"好酸球性炎症の診断アッセイEIDAを使用して患者が好酸球性炎症陽性EIPであるかを決定することを含む、TH2経路阻害剤による治療に応答する可能性のある喘息患者又は呼吸器疾患患者を同定するための方法であって、EIP状態が、患者がTH2経路阻害剤による治療に応答する可能性があることを示す方法。好酸球性炎症の診断アッセイEIDAを使用して患者が好酸球性炎症陽性EIPであるかを決定することを含む、重度の増悪に罹患する可能性のある喘息患者又は呼吸器疾患患者を同定するための方法であって、EIP状態が、患者が重度の増悪の増大に罹患する可能性のあることを示す方法。好酸球性炎症の診断アッセイEIDAを使用して患者が好酸球性炎症陰性EINであるかを決定することを含む、TH2経路阻害剤による治療に応答する可能性が少ない喘息患者又は呼吸器疾患患者を同定するための方法であって、EIN状態が患者がTH2経路阻害剤による治療に応答する可能性が少ないことを示す方法。好酸球性炎症の診断アッセイEIDAを使用して患者が好酸球性炎症陽性EIP又は好酸球性炎症陰性EINであるかを決定することを含む、TH2経路阻害剤により治療されている喘息患者をモニタリングする方法。TH2経路阻害剤の治療レジメンを決定することを更に含む、請求項4の方法。EIPの決定が、TH2経路阻害剤による治療を継続することを示し、EINの決定はTH2経路阻害剤による治療を中止することを示す、請求項5の方法。EIDAが、a喘息患者から得たサンプル中の総ペリオスチンの量を決定し;b工程aで決定された総ペリオスチンの量を参照量に対して比較し;及びc前記患者を工程bで得られた比較に基づいて応答者又は非応答者のカテゴリに層別化する工程を含む、請求項1から4に記載の方法。総ペリオスチンが血清ペリオスチンであり、該ペリオスチンがイムノアッセイを使用して測定される、請求項7に記載の方法。イムノアッセイがサンドイッチイムノアッセイである、請求項8に記載の方法。サンドイッチイムノアッセイがE4アッセイであるか、又はElecsys登録商標アナライザーにより実施される、請求項9に記載の方法。工程aにおいてE4アッセイを使用するときEIPの参照量が23ng/ml以上である、請求項7に記載の方法。工程aにおいてElecsys登録商標アナライザーを使用するときEIPの参照量が50ng/ml以上である、請求項7に記載の方法。工程aにおいてE4アッセイを使用するときEINの参照量が21ng/ml以下である、請求項7に記載の方法。工程aにおいてElecsys登録商標アナライザーを使用するときEINの参照量が48ng/ml以下である、請求項7に記載の方法。患者が中等度から重度の喘息に罹患している、請求項1から14の何れか一項に記載の方法。喘息又は呼吸器疾患がコルチコステロイドで制御されない、請求項1から14の何れか一項に記載の方法。コルチコステロイドが吸入コルチコステロイドである、請求項16に記載の方法。吸入コルチコステロイドが、キュバール登録商標、パルミコート登録商標、シンビコート登録商標、Aerobid登録商標、フロベント登録商標、アドベア登録商標又はアズマコート登録商標である、請求項17に記載の方法。患者がまた第二コントローラーで治療されている、請求項1から14の何れか一項に記載の方法。第二コントローラーが長時間作用型気管支拡張薬LABDである、請求項19に記載の方法。LABDが、長時間作用型β2アゴニストLABA、ロイコトリエン受容体アンタゴニストLTRA、長時間作用型ムスカリンアンタゴニストLAMA、テオフィリン、または経口コルチコステロイドOCSである、請求項20に記載の方法。LABDが、シンビコート登録商標、アドベア登録商標、ブロバナ登録商標、フォラジル登録商標、PerforomistTM、又はセレベント登録商標である、請求項20に記載の方法。TH2経路阻害剤が、標的ITK,BTK,IL-9例えば、MEDI-528、IL-5例えば、メポリズマブ、CAS番号196078-29-2;レシリズマブresilizumab、IL-13例えば、IMA-026,IMA-638アンルキンズマブとも言う、INNNo.910649-32-0;QAX-576;IL4/IL13トラップ,トラロキヌマブCAT-354,CAS番号1044515-88-9とも言う;AER-001,ABT-308ヒト化13C5.5抗体とも言う,IL-4例えばAER-001,IL4/IL13トラップ,OX40L,TSLP,IL-25,IL-33及びIgE例えば、XOLAIR,登録商標、QGE-031;MEDI-4212;及び受容体、例えば:IL-9受容体、IL-5受容体例えば、MEDI-563ベンラリズマブ,CAS番号1044511-01-4,IL-4受容体α例えば、AMG-317,AIR-645,IL-13受容体α1例えばR-1671及びIL-13受容体α2,OX40,TSLP-R,IL-7RアルファTSLPの共受容体,IL17RBIL-25の受容体,ST2IL-33の受容体,CCR3,CCR4,CRTH2例えばAMG-853,AP768,AP-761,MLN6095,ACT129968,FcepsilonRI,FcepsilonRII/CD23IgEの受容体,Flap例えば、GSK2190915,SykキナーゼR-343,PF3526299;CCR4AMG-761,TLR9QAX-935を阻害し、又はCCR3,IL5,IL3,GM-CSFの多重サイトカイン阻害剤例えば、TPIASM8である、請求項1から19の何れか一項に記載の方法。TH2経路阻害剤が抗IL13/IL4経路阻害剤又は抗IgE結合剤である、請求項1から19の何れか一項に記載の方法。TH2経路阻害剤が抗IL-13抗体である、請求項1から19の何れか一項に記載の方法。抗IL-13抗体が、配列番号9を含むVHと配列番号10を含むVLを含む抗体であり、抗IL-13抗体はHVRH1、HVRH2、HVRH3、HVRL1、HVRL2、及びHVRL3を含み、各HVRが配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、及び配列番号16、又はレブリキズマブのアミノ酸配列を有する、請求項25に記載の方法。抗IL-13抗体がIL-4にも結合する二重特異性抗体である、請求項25に記載の方法。TH2経路阻害剤が抗IgE抗体である、請求項1から19の何れか一項に記載の方法。抗IgE抗体が、iXOLAIR登録商標抗体、ii可変重鎖が配列番号24で可変軽鎖が配列番号25である、可変重鎖と可変軽鎖を含む抗M1’抗体、又はiii可変重鎖が更に、HVR-H1,HVR-H2及びHVR-H3を含み、可変軽鎖が更に、HVR-L1,HVR,L2及びHVR-L3を含む、可変重鎖と可変軽鎖を含む抗M1’抗体であり、そして:aHVR-H1は配列番号24の残基26-35[GFTFSDYGIA]であり;bHVR-H2は配列番号24の残基49-66[AFISDLAYTIYYADTVTG]であり;cHVR-H3は配列番号24の残基97-106[ARDNWDAMDY]であり;dHVR-L1は配列番号25の残基24-39[RSSQSLVHNNANTYLH]であり;eHVR-L2は配列番号25の残基55-61[KVSNRFS]であり;fHVR-L3は配列番号25の残基94-102[SQNTLVPWT]である、請求項28に記載の方法。喘息患者を、TH2経路阻害剤による治療的処置に対する可能性のある応答者及び非応答者へと層別化/分類するために喘息患者から得られたサンプル中の総ペリオスチンを検出するためのキットの使用。総ペリオスチンがEIDAを使用して検出され、該EIDAはa喘息患者から得たサンプル中の総ペリオスチンの量を決定し;b工程aで決定された総ペリオスチンの量を参照量に対して比較し;及びc前記患者を工程bで得られた比較に基づいて応答者又は非応答者のカテゴリに層別化する工程を含む、請求項30に記載の方法。総ペリオスチンが血清ペリオスチンであり、該ペリオスチンがイムノアッセイを使用して測定される、請求項30又は請求項31に記載の使用。イムノアッセイがサンドイッチイムノアッセイである、請求項32に記載の使用。サンドイッチイムノアッセイがElecsys登録商標アナライザーにより実施される、請求項33に記載の使用。工程aにおいてE4アッセイを使用するとき応答者についての参照量が23ng/ml以上である、請求項31に記載の使用。工程aにおいてElecsys登録商標ペリオスチンアッセイを使用するとき応答者についての参照量が50ng/ml以上である、請求項31に記載の使用。患者が中等度から重度の喘息に罹患している、請求項30から36に記載の使用。喘息又は呼吸器疾患がコルチコステロイドで制御されない、請求項30から36に記載の使用。コルチコステロイドが吸入コルチコステロイドである、請求項38に記載の方法。吸入コルチコステロイドが、キュバール登録商標、パルミコート登録商標、シンビコート登録商標、Aerobid登録商標、フロベント登録商標、アドベア登録商標又はアズマコート登録商標である、請求項39に記載の方法。患者がまた第二コントローラーで治療されている、請求項30から39に記載の使用。第二コントローラーが長時間作用型気管支拡張薬LABDである、請求項41に記載の使用。LABDが、LABA、LTRA、LAMA、テオフィリン、又はOCSである、請求項42に記載の使用。LABDが、シンビコート登録商標、アドベア登録商標、ブロバナ登録商標、フォラジル登録商標、PerforomistTM、又はセレベント登録商標である、請求項43に記載の使用。TH2経路阻害剤が、標的ITK,BTK,IL-9例えば、MEDI-528、IL-5例えば、メポリズマブ、CAS番号196078-29-2;レシリズマブresilizumab、IL-13例えば、IMA-026,IMA-638アンルキンズマブとも言う、INNNo.910649-32-0;QAX-576;IL4/IL13トラップ,トラロキヌマブCAT-354,CAS番号1044515-88-9とも言う;AER-001,ABT-308ヒト化13C5.5抗体とも言う,IL-4例えばAER-001,IL4/IL13トラップ,OX40L,TSLP,IL-25,IL-33及びIgE例えば、XOLAIR、QGE-031;MEDI-4212;及び受容体、例えば:IL-9受容体、IL-5受容体例えば、MEDI-563ベンラリズマブ,CAS番号1044511-01-4,IL-4受容体α例えば、AMG-317,AIR-645,IL-13受容体α1例えばR-1671及びIL-13受容体α2,OX40,TSLP-R,IL-7RアルファTSLPの共受容体,IL17RBIL-25の受容体,ST2IL-33の受容体,CCR3,CCR4,CRTH2例えばAMG-853,AP768,AP-761,MLN6095,ACT129968,FcepsilonRI,FcepsilonRII/CD23IgEの受容体,Flap例えば、GSK2190915,SykキナーゼR-343,PF3526299;CCR4AMG-761,TLR9QAX-935を阻害し、又はCCR3,IL5,IL3,GM-CSFの多重サイトカイン阻害剤例えば、TPIASM8である、請求項30から43に記載の使用。TH2経路が抗IL13/IL4経路阻害剤又は抗IgE結合剤である、請求項30から43に記載の方法。抗抗IL-13抗体の請求項30から43に記載の使用。抗IL-13抗体が、配列番号9を含むVHと配列番号10を含むVLを含む抗体であり、抗IL-13抗体はHVRH1、HVRH2、HVRH3、HVRL1、HVRL2、及びHVRL3を含み、各HVRが配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、及び配列番号16、又はレブリキズマブのアミノ酸配列を有する、請求項47に記載の使用。抗IL-13抗体がIL-4にも結合する二重特異性抗体である、請求項47に記載の使用。TH2経路阻害剤が抗IgE抗体である、請求項30から43に記載の使用。抗IgE抗体が、iXOLAIR登録商標抗体、ii可変重鎖が配列番号24で可変軽鎖が配列番号25である、可変重鎖と可変軽鎖を含む抗M1’抗体、又はiii可変重鎖が更に、HVR-H1,HVR-H2及びHVR-H3を含み、可変軽鎖が更に、HVR-L1,HVR,L2及びHVR-L3を含む、可変重鎖と可変軽鎖を含む抗M1’抗体であり、そして:aHVR-H1は配列番号24の残基26-35[GFTFSDYGIA]であり;bHVR-H2は配列番号24の残基49-66[AFISDLAYTIYYADTVTG]であり;cHVR-H3は配列番号24の残基97-106[ARDNWDAMDY]であり;dHVR-L1は配列番号25の残基24-39[RSSQSLVHNNANTYLH]であり;eHVR-L2は配列番号25の残基55-61[KVSNRFS]であり;fHVR-L3は配列番号25の残基94-102[SQNTLVPWT]である、請求項50に記載の使用。喘息患者又は呼吸器疾患に罹患している患者から得た生物学的サンプル中の総ペリオスチンを測定するためのキットであり、該キットは1第二の核酸分子が総ペリオスチン又はその一部をコードする第二の核酸分子にハイブリダイズする第一の核酸分子を含むか、又は2該キットは総ペリオスチンに結合する抗体を含むキット。請求項30から51の何れか一項に記載の使用を記述する情報を含むパッケージ挿入物を含む、請求項52に記載のキット。1患者から得た血清サンプル中の総ペリオスチンのレベル、及び任意で、TARC及びMCP-4から選択される一以上のタンパク質について血清サンプル中のタンパク質の発現レベルを測定し;及び2血清サンプル中の総ペリオスチンの発現レベル及び任意でTARC及びMCP-4から選択される一以上のタンパク質の発現レベルを測定するためのインストラクションを包含し、ここで前記タンパク質の何れか一、組み合わせ又は全ての発現の上昇が喘息サブタイプの指標である、患者の喘息サブタイプを診断するためのキット。キットが、喘息患者又は呼吸器疾患患者がEIP又はEINであるかを決定するためのパッケージ挿入物を更に含む、請求項54に記載のキット。キットが、喘息患者がTH2経路阻害剤に応答する可能性があるかを決定するためのパッケージ挿入物を更に含む、請求項55に記載のキット。請求項30から51の何れか一項に記載の使用を記述する情報を含むパッケージ挿入物を更に含む、請求項55に記載のキット。生物学的サンプルを保持する空の容器を更に含む、請求項52から56に記載のキット。キットが総ペリオスチンのレベルを決定するためのイムノアッセイにおける使用のための2つの抗ペリオスチンを含む、請求項52から56に記載のキット。喘息又は呼吸器疾患を治療する方法であって、HVRH1,HVRH2,HVRH3,HVRL1,HVRL2,及びHVRL3を含み、各HVRが配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15及び配列番号16のアミノ酸配列を有する抗IL-13抗体を、喘息又は呼吸器疾患に罹患する患者に対して125-500mgの均一用量で2~8週間毎に投与することを含む方法。患者が中等度から重度の喘息に罹患している、請求項60に記載の方法。喘息又は呼吸器疾患がコルチコステロイドで制御されない、請求項60又は61に記載の方法。喘息又は呼吸器疾患が吸入コルチコステロイドで制御されない、請求項62に記載の方法。喘息又は呼吸器疾患が、一日の全用量が少なくとも500mcgのフルチカゾンプロピオン酸エステルFPで制御されない、請求項62に記載の方法。コルチコステロイドが、キュバール登録商標、パルミコート登録商標、シンビコート登録商標、Aerobid登録商標、フロベント登録商標、アドベア登録商標、アズマコート登録商標である吸入コルチコステロイドである、請求項63に記載の方法。患者が第二コントローラーで治療されている、請求項60から65の何れか一項に記載の方法。患者が、抗IL-13抗体による治療期間において、コルチコステロイド、任意で吸入コルチコステロイドで継続的に治療されている、請求項60から66の何れか一項に記載の方法。患者が、抗IL-13抗体による治療期間において、第二コントローラーで継続的に治療されている、請求項67に記載の方法。第二コントローラーが長時間作用型気管支拡張薬である、請求項66又は請求項68に記載の方法。長時間作用型気管支拡張薬が、LABA、LTRA、LAMA、テオフィリン、又はOCSである、請求項69に記載の方法。患者がEIPであると決定されている、請求項70に記載の方法。請求項50から59の何れか一項に記載のキットを使用して、EIPであると決定されている、請求項70に記載の方法。請求項7から12の何れか一項に記載の方法を使用して、EIPであると決定されている、請求項70に記載の方法。患者が4週間毎に125mg又は250mgの均一用量を投与される、請求項60から73の何れか一項に記載の方法。患者が18歳以上である、請求項74に記載の方法。患者が12~17歳以上、又は12歳以上である、請求項74に記載の方法。患者が6~11歳以上、又は6歳以上である、請求項74に記載の方法。抗IL-13抗体が皮下に投与される、請求項60から77の何れか一項に記載の方法。抗IL-13抗体がプレフィルドシリンジまたは自動注入装置を使用して投与される、請求項78に記載の方法。治療されるべき喘息患者が18歳以上であり、血清ペリオスチンを50ng/mL以上有し、吸入コルチコステロイドと第二コントローラー薬物で制御されない、請求項60に記載の方法。請求項7から10及び12の何れか一項に記載の方法を使用して、血清ペリオスチンが測定される、請求項78に記載の方法。請求項52から59の何れか一項に記載のキットを使用して血清ペリオスチンが測定される、請求項78に記載の方法。抗IL-13抗体が配列番号9を含むVH及び配列番号10を含むVLを含む抗体である、請求項60から82の何れかに記載の方法。抗IL-13抗体がレブリキズマブである、請求項60から82の何れか一項に記載の方法。喘息患者が12歳以上であり、吸入コルチコステロイドと第二コントローラー薬物で制御されない、請求項76に記載の方法。患者にレブリキズマブの治療的有効量を投与することを含む喘息又は呼吸器疾患を治療する方法であって、該治療がレブリキズマブによる治療前に比べて5を超えるFEV1の相対的改善をもたらす方法。FEV1の相対的改善がレブリキズマブによる治療前と比較して8を超える、請求項86に記載の方法。患者にレブリキズマブの治療的有効量を投与することを含む喘息又は呼吸器疾患を治療する方法であって、該治療が重度の増悪の減少をもたらす方法。TH2経路阻害剤をEIPと診断された患者に投与することを含む、喘息又は呼吸器疾患に罹患した患者を治療する方法。総ペリオスチンアッセイを使用して患者をEIPとして診断する工程を更に含む、請求項89に記載の方法。患者がEIPであると決定される場合、TH2経路阻害剤で患者を再治療する工程を更に含む、請求項89又は請求項90に記載の方法。患者からの血清が患者がEIPであるかを決定するために使用される、請求項89から91の何れか一項に記載の方法。EIP状態がEIDAを使用して診断され、該アッセイが、a患者から得たサンプル中の総ペリオスチンの量を決定し;b工程aで決定された総ペリオスチンの量を参照量に対して比較し;及びc前記患者を工程bで得られた比較に基づいて応答者又は非応答者のカテゴリに層別化する工程を含む、請求項89から91の何れか一項に記載の方法。総ペリオスチンが血清ペリオスチンであり、該ペリオスチンがイムノアッセイを使用して測定される、請求項93に記載の方法。イムノアッセイがサンドイッチイムノアッセイである、請求項94に記載の方法。サンドイッチイムノアッセイがElecsys登録商標アナライザーにより実施される、請求項95に記載の方法。工程aにおいてE4アッセイを使用するとき参照量が23ng/ml以上である、請求項93から96の何れか一項に記載の方法。工程aにおいてElecsys登録商標ペリオスチンアッセイを使用するとき、参照量が50ng/ml以上である、請求項93から96の何れか一項に記載の方法。患者が中等度から重度の喘息に罹患している、請求項89から98に記載の方法。喘息又は呼吸器疾患がコルチコステロイドでコントロールされない、請求項89から99に記載の方法。コルチコステロイドが吸入コルチコステロイドである、請求項100に記載の方法。吸入コルチコステロイドが、キュバール登録商標、パルミコート登録商標、シンビコート登録商標、Aerobid登録商標、フロベント登録商標、アドベア登録商標又はアズマコート登録商標である、請求項101に記載の方法。患者がまた第二コントローラーで治療されている、請求項89から101に記載の使用。第二コントローラーが長時間作用型気管支拡張薬LABDである、請求項103に記載の方法。LABDが、LABA、LTRA、LAMA、テオフィリン、又はOCSである、請求項104に記載の方法。LABDが、シンビコート登録商標、アドベア登録商標、ブロバナ登録商標、フォラジル登録商標、PerforomistTM、又はセレベント登録商標である、請求項104に記載の方法。TH2経路阻害剤が、標的ITK,BTK,IL-9例えば、MEDI-528、IL-5例えば、メポリズマブ、CAS番号196078-29-2;レシリズマブresilizumab、IL-13例えば、IMA-026,IMA-638アンルキンズマブとも言う、INNNo.910649-32-0;QAX-576;IL4/IL13トラップ,トラロキヌマブCAT-354,CAS番号1044515-88-9とも言う;AER-001,ABT-308ヒト化13C5.5抗体とも言う,IL-4例えばAER-001,IL4/IL13トラップ,OX40L,TSLP,IL-25,IL-33及びIgE例えば、XOLAIR、QGE-031;MEDI-4212;及び受容体、例えば:IL-9受容体、IL-5受容体例えば、MEDI-563ベンラリズマブ,CAS番号1044511-01-4,IL-4受容体α例えば、AMG-317,AIR-645,IL-13受容体α1例えばR-1671及びIL-13受容体α2,OX40,TSLP-R,IL-7RアルファTSLPの共受容体,IL17RBIL-25の受容体,ST2IL-33の受容体,CCR3,CCR4,CRTH2例えばAMG-853,AP768,AP-761,MLN6095,ACT129968,FcepsilonRI,FcepsilonRII/CD23IgEの受容体,Flap例えば、GSK2190915,SykキナーゼR-343,PF3526299;CCR4AMG-761,TLR9QAX-935を阻害し、又はCCR3,IL5,IL3,GM-CSFの多重サイトカイン阻害剤例えば、TPIASM8である、請求項88から101に記載の方法。TH2経路が抗IL13/IL4経路阻害剤又は抗IgE結合剤である、請求項88から106に記載の方法。抗IL-13/IL4経路阻害剤は抗抗IL-13抗体である、請求項108に記載の方法。抗IL-13抗体が、配列番号9を含むVHと配列番号10を含むVLを含む抗体であり、抗IL-13抗体はHVRH1、HVRH2、HVRH3、HVRL1、HVRL2、及びHVRL3を含み、各HVRが配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、及び配列番号16、又はレブリキズマブのアミノ酸配列を有する、請求項109に記載の方法。抗IL-13抗体がIL-4にも結合する二重特異性抗体である、請求項109に記載の方法。TH2経路阻害剤が抗IgE抗体である、請求項108に記載の方法。抗IgE抗体が、iXOLAIR登録商標抗体、ii可変重鎖が配列番号24で可変軽鎖が配列番号25である、可変重鎖と可変軽鎖を含む抗M1’抗体、又はiii可変重鎖が更に、HVR-H1,HVR-H2及びHVR-H3を含み、可変軽鎖が更に、HVR-L1,HVR,L2及びHVR-L3を含む、可変重鎖と可変軽鎖を含む抗M1’抗体であり、そして:aHVR-H1は配列番号24の残基26-35[GFTFSDYGIA]であり;bHVR-H2は配列番号24の残基49-66[AFISDLAYTIYYADTVTG]であり;cHVR-H3は配列番号24の残基97-106[ARDNWDAMDY]であり;dHVR-L1は配列番号25の残基24-39[RSSQSLVHNNANTYLH]であり;eHVR-L2は配列番号25の残基55-61[KVSNRFS]であり;fHVR-L3は配列番号25の残基94-102[SQNTLVPWT]である、請求項112に記載の方法。増悪、市中感染性肺炎、アナフィラキシー、筋骨格痛、筋骨格系障害、結合組織痛または結合組織疾患であるである事象の数及び/又は重症度をモニタリングする工程を含む、レブリキズマブによる喘息の治療に関連した患者における有害事象を評価するための方法。筋骨格又は結合組織疾患が、関節痛、背中の痛み、四肢の痛み、筋肉痛、首の痛み、関節炎、骨の発達異常、滑液包炎、肋軟骨炎、外骨腫、腹部痛、筋骨格系胸痛、筋骨格痛、顎または腱の痛みである、請求項114に記載の方法。配列番号1のHVR配列、及び配列番号2のHVR配列を含む、抗ペリオスチン抗体。抗体が配列番号1及び配列番号2を含む、請求項116に記載の抗体。配列番号3のHVR配列、及び配列番号4のHVR配列を含む、抗ペリオスチン抗体。抗体が配列番号3及び配列番号4の配列を含む、請求項118に記載の抗体。請求項116及び118の抗体の使用を含む総ペリオスチンアッセイ。実施例1アレルゲン曝露臨床研究第II相無作為化、二重盲検、プラセボ対照試験;5mg/kgのレブリキズマブ:プラセボ1:1の割合12週間、4週間ごとに皮下に。試験デザインの高レベルの概要が表2及び図1にある。主要エンドポイントは、13週でのアレルゲン誘導性遅発型喘息反応LARであった。スクリーニング期間中及び第13週に、患者はアレルゲン曝露を受け、その後18~24時間後にメタコリン曝露を受けた。血清バイオマーカーもまたIL13経路阻害を実証しかつレブリキズマブからの恩恵が増加した患者を同定するために評価された。試験に含まれた患者は、軽度の喘息で18~55歳でaイエダニ、猫のフケ、又はブタクサに対してのスクリーニングで皮膚試験陽性陰性コントロールに対して3mm以上;b1秒間の強制呼気容量が予測値の70以上;及びcアレルゲン曝露後5~30分でFEV1の20以上の減少の早期喘息反応、及び曝露後2~8時間でFEV1の15以上の減少の遅発型喘息反応LARを呈していた。28人の患者が主要エンドポイントの分析に含まれたn=16人がプラセボ、12人がレブリキズマブ。第13週で、レブリキズマブはLARを阻害した。レブリキズマブ治療患者でアレルゲン曝露後2~8時間でのFEV1の平均AUC曲線下面積LARは、プラセボに対して48減少し26.3対50.5;95CI:-19から90、第13週で早期反応EARに影響を及ぼさなかった。アレルゲン曝露後0~2時間でのFEV1の平均AUC及びFEV1の最大減少は、レブリキズマブ群とプラセボ群で似ていた両方のパラメーターにおいて27.5対26.4;表5。図2も参照。レブリキズマブ群とプラセボ群の間で、メサコリンに対する気道過敏性に有意な違いは観察されなかった。レブリキズマブ群におけるメサコリン倍加用量の算術平均はプラセボ群におけるそれより0.33倍加用量高く1.58対1.25,95CI-0.64から1.3、臨床的に意義のある阻害とは考えられなかった。レブリキズマブ治療は、血清IgE、MCP-4/CCL13、及びTARC/CCL17のそれぞれにおいて24、25及び26のプラセボで補正された減少の平均値を有し、TH2炎症のマーカーで全身的作用を明らかに発揮したP<0.01。図3A及び3Bを参照。治療後に、血清ペリオスチンレベルはわずかに減少した5~10。治療後に、血清IL-13レベルは大半が検出レベル未満<150pg/mlであった。図3Cは、個々の患者において第13週での、IgE、CCL3及びCCL17の、それらのマーカーのベースラインレベルに対する減少を示す。一般に、ペリオスチン、YKL-40,CEA、及び血中好酸球レベルはレブリキズマブ治療後に有意には変化しなかったデータ非表示。末梢血好酸球、血清IgE又は血清ペリオスチンの中央値を上回るベースラインレベルを持つ患者は、これらのバイオマーカーのレベルが中央値未満である患者よりも、LARにおいてプラセボで補正されたレブリキズマブ依存性の大きな減少を示した。図4を参照。患者は、ベースラインでの炎症性バイオマーカー:血清IgE、CLL13、CCL17、CEA、ペリオスチン、YKL-40及び末梢血好酸球のレベルの中央値よりも高いか又は低いかに基づいてバイオマーカー高又はバイオマーカー低として分類された。図4に示されるように、血清IgE、好酸球及びペリオスチンに対する結果は、ベースラインの血清IgEが中央値に比べて上昇したか又は末梢血好酸球が上昇した患者は、例えばレブリキズマブによるIL13遮断に反応する可能性がより高かった。結論として、本研究は、後期AUCの平均において主要エンドポイント:48の減少90CI[-19,90]を満たした。レブリキズマブはプラセボに比べて著しくLARを減少させた。安全なシグナルは安全性データに見られなかった。IL-13の治療的遮断は、特に気道TH2炎症のマーカーが上昇した患者においてアレルギー性喘息の効果的な治療法であり得る。実施例2喘息患者の臨床試験I無作為化、二重盲検、プラセボ対照試験は、ICSによる長期治療の間制御が不十分なままか又は制御されないままである喘息を有する患者においてレブリキズマブの効果を評価するために実施された。患者は吸入コルチコステロイドICS及びLABAをも含むことができる標準治療を続けた。この2群試験において、レブリキズマブ又はプラセボの何れかを6ヶ月間受けるために患者は無作為に割り当てられた。14~20日の導入期間run-inperiodの最中来院1から来院3、患者はICSの順守及び試験を通して日々のモニタリングに必要な装備を使用する彼らの能力を実証しなければならなかった。次いで患者は試験の適格性について評価され、IL-13シグニチャーサロゲート状態以下に更に記述、LABAの使用、及び試験場所に基づく層別化により、無作為に試験薬レブリキズマブ又はプラセボに割り当てられた1:1。最初のSC投与は無作為化割り当ての24時間以内に起きた試験第1日、即ち無作為化割り当ての日、最初の試験薬の投与日に関わらず。試験薬の投与は次の20週間4週間に1回繰り返された24週間の治療期間である場合、合計6つの試験薬の投与のため。レブリキズマブの有効性の測定が治療期間中評価された。試験薬は、次の時点:第1日及び第4週、8週、12週、16週及び20週で皮下SC注射によって選択された患者に投与した。レブリキズマブの各用量は250mgであった。各プラセボ用量はレブリキズマブを含まない2mLの同一液体であった。皮下注射は腕、太もも、または腹部に投与された。この試験計画の模式図を図5に見ることができる。全て約200人の患者が治療された後で主な解析が実行され、無作為化割り当て後第1日24週間続いた。安全性は試験を通して評価した。試験薬の最後の投与後第20週、患者は更に12週間モニターされた;最終投与後の最初の4週間は第24週治療期間の部分と見なされ、最終8週間は経過観察期間を構成した。8週間の経過観察期間は、治療期間の最後の4週間とともに、最後の投薬後に3~4の半減期について患者のモニタリングを考慮した。従って、患者は一般に、合計約34週間試験に参加した。図5を参照。有効性が評価可能な患者n=180は意思決定目的のために定義され、二つの理由から被験者を除外した。1鍵となる特徴の標的集団の部分でなく及び2治療効果を測定するためには信頼性のないベースラインFEV1。この試験に参加している患者のベースラインの特徴については図6を参照。鍵となる包含基準は以下を含める:試験特異的肺機能検査PFTマニュアル通り、来院1-3での肺活量測定を実行する能力;臨床的に有意な異常の証拠を持たない来院1の12ヶ月以内の胸部X線検査;日記完了と来院1~3の間のPEF測定の順守により測定される試験材料を完結する能力;以下の基準の全てに基づいて選択される制御されない喘息:-喘息の診断>12か月-来院1又は2での気管支拡張反応-前気管支拡張剤来院1及び3で予測されるFEV1≧40及び≦80-ICSの使用プロピオン酸フルチカゾンの1日の総用量が≧200μg及び≦1000μg-来院3の喘息コントロールアンケートACQスコア≧1.5ICSの順守にかかわらず。鍵となる除外基準は以下を含める:医学的状態:-来院1~3から喘息の増悪、著しい気道閉塞、又は呼吸器感染。-既知の悪性腫瘍又は潜在的な悪性腫瘍の現在の評価-既知の免疫不全、限定しないがHIV感染を含む-活動性の感染を含む、喘息以外の事前に存在している肺疾患-制御されない臨床的に有意な医学的疾患曝露:-人生の喫煙歴が10パック年を超える現喫煙者又は以前の喫煙者-禁止されている併用薬ICS以外のステロイド、SABA以外の短時間作用型気管支拡張薬、免疫調節薬-妊娠中又は非常に効果的な避妊法を使用する意志なし肺それ自体でIL-13を測定する実際の困難を仮定すると、末梢血中の好酸球レベル及びIgEレベルがサロゲートsurrogate測定として使用され、IL-13シグニチャーサロゲートsignaturesurrogateとして示される。IL-13シグニチャーサロゲート陽性患者は、IgE>100IU/mL及び血中好酸球≧0.14×10×e9細胞/Lを持つ患者として定義され、IL-13シグニチャーサロゲート陰性患者は、総計IgE≦100IU/mL又は血中好酸球<0.14×10×e9細胞/Lを有する。IL-13シグニチャーサロゲートの患者の状態を決定したIgE及び好酸球レベルの基準は喘息患者から確立され、気管支上皮におけるIL-13誘導性遺伝子発現IL-13シグニチャーは末梢血のIgE及び好酸球と相関していた。レブリキズマブの有効性は、肺機能即ちFEV1,ピークフローの変動を含むピークフロー,選択されたセンターでのメタコリンへの応答、分画呼気一酸化窒素[FENO]を含む喘息の活動性の複数の測定及び疾患活動性又はコントロールすなわち、患者の報告結果[PRO]、救助薬の使用、増悪率の測定を使用して評価された。FEV1の変化は、主要転帰であった。レブリキズマブでの治療後以下のマーカー:TARCCCL17,MCP-4CCL13及びIgEが薬力学解析に用いられた。主要有効性評価項目主要有効性評価項目は、ベースラインから第12週までの気管支拡張薬前FEV1体積の相対的変化であった。2次有効性評価項目2次有効性評価項目は以下であった。ベースラインから第24週までの気管支拡張薬前FEV1体積の相対的変化;IL-13シグニチャーサロゲート陽性状態の患者におけるベースラインから第12週までの気管支拡張薬前FEV1体積の相対的変化;ベースラインから第12週までの喘息コントロールアンケートACQスコアの変化;ベースラインから第12週までの喘息コントロールの日々の日記ACDD;ベースラインから第12週までの朝の気管支拡張薬前のピークフローの変化;24週間の治療期間中の喘息の増悪率;24週間の治療期間中の重篤な喘息の増悪率;ベースラインから第12週までの救助薬使用の変化救助薬又は噴霧救助薬の一日あたりのパフの数で測定された。探索的な測定:以下の探索的な評価項目が評価された:ベースラインから第12週までのACDDにより測定される良好に制御された喘息である週あたりの日数の変化;ベースラインから第12週までの喘息に起因する夜間覚醒の週あたりの頻度の変化;ベースラインから第12週までのFENOの変化。初期所見不完全に制御された喘息を持つ患者に関する本研究にて、レブリキズマブ治療は、主要転帰の変数である気管支拡張薬前FEV1における統計的に有意な改善と関係していた。治療の開始直後に生じたFEV1の改善は、IL-13阻害は相対的に素早く気流の測定に影響を与えたことを示している。レブリキズマブ治療は、Elecsys登録商標ペリオスチンアッセイを使用して、プロトコルに定められた重篤な増悪において統計的に有意な減少へと至らなかったが以下に記載、解析に寄与する値が得られなかったため、特にペリオスチンが高い患者において、重篤な増悪率の減少傾向が観察された。しかし、以下の記述されるようにE4アッセイを使用して、レブリキズマブ治療はプロトコルに定められた重篤な増悪の統計的に有意な減少へと導いたペリオスチンが高い群で8495CI14,97,p=0.03。以下を参照。更に、FENOのサブグループ解析は、重篤な増悪において統計的に有意な減少を達成したp=0.04。レブリキズマブ治療は、ACQ5の症状のみのバージョン救助SABAの使用及びFEV1を除く又は日々の日記による計測により測定されるように、喘息症状を改善しなかった。血清Th2ケモカイン、CCL13及びCCL17、及びIgEは気道で測定される臨床的影響の基礎となる、レブリキズマブ媒介性の生物学的作用を支持する。血中の好酸球の数のわずかな増加は、好酸球を誘因するケモカインの阻害後の、血液から肺コンパートメントへの好酸球の移行の全体的な減少と一致する。レブリキズマブがFENOを減少させるという知見はこの示唆と一致する。しかし、レブリキズマブは好酸球性炎症を修飾することそれもまたFENOに影響を与えると考えられているによるよりも、IL-13遮断を介した一酸化窒素合成酵素の発現を間接的に阻害することによりFENOを減少させる可能性がある。この試験に対する患者の適格性の基準は、来院前に少なくとも4時間SABAを使用せず、かつ少なくとも12時間LABAを使用せずに少なくとも12から400μgのアルブテロールの可逆性を必要とした。これは、肺機能に少なくとも10の全体的な相対的変化を期待するときに、患者が動く余地を有することを保証するためであった。この単純な臨床試験は、これらのデータを一般化する性能を、選択されていない、より一般的な喘息患者集団に制限する場合もある。実際、患者の不適格性はスクリーニングに失敗した263人の患者のうち92人でのこの試験の失敗であった。この試験において、我々は、高血清IgE及び高血中好酸球計数の組み合わせは、肺においてIL-13関連遺伝子の発現が増加したIL-13シグニチャーサロゲート又はTh2が高い患者を同定するためのサロゲートであるとする仮説を最初にたてた。データは治療の帰属に対してなお隠されているが、血清ペリオスチンレベルに基づく差別化を使用する統計解析計画を我々は書いた。以下により詳述されるように、このサブグループ解析は、FEV1のより強固な増強及びFENOのより大きな低下の両方で、並びに有意な相互作用試験で観察されたように、レブリキズマブ治療の有効性はペリオスチンが低い患者よりもペリオスチンが高い患者において増強されたことを示した。これらの知見は、事前に特定されたマーカーである血清ペリオスチンは、レブリキズマブ治療により応答し得る喘息患者を選択するために使用される可能性があることを示唆している。本試験に参加している患者のペースラインの特性を図6に示す。特に断りのない限り、数字は平均値SDを指す。ペリオスチンが高いとは下記に記載されるE4アッセイに従って23ng/mlを超えるペリオスチンのベースラインを持つ患者を指す。ペリオスチンが低いとは下記に記載されるE4アッセイに従って23ng/ml未満のペリオスチンのベースラインを持つ患者を指す。治療された患者についての12週間と24週間でのFEV1の相対的変化リットル95信頼区間を図7に示す。IL-13シグニチャー陽性患者に比べた場合、ペリオスチン陽性患者はFEV1の相対的により高い変化を経験していた。図7は、全参加者のベースラインから第12週までのプラセボで補正されたFEV1の相対的変化は5.995CI0.9,10.9,p=0.2でペリオスチンが高いサブグループについては1095CI2.5,17.5,p=0.01であったことを示す。全参加者のベースラインから第24週までのプラセボで補正されたFEV1の相対的変化は4.895CI0.3,9.3,p=0.04でペリオスチンが高いサブグループについては6.195CI-1.4,13.6,p=0.11。図8は、全ての有効性評価可能な被験体についてA及びペリオスチンが高い被験体のみについてB、治療期間32週間を通してのFEV1の相対的変化を示す。治療の32週でのレブリキズマブの有効性は、レブリキズマブが投与される頻度を減らすことが可能であり得ることを示唆することを弱めなかった。気道リモデリングにおける間接的サロゲート及び探索的転帰として、我々は気管支拡張薬後のFEV1におけるレブリキズマブ治療の効果も調べた。20週での気管支拡張薬後のFEV1の変化は100mcgのアルブテロールの4回の吸入後に測定された。試験薬の投与前のベースラインにて、気管支拡張薬後のFEV1の平均値は、プラセボ及びレブリキズマブ群のそれぞれにおいて、2.50リットル0.71及び2.54リットル0.73であった。これは両方の群において期待される77.9に相当する。気管支拡張薬後のFEV1における全体的なプラセボ補正後の変化は、4.9であった95CI0.2から9.6;p=0.04。ペリオスチンが高い群では、レブリキズマブ治療は、20週で気管支拡張薬後のFEV1を増加させた8.5;95CI1.1から16;p=0.03。ペリオスチンが低い群では気管支拡張薬後のFEV1における改善の証拠は無かった1.8;95CI4.1から7.7;p=0.55。加えて、レブリキズマブはペリオスチンが高い群で絶対的な気管支拡張薬後のFEV1を増加させた170mls;95CI10から320ml。我々は、レブリキズマブは、Th2気道炎症が増加した証拠を有しペリオスチンが高い、制御されない喘息患者において気管支拡張薬後のFEV1を改善すると結論づけた。このデータに基づくと、レブリキズマブは喘息において気道リモデリングを低下させる可能性を有する場合がある。図9は、治療の24週で観察された増悪率と重篤な増悪率を示す。増悪率はプラセボと比較してレブリキズマブで治療された全参加者で37減少し95CI-22,67,p=0.17、ペリオスチンが高いサブグループで61減少した95CI-6,86,p=0.07。重篤な増悪率は全参加者で51減少し95CI-33,82,p=0.16、ペリオスチンが高いサブグループで84減少した95CI14,97,p=0.03。我々はまた、ITT集団において、32週、経過観察期間の終了点、レブリキズマブの最終投与後12週で重篤な増悪の割合を調べた。表10に示すように、32週での全患者にわたる重篤な増悪率は、プラセボと比べてレブリキズマブで治療された患者で50著しく減少したp=0.03。重篤な増悪はレブリキズマブで治療されたペリオスチンが高い患者で最低であった0.13;しかしプラセボからの率の減少はサブ解析において統計的有意性に到達しなかった。レブリキズマブはICSにより不十分に制御された患者において重篤な増悪を減少させる有意な利点を有していたと結論する。重篤な増悪の最大の減少は治療前に高いペリオスチンレベルを持つ患者において見られた。事象をとらえるための観察時間は、このエンドポイントについての試験に力を与える点で重要である。24週間に比べて32週間の観察はおよそ200人の被験者において少なくとも50の減少を検出するため必要とされ得る。レブリキズマブはその主要エンドポイントを満たしており、重篤な増悪を減少させるに非常に効果的であった。データは、患者のペリオスチン状態は増悪事象及びそれほどではないにせよFEV1の予後徴候となることを示している。データはレブリキズマブ治療に対する応答を決定するためのペリオスチンレベルの予測値を支持する。例えば、E4アッセイを使用して、20ng/ml未満の血清又は血漿ペリオスチンレベルを持つそれらの患者は、レブリキズマブから恩恵を得る可能性が小さいが、20ng/mlを超える血清又は血漿ペリオスチンレベルを持つそれらの患者は、レブリキズマブからより恩恵を得る可能性がある。更に、E4アッセイで決定される場合23ng/mlを超える血清又は血漿ペリオスチンレベルを持つそれらの患者は、レブリキズマブ治療から恩恵を得る更に大きな可能性を有する。患者の報告結果ACQ及びミニAQLQは治療群間で一致した相違を示さなかった。何回かの来院後に、ACDDデータは、全てレブリキズマブ治療が好む、良好に制御された日、喘息症状、夜間覚醒、及び救助薬の使用において、治療群間の平均スコアに幾つかの相違を示した。ACDDデータ良好に制御された日、喘息症状、夜間覚醒、及び救助薬の使用の全てのエンドポイントにおいて、全被験体に比べてペリオスチンが高い被験体において、より大きなプラセボ補正後の治療効果があった;しかし12週では治療群間での相違は統計的に有意ではなかった。肺の機能:ベースラインからの肺機能の改善PEFは、レブリキズマブで治療された全被験体でほとんどの時点で観察され、及びペリオスチンが高いレブリキズマブで治療された被験体において全時点で観察された。プラセボで処置された被験体は全時点でベースラインから減少した。肺の炎症:FENOはレブリキズマブで治療された被験体及びペリオスチンが高いサブセットの被験体の両方において試験期間中減少した改善したが、プラセボで処置された被験体はFENOを増加させた悪化させた。12週でのFENOの変化のパーセントは、レブリキズマブで治療された被験体で-20.1n=83、対するプラセボ処置被験体で15n=86であった[p<0.01]。12週でのFENOの変化のパーセントは、レブリキズマブで治療された被験体で-24.2、対するプラセボ処置被験体で17.5n=44であった[p<0.01]。12週での治療群間の相違は統計的に有意であった。図10を参照。事後解析において、高いベースラインのFENOはまた、FEV1を改善することにおける有効性と、プラセボと比較して重篤な増悪率が低いことと関連していた。しかし、ベースラインのFENOは、ペリオスチンよりも、導入期間中に患者間のより大きなばらつきを示した19.8対5.0ことに我々は気がづいた。我々はまた、ペリオスチンが低くかつFENOが高い患者が、ペリオスチンが高い患者と同程度にレブリキズマブ治療から恩恵を受けるかどうかを決定するためにデータを調べた。我々は、ベースラインにて、FENOと血清ペリオスチンの間の中等度の相関を観察したrs=0.31,P<0.001;N=210マッチングデータを含む。中央値カットオフを使用して、ペリオスチンとFENOの状態は完全ではないが一般的に重複した表11。表11に示すデータにおいて、ペリオスチンカットオフは、下記に記載のE4アッセイを使用して25ng/mLで、FENOのカットオフは当該技術分野で既知の標準的方法を使用して測定される場合21ppbであった。ペリオスチンとFENOの複合状態に基づくFEV1の評価は、12週でのレブリキズマブのプラセボで補正された効果は、ペリオスチンとFENOの両方のレベルが高レベルの群で最高であった表12。対照的に、ペリオスチンが低く/FENOが高い群における観察された治療効果はわずかであった2.3,P=0.73。従って、FENOはレブリキズマブからの恩恵を受けるペリオスチンが低い患者のサブセットを同定するようには見えない。レブリキズマブ治療に対する応答についてのペリオスチンとFENOの相対的予測値は更なる試験に値する。レブリキズマブの薬物動態学的特性は、以前の研究で見られていたものと同様であった。被験者の体重はレブリキズマブの薬物動態に影響を与えた。幾つかのマーカーが、血清ペリオスチンレベルに加えて又は代替として、上記の治療上の利益の観点から予測値を提供する能力について評価した。それらのマーカーはCEA、IgEの、TARCCCL17及びMCP-4CCL13を含んでいた。加えて、我々はペリオスチンが高い喘息患者の過剰な血清ペリオスチンは、IL-13の作用によるという仮説を立てた。従って、我々は、制御されない喘息を持ち、プラセボ及びレブリキズマブで治療された患者の両方において、全身ペリオスチンレベルに対するIL-13の相対的な寄与を評価することを求めた。これらの実験のために、我々は実施例7に記載されているElecsys登録商標ペリオスチンアッセイを用いて血清ペリオスチンを測定した。図18と19に示されるように、ベースラインでペリオスチンが低い患者の大部分>90が試験の両方の群で低いままであるが図18A、プラセボで処置されたペリオスチンが高い患者の72及びレブリキズマブで治療された40が12週でペリオスチンが高いままである図18Bことを見いだした。ICSにも関わらず制御されない喘息を持つ成人において、ペリオスチンが高い患者は、プラセボに比べてレブリキズマブによる治療で血清ペリオスチンのレベルに有意な減少を示すが、ペリオスチンが低い患者はレブリキズマブに対する応答に有意な減少を示さないと結論づけた。これらの知見は、制御されない喘息患者において、過剰の血清ペリオスチンは、IL-13の活性によるものであり、IL-13によるレブリキズマブの阻害は血清ペリオスチンレベルを減少させることを示唆している。レブリキズマブで治療された4人の患者は、重篤な有害事象SAE喘息増悪[n=2]、市中肺炎、及び車の事故に関連して外傷性気胸を経験した。6人のプラセボ患者は、7つのSAE喘息増悪[n=2]、頭痛、硬膜外後ろの脳脊髄液漏出、帯状疱疹、帯状疱疹、急性化膿性髄膜炎、及び鎮痛薬物中毒を経験した。この試験の安全性の結果については、図11を参照。有害事象AEの全体的な頻度は、重篤な有害事象の頻度レブリキズマブ、3.8;プラセボ、5.4と同様に、両治療群で類似していたレブリキズマブ、74.5;プラセボ、78.6。筋骨格系の事象はレブリキズマブでより一般的であったレブリキズマブ、13.2;プラセボ、5.4;P=0.045表9。12人のプラセボ処置患者と12人のレブリキズマブ治療患者を含む25人の患者11.5は早期に試験を中止した。実施例3喘息患者の試験II用量範囲試験コルチコステロイドを吸入していない喘息患者における有効性、安全性及び耐容性の観点から、レブリキズマブの用量と応答との間の関係を評価するために、無作為化され、二重盲検の、プラセボで制御された、4つの群で用量範囲試験が行われた。この試験の模式的デザインについては、図12を参照。選択された患者は少なくとも15の気管支拡張薬応答を有していた。気管支拡張薬前のFEV1≧60で、≦85が導入期間中に示される疾患の安定性について予測された。以前にICSで管理される試験のための選択された患者は、最初の試験の来院来院1の前の最小30日間はICSを受けていることができなかった。試験では休薬期間は無かった;患者は試験に対して適格となる目的だけのためにコルチコステロイドを止めるべきではなかった。来院1での第1試験に関連した手順は約2週間の導入期間で開始した。導入期間の最中来院1~3、喘息のコントロール喘息コントロールアンケート[ACQ]スコアにより測定及び肺機能を評価した。患者の喘息は、さらに皮膚プリックテストおよびIgEおよび末梢血好酸球を含む関連バイオマーカーにより更に特徴付けられた。IgEおよび好酸球のレベルは、IL-13シグニチャーサロゲートに基づいて患者を分類するために使用された。導入期間の最後に、レブリキズマブの3つの用量500mg,250mg又は125mgの一もしくはプラセボをSC投与により受けるために適格な患者が無作為に割り当てられた1:1:1:1。試験薬は、12週間の治療期間中に4回投与した。試験薬の最終投与後、患者はさらに8週間の経過観察期間モニターした。従って、ほとんどの患者は来院1の後合計約22週間試験に参加し、その間断続的にPKサンプルを得た。集中的なPKサンプリングは、試験中及び経過観察期間中に得られた追加のPKサンプル並びに最後の試験薬投与後16週間の追加のPKのサンプルを用いて、70人の被験体が集中的なPKサンプリングを完了するまで行われた。従って、集中的なPKサンプリング群の患者の試験への参加は、来院1の後に約26週間続いた。安全性は試験を通して評価され、治療失敗についての事前に特定された閾値は、もし患者が臨床的に著しい増悪を有した場合に、患者が試験薬を止めて標準的治療を再開できるように定められた。初期所見有効性:全てのレブリキズマブで治療された被検体におけるベースラインから12週までのプラセボで補正されたFEV1の相対的変化は4.195CI-0.4,8.6;p=0.075であった。12週間の治療期間を通して、レブリキズマブで治療された全患者における治療の失敗の見積もられたリスクは、プラセボで処置された患者よりも75低かったHR0.25,95CI:0.11,0.78;p=0.001。これらの結果は、臨床的及び統計的に有意とみなした。用量応答の証拠はなかった図16参照。安全性:レブリキズマブで治療及びプラセボで治療を受けた患者の間には、臨床的に重大な不均衡は注射部位反応レブリキズマブ対プラセボは23対6を除いて無かった。実施例4ペリオスチンアッセイE4アッセイ非常に敏感であるペリオスチン捕捉ELISAアッセイ感度1.88ng/mlを以下に説明する。抗体は、nMの親和性でペリオスチンアイソフォーム1-4を認識する配列番号:5-8。80uLの精製モノクローナル抗体、25D4ハイブリドーマ又はCHO細胞株から発現されたコート抗体、配列番号1及び2をリン酸緩衝生理食塩水で2ug/mlの最終濃度まで希釈する。マイクロタイタープレートをウェルあたりコート抗体100μLで2~8°Cで一晩覆いコーティングする。プレートを400μLの洗浄バッファーPBS/0.05のTweenポリソルベート20により室温で洗浄バッファーのサイクルあたりウェル毎に3回洗浄する。ウェルあたりの200μLのブロッキングバッファーをプレートに添加する。覆われたプレートを室温で1.5時間振とうしながらインキュベートする。rhuPeriostinの標準曲線を用意するrhuPeriostinの標準ストック=アッセイ希釈液PBS/0.5ウシ血清アルブミンBSA/0.05ポリソルベート20/0.05ProClin300,pH7.4中でのrhuPeriostinアイソフォーム1,RDsystems3548-F2,5.25ng/ml。標準曲線希釈液=PBS/0.5BSA/0.05ポリソルベート20、0.05ProClin300、pH7.4。例えばコントロールとサンプルを調製する。3つのコントロール:スパイクソースコントロールSpikeSourceControlrhuPeriostinの完全長,アイソフォーム1,RDSystems3548-F2,正常マトリックスコントロールNormalMatrixControl正常ヒト血清プール,Bioreclamation,Inc.,高マトリックスコントロールHighMatrixControl正常ヒト血清プール100ng/mlrhuPeriostinスパイク。例えば10μLコントロール又はサンプル血清1.99mLサンプル/コントロール希釈液=1:200300μL1:200希釈300μLサンプル/コントロール希釈液=1:400300μL1:400希釈300μLサンプル/コントロール希釈液=1:800300μL1:800希釈300μLサンプル/コントロール希釈液=1:1600各希釈は1回実行される。正常ヒト血清プールを使用して、マトリックスコントロールを構築する。正常コントロールとしてスパイクされていないプールされたヒト血清を使用する。上述のようにプールした血清に100ng/mLrhuPOSTNをスパイクすることにより高コントロールを生成する。プレート毎の各コントロールに対する4つの希釈の平均値、標準偏差SD、および分散の係数CV、パーセントで表すを計算する。CVは、複製の平均についての反復測定の分散の大きさを定量化している。CV=100標準偏差/平均.プレート間の精度を決定するために、全てのプレートに渡るこれらの平均濃度を評価する。このコントロール表は、その後、各コントロールの平均濃度の±20まで許容分散を設定して、正常及び高コントロールの合格/不合格の基準を定めるために使用される。洗浄バッファーPBS/0.05ポリソルベート20のサイクルあたりウェルあたり400μLでプレートを3回洗浄する。希釈した標準液ウェルを複製、コントロールすべての4つの希釈液、およびサンプルすべての4つの希釈液をプレートに、ウェルあたり100μL添加する。カバーされたプレートは室温で2時間振とうしながら、室温でインキュベートする。80uLの検出MAbストックIビオチン化マウス抗ヒトペリオスチン、モノクローナル抗体23B9、アッセイ希釈液中で7.5ug/mlをアッセイ希釈液=50ng/mLで12mLに希釈する。洗浄バッファーのサイクルあたりウェルあたり400μLでプレートを4回洗浄する。希釈した検出モノクローナル抗体をプレートにウェルあたり100μL添加する。覆われたプレートを室温で1時間振とうしながらインキュベートする。アッセイ希釈液中で1:80に希釈された80uLのストレプトアビジンHRPストックIAMDEXストレプトアビジン-HRP、GEヘルスケアRPN4401、約1mg/mlをアッセイ希釈液=1:12kで12mLへ希釈する。洗浄バッファーのサイクルあたりウェルあたり400μLでプレートを4回洗浄する。希釈したストレプトアビジンHRPををプレートにウェルあたり100μL添加する。覆われたプレートを室温で45分間振とうしながらインキュベートする。キルケガードベリーKirkegaardandPerryKPL2ステップTMB試薬を室温にする;混ぜない。洗浄バッファーのサイクルあたりウェルあたり400μLでプレートを4回洗浄する。KPLのTMB基質コンポーネントの等量を混ぜ、プレートに、ウェルあたり100μL追加する。振とうしながら室温で20分間プレートをインキュベートする。1Mリン酸をプレートにウェルあたり100μL添加する。450nmの読み取り波長と650nmの参照波長を使用してプレートを読む。このアッセイまたは上記アッセイと同様のアッセイを、実施例3に記載の臨床試験に用いた。アイソフォーム1総ペリオスチンではないに対する抗体を用いたペリオスチンアッセイが、類似の抗体捕捉フォーマットを使用して別の喘息患者のサンプルで試験された。予備的な結果では、ペリオスチンのアイソフォーム1は総ペリオスチンとしてTH2炎症に対するマーカーのようには堅牢でないことを示している。実施例5喘息患者の観察研究我々は以前、健常者及び喘息のボランティアにおいて研究目的のために実施された気管支鏡検査中に収集され、カリフォルニア大学サンフランシスコ校UCSFで気道組織バンクに保存されている生物学的サンプルの我々の研究に基づいて特定のバイオマーカーの知見を報告した。例えば、国際公開第2009/124090号を参照。中等度から重度の喘息の大きなコホートにおけるこれらの知見を確かめて、複数の臨床期間にわたってそれらを一般化するために、高用量のICS>1000μg/日フルチカゾンDPI又は同等物の制御されない中等度から重度の喘息患者ACQ>1.50及びFEV1が40-80の間の多施設の3来院観察研究BOBCATを誘発喀痰、気管支内生検、及び末梢血を集めて実施した。我々は59の被験体から一致した血液及び気道のデータを得た図13の研究概要を参照。試験の詳細は以下に提供される。BOBCATコルチコステロイド抵抗性喘息におけるバイオマーカーの探索的気管支鏡調査研究は、米国、カナダ、英国で行われた多施設研究であり、約60人の中等度から重度の喘息患者において一致した気道と血液サンプルを収集した。選択基準は、40-80の間に予測されるFEV1、並びに過去5年以内に短時間作用型の気管支拡張薬による気道閉塞の可逆性が>12である証拠、又はメタコリン感受性PC20が<8mg/mlにより確認され前年に少なくとも2回の増悪又は喘息コントロールアンケートAQCJuniperEFetalRespirMed100616621におけるスコアが>1.50により定義されるように制御されないが、一方長時間作用型βアゴニストを含むか又は含まない高用量のICS1日あたり>1000μgのフルチカゾンまたは同等物の安定的な投薬レジメン>6週間を受けている中等度から重度の喘息の診断を必要とした。許容される併用薬はまた、ロイコトリエン受容体アンタゴニストと経口コルチコステロイドが含まれていた。BOBCAT試験スキームは、図13に示されている。FENO、気管支鏡検査、BAL、誘発喀痰、及び好酸球数のための免疫組織化学的検査を以前に既述されるように行ったBousheyHAetalNEnglJMed35215191528BrightlingCEetalThorax58528532LemiereetalJAllergyClinImmunol11810331039。全ての研究プロトコルが関連する治験審査委員会によって承認され、インフォームドコンセントは、登録前に全ての被験体から得られた。患者の人口統計および肺機能データを以下の表5に要約する。我々は、以前の試験に一致した予め指定されたカットオフ値として喀痰好酸球に対して3HaldarPetalNEnglJMed360973984及び全生検面積に対して22好酸球/mm2SilkoffPEetalJAllergyClinImmunol11612491255を使用した。血清ペリオスチンレベルは、最大5週までに及ぶ3回の来院にわたり、個別の被検体内で非常に安定であったデータ非表示。平均のペリオスチンレベルは、痰又は組織好酸球の測定によって定められるように好酸球が低い被験体に比べて好酸球が高い被検体で有意に高かったデータ非表示。喀痰及び組織好酸球の何れでもないについて0、どちらかについて1又は両方について2の複合スコアにより層別される被検体は、好酸球のスコアの増加に伴い血清ペリオスチンが増加する非常に有意な傾向を示していたデータ非表示。更に、全コホートにわたる非好酸球性喘息患者は上述されたE4アッセイを使用して血清ペリオスチンレベルが一貫して25ng/ml未満であった。カットオフとして25ng/ml血清ペリオスチンを使用して、BOBCATにおける好酸球が低い及び好酸球が高い被検体は、93の陽性予測値により効果的に区別された表6。組織の好中球数は組織の好酸球レベル及び血清ペリオスチンレベルと正に相関していたデータ非表示。まとめると、これらのデータは血清ペリオスチンが、ステロイド治療にもかかわらず、中等度から重度の喘息患者における持続的な気道の好酸球増加症の全身バイオマーカーであることを示している。血清ペリオスチンの喘息のバイオマーカーとしての分画呼気一酸化窒素FENO,末梢血好酸球、血清IgE値、及び血清YKL-40との比較近年、喘息の重症度および気道炎症の他の非侵襲的なバイオマーカーが記載されている。特に関心のある4つのマーカーは、分画呼気一酸化窒素FENO,炎症を起こした気管支粘膜における酵素のiNOS誘導型一酸化窒素合成酵素の作用によって生成された呼気ガス;末梢血好酸球、血清IgE値、及びYKL-40、末梢血中で検出キチナーゼ様タンパク質である。我々は我々の喘息コホートにおけるこれらのバイオマーカーを測定し、気道好酸球増加症による値と他のバイオマーカーによる値を比較した。BOBCATにおいて、FENO,IgE、又は血中好酸球の何れもがACQ、FEV1、年齢、性別、体格指数BMIと有意には相関していなかった。BOBCATにおいて、FENOはより高いレベルでより変化したが、血清ペリオスチンレベルと同様に、FENOレベルは、一般に複数の来院にわたって一貫しておりデータ非表示、一方血清好酸球は遙かに多く変化した来院1と3の間の血清ペリオスチンについてのr2=0.65に比べて、来院1と3の間の血中好酸球についてr2=0.18、非表示。図14A~Fに示すように、来院1、2、及び3での血清ペリオスチンレベルはお互いにかつBOBCATにおける全来院にわたるペリオスチンレベルの平均値と非常に相関していた。表6に示されるように、喀痰と生検の好酸球の状態を層別すると、FENOレベルは、非好酸球性喘息患者に比べて好酸球性喘息患者で有意に高かった。しかし、FENO及びペリオスチンの両方とも高度の特異性を有し、好酸球が低い患者に対して一貫して低い値を示しているが、FENOは組織好酸球増加症の少数の被検体を検出し、用いた各測定基準によれば、好酸球が低い被検体及び好酸球が高い被検体の間で大きな重複を示していた図15A~D。我々は、年齢、性別、BMI、血中好酸球、血清IgE、FENO、及び血清ペリオスチンを取り入れたロジスティック回帰モデルをフィットさせ表7、ペリオスチンが、複合気道好酸球状態の最も有意な単一の予測因子であることがわかったP=0.007。前述したように35ppbのカットオフ値を使用して、FENOは、25ng/mlのペリオスチンカットオフに匹敵する特異性であるがより低い感受性を持つ好酸球が低い喘息患者及び好酸球が高い喘息患者を区別した表6。末梢血好酸球は、好酸球が高い喘息患者で高い傾向を示したが、統計的有意性には到達しなかったデータ非表示。継続的に各マーカーの相対的なパフォーマンスを評価するために、我々は、FENO、血中好酸球、及び血清IgE対複合気道好酸球の状態の受信者動作特性ROC分析を行い、ペリオスチンはFENOに対して好ましく機能したがAUCSはそれぞれ0.84と0.79、血中好酸球と血清IgEは実質的にあまり良く機能しなかった図15E。YKL-40は、任意のコホートにおいて、ペリオスチンと、又は気道又は末梢好酸球増加症の何れの測定とも有意な相関を示さなかったデータ非表示。呼気と血中バイオマーカーレベルのこれらの調査結果と一致して、我々は、ペリオスチン及びNOS2iNOSをコードする遺伝子の気管支上皮遺伝子発現レベルが、お互いに、かつIL-13及びIL-5の気管支粘膜の発現レベルと有意に相関するが、CHI3L1YKL-40をコードする遺伝子の発現は、ペリオスチン、IL-13、又はIL-5とも相関していないことを見いだした。まとめると、これらのデータは、喘息患者において重症度とステロイド治療の広範囲にわたって、末梢血ペリオスチンが、FENO、血中好酸球、血清IgE、又はYKL-40よりも気道Th2/好酸球性炎症のより信頼性の高い指標であることを示している。議論喘息は伝統的Th2誘導性炎症によって媒介されるアレルギー性疾患とみなされているが1、病態生理学的な不均一性の新たな証拠がある3-8。軽度から中等度のステロイド治療を受けていない喘息患者においては、約半分の患者のみがその気道にTH2炎症の証拠があることを最近示した。Th2が高い被検体は、アレルギー、好酸球性気道炎症、気管支線維症のマーカーの上昇、及びICSに対する感受性により識別される。Th2サイトカインのアンタゴニストとして、IL-4、IL-5及びIL-13が喘息治療薬として活発に開発中であり35-37、これらの標的とされた治療法から最も恩恵を受ける喘息患者を同定することが重要となるであろう。気管支鏡検査、誘発喀痰サンプリング、呼気ガス測定は、気道における炎症経路の直接的な特性評価を可能とするが、これらのモダリティは、時間がかかり、高価で、侵襲的であり得、及び/又はプライマリケアの環境で広く利用可能ではない。更に、アッセイ手順は、気道サンプルを解析するための比較的少数の装備されたセンターに横断して標準化されておらず、多施設臨床試験における実装を困難にしている。従って、標的とされた治療法に対して、気道にTh2駆動型好酸球性炎症の根拠を持つ患者を選択するために、アクセス可能なアッセイプラットフォーム上で広く利用可能なTh2駆動型好酸球性気道炎症の非侵襲的なバイオマーカーを開発することは有益である。このニーズに対応するために、我々はTh2駆動型好酸球性気道炎症の臨床的に有用な周辺マーカーの発見と特徴付けを可能にするために、喘息気道サンプル中の遺伝子発現プロファイリングを使用している。ペリオスチンは、線維症に関連付けられている分泌マトリクス細胞のタンパク質であり、その発現は、培養気管支上皮細胞21、38及び気管支線維芽細胞39における組換えIL-4、IL-13によって上方制御される。これは、喘息のマウスモデル40、喘息のアカゲザルモデル未発表データ、及びヒト喘息患者のの気管支上皮細胞21とその上皮下気管支層39においてインビボで高レベルで発現される。ヒト喘息患者において、ペリオスチン発現レベルは、上皮下線維症の指標23である網状基底膜の厚さに相関する。ペリオスチンはまた、アスピリン感受性喘息41、42に関連する鼻ポリープ、及び好酸球性食道炎患者の食道上皮内43でIL-13依存的にで過剰発現され、したがって、Th2駆動型疾患過程44において好酸球の組織浸潤の役割を果たすことができる。ペリオスチン発現の上昇はまた、上皮由来の癌の一部の型で観察されており45-49、かつ可溶性ペリオスチンのレベルの上昇は、一部癌患者の血清中で報告されている24-26、45、46。喘息又はその他の条件でペリオスチンの局所的及び全身での発現はIL-13の直接または間接的な作用が原因であるかどうかはまだ不明であり、IL-13の治療遮断の前後でペリオスチンの発現を比較することによる評価により最良に対処されると考えられる。ペリオスチンは、非喘息患者の末梢血中でかなりの全身濃度で検出されるが、ICS治療を受けていない喘息患者のサブセットの末梢血中において上昇している。気管支上皮におけるその発現は、ICS治療によって抑制され13、21、その全身レベルは、ICSを受けていない喘息患者に比較して相対的に良好に制御される中等度の喘息患者において、かなり不均一性があるものの一般的に低くなっている。ICSは主に気道内で局所的にその効果を発揮し、そして全身のペリオスチンレベルが我々が以前、例えば国際特許出願公開第2009/124090号に示したようにICSの治療を受けた後、喘息患者では抑制されていることを考慮すると、全身ペリオスチンの実質的画分は喘息患者における気道に由来するので、全身ペリオスチンのレベルの10~20の違いは、気道炎症に関して臨床的に意味があると結論され得る。FENOは気道炎症に関連付けられており、様々な重症度の喘息患者におけるICSの応答性を予測している11、34。しかし、FENOレベルは重度のステロイド依存性喘息における気道好酸球増加症を信頼性良く反映しておらず、FENOに関して喀痰と粘膜好酸球定量化の間に矛盾がある29、50。喀痰好酸球数を抑制するためのICS治療の用量設定は、重度の喘息増悪率を減少させるが12、FENOレベルに対するICS治療の用量設定は減少させない51。血清YKL-40は、喘息性の気道炎症のマーカーとして説明されているが、しかし、そのレベルは、IgEの又は好酸球などのTh2型炎症の指標と相関していなかった33。従って、本研究で我々は、CHI3L1でなくペリオスチンとNOS2の気管支上皮遺伝子発現が、気管支のIL-13及びIL-5の発現と相関していることを見いだした表8。我々は、気管支又は全身の好酸球増加症と血清ペリオスチンレベル間に比較的強い正の相関を観察したが、好酸球増加症とFENO間の相関は弱く、我々は試験された喘息患者において血清YKL-40と好酸球性炎症との間の相関関係を観察することができなかった。喀痰及び血中好酸球数及びFENOは、アレルゲン曝露、増悪、及びステロイド治療に応じて有意な一時的変動にさらされる50、52、53。循環するペリオスチンの半減期は現在不明であるが、ペリオスチンが血中で比較的長い寿命である場合、全身ペリオスチンレベルは、長期間にわたって総気道Th2型炎症の統合を反映し得ることが可能である。この可能性と一致して、我々は、最大5週間の経過にわたる3つの測定において血清ペリオスチンで比較的少ない被検体内の変動性を観察した。更なる研究が、血清ペリオスチン、気道好酸球増加症、FENO、長時間にわたるTh2型炎症の他のバイオマーカー候補における長期的な被検体内の変動性を比較する評価に向けられるべきである。対症療法例えば、β-アゴニストで制御されない気管支喘息の標準治療は吸入コルチコステロイドICSである。気道のIL-13のレベルが上昇した軽度から中等度の喘息患者及び食道組織でIL-13のレベルが上昇した好酸球性食道炎の患者において43、ICS治療は、影響を受けた組織におけるIL-13のレベルとIL-13誘導性遺伝子を実質的に減らす。1週間のICS治療後の喘息患者の気道上皮において及び培養された気管支上皮細胞において、我々は、コルチコステロイド治療は、Th2シグニチャー遺伝子のIL-13誘導性発現レベルを実質的に減らすことを示した13,21。この下方制御は、IL-13のレベルのICS媒介性の減少、標的遺伝子発現のICS媒介性の減少、又はその2つの組み合わせの結果である可能性がある。ICSの治療に難治性の重度喘息患者においては、軽度のICSナイーブ喘息患者で見られるものと類似の被験体の画分約40が、検出可能な喀痰IL-13のレベルを有することが見いだされ、それは我々が記述した気管支上皮Th2シグニチャーを持つ患者の割合に匹敵する13。同様の観察が、IL-4およびIL-5を発現するBAL中の細胞を持つステロイド難治性喘息患者における持続性、及び気管支生検および喀痰中の好酸球性炎症において報告されている。これらの観察は、Th2駆動型好酸球性炎症は中等度の喘息患者におけるICS治療により抑制されるものの、ステロイド治療で不完全に制御される重篤な喘息患者のサブセットにおいて再び出現することを示唆している。追加の合併症は、所定のICS療法に対する不完全なアドヒアランスによってもたらされ、それは一部の重篤な喘息患者にいける制御不良の根底にある。したがって、更なる研究が、ICS治療状況、ICS用量、本質的なステロイド感受性、及びICS治療へのアドヒアランスの関連で血液ペリオスチンレベルを評価することに向けられるべきである。現在、IL-13及び、本明細書に記載されるものを含め、喘息患者においてTh2炎症を駆動する関連因子35~37を標的とする数多くの生物学的治療薬が臨床開発において存在する。これらの治療は関連する分子病理学を持つ患者へ標的とされ、そうでなければ重要な治療効果が過小評価されうることは重要である;抗IL5治療はこの点を強調する14,15,55。我々の知見は、ステロイドナイーブの軽度から中等度の喘息患者の約半分が、その気道におけるTh2経路の活性を示す場合があり、かつ中等度から重度の、ステロイド難治性喘息患者の類似の割合がこの経路の活性を示すことを示唆している。従って、本明細書に記載されるように、気道におけるTh2駆動性炎症を有する可能性が高い喘息患者を特定するバイオマーカーは、これらの実験的標的治療に反応する可能性が最も高い患者の識別と選択に役立つ場合がある。参考文献実施例51GalliSJMTsaiandAMPiliponskyThedevelopmentofallergicinflammationNature4544454542HaldarPandIDPavordNoneosinophilicasthmaadistinctclinicalandpathologicphenotypeJAllergyClinImmunol11910431052quiz105310443AndersonGPEndotypingasthmanewinsightsintokeypathogenicmechanismsinacomplexheterogeneousdiseaseLancet372110711194MooreWCDAMeyersSEWenzelWGTeagueHLiXLiRDAgostinoJrMCastroDCurranEverettAMFitzpatrickBGastonNNJarjourRSorknessWJCalhounKFChungSAComhairRADweikEIsraelSPPetersWWBusseSCErzurumandERBleeckerIdentificationofasthmaphenotypesusingclusteranalysisintheSevereAsthmaResearchProgramAmJRespirCritCareMed1813153235SiddiquiSandCEBrightlingAirwaysdiseasephenotypingheterogeneityusingmeasuresofairwayinflammationAllergyAsthmaClinImmunol360696SimpsonJLRScottMJBoyleandPGGibsonInflammatorysubtypesinasthmaassessmentandidentificationusinginducedsputumRespirology1154617WardlawAJMSilvermanRSivaIDPavordandRGreenMultidimensionalphenotypingtowardsanewtaxonomyforairwaydiseaseClinExpAllergy35125412628WenzelSESJSzeflerDYLeungSISloanMDRexandRJMartinBronchoscopicevaluationofsevereasthmaPersistentinflammationassociatedwithhighdoseglucocorticoidsAmJRespirCritCareMed1567377439FahyJVEosinophilicandneutrophilicinflammationinasthmainsightsfromclinicalstudiesProcAmThoracSoc625625910FahyJVIdentifyingclinicalphenotypesofasthmastepsintherightdirectionAmJRespirCritCareMed18129629711CowanDCJOCowanRPalmayAWilliamsonandDRTaylorEffectsofsteroidtherapyoninflammatorycellsubtypesinasthmaThorax6538439012GreenRHCEBrightlingSMcKennaBHargadonDParkerPBraddingAJWardlawandIDPavordAsthmaexacerbationsandsputumeosinophilcountsarandomisedcontrolledtrialLancet3601715172113WoodruffPGBModrekDFChoyGJiaARAbbasAEllwangerLLKothJRArronandJVFahyThelpertype2driveninflammationdefinesmajorsubphenotypesofasthmaAmJRespirCritCareMed18038839514HaldarPCEBrightlingBHargadonSGuptaWMonteiroASousaRPMarshallPBraddingRHGreenAJWardlawandIDPavordMepolizumabandexacerbationsofrefractoryeosinophilicasthmaNEnglJMed36097398415NairPMMPizzichiniMKjarsgaardMDInmanAEfthimiadisEPizzichiniFEHargreaveandPMOByrneMepolizumabforprednisonedependentasthmawithsputumeosinophiliaNEnglJMed36098599316HersheyGKIL13receptorsandsignalingpathwaysanevolvingwebJAllergyClinImmunol111677690quiz69117BerryMADParkerNNealeLWoodmanAMorganPMonkPBraddingAJWardlawIDPavordandCEBrightlingSputumandbronchialsubmucosalIL13expressioninasthmaandeosinophilicbronchitisJAllergyClinImmunol1141106110918HumbertMSRDurhamPKimmittNPowellBAssoufiRPfisterGMenzABKayandCJCorriganElevatedexpressionofmessengerribonucleicacidencodingIL13inthebronchialmucosaofatopicandnonatopicsubjectswithasthmaJAllergyClinImmunol9965766519SahaSKMABerryDParkerSSiddiquiAMorganRMayPMonkPBraddingAJWardlawIDPavordandCEBrightlingIncreasedsputumandbronchialbiopsyIL13expressioninsevereasthmaJAllergyClinImmunol12168569120TruyenELCoteurEDilissenLOverberghLJDupontJLCeuppensandDMBullensEvaluationofairwayinflammationbyquantitativeTh1Th2cytokinemRNAmeasurementinsputumofasthmapatientsThorax6120220821WoodruffPGHABousheyGMDolganovCSBarkerYHYangSDonnellyAEllwangerSSSidhuTPDaoPickCPantojaDJErleKRYamamotoandJVFahyGenomewideprofilingidentifiesepithelialcellgenesassociatedwithasthmaandwithtreatmentresponsetocorticosteroidsProcNatlAcadSciUSA104158581586322WinpennyJPLLMarseyandDWSextonTheCLCAgenefamilyputativetherapeutictargetforrespiratorydiseasesInflammAllergyDrugTargets814616023SidhuSSSYuanALInnesSKerrPGWoodruffLHouSJMullerandJVFahyRolesofepithelialcellderivedperiostininTGFbetaactivationcollagenproductionandcollagengelelasticityinasthmaProcNatlAcadSciUSA24SasakiHMDaiDAuclairIFukaiMKiriyamaYYamakawaYFujiiandLBChenSerumleveloftheperiostinahomologueofaninsectcelladhesionmoleculeasaprognosticmarkerinnonsmallcelllungcarcinomasCancer9284384825SasakiHKMLoLBChenDAuclairYNakashimaSMoriyamaIFukaiCTamMLodaandYFujiiExpressionofPeriostinhomologouswithaninsectcelladhesionmoleculeasaprognosticmarkerinnonsmallcelllungcancersJpnJCancerRes9286987326SasakiHCYYuMDaiCTamMLodaDAuclairLBChenandAEliasElevatedserumperiostinlevelsinpatientswithbonemetastasesfrombreastbutnotlungcancerBreastCancerResTreat7724525227GibsonPGInflammatoryphenotypesinadultasthmaclinicalapplicationsClinRespirJ319820628ChanezPSEWenzelGPAndersonJMAntoEHBelLPBouletCEBrightlingWWBusseMCastroBDahlenSEDahlenLMFabbriSTHolgateMHumbertMGagaGFJoosBLevyKFRabePJSterkSJWilsonandIVachierSevereasthmainadultswhataretheimportantquestionsJAllergyClinImmunol1191337134829LemiereCPErnstROlivensteinYYamauchiKGovindarajuMSLudwigJGMartinandQHamidAirwayinflammationassessedbyinvasiveandnoninvasivemeansinsevereasthmaeosinophilicandnoneosinophilicphenotypesJAllergyClinImmunol1181033103930MirandaCABusackerSBalzarJTrudeauandSEWenzelDistinguishingsevereasthmaphenotypesroleofageatonsetandeosinophilicinflammationJAllergyClinImmunol11310110831SilkoffPEAMLentAABusackerRKKatialSBalzarMStrandandSEWenzelExhalednitricoxideidentifiesthepersistenteosinophilicphenotypeinsevererefractoryasthmaJAllergyClinImmunol1161249125532PavordIDandDShawTheuseofexhalednitricoxideinthemanagementofasthmaJAsthma4552353133ChuppGLCGLeeNJarjourYMShimCTHolmSHeJDDziuraJReedAJCoylePKienerMCullenMGrandsaigneMCDombretMAubierMPretolaniandJAEliasAchitinaselikeproteininthelungandcirculationofpatientswithsevereasthmaNEnglJMed3572016202734DweikRARLSorknessSWenzelJHammelDCurranEverettSAComhairEBleeckerWBusseWJCalhounMCastroKFChungEIsraelNJarjourWMooreSPetersGTeagueBGastonandSCErzurumUseofexhalednitricoxidemeasurementtoidentifyareactiveatriskphenotypeamongpatientswithasthmaAmJRespirCritCareMed1811033104135BarnesPJThecytokinenetworkinasthmaandchronicobstructivepulmonarydiseaseJClinInvest1183546355636HolgateSTandRPolosaTreatmentstrategiesforallergyandasthmaNatRevImmunol821823037WalshGMEmergingdrugsforasthmaExpertOpinEmergDrugs1364365338YuyamaNDEDaviesMAkaiwaKMatsuiYHamasakiYSuminamiNLYoshidaMMaedaAPanditJLLordanYKamogawaKArimaFNagumoMSugimachiABergerIRichardsSLRoberdsTYamashitaFKishiHKatoKAraiKOhshimaJTadanoNHamasakiSMiyatakeYSugitaSTHolgateandKIzuharaAnalysisofnoveldiseaserelatedgenesinbronchialasthmaCytokine1928729639TakayamaGKArimaTKanajiSTodaHTanakaSShojiANMcKenzieHNagaiTHotokebuchiandKIzuharaPeriostinanovelcomponentofsubepithelialfibrosisofbronchialasthmadownstreamofIL4andIL13signalsJAllergyClinImmunol1189810440HayashiNTYoshimotoKIzuharaKMatsuiTTanakaandKNakanishiThelper1cellsstimulatedwithovalbuminandIL18induceairwayhyperresponsivenessandlungfibrosisbyIFNgammaandIL13productionProcNatlAcadSciUSA104147651477041PlagerDAJCKahlYWAsmannAENilsonJFPallanchOFriedmanandHKitaGenetranscriptionchangesinasthmaticchronicrhinosinusitiswithnasalpolypsandcomparisontothoseinatopicdermatitisPLoSOne5e1145042StankovicKMHGoldszteinDDRehMPPlattandRMetsonGeneexpressionprofilingofnasalpolypsassociatedwithchronicsinusitisandaspirinsensitiveasthmaLaryngoscope11888188943BlanchardCMKMinglerMVicarioJPAboniaYYWuTXLuMHCollinsPEPutnamSIWellsandMERothenbergIL13involvementineosinophilicesophagitistranscriptomeanalysisandreversibilitywithglucocorticoidsJAllergyClinImmunol1201292130044BlanchardCMKMinglerMMcBridePEPutnamMHCollinsGChangKStringerJPAboniaJDMolkentinandMERothenbergPeriostinfacilitateseosinophiltissueinfiltrationinallergiclungandesophagealresponsesMucosalImmunol128929645BarilPRGangeswaranPCMahonKCauleeHMKocherTHaradaMZhuHKalthoffTCrnogoracJurcevicandNRLemoinePeriostinpromotesinvasivenessandresistanceofpancreaticcancercellstohypoxiainducedcelldeathroleofthebeta4integrinandthePI3kpathwayOncogene262082209446BenQWZZhaoSFGeJZhouFYuanandYZYuanCirculatinglevelsofperiostinmayhelpidentifypatientswithmoreaggressivecolorectalcancerIntJOncol3482182847KudoYIOgawaSKitajimaMKitagawaHKawaiPMGaffneyMMiyauchiandTTakataPeriostinpromotesinvasionandanchorageindependentgrowthinthemetastaticprocessofheadandneckcancerCancerRes666928693548PuglisiFCPuppinEPegoloCAndreettaGPascolettiFDAurizioMPandolfiGFasolaAPigaGDamanteandCDiLoretoExpressionofperiostininhumanbreastcancerJClinPathol6149449849SiriwardenaBSYKudoIOgawaMKitagawaSKitajimaHHatanoWMTilakaratneMMiyauchiandTTakataPeriostinisfrequentlyoverexpressedandenhancesinvasionandangiogenesisinoralcancerBrJCancer951396140350NairPMKjarsgaardSArmstrongAEfthimiadisPMOByrneandFEHargreaveNitricoxideinexhaledbreathispoorlycorrelatedtosputumeosinophilsinpatientswithprednisonedependentasthmaJAllergyClinImmunol51ShawDEMABerryMThomasRHGreenCEBrightlingAJWardlawandIDPavordTheuseofexhalednitricoxidetoguideasthmamanagementarandomizedcontrolledtrialAmJRespirCritCareMed17623123752PavordIDPKJefferyYQiuJZhuDParkerACarlsheimerINayaandNCBarnesAirwayinflammationinpatientswithasthmawithhighfixedorlowfixedplusasneededbudesonideformoterolJAllergyClinImmunol123108310891089e1081108753DSilvaLRJCookCJAllenFEHargreaveandKParameswaranChangingpatternofsputumcellcountsduringsuccessiveexacerbationsofairwaydiseaseRespirMed1012217222054LeungDYRJMartinSJSzeflerERSherSYingABKayandQHamidDysregulationofinterleukin4interleukin5andinterferongammageneexpressioninsteroidresistantasthmaJExpMed181334055FloodPagePCSwensonIFaifermanJMatthewsMWilliamsLBrannickDRobinsonSWenzelWBusseTTHanselandNCBarnesAstudytoevaluatesafetyandefficacyofmepolizumabinpatientswithmoderatepersistentasthmaAmJRespirCritCareMed17610621071実施例6喘息患者試験III安全性、耐容性と有効性を評価するために本研究は、ICS500-2000μg/日のプロピオン酸フルチカゾン乾燥粉末吸入器[DPI]または同等品長時間作用型β刺激薬LABA、ロイコトリエン受容体拮抗薬LTRA、長時間作用型ムスカリンアンタゴニストLAMA又はテオフィリンなどの第2コントローラー薬物療法による日々の治療にもかかわらず制御されないままである重篤な喘息を持つ患者におけるレブリキズマブの無作為化、多施設、二重盲検、プラセボ対照、並行群間試験である。この試験はまた、血清ペリオスチンのベースラインレベル≧50ng/mLの診断値Elecsys登録商標アッセイにより測定されるを評価する。ICS及び第二のコントローラー薬物が含まれなければならない管理治療の標準を継続しつつ、患者を無作為に、レブリキズマブの3つの用量の何れか、又は52週間のプラセボ対照期間のプラセボに割り当てる。スクリーニング期間とも呼ばれる2週間の導入期間中来院1から来院3、患者は現在の喘息治療の順守及び試験を通じての毎月の臨床来院のために必要な装備を使用する彼らの能力並びに標準治療薬物により与えられる喘息の制御の程度について評価される。喘息コントロールアンケートACQスコア≧1.5及び制御されない喘息の一以上の症状夜間覚醒1回/週、症状>2日/週、SABAの使用>2日/週、及び/又は日常的な活動の妨害を報告する患者は制御されないと考えられる。コントローラー薬物のアドヒランスによらず、来院1又は2及び来院3で症状が制御されないままである患者は参加する適格性がある。アドヒランスデータが不完全であるケースにおいて、及び来院3でACQ-5が<1.5である患者に対して、治験責任医師のこの患者の経験が、今週は彼らの病気について非定型的であったことを示唆する場合、スクリーニング期間を1週間延長する場合がある。患者は、最高で更に2回まで選択された理由により再スクリーニングに適格となり得る。導入スクリーニング期間の最後に、適格患者は無作為に試験薬プラセボ又はレブリキズマブを毎月37.5mgSC、毎月125mgSC、又は4週間毎に250mgSCに割り当てられる1:1:1:1。無作為化は、Elecsys登録商標アッセイを使用して測定されたベースラインの血清ペリオスチン<42ng/mL,≧42から<50ng/mL,≧50から<58ng/mL,≧58ng/mL、最後の12か月の喘息増悪の既往歴0,1-2,≧3事象、ベースラインの喘息薬物ICS用量≧プロピオン酸フルチカゾンDPI又は同等物の1000μg/日LABA[はい、いいえ]、および地理的領域米国/カナダ、ヨーロッパ、アジア、世界の残りの部分によって階層化される。患者は彼らの標準治療の安定的投与量を続けると考えられ、それは52週間の二重盲検試験治療を受けることに加えて、ICSプロピオン酸フルチカゾンDPI又は同等物の500、2000μg/日及び第二コントローラー薬物を含まなければならない。試験治療の第1のSC注射は無作為化と同じ日に起き来院3[第1日]、合計13の試験治療投与のために投薬は52週間のプラセボ対照期間にわたって4週間に1回反復されるであろう。安全性、有効性及び患者の報告結果PROの測定は52週間のプラセボ対照期間を通じて評価されるであろう。主要有効性エンドポイントは喘息増悪率であり、52週間のプラセボ対照期間を通じて評価されるであろう。52週間のプラセボ対照期間を完了する患者即ち、時期尚早に試験治療を中止していない患者は、52週間の積極的な治療延長へと続く。52週間の積極的な治療延長試験へと続いた全ての患者は、4週間ごとに125mg又は250mgの何れかの投与量で二重盲検でSCレブリキズマブを受けるであろう。52週間のプラセボ対照期間中に125mg又は250mgの何れかのレブリキズマブを受けることを割り当てられた患者は、割り当てられたレブリキズマブの用量のままであろう。52週間のプラセボ対照期間中4週間ごとにプラセボ又はレブリキズマブの37.5mgのSCを受けることを割り当てられた患者は、ベースラインペリオスチンレベル及び前治療の割り当てにより層別化される無作為化により、52週間の積極的な治療延長において4週間ごとにSCレブリキズマブを125mg又は250mgの何れかに対して、1:1の比で無作為化されるであろう。52週間の積極的治療延長の第76週で、各患者は、最近の3回の来院68,72及び76週からのデータを使用して、喘息コントロールについて評価されるであろう。喘息症状が連続する12週間において制御されている患者各評価でACQ5≦0.75及び積極的治療延長の最初の半分以内で52~76週増悪しなかった患者は、レブリキズマブ治療を中止し、経過観察期間に入る。経過観察の間、患者は試験薬の最後の投与後24週間安全性について経過観察されるであろう。76週で症候性のままの患者ACQ-5>0.75又は積極的治療延長の最初の半分の期間52~76週に増悪事象を経験した患者は更に28週間のレブリキズマブ治療を続けるであろう。安全性、有効性及びPROの測定は52週間積極的治療延長を通じて評価されるであろう。経過観察期間中に、全ての患者は、プロトコールでスケジュールされるとき又は試験治療からの早期中止の事象でいつでも生じ得る、試験治療の最終投与後24週間薬剤の>5半減期安全性について経過観察されるであろう。来院2376週を通して試験を完了し、良好に制御され、試験治療を中止した患者においては、来院23が安全性の経過観察の来院1に置き換わるであろう。来院30104週を通して全試験を完了した患者においては、来院30が安全性の経過観察の来院1に置き換わるであろう。これらの場合の両方において、経過観察期間における次回の来院は12週での安全性の経過観察の来院2であろう。他の全ての患者において、最初の経過観察の来院は、安全性の経過観察期間の4週での試験治療の最後の投与後約4週安全性経過観察の来院1であろう。試験における全参加は、来院3第1日での無作為化から、52週間のプラセボ対照期間、52週間の積極的治療延長及び安全性の経過観察期間を含み、124週間にも及ぶであろう。およそ1400人の患者ペリオスチンの群[ペリオスチンが高い≧50ng/mL,ペリオスチンが低い<50ng/mL]あたり、治療群[SCレブリキズマブ250mg,125mg,37.5mg,又はプラセボ]あたり175患者が世界的に約250箇所で試験に登録されるであろう。最小の650人の患者が、ペリオスチンが高い群≧50ngの/mLに登録されるであろう。DPIでのICSフルチカゾン≧1000μg/日又は同等物LABAを受けている、最小の約450人の患者が登録されるであろう。鍵となる包含基準は以下を含める:スクリーニング前に≧12ヶ月の喘息の診断;気管支拡張薬応答/可逆性:患者はスクリーニング期間中に短時間作用型βアンタゴニスト例えば、アルブテロールまたはサルブタモールの4回のパフに応答する≧12の気管支拡張薬応答を有さねばならない;来院2と来院3の両方で予測された気管支拡張薬前FEV1が40~80;スクリーニング前に≧6ヶ月の間、ICS>500例えば500-2000μgのプロピオン酸フルチカゾンDPI又は同等物1日の総用量を受けている;スクリーニング前の6ヶ月間に第二のコントローラー薬物例えば所定の投与量の範囲内でのLABA,LAMA,LTRA,又はテオフィリンを受けている;スクリーニング期間即ち来院1[第14日]又は来院2[第7日]及び無作為化の時来院3[第1日]の両方で示される制御されない喘息、以下に定められるように:ACQ-5スコア≧1.5で、国立心肺血液研究所NationalHeartLungandBloodInstitute及び全国喘息教育予防プログラムの専門家パネル報告書32007NationalAsthmaEducationandPreventionProgramExpertPanelReport3及び喘息のためのグローバルイニシアティブ2010のガイドラインtheGlobalInitiativeforAsthmaguidelinesに基づく、制御されない喘息の以下の症状の少なくとも一:症状>2日/週夜間の覚醒≧1回/週救助薬としてのSABAの使用>2日/週正常な日常の活動の干渉;他の肺疾患が無いことをを確認する、来院1の前12ヶ月以内に得られた胸部X線写真又はコンピューター断層撮影CTスキャン又はスクリーニング期間中の胸部X線写真;スクリーニング期間中の70以上においてコントローラー薬物によるアドヒランスの実証アドヒアランスは、ピークフローメータ装置に記録されているように、患者がスクリーニング期間中来院1から来院3の70以上の日を喘息治療コントローラー治療をを受けていると肯定的に応答するとして定義される。鍵となる除外基準は以下を含める:生物学的製剤又はレブリキズマブ注射の任意の成分に対する既知の過敏症に対する重度のアレルギー反応又はアナフィラキシー反応の既往歴;来院1の前3ヶ月以内の毎日の又は隔日の経口コルチコステロイド維持療法として定義される経口コルチコステロイド維持療法;スクリーニング来院1前の4週間又は急性増悪事象を含む任意の理由により全身性の経口、静脈内投与IV又は筋肉内投与IMのコルチコステロイドを必要とするスクリーニング期間の何れかでの喘息の増悪;以下の何れかを必要とする感染の主な発症;1.スクリーニング来院1の前4週間以内で24時間以上の入院2.スクリーニング来院1の4週間以内での静脈内投与IV抗生物質による治療3.スクリーニング来院1の前2週間以内での経口投与抗生物質;来院1の前6ヶ月以内での活動性の寄生虫感染症;スクリーニング前の12ヶ月以内での治療を要求する結核結核を治療され、治療終了後12ヶ月で再発していない患者は許容される;限定されないがHIV感染を含む既知の免疫不全症;免疫調節療法の現在の使用;潜在的な悪性腫瘍について知られている現在の悪性腫瘍又は現在の評価;活動性B/C型肝炎または不安定な肝疾患の証拠;スクリーニング前の6ヶ月以内の活動性寄生虫感染;AST/ALT上昇≧2.0正常の上限;嚢胞性線維症、慢性閉塞性肺疾患、および/または喘息以外の他の臨床的に有意な肺疾患の既往歴;現在喫煙又は喫煙履歴>10パック年;スクリーニング前6ヶ月の期間での任意の時での生物学的療法;試験期間中に非常に効果的な避妊方法を使用することを望んでいないか又は妊娠中または授乳中である生殖能のある女性患者;他の不安定な医学的疾患;ボディマスインデックス>38kg/m2、体重<40kg。第III相試験の投薬の理論的根拠集団PK解析法成人患者のレブリキズマブのPKプロファイルを記述するために、予備的集団PKモデルが開発された。上述した試験の333人のレブリキズマブ治療患者由来の総計4914の血清濃度-時間サンプルがモデルを開発するために使用された。各試験で観測された平均PKプロファイルと過去のデータから予測されるプロファイルの間の良好な一致によって証明されるように、試験にわたって明らかな相違は観察されなかった。一次吸収と排泄動態による2コンパートメントモデルは、血清レブリキズマブの濃度-時間データを十分に説明した。構造モデルのパラメータは、クリアランスCL、中心コンパートメントV1の分布容積、末梢コンパートメント容積V2、インターコンパートメントクリアランスQ、並びに皮下SC投与後の吸収の一次吸収率Kaおよび生物学的利用能Fが含まれている。すべてのパラメーターは、V2とQ母平均値に固定されたを除いて、対数正規分布であると仮定した。母平均CLとVLは0.18L/日及び3.7Lとそれぞれ見積もられた。母平均バイオアベイラビリティは76と推定された。PKパラメーターの個人間変動は適度な15から27までの範囲であった。体重はCLとレブリキズマブの分布の体積の有意な共変量であることが見いだされ、体重の重さが高いクリアランス及び大きな分布体積と関連している。CLにおけるおよそ19の個人間変動及びV1における11の個人間変動は体重により説明された。見積もられた集団PKパラメーターが表13に要約される。集団PK解析は、レブリキズマブのPK特徴はIgGモノクローナル抗体に典型的なそれと一致していることを示していた。PKパラメーターにおけるペリオスチンの効果は、実施例2の試験及び実施例3の試験における中央値の上下のベースラインペリオスチンレベルを持つPKパラメーターの個々の事後推定値を比較することにより評価された。その違いは、CLp=0.54,0.11,V1p=0.83,0.79,及びFp=0.74,0.37についての両方の試験において有意であったp>0.05。均一投薬の理論的根拠均一な投薬を上述した第II相試験で使用した。レブリキズマブのPKプロファイルにおける体重の影響を考慮すると、体重が重い患者は一般的に薬物曝露が少なくなる。しかし、レブリキズマブで治療された個々の患者におけるベースラインから第12週までのFEV1の比例した変化と体重との間には相関を見いだされず、曝露における体重の影響は有効性に影響を及ぼさなかったことを示唆している図20を参照。更に、これらの試験由来のデータは試験された体重の範囲内で53~135kg均一投薬に対する安全上の懸念は無いことを示していた。レブリキズマブに対する曝露の全体的な変動性における均一投薬の影響を評価するために、集団PKシミュレーションが、上述の第II相試験に見られるものと似た分布を仮定して、均一投薬及びそれと同等の体重に基づいた即ちmg/kg投薬レジメンを比較するために実施された。様々なレベル以上の定常状態のトラフ濃度による予測された患者の割合は、均一及び体重に基づく投薬レジメンの間で似ており図21、体重に基づく投薬の明らかな利点は無いことを示唆している。その結果、個別化された体重に基づく投薬と比較して、投薬誤差のリスクと操作の複雑性例えば薬物調製を減少するその利点を考慮すると、均一投薬が第III相試験において選択された。標的濃度の理論的根拠第III相試験を用いた曝露-応答解析が、第III相試験の用量選択を知らせる標的のレブリキズマブ濃度を導き出すために行われた。上述された両方の第II相試験において、レブリキズマブで治療された個々の患者において、ベースラインからのFEV1のプラセボ補正変化と、12週での血清トラフ薬物濃度の間には明らかな相関が見られずデータ非表示、FEV1におけるレブリキズマブの作用は両方の試験でテストされた曝露の範囲では飽和していることを示唆している。更に、PDバイオマーカーFeNO,IgE,CCL17,及びCCL13における変化と第II相試験における血清トラフ薬物濃度の間の相関の評価は、両方の試験において治療期間中のこれらのPD応答の飽和を示唆していた。結果はペリオスチンが高い群で似ていた。これらの結果を基にして、標的血清定常状態トラフ濃度が10μg/mLが、両方の知見において観察されたCトラフ値,12週範囲の下端を一括すると提案された実施例2の試験において、5番目-95番目パーセンタイル:9.6-50μg/mL;実施例3の試験において9.4-73μg/mL.。更に、文献で入手できるデータに基づいた肺におけるIL-13のレベルとレブリキズマブの仮定された血清から肺への分配1:500を考慮すると、10μg/mLの血清濃度が、喘息患者でIL13を中和するために肺において十分高い薬物レベルを維持することが期待される。従って、第III相における有効用量は血清の定常状態トラフ濃度>10μg/mLを維持するであろうことが予測される。第III相における部分的有効用量を選択するために、効能が観察された実施例2と実施例3の両方において、観察されたCトラフ値,12週範囲との重複が無いことを確実にするために、5μg/mLの低い標的定常状態トラフ濃度が提案された。加えて、両方の試験において、血清CCL17TARCレベルにいおけるレブリキズマブの効果は、薬物洗い出しの最中に図22:A実施例2の試験、B実施例3の試験を参照、血清レブリキズマブ濃度の平均値が>5μg/mLで、ベースライン側に戻った。血清CCL17TARCのレブリキズマブの効果は有効性とは相関しなかったが、このバイオマーカーの回復は、この濃度で所定の生物学的経路においてIL-13の準最適抑制を示唆している。従って、部分的有効用量は、血清の定常状態トラフ濃度<5μg/mLを維持すると提案される。提案された第III相の投薬量の理論的根拠上述のように実施例3における明らかな投薬応答の欠如を考慮すると即ち、125mg、250mg、及び500mgの用量は等しく有効であるように見えた、第III相の投与量が、有効用量レベル及び部分的有効用量レベルの両方を含むことにより、レブリキズマブの用量応答を実証するために選択された。この目的を満たすために、第III相プログラムのレブリキズマブの提案された用量は、4週間ごとにq4wk皮下SC注射により与えられる250ミリグラム、125ミリグラム及び37.5mgを含む。図23は、第II相試験において見られるものと同様の体重分布を仮定して、これらの用量においてシミュレートされた集団PKプロファイルを示す。4週間ごとのq4wk250mgの最高用量1mLのSC注射を2回が、第III相における臨床的有効性を実証すると予測される。それは、第II相の概念実証試験実施例2で試験され、喘息がICS治療にも関わらず制御されない患者の重篤な喘息増悪率を減少させることに有効性を示したただ一つの投薬レジメンであり、その患者集団が治療のために意図された。実施例2の患者は、他のコントローラーを含むか又は含まないICSによる治療にもかかわらず、制御されない喘息を持っており、ICS≧500μg/日を受けている実施例2の患者の≧90がLABA薬物をも受けていた。この投薬レジメンにて、ほとんど全て99の患者は、集団PKシミュレーションに基づいて、10μg/mLの標的Cトラフ、SSを達成すると予想され表14参照、それは最大の有効性が期待されることを意味する。従って、この用量が第II相で見られる臨床効果を複製するために試験されるであるう。4週間ごとに125mgの中間の用量が、第II相用量範囲試験において、4週間ごとの125mg及び250mgで観察されたFEV1の改善の大きさの類似性に基づいて提案される実施例3。同じ用量-応答関係が増悪エンドポイントにおいて重度の喘息患者集団に当てはまると期待することは妥当であり、従って、125mgの用量が第III相における有効性を示すと予想される。この予想は、集団PKシミュレーションにより更に支持され、それは患者の大部分78がこの投薬レジメンにより10μg/mLのCトラフ、SSを達成するであろうことを示している表14参照。4週間ごとの37.5mgの用量0.3mLのSC注射を1回が、用量-応答関係を確立するために重要である、レブリキズマブの部分的有効用量又は臨床的非有効用量を実証するために提案される。この投薬レジメンには以下の考慮事項を考慮して選択される:患者の大部分72で5μg/mL未満、患者のほとんど全て99で10μg/mL未満のCトラフ、SSを維持する能力表14を参照。中間用量からの合理的な3.3倍の分離差次的臨床応答を実証するために、中間用量と、レブリキズマブに対する血清曝露のシミュレートされた範囲における最小の重複表14参照投薬誤差の可能性を低減するのに便利な注射量0.1mLで複数この第III相試験の様々な評価項目は以下のとおりである。評価項目以下のエンドポイントの各々はペリオスチンが高い患者と低い患者で別個に評価されるであろう。250mgのレブリキズマブ群をプラセボ群と比較したときに、主要エンドポイントがペリオスチンが高い群では満たされている場合、試験は陽性と見なされる。主要有効性評価項目主要有効性エンドポイントは、52週間のプラセボ対照期間の喘息増悪率の評価項目ある。この試験において、喘息の増悪は、全身性コルチコステロイドによる治療や入院につながる新規の喘息症状または喘息症状の増加例えばこれらの症状に起因する喘鳴、咳、呼吸困難又は胸の圧迫感又は夜間覚醒を含むとして定義される。ここで、全身性コルチコステロイドによる治療とは、経口即ちOCS又は非経口コルチコステロイドによる3日間以上の治療又は非経口IV又はIMコルチコステロイドの一以上の投薬を伴う救急部の来院として定義される。2次有効性評価項目52週での2次有効性評価項目は以下の通りである:ベースラインから52週までの気管支拡張薬前のFEV1の相対的な変化;52週間の治療期間中の最初の喘息増悪までの時間;ベースラインから52週までの一酸化窒素FENO排泄分画の変化;ベースラインから52週までの喘息生活の質のアンケートAQLQの標準化バージョンの全体スコアにより評価される、喘息特異的健康関連の生活の質の変化;ベースラインから52週までの救助薬の使用の変化救助薬又噴霧救急薬即ちSABAの1日あたりのパフの数により測定される;52週間のプラセボ対照期間中の緊急の喘息関連保健医療の利用すなわち、入院、救急来院、および救急治療の来院。探索的評価項目探索的評価項目は以下を含むであろう:52週間のプラセボ対照期間中プロコールに定められた喘息悪化を経験しない患者の割合;ベースラインから52週までの朝の気管支拡張薬後のピークフロー値L/分の変化;ベースラインから52週までの気管支拡張薬後のFEV1の変化;52週間のプラセボ対照期間中、気管支拡張薬前のFEV1の150mLの改善までの時間;4週から52週にわたり平均したベースラインからの気管支拡張薬前のFEV1の相対的変化リットル;ベースラインから52週までの努力肺活量の相対的変化;全身性コルチコステロイドによる治療を要するスクリーニング期間中来院1~3、最高値の60未満のFEV1又はPEFを生じる増悪として定義される肺機能の低下と関連している増悪率;ベースラインから52週までの労働生産性と活動性の障害-喘息アンケートWPAI-喘息により評価される労働、学校及び活動性の障害の変化;ベースラインから52週までの喘息コントロールアンケート-5ACQ-5スコアにおける変化;ベースラインから52週までの喘息症状効用指数ASUIにより測定される喘息症状の変化;ベースラインから52週までのEQ-5Dにより評価される、健康効用healthutilitiesの変化;ベースラインから52週までの治療効果のグローバル評価GETEの変化。これらの探索的評価項目はまた52週間の積極的治療延長及び24週間の経過観察期間の最中に評価されうる。更なる探索的評価項目は、52週間を超えてレブリキズマブに曝露された患者における有害事象の頻度と重篤度;52週間の積極的治療延長又は24週間の経過観察期間中のインターロイキン-13IL-13/喘息関連PDバイオマーカーの変化;52週間の積極的治療延長又は24週間の経過観察期間中の血清レブリキズマブ濃度を含み得る。患者の報告結果喘息の生活の質アンケート-標準化AQLQSAQLQSは患者の喘息固有の健康に関連した生活の質を評価するために使用されるであろう。アンケートは、活動の制限、症状、感情機能、及び環境刺激を含む4つのドメインが含まれる。AQLQSはこの試験集団における使用のために検証されている。AQLQSは2週間のリコール仕様がある。AQLQSは全ての他の非PRO評価に先立ち、かつその評価の期間に患者が疾患の状態の情報又は試験薬を受ける前に患者に対して施される。労働生産性と活動性の障害-喘息アンケートWPAI-喘息職場、学校における及び活動性に関する障害を評価するために、WPAI-喘息アンケートが施される。アンケート項目は、WPAIアレルギー特異的WPAI-ASアンケートから適合され、アレルギーの用語の全出現を喘息に置き換えている。WPAI-ASは全ての他の非PRO評価に先立ち、かつその評価の期間に患者が疾患の状態の情報又は試験薬を受ける前に患者に対して施される。ヨーロッパQOL5DアンケートEQ-5DEQ-5Dは、健康状態に関する単一指標を提供する一般的な優先に基づく健康関連の生活の質のアンケートである。EQ-5Dは、患者による自己完成用に設計されている。Eq-5Dは全ての他の非PRO評価に先立ち、かつその評価の期間に患者が疾患の状態の情報又は試験薬を受ける前に患者に対して施される。喘息症状効用指数ASUIASUIは、咳、喘鳴、息切れ及び夜間覚醒を測定する喘息特有の症状アンケートである。ASUIは全ての他の非PRO評価に先立ち、かつその評価の期間に患者が疾患の状態の情報又は試験薬を受ける前に患者に対して施される。実施例7Elecsys登録商標ペリオスチンアッセイペリオスチンの定量的検出は自動化ロシュcobase601Elecsys登録商標アナライザRocheDiagnosticsGmbHで評価される。試験は、分析物のペリオスチンが、ペリオスチン上の2つの異なるエピトープに結合する2つのモノクローナル抗体の間に挟まれているサンドイッチ形式で行われる。一つの抗体がビオチン化され、ストレプトアビジンコート磁気ビーズへの免疫複合体の取り込みを可能にしている。第二抗体は、シグナル伝達部分としての錯化ルテニウムカチオンを有し、結合した免疫複合体の電圧依存化学発光検出を可能にする。詳しくは、試薬は以下のように用いれている。-ビーズM:ストレプトアビジンでコーティングされた磁性微粒子0.72mg/mL;防腐剤。-試薬1R1:抗ペリオスチン抗体~ビオチン:この精製されたマウスモノクローナル抗体は、実施例4に係るコーティング抗体25D4に対応し、ビオチン化形式>1.0mg/L;TRIS緩衝液>100mmol/L、pH7.0;保存剤で使用される。-試薬2R2:抗ペリオスチン-抗体~Rubpy:この精製されたマウスモノクローナル抗ペリオスチン抗体は実施例4に係る検出抗体23B9に対応し、トリス2,2’-ビピリジルルテニウムII錯体Rubpy複合体で標識された標識形態>1.0mg/L;TRIS緩衝液>100mmol/L,pH7.0;保存剤で使用される。イムノアッセイは、2つのインキュベーションを用いて行われる。約9分間の第1のインキュベーションにおいて、20μLサンプル中のペリオスチンとビオチン化モノクローナル抗ペリオスチン抗体R1は複合体を形成する。更に9分間の第2のインキュベーションにおいて、ルテニル化モノクローナル抗ペリオスチン抗体R2とストレプトアビジンでコーティングされた微粒子Mが、3員環サンドイッチ複合体が形成され、ビオチンとストレプトアビジンとの相互作用を介して固相微粒子に結合されるように、第1のインキュベーションのバイアルに加えられる。反応混合物が測定セル内に吸引され、ここで微小粒子が白金電極の表面に磁気的に捕捉される。非結合物質は洗い流され、細胞はトリプロピルアミンを含む試薬であるProCellで流される。電極への電圧の印加は、次いで、光電子増倍管によって測定される化学発光放出を誘導する。結果は、試薬バーコードを介して提供されるマスターカーブと2点校正とによって生成される機器固有の検量線を介して決定される。キャリブレーター1は分析物無しであり、キャリブレーター2はバッファリングマトリックスに50ng/mLの組換えヒトペリオスチンが含まれる。キャリブレーションを確認するために、約30~80ngの/mLのペリオスチンを持つ2つのコントロールが採用されている。実施例8E4アッセイとElecsys登録商標ペリオスチンアッセイの比較ペリオスチンレベルは、E4アッセイ実施例4とElecsys登録商標ペリオスチンアッセイ実施例7に類似の方法を使用して、実施例2と実施例3の各々に記載される臨床試験からの患者の血清サンプルで測定された。両試験からのサンプルの結果は、ペリオスチンの値が重複することを示した。変動性と広がりがアッセイ間で比較可能であった。一般に、中央値で、Elecsys登録商標アッセイの結果は典型的には2倍又は2倍を超えて、E4アッセイの結果より高かった。図17を参照、即ち、中央値はElecsys登録商標アッセイに対して50-51ng/mlでE4アッセイに対して中央値は23ng/mlであった。前述の発明は、理解を明確にする目的のために例示および実施例によってある程度詳細に説明してきたが、説明や例は、本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。すべての特許および本明細書に引用される科学文献の開示は、参照によりその全体が援用される。"