"細菌感染の治療に使用するための式1のE,Z-アホエン。前記細菌感染が、バイオフィルムを生成する細菌を含む感染である請求項1に記載の細菌感染の治療に使用するためのE,Z-アホエン。前記バイオフィルムを生成する細菌が、N-アシル-ホモセリンラクトンを産生する細菌である請求項2に記載の細菌感染の治療に使用するためのE,Z-アホエン。前記細菌が、ビブリオフィッシェリVibriofischeri、アエロモナスヒドロフィラAeromonashydrophila、アエロモナスサルモニシダAeromonassalmonicida、アグロバクテリウムツメファシエンスAgrobacteriumtumefaciens、バークホルデリアセパシアBurkholderiacepacia、クロモバクテリウムビオラセウムChromobacteriumviolaceum、エンテロバクターアグロメランスEnterobacteragglomerans、エルウィニアカロトボーラErwiniacarotovora、エルウィニアクリサンテミErwiniachrysanthemi、エルウィニアステワティErwiniaStewartii、エシェリヒアコリEscherichiacoli、シュードモナスオーレオファシエンスPseudomonasaureofaciens、シュードモナスアエルギノーザPseudomonasaeruginosa、ラルストニアソラナケアルムRalstoniasolanacearum、リゾビウムエトリRhizobiumetli、リゾビウムレグミノサルムRhizobiumleguminosarum、ロドバクタースフェロイデスRhodobactersphaeroides、サルモネラチフィムリウムSalmonellatyphimurium、セラチアリクファシエンSerratialiquefaciens、シノリゾビウムメリロティSinorhizobiummeliloti、ビブリオアングイラルムVibrioanguillarum、ビブリオハーベイVibrioharveyi、エルシニアエンテロコリティカYersiniaenterocolitica、及びエルシニアシュードツベルクローシスYersiniapseudotuberculosisからなる群から選択され、特に、シュードモナスアエルギノーザである請求項1~3のいずれか1項に記載の細菌感染の治療に使用するためのE,Z-アホエン。前記細菌感染が肺でのものである請求項1~4のいずれか1項に記載の細菌感染の治療に使用するためのE,Z-アホエン。前記細菌感染が慢性創傷でのものである請求項1~4のいずれか1項に記載の細菌感染の治療に使用するためのE,Z-アホエン。前記細菌感染が、免疫不全を患う哺乳動物でのものである請求項1~6のいずれか1項に記載の細菌感染の治療に使用するためのE,Z-アホエン。前記免疫不全が、免疫低下疾患によるものであるか、または免疫抑制薬を用いた治療によるものである請求項7に記載の細菌感染の治療に使用するためのE,Z-アホエン。前記哺乳動物が、ヒト、ペットおよび家畜からなる群から選択される請求項7~8のいずれかに記載の細菌感染の治療に使用するためのE,Z-アホエン。前記細菌感染が、嚢胞性線維症を患う哺乳動物でのものである請求項1~8のいずれか1項に記載の細菌感染の治療に使用するためのE,Z-アホエン。式1のE,Z-アホエンと、少なくとも1つの抗生物質とを含む組成物。前記抗生物質が、アミノグリコシド、アンサマイシン、カルバセフェム、カルバペネム、セファロスポリン、糖ペプチド、マクロライド、モノバクタム、ペニシリン、ポリペプチド、キノロン、スルホンアミド、及びテトラサイクリンからなる群から選択される請求項11に記載の組成物。前記抗生物質が、アンピシリン、バカンピシリン、カルベニシリンインダニル、メズロシリン、ピペラシリン、チカルシリン、アモキシシリン-クラブラン酸、アンピシリン-スルバクタム、ベンジルペニシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、メチシリン、オキサシリン、ペニシリンG、ペニシリンV、ピペラシリンタゾバクタム、チカルシリンクラブラン酸、ナフシリン、セファドロキシル、セファゾリン、セファレキシン、セファロチン、セファピリン、セフラジン、セファクロル、セファマンドール、セフォニシド、セフォテタン、セフォキシチン、セフプロジル、セフメタゾール、セフロキシム、ロラカルベフ、セフジニル、セフチブテン、セフォペラゾン、セフィキシム、セフォタキシム、セフポドキシムプロキセチル、セフタジジム、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフェピム、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、クリンダマイシン、ジリスロマイシン、エリスロマイシン、リンコマイシン、トロレアンドマイシン、シノキサシン、シプロフロキサシン、エノキサシン、ガチフロキサシン、グレパフロキサシン、レポフロキサシン、ロメフロキサシン、モキシフロキサシン、ナリジクス酸、ノルフロキサシン、オフロキサシン、スパルフロキサシン、トロバフロキサシン、オキソリン酸、ゲミフロキサシン、ペルフロキサシン、イミペネム-シラスタチン、メロペネム、アズトレオナム、アミカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルミシン、ストレプトマイシン、トブラマイシン、パロモマイシン、テイコプラニン、バンコマイシン、デメクロサイクリン、ドキシサイクリン、メタサイクリン、ミノサイクリン、オキシテトラサイクリン、テトラサイクリン、クロルテトラサイクリン、マフェニド、スルファジアジン銀、スルファセタミド、スルファジアジン、スルファメトキサゾール、スルファサラジン、スルフイソキサゾール、トリメトプリム-スルファメトキサゾール、スルファメチゾール、リファンピン、リファブチン、リファンピン、リファペンチン、リネゾリド、キヌプリスチンダルホプリスチン、バシトラシン、クロラムフェニコール、ホスホマイシン、イソニアジド、メテナミン、メトロニダゾール、ムピロシン、ニトロフラントイン、ニトロフラゾン、ノボビオシン、ポリミキシン、スペクチノマイシン、トリメトプリム、コリスチン、サイクロセリン、カプレオマイシン、エチオナミド、ピラジンアミド、パラ-アミノサリチル酸、及びエリスロマイシンエチルコハク酸からなる群から選択され、特に、トブラマイシンである請求項11~12のいずれか1項に記載の組成物。細菌感染の治療に使用するための請求項11~13のいずれかに記載の組成物。前記細菌がN-アシル-ホモセリンラクトンを産生する細菌である請求項14に記載の細菌感染の治療に使用するための組成物。前記細菌が、ビブリオフィッシェリVibriofischeri、アエロモナスヒドロフィラAeromonashydrophila、アエロモナスサルモニシダAeromonassalmonicida、アグロバクテリウムツメファシエンスAgrobacteriumtumefaciens、バークホルデリアセパシアBurkholderiacepacia、クロモバクテリウムビオラセウムChromobacteriumviolaceum、エンテロバクターアグロメランスEnterobacteragglomerans、エルウィニアカロトボーラErwiniacarotovora、エルウィニアクリサンテミErwiniachrysanthemi、エルウィニアステワティErwiniaStewartii、エシェリヒアコリEscherichiacoli、シュードモナスオーレオファシエンスPseudomonasaureofaciens、シュードモナスアエルギノーザPseudomonasaeruginosa、ラルストニアソラナケアルムRalstoniasolanacearum、リゾビウムエトリRhizobiumetli、リゾビウムレグミノサルムRhizobiumleguminosarum、ロドバクタースフェロイデスRhodobactersphaeroides、サルモネラチフィムリウムSalmonellatyphimurium、セラチアリクファシエンSerratialiquefaciens、シノリゾビウムメリロティSinorhizobiummeliloti、ビブリオアングイラルムVibrioanguillarum、ビブリオハーベイVibrioharveyi、エルシニアエンテロコリティカYersiniaenterocolitica、及びエルシニアシュードツベルクローシスYersiniapseudotuberculosisからなる群から選択され、特に、シュードモナスアエルギノーザである請求項14~15のいずれかに記載の細菌感染の治療に使用するための組成物。前記細菌感染が肺でのものである請求項14~16のいずれか1項に記載の細菌感染の治療に使用するための組成物。前記細菌感染が慢性創傷でのものである請求項14~16のいずれか1項に記載の細菌感染の治療に使用するための組成物。式1のE,Z-アホエンを製造する方法であって、内部-C=C-の配座は、EもしくはZ、またはこれらの混合物であってもよく、この方法は、溶媒存在下、式3のアリシンと、酸とを反応させ、上に定義したような式1のE,Z-アホエンを提供することを含む方法。式1のE,Z-アホエンの純度が、95~99.5、例えば、97~99.5、98~99.5、99~99.5、例えば、約99.5である請求項19に記載の方法。式3のアリシンが、式2のジアリルジスルフィドと、DMDO、MCPBA、過酢酸、過マンガン酸カリウム、酸化マグネシウムおよびSwern酸化剤からなる群から選択される酸化剤とを反応させることによって提供される請求項19~20のいずれか1項に記載の方法。酸化剤がDMDOである請求項21に記載の方法。アリシン3を、その後に行う酸処理の前に精製する請求項19~22のいずれか1項に記載の方法。添加する酸は、カルボン酸、カルボン酸無水物またはスルホン酸である請求項19~23のいずれか1項に記載の方法。請求項19~24に記載の方法によって得ることができるE,Z-アホエン。式1のE,Z-アホエンが、請求項19~24によって与えられる方法によって得られる請求項1~10のいずれか1項に記載のE,Z-アホエン。式1のE,Z-アホエンが、請求項19~24によって与えられる方法によって得られる請求項11~18のいずれか1項に記載の組成物。以下にさらに詳細に本発明を記載する。発明の詳細な説明定義本発明をさらに詳細に記載する前に、まず、以下の用語および規則を定義する。本発明の観点で、E,Z-アホエン誘導体またはアホエン誘導体のE,Z-異性体という用語は、実質的に純粋なE-アホエン誘導体、実質的に純粋なZ-アホエン誘導体、またはE-アホエン誘導体とZ-アホエン誘導体の混合物のいずれかとして単離されるアホエン誘導体を指す。E,Zという記号は、配座がさまざまであってもよい場所を構造中に波線によって示しているようなアホエンの内部-C=C-二重結合を指す。誘導体という用語は、2種類の異性体EおよびZ、およびこれらの混合物の両方を指し、さらに、E,Zアホエンおよびこれらの混合物の酸化誘導体および/または還元誘導体も指す。酸化剤は、本明細書で定義されるように、元々の酸化状態から高酸化状態へと分子の酸化状態を変えることができる任意の化学反応剤である。同様に、還元剤は、元々の酸化状態から低酸化状態へと分子の酸化状態を変えることができる任意の化学反応剤である。本発明の観点で、酸は、無機酸および有機酸の両方を含む。酸は、有機酸無水物または任意の他のプロ酸pro-acidを含む。本明細書で定義されるように、プロ酸は、特定の条件下で酸へと変換することができる任意の化合物である。このような条件は、加熱することまたは水性環境にさらすことを含んでいてもよい。任意の酸混合物も想定される。本明細書に記載するように、バイオフィルムは、バイオポリマーマトリックスに包まれ、例えば、プランクトン対応物と比較したときに抗生物質および自然免疫系の重要な対への耐性の上昇を示す、任意の凝集した、多くは、必須ではないが表面に結合した固着性の細菌共同体を指す。本発明の観点で、クオラムセンシングQSという用語は、低分子量の拡散性シグナル分子によって送られる細胞間の情報伝達によって、細菌の挙動を協調させる機構を指す。QS系は、初期の感染事象の間、重要な役割をはたす。印象的な量の病原因子の発現を制御するために、その多くが抗原性の決定因子である3つのQS系Las、Rhl、PQSで示したを利用することによって、緑膿菌のような特定の細菌は、QS系が活性化され、病原性および免疫保護が作動する特定の細胞密度に達するまで、潜伏した様式で働くことができる。QS系が活性化したら、組織を損傷し、免疫による防御を弱らせる病原因子が協働しつつ放出が起こる。また、この内容で、N-アシル-ホモセリンラクトンを産生する細菌は、クオラムセンシング中、細胞間の情報伝達にN-アシル-ホモセリンラクトンをメッセンジャー分子として利用する細菌であると定義される。本明細書に定義されるように、クオラムセンシング阻害剤またはQS-阻害剤は、細菌のQSに基づく情報伝達を阻害することができる物質または物質の混合物である。調節遺伝子の変異またはQS阻害剤によるQSプロセスの停止によって、細菌は、従来の抗生物質、特に、アミノグリコシド例えば、トブラマイシンおよび細胞の宿主防御に重要な成分、例えば、PMN-白血球多形核球-白血球の両方に攻撃されやすくなる。上述のように、本発明の第1の態様は、一般式1の化合物を製造する方法を提供し、この化合物は、E,Z-アホエンとも呼ばれる。内部-C=C-結合の配座は、EまたはZ、またはこれらの混合物であってもよい。この方法は、アリシンとも呼ばれる式3の中間体化合物を提供することと、溶媒存在下、式3の化合物を酸で処理し、上に定義したような式1の化合物を提供することとを含む。好ましい実施形態では、化合物3を含有する溶液の濃度は、0.06~6.0M、好ましくは、0.12~3.0M、0.24~1.5M、0.48~0.8M、例えば、0.6Mであってもよい。酸を過剰量または化学量論量で加えてもよいが、典型的には、5~50mol、10~40mol、15~30mol、例えば、20molのような触媒量で加えてもよい。好ましい実施形態では、中間体3から式1の化合物への変換のときに加えられる酸は、カルボン酸酢酸、プロピオン酸、酪酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、またはトリフルオロ酢酸TFA、またはp-トルエンスルホン酸TsOH、メタンスルホン酸MsOH、ショウノウスルホン酸CSAのような多くの酸であってもよい。好ましい酸は酢酸である。酸の選択は、得られるE:Z異性体の比率に影響を及ぼす。すなわち、使用される酸と、これに対応して得られるE:Z比は、例えば、40V/Vのアセトン水溶液を溶媒として用いるとき、トリフルオロ酢酸E:Z=約1:1、p-トルエンスルホン酸E:Z=約1:4、メタンスルホン酸E:Z=約1:4、ショウノウスルホン酸E:Z=約1:5であってもよい。式1の化合物を与える酸処理の好ましい実施形態では、使用する溶媒は、10~70V/Vアセトン水溶液、好ましくは、20~60V/V、30~50V/V、例えば、40V/Vアセトン水溶液すなわち、40の水中、60のアセトンである。酸を加えた後、0~100°C、好ましくは、20~80°C、例えば、40~70°C、好ましくは、50~65°Cの範囲、例えば、64°Cに反応温度を調節してもよい。反応時間は、1~24h、好ましくは、2~10h、例えば、3~5h、好ましくは、4hであってもよい。溶媒としてアセトン水溶液を使用すると、酸処理中に酢酸を用いるとき、E:Z比が1:2~1:6、好ましくは、1:3~1:5、例えば、約1:4の式1の化合物が得られる。式1の化合物を与える上述の方法のさらに別の好ましい実施形態では、中間体3の酸処理中に使用する溶媒は、トルエンまたはベンゼン水溶液である。ベンゼン水溶液は、1~50V/Vベンゼン水溶液、好ましくは、5~30V/V、例えば、7~20V/V、好ましくは、10V/Vのベンゼン水溶液すなわち、10の水中、90のベンゼンであってもよい。酸を加えた後、0~100°C、好ましくは、10~80°C、例えば、20~60°C、好ましくは、30~50°Cの範囲、例えば、40°Cに反応温度を調節してもよい。トルエンまたはベンゼン水溶液中の酸処理にかかる反応時間は、2~96h、好ましくは、24~72h、例えば、36~60hの範囲、好ましくは、48hであってもよい。溶媒としてトルエンまたはベンゼン水溶液を使用すると、酸処理中に酢酸を用いるとき、E:Z比が6:1~20:1、例えば、約10:1の式1の化合物が得られる。得られた生成物の精製は、典型的には、標準的な溶媒抽出技術を用いた後、カラムクロマトグラフィーによる精製を用いて行われてもよいが、蒸溜、分取薄層クロマトグラフィーまたは固体化合物の場合には結晶化のような他の方法を使用してもよい。化合物1の精製の好ましい実施形態では、反応混合物を室温まで冷却し、3倍容積の水とエタノールの1:1混合物で希釈した後、ペンタンのような非極性溶媒で抽出する。水性画分を硫酸アンモニウムを用いて飽和状態にし、ペンタンよりも極性の溶媒例えば、ジクロロメタンでさらに抽出してもよい。合わせた有機抽出物を濃縮し、未精製生成物を、40~99V/Vのペンタン中の酢酸エチル、好ましくは、50~90V/V、60~80V/V、例えば、70V/Vを含む溶出移動相を用いたシリカカラムクロマトグラフィーにかけることによって、E,Z-アホエン1を単離することができる。上の手順の後のE,Z-アホエンの純度は、95~99.5、例えば、97~99.5、98~99.5、99~99.5、例えば、約99.5であってもよい。驚くべきことに、本願発明者らは、カラムクロマトグラフィーの後で得られた生成物をさらに精製する例えば、逆相HPLCクロマトグラフィーまたは他の精製工程を用いると、E,Z-アホエン生成物は、例えば、実施例に記載するようなアッセイで、生体活性をすべて、または部分的に失うことがわかった。純粋なE-アホエンおよび/または純粋なZ-アホエンを例えばHPLCを用いて単離するときも、同じことがわかった。少量の、例えば、5未満、3未満、2未満、1未満、例えば、0.5未満のアホエンから誘導される化学物質すなわち、アホエンに関連する化合物が、invitroで、またもっと重要であるがinvivoの両方で、分解例えば、酸化、還元および/または開裂に対するE,Z-アホエンおよび誘導体の安定化にとって非常に重要であると推察される。本発明の一実施形態は、式1のE,Z-アホエンについて、2回以上のクロマトグラフィー精製工程を行わずに、また、このクロマトグラフィー精製工程が逆相HPLCを含まない、上述の方法である。精製した後、E,Z-アホエン誘導体を異性体混合物として、化合物3を基準として少なくとも10mol、好ましくは、15mol、20mol、25mol、例えば、少なくとも30molの収率で単離することができる。一実施形態では、ジアリルジスルフィドDADSとも呼ばれる式2の化合物を酸化剤で処理することによって式3のアリシンを製造してもよい。この方法の有用な実施形態では、式2の化合物を酸化して式3の化合物にするのに用いられる酸化剤は、DMDO、MCPBA、過酢酸、過マンガン酸カリウム、酸化マグネシウムおよびSwern酸化剤、例えば、塩化オキサリル、ジメチルスルホキシドDMSO、および有機塩基例えば、トリエチルアミンからなる群から選択されてもよく、DMDOは、最も高い収率が得られるため、好ましい酸化剤である。酸化剤を、化合物2に対して触媒量または化学量論量で加えてもよいが、好ましくは、1.01~10.0mol当量、好ましくは、1.05~5.0mol当量、例えば、1.07~2.0mol当量、好ましくは、1.10mol当量の過剰量で加えてもよい。有利には、酸化剤溶液に対し、低温で数分間かけて式2の化合物を加えてもよい。溶液中の酸化物の濃度は、0.001~1.0M、好ましくは、0.005~0.5M、0.01~0.1M、例えば、0.07Mであってもよい。溶液は、低温で流体のままであり得る溶媒であってもよく、例えば、アセトン、ジクロロメタン、クロロホルム、テトラクロロメタン、ジエチルエーテル、酢酸エチルまたはテトラヒドロフランであってもよい。化合物2を加えている間の溶液の温度は、-100°C~10°C、好ましくは、-80°C~-10°C、-60°C~-40°C、例えば、-50°Cであってもよい。化合物2を1~120分、好ましくは、5~90分、7~60分、10~30分、12~20分、例えば、15分かけて加えてもよい。この溶液に化合物2を加えた後、有利には、10~60°C、好ましくは、20~40°C、例えば、30°Cまで10~120分、好ましくは、15~90分、20~60分、25~40分、例えば、30分かけてゆっくりと加温してもよい。溶媒の蒸発を経た濃度は、未精製形態で中間体化合物3を少なくとも80mol、好ましくは、少なくとも85mol、少なくとも90mol、例えば、少なくとも95molの純度で与える。未精製アリシン3をさらに精製することなく使用してもよく、その場合でも、以下の工程で良好な収率を与える。このことは、酸化手順に、酸化と、その後の貯蔵の間のアリシンの分解に寄与すると思われる酸が存在しないためであると考えられる。しかし、好ましい実施形態では、有利には、その後に行われる酸処理の前に実質的にアリシン3を単離するために、アリシン3を精製してもよい。このことから、後の酸処理工程でもきれいな反応を与え、収率が高くなり、式1の化合物を与えることがわかった。任意の従来からある精製方法、好ましくは、シリカカラムクロマトグラフィーを用い、精製を行うことができる。ペンタン中のジエチルエーテル、好ましくは、ペンタン中、0.5~20V/Vのジエチルエーテル、例えば、1~10V/V、2~8V/V、3~7V/V、4~6V/V、好ましくは、5V/Vの混合物からなる移動相溶出液を用い、クロマトグラフィーを行うことができる。それによって、式3の化合物が、化合物2を基準として、少なくとも80mol、好ましくは、少なくとも85mol、少なくとも90mol、例えば、少なくとも95molの収率で得られる。本発明の第2の態様では、式4の化合物を製造するプロセスが提供され、式中、Yは、-S-、-SOまたは-SO2-から選択され、Rは、アリル、フェニル、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ベンジル、p-トルオイル、m-トルオイル、o-トルオイルから選択され、内部の-C=C-結合の配座は、EまたはZ、またはこれらの混合物のいずれかであってもよい。このプロセスは、式1の化合物を製造した後、式1のE,Zアホエンと少なくとも1つのさらなる酸化試薬とを反応させることを含むさらなる反応工程によって、式4の化合物Rはアリルであるを得て、場合により、式4の化合物とR置換されたリチオ化スルフィドR-SLiとを反応させ、式4の化合物Rは、フェニル、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ベンジル、p-トルオイル、m-トルオイルまたはo-トルオイルであるを得る、上に定義するような方法を含む。上に定義した方法の一実施形態では、式1の化合物を酸化して式4の化合物にするために使用される第2の酸化剤は、DMDO、MCPBA、過酢酸、過マンガン酸カリウム、過酸化水素、BisTMSPeroxide、または任意の穏和な過酸化物からなる群から選択されてもよい。R置換されたリチオ化スルフィドとの反応は、テトラヒドロフラン溶媒中、-78°C~0°Cまでの温度で行われてもよい。反応時間は、30分~24時間、好ましくは、30分~2時間であってもよい。式4の化合物の精製は、上述の式1の化合物の精製と同様の様式で行ってもよい。得られた一般式4の化合物をE,Z-異性体の混合物として単離してもよく、またはこれらの異性体を分離して、実質的に純粋なE-異性体または実質的に純粋なZ-異性体を得てもよい。また、異なる酸化状態Yを有する式4の化合物すなわち、Yは、-S-、SOまたは-SO2-に等しいを混合物として分離または単離してもよい。本発明の別の実施形態は、上述の方法によって得られる式1の化合物、またはそれに代えて、上述の方法によって得ることができる式1の化合物である。上述のように、上の方法によって、良好な純度の未精製物が得られ、これにより、たった1回のクロマトグラフィー精製工程の使用でよく、このことが、生物学的にさらに活性が高いE,Z-アホエン誘導体1を得るのに重要であることがわかった。このような活性なアホエン誘導体は、純度が95~99.5、例えば、約97~99.5、98~99.5、99~99.5、例えば、約99.5であってもよい。得られるE,ZアホエンのE:Z比は、好ましくは、20:1~1:10、例えば、15:1~1:6、12:1~1:5、好ましくは、約10:1~約1:4であってもよい。または、E:Z比は、好ましくは、1:1~1:10、例えば、1:2~1:8、1:3~1:5、好ましくは、約1:4であってもよい。本発明のさらなる態様は、式1を有するE,Z-アホエンと、少なくとも1つの抗生物質とを含む組成物である。化合物すなわち、純粋なEまたは純粋なZを含め、得ることができるE:Z比を有するE,Z-アホエンを上述の方法によって、または生物学的に活性なQSを阻害するE,Z-アホエン生成物を与える任意の他の方法によって得てもよい。このような組成物を医薬製剤で使用してもよく、したがって、式1を有するE,Z-アホエンと、少なくとも1つの抗生物質と、医薬的に許容される担体および/またはバインダーとを含む医薬または投薬形態として配合してもよい。医薬を液体または固体の投薬形態として配合してもよく、液体組成物には、局所投与のための液体組成物、静脈投与、筋肉内注射または皮下注射のための液体組成物、またはエアロゾルとして吸入するための液体組成物が含まれてもよい。固体投薬形態には、錠剤、カプセル、粉剤吸入のための粉末を含むが含まれてもよい。E,Z-アホエンを上のいずれかの様式で投与しつつ、抗生物質を上のいずれかの様式で投与する実施形態も考慮される。例えば、アホエンを粉剤またはエアロゾルを経て吸入によって投与しつつ、抗生物質を静脈投与してもよい。組成物中のE,ZアホエンのE:Z比は、好ましくは、20:1~1:10、例えば、15:1~1:6、12:1~1:5、好ましくは、約10:1~約1:4であってもよい。または、E:Z比は、好ましくは、1:1~1:10、例えば、1:2~1:8、1:3~1:5、好ましくは、約1:4であってもよい。したがって、ある実施形態は、感染、好ましくはバイオフィルムを生成する細菌を含む細菌感染の治療で使用するための、式1を有するE,Z-アホエンと、少なくとも1つの抗生物質とを含む上述の組成物である。このような組成物の利点は、本明細書に示したように、QS-阻害剤を抗生物質と共に組成物として用いる場合に相乗効果が達成されることである。本発明の観点で、抗生物質は、抗菌効果がQS阻害に基づかない任意の抗菌物質であると定義される。典型的には、QS-阻害剤と組み合わせて用いられる抗生物質は、殺菌性または静菌性と分類することができる。殺菌性は、細胞を直接殺し、静菌性は、細胞が分裂するのを防ぐ。抗生物質の種類としては、アミノグリコシド、アンサマイシン、カルバセフェム、カルバペネム、セファロスポリン、糖ペプチド、マクロライド、モノバクタム、ペニシリン、ポリペプチド、キノロン、スルホンアミド、テトラサイクリンが挙げられる。抗生物質は、これらの種類のいずれかから選択されてもよい。抗生物質は、アンピシリン、バカンピシリン、カルベニシリンインダニル、メズロシリン、ピペラシリン、チカルシリン、アモキシシリン-クラブラン酸、アンピシリン-スルバクタム、ベンジルペニシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、メチシリン、オキサシリン、ペニシリンG、ペニシリンV、ピペラシリンタゾバクタム、チカルシリンクラブラン酸、ナフシリン、セファドロキシル、セファゾリン、セファレキシン、セファロチン、セファピリン、セフラジン、セファクロル、セファマンドール、セフォニシド、セフォテタン、セフォキシチン、セフプロジル、セフメタゾール、セフロキシム、ロラカルベフ、セフジニル、セフチブテン、セフォペラゾン、セフィキシム、セフォタキシム、セフポドキシムプロキセチル、セフタジジム、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフェピム、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、クリンダマイシン、ジリスロマイシン、エリスロマイシン、リンコマイシン、トロレアンドマイシン、シノキサシン、シプロフロキサシン、エノキサシン、ガチフロキサシン、グレパフロキサシン、レポフロキサシン、ロメフロキサシン、モキシフロキサシン、ナリジクス酸、ノルフロキサシン、オフロキサシン、スパルフロキサシン、トロバフロキサシン、オキソリン酸、ゲミフロキサシン、ペルフロキサシン、イミペネム-シラスタチン、メロペネム、アズトレオナム、アミカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルミシン、ストレプトマイシン、トブラマイシン、パロモマイシン、テイコプラニン、バンコマイシン、デメクロサイクリン、ドキシサイクリン、メタサイクリン、ミノサイクリン、オキシテトラサイクリン、テトラサイクリン、クロルテトラサイクリン、マフェニド、スルファジアジン銀、スルファセタミド、スルファジアジン、スルファメトキサゾール、スルファサラジン、スルフイソキサゾール、トリメトプリム-スルファメトキサゾール、スルファメチゾール、リファンピン、リファブチン、リファンピン、リファペンチン、リネゾリド、キヌプリスチンダルホプリスチン、バシトラシン、クロラムフェニコール、ホスホマイシン、イソニアジド、メテナミン、メトロニダゾール、ムピロシン、ニトロフラントイン、ニトロフラゾン、ノボビオシン、ポリミキシン、スペクチノマイシン、トリメトプリム、コリスチン、サイクロセリン、カプレオマイシン、エチオナミド、ピラジンアミド、パラ-アミノサリチル酸、エリスロマイシンエチルコハク酸からなる群から選択されてもよい。抗生物質は、例えば、トブラマイシンであってもよい。本発明の一態様は、細菌感染、好ましくは、バイオフィルムを生成する細菌を含む細菌感染の治療で使用するための式1のE,Z-アホエンである。本発明の別の態様は、細菌感染、好ましくは、バイオフィルムを生成する細菌を含む細菌感染の治療で使用するための本明細書に記載した方法によって得られる式1のE,Z-アホエンである。したがって、以下に記載する実施形態は、一般的にはE,Z-アホエンに関し、さらに、本明細書に記載した方法で与えられるようなE,Z-アホエンにも関し、最後に、E,Z-アホエンと、上述のような抗生物質とを含む組成物にも関する。得られたE,ZアホエンのE:Z比は、好ましくは、20:1~1:10、例えば、15:1~1:6、12:1~1:5、好ましくは、約10:1~約1:4であってもよい。または、E:Z比は、好ましくは、1:1~1:10、例えば、1:2~1:8、1:3~1:5、好ましくは、約1:4であってもよい。バイオフィルムを生成する細菌を含む細菌感染を含め、細菌感染の治療は、予防のためであってもよい。使用される化合物は、抗生物質および/または医薬的に許容される担体を含む組成物の状態であってもよい。化合物または組成物を静脈注射、筋肉内注射または皮下注射によって投与してもよく、経口投与、局所投与してもよく、または、化合物または組成物を、好ましくは適切な吸入機器を用いて吸入してもよい。化合物または組成物を固体組成物例えば、粉末として吸入してもよく、またはエアロゾルの形態で液体組成物として吸入してもよい。一実施形態では、治療される細菌感染は、免疫不全を患う哺乳動物の細菌感染である。本発明の観点で、免疫不全を患う哺乳動物は、何らかの理由で免疫が低下した哺乳動物であり、免疫が低下したとは、自然防御能の態様の一部またはすべての性能が通常よりも低いことを意味する。典型的には、免疫低下疾患が原因であるか、または免疫抑制薬を用いた治療が原因であろう。このような哺乳動物は、バイオフィルムを生成する細菌例えば緑膿菌による感染の危険性が高く、したがって、抗生物質との組成物であってもよいQS阻害剤を用いた予防的治療および急性時の治療の両方が有益である可能性がある。哺乳動物は、ヒト、ペットおよび家畜を含んでいてもよく、または哺乳動物は、ヒト、ペットおよび家畜からなる群から選択されてもよい。免疫低下疾患としては、嚢胞性線維症、糖尿病、COPD、血液性悪性疾患、癌、HIV、AIDS、慢性創傷、熱傷創からなる群から選択される疾患が挙げられる。患者には、カテーテルを埋め込んでいる患者、医療機器、インプラント、ステントで治療した患者、ICUにいる患者が含まれてもよい。本発明の好ましい実施形態では、細菌、特に、上述の感染を引き起こすバイオフィルムを生成する細菌は、グラム陰性菌のような、病原性をQSで制御可能な細菌の群から選択されてもよく、特に、以下のグラム陰性菌群であってもよい。ビブリオフィッシェリVibriofischeri、アエロモナスヒドロフィラAeromonashydrophila、アエロモナスサルモニシダAeromonassalmonicida、アグロバクテリウムツメファシエンスAgrobacteriumtumefaciens、バークホルデリアセパシアBurkholderiacepacia、クロモバクテリウムビオラセウムChromobacteriumviolaceum、エンテロバクターアグロメランスEnterobacteragglomerans、エルウィニアカロトボーラErwiniacarotovora、エルウィニアクリサンテミErwiniachrysanthemi、エルウィニアステワティErwiniaStewartii、エシェリヒアコリEscherichiacoli、シュードモナスオーレオファシエンスPseudomonasaureofaciens、緑膿菌、ラルストニアソラナケアルムRalstoniasolanacearum、リゾビウムエトリRhizobiumetli、リゾビウムレグミノサルムRhizobiumleguminosarum、ロドバクタースフェロイデスRhodobactersphaeroides、サルモネラチフィムリウムSalmonellatyphimurium、セラチアリクファシエンSerratialiquefaciens、シノリゾビウムメリロティSinorhizobiummeliloti、ビブリオアングイラルムVibrioanguillarum、ビブリオハーベイVibrioharveyi、エルシニアエンテロコリティカYersiniaenterocolitica、エルシニアシュードツベルクローシスYersiniapseudotuberculosis、特に、緑膿菌。本発明のさらに好ましい実施形態は、感染した領域が創傷例えば、慢性創傷および/または治癒していない創傷であるような細菌感染の治療で使用するための式1のE,Z-アホエンである。これらの場合には、この化合物を局所投与する方が利点があるだろう。別の有用な実施形態は、感染した領域が肺であるような細菌感染の治療で使用するための式1のE,Z-アホエンである。この治療は、嚢胞性線維症患者の免疫応答が低く、バイオフィルムを生成する細菌例えば、緑膿菌を含む持続性の肺感染を患っていることが多いため、特に、嚢胞性線維症患者と関連がある。したがって、好ましい実施形態は、感染した領域が嚢胞性線維症患者の肺であるような細菌感染の治療で使用するための式1のE,Z-アホエンである。これらの場合には、この化合物を吸入または静脈投与によって投与する方が利点があるだろう。別の好ましい実施形態では、感染した領域は、インプラントまたはインプラント周囲の領域である。本明細書で定義されるように、インプラントは、哺乳動物の失われた生体構造と置き換えるため、または失われた生体機能として機能させるために作られた医療用機器である。このようなインプラントとしては、人工ペースメーカーおよび人工内耳のような電子機器を備えたインプラント、埋め込み可能な丸薬または薬物を溶出するステントの形態をした、皮下での薬物送達機器、骨置換のような人工器官、支持機器または歯科用インプラントが挙げられる。さらに別の実施形態では、感染した領域は、消化器系の一部、例えば、胃および/または腸であってもよい。このような感染としては、食中毒、または膵臓または胆管のステントから引き起こされる感染が挙げられる。本発明のいずれかの態様の観点で記載した実施形態および特徴を本発明の他の実施形態にも適用することを注記しておくべきである。また、種々の徴候の治療に使用するための上に記載する化合物および組成物の上述の実施形態はすべて、この化合物または組成物を投与することによって徴候を治療する方法としてすべて同等に記載されていてもよい。本明細書で引用したあらゆる特許文献および非特許文献は、その全体が本明細書に参考として援用される。以下の非限定的な実施例によって、本発明をさらに詳細に記載する。実施例実施例1:化合物3アリシンの合成アセトン1mL中の化合物2ジアリルジスルフィド0.29g、2.0mmolに、アルゴン下、-50°CでDMDO31mL、0.07M、2.2mmolのアセトン溶液を15分かけて滴下した。得られた淡黄色反応混合物を-20°Cまで加温しつつ、30分間撹拌した。得られた透明反応混合物を減圧下で濃縮した。未精製残渣0.31g、98をカラムクロマトグラフィーペンタン中、5Et2Oで溶出によって精製し、化合物3アリシンを淡黄色液体として得た0.31g、1.9mmol、収率96、純度は95より大きく、99.9まで。溶媒および温度について条件を変えながら、上の反応を繰り返した。残りのパラメーターは同じにしておいた。以下の表1からわかるように、この反応は、多くの条件で効果的である。実施例2:アセトン溶媒を用いた化合物1E,Z-アホエンの合成化合物3アリシン0.162g、1.0mmolを40アセトン水溶液1.6mLに溶かし、この溶液をAcOH0.011mL、0.2mmolで処理した。得られた混合物を64°Cで4時間加熱した。冷却した反応混合物を50メタノール水溶液6mLで希釈し、ペンタンで抽出した10mL×5回。水性画分を固体NH4SO4で飽和状態にし、混合物をCH2Cl2で抽出した10mL×5回。有機抽出物を合わせ、乾燥しNa2SO4、減圧下で濃縮した。未精製残渣0.16gをカラムクロマトグラフィーペンタン中60~80EtOAcで抽出でさらに精製し、化合物1E,Z-アホエンを淡黄色液体として得たE:Z比=1:4、0.025g、0.1mmol、収率32。種々の酸を用い、上の反応を繰り返した。残りのパラメーターは上と同じにしておいた。酸の置き換えは、以下の表2からわかるように、アホエンの収率にもE:Z比にも影響を及ぼした。重要なことに、それほど純度が高いというわけではないアリシン3を用いた場合、上の反応の収率はゼロではないものの、顕著に下がることがわかった。また、アリシン3を得るための従来技術の方法を用いたとき、ニンニク抽出物か、またはアリシンのブロック合成で用いられる反応剤または生成物のいずれかに起因する不純物の中には、アホエンの収率を6~12以下にしてしまうものがあることもわかった。このことは、アホエン合成にどの溶媒およびどの酸を用いるかにかかわらず当てはまった。実施例3:化合物1E,Z-アホエン[E:Z=10:1]の合成化合物3アリシン0.162g、1.0mmolを10ベンゼン水溶液1.6mLに溶かし、この溶液をAcOH0.011mL、0.2mmolで処理した。得られた混合物を48時間で37°Cまで加熱した。冷却した反応混合物を50メタノール水溶液6mLで希釈し、ペンタンで抽出した10mL×5回。水性画分を固体NH4SO4で飽和状態にし、混合物をCH2Cl2で抽出した10mL×5回。有機抽出物を合わせ、乾燥しNa2SO4、減圧下で濃縮した。未精製残渣0.15gをカラムクロマトグラフィーペンタン中60~80EtOAcで抽出でさらに精製し、化合物1E,Z-アホエンE:Z比が10:1、0.023g、0.1mmol、収率30を淡黄色液体として得た。実施例4:式4の化合物の合成E,Zアホエンの酸化したスルホン誘導体は、QS阻害効果をもつことが示されている。したがって、このような誘導体すなわち、式4の化合物を以下に記載するような種々の経路を用いて合成した図2も参照のこと。Y=S、R=アリル式1の化合物E,Zアホエンをアセトン中、過マンガン酸カリウムKMnO4を用いて-20°Cで2時間処理し、Y=Sであり、R=アリルである式4の化合物を収率96で得た。処理および精製は、E,Zアホエンについて用いたのと同様のものであった。Y=SO2、R=アリル式1の化合物E,Zアホエンをジクロロメタン中、過酢酸を用いて0°Cで12時間処理し、Y=SO2であり、R=アリルである式4の化合物を収率38で得た。処理および精製は、E,Zアホエンについて用いたのと同様のものであった。または、式1の化合物E,Zアホエンをアセトン中、4当量のDMDOを用いて-10°Cで6時間処理し、Y=SO2であり、R=アリルである式4の化合物を収率82で得た。処理および精製は、E,Zアホエンについて用いたのと同様のものであった。さらに別の代替的な経路では、Y=Sであり、R=アリルである上述の式4の化合物をアセトン中、2当量のDMDOを用いて-10°Cで6時間処理し、Y=SO2であり、R=アリルである式4の化合物を収率78で得た。Y=S、R=フェニルY=SO2であり、R=アリルである式4の化合物をテトラヒドロフラン中、リチオ化スルフィドPhSLiを用いて-78°Cの温度で処理し、温度を1時間かけて0°Cまで上げていき、Y=Sであり、R=フェニルである式4の化合物をモル収率86で得た。Y=S、R=メチル、エチル、ベンジルY=Sであり、R=フェニルである場合の上述の方法と類似した方法で、R=メチル、エチル、ベンジルである式4の対応する化合物を、対応するリチオ化スルフィドすなわち、MeSLi、EtSLi、アリルSLiを用いて同様の収率で製造した。残りのパラメーターは同じにしておいた。実施例5:アホエン処理によって制御される緑膿菌遺伝子DNAマイクロアレイ分析を用い、アホエン処理によって制御される遺伝子を特定した。リファレンスとして、Hentzerら[M.Hentzeretal.,EMBOJ.,2003,22,p.3803-3815]によって以前特定されたQSレギュロンを使用し、これらのデータを用い、クオラムセンシングを阻害するQSIと推定される化合物の標的特異性を検証した。指数関数的に成長する緑膿菌培養物を以下の4種類の濃度のアホエンで処理した。10μg/ml42.7μM、20μg/ml85.4μM、40μg/ml170.8μM、80μg/ml341.6μM。E:Z比が1:4のE,Zアホエンを使用した。これらの濃度では、成長阻害効果を発揮しない。サンプルをOD600nmで2.0光学密度で再び得た。以前の観察結果では、この細胞密度でQS遺伝子について最も高い活性を示したためである。処理した培養物の遺伝子発現を未処理のコントロールと比較した。一般的に、上の4種類の異なる濃度のアホエンのうち、5分の1より大きくダウンレギュレーションされた遺伝子はほんのわずかであった。10μg/mlのアホエンでは0種類の遺伝子、20μg/mlのアホエンでは0種類の遺伝子、40μg/mlのアホエンでは2種類の遺伝子、80μg/mlのアホエンでは11種類の遺伝子。5倍より大きくアップレギュレーションされた遺伝子の量は、処理した培養物間で著しい差はなかった。本願発明者らの実験設定によれば、合計数で163種類のQSによって制御される緑膿菌遺伝子のうち、10種類の発現Hentzerら[M.Hentzeretal.,EMBOJ.,2003,22,p.3803-3815]がアホエン処理によってダウンレギュレーションされた。濃度が80μg/mlのアホエンは、合計で5570種類の緑膿菌遺伝子のうち、11種類の発現に影響を与える。したがって、アホエンは、QSによって制御される遺伝子の一部に対し、非常に特異性である表3。アホエンによって有意にダウンレギュレーションされた遺伝子のうち、以下のものが、QSによって制御された重要な病原因子であった。LasAプロテアーゼlasA、PA1871、キチナーゼchiC、PA2300、細胞毒性のあるガラクトース親和性のレクチンlecA、PA2570、ラムノシルトランスフェラーゼABオペロンrhlA、PA3478およびrhlB、PA3479、カゼイン、エラスチン、ラクトフェリン、トランスフェリンおよびデコリンを分解する、PvdSによって制御されるエンドプロテアーゼprpL、PA4175、キチンを含有する物質への結合に介在し、おそらくバイオフィルムの生成を補助する、関連するキチン結合性タンパク質cbpDPA0852。lasBは、5分の1よりも大きなダウンレギュレーションは起こさなかった。実施例6:マイクロアレイデータの検証マイクロアレイデータを検証するために、lasBおよびrhlAという主要な2種類のQS遺伝子を用いてRT-PCRを行った図3を参照。この2種類の方法を比較すると、lasB遺伝子およびrhlA遺伝子の発現抑制は同じ傾向に従っており、一般的に、RT-PCRに基づく方法で観察されたものよりわずかに低下率が大きい。RT-PCRデータは、濃度が80μg/mlのアホエンが、rhlAの発現をほぼ12分の1、lasBの発現をほぼ5分の1まで下げることを示す。rhlAの発現は、主にRhlQS系およびシグナルBHLによって制御され、一方、lasBの発現は、Las系およびRhlQS系と、シグナル分子OdDHLおよびBHLの濃度の両方によって影響を受ける。Rasmussenら[Rasmussenetal.,Microbiology,2005,151,p.1325-1340]によれば、表3に列挙した遺伝子は、その制御が完全にLasQS系によって制御されるprpLを除きLas系およびRhlQS系の両方によって制御を受ける。このことは、アホエンが主にRhlQSを標的とすることを示唆している。E:Z比が1:4のE,Zアホエンをこれらの実験で使用した。実施例7:アホエンによるラムノ脂質産生の低下主要な病原因子の1つの合成を阻害することについて、アホエンの実際の有効性を実証するために、DNAアレイおよびRT-PCRのために成長させた培養物中に存在するラムノ脂質の濃度をLC-MSによって直接定量した。ラムノ脂質の産生は、rhlA、rhlB、rhlC遺伝子PA3479、PA3478およびPA1131によってコードされるRhlQS系によって協働して制御される静止期において初期に始まる[V.E.Wagneretal.,JBacteriol.,2003,185,p.2080-2095およびR.Rahimetal.,MolMicrobiol.,2001,40,p.708-718]。したがって、サンプルをOD600nmで1.5および2.0に調整し、ラムノ脂質の産生をその合成が完全に開始する前と開始した後に調べた。サンプル中のラムノ脂質の濃度は、アホエンの濃度を上げていくと徐々に下がっていくことがわかった。OD600nmで2.0のときに20μg/mlのアホエンで処理したとき、ラムノ脂質の含有量は、未処理の培養物と比較して約1/3まで下がり、細胞を80μg/mlのアホエンで処理したとき、サンプル中に存在するラムノ脂質はほとんど検出することができなかった。したがって、この濃度は、ラムノ脂質の合成をほぼ完全に止めている。E:Z比が1:4のE,Zアホエンを使用した。実施例8:invitroでバイオフィルムからラムノ脂質を失わせ、PMNの死を防ぐアホエンによる処理バイオフィルムをPMN白血球にさらすと、ラムノ脂質が産生し、ラムノ脂質は、盾として機能し、バイオフィルムの細菌を食作用から守る機能を有する。PMNの溶解に対するアホエンの影響は、invitroでの連続培養による1回通過型フローチャンバーバイオフィルム系を用いて示された[B.B.Christensenetal.,MethodsEnzymol.,1999,310,p.20-42]。100μg/mlのアホエンが存在する状態、または存在しない状態で、緑膿菌バイオフィルムを4日間成長させた。その後、フローチャンバーの中にあるアホエンが存在しない状態で成長させたバイオフィルムの上にPMNを導入すると、ヨウ化プロピジウムPIによる染色は、PMNが壊死していることを示した図5A。対照的に、バイオフィルムをアホエン存在下で成長させたときは、PMNの壊死は観察されなかった図5B。したがって、アホエンによって処理すると、アホエンのバイオフィルム合成を止めることによって、PMN白血球を守る。守られたPMNは、バイオフィルム細菌を貪食する能力を有することがすでに示されている[T.Bjarnsholtetal.,Microbiology,2005,151,p.3873-3880]。E:Z比が1:4のE,Zアホエンを使用した。実施例9:アホエンおよび抗生物質を用いた処理の相乗効果をinvitroおよびinvivoで確認細菌性バイオフィルムの感染における重要な課題の1つは、投与される抗生物質の有効性が下がることである。CF患者の気道での感染は、PMNおよび細菌のような溶解した炎症細胞から放出した、DNAのようなアニオン性高分子電解質を高濃度で生じるだろう[T.Brandtetal.,Thorax,1995,50,p.880-882]。アニオン性高分子電解質、特にDNAが、トブラマイシンのようなカチオン性抗生物質と結合し、活性を下げてしまい、生体が利用可能なトブラマイシンが存在量の5程度まで下がってしまう可能性があることが示されている。[P.M.Mendelman,1985,AmRevRespirDis.,132、p.761-765]。このことは、ラムノ脂質およびeDNAの産生および放出を止めることによって、その後のトブラマイシンの不活性化を低減することができることを示唆している。このことに従って、本願発明者らは、3日間成長させたバイオフィルム連続培養による1回通過型フローセルにてinvitroで成長させたを、ニンニク抽出物と抗生物質であるトブラマイシンを組み合わせて処理すると、相乗的な殺菌効果を示すことをすでに発表している[T.Bjarnsholtetal.,Microbiology,2005,151,p.3873-3880]。しかし、何がニンニク抽出物の活性成分であるかはわかっていなかった。したがって、緑膿菌株のバイオフィルムを、100μg/mlのアホエンが存在する状態、または存在しない状態で成長させた。3日目に、バイオフィルムを10μg/mlのトブラマイシンを用いて24時間処理した。従来の処理試験は、10μg/ml、100μg/mlまたは340μg/mlを用いた処理が殺菌度に差がないことを示していた。したがって、この試験では10μg/mlのトブラマイシンを選択した。生存/死亡株および共焦点レーザー走査顕微鏡CSLMを用いて殺菌効力を評価し、アホエン[アホエンは、例えば、HPLC精製されていない]が存在する状態で成長させ、その後にトブラマイシンで処理したバイオフィルムは、ほぼ100死んでいることが示された図6A。この相乗効果は、機能的なQS系を有している臨床的なCF単離物CF438診断したCF児から最初に単離したものを用いても評価され、この場合も、バイオフィルムのほぼ100が死んでいることが検出された図6B。invivoでのアホエンとトブラマイシンの組み合わせ処理の影響を試験するために、本願発明者らは、異物感染モデルを使用した[L.D.Christensenetal.,Microbiology,2007,153,p.2312-2320]。野生型緑膿菌であらかじめコロニーを作成しておいた大きさが4mm内径4mm/外径6mmのシリコーン管インプラントをマウスの腹腔に挿入した。24時間ごとに皮下注射によって治療し、アホエンとトブラマイシンによる治療を、それぞれ挿入の2日前および挿入後24時間から開始した。挿入してから72時間後に、インプラントをマウスから取り出し、インプラントあたり、コロニーの生成数を決定した。本願発明者らは、野生型緑膿菌をアホエンとトブラマイシンを組み合わせて治療すると、プラセボ群およびアホエンまたはトブラマイシンでの単剤治療と比較して、インプラントの清浄化が顕著に早まることを発見したそれぞれ、p<0.0001、p=0.009およびp=0.01。清浄化の有意な差は、プラセボ群と単剤治療群との間でもみられたp=0.008およびp<0.0001。本願発明者らは、2種類の単剤治療群の間には、清浄化に有意な差がないことを発見したp=30図6C。E:Z比が1:4のE,Zアホエンを使用した。本願発明者らは、invitroで、100μg/mlのアホエンをバイオフィルムに加えた後、10μg/mlのトブラマイシンを加えると、バイオフィルムをほぼ100殺すのに対し、トブラマイシンまたはアホエンのみが存在する状態では、バイオフィルム細菌をまったく殺さないか、ほんの少ししか殺さないことを示した。eDNAの放出がQSによって制御されることと、本願発明者らの結果を考慮し、この結果を組み合わせると、eDNAの放出がアホエンによって弱められている可能性を示している。実施例10:肺緑膿菌感染のアホエンによる治療この試験では、アホエンを予防的に投与し、その後、感染後にも続けた。腹膜に皮下から注射した。本願発明者らは、緑膿菌PAO1を用いた肺感染マウスモデルにおいて、アホエンを用いて3回の個々のinvivo治療実験を行った。BALB/cマウスに対し、1.5×108CFU/mlの緑膿菌を含むアルギン酸ビーズで気管からチャレンジ試験を行った0日目。2グループのマウスには、1日に1回、治療しないプラセボか、またはアホエン25μg/マウスgで治療した。マウスには、細菌チャレンジ試験の前に予防的治療またはプラセボを2日間与えておいた。治療を3日間続けた。プレート計測数の一覧は、3日目に治療グループとプラセボグループの間で有意な差を示した。この実験を組み合わせたとき、3日目に有意な差がみられp<0.002、グループ間でクリアランスに500倍差があった図7。この結果は、生ニンニク抽出物を治療として使用した同様の肺感染モデルに関するBjarnsholt2005年らによって得られた結果と一致している。[T.Bjarnsholtetal.,Microbiology,2005,151,p.3873-3880]。このマウスは、25μg/体重gの投与量に十分に忍容性であった。アホエンが上述のような緑膿菌感染のクリアランスを誘発する能力を比較する同様の実験は、非常に高純度>99.5、HPLCで精製したまたは95~99.5の純度すなわち、未精製アホエンまたは1回のカラムクロマトグラフィー工程を行ったアホエンで使用した場合、非常に高純度のアホエンは、肺感染の清浄化に有効ではなかったが、一方、純度が95~99.5のアホエンは有効であったことを示している図8、それぞれ上および下のグラフ。このことは、HPLC精製の使用を避けるために、十分な純度の未精製アホエン生成物を与える合成が必須であることを強調するものである。この工程が生体活性に悪影響を与えるからである。したがって、処理し、場合によりカラムクロマトグラフィーにかけた後に、純度が95より高く、99.5未満であるアホエンを与える本発明のプロセスは、驚くべきことに、従来技術より有利である。E:Z比が1:4であるE,Zアホエンを使用した。アホエンを用いる今回の試験と、ニンニク抽出物を用いる従前の試験を比較すると、今回の試験は、アホエンおよびアホエンに近い誘導体が、緑膿菌感染を減らすことができるニンニクの主要な活性要素であるという説得力のある指標を与えている。結論要するに、本願発明者らは、アホエンを使用すると、緑膿菌の重要なQSによって制御される病原性遺伝子のうち、ほんの一部の転写を阻害することによって、invivoで緑膿菌の病原性を弱めることを示した。本願発明者らのトランスクリプトーム解析から、本願発明者らは、アホエンの標的がおそらくRhlQS系であることを示唆した。QSを阻害しても緑膿菌のバイオフィルム生成能力がなくならないことは、認識しておく価値がある。しかし、あらゆる入手可能なデータは、QSが不足したバイオフィルムは、QSが豊富なバイオフィルムよりも脆いことを示す。例えば、マトリックス要素であるDNAが失われているマトリックスの産生はRhlQSが制御しているため、バイオフィルムは、剪断力に弱く、流体力に依存して剥がれ落ちることがある。それに加え、ラムノ脂質は生成しないため、バイオフィルムは、PMNの作用に弱くなるPMNは、バイオフィルムと接触しても死なないため。本願発明者らは、invitroで、QSが不足する細菌のバイオフィルムは、QSが豊富なバイオフィルムとは対照的に、新しく単離したPMNが貪食することができることを以前示した。PMNに対するバイオフィルムの忍容性にとって重要なことは、ラムノ脂質の産生によって、向かってくるPMNに対する保護的な盾が作られることであり、本願発明者らは、この事実が今回の場合にも当てはまることを裏付けるいくつかの証拠を持っている。したがって、QS阻害剤を用いると、PMNの抗菌性を大きく高め、バイオフィルムを生成する細菌を有効に壊滅させることができるはずである。さらに、ラムノ脂質は、PMNを溶解し、その後、内在するDNA、加水分解酵素、酸素ラジカルが漏出する。これにより、特に、組織損傷、炎症の増大、ムコイド表現型の外観が顕著に症状の憎悪の原因となるような緑膿菌の変異の誘発に関して悪いサイクルが生じる。トブラマイシンとの組み合わせ実験におけるマウス実験での感染の低下、invitroでのバイオフィルムの除去は、慢性的な緑膿菌感染を治療するための将来的な抗菌薬物としてアホエンを用いる可能性を示唆している。参考文献W.C.Fuquaetal.,J.Bacteriol.,1994,176,p269-275T.Bjarnsholtetal.,Microbiology,2005,151,p.3873-3880R.Naganawaetal.,AppliedandEnvironmentalMicrobiology,62,1996,p.4238-4242EP185324Blocketal.,J.Am.Chem.Soc,1986,108,p.7045-7055US4,665,088WO2010/100486M.Hentzeretal.,EMBOJ.,2003,22,p.3803-3815Rasmussenetal.,Microbiology,2005,151,p.1325-1340[V.E.Wagneretal.,JBacteriol.,2003,185,p.2080-2095R.Rahimetal.,MolMicrobiol.,2001,40,p.708-718]B.B.Christensenetal.,MethodsEnzymol.,1999,310,p.20-42T.Brandtetal.,Thorax,1995,50,p.880-882P.M.Mendelman,1985,AmRevRespirDis.,132,p.761-765L.D.Christensenetal.,Microbiology,2007,153,p.2312-2320"