"固体支持体に配置され、蛍光顕微鏡に取り付けられた生体試料の光学セグメンテーションのための方法であって、所定の波長の光源からの光を生体試料上に送出し、前記光により、前記生体試料が蛍光を発光し、画像取り込みデバイスを使用して前記生体試料の蛍光画像を取得し、少なくとも部分的に、フィーチャベース情報又は画素強度情報を利用して前記蛍光画像を分析して、前記生体試料内の特異的構造に対応するマスキングパターンを生成し、前記マスキングパターンを、再フォーマットされたマスキングパターンに変換して、前記画像取り込みデバイスの前記画像をデジタルマイクロミラーデバイスDMDの空間座標に位置合わせし、前記デジタルマイクロミラーデバイスDMDを使用して、前記再フォーマットされたマスクパターンを前記生体試料に投射し、前記DMDが前記光源と前記生体試料との間に配置され、前記再フォーマットされたマスク化パターンが前記生体試料と位置合わせされ、前記生体試料のマスク化蛍光画像を前記画像取り込みデバイスで取得し、前記マスク化蛍光画像をデジタル画像に転換することを含む方法。前記マスキングパターンを、再フォーマットされたマスキングパターンに変換することが、アフィン変換パラメータを前記マスキングパターンに適用することを含む、請求項1記載の方法。前記アフィン変換パラメータが較正手順を使用して計算され、前記較正手順が、目標画像を前記DMD上にアップロードし、前記画像を較正試料上に投射し、前記較正試料上に投射された前記目標画像の較正画像を取得し、前記較正画像を数を減らして選択して、前記画像取り込みデバイスとデジタルマイクロミラーデバイスDMDの空間座標との間の形状係数を整合させ、再フォーマットされた画像を生成し、前記再フォーマットされた画像を前記目標画像と位置合わせし、前記アファイン変換パラメータについて解くことを含む、請求項2記載の方法。前記数を減らして選択することが、双直線補間及び2Dテーパリング関数を前記画像取り込みデバイスからの画像に適用することを含む、請求項3記載の方法。前記アファイン変換の変換パラメータについて解くことが、フーリエ変換演算を画像位置合わせに適用することを含む、請求項3記載の方法。前記フーリエ変換演算の大きさが対数極座標空間において表される、請求項5記載の方法。前記再フォーマットされたマスクパターンを前記生体試料に投射することが、前記生体試料の空間照明を変更することをもたらす、請求項1記載の方法。前記生体試料の前記空間照明を変更することが、前記生体試料で見いだされる目標でない外因性蛍光体又は内因性蛍光化合物の励起を減少させることによって画像取り込みデバイスのダイナミックレンジを拡大する、請求項7記載の方法。前記生体試料の前記空間照明を変更することが、前記マスク化画像の空間境界内での1つ以上のバイオマーカーの光学セグメンテーションを可能にする、請求項7記載の方法。前記マスク化蛍光画像をデジタル画像に転換することが、前記再フォーマットされたマスクパターンのポジ又はネガ画像を表す、請求項1記載の方法。前記生体試料の蛍光画像を取得することが、前記蛍光画像の信号対雑音比、忠実度、特異性、又はそれらの組合せを向上させるために前記試料を選択的に照明するのに前の画像からの画像情報を使用することを含む、請求項1記載の方法。固体支持体に配置された生体試料の光学セグメンテーションのための画像分析システムであって、前記生体試料を取り付けるためのステージを有する蛍光顕微鏡と、前記生体試料を照明し、光が前記蛍光顕微鏡の開口を通り、前記生体試料上に誘導されるように配置された光源と、前記光源と前記蛍光顕微鏡の前記開口との間に配置されるデジタルマイクロミラーデバイスDMDと、前記蛍光顕微鏡に取り付けられ、前記生体試料の蛍光画像を取得するように構成された画像取り込みデバイスと、前記画像取り込みデバイスからの蛍光画像を受け取り、少なくとも部分的に、フィーチャベース情報又は画素強度情報を利用して前記蛍光画像を分析して、前記生体試料内の特異的構造に対応するマスキングパターンを生成し、前記マスキングパターンを、再フォーマットされたマスキングパターンに変換して、前記画像取り込みデバイスの前記画像を前記DMDの空間座標に位置合わせするように構成された、デジタル光プロセッサとを備えるシステム。前記デジタル光プロセッサがアフィン変換パラメータを前記マスキングパターンに適用するように構成される、請求項12記載のシステム。前記デジタル光プロセッサが、前に分析した1つ以上の試料からのアフィン変換パラメータを記憶するようにさらに構成される、請求項13記載のシステム。前記前に分析された試料が較正試料からのものである、請求項14記載のシステム。前記DMDは、個々のマイクロミラー表面に入射する光が前記蛍光顕微鏡の前記開口の中に又は離れたところに偏向され、その結果、パターン画像が前記生体試料上に投射されうるように構成された2次元MEMSミラーアレイである、請求項12記載のシステム。前記デジタル光プロセッサが、前の画像からの画像情報を使用して前記生体試料の前記照明を制御するようにさらに構成され、前記照明が、前記取り込まれる蛍光画像の信号対雑音比、忠実度、特異性、又はそれらの組合せを向上させる、請求項12記載のシステム。しかし、画像取得自体の間に、関心のある特異的領域を目標とするか、又はコントラスト及び信号対雑音比を局所的に向上させるのに使用することができる方法の必要性がある。実時間SIMプロセスは、後続の照明パターンを調整するために組織画像の前の情報又は特異的フィーチャを使用して試料の蛍光励起及び分析の効率又は特異性を改善することになる。しかし、これを達成するには、取得される画像及び照明マスクが位置合わせされ、その結果、後続の画像取得の間、照明マスクを試料に正確に重ねることができることをプロセスは必要とする。本発明は、光学セグメンテーションを使用して生体試料中のタンパク発現及び場所をイメージングすることに関する。したがって、本発明の一実施形態は、固体支持体に配置され、蛍光顕微鏡に取り付けられた生体試料の光学セグメンテーションのための方法を含む。この方法は、所定の波長の光源からの光を生体試料上に送出し、光により、生体試料が蛍光を発光し、画像取り込みデバイスを使用して生体試料の蛍光画像を取得し、少なくとも部分的に、フィーチャベース情報又は画素強度情報を利用して蛍光画像を分析して、生体試料内の特異的構造に対応するマスキングパターンを生成し、このマスキングパターンを、再フォーマットされたマスキングパターンに変換して、画像取り込みデバイスの画像をデジタルマイクロミラーデバイスDMDの空間座標に位置合わせし、デジタルマイクロミラーデバイスDMDを使用して、再フォーマットされたマスクパターンを生体試料に投射し、DMDが光源と生体試料との間に配置され、再フォーマットされたマスク化パターンが生体試料と位置合わせされ、生体試料のマスク化蛍光画像を画像取り込みデバイスで取得し、マスク化蛍光画像をデジタル画像に転換することを含む。別の実施形態では、本発明は、固体支持体に配置された生体試料の光学セグメンテーションのための画像分析システムを含む。この画像分析システムは、生体試料を取り付けるためのステージを有する蛍光顕微鏡と、生体試料を照明し、光が蛍光顕微鏡の開口を通り、生体試料上に誘導されるように配置された光源と、光源と蛍光顕微鏡の開口との間に配置されるデジタルマイクロミラーデバイスDMDと、蛍光顕微鏡に取り付けられ、生体試料の蛍光画像を取得するように構成された画像取り込みデバイスと、デジタル光プロセッサとを備える。デジタル光プロセッサは、画像取り込みデバイスからの蛍光画像を受け取り、少なくとも部分的に、フィーチャベース情報又は画素強度情報を利用して蛍光画像を分析して、生体試料内の特異的構造に対応するマスキングパターンを生成し、このマスキングパターンを、再フォーマットされたマスキングパターンに変換して、画像取り込みデバイスの画像をDMDの空間座標に位置合わせするように構成される。本発明のこれら及び他の特徴、態様、及び利点は、図面の全体を通して同様の符号が同様の部分を表す添付図面を参照しながら以下の詳細な説明が読まれるとき一層よく理解されるであろう。従来の蛍光イメージングシステムでは、空間的に均一な光源を使用して関心のある蛍光標識されたバイオマーカーを励起し、それにより、生体試料内で見いだされる外因性蛍光体及び内因性蛍光化合物の両方の励起がもたらされる。しかし、所与のタンパクが、細胞核又は上皮などの特異的細胞領域で主として発現することが知られている場合、この情報を利用して、蛍光励起の効率又は特異性を改善することができる。タンパク発現領域の外側の励起は、まず所与のチャネルの関心のある構造の均一照明の画像を取り込み、この画像を、関心のあるマーカーに対応するチャネルのための照明マスクとして使用することよって避けられる。本発明は、概して、均一照明の生体試料から得られた情報を使用して、生体試料内の関心のある構造フィーチャを選択的に照明する画像取得法に関する。この方法は、生体試料内の特異的構造に対応するマスキングパターンを生成することを含む。特異的構造は、限定はしないが、細胞膜マーカー、血管マーカー、核染色、腫瘍マーカー、上皮マーカー、又は間質マーカーを含む高発現形態学的信号である。生成されたマスキングパターンは、少量マーカーが存在すると推定される領域の照明で使用することができる。したがって、この方法は、リポフスチンや赤血球などの試料内の高度放出発生源に関連する問題の幾つかを緩和することによって試料のダイナミックレンジイメージングを拡大するのに使用される。例えば、選択された細胞内組織領域のダイナミックレンジイメージングは、赤血球などの試料内の他の物体の励起を避けながら、必要とされる照明をより多く送ることによって、最適化することができる。言い換えれば、目標とされていない、生体試料内で見いだされる外因性蛍光体及び内因性蛍光化合物の両方の励起を減少させることができる。さらに、形態学的マーカーを使用して設計された照明マスクにより、特異的細胞及び組織構造を対象とした他の生物マーカーの検出を可能にすることができる幾つかの実施形態では、生体試料は固体支持体に取り付け、生体試料上に投射されるマスキングパターンを使用して分析するための蛍光顕微鏡に配置することができる。生体試料という用語は、生体内又は生体外で得られる生体組織又は流体起源の試料を含む生物学的対象から得られる試料を指す。そのような試料は、限定はしないが、人間を含む哺乳動物から分離された体液例えば、血液、血漿、血清、又は尿、臓器、組織、画分及び細胞とすることができる。生体試料は、組織を含む生体試料の切片例えば、臓器又は組織の断面部分をさらに含むことができる。生体試料は、生体試料からの抽出物、例えば、生体液例えば、血液又は尿からの抗原をさらに含むことができる。生体試料は原核生物起源又は真核生物起源例えば、昆虫、原生動物、鳥、魚、爬虫類のものとすることができる。実施形態によっては、生体試料は哺乳類例えば、ネズミ、マウス、牛、犬、ロバ、モルモット、又はウサギである。幾つかの実施形態では、生体試料は霊長類起源例えば、チンパンジー又は人間である。さらに、固体支持体は、生体試料が本明細書で開示する方法によって固定され、続いて検出されうる物品を指す。生体試料は、物理吸着によって、共有結合形成によって、又はそれらの組合せによって固体支持体に固定することができる。固体支持体は、重合体、ガラス、又は金属材料を含むことができる。固体支持体の例には、膜、マイクロタイタ板、ビード、フィルタ、テストストリップ、スライド、カバーガラス、及び試験管が含まれる。イメージングに先立って、生体試料は、まず、分子マーカー色素及び抗体を使用して、蛍光色素又は蛍光体で標識することができる。例えば、細胞核はDAPIDNAに特異的に結合する蛍光色素で染色することができるが、一方、組織の他の領域は免疫蛍光法的に標識することができ、関心のある分子は、直接共役した抗体によって、又は主要な二次増幅検出によって目標にされる。赤血球RBCなどの幾つかの構造では、自己蛍光が生じることがある。マスキングパターンを生成する方法は、所定の波長の光源からの光を生体試料上に送出することを含み、光により、生体試料は蛍光を発光する。幾つかの実施形態では、生体試料は表面の端から端まで均一に照明される。他の実施形態では、前の走査又は同様の試料から得られた画像情報を使用して、試料を選択的に照明することができる。選択的な照明は、後続で取り込まれる広視野蛍光画像の信号対雑音比、忠実度、特異性、又はそれらの組合せを向上させることができる。画像取り込みデバイスを使用して生体試料の広視野蛍光画像を取り込み、分析のためのデジタル光プロセッサDLPに移送することができる。画像は、少なくとも部分的に、フィーチャベース情報又は画素強度情報を使用して分析されて、生体試料内の特異的構造に対応するマスキングパターンが生成される。マスキングパターンは、広視野蛍光画像をデジタルマイクロミラーデバイスDMDの空間座標に位置合わせするためにDLPを使用して再フォーマットすることができ、デジタルマイクロミラーデバイスDMDは、光源とイメージングシステムの照明光学系との間に配置され、取り付けられた生体試料上に再フォーマットされたマスク化画像を投射するのに使用される。画像をDMD座標に再フォーマットすると、広視野画像とDMDデバイスとの間のアレイ密度の差に関係する画像解像度の変動が除去され、したがって、重ねられた画像の配置が改良される。DMDは様々な画素アレイで構成することができる。幾つかの実施形態では、DMDは、光を照明経路又は液晶デバイスの中に又はそれから離れたところに誘導することができるMEMSミラーとすることができる。MEMSミラー微小電気機械システムはリソグラフィで生成されるミラーであり、それは、同様のリソグラフィ技法で生成される集積回路を通して印加される電圧信号で作動される。これらのミラーは、一般に、ミリメートル又は1ミリメートルの数分の1である寸法を有する。幾つかの実施形態では、DMDを構成するマイクロミラーは、オン状態及びオフ状態に対応する2つの角度の一方に配置される。状態間を切り替えるために、各ミラーは対角軸のまわりに個々に回転される。各マイクロミラーから反射される光は、図1に示されるように、オン状態では顕微鏡の照明光学系に誘導され、又はオフ状態では顕微鏡の入口から離れたところに偏向される。図2は、顕微鏡に取り付けられることになるシステムを通る照明経路を示す本発明の一実施形態の図である。コリメータレンズ40は、光源図示せずからの光を、限定はしないが非球面レンズなどのイメージング要素50により集束し、光は広帯域ミラー60からDMD70に反射される。DMDマイクロミラー表面に入射し、顕微鏡対物レンズ80に誘導される光は、非球面イメージングレンズ90を通り視野絞り開口100上に進む。図2に示される照明経路中で画像を視野絞り上に合焦することによって、試料それ自体に焦点が合っている限り、DMDパターンは試料上に鮮明にイメージングされる。視野絞りは対物レンズの焦点面と共役であり、そのため、視野絞りと同一平面上にある画像が対物レンズの焦点面に中継ぎされることになる。カメラで取得された画像をDMDパターンとして使用するために、画像が顕微鏡光学系を通って投射されるときに生じる変倍、平行移動、及びシフトに一致させるのにアフィン変換を適用することができる。アフィン変換は、当初、線上にはあるすべての点が距離の変換及び拡大縮小の後に依然として線上にあり、線分の中間点が変換の後に中間点にとどまるような共線性を保存する任意の変換を指す。アフィン変換の必要性に加えて、形状係数の不整合があることがある。例えば、DMDは768×1024ミラーであるミラーアレイを有することがあり、一方、カメラセンサは1728×2352画素である画素アレイを有することがある。したがって、DMDで使用するためにカメラ画像を再フォーマットするプロセスは、最終フォーマットが元のカメラ画像よりも少ない画素を有するのでダウンサンプリングを必要とすることがある。変換パラメータが分かった後、変換パラメータをカメラで取得された画像に適用して、再フォーマットされた画像を生じさせることができ、それをDMDにアップロードすることができる。再フォーマットされた画像は、顕微鏡を通して投射されるとき試料と正確に位置合わせされることになる。図3は、カメラ座標をDMDの座標にマッピングするアフィンパラメータを解くのに使用することができる1つの較正ルーチンを示す流れ図である。目標の画像は、それぞれパラメータS、x、及びy、すなわち変倍、回転、xシフト、及びyシフトを解くために元の画像に位置合わせされる。一実施形態では、図3に示されるように、目標画像がDMD上にアップロードされ1、較正試料上に投射される2。試料上のこの目標の画像は顕微鏡カメラにより取得される3。次に、試料は、2つの画像の間の形状係数を一致させて再サンプリングしたカメラ画像を生成するために数を減らして選択することができる4。再サンプリングされたカメラ画像と目標DMD画像とは、位置合わせされ、アファイン変換パラメータ、すなわち、2つの画像間の回転、変倍、及びx-y平行移動を解くのに使用される5及び6。変換パラメータが計算された後、パラメータは記憶し7、同じ顕微鏡カメラ及びDMDを使用する生体試料画像の位置合わせに適用する8ことができる。一実施形態では、較正ルーチンは、変換パラメータのために目標DMD画像を使用し、それによって、DMD画像は角と直線などの輪郭の明確なフィーチャを使用して、目標と試料平面上のその投射との間の頑健な位置合わせを容易にすることができる。このタイプの較正で使用される較正目標画像が図4に示され、スライドガラスとカバーガラスとの間に押しつけられた高濃度Cy3色素の薄層からなる。この目標は、Cy3フィルタセットで観察されるとき蛍光の明るい均一層をもたらした。色素層を薄くすると、ハイコントラストをもつ最良合焦の狭い範囲が保証された。図4は、DMD目標画像A、位置合わせの前の試料への投射B、及び位置合わせの後の試料への投射Cを示す。物体への目標DMD投射が768×1024画素を有し、カメラの画像が1728×2352画素を有するとすると、カメラ画像の再サンプリングを使用して、位置合わせの前に2つの画像間の形状係数を一致させるようにすることができる。幾つかの実施形態では、双直線補間を使用して、カメラ画像の非整数座標での画素値が決定される。幾つかの実施形態では、ハニング窓などの2Dテーパリング又はエッジフィルタリング関数を使用することができる。例えば、図4に示されたものなどの画像に2Dハニング窓関数を乗算して、画像の外側の50の画素をゼロまで滑らかに次第に減少させることができる。そのようなテーパ窓は、位置合わせの際に画像フィーチャとして間違えることがあるエッジアーチファクトの存在を避けるのに使用することができる。窓処理の後、目標DMD画像と再サンプリングされたカメラ画像とを位置合わせして、アファイン変換パラメータを解くことができる。2つの画像の間の回転、変倍、及びx-y平行移動が与えられたとして、適切な変換を適用してパラメータの各々を系統的に分離し、解くことができる。幾つかの実施形態では、フーリエ変換を使用することができるが、それは、画像のシフトがそのフーリエ変換の大きさを変更しないからである。したがって、各画像のフーリエ変換の大きさのみを考慮することによって、画像位置合わせは回転と変倍との係数に制限されうる。画像の回転は、そのフーリエ変換の大きさの等しい回転をもたらす。α倍だけ画像を変倍すると、1/α倍だけ変倍されたフーリエ変換の大きさがもたらされる。しかし、これらのパラメータは、多くの場合、フーリエ変換から直接評価することが難しい。別の手法は、フーリエ変換の大きさを対数極座標空間で表すこととすることができる。対数極座標変換は、画像を半径座標及び角度座標に割り当てるように適用することができ、それにより、変倍と回転はρ軸及びθ軸上の平行移動に本質的に転換される。画像のフーリエ変換の大きさは、C=logabsFc及びD=logabsFdであり、ここで、c及びdは、それぞれ、ハニング窓を乗算した後のカメラ画像及びDMD画像を表す。画像C及びDが図5に示され、上にある行は全画像であり、下の行は拡大区域を示す。図5で観察されるように、画像CはDの変倍及び回転されたバージョンであり、そのため、極座標変換Cp及びDpは以下の関係式を有し、Cpρ;θ=Dpρ/α,θ-θ’ここで、αは変倍係数であり、θ’は度単位の回転である。したがって、回転はθ軸に沿った平行移動に換算される。変倍係数を半径軸に沿った平行移動に換算するために、このρ軸は対数目盛りを使用して表すことができる。その結果は対数極座標画像Clp及びDlpであり、それらは、以下の関係式Clpρ;θ=Dlplogρ-logα,θ-θ’を有する。次に、変倍係数は、以下のように対数極座標空間で平行移動logaを見いだし、指数化することによって解くことができる。a=elog同様に、回転は、ρ軸に沿ったシフトについて解くことによって決定される。対数極座標表現Clp及びDlpが図6に示される。図6は、DMD画像A及びカメラ画像Bのフーリエ変換の大きさの対数極座標変換の顕微鏡写真図である。これらの変換は中心としてフーリエ変換の中心又はDC項を使用しており、したがって、前のフーリエ変換で観察された変倍及び回転をρ軸及びθ軸に沿った平行移動に転換する。平行移動は、位相相関、すなわち、2つの画像の相対シフトをそれらの位相オフセットに基づいて決定する周波数ドメイン技法を使用して決定することができる。2つの画像a及びbからの位相相関は、まず2つの信号の規格化クロスパワースペクトルを計算することによって決定することができ、R=AB/[AB]と定義され、ここで、A及びBは画像a及びbのフーリエ変換である。この場合、a及びbは対数極座標変換Clp及びDlpである。次に、関数rがRの逆フーリエ変換から得られる。横方向シフトは、rのピークの水平及び垂直の位置に対応し、Δx;Δy=argmaxrである。この技法を使用して、対数極座標プロットにおけるlogr及びθシフトを解くことができる。同様に、変倍及び回転を適用した後、2つの結果として生じる画像は、単に、x及びyのシフトの点で異なる。位相相関を適用して、2つの画像のx及びy平行移動を見いだすことができる。実験構造化照明は、市販のDMD開発基盤のDLP登録商標DISCOVERY商標4000テキサス州、ダラスのTexasInstrumentsInc.を使用して実施された。このモジュールにより、8ビットグレースケール画像をアップロードし、XGA解像度768×1024画素で表示することができる。広帯域水銀ランプのEXFOX-CITE登録商標120Qカナダ、ケベックのEXFOElectro-OpticalEngineeringInc.がシステムのための照明光源として使用された。液体ライトガイドが、ランプからの出力光をコリメートレンズまで導くのに使用されている。次に、200mm焦点距離の非球面がコリメートビームをおよそDMDのサイズ0.7の対角線長さのスポットに集束する。集束ビームの経路は、まず、DMDの面上に集束する前に、方向転換ミラーにより適切な角度で方向づけられる。最後に、2直径の100mmの非球面ダブルを使用して、DLPの画像がOlympus登録商標BX-51顕微鏡ペンシルバニア州、CenterValleyのOlympusAmericaInc.の視野絞り上に中継ぎされる。A.ダイナミックレンジ拡大照明強度の空間的な変更を使用して、普通なら検出器を飽和させることになる領域から放出される信号の量を減少させることができる。これが、赤血球を含む前立腺試料を使用して実証され、それが図7に示されるようにCy3チャネルでイメージングされている。赤血球は、カメラのダイナミックレンジを凌駕するのに十分な大きさの強度で蛍光を発し、その結果として、関心のある信号は比較的低い信号対雑音比SNRのままである。赤血球への励起を低減するマスクを用いて照明した後、集積時間が検出器を飽和させることなく3倍にされた。これが図8に示される。信号領域の0.35メガ画素区域にわたる平均化により、飽和する均一照明の画像では43.1の平均画素値が示され、それは構造化照明による同じ領域の91.9の平均値と比較される。構造化照明の使用により、飽和を避けながら平均信号において2倍を超える増加がもたらされた。この結果は、強い自己蛍光発生源を取り扱うシステムのダイナミックレンジの有効な増加を実証している。飽和の場合には、均一照明の画像を使用し、飽和画素をゼロに設定することによって照明マスクが形成される。B.光学セグメンテーション生体構造の光学セグメンテーションは、関心のある形態学的フィーチャに対して染色した試料の画像を取得することによって行われる。この画像を処理することによって、照明マスクを生成し、それにより、関心のある構造に対応する領域にのみ励起が到達するようにすることができる。このマスクを異なるチャネルに使用することにより、マスクに対応する生体試料の形態論的構造の空間境界内での任意のバイオマーカーのセグメンテーションが可能になる。これが、上皮対間質細胞核のセグメンテーションに対して様々な組織試料で実証された。図9は、ケラチン及び細胞核に対して染色された結腸組織、すなわち、DAPIチャネルでイメージングされた染色細胞核A、Cy3バンドで着色するケラチンB、及び照明マスクとしてケラチン画像を使用してDAPIチャネルでイメージングされた上皮核Cの例である。ケラチン、すなわち、皮膜組織の多量タンパクがCy3バンドで染色され、細胞核がDAPIで染色される。皮膜組織のCy3チャネル画像が与えられると、ヒストグラム正規化とそれに続く閾値処理により、上皮組織の2値マップが与えられる。次に、このマップは位置合わせされ、DMDに送出される。DAPIチャネルへの切替え及び上皮照明マスクの適用により、上皮細胞核のみが励振されることになる。本発明は、分析物検出、組織化学、免疫組織化学、又は免疫蛍光法などの分析、診断、又は予知の用途のために生体試料を使用することに一般に関係する実施形態を含む。幾つかの実施形態では、本明細書で開示された方法は、組織化学、免疫染色、免疫組織化学、免疫測定、又は免疫蛍光法において特に適用可能とすることができる。幾つかの実施形態では、本明細書で開示された方法は、免疫ブロット技法、例えば、ウェスタンブロット、又は酵素結合免疫吸着検定法ELISAなどの免疫測定において特に適用可能とすることができる。本発明はその趣旨又は本質的特質から逸脱することなく他の特異的形態で具現することができる。したがって、前述の実施形態は、本明細書で説明された本発明に限定するものではなくあらゆる点で例示と見なされるべきである。したがって、本発明の範囲は前述の説明によってではなく添付の特許請求の範囲によって示され、したがって、特許請求の範囲の均等の意味及び範囲内に入るすべての改変はその範囲内に包含されるものである。"