"少なくとも1つの酸化酵素及び少なくとも1つのalkL遺伝子産物を用いて有機物質を酸化する方法において、該alkL遺伝子産物を、該alkL遺伝子を含むalkオペロンによってコードされた少なくとも1つのさらに別の遺伝子産物とは無関係に供給することを特徴とする方法。前記有機物質が、分枝した又は非分枝の、飽和又は不飽和の、場合により置換されたアルカン、アルケン、アルキン、アルコール、アルデヒド、ケトン、カルボン酸、カルボン酸エステル、アミン及びエポキシドを含む群から選択されており、その際、これらは、有利には3~22個、殊に6~18個、さらに有利には8~14個、殊に12個の炭素原子を有することを特徴とする、請求項1記載の方法。前記有機物質が、カルボン酸及び該カルボン酸の相応するエステル、3~22個の炭素原子を有する非置換アルカン、3~22個の炭素原子を有する非置換アルケン、3~22個の炭素原子を有する非置換の一価アルコール、3~22個の炭素原子を有する非置換アルデヒド、3~22個の炭素原子を有する非置換の一価アミン、並びに、殊に更なる置換基として1つ以上のヒドロキシ基、アミン基、ケト基、カルボキシル基、シクロプロピル基又はエポキシ官能基を有する置換化合物を含む群から選択されていることを特徴とする、請求項1又は2記載の方法。前記有機物質をアルコールへと、アルデヒドへと、ケトンへと又は酸へと酸化することを特徴とする、請求項1から3までのいずれか1項記載の方法。前記有機物質、殊にカルボン酸又はカルボン酸エステルをω位で酸化することを特徴とする、請求項1から4までのいずれか1項記載の方法。前記酸化酵素が、アルカンモノオキシゲナーゼ、キシレンモノオキシゲナーゼ、アルデヒドデヒドロゲナーゼ、アルコールオキシダーゼ又はアルコールデヒドロゲナーゼ、好ましくはアルカンモノオキシゲナーゼであることを特徴とする、請求項1から5までのいずれか1項記載の方法。前記アルカンモノオキシゲナーゼが、シトクロムP450モノオキシゲナーゼ、殊に、カンジダ由来、例えばカンジダトロピカリスCandidatropicalis由来の、又は植物由来、例えばヒヨコマメCicerarietinumL.由来のシトクロムP450モノオキシゲナーゼであることを特徴とする、請求項6記載の方法。前記アルカンモノオキシゲナーゼが、グラム陰性細菌の群から、殊にシュードモナスPseudomonaden類、殊にシュードモナスプチダPseudomonasputidaGPo1の群から選択された生物由来のalkB遺伝子でコードされるalkB遺伝子産物であることを特徴とする、請求項6記載の方法。前記アルコールデヒドロゲナーゼが、alkJ遺伝子でコードされたアルコールデヒドロゲナーゼ、殊に、グラム陰性細菌の群からの、殊にシュードモナス類、殊にシュードモナスプチダGPo1の群からのalkJ遺伝子でコードされたアルコールデヒドロゲナーゼであることを特徴とする、請求項6記載の方法。前記alkL遺伝子産物が、グラム陰性細菌の群から、殊に、シュードモナス類、特にシュードモナスプチダ、殊にシュードモナスプチダGPo1及びP1、アゾトバクターAzotobacter、デスルフィトバクテリウムDesulfitobacterium、バークホルデリアBurkholderia、有利にはバークホルデリアセパシアBurkholderiacepacia、サントモナスXanthomonas、ロドバクターRhodobacter、ラルストニアRalstonia、デルフチアDelftia及びリケッチアRickettsia、オセアニコウリス属Oceanicaulis、有利にはオセアニコウリスアレクサンドリイOceanicaulisalexandriiiHTCC2633、カウロバクター属Caulobacter、有利にはカウロバクターエスピーCaulobactersp.K31、マリノバクター属Marinobactor、有利にはマリノバクターアクアエオレイ属Marinobactoraquaeolei、特に有利にはマリノバクターアクアエオレイVT8及びロドシュードモナス属Rhodopseudomonasの群から選択された生物由来のalkL遺伝子によりコードされる、請求項1から9までのいずれか1項記載の方法。前記alkL遺伝子産物が、シュードモナスプチダGPo1及びP1由来のalkL遺伝子によってコードされたタンパク質、該遺伝子は、配列番号1及び配列番号3によって示される、並びにポリペプチド配列の配列番号2若しくは配列番号4を有するタンパク質、又は配列番号2若しくは配列番号4に対してアミノ酸残基の60までが欠失、挿入、置換又はそれらの組合せによって改変されており、かつ、それぞれ配列番号2若しくは配列番号4の基準配列を有するタンパク質の活性のなお少なくとも50を有するポリペプチド配列を有するタンパク質から成る群から選択されていることを特徴とする、請求項1から10までのいずれか1項記載の方法。前記さらに別の遺伝子産物が、AlkB、AlkF、AlkG、AlkH、AlkJ、及びAlkKから成る群からの少なくとも1つから選択されていることを特徴とする、請求項1から11までのいずれか1項記載の方法。少なくとも1つの微生物において、又は少なくとも1つの微生物を取り囲む培地中で実施されることを特徴とする、請求項1から12までのいずれか1項記載の方法。前記酸化酵素及び前記alkL遺伝子産物が、微生物において組み換えられて合成されることを特徴とする、請求項1から13までのいずれか1項記載の方法。前記微生物が、細菌、殊にグラム陰性細菌の群から、特に大腸菌、シュードモナスエスピーPseudomonassp.、シュードモナスフルオレッセンスPseudomonasfluorescens、シュードモナスプチダ、シュードモナスアシドボランスPseudomonasacidovorans、シュードモナスエルジノーサPseudomonasaeruginosa、アシドボラックスエスピーAcidovoraxsp.、アシドボラックステンペランスAcidovoraxtemperans、アシネトバクターエスピーAcinetobactersp.、バークホルデリアエスピーBurkholderiasp.、シアノバクテリアCyanobakterien、クレブシエラエスピーKrebsiellasp.、サルモネラエスピーSalmonellasp.、リゾビウムエスピーRhizobiumsp.及びリゾビウムメリロティRhizobiummelilotiを含む群から選択されていることを特徴とする、請求項13又は14記載の方法。有機物質を酸化する少なくとも1つの酵素及び少なくとも1つのalkL遺伝子産物を増強して合成するように遺伝子工学的に改変された微生物において、該alkL遺伝子産物が、該alkL遺伝子を含むalkオペロンによってコードされた少なくとも1つのさらに別の遺伝子産物とは無関係に合成されることを特徴とする、微生物。有機物質を酸化する少なくとも1つの酵素の酸化速度を高めるためのalkL遺伝子産物の使用において、該alkL遺伝子産物が、該alkL遺伝子を含むalkオペロンによってコードされた少なくとも1つのさらに別の遺伝子産物とは無関係に使用されることを特徴とする、使用。比較例1:AlkBGTの発現ベクターalkLを有さないシュードモナスプチダGPo1由来のアルカンヒドロキシラーゼ系の発現ベクターpCOM系Smitsetal.,2001プラスミド64:16-24から出発して、構造pBT配列番号5を製造し、これは、シュードモナスプチダ由来の3つの成分アルカンヒドロキシラーゼAlkB、ルブレドキシンAlkG及びルブレドキシン-レダクターゼAlkTを有する。これら3つの遺伝子の発現のために、alkBFG遺伝子配列を、alkBプロモーターの制御下におき、かつalkT遺伝子をalkSプロモーターの制御下においた。alkB及びalkGのクローニングを簡素化するために、その間にある遺伝子alkFをalkB及びalkGと一緒に増幅し、かつクローン化した。AlkFは、触媒されるべき反応にとって重要でない。ベクターpBT10の製造の詳細な説明は、WO2009077461を参照することができる。例1:alkLを有するシュードモナスプチダGPo1由来のAlkBGTアルカンヒドロキシラーゼの発現ベクター更なる試みでは、目的に合わせてalkL遺伝子を、酸化に必要とされる最小の酵素群と一緒にそれを合成できるように、alkBFGオペロンにクローン化した。そのために、pGEc47のalkL遺伝子Egginketal.,1987,JBiolChem262,17712-17718をPCRで増幅した。そのために使用したプライマーP1及びP2は、プラスミドpBT10のSalI切断部位にクローン化するために、目標配列の外側で同様にSalI切断部位を有する。そのうえ、フォワードプライマーP1に停止コドンをSalI切断部位の後方で導入して、alkH残基の可能な翻訳を終えた。P1ACGCGTCGACCTGTAACGACAACAAAACGAGGGTAG配列番号6P2ACGCGTCGACCTGCGACAGTGACAGACCTG配列番号7増幅のために、FinnzymePhusionPolymeraseフィンザイムのPhusionポリメラーゼNewEnglandBiolabsを用いた。製造規程に従って、34μLのH2O、10μLの5×PhusionHF緩衝液、1μLのdNTPsそれぞれ10mM、1.25μLのP1、1.25μLのP20.5mMのエンド-プライマー-濃度、2μLのpGEc47プラスミド溶液150ng/μL及び0.5μLのPhusionポリメラーゼを混合し、かつ薄壁のPCR-エッペンドルフEppendorf-容器中でPCRのために用いた。以下のPCRプログラムを、ポリメラーゼ製造の示唆に則ってプログラミングした:[98°C/30秒]、[98°C/10秒][72°C/60秒]30サイクル、[72°C/10分]754bpの長さを有する生じたPCR産物を、peqGOLDcyclepureKitsPEQLABBiotechnologyGmbH,Erlangen在を用いて、製造規定に則って精製し、かつT4ポリヌクレオチドキナーゼを用いてリン酸化した。そのために、該精製より得られたPCR産物溶液を、2μLのATP溶液100mM、2μLのキナーゼ緩衝液及び1μLのT4ポリヌクレオチドキナーゼと混ぜ、37°Cで20分間培養した。引き続き、この酵素を10分間75°Cに加熱することによって死滅させた。そのようにして準備したPCR産物を製造規定に則って、それからLucigen社のpSMARTベクターにライゲーションした。このライゲーションバッチ2μlを、ヒートショック42°Cで45秒間によって大腸菌DH5αケミカリーコンピテントセルに形質転換した。カナマイシンプレートで選択したコロニーの一晩培養後に、液体培養カナマイシン30μg/mLを有する5mLLB培地において培養し、かつプラスミドをpeqGOLDMiniprepKitsPEQLABBiotechnologieGmbHErlangenを用いて分離した。SalIによる制限切断及び引き続くゲル電気泳動によって、正しくライゲーションされたプラスミドを同定した。係るプラスミドを、より多量に調製し、かつSalIで切断した。生じる693bp断片を、AgarosegelアガロースゲルpeqGOLDGelExtractionKitからの精製によって分離した。プラスミドpBT10も同様に、より多量に調製し、SalIで切断し、かつ最後にアルカリ性ホスファターゼ仔ウシ腸由来の[アルカリ]ホスファターゼ、CIPNEBで脱リン酸化した。これらの手順を、反応容器中で実施した。そのために、13.3μLのプラスミドDNAを、4μLの緩衝液、19.2μLの水、2μLのアルカリ性ホスファターゼ及び1.5μLのSalINEBと混ぜ、そして37°Cで2時間培養した。切断し、かつ脱リン酸化したベクターを、同様に上記の通りAgarosegelにより精製した。ライゲーションにおけるベクターとインサートとの正しい比を調整するために、相応するDNA溶液の濃度をアガロースゲル電気泳動によって確かめた。ライゲーションのために、10μLの切断したベクターDNA溶液を、DNA質量比1:5となるように5μLのインサートDNA溶液と混ぜ、2μLのリガーゼ緩衝液、1μLの水並びに1μLのリガーゼを加え、引き続き22°Cで2時間、かつ、その後に一晩中4°Cで培養した。このバッチの5μLを、電気穿孔法により大腸菌細胞DH5αに形質転換した。カナマイシン耐性コロニーを、抗生物質を含む5mLLB培地中で一晩培養し、かつプラスミドを上記の通り調製した。EcoRVによる5つのクローンからのプラスミドDNAの制限切断により、3つの場合において、それぞれ8248Bp、2234Bp及び1266Bpのバンドが示された。得られたプラスミドをpBT10_alkL図1を参照されたいとし、これは配列番号8を有する。例2:ラウリン酸メチルエステルからω-ヒドロキシラウリン酸メチルエステルへの変換生体内変化のために、プラスミドpBT10又はpBT_alkLを、42°Cで2分間のヒートショックによって大腸菌種W3110ケミカリーコンピテントに形質転換したHanahanD,DNAcloning:Apractivalapproach.IRLPress,Oxford,109-135。ヒドロキシラウリン酸メチルエステルの合成のために、大腸菌W3110-pBT10及びW3110-pBT10_alkLを一晩中30°C及び180rpmにて、30mg/Lのカナマイシンを有する100mLのM9培地Na2HPO46g/L、KH2PO43g/L、NaCl0.5g/L、NH4Cl1g/L、2mMMgSO4、0.1mMCaCl2、グルコース0.5中で培養し、かつ遠心分離によって集菌した。バイオマスの一部を、無菌でグルコース0.5及びカナマイシン30mg/Lを有する250mLのM9培地に再懸濁してOD450=0.2とし、かつ振盪フラスコ内で30°C及び180°Crpmにてさらに培養した。alk遺伝子の発現を、4時間の生長時間後に0.025v/vのジシクロプロピルケトンの添加によって誘発し、かつ培養物を同じ条件下でさらに4時間振盪した。細胞を引き続き遠心分離除去し、細胞ペレットをKPi緩衝液に再懸濁し、かつ30°Cに調温したバイオリアクターに加えた。約1.8gCDW/Lのバイオマス濃度を設定した。力強い撹拌1500min1及び2vvm体積及び1分当たりの体積のの通気量の下で、基質のラウリン酸メチルエステルを1:2の比において細胞懸濁液に加えた100mlの細胞懸濁液、50mlのラウリン酸メチルエステル。温度は30°Cで一定に保った。ヒドロキシラウリン酸メチルエステルの形成は、反応バッチのGC分析によって検出した。そのために、0分後にNegativeControlとして及び150分後にサンプルを、スポイトを用いて反応器の上昇管を通して採取し、かつ2mLのエッペンドルフ容器においてエッペンドルフ卓上型遠心分離機を使って13200rpmにて相分離のために5分間のあいだ遠心分離した。有機相は、ガスクロマトグラフィーThermoTraceGCUltraによって分析した。カラムとして、VarianInc.FactorFourTMVF-5m、長さ:30m、膜厚:0.25μm、内径:0.25mmを用いた。分析条件:炉温度80~280°C昇温速度15°C/minスプリット比15注入量1μlキャリアー流量1.5ml/minPTVインジェクター15°C/sで80~280°C検出器基準温度:320°Cここで、12-ヒドロキシラウリン酸メチルエステルの測定された形成率は、生体触媒の活性に換算することができ、かつ使用した細胞マスを基準とすることができる。変換速度の線形領域中では、活性に関して、活性[U]=変換した物質量[μmol]/時間[min]が当てはめられる。酵素の説明に通常用いられるこの単位Uは、反応の開始時の係る生体触媒の性能の尺度である。初期活性は、付加的に発現されたalkLによって26.7倍上昇させることができた。"