"生理的条件下でbcl-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする第一のオリゴヌクレオチドを含む組成物。第一のオリゴヌクレオチドが、配列番号3、7、8および9からなる群から選択される、請求項1に記載の組成物。第一のオリゴヌクレオチドにおけるシトシン塩基の少なくとも1つが、5-メチルシトシンである、請求項1に記載の組成物。第一のオリゴヌクレオチドにおけるシトシン塩基の全てが、5-メチルシトシンである、請求項3に記載の組成物。bcl-2遺伝子のプロモーター領域に対する、第一のオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションが、該bcl-2遺伝子の発現を阻害する、請求項1に記載の組成物。bcl-2遺伝子は細胞の染色体上にあり、bcl-2遺伝子のプロモーター領域に対する第一のオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションにより、細胞の増殖が低下する、請求項1に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドをさらに含む、請求項1に記載の組成物。CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが、5-メチルシトシンである、請求項7に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドが、配列番号3、7、8および9からなる群から選択され、該第二のオリゴヌクレオチドが、第一のオリゴヌクレオチドとは異なる、請求項7に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドが、第二の遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、該第二の遺伝子はbcl-2ではない、請求項7に記載の組成物。第二の遺伝子が発癌遺伝子である、請求項10に記載の組成物。発癌遺伝子が、c-ki-Ras、c-Ha-Ras、c-myc、Her-2およびTGF-αからなる群から選択される、請求項11に記載の組成物。配列番号1のヌクレオチド1~40の間、配列番号1のヌクレオチド161~350の間、配列番号1のヌクレオチド401~590の間、および配列番号1のヌクレオチド1002~1260の間からなる群から選択される位置で、bcl-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物。ai配列番号3、7、8および9からなる群から選択されるオリゴヌクレオチド、およびiibcl-2遺伝子を発現できる細胞であって、該細胞が増殖できる細胞、を提供すること、ならびにb該細胞に該オリゴヌクレオチドを導入すること、を含む方法。投与により、細胞の増殖低下がもたらされる、請求項14に記載の方法。投与により、bcl-2遺伝子の発現阻害がもたらされる、請求項14に記載の方法。細胞が癌細胞である、請求項14に記載の方法。細胞が宿主動物中に存在する、請求項14に記載の方法。宿主動物が非ヒト哺乳動物である、請求項18に記載の方法。宿主動物がヒトである、請求項18に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、0.01μgから100gの間の投与量で宿主動物に導入される、請求項18に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、体重1kg当り1mgから100mgの間の投与量で宿主動物に導入される、請求項18に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、1日当り1回以上宿主動物に導入される、請求項18に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、宿主動物に連続的に導入される、請求項18に記載の方法。細胞が細胞培養物中に存在する、請求項14に記載の方法。細胞に試験化合物を導入するステップをさらに含む、請求項14に記載の方法。試験化合物が公知の化学療法剤である、請求項27に記載の方法。癌が、膵癌、大腸癌、乳癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前立腺、リンパ腫、卵巣および黒色腫からなる群から選択される、請求項17に記載の方法。オリゴヌクレオチドを細胞に導入するための薬物送達系を提供することをさらに含む、請求項19に記載の方法。薬物送達系がリポソームを含んでおり、該リポソームは、中性脂肪および脂質様化合物からなる群から選択される、請求項29に記載の方法。薬物送達系が細胞標的成分を含む、請求項29に記載の方法。細胞標的化合物が、細胞表面受容体に関するリガンドおよび核受容体に関するリガンドからなる群から選択される、請求項31に記載の方法。薬物送達系が、インビボで使用するためのものであり、オリゴヌクレオチドおよびリポソームが、体重1kg当り2:1から1:3/1μgから100mgの比率で存在する、請求項29に記載の方法。aibcl-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチド、およびiibcl-2遺伝子を含む細胞、を提供すること、およびb該細胞に該オリゴヌクレオチドを導入すること、を含む方法。オリゴヌクレオチドが、配列番号1のヌクレオチド1~40の間、配列番号1のヌクレオチド161~350の間、配列番号1のヌクレオチド401~590の間、および配列番号1のヌクレオチド1002~1260の間からなる群から選択される位置で、bcl-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする、請求項34に記載の方法。オリゴヌクレオチドが15塩基長から30塩基長の間である、請求項34に記載の方法。オリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンである、請求項34に記載の方法。オリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の全てが5-メチルシトシンである、請求項34に記載の方法。c-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域に生理的条件下でハイブリダイズする第一のオリゴヌクレオチドを含む組成物。第一のオリゴヌクレオチドが、配列番号47、48、50および53からなる群から選択される、請求項39に記載の組成物。第一のオリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンである、請求項39に記載の組成物。該第一のオリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の全てが5-メチルシトシンである、請求項41に記載の組成物。c-ki-Rasのプロモーター領域に対する第一のオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションが、該c-ki-Ras遺伝子の発現を阻害する、請求項42に記載の組成物。c-ki-Ras遺伝子が細胞の染色体上にあって、該c-ki-Rasのプロモーター領域に対する第一のオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションが、該細胞の増殖を低下させる、請求項43に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドをさらに含む、請求項39に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンである、請求項45に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドは、配列番号47、48、50および53からなる群から選択され、該第二のオリゴヌクレオチドは第一のオリゴヌクレオチドとは異なる、請求項45に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドが第二の遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、該第二の遺伝子はc-ki-Rasではない、請求項45に記載の組成物。第二の遺伝子が発癌遺伝子である、請求項48に記載の組成物。発癌遺伝子が、c-Ha-Ras、c-myc、Her-2、TGF-αおよびbcl-2からなる群から選択される、請求項49に記載の組成物。配列番号46のヌクレオチド1から289の間、および配列番号46のヌクレオチド432から658の間からなる群から選択される位置で、c-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物。ai配列番号47、48、50および53からなる群から選択されるオリゴヌクレオチド、およびiic-ki-Ras遺伝子を含む細胞であって、該c-ki-ras遺伝子は発現可能であり、該細胞は増殖可能である細胞、を提供すること、ならびにb該細胞に該オリゴヌクレオチドを導入すること、を含む方法。導入により、該細胞の増殖低下がもたらされる、請求項52に記載の方法。導入により、c-ki-Ras遺伝子の発現阻害がもたらされる、請求項52に記載の方法。細胞が癌細胞である、請求項53に記載の方法。細胞が宿主動物に存在する、請求項53に記載の方法。宿主動物が非ヒト哺乳動物である、請求項56に記載の方法。宿主動物がヒトである、請求項56に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、0.01μgから100gの間の投与量で宿主動物に導入される、請求項56に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、体重1kg当り1mgから100mgの間の投与量で宿主動物に導入される、請求項56に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、1日当り1回以上、宿主動物に導入される、請求項56に記載の方法。オリゴヌクレオチドが宿主動物に連続的に導入される、請求項56に記載の方法。細胞が細胞培養物中に存在する、請求項52に記載の方法。細胞に試験化合物を導入するステップをさらに含む、請求項52に記載の方法。試験化合物が公知の化学療法剤である、請求項64に記載の方法。癌が、膵癌、大腸癌、乳癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前立腺、リンパ腫、卵巣および黒色腫からなる群から選択される、請求項55に記載の方法。オリゴヌクレオチドを細胞に導入するための薬物送達系を提供することをさらに含む、請求項57に記載の方法。薬物送達系がリポソームを含んでおり、該リポソームは中性脂肪および脂質様化合物からなる群から選択される、請求項67に記載の方法。薬物送達系が細胞標的成分を含む、請求項67に記載の方法。細胞標的化合物が、細胞表面受容体に関するリガンドおよび核受容体に関するリガンドからなる群から選択される、請求項69に記載の方法。薬物送達系はインビボで使用するためのものであって、オリゴヌクレオチドおよびリポソームが体重1kg当り2:1から1:3/1μgから100mgの比率で存在する、請求項67に記載の方法。aic-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチド、およびiic-ki-Ras遺伝子を含む細胞、を提供すること、ならびにb該細胞に該オリゴヌクレオチドを導入すること、を含む方法。オリゴヌクレオチドが、配列番号46のヌクレオチド1から289の間、および配列番号46のヌクレオチド432から658の間からなる群から選択される位置でc-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする、請求項72に記載の方法。オリゴヌクレオチドが15塩基長から30塩基長の間である、請求項72に記載の方法。オリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンである、請求項72に記載の方法。オリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の全てが5-メチルシトシンである、請求項72に記載の方法。生理的条件下でc-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする第一のオリゴヌクレオチドを含む組成物。第一のオリゴヌクレオチドが、配列番号110、111、112、113、114および115からなる群から選択される、請求項77に記載の組成物。第一のオリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンである、請求項77に記載の組成物。第一のオリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の全てが5-メチルシトシンである、請求項79に記載の組成物。c-myc遺伝子のプロモーター領域に対する第一のオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションが、該c-myc遺伝子の発現を阻害する、請求項80に記載の組成物。c-myc遺伝子が細胞の染色体上にあって、該c-myc遺伝子のプロモーター領域に対する第一のオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションにより、細胞の増殖が低下する、請求項81に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドをさらに含む、請求項77に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンである、請求項83に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドが配列番号110、111、112、113、114および115からなる群から選択され、該第二のオリゴヌクレオチドは第一のオリゴヌクレオチドとは異なる、請求項83に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドが第二の遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、該第二の遺伝子はc-mycではない、請求項83に記載の組成物。第二の遺伝子が発癌遺伝子である、請求項86に記載の組成物。発癌遺伝子が、c-ki-Ras、c-Ha-Ras、bcl-2、Her-2およびTGF-αからなる群から選択される、請求項87に記載の組成物。配列番号108のヌクレオチド3から124の間、および配列番号108のヌクレオチド165から629の間からなる群から選択される位置で、c-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする、オリゴヌクレオチドを含む組成物。ai配列番号110、111、112、113、114および115からなる群から選択されるオリゴヌクレオチド、およびiic-myc遺伝子を含む細胞であって、該c-myc遺伝子は発現が可能であり、該細胞は増殖が可能である細胞、を提供すること、ならびにb該細胞に該オリゴヌクレオチドを導入すること、を含む方法。導入により、細胞の増殖低下がもたらされる、請求項90に記載の方法。導入により、c-myc遺伝子の発現阻害がもたらされる、請求項90に記載の方法。細胞が癌細胞である、請求項90に記載の方法。細胞が宿主動物に存在する、請求項90に記載の方法。宿主動物が非ヒト哺乳動物である、請求項94に記載の方法。宿主動物がヒトである、請求項94に記載の方法。オリゴヌクレオチドが0.01μgから100gの間の投与量で宿主動物に導入される、請求項94に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、体重1kg当り1mgから100mgの間の投与量で宿主動物に導入される、請求項94に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、1日当り1回以上、宿主動物に導入される、請求項94に記載の方法。オリゴヌクレオチドが宿主動物に連続的に導入される、請求項94に記載の方法。細胞が細胞培養物中に存在する、請求項90に記載の方法。細胞に試験化合物を導入するステップをさらに含む、請求項90に記載の方法。試験化合物が公知の化学療法剤である請求項102に記載の方法。癌が、膵癌、大腸癌、乳癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前立腺、リンパ腫、卵巣および黒色腫からなる群から選択される、請求項93に記載の方法。薬物送達系を提供することをさらに含む、請求項14に記載の方法。薬物送達系はリポソームを含んでおり、該リポソームは中性脂肪および脂質様化合物からなる群から選択される、請求項105に記載の方法。薬物送達系が細胞標的成分を含む、請求項105に記載の方法。細胞標的化合物が細胞表面受容体に関するリガンドおよび核受容体に関するリガンドからなる群から選択される、請求項107に記載の方法。薬物送達系がインビボで使用するためのものであって、オリゴヌクレオチドおよびリポソームは体重1kg当り2:1から1:3/1μgから100mgの比率で存在する、請求項105に記載の方法。aic-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチド、およびiic-myc遺伝子を含む細胞、を提供すること、ならびにb該細胞に該オリゴヌクレオチドを導入すること、を含む方法。オリゴヌクレオチドが、配列番号108のヌクレオチド3から124の間、および配列番号108のヌクレオチド165から629の間からなる群から選択される位置で、c-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする、請求項110に記載の方法。オリゴヌクレオチドが15塩基長から30塩基長の間にある、請求項110に記載の方法。オリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンである、請求項110に記載の方法。オリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の全てが5-メチルシトシンである、請求項110に記載の方法。生理的条件下でc-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする第一のオリゴヌクレオチドを含む組成物。第一のオリゴヌクレオチドが、配列番号67、68、69、71、73、74、76、78、84、160、161および162からなる群から選択される、請求項115に記載の組成物。第一のオリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンである、請求項115に記載の組成物。第一のオリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の全てが5-メチルシトシンである、請求項115に記載の組成物。c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域に対する第一のオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションが、該c-Ha-ras遺伝子の発現を阻害する、請求項118に記載の組成物。c-Ha-ras遺伝子は細胞の染色体上にあって、該c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域に対する第一のオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションが該細胞の増殖を低下させる、請求項119に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドをさらに含む、請求項115に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンである、請求項121に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドが配列番号67、68、69、71、73、74、76、78、84、160、161および162からなる群から選択され、該第二のオリゴヌクレオチドが第一のオリゴヌクレオチドとは異なる、請求項121に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドが第二の遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、該第二の遺伝子はc-Ha-rasではない、請求項121に記載の組成物。第二の遺伝子が発癌遺伝子である、請求項124に記載の組成物。発癌遺伝子がc-ki-Ras、c-myc、bcl-2、Her-2およびTGF-αからなる群から選択される、請求項125に記載の組成物。配列番号66のヌクレオチド21から220の間、配列番号66のヌクレオチド233から860の間、配列番号66のヌクレオチド1411から1530の間、および配列番号66のヌクレオチド1631から1722の間からなる群から選択される位置で、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む、組成物。ai配列番号67、68、69、71、73、74、76、78、84、160、161および162からなる群から選択されるオリゴヌクレオチド、およびiic-Ha-ras遺伝子を含む細胞であって、該c-ki-ras遺伝子は発現が可能であり、該細胞は増殖が可能である細胞、を提供すること、ならびにb該細胞に該オリゴヌクレオチドを導入すること、を含む方法。導入により、細胞の増殖低下がもたらされる、請求項128に記載の方法。導入により、c-Ha-ras遺伝子の発現阻害がもたらされる、請求項128に記載の方法。細胞が癌細胞である、請求項128に記載の方法。細胞が宿主動物に存在する、請求項128に記載の方法。宿主動物が非ヒト哺乳動物である、請求項132に記載の方法。宿主動物がヒトである、請求項132に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、0.01μgから100gの間の投与量で宿主動物に導入される、請求項132に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、体重1kg当り1mgから100mgの間の投与量で宿主動物に導入される、請求項132に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、1日当り1回以上、宿主動物に導入される、請求項132に記載の方法。オリゴヌクレオチドが宿主動物に連続的に導入される、請求項132に記載の方法。細胞が細胞培養物中に存在する、請求項128に記載の方法。細胞に試験化合物を導入するステップをさらに含む、請求項128に記載の方法。試験化合物が公知の化学療法剤である、請求項140に記載の方法。癌が、膵癌、大腸癌、乳癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前立腺、リンパ腫、卵巣および黒色腫からなる群から選択される、請求項131に記載の方法。オリゴヌクレオチドを細胞に導入するための薬物送達系を提供することをさらに含む、請求項128に記載の方法。薬物送達系がリポソームを含んでおり、該リポソームは中性脂肪および脂質様化合物からなる群から選択される、請求項143に記載の方法。薬物送達系が細胞標的成分を含む、請求項143に記載の方法。細胞標的化合物が、細胞表面受容体に関するリガンドおよび核受容体に関するリガンドからなる群から選択される、請求項145に記載の方法。薬物送達系がインビボで使用するためのものであって、オリゴヌクレオチドおよびリポソームが体重1kg当り2:1から1:3/1μgから100mgの比率で存在する、請求項143に記載の方法。aic-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチド、およびiic-Ha-ras遺伝子を含む細胞、を提供すること、ならびにb該細胞に該オリゴヌクレオチドを導入すること、を含む方法。オリゴヌクレオチドが、配列番号66のヌクレオチド21~220の間、配列番号66のヌクレオチド233~860の間、配列番号66のヌクレオチド1411~1530の間および配列番号66のヌクレオチド1631~1722の間からなる群から選択される位置で、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする、請求項148に記載の方法。オリゴヌクレオチドが15塩基長から30塩基長の間にある、請求項148に記載の方法。オリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンである、請求項148に記載の方法。オリゴヌクレオチド中のシトシン塩基の全てが5-メチルシトシンである、請求項148に記載の方法。生理的条件下でHer-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする第一のオリゴヌクレオチドを含む組成物。オリゴヌクレオチドが、配列番号31、32、35、36、37および38からなる群から選択される、請求項153に記載の組成物。オリゴヌクレオチドが少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基のうちの少なくとも1つが5-メチルシトシンである、請求項153に記載の組成物。オリゴヌクレオチドのCGジヌクレオチド対の全てにおいてシトシン塩基の全てが、5-メチルシトシンである、請求項153に記載の組成物。Her-2遺伝子のプロモーター領域へのオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションが、該Her-2遺伝子の発現を阻害する、請求項153に記載の組成物。Her-2遺伝子が細胞の染色体上にあって、Her-2遺伝子のプロモーター領域へのオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションが該細胞の増殖を低下させる、請求項157に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドをさらに含む、請求項153に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドが、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、該CGジヌクレオチド対中のシトシン塩基のうちの少なくとも1つが5-メチルシトシンを含む、請求項159に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドが、配列番号31、32、35、36、37および38からなる群から選択される、請求項159に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドが第二の遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、該第二の遺伝子はHer-2ではない、請求項159に記載の組成物。第二の遺伝子が発癌遺伝子である、請求項163に記載の組成物。発癌遺伝子が、c-ki-Ras、c-Ha-Ras、bcl-2、c-mycおよびTGF-αからなる群から選択される、請求項163に記載の組成物。配列番号29のヌクレオチド205から344の間および配列番号29のヌクレオチド382から435の間からなる群から選択される位置で、c-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物。ai配列番号31、32、35、36、37および38からなる群から選択されるオリゴヌクレオチド、およびiiHer-2遺伝子を含む細胞、を提供すること、ならびにb該細胞に該オリゴヌクレオチドを投与すること、を含む方法。投与により、細胞の増殖低下がもたらされる、請求項166に記載の方法。投与により、Her-2遺伝子の発現阻害がもたらされる、請求項166に記載の方法。細胞が癌細胞である、請求項166に記載の方法。細胞が宿主動物に存在する、請求項166に記載の方法。宿主動物が非ヒト哺乳動物である、請求項170に記載の方法。宿主動物がヒトである、請求項170に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、0.01μgから100gの間の投与量で宿主動物に投与される、請求項170に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、体重1kg当り1mgから100mgの間の投与量で宿主動物に投与される、請求項170に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、1日当り1回以上、宿主動物に投与される、請求項170に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、宿主動物に連続的に投与される、請求項170に記載の方法。細胞が細胞培養物中に存在する、請求項166に記載の方法。細胞に試験化合物を投与するステップをさらに含む、請求項166に記載の方法。試験化合物が公知の化学療法剤である、請求項178に記載の方法。癌が、膵癌、大腸癌、乳癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前立腺、リンパ腫、卵巣および黒色腫からなる群から選択される、請求項169に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基のうちの少なくとも1つが5-メチルシトシンを含む請求項166に記載の方法。オリゴヌクレオチドのCGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の全てが5-メチルシトシンである、請求項166に記載の方法。薬物送達系を提供することをさらに含む、請求項166に記載の方法。薬物送達系がリポソームを含んでおり、該リポソームは中性脂肪または脂質様化合物を含む、請求項183に記載の方法。薬物送達系が特異的細胞標的成分を含む、請求項183に記載の方法。細胞標的化合物が、特異的な細胞表面受容体または核受容体に関するリガンドまたはリガンド様成分からなる群から選択される、請求項185に記載の方法。薬物送達系がインビボで使用するためのものであって、オリゴヌクレオチドおよびリポソームが、体重1kg当り2:1から1:3/1μgから100mgの比率で存在する、請求項183に記載の方法。aiHer-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチド、およびiiHer-2遺伝子を含む細胞、を提供すること、ならびにb該細胞に該オリゴヌクレオチドを投与すること、を含む方法。配列番号134、136、139、140、141、142、143および144からなる群から選択されるオリゴヌクレオチドを含む組成物。オリゴヌクレオチドが少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基のうちの少なくとも1つが5-メチルシトシンを含む、請求項189に記載の組成物。オリゴヌクレオチドの全てのCGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の全てが5-メチルシトシンである、請求項189に記載の組成物。オリゴヌクレオチドが生理的条件下でTGF-α遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする請求項189に記載の組成物。TGF-α遺伝子のプロモーター領域に対するオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションが、該TGF-α遺伝子の発現を阻害する、請求項192に記載の組成物。TGF-α遺伝子は細胞の染色体上にあり、TGF-α遺伝子のプロモーター領域に対するオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションが該細胞の増殖を低下させる、請求項193に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドをさらに含む、請求項189に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドは少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基のうちの少なくとも1つが5-メチルシトシンを含む請求項195に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドは、配列番号134、136、139、140、141、142、143および144からなる群から選択される、請求項195に記載の組成物。第二のオリゴヌクレオチドは第二の遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、該第二の遺伝子がTGF-αではない、請求項195に記載の組成物。第二の遺伝子が発癌遺伝子である、請求項198に記載の組成物。発癌遺伝子が、c-ki-Ras、c-Ha-Ras、bcl-2、Her-2およびc-mycからなる群から選択される、請求項199に記載の組成物。配列番号131のヌクレオチド1から90の間、配列番号131のヌクレオチド175から219の間、配列番号131のヌクレオチド261から367の間、配列番号131のヌクレオチド431から930の間、および配列番号131のヌクレオチド964から1237の間からなる群から選択される位置で、c-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物。生理的条件下でTGF-α遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物。ai配列番号134、136、139、140、141、142、143および144からなる群から選択されるオリゴヌクレオチド、およびiiTGF-α遺伝子を含む細胞、を提供すること、ならびにb該細胞に該オリゴヌクレオチドを投与すること、を含む方法。投与により、細胞の増殖低下がもたらされる、請求項203に記載の方法。投与により、TGF-α遺伝子の発現阻害がもたらされる、請求項203に記載の方法。細胞が癌細胞である、請求項203に記載の方法。細胞が宿主動物に存在する、請求項203に記載の方法。宿主動物が非ヒト哺乳動物である、請求項207に記載の方法。宿主動物がヒトである、請求項207に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、0.01μgから100gの間の投与量で宿主動物に投与される、請求項207に記載の方法。オリゴヌクレオチドが、体重1kg当り1mgから100mgの間の投与量で宿主動物に投与される、請求項207に記載の方法。オリゴヌクレオチドが1日当り1回以上宿主動物に投与される、請求項207に記載の方法。該オリゴヌクレオチドが宿主動物に連続的に投与される、請求項207に記載の方法。細胞が細胞培養物中に存在する、請求項203に記載の方法。細胞に試験化合物を投与するステップをさらに含む、請求項203に記載の方法。試験化合物が公知の化学療法剤である、請求項215に記載の方法。癌が、膵癌、大腸癌、乳癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前立腺、リンパ腫、卵巣および黒色腫からなる群から選択される、請求項206に記載の方法。オリゴヌクレオチドが少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基のうちの少なくとも1つが5-メチルシトシンを含む、請求項203に記載の方法。オリゴヌクレオチドのCGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の全てが、5-メチルシトシンである、請求項203に記載の方法。薬物送達系を提供することをさらに含む、請求項203に記載の方法。薬物送達系はリポソームを含んでおり、該リポソームが中性脂肪または脂質様化合物を含む、請求項230に記載の方法。薬物送達系が細胞標的成分を含む、請求項230に記載の方法。細胞標的化合物が、特異的細胞表面受容体または核受容体に本発明は、遺伝子発現の阻害に関する方法および組成物に関する。特に、本発明は、癌に関与する発癌遺伝子を阻害するためのオリゴヌクレオチドを基にした療法を提供する。いくつかの実施態様において、本発明は、生理的条件下で、bcl-3遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする第一のオリゴヌクレオチド例えば、配列番号1438、3、7、8または9を含む組成物を提供する。いくつかの実施態様において、第一のオリゴヌクレオチドにおけるシトシン塩基の少なくとも1つが、5-メチルシトシンである。いくつかの実施態様において、第一のオリゴヌクレオチドにおけるシトシン塩基の全てが、5-メチルシトシンである。いくつかの好ましい実施態様において、bcl-2遺伝子のプロモーター領域への第一のオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションにより、bcl-2遺伝子の発現が阻害される。いくつかの実施態様において、bcl-2遺伝子は細胞の染色体上に存在し、bcl-2遺伝子のプロモーター領域と第一のオリゴヌクレオチドとのハイブリダイゼーションは、該細胞の増殖を低下させる。いくつかの実施態様において、該組成物は、第二のオリゴヌクレオチドをさらに含む。いくつかの実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドにおけるシトシン塩基の少なくとも1つ例えば全てが、5-メチルシトシンである。いくつかの実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドは、配列番号3、7、8または9を含み、第一のオリゴヌクレオチドとは異なる例えば、第二のオリゴヌクレオチドが、配列番号3を有していれば、第一のオリゴヌクレオチドは、配列番号3以外の配列を有するなど。いくつかの実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドは、第二の遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、該第二の遺伝子はbcl-2ではない。いくつかの実施態様において、第二の遺伝子は、発癌遺伝子例えば、c-ki-Ras、c-Ha-Ras、c-myc、Her-2、またはTGF-αである。別の実施態様において、本発明は、配列番号1のヌクレオチド1から40の間、配列番号1のヌクレオチド161から350の間、配列番号1のヌクレオチド401から590の間、配列番号1のヌクレオチド1002から1260の間を含む位置で、bcl-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を提供する。さらに他の実施態様において、本発明は、オリゴヌクレオチド例えば、配列番号1438、3、7、8または9;および、増殖可能で発現可能なbcl-2遺伝子を含む細胞を提供すること;および該細胞にオリゴヌクレオチドを導入することを含む方法を提供する。いくつかの実施態様において、該導入により細胞の増殖低下がもたらされる。特定の実施態様において、該導入により、bcl-2遺伝子発現の阻害がもたらされる。いくつかの実施態様において、該細胞は癌細胞である。いくつかの実施態様において、該細胞は、宿主動物例えば、非ヒト哺乳動物またはヒト中に存在する。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、体重1kg当たり、0.01μgから100gの間、好ましくは、1mgから100mgの間の投与量で、宿主動物に導入される。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、1日1回以上、宿主動物に導入される。他の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、連続的に宿主動物に導入される。さらなる実施態様において、該細胞は、細胞培養物中に存在する。いくつかの実施態様において、該方法は、該細胞に試験化合物を導入するステップをさらに含む。いくつかの実施態様において、該試験化合物は、公知の化学療法剤である。いくつかの実施態様において、前記癌は、膵癌、大腸癌、乳癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前立腺、リンパ腫、卵巣または黒色腫である。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドにおけるシトシン塩基の少なくとも1つ例えば、全てが、5-メチルシトシンである。いくつかの実施態様において、本方法は、薬物送達系をさらに提供する。いくつかの実施態様において、該薬物送達系は、リポソーム例えば、中性脂肪または脂質様化合物を含むリポソームを含む。いくつかの実施態様において、該薬物送達系は、細胞標的成分例えば、細胞表面受容体または核受容体に対するリガンドまたはリガンド様分子を含む。特定の実施態様において、該薬物送達系は、インビボで使用するためのものであり、オリゴヌクレオチドおよびリポソームは、体重1kg当たり、2:1から1:3/1μgから100mgの比率で存在する。本発明は、bcl-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチド;およびbcl-2遺伝子を含む細胞を提供すること;そして該オリゴヌクレオチドを該細胞に導入することを含む方法を、さらに提供する。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つは、5-メチルシトシンである。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、bcl-2遺伝子のプロモーター領域に、完全に相補的である。他の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、bcl-2遺伝子のプロモーター領域に、部分的に相補的である。例えば、特定の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、bcl-2遺伝子のプロモーター領域に対して、1つの誤対合を含有する。いくつかの好ましい実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、bcl-2遺伝子のプロモーター領域に対してのみ相補的であり、ヒトゲノムの他の領域に対しては、完全に相補的であることはない。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、10ヌクレオチド長から60ヌクレオチド長の間であり、好ましくは、15ヌクレオチド長から35ヌクレオチド長の間である。いくつかの実施態様において、該方法は、薬物送達系をさらに提供する。いくつかの実施態様において、該薬物送達系は、リポソーム例えば、中性脂肪または脂質様化合物を含むリポソームを含む。いくつかの実施態様において、該薬物送達系は、細胞標的成分例えば、細胞表面受容体または核受容体に対するリガンドまたはリガンド様分子を含む。特定の実施態様において、該薬物送達系は、インビボで使用するためのものであり、該オリゴヌクレオチドおよび該リポソームは、体重1kg当たり、2:1から1:3/1μgから100mgの比率で存在する。さらなる実施態様において、本発明は、生理的条件下で、bcl-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を提供する。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つは、5-メチルシトシンである。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、bcl-2遺伝子のプロモーター領域に、完全に相補的である。他の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、bcl-2遺伝子のプロモーター領域に、部分的に相補的である。例えば、特定の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、bcl-2遺伝子のプロモーター領域に対して、1つの誤対合を含有する。いくつかの好ましい実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、bcl-2遺伝子のプロモーター領域に対してのみ相補的であり、ヒトゲノムの他の領域に対しては、完全に相補的であることはない。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、10ヌクレオチド長から60ヌクレオチド長の間であり、好ましくは、15ヌクレオチド長から35ヌクレオチド長の間である。本発明は、生理的条件下、bcl-2遺伝子の発現が阻害されるような条件下で、bcl-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を、さらに提供する。本発明は、生理的条件下、細胞の増殖が低下するような条件下で、該細胞の染色体上にあるbcl-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を、さらに提供する。また、本発明は、生理的条件下で、bcl-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンである第一オリゴヌクレオチド;および、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンである第二オリゴヌクレオチド、を含む組成物を提供する。特定の実施態様において、本発明は、生理的条件下に、bcl-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対中のシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンであるオリゴヌクレオチドを含むキット;ならびに、細胞の染色体上にbcl-2遺伝子を含む該細胞の増殖を低下させるか、または遺伝子発現を阻害するためのキットの使用説明書を提供する。いくつかの実施態様において、該キット内の組成物は、対象における癌を治療するために使用され、該説明書は、対象における癌を治療するためにキットを使用するための説明書を含む。いくつかの実施態様において、該説明書は、医薬品の表示に関する米国食品医薬品局により要求された説明書である。また、本発明は、癌と診断された対象からの生物学的サンプルおよびサンプル中の発癌遺伝子の発現の有無を検出する試薬を提供すること;サンプル中の発癌遺伝子の発現の有無を検出すること;生理的条件下、生物学的サンプル中に発現した発癌遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、少なくとも1つのCGジヌクレオチドを含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンであるオリゴヌクレオチドを対象に導入すること、を含む方法を提供する。本発明は、生理的条件下、生物学的サンプル中に発現した癌または過剰増殖疾患に関与する遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、少なくとも1つのCGジヌクレオチドを含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンであるオリゴヌクレオチドを提供すること;および該遺伝子の発現が阻害されるような条件下で、該オリゴヌクレオチドを対象に投与すること、を含む、対象における遺伝子の発現を阻害する例えば、癌または他の過剰増殖疾患を治療するための方法をさらに提供する。いくつかの実施態様において、該対象はヒトである。さらなる実施態様において、本発明は、疑わしい発癌遺伝子を含む細胞および該遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを提供すること;該オリゴヌクレオチドを該細胞に導入すること;そして該オリゴヌクレオチドの不在の場合と比較して、該オリゴヌクレオチドが存在した場合に該細胞の増殖が阻害されるかどうかを判定すること、を含む化合物のスクリーニング法を提供する。いくつかの実施態様において、該細胞は、細胞培養物例えば、癌細胞系中に存在する。他の実施態様において、該細胞は、宿主動物例えば、非ヒト哺乳動物中に存在する。いくつかの実施態様において、該方法は、ハイスループットスクリーニング法である。したがって、いくつかの実施態様において、本発明は、生理的条件下に、c-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする第一のオリゴヌクレオチド例えば、配列番号47、48、50または53を含む組成物を提供する。特定の実施態様において、第一のオリゴヌクレオチドのシトシン塩基の少なくとも1つ例えば全ては、5-メチルシトシンである。いくつかの実施態様において、c-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域に対する第一のオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションにより、c-ki-Ras遺伝子の発現が阻害される。特定の実施態様において、c-ki-Ras遺伝子は、細胞の染色体上にあり、c-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域に対する第一のオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションにより、該細胞の増殖が低下する。いくつかの実施態様において、該組成物は、第二のオリゴヌクレオチドをさらに含む。いくつかの実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドにおけるシトシン塩基の少なくとも1つは5-メチルシトシンである。他の実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドにおけるシトシン塩基の全てが5-メチルシトシンである。いくつかの実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドは、配列番号47、48、50または53を含み、第二のオリゴヌクレオチドは、第一のオリゴヌクレオチドとは異なる例えば、第二のオリゴヌクレオチドが、配列番号47の配列を有していれば、第一のオリゴヌクレオチドは、配列番号47以外の配列を有するなど。特定の実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドは、第二の遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、該第二の遺伝子は、c-ki-Rasではない。いくつかの実施態様において、第二の遺伝子は、発癌遺伝子例えば、これらに限定はしないが、c-Ha-Ras、c-myc、Her-2、またはTGF-α、およびbcl-2などである。さらに他の実施態様において、本発明は、配列番号46のヌクレオチド1から289の間、または配列番号46のヌクレオチド432から658の間を含む位置で、c-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を提供する。他の実施態様において、本発明は、c-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチド例えば、配列番号47、48、50または53を含むオリゴヌクレオチド;および発現可能なc-ki-Ras遺伝子を含み、増殖できる細胞を提供すること;そして該オリゴヌクレオチドを該細胞に導入すること、を含む方法を提供する。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つは、5-メチルシトシンである。他の実施態様において、該オリゴヌクレオチドのCGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の全てが、5-メチルシトシンである。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、配列番号46のヌクレオチド1から289の間、または配列番号46のヌクレオチド432から658の間を含む位置で、c-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、15塩基長から30塩基長の間である。いくつかの好ましい実施態様において、導入により細胞の増殖低下がもたらされる。いくつかの実施態様において、該導入により、c-ki-Ras遺伝子の発現阻害がもたらされる。いくつかの実施態様において、該細胞は癌細胞例えば、これらに限定はしないが、膵癌、大腸癌、乳癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前立腺、リンパ腫、卵巣、または黒色腫などである。いくつかの実施態様において、該細胞は、宿主動物中に存在する。いくつかの実施態様において、該宿主動物は、非ヒト哺乳動物である。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、体重1kg当たり、0.01μgから100gの間、好ましくは、1mgから100mgの間の投与量で、宿主動物に導入される。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、1日1回以上、宿主動物に導入される。他の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、連続的に例えば、2時間から2週間の間の期間宿主動物に導入される。他の実施態様において、該細胞は、細胞培養物中に存在する。いくつかの実施態様において、該方法は、該細胞に試験化合物を導入するステップをさらに含む。いくつかの実施態様において、該試験化合物は公知の化学療法剤である。いくつかの実施態様において、該方法は薬物送達系をさらに提供する。いくつかの実施態様において、該薬物送達系は、リポソーム例えば、中性脂肪または脂質様化合物を含むリポソームを含む。いくつかの実施態様において、該薬物送達系は、細胞標的成分例えば、細胞表面受容体または核受容体に対するリガンドまたはリガンド様分子を含む。特定の実施態様において、該薬物送達系は、インビボで使用するためのものであり、該オリゴヌクレオチドおよび該リポソームは、体重1kg当たり、2:1から1:3/1μgから100mgの比率で存在する。さらなる実施態様において、本発明は、生理的条件下で、c-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を提供し、該オリゴヌクレオチドにおけるシトシン塩基の少なくとも1つ例えば、全ては、5-メチルシトシンである。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、c-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域に、完全に相補的である。他の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、c-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域に、部分的に相補的である。例えば、特定の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、c-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域に対して、1つの誤対合を含有する。いくつかの好ましい実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、c-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域に対してのみ相補的であり、ヒトゲノムの他の領域に対しては、完全に相補的であることはない。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、10ヌクレオチド長から60ヌクレオチド長の間であり、好ましくは、15ヌクレオチド長から35ヌクレオチド長の間である。本発明は、生理的条件下にc-ki-Ras遺伝子の発現が阻害されるような条件下で、c-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を、さらに提供する。本発明は、生理的条件下、細胞の増殖が低下するような条件下で、該細胞の染色体にあるc-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を、さらに提供する。また、本発明は、生理的条件下で、c-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンである第一のオリゴヌクレオチド;少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンである第二のオリゴヌクレオチド、を含む組成物を提供する。特定の実施態様において、本発明は、生理的条件下に、c-ki-Ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンであるオリゴヌクレオチドを含むキット;ならびに、細胞の染色体上にc-ki-Ras遺伝子を含む、該細胞の増殖を低下させるかまたは遺伝子発現を阻害するためのキットの使用説明書を提供する。いくつかの実施態様において、該キット内の組成物は、対象における癌を治療するために使用され、該説明書は、対象における癌を処置するためのキットの説明書を含む。いくつかの実施態様において、該説明書は、医薬品表示に関する米国食品医薬品局により要求された説明書である。また、本発明は、次の工程を含む方法を提供する:癌と診断された対象からの生物学的サンプル、およびサンプル中の発癌遺伝子の発現の有無を検出する試薬を提供すること;サンプル中の発癌遺伝子の発現の有無を検出すること;生理的条件下で、生物学的サンプル中で発現した発癌遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチドを対象に投与すること。本発明は、対象における遺伝子の発現を阻害する例えば、癌または他の過剰増殖疾患を治療するために方法をさらに提供するものであって、生理的条件下、生物学的サンプル中で発現した癌または過剰増殖疾患に関与する遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、少なくとも1つのCGジヌクレオチドを含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチドを提供すること;そして、該遺伝子の発現が阻害されるような条件下で、該オリゴヌクレオチドを対象に投与すること、を含む方法を提供する。いくつかの実施態様において、該対象はヒトである。さらなる実施態様において、本発明は、次の工程を含む化合物のスクリーニング法を提供するものである;疑わしい発癌遺伝子を含む細胞、および該遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを提供すること;および該オリゴヌクレオチドを該細胞に投与すること;および該オリゴヌクレオチドの不在の場合と比較して、該オリゴヌクレオチドが存在した場合に該細胞の増殖が阻害されるかどうかを判定すること。いくつかの実施態様において、該細胞は、細胞培養物例えば、癌細胞系中に存在する。他の実施態様において、該細胞は、宿主動物例えば、非ヒト哺乳動物中に存在する。いくつかの実施態様において、該方法はハイスループットスクリーニング法である。いくつかの実施態様において、本発明は、生理的条件下、c-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする第一のオリゴヌクレオチド例えば、配列番号110、111、112、113、114または115を含む組成物を提供する。いくつかの実施態様において、第一のオリゴヌクレオチドのシトシン塩基の少なくとも1つ例えば全ては5-メチルシトシンである。いくつかの好ましい実施態様において、c-myc遺伝子のプロモーター領域に対する第一のオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションにより、c-myc遺伝子の発現が阻害される。いくつかの実施態様において、c-myc遺伝子は、細胞の染色体上にあり、c-myc遺伝子のプロモーター領域に対する第一のオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションにより、該細胞の増殖が低下する。いくつかの実施態様において、該組成物は、第二のオリゴヌクレオチドをさらに含む。いくつかの実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドにおけるシトシン塩基の少なくとも1つ例えば全ては、5-メチルシトシンである。いくつかの実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドは、配列番号110、111、112、113、114または115を含み、第二のオリゴヌクレオチドは、第一のオリゴヌクレオチドとは異なる例えば、第二のオリゴヌクレオチドが、配列番号110の配列を有していれば、第一のオリゴヌクレオチドは、配列番号110以外の配列を有するなど。いくつかの実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドは第二の遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、該第二の遺伝子はc-mycではない。いくつかの実施態様において、第二の遺伝子は発癌遺伝子例えば、c-ki-Ras、c-Ha-Ras、bcl-2、Her-2、またはTGF-αである。本発明は、配列番号108のヌクレオチド3から124の間、または配列番号108のヌクレオチド165から629の間を含む位置で、c-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を、さらに提供する。本発明は、生理的条件下、c-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチド例えば、配列番号110、111、112、113、114または115およびc-myc遺伝子を発現できるc-myc遺伝子を含んでおり、増殖できる細胞、を提供すること;そして、該オリゴヌクレオチドを該細胞に導入すること、を含む方法をさらに提供する。いくつかの実施態様において、該導入により、該細胞の増殖低下がもたらされる。特定の実施態様において、該導入により、c-myc遺伝子発現の阻害がもたらされる。いくつかの実施態様において、該細胞は癌細胞である。他の実施態様において、該細胞は、宿主動物例えば、非ヒト哺乳動物またはヒト中に存在する。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、体重1kg当たり、0.01μgから100gの間、好ましくは、1mgから100mgの間の投与量で、宿主動物に導入される。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、1日1回以上、宿主動物に導入される。他の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、連続的に宿主動物に導入される。さらなる実施態様において、該細胞は、細胞培養物中に存在する。いくつかの実施態様において、該方法は、該細胞に試験化合物を導入するステップをさらに含む。いくつかの実施態様において、該試験化合物は、公知の化学療法剤である。いくつかの実施態様において、前記癌は、膵癌、大腸癌、乳癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前立腺、リンパ腫、卵巣、または黒色腫である。いくつかの実施態様において、該方法は、薬物送達系をさらに提供する。いくつかの実施態様において、該薬物送達系は、リポソーム例えば、中性脂肪または脂質様化合物を含むリポソームを含む。いくつかの実施態様において、該薬物送達系は、細胞標的成分例えば、細胞表面受容体または核受容体に対するリガンドまたはリガンド様分子を含む。特定の実施態様において、該薬物送達系は、インビボで使用するためのものであり、該オリゴヌクレオチドおよび該リポソームは、体重1kg当たり、2:1から1:3/1μgから100mgの比率で存在する。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドにおけるシトシン塩基の少なくとも1つ、好ましくは全てが5-メチルシトシンである。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、10ヌクレオチド長から60ヌクレオチド長の間であり、好ましくは、15ヌクレオチド長から35ヌクレオチド長の間である。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、配列番号108のヌクレオチド3から124の間、または配列番号108のヌクレオチド165から629の間を含む位置で、c-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする。さらなる実施態様において、本発明は、生理的条件下で、c-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を提供し、該オリゴヌクレオチドは、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、該CGジヌクレオチド対中のシトシン塩基の少なくとも1つは5-メチルシトシンを含む組成物を提供する。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、c-myc遺伝子のプロモーター領域に、完全に相補的である。他の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、c-myc遺伝子のプロモーター領域に、部分的に相補的である。例えば、特定の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、c-myc遺伝子のプロモーター領域に対して、1つの誤対合を含有する。いくつかの好ましい実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、c-myc遺伝子のプロモーター領域に対してのみ相補的であり、ヒトゲノムの他の領域に対しては、完全に相補的であることはない。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、10ヌクレオチド長から60ヌクレオチド長の間であり、好ましくは、15ヌクレオチド長から35ヌクレオチド長の間である。本発明は、生理的条件下、c-myc遺伝子の発現が阻害されるような条件下で、c-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を、さらに提供する。本発明は、生理的条件下、細胞の増殖が低下するような条件下で、該細胞の染色体にあるc-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を、さらに提供する。また、本発明は、生理的条件下で、c-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンである第一のオリゴヌクレオチド;少なくとも1つのCGジヌクレオチドを含み、CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つは、5-メチルシトシンを含む第二のオリゴヌクレオチド、を含む組成物を提供する。特定の実施態様において、本発明は、生理的条件下に、c-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドであって、少なくとも1つのCGジヌクレオチドを含み、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチドを含むキット;ならびに、細胞の染色体上にc-myc遺伝子を含む該細胞の増殖を低下させるか、または遺伝子発現を阻害するためのキットの使用説明書を提供する。いくつかの実施態様において、該キット内の組成物は、対象における癌を治療するために使用され、該説明書は、対象における癌を処置するためのキットの説明書を含む。いくつかの実施態様において、該説明書は、医薬品表示に関する米国食品医薬品局により要求された説明書である。また、本発明は、癌と診断された対象からの生物学的サンプル、およびサンプル中の発癌遺伝子の発現の有無を検出する試薬を提供すること;サンプル中の発癌遺伝子の発現の有無を検出すること;そして、生理的条件下に、生物学的サンプル中に発現した発癌遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、少なくとも1つのCGジヌクレオチドを含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチドを対象に投与すること、を含む方法を提供する。本発明は、生理的条件下に、生物学的サンプル中に発現した癌または過剰増殖疾患に関与する遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドであって、少なくとも1つのCGジヌクレオチドを含み、CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチドを提供すること;および該遺伝子の発現が阻害されるような条件下で、該オリゴヌクレオチドを対象に投与することを含む、対象における遺伝子の発現を阻害する例えば、癌または他の過剰増殖疾患を治療するために方法をさらに提供する。いくつかの実施態様において、該対象はヒトである。さらなる実施態様において、本発明は、疑わしい発癌遺伝子を含む細胞および該遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを提供すること;および該オリゴヌクレオチドを該細胞に投与すること;および該オリゴヌクレオチドの不在の場合と比較して、該オリゴヌクレオチドが存在した場合に該細胞の増殖が阻害されるかどうかを判定することを含む、化合物のスクリーニング法を提供する。いくつかの実施態様において、該細胞は、細胞培養物例えば、癌細胞系中に存在する。他の実施態様において、該細胞は、宿主動物例えば、非ヒト哺乳動物中に存在する。いくつかの実施態様において、該方法は、ハイスループットスクリーニング法である。いくつかの実施態様において、本発明は、生理的条件下に、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする第一のオリゴヌクレオチド例えば、配列番号67、68、69、71、73、74、76、78、84、160、161、または162を含む組成物を提供する。いくつかの実施態様において、第一のオリゴヌクレオチドのシトシン塩基の少なくとも1つは、5-メチルシトシンである。いくつかの実施態様において、第一のオリゴヌクレオチドのシトシン塩基の全てが、5-メチルシトシンである。特定の実施態様において、第一のオリゴヌクレオチドは、生理的条件下で、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする。いくつかの好ましい実施態様において、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域と第一のオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションにより、c-Ha-ras遺伝子の発現が阻害される。いくつかの実施態様において、c-Ha-ras遺伝子は、細胞の染色体上にあり、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域への第一のオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションにより、該細胞の増殖が低下する。いくつかの実施態様において、該組成物は、第二のオリゴヌクレオチドをさらに含む。いくつかの実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドにおけるシトシン塩基の少なくとも1つ例えば、全ては、5-メチルシトシンである。いくつかの実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドは、配列番号67、68、69、71、73、74、76、78、84、160、161または162を含み、第一のオリゴヌクレオチドは、第二のオリゴヌクレオチドとは異なる例えば、第二のオリゴヌクレオチドが、配列番号67の配列を有していれば、第一のオリゴヌクレオチドは、配列番号67とは異なる配列を有するなど。いくつかの実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドは、第二の遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、第二の遺伝子は、c-Ha-rasではない。いくつかの実施態様において、第二の遺伝子は、発癌遺伝子例えば、c-ki-Ras、c-myc、bcl-2、Her-2、またはTGF-αである。本発明は、配列番号66のヌクレオチド21から220の間、配列番号66のヌクレオチド233から860の間、配列番号66のヌクレオチド1411から1530の間、または配列番号66のヌクレオチド1631から1722の間を含む位置で、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を、さらに提供する。さらに他の実施態様において、本発明は、生理的条件下、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチド例えば、配列番号67、68、69、71、73、74、76、78、84、160、161、または162;および発現可能な、c-Ha-ras遺伝子を含む細胞であって、増殖できる細胞、を提供すること;および該オリゴヌクレオチドを、該細胞に導入すること、を含む方法を提供する。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、15塩基長から30塩基長の間である。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、配列番号66のヌクレオチド21から220の間、配列番号66のヌクレオチド233から860の間、配列番号66のヌクレオチド1411から1530の間、または配列番号66のヌクレオチド1631から1722の間を含む位置で、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする。いくつかの実施態様において、該導入により、該細胞の増殖低下がもたらされる。特定の実施態様において、該導入により、c-Ha-ras遺伝子発現の阻害がもたらされる。いくつかの実施態様において、該細胞は癌細胞である。いくつかの実施態様において、前記癌は、膵癌、大腸癌、乳癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前立腺、リンパ腫、卵巣、または黒色腫である。他の実施態様において、該細胞は、宿主動物例えば、非ヒト哺乳動物またはヒト中に存在する。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、体重1kg当たり、0.01μgから100gの間、好ましくは、1mgから100mgの間の投与量で、宿主動物に導入される。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、1日1回以上、宿主動物に導入される。他の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、連続的に例えば、2時間から2週間の間の期間宿主動物に導入される。他の実施態様において、該細胞は、細胞培養物中に存在する。特定の実施態様において、該方法は、該細胞に試験化合物を導入するステップをさらに含む。いくつかの実施態様において、該試験化合物は、公知の化学療法剤である。いくつかの実施態様において、該方法は、薬物送達系をさらに提供する。いくつかの実施態様において、該薬物送達系は、リポソーム例えば、中性脂肪または脂質様化合物を含むリポソームを含む。いくつかの実施態様において、該薬物送達系は、細胞標的成分例えば、細胞表面受容体または核受容体に対するリガンドまたはリガンド様分子を含む。特定の実施態様において、該薬物送達系は、インビボで使用するためのものであり、該オリゴヌクレオチドおよび該リポソームは、体重1kg当たり、2:1から1:3/1μgから100mgの比率で存在する。さらなる実施態様において、本発明は、生理的条件下で、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を提供する。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドにおけるシトシン塩基の少なくとも1つ例えば全ては、5-メチルシトシンである。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域に、完全に相補的である。他の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域に、部分的に相補的である。例えば、特定の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域に対して、1つの誤対合を含有する。いくつかの好ましい実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域に対してのみ相補的であり、ヒトゲノムの他の領域に対しては、完全に相補的であることはない。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、10ヌクレオチド長から60ヌクレオチド長の間であり、好ましくは、15ヌクレオチド長から35ヌクレオチド長の間である。本発明は、生理的条件下、c-Ha-ras遺伝子の発現が阻害されるような条件下で、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を、さらに提供する。本発明は、生理的条件下、細胞の増殖が低下するような条件下で、該細胞の染色体にあるc-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を、さらに提供する。また、本発明は、生理的条件下で、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする第一のオリゴヌクレオチド、即ち少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチド;および第二のオリゴヌクレオチド、即ち少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチド、を含む組成物を提供する。特定の実施態様において、本発明は、生理的条件下で、c-Ha-ras遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチドを含むキット;ならびに、細胞の染色体上にc-Ha-ras遺伝子を含む該細胞の増殖を低下させるか、または遺伝子発現を阻害するためのキットの使用説明書を提供する。いくつかの実施態様において、該キット内の組成物は、対象における癌を治療するために使用され、該説明書は、対象における癌を処置するためのキットの使用説明書を含む。いくつかの実施態様において、該説明書は、医薬品表示に関する米国食品医薬品局により要求された説明書である。また、本発明は、癌と診断された対象からの生物学的サンプル、およびサンプル中の発癌遺伝子の発現の有無を検出する試薬を提供すること;生物学的サンプル中の発癌遺伝子の発現の有無を検出すること;生理的条件下に、生物学的サンプル中に発現した発癌遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチドを対象に投与すること、を含む方法を提供する。本発明は、生理的条件下、生物学的サンプル中に発現した癌または過剰増殖疾患に関与する遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドであって、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチドを提供すること;そして該遺伝子の発現が阻害されるような条件下で、該オリゴヌクレオチドを対象に投与すること、を含む、対象における遺伝子の発現を阻害する例えば、癌または他の過剰増殖疾患を治療するために方法をさらに提供する。いくつかの実施態様において、該対象はヒトである。さらなる実施態様において、本発明は、疑わしい発癌遺伝子を含む細胞、および該遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを提供すること;および該オリゴヌクレオチドを該細胞に投与すること;および該オリゴヌクレオチドの不在の場合と比較して、該オリゴヌクレオチドが存在した場合に該細胞の増殖が阻害されるかどうかを判定すること、を含む、化合物のスクリーニング法を提供する。いくつかの実施態様において、該細胞は、細胞培養物例えば、癌細胞系中に存在する。他の実施態様において、該細胞は、宿主動物例えば、非ヒト哺乳動物中に存在する。いくつかの実施態様において、該方法は、ハイスループットスクリーニング法である。いくつかの実施態様において、本発明は、配列番号31、32、35、36、37または38を含むオリゴヌクレオチドを含む組成物を提供する。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、少なくとも1つのCGヌクレオチド対を含み、CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含む。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドの全てのCGヌクレオチド対のシトシン塩基の全てが、5-メチルシトシンである。特定の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、生理的条件下で、Her-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする。いくつかの好ましい実施態様において、Her-2遺伝子のプロモーター領域に対する該オリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションにより、Her-2遺伝子の発現が阻害される。いくつかの実施態様において、Her-2遺伝子は、細胞の染色体上にあり、Her-2遺伝子のプロモーター領域に対する該オリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションにより、該細胞の増殖が低下する。いくつかの実施態様において、該組成物は、第二のオリゴヌクレオチドをさらに含む。いくつかの実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドは、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つは5-メチルシトシンである。いくつかの実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドは、配列番号31、32、35、36、37または38を含む。いくつかの実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドは、第二の遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、第二の遺伝子はHer-2ではない。いくつかの実施態様において、第二の遺伝子は、発癌遺伝子例えば、c-ki-Ras、c-myc、bcl-2、c-Ha-ras、またはTGF-αである。他の実施態様において、本発明は、配列番号29のヌクレオチド205から344の間、または配列番号29のヌクレオチド382から435の間を含む位置で、c-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を提供する。さらなる実施態様において、本発明は、生理的条件下で、Her-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を提供する。さらに他の実施態様において、本発明は、オリゴヌクレオチド例えば、配列番号31、32、35、36、37、または38;およびHer-2遺伝子を含む細胞を提供すること;および該オリゴヌクレオチドを該細胞に投与すること、を含む方法を提供する。いくつかの実施態様において、該投与により、該細胞の増殖低下がもたらされる。特定の実施態様において、該投与により、Her-2遺伝子発現の阻害がもたらされる。いくつかの実施態様において、該細胞は癌細胞である。他の実施態様において、該細胞は、宿主動物例えば、非ヒト哺乳動物またはヒト中に存在する。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、体重1kg当たり、0.01μgから100gの間、好ましくは、1mgから100mgの間の投与量で、宿主動物に投与される。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、1日1回以上、宿主動物に投与される。他の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、連続的に宿主動物に投与される。さらなる実施態様において、該細胞は、細胞培養物中に存在する。いくつかの実施態様において、該方法は、該細胞に試験化合物を投与するステップをさらに含む。いくつかの実施態様において、該試験化合物は、公知の化学療法剤である。いくつかの実施態様において、前記癌は、膵癌、大腸癌、乳癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前立腺、リンパ腫、卵巣、または黒色腫である。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つ、好ましくは全てが、5-メチルシトシンを含む。本発明は、Her-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチド;およびHer-2遺伝子を含む細胞を提供すること;そして該オリゴヌクレオチドを該細胞に投与すること、を含む方法をさらに提供する。さらなる実施態様において、本発明は、生理的条件下で、Her-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を提供するものであり、該オリゴヌクレオチドは、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つは5-メチルシトシンを含む。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、Her-2遺伝子のプロモーター領域に、完全に相補的である。他の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、Her-2遺伝子のプロモーター領域に、部分的に相補的である。例えば、特定の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、Her-2遺伝子のプロモーター領域に対して、1つの誤対合を含有する。いくつかの好ましい実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、Her-2遺伝子のプロモーター領域に対してのみ相補的であり、ヒトゲノムの他の領域に対しては、完全に相補的であることはない。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、10ヌクレオチド長から60ヌクレオチド長の間であり、好ましくは、15ヌクレオチド長から35ヌクレオチド長の間である。本発明は、生理的条件下、Her-2遺伝子の発現が阻害されるような条件下で、Her-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を、さらに提供する。本発明は、生理的条件下、細胞の増殖が低下するような条件下で、該細胞の染色体上にあるHer-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を、さらに提供する。また、本発明は、生理的条件下で、Her-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする第一のオリゴヌクレオチド、即ち少なくとも1つのCGジヌクレオチドを含み、CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つは、5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチド;および第二のオリゴヌクレオチド、即ち少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチド、を含む組成物を提供する。特定の実施態様において、本発明は、生理的条件下で、Her-2遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチドを含むキット;ならびに、細胞の染色体上にHer-2遺伝子を含む該細胞の増殖を低下させるか、または遺伝子発現を阻害するためのキットの使用説明書を提供する。いくつかの実施態様において、該キット内の組成物は、対象における癌を処置するために使用され、該説明書は、対象における癌を処置するためのキットの説明書を含む。いくつかの実施態様において、該説明書は、医薬品表示に関する米国食品医薬品局により要求された説明書である。また、本発明は、癌と診断された対象からの生物学的サンプルおよびサンプル中の発癌遺伝子の発現の有無を検出する試薬を提供すること;サンプル中の発癌遺伝子の発現の有無を検出すること;生理的条件下で、生物学的サンプル中に発現した発癌遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、少なくとも1つのCGジヌクレオチドを含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチドを対象に投与すること、を含む方法を提供する。本発明は、生理的条件下で、生物学的サンプル中に発現した癌または過剰増殖疾患に関与する遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドであって、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチドを提供すること;および該遺伝子の発現が阻害されるような条件下で、該オリゴヌクレオチドを対象に投与することを含む、対象における遺伝子の発現を阻害する例えば、癌または他の過剰増殖疾患を治療するために方法をさらに提供する。いくつかの実施態様において、該対象はヒトである。さらなる実施態様において、本発明は、疑わしい発癌遺伝子を含む細胞および該遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを提供すること;および該オリゴヌクレオチドを該細胞に投与すること;そして該オリゴヌクレオチドの不在の場合と比較して、該オリゴヌクレオチドが存在した場合に該細胞の増殖が阻害されるかどうかを判定することを含む、化合物のスクリーニング法を提供する。いくつかの実施態様において、該細胞は、細胞培養物例えば、癌細胞系中に存在する。他の実施態様において、該細胞は、宿主動物例えば、非ヒト哺乳動物中に存在する。いくつかの実施態様において、該方法は、ハイスループットスクリーニング法である。いくつかの実施態様において、本発明は、配列番号134、136、139、140、141、142、143、または144を含むオリゴヌクレオチドを含む組成物を提供する。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含む。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドの全てのCGヌクレオチド対におけるシトシン塩基の全てが5-メチルシトシンである。特定の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、生理的条件下で、TGF-α遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする。いくつかの実施態様において、TGF-α遺伝子のプロモーター領域への該オリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションにより、TGF-α遺伝子の発現が阻害される。いくつかの実施態様において、TGF-α遺伝子は、細胞の染色体上にあり、TGF-α遺伝子のプロモーター領域に対する該オリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションにより、該細胞の増殖が低下する。いくつかの実施態様において、該組成物は、第二のオリゴヌクレオチドをさらに含む。いくつかの実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドは、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つは、5-メチルシトシンを含む。いくつかの実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドは、配列番号134、136、139、140、141、142、143または144からなる群から選択される。他の実施態様において、第二のオリゴヌクレオチドは、第二の遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、第二の遺伝子は、TGF-αではない。さらなる実施態様において、第二の遺伝子は、発癌遺伝子例えば、c-ki-Ras、c-Ha-ras、bcl-2、Her-2、またはc-mycである。他の実施態様において、本発明は、配列番号131のヌクレオチド1から90の間、配列番号131のヌクレオチド175から219の間、配列番号131のヌクレオチド261から367の間、配列番号131のヌクレオチド431から930の間、または配列番号131のヌクレオチド964から1237の間を含む位置で、c-myc遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を提供する。さらに他の実施態様において、本発明は、生理的条件下、TGF-α遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を提供する。さらなる実施態様において、本発明は、オリゴヌクレオチド例えば、配列番号134、136、139、140、141、142、143、または144;およびTGF-α遺伝子を含む細胞を提供すること;および該オリゴヌクレオチドを、該細胞に投与すること、を含む方法を提供する。いくつかの実施態様において、該投与により、該細胞の増殖低下がもたらされる。特定の実施態様において、該投与により、TGF-α遺伝子発現の阻害がもたらされる。いくつかの実施態様において、該細胞は癌細胞である。他の実施態様において、該細胞は、宿主動物例えば、非ヒト哺乳動物またはヒト中に存在する。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、体重1kg当たり、0.01μgから100gの間、好ましくは、1mgから100mgの間の投与量で、宿主動物に投与される。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、1日1回以上、宿主動物に投与される。他の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、連続的に宿主動物に投与される。さらなる実施態様において、該細胞は、細胞培養物中に存在する。いくつかの実施態様において、該方法は、該細胞に試験化合物を投与するステップをさらに含む。いくつかの実施態様において、該試験化合物は、公知の化学療法剤である。いくつかの実施態様において、前記癌は、膵癌、大腸癌、乳癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前立腺、リンパ腫、卵巣、または黒色腫である。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含み、CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つ、好ましくは全てが、5-メチルシトシンを含む。本発明は、TGF-α遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドおよびTGF-α遺伝子を含む細胞を提供すること;そして該オリゴヌクレオチドを、該細胞に投与すること、を含む方法をさらに提供する。さらなる実施態様において、本発明は、生理的条件下で、TGF-α遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を提供し、該オリゴヌクレオチドは、少なくとも1つのCGジヌクレオチド地を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つは5-メチルシトシンを含む。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、TGF-α遺伝子のプロモーター領域に、完全に相補的である。他の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、TGF-α遺伝子のプロモーター領域に、部分的に相補的である。例えば、特定の実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、TGF-α遺伝子のプロモーター領域に対して、1つの誤対合を含有する。いくつかの好ましい実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、TGF-α遺伝子のプロモーター領域に対してのみ相補的であり、ヒトゲノムの他の領域に対しては、完全に相補的であることはない。いくつかの実施態様において、該オリゴヌクレオチドは、10ヌクレオチド長から60ヌクレオチド長の間であり、好ましくは、15ヌクレオチド長から35ヌクレオチド長の間である。本発明は、生理的条件下に、TGF-α遺伝子の発現が阻害されるような条件下で、TGF-α遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物をさらに提供する。本発明は、生理的条件下に、細胞の増殖が低下するような条件下で、該細胞の染色体上にあるTGF-α遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを含む組成物を、さらに提供する。また、本発明は、生理的条件下で、TGF-α遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズする第一のオリゴヌクレオチド、即ち少なくとも1つのCGジヌクレオチドを含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチド;および第二のオリゴヌクレオチド、即ち少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチド、を含む組成物を提供する。特定の実施態様において、本発明は、生理的条件下で、TGF-α遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドであって、少なくとも1つのCGジヌクレオチドを含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチドを含むキット;ならびに、細胞の染色体上にTGF-α遺伝子を含む該細胞の増殖を低下させるか、または遺伝子発現を阻害するためのキットの使用説明書を提供する。いくつかの実施態様において、該キット内の組成物は、対象における癌を処置するために使用され、該説明書は、対象における癌を処置するためのキットの説明書を含む。いくつかの実施態様において、該説明書は、医薬品表示に関する米国食品医薬品局により要求された説明書である。また、本発明は、癌と診断された対象からの生物学的サンプルおよびサンプル中の発癌遺伝子の発現の有無を検出する試薬を提供すること;サンプル中の発癌遺伝子の発現の有無を検出すること;生理的条件下、生物学的サンプル中に発現した発癌遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチドを対象に投与すること、を含む方法を提供する。本発明は、生理的条件下、生物学的サンプル中に発現した癌または過剰増殖疾患に関与する遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドであって、少なくとも1つのCGジヌクレオチド対を含んでおり、該CGジヌクレオチド対におけるシトシン塩基の少なくとも1つが5-メチルシトシンを含むオリゴヌクレオチドを提供すること;および該遺伝子の発現が阻害されるような条件下で、該オリゴヌクレオチドを対象に投与することを含む、対象における遺伝子の発現を阻害する例えば、癌または他の過剰増殖疾患を治療するために方法をさらに提供する。いくつかの実施態様において、該対象はヒトである。さらなる実施態様において、本発明は、疑わしい発癌遺伝子を含む細胞および該遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを提供すること;および該オリゴヌクレオチドを該細胞に投与すること;および該オリゴヌクレオチドの不在の場合と比較して、該オリゴヌクレオチドが存在した場合に該細胞の増殖が阻害されるかどうかを判定することを含む、化合物のスクリーニング法を提供する。いくつかの実施態様において、該細胞は、細胞培養物例えば、癌細胞系中に存在する。他の実施態様において、該細胞は、宿主動物例えば、非ヒト哺乳動物中に存在する。いくつかの実施態様において、該方法は、ハイスループットスクリーニング法である。他の実施態様において、本発明は、癌療法のための方法および組成物に関する。特に、本発明は、リポソームベースの癌療法を提供する。したがって、いくつかの実施態様において、本発明は、カチオン性、中性、またはアニオン性リポソームおよびオリゴヌクレオチドを含む例えば、それらから構成される医薬組成物を提供する。いくつかの好ましい実施態様において、該リポソームは、カルジオリピンを基にしたカチオン性リポソーム例えば、NEOPHECTINである。いくつかの好ましい実施態様において、NEOPHECTIN対オリゴヌクレオチドの電荷比は、6:1である。他の実施態様において、該リポソームは、N-1-2,3-ジオレオイルオキシプロピル-N,N,N-トリメチルアンモニウムメチルサルフェートDOTAPを含む。いくつかの実施態様において、本発明は、オリゴヌクレオチド例えば、発癌遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドおよびカチオン性、中性、またはアニオン性リポソームを含む例えば、それらから構成される第一の医薬組成物を含み、所望により第2の医薬組成物を含むキットを提供するものであって、ここで該第2の医薬組成物は公知の化学療法剤例えば、TAXOTERE、TAXOL、またはVINCRISTINEを含んでおり、該公知の化学療法剤は第一の医薬組成物とは別に製剤化される、キットを提供する。いくつかの実施態様において、該化学療法剤は、標準投与量の半分未満、より好ましくは1/3未満、さらに好ましくは1/4未満、さらに好ましくは1/10未満、さらに好ましくは1/100未満で存在する。さらに他の実施態様において、本発明は、カチオン性、中性、またはアニオン性リポソームおよびオリゴヌクレオチド例えば、発癌遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドから構成される医薬組成物を提供すること;そして該医薬組成物を癌細胞に曝露することを含む方法を提供する。いくつかの好ましい実施態様において、該リポソームは、カルジオリピンを基にしたカチオン性リポソーム例えば、NEOPHECTINである。いくつかの好ましい実施態様において、NEOPHECTIN対オリゴヌクレオチドの電荷比は、6:1である。他の実施態様において、該リポソームは、N-1-2,3-ジオレオイルオキシプロピル-N,N,N-トリメチルアンモニウムメチルサルフェートDOTAPを含む。いくつかの実施態様において、該癌細胞は、前立腺癌細胞、卵巣癌細胞、乳癌細胞、白血病細胞、またはリンパ腫細胞である。いくつかの実施態様において、該細胞は、宿主動物例えばヒト中にある。いくつかの実施態様において、該医薬組成物は、宿主動物に、1日1回または複数回例えば連続的に導入される。いくつかの実施態様において、該方法は、対象に公知の化学療法剤TAXOTERE、TAXOL、またはVINCRISTINEを投与するステップをさらに含んでなり、公知の化学療法剤は、カチオン性、中性、またはアニオン性リポソームとは別個に製剤化される。好ましい実施態様において、公知の化学療法剤は、該医薬組成物とは別個に製剤化される。いくつかの実施態様において、該化学療法剤は、標準投与量の半分未満、より好ましくは1/3未満、さらに好ましくは1/4未満、さらに好ましくは1/10未満、さらに好ましくは1/100未満で存在する。定義本発明の理解を助けるために、多数の用語および語句を以下に定義する:本明細書に用いられるとおり、用語前記化学療法剤は、標準投与量の半分未満で存在するとは、ヒトへの投与に使用される標準的投与量範囲の最少値の半分未満例えば、50未満、好ましくは40未満、さらに好ましくは10未満、さらに好ましくは1未満の投与量を言う。いくつかの実施態様において、標準的投与量範囲は、製造元によって推奨される投与量範囲である。他の実施態様において、標準的投与量範囲は、当該分野における医師によって使用される範囲である。さらに他の実施態様において、標準的投与量範囲は、当該分野における医療の通常の標準と考えられる範囲である。該投与量範囲内における具体的な投与量は、例えば、対象の年齢、体重、および健康状態、ならびに治療されている癌のタイプによって決定される。本明細書に用いられるとおり、用語前記遺伝子の発現が阻害されるような条件下とは、本発明のオリゴヌクレオチドが遺伝子例えば、該遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズし、該オリゴヌクレオチドが不在の場合の転写レベルに比較して、少なくとも10、好ましくは、少なくとも25、さらに好ましくは少なくとも50、さらに好ましくは少なくとも90、該遺伝子の転写を阻害する条件を言う。本発明は、ある特定の遺伝子の発現阻害に限定されない。代表的遺伝子としては、これらに限定はしないが、c-ki-Ras、c-Ha-ras、c-myc、her-2、TGF-α、およびbcl-2が挙げられる。本明細書に用いられるとおり、用語細胞の増殖が低下するような条件下とは、本発明のオリゴヌクレオチドが細胞例えば癌に投与された場合、該オリゴヌクレオチドが不在の場合の該細胞の増殖率に比較して、少なくとも10、好ましくは、少なくとも25、さらに好ましくは少なくとも50、さらに好ましくは少なくとも90、該細胞の増殖率を低下させる条件を言う。本明細書に用いられるとおり、用語エピトープとは、特定の抗体に接触させる抗原の部分を言う。タンパク質またはタンパク質の断片が、宿主動物を免疫化するために用いられる場合、該タンパク質の多くの領域が該タンパク質の特定の領域または三次元構造に特異的に結合する抗体の産生を誘導でき;これらの領域または構造は、抗原決定基と称される。抗原決定基は、抗体への結合に関して、完全な抗原すなわち、免疫応答を誘発するために用いられる免疫原と競合できる。本明細書に用いられるとおり、用語対象は、これらに限定はしないが、具体的な治療のレシピエントとなる、ヒト、非ヒト霊長類、齧歯類などの任意の動物例えば哺乳動物を言う。通常、用語の対象および患者は、本明細書において、ヒト対象に関して互換的に用いられる。本明細書に用いられるとおり、用語コンピューターメモリおよびコンピューターメモリ装置とは、コンピュータプロセッサによって読み取り可能な保存媒体を言う。コンピューターメモリの例としては、これらに限定はしないが、RAM、ROM、コンピュータチップ、デジタルビデオディスクDVD、コンパクトディスクCD、ハードディスクドライブHDDおよび磁気テープが挙げられる。本明細書に用いられるとおり、用語コンピュータ読み取り可能媒体とは、コンピュータプロセッサに情報例えばデータおよび命令を保存および提供するための任意の装置またはシステムを言う。コンピュータ読み取り可能媒体の例としては、これらに限定はしないが、DVD、CD、ハードディスクドライブ、磁気テープおよびネットワーク上に媒体を流すためのサーバーが挙げられる。本明細書に用いられるとおり、用語プロセッサおよび中央処理装置あるいはCPUとは、互換的に用いられ、コンピューターメモリ例えば、ROMまたは他のコンピューターメモリからプログラムを読み取ることができ、そのプログラムにしたがって1組のステップを実施できる装置を言う。本明細書に用いられるとおり、用語非ヒト動物とは、これらに限定はしないが、齧歯類、非ヒト霊長類、ヒツジ、ウシ、反芻類、ウサギ、ブタ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、鳥類などの脊椎動物、ならびにショウジョウバエおよび線虫などの非脊椎動物などの全ての非ヒト動物を言う。いくつかの実施態様において、非ヒト動物とはさらに、細菌病原体、ウィルス病原体などの原核生物およびウィルス類を言う。本明細書に用いられるとおり、用語核酸分子とは、これらに限定はしないが、DNAまたはRNAなどの分子を含有する任意の核酸を言う。該用語は、これらに限定はしないが、4-アセチルシトシン、8-ヒドロキシ-N6-メチルアデノシン、アジリジニルシトシン、プソイドイソシトシンpseudoisocytosine、5-カルボキシヒドロキシルメチルウラシル、5-フルオロウラシル、5-ブロモウラシル、5-カルボキシメチルアミノメチル-2-チオウラシル、5-カルボキシメチルアミノメチルウラシル、ジヒドロウラシル、イノシン、N6-イソペンテニルアデニン、1-メチルアデニン、1-メチルプソイドウラシル、1-メチルグアニン、1-メチルイノシン、2,2-ジメチルグアニン、2-メチルアデニン、2-メチルグアニン、3-メチルシトシン、5-メチルシトシン、N6-メチルアデニン、7-メチルグアニン、5-メチルアミノメチルウラシル、5-メトキシアミノメチル-2-チオウラシル、ベータ-D-マンノシルケオシン、5’-メトキシカルボニルメチルウラシル、5-メトキシウラシル、2-メチルチオ-N6-イソペンテニルアデニン、ウラシル-5-オキシ酢酸メチルエステル、ウラシル-5-オキシ酢酸、オキシブトキソシン、プソイドウラシル、ケオシン、2-チオシトシン、5-メチル-2-チオウラシル、2-チオウラシル、4-チオウラシル、5-メチルウラシル、N-ウラシル-5-オキシ酢酸メチルエステル、ウラシル-5-オキシ酢酸、プソイドウラシル、ケオシン、2-チオシトシン、および2,6-ジアミノプリンなどのDNAおよびRNAの公知のあらゆる塩基アナログを含む配列を包含する。用語の遺伝子とは、ポリペプチド、前駆体、またはRNA例えばrRNA、tRNAの産生に必要なコード配列を含む核酸例えばDNA配列を言う。該ポリペプチドは、完全長コード配列によって、または、完全長または断片の所望の活性または機能的性質例えば、酵素活性、リガンド結合性、シグナル伝達性、免疫原性などが保持される限り、該コード配列のいずれかの部分によってコードされ得る。また、該用語は、該遺伝子が完全長mRNAの長さに対応するように、5’末端または3’末端のいずれかの末端において、約1kb以上離れた双方の末端のコード領域に隣接して位置する構造遺伝子のコード領域および該配列を包含する。コード領域の5’に位置し、mRNA上に存在する配列は、5’非翻訳配列と称される。コード領域の3’または下流に位置し、mRNA上に存在する配列は、3’非翻訳配列と称される。用語の遺伝子は、cDNAおよび遺伝子のゲノム体の双方を包含する。遺伝子のゲノム体またはクローンは、イントロンまたは介在領域または介在配列と称される非コード配列によって割り込まれたコード部分を含有する。イントロンは、核RNAhnRNAに翻訳される遺伝子の区域であり;イントロンは、エンハンサーなどの調節要素を含有できる。イントロンは、核または第一次転写体から除去またはスプライスアウトされ;したがって、イントロンは、メッセンジャーRNAmRNA転写体には不在である。mRNAは翻訳時、新生ポリペプチドにおけるアミノ酸の配列または順序を規定する働きをする。本明細書に用いられるとおり、用語異種遺伝子とは、その自然の環境にはない遺伝子を言う。例えば、他の種に導入された1つの種由来の遺伝子が含まれる。また、異種遺伝子としては、何らかの方法で変化した例えば、変異した、複数コピーで加えられた、非天然調節配列に結合した、などある生物に固有の遺伝子が挙げられる。異種遺伝子は内因性遺伝子とは区別される、即ち異種遺伝子配列は染色体中の遺伝子配列に結合した天然に見られないDNA配列に典型的に結合しているか、または天然に見られない染色体の部分例えば、通常は発現しない座に発現した遺伝子と結合している。本明細書に用いられるとおり、用語遺伝子発現とは、遺伝子の転写を介してすなわち、RNAポリメラーゼの酵素作用を介して、遺伝子にコードされた遺伝情報を、RNA例えば、mRNA、rRNA、tRNAまたはsnRNAに、また、タンパク質では、mRNAの翻訳を介して、タンパク質のコード遺伝子をタンパク質に変換する過程を言う。遺伝子発現は、該過程における多くの段階で調節できる。本明細書に用いられるとおり、用語アップレギュレーションまたは活性化とは、遺伝子発現産物すなわち、RNAまたはタンパク質の産生を増加させる調節を言い、一方、ダウンレギュレーションまたは抑制とは、産生を低下させる調節を言う。アップレギュレーションまたはダウンレギュレーションに関与している分子例えば、転写因子は、しばしば、それぞれ、活性化因子および抑制因子と呼ばれる。遺伝子のゲノム体は、イントロンを含有する他に、RNA転写体に存在する配列の5’末端および3’末端双方に位置する配列も含み得る。これらの配列は、フランキング配列またはフランキング領域と称されるこれらのフランキング配列は、mRNA転写体に存在する非翻訳配列に対して5’または3’に位置している。5’フランキング領域は、遺伝子の転写を制御する、または影響を与えるプロモーターまたはエンハンサーなどの調節配列を含有し得る。3’フランキング領域は、転写の終結、翻訳後開裂およびポリアデニル化を指令する配列を含有し得る。用語の野生型とは、天然源から単離した遺伝子または遺伝子産物を言う。野生型遺伝子は、集団内に最も多く見られるものであり、したがって、該遺伝子の正常形態または野生型形態を任意に表している。対照的に、用語の改変または変異は、野生型遺伝子または野生型遺伝子産物と比較して、配列および/または機能的性質における改変すなわち、特性の変更を示す遺伝子または遺伝子産物を言う。天然の変異体は単離できる;これらは、野生型遺伝子または野生型遺伝子産物に比較した場合、特性が変化している核酸配列の変化を含みという事実によって同定されることが認められる。本明細書に用いられるとおり、用語核酸分子コード、DNA配列コード、およびDNAコードとは、デオキシリボ核酸の鎖に沿ったデオキシリボヌクレオチドの順序または配列を言う。これらのデオキシリボヌクレオチドの順序によって、ポリペプチドタンパク質鎖に沿ったアミノ酸の順序が決定される。このように、DNA配列は、アミノ酸配列をコードしている。本明細書に用いられるとおり、用語遺伝子をコードするヌクレオチド配列を有するオリゴヌクレオチドおよび遺伝子をコードするヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチドとは、遺伝子のコード領域を含む核酸配列、言い換えると、遺伝子産物をコードする核酸配列を意味する。コード領域は、cDNA、ゲノムDNAまたはRNA形態に存在し得る。DNA形態に存在する場合、オリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドは、一本鎖すなわち、センス鎖でも、二本鎖でもあり得る。転写の適切な開始および/または一次RNA転写体の正しいプロセシングをさせるために必要ならば、エンハンサー/プロモーター、スプライス接合体、ポリアデニル化シグナルなどの好適な制御要素は、該遺伝子のコード領域に近接して配置できる。あるいは、本発明の発現ベクターに利用されるコード領域は、内因性エンハンサー/プロモーター、スプライス接合体、介在配列、ポリアデニル化シグナルなど、または内因性制御要素と外来性制御要素の組合せの両方を含有し得る。本明細書に用いられるとおり、用語オリゴヌクレオチドとは、短い一本鎖ポリヌクレオチド鎖を言う。オリゴヌクレオチドは、典型的には、200残基長未満例えば、8から100の間であるが、本明細書に用いられる用語は、より長いポリヌクレオチド鎖例えば、5000残基のような大きさを包含することも意図されている。オリゴヌクレオチドは、しばしば、それらの長さによって称される。例えば、24残基のオリゴヌクレオチドは、24量体と称される。オリゴヌクレオチドは、自己ハイブリダイズすることによって、または他のポリヌクレオチドとハイブリダイズすることによって、二次および三次構造を形成できる。このような構造としては、これらに限定はしないが、二重、ヘアピン、十字、湾曲、および三重構造が挙げられる。いくつかの実施態様において、オリゴヌクレオチドはアンチジーンである。本明細書に用いられるとおり、用語アンチジーンとは、遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを言う。いくつかの実施態様において、プロモーターに対するアンチジーンのハイブリダイゼーションによって、遺伝子の発現が阻害される。本明細書に用いられるとおり、用語相補的なまたは相補性は、塩基対合則に関連したポリヌクレオチドすなわち、ヌクレオチドの配列に関して用いられる。例えば、配列A-G-Tは、配列T-C-Aに相補的である。相補性は、部分的であり得、そこでは、核酸塩基のいくつかのみが塩基対合則に対合している。あるいは、核酸間に、完全なまたは全体的相補性があり得る。核酸鎖間の相補性の程度は、核酸鎖間のハイブリダイゼーションの効率および強度に重要な影響を及ぼす。これは、増幅反応ならびに核酸間の結合に依存する検出法において、特に重要である。本明細書に用いられるとおり、用語完全に相補的とは、例えば、本発明のオリゴヌクレオチドに関して用いられる場合、全てのヌクレオチドが標的配列例えば遺伝子に相補的であるオリゴヌクレオチドを言う。本明細書に用いられるとおり、用語部分的に相補的とは、例えば、本発明のオリゴヌクレオチドに関して用いられる場合、少なくとも1つのヌクレオチドが標的配列に相補的でないオリゴヌクレオチドを言う。好ましい部分的に相補的なオリゴヌクレオチドは、生理的条件下で、標的配列に依然としてハイブリダイズできるものである。用語の部分的に相補的とは、該オリゴヌクレオチドの内部またはいずれかの末端に、1つまたは複数の非相補的ヌクレオチドの領域を有するオリゴヌクレオチドを言う。末端に誤対合を有するオリゴヌクレオチドでも依然として標的配列にハイブリダイズできる。用語の相同性とは、相補性の程度を言う。部分的相同性または完全相同性すなわち、同一性があり得る。部分的に相補的な配列とは、完全に相補的な核酸分子が、実質的に相同性である標的核酸にハイブリダイズすることを、少なくとも部分的に阻害する核酸分子である。標的配列に対する完全に相補的な配列のハイブリダイゼーション阻害は、低ストリンジェンシー条件下、ハイブリダイゼーションアッセイサザンブロットまたはノーザンブロット、溶液ハイブリダイゼーションなどを用いて調べることができる。実質的に相同性の配列またはプローブは、低ストリンジェンシー条件下、標的に対して完全に相同性の核酸分子の結合すなわち、ハイブリダイゼーションに競合または阻害する。とはいっても、非特異的結合が可能であるような低ストリンジェンシー条件ということではない;低ストリンジェンシー条件は、2つの配列相互の結合が特異的選択的相互作用であることを必要とする。非特異的結合の不在は、実質的に非相補的な例えば、同一性が約30未満第2の標的の使用によって試験でき;非特異的結合の不在下では、プローブは、第2の非相補的標的にハイブリダイズしない。cDNAまたはゲノムクローンなどの二本鎖核酸配列に関して用いられる場合、用語の実質的に相同性とは、上記の低ストリンジェンシー条件下、二本鎖核酸配列のいずれかの鎖または双方の鎖にハイブリダイズできる任意のプローブを言う。遺伝子は、一次RNA転写体の差異的スプライシングによって生成する複数のRNA種を産生し得る。同じ遺伝子のスプライス変種であるcDNAは、配列同一性または完全相同性の領域双方のcDNA上に、同じエキソンまたは同じエキソンの部分の存在を示すおよび完全非同一性の領域例えば、cDNA1上には、エキソンAの存在を示し、cDNA2は、代わりに、エキソンBを含有するを含む。2つのcDNAは、配列同一性の領域を含有するため、それらは双方とも、双方のcDNA上に見られる配列を含有する遺伝子全体または該遺伝子の部分から誘導されたプローブにハイブリダイズし;したがって、2つのスプライス変種は、このようなプローブに、および互いに、実質的に相同性である。一本鎖核酸配列に関して用いられる場合、用語の実質的に相同性とは、上記の低ストリンジェンシー条件下、一本鎖核酸配列にハイブリダイズできるすなわち、相補的な任意のプローブを言う。本明細書に用いられるとおり、用語ハイブリダイゼーションは、相補的核酸の対合に関して用いられる。ハイブリダイゼーションおよびハイブリダイゼーションの強度すなわち、核酸間の結合の強度は、核酸間の相補性の程度、関与する条件のストリンジェンシー、形成されたハイブリッドのTm、および核酸内のG:C比などの因子によって影響される。その構造内に、相補的核酸の対合を含有する単一分子は、自己ハイブリダイズされていると言われる。本明細書に用いられるとおり、用語Tmは、融解温度に関して用いられる。融解温度は、二本鎖核酸分子の集団が、一本鎖へと半分に解離する温度である。核酸のTmを算出する等式は、当技術分野でよく知られている。標準的文献に示されるとおり、Tm値の単純な推定値は、核酸が1MのNaClにおける水溶液中にある場合、等式:Tm=81.50.41GCによって算出できる例えば、アンダーソンAndersonおよびヤングYoung、QuantativeFilterHybridization,inNucleicAcidHybriization1985を参照。他の文献は、Tmの算出に、構造特性ならびに配列特性を考慮に入れるより複雑な演算を含む。本明細書に用いられるとおり、用語ストリンジェンシーは、核酸ハイブリダイゼーションが行われる温度、イオン強度、および有機溶媒などの他の化合物の存在という条件に関して用いられる。低ストリンジェンシー条件下では、目的とする核酸配列は、正確な相補体、1つの塩基誤対合を有する配列、密接に関連した配列例えば、90以上の相同性を有する配列、および部分的相同性のみを有する配列例えば、50~90の相同性を有する配列にハイブリダイズする。中ストリンジェンシー条件下では、目的とする核酸配列は、正確な相補体、1つの塩基誤対合を有する配列、および密接に関連した配列例えば、90以上の相同性を有する配列とのみハイブリダイズする。高ストリンジェンシー条件下では、目的とする核酸配列は、正確な相補体、および温度などの条件に依るが1つの塩基誤対合を有する配列とのみハイブリダイズする。言い換えると、高ストリンジェンシー条件下では、1つの塩基誤対合を有する配列に対するハイブリダイゼーションを除外するために、温度を上げることができる。核酸ハイブリダイゼーションに関して用いられる場合、高ストリンジェンシー条件は、約500ヌクレオチド長のプローブを用いる場合、5XSSPE43.8g/lのNaCl、6.9g/lのNaH2PO4H2Oおよび1.85g/lのEDTA、NaOHによりpHを7.4に調整、0.5のSDS、5Xデンハート試薬および100μg/mlの変性サケ精子DNAからなる溶液中、42°Cでの結合またはハイブリダイゼーションに引き続き、42°Cで、0.1XSSPE、1.0のSDSを含む溶液中での洗浄に相当する条件を含む。核酸ハイブリダイゼーションに関して用いられる場合、中ストリンジェンシー条件は、約500ヌクレオチド長のプローブを用いる場合、5XSSPE43.8g/lのNaCl、6.9g/lのNaH2PO4H2Oおよび1.85g/lのEDTA、NaOHによりpHを7.4に調整、0.5のSDS、5Xデンハート試薬および100μg/mlの変性サケ精子DNAからなる溶液中、42°Cでの結合またはハイブリダイゼーションに引き続き、42°Cで、1.0XSSPE、1.0のSDSを含む溶液中での洗浄に相当する条件を含む。低ストリンジェンシー条件は、約500ヌクレオチド長のプローブを用いる場合、5XSSPE43.8g/lのNaCl、6.9g/lのNaH2PO4H2Oおよび1.85g/lのEDTA、NaOHによりpHを7.4に調整、0.1のSDS、5Xデンハート試薬500ml当たり、50Xデンハートは:5gのフィコールタイプ400、Pharmcia、5gのBSAフラクションV;シグマSigmaを含有および100μg/mlの変性サケ精子DNAからなる溶液中、42°Cでの結合またはハイブリダイゼーションに引き続き、42°Cで、5XSSPE、0.1のSDSを含む溶液中での洗浄に相当する条件を含む。本発明は、約500ヌクレオチド長のプローブのハイブリダイゼーションに限定されない。本発明は、およそ8ヌクレオチド長から数千例えば少なくとも5000ヌクレオチド長までの間のプローブの使用を考慮している。当業者は、他のサイズのプローブでは、ストリンジェンシー条件を変更し得ることを認識している例えば、アンダーソンAndersonおよびヤングYoung、QuantitativeFilterHybridization,inNucleicAcidHybridization1985およびサンブルックSambrookら、MolecularCloning:ALaboratoryManual、コールドスプリングハーバープレスColdSpringHarborPress、ニューヨーク1989を参照。低ストリンジェンシー条件を含む多数の等価条件を使用できることが、当業界ではよく知られており;プローブの長さおよび性質DNA、RNA、塩基組成および標的の性質DNA、RNA、塩基組成、溶液中の存在、または固定化などならびに塩および他の成分の濃度例えば、ホルムアミド、硫酸デキストラン、ポリエチレングリコールの存在または不在が考慮され、また、ハイブリダイゼーション溶液は、上記に挙げた条件とは異なるが、等価である低ストリンジェンシーハイブリダイゼーションの条件を生み出すために、ハイブリダイゼーション溶液を変化させることができる。さらに、高ストリンジェンシーの条件下でハイブリダイゼーションを促進させる条件例えば、ハイブリダイゼーションおよび/または洗浄ステップの温度増加、ハイブリダイゼーション溶液におけるホルムアミドの使用などは当技術分野で知られているストリンジェンシーに関する上記の定義を参照。本明細書に用いられるとおり、用語生理的条件とは、動物例えばヒト内部の、またはそれに近似した特定のストリンジェンシー条件を言う。インビトロで使用される代表的な生理的条件としては、これらに限定はしないが、37°C、95の空気、5のCO2、哺乳動物細胞を培養するための市販の培地例えば、ジブコGibco、メリーランド州から入手できるDMEM培地、5~10の血清例えば、ウシ血清またはウマ血清、追加緩衝液、および任意にホルモン例えば、インスリンおよび上皮成長因子が挙げられる。用語の単離とは、単離オリゴヌクレオチドまたは単離ポリヌクレオチドにおけるように、核酸に関して用いられる場合、同定され、核酸配列の天然源において、通常、核酸配列に結合している少なくとも1つの成分または混入物から分離された核酸配列を言う。単離核酸は、天然状態で見られるのとは異なる形態または設定において存在する。対照的に、非単離核酸は、天然に存在する状態で見られるDNAおよびRNAなどの核酸である。例えば、特定のDNA配列例えば遺伝子は、宿主細胞の染色体上に、隣接遺伝子の近くに見られ;特定のタンパク質をコードする特定のmRNA配列などのRNA配列は、多数のタンパク質をコードする他の多数のmRNAとの混合物として細胞中に見られる。しかし、特定のタンパク質をコードする単離核酸としては、例えば、通常、特定のタンパク質を発現する細胞中核酸であって、天然の細胞の染色体位置とは異なる染色体位置にあるか、または、天然に見られる核酸配列とは異なる核酸配列によってはさまれている核酸などが挙げられる。単離核酸、オリゴヌクレオチド、またはポリヌクレオチドは、一本鎖形態においても二本鎖形態においても存在し得る。単離核酸、オリゴヌクレオチド、またはポリヌクレオチドを、タンパク質を発現させるために利用する場合、該オリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドは、最小限、センス鎖またはコード鎖を含有することになるすなわち、該オリゴヌクレオチド、またはポリヌクレオチドは、一本鎖であり得るが、センス鎖およびアンチセンス鎖の双方を含有し得るすなわち、オリゴヌクレオチド、またはポリヌクレオチドは、二本鎖であり得る。本明細書に用いられるとおり、用語精製されたまたは精製するとは、サンプルからの成分例えば、混入物の除去を言う。例えば、抗体は、混入している非免疫グロブリンタンパク質の除去によって精製され;また、標的分子に結合しない免疫グロブリンの除去によっても精製される。非免疫グロブリンタンパク質の除去および/または標的分子に結合しない免疫グロブリンの除去により、サンプル中の標的反応性免疫グロブリンのパーセント増加がもたらされる。他の例では、組換えポリペプチドを細菌宿主細胞中に発現させ、該ポリペプチドを、宿主細胞タンパク質の除去によって精製し;それによって、サンプル中の組換えポリペプチドのパーセントを増加させる。アミノ酸配列およびポリペプチドまたはタンパク質などの用語は、該アミノ酸配列を、挙げられたタンパク質分子に関連した完全な天然アミノ酸配列に限定することを意味しない。本明細書に用いられるとおり、用語天然タンパク質は、タンパク質がベクター配列によってコードされたアミノ酸残基を含有しないことを示しており;すなわち、天然タンパク質は、天然タンパク質に見られるアミノ酸のみを含有している。天然タンパク質は、組換え法によって作製できるか、または天然源から単離できる。本明細書に用いられるとおり、用語部分とは、タンパク質に関する場合特定のタンパク質の部分などの場合、そのタンパク質の断片を言う。該断片は、4つのアミノ酸残基からアミノ酸配列全体マイナス1アミノ酸までのサイズの範囲であり得る。用語のサザンブロットとは、サイズによってDNAを分画するために、寒天ゲルまたはアクリルアミドゲル上でDNAを分析し、引き続き、該DNAを、該ゲルから、ニトロセルロースまたはナイロン膜などの固体支持体へ移すことを言う。次いで、固定化DNAを、標識化したプローブによって探索して、使用したプローブに相補的なDNA種を検出する。該DNAは、電気泳動の前に、制限酵素によって開裂できる。電気泳動後、該DNAは、固体支持体に移す前に、または移す時に、部分的に脱プリン化し、変性させることができる。サザンブロットは、分子生物学者の標準的な手段であるJ.サンブルックJ.Sambrookら、MolecularCloning:ALaboratoryManual、ColdSpringHarborPress、ニューヨーク州、9.31-9.58頁1989。用語のノーザンブロットとは、サイズによってRNAを分画するために、寒天ゲル上でのRNAの電気泳動によってRNAを分析し、続いて該RNAを該ゲルから、ニトロセルロースまたはナイロン膜などの固体支持体へ移すことを言う。次いで、固定化RNAを、標識化したプローブによって探索して、使用したプローブに相補的なRNA種を検出する。ノーザンブロットは、分子生物学者の標準的な手段であるJ.Sambrookら、上記、7.39-7.52頁1989。用語のウェスタンブロットとは、ニトロセルロースまたは膜などの支持体上に固定化したタンパク質またはポリペプチドの分析を言う。タンパク質をアクリルアミドゲル上で操作して、タンパク質を分離し、続いて該タンパク質を該ゲルからニトロセルロースまたはナイロン膜などの固体支持体へ移す。次いで、固定化タンパク質を、対象となる抗原に対して反応性を有する抗体に曝露する。抗体の結合は、放射標識抗体の使用など、種々の方法によって検出できる。本明細書に用いられるとおり、用語細胞培養物とは、任意のインビトロ細胞培養物を言う。この用語には、連続細胞系例えば、不死表現型により、一次細胞培養物、形質転換細胞系、有限細胞系例えば、非形質転換細胞、およびインビトロで維持された任意の他の細胞集団が含まれる。使用される用語の真核生物とは、原核生物と区別可能な生物を言う。この用語は、核膜によって境界づけられた真核の存在、核膜内に、染色体があること、膜で境界づけられた細胞小器官の存在など、真核生物の通常の特徴、および真核生物に一般的に見られる他の特徴を示す細胞を有する全ての生物を包含することが意図されている。したがって、この用語には、これらに限定はしないが、真菌、原生動物、および動物例えばヒトが含まれる。本明細書に用いられるとおり、用語インビトロとは、人工的環境および人工的環境内で生じる過程または反応を言う。インビトロ環境は、これらに限定はしないが、試験管および細胞培養物から構成できる。用語のインビボとは、自然環境例えば、動物または細胞および自然環境内で生じる過程または反応を言う。用語の試験化合物および候補化合物とは、疾患、疾病、病気、または身体機能の障害例えば癌を、治療または予防するために使用する候補である任意の化学物質、医薬品、薬物などを言う。試験化合物は、公知の、および可能性を有する治療用化合物の双方を含む。試験化合物は、本発明の方法を用い、スクリーニングによって、治療用であることを決定できる。本発明のいくつかの実施態様において、試験化合物には、アンチセンス化合物が含まれる。本明細書に用いられるとおり、用語公知の化学療法剤とは、疾患例えば癌の治療に有用であることが知られている化合物を言う。癌に対して有効である代表的な化学療法剤としては、これらに限定はしないが、ダウノルビシン、ダクチノマイシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシン、ナイトロジェンマスタード、クロラムブシル、メルファラン、シクロホスファミド、6-メルカプトプリン、6-チオグアニン、シタラビンCA、5-フルオロウラシル5-FU、フロクスウリジン5-FUdR、メトトレキセートMTX、コルヒチン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、エトポシド、テニポシド、シスプラチンおよびジエチルスチルベストロールDESが挙げられる。本明細書に用いられるとおり、用語サンプルは、その最も広い意味において用いられる。ある意味では、それは、生物学的サンプルならびに環境サンプルの任意の出所から得られた検体または培養物を意味する。生物学的サンプルは、動物ヒトを含めてから得ることができ、液体、固体、組織、および気体を包含する。生物学的サンプルとしては、血漿、血清などの血液産物が挙げられる。環境サンプルとしては、表面物質、土壌、水、結晶および工業サンプルが挙げられる。しかし、このような例は、本発明に適用できるサンプルタイプを限定するものとして考えるべきではない。本発明は、癌治療のための方法および組成物に関する。特に本発明は、種々の癌に関与する発癌遺伝子の阻害のためのオリゴヌクレオチドを基にした療法を提供する。本発明は、特定の癌の治療に限定されない。限定はしないが、乳癌などの任意の癌を標的化できる。本発明はまた、癌または発癌遺伝子を標的化することに限定されない。本発明の方法および組成物は、発現を阻害することが望ましい任意の遺伝子との使用例えば、治療使用または研究使用に好適である。I.発癌遺伝子の標的幾つかの実施態様において、本発明は、発癌遺伝子の抗遺伝子阻害剤を提供する。本発明は、特定の発癌遺伝子の阻害に限定されない。実際、本発明は、これに限定はしないが、本明細書に開示されたものなど、任意の数の発癌遺伝子に対する抗遺伝子阻害剤を包含する。A.Ras多くの科学者に注目されている1つの遺伝子は、ヒト癌原遺伝子、c-Ha-rasである。c-Ha-rasのプロモーター領域の核酸配列は、図7に示している。この遺伝子は、化学シグナルを細胞に中継し、細胞分化を制御する中枢ディスパッチャーとして作用する。ras遺伝子を変化させることにより、該遺伝子をオン位置に留まらせることができる。ras発癌遺伝子は、大腸癌、肺癌、膀胱癌および哺乳動物の癌など、癌の30までの基礎をなすと考えられているボスBosCancerRes.49:4682-4689頁。したがってras発癌遺伝子は、治療薬の標的となった。rasmRNAの種々の部位に相補的なオリゴヌクレオチド類は、細胞培養物中の細胞増殖速度を減少させるrasタンパク質p21の合成を阻害できることを示す幾つかの報告がある米国特許第5,576,208号明細書;米国特許第5,582,986号明細書;ダスカDaskaら、OncogeneRes.5:267-275頁[1990];ブラウンBrownら、OncogeneRes.4:243-252頁[1989];セゾン-ベーモアラスSaison-Behmoarasら、EMBOJ.10:1111-1116頁[1993]。c-Ha-rasmRNA転写物の5’フランキング領域に相補的なオリゴヌクレオチド類は、ヌードマウスにおける腫瘍増殖を14日間まで阻害することが示されているグレイGrayら、CancerRes.53:577-580頁[1993]。c-Ha-rasmRNAのコドン12における点変異G>Cに特異的なアンチセンスオリゴヌクレオチドは、細胞増殖ならびに皮下注入された場合のヌードマウスにおける腫瘍増殖を阻害したことが、最近報告されており米国特許第5,576,208号明細書;米国特許第5,582,986号明細書;シュワブSchwabら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA91:10460-10464[1994];これらの各々は、参考文献として本明細書に組み込まれる。アンチセンス薬物が、小規模臨床試験において卵巣腫瘍を縮小したことも複数の研究者により報告されているラウシュRoushら、Science276:1192-1194頁[1997]。B.Her-2HER-2neu発癌遺伝子またはerbB-2としても知られている発癌遺伝子は、幾つかのヒト癌ハインズHynesおよびスターンStern、Biochem.etBiophy.Acta1198:165-184頁[1994];ダウガルDougallら、Oncogene9:2109-2123頁[1994]において、また哺乳動物の発生リーLeeら、Nature378:394-398頁[1995]におけるその役割のため、広範に調査されている受容体様チロシンキナーゼRTKをコードする。Her-2のプロモーター領域の核酸配列を図3に示している。HER-2タンパク質の配列は、胎盤カウッセンスCoussensら、Science230:1132-1139頁[1985]から、また胃癌細胞系ヤマモトYamamotoら、Nature319:230-234頁[1986]から上皮成長因子受容体EGFRmRNAに対する相同性によりクローン化されたcDNAから決定された。HER-2mRNAは、約4.5kbカウッセンスCoussensら、Science230:1132-1139頁[1985];ヤマモトYamamotoら、Nature319:230-234頁[1986]であることが示されており、正常ヒト組織および悪性ヒト組織p185HER-2において185kDaの膜内外糖タンパク質をコードするハインズHynesおよびスティーンSteen、Biochem.etBiophys.Acta1198:165-184頁[1994];ダウガルDougallら、Oncogene9:2109-2123頁[1994]。HER-2の過剰発現は、培養細胞の形質転換を引き起こしディフィオレDiFioreら、Science237:178-182頁[1987];ハジアクHudziakら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA84:7159-7163[1987]、乳癌および卵巣癌の積極的臨床進行に関連しているスラモンSlamonら、Science235:177-182[1987];スラモンSlamonら、Science244:707-712[1989]。HER-2は、癌において最も頻繁に変化する遺伝子の1つである。それは、チロシンキナーゼ活性により膜内外受容体p185としても知られているをコードし、上皮成長因子EGFファミリーのメンバーであり、したがって、上皮成長因子受容体EGFRまたはHER-1に関連する。HER-2遺伝子発現の異常は、多種多様の癌に存在し、乳癌、卵巣癌および胃癌に最もよく見られる。HER-2は、ヒト乳癌および卵巣癌全体の25~30に過剰発現する。HER-2過剰発現のレベルは、乳癌の臨床段階、予後および転移の可能性とよく相関する。HER-2の過剰発現は、低生存率、再発率の増加および転移可能性の増加に関連する。タンTanら、CancerRes.、57:1199頁[1997]は、HER-2遺伝子の過剰発現が、乳癌細胞の形質転換能力を増加させることなくそれらの転移可能性を増加させることを示している。HER-2の過剰発現は、正常なHER-2の発現および変異HER-2の発現双方の増加を含む。HER-2癌原遺伝子の活性化は、3つのメカニズム-点変異、遺伝子増幅および過剰発現のいずれかによって発生し得る。遺伝子増幅は、最もよく見られるメカニズムである。リガンド活性化が形質転換を促進させるために必要である他のEGFファミリーメンバーと違って、HER-2の過剰発現だけで形質変換にとって十分であるコーエンCohenら、J.Biol.Chem.、271:30897頁[1996]。HER-2遺伝子産物のレベルを低下させるために、幾つかの治療的アプローチが使用されている。アデノウィルスタイプ5遺伝子産物E1Aは、ヌードマウスにおける乳癌モデルを用いて可能性のある療法として研究されている。この遺伝子産物は、HER-2/neuプロモーター活性を抑制することによりHER-2/neu過剰発現を抑制することができ、HER-2/neu過剰発現卵巣癌細胞の腫瘍発生の可能性を抑止できる。HER-2/neu過剰発現乳癌異種移植片を有するマウスにおいて、アデノウィルスまたはリポソームのいずれかにより送達されたE1Aは、腫瘍増殖を阻害し、対照と比較してマウス生存を延長させたチャングChangら、Oncogene14:561頁[1997]。HER-2/neuタンパク質産物およびFcガンマRIIICD16双方の細胞外ドメイン、ヒトナチュラルキラー細胞、好中球、および分化単核食細胞により発現されたFcガンマ受容体を標的とする二重特異性抗体を評価するために臨床試験が実施されたウェイナーWeinerら、J.Hematotherapy、4:471頁[1995]。HER-2の過剰発現はまた、化学療法に対する耐性増加に関連することが見出されている。したがって、HER-2のレベル上昇患者は、多くの薬剤に対して応答不良である。HER-2発現を阻害するために用いられる方法は、通常用いられる化学療法剤と併用されているウエノUenoら、Oncogene15:953頁[1997]。アデノウィルスタイプ5遺伝子産物、E1Aとタキソールとの併用は、ヒト乳癌細胞において相乗効果を示した。チロシン特異的阻害剤であるエモジンが、シスプラチン、ドキソルビシンおよびエトポシドなど、種々の化学療法薬に対する非小細胞肺癌NSCLCの感度を高めることがツアングZhangら、Oncogene12:571頁[1996]により立証された。HER-2抗体は、ヒト乳癌細胞におけるタモキシフェンの有効性を増加させることを見出したウィッタースWittersら、BreastCancerRes.andTreatment、42:1頁[1997]。オリゴヌクレオチド類もまた、HER-2の機能を研究するために用いられている。mRNA転写開始部位の42から69ヌクレオチド上流のHER-2プロモーターに標的化された三重形成オリゴヌクレオチドが、HER-2のインビトロ発現を阻害することが見出されたエッビングハウスEbbinghausら、J.Clin.Invest.、92:2433頁[1993]。ポーラムPorumbらCancerRes.、56:515頁[1996]はまた、同じHER-2プロモーター領域に標的化された三重形成オリゴヌクレオチドを用いた。HER-2mRNAおよびタンパク質レベルにおける減少が、培養細胞に見られた。JuhlらJ.Biol.Chem.、272:29482頁[1997]は、タンパク質の膜内外領域のすぐ下流のHER-2RNAの中央領域に標的化された抗HER-2リボザイムを用いて、ヒト卵巣癌細胞におけるHER-2mRNAおよびタンパク質レベルの低下を立証した。ヌードマウスにおける腫瘍成長低下もまた見られた。アンチセンスアプローチは、HER-2の過剰発現癌に対する可能性のある療法として用いられている。ペグースPeguesらCancerLett.、117:73頁[1997]は、アンチセンス方向におけるHER-2の1.5kbフラグメントを発現ベクターにクローン化し;この構築体の卵巣癌細胞への形質移入により付着依存性増殖が低下した。カサリニCasaliniらInt.J.Cancer72:631頁[1997]は、151bp長から415bp長のHER-2フラグメントを含有する幾つかのヒトHER-2アンチセンスベクター構築体を用いて、肺腺癌におけるHER-2タンパク質レベルの減少および付着依存性増殖低下を立証した。コロマーColomerらBr.J.Cancer、70:819頁[1994]は、翻訳開始コドンに、またはそのすぐ下流に標的化されたホスホジエステルアンチセンスオリゴヌクレオチド類が、ヒト乳癌細胞の増殖を60まで阻害したことを示した。ウィーチェンWiechenらInt.J.Cancer63:604頁[1995]は、HER-2の翻訳開始コドンの33ヌクレオチド下流のコード領域に標的化された18-ヌクレオチドホスホロチオエートオリゴヌクレオチドが、卵巣癌細胞の付着依存性増殖を低下させることを示した。バートラムBertramらBiochem.Biophys.Res.Commun.、200:661頁[1994]は、翻訳開始領域およびチロシンキナーゼコンセンサス配列に対して高い相同性を有するmRNAの翻訳領域の3’部における配列に標的化されたアンチセンスホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを用いて、ヒト乳癌細胞においてHER-2タンパク質レベルが75の低下したことを立証した。リュウLiuらAntisenseandNucleicAcidDrugDevelop.、6:9頁[1996]は、5’キャップ部位およびコード領域に標的化されたアンチセンスホスホロチオエートオリゴヌクレオチド類を用いた。5’キャップ部位に標的化された最も有効なオリゴヌクレオチドは、HER-2タンパク質発現を90減少した。細胞増殖もまた、同等の量で減少した。ボーグンVaughnらNuc.Acids.Res.、24:4558頁[1996]は、HER-2の翻訳開始領域に、またはその隣接部に両側標的化されたホスホロチオエート、ホスホロジチオエートおよびキメラアンチセンスオリゴヌクレオチド類を用いた。翻訳開始領域に標的化された互換的なジチオエート/ジエステルオリゴヌクレオチドは、全てのホスホロチオエートオリゴヌクレオチドよりも僅かに良好に作用した。ブリシュBryschらCancerGeneTher.、1:99頁[1994]は、HER-2の翻訳開始コドンに標的化された化学的に修飾されたアンチセンスオリゴヌクレオチド類を用い、タンパク質レベルを減少し、ヒト乳癌細胞系の増殖を阻害した。C.C-Mycc-myc遺伝子産物は、即時早期応答遺伝子によりコードされ、その発現は、種々のマイトジェンにより誘導され得る。c-myc遺伝子のプロモーター領域の核酸配列は、図9に示される。C-myc発現は、細胞分裂に導くシグナル伝達経路に関与する。増殖している細胞は、静止状態細胞よりもc-mycmRNAおよびc-mycタンパク質の高レベルを有することが研究により立証された。ヒトc-mycタンパク質に対する抗体は、ヒト細胞から単離された核におけるDNA合成を阻害することが知られている。逆に、遺伝子導入により生じたc-mycの構成的発現は、幾つかの細胞系の分化誘導を阻害する。c-mycの構成的発現により、遺伝子導入マウスは腫瘍を発現し易くなる。幾つかの研究により、c-myc遺伝子産物は、SMC類において増殖的な役割を演じ得ることが示唆されている。ラット大動脈のバルーン脱内皮形成化および傷害により、その後の増殖および移動前に血管SMCのc-mycmRNA発現を増加させることが知られている。また、PDGF、FGF、EGF、IGF-1などの幾つかのマイトジェンおよび血清に曝された場合、培養物中のSMC類が増殖する。これらマイトジェンの各々は、c-mycタンパク質、c-mycmRNAのいずれか、または双方の他の細胞系において発現を増加できることが見出されている。さらに血清は、SMC類におけるc-mycmRNAレベルを増加させることが見出されている。ハレル-ベランらJ.Immun.140:2431-2435頁1988は、c-mycmRNAに対して相補的なアンチセンスオリゴヌクレオチド類が、ヒトT細胞におけるその翻訳を効果的に阻害することが立証された。これらT細胞が、細胞分裂のS期に入ることを阻害された。c-myc癌原遺伝子配列は、マルクMarcuら、Ann.Rev.Biochem.、61:809-860頁[1992];ワットWattら、Nature、303:725-728頁[1983];バッテイBatteyら、Cell、34:779-787頁1983;およびエプスタインEpsteinら、NTIS公表PB93-100576頁に記載されている。D.Bcl2リンパ腫および白血病など、多くのタイプのヒト腫瘍において、ヒトbcl-2が過剰発現されており、腫瘍形成能に関連し得ると考えられるツジモトTsujimotoら、Science228:1440-1443頁[1985]。bcl-2のプロモーター領域の核酸配列を、図1に示している。高レベルのヒトbcl-2遺伝子発現が、たいていの濾胞性B細胞リンパ腫および多くの大型細胞非ホジキンリンパ腫など、t14;18染色体転座を有する全てのリンパ腫に見られている。bcl-2遺伝子高レベル発現はまた、長期の急性リンパ球性白血病のたいていの症例、プレB細胞タイプの多くの急性リンパ白血病、前立腺、乳房、および大腸の多くの腺癌など、t14;18染色体翻訳を有さないある種の白血病に見出されている。リードReedら、CancerRes.51:6529頁[1991];ユニスYunisら、NewEnglandJ.Med.320:1047頁;キャンポスCamposら、Blood81:3091-3096頁[1993];マクドーネルMcDonnellら、CancerRes.52:6940-6944頁[1992];ルーLuら、Int.JCancer53:29-35[1993];ボンナーBonnerら、LabInvest.68:43A頁[1993]。E.TGF-α形質転換成長因子アルファTGF-αは、アミノ酸50のポリペプチドである。TGF-αプロモーターのアミノ酸配列を図11に示している。それは、レトロウィルス形質転換されたマウス細胞系から最初に単離され、その後ヒト腫瘍細胞、早期ラット胎児細胞およびヒト脳下垂体の細胞培養物中に確認されている。TGF-αは、構造的にも機能的にも上皮成長因子EGFに密接に関連し、双方が同じ受容体、すなわち、上皮成長因子受容体EGFRに結合する。EGFおよびTGF-α双方の配列および三次元構造が決定されているキャンプベルCampbellら、Prog.GrowthFactorRes.1:13頁[1989]。TGF-αは、EGFと約40相同性の残基を有するアミノ酸50のポリペプチドである。両ペプチドは、3つの十分に定義されたループA、BおよびCと表示されるを特徴とし、3つの分子内ジスルフィド結合を有する。TGF-αおよびEGFなど幾つかの成長因子は、上皮成長因子受容体EGF受容体との相互作用を経て生物学的効果を発揮すると考えられている。EGF受容体は、タイプ1受容体チロシンキナーゼである。EGF受容体およびそのリガンドは、正常な生理学的過程ならびに過剰増殖疾患および腫瘍性疾患における役割に関して興味深い。TGF-αのインビボ前駆体は、開裂して溶解性化合物を産生するアミノ酸160の残基の膜結合タンパク質プロTGF-アルファであるマッサーグMassague、J.Biol.Chem.、265:21393-21396頁[1990]。この開裂は、6Kdの分子量を有する50のアミノ酸から構成される細胞外部分を除去し、タンパク質キナーゼCを経て作用するホルボールエステル類により刺激され得る重要な制御事象パンディエラPandiellaら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA、88:1726-1730頁[1990]と考えられているパンディエラPandiellaら、J.Biol.Chem.、266:5769-5773頁[1991]。培養ヒト前立腺腫瘍系は、上昇したTGF-αmRNAレベルを含有し、TGF-αに応答して増殖するワイルディングWildingら、TheProstate、15:1-12頁[1989]。TGF-αは、自己分泌機能およびパラ分泌機能の双方を有し、細胞分裂および血管新生などの生理的活性を刺激すると思われる。遺伝子導入マウスに誘導された場合、TGF-αは、上皮過形成およびもとの癌に似た病巣の異形成変化を生じさせるサンドグレンSandgrenら、Cell、61:1121-1135頁[1990]。F.c-ki-RASc-ki-RASKRAS発癌遺伝子は、遍在的に発現する。30kb超の長さを有するKRASは、HRASまたはNRASよりもはるかに大きい。c-ki-rasのプロモーター領域の配列を図5に示している。3つのras遺伝子、HRAS、KRAS、およびNRASは、異なる遺伝子構造を有するが、189のアミノ酸残基のタンパク質に関する全てのコードを総称して、p21と呼ばれる。これらの遺伝子は、それぞれのp21の12番目または61番目のアミノ酸残基の組込みに影響を及ぼす単一の点変異により悪性を獲得する。KRASは、HRASよりもはるかに多く悪性疾患に関与する。NIH3T3形質変換系における96のヒト腫瘍または腫瘍細胞系の研究においてパルシアニPulcianiら、Nature300:539頁1982、変異HRAS座はT24膀胱癌細胞においてのみに見られるが、一方、形質転換KRAS遺伝子は、8つの異なる癌および肉腫において確認されている。卵巣の重篤な嚢胞腺癌において、フェイグFeigらScience223:698頁1984は、活性化KRAS発癌遺伝子の存在を示したが、この遺伝子は、同じ患者の正常細胞で活性化されていない。形質転換遺伝子産物は、SDSポリアクリルアミドゲルにおいて他の腫瘍におけるKRAS形質転換タンパク質の移動度とは異なった電気泳動移動度を示した。したがって、先に記載されていない変異が、この卵巣癌におけるKRAS活性化の原因であった。肺癌における発癌遺伝子の役割を研究するために、ローデンヒュースRodenhuisらNewEng.J.Med.317:929頁1987は、インビトロ増幅ステップ後のオリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションに基づくアッセイを用いた。ゲノムDNAは、開胸術で得られた39の腫瘍標本から調べた。KRAS遺伝子は、10の腺癌のうちの5つにおいて、コドン12における点変異によって活性化されることが見出された。これら腫瘍のうちの2つは、サイズが2cm未満であり、転移はなかった。15の扁平細胞癌、10の大型細胞癌、1つの癌様体、肺外側の原発性腫瘍から2つの転移腺癌、および1つの小型細胞癌にHRAS、KRAS、またはNRAS変異は見られなかった。未変異KRAS遺伝子のおよそ20倍の増幅が、直腸癌の孤立性肺転移であると証明された腫瘍に見られた。ヤネズYanezらOncogene1:315頁1987は、16の大腸癌のうちの4つ、27の肺癌のうちの2つ、8つの乳癌のうちの1つにKRAS遺伝子のコドン12における変異を見出し;変異は、61位に見られなかった。コドン12における6つの可能なアミノ酸置換の中で、1つ以外の全ては同定された7つの変異に示されている。G.他の発癌遺伝子の標的本発明は、上記の発癌遺伝子に限定されない。本発明の方法は、公知のプロモーター領域を有する任意の発癌遺伝子との使用に好適である。代表的な発癌遺伝子としては、これらに限定はしないが、BCR/ABL、ABL1/BCR、ABL、BCL1、CD24、CDK4、EGFR/ERBB-1、HSTF1、INT1/WNT1、INT2、MDM2、MET、MYB、MYC、MYCN、MYCL1、RAF1、NRAS、REL、AKT2、APC、BCL2-ALPHA、BCL2-BETA、BCL3、BCR、BRCA1、BRCA2、CBL、CCND1、CDKN1A、CDKN1C、CDKN2A、CDKN2B、CRK、CRK-II、CSF1R/FMS、DBL、DDOST、DCC、DPC4/SMAD4、E-CAD、E2F1/RBAP、ELK1、ELK3、EPH、EPHA1、E2F1、EPHA3、ERG、ETS1、ETS2、FER、FGR、FLI1/ERGB2、FOS、FPS/FES、FRA1、FRA2、FYN、HCK、HEK、HER3/ERBB-2、ERBB-3、HER4/ERBB-4、HST2、INK4A、INK4B、JUN、JUNB、JUND、KIP2、KIT、KRAS2A、KRAS2B、LCK、LYN、MAS、MAX、MCC、MLH1、MOS、MSH2、MYBA、MYBB、NF1、NF2、P53、PDGFB、PIM1、PTC、RBI、RET、ROS1、SKI、SRC1、TAL1、TGFBR2、THRA1、THRB、TIAM1、TRK、VAV、VHL、WAF1、WNT2、WT1、YES1、ALK/NPM1、AMI1、AXL、FMS、GIP、GLI、GSP、HOX11、HST、IL3、INT2、KS3、K-SAM、LBC、LMO-1、LMO-2、L-MYC、LYL1、LYT-10、MDM-2、MLH1、MLL、MLM、N-MYC、OST、PAX-5、PMS-1、PMS-2、PRAD-1、RAF、RHOM-1、RUOM-2、SIS、TAL2、TAN1、TIAM1、TSC2、TRK、TSC1、STK11、PTCH、MEN1、MEN2、P57/KIP2、PTEN、HPC1、ATM、XPA/XPG、BCL6、DEK、AKAP13、CDH1、BLM、EWSR1/FLI1、FES、FGF3、FGF4、FGF6、FANCA、FLI1/ERGB2、FOSL1、FOSL2、GLI、HRAS1、HRX/MLLT1、HRX/MLLT2、KRAS2、MADH4、MAS1、MCF2、MLLT1/MLL、MLLT2/HRX、MTG8/RUNX1、MYCLK1、MYH11/CBFB、NFKB2、NOTCH1、NPM1/ALK、NRG/REL、NTRK1、PBX1/TCF3、PML/RARA、PRCA1、RUNX1、RUNX1/CBFA2T1、SET、TCF3/PBX1、TGFB1、TLX1、P53、WNT1、WNT2、WT1、αv-β3、PKCα、TNFα、クルステリンClusterin、サーバイビングSurviving、TGFβ、c-fos、c-SRC、およびINT-1が挙げられる。II.非発癌遺伝子の標的本発明は、発癌遺伝子の標的に限定されない。本発明の方法と組成物は、発現をダウンレギュレートすることが望ましい任意の遺伝子の標的化に使用される。例えば、幾つかの実施態様において、標的にされる遺伝子としては、これらに限定はしないが、免疫グロブリンまたは抗体遺伝子、凝固因子遺伝子、プロテアーゼ、脳下垂体ホルモン、プロテアーゼ阻害剤、成長因子、ソマトメジアン、ゴナドトロフィン、ケモタクチン、ケモカイン、血漿タンパク質、血漿プロテアーゼ阻害剤、インターロイキン、インターフェロン、サイトカイン、転写因子、または病原体標的例えば、ウィルス遺伝子、細菌遺伝子、微生物遺伝子、真菌遺伝子が挙げられる。特定の遺伝子の例としては、これらに限定はしないが、ADAMTS4、ADAMTS5、APOA1、APOE、APP、B2M、COX2、CRP、DDX25、DMC1、FKBP8、GH1、GHR、IAPP、IFNA1、IFNG、IL1、Il10、IL12、IL13、IL2、IL4、IL7、IL8、IPW、MAPK14、Mei1、MMP13、MYD88、NDN、PACE4、PRNP、PSEN1、PSEN2、RAD51、RAD51C、SAP、SNRPN、TLR4、TLR9、TTR、UBE3A、VLA-4、およびPTP-1B、c-RAF、m-TOR、LDL、VLDL、ApoB-100、HDL、VEGF、rhPDGF-BB、NADs、ICAM-1、MUC1、2-dG、CTL、PSGL-1、E2F、NF-kB、HIF、およびGCPRsが挙げられる。他の実施態様において、病原体の遺伝子が標的にされる。代表的な病原体としては、これらに限定はしないが、ヒト免疫不全ウィルス、B型肝炎ウィルス、C型肝炎ウィルス、A型肝炎ウィルス、呼吸器合胞体ウィルス、重篤な急性呼吸器症候群に関与する病原体、西ナイルウィルス、および食品伝染病原体例えば、大腸菌が挙げられる。III.DNAメチル化幾つかの実施態様において、本発明は、特定の部位においてメチル化されているオリゴヌクレオチド療法を提供する。本発明は、特定のメカニズムに限定されない。実際には、メカニズムの理解は、本発明を実施するために必要ではないが、遺伝子活性の制御のための1つのメカニズムは、DNAにおけるシトシン残基のメチル化であると考えられている。5-メチルシトシン5-MeCは、DNAにおいて検出された唯一の天然修飾塩基であるエーリックEhrlickら、Science212:1350-13571981。全ての遺伝子が、メチル化により調節されるとは限らないが、多くの遺伝子における特定の部位または特定の領域における低メチル化は、転写活性と相関するデールフラーDoerfler、Annu.Rev.Biochem.52:93-124頁[1984];クリストマンChristman、Curr.Top.Micribiol.Immunol.108:49-78頁[1988];Cedar、Cell34:5503-5513頁[1988]。インビトロでのDNAメチル化により、無細胞系における遺伝子の効率的な転写または形質移入遺伝子の一過性発現を防ぐことができる。また、幾つかの特定のシス制御領域におけるC残基のメチル化により、転写因子または抑制因子の結合をブロックまたは増強できるデールフラーDoerfler、上記文献;クリストマンChristman、上記文献;セダーCedar、Cell34:5503-5513頁1988;テートTateら、Curr.Opin.Genet.Dev.3:225-231頁[1993];クリストマンChristmanら、VirusStrategies編集、デールフラー,W.Doerfler,Wボーム,P.Bohm,P.VCH、ヴァインハイムWeinheim、ニューヨーク州319-333頁。DNAメチル化の正常パターンの破壊は、癌発生に関連づけられてきたクリストマンChristmanら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA、92:7347-7351頁[1995]。腫瘍および腫瘍誘導細胞系のDNAの5-MeC含量は、一般に正常組織よりも低いジョーンズJonesら、Adv.CancerRes40:1-30頁[1983]。c-myc、c-Ki-rasおよびc-Ha-rasなどの特定の発癌遺伝子の低メチル化は、種々のヒト腫瘍および動物腫瘍において検出されているナンブNambuら、Jpn.J.CancerGann78:696-704頁[1987];フェインバーグFeinbergら、Biochem.Biophys.Res.Commun.111:47-54頁[1983];チーCheahら、JNCI73:1057-1063頁[1984];ベーブBhaveら、CarcinogenesisLond9:343-348頁[1988]。ヒト腫瘍進行の最も良く研究された例の1つにおいて、DNAの低メチル化は、大腸癌発現における初期事象であることが示されているゲーツGoetzら、Science228:187-290頁[1985]。インビボでのメチル化妨害により、腫瘍形成に至り得る。L-メチオニンまたは5-アザシトジンなどのメチル化阻害剤の給餌またはリポトロープの除去した食餌の給餌を介した5-アデノシンメチオニンの重度の欠乏により、ラットにおいて肝腫瘍形成が誘導されることが報告されているウェインファンWainfanら、CancerRes.52:2071s-2077s頁[1992]。極度のリポトロープ欠乏食餌は、c-myc、rasおよびc-fosなどの遺伝子における特定の部位におけるメチル基の喪失を生じ得ることが研究により示されているディジクDizikら、Carcinogenesis12:1307-1312頁[1991]。DNAMTアーゼ活性のレベル上昇が存在しているにもかかわらず低メチル化が生じるウェインファンWainfanら、CancerRes.49:4094-4097頁[1989]。活性な増殖保持にとって必要な遺伝子は、分化時にメチル化されて不活化され、組織特異的遺伝子は低メチル化され、活性となる。したがって、低メチル化により、2つの状態間の平衡が移動し得る。したがって幾つかの実施態様において、本発明は、この自然現象を利用して、特異的遺伝子プロモーターの部位特異的メチル化のための組成物および方法を提供し、それによってある遺伝子の転写および翻訳を防ぐ。他の実施態様において、本発明は、遺伝子のメチル化パターンを変えることによって目的遺伝子例えば、腫瘍抑制遺伝子の発現をアップレギュレートする方法および組成物を提供する。本発明は、メチル化オリゴヌクレオチド類の使用に限定されない。実際、遺伝子発現阻害のための非メチル化オリゴヌクレオチド類の使用が、本発明により特に考慮されている。本発明の開発過程時に実施された実験により、Bcl-2に対して標的化された非メチル化オリゴヌクレオチドは、メチル化オリゴヌクレオチドのレベルと同等のレベルまでリンパ腫細胞の増殖を阻害することが立証された例えば、実施例8を参照。IV.オリゴヌクレオチド類幾つかの実施態様において、本発明は、発癌遺伝子の発現を阻害するための抗遺伝子オリゴヌクレオチド類を提供する。抗遺伝子のための代表的な設計および産生法が以下に記載されている。以下の記載は、本発明の使用に好適な抗遺伝子化合物の範囲を限定する意図はない。当業者は、さらなる抗遺伝子が、本発明の範囲内にあることを認識している。A.オリゴヌクレオチドの設計幾つかの実施態様において、オリゴヌクレオチド類は、好ましい計画評価基準に基づき設計される。次いでこのようなオリゴヌクレオチド類は、本明細書に開示された方法を用いて有効性に関して試験できる。例えば、幾つかの実施態様において、オリゴヌクレオチド類は、少なくとも1つ、好ましくは少なくとも2つ、さらにより好ましくはCpGアイランドの全てがメチル化される。他の実施態様において、オリゴヌクレオチド類はメチル化を含まない。本発明は、特定のメカニズムに限定されない。実際、メカニズムの理解は、本発明を実施するために必要としないが、好ましいオリゴヌクレオチド類は、少なくとも50GC含量および少なくとも2GCジヌクレオチド類を有するものであることが考慮されている。オリゴヌクレオチド類は、自己ハイブリダイズしないことが好ましい。幾つかの実施態様において、自己ハイブリダイゼーションを最少にするために少なくとも1AまたはTにより設計される。幾つかの実施態様において、自己ハイブリダイズする能力に関してオリゴヌクレオチド類を調査するために市販のコンピュータプログラムが用いられる。好ましいオリゴヌクレオチド類は、少なくとも10のヌクレオチド長、好ましくは少なくとも15のヌクレオチド長であって、100以下のヌクレオチド長である。特に好ましいオリゴヌクレオチド類は、18~24ヌクレオチド長である。幾つかの実施態様において、オリゴヌクレオチド類は、普遍的タンパク質結合配列CGCCCおよびCGCGまたはそれらの相補体を含む。また、オリゴヌクレオチドは、プロモーターのTATAボックスから上流の遺伝子のプロモーター領域にハイブリダイズすることが好ましい。また、オリゴヌクレオチド化合物は、ヒトゲノムの他の領域に完全には相同的でないことが好ましい。本発明のオリゴヌクレオチド化合物とゲノムの他の領域との相同性は、入手可能な探索手段例えば、NCBIのインターネットサイトで入手できるBLASTを用いて決定できる。幾つかの実施態様において、オリゴヌクレオチド類は、タンパク質例えば、転写因子により結合されることが知られている発癌遺伝子のプロモーター領域の領域とハイブリダイズするように設計される。本発明の代表的なオリゴヌクレオチド化合物は、図2、図4、図6、図8、図10、および図12に示される。本発明は、本明細書に記載されたオリゴヌクレオチド類に限定されない。他の好適なオリゴヌクレオチド類を同定できる例えば、上記の評価基準を用いて。開示されたオリゴヌクレオチド類の代表的なオリゴヌクレオチド変異体を、図25~図30に示している。候補オリゴヌクレオチド類は、これらに限定はしないが、下記の例示的実施例に記載されたものなど、任意の好適な方法を用いて有効性に関して試験できる。下記の実施例1および2に記載されたインビトロアッセイを用いて、候補オリゴヌクレオチド類は、種々の濃度で細胞増殖を防ぐ能力に関して評価できる。特に好ましいオリゴヌクレオチド類は、低濃度本明細書に開示されたインビトロアッセイにおいて、例えば、20μM未満、好ましくは10μM未満で細胞増殖の遺伝子発現を阻害するものである。B.好ましいオリゴヌクレオチドゾーン幾つかの実施態様において、発癌遺伝子のプロモーター領域内の領域が、オリゴヌクレオチド類のハイブリダイゼーションに関して好ましい領域としてさらに規定される。幾つかの実施態様において、これらの好ましい領域は、ホットゾーンと称される。幾つかの好ましい実施態様において、ホットゾーンは、有効であると示されているオリゴヌクレオチド化合物オリゴヌクレオチド類に関して上記節を参照および上記のオリゴヌクレオチド類に関して好ましい評価基準に基づいて有効であると考えられるものに基づいて規定される。好ましいホットゾーンは、各ホットゾーンに含まれた各化合物の10bp上流および下流を包含し、各化合物のさらに40bp上流または下流の増分内で少なくとも1以上のCGを有する。好ましい実施態様において、ホットゾーンは、ホットゾーンに含まれた各オリゴヌクレオチド化合物の最大100bp上流および下流を包含する。さらなる実施態様において、ホットゾーンは、各プロモーターの開始領域に規定される。これらのホットゾーンは、有効な配列または考慮された配列に基づいて規定され、200bpの好ましい最大長を有する。上記の評価基準に基づいて、代表的なホットゾーンが設計された。これらのホットゾーンを表1に示している。ナンバリングは、本発明の図に記載されている配列に基づいている。C.オリゴヌクレオチド類の調製および製剤化オリゴヌクレオチド合成の公知の任意の方法を使用して、本発明の修飾オリゴヌクレオチド類を調製することができる。メチル化オリゴヌクレオチド類を利用する幾つかの実施態様において、ヌクレオチド、dCは、本発明により教示される適切な場合5-メチル-dCにより置換される。本発明の修飾または非修飾オリゴヌクレオチド類は、任意の市販の自動化核酸合成機を用いることにより最も好適に調製される。それらはまた、顧客仕様書に従って注文オリゴヌクレオチド類を合成する市販の原料から得ることができる。オリゴヌクレオチド類が、化合物の好ましい形態であるが、本発明は、これらに限定はしないが、下記のようなオリゴヌクレオチド模倣物など、他のオリゴマーのオリゴヌクレオチド化合物を含む。本発明によるオリゴヌクレオチド化合物は、約18から約30の核酸塩基すなわち、約18から約30の結合塩基を含むことが好ましいが、より長い、またより短い配列を、本発明により使用できる。本発明に有用な好ましい化合物の具体的な例としては、修飾された主鎖または非天然のヌクレオシド間の結合を含有するオリゴヌクレオチド類が挙げられる。本明細書に定義されるように、修飾された主鎖を有するオリゴヌクレオチド類としては、主鎖にリン原子を保持するもの、および主鎖にリン原子を有さないものが挙げられる。本明細書の目的のために、ヌクレオシド間主鎖にリン原子を有さない修飾オリゴヌクレオチド類はまた、オリゴヌクレオシド類であることが考慮され得る。好ましい修飾オリゴヌクレオチド主鎖としては、例えば、ホスホロチオエート類、キラルホスホロチオエート類、ホスホロジチオエート類、ホスホトリエステル類、アミノアルキルホスホトリエステル類、3’-アルキレンホスホネート類ならびにキラルホスホネート類を含むメチルおよび他のアルキルホスホネート類、ホスフィネート類、3’-アミノホスホルアミデートならびにアミノアルキルホスホルアミデート類を含むホスホルアミデート類、チオノホスホルアミデート類、チオノアルキルホスホネート類、チオノアルキルホスホトリエステル類、および直鎖状3’-5’結合を有するボラノホスフェート類、これらの2’-5’結合アナログ、ヌクレオシド単位の隣接対が、3’-5’から5’-3’または2’-5’から5’-2’に結合している反転極性を有するものが挙げられる。種々の塩類、混合塩類および遊離酸形態もまた含まれる。リン原子を含まない好ましい修飾のオリゴヌクレオチド主鎖としては、短鎖アルキルまたはシクロアルキルヌクレオシド間結合、混合へテロ原子およびアルキルまたはシクロアルキルヌクレオシド間結合、または1つ以上の短鎖ヘテロ原子あるいはヘテロ環式ヌクレオシド間結合により形成される主鎖を有する。これらには、モルホリノ結合ヌクレオシドの糖部分から一部形成される;シロキサン主鎖;スルフィド、スルホキシドおよびスルホン主鎖;ホルムアセチルおよびチオホルムアセチル主鎖;メチレンホルムアセチルおよびチオホルムアセチル主鎖;アルケン含有主鎖;スルファメート主鎖;メチレンイミノおよびメチレンヒドラジノ主鎖;スルホネートおよびスルホンアミド主鎖;アミド主鎖;および混合N、O、SならびにCH2成分部分を有する他の主鎖を有するものが挙げられる。他の好ましいオリゴヌクレオチド模倣物において、ヌクレオシド単位の糖およびヌクレオシド間結合すなわち、主鎖は双方とも、新規な基により置換される。塩基単位は、適切な核酸標的化合物とのハイブリダイゼーションのために維持される。このようなオリゴマー化合物の1つである、優れたハイブリダイゼーション特性を有することが示されているオリゴヌクレオチド模倣物は、ペプチド核酸PNAと称される。PNA化合物において、オリゴヌクレオチドの糖主鎖は、アミド含有主鎖、特にアミノエチルグリシン主鎖により置換される。核酸塩基は、保持され、主鎖のアミド部分のアザ窒素原子に直接的または間接的に結合する。PNA化合物の調製を教示する代表的な米国特許としては、これらに限定はしないが、米国特許第5,539,082号明細書;米国特許第5,714,331号明細書;および米国特許第5,719,262号明細書が挙げられ、それらの各々は、参考文献として本明細書に組み込まれる。PNA化合物のさらなる教示は、ニールセンNielsenら、Science254:1497頁1991に見ることができる。幾つかの実施態様において、本発明のオリゴヌクレオチド類は、ホスホロチオエート主鎖を有するオリゴヌクレオチド類およびヘテロ原子主鎖を有するオリゴヌクレオシド類であり、特に-CH2、-NH-O-CH2-、-CH2-NCH3-O-CH2-[メチレンメチルイミノまたはMMI主鎖として知られている]、-CH2-O-NCH3-CH2-、-CH2-NCH3-NCH3-CH2-、および米国特許第5,489,677号明細書に引用される-O-NCH3-CH2-CH2-[固有のホスホジエステル主鎖は-O-P-O-CH2-として表される]、米国特許第5,602,240号明細書に引用されるアミド主鎖である。また、米国特許第5,034,506号明細書に引用されるモルホリノ主鎖構造を有するオリゴヌクレオチド類が好ましい。修飾オリゴヌクレオチド類はまた、1つ以上の置換糖部分を含有できる。好ましいオリゴヌクレオチド類は、2’位に以下のものの1つを含む:OH;F;O-、S-、またはN-アルキル;O-、S-、またはN-アルケニル;O-、S-、またはN-アルキニル;またはO-アルキル-O-アルキルの1つを含み、ここで該アルキル、該アルケニルおよび該アルキニルは、置換または非置換のC1からC10アルキルまたはC2からC10のアルケニルおよびアルキニルであり得る。O[CH2nO]mCH3、OCH2nOCH3、OCH2nNH2、OCH2nCH3、OCH2nONH2、およびOCH2nON[CH2nCH3]2が特に好ましく、式中nおよびmは、1から約10である。他の好ましいオリゴヌクレオチド類は、2’位に以下のものの1つを含む:C1からC10低級アルキル、置換低級アルキル、アルカリール、アラルキル、O-アルカリールまたはO-アラルキル、SH、SCH3、OCN、Cl、Br、CN、CF3、OCF3、SOCH3、SO2CH3、ONO2、NO2、N3、NH2、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルカリール、アミノアルキルアミノ、ポリアルキルアミノ、置換シリル、RNA開裂基、レポーター基、インターカレーター、オリゴヌクレオチドの薬物動態学的性質を改善するための基、またはオリゴヌクレオチドの薬力学的性質を改善するための基、および同様の性質を有する他の置換基。好ましい修飾としては、2’-メトキシエトキシ2’-O-CH2CH2OCH3、また2’-O-2-メトキシエチルまたは2’-MOEとして知られているマーチンMartinら、Helv.Chim.Acta78:486頁[1995]すなわち、アルコキシアルコキシ基が挙げられる。さらなる好ましい修飾としては、2’-ジメチルアミノオキシエトキシすなわち、OCH22ONCH32基、2’-DMAOEとしても知られており、2’-ジメチルアミノエトキシエトキシまた2’-O-ジメチルアミノエトキシエチルまたは2’-DMAEOEとしても知られている、すなわち2’-O-CH2-O-CH2-NCH22が挙げられる。他の好ましい修飾としては、2’-メトキシ2’-O-CH32’-アミノプロポキシ2’-OCH2CH2CH2NH2および2’-フルオロ2’-Fが挙げられる。同様の修飾は、オリゴヌクレオチド上の他の位置、特に3’末端ヌクレオチド上の糖の3’位または2’-5’結合オリゴヌクレオチドにおいて、および5’末端ヌクレオチドの5’位においても為すことができる。オリゴヌクレオチド類はまた、ペントフラノシル糖の代りにシクロブチル部分などの糖模倣物を有することができる。オリゴヌクレオチド類はまた、核酸塩基当業界ではしばしば単に塩基と称されるの修飾または置換を含むことができる。本明細書に用いられる非修飾または天然の核酸塩基としては、プリン塩基のアデニンAおよびグアニンG、ピリミジン塩基のチミンT、シトシンCおよびウラシルUが挙げられる。修飾核酸塩基としては、5-メチルシトシン5-me-C、5-ヒドロキシメチルシトシン、キサンチン、ヒポキサンチン、2-アミノアデニン、アデニンおよびグアニンの6-メチルならびに他のアルキル誘導体、アデニンおよびグアニンの2-プロピルならびに他のアルキル誘導体、2-チオウラシル、2-チオチミンおよび2-チオシトシン、5-ハロウラシルおよびシトシン、5-プロピニルウラシルおよびシトシン、6-アゾウラシル、シトシンおよびチミン、5-ウラシルシュードウラシル、4-チオウラシル、8-ハロ、8-アミノ、8-チオール、8-チオアルキル、8-ヒドロキシルおよび他の8-置換アデニン類およびグアニン類、5-ハロ、特に5-ブロモ、5-トリフルオロメチルおよび他の5-置換ウラシル類およびシトシン類、7-メチルグアニンおよび7-メチルアデニン、8-アザグアニンおよび8-アザアデニン、7-デアザグアニンおよび7-デアザアデニン、ならびに3-デアザグアニンおよび3-デアザアデニンなどの他の合成および天然核酸塩基が挙げられる。さらなる核酸塩基としては、米国特許第3,687,808号明細書に記載されているものが挙げられる。これら核酸塩基の中の幾つかは、本発明のオリゴマー化合物の結合親和性を増加させるために特に有用である。これらには、2-アミノプロピルアデニン、5-プロピニルウラシルおよび5-プロピニルシトシンなど、5-置換ピリミジン類、6-アザピリミジン類およびN-2、N-6およびO-6置換プリン類が含まれる。5-メチルシトシンの置換は、0.6~1.2°Cまで核酸二重鎖安定性を増加させることが示されており、現時点で、好ましい塩基置換であり、特に2’-O-メトキシエチル糖修飾と組合わせた場合はさらに好ましい。本発明のオリゴヌクレオチド類の別の修飾は、オリゴヌクレオチドの1つ以上の部分に対する化学的結合を含むか、またはオリゴヌクレオチドの活性、細胞分散または細胞取込みを増強する共役体を含む。このような部分としては、これらに限定はしないが、コレステロール部分、コール酸、チオエーテル例えば、ヘキシル-S-トリチルチオール、チオコレステロール、脂肪鎖例えば、ドデカンジオール残基またはウンデシル残基、リン脂質例えば、ジ-ヘキサデシル-rac-グリセロールまたはトリエチルアンモニウム1,2-ジ-O-ヘキサデシル-rac-グリセロ-3-H-ホスホネート、ポリアミン鎖もしくはポリエチレングリコール鎖またはアダマンタン酢酸、パルミチル部分、またはオクタデシルアミン部分あるいはヘキシルアミノ-カルボニル-オキシコレステロール部分などの脂質部分が挙げられる。当業者は、上記の修飾を含有するオリゴヌクレオチド類の生成法を熟知している。本発明は、上記のアンチセンスオリゴヌクレオチド類に限定されない。任意の好適な修飾または置換を利用できる。特定の化合物における全位置が必ずしも均一に修飾される必要はなく、実際、前述の修飾の1以上を、単一化合物にまたはさらには、オリゴヌクレオチド内の単一ヌクレオシドに取り込むこともできる。本発明は、また下記の通り本発明のアンチセンス化合物を含んでいる医薬組成物および製剤を含む。D.カクテル幾つかの実施態様において、本発明は、遺伝子例えば、発癌遺伝子のプロモーター領域に対して2つ以上のオリゴヌクレオチドを含むカクテルを提供する。幾つかの実施態様において、2つのオリゴヌクレオチドは、同じ遺伝子のプロモーターの異なる領域にハイブリダイズする。他の実施態様において、2つ以上のオリゴヌクレオチドは、2つの異なる遺伝子のプロモーターにハイブリダイズする。本発明は、特定のメカニズムに限定されない。実際、このメカニズムの理解は、本発明を実施するために必要ではないが、本発明の2つ以上の化合物の組合わせが、別々に投与された各々の化合物の付加的阻害よりも大きな癌細胞増殖阻害を提供することが考慮されている。V.研究使用本発明は、治療適用に限定されない。例えば、幾つかの実施態様において、本発明は、研究用手段としてオリゴヌクレオチド類使用のための組成物および方法を提供する。A.キット例えば、幾つかの実施態様において、本発明は、目的の遺伝子阻害に特異的なオリゴヌクレオチド類、および所望により遺伝子を発現するための公知の細胞系例えば、癌細胞系を含むキットを提供する。例えば、このようなキットは、代謝経路の確認または疾患例えば、癌における遺伝子の関与、ならびに診断適用に使用される。幾つかの実施態様において、さらにキットは、緩衝剤および他の必要な試薬、ならびにキットを使用するための取扱い説明書を含む。B.標的の検証幾つかの実施態様において、本発明は、遺伝子標的例えば、疾患に関与していると疑われる遺伝子の検証に使用するための方法および組成物を提供する。例えば、幾つかの実施態様において、広範なスクリーニング用途例えば、遺伝子発現アレイにおいて疾患に関与していることが同定されている遺伝子発現は、本発明の方法および組成物を用いてダウンレギュレートされる。本発明の方法および組成物は、標的の検証目的のためのインビトロおよびインビボ使用例えば、非ヒト動物においてに好適である。他の実施態様において、本発明の化合物は、移植術研究例えば、HLA阻害に使用される。C.薬物スクリーニング他の実施態様において、本発明の方法および組成物は、薬物スクリーニング用途に使用される。例えば、幾つかの実施態様において、本発明のオリゴヌクレオチド類は、対象の遺伝子発現を阻害するために細胞例えば、培養物中または非ヒト動物内のに投与される。幾つかの実施態様において、対象遺伝子の阻害は、生理的または疾患症状を模倣する。他の実施態様において、発癌遺伝子は阻害される。次に試験化合物例えば、低分子の薬物またはオリゴヌクレオチド模倣物を、試験細胞に投与し、試験化合物の効果をアッセイする。本発明の試験化合物は、生物学的ライブラリー;ペプトイドライブラリーペプチドの機能性を有するが、新規な非ペプチド主鎖を有し、酵素分解に耐性があるが、生物活性を維持する分子のライブラリー;例えば、ズッケンナンZuckennannら、J.Med.Chem.37:2678-85頁[1994]を参照;空間的に操作可能な平行固相または溶液相ライブラリー;分解分離を必要とする合成ライブラリー法;ワンビズワンコンパウンドライブラリー法;およびアフィニティークロマトグラフィ選択を用いる合成ライブラリー法を含む、当技術分野で公知の組合わせライブラリー法における多くの任意のアプローチを用いて得ることができる。生物学的ライブラリーおよびペプトイドライブラリーのアプローチは、ペプチドライブラリーとの使用に好ましいが、他の4つのアプローチは、ペプチド、非ペプチドオリゴマーまたは化合物の低分子ライブラリーに適用可能であるLam1997AnticancerDrugDes.12:145頁。分子ライブラリーの合成法の例は、例えば:デウィットDeWittら、Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90:6909頁[1993];エルブErbら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA91:11422頁[1994];ズッカーマンZuckermannら、J.Med.Chem.37:2678頁[1994];チョウChoら、Science261頁:1303頁[1993];カレルCarrellら、Angew.Chem.Int.Ed.Engl.33.2059頁[1994];カレルCarrellら、Angew.Chem.Int.Ed.Engl.33.2061頁[1994];およびギャロップGallopら、J.Med.Chem.37:1233頁[1994]の当技術分野で見ることができる。化合物のライブラリーは、溶液中例えば、ホーテンHoughten、Biotechniques13:412-421頁[1992]、またはビーズ上ラムLam、Nature354:82-84頁[1991]、チップ上フォーダーFodor、Nature364:555-556[1993]、細菌またはスポア上参考文献として本明細書に組み込まれる、米国特許第5,223,409号明細書、プラスミド上カルCullら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA89:18651869頁[1992]またはファージ上スコットおよびスミスScottandSmith、Science249:386-390頁[1990];デブリンDevlinScience249:404-406頁[1990];クワーラCwirlaら、Proc.Natl.Acad.Sci.87:6378-6382頁[1990];フェリシFelici、J.Mol.Biol.222:301頁[1991]において提供できる。VI.組成物および送達幾つかの実施態様において、本発明のオリゴヌクレオチド化合物は、医薬品として対象への送達用に医薬組成物として製剤化できる。本発明の新規な抗原化合物は、遺伝子発現または細胞増殖を阻害することが望ましい種々の疾患状態および症状の治療における使用が見出された。幾つかの好ましい実施態様において、該化合物は、例えば、これに限定はしないが、癌など無制御細胞増殖から生じる疾患状態を治療するために用いられる。本発明は、特定の癌の治療に限定されない。本発明のオリゴヌクレオチド化合物は、これらに限定はしないが、乳癌、大腸癌、肺癌、胃癌、膵癌、膀胱癌、白血病、およびリンパ腫などの種々の癌の治療に好適である。下記の考察により、製剤化および投与量の代表的な非限定例が提供される。A.医薬組成物本発明は、医薬組成物例えば、上記のオリゴヌクレオチド化合物を含むをさらに提供する。本発明の医薬組成物は、局所治療または全身治療が望ましいかどうかに依って、また治療を受ける部位に依って多くの方法で投与できる。投与は、局所眼ならびに膣および直腸などの粘膜送達など、肺例えば、ネブライザーによるなどの散剤またはエーロゾル剤の吸入またはガス注入;気管内、鼻腔内、表皮および経皮、経口または非経口であり得る。非経口投与としては、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内または筋肉内注射または輸注;または頭蓋内投与、例えば髄腔内投与または心室内投与が挙げられる。局所投与用の医薬組成物および製剤としては、経皮用パッチ、軟膏、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤、点滴剤、座剤、スプレー剤、液剤および散剤を挙げることができる。従来の製薬担体、水性基剤、粉末基剤または油性基剤、増粘剤などが必要で、または望ましいと思われる。経口投与用の医薬組成物および製剤としては、散剤または顆粒剤、水媒体または非水媒体中の懸濁剤また液剤、カプセル剤、サッシェまたは錠剤が挙げられる。増粘剤、風味剤、希釈剤、乳化剤、分散補助剤または結合剤が望ましいと思われる。非経口投与、髄腔内投与または心室内投与用の医薬組成物および製剤としては、緩衝剤、希釈剤、これらに限定はしないが、透過エンハンサー、担体化合物および他の医薬的に許容できる担体または賦形剤などの好適な添加物も含有できる滅菌水溶液を挙げることができる。本発明の医薬組成物としては、これらに限定はしないが、液剤、乳濁剤、およびリポソーム含有製剤が挙げられる。これらの組成物は、これらに限定はしないが、予め形成された液体、自己乳化固体および自己乳化半固体を含む種々の成分から生成できる。単位剤形において都合よく存在し得る本発明の製薬製剤は、製薬業界に周知の従来からの技法に従って調製できる。このような技法は、有効成分と製薬用担体または賦形剤とを組合わせるステップを含む。一般に製剤は、有効成分と液体担体または微粉固体担体あるいは双方を均一かつ密接に組合わせ、次いで必要ならば製造物を成形することにより調製される。本発明の組成物は、これらに限定はしないが、錠剤、カプセル剤、液体シロップ剤、軟質ゲル剤、座剤、および浣腸などの多くの任意の可能な剤形に製剤化できる。本発明の組成物はまた、水性媒体、非水媒体または混合媒体中の懸濁剤として製剤化できる。水性懸濁剤は、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトールおよび/またはデキストランなど、懸濁剤の粘度を増加させる物質をさらに含有できる。懸濁剤はまた、安定化剤を含有できる。本発明の一実施態様において、医薬組成物を製剤化し、発泡剤として使用できる。製薬発泡剤としては、これらに限定はしないが、乳濁剤、ミクロ乳濁剤、ジェリーおよびリポソームなどの製剤が挙げられる。基本的性質は同様であるが、これらの製剤は、最終製造物の成分および粘稠度において変化がある。細胞レベルにおいてオリゴヌクレオチド類の取込みを増強させる化合物もまた、本発明の医薬品および他の成分に添加できる。例えば、リポフェクチン米国特許第5,705,188号明細書などのカチオン性脂質、カチオン性グリセロール誘導体、およびポリリジン国際公開第97/30731号パンフレットなどのポリカチオン性分子もまた、オリゴヌクレオチド類の細胞取込みを増強させる。本発明の組成物は、従来から医薬組成物に見られた他の補助剤成分をさらに含有できる。したがって、例えば、該組成物は、例えば、止痒剤、収斂剤、局所麻酔剤または抗炎症剤など、さらなる適合性の製薬活性物質を含有できるか、または本発明の組成物の種々の剤形を物理的に形成する上で有用なさらなる物質、例えば色素、風味剤、保存剤、抗酸化剤、乳白剤、増粘剤および安定化剤など、を含有できる。しかしながら、このような物質が添加された場合に、本発明の組成物成分の生物活性を過度に妨害してはならない。該製剤は滅菌でき、所望ならば、製剤の核酸と有害な相互作用をしない補助剤、例えば、潤滑剤、保存剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を及ぼす塩類、緩衝剤、着色剤、風味剤および/または芳香物質などと混合できる。経口投与用組成物および製剤としては、散剤または顆粒剤、ミクロ粒子剤、ナノ粒子剤、水媒体または非水媒体中の懸濁剤また液剤、カプセル剤、ゲルカプセル剤、サッシェ、錠剤またはミニ錠剤が挙げられる。増粘剤、風味剤、希釈剤、乳化剤、分散補助剤または結合剤が望ましいと思われる。好ましい経口用製剤は、本発明のオリゴヌクレオチド類が、1種以上の透過エンハンサー、界面活性剤およびキレート化剤と組合わせて投与されるものである。好ましい界面活性剤としては、脂肪酸および/またはそのエステル類または塩類、胆汁酸および/またはその塩類が挙げられる。好ましい胆汁酸/塩類としては、ケノデオキシコール酸CDCAおよびウルソデオキシケノデオキシコール酸UDCA、コール酸、デヒドロコール酸、ヒドロキシコール酸、グルコール酸、グリコール酸、グリコデオキシコール酸、タウロコール酸、タウロデオキシコール酸、タウロ-24,25-ジヒドロ-フシジン酸ナトリウム、グリコジヒドロフシジン酸ナトリウムが挙げられる。好ましい脂肪酸としては、アラキドン酸、ウンデカン酸、オレイン酸、ラウリン酸、カプリル酸、カプリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、リノール酸、リノレン酸、ジカプレート、トリカプレート、モノオレイン、ジラウリン、グリセリル1-モノカプレート、1-ドデシルアザシクロヘプタン-2-オン、アシルカルニチン、アシルコリン、またはモノグリセリド、ジグリセリドまたは医薬的に許容できるその塩例えば、ナトリウムが挙げられる。透過エンハンサーの組合わせ、例えば、胆汁酸/塩類と組合わせた脂肪酸/塩類もまた好ましい。特に好ましい組合わせは、ラウリン酸、カプリン酸およびUDCAのナトリウム塩である。さらなる透過エンハンサーとしては、ポリオキシエチレン-9-ラウリルエーテル、ポリオキシエチレン-20-セチルエーテルが挙げられる。本発明のオリゴヌクレオチド類は、スプレー乾燥粒子などの顆粒形態で経口送達でき、あるいはミクロ粒子またはナノ粒子を形成するために複合化できる。オリゴヌクレオチド錯化剤としては、ポリアミノ酸類;ポリイミン類;ポリアクリレート類;ポリアルキルアクリレート類、ポリオキシエタン類、ポリアルキルシアノアクリレート類;カチオン化ゼラチン類、アルブミン類、澱粉類、アクリレート類、ポリエチレングリコール類PEGおよび澱粉類;ポリアルキルシアノアクリレート類;DEAE誘導化ポリイミン類、ポルラン類、セルロース類および澱粉類が挙げられる。特に好ましい錯化剤としては、キトサン、N-トリメチルキトサン、ポリ-L-リジン、ポリヒスチジン、ポリオルニチン、ポリスペルミン類、プロタミン、ポリビニルピリジン、ポリチオジエチルアミノ-メチルエチレンPTDAE、ポリアミノスチレン例えば、p-アミノ、ポリメチルシアノアクリレート、ポリエチルシアノアクリレート、ポリブチルシアノアクリレート、ポリイソブチルシアノアクリレート、ポリイソヘキシルシアノアクリレート、DEAE-メタクリレート、DEAE-ヘキシルアクリレート、DEAE-アクリルアミド、DEAE-アルブミンおよびDEAE-デキストラン、ポリメチルアクリレート、ポリヘキシルアクリレート、ポリD,L-乳酸、ポリDL-乳酸-コ-グリコール酸PLGA、アルギネート、ポリエチレングリコールPEGが挙げられる。本発明の特定の実施態様では、a1種以上のオリゴヌクレオチド化合物およびb非オリゴヌクレオチドメカニズムによって機能する1種以上の他の化学療法剤を含有する医薬組成物が提供される。このような化学療法剤の例としては、これらに限定はしないが、ダウノルビシン、ダクチノマイシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシン、ナイトロジェンマスタード、クロラムブシル、メルファラン、シクロホスファミド、6-メルカプトプリン、6-チオグアニン、シタラビンCA、5-フルオロウラシル5-FU、フロクスウリジン5-FUdR、メトトレキサートMTX、コルヒチン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、エトポシド、テニポシド、シスプラチンおよびジエチルスチルベストロールDESなどの抗癌剤が挙げられる。これらに限定はしないが、非ステロイド系抗炎症薬およびコルチコステロイド類などの抗炎症薬、これらに限定はしないが、リビビリン、ビダラビン、アシクロビルおよびガンシクロビルなどの抗ウイルス薬もまた、本発明の組成物に組合わせることができる。他の非オリゴヌクレオチド化学療法剤もまた、本発明の範囲内にある。2種以上の組合わせ化合物は、一緒にまたは連続的に使用できる。B.送達本発明のオリゴヌクレオチド化合物は、任意の好適な方法を用いて送達できる。幾つかの実施態様において、裸のDNAを投与する。他の実施態様において、リポフェクションは、対象への核酸の送達に利用される。別のさらなる実施態様において、オリゴヌクレオチド類を送達のためにホスホチオレート類により修飾される例えば米国特許第6,169,177号明細書を参照されたい。出典明示により参考文献として本明細書に組み込まれる。幾つかの実施態様において、送達用の核酸類は、それらの取込みを補助するために圧縮される例えば、参考文献として本明細書に組み込まれる、米国特許第6,008,366号明細書、米国特許第6,383,811号明細書を参照されたい。幾つかの実施態様において、圧縮された核酸類は、標的の細胞結合部分を介して特定の細胞タイプ例えば、癌細胞に標的化される例えば、各々が参考文献として本明細書に組み込まれる、米国特許第5,844,107号明細書、米国特許第6,077,835号明細書を参照されたい。幾つかの実施態様において、オリゴヌクレオチド類は、それらの送達を補助するために他の化合物に結合させる。例えば、幾つかの実施態様において、核酸類は、送達を補助するためにポリエチレングリコールに結合させる例えば、各々が参考文献として本明細書に組み込まれ、米国特許第6,177,274号明細書、米国特許第6,287,591号明細書、米国特許第6,447,752号明細書、米国特許第6,447,753号明細書および米国特許第6,440,743号明細書を参照されたい。さらに他の実施態様において、オリゴヌクレオチド類は、帯電可能な薬物ナノ担体ファルマインPharmaInである保護されたグラフトコポリマー類に結合させる。なおさらなる実施態様において、オリゴヌクレオチド類の細胞内への輸送は、ビタミン類との結合により促進されるエンドサイトEndocyte社、WestLafayette、インディアナ州;例えば、米国特許第5,108,921号明細書、米国特許第5,416,016号明細書、米国特許第5,635,382号明細書、米国特許第6,291,673号明細書および国際公開第02/085908号パンフレットを参照されたい。各々が参考文献として本明細書に組み込まれる。他の実施態様において、オリゴヌクレオチド類は、ナノ粒子に結合される例えば、ナノメッド製薬会社NanoMedPharmaceuticals;Kalamazoo、ミシガン州。好ましい実施態様において、オリゴヌクレオチド類は、送達を補助するために脂質例えば、リポソーム類またはミセル類に封入される例えば、各々が参考文献として本明細書に組み込まれ、米国特許第6,458,382号明細書、米国特許第6,429,200号明細書を参照されたい。好ましいリポソーム類としては、これらに限定はしないが、カルジオリピンを基にしたカチオン性リポソーム類例えば、ネオファームNeoPharm、ForestLake、イリノイ州から入手できるNEOPHECTINが挙げられる。幾つかの好ましい実施態様において、NEOPHECTIN対オリゴヌクレオチドの充填比は6:1である。なおさらなる実施態様において、オリゴヌクレオチド類は、送達を補助するためにさらにポリマー類と錯化される例えば、米国特許第6,379,966号明細書、米国特許第6,339,067号明細書、米国特許第5,744,335号明細書を参照されたい;それらの各々は参考文献として本明細書に組み込まれる;イントラジグムIntradigm社、Rockville、メリーランド州を参照。なおさらなる実施態様において、マイルスMirusMadison、ウィスコンシン州により開発された制御された高圧送達系が、オリゴヌクレオチド類の送達に利用されている。C.投与量投薬は、治療を受ける疾患状態の重症度および応答性に依り治療の過程は、数日から数ヵ月までか、あるいは治癒が達成されるまでか、または疾患状態の減退が達成されるまで続く。最適な投薬計画は、患者の体内における薬物蓄積の測定から算出できる。投与担当医師は、最適用量、投薬方法論および反復率を容易に判定できる。最適用量は、個々のオリゴヌクレオチドの相対的効力、および送達手段に依って変えることができ、インビトロおよびインビボの動物モデルで有効であると判っているEC50sに基づき、または本明細書に記載された実施例に基づいて一般的に推定できる。一般に、用量は、体重1kg当り0.01μgから100gであり、毎日、毎週、毎月または毎年1回以上投与できる。幾つかの実施態様において、投与は、数時間から数日または数週の期間継続される例えば、静脈内に。幾つかの実施態様において、処置は、規定された期間連続して投与された後、処置なしの期間が続く。幾つかの実施態様において、連続投薬に次いで処置なしの期間というパターンが、数回例えば、疾患状態が減退するまで反復される。担当医師は、体液または組織における測定した薬物の滞留時間および濃度に基づいて投薬に関する反復率を推定できる。治療の成功後、疾患状態の再発を防ぐために、対象に維持療法を受けさせることが望ましいと考えられ、該オリゴヌクレオチドを、体重1kg当り0.01μgから100g、好ましくは1mgから50mg、さらにより好ましくは6mgから30mgの範囲の維持用量で、1日1回以上から20年毎に1回投与される。VII.併用療法幾つかの実施態様において、本発明の組成物は、既存の療法と併用して提供される。他の実施態様において、本発明の2つ以上の化合物は、組合わせて提供される。幾つかの実施態様において、本発明の成分は、公知の化学癌療剤と併用して提供される。本発明は、特定の化学療法剤に限定されない。種々のクラスの抗悪性腫瘍例えば、抗癌剤が、本発明の特定の実施態様における使用のために考慮される。本発明による使用に好適な抗癌剤は、これらに限定はしないが、アポトーシスを誘導する、アデノシンデアミナーゼ機能を阻害する、ピリミジン生合成を阻害する、プリン環生合成を阻害する、ヌクレオチド相互変換を阻害する、リボヌクレオチドレダクターゼを阻害する、チミジンモノホスフェートTMP合成を阻害する、ジヒドロフォレート還元を阻害する、DNA合成を阻害する、DNAとの付加体を形成する、DNAを損傷する、DNA修復を阻害する物、DNAとインターカレートする物、アスパラギン類をデアミネートする物、RNA合成を阻害する物、タンパク質合成または安定性を阻害する物、微小管合成または機能を阻害する物質などが挙げられる。幾つかの実施態様において、本発明の組成物および方法の使用に好適な代表的な抗癌剤としては、これらに限定はしないが:1微小管阻害剤例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、およびビンデシンなど、微小管安定化剤例えば、パクリタキセルTAXOL、およびドセタキセルなどを含むアルカロイド類、エピポドフィロトキシン類例えば、エトポシドVP-16、およびテニポシドVM-26などなどのトポイソメラーゼ阻害剤を含むクロマチン機能阻害剤、トポイソメラーゼIを標的とする薬剤例えば、カンプトテシンおよびイシリノテカンCPT-11など;2ナイトロジェンマスタード類例えば、メクロレタミン、クロラムブシル、シクロホスファミド、イフォスファミド、およびブスルファンMYLERANなど、ニトロソ尿素類例えば、カルムスチン、ロムスチン、およびセムスチンなど、および他のアルキル化剤例えば、ダカルバジン、ヒドロキシメチルメラミン、チオテパ、およびマイトマイシンなどなどの共有DNA結合剤アルキル化剤;3核酸阻害剤例えば、ダクチノマイシンアクチノマイシンDなど、アントラサクリン類例えば、ダウノルビシンダウノマイシンおよびセルビジン、ドキソルビシンアドリアマイシン、およびイダルビシンイダマイシンなど、アントラセンジオン類例えば、ミトキサントロンなどのアントラサクリンアナログ、ブレオマイシン類BLENOXANEなど、およびプリカマイシンミトラマイシンなどの非共有DNA結合剤抗腫瘍抗生物質;4葉酸代謝拮抗薬例えば、メトトレキサート、FOLEX、およびMEXATEなど、プリン代謝拮抗薬例えば、6-メルカプトプリン6-MP、PURINETHOL、6-チオグアニン6-TG、アザチオプリン、アシクロビル、ガンシクロビル、クロロデオキシアデノシン、2-クロロデオキシアデノシンCdA、および2’-デオキシコフォルマイシンペントスタチンなど、ピリミジンアンタゴニスト例えば、フルオロピリミジン類例えば、5-フルオロウラシルADRUCIL、5-フルオロデオキシウリジンFdUrdフロクスウリジンなど、およびシトシンアラビノシド類例えば、CYTOSARara-Cおよびフルダラビンなどなどの代謝拮抗薬;5L-アスパラギナーゼ、およびヒドロキシ尿素などの酵素;6グルココルチコイド類、抗エストロゲン類例えば、タモキシフェンなど、非ステロイド系抗アンドロゲン類例えば、フルタミドなど、およびアロマターゼ阻害剤例えば、アナストロゾールARIMIDEXなどなどのホルモン類;7白金化合物例えば、シスプラチンおよびカルボプラチンなど;8抗癌剤、毒素、および/または放射性核種と結合したモノクローナル抗体など;9生体応答調整物質例えば、インターフェロン類例えば、IFN-αなどおよびインターロイキン類例えば、IL-2などなど;10養子免疫治療;11造血成長因子;12腫瘍細胞分化を誘導する薬剤例えば、オール-トランス-レチノイン酸など;13遺伝子療法技法;14アンチセンス療法技法;15腫瘍ワクチン;16腫瘍転移に対する療法例えば、バチマスタットbatimastatなど;17血管新生阻害剤;18プロテオソーム阻害剤例えば、VELCADE;19アセチル化阻害剤および/またはメチル化阻害剤例えば、HDAC阻害剤;20NFκBのモジュレーター;21細胞分裂周期調節阻害剤例えば、CDK阻害剤;22p53タンパク質機能のモジュレーター;および23放射線、が挙げられる。癌療法作業場所でルーチンに使用される任意の腫瘍融解剤が、本発明の組成物および方法における使用を見出される。例えば、米国食品医薬品局は、米国での使用に承認された腫瘍崩壊性剤の処方を支持している。U.S.F.D.A.に対応する国際政府機関は、同様の処方を支持している。表3は、米国における使用に関して承認された代表的な抗悪性腫瘍薬のリストを提供している。米国で承認された全ての化学療法薬に対して求められる製品分類が、代表的な薬剤に関して承認された効能効果、投薬情報、毒性データなどが記載されていることを当業者は認識されるであろう。表3VIII.カスタマイズされた患者医療幾つかの実施態様において、本発明は、カスタマイズされた患者治療を提供する。本発明の組成物は、患者疾患例えば、癌に独特な特定の遺伝子を標的にする。例えば、幾つかの実施態様において、患者の癌または他の患部組織例えば、生検のサンプルを最初に得る。特定の遺伝子例えば、発癌遺伝子の発現の存在について生検を分析する。幾つかの好ましい実施態様において、患者の遺伝子の発現レベルを分析する。発現は、特定の発癌遺伝子に対応するRNAまたはDNAの存在に関してモニタリングすることによって検出できる。これらに限定はしないが、下記に開示されたものなどの任意の好適な検出法を利用できる。対象患者遺伝子の遺伝子発現パターンの特徴分析後、カスタマイズ療法を、各患者のために作製する。好ましい実施態様において、患者に異常発現する例えば、腫瘍において遺伝子に特異的なオリゴヌクレオチド化合物を、治療カクテル中で混合する。幾つかの実施態様において、治療カクテルは、追加の化学療法剤例えば、上記のものをさらに含む。次に該カクテルを、上記のとおり患者に投与する。幾つかの実施態様において、癌サンプルの分析および治療化合物に関するオリゴヌクレオチドの選択は自動化される。例えば、幾つかの実施態様において、オリゴヌクレオチド類の最適な選択および濃度に達するために、一連の発癌遺伝子の発現レベルを解析するソフトウェアプログラムを利用する。幾つかの実施態様において、該解析は、患者サンプルを解析する臨床検査室により実施され、治療カクテルの製剤化に関する第2のプロバイダーに伝達される。幾つかの実施態様において、この情報は、インターネットで伝達され、したがって、診断と治療開始との間での最短時間を可能にする。A.RNAの検出幾つかの実施態様において、発癌遺伝子の検出例えば、これらに限定はしないが、本明細書に記載されたものなどを含むは、組織サンプル例えば、癌組織中の対応するmRNAの発現を測定することによって検出される。他の実施態様において、mRNAの発現は、これらに限定はしないが、血液、血清、粘液、尿などの体液中で測定される。幾つかの好ましい実施態様において、mRNAの発現レベルは、定量的に測定される。RNA発現は、下記に開示したものなど、任意の好適な方法により測定できるが、これに限定するものではない。幾つかの実施態様において、RNAは、ノーザンブロット解析により検出される。ノーザンブロット解析は、RNAの分離および相補的な標識プローブのハイブリダイゼーションを含む。他の実施態様において、RNA発現は、特定の構造の酵素的開裂によって検出されるINVADERアッセイ、ThirdWaveTechnologies;例えば、米国特許第5,846,717号明細書;米国特許第6,090,543号明細書;米国特許第6,001,567号明細書;米国特許第5,985,557号明細書;および米国特許第5,994,069号明細書を参照されたい;それらの各々は、参考文献として本明細書に組み込まれる。INVADERアッセイは、オーバラップするオリゴヌクレオチドプローブのハイブリダイゼーションにより形成された複合体を開裂する構造特異的酵素を用いることによって特定の核酸配列例えば、RNAを検出する。さらなる実施態様において、RNAまたは対応するcDNAは、オリゴヌクレオチドプローブに対するハイブリダイゼーションによって検出される。ハイブリダイゼーションおよび検出のための種々の技法を用いる種々のハイブリダイゼーションアッセイが利用できる。例えば、幾つかの実施態様において、TaqManアッセイPEバイオシステムズPEBiosystems、FosterCity、カリフォルニア州;例えば、米国特許第5,962,233号明細書および米国特許第5,538,848号明細書を参照されたく;それらの各々は、参考文献として本明細書に組み込まれるが利用される。該アッセイは、PCR反応時に実施される。TaqManアッセイは、AMPLITAQGOLDDNAポリメラーゼの5’-3’エキソヌクレアーゼ活性を活用する。5’-レポーター染色例えば、蛍光染色および3’-クエンチャー染色を有するオリゴヌクレオチドからなるプローブが、PCR反応に含まれる。PCR中、プローブが標的に結合されている場合、AMPLITAQGOLDポリメラーゼの5’-3’の核酸開裂活性により、レポーター染色とクエンチャー染色との間でプローブが開裂される。クエンチャー染色からレポーター染色が分離されることにより、蛍光が増加する。このシグナルはPCRの各サイクルにより蓄積され、蛍光光度計によりモニターできる。さらに他の実施態様において、RNA発現を検出するために逆転写酵素PCRRT-PCRが用いられる。RT-PCRにおいて、RNAは、逆転写酵素を用いて相補的なDNAすなわちcDNAに酵素的に変換される。次にcDNAは、PCR反応のためのテンプレートとして使用される。PCR産物は、これらに限定はしないが、ゲル電気泳動およびDNA特異的染色による染色または標識プローブに対するハイブリダイゼーションなど、任意の好適な方法により検出できる。幾つかの実施態様において、米国特許第5,639,606号明細書、米国特許第5,643,765号明細書、および米国特許第5,876,978号明細書それらの各々は、参考文献として本明細書に組み込まれるに記載されている競合的テンプレート法の標準的混合物による定量的逆転写酵素PCRが利用される。B.タンパク質の検出他の実施態様において、発癌遺伝子の遺伝子発現は、対応するタンパク質またはポリペプチドの発現を測定することにより検出される。幾つかの実施態様において、タンパク質発現は、組織サンプルにおいて検出される。他の実施態様において、タンパク質発現は、体液中に検出される。幾つかの実施態様において、タンパク質発現レベルは定量化される。タンパク質発現は、任意の好適な方法により検出できる。幾つかの実施態様において、タンパク質は、タンパク質に対して生じる抗体との結合によって検出される。抗体の生成は、当業者に周知である。抗体結合は、当技術分野で公知の技法例えば、放射免疫アッセイ、ELISA酵素結合免疫吸着アッセイ、サンドイッチ免疫アッセイ、免疫放射線アッセイ、ゲル内沈降反応、免疫拡散アッセイ、インサイチュ免疫アッセイ例えば、金コロイド、酵素または放射性同位元素標識を用いて、ウェスタンブロット、沈殿反応、凝集反応アッセイゲル凝集アッセイ、赤血球凝集反応アッセイなど、補体結合反応アッセイ、免疫蛍光アッセイ、タンパク質Aアッセイ、および免疫電気泳動アッセイなどにより検出される。一実施態様において、抗体結合は、一次抗体上の標識を検出することにより検出される。別の実施態様において、該一次抗体は、二次抗体または一次抗体への試薬の結合を検出することにより検出される。さらなる実施態様において、該二次抗体が標識される。免疫アッセイにおける結合を検出するための多くの方法が当技術分野で公知であり、本発明の範囲内にある。幾つかの実施態様において、自動化検出アッセイが利用される。免疫アッセイの自動化法としては、米国特許第5,885,530号明細書、米国特許第4,981,785号明細書、米国特許第6,159,750号明細書、および米国特許第5,358,691号明細書に記載されているものが挙げられ、それらの各々は、参考文献として本明細書に組み込まれる。幾つかの実施態様において、結果の解析および提示もまた自動化されている。例えば、幾つかの実施態様において、発癌遺伝子に対応する一連のタンパク質の存在または不在に基づく発現プロフィルを作製するソフトウェアが利用される。他の実施態様において、該免疫アッセイは、米国特許第5,599,677号明細書および米国特許第5,672,480号明細書に記載されており;それらの各々は、参考文献として本明細書に組み込まれる。以下の実施例は、本発明の特定の好ましい実施態様および態様を示し、さらに説明するために提供されるものであり、本発明の範囲を限定するものとして解釈してはならない。以下の実施例の開示において、以下の略語が適用される:N正常;Mモル;mMミリモル;μMマイクロモル;molモル;mmolミリモル;μmolマイクロモル;nmolナノモル;pmolピコモル;gグラム;mgミリグラム;μgマイクログラム;ngナノグラム;lまたはLリットル;mlミリリットル;μlマイクロリットル;cmセンチメートル;mmミリメートル;μmマイクロメートル;nmナノメートル;および°C摂氏度。実施例1材料と方法本実施例では、下記の実施例に利用される実験方法を記載する。A.細胞系本発明の実験に使用される細胞系を以下に記載する。MDA-MB-231組織:悪性腺腫;乳腺;乳房;胸水腫瘍化:悪性腺腫グレードIIIを形成発現受容体:上皮成長因子EGFおよび形質転換成長因子TGF-アルファ発癌遺伝子:wnt3およびwnt7h引用文献:シシリアノMJSicilianoMJ、バーカーPEBarkerPE、ケーローRCailleau。共通の染色体マーカーを有するヒト乳房腫瘍細胞系の相互に排他的な遺伝子記号。CancerRes.1979年3月;393:919-22頁カローRCalleauR、オリーブMOliveM、クルシガーQVCrucigerQV。転移起源の長期ヒト乳癌細胞系:予備的特性化。インビトロ1978年11月;1411:911-5頁。クルシガーQVCrucigerQV、パサクSPathakS、カローRCalleauR。ヒト乳癌:7つの症例中1qを含む標識染色体。CytogenetCellGenet.1976年;174:231-5頁。サチヤプラカシュKLSatya-PrakashKL、パサクSPathakS、スーTCHsuTC、オリーブMOliveM、カローRCalleauR。8種のヒト乳癌細胞系に対する細胞遺伝学的分析:高頻度の1q、11qおよびHeLa様標識染色体。CancerGenetCytogenet1981年1月;31:61-73頁。MCF7組織:悪性腺癌、乳腺、乳房転移部位:胸水受容体:エストロゲン受容体発癌遺伝子:wnt7hこの細胞系はまた、c-erbB-2を中程度に発現し、c-myc発癌遺伝子を過剰発現することが知られている。細胞産物:インスリン様成長因子結合タンパク質IGFBP。引用文献:ソールHDSouleHDら、乳癌に由来する胸水からのヒト細胞系。J.Natl.CancerInst.51:1409-1416頁、1973年。ランダースJELandersJEら、安定化された野生型p53タンパク質を含有するヒト腫瘍細胞におけるmdm2発癌遺伝子発現の翻訳増強。CancerRes.57:3562-3568頁、1997年。ベーカスSSBacusSSら、細胞表面のHER-2/neuオリゴヌクレオチドの減少と関連する培養ヒト癌細胞AU-565およびMCF7の分化。Mol.Carcinog.3:350-362頁、1990年。MCF10CA1MCF10細胞は、線維嚢胞疾患の女性からの良性乳房組織に由来する。MCF10系は、7種の系からなり、1つは、不死化正常ヒト乳房細胞系のMCF10Aである。MCF10Aは、T24Ha-rasにより形質転換されて、MCF10AneoT細胞を作製する。腫瘍性進行可能性を有するMCF10ATは、異種移植片継代のMCF10-AneoT細胞に由来する。MCF10ATは、約25の異種移植片に癌を発生する。完全悪性MCF10CA1細胞系は、数回のMCF10ATの異種移植片継代物に由来した。MCF10CA1aは、その時点で100腫瘍を形成し、それは転移するMCF10CA1aの核型分析は、染色体1の余分な複製物を示す。それは、細胞のIV注入36日後に肺に転移する。引用文献:サントナーSJSantnerSJら、悪性前ヒト乳房上皮MCF10AT細胞に由来する悪性MCF10CA1細胞系。BreastCancerResearchandtreatment65:101-110頁、2001年。MYC-MT-1メスMMTV-C-MYC遺伝子導入マウスは、乳癌を発症した。該腫瘍を単離し、小さな新鮮組織を、KarmanosCancerInstituteのジュウショアリヤオJushoaLiao博士により馴化された培地と共に培養物中に入れる。この腫瘍細胞系は、10回の継代後確立された。NMuMG組織:マウス正常乳腺、上皮。株:NAMRU、メス腫瘍化:マウスにおいて良性腫瘍を産生。引用文献:オーエンスRBOwensRB。マウス由来の腺上皮細胞:選択的培養法。J.Natl.CancerInst.52:1375-1378頁、1974年。オーエンスRBOwensRB。マウスの正常腺組織由来の上皮細胞培養物。J.Natl.CancerInst.53:261-269頁、1974年。イングリングJMYinglingJMら。哺乳動物の矮性体は、TGF-βの変換に応答してリン酸化され、細胞増殖の制御に関連される。Proc.Natl.Acad.Sci.USA:8940-8944頁、1996年。BxPC-3組織:悪性腺腫、膵臓。細胞産物:ムチン、膵癌特異的抗原;CEA、癌胎児性抗原。出所源:61歳の女性。腫瘍化:あり。発癌遺伝子:c-Ki-ras。引用文献:タンMHTanMHら。新規な一次ヒト膵臓腫瘍系の特性化。CancerInvest.4:15-23頁、1986年。ルーアRLoorRら。膵癌の免疫診断における膵臓特異的抗原の使用。Clin.Lab.Med.2:567-578頁、1982年。ランMSLanMSら。ヒト腫瘍ムチン抗原のポリペプチドコア。CancerRes.50:2997-3001頁、1990年。チャンバーズJAChambersJAおよびハリスAHarrisA。ヒト管上皮細胞における嚢胞性線維症遺伝子および主要膵臓ムチン遺伝子MUC1の発現。J.CellSci.105:417-422頁、1993年T-47D組織:腺管癌、乳腺、乳房、管転移部位:胸水出所源:乳房の管癌浸潤を有する54歳女性の胸水。受容体発現:エストロゲン、アンドロゲン、カルシトニン、プロゲステロン、グルココルチコイドおよびプロラクチン陽性。発癌遺伝子:wnt3およびwnt7hこの細胞系は、c-erbB-2を過剰発現することも知られている。引用文献:キーダーIKeydarIら、ヒト乳癌起源の細胞系の確立および特性化。Eur.J.Cancer15:659-670頁、1979年。ジャッジSMJudgeSMおよびチャッタートンRTJr.ChattertonRTJr.。乳癌細胞系T-47Dにおけるトリグリセリド生合成のプロゲステロン特異的刺激。CancerRes.43:4407-4412頁、1983年。ランプSJLampSJら。ヒト乳癌細胞T-47Dにおけるアデニレートシクラーゼの持続的活性化状態のカルシトニン誘導。J.Biol.Chem.256:12269-12274頁、1981年。シェールESherEら。培養物中の乳癌細胞T-47Dにより1,25-ジヒドロキシ-コレカルシフェロールの全細胞取込みおよび核局在化。Biochem.J.200:315-320頁、1981年。フリーケHCFreakeHCら。1,25-ジヒドロキシビタミンD3は、ヒト乳癌細胞系T-47Dに特異的に結合し、増殖を刺激する。Biochem.Biophys.Res.Commun.101:1131-1138頁、1981年。ファウストJBFaustJBおよびミーカーTCMeekerTC。ヒト固形腫瘍細胞系におけるbcl-1遺伝子の増幅および発現。CancerRes.52:2460-2463頁、1992年RF33514:ハグエットELHuguetELら。ヒト乳房細胞系ならびにヒト乳房組織の正常および疾患状態におけるヒトWnt遺伝子2、3、4、および7Bの分化発現。CancerRes.54:2615-2621頁、1994年。BT-474組織:腺管癌、乳腺、乳房出所源:60歳女性発癌遺伝子:c-erbB-2引用文献:ラスファーグスEYLasfarguesEYら。固形乳癌から2種のヒト腫瘍上皮細胞系の単離。J.Natl.CancerInst.61:967-978頁、1978年。ラスファーグスEYLasfarguesEYら。マウス乳房腫瘍ウィルス複製を支持するヒト乳房腫瘍細胞系BT-474。Invitro15:723-729頁、1979年。リトルウッドエバンスAJLittlewood-EvansAJら。破骨細胞関連プロテアーゼカテプシンKは、ヒト乳癌に発現する。CancerRes.57:5386-5390頁、1997年。WSU-FSCCL1993年に確立されたヒトB細胞系出所源:白血病相における低度の濾胞性リンパ腫中細胞型の男性患者の末梢血由来。発癌遺伝子:c-mycおよびbcl-2の双方に関して染色体転座を示す。引用文献:マハマドRMMohammadRM、マハマドANMohammadAN、スミスMRSmithMR、ジャワジNSJawadiNS、AL-カチブAAL-KhatibA。t14;18およびt8;11の双方を示すユニークなEBV-陰性低グレードリンパ腫系WSU-FSCCL。CancerGenetCytogenet70:62-67頁、1993年。B.細胞培養ヒト乳癌細胞、MCF7、MCF10CAla、MDA-MB231、MDA-MB435.eB、およびヒト正常乳房細胞、MCF10Aは全て、KarmanosCancerInstituteから入手した。全ての細胞に、10mMHEPES、29mM重炭酸ナトリウム、ペニシリン100単位/mlおよびストレプトマイシン100μg/mlを添加したDMEM/F12培地ギブコGibco、メリーランド州中で培養した。さらに、10子ウシ血清、10μg/mlインスリンシグマケミカルSigmaChemical、セントルイス、ミズーリ州、および0.5nMエストラジオールをMCF7培地に用いた。5ウマ血清およびインスリン10μg/mlをMCF10Calaに対し用い、10胎仔ウシ血清をMDA-MB231および435系に対して用いた。MCF1.0A培養物に、5ウマ血清、インスリン10μg/ml、100ng/mlコレラエンテロトキシンカルビオケムCalbiochem、カリフォルニア州、0.5μg/mlヒドロコルチゾンシグマケミカルSigmaChemicalおよび20ng/ml上皮成長因子シグマケミカルSigmaChemicalを添加した。全てのフラスコおよびプレートを、37°Cで95空気および5CO2の加湿雰囲気下でインキュベートした。MYC-MT-1細胞はまた、10ng/mlEGF上皮成長因子、1nMエストラジオール、10μg/mlインスリンおよび10FBSウシ胎児血清を含有するDMEM/F12培地中で培養した。BxPC-3膵癌細胞系およびBT-474、乳房腫瘍細胞系を、10FBSを有するRPMI1640中で培養した。乳房腫瘍細胞系、T-47Dを、2.5μg/mlインスリンの添加によるBT-474と同じ培地中で培養した。NMuMG正常マウス乳腺細胞細胞系を、4.5g/lグルコース、10μg/mlインスリンおよび10FBSを有するDMEM培地中で増殖させた。全ての上記細胞を、2500個から5,000個/ウェルで96ウェルプレートに播種した。細胞を、播種24時間後、新鮮培地全容量100μl中のオリゴヌクレオチド化合物で処理した。この培地を、処理24時間後、6日間から7日間48時間毎に、または対照細胞が80から100コンフルエントになるまでオリゴヌクレオチド不含新鮮培地に置き換えた。オリゴヌクレオチドの抑制効果を、MTT染色法を用いて評価した。ヒト濾胞性リンパ腫細胞系、WSU-FSCCLを用いて、抗mycオリゴヌクレオチドならびに抗Bcl-2オリゴヌクレオチドの効果を評価した。FSCCL細胞は、組織培養中の単一細胞懸濁液として増殖させる。この培養物を、10ウシ胎児血清、1L-グルタミン、100unit/mlペニシリンおよび1.00μg/mlストレプトマイシンを添加したRPMI1640中で保持した。FSCCL細胞を、オリゴヌクレオチド化合物を有する24ウェルプレート2x105細胞/ウェル/ml中で処理し、37°Cで95空気および5CO2の加湿雰囲気下でインキュベートした。細胞を血球計測器を用いて24時間毎に計測した。C.オリゴヌクレオチドの調製バイオシンセシスBIOSYNTHESISLewisville、テキサス州またはキアゲンQiagenValencia、カリフォルニア州により、オリゴヌクレオチドの全てを合成し、ゲル精製し、凍結乾燥した。メチル化オリゴヌクレオチドは、全CpG部位でメチル化された。メチル化オリゴヌクレオチドを、滅菌純水ギブコGibco、インビトロゲンInvitrogen社に溶解し、培養物中の細胞を処理するために用いた。D.リポフェクチンのカプセル化20μgリポフェクチンインビトロゲンInvitrogenおよび16μgオリゴヌクレオチドをそれぞれ、別個の滅菌チューブ中で200μlOpti-MEMインビトロゲンInvitrogen培地と共に室温で45分間インキュベートした。次にそれらを合わせてさらに15分間インキュベートした。次いで1.6mlのOpti-MEM培地を、最終容量2mlおよび最終濃度1μMのオリゴヌクレオチドに加えた。リポフェクチンおよびオリゴヌクレオチドの濃度は、それらの分子量および所望の化合物濃度に基づいて調製できる。このレベルで細胞毒性効果は無かった。E.細胞増殖阻害アッセイ細胞増殖阻害を、シグマケミカルSigmaChemicalセントルイス、ミズーリ州から購入された臭化3-[4,5-ジメチル-チアゾール-2-イル]-2,5ジフェニルテトラゾリウムMTTを用いて評価した。細胞を、50,000個細胞/mlで培養培地に再懸濁し、100μlを、96ウェル平底プレートコスターコーニングCostarCorning、ニューヨーク州、米国の各ウェルに分配し、24時間インキュベートした。培地を、所望の濃度のオリゴヌクレオチドを含有する100μlの新鮮培地に変えて、24時間インキュベートした。対照は、オリゴヌクレオチド溶液の容量に等しい滅菌純水を有する培地とした。この培地に、対照培養がコンフルエントになるまで6日から7日24時間毎にさらなるオリゴヌクレオチドを添加しないで変えた。その後、培地を除き、プレートをリン酸緩衝生理食塩水PBSで2回洗浄し、0.5mg/mlのMTT染料を含有する100μlの無血清培地を、各ウェルに加え、37°Cで1時間インキュベートした。染料を有する培地を除き、PBSで洗浄し、100μlのジメチルスルホキシドDMSOを加えて反応性の染料を溶解した。この吸光度を、自動マルチウェル分光光度計バイオテクマイクロプレートオートリーダーBio-TekMicroplateAutoreader、Winooski、バーモント州、米国を用いて読み取った。各処理は、各回8つの独立したウェルで少なくとも3回反復した。F.タンパク質抽出およびウェスタンブロット解析細胞を播種し、200,000個の細胞/フラスコでT25組織培養フラスココスターコーニングCostarCorning、ニューヨーク州、米国中で培養した。細胞を24時間付着させた。該培地を、10μMから20μMのオリゴヌクレオチドを含有する新鮮な培地に置き換えて、24時間インキュベートした。この培地は、別途阻害剤を添加することなく48時間毎に変えて、対照フラスコがコンフルエントになるまで6~7日細胞培養を継続した。細胞は、1xトリプシン:EDTAインビトロゲンInvitrogen、Gibco、メリーランド州を用いて回収し、2000rpmで5分間の遠心分離により回収した。細胞を、125mMのトリスHCL緩衝液pH6.8に再懸濁し、10~20出力で音波処理し、4SDSの最終濃度に対して8SDSの等しい容量に溶解した。細胞抽出物を10分間沸騰させ、氷上で冷却し、2,000rpmで5分間遠心分離してから上澄液を採取した。タンパク質をBCAタンパク質アッセイキットピアスPierce、Rockford、イリノイ州を用いて定量した。50μgから100μgのタンパク質を、10から15ゲル各タンパク質の分子量に依って電気泳動に供し、ニトロセルロース膜シュレイシャーアンドシュエルSchleicherSchuell、Kence、ニューハンプシャー州に移した。各膜を、10乾燥ミルクのTBSTeトリス緩衝生理食塩水、ツイーン20中で2時間ブロックしてから、TBST中の一次抗体により一晩インキュベートした。ヒトc-myc、c-ha-rasおよびerbB-2に対する抗体は、マウスIgGファーミンゲンPharmingenサンディエゴ、カリフォルニア州であった。膜を、各TBST中15分間で3回洗浄してから、ペルオキシダーゼで1時間結合させた二次抗体と共にインキュベートした。この膜を、各TBST中10分間で5回洗浄し、各2mlのLumio/エンハンサーおよび安定なペルオキシド溶液ピアスPierceと共に1分間インキュベートした。該膜を、X線フィルムに2分間曝露した曝露時間は、必要ならば10秒から24時間まで調整する。実施例2c-ki-RAS本実施例では、癌細胞系の増殖を抑制するためにc-ki-Ras遺伝子のプロモーターに対して標的化されたオリゴヌクレオチド化合物の能力を記載する。実験は、実施例1に記載されたとおり実施した。この結果を図13および図19に示す。c-ki-Rasに対して標的化されたオリゴヌクレオチド配列ならびにc-ki-Ras遺伝子配列を図5および図6に示す。実施例3Bcl-2本実施例では、癌細胞系の増殖を抑制するためにbcl-2遺伝子のプロモーターに対して標的化されたオリゴヌクレオチド化合物の能力を記載する。実験を、実施例1に記載されたとおり実施した。この結果を図14および図20に示す。bcl-2に対して標的化されたオリゴヌクレオチド配列ならびにbcl-2遺伝子配列を図1および図2に示した。実施例4c-ha-RAS本実施例では、癌細胞系の増殖を抑制するためにc-ha-Ras遺伝子のプロモーターに対して標的化されたオリゴヌクレオチド化合物の能力を記載する。実験は、実施例1に記載されたとおり実施した。この結果を図16および図22に示した。c-ha-Rasに対して標的化されたオリゴヌクレオチド配列、ならびにc-ha-Ras遺伝子配列を図7および図8に示す。実施例5c-erbB-2本実施例では、癌細胞系の増殖を抑制するためにc-erbB-2遺伝子のプロモーターに対して標的化されたオリゴヌクレオチド化合物の能力を記載する。実験は、実施例1に記載されたとおり実施した。この結果を図15および図21に示す。c-erbB-2に対して標的化されたオリゴヌクレオチド配列、ならびにc-erbB-2遺伝子配列を図3および図4に示す。実施例6c-myc本実施例では、癌細胞系の増殖を抑制するためにc-myc遺伝子のプロモーターに対して標的化されたオリゴヌクレオチド化合物の能力を記載する。実験は、実施例1に記載されたとおり実施した。この結果を図17および図23に示す。c-mycに対して標的化されたオリゴヌクレオチド配列ならびにc-myc遺伝子配列を図9および図10に示す。実施例7TGF-α本実施例では、癌細胞系の増殖を阻害するためにTGF-α遺伝子のプロモーターに対して標的化されたオリゴヌクレオチド化合物の能力を記載する。実験は、実施例1に記載されたとおり実施した。この結果を図18および図24に示す。TGF-αに対して標的化されたオリゴヌクレオチド配列ならびにTGF-α遺伝子配列を図11および図12に示す。実施例8非メチル化オリゴヌクレオチドによる細胞増殖の抑制本実施例では、Bcl-2に対して標的化された非メチル化オリゴヌクレオチドによるリンパ腫細胞系の増殖阻害を記載する。WSU-FSCCL細胞は、2x105細胞/ウェルの24ウェルプレートでt=24時間で平板培養した。収集される各時点で、三対のウェルを、指定された濃度でオリゴoligosを用いてt=0で処理した。対照は、三対で平板培養した。プレートを37°Cでインキュベートした。全ての培養物を、トリパンブルー染色および血球計数器を用いて4日間24時間毎に細胞数および生存度による実験を通してモニターした。MABL2オリゴヌクレオチドは、Bcl-2[5’-CAXGCAXGXGCATCCCXGCCXGTG-3’]のプロモーター領域に標的化する。Pho-Mabl-2は、MABL-2[5’-CACGCACGCGCATCCCCGCCCGTG-3’]の非メチル化バージョンである。WSU-FSCCL-ヒトB細胞リンパ腫低度の濾胞性開裂中細胞型リンパ腫から由来。実験プロトコルを表2に示す。この結果を図31に示す。この結果は、Bcl-2に対する非メチル化オリゴヌクレオチドは、細胞増殖を阻害する上でメチル化オリゴヌクレオチドと同じ程度有効であることを示している。実施例9腫瘍増殖のインビボ抑制本実施例では、ヒト前立腺癌モデルにおいて本発明のオリゴヌクレオチド類により腫瘍増殖阻害を記載する。動物:ヒトPC-3GFP前立腺癌皮下モデルを利用した例えば、ヤングYangら、CancerResearch59、781-786頁、[1999];グリンスキーGlinskiiら、CancerResearch63、4239-4243頁、[2003];およびカリキンKalikinら、CancerBiologyandTherapy2:6、17-21頁[2003]を参照。5週齢から6週齢の間のオス胸腺欠損MCrヌードマウスを用いた。動物を飼育し、オートクレーブにより滅菌されたケージ、食餌および敷わらを有するHEPAろ過環境中で維持した。飼育ペインルスpainrsは、TaconicQualiryLaboratoryandServicesfromResearchGermantown、NYから入手した。動物飼料5010オートクレーブ可能なげっ歯類飼料は、PMIニュートリションインターナショナルPMInutritionInternational社Brentwood、ミズーリ州から入手した。全部で60匹のオス動物を試験用に用いた。試験薬物:核酸を基にしたオリゴ化合物PNT100およびカチオン性リポソーム送達LDV製剤とのスクランブル化オリゴ対照PNT-C。GFP発現ベクター:pLEINは、クロンテックClontechPaloAlto、カリフォルニア州から入手した。このベクターは、増強されたGFPおよび内部リボソーム侵入部位を含有する同じバイシストロニックなメッセージでネオマイシン耐性遺伝子を発現する。細胞培養、ベクター産物、トランスフェクション、およびサブクローニング:10AIウィルスエンベロープを発現する、NIH3T3誘導パッケージング細胞系であるPT67は、クロンテックClontechから購入した。PT67細胞を、10胎仔ウシ血清を添加したDMEM中で培養した。ベクター産生に関して、70コンフルエンスでのパッケージング細胞PT67を、硫酸N-[1-2,3-ジオレオイルオキシルプロピル]-N,N,トリメチルアンモニウムメチル試薬および飽和量のpLEINプラスミドの沈殿混合物と共に18時間インキュベーションした。新鮮な培地をこの時点で補充した。細胞は、トランスフェクション48時間後に蛍光顕微鏡により調べた。選択のため、細胞を200~1000μg/mlG418の存在下で7日間培養した。PC-3-GFP細胞のGFP遺伝子の形質導入:GFP遺伝子の形質導入に関して、20コンフルエンスPC-3細胞ATCC、CRL1435を、PT67細胞のレトロウィルス上澄液および7胎仔ウシ血清を含有するハムHamのF-12Kの1:1の予め沈殿させた混合物と共に72時間インキュベートした。新鮮な培地をこの時点で補充した。PC-3細胞を、形質導入72時間後にトリプシンEDTAにより収集し、200μg/ml6418を含んだ選択培地に1:15の比率で継代培養した。6418のレベルを、ステップ毎に1000Ng/mlに増加した。GFPを発現する最も輝いたPC-3細胞クローンを選択し、合わせてから、増幅させ、従来の培養法に移行させた。皮下腫瘍増殖:腫瘍ストックを、5x106細胞/200μlの濃度でPC-3-GFP細胞をヌードマウスの側腹部に皮下注入することにより作製した。マウスの皮下に成長した腫瘍の強いGFP発現が、収集前に証明された。ヌードマウスの皮下成長から収集された腫瘍組織を検査し、壊死のひどい組織または壊死の疑いのある組織または非GFP腫瘍組織を除いた。引き続き腫瘍組織を、凡そ2mm3の小断片に切断した。皮下組織断片の移植:前立腺癌PC-3GFPの腫瘍ストックは、PC-3GFP細胞をヌードマウスの側腹部に皮下注入することにより確立した。この腫瘍は、使用前の腫瘍ストックとしてヌードマウスの皮下に維持された。移植前に、PC-3GFP腫瘍組織の強いGFP発現は、蛍光灯により確認された。移植日に、腫瘍を皮下部位から収集し、RPMI-1640培地に入れた。壊死組織を除き、生存組織を2mm3片に切断した。次に組織断片を、ヌードマウスの右側腹部に皮下移植した。腫瘍および転移を発現する緑蛍光タンパク質の全身光学的画像:水銀ランプ電源装置を具備したライカLeicaステレオ蛍光顕微鏡モデルLZ12を用いた。GFPの選択的励起は、D425/60バンドパスフィルタおよび470DCXRダイクロイックミラーを通して生じた。放射蛍光は、1317x1035ピクセルチップにより、ST-133MicromaxHighSpeedTEA/CCD-1317K1熱電冷却カメラプリンストンインスルメンツPrincetonInstruments、Trenton、ニュージャージー州上のロングパスフィルタGG475クローマテクノロジーChromaTechnology、Brattleboro、バーモント州を通して回収した。実験を制御し、画像をコントラストと明るさについて処理し、ImageProPlus3.1ソフトウェアメディア才バーネチクスMediaCybernetics、SilverSpring、メリーランド州の補助により分析した。高分解能画像を、コンピュータまたは連続的ビデオ出力を通して直接取り込んだ。試験動物:試験に用いられた全部で60匹のマウスは、術後12日目に6群に分けられた。各コホート条件の各群を無作為に選択した。処置開始:一次腫瘍が50~100mm3の推定堆積に達した場合。試験計画を表4に示す。データ収集:腫瘍サイズ:各動物を、試験終了までカリパス測定による腫瘍成長に関して週1回チェックした。経時的腫瘍体積応答を算出するために、40日間に亘る測定を実施した。凡その腫瘍体積は、式1/2axb式中bは、2つの垂直直径のうちのより小さな和であるを用いて算出した。概算腫瘍体積を、式WxLx1/2により算出した。GFP画像:移植12日後に、GFP発現腫瘍の全身光学的画像を週1回撮った。体重:全動物に関する体重は、試験期間の間、週1回重量を量った。電子計量器を用いて体重を測定した。終了:最終腫瘍重量は、試験の46日目に動物を屠殺した後に得た。各腫瘍は、電子計量器を用いて重量を量った。有効性評価に用いた統計的方法:6群全ての腫瘍体積および最終腫瘍重量を、an=0.05両側性によるスチューデントt2検定を用いて分析した。結果:これらの結果を図32~35に示す。図32は、PNT-100および/またはTAXOTEREによる処置後のPC-3GFP前立腺癌皮下モデルにおける腫瘍の平均体積を示す。図33は、PNT-100および/またはTAXOTEREによる処置後のPC-3GFP前立腺癌皮下モデルにおける腫瘍の平均体重を示す。図34は、PNT-100および/またはTAXOTEREによる処置後のPC-3GFP前立腺癌皮下モデルにおける腫瘍の平均腫瘍体積を示す。図35は、PNT-100および/またはTAXOTEREによる処置後のPC-3GFP前立腺癌皮下モデルにおける腫瘍の最終平均腫瘍体積を示す。これらの結果は、PNT-100が腫瘍サイズを低下したことを示している。この効果は、TAXOTEREの存在下で増加した。実施例10腫瘍成長のインビボ抑制本実施例では、ヒト前立腺癌モデルにおいて本発明のオリゴヌクレオチド類のインビボ送達による腫瘍成長の阻害を説明する。1種々の血管新生状態で無作為化された異種移植を用いてi.v.投与されたPNT100に対するPC-3前立腺異種移植腫瘍応答を調査した。この実験は、5日間の一日用量が1mg/kgのPNT100による2ステップのネオフェクチン製剤により実施された。この投薬措置でマウスの全てが、注目すべき毒性応答なしに生存した。IIWSU-DLCL2異種移植のi.v.PNT100試験:非ホジキンリンパ腫モデルNHLにおけるPNT100-ネオフェクチンのi.v.送達および有効性を確立するために、二次的試験を実施した。該試験は、5日間の一日の用量が5mg/kgのPNT100を投与するために計画し、特定のコホートにおいて、ビンクリスチンとの併用療法を計画した。PNTの1回の用量後、PNT100およびPNT-Cを注射した動物スクランブル化対照において顕著な体重損失が見られた。このデータにより、PNT100とPNT-Cとの併用療法の実質的な効果が示されている。結果を図1および図2に示す。図36および図37は、WSU-DLCL2移植20日後の腫瘍負荷量を示している。この結果により、PNT-100単独、およびビンクリスチンとの併用が、マウスにおける腫瘍を縮小させることが示されている。上記明細書に記述された全ての刊行物および特許は、参考文献として本明細書に組み込まれる。記載された方法および本発明の系に関する種々の修飾および変型は、本発明の範囲および精神から逸脱することなく当業者にとって明らかとなろう。本発明は、特定の好ましい実施態様と関連して記載されているが、主張されている本発明は、このような特定の実施態様に対して過度に限定してはならないことを理解されるべきである。実際、関連分野の当業者にとって明白である本発明を実施するために記載された様式の種々の修飾は、添付の特許の請求の範囲内にあると意図されている。"