"個体における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止、限定もしくは減少する能力について組成物をスクリーニングする方法であって、a該個体由来の細胞におけるFbxo40のレベルもしくは活性を確認する、b所望により、該細胞をFbxo40に対するアンタゴニストを含む組成物で処理する、およびc所望により、再び該細胞におけるFbxo40のレベルもしくは活性を確認することを含み、コントロールと比較してFbxo40の上昇したレベルが、対象が筋肉疲労障害を有するか、または発症する危険性があることの指標であり、Fbxo40のレベルもしくは活性を低下する該組成物の能力は、個体における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止する能力と相関する、方法。個体が、悪液質、癌、腫瘍誘導体重減少、敗血症、慢性心不全、リウマチ性関節炎、後天性免疫不全症候群、サルコペニア、糖尿病、高血圧、高レベルの血清コレステロール、高レベルのトリグリセリド、パーキンソン病、不眠症、薬物中毒、疼痛、不眠症、低血糖、肝臓機能障害、肝硬変症、胆嚢障害、舞踏病、運動障害、腎臓障害および/または尿毒症から選択される筋肉疲労関連障害に罹患している、請求項1に記載の方法。アンタゴニストが、Fbxo40のレベル、発現もしくは活性を減少させる、請求項1に記載の方法。個体における筋肉量増加もしくは維持または喪失の減少のレベルを診断またはモニタリングする方法であって、a該個体由来の細胞におけるFbxo40のレベルもしくは活性を確認する、b所望により、該細胞をFbxo40に対するアンタゴニストを含む組成物で処理する、およびc所望により、再び該細胞におけるFbxo40のレベルもしくは活性を確認することを含み、コントロールと比較してFbxo40の上昇したレベルが、対象が筋肉疲労障害を有するか、または発症する危険性があることの指標であり、Fbxo40のレベルもしくは活性を低下する該組成物の能力は、個体における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止する能力と相関する、方法。個体が、悪液質、癌、腫瘍誘導体重減少、敗血症、慢性心不全、リウマチ性関節炎、後天性免疫不全症候群、サルコペニア、糖尿病、高血圧、高レベルの血清コレステロール、高レベルのトリグリセリド、パーキンソン病、不眠症、薬物中毒、疼痛、不眠症、低血糖、肝臓機能障害、肝硬変症、胆嚢障害、舞踏病、運動障害、腎臓障害および/または尿毒症から選択される筋肉疲労関連障害に罹患している、請求項4に記載の方法。アンタゴニストが、Fbxo40のレベル、発現もしくは活性を減少させる、請求項4に記載の方法。治療有効量のFbxo40のアンタゴニストを個体に投与することを含む、該個体における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を維持もしくは防止する方法。個体が、悪液質、癌、腫瘍誘導体重減少、敗血症、慢性心不全、リウマチ性関節炎、後天性免疫不全症候群、サルコペニア、糖尿病、高血圧、高レベルの血清コレステロール、高レベルのトリグリセリド、パーキンソン病、不眠症、薬物中毒、疼痛、不眠症、低血糖、肝臓機能障害、肝硬変症、胆嚢障害、舞踏病、運動障害、腎臓障害および/または尿毒症から選択される筋肉疲労関連障害に罹患している、請求項7に記載の方法。理学療法、栄養物、電気刺激、NMESの電気神経筋刺激因子、筋肉への神経投入;および/またはステロイド、ホルモン、成長ホルモン、成長ホルモン分泌促進物質;イブタモレンメシル酸塩MK-677、イチョウ抽出物、フラボングリコシド、ギンコライド、アミノ酸栄養補助食品、ロイシン、アミノ酸前駆体、ロイシン前駆体、ピルビン酸およびピルビン酸代謝産物、ベータ-ヒドロキシ-ベータ-メチルブチレート、アルファ-ケトイソカプロン酸、分枝鎖アミノ酸、エリスロポエチン、アヘン剤、スコポラミン、インスリン、インスリン様増殖因子-1IGF1および/またはテストステロン;および/またはアルドステロン、アルファ受容体、アンジオテンシンII、ベータ受容体、カテプシンB、キマーゼ、エンドセリン受容体、真核生物開始因子2-アルファeIF2-アルファ、イミダゾリン受容体、インターフェロン、MAFbx筋萎縮F-box、MuRF1筋肉リングフィンガー1、ミオスタチン、副甲状腺ホルモン関連タンパク質PTHrPおよび/またはその受容体、タンパク質分解誘導因子PIF、RNA依存性セリン/スレオニンタンパク質キナーゼPKR、腫瘍壊死因子アルファTNF-アルファおよび/またはキサンチンオキシダーゼの阻害剤の1つ以上を投与することをさらに含む、請求項7に記載の方法。アンタゴニストがFbxo40の発現、レベルもしくは活性を減少させる、請求項7に記載の方法。Fbxo40のアンタゴニストが低分子量化合物である、請求項7に記載の方法。アンタゴニストがポリペプチドである、請求項7に記載の方法。Fbxo40のアンタゴニストがFbxo40をコードする核酸に結合するsiRNAである、請求項7に記載の方法。siRNAが平滑末端である、請求項13に記載の方法。Fbxo40のアンタゴニストがFbxo40に結合する抗体である、請求項7に記載の方法。アンタゴニストがFbxo40の発現、レベルもしくは活性を減少させ、筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止、限定もしくは減少する、Fbxo40のアンタゴニストを含む組成物。ステロイド、ホルモン、成長ホルモン、成長ホルモン分泌促進物質;イブタモレンメシル酸塩MK-677、イチョウ抽出物、フラボングリコシド、ギンコライド、アミノ酸栄養補助食品、ロイシン、アミノ酸前駆体、ロイシン前駆体、ピルビン酸およびピルビン酸代謝産物、ベータ-ヒドロキシ-ベータ-メチルブチレート、アルファ-ケトイソカプロン酸、分枝鎖アミノ酸、エリスロポエチン、アヘン剤、スコポラミン、インスリン、インスリン様増殖因子-1IGF1および/またはテストステロン;および/またはアルドステロン、アルファ受容体、アンジオテンシンII、ベータ受容体、カテプシンB、キマーゼ、エンドセリン受容体、真核生物開始因子2-アルファeIF2-アルファ、イミダゾリン受容体、インターフェロン、MAFbx筋萎縮F-box、MuRF1筋肉リングフィンガー1、ミオスタチン、副甲状腺ホルモン関連タンパク質PTHrPおよび/またはその受容体、タンパク質分解誘導因子PIF、RNA依存性セリン/スレオニンタンパク質キナーゼPKR、腫瘍壊死因子アルファTNF-アルファおよび/またはキサンチンオキシダーゼの阻害剤の1つ以上を投与することをさらに含む、請求項16に記載の組成物。アンタゴニストがFbxo40の発現、レベルもしくは活性を減少させる、請求項16に記載の組成物。Fbxo40のアンタゴニストが低分子量化合物である、請求項16に記載の組成物。アンタゴニストがポリペプチドである、請求項16に記載の組成物。Fbxo40のアンタゴニストがFbxo40をコードする核酸に結合するsiRNAである、請求項16に記載の組成物。siRNAが平滑末端である、請求項21に記載の組成物。Fbxo40のアンタゴニストがFbxo40に結合する抗体である、請求項16に記載の組成物。発明の詳細な説明本明細書は、Fbxo40をアンタゴナイズすることが筋肉量を増加する、および/または筋肉量の喪失を防止、限定もしくは減少するという考えに基づく。本発明者らは、本明細書において、サルコペニア、悪液質および他の筋力低下関連障害、例えば、本明細書に記載されているもの、および当分野で知られているか、知られるようになるものを処置するために使用することができるFbxo40アンタゴニストを提供する。該アンタゴニストは、低分子量化合物LMW、抗体または阻害核酸、例えば、siRNA、またはFbxo40をアンタゴナイズするあらゆる他の組成物であり得る。Fbxo40アンタゴニストは、筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止、限定もしくは減少する。Fbxo40に対するアンタゴニストは、単独で、または他の治療と共に投与することができる。本明細書はまた、Fbxo40をアンタゴナイズし、筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止、限定もしくは減少する能力について組成物をスクリーニングする方法を含む。本明細書はまた、Fbxo40を検出するための診断方法であって、Fbxo40の上昇したレベルが筋肉疲労障害またはその危険性と関連する方法を含む。筋肉疲労関連障害を有するヒト患者は、直接的または間接的にFbxo40アンタゴニストを投与する結果として、筋肉量を維持することができるか、または筋肉量および/または強度のより高いレベルを有することができる。アンタゴニストはまた、筋肉量を増加するために、非ヒト動物、例えば、ウシ、ブタ、ニワトリ、イヌ、ネコおよび他の動物に投与することができる。特定の理論に限定されることは望まないが、本発明者らは、Fbxo40が、図2において示されるとおり、IRS1インスリン受容体基質1との直接接触を介して活性を媒介することを示唆する。IGF1シグナル伝達経路において、IRS1活性化は筋肉成長を引き起こす。Fbxo40は、該活性をアンタゴナイズする。Fbxo40は、IRS1をSCFFbxo40複合体Fbxo40、Skp1、Cullin1およびRbx1を含むと結合させる。該複合体において、Rbx1は、IRS1をユビキチン化し、それを分解のためにマークする。Fbxo40の阻害は、IRS1のユビキチン化を防止し、IRS1に筋肉成長を活性化させ続ける。したがって、1つの特定の態様において、本明細書は、治療有効量のFbxo40のアンタゴニストを個体に投与することを含む、該個体における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止する方法を含む。1つの態様において、本明細書は、病理学的疾患の治療における使用のための、または処置における使用のための薬物としてFbxo40アンタゴニストを提供する。1つの特定の態様において、本明細書は、個体における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止、限定もしくは減少する能力について組成物をスクリーニングする方法であって、a該個体由来の細胞におけるFbxo40のレベルもしくは活性を確認する、b所望により、該細胞をFbxo40に対するアンタゴニストを含む組成物で処理する、およびc所望により、再び該細胞におけるFbxo40のレベルもしくは活性を確認する、ことを含み、コントロールと比較してFbxo40の上昇したレベルが、対象が筋肉疲労障害を有するか、または発症する危険性があることの指標であり、Fbxo40のレベルもしくは活性を低下させる該組成物の能力は、個体における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止、限定もしくは減少する能力と相関する方法を含む。この方法の1つの態様において、個体は、悪液質、癌、腫瘍誘導体重減少、敗血症、慢性心不全、リウマチ性関節炎、後天性免疫不全症候群、サルコペニア、糖尿病、高血圧、高レベルの血清コレステロール、高レベルのトリグリセリド、パーキンソン病、不眠症、薬物中毒、疼痛、不眠症、低血糖、肝臓機能障害、肝硬変症、胆嚢障害、舞踏病、運動障害、腎臓障害および/または尿毒症から選択される筋肉疲労関連障害に罹患している。この方法の1つの態様において、アンタゴニストは、Fbxo40のレベル、発現もしくは活性を減少させる。1つの特定の態様において、本明細書は、個体における筋肉量増加もしくは維持のレベルを診断またはモニタリングする方法であって、a該個体由来の細胞におけるFbxo40のレベルもしくは活性を確認する、b所望により、該細胞をFbxo40に対するアンタゴニストを含む組成物で処理する、およびc所望により、再び該細胞におけるFbxo40のレベルもしくは活性を確認する、ことを含み、コントロールと比較してFbxo40の上昇したレベルが、対象が筋肉疲労障害を有するか、または発症する危険性があることの指標であり、Fbxo40のレベルもしくは活性を低下する該組成物の能力は、個体における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止、限定もしくは減少する能力と相関する方法を含む。この方法の1つの態様において、個体は、悪液質、癌、腫瘍誘導体重減少、敗血症、慢性心不全、リウマチ性関節炎、後天性免疫不全症候群、サルコペニア、糖尿病、高血圧、高レベルの血清コレステロール、高レベルのトリグリセリド、パーキンソン病、不眠症、薬物中毒、疼痛、不眠症、低血糖、肝臓機能障害、肝硬変症、胆嚢障害、舞踏病、運動障害、腎臓障害および/または尿毒症から選択される筋肉疲労関連障害に罹患している。この方法の1つの態様において、アンタゴニストは、Fbxo40のレベル、発現もしくは活性を減少させる。1つの特定の態様において、本明細書は、治療有効量のFbxo40のアンタゴニストを個体に投与することを含む、該個体における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止する方法を含む。この方法の1つの態様において、個体は、悪液質、癌、腫瘍誘導体重減少、敗血症、慢性心不全、リウマチ性関節炎、後天性免疫不全症候群、サルコペニア、糖尿病、高血圧、高レベルの血清コレステロール、高レベルのトリグリセリド、パーキンソン病、不眠症、薬物中毒、疼痛、不眠症、低血糖、肝臓機能障害、肝硬変症、胆嚢障害、舞踏病、運動障害、腎臓障害および/または尿毒症から選択される筋肉疲労関連障害に罹患している。この方法の1つの態様において、該方法は、理学療法、栄養物、電気刺激、NMESの電気神経筋刺激因子、筋肉への神経投入;および/またはステロイド、ホルモン、成長ホルモン、成長ホルモン分泌促進物質;イブタモレンメシル酸塩MK-677、イチョウ抽出物、フラボングリコシド、ギンコライド、アミノ酸栄養補助食品、ロイシン、アミノ酸前駆体、ロイシン前駆体、ピルビン酸およびピルビン酸代謝産物、ベータ-ヒドロキシ-ベータ-メチルブチレート、アルファ-ケトイソカプロン酸、分枝鎖アミノ酸、エリスロポエチン、アヘン剤、スコポラミン、インスリン、インスリン様増殖因子-1IGF1および/またはテストステロン;および/またはアルドステロン、アルファ受容体、アンジオテンシンII、ベータ受容体、カテプシンB、キマーゼ、エンドセリン受容体、真核生物開始因子2-アルファeIF2-アルファ、イミダゾリン受容体、インターフェロン、MAFbx筋萎縮F-box、MuRF1筋肉リングフィンガー1、ミオスタチン、副甲状腺ホルモン関連タンパク質PTHrPおよび/またはその受容体、タンパク質分解誘導因子PIF、RNA依存性セリン/スレオニンタンパク質キナーゼPKR、腫瘍壊死因子アルファTNF-アルファおよび/またはキサンチンオキシダーゼの阻害剤の1つ以上を投与することをさらに含む。この方法の1つの態様において、アンタゴニストはFbxo40の発現、レベルもしくは活性を減少させる。この方法の1つの態様において、Fbxo40のアンタゴニストは低分子量化合物である。この方法の1つの態様において、アンタゴニストはポリペプチドである。この方法の1つの態様において、Fbxo40のアンタゴニストはFbxo40をコードする核酸に結合するsiRNAである。この方法の1つの態様において、siRNAは平滑末端である。この方法の1つの態様において、Fbxo40のアンタゴニストはFbxo40に結合する抗体である。1つの特定の態様において、本明細書は、アンタゴニストがFbxo40の発現、レベルもしくは活性を減少させ、筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止、限定もしくは減少する、Fbxo40のアンタゴニストを含む組成物を含む。本組成物の1つの態様において、組成物は、ステロイド、ホルモン、成長ホルモン、成長ホルモン分泌促進物質;イブタモレンメシル酸塩MK-677、イチョウ抽出物、フラボングリコシド、ギンコライド、アミノ酸栄養補助食品、ロイシン、アミノ酸前駆体、ロイシン前駆体、ピルビン酸およびピルビン酸代謝産物、ベータ-ヒドロキシ-ベータ-メチルブチレート、アルファ-ケトイソカプロン酸、分枝鎖アミノ酸、エリスロポエチン、アヘン剤、スコポラミン、インスリン、インスリン様増殖因子-1IGF1、および/またはテストステロン;および/またはアルドステロン、アルファ受容体、アンジオテンシンII、ベータ受容体、カテプシンB、キマーゼ、エンドセリン受容体、真核生物開始因子2-アルファeIF2-アルファ、イミダゾリン受容体、インターフェロン、MAFbx筋萎縮F-box、MuRF1筋肉リングフィンガー1、ミオスタチン、副甲状腺ホルモン関連タンパク質PTHrPおよび/またはその受容体、タンパク質分解誘導因子PIF、RNA依存性セリン/スレオニンタンパク質キナーゼPKR、腫瘍壊死因子アルファTNF-アルファおよび/またはキサンチンオキシダーゼの阻害剤の1つ以上をさらに含む。本組成物の1つの態様において、アンタゴニストはFbxo40の発現、レベルもしくは活性を減少させる。本組成物の1つの態様において、Fbxo40のアンタゴニストは低分子量化合物である。本組成物の1つの態様において、アンタゴニストはポリペプチドである。本組成物の1つの態様において、Fbxo40のアンタゴニストはFbxo40をコードする核酸に結合するsiRNAである。本組成物の1つの態様において、siRNAは平滑末端である。本組成物の1つの態様において、Fbxo40のアンタゴニストはFbxo40に結合する抗体である。したがって、本明細書のFbxo40アンタゴニストは、筋肉疲労関連障害、限定はしないが、例えば、糖尿病、脱神経、損傷、心臓血管疾患、神経退化および種々の癌を処置するために有用であり得る。定義明細書および特許請求の範囲の明確な理解を提供するために、以下の定義を好都合に提供される。Fbxo40は、Fboxファミリーメンバーの遺伝子およびタンパク質である遺伝子またはタンパク質を意味し、これのヒトホモログはGenbankNo.NM_016298により示される。この遺伝子の動物ホモログは、数種類において知られている:マウスハツカネズミ:NM_001037321;ラットドブネズミ:XM_344023;チンパンジーチンパンジー:NC_006490.2;アカゲザルアカゲザル:NC_007859.1;ゼブラフィッシュゼブラダニオ:BX322577.11偽遺伝子またはXP_694708.3;イノシシイノシシ:EU743742;ニワトリニワトリ:XP_424000.2;およびイヌイヌ46504661Yeら2007Gene4045360Jinら2004GenesDev1825732580。Fbxo40は、タンパク質-タンパク質相互作用を介在する約50個のアミノ酸のタンパク質構造モチーフである少なくとも1つのF-boxモチーフをそれぞれ含むF-boxタンパク質のファミリーメンバーである。例えば、Baiら1996Cell8626374Kipreosら2000GenomeBiol1REVIEWS3002Craigら1999ProgBiophysMolBiol72299328およびYeら2007Gene4045360参照。Fbxo40のF-boxモチーフは、タンパク質Skp1と直接相互作用する。上記および図1に記載されているとおり、Fbxo40はIGF1シグナル伝達経路に関与する。この経路において、インスリンおよびIGF1は、それぞれインスリン受容体IRおよびIGF1受容体IGF1Rに結合する。IGF1は、両方の受容体に結合し、IGF1Rに対する非常に高い親和性を有する。該結合は、キナーゼドメインの活性化ループにおけるトリプルチロシンクラスターを自己リン酸化し、IRS1をチロシンリン酸化する受容体の内因性チロシンキナーゼ活性を活性化する。リン酸化IRS1は、クラスIAホスファチジルイノシトール3-キナーゼPI3Kのp85α調節サブユニットに結合し、PI3Kを活性化する。PI3Kは、ミオイノシトール脂質の3-OH位置のリン酸化を触媒する。PIP3ホスファチジルイノシトール-3,4,5-三リン酸塩は、PDK1によるAktの後のリン酸化および活性化で、細胞膜にPHドメイン含有分子、例えば、PDK13-ホスホイノシチド依存性タンパク質キナーゼ-1、マスターキナーゼおよびAkt重要なタンパク質キナーゼを補充する。Aktは、グリコーゲン合成酵素キナーゼ-3GSK3をリン酸化し、不活性化する。GSK3は、グリコーゲン合成酵素、NFAT活性化T細胞の核因子、転写因子およびeIF2B真核生物開始因子2に関するグアニンヌクレオチド交換因子をリン酸化し、不活性化するセリン/スレオニンタンパク質キナーゼである。活性化Aktはまた、順にp70S6Kを活性化し、PHAS-14E-BPを不活性化し、最後にタンパク質合成および筋肉肥大を引き起こすmTOR重要なセリン/スレオニンキナーゼを活性化し得る。IGF1誘導IRS1リン酸化はまた、IRS1を標的化し、SCFFbxo40によりユビキチン化し、プロテオソームにおいて破壊する。タンパク質合成および筋肉肥大においてネガティブな影響を有する因子は、PTP1bタンパク質チロシンホスファターゼ、GSK3およびPHAS-1である。他の因子、すなわちPI3K、NFAT、eIF2B、Akt、mTOR、PDK1およびp70S6Kは、タンパク質合成および筋肉肥大においてポジティブな影響を有する。この経路において、Fbxo40はIRS1をアンタゴナイズする。図2に示されているとおり、Fbxo40はIRS1に結合し、SCFFbxo40複合体に取り込む。IRS1のリン酸化Fbxo40への結合に直接関与するとまだ明らかではないが推測されており、取り囲まれているp記号はIRS1がリン酸化されることを示すことに注意する。SCFFbxo40複合体は、Skp1、Cullin1およびRbx1RING-boxタンパク質1を含む。複合体中に結合すると、IRS1はユビキチン化されUb、Rbx1による分解のためにマークする。Fbxo40の阻害は、SCFFbxo40複合体とIRS1との結合を防止し、したがって、IRS1のユビキチン化および分解を防止する。これは、筋肉成長の促進におけるIRS1の活性を持続することができる。したがって、Fbxo40の阻害は筋肉肥大を可能にする。Fbxo40と違って、複合体の他の成分Skp1、Cullin1およびRbx1はそれぞれ、多数の他の経路に関与する。このことは、Fbxo40を唯一、標的化に適したものとする。加えて、IGF1と違って、Fbxo40は、心臓および骨格筋組織においてのみ高度に発現される。Yeら2007は、Fbxo40がいくつかの組織型において発現しないことを示した。本発明者らは、Fbxo40が脂肪、膀胱、脳、頸部、大腸、食道、腎臓、肝臓、肺、卵巣、胎盤、前立腺、小腸、脾臓、精巣、胸腺、甲状腺または気管組織において発現されない図3におけるさらなるデータを示す。この図において、A.U.は、相対的な恣意的単位を示す。この高い組織特異性はまた、Fbxo40を筋肉成長の増加のための望ましい標的とさせる。筋肉および筋肉疲労関連障害Fbxo40に対するアンタゴニストは、筋肉疲労関連障害に罹患しているか、または危険性がある個体または患者の筋肉および筋肉組織に直接的または間接的に投与することができ、該アンタゴニストは、このような個体および患者における筋肉量を増加するか、または筋肉量の減少を防止もしくは遅延することができる。筋肉は、あらゆる種々の収縮組織、例えば、骨格、平滑筋および心筋、例えば、随意筋および不随意筋の両方、また遅筋および速筋繊維の両方を意味する。本明細書のアンタゴニストは、特に、心筋および骨格筋の成長を促進するか、または喪失を防止するために有用である。筋肉疲労関連障害は、筋緊張または筋肉量の喪失と関連するあらゆる状態を意味する。これらの状態は、限定はしないが、サルコペニア、悪液質、AIDS消耗性症候群、筋ジストロフィー例えば、デュシェンヌ型筋ジストロフィー症候群およびベッカー型筋ジストロフィー症候群、筋萎縮、神経筋疾患、食欲不振、運動ニューロン疾患、神経筋連結部の疾患、炎症性筋疾患、筋肉量の減少と関連する他の状態または疾患、および他の関連疾患を含む。これらの障害はまた、例えば、病気または損傷と関連する、固定化または不活発、または空の旅および宇宙旅行の硬直によって生じ得るような慢性または急性体調不良を含む。筋萎縮を含む筋肉疲労はまた、結果として、脱神経、損傷、関節固定化、強制ベッドレスト廃用性萎縮、グルココルチコイド処理、敗血症、重量減、癌および加齢となり得る。Jagoeら2001CurrOpinClinNutrMetabCare4183。加えて、重度の疼痛、脱力感、疲労および無力感をもたらすミオパチーの種々の珍しい形態炭水化物代謝の障害、脂質代謝の障害、リソソーム性ミオパチー、封入体ミオパチー、遠位型ミオパチー、自己免疫性炎症性筋疾患などがある。悪液質は、多数の病気、例えば、癌、慢性閉塞性肺疾患COPD、敗血症、慢性心不全、リウマチ性関節炎および後天性免疫不全症候群AIDSの共通特徴がある。特定の腫瘍は、タンパク質分解誘導因子PIFと呼ばれる24kDAの糖タンパク質の生産を介して悪液質を誘導する。米国特許出願第20090105123号。悪液質はまた、特発的に起こり得る。悪液質は、著しい体重減少、食欲不振、無力症および貧血により特徴付けられる。悪液質はまた、食欲喪失、脱力感、免疫機能低下および電解質不均衡の症状を有し得る。筋肉量の喪失は、多数の因子、例えば、正常な筋肉分解でタンパク質合成の速度の減少、正常な合成で分解の増加、または合成の減少および分解の増加の両方の組合せの結果であり得る。筋肉量の維持は、適当な栄養、神経投入およびホルモン状態に依存する。サルコペニアは、多くの高齢者を苦しめ、年齢と共に筋肉量の減少として現れる筋肉苦痛である。サルコペニアは、罹患率および死亡率につながる衰弱、骨折および衰退と関連する。Baumgartnerらは、若年参照グループの平均以下で2つの標準偏差未満である付属肢骨格筋量kg/高さ2とサルコペニアを定義した。加えて、患者は、アルコール依存症、高レベルの血清コレステロール、舞踏病、糖尿病、薬物中毒、運動障害、胆嚢障害、慢性心不全、高血圧、ハンチントン病、低血糖、感染症例えば、慢性感染症、例えば、肺炎、不眠症、腫瘍誘導体重減少、腎臓障害、例えば、尿毒症、肝臓機能障害、例えば、肝硬変症、骨量の減少例えば、骨粗鬆症、疾患または損傷、疼痛、パーキンソン病、肺疾患例えば、慢性閉塞性肺疾患、リウマチ性関節炎、敗血症、高レベルのトリグリセリドおよび炎症状態例えば、慢性炎症、例えば、炎症性腸疾患の1つ以上に罹患していてもよい。筋肉量の喪失の生化学のいくつかの局面は、調査されている。癌悪液質の原因物質と考えられているカケクチンは、腫瘍壊死因子TNFと同一である。サイトカイン例えば、インターロイキン、IL-1、IL-6、LIF、IFN、などがまた、カケクチンと同じ作用を有することを見出されている。したがって、特定の理論により束縛されることなく、出願人は、悪液質が多数の因子の複合作用により誘導され得ることに言及する。ヒト口腔癌腫由来のOCC-1細胞系は、癌悪液質に関与する種々の液性因子を生産する。OCC-1細胞を埋め込まれたヌードマウスは、悪液質を含む種々の症候群を発症する。Kajimuraら1996CancerChemotherPharmacol38SupplS4852Tanakaら1996JpnJClinOncol268894。ヌードマウスに埋め込まれるOCC-1細胞は、症状を複合的に引き起こすように作用する種々のサイトカイン例えば、G-CSF、IL-6、LIF、IL-11およびPTHrPを生産すると考えられている。本明細書の組成物で処置することができる筋ジストロフィーの例は、デュシェンヌ型筋ジストロフィーDMD、ベッカー型筋ジストロフィーBMD、エメリドレフュス型筋ジストロフィーEDMD、肢帯型筋ジストロフィーLGMD、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィーFSHまたはFSHDランドゥジーデジュリンとしても知られている、筋強直性ジストロフィーMMDシュタイネルト病としても知られている、眼咽頭型筋ジストロフィーOPMD、遠位型筋ジストロフィーDDおよび先天型筋ジストロフィーCMDを含む。本明細書の組成物で処置することができる運動ニューロン疾患の例は、筋萎縮性側索硬化症ALSルーゲーリック病としても知られている、乳児進行性脊髄性筋萎縮症SMA、SMA1またはWHSMA1型、ウェルドニッヒホフマンとしても知られている、中間型脊髄性筋萎縮症SMAまたはSMA2SMA2型としても知られている、若年性脊髄性筋萎縮症SMA、SMA3またはKWSMA3型、クーゲルベルクウエランダーとしても知られている、球脊髄性筋萎縮症SBMAケネディ病およびX連鎖SBMAとしても知られているおよび成人型脊髄性筋萎縮症SMAを含む。本明細書の組成物で処置することができる炎症性筋疾患の例は、皮膚筋炎PM/DM、多発性筋炎PM/DMおよび封入体筋炎IBMを含む。本明細書の組成物で処置することができる神経筋連結部の疾患の例は、重症筋無力MG、ランバート-イートン症候群LESおよび先天性筋無力症候群CMSを含む。本明細書の組成物で処置することができる内分泌腺異常によるミオパチーの例は、甲状腺機能亢進性ミオパチーHYPTMおよび甲状腺機能低下性ミオパチーHYPOTMを含む。本明細書の組成物で処置することができる末梢神経の疾患の例は、シャルコーマリーツース病CMT、デジェリンソッタス病DSおよびフリードライヒ失調症FAを含む。本明細書の組成物で処置することができるミオパチーの他の例は、先天性筋緊張症MC、先天性パラミオトニアPC、セントラルコア病CCD、ネマリンミオパチーNM、ミオチュブラーミオパチーMTMまたはMMおよび周期性四肢まひPPを含む。本明細書の組成物で処置することができる筋肉の代謝疾患の例は、ホスホリラーゼ欠損症MPDまたはPYGM、酸性マルターゼ欠損症AMD、ホスホフルクトキナーゼ欠損症PFKM、脱分枝酵素欠損症DBD、ミトコンドリア性筋障害MITO、カルニチン欠損症CD、カルニチンパルミトイルトランスフェラーゼ欠損症CPT、ホスホグリセリン酸キナーゼ欠損症PGK、ホスホグリセリン酸ムターゼ欠損症PGAMまたはPGAMM、乳酸デヒドロゲナーゼ欠損症LDHAおよびミオアデニル酸デアミナーゼ欠損症MADを含む。本明細書のFbxo40に対するアンタゴニストは、これらの障害および当分野で知られている種々の他の筋肉疲労関連障害を処置するために使用することができる。筋肉疲労関連障害に対するさらなる処置Fbxo40のアンタゴニストは、筋肉量および/または強度を増加するか、または筋肉量の喪失を防止すると知られているか、または推測されている別の薬物または処置と共投与される。このような処置は、筋肉に対する理学療法、栄養、電気刺激例えば、NMESの電気神経筋刺激因子および/または神経投入を含む。種々の薬物が、悪液質、サルコペニアおよび他の筋肉障害、例えば、ステロイド、ホルモン、例えば、成長ホルモン、成長ホルモン分泌促進物質[例えば、イブタモレンメシル酸塩MK-677]、イチョウ抽出物例えば、フラボングリコシドおよび/またはギンコライド、アミノ酸栄養補助食品例えば、ロイシン、アミノ酸前駆体例えば、ロイシン前駆体、例えば、ピルビン酸および代謝産物、例えば、ベータ-ヒドロキシ-ベータ-メチルブチレートおよびアルファ-ケトイソカプロン酸、分枝鎖アミノ酸、エリスロポエチン、アヘン剤、スコポラミン、インスリン、インスリン様増殖因子-1IGF1およびテストステロンを処置するために提供されている。Fbxo40アンタゴニストと共投与され得るさらなる薬物は、悪液質の直接的または間接的原因因子、またはさもなければ筋肉成長に関連する因子である生物学的因子生物学的薬物および/または遺伝子の阻害剤を含む。これらの因子、薬物および/または遺伝子は、アルドステロン例えば、スピロノラクトン、テストラクトン、メスピレノンおよびカンレノ酸、アルファ受容体例えば、ドキサゾシン、プラゾシン、テラゾシンおよびイプサピロン、アンジオテンシンII、ベータ受容体アセブトロール、アルプレノロール、アテノロール、ベタキソロール、ビソプロロール、カルテオロール、セリプロロール、エスモロール、ラベタロール、レボブノロール、メチプラノロール、メトプロロール、ナドロール、オクスプレノロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロパノロール、ソタロール、ネビボロール、カルベジロール、ブシンドロールおよびチモロール、カテプシンB[例えば、エポキシスクシニルペプチド、例えば、CA-074およびE-64c、ステフィンA、シスタチンC内因性阻害剤、CA074カテプシンBの特異的阻害剤およびE-64カテプシンBの天然阻害剤]、キマーゼ[例えば、アレンドロネート、アプロチニンおよびマトリクスメタロプロテイナーゼTIMPの組織阻害剤]、エンドセリン受容体、真核生物開始因子2-アルファeIF2-アルファ、イミダゾリン受容体[例えば、モキソニジン、クロニジン、リルメニジン、ペンタミジン1,5-ビス4-アミジノフェノキシペンタンおよびアルファメチルドーパ]、インターフェロン、MAFbx筋萎縮F-box、MuRF1筋肉リングフィンガー1、ミオスタチン、副甲状腺ホルモン関連タンパク質PTHrPおよび/またはその受容体、タンパク質分解誘導因子PIF、RNA依存性セリン/スレオニンタンパク質キナーゼPKR、腫瘍壊死因子アルファTNF-アルファおよびキサンチンオキシダーゼを含む。1つの特定の態様において、IGF1は、Fbxo40に対するアンタゴニストと共投与される。参照のため、例えば、米国特許出願第20090105123号参照。米国特許第6,194,402;7,232,580;7,417,038;7,442,706;および7,468,184号;および米国特許出願第20020028838;20040122097;および20090105123号;およびBodineら2001McPherronら1997ProcNatlAcadSci941245761Williams2004NEnglJMed35110301参照。本明細書の組成物はまた、健常患者における筋肉量の喪失を防止するか、または筋肉量を増加するために使用することができる。本明細書の別の態様において、組成物は、非ヒト動物に投与することができるFbxo40アンタゴニストを含む。例えば、組成物は、ニワトリ、シチメンチョウ、家畜動物例えば、ヒツジ、ブタ、ウマ、ウシなど、ペット例えば、ネコおよびイヌに与えることができるか、または成長を促進する、およびタンパク質/脂質比率を改善するために水産養殖において有用性を有し得る。組成物は、成長を刺激すること、肉生産のために飼育されている動物の飼料効率を増強すること、および枝肉品質を改善することができる。Fbxo40に対するアンタゴニストの型および有効性本明細書において使用されるFbxo40アンタゴニストなどなる用語は、Fbxo40またはその活性、レベルまたは発現を下方調節するあらゆる部分、化合物、組成物などを示す。このようなアンタゴニストは、とりわけ、低分子量化合物LMW、抗体および/または阻害核酸[例えば、低分子干渉RNAsiRNA]を含み得る。アンタゴニストは、Fbxo40活性、レベルおよび/または発現の減少、例えば、遺伝子、mRNAレベルおよび/またはタンパク質レベルを標的化することによる遺伝子のノックダウンまたはノックアウトをもたらす。本明細書において使用される下方調節するは、活性および/または発現の完全ブロックすなわち、完全阻害を含む、Fbxo40の生物学的活性および/または発現におけるあらゆる統計的に有意な減少を示す。例えば、下方調節は、Fbxo40活性および/または発現における少なくとも約10、20、30、40、50、60、70、80、90または100の減少を示すことができる。アンタゴニストは、例えば、Fbxo40を阻害もしくは破壊するか、またはFbxo40の活性の破壊もしくは阻害における他の化合物もしくは生物学的成分を手助けすることができる。本明細書において使用されるFbxo40を阻害するまたは阻害なる用語、活性および/または発現の完全ブロックを含む、Fbxo40の生物学的活性および/または発現におけるあらゆる統計的に有意な減少を示す。例えば、阻害は、Fbxo40活性および/または発現における少なくとも約10、20、30、40、50、60、70、80、90または100の減少を示すことができる。本明細書において使用される阻害するなる用語は、同様に、あらゆる他の生物学的薬物または組成物の言及について、活性および/または発現における有意な減少を示す。本明細書のFbxo40アンタゴニストは、Fbxo40発現、レベルもしくは活性を減少または下方調節する。発現は、該アンタゴニストが、遺伝子を発現することに関与する任意の既知の生化学的工程、例えば、DNAをmRNAに転写すること、mRNAをプロセッシングすること、mRNAをタンパク質に翻訳すること、およびタンパク質を翻訳後修飾することを妨げることができることを意味する。例えば、Fbxo40の発現を妨げるアンタゴニストは、遺伝子が発現することを防止することに関与する。これは、例えば、DNAまたはmRNAへ結合することにより直接的に、または、例えば、遺伝子を転写するために必要である転写因子または転写補助因子、またはFbxo40mRNAをプロセッシングするために必要である因子を妨げることにより間接的に行うことができる。レベルは、Fbxo40アンタゴニストが、Fbxo40の検出可能なレベル、例えば、Fbxo40mRNAのレベルまたはFbxo40タンパク質のレベルを妨げることができることを意味する。これらのレベルは、ノーザンブロット、サザンブロット、免疫沈降または当分野で知られている任意の種々の技術により検出することができる。活性は、Fbxo40アンタゴニストが、本明細書に記載されているか、または文献において知られているFbxo40の任意の既知の活性を妨げることができることを意味する。本明細書の1つの局面において、該アンタゴニストは、例えば、別の生物学的成分、例えば、限定はしないがSkp1またはIRS1とFbxo40との間接的または直接的相互作用例えば、結合を防止または改変することにより、Fbxo40を直接的にアンタゴナイズするあらゆる部分、化合物などである。非限定的な例として、Fbxo40アンタゴニストは、例えば、Skp1および/またはIRS1への結合からFbxo40を立体的に妨害する抗体であり得る。Fbxo40のアンタゴニストは、非限定的な例として、低分子量組成物LMW、タンパク質、抗体または低分子干渉RNAsiRNA、またはそれらの変異体、誘導体もしくは融合体であり得る。本明細書の種々の態様において、Fbxo40アンタゴニスト限定はしないが、LMW、タンパク質または抗体を含むは、Fbxo40の任意の既知または推定構造と相互作用することができる。これらのFbxo40構造は、限定はしないが、約aaアミノ酸570-624でのF-boxモチーフおよびaa54-96での亜鉛フィンガーTRAF型ドメインを含むYeら2007に記載されている。別の態様において、Fbxo40アンタゴニストは、aa145-372の領域に結合しない抗体であり;したがって、Fbxo40アンタゴニストは、aa1-143または373-709の領域に結合する抗体である。本明細書のさらなる態様において、Fbxo40アンタゴニストは、F-box配列を含む、Fboxファミリーの他のメンバーと比較して保存されているFbxo40のアミノ酸と相互作用する。このFboxモチーフに対するコンセンサス配列は、Kipreosら2000GenomeBiol1REVIEWS3002において提供される。Fbxo40のFboxモチーフは、約aa570から624にある。Yeら2007。種々の態様において、本明細書は、以下の条件を提供する。Fbxo40アンタゴニストは、1つ以上の記載されているいずれかの特定の構造または配列ではないが、Fbxo40と相互作用する例えば、物理学的に結合する;したがって、種々の態様におけるFbxo40アンタゴニストは、aa570から624のFboxモチーフではないが、Fbxo40遺伝子またはタンパク質と相互作用することができるか、または、種々の態様におけるFbxo40アンタゴニストは、aa54から96の亜鉛フィンガードメインではないがFbxo40遺伝子またはタンパク質と相互作用することができる。1つの態様において、本明細書は、Fbxo40アンタゴニストがポリクローナル抗体ではないという条件を有する。別の態様において、本明細書は、Fbxo40アンタゴニストが、Fbxo40配列CEKARESLVSTFRARPRGRHF配列番号:34に対する、または結合するポリクローナル抗体ではないという条件を有する。本明細書の1つの態様において、Fbxoアンタゴニストは、CACCTCCTGGAAAGTCCACAA配列番号:19、GTGGGAAAGTATGTTCAGCAA配列番号:20またはAGCCGTGGATGCCAAAGACTA配列番号:21の配列を標的とするsiRNAまたはRNA同等物である。Fbxo40に対するアンタゴニストの投与は、筋肉肥大、または筋力低下の防止、限定もしくは減少をもたらす。筋肉肥大、筋肉成長などは、筋肉量の増加を意味する。これは、筋繊維の数よりもむしろ、サイズの増加を含むことができる。これらの筋繊維は、心臓および骨格筋、例えば、体重負荷および非体重負荷筋肉を含むことができる。筋肉肥大は、個体筋繊維の平均断面面積を測定することを含む、当分野で知られている種々の方法により測定することができる。筋肉肥大は、インビトロ例えば、C2C12筋管またはインビボで測定することができる。筋力低下の防止、限定もしくは減少および同様の句は、Fbxo40アンタゴニストの投与によって、特定の状態、例えば、悪液質または食欲不振と通常関連する、筋力低下の量または率を防止、限定もしくは減少することを意味する。非限定的な特定の例として、Fbxo40に対するアンタゴニストは、低分子量組成物または化合物、抗体など、および/または阻害核酸またはsiRNAなどを含むことができる。Fbxo40に対するアンタゴニストとしての低分子量組成物Fbxo40のアンタゴニストは、低分子量組成物LMWまたは小分子であり得る。1つの態様において、本明細書の方法において使用されるFbxo40アンタゴニストは小分子である。本明細書において使用される小分子なる用語は、当該技術分野の用語であり、約7500、7000、6000、5000、4000、3000、2500、2000、1500、1000、900、800、700、600、500、400、300、200または100分子量未満であり、Fbxo40活性を阻害する分子を含む。小分子の例は、限定はしないが、低分子有機分子例えば、Caneら1998Science28263、および天然産物抽出物ライブラリーを含む。別の態様において、化合物は、低分子非ペプチド有機化合物である。抗体のように、これらの小分子阻害剤は、Fbxo40の活性を間接的または直接的に阻害する。本明細書の別の態様において、Fbxo40アンタゴニストは、タンパク質である。1つの特定の態様において、本明細書は、個体における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止する能力について組成物をスクリーニングする方法であって、細胞におけるFbxo40のレベルもしくは活性を確認する、該細胞を組成物で処理する、および再び該細胞におけるFbxo40のレベルもしくは活性を確認することを含み、Fbxo40のレベルもしくは活性を低下する該組成物の能力は、個体における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止する能力と相関する方法を含む。Fbxo40を阻害するLMWを得るために、化合物の多数の変異体を含む化合物ライブラリーを創造することができる。化合物ライブラリーは、Fbxo40の生物学的活性例えば、IRS1またはSkp1への結合の特定の阻害について試験される。選択される化合物は、さらなるランダム化および選択のための基礎として使用し、より高い親和性または阻害活性の誘導体を生産することができる。LMWライブラリーを開発する方法および標的タンパク質への結合についてそれらをスクリーニングする方法は、当分野で知られている。例えば、米国特許第7,377,894号は、最大10,000個の化合物のライブラリーを構築するための方法を記載しており、これらの大多数は好ましくはわずか350グラム/モルである。この技術は、室温で少なくとも約1mMで重水への溶解度を有する化合物を選択することを含み、フロー核磁気共鳴NMR分光法および勾配分光法WaterLOGSY方法での水リガンド観察を使用する。この方法は、NMR分光法技術に基づいて標的分子例えば、タンパク質に結合する化合物を同定することを含む。このような方法は、一般的に、例えば、標的分子の添加時の試験化合物の共鳴強度における変化好ましくは、強度の有意な減少をモニタリングすることを含む、緩和編集技術の使用を含む。好ましくは、緩和編集技術は、一次元、さらに好ましくは、一次元1HNMR技術である。あるいは、このような方法は、WaterLOGSYの使用を含むことができる。これは、結合相互作用を検出するためにバルク水からの磁化の移動を含む。WaterLOGSY技術を使用して、結合化合物は、それらの水リガンド核オーバーハウザー効果NOEの異符号により、非結合化合物と区別される。化合物ライブラリーを開発するための他の技術は知られている。米国特許第7,367,933号は、少なくとも1つの植物種から少なくとも1つの抽出物を抽出することを含む化合物ライブラリーを生産する方法を記載している。任意のこれらの方法または当分野で知られている他の方法は、Fbxo40に対する結合およびアンタゴナイズについてスクリーニングすることができるLMWライブラリーを生産するために使用することができる。標的この場合、Fbxo40への結合について化合物ライブラリーをスクリーニングする方法は、当分野で知られている。米国特許第7,238,490号は、分子間結合が、シグナルの即時産生をもたらすパラトープの形成により検出することができるという分子間相互作用および状態のリアルタイム検出に関する。相互作用について試験される物質はデミトープに結合し、該デミトープは、結合したとき、該シグナルを提供するレポーターに結合するパラトープの成分である。該方法において測定される既知の相互作用はまた、相互作用を妨げる化合物についてスクリーニングするために使用することができる。個々の相互作用についての試験に加えて、ライブラリーと化合物との相互作用またはライブラリータイムライブラリー相互作用をまた、決定することができ、潜在的に干渉する物質の効果を評価することができる。化合物ライブラリーを創造およびスクリーニングするための種々の他の方法は、とりわけ、米国特許第6,764,858;6,723,235;6,720,190;6,677,160;6,656,739;6,649,415;6,630,835;6,627,453;6,617,114;6,613,575;6,607,921;6,602,685;6,448,794;6,421,612;6,395,169;6,387,257;6,355,163;6,214,561;6,187,923;および6,054,047号に記載されている。LMWのライブラリーを創造およびスクリーニングするための任意のこれらの方法または当業者に知られている任意の他の方法は、Fbxo40に結合し、アンタゴナイズする小分子を得るために使用することができる。Fbxo40に対するアンタゴニストとしての抗体などFbxo40のアンタゴニストはまた、抗-Fbxo40抗体、抗体様分子、および/またはFbxo40に特異的および/または選択的に結合する分子、または、それらの変異体、誘導体または免疫抱合体などであり得る。本明細書の1つの態様において、本明細書に記載されている治療および診断方法は、直接的または間接的に結合し、Skp1-Cullin1-Rbx1複合体へのFbxo40の結合を中断することによりFbxo40活性を阻害し、および/またはFbxo40発現を下方調節する抗体または免疫グロブリン中和抗体を使用する。抗体または免疫グロブリンなどなる用語は、あらゆる全抗体、あらゆる抗原結合部分、あらゆる1つ以上のCDR領域、フラグメント、またはそれらの一本鎖、および抗体の結合親和性および抗原結合部分を模倣する分子、ならびにそれらの変異体および誘導体を含む。抗体は、ジスルフィド結合により連結された2つの重H鎖および2つの軽L鎖を含む。それぞれの重鎖は、重鎖可変領域VHおよび重鎖定常領域を含み、後者は3つのドメイン、CH1、CH2およびCH3を含む。それぞれの軽鎖は、軽鎖可変領域VLおよび1つのドメインCLを含む軽鎖定常領域を含む。VHおよびVL領域は、より保存されている領域[フレームワーク領域FR]で分散された超可変性[相補性決定領域CDR]の領域にさらに分けることができる。それぞれのVHおよびVLは、3つのCDRおよび4つのFRからなる。重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含む。定常領域は、宿主組織または因子、例えば、免疫系の細胞例えば、エフェクター細胞および古典的補体系の第一成分Clqへの抗体の結合を介在し得る。本明細書の抗Fbxo40抗体は、限定はしないが、Fbxo40に結合する抗体のあらゆる誘導体もしくは変異体、抗体様分子、抗体の抗原結合部分、あらゆるモノクローナル、ポリクローナル、組換え、キメラ、ヒト、非ヒト、ヒト化、二重特異性、二機能性、アイソタイプ-スイッチ、非アイソタイプ-スイッチ抗体またはそれらの変異体もしくは誘導体を含む。Fbxo40に対する抗体は好ましくはモノクローナルである。本明細書の抗Fbxo40抗体はまた、Fbxo40に結合し、アンタゴナイズするラクダナノボディ、ダイアボディ、一本鎖ダイアボディおよびジ-ダイアボディを含む。本明細書はまた、Fbxo40に非競合的に結合することができる2つ以上の抗体、変異体または抗体様分子のセットを含む。好ましくは、分子のセットまたは組合せの親和性は、構成分子のいずれかよりも高い。本明細書において使用される抗体の抗原結合部分なる用語は、抗原例えば、Fbxo40に特異的に結合する能力を保持する抗体のフラグメントを示す。結合フラグメントの例は、iFabフラグメント、VL、VH、CLおよびCH1ドメインからなる一価のフラグメント、iiFab’2フラグメント、ヒンジ領域でジスルフィド架橋により連結される2つのFabフラグメントを含む二価フラグメント、iiiVHおよびCH1ドメインからなるFdフラグメント、iv抗体の単一のアームのVLおよびVHドメインからなるFvフラグメント、vVHおよびVLドメインを含むdAb、viVHドメインからなるdAbフラグメント[Wardら1989Nature341544546]、viiVHまたはVLドメインからなるdAb、およびviii単離された相補性決定領域CDRまたはix所望により合成リンカーにより結合され得る2つ以上の単離されたCDRの組合せを含む。これらの組成物はまた、とりわけ、抗体様分子なる用語により包含される。Fvフラグメントの2つのドメインであるVLおよびVHは、別個の遺伝子によってコードされるが、それらは組換え方法を使用して、合成リンカーにより結合し、一本鎖FvscFvとして知られる一価の単一のタンパク質鎖を創造することができる。Birdら1988Science242423426およびHustonら1988ProcNatlAcadSciUSA8558795883。抗原結合部分は組換えDNA技術またはインタクトな免疫グロブリンの酵素的もしくは化学的開裂により生産することができる。本明細書において使用されるモノクローナル抗体なる用語は、例えば、Fbxo40に結合し、アンタゴナイズする、実質的に同種の抗体の集団からの抗体を示す。モノクローナル抗体は、例えば、種々の方法を使用して、製造することができる、例えば、Kohlerら1975Nature256495Lonbergら1994Nature368856859米国特許第4816567号Clacksonら1991Nature352624628およびMarksら1991JMolBiol222581597。異なるエピトープに対する異なる抗体を含むポリクローナル抗体製造物と対照的に、それぞれのモノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定因子に指向する。したがって、モノクローナル抗体は高度に特異的であり、単一の抗原部位またはエピトープに指向する。エピトープまたは抗原決定因子なる用語は、抗体が特異的に結合する抗原、例えば、Fbxo40上の部位を示す。エピトープは、連続アミノ酸またはタンパク質の三次折り畳みによって並列される非連続アミノ酸の両方から形成することができる。連続アミノ酸から形成されるエピトープは、一般的に変性溶媒へ暴露されても保持されるが、三次折り畳みによって形成されるエピトープは、一般的に、変性溶媒での処理において喪失する。エピトープは、一般的に、ユニークな空間配座における少なくとも約3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14または15個のアミノ酸を含む。エピトープの空間配座を決定する方法は、当該分野の技術および本明細書に記載されているもの、例えば、X線結晶学および二次元核磁気共鳴を含む。例えば、EpitopeMappingProtocolsinMethodsinMolecularBiologyVol66GEMorrisEd1996参照。モノクローナル抗体は、キメラ抗体、ヒト抗体およびヒト化抗体を含み、天然に生じ得るか、または組換え的に生産され得る。組換え抗体なる用語は、組換え方法により製造されるか、発現されるか、創造されるか、または単離される抗体、例えば、a免疫グロブリン遺伝子例えば、ヒト遺伝子に対してトランスジェニックまたはトランスクロモソーマルtranschromosomalである動物例えば、マウスまたはそれから製造されるハイブリドーマから単離される抗体、b抗体を発現するように形質転換された宿主細胞、例えば、トランスフェクトーマから単離される抗体、cファージディスプレイを使用して組換えコンビナトリアル抗体ライブラリー例えば、ヒト抗体配列を含むから単離される抗体、およびd免疫グロブリン遺伝子配列例えば、ヒト遺伝子の他のDNA配列へのスプライシングを含む他の任意の方法により製造されるか、発現されるか、創造されるか、または単離される抗体を示す。このような組換え抗体は、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域および定常領域を有していてもよい。このような組換えヒト抗体は、インビトロ変異誘発に付すことができ、したがって、組換え抗体のVHおよびVL領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖細胞系列配列に由来するが、ヒト抗体生殖細胞系列レパートリー内にインビボで天然には存在しなくてもよい配列である。キメラ抗体なる用語は、可変領域が第1の種に由来し、定常領域が第2の種に由来する免疫グロブリンまたは抗体を示す。本明細書において使用されるヒト抗体なる用語は、フレームワークおよびCDRの両方がヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する抗体を含むことを意図する。KabatらSequencesofproteinsofImmunologicalInterestFifthEditionUSDepartmentofHealthandHumanServicesNIHPublicationNo913242。CDRおよびフレームワークコンセンサス配列はまた、ChothiaらJMolBiol196901917およびMacCallumらJMolBiol262732745およびChothiaら1998JMolBiol278457479に記載されている。好ましくはKabatまたはChothiaであるが、これらのいずれかを、特定の抗体可変領域内のCDR配列を決定するために使用することができる。ヒト抗体は、野生型ヒト生殖細胞系列配列の変異体を含むことができる。ヒト化抗体なる用語は、定常領域と共に、実質的にヒト抗体に由来する可変領域および実質的に非ヒト抗体に由来するCDRを有する少なくとも1つのヒト化軽鎖または重鎖を含む抗体を示す。ヒト化可変領域なる用語は、実質的にヒト抗体に由来する可変フレームワーク領域および実質的に非ヒト抗体に由来するCDRを含む可変領域を示す。二重特異的または二重機能性抗体なる用語は、とりわけ、2つの異なる重鎖/軽鎖対および2つの異なる結合部位を有する人工ハイブリッド抗体を含む。Songsivilaiら1990ClinExpImmunol79315321Kostelnyら1992JImmunol14815471553。本明細書において使用される異種抗体は、トランスジェニック非ヒト生物体または植物が生産するかかる抗体に関して定義される。本明細書の抗体は、とりわけ、アイソタイプ-スイッチおよび非-アイソタイプ-スイッチ抗体を含む。本明細書において使用されるアイソタイプは、重鎖定常領域遺伝子によってコードされる抗体クラス例えば、IgMまたはIgGなどを示す。1つの態様において、抗体またはその抗原結合部分は、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA1、IgA2、IgAsec、IgDまたはIgE抗体アイソタイプから選択されるアイソタイプのものである。本明細書において使用されるアイソタイプスイッチングは、抗体のクラスまたはアイソタイプが、あるIgクラスから他のIgクラスの一つに変化することによる現象を示す。本明細書において使用される非スイッチアイソタイプは、アイソタイプスイッチングが起こらないときに生産される重鎖のアイソタイプクラスを示す。非スイッチアイソタイプをコードするCH遺伝子は、一般的に、機能的に再配列されたVDJ遺伝子からすぐ下流の最初のCH遺伝子である。本明細書の抗Fbxo40抗体はまた、Fbxo40に結合し、アンタゴナイズするラクダナノボディ、ダイアボディ、一本鎖ダイアボディおよびジ-ダイアボディを含む。新世界メンバー、例えば、ラマ種アルパカ、ラマおよびビクーナを含むラクダおよびヒトコブラクダフタコブラクダおよびヒトコブラクダファミリーメンバーから得られる抗体タンパク質は、特徴付けられている。これらに哺乳動物において見出される特定のIgG抗体は軽鎖を欠き、したがって他の動物由来の抗体と構造的に異なっている。PCT公開WO94/04678。ラクダ抗体の小さい単一の可変ドメインVHHは、ラクダナノボディとして知られる高親和性低分子量抗体由来タンパク質を生じる。米国特許第5,759,808号;Stijlemansら2004JBiolChem27912561261Dumoulinら2003Nature424783788Pleschbergerら2003BioconjugateChem14440448CortezRetamozoら2002IntJCancer8945662およびLauwereysら1998EMBOJ1735123520。ラクダ抗体および抗体フラグメントの人工ライブラリーは、利用できる、例えば、AblynxGhentBelgiumから市販されている。ナノボディは、ヒト化でき、ラクダ抗体の本来の低い抗原性をさらに低下させることができる。ラクダナノボディは、ヒトIgG分子の約10分の1の分子量を有し、わずか数ナノメートルの直径を有する。ラクダナノボディは、大型抗体タンパク質には機能的に見えない抗原部位に結合することができる。ラクダナノボディは、熱安定であり、極端なpHおよびタンパク質分解消化に対して安定であり、乏しい抗原性である。それらは、循環系から組織へ、血液脳関門を通過するときでさえ容易に移動し、神経組織に影響する障害を処置することができる。ナノボディはさらに、血液脳関門を通過する薬物移動を促進することができる。2004年8月19日に公開された米国特許出願第20040161738号。本明細書のFbxo40に特異的および/または選択的に結合する抗体、抗体様分子および他の分子はまた、とりわけ、ダイアボディ、一本鎖ダイアボディscDb、抗体の機能特性を示すが、それらのフレームワークおよび抗原結合部分は他のポリペプチド例えば、フィブロネクチンおよびフィブロネクチン様分子に由来する分子、ならびに任意の、および全ての抗体フラグメントおよび模擬物、例えば、限定はしないが、例えば、ドメイン抗体、Nanobodies、UniBodies、Adnectins、アプタマー、Affibodies、DARPins、Anticalins、Avimers、Versabodiesおよび/またはSMIPsTMSmallModularImmunoPharmaceuticalsTrubionPharmaceuticalsを含む。ダイアボディは、VHおよびVLドメインが同じ鎖の2つのドメイン間で対にするには非常に短いリンカーにより連結される単一のポリペプチド鎖で発現される二価の二重特異性分子である。VHおよびVLドメインは、別の鎖の相補的ドメインと対になり、それにより2つの抗原結合部位を創造する。Holligerら1993ProcNatlAcadSciUSA9064446448Poljakら1994Structure211211123。一本鎖ダイアボディscDbは、約15アミノ酸残基のリンカーで、2つのダイアボディ形成ポリペプチド鎖を連結することにより生産される。Holligerら1997CancerImmunolImmunother4512830Wuら1996Immunotechnology22136Pluckthunら1997Immunotech383105Ridgwayら1996ProteinEng961721。ダイアボディは、Fcと融合させ、ジ-ダイアボディを生成することができる。Luら2004JBiolChem279285665。本明細書はさらに、抗体の機能特性を示すが、他のポリペプチド由来のフレームワークおよび抗原結合部分に由来するFbxo40結合分子を提供する。これらの結合分子の抗原結合ドメインは、定方向進化プロセスを介して産生することができる。米国特許第7,115,396号。抗体の可変ドメインと同様の全体の折り畳み免疫グロブリン様折り畳みを有する分子は、適当なスカフォールドタンパク質である。抗原結合分子を導くために適当なスカフォールドタンパク質は、フィブロネクチンまたはフィブロネクチンダイマー、テネイシン、N-カドヘリン、E-カドヘリン、ICAM、タイチン、GCSF-受容体、サイトカイン受容体、グリコシダーゼ阻害剤、抗生物質色素タンパク質、ミエリン膜接着分子P0、CD8、CD4、CD2、クラスIMHC、T細胞抗原受容体、CD1、C2およびVCAM-1のI-セットドメイン、ミオシン結合タンパク質CのI-セット免疫グロブリンドメイン、ミオシン結合タンパク質HのI-セット免疫グロブリンドメイン、テロキンのI-セット免疫グロブリンドメイン、NCAM、トウィッチン、ニューログリアン、成長ホルモン受容体、エリスロポエチン受容体、プロラクチン受容体、インターフェロン-ガンマ受容体、β-ガラクトシダーゼ/グルクロニダーゼ、β-グルクロニダーゼ、トランスグルタミナーゼ、T細胞抗原受容体、スーパーオキシドジスムターゼ、組織因子ドメイン、シトクロムF、緑色蛍光タンパク質、GroELおよびソーマチンを含む。Fbxo40抗体、Fbxo40抗体様分子、Fbxo40に特異的および/または選択的に結合する分子なる用語などはまた、広範に、限定はしないが、抗体フラグメントおよび抗体模擬物を含む。多種多様の抗体フラグメントおよび抗体模擬物技術は知られている。Fbxo40抗体、Fbxo40抗体様分子およびFbxo40に特異的および/または選択的に結合する分子なる用語は、広範に、任意の、および全ての抗体フラグメントおよび模擬物、限定はしないが、例えば、ドメイン抗体、Nanobodies、UniBodies、Adnectins、アプタマー、Affibodies、DARPins、Anticalins、AvimersおよびVersabodiesを含むことを意味する。これらの分子のいくつかは、GillandDamle17653658に概説されている。ドメイン抗体dAbは、ヒト抗体の重VH鎖または軽VL鎖のいずれかの可変領域に対応する抗体の最小機能性結合ユニットである。Domantisは、完全ヒトVHおよびVLdAbの一連の大型のおよび高度に機能性のライブラリーを開発しており、これらのライブラリーを治療標的に特異的であるdAbを選択するために使用する。米国特許第6,291,158;6,582,915;6,593,081;6,172,197;6,696,245号;米国シリアスナンバー2004/0110941;欧州特許出願第1433846号および欧州特許第03686840616640号;WO05/035572、WO04/101790、WO04/081026、WO04/058821、WO04/003019およびWO03/002609。Nanobodiesは、天然重鎖抗体のユニークな構造および機能特性を含む抗体由来治療タンパク質である。これらの重鎖抗体は、単一の可変ドメインVHHおよび2つの定常ドメインCH2およびCH3を含む。WO04/041867;米国6,765,087;WO06/079372。UniBodiesは、IgG4抗体のヒンジ領域の除去に基づく抗体フラグメント技術である。この欠失は、従来のIgG4抗体のサイズの本質的に半分であり、一価の結合領域を有する分子を生産する。WO2007/059782。Adnectin分子は、フィブロネクチンタンパク質の1つ以上のドメインに由来する操作された結合タンパク質である。WardらcallutheraneduAcademicProgramsDepartmentsBioDevommfibrofibrohtmPankovandYamadaJCellSci11538613HohenesterandEngel21115128、およびLucenaらInvestClin48249262。Adnectin分子は、2つのベータシート間に分配された多数のベータストランドからなる天然タンパク質を改変することによるフィブロネクチンIII型ドメインに由来し得る。本明細書はまた、広範に、Fbxo40に特異的および/または選択的に結合するフィブロネクチンまたはフィブロネクチン様分子を含む。フィブロネクチンは、例えば、1Fn3、2Fn3、3Fn3などを示し得る多数のIII型ドメインを含み得る。10Fn3ドメインはインテグリン結合モチーフを含み、さらに、ベータストランドと連結する3つのループを含む。これらのループは、IgG重鎖の抗原結合ループに対応すると考えられ、それらは、Fbxo40に特異的に結合するように以下で議論されている方法により改変され得る。米国特許出願第20070082365号;Szostakら、米国特許出願第09/007,005および09/247,190号;Szostakら、WO989/31700;およびRobertsSzostak941229712302;Lohse、米国特許出願第60/110,549号、米国特許出願第09/459,190号およびWO00/32823;米国特許第7,115,396;6,818,418;6,537,749;6,660,473;7,195,880;6,416,950;6,214,553;6623926;6,312,927;6,602,685;6,518,018;6,207,446;6,258,558;6,436,665;6,281,344;7,270,950;6,951,725;6,846,655;7,078,197;6,429,300;7,125,669;6,537,749;6,660,473号;および米国特許出願第20070082365;20050255548;20050038229;20030143616;20020182597;20020177158;20040086980;20040253612;20030022236;20030013160;20030027194;20030013110;20040259155;20020182687;20060270604;20060246059;20030100004;20030143616および20020182597号。フィブロネクチンIII型ドメイン、例えば、10Fn3における多様性の産生は、後の選択工程は、当分野で知られている他の方法、例えば、ファージディスプレイ、リボソームディスプレイまたは酵母表面ディスプレイ、例えば、LipovsekらJournalofMolecularBiology36810241041SergeevaらAdvDrugDelivRev5816221654PettyらTrendsBiotechnol25715RotheらExpertOpinBiolTher6177187およびHoogenboomNatBiotechnol2311051116を使用して成し遂げられ得る。上記方法を介して抗体模倣物を産生するために使用することができるさらなる分子は、限定はしないが、ヒトフィブロネクチン分子1Fn3-9Fn3および11Fn3-17Fn3、ならびに非ヒト動物および原核生物由来の関連Fn3分子モジュール、および10Fn3に対する配列相同性を有する他のタンパク質由来のFn3モジュール、例えば、テネイシンおよびウンデュリンを含む。免疫グロブリン様折り畳みを有する他の非抗体タンパク質は、N-カドヘリン、ICAM-2、チチン、GCSF受容体、サイトカイン受容体、グリコシダーゼ阻害剤、E-カドヘリンおよび抗生物質色素タンパク質を含む。関連構造を有するさらなるドメインは、ミエリン膜接着分子P0、CD8、CD4、CD2、クラスIMHC、T細胞抗原受容体、CD1、C2およびVCAM-1のI-セットドメイン、ミオシン結合タンパク質CのI-セット免疫グロブリン折り畳み、ミオシン結合タンパク質HのI-セット免疫グロブリン折り畳み、テロキンのI-セット免疫グロブリン折り畳み、テリキン、NCAM、トウィッチン、ニューログリアン、成長ホルモン受容体、エリスロポエチン受容体、プロラクチン受容体、GC-SF受容体、インターフェロン-ガンマ受容体、ベータ-ガラクトシダーゼ/グルクロニダーゼ、ベータ-グルクロニダーゼおよびトランスグルタミナーゼに由来し得る。あるいは、1つ以上の免疫グロブリン様折り畳みを含む任意の他のタンパク質が、アドネクチン様結合部分を創造するために利用され得る。このようなタンパク質は、例えば、プログラムSCOPを使用して同定され得る。MurzinらJMolBiol247536LoConteらNucleicAcidsRes25257。アプタマーは、特異的標的に結合する小分子ヌクレオチドポリマーである。アプタマーは、一本または二本鎖核酸分子DNAまたはRNAであり得る。アプタマーは、しばしば、標的に対する親和性を決定する複合体三次元構造を形成する。Ellingtonら1990Nature34681822Schneiderら1992JMolBiol2288629Klussmann。アプタマーハンドブック:FunctionalOligonucleotidesandTheirApplicationsISBN9783527310593Ulrichら2006CombChemHighThroughputScreen961932Cerchiaら2007MethodsMolBiol361187200Iresonら2006MolCancerTher20065295762;米国特許第5582981;5840867;5756291;6261783;6458559;5792613;6111095号;および米国特許出願第11/482,671;11/102,428;11/291,610;および10/627,543号。SELEX方法はアプタマーを産生するために使用することができる。Bugautら2006440828Stoltenburgら2007BiomolEng200724381403およびGopinath2007AnalBioanalChem200738717182。本明細書のアプタマーはまた、ヌクレオチドの代わりにペプチドから作られたアプタマー分子を含む。BainesandColas2006DrugDiscovToday1133441およびBickleら2006NatProtoc1106691。Affibody分子は、ブドウ球菌タンパク質AのIgG-結合ドメインに由来する58-アミノ酸残基タンパク質ドメインに基づく。このドメインは、コンビナトリアルファージミドライブラリーの構築のためのスカフォールドとして使用されており、これから、所望の分子を標的化する変異体を、ファージディスプレイ技術を使用して選択することができるNordらNatBiotechnol1997157727RonmarkらEurJBiochem2002269264755。単一の構造および小サイズのAffibody分子は、多数の適用のために、例えば、検出試薬としてRonmarkらJImmunolMethods2002261199211、および受容体相互作用を阻害するためにSandstormらProteinEng2003166917適当とされる。米国特許第5,831,012号も参照。DARPins設計されたアンキリン反復タンパク質は、非抗体ポリペプチドの結合能力利用するために開発された抗体模擬物DRP設計された反復タンパク質技術の1つの例である。反復タンパク質、例えば、アンキリンまたはロイシンリッチ反復タンパク質は、可変およびモジュール標的結合表面を提示する伸長ドメインを形成するように、互いに積み重ねる反復構造単位を有する普遍的結合分子である。多様な結合特異性を有するポリペプチドのコンビナトリアルライブラリーを産生することができる。米国特許出願公開第2004/0132028号および国際特許出願公開WO02/20565。Anticalinは、ヒト組織および体液において発現される低分子量タンパク質ファミリーであるリポカリン由来の抗体模擬物である。リポカリンは、化学的に感受性または不溶性化合物の生理学的輸送および保存と関連する。リポカリンをクローンし、それらのループを、Anticalinを創造するために操作に付す。構造的に種々のAnticalinのライブラリーが産生されており、Anticalinディスプレイは、結合機能の選択およびスクリーニング、後の可溶性タンパク質の発現および生産を可能にする。Anticalinsはまた、デュアル標的化タンパク質、いわゆるDuocalinとして設定することができる。Duocalinは、1つのモノマータンパク質における2つの別々の治療標的に結合する。米国特許第7,250,297号および国際特許出願公開WO99/16873。本明細書に対して有用な別の抗体模擬物技術はAvimersである。Avimersは、インビトロエキソンシャッフリングおよびファージディスプレイによるヒト細胞外受容体ドメインの大型ファミリーから開発され、結合および阻害特性を有するマルチドメインタンパク質を産生する。米国特許出願公開第2006/0286603、2006/0234299、2006/0223114、2006/0177831、2006/0008844、2005/0221384、2005/0164301、2005/0089932、2005/0053973、2005/0048512、2004/0175756号。Versabodiesは、本明細書の文脈において使用され得る別の抗体模擬物技術である。Versabodiesは、高いジスルフィド密度スカフォールドを形成する>15のシステインを有する3-5kDaの小分子タンパク質であり、典型的なタンパク質が有する疎水性コアを置換する。米国特許出願公開第2007/0191272号。SMIPsTMSmallModularImmunoPharmaceuticalsTrubionPharmaceuticalsは、標的結合、エフェクター機能、インビボ半減期および発現レベルを維持および最適化するために操作される。ZhaoらBlood110256977;および米国特許出願第20050238646;20050202534;20050202028;20050202023;20050202012;20050186216;20050180970;および20050175614号。本明細書のFbxo40抗体またはFbxo40に特異的および/または選択的に結合する抗体様分子もしくは分子、またはそれらの変異体もしくは誘導体などはまた、Fbxo40に対する特異的結合、および/またはFbxo40抗体の同様のKD、Koffおよび/またはEC50を保持する。この変異体、誘導体または抗体様分子は、所望により、同じ、または異なるグリコシル化パターンを有するか、または天然もしくは再配列されていてもよく、修飾、保存または非保存的置換を有することができ、および/またはFbxo40抗体のコンセンサスフレームワークを保持することができる。したがって、本明細書において使用されるFbxo40に結合するFbxo40に対する抗体、Fbxo40抗体、抗体様分子などなる用語は、すべて、Fbxo40に特異的に結合し、特異的および/または選択的に結合する種々の型の抗体、抗体フラグメント、変異体および誘導体、抗体様分子および分子を示す。好ましくは、これらの組成物はまた、Fbxo40の機能、例えば、本明細書に記載されている機能を阻害する。本明細書において使用される特異的結合、選択的結合などの用語は、抗体または他の分子が、他の抗原およびエピトープではなく特定の抗原またはエピトープ、例えば、他の物質ではなくFbxo40ただし、抗体または分子がFbxo40に結合しない場合を除くに対するかなりの親和性を示すことを意味する。かなりのまたは特定の特異的結合は、少なくとも106、107、108、109M-1、または1010M-1の親和性での結合を含む。107M-1より良い、好ましくは108M-1より良い親和性が好ましい。有意な交差反応性を示さない抗体は、望ましくない物質例えば、望ましくないタンパク質状物質とあまり結合しないものである。特異的または選択的結合は、当該技術分野において認識されている任意の方法、例えば、Scatchard分析および/または競合的結合アッセイにしたがって決定することができる。本明細書において使用されるKDなる用語は、特定の抗体抗原相互作用の解離平衡定数または抗原に対する抗体の親和性を示すことを意図する。1つの態様において、本明細書の抗体は、表面プラズモン共鳴アッセイまたは細胞結合アッセイを使用して測定するとき、50nMまたはそれより良い例えば、40nMまたは30nMまたは20nMまたは10nM以下親和性KDで抗原に結合する。本明細書において使用されるKoffなる用語は、抗体/抗原複合体から抗体の解離についてのオフ速度定数を示すことを意図する。本明細書において使用されるEC50なる用語は、最大応答の50、すなわち、最大応答とベースラインの中間である、インビトロまたはインビボアッセイのいずれかにおいて応答を誘導する抗体の濃度を示す。したがって、本明細書のFbxo40へ特異的および/または選択的に結合する抗体、抗体様分子および他の分子は、限定はしないが、とりわけ、本明細書に記載されているあらゆる型の分子、および当分野で知られている特異的に結合する種々の他の分子を含む。これらの分子は、限定はしないが、本明細書に記載されているものを含む当分野で知られている任意の技術を使用して産生することができる。これらの分子を産生するための技術は、代替ポリペプチドベースの技術、例えば、QuiらNatureBiotechnology25921929に記載されている相補的決定領域の融合、ならびに核酸ベースの技術、例えば、米国特許第5,789,157、5,864,026、5,712,375、5,763,566、6,013,443、6,376,474、6,613,526、6,114,120、6,261,774および6,387,620号に記載されているRNAアプタマー技術を含む。非抗体結合分子を産生するため、クローンのライブラリーは、抗原に結合するスカフォールドタンパク質例えば、フィブロネクチンまたはフィブロネクチン様分子の配列をランダム化して創造することができる。ライブラリークローンは、抗原に対する特異的結合および他の機能例えば、Fbxo40の生物学的活性の阻害について試験する。選択されるクローンは、さらなるランダム化および選択の基礎として使用して、抗原に対するより高い親和性の誘導体を生産することができる。高親和性結合分子はまた、例えば、スカフォールドとしてフィブロネクチンIIIの第10モジュール10Fn3またはFn10を使用して産生することができる。ライブラリーは、10FN3の3つのCDR様ループのそれぞれについて残基23-29、52-55および78-87で構築される。米国特許第6,818,418および7,115,396号;RobertsandSzostak1997ProcNatlAcadSciUSA9412297;米国特許第6,261,804号;米国特許第6,258,558号;およびSzostakらWO98/31700。非抗体結合分子は、標的に対する親和性を増加させるために、二量体または多量体として生産することができる。例えば、抗原結合ドメインは、Fc-Fc二量体を形成する抗体の定常領域Fcとの融合体として発現される。米国特許第7,115,396号。同じまたは重複エピトープを認識する抗体は、日常的な技術、例えば、免疫測定法、例えば、競合的結合アッセイを使用して同定することができる。多くのタイプの競合的結合アッセイが知られている、例えば:固相直接または間接ラジオイムノアッセイRIA、固相直接または間接酵素免疫測定法EIA、サンドイッチ競合アッセイStahliらMethodsinEnzymology9242参照;固相直接ビオチン-アビジンEIAseeKirklandらJImmunol1373614;固相直接標識化アッセイ、固相直接標識化サンドイッチアッセイHarlowandLaneAntibodiesALaboratoryManualColdSpringHarborPress参照;I-125ラベルを使用する固相直接ラベルRIAMorelらMolImmunol257参照;固相直接ビオチン-アビジンEIACheungらVirology176546;および直接標識化RIAMoldenhauerらScandJImmunol3277。Fbxo40に特異的に結合する抗体、抗体様分子および他の結合分子もまた、修飾することができる。これらの修飾は、とりわけ、天然において見出される分子の状態天然状態からの変化、アミノ酸配列のグリコシル化パターン、再配列、修飾とりわけ、保存および非保存的置換を含むにおける変化、CDRグラフティング、親和性成熟、Fc領域またはヒンジ領域の修飾、および/またはペグ化または他の翻訳後修飾における変化などを含む。対象に適用して適用されるとき、本明細書において使用される天然なる用語は、ある対象が天然に見出すことができることを示す。例えば、生物体ウイルスを含むに存在し、天然の供給源から単離でき、そして研究室で人によって意図的に修飾されていないポリペプチドまたはポリヌクレオチド配列は、天然である。本明細書において使用されるグリコシル化パターンは、タンパク質、さらに具体的には、免疫グロブリンタンパク質と共有結合する炭水化物単位のパターンと定義される。本明細書において使用される再配列なる用語は、Vセグメントが、完全なVHまたはVLドメインをそれぞれ本質的にコードする配座においてD-JまたはJセグメントと密接に隣接した位置にある、重鎖または軽鎖免疫グロブリン座の配置を示す。再配列された免疫グロブリン遺伝子座は、生殖細胞系列DNAとの比較により同定することができる。再配列された座は、少なくとも1つの再結合されたヘプタマー/ノナマーホモロジー要素を有する。Vセグメントについて、本明細書において使用される再配列されていないまたは生殖細胞系列配置なる用語は、Vセグメントが、DまたはJセグメントに密接に隣接するように再結合されない配置を示す。本明細書において使用される修飾するまたは修飾なる用語は、抗体中の1つ以上のアミノ酸を変化することを示すことを意図する。変化は、1個以上の位置でのアミノ酸の付加、置換または欠失により生産することができる。Fbxo40に特異的および/または選択的に結合する抗体、抗体様分子および他の分子は、保存および非保存的アミノ酸置換を含む修飾を有することができる。したがって、本明細書は、保存的アミノ酸置換、すなわち、Fbxo40への抗体の結合を破棄しないヌクレオチドおよびアミノ酸配列修飾を含む。保存的アミノ酸置換は、あるクラスのアミノ酸を同じクラスのアミノ酸で置換することを含む。アミノ酸側鎖の6個の一般的なクラスは、クラスICys、クラスIISer、Thr、Pro、Ala、Gly、クラスIIIAsn、Asp、Gln、Glu、クラスIVHis、Arg、Lys、クラスVIle、Leu、Val、Met、およびクラスVIPhe、Tyr、Trpを含む。BrummellらBiochem3211801187KobayashiらProteinEng12879884およびBurksらProcNatlAcadSciUSA94412417。非保存的アミノ酸置換なる用語は、あるクラスのアミノ酸の別のクラスのアミノ酸での置換を示す。あるいは、別の態様において、変異保存的または非保存的を、例えば、飽和変異誘発により、抗体コード配列の全てまたは一部に沿ってランダムに導入することができる。得られる修飾抗体は、結合活性についてスクリーニングすることができる。保存および非保存修飾は、Fbxo40へ特異的および/または選択的に結合する抗体、抗体様分子または他の分子のコンセンサス配列において生じ得る。コンセンサス配列は、関連配列のファミリーにおいて最も頻繁に生じるアミノ酸またはヌクレオチドから形成される配列である例えば、WinnakerFromGenestoClonesUmanaらによるWO9954342Umanaら1999NatBiotech17176180。抗体は、例えば、抗体の生物学的例えば、血清半減期を増加するためにペグ化することができる。本明細書において使用されるポリエチレングリコールなる用語は、他のタンパク質を誘導体化するために使用されているPEGのあらゆる形態、例えば、モノC1-C10アルコキシ-もしくはアリールオキシ-ポリエチレングリコールまたはポリエチレングリコール-マレイミドを含むことを意図する。1つの態様において、ペグ化される抗体はアグリコシル化抗体である。NishimuraらによるEP0154316およびIshikawaらによるEP0401384。ペグ化は、非天然アミノ酸の導入によりペグ化を改変することができる。DeitersらJAmChemSoc12511782117832003WangらScience3019649672003WangらScience2924985002001ZhangらScience3033713732004米国特許第7083970号。したがって、本明細書は、あらゆる、および全ての種類のFbxo40に対する抗体または免疫グロブリン、それらの修飾、フラグメントまたは変異体、または抗Fbxo40抗体の機能性および/または構造を模倣する分子を含む。本明細書に記載されている全ての文献を、出典明示によりそれらの全体を本明細書に包含させる。Fbxo40に特異的および/または選択的に結合する抗体、抗体様分子および他の分子は、別の部分に抱合される場合、免疫抱合体を作るために使用することができる。したがって、別の局面において、本明細書の方法は、Fbxo40を標的化し、Fbxo40を阻害または下方調節する免疫抱合体剤、例えば、限定はしないが、細胞毒性剤、抗炎症剤、例えば、ステロイド系もしくは非ステロイド系炎症剤、または細胞毒素代謝アンタゴナイズ剤例えば、メトトレキサート、6-メルカプトプリン、6-チオグアニン、シタラビン、5-フルオロウラシルデカルバジン、アルキル化剤例えば、メクロレタミン、チオテパ、クロラムブシル、メルファラン、カルムスチンBSNUおよびロムスチンCCNU、シクロホスファミド、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンC、およびシス-ジクロロジアミンプラチナIIDDPシスプラチン、アントラサイクリン例えば、ダウノルビシン以前はダウノマイシンおよびドキソルビシン、抗生物質例えば、ダクチノマイシンアクチノマイシン、ブレオマイシン、ミトラマイシンおよびアントラマイシンAMC、および抗有糸分裂剤例えば、ビンクリスチンおよびビンブラスチンを使用する。細胞毒素または細胞毒性剤なる用語は、線維性組織に対して有害である例えば、殺すあらゆる薬剤を含む。例は、タキソール、サイトカラシンB、グラミシジンD、臭化エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テニポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラセンジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンD、1-デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロールおよびピューロマイシン、ならびにそれらのアナログまたはホモログを含む。免疫抱合体は、抗体と適当な治療剤を抱合する例えば、化学的に連結するか、または組換え的に発現することにより形成することができる。適当な薬剤は、例えば、細胞毒性剤、毒素および/または放射性同位体を含む。使用することができる毒素およびそれらのフラグメントは、ジフテリアA鎖、ジフテリア毒素の非結合性活性フラグメント、エクソトキシンA鎖緑膿菌由来、リシンA鎖、アルビンA鎖、モデクシンA鎖、アルファ-サルシナ、シナアブラギリタンパク質、ジアンチンタンパク質、ヨウシュヤマゴボウタンパク質PAPI、PAPIIおよびPAP-S、ツルレイシ阻害剤、クルシン、クロチン、サパオナリアオフィシナリスsapaonariaofficinalis阻害剤、ゲロニン、ミトギリン、レストリクトシン、フェノマイシン、ネオマイシンおよびトリコテセンを含む。種々の放射性核種、例えば、212Bi、131I、131In、90Yおよび186Reを使用することができる。免疫抱合体は、種々の二機能性タンパク質カップリング剤、例えば、N-スクシンイミジル-3-2-ピリジルジチオールプロピオネートSPDP、イミノチオランIT、イミドエステルの二機能性誘導体例えば、ジメチルアジピミデートHCL、活性エステル例えば、ジスクシンイミジルスベラート、アルデヒド例えば、グルタルデヒド、ビスアジド化合物例えば、ビスp-アジドベンゾイルヘキサンジアミン、ビスジアゾニウム誘導体例えば、ビス-p-ジアゾニウムベンゾイル-エチレンジアミン、ジイソシアネート例えば、トリエン2,6-ジイソシアネートおよびビス活性フッ素化合物例えば、1,5-ジフルオロ-2,4-ジニトロベンゼンを使用して作成することができる。リシン免疫毒素は製造することができる。VitettaらScience2381098。炭素-14-標識1-イソチオシアナトベンジル-3-メチルジエチレントリアミンペンタ酢酸MX-DTPAは、放射性ヌクレオチドと抗体の抱合のためのキレート化剤の例である例えば、WO94/11026参照。Fbxo40に特異的および/または選択的に結合し、アンタゴナイズする種々の他の抗体、抗体様分子および他の分子、ならびにそれらの変異体および免疫抱合体は、当業者により製造することができる。Fbxo40をアンタゴナイズするsiRNA、他の阻害核酸などFbxo40のアンタゴニストはまた、阻害核酸、例えば、低分子干渉RNAsiRNAであり得る。1つの態様において、本明細書の方法において使用されるFbxo40アンタゴニストは、Fbxo40核酸または遺伝子に相補的なsiRNAまたは他の核酸またはそのアンチセンスもしくは部分、または核酸をコードする組換え発現ベクターまたはそのアンチセンスもしくは部分である。本明細書において使用されるアンチセンス核酸は、Fbxo40タンパク質をコードするセンス核酸に相補的例えば、二本鎖DNAのコード鎖に相補的、mRNAに相補的、または、Fbxo40遺伝子のコード鎖に相補的なヌクレオチド配列を含む。種々の文脈において、本明細書において使用されるsiRNAまたはアンチセンス核酸などは、あらゆるsiRNA二本鎖RNAまたはあらゆる一本鎖DNAを含むことができる。本明細書において使用される、および以下に詳細に記載されているsiRNAなる用語は、RNA干渉を介在することができる二本鎖領域を含むRNAのあらゆる型を含むことができる例えば、2つの別々の鎖を含む分子、ループ[例えば、ヘアピン]で連結された2つの鎖、1つまたは両方の鎖が一本鎖ニックを含む2つの鎖、修飾ヌクレオチドおよび/またはエンドキャップなどを含む分子。1つの態様において、Fbxo40に対するsiRNAは、Fboxを示す遺伝子の部分に結合する。別の特定の態様において、Fbxo40に対するsiRNAは、亜鉛フィンガードメインを示す遺伝子の部分に結合する。別の特定の態様において、siRNAは、Fboxを示さない遺伝子の部分に結合する。別の特定の態様において、siRNAは遺伝子の一部に結合する。細胞中の特定のタンパク質の発現を下方調節するためのアンチセンス核酸の使用は、当分野でよく知られている。WeintraubらReviewsTrendsinGeneticsVol11986Askariら1996NEngJMed334316318Bennettら1995Circulation9219811993Mercolaら1995CancerGeneTher24759Rossi1995BrMedBull51217225Wagner1994Nature372333335。siRNAまたはアンチセンス核酸は、別の核酸例えば、mRNAのコード鎖に相補的な配列を含み、水素結合することができる。mRNAに相補的なアンチセンス配列は、コード領域、mRNAの5’もしくは3’非翻訳領域および/またはコード領域と非翻訳領域を橋渡しする領域および/またはそれらの部分に相補的であり得る。さらに、siRNAまたはアンチセンス核酸は、mRNAをコードする遺伝子の調節領域、例えば、転写または翻訳開始配列または調節要素に相補的であり得る。好ましくは、アンチセンス核酸は、コード鎖上の開始コドンまたはmRNAの3’非翻訳領域に先行するかもしくは橋渡しをする領域に相補的であり得る。siRNAおよびアンチセンス核酸は、ワトソンクリック塩基対の規則にしたがって設計することができる。siRNAまたはアンチセンス核酸分子は、Fbxo40mRNAの全コード領域に相補的であり得るが、さらに好ましくは、Fbxo40mRNAのコードまたは非コード領域の一部にのみに対してアンチセンスであるオリゴヌクレオチドである。例えば、siRNAまたはアンチセンスオリゴヌクレオチドは、Fbxo40mRNAの翻訳開始部位の周辺の領域に相補的であり得る。siRNAまたはアンチセンス核酸は、例えば、約5、10、15、20、25、30、35、40、45または50ヌクレオチド長であり得る。siRNAまたはアンチセンス核酸は、当分野で知られている方法を使用して、化学合成および酵素的ライゲーション反応を使用して構築することができる。例えば、siRNAまたはアンチセンス核酸例えば、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、天然ヌクレオチド、または、分子の生物学的安定性を増加するか、またはアンチセンスとセンス核酸間で形成された二本鎖の物理的安定性を増加するように設計された種々の修飾ヌクレオチドを使用して化学的に合成でき、例えば、ホスホロチオエート誘導体およびアクリジン置換ヌクレオチドを使用することができる。アンチセンス核酸を産生するために使用することができる修飾ヌクレオチドの例は、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-クロロウラシル、5-ヨードウラシル、ヒポキサンチン、キサンチン、4-アセチルシトシン、5-カルボキシヒドロキシルメチルウラシル、5-カルボキシメチルアミノメチル-2-チオウリジン、5-カルボキシメチルアミノメチルウラシル、ジヒドロウラシル、ベータ-D-ガラクトシルキュエオシン、イノシン、N6-イソペンテニルアデニン、1-メチルグアニン、1-メチルイノシン、2,2-ジメチルグアニン、2-メチルアデニン、2-メチルグアニン、3-メチルシトシン、5-メチルシトシン、N6-アデニン、7-メチルグアニン、5-メチルアミノメチルウラシル、5-メトキシアミノメチル-2-チオウラシル、ベータ-D-マンノシルケウオシン、5’-メトキシカルボキシメチルウラシル、5-メトキシウラシル、2-メチルチオ-N6-イソペンテニルアデニン、ウラシル-5-オキシ酢酸v、ワイブトキソシン、偽ウラシル、キュエオシン、2-チオシトシン、5-メチル-2-チオウラシル、2-チオウラシル、4-チオウラシル、5-メチルウラシル、ウラシル-5-オキシ酢酸メチルエステル、ウラシル-5-オキシ酢酸v、5-メチル-2-チオウラシル、3-3-アミノ-3-N-2-カルボキシプロピルウラシル、acp3wおよび2,6-ジアミノプリンを含む。siRNAまたはアンチセンス核酸はまた、別の骨格、例えば、ロックド核酸LNA、モルホリノ、ペプチド核酸PNA、トレオース核酸TNAまたはグリコール核酸GNAを有することができ、および/または、それは標識化することができる例えば、放射性標識されているか、またはタグ化されている。WO2005/075637;WO9518820;Zhangら2005JAmChemSoc12741745Orgel2000Science29013061307Moulton2009Molecules1413041323Summerton1999BiochimicaetBiophysicaActa148914158。さらに別の態様において、本明細書の方法により使用されるsiRNAまたはアンチセンス核酸分子は、αアノマー核酸分子を含むことができる。αアノマー核酸分子は、通常のβユニットに反して、鎖が互いに平行に走る相補的RNAと特異的な二本鎖ハイブリッドを形成する。Gaultierら1987NucleicAcidsRes1566256641。siRNAまたはアンチセンス核酸分子はまた、2’-o-メチルリボヌクレオチドInoueら1987NucleicAcidsRes1561316148またはキメラRNA-DNA類似体Inoueら1987FEBSLett215327330を含むことができる。さらに別の態様において、siRNAまたはアンチセンス核酸はリボザイムである。リボザイムは、相補的領域を有する一本鎖核酸、例えば、mRNAを開裂することができるリボヌクレアーゼ活性を有する触媒RNA分子である。したがって、リボザイム[例えば、ハンマーヘッドリボザイムHaselhoffら1988Nature334585591に記載されている]を、Fbxo40mRNA転写産物を触媒的に開裂し、それによりFbxo40mRNAの翻訳を阻害するために使用することができる。あるいは、遺伝子発現は、Fbxo40の調節領域例えば、プロモーターおよび/またはエンハンサーに相補的なヌクレオチド配列を標的化し、Fbxo40遺伝子の転写を防止するトリプルヘリックス構造を形成することにより阻害することができる。一般的に、Helene1991AnticancerDrugDes656984Heleneら1992AnnNYAcadSci6602736およびMaher1992Bioassays1480715参照。あるいは、siRNAまたはアンチセンス核酸は、核酸がアンチセンス方向すなわち、挿入された核酸から転写されるRNAは、興味ある標的核酸に対するアンチセンス方向である、以下の小区分においてさらに記載されているにおいてサブクローニングされた発現ベクターを使用して、生物学的に生産することができる。本明細書のsiRNAまたはアンチセンス核酸分子は、Fbxo40をコードする細胞性mRNAおよび/またはゲノムDNAとハイブリダイズし、転写および/または翻訳を阻害することにより発現を阻害するように、一般的に対象に投与されるか、またはsituで産生される。アンチセンス核酸分子の投与経路の例は、組織部位での直接的注射を含む。あるいは、siRNAまたはアンチセンス核酸分子を選択される細胞を標的化するように修飾し、次に、全身的に投与することができる。例えば、全身投与のために、siRNAまたはアンチセンス分子は、例えば、細胞表面受容体または抗原に結合するペプチドまたは抗体に核酸分子を連結することにより、選択される細胞表面上で発現される受容体または抗原に特異的に結合するように修飾することができる。核酸分子はまた、当分野でよく知られている、および、例えば、US20070111230この全体の内容を本明細書に包含させるに記載されているベクターを使用して細胞送達することができる。分子の十分な細胞内濃度をなし遂げるために、核酸分子が強いpolIIまたはpolIIIプロモーターの制御下で置き換えられたベクター構築物が好ましい。別の態様において、本明細書の方法において使用されるsiRNAまたはアンチセンス核酸は、RNAiを介在するRNA干渉化合物である。RNA干渉剤は、限定はしないが、Fbxo40またはそのフラグメントと同種であるRNA分子を含む核酸分子、低分子干渉RNAsiRNA、低分子ヘアピン、低分子ヘアピンRNAshRNA、マイクロRNAmiRNAおよび遺伝子調節またはmRNA転写のレベルでRNA干渉RNAiにより標的遺伝子の発現を調節、妨害または阻害する他の小分子を含む。RNA干渉は、二本鎖RNAdsRNAを使用してdsRNAと同じ配列を含むメッセンジャーRNAmRNAを破壊する転写後標的化遺伝子サイレンシング技術である。Zamoreら2000Cell1012533Fireら1998Nature391806Hamiltonら1999Science286950951Linら1999Nature402128129Sharp1999GenesDev13139141Strauss1999Science286886Sharpら200028724312432Tuschlら1999GenesDev1331913197。RNAiのプロセスは、リボヌクレアーゼIIIダイサーが長いdsRNAをsiRNAと呼ばれる短いフラグメントに開裂するとき、起こる。siRNA低分子干渉RNAは、一般的に、約21から23ヌクレオチド長であり、約19塩基対の二本鎖を含む。Bass2000Cell101235Zamoreら2000Cell1012533Hammondら2000Nature404293Bersteinら2001Nature409363Elbashirら2001GenesDev15188。次に、小RNAセグメントは、標的mRNAの分解を介在する。ダイサーはまた、翻訳調節に関与する保存された構造の前駆体RNAからの21-および22-ヌクレオチドのスモールテンポラルRNAstRNAの切除に関与している。Hutvagnerら2001Science293834。RNAi応答はまた、siRNAのアンチセンス鎖と相補的な一本鎖mRNAの開裂を介在する、RNA誘導型サイレンシング複合体RISCと一般的に称されるエンドヌクレアーゼ複合体を特徴とする。標的RNAの開裂は、siRNA二本鎖のアンチセンス鎖と相補的な領域の中央で起こる。Elbashirら2001GenesDev15188。RNAiの合成のためのキットは、例えば、NewEnglandBiolabsおよびAmbionから市販されている。RNAiは、種々の系において研究されている。Fireら1998Nature391806BahramianandZarbl1999MolCellBiology19274283WiannyandGoetz1999NatureCellBiol270Hammondら2000Nature404293Elbashirら2001Nature411494およびTuschlら国際PCT公開WO0175164は、培養された哺乳動物細胞、例えば、ヒト胚腎臓およびHeLa細胞における合成21-ヌクレオチドRNAの二本鎖の導入により誘導されるRNAiを記載している。ショウジョウバエ胚溶解物における最近の研究Elbashirら2001EMBOJ206877およびTuschlら国際PCT公開WO01/75164は、効率的なRNAi活性を介在するために必須であるsiRNAの長さ、構造、化学組成および配列についての特定必要条件を示した。これらの研究は、21ヌクレオチドのsiRNA二本鎖が、3’-末端ジヌクレオチドオーバーハングを含むとき、非常に活性であることを示した。3’-末端siRNAオーバーハングヌクレオチドの2’-デオキシヌクレオチド2’-Hでの置換は許容された。加えて、siRNA二本鎖の標的相補鎖上の5’-リン酸は、siRNA活性のために必要である。Nykanenら2001Cell107309。デオキシリボヌクレオチドでの2つのヌクレオチドの3’-オーバーハングを有する21-merのsiRNA二本鎖の3’-末端ヌクレオチドのオーバーハングしているセグメントの置換は、RNAi活性に対して悪影響を有さない。siRNAのそれぞれの末端上にて最大4個のヌクレオチドのデオキシリボヌクレオチドでの置換が許容され、デオキシリボヌクレオチドでの完全置換はRNAi活性をなくす。Elbashirら2001EMBOJ206877およびTuschlら国際PCT公開WO0175164。Liら国際PCT公開WO00/44914およびBeachら国際PCT公開WO01/68836は、siRNAが、リン酸-糖骨格またはヌクレオシドのいずれかに少なくとも1つの窒素または硫黄ヘテロ原子を含むように修飾を含み得ることを予備的に示唆する。Kreutzerらカナダ特許出願第2,359,180号はまた、二本鎖RNA依存性タンパク質キナーゼPKR、具体的には、2’-アミノまたは2’-O-メチルヌクレオチド、および2’-Oまたは4’-Cメチレン架橋を含むヌクレオチドの活性化を中和するために、dsRNA構築物における使用のための特定の化学修飾を記載している。Parrishら2000MolecularCell610771087は、長い>25ntsiRNA転写産物を使用して、シーエレガンスにおけるunc-22遺伝子を標的化する特定の化学修飾を試験した。著者らは、T7およびT3RNAポリメラーゼでチオリン酸ヌクレオチドアナログを取り込ませることによるこれらのsiRNA転写産物へのチオリン酸残基の導入を記載しており、2つのホスホロチオエート修飾塩基を有するRNAがまた、RNAiとしての有効性において実質的な減少を有することを観察した。さらに、Parrishらは、2つ以上の残基のホスホロチオエート修飾が、干渉活性をアッセイすることができないように、インビトロでRNAを非常に不安定化させることを報告した同上、1081。著者らはまた、長いsiRNA転写産物におけるヌクレオチド糖の2’位での特定の修飾を試験し、リボヌクレオチドに対するデオキシヌクレオチドの置換が、とりわけウリジンからチミジンおよび/またはシチジンからデオキシシチジンへの置換の場合、干渉活性における実質的な減少を生じることを見出した同上。加えて、著者らは、例えば、センスおよびアンチセンス鎖における、ウラシルに対するsiRNA、4-チオウラシル、5-ブロモウラシル、5-ヨードウラシルおよび3-アミノアリルウラシル、ならびにグアノシンに対するイノシンの置換を含む特定の塩基修飾を試験した。4-チオウラシルおよび5-ブロモウラシル置換は許容されたように見られるが、Parrishは、イノシンが、いずれかの鎖に組み込まれるとき、干渉活性における実質的な減少を生じると報告している。Parrishはまた、アンチセンス鎖における5-ヨードウラシルおよび3-アミノアリルウラシルの取り込みが、同様に、RNAi活性における実質的な減少をもたらすと報告している。当業者は、当分野で知られている任意の慣用の方法を使用して、所望によりsiRNAを合成および修飾することが可能であることを認識しているHenschelら2004DEQOR:siRNAの設計および品質管理のためのウェブベースツール。NucleicAcidsResearch32W113W120参照。さらに、当業者は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、siRNAまたはshRNA発現構築物/ベクターに有用である種々の調節配列例えば、構成的または誘導プロモーター、組織特異的プロモーターまたはその機能性フラグメントなどがあることを認識している。当分野において、ヌクレアーゼ安定性および有効性において有意な増強で核酸分子に導入することができる糖、塩基、リン酸および骨格修飾を記載しているいくつかの例がある。例えば、オリゴヌクレオチドは、ヌクレアーゼ耐性基、例えば、2’-アミノ、2’-C-アリル、2’-フルオロ、2’-O-メチル、2’-O-アリル、2’-H、ヌクレオチド塩基修飾での修飾により安定性を増強する、および/または生物学的活性を増強するように修飾される概説のために、UsmanandCedergren1992TIBS1734Usmanら1994NucleicAcidsSympSer31163Burginら1996Biochemistry3514090参照。核酸分子の糖修飾は、当該技術分野において広範囲に記載されている[Ecksteinら国際公開PCTWO9207065PerraultらNature1990344565568PiekenらScience1991253314317UsmanらTrendsinBiochemSci199217334339Usmanら国際公開PCTWO9315187Sproat米国特許第5334711号およびBeigelmanら1995JBiolChem27025702Beigelmanら国際PCT公開WO9726270Beigelmanら米国特許第5716824号Usmanら米国特許第5627053号Woolfら国際PCT公開WO98135261998年4月20日に出願されたThompsonら米国特許出願第60082404Karpeiskyら1998TetrahedronLett391131Earnshawら1998Biopolymers483955VermaandEckstein1998AnnuRevBiochem6799134およびBurlinaら1997BioorgMedChem519992010Iwaseら2007NucleosidesNucleotidesandNucleicAcids2614511454IwaseらPeptideScience2003MUekiedTheJapanesePeptideSocietyOsaka2004pp445446Elbashirら2001Nature411494498Dowlerら2006NuclAcidsRes3416691675Mesmaekerら1996AngewChemIntEdEngl3527902794Roznersら1997NucleosidesNucleotides16967970Robinsら2000NucleosidesNucleotidesNucleicAcids196986参照これらの全ての文献は出典明示によりそれら全体を本明細書に包含させる]。有効性を変化または改善するためのsiRNAに対する修飾の別の例は、HohjohinFEBSLetters557pp193198により記載されている。さらなる修飾および3’-エンドキャップは、WO2005/021749およびWO2007/128477において提供される。Soutschekら2004Nature432173178は、ピロリジンリンカーの手段によるsiRNA分子のセンス鎖の3’末端へのコレステロールの抱合、それによる共有および不可逆性抱合体の産生を示している。siRNAの化学修飾他の分子との抱合を含むはまた、インビボでの薬物動態学保持時間および効率を改良させ得る。Markら2006MolecularTherapy13644670。siRNA修飾を記載している他の一般的な文献は、インビボでの使用のためのsiRNAの化学修飾を含む。Behlke2008Oligonucleotides1830519Wattsら2008DrugDiscovToday1384255PeekらCurrOpinMolTher200791108Chenら2005DrugDiscovToday1058793。より長いdsRNAの使用が記載されている。例えば、Beachら国際PCT公開WO01/68836は、内因性dsRNAを使用して遺伝子発現を弱めることを記載している。Tuschlら国際PCT公開WO01/75164は、ショウジョウバエのインビトロRNAiシステムおよび特定の機能性ゲノムおよび特定の治療適用のための特定のsiRNA分子の使用を記載している。Liら国際PCT公開WO00/44914は、特定の標的遺伝子の発現を弱めるための、特定の長い141bp-488bp、酵素的に合成されたか、またはベクター発現されたdsRNA分子の使用を記載している。Zernicka-Goetzら国際PCT公開WO01/36646は、特定の長い550bp-714bp、酵素的に合成されたか、またはベクター発現されたdsRNA分子を使用して、哺乳動物細胞における特定の遺伝子の発現を阻害するための特定の方法を記載している。Fireら国際PCT公開WO99/32619は、線虫における遺伝子発現を阻害することにおける使用のための、細胞に特定の長いdsRNA分子を導入するための特定の方法を記載している。Plaetinckら国際PCT公開WO00/01846は、特定の長いdsRNA分子を使用して細胞における特定の表現型を与えることに関与する特定の遺伝子を同定するための特定の方法を記載している。Melloら国際PCT公開WO01/29058は、dsRNA介在性RNAiに関与する特定の遺伝子の同定を記載している。Pachuckら国際PCT公開WO00/63364は、特定の長い少なくとも200個のヌクレオチドdsRNA構築物を記載している。DeschampsDepailletteら国際PCT公開WO99/07409は、特定の抗ウイルス剤と組み合わせた特定のdsRNA分子からなる特定の組成物を記載している。Waterhouseら国際PCT公開99/53050および1998PNAS951395913964は、特定のdsRNAを使用して植物細胞における核酸の表現型発現を減少させるための特定の方法を記載している。Driscollら国際PCT公開WO01/49844は、標的生物体において遺伝子サイレンシングを促進することにおける使用のための特定のDNA発現構築物を記載している。他は、種々のRNAiおよび遺伝子サイレンシングシステムについて報告している。例えば、Parrishら2000MolecularCell610771087は、シーエレガンスのunc-22遺伝子を標的化する特定の化学的に修飾されたdsRNA構築物を記載している。Grossniklaus、国際PCT公開WO01/38551は、特定のdsRNAを使用して、植物におけるポリコーム遺伝子発現を制御するための特定の方法を記載している。Churikovら国際PCT公開WO01/42443は、特定のdsRNAを使用して、生物体の遺伝的特性を修飾するための特定の方法を記載している。Cogoniら国際PCT公開WO01/53475は、アカパンカビサイレンシング遺伝子を単離するための特定の方法およびその使用を記載している。Reedら国際PCT公開WO01/68836は、植物における遺伝子サイレンシングのための特定の方法を記載している。Honerら国際PCT公開WO01/70944は、特定のdsRNAを使用して、パーキンソン病のモデルとしてトランスジェニック線虫を使用する薬物スクリーニングの特定の方法を記載している。Deakら国際PCT公開WO01/72774は、ショウジョウバエにおけるRNAiに関連し得る特定のショウジョウバエ由来の遺伝子産物を記載している。Arndtら国際PCT公開WO01/92513は、RNAiを増強する因子を使用することによる遺伝子抑制を介在するための特定の方法を記載している。Tuschlら国際PCT公開WO02/44321は、特定の合成siRNA構築物を記載している。Pachukら国際PCT公開WO00/63364およびSatishchandranら国際PCT公開WO01/04313は、特定の長い250bpを越える、ベクター発現されたdsRNAを使用して、特定のポリヌクレオチド配列の機能を阻害するための特定の方法および組成物を記載している。Echeverriら国際PCT公開WO02/38805は、RNAiを介して同定された特定のシーエレガンス遺伝子を記載している。Kreutzerら国際PCT公開WO02/055692、WO02/055693およびEP1144623B1は、dsRNAを使用して、遺伝子発現を阻害するための特定の方法を記載している。Grahamら国際PCT公開WO99/49029およびWO01/70949およびAU4037501は、特定のベクター発現されたsiRNA分子を記載している。Fireら米国特許第6,506,559号は、RNAiを介在する特定の長いdsRNA299bp-1033bp構築物を使用して、インビトロでの遺伝子発現を阻害するための特定の方法を記載している。Martinezら2002Cell110563574は、HeLa細胞におけるRNA干渉を介在する特定の5’-リン酸化一本鎖siRNAを含む特定の一本鎖siRNA構築物を記載している。Harborthら2003AntisenseNucleicAcidDrugDevelopment1383105は、特定の化学的および構造的に修飾されたsiRNA分子を記載している。ChiuandRana2003RNA910341048は、特定の化学的および構造的に修飾されたsiRNA分子を記載している。Woolfら国際PCT公開WO03/064626およびWO03/064625は、特定の化学的に修飾されたdsRNA構築物を記載している。本明細書のsiRNAは、当分野で知られている任意の手段により例えば、インビトロで細胞に、または患者に送達することができる。組織へのsiRNAの送達は、物質が標的臓器に到達しなければならず、また標的細胞の細胞質に入らなければならないという両方の問題がある。RNAは細胞膜を貫通することができず、だから、裸のsiRNAの全身送達は成功しそうにない。RNAは、血清中のRNAse活性により迅速に破壊される。これらの理由のため、siRNAを標的細胞に送達するための他のメカニズムが考案されている。当分野で知られている方法は、安定性を改善するために、限定はしないが、ウイルス送達レトロウイルス、アデノウイルス、レンチウイルス、バキュロウイルス、AAV;リポソームリポフェクタミン、陽イオン性DOTAP、中性DOPCまたはナノ粒子陽イオン性ポリマー、PEI、細菌送達tkRNAi、およびまた、siRNAの化学修飾LNAを含む。Xiaら2002NatBiotechnol20およびDevroeら2002BMCBiotechnol2115は、ウイルスベクターへのsiRNAの取り込みを記載している。リポソームは、薬物送達例えば、化学療法の送達のために以前に使用されている。リポソーム例えば、陽イオン性リポソームは、PCT公開WO02/100435A1、WO03/015757A1およびWO04029213A2;米国特許第5,962,016;5,030,453;および6,680,068号;および米国特許出願第2004/0208921号に記載されている。リポソームを製造する方法はまた、WO04/002453A1に記載されている。さらに、中性脂質は、陽イオン性リポソームに取り込まれている例えば、Farhoodら1995。陽イオン性リポソームは、種々の細胞型にsiRNAを送達するために使用されているSioudandSorensen2003;米国特許出願第2004/0204377号;Duxburyら2004;DonzeandPicard2002。中性リポソームの使用は、Millerら1998、および米国特許出願第2003/0012812号に記載されている。脂質ベース、アミンベースおよびポリマーベースの技術を使用する化学的トランスフェクションは、AmbionIncAustinTexおよびNovagenEMDBiosciencesIncanAffiliateofMerckKGaADarmstadtGermany由来の製品OvcharenkoDEfficientdeliveryofsiRNAstohumanprimarycellsAmbionTechNotes101516に記載されている。さらに、SongらNatMedpublishedonlinedoi101038nm828および他のもの[Caplenら2001ProcNatlAcadSci9897429747およびMcCaffreyらNature4143439]は、肝細胞が哺乳動物の循環系へのsiRNAの注射により効率的にトランスフェクトすることができることを記載している。種々の分子は、細胞特異的siRNA送達のために使用されている。例えば、プロタミンの核酸凝縮特性は、siRNAを送達するように、特異的抗体と結合されている。Songら2005NatBiotch23709717。自己集合PEG化ポリカチオンポリエチレンイミンPEIはまた、siRNAを凝集および保護するために使用されている。Schiffelersら2004NuclAcidsRes32el49141110。次に、siRNA含有ナノ粒子は、インテグリンを過剰発現する腫瘍新生血管に成功裏に送達された。HuLieskovanら2005CancerRes6589848992。siRNA送達方法論を記載している他の文献は、Whiteheadら2009NatRevDrugDiscov812938Wullnerら2009RecentPatAnticancerDrugDiscov418Aignerら2008CurrPharmDes14360319Kimら2009PharmRes2665766Epub2008Nov18ShenらIDrugs2008Aug115728Reischlら2009Nanomedicine20095820Epub2008Jul18Durcanら2008MolPharm555966Sanguinoら2008MiniRevMedChem824855deFougerollesら2008HumGeneTher20081912532Akhtarら2007JClinInvest117362332Zhangら2007JControlRelease123110Epub2007Aug7Meadeら2007AdvDrugDelivRev5913440Epub2007Mar15Lewisら2007AdvDrugDelivRev5911523Epub2007Mar15Sioud2005ExpertOpinDrugDeliv263951において見出すことができる。特異的siRNAの設計は、mRNA二次構造の分析を含むことができる。mRNAは、インビボで直線でないが、むしろ、それは複雑な様式においてそれ自体で折りたたまれ、二本鎖領域例えば、ステムおよび一本鎖領域例えば、ループを形成する。それはまた、三重領域、擬似からみおよび他の構造を形成することができる。したがって、mRNAは、多数の対および不対セグメントおよび多種多様のヘアピン構造を有することができる。方法は、mRNAのこの二次構造を予測するために提案されている。Zuker2003NuclAcidsRes31340615およびMathewsら1999JMolBiol288911940。方法はまた、siRNAがmRNAの一本鎖領域に結合するであろうことを予測するために提案されている。WO2005/075637。本明細書に特に有用であるsiRNAは、Fbxo40mRNAの領域に特異的に結合することができ、1つ以上の以下の特性を有するものを含む。Fbxo40のコードセグメントにおける結合;5’非翻訳領域の連結部およびコードセグメントの開始部で、または付近での結合;mRNAの翻訳開始部位で、または付近での結合;エキソンおよびイントロンの連結部で、または付近での結合;他の遺伝子のmRNAへのわずかな、または存在しない結合わずかな、または存在しない的外れの効果;二本鎖またはステム領域ではない領域における、または付近の、例えば、ループまたは一本鎖部分におけるFbxo40mRNAへの結合;わずかな、または存在しない免疫原性を誘導すること;保存された配列の存在が種々の実験動物を使用する試験を容易にするするため、種々の動物種ヒト、マウス、ラット、カニクイザルなどを含む中で保存されているFbxo40mRNAの配列のセグメントにおける結合;mRNAの二本鎖領域への結合;ATリッチ領域例えば、少なくとも約50、51、52、53、54、55、56、57、58、59または60のATリッチへの結合;および、siRNA活性を減少させることが知られているか、または疑われる特定の配列、例えば、siRNAの二本鎖部分の分離を減少させ得る5’末端でのGG配列の存在の欠失。siRNAは、内部に、または1つまたは両方の末端に修飾を有し得る。末端での修飾は、血中のヌクレアーゼによる分解から保護することにより、siRNAを安定化することを手助けすることができる。siRNAは、所望により、遺伝子のスプライス部位付近と、またはそこと知られているか、または予測されるFbxo40mRNAの領域;例えば、エキソン-イントロン連結部に指向され得る。siRNAはまた、所望により、知られているか、または予測されるmRNAの暴露および/または一本鎖領域例えば、ループにアニールするように設計することができる。上記のとおり、ヒトFbxo40に関するmRNA配列は、例えば、GenBank:NM_016298配列番号:2で容易に利用できる。いくつかの動物ホモログに関する配列は、マウスハツカネズミ:NM_001037321;ラットドブネズミ:XM_344023;チンパンジー:NC_006490.2;アカゲザルアカゲザル:NC_007859.1;ゼブラフィッシュゼブラダニオ:BX322577.11偽遺伝子またはXP_694708.3;イノシシ:EU743742;ニワトリ:XP_424000.2;およびイヌ:XP_545126.2を利用できる。siRNAは、Fbxo40mRNAに結合し、分解を手助けするFbxo40アンタゴニストとして設計することができる。抗Fbxo40siRNAは、コードセグメントまたは非コードセグメント例えば、5’または3’非翻訳領域、またはUTRに結合するように設計することができる。好ましくは、siRNAは、mRNAのコードセグメントに結合する。siRNAは、例えば、17、18、19、20、21、22、23または24bpの二本鎖領域を有することができる。好ましくは、siRNAは、19または21bpを含む。siRNAはまた、0、1または2つのオーバーハングを有することができ、好ましくは、0ntオーバーハングの場合において、それらは平滑末端である。遺伝子のmRNA配列は、とりわけコードセグメント内または非翻訳領域におけるゆらぎ位置で、個体から個体で変化し得る。個体はまた、コード配列において互いに異なり得、mRNAおよび対応するsiRNA配列におけるさらなる違いをもたらす。siRNAはまた、免疫原性、望ましくない遺伝子への結合例えば、的外れの効果を減少させるように、または血中の安定性を増加させるように配列を修飾することができる。これらの配列変異体は、siRNAの塩基または5’もしくは3’または他の末端キャップの化学修飾から独立している。配列番号:2として存在する配列から、19-merおよびオーバーハングを含むsiRNAの適当な配列は、容易に決定することができる。アンチセンス鎖は、上記のとおり、ワトソン-クリック対に基づいて容易に導かれる。オーバーハングは、配列番号:2において上記で提供される完全遺伝子配列に基づいて付加することができる。加えて、1つの特定の態様において、Fbxo40siRNAは、3’末端のいずれか、または両方においてdTdTのオーバーハングを含む。加えて、種々の特定の態様において、Fbxo40siRNAは、配列番号:1の15、16、17または18ntの任意の部分を含む二本鎖領域を含む。1つの特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、アンチセンス鎖と一緒にnt1から5704の位置で開始するsiRNAの19-mer配列からなる。別の特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、アンチセンス鎖と一緒にnt1から5704の位置で開始するsiRNAの19-mer配列を含み、加えて、どちらかの鎖にオーバーハングを有する。別の特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、両方の鎖においてオーバーハングを有する。別の特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、一本鎖のみにおいてオーバーハングを有する。オーバーハングは、3’または5’末端であり得る。別の特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、5nt長未満であるオーバーハングを有する。別の特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、2nt長であるオーバーハングを有する。別の態様において、Fbxo40siRNAは、1から5709のあらゆる配列で始まるが、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45または46nt長であるあらゆるsiRNAを含む。1つの特定の態様において、siRNAは、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45または46nt長の二本鎖領域を含む。1つのとりわけ特定の態様において、Fbxo40siRNAは、19または21bpの二本鎖領域を含む。1つの特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、ヒトおよびマウスホモログ間の完全一致を有する19-merを含む。これは、動物モデルとしてのマウスの使用を容易にする。別の特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、ヒトおよびラットホモログ間の完全一致を有する19-merを含む。これは、動物モデルとしてのラットの使用を容易にする。別の特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、ヒトおよびイノシシホモログ間の完全一致を有する19-merを含む。別の特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、ヒトおよびニワトリホモログ間の完全一致を有する19-merを含む。別の特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、ヒトおよびアカゲザルホモログ間の完全一致を有する19-merを含む。別の特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、ヒトおよびチンパンジーホモログ間の完全一致を有する19-merを含む。別の特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、ヒト、ラットおよびアカゲザルホモログ間の配列において一致する。別の特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、ヒト、マウスおよびアカゲザルホモログ間の完全一致を有する19-merを含む。別の特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、ヒト、マウス、ラット、イノシシ、チンパンジーおよびアカゲザルホモログ間の完全一致を有する19-merを含む。別の特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、ヒト、マウス、ラットおよびアカゲザルホモログ間の完全一致を有する19-merを含む。本明細書は、記載されている19-merの部分例えば、15、16、17または18nt長を示す配列をさらに含む。したがって、例えば、ヒトFbxo40および特定の動物にマッチする配列での19-merはまた、本明細書において使用することができる種々の15、16、17および18-mer配列を含む。1つの特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、CACCTCCTGGAAAGTCCACAA配列番号:19、GTGGGAAAGTATGTTCAGCAA配列番号:20またはAGCCGTGGATGCCAAAGACTA配列番号:21またはそれらのRNA同等物の配列を標的化する。別の特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、ヒトFbxo40遺伝子に唯一である配列したがって、別のヒト遺伝子において見出されないを含む。これは、的外れの効果を減少させる。別の特定の態様において、選択されるFbxo40siRNAは、Fbxo40mRNAにおける特定の二次構造に結合する。mRNAは、二本鎖領域例えば、ステムおよび一本鎖領域例えば、ループを含む複雑な二次構造を形成することが知られている。他の構造例えば、擬似からみおよび三重領域もまた可能である。これらの構造は、種々のソフトウェアにより既知の配列から予測することができる。Zuker2003NuclAcidsRes31340615およびMathewsら1999JMolBiol288911940。非限定的な例として、以下のパラメーターを使用することができる:フォールディング温度:37°C。RNA配列は直線である。イオン条件:1MのNaCl、二価イオンなし。パーセント部分最適性数:5。計算フォールディングの数の上限:50。ウインドウパラメーター:デフォルト。最大内部/バルジループサイズ:30。内部/バルジループの最大非対称:30。塩基対間の最大距離:限定なし。特定の理論に縛られることは望まないが、本発明者らは、mRNAでの特定の構造がsiRNAへの結合に特に適していることに注目する。これらの領域はホットスポットと称される。siRNAがmRNAの一本鎖領域に結合することを予測するための方法も提案している。WO2005/075637。これらの構造は、一本鎖領域例えば、ループ、短いループを含む配列例えば、ステム領域が散在した1または2つのより短いループを含む19-または21-ntsiRNA、ループに隣接した配列、特にループのすぐ下流の配列例えば、siRNAに結合する配列に対して5’側にループを有する;2つのステム領域にわたる配列を含む。したがって、Fbxo40アンタゴニストとして有用なsiRNAは、1つ以上の一本鎖領域またはその一部、1つ以上の二本鎖領域またはその一部に結合し得るか、または1つ以上の一本鎖領域に隣接した領域に結合し得る。さらに、種間で高度に保存されている配列はまた、siRNAに非常に適し得る。加えて、宿主タンパク質による結合されることが知られているmRNA配列は、適さないであろう。したがって、本明細書のFbxo40アンタゴニストは、限定はしないが、aFbxo40mRNAにおける少なくとも1、2またはそれ以上の予測されるループに対応するアニールするループの部分または全体に対応またはアニールする;bFbxo40mRNAにおける1または2つの予測されるループに隣接している;c少なくとも1、2またはそれ以上のステム構造に対応する;および/または、dFbxo40mRNAの1または2つのステム構造に隣接するsiRNAを含むことができる。好ましくは、siRNAは、少なくとも約1、2、3、4、5、6、7、8、9または10個、さらに好ましくは少なくとも約4個、さらに好ましくは少なくとも約6個のヌクレオチドを含むループを含むように予測されたFbxo40mRNA配列にアニールする。別の特定の態様において、siRNAは、少なくとも約1、2、3、4、5、6、7、8、9または10個、さらに好ましくは少なくとも約4個、さらに好ましくは少なくとも約6個のヌクレオチドを含むループに隣接したFbxo40配列にアニールする。本明細書の記載に加えて、当分野で知られている任意の方法または物質を、Fbxo40をアンタゴナイズすることができる阻害核酸、siRNAなどを製造するために使用することができる。Fbxo40のアンタゴナイズFbxo40アンタゴニストLMW、抗体、siRNAまたは他の組成物を含もうとなかろうとは、Fbxo40の活性、レベルおよび/または発現を減少させる。当分野で知られている任意の方法を、Fbxo40アンタゴニストにより誘導されるFbxo40活性、レベルおよび/または発現における変化を測定するために使用することができる。測定は、アンタゴニストの効果を決定するために、アンタゴニストの投与前、中および後の多数の時点で行うことができる。Fbxo40のレベルまたは発現は、mRNA例えば、ノーザンブロットまたはPCRを介してまたはタンパク質例えば、ウェスタンブロットの評価により測定することができる。Fbxo40発現におけるアンタゴニストの効果は、Fbxo40遺伝子の転写速度を測定することにより決定することができる例えば、ノーザンブロット;または逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応またはリアルタイムポリメラーゼ連鎖反応を介して。RT-PCRは、Fbxo40のmRNAレベルが腎臓、膵臓および前立腺において高く、肝臓および脾臓において中程度であることを示すために使用された。BraunerOsborneら2001BiochimBiophysActa1518237248。直接的測定は、例えば、Fbxo40が発現される組織、例えば心臓および骨格筋のウェスタンブロットによるFbxo40のレベルからなり得る。いくつかの手段は、Fbxo40活性を測定するために利用できる。Fbxo40活性は、IRS1に結合するFbxo40の能力により測定することができる。あるいは、Fbxo40活性は、Skp1に結合するタンパク質の能力により測定することができる。このような評価は、Fbxo40アンタゴニストが介在するFbxo40発現、レベルもしくは活性の下方調節を測定することができる。個体における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止、限定もしくは減少する能力について組成物をスクリーニングする方法であって、細胞におけるFbxo40のレベルもしくは活性を確認する、該細胞を組成物で処理する、および再び該細胞におけるFbxo40のレベルもしくは活性を確認することを含み、Fbxo40のレベルもしくは活性を低下する該組成物の能力は、個体における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止する能力と相関する方法。この方法において、Fbxo40のレベルまたは活性は、インビトロで細胞中で測定することができる。Fbxo40のレベルまたは発現は、例えば、Fbxo40のmRNAまたはタンパク質レベルを測定する当分野で知られている任意の方法、例えば、上記のものを使用して、測定することができる。Fbxo40の活性は、例えば、Skp1および/またはIRS1と相互作用するFbxo40の能力を測定する当分野で知られている任意の方法、例えば、上記のものにより測定することができる。次に、細胞を推定Fbxo40アンタゴニストで処理することができる。同じ型のいくつかの細胞を、種々のレベルの推定アンタゴニストまたはコントロール例えば、PBS、リン酸緩衝生理食塩水で処理することができる。該細胞を、また、あるいは、推定アンタゴニストで複数回で処理することができる。次に、細胞を、Fbxo40レベル、発現もしくは活性について再測定することができる。加えて、siRNAアンタゴニストを送達するためにアデノウイルスを使用するための方法、および、次に筋肉肥大の促進におけるsiRNAの有効性を測定するための方法は、当分野で知られている。非限定的な例として、ヒトFbxo40に対するsiRNAアンタゴニストを発現する高い力価の精製されたアデノウイルスを作製することができる。アデノウイルスは、力価測定することができる。マウス初代筋芽細胞は、以前に記載されているとおりに、単離、増殖および分化される。初代筋芽細胞を、例えば、6-ウェルプレートにおいて8×105細胞/ウェルまたは12-ウェルプレートにおいて4×105細胞/ウェルで播種する。次の日にそれらを誘導して分化する。分化2日後、筋管に、示されているとおりに種々のアデノウイルスを形質導入する。細胞を、示されているとおりに、形質導入48または72時間後に種々の分析に付す。形質導入のために使用される力価は、例えば、2.5×108または1×109粒子/mlであり得る。アンタゴナイズFbxo40に対するsiRNAを送達するアデノウイルスの使用および有効性の試験の非限定的な例は、本明細書に記載されている。初代筋管は、例えば、48時間で、例えば、アデノウイルスで形質導入することができる。培地を除去し、細胞をPBSで3回洗浄する。それらを、例えば、37°Cで20分間、5のグルタルアルデヒドで固定し、PBSで2回洗浄し得る。細胞形態を、例えば、ZeissAxovert顕微鏡セットを使用して10×拡大で観察することができる。焦点イメージングを得て、顕微鏡を蛍光イメージングのためのFITCに合わせることができる。ランダムイメージングをそれぞれのウェルから得て、分析のために保存することができる。イメージングを、例えば、PipelinePilotWebportを使用して分析し、筋肉サイズの指標としての筋管の厚さを得ることができる。統計分析は、例えば両側ステューデントt検定を使用して、全てのデータにおいて行うことができる。例えば、0.05未満のp値は有意であると考えることができる。筋力低下の処置におけるFbxo40アンタゴニストの有効性についてのさらなる試験単独、または他の処置と組み合わせては、筋肉量の測定により決定することができる。このような測定は、当分野で知られている方法により行うことができる。ラットおよび他の実験動物の試験において、脚筋例えば、ヒラメ筋、前脛骨筋および腓腹筋を取り出し、試験することができる。ラットにおける脱神経、固定化および重量減は、全て、内側腓腹筋量の喪失の同様の割合をもたらす。BodineらScience200129417041707。悪液質はまた、インターロイキン-1IL-1およびグルココルチコイドデキサメタゾンの投与によりラットにおいて誘導することができる。Bodineら2001。加えて、OCC-1細胞を埋め込まれたヌードマウスは、本明細書の種々の組成物を試験するための悪液質に関する有用な動物モデルである。ヒト患者において、反復または時限身体活性は、筋肉量を測定するために使用することができる。全付属肢骨格量ASMはまた、Gallagherら1997JApplPhysiol83229239およびBaumgartnerら1998にしたがって測定することができる。患者の中軸骨格筋量は、dxa二重エネルギーX線吸収測定法または同様の測定により決定することができる。Fbxo40アンタゴニストを評価するための1つの戦略は、外傷性破裂後の前十字靱帯ACL修復で患者を処置することである。これらの患者は、手術後に長期間のひざ上キャスティングを受け、しばしば実質的な大腿四頭筋萎縮となる。対側脚は、試験を確認するためのプラセボ処置グループにおける萎縮に対するコンパレーターとして役立てることができる。中央大腿筋量は、大腿四頭筋伸長によるDEXA二重エネルギーX線吸収測定法および単回反復最大強度評価により評価することができる。さらなる評価は、ふくらはぎの力の測定を含む。ポジティブな結果は、プラセボと比較して、薬物処置グループにおける大腿四頭筋量および強度の統計的に有意な保存を含むことができる。インビトロで筋萎縮を試験する別の方法は筋管の使用を含む。筋管は、管状外観を有する発達中の骨格筋線維であり;発達段階中の筋芽細胞の融合により形成される骨格筋線維であり;わずかな筋原線維が周囲で起こり、中核は線維が管状外観を有することができるように核および筋形質により占有される。分化有糸分裂後多核C2C12骨格筋管、例えば、Bainsら1984MolCellBiol41449を使用することができる。これらは、萎縮と関連する遺伝子をコードするアデノウイルス例えば、高感度緑色蛍光タンパク質EGFPまたは別のマーカーと一緒にFbxo40またはコントロールEGFP単独でのアデノウイルスに感染させることができる。免疫ブロット法は、感染を確認し、Fbxo40およびコントロールのタンパク質発現レベルを定量するために使用することができる。適当な時間例えば、2日間後、筋管直径を測定し、Fbxo40遺伝子を有するアデノウイルスに感染した筋管は、より薄いことが見出された。Fbxo40を有するアデノウイルスに感染した筋管での成長は、Fbxo40が萎縮介在する能力を抑制することにおけるアンタゴニストの有効性を試験するために使用することができる。これらの種々の筋肉量の試験は、筋肉状態を評価する時間にわたって;または、処置レジメンおよび患者応答にしたがって調整されたレジメンの有効性を評価するための処置前後に繰り返され得る。Baumgartnerら1998は、患者が若年参照グループの平均t-スコア以下で2つの標準偏差未満のASMを有する状態としてサルコペニアを定義した。サルコペニアの進行の減速の本明細書の例は、患者が-1.5から-2へt-スコアが進む時間を変化させることである;例えば、このような進行が通常5年かかるとき、本明細書において使用される処置は、この変化を10年に減速することができる。部分的な回復の例は、約0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0単位またはそれ以上のt-スコアの減少を含む例えば、-2のt-スコアから-1.9、-1.8、-1.6、-1.5、-1.4、-1.3、-1.2、-1.1などのt-スコアへの移動。サルコペニアの処置はまた、サルコペニアの発症の遅延を含む。例えば、典型的な50歳の男性が55歳までにサルコペニアの徴候が見られ始めるとき、本明細書の処置は、約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10年またはそれ以上発症を遅延する。ASM測定に加えて、測定はまた、体重、脂肪、腹部内臓脂肪、除脂肪量、脚ASM、大腿筋ASM、体内水分および細胞量および筋肉強度を取ることであり得る。Fbxo40レベル、発現もしくは活性を減少させるアンタゴニストの能力は、個体における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止するアンタゴニストの能力と相関している。Fbxo40アンタゴニストに関するスクリーニング本明細書はまた、Fbxo40のアンタゴナイズにおける有用性について組成物をスクリーニングする、および患者における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止、限定もしくは減少するための方法を含む。1つの特定の態様において、本明細書は、個体における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止、限定もしくは減少する能力について組成物をスクリーニングする方法であって、a該個体由来の細胞におけるFbxo40のレベルもしくは活性を確認する、b所望により、該細胞をFbxo40に対するアンタゴニストを含む組成物で処理する、およびc所望により、再び該細胞におけるFbxo40のレベルもしくは活性を確認する、を含み、コントロールと比較してFbxo40の上昇したレベルは、対象が筋肉疲労障害を有するか、または発症する危険性があることの指標であり、Fbxo40のレベルもしくは活性を低下する該組成物の能力は、個体における筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止する能力と相関する方法を含む。この方法の1つの特定の態様において、個体は、悪液質、癌、腫瘍誘導体重減少、敗血症、慢性心不全、リウマチ性関節炎、後天性免疫不全症候群、サルコペニア、糖尿病、高血圧、高レベルの血清コレステロール、高レベルのトリグリセリド、パーキンソン病、不眠症、薬物中毒、疼痛、不眠症、低血糖、肝臓機能障害、肝硬変症、胆嚢障害、舞踏病、運動障害、腎臓障害および/または尿毒症から選択される筋肉疲労関連障害に罹患している。この方法の1つの特定の態様において、アンタゴニストが、Fbxo40のレベル、発現もしくは活性を減少させる。この方法の種々の態様において、スクリーニングされるアンタゴニストは、本明細書に記載されているか、または当分野で知られている低分子量組成物LMW、抗体など例えば、Fbxo40抗体、Fbxo40抗体様分子、Fbxo40に特異的および/または選択的に結合する分子、および/またはsiRNAまたは他の阻害核酸を含むことができる。上記のとおり、LMWの化合物ライブラリーを創造およびスクリーニングするための種々の他の方法は、とりわけ、米国特許第6,764,858;6,723,235;6,720,190;6,677,160;6,656,739;6,649,415;6,630,835;6,627,453;6,617,114;6,613,575;6,607,921;6,602,685;6,448,794;6,421,612;6,395,169;6,387,257;6,355,163;6,214,561;6,187,923;および6,054,047号に記載されている。LMWのライブラリーを創造およびスクリーニングするための任意のこれらの方法または当業者に知られている任意の他の方法は、Fbxo40に結合し、アンタゴナイズする小分子を得るために使用することができる。標的、例えば、Fbxo40に特異的および/または選択的に結合する抗体、抗体様分子および/または分子をスクリーニングする方法はまた、当分野で知られている。また、標的、例えばFbxo40に対するsiRNAおよび他の阻害核酸をスクリーニングする方法が当分野で知られている。個体由来の細胞におけるFbxo40のレベル、活性または発現を確認する方法は、当分野で知られている。これらの方法は、Fbxo40に対する候補アンタゴニストへの細胞の暴露前後に使用することができる。これらのスクリーニング方法は、本明細書に記載されている、および当分野で知られている、Fbxo40をアンタゴナイズし、筋肉量を増加するか、または筋肉量の喪失を防止する能力について組成物を同定するために有用である。Fbxo40および筋力低下を防止するか、または筋肉量を維持する能力についてアンタゴニストをスクリーニングすることに関する本明細書の態様における種々の用語は、本明細書で定義されている。診断方法本発明はまた、対象が筋肉疲労障害を有するか、または発症する危険性があるか否かを評価するための新規方法を提供する。筋肉疲労障害を有する疑いがある個体は、疾患進行を遅延させる、またはさらに停止もしくは逆転させることができるという、早期検出からの利益がある。該方法は、Fbxo40を検出することができる試薬と対象由来のサンプルを接触させ、Fbxo40を検出することを含む、対象が筋肉疲労障害を有するか、または発症する危険性があるか否かを評価することを含み、コントロールと比較してFbxo40の上昇したレベルが対象が筋肉疲労障害を有するか、または発症する危険性がある指標である。本発明は、さらに、筋肉疲労障害を処置するための処置レジメンの有効性を決定または予測するための方法を提供する。これらの方法は、対象における筋肉疲労障害を処置するための処置レジメンの有効性を評価することを含み、該方法は、a処置レジメンの少なくとも一部を対象に投与する前に、対象から得られる第1のサンプルとFbxo40を検出することができる試薬を接触させる;b処置レジメンの少なくとも一部の投与後に、該対象から得られる第2のサンプルとFbxo40を検出することができる試薬を接触させる;および、c第1および第2のサンプル由来のFbxo40のレベルを比較することを含み、第2のサンプルと比較して第1のサンプルにおいて存在するFbxo40の上昇したレベルは、処置レジメンが対象における筋肉疲労障害を処置するための有効である指標である。本明細書において使用されるサンプルなる用語は、対象由来のあらゆる体液例えば、血液、リンパ液、婦人科に関する液体、嚢胞液、尿、眼液および腹膜洗浄液により回収される液体または細胞を含む。通常は、組織または細胞は患者から取り出されるが、インビボ診断も考慮される。他の患者サンプルは、涙滴、血清、脳脊髄液、糞便、唾液および細胞抽出物を含む。本明細書において使用されるFbxo40を検出することができる試薬なる用語は、Fbxo40に特異的に結合し、Fbxo40を検出可能な部分に変換することができるあらゆる薬物を含む。適当な試薬は、抗体、抗体誘導体、抗体フラグメントなどを含む。Fbxo40核酸例えば、ゲノムDNA、mRNA、スプライスされたmRNA、cDNAなどとの結合に適当な試薬は、相補的核酸を含む。例えば、核酸試薬は、基質に固定された標識または非標識されたオリゴヌクレオチド、基質と結合しない標識オリゴヌクレオチド、PCRプライマー対、分子ビーコンプローブなどを含み得る。本明細書において使用されるコントロールなる用語は、筋肉疲労障害に罹患していない対象由来のサンプル中のFbxo40のレベルであり得る。試験サンプルと同じ型または異なっている型のサンプルであり得る。例えば、試験される対象由来のサンプルが心臓または筋肉サンプル例えば、細胞、細胞の回収物または心臓または筋肉生検から得られた組織であるとき、コントロールサンプルはまた、筋肉疲労障害に罹患していない対象由来の心臓または筋肉サンプルであり得る。あるいは、コントロールサンプルは、異なる型であり得る、例えば、それは、筋肉疲労障害に罹患していない対象由来のサンプルであり得る。他の態様において、コントロールサンプルは、筋肉疲労障害を有さない対象由来のサンプルの回収物または筋肉疲労障害を有さない対象の回収物由来のサンプルであり得る。本明細書において使用されるFbxo40の異常なレベルは、Fbxo40のコントロールレベルと異なるFbxo40のあらゆるレベル、例えば、有意に高いまたは上昇したレベルである。本明細書において使用されるFbxo40の高いレベル、上昇したレベルまたは増加したレベルは、適当なコントロールと比較して上昇したレベルを示す。好ましくは、適当なコントロールとの差は、レベルを評価するために使用されるアッセイの標準誤差よりも大きい。さらに、上昇したレベルは、適当なコントロール例えば、線維症を有さない対象由来のサンプルもしくはいくつかのコントロールサンプルもしくは他の適当なベンチマークにおけるFbxo40の平均レベルにおけるFbxo40のレベルの好ましくは少なくとも2倍、さらに好ましくは3、4、5、6、7、8、9または10倍である。本明細書において使用される有効であるおよび有効性なる用語は、処置レジメンが対象における筋肉疲労障害を処置する可能性を示す。例えば、処置レジメンは、処置が対象における筋肉疲労障害症状例えば、筋力低下、食欲の喪失、脱力感、免疫機能低下および/または電解質不均衡の少なくとも5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95またはそれ以上の緩和をもたらすとき、有効であると考え、生存可能である治療選択と考える。A.アッセイ対象から得られる生物学的サンプル中のFbxo40の存在、非存在および/またはレベルは、サンプル内でFbxo40を検出および定量することができる部分に変換する任意の多種多様のインビトロおよびインビボ技術および方法により評価され得る。このような方法の非限定的な例は、タンパク質検出のための免疫学的方法、タンパク質精製方法、タンパク質機能または活性アッセイ、核酸ハイブリダイゼーション方法、核酸逆転写方法、および核酸増幅方法、酵素免疫吸着法ELISA、免疫ブロット法、ウェスタンブロッティング、ノーザンブロット法、電子顕微鏡、質量分析、免疫沈降、免疫蛍光、サザンハイブリダイゼーションなどを使用して、サンプルを分析することを含む。1つの態様において、サンプル中のFbxo40の存在、非存在および/またはレベルは、試薬、例えば、抗体例えば、放射性-標識された、発色団-標識された、フルオロフォア-標識された、または酵素-標識された抗体、抗体誘導体例えば、基質またはタンパク質リガンド対例えば、ビオチン-ストレプトアビジンのタンパク質もしくはリガンドと接合した抗体またはバイオマーカー、例えば、Fbxo40に特異的に結合し、サンプル中で検出可能な分子に変換する抗体フラグメント例えば、一本鎖抗体または単離された抗体超可変ドメインを使用して評価することができる。抗体に関して標識なる用語は、検出可能な物質を抗体に結合するすなわち、物理学的に連結することによる抗体の直接的標識化、ならびに直接標識される別の試薬での反応性による抗体の間接的標識化を含むことを意図する。間接的標識化の例は、蛍光標識されたストレプトアビジンで検出することができるような、蛍光標識された二次抗体を使用する一次抗体の検出を含む。別の態様において、Fbxo40の存在、非存在および/またはレベルは、核酸を使用して評価される。例えば、1つの態様において、Fbxo40の存在、非存在および/またはレベルは、核酸プローブを使用して評価される。本明細書において使用されるプローブなる用語は、Fbxo40に選択的に結合することができるあらゆる分子を示す。プローブは、当業者により合成されるか、または適当な生物学的調製物由来であり得る。プローブは、具体的には、標識されるように設計され得る。プローブとして利用することができる分子の例は、限定はしないが、RNA、DNA、タンパク質、抗体および有機分子を含む。単離されたmRNAは、限定はしないが、サザンまたはノーザン分析、ポリメラーゼ連鎖反応分析およびプローブアレイを含む、ハイブリダイゼーションまたは増幅アッセイにおいて使用することができる。mRNAレベルの検出のための1つの方法は、単離されたmRNAをFbxo40mRNAにハイブリダイズすることができる核酸分子プローブと接触することを含む。核酸プローブは、例えば、全長cDNAまたはその一部、例えば、少なくとも7、15、30、50、100、250または500ヌクレオチド長の、およびストリンジェント条件下でFbxo40ゲノムDNAに特異的にハイブリダイズするために十分であるオリゴヌクレオチドであり得る。1つの態様において、mRNAを固体表面上に固定し、例えば、アガロースゲル上に単離されたmRNAを流し、ゲルから膜、例えばニトロセルロースにmRNAを移すことにより、プローブと接触させる。別の態様において、プローブを固体表面上に固定し、例えば、Affymetrix遺伝子チップアレイにおいて、mRNAをプローブと接触させる。当業者は、Fbxo40mRNAのレベルの検出における使用のための既知のmRNA検出方法を容易に採用することができる。サンプル中のFbxo40mRNAのレベルを決定するための代替方法は、例えば、RT-PCRMullis、1987、米国特許第4,683,202号に記載されている実験的態様、リガーゼ鎖反応BaranyProcNatlAcadSciUSA88189193、自立配列複製GuatelliらProcNatlAcadSciUSA8718741878、転写増幅システムKwohらProcNatlAcadSciUSA8611731177、Q-ベータレプリカーゼLizardiらBioTechnology61197、ローリングサークル複製Lizardiら、米国特許第5,854,033号または任意の他の核酸増幅方法による核酸増幅方法、次に、当業者によく知られている技術を使用する増幅された分子の検出を含む。これらの検出スキームは、非常に少ない数であるとき、とりわけ核酸分子の検出のために有用である。本発明の特定の局面において、Fbxo40発現は、定量蛍光RT-PCRすなわち、TaqManTMSystemにより評価される。このような方法は、一般的に、Fbxo40に特異的であるオリゴヌクレオチドプライマーの対を利用する。既知の配列に特異的なオリゴヌクレオチドプライマーを設計するための方法は、当分野でよく知られている。Fbxo40mRNAの発現レベルは、膜ブロット例えば、ハイブリダイゼーション分析、例えば、ノーザン、サザン、ドットなどにおいて使用される、またはマイクロウェル、サンプルチューブ、ゲル、ビーズまたは線維または結合された核酸を含む任意の固体支持体を使用してモニタリングされ得る。米国特許第5,770,722、5,874,219、5,744,305、5,677,195および5,445,934号参照これらを出典明示により本明細書に包含させる。Fbxo40の検出発現はまた、溶液中で核酸プローブを使用することを含み得る。本発明の1つの態様において、マイクロアレイは、Fbxo40発現を検出するために使用される。マイクロアレイは、異なる実験間の再現性により、この目的に非常に合う。DNAマイクロアレイは、多数の遺伝子の発現レベルの同時測定のための1つの方法を提供する。それぞれのアレイは、固体支持体に付着した捕捉プローブの再現性のあるパターンからなる。標識化RNAまたはDNAは、アレイ上の相補的プローブにハイブリダイズし、次にレーザー走査により検出される。アレイ上のそれぞれのプローブに対するハイブリダイゼーション強度を決定し、相対遺伝子発現レベルを示す定量値に変換する。米国特許第6,040,138、5,800,992および6,020,135、6,033,860および6,344,316号これらは出典明示により本明細書に包含させる参照。高密度オリゴヌクレオチドアレイは、サンプル中の多くのRNAの遺伝子発現プロフィールを決定するために特に有用である。さらに、Fbxo40の検出のためのインビボ技術は、Fbxo40に結合し、検出可能な分子に変換するFbxo40に対する標識された抗体を対象に導入することを含む。上記のとおり、対象における検出可能なFbxo40の存在、レベルまたは位置でさえ、標準イメージング技術により検出され、決定され得る。別の態様において、質量分析は、サンプル中のFbxo40を検出するために使用することができる。質量分析は、荷電分子またはそれらのフラグメントを賛成するために化合物をイオン化し、それらの質量対電荷比を測定することからなる分析技術である。典型的な質量分析方法において、サンプルは対象から得られ、質量分析に充填し、その成分例えば、Fbxo40を種々の方法により例えば、それらを電子ビームで衝撃を与えることによりイオン化し、荷電粒子イオンの形成をもたらす。次に、粒子の質量対電荷比を、電磁場を通るときのイオンの動きから計算する。A.診断アッセイFbxo40の存在、非存在および/またはレベルは、分子またはタンパク質を検出するための多種多様の既知の方法のいずれかによって評価され得る。このような方法の非限定的な例は、タンパク質の検出のための免疫学的方法、タンパク質精製方法、タンパク質機能または活性アッセイ、核酸ハイブリダイゼーション方法、核酸逆転写方法および核酸増幅方法、ELISA、免疫ブロット法、ウェスタンブロッティング、ノーザンブロット法、サザンブロット法などを含む。1つの態様において、Fbxo40の存在、非存在および/またはレベルは、バイオマーカー、すなわち、Fbxo40、例えば、バイオマーカーに対応するオープンリーディングフレームによってコードされるタンパク質またはその正常な翻訳後修飾のすべてまたは一部を受けたタンパク質に特異的に結合する抗体例えば、放射線標識化、発色団標識化、フルオロフォア標識化または酵素標識化抗体、抗体誘導体例えば、基質またはタンパク質またはタンパク質-リガンド対例えば、ビオチン-ストレプトアビジンのリガンドとの抱合された抗体または抗体フラグメント例えば、一本鎖抗体、単離された抗体超可変ドメインなどを使用して評価される。抗体に関して標識化なる用語は、検出可能な物質と抗体との結合すなわち、物理学的に連結による抗体の直接標識化、ならびに直接標識化されている別の試薬との反応性による抗体の間接標識化を含むことを意図する。間接標識化の例は、蛍光標識化ストレプトアビジンで検出することができるような、蛍光標識化二次抗体を使用する一次抗体の検出を含む。別の態様において、Fbxo40の存在、非存在および/またはレベルは、核酸を使用して評価することができる。本発明の検出方法は、Fbxo40、例えば、インビトロならびにインビボでの生物学的サンプルにおけるFbxo40を検出するために使用することができる。例えば、mRNAの検出のためのインビトロ技術は、ノーザンハイブリダイゼーション、インサイチュハイブリダイゼーションおよびQPCRを含む。Fbxo40の検出のためのインビトロ技術は、例えば、酵素免疫吸着法ELISA、ウェスタンブロット、免疫沈降および免疫蛍光を含む。Fbxo40DNAの検出のためのインビトロ技術は、例えば、サザンハイブリダイゼーションを含む。さらに、Fbxo40の検出のためのインビボ技術は、対象にFbxo40に対する標識された抗体を導入することを含む。本明細書に記載されているとおり、抗体は、標準イメージング技術により対象内での存在および位置が検出することができる放射活性バイオマーカーで標識化することができる。さらなる定義本明細書および特許請求の範囲の明確な理解を提供するために、以下のさらなる定義を、好都合に下記に提供する。本明細書は、筋肉疲労関連障害の危険性があるか、または罹患している患者への投与のためのFbxo40のアンタゴニストそれを作る方法およびその使用を提供する。本明細書はまた、有効量のアンタゴニストを含む処置を含む。処置は、種々の用量で提供することができ、非限定的な例として、薬学的に許容される塩および/または担体を含むことができる。患者は、筋肉疲労関連障害、筋力低下に関するか、または関連する障害を患っているか、または危険性がある個体、好ましくはヒトを意味する。筋肉量喪失を防止するか、または筋肉量を増加するための薬物を必要とする患者は、筋肉量の喪失と間接的に関連するか、または全く関連しない1つ以上の苦痛のみを患っていてもよい。患者は、筋肉疲労関連障害の危険性があり得例えば、遺伝的にかかりやすい、わずかな疾患の症状を示すか、または症状なしであり得る例えば、障害が無症候であり得る。この場合、アンタゴニストは、筋力低下の発症を防止するための予防処置として投与することができる。患者は、Fbxo40アンタゴニストでの処置に加えて前に、同時にまたは後に、これらの病気のためのあらゆる適当な処置を施すことができる。したがって、患者は、1つ以上のFbxo40アンタゴニスト、所望により筋力低下を改善する1つ以上のさらなる処置または薬物、および別の疾患例えば、癌、糖尿病またはハンチントン病のための所望により1つ以上の処置で処置することができる。例えば、糖尿病を有する患者は、Fbxo40アンタゴニストおよびインスリンを投与することができ;癌患者は、Fbxo40アンタゴニストおよび抗癌薬物を投与することができる。特に高齢者患者における筋肉疲労障害は、ときどき骨量の減少障害、例えば、骨粗鬆症と関連する。したがって、Fbxo40アンタゴニストはまた、骨粗鬆症のための処置、例えば、Aclastaゾレドロン酸またはゾレドロネートまたはDenosumabAMG162;RANKLを標的とする抗体と共投与することができる。本明細書は、患者および個体への投与のためのFbxo40に対するアンタゴニストを含む処置および処置方法をさらに含む。処置は、予防、治療、治癒または改良または健康状態の悪化の改善もしくは悪化しないことを示す患者の状態における他のあらゆる変化を意味する。処置は、筋力低下の処置または患者が有する他のあらゆる病気の処置を意味する。本明細書において使用される処置および処置するなる用語は、疾患にかかる危険性があるか、または疾患を有する疑いがある患者、ならびにすでに病気であるか、または病気であると診断された患者の処置を含む、予防または防止処置および治癒または疾患修飾処置の両方を示す。処置および処置するなる用語はまた、疾患に罹患していないが、不健康状態、例えば、窒素平衡失調または筋力低下を発症しやすい個体における健康の維持および/または促進を示す。有効量または治療有効量は、個体の疾患または医学的状態を処置するか、またはさらに一般的に、個体に栄養的、生理学的または医薬的利益を提供する量である。本明細書の種々の態様において、患者は、少なくとも約6月齢、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、55、60、65、70または75歳である。種々の態様において、患者は、約10、20、30、40、50、55、60、65、70、75、80、90または100歳以下である。種々の態様において、患者は、少なくとも約90、100、120、140、160、180、200、220、240、260、280、300、320、340、360、380または400ポンドの体重を有する。種々の態様において、患者は、約90、100、120、140、160、180、200、220、240、260、280、300、320、340、360、380または400ポンド以下の体重を有する。本明細書の種々の態様において、用量は、少なくとも約1、5、10、25、50、100、200、250、300、250、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950または1000ng、1、5、10、25、50、100、200、250、300、250、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950または1000マイクログラム、1、5、10、25、50、100、200、250、300、250、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950または1000mgであり得る。種々の態様において、用量は、約10、25、50、100、200、250、300、250、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950または1000mg以下であり得る。種々の態様において、用量は、少なくとも1日に2回以上、毎日、1週間に2回以上、1週間毎、2週間毎、1月毎、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11または12月毎に投与することができる。種々の態様において、用量は、個体の体重または表面積と相関する。実際の投与レベルは、特定の患者、組成物および投与経路について、患者に毒性なく有効である活性剤の量を得るように変化され得る。選択される用量は、種々の薬物動態学因子、例えば、使用される特定のアンタゴニストの活性、投与経路、アンタゴニストの排出速度、処置期間、アンタゴニストと組み合わせて使用される他の薬物、化合物および/または物質、年齢、性別、体重、状態、一般的健康および患者の病歴等、および医学分野で既知の因子に依存する。通常の技術を有する医師または獣医は、必要なアンタゴニストの有効量を容易に決定し、次に処方することができる。適当な用量は、治療効果を奏するのに有効な最低用量または副作用を引き起こさずに治療効果を奏するように十分低い用量である量である。薬学的に許容される塩は、親化合物がそれらの酸性または塩基性塩を作ることにより修飾されている記載されている化合物の誘導体を示す。薬学的に許容される塩の例は、限定はしないが、塩基性残基、例えば、アミンの鉱酸または有機酸塩;酸性残基、例えば、カルボン酸のアルカリまたは有機塩などを含む。薬学的に許容される塩は、例えば、非毒性無機または有機酸から形成される親化合物の慣用の非毒性塩または四級アンモニウム塩を含む。例えば、このような慣用の非毒性塩は、限定はしないが、1,2-エタンジスルホン酸、2-アセトキシ安息香酸、2-ヒドロキシエタンスルホン酸、酢酸、アスコルビン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、重炭酸、炭酸、クエン酸、エデト酸、エタンジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、グリコリルアルサニル酸、ヘキシルレゾルシン酸、ヒドラバミン酸、臭化水素酸、塩酸、ヒドロアイオダイド、ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシナフトエ酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリルスルホン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ナプシル酸、硝酸、シュウ酸、パモ酸、パントテン酸、フェニル酢酸、リン酸、ポリガラクツロン酸、プロピオン酸、サリチル酸、ステアリン酸、スバセチック、コハク酸、スルファミン酸、スルファニル酸、硫酸、タンニン酸、酒石酸およびトルエンスルホン酸から選択される無機および有機酸から誘導されたものを含む。本明細書の薬学的に許容される塩は、慣用の化学的方法により、塩基性または酸性部分を含む親化合物から合成することができる。一般的に、このような塩は、水または有機溶媒または2つの混合物中で、これらの化合物の遊離酸または塩基形態を化学量論量の適当な塩基または酸と反応させることができる;一般的に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールまたはアセトニトリルのような非水性媒体が好ましい。適当な塩のリストは、RemingtonsPharmaceuticalSciences18thedMackPublishingCompanyEastonPa1990p1445この明細書を出典明示により本明細書に包含させるにおいて見出される。Fbxo40アンタゴニストを含む医薬組成物は、固体形態、例えば、粉末、顆粒、錠剤、丸剤、ジェルキャップ、ゼラチンカプセル、リポソーム、坐薬、チュアブル形態またはパッチであり得る。Fbxo40アンタゴニストを含む医薬組成物はまた、液体形態、例えば、溶液、エマルジョン、懸濁液、エリキシル剤またはシロップで提供され得る。適当な液体支持体は、水中で様々な割合で、例えば、水、有機溶媒、例えば、ポリオール、例えば、グリセロールまたはグリコール、例えば、プロピレングリコールおよびポリエチレングリコール、またはエタノール、CremophorEL、またはそれらの混合物であり得る。組成物は、アルブミンまたは界面活性剤でコーティングされたナノサイズの非結晶または結晶顆粒を含むことができる。適当な支持体は、例えば、抗菌および抗真菌剤、緩衝剤、リン酸カルシウム、セルロース、メチルセルロース、クロロブタノール、ココアバター、着色剤、デキストリン、乳化剤、腸溶コーティング、香味剤、ゼラチン、等張剤、レシチン、ステアリン酸マグネシウム、芳香剤、多価アルコール、例えば、マンニトール、注射可能な有機エステル、例えば、オレイン酸エチル、パラベン、フェノールソルビン酸、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリジン、リン酸緩衝生理食塩水PBS、保存剤、プロピレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、塩化ナトリウム、ソルビトール、種々の糖限定はしないが、スクロース、フルクトース、ガラクトース、ラクトースおよびトレハロースを含む、デンプン、坐薬ロウ、タルク、植物油、例えば、オリーブ油およびコーンオイル、ビタミン、ロウおよび/または湿潤剤を含むことができる。siRNAであるFbxo40アンタゴニストについて、特定の支持体は、デキストランおよび水、例えば、水中で5のデキストロースD5Wを含む。医薬組成物の生物学的に不活性な部分は、所望により層化および/または侵食可能であり、それによりアンタゴニストの持続放出を可能にする。Fbxo40を含む医薬組成物は、バッカル、吸入吸引および深い吸入を含む、経鼻、経口、非経口、埋め込み、硬膜外を介する注射または注入、動脈内、関節内、嚢内、心臓内、脳室内、頭蓋内、皮内、筋肉内、眼窩内、腹腔内、髄腔内、胸骨内、髄腔内、静脈内、くも膜下、被膜下、皮下、表皮下、経内皮、経気管、経血管、経直腸、舌下、局所および/または膣経路により投与することができる。これは、注射、注入、皮膚パッチまたは当分野で知られているあらゆる他の方法により投与され得る。製剤は、粉末化、噴霧化、エアロゾル化、粒状化またはあるいは送達のために他の方法で適当に調製され得る。投与は、液体の場合、ゆっくりまたはボーラスを介してであってもよいが、当分野で知られているいくつかの環境下において、ボーラス注射は、腎臓を介する物質の喪失を引き起こし得る。Fbxo40アンタゴニストは、当分野で知られている医療デバイスで投与することができる。例えば、特定の態様において、アンタゴニストは、無針皮下注射デバイス、例えば、米国特許第5,399,163、5,383,851、5,312,335、5,064,413、4,941,880、4,790,824または4,596,556号に記載されているデバイスで投与することができる。本明細書において有用なよく知られているインプラントおよびモジュールの例は以下のものを含む:制御された速度で薬物を分配するための移植可能な微小注入を記載している米国特許第4,487,603号;皮膚を介して薬物を投与するための治療デバイスを記載している米国特許第4,486,194号;正確な注入速度で薬物を送達するための薬物注入ポンプを記載している米国特許第4,447,233号;連続的な薬物送達のための可変流量の移植可能な注入装置を記載している米国特許第4,447,224号;多重チャンバー区画を有する浸透圧薬送達系を記載している米国特許第4,439,196号;および浸透圧薬送達系を記載している米国特許第4,475,196号。多くの他のこのようなインプラント、送達系およびモジュールは、当業者に知られている。1つの態様において、アンタゴニストは、インビボでの適切な分布を保証するために製剤化することができる。例えば、血液脳関門BBBは、多くの親水性の高い化合物を排除する。アンタゴニストがBBBを所望により通過することを保証するため、それらは、例えば、リポソーム中で製剤化することができる。リポソームを製造する方法について、例えば、米国特許第4,522,811;5,374,548;および5,399,331号参照。リポソームは、特定の細胞または臓器に選択的に輸送される1つ以上の部分を含んでいてよく、したがって、標的薬物送達を増強する例えば、VVRanadeJClinPharmacol29685参照。標的部分の例は、葉酸またはビオチン例えば、Lowらの米国特許第5,416,016号参照;マンノシドUmezawaetalBiochemBiophysResCommun1531038;抗体PGBloemanらFEBSLett357140MOwaisらAntimicrobAgentsChemother39180;界面活性剤タンパク質A受容体BriscoeらAmJPhysiol1233134、本明細書の製剤ならびに本発明の分子の成分を含み得る異なる種、p120SchreierらJBiolChem2699090を含むKKeinanenMLLaukkanenFEBSLett346123JJKillionIJFidlerImmunomethods4273も参照。種々の態様において、本発明の方法および組成物は本明細書に記載されているとおりであるが、ただし、アンタゴニストは抗体ではない。種々の態様において、本発明の方法および組成物は本明細書に記載されているとおりであるが、ただし、アンタゴニストは抗体様分子ではない。種々の態様において、本発明の方法および組成物は本明細書に記載されているとおりであるが、ただし、アンタゴニストは小分子有機化合物LMWではない。種々の態様において、本発明の方法および組成物は本明細書に記載されているとおりであるが、ただし、アンタゴニストはsiRNAではない。本明細書において使用されるaおよびanなる冠詞は、冠詞の文法的な目的語の1つまたは1つ以上の少なくとも1つを示す。本明細書は以下の実施例によりさらに説明されるが、これはさらなる限定と解釈すべきでない。本出願を通じて引用した全ての図面および全ての文献、特許および公開特許出願の内容は、明確に出典明示により本明細書に包含させる。実施例1IGF1処理されると、IRS1は、C2C12筋管中で迅速に分解されるIGF1は、成体骨格筋において肥大を誘導するために十分であることが証明されている。インスリン受容体基質IRSは、同種受容体へのIGF1またはインスリン結合時にチロシンリン酸化され、それにより、多数のSH2ドメイン含有タンパク質とシグナル伝達複合体を形成し、多数の細胞内シグナルを開始することを可能にする。IRSレベルの変化は、IGF1およびインスリンの両方への感受性および応答に影響し得る。多数の種々の細胞モデル系において、IGF1またはインスリンへの暴露はIRSレベルの減少をもたらす。本実施例において、本発明者らは、内因性IRS1がIGF1処理時に筋肉細胞において分解されるか否かを確認する。分化C2C12筋管を、タンパク質合成阻害剤エメチンEmeと一緒に、増大する濃度のIGF1または筋萎縮を引き起こし得るグルココルチコイドであるデキサメタゾンDEXで処理する。図4Aは、C2C12筋管中、用量依存的方法において、IRS1がDEXではなくIGF1処理時に分解されるということを証明する。この結果に基づいて、本発明者らは、さらなる実験のために10nMのIGF1を使用することを選択する。C2C12筋管において、IRS1は、IGF1処理時に約2時間の半減期で迅速に分解される図4Bおよび4E。IRS1のタンパク質レベルはまた、遅い速度論であるけれども、IGF1単独で処理された細胞中でも減少し図4E、それにより、この迅速な分解が活性なタンパク質合成を越えることが示唆されることに留意する。IRS1は、プロテオソーム依存経路を介して分解される。この結論は、プロテオソーム阻害剤MG132がこのタンパク質を実質的に安定化するという観察に基づく図4B。ユビキチン化タンパク質が細胞中で迅速に分解されるため、図4Cに示される実験においてユビキチン化IRS1タンパク質を検出するために、C2C12筋管をhis-mycタグユビキチンを過剰発現するアデノウイルスに感染させ、MG132またはイソペプチダーゼ阻害剤G5と一緒にIGF1とインキュベートする。IRS1を、ウサギポリクローナル抗-IRS1抗体レーン6、8、10、12またはコントロールとしての非特異的IgGレーン5、7、9、11で免疫沈降する。ポリユビキチン化が、his-mycタグユビキチンに対するモノクローナル抗-myc抗体で検出され、IRS1で特異的に免疫沈降されることが見られる図4C、上のパネル。興味深いことに、IRS1の電気泳動移動度における上へのシフトは、G5処理で明らかであり図4C、下のパネル、レーン10および12、イソペプチダーゼに対するG5の阻害的役割と一致する。図4Cの上のパネルにおいて、G5処理がまた、MG132処理単独との比較においてhis-mycタグユビキチンの上へのシフトを引き起こすことに注意することレーン10をレーン8と比較して。IGF1処理時のIRS1の誘導分解に一致して、ポリユビキチン化IRS1はまた、細胞中のユビキチン化タンパク質の全量が少し減少したにもかかわらず図4D、下のパネル、IGF1処理で増加する図4D、上のパネル。これらのデータは、IGF1がC2C12筋管におけるIRS1の迅速な分解をもたらすことを示す。さらに、IRS1は、プロテオソーム依存経路を介して分解される。次に、本発明者らは、何の酵素がこの分解に関与するのか、または関与しないのかを決定する。実施例2C2C12筋管におけるIRS1の分解は、PI3-キナーゼおよびmTORに対する阻害剤により救うことができないどのシグナル伝達経路がC2C12筋管におけるIRS1分解の活性化において役割を果たすのかを決定するために、筋管を、10nMのIGF1およびPI3-キナーゼウォルトマンニン、AktAPI-2、GSK3LiCl、mTORラパマイシン、MEKPD98059およびMEK1/2阻害剤、p38およびJNKに対する阻害剤または担体DMSOとインキュベートする。データ示されていないは、C2C12筋管におけるIRS1の分解が、PI3-キナーゼおよびmTORに対する阻害剤により救うことができないことを示す。このデータは、リガンド誘導IRS1分解がIGF1RによるIRS1の直接的リン酸化が原因であり得ることを示唆する。実施例3IRS1は、Skp1-Cullin1-Rbx1複合体により標的化される本実施例において、本発明者らは、分解のためにIRS1をプロテオソームに標的化することに関与するE3リガーゼを見出すことを試みる。IRS1が、今までに文献において報告されている他のあらゆる細胞型とは異なって調節されるC2C12筋管における迅速な分解を有するため、本発明者らはC2C12筋管における研究に焦点を合わせる。細胞中には、2つの主な型:RingフィンガードメインRNFおよびHECTドメイン含有E3リガーゼを含む、600以上のE3リガーゼがある[Liら2008PLoSOne3e1487]。RNF依存E3リガーゼは、2つのカテゴリー:単一のポリペプチド鎖RNFE3およびマルチサブユニットCullin-RingE3複合体にさらに分けることができる。Rbx1は、種々の因子と関連し、マルチサブユニットCullin-RingE3複合体の4つの異なる型を形成することができる一般的な小分子RNFタンパク質である。IRS1を標的化するE3リガーゼを迅速に見出すために、本発明者らは、最初に、Rbx1をノックダウンすることにより可能性のある標的を絞り込むことを試みる。C2C12筋管を、Rbx1を標的化する3つの異なるsiRNAでトランスフェクトする。図5Aに示されるとおり、siRbx1_1およびsiRbx1_2は、基底レベルの50にRbx1タンパク質をノックダウンし、IGF1誘導IRS1分解をほとんど完全にブロックするが、siRbx1_3は、タンパク質を有意にノックダウンせず、効果がない図5A。さらに、Skp1図5BおよびCullin1図5Cおよび5Dに対するsiRNAは同様の効果を有し、Rbx1含有Skp1-Cullin1-F-boxSCF複合体が、プロテオソーム分解のためのIRS1を標的化するE3リガーゼであることを示唆する。コントロールとして、本発明者らはまたは、Cullin2ノックダウンの効果を確認し、Cullin2が関連しないことを見出す図5Fおよび5G。最後に、Rbx1はIRS1と共免疫沈降することができ、これらの2つのタンパク質が1つの複合体において存在することを示唆する図5E。これらのデータは、IRS1がSkp1-Cullin1-Rbx1複合体により標的化されることを示す。したがって、1つのFboxタンパク質は、IGF1誘導IRS1分解に関与する。次の工程は、どのFboxタンパク質が関与するのかを決定する工程である。実施例4Fbxo40はSkp1-Cullin1-Rbx1複合体と結合し、分解のためにIRS1を標的化するマウスにおいて今までのところ同定されている約77個のF-boxタンパク質がある。本発明者らは、IRS1を標的化するF-boxタンパク質についてスクリーニングするために機能性ゲノムアプローチを使用する。C2C12筋管を、DharmaconからのSOCS-boxおよびF-box含有タンパク質に対するsiRNAまたはsiCONを含むマウスユビキチン結合siRNAライブラリーサブセット2でトランスフェクトする。トランスフェクション48時間後に、細胞を、16時間、10nMのIGF1で処理する。IRS1タンパク質レベルをウェスタンブロッティングにより分析する。このスクリーニングからのポジティブヒットを、異なる供給源Qiagenからの3つの異なるsiRNAによりさらに確認する。ノックダウン効率を、ポジティブヒットに対する定量リアルタイムPCRにより評価する。いくつかの場合において、全3つのQiagensiRNAは、mRNAレベルで標的遺伝子発現を少なくとも70サイレントすることができない。この場合において、DharmaconからのON-TARGETplussiRNASMARTpoolをさらなる確認のために使用する。スクリーニングされた67個のF-boxタンパク質のうち残存遺伝子に対するsiRNAはライブラリー中に示されなかった、本発明者らは、1つのポジティブヒットであるFbxo40を同定する。図6Aは、Fbxo40をノックダウンすることによるIRS1の用量依存的レスキューを証明する。Fbxo40を標的化する3つのsiRNA中の、siFbxo40_7はタンパク質レベルを基底レベルの10に減少させ、最も良い有効性を有するが、最も少ないノックダウンを引き起こすsiFbxo40_9はコントロールレベルを越えるIRS1タンパク質のわずかな増加をもたらすのみである。重要なことには、これらの3つのsiRNAは、IGF1処理なしでIRS1タンパク質レベルの増加をもたらさなかった図6A、左のパネル。Fbxo40は、除神経筋において上方調節される新規F-boxタンパク質である。Yeら2007Gene4045360。本発明者らは、定量リアルタイムPCRによりFirstChoiceHumanTotalRNAPanelを調査し、Fbxo40が心臓および筋肉において高度に発現されることを見出す図3。さらに、そのmRNA図6Bおよびタンパク質図8AはC2C12細胞の分化中に誘導され、これはC2C12筋管におけるIRS1の加速分解と一致する。IRS1およびRbx1は、Fbxo40に対する抗体と共免疫沈降することができる図6C。Fbxo40タンパク質レベルがMG132とのインキュベーション後に増加し図6C、レーン1-3と比較して、それにより、このタンパク質がまた、細胞で迅速にターンオーバーすることが示されることに注意すること。本発明者らはまた、この免疫沈降されたFbxo40-Rbx1複合体を使用してインビトロで組換えIRS1ユビキチン化し、IRS1を時間依存手段においてユビキチン化することができることを見出す図6D。この実験において、本発明者らは、6つのコントロール反応を含む。最初の4つのコントロールは、それぞれE1またはE2UbcH5cまたはHis6-ビオチン-N-末端ユビキチンまたは組換えIRS1を省略して30°Cで90分間行った反応である。最後の2つのコントロールは、免疫沈降されたFbxo40なしでIgGを有さない、または非特異的ウサギIgGを有する溶解物とインキュベートされたビーズと行った完全反応である。ポリユビキチン化IRS1は、60分または90分後に30°Cで完全反応において観察することができる。これらのデータは、Fbox40がIGF1処理時にIRS1タンパク質を制御するE3リガーゼであるという仮説を支持する。実施例5Rbx1の部分的ノックダウンはC2C12筋管におけるIGF1の肥大作用を強化するFbxo40の阻害が筋肉肥大を誘導することができるという間接的な証拠として、本発明者らは、Fbxo40と関連し、かつ、IRS1のユビキチン化におけるその機能がFbxo40を必要とするRbx1を部分的にノックダウンする。実験の以下のセットにおいて、本発明者らは、QiagenからのsiRNAでRbx1発現をノックダウンする。図5Aに示されるとおり、siRbx1_1およびsiRbx1_2はタンパク質発現を基底レベルの約50に低下させることができるが、siRbx1_3はわずかに機能することに注意すること。本発明者らは、この実験のためにsiRbx1_1およびsiRbx1_2のみを使用した。トランスフェクト細胞を24時間、2つの異なる用量のIGF1で処理する。筋管の直径を、それぞれの処理群の10枚の写真で自動ソフトウェアを使用して測定する。Rbx1のノックダウンは、1nMのIGF1処理でいっそうより大きい筋管の産生をもたらす図7A。siCONトランスフェクト細胞において、10nMのIGF1のみが統計的に有意により厚い筋管を生産する。二元ANOVAを使用する統計分析は、siRbx1_1およびsiRbx1_2の導入が、siCONトランスフェクト細胞よりもIGF1の肥大作用を有意に強化することを示す図7B。実施例6Fbxo40のノックダウンは、より厚い筋管および筋肉量の増加をもたらす本実施例は、Fbxo40のノックダウンがより厚い筋管をもたらし、筋肉量の増加を示すことを示す。IGF1が分化後の筋管のサイズを増加することができるため、本実施例は、Fbxo40ノックダウンのインビボ結果を決定するために設計する。Rommelら2001NatCellBiol310091013Jacqueminら2004ExpCellRes299148158およびSemsarianら1999Nature400576581。図6Aに示されているFbxo40を標的とする3つのsiRNAのノックダウン効率に基づいて、本発明者らは、この実験のために2つの最も有効なsiRNAであるsiFbxo40_7およびsiFbxo40_8を使用する。Fbxo40発現が分化の後期に検出可能であるため図6Bおよび8A、筋管を、分化2日後にsiCON、siFbxo40_7およびsiFbxo40_8でトランスフェクトし;次に、1日後分化3日後、筋管を24時間、IGF1の2つの異なる用量のいずれかで処理する。筋管の直径を、それぞれの処理群の10枚の写真で自動ソフトウェアを使用して測定する。Fbxo40のノックダウンは、さらなるIGF1処理なしでいっそう劇的により大きい筋管の産生をもたらす図9A。筋管が内因性IGF1を生産することに注意すべきであるデータは示していない。siFbxo40_7でのノックダウン後の筋管の典型的な写真は図9Aに示されている。より大きい筋管はまた、トランスフェクション24時間後に、少し有効なsiRNAであるsiFbxo40_8で観察されるデータは示していない。筋管直径の定量化は図9Bに示されている。siCONトランスフェクトグループ中、10nMのIGF1のみが、担体だけで処理された細胞と比較して統計的に有意により厚い筋管を生産する;これらは筋管直径において約11の増加を示す。しかしながら、siFbxo40_7の導入が、siCONトランスフェクト細胞よりも有意により厚い筋管をもたらす。見られる該効果は、筋管直径において極めて大きい約50の増加である。さらに、IRS1がFbxo40と共にノックダウンされるときmRNAはsiCONトランスフェクト細胞の65に減少する、データは示していない、本発明者らは、筋管直径において約20の増加のみであることを発見し図9C、これは、いくつかの他の可能性のある基質とは対照的に、Fbxo40がIRS1の調節を介して筋管直径を調節することをさらに証明する。これらの実験は、Fbxo40のノックダウンが筋肉量の増加を示すより厚い筋管をもたらすことを示す。次に、本発明者らは、Fbxo40がまた、マウスにおいてIRS1タンパク質レベルを調節するか否かを確認する。マウス前脛骨筋に、左脚においてsiCONおよび右脚においてsiRbx1_1またはsiFbxo40_7をエレクトロポレーションする。pCMV-LacZプラスミドをsiRNAと共注入し、siRNA発現を有する線維を同定する手助けとする。2日間回復後、IGF11回注射あたり100μgを2日目、5日目および7日目に前脛骨筋に筋肉内注射する。筋肉を8日目に回収し、タンパク質抽出物を調製する。図9Dは、IRS1タンパク質がsiCONサンプルよりもsiRbx1およびsiFbxo40エレクトロポレーションサンプルにおいてより高いことを示す。加えて、より大きい筋繊維はまた、Fbxo40ノックダウンで観察され、siCONエレクトロポレーション対側脚と比較して18±5増加する図9E。したがって、筋管においてFbxo40をノックダウンすることによる表現型の結果が何であるかを決定するために実験を行う。本発明者らは、Fbxo40発現の減少がIGF1介在肥大を増強するかどうかをIGF1刺激有りおよび無しで試験する。驚くことに、Fbxo40のノックダウンは、筋管サイズにおいて劇的な増加をもたらすために十分であり;Fbxo40ノックダウンは、筋管サイズにおいて50増加をもたらす。これは、IGF1の相加効果の余地がない。IGF110nM単独は、siCONトランスフェクト細胞の筋管サイズにおいて11増加をもたらすことができるのみである。しかしながら、筋管が内因性IGF1を生産することに注意すべきである。したがって、Fbxo40の減少が内因的に生産された成長因子への非コントロール自己分泌介在肥大応答をもたらすようであり、このことはなぜFbxo40がこの自己分泌シグナル伝達を調節するために必要であるかを説明する手助けとなる。これは、Fbxo40の減少に加えてIRS1をノックダウンすることにより証明される。したがって、データは、Fbxo40のノックダウンがより厚い筋管および筋肉量の増加をもたらすことを示す。実施例7材料および方法当業者に知られている材料および方法を、本明細書における作製および使用において使用することができる。以下は例であり、非限定的材料および方法であり、実施例1から6に使用されるものを含む。抗体および阻害剤本試験において、本発明者らは、CellSignalingTechnologyからのAkt、ホスホ-AktSer473、ホスホ-AktThr308、ホスホ-GSK-3α/βSer21/9、IGF1受容体β、ホスホ-IGF1受容体βTyr1135/1136、ウサギポリクローナルIRS1、p44/p42MAPキナーゼ、ホスホ-p44/p42MAPキナーゼThr202/Tyr204、ホスホ-mTORSer2448、mTOR、ホスホ-p70S6キナーゼThr389、p70S6キナーゼ、c-Cbl、NEDD4およびα/β-チューブリン抗体;SantaCruzBiotechnologyIncからの抗-Cbl-bマウスモノクローナル抗体;BDTranductionLaboratoriesからの抗-Skp1抗体;Milliporeからの抗-Cullin7およびウサギポリクローナル抗-IRS1抗体およびマウスモノクローナル抗-IRS1抗体;Abcamからのウサギポリクローナル抗-Rbx1抗体;Invitrogenからのマウスモノクローナル抗-ユビキチンおよび抗-myc抗体を使用する。Fbxo40に対するウサギポリクローナル抗体Fbxo40-691:710:CEKARESLVSTFRARPRGRHF配列番号:34は、OpenBiosystemsにより作製され、アフィニティー精製されている。シグナル伝達阻害剤、ラパマイシン100nMの最終濃度で使用される、LY29400250μMの最終濃度、ウォルトマンニン100nMの最終濃度、Akt阻害剤API-21μMの最終濃度、GSK3阻害剤LiCl20mMの最終濃度、p38MAPキナーゼ阻害剤SB20219010μMの最終濃度、MEK阻害剤PD9805925μMの最終濃度、MEK1/2阻害剤MEK1およびMEK2の細胞透過性選択的阻害剤、10μMの最終濃度およびJNK阻害剤V20μMの最終濃度は、EMDChemicalsIncから購入する。細胞培養C2C12筋芽細胞ATCCを、以前に記載されているとおりに培養し、分化する。Rommelら1999Scence28617381741。0日目を、細胞を低血清分化培地に移した日として定義する。阻害剤処理およびウェスタンブロッティング細胞を、温かい無血清DMEMで2回洗浄し、中間で新鮮な培地の交換で、無血清DMEM中で4時間飢餓にする。次に、シグナル伝達阻害剤を加え、細胞を30分間前処理し、さらに5時間、規定されている10nMのIGF1R3形態、SigmaStLouisMOまたは10μMのEmetinSigmaStLouisMOまたは20μMのMG132AlexisBiochemicalsCarlsbadCAを有する新たに調製された阻害剤とインキュベーションする。細胞を氷冷PBSで2回濯ぎ、10μMのMG132およびプロテアーゼ/ホスファターゼ阻害剤錠剤RocheBaselSwitzerlandを有する氷冷RIPAバッファー中に回収する。細胞溶解物を4°Cで少なくとも1時間回転し、10分間16,000×gで微小遠心管中で4°Cでスピンする。上清のタンパク質濃度を、BCAProteinAssayKitにより決定する。等量のタンパク質10-20μgを、4-12のBis-TrisゲルInvitrogenCarlsbadCA上にレーン毎に負荷し、PVDF膜MilliporeBillericaMAに移す。膜をTBST中の10w/vのミルク中で室温で1時間ブロックし、次に5のBSAを有するTBST中で4°Cで一晩、一次抗体とインキュベーションする。二次抗体を室温で1時間、膜とインキュベートする。免疫反応をECLにより検出し、フィルムまたはKodakImageStation4000Rに暴露する。密度測定を、KodakMolecularImagingsoftwareversion40を使用して分析する。タンパク質安定性の測定細胞を、温かい無血清DMEMで2回洗浄し、中間で新鮮な培地の交換で、無血清DMEM中で4時間飢餓にする。0時に、10μMのエメチンまたは100μg/mlのシクロヘキシミドまたは10nMのIGF1または20μMのMG132を、規定されている細胞に加える。指示される時間間隔で、細胞をPBSで2回濯ぎ、10μMのMG132およびプロテアーゼ/ホスファターゼ阻害剤を有する氷冷RIPAバッファー中に回収する。細胞溶解物を4°Cで少なくとも1時間回転し、10分間16,000×gで微小遠心管中で4°Cで回転させる。上清をウェスタンブロッティングにより分析する。インビボでのユビキチン化アッセイおよび免疫沈降His-myc-ユビキチンアデノウイルス発現構築物を、生産および精製のためにWelgenIncに送る。精製されたアデノウイルスを、分化2日後に2x108pfu/mlの濃度で一晩、C2C12細胞に加える。感染48時間後に、細胞を飢餓にし、5時間、規定された10nMのIGF1または20μMのMG132または5μMのG5イソペプチダーゼ阻害剤、EMDChemicalsIncGibbstownNJで処理する。次に、細胞をPBSで2回濯ぎ、10μMのMG132、5μMのG5およびプロテアーゼ/ホスファターゼ阻害剤錠剤を有する10cm皿毎に800μlの氷冷RIPAバッファー中に回収する。細胞溶解物を4°Cで少なくとも1時間回転し、10分間16,000×gで微小遠心管中で4°Cで回転させる。上清のタンパク質濃度をBCA分析により決定する。この物質1mgの全タンパク質を、回転させながら4°Cで一晩、40μlのM-280ヒツジ抗ウサギIgGDynabeadsInvitrogenCarlsbadCAと一緒に、ウサギポリクローナルIRS1抗体CellSignalingDenversMAおよび非特異的ウサギIgGそれぞれ3ugとインキュベートする。次に、ビーズをTritonLysisBuffer50mMのTris-HCl、150mMのNaCl、5mMのEDTAおよび1のTriton、pH7.4で3回洗浄する。溶離を、100mMのDTTを有する30μlのサンプルバッファー中でビーズを再懸濁し、次に、95°Cで5分間沸騰することにより行う。溶解物のアリコート20μgを、100の溶出液と共にウェスタンブロッティングにより分析する。IRS1およびRbx1共免疫沈降実験において、3日目に、C2C12筋管を、中間で新鮮な培地の交換で、無血清DMEM中で飢餓にする。次に、細胞を、無血清DMEM中の10nMのIGF1および20μMのMG132で16時間処理する。細胞を氷冷PBSで2回濯ぎ、10μMのMG132およびプロテアーゼ/ホスファターゼ阻害剤を補った氷冷Triton溶解バッファーに溶解する。細胞溶解物を、16,000×gで4°Cで少なくとも1時間回転する。上清1mgを、回転させながら4°Cで一晩、40μlのM-280ヒツジ抗ウサギIgGDynabeadsと一緒に、ウサギポリクローナルIRS1抗体細胞シグナル伝達および非特異的ウサギIgGそれぞれ3ugとインキュベートする。結合したタンパク質を100mMのDTTを有する30μlのサンプルバッファーで溶離する。あるいは、Fbxo40とのIRS1およびRbx1共免疫沈降の実験において、3日目に、C2C12筋管を飢餓にし、上記されているとおりに10nMのIGF1または20μMのMG132で処理する。細胞溶解物1mgを、40μlのM-280ヒツジ抗ウサギIgGDynabeadsと一緒に、アフィニティー精製されたFbxo40抗体および非特異的ウサギIgGそれぞれ3ugとインキュベートする。インビトロでのユビキチン化アッセイインビトロでのユビキチン化アッセイにおいて、酵母E1、ヒト組換えUbcH5c、ヒトHis6-ビオチン-N-末端ユビキチン、ユビキチンアルデヒドおよびエナジーリジェネレーション溶液ERSを、BostonBiochemIncから購入する。ラクタシスチンを、AlexisBiochemicalsから購入する。精製された組換えIRS1タンパク質を、Milliporeから購入する。2日目に、C2C12筋管を、16時間、完全培地中の10nMのIGF1および20μMのMG132で処理する。細胞を氷冷PBSで2回濯ぎ、10μMのMG132、5μMのG5およびプロテアーゼ/ホスファターゼ阻害剤を補った氷冷Triton溶解バッファーに溶解する。細胞溶解物を、16,000×gで4°Cで少なくとも1時間回転する。上清1mg、回転させながら4°Cで一晩、40μlのM-280ヒツジ抗ウサギIgGDynabeadsと一緒に、抗Fbxo40抗体または非特異的ウサギIgGそれぞれ3ugとインキュベートする。1つのコントロール条件において、あらゆるIgGを有さない溶解物をビーズとインキュベートする。次に、ビーズを、振動させながら10分間、Triton溶解バッファーで3回洗浄する。ユビキチン化反応は、40μlの全容量中E1125nM、UbcH5c3.125μM、His6-ビオチン-N-末端ユビキチン5.4μM、1×ERS、ユビキチンアルデヒド5μM、ラクタシスチン20μM、組換えIRS140ngおよび反応バッファー50mMのHEPES、0.6mMのDTT、pH7.4をビーズに加えることにより行う。反応は、30°Cで0、30、60、90分間行う。コントロール反応は、30°Cで90分間、E1またはE2UbcH5cまたはHis6-ビオチン-N-末端ユビキチンまたはIRS1の脱落で行う。それぞれの条件は、デュプリケートセットで行う。1つのセットについて、反応は、反応混合物をビーズから分離し、SDS-PAGEサンプルバッファーを加え、加熱することにより終える。別のセットについて、さらなる氷冷Triton溶解バッファー800μlを加え、反応を停止する。次に、反応混合物をビーズから分離し、回転させながら4°Cで一晩、40μlのM-280ヒツジ抗ウサギIgGと一緒に、ウサギポリクローナル抗-IRS1抗体細胞シグナル伝達ともう1回免疫沈降に付す。結合したタンパク質を100mMのDTTを有する35μlのサンプルバッファーで溶離する。反応物をMOPSランニングバッファーを有する4-12のBis-Trisゲルまたは3-8のTris-AcetateゲルInvitrogenに流し、ストレプトアビジン結合セイヨウワサビペルオキシダーゼPierceでの免疫ブロット法のためにPVDF膜に移す。siRNA配列他に示されていない限り、siRNAは、Qiagenから購入する。本発明者らは、本発明者らのコントロールsiRNAとしてAllStarsネガティブコントロールsiRNAを使用した。siRNAの標的配列は以下のとおりである。ユビキチン結合に関与するタンパク質を標的化するsiRNAライブラリーは、Dharmaconから購入する。このライブラリーは3つのサブセットを含み、これはE1、E2、F-boxおよびSOCSboxタンパク質、cullin、HECTドメイン含有、RINGフィンガーおよびRINGフィンガー様ドメイン含有E3を含む。それぞれの遺伝子は、4つの個々のsiRNAのプールにより標的化される。DharmaconからのON-TARGETプラス非標的siRNAプールをネガティブコントロールとして使用する。二本鎖RNAの一本鎖のみを示す。Fbxo40siRNAsiFbxo40_7は、配列CACCTCCTGGAAAGTCCACAA配列番号:19を標的化し;このsiRNAは、Qiagenカタログナンバーsi04390162である。Fbxo40siRNAsiFbxo40_8は、配列GTGGGAAAGTATGTTCAGCAA配列番号:20を標的化し;このsiRNAは、Qiagenカタログナンバーsi04390169である。Fbxo40siRNAsiFbxo40_9は、配列AGCCGTGGATGCCAAAGACTA配列番号:21を標的化し;このsiRNAは、Qiagenカタログナンバーsi04390176である。RNAi1日目に、C2C12細胞に、HiPerfectトランスフェクション試薬用のQiagenプロトコールに記載されているsiRNAをトランスフェクトする。簡潔には、該方法は、6-ウェルプレートにおいて培養された細胞について以下に記載されている。最初に、56μlのOPTI-MEMInvitrogenを4μlのsiRNA10μMのストックと混合する。次に、40μlのHiPerFectトランスフェクション試薬をこの混合物に加え、100μlの全容量とする。該混合物を室温で10分インキュベートし、トランスフェクション複合体の形成をする。一方、細胞に6ウェル皿のウェル毎に2mlの新鮮な分化培地を与える。100μlの複合体を、1つのウェル中の細胞上に滴下する。プレートを、均質な分配を保証するように穏やかに回転させ、37°Cインキュベーターに戻す。トランスフェクション48時間、細胞を4時間、無血清DMEM中で飢餓にし、37°Cで16時間10nMのIGF1または20μMのMG132で処理する。次に、細胞を溶解し、タンパク質を、阻害剤処理およびウェスタンブロッティングのセクションに記載されているウェスタンブロッティングにより分析する。RNA発現もまた、トランスフェクション48時間後に確認する。1日目に、12-ウェルプレートにおいて培養されたC2C12細胞を、Dharmaconにより記載されているプロトコールにしたがってDharmafect3を使用するDharmaconsiRNAライブラリー10μMのストック溶液でトランスフェクトする。細胞とインキュベートされるsiRNAの最終濃度は100nMである。細胞を処理し、RNAを上記トランスフェクション48時間後に回収する。定量リアルタイムPCR全RNAを、Tri試薬MolecularResearchCenterIncCincinnatiOHを使用して細胞から単離する。それぞれの処理条件について、3つの独立したサンプルがある。ゲノムDNAを、TURBODNA-freekitの手助けでRNAサンプルから取り出す。RNAサンプル1μgのそれぞれのサンプルを、HighCapacitycDNA逆転写キットAppliedBiosystemsFosterCityCAを使用してcDNAに逆転写させる。得られるcDNAサンプルを1:10に希釈し、9μlを、7900HTFastRealTimePCRSystemを使用して、以下の表に記載されているTaqmanGeneExpressionAssayで384-ウェルプレートにおいてトリプリケートで分析する。データをSDSソフトウェアv2.2で分析する。コントロールsiRNAトランスフェクトまたは担体処理細胞におけるmRNAレベルを1に設定する。相対的倍数変化を、それぞれのサンプルについて2-ΔΔCt手段を使用して計算する。3つの独立したサンプルの5728平均倍数変化および平均の標準誤差をプロットする。FirstChoiceHumanTotalRNASurveyPanelは、Ambionから購入する。筋管直径の測定細胞を、処理後、氷冷PBSで2回濯ぎ、次に、37°Cで15-30分間5のグルタルアルデヒドで固定し、PBSで2回濯ぐ。CarlZeissAxioObserver.Z1蛍光顕微鏡を使用して10倍拡大レンズで、10枚の写真をそれぞれの条件に対して撮る。筋管直径を、Novartisにより開発された自動ソフトウェアを使用してTIFFフォーマット写真から決定する。それぞれのトランスフェクショングループにおける未処理コントロール細胞の平均値を1に設定し、特異的siRNAの導入をもたらし得る複雑化を除去する。相対的平均倍数変化および平均の標準誤差を計算し、プロットする。統計分析図7Bおよび9Bを除いて、2つの処理条件間の違いを一元ANOVAを使用して分析する。有意性はBonferroniposttestposthoctestにより決定する。値は、p<0.01で有意と考えられる。図7Bおよび9Bにおいて、グループ間の違いを二元ANOVAを使用して分析する。有意性はBonferroniposttestにより決定する。値は、p<0.01で有意と考えられる。マウス処理12-14週齢のC57BL/6JマウスTaconicIncHudsonNYを2-3のイソフルオランで麻酔する。毛を筋肉周辺部から剃る。0日目に、50μgのpCMV-LacZプラスミドと一緒に500pmoleのsiCONを左脛骨筋肉に注入する。右脛骨筋肉に500pmoleのsiRbx1_1またはsiFbxo40_7および50μgのpCMV-LacZプラスミドを注入する。注射後即座に、脚に、125V/cm、30ms持続時間、400ms時間間隔での5回ポジティブパルス、次に、同じパラメーターの5回ネガティブパルスでパルスを発する。マウスを2日間、それぞれのケージにおいて回復させる。Long-R3-IGF1注射毎に100μgを、2、5、7日目に、脛骨筋肉に筋肉内注射する。8日目に、マウスを殺し、脛骨筋肉を迅速に切り裂き、液体窒素で予冷された2-メチルブタンにおいてスナップ冷凍する。8μMの厚さの連続横断面を低温切開片にし、正電荷スライドにのせる。切片をι-ガラクトシダーゼLacZ染色する。全組織切片のイメージをImagescopeAperioを使用して得、LacZ陽性線維の断面積CSAをAdobePhotoshopを使用して測定する。脛骨筋肉の残りを液体窒素下で粉砕し、タンパク質を抽出する。全ての動物処理は、InstitutionalAnimalCareandUseCommitteeofNovartisInstituteforBiomedicalResearchにより承認されており、AnimalWelfareActRegulations9CFRParts12and3andUSregualtionsに従う。"