"方法が:p53例えば、機能的p53をコードするか又は発現する細胞を得ること:細胞中でHDMXが発現されているか否かを確認すること;及びHDMXが発現されている場合に、細胞をHDMX調節剤と接触させること、それによって、細胞中のp53活性を増大させることを含んでなる、細胞中のp53活性を増大する方法。HDMX調節剤が:p53の転写活性ドメインと少なくとも30の同一性を有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド;又はp53の転写活性ドメインと少なくとも30の同一性を有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド、ここで、このペプチドの相互作用面にあるアミノ酸は保存されている;又はp53の転写活性ドメインと少なくとも30の同一性を有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド、ここで、ペプチドの相互作用面にある1つ又はそれ以上のアミノ酸は、ペプチドの相互作用面を変化させない同類アミノ酸で置換されている;又は配列番号22に記載のアミノ酸配列、を含んでいる、ここで、ペプチドは内部架橋剤によって架橋されている、請求項1に記載の方法。p53がヒトp53である、請求項2に記載の方法。HDMX調節剤が、図1Cに示される架橋されたペプチドである、請求項1に記載の方法。HDMX調節剤がSAH-p53-8である、請求項1に記載の方法。細胞をHDM2調節剤と接触させるこを更に含んでなる、請求項1に記載の方法。HDM2調節剤がNutlin-3である、請求項6に記載の方法。HDMXが発現されているか否かを確認する工程が、HDMX及び/又はp53-HMDX複合体の存在を検出することを含んでなる、請求項1に記載の方法。細胞中でHDM2が発現されているか否かを確認すること;及びHDM2が発現されている場合に、細胞をHDM2調節剤と接触させることを更に含んでなる、請求項1に記載の方法。HDM2調節剤がNutlin-3である、請求項9に記載の方法。HDMX調節剤及びHDM2調節剤の用量が、相乗的用量又は相加的用量である、請求項6又は9又は10の何れか一項に記載の方法。細胞がインビトロにある、請求項1に記載の方法。細胞が対象内にある、請求項1に記載の方法。対象が、癌を有している対象である、請求項13に記載の方法。方法が:HDM2調節剤例えば、Nutlin-3による処置によってp53活性が実質的に増大しない細胞を得ること;及び細胞をHDMX調節剤と接触させること、それによって細胞中のp53活性を増大させることを含んでなる、細胞中のp53活性を増大する方法HDMX調節剤が:p53の転写活性ドメインと少なくとも30の同一性を有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド;又はp53の転写活性ドメインと少なくとも30の同一性を有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド、ここで、ペプチドの相互作用面にあるアミノ酸は保存されている;又はp53の転写活性ドメインと少なくとも30の同一性を有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド、ここで、ペプチドの相互作用面にある1つ又はそれ以上のアミノ酸は、ペプチドの相互作用面を破壊しない同類アミノ酸で置換されている;又は配列番号22に記載のアミノ酸配列、を含んでいる、ここで、ペプチドは内部架橋剤によって架橋されている、請求項15に記載の方法。p53がヒトp53である、請求項16に記載の方法。HDMX調節剤が、図1Cに示される架橋されているペプチドである、請求項15に記載の方法。HDMX調節剤が、SAH-p53-8である、請求項15に記載の方法。細胞をHDM2調節剤と接触させることを更に含んでいる、請求項15に記載の方法。HDM2調節剤がNutlin-3である、請求項20に記載の方法。HDMX調節剤及びHDM2調節剤の用量が、相乗的用量又は相加的用量である、請求項20に記載の方法。方法が:p53例えば、機能的p53をコードするか又は発現する細胞を得ること;細胞をHDMX調節剤及びHDM2調節剤と接触させること、ここで、HDM2調節剤は図1Cに示されるステープル状に架橋されたペプチドではない、それによって細胞中のp53活性を増大させることを含んでなる、細胞中のp53活性を増大する方法。HDMX調節剤が:p53の転写活性ドメインと少なくとも30の同一性を有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド;又はp53の転写活性ドメインと少なくとも30の同一性を有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド、ここで、ペプチドの相互作用面にあるアミノ酸は保存されている;又はp53の転写活性ドメインと少なくとも30の同一性を有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド、ここで、ペプチドの相互作用面にある1つ又はそれ以上のアミノ酸は、ペプチドの相互作用面を破壊しない同類アミノ酸で置換されている;又は配列番号22に記載のアミノ酸配列、を含んでなる、ここで、ペプチドは内部架橋剤によって架橋されている、請求項23に記載の方法。p53がヒトp53である、請求項24に記載の方法。HDMX調節剤が、図1Cに示される架橋されているペプチドである、請求項23に記載の方法。HDMX調節剤がSAH-p53-8である、請求項23に記載の方法。HDM2調節剤がNutlin-3である、請求項23に記載の方法。HDMX調節剤及びHDM2調節剤の用量が、相乗的用量又は相加的用量である、請求項23に記載の方法。細胞がインビトロにある、請求項23に記載の方法。細胞が対象中にある、請求項23に記載の方法。対象が癌を有している対象である、請求項28に記載の方法。方法が:対象由来の異常増殖細胞又は癌細胞を含んでいるか又はそれから得られる生体試料中で機能的p53がコードされているか又は発現することができるか否かを検出すること;機能的p53がコードされているか又は発現することができる場合は、試料中のHDM2、若しくはHDMX、又は両方のレベルを検出すること;iHDM2調節剤を含む組成物の治療有効量を投与することを含んでいる治療;iiHDMX調節剤を含む組成物の治療有効量を投与することを含んでいる治療;及びiiiHDM2調節剤及びHDMX調節剤を含む組成物の治療有効量を投与することを含んでいる治療;よりなる群から治療を選択すること;ここで、試料中のHDM2のレベルがHDMXのレベルより実質的に大きい場合は治療iが選択され、試料中のHDMXのレベルがHDM2のレベルより実質的に大きい場合は治療iiが選択され、そして試料中のHDM2とHDMXのレベルがほぼ等しい場合は治療iiiが選択され、それによって対象における癌に対する治療を選択すること;及び、治療i、ii、又はiiiに従って治療を対象に投与すること、ここで、治療を選択する工程、及び治療を投与する工程は、同時に又は異なった時点に独立して又は同じ当事者によって実施される;を含んでなる、対象における癌に対する治療を選択する方法。iのHDM2調節剤が、図1Cに示されるステープル状に架橋されたペプチドではない、請求項33に記載の方法。HDM2が発現されていて且つHDMXが発現されていない場合に、治療iが選択される、請求項33に記載の方法。HDMXが発現されていて且つHDM2が発現されていない場合に、治療iiが選択される、請求項33に記載の方法。治療iiiが、HDM2阻害剤及びHDMX阻害剤を同時に又は別々に投与することを含んでなる、請求項33に記載の方法。HDMXのレベルを検出する工程が、p53-HMDX複合体の存在を検出することを含んでなる、請求項33に記載の方法。HDMX調節剤が:p53の転写活性ドメインと少なくとも60の同一性を有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド;又はp53の転写活性ドメインと少なくとも60の同一性を有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド、ここで、ぺプチドの相互作用面にあるアミノ酸は保存されている;又はp53の転写活性ドメインと少なくとも60の同一性を有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド、ここで、ペプチドの相互作用面にあるアミノ酸は、ペプチドの相互作用面の結合活性を破壊しない同類アミノ酸で置換されている;を含んでなる、ここで、ペプチドは内部架橋剤によって架橋されている、請求項33に記載の方法。p53がヒトp53である、請求項39に記載の方法。HDMX調節剤が、図1Cに示される架橋されているペプチドである、請求項33に記載の方法。HDMX調節剤が、SAH-p53-8である、請求項33に記載の方法。HDM2調節剤が、Nutlin-3である、請求項33に記載の方法。治療iiiにおけるHDMX調節剤及びHDM2調節剤の用量が、相乗的用量又は相加的用量である、請求項33に記載の方法。1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び1つ又はそれ以上のHDM2調節剤を含んでなる、組成物。1つ又はそれ以上のHDMX調節剤が、p53の転写活性ドメインと少なくとも60の同一性をを有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド;又はp53の転写活性ドメインと少なくとも60の同一性をを有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド、ここで、ペプチドの相互作用面にあるアミノ酸は保存されている;又はp53の転写活性ドメインと少なくとも60の同一性をを有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド、ここで、ペプチドの相互作用面にある1つ又はそれ以上のアミノ酸はペプチド相互作用面の結合活性を破壊しない同類アミノ酸で置換されている:を含んでなる、ここで、ペプチドは内部架橋剤によって架橋されている、請求項45に記載の組成物。p53がヒトp53である、請求項46に記載の組成物。1つ又はそれ以上のHDMX調節剤が、図1Cに示される架橋されているペプチドである、請求項45に記載の組成物。1つ又はそれ以上のHDMX調節剤が、SAH-p53-8である、請求項45に記載の組成物。1つ又はそれ以上のHDM2調節剤が、Nutlin-3である、請求項45に記載の組成物。p53及びHDMXからなる、単離されたタンパク質複合体。請求項51に記載の単離されたタンパク質複合体と特異的に結合する、抗体。癌の診断に又は治療有効性を観察するために、請求項51に記載の単離されたタンパク質複合体を使用する方法。対象における癌を治療するためのオーダーメイドの治療方法を開発するために、請求項51に記載の単離されたタンパク質複合体を使用する方法。p53並びに1つ又はそれ以上のHDMX、HDM2、及び/又はp53-HMDX複合体を検出するための組成物;及び1つ又はそれ以上のp53並びに1つ又はそれ以上のHDMX、HDM2、及び/又はp53-HMDX複合体の検出に基づいて、癌を有する対象の癌を治療するためのオーダーメイドの治療計画を開発するための使用説明書:を含んでなる、キット。1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤;1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤の投与に適している1つ又はそれ以上の器具;並びに1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤を如何に投与すべきかを提供する使用説明書を含んでなる、キット。請求項55に記載のキット及び請求項56に記載のキットを含んでなる、複合キット。方法が、少なくとも1用量の放射線治療の前に、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤を対象に投与することを含んでなる、放射線治療を受ける予定になっている対象を治療する方法。方法が、少なくとも1用量の放射線治療の前に、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤を対象に投与すること及び対象を放射線治療に曝露することを含んでなる、癌を有する対象を治療する方法。1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤を、対象の腸に経口など、局所的に投与する、請求項58~59の何れか一項に記載の方法。1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤が全身投与される、請求項58~59の何れか一項に記載の方法。HDMX調節剤が:p53の転写活性ドメインと少なくとも60の同一性を有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド;又はp53の転写活性ドメインと少なくとも60の同一性を有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド、ここで、ペプチドの相互作用面にあるアミノ酸は保存されている;又はp53の転写活性ドメインと少なくとも60の同一性を有しているアミノ酸配列を含んでいるペプチド、ここで、ペプチドの相互作用面にある1つ又はそれ以上のアミノ酸は、ペプチドの相互作用面の結合活性を破壊しない同類アミノ酸で置換されている;を含有してなる、ここで、ペプチドは内部架橋剤によって架橋されている、請求項58~59の何れか一項に記載の方法。p53がヒトp53である、請求項62に記載の方法。HDMX調節剤が、図1Cに示される架橋されているペプチドである、請求項58~59の何れか一項に記載の方法。HDMX調節剤が、SAH-p53-8である、請求項58~59の何れか一項に記載の方法。HDM2調節剤が、Nutlin-3である、請求項58~59の何れか一項に記載の方法。HDMX調節剤及びHDM2調節剤の用量が、相乗的用量又は相加的用量である、請求項58~59の何れか一項に記載の方法。HDM2調節剤が、図1Cに示される架橋されているペプチドではない、請求項58~59の何れか一項に記載の方法。アミノ酸配列:Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Phe6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Trp10-Xaa11-Xaa12-Leu13-Xaa14-Xaa15-Xaa16配列番号22式中の、Xaa1はLeu又はGlnであるか、又は欠失している;Xaa2はSerであるか、又は欠失している;Xaa3はGlnであるか、又は欠失している;Xaa4はGlu又はGln又はAlaであり;Xaa5はThr又はAlaであり;Phe6はPhe又はその同類置換であり;Xaa7はSerであり;Xaa8はAsp又はAsnであるか、或いはAsp及びGlu以外のアミノ酸であり;Xaa9はLeuであり;Trp10はTrp又はその同類置換であり;Xaa11はLys又は正に荷電しているアミノ酸であり;Xaa12はLeu又はLys又はAlaであり;Leu13はLeu又はその同類置換であり;Xaa14はProであるか、又は欠失している;Xaa15はGlu又はGln又はAla、又はAsp及びGlu以外のアミノ酸であるか、或いは欠失している;Xaa16はAsnであるか、又は欠失しているここで、該アミノ酸配列の2つ、3つ、又は6つのアミノ酸分離れている少なくとも2つのアミノ酸の側鎖が内部架橋に置き換えられている、該アミノ酸配列の少なくとも6連続アミノ酸を含んでなる、内部架橋されているポリペプチド。Xaa1がLeuであるか、又は欠失している;Xaa2がSerであるか、又は欠失している;Xaa3がGlnであるか、又は欠失している;Xaa4がGluであり;Xaa5がThrであり;Phe6がPheであり;Xaa7がSerであり;Xaa8がAspであり;Xaa9がLeuであり;Trp10がTrpであり;Xaa11がLysであり;Xaa12がLeuであり;Leu13がLeuであり;Xaa14がProであるか、又は欠失している;Xaa15がGluであるか、又は欠失している;Xaa16はAsnであるか、又は欠失している、ここで、Phe6、Trp10及び/又はLeu13のうちの1つ、2つ及び/又は3つが、ペプチドの結合面とHDMXの間の相互作用を変化させない、同類アミノ酸置換で置換されており;及び/又はPhe6、Trp10及び/又はLeu13に対応する残基以外のアミノ酸が配列番号1又は配列番号2に記載の配列と少なくとも30例えば、30、40、50、60、70、80、90、95、98、又は100同一である、請求項69に記載の内部架橋されているペプチド。アミノ酸配列が、配列番号10に記載の配列である、請求項69又は70に記載の架橋されているたペプチド。内部架橋に置き換えられている側鎖を有する少なくとも2つのアミノ酸が、表1に示されているステープル状の架橋から選ばれる、請求項69~71に記載の架橋されているペプチド。内部架橋に置き換えられている側鎖を有する少なくとも2つのアミノ酸が、表1に示されている縫合状の架橋から選ばれる、請求項69~71に記載の架橋されているペプチド。内部架橋に置き換えられている側鎖を有する少なくとも2つのアミノ酸が、表1に示されている2つ又はそれ以上のステープル状の架橋を含んでいる、請求項72に記載の架橋されているペプチド。内部架橋に置き換えられている側鎖を有する少なくとも2つのアミノ酸が、表1に示されている少なくとも1つのステープル状の架橋及び少なくとも1つの縫合状の架橋を含んでいる、請求項72に記載の架橋されているペプチド。内部架橋に置き換えられている側鎖を有する少なくとも2つのアミノ酸が、Xaa7とXaa14の間に位置している、請求項69~75に記載の架橋されているペプチド。内部架橋に置き換えられている側鎖を有する少なくとも2つのアミノ酸が1つ又はそれ以上のステープル状の架橋を含んでいて、ここで少なくとも2つのアミノ酸は6つのアミノ酸分離れている、請求項69~76に記載の架橋されているペプチド。内部架橋が、配列番号2~21に示されている位置に位置している、請求項69~77に記載の架橋されているペプチド。請求項69~78に記載の架橋されたペプチドを含んでなる、医薬組成物。請求項69~78に記載の架橋されたペプチド及び1つ又はそれ以上のHDM2調節剤を含んでなる、医薬組成物。1つ又はそれ以上のHDM2調節剤がNutlin-3を含んでなる、請求項80に記載の医薬組成物。癌は米国において相変わらず主要な死亡率及び死亡数の要因の1つである。改善された癌治療が必要とされている。本開示は、対象の癌を診断、予測、及び/又は治療する組成物及び方法を提供する。ある態様では、本開示は、細胞におけるp53活性を増大する方法を提供する。このような方法は、p53例えば、機能的P53をコード又は発現する細胞を得ること又は供給すること、細胞中でHDMXが発現されているか否かを確認すること、そしてHDMXが発現されている場合は、細胞をHDMX調節剤と接触させること、それによって細胞におけるp53活性を増大させることを包含できる。ある実施態様では、HDMX調節剤は、p53の転写促進ドメインと同一性を有しているペプチド例えば、架橋されていないnoncrosslinked及び架橋されているcrosslinkedペプチドを包含する。ある例では、ペプチドは、p53転写促進ドメインの相互作用面に存在するアミノ酸に対応するアミノ酸に関してp53転写促進ドメインとの同一性の第1レベル、及び他の全てのアミノ酸例えば、相互作用面の外にあるものに関してp53転写促進ドメインとの同一性の第2レベルを有することができる。例えば、p53転写促進ドメインの相互作用面上のそれに対応しているペプチド中のアミノ酸は、保存されていてもよく、或いはp53転写促進ドメインの相互作用面にあるアミノ酸の同類置換であってもよく、そして相互作用面のもの以外のアミノ酸は、ペプチドの相互作用面の外にあるそれらアミノ酸と、少なくとも又は約30、少なくとも又は約40、少なくとも又は約50、少なくとも又は約60、少なくとも又は約70、少なくとも又は約80、少なくとも又は約90、少なくとも又は約95、少なくとも又は約98、少なくとも又は約99、又は100の同一性を有することができる。ある態様では、ペプチドは1つ又はそれ以上の内部架橋剤internalcrosslinkerによって架橋されていてもよい。ある実施態様ではp53はヒトp53である。ある実施態様では、HDMX調節剤は図1Cに示した架橋されたペプチドであってよい。ある実施態様では、HDMX調節剤は図1Cに示した、SAH-p53-8であってよい。上に開示した方法は更に、細胞を1つ又はそれ以上のHDM2調節剤と接触させることを包含できる。例示的HDM2調節剤は、その類縁体、改変体、改良体、及び誘導体を含む、Nutlin-3例えば、Nutlin-3aを包含できる。ある実施態様では、HDMXが発現されているか否かを確認する工程はHDMX及び/又はp53-HDMX複合体の存在を検出することを含むことができる。方法は更に、HDM2が細胞内で発現されているか否かを確認すること、そしてHDM2が発現されている場合は、細胞をHDM2調節剤例えば、Nutlin-3と接触させることを任意に含むこともできる。ある実施態様では、細胞又は対象に投与されるHDMX調節剤とHDM2調節剤の用量は相乗的又は相加的である。ある実施態様では、細胞はインビトロである。或いは又は更に、細胞は対象例えば、癌を有する対象内にあってよい。別の態様では、本開示は、HDM2調節剤例えば、Nutlin-3による治療でp53活性が実質的に増大しない細胞を得ること又は提供すること;そしてこの細胞をHDMX調節剤と接触させること、それによって細胞中のp53活性を増大することを包含する、細胞中のp53活性を増大する方法を提供する。ある実施態様では、HDMX調節剤は本明細書に記載されているペプチドを包含できる。ある実施態様では、p53は、ヒトp53である。ある実施態様では、HDMX調節剤は図1Cに示した架橋されたペプチドであってよい。ある実施態様では、HDMX調節剤はSAH-p53-8であってよい。方法は、細胞をHDM2調節剤例えば、Nutlin-3と接触させることを任意に含んでいてもよい。ある実施態様では、細胞又は対象を、相乗的又は相加的であるHDMX調節剤及びHDM2調節剤の用量と接触させる例えば、処置することができる。更なる態様では、本開示は、p53例えば、機能的p53をコードするか例えば、遺伝子的にコードする又は発現する細胞を得ること又は提供すること、この細胞をHDMX調節剤及びHDM2調節剤と接触させることここで、HDM2調節剤は図1Cに示したステープル状に架橋されたペプチドではない、それによって、細胞においてp53活性を増大することを含んでいる、細胞中のp53活性を増大する方法を提供する。ある実施態様では、HDMX調節剤は本明細書に記載されているペプチドを包含できる。ある態様では、p53は、ヒトp53である。ある実施態様では、HDMX調節剤は図1Cに示した架橋されているペプチドであってよい。ある実施態様では、HDMX調節剤はSAH-p53-8であってよい。ある実施態様では、HDM2調節剤はNutlin-3であってよい。ある実施態様では、HDMX調節剤及びHDM2調節剤の用量は相乗的又は相加的用量である。ある実施態様では、細胞はインビトロである。或いは、ある例では、細胞は対象例えば、癌を有する対象にある。ある態様では、本開示は対象の癌を治療する方法を含んでいる。これらの方法は、対象由来の異常増殖細胞又は癌細胞を含むか又はこれらから得られる生体試料において、機能的p53をコードしているか例えば、遺伝子的にコードしている又は発現できるか否かを検出すること、機能的p53をコードしているか又は発現できる場合は、試料におけるHDM2、若しくはHDMX、又は両方のレベルを検出すること、以下よりなる群から治療を選択すること:iHDM2調節剤を含有している組成物の治療有効量を投与することを含む治療;iiHDMX調節剤を含有している組成物の治療有効量を投与することを含む治療;及びiiiHDM2調節剤及びHDMX調節剤を含有している組成物の治療有効量を投与することを含む治療ここで、試料においてHDM2のレベルがHDMXのレベルより実質的に高い場合は治療iが選ばれ、試料においてHDMXのレベルがHDM2のレベルより実質的に高い場合は治療iiが選ばれ、そして試料においてHDM2とHDMXのレベルがほぼ等しい場合は治療iiiが選ばれる、それによって、対象における癌の治療が選ばれること、そして治療i、ii、又はiiiに従って対象を治療することここで、治療の選択及び治療段階の投与は同時点又は別の時点に独立して又は同じ当事者によって行われるを含むことができる。このような方法のある例では、iのHDM2調節剤は図1Cに示したステープル状に架橋されたペプチドではない。ある実施態様では、HDM2が発現されてHDMXが発現されない場合に治療iが選ばれる。ある実施態様では、HDMXが発現されてHDM2が発現されない場合に治療iiが選ばれる。ある実施態様では、治療iiiは、HDM2阻害剤及びHDMX阻害剤を同時に又は別々に投与することを含む。ある例では、HDMXのレベルを検出するステップは、p53-HDMX複合体の存在を検出することを含んでいる。ある実施態様では、HDMX調節剤は本明細書に記載されているペプチドを包含できる。ある実施態様では、ペプチドは1つ又はそれ以上の内部架橋剤によって架橋されていてもよい。ある実施態様では、p53は、ヒトp53である。ある実施態様では、HDMX調節剤は、図1Cに示したステープル状に架橋されたペプチドあってよい。ある実施態様では、HDMX調節剤はSAH-p53-8であってよい。ある実施態様では、HDM2調節剤はNutlin-3である。ある実施態様では、治療iiiで用いられるか又は投与されるHDMX調節剤及びHDM2調節剤の用量は相乗的用量又は相加的用量である。別の態様では、本開示は、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び1つ又はそれ以上のHDM2調節剤を含有している組成物を提供する。ある実施態様では、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤は本明細書に記載されているペプチドを包含できる。ある実施態様では、ペプチドは1つ又はそれ以上の内部架橋剤で架橋されていてよい。ある実施態様では、p53は、ヒトp53である。ある実施態様では、HDMX調節剤は図1Cに示した架橋されたペプチドであってよい。ある実施態様では、HDMX調節剤はSAH-p53-8である。ある実施態様では、HDM2調節剤はNutlin-3である。別の態様では、本開示は更に、p53とHDMXからなる単離されたタンパク質複合体、並びにこの単離されたタンパク質複合体と特異的に結合する抗体及び/又は抗体断片を提供する。ある実施態様では、本開示は、この単離されたタンパク質複合体を、癌診断に及び/又は治療効果を観察するために用いる方法;並びに/又は対象における癌を治療するためのオーダーメード治療方法を開発するために用いる方法を提供する。ある態様では、本開示は、p53並びにHDMX、HDM2、及び/又はp53-HDMX複合体の1つ又はそれ以上のを検出するための組成物;並びに1つ又はそれ以上のp53及びHDMX、HDM2、及び/又はp53-HDMX複合体の1つ又はそれ以上の検出に基づく癌を有する対象における癌治療のためのオーダーメード治療計画を開発するための使用説明書を包含しているキットを提供する。ある実施態様では、本開示は1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤;1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤の投与に適している1つ又はそれ以上のデバイス;1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤どのように投与すべきかを提供する使用説明書を含んでいるキットを提供する。p53並びに1つ又はそれ以上のHDMX、HDM2、及び/又はp53-HDMX複合体を検出するための組成物;及び1つ又はそれ以上のp53並びに1つ又はそれ以上のHDMX、HDM2、及び/又はp53-HDMX複合体並びに1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤の検出に基づく癌を有する対象における癌治療のためのオーダーメード治療計画を開発するための使用説明書;1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤の投与に適している1つ又はそれ以上のデバイス;並びに1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤をどのようにして投与すべきかを提供する使用説明書を包含しているキットも提供される。ある態様では、本開示は、放射線治療を受ける予定になっている対象を治療する方法を提供する。このような方法は、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤を少なくとも1用量の放射線治療の前に対象に投与することを包含できる。ある態様では、本開示は、癌を有する対象を治療する方法を提供する。これらの方法は、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤を少なくとも1用量の放射線治療の前に対象に投与し、そして対象を放射線治療に曝すことを包含できる。ある実施態様では、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤を対象の腸に局所的に投与する。ある実施態様では、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤を全身投与する。ある実施態様では、HDMX調節剤は、p53の転写促進ドメインと少なくとも60同一性を有するアミノ酸配列を有しているペプチド、p53の転写促進ドメインと少なくとも60同一性を有するアミノ酸配列を有しているペプチドここで、ペプチドの相互作用面上のアミノ酸は保存されている、及びp53の転写促進ドメインと少なくとも60同一性を有するアミノ酸配列を有しているペプチドここで、ペプチドの相互作用面上の1つ又はそれ以上のアミノ酸は、ペプチドの相互作用面を変化させない保存アミノ酸で置換されているを包含できる。ある実施態様では、ペプチドは1つ又はそれ以上の内部架橋剤で架橋されていてもよい。ある実施態様では、p53は、ヒトp53である。ある実施態様では、HDMX調節剤は図1Cに示した架橋されたペプチドであってよい。ある実施態様では、HDMX調節剤はSAH-p53-8であってよい。ある実施態様では、HDM2調節剤はNutlin-3である。ある実施態様では、HDMX調節剤及びHDM2調節剤の用量は相乗的用量又は相加的用量である。ある実施態様では、HDM2調節剤は図1Cに示した架橋されたペプチドではない。ある態様では、本開示は、アミノ酸配列、Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Phe6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Trp10-Xaa11-Xaa12-Leu13-Xaa14-Xaa15-Xaa16配列番号22ここで:Xaa1はLeu又はGln、又は欠失している;Xaa2はSer又は欠失している;Xaa3はGln又は欠失している;Xaa4はGlu、Gln又はAlaであり;Xaa5はThr又はAlaであり;Phe6はPhe又はその同類置換であり;Xaa7はSerであり;Xaa8はAsp若しくはAsn又はAsp及びGlu以外の何れかのアミノ酸であり;Xaa9はLeuであり;Trp10はTrp又はその同類置換であり;Xaa11はLys又は正電荷を有するアミノ酸;Xaa12はLeu、Lys又はAlaであり;Leu13はLeu又はその同類置換であり;Xaa14はPro又は欠失している;Xaa15はGlu、Gln若しくはAla、若しくはAsp及びGlu以外の何れかのアミノ酸、又は欠失している;Xaa16はAsn又は欠失している、ここで2、3、又は6個のアミノ酸で隔てられている少なくとも2つのアミノ酸の側鎖は内部架橋に置き換えられているの少なくとも6個の連続アミノ酸を含む内部架橋されたポリペプチドを提供する。ある実施態様では、内部架橋されたペプチドは、Xaa1がLeu又は欠失している;Xaa2がSer又は欠失している;Xaa3がGln又は欠失している;Xaa4がGluであり;Xaa5がThrであり;Phe6がPheであり;Xaa7がSerであり;Xaa8がAspであり;Xaa9がLeuであり;Trp10がTrpであり;Xaa11がLysであり;Xaa12がLeuであり;Leu13がLeuであり;Xaa14がPro又は欠失している;Xaa15がGlu又は欠失している;Xaa16がAsn又は欠失している;ここでPhe6、Trp10、及び/又はLeu13の1つ、2つ及び/又は3つは、ペプチド及びHDMXの結合面間の相互作用を変化させない同類アミノ酸置換で置換されていて;及び/又はPhe6、Trp10、及び/又はLeu13に対応する残基以外のアミノ酸は配列番号1又は配列番号2の配列と少なくとも30例えば、30、40、50、60、70、80、90、95、98、又は100同一である、を包含する。ある実施態様では、ペプチドは配列番号10のアミノ酸配列を含んでいる。ある実施態様では、内部架橋されたペプチドは表1に示したステープル状の架橋から選ばれる内部架橋に置き換えられた側鎖を有する少なくとも2つのアミノ酸をを包含している。ある実施態様では、内部架橋されたペプチドは、表1に示したステープル状の架橋から選ばれる内部架橋に置き換えられた側鎖を有する少なくとも2つのアミノ酸を包含している。ある実施態様では、内部架橋に置き換えられた側鎖を有する少なくとも2つのアミノ酸は表1から選ばれる1つ又はそれ以上のステープル状の架橋を含んでいる。ある実施態様では、内部架橋に置き換えられた側鎖を有する少なくとも2つのアミノ酸は、表1に示した少なくとも1つのステープル状の架橋及び少なくとも1つの縫合状の架橋stitchを含んでいる。ある実施態様では、内部架橋に置き換えられた側鎖を有する少なくとも2つのアミノ酸は、Xaa7とXaa14の間に位置している。ある実施態様では、内部架橋に置き換えられた側鎖を有する少なくとも2つのアミノ酸は、少なくとも2つのアミノ酸が6アミノ酸分離れている1つ又はそれ以上のステープル状の架橋を包含している。ある実施態様では、内部架橋は配列番号2~21に示した1つ又はそれ以上の位置に位置している。ある態様では、本開示は、本明細書で開示された1つ又はそれ以上の架橋されたペプチド例えば、表1又は図1Cに開示された1つ又はそれ以上のペプチドを含有している医薬組成物を提供する。ある態様では、本開示は、本明細書で開示された1つ又はそれ以上の架橋されたペプチド例えば、表1又は図1Cに開示された1つ又はそれ以上のペプチド及び1つ又はそれ以上のHDM2調節剤を含有している医薬組成物を提供する。ある実施態様では、1つ又はそれ以上のHDM2調節剤はNutlin-3を包含する。別段の定義がない限り、本明細書で用いられる全ての技術及び科学用語は、本発明に関連する当業者によって一般に理解されているものと同じ意味を有している。方法及び材料は本発明で用いるために本明細書に記載されているほか;当該技術分野で公知の適切な方法及び材料も用いることができる。材料、方法、及び実施例は説明のためだけであって限定を意図していない。本明細書で述べられている全ての刊行物、特許出願、特許、配列、データベース登録、及びその他の引例はその全てが参照により本明細書に取り込まれている。矛盾する場合は、定義を含む、本明細書が支配する。本発明のその他の特徴及び利点は以下の詳細な説明、図面から、そして特許請求の範囲から明らかになるだろう。本開示は、とりわけ、ステープル状に架橋されたp53ペプチド、例えば、HDM2を標的にするために初めに開発されたステープル状に架橋されたp53ペプチドがHDMXと高い親和性で結合するという予想外の発見に基づいている。更に、ステープル状に架橋されたp53ペプチドは、それらがHDM2と結合するより25倍高い親和性でHDMXと結合する。従って、本開示は、ある特定の癌を治療するため又は治療法を開発するための新規な方法及び組成物例えば、組成物の組合わせを提供する。治療に適している癌は、癌細胞がある程度のレベルの機能的p53を発現しているか、又は機能的p53発現を誘発できるものを包含している。例えば、機能的p53が発現されるが、HDMXによってp53のレベル又は活性が細胞中で低下する何れかの癌細胞、及び/又はHDMXが本明細書に開示されている組成物又は方法を用いて有利に治療できる何れかの癌細胞である。本明細書に開示されているように、p53活性は、癌細胞で、本明細書に開示されているある状況においてHDMX調節剤例えば、図1Cに開示されているようなステープル状に架橋されたペプチドを単独で、又は本明細書に開示されている別の状況においてHDMX調節剤をHDM2調節剤と組み合わせて用いて、増大できる。本明細書で示すように、p53活性のこのような増大はインビトロ及びインビボにおける癌細胞の生存能の減少又は死をもたらすことができる。従って、本明細書に開示された組成物及び方法は癌の治療に用いることができる。本明細書に開示された組成物及び方法においてHDMX調節剤及びHDM2調節剤として用いるのに適している薬剤は以下に開示されている。HDMX調節剤本開示に包含されるHDMX調節剤は、細胞におけるp53の発現、レベル及び/又は活性を直接的に例えば、結合して、又は間接的に例えば、HDMX発現及び/又は活性を調節する分子又は経路例えば、ユビキチン化経路及びE3ユビキチンリガーゼのようなこの経路の要素を介して、細胞におけるHDMXの発現例えば、タンパク質又はmRNAの発現及び/又はレベルタンパク質レベルを阻害することによって、細胞におけるp53の発現、レベル及び/又は活性を増大する薬剤を包含する。ある実施態様では、HDMX調節剤は、以下に開示される1つ又はそれ以上の薬剤を包含できる。例えば、HDMX調節剤は、1HDMXと結合する1つ又はそれ以上の架橋されていないペプチド;2HDMXと結合する1つ又はそれ以上のステープル状に架橋された又は縫合状に架橋されたp53ペプチド;3HDMXと結合する1つ又はそれ以上の小分子;4HDMXと結合する例えば、特異的に結合する1つ又はそれ以上の抗体又は抗体の断片;5HDMXの発現を減少する1つ又はそれ以上の核酸分子例えば、抑制性核酸分子例えば、RNAi又はsiRNA;6HDMXの発現及び/又は活性を減少する1つ又はそれ以上の医薬品;及び7HDMXの発現及び/又は活性を減少する1つ又はそれ以上の方法、並びに1、2、3、4、5、6及び/又は7の何れかの組合わせ又は1と2、3、4、5、6及び/又は7との何れかの組合わせを包含できる。ある実施態様では、本明細書で開示されている方法及び組成物で用いられるHDMX調節剤は:本明細書で開示されているHDM2調節剤と同一ではない例えば、HDMX調節剤はHDM2と結合せずに例えば、実質的に結合しないHDMXと特異的に結合する。ある実施態様では、HDMX調節剤はHDMX及びHDM2と結合できる。しかしながら、このような実施態様では、HDMX阻害剤は一般に、HDM2に対するよりHDMX対してより高い結合親和性を有している例えば、HDMX調節剤の結合親和性は、HDM2に対してより、HDMXに対して、2、5、10、20、25、50、75、100、25、500、1000、2000、5000、10,000倍又はそれ以上高い。HDMX調節ペプチドある実施態様では、HDMX調節剤はペプチド例えば、組み換え又は合成によって産生されたペプチドである。上記のように、このようなペプチドは、例えば、本明細書に記載されているようにHDMXと相互作用するペプチドであるならば、架橋されていなくても、ステープル状に架橋されていても又は縫合状に架橋されていてもよい。ある実施態様では、HDMX調節タンパク質は野生型ヒトp53タンパク質又はアミノ酸配列例えば、配列番号1の部分複数を含むに関連しているか又は同一であるアミノ酸配列を包含する例えば、含む、からなる、又は本質的にからなることができる。例えば、ペプチドは野生型p53の1つ又はそれ以上のドメインを包含できる。このようなドメインは天然に連続していてもよい。あるいは、非天然連続p53ドメインを組合せてもよい。ある例では、ペプチドは少なくとも6個例えば、配列番号1の連続アミノ酸を、361、361未満、300未満、200未満、100未満、50未満、25未満、及び20未満を包含する、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16又はそれ以上を包含できる。ある例では、配列番号1の部分複数を含むとの同一性を有するペプチドは、p53の相互作用面例えば、p53の転写促進ドメインの相互作用面のアミノ酸に対応するアミノ酸に関して第1レベルの同一性を有して、相互作用面に対応しないアミノ酸に関して第2レベルの同一性を有している。例えば、p53の相互作用面例えば、p53の転写促進ドメインの相互作用面のアミノ酸に対応するアミノ酸は、保存されていても又はp53の相互作用面例えば、p53の転写促進ドメインの相互作用面に存在するアミノ酸の同類置換であってもよい。対照的に、相互作用面の外のアミノ酸は、配列番号2又は22~23内のペプチドの相互作用面の外のアミノ酸と少なくとも約30、少なくとも約40、少なくとも約50、少なくとも約60、少なくとも約70、少なくとも約80、少なくとも約90、少なくとも約95、少なくとも約98、少なくとも約99、又は少なくとも約100同一性を有することができる。或いは又は更に、相互作用面の外にあるアミノ酸は同類であろうとなかろうと、アミノ酸の置換及び/又は欠失を包含できる。例えば、相互作用面の外にあるアミノ酸は、同類であろうとなかろうと、1、2、3、4、5、6、7、8、10未満、5未満、4未満、3未満、又は2未満のアミノ酸の置換、欠失、及び/又は付加を包含できる。従って、相互作用面の残基が配列番号2のそれと同一であるか又はその同類置換である限り、本明細書に開示されている何れかのペプチドのアミノ酸配列は変更することができる。本明細書のペプチドの相互作用面は、HDMXと相互作用する例えば、特異的に相互作用する、或いは特異的に結合するp53α螺旋のアミノ酸残基を包含する。p53転写促進ドメインの相互作用面に含まれているアミノ酸残基を包含する、p53の相互作用面内に含まれているアミノ酸残基は当該技術分野において公知である例えば、KussieetalScience274948953andJosephetalCellCycle945604568を参照されたい。ある例では、KussieetalScience274948953又はJosephetalCellCycle945604568によって開示されたようなp53の相互作用面内のアミノ酸に対応する本明細書で開示されたペプチドのアミノ酸は、KussieetalScience274948953及びJosephetalCellCycle945604568によって開示されたアミノ酸と同一であるか又は同類置換であってよい。例えば、ある例では、本明細書に開示されているペプチドの相互作用面内のアミノ酸は、野生型p53配列番号1のPhe19、Trp23、及びLeu26に対応している。ある例では、これらの位置は以下の配列で下線が付されている:LSQETFSDLWKLLPEN配列番号2。本明細書に開示されているペプチド内に包含させるのに適している同類置換を以下に検討する。例えば、ある例では、同類アミノ酸置換は、あるアミノ酸残基を類似する側鎖を有する他のアミノ酸残基と置き換える置換を包含できる。類似側鎖を有しているアミノ酸残基のファミリーは当該技術分野で定義されている。これらのファミリーは、塩基性側鎖を有するアミノ酸例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン、酸性の側鎖を有するアミノ酸例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸、非荷電極性側鎖を有するアミノ酸例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン非極性側鎖を有するアミノ酸例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、β-分岐側鎖を有するアミノ酸例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン及び芳香族側鎖を有するアミノ酸例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジンを包含する。ある例では、本明細書に開示されているペプチド例えば、配列番号1及び配列番号2~21の相互作用面内のアミノ酸に関連して、同類アミノ酸置換は、ペプチドの疎水性相互作用面の構造を変えないアミノ酸置換である。例えば、同類アミノ酸置換はペプチドのHDMXとの結合を低下させない実質的に低下させないアミノ酸置換である。結合における何れかの減少を検出する方法は、同類アミノ酸置換後の結合親和性を比較することを包含し、ここで結合を低下させる実質的に低下させる何れのアミノ酸置換も同類アミノ酸置換ではない。ある実施態様では、実質的に低下した結合は、改変していないペプチドのHDMXとの結合より10、20、30、40、50、60、70、80、90、95、98、99、又は100低い結合を包含する。ペプチドとHDMXの間の相互作用を評価する方法は本明細書に開示されている。ペプチドの相互作用面を同定する方法は当該技術分野において公知である例えば、BrogliaetalProteinsci142668812005HammondetalJPharmSci9845896032009NgandYangJPhysChemB11113886932007及びBirdetalPNASUSA197140932010を参照されたい。ある実施態様では、ペプチドは、p53例えば、配列番号1の転写促進ドメインに対応する配列:Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Phe6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Trp10-Xaa11-Xaa12-Leu13-Xaa14-Xaa15-Xaa16配列番号22ここで、Xaa1-Xaa5、Xaa7-Xaa9、及びXaa11-Xaa16のそれぞれ又は何れかは何れかのアミノ酸例えば20個の天然アミノ酸の何れかであるか又は欠失しているの少なくとも6個例えば、7、8、9、10、11、12、13、14、又は15個の連続アミノ酸を包含している例えば、含有する、から成る、又は本質的にからなる。ある実施態様では、Xaa1は、Leu若しくはGlnであるか、又は欠失している;Xaa2は、Serであるか、又は欠失している;Xaa3は、Glnであるか、又は欠失している;Xaa4は、Glu、Gln又はAlaである;Xaa5は、Thr又はAlaである;Phe6は、Phe又はその同類置換である;Xaa7は、Serである;Xaa8は、Asp若しくはAsn、又はAsp及びGlu以外のアミノ酸好ましくはAsnである;Xaa9は、Leuである;Trp10は、Trp又はその同類置換である;Xaa11は、Lys又は正荷電したアミノ酸好ましくはArgである;Xaa12は、Leu、Lys又はAlaである;Leu13は、Leu又はその同類置換である;Xaa14は、Proであるか、又は欠失している;Xaa15は、Glu、Gln若しくはAla、若しくはAsp及びGlu以外のアミノ酸好ましくはGlnであるか、又は欠失している;Xaa16は、Asnであるか、又は欠失している。ここで、一つ又はそれ以上例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、又は16個のXaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Phe6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Trp10-Xaa11-Xaa12-Leu13-Xaa14-Xaa15-Xaa16はペプチドの相互作用面を変えない同類アミノ酸置換に置き換えられており;及び/又はPhe6、Trp10、及び/又はLeu13に対応する残基以外のアミノ酸は配列番号1の配列と少なくとも80例えば、80、85、90、95、98、99、99.5、又は100同一であり;及び/又はPhe6、Trp10、及び/又はLeu13に対応する残基以外のアミノ酸は1つ又はそれ以上例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、10未満、5未満、4未満、3未満、又は2未満の同類又は非同類の置換又は欠失を包含している。ここでペプチドは任意に安定したα螺旋二次構造を有するように適合されている。ある場合は、ペプチドは、配列:Xaa3-Xaa4-Xaa5-Phe6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Trp10-Xaa11-Xaa12-Leu13配列番号23を有する配列番号22の一部分を包含する例えば、含有する、から成る、又は本質的にからなることができる。ある実施態様では、上で示したように、本明細書のペプチドのアミノ酸配列は、配列番号2の相互作用面に対応するアミノ酸例えば、Phe6、Trp10、及び/又はLeu13以外のものを、殆ど制限なしに、変えることができる。例えば、相互作用面の外のアミノ酸は、配列番号2又は22~23内のペプチドの相互作用面の外のアミノ酸と少なくとも又は約30、少なくとも又は約40、少なくとも又は約50、少なくとも又は約60、少なくとも又は約70、少なくとも又は約70、少なくとも又は約80、少なくとも又は約90、少なくとも又は約95、少なくとも又は約98、少なくとも又は約99、少なくと又は約100の同一性を有することができる。或いは又は更に、相互作用面の外のアミノ酸は、同類であろうとなかろうと、アミノ酸の置換及び/又は欠失を包含できる。例えば、相互作用面の外のアミノ酸は、1、2、3、4、5、6、7、8の、10未満、5未満、4未満、3未満、又は2未満のアミノ酸の置換、欠失、及び/又は付加を、同類であろうとなかろうと、包含できる。従って、本明細書に開示されている何れのペプチドのアミノ酸配列も、相互作用面の残基が配列番号2のそれと同一であるか、又はその同類置換である限り、変えることができる。ある例では、ペプチドは、LSQETFSDLWKLLPEN配列番号2を包含する例えば、含有する、から成る、又は本質的にからなることができる。ある実施態様では、ペプチドは、PazgieretalPNAS10646654670これはその全てが参照により本明細書に取り込まれているに開示されている1つ又はそれ以上のペプチドを包含する例えば、含有する、から成る、又は本質的にからなることができる。例えば、HDMX調節剤は、PazgieretalPNAS10646654670に開示されているペプチドTSFAEYWNLLSPPMIと称する配列番号24及びLTFEHYWAQLTSpDIと称する配列番号25を包含できる。ある実施態様では、HDMX調節ペプチドは、1つ又はそれ以上の内部ペプチド架橋剤で架橋例えば、ステープル状に架橋又は縫合状に架橋されている。ペプチドをステープル状に架橋するとは、合成方法BlackwelletalJOrgChem66529153022001AngewetalChemIntEd3732811994に由来する造語であり、当該合成方法では、ポリペプチド鎖に存在する2つのオレフィン含有側鎖例えば、架橋可能な側鎖を、架橋された環を形成するための閉環メタセシスRCM反応を用いて共有結合する例えば、オレフィン含有側鎖を合わせてステープル状に架橋する。本明細書で用いられる用語ペプチドをステープル状に架橋するとは、ポリペプチド鎖に存在している、2つの二重結合含有側鎖、2つの三重結合含有側鎖、又は1つの二重結合含有側鎖と1つの三重結合含有側鎖を、このような反応を促進する各種の反応条件及び/又は触媒を用いて、連結して単一のステープル状に架橋されたペプチドを提供することを包含している。更に、本明細書で用いられる用語ペプチドを縫合状に架橋するとは、縫合状に架橋された多数のステープル状に架橋されたポリペプチドをもたらす、単一ポリペプチド鎖における多重及び直列に例えば、1つのアミノ酸が2つのアミノ酸と架橋されているステープル状にペプチドを架橋する事象を示す。ペプチドをステープル状に架橋することは、国際特許公開第WO200812176号及び同第WO2010/068684号公報に開示されており、両者は参照により本明細書に取り込まれている。全てが炭化水素の架橋を用いるペプチドのステープル状の架橋化は、特に生理的に適切な条件下で、その元来の立体配座及び/又は二次構造を保持するのに役立つことが示されているSchafmiesteretalJAmChemSoc122589158922000WalenskyetalScience305146614702004。全てが炭化水素の架橋によって本明細書のポリペプチドをα螺旋二次構造を有するようにステープル状に架橋化することは、ポリペプチドをその元来のα螺旋構造に拘束することができる。拘束された二次構造は、例えば、ペプチドのタンパク分解開裂に対する耐性を増大し、ペプチドの疎水性を増大でき、ペプチドの標的細胞の膜内への優れた浸透を可能にでき例えば、細胞飲作用のようなエネルギー依存性輸送メカニズムを介して、対応する架橋されていない例えば、縫合状に架橋されていないunstitched又はステープル状に架橋されていないunstapledペプチドと比べてペプチドの生物活性の改善をもたらすことができる。このような拘束はアポトーシス誘発BID-BH3α螺旋に適用されて、動物モデルにおいて縫合状に架橋されていないポリペプチドと比較して白血病の悪性腫瘍生育のより高い抑制をもたらしたWalenskyetalScience305146614702004米国特許出願公開第2005/02506890号;及び同第2006/0008848号、これらはそれぞれ参照により本明細書に取り込まれている。適切な架橋closslinks;これらは技術分野において繋ぎ止めtethersとも呼ばれているは,本明細書及び米国特許公開第2005/0250680号、国際特許出願第PCT/US2008/058575号、米国特許出願第12/864,375号WO2009/108261、及び国際特許出願公開第WO2010/148335号に記載されている。本明細書に開示されている架橋されたペプチドは、天然又は非天然のアミノ酸を包含し、アミノ酸の側鎖が置換されている2つのアミノ酸のα炭素の間に結合linkageを有することができる。本明細書に開示されているペプチドを得る例えば、合成するために、及び精製するために適している方法は当該技術分野において公知であり例えば、BirdetalMethodsinEnzymol446369386WalenskyetalScience30514661470SchafmeisteretalJAmChemSoc12258915892米国特許出願第12/525,123号2010年3月18日出願、及び米国特許第7,723,468号2010年5月25日登録を参照されたい、これらはそれぞれその全てが参照により本明細書に取り込まれている、そして本明細書に記載されている例えば、実施例1を参照されたい。ある実施態様では、このような架橋されたp53ペプチドは、架橋されていない又はコントロールのペプチド、例えば、同じアミノ酸配列を有している架橋されていないペプチドよりもHDMXに対してより高い親和性を示すことができる。ある実施態様では、架橋されたp53ペプチドは、細胞膜を貫通でき、或いは架橋されていない又はコントロールのペプチド、例えば、同じアミノ酸配列を有している架橋されていないペプチドよりもより高い細胞透過性を有している。ある実施態様では、HDMX調節剤は、PazgieretalPNAS10646654670に開示されているペプチドの1つ又はそれ以上の架橋された型を包含できる。例えば、HDMX調節剤は、PazgieretalPNAS10646654670に開示されているTSFAEYWNLLSPPMIと称する配列番号24又はLTFEHYWAQLTSpDIと称する配列番号25のステープル状に架橋された又は縫合状に架橋された型を包含できる。ある例では、PMIは、F、W及び最後のLが無傷のままで又は改変されずに残っている限り例えば、TSFAEYWNLLSP配列番号24において下線を付けたアミノ酸が無傷のままで又は改変されずに残っている限り何れかの2つのアミノ酸の間を架橋例えば、内部架橋を用いてステープル状に架橋することができる。ある例では、pDIは、F、W及び最後のL又はTが無傷のままで又は改変されずに残っている限り例えば、LTFEHYWAQLTS配列番号25又はLTFEHYWAQLTS配列番号25において下線を付けたアミノ酸が無傷のままで又は改変されずに残っている限り何れかの2つのアミノ酸の間を架橋例えば、内部架橋を用いてステープル状に架橋することができる。配列番号1はヒトp53の配列である。ある例では、架橋されたペプチドは、配列:LeuSerGlnGluThrPheSerAspLeuTrpLysLeuLeuProGluAsn配列番号1の14~29番目のアミノ酸配列番号2を包含できる。架橋されたペプチドは、PheSerAsnLeuTrpArgLeuLeuProGlnAsn配列番号26又は配列:GlnSerGlnGlnThrPheSerAsnLeuTrpArgLeuLeuProGlnAsn配列番号27も包含できる。配列の何れかにおいて、2、3、4又は6アミノ酸分離れている2つのアミノ酸の側鎖を結合基linkinggroupR3で置換できる。ステープル状に架橋されたポリペプチドは以下のアミノ酸配列の全て又は一部例えば、少なくとも10個、少なくとも11個、少なくとも12個、少なくとも13個を包含できる:Xaa1Ser2Gln3Xaa4Thr5Phe6Xaa7Xaa8Leu9Trp10Xaa11Leu12Leu13Xaa14Xaa15Asn16配列番号28、ここで、Xaa1、Xaa4、Xaa7、Xaa8、Xaa11、Xaa14、Xaa15のそれぞれは何れかのアミノ酸例えば、20個の天然アミノ酸である。ある状況では:Xaa1は、Leu若しくはGln、又は側鎖が結合基R3で置換されているアミノ酸であり;Xaa4は、Glu若しくはGln、又は側鎖が結合基R3で置換されているアミノ酸であり;Xaa7は、Ser又は結合基R3であり;Xaa8は、Asp若しくはAsp及びGlu以外の何れかのアミノ酸好ましくはAsn;例えば、Xaa8はAsp又はAsnであってよい、又は側鎖が結合基R3で置換されているアミノ酸であり;Xaa11は、Lys若しくは正に荷電したアミノ酸好ましくはArg、又は側鎖が結合基R3で置換されているアミノ酸であり;Xaa14は、Pro、又は側鎖が結合基R3で置換されているアミノ酸であり;Xaa15は、Glu若しくはAsp及びGlu以外のアミノ酸好ましくはGln又は側鎖が結合基R3で置換されているアミノ酸である。ある実施態様では、ペプチドは配列番号28を含み、そこでXaa1は、Leu若しくはGln、又は側鎖が結合基R3で置換されているアミノ酸であり;Xaa4は、Glu若しくはGln、又は側鎖が結合基R3で置換されているアミノ酸であり;Xaa7は、Ser、又は側鎖が結合基R3で置換されているアミノ酸であり;Xaa8は、Asp若しくはAsn、又は側鎖が結合基R3で置換されているアミノ酸であり;Xaa11は、Lys若しくはArg、又は側鎖が結合基R3で置換されているアミノ酸であり;Xaa14は、Pro、又は側鎖が結合基R3で置換されているアミノ酸であり;Xaa15は、Glu若しくはGln、又は側鎖が結合基R3で置換されているアミノ酸である。ステープル状に架橋されたペプチドにおいて、Glnで占められている何れかの位置も代わりにGluであってもよく、Gluで占められている何れかの位置も代わりにGlnであってもよい。同様に、Asnで占められている任意の位置は代わりにAspであってもよく、Apsで占められている何れかの位置も代わりにAsnであってもよい。Asn又はArg及びGln又はGluの選択はステープル状に架橋されたペプチドの所望の電荷によって決まる。ある場合では、ペプチドは、Gln3Xaa4Thr5Phe6Xaa7Xaa8Leu9Trp10Xaa11Leu12Leu13配列番号29の一部を含んでいる。配列番号29内の、架橋できるアミノ酸の対は、これに限定されないが、5番目と12番目のアミノ酸;4番目と11番目のアミノ酸;7番目と11番目のアミノ酸;及び7番目と14番目のアミノ酸を包含する。繋ぎ止め又は架橋は、螺旋の1回転又は2回転すなわち、約3.4個又は7個のアミノ酸の長さに渡って伸ばすことができる。従って、iとi3;iとi4;又はiとi7に位置するアミノ酸は化学修飾及び架橋化のための理想的な候補である。従って、例えば、ペプチドが配列:...Xaa1、Xaa2、Xaa3、Xaa4、Xaa5、Xaa6、Xaa7、Xaa8、Xaa9...ここで、...は追加アミノ酸の任意の存在を示すを有している場合には、Xaa1とXaa4の間例えば、i3、又はXaa1とXaa5の間例えば、i4、又はXaa1とXaa8の間例えば、i7の架橋は、Xaa2とXaa5の間例えば、i3、又はXaa2とXaa6の間例えば、i4、又はXaa2とXaa9の間例えば、i7の架橋等のように有用である。ポリペプチドは、配列を更に安定化するため、或いはより長いポリペプチドの縫合状の架橋の安定化を促進するためにポリペプチド配列内に1つ以上の架橋を包含できる。ポリペプチドが、1つの部分に容易に合成するには長過ぎる場合は、ネイティブケミカルライゲーションnativechemicalligationと呼ばれる技術によって独立して合成した架橋されているペプチドを結合することができるBangetalJAmChemSoc1261377。或いはまたは更に、架橋されているペプチドは1つ又はそれ以上の例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10又はそれ以上、10未満、9未満、8未満、7未満、6未満、5未満、4未満、3未満、又は2未満のステープル状の架橋及び/又は縫合状の架橋を包含できる。内部架橋例えば、ステープル状の架橋及び/又は縫合状の架橋を、ペプチドの結合又は相互作用の面におけるアミノ酸の構造関連性を保存する例えば、ペプチドの結合界面を保存するためにペプチド内のアミノ酸上に位置づけることができる。例えば、i1~i16の1つ又はそれ以上表1を参照されたいを少なくとも1個の他のアミノ酸とステープル状に架橋又は縫合状に架橋させて、疎水性相互作用面においてアミノ酸の構造関連性を保存できる例えば、KussieetalScience274948953andJosephetalCellCycle945604568を参照されたい。このような内部架橋は:1つ又はそれ以上のステープル状の架橋;1つ又はそれ以上の縫合状の架橋;及び/又は1つ又はそれ以上のステープル状の架橋の1つ又はそれ以上の縫合状の架橋との組合わせを包含できる。上記のように、例示的な架橋されたペプチドは、配列番号2~21図1Cを参照されたい、及び/又は配列番号9例えば、SAH-p53-8に記載の配列を包含する。改変のためのアミノ酸の選択例えば、内部架橋をサポートするためのはステープル状の架橋スキャンニングによっても促進される。用語ステープル状の架橋スキャンは、ステープル状に架橋されたペプチドのライブラリーの合成を示し、それによりiとi3;iとi4;又はiとi7の単一及び複数のステープル状の架橋又は縫合状の架橋の位置をペプチド配列の長さにそって順次位置づけ、全ての可能な位置をサンプリングして、ステープル状に架橋された又は縫合状に架橋された構築物に対して望ましい又は最適な特性及び活性を同定する。架橋スキャンニング方法の例は図に説明されている。ある例では、本明細書の架橋されたペプチドは少なくとも2つの内部架橋された又はステープル状に架橋されたアミノ酸を包含し、ここでは少なくとも2つのアミノ酸が2個すなわち、i、i3、表1において□と示した、3個すなわち、i、i4、表1において○と示した、又は6個すなわち、i、i7、表1において▲として示したのアミノ酸分離れている。内部架橋例えば、ステープル状の架橋をサポートするために少なくとも2個のアミノ酸が必要であるが、内部架橋されたアミノ酸の更なる対を、例えば、更なる内部架橋例えば、ステープル状の架橋をサポートするために、ペプチドに包含させることができる。例えば、ペプチドは、1、2、3、4、5又はそれ以上のステープル状の架橋を包含できる。或いはまたは更に、ペプチドは3つの内部架橋された又は縫合状に架橋されたアミノ酸を包含できる。ペプチドの縫合状の架橋は少なくとも3つの内部架橋されたアミノ酸を包含し、ここで3つのアミノ酸のうちの中央のアミノ酸本明細書では核又は中心アミノ酸と表わして、表1でiと示したはそれぞれの隣接改変アミノ酸とα炭素の間に内部架橋を形成する。核アミノ酸は2つの内部架橋されている側鎖を包含し、これは飽和でも不飽和でもよい。核アミノ酸に架橋されているアミノ酸は核アミノ酸から何れかの方向に2、3、又は6アミノ酸例えば、i、i-3、i、i-4、i、i-7表1で、それぞれ、■、●、及び▼と示す、i、i3、i、i4、i、i7表1で、それぞれ、□、○、及び▲と示す、ここで、iは核アミノ酸である分離れてもよい。核の両側にあるアミノ酸の数例えば、核アミノ酸と核に架橋しているアミノ酸の間は同一であっても異なっていてもよい。ある例では、縫合状の架橋は3、4、5個、又はそれ以上の内部架橋されているアミノ酸を包含できる。ある例では、ペプチドは1、2、3、4つ、又はそれ以上の縫合状の架橋を含有できる。ある実施態様では、本明細書のペプチドは少なくとも1つ例えば、1、2、3、4、又は5つのステープル状の架橋と少なくとも1つ例えば、1、2、3、4、又は5つの縫合状の架橋との組み合わせを包含できる。ある実施態様では、繋ぎ止め、例えば、炭化水素によるステープル状の架橋は螺旋以外の構造を安定化するために用いられる。このような場合は、繋ぎ止めの端部はi、i3、i4、及び17以外の間隔で位置付けることができる。上に開示したように、本明細書のペプチドは、一緒になって内部分子内架橋を形成する少なくとも2つの改変アミノ酸を包含し、ここで少なくとも2つの改変アミノ酸は2個すなわち、i、i3、表1で□と示す、3個すなわち、i、i4、表1で○と示す、又は6個すなわち、i、i7、表1で▲と示すのアミノ酸分離れている。例えば、ペプチドは表1に説明されている1つ又はそれ以上の位置にある架橋されているアミノ酸を含有できる。ある実施態様では、本発明は式Iの改変ポリペプチド又はその薬学的に許容される塩を特徴とする。式中の、それぞれのR1及びR2は独立して、H、又はC1~C10アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアリールアルキル、又はヘテロシクリルアルキルである。R3は、アルキレン、アルケニレン又はアルキニレン、或いは[R4’-K-R4]nであって、それぞれは0~6個のR5で置換されている。R4及びR4’は、独立して、アルキレン、アルケニレン又はアルキニレンである例えば、それぞれは、C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9又はC10アルキレン、アルケニレン又はアルキニレンである。R5は、ハロ、アルキル、OR6、NR62、SR6、SOR6、SO2R6、CO2R6、R6、蛍光部分、又は放射性同位元素である。Kは、O、S、SO、SO2、CO、CO2、CONR6、又は、アジリジン、エピスルフィド、ジオール、又はアミノアルコールである。R6は、H、アルキル、又は治療薬である。nは、2、3、4又は6である。xは、2~10の整数である。w及びyは、独立して0~100の整数である。zは、1~10の整数例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10である。それぞれのXaaは、独立してアミノ酸例えば、20個の天然アミノ酸、又は何れかの天然又は非天然アミノ酸の1つである。ここで、このポリペプチドは、a配列番号1又は2の8個の連続アミノ酸内の、2、3又は6個のアミノ酸分離れている少なくとも1対のアミノ酸の側鎖が、式Iで示されているアミノ酸対のα炭素と連結する、結合基、R3によって置換されていること;及びbアミノ酸の第1対のα炭素が式Iで示されているR1で置換されていて、アミノ酸の第2対のα炭素が式Iで示されているR2で置換されていること以外は、配列番号1ヒトp53又はその変異体、配列番号2又はその変異体、又は本明細書に記載されているその他のポリペプチド配列の少なくとも8個の連続アミノ酸を含有している。別の態様では、本発明は式IIの改変ポリペプチド、又はその薬学的に許容される塩を特徴としている。式中の、それぞれのR1及びR2は独立して、H、又はC1~C10アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアリールアルキル、又はヘテロシクリルアルキルである。R3は、アルキレン、アルケニレン又はアルキニレン、或いは[R4’-K-R4]nであって、それぞれは0~6個のR5で置換されている。R4及びR4’は、独立して、アルキレン、アルケニレン又はアルキニレンである例えば、それぞれは、独立して、C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9又はC10アルキレン、アルケニレン又はアルキニレンである。R5は、ハロ、アルキル、OR6、NHR6、NR62、SR6、SOR6、SO2R6、CO2R6、R6、蛍光部分、又は放射性同位元素である。Kは、O、S、SO、SO2、CO、CO2、CONR6、又は、アジリジン、エピスルフィド、ジオール、アミノアルコール、又はジアミンである。R6は、H、アルキル、又は治療薬である。nは、2、3、4、5又は6である。xは、2~10の整数である。w及びyは、独立して0~100の整数である。zは、1~10の整数例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10である。それぞれのXaaは、独立してアミノ酸例えば、20個の天然アミノ酸、又は何れかの天然又は非天然アミノ酸の1つである。R7は、PEG、tatタンパク質、親和性標識、標的部分、脂肪酸由来アシル基、ビオチン部分、蛍光プローブ例えば、フルオレセイン又はローダミン結合を介して、例えば、チオカルバメート又はカルバメート結合である。R8は、H、OH、NH2、NHR8a、NR8aR8bである。ここで、このポリペプチドは、a配列番号1又は2の8個の連続アミノ酸内の、2、3又は6個のアミノ酸分離れている少なくとも1対のアミノ酸の側鎖が、式Iで示されているアミノ酸対のα炭素と連結する、結合基、R3によって置換されていること;及びbアミノ酸の第1対のα炭素が式IIで示されているR1で置換されていて、アミノ酸の第2対のα炭素が式IIで示されているR2で置換されていこと以外は、配列番号1ヒトp53又はその変異体、配列番号2又はその変異体、又は本明細書に記載されているその他のポリペプチド配列の少なくとも8個の連続アミノ酸を含有している。式I又は式IIの場合は、以下の実施態様に開示されている。x=2すなわち、i3連結の場合は、R3はC7アルキレン、アルケニレンであってよい。アルケニレンの場合は1つ又はそれ以上の二重結合を有していてよい。x=6すなわち、i4連結の場合は、R3はC1、C12、又はC13アルキレン又はアルケニレンであってよい。アルケニレンの場合は1つ又はそれ以上の二重結合を有していてよい。x=3すなわち、i4連結の場合は、R3はC8アルキレン又はアルケニレンであってよい。アルケニレンの場合は1つ又はそれ以上の二重結合を有していてよい。ある特定の例では、2つのα、α二置換立体中心α炭素は、両方がR配置又はS配置例えば、i、i4架橋にあるか、又は一方の立体中心がR配置で、他方がS配置例えば、i、i7架橋にある。従って、式Iは次のように表わされる:ここで、例えば、xが3のときに、C’及びC二置換立体中心は、両方がR配置にあるか、又は両方がS配置にってよい。xが6のときは、C’二置換立体中心がR配置にあって、C二置換立体中心がS配置にあるか、或いはC’二置換立体中心がS配置にあって、C二置換立体中心がR配置にある。R3二重結合はE又はZ立体化学配置にあってよい。直前に表わした式のC’及びCに対応する、式IIの炭素に対しても、同様な配置が可能である。ある例では、R3は[R4-K-R4’]nであり、そしてR4及びR4’は独立して、アルキレン、アルケニレン又はアルキニレンである例えば、それぞれは独立して、C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9又はC1のアルキレン、アルケニレン又はアルキニレンである。ある例では、ポリペプチドは、架橋に置き換えられているアミノ酸側鎖に加えて、配列番号1又は2の何れかにおいて1、2、3、4又は5つのアミノ酸変化を有しているアミノ酸配列を包含する。鎖は、アルキル、アルケニル、又はアルキニル部分例えば、C5、C8又はC11アルキル、C5、C8又はC11アルケニル、又はC5、C8又はC11アルキニルを包含できる。繋ぎ止めされたアミノ酸は例えば、C1~C3又はメチルでα二置換されていてもよい。[Xaa]y及び[Xaa]wは、p53ポリペプチド例えば、配列番号1又は2の何れかの少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25又はそれ以上の連続アミノ酸好ましくは、2又は5連続アミノ酸を独立して含有できるペプチドであって、[Xaa]xはp53ペプチドのアミノ酸の3又は6連続アミノ酸を含有できるペプチドである。ペプチドは、p53ポリペプチドの、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30、35、40、45、50のアミノ酸、或いは20~50の何れかの数のアミノ酸、又は列挙された何れか2つのアミノ酸数間の範囲のアミノ酸を含有できる。3個又は6個のアミノ酸分離れているアミノ酸の1つ又はそれ以上の対が、例えば、R3を介して、架橋を形成するアミノ酸置換に置き換わっていること以外は、アミノ酸は連続している。従って、少なくとも2つのアミノ酸は、繋ぎ止めされたアミノ酸又は繋ぎ止めされたアミノ酸置換に置き換えできる。従って、式Iをと表わすと、[Xaa]y’、[Xaa]x及び[Xaa]yはそれぞれ、同一又は異なったp53ペプチド由来の連続したポリペプチド配列を含有できる。ペプチドは、p53ポリペプチド配列番号1又は2の1011、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、30、35、40、45、50又はそれ以上連続したアミノ酸を包含でき、ここで3個のアミノ酸又は6個のアミノ酸分離れている2つのアミノ酸のα炭素がR3を介して結合していて、2つのα炭素のうちの1つがR1で置換されていて、他方がR2で置換されていて、それぞれがペプチド結合を介して更なるアミノ酸と結合している。ある例では、このポリペプチドはp53分解のドミナントネガティブ阻害剤として作用する。ある例では、このポリペプチドは蛍光部分、若しくは放射性同位元素、又は放射性同位元素をキレート化できる例えば、Re、In又はYの放射性同位元素にキレート化されたメルカプトアセチルトリグリシン又は1,4,7,10-テトラアザシクロドデカン-N,N’,N,N’-テトラ酢酸DOTA部分も包含する。ある例では、R1及びR2がメチルであり;R3が、C8アルキル、C11アルキル、C8アルケニル、C11アルケニル、C8アルキニル、又はC11アルキニルであり;そしてxが2、3、又は6である。ある例では、このポリペプチドは、PEGリンカー、tatタンパク質、親和性標識、標的部分、脂肪酸由来アシル基、ビオチン部分、蛍光プローブ例えば、フルオレセイン又はローダミン、又は金属キレート基を包含する。このペプチドは1つ又はそれ以上の不斉中心を含有できるので、ラセミ体及びラセミ混合物、単一エナンチオマー、個々のジアステレオマー及びジアステレオマー混合物、並びに存在する何れかのオレフィンの幾何異性体例えば、Z又はシス、及びE又はトランスとして生じる。これらの化合物のこのような全ての異性体は明確に本発明に包含される。化合物は複数の互変異性で表わすこともでき、そのような場合、本発明は、本明細書に記載されている化合物の全ての互変異性例えば、平衡状態にある異性体例えば、ケト-エノール、ここでは複数部位におけるアルキル化が位置異性体を生じる可能性がある、位置異性体、及び本明細書に記載されている化合物の酸化産物本発明はこのような反応産物の全てを明確に包含するを明確に包含する。このような化合物のこのような異性体形態の全ては全ての結晶形と同様に包含される。ペプチドは、α炭素と呼ばれている炭素に結合しているアミノ基とカルボキシル基の両方を含有しているアミノ酸も包含できる。水素及び側鎖もα炭素に結合している。適切なアミノ酸は、これに限定されないが、ペプチド中に見出せる20の通常の天然アミノ酸例えば、A、R、N、C、D、Q、E、G、H、I、L、K、M、F、P、S、T、W、Y、V1文字略語として知られているのD及びL異性体の両方を、更に有機合成又はその他の代謝経路で製造された天然及び非天然アミノ酸も包含する。以下の表2は20の通常の天然アミノ酸それぞれの側鎖の構造を提供する。この表において、各構造の右側にある-はα炭素への結合である。非必須アミノ酸残基は、ポリペプチドの野生型配列からその活性を無効にすることも実質的に改変することもなく改変できる残基である。必須アミノ酸残基は、ポリペプチドの野生型配列から改変した場合に、ポリペプチド活性の無効化又は実質的な無効化をもたらす残基である。ある実施態様では、本明細書で用いられる用語必須アミノ酸残基は、必須アミノ酸の同類置換を包含する。通常、必須アミノ酸残基はα螺旋の相互作用面に見られる。次の記号は、分子構造の部分として用いられた場合に、単一結合又はトランス若しくはシス二重結合を示す。用語アミノ酸側鎖は、アミノ酸のα炭素に結合している部分を示す。例えば、アラニンのアミノ酸側鎖はメチルであり、フェニルアラニンのアミノ酸側鎖はフェニルメチルである、システインのアミノ酸側鎖はメチルチオールであり、アスパラギン酸のアミノ酸側鎖はカルボキシメチルであり、チロシンのアミノ酸側鎖は4-ヒドロキシフェニルメチルである等である。その他の非天然アミノ酸側鎖は、例えば天然のもの例えば、アミノ酸代謝物又は合成で作られたもの例えば、α二置換アミノ酸も包含される。用語ポリペプチドは、共有結合例えば、アミド結合で結合している、2個又はそれ以上の天然の又は合成のアミノ酸を包含する。本明細書に記載されているようなポリペプチドは、全長のタンパク質例えば、十分に処理されたタンパク質を、更により短いアミノ酸配列例えば、天然のタンパク質の断片、又は合成ポリペプチドの断片も包含する。用語ハロは、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素の何れかの基を示す。用語アルキルは指定された数の炭素原子を含有している、直鎖であっても分岐鎖であってもよい炭化水素鎖を示す。例えば、C1~C10は、この基が、その中に1~10個の炭素原子を包括的に有してもよいことを示している。数の指定がないとき、アルキルは、1~20個の炭素原子を包括的にその中に有している鎖直鎖又は分岐鎖である。用語アルキレンは2価のアルキルすなわち、-R-を示す。用語アルケニルは、Z又はEの幾何学的配置において1つ又はそれ以上の炭素-炭素二重結合を有する、直鎖であっても分岐鎖であってもよい炭化水素鎖を示す。アルケニル部分は指定された数の炭素原子を含有している。例えば、C2~C10は、この基が、その中に2~10個の炭素原子を包括的に有してもよいことを示している。用語低級アルケニルは、C2~C8アルケニル鎖を示す。数の指定がないとき、アルケニルは、2~20個の炭素原子を包括的にその中に有している鎖直鎖又は分岐鎖である。用語アルキニルは、1つ又はそれ以上の炭素-炭素三重結合を有している直鎖であっても分岐鎖であってもよい炭化水素鎖を示す。アルキニル部分は指定された数の炭素原子を含有している。例えば、C2~C10は、この基が、その中に2~10個の炭素原子を包括的に有してもよいことを示している。用語低級アルキニルは、C2~C8アルキニル鎖を示す。数の指定がないとき、アルキニルは、2~20個の炭素原子を包括的にその中に有している鎖直鎖又は分岐鎖である。用語アリールは炭素6個の単環式又は炭素10個の二環式芳香族環系であり、そこでは各環の0、1、2、3、4、又は5の原子は置換基で置換されていてもよい。アリール基の例は、フェニル、ナフチル等を包含する。用語アリールアルキル又はアラルキルは、アリールで置換されているアルキルを示す。用語アリールアルコキシは、アリールで置換されているアルコキシを示す。本明細書で用いられているシクロアルキルは、3~12個の炭素、好ましくは3~8個の炭素、そしてより好ましくは3~6個の炭素を有している飽和又は部分的に不飽和の環式炭化水素基を包含し、ここで、シクロアルキル基は更に任意に置換されていてもよい。好ましいシクロアルキル基は、これに限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル、シクロヘプチル、シクロヘプタジエニル、シクロヘプタトリエニル、シクロオクチル、シクロオクテニル、シクロオクタジエニル、シクロオクタトリエニル、及びシクロオクチニルを包含する。用語ヘテロアリールは、芳香族の5~8員の単環式、8~12員の二環式、又は11~14員の三環式の環系であって、単環式の場合は1~3個のヘテロ原子を、二環式の場合は1~6個のヘテロ原子を、又は三環式の場合は1~9個のヘテロ原子を有しており、当該ヘテロ原子はO、N、又はSから選ばれる例えば、単環式、二環式、又は三環式のそれぞれの場合に、炭素原子と1~3個、1~6個又は1~9個のN、O、又はSヘテロ原子。ここで、各環の0、1、2、3、又は4個の原子は置換基で置換されていてもよい。ヘテロアリール基の例は、ピロリル、ピリジル、フリル又はフラニル、イミダゾリル、1,2,3-トリアゾリル、1,2,4-トリアゾリル、ベンズイミダゾリル、ピリダジル、ピリミジル、チオフェニル、キノリニル、インドリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル等を包含する。用語ヘテロアリールアルキル又は用語ヘテロアラルキルは、ヘテロアリールで置換されたアルキルを示す。用語ヘテロアリールアルコキシはヘテロアリールで置換されたアルコキシを示す。用語ヘテロシクリルは、非芳香族の5~8員の単環式、8~12員の二環式、又は11~14員の三環式の環系であって、単環式の場合は1~3個のヘテロ原子を、二環式の場合は1~6個のヘテロ原子を、又は三環式の場合は1~9個のヘテロ原子を有しており、当該ヘテロ原子はO、N、又はSから選ばれる例えば、単環式、二環式、又は三環式のそれぞれの場合に、炭素原子と1~3個、1~6個又は1~9個のN、O、又はSヘテロ原子。ここで、各環の0、1、2、3、又は4個の原子は置換基で置換されていてもよい。ヘテロシクリル基の例は、ピペラジニル、ピロリジニル、ジオキサニル、アジリジニル、オキシリル、チイリルthiiryl、モルホリニル、テトラヒドロフラニル等を包含する。用語置換基は、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、又はヘテロアリール基上でその基の何れかの原子と置き換えられている基を示す。適切な置換基は、これに限定されないが、ハロ、ヒドロキシ、メルカプト、オキソ、ニトロ、ハロアルキル、アルキル、アルカリル、アリール、アラルキル、アルコキシ、チオアルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アルコキシカルボニル、アミド、カルボキシ、アルカンスルホニル、アルキルカルボニル、アジド、及びシアノ基を包含する。ある例では、本明細書に記載されている炭化水素鎖すなわち、架橋を更に操作できる。一例では、炭化水素アルケニル鎖の二重結合例えば、ルテニウム触媒による閉環メタセシスRCMを用いて合成したようなを酸化して例えば、エポキシ化又はジヒドロキシル化によって以下の化合物の1つを提供することができる。エポキシド部分又は遊離のヒドロキシル部分の何れかを更に官能基化できる。例えば、エポキシドを求核試薬で処理することができて、これは例えば、タグ例えば、放射性同位元素又は蛍光タグを取り付けるために、用いることができる更なる機能性をもたらす。タグは化合物を体内の所望の位置へ向かわせるために、又は体内の化合物の位置を追跡するために活用できる。或いは、更なる治療薬例えば、ラパマイシン、ビンブラスチン、タキソール等のような抗癌剤を官能基化した鎖に化学的に付加することができる。あるいはこのような誘導体化はポリペプチドのアミノ末端又はカルボキシ末端の、又はアミノ酸側鎖を介して、合成操作によって達成できる。他の薬剤、例えば、ポリペプチドの細胞内への侵入を促進する薬剤を官能基化した鎖に付加することができる。炭化水素鎖を記載してきたが、その他の鎖も想定される。例えば、鎖は1つ又はそれ以上のエーテル、チオエーテル、エステル、アミン、又はアミド部分を包含できるる。ある場合は、天然アミノ酸の側鎖を鎖の中に組み込むことができる。例えば、鎖を、セリンのヒドロキシル、システインのチオール、リジンの一級アミン、アスパラギン酸又はグルタミン酸の酸、又はアスパラギン又はグルタミンのアミドのような官能基と結合させることができる。従って、2つの非天然アミノ酸を結合して作る鎖を用いるのではなくて、天然アミノ酸を用いて鎖を作ることが可能である。1つの非天然アミノ酸と天然アミノ酸を用いることも可能である。鎖の長さを変えることが更に想定される。例えば、α螺旋二次構造に、より高度の拘束をもたらすことが望ましい場合に、より短い鎖を用いることができ、一方、ある場合には、α螺旋二次構造に対してより小さい拘束が望ましいので、より長い鎖が望まれる。また、主にα螺旋の単一面上にある鎖を提供するために、アミノ酸iからi3、iからi4、及びiからi7にまたがる鎖の例を記載してきたが、アミノ酸の数の任意の組合わせにまたがるように鎖を合成することができる。報告されているように、StewartetalNatureChemBiol2010JosephetalCellCycle2010上述、ステープル状の架橋自体が標的タンパク質結合部位の表面での結合相互作用に寄与して、標的親和性は保持しながら、親和性を増大するために用いてもよいことが更に想定される。ある例では、α二置換アミノ酸がポリペプチド中でα螺旋二次構造の安定性を改善するために用いられる。しかしながら、α二置換アミノ酸を必要とせずに、モノα置換を用いる例例えば、繋ぎ止めされたアミノ酸中でも想定される。ある例では、p53の例えば、配列番号1の相互作用面のPhe6、Trp10、Leu13の1つ又はそれ以上例えば、3つ全部を、別のアミノ酸、例えば、Alaで置き換えて、ステープル状に架橋された不活性なペプチドを作成することは有用であろう。このようなステープル状に架橋された不活性なペプチドは、例えば、負のコントロールとして有用である。ステープル状に架橋されたポリペプチドは薬剤、毒素、ポリエチレングリコールの誘導体、第2ポリペプチド、炭水化物等を包含できる。ポリマー又はその他の物質がステープル状に架橋されたポリペプチドに結合していることは実質的に均質である組成物にとって望ましい。ポリエチレングリコールPEG分子の付加はポリペプチドの薬物動態及び薬力学的特性を改善できる。例えば、PEG化は腎クリアランスを低下させることができ、そしてより安定な血漿濃度をもたらすことができる。PEGは水溶性ポリマーであって、式:XOCH2-CH2On--CH2CH2Y式中の、nは2~10,000であり、XはH又は末端修飾、例えば、C1~4アルキルであり、そしてYはポリペプチドのアミン基へのアミド、カルバメート、又は尿素の結合これに限定されないが、リジンのイプシロンアミン、又はN-末端を包含しているであるのようにポリペプチドに結合するように表わすことができる。Yは、チオール基これに限定されないが、システインのチオール基を包含するへのマレイミド結合であってもよい。PEGをポリペプチドに直接又は間接的に結合する別の方法は当業者に公知である。PEGは線状でも分岐状でもよい。各種の官能基化した誘導体を含むPEGの各種形態が市販されている。主鎖に分解可能な結合を有しているPEGを用いることができる。例えば、PEGは、加水分解されるエステル結合を用いて製造できる。分解可能なPEG結合を有している複合体は、国際特許出願公開第WO99/34833号、同第WO99/14259号、及び米国特許第6,348,558号に記載されている。ある実施態様では、高分子ポリマー例えば、PEGを、仲介リンカーを介して本明細書に記載されている物質に付加する。ある実施態様では、リンカーはペプチド結合で結合している1~20個のアミノ酸からで作られ、ここでアミノ酸は20個の天然アミノ酸から選ばれる。これらのアミノ酸の幾つかは、当業者によく理解されているように、グリコシル化されてもよい。別の実施態様では、1~20のアミノ酸は、グリシン、アラニン、プロリン、アスパラギン、グルタミン、及びリジンから選ばれる。別の実施態様では、リンカーはグリシン及びアラニンのような、立体障害を受けないアミノ酸から大部分が作られる。非ペプチドリンカーも可能である。例えば、-NHCH2nCO-式中のnは2~20であるのようなアルキルリンカーを用いることができる。これらのアルキルリンカーは更に、低級アルキルC1~C6、低級アシル、ハロゲン例えば、Cl、Br、CN、NH2、フェニル等のような、立体障害のない基で置換されていてもよい。米国特許第5,446,090号には、二官能性PEGリンカー及びPEGリンカーのそれぞれの末端にペプチドを有している複合体の形成でのその使用が記載されている。別の実施態様において、ステープル状に架橋されたペプチドを、例えば、細胞取り込みを促進するために又はインビボ安定性を増大するために改変することができる。例えば、ペプチド模倣体大環状分子をアシル化又はPEG化することは細胞の取り込みを促進し、生物学的利用能を増大し、血液循環を増大し、薬物動態を変え、免疫原性を減少し、及び/又は必要とする投与頻度を減少する。ある実施態様では、本明細書に開示されているステープル状に架橋されたペプチドは例えば、ステープル状に架橋されていないペプチドと比較して増強された細胞膜貫通能力を有している。これらの同じペプチドは、ヒト血清タンパク質に対して1マイクロモル又はそれ以下の見掛け上の親和性も有しているか、或いは有するように改変できる。別の実施態様では、改良された架橋されているポリペプチドはヒト血清タンパク質に対して3マイクロモル又はそれ以下の見掛け上の親和性を有している。別の実施態様では、改良された架橋されているポリペプチドはヒト血清タンパク質に対して10マイクロモル又はそれ以下の見掛け上の親和性を有している。別の実施態様では、改良された架橋ポリペプチドはヒト血清タンパク質に対して70マイクロモル又はそれ以下の見掛け上の親和性を有している。別の実施態様では、改良された架橋ポリペプチドはヒト血清タンパク質に対して1~70マイクロモルの見掛け上の親和性を有している。別の実施態様では、改良された架橋ポリペプチドはヒト血清タンパク質に対して1~700マイクロモルの見掛け上の親和性を有している。ある実施態様では、改良された架橋ポリペプチドは、全血において0.1~50の推定遊離画分を有している。別の実施態様では、改良された架橋ポリペプチドは、全血において0.5~10の推定遊離画分を有している。例えば、架橋されているポリペプチドの見掛け上の血清結合親和性Kdが、1、3、10、70マイクロモル又はそれ以上になるように、ポリペプチドを選択することができる。別の実施態様では、架橋されているポリペプチドは、それがヒト血液において0.1~50、又は0.15~10の推定遊離画分を有するように選択される。何れかの特定のペプチドが血清タンパク質と結合する傾向を定量する方法は当該技術分野において公知である例えば、米国特許出願公開第2010/021688号2010年8月26日公開を参照されたい。ある実施態様では、改良された架橋されているポリペプチドは、全血において0.1~50の推定遊離画分を有している。別の実施態様では、改良された架橋ポリペプチドは、全血において0.5~10の推定遊離画分を有している。ある実施態様では、HDMX調節剤は、米国特許出願公開第2010/0168388号2010年7月1日公開、同第2010/0216688号2010年8月26日公開、同第2010/0184628号2010年7月22日公開、同第2009/0047711号2009年2月19日公開、同第2009/0088533号2009年4月2日公開、同第2009/0326192号2009年12月31日公開、同第2009/0275519号2009年11月5日公開、同第2008/0262200号2008年10月23日公開、同第2010/022549号2010年1月28日公開、同第2010/0113466号2010年5月6日公開、同第2009/0069334号2009年3月12日公開これらはそれぞれその全てが参照により本明細書に取り込まれているの何れかの1つ又はそれ以上に開示されているステープル状に架橋されたペプチドであってよく、又はステープル状に架橋されたペプチドの改変体を包含できる。ある実施態様では、HDMX調節剤はステープル状に架橋されたペプチドであってよく、又はステープル状に架橋されたペプチド、例えば、アミノ及び/又はカルボキシ末端の改変体を包含できる。ある実施態様では、アミノ及び/又はカルボキシ末端の改変体は、これに限定されないが、例えば、N-末端ビオチン、N-末端Ac、N-末端Ac-bala、N-末端PEG、C-末端アミド、及び/又はC末端COOHを包含するアミノ及び/又はカルボキシ末端誘導体を包含できる。ある実施態様では、上記のように、HDMX調節剤はHDM2例えば、GenBank登録商標Accession番号228952;GI228952及び/又はHDM4HDMXとも称する;GenBank登録商標Accession番号88702791;GI88702791とも結合できる。このような場合は、HDMX調節剤のHDMXに対する親和性は、HDMX調節剤のHDM2又はHDM4に対する親和性より高くなる例えば、実質的により高い、例えば、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、30、40、50、75、100、250、500、1000、又は2000倍高く、或いは2000倍以上高い。ある実施態様では、HDMX調節剤はHDM2及びHDMXの両方と結合できるが、HDMXの活性のみを阻害する例えば、実質的に阻害する。上記のように、本明細書に開示されている化合物の合成方法は当該技術分野において公知である。それでも、下記の例示的な方法を用いることができる。当然のことながら、所望の化合物を得るために順序又は順番を変えて各種工程を実施することができる。本明細書に記載されている化合物の合成に有用な、合成化学変換及び保護基方法保護及び脱保護は当該技術分野で公知であって、例えば、RLarockComprehensiveOrganicTransformationsVCHPublishersTWGreeneandPGMWutsProtectiveGroupsinOrganicSynthesis3dEdJohnWileyandSonsLFieserandMFieserFieserandFiesersReagentsforOrganicSynthesisJohnWileyandSons及びLPaquetteedEncyclopediaofReagentsforOrganicSynthesisJohnWileyandSons、並びにこれらの続刊に記載されているようなものを包含する。本発明のペプチドは、当業者に周知の化学合成法によって製造できる。例えば、FieldsetalChapter3inSyntheticPeptidesAUsersGuideedGrantWHFreemanCoNewYorkNY1992p77を参照されたい。従って、例えば、AppliedBiosystemsPeptideSynthesizerモデル430A又は431上で、側鎖保護アミノ酸を用いるt-Boc又はFmoc化学のいずれかにより保護されたα-NH2を用いる固相合成の自動化したメリフィールド技術を用いてペプチドを合成できる。本明細書に記載されているペプチドを作成する1つの方法は固相ペプチド合成SPPSを用いることである。C-末端アミノ酸は、リンカー分子によって酸不安定結合を介して架橋されているポリスチレン樹脂と結合している。この樹脂は合成に用いられる溶媒に不溶性であって、過剰な試薬及び副産物を比較的単純に且つ速く洗い流すようにする。N-末端は、酸に安定で塩基によって除去可能な、Fmoc基で保護される。側鎖官能基の何れかを塩基に安定で酸に不安定な基で保護する。より長いペプチドは、ネイティブケミカルライゲーションを用いて個々の合成ペプチドを結合することによって作成できる。あるいは、より長い合成ペプチドを周知の組み換えDNA技術によって合成できる。このような技術は、詳細なプロトコルを有する周知の標準マニュアルに提供されている。本発明のペプチドをコードする遺伝子を構築するために、好ましくは遺伝子が発現される生物に最適なコドンを用いて、アミノ酸配列を逆転写してアミノ酸配列をコードする核酸配列を得る。次に、典型的には、ペプチド及び所望により調節要素をコードするオリゴヌクレオチドを合成して、合成遺伝子を作成する。合成遺伝子を適切なクローニングベクターに挿入して宿主細胞にトランスフェクトする。次いで、選択された発現系及び宿主に適している適切な条件下でペプチドを発現する。ペプチドを精製して標準的な方法で特徴づける。ペプチドは、ハイスループットな、組合せ方法で、例えば、AdvancedChemtechから入手可能な、ハイスループットマルチチャンネル組合せシンセサイザーを用いて、作成できる。改変ポリペプチドにおいて、1つ又はそれ以上の従来のペプチド結合は、体内でペプチドの安定性を増大できる異なる結合で置き換えた。ペプチド結合は:レトロインベルソretroinverso結合CO-NH;還元アミド結合NH-CH2;チオメチレン結合S-CH2又はCH2-S;オキソメチレン結合O-CH2又はCH2-O;エチレン結合CH2-CH2;チオアミド結合CS-NH;トランス-オレフィン結合CH=CH;フッ素置換トランス-オレフィン結合CH=CH;ケトメチレン結合CO-CHR又はCHR-CO、ここでRはH又はCH3である;及びフルオロケトメチレン結合CO-CFR又はCFR-CO、ここでRはH又はF又はCH3であるで置換できる。ポリペプチドは更に、アセチル化、アミド化、ビオチニル化、シンナモイル化、ファルネシル化、フルオレセイン化、ホルミル化、ミリストイル化、パルミトイル化、リン酸化Ser、Tyr又はThr、ステアロイル化、スクシニル化及びスルフリル化によって改変できる。本発明のポリペプチドは、例えば、ポリエチレングリコールPEG;アルキル基例えば、C1~C20の直鎖又は分岐鎖アルキル基;脂肪酸基;及びこれらの組合わせと共役することもできる。多種の長さのオレフィン側鎖を含有しているα,α二置換非天然アミノ酸を公知の方法WilliamsetalJAmChemSoc11392761991SchafmeisteretalJAmChemSoc12258912000及びBirdetalMethodsEnzymol4463692008で合成できる。i7ステープル状の架橋に結合しているiが用いられるペプチドでは螺旋の2回転が安定化されている、1個のS5アミノ酸及び1個のS8アミノ酸が用いられるか、又は1個のS8アミノ酸及び1個のS5アミノ酸が用いられる。R8は、開始キラル補助基がR-アルキル立体異性体をもたらす以外は、同様な経路を用いて合成される。また、8-ヨードオクテンが5-ヨードペンテンの代わりに用いられる。阻害剤は、MBHA樹脂上で固相ペプチド合成SPPSを用いて固体支持体上で合成される。オレフィンアミノ酸Fmoc-S5-OH、Fmoc-R8-OH、Fmoc-R8-OH、Fmoc-S8-O及びFmoc-R5-OH以外のFmoc-保護αアミノ酸、2-6-クロロ-1-H-ベンゾトリアゾール-1-イル-1,1,3,3-テトラメチルアミニウムヘキサフルオロホスフェートHCTU、及びRinkAmideMBHAは、例えば、Novabiochemから市販されている。ジメチルホルムアミドDMF、N-メチル-2-ピロリドンNMP、N,N-ジイソプロピルエチルアミンDIEA、トリフルオロ酢酸TFA、1,2-ジクロロエタンDCE、フルオレセインイソチオシアネートFITC、及びピペリジンは、例えば、SigmaAldrichから市販されている。オレフィンアミノ酸合成は当該技術分野において報告されているWilliamsetalOrgSynth80312003。ある実施態様では、ステープル状に架橋されたペプチドは以下の方法を用いて作成できる。ペプチドは、0.4~0.6ミリモル/g樹脂の濃度を負荷して、RinkアミドMBHA樹脂上で、Fmoc固相ペプチド化学を用いて手作業で合成できる。以下のプロトコルを用いた。1.Fmoc保護基を、NMP中の20ピペリジンで30分間かけて除去した。2.樹脂をNMPで5回洗浄した。3.その後のFmoc-保護アミノ酸をFmoc-AA10当量、架橋剤に対して4当量、HCTU9.9当量、架橋剤に対して3.9当量、及びDIEA20当量、架橋剤に対して7.8当量を用いて30分間架橋剤に対して60分間カップリングした。4.樹脂をNMPで5回洗浄した。5.工程1から繰り返す。全てのペプチドのN-末端をβアラニン残基で保護した。CD実験はN-末端がアセチル化されているペプチドを活用する。アセチル化反応は上に概説したFmoc基の脱保護からなり、その後無水酢酸及びDIEAを用いて反応した。示したその他の実験は、N-末端を蛍光標識化したペプチドを活用する。この目的を達成するために、脱保護したN-末端を有するペプチドを、DIEAの存在下に1晩、DMF中でフルオレセインイソチアネートに曝露した。閉環メタセシス反応は、使い捨てフリット反応器中の固体支持体上にあるままで、N-末端保護ペプチド上で実施できる。樹脂を、1,2-ジクロロエタン又はジクロロメタン中のビストリシクロヘキシルホスフィンベンジリジンルテニウムIVジクロライドグルブスの第1世代触媒の10mM溶液に2時間曝露した。触媒付加及び2時間のメタセシス反応を1度繰り返した。樹脂に結合したペプチドをCH2Cl2で3回洗浄して窒素気流下で乾燥した。ペプチドは、試薬K82.5のTFA、5のチオアニソール、5のフェノール、5の水、2.5のエタンジチオール又は95のTEA、2.5の水、2.5のトリイソプロピルシランに曝露して樹脂から解離し、脱保護して、4°Cでメチル-tert-ブチルエーテルで沈殿させて凍結乾燥することができる。ペプチドは、例えば、HPLCを用いて、任意に凍結乾燥して、精製できる。ある実施態様では、ペプチドはステープル状に架橋されていないペプチド混入物を実質的に含まないか、又は単離されている。ペプチドを精製する方法は、例えば、固相支持体上でペプチドを合成することを含んでいる。環化に続いて、固相支持体を単離して、DMSO、DMSO/ジクロロメタン混合液、又はDMSO/NMP混合液のような溶媒溶液中に懸濁する。DMSO/ジクロロメタン、又はDMSO/NMP混合物は約30、40、50、又は60のDMSOを含有できる。特定の実施態様では、50/50のDMSO/NMP溶液が用いられる。溶液を1、6、12又は24時間インキュベートして、続いて、樹脂を例えばジクロロメタン又はNMPで洗浄する。ある実施態様では、樹脂はNMPで洗浄する。溶液中での不活性ガスの撹拌及び泡立ても実施できる。本発明の架橋されたポリペプチドの特性を、例えば、以下に記載した方法を用いてアッセイすることができる。α螺旋性を確認するアッセイ例えば、50mMのリン酸カリウム溶液pH7、又は蒸留したH2Oに、濃度が25~50μMになるように化合物を水溶液に溶解する。標準的な測定パラメーター例えば、温度、20°C;波長、190~260nm;ステップ分解能、0.5nm;速度20nm/秒;蓄積、10;応答、1秒;バンド幅、1nm;路長、0.1cmを用いて分光偏光計例えば、JascoJ710上で円偏光二色性CDスペクトルを得た。各ペプチドのα螺旋含量は、平均残渣楕円率を、モデル螺旋デカペプチドについて報告されている値YangetalMethodsEnzymol130208で割って算出した。融点Tmを確認するアッセイペプチド模倣体大環状分子又は改変していないペプチドを蒸留したH2Oに例えば、50μMの最終濃度に溶解して、標準的なパラメータ例えば、波長、222nm;ステップ分解能、0.5nm;速度、20nm/秒;蓄積、10;応答、1秒;バンド幅、1nm;温度上昇速度、1°C/分;路長、0.1cmを用いて分光偏光計例えば、JascoJ710上で温度範囲例えば、4~95°Cに渡る楕円率の変化を測定してTmを決定した。プロテアーゼ耐性アッセイペプチド骨格のアミド結合はプロテアーゼによる加水分解に敏感であるので、ペプチド化合物がインビボで迅速な分解を受けやすくする。しかしながら、ペプチド螺旋形成は典型的にアミド骨格を隠し、それによって、これをタンパク質分解から防御できる。本発明のペプチド模倣体大環状分子は、対応する架橋されていないポリペプチドと比較した分解速度の変化を評価するために、インビトロのトリプシンタンパク質分解に付すことができる。例えば、ペプチド模倣体大環状分子及び対応する架橋されていないポリペプチドをトリプシンアガロースとインキュベートして、遠心分離によって多様な時点で反応を止めて、次いでHPLC注入して、280nmにおける紫外線吸収によって残存基質を定量する。すなわち、ペプチド模倣体大環状分子及びペプチド模倣体前駆体5mcgをトリプシンアガロースPierceS/E.約125と0、10、20、90、及び180分間インキュベートする。反応を高速の卓上遠心分離器で止めて;単離した上澄液中の残存基質を280nmでHPLCベースのピーク検出によって定量する。一次速度則及び速度定数kを示すタンパク質分解反応を、ln[S]対時間のプロットから確認した。エクスビボ安定性のアッセイペプチド模倣体大環状分子及び/又は対応する架橋されていないポリペプチドをそれぞれ、新鮮なマウス、ラット及び/又はヒトの血清例えば、1~2mLと37°Cで、例えば、0、1、2、4、8、及び24時間インキュベートできる。異なった濃度の大環状分子の試料を血清と連続希釈して調製することができる。無傷化合物のレベルを確認するために、以下の手順を用いることができる。100μlの血清を2mlの遠心分離管に移した後、10μlの50ギ酸及び500μlのアセトニトリルを加えて、4±2°Cで10分間、14,000RPMで遠心分離する。次いで、上澄液を新鮮な管に移して、N2<10psi、37°Cで、Turbovap上で濃縮する。試料を100μlの50:50アセトニトリル:水にもどして、LC-MS/MS分析に付す。エクスビボ安定性を試験する同じ又は類似の手法は公知であって、血清中の大環状分子の安定性を確認するために用いることができる。インビトロ結合アッセイペプチド模倣体大環状分子及びペプチド模倣体前駆体の受容体タンパク質に対する結合及び親和性を評価するために、例えば、蛍光偏光アッセイFPAを用いることができる。FPA技術は、偏光及び蛍光トレーサーを用いて、分子配向及び分子移動性を測定する。偏光で励起すると、高い見掛け分子量を有する分子に結合したFITCのような蛍光トレーサー例えば、巨大タンパク質に結合したFITC標識化ペプチドは、小分子に結合した蛍光トレーサー例えば、溶液中で遊離しているFITC標識化ペプチドと比較して、その低い速度の回転に起因して高レベルの偏光蛍光を発生させる。ペプチド-タンパク質相互作用の拮抗剤を特徴づけるインビトロ置換アッセイペプチドと受容体タンパク質の間の相互作用に拮抗する化合物の結合及び親和性を評価するために、例えば、ペプチド模倣体前駆体の配列に由来する蛍光標識化ペプチド模倣体大環状分子を利用する蛍光偏光アッセイFPAを用いる。FPA技術は、偏光及び蛍光トレーサーを用いて、分子配向及び分子移動性を測定する。偏光で励起すると、高い見掛け分子量を有する分子に結合したFITCのような蛍光トレーサー例えば、巨大タンパク質に結合したFITC標識化ペプチドは、小分子に結合した蛍光トレーサー例えば、溶液中で遊離しているFITC標識化ペプチドと比較して、その低い速度の回転に起因して高レベルの偏光蛍光を発生させる。蛍光標識化ペプチド模倣体大環状分子と受容体タンパク質の間の相互作用に拮抗する化合物は競合結合FPA実験で検出されるだろう。無傷細胞における結合アッセイペプチド又は架橋されているポリペプチドの、無傷細胞におけるそれらの天然の受容体との結合を、例えば、本明細書に記載されているような、免疫沈降実験で測定することができる。P-LISA及び免疫蛍光法無傷細胞におけるp53/HDMXの細胞内複合体を妨害するSAH-p53-8の能力を評価するために、P-LISAアッセイを適用した。ドキシサイクリン誘発性HA-HDMX構築物を発現するU2OS細胞Wangetal2007をカバースリップ上に播種してドキシサイクリンで24時間処置した。SAH-p53-810μM、エナンチオマーのNutlin-310μMRoche、又は両方の化合物を処置の最終8時間に添加した。細胞を3.7のパラホルムアルデヒド中に固定し、PBS中で洗浄して、0.2のトリトンX-100中で5分間透過処理した。次いで、カバースリップをPBS中の10正常ヤギ血清NGS中で2時間ブロックした。P-LISAのために、HA.11BabCo、1:500及びFL393SantaCruz、1:1000をPBS/EDTA/0.2トリトンX-100/2/NGS中に希釈して4°Cで1晩インキュベートした。TBS/0.05Tween-20で洗浄した後、近接ライゲーションinsituアッセイP-LISAを、以下を除いて製造会社のプロトコルDetectionKit613OLinkBioScienceに従って実施した。ヤギ抗ウサギマイナス及び抗マウスプラスP-LISAプローブを1:5ではなく1:10でNGS中に希釈した。カバースリップを顕微鏡スライドに設置し、そしてOpenLabソフトウェア及びZeissAxioplan2顕微鏡を使用して画像を得た。核内フォーカス処置当たり少なくとも100細胞をBlobfinderソフトウェアこれはその全てが参照により本明細書に取り込まれているに開示されている1つ又はそれ以上の小分子を包含できる。例えば、HDMX調節剤は、ReedetalJBiolChem2851078610796に開示されている小分子SJ-172550を包含できる。ある実施態様では、HDMX調節剤は、HarkeretalBioorgMedChem1720382046これはその全てが参照により本明細書に取り込まれているに開示されている1つ又はそれ以上の314-螺旋β-ペプチドを含有できる。例えば、HDMX調節剤は、HarkeretalBioorgMedChem1720382046に開示されているβ3-ペプチドβ53-12を包含できる。ある実施態様では、HDMX調節剤は、HayashietalBioorgMedChem1778847893これはその全てが参照により本明細書に取り込まれているに開示されている1つ又はそれ以上のN-アシルポリアミンNAPAsを包含できる。例えば、HDMX調節剤は、HayashietalBioorgMedChem1778847893に開示されているNAPA25を包含できる。ある実施態様では、HDMX調節剤は、LietalJAmChemSoc1301354613548これはその全てが参照により本明細書に取り込まれているに開示されている1つ又はそれ以上の改変スコルピオン毒素ミニチュアタンパク質を包含できる。例えば、HDMX調節剤は、LietalJAmChemSoc1301354613548に開示されているストッピン-1stoppin1を包含できる。ある実施態様では、HDMX調節剤は、HuetalCancerRes6788108817KallenetalJBiolChem28488128821これはその全てが参照により本明細書に取り込まれているに開示されている1つ又はそれ以上のチオレドキシン-共役ペプチドを包含できる。例えば、HDMX調節剤は、PhanetalJBiolChem28521742183に開示されているpDIペプチドを包含できる。ある実施態様では、HDMX調節剤は、MarkeyetalOncogene110これはその全てが参照により本明細書に取り込まれているに開示されている1つ又はそれ以上のマイクロRNAmiRNAを包含できる。例えば、HDMX調節剤は、MarkeyetalOncogene110に開示されているmiRNAmiR-34aを包含できる。HDM2調節剤本開示が網羅するHDM2調節剤は、細胞中のHDM2の活性例えば、E3ユビキチンリガーゼ活性、発現例えば、タンパク質又はmRNA発現及び/又はレベル例えばタンパク質レベルを直接例えば、HDM2に結合して又は間接的に例えば、HDM2発現の及び/又は活性を制御する分子又は経路に作用して調節すること例えば、阻害するによって細胞内のp53の発現、レベル及び/又は活性を増大する何れかの物質を包含する。ある実施態様では、HDM2調節剤は、以下に開示されている1つ又はそれ以上の物質を包含できる。例えば、HDM2調節剤は:1HDM2と結合する1つ又はそれ以上のステープル状に架橋されていないペプチド;2HDM2と結合する1つ又はそれ以上のステープル状に架橋されているp53ペプチド;3HDM2と結合する1つ又はそれ以上の小分子;4HDM2と結合する例えば特異的に結合する抗体又は抗体の断片;5HDM2の発現を減少させる1つ又はそれ以上の核酸分子例えば、抑制性核酸分子例えば、RNAi又はsiRNA;6HDM2の発現及び/又は活性を減少させる1つ又はそれ以上の医薬;及び7HDM2の発現及び/又は活性を減少させる1つ又はそれ以上の方法、並びに1、2、3、4、5、6及び/又は7の組合わせの何れかを包含できる。ある実施態様では、本明細書に開示されている方法及び組成物で用いられるHDM2調節剤は、本明細書に開示されているHDMX調節剤とは同じではない例えば、HDM2調節剤は、HDMXと結合例えば、実質的に結合しないで特異的にHDM2と結合する。ある実施態様では、HDM2調節剤はHDM2及びHDMXと結合できる。しかしながら、このような実施態様では、HDMX阻害剤は一般に、HDMXに対するよりHDM2に対してより高い結合親和性を有している例えば、HDM2調節剤の結合親和性はHDMXに対するよりHDM2に対して2、5、10、20、25、50、75、100倍又はそれ以上である。ある実施態様では、HDM2調節剤はHDM2及びHDMXの両方と結合できるが、HDM2の活性のみを阻害する例えば、実質的に阻害する。ある実施態様では、HDM2調節剤は、ペプチド又はステープル状に架橋されているペプチドがHDM2と結合するか及び/又はこれを調節する限り、本明細書に開示されている1つ又はそれ以上のペプチド又はステープル状に架橋されているペプチドを包含できる物質がHDM2の発現又は活性を調節できるか否かを評価する方法は当該技術分野において公知である例えば、米国特許出願番号第12/525,123号これは参照により本明細書に取り込まれているを参照されたい。ある実施態様では、本明細書に開示されている方法及び組成物で用いられるHDM2調節剤は、本明細書に開示されている方法及び組成物で用いられるHDMX調節剤とは同じではない例えば、HDM2調節剤は、HDMXと結合例えば、実質的に結合しないで特異的にHDM2と結合するか、又は本明細書に開示されている方法及び組成物で用いられるHDMX調節剤と同じであるが、HDMXに対するよりHDM2に対してより高い結合親和性を有している例えば、HDMX調節剤の結合親和性はHDMXに対するよりHDM2に対して2、5、10、20、25、50、75、100倍又はそれ以上である。ある実施態様では、HDM2調節剤は架橋されているペプチドではない。ある実施態様では、HDM2調節剤は図1Cに示す架橋されているペプチドではない。ある実施態様では、HDM2調節剤はSAH-p53-8ではない。ある実施態様では、HDM2調節剤はNutlin-3a例えば、C30H30C12N4O4;分子量:581.4896[g/mol]二次元及び三次元構造は、ワールドワイドウェブアドレス、pubchemncbinlmnihgovsummarysummarycgicid216345に示されているAryaetalBritishJCancer103186195LaurieetalNature4446166Nutlin-3はHDM2及びHDMXと結合するがHDMXよりより高い親和性でHDM2と結合するという報告を参照されたい、例えば、市販のNutlin-3又はNutlin-3aを包含できる。ある実施態様では、HDM2調節剤は、Shangaryetal、これは参照によりその全てが本明細書に取り込まれているに開示される1つ又はそれ以上のスピロ-オキシンドールを包含できる。ある実施態様では、HDM2調節剤は、Dingetal、これは参照によりその全てが本明細書に取り込まれているに開示されるスピロ-オキシンドールを包含できる。ある実施態様では、HDM2調節剤は、Grasbergeretal、これは参照によりその全てが本明細書に取り込まれているに開示される、1つ又はそれ以上のベンゾジアゼピンジオンを包含できる。ある実施態様では、HDM2調節剤は、Yinetal、これは参照によりその全てが本明細書に取り込まれているに開示される、1つ又はそれ以上のテルフェニルに基づく螺旋模倣体を包含できる。ある実施態様では、HDM2調節剤は、HDM2と結合する例えば、特異的に結合する抗体例えば、モノクローナル又はポリクローナル抗体、或いはHDM2と結合する例えば特異的に結合するモノクローナル又はポリクローナル抗体の抗原結合断片を包含できる。ある実施態様では、Andersonetal、これは参照によりその全てが本明細書に取り込まれているに開示されるモノクローナル抗体MDM2-F4-14を包含できる。ある実施態様では、HDM2調節剤は、Kritzeretal、これは参照によりその全てが本明細書に取り込まれているに開示される1つ又はそれ以上のミニチュアタンパク質を包含できる。ある実施態様では、HDM2調節剤は、Kritzeretalに開示されるミニチュアペプチドp53AD15-31を包含できる。ある実施態様では、HDM2調節剤は、PichiorrietalCancerCell18367381、これは参照によりその全てが本明細書に取り込まれているに開示される1つ又はそれ以上のマイクロRNAmiRNAを包含できる。例えば、HDM2調節剤は、PichiorrietalCancerCell18367381に開示されるmiRNAmiR-192を包含できる。p53の発現及び/又は活性を誘発する組成物及び/又は方法上記のように、HDMX調節剤の何れかの組合わせ、又はHDM2調節剤と組合わせたHDMX調節剤は、p53の発現及び/又は活性を誘発する組成物及び/又は方法と組合わせて用いることができる。例示的なp53の発現及び/又は活性を誘発する組成物及び/又は方法は、これに限定されないが、イオン化放射;紫外線;エトポシド、アクチノマイシンD、ドクソルビシン、パクリタキセル、及びその他の化学療法剤のようなDNA損傷剤を包含できる。ある実施態様では、細胞中のp53活性は、活性なp53を細胞に導入する例えばウィルス例えば、レトロウィルス及び/又はDNAの導入を用いてことによって増大できる。ある実施態様では、活性なp53は対象から得られる核酸配列から発現でき、及び/又は活性なp53は対象から得た単離されたタンパク質であってよく、任意にp53の細胞透過性を増強する部分と結合させることができる。ある実施態様では、p53の活性は、癌細胞例えば、p53活性が減退している癌細胞に的を絞った方法でp53のレトロウィルスによる再構築によって増大することができる。ある実施態様では、p53の発現及び/又は活性を誘発する組成物及び/又は方法は、本明細書に開示されている1つ又はそれ以上のHDM2阻害剤を包含できる。本明細書で用いられる用語発現は、タンパク質及び/又は核酸の発現及び/又はタンパク質活性を包含する。医薬組成物ある実施態様では、本明細書に開示されている、医薬組成物を含んでいる組成物は:11つ又はそれ以上のHDMX調節剤;及び/又は21つ又はそれ以上のHDM2調節剤;及び/又は3p53の発現及び/又は活性を誘発する1つ又はそれ以上の組成物及び/又は方法を包含し、これは1~3の何れかの組合わせ、例えば、1と2及び/又は3例えば、1と2、1と3、そして1と2と3の組合わせの何れかを包含している。更に、本明細書に開示されている方法はこれらの組成物の何れか、例えば、組成物又は医薬組成物のような、の使用を包含する。本明細書で用いられるような、本明細書に記載されている式の化合物を包含している、本発明の組成物は、それらの薬学的に許容される誘導体又はプロドラッグを包含するように定義される。薬学的に許容される誘導体又はプロドラッグは、レシピエントに投与すると、本発明の化合物を直接的又は間接的にもたらすことができる本明細書に開示されている化合物又は物質の、薬学的に許容される塩、エステル、エステルの塩、又は他の誘導体の何れかを意味する。特に好ましい誘導体及びプロドラッグは、このような化合物を哺乳動物に投与したときに化合物のバイオアベラビリティーを増大する例えば、経口投与された化合物をより容易に血中に吸収されるようにすることによって、又は親化合物の生体区画例えば、脳又はリンパ系への送達を親種と比べて増強するものである。好ましいプロドラッグは、水溶性又は腸膜を介する能動輸送を増大させる基が本明細書に開示されている式の構造に付加している誘導体を包含する。本発明の化合物は選択的な生物特性を増強する適切な官能基を付加することによって改変できる。このような改変は当該技術分野において公知であって、所定の生体区画例えば、血液、リンパ系、中枢神経系内への生物学的浸透を増大し、経口アベイラビリティーを増大し、注射による投与を可能にするために溶解性を増大し、代謝を変え、そして排泄速度を変えるものを包含する。本発明の化合物の薬学的に許容される塩は、薬学的に許容される無機及び有機の酸及び塩基から誘導されるものを包含する。適切な酸塩の例は、酢酸塩、アジピン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グリコール酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、2-ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、パルモ酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、トリフルオロメチルスルホン酸塩、及びウンデカン酸塩を包含する。適切な塩基に由来する塩は、アルカリ金属例えば、ナトリウムアルカリ土類金属例えば、マグネシウム、アンモニウム及びN-アルキル4塩を包含する。本発明は本明細書に開示されている化合物の何れかの塩基性窒素含有基の四級化も想定している。水溶性又は脂溶性或いは分散性の生成物もこのような四級化で得られる。本明細書に開示されている式の化合物は、例えば、約0.001~100mg/体重kgの範囲の用量を用いて、又は特定薬剤の要求に従って、注射、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内、筋肉内、又は皮下注射で;又は経口で、口腔内に、経鼻的に、経粘膜で、局所に、眼科製剤で、又は吸入によって投与されてよい。あるいは又は更に、本発明の化合物は食品医薬品局FoodandDrugAdminstarationが承認した何れかの方法、例えば、CDERDataStandardsManualversionnumber004fdagivecderdsmDRGdrg00301htmで入手できるに記載されているような、に従って投与できる。本明細書の方法は、所望の又は定められた効果を達成する化合物又は化合物組成物の有効量の投与を意図している。典型的には、本発明の医薬組成物は1日当り約1~約6回或いは、連続輸液として投与される。このような投与は長期治療又は救急治療として利用できる。単回用量製剤を作成するために担体物質と混合できる活性成分の量は、治療される対象及び特定の投与方法によって変わる。典型的な製剤は約5~約95の活性化合物W/Wを含有している。或いは、このような製剤は約20~約80の活性化合物を含有している。ある実施態様では、HDMX調節剤例えば、p53のステープル状に架橋されているペプチドの有効用量は、これに限定されないが、例えば、約、0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~10000;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~5000;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~2500;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~1000;.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~900;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~800;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~700;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~600;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~500;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~400;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~300;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~200;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~100;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~90;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~80;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~70;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~60;0.0000、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~50;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~40;0.00001、0.0001、0.001、01、0.1、1又は10~30;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~20;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~30;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1~15、0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~30;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1~10、0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~30;又は0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1~5mg/kg/日の、例えば、静脈内投与を包含できる。ある実施態様では、SAH-p53-8の有効用量は、これに限定されないが、例えば、約、0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~10000;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~5000;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~2500;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~1000;.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~900;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~800;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~700;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~600;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~500;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~400;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~300;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~200;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~100;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~90;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~80;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~70;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~60;0.0000、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~50;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~40;0.00001、0.0001、0.001、01、0.1、1又は10~30;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~20;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~30;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1~15、0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~30;0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1~10、0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1又は10~30;又は0.00001、0.0001、0.001、0.01、0.1、1~5mg/kg/日の、例えば、静脈内投与を包含できる。上で述べたものより低い又は高い用量を必要とするかもしれない。何れか特定の患者に対する特定の用量及び治療計画は、用いられる具体的な化合物の活性、年齢、体重、一般的な健康状態、性別、食生活、投与の時間、排泄の速度、薬剤の組合わせ、病気、症状又は疾患の重症度及び経過、患者の病気、疾患又は症状に対する素質、及び治療医師の判断を含む各種因子によって決まるだろう。患者の疾患の改善によって、所望により、本発明の化合物、組成物又は組合せの維持用量を投与してよい。続いて、投与の用量又は回数、或いはその両方を、症状に応じて改善された疾患が維持されるレベルまで減少させてよい。しかしながら、患者は病状の何らかの再発に基づき間欠的治療を必要とするかもしれない。本発明の医薬組成物は、本明細書に記載されている式の化合物又はそれらの薬学的に許容される塩;例えば、モルフィン又はコデインを包含する追加の薬剤;及び薬学的に許容される担体、補助剤又は賦形剤の何れかを含有している。本発明の別の組成物は、本明細書に記載されている式の化合物又はそれらの薬学的に許容される塩;及び薬学的に許容される担体、補助剤又は賦形剤を含有している。本明細書で説明されている組成物は、疾患又は疾患の症状の調節を達成するのに有効な量の、本明細書で説明されている式の化合物の、更には存在するなら、追加の治療剤を含有している。用語薬学的に許容される担体又は補助剤は、本発明の化合物と共に患者に投与でき、そして化合物の治療量を送達するのに十分な用量を投与したときにそれらの薬学的な活性を失わせず、無毒性である担体又は補助剤を示す。本発明の医薬組成物で用いられてよい薬学的に許容される担体、補助剤及び賦形剤は、これに限定されないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、d-α-トコフェロールポリエチレングリコール1000コハク酸エステルのような自己乳化送達系SEDDS、ツイーン又はその他の類似のポリマー送達マトリックスのような、医薬剤形で用いられる界面活性剤、ヒト血清アルブミンのような血清タンパク質、リン酸塩のような緩衝物質、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩又は電解質硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素二カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩のような、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン-ポリオキシプロピレン-ブロック重合体、ポリエチレングリコール及び羊毛脂を包含する。α-、β-、及びγ-シクロデキストリンのようなシクロデキストリン類は本明細書に記載されている式の化合物の送達を増強するために有利に用いることもできる。本発明の医薬組成物は、経口、非経口、吸入スプレーで、局所、経鼻、口腔内、膣内又は移植容器を介して、好ましくは経口投与又は注射投与で、投与できる。本発明の医薬組成物は何れかの通常の非毒性で薬学的に許容される担体、補助剤又は賦形剤を含有できる。ある場合は、製剤化した化合物又はその送達形態の安定性を向上させるために、製剤のpHを薬学的に許容される酸、塩基又は緩衝剤で調節できる。本明細書で用いられる用語、非経口は、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、関節内、動脈内、滑液嚢内投与、胸骨下、髄腔内、病巣内及び頭蓋内注射、又は点滴術を包含する。あるいは又は更に、本発明の医薬組成物は食品医薬品局FoodandDrugAdminstarationが承認した何れかの方法、例えば、CDERDataStandardsManualversionnumber004fdagivecderdsmDRGdrg00301htmで入手できるに記載されているような、に従って投与できる。医薬組成物は無菌注射製剤、例えば、無菌注射用の水性又は油性の懸濁液のような形態にできる。この懸濁液は、適切な分散又は湿潤剤例えば、ツイーン80のような及び懸濁剤を用いて当該技術分野で公知の技術に従って製剤化できる。無菌注射製剤は、非毒性で非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の無菌の注射用溶液又は懸濁液、例えば1,3-ブタンジオール溶液であってよい。許容される賦形剤及び溶媒のうちで使用できるものは、マンニトール、水、リンゲル溶液及び等張食塩溶液である。更に、無菌の固定油は溶媒又は懸濁化媒体として通常に用いられている。この目的のために、合成モノ-又はジグリセリドを包含する、何れかの無刺激性固定油を用いることができる。オレイン酸及びそのグリセリド誘導体のような、脂肪酸は、オリーブ油又はひまし油のような、天然の薬学的に許容される油と同様に、特にそのポリオキシエチル化バージョンでは、注射用製剤において有用である。これらの油性溶液又は懸濁液は、長鎖アルコール希釈剤又は分散剤、又は乳剤及び/又は懸濁剤のような薬学的に許容される剤形の製剤化で通常用いられているカルボキシメチルセルロース又は同様な懸濁化剤も含有できる。ツイーン類又はスパン類のようなその他の通常用いられている界面活性剤及び/又は薬学的に許容される固体、液体又はその他の剤形の製造で通常用いられている同様な乳化剤又はバイオアベイラビリティーの増強剤も製剤化の目的のために用いることができる。本発明の医薬組成物は、これに限定されないが、カプセル剤、錠剤、乳剤及び水性懸濁剤、分散液並びに溶液を包含する経口投与に許容される何れかの剤形で経口投与できる。経口使用のための錠剤の場合は、通常用いられる担体は乳糖及びコーンスターチを包含している。ステアリン酸マグネシウムのような、滑沢剤も一般的に添加される。カプセル形態で経口投与するために、有用な希釈剤は乳糖及び乾燥コーンスターチを包含している。水性懸濁剤及び/又は乳剤を経口投与する場合は、油層に懸濁又は溶解した活性成分を乳化及び/又は懸濁化剤と混合できる。所望により、ある特定の甘味及び/又は着香及び/又は着色剤を加えることができる。本発明の医薬組成物は直腸内投与用の坐剤の形態で投与することもできる。これらの製剤は本発明の化合物を、室温では固体であるが直腸温度では液体であるので直腸内で溶解して活性成分を放出する、適切な非刺激性賦形剤と混合することによって製造できる。このような物質は、これに限定されないが、ココアバター、蜜蝋及びポリエチレングリコールを包含する。本発明の医薬組成物は経鼻エアゾール又は吸入によって投与できる。このような組成物は、医薬製剤の技術分野で公知である技術に従って製造され、ベンジルアルコール又はその他の適切な保存剤、バイオアベイラビリティーを増強する吸収促進剤、フッ化炭素、及び/又は当該技術分野で公知のその他の安定化又は分散化剤を用いて、生理食塩水の溶液として製造できる。本発明の組成物が本明細書に記載されている式の化合物と1つ又はそれ以上の追加の治療又は予防薬剤との組み合わせを含んでいるときは、本化合物及び追加薬剤の両方は、単独治療法で通常投与される用量の約1~100、より好ましくは5~95の用量レベルで存在させるべきである。追加薬剤は、本発明の化合物とは別に、多剤投与の一部として投与できる。或いはこれらの薬剤を、本発明の化合物と共に単一の組成物中に混合した、単一剤形の一部とすることができる。本明細書で用いられる用語有効量及び治療に有効なは、その投与により意図した効果又は生理的な転帰がもたらされるという意味で有効である、ある期間救急投与又は慢性投与、及び継続又は連続投与を包含する用いられる、本明細書に記載されている1つ又はそれ以上の化合物又は医薬組成物の量又は濃度を示す。本発明で用いられる1つ又はそれ以上の化合物又は医薬組成物の有効量は、細胞中のp53濃度例えば、タンパク質濃度及び/又はp53活性例えば、生物活性の増大を促進する量を包含する。化合物の治療有効量は疾患の治癒を必要としないが疾患の治療をもたらすだろう。ある実施態様では、本開示は、下記方法において本明細書中に開示されている1つ又はそれ以上の組成物以下にXと示してあるの何れかを用いる方法を提供する:本明細書に開示されている1つ又はそれ以上の病気又は疾患例えば、癌、以下の実施例でYと示してあるの治療において薬剤として用いるための物質X。Yの治療のための薬剤の製造のための物質Xの使用;及びYの治療において使用するための物質X。治療方法/オーダーメイド治療本開示は、癌の治療方法、例えば対象例えば、ヒト対象における癌を治療する方法を包含している。本明細書で用いられる治療は、病気又は疾患例えば、癌の1つ又はそれ以上の症状を改善するかあるいは有益に変える何れかの方法を意味する。本明細書で用いられているような、特定の疾患例えば、癌の症状の改善は、永続的又は一時的、持続的又は過渡的に関わらず、本発明の組成物及び方法による治療に起因する、あるいは治療に関連する、何らかの減少を示す。ある実施態様では、治療は、例えば、治療前の癌細胞の数例えば、対象中のに比べて癌細胞の数例えば、対象中のの減少;治療前の癌細胞例えば、対象中のの生存能例えば、平均averagemean生存能と比べた癌細胞例えば、対象中のの生存能例えば、平均averagemean生存能の減少;治療前の腫瘍サイズと比べた腫瘍サイズの低下;及び/又は治療前の対象の症状と比べた対象における1つ又はそれ以上の癌に関連する1つ又はそれ以上の症状の減少を促進するか又はもたらすことができる。ある実施態様では、方法は治療を必要としている対象例えば、1つ又はそれ以上の癌に罹る危険性がある、癌を有している、又は癌に罹っている対象を選択すること、及び11つ又はそれ以上のHDMX調節剤;21つ又はそれ以上のHDM2調節剤;及び3p53の発現及び/又は活性を誘発する1つ又はそれ以上の組成物及び又は方法:の1つ又はそれ以上の有効用量を対象に投与することを包含していて、対象を治療するのに十分な条件下及び期間、1の2及び3との何れかの組合わせ例えば、1と2;1と3;及び1と2と3を包含する。このような方法は、治療の有効性を確認するために組成物の投与の間及び投与後に対象を観察又は評価すること、及び、必要により、有効性を向上させるために治療を調節すること例えば、組成物を変えて、組成物の単回投与の用量を増量して、1日当りに投与される組成物の投与回数を増やして、及び/又は組成物を投与する日数を増やしても包含している。ある実施態様では、方法は、癌を有する患者に対するオーダーメイド治療計画を開発することを包含できる。このような方法は、例えば、HDM2調節剤に対して感受性のある癌細胞を有している対象を同定すること、及び1つ又はそれ以上のHDM2調節剤で対象を治療すること;HDMX調節剤に対して感受性のある癌細胞を有している対象を同定すること、及び1つ又はそれ以上のHDMX調節剤で対象を治療すること;並びにHDM2調節剤及び/又はHDMX調節剤に耐性を示す癌細胞を有している対象を同定すること、及び1つ又はそれ以上のHDMX調節剤と1つ又はそれ以上のHDM2調節剤の相乗作用のある組合わせで対象を治療することを包含できる図11及び12を参照されたい。ある実施態様では、方法は、癌を有していると確認された患者に最も適している治療を確認すること例えば、本明細書に開示される組成物を用いる治療に対する対象の1つ又はそれ以上の癌細胞の感受性を確認例えば、インビトロですることによって、対象に対する治療計画を開発すること、及び治療計画に従って対象に組成物を任意に投与することを包含できる。これらの方法は、例えば、以下の方法を包含できる。i癌を有する患者を選択すること;患者の癌における例えば、対象から入手した例えば、生検で入手した癌細胞中のp53の発現及び/又は活性を評価すること例えば、検出すること;及び、p53の発現及び/又は活性が検出されたら、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤の有効量を対象に投与することを包含しているオーダーメイド治療計画を対象に提供すること。ある実施態様では、方法は、対象を治療するのに十分な条件下で及び十分な期間、対象に1つ又はそれ以上のHDMX調節剤を投与することを包含している。ii癌を有する患者を選択すること;対象から入手した例えば、生検で得た癌細胞試料例えば、癌細胞におけるp53-HDMX複合体の存在及び/又はレベルを検出すること;そして、p53-HDMX複合体が検出されたら、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤の有効量を対象に投与することを包含しているオーダーメイド治療計画を患者に提供すること。ある実施態様では、方法は、対象を治療するのに十分な条件下で及び十分な期間、対象に1つ又はそれ以上のHDMX調節剤を投与することを包含している。iii癌を有する患者を選択すること;対象から入手した例えば、生検で得た癌細胞試料例えば、癌細胞におけるp53-HDMX複合体の存在及び/又はレベルを検出すること;そして、p53-HDMX複合体が検出されたら、対象を治療するのに十分な条件下で及び十分な期間、対象に1つ又はそれ以上のHDMX調節剤を投与すること;組成物の投与の間及び投与後に対象を観察又は評価して治療の有効性を確認すること;そして治療の有効性が低い場合は、1つ又はそれ以上のHDM2調節剤を対象に投与すること。iv癌を有する患者を選択すること;対象から入手した例えば、生検で得た癌細胞試料例えば、癌細胞におけるp53-HDMX複合体の存在及び/又は濃度を検出し、そして試料中のp53のレベルを評価してp53のレベル又は活性が例えば、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤に接触させたときに減少した生存能を示す癌細胞におけるp53のレベル又は活性と比較して低いか否かを確認すること。ある実施態様では、p53のレベルをJeg-3及び/又はMCF-7細胞複数を含む中のp53のレベルと比較する。ある実施態様では、活性は本明細書に記載のように、HDMX-p53複合体の解離を滴定することによって評価でき、そしてp53-HDMX複合体が検出されてp53のレベルが低いときは、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び1つ又はそれ以上のHDM2調節剤の有効量を対象に投与することを包含しているオーダーメイドの治療計画を対象に提供すること。ある実施態様では、方法は、p53の発現及び/又は活性を誘発する組成物及び/又は方法の有効量を投与することを更に含んでいる、オーダーメイド治療計画を対象に提供することも含んでいる。ある実施態様では、方法は、対象を治療するのに十分な条件下及び期間、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び1つ又はそれ以上のHDM2調節剤、並びに、任意に対象に対してp53の発現及び/又は活性を誘発する組成物及び/又は方法を投与することを含有している。v以前に1つ又はそれ以上のHDM2調節剤例えば、Nutlin-3を投与されたが、それらの癌細胞がHDM2調節剤例えば、Nutlin-3に耐性例えば、部分的な耐性を示した、癌を有する対象を選択すること;そして1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び1つ又はそれ以上のHDM2調節剤、並びに任意に、p53の発現及び/又は活性を誘発する組成物及び/又は方法の有効量を投与することを包含するオーダーメイドの治療計画を対象に提供すること。ある実施態様では、方法は、対象を治療するのに十分な条件下及び期間、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び1つ又はそれ以上のHDM2調節剤、並びに任意にp53の発現及び/又は活性を誘発する組成物を対象に投与することを包含している。及び/又はvi以前に1つ又はそれ以上のHDMX調節剤例えば、SAH-p53-8を投与されたが、それらの癌細胞がHDMX調節剤に耐性例えば、部分的な耐性を示した癌を有する対象を選択すること;そして1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び1つ又はそれ以上のHDM2調節剤、並びに任意に、p53の発現及び/又は活性を誘発する組成物の有効量を投与することを包含しているオーダーメイド治療計画を対象に提供すること。ある実施態様では、方法は、対象を治療するのに十分な条件下及び期間、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び1つ又はそれ以上のHDM2調節剤、並びに任意にp53の発現及び/又は活性を誘発する組成物を対象に投与することを包含している。方法i~viは独立して又は共に及び何れの順番でも実施できることに注目すべきである。方法i~viの何れも、組成物の投与の間及び投与後に対象を観察又は評価して治療の有効性を確認して、必要によって、有効性を向上させるために治療を調節すること例えば、組成物を変えて、組成物の単回投与の用量を増やして、1日当りに投与される組成物の投与回数を増やして、及び/又は組成物を投与する日数を増やしても包含できる。ある実施態様では、本明細書のHDMX調節組成物及び方法は、対象の治療において他の抗癌治療剤又は治療方法と組合わせて用いることができる。例えば、本明細書のHDMX調節組成物及び方法は、化学療法、放射線治療、及び抗体治療と組合わせて用いることができる。ある実施態様では、本開示は放射線誘発胃腸症候群を発症する危険のある対象を治療するための組成物及び方法を包含する検討のために、例えば、KrischetalSceience327593596を参照されたい。電離放射線への急性曝露はGI症候群として知られている疾患を誘導する胃腸GI管に致命的な損傷を引き起こす。例えば、GI管の上皮細胞における、P53の過剰発現は急性電離放射線が引き起こす障害に対してGIを保護するKrischetal。従って、ある実施態様では、本開示は放射線治療例えば、電離放射線治療を受ける予定になっている対象を選択すること及びこの対象のための治療計画を開発することを含んでいる。治療計画は、放射線例えば、電離放射線に曝露される前例えば、直前、1日前、1日以上前、1週間前、1週間以上前に1つ又はそれ以上のHDMX調節剤例えば、SAH-p53-8の有効用量及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤例えば、Nutlin-3の有効用量で対象を治療すること例えば、投与することを包含できる。ある実施態様では、放射線例えば、電離放射線に曝露される前例えば、直前、1日前、1日以上前、1週間前、1週間以上前に、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤例えば、SAH-p53-8及び/又はHDM2調節剤例えば、Nutlin-3の単回用量又は複数回用量を用いて、対象を治療することができる。ある実施態様では、用量複数も含むは全身投与される。あるいは又は更に、用量複数も含むは局所的に例えば、GIへ又はGIの上皮細胞へ局所的に投与される。ある実施態様では、治療は1つ又はそれ以上のHDMX調節剤例えば、SAH-p53-8の有効用量を含んでいる。ある実施態様では、治療は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤例えば、Nutlin-3の有効用量を含んでいる。ある実施態様では、治療は1つ又はそれ以上のHDMX調節剤例えば、SAH-p53-8及び1つ又はそれ以上のHDM2調節剤例えば、Nutlin-3の相乗効果をもたらす用量を含んでいる。方法は、投与の間及び投与後に対象を観察又は評価して治療の有効性を確認して、必要によって、例えば、更なる放射線治療の前に、治療の有効性を向上させるために治療を調節すること例えば、組成物を変えて、組成物の単回投与の用量を増やして、1日当りに投与される組成物の投与回数を増やして、及び/又は組成物を投与する日数を増やしても包含できる。これらの方法は放射線治療と組合わせた、1つ又はそれ以上のHDMX調節剤及び/又は1つ又はそれ以上のHDM2調節剤を対象に投与することも含んでいる。対象の選択用語対象は本明細書を通して、本発明の方法による治療が提供される、動物、ヒト又は非ヒトを記載するために用いられる。本明細書で用いられる用語癌、過剰増殖性及び腫瘍性は、自立的増殖能を有する、すなわち、急速に増殖する細胞生育によって特徴付けられる異常な状態又は条件の細胞を示す。本明細書で述べられているように、本発明の方法は機能的p53を発現できる何れかの癌細胞を治療するために用いることができる。例えば、機能的p53が発現しているが、その細胞中のp53のレベル又は活性がHDMX及び/又はHDM2によって減少する癌細胞は何れも本明細書に開示されている組成物及び方法を用いて有益に治療することができる。野生型p53の活性は必要としていない。例えば、いくつかの機能を保持している突然変異p53を発現する細胞を有益に治療することができる。従って、本開示は:1癌を有する対象を同定すること;及び2対象の癌細胞が機能的p53をコードするか又は発現するかを確認すること;及び3対象の癌細胞が機能的p53を発現した場合は、本明細書に開示されている組成物及び方法を用いて対象を治療するか又は対象の治療法を開発することを包含できる。例えば、p53の機能は以下の癌の何れかで評価できる。ある場合は、対象又は対象由来の細胞は機能的なp53を発現することができる。このような機能的p53はいくつかのp53機能を有しているが、野生型p53と同様な機能レベルを有する必要はない。従って、機能的p53は幾らかの機能レベルを保持している突然変異p53を包含できる。ある場合は、機能的p53は野生型p53例えば、同じ対象の非腫瘍性細胞内の野生型p53の機能活性の1、2、5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、95、又はそれ以上を有している。ある実施態様では、細胞は機能的p53を発現することができるが、機能的p53は検出不能である例えば、細胞中で機能的p53は発現するが急速に劣化する。このような細胞は、細胞が機能的p53をコードすることを検出することにより同定できる。このような方法は、例えば、DNAプローブを用いて及び/又は細胞又はそれに由来する試料中のp53mRNAを検出することにより、実施できる。癌又は腫瘍性疾患の例は、これに限定されないが、線維肉腫、筋肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑液腫瘍、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋腫瘍、横紋筋腫瘍、胃癌、食道癌、直腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、子宮癌、頭頸部癌、皮膚癌、脳腫瘍、扁平上皮癌、皮脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、肝癌、胆道癌、絨毛癌、精上皮腫、胚性癌腫、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、精巣癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫瘍、乏突起神経膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、白血病、リンパ腫、又はカポジ肉腫を包含する。増殖性疾患の例は造血器腫瘍性疾患を包含する。本明細書で用いられる用語造血器腫瘍性疾患は、造血器の過形成/腫瘍性細胞、例えば、骨髄、リンパ又は赤血球系列から生じる細胞、又はその前駆細胞を含有している疾患を包含する。好ましくは、疾患は低分化型急性白血病、例えば、赤血球性白血病及び急性巨核芽球性白血病から生じる。更なる典型的な骨髄疾患は、これに限定されないが、急性前骨髄細胞性白血病APML、急性骨髄性白血病AML及び慢性骨髄性白血病CMLを包含しVaickusCritRevOncolHemotol1126797に概説されている;リンパ性腫瘍は、これに限定されないが、B系列ALL及びT系列ALLを包含する急性リンパ芽球性白血病ALL、慢性リンパ芽球性白血病CLL、前リンパ球性白血病PLL、毛様細胞白血病HLL及びワルデンシュトレームマクロフルブリン血症WMを包含する。悪性リンパ腫の更なる形態は、これに限定されないが、非ホジキンリンパ腫及びその異型、末梢T細胞リンパ腫、成人T細胞白血病/リンパ腫ATL、皮膚T細胞リンパ腫CTCL、大型顆粒球リンパ球白血病LGF、ホジキン病、並びにリードシュテンベルグ病を包含する。乳腺の細胞増殖及び/又は分化疾患の例は、これに限定されないが、例えば、上皮過形成、硬化性腺症、及び小管乳頭腫を包含する、増殖性乳腺疾患;腫瘍、例えば、線維腺腫、葉状腫瘍、及び肉腫のような間質性腫瘍、並びに大管乳頭腫のような上皮腫瘍;非浸潤性乳管癌パージェット病を含む及び非浸潤性小葉癌を包含する非浸潤性腫瘍、並びに、これに限定されないが、浸潤性乳管癌、浸潤性小葉癌、髄様癌、膠様粘液性癌、管状腺癌、及び浸潤性乳頭癌を包含する浸潤性腫瘍を含んでいる乳腺の腫瘍、並びに混合型悪性腫瘍を包含する。男性乳腺の疾患は、これに限定されないが、女性化乳房及び腫瘍を包含する。肺の細胞増殖及び/又は分化疾患の例は、これに限定されないが、腫瘍随伴性症候群、細気管支肺胞腫瘍、及び気管支カルチノイドのような神経内分泌腫瘍、混合型腫瘍、及び転移性腫瘍を包含する気管支癌;炎症性胸水、非炎症性胸水、気胸、並びに単発性線維性腫瘍胸膜線維腫及び悪性中皮腫を包含する胸膜癌を包んでいる胸膜の病変を包含する。結腸の細胞増殖及び/又は分化疾患の例は、これに限定されないが、非腫瘍性ポリープ、腺腫、家族性症候群、結腸直腸発癌、結腸直腸腫瘍、及びカルチノイド腫瘍を包含する。肝臓の細胞増殖及び/又は分化疾患の例は、これに限定されないが、結節性過形成、腺腫、並びに肝臓の原発性癌及び転移性腫瘍を含む悪性腫瘍を包含する。卵巣の細胞増殖及び/又は分化疾患の例は、これに限定されないが、体腔上皮の腫瘍、漿液腫瘍、粘液性腫瘍、内膜性腫瘍、透明細胞腺癌、嚢胞腺線維腫、ブレンナー腫瘍、表面上皮腫瘍のような卵巣癌;成熟良性奇形腫、単胚葉性奇形腫、未成熟悪性奇形腫、未分化胚細胞腫、卵胞嚢腫瘍、絨毛腫瘍のような生殖細胞腫瘍;顆粒膜-卵胞膜細胞腫瘍、卵胞膜線維腫、セルトリ間質細胞腫瘍アンドロブラストーマ、門細胞腫瘍hillcelltumors、及び性腺芽細胞腫のような性索間質腫瘍;及びクルケンベルグ腫瘍のような転移性腫瘍を包含する。癌を発症する危険性のある対象及び/又は癌を有している対象を同定する方法は、当該技術分野で公知である。例えば、癌を発症する危険性のある対象例えば、癌を発症する見込みが増大している対象を同定する方法は当該技術分野で公知である例えば、米国特許第7,611,870号及びJieLietalNatureIdentificationofhighqualitycancerprognosticmarkersandmetastasisnetworkmodulesを参照されたい。癌を有している患者を同定する方法も当該技術分野で公知であって、自己評価、臨床評価身体検査及び生検を含む、検査室分析例えば、バイオマーカー分析、パパニコロー検査パップスメア、及び画像化方法例えば、マンモグラフィー、MRI、PET及び/又はCTスキャン及び血管造影を含む。ある実施態様では、本明細書に開示されているp53-HMDXバイオマーカを癌例えば、HDMX調節剤による治療に感受性がある癌を有している対象の同定に用いる。本明細書で用いられているように、p53活性は、これに限定されないが、例えば、p53転写活性これは、例えば、p53の標的、例えばp53転写標的の、転写、mRNAレベル、タンパク質レベルをモニタリングすることによって評価できるを包含できる。適切なp53転写標的は当該技術分野で公知であって、これに限定されないが、例えば、SFN、GADD45A、CRYZ、S100A2、BTG2、ODC1、TP53I3、TGFA、PCBP4、PLK2、CDC25C、CCNG1、IER3、TAP1、CDKN1A、EEF1A1、THBS2、ANLN、IGFBP3、EGFR、HGF、SERPINE1、MET、NOS3、TNFRSF10B、SCARA3、RRM2B、GML、DKK1、FAS、SCD、LRDD、CTSD、CD82、HSPA8、P53AIP1、SLC38A2、MDM2、HDM2、RB1、BDKRB2、MMP2、CX3CL1、SERPINB4、GDF15、BBC3、BAX、PCNA、TRPM2、及びP2RXL1及び/又はp53機能活性例えば、p53タンパク質-相互作用に基づく機能、例えば、細胞死例えば、壊死及びアポトーシス、及び細胞周期停止を包含する。p53活性は、p53転写、mRNA、又はタンパク質レベルを確認することによっても評価できる。これらの例示的な方法のそれぞれを実施する方法は当該技術分野において周知である。キット本明細書に記載されている化合物及び医薬組成物はキットで提供することができる。例えば、キットは、組成物及び癌を有する対象のためにオーダーメイドの治療方法を開発する方法を包含できる。ある実施態様では、これらのキットは、HDMXとの複合体中のp53のバイオマーカー例えば、複合体及び/又はp53若しくはHDMXを免疫沈降するために必要な成分と特異的に結合して、免疫ブロッティングでp53若しくはHDMXを検出する抗体を検出するための組成物を包含できる例えば、キットは、p53を免疫沈降させる第1抗体例えば、抗p53抗体及び免疫ブロッティングでHDMXを検出する第2抗体例えば、抗HDMX抗体を包含できる;又はキットはHDMXを免疫沈降する第1抗体例えば、抗HDMX抗体及び免疫ブロッティングで検出する第2抗体例えば、抗p53抗体を提供できる。ある実施態様では、キットは更に、11つ又はそれ以上のHDMX調節剤例えば、SAH-p53-8;及び/又は21つ又はそれ以上のHDM2調節剤例えば、Nutlin-3;及び/又は3p53の発現及び/又は活性を誘発する1つ又はそれ以上の組成物及び/又は方法を包含し、1~3の何れかの組合わせ、例えば、1と2及び/又は3の何れかの組合わせ例えば、1と2、1と3、及び1と2と3を包含している、対象に投与するための医薬組成物を含んでいる、組成物を更に包含できる。このような場合は、対象に投与するための組成物は対象に対してオーダーメイドすることができる。或いは、対象に投与する組成物はオーダーメイドされない。ある実施態様では、オーダーメイド治療方法を開発するための組成物及び方法と、対象に投与するための組成物は別々に独立したキットで提供される。キットは、組成物及び組成物を用いる方法に関する情報資料も包含できる。情報資料は、本明細書に記載されている方法及び/又は本明細書に記載されている方法についての薬剤の使用に関する、記述的、取扱い説明、販促又はその他の資料であってよい。例えば、情報資料は、癌を有しているか、又は発症の危険性がある対象を治療するための化合物の使用に関連している。キットは、1つ又はそれ以上の化合物を細胞培地中又はインビボに投与するための及び/又は細胞を患者に投与するための、そして本明細書に記載されている方法の何れかの組合わせのための用具一式も包含できる。一実施態様では、情報資料は、ヒトを治療するために医薬組成物及び/又は細胞複数を含むを適切な方法で、例えば、適切な用量、剤形又は投与方法で例えば、本明細書に記載されている用量、剤形又は投与方法で投与するための使用説明書を包含できる。別の実施態様では、情報資料は、医薬組成物を適切な対象、例えば、ヒト、例えば、癌を有しているか、又は発症の危険性のあるヒトに投与するための使用説明書を包含できる。キットの情報資料はその形態に制限はない。多くの場合、情報資料例えば、使用説明書は、活字、図面、及び/又は写真のような印刷物で、ラベル又は印刷紙で、提供される。しかしながら、情報資料は、点字、コンピュータ読み込み可能な物質、録画、又は録音のような、別の形式で提供されてもよい。勿論、情報資料は形式の何れかの組合わせで提供されてもよい。化合物に加えて、キットの組成物は、溶媒又は緩衝液、安定化剤、保存剤及び/又は本明細書に記載されている病気又は疾患を治療するための第2の薬剤のような、その他の成分を包含できる。或いは、その他の成分をキットに包含してよいが、化合物とは異なった組成物又は容器中に包含してもよい。このような実施態様では、キットは、薬剤と他の成分を混合するための、又は1つ又はそれ以上の化合物をその他の成分と共に用いるための使用説明書を包含してもよい。キットは、医薬組成物のために1つ又はそれ以上の容器を包含できる。ある実施態様では、キットは組成物と情報資料を分ける容器、仕切り又は区画を収容できる。例えば、組成物はボトル、バイアル、又は注射器に収容することができ、そして情報資料はプラスチックの管又はパケット内に収容できる。別の実施態様では、キットの別々の構成要素を1つの分かれていない容器に収容できる。例えば、情報資料をラベル形態で付着させているボトル、バイアル又は注射器内に組成物を収容できる。ある実施態様では、キットは、それぞれが医薬組成物の単回投与剤形例えば、本明細書に記載されている剤形の1つ又はそれ以上を収容している複数の別々の容器例えば、パックを含んでいる。例えば、キットは、それぞれが医薬組成物の単回用量を収容している、複数の注射器、アンプル、ホイルパケット、又はブリスターパックを含むことができる。キットの容器は気密及び/又は防水性にすることができて、容器は特定用途用のラベルを貼ることができる。例えば、容器に聴覚障害を療するために用いるとラベル付けすることができる。上記のように、キットは、組成物の投与に適した器具例えば、注射器、ピペット、鉗子、スポイト、綿棒、又は何れかのそのような送達器具を任意に包含している。本発明を以下の実施例で更に記載する。これは特許請求の範囲に記載されている本発明の範囲を限定しない。実施例1:ステープル状に架橋されたp53ペプチドの設計、合成、及び特徴づけSAH-p53化合物を設計するために、合成オレフィン誘導体を、HDM2との結合に必須の残基を回避する位置に置いた。i、i7位に架かる炭化水素によるステープル状の架橋を、図1Aに示すように、オレフィンメタセシスで作成した。ペプチド合成、オレフィンメタセシス、FITC誘導体化、逆相HPLC精製、及びアミノ酸分析を、既に報告されているように実施した。より詳細には、図1BにSAH-p53-8と示される、SAH-58-8の配列は、これも図1BにWTp5314-29と示される、野生型p53転写促進ドメインアミノ酸配列配列番号1のアミノ酸14~29の改変からもたらされた。すなわち、S20とP27位にあるアミノ酸を合成オレフィン残基に置換した。次いで、構造補強炭化水素によるステープル状の架橋をBirdetalに記載されている方法に従って、オレフィンメタセシスにより作成した。この方法は参照により本明細書に取り込まれていて、図1Dに説明されている。HDM2相互作用に必要ではない追加の残基もペプチドの溶解性及び取り込みを改善するためにBernaletalに記載されるようにして改変した。SAH-p58-8及びSAH-p53-8の設計及び合成に用いた方法はBernaletalに記載されていて、この開示は参照により本明細書に取り込まれている。コントロールペプチドであるSAH-p53-8F19を、SAH-p53-8のアミノ酸F19HDM2相互作用に対する必須アミノ酸BottgeretalJMolBiol269744756をアラニンで置換して作成した。SAH-p53-8F19は、本明細書に記載されている生物学的実験に対するネガティブコントロールとして働く。これら及びその他のステープル状に架橋されたp53ペプチドの配列及びその他の特性は図1Cに示されている。これらのペプチドの特性を評価した。より詳細には、全てが炭化水素のi、i7のステープル状の架橋の導入の構造的な効果を評価するために、円偏光二色性CD実験を行ってα螺旋性を確認した。図1Cに示すように、野生型p53ペプチドがpH7.0の水中で11のα螺旋含量を示したのに対して、SAH-p53-1~4は10~59のα螺旋性を示した。SAH-p53-4はタンパク分解安定性の向上も示した。また図1Cに示すように、SAH-p53化合物は無傷JurkatT細胞に浸透できなかったのに対して、SAH-p53-5~8は細胞に浸透して生理的なpHで正に帯電した。従って、この正荷電は、細胞に浸透するペプチドの特性、又は要件であるかもしれない。SAH-p53-5~8は、アスパラギン酸とグルタミン酸をアスパラギンとグルタミンで置き換えてペプチドの電荷を調節し、そしてp53の核外輸送L14Q及び潜在的なユビキチン化K24Rに関与すると既に報告されている選択アミノ酸を変異させた。これらの改変により、α螺旋含量の2~8.5倍の増大を示し、HDM2に対する高い結合親和性を保持し、そしてFACS及び共焦点顕微鏡によって時間及び温度依存性の細胞取り込みを明らかにしたステープル状に架橋されたペプチドがもたらされた。SAH-53ペプチドに曝露したRKO又はSJSA-1癌細胞を用いる細胞生存能アッセイにより、核外輸送及びユビキチン化部位の両方に点突然変異を含んでいる、SAH-p53-8が構造的に安定で細胞浸透性で、そして細胞死を促進することが示された。実施例2:SAH-p53-8はHDMX及びHDM2と結合するSAH-p53-8のHDMXとの相互作用を、全長HDMX及びFITCで標識化したステープル状に架橋されたペプチド、WT-p5314-29、SAH-p53-8、並びにSAH-p53-8F19Aを用いる蛍光偏光を用いて評価した。先に報告されているBernaletalJAmChemSoc12924562457ようにして組み換えHDM2を作成した。組み換えHDMXを作成するために、N-末端チオレドキシン、S、及びヘキサヒスチジンタグを有する全長HDMXをコードするプラスミド、及び組み換えTEVプロテアーゼ開裂部位pET32-LICベクター、Novagenを含有している大腸菌BL21DE3pLysSを、アンピシリン及びクロラムフェニコールを含有しているLuria-Bertani培地中でインキュベートして、0.1mMのイソプロピルβ-D-チオガラクトシドで誘発した。6時間後に3200rpmで20分間遠心分離して細胞を採取し、緩衝液A20mMTris、pH8.0、0.5MのNaCLに懸濁して、超音波で溶解した。15,000rpmで30分間遠心分離して細胞残屑をペレット化して、上澄液をNi-NTAアガロースQuiagenと2時間培養した。樹脂を緩衝液Aで洗浄して5mM~500mM範囲のイミダゾールの濃度勾配で溶出した。溶出したタンパク質を含有している画分を濃縮して組み換えTEVS219VプロテアーゼKapustetalProteinEng149931000で1晩4°Cで処理した。反応液を2mLまで濃縮してG200カラムを用いるサイズ排除クロマトグラフィーで精製した。タンパク質の純度をSDS-PAGEによって評価して、その同一性をMALDI-TOF質量分析により確認した。先に記載されているBernaletalJAmChemSoc12924562457PitteretalMethodsEnzymol446387408ようにしてFPアッセイを実施した。すなわち、ペプチド-タンパク質相互作用の解離定数を、蛍光標識化ペプチド25nMを全長HDMX又はHDM17-12525pM~100nMと培養して測定した。次いで、平衡状態で蛍光偏光をSpectraMaxM5マイクロプレートリーダーMolecularDevices上で測定した。図2Aに示したように、FITC-SAH-p53-8はHDMXに対して強い親和性KD=2.3±0.2nMを示した。このSAH-p53-8の親和性はHDM2に対するSAH-p53-8の親和性Bernaletalによって以前に報告された、KD=55±11nMを上回った。その一方、図2Aに示されるように、WT-p5314-29及びSAH-p53-8F19Aは同じ用量範囲でHDMXとの相互作用を示さなかった。アセチルで覆われているSAH-p53-8のFITC-SAH-p53-8のHDM2及びHDMXとの高親和性複合体を破壊する能力を試験するために競合結合アッセイも実施した。FPアッセイは、FITC-ペプチド25nMをNutlin-3EMDChemicals又は標識化していないSAH-p53-8の連続希釈と組合せたのちHDM2又はHDMXタンパク質100nMを添加すること以外は、実質的に上記のようにしてFPアッセイを行った。FITC-ペプチド置換に対するIC50値は、PrismソフトウェアGraphPadを用いる非線形回帰分析で計算した。図2Bに示したように、SAH-p53-8と選択的HDM2阻害剤Nutlin-3の両方は、HDM2結合に対してFITC-SAH-p53-8と効果的に競合した小分子と比べて比較的大きなステープル状に架橋されたペプチドの相互作用面が、ある程度、このアッセイで何故SAH-p53-8がNutlin-3より有効であるかを説明するだろう。その一方、図2Cに示したように、SAH-p53-8だけがFITC-SAH-p53-8/HDMX相互作用を断ち切ることができた。これらのデータにより、SAH-p53-8はインビトロでHDM2及びHDMXの両方を標的にして、そしてHDM2に対するよりもHDMXに対して25倍強い結合を示すことが明らかにされる。実施例3:SAH-p53-8は細胞内HDMX及びHDM2と結合するSAH-p53-8の細胞内HDM2及びHDMXを標的にする能力を、HDMXも過剰発現するように遺伝子を組み換えたHDM2を過剰発現する骨肉腫細胞株である、SJSA-X細胞WadeetalCellCycle719731982において免疫沈降実験を行って評価した。すなわち、抗FITC破壊実験を以前に記載されたPitteretalMethodsEnzymol446387408WalenskyetalMolCell24199210ようにして、以下のように実施した。細胞1.5×106をFITC-SAH-p53ペプチド15μMで処理して緩衝液B0.1のトリトンX-100、50mMのTris、pH7.4、150mMのNaCl、1mMのPMSF、EDTAを含まないプロテアーゼ阻害剤錠Roche、及び20単位/mLのベンゾナーゼヌクレアーゼEMDChemicalsに溶解した。タンパク質をヤギ抗FITC抗体AbCamと共免疫沈降して、電気泳動タンパク質のウェスタン分析をマウス抗HDM2IF2EMDChemicals、ウサギ抗HDMXBL1258BethylLaboratories、及びβ-アクチンSigma抗体を用いて実施した。Typhoon8600ImagingSystemを用いてブロットの蛍光画像化を実施した。細胞を、賦形剤、FITC-SAH-p53-8、又はFITC-SAH-p53-8F19Aで12時間処理した。細胞溶解物中にFITC-SAH-p53-8及びFITC-SAH-p53-8F19Aの存在を確認するためにウェスタンブロッティングを用い、両方のSAH-p53ペプチドが無傷SJSA-X細胞に有効に透過することを確認した。次いで、細胞を溶解して、抗FITC破壊を実施した後HDM2及びHDMXウェスタン分析を実施した。図3に示したように、天然のHDM2及びHDMXはFITC-SAH-p53-8と特異的に共免疫沈降したが、FITC-SAH-p53F19Aとは共免疫沈降しなかった。これらのデータは、SAH-p53-8が細胞内のHDM2及びHDMX標的の両方にアクセスできることを明らかにしてインビトロの知見を拡張する。実施例4:SAH-p53-8はHDMX、HDM2、又はHDMXとHDM2の両方を過剰発現する癌細胞に対して細胞傷害性を示す細胞生存能に対するSAH-p53-8処置の影響を、異なったレベルのHDM2及び/又はHDMXを発現する固形腫瘍細胞のパネルを処置して評価した。使用のために選択した細胞は、HDM2及び/又はHDMXのレベルをp53の機能を減少する程度まで変えられる何種類かの癌を示す。例えば、用いた細胞株は、機能的HDM2が過剰発現されるがHDMXが存在していないSJSA-1を参照されたい;HDM2は存在していないが機能的HDMXが過剰発現しているJEG-3を参照されたい;機能的HDM2及び機能的HDMXが両方過剰発現されているSJSA-Xを参照されたい;そしてHDM2とHDMXが発現されているMCF-7を参照されたいヒト癌を表わす。細胞株は、野生型p53を発現するものも包含した。用いた細胞株は以下のものを包含した。SJSA-1、HDMXを発現しないHDM2過剰発現骨肉腫すなわち、HDM2/HDMX-細胞株;HDM2とHDMXの両方を過剰発現する組み換えSJSA-X誘導体すなわち、HDM2/HDMX細胞株;HDM2を発現しない、HDMX過剰発現絨毛癌細胞株JEG-3すなわち、HDM2-/HDMX細胞株;及びHDM2を発現してHDMXを発現する乳癌及び結腸癌細胞株MCF-7及びHCT116すなわち、HDM2/HDMX細胞株Bunzetal1999Chenetal2007Drukteinisetal2005Kwoketal1994Wadeetal2008Xiaetal2008を参照されたい。本明細書に開示されている治療戦略におけるp53の重要性を評価するための、ドミナントネガティブp53-DDタンパク質を発現するSJSA-DD細胞ShaulianetalMolCellBiol1255815592及びWadeetalCellCycle719731982、p53が欠けているHCT116細胞BunzetalJClinInvest104263269、及びR273Hp53突然変異を有するA431メラノーマ細胞KwoketalCancerRes5428342836。最後に、WSI正常ヒト線維芽細胞を試験して、腫瘍細胞対非形質転換細胞における相対毒性を評価した。これらの細胞株の使用により、癌細胞中のHDM2又はHDMX或いはその両方を標的とする治療戦略の有効性又は効力の分析が可能になる。培養した細胞をウシ胎仔血清及びペニシリン/ストレプトマイシンを補完した適切な培地中で保持したSJSA-1、SJSA-X、SJSA-DD、A431DMEM;JEG-3、MCF-7、WS1EMEM;HCT116McCoy’s5A。生存能分析のために、1×104個の細胞を1晩96ウェルのプレートに播種し、PBS中で洗浄し、次いでOPTI-MEM登録商標中で24時間示した用量でステープル状に架橋されたp53ペプチド、Nutlin-3EMDChemicals、又はその両方とインキュベートした。生存能を、CellTiter-Glo登録商標化学発光試薬を加えて製造会社Promegaのプロトコルに従ってアッセイした。SpectramaxM5マイクロプレートリーダーMolecularDevicesを用いて発光を測定した。データを賦形剤で処置したコントロールと正規化して、SAH-p53-8とNutlin-3の間の適切な相乗効果を、CalcusynソフトウェアパッケージChou2006BiosoftCambridgeUKを用いて計算した。全ての生存能アッセイを少なくとも3回繰返し実施した。上記のように、培養した細胞を、Nutlin-3、SAH-p53-8、又はSAH-53-8F19A点突然変異コントロールの連続希釈で処置した。図4Aに示したように、SJSA-1細胞はNutlin-3による処置に対して非常に感受性があったのに対して、SJSA-X及びJEG-3細胞はNutlin-3に対して全くか殆ど反応を示さなかったそれぞれ、図4B及び4Cを参照されたい。つまり、Nutlin-3は機能的HDM2を発現するがHDMXを発現しない細胞すなわち、SJSA-1の細胞生存能を減少する;しかしながら、Nutlin-3は、HDM2を発現しないがHDMXを発現する細胞すなわち、JEG-3に有効ではく、そしてNutlin-3の有効性はHDM2とHDMXの両方を発現する細胞すなわち、SJSA-Xで減少する。これらの観察はNutlin-3がHDM2を標的にするがHDMXを標的にしないという能力と一致する。図4D及び4Eに示したように、HDM2とHDMXを発現するが、何れのタンパク質も過剰に発現しない、MCF-7及びHCT116細胞もNutlin-3処置に対して多少は感受性があり、これらの細胞におけるHDM2とHDMXの同時発現と一致する。従って、これらのデータにより、HDM2が過剰発現又は発現されるとき、Nutlin-3は細胞生存能を減少させるが、単独で用いたときのNutlin-3の有効性は、HDMXも過剰に発現している細胞においては減少することが明らかにされる。対照的に、図4A~4Eに示したように、SAH-p53-8は、5つの細胞株全てにおいて細胞生存能の用量依存的な阻害をもたらした。この観察は、細胞が上昇した又は正常のレベルでHDM2、HDMX、又は両方のタンパク質を発現するときに、SAH-p53-8はp53経路を再活性化できるということを裏付けている。注目すべきは、図2Bに示したように、インビトロでのNutlin-3と比べて、p53のトランス活性化螺旋をHDM2から移動するSAH-p53-8の能力は相対的に増大したにも関わらず、Nutlin-3はSJSA-細胞においてSAH-p53-8より細胞傷害性であることである図4Aを参照されたい。この明確な食い違いは恐らく1SAH-p53-8のHDM2と比べて優先的なHDMX結合活性によって、HDM2標的化に利用可能なSAH-p53-8の有効濃度が低下すること、及び2ステープル状に架橋されているペプチドに関する細胞取り込みメカニズムすなわち、飲食細胞作用BernaletalJAmChemSoc12924562457WalenskyetalScience30514661470及び小分子すなわち、拡散の潜在的に異なる効率、に由来しているようだ。SAH-p53-8のHDM2よりもHDMXとの結合優先性を明らかにしている図2Aを参照されたい、本明細書に示したインビトロ結合データと一致して、SJSA-X細胞はSJSA-1細胞よりもSAH-p53-8に影響を受けやすかった図4A及び4Bを参照されたい。更に、HDMXを過剰に発現するJEG-3細胞はSAH-p53-8に対して最も感受性があったが、Nutlin-3に対して最も耐性があった図4Cを参照されたい。この知見を以下のメカニズム分析で検討する。SAH-p53-8の細胞傷害性は、野生型p53タンパク質の活性に特異的に依存していて、正常な線維芽細胞の生存能に有意に影響しないことが確認された図4Iを参照されたい。HCT116細胞からのp53の遺伝子欠失又はSJSA-1細胞におけるp53のドミナントネガティブ形態の過剰発現は、両方の細胞型をNutlin-3及びSAH-p53-8に対して完全に非感受性にする図4F及び4Gを参照されたい。図4Hに示したように、不活性化されているp53の点突然変異を有している、A431メラノーマ細胞株は、同様に治療による効果がなかった。上記のように、SAH-p53-8は、Nutlin-3と同様に、正常ヒト線維芽細胞の生存能に対して影響を与えないことが明らかになった図4Iを参照されたい。特異性を更に測定すると、突然変異ペプチドSAH-p53-8F19Aは試験した細胞株全てにおいて不活性であることが観察された図4A~4Iを参照されたい。これらのデータはさらに、SAH-p53-8の抗腫瘍細胞活性がペプチド配列依存性であって、そのHDM2及びHDMXの細胞内標的化に由来していることを示している。実施例5:SAH-p53-8は、HDMXが介在するp53の隔離を阻止してp53の腫瘍抑制経路を再活性化する免疫沈降の検討Nutlin-3耐性細胞におけるSAH-p53-8の薬理学的効果がHDMX標的化に由来しているのか否かを確認するために、JEG-3細胞株HDM2-/HDMX細胞株において免疫沈降の検討を実施した。HDMX免疫沈降実験のために、細胞1.5×106個を指示された用量のSAH-p53-8単独又はNutlin-3EMDChemicals単独のいずれかと、0.5mLのOPTI-MEM登録商標、Invitrogen中、10μMのMG-132を用いて又は用いないで6時間培養したこと以外は、実施例3に記載したようにして、細胞培養及び免疫沈降を実施した。PBS2×1mLで洗浄した後、細胞を細胞緩衝液Bに溶解した。HDMXは、抗HDMX抗体BL1258BethylLaboratoriesと免疫沈降して、p53DO1EMDChemicals又はFL393SantaCruzBiotechnology、HDMXMDMX82Abcam及びHAUSP抗-USP7、BethylLabs、並びにWesternLightning化学発光試薬を用いて、電気泳動されたタンパク質のウェスタン分析を行った。賦形剤、SAH-p53-8、又はNutlin-3で6時間処置した後、細胞抽出物を調製して抗HDMX破壊に付し、続いてp53ウエスタン分析を行った。図5に示したように、JEG-3は、しっかりとしたレベルのp53タンパク質を有していることが分かり、HDMXと共免疫沈降した図5Aを参照されたい。SAH-p53-8又はNutlin-3の何れかで処置すると、p53レベルの増大が観察された図4Aのインプットを参照されたいが、SAH-p53-8処置のみがJEG-3細胞の生存能に影響を与えた。SAH-p53-8処置がHDMXが介在するp53の隔離を、特にp53レベルがHDM2阻害によって更に促進されているときに、阻害するか否かを試験するためにHMDXIPを用いた。図5AIP:HDMXに示したように、SAH-p53-8は、p53-HDMX複合体の形成を効果的に阻害し、HDMXによって少量のp53が免疫沈降した。対照的に、p53-HMDX複合体は、Nutlin-3で処置した細胞内に、増加はしなかったが、保存された図5AIP:HDMXを参照されたい。図5Bに示したように、p53レベルはプロテアソーム阻害剤MG-132で細胞を処理することによって更に安定化された。更に、沈降したHDMX-p53複合体の増大によって明らかにされたこの安定性の増大は、SAH-p53-8での処理により用量依存的に減少した図5Bを参照されたい。SAH-p53-8が細胞状況においてp53/HDMX相互作用を妨害することを立証するために、近接ライゲーションinsitu分析proximityligationinsituassay、すなわちP-LISAを用いて、細胞におけるp53-HDMX複合体形成及び薬理学的解離を直接観察したSoderbergetal2006図5C~E。ドキシサイクリン誘導性HA-HDMX構築物を含有しているU2OS骨肉腫細胞Wangetal2007をSAH-p53-8、Nutlin-3、又は両方の存在下又は非存在下に、ドキシサイクリンで処理した。ドキシサイクリンのみの存在下で、HA-HDMXは内因性p53への結合を生じ、検出可能であるが低強度のPLISA病巣の形成をもたらした図5D、5E。ドキシサイクリンとNutlin-3処置の組み合わせにより強いP-LISAシグナルが生じ、これはp53/HA-HDMX複合体の十分な形成を表わしている図5D、5E。SAH-p53-8又はNutlin-3の単剤に対する応答において同様なレベルのp53が誘導された図5Cにもかかわらず、ドキシサイクリンでの処置によって生じたP-LISAシグナルはSAH-p53-8との併用処置によって阻害された図5D、5E。さらに、SAH-p53-8をドキシサイクリン/Nutlin-3と組合わせると、ドキシサイクリン/Nutlin-3の組合わせ単独により生じたP-LISAシグナルを有意に減少した図5D、5E。まとめると、これらのデータは、Nutlin-3ではなく、SAH-p53-8が、細胞内HDMXを標的にするその能力に起因して、p53-HMDX複合体の形成を阻害することを裏付けている。定量的PCR及びアポトーシスの検討SAH-p53-8によるp53-HMDXタンパク質複合体の薬理学的破壊を、p53腫瘍抑制経路の再活性化と関連付けるために、p53転写活性を、qPCR分析を用いてp53標的の転写活性を評価して、間接的に分析した。p53活性も、アポトーシス活性を用いて間接的に、又はカスパーゼ-3/7活性化アッセイを用いてアポトーシスを測定してより特異的に評価した。qPCRの検討を以下のように実施した。JEG-3細胞7.5×106個を6ウェルのプレートに播種して、賦形剤、又は20μMのSAH-p53-8若しくはNutlin-3EMDChemicalsで処置し、そして37°Cで6時間インキュベートした。RNEasyMiniキットQuiagenを用いてRNA試料を作成した。SuperscriptIII逆転写酵素Invitrogenを用いて全てのRNAをcDNAに逆転写した。誘導されたcDNAを、SYBRGreenPCRMasterMixAppliedBiosystemsを用いるPRISM7700システム上でのqRT-PCRによる相対転写レベルを測定するための基質として使用した。HDM2、p21、MIC-1及びUBBコントロールに特異的なプライマーを使用した。96ウェルの光学PCRプレート中で反応を3回繰返し行った。繰返し試験のそれぞれについて閾値サイクルCt値を自動的に計算して、処置及び未処置試料の両方についてUBBと比較した関心のある遺伝子の相対発現を、2-△△Ct法LivakandSchmittgenMethods25402408によって測定するために用いた。JEG-3細胞を賦形剤、Nutlin-320μM、又はSAH-p53-820μMで6時間37°Cで処置した後、RNAを単離し、逆転写して、HDM2、p21、及びMIC-1プライマーを用いて、誘導されたcDNA基質のqPCR分析を行った。図6Aに示したように、Nutlin-3は賦形剤に比べてp53転写標的の小幅な1.5~4倍の上方調節を誘発したのに対して、SAH-p53-8は同じ標的遺伝子に対して有意に高い5~14倍のmRNAレベルを誘発した。アポトーシスの検討を以下のように実施した。JEG-3細胞1x104を96ウェルのプレートに1晩播種し、PBS中で洗浄し、次いで指定した用量のSAH-p53-8又はNutlin-3EMDChemicalsとOPTI-MEM登録商標中で12時間インキュベートした。カスパーゼ-3/7-Glo登録商標化学発光試薬を製造会社Promegaのプロトコルに従って添加し、SpectramaxM5マイクロプレートリーダーMoleculrDevicesを用いて発光を測定してカスパーゼ-3/7活性をアッセイした。図6Bに示したように、SAH-p53-8処置は、カスパーゼ-3/7の用量反応性の活性を引き起こしたのに対して、Nutlin-3は殆ど効果がなかった。従って、Nutlin-3耐性JEG-3細胞におけるSAH-p53-8によるp53-HDMX複合体の標的とする破壊は、p53転写標的の上方調節、カスパーゼ-3/7活性化、及び腫瘍細胞生存能の減少と一致して起きる。実施例6:インビボにおけるp53経路の再活性化によるJEG-3腫瘍生育の抑制SAH-p53-8がインビボでp53経路を調節してそれにより腫瘍の生育を阻害できるのか否かを確認するために、賦形剤、Nutlin-3、及びSAH-p53-8の活性をJEG-3ネズミ移植モデルで比較した。すなわち、NOD-SCID-IL2RγnullNSGマウスJacksonLabsの脇腹内に107個の細胞を皮下注射して、JEG-3移植を確立した。腫瘍が平均容量100mm3に達したときに、実験群n=7を、賦形剤D5W中5のDMSO、SAH-p53-810mg/kg又はNutlin-310mg/kgEMDChemicalsを1日1回4日間静脈内投与して処置した。1、3、4及び5日目に腫瘍サイズをノギスで測定した。5日目にマウスを安楽死させ、腫瘍を切除し、各腫瘍の一部を急速冷凍して、上記のように、qRTPCR分析のためにRNAを単離した。各動物の残り部分をブアン固定液中で固定して、完全に解剖するために、theDanaFarberHarvardCancerCenterRodentHistopathologyCoreに提出した。動物実験は、InstitutionalAnimalCareandUseCommitteeoftheDanaFarberCancerInstituteに承認され、且つ規定されるガイダンス及び規制に従って実施した。図7Aに示したたように、腫瘍生育速度はNutlin-3処置による影響を受けなかったが、SAH-p53-8は、5日間の評価期間を通して賦形剤及びNutlin-3と比べて全身腫瘍組織量の37~46の低減を達成及び保持して、腫瘍生育を有意に抑制した。5日目に腫瘍を切除し、急速冷凍して、HDM2、p21、及びMIC-1プライマーセットを用いるqPCR分析のためにRNAを抽出した。培養したJEG-3細胞を用いて実施した対応するインビトロでの検討と同様に、SAH-p53-8は処置したマウスの腫瘍においてHDM2、p21、及びMIC-1の統計的に有意な転写活性を誘発した図7Bを参照されたい。SAH-p53-8で処理したマウスの組織学的検査では、培養WS1線維芽細胞を用いる細胞生存能アッセイにおけるSAH-p53-8の不活性と一致して、正常組織に対する化合物の明確な毒性は示されなかった図4I。これらのインビボデータは、HDMXが介在するp53の抑制及びNutlin-3耐性に関連して、p53経路を再活性化することにより腫瘍生育を機能的に抑制することを標的にするHDMXの薬理学的潜在力を強調するものである。実施例7:HDM2、HDMX、又は二重機能阻害剤を感受性癌細胞に適合させるための計画基礎p53レベルが自然に上昇したとき、SAH-p53-8によるHDMXの標的化が腫瘍細胞の生存能の減少に最も効果的であったので、SAH-p53-8が介在するHDMXの阻害が細胞をNutlin-3が介在するp53を上方調節するように再感作できるか否かを試験するためにNutlin-3耐性細胞において相乗効果試験を実施した。高いHDMXを有している細胞において、Nutlin-3での処置によって誘発されるp53のプールを、p53-HDMX複合体中に隔離して、Nutlin-3活性を妨害することができる。従って、そのような細胞におけるSAH-p53-8によるHDMXの阻止は、HDMXが介在するp53の隔離を妨害してNutlin-3の活性を回復させることができると仮定した。乳腺腺癌細胞株MCF-7は、HDMXを過剰発現しDanovietalMolCellBiol2458355843、そしてNutlin-3の処置に対して僅かに感受性があるだけであるWadeetalCellCycle719731982。図8に示したように、MCF-7細胞においてNutlin-3はp53レベルを上昇させることができるが、このp53の上昇はNutlin-3の細胞傷害性を制限する、阻害性p53-HMDX複合体の出現と同時に起きる。しかしながら、本明細書に示したように、Nutlin-3を用いることによって、MCF-7細胞は、HDMXとの複合体におけるp53の量の増大を明らかに示すJEG-3様状態に薬学的に変換される図9~10を参照されたい。より具体的には、組み合わせると、SAH-p53-8とNutlin-3は用量反応性の方法で互いに感作する図9A~9Bを参照されたい。図10Aに示したように、Chouに記載されるCalcuSyn用量効果分析を用いて相乗効果が確認された。SAH-p53-8との併用処置において観察された細胞傷害性の増大は図9Aに示したそのp53-HMDX複合体形成の阻害と相関していて、MCF-7細胞における耐性の主要な要因であるHDMXを標的にするSAH-p53-8の更なる能力と一致している。更に、図10Bに示したように、内因性p53レベルは既に上昇しているので、Nutlin-3はJEG-3細胞においてSAH-p53-8と相乗作用しない。逆に、SJSA-1細胞のように、HDMX及びp53の発現レベルが低くて、むしろHDM2発現によって細胞表現型が操作されている場合は、SAH-p53-8との併用処置はNutlin-3に更なる利点をもたらさない図10Cを参照されたい。しかしながら、この同種細胞株へのHDMXの発現の誘導により、相乗効果の結果を完全に変化させて、Nutlin-3を単剤として効果がないものとして、SAH-p53-8に対する感受性を回復し、そしてNutlin-3をSAH-p53-8治療と組合わせることの相乗効果を再確立する図10Dを参照されたい。SAH-p53-8とNutlin-3を組合わせることによる相乗的抗腫瘍活性の更なる例がリンパ腫及びメラノーマ癌細胞についても示されている図10E~Gこれらの相乗効果分析により、癌におけるp53経路を再活性化するHDM2及びHDMX標的化剤を如何に適切に適用するかを決定するための機構的な枠組みが提供される。実際に、検出可能なp53-HDMX複合体の存在、治療効果を予測するための潜在的に価値のあるバイオマーカー、及び治療の薬力学的効果のモニタリングに反映されるように、p53レベルが自然に又は薬理学的に増大しているときに、HDMX標的化は最大に効果的である。本明細書に示したように、SAH-p53-8はインビトロ及びインビボでHDMXと高い親和性で結合する。この結合の結果として、SAH-p53-8はp53-HMDX相互作用を減少させ、それによって、例えば、インビトロ及びインビボの両方における例えば、動物モデルにおいて腫瘍細胞生存能の減少及びp53標的の転写の上方調節から明らかなように、p53経路を回復させる。本明細書に示したデータは、腫瘍細胞中のある特定のタンパク質のレベルを特徴づけることによって癌を治療するための治療戦略を開発又は改善できることをも明らかにしている。例えば、このような方法は、例えば、腫瘍細胞例えば、対象における腫瘍細胞又は対象から得た腫瘍細胞例えば、生検試料中の腫瘍細胞中の機能的p53の発現野生型p53発現及び突然変異p53が幾つかの機能例えば、細胞を本明細書に開示されている1つ又はそれ以上の処置に曝露したときに癌細胞の生存能を減少させるのに十分なp53機能を保持している限りは突然変異p53発現を包含する並びにHDMX及び/又はHDM2の発現を確認すること、を包含している。このような方法は以下により詳細に記載されている。その他の実施態様本発明はその詳細な説明と組み合わせて記載されているが、前記記載は添付した特許請求の範囲の範囲によって定義される本発明を説明することを意図していて、本発明の範囲を限定することは意図していない。その他の態様、利点、及び改変は以下の特許請求の範囲の範囲内にある。"