ガノデリックアシッドDMganodericacidDM、またはその塩若しくはエステルを有効成分とするチューブリン結合剤。ガノデリックアシッドDMganodericacidDM、またはその塩若しくはエステルを含む天然物抽出物を含有する、請求項1記載のチューブリン結合剤。ガノデリックアシッドDMganodericacidDM、またはその塩若しくはエステルを有効成分とするチューブリン重合促進剤または微小管安定剤。ガノデリックアシッドDMganodericacidDM、またはその塩若しくはエステルを含む天然物抽出物を含有する、請求項3に記載するチューブリン重合促進剤または微小管安定剤。前述するように、従来より、タキサン系薬剤やエポチロン系薬剤などのチューブリン結合剤が、αチューブリンまたはβチューブリンに結合することで両チューブリンのダイマー形成及び重合を促進し、微小管の集成を安定化することで有糸分裂中の細胞周期を停止させる等、細胞分裂装置の主体である微小管の不全をもたらし、細胞分裂を阻害することが知られている。こうしたチューブリン結合剤の細胞分裂に対する阻害作用は、前述するように抗がん剤の機能として利用されているほか、乾癬、狭窄症、心筋梗塞及び糸球体腎炎の治療剤の機能として、また移植拒絶を抑制する機能としても利用されている。そこで本発明は、新規チューブリン結合剤、並びに新規なチューブリン重合促進剤または微小管安定剤を提供すること、特に、上記するように医薬品として臨床応用が可能な、チューブリン結合剤、並びに新規なチューブリン重合促進剤または微小管安定剤を提供することを目的とする。本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意検討を重ねていたところ、ガノデリックアシッドDMganodericacidDM:以下、単にGADMともいうが、ビンカアルカロイドの1種であるビンブラスチンとほぼ同様にチューブリンに強く結合することを見出し実験例1参照、さらにGADM-OH7OxoganodericacidZ及びGanodericacidAは、いずれもGADMと構造が類似するにもかかわらず、チューブリンと殆ど結合しないことを確認した。このことから、チューブリンとの結合には、GADMの構造中、ステロイド骨格の領域図5のAで示す領域が関与し、カルボキシル基を含む領域図5のBで示す領域は関与しないことを確認した実験例3参照。さらに本発明者らは、上記知見に基づいて、GADMのチューブリン重合に及ぼす作用を調べたところ、GADMは、タキサン系薬剤やエポチロン系薬剤などのチューブリン結合剤と同様に、チューブリンに結合し、チューブリンの重合を促進し、重合を安定化させる作用を有することを確認した実験例2。この結果から、GADMがタキサン系薬剤やエポチロン系薬剤などと同様の薬理作用を有することが強く示唆された。本発明はかかる知見に基づいて、さらに検討をかさねて完成したものであり、下記の実施態様を包含するものである。Iチューブリン結合剤I-1ガノデリックアシッドDM、またはその塩若しくはエステルを有効成分とするチューブリン結合剤。I-2ガノデリックアシッドDM、またはその塩若しくはエステルを含む天然加工物を含有する、I-1記載のチューブリン結合剤。IIチューブリン重合促進剤または微小管安定剤II-1ガノデリックアシッドDM、またはその塩若しくはエステルを有効成分とするチューブリン重合促進剤または微小管安定剤。II-2ガノデリックアシッドDM、またはその塩若しくはエステルを含む天然加工物を含有する、II-1記載のチューブリン重合促進剤または微小管安定剤。本発明により、ガノデリックアシッドDMGADMにチューブリン結合作用があること、当該チューブリン結合作用は、GADMの構造中、ステロイド骨格の領域が関与することが判明した。さらに本発明により、GADMは、タキサン系薬剤やエポチロン系薬剤などのチューブリン結合剤と同様に、チューブリンに結合して、チューブリンの重合を促進することが判明し、微小管の集成を強化し安定化するように作用することが示唆された。これらのことは、GADM、またはその塩若しくはエステルが、チューブリン結合剤として、またチューブリン重合促進剤若しくは微小管安定剤として、創薬のリード化合物になり得ることを示している。Iチューブリン結合剤本発明のチューブリン結合剤は、ガノデリックアシッドDMを有効成分とすることを特徴とする。当該ガノデリックアシッドDMGADMは、下式で示される公知化合物である。当該GADMは、例えばChromaDexInc等から、商業的に入手することができる。後述する実験例3に示すように、当該GADMのチューブリンとの結合部位は、GADMのカルボキシル基を含む領域図5のB参照ではなく、ステロイド骨格の領域図5のAである。このため、GADMは、26位のカルボキシル基がアルコールと反応してエステル化されたものであってもよいし、当該カルボキシル基がアルコールに還元されてもよいし、また当該カルボキシル基に塩基が反応して形成された塩の形態を有するものであってもよい。エステル基としては、特に制限されるものではないが、通常、メチルエステル基、エチルエステル基等、炭素数1~11、好ましくは炭素数1~6を有する直鎖または分岐状のアルキルエステル基を挙げることができ、また塩としては、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属塩;アンモニウム塩等を挙げることができる。かかるエステル体および塩は、上記GADMを出発原料として定法に従って調製することができる。本発明のチューブリン結合剤に含有されるGADM、またはその塩若しくはエステルの割合は、当該チューブリン結合剤がチューブリンに対して結合作用を発揮することを限度として特に制限されず、チューブリン結合剤100重量中、0.1~100重量の範囲から適宜設定することができる。なお、チューブリンに対して結合作用を発揮するか否かの判断は、例えば後述する実験例2に記載するように水晶振動子QuartzCrystalMicrobalanceQCMの質量付加効果を利用して測定評価することができる。かかる水晶振動子の質量付加効果は、後述するように、例えば市販の水晶振動子式センサーによる計測装置NAPiCOS登録商標システム:日本電波工業等を用いて測定することができる。本発明のチューブリン結合剤に配合するGADM、またはその塩若しくはエステルは、精製されたものであっても、また粗精製状態のものであってもよく、粗精製状態のものとしては、天然物から得られる加工物を挙げることができる。ここで天然物としては、GADMを含むもの動物、植物、キノコ、微生物などを広く挙げることができる。例えば、キノコの例示として、マンネンタケを挙げることができる。マンネンタケは、学名がGanodermalucidumであり、ヒダナシタケ目マンネンタケ科に属するキノコである。マンネンタケは、一般的に霊芝と呼ばれており、古来中国では霊芝又は芝草と呼ばれ、日本ではレイシ、サイワイタケと呼ばれることもある。これら天然物の加工物としては、天然物を乾燥、破砕または抽出等の加工処理に供して調製したものを挙げることができる。好ましくは、天然物の抽出物である。抽出物を得るための抽出溶媒としては、通常、水;メタノール、n-ヘキサン、エタノール、エーテル、酢酸エチル等の有機溶媒;又は水と有機溶媒との混合物が用いられる。また、抽出処理は、特に制限されないが、例えば、天然物を、必要に応じて乾燥または粉砕した後、抽出溶媒に浸漬し放置することにより抽出する浸漬法冷浸法、温浸法、及びソックスレー抽出器を用いた加熱還流によるソックスレー抽出法等の公知の抽出法を適用することができる。斯くして抽出された抽出液は、必要に応じて、溶媒を濃縮または乾固してもよく、固体又はその粉末の形態として調製することができる。また、必要に応じて、シリカゲルカラムクロマトグラフィー、逆相分取液体クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィーTLCなどの各種クロマトグラフィーによって、さらに分画操作を繰り返し、GADM、またはその塩若しくはエステルの含有量及び純度を高めてもよい。また、斯くして天然物から分離し、精製することによって取得したGADMもまた、本発明のチューブリン結合剤の有効成分として用いることができる。本発明のチューブリン結合剤は、GADMまたはその塩若しくはエステル、または上記のようにして調製される天然物の加工物だけを含有するものであってもよいし、またさらに薬学的に許容される担体や添加剤または可食性成分を含有するものであってもよい。チューブリン結合剤は、固形製剤、液状製剤、及び乳液製剤等の慣用の製剤の形態に調製することができ、例えば固形製剤の形態に調製する場合、担体として賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、及び増粘剤などが用いられる。また、液状製剤の形態に調製する場合、担体として溶剤、分散剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤などが、また乳液製剤の場合は、これらに加えて乳化剤が用いられる。また、必要に応じて、防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤などの添加物も用いることができる。賦形剤の好適な例としては、制限されないが、例えば乳糖、白糖、D-マンニトール、デンプン、結晶セルロース、軽質無水ケイ酸等が挙げられる。滑沢剤の好適な例としては、制限されないが、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、コロイド、シリカ等が挙げられる。結合剤の好適な例としては、制限されないが、例えば結晶セルロース、白糖、D-マンニトール、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。崩壊剤の好適な例としては、制限されないが、例えばデンプン、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルスターチナトリウム等が挙げられる。増粘剤の好適な例としては、制限されないが、例えば天然ガム類、セルロース誘導体、アクリル酸重合体等が挙げられる。溶剤の好適な例としては、制限されないが、例えば注射用水、アルコール、プロピレングリコール、マクロゴール、ゴマ油、トウモロコシ油等が挙げられる。分散剤の好適な例としては、例えばTween80、HCO60、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム等が挙げられる。溶解補助剤の好適な例としては、制限されないが、例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコール、D-マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。懸濁化剤の好適な例としては、制限されないが、例えばステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸クセリセリン等の界面活性剤、例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等の親水性高分子等が挙げられる。等張化剤の好適な例としては、制限されないが、例えば塩化ナトリウム、グリセリン、D-マンニトール等が挙げられる。緩衝剤の好適な例としては、制限されないが、例えばリン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩等の緩衝液等が挙げられる。無痛化剤の好適な例としては、制限されないが、例えばベンジルアルコール等が挙げられる。防腐剤の好適な例としては、例えばパラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸等が挙げられる。抗酸化剤の好適な例としては、制限されないが、例えば亜硫酸塩、アスコルビン酸等が挙げられる。本発明のチューブリン結合剤は、投与経路全身投与経路、局所投与経路に応じて各種の形状に調製することができる。例えば経口投与経口摂取する場合は、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、ドリンク剤などの経口投与形態に;また静脈内投与、筋肉内投与、皮内投与、皮下投与、腹腔内投与または経腸投与する場合は、注射剤や点滴剤などの非経口投与形態に;直腸投与する場合は坐剤等の非経口投与形態に;経皮投与する場合は、クリーム剤、軟膏剤、貼付剤などの外用剤の非経口投与形態にそれぞれ調製することができる。本発明のチューブリン結合剤は、有効成分であるGADMまたはそのエステル若しくは塩の量に換算して、体重1kgあたり通常0.01μg~10000mg、好ましくは0.1μg~1000mg、より好ましくは1μg~100mgの投与量の割合で1日に1~数回に分けて投与されてもよいし、2~数日に1回、間欠的に投与されてもよい。かかる薬学的な有効量、投与方法又は投与手段及び投与期間は、投与対象者の病理状態、性別、年齢、体重などによって左右され、当業者であれば適宜設定することができる。本発明のチューブリン結合剤は、チューブリンに対して結合することを特徴とする。かかるチューブリン結合剤の機能としては、一般に、α-チューブリンとβ-チューブリンとのダイマー形成やチューブリンの重合並びに微小官の集成を阻害するか、またはチューブリンの重合を促進し、微小官の集成を安定化することによって、微小管の機能を不全化することが挙げられる。本発明のチューブリン結合剤は、後述する実験例2で示すように、チューブリンの重合を促進するように機能する。すなわち、本発明のチューブリン結合剤は、タキソールと同様に、重合したチューブリンを安定化し、脱重合を阻害することによって、微小管の機能の不全化を引き起こすと考えられる。このため、前述する各種の投与形態を有する本発明のチューブリン結合剤によれば、微小管の機能が過剰に亢進することによって発症するような疾患の予防や治療に有効に使用することができる。かかる疾患としては、腫瘍、特に悪性腫瘍のほか、乾癬、狭窄症、心筋梗塞、及び糸球体腎炎を挙げることができる。斯くして、本発明のチューブリン結合剤は、ヒトを含む被験哺乳動物を対象として、上記疾患の予防または治療を目的として、医薬品、医薬部外品、化粧品、及び食品等への応用が可能である。さらに、本発明のチューブリン結合剤、特にその有効成分は、チューブリンに結合するため、チューブリンに結合する他の物質をスクリーニングするために使用することができる。すなわち、被験物質の存在下又は非存在下において、標識したGADMまたはそのエステル若しくは塩とチューブリンとの結合活性を測定し、比較することにより、チューブリンに結合し、GADMまたはそのエステル若しくは塩とチューブリンとの結合量を変化させる物質をスクリーニングすることができる。この場合、GADMまたはそのエステル若しくは塩には、放射ラベル、蛍光ラベルなどで標識されたものを用いることができる。この場合、被験物質非存在下に比べて放射活性または蛍光量などが変化した被験物質は、チューブリンに対して結合能を有する物質チューブリン結合剤として同定することができる。IIチューブリン重合促進剤または微小管安定剤前述するように、本発明のチューブリン結合剤は、チューブリンの重合を促進するように機能する実験例2。すなわち、本発明のチューブリン結合剤は、チューブリンの重合を促進し、重合したチューブリン集成した微小管を安定化し、脱重合を阻害することによって、微小管の機能の不全化を引き起こすと考えられる。この観点から、本発明のGADMまたはそのエステル若しくは塩を有効成分とするチューブリン結合剤は、別の角度から、チューブリン重合促進剤またはチューブリン微小管安定剤として機能する。従って、本発明は、前述するチューブリン結合剤について、チューブリン重合促進剤またはチューブリン微小管安定剤としての用途を提供するものでもある。当該チューブリン重合促進剤またはチューブリン微小管安定剤について、その有効成分やその含有量、剤型、投与経路、投与形態、投与方法、適用疾患、及び適用被験者は、いずれも前述するチューブリン結合剤に関して説明した通りであり、Iでの説明は、そのままここに援用することができる。実験例1GanodericacidDMが結合する標的生体分子の同定下式で示されるganodericacidDM以下、単にGADMというに結合する標的生体分子を、GADMを表面に結合させたナノ磁性微粒子を用いてスクリーニングした。1ガンデリックアシッドDM固定化ナノ磁性ビーズの作製ナノ磁性微粒子FGビーズ多摩川精機製は、フェライト粒子をポリグリシジルメタクリレートポリGMAで強固に被覆した約200nmの粒子であり、表面に設けられたリンカーの先端にタンパク質や薬剤などをリガンドとして固定化し、その標的分子を、上記リガンドとのアフィニティーを利用してスクリーニングまたは精製するために使用される担体である。本実験では、FGビーズのリンカーの末端のアミノ基を介して、GADMの側鎖のカルボキシル基とアミド結合をさせることにより、固定化した。図1。具体的には、図1に示すように、GADMの26位のカルボキシル基をFGビーズNH2ビーズ:型式TAS8848N1130、多摩川精機製表面のリンカーとアミド結合させて、当該ビーズ表面に固定化した。斯くしてGADMを固定化したFGビーズをアフィニティFGビーズとして、GADMに結合する標的生体分子の探索に用いた。2GADMの標的生体分子のスクリーニングと同定前立腺癌細胞由来培養細胞株LNCaP細胞を、プロテオエクストラクトタンパク抽出調製キットProteoExtractTMSubcellarProteomeExtractionKitCalbinochemを用いて、細胞質、細胞膜、細胞骨格、及び細胞核に分画した。これらのLNCaP細胞の各分画を上記1で作製したアフィニティFGビーズと混合し、当該FGビーズ表面のGADMに結合するタンパク質を結合させた後、当該FGビーズを磁石を用いて回収し、当該FGビーズからGADMに結合したタンパク質を溶出させて回収した。次いで、回収したタンパク質を一次元ゲル電気泳動に供し、分画後、特異的スポットを切り出した。LCMS分析によりタンパク質を解析し、ライブラリー検索を行い、GADMの標的生体分子の同定を行った。その結果、LNCaP細胞の細胞核画分と細胞骨格画分からは、GADMに結合する標的生体分子は検出されなかったデータ未掲載。一方、図2に示すように、LNCaP細胞の細胞質画分と細胞膜画分については、ビーズを回収後、加熱することによって、結合しているタンパク質を溶出させたところ、特異的なタンパク質が見いだされた。つまり、GADMの固定量を0、2、及び10mMと増加させたアフィニティFGビーズを用いることで、当該GADMの固定量に伴って、当該ビーズに結合する特異的タンパク質のバンドが増加していることが判明した。当該細胞質画分と細胞膜画分について検出された特異的タンパク質のバンドを切り出し、LCMSMSで分析を行った。LCMSMSで得たMSMSスペクトルのすべてのプロダクトイオン測定データを用いて、Mascotデータベース検索を行った。その結果、細胞質画分から微小管の主要タンパク質であるαならびにβチュ-ブリンが検出された。細胞膜画分からは、数多くのタンパク質が検出された。非特異的結合タンパク質の存在も示唆されるために、標的タンパク質の同定には至らなかった。以上の実験から、GADMはチュ-ブリンと結合すること、つまりGADMが結合する標的生体分子はチュ-ブリンであることが確認された。実験例2チューブリン重合試験上記実験により、GADMがチュ-ブリンと結合することが判明したことから、GADMのチュ-ブリン重合に及ぼす作用を調べた。1試験方法チュ-ブリン重合試験は、チューブリン重合アッセイキットCytoskeletonIncDenverCOUSAを用いて行った。まず、GADMをDMSOに溶解し、2mM濃度に調製し、これを被験溶液とした。またコントロール溶液としてDMSOを用いた。次いで、37°Cに暖めた96wellplateに、5μLの被験溶液またはコントロール溶液と、チューブリンを含む50μLのReactionmixtureを加え、反応溶液の蛍光の変化を1時間かけて測定した。蛍光強度が高いとチューブリンの重合が進展していることを意味する非特許文献10。Buffer1の組成と、分析に使用した蛍光測定の条件を以下に示す。<1×Buffer1の組成>80mMPiperazineNNbis2ethanesulfonicacidsequisodiumsalt20mMMagnesiumchloride05mMEthyleneglycolbisNNNNtetraaceticacid10μMfluorescentreporter。<蛍光測定の条件>測定波長励起波長360nm、発光波長450nm測定時間60min積分40μs。2試験結果結果を図3に示す。横軸は反応時間、縦軸は蛍光強度を示す。図3からわかるように、GADMを含む被験溶液は、GADMを含まないコントロール溶液と比べて、Reactionmixtureと混合することで速やかに蛍光強度が上昇し、また上昇した蛍光強度は安定であった。このことから、GADMは、チューブリン重合を促進し、安定化する作用を有していると考えられる。この挙動は、タキソールと類似した挙動であり、ビンブラスチン等の重合阻害剤とは相違するものである。この結果から、GADMは、タキソールと同様に、チューブリンの重合を促進ならびに、重合体の安定化を促すことにより、微小管の集成を強化し、その結果、重合した微小管の安定化、異常な紡錘体エステルspindleesterおよび有糸分裂中の細胞周期停止をもたらすと考えられる。実験例3GanodericacidDMが結合する標的生体分子の同定水晶振動子QuartzCrystalMicrobalanceQCMの質量付加効果を利用して、下式1で示されるGanodericacidDMGADM、下式2で示されるGADMOHGADMの3位のカルボニル基がヒドロキシ基に置換したもの、下式3で示されるGanodericacidA、並びにチューブリンに結合することが知られているパクリタキセルタキサン系抗がん剤、およびビンブラスチンビンカアルカノイド系抗がん剤について、β-チューブリン総称して被験化合物というに対する結合性を測定した。なお、水晶振動子QuartzCrystalMicrobalanceQCMの質量付加効果は、下記条件の水晶振動子式センサーによる計測装置NAPiCOS登録商標システム:日本電波工業を用いて測定した。<NAPiCOS登録商標システムによる測定条件>センサー:仕様:30MHzツインセンサー電極材料:金フロー条件送液バッファー:50エタノール水溶液流速:20μL/minサンプル量:100μL。1実験方法まず、NAPiCOS登録商標システムの、水晶センサーの一方の電極反応電極:1chにチューブリンダイマー99purefromporcinebrain、CytoskeletonIncStDenverCOを物理吸着させて固定した。次いで、水晶センサーのもう一方の電極リファレンス電極:2chをBSAウシ血清アルブミンで処理し、ブロッキングした。これらの水晶センサーをNAPiCOS登録商標システムにセットして、水晶センサーの表面に、上記被験化合物それぞれ213マイクロモル濃度になるように、50エタノール水溶液にて調製を添加した。斯くして、被験化合物添加後の周波数の低下量から、チューブリンに対する被験化合物の結合量を測定した。結果を図4に示す。図4の縦軸は、周波数の変化量低下量Hzを示し、変化量低下量が大きいほど、チューブリンに対する結合量が大きいことを示す。図4に示すように、GADMOHGAOH2及びGanodericacidAGAA3は、いずれもGADM1と構造が類似するにもかかわらず、チューブリンと全く結合しなかった。このことから、チューブリンとの結合には、GADMの構造中、図4に示すAの部分が関与し、Bの部分は関与しないと考えられる。チューブリンは、分子量約5万のαチューブリンとβチューブリンがあり、これらが1個ずつ結合したチューブリンダイマーが直線上に重合し、微小管のプロトフィラメントを構成する。このプロトフィラメントが管状に1116本程度結合したものが微小管である。チューブリンはGTP結合タンパク質であり、GTPの結合加水分解により微小管の伸長と短縮が調節される。また中心体にはγチューブリンがあって微小管形成において重要な役割を演じている。GADMは前立腺ガン細胞のチューブリンに結合して微小管の機能を攪乱し、細胞分裂を阻害することにより、前立腺ガン細胞の細胞増殖を抑制していることを示唆された。また、図4に示すように、チューブリンに結合するGADM量は、パクリタキセルタキサン系抗がん剤よりも格段に多く、ビンブラスチンビンカアルカノイド系抗がん剤とほぼ同等またはそれ以上であった。前述するように、パクリタキセルは、β-チューブリンに結合することで微小管の集成を強化し、その結果、重合した微小管を安定させて細胞の有糸分裂を停止させアポトーシスへ導くのに対して、ビンブラスチンは、チューブリンに結合し、チューブリン二量体の付着に関与する領域を遮断することで重合を阻害し、それによって微小管の集成及び形成を妨げることが分かっている。上記に示すように、GADMは、ビンブラスチンと同様にチューブリンに対して強い結合力を有するが、前述する実験例2に示すように、ビンブラスチンの機能とは異なり、パクリタクセルと同様に、微小管の集成チューブリンの重合を促進、安定化させるように機能する。つまり、GADMは、微小管の集成チューブリンの重合を促進し、安定化させることにより、微小管の機能を妨げるように作用するものと考えられる。さらに、その結合活性は、GADMに特異的であることが、図4の結果から明らかである。3位のカルボニル基をアルコールに還元した構造では、チューブリンへの結合活性は劇的に低下した。さらに、GAAにおいても、全く結合活性を示さなかった。このことから、GADMの構造特異的に、活性が発現するものと考えられた。GADMとGAOHとの比較の結果から、図5に示すように、Aの構造部分が活性発現には、重要であることが示された。このことから、GADMは微小管の機能亢進に関係する疾患に対する予防または治療薬として有効に利用できる可能性があると考えられる。