処置を必要とする対象において慢性疼痛を処置するのに有効な量でP2X3またはP2X2の発現を阻害する有効量の二本鎖RNAを含む、医薬組成物。有効量の少なくとも1つの二本鎖RNAを含み、該二本鎖RNAが配列番号7、9、11、13、15、17および22からなる群から選択される配列の一鎖を含む、医薬組成物。慢性疼痛の処置用の薬剤の製造のための二本鎖RNAの使用であって、該二本鎖RNAがP2X3、P2X2およびMob5から選択される標的遺伝子を標的とすることを特徴とする、使用。二本鎖RNAがプリン受容体P1もしくはP2、またはガラニンR1受容体、またはIL24もしくはIL20RαもしくはIL20Rβ、Mob5もしくはMMP7、またはP2X3もしくはP2X2を阻害する、請求項3に記載の使用。該慢性疼痛が癌性疼痛または骨関節炎性疼痛または異痛または痛覚過敏症である、請求項3に記載の使用。siRNAを含む組成物であって、a該siRNAが遺伝子P2X3を標的とし、ここで該siRNAが配列番号7~10または13~16の配列のいずれかを有する二本鎖RNAのものと対応するP2X3遺伝子配列を標的とするか;またはb該siRNAがMob5遺伝子を標的とし、ここで該siRNAが配列番号21および22の配列を有する二本鎖RNAのものと対応するMob5遺伝子配列を標的とする、組成物。siRNAが15~25ntの二本鎖領域を含む、請求項6に記載の組成物。siRNAが少なくとも1つのヌクレオチドの、アンチセンスもしくはセンス鎖、または両鎖上に3’オーバーハングを含む、請求項6に記載の組成物。3’オーバーハングが少なくとも1つの改変ヌクレオチドを含む、請求項8に記載の組成物。3’オーバーハングが少なくとも1つの2’-MOE改変ヌクレオチドを含む、請求項8に記載の組成物。3’オーバーハングが4ウラシルを含む、請求項8に記載の組成物。siRNAが少なくとも1つのホスホロチオエート結合を含む、請求項6~11のいずれか一項に記載の組成物。遺伝子P2X3および/または遺伝子Mob5がヒトのものである、請求項6に記載の組成物。有効量の二本鎖dsRNAを含む薬剤であって、該dsRNAが請求項6に記載のsiRNAである、髄腔内注射によりそれを必要とする対象における疼痛を処置または改善するための薬剤。該疼痛が慢性神経因性疼痛である、請求項14に記載の薬剤。該疼痛が癌性疼痛、骨関節炎性疼痛、異痛および痛覚過敏症からなる群から選択される、請求項14に記載の薬剤。dsRNAを含む疼痛の処置または改善用薬剤であって、髄腔内注射により投与することを特徴とする、薬剤。以下の実施例により本発明を説明する。材料および方法P2X3またはMOB5をターゲッティングするオリゴヌクレオチドの合成アンチセンスオリゴヌクレオチドASOP2X3およびGAPDHに対するASOは、2’MOE基で改変した3’末端に9個のヌクレオチドを有する完全にホスホロチオエート化された18マーであり、ホスホルアミダイト化学欧州特許出願EP992506A2を用いて合成し、HPLC精製し、エレクトロスプレー質量分析およびキャピラリーゲル電気泳動により同定されたものである。ミスマッチを含む対照オリゴヌクレオチドについては、マッチオリゴヌクレオチドのおよその塩基組成を維持するものであった表1。特に断りのない限り、ヌクレオチド間結合はホスホジエステル、Nデオキシリボヌクレオシド、n2’O2メトキシエチルリボヌクレオシド、c2’O2メトキシエチル5メチルシチジン、t2’O2メトキシエチル5メチルウリジン、sホスホロチオエートである。オリゴヌクレオチドは全て、完全なホスホジエステル18マーであり、Nはデオキシリボヌクレオシド、n2’O2メトキシエチルリボヌクレオシド、c2’O2メトキシエチル5メチルシチジン、t2’O2メトキシエチル5メチルウリジンである。オリゴリボヌクレオチドsiRNA本発明に記載される改変された合成オリゴリボヌクレオチドおよび改変されたアンチセンスオリゴヌクレオチドは、インビトロinvitro用としてはABI394またはExpediteMossSynthesizersAppliedBiosystemsにて、また、invivo用としてはOligoPilotIIAmershamPharmaciaBiotechにて、標準的なホスホルアミダイト化学を用いて製造する。ホスホルアミダイトはアセトニトリルに005M濃度OligopilotIIでは02Mで溶かし、アセトニトリル中ベンジミダゾリウムトリフレートの02M溶液よりホスホルアミダイトを活性化させることでカップリングを行う。カップリング時間は通常3~6分の間である。最初のキャッピングは標準的なキャッピング試薬を用いて行う。硫化はNエチル、Nフェニル5アミノ124ジチアゾール3チオンの005M溶液を用いて2分間行うEPA0992506に記載。酸化はTHF/ピリジン/水111中01Mのヨウ素溶液により2分間行う。2回目のキャッピングは酸化または硫化の後に行う。次のカップリングのため、オリゴヌクレオチド成長鎖をジクロロメタンまたはジクロロエタン中2のジクロロ酢酸により脱トリチル化する。配列が完成した後、支持体に結合した化合物を切断し、オリゴリボヌクレオチドに関しては35°Cで6時間、メチルアミン溶液41水性メチルアミン/33エタノール性メチルアミン11vvによる、また、アンチセンスオリゴヌクレオチドに関しては、55°Cで16時間、32アンモニア水溶液によるトリチルオンTritylonのようにして脱保護する。得られた懸濁液を凍結乾燥により乾固させる。オリゴリボヌクレオチドに関しては、1Mフッ化テトラブチルアンモニウムで50°Cにて10分間、さらに35°Cにて6時間処理すると、2’Oシリル基が除去される。得られた粗溶液をそのままRPHPLCで精製する。精製した脱トリチル化化合物をエレクトロスプレー質量分析およびキャピラリーゲル電気泳動で分析し、それらの吸光係数に従い、UV260nMにより定量する。ラットP2X3およびMOB5に対するオリゴリボヌクレオチドおよびアンチセンスオリゴヌクレオチド、ならびにそれらの対照をそれぞれ表3および4に示す。RNANAS8646とNAS8647、NAS7556とNAS7557、NAS4882とNAS4883、NAS4884とNAS4885、NAS7127と7126、およびNAS10104とNAS10105をアニーリングしてsiRNAを得る。NAS8646とNAS8647、およびNAS10104と10105はオリゴリボヌクレオチドの3’末端に2’MOEリボヌクレオチドを有し、配列NAS8647は標的遺伝子に完全に相補的である。NAS7556とNAS7557はオリゴリボヌクレオチドの3’末端に2’MOEAリボヌクレオチドを有し;NAS4882とNAS4883はオリゴリボヌクレオチドの3’末端に2dTデオキシリボヌクレオチドを有し;NAS4884とNAS4885はオリゴリボヌクレオチドの3’末端に2dTデオキシリボヌクレオチドを有する。オリゴリボヌクレオチドNAS7126と7127は無関連の遺伝子をターゲッティングする。特に断りのない限り、ヌクレオチド間結合はホスホジエステル、Nリボヌクレオシド、n2’O2メトキシエチルリボヌクレオシド、c2’O2メトキシエチル5メチルシチジン、t2’O2メトキシエチル5メチルウリジン、dNデオキシリボヌクレオシド、sホスホロチオエートである。RNANAS11535とNAS11536、NAS11537とNAS11538をアニーリングしてsiRNAを得る。ASONAS4660は無関連の遺伝子をターゲッティングする。特に断りのない限り、ヌクレオチド間結合はホスホジエステル、Nリボヌクレオシド、dNデオキシリボヌクレオシド、n2’Oメトキシエチルリボヌクレオシド、sホスホロチオエートである。ラットP2X3を発現するCHO細胞系統rP2X3CHOの作出チャイニーズハムスター卵巣細胞CHOK1ATCCCCL61を、ベクターpRK7JohnWoodから厚意により入手ChenCCetal1995Nature377428430中の完全ラットP2X3cDNA配列で安定的にトランスフェクトした。トランスフェク細胞の選択を可能とするため、ベクターを10倍過剰の、ネオマイシン耐性遺伝子を含むpMC1neoStratageneで同時エレクトロポレーションした。細胞を、10vvウシ胎児血清FBS、2mMグルタミン、および10000IU500mlペニシリン/ストレプトマイシンを添加したMinimalEssentialMediumαMEMαで培養した。ラットP2X3P2X2rP2X32CHOを発現するCHO細胞系統の作出rP2X3インサートを、鋳型としてラットDRGRNA由来のRTを用い、以下に挙げたオリゴを用いてPCRにより得た。P2X3HindFCGCAAGCTTGGCTGTGAGCAGTTTCTCAGTATGAACTTG配列番号17P2X3SacIRCTTGAGCTCGGGAAGAGGCCCTAGTGACCAATAG配列番号18注:下線の配列はP2X3相補的オリゴに付加されたHindIII制限酵素部位である。リバースプライマーにおけるSacI部位はクローニングには用いなかった。このPCR産物をAdvantageHF2ポリメラーゼを用い、熱周期94°C30秒、62°C60秒、および68°C180秒を6サイクル、94°C30秒、および68°C240秒をさらに29サイクルにて増幅した。このPCRフラグメントをpGEMTEasyPromegaにクローニングし、T7およびM13リバースプライマーを用いて配列決定した。このクローンは受託番号X91167のGenbankcDNAと同じ配列を持っていた。rP2X3インサートをpGEMTEasyから、NotIでの消化により切り出し、NotIで線状化して脱リン酸化したpcDNA5FRTへサブクローニングした。クローンのBamHIおよびXhoIでの消化によりrP2X2を得た上記参照。rP2X2を同じ酵素で切断したpcDNA5FRTNeoにサブクローニングした。各25μgのDNAを用い、FuGENE6試薬を用いて、2つのFRT部位が組み込まれたCHOFlpIn細胞をトラスフェクトした。rP2X2でトランスフェクトされた細胞をGeneticin500μgmlで選択した後、rP2X3でトランスフェクトし、ハイグロマイシンB200μgmlで選択し、二重トランスフェクト物を得た。ラットMOB5を発現する細胞系統のトランスフェクション用いた細胞系統はRBAATCC番号1747であった。これは、ラット皮膚に由来し、平板状に極めて強固に結合して増殖し、皮膚様の形態で、本来rasおよびmob5rasの下流にあることが知られているを発現する。トランスフェクションの24時間前、2×105細胞を2ml/ウェルの量で6ウェルプレートにプレーティングし、70~80の密集度とした。トランスフェクション当日、トランスフェクター溶液の2倍原液を、リポフェクチン登録商標を血清フリーOptiMEMGIBCOBRLGaitherburgMDの両所に希釈し配合:1mlOptiMEM中に、3μlリポフェクチン/所望の最終オリゴヌクレオチド濃度100Nm、室温で15分間インキュベートすることにより調製した。次に、この溶液を、OptiMEM中にASOの所望の最終量の2倍を含む2倍ASO溶液と11で合わせた。このトランスフェクション混合物を室温で15分間インキュベートしてトランスフェクション複合体を形成させた後、事前に吸引した各ウェルの細胞に2mlを加えた。リポフェクチン試薬のみの対照および通常細胞対照処理なしも含めた。37°Cで4時間インキュベート下後、MEMα中50のFBS500μlを各ウェルに加え、最終FBS濃度10とした。これらの培養物を5CO2の加湿インキュベーター中、37°Cで24時間インキュベートした後、mRNAを回収した。哺乳類細胞のエレクトロポレーション標準的な電気トランスフェクションBioradキュベット04cm中、106細胞125μl、250V、03μF、無限抵抗を用い、CHOrP2X23細胞を015、03、06または12ナノモルのASOまたはsiRNA二重らせんでトランスフェクトした。エレクトロポレーション後、すぐ、サンプルを6mlの培養培地と合わせた。結果として、ASOまたはsiRNA試薬の対応する最終濃度は10、50、100または200nMとなった。細胞を非被覆96ウェルプレートCostarカタログ番号3904にプレーティングし、37°Cで24時間または48時間インキュベートした後、それぞれRNAまたはタンパク質を抽出した。全RNAの単離と定量的リアルタイムPCRQPCRのよるアッセイRNeasy96キットQiagenを用い、全RNAを抽出および精製した。リアルタイムPCRのためのプライマー対およびFAM標識TaqManプローブはPrimerExpressv20プログラムABIPRISMPEBiosystemsを用いてデザインした。QPCR反応のためには、TaqManPCR試薬キットプロトコールEurogentecに従い、50ngの全RNAを、全量25μl中、5’および3’プライマー各10μM、TaqManプローブ5μM、MuLV逆転写酵素625uPEBiosystems、RNアーゼOutRNアーゼ阻害剤10uLifeTechnologiesおよびTaqManPCR試薬キットEurogentecの成分と混合した。逆転写およびリアルタイムPCRを下記のようにGeneAmpSequenceDetector5700PEBiosystemsにて行った:50°Cで2分の逆転写、95°Cで10分の変性、その後、95°Cで15秒の変性および60°Cで1分のアニーリングおよび伸張を50サイクル。遺伝子発現の相対数値はABIPRISM7700ユーザー会報2PEBiosystemsに記載のようにして算出した。ウエスタンブロッティング6ウェルプレートで増殖させた細胞をPBSで洗浄し、141mMNaCl、5mMKCl、25mMTrispH74、50nMVa3VO4、01vvNonidetP40100、および006gプロテアーゼ阻害剤/100mlを含むバッファーで溶解させた。溶解物を14000rpmで10分遠心分離した。上清中の可溶化タンパク質に対し、NOVEX商標MiniCellシステムにてNuPAGE商標4~12BisTrisゲルでSDSポリアクリルアミドゲル電気泳動を行った後、PVDFメンブランMilliporeに移した。これらのフィルターを、ECFウエスタンブロッティングキットAmershamPharmaciaBiotechに含まれているブロッキングバッファーで1時間ブロッキングし、005Tween20を含む1×PBSpH74中で数回洗浄し、15000希釈の一次抗P2X3抗体Neuromicsから購入とともに1時間インキュベートした。その後、これらのフィルターを、間に数回洗浄しながら、製造業者の指示に従い、ECFウエスタンブロッティングキットの二次抗体、三次抗体およびECF基質とともにインキュベートした。可視化されたバンドの定量はソフトウエアImageQuant商標MolecularDynamicsにより行った。FLIPRアッセイFLIPRデータの作成と分析FLIPR実験は次のようにして行った。要するに、25mMプロベニシドの存在下で30~45分間細胞にfluo4AMを加え、HBSSGibco20mMHEPESで2回洗浄し、蛍光リーダーFLIPRMolecularDevicesに移した。薬物のプレートは5倍の最終濃度で調製した。Fluo4の蛍光は05Hzで3分測定した。20ポイントのベースラインが検出されたところでアゴニストを添加した。FLIPR配列ファイルをIgorProWavemetricsを用いて分析した。ベースラインを薬物添加前の20ポイントの平均値に設定し、薬物添加後の50のデータポイント中の最大シグナルとしてピークを検出した。蛍光の相対変化dFFを、ピーク-ベースライン/ベースラインとして求めた。これらの値の平均をとり、濃度応答分析に関しては、データにS字曲線方程式を当てはめることでさらに分析した。データは平均値SEMまたはEC50平均値として表されている95信頼区間。慢性疼痛の動物モデル慢性神経因性疼痛のインビボinvivo動物モデルには次のものが含まれる。SeltzerモデルSeltzerモデルSeltzeretal1990Pain43205218では、ラットを麻酔し、一方の大腿通常は左の正中を上方に小さく切開し、坐骨神経を露出させる。後大腿二頭筋半腱様筋神経が総坐骨神経を分岐する点から少し離れた転子付近の部位で、この神経の周囲の結合組織を注意深く取り除く。70縫合糸を、38カーブのリバースカッティングミニニードルreversedcuttingminineedleで神経に挿入し、神経の厚みの背側13~12が結紮内に保持されるようにしっかり結紮する。縫合糸とクリップで筋肉と皮膚を閉じ、傷口に抗生物質粉末を塗布する。擬似手術動物では、座骨神経を露出させるが、結紮はせず、擬似手術動物の場合と同様、傷口を閉じる。慢性絞扼神経損傷ChronicConstrictionInjuryCCIモデルCCIモデルBennettGJandXieYKPain19883387107では、ラットを麻酔し、一方の大腿通常は左の正中を上方に小さく切開し、坐骨神経を露出させる。この神経の周囲の結合組織を取り除き、この神経を約1mm間隔で4箇所、40腸線縫合糸で、神経の表面がわずかにくびれるように軽く結紮する。上記のように縫合糸とクリップで傷口を閉じる。擬似手術動物では、座骨神経を露出させるが、結紮はせず、擬似手術動物の場合と同様、傷口を閉じる。Chungモデル末梢神経に対する損傷を含むSeltzerおよびCCIモデルに対し、Chungモデルは脊髄神経の結紮を含むKimSOandChungJMPain199250355363。このモデルでは、ラットを麻酔し、腹臥位に置き、脊髄の左側をL4S2レベルで切開する。坐骨神経は分岐してL4、L5およびL6脊髄神経を形成しているが、傍脊柱筋を深く切り、L4S2レベルで脊髄突起から筋肉を分離すると坐骨神経の一部が現れる。L6横突起を小さな骨鉗子で注意深く取り除くと、これらの脊髄神経が見える。L5脊髄神経を単離し、70縫合糸でしっかり結紮する。傷口を一重の筋縫合糸60シルクおよび1または2個の皮膚縫合クリップで閉じ、抗生物質粉末を塗布する。擬似手術動物では、L5神経を露出させるが、結紮はせず、上記と同様に傷口を閉じる。軸索切断Axotomyモデル軸索切断モデルは坐骨神経の完全切断と結紮を含む。これらの神経終末は神経小丘を形成するが、この神経は再生できないので、このモデルでは挙動相関が見られず、脚は恒常的に麻痺するKingeryandVallinPain38321321989。高度坐骨神経損傷HighSciaticLesionモデルこのモデルでは、坐骨神経を腸骨弓の領域で穿孔する。神経に対する顕在的な損傷は見られないが、局部的な腫脹が、神経が腸骨弓の下を通っているので、神経に対する圧力を高める。このモデルは腸骨でしばしば見られる症状を模倣したものである。慢性炎症性疼痛モデルフロイントの完全アジュバントにより誘発される機械的痛覚過敏症を慢性炎症性疼痛のモデルとして用いることができるSteinCetalPharmacolBiochemBehav198831445451。このモデルでは、典型的には、雄のSpragueDawleyまたはWistarラット200~250gの片方の後脚に25μlのフロイントの完全アジュバントを足底内注射する。この後脚に著しい炎症が起こる。一般に、炎症発生から24時間後、機械的痛覚過敏症が十分確立されたとみなされた際に薬物を投与して効力を評価する。挙動指数Behavioralindex全ての慢性疼痛モデル炎症性および神経因性で、機械的痛覚過敏症は、AnalgesymeterUgoBasileMilanを用いて段階的に高まる圧力刺激に対する両後脚の引っ込め閾値withdrawalthresholdを測定することにより評価する。機械的異痛は、両後脚の足底表面にvonFreyhairで適用する無害の機械的刺激に対する引っ込め閾値を測定することにより評価する。熱的痛覚過敏症は、各後脚の裏面に適用する無害の熱刺激に対する引っ込め閾値を測定することにより評価する。全てのモデルで、機械的痛覚過敏症および異痛ならびに熱的痛覚過敏症は外科術後1~3日以内に発症し、少なくとも50日間持続する。本明細書に記載のアッセイでは、外科術前後に薬物を適用し、特に外科術後約14日目に痛覚過敏症の発症に対する効果を評価し、確立された痛覚過敏症を反転させるそれらの能力を決定することができる。痛覚過敏症の反転パーセンテージは以下のように算出する:本明細書で開示される実施例では、上記の慢性神経因性疼痛モデルにおいてWistarラット雄を用いる。ラットは外科術時約120~140グラムの体重である。外科術は全てエンフルラン/O2吸入麻酔下で行う。完全切断モデル以外の全てのモデルでは、明らかな機械的および熱的痛覚過敏症および異痛が発症し、脚の引っ込め閾値に低下が見られ、触覚刺激、圧力刺激または熱刺激に対する後脚の反射的引っ込め応答が高くなる。また、外科術後、動物は処置された脚に特徴的な変化を示す。大多数の動物で、処置された後脚の指が合わせて握られ、脚がわずかに一方へ曲がり、また、中には足指が下へ巻き込んでいるラットもいる。結紮したラットの歩行は様々であるが、跛行はあまりない。中には、処置された後脚をケージの床面から浮かせたり、捕まえた時に後脚を不自然にこわばらせて伸ばしたりするラットもいる。ラットは接触に極めて敏感となる傾向があり、鳴き声を上げることもある。その他のラットの健康状態および症状は良好である。慢性疼痛の動物モデルの処置動物モデルに用いたオリゴヌクレオチド試薬には次のような名称が付けられている:ASONAS6798配列番号5、MSONAS6799配列番号6、P2X3RNAiNAS8646およびNAS8647それぞれ、配列番号7および8、P2X3RNAiミスセンスNAS10104およびNAS10105それぞれ、配列番号19および20。siRNAの髄腔内送達dsRNAをバッファー100mMKA2mMMgAc、01749gHEPES遊離酸M2383、02102gNaCl/100mlRNアーゼフリー水KOHで20°CにてpH763中、留置カニューレを通じて髄腔内投与した。ラットを麻酔し、正中のすぐ側部、腹側腸骨棘より尾側へ約10mmの背中の皮膚を切開した。無菌カテーテルポリエチレンPE10チューブをガイドカニューレ20ゲージニードルを通じて挿入し、髄腔内を頭部側へ3cmほぼL1レベルまで前進させた。次に、このカテーテルを、左または右側腹部に皮下挿入し、P2X3受容体またはMOB5受容体siRNA、ミスセンスsiRNAまたは生理食塩水1μl時、7日を送達するオスモティックミニポンプAlzetに接続した。創傷クリップで切開部を閉じ、抗生物質粉末を塗布した。実験から180ならびに220μg日であれば毒性の徴候がないものと判定された。機械的痛覚過敏症は、αβメチレンATPMeATPの投与前は1日目と6日目、そしてMeATP投与1時間後に、AnalgesymeterUgoBasileMilanを用いて、高まる圧力刺激に対する両後脚の引っ込め閾値を測定することで評価した。限界値を250gに設定し、終点を引っ込め、鳴き声、または明らかな身もだえとした。各動物を無作為の順番で、一度だけ試験した。異なる試験動物群から得られた機械的痛覚過敏症データの統計学的有意性はANOVAの後にTukeyのHSD検定を用いて分析した。試験の最終日には、10μmol10μlのMeATPを対側の後脚に足底内ipl投与した。投与から10人看護、機械的痛覚過敏症に対する脚の引っ込め閾値を測定した。実施例1ラットP2X3を発現する細胞系統へのsiRNAのトランスフェクションCHOrP2X3細胞のオリゴフェクタミン媒介トランスフェクションにより送達された種々のsiRNAによるP2X3mRNA阻害の効力。QPCR分析。OF:オリゴフェクタミン単独を用いた対照;mmNAS75587559:ミスマッチを含む対照;NAS75567557:最適化されたNAS5037として配列と非相補的moepsオーバーハングを有するsiRNA;NAS86468647:mRNA相補的オーバーハングを有すること以外はNAS75567557と同様;NAS48824883:最適化されたNAS5037として配列と非相補的dTdTオーバーハングを有するsiRNA;NAS48844885:HarborthJetal2001JCellScience11445574565に記載の基準にしたがってデザインされた配列を有するsiRNA。実施例2siRNANAS75567557によるP2X3タンパク質阻害をとしてプロットしたもの。SDSPAGEの後、タンパク質をブロットし、抗P2X3抗体Neuromicsで免疫検出し、ブロットバンドをImageQuant商標ソフトウエアで定量し、発現レベルを対照siRNAに対するとしてプロットした。実施例3siRNANAS86468647とそのアンチセンス類似体NAS5037との、4回投与時のP2X3発現のmRNA阻害の比較。組換えP2X3と組換えP2X2を発現するCHO細胞系統のエレクトロポレーション。MRNAはリアルタイム定量的PCRで測定した。実施例4FLIPR機能アッセイ。アゴニスト処置の48時間前、10、50、100および200nMの濃度でCHOrP2X2P2X3細胞系統へASONAS5037およびsiRNANAS86468647をトランスフェクトすることによる、10μMMeATPアゴニストに対する機能的応答の、無処置対照およびミスマッチ対照MSO5655およびsiRNANAS75577558と比べた場合のダウンレギュレーション。実施例5アゴニスト誘発性の疼痛を有するラットにおける痛覚過敏症に対するP2X3siRNAの効果機械的異痛に対する、ナイーブラットに6日にわたる髄腔内注入として投与したP2X3RNAiの効果。6日目:1μmolMeATPのipl注射およびこれらの処置ラットのVonFrey閾値の測定。ビヒクル:等張バッファー、n6/処置群。実施例6アゴニスト誘発性疼痛を有するラットにおける異痛に対するP2X3siRNAの効果機械的異痛に対する、ナイーブラットに6日にわたる髄腔内注入として投与したP2X3RNAiの効果。6日目:1μmolMeATPのipl注射およびこれらの処置ラットのVonFrey閾値の測定。ビヒクル:等張バッファー、n6/処置群。実施例7神経因性疼痛を有するラットにおける機械的痛覚過敏症に対するP2X3siRNAの効果Seltzerモデル0日目に4つのラット群の左後脚を結紮し、毎日ベースラインの機械的痛覚過敏症を測定した。付加的に、非結紮群ナイーブを対照として設けた。11日目にラットにカニューレ留置を行い、ビヒクル、RNAi、RNAiミスセンスまたはASOをさらに6日間注入した。脚の引っ込め閾値左脚を毎日測定した。ビヒクル:等張バッファー、n8/処置群。実施例8神経因性疼痛を有するラットにおける機械的異痛に対するP2X3siRNAの効果Seltzerモデル0日目に4つのラット群の左後脚を結紮し、毎日ベースラインの機械的痛覚過敏症を測定した。付加的に、非結紮群ナイーブを対照として設けた。11日目にラットにカニューレ留置を行い、ビヒクル、RNAi、RNAiミスセンスまたはASOをさらに6日間注入した。左脚でVonFrey閾値を毎日測定した。ビヒクル:等張バッファー、n8/処置群。実施例9神経因性疼痛を有するラットにおける機械的痛覚過敏症に対するMOB5siRNAの効果Seltzerモデル0日目に4つのラット群の左後脚を結紮し、毎日ベースラインの機械的痛覚過敏症を測定した。付加的に、非結紮群ナイーブを対照として設けた。10日目にラットにカニューレ留置を行い、ビヒクル、RNAiまたはミスセンスをさらに6日間注入した。脚の引っ込め閾値左脚を毎日測定した。ビヒクル:等張バッファー、n8/処置群。各群で右脚でも測定したが、脚の引っ込め閾値はナイーブ動物と違いがなかった。実施例10神経因性疼痛を有するラットにおける機械的異通に対するMOB5siRNAの効果Seltzerモデル0日目に4つのラット群の左後脚を結紮し、ベースラインの機械的胃痛を測定した。付加的に、非結紮群ナイーブを対照として設けた。10日目にラットにカニューレ留置を行い、ビヒクル、RNAiまたはミスセンスをさらに6日間注入した。左脚でVonFrey閾値を毎日測定した。ビヒクル:等張バッファー、n8/処置群。各群で右脚でも測定したが、脚の引っ込め閾値はナイーブ動物と違いがなかった。