特異的およびpp65NLV特異的CD8T細胞を生じさせる>この実施例は、組換えDBrecDBでの免疫が、有意の頻度のIE1TMY特異的CD8T細胞およびpp65NLV特異的CD8T細胞をプライミングすることを示す。以前の実験は、recDBがマウスにおいてIE1TMY特異的CD8T細胞を誘導できることを示していた。しかし、これらの細胞は、免疫マウスからのCD8T細胞画分をコグネイトペプチドによりインビトロ刺激した後にのみ検出可能であった。応答性CD8T細胞はエクスビボでは直接検出されず、特異的細胞の総数、すなわちそれらのrecDBに対する全体的応答が低いことを指した[21]。新たに確立されたrecDBの免疫学的潜在能を評価するため、HLA-A2トランスジェニックHHDマウスをアジュバントの不在下に異なるDBで免疫した。予想されたように、IE1TMYまたはpp65NLVに特異的な応答性CD8T細胞はインビトロ刺激後に検出可能であったデータには示されていない。免疫マウスからの細胞を直接エクスビボでも試験した。このために、脾細胞のCD8画分をMACSソーティングによって分離し、ペプチド負荷した抗原提示細胞を使用してElispot分析により試験した。IE1TMYに特異的なCD8T細胞は、DB-SB3およびDB-SB6のどちらによる免疫後も検出することができた図4。DB-SB3によってプライミングされたIE1特異的応答は、DB-SB6によって誘導された応答よりも強力であると思われたが、どちらも明らかに検出可能なレベルに達した。DB-SB3での免疫後、pp65NLVに対して反応性のCD8T細胞は、野生型DBと比較しておおよそ3倍のレベルで検出することができた。驚くべきことに、しかし、この応答は、DB-SB6での免疫後に選択した実験設定では検出不能であり、pp65NLV特異的応答はエクスビボで検出することができなかった。この結果は2番目の実験において確認され、DB-SB6で免疫することにより免疫優性pp65NLVペプチドに対してプライミングされるCD8T細胞応答が効率的でないことを示した図4。同等の結果が、T2細胞を抗原提示のために選択した場合に得られたデータには示されていない。さらに、これは、これらの細胞がアッセイの検出限界より低い頻度でしか誘導されなかったことを示す。それと一致して、インビトロでのpp65NLV特異的T細胞の再刺激は、IE1TMY特異的細胞と比較して遅延したデータには示されていない。合わせて考慮すると、これらの実験は、特に、異種抗原性ペプチドに対するCD8T細胞応答をプライミングするDB-SB3の潜在能を証明した。参考文献のリスト:本出願では、以下のように様々な参考文献を引用する。1MwintshiKBrennanDCPreventionandmanagementofcytomegalovirusinfectioninsolidorgantransplantationExpertRevAntiInfectTher200752953042RubinRHThepathogenesisandclinicalmanagementofcytomegalovirusinfectionintheorgantransplantrecipienttheendofthesilohypothesisCurrOpinInfectDis2007203994073ArthursSKEidAJPedersenRADierkhisingRAKremersWKPatelRetalDelayedonsetprimarycytomegalovirusdiseaseafterlivertransplantationLiverTranspl200713170394ArthursSKEidAJPedersenRAKremersWKCosioFGPatelRetalDelayedonsetprimarycytomegalovirusdiseaseandtheriskofallograftfailureandmortalityafterkidneytransplantationClinInfectDis20084684065PeggsKSCytomegalovirusfollowingstemcelltransplantationfrompharmacologictoimmunologictherapyExpertRevAntiInfectTher20042559736HebartHEinseleHClinicalaspectsofCMVinfectionafterstemcelltransplantationHumImmunol20046543267LjungmanPRiskassessmentinhaematopoieticstemcelltransplantationviralstatusBestPractResClinHaematol200720209178BoeckhMNicholsWGPapanicolaouGRubinRWingardJRZaiaJCytomegalovirusinhematopoieticstemcelltransplantrecipientsCurrentstatusknownchallengesandfuturestrategiesBiolBloodMarrowTransplant20039543589BoeckhMNicholsWGTheimpactofcytomegalovirusserostatusofdonorandrecipientbeforehematopoieticstemcelltransplantationintheeraofantiviralprophylaxisandpreemptivetherapyBlood20041032003810PlotkinSACytomegalovirusvaccinesInPlotkinSAOrensteinWAOffitPAeditorsVaccines5edElsevier2008p11475411CheeranMCLokensgardJRSchleissMRNeuropathogenesisofcongenitalcytomegalovirusinfectiondiseasemechanismsandprospectsforinterventionClinMicrobiolRev20092299126Table12StrattonKRDurchJSLawrenceRSVaccinesforthe21stCenturyAToolforDecisionmakingWashingtonDCNationalAcademyPress200113ReddehaseMJMutterWMunchKBuhringHJKoszinowskiUHCD8positiveTlymphocytesspecificformurinecytomegalovirusimmediateearlyantigensmediateprotectiveimmunityJVirol1987613102814WillsMRCarmichaelAJSissonsJGAdaptiveCellularImmunitytoHumanCytomegalovirusInReddehaseMJeditorCytomegalovirusMolecularBiologyandImmunologyCaisterAcademicPressWymondhamNorfolkUK2006p3416515WalterEAGreenbergPDGilbertMJFinchRJWatanabeKSThomasEDetalReconstitutionofcellularimmunityagainstcytomegalovirusinrecipientsofallogeneicbonemarrowbytransferofTcellclonesfromthedonorNEnglJMed199533310384416HerrWPlachterBCytomegalovirusandvaricellazostervirusvaccinesinhematopoieticstemcelltransplantationExpertRevVaccines20098999102117SchleissMRCytomegalovirusvaccinedevelopmentCurrTopMicrobiolImmunol20083253618218PassRFZhangCEvansASimpsonTAndrewsWHuangMLetalVaccinepreventionofmaternalcytomegalovirusinfectionNEnglJMed20093601191919BernsteinDIReapEAKatenKWatsonASmithKNorbergPetalRandomizeddoubleblindPhase1trialofanalphavirusrepliconvaccineforcytomegalovirusinCMVseronegativeadultvolunteersVaccine2009284849320PepperlSMunsterJMachMHarrisJRPlachterBDensebodiesofhumancytomegalovirusinducebothhumoralandcellularimmuneresponsesintheabsenceofviralgeneexpressionJVirol20007461324621MerssemanVBesoldKReddehaseMJWolfrumUStrandDPlachterBetalExogenousintroductionofanimmunodominantpeptidefromthenonstructuralIE1proteinofhumancytomegalovirusintotheMHCclassIpresentationpathwaybyrecombinantdensebodiesJGenVirol2008893697922MerssemanVBohmVHoltappelsRDeegenPWolfrumUPlachterBetalRefinementofstrategiesforthedevelopmentofahumancytomegalovirusdensebodyvaccineMedMicrobiolImmunol20081979710723BesoldKFrankenbergNPepperlKlindworthSKuballJTheobaldMHahnGetalProcessingandMHCclassIpresentationofhumancytomegaloviruspp65derivedpeptidespersistdespitegpUS211mediatedimmuneevasionJGenVirol20078814293924TownsendAOhlenCBastinJLjunggrenHGFosterLKarreKAssociationofclassImajorhistocompatibilityheavyandlightchainsinducedbyviralpeptidesNature1989340443825BorstEMHahnGKoszinowskiUHMesserleMCloningofthehumancytomegalovirusgenomeasaninfectiousbacterialartificialchromosomeinEscherichiacolianewapproachforconstructionofHCMVmutantsJVirol1999738320926WarmingSCostantinoNCourtDLJenkinsNACopelandNGSimpleandhighlyefficientBACrecombineeringusinggalKselectionNucleicAcidsRes200533e3627HobomUBruneWMesserleMHahnGKoszinowskiUHFastscreeningproceduresforrandomtransposonlibrariesofclonedherpesvirusgenomesmutationalanalysisofhumancytomegalovirusenvelopeglycoproteingenesJVirol2000747720928BesoldKWillsMPlachterBImmuneevasionproteinsgpUS2andgpUS11ofhumancytomegalovirusincompletelyprotectinfectedcellsfromCD8TcellrecognitionVirology200939151929IrmiereAGibsonWIsolationandcharacterizationofanoninfectiousvirionlikeparticlereleasedfromcellsinfectedwithhumanstrainsofcytomegalovirusVirology19831301183330SchmolkeSDrescherPJahnGPlachterBNucleartargetingofthetegumentproteinpp65ofhumancytomegalovirusanunusualbipartitenuclearlocalizationsignalfunctionswithotherportionsoftheproteintomediateitsefficientnucleartransportJVirol1995691071831UtzUBrittWVuglerLMachMIdentificationofaneutralizingepitopeonglycoproteingp58ofhumancytomegalovirusJVirol1989631995200132FrankenbergNPepperlKlindworthSMeyerRGPlachterBIdentificationofaconservedHLAA2restricteddecapeptidefromtheIE1proteinofhumancytomegalovirusVirology20022952081633WillsMRCarmichaelAJMynardKJinXWeekesMPPlachterBetalThehumancytotoxicTlymphocyteresponsetocytomegalovirusisdominatedbystructuralproteinpp65frequencyspecificityandTcellreceptorusageofpp65specificCTLJVirol19967075697934DiamondDJYorkJSunJYWrightCLFormanSJDevelopmentofacandidateHLAA0201restrictedpeptidebasedvaccineagainsthumancytomegalovirusinfectionBlood19979017516735GallezHawkinsGVillacresMCLiXSanbornMCLomeliNAZaiaJAUseoftransgenicHLAA0201KbandHHDIImicetoevaluatefrequencyofcytomegalovirusIE1derivedpeptideusageinelicitinghumanCD8cytokineresponseJVirol20037744576236PascoloSBervasNUreJMSmithAGLemonnierFAPerarnauBHLAA21restrictededucationandcytolyticactivityofCD8Tlymphocytesfrombeta2microglobulinHLAA21monochaintransgenicH2Dbbeta2mdoubleknockoutmiceJExpMed199718520435137BohmVSimonCOPodlechJSeckertCKGendigDDeegenPetalTheimmuneevasionparadoximmunoevasinsofmurinecytomegalovirusenhanceprimingofCD8TcellsbypreventingnegativefeedbackregulationJVirol200882116375038PepperlKlindworthSPlachterBCurrentperspectivesinvaccinedevelopmentInReddehaseMJeditorCytomegalovirusesMolecularBiologyandImmunologyCaisterAcademicPressLtdWymondhamNorfolkUK2006本明細書、特許請求の範囲、配列表および/または図面において開示される本発明の特徴は、本発明をその様々な形態で実現するために別々におよびそれらの任意の組合せの両方で具現化することができる。"