畜産反芻動物により生成されるメタン量を評価するための方法であり、前記方法は、前記反芻動物からの乳のサンプル中の、デノボ合成から誘導される、少なくとも1つの脂肪酸の重量AGを測定することを含み、及び次式:CH4=aデノボAGyBHAGz:によりメタンの量を評価すること;を含むことを特徴とし、ここで、-CH4は、前記反芻動物による乳1キログラム又は1リットル当たり生成されるメタンのグラム数で表した量であり、-デノボAGは、前記サンプル中で測定された、それ自体又は他のデノボ脂肪酸の前記少なくとも測定された量との組み合わせて取得された乳1キログラム当たり又は1リットル当たりのグラム数で表された少なくとも前記脂肪酸の前記サンプル中での量であり;-BHAGは、前記サンプル中で測定された、それ自体又は他の腸内生体水素化から誘導される他の脂肪酸の前記少なくとも測定された量との組み合わせて取得された乳1キログラム当たり又は1リットル当たりのグラム数で表された少なくとも前記脂肪酸の前記サンプル中での量であり;-aは、yはゼロである場合-2から2、又はyがゼロとは異なる場合には0.1と10の間の数であり;-yは、aがゼロではない場合には-10から10、又はaがゼロの場合には-50から-0.1の間の数であり;-a及びyが共に同時にゼロではなく;-zは-100と100の間の数を含む、方法。請求項1に記載の方法であり、デノボAGは次の定義:a4から14炭素原子を持つ飽和脂肪酸の量AGS;b4から16炭素原子を持つ飽和脂肪酸の量;cC12及びC14飽和脂肪酸の量;dC4、C6、C8、C10、C12、C14及びC16飽和脂肪酸の量の単独又はこれらの少なくとも2つの組み合わせ、から選択される、ことを特徴とする、方法。請求項2に記載の方法であり、yがゼロであり、前記メタンの量が次の式:CH4=1.07±0.5C4からC14飽和脂肪酸の和4.8±3で与えられることを特徴とする、方法。請求項1又は2のいずれか一項に記載の方法であり、yがゼロではなく、BHAGが次の定義:a不飽和脂肪酸の全量AGI;b少なくとも18炭素原子を含む不飽和脂肪酸AGIの全量;c少なくとも18炭素原子を含む不飽和脂肪酸AGIの全量、但C18:1n-9、C18:2n-6及びC18:3n-3不飽和脂肪酸を除く;dC18飽和脂肪酸C18:0の量;eトランス脂肪酸又はその一部の量、から選択されることを特徴とする、方法。請求項4に記載の方法であり、前記メタンの量が以下の式:CH4=1.14±0.4C4からC14飽和脂肪酸の和-0.07±0.3[AGI-C18:1n-9C18:2n-6C18:3n-3]4.7±0.5、ここで、[AGI-C18:1n-9C18:2n-6C18:3n-3]は、C18:1n-9を除く不飽和脂肪酸の全量を表す、で与えられることを特徴とする方法。請求項1乃至5のいずれか一項に記載の方法であり、前記デノボ合成から誘導される脂肪の量が、赤外線スペクトル法、好ましくは中赤外線領域のスペクトル法で測定されることを特徴とする方法。請求項1乃至6のいずれか一項に記載の方法であり、a前記方法は標準乳として知られるいくつかのサンプル乳を用いて繰り返されbそれぞれの標準サンプルの測定されたCH4の量が、それぞれの赤外線吸収スペクトルと関連付けられる;c試験される新たなサンプルの赤外線吸収スペクトルが記録される;d前記スペクトルを前記標準サンプルのスペクトルと比較される;e前記新たなサンプルに関連付けられるCH4の量を、標準サンプルのスペクトルと比較することで導き出す、ことを特徴とする方法。請求項7に記載の方法であり、ステップdで、前記比較を数学的統計学的モデルを用いて行い、かつステップeで、ステップdのモデルで得られた評価式を用いて行うことを特徴とする方法。本発明は、これらの困難性を解消することを目的とする。従って、本発明は、畜産反芻動物により生成されるメタン量を評価するための方法が提案され、前記方法は、前記反芻動物からの乳のサンプル中の、デノボ合成から誘導される、少なくとも1つの脂肪酸の重量AGを測定することを含み、及び次式:CH4=aデノボAGyBHAGz:によりメタンの量を評価すること;を含みことを特徴とし、ここで、-CH4は前記反芻動物による乳1キログラム又は1リットル当たり生成されるメタンのグラム数で表した量であり、-デノボAGとは、前記サンプル中で測定された、それ自体又は他のデノボ脂肪酸の前記少なくとも測定された量との組み合わせて取得された乳1キログラム当たり又は1リットル当たりのグラム数で表された少なくとも前記脂肪酸の前記サンプル中での量であり;-BHAGとは、前記サンプル中で測定された、それ自体又は他の腸内生体水素化から誘導される他の脂肪酸の前記少なくとも測定された量との組み合わせて取得された乳1キログラム当たり又は1リットル当たりのグラム数で表された少なくとも前記脂肪酸の前記サンプル中での量であり;-aは、yはゼロである場合-2から2、又はyがゼロとは異なる場合には0.1と10の間の数であり;-yは、aがゼロではない場合には-10から10、又はaがゼロの場合には-50から-0.1の間の数であり;-a及びyが共に同時にゼロではなく;-zは-100と100の間の数を含む。この方法により、前記反芻動物の生産性に縛られることな、乳の簡単なサンプルを分析することでCH4の量を決定することが可能となる。さらに他の有利なかつ非限定的な特徴により:-デノボAGが次の定義から選択される:a4から14炭素原子を持つ飽和脂肪酸の量AGS;b4から16炭素原子を持つ飽和脂肪酸の量;cC12及びC14飽和脂肪酸の量;dC4、C6、C8、C10、C12、C14及びC16飽和脂肪酸の量;の単独又はこれらの少なくとも2つの組み合わせ。-前記メタン量は次の式で与えられる:CH4=1.07±0.5C4からC14飽和脂肪酸の和4.8±3。-BHAGは次の定義から選択される:a不飽和脂肪酸の全量AGI;b少なくとも18炭素原子を含む不飽和脂肪酸AGIの全量;c少なくとも18炭素原子を含む不飽和脂肪酸AGIの全量、但C18:1n-9、C18:2n-6及びC18:3n-3不飽和脂肪酸を除く;dC18飽和脂肪酸C18:0の量;eトランス脂肪酸又はその一部の量。-メタンの前記量は以下の式で与えられる:CH4=1.14±0.4C4からC14飽和脂肪酸の和-0.07±0.3[AGI-C18:1n-9C18:2n-6C18:3n-3]4.7±0.5、ここで、[AGI-C18:1n-9C18:2n-6C18:3n-3]は、C18:1n-9を除く不飽和脂肪酸の全量を表している。-前記デノボ合成から誘導される脂肪酸の量は、赤外線スペクトル法で、好ましくは中赤外線スペクトル法で測定する。a前記方法は標準乳として知られるいくつかのサンプル乳を用いて繰り返される;bそれぞれの標準サンプルの測定されたCH4の量が、それぞれの赤外線吸収スペクトルと関連付けられる;c試験される新たなサンプルの赤外線吸収スペクトルが記録される;d前記スペクトルを前記標準サンプルのスペクトルと比較される;e前記新たなサンプルに関連付けられるCH4の量を、標準サンプルのスペクトルと比較することで導き出す。-好ましくは、ステップdで、前記比較を数学的統計学的モデルを用いて行い、かつステップeで、ステップdのモデルで得られた評価式を用いて行う。本発明の他の特徴及び利点は以下の詳細な記載を参照することで明らかとなる。本出願を通じて次の表現は以下のように定義される。-デノボ脂質生成:乳腺上皮細胞による脂肪酸合成;-デノボ脂肪酸:乳腺上皮細胞による脂肪酸で、16以下の炭素原子を含む脂肪酸;-BH脂肪酸又は腸内生体水素化から誘導される脂肪酸:腸内発酵の過程で少なくとも1つの水素化を経た18炭素原子を持つ飽和脂肪酸。これらはゼロ、1又はそれ以上の不飽和性を持つ。最後に、用語組み合わせるとは、加える、差し引く、掛け合わす又は割ることを意味する。[1]:メタン及びAGV揮発性脂肪酸関係-ルーメンとメタン生成ルーメン中でのAGVの生産とメタンの生成との関連付けは知られており多年研究されている。従って、ルーメン中での酢酸塩及び酪酸塩の生成は水素を放出し、メタン生成に有利であり、一方でプロピオン酸塩の生成は水素の使用を可能にし従ってメタン生成を抑制する。このことは次の式で表される:1グルコースC6は、2ピルビン酸塩C3[4H]を与え、1ピルビン酸塩C3H2O=1酢酸塩CO2[2H]であり、及び1ピルビン酸塩=1プロピオン酸塩C3[-4H]。従って、予想式がMOssら2000の刊行物により開発され、CH4の生成がAGCの生成から予想される。従って、ルーメンでの発酵がC2酢酸塩及び酪酸塩C4をより生成すると、CH4の生成がより多くなる。逆に、ルーメンでのC3プロピオン酸塩の発酵が多いと、CH4の生成は減少する。これから確かな合成式は次のようであるMossの式:[CH4]=0.45[酢酸塩]0.40[酪酸塩]-0.275[プロピオン酸塩]、ここで、[x]=xの量を全AGVに対するで表す。前記デノボ脂肪酸合成とメタン合成との関連付けはここで明らかである、というのはC2とC4は乳頭で合成されるデノボ脂肪酸デノボAGの前駆体だからである。ルーメンの発酵によりC2及びC4がより多く存在するほど、前記乳のデノボ脂肪酸合成に利用可能な材料が多く存在することとなる。[2]:乳頭及び脂質合成ルーメン発酵から由来するC2及びC4のAGVはその後乳腺上皮細胞に取り込まれデノボAG合成の材料として供される。AGV材料の利用可能性が、これらの合成を制限するファクタである場合にはこれは極めて普通である、腸内CH4の放出と、前記乳中のデノボ合成から由来するAGの排泄には関連があり、以下の表に示される。乳腺内皮細胞でデノボAGの合成は、M上で開発されたMoss式が示唆するように、メタンフットプリントを持ちルーメン発酵から由来するC2とC4基質からほとんど生じる。その後次の飽和脂肪酸の合成で終了する:C4:0、C6:0、C8:0、C10:0、C12:0、C14:0、16:0。しかし留意すべきことは、第2相において、前記デノボ合成から由来の前記飽和AGAGSが不飽和化される、ということである。従って、一方では前記二重関係C2C4とCH4メタンを用い、及び乳頭で飽和デノボAGの合成の前駆体としてC2C4を用いて、前記合成されたデノボAGの量から放出されるメタンの量を予想しようとするように見える。乳の脂質はまた、AGV基質を用いるデノボ合成から誘導される奇数飽和AGを含みが、またC3から誘導されるものも含み、これはメタン生成の影響はない。従って、奇数AGについて、乳中のこれらの重量とこれらのメタンフットプリントとの関連性は低いと考えられる。しかし、ある偶数飽和AGは外因性起源を持ち得るものであり、特にC16:0はこれ自体全乳のAGのほとんど1/3であり、種々の起源から派生し、例えば脂肪細胞又は外因性植物油例えばパーム油などの保存領域の転移から由来する。従って、乳1キログラム当たりのメタンフットプリントと、AGの重量との信頼性のある関係を確立するためには、第1に必要なことは、乳1キログラム当たりの重量の信頼性のある測定が可能である、ということである。[3]:乳中に存在するデノボAGの量の評価合成メカニズムは次に乳腺中での偶数飽和脂肪酸のエステル化であり、これは多くの経路が交差している。また、乳中の偶数飽和AG間の強い関係を見出すことが合理的である。次の表Moateら、2007は、この論文で刊行されるメタ分析後の乳中の偶数C4からC16間の統計的関係を与える。これらのAGの全てがお互いに相当な割合で合成経路で関連付けされており、乳中でのこれらの濃度はお互いに関連している、ということが明らかである。脂肪酸C16:0は、他の偶数の短鎖長のAGSよりも、短及び中間的鎖長を持つAGSと弱い関係があるように見えるが、これは部分的に外因性起源によると考えられる。脂肪酸C4:0はまた、他のデノボAGよりも関連性が弱いように見えるが、これは他のAGとは異なる合成経路及びエステル化経路乳のトリグリセリドによるものと考えられ、又は分析困難性によるものと考えられる。従って、C2及びC4基質として、前記それぞれのAGの和又は組み合わせを用いてデノボ合成のマーカーとして使用することと同等であるように思われる。好ましい方法では、C16:0外因性起源であり得るを除いて、全ての短鎖長又は中間長AGC4:0からC14:0の重量和が最も信頼性のある関係であるように思われる。しかしながら、偶数C4からC16AGはそれのみ、又は前記AGの少なくとも2つの和又は組み合わせは多かれ少なかれ、デノボ合成について、従って腸内メタン合成について、C2及びC4基質の使用の信頼性のある評価を与える。従って、乳1キログラム当たり、又は乳1リットル当たりに放出されたCH4量を決定するために、次の式が使用される。CH4g/kg=aデノボAGzここでデノボAGは重量g/kg乳であり、式中、aは-2から2の間の数、及びzは-100から100の間の数である。前記デノボAGは、好ましくは、乳中の4から14炭素原子の飽和AGAGS含有量により評価され得る。この式は、乳腺不飽和化の過程後4から16炭素原子のモノ不飽和AGの合成のために使用されるC2及びC4脂質の量を過小評価するが、しかし奇数飽和AGでのC2及びC4の共有をやや過大評価する。特に好ましい方法では、この量は式:CH4g/kg=1.07C4からC14AGSの和4.8で評価される。ここでC4からC16AGSの和が乳1キログラム当たりのグラム数で表現されている。しかし、C4からC16AGSの和の代えて、次の変数を含む他の式を用いることも可能である:-全てのAGS、の和:これはしかし精度が低い、というのは前記AGSはまた外因性AG及びルーメン生体水素化から由来するC18:0を含むからである。-4から16炭素原子の飽和AGの和:C16:0がいつでも知られるものではなく、これは外因性起源である。-C12:0及びC14:0の和。-C4:0、C6:0、C8:0、C10:0、C12:0、C14:0、C16:0の単独又は少なくとも2つの組み合わせ。[4]精度利得本発明による方法は、前記のようにメタン合成と脂質合成との間の関連付けを十分考慮するものである。しかし、メタンの放出の変化はここでは、メタン合成の経路とプロピオン酸塩合成の経路との間の水素の分配/競争へ関連付けされている。また、メタン合成及びプロピオン酸塩合成以外の経路も水素利用について存在する。ほとんどは限定的であるが、ルーメンでの嫌気的発酵で生成される水素代謝物はまた、飼料摂取された多飽和AGの水素化反応でも使用され得る。従って、前記式はまた次のように表現される:CH4g/kg=aデノボAGyBHAGzBHAGは、ルーメン生体水素化式から誘導されるAGである:ここで、-aは、yがゼロの場合に-2から2の間の数、又はyがゼロではない場合には0.1から10の間の数を持ち;-yはゼロと異なる場合には-10と10の間の数を持ち;-aとyとは同時にゼロとなることはなく;-zは-100と100の間の数である。生体水素化由来のAGは、18以上で外因性起源のものより少ない炭素原子を持つ全AGの和を表す。これは:-ステアリン酸C18:0を含むが、これはまた外因性起源であり得る;-C18:0の乳頭での不飽和化から誘導される場合オレイン酸C18:1n-9を含むが、しかしこれはまた外因性起源である得る;-外因性起源のリノール酸C18:2n-6及びアルファリノール酸C18:3n-3を除く2以上の不飽和を持つ全てのAGを含むが;-C20:4n-6、C20:5n-3、C22:6n-3又はより長鎖のAGを除外することが好ましい。水素化との競争によりメタン放出の減少へのこれらの特異的寄与前記デノボ合成から懸念されるルーメン発酵へのオイルの一般的効果とは異なるは完全には無視できない。実施例-360gの食餌C18:1n-9飼料摂取の2は、ルーメン内で85水素化され、乳1キログラムあたりのCH4の0.4gの合成CH4放出の約2に必要な水素を消費する。-360gの食餌C18:2n-6は、ルーメン内で85水素化され、乳1キログラムあたりのCH4の0.7gの合成CH4放出の約4に必要な水素を消費する。-360gの食餌C18:3n-3は、ルーメン内で85水素化され、乳1キログラムあたりのCH4の1.1gの合成CH4放出の約6に必要な水素を消費する。生体水素化由来のAGの性質は複雑である。18炭素元素以上のAGにうち、C18:1n-9などは、内因性C18:0で水素化、その後C18:1n-9で不飽和化又は外因性起源例えばなたね油を持つ。[AGI-C18:1n-9-C18:2n-6-C18:3n-3]値は、具体的に水素化から由来するAGの量のよい指標である。従って、前記式は有利には次のように表される。CH4g/kg=1.14C4からC14AGSの和-0.07[AGI-C18:1n-9C18:2n-6C18:3n-3]4.7また、AGI-C18:1n-9C18:2n-6C18:3n-3の代わりに、生体水素化の指標として次の変数が含まれる:-AGIの和;-C18:0;-トランスAG又はそれらの和。前記のとおり、従来技術では、直接、迅速にかつ容易に実施することができない。現在最も正確な予想には、少なくとも前記乳中の脂質含有量及び前記牛の生産性を知ることが必要であり、この2つのファクタは通常は知り得ない。本発明の方法は、1つの基準:1キログラムの乳中のグラムで表された前記乳中の脂肪酸の含有量から、乳1キログラム当たりのメタン放出量を評価することを可能にするもはや最小3の基準でもない。[5]本方法の実施数年間、赤外線スペクトル方法により、1キログラム又は1リットル当たりの乳中のグラムでのAGの迅速測定技術が開発されてきている。乳サンプルのデータベースから、これはそれぞれの乳中のサンプルについて、赤外線スペクトル方法で得られた光吸収スペクトルと標準分析ガス相クロマトグラフなどで得られたAG1リットル中のグラム中の成分との関連付けを構成する。式例えば較正を利用する数学的及び統計学的方法により、前記測定の信頼性のレベルが満足できるものとなり、事前に決定された評価式を用いて、赤外線分析による全ての乳サンプルのAGを指揮により評価することが可能となる。前記乳のAGとメタン放出との化学量論的関連付けが知られ、前記乳のメタンフットプリントを評価するために1キログラム又は1リットル当たりのグラム数で乳中のAGの直接読み出すことが試みられる。牛の生産性又は前記乳の全脂質量を知ることが必要ではない。赤外線スペクトル、特に好ましくは中赤外線を用いることで、乳1キログラム又は1リットル当たりのグラム数で直接、液体乳サンプルのAG含有量を測定することが可能となる。この方法の精度は、最近の刊行物に示されるようにますます信頼性が高くなってきているSoyeurtら、2010。この技術的利点は本発明をより大きな施設で実施することを可能にする。従って、液体抽出及びガスクロマトグラフの実行はもはや必要なく、乳の全脂質含有量も牛の生産性も知る必要はない。本発明によれば、乳のそれぞれ1キログラムのメタンフットプリントの測定は、いつでも通常測定ルーチンで実施することが可能となる。前記AGを連続的に単独で又は組合せて取得して測定する代わりに、前記乳の赤外線スペクトル分析、次いでこれらのAGからのCH4の分析により、赤外線スペクトル分析から前記CH4を直接推定することが想定され得る。事実、デノボAGの量は、少なくとも、現在では中赤外線で非常によく決定されており、具体的に、識別される吸収スペクトルバンド、及びその光吸収に対応する波長に関連付けされている。従って、乳のAGの測定を行うことなく、前記同じスペクトルバンドを用いることで、スペクトル分析から乳サンプルのCH4を直接決定することを可能にする。