"一般式1[式1中、R1は、1~3個のハロゲン原子を置換基として有していてもよいC1~C6アルキル基または水素原子を示し、R2は、ハロゲン原子を示し、R3は、C1~C6アルキル基またはC1~C6アルコキシ基を示し、R4は、1~3個のハロゲン原子を置換基として有していてもよいC1~C6アルキル基、シアノ基、ハロゲン原子または水素原子を示し、Xは、単結合またはメチレン基を示す。]で表される化合物またはその塩。2-{4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-メチルアセタミド。2-{4-アミノ-2-[3-ブロモ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-メチルアセタミド。2-{4-アミノ-2-[3-ブロモ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-yl}アセタミド。2-{4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-2-フルオロエチルアセタミド。4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシピリジン-2-イルメチル]-N-2,2-ジフルオロエチル-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-カルボキサミド。請求項2から6のいずれか1項に記載の化合物の臭化水素酸塩。請求項2から6のいずれか1項に記載の化合物の塩酸塩。請求項2から6のいずれか1項に記載の化合物のメタンスルホン酸塩。請求項2から6のいずれか1項に記載の化合物のエタン-1,2-ジスルホン酸塩。請求項1から10のいずれか1項に記載の化合物またはその塩を含有するHSP90阻害剤。請求項1から10のいずれか1項に記載の化合物またはその塩を含有するHSP90のATPase活性阻害剤。請求項1から10のいずれか1項に記載の化合物またはその塩を含有するHSP90とATPの結合阻害剤。請求項1から10のいずれか1項に記載の化合物またはその塩を有効成分として含有する医薬。請求項1から10のいずれか1項に記載の化合物またはその塩を有効成分として含有する抗癌剤。請求項1から10のいずれか1項に記載の化合物またはその塩、および薬学的に許容し得る担体を含有する医薬組成物。請求項1から10のいずれか1項に記載の化合物またはその塩を投与することを特徴とする癌の治療方法。請求項1から10のいずれか1項に記載の化合物またはその塩の、医薬製造のための使用。癌が、HSP90のクライアント蛋白質が過剰発現している癌である請求項15に記載の抗癌剤。癌が、HSP90のクライアント蛋白質が過剰発現している癌である請求項17に記載の癌の治療方法。癌が、HSP90のクライアント蛋白質の変異がみられる癌である請求項15に記載の抗癌剤。癌が、HSP90のクライアント蛋白質の変異がみられる癌である請求項17に記載の癌の治療方法。癌が、HSP90のクライアント蛋白質の活性化がみられる癌である請求項15に記載の抗癌剤。癌が、HSP90のクライアント蛋白質の活性化がみられる癌である請求項17に記載の癌の治療方法。癌が、HSP90のクライアント蛋白質が属する細胞内シグナル伝達経路の活性化がみられる癌である請求項15に記載の抗癌剤。癌が、HSP90のクライアント蛋白質が属する細胞内シグナル伝達経路の活性化がみられる癌である請求項17に記載の癌の治療方法。癌が、HSP90のクライアント蛋白質に依存している癌である請求項15に記載の抗癌剤。癌が、HSP90のクライアント蛋白質に依存している癌である請求項17に記載の癌の治療方法。HSP90阻害剤は、医薬、特に、抗癌剤としての利用が期待されているものの、実際に医薬として使用されるに到った化合物は未だない。本発明者らは、鋭意検討を行った結果、HSP90のATPase活性を阻害し、抗腫瘍活性を有する新規化合物として、下記一般式1で表される化合物を見出し、本発明を完成させた。さらに、本発明者らは、本発明の化合物について、invivoにおける抗腫瘍試験、安全性試験、代謝安定性試験、代謝酵素に対する阻害試験等を実施し、本発明の化合物は医薬に求めらる種々の資質を具備していることを見出した。すなわち、本発明は、1一般式1[式1中、R1は、1~3個のハロゲン原子を置換基として有していてもよいC1~C6アルキル基または水素原子を示し、R2は、ハロゲン原子を示し、R3は、C1~C6アルキル基またはC1~C6アルコキシ基を示し、R4は、1~3個のハロゲン原子を置換基として有していてもよいC1~C6アルキル基、シアノ基、ハロゲン原子または水素原子を示し、Xは、単結合またはメチレン基を示す。]で表される化合物またはその塩。22-{4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-メチルアセタミド。32-{4-アミノ-2-[3-ブロモ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-メチルアセタミド。42-{4-アミノ-2-[3-ブロモ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-yl}アセタミド。52-{4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-2-フルオロエチルアセタミド。64-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシピリジン-2-イルメチル]-N-2,2-ジフルオロエチル-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-カルボキサミド。72から6のいずれか1に記載の化合物の臭化水素酸塩。82から6のいずれか1に記載の化合物の塩酸塩。92から6のいずれか1に記載の化合物のメタンスルホン酸塩。102から6のいずれか1に記載の化合物のエタン-1,2-ジスルホン酸塩。111から10のいずれか1に記載の化合物またはその塩を含有するHSP90阻害剤。121から10のいずれか1に記載の化合物またはその塩を含有するHSP90のATPase活性阻害剤。131から10のいずれか1に記載の化合物またはその塩を含有するHSP90とATPの結合阻害剤。141から10のいずれか1に記載の化合物またはその塩を有効成分として含有する医薬。151から10のいずれか1に記載の化合物またはその塩を有効成分として含有する抗癌剤。161から10のいずれか1に記載の化合物またはその塩、および薬学的に許容し得る担体を含有する医薬組成物。171から10のいずれか1に記載の化合物またはその塩を投与することを特徴とする癌の治療方法。181から10のいずれか1に記載の化合物またはその塩の、医薬製造のための使用。19癌が、HSP90のクライアント蛋白質が過剰発現している癌である15に記載の抗癌剤。20癌が、HSP90のクライアント蛋白質が過剰発現している癌である17に記載の癌の治療方法。21癌が、HSP90のクライアント蛋白質の変異がみられる癌である15に記載の抗癌剤。22癌が、HSP90のクライアント蛋白質の変異がみられる癌である17に記載の癌の治療方法。23癌が、HSP90のクライアント蛋白質の活性化がみられる癌である15に記載の抗癌剤。24癌が、HSP90のクライアント蛋白質の活性化がみられる癌である17に記載の癌の治療方法。25癌が、HSP90のクライアント蛋白質が属する細胞内シグナル伝達経路の活性化がみられる癌である15に記載の抗癌剤。26癌が、HSP90のクライアント蛋白質が属する細胞内シグナル伝達経路の活性化がみられる癌である17に記載の癌の治療方法。27癌が、HSP90のクライアント蛋白質に依存している癌である15に記載の抗癌剤。28癌が、HSP90のクライアント蛋白質に依存している癌である17に記載の癌の治療方法。本発明によって、HSP90阻害活性を有する、上記一般式1で表される新規ピラゾロピリミジン誘導体が提供される。本発明の化合物は、抗腫瘍剤として有用である。本発明において、熱ショック蛋白質90、heatshockprotein90またはHSP90は、特に限定しない限り、HSP90ファミリーのいずれかまたは全てを示す。HSP90ファミリーとしては、例えば、HSP90α、HSP90β、94kDaglucose-regulatedproteinGRP94およびHsp75/tumornecrosisfactorreceptorassociatedprotein1TRAP1が挙げられる。本発明において、HSP90阻害剤とは、HSP90の作用を一部もしくは完全に阻害する化合物または組成物をいい、例えば、HSP90の発現を一部もしくは完全に阻害する化合物または組成物、または、HSP90のシャペロン蛋白質としての機能を一部もしくは完全に阻害する化合物または組成物が挙げられる。ここで、HSP90のシャペロン蛋白質としての機能とは、HSP90がクライアント蛋白質のフォールディングを補助してクライアント蛋白質をその機能する形態に導くこと、または、HSP90がクライアント蛋白質を安定化させる機能等をいう。従って、HSP90阻害剤として、具体的には、例えば、HSP90の発現を阻害する化合物、HSP90とクライアント蛋白質の結合を阻害する化合物、HSP90とコシャペロンやイムノフィリン類の結合を阻害する化合物、HSP90とATPの結合を阻害する化合物、HSP90のATPase活性を阻害する化合物またはHSP90のコンフォメーション変化を阻害する化合物が挙げられる。HSP90阻害剤は、HSP90の作用に起因する疾患の治療剤として使用することができる。HSP90のクライアント蛋白質としては、Her2、EGFR、c-Kit、c-Met、KDR、Flt3、IGF-1R、PDGF等の増殖因子受容体キナーゼ、PDK1、Akt、Raf、S6、Cdk4、Cdk6、Chk1、PLK1、Src、AuroraB、Bcr-Abl、GSK3β、ERK5等の細胞内キナーゼ、GR、ERα、PR、ARなどのステロイド受容体、その他として、HIF-1、Survivin、Tert、Bcl-6、p53等が挙げられる。本発明において、HSP90の作用に起因する疾患としては、例えば、癌、アルツハイマー病等の神経変性疾患、心臓血管疾患、感染症、自己免疫疾患またはアポトーシスによる細胞傷害が関連する疾患等が挙げられる。本発明において、用語腫瘍および癌は交換可能に使用される。また、本発明において、腫瘍、悪性腫瘍、癌、悪性新生物、癌腫、肉腫等を総称して、腫瘍または癌と表現する場合がある。以下に、本発明の一般式1中の各置換基について説明する。R1は、1~3個のハロゲン原子を置換基として有していてもよいC1~C6アルキル基または水素原子を示す。ここで、1~3個のハロゲン原子を置換基として有していてもよいC1~C6アルキル基とは、無置換であるか、または1~3個のハロゲン原子を置換基として有している炭素数1~6の直鎖、分岐鎖または環状のアルキル基を意味する。炭素数1~6のアルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチルまたはシクロヘキシルエチル基等が挙げられる。アルキル基に置換するハロゲン原子としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられ、置換基の位置はアルキル基上のいずれの炭素原子上であってもよく、複数個の置換基を有する場合、該置換基は同一の炭素上の置換基であっても異なる炭素上の置換基であってもよい。アルキル基に置換するハロゲン原子としては、フッ素原子または臭素原子が好ましく、フッ素原子がより好ましい。R1としては、無置換のC1~C3アルキル基、フッ素原子を置換基として有するC1~C3アルキル基であるかまたは水素原子であることが好ましくメチル基、エチル基、フルオロエチル基、ジフルオロエチル基または水素原子であることがより好ましい。R2は、ハロゲン原子を示す。ハロゲン原子としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。R2としては、フッ素原子、塩素原子または臭素原子が好ましく、塩素原子または臭素原子がより好ましい。R3は、C1~C6アルキル基またはC1~C6アルコキシ基を示す。ここで、C1~C6アルキル基は、上記R2における定義と同義である。C1~C6アルコキシ基とは、上記C1~C6アルキル基をアルキル部分に有するC1~C6アルコキシ基を意味する。R3としては、C1~C3アルキル基、C1~C3アルコキシ基が好ましく、メチル基、エチル基またはメトキシ基がより好ましい。R4は、1~3個のハロゲン原子を置換基として有していてもよいC1~C6アルキル基、シアノ基、ハロゲン原子または水素原子を示す。ここで、1~3個のハロゲン原子を置換基として有していてもよいC1~C6アルキル基は、上記R1における定義と同義である。R4としては、C1~C3アルキル基、シアノ基、フッ素原子または水素原子が好ましい。Xは、単結合であるか、メチレン基であることが好ましい。本発明の式1で表される化合物には、立体異性体あるいは不斉炭素原子に由来する光学異性体が存在することもあるが、これらの立体異性体、光学異性体およびこれらの混合物のいずれも本発明に含まれる。本発明の式1で表される化合物は、次に記載の群から選ばれるいずれか1の化合物が特に好ましい。2-{4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-メチルアセタミド、2-{4-アミノ-2-[3-ブロモ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-メチルアセタミド、2-{4-アミノ-2-[3-ブロモ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-yl}アセタミド、2-{4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-2-フルオロエチルアセタミド、4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシピリジン-2-イルメチル]-N-2,2-ジフルオロエチル-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-カルボキサミド。本発明の一般式1で表される化合物は、所望により医薬的に許容される塩とすることができる。そのような塩としては、例えば塩酸塩、ヨウ化水素酸塩等のハロゲン化水素酸塩;硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、燐酸塩等の無機酸塩;メタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩等の低級アルカンスルホン酸塩;ベンゼンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩等のアリ-ルスルホン酸塩;ギ酸、酢酸、りんご酸、フマル酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、蓚酸塩、マレイン酸塩等の有機酸塩;およびオルニチン酸塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩等のアミノ酸塩;を挙げることができ、ハロゲン化水素酸塩および有機酸塩が好ましく、臭素酸塩、塩酸塩、メタンスルホン酸塩またはエタン-1,2-ジスルホン酸塩がより好ましい。本発明の一般式1で表される化合物またはその塩は、遊離体、水和物もしくは溶媒和物として存在することもある。空気中の水分を吸収すること等により水和物、含水塩等として存在することもある。溶媒和物としては、医薬的に許容し得るものであれば特に限定されないが、具体的には、水和物、エタノール和物等が好ましい。また、一般式1で表される本発明化合物中に窒素原子が存在する場合にはN-オキシド体となっていてもよく、これら溶媒和物、水和物、含水塩およびN-オキシド体も本発明の範囲に含まれる。本発明の一般式1で表される化合物は、置換基の種類や組み合わせによって、シス体、トランス体等の幾何異性体、互変異性体又はd体、l体等の光学異性体等の各種異性体が存在し得るが、本発明の化合物は、特に限定していない場合はそれら全ての異性体、立体異性体及びいずれの比率のこれら異性体及び立体異性体混合物をも包含するものである。本発明の一般式1で表される化合物は、構成する原子の一つまたは複数で非天然の比率の原子同位体を含むこともある。原子同位体としては、例えば、重水素2H、トリチウム3H、ヨウ素-125、125Iまたは炭素-1414Cなどが挙げられる。これらの化合物は、治療又は予防剤、研究試薬、例えば、アッセイ試薬、及び診断剤、例えば、インビボ画像診断剤として有用である。一般式1で表される化合物のすべての同位体変種は、放射性であるかどうかにかかわらず、本発明の範囲内に含まれる。また、本発明は、生体内における生理条件下で酵素や胃酸等による反応により本発明の医薬組成物の有効成分である化合物1に変換される化合物、すなわち、酵素的に酸化、還元、加水分解等を起こして化合物1に変化される化合物又は胃酸等により加水分解等を起こして化合物1に変化される医薬的に許容されるプロドラッグ化合物も本発明に包含する。上記プロドラッグとしては、化合物1のアミノ基がアシル化、アルキル化、リン酸化された化合物例えば、そのアミノ基がエイコサノイル化、アラニル化、ペンチルアミノカルボニル化、5-メチル-2-オキソ-1,3-ジオキソレン-4-イルメトキシカルボニル化、テトラヒドロフラニル化、ピロリジルメチル化、ピバロイルオキシメチル化、tert-ブチル化された化合物等である等を挙げることができる。本発明の化合物のプロドラッグは公知の方法によって化合物1から製造することができる。また、本発明の化合物のプロドラッグは、広川書店1990年刊医薬品の開発第7巻分子設計163頁~198頁に記載されているような、生理的条件で化合物1に変化するものも含まれる。次に、一般式1で表される化合物の代表的な製造方法を説明する。なお、各反応は、必要に応じて、適当な保護基を用いてもよいし、通常の有機化学的反応で所望の変換を用いてもよく、保護基の種類および各置換基の変換順序は、特に限定されない。[主工程1]一般式1中のXが、メチレン基である化合物の製造方法を説明する。スキーム1[各式中、R1、R2、R3およびR4は、上記と同様に定義され、R5は、1個または2個の炭素数1~6個のアルキル基が置換していてもよいメチレン基を示し、R6は、置換基を有していてもよいアリール基または置換基を有していてもよい複素環基を示し、R7は、保護基を有するアミノ基を示し、LG1およびLG2は脱離基を示す。脱離基LG1およびLG2としては、ハロゲン原子、トルエンスルホニルオキシ基、メタンスルホニルオキシ基およびトリフルオロメタンスルホニルオキシ基等が挙げられる。アミノ基の保護基としては、ベンジルオキシカルボニル基、tert-ブトキシカルボニル基、ベンジル基等が挙げられる。]アルデヒド誘導体1市販品として入手可を溶媒中、アリルブロミドとインジウム粉末で処理することにより化合物2を得ることができる。アルケン誘導体2は、アルデヒド誘導体1とアリルマグネシウムブロミド等のグリニャール試薬を用いても得ることができ、溶媒としては、N,N-ジメチルホルムアミド、N-メチルピロリドン、テトラヒドロフランまたはジメチルスルホキシド等が好ましい。反応温度は、-70°C~100°Cが好ましく、-20°C~50°Cがより好ましい。反応時間は、1時間~48時間が好ましい。アルケン誘導体2の1,2-ジオール化反応を行うことにより、トリオール誘導体3を得ることができる。アルケンのジオール化反応としては、過マンガン酸カリウムを用いる反応、水銀塩存在下での水の付加Kucherov-Deniges法反応、触媒量の四酸化オスミウムと共酸化剤としてアミンオキシドとを用いるオスミウム酸化反応またはヨウ素を用いるジヒドロキシ化反応Prevoat法またはWoodward法等が挙げられる。これらの反応の溶媒としては、N,N-ジメチルホルムアミド、N-メチルピロリドン、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、塩化メチレン、アセトン、tブタノール、水もしくはそれらの混合溶媒等が挙げられる。反応温度は、0°C~100°Cであればよく、10°C~50°Cが好ましい。反応時間は、1時間~72時間が好ましい。トリオール誘導体3はN,N-ジメチルホルムアミド、N-メチルピロリドン、テトラヒドロフランまたはジメチルスルホキシド等の溶媒中、2,2-ジメトキシプロパンと触媒量の酸で処理することにより、あるいはアセトン中、酸触媒で処理することにより、アセタール誘導体4に変換することができる。酸触媒としては、p-トルエンスルホン酸、塩酸、硫酸、塩化亜鉛に代表されるルイス酸等が挙げられる。反応温度は、0°C~100°Cが好ましく、10°C~50°Cがより好ましい。反応時間は、1時間~48時間が好ましい。化合物4は、適当な酸化反応条件下で処理することによりケトン誘導体5に導くことができる。その場合の酸化反応としては、ジメチルスルホキシド等を活性化する向山酸化、Swern酸化、その変法として塩化オキザリルに代えてジシクロヘキシルカルボジイミド、トリフルオロ無水酢酸、無水酢酸もしくは三酸化硫黄ピリジン錯体を用いる方法、または、二酸化マンガンを用いる酸化反応が挙げられる。溶媒としては、ジオキサン、テトラヒドロフランまたは塩化メチレン等が挙げられる。反応温度は、-70°C~50°Cが好ましい。反応時間は、1時間~48時間が好ましい。ケトン誘導体5は、溶媒中、ヒドラジン誘導体R6-R5-NHNH2化合物Aと処理することにより化合物6へと変換することができる。化合物Aは、J.Am.Chem.Soc.1995,117,4228-4239等に記載されている方法により製造することができる。この反応に用いる溶媒としては、アルコール、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、ジオキサン等またはこれらの混合溶媒が挙げられる。反応温度は、-20°C~50°Cが好ましく、0°C~30°Cがより好ましい。化合物Aに換えてそれらの塩を用いる場合は、塩と当量または過剰量の塩基を用いればよい。塩基としては、トリエチルアミン等が挙げられる。反応時間は、1時間~48時間が好ましい。化合物6の6位アミノ基をベンジルオキシカルボニル基、tert-ブトキシカルボニル基等の適当な保護基で保護して化合物7に変換した後、アセタール誘導体7を硫酸、塩酸、酢酸等の酸で処理することによりジオール誘導体8を得ることができる。この反応に用いる溶媒としては、アルコール、水、ジオキサン等またはこれらの混合溶媒が挙げられる反応温度は、10°C~70°Cが好ましく、0°C~40°Cがより好ましい。反応時間は、1時間~48時間が好ましい。化合物8の水酸基を有機化学の通常の知識に基づいて、例えば、塩基存在下に塩化チオニル、臭化チオニル、トルエンスルホニルクロリド、メタンスルホニルクロリドまたはトリフルオロメタンスルホニルクロリド等で処理して、ハロゲン原子、トルエンスルホニルオキシ基、メタンスルホニルオキシ基またはトリフルオロメタンスルホニルオキシ基等の脱離基LG1に変換して化合物9を得ることができる反応温度は、78°C~30°Cが好ましく、-20°C~10°Cがより好ましい。反応時間は、1時間~48時間が好ましい。化合物9をN,N-ジメチルホルムアミド等の溶媒中で硫化水素ナトリウムと反応させた後、塩基で処理することにより、化合物10を得ることができる。または、化合物9をN,N-ジメチルホルムアミド等の溶媒中でチオ酢酸カリウムと反応させることによっても、化合物10を得ることができる。塩基としては、炭酸カリウムまたは炭酸水素カリウム等が挙げられ、炭酸カリウムが好ましい。反応温度は、-30°C~100°Cであればよく、-10°C~70°Cが好ましい。水酸基のオキソ基への変換化合物10から化合物11への変換方法としては、向山酸化、Swern酸化またはその変法として塩化オキザリルに換えてDCC、トリフルオロ無水酢酸、無水酢酸もしくは三酸化硫黄ピリジン錯体を用いる酸化反応を挙げることができる。それらの方法は日本化学会編第4版実験化学講座23巻,有機合成V丸善株式会社、1992年等に記載されている。酢酸エステル誘導体12は、所望のR1基を得るためにそれぞれ選択された市販の試薬とケトン誘導体11とのWittig反応を代表とする増炭素反応により製造ができる。増炭素反応は、公知の反応が好ましく、実験化学講座第四版、Vol.22.日本化学会編、丸善株式会社有機合成I:炭化水素ハロゲン化合物、P57~P69等を挙げることができる。酢酸アミド誘導体13は、酢酸エステル誘導体12にモノアルキルアミンをアルコール中で直接作用させ導くか、酢酸エステル誘導体12を加水分解して酢酸誘導体とした後、各種アミン市販品として入手可との縮合反応により導くことができる。エステル加水分解反応は、公知のアルカリ加水分解が好ましく、参考文献としては、実験化学講座第四版、Vol.22.日本化学会編、丸善株式会社有機合成IV:酸アミノ酸ペプチド、P6~P11等を挙げることができる。アミンとの縮合反応には、ペプチド合成法として一般的に用いられる方法を適用すればよい。ペプチド合成法としては、例えば、アジド法、酸クロリド法、DCCジシクロヘキシルカルボジイミド法、活性エステル法、カルボニルジイミダゾール法、水溶性カルボジイミドを使用する方法またはジエチルシアノホスフェートを使用する方法等を挙げることができる。これらの方法は、M.Bondansky,Y.S.KlausnerおよびM.A.Ondetti著PeptideSynthesisAWiley-intersciencepublication,NewYork,1976年、G.R.Pettit著SyntheticPeptidesElsevierScientificPublicationCompany,NewYork,1976年または日本化学会編第4版実験化学講座22巻,有機合成IV丸善株式会社、1992年等に記載されている。各種アミンとの縮合反応に用いる溶媒としては、N,N-ジメチルホルムアミド、N-メチルピロリドン、ピリジン、クロロホルム、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、ジオキサン、アセトニトリル等またはこれらの混合溶媒を挙げることができる。反応温度は、-20°C~50°Cであればよく、-10°C~30°Cが好ましい。化合物13は、そのR6-R5-基が例えば4-メトキシベンジル基などの保護基である場合には、酸処理、酸化処理または加水素分解した後、保護基を有するアミノ基R4の保護基に適った脱保護反応条件で処理することにより、化合物13aへ変換することができる。保護基に適った脱保護反応条件として、代表的な例を以下に述べる。例えば、保護基で置換されたアミノ基がアルカノイルアミノ基またはアロイルアミノ基である場合には、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムまたはアンモニア等の水溶液を用いて加水分解することによりアミノ基とすることができる。保護基で置換されたアミノ基がtert-ブトキシカルボニルアミノ基またはジ-tert-ブトキシカルボニルアミノ基である場合には、塩酸またはトリフルオロ酢酸等の酸で処理することによりアミノ基とすることができる。化合物13aは、溶媒中で塩基の存在下にJ.Med.Chem.1992,35,438-450等に記載されている方法により調製したピリジン誘導体化合物Bと処理することにより、化合物14へ導くことができる。溶媒としては、N,N-ジメチルホルムアミド、N-メチルピロリドン、テトラヒドロフランまたはジメチルスルホキシド等が挙げられる。塩基としては、水素化ナトリウム、ナトリウムエトキシド、カリウムtert-ブトキシド、水酸化カリウム、炭酸カリウムまたは炭酸セシウム等が挙げられる。反応温度は、0°C~100°Cであればよい。反応時間は、1時間~48時間であればよい。一方、化合物13のR6-R5-基が保護基ではなく、目的の置換基である場合、保護基を有するアミノ基R7を上記の脱保護反応条件で処理することにより、化合物14を得ることができる。[主工程2]一般式1中のXが単結合である化合物の製造方法を説明する。スキーム2[各式中、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7およびLG2は、それぞれ上記と同様に定義される。]ケトン誘導体11を無水トリフルオロメタンスルホン酸と塩基存在下で処理することにより、トリフレート体15へ変換できる。溶媒としては、塩化メチレン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、N,N-ジメチルホルムアミド等が好ましく、塩化メチレンがより好ましい。塩基としては、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウム、ナトリウムtert-ブトキシド、カリウムtert-ブトキシド、ピリジン、トリエチルアミン、DBU、ジイソプロピルエチルアミン等が好ましく、トリエチルアミンがより好ましい。反応温度は、-80°C~150°Cが好ましく、-10°C~40°Cがより好ましい。トリフレート体15は、アルコール中で金属触媒及び塩基の存在下、一酸化炭素とのカップリング反応を行うことにより、エステル体16へ変換できる。アルコールとしては、メタノール、エタノールが好ましい。金属触媒としてはパラジウム触媒が好ましく、例えば[1,1’-ビスジフェニルホスフィノフェロセン]ジクロロパラジウムII/ジクロロメタン錯体1:1、又はジクロロビストリフェニルホスフィンパラジウムII及びテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム0等を挙げることができる。金属触媒の使用量としては、トリフレート体15に対して0.01~0.2倍モル当量の範囲が好ましい。塩基としては、例えばリン酸三カリウム、炭酸カリウム、炭酸ナリウム、炭酸セシウム等の無機塩基類が好ましく、リン酸三カリウム及び炭酸ナリウムがより好ましい。塩基の使用量としては、トリフレート体15に対して1~100倍モル当量の範囲が好ましい。添加剤としては、1,1’-ビスジフェニルホスフィノフェロセンdppf、トリフェニルホスフィン等の有機リン化合物が挙げられ、添加剤の使用量としては、トリフレート体15に対して0.05~0.2モル当量の範囲が好ましい。反応温度としては、-10°C~溶媒の沸点の範囲が好ましく、0°C~100°Cの範囲がより好ましい。反応時間は、通常1~50時間程度である。以後の工程化合物17から化合物18への変換は、スキーム1で示した方法化合物13から化合物14への変換と同様な処理を行うことにより製造することができる。本発明の化合物またはその塩は、HSP90を阻害するので、HSP90阻害剤、HSP90のATPase活性阻害剤、HSP90とATPの結合阻害剤として用いることができ、本発明の化合物またはその塩を含有する医薬、特に好ましくは抗癌剤として用いることができる。HSP90のATPase活性は、当業者に通常用いられるATPaseアッセイを用いて調べることができる。例えば、HSP90のATPase活性は、下記の試験例1に記載されるように、試験化合物の存在下または非存在下で、組換えHSP90蛋白質およびATPを用いて検出することができる。あるいは、ATPaseアッセイは、例えば、AnalyticalBiochemistry327,176-1832004あるいはNature425,407-4102003に記載されている方法を実施すればよい。HSP90の発現の阻害は、当業者に通常用いられるノーザンブロッティング、ウェスタンブロッティングまたはELISA等を用いて調べることができる。例えば、試験化合物の存在下または非存在下で培養した細胞からmRNAを回収してノーザンブロッティングを行い、試験化合物の非存在下と比較して試験化合物の存在下で培養した細胞から回収したmRNAにおけるHSP90mRNA量が減少している場合、該試験化合物をHSP90の発現を阻害する化合物であると同定する。あるいは、例えば、Cancer.Res.65,6401-64082005に記載されている方法でウェスタンブロッティングを実施し、HSP90の蛋白質量を調べればよい。HSP90とクライアント蛋白質の結合の阻害は、例えば、当業者に通常用いられる免疫沈降およびウェスタンブロッティングを用いて調べることができる。免疫沈降およびウェスタンブロッティングは、例えば、J.Biol.Chem.277,10346-103532002に記載されている方法を実施すればよい。HSP90とコシャペロンやイムノフィリン類の結合を阻害する化合物は、例えば、当業者に通常用いられる免疫沈降およびウェスタンブロッティングを用いて調べることができる。例えば、Nature425,407-4102003に記載されている方法を実施し、試験化合物の存在下または非存在下で、HSP90とコシャペロンやイムノフィリン類の結合を調べればよい。HSP90とATPの結合の阻害は、例えば、標識したATPとHSP90との結合試験を用いて調べることができる。例えば、J.Biol.Chem.272,18608-186131997に記載されている方法を実施し、試験化合物の存在下または非存在下で、HSP90と標識ATPの結合を調べればよい。HSP90のコンフォメーション変化の阻害は、例えば、bis-ANS1,1’-bis4-anilino-5-naphthalenesulfonicacidを利用したコンフォメーショナルアッセイconformationalassayを用いて調べることができる。コンフォメーショナルアッセイは、例えば、J.Med.Chem.47,3865-38732004に記載されている方法を実施すればよい。細胞の増殖阻害活性は、当業者に通常用いられる増殖阻害試験法を用いて調べることができる。細胞の増殖阻害活性は、例えば、下記の試験例2に記載されるように、試験化合物の存在下または非存在下における細胞例えば、腫瘍細胞の増殖の程度を比較することによって実施することができる。増殖の程度は、例えば、生細胞を測定する試験系を用いて調べることができる。生細胞の測定方法としては、例えば、[3H]-チミジンの取り込み試験、BrdU法またはMTTアッセイ等が挙げられる。また、invivoでの抗腫瘍活性は、当業者に通常用いられる抗腫瘍試験法を用いて調べることができる。例えば、マウス、ラット等に各種腫瘍細胞を移植し、移植細胞の生着が確認された後に、本発明の化合物を経口投与、静脈内投与等し、数日~数週間後に、薬剤無投与群における腫瘍増殖と化合物投与群における腫瘍増殖とを比較することにより本発明のinvivoでの抗腫瘍活性を確認することができる。本発明の化合物は、腫瘍または癌、例えば、肺癌、消化器癌、卵巣癌、子宮癌、乳癌、肝癌、頭頚部癌、血液癌、腎癌、睾丸腫瘍、前立腺癌、多発性骨髄腫、悪性黒色腫等の皮膚癌、肉腫等の治療に使用することができる。本発明の化合物は、HSP90阻害作用を有するので、HSP90依存性が上昇している癌の治療に用いることができる。HSP90への依存性が上昇している癌としては、HSP90クライアント蛋白質に依存している癌、HSP90のクライアント蛋白質が過剰発現している癌、HSP90のクライアント蛋白質の変異がみられる癌等が挙げられ、より具体的には、例えば、Her2、c-Met、Flt3等が過剰発現している癌やc-kit、PDGFR、Raf等の変異がみられる癌が挙げられるがこれらに限定されない。さらには、HSP90クライアント蛋白質が属する細胞内シグナル伝達経路には、癌に関与しているとされる因子群RAS-MAPK、PI3K、テロメレース等が多く存在し、HSP90を阻害すれば、これら因子へのシグナル伝達が阻害され、結果として上記細胞内シグナル伝達経路の活性化をも阻害することとなるので、HSP90阻害剤である本発明の化合物は、当該観点からも様々な癌の治療に好適に用いることができる。本発明の医薬組成物は、本発明の化合物と薬学的に許容し得る担体を含み、静脈内注射、筋肉内注射、皮下注射等の各種注射剤として、あるいは、経口投与または経皮投与等の種々の方法によって投与することができる。薬学的に許容し得る担体とは、本発明の化合物または本発明の化合物を含む組成物を、ある器官または臓器から他の器官または臓器に輸送することに関与する、薬学的に許容される材料例えば、賦形剤、希釈剤、添加剤、溶媒等を意味する。製剤の調製方法としては投与法に応じ適当な製剤例えば、経口剤または注射剤を選択し、通常用いられている各種製剤の調製法にて調製できる。経口剤としては、例えば、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、トローチ剤、溶液剤、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤、または油性ないし水性の懸濁液等を例示できる。経口投与の場合では遊離体のままでも、塩の型のいずれでもよい。水性製剤は薬学的に許容される酸と酸付加物を形成させるか、ナトリウム等のアルカリ金属塩とすることで調製できる。注射剤の場合は製剤中に安定剤、防腐剤または溶解補助剤等を使用することもできる。これらの補助剤等を含むこともある溶液を容器に収納後、凍結乾燥等によって固形製剤として用時調製の製剤としてもよい。また、一回投与量を一の容器に収納してもよく、また複数回投与量を一の容器に収納してもよい。固形製剤としては、例えば、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、またはトローチ剤が挙げられる。これらの固形製剤は、本発明の化合物とともに薬学的に許容し得る添加物を含んでもよい。添加物としては、例えば、充填剤類、増量剤類、結合剤類、崩壊剤類、溶解促進剤類、湿潤剤類または滑沢剤類が挙げられ、これらを必要に応じて選択して混合し、製剤化することができる。液体製剤としては、例えば、溶液剤、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤、または懸濁剤が挙げられる。これらの液体製剤は、本発明の化合物とともに薬学的に許容し得る添加物を含んでもよい。添加物としては、例えば、懸濁化剤または乳化剤が挙げられ、これらを必要に応じて選択して混合し、製剤化することができる。本発明の化合物は、哺乳類、特にヒトの癌治療に用いることができる。投与量および投与間隔は、疾患の場所、患者の身長、体重、性別または病歴によって、医師の判断により適宜選択され得る。本発明の化合物をヒトに投与する場合、投与量の範囲は、1日当たり、約0.01mg/kg体重~約500mg/kg体重、好ましくは、約0.1mg/kg体重~約100mg/kg体重である。ヒトに投与する場合、好ましくは、1日あたり1回、あるいは2から4回に分けて投与され、適当な間隔で繰り返すのが好ましい。また、1日量は、医師の判断により必要によっては上記の量を超えてもよい。本発明の化合物は他の抗腫瘍剤と併用して用いてもよい。例えば、抗腫瘍抗生物質、抗腫瘍性植物成分、BRM生物学的応答性制御物質、ホルモン、ビタミン、抗腫瘍性抗体、分子標的薬、その他の抗腫瘍剤等が挙げられる。より具体的に、アルキル化剤としては、例えば、ナイトロジェンマスタード、ナイトロジェンマスタードN-オキシドもしくはクロラムブチル等のアルキル化剤、カルボコンもしくはチオテパ等のアジリジン系アルキル化剤、ディブロモマンニトールもしくはディブロモダルシトール等のエポキシド系アルキル化剤、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ニムスチンハイドロクロライド、ストレプトゾシン、クロロゾトシンもしくはラニムスチン等のニトロソウレア系アルキル化剤、ブスルファン、トシル酸インプロスルファンまたはダカルバジン等が挙げられる。各種代謝拮抗剤としては、例えば、6-メルカプトプリン、6-チオグアニンもしくはチオイノシン等のプリン代謝拮抗剤、フルオロウラシル、テガフール、テガフールウラシル、カルモフール、ドキシフルリジン、ブロクスウリジン、シタラビン若しくはエノシタビン等のピリミジン代謝拮抗剤、メトトレキサートもしくはトリメトレキサート等の葉酸代謝拮抗剤等が挙げられる。抗腫瘍性抗生物質としては、例えば、マイトマイシンC、ブレオマイシン、ペプロマイシン、ダウノルビシン、アクラルビシン、ドキソルビシン、ピラルビシン、THP-アドリアマイシン、4’-エピドキソルビシンもしくはエピルビシン等のアントラサイクリン系抗生物質抗腫瘍剤、クロモマイシンA3またはアクチノマイシンD等が挙げられる。抗腫瘍性植物成分としては、例えば、ビンデシン、ビンクリスチン若しくはビンブラスチン等のビンカアルカロイド類、パクリタキセル、ドセタキセル等のタキサン類、またはエトポシドもしくはテニポシド等のエピポドフィロトキシン類が挙げられる。BRMとしては、例えば、腫瘍壊死因子またはインドメタシン等が挙げられる。ホルモンとしては、例えば、ヒドロコルチゾン、デキサメタゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、プラステロン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、オキシメトロン、ナンドロロン、メテノロン、ホスフェストロール、エチニルエストラジオール、クロルマジノンまたはメドロキシプロゲステロン等が挙げられる。ビタミンとしては、例えば、ビタミンCまたはビタミンA等が挙げられる。抗腫瘍性抗体、分子標的薬としては、トラスツズマブ、リツキシマブ、セツキシマブ、ニモツズマブ、デノスマブ、ベバシズマブ、インフリキシマブ、メシル酸イマチニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、スニチニブ、ラパチニブ、ソラフェニブ等が挙げられる。その他の抗腫瘍剤としては、例えば、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、タモキシフェン、カンプトテシン、イホスファミド、シクロホスファミド、メルファラン、L-アスパラギナーゼ、アセクラトン、シゾフィラン、ピシバニール、プロカルバジン、ピポブロマン、ネオカルチノスタチン、ヒドロキシウレア、ウベニメクスまたはクレスチン等が挙げられる。本発明には、本発明化合物又はその塩を投与することを特徴とする癌の予防方法及び/または治療方法も含まれる。さらに、本発明には、前記医薬を製造するための本発明の化合物、その塩又はそれらの溶媒和物の使用も含まれる。以下に示す実施例によって本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではなく、これらはいかなる意味においても限定的に解釈されない。また、本明細書において、特に記載のない試薬、溶媒および出発材料は、市販の供給源から容易に入手可能である。実施例111-2-アミノ-4,6-ジクロロピリミジン-5-イル-3-ブテン-1-オール市販の2-アミノ-4,6-ジクロロピリミジン-5-カルボアルデヒド1.92gとN,N-ジメチルホルムアミド20mlからなる混合物に、インジウム粉末0.23gと亜鉛粉末1.31gを加えた後、室温でヨウ化ナトリウム0.15gとアリルブロミド1.73mlを加え、3時間撹拌した。反応混合物をセライト濾過し、濾液に酢酸エチルを加え、1N塩酸、飽和食塩水の順で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥、濃縮し、残渣にヘキサンを加え析出物を濾取し、標題化合物1.75gを固体として得た。1H-NMRDMSO-D6δ:2.55-2.692H,m,4.95-5.093H,m,5.371H,d,J=4.1Hz,5.67-5.771H,m,7.422H,s.21-2-アミノ-4,6-ジクロロピリミジン-5-イル-2-2,2-ジメチル-[1,3]ジオキソラン-4-イルエタン-1-オール1-2-アミノ-4,6-ジクロロピリミジン-5-イル-3-ブテン-1-オール57.24g、N-メチルモルホリン-N-オキシド147.6g、テトラヒドロフラン500ml、アセトン500ml、水500mlおよび四酸化オスミウム62mgからなる混合物を室温で2日間撹拌した。原料消失を確認した後、飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液1Lを加え、反応混合物を減圧下で約1.5Lまで濃縮した。残渣に塩化ナトリウムを加えて飽和させ、テトラヒドロフランで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過後、濾液を減圧下で濃縮して溶媒を留去した。得られた残渣にN,N-ジメチルホルムアミド500ml、2,2-ジメトキシプロパン210mlおよびp-トルエンスルホン酸一水和物18.61gを加え、室温にて14時間撹拌した。反応混合物に飽和重曹水1Lと水1Lを加えた後、酢酸エチルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾液を減圧下で約100mlまで濃縮し、残渣にヘキサンを加え析出物を濾取し、標題化合物53.88gを固体として得た。1H-NMRDMSO-D6δ:1.22-1.326H,m,1.72-2.232H,m,2.501H,s,3.501H,td,J=14.2,6.9Hz,4.22-3.922H,m,5.06-5.362H,m,7.432H,d,J=12.8Hz.ESI-MSm/z:308MH.31-2-アミノ-4,6-ジクロロピリミジン-5-イル-2-2,2-ジメチル-[1,3]ジオキソラン-4-イルエタン-1-オン氷浴冷却下、1-2-アミノ-4,6-ジクロロピリミジン-5-イル-2-2,2-ジメチル-[1,3]ジオキソラン-4-イルエタン-1-オール74.70gとジメチルスルホキシド600mlからなる混合物に無水酢酸149mlを室温で15分かけて滴下し、同温で18時間撹拌した。原料消失を確認した後、反応液を氷水にあけ、析出する固体を濾取し、標題化合物68.26gを得た。1H-NMRCDCl3δ:1.373H,s,1.423H,s,2.98-3.061H,m,3.32-3.401H,m,3.67-3.721H,m,4.25-4.301H,m,4.57-4.641H,m,5.722H,s.ESI-MSm/z:306MH.44-クロロ-3-[2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-イルメチル]-1-4-メトキシベンジル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-6-アミン氷浴冷却下、1-2-アミノ-4,6-ジクロロピリミジン-5-イル-2-2,2-ジメチル-[1,3]ジオキソラン-4-イルエタン-1-オン61.23g、米国特許US2003/18197号に記載の方法により製造した4-メトキシベンジル-ヒドラジン塩酸塩41.50gおよびジクロロメタン600mlからなる混合物に、トリエチルアミン83.68mlを30分間かけて加えた。徐々に昇温させて17時間撹拌した後、反応混合物に10クエン酸水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮して得られた残渣に5クエン酸水溶液を加え、析出物を濾取、水で洗浄して、標題化合物73.84gを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:1.363H,s,1.433H,s,3.111H,dd,J=14.7,8.1Hz,3.431H,dd,J=14.7,5.2Hz,3.73-3.784H,m,4.081H,dd,J=8.1,6.0Hz,4.54-4.611H,m,4.772H,brs,5.222H,s,6.832H,d,J=8.5Hz,7.242H,d,J=8.5Hz.ESI-MSm/z:404MH.5ジ-tert-ブチル{4-クロロ-3-[2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-イルメチル]-1-4-メトキシベンジル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-6-イル}イミドジカーボネート4-クロロ-3-[2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-イルメチル]-1-4-メトキシベンジル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-6-アミン72.83gとテトラヒドロフラン700mlからなる混合物に、4-ジメチルアミノピリジン2.20gとジ-tert-ブチルジカーボネート86.59gを加えた後、室温にて12時間撹拌した。反応混合物を濾過した後、濾液を減圧下で濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー酢酸エチル-ヘキサンで精製することにより、標題化合物70.00gをアモルファスとして得た。1H-NMRCDCl3δ:1.373H,s,1.403H,s,1.44-1.4618H,m,3.21-3.291H,m,3.48-3.551H,m,3.74-3.814H,m,4.09-4.151H,m,4.58-4.661H,m,5.482H,dd,J=17.3,15.1Hz,6.812H,d,J=7.8Hz,7.27-7.302H,m.ESI-MSm/z:604MH.6ジ-tert-ブチル[4-クロロ-3-2,3-ジヒドロキシプロピル-1-4-メトキシベンジル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-6-イル]イミドジカーボネートジ-tert-ブチル{4-クロロ-3-[2,2-ジメチル-1,3-ジオキソラン-4-イルメチル]-1-4-メトキシベンジル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-6-イル}イミドジカーボネート53.85gをアセトニトリル500mlに溶かし、塩化銅II二水和物30.39gを加え、室温で2時間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー酢酸エチル-ヘキサンで精製することにより、標題化合物37.70gをアモルファスとして得た。1H-NMRCDCl3δ:1.4618H,s,3.151H,d,J=3.7Hz,3.23-3.332H,m,3.62-3.825H,m,4.26-4.341H,m,5.492H,t,J=15.9Hz,6.822H,d,J=8.1Hz,7.25-7.302H,m.ESI-MSm/z:564MH.7ジ-tert-ブチル[8-ヒドロキシ-2-4-メトキシベンジル-2,7,8,9-テトラヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-4-イル]イミドジカーボネート氷浴冷却下、ジ-tert-ブチル[4-クロロ-3-2,3-ジヒドロキシプロピル-1-4-メトキシベンジル-1H-ピラゾロ[3,4-d]ピリミジン-6-イル]イミドジカーボネート28.00g、2,4,6-コリジン16.53mlおよび脱水ジクロロメタン400mlからなる混合物に、メタンスルホニルクロリド4.23mlを滴下して加えた後、4°Cで15時間撹拌した。反応混合物に10クエン酸水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥、減圧下濃縮した。得られた残渣をN,N-ジメチルホルムアミド300mlに溶解させ、氷浴冷却下、硫化水素ナトリウム一水和物5.52gを加えた後、室温で1.5時間撹拌した。反応混合物に炭酸カリウム10.29mgを加え、50°Cに加熱してさらに5時間撹拌した。反応混合物に酢酸エチルを加え、10クエン酸水溶液、飽和食塩水の順に洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー酢酸エチル-ヘキサンで精製して、標題化合物20.59gを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:1.4518H,s,2.391H,brs,3.29-3.514H,m,4.581H,brs,3.763H,s,5.42-5.492H,m,6.822H,d,J=8.6Hz,7.302H,d,J=8.6Hz.ESI-MSm/z:544MH.84-[ビスtert-ブトキシカルボニルアミノ]-2-4-メトキシベンジル-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イルアセテート窒素雰囲気下、ジ-tert-ブチル[8-ヒドロキシ-2-4-メトキシベンジル-2,7,8,9-テトラヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-4-イル]イミドジカーボネート8.17g、ジメチルスルホキシド74mlおよびピリジン12mlからなる混合物に無水酢酸14mlを氷冷下で滴下し、30分間撹拌した後、室温で15時間撹拌した。原料消失を確認した後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー酢酸エチル-ヘキサンで精製して、標題化合物6.15gをアモルファスとして得た。1H-NMRCDCl3δ:1.4418H,s,2.263H,s,3.773H,s,3.882H,s,5.502H,s,6.681H,s,6.832H,d,J=8.8Hz,7.312H,d,J=8.8Hz.ESI-MSm/z:584MH.9ジ-tert-ブチル[2-4-メトキシベンジル-8-オキソ-2,7,8,9-テトラヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-4-イル]イミドジカーボネート氷浴冷却下、4-[ビスtert-ブトキシカルボニルアミノ]-2-4-メトキシベンジル-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イルアセテート6.15g、メタノール200mlおよび炭酸カリウム0.73gの混合物を1.5時間撹拌した。原料消失を確認した後、反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、減圧下で濃縮して標題化合物5.70gをアモルファスとして得た。1H-NMRCDCl3δ:1.4618H,s,3.842H,s,3.773H,s,4.232H,s,5.482H,s,6.832H,d,J=8.6Hz,7.322H,d,J=8.6Hz.ESI-MSm/z:542MH.10エチル{4-[ビスtert-ブトキシカルボニルアミノ]-2-4-メトキシベンジル-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}アセテートジ-tert-ブチル[2-4-メトキシベンジル-8-オキソ-2,7,8,9-テトラヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-4-イル]イミドジカーボネート5.19g、エチルトリフェニルホスファニリデンアセテート3.51gおよびトルエン300mlからなる混合物を65°Cにて13時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー酢酸エチル-へキサンで精製することにより、標題化合物3.78gをアモルファスとして得た。1H-NMRCDCl3δ:1.293H,t,J=7.1Hz,1.69-1.771H,m,2.37-2.401H,m,2.46-2.521H,m,2.68-2.712H,m,4.202H,q,J=7.1Hz,5.10-5.131H,m,5.202H,brs.ESI-MSm/z:612MH112-4-アミノ-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル-N-メチルアセタミドトリフルオロ酢酸塩エチル{4-[ビスtert-ブトキシカルボニルアミノ]-2-4-メトキシベンジル-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}アセテート2.2gを40メチルアミン/メタノール溶液40mlに溶解し、室温で2時間撹拌した。反応完結をLC-MSにて確認し、溶媒を減圧留去した。得られた残渣にアニソール2mlとトリフルオロ酢酸40mlを加え、65°Cで15時間撹拌した。反応液を減圧下で濃縮し、残渣にイソプロピルエーテル-エーテル混合液を加え、析出物を濾取し、標題化合物1.53gを固体として得た。ESI-MSm/z:277MH.125-クロロ-4-ヒドロキシ-6-メチルニコチニックアシッド市販の4-ヒドロキシ-6-メチル-ニコチニックアシッド300mgをアセトニトリル3mlに懸濁し、N-クロロスクシンイミド380mgを加え、室温で30分間撹拌した後、45分間加熱還流した。原料消失を確認した後、反応液を氷冷し、析出物を濾取し標題化合物324mgを固体として得た。1H-NMRCD3ODδ:2.563H,s,8.501H,s.ESI-MSm/z:188MH13メチル4,5-ジクロロ-6-メチルニコチネート5-クロロ-4-ヒドロキシ-6-メチルニコチニックアシッド320mgにオキシ塩化リン1.13mlを加え、2時間加熱還流した。反応液を減圧濃縮し、残渣に氷冷下メタノール3mlを滴下し、室温で30分間撹拌した後、減圧濃縮した。残渣に飽和重曹水を氷冷中加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥した後、溶媒を留去して標題化合物の粗体436mgを固体として得た。ESI-MSm/z:220MH14メチル5-クロロ-4-メトキシ-6-メチルニコチネート粗メチル4,5-ジクロロ-6-メチルニコチネート380mgをメタノール3mlに溶解し、窒素気流下、氷冷にてナトリウムメトキシド120mgを加えた。徐々に室温まで昇温し、18時間撹拌した。原料消失を確認した後、氷冷下、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、クロロホルムにて抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥した後、溶媒を留去してシリカゲルクロマトグラフィー酢酸エチル-ヘキサンにて精製し標題化合物210mgを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.673H,s,3.954H,s,4.003H,s,8.761H,s.ESI-MSm/z:216MH155-クロロ-4-メトキシ-6-メチルピリジン-3-イルメタノールメチル5-クロロ-4-メトキシ-6-メチルニコチネート1.0gをメタノール30mlに溶解し、水素化ホウ素ナトリウム1.75gを加え、1時間加熱還流した。氷冷下、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、クロロホルムにて3回抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥した後、溶媒を留去して標題化合物0.92gを油状物質として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.633H,s,4.003H,s,4.712H,brs,8.331H,sESI-MSm/z:188MH163-クロロ-5-クロロメチル-4-メトキシ-2-メチルピリジン5-クロロ-4-メトキシ-6-メチルピリジン-3-イルメタノール520mg,をクロロホルム20mlに溶解し、氷冷下、塩化チオニル0.38mlを加え、同温で3時間撹拌した。反応液を濃縮し、酢酸エチルを加え、飽和重曹水、水、飽和食塩水の順で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥した後、溶媒を留去してシリカゲルクロマトグラフィー酢酸エチル-ヘキサンにて精製し、標題化合物550mgを油状物質として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.643H,s,4.053H,s,4.612H,s,8.351H,s.ESI-MSm/z:206MH173-クロロ-4-メトキシ-2,5-ジメチルピリジン3-クロロ-5-クロロメチル-4-メトキシ-2-メチルピリジン550mgをメタノール10mlに溶解し、10Pd炭素50mgを加え、氷冷下、3時間常圧接触水素添加を行った。触媒を濾別し、メタノールを減圧下留去した。クロロホルムにて抽出し、有機層を飽和重曹水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムにて乾燥した後、溶媒を留去してシリカゲルクロマトグラフィー酢酸エチル-ヘキサンにて精製し、標題化合物365mgを油状物質として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.253H,s,2.593H,s,3.893H,s,8.161H,s.ESI-MSm/z:172MH183-クロロ-4-メトキシ-2,5-ジメチルピリジン1-オキシド3-クロロ-4-メトキシ-2,5-ジメチルピリジン181mgをジクロロメタン5mlに溶解し、過酸化尿素169mgと無水フタル酸219mgを加えた。室温で2.5時間撹拌した。氷冷にて飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで希釈し、水層をクロロホルムで2回抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥した後、溶媒を留去して標題化合物181mgを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.243H,s,2.623H,s,3.873H,s,8.071H,s.ESI-MSm/z:188MH193-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメタノール3-クロロ-4-メトキシ-2,5-ジメチルピリジン1-オキシド530mgをジクロロメタン15mlに懸濁し、氷冷にて無水トリフルオロ酢酸0.39mlを加え、室温で3時間撹拌した。クロロホルムで希釈し飽和重曹水で洗浄し、水槽をクロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥した後、溶媒を留去して標題化合物521mgを油状物質として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.293H,s,3.933H,s,4.291H,brs,4.72-4.742H,m,8.261H,s.ESI-MSm/z:188MH203-クロロ-2-クロロメチル-4-メトキシ-5-メチルピリジン塩酸塩3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメタノール530mgをクロロホルム20mlに溶解し、氷冷下、塩化チオニル1.03mlを滴下し、室温で3時間撹拌した。反応液を濃縮し、エーテル-へキサンの混合溶媒洗浄により標題化合物410mgを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.473H,s,4.323H,s,5.092H,s,8.541H,s.ESI-MSm/z:206MH212-{4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-メチルアセタミド2-4-アミノ-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル-N-メチルアセタミドトリフルオロ酢酸塩28mg、3-クロロ-2-クロロメチル-4-メトキシ-5-メチルピリジン塩酸塩36mgおよび炭酸カリウム69mgにジメチルホルムアミド1mlを加え、60°Cで2時間30分撹拌した。不溶物を濾別後、溶媒を窒素気流下留去した。得られた残渣をジメチルスルホキシド1mlに溶解して分取逆相HPLCにて精製し、溶媒を減圧留去することにより標題化合物27.0mgを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.244H,s,2.823H,d,J=4.9Hz,3.272H,s,3.802H,s,3.913H,s,5.212H,s,5.652H,s,5.871H,s,6.701H,s,8.161H,s.ESI-MSm/z:446MH.実施例215-ブロモ-2,3-ジメチル-4-ニトロピリジン1-オキサイド米国特許US5250527号に記載の方法により製造した5-ブロモ-2,3-ジメチルピリジン1-オキサイド4.61gを濃硫酸10mlに溶解し、氷冷撹拌下発煙硝酸24mlと発煙硫酸13mlの混液を滴下した。そのまま30分撹拌後90°Cで1時間撹拌した。反応液を放冷後氷水中に投入し、氷水浴撹拌下、ジクロロメタンを加え、アンモニア水を添加して中和した。ジクロロメタンで抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、粗製の標題化合物4.80gを固体として得た。25-ブロモ-4-メトキシ-2,3-ジメチルピリジン1-オキサイド5-ブロモ-2,3-ジメチル-4-ニトロピリジン1-オキサイド4.80gのメタノール20ml溶液に、氷水浴下、1Mナトリウムメトキシド-メタノール溶液30mlを加えて、室温にて一晩撹拌した。反応液を濃縮して、残渣をジクロロメタンおよび水に分配して、分液した。有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥後、ろ液を濃縮して、粗製の標題化合物4.91gを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.303H,s,2.473H,s,3.843H,s,8.361H,s.ESI-MSm/z:232MH35-ブロモ-4-メトキシ-3-メチルピリジン-2-イルメタノール5-ブロモ-4-メトキシ-2,3-ジメチルピリジン1-オキサイド4.91gをジクロロメタン60mlに溶解し、室温にて無水トリフルオロ酢酸20mlを加え、一晩撹拌した。反応液を濃縮後、メタノール50mlに溶解し、50°Cにて1時間撹拌した。反応液を濃縮後、残渣をジクロロメタンに溶解し、飽和重曹水にて洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥後、ろ液を濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン-酢酸エチルにて精製し、標題化合物3.43gを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.173H,s,3.893H,s,4.622H,s,8.501H,s.ESI-MSm/z:232MH45-ブロモ-2-{[tert-ブチルジメチルシリル]オキシ}メチル-4-メトキシ-3-メチルピリジン5-ブロモ-4-メトキシ-3-メチルピリジン-2-イルメタノール500mgをジクロロメタン10mlに溶解し、氷水浴下、t-ブチルジメチルシリルクロリド487mg、トリエチルアミン0.48ml、ジメチルアミノピリジン30mgを加えて、室温にて一晩撹拌した。反応液をジクロロメタンにて希釈して、飽和重曹水にて洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥後、ろ液を濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン-酢酸エチルにて精製し、標題化合物743mgを油状物質として得た。1H-NMRCDCl3δ:0.076H,s,0.899H,s,2.373H,s,3.873H,s,4.772H,s,8.431H,s.52-{[tert-ブチルジメチルシリル]オキシ}メチル-5-フルオロ-4-メトキシ-3-メチルピリジン5-ブロモ-2-{[tert-ブチルジメチルシリル]オキシ}メチル-4-メトキシ-3-メチルピリジン734mgをテトラヒドロフラン30mlに溶解し、-110°Cにてブチルリチウム1.59M溶液、2.42mlを滴下した。そのまま1時間撹拌後、同温にてN-フルオロベンゼンスルホンイミド3.03gのテトラヒドロフラン5ml溶液を滴下した。徐々に3時間で-68°Cまで昇温して、その後、室温にて30分間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、ジクロロメタンにて抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥後、ろ液を濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン-酢酸エチルにて精製し、標題化合物353mgを油状物質として得た。1H-NMRCDCl3δ:0.066H,s,0.899H,s,2.283H,s,4.073H,d,J=3.7Hz,4.752H,s,8.151H,d,J=3.7Hz.ESI-MSm/z:286MH.65-フルオロ-4-メトキシ-3-メチルピリジン-2-イルメタノール2-{[tert-ブチルジメチルシリル]オキシ}メチル-5-フルオロ-4-メトキシ-3-メチルピリジン353mgのテトラヒドロフラン10ml溶液に、氷水浴下、フッ化テトラブチルアンモニウム1M溶液、1.49mlを加えて、室温にて1時間撹拌した。反応液をジクロロメタンにて希釈して、水洗した。有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥後、ろ液を濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン-酢酸エチルで精製し、標題化合物150mgを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.083H,s,4.103H,d,J=4.1Hz,4.521H,s,4.612H,s,8.221H,d,J=4.1Hz.ESI-MSm/z:172MH.72-クロロメチル-5-フルオロ-4-メトキシ-3-メチルピリジン塩酸塩5-フルオロ-4-メトキシ-3-メチルピリジン-2-イルメタノール135mgを用いて実施例120と同様の方法で合成し、標題化合物154mgを固体として得た。ESI-MSm/z:190MH.82-{4-アミノ-2-[5-フルオロ-4-メトキシ-3-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-メチルアセタミド2-4-アミノ-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル-N-メチルアセタミドトリフルオロ酢酸塩60mgのN,N-ジメチルホルムアミド5ml溶液に、炭酸カリウム85mgおよび2-クロロメチル-5-フルオロ-4-メトキシ-3-メチルピリジン塩酸塩52mgを加え、50°Cにて3.5時間撹拌した。不溶物を濾別後、ろ液を濃縮して、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィークロロホルム-メタノールにて精製し、標題化合物30mgを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.273H,s,2.833H,d,J=4.6Hz,3.272H,s,3.782H,s,4.083H,d,J=4.6Hz,5.132H,s,5.492H,s,5.741H,brs,6.701H,s,8.191H,d,J=3.4Hz.ESI-MSm/z:430MH.元素分析値C19H20FN7O2S0.5H2Oとして計算値:C,52.05;H,4.82;N,22.36;F,4.33;S,7.32.実測値:C,52.27;H,4.79;N,22.10;F,4.44;S,7.05.実施例313-ブロモ-2,5-ジメチル-4-ニトロピリジン1-オキサイド市販の3-ブロモ-2,5-ジメチルピリジン1-オキサイド2.35gを用いて実施例21と同様の方法で合成し、標題化合物1.08gを固体として得た。ESI-MSm/z:247MH.23-ブロモ-4-メトキシ-2,5-ジメチルピリジン1-オキサイド3-ブロモ-2,5-ジメチル-4-ニトロピリジン1-オキサイド1.08gを用いて実施例22と同様の方法で合成し、粗製の標題化合物990mgを固体として得た。ESI-MSm/z:234MH.33-ブロモ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメタノール3-ブロモ-4-メトキシ-2,5-ジメチルピリジン1-オキサイド990mgを用いて実施例23と同様の方法で合成し、標題化合物931mgを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.333H,s,3.903H,s,4.381H,brs,4.692H,s,8.281H,s.ESI-MSm/z:234MH.43-ブロモ-2-クロロメチル-4-メトキシ‐5-ピリジン塩酸塩3-ブロモ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメタノール150mgを用いて実施例120と同様の方法で合成し、標題化合物161mgを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.503H,s,4.213H,s,5.182H,s,8.471H,s.ESI-MSm/z:250and252MH.52-{4-アミノ-2-[3-ブロモ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-メチルアセタミド2-4-アミノ-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル-N-メチルアセタミドトリフルオロ酢酸塩150mgのN,N-ジメチルホルムアミド5ml溶液に、炭酸カリウム160mgおよび3-ブロモ-2-クロロメチル-4-メトキシ-5-ピリジン塩酸塩166mgを加え、50°Cにて一晩撹拌した。反応液をジクロロメタンで希釈して水洗した。有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥後、ろ液を濃縮して、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィークロロホルム-メタノールにて精製し、標題化合物105mgを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.273H,s,2.833H,d,J=4.6Hz,3.282H,s,3.812H,s,3.883H,s,5.08-5.142H,brm,5.662H,s,5.771H,brs,6.721H,s,8.171H,s.ESI-MSm/z:492MH.元素分析値C19H20BrN7O2S0.25H2O0.2ジオキサンとして計算値:C,46.40;H,4.34;N,19.13;Br,15.59;S,6.45.実測値:C,46.21;H,4.07;N,19.16;Br,15.70;S,6.27.実施例41tert-ブチル[8-2-アミノ-2-オキソエチル-2-4-メトキシベンジル-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-4-イル]カルバメートエチル{4-[ビスtert-ブトキシカルボニルアミノ]-2-4-メトキシベンジル-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}アセテート600mgのエタノール5ml溶液に、1N水酸化ナトリウム水溶液3ml加えて、室温にて一晩撹拌した。反応液に1N塩酸3mlを加えて、溶液を濃縮して、残渣にジクロロメタンを加えて抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥後、ろ液を濃縮してカルボン酸576mgを得た。カルボン酸576mgをアセトニトリル10mlに溶解し、塩化アンモニウム157mg、トリエチルアミン0.2ml、1-エチル-3-3-ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩282mgを加えて室温で3日間撹拌した。反応液をジクロロメタンにて希釈して、水を加え、分液操作をおこなった。有機層を飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィークロロホルム-メタノールにて精製し、標題化合物252mgを固体として得た。ESI-MSm/z:483MH22-4-アミノ-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イルアセタミドトリフルオロ酢酸塩tert-ブチル[8-2-アミノ-2-オキソエチル-2-4-メトキシベンジル-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-4-イル]カルバメート256mgを用いて実施例111と同様の方法で合成し、標題化合物162mgを固体として得た。ESI-MSm/z:263MH.32-{4-アミノ-2-[3-ブロモ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-yl}アセタミドメシル酸塩2-4-アミノ-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イルアセタミドトリフルオロ酢酸塩100mgのN,N-ジメチルホルムアミド5ml溶液に、炭酸カリウム110mgおよび3-ブロモ-2-クロロメチル-4-メトキシ-5-ピリジン塩酸塩114mgを加え、50°Cにて一晩撹拌した。反応液をジクロロメタンで希釈して水洗した。有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥後、ろ液を濃縮して、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィークロロホルム-メタノールにて精製し、2-{4-アミノ-2-[3-ブロモ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}アセタミド90mgを固体として得た。獲得した固体27mgをジオキサンに溶解し、氷水浴下、0.2Mメシル酸水溶液0.283mlを加え、凍結乾燥して、標題化合物32mgを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.303H,s,2.843H,s,3.352H,d,J=0.9Hz,3.923H,s,3.952H,s,5.461H,brs,5.682H,s,5.971H,brs,6.751H,s,8.191H,s.ESI-MSm/z:476and478MH.実施例51tert-ブチル[8-2-[2-フルオロエチルアミノ]-2-オキソエチル-2-4-メトキシベンジル-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-4-イル]カーバメートエチル{4-[ビスtert-ブトキシカルボニルアミノ]-2-4-メトキシベンジル-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}アセテート526mgのエタノール10mL溶液に1N水酸化ナトリウム水溶液2.7mLを加え、一晩室温にて撹拌した。溶媒を留去して、カルボン酸のナトリウム塩を得た。このものをN,N-ジメチルホルムアミド10mLに溶解し、氷水浴下、2-フルオロエチルアミン171mg、1-エチル-3-3-ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩247mg、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール10mgを加えて室温で3日間撹拌した。反応液をジクロロメタンにて希釈して、水を加え、分液操作をおこなった。有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン-酢酸エチルで精製し、標題化合物419mgを油状物質として得た。ESI-MSm/z:529MH.22-4-アミノ-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル-N-2-フルオロエチルアセタミドトリフルオロ酢酸塩2-[4-アミノ-2-4-メトキシベンジル-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル]-N-2-フルオロエチルアセタミド418mgを用いて実施例111と同様の方法で合成し、粗製の標題化合物247mgを固体として得た。ESI-MSm/z:309MH.32-{4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-2-フルオロエチルアセタミド2-4-アミノ-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル-N-2-フルオロエチルアセタミドトリフルオロ酢酸塩60mgと3-クロロ-2-クロロメチル-4-メトキシ-5-ピリジン塩酸塩52mgを用いて実施例35と同様の方法で合成し、標題化合物12mgを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.253H,s,3.312H,s,3.561H,dd,J=10.5,5.0Hz,3.631H,dd,J=10.5,5.0Hz,3.812H,s,3.913H,s,4.441H,t,J=4.8Hz,4.561H,t,J=4.8Hz,5.112H,s,5.652H,s,6.091H,brs,6.731H,s,8.171H,s.ESI-MSm/z:478MH.元素分析値C20H21ClFN7O2S0.75ジオキサンとして計算値:C,50.80;H,5.00;N,18.02.実測値:C,51.18;H,4.86;N,17.91.実施例613-クロロ-4-メトキシ-2-メチルピリジン1-オキシドPolishJournalofChemistry,1986,59,10-12に記載の方法により製造した3-クロロ-2-メチル-4-ニトロピリジン-1-オキシド1.00gを0.5Mナトリウムメトキシド-メタノール溶液15.9mLに溶解し、室温で終夜撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、メタノールを減圧留去した後クロロホルムで3回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去して標題化合物897mgを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.683H,s,3.963H,s,6.731H,d,J=7.3Hz,8.201H,d,J=7.3Hz.ESI-MSm/z:174MH.23-クロロ-4-メトキシピリジン-2-イルメチルアセテート3-クロロ-4-メトキシ-2-メチルピリジン-1-オキシド890mgを無水酢酸12mLに溶解し、30分加熱還流した。室温まで放冷後減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーヘキサン-酢酸エチルにて精製して標題化合物576mgを油状物質として得た。1H-NMRCDCl3δ:2.173H,s,3.973H,s,5.332H,s,6.831H,d,J=5.6Hz,8.391H,d,J=5.6Hz.ESI-MSm/z:216MH.33-クロロ-4-メトキシピリジン-2-イルメタノール3-クロロ-4-メトキシピリジン-2-イルメチルアセテート570mgをメタノール13mLに溶解し、炭酸カリウム731mgを加えて50°Cで30分撹拌した。メタノールを減圧留去し、残渣に水を加えてクロロホルムで3回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後溶媒を減圧留去して標題化合物437mgを油状物質として得た。1H-NMRCDCl3δ:3.983H,s,4.391H,t,J=4.4Hz,4.762H,d,J=4.4Hz,6.841H,d,J=5.6Hz,8.371H,d,J=5.6Hz.ESI-MSm/z:174MH.43-クロロ-4-メトキシ-2-クロロメチルピリジン塩酸塩3-クロロ-4-メトキシピリジン-2-イルメタノール437mgを用いて実施例120と同様の方法で合成し、標題化合物558mgを固体として得た。1H-NMRCDCl3δ:4.263H,s,5.172H,s,7.481H,d,J=6.8Hz,8.771H,d,J=6.8Hz.ESI-MSm/z:192MH.54-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシピリジン-2-イルメチル]-N-2,2-ジフルオロエチル-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-カルボキサミド4-アミノ-N-2,2-ジフルオロエチル-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-カルボキサミドトリフルオロ酢酸塩50mgと3-クロロ-2-クロロメチル-4-メトキシピリジン35mgを用いて、実施例28と同様の方法で合成し、標題化合物48mgを固体として得た。1H-NMRDMSO-D6δ:3.55-3.632H,m,3.963H,s,4.092H,s,5.602H,s,5.95-6.191H,m,7.062H,brs,7.161H,d,J=5.73Hz,7.491H,s,8.251H,d,J=5.73Hz,8.821H,t,J=5.73Hz.ESI-MSm/z,468MH.元素分析値C18H16ClF2N7O2S0.25H2O0.5ジオキサンとして計算値:C,46.51;H,4.00;N,18.99;Cl,6.86;F,7.36;S,6.21.実測値:C,46.40;H,3.72;N,19.10;Cl,6.93;F,7.29;S,6.19.実施例72-{4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-メチルアセトアミド1臭化水素酸塩2-{4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-メチルアセトアミド250mg、0.561mmolのアセトニトリル溶液350mlに、20臭化水素酸エタノール溶液204μl、0.505mmolを室温で加えた。3時間攪拌した後、析出した固体をろ取した。得られた固体にエタノール3mlを加え、1日攪拌した後、固体をろ取した。その後、減圧下、室温で2日間乾燥し、表記化合物128mg、0.243mmolを得た。元素分析値C19H21N7O2SClBr0.4H2Oとして計算値:C,42.91;H,4.01;O,7.13;N,18.57;Cl,6.68;Br,15.03;S,6.08.実測値:C,42.73;H,4.11;O,7.19;N,18.36;Cl,6.64;Br,14.96;S,6.00.実施例82-{4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトアアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル-N-メチルアセタミド1塩酸塩2-{4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトアアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル-N-メチルアセタミド527.52mg,1.183mmolのエタノール30ml懸濁液に25°Cで攪拌しながら、3規定塩酸0.786ml,2.358mmolを加え1時間攪拌した。析出固体を濾過し、エタノール6mlで洗浄後、減圧下40°Cにて30分間乾燥し、表題化合物531.09mg,1.101mmolを得た。元素分析値C19H21Cl2N7O2Sとして計算値:C,47.31;H,4.39;N,20.33;O,6.63;Cl,14.70;S,6.65.実測値:C,47.29;H,4.40;N,20.02;O,6.87;Cl,14.99;S,6.83.実施例92-{4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-メチルアセトアミド1メタンスルホン酸塩2-{4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-メチルアセトアミド151mg、0.339mmolのアセトニトリル溶液150mlに、メタンスルホン酸32mg、0.302mmolのジエチルエーテル溶液50mlを5°Cで加え、25分間、5°Cで攪拌した。その後、溶媒を減圧留去し、ジエチルエーテル適量を加え、固体をろ取した。得られた固体にエタノール1mlを加え、室温で約1日攪拌した後、固体をろ取した。その後、減圧下、室温で1日乾燥し、表記化合物145mg、0.268mmolを得た。元素分析値C20H24N7O5S2Cl0.3H2Oとして計算値:C,44.71;H,4.69;O,15.45;N,17.81;Cl,6.54;S,11.56.実測値:C,43.88;H,4.53;O,15.49;N,17.91;Cl,6.48;S,11.71.実施例102-{4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-メチルアセトアミド1エタン1,2-ジスルホン酸塩2-{4-アミノ-2-[3-クロロ-4-メトキシ-5-メチルピリジン-2-イルメチル]-2,7-ジヒドロ-6-チア-1,2,3,5-テトラアザベンゾ[cd]アズレン-8-イル}-N-メチルアセトアミド164mg、0.368mmolのアセトン溶液50mlに、エタン-1,2-ジスルホン酸塩70mg、0.368mmolのアセトン溶液50mlを5°Cで加えた。20分間、5°Cで攪拌した後、18時間5°Cで静置し、その後室温で7時間攪拌した。析出した固体をろ取し、減圧下、室温で約1日乾燥し、表記化合物119mg、0.187mmolを得た。元素分析値C21H26N7O8S3Cl1.4H2Oとして計算値:C,38.06;H,4.68;O,22.29;N,14.92;Cl,5.25;S,13.83.実測値:C,38.14;H,4.39;O,22.74;N,14.83;Cl,5.36;S,14.55.試験例1Hsp90ATPaseアッセイ組換え酵母Hsp90蛋白質以下、rHsp90と称するを用いてHsp90ATPaseアッセイを行った。酵母Hsp90DNAを、常法に従って、酵母ゲノムDNAライブラリーからクローニングした。クローニングした酵母Hsp90DNAを、大腸菌発現用プラスミドに組込み、このプラスミドを大腸菌で発現させることによって、rHsp90を得た。試験化合物をDMSOを用いて10mMになるように溶解した。溶解した溶液を、1mMおよび0.2mMの濃度にDMSOを用いて希釈した。アッセイバッファー100mMTris、pH7.4、20mMKCl、6mMMgCl2を用いてさらに10倍希釈した各試験化合物溶液の濃度:100μMおよび20μM。DMSO濃度10。rHsp90をTEバッファー20mMTris、pH7.4、1mMEDTAを用いて2.531mg/mLの濃度に溶解した。溶液を、アッセイバッファーを用いて125μg/mLに希釈し、96ウェルのアッセイプレートの各ウェルに40μLずつ分注した終濃度100μg/mL。試験化合物溶液を各ウェルに5μLずつ分注し、次いで、各ウェルの溶液をプレートミキサーを用いて混和した。100mMATPSigma、カタログ番号A-7699を、アッセイバッファーを用いて1mMに希釈し、各ウェルに5μLずつ分注した終濃度100μM。各ウェルの溶液をプレートミキサーを用いて混和した後、アッセイプレートを37°Cに設定したインキュベータ中で2時間静置した。BIOMOLGREENReagentBIOMOL、カタログ番号AK-111を各ウェルに100μLずつ分注し、反応を停止させた。各ウェルの溶液をプレートミキサーを用いて混和し、次いで、34クエン酸ナトリウムを各ウェルに10μLずつ分注した。各ウェルの溶液をプレートミキサーを用いて混和した後、アッセイプレートを室温に30分間放置した。各ウェルの650nmの吸光度をSpectramaxPLUSMolecularDevicesを用いて測定した。試験化合物およびrHsp90を添加したウェルの吸光度をAとし、rHsp90のみを添加したウェルの吸光度をBとし、試験化合物およびrHsp90のいずれも添加していないウェルの吸光度をCとし、以下の計算式により試験化合物添加群と試験化合物非添加群との比T/C値を求めた。計算は、SoftmaxPro4.6MolecularDevicesを用いた。さらに、以下の計算式より阻害率を算出した。T/C=A-C/B-C実施例1~6の化合物は、2μMの濃度で50以上のATPase阻害活性を示した。試験例2抗細胞試験2種類の細胞ヒト乳癌由来細胞株SK-BR-3、ヒト肺癌由来細胞株NCI-H460を用いて抗細胞試験を実施した。各細胞を、それぞれ培地に懸濁し、96ウェルのマルチウェルプレートにSK-BR-3は2000細胞/150μL/ウェル、NCI-H460は500細胞/150μL/ウェルで播種した。試験化合物をDMSOに溶解後、培地で希釈して検体溶液としたDMSO濃度0.5以下。播種の翌日、試験化合物を添加していないDMSO入り培地以下、DMSO希釈液と称する。DMSO濃度0.5以下または検体溶液を、50μLずつさらに添加した。検体溶液またはDMSO希釈液を細胞に添加した直後と72時間後に、MTTアッセイを実施した。MTTアッセイは以下のように実施した。5mg/mLのMTT3-4,5-ジメチルチアゾール-2-イル-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロマイド溶液を各ウェルに20μLずつ添加した。その後、プレートを37°C、5CO2下で4時間培養した。プレートを1200rpmで5分間遠心した後、培養上清をディスペンサーにて吸引除去した。DMSOを各ウェルに150μLずつ添加し、生成されたフォルマザンを溶解した。プレートミキサーを用いてプレートを攪拌することにより、各ウェルの発色を均一にした。各ウェルの吸光度をOD540nm、reference660nmの条件下、プレートリーダーを用いて測定した。検体溶液添加の直後に測定したOD値をSとし、検体溶液添加の72時間後に測定したOD値をTとし、DMSO希釈液添加の72時間後に測定したOD値をCとし、下記の計算式より各濃度におけるT/Cを求めて用量反応曲線を描き、50増殖抑制濃度GI50値を算出した。T/C=T-S/C-S×100以下に結果を示す。試験例3invivo抗腫瘍試験NCI-H1975ヒト非小細胞肺癌細胞株を用いて抗腫瘍試験を実施した。Day0に、1匹当たり4×106個の細胞を雄ヌードマウスの右側腹部皮下に移植した。Day10に体重と腫瘍径を測定し、体重と推定腫瘍体積のいずれも群間に統計学的有意差がつかないように、ランダムに群分けした推定腫瘍体積=腫瘍長径×腫瘍短径×腫瘍短径/2。Day11に腫瘍径を測定し、投与を開始した。被験化合物を1.5mg/mLに調製し、15mg/10mL/kgで経口投与した。投与はDay11からDay14に一日一回、腫瘍径の測定はDay11からDay14とDay17に行った。Day17に腫瘍を摘出して、腫瘍湿重量を測定した。Day11に測定した腫瘍体積から、比重1として開始腫瘍重量を算出した。Day17に測定した腫瘍湿重量から開始腫瘍重量を差し引き、腫瘍増加重量を算出した。コントロール群溶媒投与群の腫瘍増加重量Cに対する被験化合物投与群の腫瘍増加重量Tの比T/Cから、それぞれ被験化合物の腫瘍増殖抑制率GI=100-T/Cを算出した。コントロール群と被験化合物投与群との間の有意差検定はEXSASver.7.5.2.2ArmCorpを用いて、Dunnett’smultiplecomparisontestで実施した。実施例1~6の化合物は、50以上の有意な腫瘍増殖阻害活性を示した。試験例4ヒト肝ミクロソームによるCYP3A4阻害試験Midazolam基質、和光純薬工業株式会社、1’-Hydroxymidazolam測定対象物、日本ベクトンディッキンソン社、Ketoconazoleポジティブコントロール、SigmaChemicalCo.、NADPHリジェネレーションシステムは、ソリューションAおよびソリューションB日本ベクトンディッキンソン社を使用した。試験化合物、基質、測定対象物およびポジティブコントロールは適当量を秤量後、DMSOで溶解させ、必要に応じてアセトニトリルで希釈して用いた。下記の1~5を混合した反応溶液180μlをあらかじめ37°Cにて10分間温めた。1リン酸カリウム緩衝液pH7.4、終濃度50mM2精製水3Midazolam終濃度2.5μM4試験化合物終濃度10μM、陰性コントロール:化合物なし、陽性コントロール:Ketoconazole終濃度0.1μM5ヒト肝ミクロソーム終濃度0.05mg-P/mlこれにNADPHリジェネレーションシステムソリューションA/ソリューションB/精製水=5/1/420μlを添加し反応を開始させた。10分間インキュベートした後、この反応液50μlをサンプリングし、アセトニトリル200μlの中へ加えて反応を停止させ、さらに内部標準物質を含むアセトニトリル溶液50μlを加えた。このサンプルの除タンパクのため、Captiva登録商標GLサイエンス社を用いて、96wellコレクションプレートウォーターズ社へ移し、このサンプル溶液をLC-MS/MSによる定量用サンプルとした。別途、1’-Hydroxymidazolam既知濃度終濃度0~5μM、計5点のサンプルを調製して、定量用検量線を作成し、サンプル中の1’-Hydroxymidazolamの濃度を定量した。なお、反応はデュプリケートで行った。陰性コントロールにおける1’-Hydroxymidazolam生成量を100としたとき、各化合物添加での生成の割合を算出し、CYP3A4の阻害値を求めた。化合物1は15、化合物2は58、化合物3は5、化合物4は43、化合物5は66、化合物6は-18の阻害率を示した。陽性対照であるKetoconazoleは82の阻害率を示した。試験例5invivo抗腫瘍試験NCI-H1650ヒト非小細胞肺癌細胞株を用いて抗腫瘍試験を実施する。1匹当たり1×107個の細胞を雄ヌードマウスの右側腹部皮下に移植する。39日後に腫瘍を摘出し、一辺が2-3mmの小片を作製し、雄ヌードマウスの右側腹部皮下に移植するDay0。Day14に体重と腫瘍径を測定し、体重と推定腫瘍体積のいずれも群間に統計学的有意差がつかないように、ランダムに群分けする推定腫瘍体積=腫瘍長径×腫瘍短径×腫瘍短径/2。Day14に投与を開始する。被験化合物を0.65、0.9、1.3mg/mLに調製し、10mL/kgで経口投与する。投与はDay14からDay31に一日一回、腫瘍径の測定はDay14、Day17、Day21、Day24、Day28とDay31に行う。Day31に腫瘍を摘出して、腫瘍湿重量を測定する。Day14に測定した腫瘍体積から、比重1として開始腫瘍重量を算出する。Day31に測定した腫瘍湿重量から開始腫瘍重量を差し引き、腫瘍増加重量を算出する。コントロール群溶媒投与群の腫瘍増加重量Cに対する被験化合物投与群の腫瘍増加重量Tの比T/Cから、それぞれ被験化合物の腫瘍増殖抑制率GI=100-T/Cを算出する。コントロール群と被験化合物投与群との間の有意差検定はEXSASver.7.5.2.2ArmCorpを用いて、Dunnett’smultiplecomparisontestで実施する。"