"以下の式の化合物:式中、mは0または1であり;R1およびR2の少なくとも一方もしくは両方は、独立して、CN;NO2;置換されていてもよいアリール;置換されていてもよいヘテロアリール;置換されていてもよいアルケニル;置換されていてもよいアルキニル;COR3またはSOR3またはSO2R3式中、R3は、Hもしくは置換されていてもよいアルキル;各々が置換されていてもよいアリールもしくはアリールアルキル;各々が置換されていてもよいヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル;またはOR9もしくはNR92式中、各Rは、独立して、Hもしくは置換されていてもよいアルキルであるか、または、両方のR9基はこれらが結合している窒素と一緒になって複素環を形成しているである;SR4式中、R4は、置換されていてもよいアルキル;各々が置換されていてもよいアリールもしくはアリールアルキル;または各々が置換されていてもよいヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキルであるであり、ここで、R1およびR2は、結合されて3~8員環を形成していてもよく;およびここで、R1およびR2の一方ならびにいずれか一方のみは、H、または、各々が置換されていてもよい、アルキル、アリールアルキルもしくはヘテロアリールアルキルであってもよく;各R5は、独立して、H、または、各々が置換されていてもよい、アルキル、アルケニルアルキル、アルキニルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキルであり;Zは、O、Sもしくは非塩基性Nを介してカップリングされた薬物またはプロドラッグの残基であるか、または、前記カップリングを媒介する脱離基であり;Bは、各々が置換されていてもよい、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキルであり;かつここで、R1、R2、R5またはBの1つは巨大分子にカップリングされているか、または、前記カップリングを媒介するための官能基を含んでいる。R1およびR2の一方がCNである、請求項1に記載の化合物。R1およびR2の少なくとも一方が、フェニルまたはフェニレンを含む、請求項1に記載の化合物。R1およびR2の一方がSO2R3であり、かつ他方がH、アルキルまたはフェニルである、請求項1に記載の化合物。mが0である、請求項1に記載の化合物。以下の式の薬物共役体である、請求項1に記載の化合物:式中、R1、R2、R5、mおよびBは請求項1において定義されているとおりであり、Dは、O、SまたはNを介してカップリングされた薬物またはプロドラッグの前記残基であり;かつR1、R2、R5またはBの1つは、巨大分子にカップリングされている。前記巨大分子がポリエチレングリコールPEGである、請求項6に記載の薬物共役体。前記薬物が、ペプチド、核酸または小分子である、請求項6に記載の薬物共役体。以下の式である、請求項1に記載の化合物:式中、R1、R2、R5、mおよびBは請求項1に定義されているとおりであり;Lは、O、Sまたは非塩基性Nを介してカップリングされた薬物またはプロドラッグの前記カップリングを媒介する脱離基であり;かつR1、R2、R5またはBの少なくとも1つは、巨大分子に対するカップリングを媒介するための官能基を含む。以下の式である、請求項1に記載の化合物:式中、m、R1、R2、R5、mおよびBは請求項1に定義されているとおりであり;Dは、O、Sまたは非塩基性Nを介してカップリングされた薬物またはプロドラッグの前記残基であり;かつR1、R2、R5またはBの少なくとも1つは、巨大分子に対するカップリングを媒介するための官能基を含む。以下の式である、請求項1に記載の化合物:式中、R1、R2、R5、mおよびBは請求項1に定義されているとおりであり;Lは、O、Sまたは非塩基性Nを介した薬物またはプロドラッグの前記カップリングを媒介する脱離基であり;かつR1、R2、R5またはBの少なくとも1つは、巨大分子に対するカップリングを媒介するための官能基を含む。以下の式:式中、R1、R2、R5、mおよびBは請求項1に定義されているとおりであり;Lは、O、Sまたは非塩基性Nを介した薬物またはプロドラッグの前記カップリングを媒介する脱離基であり;かつR1、R2、R5およびBの1つは、巨大分子にカップリングされているの化合物と薬物またはプロドラッグとを、前記プロドラッグが式IVの前記化合物にカップリングされる条件下で反応させる工程を含む、請求項6に記載の式Iの化合物を調製する方法。以下の式:式中、m、R1、R2、R5、mおよびBは請求項1に定義されているとおりであり;Lは、O、Sまたは非塩基性Nを介した薬物またはプロドラッグの前記カップリングを媒介する脱離基であり;かつR1、R2、R5またはBの少なくとも1つは、巨大分子に対するカップリングを媒介するための官能基を含むの化合物と薬物またはプロドラッグとを、前記薬物またはプロドラッグが式IIの前記化合物にカップリングされる条件下で反応させる工程を含む、請求項10に記載の式IIIの化合物を調製する方法。以下の式:式中、m、R1、R2、R5、mおよびBは請求項1に定義されているとおりであり;かつDは、O、Sまたは非塩基性Nを介してカップリングされた薬物またはプロドラッグの前記残基であり;かつR1、R2、R5およびBの少なくとも1つは、式IIIを巨大分子にカップリングする官能基を含むの化合物と巨大分子とを、前記巨大分子が式IIIの前記化合物にカップリングされる条件下で反応させる工程を含む、請求項6に記載の式Iの化合物を調製する方法。以下の式:式中、m、R1、R2、R5、mおよびBは請求項1に定義されているとおりであり;Lは、O、Sまたは非塩基性Nを介した薬物またはプロドラッグの前記カップリングを媒介する脱離基であり;かつR1、R2、R5およびBの1つは、式IIを巨大分子にカップリングする官能基を含むの化合物と巨大分子とを、前記巨大分子が式IIの前記化合物にカップリングされる条件下で反応させる工程を含む、請求項11に記載の式IVの化合物を調製する方法。ZがSN-38分子の残基である、請求項1に記載の化合物。以下の式XXの化合物:式中、R1、R2、R5、mおよびBは請求項1において定義されているとおりである。mが0である、請求項17に記載の化合物。mが0であり;R1が、フェニルスルホニル、置換フェニルスルホニル、メタンスルホニル、R92N-SO2またはCNであり;R2がHであり;一方のR5がN3CH25でありかつ他方のR5がHであり;かつ、Bがフェニルまたは置換フェニルである、請求項17に記載の化合物。mが0であり;R1が、フェニルスルホニル、置換フェニルスルホニル、メタンスルホニル、R2N-SO2またはCNであり;R2がHであり;一方のR5が置換されていてもよいアルキルでありかつ他方のR5がHであり;かつ、Bがフェニルまたは置換フェニルであり、かつここで、R1、R5およびBの1つが巨大分子に対する結合をさらに含む、請求項17に記載の化合物。薬物がリンカーを介して巨大分子に結合しており;薬物分子がO、Sまたは非塩基性Nを介して前記リンカーに結合しており;かつ、前記薬物が生理学的条件下でβ-脱離反応を介して前記共役体から放出される、薬物-巨大分子共役体。本発明は、後に生理学的条件下で薬物を制御された速度で放出させる切断可能なリンカーを含む、巨大分子キャリアと薬物との共役体、ならびに、切断可能なリンカー、切断可能なリンカーを含むリンカー-薬物分子、切断可能なリンカーを含む巨大分子キャリア、ならびに、これらの調製方法および使用方法を提供する。一般に、本発明は、式式中、mは0または1であり;R1およびR2の少なくとも一方もしくは両方は、独立して、CN;NO2;置換されていてもよいアリール;置換されていてもよいヘテロアリール;置換されていてもよいアルケニル;置換されていてもよいアルキニル;COR3またはSOR3またはSO2R3式中、R3は、Hもしくは置換されていてもよいアルキル;各々が置換されていてもよいアリールもしくはアリールアルキル;各々が置換されていてもよいヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル;またはOR9もしくはNR92式中、各R9は、独立して、Hもしくは置換されていてもよいアルキルであるか、または、両方のR9基はこれらが結合している窒素と一緒になって複素環を形成しているである;SR4式中、R4は、置換されていてもよいアルキル;各々が置換されていてもよいアリールもしくはアリールアルキル;または各々が置換されていてもよいヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキルである;であり、式中、R1およびR2は、結合されて3~8員環を形成していてもよく;および式中、R1およびR2の一方ならびにいずれか一方のみは、H、または、各々が置換されていてもよい、アルキル、アリールアルキルあるいはヘテロアリールアルキルであってもよく;各R5は、独立して、H、または、各々が置換されていてもよい、アルキル、アルケニルアルキル、アルキニルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールあるいはヘテロアリールアルキルであり;Zは、O、Sあるいは非塩基性Nを介してカップリングされた薬物またはプロドラッグの残基であるか、または、このようなカップリングを可能にする脱離基であり;ならびにBは、各々が置換されていてもよい、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキルであり;ならびに式中、R1、R2、R5あるいはBの1つは巨大分子にカップリングされているか、または、巨大分子への結合を可能にする官能基を含んでいるの化合物に関する。それ故、一態様において、本発明は、式I式中、R1、R2、R5、mおよびBは上記に定義されているとおりであり、ならびに、式中、Dは、O、Sまたは非塩基性Nを介してカップリングされた薬物またはプロドラッグであり、ならびに、式中、R1、R2、R5またはBの1つは、巨大分子にカップリングされているを有する切断可能なリンカーを含む、薬物と巨大分子キャリアとの共役体に関する。第2の態様において、本発明は、式II式中、R1、R2、R5、mおよびBは上記に定義されているとおりであり;ならびに、Lは、O、Sまたは非塩基性Nを介した薬物またはプロドラッグへの結合を可能にする脱離基であるを有する式Iの化合物に対する前駆体である切断可能なリンカー試薬化合物を提供する。式IIにおいては、巨大分子にカップリングされる代わりに、R1、R2、R5、およびB基の少なくとも1つは、巨大分子への結合を可能にする官能基を含む。第3の態様において、本発明は、式III式中、R1、R2、R5、mおよびB基は上記に定義されているとおりであり;Dは、O、Sまたは非塩基性Nを介して結合された薬物またはプロドラッグの残基であり;ならびに、式中、R1、R2、R5またはB基の少なくとも1つは、上記のとおり巨大分子への結合を可能にする官能基を含むを有するリンカー-薬物化合物を提供する。第4の態様において、本発明は、式IV式中、R1、R2、R5、mおよびB基は上記に定義されているとおりであり;Lは、O、Sまたは非塩基性Nを介して薬物またはプロドラッグに対する結合を可能にする脱離基であり;ならびに、式中、式Iと同様に、R1、R2、R5またはBの少なくとも1つは巨大分子にさらに結合されているを有する切断可能なリンカーを含む巨大分子キャリアを提供する。第5の態様において、本発明は、薬物がリンカーを介して巨大分子に結合されており、薬物分子がO、Sまたは非塩基性Nを介してリンカーに結合されており、および、薬物が生理学的条件下でβ-脱離反応を介して共役体から放出される、薬物-巨大分子共役体を提供する。他の態様において、本発明は、式I、II、IIIおよびIVの化合物を調製する方法、ならびに、これらの使用方法を提供する。本発明の説明本発明は、標準的な共役体の活用の向上を提示し、上記で参照した国際公開第2009/158668号パンフレットに記載のものなどのPEG化放出性薬物組成物に勝るさらなる利点を有している。利点は、巨大分子キャリアから放出されるまでの不活性形態での薬物またはプロドラッグの保持、薬物投与量を増加し得、それ故、作用力の弱い薬物の送達を可能にする薬物に対する複数の結合部位、および、酵素の分解または他の不活性化条件に対する保護の提供を含む。本発明の組成物の他の利点は、リンパ系への薬物の効果的な送達をもたらすことである。本発明の化合物は、薬物の分子量よりも顕著に高い分子量を有しているため、化合物を皮下投与した際にもリンパ系中に薬物を保持させることが可能である。40,000以上の分子量を有する化合物が、リンパ系中に効果的に保持される。さらに、リンパは、エステル化リンケージから薬物を放出させ得るエステラーゼを血漿中に有していないため、好ましいリンパのpH血漿のpHと等しいが共役体からの有効薬物の放出を可能とする。それ故、本発明の化合物は、例えばリンパ腫に関連する事例などのとおり、リンパへの送達が所望される場合には、リンパに薬物を効果的に放出させる。本発明は、後に生理学的条件下で薬物を制御された速度で放出させる切断可能なリンカーを含む巨大分子キャリアと薬物との共役体、ならびに、切断可能なリンカー試薬、切断可能なリンカーを含むリンカー-薬物化合物、切断可能なリンカー試薬を含む巨大分子キャリア、ならびに、これらの調製方法および使用方法を提供する。本発明の化合物は、薬物共役体およびその前駆体を含んでいる式Vを有しており、さらに、本発明の説明に用いられ得る。式V:において、R1および/またはR2基は、隣接するC-Hを生理学的条件下でのβ-脱離のために活性化する。本明細書において用いられる生理学的条件下でのβ-脱離という用語は、例示のスキームに従って本発明の分子がアルケン部分およびカルバミン酸に形質転換される化学的形質転換を指し、これは、例えば6~8のpHおよび25~40°Cの温度などの生物学系の典型的な条件下で、反応の半減期が1~10,000時間または1~5,000時間または1~1,000時間または1~100時間または1~10時間となるような速度で実施される。生成物カルバミン酸は典型的にはきわめて不安定であり、さらに分解してCO2、B-NH2、H2C=OおよびZ-Hを放出する。この分解のためにとり得る経路が図2Aにおいて示されており、以下のとおりさらに詳細に示されている:1HO-C=O-NB-CH2-Z->CO2B-NH-CH2-Z不安定なホルムアルデヒドアミナール2B-NH-CH2-Z->B-N=CHZHイミン形成3B-N=CHH2O->B-NH-CH2-OHヘミアミナールを形成するためのイミンへの水の付加4B-NH2O=CH2ヘミアミナールのホルムアルデヒドアミンへの分解。当業者は、上記のβ-脱離およびその後の分解反応1~4の種々の中間体は過渡的であってもよく、従って、生理学的または他の化学的反応条件下において検出可能ではない場合があることを認識するであろう。活性化R1および/またはR2基の性質は上記に記載されており、脱離反応を実質的に律速する。それ故、R1および/またはR2基は、隣接するC-Hの酸性度を判定することにより1つ以上のトリガ基として作用する。一連の好適なR1および/またはR2トリガ基は、本発明の化合物からの薬物放出速度を制御する手段を提供する。R1および/またはR2基が隣接するC-H結合を活性化させる程度はC-H結合の最終的な酸性度により表されてもよく;この酸性度は、次いで、C-H結合のpKaとして表されてもよく、ここで、低いpKaはより酸性であることを示し、C-H結合がより容易にイオン化されることを示す。種々の基に対するおおよそのpKa値の列挙は、例えば、Bordwell,F.G.,Equilibriumaciditiesindimethylsulfoxidesolution,AccountsofChemicalResearch2112:456-4632002本明細書において参照により援用されているのように当該技術分野において一般的である。好適な活性化基の例には、これらに限定されないが、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいアルケン、置換されていてもよいアルキン、スルホン、スルホキシド、ニトリル、ケトン、エステル、アミドおよびニトロ基が含まれる。R1および/またはR2基が結合して3~8員環を形成している場合、この環は、例えばおよびその置換形態などの、置換されていてもよいより大きい環構造の一部を形成していてもよい。R1および/またはR2基上の置換基が、任意に追加されて、隣接するC-Hの酸性度、従って、β-脱離反応の速度のさらなる制御がもたらされてもよい。一般的に、電子求引性置換基はβ-脱離反応の速度を高め、一方で、電子供与性置換基はβ-脱離反応の速度を低下させるであろう。種々の置換基の電子効果は当該技術分野において周知であり、例えば直線自由エネルギーハメット関係として表され得る。例えば置換アリール、ヘテロアリール、アリールケトン、ヘテロアリールケトン、アリールスルホン、ヘテロアリールスルホン、アリールスルホキシド、およびヘテロアリールスルホキシド基などの芳香族系に関して、置換基の電子効果がハメットσパラメータによって説明されており、正のσ値は電子求引性効果を示し隣接するC-Hと比して加速的、および、負のσ値は電子供与性効果を示すC-Hと比して減速的。表1に種々の置換基に対するハメットσ定数が列挙されている。一例として、アリール環R1が電子供与性基置換基で置換されている場合、隣接するベンジルタイプC-H結合の酸性度が低減されることとなる。好適な電子供与性置換基の例には、これらに限定されないが、アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、シリルアミノ、アルキルアミノおよびジアルキルアミノが含まれる。1個以上の電子求引性基でのアリール環の置換により、隣接するベンジルタイプのC-H結合の酸性度が高められる。好適な電子求引性置換基の例には、これらに限定されないが、ハロゲン、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ニトロ、フェニル、アルケニル、シアノ、C=O-R式中、Rは、H、アルキル、アルコキシまたはアミノである、または、SORもしくはSO2R式中、Rは、アルキル、アリールまたはヘテロアリールであるが含まれる。非水素電子供与性置換基または電子求引性置換基は、これらが結合している環の複数の位置に存在していてもよい。簡便性のために、ほとんどの例においては、単環上に単一の非水素置換基が存在している場合のみが示されているが、複数の置換基もまた存在し得ると共に、これらもまた本発明の範囲内である。置換基は同一であっても異なっていてもよい。いくつかの場合において、置換基が電子求引性であるか電子供与性であるかは、芳香族環中の位置に応じるために、前述の記載はいくらか過度に簡略化されている。これは、以下の直線自由エネルギーハメット関係の表に反映されており、ここで、正のσ値は電子求引効果を示しており、負のσ値は電子供与効果を示している。表に示されているとおり、例えば、OMeは、フェニル環のメタ位に存在している場合には電子求引性であるが、パラまたはオルト位では電子供与性である。芳香族置換基に対する選択されたハメットσ定数残りの置換基R5およびBが有するβ-脱離の速度への影響は小さいが、Bの性質は、競合するE1脱離反応の速度に特に影響を及ぼす。B基の性質は、図2Bに示されているE1-タイプ脱離反応を介した分解に向けてN-メチレン-カルバメートの安定性に影響を及ぼす。例えば拡張された共役および/または電子求引能を介してカルバメートN孤立電子対の反応性を低減させるB基は、E1-脱離経路による競合する分解の速度を低減させる。巨大分子は、追加のコネクタを介して式Vにカップリングされ得る。追加のコネクタは二官能性有機化合物である。多くのこのようなコネクタが、例えばPierceChemicalCo,Rockford,ILから市販されている。種々の二官能性コネクタが当該技術分野において周知であり、ジカルボン酸もしくは無水物、ジアミン、または、ヘテロ二官能性コネクタが含まれる。ヘテロ二官能性コネクタの例には、例えば、スクシンイミジルエステルNHSおよびアルキンもしくはシクロアルキン例えば、DBCO-NHS、マレイミドおよびNHS、または、同様の分子を有するものが含まれる。当然ながら、選択されるコネクタは、巨大分子、薬物、および、式I~Vに対応する中間体の置換基の官能基の性質に依存するであろう。アルキルという用語は、1~8個の炭素、または、いくつかの実施形態においては、1~6個または1~4個の炭素原子の直鎖、分岐または環式飽和炭化水素基を含む。アルコキシという用語は、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシ、シクロプロポキシ、シクロブトキシ等を含む酸素に結合したアルキル基を含む。アルケニルという用語は、炭素-炭素二重結合を有する非芳香族不飽和炭化水素を含む。アルケニルC2という用語は、任意の幾何学的構成の、一置換、二置換、三置換または四置換炭素-炭素二重結合を意味する。アルキニルという用語は、炭素-炭素三重結合を有する非芳香族不飽和炭化水素を含む。アルキニルC2という用語は、一置換または二置換炭素-炭素三重結合を意味する。アリールという用語は、フェニル、ナフチルおよびアントラセニルなどの基を含む6~18個の炭素、好ましくは6~10個の炭素の芳香族炭化水素基を含む。ヘテロアリールという用語は、少なくとも1個のN、OまたはS原子を含めて3~15個の炭素、好ましくは、少なくとも1個のN、OまたはS原子を含めて3~7個の炭素を含む芳香族環を含み、ピロリル、ピリジル、ピリミジニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、キノリル、インドリル、インデニルなどの基を含む。いくつかの事例においては、アルケニル、アルキニル、アリールまたはヘテロアリール部分は、アルキルリンケージを介して分子の残りにカップリングされ得る。これらの状況下では、置換基は、アルケニルアルキル、アルキニルアルキル、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルと称されることとなり、アルケニル、アルキニル、アリールまたはヘテロアリール部分と、アルケニル、アルキニル、アリールまたはヘテロアリールがカップリングされた分子との間にアルキレン部分があることが示されている。ハロゲンという用語は、ブロモ、フルオロ、クロロおよびヨードを含む。複素環という用語は、3~7個の炭素原子および少なくとも1個のN、OまたはS原子を含む4~8員芳香族または非芳香族環を指す。例には、ピペリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピラニル、ピロリジンおよびテトラヒドロフラニル、ならびに、上記の用語ヘテロアリールについて例示されている基が含まれる。マレイミドとは、式を指す。非塩基性Nという用語は、遊離薬物分子DHにおけるNH基の一部である窒素を指し、ここで、NHは、およそ20以下のpKaを有することにより特徴付けられる。本発明の特定の実施形態において、非塩基性Nは、ピロール、インドール、ピリミジンあるいはプリンなどのヘテロアリール環系、第1級もしくは第2級スルホンアミドR-SO2NHR、第1級もしくは第2級アミドR-CONHR、または、イミドR-CO-NH-CO-Rの構成要素である。脱離基は、結合されていた電子対を伴う解離基である。例示的な脱離基は、ハロゲン、OH、アルコキシ、アリールスルホネート、アルキルスルホネート、または、R2S式中、Rの各々は、独立して、アルキル、アリールまたはヘテロアリールであるである。巨大分子という用語は、5,000~1,000,000ダルトン、好ましくは10,000~500,000ダルトン、および、より好ましくは10,000~250,000ダルトンの分子量を有する分子または分子の残基を意味する。巨大分子の例には、これらに限定されないが、抗体、抗体フラグメントおよび酵素を含むタンパク質;ポリリシンおよびポリバリンなどのポリアミノ酸ならびに混合配列ポリペプチドを含むポリペプチド;ポリエチレングリコールPEG、ポリエチレンオキシドPEO、ポリエチレンイミンPEIおよびこれらのコポリマーを含む合成ポリマー;ならびに、デキストランなどの多糖類が含まれる。巨大分子は、上記のとおり、アミン、カルボン酸、アルコール、チオール、アルキン、アジドまたはマレイミド基などの、自然に、または、化学的形質転換後に、共役に好適な少なくとも1つの官能基を含むこととなる。本発明の特定の実施形態において、巨大分子はポリエチレングリコールである。ポリエチレングリコールは、直鎖であっても分岐鎖であってもよく、その一端が共役に好適な官能基で末端封止されていると共に他端が末端封止基例えばメチルによって末端封止されていればよく、または、その各々が共役に好適な官能基で末端封止されている複数の枝を含んでいてもよい。本発明の好ましい実施形態において、ポリエチレングリコールは、20,000~200,000ダルトン、好ましくは20,000~100,000ダルトン、および、最も好ましくはおよそ40,000ダルトンの平均分子量を有する直鎖、分岐または多枝ポリマーである。このようなポリエチレングリコールの例は当該技術分野において公知であると共に、例えば日油株式会社日本、東京から市販されている。タンパク質およびペプチドという用語は鎖長に関わらず同義的に用いられ、これらの用語は、CH2NH2リンケージなどのアミドリンケージ以外のリンケージを含む疑似ペプチドならびにペプチド模倣薬をさらに含む。核酸およびオリゴヌクレオチドという用語もまた鎖長に関わらず同義的に用いられる。核酸またはオリゴヌクレオチドは、単鎖もしくは二重鎖であり得、または、DNA、RNA、あるいは、ホスホジエステル、ホスホロアミデートなどのリンケージが変更されたその修飾形態であり得る。本発明において薬物として有用なタンパク質および核酸の両方に関して、これらの用語はまた、タンパク質ならびに疑似ペプチド結合の場合において自然には見出されない側鎖を有するもの、および、核酸ならびにペプチド核酸などの主鎖変化形の場合において自然には見出されない塩基をも含む。小分子という用語は、薬物の文脈において、当該技術分野において十分に理解された用語であり、合成されるか、または、自然から単離され、一般的にタンパク質または核酸に類似していない、タンパク質および核酸以外の化合物を含むことを意味する。典型的には、これらは、認識されている特定のカットオフが存在しているわけではないが、1,000未満の分子量を有する。それにもかかわらず、この用語は、薬理学および製剤分野において十分に理解されている。広く多様な薬物がDの実施形態として含まれていてもよい。これらの薬物の各々は、非塩基性窒素、酸素または硫黄を介して本発明の化合物のメチルカルバメート部分にカップリングされることとなる。それ故、好適な薬物は、リンカーへのカップリングが可能であるようヒドロキシ、チオールまたは非塩基性アミンを有しているものであろう。好適な薬物の例には、特にこれらに限定されないが、抗糖尿病剤;成長促進物質;アミノグリコシド、ペニシリン、セファロスポリン、マクロライドおよびペプチド、トリメトプリム、ピロミド酸ならびにスルファメタジンを含む抗菌剤;鎮痛薬および抗炎症薬、抗アレルギーおよび抗喘息薬、抗高コレステロール血症薬、β-アドレナリン遮断薬および降圧薬、抗悪性腫瘍薬および抗ウイルス性薬物を含むヒトまたは獣医学的用途のためのものが含まれる。このような薬物のさらなる例には、パクリタキセルおよび類似体、エポチロンおよび類似体、カンプトテシンおよびイリノテカンなどの類似体などのアルコール、ならびに、5-フルオロウラシルおよびカペシタビンなどのヌクレオシドが含まれる。他の実施形態において、薬物は、セリン残基を含むペプチドである。他の実施形態において、薬物はアリールオール基を含む小分子であり;このような薬物の例には、SN-38、エチレフリン、プレナルテロールおよびエストラジオールが含まれる。他の実施形態において、薬物はチロシン残基を含むペプチドである。カップリングがSを介している場合、薬物はチオール基を含む小分子であり得る。このような薬物の例には、ペニシラミン、カプトプリルおよびエナラプリルが含まれる。薬物は、チオアリールまたはチオヘテロアリール基を含む小分子であってもよく;このような薬物の例には、6-メルカプトプリンが含まれる。カップリングが非塩基性Nを介している場合、薬物は、第1級もしくは第2級アミドピログルタミン酸残基もしくは他のアミドなどまたはスルホンアミド、または、インドール例えば、トリプトファンまたはプリンなどのヘテロアリール基を含む小分子またはペプチドであり得る。例には、甲状腺刺激ホルモン-放出ホルモン、ボンベシン、黄体ホルモン-放出ホルモン、小胞-刺激放出ホルモン、オクトレオチド、5-フルオロウラシルおよびアロプリノールが含まれる。核酸-ベースの薬物の例には、動物、特に哺乳動物由来の任意の遺伝子のセンス鎖およびアンチセンス鎖が含まれる。このような遺伝子は、例えばタンパク質キナーゼC-α、BCL-2、ICAM-1、腫瘍壊死因子α等の遺伝子などの、既に種々の疾病を治療する目的でもたらされたアンチセンスDNAもしくはRNA、または、低分子干渉RNAの対象であるものであることが可能である。追加の例には、核酸に対するウイルス送達剤が含まれる。特定の実施形態において、薬物は、SN-387-エチル-10-ヒドロキシカンプトテシンである。前駆体という用語は、式Iと同様の化合物であるが、巨大分子ではなく、関連する置換基R1、R2、R5またはBがカップリングをもたらすことが可能である官能基またはリンカーを備えており、および/または、Dが脱離基で置き換えられている化合物を指す。それ故、このカテゴリーの化合物は、式II、IIIおよびIVを有する。典型的には、薬物の活性形態が本発明の共役体から直接的に放出されるが、いくつかの場合においては、有効薬物をそのプロドラッグの形態で放出することが可能である。誤解を回避するため、本明細書に記載の薬物共役体は、薬物およびプロドラッグの両方の共役体を含む。上記のとおり、式Vにおいて、Zは、O、SあるいはNを介してカップリングされた薬物もしくはプロドラッグの残基であるか、または、O、Sあるいは非塩基性Nを介した薬物への結合を可能にする脱離基を含む。ZがO、Sまたは非塩基性Nを介した薬物への結合を可能にする脱離基である場合、Zは、ハロゲン、OH、アルコキシ、アリールスルホネート、アルキルスルホネートまたはR2Sであってもよく、式中、各Rは、独立して、アルキル、アリールまたはヘテロアリールである。特定の一実施形態において、ZはハロゲンまたはR2Sである。他の実施形態において、Zはクロロまたはメトキシである。同様に、式IIおよび式IV中のLは、ハロゲン、OH、アルコキシ、アリールスルホネート、アルキルスルホネートまたはR2Sであってもよく、式中、各Rは、独立して、アルキル、アリールまたはヘテロアリールであり、および、特定の実施形態において、Lはクロロまたはメトキシである。例示的な置換基基R1、R2、R5およびBは、これらの基を定義する本発明の化合物のすべてに共通であるため、以下に記載された代替形態において提示されているこれらの基の種々の実施形態はこれらのすべてについて共通である。任意の基自体が置換されていてもよい場合、任意の環系での置換は、各々が置換されていてもよい、アルキル、アルキエニルalkyenyl、アルキニルまたは追加の環であり得る。上記を含むいずれかの基の任意の置換基としては、ハロ、ニトロ、シアノ、OR、SR、NR2、OCOR、NRCOR、COOR、CONR2、SOR、SO2R、SONR2、SO2NR2が含まれ、式中、各Rは、独立して、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールあるいはヘテロアリールであるか、または、2個のR基は、これらが結合している原子と一緒になって環を形成する。本発明の化合物は、R1、R2、R5およびBの1つを介した巨大分子へのリンケージを含有しているか式V、IおよびIV、または、R1、R2、R5およびBの1つは、巨大分子への結合を可能にする官能基を含む式V、IIおよびIII。巨大分子への結合を可能にする好適な官能基としては、アミノ、アジド、ヒドロキシ、カルボン酸、アルキニル、チオール、マレイミド、フラン、シクロペンタジエン、1,3-ジエンあるいは1,3-ジカルボニル基、または、これらの保護変種が含まれる。反応性官能基を含む置換基としては、反応性の化学部分で置換された、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキルまたはヘテロアリールアルキル基が含まれる。それ故、R1、R2、R5およびB基の少なくとも1つが巨大分子を含むか、または、アミノ、アジド、ヒドロキシ、カルボン酸、アルキニル、チオール、マレイミド、フラン、シクロペンタジエン、1,3-ジエンあるいは1,3-ジカルボニル基の1つ以上、または、その保護変種を含む。いくつかの実施形態において、R1は、巨大分子にカップリングされているか、または、巨大分子への結合を可能にする官能基を含む。いくつかの実施形態において、R5は、巨大分子にカップリングされているか、または、巨大分子への結合を可能にする官能基を含む。上記のとおり、本発明の化合物において、R1およびR2が一緒になって薬物の放出速度に対して最大の制御を及ぼすが、R5およびmもいくらかの影響を有する。いくつかの事例においては、R1およびR2の一方が水素であるか、または、アルキル、アリールアルキルあるいはヘテロアリールアルキルであると共に、他方が、本明細書中に上述されている残りの実施形態の1つを有する。他の事例においては、R1およびR2のいずれも水素、または、アルキル、アリールアルキルあるいはヘテロアリールアルキルではない。例えば、R1はHであってもよく、R2は置換されていてもよいフェニルであってもよく、R1およびR2の両方が置換されていてもよいフェニルであってもよい。フェニル環での置換は1~5位であり得るが、3以下であることが好ましい。R1およびR2の両方が置換されていてもよいフェニルである場合、これらが等しく置換されている必要はなく、または、等しく置換されていてもよい。好適な置換基としては、例えば上記表1に与えられている、アルコキシ、ハロ、ニトロ、シアノ等が含まれる。他の実施形態においては、R1およびR2の一方または両方が、R6S-、R6SO-またはR6SO2-であり、式中、R6は、アルキル、置換アルキル、ジアルキルアミノ、アルキルアリールアミノ、ジアリールアミノ、N-結合複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールである。次いで、R1およびR2の残りの構成要素は例えばHであっても、上記の代替的実施形態のいずれかであってもよい。特定の実施形態においては、R1およびR2の一方がR6SO2-であり、式中、R6は、メチル、モルホリノ、未置換フェニル、または、ハロ、メチル、メトキシあるいはトリフルオロメチル基の1個以上で置換されているフェニルであり、ならびに、R1およびR2の他方がHである。さらなる実施形態においては、R1およびR2の一方は、フェニルスルホニル、4-トリフルオロメチルフェニルスルホニル、4-クロロフェニルスルホニル、4-メチルフェニルスルホニル、4-メトキシフェニルスルホニル、2,4,6-トリメチルフェニルスルホニル、モルホリノスルホニルまたはメタンスルホニルであり、ならびに、R1およびR2の他方はHである。他の事例において、R1およびR2の一方または両方は、シアノであってもよく、ならびに、H、および、特に、例えばハロ、CN、NO2、メトキシ等で1つ以上の位置で置換されていてよく、ならびに、任意に巨大分子への結合を可能にする官能基をさらに含むフェニルなどの上記の許容可能な置換基から任意に選択される他のものであり得る。さらなる実施形態においては、R1およびR2の一方がシアノであると共に他方がHである。他の組の事例において、R1およびR2の一方または両方は、置換されていてもよいベンゾイルであると共に、他方は、水素、または、置換されていてもよいフェニルなどの他の好適選択肢のいずれかである。さらなる実施形態において、R1およびR2の一方は、N,N-ジアルキルアミノカルボニルなどのアミノカルボニルまたはモルホリノカルボニルであると共に他方はHである。追加の実施形態において、R1およびR2の一方は、上記の特定の実施形態のいずれか1つであって、巨大分子または巨大分子への結合を可能にする官能基をさらに含み、ならびに、R1およびR2の他方はHである。R1およびR2が結合して環構造を形成している場合、これは、R1-CH-R2部分が、例えば、などの部分構造を形成し、および、その形態は、上記のとおり電子求引性基および/または電子供与性基で置換されていてもよい基を含む式中、Gは、結合例えば、9-フルオレニル、C=O、SO、SO2、CA2またはCA2CA2であり、Aの各々は、独立して、HまたはClである。さらなる実施形態において、R1およびR2は、これらが結合しているCHと一緒になって、巨大分子または巨大分子への結合を可能にする官能基をさらに含む、未置換のフルオレニルまたはフルオレニルを形成する。特定の実施形態において、R1およびR2は、これらが結合しているCHと一緒になって、フルオレニル、または、アルキルアジド、特にアジド-N-メチルCH23-6アルキル-アミドメチルで置換されているフルオレニルを形成する。各R5は、独立してHであるか、または、各々が置換されていてもよい、アルキル、アルケニルアルキル、アルキニルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールあるいはヘテロアリールアルキルである。特定の実施形態において、各R5はHである。他の実施形態においては、R5の一方がHであると共に他方が置換アルキルまたは置換フェニルである。さらに他の実施形態においては、R5の一方がHであると共に、他方がアジドアルキル基を含む。さらに他の実施形態においては、R5の一方がHであると共に、他方がアジド-CH23-6アルキル、モノアルキルアミノ-CH23-6アルキル、N3CH23-6NMeCOCH23-6-または-CH23-6-CO2H、または、その保護変種である。追加の実施形態においては、R5の一方が巨大分子または巨大分子への結合を可能にする官能基をさらに含む上記の特定の実施形態のいずれか1つであると共に、R5の他方がHである。B基は、各々が置換されていてもよい、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキルであり得る。本発明の好ましい実施形態において、Bは、置換されていてもよいアリール、または、置換されていてもよいヘテロアリールである。本発明の特定の実施形態において、Bは、各々が正のハメットσ定数を有する少なくとも1つの基で置換されているアリールまたはヘテロアリールである表1。本発明の特定の一実施形態において、Bは、フェニルであるか、または、アルコキシカルボニル、カルボキサミド、スルホンアミド、CN、NO2あるいはBrで置換されているフェニルである。さらなる実施形態において、Bは未置換フェニルである。さらなる実施形態において、Bは、未置換フェニルであるか、または、ジエチルミノカルボニル、モルホリノカルボニルあるいはモルホリノスルホニルで置換されているフェニルである。さらなる実施形態において、Bは、フェニル、プロパルギル、4-ブロモフェニル、4-エトキシカルボニルフェニル、プロピル、4-N,N-ジエチルカルボキサミドフェニル、4-モルホリノカルボニルフェニルまたは4-モルホリノスルホニルフェニルである。さらなる実施形態において、Bは、フェニル、4-N,N-ジエチルカルボキサミドフェニル、4-モルホリノカルボニルフェニルまたは4-モルホリノスルホニルフェニルである。追加の実施形態において、Bは上記の特定の実施形態のいずれか1つであり、さらに、巨大分子または巨大分子への結合を可能にする官能基を含む。特定の実施形態において、mは0である。他の実施形態において、本発明は、式Xの化合物:式中、xは、0、1、2または3であり;各R10は、独立して、メチル、トリフルオロメチル、メトキシまたはハロであり;Bは、アルコキシカルボニル、カルボキサミド、スルホンアミド、CN、NO2またはハロで置換されていてもよいフェニルであり;Zは、O、Sあるいは非塩基性Nを介してカップリングされている薬物もしくはプロドラッグの残基であるか、または、このようなカップリングを可能にする脱離基であり;スペーサは、各々が置換されていてもよい、アルキル、ヘテロアルキル、アリールまたはアラルキル基を含むリンカーであり;およびMMは巨大分子であるか、または、巨大分子への結合を可能にする官能基であるを想定している。他の実施形態において、本発明は、式XX:式中、R1、R2、R5、mおよびBは、式Vについて上記に定義されているとおりであるの化合物を想定している。式XXのさらなる実施形態において、mは0である。式XXのさらなる実施形態において、mは0であり;R1は、フェニルスルホニル、置換フェニルスルホニル、メタンスルホニル、R92N-SO2式中、R9は式Vについて定義されているとおりであるまたはCNであり;R2はHであり;R5の一方はN3CH25であると共にR5の他方はHであり;ならびに、Bはフェニルまたは置換フェニルである。他の実施形態において、mは0であり;R1は、フェニルスルホニル、置換フェニルスルホニル、メタンスルホニル、R92N-SO2またはCNであり;R2はHであり;一方のR5は置換されていてもよいアルキルであると共に他方のR5はHであり;ならびに、Bはフェニルまたは置換フェニルであって、ここで、R1、R5およびBの1つは、巨大分子への結合をさらに含む。式XXのさらなる実施形態において、巨大分子は、直鎖、分岐または多枝ポリエチレングリコールである。式XXのさらなる実施形態において、mは0であり;R1は、フェニルスルホニル、置換フェニルスルホニル、メタンスルホニル、R92N-SO2またはCNであり;R2はHであり;R5の一方はポリエチレングリコールにさらに結合されている置換アルキルであると共にR5の他方はHであり;ならびに、Bは置換フェニルである。調製他の態様において、本発明は、式Vの化合物を調製する方法を提供する。当業者は、式I、II、III、IVおよびXの化合物は、式Vの化合物のサブセットであることを認識するであろう。式IIの化合物の調製式IIのリンカー化合物を調製する方法は、当該技術分野において公知である、N-ヒドロキシメチル-、N-アルコキシメチル-およびN-ハロメチル-アミドの調製方法、または、単純なN-ハロメチル-、N-アルコキシメチルまたはN-チオメチル-カルバメートの調製方法MajumdarSloan,BioorganicMedicinalChemistryLetters200717:1447-1450、本明細書において参照により援用されていると同様であり、図5に示されている。式IIの化合物は、アルコールR1R2C-C=CmCR52OH図5および以下の式Aおよびm=1である類似体から調製される。このようなアルコールの合成は、例えば、国際公開第2009/158668A1号パンフレットとして公開されているPCT国際特許出願公開米国特許第2009/048943号明細書本明細書において参照により援用されているにおいて記載されている。例が、図6および以下の実証例において記載されている。mが0であるアルコールR1R2C-C=CmCR52OH式Aは、R1R2CH2と例えばブチルリチウム、NaH、リチウムジイソプロピルアミド、リチウムビストリメチルシリルアミドなどの強塩基とを反応させることにより形成されるカルバニオンR1R2CH-の式Aの化合物を生成するための分子との付加により調製され得る。あるいは、mが0であると共に一方のR5がHである式Aの化合物は、2ステッププロセスにより調製され得る。第1のステップにおいて、R1R2CH2と強塩基とを反応させることにより形成されるカルバニオンR1R2CH-のエステルR5-C=OOR式中、Rは低級アルキルであるとの付加により、中間体ケトンR1R2CH-CR5=Oが生成され、これが、第2のステップにおいて、例えばNaBH4またはNaBH3CNなどの好適な還元剤と反応して、一方のR5がHである式Aの化合物がもたらされ得る。例えば、R1R2CH2がフルオレンである場合、これは例えば強塩基と反応してフルオレニルカルバニオンを形成し、次いで、R52-COと反応する。反応は以下のとおりである。mが1であると共に両方のR5がHであるアルコールR1R2C-C=CmCR52OHは、例えばNaH、ブチルリチウム、リチウムビストリメチル-シリルアミドなどの強塩基を用いるR1R2CH2のリチウム化により誘導されるカルバニオンをメチル3-ジメチルアミノ-アクリレートなどの不飽和化合物に付加して中間体エステルを生成するこれは、1つのステップまたは複数のステップを介して対応する不飽和アルコールに還元され得ることにより調製され得る。例えばOrg.Lett.20057:4153-5に記載されている、上記に示されている不飽和アルデヒドと置換または非置換のアリールボロン酸、アリール-BOH2との、パラジウム触媒の存在下での反応は、mが1であり、一方のR5が置換アリールであると共に一方のR5がHである化合物をもたらす。あるいは、上記に示されている不飽和アルデヒドとSoderquist法によるアルキルボランとの反応は、一方のR5がHであると共に他方が-CH2CH=CH2または-CH2CCHである化合物をもたらす。Burgos,C.H.,etal.,J.Am.Chem.Soc.2005127:8044を参照のこと。次いで、アルコールR1R2C-C=CmCR52OHは、例えば、:1アルコールのクロロホルメートへの活性化ホスゲン、もしくは、トリホスゲンおよびピリジンなどのホスゲン均等物で、および、クロロホルメートとB-NH2とのピリジンもしくはNaHCO3などの温和な塩基の存在下での反応;または、2アルコールとイソシアネートとの反応図5による当該技術分野において公知である方法によって、カルバメートR1R2C-C=CmCR52OCONHBに転換される。次いで、カルバメートR1R2C-C=CmCR52OCONHBが脱離基ドナーLの存在下にパラホルムアルデヒドと反応して式IIの化合物がもたらされる。特定の実施形態において、Lは、LがClである式IIの化合物をもたらすMe3SiClまたはHClなどの塩化物ドナーである。他の実施形態において、LがClである式IIのリンカー化合物は、クロロホルメートのヘキサヒドロトリアジン誘導体B-N-CH23との反応により調製される図5。反応は、何も添加せずに、または、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン、酢酸エチルまたはジオキサンなどの不活性溶剤の存在下で、0°C~100°Cの温度で、典型的には溶剤の沸点または沸点に近い温度で行われ得る。巨大分子の式IIまたはIIIの化合物へのカップリング式IIおよびIII中のR1、R2、R5またはB基は、巨大分子に結合する手段を提供する。巨大分子に共役させる方法が一般に、当該技術分野において公知である。巨大分子への結合を可能にするR1、R2、R5またはB基上の官能基が保護形態で存在している場合、式IIまたはIIIのリンカー-薬物化合物が、先ず、保護基が取り外される条件下に供される。それ故、tブチルエステルエーテルもしくはチオエーテル、または、tBOCカルバメートなどに係る保護基が酸-切断可能である場合、式IIまたはIIIのリンカー-薬物は先ず、保護基を取り外すために、十分な時間をかけてトリフルオロ酢酸で処理される。アリルエーテルもしくはエステル、または、Allocカルバメートなど、保護基が還元により取り外し可能である場合、式IIまたはIIIのリンカー-薬物は先ず、例えばテラキストリフェニルホスフィンパラジウムterakistriphenylphosphinepalladiumなどのパラジウム0触媒の存在下でフェニルシランなどの温和な還元剤で処理される。保護基がシリル保護基である場合、遊離ヒドロキシ基を露出させるための取り外しは、温和な酸またはフッ化物イオンでの処理により達成され得る。次いで、共役が当該技術分野において公知である方法を用いて実施される。1つの例示的な方法において、アミドリンケージは、アミノ基とカルボン酸基との間に形成され;それ故、アミノ基を含むリンカーをカルボン酸基を含む巨大分子と共役化させることも、カルボン酸基を含むリンカーをアミノ基を含む巨大分子と共役化させることも可能である。共役は、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミドDCCもしくは1-3-ジメチルアミノプロピル-3-エチルカルボジイミドEDCIなどのカルボジイミド、O-ベンゾトリアゾール-N,N,N,N-テトラメチルウロニウム-ヘキサフルオロリン酸HBTUなどのウロニウム試薬、または、ベンゾトリアゾール-1-イル-オキシ-トリス-ジメチルアミノホスホニウムヘキサフルオロリン酸塩BOPなどのホスホニウム試薬などの縮合剤の存在下で、リンカーおよび巨大分子を反応させることにより実施され得る。代わりに、例えば、塩化チオニルもしくは塩化オキサリルを用いる酸塩化物への転換、または、カルボジイミドおよびペンタフルオロフェノールを用いるペンタフルオロフェニルエステル、もしくは、カルボジイミドおよびN-ヒドロキシスクシンイミドを用いるN-ヒドロキシスクシンイミジルエステルなどの活性エステルへの転換により、カルボン酸基を先行するステップにおいて共役のために活性化させてもよく、次いで、第2のステップにおいて、得られる活性化カルボキシレートをアミンと反応させてもよい。アミンおよびカルボン酸基は、初期において、追加の化学的形質転換に係る安定性および/または親和性のために必要に応じて保護形態で存在していてもよく、共役ステップに先だって脱保護される。アミン基は、中性~酸性条件下で除去され得る、カルバメート、好ましくはtert-ブトキシカルボニルtBOC、アリルオキシカルボニルAllocまたは他のカルバメート基として保護され得る。カルボン酸は、中性~酸性条件下で除去され得る、tert-ブチルtBu、トリチルPh3C、アリルAllまたはメトキシメチルMOMなどのエステルとして保護され得る。第2の例示的な方法において、チオエーテル結合はチオール基とマレイミド基との間に形成され;それ故、チオール基を含むリンカーはマレイミド基を含む巨大分子に共役化されることも、マレイミド基を含むリンカーはチオール基を含む巨大分子に共役化されることも可能である。チオール基は、初期において、追加の化学的形質転換に係る安定性および/または親和性のために必要に応じて保護形態で存在していてもよく、共役ステップに先だって脱保護される。好適な保護基としては、例えばtert-ブチルチオエーテルtBuまたはトリチルチオエーテルなどの、中性~酸性条件下で除去され得るものが含まれる。第3の例示的な方法において、1,2,3-トリアゾールリンケージはアルキンとアジド基との間に形成され;それ故、アルキン基を含むリンカーはアジド基を含む巨大分子に共役化されることも、アジド基を含むリンカーは、アルキン基を含む巨大分子に共役化されることも可能である。共役反応は、典型的には銅もしくはルテニウムを用いる金属触媒下で実施されても、シクロオクチンなどの活性化アルキンを用いて触媒の不在下で実施されてもよい。1,3-ジエン例えば、シクロペンタジエンとジエノフィル例えばマレイミドとの間の例えばディールスアルダー反応などの他の環付加反応もまた用いられ得る。第4の例示的な方法において、エナミノ-ケトンリンケージはアミノ基と1,3-ジカルボニル基との間に形成され;それ故、アミノ基を含むリンカーは、1,3-ジカルボニル基を含む巨大分子に共役化されることも、1,3-ジカルボニル基を含むリンカーは、アミン基を含む巨大分子に共役化されることも可能である。一実施形態においては、1,3-ジカルボニル基を含むリンカーは、好適には反応性のリシンε-アミノ基を含むm38C2などの抗体と反応するDoppalapudi,etal.,BioorganicMedicinalChemistryLetters200717:501-506、本明細書において参照により援用されている。それ故、R1、R2、R5またはB基は、独立して、巨大分子との共役を可能にするために、保護されていてもよいアミン、保護されていてもよいカルボン酸、保護されていてもよいチオール、マレイミド、アルキンまたはアジド基を含んでいてもよい。一旦共役化されると、これらの基は、独立して、カルボン酸アミド、チオエーテルまたは1,2,3-トリアゾール基を介して結合された巨大分子により任意に置換され得る。式IIまたは式IVの化合物の薬物/プロドラッグへのリンケージ式IIIまたはIの化合物は、それぞれ、Lが、トシレート、アルキルスルホネート、ハロゲンまたはR6R7Sなどの好適な解離基である、式IIまたはIVの化合物と、OH、SHまたは非塩基性NH基を含む薬物DHとの、温和な塩基の存在下の無水条件下での反応により調製される。好適な塩基としては、トリエチルアミンおよびN,N-ジイソプロピルエチルアミンなどの第三級アミン、ピリジンまたは4-ジメチルアミノピリジンが含まれる。反応混合物は、反応を加速させるために、任意に、NaIまたはヨウ化テトラアルキルアンモニウムを含んでいてもよい。好適な溶剤としては、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、酢酸エチル、ジクロロメタン、アセトンおよびクロロホルムを含むいずれかの不活性無水溶剤が含まれる。いくつかの事例においては、例えば、薬物がフェノールまたは非塩基性NHを含んでいる場合、例えばNaH、リチウムビストリメチルシリルアミド、リチウムジイソプロピルアミドなどの強塩基との反応により薬物の塩を予め形成しておくことが有利であり得る。薬物がペプチドである本発明の一実施形態において、ペプチドの末端アミノ酸は、本発明のリンカーに結合したピログルタミル残基であり得る。このようなペプチドは、最終カップリングステップがリンカー-ピログルタミン酸残基を用いる、ペプチドの化学合成により調製され得る。このようなリンカー-ピログルタミン酸残基は、例えばピログルタミン酸アリルなどの好適なピログルタミン酸エステルの塩の、本発明の化合物IIまたはIVでのアルキル化によって調製され得る。例えば、シランなどの還元剤の存在下でパラジウム触媒を用いてエステル保護基を取り外した後、リンカー-ピログルタミン酸残基を、標準的な方法を用いるペプチド合成において用いることが可能である。投与および使用薬物を制御可能な速度で放出するよう設計されている本発明の共役体は、一般的な医薬製剤と同様に対象に投与される。対象は、マウス、ラットあるいはウサギなどのモデル系であっても、ヒト患者であっても、伴侶動物、家畜および鳥類対象などの獣医学的対象であってもよい。本発明の共役体は、典型的には、普通静脈注入などの注入により投与されるが、経口投与、座薬による投与、経皮または経粘膜投与などの他の投与メカニズムもまた本発明の範囲に包含される。投与レベルは、薬物の性質、処置されるべき容体、対象の性質、および、担当する専門家の見解に依存することとなる。特定の薬物またはプロトコルに対する適切な放出速度の選択もまたこれらの要因に依存する。それ故、本発明の化合物の使用および投与は施術者の技量の範囲内である。さらに、上記のとおり、本発明の共役体は、皮下注入が好ましいリンパ系疾病の処置に特に有用であると共に有利である。他に明記されていない限りにおいて、本明細書において引用されているすべての文献は、参照によりそれらの全体が援用される。以下の実施例は、例示が意図されており、本発明を限定することは意図されていない。実施例1β-脱離による切断が可能な基放出速度の評価のために、潜在的なpKa修飾因子置換芳香族化合物、ケトン、ニトリル、スルホンとして一連の官能基を有する一連のリンカー骨格を設計し、調製し、および、カルバメート結合を介してNe-2,4-ジニトロフェニル-L-リシンNe-DNP-Lysに結合した。水溶性であると共にHPLC-UV分析が可能である強発色団であるために、DNP-Lysを放出される部分として選択した。この実験は、カルバメートの切断速度は、トリガ基の特定の置換基を選択することで制御可能であることを実証する。モデルDNP-リシン誘導体を、整理番号67057-20003.00として出願した同時継続中の出願に記載のとおり調製した。これらの化合物からのNε-2,4-ジニトロフェニル-L-リシンの放出速度を、pH7.4またはpH8.3、37°Cで、HPLC分析により測定した。放出反応の動態学的分析を、350nmでUV/visモニタを用いてHPLCC18;線形メタノール/水0.5HOAc勾配により実施した。LysDNPPおよび出発材料Sピーク下面積を積分してR=P/SPとして反応Rの程度を判定した。反応速度は、ln1-R対時間のプロットの線形回帰分析により得た線の傾きから算出した。pH7.4および/または8.3でのDNP-Lysカルバメートのβ-脱離切断のt1/2値が表2に示されている。表237°CでのNe24ジニトロフェニルLリシンの放出に係る動態データ表2に示されているとおり、カルバメートの脱離およびNε-2,4-ジニトロフェニル-L-リシンの放出に係る半減期は、pH7.4では2時間から1650時間超の間変化した。切断がβ-脱離反応により形成されたことは異なる半減期により明らかにされ、観察では、O-ベンジル-N-Nε-2,4-ジニトロフェニル-L-リシン-カルバメートO-アルキル分断されることができないは、37°CおよびpH7.4で5日間後に、Nε-2,4-ジニトロフェニル-L-リシン0.25切断の推定検出限界未満の観察可能な放出を示さなかったt1/2>3年。O-ベンジル-N-Ne-2,4-DNP-Lysカルバメートは、37°Cで1週間後に、50ヒト血清中において検出可能な加水分解を示さなかった。これは、カルバメートの血清ヒドロラーゼに対する安定性を実証していた。一般に、C-Hと比して、aβ位の電子吸引基は速度を高め;bα位のアルキル基は速度を高め;および、cα位のアリール部分は速度を低下させる。良好な直線自由エネルギー関係が置換フェニルスルホニルエチルリンカーについて観察され、ハメットσパラメータを用いた、SARに基づくこの系列における他の置換リンカーに係る放出速度の推定が可能であった。それ故、置換基を選択して、遅い放出速度例えば、4-OMe、σp=-0.27;4-OH、σp=-0.37;4-Me2N、σp=-0.83または中間の放出速度例えば、4-F、σp=0.06;4-Cl、σp=0.23;3-Br、σm=0.39;4-CF3、σp=0.54を提供することが可能である。実施例2クロロホルメートおよびN-ヒドロキシスクシンイミドカーボネートの一般的調製ピリジン0.33当量を、アルコールR1R2C-C=CmCR52OH1当量およびトリホスゲン0.33当量の氷で冷却した無水テトラヒドロフラン2mL/mmol中の激しく撹拌した溶液に滴下する。1時間後、混合物を周囲温度にし、一晩保持する。次いで、混合物をろ過し、ロータリーエバポレータで減圧下で濃縮する。得られる粗クロロホルメートR1R2C-C=CmCR52OCOClをさらに精製せずに用いる。N-ヒドロキシスクシンイミドカーボネートを調製するために、粗クロロホルメートを無水テトラヒドロフラン2mL/mmol中に溶解させ、ピリジン2当量およびN-ヒドロキシスクシンイミド4当量で、周囲温度で30分間処理する。混合物を酢酸エチルで希釈し、0.1NHCl、水および塩水で順次洗浄し、次いで、MgSO4で乾燥させ、ろ過し、蒸発させる。粗カーボネートR1R2C-C=CmCR52OCOSuをシリカゲルクロマトグラフィ酢酸エチル/ヘキサンにより精製する。実施例3カルバメートの一般的調製実施例2のクロロホルメート1当量のアセトン2mL/mmol中の溶液を、激しく撹拌したアミンBNH21当量とNaHCO32当量との水2mL/mmol中の混合物に滴下する。30分後、固形分として析出したカルバメートを減圧ろ過により回収し、水で洗浄し、乾燥させ;油として分離するカルバメートを酢酸エチルで抽出する。抽出物をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、蒸発させて粗カルバメートを得る。いずれの場合も、粗カルバメートR1R2C-C=CmCR52OCONHBをカラムクロマトグラフィーSiO2により、または、結晶化によりさらに精製する。あるいは、トリエチルアミン1当量を、アミンBNH21当量とクロロホルメート1当量との例えばジクロロメタン、テトラヒドロフランまたは酢酸エチルなどの不活性の無水溶剤中の混合物に添加する。周囲温度で1時間攪拌した後、混合物を乾燥するまで蒸発させ、残渣を酢酸エチル中に溶解させ、1NHCl、水、飽和水性NaHCO3および塩水で順次洗浄し、次いで、MgSO4で乾燥させ、ろ過し、蒸発させて粗カルバメートを得、これを上記のとおり精製する。あるいは、アルコールR1R2C-C=CmCR52OHを、中間体クロロホルメートを単離することなくカルバメートに転換する。ピリジン0.33当量を、アルコール1当量およびトリホスゲン0.33当量の氷で冷却した無水テトラヒドロフラン2mL/mmol中の激しく撹拌した溶液に滴下する。1時間後、混合物を周囲温度にし、一晩保持する。混合物を氷で冷却し、アミンBNH22当量を添加する。混合物を周囲温度にし、一晩保持する。次いで、混合物を乾燥するまで蒸発させ、残渣を酢酸エチル中に溶解させ、1NHCl、水、飽和水性NaHCO3および塩水で順次洗浄し、次いで、MgSO4で乾燥させ、ろ過し、蒸発させて粗カルバメートを得、これを上記のとおり精製する。実施例4カルバメートのN-クロロメチル化密閉したネジ蓋付きのバイアル中の、実施例31当量のカルバメートと、パラホルムアルデヒド3当量のホルムアルデヒドとの、1:1テトラヒドロフラン/クロロトリメチルシラン1mL/mmol中の混合物を清透な溶液が得られるまで55°Cで加熱する。混合物をロータリーエバポレータで減圧下で濃縮し、残渣を酢酸エチル中に溶解させ、ろ過し、再度濃縮して粗N-クロロメチルカルバメートR1R2C-C=CmCR52OCONBCH2Clを得る。実施例5N-メトキシメチルカルバメート実施例4のN-クロロメチルカルバメートのメタノール中の溶液を周囲温度で1時間静置し、次いで、乾燥するまで濃縮してN-メトキシメチルカルバメートR1R2C-C=CmCR52OCONBCH2OMeを得る。実施例6N-アルコキシメチルカルバメート、N-フェノキシメチルカルバメート、N-チオメチルカルバメートおよびN-チオフェニルメチルカルバメート薬物DH1当量由来のアルコール、フェノール、チオールまたはチオフェノールおよび実施例4のN-クロロメチルカルバメート1当量の、例えばテトラヒドロフラン、ジクロロメタンまたは酢酸エチルなどの不活性無水溶剤中の溶液を、トリエチルアミン1当量で滴下処理した。1時間後、混合物を乾燥するまで蒸発させる。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィにより精製する。実施例7O-9-フルオレニルメチル-N-プロパルギルカルバメート塩化9-フルオレニルメトキシカルボニル2.6gの20mLのアセトン中の溶液を、プロパルギルアミン塩酸塩0.91gとNaHCO32.5gとの20mLの水中の撹拌混合物にゆっくりと添加した。1時間後、固体析出物を減圧ろ過により回収し、水で洗浄し、空気乾燥させた。酢酸エチル/ヘキサンからの結晶化で生成物を得た。実施例8O-9-フルオレニルメチルN-4-ブロモフェニルカルバメートトリエチルアミン0.7mLを、4-ブロモアニリン0.85gと塩化9-フルオレニルメトキシカルボニル1.3gとの25mLのジクロロメタン中の撹拌混合物に添加した。混合物を周囲温度で1時間撹拌し、次いで、1NHCl、水、飽和水性NaHCO3および塩水で洗浄した。有機溶液をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、蒸発させた。実施例9O-9-フルオレニルメチルN-4-エトキシカルボニルフェニルカルバメートトリエチルアミン0.7mLを、エチル4-アミノ安息香酸塩0.85gと塩化9-フルオレニルメトキシカルボニル1.3gとの25mLのジクロロメタン中の撹拌混合物に添加した。混合物を周囲温度で1時間撹拌し、次いで、1NHCl、水、飽和水性NaHCO3および塩水で洗浄した。有機溶液をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、蒸発させた。実施例10O-9-フルオレニルメチルN-フェニルN-メトキシメチルカルバメートO-9-フルオレニルメチルN-フェニルN-クロロメチルカルバメート実施例14をメタノールに溶解させることにより調製した。1H-NMRd6-DMSOδ7.862H,d,J=7Hz,7.42-7.22m,9H,7.14m,2H,4.832H,brs,4.472H,d,J=6Hz,4.181H,m,3.113H,brs。実施例11ヒドロキシおよびチオール含有部分のリンカーへの共役この実施例は、ヒドロキシ含有分子がリンカー部分に容易に共役化されることを実証する。A.N-6-2,4-ジニトロフェニルアミノヘキサノイル-L-セリンアリルエステルステップ1.N-tert-ブトキシカルボニル-L-セリンアリルエステル:アリルブロミド2.3mL、26.6mmolおよびトリカプリルメチル塩化アンモニウム4.00g、9.90mmolのCH2Cl235mL中の撹拌溶液に、N-tert-ブトキシカルボニル-L-セリン1.03g、5.02mmolおよびNaHCO30.43g、5.12mmolの水16mL中の溶液を添加した。二相性反応混合物を、室温で48時間激しく撹拌した。これを水50mLで希釈し、CH2Cl23×50mLで抽出した。組み合わせた有機抽出物をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮して無色の油を得た5.95g。60ヘキサン/40酢酸エチルでの溶離が伴うThomsonInstrumentsSingleStep80gシリカゲルカートリッジを用いる精製で、LR2-11.01g、82を無色の油として得た。1HNMRDMSO-d6δ1.379H,s,3.632H,m,4.002H,m,4.532H,m,4.891H,t,J=6.2Hz,5.181H,dd,J=1.4Hz,J=10.6Hz,5.301H,dd,J=1.6Hz,J=17.1Hz,5.841H,m,6.981H,d,J=8.2Hz。ステップ2.N-tert-ブトキシカルボニル-L-セリンアリルエステル0.175g、0.731mmolの4M塩化水素/ジオキサン2mL中の溶液を周囲温度で40分間撹拌した。反応混合物をロータリーエバポレータで濃縮し、粗HCl塩を無水テトラヒドロフラン3mL中に採った。この溶液に、N-スクシンイミジル6-2,4-ジニトロアニリノヘキサノエート0.288g、0.791mmolおよびトリエチルアミン102mL、0.731mmolを添加した。反応混合物を室温で30分間撹拌し、溶剤を蒸発させた。残渣を酢酸エチルと水との間に分割し、相を分離した。有機相を飽和NaHCO3および飽和NaClで洗浄した。これをMgSO4で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮して粗生成物0.293gを黄色の油として得た。50ヘキサン/50酢酸エチル、続いて、酢酸エチルでの溶離が伴うThomsonInstrumentsSingleStep12gシリカゲルカートリッジを用いる精製で、生成物0.222g、72を黄色の油として得た。1HNMRDMSO-d6δ1.322H,m,1.52-1.644H,m,2.152H,t,J=7.0Hz,3.442H,m,3.591H,m,3.661H,m,4.331H,m,4.552H,m,5.021H,t,J=5.5Hz,5.171H,m,5.281H,m,5.831H,m,7.211H,d,J=9.5Hz,8.121H,d,J=7.9Hz,8.231H,dd,J=2.5Hz,J=9.4Hz,8.852H,m。B.O-N-9-フルオレニルメトキシカルボニル-N-フェニルアミノエチルN-6-2,4-ジニトロフェニルアミノヘキサノイル-セリンステップ1.N-6-2,4-ジニトロフェニルアミノヘキサノイル-L-セリンアリルエステル0.050g、0.118mmol、O-9-フルオレニルメチルN-フェニルN-クロロメチルカルバメート0.043g、0.118mmolおよびトリエチルアミン16.1mL、0.116mmolの無水CH2Cl22mL中の溶液を還流で1時間加熱した。さらなるアリコートのO-9-フルオレニルメチルN-フェニルN-クロロメチルカルバメート0.043g、0.118mmolおよびトリエチルアミン16.1mL、0.116mmolを添加し、還流を1時間維持した。溶液を室温に冷却し、CH2Cl2で希釈し、飽和NaCl溶液で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗材料0.145gを、50ヘキサン/50酢酸エチル、続いて、30ヘキサン/70酢酸エチルでの溶離が伴うThomsonInstrumentsSingleStep12gシリカゲルカートリッジを用いて精製して、中間体アリルエステル0.030g、33を黄色の油として得た。1HNMRDMSO-d6δ1.312H,m,1.52-1.634H,m,2.152H,t,J=7.3Hz,3.412H,m,3.43-3.702H,br.m,4.151H,br,m,4.43-4.545H,br.m,4.872H,br.m,5.141H,m,5.251H,m,5.791H,m,7.12-7.3812,m,7.822H,d,J=7.4Hz,8.211H,dd,J=2.5Hz,J=9.5Hz,8.251H,d,J=8.0Hz,8.842H,m。ステップ2.テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム00.002g、1.7μmolを、ステップ1からのアリルエステル0.030g、40μmolおよびフェニルシラン9.8mL、80μmolの無水テトラヒドロフラン0.5mL中の撹拌溶液に添加した。反応混合物を周囲温度で30分間撹拌し、次いで、濃縮した。シリカゲルおよびCH2Cl2を添加し、混合物を再度濃縮し、短いシリカゲルカラムに充填した。カラムを30ヘキサン/70酢酸エチル、続いて、酢酸エチル、および、最後に0.5酢酸を含有する酢酸エチルで溶離して、カルボン酸0.024g、86を黄色の油として生成した。1HNMRDMSO-d6δ1.312H,m,1.51-1.624H,m,2.142H,t,J=7.3Hz,3.402H,m,3.45-3.802H,br.m,4.141H,br.m,4.413H,br.m,4.872H,br.m,7.16-7.3012H,m,7.822H,d,J=7.6Hz,8.081H,d,J=8.1Hz,8.201H,dd,J=2.7Hz,J=9.6Hz,8.832H,m。0.1Mヘペス緩衝液中における、15mMNaCl、pH7.40、37°CでのN-6-2,4-ジニトロフェニルアミノヘキサノイル-セリンのO-N-9-フルオレニルメトキシカルボニル-N-フェニルアミノエチル-セリンからの放出に係る動態学が図4に示されている。C.S-N-9-フルオレニルメトキシカルボニル-N-フェニルアミノメチルN-2,4-ジニトロフェニル-システインN-DNP-システインアリルエステル82mgおよびO-9-フルオレニルメチルN-フェニルN-クロロメチルカルバメート91mgのジクロロメタン1mL中の溶液をトリエチルアミン35μLで1時間処理し、次いで、1:1酢酸エチル/ヘキサンを用いてシリカゲルを通してろ過し、乾燥するまで濃縮した。生成物をシリカゲルクロマトグラフィにより精製した。アリルエステル、フェニルシラン75μLおよびテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム15mgのTHF2.5mL中の溶液を周囲温度で10分間撹拌し、次いで、乾燥するまで蒸発させた。残渣をジクロロメタン中に溶解し、シリカゲルの5mLカラムに充填し、これを1:4酢酸エチル/ヘキサン、酢酸エチルおよび0.5酢酸/酢酸エチルで順次に溶離した。生成物を含有する画分を組み合わせ、蒸発させた。1H-NMRd6-DMSO:d13.71H,brs,9.011H,d,J=7Hz,8.851H,d,J=3Hz,8.251H,dd,J=3,9Hz,7.821H,d,J=7,7.40-7.25m,7H,7.25-7.15m,3H,7.11m,2H,4.96m,1H,4.81s,2H,4.30m,2H,4.08m,1H,3.18m,2H。S-N-9-フルオレニルメトキシカルボニル-N-フェニルアミノエチルN-2,4-ジニトロフェニル-システインからの、0.1Mヘペス緩衝液、15mMNaCl、pH7.40、37°CにおけるN-2,4-ジニトロフェニル-システインの放出の動態学が図3に示されている。実施例12O-9-2-N-6-アジドヘキサノイルN-メチルアミノエチルフルオレニルメチルN-フェニルN-クロロメチルカルバメートフルオレン-2-塩化カルボニルフルオレン-2-カルボン酸および塩化オキサリルから調製のTHF中の溶液を水性メチルアミン2モル当量に添加してN-メチルフルオレン-2-カルボキサミドを調製する。エーテル中のLiAlH4を用いるアミドの還元で2-メチルアミノメチルフルオレンを得る。アミンをジ-tert-ブチルジカルボネートとの反応により保護して2-N-tBOC-N-メチルアミノメチルフルオレンを得る。2-N-tBOC-N-メチルアミノメチルフルオレンの無水テトラヒドロフランTHF中の溶液を-78°Cに冷却し、次いで、リチウムビストリメチルシリルアミドのTHF中の溶液1.2モル当量で処理する。1時間後、ギ酸エチルを添加し、混合物を周囲温度にする。混合物を酢酸エチルで希釈し、0.1NHCl、水、飽和水性NaHCO3および塩水で順次洗浄し、次いで、MgSO4で乾燥させ、ろ過し、蒸発させて、2-N-tBOC-N-メチルアミノメチル-フルオレン-9-カルボキシアルデヒドを得る。この化合物をメタノール中に溶解し、NaBH4で処理して9-2-N-tBOC-N-メチルアミノメチルフルオレニルメタノールを得る。9-2-N-tBOC-N-メチルアミノメチルフルオレニルメタノールをTHF中に溶解し、実施例2の基本手順に従ってトリホスゲンおよびピリジンで処理してクロロホルメートを得る。クロロホルメートを実施例3の方法に従ってアニリンと反応させてO-9-2-N-tBOC-N-メチルアミノメチルフルオレニルメチルN-フェニルカルバメートを得る。カルバメートをトリフルオロ酢酸中に溶解してtBOC保護基を取り外す。乾燥するまで蒸発させた後、得られるアミンをTHF中に溶解し、N-6-アジドヘキサノイルスクシンイミドおよびトリエチルアミン2当量で処理してO-9-2-N-6-アジドヘキサノイル-N-メチルアミノメチルフルオレニルメチルN-フェニルカルバメートを得る。O-9-2-N-6-アジドヘキサノイル-N-メチルアミノメチルフルオレニルメチルN-フェニルカルバメートと1:1THF/クロロトリメチルシラン中のパラホルムアルデヒドとの反応で生成物N-クロロメチルカルバメートを得る。実施例13SN-38とのリンカー-薬物化合物この実施例は、特に薬物分子中のフェノール基を介した薬物分子の本発明の化合物とのリンケージを実証する。実施例12のN-クロロメチルカルバメート1当量、SN-381当量およびヨウ化ナトリウム10当量の無水アセトン中の溶液をトリエチルアミン1当量で処理する。生成物をシリカゲルクロマトグラフィにより精製する。実施例14PEGへの共役40-kDaPEG-アルキン2.5μmol;40-kDaPEG-アミンと5-ヘキシン酸のN-ヒドロキシスクシンイミドエステルとの反応により調製とアジド-リンカー50μmol;例えば、実施例12の分子とのTHF3mLおよび水1.6mL中の混合物を、0.1MCuSO450μL、DMSO50μL中の50mMトリス[1-ベンジル-1H-1,2,3-トリアゾール-4-イルメチル]アミンTBTAと、0.1Mアスコルビン酸ナトリウム200μLとの新たに調製した混合物で処理する。周囲温度で12時間後、混合物をロータリーエバポレータで濃縮してTHFを除去し、水で2mLに希釈し、SephadexG25カラムでゲル-ろ過する。次いで、巨大分子を含有する流出物を凍結乾燥し、残渣を2mLのTHF中に溶解し、5mLのメチルtert-ブチルエーテルを添加することにより生成物を析出させる。必要な場合には、ゲル-ろ過およびその後のステップを繰り返す。実施例15R5アジドアルキル-リンカーの調製の一般的スキーム例えばNaH、リチウムビストリメチルシリルアミドLiHMDSまたはリチウムジイソプロピルアミドLDAなどの強塩基の存在下での、R-CH2-トリガのアジドアルカノエートエステルN3CH2nCO2Rn=3~6とのクライゼン縮合ではケトンが得られ、これが、例えば水素化ホウ素ナトリウムなどの温和な還元剤とのメタノール中での反応によりアルコールに還元される。次いで、得られるアルコールをクロロホルメートを介してカルバメートに、次いで、上記のとおりN-クロロメチルカルバメート転換する。実施例16R5BOC-保護アミンリンカーの調製の一般的スキーム例えばNaH、リチウムビストリメチルシリルアミドLiHMDSまたはリチウムジイソプロピルアミドLDAなどの強塩基の存在下での、R-CH2-トリガのN-tert-ブトキシカルボニルN-アルキルアミノアルカノエートエステルn=3~6とのクライゼン縮合ではケトンが得られ、これを、例えば水素化ホウ素ナトリウムなどの温和な還元剤とのメタノール中での反応によりアルコールに還元する。次いで、得られるアルコールを、実施例3に記載のとおりアミンB-NH2を用いてカルバメートに転換する。カルバメートを、実施例4に記載のとおりN-クロロメチルカルバメートに転換する。アルコール、チオール、フェノールまたはチオフェノール基中の薬物分子とのカップリングの後、BOC基をトリフルオロ酢酸での処理によりカルバメートから取り外す。得られるアミンをEDCIなどの例えばカルボジイミドなどの縮合剤を用いてカルボン酸を含む巨大分子とカップリングする。実施例17R5アミド-アジドアルキル-リンカーの調製の代替スキームトリフルオロ酢酸での処理により実施例19の中間体BOC-保護カルバメートからBOC基を除去し、得られるアミンとアジドアルカノエートN-ヒドロキシスクシンイミドエステルn=3~6との反応でアジドアミドを得る。これを、実施例4に記載されているとおりN-クロロメチルカルバメートに転換する。実施例18スルホニル-トリガR5アミンリンカーの調製エチル2-フェニルスルホニルアセテートを過剰量のNaHを用いてTHF中で脱プロトン化し、N-6-ブロモヘキシルエチルカルバメートでアルキル化する。生成物を水素化アルミニウムリチウムを用いてエーテル中で還元してメチルアミノアルコールを得、これをBOCカルバメートとしてN-保護する。アルコールをクロロホルメートに転換し、ここから、既述の手法に従ってカルバメート、および、N-クロロメチルカルバメートに転換する。実施例19スルホニル-トリガR5アミド-アジドリンカーの調製トリフルオロ酢酸での処理により実施例18の中間体BOC-保護カルバメートからBOC基を除去し、得られるアミンとアジドアルカノエートN-ヒドロキシスクシンイミドエステルn=3~6との反応でアジドアミドを得る。これを、実施例4に記載されているとおりN-クロロメチルカルバメートに転換する。実施例20スルホニル-活性化R5酸リンカーの合成フェニルメチルスルホンをNaHでテトラヒドロフラン中で脱プロトン化し、その際グルタル酸無水物でアシル化してケト酸を得る。得られる酸をtert-ブチルエステルとして保護し、ケトンをNaBH4を用いて還元する。得られるアルコールをクロロホルメートを介してカルバメートに転換し、ここから、上記のとおりN-クロロメチルカルバメートに転換する。実施例21スルホニル-活性化酸リンカーを有するリンカー-薬物化合物の調製およびPEGへの共役実施例20のリンカーを、1当量のトリエチルアミンの存在下に薬物DHと反応させる。得られる保護されたリンカー-薬物化合物をトリフルオロ酢酸で処理し、得られる遊離カルボン酸を、EDCIを用いてアミノ-ポリエチレングリコールに共役化する。メチルt-ブチルエーテルMTBEの添加によりアセトニトリルから共役体を析出させ、次いで、サイズ排除クロマトグラフィにより精製する。実施例22結合ペプチドの合成この実施例は、ペプチド合成は本発明の化合物を用いて容易に達成されることを実証する。ペプチド合成を、これらの残基の側鎖が他の残基の脱保護を伴わずに選択的に脱ブロック化され得るよう好適な保護形態で、セリン、チロシンまたはシステインを用いる固体相ペプチド合成のための標準的な方法を用いて実施する。部分的に脱保護されたペプチドを過剰量の式IIの化合物と温和な塩基の存在下で反応させる。樹脂を洗浄した後、生成物ペプチドを脱ブロック化し、樹脂から切断して、Dがペプチドである式IIIの化合物を得る。一例として、CCK8Asp-Tyr-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2を、例えば、米国特許第4,769,445号明細書本明細書において参照により援用されているに記載されている当該技術分野において公知である方法を用いて、Rink樹脂を用いて固体担体上に合成する。市販されているFmoc-Phe-Rinkアミド-MBHA樹脂を予めDMF中に30分間膨潤させ、次いで、ピペリジン/DMF体積基準で1:4、50ml中に室温で30分間懸濁および振盪させて、Fmoc基を除去する。生成物をろ過により単離し、DCM、DCM中の5N,N-ジイソプロピルエチルアミンDIEA、および、DCMで洗浄各々3×50mlして、Phe-Rinkアミド-MBHA-樹脂の遊離塩基を得る。Fmoc-AspOtBu-OH1.23g、3mmol、DCC0.62g、3mmolおよびHOBt0.69g、4.5mmolを、0°で1時間攪拌しながら50mlの体積基準で4:1のDCM/DMF中に溶解する。Phe-Rinkアミド-MBHA樹脂1meqをろ過した反応混合物析出したDCUは除去する中に懸濁させ、室温で2~15時間振盪する。Fmoc-Asp-OtBu-Phe-Rinkアミド-MBHA樹脂生成物をろ過により回収し、DCMで洗浄する。Fmoc-Asp-OtBu-Phe-Rinkアミド-MBHA樹脂を、ピペリジン/DMF体積基準で1:4、50ml中に室温で3分間懸濁および振盪させ、次いで、2回目として7分間振盪させてFmoc基を除去する。生成物をろ過により単離し、DMFおよびDCMで洗浄各々3×50mlしてAsp-OtBu-Phe-Rinkアミド-MBHA樹脂の遊離塩基を得る。Fmoc-Met-OH1.12g、3mmol、DCC0.62g、3mmolおよびHOBt0.69g、4.5mmolを、0°で1時間攪拌しながら50mlの体積基準で4:1のDCM/DMF中に溶解する。Asp-OtBu-Phe-Rinkアミド-MBHA樹脂1meqをろ過した反応混合物析出したDCUは除去する中に懸濁させ、室温で2~15時間振盪する。Fmoc-Met-Asp-OtBu-Phe-Rinkアミド-MBHA樹脂生成物をろ過により回収し、DCMおよびDMFで洗浄する。Fmoc-Met-Asp-OtBu-Phe-Rinkアミド-MBHA樹脂を脱保護し、Fmoc-Trp-OH1.28g、3mmol、Fmoc-Gly-OH0.89g、3mmol、Fmoc-Met-OH1.12g、3mmol、Fmoc-Tyr-OH1.37g、3mmolおよびBoc-AspOtBu-OH1.23g、3mmolで順次にカップリングさせて、Boc-AspOtBu-Tyr-Met-Gly-Trp-Met-AspOtBu-Phe-Rinkアミド-MBHA樹脂を得る。Boc-AspOtBu-Tyr-Met-Gly-Trp-Met-AspOtBu-Phe-Rinkアミド-MBHA樹脂をDCMで洗浄3×50mlし、O-9-フルオレニルメチルN-フェニルN-クロロメチルカルバメート10当量とトリエチルアミン1当量とのDCM中の混合物中に懸濁および振盪させる。樹脂をろ過により単離し、DCMで洗浄する各々3×50ml。得られるBoc-AspOtBu-TyrOX-Met-Gly-Trp-Met-AspOtBu-Phe-Rinkアミド-MBHA樹脂を樹脂から切断し、8フェノール、5チオアニソール、5水および33,6-ジオキサ-1,8-オクタンジチオールの混合物と一緒にトリフルオロ酢酸10mL/g樹脂中で4時間振盪することにより脱ブロック化する。樹脂をろ過により除去し、ペプチドを10体積のエーテルを添加することにより析出させる。粗ペプチドを逆相HPLCにより精製する。他の例において、システイン含有ペプチドを、S-アリルオキシカルボニルアミノメチル-システイン[Cysallocam]またはS-N-[2,3,5,6-テトラフルオロ-4-N-ピペリジノフェニル]-N-アリルオキシカルボニル-アミノシステイン[Cysfnam]残基を組み込む上記の方法を用いる固体相合成によって調製する。樹脂からの切断に先行して、システイン残基を、Ph3P4Pdおよびフェニルシランを用いてDCM中で選択的に脱ブロック化し、次いで、上記のとおり式IIの化合物を反応させる。ペプチドを最終的に脱ブロック化し、樹脂から取り出し、上記のとおり精製する。実施例235-フルオロウラシルのリンカー-薬物化合物Dが複素環式Nを介してカップリングさせた薬物の残基である本発明の化合物の一調製例として、式IIIのリンカー-薬物化合物を、5-フルオロウラシルおよび式IIの化合物から、TaylorandSloane,1-AlkylcarbonyloxymethylProdrugsof5-Fluorouracil5-FU:Synthesis,PhysicochemicalProperties,andTopicalDeliveryof5-FU,J.PharmaceuticalSci.199887:15-20、および、RobertsandSloane、Synthesisof3-Alkylcarbonyl-oxymethylDerivativesof5-Fluorouracil,J.HeterocyclicChem.39:905-910各本明細書において参照により援用されているにより用いられたものと同様の手法で調製し得る。それ故、LがClである式IIの化合物1mmolとNaI1.3mmolとの乾燥アセトニトリル1mL中の懸濁液を暗中で24時間撹拌し、次いで、ろ過してLがIである式IIの化合物の溶液を得る。濾液を、1-アリルオキシカルボニル-オキシメチル-5-フルオロウラシル[Liu,Fullwood,andRimmer,SynthesisofAllyloxycarbonylmethyl-5-fluorouracilandcopolymerizationswithN-vinylpyrrolidinone,J.MaterialsChem.200010:1771-1777]0.8mmolと1,8-ビスジメチルアミノナフタレンとの混合物と周囲温度で反応させる。6時間後、混合物をエーテルで希釈し、1時間撹拌し、ろ過する。濾液を濃縮して粗保護生成物を得、これを、テトラキストリフェニルホスフィン-パラジウム0とフェニルシランとの混合物で無水THF中で1時間処理してアリルオキシカルボニルメチル保護基を取り外す。混合物を蒸発させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィにより精製して、式IIIのリンカー-薬物化合物を得る。実施例246-アジドヘキサナルの調製16-アジド-1-ヘキサノール:6-クロロ-1-ヘキサノール25g、183mmolとアジ化ナトリウム32.5g、500mmolとの200mLの水中の混合物を還流で20時間加熱し、次いで、周囲温度に冷却し、酢酸エチルで3回抽出した。組み合わせた抽出物を塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、ろ過し、濃縮して生成物を薄い黄色の油として得た28.3g。26-アジドヘキサナル:固体トリクロロイソシアヌル酸TCCA;4.3gを、6-アジド-1-ヘキサノール7.15gと重炭酸ナトリウム5.0gとのジクロロメタン100mLおよび水10mL中の激しく撹拌した混合物に、少分量で添加した。添加の後、混合物をさらに30分間撹拌し、次いで、珪藻土のパッドを通してろ過した。有機相を分離し、飽和水性NaHCO3および塩水で順次洗浄し、次いで、MgSO4で乾燥させ、ろ過し、濃縮して生成物5.8gを得、これをさらに精製せずに用いた。実施例25アジドアルコールの調製n-ブチルリチウム3.1mL、5.0mmolのヘキサン中の1.6M溶液を、-78°Cに冷却したR-CH35.0mmolの無水テトラヒドロフランTHF15mL中の撹拌溶液に滴下した。添加の後、冷却浴を外し、混合物をゆっくりとおよそ30分間かけて0°Cにした。次いで、混合物を-78°Cに冷却し戻し、6-アジドヘキサナル5.5mmolを添加した。15分間攪拌した後、冷却浴を外し、混合物の温度が上昇するのを許した。混合物が清透になった時点で、5mLの飽和水性NH4Clを添加し、混合物の温度が引き続き周囲温度まで上昇するのを許した。混合物を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で順次洗浄し、次いで、MgSO4で乾燥させ、ろ過し、蒸発させて粗生成物を油として得た。ヘキサン中の酢酸エチル勾配を用いるシリカゲルでのクロマトグラフィで精製した生成物を得た。この方法に従って調製した化合物は以下を含む:1-4-トリフルオロメチルフェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプタノールR-CH3=4-トリフルオロメチルフェニルメチルスルホン;1-4-クロロフェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプタノールR-CH3=4-クロロフェニルメチルスルホン;1-フェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプタノールR-CH3=フェニルメチルスルホン;1-4-メチルフェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプタノールR-CH3=4-メチルフェニルメチルスルホン;1-4-メトキシフェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプタノールR-CH3=4-メトキシフェニルメチルスルホン;1-2,4,6-トリメチルフェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプタノールR-CH3=2,4,6-トリメチルフェニルメチルスルホン;1-モルホリノスルホニル-7-アジド-2-ヘプタノールR-CH3=4-メチルスルホニル-モルホリン;1-メタンスルホニル-7-アジド-2-ヘプタノールR-CH3=ジメチルスルホン;1-シアノ-7-アジド-2-ヘプタノールR-CH3=アセトニトリル;1-モルホリノカルボニル-7-アジド-2-ヘプタノールR-CH3=4-アセチルモホリン;および1-9-フルオレニル-7-アジド-2-ヘプタノールR-CH3=フルオレン。実施例26アジド-リンカークロロホルメートの調製ピリジン160μLを、実施例25のアジドアルコール1.0mmolとトリホスゲン500mgとの15mLの無水THF中の撹拌溶液に滴下した。得られた懸濁液を10分間撹拌し、次いで、ろ過し、濃縮して粗クロロホルメートを油として得た。この方法に従って調製した化合物は以下を含む:1-4-トリフルオロメチルフェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチルクロロホルメート;1-4-クロロフェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチルクロロホルメート;1-フェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチルクロロホルメート;1-4-メチルフェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチルクロロホルメート;1-4-メトキシフェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチルクロロホルメート;1-2,4,6-トリメチルフェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチルクロロホルメート;1-モルホリノスルホニル-7-アジド-2-ヘプチルクロロホルメート;1-メタンスルホニル-7-アジド-2-ヘプチルクロロホルメート;1-シアノ-7-アジド-2-ヘプチルクロロホルメート;1-モルホリノカルボニル-7-アジド-2-ヘプチルクロロホルメート;および1-9-フルオレニル-7-アジド-2-ヘプチルクロロホルメート。トリガ官能基を有さないモデル系への経路の途中で、6-アジドヘキシルクロロホルメートを、6-アジドヘキサノールから開始して上記のとおり調製した。実施例27アジド-リンカー-HSEカーボネートの調製実施例26のクロロホルメートの15mLの乾燥THF中の溶液を、N-ヒドロキシスクシンイミド350mgおよびピリジン250μLで10分間かけて順次に処理した。次いで、混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル中に再度溶解させた。0.1NHCl、水、飽和NaHCO3、水および塩水で洗浄した後、溶液をMgSO4で乾燥させ、ろ過し、蒸発させた。いくつかの場合において、HSEカーボネートは自然と結晶化し、これを酢酸エチル/ヘキサンから再結晶化させた。他の場合においては、粗HSEカーボネートを先ずヘキサン中の酢酸エチルの勾配を用いるシリカゲルでのクロマトグラフィにかけ、続いて、結晶化した。すべての化合物は、1-メタンスルホニル-7-アジド-2-ヘプタノールから得たものを除き結晶性であった。この方法に従って調製した化合物は以下を含む:O-[1-4-トリフルオロメチルフェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-O-スクシンイミジルカーボネート;O-[1-4-クロロフェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-O-スクシンイミジルカーボネート;O-[1-フェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-O-スクシンイミジルカーボネート;O-[1-4-メチルフェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-O-スクシンイミジルカーボネート;O-[1-4-メトキシフェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-O-スクシンイミジルカーボネート;O-[1-2,4,6-トリメチルフェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-O-スクシンイミジルカーボネート;O-[1-モルホリノスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-O-スクシンイミジルカーボネート;O-[1-メタンスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-O-スクシンイミジルカーボネート;O-[1-シアノ-7-アジド-2-ヘプチル]-O-スクシンイミジルカーボネート;O-[1-モルホリノカルボニル-7-アジド-2-ヘプチル]-O-スクシンイミジルカーボネート;O-[1-9-フルオレニル-7-アジド-2-ヘプチル]-O-スクシンイミジルカーボネート。この方法に従って、6-アジドヘキシルクロロホルメートから開始して、O-[6-アジドヘキシル]-O-スクシンイミジルカーボネートもまた調製した。実施例284-N,N-ジエチルカルボキサミドアニリンの調製1N,N-ジエチル4-ニトロベンズアミド:ジエチルアミン5.6mLを、4-ニトロベンゾイルクロリド5.0gの100mLのDCM中の氷冷溶液に添加した。1時間後、混合物を水、飽和水性NaHCO3および塩水で順次に洗浄し、次いで、MgSO4で乾燥させ、ろ過し、蒸発させて、静置させると結晶化する無色の液体を得た。酢酸エチル/ヘキサンからの再結晶で生成物を薄い黄色の結晶として得た4.6g。24-N,N-ジエチルカルボキサミドアニリン:N,N-ジエチル4-ニトロベンズアミド4.44gと10パラジウム炭素0.2gとの100mLのメタノール中の混合物を、ギ酸アンモニウム4.0gで周囲温度で2時間処理した。混合物を珪藻土を通してろ過し、濃縮した。残渣をDCM中に再度溶解し、0.5MNa2CO3、水および塩水で順次洗浄し、次いで、MgSO4で乾燥させ、ろ過し、蒸発させて結晶性材料を得た。酢酸エチル/ヘキサンからの再結晶で生成物アニリンを得た。同一の手法に従って、ジエチルアミンをモルホリンで置換することにより、4-モルホリノカルボニルアニリンも調製した。実施例29アジドカルバメートの調製実施例26の手法に従って2.5mmolのアジドアルコールから調製した粗クロロホルメートを20mLのTHF中に溶解させ、アニリン2.5mmolおよびトリエチルアミン0.7mL、5.0mmolを添加した。1時間後、混合物を酢酸エチルで希釈し、1NHCl、水、飽和NaHCO3および塩水で順次洗浄し、次いで、MgSO4で乾燥させ、ろ過し、蒸発させた。残渣を、酢酸エチル/ヘキサンを用いるシリカゲルでのクロマトグラフィにかけて生成物カルバメートを得た。この方法に従って調製した化合物は以下を含む:O-[1-フェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-N-[4-ジエチルカルボキサミドフェニルカルバメート;O-[1-モルホリノスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-N-[4-ジエチルカルボキサミドフェニルカルバメート;O-[1-メタンスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-N-[4-ジエチルカルボキサミドフェニルカルバメート;O-[1-フェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-N-[4-モルホリノカルボキサミドフェニルカルバメート;およびO-[1-フェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-N-[4-モルホリノスルホニルフェニルカルバメート。実施例30N-クロロメチルカルバメートの調製実施例29のアジドカルバメート1.0mmol、パラホルムアルデヒド45mg、クロロトリメチルシラン1mLおよびTHF1mLの密閉した20mLバイアル中の混合物を55°Cの浴中で17時間かけて加熱した。周囲温度に冷却した後、バイアルを開封し、混合物をロータリーエバポレータで粘性の油に濃縮し、これを酢酸エチル中に採り、再度濃縮した。残渣を2:1酢酸エチル/ヘキサン中に溶解し、ろ過し、濃縮してN-クロロメチルカルバメートを得、これをさらに精製せずに用いた。この方法に従って調製した化合物は以下:O-[1-フェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-N-[4-ジエチルカルボキサミドフェニル]-N-クロロメチルカルバメート;O-[1-モルホリノスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-N-[4-ジエチルカルボキサミドフェニル]-N-クロロメチルカルバメート;O-[1-メタンスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-N-[4-ジエチルカルボキサミドフェニル]-N-クロロメチルカルバメート;およびO-[1-モルホリノカルボニル-7-アジド-2-ヘプチル]-N-[4-ジエチルカルボキサミドフェニル]-N-クロロメチルカルバメートを含み、O-[6-アジドヘキシル]-N-[4-ジエチルカルボキサミドフェニル]-N-クロロメチルカルバメートもまた、トリガ基を有さない対照化合物への経路の途中で調製した。実施例31N-アルコキシメチルカルバメートの調製実施例30のN-クロロメチルカルバメート0.4mmolを5mLの乾燥アルコール中に溶解する。1時間後、混合物を乾燥するまで蒸発させ、残渣をシリカゲル酢酸エチル/ヘキサンでクロマトグラフィにかけて生成物を得る。この方法に従って調製した化合物は以下を含む:O-[1-フェニルスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-N-[4-ジエチルカルボキサミドフェニル]-N-メトキシメチルカルバメート;O-[1-モルホリノスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-N-[4-ジエチルカルボキサミドフェニル]-N-メトキシメチルカルバメート;およびO-[1-メタンスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-N-[4-ジエチルカルボキサミドフェニル]-N-メトキシメチルカルバメート。O-[6-アジドヘキシル]-N-[4-ジエチルカルボキサミドフェニル]-N-メトキシメチルカルバメートもまた、トリガ基を有さない対照化合物への経路の途中で調製した。実施例32アジド-リンカー-SN38の調製手法1塩基=DBU。SN-387-エチル-10-ヒドロキシ-カンプトテシン40mg、0.1mmolの5mLのTHF中の懸濁液を、16.5μLの1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデカ-7-エンDBUで処理した。清透な金色の溶液が30分後に形成された。実施例30のN-クロロメチルカルバメート0.11mmolの1mLのTHF中の溶液を添加したところ、粘性の析出物の形成が見られた。30分後、HPLC分析は、SN-38のアジド-リンカー-SN38付加物への約40の転換を示した。追加のDBU20μLおよびN-クロロメチルカルバメート0.04mmolを添加した。15分後、混合物を10水性クエン酸の添加により失活させ、ジクロロメタンDCMで抽出した。抽出物を、10クエン酸、水および塩水で順次に洗浄し、次いで、MgSO4で乾燥させ、ろ過し、蒸発させた。残渣をDCM中に溶解し、ろ過し、蒸発させて生成物を得た。手法2塩基=LiHMDS。5mLの4:1THF/DMF中のSN-3842mgの懸濁液を-78°C浴中で冷却し、リチウムビストリメチルシリルアミドのTHF150μL中の1.0M溶液で滴下処理した。混合物は塩基の添加で濃い緑色に変色し、続いて濃い金色が形成された。添加が完了した後、混合物を周囲温度にし、実施例30のN-クロロメチルカルバメート0.2μmolの1mLのTHF中の溶液を添加した。10分後、反応を10水性クエン酸の添加により失活させ、ジクロロメタンDCMで抽出した。抽出物を10クエン酸、水および塩水で順次に洗浄し、次いで、MgSO4で乾燥させ、ろ過し、蒸発させて黄色の油状の材料を得た。水で倍散して過剰量のDMFを除去して、粗生成物を黄色の固体として得た。残渣をDCM中に溶解し、ヘキサン中のアセトンの勾配を用いるシリカゲルでクロマトグラフィにかけて精製された生成物を得た。この手法に従って調製した生成物は以下を含む:R=フェニルスルホニル、R=4-N,N-ジエチルカルボキサミド;R=モルホリノスルホニル、R=4-N,N-ジエチルカルボキサミド;およびR=メタンスルホニル、R=4-N,N-ジエチルカルボキサミド。実施例334-armPEG-[DBCO]4の調製ペンタエリスリトール核を有するアミノプロピル末端基を有する40-kDa4-armポリエチレングリコールNOFAmerica,PTE400PA500mg、12.5μmol、トリエチルアミン20μLおよび6-アザ-5,9-ジオキソ-9-1,2-ジデヒドロジベンゾ[b,f]アゾシン-56H-イルノナン酸スクシンイミジルエステルDBCO-NHS、ClickChemistryTools,Macon,GA36mg、75μmolの5mLのTHF中の溶液を周囲温度で24時間撹拌した。生成物を反応混合物の50mLのメチルtert-ブチルエーテルMTBEへの添加により析出させた。析出物を減圧ろ過により回収し、減圧下で乾燥させて510mgの生成物を得た。実施例34放出性4-armPEG-SN38共役体の調製4-armPEG-[DBCO]4100mg、2.0μmolDBCOおよび実施例32のアジド-リンカー-SN3810μmolの1.5mLのTHF中の溶液を周囲温度で21時間維持した。混合物を濃縮し、次いで、メタノール中に再度溶解し、メタノールに対して透析10kDaカットオフメンブランして遊離アジドを除去した。ロータリーエバポレータでの濃縮の後、生成物を2mLのTHF中で溶解し、10mLのMTBEの添加により析出させた。析出物を減圧ろ過により回収し、減圧下で乾燥させて生成物共役体を得た。水中の20~100アセトニトリル勾配0.1TFAを用いるHPLC分析300AC4JupiterカラムPhenomenex、40°Cで調温したは、非共役化SN-38または遊離アジドは存在していなかったことを実証した。次いで、SN-38含有量を、361nmでε=22,500M-1cm-1を用いて水溶液のUV吸光度を計測することにより測定した。この方法に従って調製した放出性共役体は:各々R=4-N,N-ジエチルカルボキサミドを有する、R=フェニルスルホニル;R=メタンスルホニル;および、R=モルホリノスルホニルを含む。対照として、トリガ基を有さない共役体を同一の手法に従って調製した。実施例35SN-38のPEG-SN38共役体からの放出R=4-N,N-ジエチルカルボキサミドおよびR=フェニルスルホニルまたはメタンスルホニルである実施例34の4-armSN-38共役体のサンプルを緩衝液中に溶解し、37°Cで維持した。20μLのアリコートを定期的にHPLC300AC4JupiterカラムPhenomenex、40°Cで調温したに注入し、水中の20~100アセトニトリル勾配0.1TFAを用い、蛍光検出励起380nm;放射515nmを用いて分析した。これらの条件下では、遊離SN-38は5分間で溶離され、共役体は7分間で溶離された。ピーク面積を計測し、これを用いて指数関数的適合により反応速度を算出した。R=4-N,N-ジエチルカルボキサミドおよびR=フェニルスルホニルである0.1Mビシン中の共役体は、pH8.5、37°Cで、SN-38をT1/2=1.6時間で放出し、R=4-N,N-ジエチルカルボキサミドおよびR=メタンスルホニルである共役体は、SN-38を同一条件下で、T1/2=9時間で放出した。実施例36マウスにおける4-armPEG-SN38共役体の薬物動態学361nmε=22,500M-1cm-1でのUV吸光度による測定で1mMの最終SN-38濃度をもたらすよう、実施例34の4-armPEG-SN38共役体を10mM酢酸ナトリウム、pH5.0に溶解させることにより投薬溶液を調製した。投薬溶液を0.2μmシリンジフィルタを用いて無菌ろ過し、凍結させた。サンプルを、2μL/g体重で化合物当たり4匹のCD-1マウスに静脈内注入した。血液サンプルを以下の計画を用いて眼窩静脈叢から採集した:マウス1:1、16および72時間;マウス2:2および24時間;マウス3:4および32時間;マウス4:8および48時間。サンプルを直ぐに、分析まで、-80°Cで凍結させた。Nε-2,4-ジニトロフェニル-L-リシンの0.25mg/mL溶液の体積の三分の一を、0.0625mg/mLの最終濃度に対する内標準として血清サンプルの各々に加えた。pH10.75の200mMトリエチルアミンHCl緩衝液の体積の半分を血清サンプルの各々に加え、37°Cで16時間置いた。加水分解に続いて、血清タンパク質を三回分のメタノールで析出した。検量線を、マウス血清中で希釈し、同一の手法を用いて加水分解したR=CH3SO2およびR=4-N,N-ジエチルカルボキサミドの共役体のストック溶液から準備した。サンプルおよび標準を、H2O中のアセトニトリルの20~100勾配と0.1トリフルオロ酢酸とを用いるShimadzuHPLCJupiterC4300Å5μカラムで総遊離SN38について分析した。SN38を、380nm/515nmの励起/放射で設定した蛍光検出器で検出した。蛍光ピーク面積を用いて検量線からSN38濃度を算出した。PKSolutions薬物動態学ソフトウェアを用いてデータからの薬物動態学的パラメータを算出した。結果が図8に示されている。実施例37N-クロロメチルカルバメートでのペプチドチオールへの結合実施例30のN-クロロメチルカルバメート0.1μmolをチオール含有ペプチド0.1μmolの1.0mLのトリフルオロ酢酸TFA中の溶液に添加する。2時間後、5mLのエチルエーテルの添加により生成物を析出させ、遠心分離により回収する。析出物をエーテルで3回洗浄し、乾燥させる。これをアセテート緩衝液、pH5に溶解し、1-gBondElutC18カートリッジに充填する。カートリッジを0.1TFAを含有する水中のメタノールの段階的な勾配で洗浄して精製した生成物を溶離させる。実施例38N-アルコキシメチルカルバメートでのペプチドチオールへの結合実施例31のN-アルコキシメチルカルバメート0.1μmolをチオール含有ペプチド0.1μmolの1.0mLのトリフルオロ酢酸TFA中の溶液に添加する。2時間後、5mLのエチルエーテルの添加により生成物を析出させ、遠心分離により回収する。析出物をエーテルで3回洗浄し、乾燥させる。これをアセテート緩衝液、pH5に溶解し、1-gBondElutC18カートリッジに充填する。カートリッジを0.1TFAを含有する水中のメタノールの段階的な勾配で洗浄して精製した生成物を溶離させる。実施例39アジド-リンカーグルタチオンの調製O-[1-メタンスルホニル-7-アジド-2-ヘプチル]-N-[4-ジエチルカルボキサミドフェニル]-N-メトキシメチルカルバメート50mgを、還元グルタチオン50mgの1.0mLのトリフルオロ酢酸TFA中の溶液に添加した。2時間後、生成物を5mLのエチルエーテルの添加により析出させ、回収し、乾燥させた。析出物を5mLの10mM酢酸ナトリウム緩衝液、pH5に溶解し、1-gBondElutC18カートリッジに充填した。カートリッジを10mLの水/0.1TFAで洗浄して過剰量のグルタチオンを除去し、続いて、10mLの1:1メタノール/水/0.1TFAで洗浄して生成物を溶離した。生成物含有溶出液をロータリーエバポレータで乾燥するまで蒸発させた。実施例40チオール-結合ペプチドの共役実施例37または38のチオール-結合ペプチドアジド1.5当量およびDBCO-活性化ポリエチレングリコールPEG-DBCO1当量の水性緩衝液中の溶液をUV分光法により監視する。トリアゾールの形成に際して、301nmでのDBCOの特徴的な吸光度が失われる。次いで、反応混合物を10mM酢酸ナトリウム、pH5.0に対して透析10kDaカットオフメンブランして過剰量のアジドを除去する。実施例41PEG-共役化グルタチオン40-kDa直鎖mPEG-DBCO100mg、2.5μmolの2.5mLの10mM酢酸ナトリウム緩衝液、pH5.0中の溶液をS-[N-4-ジエチル-カルボキサミドフェニルN-6-アジド-1-フェニルスルホニルメチルヘキシルオキシ-カルボニルアミノエチル]グルタチオンメタノール中に65mg/mL;60μLの溶液と混合し、これを周囲温度で16時間保持し、次いで、水中で平衡化させたPD-10カラムGEHealthSciencesを通した。巨大分子を含有するカラムからの流出物を回収し、蒸発させた。実施例42ラットにおける4-armPEG-SN38共役体の薬物動態学実験2361nmε=22,500M-1cm-1でのUV吸光度による測定で1mMの最終SN-38濃度をもたらすよう、実施例42の4-armPEG-SN38共役体を10mM酢酸ナトリウム、pH5.0に溶解させることにより投薬溶液を調製した。投薬溶液を0.2μmシリンジフィルタを用いて無菌ろ過し、凍結させた。サンプルを、カニューレ処置したオスのスプラーグドーリーラットに100μL/100g体重で静脈注射により投与した。化合物当たり1匹のラットを全時間経過について用いた。血液サンプルを0、1、2、4、8、12、24、48、72および120時間で回収した。血清を分離し、凍結させた。ラット血清サンプルを氷上で解凍した。Nε-2,4-ジニトロフェニル-L-リシンの0.25mg/mL溶液の60μLアリコートを180μLの解凍した血清サンプルの各々に添加した。2.5μLの2M酢酸をこれらのサンプルの100μLアリコートに添加し、続いて、300μLのメタノールを析出した血清タンパク質に添加した。サンプルを氷上に1時間放置し、14,000rpmで遠心分離した。各サンプルの別個の100μLアリコートに、50μLの200mMEt3Nを添加し、アリコートを37°Cのインキュベータに一晩約16時間入れて、PEGからSN38を加水分解した。検量線を、40μMにラット血清Sigma-Aldrich中に希釈し、上記と同一の手法に従って処置したR=フェニルスルホニルである共役体のストック溶液から準備した。サンプルおよび標準を、H2O中にアセトニトリルの0~100勾配と0.1TFAとを用いるJupiterC4400A5uカラムでのShimadzuHPLCで、10分間にわたって、SN38共役体および総遊離SN38について分析した。SN38を、380nm/515nmの励起/放射で設定した蛍光検出器で検出した。サンプル濃度を、ExcelMicrosoftを用いる検量線への適合によって判定した。PKパラメータをPKsolutionsソフトウェアSummitPKを用いて算出した。実験の結果が図9に示されている。実施例43放出の動態学本発明の共役体からの薬物の放出速度は、HPLCなどのクロマトグラフィ法を含む当該技術分野において公知である方法によって容易に判定することが可能である。例えば、蛍光マーカーが薬物に対するモデル系として用いられる場合、遊離された蛍光化合物に起因する蛍光は、共役体により放射される蛍光と比して容易に判定される。本発明の共役体からの薬物のインビボ放出は、共役体の薬物動態学を同一サイズの非放出性共役体の薬物動態学と比して判定することにより計測され得る。小分子薬物に関して、放出される薬物は、すべてのモデル系の血漿から事実上直ぐにクリアランスされ、従って、血漿中の遊離薬物濃度の計測は基本的に無視可能であり、系の無処置の共役体のクリアランスを比較する場合に、共役体自体の濃度を計測して放出速度を算出する必要性があるのみである。このようなデータは、本発明の高分子量共役体に対してより好ましいクリアランス速度を示すために、マウスと比してラットにおいて入手することが好ましい。より詳細には、共役体を、ラットなどのモデル対象に例えば静脈内投与によって投与し、血液サンプルを定期的に採取し、血漿を単離する。次いで、時間に応じた血漿中の共役体レベルを判定する。これは、クロマトグラフィによる分離例えば、UV、蛍光または質量分析検出と組み合わせた除タンパク後のHPLC分析によって行っても、適切な場合には、ELISA、生理活性または蛍光などの直接アッセイによって行ってもよい。上記のとおり、巨大分子共役体は単一コンパートメントモデルに準拠しており、本発明の共役体は以下の2つのメカニズム、すなわち、共役体からの薬物の放出、および、無処置の共役体のクリアランス例えば、腎臓ろ過の一方により血漿から消失する可能性がある。血漿からの放出性共役体の損失速度は、それ故、薬物の放出による損失の速度と共役体のクリアランスによる損失の速度との和である。対照的に、非放出性共役体の損失速度は、薬物は放出されないため、単に血漿からの共役体のクリアランス速度である。それ故、本発明の共役体からの薬物の放出速度は、放出性共役体の損失速度と対応する非放出性共役体の損失速度とにおける差として算出することが可能である。これは、速度における差を直接的に得ることにより行うことも、図9aおよび9bに示されているとおり、lnR/N式中、Rは放出性共役体の濃度であり、Nは非放出性共役体の濃度である対時間のプロットの傾きから算出することも可能である。パネルaに示されているとおり、生データは単に、種々の共役体の濃度の対数ln、および、時間に応じた安定な共役体の対数lnを示す。パネルbは、上記の計算により得られる種々の放出性共役体の放出速度における差を示す。当然ながら、安定な共役体はゼロ放出速度を示すが、一方で、サンプル共役体における放出のためのトリガの種々の実施形態の薬物の放出速度が示されている。図10は、トリガのインビトロおよびインビボ性質に応じた速度定数の変動が同一のパターンに従うことを示す。"