"物質が有するBDNFレセプターのリン酸化制御能力の検定方法であり、1被験物質とタンパク質チロシンフォスファターゼレセプタータイプEProteintyrosinephosphatasereceptortypeE、以下、PTPREとの接触系内に含まれるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標を測定する第一工程、及び2第一工程で得られた前記接触系内に含まれるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標の測定値を前記指標の対照値と比較する第二工程、及び、3第二工程で比較して得られた差異に基づいて前記被験物質が有するBDNFレセプターのリン酸化制御能力の有無及びその水準を評価する第三工程、を有することを特徴とする方法。PTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標が、以下のいずれかの測定用指標であることを特徴とする請求項1記載の方法。<測定用指標>1前記接触系内に含まれるPTPREのタンパク質単位重量当たりの酵素活性2前記接触系内に含まれるPTPREのタンパク量前記接触系が、BDNFレセプターを有する細胞であって、前記被験物質が投与され、且つ、タンパク質チロシンフォスファターゼレセプタータイプEを細胞内で産生する能力を有する細胞であることを特徴とする請求項1記載の方法。前記細胞が、PTPRE遺伝子を含む細胞であることを特徴とする請求項3記載の方法。PTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標が、以下の測定用指標であることを特徴とする請求項4記載の方法。<測定用指標>1前記接触系内に含まれるPTPREのタンパク質単位重量当たりの酵素活性2前記接触系内に含まれるPTPREのタンパク量3前記接触系内に含まれるPTPRE遺伝子の転写量及び/又は翻訳量前記指標の対照値が、被験物質との非接触系内に含まれるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標の測定値であることを特徴とする請求項1乃至5のいずれかの請求項記載の方法。第三工程において、測定値が対照値の1/2倍以下、又は、対照値と比較し統計学的に有意な低値であることを基準とし、前記被験物質がBDNFレセプターのリン酸化制御能力としてBDNFレセプターの脱リン酸化抑制能力を有するものとして評価することを特徴とする請求項6記載の方法。前記被験物質が、RNAi、miRNA及びアンチセンス核酸からなる群から選ばれる少なくとも一つ以上の物質であることを特徴とする請求項7記載の方法。請求項1乃至8のいずれかの請求項記載の方法により評価されたBDNFレセプターのリン酸化制御能力の有無及びその水準に基づき、BDNFレセプターのリン酸化制御能力を有する物質を探索する工程を有することを特徴とする物質の探索方法。物質が有するBDNFレセプターのリン酸化制御能力の有無及びその水準を評価するための指標を提供する試薬としての、タンパク質チロシンフォスファターゼレセプタータイプE若しくはその遺伝子の使用。請求項1乃至8のいずれかの請求項記載の方法により評価されたBDNFレセプターのリン酸化制御能力の有無及びその水準に係るデータ情報を入力蓄積管理する手段、前記データ情報を所望の結果を得るための条件に基づき照会検索する手段、及び、照会検索された結果を表示出力する手段を具備することを特徴とするシステム。しかしながら、上記のような従来方法を利用した、物質が有するBDNFレセプターのリン酸化制御能力の検定方法は、その工程が煩雑で比較的高度な手技が要求されるものであり、特に多数の物質をスクリーニングする際には多大な困難を伴うものであることから、必ずしも十分に満足できるものではなかった。そこで、物質が有するBDNFレセプターのリン酸化制御能力をできるだけ簡便に評価するための検定方法の開発が望まれている。かかる状況の下、本発明者は鋭意検討した結果、本発明に至った。即ち、本発明は、1.物質が有するBDNFレセプターのリン酸化制御能力の検定方法であり、1被験物質とタンパク質チロシンフォスファターゼレセプタータイプEProteintyrosinephosphatasereceptortypeE、以下、PTPREとの接触系内に含まれるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標を測定する第一工程、及び2第一工程で得られた前記接触系内に含まれるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標の測定値を前記指標の対照値と比較する第二工程、及び、3第二工程で比較して得られた差異に基づいて前記被験物質が有するBDNFレセプターのリン酸化制御能力の有無及びその水準を評価する第三工程、を有することを特徴とする方法以下、本発明検定方法と記すこともある。;2.PTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標が、以下のいずれかの測定用指標であることを特徴とする前項1記載の方法;<測定用指標>1前記接触系内に含まれるPTPREのタンパク質単位重量当たりの酵素活性2前記接触系内に含まれるPTPREのタンパク量3.前記接触系が、BDNFレセプターを有する細胞であって、前記被験物質が投与され、且つ、タンパク質チロシンフォスファターゼレセプタータイプEを細胞内で産生する能力を有する細胞であることを特徴とする前項1記載の方法;4.前記細胞が、PTPRE遺伝子を含む細胞であることを特徴とする前項3記載の方法;5.PTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標が、以下の測定用指標であることを特徴とする前項4記載の方法;<測定用指標>1前記接触系内に含まれるPTPREのタンパク質単位重量当たりの酵素活性2前記接触系内に含まれるPTPREのタンパク量3前記接触系内に含まれるPTPRE遺伝子の転写量及び/又は翻訳量6.前記指標の対照値が、被験物質との非接触系内に含まれるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標の測定値であることを特徴とする前項1乃至5のいずれかの前項記載の方法;7.第三工程において、測定値が対照値の1/2倍以下、又は、対照値と比較し統計学的に有意な低値であることを基準とし、前記被験物質がBDNFレセプターのリン酸化制御能力としてBDNFレセプターの脱リン酸化抑制能力を有するものとして評価することを特徴とする前項6記載の方法;8.前記被験物質が、RNAi、miRNA及びアンチセンス核酸からなる群から選ばれる少なくとも一つ以上の物質であることを特徴とする前項7記載の方法;9.前項1乃至8のいずれかの前項記載の方法により評価されたBDNFレセプターのリン酸化制御能力の有無及びその水準に基づき、BDNFレセプターのリン酸化制御能力を有する物質を探索する工程を有することを特徴とする物質の探索方法以下、本発明探索方法と記すこともある。;10.物質が有するBDNFレセプターのリン酸化制御能力の有無及びその水準を評価するための指標を提供する試薬としての、タンパク質チロシンフォスファターゼレセプタータイプE若しくはその遺伝子の使用以下、本発明使用と記すこともある。;11.前項1乃至8のいずれかの前項記載の方法により評価されたBDNFレセプターのリン酸化制御能力の有無及びその水準に係るデータ情報を入力蓄積管理する手段、前記データ情報を所望の結果を得るための条件に基づき照会検索する手段、及び、照会検索された結果を表示出力する手段を具備することを特徴とするシステム以下、本発明システムと記すこともある。;等を提供するものである。本発明により、物質が有するBDNFレセプターのリン酸化制御能力の簡便な検定方法等が提供可能となる。本明細書に記載される発明は記載されている特定の方法論、プロトコ-ル、及び、試薬に限定されず、可変であると考えられる。また、本明細書で用いる用語は単に特定の実施形態を記載するためのものであり、本発明の範囲を何ら限定するものではないと考えられる。特に断りの無い限り、本明細書で用いる全ての技術用語、及び、化学用語は、本発明が属する技術分野の熟練者に共通に理解されているものと同じ意味を持つ。本発明を実施又は試験する上で、本明細書に記載されているものと同様又は同等の方法、及び、材料のいずれを用いてもよいが、以下、好ましい方法、装置、及び、材料を記載する。本明細書において、DNAの調製やベクターの調製等の分子生物学的な手法、タンパク質の抽出やウエスタンブロッテイング等のタンパク質化学的な手法、酵素反応測定の操作等は、特に明記しない限り、MolecularCloningAlaboratorymanual、新生化学実験講座日本生化学会編;東京化学同人等の実験書に記載される通常の方法又はそれに準じた方法により行うことができる。本発明は、PTPREの酵素ユニットが増減するとBDNFが結合するときに生じるBDNFレセプターのリン酸化の制御活性が増減するという関係を新たに見出したことに基づくものであり、BDNFレセプターの脱リン酸化を担う分子がPTPREであるという新知見を利用したものである。本発明検定方法は、物質が有するBDNFレセプターのリン酸化制御能力の検定方法であり、1被験物質とタンパク質チロシンフォスファターゼレセプタータイプEProteintyrosinephosphatasereceptortypeE、以下、PTPREとの接触系内に含まれるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標を測定する第一工程、及び2第一工程で得られた前記接触系内に含まれるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標の測定値を前記指標の対照値と比較する第二工程、及び、3第二工程で比較して得られた差異に基づいて前記被験物質が有するBDNFレセプターのリン酸化制御能力の有無及びその水準を評価する第三工程、を有する。本発明におけるBDNFレセプターとは、BDNF即ち、脳由来神経栄養因子が結合するレセプターを意味する。本発明におけるBDNFレセプターのリン酸化制御能力とは、BDNFレセプターが有するリン酸化部位におけるリン酸化の割合を増加又は減少させる能力を意味する。当該制御能力は、BDNFレセプターが有するリン酸化部位におけるリン酸化の割合を制御することにより、BDNFレセプターが有する機能を増強又は抑制される。本発明検定方法の第一工程では、被験物質とタンパク質チロシンフォスファターゼレセプタータイプEProteintyrosinephosphatasereceptortypeE、以下、PTPREとの接触系内に含まれるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標を測定する。ここで被験物質としては、例えば、各種の抽出物、天然若しくは人工合成された化合物、ペプチド、タンパク質、核酸、又は、siRNA、miRNA等のRNAi作用を有する核酸、アンチセンス核酸等を挙げることができる。本発明検定方法に供試する好ましい被験物質としては、例えば、脳神経系等の組織部位に存在する細胞に到達しうる物質等を挙げることができる。本発明検定方法に供試する被験物質の形態は、例えば、固体であっても、液体であってもよい。また、基材との混合物、懸濁液若しくは溶液等の形態であってもよい。被験物質の形態が懸濁液若しくは溶液である場合には、水、pH緩衝液、メチルセルロース溶液、生理食塩水、有機溶媒の水溶液有機溶媒としては、通常、エタノール、ジメチルスルホキシド等が挙げられる。等を媒体として用いることができる。被験物質の形態が基材との混合物である場合には、グリセリン、スクワラン等の油等を基材としては用いることができる。尚、これら媒体の好ましい量は、被験物質とPTPREとの接触系内に含まれるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標に対して影響を及ぼさない範囲内に設定すればよい。本発明におけるタンパク質チロシンフォスファターゼレセプタータイプEProteintyrosinephosphatasereceptortypeE、PTPREとは、タンパク質チロシンフォスファターゼ膜貫通型PTPR遺伝子ファミリーに属する遺伝子であり、タイプEとして分類されているもの即ち、PTPRE遺伝子がコードするタンパク質フォスファターゼ酵素を意味する。上記のPTPRE遺伝子に関して、例えば、ヒト由来の遺伝子は、KruegerNXetalEMBOJ9p32413252等に記載された公知な遺伝子である。その塩基配列は、例えば、GenbankaccessionNoNM006504として公共データベースに既に登録されている。尚、Genbankに登録されている塩基配列に関する情報は、例えば、NationalCenterforBiotechnologyInformationのWEBページURLhttpwwwncbinlmnihgovから、Genbankによって各遺伝子に付与されている上記の登録番号AccessionNoをもとに検索を行うことによって入手することができる。因みに、GenBankDDBL及びEMBLの各データバンクが公開しているデータ全てを誰でも制限無しに利用でき、登録されたデータは科学資料として永久に保存され公開されることは、上記3データバンクで構成される国際塩基配列データベースInternationalNucleotideSequenceDatabasesINSDの諮問機関である国際諮問委員会により作成されたDDBLEMBLGenbankの登録データの取り扱い2002年5月2324日で明文化されており、如何なる当業者であっても登録番号AccessionNoに基づきデータの照会、検索、入手等は可能である。上記のPTPRE遺伝子は、勿論、各種スプライシングバリアント、ラットやマウス等の生物種由来のPTPREオーソログであってもよく、上記の公知の塩基配列と全く同一の塩基配列を有する遺伝子のほか、その遺伝子の塩基配列に、生物の種差に留まらない個体差、若しくは、器官、組織間の差異等により天然に生じる変異による塩基の欠損、置換若しくは付加が生じた塩基配列を有する遺伝子であってもよい。本発明におけるPTPREの酵素ユニットとしては、具体的には例えば、以下の3つのものを目的状況等に応じて適宜用いればよい。1第1の酵素ユニットは、酵素一分子若しくは酵素単位重量当たりに着目した酵素ユニットであり、所謂、酵素の活性と呼ばれるものである。このような酵素ユニットに対して影響を与える因子としては、例えば、酵素活性の阻害度若しくは活性化度、酵素タンパク質の不安定化度若しくは安定化度等を挙げることができる。これら因子は、言い換えれば、酵素ユニットと相関関係を有する指標の一例であり、本発明における測定用指標である接触系内に含まれるPTPREのタンパク質単位重量当たりの酵素活性に相当するものである。2第2の酵素ユニットは、接触系内に存在する物質としての量に着目した酵素ユニットであり、所謂、酵素の量と呼ばれるものである。このような酵素ユニットに対して影響を与える因子としては、例えば、酵素タンパク質合成の阻害度若しくは促進度、酵素をコードする遺伝子の転写の阻害度若しくは活性化度、酵素をコードする遺伝子の翻訳の阻害度若しくは活性化度、mRNAの不安定化度若しくは安定化度、酵素タンパク質の分解度若しくは分解抑制度、酵素の存在量等を挙げることができる。これら因子は、言い換えれば、酵素ユニットと相関関係を有する指標の一例であり、本発明における測定用指標である接触系内に含まれるPTPREのタンパク量、接触系内に含まれるPTPRE遺伝子の転写量及び/又は翻訳量に相当するものである。3第3の酵素ユニットは、接触系内に存在するトータルな触媒力価に着目した酵素ユニットであり、所謂、酵素の力価と呼ばれるものである。このような酵素ユニットに対して影響を与える因子としては、例えば、前記1と前記2との組み合わせ等を挙げることができる。因みに、酵素ユニットとは、医薬臨床化学分野で用いられる酵素の単位である。単位となるユニットは、例えば、特定の条件下例えば、温度、pHで一定時間内例えば、1分間にどれだけの働きをするか例えば、1マイクロモルμmolの基質を変化されることができる酵素の単位として表現したものを挙げることができる。本発明におけるPTPREの酵素ユニットと相関関係を有する指標としては、上記のように、1前記接触系内に含まれるPTPREのタンパク質単位重量当たりの酵素活性、2前記接触系内に含まれるPTPREのタンパク量等のような測定用指標を挙げることができる。また、本発明検定方法において、細胞がPTPRE遺伝子を含む細胞である場合には、PTPREの酵素ユニットと相関関係を有する指標としては、上記のように、1前記接触系内に含まれるPTPREのタンパク質単位重量当たりの酵素活性、2前記接触系内に含まれるPTPREのタンパク量、3前記接触系内に含まれるPTPRE遺伝子の転写量及び/又は翻訳量等のような測定用指標を挙げることができる。本発明検定方法における接触系としては、例えば、哺乳動物から採取された細胞尚、本発明における細胞とは、組織から分離された形態にある細胞のみならず、組織の一部として存在している形態にある細胞をも含む。又はそれらの内容物が含まれる生体試料例えば、前記細胞から分離、分画、固定化等の種々の操作により調製された生体試料を挙げることができる。また前記細胞としては、例えば、BDNFレセプターを有する細胞であって、前記被験物質が投与され、且つ、タンパク質チロシンフォスファターゼレセプタータイプEを細胞内で産生する能力を有する細胞例えば、PTPRE遺伝子を含む細胞等を挙げることができる。このようなPTPREを細胞内で産生する能力を有する細胞は、例えば、内在性のPTPRE遺伝子を発現する哺乳動物の脳神経系組織由来の細胞であってもよい。具体的には例えば、神経系に関連した培養細胞としては、SKNSH細胞やPC12細胞等を挙げることができる。神経初代培養細胞はPTPREを発現しており、実際の脳内の細胞に近いために好ましい細胞として挙げることができる。尚、このような初代培養細胞は、例えば、培養細胞実験ハンドブック羊土社2004黒木登志夫ら編ISBN4897068843等に従って調製すればよい。また、外来性のPTPRE遺伝子を発現する細胞例えば、PTPREを強制的に発現させた培養細胞安定形質転換細胞等であってもよい。前記生体試料としては、例えば、脳のスライスを挙げることができる。実験用の哺乳動物の脳のスライスはPTPREを発現しており、好ましく挙げることができる。ここで哺乳動物として、ヒトを含むいかなる哺乳動物でも用いることができる。このような哺乳動物としては、例えば、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、サル、ヒト、イヌ、ネコ、ウサギ、モルモット、ハムスター、マウス、ラット、ウマ等が挙げられる。実験動物としては非ヒト哺乳動物が好ましいが、この中でも、個体発生に要する期間及び生物サイクルが比較的短く、また繁殖が容易なげっ歯類哺乳動物が好ましい。また組織又は細胞由来の組織としては、例えば、脳神経系の組織等を好ましく挙げることができる。本発明検定方法においては、まず、被験物質若しくは対照物質とPTPREとを接触させる。被験物質若しくは対照物質とPTPREとの接触は、例えば、哺乳動物に被験物質を投与することにより行ってもよい。哺乳動物は、天然の動物のほか、トランスジェニック動物、遺伝子ノックアウト動物等であってもよい。哺乳動物への被験物質若しくは対照物質の投与方法としては、例えば、経口強制又は飲料水や餌に混じ、筋肉内、静脈内、皮下、腹腔内、経気道等により行うことができる。投与量、投与回数及び投与期間は、例えば、全身状態、全身諸器官組織等に重篤な影響を及ぼさない範囲内例えば投与量は、最大耐量とすればよい。また、哺乳動物から採取された細胞尚、組織の一部として存在している形態にある細胞も含む。又はそれらの内容物が含まれる生体試料に被験物質若しくは対照物質を直接注入することにより行ってもよい。本発明検定方法において、被験物質若しくは対照物質が核酸である場合には、当該核酸は、例えば、RNA実験ノート下小分子RNAの解析からRNAiへの応用まで羊土社2008稲田利文ら編ISBN9784897069258C3345、RNAi実験プロトコール羊土社2003多比良和誠ら編ISBN4897064104C3045、遺伝子の機能阻害実験法羊土社2001多比良和誠ら編ISBN4897069564C3047等に記載される通常の方法に準じて調製してもよく、予備的に選定することにより用意してもよい。また市販のステルスRNA等の試薬として候補物質を購入してもよい。本発明検定方法において、被験物質若しくは対照物質が核酸である場合には、例えば、市販のアデノウイルスベクター例えば、Invitrogen社ViraPowerアデノウイルス発現システムK493000、レトロウイルスベクター例えば、タカラバイオ社RetrovirusCostructivesystem6164、レンチウイルスベクター例えば、Invitrogen社ViraPowerHiperformレンチウイルス発現システムK531000等の各種のウイルスベクター、或いは、例えば、ミラーMiller、HumanGeneTherapy15~141990;フリードマンFriedman、Science2441275~12811989;エグリティスEglitis及びアンダーソンAnderson、BioTechniques6:608~6141988;トルストシェフTolstoshev及びアンダーソンAnderson、currentopinioninBiotechnology1:55~611990;シャープSharp、TheLancet337:1277~12781991;コルネッタCornettaら、NucleicAcidResearchandMolecularBiology36:311~3221987;アンダーソンAnderson、Science22:401~4091984;モーンMoen、BloodCells17:407~4161991;ミラーMillerら、Biotechniques7:980~9901989;LeGaiLaSalleら、Science259:988~9901993;ジョンソンJohnson、Chest107:77S~83S1995等に記載される公知のベクター、ローゼンバーグRosenbergら、N.Engl.J.Med3233701990;アンダーソンAndersonら、米国特許第5399346号等に記載されるレトロウイルスベクター等を用いる通常の方法により、哺乳動物から採取された細胞に被験物質若しくは対照物質を導入することもできる。また、例えば、発現miRRNAi法用キットInvitrogen社製BlockitPolIImiRRNAiexpressionkitK493500、発現shRNA法用キットBlockitinducibleH1RNAivectorkitK492000等の市販のシステムを用いる発現miRRNAi法又は発現RNAi法により、哺乳動物から採取された細胞尚、組織の一部として存在している形態にある細胞も含む。に被験物質若しくは対照物質を導入することもできる。また、核酸の導入法移入送達手段としては、非ウイルス的手法を用いることもできる。例えば、フェルグナーFelgnerら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA8474131987;オノOnoら、Neurosci.Lett.117:2591990;ブライアムBrighamら、Am.J.Med.Sci.298:2781989;シュタウビンガーStaubingerら、Meth.Enz.101512,1983、アシアロソヌコイドポリリジン抱合ウーWuら、J.Biol.Chem.26314621,1988ウーWuら、J.Biol.Chem.264:169851989等に記載されるリポフェクション、ウォルフWolffら、Science247:14651990等に記載されるマイクロインジェクション、リン酸カルシウム法、DEAEデキストラン法、エレクトロポレーション法及びプロトプラスト融合法、リポソーム法等を挙げることができる。このようにして調製又は構築された接触系内に含まれるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標を測定するには、例えば、接触系内に含まれるPTPREのタンパク質単位重量当たりの酵素活性を測定用指標とする場合、一般的なタンパク質チロシンフォスファターゼの酵素活性の測定方法を用いればよい。勿論、市販の各種チロシンフォスファターゼアッセイキット例えば、タカラバイオ社UniversalTyrosinePhosphataseAssaykitMK411等を利用してもよい。接触系内に含まれるPTPREの酵素活性を測定するための酵素反応条件としては、具体的には例えば、pH5~pH11の中性付近のpH範囲に設定された緩衝液尚、塩濃度は500mMを超えないことが好ましい。中で、4°C~45°Cの温度範囲で酵素反応を行う条件等を挙げることができる。また基質としては、リン酸化されたチロシンを初めとして種々のチロシンフォスファターゼのユニバーサル基質を挙げることができる。尚、前記基質がPTPRE以外の他の類似酵素の基質とも成り得る場合には、精製されたPTPREを用いることが好ましい。逆に、PTPREの特異基質を用いる場合には、PTPREは予め精製されていなくてもよい。また、被験物質が前記酵素反応を非特異的に妨害するような不純物を含むことが予想される場合には、当該被験物質に対して当該不純物を除く前処理操作を前記酵素反応に供する前に施すことが好ましい。反応時間は、接触系内に含まれるPTPREの酵素の存在量に応じた、反応が飽和状態に達していない時間を設定することが好ましい。例えば、前記酵素のタンパク質濃度を1nM~100nMとして、1時間を越えない反応時間を好ましく挙げることができる。一般的なタンパク質チロシンフォスファターゼの酵素活性の測定方法としては、例えば、JBiolChem1992ZhangZYetalExpressionpurificationandphysicochemicalcharacterizationofarecombinantYersiniaproteintyrosinephosphatase等に記載されているpNitrophenylphosphateを基質として用いる方法を挙げることができる。具体的には例えば、酵素反応基質:10mMpNPP、酵素反応温度:30°C、酵素反応バッファー:100mMTrisHClwith1mMEDTA、150mMNaClとすればよい。このような酵素反応系に、PTPREを含む試料を添加することにより、酵素反応を開始させる。その際、前記酵素反応系の中に、被験物質や対照物質を共存させる。酵素反応は、接触系内に1NNaOHを添加することにより停止させればよい。そして酵素反応停止後、接触系内に存在する酵素反応生成物の量を、例えば、405nmの波長の吸光度等を測定することにより算出すればよい。また、例えば、接触系内に含まれるPTPREのタンパク量を測定用指標とする場合、当該タンパク質を特異的に認識するような抗体を用いたタンパク量の測定方法、液体クロマトグラフィーを用いる測定方法等を用いればよい。抗体を用いたタンパク量の測定方法としては、例えば、タンパク質研究のための抗体実験マニュアル羊土社2004高津聖志ら編ISBN4897064147等に記載される免疫的測定方法例えば、ELISA、ウエスタンブロット、RIA、免疫組織化学的検査等、二次元電気泳動法、高速液体クロマトグラフィー等を挙げることができる。具体的には例えば、Western法を用いてタンパク質の量を測定する場合には、まずは接触系内から採取された試料を加熱処理例えば、100°Cで5分間程度する。得られた処理物を、SDSPAGE法用10アクリルアミドゲルBioRad社製等を用いた電気泳動によりゲル上で展開する。ゲル上で展開されたタンパク質を、セミドライ型ゲル転写装置BioRad社製及びセミドライ転写用Bufferナカライテスク社製等を用いて、当該装置に添付された説明書の記載に従って電気泳動後のゲルからHybondP膜アマシャムファルマシア社製等の膜へ転写する。転写後に得られた膜を、PBSで50分の1に希釈された膜ブロッキング試薬ナカライテスク社製により処理30分間した後、得られた膜の上に、例えば、PBST液PBS、01Tween20BioRad社製で1000分の1に希釈されたAntiPTPRE抗体SantaCruz社AntiPTPεSC1117を滴下する。室温で1時間程度以上インキュベートすることにより、膜上での抗原抗体反応を進行させる。次いで、膜をPBST液中で15分間2回洗浄した後、得られた膜の上に、PBSTで3000分の1程度に希釈されたAntigoatIgGHRPSantaCruzSC2020二次抗体を滴下する。室温で1時間インキュベートすることにより生じた複合体を保持する膜を、PBST液中で15分2回洗浄した後、得られた膜をECL試薬アマシャムファルマシア社製を、当該試薬に添付された取扱説明書の記載に従って処理する。このようにして得られた膜を、直ちにイメージアナライザーLAS1000富士フィルム社製等で解析することにより、PTPRE抗体で認識されたPTPREのゲル上のイメージ像を得る。得られたイメージ像を、前記装置を用いて定量することにより、前記接触系内に存在するPTPREの量を測定することができる。また、哺乳動物細胞であるCOS7細胞ATCCより購入を、10FCSが添加されたDMEM培地を用いて、10cmプレート上で、37°C、5CO2存在下で培養する。当該プレート上で8割コンフルエントの状態になるまで培養された培養細胞に、PTPRE発現プラスミドをリポフェクトアミン2000Invitrogen社製を用いて、添付される説明書のデフォルトの基本条件でトランスフェクションする。トランスフェクション後72時間程度経過した後、培地をプレート一枚当たり1mlのCellLyticMcelllysisreagentSigma社製C2978と置換し、4°C、10分~1時間程度インキュベートすることにより、培養細胞を溶解させる。得られた溶解物を、20000gで30分間遠心分離することにより上清を回収する。回収された上清細胞抽出物を、10μLのAntiPTPRE抗体SantaCruz社AntiPTPεSC1117を予め結合させておいたProteinGsepharaseビーズ50懸濁液30μlと混合した後、当該混合物を4°Cで1時間インキュベートする。得られた混合物を、2000gで1分間遠心分離することにより沈殿画分を得る。得られた沈殿画分を1mlのCellLyticMcelllysisreagentSigma社製C2978で懸濁した後、当該懸濁液を2000gで1分間遠心分離する。同様な操作1回の洗浄操作単位を3回繰り返すことにより、ビーズに結合したPTPREをタンパク質精製物として得る。このような方法を利用することにより、前記接触系内に存在するPTPREの量を測定することができる。また、例えば、接触系内に含まれるPTPRE遺伝子の転写量及び/又は翻訳量を測定用指標とする場合、PTPRE遺伝子の転写量を測定する方法としては、PTPRE遺伝子のmRNA、若しくは、PTPRE遺伝子のcDNAを測定する方法を挙げることができ、またPTPRE遺伝子の翻訳量を測定する方法としては、上述のようなタンパク量の測定方法を挙げることができる。ここで、PTPRE遺伝子のmRNAを測定する方法は絶対量測定でもよいが、接触系内の他のmRNAの量若しくはRNAの量に対するPTPRE遺伝子のmRNAの存在割合を測定する方法であってもよい。また、測定用指標は、被験物質が作用した結果生じる接触系内でのPTPRE遺伝子のmRNAの量の増減としてもよい。勿論、mRNA自体の量の増減ではなく、そのmRNAからcDNAに逆転写された結果であるcDNAの量の増減としてもよい。PTPRE遺伝子のmRNA若しくはcDNAを、他のmRNA若しくはcDNAから特異的に区別する手法としては、例えば、核酸のハイブリダイゼーションに基づく原理を利用した各種手法を挙げることができる。核酸のハイブリダイゼーション法に基づく原理を利用した各種手法では、ハイストリンジェントHighstringentな条件でのハイブリダイゼーションを採用することが好ましい。また他の測定方法として、定量的RealTimePCR法リアルタイムポリメラーゼチェイン反応法、RTPCR法、PCR法、DNAアレイ法、ノーザンバイブリダイゼーション法を初めとする、特定のmRNA若しくはcDNAの量を測定する通常の方法を挙げることもできる。このように、PTPRE遺伝子のmRNA若しくはcDNAは、増幅に基づく方法やハイブリダイゼーションに基づく方法等を使用して測定すればよい。具体的には例えば、まず、PC12細胞即ち、PTPRE遺伝子を含む細胞を、10血清、ピルビン酸Na液GIBCOBRL11360及びNonessentialamino酸液GIBCOBRL11140を補ったRPMI1640培養液中、37°C、5CO2の通常の培養条件下で培養された培養細胞を準備する。次いで、当該培養細胞に、被験物質例えば、Invitrogen社のステルスRNAiPTPRERSS300324等のPTPRE遺伝子のmRNAを切断することが期待されるRNAi候補物質等を、培養細胞へのRNAi導入試薬例えば、Invitrogen社のLipofectamineRNAiMAX試薬13778150等を用いて導入する。PTPRE遺伝子のmRNAが分解されることが期待される時間例えば、終夜から72時間後に、前記培養細胞の中に含まれる全RNAを、通常の方法例えば、市販の精製キットQIAGEN社のRneasykit74106等を用いる方法等により回収する。次いで、回収された全RNAに、例えば、MMLV東洋紡等の逆転写酵素を添加した後、反応緩衝液中、05mMdNTP及び25μgmlオリゴdT存在下で42°C、15分間~1時間反応させることにより、対応するcDNAを調製する。尚、cDNA合成キットタカラバイオ社等を用いて対応するcDNAを調製してもよい。調製されたcDNAを鋳型にして、PTPRE遺伝子の塩基配列の一部分を有するDNAをプライマーとしてPCRを行う。プライマーとしては、例えば、PTPRE遺伝子の部分塩基配列を有するプライマーを挙げることができる。PCRの条件としては、例えば、TAKARAtaqタカラバイオを使用し、反応緩衝液中、25mMdNTP及びα32PdCTP存在下で、例えば、94°C、30秒間、次いで、40°C~60°C、2分間、更に72°C、2分間の保温を1サイクルとして、これを30~55サイクル行う条件を挙げることができる。このようにして増幅されたDNAをポリアクリルアミドゲル電気泳動に供し、分離されたDNAの放射活性量を測定することにより、PTPRE遺伝子のmRNAの量を測定する。尚、PCRに、SYBRGreenPCRReagentsPCRABI社を用いて添付説明書に従ってPCRを行い、増幅されたDNAの蛍光を測定することにより、PRPRE遺伝子のmRNAの量を測定してもよい。TaqMAN法ABI社を用いてPTPRE遺伝子のTaqMANプローブABI社を用いて、PTPRE遺伝子のmRNAの量を測定してもよい。本発明検定方法の第二工程では、第一工程で得られた前記接触系内に含まれるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標の測定値を前記指標の対照値と比較する。本発明検定方法における指標の対照値としては、例えば、被験物質との非接触系内に含まれるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標の測定値等を挙げることができる。被験物質の代わりに、対照物質となり得るポジテイブコントロール又はネガテイブコントロールを用いて本発明検定方法又は、後述する本発明探索方法を実施することにより、場合に応じて本発明検定方法又は、後述する本発明探索方法でいう対照とすることもできる。ここでいうポジテイブコントロールとは、例えば、本発明検定方法においてPTPREの酵素ユニットの測定値に影響を与える物質を意味する。具体的には例えば、PTPREの酵素活性を阻害する物質、PTPRE遺伝子の発現時においてその転写若しくは翻訳即ち、タンパク質合成を阻害する物質等を挙げることができる。またネガテイブコントロールとしては、被験物質に含まれる溶媒、バックグラウンドとなる試験系溶液等が挙げられる。本発明検定方法の第三工程では、第二工程で比較して得られた差異に基づいて前記被験物質が有するBDNFレセプターのリン酸化制御能力の有無及びその水準を評価する。対照物質をネガテイブコントロールとする場合、被験物質の存在下におけるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標の測定値が、対照物質の存在下におけるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標よりも大きければ、当該被験物質はBDNFレセプターのリン酸化制御能力を有すると評価すればよい。一方、被験物質の存在下におけるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標の測定値が、対照物質の存在下におけるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標と同程度若しくは小さければ、当該被験物質はBDNFレセプターのリン酸化制御能力を有さないと評価すればよい。また、対照物質をポジテイブコントロールとする場合、被験物質の存在下におけるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標の測定値と、対照物質の存在下におけるPTPREの酵素ユニット若しくはそれと相関関係を有する指標の測定値とを比較することにより、被験物質が有するBDNFレセプターのリン酸化制御能力の有無及びその水準を評価すればよい。本発明検定方法の第三工程では、測定値が対照値の1/2倍以下、又は、対照値と比較し統計学的に有意な低値であることを基準とし、前記被験物質がBDNFレセプターのリン酸化制御能力としてBDNFレセプターの脱リン酸化抑制能力を有するものとして評価してもよい。このように評価する場合には、本発明検定方法における被験物質としては、例えば、RNAi、miRNA及びアンチセンス核酸からなる群から選ばれる少なくとも一つ以上の物質等を好ましく挙げることができる。本発明探索方法は、本発明検定方法により評価されたBDNFレセプターのリン酸化制御能力の有無及びその水準に基づき、BDNFレセプターのリン酸化制御能力を有する物質を探索する工程を有する。探索されたBDNFレセプターのリン酸化制御能力を有する物質は、例えば、BDNF作用を調節する作用を有し、内在性のBDNFによる作用を調節することを通じてBDNFが有する各種機能を調節する物質として利用することもできる。本発明探索方法により探索された被験物質がBDNFレセプターのリン酸化を制御する能力を確かに有することを確認する方法としては、例えば、リン酸化されたBDNFレセプターを特異的に認識する抗体を利用した種々の免疫的測定方法例えば、ELISA、ウエスタンブロット、RIA、免疫組織化学的検査等、二次元電気泳動法、高速液体クロマトグラフィー等を挙げることができる。リン酸化されたBDNFレセプターを認識する抗体は、BDNFレセプターの既知のリン酸化部位、例えば、ヒトBDNFレセプターの516番目のチロシン残基がリン酸化されたヒトBDNFレセプターの一部の合成ペプチドを抗原にして常法に従って作製してもよく、またヒトBDNFレセプターの516番目のチロシン残基がリン酸化されたものを認識できるAntiphosphoTrkAantibodyを初めとする市販の抗体を利用してもよい。本発明使用は、物質が有するBDNFレセプターのリン酸化制御能力の有無及びその水準を評価するための指標を提供する試薬としての、タンパク質チロシンフォスファターゼレセプタータイプE若しくはその遺伝子の使用である。本発明検定方法により評価されたBDNFレセプターのリン酸化制御能力の有無及びその水準に基づき選抜されたBDNFレセプターのリン酸化制御能力を有する物質は、当該技術分野で既知の技法に従って、哺乳動物への投与前に、医薬品と通常呼ばれる薬学的組成物として調製することができる。従って、本発明は、BDNFレセプターのリン酸化制御剤としての薬学的組成物を包含する。ここでBDNFレセプターのリン酸化制御剤としては、例えば、PTPREの酵素ユニットを低下させる能力を有する化合物具体的には例えば、PTPRE遺伝子の転写及び/又は翻訳を抑制させる能力を有する化合物、PTPREが有する酵素活性を阻害する能力を有する化合物を有効成分として含有するBDNFレセプターの脱リン酸化抑制剤、PTPREの酵素ユニットを低下させる能力を有する化合物具体的には例えば、PTPRE遺伝子の転写及び/又は翻訳を抑制させる能力を有する化合物、PTPREが有する酵素活性を阻害する能力を有する化合物を有効成分として含有するBDNFが有する生理活性の亢進剤等を挙げることができる。本発明の薬学的組成物は、少なくとも無菌であり且つ発熱物質がないことを特徴とする。本明細書で使用される場合、薬学的組成物又は製剤は、ヒト及び獣医学的使用のための製剤を包含する。本発明の薬学的組成物を調製する方法は、例えば、RemingtonsPharmaceuticalScience17thedMackPublishingCompanyEastonPaに記載されている。本発明の薬学的組成物は、薬学的に許容される担体と混合された少なくとも1つのBDNFレセプターのリン酸化制御能力を有する物質例えば、0.1~90重量又はその生理的に許容される塩を含む。また、本発明の薬学的組成物は、リポソーム又は薬学的に許容される担体によってカプセル化された少なくとも1つのBDNFレセプターのリン酸化制御能力を有する物質を含んでよい。適切な薬学的に許容される担体としては、例えば、水、緩衝用水、生理食塩液、0.4重量生理食塩水、0.3重量グリシン、ヒアルロン酸等を挙げることができる。本発明の薬学的組成物は、従来の薬学的賦形剤及び/又は添加剤を含んでもよい。適切な薬学的賦形剤としては、例えば、安定剤、抗酸化剤、モル浸透圧調整剤、緩衝剤、pH調整剤等を挙げることができる。適切な添加剤としては、例えば、生理的に生体適合性を有する緩衝剤例えば、塩酸トロメタミン、キレート剤例えば、DTPAやDTPA‐ビスアミド、カルシウムキレート錯体例えば、カルシウムDTPA、CaNaDTPA‐ビスアミドの添加剤、場合により、カルシウム塩又はナトリウム塩例えば、塩酸カルシウム、アスコルビン酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、乳酸カルシウムの添加剤等を挙げることができる。本発明の薬学的組成物は、液体形態で使用するためにパッケージすることができ、また凍結乾燥することもできる。本発明の固体の薬学的組成物としては、例えば、従来の無毒性で固体の薬学的に許容される担体例えば、マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、ナトリウムサッカリン、滑石、セルロース、グルコース、スクロース、炭酸マグネシウムなどの医薬品グレード等を使用することができる。例えば、経口投与のための固体の薬学的組成物は、上記の担体及び賦形剤のいずれか、並びに10重量~95重量、好ましくは25重量~75重量の少なくとも1つの肝発癌に係る促進活性若しくは抑制活性を有する物質を含んでよい。エアゾール吸入投与のための薬学的組成物は、0.01重量~20重量、好ましくは1重量~10重量の、上記の通りのリポソーム及び噴射剤の中にカプセル化した少なくとも1つのBDNFレセプターのリン酸化制御能力を有する物質を含んでよい。また、例えば、鼻腔内送達のためのレシチン等の担体を所望により含んでよい。本発明システムは、本発明検定方法により評価されたBDNFレセプターのリン酸化制御能力の有無及びその水準に係るデータ情報を入力蓄積管理する手段以下、手段aと記すこともある。、前記データ情報を所望の結果を得るための条件に基づき照会検索する手段以下、手段bと記すこともある。、及び、照会検索された結果を表示出力する手段以下、手段cと記すこともある。を具備する。まず、手段aについて説明する。手段aは、前記のとおり、本発明検定方法により評価された被験物質が有するBDNFレセプターのリン酸化制御能力の有無及びその水準に係るデータ情報を入力した後、入力された当該情報を蓄積管理する手段である。かかる情報は、入力手段1により入力され、通常記憶手段2に記憶される。入力手段としては、例えばキーボード、マウス等の当該情報の入力可能なものが挙げられる。当該情報の入力及び蓄積管理が完了すれば、次の手段bに進む。尚、当該情報の蓄積管理には、コンピュータ等のハードウェアとOS及びデータベース管理等のソフトウエアとを用いて、データ構造を有する情報を入力し、適当な記憶装置、例えば、フレキシブルディスク、光磁気ディスク、CD-ROM、DVD-ROM、ハードディスク等のコンピュータ読取可能な記録媒体に蓄積することにより、大量のデータを効率良く蓄積し管理すればよい。手段bについて説明する。手段bは、前記のとおり、手段aにより蓄積管理された前記データ情報を所望の結果を得るための条件に基づき照会検索する手段である。かかる情報は、入力手段1により照会検索のための条件が入力され、通常記憶手段2に記憶された上記情報の中で当該条件に合致したものを選択すれば、次の手段cに進む。選択された結果は、通常、記憶手段2に記憶され、更に表示出力手段3により表示可能となっている。手段cについて説明する。手段cは、前記のとおり、照会検索された結果を表示出力する手段である。表示出力手段3としては、例えばディスプレイ、プリンタ等が挙げられ、当該結果をコンピュータのディスプレイ装置に表示するか、印刷等により紙上に出力するか等すればよい。以下、実施例を挙げて更に詳細に本発明を説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。実施例1PTPREが有するBDNFレセプターの脱リン酸化作用ヒトPTPRE発現プラスミドは以下のようにして作製した。配列番号1で示される塩基配列配列番号1:gagactatagccttcactttccctcggtccaccatからなるオリゴヌクレオチド及び配列番号2で示される塩基配列配列番号2:catgagctttgtgttagtatcttgcagaggcacacからなるオリゴヌクレオチドをInvitrogen社に委託して通常の方法により合成した。ヒトBraincDNAライブラリータカラバイオ社製95031μLを鋳型として、且つ、前記ポリヌクレオチドをプライマーとしてPCRを行った。当該PCRにおいて、反応液50μl当たり上記のポリヌクレオチド10pmolを添加し、KODplusポリメラーゼTOYOBO製及び当該酵素を含むキットに添付されたバッファーを用いた。PCR反応液の保温は、PCRsystem9700アプライドバイオシステムズ社製を用いて、95°C1分間、次いで、68°C5分間の保温を1サイクルとしてこれを35サイクル行った。次いで、PCR反応液の全量を、低融点アガロースゲル電気泳動アガロースL:ニッポンジーンに供した。約2kbのDNAの単一バンドを確認した後、当該DNAを回収した。回収されたDNAの一部約50ngを鋳型にして、且つ、配列番号3で示されるオリゴヌクレオチド配列番号3:ggggctagcgccaccatggagcccttgtgtccactcctgctggtgggttt及び配列番号4で示されるオリゴヌクレオチド配列番号4:gggaagcttcatgagctttgtgttagtatcttgcagaggcacacをプライマーとして、KODplusポリメラーゼTOYOBO社製を用いたPCRを行うことにより、ヒトPTPREをコードする翻訳領域の開始コドンの直前にコザック配列5GCCACC3が導入されたDNAを得た。尚、PCRの反応は、95°C1分間、次いで、68°C2分間の保温を1サイクルとしてこれを35サイクル行った。このようにして得られたDNAをT4kinaseで末端リン酸化した後、低融点アガロースゲル電気泳動NusieveGTGアガロース;FMCbio社製に供することにより精製回収した。精製回収されたDNAを下記で用いるインサートDNAとした。次いで、pcDNA31ZeoベクターInvitrogen社製をHindIIIで切断した後、BAP処理して、更にDNAbluntingキットタカラバイオ社製で平滑末端化したDNAを低融点アガロースゲル電気泳動AgaroseL;ニッポンジーン社製に供し、前記DNAを回収した。回収されたDNA01μgに上記のインサートDNA05μgをT4Ligaseで結合させることにより、ヒトPTPREをコードする翻訳領域の開始コドンの直前にコザック配列が導入されている発現プラスミドを作製した。意図通りに発現プラスミドが構築されており、且つ、そのインサート配列部分に変異が無いことは、PEBiosystems社製モデル3700DNAシークエンサーによる塩基配列決定により確認された。ヒトBDNFレセプター発現プラスミドは以下のようにして作製した。AccessionNoNM006180のヒトBDNFレセプターの塩基配列を参照して、配列番号5で示される塩基配列配列番号5:gggatgtcgtcctggataaggtggcatggacccgcからなるオリゴヌクレオチド及び配列番号6で示される塩基配列配列番号6:ttcatcctctcagcccgtctgaggagtacgttgggからなるオリゴヌクレオチドをInvitrogen社に委託して通常の方法により合成した。ヒトBraincDNAライブラリータカラバイオ社製95031μLを鋳型として、且つ、前記ポリヌクレオチドをプライマーとしてPCRを行った。当該PCRにおいて、反応液50μl当たり上記のポリヌクレオチド10pmolを添加し、KODplusポリメラーゼTOYOBO製及び当該酵素を含むキットに添付されたバッファーを用いた。PCR反応液の保温は、PCRsystem9700アプライドバイオシステムズ社製を用いて、95°C1分間、次いで、68°C10分間の保温を1サイクルとしてこれを35サイクル行った。次いで、PCR反応液の全量を、T4kinaseタカラバイオ社製で末端をリン酸化した後、低融点アガロースゲル電気泳動アガロースL:ニッポンジーンに供した。約25kbのDNAの単一バンドを確認した後、当該DNAを回収して、ヒトBDNFレセプター翻訳領域全長の塩基配列を含むインサートDNAとした。次いで、pcDNA31ZeoベクターInvitrogen社製をHindIIIで切断した後、BAP処理して、更にDNAbluntingキットタカラバイオ社製で平滑末端化したDNAを低融点アガロースゲル電気泳動AgaroseL;ニッポンジーン社製に供し、前記DNAを回収した。回収されたDNA01μgに上記インサートDNA05μgをT4Ligaseで結合させることにより、ヒトBDNFレセプターをコードする翻訳領域全長遺伝子を発現するプラスミドを作製した。意図通りに発現プラスミドが構築されており、且つ、そのインサート配列部分に変異が無いことは、PEBiosystems社製モデル3700DNAシークエンサーによる塩基配列決定により確認された。次いで、ヒトBDNFレセプターを発現しておらず、且つ、EGFレセプターを発現している神経系培養細胞であるSKNSH細胞ATCCより入手した約1×107を、10FBSを含むDMEM培地日水製薬製を用いて37°Cにて5CO2存在下に、直径約10cmのシャーレファルコン社製を用いて培養した。翌日、培養された細胞をトリプシン処理により分散し、FBSを含まないDMEM培地で2回洗浄した後、再度1×107に細胞密度がなるようにFBSを含まないDMEM培地に分散した。得られた細胞分散液0.4mlに、上記のように作製されたBDNFレセプター発現プラスミド5μgと、PTPRE発現プラスミド図表1でPTPREと表示されている実験区又は親ベクターpCDNA31Zeoベクター図表1でPTPREと表示されている実験区のいずれか5μgを混合した後、得られた混合物をエレクトロポレーション用キュベットに移し、GeneパルサーBIORAD社製を用いたエレクトロポレーション法により200V、950μFの条件でトランスフェクションした。トランスフェクション後、等分して、それぞれを10cmシャーレ2枚ずつに播種し、10FBSを含むDMEM培地中で24時間培養した。PTPREの実験区の細胞とPTPREの実験区の細胞とを1ペアとして、2群に分けた。片方には水に溶かしたBDNF和光純薬社製最終濃度10ngmlを加え、もう片方にはその対照として溶媒水を加えた。このように、合計4種類の実験区に分かれた、その各々について、BDNF添加して10分後に培養上清を除去し、PBSで素早く細胞表面を洗浄した。洗浄後、CellLyticMcelllysisregentにフォスファターゼインヒビターカクテルSigma社製P2850が1100Vol添加されたものを、10cmシャーレ1枚あたり1mlの割合で細胞表面に加え、室温で45分インキュベートすることにより細胞を溶解させた。細胞溶解物を20000×gで10分間遠心分離することにより上清を回収したものを細胞抽出物として得た。得られた細胞抽出物に、SDSサンプルバッファーBioRad社製を1:1の割合で添加した後、これを100°Cで5分間程度加熱処理した。得られた処理物を、SDSPAGE法用10アクリルアミドゲルBioRad社製を用いた電気泳動によりゲル上で展開した。ゲル上で展開されたタンパク質を、セミドライ型ゲル転写装置BioRad社製及びセミドライ転写用Bufferナカライテスク社製を用いて、当該装置に添付された説明書の記載に従って、25V定電圧の条件で30分間通電することにより、電気泳動後のゲルからHybondP膜アマシャムファルマシア社製等の膜へタンパク質を転写した。転写後に得られた膜を、PBSで2に希釈されたECLadvanceブロッキング試薬GEヘルスケア社製により室温でインキュベート60分間した後、得られた膜の上に、PBST液PBS、01Tween20BioRad社製で1万分の1に希釈されたAntiPhosphoTrkAAntibodyが強制発現されているとそのBDNFレセプターのリン酸化を示すバンドが消失していることから、PTPREはBDNFレセプターの脱リン酸化作用を有することが明らかとなった。次いで、対照実験として、PTPREのEGFレセプターの脱リン酸化作用について検討した。上記と同様なSKNSH細胞約1×107を、10FBSを含むDMEM培地日水製薬製を用いて37°Cにて5CO2存在下に、直径約10cmのシャーレファルコン社製を用いて培養した。翌日、培養された細胞をトリプシン処理により分散し、FBSを含まないDMEM培地で2回洗浄した後、再度1×107に細胞密度がなるようにFBSを含まないDMEM培地に分散した。得られた細胞分散液0.4mlに、BDNFレセプターの発現プラスミド5μgの代わりに親ベクター5μgに加えてPTPRE発現プラスミド図1でPTPREと表示されている実験区又は親ベクターpCDNA31Zeoベクター図1でPTPREと表示されている実験区のいずれか5μgを混合した後、得られた混合物をエレクトロポレーション用キュベットに移し、GeneパルサーBIORAD社製を用いたエレクトロポレーション法により200V、950μFの条件でトランスフェクションした。トランスフェクション後、等分して、それぞれを10cmシャーレ2枚ずつに播種し、10FBSを含むDMEM培地中で24時間培養した。PTPREの実験区の細胞とPTPREの実験区の細胞とを1ペアとして、2群に分けた。片方には水に溶かしたEGF和光純薬社製最終濃度10ngmlを加え、もう片方にはその対照として溶媒水を加えた。このように、合計4種類の実験区に分かれた、その各々について、EGF添加して10分後に培養上清を捨て、PBSで素早く細胞表面を洗浄した。洗浄後、CellLyticMcelllysisregentにフォスファターゼインヒビターカクテルSigma社製P2850が1100Vol添加されたものを、10cmシャーレ1枚あたり1mlの割合で細胞表面に加え、室温で45分インキュベートすることにより細胞を溶解させた。細胞溶解物を20000×gで10分間遠心分離することにより上清を回収したものを細胞抽出物として得た。得られた細胞抽出物に、SDSサンプルバッファーBioRad社製を1:1の割合で添加した後、これを100°Cで5分間程度加熱処理した。得られた処理物を、SDSPAGE法用10アクリルアミドゲルBioRad社製を用いた電気泳動によりゲル上で展開した。ゲル上で展開されたタンパク質を、セミドライ型ゲル転写装置BioRad社製及びセミドライ転写用Bufferナカライテスク社製を用いて、当該装置に添付された説明書の記載に従って、25V定電圧の条件で30分間通電することにより、電気泳動後のゲルからHybondP膜アマシャムファルマシア社製等の膜へタンパク質を転写した。転写後に得られた膜を、PBSで2に希釈されたECLadvanceブロッキング試薬GEヘルスケア社製により室温でインキュベート60分間した後、得られた膜の上に、PBST液PBS、01Tween20BioRad社製で1万分の1に希釈されたAntiPhosphoEGFreceptorAntibodyが強制発現されていてもそのEGFレセプターのリン酸化を示すバンドは消失しなかったことから、PTPREはEGFレセプターの脱リン酸化作用は有しないことが明らかとなり、BDNFレセプターの脱リン酸化作用を選択的に有すると考えられた。実施例2BDNFレセプターのリン酸化制御能力を有する物質の探索その1:PTPREの酵素の活性を測定用指標とする試験哺乳動物細胞であるCOS7細胞ATCCより購入を、10FCSが添加されたDMEM培地を用いて、10cmプレート上で、37°C、5CO2存在下で培養した。当該プレート上で8割コンフルエントの状態になるまで培養された培養細胞に、実施例1記載のように作製されたPTPRE発現プラスミド24μgシャーレを、リポフェクトアミン2000Invitrogen社製60μLシャーレの割合で用いて、添付される説明書のデフォルトの基本条件でトランスフェクションした。トランスフェクション後72時間経過した後、培地を除去し、プレート一枚当たり1mlのCellLyticMcelllysisreagentSigma社製C2978と置換し、4°C、1時間インキュベートすることにより、培養細胞を溶解させた。得られた溶解物を、20000gで30分間遠心分離することにより得られた上清を回収した。回収された上清細胞抽出物を分取して、10μLのAntiPTPRE抗体SantaCruz社AntiPTPεSC1117を予め結合させておいたProteinGsepharaseビーズ50懸濁液30μlと混合した後、当該混合物を4°Cで1時間インキュベートした。得られた混合物を、2000gで1分間遠心分離することにより沈殿画分を得た。得られた沈殿画分を1mlのCellLyticMcelllysisreagentSigma社製C2978で懸濁した後、当該懸濁液を2000gで1分間遠心分離する。同様な操作1回の洗浄操作単位を3回繰り返すことにより、ビーズに結合したPTPREタンパク質精製物として得た。次いで、上記ビーズをタカラバイオ社製のUniversalTyrosinePhosphataseassaykitに付属する反応緩衝液に懸濁して、その1万分の1をPTPREタンパク質精製物1単位として、以下の反応系1wellに1単位の割合で用いた。PTPREの酵素活性測定は、前記タカラバイオ社製のUniversalTyrosinePhosphataseassaykitを用いて以下のように実施した。予めリン酸化チロシン含有ペプチドを酵素基質として固定してあるキット付属のマイクロタイタープレートの表面に対して、添付されている酵素反応用緩衝液50μLに対して1単位のPTPREタンパク質精製物、及び、被験物質若しくは対照、を添加したものを加えた後、直ちに100rpmで振動させながら37°Cで30分間酵素反応を進行させた。この際、各被験物質の濃度は10μM溶媒の最終濃度0.1DMSOであった。対照としては被験物質が混合されていない溶媒0.1DMSOの場合を併行して同様に反応させた。反応終了後、得られた反応液をプレート上から除去し、当該プレート表面を200μLのPBS01Tween20で4回洗浄した。洗浄後、キットに添付されているブロッキング用緩衝液を100μLwellずつプレート表面に加え、37°Cで30分間インキュベートした。次いで、ブロッキング用緩衝液を除去し、ペーパータオル上にプレートをタッピングして更に完全にプレート上の液を除去した後、キットに添付されているペルオキシダーゼ標識抗リン酸化チロシン抗体液を50μLwellずつプレート表面に加え、37°Cで30分反応させた。反応終了後、得られた反応液を除去し、当該プレート表面をPBS01Tween20で4回洗浄した。次いで、ペーパータオル上にプレートをタッピングして更に完全にプレート上の液を除去した後、キットに添加されている発色基質液を100μLwellずつプレート表面に加え、100rpmで振動させながら室温で15分間反応を行った。反応を、1N硫酸を添加することにより停止させた。呈色量を、テカン社製SpectraFluorプレートリーダーを用いて450nmの波長で吸光度を測定した。測定結果を図2に示した。縦軸は測定された吸光度450nmの平均値N5である。被験物質は、対照:DMSO酸ナトリウム和光純薬社製19809752、ペンタシアノニトロシル鉄III酸ナトリウム和光純薬社製19902602、Lグルタミン和光純薬社製07400522、2-メチル14ナフトキノン和光純薬社製13208132、Dソルビトール和光純薬社製19403752、Lグルタミン酸水素ナトリウム和光純薬社製19402032であった。前記被験物質のうち、測定値が対照と比較して有意に差異があることから左から3番目、オルトバナジンV酸ナトリウムは陽性と評価された。その他の被験物質は、測定値が対照と比較して有意な差が認められないことから陰性と評価された。このようにして陽性と評価された被験物質は、BDNFレセプターのリン酸化活性化を増強する活性を有する。陰性と評価された被験物質は、BDNFレセプターのリン酸化を増強する活性を有しない。以上の結果を直接確認するために、ラット大脳の初代培養神経を用いて、それぞれの被験物質が有するBDNFレセプターのリン酸化作用等を以下のようにして測定した。まず、凍結ラット大脳住友ベークライト社製Sumilon神経細胞CRを室温で解凍し、次いで、前記脳をハンクス液HBSSInvitrogen社製4mlで洗浄した後、300gで1分遠心することにより、脳をペレットとして回収した。回収された脳に対して、神経細胞分散液キット住友ベークライト社製MBX9901付属の酵素液を2.5ml加え、これを37°Cで20分間インキュベートした。次いで、軽くピペッテイングして細胞をほぐし、900gで5分間遠心することにより、細胞をペレットとした。次いで、得られたペレットをキット付属の分散液25mlに懸濁し、更に得られた懸濁液をキット付属の除去液2.5mlのクッションの下に層を乱さないように加えた。次いで、これを900gで5分間遠心することにより、ペレットとして神経細胞を得た。得られた神経細胞を神経細胞培養液住友ベークライト社製MBX9501に懸濁した後、25×107wellの割合でポリLリシンコート6wellプレート住友ベークライト社製上に播種した。これを37°C、5CO2存在下で培養した。3日目に培養液を交換し、更に培養を継続し、培養開始から7日目に得られる神経細胞を以下の実験に供した。このようにして準備された神経細胞の各wellから培養上清を除き、予め37°Cに暖めておいた、最終濃度10ngmlのBDNFが添加された神経細胞培養液住友ベークライト社製に対して各被験物質10μM、溶媒濃度0.1又は対照溶媒:DMSO、濃度0.1を混合したものを添加した。神経細胞は、直ちにインキュベータに戻し、37°Cで10分間インキュベートした。次いで、培養上清を除去し、氷冷PBSで素早く細胞表面を洗浄した。洗浄後、CellLyticMcelllysisregentにフォスファターゼインヒビターカクテルSigma社製P2850が1100Vol添加されたものを、1well当たり200μLの割合で細胞表面に加え、室温で45分インキュベートすることにより細胞を溶解させた。細胞溶解物を20000×gで10分間遠心分離することにより上清を回収したものを細胞抽出物として得た。得られた細胞抽出物に、SDSサンプルバッファーBioRad社製を1:1の割合で添加した後、これに100°Cで5分間程度加熱処理した。得られた処理物を、SDSPAGE法用10アクリルアミドゲルBioRad社製を用いた電気泳動によりゲル上で展開した。ゲル上で展開されたタンパク質を、セミドライ型ゲル転写装置BioRad社製及びセミドライ転写用Bufferナカライテスク社製を用いて、当該装置に添付された説明書の記載に従って、25V定電圧の条件で30分間通電することにより、電気泳動後のゲルからHybondP膜アマシャムファルマシア社製等の膜へタンパク質を転写した。転写後に得られた膜を、PBSで2に希釈されたECLadvanceブロッキング試薬GEヘルスケア社製により室温でインキュベート60分間した後、得られた膜の上に、PBST液PBS、0.1Tween20BioRad社製で1万分の1に希釈されたAntiPhosphoTrkAAntibody酸ナトリウム、レーン4:ペンタシアノニトロシル鉄III酸ナトリウム、レーン5:Lグルタミン、レーン6:2-メチル14ナフトキノン、レーン7:Dソルビトール、レーン8:Lグルタミン酸水素ナトリウム、レーン9:対照溶媒DMSOであった。その結果、オルトバナジンV酸ナトリウムレーン3だけが、BDNFが10ngml存在しているときのBDNFレセプターのリン酸化の程度を、対照と比較して有意に増強させることが確認された。その他の被験物質は、対照と比較して有意な差異を与えなかった。以上、PTPREの酵素活性測定結果により陽性と評価された被験物質がBDNFレセプターのリン酸化を増強させ、陰性と評価された被験物質がBDNFレセプターのリン酸化を増強させないことが確認された。実施例3BDNFレセプターのリン酸化制御能力を有する物質の探索その1:PTPREの酵素の量を測定用指標とする試験被験物質として、PTPRE遺伝子のmRNAを細胞中で分解する作用を有するステルスRNAInvitrogen社製の候補物質として、3物質物質1Invitrogen社製PTPRERSS300324、物質2Invitrogen社製PTPRERSS300325、物質3Invitorgen社製PTPRERSS300326、更にこれらと塩基配列が異なる物質を3物質物質4Invitrogen社製12935300、物質5Invitrogen社製12935112、物質6Invitrogen社製129351139の合計6物質を準備した。対照として、これらの物質を溶解するために用いられた緩衝液Invitrogen社製1×RNAAnnealingbuffer468804を用いた。まず内在性のPTPREを有する培養細胞であるPC12細胞ATCCを、10血清、ピルビン酸Na液GIBCOBRL11360及びNonessentialamino酸液GIBCOBRL11140を補ったRPMI1640培養液中、37°C、5CO2の通常の培養条件で、10cmプレート上で8割コンフルエントの状態になるまで培養された培養細胞を準備した。次いで、当該培養細胞それぞれ4枚ずつ1枚はタンパク質用、もう3枚はRNA用に、各被験物質600pmol/10cmずつ又は対照を、培養細胞へのRNAi導入試薬Invitrogen社のLipofectamineRNAiMAX試薬13778150を用いて導入した。当該導入は、当該導入試薬に添付された説明書に記載された標準方法に従って実施された。具体的には、前記被験物質とRNAi導入試薬20μL10cmとを含むOptiMEMInvitorgen社製の2mlを細胞培養上清に添加した後、前記培養細胞をインキュベートした。次いで、72時間後PTPRE遺伝子のmRNAが分解され、そしてPTPREのタンパク質量が低下することが一般に期待される期間、前記培養細胞中に含まれる全RNA及び全タンパク質をそれぞれ回収した。この際の培養細胞からの全RNA抽出方法は、細胞培養上清を除いた細胞表面に、RNA精製キットQIAGEN社のRneasykit74106中に含まれる細胞溶解液1mlをそれぞれのプレート1枚の割合で加えた後、培養細胞を5分間インキュベートすることにより、培養細胞を溶解させた。次いで、キット取り扱い説明書の標準操作方法に従って全RNAを調製した。一方、培養細胞からの全タンパク質抽出方法は、細胞培養上清を除いた細胞表面に、プロテアーゼインヒビターRocheダイアグノステックス社製11873580001を1個/5mlの割合で加えた細胞溶解液Sigma社CellLyticMcelllysisreagent1mlをそれぞれのプレート1枚の割合で加えた後、培養細胞を4°Cで45分間インキュベートすることにより、培養細胞を溶解させた。次いで、培養細胞溶解物を20000gで10分間遠心することにより、上清を回収した。次いで、調製されたそれぞれのRNA1μgに、MMLV東洋紡逆転写酵素1μLの割合で加え、添付されている反応緩衝液中、0.5mMdNTP及び25μgmlオリゴdT存在下で42°C、1時間反応させ、対応するcDNAを調製した。次いで、調製されたcDNAの全量の1000分の1量を鋳型にして、PTPRE遺伝子の塩基配列の一部分を有するオリゴヌクレオチドプライマー配列番号7:agctcaaggtcccaaacaggaaacggttaacgact及び配列番号8:tactggtagcatttatcctgctctctctcctgcacそれぞれ10pmolづつを用いて、SYBRGreenPCRReagentsPCR試薬ABI社を用いて添付説明書に従ってABI社製StepOnePlusリアルタイムPCR装置を用いて当該装置の標準プログラムでPCR反応増幅されたDNAの蛍光を測定することにより、PRPRE遺伝子のmRNA対応するcDNAの量を測定した。図4に対照の測定値を1としたときの、各被験物質のそれぞれの場合の相対測定値N3を示した。縦軸は相対測定値である。ここで、レーン1が物質1Invitrogen社製PTPRERSS300324、レーン2が物質2Invitrogen社製PTPRERSS300325、レーン3が物質3Invitorgen社製PTPRERSS300326、レーン4が物質4Invitrogen社製12935300、レーン5が物質5Invitrogen社製12935112、レーン6が物質6Invitrogen社製129351139、そしてレーン7が対照であり、これらの物質を溶解するために用いられた緩衝液Invitrogen社製1×RNAAnnealingbuffer468804の場合の結果である。その結果、物質1が対照に対して有意な測定値の差異を示したことから、物質1は陽性と評価された。その他の物質は全て対照に対して有意な測定値の差異を示さなかったことから、全て陰性と評価された。タンパク質の解析操作は以下のように行った。それぞれの細胞抽出物に、SDSサンプルバッファーBioRad社製を1:1の割合で添加した後、これに100°Cで5分間程度加熱処理した。得られた処理物それぞれ5μgを、SDSPAGE法用10アクリルアミドゲルBioRad社製を用いた電気泳動によりゲル上で展開した。ゲル上で展開されたタンパク質を、セミドライ型ゲル転写装置BioRad社製及びセミドライ転写用Bufferナカライテスク社製を用いて、当該装置に添付された説明書の記載に従って、25V定電圧の条件で30分間通電することにより、電気泳動後のゲルからHybondP膜アマシャムファルマシア社製等の膜へタンパク質を転写した。転写後に得られた膜を、PBSで2に希釈されたECLadvanceブロッキング試薬GEヘルスケア社製により室温でインキュベート60分間した後、得られた膜の上に、PBST液PBS、01Tween20BioRad社製で1万分の1に希釈されたAntiPTPε抗体を発現させたものを用いて、それぞれの被験物質が有するBDNFレセプターのリン酸化作用を以下のようにして測定した。まず、コラーゲンコート6穴プレートファルコン社製上に、内在性のPTPREを有する培養細胞であるPC12細胞ATCCを、10血清、ピルビン酸Na液GIBCOBRL11360及びNonessentialamino酸液GIBCOBRL11140を補ったRPMI1640培養液中、37°C、5CO2の通常の培養条件でプレート上で3割コンフルエントの状態になるまで培養された培養細胞を準備した。次いで、当該培養細胞に、各被験物質100pmolwellずつ又は対照と実施例1で作製されたBDNFレセプター発現プラスミド2μgwellずつとを混合したものを、培養細胞へのプラスミド及びRNAiの同時導入試薬Invitrogen社のLipofectamine200011668019を用いて導入した。当該導入は、リポフェクトアミン2000試薬に添付された説明書に記載された標準方法に従って実施された。具体的には、前記被験物質とBDNFレセプター発現プラスミドとRNAi導入試薬10μLwellを含む0.5mlとを含むOptiMEMInvitorgen社製の2mlを細胞培養上清に添加した後、前記培養細胞をインキュベートした。次いで、72時間後PTPRE遺伝子のmRNAが分解され、そしてPTPREのタンパク質量が低下することが一般に期待される期間、培養細胞が含まれる各wellから培養上清を除き、予め37°Cに暖めておいた、最終濃度10ngmlのBDNFが添加された細胞培養液に置換した。培養細胞は、直ちにインキュベータに戻し、37°Cで10分間インキュベートした。次いで、培養上清を除去し、氷冷PBSで素早く細胞表面を洗浄した。洗浄後、CellLyticMcelllysisregentにフォスファターゼインヒビターカクテルSigma社製P2850が1/100Vol添加されたものを、1well当たり200μLの割合で細胞表面に加え、室温で45分インキュベートすることにより細胞を溶解させた。細胞溶解物を20000×gで10分間遠心分離することにより上清を回収したものを細胞抽出物として得た。得られた細胞抽出物に、SDSサンプルバッファーBioRad社製を1:1の割合で添加した後、これに100°Cで5分間程度加熱処理した。得られた処理物タンパク質量各5μgを、SDSPAGE法用10アクリルアミドゲルBioRad社製を用いた電気泳動によりゲル上で展開した。ゲル上で展開されたタンパク質を、セミドライ型ゲル転写装置BioRad社製及びセミドライ転写用Bufferナカライテスク社製を用いて、当該装置に添付された説明書の記載に従って、25V定電圧の条件で30分間通電することにより、電気泳動後のゲルからHybondP膜アマシャムファルマシア社製等の膜へタンパク質を転写した。転写後に得られた膜を、PBSで2に希釈されたECLadvanceブロッキング試薬GEヘルスケア社製により室温でインキュベート60分間した後、得られた膜上に、PBST液PBS、01Tween20BioRad社製で1万分の1に希釈されたAntiPhosphoTrkAAntibodyCellSignaling社製9141を滴下した。4°Cで一晩以上インキュベートすることにより、膜の上における抗原抗体反応を進行させた。次いで、膜をPBST液中で15分間2回洗浄した後、得られた膜上に、PBSTで1万分の1に希釈されたAntiRabbitIgGHRPGEヘルスケア製NA934V二次抗体を滴下した。室温で1時間インキュベートすることにより生じた複合体を保持する膜を、PBST液中で15分2回洗浄した後、得られた膜に対してECLadvance試薬GEヘルスケア社製を用いて当該試薬に添付された取扱説明書の記載に従って処理した。このようにして得られた膜を、直ちにイメージアナライザーLAS1000富士フィルム社製で解析することにより、リン酸化されたBDNFレセプターのリン酸化の程度を示すゲル上のイメージ像を得た。得られたイメージ像を図6に示した。ここで、レーン1が物質1Invitrogen社製PTPRERSS300324、レーン2が物質2Invitrogen社製PTPRERSS300325、レーン3が物質3Invitorgen社製PTPRERSS300326、レーン4が物質4Invitrogen社製12935300、レーン5が物質5Invitrogen社製12935112、レーン6が物質6Invitrogen社製129351139、そしてレーン7が対照被験物質を溶解するために用いられた緩衝液Invitrogen社製1×RNAAnnealingbuffer468804の場合の結果である。その結果、物質1が対照に対して有意なBDNFレセプターのリン酸化活性化を増強させ、その他の被験物質がBDNFレセプターのリン酸化活性化を増強させないことが確認された。"