"N末端のグルタチオンS-トランスフェラーゼGlutathioneStransferaseGSTのアミノ酸配列又はその活性断片と、C末端のシミアンウイルス40ラージT抗原simianvirus40largeTantigenのアミノ酸配列又はその活性断片と、HPV6L1抗原、HPV11L1抗原、HPV16L1抗原、及びHPV18L1抗原からなる群から選択されたHPVL1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片とを含む融合ポリペプチド。前記融合ポリペプチドのアミノ酸配列は、配列番号11~14からなる群から選択されたアミノ酸配列である、請求項1に記載の融合ポリペプチド。N末端のグルタチオンS-トランスフェラーゼGlutathioneStransferaseGSTのアミノ酸配列又はその活性断片と、C末端のシミアンウイルス40ラージT抗原simianvirus40largeTantigenのアミノ酸配列又はその活性断片と、HPV6L1抗原、HPV11L1抗原、HPV16L1抗原、及びHPV18L1抗原からなる群から選択されたHPVL1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片とを含む融合ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。前記シミアンウイルス40ラージT抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドは、配列番号1及び配列番号2から構成された二重鎖ポリヌクレオチドをSalI及びNotI制限酵素で切断したものである、請求項3に記載のポリヌクレオチド。前記HPV6L1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドは、HPV6ゲノムから配列番号3及び配列番号4のプライマーセットを用いて増幅されたポリヌクレオチドをEcoRI及びSalI制限酵素で切断したものである、請求項3に記載のポリヌクレオチド。前記HPV11L1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドは、HPV11ゲノムから配列番号5及び配列番号6のプライマーセットを用いて増幅されたポリヌクレオチドEcoRI及びSalI制限酵素で切断したものである、請求項3に記載のポリヌクレオチド。前記HPV16L1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドは、HPV16ゲノムから配列番号7及び配列番号8のプライマーセットを用いて増幅されたポリヌクレオチドBglII及びSalI制限酵素で切断したものである、請求項3に記載のポリヌクレオチド。前記HPV18L1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドは、HPV18ゲノムから配列番号9及び配列番号10のプライマーセットを用いて増幅されたポリヌクレオチドEcoRI及びSalI制限酵素で切断したものである、請求項3に記載のポリヌクレオチド。請求項3~8のいずれかのポリヌクレオチドを含む発現ベクター。請求項9の発現ベクターで形質転換された形質転換体。請求項1又は2による融合ポリペプチドをビーズアレイ用ビーズに結合させる段階と、前記融合ポリペプチドが結合されたビーズを試料と反応させる段階と、前記試料をマーカー標識された2次抗体と反応させる段階と、前記2次抗体を蛍光物質が付着した前記マーカーの特異的結合剤と反応させる段階と、ビーズ由来の蛍光値とマーカーの特異的結合剤由来の蛍光値を測定して試料内のHPV抗体を検出する段階とを含む試料内HPV抗体検出方法。前記ビーズアレイ用ビーズはグルタチオン-カゼインGlutathionecaseinGCビーズである、請求項1に記載の試料内HPV抗体検出方法。前記マーカーはビオチンであり、前記マーカーの特異的結合剤はストレプトアビジンである、請求項11に記載の試料内HPV抗体検出方法。前記蛍光物質は、フルオレセイン、イソチオシアネート、ローダミン、フィコエリスリン、フィコシアニン、アロフィコシアニン、o-フタルデヒド又はフルオレスカミンであることを特徴とする、請求項1に記載の試料内HPV抗体検出方法。N末端のグルタチオンS-トランスフェラーゼGlutathioneStransferaseGSTのアミノ酸配列又はその活性断片と、C末端のシミアンウイルス40ラージT抗原simianvirus40largeTantigenのアミノ酸配列又はその活性断片と、HPV6L1抗原、HPV11L1抗原、HPV16L1抗原、及びHPV18L1抗原からなる群から選択されたHPVL1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片とを含む融合ポリペプチドを含むビーズアレイ用HPV抗体検出キット。発明が解決しようとする課題本発明は、N末端のグルタチオンS-トランスフェラーゼGlutathioneStransferaseGSTのアミノ酸配列又はその活性断片と、C末端のシミアンウイルス40ラージT抗原simianvirus40largeTantigenのアミノ酸配列又はその活性断片と、HPV6L1抗原、HPV11L1抗原、HPV16L1抗原、及びHPV18L1抗原からなる群から選択されたHPVL1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片とを含む融合ポリペプチドを提供することを目的とする。また、本発明は、前記融合ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、前記ポリヌクレオチドを含む発現ベクター、及び前記発現ベクターで形質転換された形質転換体を提供することを目的とする。さらに、本発明は、前記融合ポリペプチドをビーズアレイ用ビーズに結合させる段階と、前記融合ポリペプチドが結合されたビーズを試料と反応させる段階と、前記試料をマーカー標識された2次抗体と反応させる段階と、前記2次抗体を蛍光物質が付着した前記マーカーの特異的結合剤と反応させる段階と、ビーズ由来の蛍光値とマーカーの特異的結合剤由来の蛍光値を測定して試料内のHPV抗体を検出する段階とを含む試料内HPV抗体検出方法を提供することを目的とする。さらに、前記融合ポリペプチドを含むビーズアレイ用HPV抗体検出キットを提供することを目的とする。課題を解決するための手段本発明は、N末端のグルタチオンS-トランスフェラーゼGlutathioneStransferaseGSTのアミノ酸配列又はその活性断片と、C末端のシミアンウイルス40ラージT抗原simianvirus40largeTantigenのアミノ酸配列又はその活性断片と、HPV6L1抗原、HPV11L1抗原、HPV16L1抗原、及びHPV18L1抗原からなる群から選択されたHPVL1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片とを含む融合ポリペプチドを提供する。また、本発明は、前記融合ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、前記ポリヌクレオチドを含む発現ベクター、及び前記発現ベクターで形質転換された形質転換体を提供する。さらに、本発明は、前記融合ポリペプチドをビーズアレイ用ビーズに結合させる段階と、前記融合ポリペプチドが結合されたビーズを試料と反応させる段階と、前記試料をマーカー標識された2次抗体と反応させる段階と、前記2次抗体を蛍光物質が付着した前記マーカーの特異的結合剤と反応させる段階と、ビーズ由来の蛍光値とマーカーの特異的結合剤由来の蛍光値を測定して試料内のHPV抗体を検出する段階とを含む試料内HPV抗体検出方法を提供する。さらに、前記融合ポリペプチドを含むビーズアレイ用HPV抗体検出キットを提供する。発明の効果本発明を用いると、HPV抗体に特異的に結合できる活性に影響を及ぼすことなく、組換えHPV抗原を高純度に分離、精製してビーズアレイ用ビーズに効果的に均一に付着させることができ、高感度及び高精度で試料内のHPV6、11、16及び18抗体を複合的に検出することができる。抗体の力価を測定してHPVワクチンの接種時期を決定する際に活用することができ、ワクチン接種後の防御期間の測定などに活用することができる。図面の簡単な説明図1SV40ラージT抗原オリゴマーが発現ベクターpGEX4T-3内に正確に挿入されていることを確認するために、SV40ラージT抗原が挿入されたpGEX4T-3ベクターで形質転換した大腸菌E.coliDH5αからプラスミドDNAを分離し、次いで制限酵素SalIで切断し、その後1アガロースゲルにDNAサイズマーカーとSalIで切断されたpGEX4T-3を共に電気泳動した状態を示す図である。図2mpGEX4T-3/HPV6L1ベクターを示す開裂地図である。図3mpGEX4T-3/HPV11L1ベクターを示す開裂地図である。図4mpGEX4T-3/HPV16L1ベクターを示す開裂地図である。図5mpGEX4T-3/HPV18L1ベクターを示す開裂地図である。図6組換え菌株E.coliBL21Gen-XTM/mpGEX4T-3/HPV6L1、E.coliBL21Gen-XTM/mpGEX4T-3/HPV11L1、E.coliBL21Gen-XTM/mpGEX4T-3/HPV16L1、及びE.coliBL21Gen-XTM/mpGEX4T-3/HPV18L1から発現したHPV6L1抗原を含む融合ポリペプチド、HPV11L1抗原を含む融合ポリペプチド、HPV16L1抗原を含む融合ポリペプチド、HPV18L1抗原を含む融合ポリペプチドをrabbitanti-GST抗体を用いてウェスタンブロットした状態を示す図である。図7組換え菌株E.coliBL21Gen-XTM/mpGEX4T-3/HPV16L1から発現したHPV16L1抗原を含む融合ポリペプチドをmouseanti-HPV16L1抗体を用いてウェスタンブロットした状態を示す図である。図8組換え菌株E.coliBL21Gen-XTM/mpGEX4T-3/HPV18L1から発現したHPV18L1抗原を含む融合ポリペプチドをmouseanti-HPV18L1抗体を用いてウェスタンブロットした状態を示す図である。図9HPV16抗体を希釈してHPV16L1抗原を用いた標準定量曲線を示す図である。図10HPV18抗体を希釈してHPV18L1抗原を用いた標準定量曲線を示す図である。図112価HPVワクチンとPlaceboワクチンを接種したグループを対象に、ワクチン接種後の血液を採取して血清を分離し、その後本発明のHPV16L1抗原、及びHPV18L1抗原を用いて実際に血液内のHPV抗体の量を測定した結果である。発明を実施するための形態一様態において、本発明は、N末端のグルタチオンS-トランスフェラーゼGlutathioneStransferaseGSTのアミノ酸配列又はその活性断片と、C末端のシミアンウイルス40ラージT抗原simianvirus40largeTantigenのアミノ酸配列又はその活性断片と、HPV6L1抗原、HPV11L1抗原、HPV16L1抗原、及びHPV18L1抗原からなる群から選択されたHPVL1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片とを含む融合ポリペプチドを提供する。前記融合ポリペプチドのアミノ酸配列は、配列番号11~14からなる群から選択されたアミノ酸配列でもよい。前記活性断片の長さは限定されないが、本発明の具体的な実施例によれば、シミアンウイルス40ラージT抗原活性断片の長さは11個のアミノ酸である。HPV抗原をN末端のグルタチオンS-トランスフェラーゼGlutathioneStransferaseGSTのアミノ酸配列又はその活性断片、C末端のシミアンウイルス40ラージT抗原simianvirus40largeTantigenのアミノ酸配列又はその活性断片と融合することにより、HPV抗体に特異的に結合する活性に影響を及ぼすことなく、組換えHPV抗原を高純度に分離、精製してビーズアレイ用ビーズに効果的に均一に付着させることができ、シミアンウイルス40ラージT抗原により組換えHPV抗原がビーズに正しく付着したか、付着した量が常に同一か、HPV抗原4種間でビーズに付着した程度が均一かなどを判定することができ、高感度及び高精度で試料内のHPV抗体をスクリーニングすることができる。また、前記アミノ酸配列と少なくとも1つのアミノ酸残基が異なる配列を有するポリペプチドが含まれてもよい。分子の活性を全体的に変化させないタンパク質及びポリペプチドにおけるアミノ酸交換は当該分野で公知である。通常最も多く行われる交換は、アミノ酸残基Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Thy/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu、Asp/Glyの交換である。また、アミノ酸配列の変異又は修飾により熱、pHなどにおける構造的安定性が向上したタンパク質や、活性が向上したタンパク質が含まれてもよい。本発明の融合ポリペプチドは、当該分野に公知の化学的ペプチド合成方法で製造することもでき、各領域をコードする遺伝子をPCRpolymerasechainreactionによる増幅や公知の方法で合成し、その後インフレームinframeで発現ベクターに作動可能に連結してクローニングして発現させることもできる。他の様態において、本発明は、前記融合ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、前記ポリヌクレオチドを含む発現ベクター、前記発現ベクターで形質転換された形質転換体を提供する。前記シミアンウイルス40ラージT抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドは、配列番号1及び配列番号2から構成された二重鎖ポリヌクレオチドをSalI及びNotI制限酵素で切断したものであってもよい。前記HPV6L1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドは、HPV6ゲノムから配列番号3及び配列番号4のプライマーセットを用いて増幅されたポリヌクレオチドをEcoRI及びSalI制限酵素で切断したものであってもよい。前記HPV11L1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドは、HPV11ゲノムから配列番号5及び配列番号6のプライマーセットを用いて増幅されたポリヌクレオチドをEcoRI及びSalI制限酵素で切断したものであってもよい。前記HPV16L1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドは、HPV16ゲノムから配列番号7及び配列番号8のプライマーセットを用いて増幅されたポリヌクレオチドをBglII及びSalI制限酵素で切断したものであってもよい。前記HPV18L1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドは、HPV18ゲノムから配列番号9及び配列番号10のプライマーセットを用いて増幅されたポリヌクレオチドをEcoRI及びSalI制限酵素で切断したものであってもよい。本発明の具体的な実施例において、前記シミアンウイルス40ラージT抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドを制限酵素SalI及びNotIで切断された発現ベクターpGEX4T-3に挿入してmpGEX4T-3ベクターを製造する段階、前記mpGEX4T-3ベクターを制限酵素EcoRI、SalIで切断してHPV6L1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドを挿入し、図2に示す開裂地図を有するmpGEX4T-3/HPV6L1ベクターを製造する段階、前記mpGEX4T-3/HPV6L1ベクターをEscherichiacoliBL21Gen-XTMに形質転換する段階、及び前記形質転換体からHPV6L1抗原を含む融合ポリペプチドを得る段階により、HPV6L1抗原を含む融合ポリペプチドを製造することができる。また、本発明の具体的な実施例において、前記シミアンウイルス40ラージT抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドを制限酵素SalI及びNotIで切断された発現ベクターpGEX4T-3に挿入してmpGEX4T-3ベクターを製造する段階、前記mpGEX4T-3ベクターを制限酵素EcoRI、SalIで切断してHPV11L1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドを挿入し、図3に示す開裂地図を有するmpGEX4T-3/HPV11L1ベクターを製造する段階、前記mpGEX4T-3/HPV11L1ベクターをEscherichiacoliBL21Gen-XTMに形質転換する段階、及び前記形質転換体からHPV11L1抗原を含む融合ポリペプチドを得る段階により、HPV11L1抗原を含む融合ポリペプチドを製造することができる。さらに、本発明の具体的な実施例において、前記シミアンウイルス40ラージT抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドを制限酵素SalI及びNotIで切断された発現ベクターpGEX4T-3に挿入してmpGEX4T-3ベクターを製造する段階、前記mpGEX4T-3ベクターを制限酵素BamHI、SalIで切断してHPV16L1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドを挿入し、図4に示す開裂地図を有するmpGEX4T-3/HPV16L1ベクターを製造する段階、前記mpGEX4T-3/HPV16L1ベクターをEscherichiacoliBL21Gen-XTMに形質転換する段階、及び前記形質転換体からHPV16L1抗原を含む融合ポリペプチドを得る段階により、HPV16L1抗原を含む融合ポリペプチドを製造することができる。さらに、本発明の具体的な実施例において、前記シミアンウイルス40ラージT抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドを制限酵素SalI及びNotIで切断された発現ベクターpGEX4T-3に挿入してmpGEX4T-3ベクターを製造する段階、前記mpGEX4T-3ベクターを制限酵素EcoRI、SalIで切断してHPV18L1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片をコードするポリヌクレオチドを挿入し、図5に示す開裂地図を有するmpGEX4T-3/HPV18L1ベクターを製造する段階、前記mpGEX4T-3/HPV18L1ベクターをEscherichiacoliBL21Gen-XTMに形質転換する段階、及び前記形質転換体からHPV18L1抗原を含む融合ポリペプチドを得る段階により、HPV18L1抗原を含む融合ポリペプチドを製造することができる。HPV抗原のN末端のグルタチオンS-トランスフェラーゼGlutathioneStransferaseGSTのアミノ酸配列又はその活性断片、C末端のシミアンウイルス40ラージT抗原simianvirus40largeTantigenのアミノ酸配列又はその活性断片と融合することにより、組換えHPV抗原を高純度に分離、精製してビーズアレイ用ビーズに効果的に均一に付着させることができ、シミアンウイルス40ラージT抗原により組換えHPV抗原がビーズに正しく付着したか、付着した量が常に同一か、HPV抗原4種間でビーズに付着した程度が均一かなどを判定することができるが、HPV抗体に特異的に結合する抗原性に影響を及ぼさないようにするためには、HPV抗原部位の選択、結合方向、結合位置が全て考慮されなければならない。両末端の融合部分の存在により抗原性を示す部位が分子内部に埋没して抗原性が低下することがあるからである。本発明の融合ポリペプチドが試料内のHPV抗体を高感度及び高精度でスクリーニングできるということは、全く類推できない効果である。前記ポリヌクレオチド配列は、少なくとも1つの塩基の置換、欠失、挿入、又はそれらの組み合わせにより変異することがある。ヌクレオチド配列を化学的に合成して製造する場合は、当業界で周知の合成法、例えば文献EngelsandUhlmannAngewChemIntEdEngl37731271988に記述された方法を用いることができ、トリエステル、ホスファイト、ホスホルアミド及びH-ホスフェート方法、PCR、並びにその他オートプライマー方法、固体支持体上のオリゴヌクレオチド合成法などを用いることもできる。本発明において、作動可能に連結operablylinkedとは、一般的機能が行えるように、核酸発現調節配列と目的とするタンパク質又はRNAをコードする核酸配列が機能的に連結functionallinkageされていることをいう。例えば、プロモーターとタンパク質又はRNAをコードする核酸配列が作動可能に連結されてコード配列の発現に影響を及ぼす。発現ベクターとの作動的連結は当該技術分野で周知の遺伝子組換え技術を用いて製造することができ、部位特異的DNA切断及び連結は当該技術分野において一般に知られた酵素などを用いる。本発明において、発現ベクターとは、適当な宿主細胞において目的タンパク質を発現できる組換えベクターであり、遺伝子挿入物が発現されるように作動可能に連結された必須の調節要素を含む遺伝子生成物をいう。本発明の発現ベクターは、好ましい発現ベクターが一般に有する要素であるプロモーター、オペレーター、開始コドンなどの発現調節要素を含む。開始コドン及び終止コドンは一般にポリペプチドをコードするヌクレオチド配列の一部とみなされ、遺伝子生成物が投与された際にその個体で必ず作用しなければならず、コード配列とインフレームinframeでなければならない。ベクターのプロモーターは構成的でもよく、誘導性でもよい。また、細胞培養液からのタンパク質の分離を促進するために、融合ポリペプチドの排出のためのシグナル配列を含んでもよい。特異的な開始シグナルはまた、挿入された核酸配列の効率的な翻訳に必要とされることもある。これらシグナルは、ATG開始コドン及び隣接する配列を含む。ATG開始コドンを含む外因性翻訳調節シグナルが提供されなければならないこともある。これら外因性翻訳調節シグナル及び開始コドンには様々な天然及び合成供給源が用いられる。発現効率は適当な転写又は翻訳エンハンサーの導入により向上する。発現ベクターは、通常のあらゆる発現ベクターを用いることができる。宿主細胞によってタンパク質の発現量や修飾状態などが異なるので、目的に最も適した宿主細胞を選択して用いればよい。本発明の具体的な実施例において、本発明の融合ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターとして、mpGEX4T-3/HPV6L1ベクター、mpGEX4T-3/HPV11L1ベクター、mpGEX4T-3/HPV16L1ベクター、mpGEX4T-3/HPV18L1ベクターを製造した。前記ベクターが発現される形質転換体を栄養培地で培養すると、有用なタンパク質を大量に製造、分離することができる。培地と培養条件は、宿主細胞に応じて慣用されるものを適宜選択して用いることができる。培養の際は、細胞の生育とタンパク質の大量生産に適するように、温度、培地のpH、培養時間などの条件を適切に調節しなければならない。本発明による発現ベクターで形質転換できる宿主細胞は、原核細胞を含み、DNAの導入効率が高く、導入されたDNAの発現効率が高い宿主が通常用いられる。細菌、例えばエシェリキア、シュードモナス、バチルス、ストレプトマイセスなどの周知の原核宿主が、用いられる宿主細胞の例である。大腸菌を用いることが好ましい。ペプチドの発現は誘導因子IPTGを用いて発現を誘導することができ、誘導時間はタンパク質の量が最大となるように調節することができる。本発明において、組換えにより生産されたペプチドは培地又は細胞分解物から回収することができる。ペプチド発現に用いられた細胞は、凍結解凍の繰り返し、音波処理、機械的破壊又は細胞分解剤などの様々な物質的又は化学的手段により破壊することができ、通常の生化学的な分離技術による分離、精製することができるSambrooketalMolecularCloningAlaboraroryManual2ndEdColdSpringHarborLaboratoryPress1989DeuscherMGuidetoProteinPurificationMethodsEnzymologyVol182AcademicPressIncSanDiegoCA1990。電気泳動、遠心分離、ゲル濾過、沈殿、透析、クロマトグラフィイオン交換クロマトグラフィ、アフィニティークロマトグラフィ、免疫吸着アフィニティークロマトグラフィ、逆相HPLC、ゲル浸透HPLC、アイソエレクトリックフォーカシング、及びその様々な変形及び複合方法を含むが、これらに限定されるものではない。他の態様として、本発明は、前記融合ポリペプチドをビーズアレイ用ビーズに結合させる段階と、前記融合ポリペプチドが結合されたビーズを試料と反応させる段階と、前記試料をマーカー標識された2次抗体と反応させる段階と、前記2次抗体を蛍光物質が付着した前記マーカーの特異的結合剤と反応させる段階と、ビーズ由来の蛍光値とマーカーの特異的結合剤由来の蛍光値を測定して試料内のHPV抗体を検出する段階とを含む方法を提供する。前記ビーズアレイ用ビーズはグルタチオン-カゼインGlutathionecaseinGCビーズでもよく、前記マーカーはビオチン、前記マーカーの特異的結合剤はストレプトアビジンでもよく、前記蛍光物質はフルオレセイン、イソチオシアネート、ローダミン、フィコエリスリン、フィコシアニン、アロフィコシアニン、o-フタルデヒド又はフルオレスカミンでもよい。前記ビーズアレイは多重ビーズアレイでもよく、本発明の具体的な実施例においてはルミネックス分析法を用いた。本発明による方法は、N末端のグルタチオンS-トランスフェラーゼGlutathioneStransferaseGSTのアミノ酸配列又はその活性断片と、C末端のシミアンウイルス40ラージT抗原simianvirus40largeTantigenのアミノ酸配列又はその活性断片と、HPV6L1抗原、HPV11L1抗原、HPV16L1抗原、及びHPV18L1抗原からなる群から選択されたHPVL1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片とを含む融合ポリペプチドの組換えHPV抗原をビーズアレイ用ビーズに結合させる段階を含む。前記ビーズアレイ用ビーズとしてルミネックスビーズLuminexbeadを用いることができる。前記ビーズは多重ビーズアレイ方法に用いられるものであれば特に限定されるものではなく、ビーズにさらにグルタチオン-カゼインGlutathionecaseinGCを結合させたグルタチオン-カゼインGlutathionecaseinGCビーズを用いることもできる。グルタチオン-カゼインビーズは、当業界で公知の様々な方法で製作することもでき、購入して用いることもできる。本発明の具体的な実施例よれば、N-ethylmaleimideNEMでカゼインのシステインcysteine残基をブロックblockingし、その後heterobifunctionalcross-linkerであるsulfo-succinimidyl-4-P-maleimidophenyl-butyratesulfo-SMPBを添加してチオールthiol基と反応し得るcasein-maleimidophenyl-butyrateを形成させ、グルタチオンglutathioneのシステインのチオール残基と反応してグルタチオン-カゼインGlutathionecaseinGCが形成されるようにした。グルタチオン-カゼインGlutathionecaseinGCの末端アミンterminalaminesとビーズのカルボキシル基carboxylgroupsを結合させてグルタチオン-カゼインビーズを製作した。前記多重ビーズアレイ用ビーズは色で100種類まで区別することができるので、特定色番号のビーズに特定抗原を付着させ、様々なビーズセットを混ぜて反応を進め、その後多重ビーズアレイ分析器例えば、ルミネックス分析器で各ビーズの色とそのビーズ表面の抗原抗体反応量を同時に測定すると、HPV6L1抗体、HPV11L1抗体、HPV16L1抗体、HPV18L1抗体をはじめとする様々な抗体を同時に測定することができる。よって、少量の試料で分析できるだけでなく、1回の実験で数回の実験を代替できるので、時間と労働力が節約される。また、本発明による方法は、前記融合ポリペプチドが結合されたビーズを試料と反応させる段階を含む。前記試料はHPVにより感染する個体[例えば、人間、家畜例えば、牛、馬、豚、羊、ヤギ、ペット例えば、猫、犬などの哺乳動物]などを含む個体に由来する。試料は、血清、細胞などのHPV抗体を含むことができるものであればいかなるものでもよい。融合ポリペプチド抗原は、試料内のHPV6L1抗体、HPV11L1抗体、HPV16L1抗体、及びHPV18L1抗体と抗原抗体反応を起こす。さらに、本発明は、前記試料をマーカー標識された2次抗体と反応させる段階と、前記2次抗体を蛍光物質が付着した前記マーカーの特異的結合剤と反応させる段階と、ビーズ由来の蛍光値とマーカーの特異的結合剤由来の蛍光値を測定して試料内のHPV抗体を検出する段階とを含む。前記マーカーはビオチンbiotinでもよく、マーカーの特異的結合剤はストレプトアビジンでもよい。前記2次抗体は試料内のHPV6L1抗体、HPV11L1抗体、HPV16L1抗体、及びHPV18L1抗体と特異的に結合し、2次抗体に結合されたビオチンはストレプトアビジン又は、アビジンと特異的に結合するので、ストレプトアビジンに結合された蛍光物質から蛍光が発せられる。前記蛍光物質は、例えばフルオレセイン、イソチオシアネート、ローダミン、フィコエリスリン、フィコシアニン、アロフィコシアニン、o-フタルデヒド又はフルオレスカミンであるが、これらに限定されるものではなく、当業界で公知の様々な蛍光物質を用いることができる。ビーズ由来の蛍光値各ビーズの色とマーカーの特異的結合剤由来の蛍光値を共に測定して抗原抗体反応量を決定することにより、試料内のHPV6L1抗体、HPV11L1抗体、HPV16L1抗体、又はHPV18L1抗体の有無及び抗体の力価を正確に検出することができる。抗体の力価は蛍光値の判定基準値cutoffvalueを設定して測定する。本発明の具体的実施例において、前記HPV抗原をN末端のグルタチオンS-トランスフェラーゼGlutathioneStransferaseGSTのアミノ酸配列又はその活性断片、C末端のシミアンウイルス40ラージT抗原simianvirus40largeTantigenのアミノ酸配列又はその活性断片と融合することにより、HPV抗体に特異的に結合する活性に影響を及ぼすことなく、組換えHPV抗原を高純度に分離、精製してビーズアレイ用ビーズに効果的に均一に付着させることができ、シミアンウイルス40ラージT抗原により組換えHPV抗原がビーズに正しく付着したか、付着した量が常に同一か、HPV抗原4種間でビーズに付着した程度が均一かなどを判定することができ、高感度及び高精度で試料内のHPV6L1抗体、HPV11L1抗体、HPV16L1抗体、又はHPV18L1抗体を含むHPV抗体をスクリーニングできた。他の態様として、本発明は、N末端のグルタチオンS-トランスフェラーゼGlutathioneStransferaseGSTのアミノ酸配列又はその活性断片と、C末端のシミアンウイルス40ラージT抗原simianvirus40largeTantigenのアミノ酸配列又はその活性断片と、HPV6L1抗原、HPV11L1抗原、HPV16L1抗原、及びHPV18L1抗原からなる群から選択されたHPVL1抗原のアミノ酸配列又はその活性断片とを含む融合ポリペプチドを含むビーズアレイ用HPV抗体検出キットを提供する。本発明は上述した各実施形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。実施例以下、本発明を実施例により詳細に説明する。ただし、下記実施例は本発明を例示するものであり、本発明の内容が下記実施例に限定されるものではない。実施例1SV40がタギングされた変形した発現ベクターの構築ミクロビーズと融合ポリペプチドの結合を後で確認するために、抗原にSV40ラージT抗原の11個のアミノ酸がタギングされるようにpGEX4T-3発現ベクターを変形した。まず、SV40ラージT抗原の11個のアミノ酸配列をコードする配列番号1センスDNAオリゴマーSV40Sと、その塩基に相補的な配列番号2アンチセンスDNAオリゴマーSV40ASをそれぞれ製作した。配列番号1オリゴマーは制限酵素SalI切断部位を、配列番号2オリゴマーは制限酵素NotI切断部位をそれぞれ含むように合成した。合成した各オリゴマーをアニーリング緩衝液の存在下で90°Cで4分間反応させ、その後70°Cで10分間、10°Cで2時間反応させた。アニーリングされたSV40ラージT抗原オリゴマーを制限酵素SalI及びNotIで切断された発現ベクターpGEX4T-3に挿入し、T4DNA連結酵素を用いて室温で3時間連結反応させて連結し、その後大腸菌E.coliDH5αに形質転換させた参照:SambrookJetal1989Molecularcloningalaboratorymanual2ndedColdSpringHarborLaboratoryPress。配列番号1センスDNAオリゴマーSV40S:5’TCGACAAACCTCCCACACCTCCCCCTGAACCTGAAACAGC-3’配列番号2アンチセンスDNAオリゴマーSV40AS:5’GGCCGCTGTTTCAGGTTCAGGGGGAGGTGTGGGAGGTTTG-3’形質転換体からプラスミドDNAを分離し、次いで制限酵素SalIで切断し、その後1アガロースゲルにDNAサイズマーカーとSalIで切断されたpGEX4T-3を共に電気泳動し、SV40ラージT抗原オリゴマーが発現ベクター内に正確に挿入されていることを再確認した図1。前述したように構築されたSV40ラージT抗原をコードするDNA配列に変形したpGEX4T-3をmpGEX4T-3と命名した。実施例2HPV6L1、HPV11L1、HPV16L1、及びHPV18L1遺伝子の発現のための発現ベクターの構築ドイツから分譲されたrecombinantplasmidharboringfullgenomeofHPV6、HPV11、HPV16、及びHPV18から得たL1遺伝子を発現ベクターに挿入した組換えプラスミドmpGEX4T-3/HPV6L1、mpGEX4T-3/HPV11L1、mpGEX4T-3/HPV16L1、及びmpGEX4T-3/HPV18L1を下記の通り構築した。まず、HPV6L1、HPV11L1、HPV16L1、及びHPV18L1遺伝子を得るためにHPV6L1遺伝子の塩基配列からN-末端アミノ酸配列をコードする配列番号3プライマーHPV6L1F5’末端プライマー、C-末端アミノ酸配列をコードするDNA塩基に相補的な配列番号4プライマーHPV6L1R3’末端プライマー、HPV11L1遺伝子の塩基配列からN-末端アミノ酸配列をコードする配列番号5プライマーHPV11L1F5’末端プライマー、C-末端アミノ酸配列をコードするDNA塩基に相補的な配列番号6プライマーHPV11L1R3’末端プライマー、HPV16L1遺伝子の塩基配列からN-末端アミノ酸配列をコードする配列番号7プライマーHPV16L1F5’末端プライマー、C-末端アミノ酸配列をコードするDNA塩基に相補的な配列番号8プライマーHPV16L1R3’末端プライマー、HPV18L1遺伝子の塩基配列からN-末端アミノ酸配列をコードする配列番号9プライマーHPV18L1F5’末端プライマー、C-末端アミノ酸配列をコードするDNA塩基に相補的な配列番号10プライマーHPV18L1R3’末端プライマーをそれぞれ製作した。製作したプライマーを用いて各HPVL1遺伝子を増幅した。配列番号3、5、7、9プライマーは制限酵素EcoRI又はBglII切断部位を、配列番号4、6、8、10プライマーは制限酵素SalI切断部位をそれぞれ含むように合成した。各PCRは0.2μgHPVプラスミドDNAと10pmoleの5’-末端プライマー及び3’-末端プライマー、200μMdNTPs、10XAccuprimeDNA重合酵素緩衝液及び2.5UAccuprimeDNA重合酵素invitrogenからなる混合組成液を95°Cで3分間反応させ、95°Cで30秒間、60°Cで30秒間、68°Cで90秒間の条件で30回繰り返し、最後に68°Cで5分間反応させた。配列番号3プライマーHPV6L1F:5’-NNNNNGAATTCAATGTGGCGGCCTAGCGACAG-3’EcoRI切断部位を含む配列番号4プライマーHPV6L1R:5’-GCATGAGTCGACCCTTTTAGTTTTGGCGCGC-3’SalI切断部位を含む配列番号5プライマーHPV11L1F:5’-GCAGTCGAATTCGTGGCGGCCTAGCGACAGCACA-3’EcoRI切断部位を含む配列番号6プライマーHPV11L1R:5’-NNNNNGTCGACCTTTTTGGTTTTGGTACGTTTTCGTTT-3’SalI切断部位を含む配列番号7プライマーHPV16L1F:5’-NNNNNAGATCTATGCAGGTGACTTTTATTTACATCCTA-3’BglII切断部位を含む配列番号8プライマーHPV16L1R:5’-GCATGAGTCGACCAGCTTACGTTTTTTGCGTTTAGC-3’SalI切断部位を含む配列番号9プライマーHPV18L1F:5’-NNNNNGAATTCAATGTGCCTGTATACACGGGTCCTG-3’EcoRI切断部位を含む配列番号10プライマーHPV18L1R:5’-GCATGAGTCGACCTTCCTGGCACGTACACGGAC-3’SalI切断部位を含むDNAサイズマーカーsizemarkerと共に1アガロースゲルに電気泳動し、約1.5kbの位置に各バンドが存在することを確認した。PCR済みの反応混合物を1アガロースゲルに電気泳動し、PCRを用いて増幅された約1.5kbのDNA産物をPCRquick-spinTMPCRProductPurificationKitIntronKoreaを用いて精製して回収した。回収されたHPV6、HPV11、HPV18DNAを制限酵素EcoRI及びSalIで、HPV16DNAを制限酵素BglII及びSalIでそれぞれ切断し、その後遺伝子断片をそれぞれ精製して回収した。精製された遺伝子断片を同じ制限酵素で切断された発現ベクターmpGEX4T-3にそれぞれ挿入し、T4DNA連結酵素を用いて室温で3時間連結反応させて連結させ、E.coliBL21Gen-XTMに形質転換させた。mpGEX4T-3/HPV16L1を製作するために、制限酵素BglIIとBamHIはアニーリング配列が同一であるので、mpGEX4T-3をBamHIで、HPV16L1をBglIIで切断して連結した。形質転換体からプラスミドDNAを分離し、次いで前記制限酵素で切断し、その後1アガロースゲルにDNAサイズマーカーと共に電気泳動して各遺伝子が発現ベクター内に正確に挿入されていることを再確認した。前述したように構築されたHPV6L1遺伝子の発現のために、構築された発現ベクターをmpGEX4T-3/HPV6L1と命名し図2、HPV11L1遺伝子の発現のために構築された発現ベクターをmpGEX4T-3/HPV11L1と命名し図3、HPV16L1遺伝子の発現のために構築された発現ベクターをmpGEX4T-3/HPV16L1と命名し図4、HPV18L1遺伝子の発現のために構築された発現ベクターをmpGEX4T-3/HPV18L1と命名した図5。実施例3HPV6L1、HPV11L1、HPV16L1、HPV18L1を含む融合ポリペプチドの発現と精製大腸菌に形質転換させた組換え菌株E.coliBL21Gen-XTM/mpGEX4T-3/HPV6L1、E.coliBL21Gen-XTM/mpGEX4T-3/HPV11L1、E.coliBL21Gen-XTM/mpGEX4T-3/HPV16L1、及びE.coliBL21Gen-XTM/mpGEX4T-3/HPV18L1からN末端にGSTが、C末端にSV40が融合されたHPV6L1抗原、HPV11L1抗原、HPV16L1抗原、HPV18L1抗原にそれぞれ発現させ、rabbitanti-GST抗体、mouseanti-HPV6L1抗体、mouseanti-HPV11L1抗体、mouseanti-HPV16L1抗体、mouseanti-HPV18L1抗体、又はKT3抗体のそれぞれを最初の抗体として用いてウェスタンブロットし、発現の有無を確認した。その結果を図6~8により確認した。次に、発現されたタンパク質を下記の通り精製した。組換えプラスミドを有するE.coliBL21Gen-XTMを100μg/μlアンピシリンが添加されたLB液体培地に接種して37°Cで16時間培養し、その後500ulを100μg/μlアンピシリンが添加されたLB液体培地100mlに接種して37°Cで培養した。600nmでの吸光度が約0.4になったとき、IPTGisopropylβDgalactopyranosideを最終濃度が1.0mMになるように添加し、3時間培養してタンパク質発現を誘導した。6,000rpmで15分間遠心分離して菌体14gwetweightを回収し、次いでCompleteTMProteaseInhibitorCocktailSantaCruzBiotechnologyが含まれる5mlの超音波処理緩衝液sonicationbuffer50mMTrisHClpH80150mMNaCl5mMEDTAに懸濁し、その後最終濃度0.1mg/mllysozymeを添加して4°Cで1時間lysisした。超音波で破砕し、次いで1tritonx-100を添加して4°Cで1時間反応させ、14,000rpmで15分間遠心分離して大腸菌細胞破片celldebrisを除去した。次に、前記上澄液をGlutathioneSepharoseTM4BGEHealthcareを用いたアフィニティークロマトグラフィにより最終的に精製した。実施例4精製された融合ポリペプチドをカゼインcaseinがカップリングcouplingされたビーズbeadに結合4-1.グルタチオン-カゼインGCの製造N-ethylmaleimideNEMでカゼインのシステインcysteine残基をブロックblockingし、その後heterobifunctionalcross-linkerであるsulfo-succinimidyl-4-P-maleimidophenyl-butyratesulfo-SMPBを添加してチオールthiol基と反応し得るcasein-maleimidophenyl-butyrateを形成させた。PD10columnを用いて残余NEMとsulfo-SMPBを除去し、その後グルタチオンglutathioneのシステインのチオール残基と反応してグルタチオン-カゼインが形成されるようにした。また、PD10columnを用いて残余グルタチオンを除去した。4-2.ルミネックスビーズLuminexbeadとGCとの結合GCの末端アミンterminalaminesとビーズのカルボキシル基carboxylgroupsが結合されたグルタチオン-カゼインGCビーズを生産するために、1.25×106個のビーズを200μlの活性化activation緩衝液[01molLsodiumphosphatepH62]で2回洗浄し、その後50mg/mlのN-3-dimethylaminopropyl-N-ethylcarbodiimideEDCとN-hydroxysuccinimideNHSをそれぞれ25μlずつ添加して遮光された室温環境下で20分間ビーズを活性させた。活性されたビーズは1mlのカップリング緩衝液[2morpholinoethanesulfonicacid50mmolLpH50]で2回洗浄し、次いで上層を除去し、その後250mlの250mg/L、GC溶液に懸濁させて遮光し、その後室温で2時間カップリングした。次いで、1mlの洗浄緩衝液[phosphatebufferedsaline50mmolLTris05mlLTween20pH74]で2回洗浄し、その後保存液[PBSpH74containing1gLcaseinand05gLsodiumazide]に入れて4°Cで遮光して保管した。4-3.融合ポリペプチドとGCビーズの結合生産された融合ポリペプチドは1g/Lのカゼイン緩衝液[1gLcaseininPBSpH74]で希釈し、その後3000個のGCビーズと室温で遮光して反応させた。1時間後、カゼイン緩衝液で3回洗浄して保管した。実施例5マルチプレックスルミネックス分析HPV16抗体AbnovaMAB1616とHPV18抗体Ab31492をそれぞれ4,000~500倍に順次希釈してHPV16L1抗原及びHPV18L1抗原を用いた標準定量曲線をまず確認した図9及び図10。その後、2価HPVワクチンサーバリックス,GSKとPlaceboワクチンを接種したグループを対象に、ワクチン接種3カ月後に血液を採取して血清を分離し、開発されたHPV16L1抗原及びHPV18L1抗原を用いて実際に血液内のHPV抗体の量を測定した。融合ポリペプチドが結合されたビーズ混合液を希釈した血清と96ウェルプレートで2時間遮光して室温で反応させた。100μlカゼイン緩衝液で3回洗浄し、ビオチンbiotinが結合された2次抗体[goatantihumanIgAIgMIgG]を1:1,000に希釈して30分間反応させた。最後に発色試薬であるストレプトアビジン-R-フィコエリスリンstreptavidinRphycoerythrinを添加して30分間反応させ、ルミネックス分析器でmedianfluorescenceintensityMFIを測定した。その結果を図11に示す。全12人2価HPVワクチン接種者7人,Placeboワクチン接種者5人を対象に実施し、接種者全員にHPV16型に対する抗体が形成されたが、HPV18に対する抗体は7人中5人にのみ検出されたことが確認された。SV40ラージT抗原オリゴマーが発現ベクターpGEX4T-3内に正確に挿入されていることを確認するために、SV40ラージT抗原が挿入されたpGEX4T-3ベクターで形質転換した大腸菌E.coliDH5αからプラスミドDNAを分離し、次いで制限酵素SalIで切断し、その後1アガロースゲルにDNAサイズマーカーとSalIで切断されたpGEX4T-3を共に電気泳動した状態を示す図である。mpGEX4T-3/HPV6L1ベクターを示す開裂地図である。mpGEX4T-3/HPV11L1ベクターを示す開裂地図である。mpGEX4T-3/HPV16L1ベクターを示す開裂地図である。mpGEX4T-3/HPV18L1ベクターを示す開裂地図である。組換え菌株E.coliBL21Gen-XTM/mpGEX4T-3/HPV6L1、E.coliBL21Gen-XTM/mpGEX4T-3/HPV11L1、E.coliBL21Gen-XTM/mpGEX4T-3/HPV16L1、及びE.coliBL21Gen-XTM/mpGEX4T-3/HPV18L1から発現したHPV6L1抗原を含む融合ポリペプチド、HPV11L1抗原を含む融合ポリペプチド、HPV16L1抗原を含む融合ポリペプチド、HPV18L1抗原を含む融合ポリペプチドをrabbitanti-GST抗体を用いてウェスタンブロットした状態を示す図である。組換え菌株E.coliBL21Gen-XTM/mpGEX4T-3/HPV16L1から発現したHPV16L1抗原を含む融合ポリペプチドをmouseanti-HPV16L1抗体を用いてウェスタンブロットした状態を示す図である。組換え菌株E.coliBL21Gen-XTM/mpGEX4T-3/HPV18L1から発現したHPV18L1抗原を含む融合ポリペプチドをmouseanti-HPV18L1抗体を用いてウェスタンブロットした状態を示す図である。HPV16抗体を希釈してHPV16L1抗原を用いた標準定量曲線を示す図である。HPV18抗体を希釈してHPV18L1抗原を用いた標準定量曲線を示す図である。2価HPVワクチンとPlaceboワクチンを接種したグループを対象に、ワクチン接種後の血液を採取して血清を分離し、その後本発明のHPV16L1抗原、及びHPV18L1抗原を用いて実際に血液内のHPV抗体の量を測定した結果である。"