"明細書中に記載の発明。本発明は、以下の項目を提供する。項目1CD40抗原を発現する新生物細胞を含む癌についてヒト被検体を処置する方法であって、該方法は、該被検体に対して併用療法を施す工程を包含し、該療法は、インターロイキン-2IL-2もしくはその生物学的に活性な改変体との組み合わせての、抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの有効量の投与を包含し、ここで該抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、CD40抗原に対して結合される場合に、有意なアゴニスト活性を有さず、該抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、以下:aモノクローナル抗体CHIR-5.9またはCHIR-12.12;bハイブリドーマ細胞株5.9または12.12によって産生されるモノクローナル抗体;c配列番号6に示される配列、配列番号7に示される配列、配列番号8に示される配列、配列番号6と配列番号7とに示される配列の両方、および配列番号6と配列番号8とに示される配列の両方からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体;d配列番号2に示される配列、配列番号4に示される配列、配列番号5に示される配列、配列番号2と配列番号4とに示される配列の両方、および配列番号2と配列番号5とに示される配列の両方からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体;e配列番号1に示される配列、配列番号3に示される配列、および配列番号1と配列番号3とに示される配列の両方からなる群より選択されるヌクレオチド配列を含む核酸分子によってコードされるアミノ酸配列を有するモノクローナル抗体;fハイブリドーマ細胞株5.9または12.12によって産生されるモノクローナル抗体に結合し得るエピトープに結合するモノクローナル抗体;g配列番号10または配列番号12に示されるヒトCD40配列の残基82~87を含むエピトープに結合するモノクローナル抗体;h配列番号10または配列番号12に示されるヒトCD40配列の残基82~89を含むエピトープに結合するモノクローナル抗体;i競合結合アッセイにおいてモノクローナル抗体CHIR-5.9またはCHIR-12.12と競合するモノクローナル抗体;j前述の項目aのモノクローナル抗体または前述の項目c~iのいずれか1項のモノクローナル抗体であって、該抗体は組換え産生される、モノクローナル抗体;ならびにk前述の項目a~jのいずれか1項のモノクローナル抗体の抗原結合フラグメントであるモノクローナル抗体であって、該フラグメントは該ヒトCD40抗原に特異的に結合する能力を保持する、モノクローナル抗体からなる群より選択される、方法。項目2上記併用療法は、相乗的な治療効果を提供する、項目1に記載の方法。項目3上記抗CD40抗体の上記抗原結合フラグメントは、Fabフラグメント、Fab’2フラグメント、Fvフラグメント、および単鎖Fvフラグメントからなる群より選択される、項目1に記載の方法。項目4上記IL-2は、ヒトIL-2またはその生物学的に活性な改変体である、項目1に記載の方法。項目5ヒトIL-2の上記改変体は、デス-アラニル-1,セリン-125のヒトIL-2である、項目4に記載の方法。項目6上記抗CD40抗体は、モノクローナル抗体CHIR-5.9またはモノクローナル抗体CHIR-12.12である、項目5に記載の方法。項目7上記癌は、B細胞関連の癌または固形腫瘍である、項目1に記載の方法。項目8項目7に記載の方法であって、上記B細胞関連の癌は、非ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病、多発性骨髄腫、B細胞リンパ腫、高悪性度B細胞リンパ腫、中悪性度B細胞リンパ腫、低悪性度B細胞リンパ腫、B細胞急性リンパ性白血病、骨髄芽球性白血病、ホジキン病、プラズマ細胞種、濾胞性リンパ腫、濾胞性核切れ込み小細胞型リンパ腫、濾胞性大細胞型リンパ腫、濾胞性混合型核切れ込み小細胞型リンパ腫、びまん性核切れ込み小細胞型リンパ腫、びまん性小リンパ球性リンパ腫、前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、辺縁層リンパ腫、粘膜関連リンパ組織リンパ腫、単球様B細胞リンパ腫、脾性リンパ腫、ヘアリーセル白血病、びまん性大細胞型リンパ腫、縦隔大細胞型B細胞リンパ腫、リンパ腫様肉芽腫症、血管内リンパ腫症、びまん性混合型リンパ腫、びまん性大細胞型リンパ腫、免疫芽球性リンパ腫、バーキットリンパ腫、エイズ関連リンパ腫、およびマントル細胞リンパ腫からなる群より選択される、方法。項目9上記固形腫瘍は、膀胱癌、乳癌、肝臓癌、胃癌、結腸癌、前立腺癌、腎細胞癌、鼻咽腔癌、扁平上皮癌、甲状腺乳頭癌、黒色腫、卵巣癌、肺癌、頚癌、および肉腫からなる群より選択される、項目7に記載の方法。項目10上記IL-2またはその改変体、および上記抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、連続して投与される、項目1に記載の方法。項目11上記IL-2またはその改変体、および上記抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、同時に投与される、項目1に記載の方法。項目12上記抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、処置期間全体にわたってかまたは該処置期間内の4週間~16週間の決められた持続期間の間、該処置期間の間の一定のIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルの投与との組み合わせで、1週間に1度、2週間に1度、3週間に1度、および4週間に1度からなる群より選択される投与計画にしたがって投与され、ここで該一定のIL-2投薬レジメンは、IL-2またはその生物学的に活性な改変体の一定な1週間の総用量が上記被検体に対して投与される、第1の期間、および該IL-2またはその生物学的改変体の投与が、該被検体に対して控えられる、第2の期間を含む、項目1に記載の方法。項目13上記第1の期間は、約2週間~約12週間の持続期間を有し、そして上記第2の期間は、約1週間~約4週間の持続期間を有する、項目12に記載の方法。項目14上記第1の期間は、4週間の持続期間を有し、そして上記第2の期間は、1週間の持続期間を有する、項目13に記載の方法。項目15上記抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの第1の投与は、上記処置期間の1日目に始まり、そして上記一定のIL-2投薬レジメンの第1のサイクルは、該抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの該第1の投与の10日以内に開始される、項目13に記載の方法。項目16上記一定のIL-2投薬レジメンの上記第1のサイクルは、上記処置期間の8日目に開始される、項目15に記載の方法。項目17上記処置期間は、上記一定のIL-2投薬レジメンの上記第1のサイクルの完了後または該一定のIL-2投薬レジメンの任意のその後のサイクルの完了後の4週間以内に開始される、該一定のIL-2投薬レジメンの1つ以上のその後のサイクルを含み、上記抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの上記投与は、該処置期間全体を通して継続される、項目15に記載の方法。項目18上記CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効量は、約0.5mg/kg~約30.0mg/kgの範囲である、項目12に記載の方法。項目19IL-2またはその生物学的に活性な改変体の上記一定な1週間の総用量は、単回投与として投与されるか、または1週間に2回投与の投与計画、1週間に3回投与の投与計画、1週間に4回投与の投与計画、1週間に5回投与の投与計画、1週間に6回投与の投与計画、または1週間に7回投与の投与計画にしたがって投与される等用量の第1の系列に分割される、項目12に記載の方法。項目20上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体は、静脈内、筋肉内、および皮下からなる群より選択される経路によって投与される、項目19に記載の方法。項目21項目12に記載の方法であって、上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の上記一定な1週間の総用量は、同じ経路および同じ投与計画によって投与される参照IL-2標準の1週間の総用量に相当する量であり、該参照IL-2標準の該1週間の総用量は、約1100μg18.0MIU~約3300μg54.0MIUの範囲であり、該IL-2またはその生物学的に活性な改変体の該一定な1週間の総用量は、参照IL-2標準の該1週間の総用量によって提供されるナチュラルキラーNK細胞活性の、少なくとも70を提供する、方法。項目22上記参照IL-2標準の上記1週間の総用量は、約1100μg18.0MIU~約2567μg42.0MIUであり、そして参照IL-2標準の該1週間の総用量は、1週間に3回投与の投与計画にしたがって投与される3つの等用量に分割される、項目21に記載の方法。項目23項目1に記載の方法であって、上記抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、処置期間全体にわたってか、または該処置期間内の4週間~16週間の決められた持続期間の間、該処置期間の間の2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルの投与との組み合わせで、1週間に1度、2週間に1度、3週間に1度、および4週間に1度からなる群より選択される投与計画にしたがって投与され、ここで該2つのレベルのIL-2投薬レジメンは、IL-2またはその生物学的に活性な改変体のより高い1週間の総用量が上記被検体に対して投与される第1の期間、および該第1の期間後の、該IL-2またはその生物学的に活性な改変体のより低い1週間の総用量が該被検体に対して投与される第2の期間を含む、方法。項目24上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の第1の用量は、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの第1の用量を投与する前に、上記被検体に対して投与される、項目23に記載の方法。項目25上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の上記第1の用量は、上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの上記第1の用量が上記被検体に対して投与される前に、最長1ヶ月間まで投与される、項目24に記載の方法。項目26上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の上記第1の用量は、上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの上記第1の用量が上記被検体に対して投与される前に、1週間投与される、項目25に記載の方法。項目27上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の第1の用量は、上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの第1の用量と同時に上記被検体に投与される、項目23に記載の方法。項目28上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の第1の用量は、上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの第1の用量が上記被検体に対して投与された後に、該被検体に対して、1週間投与される、項目23に記載の方法。項目29上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの上記治療有効量は、約0.5mg/kg~約30.0mg/kgの範囲である、項目23に記載の方法。項目30上記2つのレベルのIL-2投薬レジメンは、合わせて4週間~16週間の持続期間を有する、項目23に記載の方法。項目31上記2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間は、上記合わせて4週間~16週間の持続期間の内に少なくとも1週間の持続期間を有する、項目30に記載の方法。項目34上記IL-2の2つのレベルの投薬レジメンの上記第1の期間は、上記合わせて4週間~16週間の持続期間の半分である持続期間を有する、項目30に記載の方法。項目35項目23に記載の方法であって、上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の上記のより高い1週間の総用量は、単回投与として投与されるか、または1週間に2回投与の投与計画、1週間に3回投与の投与計画、1週間に4回投与の投与計画、1週間に5回投与の投与計画、1週間に6回投与の投与計画、または1週間に7回投与の投与計画にしたがって投与される等用量の第1の系列に分割され、そして該IL-2またはその生物学的に活性な改変体の上記のより低い1週間の総用量は、単回投与として投与されるか、または1週間に2回投与の投与計画、1週間に3回投与の投与計画、1週間に4回投与の投与計画、1週間に5回投与の投与計画、1週間に6回投与の投与計画、または1週間に7回投与の投与計画にしたがって投与される等用量の第2の系列に分割される、方法。項目36上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体は、静脈内、筋肉内、および皮下からなる群より選択される経路によって投与される、項目35に記載の方法。項目38上記等用量の第1の系列は、1週間に3回投与の投与計画にしたがって投与され、そして上記等用量の第2の系列は、1週間に3回投与の投与計画にしたがって投与される、項目36に記載の方法。項目39項目23に記載の方法であって、ここで:a上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の上記のより高い1週間の総用量は、同じ経路および同じ投与計画によって投与される参照IL-2標準のより高い1週間の総用量に相当する量であり、該参照IL-2標準のより高い1週間の総用量は、約1834μg30.0MIU~約3300μg54.0MIUの範囲であり、該IL-2またはその生物学的に活性な改変体の該より高い1週間の総用量は、該参照IL-2標準のより高い1週間の総用量によって提供されるナチュラルキラーNK細胞活性の、少なくとも70を提供し;b上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の上記のより低い1週間の総用量は、同じ経路および同じ投与計画によって投与される該参照IL-2標準のより低い1週間の総用量に相当する量であり、該参照IL-2標準のより低い1週間の総用量は、約1100μg18.0MIU~約2384μg39.0MIUの範囲であり、該IL-2またはその生物学的に活性な改変体の該より低い1週間の総用量は、該参照IL-2標準のより低い1週間の総用量によって提供されるナチュラルキラーNK細胞活性の、少なくとも70を提供し;そしてc該IL-2またはその生物学的に活性な改変体のより低い1週間の総用量は、該IL-2またはその生物学的に活性な改変体のより高い1週間の総用量よりも低い、方法。項目40上記参照IL-2標準のより高い1週間の総用量は、約1834μg30.0MIU~約2567μg42.0MIUであり、そして上記参照IL-2標準のより低い1週間の総用量は、約1100μg18.0MIU~約1834μg30.0MIUである、項目39に記載の方法。項目41項目40に記載の方法であって、上記参照IL-2標準のより高い1週間の総用量は、約2567μg42.0MIUであり、そして上記参照IL-2標準のより低い1週間の総用量は、約1834μg30.0MIUであり、そして該参照IL-2標準のより高い1週間の総用量および該参照IL-2標準のより低い1週間の総用量はそれぞれ、1週間に3回投与の投与計画にしたがって投与される3つの等用量に分割される、方法。項目42項目23に記載の方法であって、該方法は、上記2つのレベルのIL-2投薬レジメン中における中断をさらに包含し、該中断は、該2つのレベルのIL-2投薬レジメンの上記第1の期間と該2つのレベルのIL-2投薬レジメンの上記第2の期間との間に、上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体を投与しない期間を含む、方法。項目43上記中断は、約1週間~約4週間の持続期間を有する、項目42に記載の方法。項目44上記処置期間は、上記2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1のサイクルの完了後または該2つのレベルのIL-2投薬レジメンの任意のその後のサイクルの完了後、約1週間~約4週間で開始される、該2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のその後のサイクルを含み、ここで上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの毎週の投与は、該処置期間全体にわたって継続される、項目23に記載の方法。項目45上記2つのレベルのIL-2投薬レジメンの少なくとも1つのサイクルは、該2つのレベルの投薬レジメン中に中断を含み、該中断は、該中断を含む該2つのレベルのIL-2投薬レジメンの任意の所定のサイクルの、第1の期間と第2の期間との間に、該IL-2またはその生物学的に活性な改変体を投与しない期間を含む、項目44に記載の方法。項目46CD40抗原を発現する新生物細胞を含む癌についてヒト被検体を処置する方法であって、該方法は、該被検体に対して併用療法を施す工程を包含し、該療法は、インターロイキン-2IL-2またはその生物学的に活性な改変体との組み合わせでの、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの有効量の投与を包含し、ここで該アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、ヒトCD40抗原のドメイン2に特異的に結合し、そしてヒトCD40抗原のドメイン2に結合される場合に、有意なアゴニスト活性を有さない、方法。項目47上記併用療法は、相乗的な治療効果を提供する、項目46に記載の方法。項目48上記アンタゴニスト抗CD40抗体は、ヒト抗体である、項目46に記載の方法。項目49上記アンタゴニスト抗CD40抗体は、組換え産生される、項目46に記載の方法。項目50上記アンタゴニスト抗CD40抗体は、ハイブリドーマ細胞株5.9によって産生される抗体およびハイブリドーマ細胞株12.12によって産生される抗体からなる群より選択される抗体に関する結合特異性を有する、項目46に記載の方法。項目51上記アンタゴニスト抗CD40抗体は、特許受託番号PTA-5542としてATCCに寄託されたハイブリドーマ細胞株によって産生される抗体、および特許受託番号PTA-5543としてATCCに寄託されたハイブリドーマ細胞株によって産生される抗体からなる群より選択される、項目46に記載の方法。項目52上記アンタゴニスト抗CD40抗体は、モノクローナル抗体CHIR-12.12またはモノクローナル抗体CHIR-5.9に関する結合特異性を有する、項目46に記載の方法。項目53上記アンタゴニスト抗CD40抗体は、配列番号10または配列番号12に示されるヒトCD40配列の残基82~87を含むエピトープに結合する、項目46に記載の方法。項目54項目46に記載の方法であって、上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、以下:a配列番号2に示される配列、配列番号4に示される配列、配列番号5に示される配列、配列番号2と配列番号4とに示される配列の両方、および配列番号2と配列番号5とに示される配列の両方からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体;b配列番号1に示される配列、配列番号3に示される配列、および配列番号1と配列番号3とに示される配列の両方からなる群より選択されるヌクレオチド配列を含む核酸分子によってコードされるアミノ酸配列を有するモノクローナル抗体;cハイブリドーマ細胞株12.12によって産生されるモノクローナル抗体に結合し得るエピトープに結合するモノクローナル抗体;d配列番号10または配列番号12に示されるヒトCD40配列の残基82~87を含むエピトープに結合するモノクローナル抗体;e競合結合アッセイにおいてモノクローナル抗体CHIR-12.12と競合するモノクローナル抗体;f前述の項目a~eのいずれか1項のモノクローナル抗体であって、該抗体が組換え産生される、モノクローナル抗体;ならびにgCHIR-12.12モノクローナル抗体の抗原結合フラグメントまたは前述の項目a~fのいずれか1項のモノクローナル抗体の抗原結合フラグメントであるモノクローナル抗体であって、該フラグメントは該ヒトCD40抗原に特異的に結合する能力を保持する、モノクローナル抗体、からなる群より選択される、方法。項目55上記抗CD40抗体の抗原結合フラグメントは、Fabフラグメント、Fab’2フラグメント、Fvフラグメント、および単鎖Fvフラグメントからなる群より選択される、項目46に記載の方法。項目56上記IL-2は、ヒトIL-2またはその生物学的に活性な改変体である、項目46に記載の方法。項目57上記ヒトIL-2の改変体は、デス-アラニル-1,セリン-125のヒトIL-2である、項目46に記載の方法。項目58上記アンタゴニスト抗CD40抗体は、モノクローナル抗体CHIR-5.9またはモノクローナル抗体CHIR-12.12である、項目57に記載の方法。項目59上記癌は、B細胞関連の癌または固形腫瘍である、項目46に記載の方法。項目60項目59に記載の方法であって、上記B細胞関連の癌は、非ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病、多発性骨髄腫、B細胞リンパ腫、高悪性度B細胞リンパ腫、中悪性度B細胞リンパ腫、低悪性度B細胞リンパ腫、B細胞急性リンパ性白血病、骨髄芽球性白血病、ホジキン病、プラズマ細胞種、濾胞性リンパ腫、濾胞性核切れ込み小細胞型リンパ腫、濾胞性大細胞型リンパ腫、濾胞性混合型核切れ込み小細胞型リンパ腫、びまん性核切れ込み小細胞型リンパ腫、びまん性小リンパ球性リンパ腫、前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、辺縁層リンパ腫、粘膜関連リンパ組織リンパ腫、単球様B細胞リンパ腫、脾性リンパ腫、ヘアリーセル白血病、びまん性大細胞型リンパ腫、縦隔大細胞型B細胞リンパ腫、リンパ腫様肉芽腫症、血管内リンパ腫症、びまん性混合細胞型リンパ腫、びまん性大細胞型リンパ腫、免疫芽球性リンパ腫、バーキットリンパ腫、エイズ関連リンパ腫、およびマントル細胞リンパ腫からなる群より選択される、方法。項目61上記固形腫瘍は、膀胱癌、乳癌、肝臓癌、胃癌、結腸癌、前立腺癌、腎細胞癌、鼻咽腔癌、扁平上皮癌、甲状腺乳頭癌、黒色腫、卵巣癌、肺癌、頚癌、および肉腫からなる群より選択される、項目59に記載の方法。項目62上記IL-2またはその改変体、および上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、連続して投与される、項目46に記載の方法。項目63上記IL-2またはその改変体、および上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、同時に投与される、項目46に記載の方法。項目64項目46に記載の方法であって、上記抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、処置期間全体または該処置期間内の4週間~16週間の決められた持続期間の間、該処置期間の間の一定のIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルの投与との組み合わせで、1週間に1度、2週間に1度、3週間に1度、および4週間に1度からなる群より選択される投与計画にしたがって投与され、ここで該一定のIL-2投薬レジメンは、IL-2またはその生物学的に活性な改変体の一定な1週間の総用量が上記被検体に対して投与される、第1の期間、および該IL-2またはその生物学的改変体の投与が該被検体に対して控えられる、第2の期間を含む、方法。項目65上記第1の期間は、約2週間~約12週間の持続期間を有し、そして上記第2の期間は、約1週間~約4週間の持続期間を有する、項目64に記載の方法。項目66上記第1の期間は、4週間の持続期間を有し、そして上記第2の期間は、1週間の持続期間を有する、項目65に記載の方法。項目67上記抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの第1の投与は、上記処置期間の1日目に始まり、そして上記一定のIL-2投薬レジメンの第1のサイクルは、該抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの該第1の投与の10日以内に開始される、項目65に記載の方法。項目68上記一定のIL-2投薬レジメンの第1のサイクルは、上記処置期間の8日目に開始される、項目67に記載の方法。項目69上記処置期間は、上記一定のIL-2投薬レジメンの上記第1のサイクルの完了後または該一定のIL-2投薬レジメンの任意のその後のサイクルの完了後の4週間以内に開始される、該一定のIL-2投薬レジメンの1つ以上のその後のサイクルを含み、上記抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの上記投与は、該処置期間全体を通して継続される、項目67に記載の方法。項目70上記CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効量は、約0.5mg/kg~約30.0mg/kgの範囲である、項目64に記載の方法。項目71IL-2またはその生物学的に活性な改変体の上記一定な1週間の総用量は、単回投与として投与されるか、または1週間に2回投与の投与計画、1週間に3回投与の投与計画、1週間に4回投与の投与計画、1週間に5回投与の投与計画、1週間に6回投与の投与計画、または1週間に7回投与の投与計画にしたがって投与される等用量の第1の系列に分割される、項目64に記載の方法。項目72上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体は、静脈内、筋肉内、および皮下からなる群より選択される経路によって投与される、項目71に記載の方法。項目73項目64に記載の方法であって、上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の上記一定な1週間の総用量は、同じ経路および同じ投与計画によって投与される参照IL-2標準の1週間の総用量に相当する量であり、該参照IL-2標準の1週間の総用量は、約1100μg18.0MIU~約3300μg54.0MIUの範囲であり、該IL-2またはその生物学的に活性な改変体の該一定な1週間の総用量は、参照IL-2標準の該1週間の総用量によって提供されるナチュラルキラーNK細胞活性の、少なくとも70を提供する、方法。項目74上記参照IL-2標準の1週間の総用量は、1100μg18.0MIU~2567μg42.0MIUであり、そして該参照IL-2標準の1週間の総用量は、1週間に3回投与の投与計画にしたがって投与される3つの等用量に分割される、項目73に記載の方法。項目75項目46に記載の方法であって、上記抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、処置期間の全体にわたって、該処置期間の間の2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルの投与との組み合わせでの、1週間に1度、2週間に1度、3週間に1度、および4週間に1度からなる群より選択される投与計画にしたがって投与され、ここで該2つのレベルのIL-2投薬レジメンは、IL-2またはその生物学的に活性な改変体のより高い1週間の総用量が上記被検体に対して投与される、第1の期間、および該第1の期間後の、該IL-2またはその生物学的に活性な改変体のより低い1週間の総用量が、該被検体に対して投与される第2の期間を含む、方法。項目76上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の第1の用量は、上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの第1の用量を投与する前に、上記被検体に対して投与される、項目75に記載の方法。項目77上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の第1の用量は、上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの上記第1の用量が上記被検体に対して投与される前に、最長1ヶ月間まで投与される、項目76に記載の方法。項目78上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の第1の用量は、上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの上記第1の用量が上記被検体に対して投与される前に、1週間投与される、項目77に記載の方法。項目79上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の第1の用量は、上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの第1の用量と同時に上記被検体に投与される、項目75に記載の方法。項目80上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の第1の用量は、上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの第1の用量が上記被検体に対して投与された後に、該被検体に対して1週間投与される、項目75に記載の方法。項目81上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの上記治療有効量は、約0.5mg/kg~約30.0mg/kgの範囲である、項目75に記載の方法。項目82上記2つのレベルのIL-2投薬レジメンは、合わせて4週間~16週間の持続期間を有する、項目75に記載の方法。項目83上記2つのレベルのIL-2投薬レジメンの上記第1の期間は、上記合わせて4週間~16週間の持続期間の内に少なくとも1週間の持続期間を有する、項目82に記載の方法。項目84IL-2の上記2つのレベルの投薬レジメンの上記第1の期間は、4週間~16週間の上記合わせた持続期間の半分である持続期間を有する、項目82に記載の方法。項目85項目75に記載の方法であって、上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の上記のより高い1週間の総用量は、単回投与として投与されるか、または1週間に2回投与の投与計画、1週間に3回投与の投与計画、1週間に4回投与の投与計画、1週間に5回投与の投与計画、1週間に6回投与の投与計画、または1週間に7回投与の投与計画にしたがって投与される等用量の第1の系列に分割され、そして上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体の上記のより低い1週間の総用量は、単回投与として投与されるか、または1週間に2回投与の投与計画、1週間に3回投与の投与計画、1週間に4回投与の投与計画、1週間に5回投与の投与計画、1週間に6回投与の投与計画、または1週間に7回投与の投与計画にしたがって投与される等用量の第2の系列に分割される、方法。項目86上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体は、静脈内、筋肉内、および皮下からなる群より選択される経路によって投与される、項目85に記載の方法。項目87上記等用量の第1の系列は、1週間に3回投与の投与計画に従って投与され、そして上記等用量の第2の系列は、1週間に3回投与の投与計画にしたがって投与される、項目86に記載の方法。項目88項目75に記載の方法であって、ここで:a上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体のより高い1週間の総用量は、同じ経路および同じ投与計画によって投与される参照IL-2標準のより高い1週間の総用量に相当する量であり、該参照IL-2標準のより高い1週間の総用量は、約1834μg30.0MIU~約3300μg54.0MIUの範囲であり、該IL-2またはその生物学的に活性な改変体の該より高い1週間の総用量は、参照IL-2標準の該より高い1週間の総用量によって提供されるナチュラルキラーNK細胞活性の、少なくとも70を提供し;b上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体のより低い1週間の総用量は、同じ経路および同じ投与計画によって投与される参照IL-2標準のより低い1週間の総用量に相当する量であり、該参照IL-2標準のより低い1週間の総用量は、約1100μg18.0MIU~約2384μg39.0MIUの範囲であり、該IL-2またはその生物学的に活性な改変体の該より低い1週間の総用量は、該参照IL-2標準の該より低い1週間の総用量によって提供されるナチュラルキラーNK細胞活性の、少なくとも70を提供し;そしてc該IL-2またはその生物学的に活性な改変体のより低い1週間の総用量は、該IL-2またはその生物学的に活性な改変体のより高い1週間の総用量よりも低い、方法。項目89上記参照IL-2標準のより高い1週間の総用量は、1834μg30.0MIU~2567μg42.0MIUであり、そして上記参照IL-2標準のより低い1週間の総用量は、1100μg18.0MIU~1834μg30.0MIUである、項目88に記載の方法。項目90項目89に記載の方法であって、上記参照IL-2標準のより高い1週間の総用量は、2567μg42.0MIUであり、そして上記参照IL-2標準のより低い1週間の総用量は、約1834μg30.0MIUであり、そして該参照IL-2標準のより高い1週間の総用量および該参照IL-2標準のより低い1週間の総用量はそれぞれ、1週間に3回投与の投与計画にしたがって投与される3つの等用量に分割される、方法。項目91項目75に記載の方法であって、該方法は、上記2つのレベルのIL-2投薬レジメン中に中断をさらに包含し、該中断は、該2つのレベルのIL-2投薬レジメンの上記第1の期間と該2つのレベルのIL-2投薬レジメンの上記第2の期間との間に、上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体を投与しない期間を含む、方法。項目92上記中断は、約1週間~約4週間の持続期間を有する、項目91に記載の方法。項目93項目75に記載の方法であって、上記処置期間は、上記2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1のサイクルの完了後または該2つのレベルのIL-2投薬レジメンの任意のその後のサイクルの完了後約1週間~約4週間で開始される、該2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のその後のサイクルを含み、ここで上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの上記毎週の投与は、該処置期間全体にわたって継続される、方法。項目94項目93に記載の方法であって、上記2つのレベルのIL-2投薬レジメンの少なくとも1つのサイクルは、該2つのレベルのIL-2投薬レジメン中に中断を含み、該中断は、該中断を含む該2つのレベルのIL-2投薬レジメンの任意の所定のサイクルの、上記第1の期間と上記第2の期間との間に、該IL-2またはその生物学的に活性な改変体を投与しない期間を含む、方法。項目95上記抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、静脈内に投与されるか、または皮下に投与される、項目1~項目94のいずれか1項に記載の方法。発明の簡単な要旨CD40細胞表面抗原を発現する新生物細胞を含む癌について被検体を処置する方法が、提供される。この方法は、インターロイキン-2IL-2またはその生物学的に活性な改変体と、少なくとも1つの抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントとの併用療法を包含する。これらの2つの薬剤を組み合わせて投与する工程は、いずれか単独の薬剤よりも大きい有効性を提供し、正の治療的応答を生じる。いくつかの実施形態において、相乗的な治療効果が起こり、本発明を単剤療法に対して不応性である標的の癌を処置するために特に有用にする。本発明の方法にしたがって、その必要がある個体は、IL-2またはその生物学的に活性な改変体とアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントとの組み合わせを投与される。適切なインターロイキン分子としては、ヒトIL-2およびその生物学的に活性な改変体例えば、IL-2ムテインアルデスロイキンデス-アラニル-1,セリン-125ヒトインターロイキン-2が挙げられる。本発明の方法に使用するための適切なアンタゴニスト抗CD40抗体としては、ヒト細胞の表面上に発現されるヒトCD40抗原に対して特異的に結合し得る、モノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントが挙げられる。これらのアンタゴニスト抗CD40抗体は、ヒト細胞上のCD40抗原に結合される場合特に新生物のヒト細胞上のCD40抗原に結合される場合に、有意なアゴニスト活性を有さないが、アンタゴニスト活性を示す。適切なモノクローナル抗CD40抗体は、ヒトの定常領域を有し;好ましくは、それらはまた、全体かまたは部分的にヒト化されたフレームワーク領域を有し;そして最も好ましくは、完全ヒト抗体またはその抗原結合フラグメントである。このようなモノクローナルアンタゴニスト抗CD40抗体の例は、組換え産生され得る、CHIR-5.9およびCHIR-12.12として本明細書中に示される抗体;131.2F8.5.9として示されるハイブリドーマ細胞株本明細書中で細胞株5.9と称されるおよび153.8E2.D10.D6.12.12と示されるハイブリドーマ細胞株本明細書中で細胞株12.12と称されるによって産生されるモノクローナル抗体;配列番号6に示される配列、配列番号7に示される配列、配列番号8に示される配列、配列番号6と配列番号7とに示される配列の両方、配列番号6と配列番号8とに示される配列の両方からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体;配列番号2に示される配列、配列番号4に示される配列、配列番号5に示される配列、配列番号2と配列番号4とに示される配列の両方、および配列番号2と配列番号5とに示される配列の両方からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体;配列番号1に示される配列、配列番号3に示される配列、および配列番号1と配列番号3とに示される配列の両方からなる群より選択されるヌクレオチド配列を含む核酸分子によってコードされるアミノ酸配列を有するモノクローナル抗体;ならびにヒトCD40に対して特異的に結合する能力を保持するこれらのモノクローナル抗体の抗原結合フラグメントであり、そしてこれらは、ヒト細胞上のCD40抗原に結合される場合に、有意なアゴニスト活性を有さないが、アンタゴニスト活性を示す。このようなモノクローナル抗CD40抗体の例としてはまた、ハイブリドーマ細胞株12.12またはハイブリドーマ細胞株5.9によって産生されるモノクローナル抗体に結合し得るエピトープに結合するモノクローナル抗体;配列番号10または配列番号12に示されるアミノ配列の残基82~87を含むエピトープに結合するモノクローナル抗体;競合結合アッセイにおいてモノクローナル抗体CHIR-12.12またはモノクローナル抗体CHIR-5.9と競合するモノクローナル抗体;ならびにCHIR-12.12モノクローナル抗体またはCHIR-5.9モノクローナル抗体の抗原結合フラグメントであるモノクローナル抗体または上述のモノクローナル抗体のいずれかであって、ここで、このフラグメントはヒトCD40抗原に対して特異的に結合する能力を保持する。いくつかの実施形態において、これらの2つの治療因子は、2つの別個の薬学的組成物として同時に投与され、このうち一方はIL-2またはその生物学的に活性な改変体を含み、他方はアンタゴニスト抗CD40抗体またはその適切な抗原結合フラグメントを含み、ここでそれぞれは、特定の投薬レジメンにしたがって投与される。このアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを含有する薬学的組成物は、毎週の投与計画にしたがって投与されるか、または代替的に、2週間に1度か、3週間に1度か、もしくは4週間に1度投薬doseされる。このアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、処置期間全体にわたって投与されても処置期間内の決められた持続期間の間投薬されてもよい。IL-2またはその生物学的に活性な改変体を含有する薬学的組成物は、一定のIL-2投薬レジメンにしたがって投与されるか、または2つのレベルのIL-2投薬レジメンにしたがって投薬される。この一定のIL-2投薬レジメンは、IL-2またはその生物学的に活性な改変体の一定な1週間の総用量が、被検体に投与され、その後、IL-2投薬を行わない期間が続く。一定のIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルは、その必要がある被検体に対して投与される。一定のIL-2投薬レジメンの各サイクルの間に投与されるべき1週間の総用量は、単回投与として投与され得る。あるいは、この一定のIL-2投薬レジメンの各サイクルの間に投与される1週間の総用量は、1週間に2回投与の投与計画、1週間に3回投与の投与計画、1週間に4回投与の投与計画、1週間に5回投与の投与計画、1週間に6回投与の投与計画、または1週間に7回投与の投与計画にしたがって投与される等用量の系列に分割され得る。上記2つのレベルのIL-2投薬レジメンは、IL-2投薬の第1の期間を含み、ここでは、IL-2またはその生物学的に活性な改変体の、より高い1週間の総用量が、この被検体に投与され、その後、IL-2投薬の第2の期間が続き、ここでは、IL-2またはその生物学的に活性な改変体のより低い1週間の総用量が、この被検体に投与される。IL-2投薬の第2の期間中の、IL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、IL-2投薬の第1の期間中に投与されるIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量より低い。IL-2投薬の第1の期間中および/またはIL-2投薬の第2の期間中に投与されるべき1週間の総用量は、単回投与として投与され得る。あるいは、IL-2投薬の第1の期間および第2の期間の、いずれかまたは両方の間に投与される1週間の総用量は、1週間に2回投与の投与計画、1週間に3回投与の投与計画、1週間に4回投与の投与計画、1週間に5回投与の投与計画、1週間に6回投与の投与計画、または1週間に7回投与の投与計画にしたがって投与される等用量の系列に分割され得る。本発明の方法はまた、IL-2の2つのレベルの投薬レジメン中に中断を提供し、ここでこの被検体は、IL-2を投与しない期間を与えられ、そして必要に応じてこの2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間と第2の期間との間に抗CD40抗体投薬をしない期間を与えられる。これらの2つの治療因子による同時療法は、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその適切な抗原結合フラグメントについて推奨される投薬レジメンとの組み合わせで、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルを投与する工程を包含する。本発明の方法は、CD40細胞表面抗原を発現する新生物細胞を含む癌について、個体を処置するために有用である。このような癌の例としては、固形腫瘍例えば、肺癌、卵巣癌、膀胱癌、腎臓癌、肝臓癌、胃癌、前立腺癌、皮膚癌、および乳癌、ならびに肉腫、およびB細胞関連の癌例えば、非ホジキンリンパ腫高悪性度リンパ腫、中悪性度リンパ腫、および低悪性度リンパ腫、ホジキン病、急性リンパ性白血病、骨髄腫、慢性リンパ性白血病および骨髄芽球性白血病が挙げられるが、これらに限定されない。発明の詳細な説明本発明は、CD40抗原を発現する新生物細胞を含む癌について、ヒト被検体を処置するための方法に関し、この癌としては、固形腫瘍、リンパ腫例えば、B細胞リンパ腫、白血病、および骨髄腫が挙げられるが、これらに限定されない。この方法は、インターロイキン-2IL-2またはその生物学的に活性な改変体と少なくとも1つのアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントとの併用療法を包含し、これらの各々は、本明細書中に開示される特定の投薬レジメンにしたがって投与される。本発明のいくつかの実施形態において、これらの投薬レジメンは、この被検体が、抗CD40抗体療法から外されるまで例えば、この被検体が、完全寛解を示すか、または抗CD40抗体毒性の1つ以上の症状を示す場合か、または本明細書中の以下に記載されるIL-2毒性の発生に起因して、IL-2療法から外されるまで続けられる。この被検体が、毒性に起因してIL-2療法から外される場合、この抗CD40抗体療法は、推奨される抗体投薬レジメンに従って継続されても継続されなくてもよく;そして上記抗体療法が継続されなかった場合に、IL-2の毒性症状が、一旦、弱まるかまたは消失すると、このIL-2療法、またはこのIL-2療法および抗CD40抗体療法は、同じIL-2投薬レジメンおよび同じ容量のIL-2またはその生物学的に活性な改変体、低用量のこの治療因子による同じIL-2投薬レジメン、または本明細書中に開示される異なるIL-2投薬レジメンを使用して再開され得る。本発明の他の実施形態において、抗CD40抗体療法についての投薬レジメンは、決められた期間例えば、2週間~16週間の間、続けられ、そして本明細書中に開示されるIL-2投薬レジメンを組み合わせて投与され、ここで所定の治療期間は、この被検体が本明細書中に開示される投薬レジメンおよび用量にしたがって抗CD40抗体療法およびIL-2療法の両方を受容する、重複期間を含む。このような実施形態において、一般的に、抗CD40抗体投与の持続期間は、約4週間~約12週間であり、この期間は、4週間、5週間、6週間、7週間、8週間、9週間、10週間、11週間、または12週間を含む。IL-2投与の持続期間は、使用されるIL-2投薬レジメンの関数である。これらの2つの治療因子による併用療法は、抗腫瘍活性を提供する。抗腫瘍活性によって、細胞増殖の速度および、それによる存在する腫瘍の増殖速度もしくは治療中に生じる腫瘍の減少、および/または存在する新生物腫瘍細胞もしくは新しく形成される新生物細胞の破壊、そしてそれによる治療中の腫瘍全体の大きさの減少が意図される。IL-2またはその改変体と少なくとも1つのアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントとの組み合わせによる治療を受ける被検体は、CD40抗原を発現する新生物細胞を含む癌の処置に関して有益である生理学的応答を経験し、この癌としては、本明細書中の以下に記載されるようなB細胞関連の癌および固形腫瘍が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の方法が、存在する癌の処置に対して指向される一方で、この方法が治療中に生じるさらなる腫瘍の増殖を妨害するのに有用であり得ることが、認識される。IL-2またはその生物学的に活性な改変体とアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントとの併用療法は、これらの治療因子のいずれかの単独使用によって提供される治療上の利点を上回る治療上の利点を提供する。さらに、これらの2つの治療因子は、単一の抗体療法または単一のサイトカイン療法に対する初期耐性の結果としてか、または単一の抗体または単一のサイトカインによる治療の1つ以上の経過の間に発生する耐性の結果としてのいずれかにより、これらのいずれかの因子単独による処置すなわち、単剤療法に対して不応性である腫瘍を処置するために組み合わせて使用され得る。なお他の実施形態において、これらの2つの治療因子による併用療法は、単剤療法に対して不応性であるかまたは非不応性すなわち、応答性である腫瘍に対して相乗的な治療効果を有する。用語腫瘍治療は、任意の癌処置を意味することが意図され、この癌処置としては、化学療法、放射線治療、免疫療法、それらの組み合わせなどが挙げられる。腫瘍治療に使用される因子は、本明細書中で腫瘍治療因子といわれる。用語免疫療法は、免疫系が調節される任意の癌治療に適用でき、そしてこれらとしては、サイトカインの投与、抗体の投与、抗原の投与/ワクチン接種、免疫細胞の投与、免疫細胞の初回刺激、それらの組み合わせなどが挙げられる。本明細書中で使用される場合、腫瘍とは、全ての新生物細胞の増殖growthおよび増殖proliferation悪性であるか良性であるかにかかわらずを指し、そして前癌性および癌性の細胞ならびに組織を指す。本明細書中で使用される場合、新生物のとは、異常な組織の増殖を生じる、無制御dysregulateな細胞増殖または無秩序な細胞増殖悪性であるか良性であるかにかかわらずを指す。CD40を発現する新生物細胞によって、CD40細胞表面抗原を発現する任意の新生物細胞悪性であるか良性であるかにかかわらずを指す。細胞におけるCD40発現を検出するための方法は、当該分野において周知であり、そしてPCR技術、免疫組織化学、フローサイトメトリー、ウェスタンブロット、ELISAなどが挙げられるが、これらに限定されない。用語癌および癌性のとは、代表的に、無秩序な細胞増殖によって特徴付けられる哺乳動物中の生理学的状態を指すか、またはそれを記載する。癌の例としては、リンパ腫、白血病、骨髄腫、および固形腫瘍肺癌、乳癌、卵巣癌、腎臓癌、肝臓癌、胃癌、結腸癌、前立腺癌、皮膚癌、肉腫などが挙げられるが、これらに限定されないが挙げられるが、これらに限定されない。癌に関連する不応性によって、特定の癌が特定の治療因子による治療に対して、耐性であるかまたは非応答性であることが意図される。癌は、特定の治療因子による処置の開始に由来してこの特定の治療因子による治療に対して不応性すなわち、この治療因子に対する最初の曝露に非応答性であり得るか、またはこの治療因子による第1の処置期間の過程にわたってか、またはこの治療因子によるその後の処置期間中のいずれかのこの治療因子に対する耐性の発達の結果としてのこの特定の治療因子による治療に対して不応性であり得るかのいずれかである。本明細書中で使用される場合、用語インターロイキン-2IL-2とは、13,000ダルトン~17,000ダルトンの範囲にある報告された分子量GillisおよびWatson1980J.Exp.Med.159:1709を有し、そして6~8.5の範囲の等電点を有するサイトカインをいう。IL-2は、正常なT細胞によって天然に産生され、そして体内に低濃度で存在する。IL-2は、Morganら、1976Science193:1007-1008によって最初に記載され、そして刺激されたTリンパ球の増殖を誘導するその能力に起因して、元々は、T細胞増殖因子と呼ばれた。抗体および免疫グロブリンIgは、同じ構造的特徴を有する糖タンパク質である。この用語は、同意語として使用される。いくつかの例では、免疫グロブリンの抗原特異性は、公知であり得る。用語抗体は、最も広義に使用され、そして完全に組み立てられた抗体、抗原に結合し得る抗体フラグメント例えば、Fab、F’ab2、Fv、単鎖抗体、二重特異性抗体diabodyおよび上記のものを含む組換えペプチドを網羅する。用語モノクローナル抗体およびmAbとは、本明細書中で使用される場合、実質的に同質の抗体すなわち、微量に存在し得る可能性のある天然に存在する変異を除いて集団を構成する個々の抗体が同一であるの集団から得られる抗体をいう。本明細書中で使用される場合、抗CD40抗体とは、CD40細胞表面抗原を特異的に認識する任意の抗原を包含し、これらとしては、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、単鎖抗体、ならびにFab、Fab’2、Fvおよび親抗CD40抗体の抗原結合機能を保持する他のフラグメントが挙げられる。本発明の方法を実施するために特に重要であるのは、本明細書中の以下に記載されるCHIR5.9ヒト抗CD40モノクローナル抗体およびCHIR12.12ヒト抗CD40モノクローナル抗体によって示される結合特性を有する抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントである。ネイティブな抗体およびネイティブな免疫グロブリンは、通常は、2つの同一の軽L鎖と2つの同一の重H鎖とからなる、約150,000ダルトンのヘテロ四量体の糖タンパク質である。各々の軽鎖は、1つの共有ジスルフィド結合によって重鎖に連結されるが、ジスルフィド連結の数は様々な免疫グロブリンアイソタイプの重鎖の間で変わる。各々の重鎖および軽鎖はまた、規則的に間隔の空いた鎖内ジスルフィド架橋を有する。各々の重鎖は、一端に可変ドメインVHを有し、次にいくつかの定常ドメインが続く。各々の軽鎖は、一端に可変ドメインVLを有し、その他端に定常ドメインを有する;軽鎖の定常ドメインは重鎖の第一の定常ドメインと整列され、軽鎖可変ドメインは重鎖の可変ドメインと整列される。特定のアミノ酸残基が、軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの間で界面を形成すると考えられる。用語可変とは、可変ドメインの特定の部分が抗体間で広範囲にわたって配列が異なる事実をいう。可変領域は、抗原結合特異性を与える。しかし、その可変性は、抗体の可変ドメインの全体にわたって均一に分布しない。可変性は、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインの両方で相補性決定領域CDRまたは超可変領域と呼ばれる3つのセグメントに集中する。可変ドメインのうちより高度に保存される部分は、フレームワークFR領域と呼ばれる。ネイティブな重鎖および軽鎖の可変ドメインは、各々、4つのFR領域を含み、これらの領域は、大部分はβシート配置をとり、βシート構造に結合する場合によってはβシート構造の一部分を形成するループを形成する3つのCDRによって結合される。各々の鎖におけるCDRは、他の鎖由来のCDRと共にFR領域によって近接して一緒に保持され、抗体の抗原結合部位の形成に寄与するKabatら、1991NIHPubl.No.91-3242,Vol.I,647-669頁を参照のこと。定常ドメインは、抗原に対する抗体の結合に直接的に関連しないが、種々のエフェクター機能例えば、FcレセプターFcR結合、抗体依存性の細胞の毒性における抗体の関与、オプソニン作用、補体依存性細胞毒性の惹起、および肥満細胞脱顆粒を示す。用語超可変領域は、本明細書中で使用される場合、抗原結合を担う抗体のアミノ酸残基をいう。超可変領域は、相補性決定領域またはCDRに由来するアミノ酸残基すなわち、軽鎖可変ドメインにおける残基24~34L1、残基50~56L2および残基89~97L3、ならびに重鎖可変ドメインにおける残基31~35H1、残基50~65H2および残基95~102H3;Kabatら1991SequencesofProteinsofImmunologicalInterest第5版、PublicHealthService,NationalInstituteofHealth,Bethesda,MDならびに/あるいは超可変ループに由来するアミノ酸残基すなわち、軽鎖可変ドメインにおける残基26~32L1、残基50~52L2および残基91~96L3、ならびに重鎖可変ドメインにおけるH1、残基53~55H2および残基96~101H3;ClothiaおよびLesk1987J.Mol.Biol.196:901-917を含む。フレームワークまたはFR残基は、本明細書中で判断されるように、超可変領域残基以外の可変ドメイン残基である。抗体フラグメントは、インタクトな抗体の一部、好ましくは、インタクトな抗体の抗原結合領域または可変領域を含む。抗体フラグメントの例としては、Fab、Fab、Fab’2およびFvフラグメント;二重特異性抗体;直鎖状抗体Zapataら1995ProteinEng.10:1057-1062;単鎖抗体分子;ならびに抗体フラグメントから形成された多重特異性抗体が挙げられる。抗体のパパイン消化により、各々単一の抗原結合部位を有する2つの同一の抗原結合フラグメントFabフラグメントと呼ばれる、および残りのFcフラグメントこの名称は、容易に結晶化する能力を反映するが生成される。ペプシン処理により、Fab’2フラグメントが得られ、これは、2つの抗原結合部位を有し、依然として抗原と架橋結合し得る。Fvは、完全な抗原認識部位および抗原結合部位を含む最小の抗体フラグメントである。この領域は、強固に非共有結合している、1つの重鎖可変領域および1つの軽鎖可変領域からなる。この構成において、各々の可変ドメインの3つのCDRが相互作用して、VH-VLダイマーの表面における抗原結合部位を規定する。合わせて、6つのCDRが抗体に対する抗原結合特異性を与える。しかし、単一の可変ドメインまたは抗原に対して特異的な3つのCDRのみを含むFvの半分でも、抗原を認識し結合する能力を有するが、完全な結合部位よりは親和性は低い。Fabフラグメントはまた、軽鎖の定常ドメインおよび重鎖の第一の定常ドメインCH1を含む。Fabフラグメントは、抗体のヒンジ領域由来の1以上のシステインを含む重鎖CH1ドメインのカルボキシ末端において、いくつかの残基が付加されている点でFab’フラグメントと異なる。Fab’-SHは、本明細書中で、定常ドメインのシステイン残基が遊離のチオール基を有するFab’についての呼称である。Fab’2抗体フラグメントは、Fab’2フラグメントの重鎖ジスルフィド架橋を還元することにより生成される。抗体フラグメントの他の化学結合もまた公知である。任意の脊椎動物種由来の抗体免疫グロブリンの軽鎖は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、2つの明らかに異なる型カッパκおよびラムダλと呼ばれるの一方に割り当てられ得る。それらの重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に依存して、免疫グロブリンが異なるクラスに割り当てられ得る。ヒト免疫グロブリンの5つの主要なクラスが存在する:IgA、IgD、IgE、IgGおよびIgM、そしてこれらの中のいくつかはさらにサブクラスアイソタイプ例えば、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1およびIgA2に分けられる。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれ、アルファ、デルタ、イプシロン、ガンマおよびミューと呼ばれる。免疫グロブリンの異なるクラスのサブユニット構造および三次元配置は周知である。異なるアイソタイプは異なるエフェクター機能を有する。例えば、ヒトIgG1アイソタイプおよびIgG3アイソタイプは、抗体依存性の細胞媒介性細胞毒性ADCCの活性を媒介する。語句標識とは、本明細書中で使用される場合、標識された抗体を生成するように抗体に直接的または間接的に結合される検出可能な化合物または組成物をいう。標識は、それ自体で検出可能である例えば、放射性同位体標識もしくは蛍光標識か、または酵素標識の場合には、検出可能な基質化合物もしくは組成物の化学的変化を触媒し得る。検出可能な標識として作用し得る放射性核種としては、例えば、I-131、I-123、I-125、Y-90、Re-188、Re-186、At-211、Cu-67、Bi-212、およびPd-109が挙げられる。この標識はまた、毒素のような検出不可能な実体であってもよい。用語アンタゴニストは、最も広い意味で使用され、本明細書中に開示されるネイティブな標的の生物学的活性またはその転写もしくは翻訳を、部分的もしくは完全にブロック、阻害、または中和する任意の分子を包含する。キャリアは、本明細書中で使用される場合、使用される投薬量および濃度でそのキャリアに曝露される細胞または哺乳動物に対して非毒性である、薬学的に受容可能なキャリア、賦形剤または安定剤を包含する。多くの場合、生理学的に受容可能なキャリアは、pH緩衝化水溶液である。生理学的に受容可能なキャリアの例としては、緩衝液例えば、リン酸、クエン酸、コハク酸および他の有機酸;抗酸化物質アルコルビン酸が挙げられる;低分子量約10残基未満ポリペプチド;タンパク質例えば、血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリン;親水性ポリマー例えば、ポリビニルピロリドン;アミノ酸例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニンまたはリジン;単糖類、二糖類および他の炭水化物グルコース、マンノースまたはデキストリンが挙げられる;キレート剤例えば、EDTA;糖アルコール例えば、マンニトールまたはソルビトール;塩を形成する対イオン例えば、ナトリウム;ならびに/あるいは非イオン性界面活性剤例えば、TWEEN、ポリエチレングリコールPEGおよびPluronicsが挙げられる。1以上のさらなる治療剤と併用して投与することは、同時simultaneousconcurrent投与および任意の順序での連続投与を包含する。宿主細胞とは、本明細書中で使用される場合、組換えベクターまたは他の転移ポリヌクレオチドのためのレシピエントとして使用され得るかもしくは使用される単細胞性実体として培養された微生物または真核細胞もしくは細胞株をいい、トランスフェクトされた元の細胞の子孫を包含する。単一の細胞の子孫は、天然の変異、偶発的な変異または意図的な変異に起因して、形態またはゲノムもしくは全DNA相補体において元の親と必ずしも完全に同一でなくてもよいことが理解される。ヒト効果細胞は、1以上のFcRを発現し、かつエフェクター機能を果たす白血球である。好ましくは、その細胞は、少なくともFcγRIIIを発現し、抗原依存性の細胞媒介性細胞毒性ADCCのエフェクター機能を果たす。ADCCを媒介するヒト白血球の例としては、末梢血単核細胞PBMC、ナチュラルキラーNK細胞、単球、マクロファージ、好酸球および好中球が挙げられ、PBMCおよびNK細胞が好ましい。ADCC活性を有する抗体は、代表的には、抗体のIgG1アイソタイプまたはIgG3アイソタイプである。IgG1抗体およびIgG3抗体を単離することに加えて、このようなADCCを媒介する抗体は、非ADCC抗体由来の可変領域IgG1アイソタイプもしくはIgG3アイソタイプ定常領域に操作することによって作製され得ることに注意すること。用語FcレセプターまたはFcRは、抗体のFc領域に結合するレセプターを表すために使用される。好ましいFcRは、ネイティブな配列のヒトFcRである。さらに、好ましいFcRは、IgG抗体に結合するものγレセプターであり、FcγRI、FcγRIIおよびFcγRIIIサブクラスのレセプターこれらのレセプターの対立遺伝子改変体および代替的スプライス形態を含むが挙げられる。FcγRIIレセプターとしてはFcγRIIA活性化レセプターおよびFcγRIIB阻害レセプターが挙げられ、これらは、類似のアミノ酸配列を有し、その細胞質ドメインが主に異なる。活性化レセプターFcγRIIAは、その細胞質ドメインに免疫レセプターチロシンベース活性化モチーフITAMを含む。阻害レセプターFcγRIIBは、その細胞質ドメインに免疫レセプターチロシンベース阻害モチーフITIMを含むDaeron1997Annu.Rev.Immunol.15:203-234を参照のこと。FcRは、RavetchおよびKinet1991Annu.Rev.Immunol.9:457-492;Capelら1994Immunomethods4:25-34;およびdeHaasら1995J.Lab.Clin.Med.126:330-341で概説される。他のFcR将来同定されるものを含むが、本明細書中の用語FcRに包含される。この用語はまた、新生児レセプターであるFcRnを包含し、これは、母性IgGの胎児への転移を担うGuyerら1976J.Immunol.117:587およびKimら1994J.Immunol.24:249。用語相乗作用は、それぞれの活性因子の各々の個々の効果の合計より大きい2つ以上の活性因子の合わせた効果を記載するのに使用される。したがって、2つ以上の因子の上記合わせた効果が、活性またはプロセス例えば、腫瘍の増殖の相乗的な阻害を生じる場合にそれは、この活性またはプロセスの阻害が、それぞれの活性因子の各々の阻害効果の合計より大きいことが意図される。用語相乗的な治療効果とは、2つ以上の治療の組み合わせによって観察される治療効果を指し、ここでこの治療効果多くのパラメータのいずれかによって測定されるようなは、個々の各治療によって観察される個々の治療効果の合計より大きい。用語治療有効用量、治療有効量、または有効量は、アンタゴニスト抗CD40抗体もしくはその抗原結合フラグメントまたはインターロイキン-2もしくはその改変体の、少なくともこれらの2つの因子を含む併用療法の一部として投与される場合の新生物細胞を含む癌についての被検体の処置に関して正の治療的応答を生じる量を意味することが意図される。アンタゴニスト抗CD40抗体とIL-2との併用療法本発明は、新生物細胞の増殖によって特徴付けられる癌を有する被検体を処置するための方法に関する指向される。本発明の方法は、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントとIL-2またはその生物学的に活性な改変体とによる併用療法を包含する。本発明の方法は、CD40細胞表面抗原を発現する新生物細胞を含む癌例えば、多くの固形腫瘍およびB細胞リンパ腫の処置について、特に有用である。本発明の方法を使用して処置され得る固形腫瘍としては、卵巣癌、肺癌例えば、扁平上皮癌型、腺癌型、および大細胞癌型の非小細胞肺癌、ならびに小細胞肺癌、乳癌、結腸癌、腎臓癌例えば、腎細胞癌が挙げられる、膀胱癌、肝臓癌例えば、肝細胞癌が挙げられる、胃癌、頚癌、前立腺癌、鼻咽腔癌、甲状腺癌例えば、甲状腺乳頭癌が挙げられる、および皮膚癌例えば、黒色腫、ならびに肉腫例えば、骨肉腫およびユーイング肉腫が挙げられるが挙げられるが、これらに限定されない。B細胞関連の癌例えば、リンパ腫としては、本明細書中の以下に記載されるように、低悪性度B細胞リンパ腫、中悪性度B細胞リンパ腫および高悪性度B細胞リンパ腫、免疫芽球性リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、ホジキン病、エプスタイン-バーウイルスEBV誘導性のリンパ腫、およびエイズ関連リンパ腫、ならびにB細胞急性リンパ性白血病、骨髄腫、慢性リンパ性白血病、急性骨髄芽球性白血病などが挙げられる。したがって、本発明の方法は、異常な、制御不可能なB細胞の増殖または蓄積に関する非ホジキンリンパ腫の処置における使用を見出す。本発明の目的に関して、このようなリンパ腫は、WorkingFormulation分類スキームにしたがって呼ばれ、低悪性度、中悪性度、および高悪性度として分類されるB細胞リンパ腫であるTheNon-Hodgkin’sLymphomaPathologicClassificationProjectCancer491982:2112-2135を参照のこと。したがって、低悪性度B細胞リンパ腫としては、小リンパ球性の、濾胞性核切れ込み小細胞型リンパ腫、および濾胞性の核切れ込み小細胞型と大細胞型との混合型リンパ腫が挙げられ;中悪性度リンパ腫としては、濾胞性大細胞型リンパ腫、びまん性核切れ込み小細胞型リンパ腫、びまん性の小細胞型と大細胞型との混合型リンパ腫、びまん性大細胞型リンパ腫が挙げられ;そして高悪性度リンパ腫としては、バーキット型および非バーキット型の、大細胞型免疫芽球性リンパ腫、リンパ芽球性リンパ腫および非核切れ込み小細胞型リンパ腫が挙げられる。本発明の方法が、RevisedEuropeanandAmericanLymphomClassificationREALシステムにしたがって分類されるB細胞リンパ腫の治療的処置に有用であることが、認識される。このようなB細胞リンパ腫としては、前駆B細胞新生物として分類されるリンパ腫例えば、Bリンパ芽球性白血病/リンパ腫;末梢B細胞新生物慢性リンパ性白血病/小リンパ球性リンパ腫、リンパ形質細胞様リンパ腫/免疫細胞腫、マントル細胞リンパ腫MCL、小胞中心リンパ腫濾胞性びまん性小細胞型リンパ腫、びまん性の小細胞型と大細胞型との混合型、およびびまん性大細胞型リンパ腫が挙げられる、辺縁層B細胞リンパ腫結節外性、結節性、および脾臓型が挙げられる、ヘアリーセル白血病、プラズマ細胞腫/骨髄腫、原発性縦隔リンパ腫の胸腺のサブタイプのびまん性大細胞型B細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、およびバーキット様の高悪性度B細胞リンパ腫が挙げられる;急性白血病;急性リンパ性白血病;骨髄芽球性白血病;急性骨髄性白血病;前骨髄球性白血病;骨髄単球性白血病;単球性白血病;赤白血病;顆粒球性白血病慢性骨髄性白血病;慢性リンパ性白血病;真性赤血球増加症;多発性骨髄腫;ヴァルデンストレームマクログロブリン血症;H鎖病;および分類できない低悪性度B細胞リンパ腫または高悪性度B細胞リンパ腫が挙げられるが、これらに限定されない。特に、本発明の方法は、上に記載されたCD40抗原を発現する新生物細胞を含む固形腫瘍およびB細胞リンパ腫を処置するために有用である。処置は、本明細書中で、被検体に対するアンタゴニスト抗CD40抗体もしくはその抗原結合フラグメントの適用または投与、あるいは被検体から単離された組織または細胞株に対するアンタゴニスト抗CD40抗体もしくはその抗原結合フラグメントの適用または投与この被検体またはこの被検体から単離した組織もしくは細胞株に対するIL-2またはその生物学的に活性な改変体の適用あるいは投与と組み合わせたとして定義され、この被検体は、疾患、疾患の症状、または疾患についての素因を有し、ここでこの目的は、その疾患、その疾患の症状、もしくはその疾患についての素因を、治癒するcureか、治癒するhealか、緩和するか、軽減するか、変化させるか、治療するか、寛解させるか、改善するか、またはそれらに影響をおよぼすことである。処置によって、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントとIL-2またはその生物学的に活性な改変体との組み合わせが、単一の薬学的組成物の一部としてか、あるいは代替的にこのアンタゴニスト抗CD40抗体もしくはその抗原結合フラグメントまたはIL-2もしくはその生物学的に活性な改変体をいずれかを含有する個々の薬学的組成物の一部として、上記被検体またはこの被検体から単離した組織もしくは細胞株に対して適用されても投与されて得ることが意図され、この被検体は、疾患、疾患の症状、または疾患についての素因を有し、この目的は、その疾患、その疾患の症状、もしくはその疾患についての素因を、治癒するcureか、治癒するhealか、緩和するか、軽減するか、変化させるか、治療するか、寛解させるか、改善するか、またはそれらに影響をおよぼすことである。腫瘍治療因子の簡単な説明本発明の方法に使用するのに適切なアンタゴニスト抗CD40抗体は、ヒト細胞の表面上に発現されるヒトCD40抗原に、特異的に結合し、そしてヒトCD40発現細胞上のCD40抗原に結合される場合に有意なアゴニスト活性を有さないがアンタゴニスト活性を示し、これらの細胞としては、正常なヒト細胞および新生物悪性であるか良性であるかにかかわらずのヒト細胞が挙げられる。いくつかの実施形態において、ヒト細胞の表面上に提示されるCD40に対するそれらの結合は、これらのヒト細胞の増殖および分化の阻害を生じる。したがって、本発明の方法に使用するのに適切なアンタゴニスト抗CD40抗体としては、細胞表面CD40抗原を発現する、正常なヒト細胞および新生物のヒト細胞に対してアンタゴニスト活性を示し得る、これらのモノクローナル抗体が挙げられる。これらの抗CD40抗体およびその抗原結合フラグメントは、本明細書中で、アンタゴニスト抗CD40抗体と称される。このような抗体としては、以下に記載される完全ヒトモノクローナル抗体CHIR-5.9および完全ヒトモノクローナル抗体CHIR-12.12、ならびにモノクローナル抗体CHIR-5.9およびモノクローナル抗体CHIR-12.12の結合特性を有するモノクローナル抗体が挙げられるが、これらに限定されない。組換え産生され得るこれらのモノクローナル抗体は、以下に記載され、そして発明の名称AntagonistAnti-CD40MonoclonalAntibodiesandMethodsforTheirUseである、2003年11月4日、2003年11月26日および2004年4月27日に出願され、それぞれ、米国特許出願第60/517,337号代理人事件番号PP20107.001035784/258442、同第60/525,579号代理人事件番号PP20107.002035784/271525、および同第60/565,710号代理人事件番号PP20107.003035784/277214と割り当てられた同時係属中の仮特許出願その各々の内容はその全体が参考として本明細書中に援用されるで開示されている。モノクローナル抗体CHIR-5.9およびモノクローナル抗体CHIR-12.12に加えて、本明細書中に記載される本発明の方法の実施において有用であり得る他のCD40抗体としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない:1131.2F8.5.9本明細書中で細胞株5.9と称されるおよび153.8E2.D10.D6.12.12本明細書中で細胞株12.12と称されるそれぞれ、特許受託番号PTA-5542および特許受託番号PTA-5543としてATCCに寄託されたで表されるハイブリドーマ細胞株によって産生されるモノクローナル抗体;2配列番号2に示される配列、配列番号4に示される配列、配列番号5に示される配列、配列番号2と配列番号4とに示される配列の両方、および配列番号2と配列番号5とに示される配列の両方からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体;3配列番号6に示される配列、配列番号7に示される配列、配列番号8に示される配列、配列番号6と配列番号7とに示される配列の両方、および配列番号6と配列番号8とに示される配列の両方からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体;4配列番号1に示されるヌクレオチド配列、配列番号3に示されるヌクレオチド配列、および配列番号1と配列番号3とに示される配列の両方からなる群より選択されるヌクレオチド配列を含む核酸分子によってコードされるアミノ酸配列を有するモノクローナル抗体;5ハイブリドーマ細胞株5.9またはハイブリドーマ細胞株12.12によって産生されるモノクローナル抗体に結合し得るエピトープに結合するモノクローナル抗体;6配列番号10または配列番号12に示されるアミノ配列の残基82~87を含むエピトープに結合するモノクローナル抗体;7競合結合アッセイにおいてモノクローナル抗体CHIR-5.9またはモノクローナル抗体CHIR-12.12と競合するモノクローナル抗体;ならびに8CHIR-12.12モノクローナル抗体またはCHIR-5.9モノクローナル抗体の抗原結合フラグメントまたは上述の項目1~7のモノクローナル抗体の抗原結合フラグメントであるモノクローナル抗体ここで、このフラグメントはヒトCD40抗原に対して特異的に結合する能力を保持する。本明細書中に開示される方法において使用するのに適切なこれらの抗体の抗体および抗原結合フラグメントとしては、当該分野において周知でありかつ本明細書中の以下に記載される方法を使用して、組換え的に産生される抗体およびその抗原結合フラグメントが挙げられ、これらとしては、例えば、組換え産生されたモノクローナル抗体CHIR-5.9およびモノクローナル抗体CHIR-12.12が挙げられる。本明細書中に開示される抗CD40抗体のフラグメントは、それらが全長抗体の所望の親和性を保持する限り、本発明の方法において使用するのに適切である。したがって、抗CD40抗体のフラグメントは、CD40B細胞表面抗原に結合する能力を保持する。このようなフラグメントは、対応する全長抗体と同様な特性によって特徴付けられる。例えば、アンタゴニスト抗CD40抗体フラグメントは、ヒト細胞の表面上に発現されるヒトCD40抗原を特異的に結合し、そしてヒトCD40発現細胞上のCD40抗原に結合される場合に、有意なアゴニスト活性を有さないが、アンタゴニスト活性を示す。このようなフラグメントは、抗原結合フラグメントと称される。上記されかつ本明細書中の以下に、より完全に記載されるアンタゴニスト抗CD40抗体を使用することに加えて、本発明の方法は、モノクローナル抗体CHIR-5.9またはモノクローナル抗体CHIR-12.12、およびそれらの各抗原に対するこれらの抗体の結合を競合的に妨害するかまたは同じエピトープに結合するモノクローナル抗体の結合特徴を有する抗体を使用して実施され得る。当業者は、抗体がCHIR-5.9の結合またはCHIR-12.12の結合を競合的に妨害するか否かを、標準的な方法を使用して決定し得る。本発明の方法に使用するための上記IL-2、またはその生物学的に活性な改変体は、任意の供給源由来であり得るが、好ましくは組換えIL-2であり、より詳しくは組換えヒトIL-2である。組換えIL-2によって、ネイティブな配列のIL-2に匹敵する生物学的活性を有するIL-2、および、例えば、Taniguchiら、1983Nature302:305-310およびDevos1983NucleicAcidsRes.11:4307-4323に記載されるような組換えDNA技術よって調製されたか、またはWangら、1984Science224:1431-1433によって記載される通りにIL-2を変異によって変化させたIL-2が意図される。一般的に、IL-2についてコードする遺伝子は、本明細書中に記載されるように、クローニングされ、次いで形質転換された生物好ましくは微生物例えば、E.coli中で発現される。この宿主生物は、発現条件下でIL-2を産生するために外来遺伝子を発現する。合成の組換えIL-2はまた、真核生物例えば、酵母またはヒト細胞中で作製される。増殖させるプロセス、収穫するプロセス、破砕するプロセス、または細胞からIL-2を抽出するためのプロセスは、例えば、米国特許第4,604,377号;同第4,738,927号;同第4,656,132号;同第4,569,790号;同第4,748,234号;同第4,530,787号;同第4,572,798号;同第4,748,234号;および同第4,931,543号に実質的に記載されるこれらはその全体が本明細書によって参考として援用される。改変IL-2タンパク質の例については、欧州特許出願番号第136,489号;1983年2月3日出願の同第83101035.0号公開番号第91539号の下で1983年10月19日に公開された;1982年12月22日出願の同第82307036.2号公開番号第88195号の下で1983年9月14日に公開された;1983年10月13日出願の欧州特許出願番号第83306221.9号公開番号第109748の下で1984年5月30日に公開された、ベルギー特許第893,016号同一人に所有される米国特許第4,518,584号に記載される組換えIL-2ムテインについての等価物である;米国特許第4,752,585号およびWO99/60128に記載されるムテイン;および本明細書中の実施例において使用されかつ米国特許第4,931,543号に記載されるIL-2ムテインデス-アラニル-1,セリン-125ヒトIL-2アルデスロイキンとも称されるならびにこの米国特許に記載される他のIL-2ムテインを参照のことこれらの全ては、本明細書中に参考として援用される。発明の名称ImprovedInterleukin-2Muteinsである、2004年3月5日に出願され、そして米国特許出願60/550,868号と割り当てられた同時係属中の仮特許出願;および発明の名称CombinatorialInterleukin-2Muteinsである、2004年7月7日に出願され米国特許出願60/585,980と割り当てられた同時係属中の仮特許出願これらの内容は、その全てが本明細書中に参考として援用されるに記載されるIL-2ムテインも参照のこと。さらに、IL-2は、上昇した溶解性および変化した薬物動態プロフィールを提供するためにポリエチレングリコールによって修飾され得るその全体が本明細書中に参考として援用される米国特許第4,766,106号を参照のこと。IL-2の適切な改変体が、より完全に議論される以下も参照のこと。いくつかの実施形態において、本発明の方法は、IL-2例えば、ヒトIL-2と抗CD40モノクローナル抗体CHIR-12.12との併用療法を包含する。他の実施形態において、本発明の方法は、IL-2例えば、ヒトIL-2と抗CD40モノクローナル抗体CHIR-5.9との併用療法を包含する。なお他の実施形態において、本発明の方法は、IL-2例えば、ヒトIL-2と抗CD40モノクローナル抗体CHIR-12.12または抗CD40モノクローナル抗体CHIR-5.9の抗原フラグメントとの併用療法を包含する。代替的な実施形態において、本発明の方法は、IL-2の生物学的に活性な改変体例えば、IL-2ムテインデス-アラニル-1,セリン-125ヒトIL-2アルデスロイキンとも称され、これは商品名Proleukin登録商標ChironCorporation,Emeryville,Californiaで市販される処方物として商業的に入手可能であると抗CD40モノクローナル抗体CHIR-12.12または抗CD40モノクローナル抗体CHIR-5.9との併用療法を包含する。他の実施形態において、本発明の方法は、IL-2の生物学的に活性な改変体例えば、IL-2ムテインデス-アラニル-1,セリン-125ヒトIL-2と抗CD40モノクローナル抗体CHIR-12.12の抗原結合フラグメントまたは抗CD40モノクローナル抗体CHIR-5.9の抗原結合フラグメントとの併用療法を包含する。本明細書中に記載される併用療法は、上記CD40抗原が上記処置プロセスにおいて標的される限り、他のバリエーションを包含する。臨床上の有効性の測定本発明の方法にしたがって、本明細書中の他所で定義されるようなIL-2またはその生物学的に活性な改変体および少なくとも1つのアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、CD40抗原を発現する新生物細胞を含む癌に対する正の治療的応答を促す組み合わせで使用される。正の治療的応答によって、これらの投与される治療因子の合わせた抗腫瘍活性と関連した、疾患の改善、および/または疾患に関連した症状の改善が意図される。したがって、例えば、正の治療的応答は、以下の1つ以上の疾患の改善に言及する:1腫瘍の大きさの減少;2多くの癌すなわち、新生物細胞の減少;3新生物細胞の死の増加;4新生物細胞の生存の阻害;4腫瘍の増殖の阻害すなわち、ある程度の遅滞、好ましくは停止;5癌細胞の末梢器官中への浸潤の阻害すなわち、ある程度の遅滞、好ましくは停止;6腫瘍転移の阻害すなわち、ある程度の遅滞、好ましくは停止;7さらなる腫瘍の増殖の妨害;8上昇した患者生存率;ならびに9その癌に関連した1つ以上の症状からのある程度の軽減。このような治療的応答は、改善の程度に応じてさらに特徴付けられ得る。したがって、例えば、その疾患の改善は、完全寛解のように特徴付けられ得る。完全寛解によって、任意の事前の異常なX線写真所見、骨髄、脳脊髄液CSFの正常化を伴う、臨床的に検出可能な疾患の欠如が意図される。このような応答は、本発明の方法にしたがう治療後、少なくとも1ヶ月間持続する必要がある。完全寛解は、腫瘍状態の評価が、最初の応答の評価後、少なくとも1ヶ月間において繰り返し行われない場合には確認できないか、あるいは疾患の改善は、部分寛解として分類される。部分寛解によって、新しい病巣の非存在下での測定可能な全ての腫瘍負荷すなわち、その被検体に存在する腫瘍細胞の数の少なくとも約50の減少および少なくとも1ヶ月間の持続が意図される。このような応答は、測定可能な腫瘍にのみ適用できる。複数のパラメータは、処置の有効性を示し得る。これらとしては、腫瘍塊の大きさの減少;腫瘍の転移性侵襲の減少;腫瘍の増殖速度の減少;腫瘍関連の後遺症例えば、悪液質および腹水の産生の重症度または出現の減少;腫瘍に関連した合併症例えば、病理的な骨折、溶血性貧血、前リンパ球性への移行prolymphocytictransformationおよびリヒター症候群などの減少および/または妨害;化学療法および他の処置に対するその腫瘍の感作;患者生存率の増加;改善された予後の観察される臨床上の関連性例えば、増加した腫瘍浸潤性リンパ球および減少した腫瘍血管新生の増加などが挙げられるが、これらに限定されない。したがって、いくつかの実施形態において、治療的組み合わせの投与は、処置を受ける患者すなわち、被検体における1つ以上のこれらのパラメータを改善するという結果をもたらす。他の実施形態において、この患者の改善は、いくつかのパラメータに関して相乗的であるが、他のパラメータに関しては相加的である。腫瘍応答は、スクリーニング技術例えば、磁気共鳴画像MRIスキャン、X線写真による画像化、コンピュータ断層映像CTスキャン、フローサイトメトリーまたは蛍光活性細胞分析分離FACS分析、生物発光の画像化例えば、ルシフェラーゼによる画像化、骨のスキャンの画像化、および骨髄穿刺BMAを含む腫瘍生検の標本化を使用して、腫瘍の形態学すなわち、全体の腫瘍負荷、腫瘍の大きさなどにおける変化について評価され得る。これらの正の治療的応答に加えて、処置を受ける被検体は、その疾患に関連した症状の改善に関する有益な効果を経験し得る。したがって、B細胞の腫瘍に関して、この被検体は、いわゆるB症状すなわち、寝汗、発熱、体重減少、および/または蕁麻疹の低下を経験し得る。臨床上の有効性を予測する1つの方法は、適切なモデル例えば、1つ以上のマウスの癌モデルにおけるIL-2またはその生物学的に活性な改変体とアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントとの組み合わせの使用におけるこれらの2つの治療因子による併用療法の効果を測定することである。リンパ腫に関して、これらのモデルとしては、例えば、ヌードマウスの異種移植片腫瘍モデル例えば、NamalwaおよびDaudiとして公知であるヒトのバーキットリンパ腫細胞株を使用するモデルが挙げられる。したがって、いくつかの実施形態において、これらの2つの治療因子の組み合わせの抗腫瘍活性は、本明細書中の以下の実施例に記載されるようなヒトNHLのNamalwa異種移植片モデルにおいてアッセイされる。このNamalwa細胞株は、ヌードマウス中に移植される場合に、悪性のリツキシマブ耐性腫瘍を生じる。他の実施形態において、これらの2つの治療的因子の組み合わせの抗腫瘍活性は、発明の名称AntagonistAnti-CD40MonoclonalAntibodiesandMethodsforTheirUseである、2004年4月27日に出願され、そして米国特許出願第60/565,710号代理人事件番号PP20107.003035784/277214と割り当てられた同時継続中の出願その全体が本明細書中に参考として援用されるに記載されるDaudiヒトリンパ腫細胞株を使用する病期にあるstagedヌードマウスの異種移植片腫瘍モデルにおいてアッセイされる。病期にあるヌードマウスの異種移植片腫瘍モデルは一般的に、病期にないモデルより、所与の治療プロトコルの治療的有効性を区別するのに有効である。病期にないモデルにおいて、治療的投薬は一般的に、腫瘍播種の約1日以内かつ明らかな腫瘍が存在する前に開始される。病期にあるモデルにおける上昇した抗腫瘍活性を示す併用治療レジメンの能力は、その併用治療レジメンが治療的に有効であることを、強力に示唆する。他の腫瘍モデルは、当該分野において周知である。例えば、多発性骨髄腫MMに関して、腫瘍モデルとしては、細胞株が免疫不全マウス中で増殖され、次いでこのマウスが目的の治療薬によって処置されるモデル、および患者の骨髄腫細胞が免疫不全マウスの胎仔とともに移植され、次いでこのマウスが目的の治療薬によって処置されるモデルが挙げられるが、これらに限定されない。したがって、例えば、これらの2つの治療因子の組み合わせの抗腫瘍活性は、ヒトMM細胞株IM-9を使用する、ヒトMMIM-9異種移植片モデルにおいてインビボでアッセイされ得る。この様式において、IL-2またはその生物学的に活性な改変体とアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントとの併用療法の有効性は、病期にない条件の生存モデルを使用して評価され得、これらの治療因子による処置は、IM-9腫瘍細胞の静脈内播種の1日後に開始する。代替的に、この併用療法の有効性は、病期にある皮下モデルを使用して評価され得、このIM-9細胞は、SCIDマウスにSCで注射され、次いでこれらの治療因子による組み合わせ処置は、一旦その腫瘍が測定可能な大きさに到達すると開始する。IL-2またはその生物学的に活性な改変体とアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントとの併用療法の抗腫瘍活性は、マウス固形腫瘍モデルにおいて評価され得る。例としては、CD40を発現するヒト結腸癌細胞株HCT116を使用する異種移植片結腸癌モデル;卵巣癌細胞株SKOV3i.p.1を使用する卵巣癌の病期にない予防的な正所性マウスモデル;および卵巣癌細胞株SKOV3i.p.1を使用する卵巣癌の病期にある治療的なマウスモデルが挙げられるが、これらに限定されない。例えば、発明の名称MethodsofTherapyforSolidTumorsExpressingtheCD40Cell-SurfaceAntigenである、2004年4月27日に出願され、そして米国特許出願第60/565,634代理人事件番号PP21566.001035784/271721と割り当てられた同時継続出願その全体が本明細書中に参考として援用されるに開示されるこれらのモデルの使用を参照のこと。投与の様式本明細書中に記載される併用療法を実施する目的に関して、治療上活性な成分のようなこれらの2つの分類の治療因子すなわち、サイトカインおよび抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを含有する薬学的組成物は、当該分野において公知である受容可能な方法のいずれかを使用して投与され得る。したがって、例えば、IL-2もしくはその生物学的に活性な改変体を含有する薬学的組成物、アンタゴニスト抗CD40抗体もしくはその抗原結合フラグメントを含有する薬学的組成物、またはIL-2もしくはその改変体およびアンタゴニスト抗CD40抗体もしくはその抗原結合フラグメントを含有する薬学的組成物は、任意の注射の形態静脈内IV注射、腫瘍内IT注射、腹腔内IP注射、筋肉内IM注射、または皮下SC注射が挙げられるによって投与され得る。いくつかの実施形態において、IL-2またはその生物学的に活性な改変体を含有する薬学的組成物は、IV注射、IM注射、IP注射、またはSC注射によって投与され、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを含有する薬学的組成物は、IV注射、IP注射、またはSC注射によって投与される。他の実施形態において、IL-2またはその生物学的に活性な改変体を含有する薬学的組成物は、IV注射、IT注射、またはSC注射によって投与され、そしてアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを含有する薬学的組成物は、IV注射またはSC注射によって投与される。本発明のいくつかの実施形態において、IL-2またはその改変体を含有する薬学的組成物は、SC注射によって投与され、そして抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを含有する薬学的組成物は、静脈内に投与される。静脈内に投与される場合に、抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを含有するこの薬学的組成物は約1時間~約10時間の期間にわたる注入によって投与され得る。いくつかの実施形態にいて、注入は、約2時間~約8時間の期間にわたって起こるか、約3時間~約7時間の期間にわたって起こるか、約4時間~約6時間の期間にわたって起こるか、または約6時間の期間にわたって起こり、これらは、投与されるアンタゴニスト抗CD40抗体に依存する。併用療法本発明の方法は、併用療法を使用する工程を包含する。用語併用は、最も広義に使用され、そして被検体が少なくとも2つの治療レジメンによって処置されることを意味する。したがって、併用療法は、被検体が、少なくとも2の腫瘍治療レジメンによって処置され、より詳しくは、少なくとも1つのアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントとの組み合わせで、少なくともIL-2またはその生物学的に活性な改変体によって処置されることを意味することが意図されるが、これらの2つの治療因子の組み合わせの有益な効果が達成される限り、異なる腫瘍治療レジメンの投与の時期は、変更され得る。アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントとの組み合わせにおけるIL-2またはその生物学的に活性な改変体による処置は、同時的併用であるか、連続的いずれかの順序で経時的であるか、またはそれらの組み合わせであり得る。したがって併用療法を受ける被検体は、両物質の組み合わせの治療効果が治療を受ける被検体にもたらされる限り、同じ時間すなわち、同時にか、異なる時間すなわち、同じ日かまたは異なる日におけるいずれかの順序で経時的ににてこれらの治療因子の両方による処置を受容し得る。いくつかの実施形態において、IL-2またはその生物学的に活性な改変体と抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントとの組み合わせは、1回の投薬で同時に与えられるが、他の投薬としては、同じ日かまたは異なる日におけるいずれかの順序での経時的投与が挙げられる。経時的投与は、その被検体が投与された第1の治療因子に対して応答するか否かにかかわらず行われ得る。これらの2つの治療因子が同時に投与される場合に、それらは、IL-2もしくはその生物学的に活性な改変体またはアンタゴニスト抗CD40抗体もしくはその抗原結合フラグメントのいずれかを各々が含む別個の薬学的組成物として投与されてもこれらの治療因子の両方を含む単一の薬学的組成物として投与されてもよい。この併用療法の効果はまた、IL-2もしくはその生物学的に活性な改変体および/または上記アンタゴニスト抗CD40抗体もしくはその抗原結合フラグメントのいずれかの投与の時期を変えることによって最適化され得る。したがって、いくつかの実施形態において、このIL-2またはその生物学的に活性な改変体例えば、デス-アラニルC125SヒトIL-2ムテインは、このアンタゴニスト抗CD40抗体例えば、モノクローナル抗体CHIR-12.12もしくはモノクローナル抗体CHIR-5.9またはその抗原結合フラグメントと同時に投与される。他の実施形態において、このIL-2またはその生物学的に活性な改変体例えば、デス-アラニルC125SヒトIL-2ムテインが、最初に投与され、その後このアンタゴニスト抗CD40抗体例えば、モノクローナル抗体CHIR-12.12もしくはモノクローナル抗体CHIR-5.9またはその抗原結合フラグメントが、次に投与される。なお他の実施形態において、このアンタゴニスト抗CD40抗体例えば、モノクローナル抗体CHIR-12.12もしくはモノクローナル抗体CHIR-5.9またはその抗原結合フラグメントが、最初に投与され、そしてこのIL-2またはその生物学的に活性な改変体例えば、デス-アラニルC125SヒトIL-2ムテインが次に投与される。いくつかの実施形態において、このIL-2またはその生物学的に活性な改変体例えば、デス-アラニルC125SヒトIL-2ムテインとアンタゴニスト抗CD40抗体例えば、モノクローナル抗体CHIR-12.12もしくはモノクローナル抗体CHIR-5.9またはその抗原結合フラグメントとの組み合わせは、1回の投薬によって同時に与えられるが、他の投薬としては、同じ日かまたは異なる日におけるいずれかの順序での経時的投与が挙げられる。これまでに記載されるように、このIL-2またはその生物学的に活性な改変体例えば、デス-アラニルC125SヒトIL-2ムテインおよびこのアンタゴニスト抗CD40抗体例えば、モノクローナル抗体CHIR-12.12もしくはモノクローナル抗体CHIR-5.9またはその抗原結合フラグメントが、同時に投与される場合に、それらは、IL-2もしくはその生物学的に活性な改変体またはアンタゴニスト抗CD40抗体もしくはその抗原結合フラグメントのいずれかを各々が含む別個の薬学的組成物として投与されてもこれらの治療因子の両方を含む単一の薬学的組成物として投与されてもよい。有効量の、IL-2またはその生物学的に活性な改変体と少なくとも1つのアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントとの組み合わせによる治療は、CD40抗原を発現する新生物細胞を含む癌に対する正の治療的応答を促し、これらの癌としては、本明細書中の他所に定義されるようなB細胞関連のリンパ腫および固形腫瘍が挙げられる。これらの抗腫瘍因子の両方による同時治療は、これらの因子の各々の抗腫瘍活性を増強し、そのことによって、IL-2またはその生物学的に活性な改変体単独の投与またはアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメント単独の投与によって観察される治療的応答に対して改良される正の治療的応答を提供する。正の治療的応答の改良は、本質的に相加的であっても本質的に相乗的であってもよい。相乗的である場合、IL-2またはその生物学的に活性な改変体と少なくとも1つアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントとによる同時治療は、別個のIL-2またはその生物学的に活性な改変体成分とアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメント成分とによって達成される正の治療応答の合計より大きい正の治療的応答を生じる。さらに、上記処置は、これらの用量の組み合わせが、任意の1つ以上の多くの治療パラメータの処置において有効である限り、用量および投薬レジメンを変えることによって達成され得る。これらの処置レジメンは、以下に記載されるような、治療効果を最大にする用量および投与計画に基づく。当業者は、任意の1つのモノクローナル抗体の用量または任意の1つのサイトカイン例えば、IL-2の用量が、個別に投与される場合に治療的に有効であり得ないが、他の因子と組み合わせて投与される場合に、治療的に有効である。したがって、いくつかの実施形態において、IL-2とアンタゴニスト抗CD40抗体との組み合わせの治療有効用量は、単独で投与される場合に、治療的に有効であり得ないか、または互いに組み合わせて投与された場合より治療的に有効でない個々の活性因子の用量を含み得る。これらの2つの治療因子の合わせた投与がこれらの因子の両方の有効性を増強することに起因して、IL-2単独の特定の用量によって達成される正の治療的応答と同様の正の治療的応答は、この因子のより低い用量によって達成され得る。この有意性は、2倍である。第1に、IL-2またはその改変体によるB細胞の悪性疾患または固形腫瘍の処置に関する大きな治療上の利点は、高用量のIL-2投与に、通常伴う毒性応答を最小にするIL-2用量において現実化され得る。このような毒性応答としては、慢性疲労、悪心、低血圧、発熱、悪寒、体重増加、痒みまたは発疹、呼吸困難dysprea、窒素血、錯乱、血小板減少、心筋梗塞、胃腸に対する毒性、および血管漏出症候群症候群が挙げられるが、これらに限定されない例えば、Allisonら、1989J.Clin.Oncol.71:75-80を参照のこと。第2に、モノクローナル抗体による腫瘍細胞表面上の特定の分子の標的は、この抗体によって認識されないか、またはその結合に影響されず、その結果、腫瘍の回避、および有効な治療的処置の喪失を生じるクローンについて選択できる。IL-2もしくはその改変体と組み合わせて投与されたアンタゴニスト抗CD40抗体またはそのフラグメントの改良された抗腫瘍活性は、モノクローナル抗体の増加した効力、モノクローナル抗体の投与頻度の減少、および/またはモノクローナル抗体のより低い用量に表れ、それらによって腫瘍の回避を減少させる。さらに、モノクローナル抗体のADCC活性はまた、好中球集団polulationおよび単球/マクロファージ集団由来の活性から生じ得る。例えば、Hernandez-Ilizaliturriら、2003Clin.CancerRes.916,Pt1:5866-5873;およびUchidaら、2004J.Exp.Med.19912:1659-1669を参照のこと。IL-2がこれらの細胞集団を活性化することが公知であるので、IL-2またはその生物学的に活性な改変体をとの上記アンタゴニスト抗CD40抗体の併用療法は、抗体のADCC媒介性の抗腫瘍活性を向上させ得る。IL-2もしくはその改変体のある量と組み合わせて投与されるべき少なくとも1つのアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの量および他の治療因子の有効性を増強するのに必要なこれらの治療因子のいずれかの量は、本明細書中に示される開示によって与えられる過度の実験を伴わずに、当業者によって容易に決定される。投与の様式ならびに組み合わせて投与されるIL-2またはその改変体およびアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントのそれぞれの量に影響する要因としては、治療に供される特定のリンパ腫または固形腫瘍、疾患の重症度、疾患の経緯、ならびに年齢、身長、体重、健康状態、および治療を受ける個体の生理的状態が挙げられるが、これらに限定されない。同様に、併用療法において投与されるべきこれらの治療因子の量は、投与の様式、およびその被検体がこれらの治療因子の各々の単回投与をうけるか複数の用量をうけるかに依存する。併用IL-2/アンタゴニスト抗CD40抗体療法についての例示的プロトコル本発明のいくつかの実施形態において、併用療法は、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを含有する薬学的組成物の推奨される治療有効用量と組み合わせて、IL-2またはその生物学的に活性な改変体を含有する薬学的組成物の推奨される1週間の総用量を投与することによって達成され、各組成物は、特定の投薬レジメンにしたがって投与される。治療有効用量または治療有効量によって、これらの2つの治療因子の他方の治療有効用量または治療有効量と共に投与される場合に、CD40細胞表面抗原を発現する新生物細胞を含む癌の処置に関する正の治療的応答を生じるこれらの2つの治療因子の一方の量が意図される。予め上記されるように、別個の薬学的組成物の投与は、両方の物質の組み合わせの治療効果が治療を受ける被検体に生じる限り、同じ時間であっても異なる時間であってもよい。本発明のいくつかの実施形態にしたがって、本明細書中の以下に定義されるようにアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの1つ以上の1週間の用量による処置を受けるヒト被検体はまた、一定のIL-2投薬レジメンにしたがうか、または2つのレベルのIL-2投薬レジメンにしたがって、本明細書中の以下に定義されるようにIL-2またはその生物学的に活性な改変体を投与される。この併用療法の重要な局面は、これらの治療因子の両方が、各々、本明細書中に開示される特定の投薬レジメンにしたがってその被検体に投与される期間の重複期間である。したがって、併用療法がこれらの2つの治療因子による投薬の、この重複期間を含む場合、この併用療法はまた、同時治療といわれる。その被検体に投与される第1の治療有効用量は、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントであっても、IL-2またはその生物学的に活性な改変体であってもよい。アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントおよびIL-2またはその生物学的に活性な改変体の両方が、その被検体に投与されることが計画される日々において、これらの治療因子は、同じ時間すなわち、同時の投与か、または異なる時間いずれかの順序での経時的な投与のいずれかにおいて投与され得る。好ましい投薬レジメンに関する以下の議論は、本明細書中に定義されるようなIL-2との組み合わせにおける、本明細書中に定義されるようなアンタゴニスト抗CD40抗体の投薬に言及するが、そのプロトコルすなわち、処置の開始、抗体処置およびIL-2処置の持続期間、抗体投薬レジメンおよびIL-2投薬レジメン、IL-2投薬の中断、併用IL-2/アンタゴニスト抗CD40抗体療法のその後の過程IL-2投与計画などは、本明細書中に定義されるようなIL-2との組み合わせにおける本明細書中に定義されるようなアンタゴニスト抗CD40抗体の抗原結合フラグメントによる投薬、本明細書中に定義されるようなIL-2の生物学的に活性な改変体との組み合わせにおける本明細書中に定義されるようなアンタゴニスト抗CD40抗体の抗原結合フラグメントによる投薬、または本明細書中に定義されるようなIL-2の生物学的に活性な改変体との組み合わせにおける、本明細書中に定義されるようなアンタゴニスト抗CD40抗体による投薬に等しく適用できる。同時療法:処置の開始IL-2およびアンタゴニスト抗CD40抗体による同時療法が、一定のIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルを含む場合、処置期間の開始において上記被検体に投与されるべき最初の治療因子は、この被検体が、両方の治療因子が本明細書中に開示される特定の投薬レジメンに各々したがって被検体に投与されている間に重複期間を有する限り、IL-2またはアンタゴニスト抗CD40抗体のいずれかであり得る。したがって、1つの実施形態において、これらの2つの治療因子の同時療法は、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量の投与を開始する前に一定のIL-2投薬レジメンを開始する工程を包含し、これは、毎週か、または代替的に、2週間に1度か、3週間に1度か、もしくは4週間に1度投与される。この様式において、IL-2の第1の用量は、アンタゴニスト抗CD40抗体の第1の用量が投与される前に最長1ヶ月間まで投与される。最長1ヶ月間までによって、IL-2の第1の用量が、アンタゴニスト抗CD40抗体投与を開始する少なくとも1日前に投与されるが、アンタゴニスト抗CD40抗体投与を開始する1ヶ月すなわち、30日以上前に投与されないことが意図される。したがって、IL-2投与は、例えば、アンタゴニスト抗CD40抗体の第1の治療有効用量を投与する1日前か、2日前か、3日前か、4日前か、5日前か、6日前か、7日前すなわち、1週間前か、10日前か、14日前すなわち、2週間前か、17日前か、21日前すなわち、3週間前か、24日前か、28日前4週間前か、または最長で1ヶ月前すなわち、30日前もしくは31日前までに始まる。別の実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンおよびアンタゴニスト抗CD40抗体投与は、一定のIL-2投薬レジメンおよびアンタゴニスト抗CD40抗体投与は、同じ日において同じ時間すなわち、同時の投与かまたは異なる時間すなわち、いずれかの順序での経時的な投与で始まる。したがって、例えば、1つの実施形態において、これら2つの治療因子による同時療法が、処置期間の1日目に始まる場合、アンタゴニスト抗CD40抗体の第1の治療有効用量およびIL-2の第1の用量は、この処置期間の第1日目において両方投与される。1つのこのような実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体の上記用量は、最初に投与され、その後、アンタゴニスト抗CD40抗体の上記用量の投与完了約10分間~約4時間以内例えば、約10分間以内、15分間以内、20分間以内、25分間以内、30分間以内、45分間以内、60分間以内、90分間以内、120分間以内、150分間以内、180分間以内、210分間以内、または240分間以内にIL-2の用量が投与される。代替的な実施形態において、処置期間の開始においてその被検体に対して投与されるべき最初の治療因子は、アンタゴニスト抗CD40抗体であり、一方、一定のIL-2投薬の第1のサイクルは、例えば、アンタゴニスト抗CD40抗体の第1の治療有効用量の投与後10日以内例えば、1日以内、2日以内、3日以内、4日以内、5日以内、6日以内、7日以内、8日以内、9日以内、または10日以内に第1のIL-2用量の投与によって開始される。いくつかの実施形態において、一定のIL-2投与の第1のサイクルは、アンタゴニスト抗CD40抗体の第1の治療有効用量の投与の7日以内例えば、1日以内、2日以内、3日以内、4日以内、5日以内、6日以内、または7日以内にIL-2の第1の用量を投与することによって開始される。したがって、例えば、1つの実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効量は、処置期間の第1日目に投与され、そして一定のIL-2投薬の第1のサイクルは、7日より後に開始されるすなわち、処置期間の第8日目に、IL-2の最初の容量を投与することによって。一定のIL-2投薬の第1のサイクルの完了後、毎週の投与計画か、または代替的に、2週間に1度の投与計画か、3週間に1度の投与計画か、もしくは4週間毎の投与計画にしたがうアンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量を受容しているヒト被検体は一定のIL-2投薬の1つ以上のその後のサイクルを投与され得る。一定のIL-2投薬の第2のサイクルおよびその後のサイクルの全ての間、一般的に、その被検体に投与されるべき第1の治療因子は、アンタゴニスト抗CD40抗体であり、このアンタゴニスト抗CD40抗体の上記用量の投与の24時間以内例えば、0.5時間以内、1時間以内、2時間以内、4時間以内、8時間以内、12時間以内、16時間以内、20時間以内、または24時間以内にIL-2の第1の用量を投与することによって開始される一定のIL-2投薬の第2のサイクルまたはその後のサイクルを伴う。アンタゴニスト抗CD40抗体およびIL-2の両方が、その被検体に投与されるように計画される日々において、これらの治療因子は、同じ時間すなわち、同時の投与または異なる時間すなわち、いずれかの順序での経時的な投与のいずれかにて投与され得る。1つのこのような実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体の上記用量は、最初に投与され、その後、アンタゴニスト抗CD40抗体の投与完了の約10分間~約4時間以内例えば、10分間以内、15分間以内、20分間以内、25分間以内、30分間以内、45分間以内、60分間以内、90分間以内、120分間以内、150分間以内、180分間以内、210分間以内、または240分間以内にIL-2の用量が投与される。IL-2およびアンタゴニスト抗CD40抗体による同時療法は、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルを包含し、処置期間の開始において被検体に投与されるべき最初の治療因子は、この被検体が、両方の治療因子が本明細書中に開示される特定の投薬レジメンに各々したがって被検体に投与されている期間に重複期間を有する限り、IL-2またはアンタゴニスト抗CD4-抗体のいずれかであり得る。したがって、1つの実施形態において、これら2つの治療因子による同時療法は、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量の投与を開始する前に、2つのレベルのIL-2投薬レジメンを開始する工程を包含し、この抗体の治療有効用量は、毎週の投与計画か、または代替的に、2週間に1度の投与計画か、3週間に1度の投与計画か、もしくは4週間毎の投与計画にしたがって投与される。この様式において、IL-2の第1の用量は、アンタゴニスト抗CD40抗体の第1の用量が投与される前に、最長1ヶ月間まで投与される。最長1ヶ月間までによって、IL-2の第1の用量が、アンタゴニスト抗CD40抗体投与を開始する少なくとも1日前に投与されるが、アンタゴニスト抗CD40抗体投与を開始する1ヶ月すなわち、30日以上前に投与されないことが意図される。したがって、IL-2投与は、例えば、アンタゴニスト抗CD40抗体の第1の治療有効用量を投与する1日前か、2日前か、3日前か、4日前か、5日前か、6日前か、7日前すなわち、1週間前か、10日前か、14日前すなわち、2週間前か、17日前か、21日前すなわち、3週間前か、24日前か、28日前4週間前か、または最長で1ヶ月前すなわち、30日前もしくは31日前までに始まる。他の実施形態において、2つのレベルのIL-2投薬レジメンおよびアンタゴニスト抗CD40抗体投与は、同じ日において同じ時間すなわち、同時の投与かまたは異なる時間すなわち、いずれかの順序での経時的な投与で始まる。したがって、例えば、1つの実施形態において、これら2つの治療因子による同時療法が、処置期間の1日目に始まる場合、アンタゴニスト抗CD40抗体の第1の治療有効用量およびIL-2の第1の用量は、この処置期間の第1日目において両方投与される。1つのこのような実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体の上記用量が最初に投与され、その後、アンタゴニスト抗CD40抗体の用量の投与完了後、約10分間~約4時間以内例えば、約10分間以内、15分間以内、20分間以内、25分間以内、30分間以内、45分間以内、60分間以内、90分間以内、120分間以内、150分間以内、180分間以内、210分間以内、または240分間以内にIL-2の用量が投与される。代替的な実施形態において、アンタゴニストCD40抗体の第1の治療有効用量は、例えば、処置期間の1日目に被検体に投与され、そして2つのレベルのIL-2投薬レジメンは、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量の投与の10日以内にIL-2の第1の用量を投与することによって開始される。このような実施形態において、好ましくは2つのレベルのIL-2投薬レジメンは、アンタゴニスト抗CD40抗体の第1の治療有効用量の投与の7日以内例えば、1日以内、2日以内、3日以内、4日以内、5日以内、6日以内、または7日以内にIL-2の第1の用量を投与することによって開始される。疾患の重症度、患者の健康状態、および患者の疾患の病歴に依存して、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルは、アンタゴニストCD40抗体療法と同時に投与され得、この抗体の治療有効用量は、毎週投与されるか、または代替的に2週間に1度か、3週間に1度か、または4週間に1度投与される。抗体処置およびIL-2処置の持続期間本発明の方法にしたがって、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量は、一定のIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルと組み合わせてか、または2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルと組み合わせて、毎週投与されるか、または代替的に2週間に1度か、3週間に1度か、または4週間に1度投与される。被検体が、本明細書中に示される様式で、これらの2つの治療因子による同時療法を受ける場合に、アンタゴニスト抗CD40抗体投与の持続期間およびIL-2投薬レジメンの任意の所定のサイクルのいずれかの持続期間は、患者の全身的健康状態、疾患の進行の病歴、および特定のアンタゴニスト抗CD40抗体/IL-2投与プロトコルに関する許容度に依存する。したがって、いくつかの実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量は、処置期間を通して、毎週すなわち、1週間に1度投与されるかまたは2週間に1度~4週間に1度例えば、2週間に1度か、3週間に1度か、または4週間に1度され、この処置期間は、一定のIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルまたは2つのレベルの投薬レジメンの1つ以上のサイクルを含む。あるいは、抗CD40抗体療法は、処置期間内に決められた持続期間を有し得る。この様式において、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量は、一定のIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルと組み合わせてか、または2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルと組み合わせて、約4週間~約16週間4週間、5週間、6週間、7週間、8週間、9週間、10週間、11週間、12週間、13週間、14週間、15週間、または16週間を含むの決められた期間の間、毎週投与されるか、または2週間に1度か、3週間に1度か、または4週間に1度投与される。したがって、例えば、IL-2との同時療法中に、この抗体は、4週間または8週間の持続期間について毎週投与され、この被検体は、それぞれ、4回または8回の抗CD40抗体の治療有効用量を受容する。同様に、この抗体が4週~8週の持続期間の間に、2週間に1度投与される場合、例えば、この被検体は、IL-2との同時療法中に、それぞれ、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量を2回または4回うける。この抗体は、6週間の持続期間、9週間の持続期間、12週間の持続期間、または15週間の持続期間について、3週間に1度投与され、例えば、この被検体は、それぞれ、治療有効用量のアンタゴニスト抗CD40抗体を、2回、3回、4回または5回受容する。同様に、この抗体は、IL-2との同時療法中に、8週間の持続期間、12週間の持続期間、または16週間の持続期間について4週間に1度投与され、この被検体は、それぞれ、治療有効用量のアンタゴニスト抗CD40抗体を、2回、3回、または4回受容し得る。これらの2つの治療因子による同時療法の間のIL-2投与の持続期間は、使用されるIL-2投薬レジメンの関数である。一般的に、IL-2は、本開示のプロトコルにしたがって投与され、そして被検体は、IL-2の毒性症状が発症しない限り、必要な場合、一定のIL-2投薬レジメンまたは2つのレベルのIL-2投薬レジメンの、1つ以上のサイクルを繰り返す。このような毒性症状が発症する場合、この被検体は、観察された任意の毒性症状が完全に消失するまでIL-2投薬から外され得る。このようなIL-2の毒性症状としては、慢性疲労、悪心、低血圧、発熱、悪寒、体重増加、痒みまたは発疹、呼吸困難、窒素血、錯乱、血小板減少、心筋梗塞、胃腸に対する毒性、および血管漏出症候群症候群が挙げられるが、これらに限定されない例えば、Allisonら、1989J.Clin.Oncol.71:75-80を参照のこと。この被検体は、これらのIL-2の毒性症状の兆候および症状の消失後に、必要な場合、これらの2つの治療因子による同時療法が再開し得る。これらの2つの治療因子による同時療法の再開は、その被検体の全身的健康状態、対応する疾患の状態、および特定のアンタゴニスト抗CD40抗体/IL-2投与プロトコルに対する許容度に依存して、本明細書中に開示されるアンタゴニスト抗CD40抗体/IL-2投与プロトコルすなわち、一定のIL-2投薬レジメンを伴うアンタゴニスト抗CD40抗体または2つのレベルのIL-2投薬レジメンを伴うアンタゴニスト抗CD40抗体のいずれかを伴い得る。一定のIL-2投薬レジメン本発明のいくつかの実施形態において、これらの2つの治療因子による同時療法を受ける被検体は、本明細書中に開示されるアンタゴニスト抗CD40抗体の投与計画すなわち、処置期間を通してかもしくは本明細書中に上記される処置期間中の決められた持続期間の間、毎週投与されるか、または2週間に1度か、3週間に1度か、4週間に1度投与されるアンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量と組み合わせて、一定のIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルを投与される。一定のIL-2投薬レジメンによって、上記被検体が、IL-2投与の任意の所定のサイクルの過程にわたって一定な1週間の総用量を投与されることが意図される。一定のIL-2投薬レジメンの1つの完全なサイクルは、約2週間~約12週間の期間例えば、2週間、3週間、4週間、5週間、6週間、7週間、8週間、9週間、10週間、11週間、または12週間について、IL-2の一定な1週間の総用量を投与し、その後、約1週間~約4週間1週間、2週間、3週間、または4週間が挙げられるの持続期間を有する、IL-2投薬を行わない期間が続く工程を包含する。したがって、一定のIL-2投薬レジメンの各サイクルは、この被検体がIL-2の一定な1週間の総用量を投与される第1の期間、およびIL-2投薬が控えられる第2の期間すなわち、IL-2投与からの休息期間または休暇を含む。好ましくは、この被検体は、少なくとも4週間~約12週間までの間、IL-2の一定な1週間の総用量を投与され、その後、IL-2投薬は、約1週間~約4週間の間、控えられる。本明細書中で上記されるように、これらの治療因子のいずれかは、この同時療法プロトコルを開始するために最初に投与される。上記被検体が、一定のIL-2投薬レジメンの各サイクル中に、処置期間すなわち、被検体がこれらの2つの治療因子による同時治療を受ける期間を通してアンタゴニスト抗CD40抗体療法を受容する場合、この被検体は、このアンタゴニスト抗CD40抗体について推奨される投薬レジメンをとどめ、したがって毎週の投与計画によるか、または2週間に1度の投与計画、3週間に1度の投与計画、または4週間に1度の投与計画によるアンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量を受容する。あるいは、上記被検体が、処置期間を通して決められた持続期間の間、アンタゴニスト抗CD40抗体を受容する場合、この処置期間は、約4週間~約16週間の決められた持続期間の間、抗CD40抗体の治療有効用量を投与するこの抗体は、1週間毎に1度、2週間に1度、3週間に1度、または4週間に1度投与される工程、および一定のIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルを投与する工程を包含する。したがって、例えば、いくつかの実施形態において、この被検体は、一定のIL-2投薬レジメンの少なくとも1つのサイクルと組み合わせて、4週間または8週間の決められた持続期間の間、1週間に1度、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量を投与される。このような実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンの完全な各サイクルは、約2週間~約12週間の期間例えば、2週間、3週間、4週間、5週間、6週間、7週間、8週間、9週間、10週間、11週間、または12週間について、IL-2の一定な1週間の総用量を投与し、その後、約1週間~約4週間1週間、2週間、3週間、または4週間が挙げられるの持続期間を有する、IL-2投薬を行わない期間が続く工程を包含する。主治医の裁量において、毎週のアンタゴニスト抗CD40抗体投与、または2週間に1度のアンタゴニスト抗CD40抗体投与、3週間に1度のアンタゴニスト抗CD40抗体投与、または4週間に1度のアンタゴニスト抗CD40抗体投与を受ける被検体は、このアンタゴニスト抗CD40抗体/一定のIL-2投薬プロトコルが良好に許容され、そしてこの被検体が、アンタゴニスト抗CD40抗体の毒性症状および/またはIL-2の毒性症状のいずれかのごくわずかな兆候しか示さない場合、12週間を越える長期間例えば、さらなる1週間~8週間についての間、IL-2の一定な1週間の総用量の受容を継続し得る。このような実施形態において、IL-2投薬の終わりに、約1週間~約4週間、IL-2投薬が、一定のIL-2投薬レジメンのその後のサイクルを開始する前に、この被検体にこの治療因子を投与されるのが控えられる。1つの実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体およびIL-2による同時療法が必要な被検体は、この処置期間の1日目に始まり、処置期間にわたって1週間に一度、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量を投与されるか、またはこの処置期間にわたって3週間に1度、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量を投与され、そして一定のIL-2投薬レジメンの第1のサイクルは、同じ処置期間の3日目、4日目、5日目、6日目、7日目、8日目、9日目、または10日目に開始される。1つのこのような実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンの第1のサイクルは、この処置期間の8日目すなわち、開始から2週間目にてに始まり、そして約4週間~約12週間のIL-2投与の持続期間を有し、その後、約1週間~約4週間の持続期間を有するIL-2投与しない期間が続く。一定のIL-2投薬レジメンのこの第1のサイクルの終わりには、この被検体は、本明細書中にされるような一定のIL-2投薬レジメンの1つ以上のその後のサイクルを受容する。別の実施形態において、この被検体は、この処置期間の1日目に始まり、処置期間にわたって1週間に一度、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量を投与されるか、またはこの処置期間にわたって3週間に1度、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量を投与され、そして一定のIL-2投薬レジメンの第1のサイクルは、この処置期間の8日目すなわち、開始から2週間目にてに始まり、そして約4週間のIL-2投与の持続期間を有し、その後、1週間の持続期間を有するIL-2投与しない期間が続く。主治医の裁量において、その後、この被検体は、この一定のIL-2投薬レジメンの1つ以上のその後のサイクルすなわち、IL-2が1週間投与されなかった後の、一定な1週間のIL-2の総用量の4週間にわたる投与を投与される。処置期間全体の間、この被検体は、1週間に1回投与の投与計画か、または3週間に1回投与の投与計画にしたがってアンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量を受容し続ける但し、この被検体がアンタゴニスト抗CD40抗体の症状を示さないという条件で。したがって、例えば、この被検体が、処置期間の8日目すなわち、2週間目の第1日目に始まるIL-2投与の第1のサイクルを伴って、アンタゴニスト抗CD40抗体の毎週すなわち、1週間に1回の投与と組み合わせて、一定のIL-2投薬レジメンの3つのサイクルを受ける場合、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量は、処置の各週の1日目1週間目~16週間目の第1日目に、この被検体に投与され、そしてIL-2の一定な1週間の総用量は、2週間目~5週間目の間か、7週間目~10週間目の間か、または12週間目~15週間目の間に投与され、IL-2が投与されない期間は、6週間目、11週間目、および16週間目の間に生じる。代替的な実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体とIL-2との同時療法が必要な被検体は、処置期間の1日目に始まり、4週間または8週間の決められた持続期間の間、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量を1週間に1度投与されるか、またはアンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量を2週間に1度投与され、そして一定のIL-2投薬レジメンの第1のサイクルは、同じ処置期間の3日目、4日目、5日目、6日目、7日目、8日目、9日目、または10日目に始まって開始される。1つのこのような実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンの第1のサイクルは、処置期間の8日目すなわち、開始から2週間目にてに始まり、そして約4週間~約12週間のIL-2投与の持続期間を有し、その後、約1週間~約4週間の持続期間を有するIL-2投与しない期間が続く。一定のIL-2投薬レジメンのこの第1のサイクルの終わりは、この被検体は、本明細書中に上記されるような一定のIL-2投薬レジメンの1つ以上のその後のサイクルを受容する。別の実施形態において、上記被検体は、処置期間の1日目に始まり、4週間または8週間の決められた持続期間の間、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量を、1週間に一度か、または2週間に1度投与され、一定のIL-2投薬レジメンの第1のサイクルは、この処置期間の8日目すなわち、開始から2週間目にてに始まり、そして4週間のIL-2投与の持続期間を有し、その後、1週間の持続期間を有するIL-2投与しない期間が続く。主治医の裁量において、その後、この被検体は、この一定のIL-2投薬レジメンの1つ以上のその後のサイクルすなわち、IL-2が1週間投与されなかった後の、一定な1週間の総用量の4週間にわたる投与を投与される。したがって、例えば、この被検体が、処置期間の8日目すなわち、2週間目の第1日目に始まるIL-2投与の第1のサイクルを伴って、4週間の決められた持続時間についてアンタゴニスト抗CD40抗体の毎週すなわち、1週間に1回の投与と組み合わせて、一定のIL-2投薬レジメンの3つのサイクルを受ける場合、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量は、処置の1週間目~4週間目の1日目1週間目~16週間目の第1日目に、この被検体に投与され、そしてIL-2の一定な1週間の総用量は、2週間目~5週間目の間か、7週間目~10週間目の間か、または12週間目~15週間目の間に投与され、IL-2が投与されない期間は、6週間目、11週間目、および16週間目の間に生じる。あるいは、この被検体が、処置期間の8日目すなわち、2週間目の第1日目に始まるIL-2投与の第1のサイクルを伴って、8週間の決められた持続時間についてアンタゴニスト抗CD40抗体の毎週すなわち、1週間に1回の投与と組み合わせて、一定のIL-2投薬レジメンの3つのサイクルを受ける場合、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量は、処置の1週間目~8週間目の1日目1週間目~16週間目の第1日目に、この被検体に投与され、そしてIL-2の一定な1週間の総用量は、2週間目~5週間目の間か、7週間目~10週間目の間か、または12週間目~15週間目の間に投与され、IL-2が投与されない期間は、6週間目、11週間目、および16週間目の間に生じる。2つのレベルのIL-2投薬レジメン本発明の他の実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体とIL-2との同時療法は、処置期間を通してかまたはこの処置期間内の決められた持続期間の間、この処置期間の過程の間に2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルと組み合わせて、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効量を、1週間に1度か、2週間に1度か、3週間に1度か、または4週間に1度投与する工程を包含する。2つのレベルのIL-2投薬レジメンによって、IL-2とアンタゴニスト抗CD40抗体との同時療法を受ける被検体が、IL-2投薬の2回の期間中にIL-2を投与されることが意図され、この2回の期間は、合わせて約2週間~約16週間2週間、3週間、4週間、5週間、6週間、7週間、8週間、9週間、10週間、11週間、12週間、13週間、14週間、15週間または16週間を含むの合わせた持続期間を有する。1つの実施形態において、2つのレベルのIL-2投薬レジメンは、合わせて約4週間~約12週間の持続期間を有し;他の実施形態において、2つのレベルのIL-2投薬レジメンは、合わせて約4週間~約8週間の持続期間約4週間、約5週間、約6週間、約7週間、または約8週間を含むを有する2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間および第2の期間中に投与されるべきIL-2の、1週間の総用量は、IL-2より高い1週間の総用量が、第1の期間中に与えられ、そしてIL-2のより低い1週間の総用量が、第2の期間中に与えられるように選択される。2つのレベルのIL-2投薬レジメンの所定のサイクルのいずれかに関する、第1の期間および第2の期間の個々の持続期間は、個体の健康状態および疾患の進行の病歴に依存して変化し得る。一般的に、この被検体は、4週間~16週間の2つのレベルのIL-2投薬レジメンの内に、少なくとも1週間の間、IL-2のより高い1週間の用量を投与される。1つの実施形態において、IL-2のより高い1週間の総用量は、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの前半の間に投与され、より低い用量がこの2つのレベルのIL-2投薬レジメンの後半の間に投与される。したがって、例えば、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つの完全なサイクルが、合わせて8週間の持続期間を有する場合、IL-2のより高い1週間の総用量は、IL-2投薬の前半4週間に投与され、そしてIL-2のより低い1週間の総用量は、IL-2投薬の後半4週間で投与される。この被検体が、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの各サイクルの間に、処置期間を通してすなわち、被検体がこれらの2つの治療因子による同時療法を受ける期間の間アンタゴニスト抗CD40抗体療法を受容する場合、この被検体は、アンタゴニスト抗CD40抗体について推奨される投薬レジメンをとどめ、したがって毎週の投与計画によるか、または2週間に1度の投与計画、3週間に1度の投与計画、または4週間に1度の投与計画によるアンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量を受容する。あるいは、上記被検体が、処置期間を通して決められた持続期間の間、アンタゴニスト抗CD40抗体を受容する場合、この処置期間は、約4週間~約16週間の決められた持続期間の間、抗CD40抗体の治療有効用量を投与するこの抗体は、1週間に1度、2週間に1度、3週間に1度、または4週間に1度投与される工程、および2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルを投与する工程を包含する。したがって、例えば、いくつかの実施形態において、この被検体は、本明細書中の上記で定義されるような2つのレベルのIL-2投薬レジメンの少なくとも1つのサイクルと組み合わせて、4週間または8週間の決められた持続期間の間、1週間に1度、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量を投与される。具体的な投薬レジメンは、本明細書中の以下に開示されるが、本発明がアンタゴニスト抗CD40抗体、ならびにIL-2のより高い1週間の総用量に対する最初の曝露およびIL-2のより低い1週間の総用量に対するその後の曝露を提供する2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルによる同時療法を提供する任意の投与プロトコルを包含することが認識される。理論に拘束されないが、IL-2投薬の最初の段階の間にIL-2のより高い用量を投与する工程は、IL-2投薬のその後の週の間のより低い用量によって維持され得るNK細胞活性の最初の刺激を提供すると考えられる。IL-2の副作用が用量関連性である場合、低められたIL-2の用量は、長い処置期間中のこの治療因子の耐容性を増加する。したがって、本発明の方法は、合わせて約2週間~約16週間2週間、3週間、4週間、5週間、6週間、7週間、8週間、9週間、10週間、11週間、12週間、13週間、14週間、15週間、または16週間を含むの持続期間を有する2つのレベルのIL-2投薬と組み合わせて、少なくとも1つのアンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量が、処置期間を通して1週間に1度投与されるか、またはこの処置期間を通して2週間に1度か、3週間に1度か、または4週間に1度投与される処置レジメンを企図する。いずれかの因子は、この2つのレベルのIL-2投薬レジメンについて上記で説明される通りに最初に投与され得る。例えば、1つの実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量が最初例えば、処置期間の1日目に投与され、その後10日以内に2つのレベルのIL-2投薬レジメンが開始され、好ましくはアンタゴニスト抗CD4-抗体の第1の投与の7日以内例えば、1日以内、2日以内、3日以内、4日以内、5日以内、6日以内、または7日以内に開始される。2つのレベルのIL-2投薬レジメンの間に、IL-2のより高い1週間の総用量は、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中例えば、IL-2-投与の最初の1週間~4週間にわたってに投与され、そしてIL-2のより低い1週間の総用量は、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間の間すなわち、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの残りの過程にわたってに投与される。1つの実施形態において、本発明の方法は、この処置期間の過程の間に2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルと組み合わせて、少なくとも1つのアンタゴニスト抗CD40抗体を含有する薬学的組成物の治療有効用量を処置期間を通して毎週すなわち、1週間に1度投与する工程、またはアンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効量をこの処置期間を通して3週間に1度投与する工程を提供し、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの各サイクルは、合わせて4週間~8週間4週間、5週間、6週間、7週間、または8週間を含むの持続期間を有する。したがって、例えば、アンタゴニスト抗CD40抗体が1週間に1度投与されるべき場合、少なくとも1つのアンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量は、この処置期間の各週の1日目に投与され、そして4週間~8週間の2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1のサイクルは、同じ処置期間の3日目、4日目、5日目、6日目、7日目、8日目、9日目、または10日目に始まって開始される。1つのこのような実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体を含有する薬学的組成物の治療有効用量は、処置期間の1日目に始まりかつこの処置期間を通じて継続して毎週投与され、そして2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1のサイクルは、同じ処置期間の8日目に始まり、そして8週間すなわちこの処置期間の2週間目~9週間目の間継続する。あるいは、本発明の方法は、その必要がある被検体のための処置レジメンを企図し、ここで合わせて約2週間~約16週間2週間、3週間、4週間、5週間、6週間、7週間、8週間、9週間、10週間、11週間、12週間、13週間、14週間、15週間、または16週間を含むの持続期間を有する2つのレベルのIL-2投薬と組み合わせて、4週間または8週間の決められた持続期間の間、少なくとも1つのアンタゴニスト抗CD40抗体が、1週間に1度投与されるか、または2週間に1度投与される。いずれかの因子は、上記で説明される通り、この2つのレベルのIL-2投薬レジメンについて最初に投与され得る。例えば、1つの実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量は、最初例えば、処置期間の1日目にに投与され、その後、10日以内に2つのレベルのIL-2投薬レジメンが開始され、好ましくはアンタゴニスト抗CD40抗体の第1の投与の7日以内例えば、1日以内、2日以内、3日以内、4日以内、5日以内、6日以内、または7日以内に開始される。2つのレベルのIL-2投薬レジメンの間に、IL-2のより高い1週間の総用量が、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中例えば、IL-2-投与の最初の1週間~4週間にわたってに投与され、そしてIL-2のより低い1週間の総用量が、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間の間すなわち、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの残りの過程にわたってに投与される。1つの実施形態において、本発明の方法は、この処置期間の過程の間に2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルと組み合わせて、少なくとも1つのアンタゴニスト抗CD40抗体を含有する薬学的組成物の治療有効用量を、4週間もしくは8週間の決められた持続期間の間、毎週すなわち1週間に1度かまたは2週間に1度投与する工程を提供し、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの各サイクルは、合わせて4週間~8週間4週間、5週間、6週間、7週間、または8週間を含むの持続期間を有する。したがって、例えば、アンタゴニスト抗CD40抗体は、4週間の持続期間について1週間に1度投薬されるべき場合、少なくとも1つのアンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量は、この処置期間の1週間目~4週間目の1日目に投与され、そして4週間~8週間の2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1のサイクルは、同じ処置期間の3日目、4日目、5日目、6日目、7日目、8日目、9日目、または10日目に始まって開始される。1つのこのような実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体を含有する薬学的組成物の治療有効用量は、処置期間の1日目に始まり、そして4週間の決められた期間について毎週投与され、そして2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1のサイクルは、同じ処置期間の8日目に始まり、そして8週間すなわちこの処置期間の2週間目~9週間目の間継続する。IL-2投薬の中断本発明の方法はまた、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルの投与との組み合わせで、本明細書中で推奨される投与計画にしたがうアンタゴニスト抗CD40抗体を受ける被検体が、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの任意の所定のサイクルの期間のいずれかの第1の期間の終わりと2つのレベルのIL-2投薬レジメンの特定のサイクルの第2の期間の開始との間に、休薬期間、またはIL-2投薬、もしくはIL-2投薬およびアンタゴニスト抗CD40抗体投薬を行わない期間を与えられる実施形態を企図する。これらの実施形態において、2つのレベルのIL-2投薬レジメンは、中断される例えば、IL-2投薬が、より高い1週間の総用量が投与される2つのレベルのIL-2投薬レジメンの所定のサイクルの第1の期間後に、約1週間~約4週間の期間の間控えられる。IL-2投薬を行わないこの期間の間に、この被検体は、本明細書中で推奨される投与計画にしたがうアンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量を受容し続け得るか、あるいは、アンタゴニスト抗CD40抗体投薬もまた、中止され得る。IL-2投薬におけるこの中断の長さは、その被検体の健康状態、疾患の進行の病歴、および2つのレベルのIL-2投薬レジメンの任意の所定のサイクルの第1の期間中に受容される最初のIL-2/抗体療法に対する被検体の応答性に依存する。一般的に、この被検体が、IL-2のより低い1週間の総用量がアンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量の毎週の投与と組み合わせて投与される2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間を施される場合に、IL-2投薬は、約1週間~約4週間の期間について中断される。2つのレベルのIL-2投薬レジメンの任意の所定のサイクルを完了するために、被検体は、より高い1週間の総用量の第1の期間およびより低い1週間の総用量の第2の期間の療法を投与される必要がある。この休薬期間すなわち、IL-2投与を行わない期間、またはIL-2およびアンタゴニスト抗CD40抗体投与を行わない期間の間に、ナチュラルキラーNK細胞数は、2つのレベルのIL-2投薬レジメン、または2つのレベルのIL-2投薬レジメンおよびアンタゴニスト抗CD40抗体の毎週の投与が再開されるべきときを決定するためにモニタリングされる。200細胞数/μlを超えるNK細胞レベルは、アンタゴニスト抗CD40抗体療法についての正の臨床的応答に影響する重要な要因である。したがって、任意のIL-2投薬の所定のサイクルの間、その終わり、およびその後におけるNK細胞数のモニタリングは、IL-2療法がIL-2投薬を行わない期間後に再開されるべきときアンタゴニスト抗CD40抗体投与を行わない期間を含んでも含まなくてもよいを決定する手段を提供する。この様式において、NK細胞数は、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの間、および休薬期間が開始される前の2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間の終わりにて隔週で測定されるかまたは月1回測定される。NK細胞数が、受容可能な閾値を上回る場合、この2つのレベルのIL-2投薬レジメンは、中断され得る。受容可能な閾値によって、処置を受ける被検体が、約150細胞/μl以上、好ましくは200細胞/μl以上であるNK細胞数を有することが意図される。IL-2投薬の中断アンタゴニスト抗CD40抗体投与の中断を含んでも含まなくてもよい後、次いでNK細胞数は、1週間に1度かもしくは1週間に2度測定されるか、またはそれより少ない頻度例えば、2週間に1度または3週間に1度でモニタリングされ得る。約150細胞/μlの受容可能な閾値より下に減少するNK細胞数例えば、150細胞/μl未満のNK細胞数は、2つのレベルのIL-2投薬レジメン、または休薬期間がまたアンタゴニスト抗CD40抗体投与を行わない期間を含む2つのレベルのIL-2投薬レジメンおよびアンタゴニスト抗CD40抗体投薬レジメンを再開するために必要であることを示す。好ましくは2つのレベルのIL-2投薬レジメンは、NK細胞数が、約200細胞/μlの閾値より下すなわち、200細胞/μl未満のNK細胞数に減少するときに再開される。このときにおいて、その被検体は、IL-2のより低い1週間の総用量がアンタゴニスト抗CD40抗体と組み合わせて投与される2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間を投与され、この抗体の治療有効用量は、1週間に1度投与されるか、または2週間に1度か、3週間に1度か、もしくは4週間に1度投与される。被検体の全身的健康状態、臨床的応答、およびこれらの2つの治療因子による同時療法の耐容性に依存して、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1のサイクルの完了後に、この被検体は、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量この抗体の治療有効用量は、1週間に1度投与されるか、または2週間に1度か、3週間に1度か、もしくは4週間に1度投与されるの投与と組み合わせて、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のその後のサイクルを投与され得る。このような実施形態において、主治医は、連続的なサイクルの間に、休薬期間またはIL-2投与を行わない期間を許容し得る。したがって、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの任意の所定のサイクルそれ自体は、IL-2投薬の第1の期間と第2の期間との間にIL-2投与を行わない期間を含んでも含まなくてもよいの完了のとき、この被検体は、2つのレベルのIL-2投薬レジメンのその後のサイクルを開始する前にIL-2投与の休止を与えられ得る。一般的に、2つのレベルのIL-2投薬の所定のサイクルのいずれかの間のIL-2投与を行わない期間は、約1週間~約4週間1週間、2週間、3週間、または4週間を含むである。IL-2休薬期間中に、この被検体は、アンタゴニスト抗CD40抗体の治療有効用量を受容し続け得、これは、1週間に1度投与され得るか、または2週間に1度か、3週間に1度か、もしくは4週間に1度投与され得るか、あるいは、アンタゴニスト抗CD40抗体投薬は、中止されてもよい。併用IL-2/アンタゴニスト抗CD40抗体療法のその後の過程これまでに言及した投薬レジメンにしたがう治療を受ける被検体が、部分寛解、または長期の寛解後の再発を示す場合、同時療法のその後の過程が、疾患の完全寛解を達成するのに必要であり得る。したがって、第1の処置期間この処置期間を通してかまたはこの処置期間内の決められた持続期間の間、抗CD40抗体と組み合わせた一定のIL-2投薬レジメンまたは2つのレベルのIL-2投薬レジメンを包含し得るからの休薬期間に続いて、被検体は、アンタゴニスト抗CD40抗体投与と組み合わせて、一定のIL-2投薬レジメンまたは2つのレベルのIL-2投薬レジメンのいずれかを含む1つ以上のさらなる処置期間を受容し得、この抗体は、さらなる処置期間を通して投与され得るかまたはこの処置期間内の決められた持続期間の間投与され得る。処置期間の間のこのような休薬の期間は、本明細書中で中断の期間といわれる。中断の期間の長さが、これらの2つの治療因子による同時療法の以前の処置期間のいずれかによって達成される腫瘍応答の程度すなわち、完全対部分に依存する。したがって、例えば、被検体が、アンタゴニスト抗CD40抗体の毎週の投薬と2つのレベルのIL-2投薬レジメンとの同時療法2つのレベルのIL-2投薬の第1の期間と第2の期間との間に休薬期間を含んでも含まなくてもよいを受ける場合、それらの処置レジメンは、複数の処置時間を含み得、処置時間の各々は、アンタゴニスト抗CD40抗体の毎週投与と2つのレベルのIL-2投薬レジメンとの同時療法を含む。これらの複数の処置時間は、本明細書中で維持サイクルといわれ、各維持サイクルは、完了した2つのレベルのIL-2投薬レジメンと組み合わせたアンタゴニスト抗CD40抗体投与を含む。完了した2つのレベルのIL-2投薬レジメンによって、この被検体が、より高い1週間の総用量の第1の期間およびより低い1週間の総用量の第2の期間の両方を投与されたことが意図される。複数の維持サイクルについての必要性は、休薬期間が正当化されるときおよびこのような休薬期間を終了する必要があるときを決定するために使用される様式と同様の様式でNK細胞数をモニタリングすることによって評価され得る。したがって、所定の維持サイクルのいずれかにおける2つのレベルのIL-2投薬レジメンの完了において、処置を行う医師は、NK細胞数の測定値を得る。その後、この指標は、所定の2つのレベルのIL-2投薬レジメンの完了後に月1回の間隔すなわち、1ヶ月に一度で測定される。休薬期間と同様に、受容可能な閾値を下回るすなわち、約150細胞/μlを下回り、好ましくは約200細胞/μlを下回るまで減少するNK細胞数は、その被検体に別の維持サイクルを投与する必要を示す。維持サイクルの間の持続期間は、約1ヶ月間~約6ヶ月間1ヶ月間、1.5ヶ月間、2ヶ月間、2.5ヶ月間、3ヶ月間、3.5ヶ月間、4ヶ月間、4.5ヶ月間、5ヶ月間、5.5ヶ月間、6ヶ月間、または約1ヶ月間~約6ヶ月間の範囲内に収まる他のこのような期間が挙げられるであり得る。したがって、本発明の投与方法は、CD40発現細胞を含む癌例えば、B細胞関連の癌例えば、リンパ腫、骨髄腫、および白血病、ならびに固形腫瘍例えば、腎臓癌例えば、腎細胞癌が挙げられる、膀胱癌、肝臓癌例えば、肝細胞癌が挙げられる、胃癌、頚癌、前立腺癌、鼻咽腔癌、甲状腺癌例えば、甲状腺乳頭癌、および皮膚癌例えば、黒色腫、ならびに肉腫例えば、骨肉腫およびユーイング肉腫が挙げられるを処理するための改良された手段を提供する。理論に拘束されないが、その間に中断を含む一定のIL-2投与計画は、アンタゴニスト抗CD40抗体療法の間のIL-2の投与頻度の減少、および長期のIL-2療法のより良い耐容性を可能にする断続的な投与計画を提供する。2つのレベルのIL-2投薬レジメンは、患者にIL-2のより高い1週間の総用量を与える機会を提供し、この総用量は、IL-2投薬のその後の週の間に、より低い用量によって維持され得るNK細胞数の増大を提供する。この投与プロトコルは、より高い1週間の総用量のIL-2投与計画およびより低い1週間の総用量のIL-2投与計画の間のIL-2休薬期間、ならびに2つのレベルのIL-2投薬レジメンの完了したサイクルの間のIL-2休薬期間を提供するさらなる利点を有し、この休薬期間は、アンタゴニスト抗CD40抗体とIL-2との同時療法の増加した耐容性に寄与する。これまでに言及された投薬レジメンにしたがう治療を受ける被検体が、部分寛解、または長期の寛解後の再発を示す場合に、この被検体は、単一の治療因子としてか、または別の腫瘍治療と組み合わせてアンタゴニスト抗CD40抗体を受容することが認識される。したがって、CD40を発現する新生物細胞を含む癌の処置のために予めIL-2とアンタゴニスト抗CD40抗体との同時療法を受けた被検体、およびこの癌のさらなる処置が必要である被検体は、アンタゴニスト抗CD40抗体およびIL-2によるさらなる同時療法の前にか、もしくはその代わりの手段として、単独のアンタゴニスト抗CD40抗体か、またはアンタゴニスト抗CD40抗体および少なくとも1つの他の腫瘍治療による治療を受け得る。腫瘍治療の他の型としては、本明細書中の以下に記載される型が挙げられるが、これらに限定されない。IL-2投与計画一定のIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルまたは2つのレベルのIL-2投薬レジメンの1つ以上のサイクルと組み合わせて、本明細書中で推奨される投与計画にしたがうアンタゴニスト抗CD40抗体による同時療法を受けるヒト被検体のために、IL-2投薬の期間中に投与されるべきIL-2の1週間の総用量は、単回投与として投与されても1週間に2回投与の投与計画、1週間に3回投与の投与計画、1週間に4回投与の投与計画、1週間に5回投与の投与計画、1週間に6回投与の投与計画、または1週間に7回投与の投与計画にしたがって投与される等用量の系列に分割されてもよい。より高い1週間の総用量は、第1の期間中に投与されるべきであり、そしてより低い1週間の総用量は、第2の期間中に投与されるべきであり、1週間の総用量が両方の投薬期間の過程にわたって同じ様式で投与されることは、必要ではない。したがって、例えば、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中のより高い1週間の総用量は、単回投与として投与されても1週間に2回投与の投与計画、1週間に3回投与の投与計画、1週間に4回投与の投与計画、1週間に5回投与の投与計画、1週間に6回投与の投与計画、または1週間に7回投与の投与計画にしたがって投与される等用量の系列に分割されてもよい。同様に、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中のより低い1週間の総用量は、単回投与として投与されても1週間に2回投与の投与計画、1週間に3回投与の投与計画、1週間に4回投与の投与計画、1週間に5回投与の投与計画、1週間に6回投与の投与計画、または1週間に7回投与の投与計画にしたがって投与される等用量の系列に分割されてもよい。本発明の目的のために、1週間に2回投与の投与計画、1週間に3回投与の投与計画、1週間に4回投与の投与計画、1週間に5回投与の投与計画、1週間に6回投与の投与計画、または1週間に7回投与の投与計画は、1週間の総用量が、それぞれ、2つの等用量、3つの等用量、4つの等用量、5つの等用量、6つの等用量、または7つの等用量に分割されることを意図され、この等用量は、7日間の期間の過程にわたって被検体に24時間の期間あたり1等用量を超えないで投与される。この等用量の系列は、1週間あたりに投与される等用量の総数に依存して、連続した日に投与されても1日以上の日数が任意の2つの連続した用量の間に生じるように投与されてもよい。したがって、例えば、IL-2の2つの等用量の系列が、1週間あたりすなわち、7日間にわたってに投与され、そしてその週の第1の等用量が、1日目に投与される場合、IL-2の第2の等用量は、その週の2日目、3日目、4日目、5日目、6日目または7日目に投与され得る。1つの実施形態において、IL-2の1週間の総用量は、7日間の期間内にその被検体に投与される2つの等用量に分割され、この期間は、投薬と投薬との間に最小で72時間および投薬と投薬との間に最大で96時間を許容する。同様に、IL-2の3つの等用量の系列が、1週間あたりに投与され、そしてその週の第1の等用量が、1日目に投与される場合、第2の等用量の投与と第3の等用量の投与との間が約24時間である限り、第2の等用量は、その週の2日目、3日目、4日目、5日目、または6日目に投与され得、そして第3の等用量は、その週の3日目、4日目、5日目、6日目または7日目に投与され得る。1つの実施形態において、IL-2の1週間の総用量は、7日間の期間内にその被検体に投与される3つの等用量に分割され、この期間は、用量と用量との間に最小で25時間および用量と用量との間に最大で72時間を許容する。IL-2の4つの等用量の系列が、1週間あたりに投与され、そしてその週の第1の等用量が、1日目に投与される場合、任意の2つの連続した用量の投与の間すなわち、第1の等用量と第2の等用量との間、第2の等用量と第3の等用量との間、および第3の等用量と第4の等用量との間が約24時間である限り、第2の等用量は、その週の2日目、3日目、4日目、または5日目に投与され得、そして第3の等用量は、その週の3日目、4日目、5日目、または6日目に投与され得、そして第4の等用量は、その週の4日目、5日目、6日目、または7日目に投与され得る。IL-2の5つの等用量の系列が、1週間あたりに投与され、そしてその週の第1の等用量が、1日目に投与される場合、任意の2つの連続した用量の投与の間すなわち、第1の等用量と第2の等用量との間、第2の等用量と第3の等用量との間、第3の等用量と第4の等用量との間、および第4の等用量と第5の等用量との間が約24時間である限り、第2の等用量は、その週の2日目、3日目、または4日目に投与され得、そして第3の等用量は、その週の3日目、4日目、または5日目に投与され得、第4の等用量は、その週の4日目、5日目、または6日目に投与され得、そして第5の等用量は、その週の5日目、6日目、または7日目に投与され得る。IL-2の6つの等用量の系列が、1週間あたりに投与され、そしてその週の第1の等用量が、1日目に投与される場合、任意の2つの連続した用量の投与の間すなわち、第1の等用量と第2の等用量との間、第2の等用量と第3の等用量との間、第3の等用量と第4の等用量との間、および第4の等用量と第5の等用量との間、および第5の等用量と第6の等用量との間が約24時間である限り、第2の等用量は、その週の2日目または3日目に投与され得、そして第3の等用量は、その週の3日目または4日目に投与され得、第4の等用量は、その週の4日目または5日目に投与され得、第5の等用量は、その週の5日目または6日目に投与され得、そして第6の等用量は、その週の6日目または7日目に投与され得る。1つの実施形態において、IL-2の1週間の総用量は、7つの等用量に分割され、これは、7日間の期間にわたって毎日投与される、それぞれの連続した投薬の間は約24時間である。一定のIL-2投薬レジメン全体にわたって同じ投与計画に従うか、または2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間および第2の期間の両方について同じ投与計画に従う必要はない。したがってこの投与計画は、アンタゴニスト抗CD40抗体療法と組み合わせた長期のIL-2療法に関する個体の許容度を適応させ、そしてこれらの2つの治療因子による同時療法に対して個体の応答性を反映させる調整され得る。一定のIL-2投薬レジメンおよび2つのレベルのIL-2投薬レジメンの2回の期間中の好ましい投与計画は、患者の病歴および本明細書中に提供される指針を与えられる主治医によって、容易に決定される。併用IL-2/アンタゴニスト抗CD40抗体療法に使用するためのアンタゴニスト抗CD40抗体用量の範囲本発明の目的に関して、本明細書中に開示されるようなIL-2療法と組み合わせた、本明細書中の他所で定義されるようなアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、約0.003mg/kg~約50mg/kg、約0.01mg/kg~約40mg/kg、約0.01mg/kg~約30mg/kg、約0.1mg/kg~約30mg/kg、約0.5mg/kg~約30mg/kg、約1mg/kg~約30mg/kg、約3mg/kg~約30mg/kg、約3mg/kg~約25mg/kg、約3mg/kg~約20mg/kg、約5mg/kg~約15mg/kg、約7mg/kg~約12mg/kgの範囲である。したがって、例えば、任意の1つのアンタゴニスト抗CD40抗体またはそのフラグメント例えば、抗CD40モノクローナル抗体CHIR-12.12もしくは抗CD40モノクローナル抗体CHIR-5.9またはその抗原結合フラグメントは、0.003mg/kg、0.01mg/kg、0.03mg/kg、0.1mg/kg、0.3mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、1.5mg/kg、2mg/kg、2.5mg/kg、3mg/kg、5mg/kg、7mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg、30mg/kg、35mg/kg、40mg/kg、45mg/kg、50mg/kg、または約0.003mg/kg~約50mg/kgの範囲内に収まる他のこのような用量であり得る。アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの同じ治療有効用量は、各週の抗体投薬を通して投与され得る。あるいは、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの異なる治療有効用量は、処置期間の過程にわたって使用され得る。したがって、いくつかの実施形態において、本明細書中の他所で定義されるようなアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの最初の治療有効用量は、より低い投薬用量範囲すなわち、約0.003mg/kg~約20mg/kgにあり得、その後、より高い投薬範囲すなわち、約20mg/kg~約50mg/kg内にある用量を伴う。代替的な実施形態において、本明細書中の他所で定義されるようなアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの最初の治療有効用量は、さらに高い投薬範囲すなわち、約20mg/kg~約50mg/kgにあり得、その後、より低い投薬用量範囲すなわち、0.003mg/kg~約20mg/kg内にあるその後の用量を伴う。したがって、1つの実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの最初の治療有効用量は、約20mg/kg~約35mg/kg約20mg/kg、約25mg/kg、約30mg/kg、および約35mg/kgが挙げられるであり、そしてアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントのその後の治療有効用量は、約5mg/kg~約15mg/kg約5mg/kg、約8mg/kg、約10mg/kg、約12mg/kg、および約15mg/kgが挙げられるである。本発明のいくつかの実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体療法は、IL-2/アンタゴニスト抗CD40抗体の併用療法が必要な被検体に対して、この抗体またはその抗原結合フラグメントの負荷用量を投与することによって開始される。負荷用量によって、この被検体に投与されるアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの最初の用量が意図され、投与される抗体またはその抗原結合フラグメントの用量は、より高い投薬範囲すなわち、約20mg/kg~約50mg/kg内に収まる。負荷用量は、完全な負荷用量が約24時間の期間内に投与される限り、単一の投与例えば、抗体またはその抗原結合フラグメントが、IVで投与される単一の注入として投与されても複数の投与例えば、抗体またはその抗原結合フラグメントが、IVで投与される複数の注入として投与されてもよい。負荷用量の投与後、次いでこの被検体は、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量を1回以上投与される。その後の治療有効用量は、毎週の投与計画にしたがって投与されても、本明細書中に上記されるように2週間に1度か、3週間に1度かまたは4週間に1度投与されてもよい。このような実施形態において、一般的に、その後の治療有効用量は、より低い投薬範囲すなわち、0.003mg/kg~約20mg/kg内に収まる。あるいは、いくつかの実施形態において、負荷用量の後、その後の治療有効用量のアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、保全計画にしたがって投与され、この抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、1ヶ月間に1度か、6週間毎に1度か、2ヶ月毎に1度か、10週間毎に1度か、3ヶ月毎に1度か、14週間に1度か、4ヶ月毎に1度か、18週間毎に1度か、5ヶ月毎に1度か、22週間に1度か、6ヶ月毎に1度か、7ヶ月毎に1度か、8ヶ月毎に1度か、9ヶ月毎に1度か、10ヶ月毎に1度か、11ヶ月毎に1度か、12ヶ月毎に1度投与される。このような実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、特にその後の用量がより頻繁な間隔例えば、2週間に1度~1ヶ月毎に1度で投与される場合に、より低い投薬範囲すなわち、0.003mg/kg~約20mg/kgに収まるか、特にその後の用量がより少ない頻度の間隔例えば、その後の用量が、約1ヶ月間~約12ヶ月間空けて投与されるで投与される場合に、より高い投薬範囲すなわち、約20mg/kg~約50mg/kg内に収まる。併用IL-2/アンタゴニスト抗CD40抗体療法に使用するためのIL-2の用量範囲アンタゴニスト抗CD40抗体療法と組み合わせて投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の治療有効用量の以下の議論の目的に関して、商品名Proleukin登録商標ChironCorporation,Emeryville,Californiaで市販されるIL-2の薬学的組成物は、参照IL-2標準として使用される。参照IL-2標準によって、アンタゴニスト抗CD40抗体療法と組み合わせてCD40を発現する細胞を含む癌を有する被検体に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の治療有効用量の決定についての基礎として機能するIL-2の処方物が意図される。このIL-2製品に使用される活性部分は、組換えヒトIL-2ムテインアルデスロイキンデス-アラニル-1,セリン-125ヒトインターロイキン-2といわれる;本明細書中に参考として援用される米国特許出願第4,931,543号を参照のことである。したがって、例えば、IL-2の供給源が、Proleukin登録商標である場合、アンタゴニスト抗CD40抗体療法と組み合わせて投与されるべきProleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、治療および推奨されるIL-2投薬レジメン例えば、一定のIL-2投薬レジメン対2つのレベルのIL-2投薬レジメンを受ける患者の病歴に依存して、約18百万国際単位MIU~約54MIUである。IL-2のより高い用量が、投与されるべき場合、Proleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、約42.0MIU~約54.0MIUの範囲42.0MIU、43.5MIU、45.0MIU、46.5MIU、48.0MIU、49.5MIU、51.0MIU、52.5MIU、および54.0MIUならびにこの範囲内に収まる他のこのような値が挙げられるである。IL-2の中間程度の用量が、投与されるべき場合、Proleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、約30.0MIU~約42.0MIUの範囲約30.0MIU、31.5MIU、33.0MIU、34.5MIU、36.0MIU、37.5MIU、39.0MIU、40.5MIU、および42.0MIUならびにこの範囲内に収まる他のこのような値が挙げられるである。IL-2のより低い用量が、投与されるべき場合、Proleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、約18.0MIU~約30.0MIUの範囲約18.0MIU、19.5MIU、21.0MIU、22.5MIU、24.0MIU、25.5MIU、27.0MIU、28.5MIU、および30.0MIUならびにこの範囲内に収まる他のこのような値が挙げられるである。一定のIL-2投薬レジメンについて推奨される用量Proleukin登録商標IL-2が、アンタゴニスト抗CD40抗体療法と組み合わせて一定のIL-2投薬レジメンにしたがって投与されるべき場合、この参照IL-2標準の1週間の総用量は、約18.0MIU~約54.0MIUである。したがって、例えば、いくつかの実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンの一部として1週間あたりに投与されるべきProleukin登録商標IL-2の全量は、約18.0MIU、約20MIU、約22.0MIU、約24.0MIU、約26.0MIU、約28.0MIU、約30.0MIU、約32.0MIU、約34.0MIU、約36.0MIU、約38.0MIU、約40.0MIU、約42.0MIU、約44.0MIU、約46.0MIU、約48.0MIU、約50.0MIU、約52.0MIU、または約54.0MIU、および約18MIU~約54MIUの範囲内に収まる他のこのような用量である。いくつかの実施形態において、Proleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、約42.0MIU~約54.0MIUの範囲内例えば、42.0MIU、44.0MIU、46.0MIU、48.0MIU、50.0MIU、52.0MIU、または54.0MIUに収まる。他の実施形態において、Proleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、約30.0MIU~約42.0MIUの範囲内例えば、30.0MIU、32.0MIU、34.0MIU、36.0MIU、38.0MIU、40.0MIU、または42.0MIUに収まる。代替的な実施形態において、Proleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、約18.0MIU~約30.0MIUの範囲内例えば、18.0MIU、20.0MIU、22.0MIU、24.0MIU、26.0MIU、28.0MIU、または30.0MIUに収まる。これまでに記載されたように、一定のIL-2投薬レジメン中のIL-2の1週間の総用量は、単回投与として投与されても1週間に2回投与の投与計画、1週間に3回投与の投与計画、1週間に4回投与の投与計画、1週間に5回投与の投与計画、1週間に6回投与の投与計画、または1週間に7回投与の投与計画にしたがって投与される等用量の系列に分割されてもよい。したがって、例えば、Proleukin登録商標IL-2の1週間の総用量が、54.0MIUである場合、それぞれの週の間に投与されるべきこのIL-2の供給源の3つの等用量は、18.0MIUであり得、そしてそれぞれの週の間に投与されるべきこのIL-2の供給源の2つの等用量は、27.0MIUであり得る。同様に、Proleukin登録商標IL-2の1週間の総用量が、42.0MIUである場合、それぞれの週の間に投与されるべきこのIL-2の供給源の3つの等用量は、14.0MIUであり得、そしてそれぞれの週の間に投与されるべきこのIL-2の供給源の2つの等用量は、21.0MIUであり得る。Proleukin登録商標IL-2の1週間の総用量が、30.0MIUである場合、それぞれの週の間に投与されるべきこのIL-2の供給源の3つの等用量は、10.0MIUであり得、そしてそれぞれの週の間に投与されるべきこのIL-2の供給源の2つの等用量は、15.0MIUであり得る。同様に、Proleukin登録商標IL-2の1週間の総用量が、18.0MIUである場合、それぞれの週の間に投与されるべきこのIL-2の供給源の3つの等用量は、6.0MIUであり得、そしてそれぞれの週の間に投与されるべきこのIL-2の供給源の2つの等用量は、9.0MIUであり得る。本発明の方法にしたがって、上記被検体は、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量と組み合わせて、この一定のIL-2投薬レジメンを投与され、この抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、本明細書中に開示される投薬レジメンにしたがってすなわち、処置期間を通してかもしくは処置期間内の決められた持続期間の間、1週間に1度、2週間に1度、3週間に1度、または4週間に1度投与される。投与されるべき抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、約0.003mg/kg~約50mg/kgの範囲約0.5mg/kg~約30mg/kgが挙げられるである。したがって、例えば、いくつかの実施形態において、抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの全量は、約0.003mg/kg、約0.01mg/kg、約0.03mg/kg、約0.1mg/kg、約0.3mg/kg、約0.5mg/kg、約1mg/kg、約1.5mg/kg、約2mg/kg、約2.5mg/kg、約3mg/kg、約5mg/kg、約7mg/kg、約10mg/kg、約15mg/kg、約20mg/kg、約25mg/kg、約30mg/kg、約35mg/kg、約40mg/kg、約45mg/kg、約50mg/kg、または約0.003mg/kg~約50mg/kgの範囲内に収まる他のこのような用量である。したがって、例えば、いくつかの実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンの一部として1週間あたりに投与されるべきProleukin登録商標IL-2の全量は、約42.0MIU、約44.0MIU、約46.0MIU、約48.0MIU、約50.0MIU、約52.0MIU、または約54.0MIUであり、そして一定のIL-2投薬レジメンと組み合わせて投与されるべきアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、約0.5mg/kg、約1mg/kg、約1.5mg/kg、約2mg/kg、約2.5mg/kg、約3mg/kg、約5mg/kg、約7mg/kg、約10mg/kg、約15mg/kg、約20mg/kg、約25mg/kg、約30mg/kg、約35mg/kg、約40mg/kg、約45mg/kg、または約50mg/kgであり、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントのこの用量は、処置期間を通してかもしくは処置期間内の決められた持続期間の間、1週間に1度か、2週間に1度か、3週間に1度か、もしくは4週間に1度投与される。1つのこのような実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンの一部として1週間あたりに投与されるべきProleukin登録商標IL-2の全量は、約42MIUであり、そして一定のIL-2投薬レジメンと組み合わせて投与されるべきアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、約0.5mg/kg、約1mg/kg、約5mg/kg、約7mg/kg、約10mg/kg、約15mg/kg、約20mg/kg、約25mg/kg、約30mg/kg、または約35mg/kgであり、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントのこの用量は、処置期間を通してかもしくは処置期間内の決められた持続期間の間、1週間に1度か、2週間に1度か、3週間に1度か、もしくは4週間に1度投与される。好ましい実施形態において、42.0MIUのProleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、それぞれ、1週間に2回投与の投与計画かもしくは1週間に3回投与の投与計画にしたがって投与される、2つの等用量または3つの等用量に分割される。この様式において、一定のIL-2投薬レジメンの各週の間に投与されるべきこのIL-2の供給源の2つの等用量は、21.0MIUであり得、そして一定のIL-2投薬レジメンの各週の間に投与されるべきこのIL-2の供給源の3つの等用量は、14.0MIUであり得る。他の実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンの一部として1週間あたりに投与されるべきProleukin登録商標IL-2の全量は、約30.0MIU、約32.0MIU、約34.0MIU、約36.0MIU、約38.0MIU、約40.0MIU、または約42.0MIUであり、そして一定のIL-2投薬レジメンと組み合わせて投与されるべきアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、約0.5mg/kg、約1mg/kg、約1.5mg/kg、約2mg/kg、約2.5mg/kg、約3mg/kg、約5mg/kg、約7mg/kg、約10mg/kg、約15mg/kg、約20mg/kg、約25mg/kg、約30mg/kg、約35mg/kg、約40mg/kg、約45mg/kg、または約50mg/kgであり、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントのこの用量は、処置期間を通してかもしくは処置期間内の決められた持続期間の間、1週間に1度か、2週間に1度か、3週間に1度か、もしくは4週間に1度投与される。1つのこのような実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンの一部として1週間あたりに投与されるべきProleukin登録商標IL-2の全量は、約30.0MIUであり、そして一定のIL-2投薬レジメンと組み合わせて投与されるべきアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、約0.5mg/kg、約1mg/kg、約5mg/kg、約7mg/kg、約10mg/kg、約15mg/kg、約20mg/kg、約25mg/kg、約30mg/kg、または約35mg/kgであり、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントのこの用量は、処置期間を通してかもしくは処置期間内の決められた持続期間の間、1週間に1度か、2週間に1度か、3週間に1度か、もしくは4週間に1度投与される。好ましい実施形態において、30.0MIUのProleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、それぞれ、1週間に2回投与の投与計画かもしくは1週間に3回投与の投与計画にしたがって投与される、2つの等用量または3つの等用量に分割される。この様式において、一定のIL-2投薬レジメンの各週の間に投与されるべきこのIL-2の供給源の2つの等用量は、15.0MIUであり得、そして一定のIL-2投薬レジメンの各週の間に投与されるべきこのIL-2の供給源の3つの等用量は、10.0MIUであり得る。なお他の実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンの一部として1週間あたりに投与されるべきProleukin登録商標IL-2の全量は、約18.0MIU、約20MIU、約22.0MIU、約24.0MIU、約26.0MIU、約28.0MIU、または約30.0MIUであり、そして一定のIL-2投薬レジメンと組み合わせて投与されるべきアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、約0.5mg/kg、約1mg/kg、約1.5mg/kg、約2mg/kg、約2.5mg/kg、約3mg/kg、約5mg/kg、約7mg/kg、約10mg/kg、約15mg/kg、約20mg/kg、約25mg/kg、約30mg/kg、約35mg/kg、約40mg/kg、約45mg/kg、または約50mg/kgであり、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントのこの用量は、処置期間を通してかもしくは処置期間内の決められた持続期間の間、1週間に1度か、2週間に1度か、3週間に1度か、もしくは4週間に1度投与される。1つのこのような実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンの一部として1週間あたりに投与されるべきProleukin登録商標IL-2の全量は、約18.0MIUであり、そして一定のIL-2投薬レジメンと組み合わせて投与されるべきアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、約0.5mg/kg、約1mg/kg、約5mg/kg、約7mg/kg、約10mg/kg、約15mg/kg、約20mg/kg、約25mg/kg、約30mg/kg、または約35mg/kgであり、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントのこの用量は、処置期間を通してかもしくは処置期間内の決められた持続期間の間、1週間に1度か、2週間に1度か、3週間に1度か、もしくは4週間に1度投与される。好ましい実施形態において、18.0MIUのProleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、それぞれ、1週間に2回投与の投与計画かもしくは1週間に3回投与の投与計画にしたがって投与される、2つの等用量または3つの等用量に分割される。この様式において、一定のIL-2投薬レジメンの各週の間に投与されるべきこのIL-2の供給源の2つの等用量は、9.0MIUであり得、そして一定のIL-2投薬レジメンの各週の間に投与されるべきこのIL-2の供給源の3つの等用量は、6.0MIUであり得る。2つのレベルのIL-2投薬レジメンについて推奨される用量Proleukin登録商標IL-2が、アンタゴニスト抗CD40抗体と組み合わせて、2つのレベルのIL-2投薬レジメンにしたがって投与されるべきである場合、このIL-2投薬レジメンの第1の期間中に投与される参照IL-2標準のより高い1週間の総用量は、約30.0MIU~約54.0MIUであり、そしてこのIL-2投薬レジメンの第2の期間中に投与される参照IL-2標準のより低い1週間の総用量は、約18.0MIU~約39.0MIUである。これまでに記載されたように、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中例えば、この投薬レジメンの前半の間に投与される1週間の総用量は、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中例えば、この投薬レジメンの後半の間に投与される1週間の総用量より常に高い。したがって、いくつかの実施形態において、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中に投与されるProleukin登録商標IL-2のより高い1週間の総用量は、約30.0MIU~約54.0MIU約30.0MIU、約32.0MIU、約35.0MIU、約37.0MIU、約40.0MIU、約42.0MIU、約45.0MIU、約47.0MIU、約50.0MIU、約52.0MIU、または約54.0MIUおよびこのより高い投薬範囲内に収まる他のこのような値が挙げられるであり;そしてProleukin登録商標IL-2のより低い1週間の総用量は、約18.0MIU~約39.0MIU約18.0MIU、約20.0MIU、約23.0MIU、約25.0MIU、約27.0MIU、約30.0MIU、約32.0MIU、約35.0MIU、約37.0MIU、または約39.0MIUおよびこのより低い投薬範囲内に収まる他のこのような値が挙げられるである。これまでに記載されたように、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間および第2の期間中の1週間の総用量は、単回投与として投与されるか、または1週間に2回投与の投与計画、1週間に3回投与の投与計画、1週間に4回投与の投与計画、1週間に5回投与の投与計画、1週間に6回投与の投与計画、または1週間に7回投与の投与計画にしたがって投与される等用量の系列に分割される。したがって、例えば、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中のProleukin登録商標IL-2の1週間の総用量が、42.0MIUである場合、各週の間に投与されるべきこの参照IL-2標準の3つの等用量は、14.0MIUであり得、そして各週の間に投与されるべきこの参照IL-2標準の2つの等用量は、21.0MIUであり得る。同様に、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中のProleukin登録商標IL-2の1週間の総用量が、30.0MIUである場合、各週の間に投与されるべきこの参照IL-2標準の3つの等用量は、10.0MIUであり得、そして各週の間に投与されるべきこの参照IL-2標準の2つの等用量は、15.0MIUであり得る。本発明の方法にしたがって、上記被検体は、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量と組み合わせてこの2つのレベルのIL-2投薬レジメンを投与され、この抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、処置期間を通してかまたは処置期間内の決められた持続期間の間、1週間に1度か、2週間に1度か、3週間に1度か、もしくは4週間に1度投与される。投与されるべき抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、約0.003mg/kg~約50mg/kgの範囲約0.1mg/kg~約30mg/kgが挙げられるである。したがって、例えば、いくつかの実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、約0.003mg/kg、約0.01mg/kg、約0.03mg/kg、約0.1mg/kg、約0.3mg/kg、約0.5mg/kg、約1mg/kg、約1.5mg/kg、約2mg/kg、約2.5mg/kg、約3mg/kg、約5mg/kg、約7mg/kg、約10mg/kg、約15mg/kg、約20mg/kg、約25mg/kg、約30mg/kg、約35mg/kg、約40mg/kg、約45mg/kg、約50mg/kg、または約0.003mg/kg~約50mg/kgの範囲内に収まる他のこのような用量である。1つの実施形態において、上記されるようなアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、処置期間を通してかまたは処置期間内の決められた持続期間について、1週間に1度か、2週間に1度か、3週間に1度か、もしくは4週間に1度投与され、そしてこのアンタゴニスト抗CD40抗体投薬レジメンと組み合わせて投与されるべきである2つのレベルのIL-2投薬レジメンは、合わせて4週間~8週間の持続期間を有し、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中に投与されるProleukin登録商標IL-2のより高い1週間の総用量は、約30.0MIU~約54.0MIU例えば、約30.0MIU、約32.0MIU、約34.0MIU、約36.0MIU、約38.0MIU、約40.0MIU、約42.0MIU、約45.0MIU、約47.0MIU、約50.0MIU、約52.0MIU、または約54.0MIUであり、そして2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中に投与されるProleukin登録商標IL-2のより低い1週間の総用量は、約18.0MIU~約39MIU例えば、約18.0MIU、約20.0MIU、約22.0MIU、約24.0MIU、約26.0MIU、約28.0MIU、約30.0MIU、約32.0MIU、約35.0MIU、約37.0MIU、または約39.0MIUである。1つのこのような実施形態において、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中に投与されるProleukin登録商標IL-2のより高い1週間の総用量は、42.0MIUであり、そして2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中に投与されるProleukin登録商標IL-2のより低い1週間の総用量は、30.0MIUである。したがって、例えば、いくつかの実施形態において、上記被検体は、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの毎週の投与および合わせて8週間の持続期間を有する2つのレベルのIL-2投薬レジメンによる同時療法を受ける。この特定の実施形態において、IL-2投薬は、2週間目の1日目すなわち、この処置期間の1日目のアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントによる最初の投薬後の8日目に始まる。この様式において、この処置期間の2週間目~5週間目の間に投与されるべきProleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、約30.0MIU~約54.0MIU例えば、約30.0MIU、約32.0MIU、約35.0MIU、約37.0MIU、約40.0MIU、約42.0MIU、約45.0MIU、約47.0MIU、約50.0MIU、約52.0MIU、もしくは約54.0MIU、またはこのより高い投薬範囲内に収まる他のこのような値である。この実施形態において、この処置期間の6週間目から9週間目の間に投与されるべきProleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、約18.0MIU~約39.0MIU例えば、約18.0MIU、約20.0MIU、約22.0MIU、約24.0MIU、約26.0MIU、約28.0MIU、約30.0MIU、約32.0MIU、約35.0MIU、約37.0MIU、または約39.0MIU、およびこの範囲内に収まる他のこのような値である。これまでに記載されたように、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間および第2の期間中に投与されるべき1週間の総用量は、より高い1週間の総用量が2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間例えば、9週間の処置期間の2週間目~5週間目中に投与され、そしてより低い1週間の総用量が2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間例えば、同じ9週間の処置期間の6週間目~9週間目中に投与されるように、これらの範囲内から選択される。したがって、例えば、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中のIL-2の1週間の総用量が、約42.0MIU~約54.0MIUである場合、IL-2投薬の第2の期間中のProleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、好ましくは約18.0MIU~約39.0MIUの範囲内に収まる。したがって、毎週のアンタゴニスト抗CD40抗体投薬と2つのレベルのIL-2投薬レジメンとの同時療法による処置期間の持続期間が、約9週間である場合、1つの実施形態において、処置期間の2週間目~5週間目の間の、Proleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、約30.0MIU~約54.0MIUであるか、または約30.0MIU~約42.0MIUであり、そしてこの処置期間の6週間目~9週間目の間の、Proleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、約18.0MIU~約30.0MIUである。1つの実施形態において、2週間目~5週間目の間の、Proleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、約42.0MIUであり、そして6週間目~9週間目の間の、Proleukin登録商標IL-2の1週間の総用量は、約30.0MIUである。この実施形態において、Proleukin登録商標IL-2のより高い1週間の総用量およびより低い1週間の総用量の各々は、1週間に2回投与の投与計画にしたがって投与される2つの等用量に分割され、この2つの等用量は、7日間の期間内に被検体に投与され、この期間は、用量と用量との間に最小で72時間および用量と用量との間に最大で96時間を許容する。代替的な実施形態において、Proleukin登録商標IL-2のより高い1週間の総用量およびより低い1週間の総用量の各々は、1週間に3回投与の投与計画にしたがって投与される3つの等用量に分割され、この3つの等用量は、7日間の期間内に被検体に投与され、この期間は、用量と用量との間に最小で25時間および用量と用量との間に最大で72時間を許容する。上記されるように、2つのレベルのIL-2投薬レジメンと組み合わせて投与されるべきアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、約0.003mg/kg、約0.01mg/kg、約0.03mg/kg、約0.1mg/kg、約0.3mg/kg、約0.5mg/kg、約1mg/kg、約1.5mg/kg、約2mg/kg、約2.5mg/kg、約3mg/kg、約5mg/kg、約7mg/kg、約10mg/kg、約15mg/kg、約20mg/kg、約25mg/kg、約30mg/kg、約35mg/kg、約40mg/kg、約45mg/kg、約50mg/kg、または約0.003mg/kg~約50mg/kgの範囲内に収まる他のこのような用量であり、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントのこの用量は、処置期間を通してかまたはこの処置期間内の4週間から8週間の決められた持続期間の間のいずれかにおいて、毎週投与される。代替的な実施形態において、この抗体またはその抗原結合フラグメントの治療有効用量は、処置期間を通して1週間に1度か、2週間に1度か、3週間に1度か、もしくは4週間に1度投与されるか、またはこの処置期間内の4週間~8週間の決められた持続期間の間、2週間に1度投与され、この被検体はまた、上記される2つのレベルのIL-2投薬レジメンを投与される。IL-2投薬についての絶対的用量に対する相対的用量Proleukin登録商標IL-2の前述の1週間の総用量は、MIUに関して表され、これは、1週間の基準において、ヒト被検体に投与されるべき全量または絶対的用量を示す。人間に投与されるべきProleukin登録商標IL-2の対応する相対的な1週間の総用量は、容易に算出され得る。平均的な人間は、約1.7m2の体表面積を有する。したがって、投与されるべきProleukin登録商標IL-2の絶対的な1週間の総用量は、約42.0MIU~約54.0MIUであり、Proleukin登録商標IL-2の対応する相対的な1週間の総用量は、約24.7MIU/m2~約31.8MIU/m2である。同様に、絶対的な1週間の総用量が、約30.0MIU~42.0MIUである場合、対応する相対的な1週間の総用量は、約17.6MIU/m2~約24.7MIU/m2である。絶対的な1週間の総用量が、約18.0MIU~約30.0MIUである場合、対応する相対的な1週間の総用量は、約10.6MIU/m2~約17.6MIU/m2である。IL-2の生物学的活性に対する国際単位IUは、世界保健機関WHOのInternationalLaboratoryforBiologicalStandardsによって1988年に確立された。WHOに属するNationalInstituteforBiologicalStandardsandControlNIBSCによって提供されるIL-2の生物学的な標準物質は、ネイティブなヒトのジャーカット細胞由来のIL-2の1アンプルあたり100国際単位を有する。IL-2製品の活性は、HT-2細胞増殖によるインビトロの効力検定においてこの国際標準に対して測定され得る。したがって、例えば、Proleukin登録商標IL-2は、HT-2細胞増殖アッセイ例えば、GearingおよびThorpe、1988J.ImmunologicalMethods114:3-9;Nakanishiら、1984J.Exp.Med.1606:1605-1621を参照のことによって決定されるようにこのIL-2製品の1mgあたり約16.36MIUの生物学的活性を有する。この製品に使用される活性部分は、組換えヒトIL-2ムテインアルデスロイキンデス-アラニル-1,セリン-125ヒトインターロイキン-2とも称される;本明細書中に参考として援用される米国特許第4,931,543号を参照のことである。この情報を使用して、推奨される治療的に有効なProleukin登録商標IL-2絶対的用量が、マイクログラムで算出され得る。したがって、Proleukin登録商標IL-2の絶対的な1週間の総用量は、約18.0MIU~約54.0MIUである場合、マイクログラムでのProleukin登録商標IL-2の絶対的な1週間の総用量は、この製品の約1100μg~約3300μgである。同様に、Proleukin登録商標IL-2の絶対的な1週間の総用量は、約18.0MIU~約30.0MIUである場合、マイクログラムでのProleukin登録商標IL-2の絶対的な1週間の総用量は、この製品の約1100μg~約1834μgである。Proleukin登録商標IL-2の絶対的な1週間の総用量は、約30.0MIU~約42.0MIUである場合、マイクログラムでのProleukin登録商標IL-2の絶対的な1週間の総用量は、この製品の約1833μg~約2567μgである。したがって、MIUで表されるProleukin登録商標IL-2の絶対的な1週間の総用量が与えられる場合、当業者は、この特定のIL-2製品のμgで表される対応する絶対的な1週間の総用量を容易に計算し得る。異なるアルデスロイキン処方物についてのIL-2用量の算出本発明を記載する目的のために、IL-2の用量は、参照IL-2標準としてのProleukin登録商標IL-2を使用して示されてきた。当業者は、Proleukin登録商標IL-2について24時間の間に収集された薬物動態PKデータおよびPKデータに対する血清濃度-時間曲線AUCの比較に基づく変換係数を使用して、異なるアルデスロイキン処方物および異なる投与経路について対応する用量を容易に決定し得る。PKデータを使用して、参照IL-2標準の単回投与を投与されたヒト被検体におけるIL-2への曝露が、決定された。これらの被検体は、それらが外因性のIL-2療法をこれまでに受容しなかったすなわち、これらの被検体がIL-2療法に対してナイーブであるように選択された。外因性のIL-2療法によって、被検体が、天然に存在するIL-2の身体での産生によって生じる曝露と対照的にIL-2の外因性の供給源に対して曝されることによる、任意の干渉が意図される。これらの被検体の一部は、参照IL-2標準の4.5MIUの単回投与を受容する一方で、他の被検体は、参照IL-2標準の7.5MIUまたは18.0MIUの単回投与を受容した。参照IL-2標準の単回投与の投与後、血清中のIL-2の曝露は、最初に注入後10時間~12時間にわたってモニタリングされ、次いで24時間に対して外挿され、そしてその24時間の間に収集されたデータについて生じる血清濃度-時間曲線下面積AUCが、算出された。この血清濃度-時間曲線下面積は、本明細書中でAUC0-24と称される。この様式においてIL-2の曝露を測定するための方法は、当該分野において周知である。例えば、Gustavson、1998J.Biol.ResponseModifiers1998:440-449;Thompsonら、1987CancerResearch47:4202-4207;Kirchnerら、1998Br.J.Clin.Pharmacol.46:5-10;Piscitelliら、1996Pharmacotherapy165:754-759;および以下の実施例8を参照のこと。したがって、Proleukin登録商標IL-2の4.5MIU275μgの用量を受容するこれらの被検体に関して、AUC0-24値は、51IU時/mlSD=14であり;Proleukin登録商標IL-2の7.5MIU458μgの用量を受容するこれらの被検体に関して、AUC0-24値は、79IU時/mlSD=29であり;Proleukin登録商標IL-2の18.0MIU1100μgの用量を受容するこれらの被検体に関して、AUC0-24値は、344IU時/mlSD=127であった。このようなAUC0-24データは、参照IL-2標準Proleukin登録商標IL-2について決定され、本明細書中に記載される治療有効用量は、約23IU時間/1ml血清~約59823IU時間/1ml血清の範囲内のIL-2の曝露を生じる以下の実施例8を参照のこと。個々の用量から得た個々のAUC0-24の合計は、分割された個々の用量における1週間の総AUC0-24を含む。例えば、18MIUの用量が、1週間に3回投与される場合、個々のAUC0-24は、344IU時/mlと見積もられ、そして1週間の総AUC0-24は、以下の表1に示されるような用量によって上昇したAUC0-24の線形仮説に基づいて、1032IU時/mlと見積もられる。表1:Proleukin登録商標IL-2の投与後に得られたAUC0-24値1032IU時/mlの同じ1週間の総AUC0-24はまた、27MIUにて1週間に2回の投薬または約11MIUにて1週間に5回の投薬によって得られ得る。任意の他のアルデスロイキン処方物に関して、本発明の方法において使用するための比較可能な推奨される用量は、Proleukin登録商標IL-2についてのこのAUC0-24データに基づいて決定され得る。この様式において、目的のアルデスロイキン処方物の単回投与が、ヒト被検体に投与される。この初回のIL-2の曝露後の血清中のIL-2のレベルは、PKデータを収集することおよび目的のアルデスロイキン処方物についてAUC0-24を得ることによって決定される。初回のIL-2の曝露によって、IL-2の曝露を測定するのに使用される被検体が、上記されるようなIL-2の外来性の供給源による治療を受けなかったことが意図される。その後、このAUC0-24は、Proleukin登録商標IL-2について推奨される用量に相当する、目的のアルデスロイキン処方物の用量を算出するのに使用され得る変換係数を決定するために、Proleukin登録商標IL-2についてのAUC0-24と比較される。例えば、以下の実施例8に示される代表的なモノマーのIL-2処方物L2-7001についての算出を参照のこと。したがって、本発明の方法に使用される他のアルデスロイキンのいずれかに関して、一定のIL-2投薬レジメンの間か、または2つのレベルのIL-2投薬レジメンの間に投与されるべきIL-2の1週間の総用量は、ヒトのPKデータから得られる血清濃度-時間曲線下面積によって決定されるような、参照IL-2標準すなわち、Proleukin登録商標IL-2の推奨される1週間の総用量に対して等価な量である。異なるIL-2分子についてのIL-2用量の算出IL-2の生物学的に活性な改変体は、変化した固有の生物学的活性を有し得る。例えば、発明の名称ImprovedInterleukin-2Muteinsである、2004年3月5日に出願され、そして米国特許出願第60/550,868号を割り当てられた同時係属中の仮特許出願;および発明の名称CombinatorialInterleukin-2Muteinsである、2004年7月7日に出願され、そして米国特許出願第60/585,980号を割り当てられた同時係属中の仮特許出願これらの内容は、その全体が本明細書中に参考として援用されるに記載されるIL-2ムテインを参照のこと。アルデスロイキン以外のIL-2改変体の用量または本明細書中に開示されるアルデスロイキンの用量に相当するネイティブな配列のIL-2の用量を見積もるために、IL-2改変体またはネイティブな配列のIL-2の相対的な生物学的活性が、その生物学的効果を試験することによって決定されるべきである。本発明のIL-2またはその改変体の相対的な生物学的活性は、リンホカイン活性化キラー細胞LAK活性および抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCを媒介するヒトNK細胞の増殖を活性化および/または達成する能力である。このような活性は、Naglerら、1989J.Immunol.143:3183-3191に開示されるアッセイのような標準的なアッセイを使用して測定される。アルデスロイキンではないIL-2改変体の適切な用量またはネイティブな配列のIL-2の適切な用量を決定するために、目的のIL-2分子すなわち、アルデスロイキン以外のIL-2改変体またはネイティブな配列のIL-2の一連の用量が、同じ投与経路によってヒト被検体に投与され、そして被検体から新しく単離されたPBMC末梢血単核球は、例えば、上述のNaglerら、1989に記載されるようなK562細胞に対するNK細胞障害性について試験される。試験されるIL-2分子のNK刺激効果は、試験されるIL-2分子について記載される同じ手順を使用する同じ投与経路によって、同じμgの量で投与される場合に、参照IL-2標準すなわち、Proleukin登録商標中に処方されるようなアルデスロイキンのNK刺激効果と比較される。あるいは、適切な用量は、目的のIL-2分子の一連の用量に供される未処理のヒトPBMCを使用して、インビトロで決定され得る。目的のIL-2分子すなわち、アルデスロイキン以外のIL-2改変体またはネイティブな配列のIL-2は、参照IL-2標準すなわち、Proleukin登録商標中に処方されるようなアルデスロイキンの同じ量のNK細胞刺激能力の、好ましくは少なくとも100であるNK細胞刺激能力を有するか、または参照IL-2標準の同じ量のNK細胞刺激能力の95、90、80、70または60のNK細胞刺激能力を有する。IL-2改変体は、十分に生物学的に活性同じ経路によって投与される、同じ用量の参照IL-2標準の少なくとも50のNK刺激活性を有するとして定義されるであるべきである。したがって、被検体が、アンタゴニスト抗CD40抗体と一定のIL-2投薬レジメンとの併用療法を受容する場合、任意のIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μgすなわち、18.0MIU~約3300μgすなわち、約54.0MIUの範囲にあり、好ましくは約1100μg~約2567μgすなわち、約42.0MIUの範囲にある参照IL-2標準すなわち、Proleukin登録商標中に処方されるようなアルデスロイキンの1週間の総用量に対して等価な量であり、IL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、参照IL-2標準すなわち、Proleukin登録商標中に処方されるようなアルデスロイキンの1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも50を提供する量である。いくつかの実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンにおいて投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μg~約3300μgの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも60例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1345μg22.0MIU、約1467μg24.0MIU、約1589μg26.0MIU、約1711μg28.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32.0MIU、約2078μg34.0MIU、約2200μg36.0MIU、約2323μg38.0MIU、約2445μg40.0MIU、約2567μg42.0MIU、約2689μg44.0MIU、約2812μg46.0MIU、約2934μg48.0MIU、約3056μg50.0MIU、約3178μg52.0MIU、または約3300μg54.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも60を提供する量である。他の実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンにおいて投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μg~約3300μgの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも70例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1345μg22.0MIU、約1467μg24.0MIU、約1589μg26.0MIU、約1711μg28.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32.0MIU、約2078μg34.0MIU、約2200μg36.0MIU、約2323μg38.0MIU、約2445μg40.0MIU、約2567μg42.0MIU、約2689μg44.0MIU、約2812μg46.0MIU、約2934μg48.0MIU、約3056μg50.0MIU、約3178μg52.0MIU、または約3300μg54.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも70を提供する量である。いくつかの実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンにおいて投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μg~約3300μgの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも80例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1345μg22.0MIU、約1467μg24.0MIU、約1589μg26.0MIU、約1711μg28.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32.0MIU、約2078μg34.0MIU、約2200μg36.0MIU、約2323μg38.0MIU、約2445μg40.0MIU、約2567μg42.0MIU、約2689μg44.0MIU、約2812μg46.0MIU、約2934μg48.0MIU、約3056μg50.0MIU、約3178μg52.0MIU、または約3300μg54.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも80を提供する量である。代替的な実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンにおいて投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μg~約3300μgの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも90例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1345μg22.0MIU、約1467μg24.0MIU、約1589μg26.0MIU、約1711μg28.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32.0MIU、約2078μg34.0MIU、約2200μg36.0MIU、約2323μg38.0MIU、約2445μg40.0MIU、約2567μg42.0MIU、約2689μg44.0MIU、約2812μg46.0MIU、約2934μg48.0MIU、約3056μg50.0MIU、約3178μg52.0MIU、または約3300μg54.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも90を提供する量である。なお他の実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンにおいて投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μg~約3300μgの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも95例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1345μg22.0MIU、約1467μg24.0MIU、約1589μg26.0MIU、約1711μg28.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32.0MIU、約2078μg34.0MIU、約2200μg36.0MIU、約2323μg38.0MIU、約2445μg40.0MIU、約2567μg42.0MIU、約2689μg44.0MIU、約2812μg46.0MIU、約2934μg48.0MIU、約3056μg50.0MIU、約3178μg52.0MIU、または約3300μg54.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも95を提供する量である。いくつかの実施形態において、一定のIL-2投薬レジメンにおいて投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μg~約3300μgの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも100例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1345μg22.0MIU、約1467μg24.0MIU、約1589μg26.0MIU、約1711μg28.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32.0MIU、約2078μg34.0MIU、約2200μg36.0MIU、約2323μg38.0MIU、約2445μg40.0MIU、約2567μg42.0MIU、約2689μg44.0MIU、約2812μg46.0MIU、約2934μg48.0MIU、約3056μg50.0MIU、約3178μg52.0MIU、または約3300μg54.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも100を提供する量である。同様の様式において、被検体が、アンタゴニスト抗CD40抗体と2つのレベルのIL-2投薬レジメンとの併用療法を受容する場合に、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中かまたは第2の期間中に投与されるべき任意のIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの間に投与される参照IL-2標準の1週間の総用量と等価な量として表され得る。したがって、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中に投与されるべき任意のIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1834μgすなわち、30.0MIU~約3300μgすなわち、約54.0MIUの範囲にある参照IL-2標準すなわち、Proleukin登録商標中に処方されるようなアルデスロイキンの1週間の総用量と等価な量であり、IL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、参照IL-2標準すなわち、Proleukin登録商標中に処方されるようなアルデスロイキンの1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも50を提供する量である。同様に、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中に投与されるべき任意のIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μgすなわち、18.0MIU~約2384μgすなわち、約39.0MIUの範囲にある参照IL-2標準すなわち、Proleukin登録商標中に処方されるようなアルデスロイキンの1週間の総用量と等価な量であり、IL-2またはその生物学的に活性な改変体の総用量は、参照IL-2標準すなわち、Proleukin登録商標中に処方されるようなアルデスロイキンの1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも50を提供する量である。これまでに記載されたように、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中例えば、この投薬レジメンの前半の間に投与される1週間の総用量は、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中例えば、この投薬レジメンの後半の間に投与される1週間の総用量より常に高い。したがって、いくつかの実施形態において、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1834μgすなわち、30.0MIU~約3300μgすなわち、約54.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも60例えば、1834μg30.0MIU、約1956μg32.0MIU、約2078μg34.0MIU、約2200μg36.0MIU、約2323μg38.0MIU、約2445μg40.0MIU、約2567μg42.0MIU、約2689μg44.0MIU、約2812μg46.0MIU、約2934μg48.0MIU、約3056μg50.0MIU、約3178μg52.0MIU、または約3300μg54.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも60を提供する量である。これらの実施形態に関して、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μgすなわち、18.0MIU~約2384μgすなわち、約39.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも60例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1406μg23.0MIU、約1528μg25.0MIU、約1650μg27.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32.0MIU、約2139μg35.0MIU、約2262μg37.0MIU、または約2384μg39.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも60を提供する量である。あるいは、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μgすなわち、18.0MIU~約2384μgすなわち、約39.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも70か、少なくとも80か、少なくとも90か、少なくとも95か、または100さえも例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1406μg23.0MIU、約1528μg25.0MIU、約1650μg27.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32MIU、約2139μg35.0MIU、約2262μg37.0MIU、または約2384μg39.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも70か、少なくとも80か、少なくとも90か、少なくとも95か、または100さえも提供する量である。他の実施形態において、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1834μgすなわち、30.0MIU~約3300μgすなわち、約54.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも70例えば、1834μg30.0MIU、約1956μg32.0MIU、約2078μg34.0MIU、約2200μg36.0MIU、約2323μg38.0MIU、約2445μg40.0MIU、約2567μg42.0MIU、約2689μg44.0MIU、約2812μg46.0MIU、約2934μg48.0MIU、約3056μg50.0MIU、約3178μg52.0MIU、または約3300μg54.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも70を提供する量である。これらの実施形態に関して、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μgすなわち、18.0MIU~約2384μgすなわち、約39.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも60例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1406μg23.0MIU、約1528μg25.0MIU、約1650μg27.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32MIU、約2139μg35.0MIU、約2262μg37.0MIU、または約2384μg39.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも60を提供する量である。あるいは、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μgすなわち、18.0MIU~約2384μgすなわち、約39.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも70か、少なくとも80か、少なくとも90か、少なくとも95か、または100さえも例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1406μg23.0MIU、約1528μg25.0MIU、約1650μg27.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32MIU、約2139μg35.0MIU、約2262μg37.0MIU、または約2384μg39.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも70か、少なくとも80か、少なくとも90か、少なくとも95か、または100さえも提供する量である。なお他の実施形態において、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1834μgすなわち、30.0MIU~約3300μgすなわち、約54.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも80例えば、1834μg30.0MIU、約1956μg32.0MIU、約2078μg34.0MIU、約2200μg36.0MIU、約2323μg38.0MIU、約2445μg40.0MIU、約2567μg42.0MIU、約2689μg44.0MIU、約2812μg46.0MIU、約2934μg48.0MIU、約3056μg50.0MIU、約3178μg52.0MIU、または約3300μg54.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも80を提供する量である。これらの実施形態に関して、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μgすなわち、18.0MIU~約2384μgすなわち、約39.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも60例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1406μg23.0MIU、約1528μg25.0MIU、約1650μg27.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32.0MIU、約2139μg35.0MIU、約2262μg37.0MIU、または約2384μg39.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも60を提供する量である。あるいは、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μgすなわち、18.0MIU~約2384μgすなわち、約39.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも70か、少なくとも80か、少なくとも90か、少なくとも95か、または100さえも例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1406μg23.0MIU、約1528μg25.0MIU、約1650μg27.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32.0MIU、約2139μg35.0MIU、約2262μg37.0MIU、または約2384μg39.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも70か、少なくとも80か、少なくとも90か、少なくとも95か、または100さえも提供する量である。代替的な実施形態において、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1834μgすなわち、30.0MIU~約3300μgすなわち、約54.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも90例えば、1834μg30.0MIU、約1956μg32.0MIU、約2078μg34.0MIU、約2200μg36.0MIU、約2323μg38.0MIU、約2445μg40.0MIU、約2567μg42.0MIU、約2689μg44.0MIU、約2812μg46.0MIU、約2934μg48.0MIU、約3056μg50.0MIU、約3178μg52.0MIU、または約3300μg54.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも90を提供する量である。これらの実施形態に関して、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μgすなわち、18.0MIU~約2384μgすなわち、約39.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも60例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1406μg23.0MIU、約1528μg25.0MIU、約1650μg27.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32MIU、約2139μg35.0MIU、約2262μg37.0MIU、または約2384μg39.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも60を提供する量である。あるいは、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μgすなわち、18.0MIU~約2384μgすなわち、約39.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも70か、少なくとも80か、少なくとも90か、少なくとも95か、または100さえも例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1406μg23.0MIU、約1528μg25.0MIU、約1650μg27.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32MIU、約2139μg35.0MIU、約2262μg37.0MIU、または約2384μg39.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも70か、少なくとも80か、少なくとも90か、少なくとも95か、または100さえも提供する量である。さらに他の実施形態において、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1834μgすなわち、30.0MIU~約3300μgすなわち、約54.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも95例えば、1834μg30.0MIU、約1956μg32.0MIU、約2078μg34.0MIU、約2200μg36.0MIU、約2323μg38.0MIU、約2445μg40.0MIU、約2567μg42.0MIU、約2689μg44.0MIU、約2812μg46.0MIU、約2934μg48.0MIU、約3056μg50.0MIU、約3178μg52.0MIU、または約3300μg54.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも95を提供する量である。これらの実施形態に関して、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μgすなわち、18.0MIU~約2384μgすなわち、約39.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも60例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1406μg23.0MIU、約1528μg25.0MIU、約1650μg27.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32MIU、約2139μg35.0MIU、約2262μg37.0MIU、または約2384μg39.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも60を提供する量である。あるいは、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μgすなわち、18.0MIU~約2384μgすなわち、約39.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも70か、少なくとも80か、少なくとも90か、少なくとも95か、または100さえも例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1406μg23.0MIU、約1528μg25.0MIU、約1650μg27.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32MIU、約2139μg35.0MIU、約2262μg37.0MIU、または約2384μg39.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも70か、少なくとも80か、少なくとも90か、少なくとも95か、または100さえも提供する量である。いくつかの実施形態において、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第1の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1834μgすなわち、30.0MIU~約3300μgすなわち、約54.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の100例えば、1834μg30.0MIU、約1956μg32.0MIU、約2078μg34.0MIU、約2200μg36.0MIU、約2323μg38.0MIU、約2445μg40.0MIU、約2567μg42.0MIU、約2689μg44.0MIU、約2812μg46.0MIU、約2934μg48.0MIU、約3056μg50.0MIU、約3178μg52.0MIU、または約3300μg54.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の100を提供する量である。これらの実施形態に関して、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μgすなわち、18.0MIU~約2384μgすなわち、約39.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも60例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1406μg23.0MIU、約1528μg25.0MIU、約1650μg27.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32MIU、約2139μg35.0MIU、約2262μg37.0MIU、または約2384μg39.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも60を提供する量である。あるいは、2つのレベルのIL-2投薬レジメンの第2の期間中に投与されるべきIL-2またはその生物学的に活性な改変体の1週間の総用量は、約1100μgすなわち、18.0MIU~約2384μgすなわち、約39.0MIUの範囲において投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも70か、少なくとも80か、少なくとも90か、少なくとも95か、または100さえも例えば、約1100μg18.0MIU、約1222μg20.0MIU、約1406μg23.0MIU、約1528μg25.0MIU、約1650μg27.0MIU、1834μg30.0MIU、約1956μg32MIU、約2139μg35.0MIU、約2262μg37.0MIU、または約2384μg39.0MIUで投与される参照IL-2標準の1週間の総用量のNK刺激活性の少なくとも70か、少なくとも80か、少なくとも90か、少なくとも95か、または100さえも提供する量である。併用IL-2/抗CD40抗体療法と共に使用するためのさらなる腫瘍治療当業者は、本明細書中に開示される併用療法の方法が、腫瘍治療の他の形態の前に使用されても後に使用されてもそれと同時に使用されてもよいことを認識する。このような腫瘍治療としては、化学療法レジメン例えば、CVPシクロホスファミド、ビンクリスチンおよびプレドニゾン、CHOPシクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチンおよびプレドニゾン、ICEイホスファミド、カルボプラチン、およびエトポシド、ミトザントロン、シタラビン、DVPダウノルビシン、プレドニゾン、およびビンクリスチン、ATRA全トランス型レチノイン酸、イダルビシン、ホエルザーhoelzerの化学療法レジメン、LaLaの化学療法レジメン、ABVDアドリアマイシン、ブレオマイシン、ビンブラスチン、およびダカルバジンCEOPシクロホスファミド、エピルビシン、ビンクリスチン、およびプレドニゾン、CEOP-BEシクロホスファミド、エピルビシン、ビンクリスチン、プレドニゾン、ブレオマイシン、およびエトポシド、2CdA2クロロデオキシアデノシン2-CDA、FLAGIDAフルダラビン、シタラビン、およびイダルビシンその後のG-CSF処置を伴うか、またはこれを伴わない、VADビンクリスチン、ドキソルビシン、およびデキサメタゾン、MPメルファランおよびプレドニゾン、C-Weeklyシクロホスファミドおよびプレドニゾン、ABCMアドリアマイシンドキソルビシン、BCNU、シクロホスファミド、およびメルファラン、MOPPナイトロジェンマスタード、オンコビン、プロカルバジン、およびプレドニゾンDHAPデキサメタゾン、高用量のara-C、およびプラチノール、フルダラビンおよびシクロホスファミドによる処置。あるいは、このような腫瘍治療としては、外科手術もしくは外科的手順、放射線療法骨髄破壊的な治療を含む、または他の抗癌モノクローナル抗体治療が挙げられ得る。したがって、本発明の方法は、このような腫瘍治療後のインビボかまたはエキソビボのいずれかで、残存する腫瘍細胞を殺傷する同時処置としての使用を見出す。この様式において、IL-2もしくはその生物学的に活性な改変体および本明細書中に記載されるアンタゴニスト抗CD40抗体、またはその抗原結合フラグメントによる併用療法は、少なくとも1つの他の癌治療と組み合わせて使用され得、この癌治療としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない:外科手術または外科的手順例えば、脾摘出、肝切除、リンパ節切除、白血球分離、骨髄移植など、放射線療法;必要に応じて自系の骨髄移植と組み合わせられる化学療法ここで適切な化学療法剤としては、フルダラビンまたはリン酸フルダラビン、クロラムブシル、ビンクリスチン、ペントスタチン、2-クロロデオキシアデノシンクラドリビン、シクロホスファミド、ドキソルビシン、プレドニゾン、およびそれらの組み合わせ例えば、CAPシクロホスファミド、ドキソルビシンに加えてプレドニゾン、CHOPシクロホスファミド、ビンクリスチン、プレドニゾンに加えてドキソルビシン、VADビンクリスチン、ドキソルビシンに加えてデキサメタゾン、MPメルファランに加えてプレドニゾンのようなアントラサイクリンを含むレジメンならび化学療法例えば、ミトキサントロン、ダウノルビシン、イダルビシン、アスパラギナーゼおよび代謝拮抗物質シタラビン、メトトレキサート、5-フルオロウラシルデカルバジン、6-チオグアニン、6-メルカプトプリン、およびネララビンが挙げられるが、これらに限定されないにおいて使用される他の細胞毒性因子および/または他の治療因子が挙げられるが、これらに限定されない;他の抗癌モノクローナル抗体治療例えば、アレムツズマブCampath登録商標または悪性のB細胞上のCD52細胞表面糖タンパク質を標的する他の抗CD52抗体;リツキシマブRituxan登録商標、完全ヒト抗体HuMax-CD20、R-1594、IMMU-106、TRU-015、AME-133、トシツモマブ/I-131トシツモマブBexxar登録商標、イブリツモマブチウキセタンZevalin登録商標、または悪性のB細胞上のCD20抗原を標的する任意の他の治療用抗CD20抗体;抗CD19抗体例えば、MT103二重特異性抗体;抗CD22抗体例えば、ヒト化モノクローナル抗体エプラツズマブ;ベバシズマブAvastin登録商標またはヒトの血管内皮増殖因子を標的する他の抗癌抗体;悪性のB細胞上のCD22抗原を標的する抗CD22抗体例えば、モノクローナル抗体BL-22、αCD22毒素;マクロファージコロニー刺激因子を標的するα-M-CSF抗体;多発性骨髄腫において過剰発現される核のレセプター活性化因子κBRANKおよびそのリガンドRANKLを標的する抗体;悪性のB細胞上のCD23抗原を標的する抗CD23抗体例えば、IDEC-152;CD80抗原を標的する抗CD80抗体例えば、IDEC-114;悪性のB細胞上のCD38抗原を標的する抗CD38抗体;悪性のB細胞上で発現される主要組織適合遺伝子複合体のクラスIIレセプターを標的する抗体抗MHC抗体;悪性のB細胞上のCD40抗原を標的する他の抗CD40抗体例えば、SGN-40;ならびに腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導性リガンドレセプター1TRAIL-R1を標的する抗体例えば、アゴニストのヒトモノクローナル抗体HGS-ETR1多くの固形腫瘍および造血器官の腫瘍上で発現されるTRAIL-R2;小分子に基づく癌治療微小管インヒビターおよび/またはトポイソメラーゼインヒビターが挙げられるが、これらに限定されない例えば、有糸分裂インヒビタードラスチンおよびドラスチンアナログ;チューブリン結合因子T900607;XL119;およびトポイソメラーゼインヒビターアミノカンプトテシン、SDX-105塩酸ベンダムスチン、イキサベピロンBMS-247550とも称されるエポチロンアナログ、プロテインキナーゼCインヒビター例えば、ミドスタウリンPKC-412、CGP41251、N-ベンゾイルスタウロスポリン、ピクサントロンpixantrone、エロキサチン抗新生物剤、ガナイトganite硝酸ガリウム、Thalomid登録商標サリドマイド、サリドマイドの免疫調節性誘導体例えば、レブリミドかつてのレビミド、AffinitakTMプロテインキナーゼC-αのアンチセンスインヒビター、SDX-101悪性リンパ球のアポトーシスを誘導するR-エトドラク、クロファラビンのような第2世代プリンヌクレオチドアナログ、癌細胞によるタンパク質Bcl-2の産生に関するインヒビター例えば、アンチセンス因子オブリマーセンoblimersenおよびGenasense登録商標、プロテアソームインヒビター例えば、VelcadeTMボルテゾミブ、小分子キナーゼインヒビター例えば、CHIR-258、小分子VEGFインヒビター例えば、ZD-6474、熱ショックタンパク質HSP90の小分子インヒビター例えば、17-AAG、スペロイルアニリドヒドロキサム酸suberanilohydroxamicacidSAHAおよびFR-901228のようなヒストンデアセチラーゼ例えば、ハイブリッド/極性細胞分化HPC因子の小分子インヒビター、ならびにアポトーシス因子例えば、Trisenox登録商標三酸化ヒ素およびXcytrin登録商標モテキサフィンmotexafinガドリニウム;ワクチン/免疫療法に基づく癌治療ワクチンアプローチ例えば、Id-KLH、オンコファージ、ビタレチンvitalethine、個別化免疫療法または活性イディオタイプ免疫療法例えば、MyVax登録商標個別化免疫療法、正式名称GTOP-99、Promune登録商標CpG7909、toll様レセプター9TLR9に対する合成アゴニスト、インターフェロン-α療法、およびIL-12療法が挙げられるが、これらに限定されない;ステロイド療法;または他の癌治療;さらなる癌治療は、IL-2/アンタゴニスト抗CD40抗体併用療法前、この併用療法の間、またはこの併用療法後に投与される。したがって、この併用療法が、化学療法、放射線療法、他の抗癌抗体療法、小分子に基づく癌治療、またはワクチン/免疫療法に基づく癌治療のような別の治療因子の投与と組み合わされるIL-2/アンタゴニスト抗CD40抗体併用療法を含む場合、本発明の方法は、別個の処方物または単一の薬学的処方物を使用する共投与を包含するか、これらを使用するいずれかの順序での連続投与を包含する。本発明の方法が、併用治療レジメンを包含する場合、これらの治療は、同時に提供され得るすなわち、IL-2/アンタゴニスト抗CD40抗体併用療法は、同時に投与されるか、または他の癌治療と同じ時間枠内で投与されるすなわち、この治療は、同時に行われるが、IL-2/アンタゴニスト抗CD40抗体併用療法は、他の癌治療として厳密には同じ時間に投与されない。あるいは、IL-2/アンタゴニスト抗CD40抗体併用療法はまた、他の癌治療の前か、後に投与され得る。異なる癌治療の連続的な投与は、処置される被検体が、寛解または再発の可能性を減少する治療の第1の過程に対して応答するか否かに関わらず実施され得る。したがって、例えば、いくつかの実施形態において、本明細書中に開示されるIL-2/アンタゴニスト抗CD40抗体併用療法を受ける被検体はまた、FCRフルダラビン、シクロホスファミド、およびリツキシマブによる治療を受ける。他の実施形態において、本明細書中に開示されるIL-2/アンタゴニスト抗CD40抗体併用療法を受ける被検体はまた、CHOP-RCHOPにリツキシマブを加えるまたはCFARフルダラビン、シクロホスファミド、リツキシマブ、およびアレムツズマブによる治療を受ける。代替的な実施形態において、本明細書中に開示されるIL-2/アンタゴニスト抗CD40抗体併用療法を受ける被検体はまた、FCフルダラビン、シクロホスファミドおよび悪性のB細胞上のCD20抗原を標的する他の抗CD20抗体のいずれか完全ヒト抗体HuMax-CD20、R-1594、IMMU-106、TRU-015、AME-133、トシツモマブ/I-131トシツモマブBexxar登録商標、およびイブリツモマブチウキセタンZevalin登録商標が挙げられるが、これらに限定されないによる処置を受ける。なお他の実施形態において、本明細書中に開示されるIL-2/アンタゴニスト抗CD40抗体併用療法を受ける被検体はまた、CHOPに他の抗CD20抗体を加えたものかまたはCFAフルダラビン、シクロホスファミド、およびアレムツズマブに他の抗CD20抗体を加えたものによる治療を受け、他の抗CD20抗体完全ヒト抗体HuMax-CD20、R-1594、IMMU-106、TRU-015、AME-133、トシツモマブ/I-131トシツモマブBexxar登録商標、およびイブリツモマブチウキセタンZevalin登録商標が挙げられるが、これらに限定されないは、悪性のB細胞上のCD20抗原を標的とする。インターロイキン-2およびその生物学的に活性な改変体本明細書中に示される薬学的処方物中に示されるIL-2および本発明の方法に使用されるべきであるIL-2は、ネイティブであっても組換え技術によって得られてもよく、そして任意の供給源例えば、ラット、ウサギ、霊長類、ブタ、およびヒトのような哺乳動物の供給源を含む由来であり得る。処置を受ける被検体が、ヒト被検体である場合、好ましくはIL-2は、ヒトの供給源に由来し、そしてこれとしては、組換え産生されるヒトIL-2例えば、微生物宿主によって産生される組換えIL-2ポリペプチドを含む。ヒトIL-2は、最初に前駆体ポリペプチド配列番号14に示されるとして翻訳され、これは、配列番号13に示されるようなヌクレオチド配列によってコードされる。この前駆体ポリペプチドは、配列番号14の残基1~20における単一の配列を含む。用語成熟ヒトIL-2とは、配列番号16に示されるアミノ酸配列を指し、これは、配列番号15に示されるようなヌクレオチド配列によってコードされる。用語デス-アラニル-1,C125SヒトIL-2およびデス-アラニル-1,セリン-125ヒトIL-2とは、成熟ヒトIL-2配列のアミノ酸位置125のシステインのセリンへの置換を有する成熟ヒトIL-2のムテインを指し、これは、成熟ヒトIL-2配列の位置1すなわち、配列番号16の位置1にあるN末端のアラニンを欠く。デス-アラニル-1,C125SヒトIL-2は、配列番号18に示されるアミノ酸配列を有し、これは、配列番号17に示されるようなヌクレオチド配列によってコードされる。アルデスロイキンと称されるE.coliで組換え産生されるデス-アラニル-1,C125SヒトIL-2ムテインは、商品名Proleukin登録商標ChironCorporation,Emeryville,Californiaで市販される処方物として商業的に入手可能である。Proleukin登録商標IL-2は、本明細書中に記載される併用IL-2/アンタゴニスト抗CD40抗体療法のプロトコルについて適切なIL-2投薬範囲を決定するための参照IL-2標準として機能する。IL-2の生物学的に活性な改変体本発明の方法に有用な薬学的組成物は、IL-2の生物学的に活性な改変体を含有し得る。このような改変体は、改変ポリペプチドを含有する薬学的組成物が被検体に投与される場合に、ネイティブなポリペプチドを含有する薬学的組成物と同じ治療効果を有するように、ネイティブなポリペプチドの所望の生物学的活性を含むべきである。改変ポリペプチドは、ネイティブなポリペプチドについて観察される様式と同様の様式で、薬学的組成物中の治療上活性な成分として機能する。方法は、改変ポリペプチドが所望の生物学的活性を維持し、そのことによって薬学的組成物中で治療上活性な成分として機能するか否かを決定するために、当該分野において利用できる。生物学的活性は、ネイティブなポリペプチドまたはネイティブなタンパク質の活性を測定するために、具体的に設計されたアッセイ本発明のアッセイを含むを使用して測定され得る。さらに、生物学的に活性なネイティブなポリペプチドに対して産生される抗体は、改変ポリペプチドに結合するそれらの能力について試験され得、有効な結合は、ネイティブなポリペプチドのコンホメーションと同様のコンホメーションを有するポリペプチドを示す。本発明の目的に関して、目的のIL-2の生物学的活性は、リンホカイン活性化キラー細胞LAK活性および抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性ADCCを媒介するためにナチュラルキラーNK細胞を活性化および/または増殖させるIL-2の活性である。したがって、本発明の方法に使用するためのIL-2改変体例えば、ヒトIL-2のムテインは、リンホカイン活性化キラー細胞LAK活性および抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性ADCCを媒介するためにナチュラルキラーNK細胞を活性化および/または増殖させる。NK細胞は、NK細胞感受性の標的例えば、ヒト赤白血病のK562細胞株といわれるインビトロの特定の細胞標的に対する自発的かまたは天然の細胞障害性を媒介する。IL-2による活性化の後、NK細胞はLAK活性を獲得する。このようなLAK活性は、多種多様な腫瘍細胞、および通常、休眠非活性化NK細胞によって溶解に対して抵抗性である他のNK非感受性の標的例えば、DaudiB細胞リンパ腫株を殺傷するNK細胞を活性化するIL-2の能力によってアッセイされ得る。同様に、ADCC活性は、NK非感受性の標的細胞例えば、DaudiB細胞リンパ腫株、または至適濃度の関連する腫瘍細胞に特異的な抗体の存在下でNK細胞を休眠させることによって容易に溶解されない他の標的細胞を溶解するNK細胞を活性化するIL-2の能力によってアッセイされ得る。NK/LAK細胞およびADCCの細胞障害活性を形成および測定するための方法は、当該分野において公知である。例えば、本明細書中に参考として援用されるCurrentProtocolsinImmunology:ImmunologicStudiesinHumans,補遺17,Unit7.7,7.18,および7.27JohnWileySons,Inc.,1996を参照のこと。本発明の目的に関して、本発明の方法に使用するためのIL-2改変体によって活性化されたNK細胞は、抗体の存在下ADCC活性または非存在下LAK活性でNK非感受性細胞より詳しくはB細胞特異的抗体リツキシマブを含むの存在下でNK非感受性のDaudi細胞の特異的溶解活性を実証し、これは、標準4-hr51Cr放出の細胞障害性アッセイ本明細書中に参考として援用されるCurrentProtocolsinImmunology:ImmunologicStudiesinHumans,Unit7.7,SupplementSection17,7.18.1JohnWileySons,Inc.,1996を参照のことにおいて12.5:1~50:1の間の比で標的に対してエフェクターを使用して測定される場合、休眠すなわち、非活性化NK細胞の溶解活性の基準線より、少なくとも約20大きいか、少なくとも約25大きいか、または30大きいか、または35大きいか、または40大きい。いくつかの実施形態において、これらのIL-2改変体に活性化されたNK細胞の特異的溶解活性は、上記の通りに測定された場合、休眠NK細胞の溶解活性の基準線より少なくとも約45大きいか、少なくとも約50大きいか、少なくとも約55大きいか、少なくとも約60大きいか、少なくとも約65大きいか、少なくとも約70大きいか、少なくとも約75大きいか、または少なくとも約80大きい。ネイティブなIL-2か天然に存在するIL-2の、適切な生物学的に活性な改変体は、そのペプチドのフラグメント、アナログ、および誘導体であり得る。フラグメントによってインタクトなポリペプチド配列およびインタクトなポリペプチド構造の一部のみからなるポリペプチドが意図され、そしてこれはネイティブなポリペプチドのC末端欠失体またはN末端欠失体であり得る。アナログによって、ネイティブなポリペプチドまたはネイティブなポリペプチドのフラグメントのいずれかのアナログが意図され、このアナログは、1つ以上のアミノ酸の置換、挿入、または欠失を有するネイティブなポリペプチド配列およびポリペプチド構造を含む。本明細書中に記載されるようなムテイン、および1つ以上のペプトイドpeptoidペプチド模倣体を有するペプチドは、用語アナログによっても包含される国際公開番号WO91/04282を参照のこと。誘導体によって、ネイティブなポリペプチドの所望の生物学的活性が維持される限り、目的のネイティブなポリペプチド、ネイティブなポリペプチドのフラグメント、もしくはこれらのそれぞれのアナログの適切な修飾例えば、グリコシル化、リン酸化、ポリマー結合例えば、ポリエチレングリコール、または他の外来の部分の付加が意図される。ポリペプチドフラグメント、ポリペプチドアナログ、およびポリペプチド誘導体を作製するための方法は、当該分野で一般的に利用可能である。例えば、ポリペプチドのアミノ酸配列改変体は、目的のネイティブなポリペプチドをコードするクローニングされたDNA配列中の変異によって調製され得る。変異誘発およびヌクレオチド配列変更についての方法は、当該分野で周知である。例えば、以下を参照のこと:WalkerおよびGaastra編1983TechniquesinMolecularBiologyMacMillanPublishingCompany,NewYork;Kunkel1985Proc.Natl.Acad.Sci.USA82:488-492;Kunkelら1987MethodsEnzymol.154:367-382;Sambrookら1989MolecularCloning:ALaboratoryManualColdSpringHarbor,NewYork;米国特許第4,873,192号;およびこれらにおいて引用される参考文献これらは、本明細書において参考として援用される。目的のポリペプチドの生物学的活性に影響しない適切なアミノ酸置換基に関しての指針は、Dayhoffら1978、AtlasofProteinSequenceandStructureNatl.Biomed.Res.Found.,Washington,D.C.本明細書において参考として援用されるのモデルにおいて見出され得る。1つのアミノ酸を類似の特性を有する別のアミノ酸で交換するような、保存的置換が好まれ得る。保存的置換の例としては、Gly⇔Ala、Val⇔Ile⇔Leu、Asp⇔Glu、Lys⇔Arg、Asn⇔Gln、およびPhe⇔Trp⇔Tyrが挙げられるが、これらに限定されない。目的のIL-2ポリペプチドの改変体の構築において、改変は、改変体が所望の活性を有し続けるようになされる。明らかに、上記改変ポリペプチドをコードするDNA中に作製された任意の変異は、リーディングフレームの外の配列に位置してはならず、そして好ましくは、mRNA二次構造を生じ得る相補的領域を生じない。欧州特許出願公開第75,444号を参照のこと。さらに、アンタゴニスト抗CD40抗体の定常領域が変異されて、多くの方法でエフェクター機能を変更し得る。例えば、米国特許第6,737,056B1号および米国特許出願公開第2004/0132101A1号を参照のこと。これらは、Fcレセプターへの抗体結合を最適化するFc変異体を開示する。IL-2の生物学的に活性な改変体は、一般的に、比較の基準として機能する参照ポリペプチド分子のアミノ酸配列に対して、少なくとも70の配列同一性、好ましくは少なくとも80の配列同一性、より好ましくは少なくとも90~95以上の配列同一性を有し、そして最も好ましくは少なくとも96、97、98または99の配列同一性を有する。したがって、IL-2参照分子が、ヒトIL-2であり、その生物学的に活性な改変体は、ヒトIL-2のアミノ酸配列に対して、少なくとも70の配列同一性、好ましくは少なくとも80の配列同一性、より好ましくは少なくとも90~95以上の配列同一性を有し、そして最も好ましくは少なくとも96、97、98または99の配列同一性を有する。本発明の目的のために、アフィンギャップサーチを使用したSmith-Watermanホモロジーサーチアルゴリズム12のギャップオープンペナルティおよび2のギャップ伸長ペナルティ、62のBLOSUMマトリックスを使用を使用して、配列同一性が決定される。このSmith-Watermanホモロジーサーチアルゴリズムは、SmithおよびWaterman1981Adv.Appl.Math.2:482-489において教示される。改変体は、例えば、わずか1~15アミノ酸残基、わずか1~10アミノ酸残基例えば、6~10、わずか5、わずか4、3、2、またはさらに1アミノ酸残基だけ上記参照IL-2配列と異なる。2つのアミノ酸配列の最適アラインメントに関して、上記改変アミノ酸配列の隣接するセグメントは、上記参照アミノ酸配列に対して、アミノ酸残基の付加またはアミノ酸残基の欠失を有し得る。上記参照アミノ酸配列を比較するために使用される隣接するセグメントは、少なくとも20個の連続するアミノ酸残基を含み、そして30個、40個、50個、100個またはそれ以上のアミノ酸残基であり得る。保存的な残基置換またはギャップに関連する配列同一性に対する補正がなされ得るSmith-Watermanホモロジーサーチアルゴリズムを参照のこと。IL-2活性を有するポリペプチドの正確な化学的構造は、多くの因子に依存する。イオン化可能なアミノ基およびカルボニル基が分子中に存在する場合、特定のポリペプチドは、酸性塩もしくは塩基性塩として、または中性形態で得られ得る。適切な環境状態に配置された場合に、その生物学的活性を保持するこのような調製物の全ては、本明細書において使用されるIL-2活性を有するポリペプチドの定義の中に含まれる。さらに、上記ポリペプチドの一次アミノ酸配列は、糖部分を使用した誘導体化グリコシル化または他の補助的な分子例えば、脂質、リン酸、アセチル基などによって増加され得る。上記ポリペプチドの一次アミノ酸配列は、糖類との結合体化によってもまた増加され得る。このような増加の特定の局面は、産生する宿主の翻訳後の処理システムを通じて達成され;他のこのような改変も、インビトロで導入され得る。とにかく、このような改変は、上記ポリペプチドのIL-2活性が破壊されない限り、本明細書において使用されるIL-2ポリペプチドの定義の中に含まれる。このような改変体は、種々のアッセイにおいて、上記ポリペプチドの活性を増強させるか、または弱めるかのいずれかによって、その活性に量的または質的に影響し得ることが予想される。さらに、上記鎖中の個々のアミノ酸残基は、酸化、還元、または他の誘導体化によって改変され得、そして上記ポリペプチドは、活性を保持するフラグメントを得るために切断され得る。活性を破壊しないこのような変更は、本明細書において使用される目的のIL-2ポリペプチドの定義から上記ポリペプチド配列を除かない。当該分野は、ポリペプチド改変体の調製および使用に関する実質的な指針を提供する。IL-2改変体の調製において、当業者は、ネイティブのタンパク質のヌクレオチドまたはアミノ酸配列に対するどの修飾が、本発明の方法において使用される薬学的組成物の治療上活性な成分として使用するために適切である改変体を生じるかを容易に決定し得る。改変IL-2タンパク質の例としては、欧州特許EP出願公開第EP136,489号を参照のことこれは、天然に存在するIL-2のアミノ酸配列における、以下の1つ以上の変更を開示する:Asn26からGln26;Trp121からPhe121;Cys58からSer58またはAla58、Cys105からSer105またはAla105;Cys125からSer125またはAla125;Arg120後の全ての残基の欠失;およびそのMet-1形態;ならびに1983年10月13日に出願された欧州特許出願第83306221.9号1984年5月30日に出願公開番号EP109,748の下で公開されたベルギー特許第893,016号の等価物であり、同一人に所有される一般的に米国特許第4,518,584号ネイティブなヒトIL-2にしたがって番号付けられる位置125のシステインが削除されるかまたは中性アミノ酸に置換される組換えヒトIL-2ムテイン;アラニル-ser125-IL-2;およびデス-アラニル-ser125-IL-2を開示するに認められるに記載される組換えIL-2ムテイン。米国特許第4,752,585号もまた参照のことこれは、以下の改変IL-2タンパク質を開示する:ala104ser125IL-2、ala104IL-2、ala104ala125IL-2、val104ser125IL-2、val104IL-2、val104ala125IL-2、デス-ala1ala104ser125IL-2、デス-ala1ala104IL-2、デス-ala1ala104ala125IL-2、デス-ala1val104ser125IL-2、デス-ala1val104IL-2、デス-ala1val104ala125IL-2、デス-ala1デス-pro2ala104ser125IL-2、デス-ala1デス-pro2ala104IL-2、デス-ala1デス-pro2ala104ala125IL-2、デス-ala1デス-pro2val104ser125IL-2、デス-ala1デス-pro2val104IL-2、デス-ala1デス-pro2val104ala125IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3ala104ser125IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3ala104IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3ala104ala125IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3val104ser125IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3val104IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3val104ala125IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4ala104ser125IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4ala104IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4ala104ala125IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4val104ser125IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4val104IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4val104ala125IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5ala104ser125IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5ala104IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5ala104ala125IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5val104ser125IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5val104IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5val104ala125IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5デス-ser6ala104ala125IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5デス-ser6ala104IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5デス-ser6ala104ser125IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5デス-ser6val104ser125IL-2、デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5デス-ser6val104IL-2、およびデス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5デス-ser6val104ala125IL-2ならびに米国特許第4,931,543号本明細書中の実施例に使用されるデス-アラニル-1,セリン-125ヒトIL-2、ならびに他のIL-2ムテインを開示するを参照のこと。位置104のメチオニンが保存的アミノ酸によって置換された組換えIL-2ムテインを開示する、欧州特許出願公開第200,280号1986年12月10日出願も参照のこと。例としては、以下のムテインが挙げられる:ser4デス-ser5ala104IL-2;デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5ala104ala125IL-2;デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5glu104ser125IL-2;デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5glu104IL-2;デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5glu104ala125IL-2;デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5デス-ser6ala104ala125IL-2;デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5デス-ser6ala104IL-2;デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5デス-ser6ala104ser125IL-2;デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5デス-ser6glu104ser125IL-2;デス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5デス-ser6glu104IL-2;およびデス-ala1デス-pro2デス-thr3デス-ser4デス-ser5デス-ser6glu104ala125IL-2。欧州特許出願公開第EP118,617号および米国特許第5,700,913号これらは、N末端アミノ酸として、ネイティブなIL-2のメチオニンの代わりにアラニンを有する非グリコシル化ヒトIL-2改変体;プロリンがN末端アミノ酸であるように最初のメチオニンが削除された非グリコシル化ヒトIL-2;およびN末端メチオニンアミノ酸とN末端プロリンアミノ酸との間にアラニンが挿入された非グリコシル化ヒトIL-2を開示するも参照のこと。他のIL-2ムテインとしては、報告によると、NK細胞よりもT細胞レセプターを発現する細胞によって発現される高親和性のIL-2レセプターに対する選択的活性を有し、そしてIL-2毒性を減少させる、WO99/60128に開示されるもの位置20のアスパラギン酸のヒスチジンもしくはイソロイシンによる置換、位置88のアスパラギンのアルギニン、グリシン、もしくはイソロイシンによる置換、または位置126のグルタミンのロイシンもしくはグルタミン酸による置換;ネイティブなIL-2と比較した場合に、高親和性のIL-2レセプターに対する減少した結合を示すが、LAK細胞を刺激する能力を維持する、米国特許第5,229,109号に開示されるムテイン位置38のアルギニンのアラニンによる置換、または位置42のフェニルアラニンのリジンによる置換;血管漏出症候群の軽減を生じると特許請求される、国際公開番号WO00/58456に開示されるムテインDはアスパラギン酸であり、xはロイシン、イソロイシン、グリシン、またはバリンであり、そしてyは、バリン、ロイシンもしくはセリンである、ネイティブなIL-2中に天然に存在するxDy配列を変化または欠失している;報告によると、NK細胞およびLAK細胞の誘導を刺激する、国際公開番号WO00/04048に開示されるIL-2p1-30ペプチドIL-2のa-へリックスA全体を含み、そしてIL-2レセプターのb鎖と相互作用する、IL-2の最初の30アミノ酸に対応するペプチド;ならびに報告によると、血管からの出血を誘導し得ないが、LAK細胞の産生する能力を保持する、WO00/04048にまた開示されるIL-2p1-30ペプチドの変異形態位置20のアスパラギン酸のリジンによる置換が挙げられる。さらに、IL-2は、向上した溶解性および変化した薬物動態プロフィールを提供するようにポリエチレングリコールによって改変され得る米国特許第4,766,106号を参照のこと。発明の名称ImprovedInterleukin-2Muteinsであって、2004年3月5日に出願され、そして米国特許出願第60/550,868と割り当てられた同時係属中の仮特許出願;および発明の名称CombinatorialInterleukin-2Muteinsであって、2004年7月7日に出願され、そして米国特許出願第60/585,980号と割り当てられた同時係属中の仮特許出願これらの内容はその全体が参考として本明細書中に援用されるに記載されるIL-2ムテインも参照のこと。これらの出願は、減少した毒性が予測される改良された機能プロフィールを有するIL-2のムテインを開示する。ムテインは、NK細胞の増殖を維持するかまたは増加させ、NK細胞媒介性のNKの細胞溶解機能、LAKの細胞溶解機能、およびADCCの細胞溶解機能を維持し、デス-アラニル-1,C125SヒトIL-2もしくはデス-アラニル-1,C125SヒトIL-2ムテインと比べてT細胞増殖機能を維持する一方で、NK細胞による、より低いレベルの炎症誘発性のサイトカイン産生を誘導する。これらの改良されたIL-2ムテインの例としては、T7A、L36G、P65E、R81L、T7D、L36H、P65F、R81M、T7R、L36I、P65G、R81N、K8L、L36K、P65H、R81P、K9A、L36M、P65I、R81T、K9D、L36N、P65K、D84R、K9R、L36P、P65L、S87T、K9S、L36R、P65N、N88D、K9V、L36S、P65Q、N88H、K9W、L36W、P65R、N88T、T10K、L36Y、P65S、V91A、T10N、R38D、P65T、V91D、Q11A、R38G、P65V、V91E、Q11R、R38N、P65W、V91F、Q11T、R38P、P65Y、V91G、E15A、R38S、L66A、V91Q、H16D、L40D、L66F、V91W、H16E、L40G、E67A、V91N、L19D、L40N、L72G、L94A、L19E、L40S、L72N、L94I、D20E、T41E、L72T、L94T、I24L、T41G、F78S、L94V、K32A、F42A、F78W、L94Y、K32W、F42E、H79F、E95D、N33E、F42R、H79M、E95G、P34E、F42T、H79N、E95M、P34R、F42V、H79P、T102S、P34S、K43H、H79Q、T102V、P34T、F44K、H79S、M104G、P34V、M46I、H79V、E106K、K35D、E61K、L80E、Y107H、K35I、E61M、L80F、Y107K、K35L、E61R、L80G、Y107L、K35M、E62T、L80K、Y107Q、K35N、E62Y、L80N、Y107R、K35P、K64D、L80R、Y107T、K35Q、K64E、L80T、E116G、K35T、K64G、L80V、N119Q、L36A、K64L、L80W、T123S、L36D、K64Q、L80Y、T123C、L36E、K64R、R81E、Q126I、L36F、P65D、R81K、およびQ126Vが挙げられるが、これらに限定されず、残基の位置は、配列番号16に示される成熟ヒトIL-2配列内の位置に対して相対的である。これらの組み合わせのIL-2ムテインの例としては、19D40D、19D81K、36D42R、36D61R、36D65L、40D36D、40D61R、40D65Y、40D72N、40D80K、40G36D、40G65Y、80K36D、80K65Y、81K36D、81K42E、81K61R、81K65Y、81K72N、81K88D、81K91D、81K107H、81L107H、91N95G、107H36D、107H42E、107H65Y、107R36D、107R72N、40D81K107H、40G81K107H、および91N94Y95Gが挙げられるが、これらに限定されず、残基の位置は、配列番号16に示される成熟ヒトIL-2配列内の位置に対して相対的である。本明細書中で使用される場合、用語IL-2はまた、投薬頻度を減少させるかまたはIL-2の耐容性を改良する、第2のタンパク質に融合したIL-2またはポリプロリンもしくは水溶性ポリマーに共有結合したIL-2を含む、IL-2融合体またはIL-2結合体を含むことが意図される。例えば、IL-2または本明細書中に定義されるその改変体は、当該分野で公知の方法WO01/79258を参照のことを使用して、ヒトアルブミンまたはアルブミンフラグメントに融合され得る。あるいは、このIL-2は、ポリプロリンまたはポリエチレングリコールホモポリマーおよびポリオキシエチル化ポリオールに共有結合され得、当該分野において公知の方法を使用して、このホモポリマーは、アルキル基によって1つの末端にて、置換されないかまたは置換され、そしてポリオールpoplyolは、置換されない。例えば、米国特許第4,766,106号、同第5,206,344号、および同第4,894,226号を参照のことIL-2またはその改変体の薬学的処方物治療上活性な成分としてIL-2またはその適切な生物学的に活性な改変体を含有する任意の薬学的組成物は、本発明の方法に使用され得る。このような薬学的組成物は、当該分野で公知であり、そしてそれらとしては、米国特許第4,604,377号;同第4,745,180号;同第4,766,106号;同第4,816,440号;同第4,894,226号;同第4,931,544号;同第4,992,271号;同第5,078,997号;および同第6,525,102号本明細書中に参考として援用されるに開示されるものが挙げられるが、これらに限定されない。したがって、IL-2またはその改変体を含有する液体、凍結乾燥または噴霧乾燥した組成物は、本発明の方法に従い、その後の被験体への投与のために、水系もしくは非水系の溶液または懸濁液として調製され得る。これらの組成物の各々は、治療的または予防的に活性な成分として、IL-2またはその改変体を含有する。治療的または予防的に活性な成分により、IL-2またはその改変体が、組成物中に特異的に組み込まれて、薬学的組成物が被験体に投与されるときに、この被験体内の疾患もしくは状態の、処置、予防または診断に関して、所望の治療的または予防的な応答をもたらすことが意図される。好ましくは、薬学的組成物は、適切な安定化剤、充填剤、またはこれらの両方を含有し、調製および保存の間の、タンパク質の安定性および生物学的活性の喪失に伴う問題を最小限にする。例えば、米国特許第4,604、377号は、IL-2の治療量これは、非IL-2タンパク質およびエンドトキシンを実質的に含まない、薬理学的に受容可能な水溶性キャリア、およびIL-2を可溶化するのに十分な量の表面活性剤例えば、ドデシル硫酸ナトリウムを有するIL-2処方物を示す。他の成分は、例えば、糖を含む。米国特許第4,766,106号は、ポリエチレングリコールPEG修飾型IL-2を含む処方物を示す。欧州特許出願公開番号268,110号は、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルTween-80、モノステアリン酸ポリエチレングリコール、およびオクチルフェノキシポリエトキシエタノール化合物TritonX405からなる群より選択される種々の非イオン性界面活性剤によって処方されるIL-2を示す。米国特許第4,992,271号は、ヒト血清アルブミンを含むIL-2処方物を開示し、そして同第5,078,997号は、ヒト血清アルブミンおよびアミノ酸を含むIL-2処方物を開示する。米国特許第6,525,102号は、ポリペプチドの主要な安定化剤として機能するアミノ酸塩基、およびこのポリペプチドの安定性について受容可能なpHの範囲内にこの溶液を緩衝化する酸および/またはその塩を含むIL-2処方物を開示する。同時継続中の米国特許出願第10/408,648号は、肺への送達に適したIL-2処方物を開示する。上記の特許および特許出願の全ては、その全体が本明細書によって参考として援用される。アンタゴニスト抗CD40抗体およびその適切な改変体モノクローナル抗体CHIR-5.9およびモノクローナル抗体CHIR-12.12は、本発明の方法において使用するのに適切なアンタゴニスト抗CD40抗体を示す。CHIR-5.9抗体およびCHIR-12.12抗体は、ハイブリドーマ細胞株131.2F8.5.9本明細書中で細胞株5.9と称されるおよび153.8E2.D10.D6.12.12本明細書中で細胞株12.12と称されるから産生されるIgG1アイソタイプの完全ヒト抗CD40モノクローナル抗体である。これらの細胞株は、ヒトIgG1重鎖遺伝子座およびヒトκ鎖遺伝子座を含む免疫異種マウスXenoMouse登録商標技術Abgenix;Fremont,California由来の脾細胞を用いて作製された。その脾臓細胞は、マウス骨髄腫SP2/0細胞と融合されたSierraBioSource。得られたハイブリドーマは数回サブクローニングされて、安定なモノクローナル細胞株5.9およびモノクローナル細胞株12.12が作製された。本発明の他の抗体は、ヒト免疫グロブリン遺伝子座についてトランスジェニックであるマウスを用いてか、または当該分野で公知および/もしくは本明細書中に記載される他の方法によって同様に調製され得る。CHIR-12.12抗体の可変領域のヌクレオチド配列およびアミノ酸配列、ならびにCHIR-5.9抗体の可変領域のアミノ酸配列は、開示される。具体的には、mAbCHIR-12.12の軽鎖ならびに重鎖についてのリーダー領域、可変領域および定常領域のアミノ酸配列が、それぞれ、本明細書中で図1Aおよび図1Bに示される。また、配列番号2mAbCHIR-12.12の軽鎖についての完全配列、配列番号4mAbCHIR-12.12の重鎖についての完全配列、および配列番号5配列番号4に示されるmAbCHIR-12.12の重鎖の改変体についての完全配列、ここで、この改変体は配列番号4の位置153においてアラニン残基に対するセリン置換を含むを参照のこと。mAbCHIR-12.12についての軽鎖および重鎖をコードするヌクレオチド配列は、それぞれ、図2Aおよび図2Bに示される。また、配列番号1mAbCHIR-12.12の軽鎖についてのコード配列、および配列番号3mAbCHIR-12.12の重鎖についてのコード配列を参照のこと。CHIR-5.9mAbの軽鎖ならびに重鎖についてのリーダー領域、可変領域および定常領域のアミノ酸配列は、それぞれ、図3Aおよび図3Bに示される。また、配列番号6mAbCHIR-5.9の軽鎖についての完全配列、配列番号7mAbCHIR-5.9の重鎖についての完全配列、および配列番号8配列番号7に示されるmAbCHIR-5.9の重鎖の改変体についての完全配列、ここで、配列番号7の位置158においてアラニン残基に対するセリン置換を含むを参照のこと。さらに、CHIR-5.9抗体およびCHIR-12.12抗体を発現するハイブリドーマは、それぞれ、PTA-5542およびPTA-5543の特許寄託表示でATCCに寄託されている。アンタゴニスト活性に加えて、抗CD40抗体は、腫瘍細胞に対する別の作用機構を有し得る。例えば、ネイティブなCHIR-5.9抗体およびCHIR-12.12抗体は、ADCC活性を有する。あるいは、CHIR-5.9抗体およびCHIR-12.12抗体の可変領域は、ADCC活性を有する別の抗体アイソタイプとして発現され得る。CHIR-5.9およびCHIR-12.12のネイティブな形態、組換え形態、または抗原結合フラグメントはまた、細胞毒、治療因子または放射性同位元素に結合することが可能である。CHIR-5.9モノクローナル抗体およびCHIR-12.12モノクローナル抗体は、ELISA型アッセイにおいて可溶性CD40に結合し、フローサイトメトリーアッセイによって決定されるように細胞表面CD40に対するCD40リガンドの結合を妨げ、予め結合したCD40リガンドを置き換える。抗体CHIR-5.9および抗体CHIR-12.12は、互いにCD40への結合に対して競合するが15B8とは競合せず、この15B8は、発明の名称HumanAnti-CD40Antibodiesである、2000年10月2日に出願された米国仮特許出願番号第60/237,556号および発明の名称HumanAnti-CD40Antibodiesである、2001年10月2日に出願されたPCT国際出願番号第PCT/US01/30857代理人事件番号PP16092.003に記載される抗CD40モノクローナル抗体であり、これらの両方が参考としてその全体が本明細書中で援用される。健常なヒト被験体由来のB細胞の増殖における効果についてインビトロで試験される場合、CHIR-5.9およびCHIR-12.12は、アンタゴニスト抗CD40抗体として作用する。さらに、CHIR-5.9およびCHIR-12.12は、健常な被験体由来のヒトリンパ球の強力な増殖を誘導しない。これらの抗体は、抗体依存性の細胞媒介性細胞毒性ADCCによってCD40を発現する標的細胞を殺傷し得る。BiacoreTMアッセイによって決定されるように、ヒトCD40に対するCHIR-5.9の結合親和性は1.2×10-8Mであり、CHIR-12.12の結合親和性は5×10-10Mである。本発明の方法において使用するのに適切なアンタゴニスト抗CD40抗体は、CD40細胞表面抗原に対して強力な単一部位結合親和性を示す。本発明のモノクローナル抗体は、少なくとも10-5M、少なくとも3×10-5M、好ましくは少なくとも10-6M~10-7M、より好ましくは10-8M~約10-12MのCD40に対する解離平衡定数KDを示し、これはBiacoreTMのような標準的なアッセイを用いて測定される。Biacore分析は当該分野で公知であり、詳細はBIAapplicationshandbookに提供されている。WO01/27160に記載される方法が結合親和性を調節するために使用され得る。CD40抗原、CD40細胞表面抗原、CD40レセプターまたはCD40によって、腫瘍壊死因子TNFレセプターファミリーに属する膜貫通糖タンパク質が意図される例えば、米国特許第5,674,492号および同第4,708,871号;Stamenkovicら1989EMBO8:1403;Clark1990TissueAntigens36:33;Barclayら1997TheLeucocyteAntigenFactsBook第2版;AcademicPress,SanDiegoを参照のこと。ヒトCD40の2つのアイソフォームこの遺伝子の代替スプライス転写産物改変体によってコードされるが同定されている。第1のアイソフォーム長いアイソフォームまたはアイソフォーム1としてもまた公知であるは、277個のアミノ酸の前駆ポリペプチド配列番号12GenBank登録番号CAA43045として最初に報告され、GenBank登録番号NP_001241においてアイソフォーム1として同定された、配列番号11GenBank登録番号X60592およびNM_001250を参照のことによってコードされるとして発現され、これは最初の19残基によって表されるシグナル配列を有する。第2のアイソフォーム短いアイソフォームまたはアイソフォーム2としてもまた公知であるは、203個のアミノ酸の前駆ポリペプチド配列番号10GenBank登録番号NP_690593、配列番号9GenBank登録番号NM_152854によってコードされるとして発現され、これも最初の19残基によって表されるシグナル配列を有する。ヒトCD40のこれら2つのアイソフォームの前駆ポリペプチドは、共通してその最初の165残基すなわち、配列番号10および配列番号12の残基1~165を共有する。短いアイソフォームの前駆ポリペプチド配列番号10に示されるは、コードセグメントを欠失する転写産物改変体配列番号9これは、翻訳のフレームシフトをもたらすによってコードされ、得られるCD40アイソフォームは、CD40の長いアイソフォームに含まれるもの配列番号12の残基166~277に示されるC末端とは異なる、より短いC末端配列番号10の残基166~203を含む。本発明の目的のために、用語CD40抗原、CD40細胞表面抗原、CD40レセプターまたはCD40は、CD40の短いアイソフォームおよび長いアイソフォームの両方を包含する。本発明の抗CD40抗体は、本明細書中で以下に示されるようにヒトCD40のエピトープに結合し、このヒトCD40は、この細胞表面抗原の短いアイソフォームまたは長いアイソフォームのいずれかのうちの同じ位置に存在する。CD40抗原は、本明細書中で他の部分に記載されるように、種々の細胞型の表面に提示される。表面に提示されるおよび表面に発現されるにより、CD40抗原のうちの全てまたは一部が、細胞の外側に曝露されることが意図される。提示または発現されたCD40抗原は、完全にまたは部分的にグリコシル化され得る。アゴニスト活性により、その物質がアゴニストとして機能することが意図される。アゴニストは細胞上の同種レセプターと結合し、レセプターの天然のリガンドにより惹起されるものと類似かまたは同じ反応もしくは活性を惹起し;例えば、これは、シグナルを細胞に伝達する。CD40のアゴニストは、以下の応答のうちのいずれかまたはすべてを誘導するが、これらに限定されない:B細胞の増殖および/または分化、抗体産生、細胞間接着、B細胞の記憶形成、アイソタイプの切り換え、MHCクラスIIおよびCD80/86の細胞表面発現の上方制御、ならびに、IL-8、IL-12、およびTNFなどのような炎症誘発性サイトカインの分泌。アンタゴニスト活性により、その物質がアンタゴニストとして機能することが意図される。CD40のアンタゴニストは、アゴニストリガンド特に、CD40Lに対するCD40レセプターの結合により誘導される応答のうちのいずれかの誘導を妨げるかまたは減少させる。アンタゴニストは、アゴニスト結合に対する応答のうちのいずれか1以上の誘導を、5、10、15、20、25、30、35、好ましくは40、45、50、55、60、より好ましくは70、80、85、そして最も好ましくは90、95、99、または100減少させ得る。抗CD40抗体およびCD40-リガンドの結合特異性およびアンタゴニスト活性を測定するための方法は、当業者に公知であり、それらとしては、標準的な競合結合アッセイ、B細胞による免疫グロブリン分泌をモニタリングするためのアッセイ、B細胞増殖アッセイ、Banchereau様B細胞増殖アッセイ、抗体産生についてのT細胞ヘルパーアッセイ、B細胞増殖の同時刺激アッセイ、およびB細胞活性化マーカーの上方制御についてのアッセイが挙げられるが、これらに限定されない。例えば、WO00/75348、および米国特許第6,087,329号参考として本明細書中に援用されるに開示されるアッセイを参照のこと。有意なアゴニスト活性により、B細胞応答アッセイのようなアッセイで測定されるように、中性物質またはネガティブコントロールによって誘導されるアゴニスト活性より、少なくとも30、35、40、45、50、60、70、75、80、85、90、95または100大きいアゴニスト活性が意図される。好ましくは、有意なアゴニスト活性は、B細胞応答アッセイで測定されるように、中性物質またはネガティブコントロールにより誘導されるアゴニスト活性より少なくとも2倍もしくは少なくとも3倍大きいアゴニスト活性である。したがって、例えば、目的のB細胞応答がB細胞増殖である場合、有意なアゴニスト活性は中性物質またはネガティブコントロールにより誘導されるB細胞増殖レベルよりも少なくとも2倍大きいかまたは少なくとも3倍大きいB細胞増殖レベルの誘導である。1つの実施形態において、CD40に結合しない非特異的免疫グロブリン例えば、IgG1は、ネガティブコントロールとしての役割を果たす。有意なアゴニスト活性を有さない物質は、B細胞応答アッセイで測定されるように、中性物質またはネガティブコントロールにより誘導されるアゴニスト活性よりも高くて約25上回るアゴニスト活性、好ましくは、中性物質またはネガティブコントロールにより誘導されるアゴニスト活性よりも高くて約20上回る、約15上回る、約10上回るか、約5上回るか、約1上回るか、約0.5上回るか、または高くて約0.1上回るアゴニスト活性を示す。本発明の方法において有用なアンタゴニスト抗CD40抗体は、ヒト細胞上のCD40抗原に結合される場合に、上記のように有意なアゴニスト活性を有さない。本発明の1つの実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体は、1つの細胞応答において有意なアゴニスト活性を有さない。本発明の別の実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体は、1より多いB細胞応答例えば、増殖および分化、または増殖、分化、ならびに抗体産生のアッセイにおいて有意なアゴニスト活性を有さない。CD40に対するモノクローナル抗体は、当該分野において公知である。例えば、McMichael編、1987;1989LeukocyteTypingIIIandIVOxfordUniversityPress、NewYork;米国特許第5,674、492号;同第5,874,082号;同第5,677,165号;同第6,056,959号;WO00/63395;国際公開番号WO02/28905および同WO02/28904;Gordonら、1988J.Immunol.140:1425;Valleら、1989Eur.J.Immunol.19:1463;Clarkら、1986PNAS83:4494;Paulieら、1989J.Immunol.142:590;Gordonら、1987Eur.J.Immunol.17:1535;Jabaraら、1990J.Exp.Med.172:1861;Zhangら、1991J.Immunol.146:1836;Gascanら、1991J.Immunol.147:8;Banchereauら、1991Clin.Immunol.Spectrum3:8;およびBanchereauら、1991Science251:70これらの全ては、本明細書中に参考として援用されるにおけるB細胞抗原についての節を参照のこと。本発明の方法に対して特に重要であるのは、上記のモノクローナル抗体CHIR-5.9およびモノクローナル抗体CHIR-12.12の結合特性を共有するアンタゴニスト抗CD40抗体である。このような抗体としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない:1131.2F8.5.9本明細書中で細胞株5.9と称されるおよび153.8E2.D10.D6.12.12本明細書中で細胞株12.12と称されるそれぞれ、特許受託番号PTA-5542および特許受託番号PTA-5543としてATCCに寄託されたで表されるハイブリドーマ細胞株によって産生されるモノクローナル抗体;2配列番号2に示される配列、配列番号4に示される配列、配列番号5に示される配列、配列番号2と配列番号4とに示される配列の両方、および配列番号2と配列番号5とに示される配列の両方からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体;3配列番号6に示される配列、配列番号7に示される配列、配列番号8に示される配列、配列番号6と配列番号7とに示される配列の両方、および配列番号6と配列番号8とに示される配列の両方からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むモノクローナル抗体;4配列番号1に示されるヌクレオチド配列、配列番号3に示されるヌクレオチド配列、および配列番号1と配列番号3とに示される配列の両方からなる群より選択される核酸配列を含む核酸分子によってコードされるアミノ酸配列を有するモノクローナル抗体;5ハイブリドーマ細胞株5.9またはハイブリドーマ細胞株12.12によって産生されるモノクローナル抗体に結合し得るエピトープに結合するモノクローナル抗体;6配列番号10または配列番号12に示されるアミノ配列の残基82~87を含むエピトープに結合するモノクローナル抗体;7競合結合アッセイにおいてモノクローナル抗体CHIR-5.9またはモノクローナル抗体CHIR-12.12と競合するモノクローナル抗体;ならびに8CHIR-12.12モノクローナル抗体またはCHIR-5.9モノクローナル抗体の抗原結合フラグメントであるモノクローナル抗体または上述の項目1~7のモノクローナル抗体の抗原結合フラグメントであって、ここで、このフラグメントはヒトCD40抗原に対して特異的に結合する能力を保持する。抗CD40抗体の作製。本発明の方法において使用するためのアンタゴニスト抗CD40抗体は、当業者に公知の任意の抗体作製方法を使用して作製され得る。したがって、ポリクローナル血清は、従来の方法によって調製され得る。一般的に、CD40抗原を含む溶液が最初に使用されて、適切な動物好ましくは、マウス、ラット、ウサギ、またはヤギを免疫化する。入手可能な血清の量、および標識された抗ウサギ抗体および抗ヤギ抗体が利用できることに起因して、ウサギまたはヤギが、ポリクローナル血清の調製に好ましい。ポリクローナル血清は、トランスジェニック動物好ましくは、ヒト免疫グロブリン座を有するマウスにおいて調製され得る。好ましい実施形態において、CD40を発現するSf9細胞が、免疫原として使用される。免疫化はまた、生理的食塩水好ましくは、フロイント完全アジュバントのようなアジュバント中の抗原を含む溶液を混合または乳化し、そしてその混合物またはエマルジョンを非経口的一般的には、皮下または筋肉内に注射することによって、実施され得る。1回の注射あたり50~200μgの用量が、代表的に十分である。免疫化は、一般的に、生理的食塩水中のタンパク質の1回以上の注射によって、好ましくはフロイント不完全アジュバントを使用して、2~6週間後にブーストされる。あるいは、本発明の目的がインビボの免役化と等しいと考えられる場合、当該分野で公知の方法を使用したインビトロの免疫化によって、抗体が作製され得る。ポリクローナル抗血清は、免役化された動物の血液をガラスまたはプラスチックの容器に採取し、その血液を25°Cで1時間インキュベートし、次いで4°Cで2~18時間インキュベートすることによって得られる。この血清は、遠心分離例えば、1,000×gで10分間によって回収される。1回の採血あたり約20~50mlが、ウサギから得られ得る。Sf9Spodopterafrugiperda細胞の作製は、米国特許第6,004,552号によって開示され、本明細書中に参考として援用される。手短に言えば、ヒトCD40をコードする配列を、輸送ベクターを使用してバキュロウイルスに再結合recombineさせた。上記プラスミドを、野生型バキュロウイルスDNAを用いてSf9細胞に同時トランスフェクトした。バキュロウイルスに感染した組換えSf9細胞を同定して、クローン的に精製した。好ましくは、上記抗体は、本質的にモノクローナル抗体である。モノクローナル抗体は特異性が高く、単一の抗原部位すなわち、上記CD40細胞表面抗原に対して指向する。さらに、異なる決定基エピトープに対して指向する異なる抗体を代表的に包含する従来のポリクローナル抗体の調製とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して指向する。修飾語句モノクローナルは、実質的に同質である抗体の集団例えば、B細胞のクローンの集団によって作製される集団から得られる場合の抗体の性質を示し、いずれかの特定の方法による抗体の作製を必要とすると解釈されるべきではない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、Kohlerら1975Nature256:495によって最初に記載されたハイブリドーマ方法によって作製されても、組換えDNA方法例えば、米国特許第4,816,567号を参照のことによって作製されてもよい。モノクローナル抗体はまた、例えば、Clacksonら1991Nature352:624-628;Marksら1991J.Mol.Biol.222:581-597;および米国特許第5,514,548号において記載される技術を使用したファージ抗体ライブラリーから単離され得る。エピトープによって、抗体が作製され、そしてその抗体が結合する抗原分子の部分が意図される。エピトープは、直鎖状のアミノ酸残基すなわち、エピトープ内の残基が、直鎖状様式で互いに連続して配置される、非直鎖状のアミノ酸残基本明細書において非直鎖状エピトープといわれ;これらのエピトープは、連続的には配置されない、または直鎖状アミノ酸残基と非直鎖状アミノ酸残基との両方を含み得る。モノクローナル抗体は、Kohlerら1975Nature256:495-496の方法、またはその改変を使用して調製され得る。代表的には、マウスが、抗原を含む溶液を使用して免疫化される。免疫化は、生理的食塩水好ましくは、フロイント完全アジュバントのようなアジュバント中の抗原を含む溶液を混合または乳化し、そしてその混合物またはエマルジョンを非経口的に注射することによって実施され得る。当該分野において公知な任意の免疫化法が、本発明の抗体を得るために使用され得る。動物を免疫化した後、脾臓そして必要に応じて、1または数個の大きなリンパ節が回収され、そして単一の細胞に解離される。上記脾臓細胞は、目的の抗原でコーティングされたプレートまたはウェルに細胞懸濁液を適用することによって、スクリーニングされ得る。膜に結合された上記抗原に特異的な免疫グロブリンを発現するB細胞は、プレートに結合し、リンスで除かれない。得られたB細胞、または全ての解離された脾臓細胞は、次いでミエローマ細胞との融合が誘導されてハイブリドーマを形成し、そして選択培地中で培養される。得られた細胞は、連続希釈によってプレートされ、そして目的の抗原に特異的に結合するかつ、無関係の抗原に結合しない抗体の産生についてアッセイされる。選択されたモノクローナル抗体mAbを分泌secreteするハイブリドーマは、次いでインビトロ例えば、組織培養ボトルまたは中空繊維反応器において、またはインビボ例えば、マウスの腹水のいずれかで培養される。本発明のアンタゴニスト抗CD40抗体が、組換えDNA方法を使用して調製される場合、モノクローナル抗体をコードするDNAは、従来の手順例えば、マウス抗体の重鎖および軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合し得るオリゴヌクレオチドプローブを使用することによってを使用して容易に単離され、かつ配列決定される。本明細書におい記載されるハイブリドーマ細胞は、このようなDNAの好ましい供給源として機能する。一旦単離されると、上記DNAは、発現ベクター中に配置され得、次いでこの発現ベクターは、別に免疫グロブリンタンパク質を産生しない宿主細胞例えば、E.coli細胞、サルCOS細胞、チャイニーズハムスター卵巣CHO細胞、または骨髄腫細胞にトランスフェクトされ、組換え宿主細胞においてモノクローナル抗体の合成を得る。抗体をコードする細菌のDNAにおける組換え発現に関する概説の論文としては、Skerraら1993Curr.OpinioninImmunol.5:256およびPhickthun1992Immunol.Revs.130:151が挙げられる。ハイブリドーマの使用に代わるものとして、抗体は、米国特許第5,545,403号;同第5,545,405号;および同第5,998,144号これらは、本明細書において参考として援用されるに開示されるように、CHO細胞株のような細胞株において産生され得る。手短に言えば、上記細胞株は、それぞれ軽鎖および重鎖を発現し得るベクターを用いてトランスフェクトされる。別個のベクター上の2つのタンパク質をトランスフェクトすることによって、キメラ抗体が産生され得る。別の利点は、上記抗体の正しいグリコシル化である。いくつかの実施形態において、上記アンタゴニスト抗CD40抗体例えば、CHIR-12.12抗体またはCHIR-5.9抗体またはその抗原結合フラグメントは、グルタミン合成をマーカーとして使用するGS遺伝子発現系LonzaBiologics,Portsmouth,NewHampshireを使用してCHO細胞中で産生され得る。米国特許第5,122,464号;同第5,591,639号;同第5,658,759号;同第5,770,359号;同第5,827,739号;同第5,879,936号;同第5,891,693号;および同第5,981,216号もまた参照のこと;これらの内容は、その全体が参考として援用される。本明細書において使用される場合、用語抗原エピトープは、抗CD40モノクローナル抗体と免疫反応をし得る三次元の分子構造直鎖状またはコンホメーションの構造のいずれかをいう。抗原エピトープは、タンパク質、タンパク質フラグメント、ペプチド、炭水化物、脂質、および他の分子を含み得るが、本発明の目的のためには、最も一般的なタンパク質、短いオリゴペプチド、オリゴペプチドの模倣体mimicすなわち、CD40抗原の抗体結合特性を模倣する有機化合物、またはそれらの組み合わせである。適切なオリゴペプチド模倣体は、特に、PCT出願US91/04282に記載される。さらに、用語抗体は、本明細書において使用される場合、キメラ抗CD40抗体を包含する。本発明の方法で使用するためのこのようなキメラ抗CD40抗体は、抗CD40モノクローナル抗体CHIR-12.12またはCHIR-5.9の結合特性を有する。キメラ抗体によって、最も好ましくは組換えデオキシリボ核酸技術を使用して誘導され、そしてヒト免疫学的に関連した種例えば、チンパンジーを含むと非ヒトの両方の構成要素を含む抗体が意図される。したがって、上記キメラ抗体の定常領域は、最も好ましくは、天然のヒト抗体の定常領域と実質的に同一であり;上記キメラ抗体の可変領域は、最も好ましくは非ヒト供給源に由来し、そしてCD40細胞表面抗原に対して所望の抗原特異性を有する。上記非ヒト供給源は、ヒトCD40細胞表面抗原またはヒトCD40細胞表面抗原を含む物質に対する抗体を作製するために使用され得る任意の脊椎動物供給源であり得る。このような非ヒト供給源としては、げっ歯類例えば、ウサギ、ラット、マウスなど;例えば、米国特許第4,816,567号本明細書において、参考として援用されるを参照のことおよび非ヒト霊長類例えば、旧世界サル、サルなど;例えば、米国特許第5,750,105号および同第5,756,096号本明細書において、参考として援用されるを参照のことが挙げられるが、これらに限定されない。本明細書において使用される場合、語句免疫学的に活性とは、キメラ抗CD40抗体をいう際に使用される場合、ヒトCD40に結合するキメラ抗体を意味する。ヒト化抗CD40抗体は、本発明の方法における使用に適切な、さらなる抗CD40抗体を表す。ヒト化によって、非ヒト免疫グロブリン配列に由来する最小の配列を含む抗CD40抗体の形態が意図される。大部分については、ヒト化抗体は、ヒト免疫グロブリンでありレシピエント抗体、このヒト化抗体において、レシピエントの超可変領域相補性決定領域またはCDRとしても公知からの残基は、非ヒト種例えば、所望の特異性、親和性、および能力を有するマウス、ラット、ウサギ、または非ヒト霊長類の超可変領域に由来する残基によって置換されるドナー抗体。語句相補性決定領域とは、ネイティブな免疫グロブリン結合部位の天然のFv領域の結合親和性および結合特異性を一緒に規定するアミノ酸配列をいう。例えば、Chothiaら1987J.Mol.Biol.196:901-917;Kabatら1991米国保健省U.S.Dept.ofHealthandHumanServices、NIH公開番号91-3242を参照のこと。語句定常領域とは、エフェクター機能を与える抗体分子の部分をいう。ヒト疾患の治療において使用するための非免疫原性抗体の作製に関する先行する研究において、マウスの定常領域は、ヒト定常領域によって置換された。この対象のヒト化抗体の定常領域は、ヒト免疫グロブリンに由来した。しかしながら、これらのヒト化抗体は、ヒトにおいて好ましくなく、かつ危険な可能性のある免疫応答を依然として誘発し、そして親和性が喪失した。本発明の方法において使用するためのヒト化抗CD40抗体は、本明細書中に記載されたCHIR-5.9モノクローナル抗体およびCHIR-12.12モノクローナル抗体によって示される結合特性と類似した結合特性を有する。ヒト化は、本質的に、Winterおよび共同研究者の方法Jonesら1986Nature321:522-525;Riechmannら1988Nature332:323-327;Verhoeyenら1988Science239:1534-1536に従って、げっ歯類もしくは変異体げっ歯類のCDRまたはげっ歯類もしくは変異体げっ歯類のCDR配列を、ヒト抗体の対応する配列と置換することによって実施され得る。米国特許第5,225,539号;同第5,585,089号;同第5,693,761号;同第5,693,762号;および同第5,859,205号もまた参照のこと;これらは、本明細書において参考として援用される。いくつかの場合において、ヒト免疫グロブリンの1以上の可変領域のフレームワーク領域内の残基は、対応する非ヒト残基によって置換される例えば、米国特許第5,585,089号;同第5,693,761号;同第5,693,762号;および同第6,180,370号を参照のこと。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体またはドナー抗体においては見出されない残基を含み得る。これらの改変は、抗体性能をさらに洗練させるため例えば、所望の親和性を得るためになされる。一般的に、上記ヒト化抗体は、少なくとも1つの、そして代表的には2つの可変領域の全てを実質的に含み、この抗体において、非ヒト免疫グロブリンに対応する超可変領域の全てまたは実質的に全て、ならびに上記フレームワーク領域の全てまたは実質的に全ては、ヒト免疫グロブリン配列のものである。上記ヒト化抗体はまた、必要に応じて、免疫グロブリン定常領域Fc代表的には、ヒト免疫グロブリンの定常領域の少なくとも一部分を含む。さらなる詳細については、Jonesら1986Nature331:522-525;Riechmannら1988Nature332:323-329;およびPresta1992Curr.Op.Struct.Biol.2:593-596を参照のこと;これらは、本明細書において参考として援用される。従って、このようなヒト化抗体は、実質的に決してインタクトでないヒト可変領域が、非ヒト種からの対応する配列によって置換されている抗体を包含し得る。実際には、ヒト化抗体は、代表的に、いくつかのCDR残基およびおそらくいくつかのフレームワーク残基が、げっ歯類抗体におけるアナログ部位からの残基によって置換されるヒト抗体である。例えば、米国特許第5,225,539号;同第5,585,089号;同第5,693,761号;同第5,693,762号;同第5,859,205号を参照のこと。米国特許第6,180,370号および国際公開第01/27160号もまた参照のこと。ここで、ヒト化抗体および所定の抗原に対して改善された親和性を有するヒト化抗体を作製するための技術が、開示される。用語抗CD40抗体によって、不活化された内因性免疫グロブリンIg座によって特徴付けられる非ヒト哺乳動物宿主より具体的には、トランスジェニックマウスにおいて産生される異種抗CD40抗体または改変抗CD40抗体もまた包含される。このようなトランスジェニック動物において、宿主免疫グロブリンの軽鎖サブユニットおよび重鎖サブユニットの発現に対して適切な内因性遺伝子は、非機能的になり、アナログのヒト免疫グロブリン座で置換される。これらのトランスジェニック動物は、軽鎖または重鎖の宿主の免疫グロブリンサブユニットが実質的にない場合に、ヒト抗体を産生する。例えば、米国特許第5,877,397号および同第5,939,598号本明細書において参考として援用されるを参照のこと。好ましくは、トランスジェニックマウスを免疫化することによって、CD40に対する完全ヒト抗体が得られる。このようなマウスの1つは、XenoMouse登録商標技術Abgenix;Fremont,Californiaを使用して得られ、米国特許第6,075,181号、同第6,091,001号および同第6,114,598号これらの全ては、本明細書において参考として援用されるに開示される。本明細書において開示される抗体を作製するために、ヒトIgG1重鎖遺伝子座およびヒトκ軽鎖遺伝子座についてのトランスジェニックマウスが、ヒトCD40を発現するSf9細胞で免疫化され得る。マウスはまた、他のアイソタイプについてのトランスジェニックであってもよい。本発明の方法において有用な完全ヒト抗体は、CHIR-5.9モノクローナル抗体およびCHIR-12.12モノクローナル抗体によって示される結合特性と類似の結合特性によって特徴付けられる。抗体の適切な抗原結合フラグメントは、全長抗体の一部分一般的には、抗原結合領域またはその可変領域を含む。抗体フラグメントの例としては、Fabフラグメント、Fab’2フラグメント、およびFvフラグメント、ならびに単鎖抗体分子が挙げられるが、これらに限定されない。Fabによって、軽鎖と重鎖の一部とからなる免疫グロブリンの一価の抗原結合フラグメントが意図される。Fab’2によって、両方の軽鎖と両方の重鎖の一部を含む免疫グロブリンの二価の抗原結合フラグメントが意図される。単鎖FvまたはsFv抗体フラグメントによって、抗体のVHドメインおよびVLドメインを含み、これらのドメインが一本のポリペプチド鎖中に提示されるフラグメントが意図される。例えば、米国特許第4,946,778号、同第5,260,203号、同第5,455,030号および同第5,856,456号これらは、本明細書において参考として援用されるを参照のこと。一般的に、上記Fvポリペプチドは、VHドメインとVLドメインとの間に、sFvが抗原結合のための所望の構造を形成することを可能にするためのポリペプチドリンカーをさらに含む。sFvの概要については、Pluckthun1994、ThePharmacologyofMonoclonalAntibodies、第113巻、RosenburgおよびMoore編Springer-Verlag,NewYork、pp.269-315を参照のこと。抗体または抗体フラグメントは、例えば、McCaffertyら1990Nature348:552-5541990および米国特許第5,514,548号において記載される技術を使用して作製された抗体ファージライブラリーから単離され得る。Clacksonら1991Nature352:624-628およびMarksら1991J.Mol.Biol.222:581-597は、それぞれ、ファージライブラリーを使用したマウス抗体およびヒト抗体の単離を記載する。以下の刊行物は、鎖シャフリングによる高親和性nM範囲のヒト抗体の作製Marksら1992Bio/Technology10:779-783、ならびに非常に広範なファージライブラリーを構築するためのストラテジーとしての、組み合わせ感染およびインビボの再組換えWaterhouseら1993Nucleic.AcidsRes.21:2265-2266を記載する。したがって、これらの技術は、モノクローナル抗体を単離するための伝統的なモノクローナル抗体のハイブリドーマ技術に対する実行可能な代替案である。種々の技術が、抗体フラグメントの作製のために開発されている。伝統的には、これらのフラグメントは、インタクトな抗体のタンパク質分解性消化を介して得られた例えば、Morimotoら1992JournalofBiochemicalandBiophysicalMethods24:107-1171992およびBrennanら1985Science229:81を参照のこと。しかし、これらのフラグメントは、現在は、組換え宿主細胞によって直接的に産生され得る。例えば、この抗体フラグメントは、上記に記載の抗体ファージライブラリーから単離され得る。あるいは、Fab’-SHフラグメントは、E.coliから直接回収され得、化学的に結合されてFab’2フラグメントを形成するCarterら1992Bio/Technology10:163-167。別のアプローチに従って、Fab’2フラグメントは、組換え宿主細胞の培養物から直接単離され得る。抗体フラグメントを作製するための他の技術は、当業者には明らかである。本発明の方法において有用な抗体としては、非CDR領域において異なる本明細書中に開示されたCHIR-5.9モノクローナル抗体およびCHIR-12.12モノクローナル抗体のようなアンタゴニスト抗CD40抗体;ならびに1つ以上のアミノ酸の付加、欠失、または置換を有する抗体が挙げられる。本発明はまた、免疫化されたヒト化アンタゴニスト抗CD40抗体を包含し、この抗体は、例えば、国際公開第98/52976号および同第0034317号本明細書において参考として援用されるに記載されたとおりに作製され得る。この様式において、本発明の方法を実施するために有用な抗体内の残基が改変されて、その結合特異性および生物学的活性を保持しながら、抗体を、ヒトに対して免疫原性がないか、または免疫原性が低いようにする。ここで、このような活性は、本明細書の他で記述されるアッセイによって測定される。特許請求の範囲の範囲内には、アンタゴニスト抗CD40抗体またはそのフラグメントを含む融合タンパク質もまた包含され、この融合タンパク質は、当該分野で公知のように、合成されても、対応するポリヌクレオチドベクターから発現されてもよい。このような融合タンパク質は、以下に記述される抗体の結合体化への参照とともに記載される。本発明の方法の実施において有用な抗体は、例えば、欧州特許出願公開第0983303A1号、国際公開第00/34317号および同第98/52976号本明細書において参考として援用されるにおいて記載される方法を使用して作製される配列のバリエーションを有し得る。例えば、CDR内の配列は、抗体をMHCクラスIIに結合させ、好ましくないヘルパーT細胞応答を誘発し得ることが示されている。保存的置換は、上記抗体の結合活性は保持させるが、好ましくないT細胞応答を誘発するその能力を失わせ得る。任意のこのような保存的置換または非保存的置換は、当該分野で認められた方法例えば、本明細書中で他の部分に記載される方法を使用して作製され得、そして生じた抗体は、本発明の範囲内である。この改変抗体は、本明細書において記載された方法を使用して、通常、アンタゴニスト活性、親和性、および特異性について試験され得る。上記の方法のいずれか、または本明細書中に開示されない任意の他の方法によって作製されるアンタゴニスト抗CD40抗体は、少なくとも1つの以下の生物学的活性を有する場合に、本発明の範囲内に納まる:T細胞によって刺激される正常なヒト末梢B細胞による免疫グロブリン分泌の阻害;ジャーカットT細胞によって刺激される正常なヒト末梢B細胞の増殖阻害;CD40Lを発現する細胞または可溶性CD40によって刺激される正常なヒト末梢B細胞の増殖阻害;および以下に記載されるような悪性のヒトB細胞の増殖阻害。これらのアッセイは、同時継続中の仮出願いずれも、発明の名称AntagonistAnti-CD40MonoclonalAntibodiesandMethodsforTheirUseであり、それぞれ、2003年11月4日、2003年11月26日、および2004年4月27日出願、割り当てられた米国特許出願第60/517,337号代理人事件整理番号:PP20107.001035784/258442、同第60/525,579号代理人事件整理番号:PP20107.002035784/271525、および同第60/565,710号代理人事件整理番号:PP20107.003035784/277214において記載されるように実施され得る。これらの特許文献の各々の内容は、その全体が、本明細書中に参考として援用される。Schultzeら1998Proc.Natl.Acad.Sci.USA92:8200-8204;Dentonら1998Pediatr.Transplant.2:6-15;Evansら2000J.Immunol.164:688-697;Noelle1998AgentsActionsSuppl.49:17-22;Ledermanら1996Curr.Opin.Hematol.3:77-86;Coliganら1991CurrentProtocolsinImmunology13:12;Kwekkeboomら1993Immunology79:439-444;ならびに米国特許第5,674,492号および同第5,847,082号本明細書において参考として援用されるにおいて記載されるアッセイもまた参照のこと。本明細書において同定されるCD40抗原エピトープに特異的なアンタゴニスト抗CD40抗体を検出するための代表的なアッセイは、競合的結合アッセイである。競合的結合アッセイは、そのアッセイにおいて、未知のものが検出されて、特異的な抗体に対する標識された既知のリガンドの結合を阻害するその能力によって定量される血清学的アッセイである。これはまた、競合的阻害アッセイともいわれる。代表的な競合的結合アッセイにおいて、標識されたCD40ポリペプチドは、例えば、本発明のモノクローナル抗体の1つ以上のエピトープに対して惹起されたモノクローナル抗体と組み合わせて、サンプル中の候補抗体によって沈殿される。目的のエピトープと特異的に反応する抗CD40抗体は、CD40タンパク質または目的のCD40タンパク質の特定のエピトープを含むタンパク質のフラグメントに対して調製された一連の抗体をスクリーニングすることによって同定され得る。例えば、ヒトCD40について、目的のエピトープとしては、図4B配列番号10に記載されたヒトCD40の短いアイソフォームGenBank登録番号NP_690593を参照のこと図4Aに記載される配列配列番号9;GenBank登録番号NM_152854もまた参照のことによってコードされる、もしくは図4D配列番号12に記載されたヒトCD40の長いアイソフォームGenBank登録番号CAA43045およびNP_001241を参照のこと図4Cに記載される配列配列番号11;GenBank登録番号X60592およびNM_001250もまた参照のことによってコードされるの直鎖状アミノ酸残基および/または非直鎖状アミノ酸残基を含むエピトープが挙げられる。あるいは、以前に同定された適切なアンタゴニスト抗CD40抗体を用いた競合的結合アッセイは、以前に同定された抗体に匹敵するモノクローナル抗体を選択するために使用され得る。任意の以前に記載されたアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、本発明の方法において使用される前に結合体化され得る。結合体化された抗体を作製するための方法は、当該分野で公知である。従って、上記抗CD40抗体は、間接的標識または間接的標識アプローチを使用して標識され得る。間接的標識または間接的標識アプローチによって、キレート剤は抗体に共有結合され、そして少なくとも1つの放射性核種が、キレート剤にいれられることが意図される。例えば、SrivastavaおよびMease1991Nucl.Med.Bio.18:589-603本明細書中に参考として援用されるに記載されるキレート剤および放射性核種を参照のこと。適切な標識としては、発蛍光団、発色団、放射活性原子特に、32Pおよび125I、高電子密度試薬、酵素、および特異的結合パートナーを有するリガンドが挙げられる。酵素は、代表的に、それらの活性によって検出される。例えば、西洋わさびペルオキシダーゼは、通常、3,3’,5,5’-テトラメチルベンジジンTMBを青色色素に変換する能力によって検出され、分光光度計で定量可能である。特異的結合パートナーとは、例えば、抗原およびその特異的なモノクローナル抗体の場合のように、高い特異性でリガンド分子に結合し得るタンパク質をいう。他の特異的な結合パートナーとしては、ビオチンとアビジンまたはストレプトアビジン、IgGとプロテインA、および当該分野で公知の多くのレセプター-リガンド対が挙げられる。同じ標識は1または数種の異なる様式において機能し得るので、上記の説明は、種々の標識を別個のクラスに分類することを意味しないことが理解されるべきである。例えば、125Iは、放射活性標識としてか、または高電子密度試薬として機能し得る。HRPは、酵素としてか、またはmAbに対する抗原として機能し得る。さらに、所望の効果のために種々の標識を組み合わせることもできる。例えば、mAbおよびアビジンもまた、本発明の実施において標識を必要とする:従って、ビオチンでmAbを標識し、125Iで標識したアビジンまたはHPRで標識した抗ビオチンmAbを用いて、その存在を検出し得る。他の交換および可能性は、当業者には容易に明らかであり、本発明の範囲内の等価物として考えられる。あるいは、抗CD40抗体は、直接的標識または直接的標識アプローチを使用して標識され得、放射性核種は、抗体に対して代表的には、アミノ酸残基を介して直接的に共有結合される。好ましい放射性核種は、SrivastavaおよびMease1991上述に提供される。間接的標識アプローチは、特に好まれる。例えば、リンカーが抗体に対して放射活性標識を結合するために使用される、国際公開番号WO00/52031および同WO00/52473、;および米国特許第6,015,542号に記載される抗体の標識された形態本明細書中に参考として援用されるも参照のこと。さらに、抗体またはそのフラグメントは、治療的部分例えば、細胞毒、治療因子、または放射活性金属イオンもしくは放射性同位体に対して結合体化され得る。細胞毒または細胞毒性因子としては、細胞に有害な任意の因子が挙げられる。例としては、タキソール、サイトカラシンB、グラミシジンD、エチジウムブロマイド、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシンジオン、ミトザントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンD、1-デヒドロテストステロン、糖質コルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、およびピューロマイシン、ならびにそれらのアナログまたはホモログが挙げられる。治療因子としては、代謝拮抗物質例えば、フルダラビン、2-クロロデオキシアデノシンクラドリビン、メトトレキサート、6-メルカプトプリン、6-チオグアニン、シタラビン、5-フルオロウラシルデカルバジン、アルキル化剤例えば、メクロレタミン、チオエパクロラムブシル、メルファラン、カルムスチンBSNUおよびロムスチンCCNU、シクロホスファミド、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンC、およびシス-ジクロロジアミン白金IIDDPシスプラチン、アントラサイクリン例えば、ダウノルビシン以前のダウノマイシンおよびドキソルビシン、抗生物質例えば、ダクチノマイシン以前のアクチノマイシン、ブレオマイシン、ミトラマイシン、およびアントラマイシンAMC、および有糸分裂阻害剤例えば、ビンクリスチンおよびビンブラスチンが挙げられるが、これらに限定されない。放射性同位体としては、I-131、I-123、I-125、Y-90、Re-188、Re-186、At-211、Cu-67、Bi-212、Bi-213、Pd-109、Tc-99、In-111などが挙げられるが、これらに限定されない。本発明の結合体は、所与の生物学的反応を修飾するために使用され得;その薬物部分は、伝統的な化学的治療因子に限定されるものとして解釈されるべきではない。例えば、薬物部分は、所望の生物学的活性を有するタンパク質またはポリペプチドであり得る。例えば、このようなタンパク質としては、毒素例えば、アブリン、リシンA、シュードモナス外毒素またはジフテリア毒素;タンパク質例えば、腫瘍壊死因子、インターフェロン-α、インターフェロン-β、神経発育因子、血小板由来成長因子、組織プラスミノゲン賦活剤;または例えば、リンホカイン、インターロイキン-1IL-1、インターロイキン-2IL-2、インターロイキン-6IL-6、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子GM-CSF、顆粒球コロニー刺激因子G-CSF、もしくは他の成長因子のような生物学的反応修飾物質が挙げられる。抗体に対するこのような治療部分を結合体化するための技術は、周知である。例えば、Arnonら1985MonoclonalAntibodiesandCancerTherapyのMonoclonalAntibodiesforImmunotargetingofDrugsinCancerTherapy,Reisfeldら編AlanR.Liss,Inc.,pp.243-256;Hellstromら編1987,ControlledDrugDeliveryのAntibodiesforDrugDelivery,Robinsonら編第2版;MarcelDekker,Inc.,pp.623-653;Thorpe1985MonoclonalAntibodies’84のAntibodyCarriersofCytotoxicAgentsinCancerTherapy:AReview:BiologicalandClinicalApplications,Pincheraら編pp.475-506EditriceKurtis,Milano,Italy,1985;MonoclonalAntibodiesforCancerDetectionandTherapyのAnalysis,Results,andFutureProspectiveoftheTherapeuticUseofRadiolabeledAntibodyinCancerTherapy,Baldwinら編AcademicPress,NewYork,1985,pp.303-316;およびThorpeら1982Immunol.Rev.62:119-158を参照のこと。あるいは、抗体は、第2の抗体に結合体化されて、米国特許第4,676,980号に記載されるような抗体ヘテロ結合体heteroconjugateを形成し得る。さらに、リンカーが、上記標識と本発明の抗体との間に使用され得る例えば、米国特許第4,831,175号を参照のこと。抗体またはその抗原結合フラグメントは、放射性のヨウ素、放射性のインジウム、放射性のイットリウム、または当該分野で公知である他の放射性粒子によって直接的に標識され得る米国特許第5,595,721号。処置は、同日かまたは異なる日に、いずれかの順序で、同時または引き続いて投与される結合体化抗体および非結合体化抗体を用いた、処置の組み合わせからなり得るWO00/52031およびWO00/52473。アンタゴニスト抗CD40抗体の生物学的に活性な改変体本発明の方法において有用な薬学的組成物は、本発明のアンタゴニスト抗CD40抗体の生物学的に活性な改変体を含有し得る。このような改変体は、この改変体ポリペプチドを含有する薬学的組成物が、被検体に対して投与される場合にネイティブなポリペプチドを含有する薬学的組成物と同じ治療効果を有するように、ネイティブのポリペプチドの所望の生物学的活性を維持するべきである。すなわち、改変抗CD40抗体は、ネイティブなアンタゴニスト抗体例えば、それぞれ、ハイブリドーマ細胞株5.9またはハイブリドーマ細胞株12.12によって発現されるようなCHIR-5.9またはCHIR-12.12において観察されるものと同様の様式において、上記薬学的組成物中の治療上活性な成分として機能する。方法は、改変抗CD40抗体が所望の生物学的活性を維持し、したがって薬学的組成物中の治療上活性な成分として機能するか否かを決定するために当該分野において利用可能である。抗体改変体の生物学的活性は、ネイティブなアンタゴニスト抗体の活性を測定するために、具体的に設計されたアッセイを使用して測定され得、このアッセイとしては、本発明に記載されるアッセイが挙げられる。アンタゴニスト抗CD40抗体の生物学的に活性な適切な改変体は、親抗体すなわち、親アンタゴニスト抗CD40抗体の所望の結合特性を維持する。抗体改変体を作製するための方法は、当該分野において一般的に利用可能である。例えば、アンタゴニスト抗CD40抗体例えば、本明細書において記載されるCHIR-5.9モノクローナル抗体またはCHIR-12.12モノクローナル抗体のアミノ酸配列の改変体は、IL-2について本明細書中に上記される変異誘発およびヌクレオチド配列変更についての方法を使用して調製され得る。例えば、以下を参照のこと:WalkerおよびGaastra編1983TechniquesinMolecularBiologyMacMillanPublishingCompany,NewYork;Kunkel1985Proc.Natl.Acad.Sci.USA82:488-492;Kunkelら1987MethodsEnzymol.154:367-382;Sambrookら1989MolecularCloning:ALaboratoryManualColdSpringHarbor,NewYork;米国特許第4,873,192号;およびこれらにおいて引用される参考文献これらは、本明細書において参考として援用される。目的のポリペプチドの生物学的活性に影響しない適切なアミノ酸置換基に関しての指針は、Dayhoffら1978、AtlasofProteinSequenceandStructureNatl.Biomed.Res.Found.,Washington,D.C.本明細書において参考として援用されるのモデルにおいて見出され得る。1つのアミノ酸を類似の特性を有する別のアミノ酸で交換するような、保存的置換が好まれ得る。保存的置換の例としては、Gly⇔Ala、Val⇔Ile⇔Leu、Asp⇔Glu、Lys⇔Arg、Asn⇔Gln、およびPhe⇔Trp⇔Tyrが挙げられるが、これらに限定されない。IL-2の改変体と同様に、アンタゴニスト抗CD40抗体の改変体は、改変体が所望の活性すなわち、類似の結合親和性を保有し続け、そしてヒト細胞の表面上に発現されたヒトCD40抗原に特異的に結合することができ、そして有意なアゴニスト活性を有さないが、ヒトCD40発現細胞上のCD40抗原に結合された場合に、アンタゴニスト活性を示すように作製される。IL-2と同様に、上記改変CD40ポリペプチドをコードするDNA中に作製された任意の変異は、リーディングフレームの外の配列に位置してはならず、そして好ましくは、mRNA二次構造を生じ得る相補的領域を作製しない。欧州特許出願公開第75,444号を参照のこと。好ましくは、アンタゴニスト抗CD40抗体の改変体は、比較の基礎として機能する参照ポリペプチド分子例えば、本明細書において記載されるCHIR-5.9モノクローナル抗体またはCHIR-12.12モノクローナル抗体のような参照アンタゴニスト抗CD40抗体分子のアミノ酸配列に対してか、あるいは参照抗体分子のより短い部分に対して、少なくとも70、好ましくは少なくとも80の配列同一性、より好ましくは少なくとも90~95以上の配列同一性、そして最も好ましくは少なくとも96、97、98または99の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。より好ましくは、上記分子は、少なくとも96、97、98または99の配列同一性を共有する。本発明の目的のために、アンタゴニスト抗CD40抗体についての配列同一性は、IL-2について記載される様式で決定される。この様式では、アフィンギャップサーチを使用したSmith-Watermanホモロジーサーチアルゴリズム12のギャップオープンペナルティおよび2のギャップ伸長ペナルティ、62のBLOSUMマトリックスを使用を使用して、配列同一性が決定される。改変体は、例えば、わずか1~15アミノ酸残基、わずか1~10アミノ酸残基例えば、6~10、わずか5、わずか4、3、2、またはさらに1アミノ酸残基だけ上記参照アンタゴニスト抗CD40抗体と異なる。本明細書中に予め上記されるように、任意の2つのアミノ酸配列の最適なアライメントに関して、上記改変アミノ酸配列の隣接するセグメントは、上記参照アミノ酸配列例えば、抗体CHIR12.12および抗体CHIR-5.9について、アミノ酸残基の付加またはアミノ酸残基の欠失を有し得る。上記参照アミノ酸配列を比較するために使用される隣接するセグメントは、少なくとも20個の連続するアミノ酸残基を含み、そして30個、40個、50個またはそれ以上のアミノ酸残基であり得る。保存的な残基置換またはギャップに関連する配列同一性に対する補正が、なされ得るSmith-Watermanホモロジーサーチアルゴリズムを参照のこと。IL-2と同様に、特に、悪性B細胞上のCD40抗原に結合された場合、CD40を特異的に結合し、かつアンタゴニスト活性を保持し得るポリペプチドの正確な化学的構造は、多くの因子に依存する。イオン化可能なアミノ基およびカルボニル基が分子中に存在する場合、特定のポリペプチドは、酸性塩もしくは塩基性塩として、または中性形態で得られ得る。適切な環境状態に配置された場合に、その生物学的活性を保持するこのような調製物の全ては、本明細書において使用されるアンタゴニスト抗CD40抗体の定義の中に含まれる。さらに、上記ポリペプチドの一次アミノ酸配列は、糖部分を使用した誘導体化グリコシル化または他の補助的な分子例えば、脂質、リン酸、アセチル基などによって増加され得る。上記ポリペプチドの一次アミノ酸配列は、糖類との結合体化によってもまた増加され得る。このような増加の特定の局面は、産生する宿主の翻訳後の処理システムを通じて達成され;他のこのような改変も、インビトロで導入され得る。とにかく、このような改変は、上記抗CD40抗体の結合特性アンタゴニスト活性を含むが破壊されない限り、本明細書において使用される抗CD40抗体の定義の中に含まれる。このような改変体は、種々のアッセイにおいて、上記ポリペプチドの活性を増強させるか、または弱めるかのいずれかによって、その活性に量的または質的に影響し得ることが予想される。さらに、上記鎖中の個々のアミノ酸残基は、酸化、還元、または他の誘導体化によって改変され得、そして上記ポリペプチドは、活性を保持するフラグメントを得るために切断され得る。無修飾抗体の所望の活性を破壊しないこのような変更は、本明細書において使用される目的の抗CD40抗体の定義から上記ポリペプチド配列を除かない。予め上記されるように、当該分野は、ポリペプチド改変体の調製および使用に関する実質的な指針を提供する。抗体改変体の調製において、当業者は、ネイティブのタンパク質のヌクレオチドまたはアミノ酸配列に対するどの修飾が、本発明の方法において使用される薬学的組成物の治療上活性な成分として使用するために適切である改変体を生じるかを容易に決定し得る。アンタゴニスト抗CD40抗体の薬学的処方物本発明のアンタゴニスト抗CD40抗体は、治療上有効である濃度において投与されて、慢性リンパ性白血病を防止または処置する。この目的を達成するために、上記抗体は、当該分野で公知の種々の受容可能な賦形剤を使用して処方され得る。代表的には、上記抗体は、例えば、静脈内注射、腹腔内注射、または皮下注射のいずれかの注射によって投与される。この投与を達成するための方法は、当業者に公知である。局所投与もしくは経口投与され得る組成物、または粘膜を通過して透過し得る組成物を得ることもまた可能であり得る。本発明の薬学的組成物は、意図される投与の経路と適合するように処方される。可能な投与の経路の例としては、非経口投与例えば、静脈内IV、筋肉内IM、皮内、皮下SC、または注入、経口投与および肺投与例えば、吸入、鼻投与、経皮局所投与、経粘膜投与ならびに直腸投与が挙げられる。非経口適用、皮内適用、もしくは皮下適用に使用される溶液または懸濁液は、以下の成分を含み得る:滅菌希釈液例えば、注射用水、生理的食塩溶液、不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒;抗菌剤例えば、ベンジルアルコールまたはメチルパラベン;抗酸化剤例えば、アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウム;キレート剤例えば、エチレンジアミン四酢酸;緩衝剤例えば、酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩、および張度調節のための薬剤例えば、塩化ナトリウムまたはデキストロース。pHは、酸または塩基例えば、塩酸または水酸化ナトリウムで調節され得る。この非経口調製物は、アンプル、使い捨てシリンジ、またはガラス製もしくはプラスチック製の複数用量バイアルの中に封じ込められ得る。上記抗体は、代表的には、標準的技術によって、薬学的に受容可能な緩衝剤例えば、滅菌生理的食塩水、滅菌緩衝水、プロピレングリコール、前述のものの組み合わせなど内に提供される。上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、別個の薬学的組成物中に処方されても、同時投与のためにIL-2もしくはその生物学的に活性な改変体を含む単一の薬学的組成物内に処方されてもよい。非経口的に投与可能な薬剤を調製するための方法は、Remington’sPharmaceuticalSciences第18版;MackPublishingCompany,Eaton,Pennsylvania,1990本明細書において参考として援用されるにおいて記載される。例えば、本発明の方法において使用するために適切な安定化抗体の薬学的処方物を記載するWO98/56418もまた参照のこと。本発明の方法において使用するための、本明細書中に記載される薬学的組成物中に存在する上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、ネイティブであっても組換え技術によって得られてもよく、そして哺乳動物の供給源例えば、マウス、ラット、ウサギ、霊長類、ブタ、およびヒトのような任意の供給源由来であってもよい。好ましくは、このようなポリペプチドは、ヒトの供給源に由来し、そしてより好ましくは組換えの、ハイブリドーマ細胞株から得たヒトタンパク質である。治療上活性な成分として本明細書中に記載される結合特性を有するアンタゴニスト抗CD40抗体を含有する、あらゆる薬学的組成物が、本発明の方法において使用され得る。従って、1種以上の本発明のアンタゴニスト抗CD40抗体を含有する液体、凍結乾燥または噴霧乾燥した組成物は、本発明の方法に従う、その後の被験体への投与のために、水系もしくは非水系の溶液または懸濁液として調製され得る。これらの組成物の各々は、治療的または予防的に活性な成分として、少なくとも1種の本発明のアンタゴニスト抗CD40抗体を含有する。治療的または予防的に活性な成分により、抗CD40抗体が、組成物中に特異的に組み込まれて、薬学的組成物が被験体に投与されるときに、この被験体内の疾患もしくは状態の、処置、予防または診断に関して、所望の治療的または予防的な応答をもたらすことが意図される。好ましくは、薬学的組成物は、適切な安定化剤、充填剤、またはこれらの両方を含有し、調製および保存の間の、タンパク質の安定性および生物学的活性の喪失に伴う問題を最小限にする。処方用物質formulantが、本発明のアンタゴニスト抗CD40抗体を含有する薬学的組成物に添加され得る。これらの処方用物質としては、油、ポリマー、ビタミン、炭水化物、アミン酸amineacid、塩、緩衝液、アルブミン、界面活性剤、または充填剤が挙げられ得るがこれらに限定されない。好ましくは、炭水化物としては、糖または糖アルコール例えば、単糖類、二糖類、もしくは多糖類、または水溶性グリカンが挙げられる。糖類またはグリカンとしては、フルクトース、グルコース、マンノース、ソルボース、キシロース、マルトース、スクロース、デキストラン、プルラン、デキストリン、αおよびβシクロデキストリン、可溶性デンプン、ヒドロキシエチルデンプン、ならびにカルボキシメチルセルロース、またはこれらの混合物が挙げられ得る。糖アルコールは、ヒドロキシル基を有するC4~C8炭化水素として定義され、そして、糖アルコールとしては、ガラクチトール、イノシトール、マンニトール、キシリトール、ソルビトール、グリセロールおよびアラビトールが挙げられる。これらの糖または糖アルコールは、個別または組み合わせで使用され得る。糖または糖アルコールの濃度は、1.0w/vと7w/vとの間であり、より好ましくは、2.0w/vと6.0w/vとの間である。好ましくは、アミノ酸としては、左旋L形態のカルニチン、アルギニンおよびベタインが挙げられる;しかし、他のアミノ酸も添加され得る。好ましいポリマーとしては、2,000と3,000との間の平均分子量を有するポリビニルピロリドンPVP、または、3,000と5,000との間の平均分子量を有するポリエチレングリコールPEGが挙げられる。処方物中に添加され得る界面活性剤としては、欧州特許第270,799号および同第268,110号に示される。さらに、抗体は、例えば、その循環半減期を増加させるために、ポリマーへの共有結合によって化学修飾され得る。好ましいポリマー、およびこのポリマーをペプチドに結合させる方法は、米国特許第4,766,106号;同第4,179,337号;同第4,495,285号;および同第4,609,546号これらは、全て、その全体が本明細書中に参考として援用されるに示される。好ましいポリマーは、ポリオキシエチル化ポリオールおよびポリエチレングリコールPEGである。PEGは、室温で水溶性であり、一般式:RO--CH2--CH2nO--Rを有する。この式において、Rは、水素、またはアルキル基もしくはアルカノール基のような保護基であり得る。好ましくは、この保護基は、1個と8個の間の炭素を有し、より好ましくは、この保護基はメチルである。記号nは、正の整数であり、好ましくは、1と1,000との間、より好ましくは、2と500との間である。PEGは、1,000と40,000との間、より好ましくは、2,000と20,000との間、最も好ましくは、3,000と12,000との間の好ましい平均分子量を有する。好ましくは、PEGは、少なくとも1つのヒドロキシ基を有し、より好ましくは、それは、末端のヒドロキシ基である。好ましくはインヒビター上の遊離アミノ基と反応するように活性化されるのは、このヒドロキシ基である。しかし、反応基の型および量は、本発明の共有結合化PEG/抗体を達成するために変動し得ることが理解される。水溶性のポリオキシエチル化ポリオールもまた、本発明において有用である。これらとしては、ポリオキシエチル化ソルビトール、ポリオキシエチル化グルコース、ポリオキシエチル化グリセロールPOGなどが挙げられる。POGが好ましい。1つの理由は、ポリオキシエチル化グリセロールのグリセロール骨格が、例えば、動物およびヒトのモノグリセリド、ジグリセリド、トリグリセリドにおいて天然に存在するものと同じ骨格であるからである。従って、この分枝形成は、必ずしも身体において外来因子として認識されない。POGは、PEGと同じ範囲の好ましい分子量を有する。POGの構造は、Knaufら1988J.Bio.Chem.263:15064-15070に示され、POG/IL-2結合体の考察については、米国特許第4,766,106号に見られ、これらは、いずれも、その全体が本明細書により参考として援用される。循環半減期を増加するための別の薬物送達系は、リポソームである。リポソーム送達系を調製する方法は、Gabizonら1982CancerResearch42:4734;Cafiso1981BiochemBiophysActa649:129;およびSzoka1980Ann.Rev.Biophys.Eng.9:467において議論されている。他の薬物送達系が当該分野で公知であり、例えば、Poznanskyら1980DrugDeliverySystemsR.L.Juliano編,Oxford,N.Y.pp.253-315;Poznansky1984PharmRevs36:277に記載される。薬学的組成物に組み込まれる処方用物質は、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの安定性のために提供されるべきである。すなわち、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、その物理的および/または化学的安定性を保持し、そして、所望の生物学的活性すなわち、本明細書において上で定義される1種以上のアンタゴニスト活性T細胞により刺激された正常なヒト末梢B細胞による免疫グロブリン分泌の阻害;JurkatT細胞により刺激された正常なヒト末梢B細胞の生存および/または増殖の阻害;CD40L発現細胞もしくは可溶性CD40リガンドsCD40Lにより刺激された正常ヒト末梢B細胞の生存および/または増殖の阻害;sCD40Lもしくは固相CD40Lにより刺激された、あらゆる細胞における生き残った抗アポトーシス細胞内シグナルの阻害;sCD40Lまたは固相CD40Lとのライゲーションに対する任意の細胞におけるCD40シグナル伝達の阻害;ならびに、本明細書中の他の部分で言及した、ヒト悪性B細胞の増殖の阻害が挙げられるがこれらに限定されないを有するべきである。タンパク質の安定性をモニターするための方法は、当該分野で周知である。例えば、Jones1993Adv.DrugDeliveryRev.10:29-90;Lee編1991PeptideandProteinDrugDeliveryMarcelDekker,Inc.,NewYork,NewYork;および本明細書中、以下に開示される安定性アッセイを参照のこと。一般に、タンパク質の安定性は、特定の時間にわたって、選択された温度において測定される。好ましい実施形態において、安定な抗体の薬学的処方物は、室温約25°Cにおいて、少なくとも1ヶ月、少なくとも3ヶ月、もしくは少なくとも6ヶ月保存した場合に、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの安定性を提供し、そして/あるいは、2~8°Cにおいて、少なくとも6ヶ月、少なくとも9ヶ月、少なくとも12ヶ月、少なくとも18ヶ月、少なくとも24ヶ月、安定である。薬学的組成物中に処方される場合、抗体のようなタンパク質は、その薬学的組成物中で、沈殿、凝集および/または変性の、目に見える徴候すなわち、変色または透明度の喪失または例えば、サイズ排除クロマトグラフィーSECまたはUV光散乱を使用して測定可能な徴候を示さない場合に、所定の時点において、その物理的安定性を保持すると考えられる。化学的安定性に関して、薬学的組成物中に処方される場合、抗体のようなタンパク質は、その薬学的組成物中で、化学的安定性の測定が、そのタンパク質すなわち、抗体が、目的の生物学的活性を保持することを暗示する場合に、所定の時点において、その化学的安定性を保持すると考えられる。化学的安定性の変化をモニターするための方法は、当該分野で周知であり、この方法としては、例えば、SDS-PAGE、SECおよび/またはマトリックス支援レーザー脱離イオン化/飛行時間質量分析を使用する、タンパク質の化学的に変更された形態例えば、クリッピングからの結果を検出するための方法;および、例えば、イオン交換クロマトグラフィーを使用する、分子の電荷の変化に伴う分解例えば、脱アミドに伴う分解を検出する方法が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、本明細書中で、以下に開示される方法を参照のこと。薬学的組成物中に処方される場合、アンタゴニスト抗CD40抗体、またはその抗原結合フラグメントは、所望の生物学的活性に適切なアッセイにおいて測定されるとき、その時点での所望の生物学的活性が、その薬学的組成物が調製された時点で示される所望の生物学的活性の約30以内、好ましくは、約20以内である場合に、所定の時点において所望の生物学的活性を保持すると考えられる。本明細書中に開示されるアンタゴニスト抗CD40抗体およびその抗原結合フラグメントの所望の生物学的活性を測定するためのアッセイは、本明細書中の実施例に記載されるようにして実施され得る。また、Schultzeら1998Proc.Natl.Acad.Sci.USA92:8200-8204;Dentonら1998Pediatr.Transplant.2:6-15;Evansら2000J.Immunol164:688-697;Noelle1998AgentsActionsSuppl.49:17-22;Ledermanら1996Curr.Opin,Hematol.3:77-86;Coliganら1991CurrentProtocolsinImmunology13:12;Kwekkeboomら1993Immunology79:439-444;ならびに米国特許第5,674,492号および同第5,847,082号に記載されるアッセイもまた参照のことこれらは、本明細書中に参考として援用される。本発明のいくつかの実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体例えば、CHIR-12.12モノクローナル抗体、もしくはCHIR-5.9モノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメントは、液体薬学的処方物中に処方される。アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、当該分野で公知の任意の方法を使用して調製され得、これらの方法としては、本明細書において上で開示された方法が挙げられる。1つの実施形態において、アンタゴニスト抗CD40抗体例えば、CHIR-12.12モノクローナル抗体、もしくはCHIR-5.9モノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメントは、CHO細胞株において組換え的に産生される。その調製および精製の後、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントは、本明細書中に示される様式で液体薬学的処方物として処方され得る。アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントが、その処方前に保存される場合、これらは、例えば、≦-20°Cにおいて凍結され、次いで、さらなる処方のために、室温にて融解され得る。この液体薬学的処方物は、治療有効量のアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。この処方物中に存在する抗体またはその抗原結合フラグメントの量は、投与経路および所望の投薬用量を考慮に入れる。この様式において、液体薬学的組成物は、アンタゴニスト抗CD40抗体例えば、CHIR-12.12抗体もしくはCHIR-5.9抗体またはその抗原結合フラグメントを、約0.1mg/ml~約50mg/ml、約0.5mg/ml~約40.0mg/ml、約1.0mg/ml~約30.0mg/ml、約5.0mg/ml~約25.0mg/ml、約5.0mg/ml~約20.0mg/ml、または約15.0mg/ml~約25.0mg/mlの濃度で含む。いくつかの実施形態において、この液体薬学的組成物は、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを、約0.1mg/ml~約5.0mg/ml、約5.0mg/ml~約10.0mg/ml、約10.0mg/ml~約15.0mg/ml、約15.0~約20.0mg/ml、約20.0mg/ml~約25.0mg/ml、約25.0mg/ml~約30.0mg/ml、約30.0mg/ml~約35.0mg/ml、約35.0~約40.0mg/ml、約40.0~約45.0mg/ml、または約45.0mg/ml~約50.0mg/mlの濃度で含む。他の実施形態において、この液体薬学的組成物は、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを、約15.0mg/ml、約16.0mg/ml、約17.0mg/ml、約18.0mg/ml、約19.0mg/ml、約20.0mg/ml、約21.0mg/ml、約22.0mg/ml、約23.0mg/ml、約24.0mg/ml、または約25.0mg/mlの濃度で含む。この液体薬学的組成物は、アンタゴニスト抗CD40抗体例えば、CHIR-12.12抗体もしくはCHIR-5.9抗体またはその抗原結合フラグメント、およびこの処方物のpHをpH約5.0~pH約7.0の範囲pH約5.0、pH約5.1、pH約5.2、pH約5.3、pH約5.4、pH約5.5、pH約5.6、pH約5.7、pH約5.8、pH約5.9、pH約6.0、pH約6.1、pH約6.2、pH約6.3、pH約6.4、pH約6.5、pH約6.6、pH約6.7、pH約6.8、pH約6.9、pH約7.0、およびpH約5.0~pH約7.0の範囲内の他のこのような値が含まれるに維持する緩衝液を含む。いくつかの実施形態において、緩衝液は、処方物のpHを、pH約5.0~pH約6.5、pH約5.0~pH約6.0、pH約5.0~pH約5.5、pH約5.5~pH約7.0、pH約5.5~pH約6.5、またはpH約5.5~pH約6.0の範囲に維持する。液体抗CD40抗体処方物のpHをpH約5.0~pH約7.0の範囲に維持する任意の適切な緩衝液は、その抗体の物理化学的安定性および所望の生物学的活性が本明細書において上に言及されたように維持される限り、処方物において使用され得る。適切な緩衝液としては、従来の酸およびその塩が挙げられるがこれらに限定されず、ここで、対イオンは、例えば、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、またはマグネシウムであり得る。薬学的な液体処方物を緩衝するために使用され得る従来の酸およびその塩の例としては、コハク酸またはコハク酸塩、クエン酸またはクエン酸塩、酢酸または酢酸塩、酒石酸または酒石酸塩、リン酸またはリン酸塩、グルコン酸またはグルコン酸塩、グルタミン酸またはグルタミン酸塩、アスパラギン酸またはアスパラギン酸塩、マレイン酸またはマレイン酸塩、およびリンゴ酸またはリンゴ酸塩の緩衝液が挙げられるがこれらに限定されない。処方物内の緩衝液の濃度は、約1mM~約50mM約1mM、約2mM、約5mM、約8mM、約10mM、約15mM、約20mM、約25mM、約30mM、約35mM、約40mM、約45mM、約50mM、または約1mM~約50mMの範囲内の他のこのような値を含むであり得る。いくつかの実施形態において、処方物内の緩衝液の濃度は、約5mM~約15mM約5mM、約6mM、約7mM、約8mM、約9mM、約10mM、約11mM、約12mM、約13mM、約14mM、約15mM、または約5mM~約15mMの範囲内の他のこのような値を含むであり得る。本発明のいくつかの実施形態において、液体薬学的処方物は、治療有効量のアンタゴニスト抗CD40抗体たとえば、CHIR-12.12モノクローナル抗体もしくはCHIR-5.9モノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメント、およびこの処方物のpHをpH約5.0~pH約7.0、好ましくは、pH約5.0~pH約6.5の範囲に維持する濃度のコハク酸緩衝液またはクエン酸緩衝液を含む。コハク酸緩衝液またはクエン酸緩衝液によって、それぞれ、コハク酸の塩またはクエン酸の塩を含む緩衝液が意図される。好ましい実施形態において、コハク酸またはクエン酸の対イオンは、ナトリウムカチオンであり、従って、緩衝液は、それぞれ、コハク酸ナトリウムまたはクエン酸ナトリウムである。しかし、任意のカチオンが、有効であると予想される。他の可能なコハク酸カチオンまたはクエン酸カチオンとしては、カリウム、アンモニウム、カルシウム、およびマグネシウムが挙げられるがこれらに限定されない。上記のように、処方物内のコハク酸緩衝液またはクエン酸緩衝液の濃度は、約1mM~約50mM約1mM、約2mM、約5mM、約8mM、約10mM、約15mM、約20mM、約25mM、約30mM、約35mM、約40mM、約45mM、約50mM、または約1mM~約50mMの範囲内の他のこのような値を含むであり得る。いくつかの実施形態において、処方物内の緩衝液の濃度は、約5mM~約15mM約5mM、約6mM、約7mM、約8mM、約9mM、約10mM、約11mM、約12mM、約13mM、約14mM、または約15mMを含むである。他の実施形態において、液体薬学的処方物は、アンタゴニスト抗CD40抗体例えば、CHIR-12.12モノクローナル抗体、もしくはCHIR-5.9モノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメントを、0.1mg/ml~約50.0mg/ml、または約5.0mg/ml~約25.0mg/mlの濃度で、そして、コハク酸緩衝液またはクエン酸緩衝液例えば、コハク酸ナトリウム緩衝液またはクエン酸ナトリウム緩衝液を、約1mM~約20mM、約5mM~約15mM、好ましくは、約10mMの濃度で含む。液体薬学的処方物が等張付近であることが望ましい場合、治療有効量のアンタゴニスト抗CD40抗体例えば、CHIR-12.12モノクローナル抗体、もしくはCHIR-5.9モノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメント、およびこの処方物のpHをpH約5.0~pH約7.0の範囲内に維持するための緩衝液を含む液体薬学的処方物は、さらに、この処方物を等張付近にするために十分な量の等張化剤を含み得る。等張付近nearisotonicにより、水溶性処方物が、約240mmol/kg~約360mmol/kg、好ましくは約240mmol/kg~約340mmol/kg、より好ましくは約250mmol/kg~約330mmol/kg、なおより好ましくは約260mmol/kg~約320mmol/kg、なおより好ましくは約270mmol/kg~約310mmol/kgの浸透圧を有することが意図される。溶液の等張度を測定する方法は、当業者に公知である。例えば、Setnikarら1959J.Am.Pharm.Assoc.48:628を参照のこと。当業者は、薬学的組成物に等張性を提供するのに有用な、種々の薬学的に受容可能な溶質に精通している。等張化剤は、本発明の液体薬学的処方物の浸透圧を、体液の浸透圧にほぼ等しい値に調節し得る任意の試薬であり得る。生理学的に受容可能な等張化剤の使用が望ましい。従って、治療有効量のアンタゴニスト抗CD40抗体例えば、CHIR-12.12モノクローナル抗体、もしくはCHIR-5.9モノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメント、およびこの処方物のpHをpH約5.0~pH約7.0の範囲内に維持するための緩衝液を含む液体薬学的処方物は、さらに、等張性を提供するために使用され得る成分例えば、塩化ナトリウム;アミノ酸例えば、アラニン、バリンおよびグリシン;糖類および糖アルコールポリオールグルコース、デキストロース、フルクトース、スクロース、マルトース、マンニトール、トレハロース、グリセロール、ソルビトールおよびキシリトールが挙げられるがこれらに限定されない;酢酸、他の有機酸またはその塩、および比較的少量のクエン酸またはリン酸を含み得る。当業者は、液体処方物の最適な張度を提供するために適切なさらなる薬剤を知っている。いくつかの好ましい実施形態において、治療有効量のアンタゴニスト抗CD40抗体例えば、CHIR-12.12モノクローナル抗体、もしくはCHIR-5.9モノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメント、およびこの処方物のpHを、pH約5.0~pH約7.0の範囲内に維持するための緩衝液を含む液体薬学的処方物は、さらに、等張化剤として塩化ナトリウムを含む。処方物中の塩化ナトリウムの濃度は、張度に対する他の成分の寄与に依存する。いくつかの実施形態において、塩化ナトリウムの濃度は、約50mM~約300mM、約50mM~約250mM、約50mM~約200mM、約50mM~約175mM、約50mM~約150mM、約75mM~約175mM、約75mM~約150mM、約100mM~約175mM、約100mM~約200mM、約100mM~約150mM、約125mM~約175mM、約125mM~約150mM、約130mM~約170mM、約130mM~約160mM、約135mM~約155mM、約140mM~約155mM、または約145mM~約155mMである。1つのこのような実施形態において、塩化ナトリウムの濃度は、約150mMである。他のこのような実施形態において、塩化ナトリウムの濃度は、約150mMであり、緩衝液は、約5mM~約15mMの濃度のコハク酸ナトリウム緩衝液またはクエン酸ナトリウム緩衝液であり、この液体薬学的処方物は、治療有効量のアンタゴニスト抗CD40抗体例えば、CHIR-12.12モノクローナル抗体、もしくはCHIR-5.9モノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメントを含み、そして、この処方物は、pH約5.0~pH約7.0、pH約5.0~pH約6.0、またはpH約5.5~pH約6.5のpHを有する。他の実施形態において、液体薬学的処方物は、pH約5.5のpHにおいて、約0.1mg/ml~約50.0mg/ml、または約5.0mg/ml~約25.0mg/mlの濃度のアンタゴニスト抗CD40抗体例えば、CHIR-12.12モノクローナル抗体、もしくはCHIR-5.9モノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメント、約150mMの濃度の塩化ナトリウム、および約10mMのコハク酸ナトリウムまたはクエン酸ナトリウムを含む。本発明の液体薬学的処方物の処理の間の凍結融解または機械的なせん断に起因するタンパク質の分解は、溶液-空気界面における表面張力を低下させるために、処方物内に界面活性剤を組み込むことによって、阻害され得る。こうして、いくつかの実施形態において、液体薬学的処方物は、治療有効量のアンタゴニスト抗CD40抗体例えば、CHIR-12.12モノクローナル抗体もしくはCHIR-5.9モノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメント、処方物のpHをpH約5.0~pH約7.0の範囲内に維持するための緩衝液を含み、そしてさらに、界面活性剤を含む。他の実施形態において、液体薬学的処方物は、治療有効量のアンタゴニスト抗CD40抗体例えば、CHIR-12.12モノクローナル抗体、もしくはCHIR-5.9モノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメント、処方物のpHをpH約5.0~pH約7.0の範囲内に維持するための緩衝液、約50mM~約300mMの濃度の等張化剤例えば、塩化ナトリウムを含み、そしてさらに、界面活性剤を含む。使用される代表的な界面活性剤は、非イオン性界面活性剤であり、これらとしては、以下が挙げられる:ポリオキシエチレンソルビトールエステル例えば、ポリソルベート80Tween80およびポリソルベート20Tween20;ポリオキシプロピレン-ポリオキシエチレンエステル例えば、PluronicF68;ポリオキシエチレンアルコール例えば、Brij35;シメチコン;ポリエチレングリコール例えば、PEG400;リゾホスファチジルコリン;およびポリオキシエチレン-p-t-オクチルフェノール例えば、TritonX-100。界面活性剤または乳化剤による伝統的な安定化については、例えば、Levineら1991J.ParenteralSci.Technol.453:160-165本明細書中に参考として援用されるに記載される。本発明を実施する際に使用される好ましい界面活性剤は、ポリソルベート80である。界面活性剤が含まれる場合、界面活性剤は、代表的に、約0.001w/v~約1.0w/v、約0.001w/v~約0.5w/v、約0.001w/v~約0.4w/v、約0.001w/v~約0.3w/v、約0.001w/v~約0.2w/v、約0.005w/v~約0.5w/v、約0.005w/v~約0.2w/v、約0.01w/v~約0.5w/v、約0.01w/v~約0.2w/v、約0.03w/v~約0.5w/v、約0.03w/v~約0.3w/v、約0.05w/v~約0.5w/v、または約0.05w/v~約0.2w/vの量で添加される。こうして、いくつかの実施形態では、液体薬学的処方物は、治療有効量のアンタゴニスト抗CD40抗体例えば、CHIR-12.12モノクローナル抗体、もしくはCHIR-5.9モノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメントを含み、緩衝液は、約1mM~約50mM、約5mM~約25mM、または約5mM~約15mMの濃度のコハク酸ナトリウム緩衝液またはクエン酸ナトリウム緩衝液であり;この処方物は、pH約5.0~pH約7.0、pH約5.0~pH約6.0、またはpH約5.5~pH約6.5のpHを有し;そして、この処方物は、さらに、約0.001~約1.0、または約0.001~約0.5の量の界面活性剤例えば、ポリソルベート80を含む。このような処方物は、必要に応じて、約50mM~約300mM、約50mM~約200mMまたは約50mM~約150mMの濃度の等張化剤例えば、塩化ナトリウムを含み得る。他の実施形態において、液体薬学的処方物は、約0.1mg/ml~約50.0mg/ml、または約5.0mg/ml~約25.0mg/ml約20.0mg/mlを含むの濃度のアンタゴニスト抗CD40抗体例えば、CHIR-12.12モノクローナル抗体、もしくはCHIR-5.9モノクローナル抗体、またはその抗原結合フラグメント;約50mM~約200mMの塩化ナトリウム約150mMの塩化ナトリウムを含む;約5mM~約20mMのコハク酸ナトリウムまたはクエン酸ナトリウム約10mMのコハク酸ナトリウムまたはクエン酸ナトリウムを含む;約50mM~約200mM約150mMを含むの濃度の塩化ナトリウム;および必要に応じて、約0.001~約1.0約0.001~約0.5を含むの量の界面活性剤例えば、ポリソルベート80;を含み、ここで、この液体薬学的処方物は、pH約5.0~pH約7.0、pH約5.0~pH約6.0、約pH5.0~pH約5.5,pH約5.5~pH約6.5、またはpH約5.5~pH約6.0のpHを有する。液体薬学的処方物は、本質的に、保存料、および本明細書において上記された他のキャリア、賦形剤または安定化剤を含まなくてもよい。あるいは、この処方物は、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの物理化学的安定性に悪影響を及ぼさないという条件で、1種以上の保存剤例えば、抗細菌剤、本明細書において上記の薬学的に受容可能なキャリア、賦形剤または安定化剤を含み得る。受容可能なキャリア、賦形剤および安定化剤の例としては、さらなる緩衝化剤、共溶媒、界面活性剤、抗酸化剤アスコルビン酸およびメチオニンを含む、キレート化剤例えば、EDTA、金属錯体例えば、Zn-タンパク質錯体、および生分解性ポリマー例えば、ポリエステルが挙げられるがこれらに限定されない。薬学的に受容可能なキャリア、安定化剤、および等モル化剤isomolyteの処方および選択の詳細な議論は、Remington’sPharmaceuticalSciences第18版;MackPublishingCompany,Eaton,Pennsylvania,1990本明細書中に参考として援用されるに見出され得る。本明細書中に記載される液体薬学的処方物または他の薬学的組成物が調製された後、これらは、分解を防ぐために凍結乾燥され得る。液体組成物を凍結乾燥するための方法は、当業者に公知である。使用の直前に、組成物は、さらなる成分を含み得る滅菌希釈剤例えば、Ringer溶液、蒸留水または滅菌生理食塩水で再構成され得る。再構成の上に、組成物は、好ましくは、当業者に公知の方法を使用して、被験体に投与される。医薬の製造におけるアンタゴニスト抗CD40抗体の使用本発明はまた、被検体中のCD40を発現する癌を処置する医薬の製造における、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの使用を提供し、ここで医薬は、IL-2またはその生物学的に活性な改変体を用いる処置と共働する。CD40を発現する癌によって、CD40細胞表面抗原を発現する新生物細胞を含む任意の癌が、意図される。本明細書中で上記されるように、このような癌としては、B細胞関連の癌例えば、非ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病、多発性骨髄腫、B細胞リンパ腫、高悪性度B細胞リンパ腫、中悪性度B細胞リンパ腫、低悪性度B細胞リンパ腫、B細胞急性リンパ性白血病、骨髄芽球性白血病、ホジキン病、プラズマ細胞種、濾胞性リンパ腫、濾胞性核切れ込み小細胞型リンパ腫、濾胞性大細胞型リンパ腫、濾胞性混合型核切れ込み小細胞型リンパ腫、びまん性核切れ込み小細胞型リンパ腫、びまん性小リンパ球性リンパ腫、前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、辺縁層リンパ腫、粘膜関連リンパ組織リンパ腫、単球様B細胞リンパ腫、脾性リンパ腫、ヘアリーセル白血病、びまん性大細胞型リンパ腫、縦隔大細胞型B細胞リンパ腫、リンパ腫様肉芽腫症、血管内リンパ腫症、びまん性混合型リンパ腫、びまん性大細胞型リンパ腫、免疫芽球性リンパ腫、バーキットリンパ腫、エイズ関連リンパ腫、およびマントル細胞リンパ腫;およびCD40抗原を発現する固形腫瘍卵巣癌、肺癌例えば、扁平上皮癌型、腺癌型、および大細胞癌型の非小細胞肺癌、ならびに小細胞肺癌、乳癌、結腸癌、腎臓癌例えば、腎細胞癌が挙げられる、膀胱癌、肝臓癌例えば、肝細胞癌が挙げられる、胃癌、頚癌、前立腺癌、鼻咽腔癌、甲状腺癌例えば、甲状腺乳頭癌が挙げられる、および皮膚癌例えば、黒色腫、ならびに肉腫例えば、骨肉腫およびユーイング肉腫が挙げられるが挙げられるが、これらに限定されないが挙げられるが、これらに限定されない。共働するcoordinatedによって、上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを含む医薬が、IL-2またはその生物学的に活性な改変体を用いる被検体の処置前か、処置中か、または処置後のいずれかで使用されるべきことが意図される。1つのこのような実施形態において、本発明は、被検体中のCD40を発現する癌を処置するための医薬の製造におけるモノクローナル抗体CHIR-12.12またはモノクローナル抗体CHIR-5.9の使用を提供し、ここでこの医薬は、IL-2またはその生物学的に活性な改変体例えば、ヒトIL-2またはデス-アラニル-1,セリン-125ヒトIL-2ムテインを用いる処置と共働し、ここでこの医薬は、IL-2またはその生物学的に活性な改変体を用いる被検体の処置前か、処置中か、または処置後のいずれかで使用されるべきである。いくつかの実施形態において、上記アンタゴニスト抗CD40抗体例えば、本明細書中に開示されるモノクローナル抗体CHIR-12.12またはモノクローナル抗体CHIR-5.9、またはその抗原結合フラグメントを含む医薬は、IL-2またはその生物学的に活性な改変体、および少なくとも1つの他の型の癌治療を用いる処置と共働する。他の癌治療の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない:本明細書中で上記される治療、すなわち、外科手術または外科的手順例えば、脾摘出、肝切除、リンパ節切除、白血球分離、骨髄移植など、放射線療法;必要に応じて自系の骨髄移植と組み合わせられる化学療法において使用される他の細胞毒性因子および/または他の治療因子ここで適切な化学療法剤としては、フルダラビンまたはリン酸フルダラビン、クロラムブシル、ビンクリスチン、ペントスタチン、2-クロロデオキシアデノシンクラドリビン、シクロホスファミド、ドキソルビシン、プレドニゾン、およびそれらの組み合わせ例えば、CAPシクロホスファミド、ドキソルビシンに加えてプレドニゾン、CHOPシクロホスファミド、ビンクリスチン、プレドニゾンに加えてドキソルビシン、VADビンクリスチン、ドキソルビシンに加えてデキサメタゾン、MPメルファランに加えてプレドニゾンのようなアントラサイクリンを含むレジメンならびに化学療法例えば、ミトキサントロン、ダウノルビシン、イダルビシン、アスパラギナーゼおよび代謝拮抗物質シタラビン、メトトレキサート、5-フルオロウラシルデカルバジン、6-チオグアニン、6-メルカプトプリン、およびネララビンが挙げられるが、これらに限定されない;他の抗癌モノクローナル抗体治療例えば、アレムツズマブCampath登録商標または悪性のB細胞上のCD52細胞表面糖タンパク質を標的する他の抗CD52抗体;リツキシマブRituxan登録商標、完全ヒト抗体HuMax-CD20、R-1594、IMMU-106、TRU-015、AME-133、トシツモマブ/I-131トシツモマブBexxar登録商標、イブリツモマブチウキセタンZevalin登録商標、または悪性のB細胞上のCD20抗原を標的する任意の他の治療用抗CD20抗体;抗CD19抗体例えば、MT103二重特異性抗体;抗CD22抗体例えば、ヒト化モノクローナル抗体エプラツズマブ;ベバシズマブAvastin登録商標またはヒトの血管内皮増殖因子を標的する他の抗癌抗体;悪性のB細胞上のCD22抗原を標的する抗CD22抗体例えば、モノクローナル抗体BL-22、αCD22毒素;マクロファージコロニー刺激因子を標的するα-M-CSF抗体;多発性骨髄腫において過剰発現される核のレセプター活性化因子κBRANKおよびそのリガンドRANKLを標的する抗体;悪性のB細胞上のCD23抗原を標的する抗CD23抗体例えば、IDEC-152;CD80抗原を標的する抗CD80抗体例えば、IDEC-114;悪性のB細胞上のCD38抗原を標的する抗CD38抗体;悪性のB細胞上で発現される主要組織適合遺伝子複合体のクラスIIレセプターを標的する抗体抗MHC抗体;悪性のB細胞上のCD40抗原を標的する他の抗CD40抗体例えば、SGN-40;ならびに腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導性リガンドレセプター1TRAIL-R1を標的する抗体例えば、アゴニストのヒトモノクローナル抗体HGS-ETR1、ならびに固形腫瘍および造血器官の多くの腫瘍上で発現されるTRAIL-R2;小分子に基づく癌治療微小管インヒビターおよび/またはトポイソメラーゼインヒビター例えば、有糸分裂インヒビタードラスチンおよびドラスチンアナログが挙げられるが、これらに限定されない;チューブリン結合因子T900607;XL119;およびトポイソメラーゼインヒビターアミノカンプトテシン、SDX-105塩酸ベンダムスチン、イキサベピロンBMS-247550とも称されるエポチロンアナログ、プロテインキナーゼCインヒビター例えば、ミドスタウリンPKC-412、CGP41251、N-ベンゾイルスタウロスポリン、ピクサントロンpixantrone、エロキサチン抗新生物剤、ガナイトganite硝酸ガリウム、Thalomid登録商標サリドマイド、サリドマイドの免疫調節性誘導体例えば、レブリミドかつてのレビミド、AffinitakTMプロテインキナーゼC-αのアンチセンスインヒビター、SDX-101悪性リンパ球のアポトーシスを誘導するR-エトドラク、クロファラビンのような第2世代プリンヌクレオチドアナログ、癌細胞によるタンパク質Bcl-2の産生に関するインヒビター例えば、アンチセンス因子オブリマーセンoblimersenおよびGenasense登録商標、プロテアソームインヒビター例えば、VelcadeTMボルテゾミブ、小分子キナーゼインヒビター例えば、CHIR-258、小分子VEGFインヒビター例えば、ZD-6474、熱ショックタンパク質HSP90の小分子インヒビター例えば、17-AAG、スペロイルアニリドヒドロキサム酸suberanilohydroxamicacidSAHAおよびFR-901228のようなヒストンデアセチラーゼ例えば、ハイブリッド/極性細胞分化HPC因子の小分子インヒビター、ならびにアポトーシス因子例えば、Trisenox登録商標三酸化ヒ素およびXcytrin登録商標モテキサフィンmotexafinガドリニウム;ワクチン/免疫療法に基づく癌治療ワクチンアプローチ例えば、Id-KLH、オンコファージ、ビタレチンvitalethine、個別化免疫療法または活性イディオタイプ免疫療法例えば、MyVax登録商標個別化免疫療法、正式名称GTOP-99、Promune登録商標CpG7909、toll様レセプター9TLR9に対する合成アゴニスト、インターフェロン-α療法、IL-12療法、IL-15療法、およびIL-21療法が挙げられるが、これらに限定されない;ステロイド療法;または他の癌治療;ここで、IL-2もしくはその生物学的に活性な改変体およびさらなる癌治療または複数のさらなる癌治療を用いる処置は、本明細書の上記で記載されるような、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを含む医薬による被検体の処置前か、処置中か、処置後に行う。上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを含む医薬が、IL-2またはその生物学的に活性な改変体および少なくとも1つの他の癌治療と共働する場合に、この医薬の使用は、複数の他の癌治療のいずれかまたは両方を用いる被検体の処置前か、処置中か、処置後であり得る。本発明はまた、本明細書中の上記で定義されるような、被検体中のCD40を発現する癌を処置するための医薬の製造における、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの相乗的な組み合わせの使用を提供し、この医薬は、IL-2またはその生物学的に活性な改変体による処置と共働する。相乗的な組み合わせsynergisticcombinationによって、上記医薬は、この医薬が、本明細書中の上記で示した様式においてIL-2またはその生物学的に活性な改変体を用いる処置と共働する場合に相乗的な治療効果を提供するアンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントの量を含むことが意図される。相乗的な治療効果とは、2つ以上の治療この場合において、このアンタゴニスト抗CD40抗体療法およびIL-2療法の組み合わせによって観察される治療効果を指し、ここでこの治療効果本明細書中で上記される効力の測定を含む、多くのパラメータのいずれかによって測定されるようは、個々の各治療によって観察される個々の各治療効果の合計より大きい。1つのこのような実施形態において、本発明は、被検体中のCD40を発現する癌を処置するための医薬の製造における上記モノクローナル抗体CHIR-12.12またはモノクローナル抗体CHIR-5.9の相乗的な組み合わせの使用を提供し、この医薬は、IL-2またはその生物学的に活性な改変体例えば、ヒトIL-2またはデス-アラニル-1,セリン-125ヒトIL-2ムテインを用いる処置と共働し、この医薬は、IL-2またはその生物学的に活性な改変体を用いる被検体の処置前か、処置中か、または処置後のいずれかで使用されるべきである。いくつかの実施形態において、上記アンタゴニスト抗CD40抗体例えば、本明細書中に開示されるモノクローナル抗体CHIR-12.12またはモノクローナル抗体CHIR-5.9、またはその抗原結合フラグメントの相乗的組み合わせを含む医薬は、IL-2またはその生物学的に活性な改変体、および少なくとも1つの上記の他の型の癌治療を用いる処置と共働する。本発明はまた、本明細書中の上記で定義されるような、被検体中のCD40を発現する癌を処置するための医薬の製造における、アンタゴニスト抗CD40抗体例えば、本明細書中に開示されるモノクローナル抗体CHIR-12.12またはモノクローナル抗体CHIR-5.9またはその抗原結合フラグメントの使用を提供し、この医薬は、IL-2またはその生物学的に活性な改変体を用いて事前に処置された被験体において使用される。事前に処置されたpretreatedまたは事前の処置pretreatmentによって、被験体が、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを含む医薬を受容する前に、IL-2療法を受容しているすなわち、IL-2またはその生物学的に活性な改変体によって処置されていることが意図される。事前に処置されたまたは事前の処置は、このアンタゴニスト抗CD40抗体例えば、本明細書中で開示されるモノクローナル抗体CHIR-12.12またはモノクローナル抗体CHIR-5.9、またはその抗原結合フラグメントを含む医薬を用いる処置の開始前、2年以内、18ヶ月以内、1年以内、6ヶ月以内、2ヶ月以内、6週間以内、1ヶ月以内、4週間以内、3週間以内、2週間以内、1週間以内、6日以内、5日以内、4日以内、3日以内、2日以内、または、さらに1日以内に、IL-2またはその生物学的に活性な改変体の単独かまたは他の癌治療との組み合わせで処置された被験体を含む。被験体は、前のIL-2療法、または前のIL-2と他の癌治療による事前の処置に対する応答者であった必要はない。従って、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを含む医薬を受容する被験体は、事前のIL-2療法による事前の処置か、または事前の処置が、癌治療の1つがIL-2療法である複合的な癌治療例えば、IL-2療法および他の抗癌抗体療法例えば、リツキシマブまたは他の抗CD20抗体療法;IL-2療法と外科手術;IL-2療法と化学療法;またはIL-2療法、化学療法、および他の抗癌抗体療法を含んだ1つ以上の事前の癌治療に対して、応答していても応答し損なっていてもよい。したがって、いくつかの実施形態において、本発明は、本明細書中の上記で定義されるような、CD40を発現する癌に対する処置が必要な被検体において使用される医薬の製造におけるアンタゴニスト抗CD40抗体例えば、本明細書中に開示されるモノクローナル抗体CHIR-12.12またはモノクローナル抗体CHIR-5.9、またはその抗原結合フラグメントの使用を提供し、この被検体は、IL-2療法によって事前に処置されているか、またはIL-2療法および1つ以上の以下に挙げる他の癌治療によって事前に処理されている:外科手術または外科的手順例えば、脾摘出、肝切除、リンパ節切除、白血球分離、骨髄移植など、放射線療法;必要に応じて自系の骨髄移植と組み合わせての化学療法ここで適切な化学療法剤としては、フルダラビンまたはリン酸フルダラビン、クロラムブシル、ビンクリスチン、ペントスタチン、2-クロロデオキシアデノシンクラドリビン、シクロホスファミド、ドキソルビシン、プレドニゾン、およびそれらの組み合わせ例えば、CAPシクロホスファミド、ドキソルビシンに加えてプレドニゾン、CHOPシクロホスファミド、ビンクリスチン、プレドニゾンに加えてドキソルビシン、VADビンクリスチン、ドキソルビシンに加えてデキサメタゾン、MPメルファランに加えてプレドニゾンのようなアントラサイクリンを含むレジメンならびに化学療法において使用される他の細胞毒性因子および/または他の治療因子例えば、ミトキサントロン、ダウノルビシン、イダルビシン、アスパラギナーゼおよび代謝拮抗物質シタラビン、メトトレキサート、5-フルオロウラシルデカルバジン、6-チオグアニン、6-メルカプトプリン、およびネララビンが挙げられるが、これらに限定されない;他の抗癌モノクローナル抗体治療例えば、アレムツズマブCampath登録商標または悪性のB細胞上のCD52細胞表面糖タンパク質を標的する他の抗CD52抗体;リツキシマブRituxan登録商標、完全ヒト抗体HuMax-CD20、R-1594、IMMU-106、TRU-015、AME-133、トシツモマブ/I-131トシツモマブBexxar登録商標、イブリツモマブチウキセタンZevalin登録商標、または悪性のB細胞上のCD20抗原を標的する任意の他の治療用抗CD20抗体;抗CD19抗体例えば、MT103二重特異性抗体;抗CD22抗体例えば、ヒト化モノクローナル抗体エプラツズマブ;ベバシズマブAvastin登録商標またはヒトの血管内皮増殖因子を標的する他の抗癌抗体;悪性のB細胞上のCD22抗原を標的する抗CD22抗体例えば、モノクローナル抗体BL-22、αCD22毒素;マクロファージコロニー刺激因子を標的するα-M-CSF抗体;多発性骨髄腫において過剰発現される核のレセプター活性化因子κBRANKおよびそのリガンドRANKLを標的する抗体;悪性のB細胞上のCD23抗原を標的する抗CD23抗体例えば、IDEC-152;CD80抗原を標的する抗CD80抗体例えば、IDEC-114;悪性のB細胞上のCD38抗原を標的する抗CD38抗体;悪性のB細胞上で発現される主要組織適合遺伝子複合体のクラスIIレセプターを標的する抗体抗MHC抗体;悪性のB細胞上のCD40抗原を標的する他の抗CD40抗体例えば、SGN-40;ならびに腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導性リガンドレセプター1TRAIL-R1を標的する抗体例えば、アゴニストのヒトモノクローナル抗体HGS-ETR1、ならびに固形腫瘍および造血器官の多くの腫瘍上で発現されるTRAIL-R2;小分子に基づく癌治療微小管インヒビターおよび/またはトポイソメラーゼインヒビターが挙げられるが、これらに限定されない例えば、有糸分裂インヒビタードラスチンおよびドラスチンアナログ;チューブリン結合因子T900607;XL119;およびトポイソメラーゼインヒビターアミノカンプトテシン、SDX-105塩酸ベンダムスチン、イキサベピロンBMS-247550とも称されるエポチロンアナログ、プロテインキナーゼCインヒビター例えば、ミドスタウリンPKC-412、CGP41251、N-ベンゾイルスタウロスポリン、ピクサントロンpixantrone、エロキサチン抗新生物剤、ガナイトganite硝酸ガリウム、Thalomid登録商標サリドマイド、サリドマイドの免疫調節性誘導体例えば、レブリミドかつてのレビミド、AffinitakTMプロテインキナーゼC-αのアンチセンスインヒビター、SDX-101悪性リンパ球のアポトーシスを誘導するR-エトドラク、クロファラビンのような第2世代プリンヌクレオチドアナログ、癌細胞によるタンパク質Bcl-2の産生に関するインヒビター例えば、アンチセンス因子オブリマーセンoblimersenおよびGenasense登録商標、プロテアソームインヒビター例えば、VelcadeTMボルテゾミブ、小分子キナーゼインヒビター例えば、CHIR-258、小分子VEGFインヒビター例えば、ZD-6474、熱ショックタンパク質HSP90の小分子インヒビター例えば、17-AAG、スペロイルアニリドヒドロキサム酸suberanilohydroxamicacidSAHAおよびFR-901228のようなヒストンデアセチラーゼ例えば、ハイブリッド/極性細胞分化HPC因子の小分子インヒビター、ならびにアポトーシス因子例えば、Trisenox登録商標三酸化ヒ素およびXcytrin登録商標モテキサフィンmotexafinガドリニウム;ワクチン/免疫療法に基づく癌治療ワクチンアプローチ例えば、Id-KLH、オンコファージ、ビタレチンvitalethine、個別化免疫療法または活性イディオタイプ免疫療法例えば、MyVax登録商標個別化免疫療法、正式名称GTOP-99、Promune登録商標CpG7909、toll様レセプター9TLR9に対する合成アゴニスト、インターフェロン-α療法、IL-12療法、IL-15療法、およびIL-21療法が挙げられるが、これらに限定されない;ステロイド療法;または他の癌治療。本発明はまた、本明細書中の上記で定義されるような、被検体中のCD40を発現する癌を処置するための医薬の製造におけるIL-2またはその生物学的に活性な改変体の使用を提供し、この医薬は、アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを用いる処置と共働する。これらの実施形態において、共働するは、上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体を含む医薬が、上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントを用いる被検体の処置前か、処置中か、処置後のいずれかで使用されるべきであることを意図される。1つのこのような実施形態において、本発明は、被検体中のCD40を発現する癌を処置するための医薬の製造におけるIL-2またはその生物学的に活性な改変体例えば、ヒトIL-2またはデス-アラニル-1,セリン-125ヒトIL-2ムテインの使用を提供し、この医薬は、モノクローナル抗体CHIR-12.12またはモノクローナル抗体CHIR-5.9を用いる処置と共働し、この医薬は、モノクローナル抗体CHIR-12.12またはモノクローナル抗体CHIR-5.9を用いる被検体の処置前か、処置中か、または処置後のいずれかで使用されるべきである。いくつかの実施形態において、上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体を含む医薬は、アンタゴニスト抗CD40抗体例えば、CHIR-12.12モノクローナル抗体もしくはCHIR-5.9モノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメント、および少なくとも1つの他の型の癌治療を用いる処置と共働する。他の癌治療の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない:本明細書中で上記される治療、すなわち、外科手術または外科的手順例えば、脾摘出、肝切除、リンパ節切除、白血球分離、骨髄移植など、放射線療法;必要に応じて自系の骨髄移植と組み合わせての化学療法ここで適切な化学療法剤としては、以下が挙げられるが、これらに限定されないフルダラビンまたはリン酸フルダラビン、クロラムブシル、ビンクリスチン、ペントスタチン、2-クロロデオキシアデノシンクラドリビン、シクロホスファミド、ドキソルビシン、プレドニゾン、およびそれらの組み合わせ例えば、CAPシクロホスファミド、ドキソルビシンに加えてプレドニゾン、CHOPシクロホスファミド、ビンクリスチン、プレドニゾンに加えてドキソルビシン、VADビンクリスチン、ドキソルビシンに加えてデキサメタゾン、MPメルファランに加えてプレドニゾンのようなアントラサイクリンを含むレジメンならびに化学療法において使用される他の細胞毒性因子および/または他の治療因子例えば、ミトキサントロン、ダウノルビシン、イダルビシン、アスパラギナーゼおよび代謝拮抗物質シタラビン、メトトレキサート、5-フルオロウラシルデカルバジン、6-チオグアニン、6-メルカプトプリン、およびネララビンが挙げられるが、これらに限定されないが挙げられるが、これらに限定されない;他の抗癌モノクローナル抗体治療例えば、アレムツズマブCampath登録商標または悪性のB細胞上のCD52細胞表面糖タンパク質を標的する他の抗CD52抗体;リツキシマブRituxan登録商標、完全ヒト抗体HuMax-CD20、R-1594、IMMU-106、TRU-015、AME-133、トシツモマブ/I-131トシツモマブBexxar登録商標、イブリツモマブチウキセタンZevalin登録商標、または悪性のB細胞上のCD20抗原を標的する任意の他の治療用抗CD20抗体;抗CD19抗体例えば、MT103二重特異性抗体;抗CD22抗体例えば、ヒト化モノクローナル抗体エプラツズマブ;ベバシズマブAvastin登録商標またはヒトの血管内皮増殖因子を標的する他の抗癌抗体;悪性のB細胞上のCD22抗原を標的する抗CD22抗体例えば、モノクローナル抗体BL-22、αCD22毒素;マクロファージコロニー刺激因子を標的するα-M-CSF抗体;多発性骨髄腫において過剰発現される核のレセプター活性化因子κBRANKおよびそのリガンドRANKLを標的する抗体;悪性のB細胞上のCD23抗原を標的する抗CD23抗体例えば、IDEC-152;CD80抗原を標的する抗CD80抗体例えば、IDEC-114;悪性のB細胞上のCD38抗原を標的する抗CD38抗体;悪性のB細胞上で発現される主要組織適合遺伝子複合体のクラスIIレセプターを標的する抗体抗MHC抗体;悪性のB細胞上のCD40抗原を標的する他の抗CD40抗体例えば、SGN-40;ならびに腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導性リガンドレセプター1TRAIL-R1を標的する抗体例えば、アゴニストのヒトモノクローナル抗体HGS-ETR1、ならびに固形腫瘍および造血器官の多くの腫瘍上で発現されるTRAIL-R2;小分子に基づく癌治療微小管インヒビターおよび/またはトポイソメラーゼインヒビターが挙げられるが、これらに限定されない例えば、有糸分裂インヒビタードラスチンおよびドラスチンアナログ;チューブリン結合因子T900607;XL119;およびトポイソメラーゼインヒビターアミノカンプトテシン、SDX-105塩酸ベンダムスチン、イキサベピロンBMS-247550とも称されるエポチロンアナログ、プロテインキナーゼCインヒビター例えば、ミドスタウリンPKC-412、CGP41251、N-ベンゾイルスタウロスポリン、ピクサントロンpixantrone、エロキサチン抗新生物剤、ガナイトganite硝酸ガリウム、Thalomid登録商標サリドマイド、サリドマイドの免疫調節性誘導体例えば、レブリミドかつてのレビミド、AffinitakTMプロテインキナーゼC-αのアンチセンスインヒビター、SDX-101悪性リンパ球のアポトーシスを誘導するR-エトドラク、クロファラビンのような第2世代プリンヌクレオチドアナログ、癌細胞によるタンパク質Bcl-2の産生に関するインヒビター例えば、アンチセンス因子オブリマーセンoblimersenおよびGenasense登録商標、プロテアソームインヒビター例えば、VelcadeTMボルテゾミブ、小分子キナーゼインヒビター例えば、CHIR-258、小分子VEGFインヒビター例えば、ZD-6474、熱ショックタンパク質HSP90の小分子インヒビター例えば、17-AAG、スペロイルアニリドヒドロキサム酸suberanilohydroxamicacidSAHAおよびFR-901228のようなヒストンデアセチラーゼ例えば、ハイブリッド/極性細胞分化HPC因子の小分子インヒビター、ならびにアポトーシス因子例えば、Trisenox登録商標三酸化ヒ素およびXcytrin登録商標モテキサフィンmotexafinガドリニウム;ワクチン/免疫療法に基づく癌治療ワクチンアプローチ例えば、Id-KLH、オンコファージ、ビタレチンvitalethine、個別化免疫療法または活性イディオタイプ免疫療法例えば、MyVax登録商標個別化免疫療法、正式名称GTOP-99、Promune登録商標CpG7909、toll様レセプター9TLR9に対する合成アゴニスト、インターフェロン-α療法、IL-12療法、IL-15療法、およびIL-21療法が挙げられるが、これらに限定されない;ステロイド療法;または他の癌治療が挙げられるが、これらに限定されず;ここで、上記アンタゴニスト抗CD40抗体もしくはその抗原結合フラグメントおよびさらなる癌治療または複数のさらなる癌治療を用いる処置、は、本明細書の上記で記載されるような、上記IL-2またはその改変体を含む医薬による被検体の処置前か、処置中か、処置後に行われる。上記IL-2またはその生物学的に活性な改変体を含む医薬が、上記アンタゴニスト抗CD40抗体またはその抗原結合フラグメントおよび少なくとも1つの他の癌治療と共働する場合に、この医薬の使用は、複数の他の癌治療のいずれかまたは両方を用いる被検体の処置前か、処置中か、処置後であり得る。以下の実施例は、例示の目的で提供され、限定を目的とするものではない。導入部以下の実施例で使用されるアンタゴニスト抗CD40抗体は、CHIR-5.9およびCHIR-12.12である。CHIR-5.9抗CD40抗体およびCHIR-12.12抗CD40抗体は、ヒトIgG1重鎖遺伝子座およびヒトK軽鎖遺伝子座を有するトランスジェニックマウスXenoMouse登録商標Abgenix;Fremont,Californiaの免疫化により作製されるヒトIgG1サブタイプ抗ヒトCD40モノクローナル抗体mAbである。CD40細胞外ドメインを発現するSF9昆虫細胞を、免疫原として使用した。簡単に述べると、免疫化マウスに由来する脾細胞を、deBoerら1988J.Immunol.Meth.113:143により以前に記載されたとおりに、50ポリエチレングリコールを使用して、10:1の比で、SP2/0マウス骨髄腫細胞またはP3x63Ag8.653マウス骨髄腫細胞と融合させた。融合した細胞を、ヒポキサンチン0.1mM、アミノプテリン0.01mM、チミジン0.016mMおよび0.5ng/mlのhIL-6Genzyme,Cambridge,Massachusettsを補充した完全IMDM培地中に再懸濁した。この融合した細胞を、次いで、各ウェルが、平均して1つの増殖するハイブリドーマを含むように、96ウェル組織培養プレートのウェル間に分配した。10~14日後、ハイブリドーマ集団の上清を、特異的抗体の産生についてスクリーニングした。ハイブリドーマクローンによる特異的抗体の産生をスクリーニングするために、各ウェルからの上清を、プールし、まず、ELISAによって、抗CD40活性の特異性について試験した。次いで、陽性のものを、標準的なFACSアッセイを用いる、EBV-形質転換B細胞の蛍光細胞染色のために使用した。陽性のハイブリドーマ細胞を、0.5ng/mlのhIL-6を含有するIMDM/FBS中で限界希釈することによって、2回クローニングした。合計31匹のマウスの脾臓を、マウス骨髄腫SP2/0細胞と融合させて、ELISAにおいて組換えCD40を認識する895の抗体を作製した。AbgenixXenoMouse登録商標技術Abgenix;Fremont,Californiaを使用して産生されたハイブリドーマの平均約10が、ヒトκ鎖の代わりにマウスλ軽鎖を含み得る。これらのマウスλ軽鎖を含有する抗体を選択した。細胞表面CD40への結合もまた示す260の抗体のサブセットを、さらなる分析のために選択した。一連のサブクローニング手順の間に選択された安定なハイブリドーマを、結合アッセイおよび機能アッセイにおけるさらなる特徴付けに使用した。選択プロセスのさらなる詳細については、同時継続中の仮出願いずれも、発明の名称AntagonistAnti-CD40MonoclonalAntibodiesandMethodsforTheirUseであり、それぞれ、2003年11月4日、2003年11月26日、および2004年4月27日出願、割り当てられた米国特許出願第60/517,337号代理人事件整理番号:PP20107.001035784/258442、同第60/525,579号代理人事件整理番号:PP20107.002035784/271525および同第60/565,710号代理人事件整理番号:PP20107.003035784/277214を参照のこと。これらの特許文献の各内容は、その全体が、本明細書中に参考として援用される。7つの他のハイブリドーマからのクローンを、アンタゴニスト活性を有するものとして同定した。その相対アンタゴニスト能およびADCC活性に基づいて、2つのハイブリドーマクローンを、さらなる評価のために選択した表2、以下。これらを、131.2F8.5.95.9および153.8E2.D10.D6.12.1212.12と名付けた。マウスハイブリドーマ株131.2F8.5.9CMCC12047およびハイブリドーマ株153.8E2.D10.D6.12.12CMCC12056は、それぞれ、AmericanTypeCultureCollectionATCC;10801UniversityBlvd.,Manassas,Virginia20110-2209USAに、特許寄託番号PTA-5542およびPTA-5543の下、寄託されている。候補抗体の可変領域をコードするcDNAを、PCRにより増幅し、クローニングし、そして、配列決定した。CHIR-12.12抗体の軽鎖および重鎖についてのアミノ酸配列を、それぞれ、図1Aおよび1Bに示す。配列番号2mAbCHIR-12.12の軽鎖および配列番号4mAbCHIR-12.12の重鎖もまた参照のこと。mAbCHIR-12.12の重鎖の改変体を、図1Bに示す配列番号5もまた参照のこと。この改変体は、配列番号4の第153位のアラニン残基の代わりにセリン残基を有するという点で配列番号4と異なる。CHIR-12.12抗体の軽鎖および重鎖をコードするヌクレオチド配列を、それぞれ、図2Aおよび2Bに示す。配列番号1mAbCHIR-12.12の軽鎖のコード配列および配列番号3mAbCHIR-12.12の重鎖のコード配列もまた参照のこと。CHIR-5.9抗体の軽鎖および重鎖についてのアミノ酸配列を、それぞれ、図3Aおよび3Bに示す。配列番号6mAbCHIR-5.9の軽鎖および配列番号7mAbCHIR-5.9の重鎖もまた参照のこと。mAbCHIR-5.9の重鎖の改変体を、図3Bに示す配列番号8もまた参照のこと。この改変体は、配列番号7の第158位のアラニン残基の代わりにセリン残基を有するという点で配列番号7と異なる。個々のハイブリドーマに由来する抗体について予測されるとおり、相補性決定領域CDR内のヌクレオチド配列に実質的なバリエーションが存在する。VHのCDR3領域内の多様性は、抗体特異性を最も有意に決定するものと考えられる。FACS分析により示されるように、CHIR-5.9およびCHIR-12.12は、ヒトCD40に特異的に結合し、そして、CD40-リガンド結合を妨げ得る。両方のmAbが、細胞表面のCD40に予め結合したCD40リガンドと競合し得る。CHIR-5.9のヒトCD40への結合親和性は、1.2×10-8Mであり、CHIR-12.12のヒトCD40への結合親和性は、5×10-10Mである。CHIR-12.12モノクローナル抗体およびCHIR-5.9モノクローナル抗体は、強力なアンタゴニストであり、正常なB細胞のインビトロCD40リガンド媒介性の増殖を阻害し、そしてNHL患者およびCLL患者から得た癌細胞のインビトロCD40リガンド媒介性の増殖を阻害する。インビトロにおいて、両方の抗体は、ADCCによって、NHL患者から得た原発性癌細胞を殺傷する。用量依存性の抗腫瘍活性を、異種移植片ヒトリンパ腫モデルにおいて見出した。これらの結果、およびこれらの結果を得るために使用したアッセイのより詳細な説明については、同時継続中の仮出願いずれも、発明の名称AntagonistAnti-CD40MonoclonalAntibodiesandMethodsforTheirUseであり、それぞれ、2003年11月4日、2003年11月26日、および2004年4月27日出願、割り当てられた米国特許出願第60/517,337号代理人事件整理番号:PP20107.001035784/258442、同第60/525,579号代理人事件整理番号:PP20107.002035784/271525および同第60/565,710号代理人事件整理番号:PP20107.003035784/277214を参照のこと。これらの特許文献の各内容は、その全体が、本明細書中に参考として援用される。実施例1:CHIR-5.9およびCHIR-12.12は、CD40上で15B8とは異なるエピトープに結合する候補モノクローナル抗体であるCHIR-5.9およびCHIR-12.12は、CD40への結合については互いに競合するが、15B8IgG2抗CD40mAbへの結合については競合しない国際公開第WO02/28904号を参照のこと。Biacoreを用いた抗体の競合結合研究を、アミンカップリングによりプロテインAが固定化されたCM5バイオセンサチップを用いて設計し、このプロテインAを用いて、抗CD40、CHIR-12.12または15B8のいずれかを捕捉した。種々の濃度のCD40-hisで、標準の会合/解離結合曲線を観察するデータ示さず。競合研究のために、CHIR-12.12または15B8のいずれかを、プロテインAの表面上で捕捉した。引き続いて、種々の濃度のCD40-his/CHIR-5.9Fab複合体100nMCD40:1μMCHIR-5.9Fabを、修飾した表面を横切って流した。CHIR-12.12の場合、複合体の会合は観察されず、CHIR-5.9が、CHIR-12.12のCD40-hisへの結合をブロックすることを示す。15B8については、FabCHIR-5.9複合体の会合が観察され、CHIR-5.9は、15B8のCD40結合部位への結合をブロックしないことを示す。しかし、複合体が解離する速度offrateは、劇的に増加したデータ示さず。15B8およびCHIR-12.12は、CD40-his結合について競合しないことがまた決定された。この実験は、プロテインAバイオセンサチップ上にCHIR-12.12を捕捉し、コントロールhIgG1で残留のプロテインAの部位をブロックし、CD40-hisを結合させ、次いで、15B8を修飾された表面上を流すことによって構成された。15B8は、これらの条件下で結合し、CHIR-12.12は、15B8がCD40に結合することをブロックしないことを示した。実施例2:CHIR-12.12mAbおよびCHIR-5.9mAbの結合特性プロテインAを、アミンカップリングにより、CM5バイオセンサチップ上に固定化した。ヒト抗CD40モノクローナル抗体1.5μg/mlを、この修飾したバイオセンサの表面に10μl/mlで、1.5分間捕捉した。組換え可溶性CD40-hisを、種々の濃度で、バイオセンサの表面上に流した。抗体および抗原を、0.01MHEPESpH7.4、0.15MNaCl、3mMEDTA、0.005SurfactantP20HBS-EP中に希釈した。動力学定数および親和性定数を、1:1の相互作用モデル/全体的なフィットを用いて、Biaevaluationソフトウェアを使用して決定した。以下の表3に示すように、CHIR-5.9およびCHIR-12.12の解離する速度には121倍の差があり、結果として、CHIR-12.12について親和性が24倍高かった。実施例3:モノクローナル抗体CHIR-12.12およびモノクローナル抗体CHIR-5.9についてのエピトープの特徴付けモノクローナル抗体CHIR-12.12およびモノクローナル抗体CHIR-5.9により認識されるCD40上のエピトープの位置を決定するために、SDS-PAGEおよびウェスタンブロット分析を実施した。精製したCD400.5μgを、還元条件および非還元条件下で、4~12のNUPAGEゲル上で分離し、PVDFメンブレンに移し、そして、10μg/ml濃度のモノクローナル抗体でプローブした。ブロットを、アルカリホスファターゼ結合体化抗ヒトIgGでプローブし、そして、アルカリホスファターゼについてのWesternBlue登録商標安定化基質Promegaを用いて発色させた。結果は、抗CD40モノクローナル抗体CHIR-12.12が、CD40の非還元型形態および還元型形態の両方の上にあるエピトープを認識し、CD40の非還元型形態が、CD40の還元型形態よりも高い強度を示すことを示す表4;ブロットは示さず。認識が、CD40の両方の形態について陽性であるという事実は、この抗体が、線形配列であるコンホメーションのエピトープの一部と相互作用することを示す。モノクローナル抗体CHIR-5.9は、主に、CD40の非還元型形態を認識し、この抗体が、一次コンホメーションのエピトープと相互作用することを示唆する表4;ブロットは示さず。CD40上の抗原性領域をマッピングするために、CD40の4つの細胞外ドメインをクローニングし、そして、GST融合タンパク質として昆虫細胞において発現させた。4つのドメインの分泌を、GP67分泌シグナルで確認した。昆虫細胞の上清を、SDS-PAGEおよびウェスタンブロット分析により分析し、エピトープを含むドメインを同定した。モノクローナル抗体CHIR-12.12は、還元条件および非還元条件の両方の下で、ドメイン2上のエピトープを認識する表5;ブロットは示さず。対照的に、モノクローナル抗体CHIR-5.9は、ドメイン2に対して、非常に弱い認識を示す表5;ブロットは示さず。これらの抗体のいずれもが、この分析において、ドメイン1、3または4を認識しない。mAbCHIR-12.12により認識されるエピトープをより正確に規定するために、ペプチドを、CD40の細胞外ドメイン2から合成し、これは、配列PCGESEFLDTWNRETHCHQHKYCDPNLGLRVQQKGTSETDTICT配列番号10または配列番号12に示される配列の残基61~104に対応する。1アミノ酸オフセットoffsetを有する35の10マーペプチドを含むSPOTメンブレンSigmaを作製した。mAbCHIR-12.12および抗ヒトIgGβ-ガラクトシダーゼを二次抗体として用いるウェスタンブロット分析を実施した。このブロットを、細片に分け、mAbCHIR-5.9で再度プローブして、この抗体により認識される領域を決定した。10μg/mlの抗CD40モノクローナル抗体CHIR12.12でプローブするSPOT分析では、スポット18~22の反応が陽性であった。これらのペプチドによりカバーされる配列領域を、表6に示す。これらの結果は、以下の線形エピトープに対応する:YCDPNL配列番号10または配列番号12に示す配列の残基82~87。このエピトープは、Y82、D84およびN86を含み、これらは、CD40-CD40リガンドの相互作用に関与すると予測されている。mAbCHIR-5.9を用いるSPOT分析は、表7に示されるスポット20~22により表されるペプチドの弱い認識を示し、これは、そのCD40への結合において、領域YCDPNLGL配列番号10または配列番号12に示す配列の残基82~89が関与することを示唆した。mAbCHIR-12.12およびmAbCHIR-5.9は、BIACORE分析においてCD40への結合に関して、互いに競合することに注意すべきである。SPOT分析により同定した線形エピトープは、CD40B1モジュールの内部である。CD40B1モジュールの配列は、HKYCDPNLGLRVQQKGTSETDTIC配列番号10または配列番号12の残基80~103である。線形エピトープ内でCHIR-12.12について同定されたのはC83である。このシステイン残基がC103とジスルフィド結合を形成することは公知である。CHIR-12.12mAbのコンホメーションのエピトープは、このジスルフィド結合C82-C103および/またはC103にコンホメーション的に近い周囲のアミノ酸を含むようである。実施例4:CHIR-12.12とIL-2との併用療法は、動物モデルにおいて相加的な抗腫瘍活性を示すCHIR-12.12mAbは、2つの抗腫瘍機構増殖/生存シグナルの遮断およびADCCの誘導のいずれか/両方によって、腫瘍の負荷を軽減する所望の薬理学的効果を生じることが予想される。現在入手可能なヒトリンパ腫の異種移植片モデルは、発生初期の癌細胞とは対照的に、それらの増殖および生存ついてのCD40刺激に依存しない長期のリンパ腫細胞株を使用する。したがって、腫瘍の増殖/生存シグナルの遮断に基づくこれらのmAbの抗腫瘍活性の構成要素は、これらのモデルにおける抗腫瘍効力に対して寄与することが予想されない。これらのモデルにおけるその効力は、上記ACDDCHIR-12.12mAbに関する第2の抗腫瘍機構に依存する。CHIR-12.12mAbとIL-2とを用いる併用療法を、病期にあるヒトNHLNamalwa異種移植片モデルにおいて評価した。一貫した腫瘍増殖を確認するために、T細胞欠損ヌードマウスを,3Gyで全身被爆whole-bodyirradiatedさせ、腫瘍播種の1日前にその免疫系をさらに抑制した。腫瘍細胞を、マウス1匹あたり5×106個にて右側面の皮下に播種した。処置を、腫瘍の体積が約100~200mm3に達したとき腫瘍の播種の約7日後に開始した。腫瘍を有するマウスを、以下の通りに処置した:110mg/kgのIgG1を腹腔内に、1週間に1回で4週間投与;21mg/kgのCHIR-12.12mAbを腹腔内に、1週間に1回で4週間投与;30.5mg/kgのIL-2を皮下に、8日間、毎日投与;40.5mg/kgのIL-2を皮下に、8日間、毎日投与に加えて、1mg/kgのCHIR-12.12mAbを腹腔内に、1週間に1回で4週間投与、および50.5mg/kgのIL-2を皮下に、8日間、毎日投与に加えて、10mg/kgのCHIR-12.12mAbを腹腔内に、1週間に1回で4週間投与。腫瘍の体積を、1週間に2回記録した。データを、ANOVAを使用して分析した。CHIR-12.12およびIL-2は両方とも単独で、Namalwa腫瘍の増殖を阻害したN=10マウス/群。CHIR-12.12とIL-2との組み合わせは、相加的な抗腫瘍活性を生じた図5。実施例5:CHIR-12.12は、正常ヒトB細胞におけるCD40Lが媒介するCD40の生き残りおよび細胞のシグナル伝達経路を遮断する可溶性CD40リガンドCD40Lは、B細胞を活性化し、機能的な応答の種々の局面生き残りおよび増殖の増強、ならびにNFκB、ERK/MAPK、PI3K/Akt、およびp38シグナル伝達経路の活性化を含むを誘導する。さらに、CD40L媒介性のCD40刺激は、正常なB細胞における切断型PARPの減少および抗アポトーシスタンパク質XIAPおよびMcl-1の誘導により、生き残りシグナルを与える。CD40L媒介性のCD40刺激はまた、TRAF2およびTRAF3を補充して、CD40の細胞質ドメインに結合する。以下の研究は、CHIR-12.12が、正常なヒトB細胞へのこれらの刺激効果の全てを直接阻害したことを実証する。例えば、CHIR-12.12処理により、時間依存的かつ用量依存的な様式でのカスパーゼ-9、カスパーゼ-3、およびPARPの切断の増加、ならびに、XIAPおよびMcl-1の減少を生じ、B細胞のアポトーシスを修復した。CHIR-12.12での処理はまた、CD40L媒介性のCD40刺激に応答して、IκBキナーゼIKKαおよびβのリン酸化NFκB経路、ERK、Aktおよびp38も阻害した。さらに、CHIR-12.12が、最初のCD40L媒介性のCD40刺激なしではこれらのアポトーシス効果を誘発しなかったことが見出された。CHIR-12.12は、PARPの切断を誘導することにより、CD40リガンドにより媒介される生き残りを阻害したこれらの実験において、健康なドナーからの0.6×106個の正常なヒトB細胞85~95の間の純度を、1μg/mlのsCD40LAlexisCorp.,Bingham,Nottinghamshire,UKで刺激した。次いで、CHIR-12.1210μg/mlおよびコントロールのIgGを添加した。細胞を、0分、20分、2時間、6時間、18時間および26時間で回収した。切断型カスパーゼ-9、切断型カスパーゼ-3、切断型PARPおよびβ-アクチンコントロールを、細胞溶解物において、ウェスタンブロットにより検出した。簡単に述べると、CD40L媒介性のCD40刺激は、切断型カスパーゼ-9、切断型カスパーゼ-3、または切断型PARPの経時的な増加を生じなかったので、生き残りシグナルを提供したことが観察され、これらの細胞は、アポトーシスを受けなかったことを示した。しかし、CHIR-12.12での処理は、これらの切断生成物の増加をもたらし、CHIR-12.12処理が、sCD40Lで刺激した正常なB細胞における生き残りシグナル伝達に対するCD40L結合の効果を抑止し、B細胞アポトーシスを修復したことを示したデータ示さず。CHIR-12.12は、生き残った抗アポトーシスタンパク質の発現を阻害したこれらの実験において、健康なドナーからの0.6×106個の正常なヒトB細胞85~95の間の純度を、1μg/mlのsCD40LAlexisCorp.,Bingham,Nottinghamshire,UKで刺激した。次いで、CHIR-12.1210μg/mlおよびコントロールのIgGを添加した。細胞を、0分、20分、2時間、6時間、18時間および26時間において回収した。Mcl-1、XIAP、CD40およびβ-アクチンコントロールを、細胞溶解物において、ウェスタンブロットにより検出した。簡単に述べると、sCD40L刺激は、Mcl-1およびXIAPの経時的な持続性の発現を生じた。しかし、sCD40Lで刺激した細胞のCHIR12.12での処理は、これらのタンパク質の発現の経時的な減少を生じたデータ示さず。Mcl-1およびXIAPは、アポトーシス経路を遮断し得る生き残りシグナルであるので、これらの結果は、CHIR-12.12処理が、sCD40Lで刺激した正常なB細胞におけるアポトーシスに対する障壁を取り除くことを示す。CHIR-12.12での処理は、正常なB細胞において、IKKαSer180およびIKKβSer181のリン酸化を阻害したこれらの実験において、健康なドナーからの1.0×106個の正常なヒトB細胞85~95の間の純度を、1μg/mlのsCD40LAlexisCorp.,Bingham,Nottinghamshire,UKで刺激した。次いで、CHIR-12.1210μg/mlおよびコントロールのIgGを添加した。細胞を、0分および20分で回収した。リン酸化IKKαSer180およびIKKβSer181および総IKKβコントロールを、細胞溶解物において、ウェスタンブロットにより検出した。簡単に述べると、sCD40Lによる刺激は、IKKαSer180およびIKKβSer181の経時的なリン酸化を生じた;しかし、CHIR-12.12での処理は、正常なB細胞におけるsCD40L刺激に対するこの応答を抑止したデータ示さず。CHIR-12.12での処理は、CD40リガンドにより媒介される生き残りを、用量依存性の様式で阻害したこれらの実験において、健康なドナーからの0.6×106個の正常なヒトB細胞85~95の間の純度を、1μg/mlのsCD40LAlexisCorp.,Bingham,Nottinghamshire,UKで刺激した。CHIR-12.120.01μg/ml、0.1μg/ml、0.2μg/ml、0.5μg/ml、1.0μg/mlおよびコントロールのIgGを次いで添加した。細胞を、24時間で回収した。切断型PARPおよびβアクチンコントロールを、細胞溶解物において、ウェスタンブロットにより検出した。簡単に述べると、CHIR-12.12処理は、sCD40L刺激した細胞において、用量依存性の様式で、PARPの切断の増加を生じ、それゆえ、sCD40Lで刺激した正常なB細胞において、生き残りシグナル伝達経路を抑止したデータ示さず。CHIR-12.12は、生き残った抗アポトーシスタンパク質の発現を、用量依存性の様式で阻害したこれらの実験において、健康なドナーからの0.6×106個の正常なヒトB細胞85~95の間の純度を、1μg/mlのsCD40LAlexisCorp.,Bingham,Nottinghamshire,UKで刺激した。CHIR-12.120.5μg/ml、2μg/ml、および10μg/mlおよびコントロールのIgGを添加した。細胞を、22時間で回収した。Mcl-1、XIAP、切断型PARPおよびβアクチンコントロールを、細胞溶解物において、ウェスタンブロットにより検出した。簡単に述べると、CHIR-12.12処理は、sCD40Lで刺激した細胞において、用量依存性の様式で、Mcl-1およびXIAPの発現を減少し、そして、切断型PARPの発現を増加し、従って、sCD40Lで刺激した正常なB細胞におけるアポトーシス経路に対するこれらの障壁を抑止したデータ示さず。CHIR-12.12は、可溶性CD40Lシグナル伝達の非存在下では、抗アポトーシスタンパク質、切断型PARPおよびXIAPの発現に影響を及ぼさなかったこれらの実験において、健康なドナーからの1.0×106個の正常なヒトB細胞85~95の間の純度を、CHIR-12.1210μg/mlおよびコントロールのIgGのみで処理したすなわち、細胞は、抗体を添加する前に、sCD40Lで事前に刺激されなかった。細胞を、0時間、4時間、14時間および16時間にて回収した。XIAP、切断型PARPおよびβアクチンコントロールを、細胞溶解物において、ウェスタンブロットにより検出した。簡単に述べると、これらの結果は、sCD40L刺激なしでは、細胞は、IgG処理コントロール細胞およびCHIR-12.12細胞の両方において、増加する濃度の切断型PARPを発現したが、XIAPの発現は一定のままであったことを示すデータ示さず。これらのデータは、CHIR-12.12が、CD40L刺激なしで、正常なヒトB細胞においてアポトーシスを誘導しないことを示す。CHIR-12.12は、正常なB細胞において、IKKαSer180およびIKKβSer181、Akt、ERKならびにp38のリン酸化を阻害するこれらの実験において、健康なドナーからの1.0×106個の正常なヒトB細胞85~95の間の純度を、1FBS含有培地中で血清飢餓状態にし、そして、1μg/mlのsCD40LAlexisCorp.,Bingham,Nottinghamshire,UKで刺激した。この培養物を、CHIR-12.121μg/mlおよび10μg/mlおよびコントロールのIgGで処理した。細胞を、0分および20分にて回収した。ホスホ-IKKα、ホスホ-IKKβ、総IKKβ、ホスホ-ERK、総ERK、ホスホ-Akt、総Akt、ホスホ-p38、および総p38を、細胞溶解物において、ウェスタンブロットにより検出した。簡単に述べると、sCD40L刺激は、IKKα/βのリン酸化、ERKのリン酸化、Aktのリン酸化、およびp38のリン酸化の増加を生じ、従って、細胞の生き残りおよびまたは増殖をもたらした。CHIR-12.12での細胞の処理は、sCD40L刺激の、正常なB細胞におけるこれらのシグナル伝達経路に対する効果を抑止したデータ示さず。CHIR-12.12は、CD40シグナル伝達カスケードにおけるPI3KおよびMEK/ERKのような複数のシグナル伝達経路を阻害するこれらの実験において、健康なドナーからの1.0×106個の正常なヒトB細胞85~95の間の純度を、1FBS含有培地中で血清飢餓状態にし、そして、1μg/mlのsCD40LAlexisCorp.,Bingham,Nottinghamshire,UKで刺激した。この培養物をまた、CHIR-12.121μg/mlおよび10μg/ml、Wortmanin一種のPI3K/Aktインヒビター;1μMおよび10μM、LY294002一種のPI3K/Aktインヒビター;10μMおよび30μMおよびPD98095一種のMEKインヒビター;10μg/mlおよび30μg/mlで処理した。細胞を、0分および20分にて回収した。ホスホ-ERK、ホスホ-Akt、総Akt、ホスホ-IKKα/β、および全体を、細胞溶解物において、ウェスタンブロットにより検出した。簡単に述べると、これらの結果は、CHIR-12.12が、これらのシグナル伝達分子の全てのリン酸化を抑止したことを示す一方で、シグナル伝達インヒビターは、特定のシグナル伝達の抑止のみを示し、CHIR-12.12が、CD40L刺激により媒介されるこれらのシグナル伝達分子の上流を阻害するようであることを示したデータ示さず。CHIR-12.12は、正常なB細胞において、シグナル伝達分子であるTRAF2およびTRAF3の、CD40の細胞質ドメインへの結合を阻害するこれらの実験において、健康なドナーからの4.0×106個の正常なヒトB細胞85~95の間の純度を、1FBS含有培地中で4時間、血清飢餓状態にし、そして、1μg/mlのsCD40LAlexisCorp.,Bingham,Nottinghamshire,UKで20分間刺激した。細胞を、0分および20分にて回収した。CD40を、ポリクローナル抗CD40SantaCruzBiotechnology,CAを用いて免疫沈降させ、そして、ウェスタンブロットにおいて、抗TRAF2mAbSantaCruzBiotechnology,CA、抗TRAF3mAbSantaCruzBiotechnology,CAおよび抗CD40mAbSantaCruzBiotechnology,CAを用いて、プローブした。簡単に述べると、この結果は、TRAF2およびTRAF3が、sCD40L刺激の後に、CD40と共沈殿したことを示す。対照的に、CHIR-12.12での処理は、sCD40Lで刺激した正常なB細胞において、CD40-TRAF2/3シグナル伝達複合体の形成を抑止した。CD40の発現には変化はなかったデータ示さず。理論に束縛されないが、これらの実験の結果、および上に概説した実施例の結果は、CHIR-12.12抗体が、固有の特性の組み合わせを有する二重作用dualactionアンタゴニスト抗CD40モノクローナル抗体であることを示している。この完全ヒトモノクローナル抗体は、B細胞の生き残りおよび増殖のためのCD40L媒介性のCD40シグナル伝達経路を遮断する;このアンタゴニスト性は、最終的に細胞死をもたらす。CHIR-12.12はまた、エフェクター細胞による認識および結合を媒介し、抗体依存性の細胞傷害性ADCCを開始する。CHIR-12.12がいったんエフェクター細胞に結合すると、細胞溶解酵素が放出され、B細胞のアポトーシスおよび溶解をもたらす。CHIR-12.12は、前臨床の腫瘍モデルで比較した場合、リツキシマブよりも強力な抗腫瘍抗体である。実施例6:アンタゴニスト抗CD40抗体のための液体薬学的処方物タンパク質の安定性は、安定化または不安定化を生じる溶液のpHに伴って変化するタンパク質の表面電荷として、溶液のpHに対して敏感であることが公知である。したがって、処方物の最適でないpHは、静電的相互作用を変化させ、凝集、沈殿などのようなアンタゴニスト抗CD40抗体の物理学的分解をもたらす。pH条件における変化はまた、共有結合の切断を生じ、断片化、脱アミノ化などのような化学的分解をもたらす。したがって、この研究を、凝集、断片化および脱アミノ化に起因するアンタゴニスト抗CD40抗体の分解を最小化する、溶液の最適なpHを同定するために設計した。本研究の目的は、この抗体についての最適な溶液環境を選択するために、生物物理学的方法および生化学的方法の両方により、アンタゴニスト抗CD40抗体CHIR-12.12の安定性に対する溶液のpHの効果を調べることであった。示差走査熱量測定法DSCの結果は、CHIR-12.12のコンホメーションの安定性が、pH5.5~6.5を有する処方物において最適であることを示した。SDS-PAGE分析、サイズ排除HPLCSEC-HPLC分析、およびカチオン交換HPLCCEX-HPLC分析の組み合わせに基づくと、CHIR-12.12の物理化学的な安定性は、pH約5.0~5.5において最適である。これらの結果を鑑みて、この抗体を含有する1つの推奨される液体薬学的処方物は、約10mMのコハク酸ナトリウム、約150mMの塩化ナトリウム中に処方された約20mg/mlのCHIR-12.12を含有し、pH約5.5のpHを有する処方物である。材料および方法処方物の研究において使用されるCHIR-12.12抗体は、CHO細胞培養手順により作製されたヒトモノクローナル抗体である。このMAbは、150kDaの分子量を有し、ジスルフィド結合により互いに連結された2つの軽鎖および2つの重鎖から構成される。この抗体は、種々の癌および自己免疫性/炎症性疾患の処置のために、CD40を発現する細胞正常および悪性のB細胞を含む上のCD40細胞表面レセプターに対して標的される。この研究のために使用される抗CD40薬物原料drugsubstanceは、CHOに由来する精製抗CD40CHIR-12.12のバルクロットであった。この薬物原料の組成は、10mMのクエン酸ナトリウム、150mMの塩化ナトリウムpH6.5中9.7mg/mlのCHIR-12.12抗体であった。この研究におけるコントロールサンプルは、一般に認められた薬物原料であり、その後、≦-60°Cにて凍結し、室温で融解し、そして、所定の時点において、安定性サンプルとともに試験した。この安定性サンプルは、異なるpH溶液に対する薬物原料の透析により調製したものであり、そして、各サンプルにおけるCHIR-12.12の濃度を、表8に示すように、UV280により測定した。種々の処方物におけるCHIR-12.12抗体の物理化学的安定性を、以下のプロトコルを用いてアッセイした。示差走査熱量測定法DSC異なる処方のサンプルのコンホメーションの安定性を、1°C/分で、15°Cから90°Cまで加熱しながら、MicroCalVP-DSCを用いてモニターした。SDS-PAGE断片化および凝集を、非還元条件および還元条件下で、4~20のTris-グリシンゲルを用いて評価した。タンパク質を、クマシーブルー染色により検出した。サイズ排除クロマトグラフィーSEC-HPLCタンパク質の断片化および凝集をまた、0.7ml/分の流速で、100mMリン酸ナトリウムpH7.0を移動相として用いて、TosohaasTSK-GEL3000SWXLカラムを備えるWaterAllianceHPLCにより測定した。カチオン交換クロマトグラフィーCEX-HPLC分解に関連する電荷の交換を、0.5ml/分の流速で、50mMのHEPESpH7.3を移動相Aとして、そして、500mMのNaClを含有する50mMHEPESpH7.3を移動相Bとして用いて、DionexPropacWCX-10カラムを備える、Waters600sHPLCシステムを使用して測定した。結果および考察コンホメーション安定性研究CHIR-12.12の熱によるアンフォールディングは、少なくとも2つの熱遷移thermaltransitionを明らかにし、おそらく、それぞれ、FabドメインおよびFcドメインのアンフォールディング融解を表す。高温では、タンパク質は、おそらく凝集して、DSCシグナルの喪失をもたらした。処方物のスクリーニングの目的で、最も低い熱遷移温度を、この研究において、融点Tmとして規定した。図6は、処方物のpHの関数としての熱融点を示す。pH5.5~6.5の処方物は、より高い熱融点により実証されるように、より高いコンホメーション安定性を有する抗CD40を提供した。SDS-PAGE分析pH4.5~9.0のCHIR-12.12処方物サンプルを、40°Cにて2ヶ月間インキュベートし、SDS-PAGE分析に供したデータ示さず。非還元条件下では、pH5.5を上回る処方物において、23kDaおよび27kDaの分子量MWを有する種が観察され、そして、全ての処方物において、51kDaのMWを有する種が観察されたが、pH5.0~5.5においては少ないようであった。100kDaのMWを有する種が、pH7.5およびpH9.0において見られ得た。還元条件下では、CHIR-12.12は、それぞれ、50kDaのMWおよび24kDaのMWを有する、遊離重鎖および遊離軽鎖に還元された。100kDaの種は、完全には還元性ではなく、そして、溶液のpHの増加に伴って増加するようであり、非ジスルフィド共有結合が、この分子において生じている可能性を示唆する。SDS-PAGEにおいて未知の正体を有する他の種が存在しなかったので、各処方物の安定性の比較は、残存するCHIR-12.12の純度に基づく。pH5.0~6.0の処方物は、CHIR-12.12に対して、より安定な環境を提供した。SDS-PAGEによって、わずかな凝集が検出されたデータ示さず。SEC-HPLC分析SEC-HPLC分析は、主ピーク種としてインタクトなCHIR-12.12を、主ピーク種とは別個の前ピーク種として凝集種を、主ピーク種の後にあるショルダーピークとして大きなフラグメントの種を検出し、そして、小さなフラグメントの種を、主ピーク後の種として検出した。5°Cおよび25°Cで3ヶ月間インキュベートした後、無視できる量<1.0のタンパク質のフラグメントおよび凝集を、上記処方物中で検出し、そして、CHIR-12.12主ピーク種は、99以上純粋なままであったデータ示さず。しかし、タンパク質のフラグメントは、40°Cで保存すると、次第に進展し、表9に示すように、pH4.5およびpH6.5~9.0においては、より多くのフラグメントが形成された。CHIR-12.12処方物を40°Cにて3ヶ月間インキュベートした後、約2~3の凝集を、pH7.5およびpH9.0において検出したが、他のpHの処方物においては、1未満の凝集を検出したデータ示さず。SEC-HPLCの結果は、CHIR-12.12が、pH約5.0~6.0において、より安定であることを示す。CEX-HPLC分析CEX-HPLC分析は、インタクトなCHIR-12.12を主ピーク種として検出し、酸性改変体は、主ピーク種よりも速く溶出し、そして、C末端リジン付加改変体は、主ピーク後の種として溶出した。表10は、残存する主ピークCHIR-12.12種および酸性改変体の百分率の、溶液のpHに対する依存性を示す。コントロールサンプルは、すでに、高い度合の酸性種約33を含んでおり、おそらくこれは、初期段階での発酵および精製のプロセスに起因するものである。より高いpH溶液に対するCHIR-12.12の感受性は、2つの事実により証明される。第一に、pH9.0t=0の最初の処方物サンプルは、すでに、コントロールよりも12多い酸性種を生じていた。第2に、酸性種の百分率は、pHの増加に伴って急激に増加した。電荷の変化に関連する分解は、脱アミノ化に起因するようである。上記のデータは、CHIR-12.12のこの型の分解が、pH約5.0~5.5において最小であったことを示す。結論pHは、CHIR-12.12のコンホメーションの安定性および物理化学的な安定性に有意な効果を有する。電荷の変化に関連する分解は、CHIR-12.12についての主な分解経路であると決定され、これは、pH5.0~5.5において最小であった。全体的な安定性のデータに基づいて、この抗体を含有する1つの推奨される液体薬学的処方物は、約10mMのコハク酸ナトリウム、約150mMの塩化ナトリウム中に処方された約20mg/mlのCHIR-12.12を含有し、pH約5.5のpHを有する処方物である。実施例7:IL-2およびアンタゴニスト抗CD40抗体を用いる臨床研究臨床の目的全体的な目的は、細胞をアンタゴニスト抗CD40抗体、およびIL-2またはその生物学的に活性な改変体の組み合わせを用いて、CD40を発現する固形腫瘍およびB細胞関連の癌を標的することにより、これらに対する有効な治療を提供することである。これらの腫瘍としては、固形腫瘍例えば、膀胱癌、乳癌、前立腺癌、腎細胞癌、鼻咽腔癌、扁平上皮癌、甲状腺乳頭癌、黒色腫、卵巣癌、肺癌、頚癌、胃癌、肝臓癌、および肉腫が挙げられる。B細胞関連の癌としては、B細胞リンパ腫、慢性リンパ性リンパ腫chroniclymphocyticlyphomaCLL、急性リンパ芽球性白血病ALL、多発性骨髄腫MM、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、および全身性キャッスルマン病が挙げられるが、これらに限定されない。活性のいくつかの基準が、第I相において得られ得るにもかかわらず、これらの疾患についてのシグナルが、第II相において決定される。最初のアンタゴニスト抗CD40抗体は、mAbCHIR-12.12、および最初のIL-2製品Proleukin登録商標であり、これらは、組換え産生されたIL-2ムテインである、デス-アラニル-1,セリンー125ヒトIL-2を含む。第I相安全性および薬物動態学を評価する-悪性腫瘍におけるこれらの2つの腫瘍治療の用量の段階的拡大。安全性、許容性、およびそれぞれの標的の血清マーカーすなわち、CD40における変化に基づいて、各腫瘍治療の用量を選択する。一般に、組み合わせて使用されるこれらの抗体の各々についてのMTDが求められるが、他の有効性の指標CD40の枯渇などは、用量決定に適切であり得る。特に異なる指標例えば、CLLの組み合わせ用量は、NHLに対する用量とは異なり得るに対する2以上の組み合わせの用量を考える。したがって、第II相では、いくつかの用量決定が、必要であり得る。患者に、毎週投薬し、リアルタイム薬物動態学Pkのサンプリングをする。最初の4週のサイクルは、許容される最大投薬である。Pkは、疾患の状態、CD40の密度などに依存して大きく変動し得る。この治験は、CD40固形腫瘍およびB細胞リンパ腫、CLL、ならびに強力な他の悪性腫瘍を有する被験体に対して公開される。研究を中止するかまたは継続するかの決定は、安全性、用量、および事実上特に相乗的である抗腫瘍活性の予備的な評価に基づく。応答速度により決定された併用療法の活性は、第II相で決定される。第II相のための組み合わせの用量を特定する。第II相数回の治験を、固形腫瘍およびB細胞リンパ腫、CLL、および多発性骨髄腫MMにおける濃縮を伴う上記の腫瘍の型について開始する。別個の治験は、CD40がリンパ腫の悪性度に依存する異なる機能を有し得るように、低悪性度NHLおよび中悪性度/高悪性度NHLにおいて必要とされ得る。2以上の用量の組み合わせ、および2以上の計画が、無作為化された第II相の設定において試験され得る。各疾患において、以下の、現行の標準的な医療が機能しない集団を対象とする:CLL:Campath登録商標および化学療法に対して耐性であった患者低悪性度NHL:Rituxan登録商標またはCHOP-Rによる治療に失敗した患者中悪性度NHL:CHOP-Rによる治療に失敗した患者多発性骨髄腫:化学療法に失敗した患者、デキサメタゾンにサリドマイドを加えた治療に失敗した患者、または高用量の化学療法に幹細胞移植を加えた治療に失敗した患者。研究を中止するかまたは継続するかの決定は、第II相における治療概念の証明に基づく臨床上の効果の早期の指標として、代理マーカーが使用され得るか否かを決定する第III相のための用量を特定する。第III相第III相は、第II相においてシグナルがどこで検出されるか、そして、どのような競合する治療が、標準的なものと考えられるかに依存する。標準的な治療が存在しない疾患の段階にシグナルがある場合、単群の、十分に制御された研究が、中心的な治験として機能し得る。標準的であると考えられる競合薬剤が存在する場合は、直接比較する研究が行なわれる。実施例8:IL-2の薬学的処方物についてのIL-2血清濃度-時間曲線の算出450万国際単位MIU約275μgのタンパク質に相当するで皮下SC投与されたProleukin登録商標IL-2の血清濃度-時間曲線下面積AUCを、未公開のHIV研究から得たデータを使用して決定した。血清濃度時間プロフィールを、8人のIL-2ナイーブのHIV患者においてこの研究における最初のIL-2の投薬への曝露後に測定した。各患者に関して、そのAUCを、最後の測定可能な濃度まで線形台形規則を使用して算出し、そしてこれを24時間に対して外挿したWinnonlinソフトウェアバージョン3.1、PharsightCorporation、California。その平均AUC0-24、SD、ならびに4.5MIU用量における95信頼限界の下限および上限を、表11に示す。18MIU1100μgに相当する用量でSCに投与されたProleukin登録商標IL-2のAUC0-24値を、このIL-2製品をSCに投与した異なる3つの研究から得たデータを使用して推定した。2つは、公開された研究であり、そのうち1つはHIV患者N=3における研究Piscitelliら、1996Pharmacotherapy165:754-759であり、もう1つは癌患者N=7における研究Kirchnerら、1998Br.J.Clin.Pharmacol.46:5-10である。3番目は、血清濃度時間データをIL-2のSC投薬後の6人の癌患者から入手した未公開の研究である。癌患者およびHIV患者におけるAUCの類似性を、予め確立した未公開データ。これらの3つの研究において実際に投与された用量は、18MIUと34MIUとの間の範囲であった。2つの公開された治験に関して、24時間までのAUCAUC0-24値を、18およびMIUにおける実際の用量の商と、AUCとを乗算することによって18MIU用量に対して標準化した。例えば、20MIU用量に対するAUC0-24を、400であると算出した場合に、標準化されたAUC0-24は、40018/20=360であり得る。上記未公開の癌患者研究に関して、個々のAUC値を、最後の測定可能な濃度まで線形台形規則を使用して血清濃度時間データから算出し、そして24時間に対して外挿しWinnonlinソフトウェアバージョン3.1、PharsightCorporation、California、その後、上記の通りに18MIU用量に対して標準化した。3つの研究全てについて、全体の平均およびSDを、方程式1および方程式2を使用して、それぞれ、平均と分散との加重平均として算出した。全体の平均AUC、SD、および18MIUにおける95信頼限界の下限および上限はまた、表11に示される。表11:皮下に投与されたProleukin登録商標IL-2の単回の用量の投与に対する初回の曝露後に得られる平均±SDAUC0-24Proleukin登録商標IL-2と同様に、L2-7001モノマーのIL-2の液体処方物を50μg~180μgの範囲の用量でHIV患者に投与した未公開データ。この研究から得られたAUCによって測定された曝露を、表12に示した。これらの曝露指数exposurevaluesは、Proleukin登録商標IL-2を使用して生じた曝露指数の範囲内であった表11。表12:モノマーのIL-2処方物L2-7001の単回の用量の投与に対する初回の曝露後に得られる平均±SDAUC0-24IL-2の曝露データAUCを、組換えヒトネイティブIL-2を、0.1MU~3.0MUの範囲の用量で8人の癌患者に対してSCに投与した場合の公開文献から得た。0.3MU用量レベル、1MU用量レベル、および3MU用量レベルについて報告された平均CVAUCは、12038U時/ml、17736U時/ml、および35946U時/mlであったGustavson1998J.Biol.ResponseModifiers1998年:440-449。Thompsonら、1987年CancerResearch47:4202-4207に記載されるように、この研究において測定された単位を、WHOによって後に国際単位IUとして採択されたGearingおよびThorpe1988J.ImmunologicalMethods114:3-9、BRMP単位Rossioら、1986LymphokineResearch5補遺1:S13-S18に対して標準化した。この研究条件下で生じたAUC値はまた、確立されたProleukin登録商標IL-2の曝露に、よく一致する。本明細書中に示される本発明の多くの改変および他の実施形態は、上述の明細書および添付の図面に提示される教示の利益を有する本発明が属する分野の当業者に想到される。したがって、本発明は、開示される特定の実施形態に限定されるべきではないこと、そして、改変および他の実施形態が、添付の特許請求の範囲および本明細書中に開示される実施形態の範囲内に含まれるべく意図されることが理解されるべきである。特定の用語が本明細書において使用されるが、これらは、一般的かつ説明的な意味のみで使用されているのであり、限定する目的で使用されているわけではない。明細書中で言及された全ての刊行物および特許出願は、本発明が属する分野の当業者の技術水準を示している。全ての刊行物および特許出願は、あたかも各個々の刊行物または特許出願が、具体的かつ個別に参考として援用されるように示されるのと同じ程度まで、本明細書中に参考として援用される。"