"κ免疫グロブリン軽鎖mRNAまたは対応する異核hetereonuclearRNAを検出するためのプローブセットであって、プローブが配列番号:1から16までより本質的になる群から選ばれることを特徴とする、プローブセット。λ免疫グロブリン軽鎖mRNAまたは対応する異核RNAを検出するためのプローブセットであって、プローブが配列番号:17から19までより本質的になる群から選ばれることを特徴とする、プローブセット。サイトメガロウイルスCMV即時型RNAおよび/または対応するmRNAを検出するためのプローブセットであって、プローブが配列番号:3-30から50までより本質的になる群から選ばれることを特徴とする、プローブセット。エプスタインバーウイルスEBVの初期RNAs、RNA1およびRNA2、EBERを検出するためのプローブセットであって、プローブが配列番号:51から54までより本質的になる群から選ばれることを特徴とする、プローブセット。ヒトAlu反復サテライトゲノムDNA配列を検出するためのプローブセットであって、プローブが配列番号:55および56より本質的になる群から選ばれることを特徴とする、プローブセット。プローブが配列番号:59から74まで、とそれらの相補体より本質的になる群から選ばれるDNAプローブセット。プローブが配列番号:75から87まで、とそれらの相補体より本質的になる群から選ばれるDNAプローブセット。プローブが配列番号:88から108まで、とそれらの相補体より本質的になる群から選ばれるDNAプローブセット。プローブが配列番号:109から112まで、とそれらの相補体より本質的になる群から選ばれるDNAプローブセット。プローブが配列番号:113から114まで、とそれらの相補体より本質的になる群から選ばれるDNAプローブセット。配列番号:58の配列からなる標識ドメインを有する第1のドメイン及び遺伝子特異的標的配列を有する標的ドメインを含む第2のドメインを含んでなる合成オリゴヌクレオチドプローブ。<好適な実施態様の詳細な記述>本発明は、細胞もしくは組織サンプル中の核酸標的遺伝子を検出または局在化するためのオリゴヌクレオチドプローブおよびオリゴヌクレオチドプローブコレクションを提供する。特に、本発明は、インサイチューハイブリダイゼーション解析における使用のためのオリゴヌクレオチドプローブのコレクションに関する。より具体的には、本発明は、オリゴヌクレオチドプローブまたはタンパク質に検出可能な部分標識を結合するためのヌクレオチドポリマーまたは標識ドメインについての特定の配列式の使用に関する。これらの配列もしくはその誘導体の特定の利用は、ハイブリダイゼーション条件の標準ストリンジェンシー下では検出可能なレベルにおいてヒトDNAもしくはRNAにハイブリダイズしないという不活性または非反応性の特性である。これらの標識ドメインまたはポリマーは、インサイチューハイブリダイゼーション解析において細胞もしくは組織サンプル中の遺伝子に特異的な配列を検出するためのオリゴヌクレオチドプローブ中への組み入れに有用な遺伝子配列であることが例証された。さらに、この不活性な配列のセットは、免疫組織化学的解析においてハプテンおよび抗原を検出するために、免疫グロブリンもしくは他のタンパク質に標識を結合させるために有用である。本明細書で使用されるように、用語プローブもしくはオリゴヌクレオチドプローブは、相補的核酸標的遺伝子を検出するために使用される核酸分子を指す。本明細書で使用されるように、用語ハイブリダイゼーションは、相補的核酸または相補体配列が結合して二本鎖核酸分子を形成する過程を指す。例えば、放射性もしくは蛍光タグにより標的核酸分子を標識することによって、プローブと標的遺伝子間の相互作用が検出できる。本発明のオリゴヌクレオチドプローブおよびコレクションのオリゴヌクレオチドプローブは慣用の方法を用いて合成される。参照、例えば、MethodsinMolecularBiology,Vol20:ProtocolsforOligonucleotidesandAnalogs165-89S.Agrawal,ed.,1993;OligonucleotidesandAnalogues:APraticalApproach87-108F.Eckstein,ed.,1991。本発明の好適な実施態様では、オリゴヌクレオチドプローブは、2つの別個のドメイン:5’または標識ドメインおよび3’または遺伝子に特異的な標的ドメインを保持する参照、図1A。本発明のより好適な実施態様では、オリゴヌクレオチドプローブは、配列CTATTTTnおよび/または配列CTATTTTnCTからなる標識ドメインを保持する。また、他の実施態様が本明細書において例証され、これは2つの末端の標識ドメインおよび中央の遺伝子特異的標的ドメインを有する3重ドメイン態様も含む。具体的には、配列番号:125-126がこの標識スキームを表している。なお、標識ドメインのさらなる好適な実施態様は、TCTTTTATCnまたはその相補体である。この配列はCTATTTTnCT標識ドメインと同じくらい独特であると予想される。本発明のオリゴヌクレオチドプローブは、特定の細胞もしくは組織において該プローブと標的核酸との間のハイブリダイゼーションが検出できるように標識される。インサイチューハイブリダイゼーションISH解析における使用のために許容される標識は当業者には既知である。そのような標識は、例えば、放射能に基づく直接検出法、蛍光に基づく直接検出法、蛍光に基づく直接検出法と共役されたジゴキシゲニン標識もしくはビオチン標識したプローブ、または抗体-酵素に基づく検出法と共役されたジゴキシゲニン標識もしくはビオチン標識したプローブを用いて、プローブと標的遺伝子間の相互作用が検出されるのを可能にする。本発明の好適な実施態様では、オリゴヌクレオチドプローブはフルオレセインにより標識される。本発明のより好適な実施態様では、オリゴヌクレオチドプローブは、シトシンヌクレオチドが、直接検出のための発蛍光団、または間接検出のためのハプテンにより標識されてもよい配列CTATTTTnCTからなる標識ドメインを保持する。いずれにおいても、フルオレセイン-シトシンヌクレオチド複合体およびフルオレセイン分子は、OBEA結合を介してシトシンのN4位に結合される引用によって本明細書に組み入れられているMishraetal.,米国特許第5,684,142号参照。好適な実施態様では、標識ドメインに結合される発蛍光団の密度は、標識ドメインのみに対して測定された場合、少なくとも7モル、好ましくは少なくとも10モル、もっとも好ましくは少なくとも16モルである。例えば、プローブ401が考えられる場合2ドメインプローブ、それは、Cがまた標識される3’末端CTを含む30塩基の標識ドメインを含有し、モルは5/30=16.7モル標識である。プローブ全体では、モルは8.3である。本発明の幾つかの実施態様では、いくつかの標的遺伝子が、複数の異なる核酸タグで標識された複数の核酸プローブに細胞もしくは組織サンプルを接触させることによって同時に解析される。例えば、複数の核酸プローブが、異なる発光波長をもつ複数の蛍光化合物により標識でき、それによって単一の標的細胞もしくは組織サンプルにおいて1段階で実施される同時多色分析を可能にする。本発明のオリゴヌクレオチドプローブおよびオリゴヌクレオチドプローブコレクションは、細胞もしくは組織サンプル中の核酸標的遺伝子を検出または局在化するためにISH解析において使用することができる。ISH解析は、例えば、InSituHybridization:MedicalApplicationsG.R.CoultonandJ.deBelleroche,eds.,KluwerAcademicPublishers,1992;InSituHybridization:InNeurobiology;AdvancesinMethodologyJ.H.Eberwine,K.L.Valentino,andJ.D.Barchas,eds.,OxfordUniversityPress,1994;またはInSituHybridization:APracticalApproachD.G.Wilkinson,ed.,OxfordUniversityPress,1992において記述されるように実施されてもよい。2ドメインプローブ設計の遺伝子プローブ構造を図解する。これは、上記実施例において記述される遺伝子特異的カクテルにおけるプローブのために使用されるオリゴヌクレオチドの設計である。各プローブは、2つのドメイン:5’標識ドメインおよび3’標的遺伝子の標的遺伝子に特異的なドメインからなる。標識ドメインは、この特異配列CTATTTTnCTからなり、この場合、シトシンヌクレオチドは、シトシン-ハプテン複合体であり、この実施例ではハプテンはフルオレセインである。この図は、具体的には、301配列番号:55および302配列番号:56プローブについての核酸配列を示し、これらの各々は、ヒト反復Alu配列に対応する標的遺伝子の遺伝子特異的ドメインおよびフルオレセインハプテンを有する標識ドメインを保持する。標識ドメインを含んでなるプローブ330プローブ;配列番号:58を用いるヒト皮膚組織のインサイチューハイブリダイゼーションISH解析について得られた結果を説明する。検出可能なシグナルの不在は、これらのISH実施例において使用されたオリゴヌクレオチドに共通する標識ドメインの配列式CTATTTTnCTが、それがハイブリダイズしないためにヒト核酸配列とワトソンクリック塩基対を形成する能力において非特異的で、そして非反応性であることを示している。標識ドメインおよびポリdT標的遺伝子特異的ドメインを含んでなるプローブ320プローブ;配列番号:57を用いるヒト皮膚組織のISH解析について得られた結果を説明する。細胞質に局在される検出可能なシグナルの存在は、このプローブがメッセンジャーRNAのポリアデニル化領域に特異的にハイブリダイズできることを示している。組織サンプルが、インサイチューハイブリダイゼーション前にリボヌクレアーゼAにより処理されなかったAか、またはインサイチューハイブリダイゼーション前にリボヌクレアーゼAにより処理されたB場合の、320プローブを用いるヒト皮膚組織のISH解析について得られた結果を説明する。Bにおける検出可能なシグナルにおける減少は、このプローブがメッセンジャーRNAに共通するポリアデニル化領域に特異的にハイブリダイズすることを示している。ハイブリダイゼーションおよびストリンジェンシー洗浄が室温Aまたは37°CBで実施された場合の、320プローブを用いるヒト脾臓組織のISH解析について得られた結果を説明する。この結果は、より強い発色がより低いストリンジェント条件を示すことによって、発色の強度がハイブリダイゼーション条件のストリンジェンシーに関係することを示している。320プローブを用いるヒトRaji細胞系のISH解析について得られた結果を説明する。これは、このプローブ設計がまた包埋細胞系ならびに包埋組織を用いて機能することを示している。301および302プローブからなるプローブコレクションを用いるヒトRaji細胞系のISH解析について得られた結果を説明する。301および302プローブからなるプローブコレクションを用いるヒトHT細胞系のISH解析について得られた結果を説明する。301および302プローブからなるプローブコレクションを用いるラット細胞系のISH解析について得られた結果を説明する。検出可能なシグナルの不在は、このプローブコレクションがヒト核酸配列に特異的であることを示している。Epstein-BarrウイルスEBVEBER核RNAに対応する標的遺伝子特異的ドメインを保持するプローブ配列番号:51から54までを用いるEBV陰性ヒトHT細胞系のISH解析について得られた結果を説明する。EBVEBER1および2核RNAに対応する標的遺伝子特異的ドメインを保持するプローブからなるプローブコレクション配列番号:51から54までを用いるヒト脾臓組織のISH解析について得られた結果を説明する。EBVEBER1および2核RNAに対応する標的遺伝子特異的ドメインを保持するプローブからなるプローブコレクション配列番号:51から54までを用いるヒト扁桃組織のISH解析について得られた結果を説明する。EBVEBER1および2核RNAに対応する標的遺伝子特異的ドメインを保持するプローブからなるプローブコレクション配列番号:51から54までを用いるヒト脾臓組織のISH解析について得られた結果を説明するが、この場合、組織サンプルは、インサイチューハイブリダイゼーション前にリボヌクレアーゼAにより処理されなかったAか、またはインサイチューハイブリダイゼーション前にリボヌクレアーゼAにより処理されたB。Bにおける検出可能なシグナルにおける減少は、このプローブがヒトEBER1および2核RNAに特異的にハイブリダイズすることを示している。ヒト免疫グロブリンλ軽鎖mRNAに対応する標的遺伝子特異的ドメインを保持するプローブ配列番号:15を用いるκ軽鎖ポジティブヒト扁桃組織のISH解析について得られた結果を説明する。ヒト免疫グロブリンλ軽鎖mRNAに対応する標的遺伝子特異的ドメインを保持するプローブからなるプローブコレクション配列番号:2-4、配列番号:7-12、配列番号:14,15を用いるリンパ腫組織のISH解析について得られた結果を説明する。Aのリンパ腫組織はκ軽鎖を過発現し、そしてBの組織はλ軽鎖を過発現する。Bにおける検出可能なシグナルの不在は、κ軽鎖プローブコレクションがκ軽鎖mRNAに特異的であることを示している。ヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変部mRNAに対応する標的遺伝子特異的ドメインを保持するプローブ配列番号:19から29までを用いるλ軽鎖ポジティブヒト扁桃組織のISH解析について得られた結果を説明する。ヒト免疫グロブリンλ軽鎖mRNAに対応する標的遺伝子特異的ドメインを保持するプローブからなるプローブコレクション配列番号:19から29までを用いるλ軽鎖ポジティブヒトRPMI8226細胞系のISH解析について得られた結果を説明する。ヒト免疫グロブリンλ軽鎖mRNAに対応する標的遺伝子特異的ドメインを保持するプローブからなるプローブコレクション配列番号:19から29までを用いるヒト脾臓組織のISH解析について得られた結果を説明する。Aの組織はλ軽鎖を過発現し、そしてBの組織はκ軽鎖を過発現する。Bにおける検出可能なシグナルの不在は、λ軽鎖プローブコレクションがヒトλ軽鎖mRNAに特異的であることを示している。CMV即時型RNAに対応する標的遺伝子特異的ドメインを保持するプローブからなるプローブコレクション配列番号:30-32,配列番号:34-35,配列番号:38,配列番号:50を用いるサイトメガロウイルスCMVポジティブヒト肺組織のISH解析について得られた結果を説明する。矢印はCMV感染細胞を示す。CMV即時型mRNAに対応する標的遺伝子特異的ドメインを保持するプローからなるプローブコレクション配列番号:30-32,配列番号:34-35,配列番号:38,配列番号:50を用いる、CMV即時型RNAの発現がシクロヘキサミドによって誘発されなかったラット9G細胞系のISH解析について得られた結果を説明する。CMV即時型RNAに対応する標的遺伝子特異的ドメインを保持するプローブからなるプローブコレクション配列番号:30-32,配列番号:34-35,配列番号:38,配列番号:50を用いる、CMV即時型RNAの発現がシクロヘキサミドによって誘発されたラット9G細胞系のISH解析について得られた結果を説明する。Aの組織は倍率40Xにおいて示され、そしてBの組織は倍率20Xにおいて示される。本発明のプローブおよびプローブコレクションの好適な実施態様は、図1-21および実施例1-2を参照することによってもっとも良く理解される。以下に示す実施例は、本発明の特別な実施態様および種々のその使用の具体的説明である。それらは、説明の目的のためにのみ記述され、そして本発明を限定するものとして解釈されるべきではない。実施例1プローブコレクションの調製長さ55~60塩基の多数のオリゴヌクレオチドプローブからなるプローブコレクションが次のように設計された。この実施例では、各オリゴヌクレオチドプローブは、2つの別個のドメイン:5’または標識ドメインおよび3’または標的遺伝子に特異的ドメインを保持した参照、図1。この実施態様では、標識ドメインは配列CTATTTTnCTからなり、この場合、シトシンヌクレオチドは、フルオレセイン-シトシンヌクレオチド複合体を表し、そしてフルオレセイン分子は、OBEA結合を介してシトシンのN4位に結合される。標的遺伝子に特異的なドメインは、特定核酸標的遺伝子に対して相補的である25-30塩基配列からなる。オリゴヌクレオチドプローブは、ヒト免疫グロブリンκ軽鎖可変部参照、表1;オリゴヌクレオチドプローブ401-416、ヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変部オリゴヌクレオチドプローブ501-515、ヒトサイトメガロウイルスCMV配列オリゴヌクレオチドプローブ221-241、ヒトEpstein-BarrウイルスEBVEBEREpstein-Barr初期RNA配列オリゴヌクレオチドプローブ100A2,100C2,100A1および100B1,ヒト反復Alu配列オリゴヌクレオチドプローブ301および302、およびポリdTオリゴヌクレオチドプローブ320に対応する標的遺伝子特異的ドメインを保持するよう設計された。実施例2標識ドメイン設計:Alu反復配列プローブAluヒト反復配列に対するすべて4プローブが使用されて標識ドメイン設計を評価した。プローブ番号301配列番号:55、301A配列番号:116、301A2/2配列番号:121、および301A3/2配列番号:122が表1に示される。4つのプローブは、それぞれ、反応液中プローブ1ml当たり濃度100,75,50および25ng/mlにおいて評価された。このハイブリダイゼーション解析は、標準プロトコールを用いてマニュアルで実施された。標的、パラフィン包埋細胞系MBAMD468OncorINFORMTMHer-2/neuControlSlides,Cat.No.S8100,Level1,VentanaMedicalSystems,Inc.,Tucson,AZが標的サンプルであり、そして標準キシレン法によってパラフィンを除去することによって処理された。組織は、VentanaのAPKバッファーによる1:2希釈液として、50°Cで12分間VentanaのProtease1にさらされた。ハイブリダイゼーション反応は、2XSSC/TritonX-100の残留100ul容量に対して、100ulプローブとしてのプローブ希釈液25ホルムアミド、5デキストラン硫酸、2XSSC、1Tritonの添加により達成された。スライドは85°Cで5分間加熱され、次いで、37°Cで1時間インキュベートされた。標準SSC洗浄が過剰のプローブを除去するために続いた。ハイブリッドはFITCに対する抗体により検出された。マウス抗体は、VentanaEnhancedAlkalinePhosphataseBlueDetectioncat760-061を用いて比色法により検出された。特に指摘しなければ、すべての試薬はVentanaMedicalSystems,Inc.,Tucson,AZから得られた。結果は明視野顕微鏡を用いて発色検出によって観察された。これらの実験の結果は、シグナル強度がプローブに共役されたフルオレセインハプテンの総数の関数であり、そしてシグナルが特定の標識ドメイン設計に属することであった。プローブ分子当たりのフルオレセイン数が大きいほど、より大きいシグナルが観察された。設計の比較およびプローブへのハプテンの配置は、これがシグナルの強度におけるファクターではないことを示した。5フルオレセインを含有した2つのプローブ301A3/2配列番号:122および301配列番号:55両方は等しいシグナルを生じた。これらの2つのプローブは、301A2/2、4フルオレセインを有する分離した標識ドメイン設計を有するプローブ、について見られるよりも大きいシグナルを生じた。プローブ301A2/2は、プローブ301A、5’末端に1つの標識ドメイン設計を有し、そして3フルオレセインを有するプローブ、よりも大きいシグナルを生じた。実施例3標識ドメイン設計:EBERプローブこの実験は、フルオレセインハプテン間のより大きい間隔が、インサイチューハイブリダイゼーション解析におけるプローブ検出段階におけるシグナル生成を改善できるか否かを決定するために、2つの標識ドメイン設計および配列を比較した。使用された組織は、シランガラス顕微鏡スライド上に置かれた厚さ4ミクロンの中性バッファーホルマリンパラフィン包埋切片中に固定されたEBV感染ヒト脾臓組織であった。組織切片は、VentanaDISCOVERYTM機器において脱パラフィンされ、続いて温度37°CでVentanaのProtease1により6分間消化された。プローブは、VentanaMedicalSystems,Inc.の自動ISH染色システム,Discoveryによって調製された後にスライド上に残された等容量の2XSSC/TritonX-100残留容量に対して適用される100ulとして、濃度50ng/mlにおいてハイブリダイゼーションバッファー希釈液に溶解された。プローブ希釈液は37°Cで6分間スライド上で残留容量と混合され、次いで、溶液は85°Cに加熱され、そして全10分間そこで維持された。次いで、スライドは温度37°Cにされ、そしてその温度で1時間維持された。スライド上のこれらの水性反応のすべては、処理中の水の蒸発損失を防ぐためにLIQUIDCOVERSLIPTMのフィルム下ですべて実施された。ハイブリダイゼーション後の各スライドは、各洗浄間に6分間インキュベーションしつつ2XSSC/Triton溶液で3回洗浄され、スライド容量は約300ul/-10volであった。ハイブリッドはFITCに対する抗体により検出された。マウス抗体は、VentanaEnhancedAlkalinePhosphataseBlueDetectioncat760-061を用いて比色法により検出された。この研究のために使用された2つのオリゴヌクレオチドプローブは、プローブ100A1配列番号:53および1002A32配列番号:120である。これらのプローブの間の2つの差異は標識ドメイン配列と構造であった。配列式CTATTTT4CT配列番号:58を有するプローブ100A1の標識ドメインは、遺伝子標的ドメインに対して5’に存在し、OBEAリンカーを介してシトシン残基に結合された5フルオレセインを含有していた。オリゴプローブ1002A32の標識ドメインは配列番号:125に類似していた。異なる配列以外に、主要な差異は、シトシン間隔が7塩基離れて比較的近くに存在するオリゴ100A1に較べて、フルオレセイン標識されたシトシンが、10塩基離れて間隔を置かれているということである。Hスコア解析によって推定されるこの比較の結果は、これらのオリゴヌクレオチドがスライド上で生成されたシグナル量に関して同等であることであった。データは、100A2については、3視野のすべてにおいて解析された368細胞ではHスコアは106であり、そしてプローブ1002A32については、3視野において解析された345細胞ではHスコアは109であることであった。Hスコアは、スライド上の総標的特異的シグナルの相対的比較を得るために、組織切片におけるスコアバックグラウンド対シグナル比に因数分解する、顕微鏡を用いて実施される分光写真解析である。参照、引用文献Giroud,F.PerrinC,andSimonyLafontaine,J.;QuantitativeImmunocytochemistryandImmunohistochemistry.ThirdConferenceoftheEuropeanSocietyforAnalyticalCellularPathology,1994;andAutoCyteQuicImmunoUser’sManual,1998,documentnumberPA-029,CoAutoCyteInc.BurlingtoNC2721。ヒストグラムおよびスコアシートは、各オリゴが比色シグナルを生じる上で等しく有効であったことを示している。このことは、標識ドメインの位置が遺伝子標的配列に対して3プライムであっても5プライムであってもよいか、または遺伝子標的配列が2つの標識ドメイン間に位置していてもよいことを示している。実施例4インサイチューハイブリダイゼーション実施例1において調製されたプローブコレクションは、最初に、20デキストラン硫酸wt/vol、50ホルムアミドvol/vol、2XSSC、10mMtris-HCl、5mMEDTAおよび0.05Brij-35からなる溶液において最終pH7.3において希釈された。次いで、プローブコレクションは2XSSCおよび0.05TritonX-100からなる溶液の等容量と混合された。ISH解析のためのサンプルは、ホルマリン固定され、パラフィン包埋された細胞もしくは組織サンプルを4μmの切片に切断し、そして切片をガラススライド上に置くことによって調製された。続くサンプルの処理およびISHは、自動装置、例えば、両方とも引用によって本明細書に組み入れられている同時所有で同時係属中の米国特許出願第60/076,198号および同第09/259,240号に記述されているDISCOVERYTMAutomatedISH/IHCStainerVentanaMedicalSystems,Inc.Tucson,AZにおいて実施された。サンプルからパラフィンを除去するために、スライドは水溶液に浸漬され、約20分間加熱され、次いで洗浄された。自動脱パラフィン操作は、両方とも引用によって本明細書に組み入れられている米国特許出願第60/099、018号および同第09/259,240号に一層完全に記述されている。次いで、サンプルはプロテアーゼで処理され、そしてスライドは、85°CRNA標的遺伝子に対するハイブリダイゼーションのためもしくは90-95°CDNA標的遺伝子に対するハイブリダイゼーションのために4~10分間加熱された。ハイブリダイゼーション反応液は、典型的には、10デキストラン硫酸wt/vol、25ホルムアミドvol/vol、2XSSC、5mMtris、2.5mMEDTA,0.025Brij-35,TritonX-100、および各個々のプローブ分子25~125ng/mlからなるハイブリダイゼーションバッファーにおいて行われた。ISH反応は37°C~54°Cにおいて実施された。実施例1において記述されるプローブコレクションを用いるISHでは、ハイブリダイゼーション反応は場合によっては47°Cで1時間実施されたハイブリダイゼーション反応が場合によっては37°Cで1時間実施されたポリdTプローブを除く。サンプル中の特定の標的遺伝子に対するフルオレセイン標識プローブ分子のハイブリダイゼーションは、一連の結合性タンパク質を用いることによって検出された、すなわち二次抗体検出。しかしながら、結合されたプローブを可視化できるdetect検出法を使用することも同じく可能である。二次検出では、最初に、フルオレセイン標識されたプローブ分子に対向された抗フルオレセインマウスモノクローナル抗体がサンプルに添加された。次に、マウス抗体に対向したビオチン標識ポリクローナルヤギ抗体がサンプルに添加された。最後に、ハイブリダイゼーション反応物は、リン酸5-ブロモ-4-クロロ-3-インドリル/ニトロブルーテトラゾリウムBCIP/NBT基質を用いて比色法により検出された。この技術は、二次抗体検出と呼ばれ、当業者には日常的に行われる。一次および二次抗体は、VentanaMedicalSystems,Inc.Tucson,AZを含む多くの販売元から得ることができ、これらはVentana自動染色システムESR,NexESR,DISCOVERYTM,およびBENCHMARKTMにおいて使用するために最適化されている。図2-21は、図1において図解される構造モチーフを有する本明細書で開示され、特許請求されるプローブまたはそのようなプローブからなるプローブコレクションを使用して、種々の細胞系もしくは組織サンプルのインサイチューハイブリダイゼーション解析について得られた結果を説明している。前記の開示は、ある特定の本発明の実施態様を強調しており、そしてあらゆるその改変もしくは代替等価物は、添付される請求項において記述される本発明の精神および範囲内にあることが理解されるべきである。"