a動的核分極法により過分極活性基質の過分極前駆体を製造し、b該前駆体を適切な担体と接触させてそれを過分極活性基質に変換する工程を含む磁気共鳴研究法に用いるための過分極活性基質の製造方法。該変換が該前駆体の加水分解により行われる請求項1記載の方法。該加水分解が該前駆体の少なくとも50の変換をもたらす請求項2記載の方法。該加水分解が該前駆体の少なくとも75の変換をもたらす請求項2記載の方法。該前駆体が、有機環状または直鎖無水物、環状または非環状ジケテン、エステル、ラクトン、またはアミドから選ばれる先の請求項のいずれかに記載の方法。該前駆体が、13C、19F、およびまたは15N核から選ばれる各非ゼロ核スピン核で豊富化されており、重水素化されていることがある請求項5記載の方法。該前駆体が、酪酸無水物、酪酸酢酸無水物、シスアコニット酸無水物、4メチリデンオキセタン2オン、エチルアセトアセテート、コハク酸モノエチルエステルもしくはコハク酸ジエチルエステル、エチルピログルタメート、ジメチルグリシンエチルエステル、2オキソチアゾリジン4カルボン酸エチルエステル、2オキソグルタル酸モノエチルエステルもしくは2オキソグルタル酸ジエチルエステル、リンゴ酸モノエチルエステルエチルエステル、113Cエチルピログルタメート、213Cd2ジメチルグリシンエチルエステル、113Cエチル2オキソチアゾリジン4カルボキシレート、113C2オキソグルタレートエチルエステル、1413C2エチルマレート、513CNアセチルグルタミン、および213C2dNアセチルグリシンから選ばれる請求項7記載の方法。該水性担体が水、生理食塩水溶液、および緩衝溶液から選ばれる請求項1~8のいずれかに記載の方法。該水性担体が、さらにアルカリ塩基、および有機酸もしくは無機酸から選ばれる添加剤を含む請求項9記載の方法。該添加剤が水酸化ナトリウムおよび塩化水素酸から選ばれる請求項10記載の方法。該過分極前駆体の変換が酵素の存在下で行われる先の請求項のいずれかに記載の方法。該酵素が、エステラーゼ、アシラーゼ、およびリパーゼから選ばれる請求項12記載の方法。該前駆体が、100°C以下で液体であり、急速に凍結すると非結晶固体を形成するエステルである、酵素存在下で行うことがある請求項1記載の方法。該エステルが、エチルアセトアセテート、エチルピログルタメート、2オキソチアゾリジン4カルボン酸エチルエステル、およびジメチルグリシンエチルエステル、コハク酸エチルエステル、2オキソグルタル酸エチルエステル、リンゴ酸エチルエステル、およびフェニルアラニンエチルエステルからなる群から選ばれる請求項14記載の方法。aMRIシステムに乗せ、上記方法に従って前駆体から得た過分極活性基質で処置した対象を、該活性基質の非ゼロ核スピン核中の核スピン遷移を励起するために選択した電磁波の周波数にかけて、b該励起した核からのMR信号を記録する工程を含むMRIシステムの操作方法。aMRIシステム中に乗せ、上記方法に従って前駆体から得た過分極活性基質で前処置した対象を、該活性基質の非ゼロ核スピン核中の核スピン遷移を励起するために選択した電磁波の周波数にかけて、b該励起した核からのMR信号を記録する工程を含むMRIシステムの操作方法。本発明の第一の局面は、a動的核分極法により過分極活性基質の過分極前駆体を製造し、b該過分極前駆体を適切な担体と接触させてそれを過分極活性基質に変換する工程を含む磁気共鳴研究法に用いるための過分極活性基質の製造方法に関する。本発明の好ましい態様において、該前駆体は、水と接触すると、好ましくはその加水分解により、対応する分極活性化合物、好ましくは1またはそれ以上の、非溶解または溶解形のカルボン酸に変換される化合物である。さらなる好ましい態様では、該前駆体は、無水物、ジケテン、エステル、ラクトン、およびアミドからなる群から選ばれる。加水分解すると、該酸それ自身を直接過分極することにより得ることができる分極度より高い分極度を有する対応する過分極酸をもたらすそれらのエステル前駆体がより好ましい。この点で、好ましいエステルは、130°C以下、好ましくは100°C、最も好ましくは35°C以下で液体であり、急速凍結、例えば液体窒素や液体ヘリウム中に入れるとガラスを形成する。本発明の前駆体は、酸性、塩基性、または中性水性担体中で加水分解することができる。典型的には、担体は、水性担体、例えばイオン水、所望により緩衝剤、酵素などの添加物を含む生理食塩水溶液から選ばれる。別の好ましい態様では、本発明による該前駆体の該活性基質への変換は、酵素の存在下での加水分解により行われる。適切な酵素の例には、加水分解酵素があり、エステラーゼ、アシラーゼ、リパーゼが特に好ましい。別の局面において、本発明は、aMRIシステム中に乗せ、上記方法に従って前駆体から得た過分極活性基質で処置した対象を、該活性基質の非ゼロ核スピン核中の核スピン遷移を励起するために選択した電磁波の周波数にかけて、b該励起した核からのMR信号を記録する工程を含むMRIシステムの操作方法に関する。さらなる局面において、本発明は、aMRIシステム中に乗せ、上記方法に従って前駆体から得た過分極活性基質で前処置した対象を、該活性基質の非ゼロ核スピン核中の核スピン遷移を励起するために選択した電磁波の周波数にかけて、b該励起した核からのMR信号を記録する工程を含むMRIシステムの操作方法に関する。本発明は、生物学的興味がある分子、特に、代謝経路、例えばトリカルボン酸回路、解糖、β酸化、尿素サイクル、およびケト体代謝経路の部分である分子のexvivo過分極の代替法を提供する。したがって、本発明は、a動的核分極法により過分極活性基質の過分極前駆体を製造し、b該過分極前駆体を適切な担体と接触させて活性過分極基質に変換する工程を含む、過分極活性基質の製造方法に関する。用語過分極前駆体は、その意味内に水性担体と接触すると少なくとも1の活性基質に変換されるあらゆる過分極分子を含む。用語水性担体は、その意味内にinvivo診断適用に用いるためのヒトまたは非ヒト動物体が許容するあらゆる水性溶媒、溶媒混合物、または溶液を含む。一般的には、該担体は、無菌で生理学的に許容される、例えば無菌水、精製水、例えば注射用水、所望により適切に緩衝された生理食塩水溶液である。該担体は、所望により、適切な量の、過分極前駆体の水溶性活性基質への急速な選択的変換を促進することができる選択した添加剤を含むことができる。この点で、該添加剤は、存在する場合は、医薬的に許容されるものであり、注射できる状態の医薬的に許容される溶液を得るために、01モル当量~10モル当量、好ましくは1モル当量~4モル当量を含む比較的低量で用いられる。ある場合、例えば、該前駆体の変換を促進するために添加した添加剤の量が比較的高い場合は、次いで、得られた水性溶液を、該前駆体がinvivo診断適用のために医薬的に許容されるようにするためにさらに添加剤と混合することができる。例えば、該溶液のpHを、次いで、それを投与する前に、それに適切な酸または塩基性緩衝液を加えることにより医薬的に許容される値に調整することができる。この点で、適切な添加剤の例には、pH調節剤、例えば有機塩基または無機塩基または有機酸もしくは無機酸、または緩衝剤がある。好ましい態様によれば、該前駆体の該活性基質への変換は加水分解により行われる。本明細書で用いている用語加水分解は、水が出発化合物と反応して1またはそれ以上の得られる化合物が生じる化学反応を含み、典型的には、出発化合物上の結合を開裂し、出発化合物の構造に水素カチオンおよびまたは水酸化物アニオンを付加して生じる化合物を得ることを含む。該加水分解反応は、酸性、塩基性、または中性条件下で行うことができるが、本明細書で以下により詳細に記載するように塩基性条件が好ましい。この方向および先に記載したように、選択した水性溶液は添加物として適切な量のアルカリ塩基、例えば水酸化物またはカーボネート、例えばNaOH、またはNaHCO3もしくはNa2CO3、および塩基性水性反応をする他の有機化合物または無機化合物;または過分極前駆体の加水分解を促進することができる無機酸または有機酸、例えば、特にリン酸、塩化水素酸、クエン酸、または酢酸のいずれかを含むことができる。本発明の方法に特に好ましい添加剤は、水酸化ナトリウムおよび塩酸である。特に好ましい態様によれば、濃度10~100mMの過分極前駆体の水性溶液を10~400mMNaOHの存在下で加水分解する。該過分極前駆体の加水分解は、実際的には約20°C~100°C、好ましくは40°C~70°Cの温度で先に記載したように選択した担体に該前駆体を加えることにより生じ、基本的に該前駆体の化学的性質に応じて所望の過分極活性産物または該産物の混合物を含む水性溶液が得られる。この点で、該前駆体は、先に記載したように水性担体と接触させると所望の過分極活性基質に定量的に変換することができる。用語過分極活性基質は、その意味中に、長T1緩和時間を示すことができる非ゼロ核スピン核を含む高T1化合物を含む。長T1緩和時間は、該信号の効果的な検出を可能にする充分な長さの時間値を意味する。本願において用語定量的変換は、該前駆体の量の20またはそれ以上、好ましくは50またはそれ以上、より好ましくは75またはそれ以上、さらにより好ましくは少なくとも90、特に好ましくは少なくとも95が該活性基質に変換されることを意味する。本発明のそれぞれ好ましい態様において、該前駆体は、加水分解すると対応するカルボン酸を単独でまたは1またはそれ以上の副反応産物との混合物で生じる化合物を含む。好ましくは、該前駆体化合物は、非ゼロ核スピン核、例えば、13C、19F、およびまたは15N核、好ましくは13Cが豊富化される。用語豊富化は、該化合物中の非ゼロスピン核の濃度が該核の天然の存在量の典型的値より大きい、天然の存在量の少なくとも10大きい、より好ましくは該天然の存在量の少なくとも25、さらにより好ましくは少なくとも75、最も好ましくは少なくとも90大きいことを意味する。該豊富化は、特に、該分子の化学的変換、または該分子の環境の化学的または磁気的変化がその化学的シフトの変化として測定可能な原子の位置に集中するだろう。該非ゼロ核は、約05mT~約20Tの磁場をかけた溶液中で測定すると、該基質に少なくとも5秒、好ましくは少なくとも10秒、好ましくは少なくとも20秒、好ましくは30秒、さらにより好ましくは40秒のT1緩和時間をもたらす。豊富化は、該分子内の1またはそれ以上の部位の選択的豊富化または全ての部位の均一な豊富化を含みうる。この点で、市販の豊富化前駆体を適切に用いることができるか、または選択した豊富化を当該分野で良く知られた開示内容に従って化学合成または生物学的標識により達成することができる。各前駆体から得ることができる活性基質は、対応して、各非ゼロ核スピン核、例えば、13C、19F、およびまたは15N核、好ましくは13Cで豊富化される。あらゆる過分極造影剤の信号はスピン緩和により減衰することがわからねばならない。したがって、最終過分極活性基質は、特に溶液の場合は、画像法が比較的快適な時間枠内で行われるのを可能にするために、十分長い時間その分極を維持すべきである。好ましくは、該過分極前駆体および加水分解基質のT1値は、少なくとも5秒またはそれ以上、好ましくは10秒またはそれ以上、より好ましくは少なくとも30秒、さらにより好ましくは50秒またはそれ以上である。T1値が70秒またはそれ以上の該基質が特に好ましく、T1値が100秒またはそれ以上の該基質がさらに特に好ましい。該T1値は、典型的には、磁場強度05mT~20Tおよび温度25°C~70°C、特に磁場強度15~3Tおよび温度37°Cで測定した値が好ましい。身体外でも、該T1値は、一般的には磁場強度05mTおよび温度60°Cで測定される。さらなる態様によれば、上記非ゼロスピン核は、典型的には最終過分極化合物のT1値を延長するために1またはそれ以上の重水素原子と直接結合させることができる。それにより、より多くの代謝物を、利用可能なより大きな化学シフト分散に基づいてそれらの基質と好都合に区別することができ、さらにより好都合には、過分極非ゼロ核スピンの重水素化は、最終過分極化合物およびその代謝物の造影に有用な可能性のある非ゼロ核スピンの群を拡大することができる。実際に、重水素化は、例えば、該基質の化学シフトおよびその代謝物の化学シフトが、互いに非常に類似しているか、または別の方法で区別または検出するには互いに近すぎる場合に特に有用である。上記の代表例は、基質グリシンが重水素化しないと1つの長T1位、重水素化すると2つの長T1位を含む化合物グリシンの場合があり得る。注目すべきは、1C位は、その予期される主な代謝物との化学シフト差がわずかであるのに対して、2C位は予期される代謝物の等価な位置と数ppmの化学シフト差を示す。驚くべきことに、本発明にしたがって対応する過分極前駆体から得られた活性物質は、特に、生理学的条件の変化、または代謝活性、例えば、細胞取込み、細胞室反応、例えばトランスアミナーゼ反応、および解糖、ミトコンドリア反応、例えばTCA回路反応、酸化還元反応、またはβ酸化の結果に応じた化学シフトの変化を示すことができる。好ましい活性基質は、例えば、3Tの磁場で、4級炭素が15ppm、重水素メチンが21ppm、重水素化メチレンが42ppm、重水素化メチル基が54ppmより大きい化学シフト差を示すだろう。本発明の方法は、あらゆるそのような分子を製造するのに適しているが、特にその直接exvivo過分極がいくつかの問題を生じうるか、または得られる程度が低いかまたは解るのが困難である過分極分子の製造に特に好都合である。実際に、多くの分子がその純粋な形でガラスを形成することができず、該基質とガラス形成添加剤を混合する必要があるが、本発明によれば該前駆体、例えば、無水物またはエステル、好ましくはエチルエステルが特にさらにいかなるガラス形成添加剤も必要とせずに目的とする生のガラスを形成することができる。他の例では、該活性基質、例えば、カルボン酸またはカルボキシレートも、異性化や化学分解などのいくつかの安定性問題をもたらすかもしれない。すなわち、本発明によれば、安定性問題をもたらさず、適切な担体に溶解すると所望の過分極基質に容易に変換することができる前駆体の使用が特に好都合である。さらに、本発明の方法は、過分極前駆体、例えば、カルボン酸のエステル前駆体がその対応する活性基質に比べて有利な特性を有することを特徴とし、これにより、その加水分解は、他の方法で該活性基質自身を直接過分極することにより得ることができる程度より高い分極度を有する対応する活性基質をもたらすことも非常に好都合である。より詳細には、上記のすべての好ましい態様によれば、好ましい前駆体は、その加水分解産物とともに、例えば、以下の誘導体、およびその各加水分解基質を含む。1a[式中、Halはハロゲン原子である;Rは、C1C6アルキルもしくはアルケン、シクロアルキルもしくはシクロアルケン、アリールアルキルもしくはヘテロアリールアルキルラジカル2、SH、SCH3で置換されているであるか、またはRは、式COZのカルボニル基である]。1b[式中、Rはポイント1aと同意義である;R’は、所望により置換されたアルキル、アリール、シクロアルキル、アリールラジカルである。これは、加水分解によってRCOOHおよびR’COOHの放出をもたらし、R’COOHはRCOOHと同じであるか、または異なる生理学的に許容されるカルボン酸である。この後者の場合、それは種々の活性基質、医薬活性化合物、または単に無毒性基質でありうる。1c[式中、Rはポイント1aと同意義である;R’は、アルキル、アリール、シクロアルキル、アリールラジカルである。これは、加水分解によりRCOOHおよびR’OHの放出をもたらし、R’OHは、ヒドロキシルまたはヘミアセタールで官能化された生理学的に許容される化合物である。1d[式中、Rはポイント1aと同意義である;R’はポイント1bと同意義である;AおよびBは、例えば加水分解によって、RCOOH、R’COOH、および生理学的に許容されるカルボニル化合物ACBの放出をもたらす。1e下記一般式の化合物:[式中、Rはポイント1aと同意義である;R’はポイント1bと同意義であるかまたは水素である;X=B、P;mn=3;r=0~1。]。1f下記一般式の化合物:[式中、Rはポイント1aと同意義である;R’はポイント1bと同意義であるかまたは水素である;mn=4;r=0~1;t=1~2。シリコン含有分子は生理学的に許容される化合物であるか、または当該分野で知られた方法により容易に速やかに除去される。]。1g下記一般式の化合物:[式中、Rはポイント1aと同意義である;mn=2、r=1~2。硫黄含有イオンは、生理学的に許容される化合物であるか、または当該分野で知られた方法により容易に速やかに除去される。]。1h下記一般式の化合物:[式中、Rはポイント1aと同意義である;Yは、カルボン酸RCOOHの放出によりB、N、Si、P、Sの非金属化合物をもたらすような基で置換されたB、N、Si、P、Sから選ばれる非金属である。]。1i下記一般式の化合物:[式中、Rはポイント1aと同意義である;R’およびRは、それぞれ独立して水素であるか、またはポイント1aと同意義のR基に対応するか、またはより速い加水分解をもたらす置換基、例えばアゾール、例えば、またはそれらの環置換およびN四級化誘導体である。]。1l下記一般式の化合物:[式中、Rはポイント1aと同意義である;R’およびRは、適切なアシル基、例えば:またはそれらの環置換および所望により塩化誘導体である。]。1m下記一般式の化合物:[式中、Rはポイント1aと同意義である。]。2下記一般式の環状無水物:[式中、n=1、2。P=水素またはアミノ保護基。P’=水素またはヒドロキシ保護基。]。2a下記式の飽和または不飽和環状無水物:[式中、Rはポイント1aと同意義である。R’、R’’は、独立してRと同意義または水素である。n’=0、1。]下記一般式のエステルおよび加水分解基質:[式中、Rはポイント1aと同意義である。R’は1bと同意義である。]。4下記一般式のケテン:[式中、Rはポイント1aと同意義である。R’は独立してRと同意義であるかまたは水素である。]。4a下記式に従って加水分解すると所望のカルボキシレートを生じるケテン環状ダイマー:[式中、Rおよび各R’は、それぞれ独立してポイント4と同意義である。]。4b下記式に従って加水分解すると所望のカルボキシレートを生じるケテン非環状ダイマー:[式中、各Rは独立してポイント1aと同意義である。]。4c下記式に従って加水分解すると所望のカルボキシレートを生じるカルボニル化合物のケテン付加物:[式中、各Rは、独立してポイント1aと同意義である。AおよびBは、ポイント1ivと同意義である。]。5下記式に従って選択されるアミノ酸特異的前駆体:5a下記式に従って加水分解すると所望のカルボキシレートを生じる下記一般式のNカルボキシ無水物:式中、RおよびR’は、式R’NHCHCOOHの天然アミノ酸に対応するよう選ばれる。]5b下記式に従って加水分解すると所望のカルボキシレートを生じる一般式のアミノ酸の金属キレート:[式中、RおよびR’は、式R’NHCHmCOOHの天然アミノ酸に対応するよう選ばれる。xは該複合体の全荷電であり、1<x<1である。yは金属イオンの荷電である。y=1~3。Mは生物適合性反磁性金属イオンである。]。荷電した複合体は、好ましくはポリヒドロキシアミンまたはポリヒドロキシ酸で塩化される。6下記式のヒドロキシ酸特異的前駆体:6a下記一般式のOカルボキシ無水物:[式中、RおよびR’は、式HOCRR’COOHの天然ヒドロキシ酸に対応するよう選ばれる。]。6b下記一般式のラクトン:[式中、Rはポイント1aと同意義であり、n=0~3である。]。6c下記一般式のジラクトン:[式中、RおよびR’は、それぞれ独立して式HOCRR’COOHの天然ヒドロキシ酸に対応するように選ばれる。]。6d下記一般式のヒドロキシ酸の金属キレート:[式中、RおよびR’は、ポイント5bと同意義である。m=0~2。n=1~3。xは該複合体の全荷電であり、2<x<4である。yは、金属イオンの荷電であり、y=1~3である。Mは生物適合性反磁性金属イオンである。]。荷電複合体は好ましくはポリヒドロキシアミンまたはポリヒドロキシ酸で塩化される。7下記加水分解反応式に従ったケト酸特異的前駆体:7a下記一般式のケト酸のエノール形:[式中、Rはポイント1aと同意義である。n=0~2である。]、および1またはそれ以上の生物適合性金属イオンを有するか、または好ましくはポリヒドロキシアミンまたはポリヒドロキシ酸で塩化されたその対応する塩。7b下記一般式のケト酸の金属キレート:[式中、Rはポイント1aと同意義である。Mは金属イオンである。n=1~3。xは、該複合体の全荷電であり、2<x<4である。yは金属イオンの荷電である。y=1~3。Mは生物適合性反磁性金属イオンである。]。荷電複合体は、好ましくはポリヒドロキシアミンまたはポリヒドロキシ酸で塩化される。該前駆体の特に好ましい例には、限定されるものではないが、有機環状または直鎖無水物、例えば、酪酸無水物、酪酸酢酸無水物、コハク酸無水物、またはシスアコニット酸無水物;環状または非環状ジケテン、例えば、4メチリデンオキセタン2オン;エステル誘導体または直鎖、例えば、アセトアセテート誘導体、例えば、エチルアセトアセテート、エチルスクシネート、エチルピログルタメート、ジメチルグリシンエチルエステル、エチル2オキソチアゾリジン4カルボキシレート、2オキソグルタレートエチルエステル、エチルマレート;アミド、例えば、Nアセチルアミノ酸が含まれる。さらに好ましい態様において、該前駆体は以下から選ばれる。酪酸無水物:酪酸酢酸無水物:シスアコニット酸無水物:4メチリデンオキセタン2オン:エチルアセトアセテート:コハク酸エチルエステル:エチルピログルタメート:ジメチルグリシンエチルエステル:2オキソチアゾリジン4カルボン酸エチルエステル:2オキソグルタル酸エチルエステル:リンゴ酸エチルエステル:フェニルアラニンエチルエステル:NアセチルグルタミンまたはNアセチルグリシン:さらにより好ましくは、該前駆体は13Cで標識され、所望により重水素化されるが、好ましいものは、以下から選ばれる:11’13C2酪酸無水物、113C酪酸酢酸無水物、613Cシスアコニット酸無水物、4メチリデンオキセタン213Cオン、113Cエチルアセトアセテート、1313C2エチルアセトアセテート、1413C2スクシネートエチルエステル、113Cエチルピログルタメート、213Cd2ジメチルグリシンエチルエステル、113Cエチル2オキソチアゾリジン4カルボキシレート、113C2オキソグルタレートエチルエステル、1413C2エチルマレート、513CNアセチルグルタミン、または213C2dNアセチルグリシン。より詳細には、好ましい基質には、所望により下記部分:ヒドロキシル、カルボキシ、またはアミノの1またはそれ以上を含む、解離形または非解離形のモノ、ジ、およびトリカルボン酸を含むカルボン酸が含まれる。適切なカルボン酸基質の例には以下のものが含まれる:RCOOH、R2、R3。高T1過分極カルボン酸基質の具体例には、例えば、ブチレート、アセトアセテート、シスアコニテート、2オキソブチレート、2ヒドロキシブチレート、3ヒドロキシブチレート、クロトネート、スクシネート、オキザロアセテート、マレート、フマレート、シトレート、イソシトレートが含まれる。適切な基質の例は、例えばUS6278893に開示されている。すなわち、好ましい過分極基質前駆体系は、アセトアセテートアセトアセテートエチルエステル、ブチレート酪酸無水物、グリシンNアセチルグリシン、スクシネートコハク酸エチルエステル、フェニルアラニンフェニルアラニンエチルエステル、グルタミンNアセチルグルタミン、2オキソグルタレート2オキソグルタル酸エチルエステル、マレートリンゴ酸エチルエステル、ピログルタメートピログルタメートエチルエステル、2オキソチアゾリジン4カルボキシレート2オキソチアゾリジン4カルボキシレートエチルエステル、およびジメチルグリシンジメチルグリシンエチルエステルから選ばれる。さらにより好ましくは、上記アセトアセテート、グリシン、グルタミン、およびジメチルグリシン基質は、本発明のさらなる態様に従って以下に記載する酵素的加水分解により示した前駆体から得られる。過分極前駆体の製造、次いで過分極活性基質への変換に関する好ましい態様を以下に示すが、好ましい豊富化された13C位は、、、または同様の記号で標識されている。本発明の好ましい態様では、酪酸の前駆体を製造する。酪酸は脂肪酸代謝経路の代謝物である。酪酸代謝の主要産物の一つは、アシルCoA合成酵素により触媒される反応において形成されたブタノイルCoAである。ブタノイルCoAは、下記式に従ってクロトノイルCoAに変換されてβ酸化経路に入り、最終的にアセチルCoA2分子になるか、またはそのカルニチンエステルブタノイルカルニチンに変換することができる。しかしながら、酪酸は、所要量のラジカルの存在下でも急速凍結すると結晶する。したがって、一定量のガラス形成剤を該酪酸のDNP調製物に加える必要がある。これは、それ自体実質的な欠点ではないかもしれないが、酪酸をガラス形成剤と混合するとDNP調製物における該酸の最終濃度を減少させる。これに対して、酪酸無水物は、いかなるガラス形成剤も添加せずに急速凍結するとガラスを形成する。さらに、塩基性pHの水性溶液中で溶解すると、無水物DNP試料の加水分解が急速に進行する。過分極試料中の該無水物の濃度はガラス形成混合物中の該酸の濃度とほぼ同じであるが、無水物分子のその後の加水分解は酪酸分子の2倍量をもたらし、酪酸のほぼ二倍の濃度を得ることができる。同様に、混合酪酸酢酸無水物もいかなるガラス形成剤も添加せずに急速凍結するとガラスを形成する。この場合も、該過分極前駆体の加水分解は、該前駆体をNaOHの1モル当量を有する水性溶液と接触させると急速に進行する。この後者では、該混合無水物の加水分解は、酪酸に加えて同量のさらなる過分極基質をもたらすと認識することができる。別の好ましい態様では、アセトアセテートの前駆体を製造する。アセトアセテートは、ケトン体代謝経路の代謝物である。D3ヒドロキシブチレート脱水素酵素により触媒される反応であるアセトアセテート代謝の1つの産物は3ヒドロキシブチレートである。この酸化還元反応は補酵素のNADNADHを含む。下記式の反応平衡は補酵素比に依存する。アセトアセテートの別の反応は、下記式に従ってアセトアセチルCoAを形成するアセトアセテートCoAトランスフェラーゼによる触媒反応である。しかしながら、アセト酢酸とその塩アセトアセテートは、その固有の不安定性から直接過分極させるのが難しい。特に、βケト酸であるこの分子は、軽度の加熱でも脱カルボキシル化する傾向がある。したがって、DNPプロセスにおける製造および溶解工程は、この化合物の分解をもたらす。すなわち、本発明では、ジケテンをアセトアセテートの前駆体として用いる。ジケテンは、少量のガラス形成剤の存在下で急速凍結するとガラスを形成することができる。過分極すると、次いでジケテンは、下記加水分解反応式に従って、水性担体と接触すると該基質をあまり分解せずに速やかにアセトアセテートに変換される。別の好ましい態様では、シスアコニテートの前駆体を製造する。シスアコニテートはTCA回路の代謝物である。シスアコニテートは、アコニターゼにより触媒される反応においてシトレートとイソシトレートを形成する。この酵素はシスアコニテートとシトレートおよびシスアコニテートとイソシトレートの間の変換を触媒するが、該平衡は下記反応式に従ってシトレートの方へと移動する。しかしながら、DNPにおけるシスアコニテートの製造では、かなりの量のガラス形成剤、例えばDMSOに溶解し、該基質をかなり低い最終濃度にする必要がある。さらに、熱力学的に安定な形はトランスアコニテートであり、溶液中で該シス形は、例えばDNP試料の製造中に徐々にトランス形に変換される。これに対して、N2中のシスアコニテート無水物の急速凍結はガラス形を生成する。さらに、必要なシス異性体は、全DNPプロセスおよび該無水物の水への溶解において維持される。水性塩基溶液の存在下で過分極シスアコニット酸無水物の加水分解が急速に進行し、所望の過分極シスアコニテートが形成される。上記のように、加水分解すると、酸自身の過分極により得ることができる分極度より高い分極度を示す対応する酸をもたらすそのエステル前駆体がさらにより好ましい。この方向で、そのようなエステルの例には、130°C以下、好ましくは100°C以下、最も好ましくは35°C以下で液体であり、急速凍結する、例えば液体窒素や液体ヘリウム中に入れるとガラスを形成する該化合物がある。典型的にはDNP法により過分極すると、本発明に従って上記エステルを水性担体に加え、好ましくは加水分解により、該基質の直接過分極により得ることができるものより少なくとも12倍の、好ましくは活性基質それ自身を直接過分極することにより得ることができるものより少なくとも15倍、例えば最大4倍までの分極度を有する対応する活性基質誘導体を得る。これに関して、好ましいエステル前駆体の例は、下記実験の部に示すように、イタコネート、ピログルタメート、2オキソチアゾリジン4カルボキシレート、およびジメチルグリシンから選ばれる。さらにより好ましくは、上記エステル前駆体を、塩基性条件下、無機アルカリ塩基、例えばNaOH、または有機塩基、例えばトリメチロールアミノメタン、所望により触媒酵素、例えばカルボキシルエステラーゼの存在下で加水分解する。この方向および本発明の別の態様において、該前駆体の活性基質への変換は、酵素的加水分解によっても行うことができる。本明細書で用いている用語酵素的加水分解は、加水分解反応の速度が加速し、およびまたは該加水分解反応の変換収率が増加する酵素反応、例えば、非酵素的加水分解に対して少なくとも2倍、好ましくは少なくとも10倍の変換収率の増加をもたらし、1またはそれ以上の結果化合物を生じる出発化合物の定量的変換をもたらす酵素反応を含む。本発明のこの態様によれば、該過分極前駆体を、酵素存在下で、過分極試料を融解するのに充分な高温で前記適切な担体と接触させ、次いで生理的温度にする。溶解および加熱中に、該前駆体は、典型的にはその酵素的加水分解により所望の過分極活性基質に変換され、得られた溶液は、所望により分極剤およびまたは前駆体変換の他の副産物を除去した後、必要に応じて患者に投与される。選択した前駆体は、少なくとも50、好ましくは少なくとも75、さらにより好ましくは最高95以上まで適切に酵素的に加水分解することができる。該酵素の量は、特定の酵素の比活性に応じて変えることができるが、典型的量は、約50U~30KU、好ましくは60U~300U、さらにより好ましくは90~270Umg酵素であり、該量を加え、一般的には2分間以内またはそれより速く、例えば10秒以内に加水分解を達成する。また、該酵素は、本発明に用いる比較的低量で生理学的に許容される。ある場合、例えば該前駆体の変換を促進するために加える添加剤の量が比較的高い場合は、次に、水性溶液中の酵素を、例えば当該分野で知られたあらゆる方法により除去するか、または使用前に、適用した酵素を固定化し、加水分解した過分極生成物を投与する前に濾過して除去することができる。用いることができる酵素の例は、一定の濃度内で該方法の時間尺度で該過分極前駆体を加水分解する、加水分解酵素と呼ばれる酵素のクラス中にみいだすことができる酵素から選ぶことができる。さらなる好ましい態様では、該酵素は、エステラーゼ、アシラーゼ、およびリパーゼからなる群から選ばれるが、該前駆体は、生物学的に許容される加水分解産物を生じる該基質から適切に選ぶことができる。特に、この点で好ましい基質は以下からなる群から選ばれる:生物活性基質のエチルエステルおよびNアシル化誘導体、特に好ましいのは、Nアセチル化アミノ酸、例えば、Nアセチルグルタミン、Nアセチルグリシン、エチルエステル、例えば、エチルアセトアセテートである。酵素的加水分解は、上記の同じ好ましい水性担体内で、酵素の非存在下、例えば、酸性、塩基性、または中性条件下で、本発明について先に記載した加水分解反応と同様に適切に行うことができる。好ましくは、酵素的加水分解は、緩衝水性溶液中、該酵素に最適なpHと温度で行う。したがって、特に好ましい態様において、本発明は、トリメチロールアミノメタン、緩衝液、またはリン酸緩衝液中で、エチルアセトアセテートおよびNアセチルグルタミンまたはNアセチルグリシンから選ばれるDNP過分極前駆体を酵素的加水分解して最適な最終代謝造影剤を得ることを含む過分極活性基質の製造方法またはアミノアシラーゼの存在下で行うに関する。実際的態様では、選択した過分極前駆体の酵素的加水分解は以下のごとく行う:過分極前駆体を、従来技術の方法に従って過分極させ、適切な媒質に溶解させる。そうして得られた過分極前駆体含有溶液を、先に記載のごとく酵素的加水分解のために最適化させた。次に、該過分極前駆体を含む溶液を、所望の酵素活性を有する酵素溶液または固定化酵素と混合し、加水分解が完結した後、所望により該酵素を反応媒質から除去した。本発明の前駆体化合物を過分極するには種々の方法を用いることができることに留意すべきである。可能な分極法に関するさらなる詳細は、例えば、WO9935508、WO9858272、およびWO9924080に記載されている。本発明によれば、該過分極前駆体は、例えばWOA9935508に記載のごとく、好ましくは分極剤の存在下で、動的核分極法により得られる。特に、その効率的な分極特性により、例えばWOA9935508、WOA8810419、WOA9000904、WOA9112024、WOA9302711、またはWOA9639367に記載のトリチルラジカルを分極剤として使用するのが好ましい。簡単には、該方法は、一般的には以下の工程を含む:均一な磁場の存在下、低温で高T1前駆体と分極剤を接触させ、該分極剤に電子スピン遷移を引き起こすために適切に選択された周波数の超音波照射に該分極剤を暴露し、該DNP調製物を適切な担体に溶解し、所望により該過分極溶液から分極剤を除去する。効率的DNPプロセスは、高磁場および低温で最高に得られ、典型的には、少なくとも1、好ましくは少なくとも5、さらにより好ましくは少なくとも10の分極レベルが得られる。ここで、分極は下記式で定義される:[式中、Nαは、核スピン相αにおけるスピン数であり、Nβは核スピン相βにおけるスピン数である。]該分極剤は、該核スピンに対する電子スピンの均質な分布と最適濃度を得るために、高T1前駆体の調製物中および所望により混合ガラス形成剤中で安定で可溶性でなければならない。典型的には、該分極剤は、DNPを受ける混合物に5mM~50mM、より好ましくは8~18mMの量で加える。さらに好ましい態様では、下記一般式のラジカルを好都合に用いることができる。式[式中、Rは、同じかまたは異なって、所望により1またはそれ以上のヒドロキシル基、メトキシ基、または式nOR2の基で置換された直鎖または分岐鎖C1C6アルキル基を表す;R2は、所望により1またはそれ以上のヒドロキシル基またはメトキシ基により置換された直鎖または分岐鎖C1C6アルキル基である;Xは、独立してH、アルカリ金属、例えば、Na、K、Cs、所望により置換された直鎖または分岐鎖C1C6アルキル基、所望により置換された脂肪族または芳香族C3C8環状基またはヘテロ基から選ばれる。]好ましくは、該ラジカルは、有機液体前駆体に溶解して少なくとも5mM溶液になる上記式の化合物、例えば、Xが水素であるか、またはXが疎水性部分、例えば、メチル、エチル、terブチル、またはフェニルから選ばれる式の化合物である。水に不溶性の該ラジカル、例えば、XおよびRが疎水性部分である式の化合物も好ましい。前駆体の水性DNP調製物の場合、好ましいラジカルは、ベンゾ1245’ビスジチオール4イルメチルナトリウム塩、またはトリスビスジチオール4イルメチルナトリウム塩である。所望により、常磁性金属イオンをDNP調製物に加え、分極する化合物の分極レベルを増大させることができる。適切な常磁性金属イオンの例は、例えばWO2007064226に開示されている。好ましくは、該常磁性金属イオンは、金属イオン濃度について濃度03~4mMのGd3イオンを含む常磁性キレートである。DNPプロセスに次いで、そのように過分極した固体試料を液相に移す。これは、典型的には、該試料を、例えばWO0237132に記載の適切な装置を用いて適切な溶媒または溶媒混合物に溶解することにより行う。invivoで使用するには、該過分極液試料からトリチルラジカルおよび所望により常磁性金属イオンを除去することが好ましい。これに関して、トリチルラジカルおよび常磁性金属イオンを除去するのに有用な方法は当該分野で知られており、例えばWO2007064226に記載されている。本発明によれば、上記各前駆体から得られる過分極化合物は、MR分光法またはMRI技術を用いてモニターすることができる。該分析は、一般的方法、例えば、適切な時間間隔で行う一連の分離した測定の連続モニタリングまたは1回の分離した測定により行うことができる。したがって、別の局面において、本発明は、以下の工程を含む、試料、好ましくは人体または非ヒト動物体の磁気共鳴画像法に関する:ai該基質の過分極前駆体を調製し、ii該過分極前駆体を適切な担体と接触させて該前駆体を過分極活性基質に変換することを含む方法により過分極活性基質を調製し、b該過分極活性基質を該試料に投与し、c該試料を該過分極活性基質中で核スピン遷移をもたらすように選択した周波数の放射線に暴露し、d該活性物質からMR信号を検出し、e所望により、該検出した信号から画像、生理学的データ、または代謝データを得る。該前駆体の過分極を分極剤の存在下で行う場合は、投与前に分極剤を活性基質から全てまたは部分的に分離することが好ましい。本発明の方法では、適切な前駆体は、適切な担体と接触させると、先に記載のごとく好ましくは加水分解により少なくとも1の活性基質に変換される過分極物質から選択される。この点で、該前駆体は、特に、無水物、混合無水物、エステル、ジケテンなどであり得る。該活性基質は一般的には溶液中に存在し、該溶液のpHは、投与前に適切な酸または塩基緩衝剤を加えることにより医薬的に許容される値に調整することができる。もちろん、正確な濃度は、一定の因子、特に毒性や投与経路などに依存する。一般的には、最適濃度は、ほとんどの場合、10mM~150mM、特に40~80mMの範囲である。いずれにしても、該溶液の用量は、検出可能な造影反応をもたらす範囲でできるだけ低く保つべきである。本発明に用いるMR造影基質の用量は、例えば用いるMR造影剤の性質、目的とする組織や器官、および測定装置によって変化する。過分極加水分解基質は、血管系に、または器官や筋肉組織に直接、または皮下経路により投与することができる。次に、本発明の方法では、該試料を、該過分極活性基質の核スピン遷移をもたらすために選択した周波数の放射線の均一磁場に暴露する。該前駆体、次いでその活性基質の過分極は、磁気共鳴信号をもたらす励起核スピン状態と基礎核スピン状態との間のポピュレーション差の増加をもたらす。MR信号強度は、このポピュレーション差に比例するので、検出される最終MR信号はより大きな振幅の信号を生じる。誘導されたMR信号の振幅も種々の他の因子、例えば、磁場の強度、試料の温度、アイソトープの性質、および造影する核の化学的環境などに依存する。この点で、MR信号を検出するために選ばれる方法には、常套的MRスキャンニングで通常知られているもの、例えば、多核スキャナー検出法、ファーストシングルショットイメージングシーケンス、EPI、RAREなどがある。同様に、本発明の方法で得られるMR信号は、常套的操作により、2または3次元画像データ;機能的、フロー、または環流データ;および生理学的もしくは代謝データに好都合に変換することができる。特に、該基質の代謝的変換は、患者の体内での代謝プロセスを研究し、およびまたは組織の代謝状態の情報を得ることを可能にする。本発明の方法は、該過分極活性基質が、該前駆体を化学的変換した直後に顕著に分極したままである時間枠内で行うべきであることは明らかであろう。したがって、そのような活性基質の投与、次いでMR測定は、好ましくはできるだけ速やかに行う。これは、試料が分極が起きる領域の近くで利用可能である必要があることを意味する。この点で、投与すべき溶液の物理的特徴は、選択した投与経路に関連したリスクを減らすために生理学的に許容されなければならないことに注意すべきである。前駆体の多様性により、本発明の方法は、種々の画像診断、例えば、限定されるものではないが、血管血管造影画像化、介入的適用、環流マッピング、または代謝分子画像化において臨床的適用をみいだすことができる。下記の実施例は本発明をより良く定義するためのものであって、本発明を限定するものではない。材料下記材料を以下の実施例で使用する。実施例1aDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下での酪酸のDNP製造酪酸をエッペンドルフチューブに入れ、39mMのラジカル1を含む90mgのグリセロール溶液と混合した。この調製物は酪酸について7Mであった。該調製物は、液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。実施例1bDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下での酪酸無水物のDNP製造酪酸無水物を、エッペンドルフチューブに入れ、1mgのラジカル3と混合し、総濃度を15mMとした。この調製物は酪酸無水物に関して65Mであった。この無水物は、ガラス形成剤を添加せずに急速凍結するとガラスを形成した。実施例1aと比較して、ガラス形成剤を添加せずに、調製物1aの濃度の二倍の酪酸濃度の、酪酸無水物を調製することができた。実施例1cDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下での酪酸酢酸無水物のDNP製造酪酸酢酸無水物を、エッペンドルフチューブに入れ、085mgのラジカル3の酸形と混合し、総濃度を15mMとした。この調製物は、酪酸酢酸について75Mであった。この混合無水物は、ガラス形成剤を添加せずに急速凍結するとガラスを形成した。実施例1aに比べて、本実施例ではガラス形成剤を添加せずに酪酸酢酸無水物の製造が可能であった。さらに、第2活性代謝造影剤が得られる。実施例1dDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下での酪酸炭酸エチル無水物のDNP製造酪酸炭酸エチル無水物は室温で液体であり、ガラス形成剤非存在下で実施例1bの方法に従って急速凍結するとガラスを形成する。活性代謝造影剤に加えて、この前駆体の加水分解は、さらにpHマーカーとMR造影剤を生じる。実施例1e酪酸無水物のDNP過分極、および加水分解のための強塩基の存在下での溶解実施例1bから得た組成物を、エッペンドルフチューブからサンプルカップに移し、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。該組成物を超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で過分極した。試料を75分間過分極した。試料を、NaOHを加えた水4mlに溶解した。溶解した試料のpHは12であった。該溶液を直接10mmNMRチューブに回収し、141T磁石に移し、時系列的に5度1D13CNMRスペクトルを1sのパルス間総遅延で記録した。10s後に該無水物を定量的に加水分解した。酪酸無水物は十分分極し、実験時間中に容易にブチレートに加水分解された。実施例1f酪酸酢酸無水物のDNP過分極、および加水分解のための強塩基の存在下での溶解実施例1cから得た組成物を、エッペンドルフチューブからサンプルカップに移し、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。該組成物を超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で過分極した。試料を90分間過分極した。試料を、NaOHを加えた水5mlに溶解した。該溶液を、直接10mmNMRチューブに回収し、141T磁石に移した。時系列的に5度1D13CNMRスペクトルを1sのパルス間総遅延で記録した。10s後に酪酸酢酸無水物を少なくとも95まで定量的に加水分解した。該酪酸酢酸無水物は十分分極し、実験時間中に容易にブチレートに加水分解された。実施例2a常磁性金属イオンとしてのGdキレートおよびDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下でのLiアセトアセテートのDNP調製Liアセトアセテートを、エッペンドルフチューブに入れ、28μlのDMSO調製物と混合した。この調製物はLiアセトアセテートについて4Mであった。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。実施例2b常磁性金属イオンとしてのGdキレートおよびDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下でのジケテンのDNP調製エッペンドルフチューブにジケテンを加え、ラジカル3および3GdのDMSO調製物47mgと混合した。この調製物はジケテンについて85Mであった。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。実施例2aに比べて、アセト酢酸の濃度は2倍である。実施例2cDNP剤としてのトリチルラジカル存在下でのエチルアセトアセテートのDNP調製エチルアセトアセテートを、エッペンドルフチューブに入れ、ラジカル2の酸形と混合し、総濃度を15mMとした。この調製物はエチルアセトアセテートについて8Mであった。このエステルはガラス形成剤を添加せずに急速凍結するとガラスを形成した。実施例2aに比べて、本実施例では、ガラス形成剤を添加せずにエチルアセトアセテートを調製することが可能であり、エチルアセトアセテートの濃度は2倍である。実施例2dLiアセトアセテートのDNP過分極、およびリン酸緩衝液への溶解実施例2aから得た全組成物を、エッペンドルフチューブからサンプルカップに移し、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。該組成物を超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で過分極した。該試料を75分間過分極した。該試料を5mlリン酸緩衝液pH73に溶解した。溶解後pH74。該溶液を、直接10mmNMRチューブに回収し、141T磁石に移し、次いで、90度1D13CNMRスペクトルを記録した。アセトアセテートのビカーボネートとアセトンへの脱カルボキシル化が検出された。分解量は、溶解後のDNP試料において1HNMRにて40と同定された。実施例2eジケテンのDNP過分極、および加水分解のための強塩基の存在下での溶解実施例2bから得た全組成物をエッペンドルフチューブからサンプルカップに移し、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。該組成物を超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で過分極した。該試料を3時間過分極した。該試料をNaOHを加えた5mlの水に溶解した。該溶液を、直接10mmNMRチューブに回収し、141T磁石に移し、時系列的に64の5度1D13CNMRスペクトルを3sのパルス間総遅延で記録した。10s後に該ラクトンは少なくとも95までが定量的に加水分解された。該ジケテンは十分分極し、実験時間中にアセトアセテートに容易に加水分解された。アセトアセテートの実質的分解はみられなかった。加水分解産物、アセトアセテートのT1は、32sである。実施例2fエチルアセトアセテートのDNP過分極、および加水分解のための強塩基の存在下での溶解実施例1cから得た組成物を、エッペンドルフチューブからサンプルカップに移し、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。該組成物を超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で過分極した。該試料を2時間過分極した。該試料をNaOHを加えた5mlの水に溶解した。該溶液を、直接10mmNMRチューブに回収し、141T磁石に移し、時系列的に5度1D13CNMRスペクトルを3sのパルス間総遅延で記録した。該エステルは部分的にのみ加水分解された。該エステルは十分分極し、10s後に約20がアセトアセテートに加水分解された。該アセトアセテートについて実質的な分解は測定されなかった。加水分解産物、アセトアセテートのC1位のT1は32sである。実施例2gエチルアセトアセテートのDNP過分極、および加水分解のためのエステラーゼ存在下での溶解実施例2cから得た組成物を、エッペンドルフチューブからサンプルカップに移し、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。組成物を超音波照射下、335T磁場中12kで2時間、DNP条件下で過分極した。該試料を5mlの40mMリン酸緩衝液pH73100mglEDTAに溶解し、エステル濃度を20mMとした。1mlの該エステル溶液を、輸送ラインを介して、141Tおよび37°Cにおいた10mmNMRチューブに注射した。10mmNMRチューブに、約270Uのブタ肝臓由来カルボン酸エステル加水分解酵素の500μl溶液を加えた。時系列的に10度1D13CNMRスペクトルを3sのパルス間総遅延で記録した。12s後、該エステルをアセトアセテートの完全に加水分解した。アセトアセテートの分解は検出されなかった。実施例3a常磁性金属イオンとしてのGdキレートおよびDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下でのシスアコニット酸のDNP調製シスアコニット酸を、エッペンドルフチューブに入れ、325μlDMSO調製物と混合した。この調製物はシスアコニット酸について25Mであった。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。実施例3b常磁性金属イオンとしてのGdキレートおよびDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下でのシスアコニット酸無水物のDNP調製シスアコニット酸無水物を、エッペンドルフチューブに加え、285mgのラジカル1および098mgの3Gdの83μmolg溶液と混合した。この調製物はシスアコニット酸無水物について9Mであった。融解した調製物は、ガラス形成剤を添加せずに急速凍結するとガラスを形成した。実施例3aに比べて、本実施例ではガラス形成剤を添加せずにシスアコニット酸無水物を調製することができ、シスアコニット酸の濃度は3倍以上である。実施例3cシスアコニット酸のDNP過分極、および中和のため塩基存在下での溶解実施例2aから得た全組成物をエッペンドルフチューブからサンプルカップに移し、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。該組成物を超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で過分極した。該試料を75分間過分極した。該試料を30μlの12MNaOHを加えた5mlリン酸緩衝液に溶解した。溶解後のpHは72であった。該溶液を、直接10mmNMRチューブに回収し、141T磁石に移し、時系列的に5度1D13CNMRスペクトルを3sのパルス間総遅延で記録した。アコニテートのトランス異性体の存在が約10の量で検出された。実施例3dシスアコニット酸無水物のDNP過分極、および加水分解のための強塩基の存在下での溶解実施例2bから得た組成物を水浴にて融解し、マグネチックスターラーで撹拌した。45mgのこの調製物をエッペンドルフチューブからサンプルカップに移し、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。該組成物を超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で過分極した。該試料を90分間過分極した。該試料をNaOHを加えた水6mlに溶解した。該溶液を、直接10mmNMRチューブに回収し、141T磁石に移し、時系列的に64の5度1D13CNMRスペクトルを3sのパルス間総遅延で記録した。10s後にシスアコニット酸無水物は、少なくとも95まで定量的に加水分解された。シスアコニット酸無水物は十分分極し、実験時間中にシスアコニテートに容易に加水分解された。加水分解産物、シスアコニテートのT1は24sである。実施例3bとは対照的に、トランスアコニテートの存在はごくわずかであった。実施例4a常磁性金属イオンとしてのGdキレートおよびDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下でのコハク酸のDNP調製コハク酸を、エッペンドルフチューブに加え、混合し、次いで92mgのDMSO調製物と混合した。この調製物はコハク酸について4Mであった。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。実施例4b常磁性金属イオンとしてのGdキレートおよびDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下でのコハク酸無水物のDNP調製コハク酸無水物を、エッペンドルフチューブに加え、ラジカル3および3Gdの218mgのDMSO溶液と混合した。この調製物はコハク酸無水物について6Mであった。この無水物は急速凍結するとガラスを形成した。実施例4aに比べて、本実施例では、より高濃度のコハク酸無水物の調製が可能である。実施例4cコハク酸無水物のDNP過分極、および加水分解のための強塩基の存在下での溶解実施例4bから得た全組成物をエッペンドルフチューブからサンプルカップに移し、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。該組成物を超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で過分極した。該試料を60分間過分極した。該試料をNaOHを加えた5mlの水に溶解した。該溶液を、直接10mmNMRチューブに回収し、141T磁石に移し、時系列的に5度1D13CNMRスペクトルを3sのパルス間総遅延で記録した。該無水物は、10s後に少なくとも95まで定量的に加水分解された。該コハク酸無水物は十分分極し、実験時間中容易に加水分解された。加水分解産物、スクシネートのT1は33sである。実施例4d常磁性金属イオンとしてのGdキレートおよびDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下でのコハク酸エチルエステルのDNP調製コハク酸エチルエステルを、エッペンドルフチューブに加え、ラジカル2および3Gdのカルボン酸形と混合した。この調製物はコハク酸エチルエステルについて6Mであった。このエステルは、急速凍結するとガラスを形成した。実施例4aに比べて、本実施例では、添加物なしに、より高濃度のコハク酸エチルエステルの調製が可能である。実施例4eコハク酸エチルエステルのDNP過分極、および加水分解のための強塩基の存在下での溶解実施例4cから得た組成物454mgを、エッペンドルフチューブからサンプルカップに移し、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。該組成物は、超音波照射下、335T磁場中12Kで60分間DNP条件下で過分極であった。該試料をNaOHを加えた6mlの水に溶解した。該溶液を、直接10mmNMRチューブに回収し、141T磁石に移し、時系列的に5度1D13CNMRスペクトルを3sのパルス間総遅延で記録した。該エステルは、20s後に少なくとも95まで加水分解された。実施例5a水酸化ナトリウム、常磁性金属イオンとしてのGdキレート、およびDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下でのLグルタミンのDNP調製Lグルタミンを、エッペンドルフチューブに加え、29μlの12MNaOHに溶解し、次いで17mgのラジカル1および3Gdと混合した。この調製物はLグルタミンについて4Mであった。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。LグルタミンはDNP調製条件下で不安定な化合物である。分解量は、可溶化した上記DNP試料について1HNMRで14と定量された。実施例5b水酸化ナトリウム、常磁性金属イオンとしてのGdキレート、およびDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下でのNアセチルLグルタミンのDNP調製NアセチルLグルタミンを、エッペンドルフチューブに加え、253μlの12MNaOHに溶解し、19mgのラジカル1および3Gdと混合した。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。この調製物は、実施例5aに比べて、NアセチルLグルタミンについてわずかに高い濃度の45Mを示し、Nアセチルグルタミンは、可溶化した上記DNP試料を1HNMRで測定すると、DNP調製物中で分解しない。実施例5cNアセチルLグルタミンのDNP過分極、溶解、および加水分解のためのNアセチラーゼの添加実施例5bから得た組成物945mgを、エッペンドルフチューブからサンプルカップに移し、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。該組成物を、超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で過分極した。該試料を60分間過分極した。該試料を5mlの40mMリン酸緩衝液に溶解した。500μlの過分極NアセチルLグルタミン溶液を141Tおよび37°Cにおいた10mmNMRチューブに輸送ラインを介して注射した。10mmNMRチューブは、約90Uのブタ腎由来アシラーゼの1mlリン酸溶液を含んだ。時系列的に5度1D13CNMRスペクトルを3sのパルス間総遅延で記録した。NアセチルLグルタミンは45s後に完全に加水分解された。Lグルタミンの分解は、熱および酸で誘導され、溶解プロセスを増強する。NアセチルLグルタミンは該溶解プロセス中で分解しない。実施例6a水酸化ナトリウム、常磁性金属イオンとしてのGdキレート、およびDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下での213Cd2グリシンのDNP調製213Cd2グリシンを、エッペンドルフチューブに加え、16μlの12MNaOHに溶解し、次いでラジカル1およびガドテリドールの4mgのNaOH溶液と混合した。この調製物はグリシンについて7Mである。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成する。実施例6b水酸化ナトリウム、常磁性金属イオンとしてのGdキレート、およびDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下での213Cd2NアセチルグリシンのDNP調製213Cd2Nアセチルグリシンを、エッペンドルフチューブに加え、ラジカル1およびガドテリドールの12MNaOH溶液22μlに溶解した。この調製物は、実施例6aに比べて、Nアセチルグリシンについてより低濃度の55Mである。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。実施例6c213Cd2グリシンのDNP過分極、および中和のための強酸存在下での溶解実施例6aから得た組成物を、超音波照射下、335T磁場中12Kで60分間、DNP条件下で過分極した。該試料を1当量のHClを加えた5mlリン酸緩衝液に溶解した。溶解後のpHは71である。該溶液を、直接10mmNMRチューブに回収し、141T磁石に移し、時系列的に3度1D13CNMRスペクトルを3sのパルス間総遅延で記録した。固体状態の信号は280であり、液体状態の分極は、46sの高磁場液体状態T1で125であった。実施例6d213Cd2NアセチルグリシンのDNP過分極、および溶解実施例6bから得た組成物を、超音波照射下、335T磁場中12Kで60分間、DNP条件下で過分極した。該試料を5mlリン酸緩衝液に溶解した。溶解後のpHは72である。該溶液を、直接10mmNMRチューブに回収し、141T磁石に移し、次いで、時系列的に3度1D13CNMRスペクトルを3sのパルス間総遅延で記録した。固体状態の信号は376であり、液体状態の分極は、40sの高磁場液体状態T1で21であった。実施例6bに比べて、より高い固体状態信号が得られ、分極の損失のない溶解とより高い液体状態分極が得られた。実施例6eNアセチルグリシンのDNP過分極、および加水分解のためのNアセチラーゼ存在下での溶解35mgのNアセチルグリシンを26μlの12MNaOHに溶解した。加熱、超音波処理、および渦巻き撹拌を用いて透明な、ガラスを形成する溶液を作製した。試料の総重量は71mgであった。105mgラジカル1および15μlの3Gdストック溶液を加えた。試料中の総Nアセチルグリシン濃度は135mMであり、3Gd濃度は04mMであった。358mgの該組成物をエッペンドルフチューブからサンプルカップに移し、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。該組成物は、超音波照射下、335T磁場中12Kで60分間、DNP条件下で過分極した。該試料を7ml40mMリン酸緩衝液に溶解した。1mlの過分極Nアセチルグリシン溶液を、輸送ラインを介して、141Tおよび37°Cにおいた10mmNMRチューブに注射した。10mmNMRチューブは、約230Uのブタ由来アシラーゼの500μlリン酸溶液を含んだ。時系列的に5度1D13CNMRスペクトルを3sのパルス間総遅延で記録した。Nアセチルグリシンは30s後に完全に加水分解した。実施例7a常磁性金属イオンとしてのGdキレートおよびDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下での2オキソグルタレート2ナトリウム塩2ナトリウム塩のDNP調製2オキソグルタレートナトリウム塩を100μlの温水に溶解した。206mgラジカル1をエッペンドルフチューブ中で計量し、111μlの2オキソグルタレート水溶液を加えて総試料量143mgを得た。この試料に、27mgの145μmolg3Gdストック溶液を加えた。この調製物を徐々に加熱し、次いで渦撹拌にて混合して溶解した。この調製物は2オキソグルタレートについて34Mであった。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。実施例7b常磁性金属イオンとしてのGdキレートおよびDNP剤としてのトリチルラジカルの存在下での2オキソグルタル酸エチルエステルのDNP調製2オキソグルタル酸エチルエステルを、エッペンドルフチューブに加え、07mgのラジカル3と混合した。この調製物は2オキソグルタレートについて65Mであった。このエチルエステルは急速凍結するとガラスを形成した。実施例7aと対照的に、本実施例では、より高濃度の2オキソグルタル酸エチルエステルを製造することができる。実施例7c2オキソグルタル酸エチルエステルのDNP過分極、および加水分解のための強塩基の存在下での溶解実施例7bから得た組成物31mgを、エッペンドルフチューブからサンプルカップに移し、をエッペンドルフチューブからサンプルカップに移し、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。該組成物は、超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で過分極した。該試料を90分間過分極した。該試料をNaODを加えた6mlのD2Oに溶解した。該溶液を、直接10mmNMRチューブに回収し、141T磁石に移し、次いで時系列的に5度1D13CNMRスペクトルを3sのパルス間総遅延で記録した。該エステルは15s後に少なくとも95まで加水分解された。該2オキソグルタル酸エチルエステルは実験時間中2オキソグルタレートに容易に加水分解された。実施例8aDNP剤としてのトリチルラジカル存在下でのリンゴ酸のDNP調製リンゴ酸を100mgのDMSOストック溶液のラジカル3に溶解した。この調製物はリンゴ酸について4Mであった。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。実施例8bDNP剤としてのトリチルラジカル存在下でのリンゴ酸エチルエステルのDNP調製リンゴ酸エチルエステルを、エッペンドルフチューブに入れ、17mgのラジカル3と混合した。この調製物はマレートについて74Mであった。このエチルエステルは急速凍結するとガラスを形成した。実施例8aと対照的に、添加物なしにより高濃度のリンゴ酸エチルエステルの調製を可能にする。実施例8cリンゴ酸エチルエステルのDNP過分極、および加水分解のための強塩基の存在下での溶解実施例8bから得た組成物399mgを、エッペンドルフチューブからサンプルカップに移し、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。該組成物を、超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で過分極した。該試料を80分間過分極した。該試料をNaOHを加えた水6mlに溶解した。該溶液を、直接10mmNMRチューブに回収し、141T磁石に移し、次いで時系列的に5度1D13CNMRスペクトルを3sのパルス間総遅延で記録した。このエステルは、20s後に少なくとも95まで加水分解された。該リンゴ酸エチルエステルは、実験時間中マレートに容易に加水分解された。実施例9aDNP剤としてのトリチルラジカル存在下でのLフェニルアラニンのDNP調製Lフェニルアラニンを695μlの12MNaOH695μl水に溶解した。この溶液を46mgラジカル1と混合した。この調製物はLフェニルアラニンについて35Mであった。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。実施例9bDNP剤としてのトリチルラジカル存在下でのエチルフェニルアラニンのDNP調製エチルフェニルアラニンを、エッペンドルフチューブに入れ、12mgのラジカル3と混合した。この調製物は、フェニルアラニンについて55Mであった。このエチルエステルは急速凍結するとガラスを形成した。実施例9aと対照的に、本実施例ではより高濃度のエチルフェニルアラニンの調製が可能である。実施例9cエチルフェニルアラニンのDNP過分極、および加水分解のための強塩基の存在下での溶解実施例9bから得た組成物49mgを、エッペンドルフチューブからサンプルカップに移し、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。該組成物を、超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で過分極した。該試料を60分間過分極した。該試料をNaOHを加えた水7mlに溶解した。該溶液を、直接10mmNMRチューブに回収し、141T磁石に移し、次いで時系列的に5度1D13CNMRスペクトルを3sのパルス間総遅延で記録した。該エステルは、15s後に少なくとも95まで加水分解された。該エチルフェニルアラニンは実験時間中にフェニルアラニンに容易に加水分解された。実施例10aDNP剤としてのトリチルラジカル存在下での113CピログルタメートのDNP過分極113Cピログルタミン酸を24μlの12MNaOHと混合した。この溶液に、11mgのラジカル1を加えた。この調製物はピログルタメートについて55Mであった。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。この全試料を、分極が完全に達成されるまで、超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で過分極した。分極を300s毎に回収する小パルス角で固体状態でモニターした。分極達成時間定数は2000sと計算され、固体状態信号は75であった。実施例10bDNP剤としてのトリチルラジカル存在下での113Cピログルタミン酸エチルエステルのDNP分極113Cピログルタミン酸エチルエステルを071mgのラジカル3と混合した。この調製物はエチルピログルタメートについて75Mであった。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。この全試料を、分極が完全に達成されるまで、超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で分極した。分極を300s毎に回収する小パルス角で固体状態でモニターした。分極達成時間定数は2070sと計算され、固体状態の分極は350であった。実施例10aに比べて、本実施例では、より高濃度のピログルタメートエチルエステルの調製が可能であり、該エチルピログルタメートは45倍以上分極し、該ピログルタメートは同じ分極達成時間定数を有し、試料中で低ラジカル濃度であった。実施例10c加水分解のための強塩基の存在下でのDNP過分極エチルピログルタメートの溶解実施例10bから得た組成物368mgを、サンプルカップに移し、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。該組成物を、超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で過分極した。該試料を60分間過分極した。該試料をNaOHを含む水5mlに溶解した。該溶液を、直接10mmNMRチューブに回収し、141T磁石に移し、時系列的に5度1D13CNMRスペクトルを3sのパルス間総遅延で記録した。該エステルは、10s以内で少なくとも95まで加水分解された。該エチルピログルタメートは実験時間中に容易にピログルタメートに加水分解された。実施例11aDNP剤としてのトリチルラジカル存在下での113CLオキソチアゾリジン4カルボン酸のDNP分極113COTZを21μlの12MNaOHと混合した。この溶液に077mgラジカル1を加えた。この調製物はOTZについて4Mであった。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。この全試料を、分極が完全に達成されるまで、超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で分極した。分極を300s毎に回収する小パルス角で固体状態でモニターした。分極達成時間定数は3500sと計算された。固体状態の信号は305であった。実施例11bDNP剤としてのトリチルラジカル存在下での113COTZエチルエステルのDNP分極113COTZエチルエステルを098mgラジカル2と混合し、14mMラジカルを含む溶液を得た。221mgの溶液Aに、さらなる量の113COTZエチルエステルを加え、ラジカル濃度11mMとした。この調製物はOTZエチルエステルについて7Mであった。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。この全試料を、分極が完全に達成されるまで、超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で分極した。分極を300s毎に回収する小パルス角で固体状態でモニターした。分極達成時間定数は1925sと計算され、固体状態の信号は380であった。実施例11aに比べて、本実施例はより高濃度のOTZエチルエステルを調製することができ、該OTZエステルは12倍分極し、OTZは同じ分極達成時間定数と試料中の低ラジカル濃度を示した。実施例11c加水分解のための強塩基の存在下でのDNP過分極エチルOTZの溶解エチルOTZを149mgラジカル3と混合し、これをサンプルカップに移し、次いで、サンプルカップをDNP過分極装置に挿入した。該組成物を、超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で過分極した。該試料を60分間過分極した。該試料をNaOHを加えた水5mlに溶解した。該溶液を、直接10mmNMRチューブに回収し、141T磁石に移し、次いで、時系列的に5度1D13CNMRスペクトルを3sのパルス間総遅延で記録した。該エステルは10s以内に少なくとも95まで加水分解された。エチルOTZは実験時間中OTZに容易に加水分解された。実施例12aDNP剤としてのトリチルラジカル存在下での113Cイタコン酸のDNP過分極113Cイタコン酸を511mg12MNaOHと混合した。この溶液に、165mgラジカル1を加えた。この調製物はイタコン酸について45Mであった。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。この全試料を、分極が完全に達成されるまで、超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で分極した。分極を300s毎に回収する小パルス角で固体状態でモニターした。分極達成時間定数は1790sと計算された。固体状態の信号は150であった。実施例12bDNP剤としてのトリチルラジカル存在下での113CイタコネートジエチルエステルのDNP過分極113Cイタコネートジエチルエステルを15mgラジカル3と混合した。この調製物はイタコネートジエチルエステルについて56Mであった。該調製物は液体窒素中で急速凍結するとガラスを形成した。632mgのこの試料を、分極が完全に達成されるまで、超音波照射下、335T磁場中12KのDNP条件下で過分極した。分極を300s毎に回収する小パルス角で固体状態でモニターした。分極達成時間定数は2120sと計算された。固体状態の信号は340であった。実施例12aに比べて、本実施例では、より高濃度の調製が可能であり、該イタコネートエチルエステルは23倍分極し、該イタコネートはより小さい分極達成時間定数を示した。