"バークホルデリアセパシアBurkholderiacepacia、バークホルデリアプランタリBurkholderiaplantari、バークホルデリアグラディオリBurkholderiagladioli、バークホルデリアマルティボランスBurkholderiamultivoransではない、バークホルデリアBurkholderia属の単離菌株であって、次に示す特性を有する単離菌株:A配列番号8、11および12に示す配列と少なくとも99の同一性を有する、フォワード配列と、配列番号9、10、13、14及び15と少なくとも99の同一性を有する、リバース配列とを含む、16SrRNA遺伝子配列を有し;B農薬活性を有し;C次に示すものからなる群より選択される農薬化合物を産生し:i次に示す特性を有する化合物:a液体クロマトグラフィ/質量分析LC/MSによって測定される、約525~555の分子量;b1HNMRδ値が、622581569566565464431393322321315310269262226223174115112105102c13CNMRδ値が、172991729316957169231675913074130121299312832734962955942577338393800354930903036292618591838180917931251;およびc水:アセトニトリルCH3CNグラジエントを使用した、逆相C18高速液体クロマトグラフィHPLCカラム上におけるHPLC保持時間が約10~15分;iv少なくとも1つのインドール部分、少なくとも1個のオキサゾール部分、少なくとも1つの置換されたアルキル基、少なくとも1個のカルボン酸エステル基、少なくとも17個の炭素、および少なくとも3個の酸素および少なくとも2個の窒素を含んだオキサゾリルインドール構造を有する化合物;v少なくとも1つのベンジル部分、少なくとも1つのオキサゾール部分、少なくとも1つの置換されたアルキル基、少なくとも1つのアミド基,少なくとも15個の炭素、少なくとも2個の酸素、および少なくとも2個の窒素を含んだオキサゾリルベンジル構造を有する化合物;vi少なくとも1個のエステル、少なくとも1個のアミド、少なくとも3個のメチレン基、少なくとも1個のテトラヒドロピラノース部分、少なくとも3個のオレフィン二重結合、少なくとも6個のメチル基、少なくとも3つのヒドロキシル基、少なくとも25個の炭素、少なくとも8個の酸素、および少なくとも1個の窒素を有する化合物;ならびに、vii少なくとも1個のエステル、少なくとも1個のアミド、エポキシドメチレン基、少なくとも1個のテトラヒドロピラノース部分、少なくとも3個のオレフィン二重結合、少なくとも6個のメチル基、少なくとも3個のヒドロキシル基、少なくとも25個の炭素、少なくとも8個の酸素、および少なくとも1個の窒素を有する化合物;D脊椎動物に対して非病原性であり;Eカナマイシン、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、ピペラシリン、イミペネム、およびスルファメトキサゾールとトリメトプリムの組合せに対して感受性があり、かつ、F脂肪酸160、シクロ170、1603OH、140、シクロ190ω8c、180を含む。バークホルデリア種が、バークホルデリアA396NRRL受託番号B0319に同定される特性を有する、バークホルデリア菌株である、請求項1記載の菌株。要補正請求項1又は2に記載の菌株由来の実質的に純粋な培養物、細胞画分もしくは上清、またはそれらの抽出物。A少なくとも1つのインドール部分、少なくとも1つのオキサゾール部分、少なくとも1つの置換されたアルキル基、少なくとも1つのカルボン酸エステル基、少なくとも17個の炭素、少なくとも3つの酸素、および2つの窒素を含んだオキサゾリルインドール構造を有し;次に示すものを少なくとも1つ有する、化合物:i分子量275~435;ii1HNMRδ値が、844874819747731398282233108;iii13CNMRδ値が、163716121548136112941254123512331218121511181047522373281227227;ivグラジエント溶媒系による水:アセトニトリルCH3CN、および210nmのUV検出を使用した、逆相C18HPLCカラム上で、液体クロマトグラフィーHPLCの保持時間が約10~20分;v226、275、327mのUV吸光帯;B少なくとも1つのベンジル部分、少なくとも1つのオキサゾール部分、少なくとも1つの置換されたアルキル基、および少なくとも1つのアミド基、少なくとも15個の炭素、少なくとも2つの酸素、および少なくとも2つの窒素を含んだオキサゾリルベンジル構造を有し;次に示す特性を少なくとも1つ有する、化合物:i液体クロマトグラフィ/質量分析LCMSによって測定される、分子量約240~290;ii1HNMRδ値が、約708706675375256215093093;iii13CNMRδ値が、1582156315551326129512951273121811521152412353267215215;iv水:アセトニトリルグラジエントを使用して、逆相C18HPLCカラム上での、液体クロマトグラフィーHPLC保持時間が約6~15分;ならびに、v約230、285、323mのUV吸光帯;C少なくとも1つのエステル、少なくとも1つのアミド、少なくとも3つのメチレン基、少なくとも1つのテトラヒドロピラノース部分、少なくとも3つのオレフィン二重結合、少なくとも6つのメチル基、少なくとも3つのヒドロキシル基、少なくとも25個の炭素、少なくとも8つの酸素、および1つの窒素を有し、次に示す特性を少なくとも1つ有する、非エポキシド化合物:i液体クロマトグラフィ/質量分析LCMSによって測定される、分子量約530~580;ii1HNMRのδ値が、640639600597567554433377373370359347341244235226197181176142137116112104;iii13CNMRのδが、17392166061450613876135711299912620123359975822078227669712370797048698460984884368933093063285525882037181114901281941;ivグラジエント溶媒系による水:アセトニトリル、および210nmのUV検出を使用して、逆相C18HPLCカラム上で、液体クロマトグラフィーHPLCの保持時間が約7~12分;vESIMSおよびNMRデータ分析の解釈によって決定される、分子式C28H45NO10;ならびに、vi約210~450nmのUV吸光帯;Di少なくとも1つのエステル、少なくとも1つのアミド、エポキシドメチレン基、少なくとも1つのテトラヒドロピラノース部分、少なくとも3つのオレフィン二重結合、少なくとも6つのメチル基、少なくとも3つのヒドロキシル基、少なくとも25の炭素、少なくとも8つの酸素、および少なくとも1つの窒素を含み、ii13CNMRδ値が17403166121436313750134391287012668124419809807576847523698769086869686048834107354531672919271224551920189513481139804;iii分子式がC28H43NO9、かつ、i1HNMRδ値が、約641640601597567555433377375372364359354352244234225196181176142138117112104;ii水:アセトニトリルCH3CNグラジエント系を使用した逆相C18HPLCカラム上での液体クロマトグラフィーHPLC保持時間が約6~15分;iii約210~450nmのUV吸光帯からなる群から選ばれる、バークホルデリア種から任意に得られる単離された農薬化合物。請求項4に記載の化合物であって、以下の構造を有する化合物:aSTR002a式中、R1は、H又はC1C10アルキルであり;R2はアルキルエステルである;bSTR003a式中、R1は、H又はC1C10アルキルである;cSTR004a式中、X、Y及びZは、それぞれ独立に、-O、-NRまたは-Sであって、Rが、HまたはC1C10アルキルであり;R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12及びR13は、それぞれ独立に、H、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、チオアルキル、置換チオアルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、アミド、カルボキシル、-CH、アシル、オキシアシル、カルバメート、スルフォニル、スルホンアミド、またはスルフリルである;d式中、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12及びR13は、それぞれ独立に、H、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、チオアルキル、置換チオアルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、アミド、カルボキシル、CH、アシル、オキシアシル、カルバメート、スルフォニル、スルホンアミド、又はスルフリルである;e式中、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R11は、それぞれ独立に、H、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、チオアルキル、置換チオアルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、アミド、カルボキシル、CH、アシル、オキシアシル、カルバメート、スルフォニル、スルホンアミド、又はスルフリルである;f式中、X、Y及びZは、それぞれ独立に、-O、-NR又は-Sであって、RはH又はC1C10アルキルであり;R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R11、R12及びR13は、それぞれ独立に、H、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、チオアルキル、置換チオアルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、アミド、カルボキシル、CH、アシル、オキシアシル、カルバメート、スルフォニル、スルホンアミド、又はスルフリルであり、ZがNRである場合、R3は非オキシホルミル部分である。請求項4又は5に記載の化合物であって、前記化合物は、テンプラゾールA、テンプラゾールB、テンプラミドA及びテンプラミドBからなる群より選ばれ、又は生物農薬、およびc任意に少なくとも1つの担体、希釈剤、界面活性剤、補助剤。A下記の特性を有する化合物:i液体クロマトグラフィ/質量分析LCMSによって測定される、約525~555の分子量;1HNMRの値が、622581569566565464431393322321315310269262226223174115112105102;13CNMRの値が、172991729316957169231675913074130121299312832734962955942577338393800354930903036292618591838180917931251;及び水:アセトニトリルCH3CNグラジエントを使用して、逆相C18高速液体クロマトグラフィHPLCカラム上で、HPLCの保持時間が約10~15分;B少なくとも1個のインドール部分、少なくとも1個のオキサゾール部分、少なくとも1つの置換アルキル基、少なくとも1個のカルボン酸エステル基、少なくとも17個の炭素、少なくとも3個の酸素、及び少なくとも2個の窒素を含むオキサゾリルインドール構造を有する、化合物;C少なくとも1個のベンジル部分、少なくとも1個のオキサゾール部分、少なくとも1個の置換アルキル基、少なくとも1個のアミド基、少なくとも15個の炭素、少なくとも2個の酸素、及び少なくとも2個の窒素を含むオキサゾリルベンジル構造を有する、化合物;D少なくとも1個のエステル、少なくとも1個のアミド、少なくとも3個のメチレン基、少なくとも1個のテトラヒドロピラノース部分、少なくとも3個のオレフィン性二重結合、少なくとも6個のメチル基、少なくとも3個のヒドロキシル基、少なくとも25個の炭素、少なくとも8個の酸素、及び少なくとも1個の窒素を有する、化合物;E少なくとも1個のエステル、少なくとも1個のアミド、1個のエポキシドメチレン基、少なくとも1個のテトラヒドロピラノース部分、少なくとも3個のオレフィン性二重結合、少なくとも6個のメチル基、少なくとも3個のヒドロキシル基、少なくとも25個の炭素、少なくとも8個の酸素、少なくとも1個の窒素を有する、化合物;ならびに、F請求項4記載の化合物、からなる群から選ばれる化合物の製造方法であって、請求項1~2に記載の菌株を培養する工程と、前記化合物を製造する工程とを含む方法。請求項7に記載の方法であって、ここで、前記生産される化合物が、A請求項5に記載の化合物;B下記の構造STR001を有する化合物、またはその農薬として許容し得る塩もしくはそれらの立体異性体;式中、Mは、1、2、3又は4であり;nは、0、1、2又は3であり;p及びqは、独立に、1又は2であり;Xは、O、NH又はNRであり;R1、R2及びR3は、同一であるかまたは異なっており、独立、アミノ酸側鎖部分又はアミノ酸側鎖誘導体であり、Rは、低級鎖アルキル、アリール、又はアリールアルキル部分である;C下記の構造STR002を有する化合物式中、X、Y及びZは、それぞれ独立に、O、NR1又はSであって、R1が、H又はC1C10アルキルであり;R1、R2及びmは、それぞれ独立に、H、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、チオアルキル、置換チオアルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、アミド、カルボキシル、CH、アシル、オキシアシル、カルバメート、スルフォホニル、スルホンアミド、又はスルフリルであり、mは、オキサゾール環のいずれの部位に位置していてもよい;D構造STR003を有する化合物式中、X及びYは、それぞれ独立に、OH、NR1またはSであり、R1は、HまたはC1C10アルキルであり;R1、R2およびmは、オキサゾール環の置換基であり、それぞれ独立して、H、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、チオアルキル、置換チオアルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、アミド、カルボキシル、CH、アシル、オキシアシル、カルバメート、スルホニル、スルホンアミド、又はスルフリルである;E下記の構造STR005を有する化合物STR005式中、X及Yは、それぞれ独立に、OH、NR1またはSであり、R1、R2はそれぞれ独立に、H、アルキル例えば、C1C10アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、置換複素環、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、チオアルキル、置換チオアルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、アミド、カルボキシル、CH、アシル、オキシアシル、カルバメート、スルホニル、スルホンアミド、又はスルフリルである、からなる群から選ばれる。請求項7-8に記載された方法であって、前記生産される化合物は、iテンプラゾールA;iiテンプラゾールB;iiiテンプラミドA;ivテンプラミドB;vFR90128;viviiviiiixxxixiixiiixivxvxvixviixviiixixxxxxixxiixxiiiFR901465からなる群から選ばれる製造された化合物。a請求項7~9のいずれかに記載の方法によって化合物を製造する工程;と、b前記工程で製造された化合物を単離する工程;と、を含む、バークホルデリアの菌株から化合物を単離するための方法。a請求項1又は2に記載の菌株由来の純粋培養物、細胞画分もしくは上清、またはこれらの抽出物;請求項4~6のいずれかに記載の化合物;請求項1又は2に記載の菌株によって産生さした化合物;及びiii請求項9に記載の方法によって単離された化合物からなる群から選ばれる第1の物質と、b任意に、化学農薬又は生物農薬である第2の物質と、c任意に、少なくとも1つの担体、希釈剤、界面活性剤、アジュバントと、からなる組合せ。前記第2の物質が、殺線虫剤、除草剤、防カビ剤、および殺虫剤からなる群から選ばれる農薬である、請求項11記載の組合せ。前記組合せが組成物である、請求項11又は12に記載の組合せ。植物及び/又はその種子及び/又は前記植物の成長に使用される基質に、請求項11~13のいずれかに記載の組合せを、植物における有害生物の蔓延をモジュレートするのに有効な量で適用することを含む、有害生物の蔓延をモジュレートするための方法。単子葉植物である雑草、カヤツリグサ科の雑草もしくは双子葉植物である雑草又は土壌に、請求項11~13のいずれかに記載の組合せを、前記雑草の出現及び/又は成長をモジュレートするのに有効な量で適用することを含む、前記雑草の出現及び/又は成長をモジュレートするための方法。請求項13記載の組合せを含む、種子。A液体クロマトグラフィ/質量分析LCMSによって測定される、分子量約525~555の分子量;1HNMRの値が、622581569566565464431393322321315310269262226223174115112105102であり;13CNMRの値が、172991729316957169231675913074130121299312832734962955942577338393800354930903036292618591838180917931251であり;そして、水:アセトニトリルCH3CNグラジエントを使用して、逆相C18高速液体クロマトグラフィHPLCカラム上で、HPLCの保持時間が約10~15分であり;B少なくとも1個のインドール部分、少なくとも1個のオキサゾール部分、少なくとも1個の置換アルキル基、少なくとも1個のカルボン酸エステル基、少なくとも17個の炭素、少なくとも3個の酸素、及び少なくとも2個の窒素を含むオキサゾリルインドール構造を有する、化合物;C少なくとも1個のベンジル部分、少なくとも1個のオキサゾール部分、少なくとも1個の置換アルキル基、少なくとも1個のアミド基、少なくとも15個の炭素、少なくとも2個の酸素、及び少なくとも2個の窒素を含むオキサゾリルベンジル構造を有する、化合物;D少なくとも1個のエステル、少なくとも1個のアミド、少なくとも3個のメチレン基、少なくとも1個のテトラヒドロピラノース部分、少なくとも3個のオレフィン性二重結合、少なくとも6個のメチル基、少なくとも3個のヒドロキシル基、少なくとも25個の炭素、少なくとも8個の酸素、がおよび少なくとも1個の窒素を有する、化合物;ならびに、E少なくとも1個のエステル、少なくとも1個のアミド、1個のエポキシドメチレン基、少なくとも1個のテトラヒドロピラノース部分、少なくとも3個のオレフィン性二重結合、少なくとも6個のメチル基、少なくとも3個のヒドロキシル基、少なくとも25個の炭素、少なくとも8個の酸素、及び少なくとも1個の窒素を有する化合物、ならびに、任意に、植物における有害生物の出現をモジュレートするが、及び/又は単子葉植物である雑草、カヤツリグサ科の雑草もしくは双子葉植物である雑草の出現及/又は成長を調節するための組成物を製剤化する農薬、からなる群から選ばれる化合物の使用。前記有害生物が、線虫、真菌類、雑草及び昆虫からなる群から選ばれる、請求項17に記載の前記使用。前述の組成物及び方法は種々の修飾及び変形の影響を受けやすいが、本明細書にはその典型的な実施例を詳しく記載する。しかし、本発明をここに記載する特定の形式に限定する意向を示すものではなく、むしろ添付のクレームに定義するように本発明の精神及び範囲内の全ての変更、同等物及び代替品を含むことを意図するものと理解すべきである。本明細書に記載される値域については特に指定がない限り、それぞれのその範囲内の値interveningvalueは、下限値の10分の1までの値、上限値と下限値の間の値及びその指定範囲内の、いずれの指定値又はその指定範囲内に入るいずれの値を含むものとする。指定の範囲内で、特に排除制限がなければ上限値及び下限値もこの範囲に含まれる。特に規定しない限り、本明細書に使用される全ての技術用語及び科学用語は、その発明が属する分野の同業者が理解するもとの同様な意味を示す。本発明の実施または試験において、明細書に記載する方法及び原料と類似または同様な方法及び原料をも使用できるが、ここには好ましい方法と原料を記載する。明細書及び添付のクレームに使用される単数形aan及びtheは、文脈に特に明記しないかぎり、複数形pluralreferencesを含むことに注意すべきである。ここで定義するように~に由来するは、ある特殊なソースから直接分離または入手する、又は特殊なソースから分離または入手する識別可能な特性を有する物質または有機体を意味するものとする。ここに定義するように分離された化合物は、本質的にほかの化合物または物質を含まない。例えば、クロマトグラフ法、電気泳動法を含む分析方法これらの方法に限られないにより計算される少なくとも約20、好ましくは少なくとも約40、より好ましくは約60、さらに好ましくは約80、最も好ましくは約90、更に最も好ましくは95の純度を持つ化合物を示す。ここに使用されるように用語アルキル基はメチル基、エチル基、nプロピル基、イソプロピル基、nブチル基、イソブチル基、tブチル基、nヘキシル基などを含む炭素原子数約1~12を有する一価の直鎖または分枝鎖炭化水素基を指す。ここに使用されるように用語置換基は、更に、ヒドロキシル基、アルコキシル基、メルカプト基、シクロアルキル基、置換シクロアルキル基、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、アリールオキシ基、置換アリールオキシ基、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、アミド、CH、アシル、オキシアシルカルボキシル基、スルホニル基、スルホンアミド、スルフリル基などから選択される1つ以上の置換基を有するアルキル基を指す。ここに使用されるように、アルケニルの語は1つ以上の炭素炭素二重結合及び約2~12の炭素原子数を有する直鎖または分枝鎖ヒドロカルビル基を指し、置換アルケニル基は、更に1つ以上の上記置換基を有するアルケニル基を指す。ここに使用されるように、用語アルキニルは、少なくとも1つの炭素炭素三重結合及び約2~12の炭素原子数を有する直鎖または分枝鎖ヒドロカルビル基を指し、用語置換アルケニルは更に1つ以上の上記置換基を有するアルキニル基を指す。ここに使用されるように、アリールは6~14の炭素原子を有する芳香族基を指し、置換アリールは更に1つ以上の上記置換基を有するアリール基を指す。ここに使用されるように、ヘテロアリールの語は、環状構造の一部に1つ以上のヘテロ原子例えば、NOSなどを含み、3~14の炭素数を有する芳香環を指し、置換へテロアリールは、更に1つ以上の上記置換基を有するヘテロアリール基を指す。ここに使用されるように、アルコキシル基はOアルキル基を指し、アルキル基は上記規定で定義した通りである。置換アルコキシル基は、更に1つ以上の上記置換基を有するアルコキシル基を指す。ここに使用されるようにチオアルキル基は、Sアルキル基を指し、アルキル基は上記規定で定義した通りである。置換チオアルキル基は更に1つ以上の上記置換基を有するチオアルキル基を指す。ここに使用されるようにシクロアルキル基は、3~8の炭素原子数を有する環状アルキル基を指し、置換シクロアルキル基は更に1つ以上の上記置換基を有するシクロアルキル基を指す。ここに使用されるように複素環は、環状構造の一部にに1つ以上のヘテロ原子例えば、NOSなど及び3~14の炭素原子数を有する環式基即ち、環を含むを指し、置換複素環は更に1つまたは1つ以上の上記置換基を有する複素環基を指す。バークホルデリア株本明細書で説明するバークホルデリア菌株は、非セパシア菌群nonBurkholderiacepaciacomplex、非苗立枯細菌病菌nonBurkholderiaplantari、非首腐病菌nonBurkholderiagladioliのバークホルデリア属種Burkholderiaspであり、鳥類、哺乳動物及び魚類等脊椎動物に対し非病原性である。この菌株は公知の技術及びLorchらの記載により土壌サンプルから分離できる。バークホルデリア菌株は様々な異なる土壌または増殖培地から分離し得る。サンプルはポテトデキストロ-ス寒天培地PDAに植菌する。バクテリアはグラム陰性であり、クリーム色の円形不透明なコロニーを形成する。このコロニーは、時間の経過に伴いピンク色からピンクがかった褐色に変色し、ムコイド又は粘液性に変化する。コロニーをポテトデキトロース寒天培地から分離し、以下の実施例に説明する本発明のバークホルデリア菌株の生物学的、遺伝学的、生化学的特性およびまたは酵素特性についてスクリーニングする。特に、バークホルデリア菌株はclustal分析で決定されるような配列番号811及び12の配列と少なくとも約99、好ましくは約995、更に好ましくは約999、最も好ましくは約100一致するフォワード配列、及び配列番号910及び1314及び15の配列と少なくとも約99、好ましくは約995、更に好ましくは約999、最も好ましくは約100一致するフォワード配列からなる遺伝子を含む16SrRNAを含んでいる。更に、以下に説明するようにこのバークホルデリア菌株は殺虫作用、特に殺ウィルス、除草、殺菌、抗真菌、殺線虫、殺菌及び殺虫効果を有し、さらに詳しくは、除草、殺虫、抗真菌及び殺線虫効果を有する。このバークホルデリア菌株は哺乳動物、鳥、魚等脊椎動物には非病原性である。また、このバークホルデリア菌株は、少なくとも本明細書に記載する農薬化合物を生成する。バークホルデリア菌株は、カナマイシン、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、ピペラシリン、イミペネム及びスルファメトキサゾールとトリメトプリムの組み合わせなどに感染しやすく、160cyclo1701603OH140cyclo190180の脂肪酸を含む。このバークホルデリア菌株は、ポテトデキストロース寒天PDA培地、またはグルコース、マルトース、フルクトース、ガラクトースなどの定義された炭素原及びペプトン、トリプトン、ソイトンsoytone及びNZアミンなどの定義されていない窒素原を含む発酵培地上でバークホルデリアA396の特徴を同定できる微生物を培養することにより得られる。農薬化合物ここに開示する農薬化合物は下記性質を有し得る。新規なバークホルデリア種、すなわち、A396から得られる;特に、殆どの農業病害虫に有毒である;約525~555の分子量を有すること、特には、液体クロマトグラフィ質量分析LCMS測定による分子量540を有すること;1HNMRの値が62258156956656546443139332232131531026926222622317411511210510213CNMRの値が172991729316957169231675913074130121299312832734962955942577338393800354930903036292618591838180917931251であること;逆相C18HPLCカラム100A100x460mm及び水:アセトニトリルのグラジエント溶媒系020分900の水性アセトニトリル2024分100のアセトニトリル2427分090の水性アセトニトリル2730分90の水性アセトニトリルを用いる高速液体クロマトグラフィーHPLCおいて、流速05mlmin下で210nmにおけるUV検出結果、カラムにおける保持時間が約10~15分、より詳細には約12分、更に詳細には約1214分であること;1HNMR13CNMR及びLCMS解析によって決定され、分子式C24H36N4O6S2を有すること;13CNMRスペクトルにおいて、5個のメチル基、4個のメチレン基、9個のメチン基を及び6個の4級炭素原子を含む計24個の炭素シグナルが観測されること;1HNMRスペクトルおいて、3個のアミノプロトン463431393及び1個のエステルカルビノールプロトン569を含むデプシペプチド独特の特性が示されること。ある特定の実施形態において、この化合物はSTR001の構造を有する。または、殺虫剤として利用可能な上記化合物の塩或いは立体異性体を含む。構造式中、Mは123又は4;nは012又は3;p及びqは相互独立な1又は2;XはONH又はNR;R1R2及びR3は同一又は異なる、それぞれ独立したアミノ酸側鎖部分又はアミノ酸側鎖誘導体であり、Rは短鎖長アルキル基、アリール基又はアリールアルキル基である。ある特定の実施形態において、化合物はFR90128の構造を有する。ここでは、構造STR002を有する化合物を提供する。式中、XY及びZは各々独立にONR1又Sをであり、R1はHまたはC1C10のアルキルであり;R1R2及びmは、各々独立にH、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、複素環、置換複素環、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、チオアルキル、置換チオアルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、アミド、カルボキシル、CH、アシル、オキシアシル、カルバメート、スルフォニル、スルフォンアミド又はスルフリル基である。他の特定の実施形態において、STR002族化合物はに示す化合物であっても良い。これらの化合物は天然物、または市販品もしくは化学合成品である。STR002族化合物の天然物ソースには微生物、藻類、海綿動物などが含まれるが、これらのソースに限定されない。ある特定の実施形態において、微生物は、下記種に由来し得るSTR002族化合物を含むが、これらの化合物に限定されない。または、これらの種に由来し得るSTR002族化合物である。これらの種には、ストレプトバーテイシリウムワクスマニストレプトマイセスピンプリナストレプトバーテイシリウムオリボレティキュリStreptoverticilliumolivoreticuli化合物viiiixxストレプトマイセス種Streptomycesspシュードモナスシリンガエ等が含まれる。又、STR002族化合物は紅藻類紅藻アヤニシキディアゾナシネンシスDiazonachinensisロドフィコタハラルディフィラム種Rhodophycotaharaldiophyllumspを含む藻類由来の化合物でも良いが、藻類はこれら藻に限られない。化合物STR003も提供する。式中、X及びYは各々独立に、OHNR1またはSであり、R1はH又はC1C10のアルキルである;R1R2及びmはオキサゾール環上での置換基であり、各々独立にH、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、複素環、置換複素環、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、チオアルキル、置換チオアルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、アミド、カルボキシル、CH、アシル、オキシアシル、カルバメート、スルフォニル、スルフォンアミド又はスルフリルである。さらに、化合物STR005を提供する。式中、X及びYは各々独立に、OHNR1またはSであり、R1R2は各々独立に、Hアルキル例えば、C1C10のアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、複素環、置換複素環、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、チオアルキル、置換チオアルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、アミド、カルボキシル、CH、アシル、オキシアシル、カルバメート、スルフォニル、スルフォンアミド又はスルフリルである。ある特定の実施形態においてSTR005族化合物、例えば、以下に示す化合物xxxxiiiは自然物ソースまたは市販品もしくは化学合成品である。STR005族化合物の自然物ソースには植物、珊瑚、微生物、海綿動物が含まれるが、これらの自然源に限られない。微生物には、ストレプトミセスグリセウス、ストレプトミセスアルブスが含まれるが、これらの微生物に限られない。STR004族化合物はハラルジオフェルム種及び紅藻を含む藻類由来のものであってもよいが、これらの藻類に限られない。ある実施態様において、この化合物は微生物、特にバークホルデリアから抽出または入手できる。この化合物は少なくとも1つのエステル、少なくとも1つのアミド、少なくとも3つのメチレン基、少なくとも1つのテトラヒドロピラノース基tetrahydropyranosemoiety、少なくとも3つのオレフィン二重結合、少なくとも6つのメチル基、少なくとも3つのヒドロキシル基、少なくとも25個の炭素、少なくとも8個の酸素及び1個の窒素を含む構造を有することを特徴とする。この化合物は更に少なくとも下記特性の1つを含む。殺虫性、特に、殺線虫、殺菌、殺昆虫、除草等特性を有すること分子量が約530~580であり、より詳しくは、液体クロマトグラフィ-質量分析測定LCMSによる分子量が555であること;1HNMRδ値が640639600597567554433377373370359347341244235226197181176142137116112104であること13CNMRδ値が17392166061450613876135711299912620123359975822078227669712370797048698460984884368933093063285525882037181114901281941であること逆相C18HPLCカラム100A100x460mm及び水:アセトニトリルのグラジエント溶媒系を用いる高速液体クロマトグラフィーHPLCにおいて、流速05mlminで210nmにおけるUV検出結果、固定相における保持時間が約7~12分、詳細的には約10分、より詳細的には約1098分であること;13CNMRスペクトルにおいて、6個のメチル及び4個のメチレン炭素、5つのsp2を含む13個のメチン及び4個の4級炭素に帰属できる28個の異なる炭素シグナルを示すこと;エレクトロスプレ-質量分析及及び核磁気共鳴分析分析による分子式がC28H45NO10であること;210450nmに、最も明確には234nmにUV吸収帯を有することSTR004aの構造を有する化合物も提供する。式中、XY及びZは各々独立に、ONR又はSであり、RはH又はC1C10のアルキルであり;R1R2R3R4R5R6R7R8R9R10R11R12及びR13はそれぞれ独立にHアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、複素環、置換複素環、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、チオアルキル、置換チオアルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、アミド、カルボキシル、CH、アシル、オキシアシル、カルバメート、スルフォニル、スルフォアミド又はスルフリルである。ある特定の実施形態において、化合物はSTR004bの構造を有する。式中、R1R2R3R4R5R6R7R8R9R10R11R12及びR13は、上記STR004aで定義した通りである。さらに、ある特定の実施形態において、化合物は下記構造を有するテンプラミドAである。他の実施形態において、構造STR004cを有する化合物を提供する。式中、R1R2R3R4R5R6R7R8及びR11は前述のSTR004aで定義した通りである。また、他の実施形態において、化合物はバークホルデリア種から得られる少なくとも1つのエステル、少なくとも1つのアミド、1つのエポキシドメチレン基、少なくとも1つのテトラヒドロピラノース基、及び少なくとも3つのオレフィン二重結合、少なくとも6つのメチル基、少なくとも3つのヒドロキシル基、少なくとも25個の炭素及び少なくとも8個の酸素と1個の窒素を含む構造を有し、殺虫効果を有することを特徴とする化合物である。この化合物は更に少なくとも下記特性の1つを含む。殺虫性、特には殺虫、殺菌、殺線虫及び除草等特性を有すること;分子量が520~560であり、より詳しくは、液体クロマトグラフィ-質量分析LCMSにより決定された分子量が537であること;1HNMRδ値が641640601597567555433377375372364359354352244234225196181176142138117112104であること;13CNMRδ値が17403166121436313750134391287012668124419809807576847523698769086869686048834107354531672919271224551920189513481139804であること水:アセトニトリルのグラジエント溶媒系用いる、逆相C18HPLCカラムにおける高速液体クロマトグラフィーHPLCの保持時間が615分、より明確には8分であること、特に、水:アセトニトリルのグラジエント溶媒系020分900の水性アセトニトリル2024分100のアセトニトリル2427分090の水性アセトニトリル2730分90の水性アセトニトリルを用いる、逆相C18HPLCカラム100A100x460mmにおける高速液体クロマトグラフィーHPLCの保持時間が、流速05mlmin及び210nmのUV検出において、8~15分、より詳細的には11分、更に詳細的には1173分であること;エレクトロスプレ-質量分析及及び核磁気共鳴分析による分子式がC28H43NO9であること;210450nmに、最も明確には234nmにUV吸収帯を有すること。ある特定の実施形態において、化合物は構造STR006aを有する。式中、XY及びZは、各々独立に、ONR又はSであり、RはH又はC1C10のアルキルであり;R1R2R3R4R5R6R7R8R9R10R11R12及びR13は、各々独立に、Hアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換へテロアリール、複素環、置換複素環、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、チオアルキル、置換チオアルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、アミド、カルボキシル、CH、アシル、オキシアシル、カルバメート、スルフォニル、スルフォアミド又はスルフリルである。ある特定の実施形態において、化合物は下記構造を有する。ほかの実施形態において、STR006bの構造を有する化合物を提供する。式中、R1R2R3R4R5R6R7R8及びR11は前述のSTR006aで定義した通りである。ある特定の実施形態において、化合物は下記構造を有するテンプラミドBである。しかしほかの特定の実施形態において、化合物はバークホルデリア種から得られる少なくとも1つのエステル、少なくとも1つのアミド、1つのエポギシドメチレン基、少なくとも1つのテトラヒドロピラノース基、及び少なくとも3つのオレフィン二重結合、少なくとも6つのメチル基、少なくとも3つのヒドロキシル基、少なくとも25個の炭素及び少なくとも8個の酸素と1個の窒素を含む構造を有することを特徴とする化合物である。この化合物は更に少なくとも下記特性の1つを含む。殺虫性、特には殺虫、殺菌、殺線虫及び除草等特性を有すること;分子量が約510~550であり、より詳しくは、液体クロマトグラフィ-質量分析LCMSにより決定された分子量が523であること;1HNMRδ値が641640601598568556433377375372365359355350244226204196181175137117104であること;13CNMRδ値が1722216755144981389413584130141258512337995482197828766971317013696848834252368933113063259921202038181414931284であること水:アセトニトリルのグラジエント溶媒系用いる、逆相C18HPLCカラムにおける高速液体クロマトグラフィーHPLCの保持時間が615分、より明確には8分であること、特に、水:アセトニトリルのグラジエント溶媒系020分900の水性アセトニトリル2024分100のアセトニトリル2427分090の水性アセトニトリル2730分90の水性アセトニトリルを用いる、逆相C18HPLCカラム100A100x460mmにおける高速液体クロマトグラフィーHPLCの保持時間が、流速05mlmin及び210nmのUV検出において、8~15分、より詳細的には10分、更に詳細的には1098分であること;エレクトロスプレ-質量分析及及び核磁気共鳴分析による分子式がC27H41NO9であること;凡そ210450nmに、最も明確には234nmにUV吸収帯を有すること。ある特定の実施形態において、化合物は下記構造を有する公知のFR901465である。この化合物は、従来からシュードモナス菌種No2663Nakajimaetal1996のバクテリアから培養ブロスにより分離されることが知られており、抗癌活性を有することがすでに報告されている。更に他の特定の実施形態において、STR006a族化合物はxxiv~xxxixに示す化合物でも良い。これらの化合物は、天然物または市販品もしくは化学合成品である。STR006a族化合物のソースには微生物、藻及び海綿動物などが含まれるが、これらのソースに限られない。更にある特定の実施形態において、STR006a族化合物を含む微生物は、シュードモナス菌種No2663化合物xxiv~xxxixNakajimaetal1996などの菌種から得られる。合成誘導体FR901464xxviixxxixはすでに合成され、抗癌化合物Koideらの米国特許出願番号20080096879A1を参考として特許されている。組成物本発明のバークホルデリア菌株から生成される実質的に純粋な培養物、細胞画分又は上澄み及び化合物は殺虫組成物を形成し得る。上記物質は、何れかの方法により組成物を形成し得る。非制限形成例には乳剤、水和剤、可溶性液体、エアロゾル、超微量濃縮物、可溶性粉末、マイクロカプセル化、水分散粒子、流動性物質、マイクロエマルション、ナノエマルション等が含まれるが、これらの形態に限られない。特に、濃縮物、粉末、粒子、乳剤などは凍結乾燥することができる。ここに記載する何れの剤形においても、活性成分の割合は001~9999である。これら組成物は、液状、ゲル状または固形状でも良い。液状組成物には、上記バークホルデリア菌株由来の農薬化合物、例えば識別可能な特性を有するバークホルデリアA396NRRL受託番号B50319菌株が含まれる。固形組成物は農薬化合物溶液に固体担体を浮遊させ、懸濁物を穏やかな条件、例えば、室温で蒸発または65°C以下で真空蒸発させることにより生成させることができる。本発明の組成物は、本発明のバークホルデリア菌株に由来するゲルカプセル化合物を含むことができる。このようなカプセル化されたゲル状組成物は、本発明の方法に用いられる農薬化合物溶液にゲル形成を引起すゲル形成剤例えば、ゼラチン、セルロース又はリグニンを混合することにより生成することができる。組成物は、更に、有効成分の乳化、分散、湿潤、展開、融合、崩壊制御、安定化及び流動性の改善又はさび防止のために使用される界面活性剤を含むことができる。ある特定の実施形態において、界面活性剤は、好ましくは、EPAリスト4Bに属する非植物毒素の、非イオン性の界面活性剤である。他の特定の実施形態において、非イオン性界面活性剤はポリオキシエチレンモノラウレートである。界面活性剤の濃度範囲は、全組成物に対し0135、好ましくは525であれば良い。分散剤、乳化剤の選択及び使用される量は、組成物の性質及びこれら組成物の分散を促進する界面活性剤の分散能力により決まる。組成物は更に他の微生物及び又は殺虫剤例えば、殺線虫剤、殺菌剤、殺虫剤を含むことができる。微生物にはバチルス種、シュードモナス種、ブレビバシルス種、レカニシリウム種、非アンペロミセス種、シュードザイマ種、ストレプトミセス種、パークホルデリア種、トリコデルマ種、グリオクラディウム種由来の物質が含まれるがこれらの物質にに限られない。或いは、この物質は天然油または殺菌性及び又は殺虫作用を有するオイル製品でも良い。この組成物は、詳細には更に殺虫剤を含むことができる。殺虫剤にはアベルメクチン、バチルスチューリンゲンシス、ニーム油、アザジラクチン、スピノサド、クロモバクテリウムサブツガエ、ユーカリ抽出物、昆虫病原性細菌又は白きょう病、メタルヒジウムアニソプリアエなどの菌及び下記化学殺虫剤が含まれる。化学殺虫剤は、有機塩素系化合物、有機リン化合物、カルバメート、ピレスロイド、ネオニコチノイドを含むが、これらの化学殺虫剤に限られない。この組成物は、さらに殺線虫剤を含むことができる。殺線虫剤にはフェナミホス、アルジカルブ、オキサミル、カルボフラン、ネアミチシド自然産物、アベルメクチンなどの化学殺線虫剤、パエシロマイセスライラキナス及びムスコドル種などの菌類、バチルスファーマス、他のバチルス菌種及びパスツリアペネトランスなどの細菌が含まれるが、これらの化学殺線虫剤に限られない。この組成物は、さらに、RサカリネンシスRsachalinesisRegalia抽出物などの生物殺菌剤または殺菌剤を含むことができる。これらの殺菌剤にはベンズイミダゾール、脱メチル化反応阻害剤DMI例えば、イミダゾール、ピペラジン、ピリミジン、トリアゾール、モルホリン、ヒドロキシピリミジン、アニリノピリミジ、ホスホロチオラート、キノンアウトサイド阻害剤、キノリン、ジカルボキスイミド、カルボキスイミド、フェニルアミド、アニリノピリミジン、フェニルピロ-ル、芳香族炭化水素、桂皮酸、ヒドロキシアニリド、抗生物質、ポリオキシン、アシルアミン、フタルミド、ベンゼノイドキシリルアアラニンのシングルサイト抗菌剤が含まれ得るが、これらのシングルサイト抗菌剤に限定されない。また、ある実施形態において、抗菌剤はイミダゾール例えば、トリフルミゾール、ピペラジン、ピリミジン、シプロコナゾール、ジニコナゾール、フェンブコナゾール、ヘキサコナゾール、テブコナゾール、テトラコナゾール、ピロピコナゾールからなる群から選択される脱メチル化阻害剤である。抗菌剤は、ニトリル例えば、クロロニトリル又はフルジオキソニル、キノキサリン、スルファミド、ホスホン酸塩、亜リン酸塩、ジチオカルバミン酸塩、クロラルキチオスchloralkythios、フェニルピリジン-アミン、シアノ-アセトアミドオキシムからなる群から選ばれるマルチサイト非無機性noninorganic殺菌剤である。この組成物は、周知の方法を用いて施用できる。特に、これらの組成物は、植物または植物部位に施用することができる。本明細書における植物は、全ての植物と植物群、例えば、好ましいまたは好ましくない野生植物または作物を意味するものとする。作物は、従来の植物栽培方法及び最適化方法またはバイオ技術、遺伝子工学技術またはこれらの方法の組合せにより得られる植物であればよく、遺伝子組換え植物及び育成者権により保護されるかまたは保護されない植物栽培品種を含む。植物部位とは、植物の地上部又は地下部を含む全ての植物部位又は器官、例えば、若枝{わかえだ}、葉、花及び根を意味するものとする。実施例に挙げられるのは葉、根、茎、葉柄、花、子実体、果肉、種子、根、塊茎及び根茎である。植物部位はまた収穫物及び植物繁殖材料、例えば、挿し木、塊茎、根茎、側枝及び種子も含む。上記説明の組成物を用いる植物及び植物部位の処理法は、組成物を植物または植物部位に直接施用するかまたはその周囲、生息地或いは貯蔵スペースに作用させることにより、例えば、浸漬、散布、蒸発、噴霧、塗布、灌注することにより施用できる。組成物を種子に適用する場合は、種子をまく前に既知の方法により種子を、この組成物で一度以上粉衣処理することができる。前述のように、本組成物は除草効果を有することができる。この組成物はさらに1つ以上の除草剤を含むことができる。これら除草剤には、生物除草剤及び又は化学除草剤が含まれるが、これら除草剤に限られない。生物除草剤は、クローブシナモン、レモングラス、かんきつ油、橙皮油、テントキシン、コルネキシスチン、AAL毒素、レプトスペルモン、サクストミン、サルメンチン、モミラクトンB、ソルゴレノ、アスカラトキシンおよびアスカラトキシ配糖体から成る群から選ばれることができる。化学除草剤には、ジフルフェンゾピル及びその塩、ジカンバ及びその塩、トプラメゾン、テムボトリオン、sメトラクロール、アトラジン、メソトリオン、プリミスルフロン-メチル、ニコスルフロン、メチルチフェンスルフロン、アスラム、メトリブジン、ジクロフォップメチル、フルアジフォップ、フェノキサプロップpエチル、アスラム、オキシフルオルフェン、リムスルフロン、メコプロップ、キンクロラク、チオベンカーブ、クロマゾン、シハロホプ、プロパニル、ベンスルフロンメチル、ペノキススラム、トリクロピル、イマゼサピルimazethapyr、ハロスルフロンメチルhalosulfuronmethyl、ペンジメサリンpendimethalin、ビスピリバクナトリウム塩、グルホシネート及びオルソスルファムロンが含まれるが、これら除草剤に限られない。除草組成物は発芽前または発芽後除草剤として、液状または固形状で施用し得る。発芽前の除草乾剤における、担体の粒子サイズは通常12mm直径であるが、要求される土地被覆により粒子はこのサイズより小さくても大きくても良い。粒子は多孔性または非孔性粒子を含むことができる。発芽後除草剤において、施用される処方成分にはスメクタイト粘土、アタパルジャイト粘土及び類似の膨潤粘土、増粘剤、例えば、キサンタンゴム、アラビアゴム及び他の多糖増粘剤及び非イオン性界面活性剤例えば、ポリオキシエチレンモノラウレート等分散安定剤などが含まれることができる。利用分野本明細書に記載されるバークホルデリア属菌株由来の組成物及び農薬化合物は農薬として、特には殺昆虫剤、殺線虫剤、殺菌剤及び除草剤として利用することができる。特に上記説明の方法を用いて抑制できる線虫には根こぶ、リングring、スティング、ランス、嚢胞等寄生線虫及び下記病変線虫lesionnematodesが含まれるが、これらの線虫に限られない。上記病変線虫にはメロイドジン属、ヘテロデラ属及びグロボデラ種;特には、メロイドジンインコグニタ、及びグロボデラロストシネンシスGloboderarostochiensisとグロボデラパイリダgloboderapailidaヘテロデラグリシネスHeteroderaglycinesヘテロデラスキャッティHeteroderaschachtii及びヘテロデラアヴェナエHeteroderaavenaeが含まれるが、これら病変線虫に限られない。本発明の方法により抑制される植物病原性昆虫には下記の目に分類される昆虫が含まれるがこれらの昆虫に限られない。チョウ目、例えば、アスレリス種、アドキソピエス種、アエゲリア種、アグロチス種、アラバマアルギルラセアエ、アミロイス種、大豆夜蛾、ハマキ種Archipsspp、アルギロタエニア種、オートグラファ種Autographaspp、ブセオラフスカ、スジマダラメイガ、カルポシナニッポネンシス、チロ種Chilospp、オビハマキ種、クリシアアムビグエラ、クナファロクロシス、クネファシア種、コキリス種、コレホラ種、ケブカノメイガ、コドリンガモドキ、シディア種Cydiaspp、ディアトラエア種、ジパロプシスカスタネア、イーリアス種、エフェスチア種、エウコスマ種、ブドウホソハマキ、エウプロクチス種、エウクソア種、グラホリタ種、ヘドヤヌビフェラナHedyanubiferana、ヘリオチス種、ハイマダラノメイガHellulaundalis、アメリカシロヒトリHyphantriacunea、ケイフェリアリコペルシケラKeiferialycopersicella、レウコプテラスシテラLeucopterascitella、リトコレティス種Lithocollethisspp、ホソバヒメハマキLobesiabotrana、マイマイガ種Lymantriaspp、リオネチア種Lyonetiaspp、マラコソマ種Malacosomaspp、ヨトウガMamestrabrassicae、マンズカセクスタManducasexta、オペロフテラ種Operophteraspp、オストリニアヌビラリスOstrinianubilalis、パメネ種Pammenespp、ペンデミス種PandemissppマツキリガPanolisflammea、ワタアカミムシガPectinophoragossypiella、ジャガイモキバガ、ジャガイモガPhthorimaeaoperculella、モンシロチョウPierisrapae、モンシロチョウ種Pierisspp、コナガPlutellaxylostella、プライス種Praysspp、シロオオメイガ種Sciprophagaspp、セサミア種Sesamiaspp、テングハマキ種Sparganothisspp、スジキリヨトウ種Spodopteraspp、コスカシバ種Synanthedonspp、タウメトポエア種Thaumetopoeaspp、ウスアミメキハマキ種Tortrixspp、イラクサギンウワバTrichoplusiani及びスガ種Yponomeutaspp鞘翅目Coleoptera、例えば、アグリオテス種Agriotesspp、アンソノムス種Anthonomusspp、アトマリアリネアリスAtomarialinearis、チェトクネマ種、オサゾウムシ種、シギゾウムシ種、デルメステス種Dermestesspp、ジアブロティカ種Diabroticaspp、エピラクナ種Epilachnaspp、エレムヌス種Eremnusspp、コロラドハムシLeptinotarsadecemlineata、イネミズゾウムシ種Lissorhoptrusspp、コフキコガネ種、オリカエフィルス種Orycaephilusspp、オチオリンカス種Otiorhynchusspp、フリクチヌス種Phlyctinusspp、ポピリア種Popilliaspp、プシリオデス種Psylliodesspp、リゾペルタ種Rhizoperthaspp、コガネムシ科Scarabeidae、コクゾウムシSitophilusspp、バクガ種Sitotrogaspp、ゴミムシダマシ種Tenebriospp、コクヌストモドキ種Triboliumspp及びマダラカツオブシムシ種Trogodermaspp;c直翅目Orthoptera、例えば、ゴキブリ種Blattaspp、チャバネゴキブリ種Blattellaspp、ケラ種Gryllotalpaspp、マデイラゴキブリLeucophaeamaderae、小穂種Locustaspp、ペリプラネタ種Periplanetaspp及びスキストケルカ種Schistocercaspp;dシロアリ目Isoptera、例えば、レティクリテルメス種Reticulitermesspp;eチャタテムシ目Psocoptera、例えば、コナチャタテ種Liposcelisspp;fシラミ目Anoplura、例えば、ブタシラミ種Haematopinusspp、ケモノホソジラミ種Linognathusspp、ヒトジラミ種Pediculusspp、天疱瘡Pemphigusspp及びフィロキセラ種Phylloxeraspp;g食毛目Mallophaga、例えば、ダマリニア種Damalineaspp及びトリコデクテス種Trichodectesspp;アザミウマ目Thysanoptera、例えば、フランクリニエラ種Frankliniellaspp、ヘルシノスリプス種Hercinotnripsspp、ナシアザミウマ種Taeniothripsspp、ミナミキイロアザミウマThripspalmi、ネギアザミウマThripstabaci及びスキトトリプスオーランティScirtothripsaurantii;カメムシ亜目Heteroptera、例えば、トコジラミ種Cimexspp、ディスタンティエラテオブロマDistantiellatheobroma、アカホシカメムシ種Dysdercusspp、オイチスツス種Euchistusspp、エウリガステル種Eurygasterspp、レプトコリサ種Leptocorisaspp、アオクサカメムシ種Nezaraspp、ピエスマ種Piesmaspp、ロドニウス種Rhodniusspp、カスミカメムシ科Sahlbergellasingularis、イネクロカメムシ種Scotinopharaspp及びトニアトマ種Tniatomaspp同翅亜目Homoptera、例えば、アレウロトリクスフロコススAleurothrixusfloccosus、コナジラミヨトウガAleyrodesbrassicae、アカマルカイガラムシ種Aonidiellaspp、アブラムシ科Aphididae、ワタアブラムシ種Aphisspp、アスピディオトゥス種Aspidiotusspp、タバココナジラミBemisiatabaci、セロプラスター種Ceroplasterspp、クリソムファルスアオニジウムChrysomphalusaonidium、クリソムファルスジクチオスペルミChrysomphalusdictyospermi、ヒラタカタカイガラムシCoccushesperidum、エムポアスカ種Empoascaspp、エリオソマラリゲルムEriosomalarigerum、エリトロネウラ種Erythroneuraspp、ガスカルディア種、ミズキカタカイガラムシLecaniumcorni、ミカンカキカイガラムシ種Lepidosaphesspp、マクロシフス種Macrosiphusspp、ミズス種Myzusspp、ツマグロヨコバイ種Nephotettixspp、トビイロウンカ種Nilaparvataspp、パラトリア種Paratoriaspp、天疱瘡種Pemphigusspp、プラノコッカス種Planococcusspp、クワシロカイガラムシ種Pseudaulacaspisspp、クワコナカイガラムシ種Pseudococcusspp、キジラミ種Psyllaspp、プルヴィナリアエチオピカPulvinariaaethiopica、カドラスピディオツス種Quadraspidiotusspp、ロパロシフム種Rhopalosiphumspp、ハンエンカタカイガラムシ種Saissetiaspp、スカフォイデウス種Scaphoideusspp、スキザフィス種Schizaphisspp、シトビオン種Sitobionspp、オンシツコナジラミTrialeurodesvaporariorum、トリオザエリトレアエTriozaerytreae及びウナスピスシトリUnaspiscitri;k膜翅目Hymenoptera、例えば、ヒメハキリアリ属Acromyrmex、ハキリアリ種Attaspp、セフス種Cephusspp、ジプリオン種Diprionspp、マツハバチ科Diprionidae、シマトウヒハバチGilpiniapolytoma、ホプロカンパ種Hoplocampaspp、ケアリ種Lasiusspp、イエヒメアリMonomoriumpharaonis、ネオディプリオン種Neodiprionspp、トフシアリ種Solenopsisspp及びスズメバチ種Vesppaspp;双翅目Diptera、例えば、ヤブカ種Aedesspp、アンテリゴナソカタAntherigonasoccata、ビビオホルツラヌスBibiohortulanus、カリホラエリツロケファラCalliphoraerythrocephala、チチュウカイミバエ種Ceratitisspp、オビキンバエ種Chrysomyiaspp、イカエ種Culexspp、クテレブラ種Cuterebraspp、ダクス種Dacusspp、キイロショウジョウバエDrosophilamelanogaster、ファニア種Fanniaspp、ウマバエ種Gastrophilusspp、ツェツェバエ種Glossinaspp、ウシバエ種Hypodermaspp、ヒッポボスカ種Hyppoboscaspp、リリオミザ種Liriomyzaspp、キンバエ種Luciliaspp、メラナグロミザ種melanagromyzaspp、イエバエ種Muscaspp、オエストラス種Oestrusspp、オルセオリア種Orseoliaspp、オスシネラフリトOscinellafrit、アカザモグリハナバエPegomyiahyoscyami、ホルビア種Phorbiaspp、リンゴミバエRhagoletispomonella、スシアラ種Sciaraspp、サシバエ種Stomoxysspp、ウシアブ種Tabanusspp、アメリカサトイモ種Tanniaspp及びチブラ種Tipulaspp;ノミ目Siphonaptera、例えば、セラトフィルス種Ceratophyllusspp及びゼノプスネズミノミXenopsyllacheopis及びシミ目Thysanura、例えば、セイヨウシミLepismasaccharinaの本発明による活性成分は、さらに十字花植物のノミハムシフィロトレタ種、根食い虫デリア種、キャベツシードポッドウィービルcabbageseedpodweevilサルゾウ種、及びキャノーラセイヨウアブラナ、カラシ種子等の油糧種子作物、及びこれらの雑種並びに稲とトウモロコシおけるアブラムシの抑制にも使用することができる。ある特定の実施形態において、昆虫はスジキリヨトウ属Spodopteraの一種であればよく、特にはシロイチモジヨトウSpodopteraexigua、モモアカアブラムシMyzusPersicae、コナガPlutellaxylostellaまたはエウスキスツス種Euschistusspである。上記物質及び組成物は発芽前又は発芽後の、単子葉類の雑草、カヤツリグサ科の雑草または双子葉類の雑草の毛状体の調節にも施用し得る。ある特定の実施形態において、雑草は、アカザアルバムChenopodiumalbum、イチビAbutilontheophrasti、ヒマワリHelianthusannuus、アンブロシアアルテミシフォリアAmbrosiaartemesifolia、アオゲイトウAmaranthusretroflexus、セイヨウヒルガオConvolvulusarvensis、野生のマスタードBrassicakaber、セイヨウタンポポTaraxacumofficinale、イヌホオズキSolanumnigrum、マルバネグレクトMalvaneglect、セタリアルテセンスSetarialutescens、ウマノチャヒキBromustectorum、スズメノカタビラPoaannua、ナガハグサPoapratensis、ホノムギLoliumperenneLvarPace、トールフェスクFestucaarundinaceaeSchrebvarAztecII、アンテムII、LS1100、ヒメイヌビエEchinochloacrusgalli、レタスLactucasativaであっても良い。上記説明のバークホルデリア菌株の化合物及び組成物は、殺菌剤として利用することができる。標的菌類は、フザリウム種Fusariumsp、ハイイロカビ種Botrytissp、モリニアキンカクキン種Moniliniasp、炭疽病種Colletotrichumsp、バーティシリウム種Verticilliumsp、ミクロフォミナ種Microphominasp、疫病菌種Phytophtorasp、ケカビ菌種Mucorsp、ポドスファエラ菌種Podosphaerasp、リゾクトニア菌種Rhizoctoniasp、ペロノスポラ菌種Peronosporasp、ゲオトリクム菌種Geotrichumsp、フォーマ菌種Phoma及び青カビ菌種Penicilliumである。さらに別の特別な態様では、菌はキサントモナスXanthomonasである。本発明は、下記非制限実施例においてより詳しく説明する。実施例上記組成物及び方法を以下の非制限実施例においてさらに詳しく説明する。これらの実施例は、様々な実施形態を説明するものであり、クレームした本発明を、ここに記載する原料、条件、重量比、プロセスパラメータなどのみに限定するものではない。実施例1.微生物の分離及び同定1.1微生物の分離日本日光輪王寺にある常緑樹の下の土壌からサンプル採集し、既知技術を用いて微生物を分離した。LorchらLorchetal1995により詳細に記載された手順に従い、ポテトデキストロース寒天培地PDAを用いて、分離を行なった。この手順では、まず土壌サンプルを滅菌水で希釈し、その後、ポテトデキストロース寒天PDAのような固体寒天培地にプレートした。プレートを25°Cで5日間成長させ、個々の微生物コロニーを分離し、それぞれ異なるPDAプルートに移した。分離されたバクテリアはグラム陰性であり、クリーム色の円形で不透明なコロニーを形成する。コロニーは、時間の経過に伴ってピンク色及びピンクがかった褐色に変色し、ムコイド又は粘液に変化した。1.2微生物の同定微生物の同定は、遺伝子配列に基づいてユニバーサルバクテリアプライマーを用いて16SrRNA部位を増幅させることにより行なった。以下のプロトコールに従い実施した。バークホルデリア種A396をポテトデキストリン培地で培養した。24時間培養後、培養物を滅菌済みのループでかき取り、DNA抽出緩衝液に再懸濁させた。DNAはMoBioUltraCleanMicrobialDNA抽出キットを用いて抽出した。DNA抽出液5μlを1アガロースゲルに展開し定性、定量を行なった。PCR増幅反応条件を下記のように設定した。2μlDNA抽出液、5μlPCR緩衝液、1μldNTPs、125μlフォーワードプライマー、125μlリバースプライマー907R5CCGTCAATTCCTTTGAGTTT3及び025μlTaq酵素をヌクレアーゼフリーの滅菌水で50μlになるよう調製した。PCR反応は、最初の95°Cにおける10分間の熱変性段階、続いて、94°C30秒、57°C20秒、72°C30秒下での30サイクル増幅反応、72°Cにおける10分間の最終鎖伸長段階を含む。生成物の凡その濃度及び分子サイズは1のアガロースゲル上に5μlの生成物を展開し、生成物のバンドとDNAラダーマーカーを比較することにより計算した。PCR産物中の過剰プライマー、dNTPs及び酵素はMoBioPCRcleanupkitを用いて取除いた。浄化したPCR産物はプライマー27F、530F、1114F5GCAACGAGCGCAACCC及び1525R、1100R、519Rを用いて直接に配列解析を行なった。A396菌株の16SrRNAゲノム配列はBLAST法を用いて、入手可能なβプロテオバクテリア細菌を代表する16srRNAゲノム配列と比較した。A395A396はセパシア菌群Burkholderiacepaiacomplex種の近縁種で、バークホルデリアマルチボランス、バークホルデリアヴェトナメンシス及びバークホルデリアセパシア分離株と99以上の同一性を持つ。BLASTサーチでは、苗立枯細菌病Bplantarii、首腐病菌Bgladioli及びバークホルデリア種Burkholderiasp細菌の分離株に98同一性を示すセパシア菌群Bcepaciacomplexを排除した。隣接結合法による離れた場所の木から得られた結果からは、A396はバークホルデリアマルチボランス及び他のセパシア菌群の分離株と関連性があることが示された。苗立枯細菌病菌Burkholderiaplantarii及びイネもみ枯細菌病菌Burkholderiaglumaeは木の分岐枝に集中することが示された。分離したバクテリア菌株は以下の配列を含むことが判明した。フォワード配列、27Fプライマーを有するDNA配列、815ヌクレオチド;リバース配列、1453bp、使用プライマー1525R、1100R、519R;リバース配列、824bp、使用プライマー907R;フォワード配列1152bp、使用プライマー530F;フォワード配列1067bp使用プライマー1114Fリバース配列1223bp、使用プライマー1525R;リバース配列1216bp、使用プライマー1100R;リバース配列1194bp、使用プライマー519R13バークホルデリアA396がバークホルデリアセパシア菌群に属さないことの証明131特異的なPCRプライマーを用いる分子生物学研究バークホルデリアA396がバークホルデリアマルチボランスであることを特定するために、更にハウスキーピング遺伝子の遺伝子配列解析を行った。バークホルデリアマルチボランスは、セパシア菌群Burkholderiacepaciacomplexとして知られている。Mahenthiralingamらの記載Mahenthiralingametal2000に従い、遺伝子recAに着目し、下記のプライマーを用いてPCR反応を行った。セパシア菌群Bcepaciacomplex配列との一致を確認するためのMahenthiralingamらが記載したBCR1及びBCR2プライマー及びBmultivorans配列との一致を確認するための、Mahenthiralingamらが記載したBCRBM1及びBCRBM2プライマー。最初のプライマーセットを用いるPCR反応における産物収量から、微生物がセパシア菌群Bcepaciacomplexに属することを確認できた。セカンドプライマーセットを用いるPCR反応における産物収量から微生物が確かにバークホルデリアマルチボランスBmultivoransであることを確認できた。何れのペアのプライマーについてもPCR産物は得られなかった。そこで、ATCC17616陽性対照及び蛍光菌を用いて、PCR反応及びプライマーの性能効率を調べた。バークホルデリアマルチボランスBmultivoranを使用した場合、2セットのプライマーを用いる何れの反応生成物においても、強いバンドが観測された。蛍光菌を使用した場合は、バンドが観測されなかった。この結果はA396がバークホルデリア属ではあるが、セパシア菌群ではなく、またバークホルデリアマルチボランス菌種でもないことを示す。この結果は、比較培養実験でも明らかになった。例えば、A396及び基準菌株のバークホルデリアマルチボランスBmultivoransを振とう培地中で並べて培養し、600nmおける培養物の光学密度を毎日測定した。設定条件下で、新種A396はBmultivorans比べて遥かに早く成長した。132DNADNAハイブリダイゼーションA396分離株がバークホルデリア新種であることを確認するために、バークホルデリアマルチボランス16SrRNAに最も近似配列を有するを用いて、DNADNAハイブリダイゼーション実験を行なった。A396及びバークホルデリアマルチボランスBmultivoransの生物体量BiomassともISP2培養液で、ファーンバックFernbachフラスコ中で、200rpm25°C下、48時間培養した。遠心分離により無菌的に生物体を得た。培養液をデカントし、細胞ペレットを水イソプロパノール11の溶液に再懸濁させた。DNADNAハイブリダイゼーション実験は、DSMZGermanCollectionofMicroorgamismsancCellCulturesinGermanyにより行った。DNAはCashionらの記載とおり、圧力式ホモナイザーを用いて分離し、ハイドロキシアパタイトを担体とするクロマトグラフィーにより精製した。DNADNAハイブリダイゼーションは、DeLeyらの記載に従い、Hussら記載の変更などを検討に入れながら、Peltierthermostatted6x6multicellcharger及びinsitu温度プローブを有する温度調節器を備えるモデルCary100BioUVVIS分光光度計Varian社を用いて行なった。DSMZは、A396とバークホルデリアマルチボランスとのDNADNA相似性は374であることを報告した。この結果は、特別委員会が提案するバクテリア種の定義づけのためのDNADNA相似性閾値70を考慮すると、バークホルデリア菌種Burkholderiaspの菌株A396は、バークホルデリアマルチボランス菌種には属さないことを示す。14BiologGN2platesを用いる生化学的プロフィール炭素原利用プロフィール作成のために、A396をポテトデキストロース寒天PDA培地で一晩培養した。製造メーカの推奨に従い、培養物をBUG培地に移し、生物学的実験に適切な培養物を産生させた。微生物の生化学的プロフィールは、BiologGN2plateに培養物を植菌し、MicroLog4自動マイクロステーションシステムを用いて、24時間インキュベーション後のプレートを読み取ることにより作成した。未知のバクテリアの同定は、作成したバクテリアの炭素ユーティライゼイションパタンをMicrolog4グラム陰性データベースと比較して行なった。Biologプロフィールには明確に決定的な一致は見出せなかった。A396に最も相似性を示すシュードモナススピノサ菌種バークホルデリア属Psedomonasuspinosa、バークホルデリアセパシア菌種Burholderiacepacia及び類鼻疽菌Burholderiapsedomallei種などのA396に対する一致は、全て35以下である。その結果を表1に示す。表1.A396の生化学的プロフィール1.5脂肪酸組成物28°Cにおいて24時間インキュベーションした。白金耳量の良く増殖した生育細胞を採取し、脂肪酸メチルエステルを調製、分離した。Vandammeらの記載に従いSherlockMicrobialIdentificationoSystemMIDI社を用いて同定を行なった。バークホルデリアA396中に存在する主な脂肪酸は下記の通りであった。160シクロ1701603OH140190ω8cシクロ180。合計された特徴8及び合計された特徴3は、それぞれ全ピーク面積の262及び202に対応した。120ALDE160isoI及び1403OHを含む合計された特徴2は全ピーク面積の58に対応し、180ANTE及び182ω6c9cを含む合計された特徴5は全ピーク面積の04に対応した。A396中に少量検出されるほかの脂肪酸には131at1213141ω5c1503OH171ω7c170160iso3OH1602OH181ω7c11メチル015及び1812OHなどが含まれた。A396の脂肪酸組成物を、MIDIデータベースにおける既知微生物菌株の脂肪酸と比較すると、新規A396に含まれる脂肪酸はBurkholderiacenocepacia脂肪酸に最も類似することが示された。1.6.抗生物質耐性バークホルデリアA396の抗生物質感受性は抗生物質ディスク法を用いてPMLMicrobiologicalstechnicaldatasheet535に記載されるように、ミューラーヒントンMullerHinton培地において試験した。25°Cで72時間インキュベート後に得られた結果を表2に示す。表2MBI206の種々の抗生物質に対する感受性極めて感受性感受性抵抗性この結果は、バークホルデリアA396の抗生物質感受性のスペクトラムが、病原性のセパシア菌群Bcepaciacomplexの菌株と全く違うことを示す。バークホルデリア菌種A396は、カナマイシン、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、ピペラシリン、イミペネム及びスルファメトキサゾールとトリメトプリムの組合せに感受性を示した。ZhouらZhouetal2007の試験によれば、嚢胞性線維症患者から単離された異なる2621種類のセパシア菌群Bcepaciacomplex株では、イミペネム又はシプロフロキサシンに対し、それぞれ7及び5の菌株のみで感受性を示した。彼らはまた、全菌株の85がクロラムフェニコールに対し耐性であり、95はスルファメトキサゾールとトリメトプリムの組合せに対し耐性を示すことを発見した。Zhouらの結果は、366Bcepacia分離株の抗生物質耐性を決定し、これら分離株の殆どがシプロフロキサシン、セフロキシム、イミペネム、クロラムフェニコール、テトサイクリン及びスルファメトキサゾールに対し耐性であることを報告したPittら結果と同様である。2.実施例2除草剤としてのバークホルデリア種21実験1初期の除草剤スクリーニングで発見したその活性を確認するために、新規バークホルデリア種の5日目の全細胞の培養液に由来する、アンバーライト7XAD樹脂の抽出物を使用してinvivo実験を行った。02非イオン性活性面活剤glycosperseを含む4エタノール中に、乾燥粗抽出物を10mgmlの濃度で再懸濁し、更に50mgmlの濃度に希釈した。この2つの試料を4週齢のサンシキヒルガオConvolvulusarvensisに散布し、その植物を2週間、室温25度で生育光の下に維持し、毒性を評価した。同じ実験で、細菌の培養物から抽出した粗抽出物を、その濃度を高めながら2週齢のレッドルートアカザに散布した。試験濃度を、125、25、50及び100mgmlとし、その植物の毒性評価の前に、上記の通りにインキュベートした。図2サンシキヒルガオと図3アカザに示した異なる濃度のバークホルデリア種粗抽出物の植物毒性効果の結果から、アカザには低濃度でも除草効果がある事が示された。いずれの濃度5mgmlと10mgmlの抽出物を使用した場合でも、サンシキヒルガオの発育は阻止された。22実験2新規バークホルデリア種A396を、定義されていないミネラル培地の中で、5日間25度、200rpm増殖させた。全細胞培養物をXAD7樹脂を使って抽出した。02非イオン性活性面活剤glycosperseを含む4エタノール中に、この乾燥粗抽出物を10mgmlの濃度で再懸濁し、更に50mgml、25mgml、及び125mgmlの濃度に希釈した。その後、4種全ての試験溶液を使用して、下記の表3に挙げた広葉種とイネ科雑草種を試験した。表3.テストした広葉種とイネ科雑草種陰性対照として02のグリコスパースglycosperse溶液を、陽性対照として一ガロンにつき6液量オンスflozのラウンドアップRoundup溶液を使用した。全植物種を3個づつ、4インチX4インチのプラスチック製の鉢の中で試験した。未処理UTCの植物には、キャリア溶液02glycosperseを含む4エタノールを、陽性対照の植物には1エーカーにつき6液量オンスに相当する割合でラウンドアップを散布した。処理した植物を、温室中で12時間ずつ、明暗の条件下で維持した。植物毒性のデータを1-8種については、テスト液散布後22日目に測定し、9-12種については12日目に測定し、その結果をそれぞれ表5及び表6にまとめた。表4には、表5及び表6に使用した評価スケールを示した。表4評価スケール表51-8種の植物毒性データ表69-12種の植物毒性データこれらの実験の結果に基づき、単離されたバークホルデリア種の培養液から抽出された、数種の雑草に対し、除草活性がある化合物を試験した。12種テストした中で、ラムスクウォーターとカラシが最も影響されやすく、次にゼンアオイとヒメムカシヨモギが影響されやすかった。125mgmlの低濃度の抽出物であっても、ラムスクウォーターとカラシは、ほぼ完全にコントロールする事が出来るが、一方でゼニアオイとヒメムカシヨモギをコントロールするにはさらに高濃度とする必要があった。別の実験で、上記と同じ実験方法により全体的な作用をテストした。バークホルデリア種A396の、10mgml濃度の粗抽出物の上澄み液を、ブタクサ、カラシ、ヒヨドリジョウゴ、メシヒバ、麦、イヌヒエの最初の1枚目の本葉に塗布した。テスト液を塗布した7日目に、苗を評価した。観察された症状は、火傷、歪み、白斑を含む。除草活性は、テスト液を塗布した葉に隣接する上の葉で観察された。テストした雑草中で、全般的効果は見られなかった。2回目の実験で、同じ粗抽出物10mgmlを5個の画分を、上記と同じ実験計画で評価した。カラシと麦とメヒシバの苗を処理した。試験後7日目及び20日目に、C-18カラムを使用した5つの画分のうち、4つ画分を用いた091113B4F6091113B4F7091113B4F8と091113B4F9カラシで、除草活性の症状が現れた。症状はテスト液を塗布した葉に隣接する上の葉で見られた。テストした雑草では全草的な活性は見られなかった。3実施例3殺虫剤としてのバークホルデリア種31.接触活性の検討新規なバークホルデリア種の培養物からの化合物が、レピドプテランペスト幼虫に対し接触活性があるかどうかを決めるために、初期のスクリーニング段階で、以下のアッセイを使用した。このアッセイを、全細胞培養液の抽出物から得られた活性画分とピークとを決定するために、さらにバイオアッセイ誘導分別のツールとして使用した。第3齢後半期の幼虫であるキャベツルーパTricoplusiani又は第3齢早期の幼虫シロイチモンジヨトウSpodopteraexiguaのいずれかを、各125オンスのプラスチックカップの中に入れて、試験を行った。1cmx1cmの固形のシロイチモンジヨトウの餌と一匹の幼虫とを、一緒に各カップの中央に置いた。それぞれのテスト液1μl全細胞培養液または5日齢のバークホルデリア種A396の培養物からの抽出物を、ハミルトン社製の精密注射器を使って、各幼虫の胸部に注射した。それぞれの処理を10回繰り返した。陰性対照として水を使用し、陽性対照としてマラチオンを使用した。注射後、それぞれのカップを空気穴の空いたパラフィルムで覆い、その後、そのカップを26°Cで3日間、インキュベートした。投薬24時間後から致死率の評価を開始し、毎日評価した。図4及び図5には接触活性テストの結果を示す。その結果によれば、バークホルデリア種の培養物からのフィルター滅菌された培養物は、テストしたすべての害虫の約40を3日以内に殺した。希釈した培養物50は活性が低く、テストしたいずれの害虫でも対照の約10であった。3.2.餌を介した幼虫に対しての活性200μlの固形のシロイチモンジヨトウ虫用の人工餌を各ウェルの中に入れ、マイクロタイタープレートを使い、下記の96ウェルプレートのアッセイフォーマットを用いるダイエットーオーバーレイテストdietoverlaytestにより、餌を介しての直接的な毒性作用をテストした。それぞれの試料100μlを餌の上に滴下し各ウェル中に1個のサンプルを入れた、試料の表面が乾燥するまで風乾した。それぞれの試料02ミクロンの滅菌フィルターを通してフィルター滅菌したについて各6匹を用いて試験を行った。陰性対照として水を使用し、陽性対照として市販のBtBthuringiensisを使用した。テスト害虫の3齢幼虫キャベツルーパーTrichoplusianiシロイチモンジヨトウSpodopteraexiquaコナガPlutellaxylostellaを1匹ずつそれぞれのウェルの中に置き、そしてそのプレートを空気穴を開けたプラスチックで覆った。害虫を入れたプレートを26°Cでインキュベートし、6日間毎日、致死率を評価した。濃度の異なる4種の抽出液、1x、14x、18x、116xを使用した第3齢初期幼虫のシロイチモンジヨトウ虫Spodopteraexiquaのダイエット―オーバーレイテストの実験データを、図5に示した。このデータは、希釈せずにフィルター滅菌した培養液で、7日間のインキュベーション期間の終わりには100コントロールする事が出来る事を示している。4倍希釈した培養液でも似たようなコントロールが得られ、実験の終わりに、未希釈培養液と4倍希釈培養液の双方を、陽性対照として使用したBtと比較した。しかしながら、Btの効果はバークホルデリア培養液の効果より有意に早かった。アワヨトウの幼虫に対するエフィカシーは、培養液の濃度に依存し、また、最も低い濃度と2番目に低い濃度の培養液125と6125とを、最も高い濃度と2番目に高い濃度の培養液と比べると、より低いコントロールとなっていた。しかしながら、125の希釈液は25の希釈液に比べて、それ程低くはなかった。16倍に希釈した培養液ははっきりした十分な活性を示さなかったが、7日間の実験の間に、部分的ではあったが、アワヨトウの33コントロールが出来た。キャベツルーパーとコナガの幼虫にも同じ希釈した濃度の培養液を使用し、それらによる死亡率は、625の培養液でキャベツルーパーの死亡率は80で、コナガの死亡率は50と少し高めだった。3.3.吸汁虫でのinvitro活性5匹の成虫カメムシEuschistusspを、それぞれ一枚のペーパタオルが敷いてある16ozの各プラスチック容器内に置いた。2mlの各試料フィルター滅菌済みの全培養液を入れたマイクロ遠心チューブに綿球で蓋をし、各プラスチック容器の底にねかせた。そのチューブの横に、1粒のヒマワリの種の餌を置いた。陰性対照として水を使用し、陽性対照として、推奨されている割合のピレトリンとPBOとの市販品を使用した。それぞれの容器の蓋を閉め、7日間25度でインキュベートし、毎日、死亡率をチェックした。下記表7に示す結果より、50希釈培養液を用いたinvitro系では、7日目までの吸汁虫カメムシのコントロールは約80であった。この実験において、バークホルデリアA396の希釈した培養液は、陽性対照として使った市販品より、効果的にカメムシをコントロール出来た。興味深い事に、原液の培養液では低害虫コントロールとなっていたが、それはこの新規なバークホルデリア種が生産する活性な二次代謝産物の摂食阻害摂食の抑制特性を示唆するものであるかもしれない。表7カメムシでのA396の活性4.実施例4吸汁虫のinvivoテスト濾過した全細胞培養液のinvivoでのエフィカシーを、テスト害虫としてのモモアカアブラムシMyzuspersicaeと植物のカラシとを用いて試験した。約1カ月齢のフロリダ広葉マスタードBrassicaspに、フィルター滅菌済みのバークホルデリア種の全細胞培養液を、異なる2つの濃度1x及び05xで、パッシェPaascheのエアブラシを使って、スプレーした。陰性対照として水を、陽性対照として市販品であるアベルメクチンAvidを使用した。植物をベンチ上で乾燥させ、その後、空気穴の開いている蓋付きの6カップのプラスチック容器の中に置いた。成長段階の異なる10匹のアブラムシを、それぞれのテスト植物の上に置き、その植物を25°Cで、7日間、生育光の下でインキュベートした。各植物に付いているアブラムシの数を毎日評価し、ノートに記録した。この結果によれば、新規バークホルデリア種の培養物から得たフィルター滅菌培養液は、いずれの濃度においても、カメムシMpersicaeの増殖を制御する事ができた。5.実施例5.線虫類での作用5.1実験1若い根瘤線虫MeloidogyneincognitaVW6の活動において、フィルター滅菌済みのバークホルデリア種A396の活性そして、その後の回復を調べるために、24ウェルプラスチックカルチャープレートを使って、下記のテストをした。各テスト容液300μLのアリコート1xまたは05xフィルター滅菌済みの培養液のいずれかを、それぞれの適当なウェルの中に加え、その後で10μLの脱イオン化水中に分散されている15匹の線虫を各ウェル中に入れ、プレートの蓋を閉め、そして24時間、25度でインキュベートした。陰性対照として水を、陽性対照として20000X倍に希釈したアビドAvidをそれぞれ使用した。各化合物による、線虫の可動性に対しての効果を、24時間後に、各線虫に針を使って調べ、そして、各処理による線虫の非可動性の程度を、スケールを使って評価しノートに記録した。各処理における可動性の回復を調べるために、それぞれのウェルから200μLの容液を取り、各ウェル中の残量容液に2mlの脱イオン水を加えて希釈した。プレートは、再度、上記に記載されている様に、24時間インキュベートし、その後で2度目の可動性評価を実施した。図6に記載したこの結果は、フィルター滅菌済み培養液のいずれのテスト濃度でも、自由に活動していた若い根瘤線虫を、非可動化出来たことを示した。この効力は、少なくとも24時間続き、それによって、バークホルデリア種A396の培養液が線虫による感染から植物を守るために使用できることを示唆している。5.2実験2実験材料と方法ミニドレンチテスト:バークホルデリアA396の全細胞培養液を、45mLのポットの中で行う温室アッセイで試験した。砂土壌で満たされているポットの中に、キュウリシーズcvトーチカCucumberseedscvToshkaの種を直接蒔いた。10日後、各ポットを5mLの懸濁液で処理した。使用した具的的な量を表9に示した。表9に示すように、各ポットにメロイドジンインコグニタMincognitaの卵を3000個、播種した。各処理及び溶液の割合のために、4個のポットを準備した。この試験的適用及び播種14日後に採取した。根瘤RootgallingをゼックのガルインデックスZeck’sgallindexZeck1971に従って評価した。植物の毒性は、根瘤の減少をコントロールと比べて測定した。結果を図9及び図10に示した。第1のミニドレンチテストにおいて、100mLL濃度のバークホルデリアA396を適用した場合には、処理効果は非常に高く、ほぼ100減少した。フォスチアゼートFosthiazateは通常通りに作用した20ppmで100制御。第2のミニドレンチテストでは図10参照、最高濃度100mLLで根瘤の100減少が達成されたが、15mLL濃度では約50に低下した。フォスチアゼートは通常通り作用した20ppmで100制御。5.3実験3バークホルデリアA396の線虫作用を立証するために、根瘤線虫をメロイジンインコグニタを制御するための試験品として、バークホルデリアA396の全細胞培養液を使って、きゅうりCucumissativusの温室実験を行った。1個のポット当たり1つのきゅうりを土壌中に植え、人工光の下で28度の温室で成長させた。植物を植えた各ポットを、未希釈の試験品、水で5に希釈した試験品のいずれかのアリコート約80mLで処理した。バークホルデリア処理、陽性対照処理としてのテミックTemikラベルに表示された割合で処理、及び陰性対象として未添加液処理は、それぞれ各5の試料数replicateで行った。植物は温室中で60日間成長させ、その後、各植物を採取して、新シュート重量と根の重量とを評価した。各ポットの中の線虫卵の数を記録し、根重量1g当たりの卵の数を示すパラメターを計算した。統計学的分析ANOVAを行い、そして、処理平均値間の統計的差異をp<01で計算した。下記表10は、未処理の対照との間で統計的な差が不十分であったとしても、未処理の対照ポットよりA396の全培養液で処理したポットでは、虫卵の数が少なかったことを示す。一個の根塊当たりの卵の数として計算した効果は、希釈した培養液を処理液として使った時に、より明確であった。表10.キュウリの新芽と根の重さにおけるA396の全細胞培養液の活性、1ポット当りのエムインコグニッタMincognitaの卵の数の合計と根塊1g当りの卵の数。6.実施例6テンプラゾールTemplazoleAとテンプラゾールBの分離実験方法と材料バークホルデリア種の細胞培養物から抽出したテンプラゾールAとBとを精製するために、下記の手順を用いた。ハイソイ増殖培地中、10LのバークホルデリアA396培養物から得た培養液を、アンバーライトXAD7樹脂Asolkaretal2006で抽出した。この抽出は、室温で2時間、225rpmで上記樹脂と細胞懸濁液と一緒に振盪させて行った。チーズクロス荒目薄地の綿布を通して濾過して樹脂と細胞の塊を集め、そして脱イオン化水で洗って塩分を除去した。上記樹脂、上記細胞塊及び上記綿布をアセトン中に2時間浸漬し、その後、アセトンを濾別して、ロータリーエバポレーターを用いて真空乾燥させ、粗抽出物にを得た。その後、逆相C18真空液体クロマトグラフィーH2OCH3OH;グラジエント90:20から0:100を用いて、粗抽出物を10の画分に分画した。その後、ロータリーエバポレーターを用いてこの画分を濃縮して乾燥させ、得られた乾燥残渣の生物学的活性を、96ウェルプレートのレタスシーディングアッセイlettuceseedingassayを用いてスクリーンニングした。その後、活性画分を、逆相HPLCスペクトラシステムP4000ThermoScientific社にかけて精製化合物を得た。得られた精製化合物を、活性合物の所在と活性とを明らかにするために、上記に記述したバイオアッセイを使って、スクリーンニングした。その化合物の同定を確認するために、LCMSやNMR等の追加の分光分析データを記録した。活性画分4を、HPLのC18カラムフェノメネックス,ルナ10uC18100A250X30、水:アセトニトリルグラジエント溶媒系0~10分;80の水性CH3CN、10~25分;80~65の水性CH3CN、25~50分;65~50の水性CH3CN、50~60分;50~70のCH3CN、60~80分;70~0の水性CH3CN、80~85分;0~20の水性CH3CNを用いて、8mL分の流速で、210nmでのUV検出を用いて精製し、保持時間4665分にテンプラゾールBを得た。他の活性画分6もまた、HPLCC18カラムフェノメネックス,ルナ10uC18100A250X30、水:アセトニトリルグラジエント系0~10分;80水性CH3CN10~25分;80~60の水性CH3CN、25~50分;60~40の水性CH3CN、50~60分;40の水性CH3CN、60~80分;40~0の水性CH3CN、80~85分;0~20の水性CH3CN、8mL分の流速で、210nmのUV検出を用いて精製し、保持時間7082分にテンプラゾールAを得た。精製化合物の質量分析を、サーモフィニガンThermoFinniganLCQDECAXPplus質量分析計ThermoElectoronCorpサーモエレクトロン社、サンノゼ、カリフォルニア上にて、フルスキャンモードmz100~1500Daで、陽性及び陰性双方のイオン化モードを用いて、サーモフィニガンLCQDecaXPプラス電子スプレーESIで、サーモフィニガンLCQDECAXPプラス電子スプレーESI装置で行った。サーモ高速液体クロマトグラフィーHPLC装置には、フィニガンサーベイヤーPDAプラス検出器、オートサンプラープラス、MSポンプ及び46mmx100mmのルナC18の5μmカラムフェノメネックス社を装備していた。溶媒系は水溶媒A及びアセトニトリル溶媒Bとから構成された。移動相は10溶媒Bから始まり、そして、直線的に20分以上かけて、100溶媒Bまで上昇した。その後4分間維持し、そして、3分以上かけて最終的に10溶媒に戻し、3分間維持した。流速は、05mL分とした。注入量は10μLであり、オートサンプラー中で試料を室温に維持した。上記化合物は、上記LC及び逆相クロマトグラフィーを利用するLCMSで分析した。本化合物の質量分析を、下記の条件の下で行った:窒素ガスの流速を、シース及びauxsweepについて、それぞれ30及び15arbに固定した。電子スプレーイオン化は、スプレー電圧を5000Vに、キャピラリー電圧を350Vで行った。キャピラリー温度は400°Cとした。データをエックスキャリバーソフトウェアXcalibursoftwareで分析した。活性化合物であるテンプラゾールAの分子量は298、陰イオン化モードでは、mzイオンは29734を示した。テンプラゾールBのLCMSクロマトグラムは、分子量258を示唆し、陰イオンモードでは、mzイオンは25774を示した。1HNMR、13CNMR及び2DNMRスペクトルを、ブルカーBrukerの500MHzと600MHzのグラジエントフィールドスペクトロメーターで測定した。対照は、内部標準であるテトラメチルシランTMS000ppmに設定した。テンプラゾールAの構造解明のため、分子量298の精製化合物を、さらに500MHzのNMRを使って分析したところ、1HNMRのδ値は、844、874、819、747、731、398、282、233、108であり、13CNMRのδ値は、1637、1612、1548、1361、1294、1254、1235、1233、1218、1215、1118、1047、522、373、281、227、227であった。テンプラゾールAは、226、275、327nmにUV吸収帯を有し、このことから、インドール環及びオキサゾール環の存在が示唆された。分子式、C17H19N2O3は、1HNMR、13CNMRの解釈及びHRESIMSのデータである、mz2991396MHC17H19N2O3の計算値は、2991397から決定した。この分子式は、10個の二重結合によって示される高度の不飽和を伴っていた。13CNMRスペクトルには、2個のメチル、1個のメトキシ、1個のメチレン炭素、1個の脂肪族メチンaliphaticmethine、一個のエステルカルボニル、及び11個の芳香族性炭素を含む、全部で17個の炭素のシグナルが現れていた。1H1HCOSY及びHMBCのスペクトルデータから、3’-置換インドールの存在が明らかになった。上記1H1HCOSY及びHMBCはまた、カルボン酸メチルエステル基及び-CH2-CH-CH32側鎖の存在を明らかにした。1H1HCOSY、13CNMR及びHMBCデータの詳細な分析から、この化合物はオキサゾール中核部を有することが判明した。上記2D分析から、イソブチル側鎖がC2位に、カルボン酸メチルエステルがC4位に、そしてインドール単位unitがC5位に結合していることが見出され、テンプラゾールAとされた。第2の除草活性のある化合物、分子量298のテンプラゾールBを、さらに、500MHzのNMRを使って分析したところ、1HNMRのδ値は、708706675375256215093093であり、13CNMRのδ値は、1582156315551326129512951273121811521152412353267215215であった。分子式には、C17H18N2O2が与えられ、1HNMR、13CNMR及び質量分析データの解釈から決定した。13CNMRスペクトルには、2個のメチル、2個のメチレン炭素、1個の脂肪族メチン、1個のアミドカルボニルamidecarbonyl及び9個の芳香族性炭素を含む、全部で15個の炭素のシグナルが現れていた。上記構造の一般的な性質は、1HNMR及び13CNMRスペクトルが示すパ位置換された芳香環δ708675、及び132712951152127311521295から推定された。この構造の1HNMRスペクトルと1H1HCOSYとHSQCスペクトルとを合わせると、イソブチル部分δ093215257に特徴的なシグナルが表示された。さらに、δ706sに1個のオレフィン性/芳香族性のプロトン、及び1個のカルボニル基炭素δ1589も、1HNMR及び13CNMRスペクトル中で見出された。HMBCスペクトルの綿密な検証によって、イソブチル部分のH1’のシグナルは、オレフィン性炭素C2δ1563と関連し、また、このオレフィン性プロトンH-4はC5δ1555C21563及びC1,412と関連していた。δ375のメチレン信号は、パラ置換芳香族分子部分のC-2と、同様にC-5やC-4とも関連していた。観察されたこれらすべての相関は、イソブチルと示されたような骨格構造にとってのp-置換ベンジル部分間の関連性を示唆している。加えて、H-4及びH-6位の芳香族性プロトンで観測されたHMBC相関に基づいて、ベンジル部分のパラ位にカルボキシアミド基が与えられた。この様に、上記のデータに基づいて、上記構造は、テンプラゾールBと特定された。7.実施例7.FR90128の分離アンバーライトXAD7樹脂アソルカーらAsolkaretal2006と細胞懸濁液とを室温で2時間、225rpmで振盪し、定義されていない成育培地中で培養したバークホルデリア種から得た全細胞培養液を抽出した。上記樹脂と細胞との塊をチーズクロスで濾別して集め、脱イオン水で洗って塩分を除いた。その後、上記樹脂、上記細胞の塊及び上記クロスをアセトンに浸漬し、その後、アセトンを濾過し、ロータリーエバポレーターを用いて真空下に乾燥させ、粗抽出物を得た。その後、上記粗抽出物を、逆相C18真空液体クロマトグラフィーH2OCH3OH;90:20から0:100のグラジエントを使用して分画し、10個の画分を得た。その後、これらの画分を、ロータリーエバポレーターを使用して、濃縮して乾燥させ、生じた乾燥残留物を、除草バイオアッセイ及び昆虫バイオアッセイを使用し、生物学的活性についてスクリーンニングした。その後、活性画分を、逆相/順相HPLCスペクトルシステムP4000サーモサイエンティフィック社に供し、精製化合物を得た。上記活性化合物は、以下に記述した除草バイオアッセイ、殺虫バイオアッセイ及び殺線虫バイオアッセイでスクリーニングし、上記活性化合物の所在/同定を行った。化合物の同定を確認するために、LC/MSおよびNMR等の付加的な分光データを記録した。活性ピークの質量分析を、LCQDecaXPplus質量分析計サーモエレクトロン社、サンノゼ、カリフォルニア上、フルスキャンモードmz100~1500Daの陽イオン化、陰イオン化双方のモードで、サーモフィニガンLCQDecaXPplusエレクトロスプレーESI装置を用いて行った。サーモ高速液体クロマトグラフィーHPLC装置には、フィニガンサーベイヤーPDAプラス検出器、オートサンプラープラス、MSポンプ及び46mmx100mmLunaC185μmカラムフェノメネックス社が装備されていた。溶媒系は、水溶媒Aとアセトニトリル溶媒Bからなっていた。移動相は、10の溶媒Bから始まり、20分以上かけて、直線的に100の溶媒Bまで上昇し、4分間維持した。そして、3分以上かけて、最終的に10の溶媒Bに戻り、3分間維持した。流速は、05mL分であった。注入量は10μLであり、サンプルをオートサンプラー中で室温中に維持した。上記化合物は、LC及び逆相クロマトグラフィーを利用するLCMSで分析した。本化合物の質量分析は、下記の条件で行った:窒素ガスの流速は、各々、シースでは30arb、auxsweepでは15arbに固定した。エレクトロスプレーイオン化は、スプレー電圧を5000V、キャピラリー電圧を350Vに設定して行った。キャピラリー温度を400°Cに設定した。データは、XキャリバーXcaliburソフトウェアを用いて分析した。LSMSの分析に基づいて、画分5で殺虫効果のある化合物の分子量は、陰イオン化モードで540であった。構造解明のため、分子量540を有する、画分5からの殺虫性のある精製化合物を、さらに、500MHzのNMRを用いて分析した。1HNMRのδ値が、622581569566565464431393322321315310269262226223174115112105102、13CNMRのδ値が、172991729316957169231675913074130121299312832734962955942577338393800354930903036292618591838180917931251を示した。NMRデータは、この化合物が、アミノ基、エステル基、カルボン酸基、脂肪酸メチル基、エチル基、メチレン基、オキシメチレン基、メチン基、オキシメチン基、及び硫黄族を含むことを示唆した。詳細な1D及び2DNMR分析によると、FR90128である上記化合物の構造が、既知の化合物であることが確認された。8.実施例8.FR90128の除草効果活性化合物FR90128分子量540の除草活性を、96ウェルプレートのプラットフォームの中の1週齢のイヌビエEchinochloacrusgalliの苗を使用する実験室アッセイで試験した。99μLの脱イオン水を含む各ウェル中に、1個の雑草の苗を植えた。純粋化合物のエタノール溶液10mgmlのアリコート1μLを各ウェルに加え、プレートを蓋で密閉した。1μLのエタノールと99μLの水を、陰性対照として使用した。この処理を、8個のウェル8replicatesについて行い、密閉したプレートを、人工光12時間の明/暗サイクル下、温室中でインキュベートした。5日後に、その結果を調べた。活性化合物で処理した全8個のウェルの雑草の苗は、緑色の組織を残すことなく枯れたが、陰性対照のウェルの苗は活発に成長した。9.実施例9.FR90128の殺虫効果活性化合物FR90128の殺虫効果を、接触バイオアッセイ系を使って実験室アッセイで試験した。上記化合物を100エタノールに溶解し、0001、0005、001、0025、005、01、025、及び05μgμLの濃度とした。シロイチモジヨトウSpodopteraexiguaの3齢期初期の幼虫を、1cm2片の人工飼料バイオサーブBioServ社製と共に、125オンスのプラスチックカップ中に入れた。ハミルトンのマイクロピペットを使用して、1μLの化合物をそれぞれの幼虫の胸部に適用する。パラフィルムを引っ張ってカップを覆い、通気のために、パラフィルムに一か所、穴を開けた。各濃度当たり10匹の幼虫を処理した。このアッセイを12時間明/12時間暗、25°Cでインキュベートした。適用後、48時間及び72時間で、スコアを付けた。LC50値を調べるためにプロビット分析を行い、化合物分子量540については、0213と認定された。10.実施例10.テンプラミドA,B,FR90145及びFR90128の単離実験方法と材料以下の手順で、バークホルデリア種の細胞培養物から抽出した化合物を精製した図7参照:ハイソイ増殖培地中で増殖させた10LのバークホルデリアA396からの培養液を、室温で2時間、225rpmで、樹脂と細胞懸濁液とを振蘯することによって、アンバーライトXAD7樹脂Asolkarら、2006で抽出した。樹脂と細胞塊とをチーズクロスを通して濾別して集め、脱イオン水で洗って塩を除いた。上記樹脂、細胞塊、及びチーズクロスをアセトン中に2時間浸漬し、その後、アセトンを濾過し、ロータリーエバポレーターを用いて真空下で乾燥させ、粗精製物を得た。その後、この粗精製物を、逆相C18真空液体クロマトグラフィーH2OCH3OH;グラジエント90:20から0:100を使用して分画し、10個の画分を得た。その後、ロータリーエバポレーターを用いてこれらの画分を濃縮し、得られた乾燥残渣を96ウェルプレートのレタス播種アッセイ除草性と3齢のシロイチモジヨトウアッセイ殺虫性に使い、生物学的活性をスクリーンニングした。その後、逆相HPLC分離スペクトルシステムP4000、サーモサイエンティフィックThermoScientific社に繰り返し供して、純粋な化合物を得た。その後、この活性化合物を上記のバイオアッセイでスクリーニングして、この活性化合物がどこに含まれているか、及び同定を行った。上記化合物の同定を確認するために、LCMSやNMR等の追加の分光分析データを加えて記録した。活性画分5を、さらにHPLCC18カラムフェノメネックス社、ルナ、10uC18100A250x30、水:アセトニトリルグラジエント溶媒系0~10分;80水溶性のCH3CN10~25分;80~65の水性CH3CN25~50分;65~50の水性CH3CN50~60分;50~70の水性CH3CN60~80分;70~0の水性CH3CN80~85分;0~20の水性CH3CNを使用し、流速8mL分及び210nmのUV検出を行った。保持時間5564分にテンプラミドA、保持時間6359分にFR901465、保持時間6665分にFR90128が、それぞれ検出された。他の活性画分6もまた、HPLCC18カラムフェノメネックス社、ルナ、10uC18100A250x30を使用し、水:アセトニトリルグラジエント系0~10分;70~60水性CH3CN、10~20分;60~40の水性CH3CN、25~50分;40~15の水性CH3CN、50~75分;15~0の水性CH3CN、75~85分;0~70の水性CH3CNを使用し、流速8mL分、210nmでUV検出を行った。保持時間3855分に、テンプラミドBが検出された。純粋な化合物の質量分析は、サーモフィニガンLCQDecaXPPlusエレクトロスプレーESI装置上で、陽イオンモード及び陰イオンモードの双方を用いたフルスキャンモードmz100~1500Daにて、LCQDECAXPplus質量分析計サーモエレクトロン社、サンノゼ、カリフォルニアで行った。フィニガンサーベイヤーPDAプラス検出器、オートサンプラープラス、MSポンプ及び46mmx100mmのルナC18の5μmカラムフェノメネックスを装備したサーモ高速液体クロマトグラフィーHPLC装置を使用した。溶媒系は水溶媒Aとアセトニトリル溶媒Bとした。移動相は、10の溶媒Bで始まり、20分以上かけて、直線的に100溶媒Bまで上昇させ、4分間維持した。最後に、3分以上かけて10溶媒Bに戻り、3分間維持した。流速は05mL/分とした。注入量は10μLとし、サンプルをオートサンプラー中で室温に維持した。LC及び逆相クロマトグラフィーを利用するLCMSによって上記化合物を分析した。本化合物の質量分析を、下記の条件で行った:窒素ガスの流速を、シースでは30arb、auxsweepガス流速では15arbにそれぞれ固定した。エレクトロスプレーイオン化は、スプレー電圧を5000V、キャピラリー電圧を450Vに設定した。キャピラリー温度を300°Cに設定した。XキャリバーXcaliburソフトウェアを使用して、データを分析した。活性化合物テンプラミドAは、陽性イオン化モードにおいて、55641MH及び57834MNaにおけるmzのピークに基づき、分子量555であった。テンプラミドBのための陽イオンモードにおけるLCMS分析では、537MH及び56065MNa、におけるmzイオンに基づき、分子量は537と推定された。化合物FR901465及びFR90128の分子量は、LCMS分析に基づいて、それぞれ523及び540が与えられた。1H、13C及び2DNMRスペクトルをブルカーの600MHzのグラジエントフィールドスペクトロメーターを使用して測定した。レファレンスは、内部標準であるテトラメチルシランTMS000ppmに設定した。テンプラミドAの構造解明のために、分子量が555である上記精製化合物を、600MHzのNMRを使用して分析したところ、1HNMRのδ値が、640639600597567554433377373370359347341244235226197181176142137116112104、13CNMRのδ値が、17392166061450613876135711299912620123359975822078227669712370797048698460984884368933093063285525882037181114901281941であった。上記13CNMRのスペクトルは28個の離散した炭素シグナルを示し、6個のメチル、4個のメチレン炭素、と5個のsp2を含む13個のメチン、4個の四級炭素に帰属された。1H、13CNMR及びHRESIMSデータの解釈から、分子式C28H45NO10が決定された。1H-1HCOSY、HMBC及びHMQCスペクトルデータは、下記の構造IIV及び2個の分離されたメチレン基及びシングレットメチル基を示した。これらの構造は、のちに使用する、上記化合物に平面構造を与える、キーHMBCthekeyHMBC相関と関連する。その構造は、まだ、文献にも報告されてはおらず、テンプラミドAとして指定されてもいない。このポリケチド分子は、2個のテトラヒドロピラノース環と、1個の共役アミドとを含む。1D及び2DNMRのスペクトルデータ分析によって与えられた基礎構造I~IV第2の除草性化合物のESIMS分析は、分子量537に相等する、53847MH及び56065MHにmzイオンを示した。この化合物の分子式C28H43NO9は、ESIMS及びNMRデーだ分析によって決定された。この化合物の1H及び13CNMRは、テンプラミドAにおけるカップリングしていないメチレン基の代わりに、新たに分離されたCH2が現れている点を除き、テンプラミドAに類似していた。43Hzの小さな初期のカップリング定数は、エポキシドメチレン基が存在するという特徴である。このエポキシドメチレンの存在は、テンプラミドAでの6098から、分子量537の化合物の4107への13CNMRのシフトから、さらに確認された。これら2つの化合物の間の分子式の相違は、エポキシド形成に続く水分子の除去によって合理的に説明される。このように、NMRとMS分析の基本に基づいて、新規化合物の構造が与えられ、テンプラミドBと特定された。構造解明のために、分子量523を有する画分5からの精製化合物を、600MHzのNMR装置を使用してさらに分析したところ、1HNMRのδ値が、641640601598568556433377375372365359355350244226204196181175137117104;及び13CNMRのδ値が、722216755144981389413584130141258512337995482197828766971317013696848834252368933113063259921202038181414931284であった。上記化合物の詳細な1H及び13CNMR分析は、この化合物が化合物テンプラミドBと非常によく似ているということを示唆した。唯一の相違は、エステル側鎖であり、アセテート部分が、側鎖中のプロピオネート部分の代わりに存在している点であった。詳細な1D及び2DNMRから、上記化合物FR901465の構造が公知の構造であることが確認された。LCMS分析に基づいて、画分5からの他の化合物は、陰イオンモードにおいて分子量が540であった。構造解明のために、分子量540を有する、画分5からの精製化合物を、500MHzNMR装置を使用してさらに分析したところ、1HNMRのδ値が622581569566565464431393322321315310269262226223174115112105102であり;13CNMRのδ値が、172991729316957169231675913074130121299312832734962955942577338393800354930903036292618591838180917931251であった。このNMRデータは、上記化合物が、アミノ基、エステル基、カルボン酸基、脂肪族メチル基、エチル基、メチレン基、オキシメチレン基、メチン基、オキシメチン基、及び硫黄族基を含むことを示唆した。詳細な1D及び2DNMR分析から、上記化合物FR90128の構造が既知の化合物であることが確認された。11.実施例11.テンプラミドA、テンプラミドB、FR901465、及びFR90128の除草効果テンプラミドA、B、FR901465及びFR90128の除草効果を、96のウェルプレートプラットフォームの中に植えた1週齢のイヌビエEchinochloacrusgalli及びレタスLactucasativaLの苗を使用して、実験室アッセイにより試験した。99μLの脱イオン水を入れた各ウェル中に、雑草の苗を1つずつ置き、各ウェル中に、上記の純粋な化合物のエタノール溶液10mgmlのアリコートを1μL添加し、プレートをフタで密封した。1μLのエタノールを加えた99μLの溶液を、陰性対照として使用した。8ウェルに植えた苗についてこの処理を行い、密閉したプレートを、人工光12時間の明/暗サイクル下、温室中でインキュベートした。5日後に、その結果を調べた。活性化合物で処理した全8個のウェルの雑草の苗は、緑色の組織を残すことなく枯れたが、陰性対照のウェルの苗は活発に成長した。テンプラミドAの除草活性は、雑草に対するよりも、レタスの苗に対して、わずかに低かった。一方、テンプラミドBはテンプラミドAよりも、レタスの苗広葉雑草のモデル系として使用したをよりよく制御した100。1ウェル当たり、10μgmL濃度表11.テンプラミドA、B、FR901465、FR90128の除草バイオアッセイデータ12.実施例12.活性化合物の殺虫作用テンプラミドA、テンプラミドB、FR901465、及びFR90128の殺虫効果は、200μLの固形の、シロイチモンジヨトウの人工飼料を、各ウェル中に入れたマイクロプレートを使用する、シロイチモンジヨトウの1齢期の幼虫による96ウェル飼料オーバーレイアッセイを使用した、実験室アッセイで試験した。飼料各ウェルごとに1個の試料の上部にピペットで100μLの各試験サンプルを載せ、表面が乾燥するまで試料を気流下で乾燥させた。各サンプルについて6個のウェルを使用して試験し、水及び市販のBtバチルスチューリンゲンシス産物を、陰性対照及び陽性対照として、それぞれ使用した。試験昆虫シロイチモンジヨトウ‐の1齢期の幼虫を1匹ずつ、各ウェルに入れ、上記プレートを通気孔を有するプラスチックカバーで覆った。昆虫を入れたプレートを、26°Cで6日間インキュベートし、毎日の死亡率を評価した。表12に示す結果に基づいて、テンプラミドA及びBは、それぞれ、40及び80の死亡率であった。1ウェル当たり、10μg/mL濃度表12.第1齢のシロイチモンジヨトウSpodopteraexiguaに対するテンプラミドA、B、FR901465、FR90128の殺虫バイオアッセイデータ実施例11.FR90128分子量540の抗真菌作用3種類の植物の病原性真菌ボトリチスシネレア、フィトフトラ属、モニリアフルクチコラプレートアッセイで試験した。プラグ法を使用して、プレートに真菌を接種した。真菌が定着し、増殖培地上で増殖し始めた後に、8個の滅菌フィルター濾紙ディスクを、円の端から約1cmの位置に、各プレート上に置いた。20、15、10、75、5、25及び125mgFR90128mLを含む10μLのエタノール溶液を濾紙ディスクに滴下し、そして、その溶液をエバポレートして蒸発させた。10μLの純エタノールを浸み込ませた1個のディスクを陰性対照として使用した。各アッセイを、3枚のディスクを使って行った。プレートを5日間、室温でインキュベートし、その後、抗真菌作用を異なる濃度のFR90128に対応する、各濾紙ディスク上周囲の阻止円を測定して記録した。その結果によると、FR90128は、モニリニアの増殖に対する効果はないが、ボトリチス及びとフィトフトラの双方に対しては、菌糸の成長の制御に効果を示した。ボトリチス及びフィロフトラについては、閾値濃度10mgmL及び125mgmLで、明らかな濃度依存性の増殖阻止があると考えられた図8。生物材料の寄託下記の生物材料を、ブタペスト条約の下、アメリカ合衆国イリノイ州61604、ペオリア、大学通り、1815北のアグリカルチュラルリサーチカルチャーコレクションAgriculturalResearchCultureCollectionに寄託し、下記の番号が付された。寄託受託番号寄託日バークホールデリア種A396NRRLB503192009年9月15日本株は、37CFR§114及び35USC§122の下、権限を有すると特許庁長官によって認められた者に、本特許出願の係属中に、上記培養物の入手が可能であることを保証する条件で寄託された。上記寄託物は、寄託菌株の実質的に純粋な培養物を意味する。上記寄託物は、対象出願の対応出願がされた国、又はその後続出願が出願された国における外国の特許法によって必要とされたときに、入手することができる。しかしながら、寄託物の入手可能性は、政府の措置によって付与された特許権を逸脱して、対象とされる発明を実施する権能を構成するものではないことを理解すべきである。本明細書で開示する特定の態様は、本発明の幾つかの態様を具体的に説明することを意図したものであるから、本明細書に記載し、クレームした発明は、本明細書に開示する特定の態様によって、範囲を何等制限されるものではない。いかなる均等の態様も本発明の範囲内に含まれるものとする。実際、前述した説明から、本明細書に示され、記載された態様に加えて、当業者は、本発明を様々に変形することができることは明らかである。こうした変形はまた、添付の特許請求の範囲内に含まれるものとする。抵触する場合には、定義を含む現在の開示に従うものとする。本明細書では種々の参考文献を引用しており、これらの開示は、引用によりすべて本明細書中に組み込まれる。引用された文献:AndersonetalThestructureofthiostreptonNature2252332351970AndraEndotoxinlikepropertiesofarhamnolipidexotoxinfromBurkholderiaplantariiimmunecellstimulationandbiophysicalcharacterizationBiolChem3873013102006ArenaetalThemechanismofactionofavermectinsinCaenorhabditiseleganscorrelationbetweenactivationofglutamatesensitivechloridecurrentmembranebindingandbiologicalactivityJParasitol812862941995AsolkaretalWeaklycytotoxicpolyketidesfromamarinederivedActinomyceteofthegenusStreptomycesstrainCNQ085JNatProd69175617592006BurkheadetalPyrrolnitrinproductionbybiologicalcontrolagentPseudomonascepaciaB37wincultureandincolonizedwoundsofpotatoesApplEnvironMicrobiol60203120391994BurkholderWHSourskinabacterialrotofonionbulbsPhytopathology401151171950CaballeroMelladoetalBurkholderiaunamaespnovanN2fixingrhizosphericandendophyticspeciesIntJSystEvolMicrobiol54116511722004CashionetalRapidmethodforbaseratiodeterminationofbacterialDNAAnalBiochem814614661977CasidaetalUSPatentNo6689357ChenetalBurkholderianodosaspnovisolatedfromrootnodulesofthewoodyBrazilianlegumesMimosabimucronataandMimosascabrellaIntJSystEvolMicrobiol57105510592007ChengACandCurrieBJMelioidosisepidemiologypathophysiologyandmanagementClinMicrobiol183834162005CoenyeTandPVandammePDiversityandsignificanceofBurkholderiaspeciesoccupyingdiverseecologicalnichesEnvironMicrobiol57197292003CompantetalDiversityandoccurenceofBurkholderiasppinthenaturalenvironmentFEMSMicrobiolRev326076262008DeLeyetalThequantitativemeasurementofDNAhybridizationfromrenaturationratesEurJBiochem121331421970DukeetalNaturalproductsassourcesforherbicidescurrentstatusandfuturetrendsWeedRes40991112000GerwicketalUSPatentNo7393812GottliebetalUSPatentNo4808207GougeetalUSPatentApplicationPubNo20030082147GuellaetalAlmazoleCanewindolealkaloidbearinganunusually25disubstitutedoxazolemoietyanditsputativebiogeneticprecursorsfromaSenegaleseDelesseriaceanseaweedHelvChimActa77199920061994GuellaetalIsolationsynthesisandphotochemicalpropertiesofalmazoloneanewindolealkaloidfromaredalgaofSenegalTetrahedron62116511702006HendersonPJandLardyHABongkrekicacidAninhibitoroftheadeninenucleotidetranslocaseofmitochondriaJBiolChem245131913261970HirotaetalIsolationofindolmycinanditsderivativesasantagonistsofLtryptophanAgriBiolChem421471511978HuFPandYoungJMBiocidalactivityinplantpathogenicAcidovoraxBurkholderiaHerbaspirillumRalstoniaandXanthomonassppJApplMicrobiol842632711998HussetalStudiesofthespectrophotometricdeterminationofDNAhybridizationfromrenaturationratesSystemApplMicrobiol41841921983JansiewiczWJandRoitmanJBiologicalcontrolofbluemoldandgraymoldonappleandpearwithPseudomonascepaciaPhytopathology78169717001988JeddelohetalWO2001055398JansenetalThiangazoleanovelinhibitorofHIV1fromPolyangiumSpecLiebigsAnnChem435733591992JeongetalToxoflavinproducedbyBurkholderiaglumaecausingricegrainrotisresponsibleforinducingbacterialwiltinmanyfieldcropsPlantDisease878908952003KnudsenGRandSpurrJFieldpersistenceandefficacyoffivebacterialpreparationsforcontrolofpeanutleafspotPlantDisease714424451987KogaBanetalcDNAsequencesofthreekindsofbetatubulinsfromriceDNAResearch221261995KoideetalUSPatentApplicationPubNo20080096879KoyamaetalIsolationcharacterizationandsynthesisofpimprininepimrinrthineandpimprinaphinemetabolitesofStreptoverticilliumolivoreticuliAgriBiolChem45128512871981KriegetalBacillusthuringiensisvartenebrionisEinneuergegenuberLarvenvonColeopterenwirksamerPathotypZAngewEntomol965005081983KunzeetalThiangazoleanewthiazolineantibioticfromPolyangiumspcepaciaisolatesfrompatientswithcysticfibrosisintheUnitedKingdomandtheRepublicofIrelandJMedMicrobiol442032101996RametteetalSpeciesabundanceanddiversityofBurkholderiacepaciacomplexintheenvironmentApplEnvironMicrobiol71119312012005ResietalBurkholderiatropicaspnovanovelnitrogenfixingplantassociatedbacteriumIntJSystEvolMicrobiol54215521622004SalamaetalPotencyofsporegammaendotoxincomplexesofBacillusthuringiensisagainstsomecottonpestsZAngewEntomol913883981981SelvaetalTargetedscreeningforelongationfactorTubindingantibioticsJAntibiot5022261997TakahashiSetalMartefraginAanovelindolealkaloidisolatedfromaredalgainhibitslipidperoxidationChemPharmBull46152715291998ThompsonetalSpinosadacasestudyanexamplefromanaturalproductsdiscoveryprogrammePestManagementScience566967022000TakitaetalChemistryofBleomycinXIXRevisedstructuresofbleomycinandphleomycinJAntibiot318018041978TranVanetalRepeatedbeneficialeffectsofriceinoculationwithastrainofBurkholderiavietnamiensisonearlyandlateyieldcomponentinlowfertilitysulphateacidsoilsofVietnamPlantandSoil2182732842000TsuruoetalRhizoxinamacrocycliclactoneantibioticasanewantitumoragentagainsthumanandmurinetumorcellsandtheirvincristineresistantsublinesCancerRes463813851986UedaetalUSPatentNo7396665UmeharaKetalStudiesofnewantiplateletagentsWS30581AandBJAntibiot37115311601984VandammeetalPolyphasictaxonomicstudyoftheemendedgenusArcobacterwithArcobacterbutzlericombnovandArcobacterskirrowiispnovanaerotolerantbacteriumisolatedfromveterinaryspecimensIntJSystBacteriol423443561992VanderwalletalAmodelofthestructureofHOOCobleomycinboundtodrecognitionatthedsiteandimplicationsfordoublestrandedDNAcleavageChemBiol43733871997VermisKetalEvaluationofspeciesspecificrecAbasedPCRtestsforgenomovarlevelidentificationwithintheBurkholderiacepaciacomplexJMedMicrobiol519379402002WatanabeHetalAnewantibioticSF2583A4chloro5oxazoleproducedbyStreptomycesMeijiSeikaKenkyuNenpo2755621988WayneetalReportoftheAdHoccommitteeonreconciliationofapproachestobacterialsystematicsIntJSystEvolMicrobiol374634641987WerneretalUptakeofindolmyciningrampositivebacteriaAntimicrobAgentsChemotherapy188588621980WilsonetalToxicityofrhizoninAisolatedfromRhizopusmicrosporusinlaboratoryanimalsFoodChemToxicol222752811984ZeckWMEinBonitierungsschemazurFeldauswertungvonWurzelgallenbefallPflanzenschutznachrichtenBayer2411441471971ZhangetalUSPatentNo7141407ZhouetalAntimicrobialsusceptibilityandsynergystudiesofBurkholderiacepaciacomplexisolatedfrompatientswithcysticfibrosisAntimicrobialAgentsandChemotherapy5110850882007"