"式1式中、R1およびR2は、それぞれ独立に、水素原子、または炭素数1~3の直鎖アルキル基を示し、R3は、水素原子、炭素数1~4のアルキル基、アルコキシアルキル基、アリール基、ハロゲン原子、またはハロゲン化アルキル基を示すで表される化合物またはその薬学的に許容できる塩からなるEP4アゴニスト。R1がメチル基である請求項1に記載のEP4アゴニスト。R3がメチル基である請求項1または2に記載のEP4アゴニスト。R2が水素原子である請求項1~3のいずれか1項に記載のEP4アゴニスト。R1がメチル基であり、R2が水素原子である請求項1~4のいずれか1項に記載のEP4アゴニスト。R3がm-メチル基である請求項1~5のいずれか1項に記載のEP4アゴニスト。R1はメチル基であり、R2は水素原子であり、R3はメチル基である請求項1に記載のEP4アゴニスト。R1は水素原子であり、R2はメチル基であり、R3はメチル基である請求項1に記載のEP4アゴニスト。4---6--3-ヒドロキシ-4--1-ペンテニル-7-ヒドロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-イリデン-1-テトラゾール-5-イルブタン、またはその薬学的に許容できる塩からなる、請求項1に記載のEP4アゴニスト。4---6--3-ヒドロキシ-4--1-ペンテニル-7-ヒドロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-イリデン-1-テトラゾール-5-イルブタン、またはその薬学的に許容できる塩からなる、請求項1に記載のEP4アゴニスト。4---6--3-ヒドロキシ-4--1-ペンテニル-7-ヒドロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-イリデン-1-テトラゾール-5-イルブタン、またはその薬学的に許容できる塩からなる、請求項1に記載のEP4アゴニスト。請求項1~11のいずれか1項に記載のEP4アゴニストを有効成分として含有する医薬。EP4の関与する疾患の予防または治療のための請求項12に記載の医薬。選択的なEP4アゴニスト作用により症状を緩和させることができる疾患の予防または治療のための請求項13に記載の医薬。選択的なEP4アゴニスト作用により症状を緩和させることができる疾患が、免疫疾患、循環器疾患、心疾患、呼吸器疾患、眼疾患、腎疾患、肝疾患、骨疾患、神経疾患または皮膚疾患である、請求項14に記載の医薬。免疫疾患が、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、シェーグレン症候群、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、臓器移植後の拒絶反応、関節炎、全身性炎症反応症候群、敗血症、血球貪食症候群、マクロファージ活性化症候群、スチルStill病、川崎病、透析時の高サイトカイン血症、多臓器不全、ショックまたは乾癬である、請求項15に記載の医薬。循環器疾患または心疾患が、動脈硬化症、狭心症、心筋梗塞、脳出血により生じる脳障害、脳梗塞により生じる脳障害、クモ膜下出血により生じる脳障害、肺動脈性肺高血圧症、末梢動脈閉塞症または末梢循環障害に基づく種々の症状である、請求項15に記載の医薬。呼吸器疾患が、喘息、肺傷害、肺線維症、肺気腫、気管支炎または慢性閉塞性呼吸器疾患である、請求項15に記載の医薬。眼疾患が、緑内障または高眼圧である、請求項15に記載の医薬。腎疾患が、糸球体腎炎、糖尿病性腎症、IgA腎症または虚血-再灌流性腎障害である、請求項15に記載の医薬。肝疾患が、肝炎、肝障害または虚血-再灌流性肝障害である、請求項15に記載の医薬。骨疾患が、骨粗鬆症、骨折または骨切り術後の回復期である、請求項15に記載の医薬。神経疾患が、神経細胞死である、請求項15に記載の医薬。皮膚疾患が、褥創または創傷である、請求項15に記載の医薬。EP4の関与する疾患が、禿頭症、脱毛症、子宮頚管熟化不全、および難聴からなる群から選択される疾患である、請求項13に記載の医薬。請求項1~11のいずれか1項に記載のEP4アゴニストを有効成分として含有する、炎症性腸疾患の予防または治療のための医薬。炎症性腸疾患が潰瘍性大腸炎またはクローン病である、請求項26に記載の医薬。請求項1~11のいずれか1項に記載のEP4アゴニストを有効成分として含有する、消化管の潰瘍性疾患の予防または治療のための医薬。消化管の潰瘍性疾患が食道炎、食道潰瘍、胃炎、胃潰瘍または小腸潰瘍である、請求項28に記載の医薬。本発明の課題は、新規なプロスタグランジンI2誘導体であって、代謝安定性に優れ、特定のプロスタグランジン受容体に選択的に結合する化合物を提供することである。本発明者らは、上記課題を解決するために、フッ素原子の有する特殊な性質を付与した新規なPG類を合成し、その物性や生理活性を明らかにすべく検討を行った。その結果、プロスタン酸骨格のC-1のカルボキシ基がテトラゾール基に置き換わり、2個のフッ素原子が結合した、新規な7,7-ジフルオロPGI2誘導体が、非常に優れた物性及び薬理作用を有すること、意外にも、PGI2誘導体であるにもかかわらずC-1カルボン酸体で認められていたIPアゴニスト作用が極めて減弱した、選択的なEP4アゴニスト作用を有すること、かかるアゴニスト作用により医薬として極めて優れた化合物であることを見いだし、本発明を完成した。選択的なEP4アゴニストは、他の受容体を介する副作用を軽減した医薬の有効成分となりうる。なお、本発明者らの知るところでは、PGのC-1がテトラゾール基で、C-7に2個のフッ素原子を有するPGI2類については、その合成例、物性、生理活性等について、全く公表されていない。すなわち、本発明は、選択的なEP4アゴニストである下記式1で表される7,7-ジフルオロPGI2誘導体以下、本発明の化合物1と略記する場合がある、その薬学的に許容できる塩、及び、それらを有効成分とする医薬を提供するものであり、1式1式中、R1およびR2は、それぞれ独立に、水素原子、または炭素数1~3の直鎖アルキル基を示し、R3は、水素原子、炭素数1~4のアルキル基、アルコキシアルキル基、アリール基、ハロゲン原子、またはハロゲン化アルキル基を示すで表される化合物またはその薬学的に許容できる塩、2R1がメチル基である1に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、3R3がメチル基である1または2に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、4R2が水素原子である1~3のいずれかに記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、5R1がメチル基であり、R2が水素原子である1~4のいずれかに記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、6R3がm-メチル基である1~5のいずれかに記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、7R1はメチル基であり、R2は水素原子であり、R3はメチル基である1に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、8R1は水素原子であり、R2はメチル基であり、R3はメチル基である1に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、94---6--3-ヒドロキシ-4--1-ペンテニル-7-ヒドロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-イリデン-1-テトラゾール-5-イルブタン、またはその薬学的に許容できる塩、104---6--3-ヒドロキシ-4--1-ペンテニル-7-ヒドロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-イリデン-1-テトラゾール-5-イルブタン、またはその薬学的に許容できる塩、114---6--3-ヒドロキシ-4--1-ペンテニル-7-ヒドロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-イリデン-1-テトラゾール-5-イルブタン、またはその薬学的に許容できる塩、121~11のいずれかに記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を有効成分として含有する医薬、131~11のいずれかに記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を有効成分として含有する消化管疾患の予防または治療のための医薬、14消化管疾患が、消化管の炎症性疾患または消化管の潰瘍性疾患である、13に記載の医薬、15消化管の炎症性疾患が、炎症性腸疾患である14に記載の医薬、16炎症性腸疾患が、潰瘍性大腸炎またはクローン病である15に記載の医薬、17炎症性腸疾患が、腸管ベーチェット病または単純性潰瘍である15に記載の医薬、18消化管の潰瘍性疾患が、食道炎、食道潰瘍、胃炎、または胃潰瘍である14に記載の医薬、19胃炎または胃潰瘍が、薬剤性の胃炎または胃潰瘍である18に記載の医薬、20薬剤性の胃炎または胃潰瘍が、非ステロイド性抗炎症剤に起因する胃炎または胃潰瘍である19に記載の医薬、21胃炎または胃潰瘍が、アルコールに起因する胃炎または胃潰瘍である18に記載の医薬、22消化管の潰瘍性疾患が、小腸潰瘍である14に記載の医薬、23小腸潰瘍が、薬剤性小腸潰瘍である22に記載の医薬、24薬剤性小腸潰瘍が、非ステロイド性抗炎症剤に起因する小腸潰瘍である23に記載の医薬、25小腸潰瘍が、アルコールに起因する小腸潰瘍である22に記載の医薬、261~11のいずれかに記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩からなるEP4アゴニスト、2726のEP4アゴニストを有効成分として含有する医薬、28EP4の関与する疾患の予防または治療のための27に記載の医薬、29選択的なEP4アゴニスト作用により症状を緩和させることができる疾患の予防または治療のための28に記載の医薬、30選択的なEP4アゴニスト作用により症状を緩和させることができる疾患が、免疫疾患、循環器疾患、心疾患、呼吸器疾患、眼疾患、腎疾患、肝疾患、骨疾患、消化管疾患、神経疾患または皮膚疾患である、29に記載の医薬、31免疫疾患が、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、シェーグレン症候群、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、臓器移植後の拒絶反応、関節炎、全身性炎症反応症候群、敗血症、血球貪食症候群、マクロファージ活性化症候群、スチルStill病、川崎病、透析時の高サイトカイン血症、多臓器不全、ショックまたは乾癬である、30に記載の医薬、32循環器疾患または心疾患が、動脈硬化症、狭心症、心筋梗塞、脳出血により生じる脳障害、脳梗塞により生じる脳障害、クモ膜下出血により生じる脳障害、肺動脈性肺高血圧症、末梢動脈閉塞症閉塞性動脈硬化症や閉塞性血栓血管炎または末梢循環障害に基づく種々の症状腰部脊柱管狭窄症に伴う間歇性跛行下肢しびれ、レイノー症候群、勃起不全、痔疾等である、30に記載の医薬、33呼吸器疾患が、喘息、肺傷害、肺線維症、肺気腫、気管支炎、または慢性閉塞性呼吸器疾患である、30に記載の医薬、34眼疾患が、緑内障または高眼圧である、30に記載の医薬、35腎疾患が、糸球体腎炎、糖尿病性腎症、IgA腎症または虚血-再灌流性腎障害である、30に記載の医薬、36肝疾患が、肝炎、肝障害または虚血-再灌流性肝障害である、30に記載の医薬、37骨疾患が、骨粗鬆症、骨折または骨切り術後の回復期である、30に記載の医薬、38神経疾患が、神経細胞死である、30に記載の医薬、39皮膚疾患が、褥創や創傷である、30に記載の医薬、40EP4の関与する疾患が、禿頭症、脱毛症、子宮頚管熟化不全、および難聴からなる群から選択される疾患である、28に記載の医薬、に関する。発明の効果本発明が提供する新規7,7-ジフルオロPGI2誘導体は、非経口投与または経口投与によって長時間血中濃度を維持し薬理作用を発揮し、炎症性腸疾患における消化管の炎症及び下痢血便の発症を予防及び治療、胃炎、胃潰瘍や小腸潰瘍等における潰瘍を予防及び治療する医薬を提供することができる。さらに、EP4アゴニスト作用により、免疫疾患、循環器疾患、心疾患、呼吸器疾患、眼疾患、腎疾患、肝疾患、骨疾患、消化管疾患、神経疾患、皮膚疾患等を予防及び治療する医薬を提供することができる。本発明の化合物は、臨床においては、EP4アゴニストが奏効する疾患群に対して同様に薬効が期待されるとともに、IPアゴニスト作用がもたらす循環器系への作用も弱まることによって、出血、低血圧、心悸亢進、顔面紅潮等の副作用の懸念が少ない。特に、本発明の化合物は、EP4アゴニスト作用に基づき、免疫が関与する消化管炎症、薬剤性消化管粘膜傷害、粘膜再生障害に基づく消化管傷害や治癒の遅延、眼疾患、腎疾患、及び肝疾患に対して有効である。具体的には、潰瘍性大腸炎、クローン病等の炎症性腸疾患、アルコール性胃炎胃潰瘍や小腸潰瘍、腎炎、緑内障高眼圧、肝炎等において有用である。定義本明細書における選択的なEP4アゴニストとは、PGI2類において通常みられるPGI2受容体IPに対するアゴニスト作用薬理活性が弱く、PGE2受容体サブタイプEP4に対するアゴニスト作用がIPアゴニスト作用と比較して顕著に優位となった化合物を意味する。EP4アゴニスト作用は、後述する実施例19に記載のアゴニスト活性の測定方法に従って測定することができる。IPアゴニスト作用は、実施例20に記載の方法に従って測定することができる。化合物が選択的なEP4アゴニストであるか否かは、実施例18に記載の測定方法に従って、同一種のEP4とIPで結合阻害定数Ki値の比IP/EP4比を求めることによって評価することができる。選択的なEP4アゴニストとしては、前記比が5以上、好ましくは10以上、より好ましくは50以上、最も好ましくは100以上の化合物が例示される。本明細書におけるプロスタグランジンI2誘導体とは、天然型PGI2の構造に基づいて、有機化学分野における通常の技術を用いてその構造が修飾された化合物を意味する。以下、本発明の化合物について説明する。本発明の化合物の定義本明細書における化合物の命名において、PG骨格における位置を示すために用いる数字は、プロスタン酸骨格の数字に対応する数字を用いる。本明細書において、アルキル基の水素原子が置換された基を、置換アルキル基とも記す。他の基においても同様である。また、アルキル基等の有機基が低級とはその炭素数が1~6であることをいう。なお、低級有機基の炭素数は1~4が好ましい。アルキル基は、直鎖であっても分岐であってもよい。アルキル基は特に記載しないかぎり炭素数が1~6である低級アルキル基が好ましく、炭素数1~4の低級アルキル基が特に好ましい。アルキル基の例としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、sec-ブチル基、tert-ブチル基、ペンチル基、またはヘキシル基等が挙げられる。アルコキシ基は、炭素数が1~6である低級アルコキシ基が好ましく、炭素数1~4のアルコキシ基が特に好ましい。アルコキシ基は直鎖であっても分岐であってもよい。アルコキシ基の例としては、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、またはブトキシ基等が挙げられる。アルコキシアルキル基は、アルコキシ基で置換されたアルキル基をいう。アルコキシアルキル基のアルコキシ基は炭素数1~4の低級アルコキシ基が好ましく、アルコキシアルキル基のアルキル基は炭素数1~4の低級アルキル基が好ましい。アルコキシアルキル基は低級アルコキシアルキル基であることすなわち、アルコキシアルキル基全体の炭素数は1~6が好ましく、炭素数1~4の低級アルコキシアルキル基であることがより好ましい。アルコキシアルキル基の例としては、メトキシメチル基、エトキシメチル基、プロポキシメチル基、エトキシエチル基等が挙げられる。アリール基とは、置換基を有していてもよい1価の芳香族炭化水素基をいう。置換基を有しないアリール基としてはフェニル基が好ましい。置換アリール基置換基を有するアリール基をいうとしては、アリール基中の水素原子の1個以上が、低級アルキル基、ハロゲン原子、ハロゲン化低級アルキル基、または低級アルコキシ基等で置換された基が好ましい。置換アリール基としては置換フェニル基が好ましく、特にモノハロフェニル基例えば、クロロフェニル基、フルオロフェニル基、ブロモフェニル基等、ハロゲン化低級アルキル置換フェニル基例えば、トリフルオロメチルフェニル基等、または低級アルコキシフェニル基例えば、メトキシフェニル基、エトキシフェニル基等が挙げられる。ハロゲン原子とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、またはヨウ素原子をいう。ハロゲン化アルキル基とは、アルキル基中の水素原子の1個以上がハロゲン原子で置換された基をいい、炭素数が1~6である低級ハロゲン化アルキル基が好ましい。ハロゲン化アルキル基の例としては、フルオロメチル基、ジフルオロメチル基、トリフルオロメチル基、トリフルオロエチル基、ペンタフルオロエチル基、クロロメチル基、またはブロモメチル基等が挙げられる。本発明の化合物1としては、薬理活性や物性の観点より以下の化合物が好ましい。すなわち、R1、R2は、それぞれ独立に水素原子または炭素数1~3の直鎖アルキル基であり、それぞれ独立に水素原子またはメチル基が好ましい。特にR1、R2の一方が水素原子で他方がメチル基であることが好ましい。R3は、水素原子、炭素数1~4のアルキル基、アルコキシアルキル基、アリール基、ハロゲン原子、またはハロゲン化アルキル基であり、さらに水素原子、炭素数1~4のアルキル基、メトキシメチル基等の低級アルコキシアルキル基、塩素原子、フッ素原子等のハロゲン原子、または低級フルオロアルキル基等の低級ハロゲン化アルキル基が好ましい。特に、水素原子、炭素数1~4のアルキル基、塩素原子または炭素数1~4のハロゲン化アルキル基が好ましい。なお、炭素数1~4のアルキル基としては、メチル基とエチル基が好ましく、炭素数1~4のハロゲン化アルキル基としてはトリフルオロメチル基が好ましい。なお、R3としては、水素原子、メチル基、トリフルオロメチル基が最も好ましい。加えて、R3はプロスタグランジン骨格の主鎖がベンゼン環に置換している位置に対して、オルトo、メタm、あるいはパラpのいずれの位置に置換していてもよい。R3は特にメタm位に置換していることが好ましい。本発明の好ましい化合物の態様加えて、本発明の化合物1における好ましいR1,R2及びR3の組み合わせは、以下の通りである。R1は水素原子であり、R2は水素原子であり、R3は水素原子である。R1は水素原子であり、R2は水素原子であり、R3はメチル基である。R1は水素原子であり、R2は水素原子であり、R3は塩素原子である。R1は水素原子であり、R2は水素原子であり、R3はトリフルオロメチル基である。R1はメチル基であり、R2は水素原子であり、R3は水素原子である。R1はメチル基であり、R2は水素原子であり、R3はメチル基である。R1はメチル基であり、R2は水素原子であり、R3は塩素原子である。R1はメチル基であり、R2は水素原子であり、R3はトリフルオロメチル基である。R1は水素原子であり、R2はメチル基であり、R3は水素原子である。R1は水素原子であり、R2はメチル基であり、R3はメチル基である。R1は水素原子であり、R2はメチル基であり、R3は塩素原子である。R1は水素原子であり、R2はメチル基であり、R3はトリフルオロメチル基である。R1はメチル基であり、R2はメチル基であり、R3は水素原子である。R1はメチル基であり、R2はメチル基であり、R3はメチル基である。R1はメチル基であり、R2はメチル基であり、R3は塩素原子である。R1はメチル基であり、R2はメチル基であり、R3はトリフルオロメチル基である。さらに、上記の中でも好ましい組み合わせは、選択的EP4アゴニスト作用が高いという観点から、以下の通りである。R1はメチル基であり、R2は水素原子であり、R3はメチル基である。R1は水素原子であり、R2はメチル基であり、R3はメチル基である。さらに、最も好ましい組み合わせは、以下の通りである。R1はメチル基であり、R2は水素原子であり、R3はm-メチル基である。R1は水素原子であり、R2はメチル基であり、R3はm-メチル基である。本発明の化合物1の製造方法本発明の化合物1は、例えば、本発明者らの発明に係わる特開平07-324081号公報や特開平08-217772号公報に記載の方法を基にして製造できる。例えば、コーリーラクトンを出発原料として、ω鎖をまず導入したのち、フッ素化により、ω鎖付ジフルオロコーリーラクトンに変換する。次いで、末端にテトラゾール基を有する有機金属反応剤の付加反応と脱水反応、あるいは、末端にテトラゾール基を有するホスホニウム塩を用いるウィティッヒ反応、等によりα鎖ユニットを導入し、所望により水酸基の脱保護を行うことにより、合成することができる。または、コーリーラクトンを出発原料として、フッ素化によりジフルオロコーリーラクトンとしたのち、まず末端にテトラゾール基を有する有機金属反応剤の付加反応と脱水反応、あるいは、末端にテトラゾール基を有するホスホニウム塩を用いるウィティッヒ反応等によりα鎖ユニットを導入し、次にω鎖を導入して所望により水酸基の脱保護を行うことにより合成することができる。または、特開平07-324081号公報に記載のカルボン酸誘導体からカルボキシ基をシアノ基に変換したのちテトラゾール誘導体に変換することによっても合成することができる。これらの製造法の中で代表的な方法を以下の化学式を用いて具体的に説明する。例えば、コーリーラクトン7を出発原料としてω鎖をまず導入したのち、得られたω鎖付コーリーラクトン類6にフッ素化反応を行ってカルボニル基のα位にフッ素原子2個を有するω鎖付ジフルオロコーリーラクトン類3を製造し、次いで、このジフルオロラクトン類3にホスホラン類4を反応させてα鎖ユニットを導入することにより、水酸基が保護されたPGI2誘導体2が得られる。そして、水酸基の保護基を脱保護して本発明の化合物1が得られる。なお、ホスホラン類4はホスホニウム塩類5より得られる。R1~R3が特定の置換基である場合を除き、上記ラクトン類6は公知の化合物である。R1~R3が特定の置換基である新規な上記ラクトン類6は、公知のラクトン類6と同様の方法で製造できる。例えば、3-アリール-2-オキソアルキルホスホン酸ジエステルを、ホルミル基を有するコーリーラクトンと反応させて新規なラクトン類6を製造できる。ここでアルキルホスホン酸のアルキル鎖は炭素数3以上である。R4、R5及びR7はそれぞれ独立に水酸基の保護基である。R4、R5、及びR7は同一の保護基であってもよい。保護基としては、例えば新実験化学講座14、有機化合物の合成と反応V丸善、プロテクティブ/グループス/イン/オーガニック/シンセシスT.W.Greene著、J.WileySons等に記載の水酸基の保護基を用いることができる。具体的には、トリオルガノシリル基、アルコキシアルキル基、環状エーテル構造を有する1価基等が挙げられる。トリオルガノシリル基としては、アルキル基、アリール基、アルアルキル基、またはアルコキシ基がケイ素原子に3個結合した基が好ましく、特に低級アルキル基またはアリール基がケイ素原子に3個結合した基が好ましい。保護基の具体例としては、テトラヒドロピラニル基、tert-ブチルジメチルシリル基、tert-ブチルジフェニルシリル基、トリエチルシリル基、トリフェニルシリル基、またはトリイソプロピルシリル基等が好ましい。特にテトラヒドロピラニル基、tert-ブチルジメチルシリル基、tert-ブチルジフェニルシリル基等が好ましい。水酸基の保護基は、容易に脱保護できる。保護された水酸基の脱保護の方法は、常法が採用できる。例えば、新実験化学講座14有機化合物の合成と反応I、II、V丸善、プロテクティブ/グループス/イン/オーガニック/シンセシスT.W.Greene著、J.WileySons等に記載の方法が採用できる。ラクトン類6にフッ素化反応を行ってジフルオロラクトン類3とするには、種々の公知のフッ素化法が適用できる。例えば、種々の求電子的フッ素化剤を用い不活性溶媒中で反応させる方法が採用される。本発明者らの発明に係わる特開平07-324081号公報や特開平09-110729号公報に記載の方法によってもフッ素化できる。ラクトン類6のフッ素化反応では、求電子的フッ素化剤を使用するのが好ましい。求電子的フッ素化剤としては、公知または周知の求電子的フッ素化剤を使用できる。例えば、北爪智也、石原孝、田口武夫著フッ素の化学講談社サイエンティフィック等に記載される求電子的フッ素化剤が挙げられる。具体的には、N-フルオロスルホンアミド類、N-スルホンイミド類、アセチルハイポフルオライト、フッ素ガス等が挙げられる。求電子的フッ素化剤は、不活性溶媒の存在下で用いるのが好ましい。不活性溶媒としては、エーテル系溶媒、炭化水素系溶媒、極性溶媒またはこれらの混合溶媒等が挙げられる。フッ素化反応で得られたジフルオロラクトン類3は、次にホスホラン類4と反応させて水酸基が保護されたPGI2誘導体2とする。ホスホラン類4は、対応するホスホニウム塩類5より、不活性溶媒中、塩基の存在下に製造され、生成したホスホラン類4は、単離せずにそのままジフルオロラクトン類3とのウィッティヒ反応に用いるのが好ましい。ホスホラン類4及びホスホニウム塩類5の製造方法は、DE2242239号明細書、DE2405255号明細書等に記載の方法等を採用できる。ホスホラン類4やホスホニウム塩類5におけるR6としては、フェニル基、トリル基等のアリール基が好ましく、フェニル基が特に好ましい。不活性溶媒としては、エーテル系溶媒、炭化水素系溶媒、極性溶媒、水系溶媒、アルコール系溶媒、またはこれらの混合溶媒等が挙げられる。以上の方法で得た水酸基が保護されたPGI2誘導体2の水酸基の保護基を脱保護することにより、化合物1を得る。なお、本発明の化合物1はその構造中に不斉炭素を有するため、各種の立体異性体、光学異性体が存在するが、本発明においては、これらすべての立体異性体、光学異性体、及びそれらの混合物を包含する。本発明の化合物1の具体例としては、下記式8で表される化合物が挙げられる。本発明の化合物1の例また、式8においてR1、R2、及びR3が下記表1に示す構造である化合物が挙げられる。本発明の化合物1の特性本発明の化合物1は、生体内において代謝を受けにくく、安定性が向上したPGI2誘導体である。PG骨格のカルボキシ基がテトラゾール基に変換されているため、PG等の脂肪酸の一般的な代謝経路として知られているβ酸化による代謝を受けにくい。このため、PG骨格にカルボキシ基を有する化合物に比べて、血中半減期が長く、有効血中濃度を長く維持することができる。また、このように代謝的な安定性が向上していることにより、薬物のバイオアベイラビリティーを改善することができる。本発明の化合物1またはその薬学的に許容できる塩は、選択的なEP4アゴニストとしての作用を示す。該作用を示す好ましい化合物1の例は、前記の化合物1の好ましい例と同じである。本発明の化合物1またはその薬学的に許容できる塩を有効成分とする医薬本発明の医薬は、化合物1及び/又は薬学的に許容される化合物1の塩を含み、さらに薬剤として許容される担体、及び場合によっては他の治療成分も含めてもよい。加えて、本発明の医薬は、化合物1及び/又は薬学的に許容される化合物1の塩、またはそれらの水和物を含み、さらに薬剤として許容される担体、及び場合によっては他の治療成分も含めてもよい。本発明の予防治療剤を患者に投与する場合、1日の投与量は患者の年齢、体重、病態及び重症度等により異なるが、通常は0.0001~10mgを、好ましくは0.01~1mgを1乃至数回に分けて投与することが望ましい。例えば、経口投与では、0.001~3mgが好ましく、特に0.001~0.5mgが好ましい。静脈内投与では、0.0001~1mgが好ましく、特に0.001~0.1mgが好ましい。投与量は疾患や病態によって適宜増減することができる。また、投与形態は、注射剤の場合は点滴持続投与を行うことが望ましい場合もある。医薬として使用する場合、経口的投与、及び非経口的投与例えば、血管静脈、動脈内投与、皮下投与、直腸内投与等によって生体内に投与することができる。投与形態としては、例えば、錠剤、カプセル剤、シロップ剤等の経口投与形態、溶液、乳剤、懸濁剤等の液状の注射剤、点滴剤、坐薬、点鼻剤、貼付剤、吸入剤等の非経口投与形態が例示される。特に経口的に投与されることが望ましい。前記投与形態の製剤は、本発明の化合物1またはその薬学的に許容できる塩に、通常の担体、賦形剤、結合剤、安定化剤等の製剤上必要な添加剤を配合し、常法によって製剤化することにより製造できる。例えば、製剤が粉末、顆粒、錠剤等の場合、固形製剤を製造するのに好適な任意の製薬担体、例えば、賦形剤、滑沢剤、崩壊剤、結合剤等を用いて製造することができる。これらの賦形剤は例えば、不活性希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム、またはリン酸ナトリウム;グラニュール化剤及び崩壊剤、例えば、コーンスターチ、またはアルギン酸;結合剤、例えば、デンプン、ゼラチンまたはアラビアゴム、及び潤滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクであってもよい。これらの錠剤は、コーティングされていなくてもよく、またはこれらは、胃腸管における崩壊及び吸収を遅らせ、これによってより長時間にわたって持続作用を与えるために、公知技術によってコーティングされてもよい。例えば、時間遅延材料、例えば、グリセリルモノステアレート、またはグリセリルジステアレートが用いられてもよい。また、本発明の化合物1が、不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、またはカオリンと混合されているハードゼラチンカプセルであってもよい。あるいは、水混和性溶媒、例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール及びエタノール、または油媒質、例えば、ピーナッツオイル、液体パラフィン、またはオリーブ油と混合されているソフトゼラチンカプセルとして提供されてもよい。また、製剤がシロップや液剤の場合、例えば、安定化剤、懸濁化剤、矯味剤、芳香剤等を適宜に選択して製造することができる。注射剤を製造するには、有効成分を塩酸、水酸化ナトリウム、乳糖、乳酸ナトリウム、酢酸、リン酸一水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム等のpH調整剤、塩化ナトリウム、ブドウ糖等の等張化剤とともに注射用蒸留水に溶解し、無菌的に調製する。プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油、エタノール、ポリソルベート80等の不活性な非水性の希釈剤を用いて調製してもよい。さらにマンニトール、デキストリン、シクロデキストリン、ゼラチン等を加えて、真空凍結乾燥し、用時溶解用注射剤としてもよい。また、安定化及び病巣到達性を改善するため公知の方法により、リポソーム製剤、脂肪乳剤を調製して注射剤として用いることもできる。また、カカオ脂、脂肪酸のトリグリセリド、脂肪酸のジグリセリド、脂肪酸のモノグリセリド、ポリエチレングリコール等の坐剤用基剤を用いて直腸内投与製剤を調製してもよい。さらにポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、グリセリン、グリセロゼラチン等の水溶性基剤、白色ワセリン、ハードファット、パラフィン、流動パラフィン、プラスチベース、ラノリン、精製ラノリン等の油性基剤等を用いて適当な粘度に調製し直腸内注入軟膏を調製することもできる。本発明の化合物1またはその薬学的に許容できる塩は局所的に皮膚または粘膜に、すなわち経皮または経粘膜投与することができる。この目的のための通常の剤型として、ゲル、ハイドロゲル、ローション、溶液、クリーム、軟膏、散布剤、ドレシング剤、泡製剤、フィルム剤、スキンパッチ、オブラート、インプラント、スポンジ、繊維、バンデージ、及びマイクロエマルジョン等が挙げられる。通常の担体としては、アルコール、水、鉱物油、流動パラフィン、白色ワセリン、グリセリン、ポリエチレングリコール及びプロピレングリコール等が挙げられる。前述の投与形態のいずれかにおいて使用するため、その溶解度、溶解速度、バイオアベイラビリティー及び安定性を改善するために、本発明の化合物1は、シクロデキストリン及びその適切な誘導体またはポリエチレングリコール含有ポリマー等の可溶性高分子単位と混合することができる。例えば、薬物-シクロデキストリン複合体等は、一般的に大半の剤型及び投与経路に有用であることが確認されている。包接及び非包接複合体のいずれも使用することができる。薬物との直接の複合体化の別法として、シクロデキストリンを補助的添加剤、すなわち担体、賦形剤または可溶化剤として用いることもできる。これらの目的のために、α-、β-及びγ-シクロデキストリン等が一般的に使用される。本発明の化合物1の薬学的に許容できる塩本発明の化合物1の薬学的に許容できる塩は、該誘導体のテトラゾール基部分と塩基性物質の塩であり、テトラゾール基の水素原子が陽イオンに置換された化合物である。この陽イオンとしては、例えば、Na、K等のアルカリ金属カチオン、1/2Ca2、1/2Mg2、1/2Zn2、1/3Al3等のアルカリ金属以外の金属カチオン、NH4、及びトリエタノールアミン、ジエタノールアミン、エタノールアミン、トロメタミン、リジン、アルギニン等の有機アミンやアミノ酸のアンモニウムカチオン等がある。好ましい陽イオンはナトリウムイオンとカリウムイオンである。より詳しくは、許容できる塩とは、無機塩基及び有機塩基を含む薬剤として許容される無毒の塩基から調製した塩を指す。薬学的に許容される無毒無機塩基由来の塩としては、前記ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、亜鉛塩、アルミニウム塩、アンモニウム塩等の他、リチウム塩、銅塩、第二鉄塩、第一鉄塩、第二マンガン塩、第一マンガン塩等の塩も挙げられる。これらのうち、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩及びアンモニウム塩が好ましく、ナトリウム塩及びカリウム塩が特に好ましい。薬学的に許容される無毒有機塩基由来の塩には、第1級、第2級、及び第3級アミン、自然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環状アミン、及び塩基性イオン交換樹脂の塩が含まれる。前記した有機アミンやアミノ酸の具体例以外としては、例えば、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、エチレンジアミン、N,N-ジベンジルエチレンジアミン、2-ジエチルアミノエタノール、2-ジメチルアミノエタノール、モルホリン、N-エチル-モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、N-エチルピペリジン、ベタイン、カフェイン、コリン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラブアミン、メチルグルカミン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン等が挙げられる。本発明の化合物1またはその薬学的に許容できる塩を有効成分とする医薬の用途本発明の化合物1またはその薬学的に許容できる塩を有効成分とする医薬は、EP4の関与する疾患、好ましくは選択的なEP4アゴニスト作用によりその症状を緩和させることができる疾患に適用することができる。具体的には、免疫疾患、消化管疾患、循環器疾患、心疾患、呼吸器疾患、神経疾患、眼疾患、腎疾患、肝疾患、骨疾患、皮膚疾患等に対して有用である。本発明における免疫疾患とは、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、シェーグレン症候群、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス等の自己免疫疾患、臓器移植後の拒絶反応等、喘息、神経細胞死、関節炎、肺傷害、肺線維症、肺気腫、気管支炎、慢性閉塞性呼吸器疾患、肝障害、急性肝炎、腎炎、腎不全、全身性炎症反応症候群、敗血症、血球貪食症候群、マクロファージ活性化症候群、スチルStill病、川崎病、熱傷、全身性肉芽腫、透析時の高サイトカイン血症、多臓器不全、ショック、乾癬等の炎症性疾患を含む。本発明における消化管疾患とは、物理的刺激、胃液等の化学的刺激、非ステロイド性抗炎症剤やステロイド等の薬物性刺激、原因が不明な免疫疾患や自己免疫疾患、精神疾患等が原因で消化管の上皮、粘膜、下部組織が炎症や潰瘍、粘膜上皮の異常増殖、機能障害を有する疾患であり、消化管の炎症性疾患及び潰瘍性疾患を含む。該消化管の炎症性疾患は、炎症性腸疾患、特に潰瘍性大腸炎、線維化あるいは潰瘍を伴う非特異性の肉芽腫性炎症性疾患であるクローン病、腸管ベーチェット病または単純性潰瘍を含む。また、本発明における該消化管の潰瘍性疾患は、口腔炎、口腔アフタ、食道炎、食道潰瘍、胃炎、胃潰瘍、小腸潰瘍を含む。さらに、胃炎、胃潰瘍は、薬剤性の胃炎、胃潰瘍、アルコールに起因する胃炎、胃潰瘍を含み、該薬剤性の胃炎、胃潰瘍は非ステロイド性抗炎症剤に起因する胃炎胃潰瘍を含む。また、小腸潰瘍は、薬剤性の小腸潰瘍、アルコールに起因する小腸潰瘍を含み、該薬剤性の小腸潰瘍は非ステロイド性抗炎症剤に起因する小腸潰瘍を含む。特に、本発明の医薬は、潰瘍性大腸炎、クローン病、胃炎胃潰瘍、小腸潰瘍の予防または治療のための医薬として有用である。循環器疾患および心疾患は、動脈硬化症、狭心症、心筋梗塞、脳出血により生じる脳障害、脳梗塞により生じる脳障害、クモ膜下出血により生じる脳障害、肺動脈性肺高血圧症、末梢動脈閉塞症閉塞性動脈硬化症や閉塞性血栓血管炎及び末梢循環障害に基づく種々の症状腰部脊柱管狭窄症に伴う間歇性跛行下肢しびれ、レイノー症候群、勃起不全、痔疾等を含む。呼吸器疾患は、喘息、肺傷害、肺線維症、肺気腫、気管支炎、慢性閉塞性呼吸器疾患を含む。神経疾患は、神経細胞死、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、脳障害脳出血、脳梗塞、およびクモ膜下出血により生じる脳障害を含む。眼疾患は、緑内障、高眼圧を含む。腎疾患は、糸球体腎炎、糖尿病性腎症、IgA腎症、虚血-再灌流性腎障害を含む。肝疾患は、肝炎、肝障害、虚血-再灌流性肝障害を含む。骨疾患は、骨粗鬆症、骨折、骨切り術後の回復期を含む。皮膚疾患は、褥創や創傷を含む。さらに、本発明の化合物1またはその薬学的に許容できる塩を有効成分とする医薬は、脱毛症、禿頭症、または難聴例、音響が原因の難聴の予防および/または治療剤、あるいは子宮頚管熟化促進剤としても有用である。以下に具体例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの例に限定されない。-2-プロピオン酸メチルエステルの合成-2-プロピオン酸12.45gにメタノール14.83g、濃硫酸6.46gを加え,還流下で6時間撹拌した。続いて、10炭酸ナトリウム水溶液で中和し、ヘキサンで抽出した。さらに、硫酸マグネシウムで乾燥後,減圧濃縮して標題化合物12.79gを得た。なお、構造特性は以下の通りである。1HNMR:δ149233364369706722.-2-オキソ-3-ブチルホスホン酸ジメチルの合成メチルホスホン酸ジメチルエステル1.97gにテトラヒドロフランTHF25mLを加え、-78°Cに冷却後にn-ブチルリチウム1.5Mヘキサン溶液10mLを加え、1時間攪拌した。次に、実施例1で合成したメチルエステル{-2-プロピオン酸メチルエステル}1.34gのTHF3.8mL溶液を-78°Cで加え、2時間攪拌した。25mL飽和重曹水で反応を停止し、酢酸エチルで抽出した。さらに、硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン/酢酸エチル5:1~1:5で精製して、標題化合物1.63gを得た。なお、構造特性は以下の通りである。1HNMR:δ139234284318376400701724.-6--3-オキソ-4--1-ペンテニル-7-ベンゾイルオキシ-2-オキサビシクロ3.3.0オクタン-3-オンの合成水素化ナトリウム558.75gを1,2-ジメトキシエタンDME300mLに分散させ氷冷し、そこに実施例2で合成したホスホナート{-2-オキソ-3-ブチルホスホン酸ジメチル}54.7gのDME50mL溶液を加え、1時間攪拌した。上記の溶液に-6-ホルミル-7-ベンゾイルオキシ-2-オキサビシクロ3.3.0オクタン-3-オン50.0gのDME400mL溶液を加え、1時間攪拌した後、350mLの10食塩水で反応を停止し、酢酸エチルで抽出した。さらに、硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮した。濃縮した粗生成物をt-ブチルメチルエーテルから再結晶して、標題化合物64.7gを得た。なお、構造特性は以下の通りである。1HNMR:δ139220228230234241249257276285380503523619669694719742795.-6--3-ヒドロキシ-4--1-ペンテニル-7-ベンゾイルオキシ-2-オキサビシクロ3.3.0オクタン-3-オンの合成実施例3で合成したエノン{-6--3-オキソ-4--1-ペンテニル-7-ベンゾイルオキシ-2-オキサビシクロ3.3.0オクタン-3-オン}147.0gのTHF1480mL溶液を-40°Cまで冷却し、--B-クロロジイソピノカンフェイルボラン1.7Mヘキサン溶液721mLを加えた後、氷冷下で20時間攪拌した。アセトン183mLを加え3時間攪拌した後に、重曹水を加え、t-ブチルメチルエーテルで抽出した。そして、硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し、粗製の標題化合物649.9gを得た。-6--3-ヒドロキシ-4-m-トリル-1-ペンテニル-7-ヒドロキシ-2-オキサビシクロ3.3.0オクタン-3-オンの合成実施例4で合成した粗製アルコール、{-6--3-ヒドロキシ-4--1-ペンテニル-7-ベンゾイルオキシ-2-オキサビシクロ3.3.0オクタン-3-オン}649.9gをメタノール740mLに溶解し、炭酸カリウム116.3gを加え、室温で17時間撹拌した。酢酸でpHを7にした後にメタノールを留去し、水を加え、酢酸エチルで抽出した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン/酢酸エチル=4/1~0/1で精製し、標題化合物22.3gを得た。なお、構造特性は以下の通りである。1HNMR:δ133170186207213223234235244247256280379385412416481527550694720.-6--3-t-ブチルジメチルシロキシ-4--1-ペンテニル-7-t-ブチルジメチルシロキシ-2-オキサビシクロ3.3.0オクタン-3-オンの合成実施例5で合成したジオール、{-6--3-ヒドロキシ-4--1-ペンテニル-7-ヒドロキシ-2-オキサビシクロ3.3.0オクタン-3-オン}988mgのN,N-ジメチルホルムアミドDMF10mL溶液に室温でt-ブチルジメチルシリルクロリド1.17g、イミダゾール1.08gを加え、2時間半撹拌した。反応液を飽和重曹水に注ぎ、ヘキサン/酢酸エチル=2/1混合物で抽出した。硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン/酢酸エチル20:1~10:1で精製して、標題化合物1.56gを得た。なお、構造特性は以下の通りである。1HNMR:δ009002086089127186192196202232231247262273382405486516530690716.-6--3-t-ブチルジメチルシロキシ-4--1-ペンテニル-7-t-ブチルジメチルシロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-オンの合成臭化マンガン1.48g、N-フルオロベンゼンスルホンイミド2.48gにテトラヒドロフランTHF19mLを加え30分攪拌した後、-78°Cに冷却した。実施例6で合成したラクトン、{-3-t-ブチルジメチルシロキシ-4--1-ペンテニル-7-t-ブチルジメチルシロキシ-2-オキサビシクロ3.3.0オクタン-3-オン}0.5gのTHF5mL溶液を加え、その後カリウムビストリメチルシリルアミドのトルエン溶液0.5M、13mLを加えて3時間半かけて0°Cまで昇温させた。反応液を飽和重曹水に注ぎ、ヘキサン/酢酸エチル=1/1混合物で抽出した。硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン/酢酸エチル20:1で精製して、標題化合物0.32gを得た。なお、構造特性は以下の通りである。1HNMR:δ008003082089128170177196204231260291382387399423500506533688716.19FNMR:1131910.4---6--3-t-ブチルジメチルシロキシ-4--1-ペンテニル-7-t-ブチルジメチルシロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-イリデン-1-テトラゾール-5-イルブタンの合成4-ブチルトリフェニルホスホニウムブロミド14.0gのトルエン390mL懸濁液に、カリウムビストリメチルシリルアミドのトルエン溶液0.5M、120mLを加え、60°Cで1時間撹拌した。実施例7で合成したジフルオロラクトン、{-6--3-t-ブチルジメチルシロキシ-4--1-ペンテニル-7-t-ブチルジメチルシロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-オン}4.32gのトルエン130mL溶液を-10°Cで加え、室温まで昇温させながら18時間撹拌した。重曹水を加えて反応を停止し、ヘキサン/酢酸エチル=1/1混合物で抽出した。硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン/酢酸エチル=5/1~0/1で精製し、標題化合物4.1gを得た。なお、構造特性は以下の通りである。1HNMR:δ01400108208912312718220922122823124525326427329329739040840948448752754469271619FNMR11238144---6--3-ヒドロキシ-4--1-ペンテニル-7-ヒドロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-イリデン-1-テトラゾール-5-イルブタンの合成実施例8で合成した化合物4.1gにTHF81mL、水81mL、酢酸244mLを加え、35°Cで46時間攪拌した。水500mLを加えクロロホルムで抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーヘキサン/酢酸エチル=1/5~0/1で精製し、ジエチルエーテルで再結晶を行い、標題化合物1.1gを得た。なお、構造特性は以下の通りである。1HNMR:δ130169182195210216229231241248256272293378404410469479536546695713.19FNMR:11668482-オキソ-3-ブチルホスホン酸ジメチルの合成ラセミ体の2-プロピオン酸を用いて実施例1~2の方法と同様にして表題の化合物を合成した。なお、構造特性は以下の通りである。1HNMR:δ139234283318376399701727.1S,5R,6R,7R-6--3-t-ブチルジメチルシロキシ-4--1-ペンテニル-7-t-ブチルジメチルシロキシ-2-オキサビシクロ3.3.0オクタン-3-オンの合成ラセミ体の2-オキソ-3-ブチルホスホン酸ジメチルを用い実施例3~6の方法と同様にして表題の化合物を合成した。なお、構造特性は以下の通りである。1HNMR:δ020010080090118128185220231230280380415481495512542688720.-6--3-t-ブチルジメチルシロキシ-4--1-ペンテニル-7-t-ブチルジメチルシロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-オンの合成実施例11で合成した-6--3-t-ブチルジメチルシロキシ-4--1-ペンテニル-7-t-ブチルジメチルシロキシ-2-オキサビシクロ3.3.0オクタン-3-オンを用いて実施例7の方法と同様にして表題の化合物を合成した。なお、構造特性は以下の通りである。1HNMR:δ02000508009011912917021023126030538441249555068572019FNMR:113611289179064---6--3-t-ブチルジメチルシロキシ-4--1-ペンテニル-7-t-ブチルジメチルシロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-イリデン-1-テトラゾール-5-イルブタンの合成実施例12で合成した-6--3-t-ブチルジメチルシロキシ-4--1-ペンテニル-7-t-ブチルジメチルシロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-オンを用いて実施例8の方法と同様にして表題の化合物を合成した。なお、構造特性は以下の通りである。1HNMR:δ015005080089120128180305390415485495523558690720.19FNMR:113011138208074---6--3-ヒドロキシ-4--1-ペンテニル-7-ヒドロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-イリデン-1-テトラゾール-5-イルブタンの合成実施例13で合成した4---6--3-t-ブチルジメチルシロキシ-4--1-ペンテニル-7-t-ブチルジメチルシロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-イリデン-1-テトラゾール-5-イルブタンを用いて実施例9の方法と同様にして表題の化合物を合成した。なお、構造特性は以下の通りである。1HNMR:δ11513518030022940542047548553557069572519FNMR114511278358185---6--3-ヒドロキシ-4--1-ペンテニル-7-ヒドロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-イリデンペンタン酸カルボン酸体の合成実施例12で合成した-6--3-t-ブチルジメチルシロキシ-4--1-ペンテニル-7-t-ブチルジメチルシロキシ-2-オキサ-4,4-ジフルオロ-ビシクロ3.3.0オクタン-3-オンと4-カルボキシブチルトリフェニルホスホニウムブロミドから、実施例8~9と同様にして表題の化合物を合成した。なお、構造特性は以下の通りである。1HNMR:δ11713016327922937541246648554055869571519FNMR11831177861853本発明の化合物のインビトロ代謝的安定性表1記載の本発明の化合物Fと化合物Jの混合物F:J=52:41、実施例14で合成、化合物Fと化合物JのC-1のテトラゾール基がカルボン酸に置換された化合物の混合物カルボン酸体と呼ぶ、F:J=54:34、実施例15で合成を試験した。まず、ラット肝臓より下記文献Aに準じてミトコンドリア画分を調製した。下記文献B、Cに記載のYAMAGUCHIらの方法を参考にNADPH非依存型β酸化の反応を検討した。反応は、37°Cで30分間とし、適当な内部標準物質を加えたメタノール溶液で停止させた。各化合物は、高分解能液体クロマトグラフ質量分析装置LC-MS/MSを用いて内部標準法で定量した。化合物F、J及びそれぞれのカルボン酸体のラットミトコンドリア画分における代謝反応後の化合物残存率を下記表2に3回実施の平均±標準偏差で示した。上記表2で明らかなように本発明で代表される化合物Fや化合物Jは、ミトコンドリア画分でのβ酸化を受けないことが示された。文献A社団法人日本生化学会編集、生化学実験講座12エネルギー代謝と生体酸化上,東京化学同人,p.217-218,第1版第2刷,1979年7月11日発行BDrugMetabolismAndDisposition23:1195-12011995.CXenobiotica266613-6261996ラット静脈内投与後の血中薬物動態本発明の化合物のインビボでの代謝的安定性を確認する為に、ラットに静脈内投与し血中薬物動態を評価した。6週齡の雄性ラット体重160~180gを1週間馴化し、健康と判断された動物を使用した。表1記載の本発明の化合物Fと化合物Jの混合物F:J=52:41、化合物Fと化合物Jのカルボン酸体F:J=54:34、化合物F実施例9で合成を少量のエタノールで溶解し、さらに生理食塩液を添加し、被験化合物溶液を調製した。その被験化合物溶液を軽いエーテル麻酔を施した非絶食ラットに大腿静脈から1mL/kgで瞬時静脈内投与した。投与後5、15、30、45、60、90及び120分に尾静脈より静脈血を採取した。ヘパリンを混合し、遠心分離3000rpm4°C15分で血漿を得た。血漿中化合物濃度は、LC-MS/MSを用いた内部標準法により測定した。本分析法の定量範囲は0.1~100ng/mLであった。得られた化合物濃度を薬物動態解析ソフトウエアWinNonlinver3.3で個体ごとに非モデル解析し、各群3匹の平均±標準偏差を得た。消失相におけるみかけの半減期t1/2を、下記表3に示す。上記表3から明らかなように、本発明の化合物Fや化合物Jのt1/2は、約1~2時間であり、カルボン酸体の10分未満に比べて大きく延長し、優れた代謝安定性を示した。受容体結合性本発明の化合物FとJのPG受容体結合性を評価した。化合物Fは、実施例9で合成したものを使用し、化合物Jは、実施例14で合成したものをカラムで分離精製し、調製した。COS-7細胞にマウスEP4、ヒトEP1-4及びヒトIPの遺伝子を導入し、受容体を強制発現させ、細胞膜を回収した。標識リガンドとして、EPにおいてトリチウム標識PGE2を、IPにおいてはトリチウム標識イロプロストを使用した。常法に従い、解離定数Kd値を得た後、各被験化合物の結合阻害定数Ki値を求めた。比較対照として、EPにおいてPGE2を、IPにおいてベラプロストナトリウムBPSを使用した。その結果、解離定数は文献値に近似した。表4に示すようにPGE2はEP1-4に同等に結合し、これらのEPサブタイプに対する選択性はなかった。BPSはIPに選択的に結合した。化合物FとJは、マウス及びヒトEP4に結合した。化合物FのヒトEP4結合性は、ヒトEP1、EP2及びEP3受容体よりも60倍以上強く結合し、さらにIPと比べると100倍以上強かった。化合物JのヒトEP4への結合性は、ヒトIPへの結合性に比べて、40倍強かった。アゴニスト活性本発明の化合物Fと化合物JのEP4アゴニスト活性を常法に従い評価した。簡潔に述べると、COS-7細胞にヒトEP4の遺伝子とCRE-LUCレポーター遺伝子を導入し、1日後に、被験化合物を添加し、3時間インキュベーションした。細胞を洗浄し、発光基質を加え、発光強度を測定して、アゴニスト活性とした。比較対照として、PGE2を使用し、その最大活性を100とし、50の作用を示す濃度EC50を算出し、被験化合物のアゴニスト活性効果を比べた。その結果、表5に示すように化合物FとJは、EP4アゴニストであった。血小板凝集における抑制効果化合物F及びJ、並びにそれぞれのカルボン酸体の血小板凝集における抑制効果を評価した。カルボン酸体は、実施例15で合成したものをカラムで分離精製し、調製した。健常人3名からクエン酸ナトリウムを抗凝固剤として血液を採取し、多血小板血漿を調製した。多血小板血漿を生理食塩液あるいは被験化合物で処理して、2分後にアデノシン2リン酸ADP、終濃度10μmol/Lで血小板凝集を惹起し、血小板凝集能測定装置で記録した。生理食塩液処理群の最大凝集率を100として、それを50抑制する被験化合物の濃度IC50を算出し、抑制効果を調べた。その結果、表6に示すとおりに化合物FやJは、IPアゴニストであるBPSやカルボン酸体に比べ、凝集抑制効果がかなり弱かった。マウスの血圧および心拍数に及ぼす影響ICRマウス、雄性、5週齢日本エスエルシーを購入し、6日間馴化飼育した後に試験に使用した。処置および測定は、イソフルラン吸入麻酔下麻酔導入2.5、麻酔維持1.8-2.1で、体温コントローラーATC-402、ユニークメディカルを用いて体温を37°Cに保ちながら行った。左大腿静脈にカテーテルを挿入して薬物投与経路とし、右大腿動脈にカテーテルを挿入し、圧トランスデューサーに接続して循環動態の各パラメーターを記録した。化合物F、化合物Fのカルボン酸体及びBPSを0.01mg/5mL/kgの用量で静脈内投与し、平均血圧および心拍数に及ぼす影響を循環動態解析ソフトフラクレット、大日本住友製薬で評価した。対照群には溶媒1.2エタノール溶液を5mL/kgで同様に静脈内投与した。結果は薬物投与前後での各パラメーターの変化率で示した。各群3~6匹の動物を使用し、結果は平均±標準偏差で表現した。その結果、溶媒は、平均血圧に変化を与えなかったが、化合物Fのカルボン酸体及びBPSは、投与1分後に顕著に血圧を低下させ、その最大低下率はそれぞれ45及び38であった図1A。この血圧低下は10分後に回復したが、心拍数は上昇傾向を示し、10分後でも高値であった図1B。一方、化合物Fによる最大低下率は16.2であったが、有意ではなかった図1A。また、化合物Fは、心拍数にほんど影響を与えなかった図1B。このように化合物Fの血圧及び心拍数への影響は、カルボン酸体やIPアゴニストであるBPSに比べて、極めて弱かった。炎症性サイトカイン産生に対する抑制効果ヒト末梢血を用いて化合物F及びJの抗炎症効果をインビトロで検討した。健常人3名から血液を採取し、CD4陽性T細胞を調製した。抗CD3抗体と抗CD28抗体を添加し24時間後に培地中に遊離したIL-2及びTNF-α量をELISAで測定した。また、採取した全血を培地で希釈し、インドメタシン処理して内因性PGE2の産生を抑制した上で、リポポリサッカライドを添加し、48時間後に培地中に遊離したIP-10量をELISAで測定した。いずれの場合も被験化合物は、刺激30分前に添加した。溶媒対照群の産生量を100として、それを50抑制する濃度をIC50とした。その結果、表7に示すようにPGE2と化合物Fは、極めて低濃度で炎症性サイトカインIL-2、TNF-α及びIP-10の産生を強く抑制した。化合物Jは、化合物Fに比べて弱いものの、同じくサイトカイン産生を抑制した。いずれの化合物もEP4結合活性やEP4アゴニスト活性を反映している。以上のように化合物Fを始めとする本発明の化合物は、PGI2誘導体であるにもかかわらずC-1カルボン酸体で認められていたIPアゴニスト活性が極めて減弱した、EP4選択的なアゴニストである。本発明の化合物は、臨床においては、EP4アゴニストが奏効する疾患群に対して同様に薬効が期待される。対照的に、当該化合物は、IPアゴニスト作用がもたらす循環器系への作用も弱まることによって、出血、低血圧、心悸亢進、顔面紅潮等の副作用の懸念が少ない。例えば、炎症性腸疾患は、腸管出血を伴う疾患であり、IPアゴニスト作用を減弱させることは重要である。化合物Fを用いて、炎症性腸疾患を始め種々の病態モデルでの本発明の化合物の薬効を検討した。マウスデキストラン硫酸ナトリウム誘発大腸炎モデルに対する予防効果化合物Fの潰瘍性大腸炎に対する予防効果をデキストラン硫酸ナトリウム誘発大腸炎モデルで検討した。本モデルは、大腸に限局した炎症をもたらし、下痢や血便を誘発させ、臨床的な潰瘍性大腸炎と酷似した病態である参照:文献D、E。BALB/c系マウス、雌性、6週齢日本エスエルシーを購入し、1週間馴化飼育した後、試験に使用した。正常群を除いて、2.2w/vに調製したデキストラン硫酸ナトリウムDSSと略す。MPBiochemicalsM.W.36,000-50,000,LotNo.3439J溶液を9日間自由飲水させることにより大腸炎を誘発した。化合物Fを、0.1、0.3及び1mg/kgの用量で、DSS飲水開始日0日目から剖検日9日目の前日まで連日1日1回、経口投与した。対照群には、溶媒1volエタノール液を10mL/kgで同様に経口投与した。マウスの便は、糞の水分量とその形状が相関することが予備的検討で分かった。そこで、下痢の度合いを示すために、便を6段階、すなわち、正常0点、球状の糞が5割以上1点、バナナ状の糞が5割未満2点、バナナ状の糞が5割以上3点、泥状便4点、水様便6点で評点した軟便スコア。便潜血出血を含むスコアは、便潜血スライド5シオノギII塩野義製薬を用いて、その程度を6段階、すなわち、陰性スライドの色が黄色から全く変化しない、0点、弱陽性わずかに青緑色、1点、陽性青緑色、2点、中等度陽性はっきりした青緑色、3点、強陽性発色試薬で瞬時に濃青色、4点、肛門出血5点で評点した。軟便スコアと潜血スコアの合計値を排便障害スコアとした。各群8~10匹の動物を使用し、結果は平均±標準偏差で表現した。剖検日にエーテル麻酔下で開腹し、採血後に放血致死させ、盲腸直下から肛門までを摘出して長さを測定した。その結果、体重はいずれの群も差はなく終始、緩やかに増加した。対照群はDSS飲水開始4日目以降、明らかな軟便及び潜血便を示した。剖検日9日目の大腸の長さは、正常群に比して明らかな短縮を示した。化合物Fは、排便障害スコアの上昇に対して用量依存的な抑制効果を示し、0.1mg/kgで抑制傾向にあり、0.3及び1mg/kgで有意であった図2A。また、大腸短縮に対しても同様に用量依存的な抑制効果を認めた図2B。このように、化合物Fは、明確に潰瘍性大腸炎の発症を予防した。文献DLab.Invest.692:238-2491993.EInflamm.Res.454:181-1911996.マウスデキストラン硫酸ナトリウム誘発大腸炎モデルにおけるIPアゴニストの効果IPアゴニストが本病態モデルに効果を有するかどうかを、選択的なIPアゴニストであるBPSで検討してみた。C57BL/6系マウス、雌性、6週齢日本エスエルシーを購入し、1週間馴化飼育した後、試験に使用した。正常群を除いて、3あるいは2w/vDSSMPBiochemicals、それぞれLotNo.5653H及び5464H溶液を1週間自由飲水させることにより大腸炎を誘発した。BPSを0.3mg/kgの用量で、化合物Fを0.3及び1mg/kgの用量で、DSS飲水開始日0日目から剖検前日まで連日1日1回、経口投与した。対照群には、溶媒1volエタノール液を10mL/kgで同様に経口投与した。便の硬さを正常0点、一部軟便1点、軟便2点、下痢4点で評価し、血便を正常0点、一部血便1点、血便2点、血便に加えて肛門出血4点で評価し、その合計値最大8点を求め、排便障害スコアとした。さらに、実施例23と同様に大腸の長さも測定した。各群6~10匹の動物を使用し、結果は平均±標準偏差で表現した。その結果、IPアゴニストであるBPSは、排便障害スコアに無効どころか悪化させる傾向を示し、大腸短縮にも効果を示さなかった図3A、3C。しかし、化合物Fは、実施例23と同様に大腸炎の発症に対して優れた予防効果を示した図3B、3D。したがって、治療効果は、EP4アゴニスト作用によりもたらされるものであり、IPアゴニスト作用によって弱められることもある。したがって、選択的EP4アゴニストであることが重要である。ラットデキストラン硫酸ナトリウム誘発大腸炎に対する予防効果化合物Fの大腸炎に対する予防効果をラットでも検討した。SD系ラット、雄性、7週齢、体重210g~240g前後チャールスリバーを購入し、1週間馴化飼育した後、試験に使用した。正常群を除いて、5.5w/vに調製したDSSMPBiochemicals,M.W.36,000-50,000,LotNo.4556J溶液を8日間自由飲水させることにより大腸炎を誘発した。化合物Fは、0.3mg/kg、1mg/kg、3mg/kgの用量で、DSS飲水開始前日から剖検日前日DSS飲水7日目まで連日1日1回、経口投与した。対照群には溶媒1volエタノール溶液を5mL/kgで経口投与した。DSS飲水開始8日目に1.25w/vのエバンスブルー溶液を0.2mL/100gで尾静脈より投与し、30分後にエーテル麻酔下で開腹して放血致死させた。その後、盲腸直下から肛門までの大腸を摘出して、ものさしでその長さを測定した。大腸は、内容物を除去後、肛門から7cmの組織を生理食塩液で3回洗浄した後、真空ポンプを用いて一晩乾燥させた。翌日、乾燥重量を測定した後、ホルムアミドを2mL添加して、50°Cで一晩かけて色素抽出し、その程度を620nmで測定した。エバンスブルー標準液で検量線を作成し、1g中の大腸組織におけるエバンスブルーの量mgとして算出し、その程度を大腸組織傷害として評価した。下痢の度合いを示すために、便の形状を6段階、すなわち、正常0点、棒状が5割未満1点、棒状が5割以上2点、棒状と一部泥状3点、泥状4点、水様6点と評点した軟便スコア。潜血スコアは、実施例23に記載の方法で評価した。軟便スコアと潜血スコアの合計値を排便障害スコアとした。各群7~10匹の動物を使用し、結果は平均±標準偏差で表現した。その結果、対照群の体重は、終始、緩やかに増加したが、正常群に比して有意に低値を推移した。排便障害スコアは、DSS飲水開始1日目から有意に増加した。また、剖検日8日目では、大腸は明らかな組織傷害を認め、有意な短縮も認められた。これに対して、化合物Fは、1mg/kg及び3mg/kg投与でこれらいずれに対しても抑制傾向または有意な抑制効果を示した図4A、4B、4C。すなわち、化合物Fは、大腸の潰瘍発生を予防し、臓器機能を正常化することで、下痢や血便の症状を抑制することがわかった。マウスデキストラン硫酸ナトリウム誘発大腸炎の寛解/再燃モデルにおける治療効果次に慢性モデルで、化合物Fの大腸炎に対する治療効果を検討した。BALB/c系マウス、雌性、6週齢、体重20g前後日本エスエルシーを購入し、1週間馴化飼育した後、試験に使用した。マウスを大腸炎誘発群と正常群に群分けした後、大腸炎誘発群に2.6w/vのDSSMPBiochemicalsM.W.36,000-50,000,LotNo.4556J溶液を自由飲水させて大腸炎を誘発した。実施例23で定義した大腸炎誘発群の排便障害スコアが約4.5に達した8日目に、マウスは対照群、化合物Fの1mg/kg投与群、サラゾスルファピリジンSIGMA、LotNo.085K1930、以下SASPと略す100mg/kg投与群に分け、DSS溶液を蒸留水に交換してその後9日間飲水させたこれを寛解期とした。群分け後は、3~4日毎に一度排便スコアを評価し、対照群のスコアが約1になった時点で再びDSS溶液を飲水させ病態を再発させたこれを再燃期とした。この寛解と再燃を1サイクルとし、これを5サイクル繰り返した。ただし、5サイクル目は寛解期のみ実施した。化合物Fの1mg/kg及びSASPの100mg/kgは初回寛解期2.6w/vDSSの飲水開始8日目から5回目の寛解期2.6w/vDSSの飲水開始57日目までの50日間、連日1日1回、経口投与した。対照群には溶媒1volエタノール液を10mL/kgで経口投与した。寛解率は各寛解期最終日の軟便スコア及び潜血スコアがともに0に至った個体を寛解とし、各群における寛解個体数の割合を寛解率として算出した。各群8~10匹を使用し、結果は平均値で表現した。その結果、対照群の排便障害スコアは、再燃期に上昇、寛解期に低下したが、正常群に比して終始ほぼ有意に高かった図5。寛解率は、寛解期5回の平均が35.5であった表8。化合物Fは、寛解期の排便スコアを早期に低下させ、また再燃期ではスコア上昇を抑制した。また、寛解率はいずれの寛解期でも60以上を示し、平均66.0と対照群に比して明らかに高かった。一方、SASPは、寛解期及び再燃期のいずれにおいても排便スコアに対する明らかな効果を示さなかった。また、寛解率は、1、3及び4サイクル目で対照群より僅かに高値を示したが、2及び5サイクル目では逆に低く、平均値は対照群と同等であった。以上のように、化合物Fは、予防効果のみならず、治療効果があり、寛解維持効果を示した。さらに、その効果は、臨床的に使用されているSASPに比べてはるかに優れていると考えられる。マウスCD4CD25-T細胞移入腸炎に対する予防効果炎症性腸疾患のもう一つの病態であるクローン病に対する効果を検討した。T細胞移入モデルは、クローン病モデルとしてよく知られ、慢性的な胃炎や腸炎を発症する参照:文献F、G、H。また、T細胞の活性化を伴う類似した腸潰瘍を生じる腸管ベーチェット病単純性潰瘍の病態モデルともみなすことができる参照:文献I、J。BALB/cAJcl系マウス、雌性、6週齢、体重19~23g日本クレア及びCB-17/Icr-scid系マウス、雌性、6週齢日本クレアを購入し、1週間馴化飼育した後、試験に使用した。BALB/cAJcl系マウスをエーテル麻酔下で開腹後、腹部大動静脈から放血致死させ、脾臓を摘出した。脾臓から脾細胞を調製し、CD4TcellIsolationKitNo.130-090-860、ミルキーバイオテク株式会社及びCD25-BiotinantibodiesNo.130-092-569、ミルキーバイオテク株式会社を用いて、CD4CD25-T細胞を調製した。細胞の分離は、TheautoMACSSeparatorミルキーバイオテク株式会社を用いて行った。分離したCD4CD25-T細胞は、生理リン酸緩衝液に懸濁し、CB-17/Icr-scidマウスに1匹あたり2.5×105細胞を腹腔内投与し、大腸炎を誘発した。化合物Fあるいはプレドニゾロンは、それぞれ1mg/kgで、CD4CD25-T細胞の移入5時間前に初回投与し、以後20日間、連日1日1回、経口投与した。対照群には溶媒1volエタノール液を10mL/kgで経口投与した。病態評価項目は、軟便スコア0~5点、便潜血スコア0~4点及び体重減少スコア0~5点を評点し、その総計をDiseaseActivityIndexスコア以下、DAIスコアと略す:最高スコア14とした。軟便スコアは、便の硬さを正常0点、わずかに柔らかい1点、やや柔らかい2点、柔らかい3点、かなり柔らかい4点及び下痢5点と評点した。便潜血スコアは、実施例23と同様に評価した。体重減少スコアは、体重の変化を体重の増加0点、3未満の減少1点、3以上6未満の減少2点、6以上9未満の減少3点、9以上12未満の減少4点、12以上の減少5点と評点した。各群8~10匹を使用し、結果は平均値で表現した。その結果、対照群の軟便スコア及び便潜血スコアはT細胞移入12日後から明らかな増加を認め、また体重減少スコアは19日目で明らかな増加を示し、21日後にはいずれもほぼ最大となった。化合物Fは、図6Aに示すように軟便スコア及び図6Bに示すように便潜血スコアの増加をほぼ半分まで抑制し、図6Cに示すように体重減少スコアの増加を、ほぼ完全に抑制した。一方、プレドニゾロンは、図6Bに示すように便潜血スコアの増加に対して化合物F投与とほぼ同程度の抑制を示したが、図6Aに示すように軟便スコアに対して21日目では明確な効果を示さなかった。また、図6Cに示すように体重減少スコアは、終始、対照群より高値に推移し、プレドニゾロンは、明らかに悪化させた。図6Dに示すように、DAIスコアは、化合物Fが、プレドニゾロンに比べ、総合的に優れていることを示した。このように化合物Fは、潰瘍性大腸炎のみならず、クローン病、腸管ベーチェット病単純性潰瘍の病態を既存の治療薬に比べて優れて抑制する。文献FImmunolRev.182:190-2002001.GInt.Immunopharmacol.68:1341-13542006.HJ.Immunol.1603:1212-12181998.IClin.Exp.Immunol1392371-3782005.JHistopathology.454:377-3832004.ラットエタノール誘発胃粘膜傷害モデルに対する効果化合物Fの胃粘膜傷害に対する抑制効果をラットエタノール誘発胃粘膜傷害モデルで検討した。本モデルは、うっ血性粘膜傷害を伴うヒトの急性胃炎の動物モデルとして繁用されている文献K。SD系ラット、雄性、7週齢チャールスリバーを、オリエンタルバイオサービスを通じて購入し、1週間馴化飼育した後、試験に使用した。ラットは、体重を指標に群分けし、試験前日から金網を敷いたクリーンケージに移して19時間絶食絶食16時間後から3時間は絶水させた後、全ての群にエタノール特級、ナカライテスク、LotNoV8A58621.5mLを経口投与して胃粘膜傷害を誘発した。化合物Fは、0.01、0.1及び1mg/kgの用量で、胃粘膜傷害誘発30分前にそれぞれ5mL/kgの容量で経口投与した。対照群には、溶媒1volエタノール液を5mL/kgで同様に経口投与した。各群8匹の動物を使用した。ラットは、エタノール投与1時間後にエーテル麻酔下で腹部大動静脈より放血致死させ、胃を摘出した。摘出した胃は、直ちに2vol中性ホルマリン溶液6mLを充填し15分間固定した。その胃を噴門部から幽門部まで大弯中央部に沿って切開し、塩化ビニル板に伸展させた。実体顕微鏡下にて各潰瘍の長さと幅を測定し、面積を算出して、これらの合計を総潰瘍面積とした。その結果、対照群の総潰瘍面積の平均は103mm2であった。化合物Fは、001mg/kgから用量依存的に総潰瘍面積を有意に縮小し、1mg/kg投与ではほぼ完全に縮小した図7。このように化合物Fは胃粘膜傷害を抑制した。文献KDigDisSci3181S85S1986.ラットインドメタシン誘発小腸傷害モデルに対する効果化合物Fの小腸傷害に対する抑制効果をラットインドメタシン誘発小腸傷害モデルで検討した。非ステロイド系抗炎症剤NSAIDsの投与はヒトにおいて小腸に出血性の傷害を惹起することが知られている。本モデルは、ラットにNSAIDsであるインドメタシンを投与することにより誘発される小腸粘膜傷害を特徴とし、ヒトNSAIDs起因性小腸傷害あるいはクローン病に類似の病態を示す文献L、M。SD系ラット、雄性、7週齢チャールスリバーを購入し、1週間馴化飼育した後、試験に使用した。ラットは、体重を指標に群分けし、全ての群にインドメタシンSIGMA、LotNo19F0018を15mg/5mL/kgで皮下投与し、小腸傷害を誘発した。化合物Fは、0.01、0.1及び1mg/kgの用量で、インドメタシン皮下投与の30分前と6時間後にそれぞれ5mL/kgの容量で経口投与した。対照群には、溶媒1volエタノール液を5mL/kgで同様に経口投与した。各群8匹の動物を使用した。ラットは、インドメタシン投与23.5時間後にエーテル麻酔下に2mLの10mg/mLエバンスブルー溶液を静脈内投与した。その30分後にエーテル麻酔下で腹部大動静脈より放血致死させ、小腸を摘出した。摘出した小腸は、2vol中性ホルマリン溶液を適当量約35mL充填し、約15分間固定した。その後、腸管膜付着部位に沿って全小腸を切開し、塩化ビニル板に伸展させて実体顕微鏡下にて各潰瘍の長さと幅を測定し、面積を算出して、これらの合計を総潰瘍面積とした。その結果、対照群では、小腸の総潰瘍面積は約730mm2であった。これに対して、化合物F投与群は0.1mg/kg投与から用量依存的に有意に潰瘍面積を縮小し、1mg/kg投与では完全であった図8。このように化合物Fは、小腸傷害を強く抑制した。文献LAlimentPharmacolTher71:29-391993.MActaGastroenterolBelg5756:306-3091994.以上により、化合物Fは、アルコール等による消化管粘膜への直接傷害やNSAIDs等による粘膜再生障害に対し優れた抑制作用を示した。すなわち、化合物Fは消化管粘膜の傷害に対する防御効果と組織修復効果が期待される。上記実施例に示したとおりに、化合物Fに認められるように本発明の化合物は、免疫が関与する消化管炎症、薬剤性消化管粘膜傷害、薬剤性粘膜再生障害に基づく消化管傷害や治癒の遅延に対して有効である。具体的には、潰瘍性大腸炎、クローン病等の炎症性腸疾患、アルコール性胃炎胃潰瘍や小腸潰瘍等において有用である。これらの作用は、EP4アゴニスト作用に基づくものであり、例示疾患に限定されるものではない。ラット抗Thy-1抗体誘発糸球体腎炎モデルにおける効果Slc:Wistar系雄性ラット、6週齢日本エスエルシーを購入し、1週間予備飼育した。正常群を除き、動物に抗Thy-1抗体マウス抗CD90抗体UK-SerotechLtd.Code:MCA47XZ、cloneNo:MRCOX-7、LotNo.0303を1回静脈内投与した。化合物Fと化合物Jの混合物F:J=52:41、化合物F/Jと記すを、抗体投与当日0日から6日後までの連日1日2回、朝夕に0.3mg/kgで経口投与した。抗体投与3日後に1日尿を採取した。抗体投与7日後に剖検し、右腎の摘出を行い、重量測定後、ホルマリン固定した。各群5~8匹の動物を使用し、結果は平均±標準偏差で表現した。その結果、対照群の体重は、正常群に比べて、抗体投与1日後より、増加抑制が認められたが、3日後より正常群と同様の増加を示した。化合物F/J投与群の体重は、対照群のそれと同様の推移を示した。24時間尿量は、対照群で正常群に比べて増加したが、化合物F/J投与群は正常群と同程度であった図9A。24時間尿蛋白量は、対照群で著明に増加したが、化合物F/J投与群はそれよりも低値を示した図9B。腎臓相対重量は、対照群で著明に増加したが、化合物F/J投与群はそれよりも低値を示し正常に近い値であった図9C。腎病理組織評価において、対照群は、糸球体総細胞数、メサンギウム領域及び糸球体PCNA陽性細胞数の増加が顕著であった。化合物F/J投与群は、これらの増加がいずれも有意に抑制されていた図9D、9E、9F。したがって、本発明の化合物は、尿量を正常化し、蛋白尿を軽減し、糸球体の免疫反応や増殖反応を抑え、腎炎に有効である。ウサギ眼圧に対する効果日本白色ウサギ、雄性、10週齢株式会社バイオテックを購入し、1週間予備飼育後に使用した。0.01w/vの化合物F溶液を両眼角膜上にマイクロピペットを用いて50μL/眼で単回点眼投与した。右眼の眼圧を測定し、左眼で眼局所刺激作用を評価した。眼圧は、点眼投与前と投与1、2、3、4、6及び8時間後にオキシブプラノールベノキシール0.4点眼液で表面麻酔を施した後、ニューマトノメーターアルコン社を用いて測定した。また、眼局所刺激作用は結膜充血、結膜浮腫、角膜混濁、虹彩充血、排泄物及び閉眼動作についてそれぞれスコア化し、評価した。溶媒対照群にはリン酸緩衝液を、また、対照薬としてイソプロピルウノプロストンレスキュラ点眼液、参天製薬を用いて評価した。各群6匹の動物を使用し、結果は平均で表現した。その結果、溶媒対照群の眼圧は、投与8時間後まで0時点から±2mmHgの範囲で推移した。化合物F群は、投与1時間後に6.9mmHgの眼圧低下を示し、その後2時間に9.3mmHg、6時間に6.6mmHgと有意な低下を維持した。一方、レスキュラ点眼液群は、化合物F群とほぼ同様の眼圧低下推移を示した図10。眼局所刺激性は、化合物F群では、投与1時間後に一部の個体で結膜浮腫及び閉眼を認めたが、その後回復した。レスキュラ点眼液群は、1時間後に一部の個体で結膜浮腫及び閉眼を認め、2時間後まで持続し、その後回復した。このように、本発明の化合物Fは、レスキュラ点眼液と同等の眼圧低下作用を示し、眼局所刺激性は同等であり、緑内障高眼圧治療剤として有用である。マウスコンカナバリンA誘発肝炎モデルに対する予防効果化合物Fの肝炎に対する予防効果をコンカナバリンA以下、ConA誘発肝炎モデルで検討した。本モデルは、T細胞依存性に肝実質細胞が傷害を受ける肝炎モデルで、臨床的には自己免疫性肝炎あるいは劇症肝炎と類似の病態である参照:文献N、O、P。BALB/c系マウス、雌性、7週齢日本エスエルシーを購入し、1週間馴化飼育した後、試験に使用した。病態非惹起群を除いて、生理食塩水に溶解したConAtypeIV、Sigma-Aldrichを、12.5mg/10mL/kgの用量で動物に尾静脈内投与し、肝炎を誘発し、20時間後、エーテル麻酔下に開腹し、腹部大静脈より0.5mL採血し、ヘパリン血漿を得た。血漿ALT及びAST活性を測定した。試験物質は、化合物Fの1mg/10mL溶液、プレドニゾロンナカライテスクの5mg/10mL懸濁液0.5w/vメチルセルロース使用及び対照群に投与した注射用水であり、ConAの尾静脈内投与の1時間前に10mL/kgの容量で経口投与した。各群7-9例で実施し、対数変換して一元配置分散分析を実施した。その結果、対照群の血漿ALT活性及び血漿AST活性は非惹起群に比して顕著に上昇した。この上昇を化合物F及びプレドニゾロンは、有意で強い抑制作用を示した。図11に血漿ALTのデータを示す。したがって、化合物Fは、T細胞が関与する肝炎に対して有効である。文献NEur.J.Immunol.2812:4105-41131998.OProc.Natl.AcadSci.9710:5498-55032000.PJ.Exp.Med.1911:105-1142000."