"一般式I:式中、lは、1から6までの整数を表し、mは、0、1、または2であり、nは、0、1、または2であるで表される、シクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物、またはその薬学的に許容できる塩。lが1、mが0または1、nが0または1である、請求項1記載のシクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物、またはその薬学的に許容できる塩。一般式II:式中、lは、1から6までの整数を表すで表される、請求項1記載のシクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物、またはその薬学的に許容できる塩。一般式III:式中、lは、1から6までの整数を表すで表される、請求項1記載のシクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物、またはその薬学的に許容できる塩。一般式1:で表される、シアノエチルBSH1を、アルカリの存在下において、一般式2:式中、Xは、ハロゲンであり、lは、1から6までの整数を表し、mは、0、1、または2であり、nは、0、1、または2であるで表される化合物2と反応させる工程を含む、シクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物の製造方法。本発明はまた、一般式1で表される、シアノエチルBSH1を、アルカリの存在下において、一般式3:式中、Xは、ハロゲンであり、lは、1から6までの整数を表し、mは、0、1、または2であり、nは、0、1、または2であるで表される化合物3と反応させる工程を含む、シクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物の製造方法。上記の通り、BNCTに利用できるガン細胞に選択的に取り込まれる、新たなホウ素含有化合物を開発することが望まれている。本発明の目的は、BNCT等に利用できる、新たなホウ素含有化合物およびその製造方法を提供することにある。本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、以下に示す、シクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物およびその製造方法により上記目的を達成できることを見出し、本発明を完成するに到った。即ち、本発明は、一般式I:式中、lは、1から6までの整数を表し、mは、0、1、または2であり、nは、0、1、または2であるで表される、シクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物、または薬学的に許容できる塩に関する。本明細書において、ホウ素化合物は、以下のように定義される。上記シクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物において、lは1、mは0または1、nは0または1であり得る。本発明は、また、下記一般式II:式中、lは、1から6までの整数を表すで表される、シクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物、および薬学的に許容できる塩に関する。本発明は、また、一般式III:式中、lは、1から6までの整数を表すで表される、シクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物、に関する。本発明はまた、一般式1:で表される、シアノエチルBSH1を、アルカリの存在下において、一般式2:式中、Xは、ハロゲンであり、lは、1から6までの整数を表し、mは、0、1、または2であり、nは、0、1、または2であるで表される化合物2とを反応させる工程を含む、シクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物の製造方法、に関する。本発明はまた、一般式1で表される、シアノエチルBSH1を、アルカリの存在下において、一般式3:式中、Xは、ハロゲンであり、lは、1から6までの整数を表し、mは、0、1、または2であり、nは、0、1、または2であるで表される化合物3とを反応させる工程を含む、シクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物の製造方法、に関する。当該製造方法によれば、一般式Iで表されるシクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物を得ることができる。本発明のシクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物Iは、疎水性部位とアミノ酸骨格を併せ持ち、癌特異的必須アミノ酸トランスポーターによるがん細胞への取り込みに都合よく使用することができる新規物質である。そのため、本発明のシクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物は、特に、ガン細胞をターゲットとするBNCTに有用である。以下、本発明の下記一般式Iで表されるシクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物、またはその薬学的に許容できる塩について説明する。一般式Iにおいて:式中、上記lは、1から6までの整数を表し、mは、0、1、または2であり、nは、0、1、または2である。上記シクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物において、lは1、mは0または1、nは0または1であるような化合物、またはその薬学的に許容できる塩が、好ましい。このうち特に、一般式II:式中、lは、1から6までの整数を表すで表される、シクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物、または薬学的に許容できる塩であることが好ましい。あるいはまた、一般式III:で表される、シクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物、であることが好ましい。さらに好ましくは、本発明の化合物は、で表されるシクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物、またはで表されるシクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物であることが最も好ましい。以下では、前記一般式Iで表されるシクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物の製造方法について説明する。本発明のシクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物Iの製造方法では、原料として、一般式1:で表されるシアノエチルBSHを用いる。このようなBSH化合物は、限定はされないが、文献既知の方法例えば、Gabel,D.;Moller,D.;Harfst,S.;Rosler,J.;Ketz,H.Inorg.Chem.1993,32,2276-2278.に従い、合成することができる。すなわち、この方法では、BSHとβブロモプロピオニトリルとを、アセトニトリル中で反応させ、次にテトラメチルアンモニウムヒドロキシドなどと処理して、目的のシアノエチルBSH化合物を得る。ここで、前記BSHは、ホウ素、水素およびイオウ原子から成る20面体のホウ素クラスター構造をとる化合物である。BSHは無機低分子化合物であるにもかかわらず、体積はベンゼン環より大きく、3つのホウ素原子が2つの電子を共有するいわゆるスリーセンターボンド構造をとり、電子が局在化した特異な構造をしている。このようなシアノエチルBSH1を、アルカリの存在下において、一般式2:式中、Xは、ハロゲンであり、lは、1から6までの整数を表し、mは、0、1、または2であり、nは、0、1、または2であるで表される化合物と反応させることで、本発明のシクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物を製造することができる。本発明のシクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物はまた、一般式1で表される、シアノエチルBSH1を、アルカリの存在下において、一般式3:式中、Xは、ハロゲンであり、lは、1から6までの整数を表し、mは、0、1、または2であり、nは、0、1、または2であるで表される化合物3と反応させ、さらに、アルカリ存在下還流することで、得られる。ここで、上記化学式2または3の製造方法は、限定はされないが、一例として、シクロブタン環を有する化合物を例にとって、その合成経路を示す。ここで、Bnは、ベンジル基である。まず、酢酸銅一水和物を酢酸に溶解させ、この溶液に亜鉛粉末を加え、dryジエチルエーテルに溶解させたアリルベンジルエーテルを加える。この溶液に、トリクロロアセチルクロリドと、三塩化ホスホリルを溶解させたdryジエチルエーテルを滴下させる。この反応液を還流し、撹拌して、室温にした後、ろ過を行う。ろ液を洗浄し、脱水を行った後、濃縮し、この残渣に、酢酸と亜鉛粉末を加え、還流下撹拌する。この反応液をろ過し、ろ液を濃縮した後、この残渣を酢酸エチルに溶解させ、中和して析出する亜鉛粉末をろ別する。このろ液を分液によりsatNaHCO3とBrineによる洗浄を行い、この有機層を脱水し、濃縮して、未反応のアリルベンジルエーテルを減圧留去した後、3-ベンジルオキシメチルシクロブタノンを得ることができる。次に、このようにして得られた3-ベンジルオキシメチルシクロブタノンを用いて、ベンジルオキシメチルシクロブタンを含むシスおよびトランスヒダントインを製造することができる。このようにして得られるベンジルオキシメチルシクロブタンを含むシスまたはトランスヒダントインを、アルカリ溶液と反応させ、さらに濃ハロゲン化水素溶液を加えて、還流することで、例えば、シスまたはトランス-1-アミノ-3-ブロモメチルシクロブタンカルボン酸臭化水素酸を得ることができる。次に、ベンジルオキシメチルシクロブタンを含むシスまたはトランスヒダントインを、ハロゲン化ヒダントインに変換することができる。さらに、上記化学式2または3の製造方法の別の方法として、シクロブタン環もしくはシクロヘキサン環、あるいはその他のシクロ環を有する化合物を製造し得る例について、その合成経路を示す。4-シクロヘキサノカルボン酸エチルエチレングリコールさらにパラトルエンスルホン酸1水和物をトルエンに溶解させ、その後、DeanStarkを用いて還流させる。反応終了後、減圧濃縮した後、5炭酸水素ナトリウム水溶液を加える。さらに、この混合溶液をエーテルにて抽出し、抽出したエーテル層を硫酸ナトリウムにて乾燥させた後、減圧濃縮する。その後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製することにより、ジオキソラン中間体を得ることができる。LiAlH4を無水THFに懸濁させた後、得られたジオキソラン中間体を滴下していく。さらに還流させた後、室温下にて、ゆっくりと、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を滴下していく。混合溶液をセライト濾過した後、得られた炉液を減圧濃縮する。残渣を酢酸エチルにて溶解させた後、酢酸エチル層を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、さらにBrineにて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥後、減圧濃縮させると、目的のアルコール中間体を得ることができる。THFに溶解させた上記アルコール中間体に0°Cにて、60NaHを添加する。撹拌の後、ベンジルブロマイドを加え、室温にて18時間撹拌させる。その後、1N塩酸水溶液にて、中和後、減圧濃縮する。そして、残った残渣をエーテルにて溶解し、水、Brineで洗浄した後、溶媒を減濃縮させる。そして、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製することにより、目的のエーテル中間体を得ることができる。上記エーテル中間体を1N塩酸水溶液に溶解させ、室温にて、1時間撹拌させ、反応溶液をクロロフォルムで洗浄した後、炭酸ナトリウムにて中和する。酢酸エチルにて抽出した後、有機層を硫酸ナトリウムにて乾燥後、減圧濃縮し、目的のケトン中間体を得ることができる。次に、ベンジルオキシケトン中間体を、ハロゲン化する。各工程では、適宜に、中和工程、精製工程を施した後に、次工程が施される。上記各工程における各生成物は、単離精製されても、そのまま次の工程に供してもよい。単離精製手段は、洗浄、抽出、再結晶法、各種クロマトグラフィーなどが包含される。各工程における各生成物は、これらの単離精製手段を単独で、あるいは適宜2種以上を組み合わせて使用して行うこともできる。このような化合物は、そのまま、あるいは薬学的に許容できる塩の形態で、あるいはそれらと薬学的に許容できるキャリアーと混合して当業者に公知の製剤の形で、あるいはBSH封入ウイルスエンベロープベクターなどの形で、ホウ素中性子捕捉療法BNCTに好都合に用いられうる。薬学的に許容できる塩には、無機塩基との塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機酸との塩、塩基性または酸性アミノ酸との塩などが挙げられる。無機塩基との塩の好適な例としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩ならびにアルミニウム塩、アンモニウム塩などが挙げられる。有機塩基との塩の好適な例としては、例えばトリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、NN-ジベンジルエチレンジアミンなどとの塩が挙げられる。無機酸との塩の好適な例としては、例えば塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸などとの塩が挙げられる。有機酸との塩の好適な例としては、例えばギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマール酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸などとの塩が挙げられる。塩基性アミノ酸との塩の好適な例としては、例えばアルギニン、リジン、オルニチンなどとの塩が挙げられ、酸性アミノ酸との塩の好適な例としては、例えばアスパラギン酸、グルタミン酸などとの塩が挙げられる。治療は、任意の適当な投与経路で、化合物が標的部位に蓄積するような方法で、本発明の化合物を含む薬剤を投与することによって行われる。本発明の化合物は、腫瘍に濃縮することが好ましい。化合物を含む製剤は一度に投与することもできるし、順次投与することもできる。製剤の投与を必要に応じて繰り返すことができる。所望であれば、腫瘍を外科的に可能な程度に除去した後、残りの腫瘍を本発明の製剤を使って破壊することも可能である。本発明のBSH誘導体製剤を用いる治療は、任意の適当な投与経路で、BSH誘導体が標的腫瘍中に蓄積するような方法で、投与することによって行われる。BSH誘導体は放射線照射前に腫瘍に濃縮することが好ましく、放射線照射前の腫瘍:血液比が約21または少なくとも15:1であると有利である。BSH誘導体は一度に投与することもできるし、順次投与することもできる。腫瘍内に化合物が望ましく蓄積した後、その部位に有効量の低エネルギー中性子を照射する。皮膚を通してその部位を照射することができるし、あるいはその部位を照射前に完全にあるいは部分的に暴露することもできる。BSH誘導体の投与とそれに続く放射線照射を必要に応じて繰り返すことができる。所望であれば、腫瘍を外科的に可能な程度に除去した後、残りの腫瘍を本発明のBSH誘導体を使って破壊する。もう1つの態様として、患者に適当量のBSH誘導体を投与し、天然に存在する中性子放射物質である252カリフォルニウムの有効量で照射する。これは腫瘍中に挿入し、適当な時間に取り出すことが好ましい。本発明のBSH誘導体投与の為に、適切な賦形剤、アジュバント、および/または薬学的に受容可能なキャリアーと混合して、単独で、あるいは他の薬剤と組み合わせて患者に投与され得る。特に好ましく用いられ得るキャリアーには、限定はされないが、生理食塩水、緩衝化生理食塩水、デキストロース、および水等が含まれる。本発明の一実施形態において、薬学的に受容可能なキャリアーは薬学的に不活性である。本発明のBSH誘導体の投与は、経口および非経口でなされ得る。非経口投与の場合、動脈内例えば、頚動脈を介する、筋肉内、皮下、髄内、クモ膜下腔内、脳室内、静脈内、腹腔内、または鼻孔内へなされうる。製剤は、散剤、顆粒剤、細粒剤、ドライシロップ剤、錠剤、カプセル剤、注射剤、液剤などのいずれの形態にもなり得る。また、その剤型に応じ、製剤学的に公知の手法により、適切な賦形剤;崩壊剤;結合剤;滑沢剤;希釈剤;リン酸、クエン酸、コハク酸、酢酸、および他の有機酸またはそれらの塩のような緩衝剤緩衝剤;等張化剤;防腐剤;湿潤剤;乳化剤;分散剤;安定化剤;溶解補助剤;アスコルビン酸のような抗酸化剤;低分子量約10残基未満のポリペプチド例えば、ポリアルギニンまたはトリペプチド;タンパク質例えば、血清アルブミン、ゼラチン、またはイムノグロブリン;親水性ポリマー例えば、ポリビニルピロリドン;アミノ酸例えば、グリシン、グルタミン酸、アスパラギン酸、またはアルギニン;単糖、二糖および他の炭水化物セルロースまたはその誘導体、グルコース、マンノース、またはデキストリンを含む;キレート剤例えば、EDTA;糖アルコール例えば、マンニトールまたはソルビトール;対イオン例えば、ナトリウム;および/または非イオン性界面活性剤例えば、ポリソルベート、ポロキサマー、などの医薬品添加物と適宜混合または希釈溶解することにより調剤することができる。等張性および化学的安定性を増強するこのような物質は、使用された投薬量および濃度においてレシピエントに対して非毒性である。処方および投与のための技術は、例えば、日本薬局方の最新版および最新追補、REMINGTON’SPHARMACEUTICALSCIENCESMaackPublishingCo.,Easton,PAの最終版に記載されている。本発明のBSH誘導体の製剤は、目的の薬剤が意図する目的を達成するのに有効な量で含有される薬剤であり、治療的有効量または薬理学的有効量は当業者に十分に認識され、薬理学的結果を生じるために有効な薬剤の量をいう。治療的有効用量の決定は十分に当業者に知られている。治療的有効量とは、投与により疾患の状態を軽減する薬剤の量をいう。このような化合物の治療効果および毒性は、細胞培養または実験動物における標準的な薬学的手順によって決定され得る。用量は、好ましくは、毒性をほとんどまたは全くともなわないED50を含む循環濃度の範囲内にある。この用量は、使用される投与形態、患者の感受性、および投与経路に依存してこの範囲内で変化する。一例として、複合体の投与量は、年齢その他の患者の条件、疾患の種類、使用する複合体の種類等により適宜選択される。好ましい日用量は、処置すべき哺乳動物の体重1Kg当たり式の化合物001~1000mgである。ヒトでは、好ましい日用量の範囲は、体重1Kgに対して式の化合物001~800mg、尚より好ましくは1~600mgである。以下に、本発明のシクロ環含有アミノ酸骨格結合ホウ素化合物の製造の具体例を実施例の態様で示すが、本発明はこれに限定されない。下記実施例において、化合物の分析および分離精製は、以下の機種や試薬を用いて行った。NMRスペクトル:日本電子JMTC-400/54/SS400MHz日本電子社製。特に明記しない限り、内部標準としてTMSを用いた。また、下記ケミカルシフトはδ値で示した。カラムクロマトグラフィー用シリカゲル:BW-200富士シリシア社製。融点:BUCHIMeltingpointB545を用いて測定した。IR:JASCOFTIR460plusを用いて測定した。実施例13-シクロブタノンの製造200mlの四ツ口フラスコに酢酸銅一水和物を016g加えて、酢酸5mlに溶解させた。この溶液に亜鉛粉末28gを加えて、90秒間撹拌した後デカントレーションを行った。この残渣に酢酸1mlを加えてデカントレーションをさらに5回繰り返した。この残渣にdryジエチルエーテル6mlを加えてデカントレーションを3回繰り返した。アスピレーターにつないだ三方コックを操作して反応装置内をアルゴンガスで完全に置換した。この反応装置内にdryジエチルエーテル60mlに溶解させたアリルベンジルエーテル63gを加えた。トリクロロアセチルクロリド50mlと、三塩化ホスホリル41mlを溶解させたdryジエチルエーテル40mlを、この溶液に一時間かけて滴下した。この反応液を還流し、21時間撹拌した。この反応液を室温にした後、ろ過を行った。ろ液を水を加えてクエンチを行った後、水とBrineによる洗浄を行った。この有機層を芒硝による脱水を行った後、濃縮した。この残渣を酢酸33mlと亜鉛粉末133gを加え、還流下4時間撹拌した。この反応液をろ過し、ろ液を濃縮した。この残渣を酢酸エチルを溶解させ、satNaHCO3で中和する事で析出した亜鉛粉末をセライトでろ別した。このろ液を分液によりsatNaHCO3とBrineによる洗浄を行った。この有機層を芒硝で脱水を行った後、濃縮した。ガラスチューブオーブンで未反応のアリルベンジルエーテルを減圧留去した。残った残渣をシリカゲルクロマトグラフィートルエン:酢酸エチル==96:4で精製し、透明なオイル状の3シクロブタノンを得た。透明な油状物、bp115°C10mmHgTLCRf0201HNMR26828631135745373213CNMR23649972873112761284138020743-ベンジルオキシメチルシクロブタノンのヒダントインの製造3シクロブタノン40g、シアン化ナトリウム21gと炭酸アンモニウム101gを100mlナスフラスコに加えて、水エタノール50を50mlで溶解させた。このナスフラスコを密閉し、60°Cで終夜撹拌した。このナスフラスコをドラフト内で注意して開けた後、減圧濃縮した。この残渣を酢酸エチルで溶解し、不溶物の無機塩を濾去した。この濾液を減圧濃縮し、残った残渣をシリカゲルクロマトグラフィーヘキサン:酢酸エチル=50:50で精製した。これにより白色結晶の3-ベンジルオキシメチルシクロブタノンのヒダントインを得た。cis体:白色結晶TLCRf0281HNMR223CHaHb258277CHaHb348458606735774trans体:白色結晶TLCRf0281HNMR241252267366454617733788シス-1-アミノ-3-ブロモメチルシクロブタンカルボン酸臭化水素酸の製造50mlのナスフラスコに、3シクロブタノンのシス-ヒダントイン500mgと05NNaOH20mlを加えて、60°Cで24時間撹拌した。この反応液を濃縮し、濃縮HBr水溶液15mlを加えて還流下6時間撹拌した。この反応液を減圧濃縮した。この残渣を水で溶解し、不溶物を濾去した。濾液を減圧濃縮し得た残渣をアセトニトリルに溶解し、不溶物を濾去した。この濾液を減圧濃縮し得た残渣を逆相シリカゲルクロマトグラフィーで精製し、白色結晶のシス-1-アミノ-3-シクロブタンカルボン酸臭化水素酸を得た。白色結晶TLCRf0521HNMR211}CHaHb262}CHaHb286343シス-1-アミノ-3-ドデカボラニルチオメチルシクロブタンカルボン酸臭化水素酸ジテトラメチルアンモニウムの製造シス-1-アミノ-3-ブロモメチルシクロブタンカルボン酸臭化水素酸とドデカボラニルエチルスルフィドテトラメチルアンモニウム塩をdryアセトニトリル5mlを25mlの三口フラスコに加え、不活性ガス中還流で終夜撹拌した。この溶液を減圧濃縮した後、アセトンを加えた。アセトンに不溶な固形物をろ別し、ろ液を減圧濃縮した。この残渣にアセトンと40メチルアミンメタノール溶液を入れ、氷冷化で撹拌した。その後、10テトラメチルアンモニウムヒドロキシドメタノール溶液を加え、30分間撹拌した後、減圧濃縮をした。この残渣にアセトンを加え、アセトンに不溶な固形物をろ取した。このろ過物を純水に溶解させ、陽イオン交換樹脂アンバーライトIR120H型を充填したガラスカラム管に通し、この水溶液を減圧濃縮した。この残渣を少量の純水で溶解させ、10テトラメチルアンモニウムヒドロキシドメタノール溶液を加えた後、減圧濃縮をした。この残渣を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、白色結晶の化合物を得た。白色結晶TLCRf0311HNMR075180210}CHaHb266}CHaHb3224IR357034113210302324912032187816181486140012681071993MSmz5146M3NMe414405M2NMe4H13662MNMe411322B12H111実施例23-ヒドロキシメチルシクロブタノンのシス-ヒダントインの製造3-ベンジルオキシメチルシクロブタノンのシス-ヒダントイン12gをメタノール30mlに溶解させた。この溶液に氷冷下で、20Pd240mgを加えた。この反応液を室温で55気圧の水素雰囲気下で終夜撹拌した。TLCにて反応の進行を確認した後、濾紙とセライトで20Pd2を濾別した。この濾液を濃縮し、白色固形の3-ヒドロキシメチルシクロブタノンのシス-ヒダントインで得た。白色結晶TLCRf0181HNMR213CHaHb251CHaHb3373513-インドメチルシクロブタノンのシス-ヒダントインの製造ヨウ素115gとイミダゾール617mgをdryジクロロメタン10mlに溶解させた。この溶液に、氷冷下でトリフェニルホスフィン238gを加えて30分間撹拌した。その後一時間かけて室温に昇温した。この反応液に3-ヒドロキシメチルシクロブタノンのシス-ヒダントイン770mgとdryジクロロメタン10mlを加えて、室温で5時間撹拌した。反応終了後、析出した白色固形物を濾取し、クロロホルムで洗浄した。この濾取物を酢酸エチルに溶解させ、1NHClとBrineで洗浄後した。この有機層を芒硝で脱水し濾別した後、濾液を減圧濃縮し粗生成物の白色固形の3-インドメチルシクロブタノンのシス-ヒダントインを得た。白色結晶TLCRf0601HNMR198CHaHb256CHaHb2683383-ドデカボラニルチオメチルシクロブタノンジテトラメチルアンモニウム塩の製造ドデカボラニル-とdryアセトニトリルの計20mlを、50mlの二口フラスコに加える。この反応液を還流下で終夜撹拌した。TLCで反応終了を確認した後、減圧濃縮した。この残渣をアセトンを加えて、不溶物を濾去した。この残渣に室温で最少量のアセトンを加え溶解させた。これに水酸化テトラメチルアンモニウムの10メタノール溶液を17mlをゆっくりと加え30分間撹拌した。この反応液を減圧濃縮した。この残渣にアセトンを加えて、不溶物を濾取した。この濾取物を純水に溶解させ、酢酸エチルで洗浄した。この水層をHP20に通し、減圧濃縮した。この残渣を純水で再結晶を行い、白色結晶の3-ドデカボラニルチオメチルシクロブタノンジテトラメチルアンモニウム塩を得た。また濾液を減圧濃縮した。この残渣を逆相シリカゲルクロマトグラフフィーによる精製を行い、白色結晶の3-ドデカボラニルチオメチルシクロブタノンジテトラメチルアンモニウム塩149mgを得た。TLCRf0471HNMR075160194CHaHb234246CHaHb3004IR358633633183307730312975293228422766249420281766171914851402131111431070シス-1-アミノ-3-ドデカボラニルチオメチルシクロブタンカルボン酸三ナトリウム塩の製造3-ドデカボラニルチオメチルシクロブタノンジテトラメチルアンモニウム塩40mgと05NNaOH34mlを10ml容ナス型フラスコに加えて、還流下で終夜撹拌した。TLCで反応の進行を確認した後、陽イオン交換樹脂アンバーライトIR120BH型に通し、減圧濃縮した。この残渣を水に溶解させ、PTFEのメンブレンフィルターに通した。この濾液を陽イオン交換樹脂アンバーライトIR120BNa型に通し、減圧濃縮し、白色固形物シス-1-アミノ-3-ドデカボラニルチオメチルシクロブタンカルボン酸三ナトリウム塩を得た。TLCRf0311HNMR075190206}CHaHb262}CHaHb3224実施例33-ヒドロキシメチルシクロブタノンのトランスヒダントインの製造3ベンジルオキシメチルシクロブタノンのトランス-ヒダントイン12gにメタノール30mlに溶解させた。この溶液に氷冷下で、20Pd240mgを加えた。この反応液を室温で55気圧の水素雰囲気下で終夜撹拌した。TLCにて反応の進行を確認した後、濾紙とセライトで20Pdを濾別した。この濾液を濃縮し、白色固形の3-ヒドロキシメチルシクロブタノンのトランス-ヒダントインで得た。白色結晶TLCRf0201HNMR236CH22553703-インドメチルシクロブタノンのトランス-ヒダントインの製造ヨウ素744mgとイミダゾール399mgをdryジクロロメタン5mlさせた。この溶液に、氷冷下でトリフェニルホスフィン154gを加えて30分間撹拌した。その後一時間かけて室温に昇温した。この反応液に3-ヒドロキシメチルシクロブタノンのトランスヒダントイン498mgとdryジクロロメタン5mlを加えて、室温で5時間撹拌した。反応液を濃縮し、ヘキサンで洗浄した。この残渣を酢酸エチルに溶解し、濾過を行った。この濾液を1NHClとBrineで洗浄した。この有機層を芒硝で脱水し濾別した後、濾液を減圧濃縮した。残った残渣をシリカゲルクロマトグラフィーヘキサン:酢酸エチル=40:60で精製した。粗生成物の白色固形の3-インドメチルシクロブタノンのトランスヒダントインを得た。TLCRf0593-ドデカボラニルチオメチルシクロブタノンジテトラメチルアンモニウム塩のトランスヒダントインの製造ドデカボラニル{2シアノエチル}スルフィドジテトラメチルアンモニウム塩430mg、3-インドメチルシクロブタノンのトランスヒダントイン494mgとdryアセトニトリル10mlを、30mlの二口フラスコに加える。この反応液を還流下で終夜撹拌した。TLCで反応終了を確認した後、減圧濃縮した。この残渣をアセトンを加えて、不溶物を濾去した。この残渣に室温で最少量のアセトンを加え溶解させた。これに水酸化テトラメチルアンモニウムの10メタノール溶液を134mlをゆっくりと加え30分間撹拌した。この反応液を減圧濃縮した。この残渣にアセトンを加えて、不溶物を濾取した。濾取物を水に溶解させ、HP20、IR120H型とIR120Na型に通し、減圧濃縮を行った。この残渣を逆相シリカゲルクロマトグラフフィーによる精製を行い、透明な油状物の3-ドデカボラニルチオメチルシクロブタノンジテトラメチルアンモニウム塩のトランスヒダントインを得た。TLCRf0441HNMR075160211CHaHb222CHaHb259トランス1アミノ-3-ドデカボラニルチオメチルシクロブタンカルボン酸三ナトリウム塩の製造3ドデカボラニルチオメチルシクロブタノンニナトリウム塩のトランスヒダントイン543mgと05NNaOH60mlを20ml容ナス型フラスコに加えて、還流下で終夜撹拌した。TLCで反応の進行を確認した後、陽イオン交換樹脂アンバーライトIR120BH型に通し、減圧濃縮した。この残渣を水に溶解させ、PTFEのメンブレンフィルターに通した。この濾液を陽イオン交換樹脂アンバーライトIR120BNa型に通し、減圧濃縮した。この残渣を逆相シリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、白色固形物のトランス1アミノ-3-ドデカボラニルチオメチルシクロブタンカルボン酸三ナトリウム塩を得た。TLCRf0311HNMR080190232}CH2264276MSmz3652MNMe413141MNa11456M21312B12H111実施例4エチル14ジオキサスピロ45デカン8カルボキシレートの製造4-シクロヘキサノカルボン酸エチル85gエチレングリコール38mlさらにパラトルエンスルホン酸1水和物11gをトルエン250mlに溶解させ、その後、DeanStarkを用いて18時間還流させた。反応終了後、減圧濃縮した後、5炭酸水素ナトリウム水溶液200mlを加えた。さらに、この混合溶液をエーテル300mlにて3回抽出し、抽出したエーテル層を硫酸ナトリウムにて乾燥させた後、減圧濃縮した。その後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製することにより、淡黄色の油状物として、エチル14ジオキサスピロ45デカン8カルボキシレート98g90を得た。1HNMR120ppm147154ppm171180187191223231ppm390ppm408ppm14ジオキサスピロ45デカン8イルメタノールの製造LiAlH424gを無水THF100mlにてけん濁させた後、得られたエチル14ジオキサスピロ45デカン8カルボキシレート67g316mmolを滴下した。さらに6時間還流させた後、室温下にて、ゆっくりと飽和炭酸水素ナトリウム水溶液100mlを滴下した。混合溶液をセライト濾過した後、得られたろ液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチル200mlにて溶解させた後、酢酸エチル層を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液100mlにて2回、さらにbrine100mlにて洗浄し、硫酸ナトリウムにて乾燥後、減圧濃縮させることにより、無色透明の油状物、14ジオキサスピロ45デカン8イルメタノール38g70を得た。1HNMR118122ppm144152170172340344ppm388ppm814ジオキサスピロ45デカンの製造THF75mlに溶解させた14ジオキサスピロ45デカン8イルメタノール52gに0°Cにて、60NaH132gを添加した。10分間の撹拌の後、ベンジルブロマイド50mmolを加え、その後室温にて18時間撹拌させた。その後、1N塩酸水溶液にて、中和後、減圧濃縮した。残った残渣をエーテルにて溶解し、水で2回、brineで1回洗浄した後、溶媒を減圧濃縮させた。その後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製することにより無色透明の油状物として、814ジオキサスピロ45デカンを得た。1HNMR122130ppm148156161182329ppm392ppm448ppm724734ppm4シクロヘキサノンの製造814ジオキサスピロ45デカン50g191mmolを1N塩酸水溶液150mlにて溶解させ、室温にて、1時間撹拌させた。反応溶液をクロロホルム100mlで2回洗浄した後、炭酸ナトリウムにて中和した。酢酸エチル100mlにて2回抽出した後、有機層を硫酸ナトリウムにて乾燥後、減圧濃縮し、淡黄色の油状物、4シクロヘキサノン37g89を得た。1HNMR142146ppm207214231234337ppm451ppm727734ppm8ベンジルオキシメチル13ジアザスピロ45デカン24ジノンの製造4ベンジルオキシメチルシクロヘキサノン190g870mmol、シアン化ナトリウム853mg174mmol、炭酸アンモニウム418g435mmolを50エタノール20mlに溶解し、反応溶液を密栓した後に60°Cで12時間攪拌した。反応溶液を室温に戻した後に、ドラフト内で、反応容器の密栓を十分に注意しながら空け、水100mlを加えた。生じた沈殿物をろ取し、水100mlで洗浄した後に、酢酸エチルから再結晶した。これにより無色結晶の8ベンジルオキシメチル13ジアザスピロ45デカン24ジノン226g90を得た。1HNMR11517932244472573684110558ヒドロキシメチル13ジアザスピロ45デカン24ジノンの製造8ベンジルオキシメチル13ジアザスピロ45デカン24ジノン150g520mmolをメタノール50mlに溶解し、10PdC150mgを加えた。この反応溶液を室温下、55気圧の水素雰囲気下で1昼夜撹拌した。反応終了後、ろ過によってパラジウムを除去し、ろ液を濃縮して得られた無色固体をメタノールから再結晶した。これにより無色結晶の8ヒドロキシメチル13ジアザスピロ45デカン24ジノン906mg88を得た。1HNMR1071683194428401055813ジアザスピロ45デカン24ジノンの製造8ヒドロキシメチル13ジアザスピロ45デカン24ジノン500mg252mmolとトシルクロリド720mg379mmolを窒素雰囲気下で、ピリジン10mlに溶解し、室温で24時間攪拌した。反応溶液に、水100mlを加え、生じた白色沈殿物をろ取し、水50mlとジエチルエーテル50mlで洗浄して、目的とする無色固体の813ジアザスピロ45デカン24ジノンを780mg88得た。1HNMR10711814715824237774877883610588ヨードメチル13ジアザスピロ45デカン24ジノンの製造813ジアザスピロ45デカン24ジノン500mg142mmolをアセトンに溶解し、NaI106g709mmolを加え12時間加熱還流を行った。反応溶液をろ過し、得られた白色沈殿物を水50mlとアセトン50mlで洗浄し、目的とする無色固体の8ヨードメチル13ジアザスピロ45デカン24ジノン362mg83を得た。1HNMR11512415118331084110608ウンデカヒドロドデカボランチオメチル13ジアザスピロ45デカン24ジノンビステトラメチルアンモニウム塩の製造8ヨードメチル13ジアザスピロ45デカン24ジノン250mg0811mmolと2ドデカボラニルチオプロパンニトリルテトラメチルアンモニウム塩254mg0676mmolをアセトニトリル10mlに溶解し、12時間加熱還流を行った。反応溶液をろ過し、ろ液を濃縮後、残渣をアセトン20mlに溶解し、25wテトラメチルアンモニウムヒドロキシド246mg0676mmolを加えた。生じた白色沈殿物をろ取し、アセトン10mlで洗浄後、得られた無色固体を水、アセトニトリルから再結晶し、無色結晶の8ウンデカヒドロドデカボランチオメチル13ジアザスピロ45デカン24ジノンビステトラメチルアンモニウム塩323mg97を得た。1HNMR05517621330983310521アミノ4メチルシクロヘキサノン1カルボン酸2ナトリウム塩の製造8ウンデカヒドロドデカボランチオメチル13ジアザスピロ45デカン24ジノンビステトラメチルアンモニウム塩300mg0609mmolを05NNaOH36mlに溶解し、5時間加熱還流を行った。反応溶液を室温に戻し、アンバーライトIR124カラムに通した後に、アンバーライトIR124カラムに通した。目的物を含むフラクションを濃縮することで、目的とする淡黄色結晶の1アミノ4メチルシクロヘキサノン1カルボン酸2ナトリウム塩220mg99を得た。1HNMR075165171187232生物学的評価実施例1から4で得た化合物ホウ素薬剤について、下記のように生物学的アッセイを行い、細胞毒性、がん細胞への取込みおよび中性子照射による殺細胞効果について、評価する。細胞毒性試験WST896ウェルのマイクロプレートを用い、1ウェルあたりに15X104cellmlの濃度のラットグリーマ細胞C6を播取し、室温37°C、5CO2で16時間培養を行なった。培養液を吸引除去し、実施例で得たホウ素薬剤を種々の濃度で含む培養液を100mLずつそれぞれのウェルに加えた。室温37°C、5CO2で48時間培養後、培養液を吸引除去し、100mLのWST8溶液をそれぞれ加え、さらに4時間室温37°C、5CO2で培養を行なった。マイクロプレートリーダーを用いて450nmリファレンス波長:655nmの波長を測定し、細胞を含まないウェルの吸光度をバックグランドコントロールとした。これにより各IC50値を決定した。実施例2で得たシス-1-アミノ-3-ドデカボラニルチオメチルシクロブタンカルボン酸三ナトリウム塩cisACBCBSH、実施例3で得たトランス1アミノ-3-ドデカボラニルチオメチルシクロブタンカルボン酸三ナトリウム塩transACBCBSHおよび実施例4で得た1アミノ4メチルシクロヘキサノン1カルボン酸2ナトリウム塩cisACHCBSHのIC50値を以下に示す。また比較対照にはBNCTの臨床研究に使用されている4-ボロノ-L-フェニルアラニンLBPAを設定した。この結果、実施例で得られた化合物は、少なくとも、4-ボロノ-L-フェニルアラニンLBPAと同程度以上の細胞毒性を示すことがわかった。腫瘍細胞へのホウ素薬剤の取り込み試験15X107cellのラットグリーマ細胞C6を播取し、24時間室温37°C、5CO2で培養を行なった。培養液を吸引除去し、各ホウ素薬剤を20mM含む培養液を加え、さらに24時間室温37°C、5CO2で培養を行なった。培養液を吸引除去後、PBSを用いて細胞を3回洗浄した後に、トリプシン処理を行い、細胞を回収した。回収した細胞数をカウントし、HClO46003mlとH2O23106mlを1時間、75°Cに加熱して灰化溶液を作成した。メンブランフィルターを用いて灰化溶液をろ過し、ICPAESを用いて溶液中のホウ素濃度を測定することによって、細胞内のホウ素濃度を決定した。実施例2で得たシス-1-アミノ-3-ドデカボラニルチオメチルシクロブタンカルボン酸三ナトリウム塩cisACBCBSH、および実施例3で得たトランス1アミノ-3-ドデカボラニルチオメチルシクロブタンカルボン酸三ナトリウム塩transACBCBSHの取り込み試験の結果を図1に示す。ここで、比較対照にはBNCTの臨床研究に使用されている4-ボロノ-L-フェニルアラニンLBPAを設定した。その結果、細胞に取り込まれる割合は、本発明の化合物の方が、4-ボロノ-L-フェニルアラニンLBPAより高かった。中性子照射による腫瘍細胞に対する殺細胞効果50X106cellの細胞を播取し、24時間室温37°C、5CO2で培養を行なった。培養液を吸引除去し、各ホウ素薬剤を20mM含む培養液を加え、さらに6時間室温37°C、5CO2で培養を行なった。培養液を吸引除去後、PBSを用いて細胞を3回洗浄した後に、トリプシン処理を行い、細胞を回収した。回収した細胞を培養液に懸濁させ、50X103cellmlの濃度に調製し、この懸濁液1mlをテフロン登録商標チューブに移した。細胞溶液を入れたテフロン登録商標チューブに対して、熱中性子線を0~43×1012cm2照射し、その細胞を300cellずつ培養液6ml中に播取した。9日間室温37°C、5CO2で培養を行なった後、エタノールを用いてコロニーを固定し、01クリスタルバイオレットで染色してからコロニー数を数えて、殺細胞効果を比較した。実施例2で得たシス-1-アミノ-3-ドデカボラニルチオメチルシクロブタンカルボン酸三ナトリウム塩cisACBCBSHの殺細胞効果を図2に示す。比較対照にはBNCTの臨床研究に使用されている4-ボロノ-L-フェニルアラニンLBPAを設定した。その結果、殺細胞効果は、4-ボロノ-L-フェニルアラニンLBPAに比較して、本発明の化合物の方が高いことがわかった。"