"i生体膜を通過してカーゴ分子を輸送するための配列番号1に記載の配列の連続したアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドと、iiカーゴ分子とを含む組成物であって、前記カーゴ分子が配列番号4に記載の配列を有するアミノ酸残基を含むペプチドではない組成物。前記ペプチドが、前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項1に記載の組成物。前記ペプチドが、ジスルフィド結合を介して前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項2に記載の組成物。前記ペプチドが、前記カーゴ分子に非共有結合されている、請求項1に記載の組成物。前記カーゴ分子が、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ナノ粒子、リポソーム、ファージ、ウイルスベクター、プラスミドDNA、核酸、ペプチド核酸、またはモルホリノ化合物である、請求項1に記載の組成物。前記カーゴ分子が、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質であり、前記カーゴ分子を輸送するための前記ペプチドが、ペプチド結合を介して前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項5に記載の組成物。前記カーゴ分子が核酸であり、DNAである、請求項5に記載の組成物。前記カーゴ分子が核酸であり、RNAである、請求項5に記載の組成物。前記カーゴ分子が核酸であり、siRNAまたはアンチセンスオリゴヌクレオチドである、請求項5に記載の組成物。前記カーゴ分子が核酸であり、ヒトp53タンパク質をコードする、請求項5に記載の組成物。前記カーゴ分子がタンパク質であり、ヒトp53タンパク質である、請求項5に記載の組成物。前記カーゴ分子が核酸であり、腫瘍抑制タンパク質をコードする、請求項5に記載の組成物。前記腫瘍抑制タンパク質が、p16、ARF、VHL、SMAD4、ARID1A、BAF180、BRCA1、BRCA2、RBおよびLKB1からなる群から選択される、請求項12に記載の組成物。前記カーゴ分子がタンパク質であり、腫瘍抑制タンパク質である、請求項5に記載の組成物。前記腫瘍抑制タンパク質が、p16、ARF、VHL、SMAD4、ARID1A、BAF180、BRCA1、BRCA2、RBおよびLKB1からなる群から選択される、請求項14に記載の組成物。前記カーゴ分子がタンパク質であり、酵素である、請求項5に記載の組成物。前記酵素が代謝酵素である、請求項16に記載の方法。前記カーゴ分子がポリペプチドまたはタンパク質であり、抗原である、請求項5に記載の組成物。前記カーゴ分子がボツリヌス毒素またはその断片である、請求項1に記載の組成物。前記カーゴ分子が診断用薬である、請求項1に記載の組成物。前記診断用薬が、放射線不透過性造影剤、常磁性造影剤、超常磁性造影剤、蛍光体、またはコンピューター断層撮影造影剤である、請求項20に記載の組成物。前記カーゴ分子が治療薬である、請求項1に記載の組成物。前記治療薬が生物学的に活性な小分子である、請求項1に記載の組成物。前記治療薬が、細胞毒性分子または化学療法薬または放射線治療薬である、請求項1に記載の組成物。前記カーゴ分子が、高分子リンカーを介して、輸送するための前記ペプチドに結合されている、請求項1に記載の組成物。前記高分子リンカーがポリエチレングリコールである、請求項25に記載の組成物。前記カーゴ分子が核酸である、請求項26に記載の組成物。前記カーゴ分子がタンパク質であり、分子量が最大160kDaである、請求項6に記載の組成物。生体膜を通過してカーゴ分子を輸送するための配列番号1に記載の配列を有する連続したアミノ酸残基を含む前記ペプチドが誘導体化されている、請求項1に記載の組成物。前記ペプチドが、配列番号1に記載の配列を有する連続したアミノ酸残基を含む、請求項1に記載の組成物。細胞内にカーゴ分子を送達するための方法であって、前記細胞内への前記カーゴ分子の侵入を許容する条件下で、前記細胞を、i生体膜を通過して前記カーゴ分子を輸送するための配列番号1に記載の配列の連続したアミノ酸残基22~173、または配列番号1に記載のアミノ酸残基の一部分を含むペプチドと、iiカーゴ分子とを含む組成物に接触させることを含み、前記カーゴ分子が配列番号4に記載の配列を有するアミノ酸残基を含むペプチドではない、方法。前記ペプチドが、前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項31に記載の方法。前記ペプチドが、ペプチド結合を介して前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項31に記載の方法。前記ペプチドが、ジスルフィド結合を介して前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項31に記載の方法。前記ペプチドが、前記カーゴ分子に非共有結合されている、請求項31に記載の方法。前記カーゴ分子が、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ナノ粒子、リポソーム、ファージ、ウイルスベクター、プラスミドDNA、核酸、ペプチド核酸、またはモルホリノ化合物である、請求項31に記載の方法。前記カーゴ分子が、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質であり、前記カーゴ分子を輸送するための前記ペプチドがペプチド結合を介して前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項36に記載の方法。前記カーゴ分子が核酸であり、DNAである、請求項36に記載の方法。前記カーゴ分子が核酸であり、RNAである、請求項36に記載の方法。前記カーゴ分子が核酸であり、siRNAまたはアンチセンスオリゴヌクレオチドである、請求項36に記載の方法。前記カーゴ分子が核酸であり、ヒトp53タンパク質をコードする、請求項36に記載の方法。前記カーゴ分子がタンパク質であり、ヒトp53タンパク質である、請求項36に記載の方法。前記カーゴ分子が核酸であり、腫瘍抑制タンパク質をコードする、請求項36に記載の方法。前記腫瘍抑制タンパク質が、p16、ARF、VHL、SMAD4、ARID1A、BAF180、BRCA1、BRCA2、RBおよびLKB1からなる群から選択される、請求項43に記載の方法。前記カーゴ分子がタンパク質であり、腫瘍抑制タンパク質である、請求項36に記載の方法。前記腫瘍抑制タンパク質が、p16、ARF、VHL、SMAD4、ARID1A、BAF180、BRCA1、BRCA2、RBおよびLKB1からなる群から選択される、請求項45に記載の方法。前記カーゴ分子がタンパク質であり、酵素である、請求項36に記載の方法。前記酵素が代謝酵素である、請求項47に記載の方法。前記カーゴ分子がポリペプチドまたはタンパク質であり、抗原である、請求項36に記載の方法。前記カーゴ分子がボツリヌス毒素またはその断片である、請求項31に記載の方法。前記カーゴ分子が診断用薬である、請求項31に記載の方法。前記診断用薬が、放射線不透過性造影剤、常磁性造影剤、超常磁性造影剤、蛍光体、またはコンピューター断層撮影造影剤である、請求項51に記載の方法。前記カーゴ分子が治療薬である、請求項31に記載の方法。前記治療薬が生物学的に活性な小分子である、請求項53に記載の方法。前記治療薬が、細胞毒性分子または化学療法薬または放射線治療薬である、請求項53に記載の方法。前記ペプチドが、配列番号1に記載の配列を有する連続したアミノ酸残基を含む、請求項31に記載の方法。前記細胞が腫瘍細胞である、請求項31に記載の方法。前記細胞がヒト対象内にある、請求項57に記載の方法。対象における腫瘍を治療するための方法であって、前記対象において前記腫瘍を治療するための有効量で、カーゴ分子にコンジュゲートされている、配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドを含む組成物のある量を前記対象に投与することを含み、前記カーゴ分子は、配列番号4に記載の配列を有するアミノ酸残基を含むペプチドではない、方法。前記カーゴ分子が腫瘍抑制タンパク質である、請求項59に記載の方法。前記腫瘍抑制タンパク質が、p53、p16、ARF、VHL、SMAD4、ARID1A、BAF180、BRCA1、BRCA2、RBおよびLKB1からなる群から選択される、請求項60に記載の方法。前記腫瘍抑制タンパク質がp53である、請求項61に記載の方法。前記組成物が連続したアミノ酸を含み、その配列が配列番号8に記載されている、請求項62に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項59から63のいずれか一項に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、ペプチド結合を介して前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項64に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、ジスルフィド結合を介して前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項59から63のいずれか一項に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、前記カーゴ分子に非共有結合されている、請求項59から63のいずれか一項に記載の方法。対象における癌を治療するための方法であって、前記対象において前記癌を治療するための有効量で、カーゴ分子にコンジュゲートされている、配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドを含む組成物のある量を前記対象に投与することを含み、前記カーゴ分子は、配列番号4に記載の配列を有するアミノ酸残基を含むペプチドではない、前記方法。前記カーゴ分子が腫瘍抑制タンパク質である、請求項68に記載の方法。前記腫瘍抑制タンパク質が、p53、p16、ARF、VHL、SMAD4、ARID1A、BAF180、BRCA1、BRCA2、RBおよびLKB1からなる群から選択される、請求項69に記載の方法。前記腫瘍抑制タンパク質がp53である、請求項70に記載の方法。前記組成物が連続したアミノ酸を含み、その配列が配列番号8に記載されている、請求項71に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項69から72のいずれか一項に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、ペプチド結合を介して前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項73に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、ジスルフィド結合を介して前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項73のいずれか一項に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、前記カーゴ分子に非共有結合されている、請求項69から72のいずれか一項に記載の方法。代謝障害を治療するための方法であって、前記代謝障害が代謝酵素の欠損によって特徴付けられ、前記対象における前記代謝障害を治療するための有効量で、前記代謝酵素にコンジュゲートされている、配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドを含む組成物のある量を前記対象に投与することを含む、方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、前記代謝酵素に共有結合されている、請求項77に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、ペプチド結合を介して前記代謝酵素に共有結合されている、請求項78に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、ジスルフィド結合を介して前記代謝酵素に共有結合されている、請求項78に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、前記代謝酵素に非共有結合されている、請求項78に記載の方法。対象における糖尿病を治療するための方法であって、前記対象において前記糖尿病を治療するための有効量で、カーゴ分子にコンジュゲートされている、配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドを含む組成物のある量を前記対象に投与することを含む、方法。前記カーゴ分子が、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ナノ粒子、リポソーム、ファージ、ウイルスベクター、プラスミドDNA、核酸、ペプチド核酸、またはモルホリノ化合物である、請求項82に記載の方法。前記カーゴ分子が、配列番号4に記載の配列を有するアミノ酸残基を含むペプチドである、請求項83に記載の方法。前記組成物が連続したアミノ酸を含み、その配列が配列番号6に記載されている、請求項84に記載の方法。前記カーゴ分子がタンパク質であり、前記タンパク質が腫瘍抑制タンパク質である、請求項83に記載の方法。前記腫瘍抑制タンパク質が、p53、p16、ARF、VHL、SMAD4、ARID1A、BAF180、BRCA1、BRCA2、RBおよびLKB1からなる群から選択される、請求項86に記載の方法。前記腫瘍抑制タンパク質がp53である、請求項87に記載の方法。前記組成物が連続したアミノ酸を含み、その配列が配列番号8に記載されている、請求項88に記載の方法。前記カーゴ分子がBCL2である、請求項82に記載の方法。前記カーゴ分子がチオレドキシンである、請求項82に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項82から91のいずれか一項に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、ペプチド結合を介して前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項92に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、ジスルフィド結合を介して前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項92のいずれか一項に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、前記カーゴ分子に非共有結合されている、請求項82から89のいずれか一項に記載の方法。対象における心血管疾患を治療するための方法であって、前記対象において前記心血管疾患を治療するための有効量で、カーゴ分子にコンジュゲートされている、配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドを含む組成物のある量を前記対象に投与することを含む、方法。前記カーゴ分子が、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ナノ粒子、リポソーム、ファージ、ウイルスベクター、プラスミドDNA、核酸、ペプチド核酸、またはモルホリノ化合物である、請求項96に記載の方法。前記カーゴ分子が、配列番号4に記載の配列を有するアミノ酸残基を含むペプチドである、請求項97に記載の方法。前記組成物が連続したアミノ酸を含み、その配列が配列番号6に記載されている、請求項98に記載の方法。前記カーゴ分子がタンパク質であり、前記タンパク質が腫瘍抑制タンパク質である、請求項97に記載の方法。前記腫瘍抑制タンパク質が、p53、p16、ARF、VHL、SMAD4、ARID1A、BAF180、BRCA1、BRCA2、RBおよびLKB1からなる群から選択される、請求項100に記載の方法。前記腫瘍抑制タンパク質がp53である、請求項101に記載の方法。前記組成物が連続したアミノ酸を含み、その配列が配列番号8に記載されている、請求項102に記載の方法。前記カーゴ分子がBCL2である、請求項96に記載の方法。前記カーゴ分子がチオレドキシンである、請求項96に記載の方法。前記心血管疾患が、動脈硬化症、アテローム性動脈硬化症、心筋症、冠動脈疾患、末梢血管疾患、うっ血性心不全、心筋梗塞、および虚血再灌流障害からなる群から選択される、請求項96に記載の方法。前記心血管疾患がアテローム性動脈硬化症である、請求項106に記載の方法。前記心血管疾患が心筋梗塞である、請求項106に記載の方法。前記組成物が前記心筋梗塞中に投与される、請求項106に記載の方法。前記組成物が細胞死を妨げるのに有効な量で投与される、請求項109に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項96から110のいずれか一項に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸22~173の一部分を含む前記ペプチドが、ペプチド結合を介して前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項111に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、ジスルフィド結合を介して前記カーゴ分子に共有結合されている、請求項111のいずれか一項に記載の方法。配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含む前記ペプチドが、前記カーゴ分子に非共有結合されている、請求項96から110のいずれか一項に記載の方法。i生体膜を通過してカーゴ分子を輸送するための配列番号1に記載の配列の連続したアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドと、iiカーゴ分子とを含む組成物であって、カーゴ分子が配列番号4に記載の配列を有するアミノ酸残基を含むペプチドではない組成物。一実施形態において、上記ペプチドは、上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記ペプチドは、ジスルフィド結合を介して上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記ペプチドは、上記カーゴ分子に非共有結合されている。一実施形態において、上記カーゴ分子は、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ナノ粒子、リポソーム、ファージ、ウイルスベクター、プラスミドDNA、核酸、ペプチド核酸、またはモルホリノ化合物である。一実施形態において、上記カーゴ分子は、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質であり、ここで、上記カーゴ分子を輸送するための上記ペプチドは、ペプチド結合を介して上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記カーゴ分子は核酸であり、DNAである。一実施形態において、上記カーゴ分子は核酸であり、RNAである。一実施形態において、上記カーゴ分子は核酸であり、siRNAまたはアンチセンスオリゴヌクレオチドである。一実施形態において、上記カーゴ分子は核酸であり、ヒトp53タンパク質をコードする。一実施形態において、上記カーゴ分子は核酸であり、腫瘍抑制タンパク質をコードする。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はp16である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はARFである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はVHLである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はSMAD4である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はARID1Aである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBAF180である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBRCA1である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBRCA2である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はRBである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はLKB1である。一実施形態において、上記カーゴ分子はタンパク質であり、ヒトp53タンパク質である。一実施形態において、上記カーゴ分子はタンパク質であり、腫瘍抑制タンパク質である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はp16である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はARFである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はVHLである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はSMAD4である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はARID1Aである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBAF180である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBRCA1である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBRCA2である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はRBである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はLKB1である。一実施形態において、上記カーゴ分子はタンパク質であり、酵素である。一実施形態において、上記酵素は代謝酵素である。一実施形態において、上記カーゴ分子はポリペプチドまたはタンパク質であり、抗原である。一実施形態において、上記カーゴ分子はボツリヌス毒素またはその断片である。一実施形態において、上記カーゴ分子はBCL2またはチオレドキシンである。一実施形態において、上記カーゴ分子は診断用薬である。一実施形態において、上記診断用薬は、放射線不透過性造影剤、常磁性造影剤、超常磁性造影剤、蛍光体、またはコンピューター断層撮影造影剤である。一実施形態において、上記カーゴ分子は治療薬である。一実施形態において、上記治療薬は生物学的に活性な小分子である。一実施形態において、上記治療薬は、細胞毒性分子または化学療法薬または放射線治療薬である。一実施形態において、上記カーゴ分子は、高分子リンカーを介して、輸送するための上記ペプチドに結合されている。一実施形態において、上記高分子リンカーはポリエチレングリコールである。一実施形態において、上記カーゴ分子は核酸である。一実施形態において、上記カーゴ分子はタンパク質であり、分子量が最大160kDaである。一実施形態において、生体膜を通過してカーゴ分子を輸送するための配列番号1に記載の配列を有する連続したアミノ酸残基を含むペプチドは誘導体化される。一実施形態において、上記ペプチドは、配列番号1に記載の配列を有する連続したアミノ酸残基を含む。一実施形態において、上記組成物は、配列番号8に記載されている配列を有する連続したアミノ酸残基を含む。細胞内へのカーゴ分子の侵入を許容する条件下で、細胞と、i生体膜を通過してカーゴ分子を輸送するための配列番号1に記載の配列の連続したアミノ酸残基22~173、または配列番号1に記載のアミノ酸残基の一部分を含むペプチドと、iiカーゴ分子とを含む組成物とを接触させることを含み、カーゴ分子が配列番号4に記載の配列を有するアミノ酸残基を含むペプチドではない、細胞内にカーゴ分子を送達するための方法。一実施形態において、上記ペプチドは、上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記ペプチドは、ペプチド結合を介して上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記ペプチドは、ジスルフィド結合を介して上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記ペプチドは、上記カーゴ分子に非共有結合されている。一実施形態において、上記カーゴ分子は、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ナノ粒子、リポソーム、ファージ、ウイルスベクター、プラスミドDNA、核酸、ペプチド核酸、またはモルホリノ化合物である。一実施形態において、上記カーゴ分子は、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質であり、ここで、上記カーゴ分子を輸送するための上記ペプチドは、ペプチド結合を介して上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記カーゴ分子は核酸であり、DNAである。一実施形態において、上記カーゴ分子は核酸であり、RNAである。一実施形態において、上記カーゴ分子は核酸であり、siRNAまたはアンチセンスオリゴヌクレオチドである。一実施形態において、上記カーゴ分子は核酸であり、ヒトp53タンパク質をコードする。一実施形態において、上記カーゴ分子は核酸であり、腫瘍抑制タンパク質をコードする。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はp16である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はARFである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はVHLである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はSMAD4である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はARID1Aである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBAF180である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBRCA1である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBRCA2である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はRBである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はLKB1である。一実施形態において、上記カーゴ分子はタンパク質であり、ヒトp53タンパク質である。一実施形態において、上記カーゴ分子はタンパク質であり、酵素である。一実施形態において、上記酵素は代謝酵素である。一実施形態において、上記カーゴ分子はタンパク質であり、腫瘍抑制タンパク質である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はp16である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はARFである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はVHLである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はSMAD4である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はARID1Aである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBAF180である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBRCA1である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBRCA2である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はRBである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はLKB1である。一実施形態において、上記カーゴ分子はポリペプチドまたはタンパク質であり、抗原である。一実施形態において、上記カーゴ分子はボツリヌス毒素またはその断片である。一実施形態において、上記カーゴ分子はBCL2である。一実施形態において、上記カーゴ分子はチオレドキシンである。一実施形態において、上記カーゴ分子は診断用薬である。一実施形態において、上記診断用薬は、放射線不透過性造影剤、常磁性造影剤、超常磁性造影剤、蛍光体、またはコンピューター断層撮影造影剤である。一実施形態において、上記カーゴ分子が治療薬である。一実施形態において、上記治療薬は生物学的に活性な小分子である。一実施形態において、上記治療薬は、細胞毒性分子または化学療法薬または放射線治療薬である。一実施形態において、上記ペプチドは、配列番号1に記載の配列を有する連続したアミノ酸残基を含む。一実施形態において、上記細胞は腫瘍細胞である。一実施形態において、上記細胞はヒト対象内にある。一実施形態において、上記組成物は、配列番号8に記載されている配列を有する連続したアミノ酸残基を含む。対象における腫瘍を治療するための方法であって、対象において腫瘍を治療するための有効量で、カーゴ分子にコンジュゲートされている、配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドを含む組成物のある量を対象に投与することを含み、上記カーゴ分子が、配列番号4に記載の配列を有するアミノ酸残基を含むペプチドではない、方法。対象における腫瘍を治療するための有効量の、対象において腫瘍を治療するための、カーゴ分子にコンジュゲートされている、配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドを含む組成物であって、上記カーゴ分子が、配列番号4に記載の配列を有するアミノ酸残基を含むペプチドではない、組成物。一実施形態において、上記カーゴ分子は腫瘍抑制タンパク質である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパクはp53である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はp16である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はARFである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はVHLである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はSMAD4である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はARID1Aである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBAF180である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBRCA1である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBRCA2である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はRBである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はLKB1である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパクはp53であり、上記組成物は連続したアミノ酸を含み、その配列は配列番号8に記載されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、ペプチド結合を介して上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、ジスルフィド結合を介して上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、上記カーゴ分子に非共有結合されている。対象における癌を治療するための方法であって、対象において癌を治療するための有効量で、カーゴ分子にコンジュゲートされている、配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドを含む組成物のある量を対象に投与することを含み、上記カーゴ分子が、配列番号4に記載の配列を有するアミノ酸残基を含むペプチドではない、方法。対象における腫瘍を治療するための有効量の、対象において癌を治療するための、カーゴ分子にコンジュゲートされている、配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドを含む組成物であって、上記カーゴ分子が、配列番号4に記載の配列を有するアミノ酸残基を含むペプチドではない、組成物。一実施形態において、上記カーゴ分子は腫瘍抑制タンパク質である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパクはp53である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はp16である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はARFである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はVHLである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はSMAD4である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はARID1Aである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBAF180である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBRCA1である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBRCA2である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はRBである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はLKB1である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はp53であり、上記組成物は連続したアミノ酸を含み、その配列は配列番号8に記載されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、ペプチド結合を介して上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、ジスルフィド結合を介して上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、上記カーゴ分子に非共有結合されている。対象における代謝酵素の欠損によって特徴付けられる代謝障害を治療するための方法であって、対象において代謝障害を治療するための有効量で、代謝酵素にコンジュゲートされている、配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドを含む組成物のある量を対象に投与することを含む、方法。対象における代謝酵素の欠損によって特徴付けられる代謝障害を治療するための代謝酵素にコンジュゲートされている、配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドを含む組成物。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、上記代謝酵素に共有結合されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、ペプチド結合を介して上記代謝酵素に共有結合されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、ジスルフィド結合を介して上記代謝酵素に共有結合されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、上記代謝酵素に非共有結合されている。対象における糖尿病を治療するための方法であって、対象において糖尿病を治療するための有効量で、カーゴ分子にコンジュゲートされている、配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドを含む組成物のある量を対象に投与することを含む、方法。対象における糖尿病を治療するためのカーゴ分子にコンジュゲートされている、配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドを含む組成物。一実施形態において、上記カーゴ分子は、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ナノ粒子、リポソーム、ファージ、ウイルスベクター、プラスミドDNA、核酸、ペプチド核酸、またはモルホリノ化合物である。一実施形態において、上記カーゴ分子は、配列番号4に記載の配列を有するアミノ酸残基を含むペプチドである。一実施形態において、上記組成物は連続したアミノ酸を含み、その配列は配列番号6に記載されている。一実施形態において、上記カーゴ分子はタンパク質であり、上記タンパク質は腫瘍抑制タンパク質である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はp53である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はp16である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はARFである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はVHLである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はSMAD4である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はARID1Aである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBAF180である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBRCA1である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBRCA2である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はRBである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はLKB1である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はp53であり、上記組成物は連続したアミノ酸を含み、その配列は配列番号8に記載されている。一実施形態において、上記カーゴ分子はBCL2である。一実施形態において、上記カーゴ分子はチオレドキシンである。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、ペプチド結合を介して上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、ジスルフィド結合を介して上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、上記カーゴ分子に非共有結合されている。対象における心血管疾患を治療するための方法であって、対象において心血管疾患を治療するための有効量で、カーゴ分子にコンジュゲートされている、配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドを含む組成物のある量を対象に投与することを含む、方法。対象における心血管疾患を治療するためのカーゴ分子にコンジュゲートされている、配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドを含む組成物。一実施形態において、上記カーゴ分子は、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ナノ粒子、リポソーム、ファージ、ウイルスベクター、プラスミドDNA、核酸、ペプチド核酸、またはモルホリノ化合物である。一実施形態において、上記カーゴ分子は、配列番号4に記載されている配列を有するアミノ酸残基を含むペプチドである。一実施形態において、上記組成物は連続したアミノ酸を含み、その配列は配列番号6に記載されている。一実施形態において、上記カーゴ分子はタンパク質であり、上記タンパク質は腫瘍抑制タンパク質である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はp53である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はp16である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はARFである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はVHLである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はSMAD4である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はARID1Aである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBAF180である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBRCA1である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はBRCA2である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はRBである。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はLKB1である。一実施形態において、上記腫瘍抑制タンパク質はp53であり、上記組成物は連続したアミノ酸を含み、その配列は配列番号8に記載されている。一実施形態において、上記カーゴ分子がBCL2である。一実施形態において、上記カーゴ分子はチオレドキシンである。一実施形態において、上記心血管疾患は、動脈硬化症、アテローム性動脈硬化症、心筋症、冠動脈疾患、末梢血管疾患、うっ血性心不全、心筋梗塞、および虚血再灌流障害からなる群から選択される。一実施形態において、上記心血管疾患はアテローム性動脈硬化症である。一実施形態において、上記心血管疾患は心筋梗塞である。一実施形態において、上記心血管疾患は心筋梗塞であり、上記組成物は心筋梗塞中に投与される。一実施形態において、上記組成物は細胞死を妨げるのに有効な量で投与される。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、ペプチド結合を介して上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、ジスルフィド結合を介して上記カーゴ分子に共有結合されている。一実施形態において、上記配列番号1のアミノ酸残基22~173、または配列番号1のアミノ酸残基22~173の一部分を含むペプチドは、上記カーゴ分子に非共有結合されている。カーゴ分子を輸送するためのペプチドとは、本明細書で使用するとき、細胞透過性ペプチドとして作用するペプチドであり、生体膜を通過して、そのペプチドに結合する分子カーゴ分子の輸送を媒介するペプチドである。カーゴ分子とは、本明細書で使用するとき、本明細書に記載されている輸送ペプチドの1つに共有結合または非共有結合されている、生体膜を通過して、例えば、細胞外空間から細胞内空間に運ばれる対象とする分子である。上記カーゴ分子がペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質である一実施形態において、上記輸送ペプチドは、融合タンパク質を形成するように上記カーゴ分子にペプチド結合を介して共有結合され得る。配列番号4に記載されているPTENポリペプチドは、カーゴ分子の定義から明確に除かれる。本明細書で使用するとき、siRNAとは、二本鎖dsRNAであり、通常、約19~25ヌクレオチド長であり、多くの場合、各末端に3’突出部2ヌクレオチドを有する。カーゴ分子を輸送するためのペプチドにsiRNAを共有結合させる1つの方法は、siRNAセンス鎖の5’末端でジスルフィド結合を介する。本明細書で使用するとき、心血管疾患とは、哺乳動物の心臓の正常な生理学的機能および/または心血供給および/または他の血管成分に影響を及ぼす病理学的状態を意味し、動脈硬化症、アテローム性動脈硬化症、心筋症、冠動脈疾患、末梢血管疾患、うっ血性心不全、心筋梗塞、および虚血再灌流障害が挙げられる。化学療法薬は、本明細書で使用するとき、癌を治療するために、当該技術分野において使用されるアルキル化剤、抗代謝産物、アントラサイクリン、植物性アルカロイド、トポイソメラーゼ阻害剤、またはチロシンキナーゼ阻害剤である。放射線治療薬は、本明細書で使用するとき、癌を治療するために、当該技術分野において使用される放射性同位体である。小分子は、本明細書で使用するとき、高分子ではなく、分子量が1kDa未満であり、より通常には800Da未満である低分子量有機化合物である。いくつかの実施形態において、腫瘍は癌性細胞である。さらなる実施形態において、上記癌性腫瘍は、対象のグリア細胞、前立腺、卵巣、子宮、子宮内膜、乳房、メラニン細胞、腎臓、肺、結腸、頭部、頸部、または膵臓の腫瘍である。一実施形態において、上記カーゴ分子は腫瘍抑制タンパク質である。腫瘍抑制タンパク質は、本明細書で使用するとき、細胞周期の調節に対して弱めるかもしくは抑制する効果を有し、またはアポトーシスを促進する、あるいはある場合にはその両方である、腫瘍抑制遺伝子によってコードされるタンパク質である。腫瘍抑制タンパク質の非制限的な例には、p53、p16、ARF、VHL、SMAD4、ARID1A、BAF180、BRCA1、BRCA2、RBおよびLKB1が含まれる。一実施形態において、上記カーゴ分子はp53タンパク質もしくはp53をコードする核酸TP53腫瘍タンパク質p53、ホモサピエンス-EntrezGeneGeneID:7157またはその活性な断片、あるいはその単一ヌクレオチド多型またはその断片である。カーゴ分子を輸送するための本明細書に記載されているペプチド配列は、概して、細胞透過性ペプチドであるが、細胞透過性ペプチドは、典型的には30アミノ酸またはそれ未満である。細胞透過性ペプチドを用いたRNAsiRNAを含むの細胞への送達は、全体として参照により本明細書に援用されるMathupalaら.ExpertOpinTlierPat.2009年February;192:137-140に記載されている。細胞透過性ペプチドを用いたワクチンの送達は、全体として参照により本明細書に援用されるBrookら,BicchirnBiophysActa.2010年Jan;18051:25-34に記載されている。ナノ粒子、リポソーム、および他のナノキャリアの送達の送達は、全体として参照により本明細書に援用されるJulianoら.WileyInterdiscipRevNcmomedNanobioteclmol.2009年May;13:324-35に記載されている。細胞透過性ペプチドを用いた化学療法薬および抗癌剤の送達は、全体として参照により本明細書に援用されるBitlerら.RecentPatAnticancerDrugDiscov.2009年Dec2.,Epubに記載されている。障害/疾患を治療することとは、障害の進行を遅延させ、停止させ、もしくは逆転させ、および/または障害の症状を改善させ、減少させ、または除去することを意味する。したがって、障害を治療することには、障害の進行を逆転させることを包含し、障害自体の排除に至るまでの治療を含む。本明細書に記載されている方法の一実施形態において、方法は、予防的に有効な量のカーゴ分子を対象に送達させるために用いられる。本明細書で使用するとき、物質の予防的に有効な量は、その物質が投与される対象において所定の病理学的状態の開始を妨げるかまたは遅延させるのに有効な量である。本明細書に記載されている方法の一実施形態において、方法は、治療的に有効な量のカーゴ分子を対象に送達させるために用いられる。本明細書で使用するとき、物質の治療的に有効な量は、その物質が投与される対象に、所定の病理学的状態を患っている対象において、その状態の症状または原因を治療し、改善しまたは減少するのに有用な量である。一実施形態において、治療的にまたは予防的に有効な量は、投薬あたり約1mg薬剤/対象から約1g薬剤/対象である。別の実施形態において、治療的にまたは予防的に有効な量は、約10mg薬剤/対象から500mg薬剤/対象である。さらなる実施形態において、治療的にまたは予防的に有効な量は、約50mg薬剤/対象から200mg薬剤/対象である。さらなる実施形態において、治療的にまたは予防的に有効な量は、約100mg薬剤/対象である。なおさらなる実施形態において、治療的にまたは予防的に有効な量は、50mg薬剤/対象、100mg薬剤/対象、150mg薬剤/対象、200mg薬剤/対象、250mg薬剤/対象、300mg薬剤/対象、400mg薬剤/対象、および500mg薬剤/対象から選択される。本明細書に記載されている方法の一実施形態において、ペプチドおよびカーゴ分子を含む組成物は、当業者に知られている種々の方法および送達システムのいずれかを用いて対象に投与される。上記投与は、例えば、静脈内、経口、鼻腔内、腹腔内、脳脊髄液経由、インプラント経由、経粘膜的、経皮、筋内、血管内、動脈内、冠動脈内、心筋内または皮下であってもよい。本明細書に記載されている方法の一実施形態において、組成物は、腫瘍に直接導入することによって対象に投与される。本明細書に記載されている方法の一実施形態において、組成物は固形腫瘍に注射される。本明細書に記載されている方法の一実施形態において、組成物は、カテーテルによって腫瘍内に直接導入される。本明細書に記載されている方法の一実施形態において、組成物は、腫瘍に分布している血管内に直接導入することによって対象に投与される。本明細書に記載されている方法の一実施形態において、組成物は腫瘍に分布している血管内に注射される。本明細書に記載されている方法の一実施形態において、組成物は、腫瘍に分布している血管内にカテーテルによって直接導入される。本明細書に記載されている方法の一実施形態において、組成物は、対象に静脈内投与される。本明細書に記載されている方法の一実施形態において、組成物は、対象に皮下投与される。PTENなる用語は、配列番号4によって定義されるポリペプチドを指す。PTENロングは、他に、時々、PTEN-ベータ、PTEN-β、PTEN-Sと呼ばれている。本明細書に記載されている組成物についての注射可能な薬物送達システムには、溶液、懸濁液、ゲル、微粒子および高分子注射物質が含まれ、賦形剤、例えば、可溶性改変剤例えば、エタノール、プロピレングリコールおよびショ糖およびポリマー例えば、ポリカプリラクトンおよびPLGAが挙げられる。移植可能なシステムは、杆状体および円板を含み、非制限的な例としてPLGAおよびポリカプリラクトンなどの賦形剤を含むことができる。本発明の組成物についての経口送達システムは、錠剤およびカプセル剤を含む。これらは、結合剤例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、他のセルロース系材料およびスターチ、希釈剤例えば、ラクトースおよび他の糖、スターチ、リン酸二カルシウムならびにセルロース系材料、崩壊剤例えば、スターチポリマーおよびセルロース系材料、および潤滑剤例えば、ステアリン酸塩およびタルクなどの賦形剤を含むことができる。本発明の組成物についての経粘膜送達システムには、パッチ、錠剤、坐薬、ペッサリー、ゲルおよびクリームを含み、可溶化剤および増強剤例えば、プロピレングリコール、胆汁酸塩およびアミノ酸および他のビヒクル例えば、ポリエチレングリコール、脂肪酸エステルおよび誘導体、ならびにヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびヒアルロン酸などの親水性ポリマーなどの賦形剤を含むことができる。本発明の組成物についての経皮送達システムは、例えば、水性および非水系のゲル、クリーム、多層エマルション、ミクロエマルション、リポソーム、軟膏、水性および非水系の溶液、ローション、エアロゾル、炭化水素基材および粉末を含み、可溶化剤、浸透増強剤例えば、脂肪酸、脂肪酸エステル、脂肪アルコールおよびアミノ酸、および親水性ポリマー例えば、ポリカルボフィルおよびポリビニルピロリドンなどの賦形剤を含むことができる。一実施形態において、医薬として許容される担体は、リポソームまたは経皮増強剤である。本発明の組成物についての再構成可能な送達システムのための溶液、懸濁液および粉末は、懸濁剤たとえば、ゴム質、ザンタン、セルロース化合物および糖、湿潤剤たとえば、ソルビトール、可溶化剤たとえば、エタノール、水、PEGおよびプロピレングリコール、界面活性物質たとえば、ラウリル硫酸ナトリウム、スパン、ツイーンおよびセチルピリジン、防腐剤および抗酸化剤たとえば、パラベン、ビタミンEおよびCおよびアスコルビン酸、固化防止剤、被覆剤、ならびにキレート薬たとえば、EDTAなどの媒体を含む。本明細書で使用するとき、5’ATRは、本明細書の以下の実験のセクションに記載されている5’代替の翻訳領域である。一実施形態において、本明細書に記載される組成物は、薬学的な担体をさらに含む。本明細書で使用するとき、薬学的な担体は、動物またはヒトに対して本発明の組成物を送達するための医薬として許容される溶媒、懸濁剤またはビヒクルである。担体は、液体、エアロゾル、ゲルまたは固形であってもよく、計画された投与の様式を考慮して選択される。本明細書に記載されている方法の一実施形態において、細胞は、固形腫瘍細胞である腫瘍細胞である。本明細書に使用されるように固形腫瘍は、癌性および非癌性の固形腫瘍を含む。癌性の固形腫瘍には、限定されないが、胆道癌;神経膠芽細胞腫および髄芽腫を含む脳癌;乳癌;子宮頚癌;絨毛癌;結腸癌;子宮内膜癌;食道癌;胃癌;ボーエン病およびパジェット病を含む上皮内の新生物;肝臓癌;肺癌;ホジキン病およびリンパ球性リンパ腫を含むリンパ腫;神経芽腫;扁平上皮癌を含む口腔癌;上皮細胞、間質性細胞、胚細胞および間充織細胞から発生するものを含む卵巣癌;膵臓癌;前立腺癌;結腸直腸癌;平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫および骨肉腫を含む肉腫;メラノーマ、カポジ肉腫、基底細胞癌および扁平上皮細胞癌を含む皮膚癌;胚腫瘍セミノーマ、非セミノーマ[奇形腫、絨毛癌]、間質腫瘍および胚細胞腫瘍を含む精巣癌;甲状腺癌および髄様癌を含む甲状腺癌;および腺癌およびウィルムス腫瘍を含む腎臓癌が含まれるが、非固形組織の腫瘍、例えば、急性のリンパ性および骨髄性の白血病;多発性骨髄腫;AIDS関連白血病および成人T細胞白血病リンパ腫を含む白血病および他の血液学的な新生物は除外される。配列表に記載の配列番号1は、PTENロングタンパク質のリーダー配列とシグナル配列残基1~21である。配列表の配列番号2は、PTENロングタンパク質のリーダー配列とシグナル配列残基1~21の類似体である。本明細書に記載されている方法および組成物の実施形態のいずれかにおいて、配列番号2は、配列番号1が記載されている場合、配列番号1に代えて用いることができる。配列番号3は、PTENロング上のエピトープである。配列番号4は、PTENのポリペプチドである即ち、PTENロングではない。配列番号6は、MSESPTENロングである。配列番号8は、PTENロング-p53融合タンパク質である。本明細書に記載されている方法および組成物の実施形態のいずれかにおいて、配列番号8のアミノ酸1~153は、配列番号1が記載されている場合、配列番号1に代えて用いることができる。上述の方法のいずれかの実施形態において、配列番号1のアミノ酸22~173、または配列番号1の一部分を含むペプチドは、生体膜を横切るカーゴ分子を輸送する能力を保持している、配列番号1のアミノ酸22~173の一部分を含むペプチドである。範囲が明細書中で与えられる場合、この範囲はその範囲の全ての整数とその範囲内の0.1単位、および任意の細分範囲を含むことが理解される。例えば、77~90の範囲は、77.0、77.1、77.2、77.3、77.4、77.5、77.6、77.7、77.8、77.9、80.0、80.1、80.2、80.3、80.4、80.5、80.6、80.7、80.8、80.9、および90.0、ならびに80~81.5の範囲などを含む。本明細書に記載されている種々の要素の全ての組み合わせは、本発明の範囲内である。本発明は、以下の実験の詳細を参照することによってより良く理解されるが、当業者は、詳述される特定の実験が、以下に続く特許請求の範囲においてより十分に記載されている本発明の単なる例であることを容易に理解する。実験の詳細第1シリーズの実験PTEN腫瘍抑制因子は、癌において最も一般的に変更される遺伝子の1つである。ホスファチジルイノシトール3,4,5-三リン酸の脂質ホスファターゼとして機能し、次にホスファチジルイノシトール3-キナーゼPI3KおよびAktからの腫瘍形成のシグナル伝達を抑制する。PTENmRNAを検査することによって、5’非翻訳領域UTRが770bpについてPTENのオープンリーディングフレームORFとインフレームであることが明らかとされた。このUTRORF内に、標準のAUG開始コドンの513塩基対上流に弱いKozak配列内に代替のCUG開始コドンが存在する。標準のPTENORFの発現により約55kDaに移動するタンパク質が産生されるが、5’UTRを含んでいるPTENcDNAの発現によりPTENロングと称される70kDaの第二のタンパク質を産生することができる。開始部位の変異は、55kDaPTENが標準の開始コドンでの翻訳から産生されるが、他方でPTENロングは上流の代替の開始部位から開始されることを指示する。異なるPTEN抗体での免疫ブロットによって、複数の細胞株にPTENロングが内因性に存在することが実証された。マウスES細胞におけるノックダウンおよびノックアウト研究によって、この大きなタンパク質が実際にPTENであることが確認された。付加されたN末端タンパク質配列がシグナルペプチドおよび切断部位をコードし、PTENロングが分泌経路に進入することを指示している。PTENロングは優先的にレクチンコンカナバリンAと結合し、グリコシル化されることが示される。さらにまた、PTENロングは、PTENに対する抗体とヘパラン硫酸の両方を用いる親和性精製により馴化培地から精製できる。また、PTENロングは、インビボでのプロテアーゼ保護アッセイにおける分解に感受性であるが、正常なPTENは感受性ではなく、PTENロングが細胞膜の外側に局在することを示している。試薬、細胞株および抗体-プロテイナーゼKおよびコンカナバリン-AをSigmaSt.Louis,MOから購入した。ヘパリンセファロースおよびHiTrapヘパリンHPカラムをAmershamPiscataway,NJから購入した。PTENに対する抗体をCellSignalingDanversMAおよびCascadeWinchesterMAから購入した。Akt抗体をCellSignalingDanversMAから得て、Eカドヘリン抗体をUpstateMilliporeBillerica,Maから得た。PTENの新規の翻訳において認められたエピトープPRHQQLLPSLSSFFFSHRLPD配列番号3に対して産生されたポリクローナル親和性精製抗体については、ZymedLaboratoriesSouthSanFransisco,CAが行った。二次抗体をPierceRockford,ILから購入した。HEK293、ZR-75-1、SKBR-3、MDAMB-361、BT549、およびPC3をATCCManassas,VAから得て、提供されたガイドラインに従い増殖させた。プラスミドおよび構築物-pCEP4-PTENPTENの完全なオープンリーディングフレームおよび5’-非翻訳領域をコードしているは、前に報告された通り、PTENcDNANCBIにU90351として寄託されたをpCEP4InvitrogenのNotI部位にクローニングすることにより作出されたLi,Simpsonら.1998年。5’UTRは、このプラスミドにおいてクローニングのため使用されるオリジナルのNotI制限部位の上流の配列をコードしているアダプターをライゲーションすることによりさらに拡張された。上記アダプターは、標準の開始部位の-513に局在する第一の可能な代替のCTG開始コドンの10塩基対上流までコードした。また、推定上の代替の開始部位をATGに変異させたアダプターを使用して、長い形態が効率的に発現されるだろう第二セットの発現構築物を作出し得た。さらに、標準の開始コドンのATAへの突然変異誘発も行い、トータルで4つの異なる構築物が生じた図5.1。これらの4つのバリエーション同様に、オリジナルのPTENのオープンリーディングフレームを、安定な発現のためMSCVClontech,Mountainview,CAレトロウイルスベクターに感染によりサブクローニングした。プロテアーゼ保護アッセイ-HEK293細胞をトリプシンなしで氷冷PBSに収集し、5×105の細胞の分割量を0.5ug/ml~10ug/mlでプロテイナーゼKの濃度を増加させて30分間インキュベーションした。Triton0.1での対照を、示されたタンパク質を分解するプロテイナーゼKの能力を検証するため含めた。反応を5mMPMSFで停止した。細胞を2×Laemmliサンプル緩衝剤125nMTrispH6.8、20グリセロール、0.05ブロモフェノールブルー、4SDS、102-メルカプトエタノールで溶解し、PTEN、AktおよびEカドヘリンに関して免疫ブロットした。マウスの肝臓からのPTEN精製-C57BL6マウスの肝臓を液体窒素中で急速凍結し、粉砕し、TNN緩衝剤50mMTrispH7.4、150mMNaCl、0.5NP-40、5mMEDTA、3グリセロール、1mMDTT、1×哺乳動物のプロテアーゼカクテルインヒビター[Sigma]に再懸濁した。懸濁液を乳鉢でホモジナイズし、40,000RPMで4°Cで1時間遠心分離した。上清を連続的に0.45ミクロンおよび0.22ミクロンのフィルターでろ過した。セファクリル200サイズ排除カラムAmershamをTNNで事前に平衡化し、サンプルを0.3ml/時の速度で適用し、続いて緩衝液を適用した。2mlの画分を回収し、低分子量のサンプルをプールし、事前に平衡化したHiTrapHepainHPカラムAmershamに適用した。カラムを三カラム容量のTNNで洗浄し、タンパク質を0.3M、0.5Mおよび1MのNaClTNN溶液の段階的な3×カラム容量で溶出した。0.5mlの増加分のフラクションを回収し、PTENに関して免疫ブロットした。培地からのPTENのヘパリン精製-HEK293細胞を15cmディッシュ中で10FBSDMEMでコンフルエントになるまで増殖させた。細胞をFBS不含の15mlのDMEMで一晩インキュベーションした。20プレートから培地を回収し、0.45ミクロンのフィルターを通してろ過した。1mlのヘパリンHPカラムをAktaPrimeAmershamBioscienceを用いて4ml/分の流速で4°CにてDMEMで平衡化した。馴化培地をカラムに1ml/分で通過させた。カラムを10容量のBC200200mMNaCl、50mMTTrispH7.4、1mMEDTA、0.2TritonX-100で洗浄した。タンパク質を5mlの1MNaClで1ml/分で1mlの画分に溶出した。各画分のタンパク質濃度を280nmのODで決定した。各画分の半分をトリクロロ酢酸の20で沈殿させ、冷アセトンで洗浄し、真空下で乾燥させた。タンパク質を20ulのLaemmli溶解緩衝剤に再構成し、PTENおよびPTENロングに対する抗体を用いて免疫ブロットした。血清からのPTEN精製-AB血漿からのヒト血清をSigmaから得た。1mlの血清を0.45ミクロンのフィルターを通してろ過し、プロテインA/Gアガロースを用いて1時間インキュベーションして抗体を清澄化した。ヘパリン-アガロースをセファロースの対照と共に一晩、事前に清澄化した血清でインキュベーションし、翌日、BC150150mMNaCl、25mMTrispH7.4、1NP-40、0.25Naデオキシコール酸、1mMEDTAで洗浄した。タンパク質をlaemmliサンプル緩衝剤で溶出し、PTENに関してまたは重鎖の混入に関して二次のみで免疫ブロットした。コンカナバリンAプルダウン-HEK293細胞をサブコンフルエンスでBC500500mMNaCl、20mMTrispH7.4、1TritonX-100、1mMMnCl2、1mMCaCl2、1×プロテアーゼインヒビターカクテルで溶解した。細胞溶解産物を遠心分離し、ろ過した。プルダウンを、20マイクロリッターのコンカナバリンAセファロースSigmaで1時間、4°Cで行った。レジンをBC500で洗浄し、タンパク質をLaemmliサンプル緩衝剤で溶出した。結果PTENmRNAは上流に代替の開始部位を有するNCBIに寄託されたPTENmRNALiおよびSun1997年;Steck,Pershouseら.1997年は、広範囲にわたる5’UTRを含む。5’UTR領域中の約770bpの連続配列は、開始コドンとインフレームである。メチオニンは、この領域でコードされない;しかしながら、標準の開始コドンから-519で始まるいくつかの代替の開始CUGコドンが存在する。この配列の翻訳からscansitescansite.mit.eduおよびprositewww.ebi.ac.uk/ppsearchに従って同定可能なドメインは明らかとされなかった。この全体領域の翻訳によって、173アミノ酸がPTENに加えられ、その分子量を約70キロダルトンに増加させる図2。他のPTENオルソログのアラインメントによって、ヒトHomosapiensUTRの翻訳配列が様々な種のPTENのオープンリーディングフレームに認められ得ることが明らかとされた。チンパンジーPantroglodytes、ウシBosTaurus、ミツバチApismelliferaおよび線虫Caenorhabditiselegansは、全てヒト5’UTRの翻訳産物と相同なタンパク質配列を含む図3。さらにまた、ヒト5’UTRおよびマウスMusmusculusPTEN5’UTRのアラインメントは、広範囲にわたりヌクレオチド相同性を示した結果は示さず。マウス5’UTRは522塩基対にわたり標準の開始コドンとインフレームで翻訳され、ヒト5’UTRの翻訳と比較した場合に高度に相同なタンパク質配列であることが明らかとされた図5.3。5’UTRの相同性や他の種の翻訳されたタンパク質にヒト5’UTRから由来するアミノ酸配列が実際に存在することは、この配列が進化上重要であることを示している。PTENmRNAは、代替の上流部位から翻訳を開始できる。PTENORFの過剰発現は、55kDaの単一のタンパク質バンドを生じた。5’UTRを含めることによって、約70kDaの二番目のより大きいタンパク質バンドを生じた。PTEN免疫ブロットにおけるより大きなタンパク質バンドは、いくつかの細胞株にも内因性に存在し、異なるモノクローナル抗体により検出可能であった図4。この大きいタンパク質バンドは、マウスの野生型ES細胞に存在し、PTENノックアウトマウスのES細胞には存在せず、PTENshRNAを安定に発現しているマウスESクローンにおいて減少した図4。また、HEK293細胞においてヒトPTENタンパク質のsiRNAを用いたノックダウンによって、70kDaタンパク質のノックダウンを生じる。PTENヌルPC3細胞株においてPTENのORFをコードしているプラスミドの発現は、55kDaタンパク質の産生を生じる。5’UTRもコードするプラスミドが過剰発現された場合、70kDaタンパク質が産生された。CTGからATGへの上流の推定上の開始コドンの変異図1、ATG/ATGは、主に免疫ブロットパターンを70kDaの形態にシフトした図4。また、55kDaのバンドは、突然変異誘発によりATG開始コドンに由来することが確認された図4CTG/ATA。従って、5’UTRは、長い形態のPTENの翻訳を開始するには十分であった。よって、5’UTRはAlternatelyTranslatedRegionの5’ATRと命名され、検出されたより大きいタンパク質はPTENロングと命名された。親和性精製したポリクローナル抗体は、5’ATRから翻訳されたアミノ酸に対し産生され、過剰発現研究において組換えPTENロングの産生、ならびにHEK293細胞における内因性の形態を確認するため使用された図4。HEK293細胞の全細胞溶解産物の免疫ブロットおよびPC3細胞における過剰発現研究から、複数の形態のPTENロングが認められ、潜在的な翻訳後修飾、記載されていないスプライス形態undocumentedspliceformsまたは5’ATRにおける代替の開始コドンのいずれかを指摘している。PTENロングはN末端シグナルペプチドをコードするPTENロングのN末端配列は、膜貫通配列またはシグナルペプチドのいずれかの指標であり得るアラニンの長いストレッチを含む。SignalIP3.0を用いた翻訳配列の分析によって、高い確率>95で前記配列がシグナルペプチドを含むことが予測された図5。シグナルペプチドは、特徴的に塩基性アミノ酸と続く疎水性のストレッチとから構成される。推定上の疎水性の膜貫通ヘリックスは、プロリンにより破壊され、やや極性の配列が続く。また、配列が切断されることも予測され、このタンパク質がERの内腔に放出されることを指摘している。分泌された細胞外のタンパク質の特徴の1つは、ゴルジ体における複合糖部分の付加であるグリコシル化として知られるプロセス。糖はN-グリコシル化を介して共通配列N-X-S/TXはプロリンではないにおいてアスパラギンに付加できるGuptaおよびBrunak2002年;セリン、スレオニンおよびチロシンのヒドロキシル基はまたO-グリコシル化と称されたものの標的となりうるJulenius,Molgaardら.2005年。PTENは、複数のO-グリコシル化部位を有するが、しかし、僅か1つのN-グリコシル化部位を有する。HEK293細胞中でPTEN相補物の部分がグリコシル化されたかどうかを決定するプルダウンアッセイにレクチンコンカナバリン-A糖部分と結合するを使用した。約50のPTENロングのPTENの混合物をこれらの細胞から精製した図6。この事項は、PTENロングがグリコシル化されること、PTENの細胞質の55kDa形態がグリコシル化されるかまたはPTENロングが細胞外で切断されることを示す。PTENロングはヘパランと結合し、細胞表面に見出されるPTENは、いくつかのプロテオグリカン例えば、シンデカンおよびグリピカンと結合し、膜の外側のリーフレットleafletに付着することが見出される。これらのプロテオグリカンは、最もヘパラン化した細胞外分子のうちの2つであるBlero,Zhangら.2005年。PTENは、以前に高度に陰性に荷電した種に高い親和性を有することが示され、PTENの特性により高度に陰イオン性のPIP3を好むことが導かれるDas,Dixonら.2003年。ヘパランは、最も陰性に荷電した生体分子の1つであるため、ヘパランがPTENの細胞外基質への結合を媒介することが可能であった。マウスの肝臓からのタンパク質抽出物を用いて、PTENがヘパランと高親和性に結合することが発見された。さらにまた、ヘパリンアガロースカラムから1MNaClを用いたPTENの連続的な溶出によって、PTENロングも溶出された図7。細胞膜の外面に突き出たPTENロングは、プロテアーゼの分解に感受性であるべきである。プロテアーゼ保護アッセイにおいて、生細胞をプロテアーゼとインキュベーションし、細胞外のタンパク質のみが分解された。これは、脂質膜はプロテアーゼを不透過性であり、全ての細胞内タンパク質の防御に貢献するからである。HEK293細胞を付着培養からPBSで穏やかに撹拌して除去し、プロテイナーゼKの濃度を増加させて懸濁した。反応をPMSFで停止し、細胞をlaemlli緩衝剤で溶解した。PTENロングは、既知の細胞外タンパク質であるE-カドヘリンと共にプロテイナーゼKでの処理に感受性を示した図8。一方、PTENは中等度のプロテアーゼ感受性を示し、55kDa種のいくつかの部分はまた細胞外グリコシル化されるためであるか、またはいくらかの細胞溶解がアッセイの間に発生し、これにより細胞質のPTENがプロテイナーゼKに暴露されることを示している。プロテイナーゼKに暴露された場合にPTENが分解されることを証明するため、膜を透過するtritonでの対照を含めた。これがPTEN本来properであるかまたは55kDaに移動し、PTEN抗体のC末端エピトープを保持するPTENロングの切断形態であるかどうかはまだ分からない。このデータは、PTENロングが細胞表面にあることを指示している。可溶性PTENロングは培地に分泌される細胞表面上のPTENロングの存在は、このタンパク質の部分が可溶性であり、細胞環境に放出される可能性は排除しない。ヘパリンセファロースをHEK293細胞で馴化した血清不含培地からPTENロングを親和性精製するために使用した。カラムの溶出によって、培地中に50kDaの分子量に移動するPTENの存在が明らかとされた図9。PTENロング特異的な抗体での免疫ブロットは同じ50kDa種を明らかにし、このタンパク質が代替の開始部位から翻訳される配列およびPTENモノクローナル抗体のC末端エピトープの配列を保持することを示している。これは、55kDaであることが観察されたPTENの部分が実際に上流の開始コドンに由来する切断された翻訳産物であることを暗示する。培地へのPTENの分泌は、さらにATG/ATG構築物でトランスフェクトされたHEK293細胞においてPTENロングを過剰発現することにより確認された。これらの細胞を使用して、血清不含の馴化培地で一晩産生させ、PTENモノクローナル抗体6H2.1を使用して、1mlの培地からPTENを免疫沈降した。大きいPTENバンドが、より低い55kDaバンドと共に培地から良好に免疫沈降された。上記タンパク質が過剰発現されたため、上記タンパク質の適切なプロセシングはおそらく生じず、完全なサイズの70kDaPTENの分泌が生じる。PTENはヒト血清中に見出される生理的な分泌物の最良の供給源の1つは血清である。ヘパリンセファロースを用いてヒト血清からPTENを親和性精製した。ヒト血清を遠心分離し、ろ過して粒子状物質を除去した。次に、BC150に1:5に希釈し、広くプロテインA/Gで事前に清澄化してIgGを除去した。血清を少量のヘパリンセファロースを用いてバッチでインキュベーションした。ヘパリンセファロースをlaemmli緩衝剤で溶出し、溶出液をPTENについてブロットし、重鎖の混入を排除するため二次抗体単独でブロットした。PTENおよびPTENロングはともにヒト血清に見出された図10。PTENロングの抗血管形成活性PTENロングの抗血管形成の役割を以下に示す:1PTENロングは、通常、マウスの発生している網膜において弱く発現するが、新生児の発生の間で退行/細胞死を経験している血管に高レベルの発現が認められる図11;2PTENロングは、腫瘍中のアポトーシスしている血管に認められる。さらに、PTENロングで処理された上皮細胞は、トランスフェクトされた細胞から部分的に精製され、細胞の移動を阻害し、アポトーシスを誘導した図12。また、精製されたPTENロングは、カスパーゼ-3切断により測定された通り、培養においてU87、HUVEC内皮細胞、または293細胞のアポトーシスの活性化と関連する細胞死も誘導できる。PTENロングのインビボでの抗腫瘍および抗血管形成活性図13は、PTENロングでのマウスの処理を示す。Aマウスn=5に神経膠芽細胞腫細胞株U87が注射され、異種移植片が乳房の脂肪パッドの2部位左および右に形成された。腫瘍移植後、1つの腫瘍にPTENロングを直接注射し、反対側の腫瘍には注射されなかったw/PTENロング。また、5匹のマウスの対照セットは、空ベクターでトランスフェクトされた細胞から由来する疑似の精製タンパク質の調製物を注射された空ベクター。再び、反対側の腫瘍は注射されなかったw/空ベクター。マウスを1~11日および13~14日に処理した。示された日にノギスで最大の直径cmを測定した。腫瘍容量が≧1cmに達した時、マウスを屠殺した。Bタンパク質をPTENロング発現ベクターを293細胞にトランスフェクションすることにより調製し、V5親和性樹脂を用いて部分的に精製し、V5ペプチドで溶出した。図14は、14日間のPTENロングの対照注射で処理したマウスの生存率を示す日数。網膜染色p7のマウス網膜中のPTENロングおよび血管の染色によって、PTENロングがこのポイントでマウスの網膜の血管発生において最初に退行する硝子体管を選択的に染色することが明らかとされた。PTENロングに対する抗体は、エピトープ:N-PRHQQLLPSLSSFFFSHRLPD-C配列番号3に対するものである。血管の染色をBS1-レクチンで行った。精製PTENロングの精製のための1つの方法において、293細胞をATG/ATGPTENロングでトランスフェクトし、細胞溶解産物をNiアフィニティーカラムに通過させた。PTENロングをAKTAPurifier上のNiカラムによりイミダゾール溶出緩衝剤を用いて一貫して精製した。腫瘍退行PTENorf403アミノ酸またはPTENロングのいずれかで注射前にトランスフェクトされたU87細胞の異種移植片。注射7日後、PTENを過剰発現しているコホートn=4のうち4と比較してPTENロングを過剰発現しているコホートにおいて乳房血管の減少が認められた。これはPTENロングが腫瘍環境に影響し得ることを示唆する。PTENロングリーダー配列による膜通過送達図18および21は、無傷な細胞に適用された場合に、細胞内AKTリン酸化を減少する、PTENではなく、PTENロングの能力を示す。[例]カーゴ分子は、配列番号1の残基22~173に記載されている配列を有する連続したアミノ酸残基を含む第2のペプチドにペプチド結合を介して共有結合される。細胞膜にこの組成物を接触させると、カーゴ分子ペプチドは、細胞膜を通過して輸送され、細胞内に送達される。カーゴ分子タンパク質は、配列番号1の残基22~173に記載されている配列を有する連続したアミノ酸残基を含むペプチドにペプチド結合を介して共有結合される。細胞膜にこの組成物を接触させると、カーゴ分子タンパク質は、細胞膜を通過して輸送され、細胞内に送達される。カーゴ分子タンパク質はヒトp53、またはその活性な断片もしくはその活性な改変体であり得る。カーゴ分子ペプチドは、配列番号1の残基22~173に記載されている配列を有する連続したアミノ酸残基を含む核酸に共有結合される。細胞膜にこの組成物を接触させると、カーゴ分子核酸は、細胞膜を通過して輸送され、細胞内に送達される。核酸は、ジスルフィド結合を介してペプチドに共有結合され得る。核酸はsiRNAであってもよい。考察細胞溶解産物および組織からのPTEN免疫ブロットにおいて二番目のより大きいタンパク質バンドを定期的に観察した。より大きなバンドがPTENであることが確認される証拠には、次の事項が含まれる:大きなタンパク質バンドは、異なるPTENモノクローナル抗体により検出された;細胞がPTENに対するsiRNAで処理されるまたはPTEN遺伝子座がマウスにおいてノックアウトされる場合、大きなタンパク質は存在しない。PTENの5’UTRは、PTENの古典的な開始コドンと700塩基対以上にわたりインフレームであることが観察された。さらに、PTENの522塩基対上流のCUGコドンが存在し、翻訳される場合にPTEN免疫ブロットにおける大きなタンパク質のバンドのサイズを説明することができた。強いコザック配列とは関連しないが、-1シトシンおよび1グアノシン配列が保持される。翻訳され、PTENORFに付加される場合、約70kDaのタンパク質が産生されるはずであり、その分子量は観察された大きなPTENバンドの分子量である。この配列の翻訳は、実際のコード配列内のいくつかのPTENオルソログに既に存在する。マウスの組織溶解産物において類似するバンドが観察されたので、マウスの5’UTRも調査した。マウスの5’UTRヌクレオチド配列は、ヒトの5’UTRと高度に相同的であり、同様に開始コドンとインフレームである。2つの潜在的な代替の開始コドンが-522および-516に存在し、これらの部位からのこの配列の翻訳はヒト配列と90相同的なアミノ酸配列を示す。この推定上のタンパク質の保存は著しく、この配列の進化上の重要性が示された。この配列をよりよく記載するため、PTENの5’ATRまたは代替の翻訳領域と改名して翻訳の潜在性を記載した。PTENのオープンリーディングフレームを5’ATRと共にクローニングしてプラスミドを構築し、この組換えPTENの発現を標準の403アミノ酸を産生するオープンリーディングフレーム単独と比較した。5’ATRを含めることにより二番目の大きなPTENタンパク質バンドが生じ、このバンドは55kDaに移動する単一のバンドを作るPTENのまさに標準のORFを含んでいる発現プラスミドと比べて約70kDaに移動する。大きなタンパク質は、翻訳されたトータルのタンパク質の僅か小部分を占める;しかしながら、推定上の開始部位のATGへの変異によって、タンパク質比は主に大きな形態にシフトした。5’ATRのタンパク質配列の保存は、進化のアーティファクト以上であることを示す。N-末端は脂肪族アミノ酸のストレッチを含み、これが膜貫通配列であることが予測された。PrositeおよびSignal3.0IPの使用によって、PTENロングのN-末端がシグナルペプチドであり、それに直接続くプロテアーゼ切断部位を有することが予測された。PTENロングが細胞の細胞外表面に局在するかどうかをインビボでのプロテアーゼ保護アッセイを使用して試験した。PTENロングは、細胞外のプロテアーゼの量を増加させることにより進行性の分解を示したが、PTENは示さなかった。これは、少なくともいくらかのPTENロングが細胞外にあり、少なくとも部分的に細胞膜の外側のリーフレットに付着することを示している。これは、最も魅力的な結果であり、細胞膜の外側のリーフレットにおける活性な脂質ホスファターゼの意味が提起された。外膜結合性のプロテオグリカンの2つのファミリーであるグリピカンおよびシンデカンは、以前にPTENタンパク質複合体中に同定された。細胞表面におけるPTENの存在は、可溶性の分泌されるPTENの可能性を排除しない。シンデカンおよびグリピカンは、最も多量にヘパラン化したプロテオグリカンのうちの2つである。ヘパランは、高度に陰性に荷電したグリコサミノグリカンであり、またPTENは、陰イオンへの親和性を有することが示されており、高度に陰性に荷電したPIP3を基質として選択することを部分的に説明している。マウス肝臓からのPTEN精製を最適化する実験によって、PTENとPTENロングの両方がヘパリンセファロースカラムを用いて精製できることが明らかとされた。さらに、約50kDaのタンパク質をHEK293細胞で馴化した血清不含培地からヘパリンセファロースカラムを用いて精製した。精製されたタンパク質は、PTENに特異的なモノクローナル抗体およびPTENロングに存在する独特なアミノ酸残基に対するポリクローナル抗体により認識された。以前に、PTENロング抗体は70kDa付近のタンパク質バンドのみを認識した。両方の抗体が一つのバンドを認識できたという観察によって、タンパク分解プロセシングがおそらく発生すること、免疫ブロットで観察されたタンパク質が双方の抗体のエピトープを保持するPTENの断片であることが示される。また、PTENとPTENロングの両方は、ヒト血清からヘパリン親和性精製を用いて精製できた。過去10年の文献によって、PTENの配列の想定が蓄積されてきた。代替の部位から翻訳され、外側のリーフレットと細胞外間隙の両方に分泌されるPTENの新規の形態が存在するとの証拠をここに示す。インビボの結果は、PTENロングがヒト血清に通常存在する新規の抗腫瘍化合物であり、抗血管形成およびアポトーシス促進特性を有することを示す。第2シリーズの実験MSESPTENロングの生成大腸菌e.coliにおける精製を目的として、PTENロングのオープンリーディングフレームを改変し、最初の21個のアミノ酸を欠失させ、真核生物のシグナルペプチド配列を除き、これを最初の4つのアミノ酸に基づいてMSESバージョンと称した図28。このタンパク質は、PTENロングに独特の代替の翻訳領域の153アミノ酸と、PTENロングとPTENの間で共有される403アミノ酸を有し、IPTGを含む誘導性発現ベクターを用いて大腸菌に導入され、ニッケルおよびヘパリン親和性カラムを用いて抽出物から精製された。細胞侵入のための6個のアルギニンリピートの重要性を調べることを目的として、この配列はインフレームR6で欠失させ、このタンパク質を上記の通り精製した。MSESPTENロングは細胞に侵入する精製されたMSESPTENロング野生型またはR6突然変異タンパク質は、1マイクログラム/mlの濃度で、培養中の増殖されたMDA-MB-468ヒト細胞の培地に添加された。並行した同一条件下で、細胞はまた、代替の翻訳領域を欠損しているオリジナルの403アミノ酸のPTEN、またはRFPタンパク質のみを発現する細胞から調製される疑似処理を用いて処理された。細胞は、細胞分画のために細胞を単離する前に、37°Cにて30分間インキュベートされた。本発明者らは、細胞質および核画分を単離した。分画の有効性は、細胞質および核画分に対して、それぞれ対照のためチューブリンおよびBAF180を用いたウエスタンブロットによって測定された。野生型PTENロングだけが細胞に侵入し、細胞質および核に存在していた。重要なことには、PTENおよびR6について欠失されたPTENロングはいずれも細胞に侵入することができなかった。これらのデータは、R6配列が効率的な細胞侵入に必要とされ、最初の21アミノ酸は必要とされないことを指示する。PTENロング-p53融合タンパク質の生成上記研究は、図2中の構築物の最初の153アミノ酸が細胞内に別のタンパク質配列を送達するために使用され得ることを示唆した。この質問に答えるために、MSESPTENロング構築物の最初の153アミノ酸は、Pten-LongLeaderについてPLと呼ばれ、ヒトp53の393アミノ酸に融合され、PL-p53融合タンパク質を生成した図30。V5-Hisエピトープタグは、精製および検出の目的で使用するためにC末端に融合された。PL-p53は細胞に侵入し、遺伝子発現を活性化し、腫瘍増殖を抑制するPL-p53融合タンパク質は、IPTGを用いて大腸菌に導入され、ニッケルおよびヘパリン親和性カラムを用いて細菌溶解物から精製された。PL-p53タンパク質は、MDA-MB-468またはH1299ヒト癌細胞とともに1時間インキュベートし、その後、分画のために細胞を回収し、融合タンパク質が細胞に侵入するかどうかを決定した。増加したp53が、処理されたH1299細胞およびMDA-MB-468細胞の核において検出され得たが、疑似処理されたこれらの細胞では検出されず、PUMAおよびp21両者ともにp53転写因子の標的であるの発現における増加と関連付けられた図31。MDA-MB-468異種移植片の毎日の処理によって、10日間にわたって腫瘍体積が減少したが、RFP赤色蛍光タンパク質を発現する大腸菌由来の疑似処理された対照では減少しなかった。細菌発現されたMSESPTENロングで処理されたマウスにおける耐糖能試験マウスは、細菌発現させたMSESPTENロングLong、RFP赤色蛍光タンパク質疑似対照、IgG対照、および細胞内への取り込みをブロックする抗PTEN抗体138G6で処理された。PTENロングは他の処理と比べて血糖値を減少させたが、抗PTEN抗体138G6はIgG対照と比較してグルコースを増加させた図32。このデータは、PTENロングが血糖値を減少させ得ることを実証している。マウスは、グルコースで処理する前にIP注射された。AclandPMDixonetalSubcellularfateoftheint2oncoproteinisdeterminedbychoiceofinitiationcodonNature3436625AlbertsBMolecularbiologyofthecellNewYorkGarlandScienceBakerSJPTENentersthenuclearageCell128258BleroDJZhangetalPhosphatidylinositol345trisphosphatemodulationinSHIP2deficientmouseembryonicfibroblastsFebsJ272251222BlobelGPWalteretalTranslocationofproteinsacrossmembranesthesignalhypothesisandbeyondSympSocExpBiol33936BonneauDandMLongyMutationsofthehumanPTENgeneHumMutat1610922DiCristofanoABPesceetalPtenisessentialforembryonicdevelopmentandtumoursuppressionNatGenet1934855EngCPTENonegenemanysyndromesHumMutat2218398FlorkiewiczRZandASommerHumanbasicfibroblastgrowthfactorgeneencodesfourpolypeptidesthreeinitiatetranslationfromnonAUGcodonsProcNatlAcadSciUSA86397881FraserMMXZhuetalPtenlosscauseshypertrophyandincreasedproliferationofastrocytesinvivoCancerRes6477739GuptaRandSBrunakPredictionofglycosylationacrossthehumanproteomeandthecorrelationtoproteinfunctionPacSympBiocomput31022HannSRRegulationandfunctionofnonAUGinitiatedprotooncogenesBiochimie768806HannSRMDixitetalThealternativelyinitiatedcMycproteinsdifferentiallyregulatetranscriptionthroughanoncanonicalDNAbindingsiteGenesDev8244152HannSRandRNEisenmanProteinsencodedbythehumancmyconcogenedifferentialexpressioninneoplasticcellsMolCellBiol4248697HannSRMWKingetalAnonAUGtranslationalinitiationincmycexon1generatesanNterminallydistinctproteinwhosesynthesisisdisruptedinBurkittslymphomasCell5218595HannSRKSloanBrownetalTranslationalactivationofthenonAUGinitiatedcmyc1proteinathighcelldensitiesduetomethioninedeprivationGenesDev6122940HersheyJWTranslationalcontrolinmammaliancellsAnnuRevBiochem6071755JuleniusKAMolgaardetalPredictionconservationanalysisandstructuralcharacterizationofmammalianmucintypeOglycosylationsitesGlycobiology1515364KieferPPAclandetalCompetitionbetweennuclearlocalizationandsecretorysignalsdeterminesthesubcellularfateofasingleCUGinitiatedformofFGF3EmboJ13412636KozakMContexteffectsandinefficientinitiationatnonAUGcodonsineucaryoticcellfreetranslationsystemsMolCellBiol9507380KozakMDownstreamsecondarystructurefacilitatesrecognitionofinitiatorcodonsbyeukaryoticribosomesProcNatlAcadSciUSA8783015KozakMAnanalysisofvertebratemRNAsequencesintimationsoftranslationalcontrolJCellBiol115887903KwabiAddoBDGirietalHaploinsufficiencyofthePtentumorsuppressorgenepromotesprostatecancerprogressionProcNatlAcadSciUSA98115638LeeJOHYangetalCrystalstructureofthePTENtumorsuppressorimplicationsforitsphosphoinositidephosphataseactivityandmembraneassociationCell9932334LiJLSimpsonetalThePTENMMAC1tumorsuppressorinducescelldeaththatisrescuedbytheAKTproteinkinaseBoncogeneCancerRes58566772MaehamaTandJEDixonThetumorsuppressorPTENMMAC1dephosphorylatesthelipidsecondmessengerphosphatidylinositol345trisphosphateJBiolChem273133758PetrocelliTandJMSlingerlandPTENdeficiencyaroleinmammarycarcinogenesisBreastCancerRes335660PratsHMKaghadetalHighmolecularmassformsofbasicfibroblastgrowthfactorareinitiatedbyalternativeCUGcodonsProcNatlAcadSciUSA86183640SulisMLandRParsonsPTENfrompathologytobiologyTrendsCellBiol1347883TairaMTIizasaetalAhumantestisspecificmRNAforphosphoribosylpyrophosphatesynthetasethatinitiatesfromanonAUGcodonJBiolChem265164917TorresJandRPulidoThetumorsuppressorPTENisphosphorylatedbytheproteinkinaseCK2atitsCterminusImplicationsforPTENstabilitytoproteasomemediateddegradationJBiolChem2769938VazquezFSRGrossmanetalPhosphorylationofthePTENtailactsasaninhibitoryswitchbypreventingitsrecruitmentintoaproteincomplexJBiolChem2764862730VazquezFSRamaswamyetalPhosphorylationofthePTENtailregulatesproteinstabilityandfunctionMolCellBiol2050108WangXLCTrotmanetalNEDD41isaprotooncogenicubiquitinligaseforPTENCell12812939XiaoJHIDavidsonetalCloningexpressionandtranscriptionalpropertiesofthehumanenhancerfactorTEF1Cell6555168YouMJDHCastrillonetalGeneticanalysisofPtenandInk4aArfinteractionsinthesuppressionoftumorigenesisinmiceProcNatlAcadSciUSA99145560。"