"試料においてゲノムの1以上の核酸を定量及び/若しくは検出するための、並びに/又はヒトDNAの可能性のある分解の状態を解析するための、並びに/又はコピー数多型CNVを解析するための方法であって、a.核酸が増幅され、かつ増幅される遺伝子座はゲノム中の多コピー遺伝子座であり、b.多コピー遺伝子座は少なくとも2つの異なる染色体上にコピーを有し、c.増副産物が検出及び/又は定量され、並びに、d.多コピー遺伝子座は反復要素ではない、方法。前記遺伝子座が、80塩基対の領域に渡り、配列番号1又は配列番号52に記載の配列と少なくとも80の配列同一性を有する、請求項1に記載の方法。多コピー遺伝子座の少なくとも4つの異なるコピーが増幅される、請求項1又は2に記載の方法。増幅方法が非等温法又は等温法の何れかである、請求項1から3に記載の方法。増幅方法が、定量リアルタイムPCRrtPCR、リガーゼ連鎖反応LCR、鎖置換増幅SDA、多置換増幅MDA、ローリングサークル増幅RCA、ループ介在等温増幅LAMP、転写介在増幅TMA、ヘリカーゼ依存増幅HDA、スマート増幅プロセスSMAP、単一プライマー等温増幅SPIA、ニッキング酵素増幅反応NEAR、指数関数増幅反応EXPAR、リコンビナーゼ-ポリメラーゼ増幅RPA及び核酸配列ベース増幅NASBAの群から選択される、請求項4に記載の方法。増幅方法がヘリカーゼ依存増幅HDA又はリアルタイムPCRrtPCRである、請求項5に記載の方法。増幅産物の長さが60塩基対から200塩基対である、前記請求項の何れか1項に記載の方法。プライマーが増幅に用いられ、前記プライマーは、18個のヌクレオチドの領域に渡り、配列番号2、3、5、6、8、9、10、11及び/又は12と、5つのヌクレオチドを超えて異なることは無いヌクレオチド配列を有する、前記請求項の何れか1項に記載の方法。ゲノムの核酸を検出及び/若しくは定量するための、ヒトDNAの可能性のある分解の状態を解析するための、又はコピー数多型CNV解析の基準遺伝子としての、ゲノム中の多コピー遺伝子座の使用であって、前記多コピー遺伝子座は少なくとも二つの異なる染色体上にコピーを有する、使用。前記遺伝子座が、80塩基対の領域に渡り、配列番号1又は配列番号52に記載の配列と少なくとも80の配列同一性を有する、請求項9に記載の使用。ヒト核酸を検出及び/又は定量するためのキットであって、前記キットは、80塩基対の領域に渡り、配列番号1又は配列番号52に記載の配列と少なくとも80の配列同一性を有する配列と、ストリンジェントな条件下で結合するプライマーを含む、キット。前記キットにおける少なくとも1つのプライマーが、18個のヌクレオチドの領域に渡り配列番号2、3、5、6、8、9、10、11及び/又は12と、5つのヌクレオチドを超えて異なることは無いヌクレオチド配列を有する、請求項11に記載のキット。本発明は、前記に特定した課題を解決し、以下に概要を示す解決手段を提供する。一の態様において、本発明は、試料においてゲノムの1以上の核酸を定量及び/又は検出するための方法であって、a.核酸が増幅され、かつ増幅される遺伝子座はゲノム中の多コピー遺伝子座であり、b.多コピー遺伝子座は少なくとも2つの異なる染色体上にコピーを有し、c.並びに、増副産物が検出及び/又は定量される方法に関する。この新規方法の実質的な利点は、既存の方法に比べてその感度が高いこと、並びに検出する標的の安定性が高いことである。これまでに知られている他の標的は、反復要素は数において変化する傾向があるため、個人個人で変化し得る[パベリッツら、ヒトU2snRNA遺伝子は分裂中期に、持続的な開かれた転写状態及びプロモーターの分解を示す。モレキュラーアンドセルラーバイオロジー、2008p35733588PavelitzetalHumanU2snRNAGenesExhibitaPersistentlyOpenTranscriptionalStateandPromoterDisassemblyatMetaphaseMolecularandCellularBiology2008p35733588;リアオら、ヒトU2snRNARNU2遺伝子座をコードするタンデム反復遺伝子の協調進化は、染色体間の均質化及び稀に起こる染色体間での遺伝子変換を伴う。エンボジャーナル、第16巻、第3番、588598頁、1997LiaoetalConcertedevolutionofthetandemlyrepeatedgenesencodinghumanU2snRNAinvolvesrapidintrachromosomalhomogenizationandrareinterchromosomalgeneconversionTheEMBOJournalVol16No3pp5885981997;ヤシニスカら、ヒトトランスクリプトームを形成する復配列、フェブスレターズ、567136141JasinskaetalRepetitivesequencesthatshapethehumantranscriptomeFEBSLetters567136141]。理想的には、遺伝子座は、短いタンデム反復、又は本質的に式AwCxGyTz21000但し、w、x、y、及びzは0~10で変化してもよく、かつ、単位中に存在するヌクレオチドの数を示す。の要素ではない。単位は2~1000回繰り返されていてもよい。別の反復要素には、テロメア中に通常含まれるサテライトDNAがある。さらに適さらない反復要素には、短鎖散在反復配列shortinterspersednuclearelements、SINE及び長鎖散在反復配列longinterspersednuclearelements、LINEがある。さらに、本発明は、ゲノムの核酸を検出及び/又は定量するための、ゲノム中の多コピー遺伝子座の使用であって、前記多コピー遺伝子座は反復要素では無く、かつ少なくとも二つの異なる染色体上にコピーを有する、使用に関する。また、本発明は、ヒト核酸を検出及び/又は定量するためのキットであって、前記キットは、80塩基対の領域に渡り、配列番号1又は配列番号52に記載の配列と少なくとも80の配列同一性を有する配列と、ストリンジェントな条件下で結合するプライマーを含む、キットに関する。本明細書においては、以下の略語が用いられる。1HDAヘリカーゼ依存増幅;helicasedependentamplification、2PAGEポリアクリルアミドゲル電気泳動、3gDNAゲノムDNA、4FAM6-カルボキシフルオレセイン6carboxyfluorescein、5SNP一塩基多型、6NTC鋳型を含まない対照notemplatecontrol、7BHQブラックホールクエンチャー;blackholequencher、8qPCR定量PCR、9HEX6-カルボキシ-4,7,2’,4’,5’,7’-ヘキサクロロフルオレセイン;6carboxy472457hexachlorofluorescein。本発明の大きな利点は、性別、人種又は地域的背景とは無関係に機能し、DNAの定量及び/又は検出を可能にする、プライマー及びプローブを作出することができることにある。このことが、既存の技術に対して大きな利点を提供する。ヒトDNAの増幅は、分子診断並びに法医学の様々な分野に関係している。法医学的方法では、DNAタイピングが、DNAの特定領域を増幅することによって実施される。これらは、しばしば、短いタンデム反復領域と呼ばれている。正しい結果を得るためには、特定の狭い濃度範囲にある鋳型DNAを適用することが不可欠である。反応に加えるDNAの量を正確に知ることが重要になる、その他分野には、HLAタイピングや一塩基多型SNP解析がある。HLAタイピングは、移植が拒絶されるか否かを解析するために実施される。SNP解析は、特定の人物の遺伝的背景を解析することを目的としてしばしば用いられ、例えば遺伝性疾患を評価したり、並びに特定の人物が特定種の癌に対する素因があるかどうかを解析することを目的としてしばしば用いられる。さらに本方法と類似する既存のいくつかの方法では、増幅される遺伝子座の複数のコピーは、タンデムに繰り返されるモチーフで1つの染色体上に位置し、かつ、その集団には異なる変異型が存在するため、異なる結果が誘導される。この事は、証明されてはいないが、既存の試験の欠点を説明する1つの仕方であると思われる。前記でも概略した一般的な増幅方法がHDA法である。米国特許第7,662,594号の図6には、過剰量のDNAを用いた場合に得られる結果が示されている。このことから、幾つかの増幅方法においては、反応に加えるDNAの正確な量を知ることが必要であり、それが反応を成功させるために不可欠であることは明白である。本方法の利点は次のような事実に基づく。すなわち、特に異なる染色体に由来する多コピーであって、遺伝子座はX染色体又はY染色体の何れにも位置しない、多コピーから再現可能な増幅を提供するゲノム領域を、文献を検索することによって最初に同定したが、それが役立たないことが判明し、次にデータベースを検索することによって同定したがやはりあまり有用ではなかったと云う事実に基づくものである。一般的な転写因子IIHサブユニット2遺伝子GTF2H2から出発して、本発明者らは、この遺伝子の一部では無いさらなる配列を同定した。同定したDNA領域の大きさは、およそ2000bpであり、第11番染色体に位置している69000bp~71000bpの位置。配列を、図6に配列番号1として示す。11番染色体で同定された配列と高い配列同一性を有する、さらなる数々の配列がゲノム全体に見出され得る。配列番号2hTFor1配列番号3hTRev1前記に特定したプライマーは、ヒトゲノム全体に分布する29個の遺伝子座を増幅する増幅反応を達成する図1を参照のこと。さらなるオリゴヌクレオチドを、等温反応用にも、プライマー及びプローブとして合成した。本明細書で考案した多コピー標的と単コピー標的との間で定量PCRを比較するために、以下のプライマー及びプローブを作製した。hTFor1及びhTRev1及びプローブhTPro1本発明の方法とcmyc遺伝子を用いた単コピー遺伝子の定量とを比較した。cmycとは対照的に、前述したオリゴヌクレオチドで増幅かつ探索できる27の遺伝子座が存在する。反応には以下の成分が含まれた。1×クオンチテクトマルチプレックスマスターミックQuantiTectMultiplexMastermix400nMhTFor1bzwcmycfwd400nMhTRev1bzwcmycrev200nMhTPro1bzwcmycprobeプローブ0bis10000コピーヒトゲノムDNAロータージーン6000キアゲンを使用して、以下のPCRプロファイルにより、反応を行った:95°Cで10分の後、95°C10秒及び60°C45秒からなる各サイクルを40サイクル実施。PCR効率は、両方のプライマーシステムで同じであった。hT-For1/Rev1-PCRの正規化プローブ蛍光は、cmyc-PCR反応のプローブ蛍光よりも、4.2±0.2サイクル早く所定の閾値に達した。これを鋳型濃度に逆算すると、hT-For1/Rev1-反応のDNA増幅の鋳型濃度はcmyc反応の鋳型濃度よりも18倍高いと計算された。この値は理論比の27:1に等しくはないが、非常に近い。等温増幅も、HDA方法を用いて、多コピーの遺伝子座について実施した。等温増幅反応用に、多数の異なるフォワードプライマー及びリバースプライマーを作成した。最適な組み合わせは、hT-For2及びhT-Rev2であった。反応産物の検出は、エンドポイント測定及びリアルタイム測定の両方で可能である。HDA反応には以下の成分が含まれた。20mMTrisHClpH8840mMNaCl10mMKCl400nMdNTPミックス3mMdATP4mMMgCl202×エバグリーンEvaGreen175μLイソアンプエンザイムミックスIsoAmpEnzymmix100nMhTFor2100nMhTRev20~10000コピーヒトゲノムDNAこの溶液を以下のプレミックスに分配した。プレミックスI:15μL容積hTFor2hTRev2エバグリーンEvaGreenヒトゲノムDNAH2OプレミックスII:8μL容積TrisHClpH88;NaCl;KCl;dNTPミックス;dATP;エンザイムミックス;H2Oスターティングソリューションstartsol:2μL50mMMgCl2反応は以下の通りに行った。プレミックスI15μlをPCRサイクラー中、95°Cで2分間インキュベートした。その後反応液を4°Cまで冷却し、ESEクアントチューブスキャナーESEQuantTubescanner、キアゲンを用いて65°Cに再加熱した。1分後、予め温めたプレミックスIにプレミックスII8μlを加え、反応液を混合した。さらに1分後、HDA反応を開始させ、65°Cで60分間インキュベートした。インキュベーションが終了した後、12ポリアクリルアミドゲルを用いて結果物を解析し、このゲルを臭化エチジウムで染色した。図2に結果を示す。レーン4は約90bpの長さの非常に強いDNAのバンドを示している。これは、計算される88bpのアンプリコン長に非常によく一致する。レーン3に陰性対照を示す。陰性対照では長さ約90bpの増副産物は見られない。反応が、さらなる蛍光で標識したオリゴヌクレオチドプローブhT-Pro2によって追跡しえることを示すさらなる実験を実施した。図3は、前記に概略した反応と同様に実施したリアルタイムHDA反応を示す。唯一の違いは、60nMの標識プローブhT-Pro2を加え、かつプライマーの濃度が異なっていたhT-For2が40nM、hT-Rev2が120nMことである。図3は、増幅の鋳型としてヒトゲノムDNAを用いたHDA反応もよく機能したことを示している。およそ25分後に、蛍光シグナルが高まった。これは、オリゴヌクレオチドプローブであるhT-Pro2が増幅された標的に結合した結果である。定量的リアルタイムPCR実験として、さらなる実験を実施した。以下のオリゴヌクレオチドを使用した。hTFor3hTRev3hTPro3これらのプライマー及びプローブは、ヒトゲノム中の14遺伝子座にハイブリダイズし、それらを増幅する。5人の男性及び5人の女性のEDTA-血液から、キアアンプマキシキットQiaAmpMaxiKit、キアゲンを使用して単離したゲノムDNAを鋳型とした。反応液には以下の成分を加えた。1×クオンチテクトマルチプレックスROXマスターミックスQuantiTectMultiplexROXMastermix400nMhT-For3400nMhT-Rev3200nMhT-Pro3反応当たり10pg~10ngのヒトgDNAPCRプロファイルは以下の通りである。最初に95°Cで15分間インキュベートした後、95°Cで1分及び60°Cで1分からなる各サイクルを50サイクル実施。図4にPCR増幅の蛍光曲線を示す。同じ実験内において、本発明による多コピーアッセイが、先行技術の単コピー方法に対して利点を有するか否かを解析した。HEXチャネルにおけるhT-For3/hT-Rev3/hT-プローブ3アッセイ多コピーの蛍光シグナルを、FAMチャネルにおけるcmycアッセイ単コピーのシグナルと比較した。結果を図5に示す。多コピーアッセイの蛍光シグナルは、単コピーcmycアッセイの蛍光シグナルよりも4.2±0.2サイクル早く閾値レベルと交差した。これは、多コピー標的の濃度が単コピー標的の濃度よりも18倍高いと計算される。従って、多コピー遺伝子座アッセイの理論上14個の異なる結合遺伝子座は、この実験によく反映された。さらに、本発明並びに配列番号1及び52の配列は、試料におけるヒトDNAの分解の解析に使用してもよい。前記使用のを解析するために用いられ得る。当該用途の好ましいプローブ及びプライマーは、以下の通りである。多コピー標的のその他の意外な用途には、コピー数多型CopyNumberVariationCNV解析の基準遺伝子としての用途である。コピー数多型CNV、すなわちゲノム中でのDNAコピー数の変化が、近年、ヒトゲノムのおよそ10~20に影響を及ぼす、広く存在する現象であることが示されている。CNVの発生は、自閉症、自己免疫疾患、及び癌等の様々な疾患と関連している。CNVを発見するために最も一般的に用いられている分子生物学的ツールは、マイクロアレイ解析及び次世代シークエンシングNGSである。これら2種類のハイスループット法によって、複数存在する可能性があるCNVを発見することができが、発見したCNVはその後独立した方法を用いて検証する必要がある。一旦検証されれば、多数の試料について確認されたCNVを調査し、CNVと表現型との間で統計的に有意な関連性を特定することができる。定量PCRqPCRは、しばしば、その使いやすさ、感度及び拡張性から、CNVの検証及び関連性試験の選択肢となる方法となる。相対的な定量の原理が、この用途に利用されており、比較する試料間でコピー数が一定であると推定される基準遺伝子を最初に定義しなければならない。次いで、目的の遺伝子GOIのコピー数が、異なる試料間で、GOI及び基準遺伝子のCqの差に基づいて計算される。qPCRに基づくCNVの定量には、一定コピー数の基準遺伝子が必須であるため、我々は、TERTテロメラーゼ逆転写酵素等の一般的に用いられている単コピーの基準遺伝子の信頼性と、多コピー標的を用いた新しい方法を比較した。基準標的としての多コピー標的は、単コピー遺伝子よりも感度及び信頼性が高いCNV定量結果を提供する。単コピー遺伝子は、コピー数の呼び出しには信頼性が低い基準である。qPCRに基づくCNV検証のために基準遺伝子として一般的に用いられている単コピー遺伝子のTERTは、それ自体がコピー数多型の対象である。図10を参照のこと。図は、第5番染色体上のTERT遺伝子及び5種類の既知CNVの位置を示す。ゲノム変異型に関するデータベースDatabaseofGenomicVariants、httpprojectstcagcacgibinvariationgbrowsehg19namechr512113401337106からの情報に基づく。加えて、dbSNPデータベースhttpwwwncbinlmnihgovsitesentrezに報告されている、517個のTERT一塩基多型SNPが存在する。qPCRプライマー又はプローブによって認識されるCNV基準遺伝子配列中のSNPは、qPCRの効率の低下、及び遅延したCq値に繋がり、その結果、誤ったコピー数の呼び出しを引き起こし得る。単コピー遺伝子を基準遺伝子としてΔΔCq解析に使用する代わりに、ゲノム全体に分布している多コピー遺伝要素を用いることで、より信頼性のある、qPCRに基づくコピー数定量を達成することができる。下記の理論計算は、CNV基準遺伝子の1コピーの喪失又は獲得が、基準のCq値、及びGOIのコピー数呼び出しに及ぼす影響を説明するものである。仮定として、基準及びGOIのqPCR効率は100であり、GOIは単コピーの遺伝子であり、試料中のそのコピー数は変化しないNCこととする。CNV定量の基準は、18コピーの遺伝要素又は単コピー遺伝子の何れかである。図11を参照のこと。単コピーの基準遺伝子の1コピーの喪失又は獲得は、誤ったGOIのコピー数呼び出しを引き起こす。GOIのコピー数呼び出しは、多コピー基準の1コピーの喪失又は獲得によっては影響を受けない。サイバーグリーンSybrGreenに基づくqPCRは、GOI及び多コピー標的基準要素を正確に定量する。この方法は、同じ実験で実行される、GOI及び多コピー標的の両者に関するCq値の比較に基づいている。これらの実験に用いたプライマーは、配列番号8及び配列番号9である。プローブに基づくqPCRは、GOI及び多コピー標的基準要素を同時に正確に定量する。この方法は、1つのqPCR反応においてGOI及び多コピー標的の両方を正確に定量する、デュプレックスである、プローブに基づくqPCR法に依拠するものである。これらの実験に用いられるプライマー及びプローブは、配列番号8、配列番号9及び配列番号10である。図12もまた参照のこと。"