少なくとも二つの反復電荷モチーフを有する50キロダルトン未満のポリマー、ここで反復電荷モチーフは陽性に荷電された遊離アミノ部分および陰性電荷から構成され、ここで少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分は少なくとも32Åの介在配列により分離されており、およびここで介在配列は中性である;および医薬として受容可能な担体を含む医薬組成物。ポリマーが非反復ユニットを有する、請求項1に記載の組成物。ポリマーが反復ユニットを有する、請求項1に記載の組成物。ポリマーが同一反復ユニットを有する、請求項3に記載の組成物。ポリマーが非同一反復ユニットを有する、請求項3に記載の組成物。ポリマーが混合ポリマーである、請求項1に記載の組成物。混合ポリマーがペプチド核酸である、請求項6に記載の組成物。ポリマーが少なくとも10の反復電荷モチーフを有する、請求項1に記載の組成物。ポリマーが少なくとも15の反復電荷モチーフを有する、請求項1に記載の組成物。ポリマーが少なくとも20の反復電荷モチーフを有する、請求項1に記載の組成物。少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分が少なくとも115Åの距離だけ分離されている、請求項1に記載の組成物。少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分が少なくとも155Åの距離だけ分離されている、請求項1に記載の組成物。少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分が少なくとも200Åの距離だけ分離されている、請求項1に記載の組成物。ポリマーが合成ポリペプチドである、請求項1に記載の組成物。ポリマーが非天然ポリペプチドである、請求項1に記載の組成物。ポリマーが、少なくとも一つの修飾アミノ酸を有するポリペプチドである、請求項1に記載の組成物。ポリマーが、少なくとも10の修飾アミノ酸を有するポリペプチドである、請求項1に記載の組成物。ポリマーが、1:1の陽性対陰性電荷比を有するポリペプチドである、請求項1に記載の組成物。少なくとも二つの反復電荷モチーフを有する50キロダルトン未満のポリペプチド、ここで反復電荷モチーフは陽性に荷電された遊離アミノ部分および陰性電荷から構成され、ここで少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分は少なくとも8アミノ酸により分離されている;および医薬として受容可能な担体を含む医薬組成物。ポリペプチドが非反復ユニットを有する、請求項19に記載の組成物。ポリペプチドが反復ユニットを有する、請求項19に記載の組成物。ポリペプチドが少なくとも10の反復電荷モチーフを有する、請求項19に記載の組成物。ポリペプチドが少なくとも15の反復電荷モチーフを有する、請求項19に記載の組成物。ポリペプチドが少なくとも20の反復電荷モチーフを有する、請求項19に記載の組成物。反復電荷モチーフの陽性および陰性電荷が少なくとも一つの中性アミノ酸により分離されている、請求項19に記載の組成物。反復電荷モチーフの陽性および陰性電荷が少なくとも五つの中性アミノ酸により分離されている、請求項19に記載の組成物。反復電荷モチーフの陽性および陰性電荷が隣接するアミノ酸上にあり、および中性アミノ酸で分離されていない、請求項19に記載の組成物。少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分が少なくとも27アミノ酸の距離だけ分離されている、請求項19に記載の組成物。少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分が少なくとも37アミノ酸の距離だけ分離されている、請求項19に記載の組成物。少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分が少なくとも47アミノ酸の距離だけ分離されている、請求項19に記載の組成物。ポリペプチドが合成ポリペプチドである、請求項19に記載の組成物。ポリペプチドが非天然ポリペプチドである、請求項19に記載の組成物。ポリペプチドが少なくとも一つの修飾アミノ酸を有する、請求項19に記載の組成物。ポリペプチドが少なくとも10の修飾アミノ酸を有する、請求項19に記載の組成物。ポリペプチドが1:1の陽性対陰性電荷比を有する、請求項19に記載の組成物。荷電された反復を分離しているアミノ酸が中性アミノ酸である、請求項19に記載の組成物。IL2分泌細胞と少なくとも二つの反復電荷モチーフを有する50キロダルトン未満のポリマーを接触させることから成るIL2分泌を誘導するための方法であって、ここで反復電荷モチーフは陽性に荷電された遊離アミノ部分および陰性電荷から構成され、ここで少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分は少なくとも32Åの距離だけ分離されており、およびここでポリマーは非反復ユニットを有する、前記方法。ポリマーが少なくとも10の反復電荷モチーフを有する、請求項37に記載の方法。ポリマーが少なくとも15の反復電荷モチーフを有する、請求項37に記載の方法。ポリマーが少なくとも20の反復電荷モチーフを有する、請求項37に記載の方法。反復電荷モチーフの陽性および陰性電荷が少なくとも一つの中性ユニットにより分離されている、請求項37に記載の方法。反復電荷モチーフの陽性および陰性電荷が少なくとも五つの中性ユニットにより分離されている、請求項37に記載の方法。反復電荷モチーフの陽性および陰性電荷が隣接するユニット上にあり、および中性ユニットで分離されていない、請求項37に記載の方法。ポリマーが合成ポリマーである、請求項37に記載の方法。ポリマーが非天然ポリマーである、請求項37に記載の方法。ポリマーがポリペプチドである、請求項37に記載の方法。陽性に荷電された遊離アミノ部分が天然に存在する陽性に荷電されたアミノ酸から生じる、請求項46に記載の方法。陽性に荷電されたアミノ酸がリジンK、アルギニンR、アスパラギンNおよびヒスチジンHから成る群より選択される、請求項47に記載の方法。陽性に荷電されたアミノ酸がリジンである、請求項47に記載の方法。陰性電荷が天然に存在する陰性に荷電されたアミノ酸から生じる、請求項46に記載の方法。陰性に荷電されたアミノ酸がアスパラギン酸Dおよびグルタミン酸Eから成る群より選択される、請求項50に記載の方法。陰性に荷電されたアミノ酸がアスパラギン酸である、請求項50に記載の方法。ポリペプチドの少なくとも一つのユニットが化学的に修飾されたアミノ酸である、請求項46に記載の方法。少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分が少なくとも27アミノ酸の距離だけ分離されている、請求項46に記載の方法。少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分が少なくとも37アミノ酸の距離だけ分離されている、請求項46に記載の方法。少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分が少なくとも47アミノ酸の距離だけ分離されている、請求項46に記載の方法。ポリペプチドが少なくとも一つの修飾アミノ酸を有する、請求項46に記載の方法。ポリペプチドが少なくとも10の修飾アミノ酸を有する、請求項46に記載の方法。ポリマーが1:1の陽性対陰性電荷比を有する、請求項46に記載の方法。荷電された反復を分離しているアミノ酸が中性アミノ酸である、請求項46に記載の方法。IL2分泌細胞と少なくとも二つの反復電荷モチーフを有する50キロダルトン未満のポリペプチドを接触させることから成るIL2分泌を誘導するための方法であって、ここで反復電荷モチーフは陽性に荷電された遊離アミノ部分および陰性電荷から構成され、ここで少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分は少なくとも8アミノ酸の距離だけ分離されている、前記方法。ポリペプチドが反復ユニットから形成され、およびここで反復電荷モチーフは反復ユニットの少なくとも一部である、請求項61に記載の方法。IL2分泌を誘導することによりIL2応答性障害を処置するための方法であって、IL2応答性障害を有する患者に、IL2分泌を誘導するために有効量の、少なくとも二つの反復電荷モチーフを有する50キロダルトン未満のポリマーを投与することから成る方法、ここで反復電荷モチーフは陽性に荷電された遊離アミノ部分および陰性電荷から構成され、ここで少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分は少なくとも32Åの距離だけ分離されており、およびここで患者は手術を受ける準備がなされていない、前記方法。IL2応答性障害がAIDS、腎細胞癌腫およびメラノーマから成る群より選択される、請求項63に記載の方法。感染に付随する膿瘍形成に対する保護を誘導する方法であって、IL2およびIL2誘導化合物から成る群より選択される化合物が、膿瘍形成に対する保護を誘導するために有効量含まれている医薬製剤をそのような保護を必要としている患者に投与することから成る方法。IL2誘導化合物が活性化T細胞、SEA、抗CD3抗体、酸化的化学物質およびツカレソールから成る群より選択される、請求項65に記載の方法。感染に付随する膿瘍形成に対する保護を誘導する方法であって、少なくとも二つの反復電荷モチーフを有する50キロダルトン未満のポリマーが、膿瘍形成に対する保護を誘導するために有効量含まれている医薬製剤をそのような保護を必要としている患者に投与することから成る方法、ここで反復電荷モチーフは陽性に荷電された遊離アミノ部分および陰性電荷から構成され、ここで少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分は少なくとも32Åの距離だけ分離されており、およびここでポリマーは非反復ユニットを有する、前記方法。医薬製剤がIL2を誘導する、請求項67に記載の方法。医薬製剤がIL10を誘導する、請求項67に記載の方法。患者が膿瘍形成状態に暴露される前に医薬製剤が患者に投与される、請求項67に記載の方法。患者が膿瘍形成状態に暴露された後に医薬製剤が患者に投与される、請求項67に記載の方法。医薬製剤が手術を必要とする患者に投与される、請求項67に記載の方法。医薬製剤が手術を受けている患者に投与される、請求項67に記載の方法。患者が膿瘍形成状態に暴露された後に医薬製剤が患者に投与される、請求項67に記載の方法。医薬製剤がペニシリンG、ペニシリンV、アンピシリン、アモキシシリン、バカンピシリン、シクラシリン、エピシリン、ヘタシリン、ピバンピシリン、メチシリン、ナフシリン、オキサシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、fルクロキサシリン、カルベニシリン、チカルシリン、アブロシリン、メツロシリン、ピペラシリン、アムジノシリン、セファレキシン、セファラジン、セファドキシル、セファゾリン、セフロキシム、アキセチル、セファマンドール、セフォニシド、セフォキシチン、セフォタキシム、セフチゾキシム、セフメノキシム、セフトリアキソン、モキサラクタム、セフォテタン、セフォペラゾン、セフタジドム、イミペネム、クラブラナート、チメンチン、スルバクタム、ネオマイシン、エリスロマイシン、メトロニダゾール、クロラムフェニコール、クリンダマイシン、リンコマイシン、バンコマイシン、トリメトプリムスルファメトキサゾール、アミノグリコシド、キノロン、テトラサイクリンおよびリファムピンからなる群より選択される一つまたはそれ以上の抗菌剤とともに与えられる、請求項67に記載の方法。ポリマーが少なくとも10の反復電荷モチーフを有する、請求項67に記載の方法。ポリマーが少なくとも15の反復電荷モチーフを有する、請求項67に記載の方法。ポリマーが少なくとも20の反復電荷モチーフを有する、請求項67に記載の方法。反復電荷モチーフの陽性および陰性電荷が少なくとも一つの中性ユニットにより分離されている、請求項67に記載の方法。反復電荷モチーフの陽性および陰性電荷が少なくとも五つの中性ユニットにより分離されている、請求項67に記載の方法。反復電荷モチーフの陽性および陰性電荷が隣接するユニット上にあり、および中性ユニットで分離されていない、請求項67に記載の方法。少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分が少なくとも47アミノ酸の距離だけ分離されている、請求項67に記載の方法。ポリマーが合成ポリマーである、請求項67に記載の方法。ポリマーが非天然ポリマーである、請求項67に記載の方法。ポリマーが非ポリサッカリドである、請求項67に記載の方法。ポリマーが非ポリペプチドである、請求項67に記載の方法。ポリマーがポリペプチドである、請求項67に記載の方法。陽性に荷電された遊離アミノ部分が天然に存在する陽性に荷電されたアミノ酸から生じる、請求項87に記載の方法。陽性に荷電されたアミノ酸がリジンK、アルギニンR、アスパラギンNおよびヒスチジンHから成る群より選択される、請求項88に記載の方法。陽性に荷電されたアミノ酸がリジンである、請求項88に記載の方法。陰性電荷が天然に存在する陰性に荷電されたアミノ酸から生じる、請求項87に記載の方法。陰性に荷電されたアミノ酸がアスパラギン酸Dおよびグルタミン酸Eから成る群より選択される、請求項91に記載の方法。陰性に荷電されたアミノ酸がアスパラギン酸である、請求項91に記載の方法。ポリペプチドの少なくとも一つのユニットが化学的に修飾されたアミノ酸である、請求項87に記載の方法。少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分が少なくとも27アミノ酸の距離だけ分離されている、請求項87に記載の方法。少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分が少なくとも37アミノ酸の距離だけ分離されている、請求項87に記載の方法。ポリペプチドが少なくとも一つの修飾アミノ酸を有する、請求項87に記載の方法。ポリペプチドが少なくとも10の修飾アミノ酸を有する、請求項87に記載の方法。ポリマーが1:1の陽性対陰性電荷比を有する、請求項87に記載の方法。荷電された反復を分離しているアミノ酸が中性アミノ酸である、請求項87に記載の方法。感染に付随する膿瘍形成に対する保護を誘導する方法であって、少なくとも二つの反復電荷モチーフを有する50キロダルトン未満のポリペプチドが、膿瘍形成に対する保護を誘導するために有効量含まれている医薬製剤をそのような保護を必要としている患者に投与することから成る方法、ここで反復電荷モチーフは陽性に荷電された遊離アミノ部分および陰性電荷から構成され、ここで少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分は少なくとも8アミノ酸の距離だけ分離されている、前記方法。ポリペプチドは反復ユニットで形成され、およびここで反復電荷モチーフは反復ユニットの少なくとも一部である、請求項101に記載の方法。抗原提示細胞存在下、T細胞と、IL2分泌を誘導するために有効量の、少なくとも二つの反復電荷モチーフを有する50キロダルトン未満のポリマーを接触させることから成るT細胞の活性化法であって、ここで反復電荷モチーフは陽性に荷電された遊離アミノ部分および陰性電荷から構成され、ここで少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分は少なくとも32Åの距離だけ分離されており、およびここでポリペプチドは非反復ユニットを有する、前記T細胞の活性化法。抗原提示細胞存在下、T細胞と、IL2分泌を誘導するために有効量の、少なくとも二つの反復電荷モチーフを有する50キロダルトン未満のポリペプチドを接触させることから成るT細胞の活性化法であって、ここで反復電荷モチーフは陽性に荷電された遊離アミノ部分および陰性電荷から構成され、ここで少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分は少なくとも8アミノ酸の距離だけ分離されている、前記T細胞の活性化法。ポリペプチドは反復ユニットで形成され、およびここで反復電荷モチーフは反復ユニットの少なくとも一部である、請求項104に記載の方法。T細胞を活性化してTh1細胞特異性サイトカインを分泌させることによりT細胞応答性障害を処置するための方法であって、T細胞応答性障害を有する患者に、T細胞によるIL2分泌を誘導するために有効量の、少なくとも二つの反復電荷モチーフを有する50キロダルトン未満のポリマーを投与することから成る方法、ここで反復電荷モチーフは陽性に荷電された遊離アミノ部分および陰性電荷から構成され、ここで少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電された遊離アミノ部分は少なくとも32Åの距離だけ分離されており、およびここで患者は手術を受ける準備がなされていない、前記方法。T細胞応答性障害がインシュリン依存性糖尿病、実験的アレルギー性脳脊髄炎、炎症性腸疾患および同種移植片拒絶から成る群より選択される、請求項106に記載の方法。特異的抗原への不適切なIgG抗体応答により特徴付けられる障害を有する患者を処置するための方法であって、不適切なIgG抗体により特徴付けられる障害を有する患者に、少なくとも二つの反復電荷モチーフを有する50キロダルトン未満のポリマーが、特異的抗原に対するIgG抗体応答を抑制するために有効量含まれている医薬製剤を投与することから成る方法、ここで反復電荷モチーフは陽性に荷電した遊離アミノ部分および陰性電荷から成っており、少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電した遊離アミノ部分は少なくとも32Åの距離だけ分離されており、ここでポリマーがポリペプチドの場合、3~7部のリジンK、1~3部のグルタミン酸E、4~7部のアラニンA、05~2部のチロシンYの相対モル比のK、E、AおよびY残基でポリマーは構成されておらず、およびここで患者は手術を受けるために準備されていない、前記方法。医薬製剤が日に一度患者に投与される、請求項108に記載の方法。医薬製剤が1:1の陽性対陰性電荷比を有する、請求項108に記載の方法。手術部位で起こる外科的手術後癒着形成を減少させる方法であって、そのような保護を必要としている患者の手術部位以外の部位に、外科的手術後癒着形成に対する保護を誘導するために有効量の、少なくとも二つの反復電荷モチーフを有する双性イオン性ポリマーを投与することから成る方法、ここで、反復電荷モチーフは陽性に荷電した遊離アミノ部分および陰性電荷から成っており、少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電した遊離アミノ部分は少なくとも32Åの距離だけ分離されている、前記方法。双性イオン性ポリマーがIL2を誘導する、請求項111に記載の方法。双性イオン性ポリマーがIL10を誘導する、請求項111に記載の方法。ポリマーの分子量が約15キロダルトンから約50キロダルトンである、請求項111に記載の方法。ポリマーがポリペプチドを含む、請求項114に記載の方法。ポリマーの分子量が約50キロダルトンより大きく、約500キロダルトンより小さい、請求項111に記載の方法。ポリマーがポリサッカリドを含んでいる、請求項116に記載の方法。ポリマーの分子量が約500キロダルトンに等しいかまたはより大きく、約5000キロダルトンまでである、請求項111に記載の方法。患者が手術部位を含んでいる手術過程を受ける前に投与が始まる、請求項111に記載の方法。患者が手術部位を含んでいる手術過程を受ける少なくとも1日前に投与が始まる、請求項119に記載の方法。ポリマーが架橋されていない、請求項111に記載の方法。ポリマーが少なくとも部分的に架橋されている、請求項111に記載の方法。手術部位以外の部位での投与が全身的である、請求項111に記載の方法。手術部位以外の部位での投与が静脈内および皮下から成る群より選択される投与経路を含む、請求項111に記載の方法。ポリマーが非反復ユニットを有する、請求項111に記載の方法。有効量が患者の体重kg当たり約110mgである、請求項111に記載の方法。手術部位で起こる外科的手術後癒着形成を減少させる方法であって、そのような保護を必要としている患者の手術部位に、外科的手術後癒着形成に対する保護を誘導するために有効量の、少なくとも二つの反復電荷モチーフを有する双性イオン性非ポリサッカリドポリマーを局所的に投与することから成る方法、ここで、反復電荷モチーフは陽性に荷電した遊離アミノ部分および陰性電荷から成っており、少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電した遊離アミノ部分は少なくとも32Åの距離だけ分離されている、前記方法。非ポリサッカリドポリマーの分子量が約15キロダルトンから約50キロダルトンである、請求項127に記載の方法。非ポリサッカリドポリマーの分子量が約50キロダルトンより大きく、約500キロダルトンより小さい、請求項127に記載の方法。非ポリサッカリドポリマーの分子量が約500キロダルトンに等しいかまたはより大きく、約5000キロダルトンまでである、請求項127に記載の方法。非ポリサッカリドポリマーがポリペプチドを含む、請求項127に記載の方法。患者が手術部位を含んでいる手術過程を受ける前に投与が始まる、請求項127に記載の方法。患者が手術部位を含んでいる手術過程を受ける少なくとも1日前に投与が始まる、請求項132に記載の方法。非ポリサッカリドポリマーが架橋されていない、請求項127に記載の方法。非ポリサッカリドポリマーが少なくとも部分的に架橋されている、請求項127に記載の方法。非ポリサッカリドポリマーが非反復ユニットを有する、請求項127に記載の方法。有効量が患者の体重kg当たり約110mgである、請求項127に記載の方法。手術部位で起こる外科的手術後癒着形成を減少させる方法であって、そのような保護を必要としている患者の手術部位に、外科的手術後癒着形成に対する保護を誘導するために有効量の、少なくとも二つの反復電荷モチーフを有する双性イオン性ポリサッカリドポリマーを局所的に投与することから成る方法、ここで、反復電荷モチーフは陽性に荷電した遊離アミノ部分および陰性電荷から成っており、少なくとも二つの反復電荷モチーフの陽性に荷電した遊離アミノ部分は少なくとも32Åの距離だけ分離されている、前記方法。ポリサッカリドポリマーの分子量が約15キロダルトンから約50キロダルトンである、請求項138に記載の方法。ポリサッカリドポリマーの分子量が約50キロダルトンより大きく、約500キロダルトンより小さい、請求項138に記載の方法。患者が手術部位を含んでいる手術過程を受ける前に投与が始まる、請求項138に記載の方法。患者が手術部位を含んでいる手術過程を受ける少なくとも1日前に投与が始まる、請求項141に記載の方法。ポリサッカリドポリマーが架橋されていない、請求項138に記載の方法。ポリサッカリドポリマーが少なくとも部分的に架橋されている、請求項138に記載の方法。ポリサッカリドポリマーが非反復ユニットを有する、請求項138に記載の方法。有効量が患者の体重kg当たり約110mgである、請求項138に記載の方法。実施例1:細菌の起源、多糖類の単離および修飾、および腹腔内敗血症の動物モデルBfragilisNCTC9343およびATCC23745を初めにNationalCollectionofTypeCulturesLondon、EnglandまたはAmericanTypeCultureCollectionBethesda、MDから得た。微生物は使用するまでペプトンイーストまたは脳心臓注入培養液中に80°Cで保存し、記載に従って嫌気的に培養した。PantostietalInfectImmun59:20751991。BfragilisNCTC9343およびATCC23745由来のCPCは、先に記載したように熱フェノール/水抽出により単離し、つづいてPSAの精製を行った。TzianabosAetalJBiolChem267:182301992。肺炎連鎖球菌1型夾膜多糖CPおよび他の肺炎連鎖球菌多糖はATCCMDから得た。荷電の変化した分子を生成するための多糖の化学的修飾については先に記載されている。TaylorRetalBiochemistry11:13831972カルボジイミド還元およびBaumannHetalBiochemistry31:40811992Nアセチル化および脱アミノ化。本研究で使用した腹腔内敗血症のラットモデルについては先に記載されている。OnderdonkAetalJInfectDis136:821977およびTzianabosAetalScience262:4161993。簡単に述べると、体重180~200gの雄WistarまたはLewisラットCharlesRiverLaboratories、Wilmington、MAを別々に飼育し、餌RalstonPurina、StLouis、MOと水は自由に与えた。動物はネンブタール50mg/ml;AbbottLaboratories、NorthChicago、IL015mlを1回腹腔内注射して麻酔し、腹部を剃り、ヨードチンキを塗布した。腹壁および腹膜を通って前正中線切開0510cmを行い、接種物05mlを含むゼラチンカプセルを骨盤に挿入した。BfragilisNCTC9343108cfu/動物、黄色ブドウ球菌PS80107cfu/動物、または精製した被験多糖を含む接種物は、記載に従って滅菌ラット盲腸内容物および10硫酸バリウムw/Vを含むアジュバント溶液と1:1に混合した。OnderdonkAetalInfectImmun13:221976。切開部位は30絹糸での結節縫合により閉じ、動物をケージに戻した。6日後、盲検により動物の剖検を行い、被験群について知らされていない観察者が一以上の腹腔内膿瘍形成について観察を行った。完全に形成された一以上の膿瘍を有するラットを陽性とした。完全に形成された膿瘍がまったく見られない動物を陰性とした。実施例2:PSAによるT細胞活性化は荷電モチーフに依存するT細胞に依存して防御宿主反応を引き起こすBfragilisPSAの効力は、PSAと上記細胞型との間の相互作用を示唆した。従って、実験はinvitroでPSAがT細胞を活性化させるか否かについて検討するために行った。T細胞増殖試験はヒトロイコパック匿名の血小板ドナー由来の廃棄白血球を使用して行った。単核細胞は赤血球および多形核球を取り除くためのficollhypaque沈降により分離した。ナイロンウールカラムを使用して、T細胞、B細胞および単核細胞からなる単核層からB細胞および単核細胞を取り除いた。これらの細胞の一部はナイロンウールにのせる前に保存し、セシウム線源を64kRads、48分間照射後に自己フィーダー細胞として使用した。98以上CD3陽性FACS分析により測定であるナイロンを通過した細胞は、リスポンダー細胞として使用するか、または磁気ビーズによるネガティブ選択に従ってCD4OKT4またはCD8OKT8に対する抗体とともにさらに枯渇させた。FinbergRWetalJImmunol149:20551992;HaregewoinAetalNature340:3091989。RPMI1640および5ウシ胎児血清を含むU底96ウェルプレートCorningCostarCorpCambridge、MA中で、照射したAPCs25×105/200μlと12日間共存培養したヒトT細胞5×104細胞/200μlに10倍希釈したPSAを添加した。NguyenLHetalJVirol66:70671992。予め設定した時点で、細胞を採取する6時間前に1mCiの3Hチミジン/ウェルで細胞をパルス標識し、細胞増殖を測定した。細胞は十分に洗浄し、採取して、液体シンチレーション法により放射活性な取り込み量を測定した。PSAに対する反応は一般にヒトT細胞ドナーにより変化した。すべての試験において、PSAとともに培養した照射APCsまたはSEA単独は、これらの抗原に反応して増殖しなかった。データはトリプリケートのウェル±標準誤差の平均としてcpmで表した。すべての増殖実験で、データは少なくとも5回の異なる実験の典型的な結果を表す。ヒトT細胞を用いた増殖試験において、PSAは用量依存的反応用量範囲:10~01μg/ml、図2を引き起こした。この増殖反応はPSAとの培養6日後に最高になった。ブドウ球菌エンテロトキシンASEAの至適濃度1ng/mlで試験を行った場合も増殖反応は6日でピークに達し、対照である培地に比べ、50~150倍の範囲の刺激指数を得た図2。PSAの2アセタミド4アミノ246トリデオキシガラクトース残基のC4における遊離アミノ基糖1、図1、およびinvivoで生物学的機能を媒介する糖3上のピルビン酸基と結合したカルボキシル基の重要性を示した。TzianabosAOetalScience262:4161993;TzianabosAOetalInfectImmun;62:48811994;TzianabosAOetalInfectImmun62:35901994。さらに、PSAによるT細胞活性化における上記化学基の役割について評価した。特異的化学的修飾はPSAの遊離アミノ基を中性のNアセチル基に変換した図。1、修飾I。PSAのNアセチル化はPSAによるT細胞活性化を阻害し、この結果はPSA上の遊離アミノ基がT細胞活性化において必須であることを示唆する図3、それぞれ10μg/mlのPSA対PSA:NAc。末端ガラクトース残基と結合したピルビン酸置換基のカルボジイミド還元によるPSA上の陰性荷電基の化学的修飾図1、修飾IIは非修飾PSAに比べ増殖反応が72低下したそれぞれ、7937±3264cpm対27886±7890cpm。これらのデータはinvitroでのT細胞活性化媒介における上記の荷電基の重要な役割を説明し、invivoでの膿瘍形成に対するPSA媒介保護における上記の基の効果と関連する。TzianabosAOetalInfectImmun62:48811994。以下のデータは、PSAに対するT細胞増殖反応がタンパク質またはペプチド汚染の存在を表すという可能性について扱う:1Bfragilis由来の表面多糖の精製はタンパク質を分解または変性するためにデザインした方法と関連した熱フェノールによる抽出、反復したプロナーゼ消化、および1MNaOH中で1時間沸騰。PantostiAetalInfectImmun59:20751991。2SDSPAGE、定量的タンパク質試験、およびアミノ酸分析は多糖サンプル中にタンパク質が含まれていないことを示した。3PSAはその電荷モチーフのために、水溶液中でイオン的に凝集し、T細胞を活性化させる能力を失う。T細胞活性化に使用するほんの少し前に等電点電気泳動により上記イオン複合体を分解することが重要である。4特異的に炭水化物を変化させ、タンパク質を変化させない化学的処置でPSAを処置すると、PSAによる増殖は阻害された。しかし、変化した炭水化物基を化学的に再生すると、T細胞活性化は復活した。実験の最終セットのために、メタ過ヨウ素酸ナトリウムNaIO4処理により、PSAを化学的に酸化した。上記処理は炭水化物の隣接したヒドロキシル基間のCC結合の開裂に選択的である。PSAの場合、過ヨウ素酸酸化はガラクトフラノース側鎖のC6の除去に非常に特異的で図1、糖4、修飾III、C5にアルデヒド基を形成する。T細胞増殖試験では、過ヨウ素酸酸化PSAは反応を誘発できなかった図3、それぞれ10μg/mlのPSA対PSA:NAc。活性の消失は過ヨウ素酸酸化によるアルデヒドの形成のためで、アルデヒドはPSAの遊離アミノ基と相互作用して中間体シッフ塩基を形成する。T細胞および/またはAPCsとの相互作用よりむしろ、シッフ塩基形成における分子内および分子間アルデヒドによる遊離アミノ基の占有が、酸化型PSAによる増殖の欠如をもたらしてもよい。RhodesはT細胞とAPCs間のシッフ塩基形成がT細胞活性化のシグナルの提供に重要であることを示した。ZhengetalScience256:15601992。過ヨウ素酸酸化後、PSAを水素化ホウ素ナトリウムNaBH4で還元し、C5のアルデヒド基をヒドロキシメチル基に変換した図1、修飾IV。この修飾により側鎖の糖はアラビノフラノース残基に変換するが、多糖の荷電基の初めのモチーフはそのままであった。酸化型PSAの側鎖ヒドロキシメチル基の再生により、上記多糖の増殖活性が復活した図3、それぞれ10μg/mlのPSA対PSA:酸化型/還元型。NMRおよびGCMSは、100の反復単位が記載されたように修飾されたことを確証した。一般に、タンパク質はNaIO4酸化に非常に抵抗性であるが、この処置によりタンパク質またはペプチドに結合したシステイン残基に存在するチオール基をスルホキシド誘導体に酸化することは可能である。JMarchAdvancesinOrganicChemistryJohnWileyandSonsNewYork第4版、1992。もしこのことが事実なら、NaBH4による還元が酸化処置を逆転し、上記の作用を受けたアミノ酸を再生するであろう。従って、上記記載の結果はシステインを含むペプチドによる汚染の結果かもしれない。上記の残っている可能性を除去するために、PSAを過酸化水素で処理した。過酸化水素はシステインのチオール基をスルホキシド誘導体に酸化するが、炭水化物構造には作用しない。JMarchAdvancesinOrganicChemistryJohnWileyandSonsNewYork第4版、1992。過酸化水素処理PSAによるT細胞増殖試験は、増殖活性が未処理多糖の活性に等しいことを示した図3、それぞれ10μg/mlのPSA対PSA:過酸化型。従って、過酸化水素により酸化された生成物による同等の増殖活性、および過ヨウ素酸酸化PSAのNaBH4還元による増殖活性の回復は、観察されたT細胞反応が炭水化物に由来するものであって、汚染したタンパク質によるものではないことを確証した。実施例3:T細胞活性化に関与する双極性イオンポリマー荷電モチーフの性状決定本実施例では、PSAと同じ荷電モチーフをもつ他の細菌多糖がinvitroでT細胞を活性化するか否について検討する。肺炎連鎖球菌1型夾膜多糖CPは反対の荷電基をもつ天然に存在するわずかな多糖類のうちの一つである。LindbergBetalCarbohydrRes78:1111980。1型CPは、PSAに存在する正に荷電した遊離アミノ基2アセタミド4アミノ246トリデオキシガラクトース残基の付いた同じ糖残基をもつ三糖反復単位である。さらに、1型CPは反復単位毎に負に荷電したカルボキシル基を含む2つのガラクツロン酸残基を有する。以前の研究で、1型CPもPSAと同様に膿瘍形成から動物を保護することを示している。TzianabosAOetalInfectImmun62:48811994。さらに、この保護活性はまたその反復単位構造中の遊離アミノ基の存在に依存している。肺炎連鎖球菌3型CPは1型CPと異なり、グルコースとグルクロン酸の2糖反復単位を有する。ReevesREetalJBiolChem139:5111941。肺炎連鎖球菌1型および3型夾膜多糖はATCCRockville、MDから得て、含まれている細胞壁多糖、C物質を除去するために80°Cで1時間、2MNaOH処理をした。ゲルろ過クロマトグラフィーによる精製後、肺炎連鎖球菌多糖類は等電点電気泳動にかけ、透析、凍結乾燥し、凝集を防ぐために3MNaCl中に保存した。T細胞増殖試験は、PSAのかわりに1型または3型CPを使用し、実施例2に従って行った。1型CPは強い用量依存的T細胞反応を引き起こし、反応は培養6時間後にピークに達し、具体的には上記試験におけるPSA反応の60~70であった。NMRにより確かめられた1型CPのNアセチル化はT細胞増殖を阻害した図4。肺炎連鎖球菌3型CPは、グルコースおよびグルクロン酸の2糖反復単位を有するが、上記試験においてT細胞反応を引き起こさなかった図5。実施例4:T細胞活性化に関与する双極性イオンポリマー荷電モチーフの性状決定T細胞活性化における双極性イオン荷電モチーフの役割を示すために、PSAの反復単位を真似て、2糖反復単位を合成した。この目的のために、反復単位サイズの異なるリシンKおよびアスパラギン酸D、KDnを合成し、CD4T細胞の刺激能に対して試験を行った。ペプチドKDnはFmocchemistryを使用して、アルコキシベンジルアルコールPACレジンPerSeptiveBiosystemsIncFraminghamMAを用いてRaininSymphonypeptidesysthesizerで行った。アミノ酸はカップリングのために21Hベンゾトリアゾール1イル1133テトラメチルウロニウムヘキサフルオロ燐酸HBTUにより活性化した。調製したペプチドはマトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間型MALDITOF質量分析法および核磁気共鳴NMR法により分析した。MassスペクトルはVoyagerMALDITOF質量分析計から得た。プロトンNMRスペクトルは500MHzのBruckerAMX500から得た。両分析により、ペプチドが予想した構造であることを確かめた。実施例2のT細胞増殖試験に従い、異なるサイズのKDペプチド20μg/mlのインキュベーション6日後のT細胞活性化能について評価した。肺炎連鎖球菌1型CP20μg/mlを陽性対照として使用した。15、20または25反復単位からなるKDペプチドはそれぞれinvitroでT細胞活性化を刺激した図6。10反復単位のペプチドによる反応はより低かった。10反復単位以下1~5のペプチドは、T細胞活性化を刺激しなかった。対照ペプチド、ポリLリシンもまた、T細胞活性化を刺激しなかった。これらのデータは多糖ではない双極性イオン反復単位ポリマーがT細胞活性化を刺激し、この活性がポリマーの反復単位サイズに依存することを明確に示した。実施例5:双極性イオンポリペプチドは膿瘍形成に対して保護をする本実施例では、実施例1の腹腔内敗血症モデルを使用して、invivoで双極性イオンKDnペプチドが膿瘍形成から動物を保護するか否かについて検討する。動物には50または5μgの25反復単位のKDペプチドKD25を投与し、Bfragilisをチャレンジした。結果を表1、実験Aに示す。高用量のKD25投与は生理的食塩水処理対照群に比べ、有意に動物を保護したそれぞれ、17と78、p<00005。しかし、低用量のペプチドでは保護できなかった。双極性イオン多糖肺炎連鎖球菌1型CPは用量50μgでは有意に動物を保護したが、用量5μgでは保護しなかった。高用量のポリLリシン投与は膿瘍形成に対する保護ができなかった。結局、KD25による動物の処理は、重要な病原菌肺炎連鎖球菌による膿瘍形成から動物を保護した表1、実験B生理的食塩水で処理し、肺炎連鎖球菌をチャレンジした動物の膿瘍形成率は80であったが、50μgのKD25での処理は膿瘍形成率を20に低下させたp<0002。これらのデータは、PSAによる動物の処理が一般にヒトでの腹腔内敗血症と関連する広範囲の腸微生物により誘発される膿瘍を妨害することを示した以前の研究と関連する。TzianabosAOetalJClinInvest96:27271995。保護におけるペプチド反復単位サイズの影響について検討した。上記記載の方法に従って、動物は50μg/各反復単位サイズの用量で処理した表2。15、20、または25反復単位ペプチドによる処理は有意な保護を示した。しかし、10以下の反復単位ペプチドによる処理では生理的食塩水で処理した動物に比べで保護は有意ではなかった。実際、10反復単位以下のペプチドでは、反復単位サイズが減少するにつれて保護の程度が低下した。invivo保護試験とT細胞増殖データとの相関関係は、これらの活性に欠くことのできない最適な反復単位サイズがあることを強く示唆している。表1.ペプチドKD25による膿瘍形成に対する保護。ジペプチド反復単位は記載に従って合成した。動物は先に記載したように、チャレンジの24時間前、チャレンジ時、24時間後に皮下注射により適当なポリマーで処理した。TzianabosAOetalJClinInvest96:27271995。動物にBfragilis1×108cfu/ラットまたは黄色ブドウ球菌PS801×107cfu/ラットをチャレンジし、6日後に腹腔内膿瘍形成を調べた。1生理的食塩水処理対照との比較。動物群間の膿瘍形成の比較はカイ2乗解析により行ったInStatGraphPadSoftwareIncSanDiegoCA。表2.異なる反復単位サイズのKD25による膿瘍形成に対する保護。動物は先に記載したように、チャレンジの24時間前、チャレンジ時、24時間後に皮下注射により適当なポリマーで処理した。TzianabosAOetalJClinInvest96:27271995。動物にBfragilis1×108cfu/ラットまたは黄色ブドウ球菌PS801×107cfu/ラットをチャレンジし、6日後に腹腔内膿瘍形成を調べた。1生理的食塩水処理対照との比較。動物群間の膿瘍形成の比較はカイ2乗解析により行ったInStatGraphPadSoftwareIncSanDiegoCA。実施例6:膿瘍形成におけるT細胞移入試験細胞移入実験は先に記載したように行った。TzianabosAOetalJClinInvest96:27271995。動物は脾臓摘出前1週間、PSA10μg/用量を全部で4用量、皮下注射した。脾臓はPSA処理または生理的食塩水処理ラットから摘出し、CoulterFNカウンターCoulterElectronicsIncHialeahFLを使用して数え、トリパンブルー排除試験により生存能力を調べた。標本をナイロンウールカラムに通してT細胞を濃縮したFACS分析による評価では純粋なT細胞は95以上。T細胞は記載に従って、CD4またはCD8T細胞に対する特異的抗体で処理して分画しBiosourceInternationalCamarilloCA、磁気ビーズによるネガティブ選択を行ったPerseptiveDiagnosticsCambridgeMA。FinbergRWetalJImmunol149:20551992;HaregewoinAetalNature340:3091989。磁気ビーズ分離後の精製した細胞集団の確認をFACS分析により行い、相当する細胞集団が95以上純粋であることを示した。次に精製したT細胞を数え、適切な細胞数3×106/動物に調製して、動物への心臓内移入02mlを行った。T細胞移入24時間後に、動物にBfragilisをチャレンジし、6日後に群ごとの膿瘍を有する動物の割合を測定した。結果を表3に示す。生理的食塩水処理動物由来の未分画T細胞を移入した動物は膿瘍を形成した84膿瘍率が、PSA処理動物由来の未分画T細胞を移入された動物ではわずか28が膿瘍を形成したp=00001。PSA処理動物由来のCD4T細胞の移入はレシピエント動物における膿瘍形成率を29に低下させたp=00001が、PSA処理ラット由来のCD8T細胞を移入され、膿瘍を発生した動物の数は、同様の処理動物由来のCD4T細胞を移入された動物より、有意に高かったp<0005。表3.CD4T細胞はBfragilisによる膿瘍形成に対する保護を媒介する。1動物はT細胞採取前にPSA10μgを4回、皮下注射した2生理的食塩水処理ラット由来のT細胞を与えた動物との比較3T細胞はラットB細胞マーカーに特異的なイソタイプ適合モノクローナル抗体とインキュベートした。実施例7:双極性イオンポリマー荷電モチーフに対するCD4T細胞反応における可溶性因子上記保護活性についてさらに詳しく調べるために実施例6に従って、生理的食塩水またはPSA処理動物から採取したCD4T細胞集団は凍結/解凍を行い、細胞を溶解させるか、または1ホルムアルデヒドで固定した。T細胞溶解産物は、濃縮T細胞集団を凍結/解凍サイクルに3回さらすことにより得た。細胞破片を遠心機で分離3000×gし、残った溶解産物をinvivoT細胞移入試験に使用した3×106細胞/動物に相当する。得られた細胞溶解産物または固定細胞集団を実施例6に記載したようにBfragilisによるチャレンジ24時間前に未処置のレシピエント動物に移入した。結果を表4に示す。生理的食塩水処理ラット由来の未処理、溶解、または固定細胞を与えた動物は膿瘍を発生したそれぞれ72、90および75。PSA処理ラット由来の無傷のCD4T細胞、またはCD4T細胞溶解産物を移入すると、未処理T細胞レシピエントは保護されたそれぞれ22および17の膿瘍率。しかし、PSA処理動物由来のCD4T細胞を固定すると保護活性は阻害され、固定した生理的食塩水処理CD4T細胞を与えた動物の75と比較して88の膿瘍率であった。表4.腹腔内膿瘍形成に対する移入したCD4T細胞処理の効果1動物はT細胞採取前に生理的食塩水またはPSA10μgを4回、皮下注射した。23×106細胞または同じ数の細胞に由来するT細胞溶解産物を各動物に移入した。3生理的食塩水処理ラット由来の同様に処理したT細胞を与えた動物との比較4NS=有意でない実施例8:PSA処理動物由来のT細胞によるサイトカインmRNA発現実施例6の細胞移入実験に記載したように動物をPSAで処理し、精製した脾臓T細胞にRTPCR分析を行った。RNeasyMiniKitQiagenSantaClaritaCAを使用して、精製したT細胞から総細胞RNAを集めた。簡単に述べると、1×107細胞を溶解し、反復して20ゲージ針を通すことによりホモジナイズし、RNAアフィニティーカラムにのせた。残ったDNAをDNaseIGibcoBRLRockvilleMDで消化し、RNeasyKitを使用してRNAを精製した。1w/vアガロースゲルの電気泳動によりRNA完全性を確認した後、SuperscriptRTPCRKitGibcoBRLRockvilleMDを使用して逆転写RTを行った。10μgアリコート中のRNAをオリゴdTでプライム化し、取り扱い説明書に従ってRTを行った。得られたcDNAをRNaseGibcoBRLRockvilleMDで処理し、15mMMgCl2、20mMTrisHCl、02mMdNTPs、01TritonX100、25UTaqポリメラーゼ、200ngcDNA、および各プライマー200ngを含む50μlの反応液中でPCRを行った。タッチダウンPCRを簡素化した、ステップダウンPCRを行い、非特異的生成物の形成を減らした。HeckerKHetalBiotechniques20:4781996。ホットスタートは94°Cで20分間行った。増幅サイクルの条件は94°C、1分間の変性、各アニーリング温度67°C、64°C、61°C、58°C、55°Cおよび51°Cでの2分間、3サイクルのアニーリング、および72°C、3分間の伸長からなる。52°Cのアニーリング温度でさらに20サイクル行い、全体で38サイクル行った。IL4のPCRは58°Cのアニーリング温度で35サイクル行った。イントロンを含むプライマーはGeneStarプログラムを使用してデザインした:βアクチンセンス5CCAACCGTGAAAAGATGACCC3SEQIDNO:1βアクチンアンチセンス5TCGTACTCCTGCTTGCTGATCC3SEQIDNO:2IL2センス5ACGCTTGTCCTCCTTGTCAAC3SEQIDNO:3IL2アンチセンス5CCATCTCCTCAGAAATTCCACC3SEQIDNO:4IL4センス5GCTGTCACCCTGTTCTGCTTTC3SEQIDNO:5IL4アンチセンス5TCATTAACGGTGCAGCTTCTC3SEQIDNO:6IL10センス5ACAATAACTGCACCCACTTCC3SEQIDNO:7IL10アンチセンス5AAATCATTCTTCACCTGCTCC3SEQIDNO:8IFNγセンス5CCATCAGCAACAACATAAGTGTC3SEQIDNO:9IFNγアンチセンス5ACTCCTTTTCCGCTTCCTTAG3SEQIDNO:10。cDNAを含まない陰性対照を各PCRごとに増幅した。プライマーの確実性は特異的IL2、IFNγ、IL4およびIL10細胞刺激試験で確かめた。cDNA産物は15アガロースゲル電気泳動を行い、臭化エチジウムで染色して視覚化した。結果を図7に示す。Th1サイトカインIL2およびIFNγの上昇したmRNAレベルはPSA処理動物から採取したT細胞から検出した。さらに、Th2サイトカインIL10の転写物も観察された。IL4の転写物の存在は上記T細胞標本からは認められなかった。生理的食塩水処理動物由来のT細胞の分析ではIL2、IFNγ、IL4およびIL10のmRNA転写物は認められなかった。実施例9:サイトカイン特異的抗体による保護の中和保護に移入におけるサイトカインの役割を評価するために、実施例7に記載したT細胞溶解産物は特異的サイトカインを中和するために抗体で処理した。上記抗体中和試験のために、3×106細胞/動物当量を50μgの適当な抗体と30分間、室温で混合し、心臓内に投与した。中和実験には、IL2特異的ポリクローナル抗体BioSourceInternationalCamarilloCAおよびIL10およびIFNγに特異的なモノクローナル抗体PharMingenSanDiegoCAを使用した。イソタイプ適合ラット抗体を陰性対照として使用した。結果を表5に示す。PSA処理動物由来T細胞溶解産物にIFNγまたはIL10に特異的な抗体の添加は膿瘍形成に対する保護の移入を中和しなかった。生理的食塩水処理動物由来のT細胞溶解産物と上記サイトカイン特異的抗体の混合は、チャレンジ後に膿瘍を形成するレシピエント動物の能力に変化をおこさなかった。しかし、PSA処理動物由来T細胞溶解産物とIL2特異的抗体を混合すると保護活性は阻害された。イソタイプ適合対照抗体と混合したPSA溶解産物を移入した動物の膿瘍形成率27と比べ、IL2特異的抗体と混合したPSA溶解産物を移入した膿瘍形成率は76であったp<00005。表5.移入したT細胞溶解産物のサイトカイン特異的抗体処理による効果1動物はT細胞採取前に生理的食塩水またはPSA10μgを4回、皮下注射した。4×106T細胞当量を各動物に移入した。2それぞれの生理的食塩水対照群との比較3動物はイソタイプ適合対照Abで処理した。4偽Abと混合したPSA溶解産物との比較実施例10:膿瘍形成に対するIL2媒介保護膿瘍形成に対して保護をするIL2の役割を示すために、Bfragilisの腹腔内チャレンジ時に組み換え型IL2を心臓内投与により動物に投与する実験を行った。結果を表6に示す。IL2による保護は用量依存的であった。1000または100pgのIL2を投与された動物は生理的食塩水を投与された動物より膿瘍が少なかったp<0002が、10pgでは有意な保護は見られなかった。100pgのIL2を投与された動物は生理的食塩水を投与された動物に比べ、有意に低い腫瘍形成率であった表6、実験A、27対70、p<0005上記の量のIL4を投与された動物では膿瘍形成に対する保護が見られなかった75膿瘍率。表6.組み換え型IL2による膿瘍形成に対する保護11動物にBfragilis108cfu/動物をチャレンジした。2生理的食塩水処理対照群との比較3有意でない実施例11:膿瘍形成に対するIL10媒介保護膿瘍モデルにおけるIL10の役割をさらに検討するために、Bfragilis1×108cfuのチャレンジ時に、組み換え型IL10、抗IL10、またはイソタイプ適合抗体対照による雄Wistarラット150gの処理を開始した。肺炎連鎖球菌1型CPを単独または抗IL10と一緒に処理した群を使用してさらに比較を行った。動物はチャレンジ6日後に致死させ、試験を行った。結果を表7に示す。イソタイプ適合対照抗体で処理した動物はすべて膿瘍を形成したが、1型CPまたは組み換え型IL10で処理したラットは膿瘍形成から保護された両群でp<00001。単独または1型CPと組み合わせた抗IL10を添加すると膿瘍形成に対する有意な保護は見られなかった。組み換え型IL10の保護効果および1型CPによる保護効果の抗IL10による阻害はともに、本発明の双極性イオン多糖による処理と膿瘍形成に対するIL10媒介保護との関連を示す。表7.IL10による膿瘍形成に対する保護11動物には108cfu/動物のBfragilisをチャレンジした。2イソタイプ適合抗体対照と比較し、Fisherの試験Fishersexacttestにより計算した。3チャレンジ開始時、24、48、72時間後に腹腔内投与。4チャレンジ開始24時間前、開始時、24時間後に皮下投与。実施例12:PSA処理により誘発したIgG抗体抑制SVJマウスは0日に、腹腔内投与によりPSA50μg、およびIII型B群連鎖球菌多糖および破傷風トキソイドを含むコンジュゲートワクチン2μgで処理した。対照にはPSAのかわりに生理的食塩水を投与した。21日後にコンジュゲートワクチンのブースター量を投与し、接種後38および56日に動物から採血した。捕捉剤として特異的抗原を使用して、サンドイッチELISAにより抗体特異的IgGレベルを試験した。結果を図8に示す。抗体レベルのELISA試験は、PSA処理動物のIII型多糖に特異的なIgGレベルは生理的食塩水処理動物に比較して抑制されることを示した。さらに、PSA処理動物の破傷風トキソイド特異的IgGのレベルも生理的食塩水処理動物に比べて低かった。従ってPSA処理は多糖およびペプチド抗体に対するIgG反応を抑制した。実施例13:肺炎連鎖球菌1型CPによる術後外科的癒着抑制ラット1群10匹を外科的処置24時間前、処置時、および24時間後に、生理的食塩水100μl、ペクチン生理的食塩水100μl中、ポリガラクツロン酸、100μg、または肺炎連鎖球菌1型CP生理的食塩水100μl中に、2つのガラクツロン酸残基および2アセタミド4アミノ246トリデオキシガラクトースをもつ三糖反復単位、80kDa、100μgを皮下注射した。癒着は先に記載したものを若干修正して誘発した。KennedyRetalSurgery120:8661996。簡単に述べると、腹腔の正中線切開を3cm行い、盲腸を露出した。盲腸は点状出血が見えるようになるまで外科用ガーゼで擦りむいた。盲腸を腹壁腔に挿入し、並置する腹壁を同様の方法で擦りむいた。上記処置後、先に記載されたように、滅菌したラット盲腸内容物05mlを腹膜腔に添加した。OnderdonkABetalJClinInvest69:91982。創傷は40絹糸で縫合した。動物は6日後に致死させ、癒着形成を調べた。癒着は先の記載に従い、以下のように0~5までの等級をつけた:0、癒着なし;1、薄膜状の癒着;2、薄膜一枚より厚い癒着;3、焦点のある厚い癒着;4、平面付着のある厚い癒着;5、非常に厚い癒着または一平面以上の癒着。KennedyRetalSurgery120:8661996。結果を図9に示す。1型CPで処理したラットはペクチン処理ラットより癒着スコアが有意に低かった非ペアt検定によりp<0001。これらのデータは、正および負の荷電基をともに有する双極性イオン多糖Zpsの非経口的投与が、負に荷電した基のみを有する多糖ペクチンに比べ、癒着形成を抑制することを示す。実施例14:癒着形成におけるT細胞移入試験実施例6と同様に脾臓摘出前1週間、動物に肺炎連鎖球菌1型CP50μg/用量を全部で4用量、皮下注射した。生理食塩水または多糖処理動物から単離した細胞を分画し、数え、実施例13の方法に従って癒着誘発24時間前に心臓内投与により移入した。動物は致死させ、6日後に癒着の等級0~5を付けた。結果を図10に示す。先に肺炎連鎖球菌1型CPで処理したドナー由来のCD4T細胞を移入した動物の癒着スコアは、生理的食塩水を投与した対照由来のT細胞を移入した動物に比べて50低下したp<002。[配列の簡単な説明]SEQIDNO1はβアクチンcDNAの増幅のためのセンスプライマーの核酸配列である。SEQIDNO2はβアクチンcDNAの増幅のためのアンチセンスプライマーの核酸配列である。SEQIDNO3はIL2cDNAの増幅のためのセンスプライマーの核酸配列である。SEQIDNO4はIL2cDNAの増幅のためのアンチセンスプライマーの核酸配列である。SEQIDNO5はIL4cDNAの増幅のためのセンスプライマーの核酸配列である。SEQIDNO6はIL4cDNAの増幅のためのアンチセンスプライマーの核酸配列である。SEQIDNO7はIL10cDNAの増幅のためのセンスプライマーの核酸配列である。SEQIDNO8はIL10cDNAの増幅のためのアンチセンスプライマーの核酸配列である。SEQIDNO9はIFNγcDNAの増幅のためのセンスプライマーの核酸配列である。SEQIDNO10はIFNγcDNAの増幅のためのアンチセンスプライマーの核酸配列である。