"式Iの化合物式中、Zは-CH2-、-CH2CH2-、-OCH2-、-CH2CH2CH2-、または-OCH2CH2-であり、R1はH、F、またはClであり、R2はH、メチル、エチル、プロピル、またはイソプロピルであるまたはその薬学的に許容可能な塩。R1がHもしくはFである、請求項1に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。R1がFである、請求項1もしくは2に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。R2がメチルもしくはエチルである、請求項1~3のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。R2がメチルである、請求項1~4のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。Zが-CH2CH2-もしくは-OCH2-である、請求項1~5のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。以下の式:を有する請求項1に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。以下の式:を有する請求項1に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。請求項1~8のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容可能な希釈剤または担体とを含む、医薬組成物。哺乳動物における腹部大動脈瘤、プラーク不安定性、アテローム性動脈硬化症、関節リウマチ、乾癬、または狼瘡を治療する方法であって、そのような治療を必要とする前記哺乳動物に、治療有効量の請求項1~8のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む、方法。哺乳動物における腹部大動脈瘤、プラーク不安定性、アテローム性動脈硬化症、関節リウマチ、乾癬、または狼瘡を治療する方法であって、そのような治療を必要とする前記哺乳動物に、治療有効量の請求項9に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。前記哺乳動物がヒトである、請求項10または11に記載の方法。治療に使用するための、請求項1~8のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。腹部大動脈瘤、プラーク不安定性、アテローム性動脈硬化症、関節リウマチ、乾癬、または狼瘡の治療に使用するための、請求項1~8のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。腹部大動脈瘤、プラーク不安定性、アテローム性動脈硬化症、関節リウマチ、乾癬、または狼瘡を治療するための医薬を製造するための、請求項1~8のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩の使用。従って、本発明は式Iの化合物:式中、Zは-CH2-、-CH2CH2-、-OCH2-、-CH2CH2CH2-、または-OCH2CH2-であり、R1は、H、FまたはClであり、R2は、H、メチル、エチル、プロピル、またはイソプロピルであるまたはその薬学的に許容可能な塩を提供する。本発明の一態様は、式Iの化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、薬学的に許容可能な希釈剤または担体とを含む医薬組成物を提供する。本発明の別の態様は、治療有効量の本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩あるいは本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物を投与することによってAAAを治療するための方法を提供する。本発明のさらなる態様は、治療有効量の本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩あるいは本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物を投与することによってヒト、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、またはサルなどの哺乳動物においてAAAを治療するための方法を提供する。本発明のさらなる態様は、大動脈直径が約3cmの正常な直径より大きいが約5cm未満であり、外科的修復または血管内修復が必要とされないヒトにおいて、治療有効量の本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩あるいは本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物を投与することによって、AAAを治療するための方法を提供する。本発明のなおさらなる態様は、大動脈直径が約5cmより大きいが、外科的修復または血管内修復が治療選択ではないヒトにおいて、治療有効量の本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩あるいは本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物を投与することによって、AAAを治療するための方法を提供する。本発明の別の態様は、治療有効量の本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩あるいは本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物を投与することによって、ヒト、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、またはサルなどの哺乳動物においてプラーク不安定性を治療するための方法を提供する。本発明のさらなる態様は、治療有効量の本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩あるいは本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物を投与することによって、ヒト、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、またはサルなどの哺乳動物においてアテローム性動脈硬化症を治療するための方法を提供する。本発明のさらに別の態様は、治療有効量の本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩あるいは本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物を投与することによって、それを必要とするヒト、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、またはサルなどの哺乳動物における自己免疫疾患を治療するための方法を提供する。本発明のさらなる態様は、治療有効量の本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩あるいは本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物を投与することによって、ヒトにおける乾癬、関節リウマチ、または狼瘡を治療するための方法を提供する。本発明のさらなる態様は、治療に使用するための化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。本発明の別の態様は、腹部大動脈瘤、プラーク不安定性、アテローム性動脈硬化症、または関節リウマチ、乾癬、および狼瘡などの自己免疫疾患の治療に使用するための化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。本発明のさらに別の態様は、腹部大動脈瘤、プラーク不安定性、アテローム性動脈硬化症、または関節リウマチ、乾癬、および狼瘡などの自己免疫疾患を治療するための医薬を製造するための化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用である。本発明の別の態様は、1つ以上の薬学的に許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤と、任意に1つ以上の他の治療剤とを組み合わせた本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物を提供する。本発明のさらに別の態様は、腹部大動脈瘤、プラーク不安定性、アテローム性動脈硬化症、関節リウマチ、乾癬、および狼瘡の治療に使用するための本発明の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。本発明のさらに別の態様は、腹部大動脈瘤、プラーク不安定性、アテローム性動脈硬化症、関節リウマチ、乾癬、および狼瘡を治療するための医薬を製造するための本発明の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。本発明の阻害化合物およびその投与を含む治療方法の実施形態は、上記のR1、R2およびZのいずれかの組み合わせを含む。具体的には、本発明の実施形態は、式Iの化合物またはその薬学的に許容可能な塩式中、R1はHまたはFであるに関する。より具体的には、本発明の実施形態は、式Iの化合物またはその薬学的に許容可能な塩式中、R1はFであるに関する。本発明の別の実施形態は、式Iの化合物またはその薬学的に許容可能な塩式中、R2はメチルまたはエチルであるである。具体的には、本発明の実施形態は、式Iの化合物またはその薬学的に許容可能な塩式中、R2はメチルであるである。本発明のさらに別の実施形態は、式Iの化合物またはその薬学的に許容可能な塩式中、Zは-CH2-、-CH2CH2-、-OCH2-、-CH2CH2CH2-、または-OCH2CH2-に関する。具体的には、本発明の実施形態は、式Iの化合物またはその薬学的に許容可能な塩式中、Zは-CH2CH2-または-OCH2-であるである。本発明のさらなる実施形態は、R1がHまたはFであり、R2がメチルまたはエチルであり、Zが-CH2CH2-または-OCH2-である組み合わせからなる。本明細書以下で例示するような本発明の好ましい化合物は以下である:[3R,4S-4-[4-フロオロベンゾイルアミノ]-6-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]クロマン-3-イル]N-メチルカルバメート、[1S,2S-1-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-7-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]テトラリン-2-イル]N-メチルカルバメート、[1S,2S-1-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-6-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]インダン-2-イル]N-メチルカルバメート、[8S,9S-9-[4-フロオロベンゾイルアミノ]-2-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]-6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-8-イル]N-メチルカルバメート、および[4S,5S-5-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-7-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]-2,3,4,5-テトラヒドロ-1-ベンゾオキセピン-4-イル]N-メチルカルバメート。本発明のより好ましい化合物は以下である:[3R,4S-4-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-6-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]クロマン-3-イル]N-メチルカルバメート、[1S,2S-1-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-7-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]テトラリン-2-イル]N-メチルカルバメート、および[8S,9S-9-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-2-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]-6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-8-イル]N-メチルカルバメート。本発明の最も好ましい化合物は以下である:[3R,4S-4-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-6-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]クロマン-3-イル]N-メチルカルバメート。上記および本発明の明細書全体を通して使用する場合、以下の用語は、他に示さない限り、以下の意味を有する。本明細書で使用する腹部大動脈瘤またはAAAという用語は、腹部大動脈の少なくとも一部のサイズが、そうでないとみなされる正常な状態のサイズを超えて引き起こされる、哺乳動物における腹部大動脈の局在化した膨張または隆起を意味する。腹部大動脈は、限定されないが、内腔径、内腔周囲、および内腔面積を含むいずれかの測定次元に関して測定でき、比較できる。測定および診断のための手段は、超音波、CTスキャン、または他の画像化技術の使用によってもよい。例えば、大動脈直径がその正常な直径より大きい、約3cmである場合、AAAはヒトに存在する。しかしながら、大動脈直径が約5cmより大きい場合、即時の外科的修復または血管内修復ステントまたは移植が、破裂および起こり得る死亡を防止する標準的な治療である。しかしながら、そのような治療が、いずれかの理由、例えば年齢に起因して実施可能でなくなるか、または選択肢にできない場合、この集団はまた、本発明を使用して治療されることができる。本明細書で使用するそれを必要とするという用語は、病態、例えばアテローム性動脈硬化症、AAA、乾癬、狼瘡または関節リウマチなどの自己免疫疾患を有するか、またはそれらと診断され、治療を必要とすることを意味する。本明細書で使用する哺乳動物という用語は、ヒトまたはイヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、もしくはサルなどの非ヒト哺乳動物を意味する。その薬学的に許容可能な塩という用語は本発明の化合物の塩を指す。それらを調製するための実施例および方法は当業者に周知である。例えば、Stahlら,HandbookofPharmaceuticalSalts:Properties,SelectionandUse,VCHA/Wiley-VCH,2002を参照のこと。治療有効量という用語は、治療を達成するための式Iの化合物または式Iの化合物を含む組成物の量または用量を指す。治療有効量は、例えば、患者の体重、身長、年齢、全体的な健康、病態の重症度、投与様式、投与レジメンなどの当業者に公知の多くの要因を考慮することによって、当業者としての担当医により容易に決定できる。本明細書で使用する治療という用語は、疾患状態の速度または進行を遅延させることを意味する。それはまた、疾患状態を中断することを含んでもよい。その用語はさらに、疾患を中断するだけでなく、既に発生しているいずれかの疾患状態もまた減少させることを含んでもよい。例えば、AAAに関して、治療という用語は、腹部大動脈瘤の膨張速度を遅延させることを意味する場合もある。それはまた、腹部大動脈瘤の膨張を停止させることを含んでもよい。さらに、それは、既に発生しているいずれかの膨張を減少させることを含んでもよい。の記号は、ページの平面から前方に突出する結合を指す。の記号は、ページの平面から後方に突出する結合を指す。Zの定義内の-OCH2-および-OCH2CH2-という用語は、酸素が縮合ベンゾ環に隣接することを意味すると理解される。本発明の化合物は好ましくは医薬組成物として製剤化される。それらを調製するための実施例および方法は当業者に周知である。例えば、Remington:TheScienceandPracticeofPharmacyA.Gennaroら,eds.19thed.,MackPublishingCo.,1995を参照のこと。式Iの化合物、またはその塩は、当業者に公知の種々の手順、ならびに以下のスキーム、調製例、および実施例に記載されている手順により調製できる。記載した経路の各々についての特定の合成工程は、式Iの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を調製するために異なる方法で組み合わされてもよい。以下の調製例および実施例はさらに本発明を例示し、概して上に記載したいずれかの新規化合物を含む、式Iの化合物の典型的な合成を表す。試薬および出発物質は容易に利用可能であるか、または当業者により容易に合成できる。調製例および実施例は、例示の目的として記載され、限定されず、種々の修飾が当業者により行われてもよいことは理解されるべきである。本発明の化合物のRまたはS立体配置は、X線分析およびキラルHPLC保持時間との相関などの標準的な技術により決定されてもよい。以下の調製例および実施例の命名は概して、SymyxIsentris登録商標バージョン3.2.3のIUPAC命名特性を使用して行われる。本明細書で使用する場合、以下の用語は示した意味を有する:AcOHは酢酸を指し;BCAはビシンコニン酸を指し;b.i.d.は1日に2回を指し;ブラインは飽和NaCl水溶液を指し;cat.は触媒量を指し;CD74は不変鎖Iiを指し;CDIは1,1’-カルボニルジイミダゾールを指し;DMAPは4-ジメチルアミノピリジンを指し;DMSOはジメチルスルホキシドを指し;DTTはジチオスレイトールを指し;EDTAはエチレンジアミン四酢酸を指し;EtOHはエタノールを指し;hr.は時間を指し;IC50は、薬剤に可能な50の最大阻害反応を生じるその薬剤の濃度、あるいは受容体に結合するリガンドの50置換を生じる薬剤の濃度を指し;IMACは、固定化金属アフィニティークロマトグラフィーを指し;IPAは、イソプロピルアルコールを指し;LCES/MSは、液体クロマトグラフィーエレクトロスプレー質量分析計を指し;MCPBAは、meta-クロロ過安息香酸を指し;MeOHはメタノールを指し;min.は分を指し;NBSはN-ブロモスクシンイミドを指し;NMPはN-メチルピロリジンを指し;N/Aは利用可能でないことを指し;p10は不変鎖CD74の断片を指し;PBSはリン酸緩衝生理食塩水を指し;PWBCは末梢白血球を指し;RFUは相対蛍光単位を指し;SFCは超臨界流体クロマトグラフィーを指し;STABはナトリウムトリアセトキシボロヒドリドを指し;SDSはドデシル硫酸ナトリウムを指し;THFはテトラヒドロフランを指し;t-bocまたはbocはtert-ブトキシカルボニルを指し;TRITON登録商標X-100はポリエチレングリコールp-1,1,3,3-トリメチルブチル-フェニルエーテルを指す。他に示さない限り、置換基は以前に定義したとおりである。中間体3の式はスキーム1に記載した反応に従って実施できる。スキーム1、工程Aにおいて、6-ブロモ-2H-クロメンをNBSで処理して、ブロモヒドリン1を形成する。好ましい条件は、約0~50°Cであるが、より好ましくは室温においてDMSO/水の溶媒混合物を使用する。工程Bにおいて、ブロモヒドリン1を水酸化アンモニウムで処理してアミノアルコール2を得る。例えば、ブロモヒドリンを、室温~60°Cにて4~24時間、THFおよびEtOHの溶媒混合物中の水酸化アンモニウムと反応させる。スキーム1、工程Cにおいて、ラセミ体アミノアルコールをその3R、4Sおよび3S、4R鏡像異性体に分割して、キラルアミノアルコール3を得る。分割のための方法は当業者に一般的に公知であり、キラル酸の塩としての結晶化、またはキラルクロマトグラフィーによる鏡像異性体の分離を含む。6-ブロモ-2H-クロメンは商業的に入手可能であるか、または当業者に一般的に公知の方法により調製できる。例えば6-ブロモ-4-クロマノンをアルコールに還元し、続いて除去して、6-ブロモ-2H-クロメンを得ることができる。スキーム2において、式7の中間体についての合成を示している。スキーム2、工程Aにおいて、式4の環状アルケンをMCPBAで酸化させて、式5のエポキシドを得る。反応を、ジクロロメタンなどのハロゲン化溶剤および炭酸水素ナトリウムなどの塩基水溶液の二相混合物中で実施する。MCPBAを-10~10°Cにて少しずつ加え、1~8時間攪拌しながら反応物を室温まで加温させる。必要な場合、さらなるMCPBAを加える。工程Bにおいて、式5のエポキシドをアンモニアで処理して、式6のラセミ体アミノアルコールを形成させる。好ましい条件は、THFなどの不活性溶媒を含む密閉容器を使用し、MeOH中のアンモニアを添加している。反応物を1~4日間50~100°Cにて加熱し、必要に応じてさらなるアンモニアを加える。スキーム2、工程Cにおいて、ラセミ体アミノアルコール6を、スキーム1、工程Cにおいて以前に記載した式7のキラルアミノアルコールに分割する。例えば、1-アミノ-7-ブロモ-テトラリン-2-オールY=-CH2-を、-ジ-1,4-トルオイル-D-酒石酸を用いて結晶化により分割する。1S,2S-アミノアルコール式中、Y=-CH2-を得るために水性塩基での塩の処理により遊離アミンを得ることができる。あるいは、ラセミ体物質6を、最終生成物およびキラルクロマトグラフィーにより分離される鏡像異性体にすることができる。式4の環状アルケンは商業的にまたは文献に公知の方法のいずれかにより容易に得られ得ることは当業者により理解されるだろう。例えば、対応するケトンはアルコールに還元でき、続いてアルケンで除去できる。中間体11の形成はスキーム3に記載されるような反応に従って実施できる。スキーム3、工程Aにおいて、アミノインダン9は、1R,2R鏡像異性体米国特許第7,326,731B2号に関する文献に含まれる手順に従う5パラジウム炭素上での水素化によりニトロインダン8から得られる。工程Bにおいて、アミノインダン9を、ザンドマイヤー反応を使用してヨードインダン10に変換する。ジアゾニウム塩は、p-トルエンスルホン酸および亜硝酸ナトリウム水溶液を使用してアセトニトリルなどの溶媒中でその場で形成される。続いてジアゾニウム塩を0~30°Cの温度にて0.5~6時間、ヨウ化カリウム水溶液で処理して、ヨードインダン10を得る。工程Cにおいて、boc保護ヨードインダン10は、HClまたはトリフルオロ酢酸などの酸性条件下でヨードアミノインダン11になる。窒素保護基を導入し、除去するための方法は当該技術分野において周知である例えば、GreeneおよびWuts,ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,3rdEd.,JohnWileyandSons,NewYork,1999を参照のこと。好ましい条件は、0~25°Cにて0.5~4時間、ジオキサン中のHClを使用する。Tert-ブチル-N-[1S,2S-6-アミノ-2-ヒドロキシ-インダン-1-イル]カルバメート8は当該技術分野において公知の方法により調製できる。例えば、ラセミ-トランス-1-アミノ-6-ニトロインダン-2-オールは、インデンから6回の工程で得られ得るAdv.Synth.Catal.2005,347,255-265。ラセミ物質は分割され、-L-マンデル酸の1R,2Rおよび1S,2S塩として単離される。1S,2S塩は1S,2S-トランス-1-アミノ-6-ニトロインダン-2-オールに遊離され、続いてアミンはtert-ブチルカルバメートとして保護されて、キラルHPLCにより分析されるように97ee超で物質を得る。式Iの本発明の化合物の形成はスキーム4に示した反応に従って実施できる。スキーム4、工程Aにおいて、式12のアミノアルコールキラルまたはラセミ体のいずれかはアシル化されて、式13のアミドを得る。カルボン酸または酸塩化物のいずれかを使用する種々のアシル化法は当該技術分野において周知である。好ましい条件は、0~25°Cの温度にて1~8時間、THFおよび炭酸水素ナトリウム水溶液の溶媒混合物中の適切な塩化ベンゾイルを使用する。開始アミノアルコールがキラル酸の塩として使用される場合、十分な塩基が使用されて遊離アミンを生成する。工程Bにおいて、式13のブロモまたはヨードアミドを、ヨウ化銅Iおよびsym-ジメチルエチレンジアミンなどのリガンドを使用して保護2-オキソ-ピペラジンと結合して、式14のオキソピペラジンを得る。反応は好ましくは、炭酸カリウムなどの無機塩基の存在下、不活性雰囲気下で、密閉容器で実施する。反応は、80~150°Cの温度で、NMPなどの不活性溶媒中で実施する。スキーム4、工程Cにおいて、オキソピペラジンをベンズアミドの存在下で選択的に還元して、式15のピペラジンを得る。反応は、0~40°Cの温度にて1~4時間、THFなどの不活性溶媒中でボラン-硫化ジメチル複合体などの還元剤を使用して達成される。さらなるボラン-硫化ジメチル複合体を使用して反応を完了させてもよい。あるいは、工程Dにおいて、ピペラジンを、カップリング反応中のN-tert-ブトキシカルボニルピペラジンを使用してヨードまたはブロモアミド13と直接反応させる。反応は、アリルパラジウムIIクロリド二量体などのPd触媒およびトリ-tert-ブチルホスホニウムテトラフルオロボレートなどのリガンドの存在下で進行する。20~120°Cの温度にて0.5~8時間、DMSOなどの不活性溶媒中のナトリウムtert-ブトキシドなどの塩基を使用して式15のピペラジンを得る。工程Eにおいて、boc保護基を除去して式16の非保護ピペラジンを得る。ジオキサン中のHClなどのboc基の除去のための酸性条件は当該技術分野において周知である。続いて、工程Fにおいて、非保護アミン16を、還元的アミノ化において3-オキセタノンと反応させて、式17のオキセタニルピペラジンを得る。還元的アミノ化を達成するための種々の方法は当該技術分野において周知である。好ましい条件は、アセトニトリルなどの不活性溶媒中で、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリドなどの還元剤を使用する。反応を0~40°Cにて約0.5~4時間実施する。さらなるナトリウムトリアセトキシボロヒドリドおよび3-オキセタノンを加えて、反応を完了させ得る。あるいは、反応は、分子篩の存在下、MeOHおよび氷酢酸などの溶媒混合物中で、シアノ水素化ホウ素ナトリウムなどの還元剤を使用して達成できる。反応は0~60°Cの温度にて約1~24時間進行する。スキーム4、工程Gにおいて、オキセタニルピペラジン17のアルコールを式Iのカルバメートに変換する。トリホスゲン/アミン、4-ニトロフェニルクロロホルメート/アミン、CDI/アミンなどのカルバメートを合成するため、または適切に置換されたイソシアネートを用いた直接的な合成のための当業者に利用可能な種々の手段が存在する。本発明の化合物式中、Z=-CH2-であるについての好ましい方法は適切なイソシアネートO=C=N-R2を使用する。例えば、DMAPまたは好ましくは4-ピロリジノピリジンなどの有機塩基の存在下でジクロロメタン、ジオキサン、または好ましくはTHFなどの非プロトン性溶媒中のアルコール17をメチルイソシアネートで処理する。反応は、20~70°Cにて約2~16時間、密閉容器内で実施する。本発明の化合物式中、カルバメート部分は主要なカルバメートR2=Hであるは、CDI/アンモニア、シアン酸ナトリウム、またはクロロスルホニルイソシアネートを使用して合成できる。他の方法は非プロトン性溶媒中のトリクロロアセチルイソシアネートを使用する。続いて、トリクロロアセチル基は、中性Al2O3またはp-トルエンスルホン酸などの有機酸を使用して開裂される。式Iのカルバメートを合成するための好ましい方法は、0~25°Cにて4~20時間、THFなどの不活性溶媒中でCDIを使用して、その場でイミダゾールN-カルボン酸エステルを形成する。適切なアミンH2NR2とのその後の反応により、式Iのカルバメートが得られる。上記の中間体は、ラセミ体混合物と共に実施され、好ましくはキラルHPLCにより最終工程として分割されて、鏡像異性的に純粋な化合物を得ることができることは当業者により理解されるだろう。調製例16-ブロモクロマン-4-オールエタノール20L中の7-ブロモ-3,4-ジヒドロナフタレン-12H-オン3.95kg,17.4molの懸濁液に、室温で水素化ホウ素ナトリウム221g,5.84molを少しずつ3時間にわたって加える。真っ赤な溶液を濃縮する。残留物を氷中約3kgに加えて懸濁液を形成し、その後、氷冷0.5MHCl10Lを上記懸濁液中に攪拌しながらゆっくりと加える。混合物をメチルtert-ブチルエーテル20Lおよび5Lで抽出する。合わせた有機相を飽和重炭酸ナトリウム水溶液10Lおよびブライン2×10Lで洗浄し、溶媒を減圧下で濃縮し、湿潤した固体を一晩空気乾燥して、標題化合物を淡黄色固体4.10kg,定量として得る。LC-ES/MSm/z211[M-H-2OH]。以下の表中のアルコールを、適切なケトンを用いる調製例1に記載された手順に基本的に従って調製する。調製例56-ブロモ-2H-クロメントルエン18L中の6-ブロモクロマン-4-オール3.98kg,17.4molの溶液に、p-トルエンスルホン酸一水和物95g,499.42mmolを室温で加える。ディーンスターク装置を取り付け、3時間および50分還流する。混合物を空気中で50°Cに冷却し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液10Lおよび氷約3kg中に攪拌しながら注ぐ。2つの層に分ける。水層をメチルtert-ブチルエーテル4Lで逆抽出する。有機層を飽和重炭酸ナトリウム10Lおよびブライン1×10Lで洗浄し、減圧下で溶媒を蒸発させて、標題化合物を茶色油4.90kg,>100,トルエンを含むとして得る。LCMSm/z79Br209[MH]。以下の表中のアルケンを、適切なアルコールを用いる調製例5に記載された手順に基本的に従って調製する。調製例9ラセミ-トランス-3,6-ジブロモクロマン-4-オールDMSO16Lおよび水2.5Lの溶液に、室温で6-ブロモ-2H-クロメン4.90kg,23.2molを加える。NBS3.47kg,19.5molを少しずつ3.5時間にわたって加える。混合物をメチルtert-ブチルエーテル12Lおよび水18L中に注ぎ、2つの層に分ける。有機層を飽和重炭酸ナトリウム7L、水8Lおよびブライン2×8Lで洗浄する。水層をメチルtert-ブチルエーテル4Lで逆抽出し、合わせた有機層の溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を赤茶色固体5.10kg,71として得る。調製例103R,4S-4-アミノ-6-ブロモ-クロマン-3-オールテトラヒドロフラン5.0Lおよびエタノール5.0L中のラセミ-トランス-3,6-ジブロモクロマン-4-オール5.10kg,16.6molの溶液に、室温で水酸化アンモニウム13.0Lを一度に加え、43°Cで2時間にわたってゆっくり加熱し、14時間加熱し続ける。混合物を減圧下で濃縮して約9Lの溶媒を除去する。メチルtert-ブチルエーテル10Lを、残留スラリーに加え、混合物を3時間25°Cで攪拌する。沈殿物を濾過により回収し、水2×2Lで洗浄し、次いで、メチルtert-ブチルエーテル3×1.5Lで洗浄して、湿潤した固体を得る。室温にて空気中で一晩乾燥して、標題化合物を淡黄色固体2.78kg,69として得る。LC-ES/MSm/z79Br244[MH]。鏡像異性体を、0.2ジメチルエチルアミン定常状態リサイクル精製を有する100メタノールで溶出する11×33cmCHIRALPAK登録商標AD、20μmカラム上で、100gずつ精製することで、3S,4R鏡像異性体異性体1,1362.5g,97.4eeおよび標題化合物異性体2,1323.7g,97.5eeを得る。分析的キラルHPLC分析の条件:4.6×150mmCHIRALPAK登録商標AD-H5μmカラム、0.2ジメチルエチルアミンを含む100メタノール、流速0.5mL/分、異性体1TR=4.69分、異性体2TR=6.27分。調製例11ラセミ-シス-6-ブロモ-1a,2,3,7b-テトラヒドロナフト[1,2-b]オキシレンジクロロメタン3.75L中の6-ブロモ-1,2-ジヒドロナフタレン250g,1.20molの溶液に、飽和重炭酸ナトリウム水溶液1250mLを加え、0~5°Cまで冷却する。MCPBA77,275g,1.23mol,1.03当量を少しずつ加える。混合物を0~5°Cで1.5時間、機械的に攪拌し、室温まで温める。室温で約1.5時間攪拌し、追加のMCPBA77,15.0g,67mmol,0.05当量を室温で加え、約1時間攪拌する。混合物をジクロロメタン3750mLで希釈し、層を分ける。有機層を飽和重炭酸ナトリウム水溶液3Lで洗浄する。10亜硫酸水素ナトリウム水溶液3750mLと飽和重炭酸ナトリウム水溶液1250mLを混合して、最終pHが約7の溶液を調製する。この溶液にジクロロメタン層を加え、室温で約10分間攪拌する。層を分け、有機層を飽和重炭酸ナトリウム水溶液3Lおよびブライン3Lで洗浄する。真空中で濃縮して、標題化合物を油263g,98として得る。GC/MSm/z79Br/81Br224/226[M]。以下の表中のエポキシドを、適切なアルケンを用いる調製例11に記載された手順に基本的に従って調製する。調製例14ラセミ-トランス-1-アミノ-7-ブロモ-テトラリン-2-オール機械的スターラーを備えた2L圧力反応器中で、テトラヒドロフラン200mL中にラセミ-シス-6-ブロモ-1a,2,3,7b-テトラヒドロナフト[1,2-b]オキシレン67.0g,298mmolを溶解する。メタノール350mL中に7Mアンモニアを加え、反応器を密封し、70°Cで2日間攪拌する。メタノール140mL中に追加の7Mアンモニアを加え、反応器を密封し、70°Cで1日間攪拌する。反応スラリーを真空中で濃縮して残留物68.1gを得る。ジエチルエーテル760mLを加え、スラリーを室温で約5時間攪拌する。固体を濾過により回収し、ジエチルエーテル2×215mLでリンスし、一晩乾燥して、標題化合物58.1g,81を得る。GC/MSm/z79Br/81Br224/226[M-NH2]。以下の表中のアミノアルコールを、適切なエポキシドを用いて調製例14に記載された手順に基本的に従って調製する。調製例171S,2S-1-アミノ-7-ブロモ-1,2,3,4-テトラヒドロナフタレン-2-オール2S,3S-2,3-ビス4-メチルベンゾイルオキシスクシネート-ジ-1,4-トルオイル-D-酒石酸2.30kg,5.95molを一度に、アセトニトリル16.0Lおよび水3.50L中のラセミ-トランス-1-アミノ-7-ブロモ-1,2,3,4-テトラヒドロナフタレン-2-オール1.40kg,5.78molの溶液に加える。濃厚懸濁液を窒素下で30分間、加熱して還流させる77°C。スターラーは約46°Cに達するまで攪拌を開始しない。オイルバスへの加熱を止め、混合物を攪拌しながら室温まで冷却する。5時間後、濃厚スラリーをブフナー漏斗で濾過し、アセトニトリル2Lでリンスする。溶媒が回収されなくなるまで1時間濾過を続ける。湿潤ケーキを室温で一晩空気乾燥して、所望の塩を黄色固体1.70kgとして得る。固体をアセトニトリル15Lおよび水3.3Lへ加え、得られた濃厚スラリーを窒素下で30分間攪拌しながら、加熱して還流させる77°C。オイルバスへの加熱を止め、攪拌しながら室温まで冷却する。5時間後、濃厚スラリーをブフナー漏斗で濾過し、アセトニトリル2Lでリンスする。溶媒が回収されなくなるまで30分間濾過を続ける。湿潤ケーキを室温で48時間乾燥して、所望の塩を淡黄色固体800g,22として得る。遊離塩基についてLC-ES/MSm/z79Br242[MH]。99.0ee。超臨界液体クロマトグラフィーSFCによる鏡像異性体過剰率決定のための分析条件:カラム:CHIRALPAK登録商標AD-H0.46×250mm,5μm、二酸化炭素流速:2.55mL/分、共溶媒:0.1ジエチルアミンを含むメタノール、共溶媒流速:0.45mL/分,背圧:150バール、カラム温度:40.9°C。異性体1TR=7.36分、0.5面積および異性体2標題化合物TR=8.46分、99.5面積。調製例18tert-ブチルN-[1S,2S-6-アミノ-2-ヒドロキシ-インダン-1-イル]カルバメート文献の手順Kozhushkov,S.I.ら,Adv.Synth.Catal.2005,347,255-265に基本的に従って、97超eeのtert-ブチルN-[1S,2S-2-ヒドロキシ-6-ニトロ-インダン-1-イル]カルバメートを得る。1R,2R鏡像異性体米国特許第7,326,731B2号について記載されているのと同じ手順を用いてニトロ基を還元して標題化合物を得る。調製例19tert-ブチルN-[1S,2S-2-ヒドロキシ-6-ヨード-インダン-1-イル]カルバメート氷槽内で30分間、アセトニトリル800mL中のtert-ブチルN-[1S,2S-6-アミノ-2-ヒドロキシ-インダン-1-イル]カルバメート25.0g,94.6mmolの懸濁液を冷却し、p-トルエンスルホン酸一水和物53.97g,283.7mmolを一度に加える。水30mL中の亜硝酸ナトリウム13.05g,189.2mmolの溶液を、5分間混合物に少しずつ加え、30分間攪拌する。水50mL中のヨウ化カリウム39.25g,236.5mmolの溶液を、混合物に10分にわたって滴下して加え、氷槽内で20分間攪拌する。混合物を室温まで温め、1.5時間攪拌する。10炭酸ナトリウム水溶液を含む濃赤色アルカリ性溶液を生成する。得られた混合物を真空中で濃縮して、アセトニトリルを除去する。濾過により茶色沈殿物を回収し、真空オーブン内で50°Cで一晩乾燥して、標題化合物33.9g,96を得る。LC-ES/MSm/z320[MH]。調製例20N-[3R,4S-6-ブロモ-3-ヒドロキシ-クロマン-4-イル]-4-フルオロ-ベンズアミドテトラヒドロフラン3.0Lおよび水3.0L中の3R,4S-4-アミノ-6-ブロモ-クロマン-3-オール692g,2.84および重炭酸ナトリウム476g,5.67molの懸濁液に、4-フルオロベンゾイルクロリド369mL,3.12molを17°Cで15分にわたって、添加漏斗を介して滴下して加え、2時間攪拌する。水2Lおよびメチルtert-ブチルエーテル3.5Lを加え、5分間攪拌する。有機相を分け、それを水2Lおよびブライン2Lで洗浄する。有機部分を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で濃縮して、淡黄色固体2.3kgを得る。固体を25°Cで3時間、ヘプタン5L中で粉砕する。濾過により回収し、50°Cで12時間、オーブン内で乾燥して、標題化合物975g,94を白色固体として得る。LC-ES/MSm/z79Br/81Br366/368[MH]。以下の表中のアミドを、適切なラセミ体またはエナンチオピュアなアミノアルコール遊離塩基または塩を用いる調製例20に記載された手順に基本的に従って調製する。アミノアルコール調製例21の塩を用いる場合は、飽和重炭酸ナトリウムを塩基として用いる。調製例244-フルオロ-N-[1S,2S-2-ヒドロキシ-6-ヨード-インダン-1-イル]ベンズアミド1,4-ジオキサン200mL中のtert-ブチルN-[1S,2S-2-ヒドロキシ-6-ヨード-インダン-1-イル]カルバメート39.6mmol,14.9gの溶液に、ジオキサン100mL中の4M塩化水素の溶液を室温で加えて、2時間攪拌する。得られた懸濁液を真空中で濃縮して、真空オーブン内で48時間乾燥する。残留物をTHF25mL中に溶解し、氷槽中で30分間冷却する。5M水酸化ナトリウム水溶液17.4mL,87.2mmolおよび4-フルオロベンゾイルクロリド3.78mL,40.4mmolを滴下して加える。溶液を室温まで温め、1時間攪拌する。黒色溶液を真空中で濃縮し、水50mLで希釈する。濾過により固体を回収し、真空オーブン内で40°Cで一晩乾燥し、標題化合物14.4g,91を得る。LC-ES/MSm/z398[MH]。調製例25tert-ブチル4-[2S,3S-3-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-2-ヒドロキシ-インダン-5-イル]-3-オキソ-ピペラジン-1-カルボキシレートN-メチルピロリドン100mL中の4-フルオロ-N-[1S,2S-2-ヒドロキシ-6-ヨード-インダン-1-イル]ベンズアミド8.70g,21.9mmol、4-N-boc-2-オキソ-ピペラジン4.61g,22.3mmol、および炭酸カリウム6.12g,43.8の混合物を、窒素ガスでパージする。ヨウ化銅I2.11g,11.0mmolおよびsym-ジメチルエチレンジアミン2.34mL,21.9mmolを加える。隔膜でフラスコを密閉し、100°Cで6時間攪拌する。混合物を室温まで冷却し、酢酸エチル100mLで希釈する。有機部分を水3×100mLで洗浄し、次いでブラインで洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮乾固する。残留物をカラムクロマトグラフィー120gシリカ、2~5メタノール/クロロホルムにより精製して、標題化合物7.63g、74を得る。LC-ES/MSm/z470[MH]。調製例26tert-ブチル4-[3S,4S-4-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-3-ヒドロキシ-テトラリン-6-イル]-3-オキソ-ピペラジン-1-カルボキシレートtert-ブチル4-[2S,3S-3-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-2-ヒドロキシ-インダン-5-イル]-3-オキソ-ピペラジン-1-カルボキシレートについての調製例25に基本的に従って、N-[1S,2S-7-ブロモ-2-ヒドロキシ-テトラリン-1-イル]-4-フルオロ-ベンズアミドを用いて標題化合物を調製する。LC-ES/MSm/z484[MH]。調製例27tert-ブチル4-[2S,3S-3-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-2-ヒドロキシ-インダン-5-イル]ピペラジン-1-カルボキシレート氷槽内で30分間、無水テトラヒドロフラン40mL中のtert-ブチル4-[2S,3S-3-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-2-ヒドロキシ-インダン-5-イル]-3-オキソ-ピペラジン-1-カルボキシレート8.85g,18.9mmolの溶液を冷却し、窒素下でボラン-ジメチル硫化物錯体2M,37.7mL,75.40mmolを加える。混合物を室温まで温め、1.5時間攪拌する。ボラン-ジメチル硫化物錯体2M,9.42mL,18.9mmolの第2部分を室温で加え、1時間攪拌する。氷槽内で10分間冷却し、水を慎重に滴下して加え、その後、飽和重炭酸ナトリウム溶液50mLを加える。得られた懸濁液を酢酸エチル150mLで希釈する。有機部分をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、真空中で濃縮する。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー120gシリカ、40~50酢酸エチル/ヘキサンにより精製して、標題化合物6.8g,79を得る。LC-ES/MSm/z456[MH]。調製例28tert-ブチル4-[3S,4S-4-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-3-ヒドロキシ-テトラリン-6-イル]ピペラジン-1-カルボキシレートtert-ブチル4-[2S,3S-3-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-2-ヒドロキシ-インダン-5-イル]ピペラジン-1-カルボキシレートについての調製例27に基本的に従って、tert-ブチル4-[3S,4S-4-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-3-ヒドロキシ-テトラリン-6-イル]-3-オキソ-ピペラジン-1-カルボキシレートを用いて標題化合物を調製する。LC-ES/MSm/z470[MH]。調製例294-フルオロ-N-[1S,2S-2-ヒドロキシ-7-ピペラジン-1-イル-テトラリン-1-イル]ベンズアミド塩酸塩1,4-ジオキサン430mL中のtert-ブチル4-[3S,4S-4-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-3-ヒドロキシ-テトラリン-6-イル]ピペラジン-1-カルボキシレート19.4g,41.3mmolの溶液に、ジオキサン135mL中の4M塩化水素を室温で加える。得られたスラリーを50°Cで13時間、機械的に攪拌する。反応物を真空中で濃縮して、標題化合物24.8g,定量を得る。LC-ES/MSm/z370[MH]。調製例304-フルオロ-N-[3R,4S-3-ヒドロキシ-6-ピペラジン-1-イル-クロマン-4-イル]ベンズアミド塩酸塩室温で攪拌しながら、DMSO1.40L中のトリ-t-ブチルホスホニウムテトラフルオロボレート16.0g,54.6mmolおよびアリルパラジウムIIクロリド二量体5.07g,27.3mmolの懸濁液を脱気する混合物を窒素で泡立てる。N-tert-ブトキシカルボニルピペラジン315g,1.64mol,97純度およびN-[3R,4S-6-ブロモ-3-ヒドロキシ-クロマン-4-イル]-4-フルオロ-ベンズアミド200.0g,546mmolを加える。混合物を15分間窒素下で攪拌し、次いで80°Cで加熱する。ナトリウムtert-ブトキシド179g,1.80molを加え、93~98°Cで45分間加熱する。混合物を1Mリン酸2.73L,2.73mol,50水酸化ナトリウムでpH=2.3に調整および酢酸エチル800mLの溶液に注ぎ、10分間攪拌する。層を分け、水層を酢酸エチル3×300mLで抽出する。合わせた有機層を半飽和ブライン2×500mLで洗浄する。有機層を活性炭20gおよびシリカゲル200gで処理し、30分間攪拌する。珪藻土のパッドで濾過し、減圧下で濃縮して、ダーク油を得る。油をメタノール800mL中に溶解し、ジオキサン410mL中の4M塩化水素を加え、溶液を40°Cで1時間攪拌する。真空中で溶媒を蒸発させ、残留物をアセトニトリル1.6L中に懸濁し、室温で1時間攪拌する。固体を窒素下で濾過により回収して、塩の水和を避ける。濾過物をアセトニトリル500mLおよびメチルtert-ブチルエーテル1Lで洗浄し、真空下で乾燥して、標題化合物262g,73を得る。LC-ES/MSm/z372[MH]。以下の表中のアミンを、適切なラセミ体またはエナンチオピュアな臭化物を用いて調製例30に記載された手順に基本的に従って調製する。調製例334-フルオロ-N-[3R,4S-3-ヒドロキシ-6-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]クロマン-4-イル]ベンズアミドナトリウムトリアセトキシボロヒドリド20g,94.4mmolを、アセトニトリル300mL中の4-フルオロ-N-[3R,4S-3-ヒドロキシ-6-ピペラジン-1-イル-クロマン-4-イル]ベンズアミド塩酸塩32.0g,78.5mmolおよび3-オキセタノン6.87g,98.1mmolのスラリーに加える。スラリーを20分間攪拌し、更なるナトリウムトリアセトキシボロヒドリド20g,94.4mmolを一度に加える。茶色混合物を28°Cで約2時間攪拌する。追加のナトリウムトリアセトキシボロヒドリド10g,47.2mmolを加え、混合物を30分間攪拌する。3-オキセタノン2g,28.6mmolを加え、20分後、追加の3-オキセタノン1g,14.3mmolを加える。30分間攪拌し、混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液1Lへ注ぎ、ジクロロメタン1Lを加える。有機層を分け、真空中で濃縮して、薄灰色固体を得る。固体を、3~6イソプロパノール/ジクロロメタンで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を白色固体19.2g,73として得る。LC-ES/MSm/z428[MH]。以下の表中のオキセタンを、適切なラセミ体またはエナンチオピュアなアミンを用いて調製例33に記載された手順に基本的に従って調製する。調製例374-フルオロ-N-[1S,2S-2-ヒドロキシ-6-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]インダン-1-イル]ベンズアミド1,4-ジオキサン5.0mL中のtert-ブチル4-[2S,3S-3-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-2-ヒドロキシ-インダン-5-イル]ピペラジン-1-カルボキシレート300mg,0.659mmolの溶液に、ジオキサン5.0mL中の4M塩化水素を室温で加え、1時間攪拌する。懸濁液を真空中で濃縮する。残留飽和重炭酸ナトリウム水溶液50mLに加え、酢酸エチル3×50mLで抽出する。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、真空中で濃縮する。残留物をメタノール20mL中に溶解し、3-オキセタノン142mg,1.98mmol、氷酢酸170μL,2.96mmol、および粉砕活性化4Å分子篩を加える。得られた懸濁液を50°Cで1時間攪拌する。シアノ水素化ホウ素ナトリウム131mg,1.98mmolを室温で加え、一晩攪拌する。飽和重炭酸ナトリウム溶液20mLを加え、20分間攪拌する。ジクロロメタン3×50mLで抽出し、合わせた有機層を水およびブラインで洗浄する。有機部分を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、標題化合物220mg,81を得る。LC-ES/MSm/z412[MH]。調製例38ラセミ-トランス-3,6-ジブロモクロマン-4-オールトルエン500mL中の6-ブロモクロマン-4-オール25.0g,109.1mmolの溶液を100°Cまで加熱する。p-トルエンスルホン酸一水和物1.1g,5.5mmolを加え、ディーンスターク装置を用いて水を回収し、100°Cで2時間攪拌する。熱源を除去し、反応混合物を氷冷0.5NNaOH250mLでクエンチする。更に反応混合物を5~10°Cに冷却し、次いで層を分ける。有機層を水25mLで洗浄し、有機層を減圧下で濃縮して、その元の体積を約半分にする。DMSO100mLを加え、トルエン蒸留物がなくなるまで減圧下で濃縮し続ける。中間体オレフィンのDMSO溶液を0~5°Cまで冷却し、水17mLを加え、0~5°Cまで再冷却する。N-ブロモスクシンイミド21.7g,120.0mmolを5回に分けて30分にわたって加える。0~5°Cで1時間攪拌する。反応混合物を酢酸エチル100mLおよび水50mLで希釈し、10分間攪拌し、層を分ける。水層を酢酸エチル100mLで逆抽出する。合わせた有機層を1:1ブライン/水2×50mLで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮して、標題化合物を白色固体33.0g,99として得る。1HNMRDMSO-d6δ4.26m,1H,4.37m,2H,4.65m,1H,6.27d,1H,6.80d,1H,7.35dd,1H,7.46bd,1H。GC/MSm/z79Br/81Br308/310[M]。調製例39ラセミ-トランス-4-アミノ-6-ブロモ-クロマン-3-オールイソプロピルアルコール300mL中のラセミ-トランス-3,6-ジブロモクロマン-4-オール30.0g,97.4mmolの溶液500mLに周囲温度で、水酸化アンモニウム28~30水溶液,150mL,2.2molを加える。15時間ゆっくりと攪拌する。反応混合物を濾過し、濾過物を水200mLで希釈する。得られた溶液を減圧下で濃縮して、その元の重量の半分にする。水100mLを加え、混合物を周囲温度で10分間攪拌し、次いで、0~5°Cに冷却し、さらに30分間攪拌する。沈殿物を濾過により回収し、固体を水25mLおよびヘプタン25mLで洗浄する。物質を40°Cで真空乾燥して、標題化合物を淡黄色固体21.2g,89.2として得る。1HNMRDMSO-d6δ1.96bs,2H,3.53m,2H,3.87dd,1H,4.11dd,1H,5.15bs,1H,6.66d,1H,7.19dd,1H,7.48dd,1H。LC-ES/MSm/z79Br244[MH]。調製例403R,4S-4-アミノ-6-ブロモ-クロマン-3-オールラセミ-トランス-4-アミノ-6-ブロモクロマン-3-オール21.1g,86.4mmol、D--ショウノウ酸17.3g,86.4mmol、アセトニトリル633mLおよび水47.6mLの混合物を、70~75°Cまで加熱し、10分間攪拌する。溶液を周囲温度まで4時間にわたって冷却する。24時間後、周囲温度で混合物を濾過する。固体をアセトニトリル2×20mL中の7H2Oでリンスする。濾過物を50°Cまで加熱し、1NNaOH216.1mLを加える。得られた混合物を減圧下で濃縮して、アセトニトリルを除去する。H2O211mLを加え、溶液を70°Cまで加熱する。周囲温度まで冷却し、沈殿物を濾過により回収する。水25mLで洗浄し、50°Cで一晩真空乾燥し、標題化合物をオフホワイト固体9.8g,50のうち46.4の理論重量,98.7eeとして得る。粗3R,4S-4-アミノ-6-ブロモクロマン-3-オール1.5g,6.15mmol、アセトニトリル12.0mLおよび水3.0mLを合わせ、70~75°Cまで加熱する。溶液を30分間攪拌し、溶液を周囲温度まで冷却し、次いで、さらに1時間攪拌する。混合物を0~5°Cまで冷却し、30分間攪拌する。固体を濾過し、冷4:1アセトニトリル:H2O10mLで洗浄する。固体を50°Cで一晩真空乾燥して、精製した標題化合物を白色固体1.1g,74.6,99.7eeとして得る。1HNMRDMSO-d6δ1.96bs,2H,3.53m,2H,3.87dd,1H,4.11dd,1H,5.15bs,1H,6.66d,1H,7.19dd,1H,7.48dd,1H.LC-ES/MSm/z79Br244[MH]。分析的キラルHPLC分析の条件:ChiralPakAD-Hカラム150×4.6mm、4.6ミクロン;流速0.6mL/分;波長290nm;溶離剤100MeOH0.2v/vジメチル-エチルアミン;実行時間10分;カラム温度30°C;アイソクラチック。調製例414-フルオロ-N-[3R,4S-3-ヒドロキシ-6-ピペラジン-1-イルクロマン-4-イル]ベンズアミドTHF50mL中の3R,4S-4-アミノ-6-ブロモ-クロマン-3-オール10.0g,41.0mmolの懸濁液に、周囲温度で重炭酸ナトリウム5.2g,61.4mmolおよび水50mLを加える。5分間攪拌し、混合物を0~5°Cまで冷却する。4-フルオロ-ベンゾイルクロリド6.5g,41.0mmolを添加漏斗で10分にわたって滴下して加える。混合物を0~5°Cで30分間攪拌し、混合物を15~20°Cまで温め、さらに2時間攪拌する。混合物をブライン50mLおよびTHF50mLで洗浄し、20分間攪拌する。層を分け、有機層を濃縮して、その元の体積の半分にする。THF50mLの追加と濃縮を、その半量になるまで3回またはカールフィッシャー水分析により溶液が0.1未満になるまで繰り返す。DMSO100mLを加え、THFが蒸留しなくなるまで混合物を減圧下で50°Cで濃縮し続ける。得られたアミド中間体のDMSO溶液を、DMSO200mLおよびトルエン45mLで希釈し、窒素ガスの表面下散布sub-surfacespargeを用いて30分間、脱気する。ピペラジン16.6g,192.7mmolを加え、溶液を30分間脱気する。溶液を40°Cまで加熱し、アリルパラジウムIIクロリド二量体0.72g,2mmolおよびトリ-tert-ブチル-ホスホニウムテトラフルオロボレート1.19g,4mmolを窒素ブランケット下で加える。混合物を10分間攪拌し、ナトリウムtert-ブトキシド13.0g,135.3mmolを窒素ブランケット下で加える。内部温度を70°Cまで上昇させ、混合物を4時間攪拌する。反応器の内容物を20°Cまで冷却し、水75mLを15分にわたって加える。6NHClを用いて混合物のpHを6~7に調整し、酢酸エチル150mLを加える。反応器の内容物を30分間攪拌し、次いで、層を分ける。水層を酢酸エチル2×150mLで逆抽出する。酢酸エチル抽出物を捨て、NaOH40水溶液を用いて水層のpHを11~12に調整する。水層を酢酸エチル3×150mLで抽出する。有機抽出物を合わせ、減圧下で濃縮して、元の体積の約半分にする。活性炭1.5gを加え、混合物を50~55°Cまで1時間加熱する。混合物を50~55°Cで1時間攪拌し、20°Cまで冷却し、濾過し、固体を除去する。濾過物をブライン2×300mLで洗浄し、有機物を減圧下で濃縮して、約2容量元の出発材料に基づくにする。混合物を0~5°Cまで冷却し、さらに3時間攪拌する。固体を濾過により単離し、メチルtert-ブチルエーテル30mLで洗浄し、固体を50°Cで真空乾燥する。標題化合物をオフホワイト固体7.9g,52として回収する。1HNMRDMSO-d6δ2.40-2.80bm,8H,3.65-3.95bm,2H,4.13d,1H,4.95m,1H,5.35bs,1H,6.63dd,1H,6.69d,1H,6.80d,1H,7.27m,2H,7.96m,2H,8.72bd,1H。LC-ES/MSm/z372[MH]。調製例424-フルオロ-N-[3R,4S-3-ヒドロキシ-6-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]クロマン-4-イル]ベンズアミドTHF164mL中で4-フルオロ-N-[3R,4S-3-ヒドロキシ-6-ピペラジン-1-イルクロマン-4-イル]ベンズアミド8.2g,22.0mmolおよび3-オキセタノン2.4g,33.0mmolを合わせる。酢酸1.3mL,22.0mmolを加え、得られた混合物を35~40°Cまで加熱する。1時間後、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド8.4g,39.6mmolを加え、35~40°Cで4時間攪拌する。反応混合物を15°Cまで冷却し、2NNaOH81.6mLを30分にわたって加える。ブライン81.6mLを添加し、混合物を30分間攪拌する。層を分け、有機層を2NNaOH81.6mLおよびブライン81.6mLで希釈する。得られた混合物を30分間攪拌する。層を分け、水層を除去する。有機層に活性炭1.0gを加え、温度を50~55°Cまで上昇させ、1時間攪拌する。混合物を濾過して、固体を除去し、濾過物を減圧下で濃縮して、元の体積の約10分の1の量にする。酢酸エチル164mLを加え、減圧下で濃縮して、元の体積の約4分の1の量にする。このプロセスを酢酸エチル2×164mLで2回繰り返す。有機物を濃縮して、約3容量元の出発材料に基づくにし、内部温度を70~75°Cまで上昇させ、2時間攪拌する。混合物を10°Cまで冷却し、ヘプタン82mLを15分にわたって加え、さらに2時間攪拌する。工業グレードの標題中間体を濾過により単離し、固体を50~55°Cで真空乾燥する10.1g回収した。精製:アセトニトリル700mL中に工業グレードの4-フルオロ-N-[3R,4S-3-ヒドロキシ-6-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]クロマン-4-イル]ベンズアミド10.0g,23.4mmolを懸濁し、混合物を加熱して還流する。2時間還流しながら攪拌し、50~55°Cまで冷却し、活性炭1.0gを加える。2時間50~55°Cで攪拌し、濾過して、固体を除去する。濾過物を減圧下で濃縮して、工業グレードの出発材料に基づいて約5容量にする。内部温度を75~80°Cまで上昇させ、1時間攪拌する。混合物を20°Cに冷却し、さらに4時間攪拌する。標題化合物を濾過により単離して、白色固体6.8g,72を得る。1HNMRDMSO-d6δ2.33m,4H,2.94m,4H,3.40m,1H,3.85m,1H,3.93d,1H,4.14d,1H,4.40dd,2H,4.49dd,2H,4.94m,1H,5.34d,1H,6.65d,1H,6.70d,1H,6.84dd,1H,7.27m,2H,7.97m,2H,8.75bd,1H。LC-ES/MSm/z428[MH]。実施例1[3R,4S-4-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-6-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]クロマン-3-イル]N-メチルカルバメートTHF648mL中の4-フルオロ-N-[3R,4S-3-ヒドロキシ-6-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]クロマン-4-イル]ベンズアミド72.0g,168mmolの溶液に、1,1’-カルボニルジイミダゾール35.5g,219mmolを加え、溶液を室温で一晩攪拌する。混合物を5°Cまで冷却し、THF210mL,421mmol,2.5当量中の2Mメチルアミンの溶液を15分にわたって滴下して加える。30分間攪拌し、水720mLおよびメチルtert-ブチルエーテル216mLの混合物に注ぐ。混合物を30分間攪拌し、層をデカントする。水層をジクロロメタン3×216mLで抽出する。合わせた有機層をブライン3×100mLで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、真空中で濃縮する。残留物を酢酸エチル720mL中で懸濁し、2時間加熱して還流し、10°Cまで冷却する。固体を濾過により回収し、真空下で一晩乾燥して、標題化合物64.0g,78を白色固体として得る。LC-ES/MSm/z485[MH]。以下の表中のカルバメートを、適切なエナンチオピュアなアルコールを用いて実施例1に記載された手順に基本的に従って調製する。実施例3[8S,9S-9-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-2-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]-6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-8-イル]N-メチルカルバメート上記実施例1についての手順に基本的に従ってラセミ-トランス-4-フルオロ-N-[8-ヒドロキシ-2-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]-6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-9-イル]ベンズアミドを用い、ラセミカルバメートを調製する。LC-ES/MSm/z497[MH]。ジクロロメタン8mLおよびメタノール3mL中にラセミ-トランス-9-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-2-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]-6,7,8,9-テトラヒドロ-5H-ベンゾ[7]アヌレン-8-イル]N-メチルカルバメート1.03gを溶解する。鏡像異性体を、CHIRALPAK登録商標AD-Hカラム2.1×25cm,5μm上でのSFCにより300μL部分中で分離する。移動相:0.2イソプロピルアミン/二酸化炭素を含む30イソプロパノール。流速:70mL/分。検出:225nm。標題化合物を異性体1333mg,99eeとして得て、8R,9R鏡像異性体を異性体2359mg,97.5eeとして得る。鏡像異性過剰率を、0.2イソプロピルアミン/二酸化炭素を含む30イソプロパノールを用いて、CHIRALPAK登録商標AD-H4.6×150mm,5μmカラム上でのSFCにより決定する。流速:5mL/分。検出:225nm。異性体1標題化合物TR=1.76分。異性体2TR=2.30分。実施例4[4S,5S-5-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-7-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]-2,3,4,5-テトラヒドロ-1-ベンゾオキセピン-4-イル]N-メチルカルバメート上記実施例1についての手順に基本的に従ってラセミ-トランス-4-フルオロ-N-[4-ヒドロキシ-7-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]-2,3,4,5-テトラヒドロ-1-ベンゾオキセピン-5-イル]ベンズアミドを用い、ラセミカルバメートを調製する。LC-ES/MSm/z499[MH]。メタノール3mL中にラセミ-トランス-[5-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-7-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]-2,3,4,5-テトラヒドロ-1-ベンゾオキセピン-4-イル]N-メチルカルバメート100mgを溶解し、不溶性固体を濾過する。鏡像異性体を、CHIRALPAK登録商標AD-Hカラム3×25cm,5μm上でのクロマトグラフィーにより1.5mL部分2注入中で分離する。移動相:95エタノール/5アセトニトリル。流速:18mL/分。検出:225nm。標題化合物を異性体142mg,99eeとして得て、4R,5R鏡像異性体を異性体240mg,99eeとして得る。鏡像異性体過剰率を、0.2ジメチルエチルアミンを含む95エタノール/5アセトニトリルを用いて、CHIRALPAK登録商標AD-H4.6×150mm,5μmカラム上でのHPLCにより決定する。流速:1.0mL/分。検出:225nm。異性体1標題化合物TR=3.58分。異性体2TR=5.13分。実施例5[1S,2S-1-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-6-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]インダン-2-イル]N-メチルカルバメートテトラヒドロフラン3.0mL中の4-フルオロ-N-[1S,2S-2-ヒドロキシ-6-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]インダン-1-イル]ベンズアミド220mg,0.535mmolの溶液に、4-ピロリジノピリジン16mg,0.107mmolを加え、圧力バイアル中で密閉する。メチルイソシアネート97μL,1.60mmolをシリンジにより混合物に加え、60°Cで一晩攪拌する。得られた懸濁液を氷槽内で冷却し、白色固体を濾過により回収し、真空オーブン内で40°Cで3時間乾燥して、標題化合物200mg,80を得る。LC-ES/MSm/z469[MH]。実施例6[3R,4S-4-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-6-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]クロマン-3-イル]N-メチルカルバメートTHF200mL中に4-フルオロ-N-[3R,4S-3-ヒドロキシ-6-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]クロマン-4イル]ベンズアミド10.0g,23.4mmolを懸濁し、1,1カルボニルジイミダゾール4.9g,30.4mmolを加える。周囲温度で3時間攪拌する。反応混合物を-5°Cまで冷却し、2MメチルアミンTHF中,21mL,42.1mmolを15分にわたって加える。得られた混合物を-5~0°Cで3時間攪拌する。2NNaOH100mLを加え、混合物を1時間10~30°Cで攪拌する。層を分け、有機物を2NNaOH4×100mLで洗浄する。水200mLを加え、混合物を減圧下で濃縮して、約20容量出発材料に基づくにする。THF200mLを加え、周囲温度で1時間攪拌する。混合物を濾過し、生成湿潤ケーキを無菌反応バイアルへ移す。THF200mLおよび水200mLを加え、周囲温度で1時間攪拌する。工業グレードの標題化合物を濾過により単離し、80°Cで真空乾燥する9.0g,80。実施例7[3R,4S-4-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-6-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]クロマン-3-イル]N-メチルカルバメートの結晶/固体形態変換THF1500mL中に窒素雰囲気下で工業グレードの[3R,4S-4-[4-フルオロベンゾイルアミノ]-6-[4-オキセタン-3-イルピペラジン-1-イル]クロマン-3-イル]N-メチルカルバメート50g,103.2mmolを懸濁する。混合物を50~60°Cまで加熱し、1時間攪拌する。活性炭5.0gを加え、50~60°Cで1時間攪拌し続ける。混合物を40~50°Cまで冷却し、濾過して固体を除去する。濾過物を減圧下で濃縮して、約5容量出発材料に基づくにする。アセトニトリル1000mLを加え、減圧下で濃縮して、約5容量にする。4回繰り返して、全てのTHFを除去し、次いで、混合物を濃縮して10~15容量にする。混合物を70~75°Cまで加熱し、18時間攪拌する。混合物を15°Cまで冷却し、4時間攪拌する。白色結晶体を濾過により単離し、55~60°Cで真空乾燥して、標題化合物42g,84を得る。1HNMRDMSO-d6δ2.32m,4H,2.53d,3H,2.96m,4H,3.39m,1H,4.11-4.25m,2H,4.39dd,2H,4.51dd,2H,4.86m,1H,5.04m,1H,6.70-6.75m,2H,6.85dd,1H,7.17m,1H7.28m,2H,7.96m,2H,8.90bd,1H.LC-ES/MSm/z485[MH]。キラル分析99.9ee。本発明の例示的な化合物を以下のインビトロおよびインビボアッセイにおいて試験する。インビトロヒトカテプシンSおよびマウスカテプシンSについての効力アッセイならびにヒトカテプシンL、B、K、V、およびFについての選択的アッセイを以下に記載する。各アッセイの実験条件および/または材料はわずかに異なるので、そのような相違は全体のアッセイ条件内に直接示すか、または全体のアッセイ条件の直後の表1における指定1a~1gを使用してそれぞれの酵素アッセイに従ってコード化する。試験化合物をDMSO中で調製して、10mMのストック溶液を作製する。ストック溶液をDMSO中で連続希釈して、インビトロ酵素アッセイを実施する前に96ウェル丸底プレート中の最終化合物濃度範囲1aを用いて10点希釈曲線を得る。本明細書以下すぐに記載しているアッセイバッファー全アッセイについて使用した中で化合物をさらに希釈する1b:ヒトカテプシンS、L、B、FおよびマウスカテプシンS:2.5mMのDTTおよび2.5mMのEDTAとさらに0.01のTRITON登録商標X-100を含有する50mMリン酸ナトリウムpH6.5ヒトカテプシンKおよびV:100mMのNaCl、2.5mMのDTTおよび2.5mMのEDTAとさらに0.01のTRITON登録商標X-100を含有する100mMの酢酸ナトリウムpH5.5。10μLの各希釈液を、対応する低タンパク質結合ハーフエリアブラックプレートCostar3694の列A~Hの各ウェルに加える。アッセイバッファー中で調製した、量1cの基質、ベンジルオキシカルボニル-L-ロイシル-L-アルギニン-4-メチル-クマリル-7-アミドPeptideInstituteを、最終濃度1dでプレートの各ウェルに加える。アッセイバッファー中で調製した、本明細書以下すぐに記載している量1eのそれぞれの酵素を、基質および試験化合物を含有するプレートの各ウェルに加え、反応を開始するために最終濃度1fを得る。ヒトカテプシンS、L、K、およびV:Calbiochemから得た。マウスカテプシンS:手短に述べると、マウスカテプシンSを、ヒスチジンタグを含有するmカテプシンS-pAN51T760構築物を使用してバキュロウイルス中でクローニングする。次いでIMACを利用して活性タンパク質を精製する。ヒトカテプシンF:手短に述べると、ヒト組換えカテプシンF酵素を以下のように実験室house内で調製する。プロカテプシンFを、ヒスチジンタグを含有するカテプシンF-pAN60T-2188構築物を使用して293E細胞中でクローニングする。次いでIMACを利用してタンパク質を精製する。ペプシンを使用してプロカテプシンFを設計し、MonoSカラムクロマトグラフィーを使用して再精製し、精製した活性化カテプシンFを得る。混合物をプレートミキサー上で低速度にて手短に振盪する。室温でのインキュベーション時間1gの後、混合物のRFUを、励起波長355nmおよび発光波長460nmにて0.1秒間、Envision2103マルチラベルリーダーを使用して記録する。RFUを阻害濃度に対してプロットし、曲線を4パラメータロジスティック式を用いて適合し、AcitivityBaseバージョン7.3.2.1を使用してIC50値を得る。ヒトカテプシンFについて、PackardFusionAlphaマイクロプレートリーダー0.5秒読み取り/ウェルを使用してRFUを測定し、GraphPadPrism4.03ソフトウェアを使用して、阻害濃度に対してRFUをプロットする。本質的に上記のプロトコルに従って、例示的な化合物は、ヒトカテプシンSおよびマウスカテプシンS酵素阻害アッセイにおいてそれぞれ800nM未満および400nMのIC50を示す。特に、実施例1および2の化合物は、ヒトカテプシンS酵素阻害アッセイにおいて、それぞれ約6.4nMおよび10.2nMのIC50を示し、マウスカテプシンS酵素阻害アッセイにおいて、それぞれ約1.7nMおよび3.9nMのIC50を示し、それにより、本発明の範囲内の特定の化合物がヒトおよびマウスカテプシンSの有効な阻害剤であることが実証される。ヒトカテプシンL、B、K、およびVの酵素阻害アッセイに関して、実施例1の化合物は、それぞれ約167μM超、5.2μM、100μM超、および33μMのIC50を示し、実施例2の化合物は、それぞれ約167μM超、94μM、100μM超、および100μM超のIC50を示す。ヒトカテプシンFに関して、実施例1の化合物は30μMまで阻害を示さない。これらの結果により、本発明の範囲内の特定の化合物はカテプシンSの選択的阻害剤であることが実証される。インビボCaCl2誘導性AAA動物有効性モデルAAAに対するカテプシンS阻害剤の効果を研究するためにCaCl2誘導を使用するAAA動物有効性モデルJ.Clin.Invest.,2002,1105,625-632を以下に記載するように改変する。各群、12匹のマウスを含む、実施例1について6群、および実施例2について5群に分けたTaconicCambridgeCity,Indianaからの野生型オス129SvEvマウス10週齢を使用する。実施例1および2についての群1~5にそれぞれビヒクル溶液1NATROSOL登録商標ヒドロキシエチルセルロース/0.25TWEEN登録商標80ポリソルベート80/0.05Antifoam-1510登録商標DowCorningおよびビヒクル溶液中の1、3、10、または30mg/kgの試験化合物を、4週間b.i.d.で強制経口投与により投与する。偽群CaCl2の代わりに大動脈に付与した0.9の生理食塩水およびビヒクルを投与したを表す群6実施例1の研究においてをベースラインを規定するために含む。第1の用量を外科手術の1日前p.m.に与え、第2の用量を外科手術の朝に与える。外科手術の日のp.m.に動物に用量を投与していない。b.i.d.投与a.m.およびp.m.を外科手術後に28日間継続する。外科手術の日に、動物に鎮痛剤BUPRENEX登録商標、0.1mg/kgを手術の10分前および手術の3時間後に皮下に与えた。マウスを2のイソフランの吸入により麻酔し、開腹を実施する。腹部大動脈を、外科手術用の開創器を用いて腸を横方向に引っ込め、腹腔内に腸を残すことによって露出させる。腎動脈のレベルから腸骨分岐部までの腹部大動脈を、顕微鏡下手術を使用して下大動脈および周囲結合組織から分離する。分離してから、腹部大動脈の対象の領域を、0.25nMのCaCl2水溶液で浸した前処理した滅菌コットンガーゼで覆った。偽対照動物において、0.9の生理食塩水をCaCl2に置換する。7分後、ガーゼを除去し、第2のCaCl2を浸したガーゼまたは偽動物において0.9の生理食塩水を浸したガーゼを適用する。2回目の7分後、ガーゼを除去し、大動脈を0.9の生理食塩水でリンスし、腹部を閉じる。動物を一般的な部屋に戻し、そこで動物を個々に収容し、自由に標準的な齧歯動物の食餌Purina2014および水を与える。上記の投与の4週間後、大動脈内腔周囲、ガーゼで包んだ大動脈部分の面積および直径を超音波BiosoundUltrasound-7.5MHzにより決定し、JMP登録商標7ソフトウェアCary,NorthCarolinaを用いて統計的に分析する。大動脈内腔周囲の測定により決定したAAAの減少の割合この場合、測定される大動脈部分に関連する不規則な形状に起因する腹部大動脈のより正確な測定を表すを以下の表1に示し、平均±標準偏差として表す。実施例1に関して、ビヒクル群を偽群と比較し、試験化合物をビヒクルと比較する。実施例2に関して、試験化合物をビヒクルと比較する。本質的に上記のプロトコルに従って、実施例1および2の化合物は、用量依存的に大動脈内腔周囲を減少させるので、本発明の範囲内の特定の化合物がAAAを減少させることが実証される。p10蓄積アッセイ各群が3匹のマウスを有する、4群に分けたTaconicCambridgeCity,Indianaからの野生型のオスC57B6または129SvEvマウス10週齢を使用する。群1~4にそれぞれ、ビヒクル溶液1NATROSOL登録商標ヒドロキシエチルセルロース/0.25TWEEN登録商標80ポリソルベート80/0.05Antifoam-1510DowCorningおよびビヒクル溶液中の3、10、または30mg/kgの試験化合物を強制経口により投与する。4時間後、全血300~500μLを各マウスから吸引する。赤血球を除去する工程を、1mLのフローサイトメトリー溶解溶液商標SantaCruzBiotechnology,Inc.を添加することによって実施し、10分間室温にて維持し、4000rpmで5分間遠心分離し、次いで上清を捨てる。この工程をもう1回反復して、赤血球を完全に除去する。PWBCペレットを50μLのCytoBuster商標試薬Novagenで再懸濁し、5~10秒間、高出力で超音波処理する。BCAアッセイAnal.Biochem.1988,175,231-237を使用してタンパク質濃度を決定する。ウェスタンブロットを使用してp10量を決定する。試料0.5μg/μlタンパク質濃度を5分間96°Cにて変性させ、20μl/ウェルの試料10μg/ウェルを4~12NUPAGE登録商標NOVEX登録商標Bis-TrisMidi-ゲルInvitrogenに負荷する。NUPAGE登録商標MESSDSランニングバッファーInvitrogenを用いてゲルを60分間120Vで流す。NUPAGE登録商標輸送バッファーInvitrogenおよび20のメタノールEMDを用いてタンパク質を100Vにて30分間0.2μmのニトロセルロースBIO-RADに移す。ブロットをPBSで手短にリンスし、室温にて60分間、10mLのODYSSEY登録商標遮断バッファーLI-CORBiosciencesで遮断する。p10に関して、ブロットを、4°Cにて一晩、遮断バッファー中のマウスCD74に対する一次抗体1μg/mlのラット抗CD74抗体BDBioscienceと共にインキュベートする。チューブリン対照に関して、ブロットを、4°Cにて一晩、遮断バッファー中のウサギ抗ベータチューブリンpAb0.2μg/mlAbcamと共にインキュベートする。ブロットを、0.01のポリソルベート20を含む洗浄バッファーHyClone製のDPBSで各々10分間、4回洗浄する。次いでブロットを室温にて60分間二次抗体と共にインキュベートする。p10に関して、ALEXAFLUOR登録商標680ヤギ抗ラットIgG1:5000希釈Invitrogenを使用する。チューブリンに関して、ALEXAFLUOR登録商標680ヤギ抗ウサギIgG1:5000希釈Invitrogenを使用する。ブロットを再び上記のように洗浄し、走査のためにPBS中に入れる。ODYSSEY登録商標赤外線画像装置LI-CORBiosciencesで走査することにより画像を捕捉する。ODYSSEY登録商標ソフトウェアを用いてp10量を分析し、チューブリン量で正規化する。JMP登録商標7ソフトウェアCary,NorthCarolinaを用いてデータを統計的に分析する。ビヒクルに対する相対p10蓄積倍の増加を表3に示す。平均±標準偏差として値を表す。上記のプロトコルに従って、実施例1および2の化合物はPWBC中で用量依存的にp10を増加させ、本発明の範囲内の特定の化合物が抗原提示を遮断することを実証する。"