"肺疾患を評価するための方法であって、患者からサンプルを得ること;及び前記患者の少なくとも一つの肺中に存在する少なくとも一つの型のコラーゲンに対する自己免疫の証拠について前記サンプルをアッセイすること:の工程を含んでなる、前記方法。前記コラーゲンが、V型コラーゲン、V型コラーゲンの少なくとも一つのエピトープ及びV型コラーゲンの少なくとも一つの抗原性断片から成る群より選択される、請求項1に記載の方法。前記肺疾患が、特発性肺線維症、成人呼吸窮迫症候群、急性呼吸不全症候群、二次膠原病性脈管疾患及び線維性肺疾患のいずれかの形態から成る群より選択される、請求項2に記載の方法。前記疾患が閉塞性細気管支炎である、請求項1に記載の方法。前記アッセイする工程が、V型コラーゲンの少なくとも一つの抗原性成分を提供すること;及び前記サンプルの少なくとも一部と前記V型コラーゲンの少なくとも一つの抗原性成分toを接触させること:を含む、請求項1に記載の方法。前記アッセイする工程がさらに、前記抗原性成分が前記V型コラーゲンの少なくとも一つの抗原性成分に対する少なくとも一つの抗体と相互作用した場合に生成されるシグナルをモニターすることを含む、請求項5に記載の方法。肺疾患を治療する方法であって、肺中に存在する少なくとも一つの型のコラーゲンに対する自己免疫を有する患者を同定すること;該自己免疫応答を抑制する少なくとも一つの化合物を提供すること;及び前記患者に前記化合物の療法的有効量を投与すること:の工程を含んでなる、前記方法。前記コラーゲンが、I型コラーゲン、II型コラーゲン、III型コラーゲン、IV型コラーゲン及びVI型コラーゲンから成る群より選択される、請求項7に記載の方法。前記コラーゲンがV型コラーゲンである、請求項7に記載の方法。前記疾患が特発性肺線維症、成人呼吸窮迫症候群、急性呼吸促迫症候群、二次膠原病性脈管疾患、線維性肺疾患のいずれかの形態から成る群より選択される、請求項7に記載の方法。前記化合物がシクロスポリン、免疫システム調節分子及び免疫システムの成分に対する抗体から成る群より選択される、請求項7に記載の方法。前記化合物が、V型コラーゲンの少なくとも一つの抗原性成分である、請求項7に記載の方法前記化合物が、肺内点滴注入により患者に投与される、請求項7に記載の方法。前記化合物が経口摂取により患者に投与される、請求項7に記載の方法。移植された臓器組織を拒絶することについて、増加したリスクがある患者を同定する方法であって、患者からサンプルを得ること;及び肺中に存在する少なくとも一つの型のコラーゲンに対する自己免疫の証拠について前記サンプルをアッセイすること:の工程を含んでなる、前記方法。前記サンプルが、血液、血清、間質性肺液、痰、粘液、組織などから成る群より選択される、請求項15に記載の方法。前記コラーゲンが、I型コラーゲン、II型コラーゲン、III型コラーゲン、IV型コラーゲン及びVI型コラーゲンから成る群より選択される、請求項15に記載の方法。前記コラーゲンがV型コラーゲンである、請求項15に記載の方法。閉塞性細気管支炎BOSを発生する、増加したリスクがある患者を同定する方法であって、患者から血液のサンプルを得ること;及び肺に観察されるコラーゲンの少なくとも一つの型に対する自己免疫反応の証拠について前記血液のサンプルをアッセイすること:の工程を含んでなる、前記方法。前記コラーゲンが、I型コラーゲン、II型コラーゲン、III型コラーゲン、IV型コラーゲン及びVI型コラーゲンから成る群より選択される、請求項19に記載の方法。前記コラーゲンがV型コラーゲンである、請求項19に記載の方法。前記試験が抗体に基づいたアッセイであり、前記アッセイが、前記サンプルの少なくとも一部と、コラーゲンの少なくとも一つの抗原性成分に対する抗体に対する抗原とを接触させ;前記抗原を、前記抗原に対する少なくとも一つの抗体に結合させること、ここで前記抗体は前記サンプル中に存在している;前記サンプル中の前記抗体の、前記抗原への結合を示す少なくとも一つのシグナルをモニターすること:の工程を含んでなる、請求項19に記載の方法。前記抗原が、V型コラーゲン、V型コラーゲンの抗原性成分及びV型コラーゲンの少なくとも一つの抗原性成分の抗原性類似体:から成る群より選択される、請求項19に記載の方法肺疾患を評価するためのキットであって、V型コラーゲンの少なくとも一つの抗原性成分;及び前記少なくとも一つの抗原性成分が少なくとも一つの抗V型抗体に結合した場合にシグナルを発生する少なくとも一つの部分:を含んでなるキット。前記キットがさらに表面を含み、前記表面は前記少なくとも一つの抗原性成分を結合するために適している、請求項24に記載のキット。前記表面が、フィルター、ビーズ、プレート、膜、チップ、スライドなどから成る群より選択される物体の一部である、請求項25に記載のキット。前記キットがさらに、レポーター分子、レポーター原子、キット中の抗原に結合された抗体に対する抗体、緩衝液、安定化剤、抗菌剤及びアジュバントから成るリストから選択される化合物の少なくとも一つを含む、請求項24に記載のキット。実施例1移植後肺患者はV型コラーゲンが特異的な自己免疫を発生していたかどうかを決定するため、8人の肺移植片レシピエント及び5人の腎臓移植片レシピエントグッドパスチャー症候群を有する、IV型コラーゲンcol自己免疫からの白血球、及び3つの異なったコラーゲンを使用する遅延型過敏性DTHアッセイを行った。図3、パネルAに示したように、肺移植片レシピエントからのT細胞はcolVに応答したが、colIV又はcolIIには応答せず、一方、グッドパスチャー症候群を有する患者からのT細胞はcolV又はcolIIには応答せずに、colIVに対して有意により高いDTH応答を有していた。この鍵となる発見は、肺移植片レシピエントが抗V型コラーゲン自己免疫を有していることを示している。我々は次ぎに、抗V型コラーゲン自己免疫応答が、肺移植を待っているいずれの患者にも観察することができ、それ故特定の患者が低下した肺機能及び拒絶を生じ易くできる先在条件を反映しているかどうかを決定した。肺移植を待っている多様な末期肺疾患を有する23人の患者における抗colVDTH応答の解析は、一つの特定の群が抗V型コラーゲン自己免疫応答を有していることを示した。図5に示したように、特発性肺線維症IPFの患者が抗colVDTH応答を示し、それはいずれか他の疾患を有する患者で観察されたよりも2倍高かった。この鍵となる発見は、IPFがV型コラーゲンに対する自己免疫応答により起こされ得ることを示している。この発見をさらに支持するため、いくつかの異なった原因により肺移植を待っている患者を、colVか又はcolIIに対するかれらの自己免疫応答について試験した。図3、パネルBに示したように、IPF患者からのT細胞のみがV型コラーゲンに特異的である自己免疫応答を示した。UniversityofWisconsinで移植したIPFを有する患者は有意に低い1年移植片生着p=0.05図3パネルCを有したことを示したのは興味深く、それは先在するV型コラーゲンへの自己免疫応答がより速い肺機能の喪失及び死を生じ得ることを示唆する。図3及び5に示された結果は、IPFはV型コラーゲンへの自己免疫応答により起こされ得ること、これらの患者はこの自己免疫応答のためより速い速度で肺を拒絶するであろうこと、及びこれことがV型コラーゲンによる経口免疫寛容療法に応答するであろう追加の患者の群を表していることを示している。IPF患者で観察されたような、V型コラーゲンに対する先在する自己免疫応答が肺破壊を生じるであろうという考えを裏付けるため、我々は、我々のラット移植モデルを使用した。WKYラットを何もなしで図6a、ニワトリ卵リゾチームHEL図6bか又はV型コラーゲン図6cで免疫し、同系移植肺を移植した。観察されるように、何もなしで又はHELで免役したラットは正常肺病理を示した。対照的に、V型コラーゲンに対して活性免疫応答を有するラットは30日以内にそれらの同系移植片肺を破壊した。これらのデータはさらにV型コラーゲンへの自己免疫応答と一致しており、V型コラーゲンに対する自己免疫応答を示さない肺移植片レシピエントで予期されるよりも、移植された肺及び肺組織の拒絶のより高いリスクを示している。実施例2閉塞性細気管支炎BOSは、肺移植後の移植片機能損失の主要原因である。肺細胞外マトリックス中のマイナーコラーゲン、V型コラーゲンcolVはラット肺同種移植片拒絶の病変形成に結びつけられてきた。ヒト肺移植後のcolVに対する自己免疫がBOSの素因となるという仮説を試験するため、我々は末梢血中の遅延型過敏性DTH応答及び気管支肺胞洗浄BAL中の抗体応答を試験した。1988年から2003年6月まで、UniversityofWisconsinで実施されたすべての肺移植n=229を、BOSの素因となるリスクファクターについて遡及的に分析した。56人のこれらのレシピエント、10人の正常対照及び25人の移植を待っている患者における、colV又はcolIIに対するDTH又は抗体を測定した。すべての対象は、UniversityofWisconsin及びIndianaUniversitySchoolofMedicineで、IRB認可インフォームドコンセント手順を使用することにより同意した。1988年から2003年3月まで、UniversityofWisconsinHospitalandClinicsで一次肺移植を受けた229人の内、3人は技術的失敗のため分析から除外した。すべての患者は、移植後0.5、1、3、6、9及び12ヶ月、及び臨床的に指示された場合はその後でもプロトコール気管支肺胞洗浄BAL及び経気管支生検TBBを受けた。TBB組織はサイトメガロウイルスCMV封入及び細胞浸潤についてスクリーニングした。colV研究患者n=56には、2000年に開始された移植後DTH研究プロトコールに登録された29人が含まれており、BALが保存されていた23人の患者が遡及的にcolVに対する抗体を試験し、4人の患者は移植後3~6年から始まったDTHについてのみ試験した。さもなければ、およそ6、12及び18ヶ月目及びその後は毎年、DTHアッセイのために血液サンプルを採取した。非喫煙成人血液ドナー及び気管支鏡検査を受けているボランティア及びBAL液の収集物が、陰性対照として働いた。グッドパスチャー症候群のための腎臓移植後の5人の患者もDTH試験における対照血液ドナーとして採用された。BOSレベルI一次研究エンドポイントは、少なくとも移植90日後、最大移植後値の<80へのFEV1の持続的低下により診断された9。IgGは、商業的に調製されたProteinGセファロースカラムを製造元のプロトコールに従って通過させることにより、患者及び対照のBAL液から親和性精製された。すべての溶出フラクションは使用するまで-80°Cで凍結した。colVに対する抗体は、検出にヒツジ抗ヒトIgGアイソタイプ特異的抗体を使用したことを除いて、以前に記載されているウェスタンブロット技術を使用して分析した。ウシcolII及びcolV又はヒト胎盤から抽出した10colVを標的抗原として使用した。CB-17SClDマウスはHarlanSpragueDawleyIncから購入するか、又は近くで繁殖させた。全ての動物はNIHガイドラインに沿って飼育し及び処置した。トランスビボDTHアッセイは、以前に記載されているようにii、SOlDマウスの足蹠内にヒトPBMC及び抗原を同時導入することにより実施した。ヒトcolV、collV又はウシcolII5μg/注入;SouthernBiotechBirminghamALが試験抗原であった。足蹠厚はダイアル厚さ計を使用し、注射前及び24時間後に測定した。緩衝液を伴ったPBMC単独によるバックグラウンド膨潤を差し引いて、抗原特異的応答を決定した。バックグラウンドを>25x10-4インチ超える膨潤応答を陽性と考えた12。BOSフリー生存率はKaplan及びMeierの方法を使用して見積り、そしてlogranktestを使用して群間を比較した。陰性colVDTH又はAb応答の基準は厳格であった-たとえ全ての他の時点で陰性であっても、ウェスタンブロットでのわずかに陽性の抗colVバンド又は最小陽性DTH応答25x104インチを有する患者は陽性と考えた。Coxの比例ハザードモデルを、疑わしいリスクファクター間の関連を評価するために使用し、そのいくつかは時間-変動,及びBOSフリー生存であった。P値<0.05は有意であると考えた。全ての分析はSAS統計ソフトウェアリリース6.12、SASInstituteIncを使用して実行した。移植前colVDTH応答はクラスカルワリス検定を使用し、IPF患者サブグループ及び他のグループ間で比較した。ここで表1図7を参照すると、ここに要約されているのは、UniversityofWIMadisonでの226人の肺移植片レシピエントにおける個体統計及びBOSのの発生率である。BOSは86人の患者38で発生した。両側肺移植n=93と比較して片側n=133でより多かった。平均経過観察期間は3.7年であった。全体の比率の構成及びcolV研究サブセットの構成はBOSの発生率、平均経過観察期間、及び各疾患カテゴリーにおける患者の比率に関して類似していた。我々は以前にIgG2産生が、肺同種移植片拒絶の病状発生の間にBAL液で選択的に増加したことを報告した10。図1Aに図解したように、肺移植片患者L3BOSレベルIII移植片機能損失及びL41BOSなしのBALから単離されたIgG抗体は、ウェスタンブロットにおいてcolVに強く結合したが、colIIには結合しなかった。ウシ及びヒトcolVの両方ともBALIgGにより等しく認識されるたことはデータは示されていない、標的エピトープが種を超えて保存されていることを示している。患者L3及びL41とは対照的に、BOSを発生していないL31のBALサンプル中では、colVへの結合は弱いか又は観察されなかった図1A;陰性結果は正常ボランティアのBALから単離されたIgGでも観察されたn=10;データは示されていない。次ぎに、我々は、末梢におけるトランスビボDTH試験を使用して及び局所的にBAL抗体分析により、BOSの発生と抗colV自己免疫との関係を試験した。同一の3人の患者の臨床経過を図1Bに示した。患者L3は、試験された移植後の最も早い時期に180日、強い及び特異的な抗colVDTH反応性を有しており、FEV-1は未だ最高レベルであった。強いcolV抗体応答はBOSの発生直前にも検出され黒色矩形、その時FEV-1の値は最大の80付近で停滞していた。DTH及びcolVに対する抗体応答の両方がBOSの発生の間に検出されたが、450日目のBOS末期グレードIIIではDTH反応性は失われた。患者L41は、colVに対する強い早期応答を有するが、同種移植片機能の持続的低下がない患者の例である。抗colV抗体2が48~213日目で検出され、及び188~460日目に得られた全てのPBMCサンプルはcolVに対してDTH陽性であった。500日目から抗colVDTH応答は変動し、そして一般に減少した。980日目の急性拒絶病状発生後、BOS-1についてのカットオフの直ぐ上の、最大FEV1のおよそ82で安定化した。患者L31は49日目にcolVに対する弱い抗体応答及び400日目に最小陽性抗colVDTH応答を有したが、強い自己免疫反応性を発生することはなかった。該患者は優れた移植片機能を>5年維持し、そしてつい最近のPBMCサンプル1600日目は抗colVDTH応答について陰性のままである。colV応答及び同種移植片機能のこれら三つのパターンは、56人の患者の研究サブグループで見られたものを代表している。図1Cは、各カテゴリーにおける4人の追加患者の移植後時間経過を示している。各々の線は単一の患者についての最大FEVlを表しており、及び各々の赤色記号はcolVについて陽性試験を表しているBAL中の抗体か又はDTHアッセイにおいて>25の正味足蹠膨潤。緑色記号は陰性抗colV結果を示している。第一のカテゴリー中の4人全ての患者抗colV、BOSは、L3患者と同様に、移植片機能の喪失に先立って陽性DTH又は抗体試験を示した。第三のカテゴリーの患者抗colV-、BOS-は、colVに対する応答をほとんど示さず、そしてすべて3~6年の経過観察でBOSフリーを続けた。中間のカテゴリーの患者は、抗colV応答についての繰り返した陽性試験にもかかわらず、移植後1~3年優れた移植片機能を何とか維持していたので、最も興味深い。BOSか又は移植片機能損失又はエンドポイントとしてのBOS単独に関連するリスクファクターの遡及的分析の結果は表2図8に示されている。全患者集団中で、BOSの有意により高いp<0.05リスクの素因となる移植前因子には、ドナーとの2DR不適合を有しているRR=1.64vs.0又は1DR不適合、及び慢性閉塞性肺疾患、COPDRR=1.7又は他のRR=1.9の疾患カテゴリーを有しているものが含まれる。BOS又は移植片機能損失のより低い発生率の素因となる移植前因子には、嚢胞性線維症CFの本来の疾患又は両側肺移植を受けているこの疾患カテゴリーの主な治療が含まれる両方ともRR=0.35。BOSについての移植後リスクファクターも評価した。予期されたように、急性拒絶病状発生の発生率は、BOSの1.4~1.5倍より高いリスクと関連し、それは極めて有意であった。しかしながら、CMVドナー肺のCMV-レシピエントへの移植、又は移植後期間におけるバイオプシ証明CMVはBOSと有意に関連しなかった。図8を再び参照すると、表2は、Cox比例ハザード肺移植モデルを使用し、colVへの応答について分析された56の肺移植片レシピエントにおける乏しい機能BOSI又は移植片機能損失又はBOSI発生の分析を要約している。この患者の下位集団において、急性拒絶は再び乏しい機能についてのリスクであった。乏しい移植片機能についての最も高いRR12.3は、BOS発生に近い時点でcolVに対して陽性DTHを有する患者で観察された。対照colIIに対するDTH応答はBOSの発生に相関を示さずRR=1.0、colVに対するDTH応答はBOSリスクの特異的マーカーであることを示している。2は、colVに対するDTH応答とBOSの発生の関係を、如実に示している。移植後370日目上のパネル及び760日目下のパネルに良好な肺機能>80最大FEV1を有する患者を、抗体及び/又はDTH分析に基づいてcolV対colV-応答者に分割し、カプランマイヤー分析を、エンドポイントとしてBOSIまでの時間で実施した。各時点に先立って抗colV反応性を有する患者の半分以上が次の2年以内にBOSを発生し、一方、colVに対して陰性応答を有する患者は主にBOSフリーであった。BAL中の抗colV抗体のレベルは、何らかの原因によりBOSの発生又は移植片機能損失RR=2.3、及びBOS単独のリスクRR=2.08と有意に関連した。二つの指標、DTH又はcolVに対する抗体が合わさった場合、BOS又は移植片機能損失に対するRRは12.7であり、BOSを発生した全ての患者がいくつかの前の時点で陽性DTHか又はcolVに対する抗体応答を有していたので、BOSについては計算することができなかった、表2図8。肺移植後患者で見られた抗colV応答が、特定の患者に乏しい機能を生じやすくすることができる、前々から存在している状態の単なる反映しているかどうかを決定するためCOPDを有する患者はより高い移植前抗colV応答を有し、一方、CFを有する患者はより低い応答を有する、肺移植を待っている、多様な末期肺疾患を有する23人の患者における抗colVDTH応答を分析した。図3、パネルAに示したように、ほとんど末期の肺疾患を有する患者は抗colVDTH応答を有しておらず、既知の肺疾患を有していない正常対象で見られたことと著しく異なっている。例外はIPFを有する患者である。これらの患者における抗colVDTH応答はいずれか他の疾患を有する患者で見られるもののおよそ2倍であった。興味深いことに、UniversityofWisconsinで移植したIPFの患者は、有意に低い1年移植片生存率p=0.05、データは示されていない、しかし同様の5年生存率及びBOS発生の比率を有していた表1。肺移植後患者におけるコラーゲンに対する自己免疫の発生がV型コラーゲンに特異的であったかどうかを決定するため、8人の肺移植レシピエント及びグッドパスチャー症候群IV型コラーゲン自己免疫を有する5人の腎臓移植レシピエントに対し、colII、colIV及びcolVを使用してDTHアッセイを実施した。図3、パネルBに示したように、肺移植レシピエントはcolVに応答したがcolIV又はcolIIには応答せず、一方、グッドパスチャー症候群を有する患者はcolV又はcolIIへの応答なしに、colIVに対し有意に高いDTH応答を有していた。実施例3V型コラーゲンに対する体液性又は抗体仲介免疫応答の検出のためのビーズアッセイ。このアッセイは、V型コラーゲン自己免疫応答を有する患者からの血清及び/又は肺洗浄液中に存在することができるV型コラーゲンに対する抗体を検出するであろう。V型コラーゲン-被覆ビーズならびに他の必要な試薬がこのアッセイのために提供される。末端利用者は、血清及び/又は肺洗浄液、及びアッセイを実行するためのPBSのような通常の試薬又はこれらの試薬はキット中に組み入れることが可能であるを提供することができる。簡単には、典型的なアッセイは以下のようである:1ストレプトアビジン被覆ビーズ5μm、結合能10~20μg/lx10/7ビーズPolyscienceWarringtonPAを滅菌PBSで2回洗浄した。ビーズ1x10/7を40μgのヒトV型コラーゲンを含んだ100μlのPBSに懸濁し、4°Cで60分インキュベートした。2ヒトコラーゲンV抗体に対する20μmのウサギ抗体ビオテンAbeamCambridgeMAを使用し、上記1と同一手順で陽性対照を発生させた。3各アッセイについて、1x106コンジュゲートビーズをPBS中で2回洗浄し、50μlの血清又は肺洗浄液を加えた100μlのPBS中でインキュベートした。室温で30分インキュベート後、ビーズを10FCS含有PBSで3回洗浄した。4ビーズを100μlの滅菌PBS10FBSに懸濁し、室温で約30分、二次抗体とインキュベートした。典型的には、R-PEにコンジュゲートされた5μlの抗ヒトIgG抗体を使用したSigmaSaintLouis。ビーズを10FCS含有PBS中で3回洗浄し、300μlのPBS/FCS溶液に懸濁し、フローサイトメーターを使用して分析した。このアッセイの例の結果は図9に要約されている。陽性対照については、既知の量の抗コラーゲン-V抗血清をビーズアッセイに加えた。図9の右側のパネルが図示しているように、抗コラーゲンV抗体の量の増加は、平均蛍光チャンネルの右への著しいシフトを生じる。それ故、この方法は患者の血清中に存在する異なった量の抗体を検出し得る。さらに図9を参照すると、左のパネルは健康なヒト対象から得られた血清サンプルと比較された4人の患者の血清からの抗コラーゲンV抗体の検出を図示している。トレースにより図示されているように、患者457からのサンプルは右への最も大きなシフトを示し、この患者が抗コラーゲンV抗体の最も高いレベルを有していることを示唆している。患者458及び420は小さなシフトを示し、患者457よりも低いレベルの抗体を示し、一方、患者519は、このアッセイで反応する何らの抗体も有していないようである。図9に要約した結果により示されているように、患者457は右への最も大きなシフトを示し、この特定の患者が抗colV抗体の最も高いレベルを有することを示唆している。対照的に、患者458及び420から集められたサンプルは蛍光ピークに小さなシフトを示し;一方、患者595はこの特定のサンプル中にいずれの抗体も少しも有していないようである。これらのデータは特発性肺疾患IPD又は他の自己免疫に基づいた肺障害又は疾患を検出する、及び/又は肺移植を受けている所与の患者が移植された臓器を拒絶するであろう可能性を評価する方法を説明している。肺疾患を診断する、又はBOSを発生する所与の患者の可能性を評価するこの方法は、一般には、患者から体液例えば、血清又は間質液又は組織を集めること、およびV型コラーゲンに対する抗体の存在についてサンプルを分析することを含む。実施例4試験動物における経口免疫寛容の誘導、コラーゲン又はコラーゲンの抗原性成分に対するヒト又は動物患者の自己免疫応答を変調するためのモデル。利用された病原体フリー、MHCRTl不適合雄ラットは:HarlanSpragueDawley又はTaconicから購入され、施設のガイドラインに従ってIndianaUniversitySchoolofMedicineのLaboratoryAnimalResourceCenterに収容した、移植の時点で250~300gのFischer344F344、RTllvl、BrownNorwayBN、RTln及びWistarKyotoWKY、RTl1ラットであった。簡単には、V型コラーゲンは以下のように調製した。精製したヒトV型コラーゲン[colV]を0.005M酢酸0.5mg/mlに希釈し、アッセイに使用されるまで4°Cで貯蔵した。colVの量は、サンプル中のヒドロキシプロリン含量の決定により評価したWoessner1961。この特定の試験において、V型コラーゲンをWKY雄ラットに経口で投与した。動物180~200gには、以前に記載されているようにStarkandOstrow1990、0.5mlの生理食塩水に溶解した10μgか又は50μgのcolV、colII又はcolXI溶液を、16ゲージボールポイントステンレススチール動物摂取針BraintreeScientificBraintreeMassを利用する胃経管栄養により摂取させた。対照として、同様の動物に希釈剤のみを摂取させた。8回又は4回摂取に対し、動物は一日おきに摂取させた。最後の摂取7日後、これらのラットは同所性移植によりF344肺同種移植片を受けた。WKYレシピエント内へ移植されたWKY肺移植片同種移植片を対照として使用した。遅延型過敏性DTH応答は、Sayeghetal1992Yoshinoetal1995及びYamagamietal1999、に記載されている方法を改変して決定した。手短に言えば、肺移植2週間後、対照又はcolV摂取WKYラットは、26ゲージ注射針を使用する皮下s.c.注射により、右耳介内に、107照射3000ラドドナー由来F344又は第三者BN脾細胞の30μlPBS溶液を受けた。左耳介は等容積の希釈剤を受け、対照部位として働いた。無処置又は同種移植片レシピエントWKYラットの別々の群が、15μgのcolVを30μl容量で右耳介内に、希釈剤を左耳介内に注射されて試験された。無処置WKYラットは陰性対照として使用した。耳の厚さは、注射直前及び24時間後に盲検様式で、マイクロメーターカリパーMitutoyoFieldToolSupplyChicago111で測定した。抗原特異的DTH応答は以下の式に従って計算した:特異的耳介膨潤=右耳厚さ24時間-右耳厚さ0時間-左耳厚さ24時間-左耳厚さ0時間x10-3mmYamagamietal1999。全てのデータは三回の測定の平均として報告されている。左肺同種移植片WKY→WKY又は同種移植F344→WKYの同所性移植はMarcketal1983andPropetal1985により最初に記載されている手順を利用し、既に報告されているようにSekineetal1997実施した。発明者の以前の報告Sekineetal1997と同様に、全ての移植群において生存率は90を上回った。実験期間の間、いずれの時点でも非免疫抑制療法は与えなかった。移植肺は、移植後1日、6日及び13日目に連続胸部X線検査によりモニターした。画像的変化は以下のように段階付けした:グレード1、正常;グレード2、軽度浸潤;グレード3、中程度浸潤;及びグレード4、重篤な浸潤又は完全不透明化。5移植群を研究した:WKYラットからの肺をWKYレシピエントにWKY→WKY、対照同系移植片;F344肺を希釈剤摂取WKYレシピエントに移植F344→WKY、対照同種移植片;F344肺をcolV摂取WKYレシピエントに移植F344→colV摂取WKY、colV摂取同種移植片;F344肺をcolII摂取WKYレシピエントに移植F344→colII摂取WKY、colII摂取同種移植片;並びにF344肺をcolXI摂取WKYレシピエントに移植F344→colXI摂取WKY、colXI摂取同種移植片。予備的実験は、無摂取WKYラット内に移植された同種移植片と比較して、同種移植病態の発生、気管支肺胞洗浄BAL示差的differential細胞計数又はDTH応答に何の影響も与えなかった。BAL液は、移植1週及び2週後のケタミン麻酔肺移植片レシピエントから集めた。簡単に言えば、自然の及び移植した肺のBALは、縫合により安全にされた16ゲージカテーテルで、右及び左主気管支の選択的カニューレ挿入により実施した。体側気管支がクランプされている期間中、3mlの滅菌PBS37°Cを各主気管支内に点滴注入し、吸引した。遠心分離検体から得られた無細胞BAL上清は、使用されるまで-70°Cで貯蔵した。BAL液示差的細胞計数は、光学顕微鏡を利用してサイトスピン上の高倍率視野当たり300細胞を計数し、サンプル中のマクロファージ、リンパ球及び多形核PMN細胞の量を決定することにより行った。肺における病態の存在を検出するため、各群から移植肺を採取し、4グルタルアルデヒドの気管内点滴注入により固定し、切片とし、ヘマトキシリン及びエオシンで染色し、光学顕微鏡下で検査し、及び、移植群の予備知識無しに盲検的様式で、LungRejectionStudyGroupYousemetal1996により確立された組織学的基準に従って段階付けした。BAL液中のPMN及びリンパ球数の統計的分析は、最初にANOVAにより実行し、群間で差違が存在するかどうかを決定した。もし差違が観察されたら、StudentNewmanKeuls検定を利用する事後解析を実行して、どの群が異なっているのかを決定した。P値<0.05が有意であると決定された。対照同種移植におけるDTH及び異なった抗原が暴露された無処置WKYラットは正常に分布していないことが観察されたので、相互作用を有するranksum二方向ANOVAを利用し、群間の差違を決定した。P値<0.05が有意であると決定された。対照同種移植片及びcolV摂取同種移植片間の、ドナー同種抗原に対するDTH応答の相違はマンホイットニーU検定を利用して決定した。P値<0.05が有意であると決定された。気道及び脈管病理学的スコア間の相違は、最初にクラスカルワリス検定を利用して、続いてマンホイットニーU検定を利用する事後解析により決定した。P値<0.03が有意であると決定された。本発明者らは、colVが、マウスにおける肺同種抗原に対する局所免疫応答の標的であることを以前に示した。次ぎに、彼らは肺同種移植片拒絶の間、colVが抗原として認識されることを示した。DTH応答は、肺以外の臓器移植の多様なげっ歯類モデルにおいて、拒絶の程度と相関すると報告されてきたVanBuskirketal1998Lowryetal1985Jooetal1995。細胞性免疫応答のインビボ試験として、同種抗原への全身DTH応答を実行した。F344肺同種移植片を受けて2週間後のWKYラットにおける、及び無処置非移植WKYラットにおけるF344脾細胞、colV及びBN脾細胞第三者に対するDTH応答を試験した。図10は、F344同種移植片を受けたWKYラットは、F344脾細胞に対する有意なDTH応答[F344脾細胞か又はcolVで試験された無処置WKYラットと比較してp<0.0001]を有していたことを図示している。F344同種移植片を受けたWKYラットは、colVに対する有意なDTH応答[F344脾細胞か又はcolVで試験された無処置WKYラットと比較してp<0.0001]を有していたことを図示している;図11。統計学的に、F344脾細胞及びcolVに対する対照同種移植片のDTH応答間には差違はなかったp>0.05。データは、F344同種移植片を受けたWKYラットは第三者同種抗原BN脾細胞、RT1nへのDTH応答は有しておらず、F344同種移植片に対する免疫応答は同種特異的であることを示している。加えて、これらのデータは、肺同種移植片拒絶の間に抗原として認識されているcolVと一致している。以前の報告は、肺以外の同種移植片の拒絶の間に免疫応答の標的である抗原の経口投与はドナー臓器に対する寛容を誘導することを示しているIshidoetal1999。移植に先だって肺移植片レシピエントへのcolVの経口投与がドナー肺に対する免疫学的寛容性を誘導するかどうかを決定するため、WKYレシピエントに、上記のごとく移植に先だってcolVを摂取させた。予備的実験では、1日おきに10μgのcolVを8回摂取させ80μgの総用量、続いて最後の摂取から7日後の左同所性肺移植は、このモデルにおけるBAL細胞計数及び拒絶病態に最も大きな効果を有していた。それ故、この摂取計画を、すべての以下の研究で利用した。ColV摂取レシピエントの左肺移植を行い、上記のように実験期間の完了時に採取した。図12は、移植2週間後の対照WKY同系移植片isograftレシピエント、対照WKY同種移植片allograftレシピエント及びcolV摂取WKY同種移植片レシピエント及び正常WKYラットからのBAL液中の示差的細胞計数を図示している。同系移植片肺と比較して正常肺におけるBAL示差的細胞計数で差違はなかった。Yagyuetal1990と同様に、正常又は同系移植片肺と比較して、対照同種移植片BALにおいてはPMN及びリンパ球が有意に増加したPMNについてp<0.039、及びリンパ球についてp<0.00001。対照的に、移植に先立ってcolVを摂取させることは、対照同種移植片と比較してBAL中のPMN及びリンパ球に有意な減少を生じたPMNについてp<0.023、及びリンパ球についてp<0.00001。急性同種移植片拒絶は通常、同種移植片BAL液中の総細胞数の増加に関係するHirtetal1999。しかしながら、移植2週間後では、対照WKY同種移植片肺は重度の拒絶を通常受けており、移植片の破壊により、BAL総細胞数を決定するための十分なBALは確実には実施することが不可能である。対照的に、colV摂取同種移植片レシピエントはより軽度の拒絶を示し、それはより容易なBALを可能にし、より高い細胞計数を生じる。これらの理由のため、群間の総細胞数の比較は行われなかった。まとめると、colVによる経口免疫は、急性拒絶間の同種移植片BAL液におけるより少ないPMN及びリンパ球と関連することをこれらのデータは示している。colV摂取が同種抗原に対するDTH応答を減少させるかどうかを決定するため、対照WKY同種移植片レシピエント及びcolV摂取同種WKY移植片レシピエントは、右耳介に全同種抗原性F344脾細胞を及び左耳介にPBSを暴露した。DTH応答は24時間後測定し、特異的耳介膨潤を決定した。図10に示したように、無処置の対照同種WKY移植片レシピエントは重度の急性拒絶を受け、ドナー抗原暴露後に強いDTH応答を有した。対照的に、より軽度の同種移植片拒絶を有していたcolV摂取WKY移植片レシピエントは、ドナー抗原に対するDTH応答の有意な減少も有した。colVにより誘導された同種抗原に対する損なわれた免疫応答は、広範囲の免疫低応答性でありFariaandWeiner1999、寛容ではない。それ故、colV摂取WKYラットが他の抗原に応答できるかどうかを決定するため、これらのラットは気管内200μg/kg~1mg/kgか又は静脈内に1~5mg/kgリポ多糖LPSSigmaStLouisMOを受け、それらの用量は注射又は注入24~48時間後、肺及び全身的に重度の炎症反応を誘発することが知られている用量であったDelclauxetal1999。ラットはcolVの最後の摂取から1週間後に暴露された。誘発された疾患は肺炎及びグラム陰性菌により起こされる敗血症に類似していた。正常WKYラットと同様に、colV摂取WKYラット内の肺内へのLPSの点滴注入又はI.V.は重度の病気波打つ毛皮及び虚脱及びレシピエント肺の炎症を誘発した。これらのデータは、移植に先立ったcolVの摂取は、ドナー抗原への広範囲の免疫低応答性ではなく、寛容性を誘導することにより同種移植片拒絶を防止したことを示している。まとめると、これらのデータは、colVは広範囲の免疫低応答性ではなく、経口寛容性の誘導により肺同種移植片拒絶を下方調節するが、colII又はcolXIはしない、ことを示している。さらに、colVにより誘導された経口免疫寛容性は、ドナー同種抗原に対するDTH応答を下方調節する。同種移植片BAL液中の減少したPMN及びリンパ球数は、急性肺同種移植片拒絶間のそれほどひどくないX線検査及び組織学的病変と関連する。肺浸潤の進行する速度を決定するため、移植レシピエントを移植後1、6及び13日目に連続胸部X線検査によりモニターし、上記のように段階付けした。対照同系移植片isograftは、全てのモニターした時点でいかなる肺浸潤も有していなかった図12A。対照同種移植片において、連続X線は移植6日目に左肺に浸潤の漸進的な発生を明らかにし、それは2週目の終わりまでに重篤な浸潤及び完全な不透明化を生じた図12B。しかしながら、colV摂取同種移植片においては、浸潤の発生は対照と比較してより遅かった。X線は6日目では正常であり、移植2週間後に軽い浸潤のみが存在した図12C。ここで図13を参照すると、上段のパネルは、移植2週間後に採取した、自然の及び同系移植片WKY肺、並びに対照同種移植及びcolV摂取同種移植ラットからの自然の及び同種移植肺の肉眼的解剖学を示している。図13AはWKYラットレシピエントの同系移植片左-L及び自然肺右-Rは外観が正常であることを示している。対照的に、対照同種移植片群の左同種移植肺は自然肺と比較して暗褐色の色、萎縮及び堅いコンシステンシーであった図13B。炎症及び拒絶の結果、対照同種移植片においては体腔壁及び臓側胸膜の融合が通常観察された。colV摂取同種移植片レシピエントの移植された左肺図13Cは自然の正常又は同系移植片肺図13Aの外観を有しており、胸膜癒着はなかった。同種移植片BAL液におけるより少ないPMN及びリンパ球、胸部X線での同種移植片におけるあまりひどくない浸潤、及び保存された肉眼的解剖学は、移植に先立ってcolVを摂取させることは、拒絶病態の発生を下方調節することを示唆している。図14の下段のパネルは、移植2週間後の対照同系移植片、対照同種移植片及びcolV摂取同種移植片の代表的な組織学を示している。以前の報告Propetal1985と同様に、対照同系移植片肺は、拒絶の徴候がない正常組織学を有していた図14D。対照同種移植片は、重度の急性拒絶と一致する広範な血管周囲、気管支周囲及び肺胞単核細胞浸潤を明らかにした図14E。対照的に、colV摂取同種移植片肺においては、軽度から中程度の血管周囲及び気管支周囲のみしか検出されなかった図14F。図15中の表3は標準判定基準を使用する移植2週間後での拒絶病態の段階付けを示している。急性血管拒絶は血管周囲単核細胞浸潤の存在及び程度に従って、A0-A4に段階付けされ、及び急性気道拒絶は気道炎症の程度及び強度に従ってB0-B4に段階付けたYousemetal1996。全ての同系移植片対照肺は肺の正常構造が明らかにされたA0±0、B0±0。対照WKY同種移植片は重度の血管及び気道拒絶を有していたそれぞれA3.8±0.2、B4±0。対照的に、colV摂取WKY同種移植は軽度から中程度の血管及び気道拒絶それぞれA2.8±0.2、B2.6±0.2を示した。CoIII及びcolXI摂取同種移植片は、無処置の同種移植片と同様の拒絶病態を有していた図15。これらのデータは、colV摂取WKY同種移植片は、他の同種移植片よりも軽度の拒絶病態を有していたAスコアについてはp<0.028及びBスコアについてはp<0.009。これらのデータは、colVを摂取させることが、肺同種移植片拒絶を下方調節することを示しており、経口的に寛容化された肺移植片レシピエントは、ドナー同種抗原で再暴露後に減少したDTH応答を有すべきであることを示している。colV摂取が同種抗原に対する免疫応答を減少させるかどうかを決定するため、対照同種移植片レシピエント及びcolV摂取同種移植片レシピエントは、右耳介に全同種F344脾細胞及び左耳介にPBSを暴露した。DTH応答は24時間後測定し、特異的耳介膨潤を決定した。図14に示したように、無処置の対照同種移植片レシピエントは重度の急性拒絶を受け、ドナー抗原暴露後に強いDTH応答を有した図10に示された対照同種移植片と同一のデータ。対照的に、colV摂取同種移植片レシピエントはドナー抗原に対する有意に軽減されたDTH応答を有していた対照同種移植片と比較してp<0.02。これらのデータは、移植に先立ってcolVを摂取することは、ドナー抗原に対する寛容性を誘導することにより同種移植片拒絶を防止したことを示している。重度の拒絶反応グレード4の発病の時間である移植2週間後、同種移植片肺は示差的細胞計数の決定及び血清を採取するためBALを受けた。自然の及び移植肺を一括して採取し、固定し、切片とし、染色し、及び標準判定基準Yousemetal1996を使用して拒絶病態について段階付けした。拒絶病態の全ての説明及び段階付けは肺病理学者であるOscarWCummingsMDにより実施され、以前に報告されているようにWilkesetal1998、彼は処置群については知らされていない。図14は、移植2週間後に採取された同系移植片WKY肺、及び対照WKY同種移植片及びcolV摂取WKY同種移植片レシピエントからの自然の及び同種移植片肺の肉眼的解剖学を示している。対照WKY同種移植片動物において、図14Bは移植された左肺は自然の肺と比較して色が暗褐色で萎縮していた。対照的に、colV摂取WKY同種移植片レシピエントの移植された左肺図14Cは、自然の正常又は同系移植片肺図14Aの外観を有していた。colII又はcolXIを摂取させたWKYラット中の同種移植片肺の全体の外観は無処置同種移植片肺と類似していた。予期されるように、同系移植片肺は正常のようにみえた図14A。図14は、移植2週間後の対照WKY同系移植片、対照WKY同種移植片、及びcolV摂取WKY同種移植片の組織学も図示している。WKY同系移植片肺は正常な組織学を有していた図14D。対照WKY同種移植片は、重度の急性拒絶と一致する広範な血管周囲、気管支周囲及び肺胞単核細胞浸潤を明らかにした図11E。対照的に、colV摂取WKY同種移植片肺においては、軽度から中程度の血管周囲及び気管支周囲のみしか検出されなかった図14F。CoIII及びcolXIを摂取させたWKYラットの同種移植片肺は、無処置の同種移植片と同様の病態を有していた図15を参照されたい。経口寛容が、肺以外の臓器におけるアロ反応性の下方調節に有益であるIshidoetal1999と示されていたけれども、肺移植における経口寛容は、2002年9月13日に出願されたWilkesによる米国特許出願番号10243797で最初に報告された。肺移植のラットモデルを利用し、本発明のデータは、肺移植に先立った肺同種移植片レシピエントへのcolVの経口投与が拒絶反応を下方調節することを示している。対照同種移植片レシピエントと比較されたcolV摂取の免疫学的、放射線学的及び組織学的分析は、colVを摂取させることが、同種移植片BAL液中の減少したPMN及びリンパ球数、胸部X線での同種移植片におけるあまりひどくない浸潤、及び同種移植片の肉眼的解剖学での保存、及び拒絶病態の減少と相関していることを示した。最後に、経口的に寛容化された同種移植片レシピエントは、ドナー同種抗原に対するDTH応答を減少させた。以前に、マウスにおいてはcolVが同種抗原に対する局所免疫応答の標的であることが示されている。V型コラーゲンは肺に存在するマイナーな型のコラーゲンであり、細気管支周囲結合組織、肺胞間質及び毛細血管基底膜に位置する。これらの組織は本発明者のマウスモデルにおいて同種抗原に応答する病理学的病変の部位であることが示されておりWilkesetal1999、ヒト肺同種移植片レシピエントにおける拒絶活性の部位であるTrulock1997。抗原の経口投与は末梢性T細胞寛容を誘導する有効な方法である。この現象はしばしば経口寛容と称され:脳脊髄炎、ぶどう膜炎、糖尿病、重症筋無力症及び関節炎を含む動物における自己免疫疾患の多様なモデルでよく研究されている。しかしながら、寛容を誘導する機構は完全には理解されていない。クローンアネルギー、クローン除去を含む寛容誘導についての全ての既知の機構、IL-4、IL-10又はTGF-β仲介能動抑制による調節が経口寛容に役割を有することができるFariaandWeiner1999。一般に、抗原のより高い用量がアネルギー又はクローン除去を誘導すると報告されておりChenetal1995Whitacreetal1991、一方、低用量はサイトカイン調節及び能動抑制を誘導するFariaandWeiner1999Chenetal1994。心臓移植の動物モデルにおいて、同種間脾細胞の経口投与は、TH1活性化をバイパスすること、及びIL-4のようなTh-2由来阻害性サイトカインの選択的刺激誘導により寛容誘導に有効であることが示されているIshidoetal1999。近交系、病原体フリー、MHCRTl不適合雄F344RTllvl及びWKYRTl1ラット250~300gを移植手術に利用した。すべてのラットはHarlanSpragueDawleyから購入した。左肺同種移植片の同所性移植は既に報告されたように実行しSekineetal1997、Marck及び共同研究者1983により記述された手順を利用した。ラットはいずれの免疫抑制も受けなかった。拒絶病態は移植後の種々の時点で段階付けした。F344→WKY移植モデルは、移植後第一週の終わりまでに軽度急性拒絶グレード1、第二週の終わりまでに中程度から重度の拒絶グレード2-3及び第三週の終わりまでに重度-グレード4拒絶の発生が付随したMatsumuraetal1995。加えて、F344→WKYモデルは、再現性よく閉塞性細気管支炎BOを発生する、ただ一つの肺移植の動物モデルであるHirtetal1999。それ故、このモデルは、急性及び慢性拒絶の病因を研究する独特の機会を提供する。経口寛容の誘導における相違を観察するため、異なった摂取計画を試験した。データはより高いcolVの用量50μgと比較して、より低い用量10μgの多数回の摂取は、拒絶病状発生がより抑制的であった。それ故、本明細書で使用した経口寛容のモデルにおいて、Th2サイトカインIL-4、IL-10による調節、又はTGF-βにより仲介される活性化された抑制も、寛容誘導において重要な役割を果たしているように思われる。移植寛容の誘導は移植研究の主たるゴールになってきており、長年にわたって異なった技術が移植寛容を誘導するために利用されてきた。ドナー特異的輸血Zhengetal1999、骨髄移植Huangetal2000、同種細胞の胸腺注入Garrovilloetal1999又はドナーMHC由来ペプチドによる全身免疫SayeghandKrensky1996は多様な動物モデルにおいて移植寛容を誘導することが示されている。しかしながら、これらの技術は、寛容誘導に利用されるドナー細胞が移植に先立って寛容を誘導する十分な時間内には利用できないであろうという事実のため、潜在肺移植片レシピエントでは限定的な実用性しか有していないであろう。低用量経口寛容の実験自己免疫モデルにおいて、経口寛容化後の調節細胞は、抗原特異的様式で引き金が引かれるが、抗原非特異的様式で抑制する。それ故、標的自己抗原それ自身を同定する必要はないであろうが、抑制性サイトカインを分泌する調節細胞を誘導することが可能なタンパク質が十分に経口的に投与されるであろうFariaandWeiner1999。本明細書で使用した肺移植における経口寛容のモデルは、経口的に投与された、ドナー特異的ではないcolVはアロ反応性を抑制し、及び移植寛容を誘導することができる。発明者は、移植に先立ったcolVによる移植片レシピエントの経口治療が、肺移植における拒絶を防止するための、及びV型コラーゲン及び/又はそれらの抗原性成分に対する自己免疫反応により引き起こされることが知られている又は考えられている疾患を治療するための療法を提供するであろうことを想定する。図及びそこに引用されている参照文献を含む、実施例4から10に報告された結果の追加の議論については、その全体が本明細書において援用される、Wilkesにより2002年9月13日に出願された米国特許出願10243792現在米国特許公開番号20030078208Alを参照されたい。実施例5同種移植片拒絶の防止、及びコラーゲン及びコラーゲン様分子に対して動物を寛容化するために有用な追加のMHC様ペプチド及びコラーゲンの評価病原体フリー、MHCRTl不適合雄ラットを本研究で利用した:WistarKyotoWKY、RT1l、Fischer344F344、RT1lvl及びBrownNorwayBN、RT1nラット移植の時点で250~300g。全てのラットはHarlanSpragueDawleyはBiogenesisSandownNH.から購入し、0.005M酢酸0.5mg/mlで希釈し、使用されるまで4°Cで貯蔵した。ヒト胎盤から抽出し、示差NaCl沈殿Maresetal2000により精製されたヒトV型コラーゲン[colV]は、DrJeromeSeyercollageninducesplateletaggregationJLabClinMed95991071980CremerYeTeratoOwensSeyerKangTypeXIcollageninducedarthritisintheLewisratcharacterizationofcellularandhumoralimmuneresponsestonativetypesXIVandIIcollagenandconstituentalphachainsJImmunol1538248321994FedoseyevaZhangOrrLevinBunckeBenichouDenovoautoimmunitytocardiacmyosinafterhearttransplantationanditscontributiontotherejectionprocessJImmunol1626836421999DelclauxSRezaiguiaDelauxCDelacourtCBrunBuissionCLafumaandHarfAAlveolarneutrophilsinendotoxininducedandbacteriainducedacutelunginjuryinratsAmJPhysicalLungCellMoIPhysiol273L104L11219971040060597DuquesnoyRJLiuKFuXFMuraseNYeQDemetrisAJEvidenceforheatshockproteinimmunityinaratcardiacallograftmodelofchronicrejectionTransplantation19996715664EstenneMMaurerJRBoehlerAetalBronchiolitisobliteranssyndrome2001anupdateofthediagnosticcriteriaJHeartLungTransplant200221297310FariaandWeinerOraltolerancemechanismsandtherapeuticapplicationsAdvImmunol731532641999GarrovilloAIiOluwoleIndirectallorecognitioninacquiredthymictoleranceinductionofdonorspecifictolerancetoratcardiacallograftsbyallopeptidepulsedhostdendriticcellsTransplantation68182718341999GarsideandMowatMechanismsoforaltoleranceCritRevImmunol19971711937HansonGormanOuiCheahSolomonTrowsdaleThehumanalpha2collagengenemapstothecentromericofthemajorhistocompatibilitycomplexonchromosome6Genomics59259311989HaqueMAMizobuchiTYasufukuKetalEvidenceforimmuneresponsestoaselfantigeninlungtransplantationroleofTypeVcollagenspecificTcellsinthepathogenesisoflungallograftrejectionJImmunol2002Aug116915429HenningsenGMKollerLDExonJHTalcottPAandOsborneCAAsensitivedelayedtypehypersensitivitymodelintherateforassessinginvivocellmediatedimmunityJImmunolMethods1984May257015365HirtYouMollerBoekeStarkeSprangerWottgeDevelopmentofobliterativebronchiolitisafterallogeneicratlungtransplantationImplicationofacuterejectionandthetimepointoftreatmentJHeartLungTransplant185425481999HudsonBGTryggvasonKSundaramoorthyMNeilsonEGAlportssyndromeGoodpasturessyndromeandTypeIVcollagenNEnglJMed2003348254356HuangFuchimotoScheierDolbergMurphyNevilleSachsJClinInvest1051731812000IshidoMatsuokaMatsunoNakagawaTanakaInductionofdonorspecifichyporesponsivenessandprolongationofcardiacallograftsurvivalbyjejunaladministrationofdonorsplenocytesTransplantation68137713821999JooPeposeStuartTcellmediatedresponsesinamurinemodeloforthotopiccornealtransplantationInvestOphthalmolVisScL36153015401995KallioEKoskinenPAavikEVaaliKandLemstomKRoleofNitricOxideinExperimentalObliterativeBronchiolitisintheRatJClinInvestVoI100No12December199729842994KonomiHayashiNakayasuArimaLocalizationoftypeVcollagenandtypeIVcollageninhumancornealungandskinAmJPathol1164174261984KrenskyandClaybergerHLAderivedpeptidesasnovelimmunosuppressivesNephrolDialTransplant128658781997LowryMarghescoBlackburnImmunemechanismsinorganallograftrejectionVIDelayedtypehypersensitivityandlymphotoxininexperimentalrenalallograftrejectionTransplantation401831881985MadriandFurthmayrIsolationandtissuelocalizationoftypeAB2collagenfromnormallungparenchymaAmJPathol943233321979MadriandFurthmayrCollagenpolymorphisminthelungHumanPathology113533661980MarckPropWidevuurLungtransplantationintheratIIIFunctionalstudiesinisoandallograftsJSurgicalRes351491581983MaresDCHeidlerKMSmithGNetalTypeVCollagenModulatesAlloantigenInducedPathologyandImmunologyintheLungAmJRespirCellMoIBiol2000JuIl236270MatsumuraMarchevskyZuoKassMatloffJordanAssessmentofpathologicalchangesassociatedwithchronicallograftrejectionandtoleranceintwoexperimentalmodelsofratlungtransplantationTransplantation59150915171995MorrisandBachingerTypeXIcollagenisaheterotrimerwiththecompositionretainingnontriplehelicaldomainsJBiologicalChem26211345113501987MurphyMageeAlexanderWaagaSnoeckVellaCarpenterSayaghInhibitionofallorecognitionbyahumanclassIIMHCderivedpeptidethroughtheinductionofapoptosisJClinInvest1038598671999OLearyEvansZuckermanINVivoDexamethasoneEffectsonNeutrophilEffectorFunctionsinaRatModelofAcuteLungInjuryInflammation2161997OluwoleChowdhuryJinHardyInductionoftransplantationintolerancetoratcardiacallograftsbyintrathymicinoculationofallogeneicsolublepeptidesTransplantation56152315271993PiezKAEigherEAandLewisMSBiochemistry2581996PropNieuwenhuisWildevuurLungallograftrejectionintheratIAcceleratedrejectioncausedbygraftlymphocytesTransplantation4025301985RodriguezDSJankowskaGanEHaynesLDetalImmuneregulationandgraftsurvivalinkidneytransplantrecipientsarebothenhancedbyhumanleukocyteantigenmatchingAmJTransplant2004453743SayaghWatschingerCarpenterMechanismsofTcellrecognitionofalloantigenTransplantation57129513021994SayeghKhouryHancockWeinerCarpenterInductionofimmunityandoraltolerancewithpolymorphicclassIImajorhistocompatibilitycomplexallopeptidesintheratProcNatlAcadScL89776277661992SayeghandKrenskyNovelimmunotherapeuticstrategiesusingMHCderivedpeptidesKidneyIntSuppl53S13201996SchwarzeUAtkinsonMHoffmanGGGreenspanDSByersPHNullallelesoftheCOL5A1geneofTypeVcollagenareacauseoftheclassicalformsofEhlersDanlossyndromeAmJHumGenet200066175765SekineNowenHeidlerVanRooijenBrownCummingsWilkesRoleofpassengerleukocytesinallograftrejectionEffectofdepletiondonoralveolarMacrophagesonthelocalproductionofTNFalphaThelper1Thelper2cytokinesIgGsubclassesandpathologyinaratmodeloflungtransplantationJImmunol159408440931997SharpiesLDMcNeilKStewartSWallworkJRiskfactorsforbronchiolitisobliteransasystematicreviewofrecentpublicationsJHeartLungTransplant20022127181SmithJrWilliamsBrandtInteractionofproteoglycanswithpericellularcollagensofcartilageJBiolChem26010761107671985StarkandOstrowTrainingManualSeriesLaboratoryAnimalTechnicianAmericanAssociationforLaboratoryAnimalScience1811821990TrulockLungtransplantationAmJRespirCritCareMed1557898181997VanBuskirkWakelySirakOroszPatternsofallosensitizationinallograftrecipientslongtermallograftacceptanceisassociatedwithactivealloantibodyproductioninconjunctionwithactiveinhibitionofalloreactivedelayedtypehypersensitivityTransplantation65111511231998vandenBergJWHepkemaBGGeertsmaAetalLongtermoutcomeoflungtransplantationispredictedbythenumberofHLADRmismatchesTransplantation20017136873WestraPropKuijpersAparadoxinheartandlungrejectionTransplantation498268281990WhitacreGienappOroszBitarOraltoleranceinexperimentalautoimmuneencephalomyelitisIIIEvidenceforclonalanergyJImmunol147215521631991WilkesHeidlerBowenQuinlanDoyleCummingsDoerschukAllogeneicbronchoalveolarlavagecellsinducethehistologyofacutelungallograftrejectionanddepositionofIGg2ainrecipientmurinelungsJImmunol155277527831995WilkesThompsonCummingsBraggHeidlerInstillationofallogeneiclungmacrophagesanddendriticcellscausedifferentialeffectsonlocalIFYgammaproductionlymphocyticbronchitisandvasculitisinrecipientmurinelungsJLeukocBiol645785861998WilkesBowmanCummingsHeidlerAllogeneicbronchoalveolarlavagecellsinducethehistologyandimmunologyoflungallograftrejectioninrecipientmurinelungsRoleofICAMIondonorcellsTransplantation678908961999WilsonEbringerAhmadiWrigglesworthTiwanaFielderBinderEttelaieCunninghamJoannouBansalSharedaminoacidsequencesbetweenmajorhistocompatibilitycomplexclassIIglycoproteinstypeXIcollagenandProteusmirabilisinrheumatoidarthritisAnnRheumDis542162201995WoessnerJrThedeterminationofhydroxyprolineintissueandproteinsamplescontainingsmallproportionsofthisimminoacidArchBiochemBiophys934404471961YagyuSteinhoffSchfersDammenhaynHaverichBorstComparisonofmononuclearcellpopulationsinbrochoalveolarlavagefluidinacuterejectionafterlungtransplantationandMycoplasmainfectioninratsJHeartTransplant95165251990YamagamiTsuruOhkawaEndoIsobeSuppressionofallograftrejectionwithantialphabetaTcellreceptorantibodyinratcornealtransplantationTransplantation676006041999YasufukuKHeidlerKMODonnellPWetalOraltoleranceinductionbyTypeVcollagendownregulateslungallograftrejectionAmJRespirCellMoIBiol2001Jul252634YasufukuKHeidlerKMWoodsKAetalPreventionofbronchiolitisobliteransinratlungallograftsbyTypeVcollageninducedoraltoleranceTransplantation2002735005YoshinoQuattrocchiWeinerSuppressionofantigeninducedarthritisinLewisratsbyoraladministrationoftypeIIcollagenArthritisRheum38109210961995YousemBerryCagleChamberlainHusainHrubanMarchevskyOhoriRitterStewartTazelaarRevisionofthe1990workingformulationfortheclassificationofpulmonaryallograftrejectionLungrejectionstudygroupJHeartLungTransplant151151996ZhengMarkeesHancockLiGreineLiMordesSayeghRossiniStromCTLA4signalsarerequiredtooptimallyinduceallografttolerancewithcombineddonorspecifictransfusionandantiCD154monoclonalantibodytreatmentJImmunol162498349901999"