"下記式1で表わされる、ポタシウム2-クロロ-4-フルオロフェニル{2R,3R,8R-7-エトキシカルボニル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-8-イルスルホニル}アザニド下記式2で表わされる、ポタシウム2-ブロモ-4-フルオロフェニル{2R,3R,8R-7-エトキシカルボニル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-8-イルスルホニル}アザニド請求項1に記載の化合物の結晶。銅のKα線の照射で得られる粉末X線回折において、図1に示すX線回折図を有する請求項3に記載の結晶。銅のKα線の照射で得られる粉末X線回折において、回折角度2θ度=3.82、7.64、11.48、19.06、23.08、25.22、及び26.98それぞれ±2に特徴的なピークを示す、請求項3に記載の結晶。請求項2に記載の化合物の結晶。銅のKα線の照射で得られる粉末X線回折において、図2に示すX線回折図を有する請求項6に記載の結晶。銅のKα線の照射で得られる粉末X線回折において、回折角度2θ度=7.66、15.36、19.08、23.76、25.26、及び27.04それぞれ±2に特徴的なピークを示す、請求項6に記載の結晶。請求項1又は請求項2に記載の化合物を有効成分として含有する医薬組成物。エンドトキシンにより引き起こされる細胞内シグナル伝達又は細胞活性化に起因する炎症性メディエーターの産生を抑制するために用いられる、請求項1又は請求項2に記載の化合物を有効成分として含有する医薬組成物。請求項1又は請求項2に記載の化合物を有効成分として含有する、敗血症の予防及び/又は治療薬。請求項1乃至8のいずれか1項に記載の結晶を含有する医薬組成物。エチル2R,3R,8R-8-[N-2-クロロ-4-フルオロフェニルスルファモイル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-7-カルボキシラートの溶液又は懸濁液にポタシウム2-エチルヘキサノエート水和物の酢酸エチル溶液を滴下することを特徴とする、請求項1に記載の化合物の製造方法。ポタシウム2-エチルヘキサノエート水和物の酢酸エチル溶液に、エチル2R,3R,8R-8-[N-2-ブロモ-4-フルオロフェニルスルファモイル-2、3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-7-カルボキシラートを滴下することを特徴とする、請求項2に記載の化合物の製造方法。本発明の課題は、保存及び取扱安定性に優れた置換シクロアルケン誘導体の結晶を提供することにある。すなわち、本発明は、1下記式1で表わされる、ポタシウム2-クロロ-4-フルオロフェニル{2R,3R,8R-7-エトキシカルボニル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-8-イルスルホニル}アザニド、2下記式2で表わされる、ポタシウム2-ブロモ-4-フルオロフェニル{2R,3R,8R-7-エトキシカルボニル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-8-イルスルホニル}アザニド、3上記1に記載の化合物の結晶、4銅のKα線の照射で得られる粉末X線回折において、図1に示すX線回折図を有する上記3に記載の結晶、5銅のKα線の照射で得られる粉末X線回折において、回折角度2θ度=3.82、7.64、11.48、19.06、23.08、25.22、及び26.98それぞれ±2に特徴的なピークを示す、上記3に記載の結晶、6上記2に記載の化合物の結晶、7銅のKα線の照射で得られる粉末X線回折において、図2に示すX線回折図を有する上記6に記載の結晶、8銅のKα線の照射で得られる粉末X線回折において、回折角度2θ度=7.66、15.36、19.08、23.76、25.26、及び27.04それぞれ±2に特徴的なピークを示す、上記6に記載の結晶、9上記1又は2に記載の化合物を有効成分として含有する医薬組成物、10エンドトキシンにより引き起こされる細胞内シグナル伝達又は細胞活性化に起因する炎症性メディエーターの産生を抑制するために用いられる、上記1又は2に記載の化合物を有効成分として含有する医薬組成物、11上記1又は2に記載の化合物を有効成分として含有する、敗血症の予防及び/又は治療薬、12上記1乃至8のいずれか1に記載の結晶を含有する医薬組成物、13エチル2R,3R,8R-8-[N-2-クロロ-4-フルオロフェニルスルファモイル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-7-カルボキシラートの溶液又は懸濁液にポタシウム2-エチルヘキサノエート水和物の酢酸エチル溶液を滴下することを特徴とする、上記1に記載の化合物の製造方法、又は、14ポタシウム2-エチルヘキサノエート水和物の酢酸エチル溶液に、エチル2R,3R,8R-8-[N-2-ブロモ-4-フルオロフェニルスルファモイル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-7-カルボキシラートを滴下することを特徴とする、上記2に記載の化合物の製造方法である。本発明によれば、保存及び取扱安定性に優れた置換シクロアルケン誘導体の結晶を提供することが可能となる。本発明の置換シクロアルケン誘導体のカリウム塩結晶は、エンドトキシンにより引き起こされる細胞内シグナル伝達又は細胞活性化に起因する炎症性メディエーターの産生を抑制し、敗血症の予防及び/又は治療薬として有効である。本発明は、下記式1で表わされる、ポタシウム2-クロロ-4-フルオロフェニル{2R,3R,8R-7-エトキシカルボニル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-8-イルスルホニル}アザニド以下、本明細書において化合物1と記載する場合がある。、又は、下記式2で表わされる、ポタシウム2-ブロモ-4-フルオロフェニル{2R,3R,8R-7-エトキシカルボニル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-8-イルスルホニル}アザニド以下、本明細書において化合物2と記載する場合がある。の結晶に関する。ここで、結晶とは、その内部構造が三次元的に構成原子又はその集団の規則正しい繰り返しからなる固体を示し、そのような規則正しい内部構造を有さないアモルファス状の固体とは区別される。ある固体が結晶であるか否かは、結晶学的に周知の方法例えば、粉末X線回折測定、示差走査熱量分析等で調べることができる。例えば、ある固体について銅のKα線の照射で得られるX線による粉末X線回折測定を行い、そのX線回折図において明確なピークが観測される場合には、その固体は結晶であると決定され、明確なピークが観測されない場合にはその固体はアモルファス状であると決定される。当該ピークを読み取ることはできるがピークが明確でない例えば、ブロードである場合には、その固体は結晶化度の低い結晶であると決定され、そのような結晶化度の低い結晶も本発明の結晶に包含される。同じ化合物の結晶であっても、結晶化の条件によって、複数の異なる内部構造及び物理化学的性質を有する結晶結晶多形が生成することがあるが、本発明の結晶は、これら結晶多形のいずれであってもよく、2以上の結晶多形の混合物であってもよい。本発明の結晶は、大気中に放置しておくことにより、水分を吸収し、付着水が付く場合や通常の大気条件下において25乃至150°Cに加熱すること等により、水和物を形成する場合がある。さらには、本発明の結晶は付着残留溶媒または溶媒和物中に、結晶化時の溶媒を含む場合もある。本明細書において、本発明の結晶を粉末X線回折のデータに基づき表すことがあるが、粉末X線回折は、通常、当該分野において用いられる手法により測定解析を行えばよく、例えば、実施例に記載の方法により行うことができる。また、一般に、水和物や脱水物は結晶水の着脱によって、その格子定数が変化し、粉末X線回折における回折角2θに変化を与えることがある。また、ピークの強度は、結晶の成長面等の違い晶癖等によって変化することもある。従って、本発明の結晶を粉末X線回折のデータに基づき表した場合、粉末X線回折におけるピークの回折角およびX線回折図が一致する結晶のほか、それらから得られる水和物および脱水物も本発明の範囲に包含される。銅のKα線を使用した粉末回折測定においては、通常、銅のKα線Kα1線及びKα2線が分離されていないものが試料に照射される。X線回折図は、Kα線に由来する回折を解析して得ることができ、また、Kα線に由来する回折から取り出されたKα1線に由来する回折のみを解析して得ることもできる。本発明において、Kα線の照射で得られる粉末X線回折図は、Kα線に由来する回折ピークを解析して得られるX線回折図、及び、Kα1線に由来する回折を解析して得られるX線回折図を包含し、好適には、Kα1線に由来する回折を解析して得られるX線回折図である。本発明の結晶の1つの好適な形態は、化合物1で表わされる、ポタシウム2-クロロ-4-フルオロフェニル{2R,3R,8R-7-エトキシカルボニル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-8-イルスルホニル}アザニドの結晶である。化合物1の結晶は、銅のKα線の照射で得られる粉末回折図において、図1に示すX線回折図を有する。また、化合物1の結晶は、回折角度2θ度=3.82、7.64、11.48、19.06、23.08、25.22、及び26.98に特徴的なピークを有する。ここで、特徴的ピークとは、粉末X線回折において最大ピーク強度を100とした場合の相対強度9以上のピークを意味する。本発明の結晶の別の1つの好適な形態は、化合物2の結晶で表わされる、ポタシウム2-ブロモ-4-フルオロフェニル{2R,3R,8R-7-エトキシカルボニル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-8-イルスルホニル}アザニドの結晶である。化合物2の結晶は、銅のKα線の照射で得られる粉末回折図において、図2に示すX線回折図を有する。また、化合物2の結晶は、回折角度2θ度=7.66、15.36、19.08、23.76、25.26、及び27.04に特徴的なピークを有する。ここで、特徴的ピークとは、粉末X線回折において最大ピーク強度を100とした場合の相対強度10以上のピークを意味する。図1及び図2の粉末X線回折図において、縦軸には回折強度[カウント/秒cps]を示し、横軸には回折角度2θ度を示す。2θは、測定条件等によりその位置及び相対強度が多少変化し得るものであるため、2θがわずかに異なる場合であっても、適宜スペクトル全体のパターンを参照して結晶形の同一性は認定されるべきである。その誤差は、通常±2の範囲であり、好ましくは±1の範囲であり、より好ましくは±0.5の範囲であり、更に好ましくは±0.2の範囲である。また、それぞれの回折ピークの強度についても、結晶学の分野において周知であるように、多数の因子特定の結晶形態から生じる優先方位および粒子サイズの影響を含むに起因して変化し得るものであり、本発明の結晶を特定するための上記主要ピークの相対強度も変化し得るものであるが、それらの結晶も本発明の結晶に包含される。本発明の化合物1又は2は、エンドトキシンにより引き起こされる細胞内シグナル伝達又は細胞活性化に起因する炎症性メディエーターの産生を抑制する活性を有し、更に、優れた保存、取扱安定性を有するため、医薬として有用である。また、上記医薬は、好適には、温血動物用であり、更に好適には、ヒト用である。本発明の化合物1および化合物2を、上記疾患の治療薬又は予防薬として使用する場合には、それ自体又は適宜の薬理学的に許容される、賦形剤、希釈剤等と混合し、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤若しくはシロップ剤等による経口的又は注射剤若しくは坐薬等による非経口的に投与することができる。これらの製剤は、賦形剤例えば、乳糖、白糖、葡萄糖、マンニトール若しくはソルビトールのような糖誘導体;トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、α澱粉若しくはデキストリンのような澱粉誘導体;結晶セルロースのようなセルロース誘導体;アラビアゴム;デキストラン;又は、プルランのような有機系賦形剤;或いは、軽質無水珪酸、合成珪酸アルミニウム、珪酸カルシウム若しくはメタ珪酸アルミン酸マグネシウムのような珪酸塩誘導体;燐酸水素カルシウムのような燐酸塩;炭酸カルシウムのような炭酸塩;又は、硫酸カルシウムのような硫酸塩等の無機系賦形剤であり得る。、滑沢剤例えば、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム若しくはステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸金属塩;タルク;ビーズワックス若しくはゲイ蝋のようなワックス類;硼酸;アジピン酸;硫酸ナトリウムのような硫酸塩;グリコール;フマル酸;安息香酸ナトリウム;D,L-ロイシン;ラウリル硫酸ナトリウム若しくはラウリル硫酸マグネシウムのようなラウリル硫酸塩;無水珪酸若しくは珪酸水和物のような珪酸類;又は、上記澱粉誘導体であり得る。、結合剤例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、マクロゴール、又は、前記賦形剤と同様の化合物であり得る。、崩壊剤例えば、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム若しくは内部架橋カルボキシメチルセルロースナトリウムのようなセルロース誘導体;カルボキシメチルスターチ、カルボキシメチルスターチナトリウム若しくは架橋ポリビニルピロリドンのような化学修飾された水溶性高分子類;又は、上記澱粉誘導体であり得る。、乳化剤例えば、ベントナイト若しくはビーガムのようなコロイド性粘土;水酸化マグネシウム若しくは水酸化アルミニウムのような金属水酸化物;ラウリル硫酸ナトリウム若しくはステアリン酸カルシウムのような陰イオン界面活性剤;塩化ベンザルコニウムのような陽イオン界面活性剤;又は、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル若しくはショ糖脂肪酸エステルのような非イオン界面活性剤であり得る。、安定剤例えば、メチルパラベン若しくはプロピルパラベンのようなパラオキシ安息香酸エステル類;クロロブタノール、ベンジルアルコール若しくはフェニルエチルアルコールのようなアルコール類;塩化ベンザルコニウム;フェノール若しくはクレゾールのようなフェノール類;チメロサール;デヒドロ酢酸;又は、ソルビン酸であり得る。、矯味矯臭剤例えば、通常使用される、甘味料、酸味料又は香料等であり得る。、希釈剤等の添加剤を用いて周知の方法で製造される。以下、実施例、試験例により、本発明を更に詳細に説明する。実施例1ポタシウム2-クロロ-4-フルオロフェニル{2R,3R,8R-7-エトキシカルボニル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-8-イルスルホニル}アザニドエチル2R,3R,8R-8-N-2-クロロ-4-フルオロフェニルスルファモイル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-7-カルボキシラート国際公開番号WO2007032362に実施例162の低極性化合物、第1ピークとして記載の化合物100mg0.208mmolを酢酸エチル1mlに溶解し、室温攪拌下、ポタシウム2-エチルヘキサノエート水和物38mg0.208mmolの酢酸エチル溶液2mlを加えた。反応液を減圧濃縮し、残渣にジエチルエーテルを加えた。析出した固形物を濾取し、ジエチルエーテルで洗浄することにより、粗生成物92mgをアモルファスとして得た。次いでこのものを酢酸エチルに溶解し、130°Cで2時間加熱還流した。冷却後、析出した固形物を濾取し、酢酸エチルで洗浄することにより、標記の化合物を白色結晶として得た。1H-核磁気共鳴スペクトル400MHz,DMSO-d6δppm:740707697684675646498482411402402393393380363341278265234225187174165158114粉末X線回折パターンを図1に示す。<別法>エチル2R,3R,8R-8-N-2-クロロ-4-フルオロフェニルスルファモイル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-7-カルボキシラート300mg0.625mmolを酢酸エチル2mlに溶解し、室温攪拌下、ポタシウム2-エチルヘキサノエート水和物114mg0.625mmolの酢酸エチル溶液4mlを加えた。反応液を減圧濃縮し、残渣にジエチルエーテルを加えた。析出した固形物を濾取し、ジエチルエーテルで洗浄することにより、粗生成物をアモルファスとして得た。次いでこのものを酢酸エチル3mlに溶解し、前法で得た種晶を添加し、100°Cで5分間加熱還流した。冷却後、析出した固形物を濾取し、酢酸エチルで洗浄することにより、標記の化合物236mgを白色結晶として得た収率73。実施例2ポタシウム2-ブロモ-4-フルオロフェニル{2R,3R,8R-7-エトキシカルボニル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-8-イルスルホニル}アザニドポタシウム2-エチルヘキサノエート水和物422mg2.31mmolを酢酸エチル23mlに溶解し、室温攪拌下、エチル2R,3R,8R-8-[N-2-ブロモ-4-フルオロフェニルスルファモイル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-7-カルボキシラート国際公開番号WO2007032362に実施例166の低極性化合物、第1ピークとして記載の化合物1.215g2.31mmolを加えた。反応液を減圧濃縮し、残渣にジエチルエーテルを加えた。析出した固形物を濾取し、ジエチルエーテルで洗浄することにより、粗生成物954mgをアモルファスとして得た。次いでこのものを酢酸エチル6mlに溶解し、70°Cで5分間加熱攪拌した。冷却後、析出した固形物を濾取し、酢酸エチルおよびジエチルエーテルで洗浄することにより、標記の化合物850mgを白色結晶として得た収率65。1H-核磁気共鳴スペクトル400MHz,DMSO-d6δppm:739717683645498483413381364341284263235226185173165156114粉末X線回折パターンを図2に示す。<別法>ポタシウム2-エチルヘキサノエート水和物102mg0.560mmolを酢酸エチル5mlに溶解し、室温攪拌下、エチル2R,3R,8R-8-N-2-ブロモ-4-フルオロフェニルスルファモイル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-7-カルボキシラート280mg0.534mmolを加えた。反応液を減圧濃縮し、残渣にジエチルエーテルを加えた。析出した固形物を濾取し、ジエチルエーテルで洗浄することにより、粗生成物をアモルファスとして得た。次いでこのものをエタノール1mlに溶解し、70°Cで1分間加熱攪拌した。冷却後、析出した固形物を濾取し、エタノールおよびジエチルエーテルで洗浄することにより、標記の化合物197mgを白色結晶として得た収率66。実施例3粉末X線回折の測定Rigaku社製RintTTR-IIIを用い、試料を無反射試料ホルダー上に均し、下記条件にて測定した。<分析条件>X線種CuKa波長154A、管電圧50kV、管電流300mA、走査速度2°min、ステッフ ゚002°、走査範囲260°、発散スリット05mm、散乱スリット05mm、受光スリット05mm<測定結果>実施例1で得た化合物の結晶を上記方法で測定した粉末X線回折図を図1に示す。図1において最大ピーク強度を100とした場合の相対強度9以上のピークを表1に示す。実施例2で得た化合物の結晶を上記方法で測定した粉末X線回折図を図2に示す。図2において最大ピーク強度を100とした場合の相対強度10以上のピークを表2に示す。実施例4吸湿性試験試料をガラス製サンプルカップに秤量し以下に示す条件にて重量を測定した。<測定条件>測定機器DVSAdvantageSurfaceMeasurementSystem製測定湿度102030405060657075808590959590858075706560504030252010RH測定温度25°C、最小曝露時間15min最大曝露時間120min、Step移行条件0006wt以内測定終了時の外観を確認した。<測定結果>表4、図3、図4、及び図5に示すように、比較例として用いた、エチル2R,3R,8R-8-N-2-クロロ-4-フルオロフェニルスルファモイル-2,3-ビスヒドロキシメチル-1,4-ジオキサスピロ4.5デカ-6-エン-7-カルボキシラート国際公開番号WO2007032362に実施例162の低極性化合物、第1ピークとして記載の化合物:フリー体は、いずれの測定湿度においても高い吸湿性を示したが図3参照、実施例1及び実施例2の化合物は吸湿性を示さなかった図4及び5参照。特に、実施例1の化合物はいずれの湿度においても、安定して吸湿性を示さなかった図4参照。実施例5溶解性試験<試験方法>実施例1、実施例2及び比較例1の化合物の150mgをそれぞれ、塩化ナトリウムを含むリン酸塩水溶液150mMのNaCl、10mMのNaH2PO32H2Oより成る5mLに溶解した。pHを測定しながら30分攪拌後、懸濁液0.5mLを採取し、シリンジフィルターにてろ過した。ろ液100μLを10mLメスフラスコに移し、50MeCN水溶液でメスアップし、試料溶液とした。懸濁液にconcHClを滴下し、pHを7.5付近に調製した。以下の条件にてHPLCを用いて測定した。<分析法条件>HPLCシステムWater’sAllianceColumnXTerraMSC1835μmColumnSize46x100mmColumnTemp40°CFlowRate12mLminSolventA01リン酸水、SolventB0.1リン酸MeCNGradientSchedule<測定結果>表4に示すように、比較例の化合物フリー体は、低い溶解性であったが、実施例1及び実施例2は、それぞれ、13.8mg/mL、9.6mg/mLの溶解性を示した。実施例6溶液安定性試験<試験方法>本発明の化合物実施例1、実施例2及び比較例のそれぞれを精密に秤量し、10mLメスフラスコに入れ、pH6のPBSに溶解した。1NHClを加えて、実施例1の化合物はpH6に、実施例2の化合物はpH7に、比較例の化合物はpH8に調整した。25°Cに光試験器に上記のフラスコ及び、対照としてアルミホイルで遮光したフラスコを入れ、1日経過後に、50MeCNにてメスアップする。上述の溶解性試験で使用したHPLC条件にて、溶液濃度を算出し、対照からの濃度変化を算出した。<測定結果>表4に示すように、1日保管した際の溶液安定性は、比較例の化合物フリー体では、99.4、実施例1の化合物では、99.9、実施例2の化合物では、99.4であった。実施例7化学的安定性評価<試験方法>低湿室25°C、30RHにて、試料を石英サンプルカップに精密に秤量し、10mLメスフラスコに入れた。シリカゲルを入れたデシケーターに開栓状態で3日間放置した。さらに、開栓状態で25°C、湿度30の環境で4週間保管した。実施例5の溶解性試験と同じHPLC条件で、残存量を測定した。<測定結果>表4に示ように、比較例の化合物フリー体は、吸湿性のため本試験の実施が不可能であったが、実施例1及び実施例2の化合物はそれぞれ、98.9および98.8の残存量を示し、実施例1及び2の化合物は安定であることが示された。試験例1エンドトキシン刺激による細胞のTNF-α産生に対する抑制効果invitroヒト単球系細胞株U937をエンドトキシン刺激した際のTNF-α産生に対する本発明の化合物の抑制率を測定した。すなわち、非働化新生仔牛血清を10容積含むRPMI1640培地に、12-O-テトラデカノイルホルボール13-アセテートを終濃度30ng/mlとなるよう添加した。該培地にU937細胞を懸濁し、96穴培養プレートスミロンへ、1穴あたりの細胞数/容量が2×104個/0.1mlとなるように播き、37°Cにて、5CO2、湿度100の炭酸ガスインキュベーター中で3日間培養した。培養終了後、培養上清を除去した。各穴へ、種々の濃度の本発明の化合物を添加し、併せてリポポリサッカライドLPSE.coli0111:B4、シグマを、終濃度30ng/mlとなるよう添加した。培養プレートを再び炭酸ガスインキュベーター中にて4.5時間培養した後、培養上清を回収した。384半穴ブラックプレートグライナーならびにシスバイオインターナショナル社製のHTRF定量キットを用い、培養上清中のTNF-α濃度をディスカバリーパッカード社にて時間分解蛍光として測定した。LPS非存在下の測定値X、本発明の化合物の非存在下の測定値Yおよび本発明の化合物の存在下の測定値Zより、下記の計算式[I]を用いてTNF-α産生抑制率を求めた。TNF-α産生抑制率={1-Z-X/Y-X}×100[I]<TNF-α産生抑制効果invitro>表5に示すように、本試験において本発明の化合物は、エンドトキシン刺激による細胞のTNF-α産生に対して、優れた抑制効果を示した。試験例2血中TNF-α濃度上昇に対する抑制効果invivo血中TNF-α濃度上昇に対する本発明の化合物の抑制果を検討した。血中TNF-α濃度上昇試験はJournalofLeukocyteBiology、第47巻、第164項1990年に記載のParantらの方法に準じて実施した。試験には、雄性SpragueDawleyラット8~9週齢を1群3~4匹として用いた。LPS投与4時間前に生理食塩液に溶解したムラミルジペプチド1mg/mlを1ml/kgの割合で尾静脈より投与した。LPS投与0.5時間前にペントバルビタール40mg/kgで麻酔し、5ジメチルアセトアミド/95ポリエチレングリコール400溶液に溶解した本発明の化合物を右大腿静脈より1ml/kgの割合で投与した。対照群には、5ジメチルアセトアミド/95ポリエチレングリコール400溶液を1ml/kgの割合で投与した。生理食塩液に溶解したLPS3μg/mlを1ml/kgの割合で左大腿静脈より投与した。LPS投与2時間後に抗凝固剤として3.8w/vクエン酸ナトリウム溶液を用いて採血し、遠心10,000g、5分間、4°Cにより血漿を分離した。TNF-α定量キットバイオソースインターナショナル社を用いて、血漿中のTNF-α濃度を測定した。対照群の血中TNF-α濃度X、本発明の化合物投与群の血中TNF-α濃度Yより、下記の計算式[II]を用いてTNF-α産生抑制率を求めた。TNF-α産生抑制率={1-Y/X}×100[II]<TNF-α産生抑制効果invivo>表6に示すように、本試験において本発明の化合物は、血中TNF-α濃度上昇に対して優れた抑制効果を示した。"