"以下の順序のアミノ酸配列セグメント:LFR1-LCDR1-LFR2-LCDR2-LFR3-LCDR3-LFR4を含むポリペプチドであって、ここで、軽鎖フレームワーク領域LFR1、LFR2およびLFR3のうちの1つまたは複数は、配列番号2または配列番号8に記載のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域から得られ、軽鎖相補性決定領域LCDR1、LCDR2およびLCDR3のうちの1つまたは複数は、ドナー抗体から得られ、ここで、該ポリペプチドは、配列番号2または配列番号8に記載の完全なアミノ酸配列を含まない、ポリペプチド。LFR4が、配列番号2または配列番号8に記載のアミノ酸配列を有する前記軽鎖可変領域から得られる、請求項1に記載のポリペプチド。前記CDRのうちの1つが、配列番号2または配列番号8に記載のアミノ酸配列を有する前記軽鎖可変領域に由来する、請求項1または2に記載のポリペプチド。前記CDRのうちの2つが、配列番号2または配列番号8に記載のアミノ酸配列を有する前記軽鎖可変領域に由来する、請求項1または2に記載のポリペプチド。前記CDRのうちの少なくとも2つが、同じドナー抗体に由来する、請求項1から3のいずれか一項に記載のポリペプチド。前記CDRの全部が同じドナー抗体に由来する、請求項1または2に記載のポリペプチド。前記フレームワーク領域および前記CDRがKabatに従って定義される、請求項1から6のいずれか一項に記載のポリペプチド。前記フレームワーク領域および前記CDRがChothiaに従って定義される、請求項1から6のいずれか一項に記載のポリペプチド。前記フレームワーク領域および前記CDRがKabat-Chothiaの組合せ定義に従って定義される、請求項1から6のいずれか一項に記載のポリペプチド。LFR1が配列番号9に記載のアミノ酸配列を含む、請求項1から7または9のいずれか一項に記載のポリペプチド。LFR2が配列番号10または配列番号18に記載のアミノ酸配列を含む、請求項1から7、9または10のいずれか一項に記載のポリペプチド。LFR3が配列番号11に記載のアミノ酸配列を含む、請求項1から7または9から11のいずれか一項に記載のポリペプチド。LFR4が配列番号12に記載のアミノ酸配列を含む、請求項1から7または9から12のいずれか一項に記載のポリペプチド。LFR1が配列番号9に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号10に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号11に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号12に記載のアミノ酸配列を含む、請求項1から7または9から13のいずれか一項に記載のポリペプチド。LFR1が配列番号9に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号18に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号11に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号12に記載のアミノ酸配列を含む、請求項1から7または9から13のいずれか一項に記載のポリペプチド。LFR1が配列番号20または配列番号24に記載のアミノ酸配列を含む、請求項1から6または8のいずれか一項に記載のポリペプチド。LFR2が配列番号21または配列番号25に記載のアミノ酸配列を含む、請求項1から6、8または16のいずれか一項に記載のポリペプチド。LFR3が配列番号22または配列番号26に記載のアミノ酸配列を含む、請求項1から6、8、16または17のいずれか一項に記載のポリペプチド。LFR4が配列番号23に記載のアミノ酸配列を含む、請求項1から6、8または16から18のいずれか一項に記載のポリペプチド。LFR1が配列番号20に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号21に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号22に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号23に記載のアミノ酸配列を含む、請求項1から6、8または16から19のいずれか一項に記載のポリペプチド。LFR1が配列番号24に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号25に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号26に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号23に記載のアミノ酸配列を含む、請求項1から6、8または16から19のいずれか一項に記載のポリペプチド。免疫グロブリン軽鎖ポリペプチド定常領域の全部または一部を含む、請求項1から21のいずれか一項に記載のポリペプチド。配列番号3に記載のアミノ酸配列を含む、請求項22に記載のポリペプチド。以下の順序のアミノ酸配列セグメント:HFR1-HCDR1-HFR2-HCDR2-HFR3-HCDR3-HFR4を含むポリペプチドであって、ここで、重鎖フレームワーク領域HFR1、HFR2およびHFR3のうちの1つまたは複数は、配列番号5または配列番号7に記載のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域から得られ、重鎖相補性決定領域HCDR1、HCDR2およびHCDR3のうちの1つまたは複数は、ドナー抗体から得られ、ここで、該ポリペプチドは、配列番号5または配列番号7に記載の完全なアミノ酸配列を含まない、ポリペプチド。LFR4が、配列番号5または配列番号7に記載のアミノ酸配列を有する前記重鎖可変領域から得られる、請求項24に記載のポリペプチド。前記CDRのうちの1つが、配列番号5または配列番号7に記載のアミノ酸配列を有する前記重鎖可変領域に由来する、請求項24または25に記載のポリペプチド。前記CDRのうちの2つが、配列番号5または配列番号7に記載のアミノ酸配列を有する前記重鎖可変領域に由来する、請求項24または25に記載のポリペプチド。前記CDRのうちの少なくとも2つが、同じドナー抗体に由来する、請求項24から26のいずれか一項に記載のポリペプチド。前記CDRの全部が同じドナー抗体に由来する、請求項24または25に記載のポリペプチド。前記フレームワーク領域および前記CDRがKabatに従って定義される、請求項24から29のいずれか一項に記載のポリペプチド。前記フレームワーク領域および前記CDRがChothiaに従って定義される、請求項24から29のいずれか一項に記載のポリペプチド。前記フレームワーク領域および前記CDRがKabat-Chothiaの組合せ定義に従って定義される、請求項24から29のいずれか一項に記載のポリペプチド。HFR1が配列番号13、17または19のいずれか1つに記載のアミノ酸配列を含む、請求項24から30または32のいずれか一項に記載のポリペプチド。HFR2が配列番号14に記載のアミノ酸配列を含む、請求項24から30、32または33のいずれか一項に記載のポリペプチド。HFR3が配列番号15に記載のアミノ酸配列を含む、請求項24から30または32から34のいずれか一項に記載のポリペプチド。HFR4が配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む、請求項24から30または32から35のいずれか一項に記載のポリペプチド。HFR1が配列番号13に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む、請求項24から30または32から36のいずれか一項に記載のポリペプチド。HFR1が配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む、請求項24から30または32から36のいずれか一項に記載のポリペプチド。HFR1が配列番号19に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む、請求項24から30または32から36のいずれか一項に記載のポリペプチド。HFR1が配列番号17に記載のアミノ酸配列を含む、請求項24から29または31のいずれか一項に記載のポリペプチド。HFR2が配列番号27または配列番号30に記載のアミノ酸配列を含む、請求項24から29、31または40のいずれか一項に記載のポリペプチド。HFR3が配列番号28または配列番号31に記載のアミノ酸配列を含む、請求項24から29、31、40または41のいずれか一項に記載のポリペプチド。HFR4が配列番号29または配列番号32に記載のアミノ酸配列を含む、請求項24から29、31または40から42のいずれか一項に記載のポリペプチド。HFR1が配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号27に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号28に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号29に記載のアミノ酸配列を含む、請求項24から29、31または40から43のいずれか一項に記載のポリペプチド。HFR1が配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号30に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号31に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号32に記載のアミノ酸配列を含む、請求項24から29、31または40から43のいずれか一項に記載のポリペプチド。免疫グロブリン重鎖ポリペプチド定常領域の全部または一部を含む、請求項24から45のいずれか一項に記載のポリペプチド。配列番号6に記載のアミノ酸配列を含む、請求項46に記載のポリペプチド。前記免疫グロブリン重鎖ポリペプチド定常領域が、IgG重鎖ポリペプチド定常領域、IgA重鎖ポリペプチド定常領域、IgE重鎖ポリペプチド定常領域、IgD重鎖ポリペプチド定常領域またはIgM重鎖ポリペプチド定常領域である、請求項46に記載のポリペプチド。i軽鎖ポリペプチド、およびii重鎖ポリペプチドを含む遺伝子工学的に操作された抗体であって、該軽鎖ポリペプチドは、以下の順序のアミノ酸配列セグメント:LFR1-LCDR1-LFR2-LCDR2-LFR3-LCDR3-LFR4を含み、ここで、軽鎖フレームワーク領域LFR1、LFR2およびLFR3は、配列番号2または配列番号8に記載のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域から得られ、軽鎖相補性決定領域LCDR1、LCDR2およびLCDR3のうちの1つまたは複数は、ドナー抗体から得られ、ここで、該軽鎖ポリペプチドは、配列番号2または配列番号8に記載の完全なアミノ酸配列を含まず、該重鎖ポリペプチドは、以下の順序のアミノ酸配列セグメント:HFR1-HCDR1-HFR2-HCDR2-HFR3-HCDR3-HFR4を含み、ここで、重鎖フレームワーク領域HFR1、HFR2およびHFR3は、配列番号5または配列番号7に記載のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域から得られ、重鎖相補性決定領域HCDR1、HCDR2およびHCDR3のうちの1つまたは複数は、ドナー抗体から得られ、ここで、該重鎖ポリペプチドは、配列番号5または配列番号7に記載の完全なアミノ酸配列を含まない、遺伝子工学的に操作された抗体。前記軽鎖フレームワーク領域、前記重鎖フレームワーク領域、前記軽鎖CDR、および前記重鎖CDRが、Kabatの定義に従って定義される、請求項49に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。前記軽鎖フレームワーク領域、前記重鎖フレームワーク領域、前記軽鎖CDR、および前記重鎖CDRが、Chothiaの定義に従って定義される、請求項49に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。前記軽鎖フレームワーク領域、前記重鎖フレームワーク領域、前記軽鎖CDR、および前記重鎖CDRが、Kabat-Chothiaの組合せ定義に従って定義される、請求項49に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR1が配列番号9に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、50または52のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR2が配列番号10または配列番号18に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、50、52または53のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR3が配列番号11に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、50または52から54のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR4が配列番号12に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、50または52から55のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR1が配列番号9に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号10に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号11に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号12に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、50または52から56のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR1が配列番号9に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号18に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号11に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号12に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、50または52から56のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR1が配列番号20または配列番号24に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49または51に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR2が配列番号21または配列番号25に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、51または59のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR3が配列番号22または配列番号26に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、51、59または60のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR4が配列番号23に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、51または59から61のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR1が配列番号20に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号21に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号22に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号23に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、51または59から62のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR1が配列番号24に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号25に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号26に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号23に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、51または59から63のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。前記軽鎖ポリペプチドが免疫グロブリン軽鎖ポリペプチド定常領域の全部または一部を含む、請求項49から64のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。前記軽鎖ポリペプチド定常領域がヒトアミノ酸配列を含む、請求項65に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。前記軽鎖定常領域がλ軽鎖定常領域またはκ軽鎖定常領域である、請求項65または66に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。配列番号3に記載のアミノ酸配列を含む、請求項65から67のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。HFR1が配列番号13、17または19のいずれか1つに記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、50または52から68のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。HFR2が配列番号14に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、50または52から69のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。HFR3が配列番号15に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、50または52から70のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。HFR4が配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、50または52から71のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。HFR1が配列番号13に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、50または52から72のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。HFR1が配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、50または52から72のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。HFR1が配列番号19に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、50または52から72のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。HFR1が配列番号17に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、51または53から68のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。HFR2が配列番号27または配列番号30に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、51、53から68または76のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。HFR3が配列番号28または配列番号31に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、51、53から68、76または77のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。HFR4が配列番号29または配列番号32に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、51、53から68または76から78のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。HFR1が配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号27に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号28に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号29に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、51、53から68または76から79のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。HFR1が配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号30に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号31に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号32に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49、51、53から68または76から79のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。前記重鎖ポリペプチドが免疫グロブリン重鎖ポリペプチド定常領域の全部または一部を含む、請求項49から81のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。前記重鎖ポリペプチド定常領域がヒトアミノ酸配列を含む、請求項82に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。前記重鎖ポリペプチドが免疫グロブリン分子のFc部分を含む、請求項82または83に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。Fc領域が、IgG1免疫グロブリンFc領域、IgG2免疫グロブリンFc領域、IgG3免疫グロブリンFc領域、IgG4免疫グロブリンFc領域、IgA免疫グロブリンFc領域、IgM免疫グロブリンFc領域、IgE免疫グロブリンFc領域またはIgD免疫グロブリンFc領域である、請求項84に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。前記重鎖ポリペプチドが配列番号6に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49から85のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR1が配列番号9に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号10に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号11に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号12に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1が配列番号13に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR1が配列番号9に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号18に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号11に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号12に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1が配列番号19に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR1が配列番号9に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号18に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号11に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号12に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1が配列番号13に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR1が配列番号9に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号10に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号11に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号12に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1が配列番号19に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR1が配列番号9に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号10に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号11に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号12に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1が配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR1が配列番号9に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号18に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号11に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号12に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1が配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR1が配列番号20に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号21に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号22に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号23に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1が配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号27に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号28に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号29に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR1が配列番号20に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号21に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号22に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号23に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1が配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号30に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号31に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号32に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR1が配列番号24に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号25に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号26に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号23に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1が配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号27に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号28に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号29に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。LFR1が配列番号24に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2が配列番号25に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3が配列番号26に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4が配列番号23に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1が配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2が配列番号30に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3が配列番号31に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4が配列番号32に記載のアミノ酸配列を含む、請求項49に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。表5に記載の重鎖フレームワーク領域と軽鎖フレームワーク領域との対のセットを含む、請求項49に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。Fd断片、Fab断片、Fab’断片、およびFab’2断片からなる群より選択される抗体断片である、請求項49から64、69から82、または87から97のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。前記軽鎖ポリペプチドおよび前記重鎖ポリペプチドが互いに共有結合している、請求項49から97のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。補体成分タンパク質に結合する、請求項49から99のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。前記補体成分タンパク質が、C1q、C1r、C1s、C4、C4a、C4b、C3、C3a、C3b、C2、C2a、C2b、C5、C5a、C5b、C6、C7、C8、C9、プロパージン、補体因子D、補体因子B、MBL、MASP1、MASP2およびMASP3からなる群より選択される、請求項100に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。細胞表面受容体に結合する、請求項49から99のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。前記細胞表面受容体がGタンパク質共役受容体である、請求項102に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。前記細胞表面受容体がケモカイン受容体またはサイトカイン受容体である、請求項102または103に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。前記細胞表面受容体が受容体チロシンキナーゼである、請求項102に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。i細胞死受容体、またはii細胞死受容体のリガンドに結合する、請求項49から99のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。増殖因子、ケモカイン、またはサイトカインに結合する、請求項49から99のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。免疫グロブリン分子に結合する、請求項49から99のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。前記免疫グロブリン分子がIgE分子である、請求項108に記載の遺伝子工学的に操作された抗体。請求項1から48のいずれか一項に記載のポリペプチド;または請求項49から109のいずれか一項に記載の遺伝子工学的に操作された抗体をコードする核酸。請求項110に記載の核酸を含むベクター。前記核酸が発現制御配列に作動可能に連結されている、請求項111に記載のベクター。請求項111または112に記載のベクターを含む細胞。ポリペプチドまたは遺伝子工学的に操作された抗体を産生させるための方法であって、請求項113に記載の細胞を、該ポリペプチドまたは該遺伝子工学的に操作された抗体の発現を可能にするのに好適な条件下で培養する工程を含む、方法。前記培養された細胞から、または該細胞を培養した培地から、前記ポリペプチドまたは前記遺伝子工学的に操作された抗体を単離する工程をさらに含む、請求項114に記載の方法。請求項114または115に記載の方法により産生された、単離されたポリペプチドまたは単離された遺伝子工学的に操作された抗体。ドナー軽鎖可変領域の免疫原性と比較してヒトにおける免疫原性が低い遺伝子工学的に操作された軽鎖抗体可変領域を作製するための方法であって、i配列番号2もしくは配列番号8に記載のアミノ酸配列を含むアクセプター軽鎖抗体可変領域アミノ酸配列、またはii該アクセプター軽鎖抗体可変領域アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む情報を提供する工程と、iii少なくとも1つのドナー抗体軽鎖可変領域アミノ酸配列、またはiv該ドナー抗体軽鎖可変領域アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む情報を提供する工程と、該アクセプター軽鎖抗体可変領域の1つまたは複数のCDRを、該ドナー抗体軽鎖可変領域に由来する1つまたは複数のCDRと交換して、該ドナー抗体軽鎖可変領域の免疫原性と比較してヒトにおける免疫原性が低い遺伝子工学的に操作された軽鎖可変領域を作製する工程とを含み、ここで、該遺伝子工学的に操作された軽鎖可変領域は、配列番号2または配列番号8に記載の完全なアミノ酸配列を含む軽鎖ポリペプチドを含まない、方法。前記遺伝子工学的に操作された軽鎖抗体可変領域と相補的な重鎖抗体可変領域または重鎖抗体可変領域をコードする核酸を取得して、遺伝子工学的に操作された抗体を作製する工程をさらに含む、請求項117に記載の方法。誘導選択を用いて前記重鎖抗体可変領域を取得する、請求項118に記載の方法。前記重鎖抗体可変領域が遺伝子工学的に操作された重鎖抗体可変領域である、請求項118に記載の方法。前記遺伝子工学的に操作された重鎖抗体可変領域の作製が、i配列番号5もしくは配列番号7に記載のアミノ酸配列を含むアクセプター重鎖抗体可変領域アミノ酸配列、またはii該アクセプター重鎖抗体可変領域アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む情報を提供する工程と、iii少なくとも1つのドナー抗体重鎖可変領域アミノ酸配列、またはiv該ドナー抗体重鎖可変領域アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む情報を提供する工程と、該アクセプター重鎖抗体可変領域の1つまたは複数のCDRを、該ドナー抗体重鎖可変領域に由来する1つまたは複数のCDRと交換して、該ドナー抗体重鎖可変領域の免疫原性と比較してヒトにおける免疫原性が低い遺伝子工学的に操作された重鎖抗体可変領域を作製する工程とを含み、ここで、該遺伝子工学的に操作された抗体可変領域が、配列番号5または配列番号7に記載の完全なアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチド可変領域を含まない、請求項120に記載の方法。ドナー抗体重鎖可変領域の免疫原性と比較してヒトにおける免疫原性が低い遺伝子工学的に操作された重鎖抗体可変領域を作製するための方法であって、i配列番号5もしくは配列番号7に記載のアミノ酸配列を含むアクセプター重鎖抗体可変領域アミノ酸配列、またはii該アクセプター重鎖抗体可変領域アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む情報を提供する工程と、iii少なくとも1つのドナー抗体重鎖可変領域アミノ酸配列、またはiv該ドナー抗体重鎖可変領域アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む情報を提供する工程と、該アクセプター重鎖抗体可変領域の1つまたは複数のCDRを、該ドナー抗体重鎖可変領域に由来する1つまたは複数のCDRと交換して、該ドナー抗体重鎖可変領域の免疫原性と比較してヒトにおける免疫原性が低い遺伝子工学的に操作された重鎖抗体可変領域を作製する工程とを含み、ここで、該遺伝子工学的に操作された抗体可変領域は、配列番号5または配列番号7に記載の完全なアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチド可変領域を含まない、方法。前記遺伝子工学的に操作された重鎖抗体可変領域と相補的な軽鎖抗体可変領域を取得し、遺伝子工学的に操作された抗体を作製する工程をさらに含む、請求項122に記載の方法。誘導選択を用いて、前記遺伝子工学的に操作された軽鎖抗体可変領域を取得する、請求項123に記載の方法。前記軽鎖抗体可変領域が、遺伝子工学的に操作された軽鎖抗体可変領域である、請求項123に記載の方法。前記遺伝子工学的に操作された軽鎖抗体可変領域の作製が、i配列番号2もしくは配列番号8に記載のアミノ酸配列を含むアクセプター軽鎖抗体可変領域アミノ酸配列、またはii該アクセプター軽鎖抗体可変領域アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む情報を提供する工程と、iii少なくとも1つのドナー抗体軽鎖可変領域アミノ酸配列、またはiv該ドナー抗体軽鎖可変領域アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む情報を提供する工程と、該アクセプター軽鎖抗体可変領域の1つまたは複数のCDRを、該ドナー抗体軽鎖可変領域に由来する1つまたは複数のCDRと交換して、該ドナー抗体軽鎖可変領域の免疫原性と比較してヒトにおける免疫原性が低い遺伝子工学的に操作された軽鎖可変領域を作製する工程とを含み、ここで、該遺伝子工学的に操作された軽鎖可変領域が、配列番号2または配列番号8に記載の完全なアミノ酸配列を含む軽鎖ポリペプチドを含まない、請求項125に記載の方法。前記フレームワーク領域および前記CDRがKabatの定義に従って定義される、請求項117から126のいずれか一項に記載の方法。前記フレームワーク領域および前記CDRがChothiaの定義に従って定義される、請求項117から126のいずれか一項に記載の方法。前記フレームワーク領域および前記CDRがKabat-Chothiaの組合せ定義に従って定義される、請求項117から126のいずれか一項に記載の方法。前記遺伝子工学的に操作された抗体軽鎖可変領域を産生させる工程をさらに含む、請求項117に記載の方法。かくして、ヒト患者における免疫原性を低下させるための治療抗体、特に、長期投与される治療抗体をヒト化するための改善された方法の必要性が明らかに依然としてある。本開示は、少なくとも部分的には、ヒト化抗C5抗体エクリズマブがヒトにおいて非常に低レベルの免疫原性を示すという本発明者らによる発見に基づく。添付の実施例に詳述されるように、130を超える治療用量のエクリズマブを、数年間の経過にわたって発作性夜間血色素尿症PNHを有する個々の患者に投与した。この患者にメトトレキサートなどの免疫抑制剤を同時投与しなかった。血液試料を患者から取得し、試料がエクリズマブに結合する抗体を含有するか否かを決定するために分析した。そのような抗体の存在は、エクリズマブに対するヒト抗ヒト抗体応答を示唆する。わずか1.2の患者161人中2人が、低いが、検出可能なレベルの、エクリズマブに結合する抗体を有することがわかった。しかしながら、さらなる分析により、2つの血液試料はいずれもエクリズマブの治療効果を中和することができる抗体を含有しないことが確認された。かくして、本発明者らは、ヒトにおいて低レベルの免疫原性も示すさらなる治療抗体を作製するための足場として、エクリズマブを用いることができると判断した。従って、本開示は、免疫原性が低下したアクセプター抗体足場上に移植されたドナー抗体のCDRを含み、ヒトにおけるドナー抗体の免疫原性と比較して、ヒトにおける免疫原性が低い遺伝子工学的に操作された抗体を特徴とする。遺伝子工学的に操作された抗体は、特にそれらを長期投与する場合、ヒトにおける中和抗抗体応答を惹起することが公知であり、予測される、または予期されるドナー抗体に由来するものであってよい。本明細書に記載されるように、ドナー抗体は、例えば、非ヒト抗体例えば、げっ歯類抗体もしくは非ヒト霊長類抗体またはヒト抗ヒト抗体HAHA応答例えば、ヒトにおけるドナー抗体の治療効果を中和するHAHA応答を生成することがわかっているヒト化抗体もしくは完全ヒト抗体であってよい。ドナー抗体および/または得られる遺伝子工学的に操作された抗体は、限定されるものではないが、癌、感染、代謝障害、炎症状態、自己免疫疾患、神経障害、血液障害、および心血管障害などのヒト被験者における任意の様々な疾患の治療または診断にとって有用である抗体であってよい。実施例に考察されるように、エクリズマブはI.23Ig軽鎖分子から誘導された軽鎖フレームワーク領域のセットと、H20C3Ig重鎖分子から誘導された重鎖フレームワーク領域のセットとを有するヒト化抗体である。H20C3重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列は、Wengら1992年JImmunol149巻7号:2518~2529頁に提供されており、NCBI受託番号AAA52985の下でも入手可能である。H20C3をコードする核酸配列は、対応するヒト生殖細胞系列重鎖免疫グロブリン遺伝子と約98類似する。I.23軽鎖ポリペプチドのアミノ酸配列は、Kleinら1993年EurJImmunol23巻12号:3248~3262頁に部分的に記載されており、完全な配列はNCBI受託番号CAA51145.1の下でも公共的に入手可能である。I.23コード配列はヒト生殖細胞系列VκおよびJκ遺伝子から誘導されたものであり、位置38に生殖細胞系列配列からのただ1個のアミノ酸変化を含む。従って、エクリズマブ、I.23および/またはH20C3に由来するフレームワーク領域エクリズマブの軽鎖または重鎖可変領域を、ヒトにおいて低レベルの免疫原性を示す遺伝子工学的に操作された抗体の作製において用いることができる。実施例は、エクリズマブに由来する軽鎖フレームワーク領域1~3および重鎖フレームワーク領域1~3を含む、さらなる機能的ヒト化抗体の構築を記載する。いくつかの実施形態では、エクリズマブ、I.23および/またはH20C3の、全部ではないが、1つまたは複数のCDRを、遺伝子工学的に操作された抗体の作製において用いることもできる。一態様では、本開示は、以下の順序のアミノ酸配列セグメント:LFR1-LCDR1-LFR2-LCDR2-LFR3-LCDR3-LFR4を含むポリペプチド例えば、軽鎖ポリペプチドを特徴とする。軽鎖フレームワーク領域LFR1、LFR2およびLFR3のうちの1つまたは複数は、配列番号2または配列番号8に記載のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域から得られ、軽鎖相補性決定領域LCDR1、LCDR2およびLCDR3のうちの1つまたは複数は、ドナー抗体から得られるが、但し、前記ポリペプチドは配列番号2または配列番号8に記載の完全なアミノ酸配列を含まない。いくつかの実施形態では、LFR4は、配列番号2または配列番号8に記載のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域から得ることができる。いくつかの実施形態では、CDRのうちの1つは、配列番号2または配列番号8に記載のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域に由来するものであってよい。いくつかの実施形態では、CDRのうちの2つは、配列番号2または配列番号8に記載のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域に由来するものであってよい。いくつかの実施形態では、CDRのうちの少なくとも2つは、同じドナー抗体に由来するものであってよい。いくつかの実施形態においては、CDRの全部が同じドナー抗体に由来するものであってよい。いくつかの実施形態では、フレームワーク領域およびCDRはKabatに従って定義される。いくつかの実施形態では、フレームワーク領域およびCDRはChothiaに従って定義される。いくつかの実施形態では、フレームワーク領域およびCDRはKabat-Chothiaの組合せ定義に従って定義される。いくつかの実施形態では、LFR1は、配列番号9に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、LFR2は、配列番号10または配列番号18に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、LFR3は、配列番号11に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、LFR4は、配列番号12に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、LFR1は配列番号9に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、LFR2は配列番号10に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、LFR3は配列番号11に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、LFR4は配列番号12に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、LFR1は配列番号9に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、LFR2は配列番号18に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、LFR3は配列番号11に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、LFR4は配列番号12に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、LFR1は、配列番号20または配列番号24に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、LFR2は、配列番号21または配列番号25に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、LFR3は、配列番号22または配列番号26に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、LFR4は、配列番号23に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、LFR1は配列番号20に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、LFR2は配列番号21に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、LFR3は配列番号22に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、LFR4は配列番号23に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、LFR1は配列番号24に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、LFR2は配列番号25に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、LFR3は配列番号26に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、LFR4は配列番号23に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、前記ポリペプチド例えば、軽鎖ポリペプチドは、免疫グロブリン軽鎖ポリペプチド定常領域の全部または一部を含む、例えば、前記ポリペプチドは、配列番号3に記載のアミノ酸配列を含んでもよい。いくつかの実施形態では、軽鎖ポリペプチド定常領域は、ヒトアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖定常領域は、λ軽鎖定常領域またはκ軽鎖定常領域である。別の態様では、本開示は、以下の順序のアミノ酸配列セグメント:HFR1-HCDR1-HFR2-HCDR2-HFR3-HCDR3-HFR4を含むか、またはそれからなるポリペプチド例えば、重鎖ポリペプチドを特徴とする。重鎖フレームワーク領域HFR1、HFR2およびHFR3のうちの1つまたは複数は、配列番号5または配列番号7に記載のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域から取得することができるか、もしくは取得され、重鎖相補性決定領域HCDR1、HCDR2およびHCDR3のうちの1つまたは複数はドナー抗体から取得されるが、但し、前記ポリペプチドは配列番号5または配列番号7に記載の完全なアミノ酸配列を含まない。いくつかの実施形態では、LFR4は、配列番号5または配列番号7に記載のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域から得ることができる。いくつかの実施形態では、CDRのうちの1つは、配列番号5または配列番号7に記載のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域に由来するものであってよい。いくつかの実施形態では、CDRのうちの2つは、配列番号5または配列番号7に記載のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域に由来するものであってよい。いくつかの実施形態では、CDRのうちの少なくとも2つが、同じドナー抗体に由来するものであってよい。いくつかの実施形態では、CDRの全部が同じドナー抗体に由来するものであってよい。いくつかの実施形態では、フレームワーク領域およびCDRはKabatに従って定義される。いくつかの実施形態では、フレームワーク領域およびCDRはChothiaに従って定義される。いくつかの実施形態では、フレームワーク領域およびCDRはKabat-Chothiaの組合せ定義に従って定義される。いくつかの実施形態では、HFR1は、配列番号13、17または19のいずれか1つに記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、HFR2は配列番号14に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、HFR3は、配列番号15に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、HFR4は、配列番号16に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、HFR1は配列番号13に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、HFR2は配列番号14に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、HFR3は配列番号15に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、HFR4は配列番号16に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、HFR1は配列番号17に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、HFR2は配列番号14に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、HFR3は配列番号15に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、HFR4は配列番号16に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、HFR1は配列番号19に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、HFR2は配列番号14に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、HFR3は配列番号15に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、HFR4は配列番号16に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、HFR1は配列番号17に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、HFR2は、配列番号27または配列番号30に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、HFR3は、配列番号28または配列番号31に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、HFR4は、配列番号29または配列番号32に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、HFR1は配列番号17に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、HFR2は配列番号27に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、HFR3は配列番号28に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、HFR4は配列番号29に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、HFR1は配列番号17に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる;HFR2は配列番号30に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる;HFR3は配列番号31に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなり、HFR4は配列番号32に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、前記ポリペプチド例えば、重鎖ポリペプチドは、免疫グロブリン重鎖ポリペプチド定常領域の全部または一部を含む、例えば、前記ポリペプチドは、配列番号6に記載のアミノ酸配列を含んでもよい。いくつかの実施形態では、前記ポリペプチド例えば、重鎖ポリペプチドは、免疫グロブリン分子のFc部分を含んでもよい。いくつかの実施形態では、免疫グロブリン重鎖ポリペプチド定常領域は、IgG、IgA、IgE、IgDまたはIgM重鎖ポリペプチド定常領域である。別の態様では、本開示は、i軽鎖ポリペプチドおよびii重鎖ポリペプチドを含む遺伝子工学的に操作された抗体であって、軽鎖ポリペプチドが以下の順序のアミノ酸配列セグメント:LFR1-LCDR1-LFR2-LCDR2-LFR3-LCDR3-LFR4を含み、軽鎖フレームワーク領域LFR1、LFR2およびLFR3が配列番号2または配列番号8に記載のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域から得られ、軽鎖相補性決定領域LCDR1、LCDR2およびLCDR3のうちの1つまたは複数がドナー抗体から得られるが、但し、軽鎖ポリペプチドは配列番号2または配列番号8に記載の完全なアミノ酸配列を含まない、前記抗体を特徴とする。重鎖ポリペプチドは、以下の順序のアミノ酸配列セグメント:HFR1-HCDR1-HFR2-HCDR2-HFR3-HCDR3-HFR4を含み、ここで重鎖フレームワーク領域HFR1、HFR2およびHFR3は配列番号5または配列番号7に記載のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域から得られ、重鎖相補性決定領域HCDR1、HCDR2およびHCDR3のうちの1つまたは複数はドナー抗体から得られるが、但し、重鎖ポリペプチドは配列番号5または配列番号7に記載の完全なアミノ酸配列を含まない。いくつかの実施形態では、軽鎖フレームワーク領域、重鎖フレームワーク領域、軽鎖CDR、および重鎖CDRは、Kabatの定義に従って定義される。いくつかの実施形態では、軽鎖フレームワーク領域、重鎖フレームワーク領域、軽鎖CDR、および重鎖CDRは、Chothiaの定義に従って定義される。いくつかの実施形態では、軽鎖フレームワーク領域、重鎖フレームワーク領域、軽鎖CDR、および重鎖CDRは、Kabat-Chothiaの組合せ定義に従って定義される。いくつかの実施形態では、LFR1は配列番号9に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2は配列番号10に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3は配列番号11に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4は配列番号12に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1は配列番号13に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2は配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3は配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4は配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、LFR1は配列番号9に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2は配列番号18に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3は配列番号11に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4は配列番号12に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1は配列番号19に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2は配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3は配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4は配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、LFR1は配列番号9に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2は配列番号18に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3は配列番号11に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4は配列番号12に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1は配列番号13に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2は配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3は配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4は配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、LFR1は配列番号9に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2は配列番号10に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3は配列番号11に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4は配列番号12に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1は配列番号19に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2は配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3は配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4は配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、LFR1は配列番号9に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2は配列番号10に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3は配列番号11に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4は配列番号12に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1は配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2は配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3は配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4は配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、LFR1は配列番号9に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2は配列番号18に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3は配列番号11に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4は配列番号12に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1は配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2は配列番号14に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3は配列番号15に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4は配列番号16に記載のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、LFR1は配列番号20に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2は配列番号21に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3は配列番号22に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4は配列番号23に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1は配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2は配列番号27に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3は配列番号28に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4は配列番号29に記載のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、LFR1は配列番号20に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2は配列番号21に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3は配列番号22に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4は配列番号23に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1は配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2は配列番号30に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3は配列番号31に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4は配列番号32に記載のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、LFR1は配列番号24に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2は配列番号25に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3は配列番号26に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4は配列番号23に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1は配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2は配列番号27に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3は配列番号28に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4は配列番号29に記載のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、LFR1は配列番号24に記載のアミノ酸配列を含み、LFR2は配列番号25に記載のアミノ酸配列を含み、LFR3は配列番号26に記載のアミノ酸配列を含み、LFR4は配列番号23に記載のアミノ酸配列を含み、HFR1は配列番号17に記載のアミノ酸配列を含み、HFR2は配列番号30に記載のアミノ酸配列を含み、HFR3は配列番号31に記載のアミノ酸配列を含み、HFR4は配列番号32に記載のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体は、表5に記載の重鎖フレームワーク領域と軽鎖フレームワーク領域との対のセットを含む。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体は、例えば、抗体断片、例えば、Fd断片、Fab断片、Fab’断片およびFab’2断片からなる群より選択される抗体断片であってもよい。本明細書に記載の任意の遺伝子工学的に操作された抗体のいくつかの実施形態では、軽鎖ポリペプチドおよび重鎖ポリペプチドは互いに共有結合していてもよい。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体は補体成分タンパク質に結合する。補体成分タンパク質は、C1q、C1r、C1s、C4、C4a、C4b、C3、C3a、C3b、C2、C2a、C2b、C5、C5a、C5b、C6、C7、C8、C9、プロパージン、補体因子D、補体因子B、MBL、MASP1、MASP2、およびMASP3からなる群より選択されるものであってもよい。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体は細胞表面受容体、例えば、Gタンパク質共役受容体、ケモカイン受容体、サイトカイン受容体、または受容体チロシンキナーゼに結合する。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体は、i細胞死受容体deathreceptorまたはii細胞死受容体のリガンドに結合する。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体は、増殖因子、ケモカイン、またはサイトカインに結合する。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体は、免疫グロブリン分子、例えば、IgE分子に結合する。さらに別の態様では、本開示は、i本明細書に記載のポリペプチドのいずれか一つ例えば、軽鎖ポリペプチドもしくは重鎖ポリペプチドまたはii本明細書に記載の遺伝子工学的に操作された抗体のいずれかをコードする核酸を特徴とする。また、前記核酸を含むベクターも特徴とする。ベクターは、発現ベクターであってよい。さらに、本開示は、前記核酸またはベクターを含む細胞を特徴とする。別の態様では、本開示は、ポリペプチドまたは遺伝子工学的に操作された抗体を産生させる方法を特徴とする。この方法は、前記ベクターを含有する上記細胞を、前記ベクター内に含まれた核酸によりコードされるポリペプチドまたは遺伝子工学的に操作された抗体の前記細胞による発現を可能にするのに好適な条件下で培養することを含む。前記方法はまた、培養された細胞から、または細胞を培養した培地から前記ポリペプチドまたは遺伝子工学的に操作された抗体を単離することを含んでもよい。また、前記方法により産生された、単離されたポリペプチドまたは単離された遺伝子工学的に操作された抗体も特徴とする。別の態様では、本開示は、ドナー軽鎖可変領域の免疫原性と比較してヒトにおける免疫原性が低い遺伝子工学的に操作された軽鎖抗体可変領域を作製する方法を特徴とする。この方法は、i配列番号2もしくは配列番号8に記載のアミノ酸配列を含むアクセプター軽鎖抗体可変領域アミノ酸配列またはiiアクセプター軽鎖抗体可変領域アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む情報を提供することと、iii少なくとも1個のドナー抗体軽鎖可変領域アミノ酸配列またはivドナー抗体軽鎖可変領域アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む情報を提供することと、アクセプター軽鎖抗体可変領域の1つまたは複数のCDRを、ドナー抗体軽鎖可変領域に由来する1つまたは複数のCDRと交換して、それによってドナー抗体軽鎖可変領域の免疫原性と比較してヒトにおける免疫原性が低い遺伝子工学的に操作された軽鎖可変領域を作製することとを含むが、但し、前記遺伝子工学的に操作された軽鎖可変領域が配列番号2または配列番号8に記載の完全なアミノ酸配列を含む軽鎖ポリペプチドを含まない。前記方法は、遺伝子工学的に操作された軽鎖抗体可変領域と相補的である、重鎖抗体可変領域、または重鎖抗体可変領域をコードする核酸を取得することにより、遺伝子工学的に操作された抗体を作製することを含んでもよい。前記方法のいくつかの実施形態では、誘導選択guidedselectionを用いて、重鎖抗体可変領域を取得する。前記方法のいくつかの実施形態では、重鎖抗体可変領域は、遺伝子工学的に操作された重鎖抗体可変領域である。前記方法のいくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された重鎖抗体可変領域の作製は、i配列番号5もしくは配列番号7に記載のアミノ酸配列を含むアクセプター重鎖抗体可変領域アミノ酸配列またはiiアクセプター重鎖抗体可変領域アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む情報を提供することと、iii少なくとも1個のドナー抗体重鎖可変領域アミノ酸配列またはivドナー抗体重鎖可変領域アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む情報を提供することと、アクセプター重鎖抗体可変領域の1つまたは複数のCDRを、ドナー抗体重鎖可変領域に由来する1つまたは複数のCDRと交換して、それによってドナー抗体重鎖可変領域の免疫原性と比較してヒトにおける免疫原性が低い遺伝子工学的に操作された重鎖抗体可変領域を作製することとを含むが、但し、前記遺伝子工学的に操作された抗体可変領域が配列番号5または配列番号7に記載の完全なアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチド可変領域を含まない。さらに別の態様では、本開示は、ドナー抗体重鎖可変領域の免疫原性と比較してヒトにおける免疫原性が低い遺伝子工学的に操作された重鎖抗体可変領域を作製する方法を特徴とする。この方法は、i配列番号5もしくは配列番号7に記載のアミノ酸配列を含むアクセプター重鎖抗体可変領域アミノ酸配列またはiiアクセプター重鎖抗体可変領域アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む情報を提供することと、iii少なくとも1個のドナー抗体重鎖可変領域アミノ酸配列またはivドナー抗体重鎖可変領域アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む情報を提供することと、アクセプター重鎖抗体可変領域の1つまたは複数のCDRを、ドナー抗体重鎖可変領域に由来する1つまたは複数のCDRと交換して、それによってドナー抗体重鎖可変領域の免疫原性と比較してヒトにおける免疫原性が低い遺伝子工学的に操作された重鎖抗体可変領域を作製することとを含むが、但し、前記遺伝子工学的に操作された抗体可変領域が配列番号5または配列番号7に記載の完全なアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチド可変領域を含まない。前記方法は、遺伝子工学的に操作された重鎖抗体可変領域と相補的な軽鎖抗体可変領域を取得することにより、遺伝子工学的に操作された抗体を作製することを含んでもよい。前記方法のいくつかの実施形態では、誘導選択を用いて、遺伝子工学的に操作された軽鎖抗体可変領域を取得する。前記方法のいくつかの実施形態では、軽鎖抗体可変領域は、遺伝子工学的に操作された軽鎖抗体可変領域である。前記方法のいくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された軽鎖抗体可変領域の作製は、i配列番号2もしくは配列番号8に記載のアミノ酸配列を含むアクセプター軽鎖抗体可変領域アミノ酸配列またはiiアクセプター軽鎖抗体可変領域アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む情報を提供することと、iii少なくとも1個のドナー抗体軽鎖可変領域アミノ酸配列またはivドナー抗体軽鎖可変領域アミノ酸配列をコードする核酸配列を含む情報を提供することと、アクセプター軽鎖抗体可変領域の1つまたは複数のCDRを、ドナー抗体軽鎖可変領域に由来する1つまたは複数のCDRと交換して、それによってドナー抗体軽鎖可変領域の免疫原性と比較してヒトにおける免疫原性が低い遺伝子工学的に操作された軽鎖可変領域を作製することとを含むが、但し、前記遺伝子工学的に操作された軽鎖可変領域が配列番号2または配列番号8に記載の完全なアミノ酸配列を含む軽鎖ポリペプチドを含まない。いくつかの実施形態では、前記方法は、遺伝子工学的に操作された抗体軽鎖可変領域および/または遺伝子工学的に操作された抗体重鎖可変領域を産生させることを含む軽鎖および重鎖可変領域は、いくつかの実施形態では、本明細書に記載の定常領域を含んでもよい。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体軽鎖可変領域を、細胞中で、または無細胞系を用いて産生させる。いくつかの実施形態では、前記方法は、前記細胞または前記細胞を培養した培地から、遺伝子工学的に操作された抗体軽鎖可変領域および/または遺伝子工学的に操作された重鎖可変領域を単離することを含む。いくつかの実施形態では、前記方法は、遺伝子工学的に操作された抗体を産生させることを含む。遺伝子工学的に操作された抗体を、細胞中で、または無細胞系を用いて産生させることができる。いくつかの実施形態では、前記方法は、前記細胞または前記細胞を培養した培地から、遺伝子工学的に操作された抗体を単離することを含む。いくつかの実施形態では、前記方法は、遺伝子工学的に操作された抗体がドナー抗体と同じ抗原に結合するか否かを決定することを含む。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体は、同じ抗原に対するドナー抗体の親和性と比較して標的抗原に対してより高い親和性を有してもよい。いくつかの実施形態では、前記方法は、遺伝子工学的に操作された抗体がヒトに投与された後に、遺伝子工学的に操作された抗体に結合する抗体が産生されるか否かを決定することを含む。いくつかの実施形態では、前記方法は、遺伝子工学的に操作された抗体を作り変えることを含む。いくつかの実施形態では、作り変えは、フレームワーク領域の少なくとも1個のアミノ酸を置換することを含む。いくつかの実施形態では、作り変えは、フレームワーク領域の少なくとも2個のアミノ酸を置換することを含む。いくつかの実施形態では、作り変えは、少なくとも2個の異なるフレームワーク領域中の少なくとも1個のアミノ酸を置換することを含む。いくつかの実施形態では、作り変えは、フレームワーク領域中の1つまたは複数のアミノ酸を置換することを含まない。いくつかの実施形態では、作り変えは、少なくとも1個のCDRの少なくとも1個のアミノ酸を置換することを含む。作り変えは、いくつかの実施形態では、少なくとも1個のCDRの少なくとも2個のアミノ酸を置換することを含む。いくつかの実施形態では、作り変えは、Kabatの定義またはKabat-Chothiaの組合せ定義に従って定義されるCDRの少なくとも1個のアミノ酸位置で置換することを含む。いくつかの実施形態では、作り変えは、重鎖可変領域の位置28および30Kabatの番号付けによるの一方または両方のアミノ酸を置換することを含む。いくつかの実施形態では、作り変えは、少なくとも2個の異なるCDR中の少なくとも1個のアミノ酸を置換することを含む。いくつかの実施形態では、作り変えは、重鎖可変領域の位置27、28、30、71または78Kabatの番号付けによるの少なくとも1個のアミノ酸を置換することを含む。いくつかの実施形態では、作り変えは、少なくとも1個のスペーサーアミノ酸配列を、遺伝子工学的に操作された抗体の軽鎖可変領域および重鎖可変領域の一方または両方に導入することを含む。前記方法のいくつかの実施形態では、フレームワークまたはCDRの1つまたは複数のアミノ酸を、交換前に置換する。いくつかの実施形態では、フレームワークまたはCDRの1つまたは複数のアミノ酸を、交換後に置換する。いくつかの実施形態では、アクセプター抗体軽鎖可変領域は、本明細書に記載の軽鎖ポリペプチドのいずれかのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アクセプター抗体重鎖可変領域アミノ酸配列は、本明細書に記載の重鎖ポリペプチドのいずれかのアミノ酸配列を含む。前記方法のいくつかの実施形態では、アクセプター抗体軽鎖可変領域アミノ酸配列は、本明細書に記載の軽鎖ポリペプチドのいずれかのアミノ酸配列を含み、アクセプター抗体重鎖可変領域アミノ酸配列は、本明細書に記載の重鎖ポリペプチドのいずれかのアミノ酸配列を含む。さらに別の態様では、本開示は、i軽鎖ポリペプチドおよびii重鎖ポリペプチドを含む遺伝子工学的に操作された抗体であって、軽鎖ポリペプチドが以下の順序のアミノ酸配列セグメント:LFR1-LCDR1-LFR2-LCDR2-LFR3-LCDR3-LFR4を含む、前記抗体を特徴とする。いくつかの実施形態では、LFR1は配列番号9に記載のアミノ酸配列を含むが、0~3個のアミノ酸置換を有し、LFR2は配列番号10または配列番号18に記載のアミノ酸配列を含むが、0~3個のアミノ酸置換を有し、LFR3は配列番号11に記載のアミノ酸配列を含むが、0~3個のアミノ酸置換を有し、LFR4は配列番号12に記載のアミノ酸配列を含むが、0~3個のアミノ酸置換を有し、LCDR1はドナー抗体に由来する軽鎖CDR1のアミノ酸配列を含み、LCDR2はドナー抗体に由来する軽鎖CDR2のアミノ酸配列を含み、LCDR3はドナー抗体に由来する軽鎖CDR3のアミノ酸配列を含む。前記軽鎖ポリペプチドは、配列番号2または配列番号8に記載のアミノ酸配列を含まない。いくつかの実施形態では、前記重鎖ポリペプチドは、HFR1が配列番号13、17または19に記載のアミノ酸配列を含むが、0~3個のアミノ酸置換を有し;HFR2が配列番号14に記載のアミノ酸配列を含むが、0~3個のアミノ酸置換を有し;HFR3が配列番号15に記載のアミノ酸配列を含むが、0~3個のアミノ酸置換を有し;およびHFR4が配列番号16に記載のアミノ酸配列を含むが、0~3個のアミノ酸置換を有し、HCDR1がドナー抗体に由来する重鎖CDR1のアミノ酸配列を含み、HCDR2がドナー抗体に由来する重鎖CDR2のアミノ酸配列を含み、HCDR3がドナー抗体に由来する重鎖CDR3のアミノ酸配列を含む、以下の順序のアミノ酸配列セグメント:HFR1-HCDR1-HFR2-HCDR2-HFR3-HCDR3-HFR4を含む。前記重鎖ポリペプチドは、配列番号5または配列番号7に記載のアミノ酸配列を含まない。遺伝子工学的に操作された抗体は、ドナー抗体または複数のドナー抗体と比較してヒトにおける免疫原性が低く、遺伝子工学的に操作された抗体はドナー抗体または複数のドナー抗体と同じ抗原に結合する。いくつかの実施形態では、aLCDR1、LCDR2およびLCDR3は単一のドナー抗体に由来する、ならびにbHCDR1、HCDR2およびHCDR3は単一のドナー抗体に由来する、のうちの一方または両方である。いくつかの実施形態では、軽鎖CDRおよび重鎖CDRの全部が同じドナー抗体に由来する。別途定義しない限り、本明細書で用いられる全ての技術的および科学的用語は、本開示が属する分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。相反する場合、定義を含む本明細書が制御するものとする。好ましい方法および材料を以下に記載するが、本明細書に記載のものと類似するか、または等価である方法および材料を、本明細書に開示される方法および組成物の実施または試験において用いることもできる。本明細書に記載の全ての刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は、その全体が参照により組入れられるものとする。本開示の他の特徴および利点、例えば、ヒトにおける免疫原性を低下させた治療抗体を作製する方法は、以下の説明、実施例、および特許請求の範囲から明らかとなる。本開示は、遺伝子工学的に操作された抗体が誘導されたそれぞれのドナー抗体の免疫原性と比較してヒトにおいて低い免疫原性を示す遺伝子工学的に操作された抗体を提供する。いかなる意味でも限定を意図するものではないが、例示的組成物、ならびにその調製および使用のための方法を以下に詳述する。遺伝子工学的に操作された抗体本明細書で用いられる遺伝子工学的に操作された抗体は、アクセプター抗体足場の可変領域上に移植されたドナー抗体の1つまたは複数例えば、2、3、4、5または6のCDRを含む抗体であり、その遺伝子工学的に操作された抗体はヒトにおけるドナー抗体の免疫原性と比較してヒトにおける免疫原性が低い。遺伝子工学的に操作された抗体の構造は、以下の通りである。遺伝子工学的に操作された抗体は、以下の順序のアミノ酸配列セグメント:LFR1-LCDR1-LFR2-LCDR2-LFR3-LCDR3-LFR4を含むか、またはそれからなる配列を有する軽鎖ポリペプチドを含む。LFR1は軽鎖可変領域のフレームワーク1FR1のアミノ酸配列に対応し、LFR2は軽鎖可変領域のフレームワーク2FR2のアミノ酸配列に対応し、LFR3は軽鎖可変領域のフレームワーク3FR3のアミノ酸配列に対応し、LFR4は軽鎖可変領域のフレームワーク4FR4のアミノ酸配列に対応する。LCDR1は軽鎖可変領域の相補性決定領域1CDR1のアミノ酸配列に対応し、LCDR2は軽鎖可変領域の相補性決定領域2CDR2のアミノ酸配列に対応し、LCDR3は軽鎖可変領域の相補性決定領域3CDR3のアミノ酸配列に対応する。遺伝子工学的に操作された抗体のLFR1、LFR2、LFR3およびLFR4アミノ酸配列のうちの1つまたは複数例えば、1個、2個、3個または4個全部が、アクセプター抗体により寄与される。いくつかの実施形態では、LFR1、LFR2、またはLFR3のみがアクセプター抗体により寄与される。いくつかの実施形態では、LFR1およびLFR2がアクセプター抗体により寄与される。いくつかの実施形態では、LFR2およびLFR3がアクセプター抗体により寄与される。いくつかの実施形態では、LFR1およびLFR3がアクセプター抗体により寄与される。いくつかの実施形態では、LFR4はアクセプター抗体により寄与されない。LCDR1、LCDR2およびLCDR3アミノ酸配列のうちの1つまたは複数が、少なくとも1個例えば、1個、2個または3個のドナー抗体から寄与される。例えば、軽鎖CDRを、単一のドナー抗体から取得するか、またはいくつかの実施形態では、CDRを2個以上の異なるドナー抗体例えば、同じ抗原に結合するが、異なる軽鎖CDR配列を有する2個の抗体から取得することができる。いくつかの実施形態では、LCDRの少なくとも1個例えば、1個、2個、または3個全部でさえを、アクセプター抗体から取得する。例えば、遺伝子工学的に操作された抗体は、ドナー抗体に由来するLCDR3ならびにアクセプター抗体に由来するLCDR1およびLCDR2を有してもよい。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体は、ドナー抗体に由来するLCDR2ならびにアクセプター抗体に由来するLCDR1およびLCDR3を有してもよい。好適なアクセプター抗体およびドナー抗体は本明細書で詳述される。CDRとフレームワーク領域との正確な境界は、様々な方法に従って異なるように定義されてきた。いくつかの実施形態では、軽鎖または重鎖可変ドメイン内のCDRまたはフレームワーク領域の位置は、Kabatら[1991年SequencesofProteinsofImmunologicalInterest、NIHPublication、91~3242番、U.S.DepartmentofHealthandHumanServices、Bethesda、MD]により定義された通りであってよい。そのような場合、CDRはKabatのCDR例えば、KabatのLCDR2またはKabatのHCDR1と呼ぶことができ、フレームワーク領域はKabatのフレームワーク領域例えば、KabatのLFR1またはKabatのHFR3と呼ぶことができる。いくつかの実施形態では、軽鎖または重鎖可変領域のCDRまたはフレームワーク領域の位置は、Chothiaら1989年Nature342巻:877~883頁により定義された通りであってよい。従って、これらの領域は、それぞれ、ChothiaのCDR例えば、ChothiaのLCDR2もしくはChothiaのHCDR3またはChothiaのフレームワーク領域例えば、ChothiaのLFR1もしくはChothiaのLFR3と呼ぶことができる。いくつかの実施形態では、軽鎖および重鎖可変領域のCDRまたはフレームワーク領域の位置は、Kabat-Chothiaの組合せ定義により定義された通りであってよい。そのような実施形態においては、これらの領域は、それぞれ、Kabat-Chothiaの組合せのCDRまたはKabat-Chothiaの組合せのフレームワーク領域と呼ぶことができる。Thomasら[1996年MolImmunol33巻17/18号:1389~1401頁]は、KabatおよびChothiaの定義に従うCDRとフレームワーク領域との境界の同定を例示する。3つの前記定義のそれぞれを用いるCDRおよびフレームワークの同定は、図1および2にも示される。いくつかの実施形態では、軽鎖または重鎖可変ドメインを含むCDRおよび/またはフレームワーク領域の位置は、HonneggerおよびPlueckthum[2001年JMolBiol309巻:657~670頁]により定義された通りであってよい。本明細書に記載され、実施例に例示されるように、マウス抗C5抗体のLCDRをI.23Igカッパ軽鎖分子のフレームワーク領域足場上に移植することにより、エクリズマブの軽鎖可変領域を作製した。エクリズマブの軽鎖可変領域のアミノ酸配列は以下の通りである:I.23の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は以下の通りである:エクリズマブのLFR2アミノ酸配列は、1個のアミノ酸:アルギニンの代わりに位置38のグルタミンにより対応するI.23LFR2のアミノ酸配列と異なる。いかなる特定の理論または作用機構にも束縛されるものではないが、エクリズマブまたはI.23に由来する軽鎖フレームワーク領域配列すなわち、LFR1、LFR2、LFR3および/またはLFR4は、ドナー抗体の免疫原性のレベルと比較してヒトにおいて低下したレベルの免疫原性を示す遺伝子工学的に操作された抗体の調製において有用であると考えられる。かくして、いくつかの実施形態では、LFR1、LFR2、LFR3および/またはLFR4は、エクリズマブおよび/またはI.23から誘導された対応する軽鎖フレームワーク領域であってよい。Kabat、Chothia、またはKabat-Chothiaにより定義された、エクリズマブおよびI.23軽鎖フレームワーク領域のアミノ酸配列を、表1に記載する。かくして、いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体の軽鎖ポリペプチドは、配列番号9に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるLFR1エレメント;配列番号10に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるLFR2エレメント;配列番号11に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるLFR3エレメント;および配列番号12に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるLFR4エレメントを含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体の軽鎖ポリペプチドは、配列番号9に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるLFR1エレメント;配列番号18に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるLFR2エレメント;配列番号11に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるLFR3エレメント;および配列番号12に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるLFR4エレメントを含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体の軽鎖ポリペプチドは、配列番号20に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるLFR1エレメント;配列番号21に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるLFR2エレメント;配列番号22に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるLFR3エレメント;および配列番号23に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるLFR4エレメントを含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体の軽鎖ポリペプチドは、配列番号24に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるLFR1エレメント;配列番号25に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるLFR2エレメント;配列番号26に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるLFR3エレメント;および配列番号23に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるLFR4エレメントを含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、軽鎖ポリペプチドは、配列番号2または配列番号8に記載のアミノ酸配列を含まないか、またはそれからならない。軽鎖ポリペプチドは、定常領域を含んでもよい。例えば、軽鎖定常領域は、λ軽鎖ポリペプチド定常領域またはκ軽鎖定常領域であってもよい。いくつかのヒトλおよびκ軽鎖定常領域のアミノ酸配列は当業界で公知であり、例えば、Kabatら1991年;上掲に記載されている。遺伝子工学的に操作された抗体の軽鎖ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を有する軽鎖定常領域を含んでもよい:配列番号3は、エクリズマブの軽鎖の定常領域である。本明細書に記載の遺伝子工学的に操作された抗体はまた、以下の順序のアミノ酸配列セグメント:HFR1-HCDR1-HFR2-HCDR2-HFR3-HCDR3-HFR4を含むか、またはそれからなるアミノ酸配列を有する重鎖ポリペプチドを含んでもよい。HFR1は重鎖可変領域のフレームワーク1FR1のアミノ酸配列に対応し、HFR2は重鎖可変領域のフレームワーク2FR2のアミノ酸配列に対応し、HFR3は重鎖可変領域のフレームワーク3FR3のアミノ酸配列に対応し、HFR4は重鎖可変領域のフレームワーク4FR4のアミノ酸配列に対応する。HCDR1は重鎖可変領域の相補性決定領域1CDR1のアミノ酸配列に対応し、HCDR2は重鎖可変領域の相補性決定領域2CDR2のアミノ酸配列に対応し、HCDR3は重鎖可変領域の相補性決定領域3CDR3のアミノ酸配列に対応する。HFR1、HFR2、HFR3およびHFR4アミノ酸配列は、アクセプター抗体から寄与されるが、HCDR1、HCDR2およびHCDR3アミノ酸配列は少なくとも1個例えば、1個、2個、または3個のドナー抗体から寄与されるものであってよい。例えば、重鎖CDRを単一のドナー抗体から取得するか、またはいくつかの実施形態では、CDRを2個以上の異なるドナー抗体例えば、同じ抗原に結合するが、異なる重鎖CDR配列を有する2個の抗体から取得することができる。いくつかの実施形態では、HCDRの少なくとも1個は、アクセプター抗体から保持されるまたは寄与される。例えば、HCDR3は、ドナー抗体に由来するものであってよく例えば、HCDR3が、ドナー抗体が結合する抗原の多くの結合エネルギーをドナー抗体に寄与することが決定された場合、HCDR1およびHCDR2はアクセプター抗体から保持されるものであってよい。いくつかの実施形態では、HCDR1、HCDR2およびHCDR3はそれぞれ、単一のドナー抗体から寄与される。好適なアクセプター抗体およびドナー抗体は、本明細書で詳述される。本明細書に記載され、実施例に例示されるように、マウス抗C5抗体のHCDRを、H20C3Ig分子の重鎖フレームワーク領域足場上に移植することにより、エクリズマブの重鎖可変領域を作製した。エクリズマブの重鎖可変領域のアミノ酸配列は以下の通りである:H20C3の重鎖可変領域のアミノ酸配列は以下の通りである:Kabatにより定義されたように、エクリズマブのHFR1のアミノ酸配列は、2個のアミノ酸によりH20C3のHFR1の対応するアミノ酸配列と異なる。具体的には、H20C3VH領域KabatのFR1の位置28のトレオニンおよび位置30のトレオニンは、エクリズマブのKabatのFR1配列中では、それぞれ、イソロイシンおよびセリンである。残りのフレームワーク領域HFR2、HFR3およびHFR4は、Kabatの定義の下ではエクリズマブとH20C3の間で同一である。Kabat-Chothiaの組合せ定義の下では、任意のフレームワーク領域について、エクリズマブのアミノ酸配列と、H20C3のアミノ酸配列との間に差異はない図2を参照されたい。いかなる特定の理論または作用機構にも束縛されるものではないが、エクリズマブまたはH20C3に由来する重鎖フレームワーク領域配列は、ドナー抗体の免疫原性のレベルと比較して、ヒトにおいて低下したレベルの免疫原性を示す遺伝子工学的に操作された抗体の調製において有用であると考えられる。かくして、いくつかの実施形態では、HFR1、HFR2、HFR3および/またはHFR4は、エクリズマブおよび/またはH20C3から誘導された対応する重鎖フレームワーク領域であってよい。Kabat、Chothia、またはKabat-Chothiaにより定義された、エクリズマブおよびH20C3重鎖フレームワーク領域のアミノ酸配列を、表2に記載する。かくして、いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体のHFR1は、例えば、配列番号13、17または19に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれであってもよい。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体のHFR2は、例えば、配列番号14に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれであってもよい。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体のHFR3は、例えば、配列番号15に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれであってもよい。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体のHFR4は、例えば、配列番号16に記載のアミノ酸配列を含むか、またはそれであってもよい。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体の重鎖ポリペプチドは、配列番号13に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR1エレメント;配列番号14に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR2エレメント;配列番号15に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR3エレメント;および配列番号16に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR4エレメントを含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体の重鎖ポリペプチドは、配列番号19に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR1エレメント;配列番号14に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR2エレメント;配列番号15に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR3エレメント;および配列番号16に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR4エレメントを含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体の重鎖ポリペプチドは、配列番号17に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR1エレメント;配列番号14に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR2エレメント;配列番号15に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR3エレメント;および配列番号16に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR4エレメントを含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体の重鎖ポリペプチドは、配列番号17に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR1エレメント;配列番号27に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR2エレメント;配列番号28に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR3エレメント;および配列番号29に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR4エレメントを含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体の重鎖ポリペプチドは、配列番号17に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR1エレメント;配列番号30に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR2エレメント;配列番号31に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR3エレメント;および配列番号32に記載のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなるHFR4エレメントを含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、重鎖ポリペプチドは、配列番号5または配列番号7に記載のアミノ酸配列を含まないか、またはそれからならない。重鎖ポリペプチドは、定常領域例えば、重鎖定常領域1CH1、重鎖定常領域2CH2、重鎖定常領域3CH3、重鎖定常領域4CH4、または前記のいずれかの組合せを含んでもよい。重鎖ポリペプチドは、免疫グロブリン分子のFc部分を含んでもよい。Fc領域は、例えば、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgM、IgEもしくはIgD免疫グロブリン分子に由来するFc領域またはこれらのそれぞれの部分の組合せであってよい。いくつかのヒト重鎖定常領域のアミノ酸配列は、当業界で公知であり、例えば、Kabatら1991年、上掲に記載されている。いくつかの実施形態では、重鎖ポリペプチドは、ハイブリッド定常領域、またはその一部、例えば、G2/G4ハイブリッド定常領域を含んでもよい例えば、Burtonら1992年AdvImmun.51巻:1~18頁;Canfieldら1991年JExpMed173巻:1483~1491頁;およびMuellerら1997年Mol.Immunol.34巻6号:441~452頁を参照されたい。例えばおよびKabatの番号付けによれば、IgG1およびIgG4定常領域はG249G250残基を含むが、IgG2定常領域は残基249を含まないが、G250を含む。249~250の領域がG2配列に由来するG2/G4ハイブリッド定常領域では、定常領域をさらに改変して、位置249にグリシン残基を導入して、G249/G250を有するG2/G4融合物を作製することができる。G249/G250を含む他の定常ドメインハイブリッドはまた、本開示に従う遺伝子工学的に操作された抗体の一部であってよい。いくつかの実施形態では、重鎖ポリペプチドは、以下のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる定常領域を含む:配列番号6は、エクリズマブの重鎖定常領域のアミノ酸配列を示す。本明細書に記載の遺伝子工学的に操作された抗体は、いくつかの実施形態では、軽鎖フレームワーク領域と重鎖フレームワーク領域との特定の例示的対を含む。例えば、本明細書に記載の遺伝子工学的に操作された抗体は、エクリズマブから誘導されたKabat軽鎖フレームワーク領域を含む軽鎖ポリペプチドと、エクリズマブから誘導されたKabat重鎖フレームワーク領域を含む重鎖ポリペプチドとを含んでもよい。別の例では、本明細書に記載の遺伝子工学的に操作された抗体は、I.23軽鎖から誘導されたKabat-Chothia軽鎖フレームワーク領域を含む軽鎖ポリペプチドと、H20C3重鎖から誘導されたKabat-Chothia重鎖フレームワーク領域を含む重鎖ポリペプチドとを含んでもよい。さらに別の例では、本明細書に記載の遺伝子工学的に操作された抗体は、I.23軽鎖から誘導されたKabat軽鎖フレームワーク領域を含む軽鎖ポリペプチドと、エクリズマブから誘導されたKabat重鎖フレームワーク領域を含む重鎖ポリペプチドとを含んでもよい。遺伝子工学的に操作された抗体の調製における使用のための、軽鎖および重鎖フレームワーク領域の例示的な対、Kabatの定義またはKabat-Chothiaの組合せ定義の下で定義される領域を表3に記載する。遺伝子工学的に操作された抗体の調製における使用のための、軽鎖および重鎖フレームワーク領域の例示的な対、Chothiaの下で定義される領域を表4に記載する。遺伝子工学的に操作された抗体の調製における使用のための、軽鎖および重鎖フレームワーク領域の対のさらなる例、Chothiaの下で定義される領域を表5に記載する。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体の上記フレームワーク領域の1つまたは複数例えば、1つ、2つ、3つ、4つ、5つ、6つ、7つ、または8つ全部を、1つまたは複数例えば、2、3、4、5、6、7、8、9または10個以上のアミノ酸置換を含むように変化させることができる。これらの1個以上の置換を含む遺伝子工学的に操作された抗体は、遺伝子工学的に操作された抗体の変異体と呼ばれることもある。例えば、遺伝子工学的に操作された抗体が抗原に対するドナー抗体の親和性と比較して低い親和性でドナー抗体により認識される抗原に結合する場合、そのような置換を導入することができる。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体の変異体のフレームワーク領域の1つまたは複数は、10個より少ない例えば、9、8、7、6、5、4、3、2、または1個より少ない置換を含む。いくつかの実施形態では、ただ1つのフレームワーク領域が、1個のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、2つ以上のフレームワーク領域が、1個のアミノ酸置換を含む。必要とされることの全部は、得られる遺伝子工学的に操作された抗体が、ヒトに投与した場合、ヒトにおいて対応するドナー抗体よりも免疫原性が低いことである。いくつかの実施形態では、上記フレームワーク領域アミノ酸配列は置換されない。アミノ酸置換は保存的置換であっても、非保存的置換であってもよい。保存的置換は、典型的には以下の基内の置換を含む:グリシンおよびアラニン;バリン、イソロイシンおよびロイシン;アスパラギン酸およびグルタミン酸;アスパラギン、グルタミン、セリンおよびトレオニン;リシン、ヒスチジンおよびアルギニン;ならびにフェニルアラニンおよびチロシン。軽鎖および重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列は、様々なセグメントの間例えば、遺伝子工学的に操作された抗体のドナーCDRとアクセプターフレームワーク領域との間にスペーサーとして挿入された1つまたは複数例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9または10個以上のアミノ酸を含んでもよい。スペーサー配列の挿入は、例えば、CDR移植プロセス中に失われた可能性がある抗原結合親和性を回復させるのに有用であり得る下記を参照されたい。例えば、MaynardおよびGeorgiou2001年AnnRevBiomedEngineering2巻:339~376頁を参照されたい。例えば、スペーサーアミノ酸配列を、LFR1とLCDR1との間に挿入することができる。いくつかの実施形態では、スペーサーアミノ酸配列を、LCDR1とLFR2との間に挿入する。いくつかの実施形態では、スペーサーアミノ酸配列を、LFR2とLCDR2との間に挿入する。いくつかの実施形態では、スペーサーアミノ酸配列を、LCDR2とLFR3との間に挿入する。いくつかの実施形態では、スペーサーアミノ酸配列を、LFR3とLCDR3との間に挿入する。いくつかの実施形態では、スペーサーアミノ酸配列を、LCDR3とLFR4との間に挿入する。いくつかの実施形態では、スペーサーアミノ酸配列を、HFR1とHCDR1との間に挿入する。いくつかの実施形態では、スペーサーアミノ酸配列を、HCDR1とHFR2との間に挿入する。いくつかの実施形態では、スペーサーアミノ酸配列を、HFR2とHCDR2との間に挿入する。いくつかの実施形態では、スペーサーアミノ酸配列を、HCDR2とHFR3の間に挿入する。いくつかの実施形態では、スペーサーアミノ酸配列を、HFR3とHCDR3との間に挿入する。いくつかの実施形態では、スペーサーアミノ酸配列を、HCDR3とHFR4との間に挿入する。いくつかの実施形態では、スペーサー配列を、軽鎖ポリペプチドのセグメントの全部および/または重鎖ポリペプチドのセグメントの全部の間に挿入する。いくつかの実施形態では、軽鎖または重鎖可変領域の構成エレメントのいずれの間にもスペーサーを導入しない。1つまたは複数のスペーサー配列を含む遺伝子工学的に操作された抗体に必要とされることの全部は、抗体がaドナー抗体と同じ抗原に結合する能力を保持すること、およびbヒトにおけるドナー抗体の免疫原性と比較してヒトにおける免疫原性が低いことである。本明細書で用いられる用語抗体とは、全抗体分子もしくは無傷の抗体分子例えば、IgM、IgGIgG1、IgG2、IgG3およびIgG4を含む、IgA、IgDもしくはIgEまたはその任意の抗原結合断片を指す。用語抗体としては、例えば、キメラ化抗体またはキメラ抗体、ヒト化抗体、脱免疫化抗体、および完全ヒト抗体が挙げられる。抗体の抗原結合断片としては、例えば、一本鎖抗体、一本鎖Fv断片scFv、Fd断片、Fab断片、Fab’断片、またはFab’2断片が挙げられる。scFv断片は、scFvが誘導される抗体の重鎖および軽鎖可変領域の両方を含む単一のポリペプチド鎖である。さらに、イントラボディ、ミニボディ、トリアボディおよびダイアボディ例えば、Todorovskaら2001年JImmunolMethods248巻1号:47~66頁;HudsonおよびKortt1999年JImmunolMethods231巻1号:177~189頁;Poljak1994年Structure2巻12号:1121~1123頁;RondonおよびMarasco1997年AnnualReviewofMicrobiology51巻:257~283頁それぞれの開示はその全体が参照により本明細書に組入れられるものとするを参照されたいも、抗体の定義に含まれ、本明細書に記載の方法における使用と適合する。二特異的抗体も、用語抗体により包含される。二特異的抗体は、少なくとも2つの異なる抗原に対する結合特異性を有するモノクローナルの、好ましくはヒトまたはヒト化抗体である。本開示はまた、Wuら2007年NatBiotechnol25巻11号:1290~1297頁に記載の四価二重可変ドメイン免疫グロブリンDVD-Ig分子などの変異形態の二特異的抗体も包含する。DVD-Ig分子は、2つの異なる親抗体に由来する2つの異なる軽鎖可変ドメインVLが、組換えDNA技術によって直接に、または短いリンカーを介して、直列に連結され、次いで、軽鎖定常ドメインに連結されるように設計される。2つの親抗体からDVD-Ig分子を作製する方法は、例えば、PCT公開第WO08/024188号および同第WO07/024715号それぞれの開示はその全体が参照により本明細書に組入れられるものとするにさらに記載されている。本明細書で用いられるドナー抗体は、実務者が本明細書に記載の方法を用いて、iドナー抗体と同じ抗原に結合し、iiドナー抗体と比較して1つまたは複数例えば、1、2、3、4、5、6もしくは7つ以上の改善された特性を有する特に、ドナー抗体の免疫原性と比較してヒトにおける免疫原性のレベルが低下した抗体の変異体遺伝子工学的に操作された抗体を取得することを望む抗体である。ドナー抗体は、任意の様々な種、例えば、非ヒト霊長類例えば、サル、ヒヒ、マカク、キツネザル、類人猿、オランウータン、ゴリラもしくはチンパンジー、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコ、ウサギ、モルモット、スナネズミ、ハムスター、ラットおよびマウスなどの哺乳動物中で作製するか、またはそれから誘導することができる。いくつかの例では、ドナー抗体は、ヒトに投与した場合、ヒトにおける中和HAHA応答を惹起するヒト化抗体または完全ヒト抗体であってよい。ヒト化抗体は、1つまたは複数の非ヒト生殖細胞系列フレームワーク領域を含む変化した抗体であってよい。完全ヒト抗体は、1つまたは複数の非生殖細胞系列ヒトフレームワーク領域を含むものであってよい。例えば、ヒトドナー抗体は、体細胞超変異にかけられ、かくして、もはや生殖細胞系列自体ではなくなった1つまたは複数のフレームワーク領域を含んでもよい例えば、Abbas、LichtmanおよびPober2000年CellularandMolecularImmunology、第4版、W.B.SaundersCompanyISBN:0721682332を参照されたい。いくつかの実施形態では、ドナー抗体は、ヒト化抗体でも、完全ヒト抗体でもない。遺伝子工学的に操作された抗体は、抗原に特異的に結合する任意のドナー抗体から誘導することができ、その抗原へのそのようなドナー抗体の結合は、ヒトにおける治療効果をもたらすか、またはもたらすと予期される。例えば、ドナー抗体は微生物病原体例えば、ウイルス、細菌、原生動物、または寄生虫タンパク質、例えば、破傷風毒素;ジフテリア毒素;または任意の様々なウイルス表面タンパク質例えば、サイトメガロウイルスCMV糖タンパク質B、HおよびgCIII;ヒト免疫不全ウイルス1HIV-1エンベロープ糖タンパク質;ラウス肉腫ウイルスRSVエンベロープ糖タンパク質;単純ヘルペスウイルスHSVエンベロープ糖タンパク質;エプスタインバーウイルスEBVエンベロープ糖タンパク質;水痘帯状疱疹ウイルスVZVエンベロープ糖タンパク質;ヒトパピローマウイルスHPVエンベロープ糖タンパク質;インフルエンザウイルス糖タンパク質;および肝炎ウイルスファミリー表面抗原に結合することができる。そのようなドナー抗体から産生された遺伝子工学的に操作された抗体は、ヒトにおける微生物感染を治療するのに有用であると予期される。いくつかの実施形態では、前記抗体は、限定されるものではないが、プロテアーゼ耐性タンパク質PrPScなどの感染性タンパク質に結合することができる。いくつかの実施形態では、ドナー抗体は、増殖因子、サイトカイン、またはケモカインに結合することができる。増殖因子としては、例えば、血管内皮増殖因子VEGF、インスリン様増殖因子IGF、骨形態形成タンパク質BMP、顆粒球-コロニー刺激因子G-CSF、顆粒球-マクロファージコロニー刺激因子GM-CSF、神経成長因子NGF;ニューロトロフィン、血小板由来増殖因子PDGF、エリスロポエチンEPO、トロンボポエチンTPO、ミオスタチンGDF-8、増殖分化因子-9GDF9、塩基性線維芽細胞増殖因子bFGFまたはFGF2、上皮増殖因子EGF、肝細胞増殖因子HGF、およびニューレグリン例えば、NRG1、NRG2、NRG3、またはNRG4が挙げられ得る。サイトカインとしては、例えば、インターフェロン例えば、IFNγ、腫瘍壊死因子例えば、TNFαまたはTNFβ、およびインターロイキン例えば、IL-1~IL-33例えば、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-12、IL-13またはIL-15が挙げられる。ケモカインとしては、例えば、I-309、TCA-3、MCP-I、MIP-1α、MIP-1β、RANTES、C10、MRP-2、MARC、MCP-3、MCP-2、MRP-2、CCF18、エオタキシン、MCP-5、MCP-4、NCC-I、HCC-I、ロイコタクチン-1、LEC、NCC-4、CCL21、TARC、PARCまたはエオタキシン-2が挙げられる。いくつかの実施形態では、ドナー抗体は、例えば、C1、C1q、C1r、C1s、C4、C4a、C4b、C3、C3a、C3b、C2、C2a、C2b、C5、C5a、C5b、C6、C7、C8、C9、プロパージン、補体因子B、補体因子D、MBL、MASP1、MASP2、またはMASP3などのヒト補体タンパク質に結合することができる。いくつかの実施形態では、ドナー抗体は、例えば、IgM、IgGIgG1、IgG2、IgG3およびIgG4を含む、IgA、IgD、またはIgEのFc部分などの抗体のFc部分に結合する。ドナー抗体は、細胞表面タンパク質に結合することができる。細胞表面タンパク質としては、例えば、Gタンパク質共役受容体GPCR、ケモカイン受容体、サイトカイン受容体、または受容体チロシンキナーゼRTKが挙げられる。ケモカイン受容体は、例えば、CCR1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4、またはCCX-CKR2であってよい。サイトカイン受容体としては、例えば、IL-1R、IL-2R、IL-3R、IL-4R、IL-5R、IL-6R、IL-8R、TNFβR1、TNFβR2、c-kit受容体、インターフェロンIFNαまたはIFNβ受容体、IFNガンマ受容体、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子GM-CSF受容体、顆粒球コロニー刺激因子G-CSF受容体、およびプロラクチン受容体が挙げられる。RTKとしては、例えば、EGF受容体、インスリン受容体、PDGF受容体、FGF受容体、VEGF受容体、およびHGF受容体が挙げられる。いくつかの実施形態では、ドナー抗体は、HER2/neu/ErbB2、HER3、またはHER4に結合する。いくつかの実施形態では、ドナー抗体は、限定されるものではないが、MART-1/Melan-A、gp100、アデノシンデアミナーゼ結合タンパク質ADAbp、FAP、シクロフィリンb、結腸直腸関連抗原CRCC017-1A/GA733、癌胎児抗原CEA、CAP-I、CAP-2、etv6、AMLI、前立腺特異的抗原PSA、PSA-1、PSA-2、PSA-3、前立腺特異的膜抗原PSMA、T細胞受容体/CD3-ゼータ鎖、などの癌抗原例えば、癌抗原の変異形態に結合する。いくつかの実施形態では、ドナー抗体は、;補体成分C3;補体成分C3a;補体成分C3b;補体成分C4a;補体成分C4b;補体成分C5;補体成分C5a;補体成分C5b;補体成分C6;補体成分C7;補体成分C8;補体成分C9;補体因子D;補体因子B;からなる群より選択されるヒトタンパク質に結合することができる。好適なドナー抗体はまた、臨床試験における、または臨床使用のための開発における使用のために認可される様々な治療抗体も含む。そのような抗体としては、例えば、リツキシマブRituxan登録商標、IDEC/Genentech/Roche、非ホジキンリンパ腫を治療するために認可されたキメラ抗CD20抗体;HuMax-CD20、Genmabにより現在開発中の抗CD20;AME-133AppliedMolecularEvolution;hA20Immunomedics、Inc.;HumaLYMIntracel;PRO70769国際特許出願第PCT/US2003/040426号;トラスツズマブHerceptin登録商標、Genentech、乳癌を治療するために認可されたヒト化抗Her2/neu抗体;Genentechにより現在開発中のペルツズマブrhuMab-2C4、Omnitarg登録商標;セツキシマブErbitux登録商標、Imclone;Abgenix-Immunex-Amgenにより現在開発中のABX-EGF;Genmabにより現在開発中のHuMax-EGFr;425、EMD55900、EMD62000、およびEMD72000MerckKGaA米国特許第5,558,864号;Murthyら1987年ArchBiochemBiophys252巻2号:549~60頁;Rodeckら1987年JCellBiochem35巻4号:315~20頁;およびKettleboroughら1991年ProteinEng4巻7号:773~83頁を参照されたい;ICR62InstituteofCancerResearch国際特許出願第WO95/20045号;Modjtahediら1993年JCellBiophys22巻1~3号:129~46頁;Modjtahediら1993年BrJCancer67巻2号:247~53頁;Modjtahediら1996年BrJCancer73巻2号:228~35頁;Modjtahediら2003年IntJCancer105巻2号:273~80頁;TheraCIMhR3YMBiosciences、CanadaandCentrodeImmunologiaMolecular、Cuba米国特許第5,891,996号;米国特許第6,506,883号;Mateoら1997年Immunotechnology3巻1号:71~81頁;mAb-806LudwigInstituteforCancerResearch、MemorialSloan-KetteringJungbluthら2003年ProcNatlAcadSciUSA100巻2号:639~44頁;KSB-102KSBiomedix;MR1-IIVAX、NationalCancerInstitutePCTWO0162931A2;B細胞慢性リンパ球性白血病の治療のために現在認可されているヒト化モノクローナル抗体であるアレムツズマブCampath登録商標、Millenium;OrthoBiotech/JohnsonJohnsonにより開発された抗CD3抗体であるムロモナブ-CD3OrthocloneOKT3登録商標;IDEC/ScheringAGにより開発された抗CD20抗体であるイブリツモマブチウキセタンZevalin登録商標;Celltech/Wyethにより開発された抗CD33p67タンパク質抗体であるゲムツズマブオゾガミシンMylotarg登録商標;Biogenにより開発された抗LFA-3Fc融合物であるアレファセプトAmevive登録商標;Centocor/Lillyにより開発されたアブシキシマブReoPro登録商標;Novartisにより開発されたバシリキシマブSimulect登録商標;Medimmuneにより開発されたパリビズマブSynagis登録商標;Centocorにより開発された抗TNFα抗体であるインフリキシマブRemicade登録商標;Abbottにより開発された抗TNFα抗体であるアダリムマブHumira登録商標;Celltechにより開発された抗TNFα抗体であるHumicade登録商標;Centocorにより開発された完全ヒト抗TNF抗体であるゴリムマブCNTO-148;Abgenixにより開発されている抗CD147抗体;Abgenixにより開発されている抗IL8抗体であるABX-IL8;Abgenixにより開発されている抗MUC18抗体であるABX-MA1;Antisomaにより開発中の抗MUC1であるペムツモマブRl549、90Y-muHMFGl;Antisomaにより開発されている抗MUC1抗体であるTherexR155O;Antisomaにより開発されているAngioMabAS1405;Antisomaにより開発されているHuBC-I;Antisomaにより開発されているThioplatinAS1407;BiogenIdecおよびElanにより開発されているAntegren登録商標ナタリズマブ;CambridgeAntibodyTechnologyにより開発されている抗TGF-β2抗体であるCAT-152;Abbottにより開発されている抗IL-12p40抗体であるABT874J695;CambridgeAntibodyTechnologyおよびGenzymeにより開発されている抗TGFβ1抗体であるCAT-192;CambridgeAntibodyTechnologyにより開発されている抗エオタキシン1抗体であるCAT-213;CambridgeAntibodyTechnologyおよびHumanGenomeSciencesInc.により開発されている抗Blys抗体であるLymphoStat-B登録商標;CambridgeAntibodyTechnologyおよびHumanGenomeSciences,Inc.により開発されている抗TRAIL-R1抗体であるTRAIL-RImAb;Genentechにより開発されている抗VEGF抗体であるAvastin登録商標ベバシズマブ、rhuMAb-VEGF;Genentechにより開発されている抗IgE抗体であるXolair登録商標オマリズマブ;GenentechおよびXomaにより開発されている抗CD11a抗体であるRaptiva登録商標エファリズマブ;GenentechおよびMillenniumPharmaceuticalsにより開発されているMLN-02抗体以前はLDP-02;Genmabにより開発されている抗CD4抗体であるHuMaxCD4;GenmabおよびAmgenにより開発されている抗IL-15抗体であるHuMax-EL15;GenmabおよびMedarex、HuMax-Cancerにより開発されているHuMax-Inflam;GenmabおよびAmgenにより開発されているHuMax-Lymphoma;Genmabにより開発されているHuMax-TAC;IDECPharmaceuticalsにより開発されている抗CD40L抗体であるDDEC-131;IDECPharmaceuticalsにより開発されている抗CD4抗体であるIDEC-151クレノリキシマブ;IDECPharmaceuticalsにより開発されている抗CD80抗体であるBDEC-114;IDECPharmaceuticalsにより開発されている抗CD23であるIDEC-152;Imcloneにより開発されている抗イディオタイプ抗体であるBEC2;Imcloneにより開発されている抗KDR抗体であるIMC-1Cl1;Imcloneにより開発されている抗flk-1抗体であるDCl01;Imcloneにより開発されている抗VEカドヘリン抗体;Immunomedicsにより開発されている抗癌胎児抗原CEA抗体であるCEA-Cide登録商標ラベツズマブ;Immunomedicsにより開発されている抗CD22抗体であるLymphoCide登録商標エプラツズマブ;Immunomedicsにより開発されているAFP-Cide;Immunomedicsにより開発されているMyelomaCide;Immunomedicsにより開発されているLkoCide;Immunomedicsにより開発されているProstaCide;Medarexにより開発されている抗CTLA4抗体であるMDX-010;Medarexにより開発されている抗CD30抗体であるMDX-060;Medarexにより開発されているMDX-070;Medarexにより開発されているMDX-018;MedarexおよびImmuno-DesignedMoleculesにより開発されている抗Her2抗体であるOsidem登録商標IDM-I;MedarexおよびGenmabにより開発されている抗CD4抗体であるHuMax登録商標-CD4;MedarexおよびGenmabにより開発されている抗EL15抗体であるHuMax-IL15;MedarexおよびCentocor/JohnsonJohnsonにより開発されている抗TNFα抗体であるCNTO148;Centocor/JohnsonJohnsonにより開発されている抗サイトカイン抗体であるCNTO1275;MorphoSysにより開発されている抗細胞間接着分子-1ICAM-ICD54抗体であるMOR101およびMOR102;MorphoSysにより開発されている抗線維芽細胞増殖因子受容体3FGFR-3抗体であるMOR201;ProteinDesignLabsにより開発されている抗CD3抗体であるNuvion登録商標ビシリズマブ;ProteinDesignLabsにより開発されている抗ガンマインターフェロン抗体であるHuZAF登録商標;ProteinDesignLabsにより開発されている抗α5β1インテグリン抗体;Xomaにより開発されている抗EpCAM抗体であるING-I;GenentechおよびNovartisにより開発されたヒト化抗IgE抗体であるXolair登録商標オマリズマブ;ならびにXomaにより開発されている抗β2インテグリン抗体であるMLNO1が挙げられる。ドナー抗体およびその対応する遺伝子工学的に操作された抗体の形態は同じであっても、または異なっていてもよいことが理解される。例えば、いくつかの実施形態では、ドナー抗体およびその対応する遺伝子工学的に操作された抗体は、全抗体である。いくつかの実施形態では、ドナー抗体は抗体断片例えば、抗体のFabまたはscFv断片であり、その対応する遺伝子工学的に操作された抗体もまた抗体断片例えば、抗体のFabまたはscFv断片である。しかしながら、いくつかの実施形態では、ドナー抗体が全抗体であり、その対応する遺伝子工学的に操作された抗体が抗体の断片であるか、またはその逆である。遺伝子工学的に操作された抗体を作製する方法は以下に記載される。遺伝子工学的に操作された抗体を作製する方法遺伝子工学的に操作された抗体を作製する方法には、ドナー抗体のCDRアミノ酸配列およびアクセプター抗体の少なくとも可変領域フレームワーク領域が必要である。上記のように、必要に応じて、遺伝子工学的に操作された抗体は1つまたは複数の定常領域例えば、配列番号6に記載の重鎖アミノ酸配列のFc領域などのアクセプター抗体の定常領域を含んでもよい。アクセプター抗体は、以下の順序のアミノ酸配列セグメント:LFR1-LCDR1-LFR2-LCDR2-LFR3-LCDR3-LFR4を有する軽鎖可変ドメインを含んでもよい。LFR1、LFR2、LFR3およびLFR4は、配列番号2または配列番号8に記載のアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメインから取得されたフレームワーク領域であってもよい。軽鎖フレームワーク領域の例示的なアミノ酸配列ならびにフレームワーク領域の例示的なセットは本明細書に記載される例えば、表1および表3~5を参照されたい。アクセプター抗体重鎖可変ドメインは、以下の順序のアミノ酸配列セグメント:HFR1-HCDR1-HFR2-HCDR2-HFR3-HCDR3-HFR4を有してもよい。HFR1、HFR2、HFR3およびHFR4は、配列番号5または配列番号7に記載のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ポリペプチドから取得されたフレームワーク領域であってよい。重鎖フレームワーク領域の例示的なアミノ酸配列ならびにフレームワーク領域の例示的なセットは本明細書に記載される例えば、表2~5を参照されたい。前記方法は、アクセプター抗体のCDR例えば、LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2およびHCDR3をドナー抗体に由来するCDRのセットで交換することを含む。抗体遺伝子工学の当業者であれば、ドナー抗体およびアクセプター抗体のそれぞれにおけるCDRおよびフレームワーク領域の位置およびアミノ酸配列を容易に決定することができる。上記のように、抗体のCDRおよびフレームワーク領域は、例えば、Kabatら1991年上掲、Chothiaら1989年、上掲、またはKabat-Chothiaの組合せ定義を参照することにより図示することができる。Kabatの定義、Chothiaの定義およびKabat-Chothiaの組合せ定義の下での抗体のCDRおよびフレームワーク領域の同定は、図1および図2ならびにThomasら1996年、上掲にも例示される。ドナー抗体に由来するCDR配列をアクセプター抗体のフレームワーク領域に移植する方法は当業界で周知であり、例えば、Jonesら1986年Nature321巻:522~525頁;Verhoeyenら1988年Science239巻4847号:1534~1536頁;Riechmannら1988年Nature332巻:323~327頁;Queenら1989年ProcNatlAcadSciUSA86巻:10029~10033頁;PCT公開第WO93/011237号;Kettleboroughら1991年ProteinEngineering,DesignandSelection4巻:773~783頁;BennyK.C.Lo2004年AntibodyEngineering:MethodsandProtocols、HumanaPressISBN:1588290921;Borrebaek1992年AntibodyEngineering,APracticalGuide、W.H.FreemanandCo.,NY;およびBorrebaek1995年AntibodyEngineering、第2版、OxfordUniversityPress、NY、Oxfordに記載されている。例えば、ドナー抗体に由来するCDRを、例えば、Daughertyら1991年NucleicAcidsRes19巻9号:2471~2476頁;Roguskaら1996年ProteinEngineering9巻10号:895~904頁;およびYazakiら2004年ProteinEngineering,DesignSelection17巻5号:481~489頁に記載の重複伸長ポリメラーゼ連鎖反応PCR技術を用いて、アクセプター抗体のフレームワーク領域上に移植することができる。ドナーCDRのセットをアクセプター抗体に移植するための好適な方法は、Thomasら1996年、上掲にも記載されている。いくつかの実施形態では、選択されたCDRアミノ酸配列が短い配列例えば、10~15アミノ酸長未満である場合、CDRをコードする核酸を、例えば、Shiraishiら2007年NucleicAcidsSymposiumSeries51巻1号:129~130頁および米国特許第6,995,259号に記載のように化学的に合成することができる。アクセプター抗体をコードする所与の核酸配列について、CDRをコードする核酸配列の領域を、標準的な分子生物学の技術を用いて、化学的に合成された核酸と交換することができる。化学的に合成された核酸の5’および3’末端を、ドナー抗体の可変領域をコードする核酸中に前記核酸をクローニングするのに使用するための付着末端制限酵素部位を含むように合成することができる。遺伝子工学的に操作された抗体を発現させ、精製する方法は当業界で公知であり、本明細書に記載される。CDRを移植し、遺伝子工学的に操作された抗体を発現させた後下記参照、遺伝子工学的に操作された抗体を、ドナー抗体と同じ抗原に結合するその能力についてアッセイすることができる。抗体がタンパク質に結合するか否かを決定するための好適な方法は当業界で公知である。例えば、抗体のタンパク質抗原への結合を、限定されるものではないが、ウェスタンブロット、ドットブロット、表面プラズモン共鳴SPR法例えば、BIAcoreシステム;PharmaciaBiosensorAB、Uppsala、SwedenおよびPiscataway、N.J.、Octet、または酵素結合免疫吸着アッセイELISAなどの様々な技術を用いて検出および/または定量することができる。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体とその同種抗原との結合親和性を決定することができる。タンパク質抗原に対する遺伝子工学的に操作された抗体の親和性を決定するための方法は当業界で公知である。例えば、タンパク質抗原への抗体の結合を、限定されるものではないが、ウェスタンブロット、ドットブロット、SPR、OctetまたはELISA技術などの様々な技術を用いて定量することができる。例えば、HarlowおよびLane1988年、上掲;BennyK.C.Lo2004年、上掲;Borrebaek1992年、上掲;Johneら1993年JImmunolMeth160巻:191~198頁;Jonssonら1993年AnnBiolClin51巻:19~26頁;およびJonssonら1991年Biotechniques11巻:620~627頁を参照されたい。好ましくは、遺伝子工学的に操作された抗体はドナー抗体と同じ抗原に特異的に結合する。抗原への抗体の結合は、結合定数Kaが106M-1より高い場合、特異的であると考えられる。かくして、抗体は、少なくとも106またはそれより高い例えば、少なくとも107、108、109、1010、1011、1012、1013、1014もしくは1015以上またはそれより高いM-1のKaを有するタンパク質に特異的に結合することができる。CDR移植は、遺伝子工学的に操作された抗体が同じ抗原に対するドナー抗体の親和性と比較して、抗原に対するほぼ同じ親和性を有するように実施することができることが多い。例えば、Jonesら1986年、上掲;Verhoeyenら1988年、上掲;およびYazakiら2004年、上掲を参照されたい。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体は、抗原に対するドナー抗体の親和性と比較して抗原に対する改善された親和性を有する。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体は、同じ抗原に対するドナー抗体の親和性と比較して抗原に対するより低い親和性を有してもよい。そのような場合、失われた親和性を、例えば、Gramら1992年ProcNatlAcadSciUSA89巻8号:3576~3580頁;米国特許第7,432,063号;ならびにPCT公開第WO02/036738号およびWO04/055182号に記載されたCDR配列の親和性成熟を用いて部分的または完全に回復させることができる。また、失われた親和性を、例えば、Kettleboroughら1991年ProteinEngineering4巻7号:773~783頁;Tempestら1991年BioTechnol9巻:266~271頁;Haleら1988年Lancet2巻:1394~1399頁;およびGormanら1991年ProcNatlAcadSciUSA88巻:4181~4185頁に記載された抗体作り変え技術を用いて部分的または完全に回復させることができるまたはさらには上回せることもある。抗体作り変えのためのコンピュータによる方法は、例えば、Padlan1991年MolImmunol28巻:489~498頁に記載されている。1個の重鎖可変フレームワーク残基、位置71Kabatらにより定義されたものが、抗原結合にとって重要であると同定されている。例えば、Tramontanoら1990年JMolBiol215巻:175~182頁を参照されたい。一連の免疫グロブリン分子に由来する構造データを用いて、著者らは、CDR2のコンフォメーションが、部分的には、残基71とのその相互作用に依存することを観察した。残基71の保持は、作り変えられた抗EGF受容体抗体における許容可能な親和性を得るのに重要であることが示されたKettleboroughら1991年、上掲およびKraussら2004年BrJCancer90巻:1863~1870頁。重鎖可変領域フレームワーク残基48、66および67Kabatらにより定義されたものも、CDR移植および作り変えの間の抗体親和性の保持にとって重要であることが示されている同上。さらに、Riechmannら1988年;上掲は、CDR移植された抗CAMPATH-1抗体の親和性を修復させるための重鎖可変領域フレームワーク残基27および30Kabatらにより定義されたものの寄与を開示する。Saldanhaら1999年MolImmunol36巻11~12号:709~719頁は、ヒトカッパIV軽鎖FR1の位置9に導入された復帰突然変異が、以前はヒト化に失敗した抗体の結合親和性を修復させたことを示し、その突然変異がCOS細胞中での前記抗体の分泌レベルも増加させることを見出した。Thomasら1996年、上掲は、ヒト抗体の機能の維持に関するVHフレームワーク領域位置78の重要性を考察している。また、例えば、FooteおよびWinter1992年JMolBiol224巻:487~499頁も参照されたい。実施例およびThomasら1996年、上掲に記載のように、VH位置28および30は、抗体の安定性および機能にとっても重要であり得る。従って、遺伝子工学的に操作された抗体がヒトにおける元のドナー抗体の免疫原性と比較してヒトにおいて低い免疫原性を保持する限り、前記改変のいずれかを、本明細書に記載の遺伝子工学的に操作された抗体に対して行うことができるか、または前記改変のいずれかが前記遺伝子工学的に操作された抗体中に存在してもよいことが理解される。抗体の作り変えの間に失われた抗原結合親和性を回復させるための好適な方法は、例えば、米国特許第6,180,370号;第6,350,861号;および第5,693,762号それぞれの開示は参照によりその全体が本明細書に組入れられるものとするにも記載されている。例えば、米国特許第6,180,370号Queenらに対して発行されたは、遺伝子工学的に操作された抗体可変領域例えば、遺伝子工学的に操作された抗体フレームワーク領域の少なくとも1個例えば、1、2、3、4、5、または6個以上のアミノ酸を、ドナー抗体可変領域中に存在する対応するアミノ酸と交換することによって遺伝子工学的に操作された抗体の親和性を修復する方法いわゆる復帰突然変異を記載している。この方法は、例えば、遺伝子工学的に操作された抗体のフレームワーク領域と、ドナー抗体中の対応するフレームワーク領域とを比較すること整列させることならびにaその位置について稀である、bCDRに隣接する、および/またはc三次元空間においてCDRの約3Å以内にあると予測されるアミノ酸複数可を同定することを含む。同定されたアミノ酸は、遺伝子工学的に操作された抗体の失われた親和性を修復するための復帰突然変異の影響を特に受けやすいものであってよい。1つまたは複数例えば、1、2、3、4、5もしくは6個以上の復帰突然変異を、遺伝子工学的に操作された抗体の単一のフレームワーク領域に、または遺伝子工学的に操作された抗体の2個以上例えば、2、3、4、5、6、7、もしくは8個のフレームワーク領域に導入することができる。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体フレームワーク領域を、対応するドナー抗体フレームワーク領域と65を超えて例えば、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94または95以上同一にするのに十分な数で復帰突然変異を導入することができる。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体可変領域例えば、軽鎖可変領域もしくは重鎖可変領域を、ドナー抗体の対応する可変領域と65を超えて例えば、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94または95以上同一にするのに十分な数で1つまたは複数の復帰突然変異を導入することができる。復帰突然変異複数可を含有する遺伝子工学的に操作された抗体に必要とされることの全ては、遺伝子工学的に操作された抗体がヒトにおけるドナー抗体の免疫原性と比較してヒトにおける免疫原性が低いことである。上記で考察したように、作り変えまたは親和性成熟技術を用いて、1つまたは複数例えば、2、3、4、5、6、7、8、9、または10個以上のアミノ酸置換例えば、保存的または非保存的置換を、1つまたは複数例えば、1、2、3、4、5、6、7、または8個全部の遺伝子工学的に操作された抗体フレームワーク領域例えば、HFR1、HFR2、HFR3、HFR4、LFR1、LFR2、LFR3またはLFR4中に導入することができる。いくつかの実施形態では、フレームワーク領域は、合計で10個未満例えば、9、8、7、6、5、4、3、2または1個未満の置換を含む。いくつかの実施形態では、ただ1個のフレームワーク領域を、作り変えプロセス例えば、前記領域中に1つまたは複数のアミノ酸置換を導入するためのの間に変化させる。いくつかの実施形態では、2個以上例えば、2、3、4、5または6個全部のフレームワーク領域を、1つまたは複数のアミノ酸置換を含むように変化させる。必要とされることの全ては、得られた遺伝子工学的に操作された抗体が、ヒトに投与した場合、ヒトにおいて対応するドナー抗体よりも免疫原性が低いことである。いくつかの実施形態では、アミノ酸置換を行った後に、移植プロセスを行う。いくつかの実施形態では、移植プロセスを行った後に、アミノ酸置換を行う。上記で考察されたように、当業者であれば、可変ドメインCDRとフレームワーク領域の正確な境界が、それらをどのように定義するかに応じて変化し得ることを認識できる。例えば、Chothiaの定義またはKabat-Chothiaの組合せ定義の下では、VH位置28および30は重鎖CDR1領域内にある。かくして、いくつかの実施形態では、1つまたは複数のアミノ酸置換を、遺伝子工学的に操作された抗体のフレームワーク領域中ではなく、該抗体のVH領域および/またはVL領域のCDR中に導入することができる。そのような置換は、抗体作り変えまたは親和性成熟に影響し得る。従って、いくつかの実施形態では、抗体作り変えまたは成熟技術は、1つまたは複数例えば、2、3、4、5、6、7、8、9または10個以上のアミノ酸置換例えば、保存的または非保存的置換を、例えば、Kabatの定義、Chothiaの定義、またはKabat-Chothiaの組合せ定義により定義されるような、1つまたは複数例えば、1、2、3、4、5、または6個全部の遺伝子工学的に操作された抗体のCDR領域例えば、HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、またはLCDR3中に導入することを含んでもよい。いくつかの実施形態では、CDRは合計で10個未満例えば、9、8、7、6、5、4、3、2または1個未満の置換を含む。いくつかの実施形態では、ドナーCDRはいずれも、アクセプター足場にCDRを移植する前、または後にアミノ酸置換にかけられない。前記置換に必要とされることの全ては、a得られた遺伝子工学的に操作された抗体が、ヒトに投与した場合、ヒトにおいて対応するドナー抗体よりも免疫原性が低いこと;およびb前記置換が、該置換を行う前の標的抗原に対する遺伝子工学的に操作された抗体の親和性と比較して該抗原に対する遺伝子工学的に操作された抗体の親和性を改善することである。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された軽鎖ポリペプチドおよび遺伝子工学的に操作された重鎖ポリペプチドを、本明細書に記載の方法を用いて作製することができる。いくつかの実施形態では、実務者であれば、遺伝子工学的に操作された軽鎖ポリペプチドまたは遺伝子工学的に操作された重鎖ポリペプチドだけを作製することを選択し、例えば、誘導選択を用いて相補的ポリペプチド鎖軽鎖または重鎖ポリペプチドを同定することによって、ヒトにおける免疫原性が低下した遺伝子工学的に操作された抗体を作ることができる。例えば、遺伝子工学的に操作された軽鎖ポリペプチドを作製した実務者であれば、誘導選択技術を用いて、同種のヒト重鎖ポリペプチド配列を同定することによって、ドナー抗体と比較してヒトにおける免疫原性が低い遺伝子工学的に操作された抗体を作製することができる。誘導選択技術は、例えば、米国特許第5,565,332号Hoogenboomらに対して発行された、Guo-QiangおよびXian-Li2009年MethodsMolBiol562巻:133~142頁、Klimkaら2000年BrJCancer83巻2号:252~260頁、ならびにBeiboerら2000年JMolBiol296巻3号:833~849頁に詳細に記載されている。簡単に述べると、誘導選択は、対象の抗体軽鎖ポリペプチドまたは抗体重鎖ポリペプチドを、ヒト相補的軽鎖または重鎖可変ドメインのレパートリーと対形成させることを含む。例えば、ファージ展示技術を用いて、ハイブリッド対を調べる。対象の抗原に対する親和性を保持する特定のハイブリッド対を選択することができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のヒト化方法は、例えば、米国特許第7,087,409号;Raderら1998年ProcNatlAcadSciUSA95巻:8910~8915頁;およびSteinbergerら2000年JBiolChem275巻46号:36073~36078頁に記載の多様なヒト可変領域のライブラリーまたはヒト可変領域の一部を調べることを含んでもよい。例えば、実務者であれば、エクリズマブ軽鎖可変領域のFR3およびFR4と、ドナー抗体のCDR3とを含む遺伝子工学的に操作された軽鎖ポリペプチドカセット中間体を作製することができる出発カセットは、連続するフレームワーク領域およびCDR配列の任意の組合せ、例えば、などであってよいことが理解される。次いで、実務者であれば、前記のFR3-CDR3-FR4カセットがヒトFR1-CDR1-FR2-CDR2カセットのライブラリーに連結される遺伝子工学的に操作された軽鎖ポリペプチド中間体の多様なライブラリーを作製することができる。軽鎖ポリペプチド中間体のライブラリーを、遺伝子工学的に操作された抗体重鎖ポリペプチド、例えば、本明細書に記載の少なくとも1個のフレームワーク領域と、ドナー抗体に由来する1つまたは複数のCDRとを含有する遺伝子工学的に操作された抗体と対形成させることができる。ハイブリッド対を調べて例えば、ファージ展示技術を用いて、ドナー抗体と同じ抗原に結合する能力を保持する1つまたは複数の個々のハイブリッド対を同定し、ドナー抗体と比較してヒトにおける免疫原性が低下したことを証明することができる。本明細書に記載の方法に従って抗体をヒト化するために交換カセットを用いるためのさらなる方法は、例えば、米国特許出願公開第20060134098号および第20050255552号に記載されている。いくつかの実施形態では、PCRによる部位特異的突然変異誘発を用いて、遺伝子工学的に操作された抗体のフレームワーク領域中に無作為突然変異を導入することによって、遺伝子工学的に操作された抗体の変異体のライブラリーを作製することができる。いくつかの実施形態においては、遺伝子工学的に操作された抗体の変異体のライブラリーを、標的化突然変異が遺伝子工学的に操作された抗体の1つまたは複数のフレームワーク領域中に導入されるPCRを用いて製造することができる。遺伝子工学的に操作された抗体の変異体のライブラリーの少なくとも一部をスクリーニングして、ドナー抗体と比較して、抗原に対する改善された親和性ならびに/またはヒトにおける低下した、もしくはさらに低下した免疫原性などの1つまたは複数の所望の特性を有する遺伝子工学的に操作された抗体の変異体を同定することができる。抗体ライブラリーをスクリーニングする方法は、抗体遺伝子工学の分野で周知であり、例えば、ファージ展示、細菌展示、酵母表面展示、真核ウイルス展示、哺乳動物細胞展示、および無細胞例えば、リボソーム展示抗体スクリーニング技術が挙げられる例えば、Etzら2001年JBacteriol183巻:6924~6935頁;Cornelis2000年CurrOpinBiotechnol11巻:450~454頁;Klemmら2000年Microbiology146巻:3025~3032頁;Kiekeら1997年ProteinEng10巻:1303~1310頁;Yeungら2002年Biotechnol.Prog.18巻:212~220頁;Boderら2000年MethodsEnzymology328巻:430~444頁;Grabherrら2001年CombChemHighThroughputScreen4巻:185~192頁;Michaelら1995年GeneTher2巻:660~668頁;Pereboevら2001年JVirol75巻:7107~7113頁;Schaffitzelら1999年JImmunolMethods231巻:119~135頁;およびHanesら2000年NatBiotechnol18巻:1287~1292頁を参照されたい。ファージ展示抗体スクリーニングは、ファージ例えば、M13繊維状ファージまたはλ、T4もしくはT7ファージ表面上に展示された抗体タンパク質を発現させることを含む。例えば、Sidhu2001年BiomolEng18巻:57~63頁;Maruyamaら1994年ProcNatlAcadSciUSA91巻:8273~8277頁;RenおよびBlack1998年Gene215巻:439~444頁;Rosenbergら1996年InNovations6巻:1~6頁;ならびにCastagnoliら2001年CombChemHighThroughputScreen4巻:121~133頁を参照されたい。簡単に述べると、それぞれ、バクテリオファージ外被タンパク質例えば、M13ファージのpIIIもしくはpVIIIおよび様々な遺伝子工学的に操作された抗体の融合タンパク質をコードする複数のファージミドベクターを、標準的な分子生物学技術を用いて製造した後、細菌例えば、E.coliの集団中に導入する。細菌中でのバクテリオファージの発現には、いくつかの実施形態では、ヘルパーファージの使用が必要である。いくつかの実施形態では、ヘルパーファージは必要ない例えば、Chasteenら2006年NucleicAcidsRes34巻21号:e145頁を参照されたい。細菌から産生されたファージを回収した後、例えば、固相支持体に結合した標的抗原に接触させる。固相支持体を洗浄することにより、未結合のファージを除去する。次いで、洗浄工程の後、結合したファージを、例えば、遊離標的抗原競合剤を用いて固相支持体から溶出させる。一般に、溶出したファージは、標的抗原に結合する抗体またはその断片を含むと考えることができる。例えば、ウェルあたり1個のファージの感染多重度でマルチウェルアッセイプレートのウェル中で増殖させた細菌を感染させることにより、集団の個々のファージを単離することができる。標的抗原に対するより高い親和性を有する抗体を含むファージ粒子に関してファージ集団を濃縮するために抗原に非特異的に結合し得るファージの割合を低下させながら、溶出したファージ上記を用いて細菌宿主細胞の集団に再感染させることができる。次いで、発現されたファージを細菌から取得し、固相支持体例えば、ビーズまたはカラムの表面に結合した標的抗原に再度接触させる。固相支持体を洗浄することにより、未結合のファージを除去する。次いで、洗浄工程の後、例えば、遊離標的抗原競合剤を用いて、固相支持体から結合したファージを溶出させる。ファージ粒子がかけられる感染-結合-溶出サイクルの数は一般に、標的抗原に対するより高い親和性を有する抗体を含むファージの濃縮レベルと相関する。抗体ファージ展示のための方法は、例えば、O’BrienおよびAitken2002年AntibodyPhageDisplay:MethodsandProtocols、HumanaPressISBN0896037118;Barbasら2004年PhageDisplay:ALaboratoryManual、ColdSpringHarborLaboratoryPressISBN:0879697407;ならびにFiginiら1998年CancerRes58巻:991~996頁それぞれの開示は参照によりその全体が本明細書に組入れられるものとするにも記載されている。高効率スクリーニングキャンペーンcampaignにおける使用のための抗体ファージ展示の様々な工程を自動化する方法は、例えば、KonthurおよびWalter2002年TARGETS1巻1号:30~36頁に記載されている。ドナー抗体と同じ抗原に結合する遺伝子工学的に操作された抗体を同定するためのさらなるスクリーニング方法が利用可能である。例えば、前記方法の実務者であれば、例えば、分泌された抗体断片を膜上に捕捉した後、可溶性標的抗原と接触させる様々なフィルタースクリーニング方法のいずれかを用いることができる。例えば、Skerraら1991年AnalBiochem196巻:151~5頁を参照されたい。この場合、細菌ペリプラズム中へのFab断片の分泌を指令するプラスミドベクターを担持する細菌を、膜またはフィルター上で増殖させる。分泌された断片を、該抗体断片に結合することができる抗体で被覆された第2の捕捉膜例えば、抗免疫グロブリン抗血清に拡散させ、捕捉フィルターを特異的抗原で精査する。抗体-酵素コンジュゲートを用いて、捕捉膜上の抗原結合抗体断片を着色スポットとして検出することができる。第1の膜上でコロニーを増殖させ、所望の抗体断片を発現するクローンを回収する。前記方法の実務者であれば、ELISA技術を用いて、ドナー抗体と同じ抗原に結合する遺伝子工学的に操作された抗体をスクリーニングすることもできる。単一のクローンから発現された個々の遺伝子工学的に操作された抗体、または複数のクローンにより産生された複数の遺伝子工学的に操作された抗体のプールを、例えば、Watkinsら1997年Anal.Biochem.253巻:37~45頁に記載のようにアッセイすることができる。実務者であれば、抗体を抗原で被覆された膜上に直接拡散させるコロニーリフト結合アッセイを用いることもできる。そのような方法は、例えば、Giovannoniら2001年NucleicAcidsResearch29巻5号:e27頁に記載されている。遺伝子工学的に操作された抗体がヒトにおいて免疫原性であるか否かを決定するための方法は、当業界で周知である。例えば、遺伝子工学的に操作された抗体を、第0相臨床試験の一部としてヒト被験者に投与することができる。例えば、Kindersら2007年MolecularInterventions7巻:325~334頁を参照されたい。遺伝子工学的に操作された抗体を、経口的もしくは経皮的に投与するか、または静脈内的、皮下的、筋肉内的、腹腔内的、直腸内的、膣内的、鼻内的、胃内的、気管内的、もしくは肺内的に注入もしくは輸液することができる。前記抗体を、好適なリンパ組織例えば、脾臓、リンパ節、または粘膜関連リンパ組織MALTに直接送達することができる。必要に応じて、追加免疫を、様々な時点で例えば、1週間間隔、1回または数回例えば、2、3、4、8もしくは12回与えてもよい。次いで、遺伝子工学的に操作された抗体に特異的な抗体例えば、IgG、IgMまたはIgA応答を、そのような抗体の存在について、当業者にはよく知られたinvitroアッセイ、例えば、ELISAを用いて、全身的に例えば、血清中で、または例えば、様々な粘膜部位で例えば、唾液もしくは胃洗浄液および気管支肺胞洗浄液中試験することにより測定することができる。市販のELISAに基づくキットが利用可能であり、例えば、HAHAELISAELPCO商標免疫アッセイALPCODiagnostics、Salem、NHが挙げられる。治療抗体に結合し、その活性を阻害する中和抗体の被験体例えば、ヒト被験者による産生を検出するための好適な方法例えば、ELISAまたはSPR法は当業界で公知であり、実施例に例示される。好適な方法は、例えば、Weltら2003年ClinCancerRes9巻4号:1338~46頁;Aardenら2008年、上掲;Szolarら2006年JPharmBiomedAnal41巻4号:1347~1353頁;Lofgrenら2007年JImmunol178巻11号:7467~7472頁;Ritterら2001年CancerRes61巻:6851~6859頁;およびBuistら1995年CancerImmunology,Immunotherapy40巻1号:24~30頁にも記載されている。あるいは、またはさらに、一般にCD4T細胞応答が抗体応答に必要とされるため、遺伝子工学的に操作された抗体に対するinvitroでのCD4T細胞応答を、当業界で公知の方法を用いて測定することができる。そのような方法としては、CD4T細胞増殖またはリンホカイン例えば、インターロイキン-2、インターロイキン-4、もしくはインターフェロン-γ産生アッセイが挙げられる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、ドナー抗体例えば、ヒト化ドナー抗体が、ヒトにおいて免疫原性である可能性があるか、またはそうであると予想されるか否かを決定することを含んでもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、ヒトにおける遺伝子工学的に操作された抗体の潜在的な免疫原性をinsilicoで決定することを含んでもよい。所与の抗体または抗体可変領域の潜在的な免疫原性を予測するための好適なコンピュータに基づく方法/アルゴリズムは当業界で公知であり、例えば、限定されるものではないが、SYFPEITHI、TEPITOPE、BEPITOPE、RANKPEPHarvardUniversity、MMPred、PREDICT、MHCBench、およびABCpredが挙げられる。Rammenseeら1999年Immunogenetics50巻:213頁;SahaおよびRaghava2007年MethodsMolBiol409巻:387~394頁;El-Manzalawyら2008年JMolRecognit21巻4号:243~255頁;Sturnioloら1999年NatBiotechnol17巻:555頁;BhasinおよびRaghava2004年Bioinformatics20巻3号:421~423頁;ならびにvandeWeertおよびMoller2008年、ImmunogenicityofBiopharmaceuticals、Biotechnology:PharmaceuticalAspectsの第8巻、SpringerPressEpitopepredictiontools,databasesanddatasetsの表題のTable4.2を参照されたいを参照されたい。insilicoでの決定を、遺伝子工学的に操作された抗体の作製例えば、1もしくは複数のドナー抗体の評価の前に、および/または遺伝子工学的に操作された抗体の作製の後に例えば、遺伝子工学的に操作された抗体をヒトに投与する前に行うことができる。いくつかの実施形態では、insilicoでの決定を、遺伝子工学的に操作された抗体を作り変えした例えば、遺伝子工学的に操作された抗体に1つまたは複数の復帰突然変異を導入した後に行うことができる。いくつかの実施形態では、insilicoでの方法を用いて、どの作り変え技術を遺伝子工学的に操作された抗体に対して用いるかを決定する際に実務者を誘導することができる。例えば、実務者が2つの比較可能な作り変え技術の間で選択肢を有する場合例えば、フレームワーク領域中の2つの異なるアミノ酸位置の1つでの復帰突然変異、実務者は上記のinsilicoでの方法を開始して、2つの技術のどちらがヒトにおける免疫原性の最少の可能性を有する遺伝子工学的に操作された抗体をもたらすかを決定することができる。遺伝子工学的に操作された抗体を発現させる方法遺伝子工学的に操作された抗体をコードする核酸複数可を、例えば、プロモーター配列、リボソーム結合部位、転写開始および停止配列、翻訳開始および停止配列、転写ターミネーターシグナル、ポリアデニル化シグナル、およびエンハンサーまたはアクチベーター配列などの転写および翻訳調節配列を含む発現ベクター中に挿入することができる。調節配列は、プロモーターならびに転写開始および停止配列を含む。さらに、発現ベクターは、それを2つの異なる生物、例えば、発現のためには哺乳動物細胞または昆虫細胞において、ならびにクローニングおよび増幅のためには原核宿主において維持することができるように2つ以上の複製系を含んでもよい。哺乳動物細胞中の核酸からのクローニングされた遺伝子工学的に操作された抗体重鎖および/または軽鎖ポリペプチドの発現のためのいくつかの可能なベクター系が利用可能である。あるクラスのベクターは、宿主細胞ゲノム中への所望の遺伝子配列の組込みに依存する。安定に組込まれたDNAを有する細胞を、E.coligptMulliganおよびBerg1981年ProcNatlAcadSciUSA78巻:2072頁またはTn5neoSouthernおよびBerg1982年MolApplGenet1巻:327頁などの薬剤耐性遺伝子を同時に導入することにより選択することができる。選択マーカー遺伝子を、発現させようとするDNA遺伝子配列に連結するか、または同時トランスフェクションWiglerら1979年Cell16巻:77頁により同じ細胞中に導入することができる。第2のクラスのベクターは、染色体外プラスミドに自己複製能力を付与するDNAエレメントを用いる。これらのベクターを、ウシパピローマウイルスSarverら1982年ProcNatlAcadSciUSA79巻:7147頁、ポリオーマウイルスDeansら1984年ProcNatlAcadSciUSA81巻:1292頁、またはSV40ウイルスLuskyおよびBotchan1981年Nature293巻:79頁などの動物ウイルスから誘導することができる。発現ベクターを、核酸のその後の発現にとって好適な様式で細胞中に導入することができる。導入の方法は、以下に考察するように、標的となる細胞型によって大きく影響される。例示的方法としては、CaPO4沈降、リポソーム融合、リポフェクチンlipofectin、エレクトロポレーション、ウイルス感染、デキストラン媒介性トランスフェクション、ポリブレン媒介性トランスフェクション、および直接マイクロインジェクションが挙げられる。遺伝子工学的に操作された抗体の発現のための好適な宿主細胞としては、例えば、酵母、細菌、昆虫、および哺乳動物細胞が挙げられる。特に対象となるのは、E.coliなどの細菌、SaccharomycescerevisiaeおよびPichiapastorisなどの菌類、SF9などの昆虫細胞、哺乳動物細胞株例えば、ヒト細胞株、ならびに初代細胞株である。抗体の発現のために選択される宿主細胞の種類は、発現させようとする特定の種類の抗体ならびに発現される抗体の意図される使用に一部依存する。例えば、当業者であれば、一本鎖抗体または抗体のFab断片を発現させるために細菌宿主を選択することができるが、当業者であれば、全抗体の発現のためには哺乳動物細胞宿主を選択することができる。遺伝子工学的に操作された抗体の発現を可能にするのに十分な条件下で、および時間量で、該抗体をコードする核酸を含む発現ベクターで形質転換された宿主細胞を培養することにより、前記抗体を細胞から産生させる。タンパク質発現のためのそのような条件は、発現ベクターおよび宿主細胞の選択によって変化し、当業者であれば日常的な実験を通じて容易に確認することができる。例えば、E.coli中で発現された遺伝子工学的に操作された抗体を、封入体から再度折畳ませることができる例えば、Houら1998年Cytokine10巻:319~30頁を参照されたい。細菌発現系およびその使用方法は当業界で周知である。コドンの選択、好適な発現ベクターおよび好適な宿主細胞はいくつかの因子に応じて変化し、必要に応じて容易に最適化することができる。遺伝子工学的に操作された抗体を哺乳動物細胞または限定されるものではないが、酵母、バキュロウイルスなどの他の発現系、およびinvitro発現系中で発現させることができる例えば、Kaszubskaら2000年ProteinExpressionandPurification18巻:213~220頁を参照されたい。いくつかの実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体を、トランスジェニック動物例えば、トランスジェニック哺乳動物中で発現させ、それから精製することができる。例えば、遺伝子工学的に操作された抗体をトランスジェニック非ヒト哺乳動物例えば、げっ歯類中で産生させ、例えば、Houdebine2002年CurrOpinBiotechnol13巻6号:625~629頁;vanKuik-Romeijnら2000年TransgenicRes9巻2号:155~159頁;およびPollockら1999年JImmunolMethods231巻1~2号:147~157頁に記載のようにミルクから単離することができる。好適な抗体発現方法は、Thomasら1996年、上掲にも記載されている。発現させた後、遺伝子工学的に操作された抗体を単離することができる。本明細書に記載のポリペプチド例えば、遺伝子工学的に操作された抗体のいずれかに適用される用語単離されたまたは精製されたとは、ポリペプチドに天然に付随する成分例えば、タンパク質または他の天然の生物分子もしくは有機分子、例えば、他のタンパク質、脂質、および該タンパク質を発現する原核生物中の核酸から分離または精製されたポリペプチドを指す。典型的には、ポリペプチドは、それが試料中の総タンパク質の少なくとも60例えば、少なくとも65、70、75、80、85、90、92、95、97、または99重量である場合、精製されている。他に何の成分が試料中に存在するかに応じて、当業者には公知の様々な方法で遺伝子工学的に操作された抗体を単離または精製することができる。標準的な精製方法としては、電気泳動技術、分子技術、免疫学的技術、およびクロマトグラフィー技術、例えば、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性クロマトグラフィー、親和性クロマトグラフィーおよび逆相HPLCクロマトグラフィーが挙げられる。例えば、遺伝子工学的に操作された抗体を、標準的な抗抗体カラム例えば、プロテインAまたはプロテインGカラムを用いて精製することができる。タンパク質濃縮と共に、限外濾過および透析濾過技術もまた有用である。例えば、Scopes1994年ProteinPurification、第3版、Springer-Verlag、NewYorkCity、NewYorkを参照されたい。精製の程度は所望の使用に応じて必ず変化する。いくつかの例においては、発現された遺伝子工学的に操作された抗体の精製は必要ではない。単離された遺伝子工学的に操作された抗体の収率または純度を決定するための方法は当業界で公知であり、例えば、Bradfordアッセイ、UV分光法、Biuretタンパク質アッセイ、Lowryタンパク質アッセイ、アミドブラックタンパク質アッセイ、高速液体クロマトグラフィーHPLC、質量分析MS、およびゲル電気泳動法例えば、クマシーブルーまたは銀コロイド染色などのタンパク質染色を用いるが挙げられる。いくつかの実施形態では、発現された遺伝子工学的に操作された抗体から、エンドトキシンを除去することができる。タンパク質試料からエンドトキシンを除去するための方法は当業界で公知である。例えば、限定されるものではないが、ProteoSpin商標EndotoxinRemovalKitsNorgenBiotekCorporation、Detoxi-GelEndotoxinRemovalGelThermoScientific;PierceProteinResearchProducts、MiraCLEAN登録商標EndotoxinRemovalKitMirus、またはAcrodisc商標-Mustang登録商標E膜PallCorporationなどの様々な市販の試薬を用いて、タンパク質試料からエンドトキシンを除去することができる。試料中に存在するエンドトキシンを検出する、および/またはその量を測定する方法精製の前後の両方は当業界で公知であり、市販のキットが利用可能である。例えば、タンパク質試料中のエンドトキシンの濃度を、QCL-1000発色キットBioWhittaker、Pyrotell登録商標、Pyrotell登録商標-T、Pyrochrome登録商標、Chromo-LALなどのカブドガニ血球抽出成分LALに基づくキット、およびAssociatesofCapeCodIncorporatedから入手可能なCSEキットを用いて決定することができる。医薬組成物本明細書に記載の遺伝子工学的に操作された抗体を含む組成物を、医薬組成物として製剤化することができる。医薬組成物は一般に、薬学的に許容される担体を含む。本明細書で用いられる薬学的に許容される担体とは、生理学的に適合する任意かつ全ての溶媒、分散媒体、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などを指し、それらを含む。前記組成物は、薬学的に許容される塩、例えば、酸付加塩または塩基付加塩を含んでもよい例えば、Bergeら1977年JPharmSci66巻:1~19頁を参照されたい。前記組成物を、標準的な方法に従って製剤化することができる。医薬製剤は十分確立されている技術であり、例えば、Gennaro2000年Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy、第20版、Lippincott、WilliamsWilkinsISBN:0683306472;Anselら1999年PharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverySystems、第7版、LippincottWilliamsWilkinsPublishersISBN:0683305727;およびKibbe2000年HandbookofPharmaceuticalExcipientsAmericanPharmaceuticalAssociation、第3版ISBN:091733096Xにさらに記載されている。いくつかの実施形態では、例えば、好適な濃度および2~8°C例えば、4°Cでの保存にとって好適な緩衝化溶液として、組成物を製剤化することができる。いくつかの実施形態では、0°C以下の温度例えば、-20°Cまたは-80°Cでの保存のために組成物を製剤化することができる。いくつかの実施形態では、2~8°C例えば、4°Cで最大で2年間例えば、1カ月、2カ月、3カ月、4カ月、5カ月、6カ月、7カ月、8カ月、9カ月、10カ月、11カ月、1年、1年半、または2年の保存のために組成物を製剤化することができる。かくして、いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、2~8°C例えば、4°Cで少なくとも1年間の保存において安定である。前記医薬組成物は、様々な形態にあってよい。これらの形態としては、例えば、液体、半固体および固体剤形、例えば、液体溶液例えば、注射可能な溶液および注入可能な溶液、分散物または懸濁液、錠剤、ピル、粉末、リポソームおよび坐剤が挙げられる。好ましい形態は、投与の意図される様式および治療的適応に一部依存する。例えば、全身または局所送達を意図される抗体または断片を含む組成物は、注射可能または注入可能な溶液の形態にあってもよい。従って、前記組成物を、非経口様式例えば、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内注射による投与のために製剤化することができる。本明細書で用いられる非経口投与、非経口投与されたおよび他の文法的に等価な語句は、通常は注射による腸内投与および局所投与以外の投与様式を指し、限定されるものではないが、静脈内、鼻内、眼内、肺、筋肉内、動脈内、鞘内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、髄腔内、硬膜外、大脳内、頭蓋内、頸動脈内および胸骨内注射および輸液が挙げられる下記を参照されたい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の遺伝子工学的に操作された抗体を、ヒトへの肺内投与例えば、噴霧器または吸入器による投与にとって好適な組成物中で製剤化することができる。そのような組成物を調製するための方法は当業界で周知であり、例えば、米国特許出願公開第20080202513号;米国特許第7,112,341号および第6,019,968号;ならびにPCT出願公開第WO00/061178号および第WO06/122257号それぞれの開示は参照によりその全体が本明細書に組入れられるものとするに記載されている。乾燥粉末吸入器製剤および該製剤の投与のための好適な系は、例えば、米国特許出願公開第20070235029号、PCT公開第WO00/69887号および米国特許第5,997,848号に記載されている。前記組成物を、溶液、マイクロエマルジョン、分散物、リポソーム、または高濃度での安定な保存にとって好適なその他の規則的構造として製剤化することができる。滅菌注射用溶液を、必要な量の本明細書に記載の抗体または該抗体の断片を、好適な溶媒中に、上記で列挙された成分の1つまたはその組合せと共に組入れた後、必要に応じて、濾過滅菌することにより調製することができる。一般的には、基本分散媒体および上記で列挙されたものからの必要な他の成分を含む滅菌ビヒクル中に、本明細書に記載の抗体または断片を組入れることにより、分散物を調製する。滅菌注射用溶液の調製のための滅菌粉末の場合、調製方法は、本明細書に記載の遺伝子工学的に操作された抗体の粉末と、予め滅菌濾過されたその溶液に由来する任意のさらなる所望の成分下記を参照されたいとをもたらす減圧乾燥および凍結乾燥を含む。例えば、レシチンなどのコーティングの使用、分散物の場合、必要な粒子経の維持および界面活性剤の使用により、溶液の適切な流動性を維持することができる。注射用組成物の吸収の延長を、吸収を遅延させる試薬、例えば、モノステアリン酸塩およびゼラチンを前記組成物中に含有させることによりもたらすことができる。特定の実施形態では、遺伝子工学的に操作された抗体を、インプラントおよびマイクロカプセル化された送達系などの制御放出製剤などの、急速な放出に対して化合物を保護する担体と共に調製することができる。エチレンビニルアセテート、ポリアンヒドリド、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸などの生分解性、生体適合性ポリマーを用いることができる。そのような製剤の調製のための多くの方法が当業界で公知である。例えば、J.R.Robinson1978年SustainedandControlledReleaseDrugDeliverySystems、MarcelDekker、Inc.、NewYorkを参照されたい。遺伝子工学的に操作された抗体をコードする核酸を、細胞内で薬剤を発現および産生させるのに用いることができる核酸を送達するための遺伝子治療プロトコールの一部として用いられる遺伝子構築物中に組み入れることができる下記を参照されたい。そのような成分の発現構築物を、任意の治療上有効な担体、例えば、前記成分の遺伝子を細胞にinvivoで効率的に送達することができる任意の製剤または組成物中で投与することができる。手法としては、組換えレトロウイルス、アデノウイルス、アデノ関連ウイルス、レンチウイルス、および単純ヘルペスウイルス-1HSV-1などのウイルスベクター、または組換え細菌プラスミドもしくは真核プラスミドへの対象遺伝子の挿入が挙げられる。ウイルスベクターは細胞を直接トランスフェクトすることができる;プラスミドDNAは、例えば、陽イオン性リポソームリポフェクチン、または誘導体化された例えば、抗体コンジュゲート、ポリリシンコンジュゲート、グラミシジンS、人工ウイルスエンベロープもしくは他のそのような細胞内担体を援用して送達することができ、ならびに遺伝子構築物の直接注入またはCaPO4沈降例えば、WO04/060407を参照されたいをinvivoで実行することができる以下のExvivoでの手法も参照されたい。好適なレトロウイルスの例としては、pLJ、pZIP、pWEおよびpEMが挙げられ、これらは当業者には公知である例えば、Eglitisら1985年Science230巻:1395~1398頁;DanosおよびMulligan1988年ProcNatlAcadSciUSA85巻:6460~6464頁;Wilsonら1988年ProcNatlAcadSciUSA85巻:3014~3018頁;Armentanoら1990ProcNatlAcadSciUSA87巻:6141~6145頁;Huberら1991年ProcNatlAcadSciUSA88巻:8039~8043頁;Ferryら1991年ProcNatlAcadSciUSA88巻:8377~8381頁;Chowdhuryら1991年Science254巻:1802~1805頁;vanBeusechemら1992年ProcNatlAcadSciUSA89巻:7640~7644頁;Kayら1992年HumanGeneTherapy3巻:641~647頁;Daiら1992年ProcNatlAcadSciUSA89巻:10892~10895頁;Hwuら1993年JImmunol150巻:4104~4115頁;米国特許第4,868,116号および第4,980,286号;PCT公開第WO89/07136号、第WO89/02468号、第WO89/05345号および第WO92/07573号を参照されたい。別のウイルス遺伝子送達系は、アデノウイルス由来ベクターを用いるものである例えば、Berknerら1988年BioTechniques6巻:616頁;Rosenfeldら1991年Science252巻:431~434頁;およびRosenfeldら1992年Cell68巻:143~155頁を参照されたい。アデノウイルス株Ad5型dl324またはアデノウイルスの他の株例えば、Ad2、Ad3、Ad7などから誘導された好適なアデノウイルスベクターは当業者には公知である。対象遺伝子の送達にとって有用なさらに別のウイルスベクター系は、アデノ関連ウイルスAAVである。例えば、Flotteら1992年AmJRespirCellMolBiol7巻:349~356頁;Samulskiら1989年JVirol.63巻:3822~3828頁;およびMcLaughlinら1989年JVirol62巻:1963~1973頁を参照されたい。適応上記で記載されたように、本明細書に記載の遺伝子工学的に操作された抗体は、特に、それが誘導されたドナー抗体の免疫原性と比較して、ヒトにおいて低下した免疫原性を有することを特徴とする。従って、前記遺伝子工学的に操作された抗体を、例えば、遺伝子工学的に操作された抗体をヒトに長期投与しようとする場合、様々な診断および/または治療的適応において用いることができる。いかなる意味でも限定を意図するものではないが、遺伝子工学的に操作された抗体を作製および/または使用することができるいくつかの適応例を、以下に列挙する。抗TNFα治療抗体ヒト患者に長期投与される治療用のヒト化抗TNFα抗体は、全ての治療された患者の大部分においてヒト抗ヒト抗体HAHA応答を惹起することが医師により見出されている。さらに、これらの患者において生成された抗体は、抗TNFα抗体の治療活性を実質的に中和する。かくして、これらの患者への抗TNFα抗体の継続的投与は治療的利益をほとんど提供しないか、または全く提供しないと決定されている。前記患者は、慢性関節リウマチ、クローン病、潰瘍性大腸炎、および強直性脊椎炎などの様々な重篤な自己免疫障害を有し、彼らはその疾患を有効に管理するために抗TNFα抗体に依存している。ドナー抗TNFα抗体のCDRを、本明細書に記載の免疫原性が低下した抗体アクセプター足場に移植する。新しく遺伝子工学的に操作された抗TNFα抗体を、TNFαに結合するその能力について試験すれば、ドナー抗TNFα抗体とほぼ同じTNFαに対する親和性を有することがわかる。第0相試験では、遺伝子工学的に操作された抗体を、6カ月間、1カ月毎に1回ヒト患者のコホートに投与する。血液試料をそれぞれの患者から取得した直後に、毎月投与し、その試料を用いて、患者が遺伝子工学的に操作された抗体に対する抗体を生成するか否かを決定する。遺伝子工学的に操作された抗体で治療された実質的により低い百分率の患者が、元のヒト化抗TNFα抗体で治療された患者の百分率と比較した場合、HAHA応答を生じると予想される。従って、遺伝子工学的に操作された抗体は、元のヒト化抗TNFα抗体と比較して、より多数の患者において重篤な自己免疫障害の長期治療にとって有効であることも予期される。抗VEGF治療抗体ヒト患者に2回以上投与された治療用のヒト化抗血管内皮増殖因子VEGF抗体は、治療された患者の大部分において中和HAHA応答を惹起することが医師によって見出されている。前記患者は結腸直腸癌を有し、それぞれ、彼らはその癌を管理するために抗VEGF療法に依存している。ドナー抗VEGF抗体のCDRを、本明細書に記載の免疫原性が低下したアクセプター抗体足場に移植する。新しく遺伝子工学的に操作された抗VEGF抗体を、VEGFに結合するその能力について試験すれば、ドナー抗VEGF抗体とほぼ同じVEGFに対する親和性を有することがわかる。第0相試験では、遺伝子工学的に操作された抗体を、2カ月間、2週間毎に1回ヒト患者のコホートに投与する。血液試料をそれぞれの患者から取得した直後、それぞれ投与し、その試料を用いて、患者が遺伝子工学的に操作された抗体に対する抗体を生成するか否かを決定する。遺伝子工学的に操作された抗体で治療された実質的により少ない百分率の患者が、元のヒト化抗VEGF抗体で治療された患者の百分率と比較した場合、HAHA応答を生じると予想される。また、遺伝子工学的に操作された抗体は元のヒト化抗VEGF抗体と比較してより多数の患者において結腸直腸癌の治療にとって有効であることも予期される。抗CD20治療抗体ヒト患者に2回以上静脈内投与された治療用ヒト化抗CD20抗体は、治療された患者の大部分において中和HAHA応答を惹起することが多くの医師によって見出されている。前記患者は非ホジキンリンパ腫を有し、それぞれの場合、患者はその症状の治療を助けるために抗CD20療法に依存している。ドナー抗CD20抗体のCDRを、本明細書に記載の免疫原性が低下したアクセプター抗体足場に移植する。新しく遺伝子工学的に操作された抗CD20抗体をCD20に結合するその能力について試験すれば、CD20タンパク質に対するドナー抗CD20抗体の親和性と比較してCD20に対する低下した親和性を有することがわかる。この抗体を作り変え技術にかけて、CD20に対する改善された親和性を有する遺伝子工学的に操作された抗CD20抗体の変異体を同定する。2つの重鎖可変領域フレームワークアミノ酸残基27および30Kabatらにより定義されたもの;Riechmannら1988年、上掲を参照されたいに置換突然変異を導入する。遺伝子工学的に操作された抗CD20抗体の変異体をCD20に対するその親和性について再試験すれば、CD20タンパク質に対するドナー抗CD20抗体の親和性と少なくとも等価であるCD20に対する改善された親和性を有することがわかる。第0相試験では、遺伝子工学的に操作された抗体の変異体を、2カ月間、週に1回ヒト患者のコホートに投与する。血液試料をそれぞれの患者から取得した直後、それぞれ投与し、その試料を用いて、患者が遺伝子工学的に操作された抗体の変異体に対する抗体を生成するか否かを決定する。遺伝子工学的に操作された抗体の変異体で治療された実質的により低い百分率の患者が、元のヒト化抗CD20抗体で治療された患者の百分率と比較してHAHA応答を生じると予想される。また、遺伝子工学的に操作された抗体の変異体が、元のヒト化抗CD20抗体と比較してより多数の患者において非ホジキンリンパ腫の治療にとって有効であることも予想される。抗IgE治療抗体肺内投与によりヒト患者に2回以上送達された治療用ヒト化抗IgE抗体は、治療された患者の大部分において中和HAHA応答を惹起することが医師により見出されている。前記患者は喘息を有する中程度から高い重篤度まで。ドナー抗IgE抗体のCDRを、本明細書に記載の免疫原性が低下したアクセプター抗体足場に移植する。新しく遺伝子工学的に操作された抗IgE抗体を、IgE重鎖定常領域に結合するその能力について試験すれば、ドナー抗IgE抗体とほぼ同じIgEに対する親和性を有することがわかる。第0相試験では、遺伝子工学的に操作された抗体を、2カ月間、2週間毎に1回ヒト患者のコホートに噴霧器により投与する。血液および唾液試料をそれぞれの患者から取得した直後に、それぞれ投与する。この試料を用いて、患者が遺伝子工学的に操作された抗体に対する抗体を生成するか否かを決定する。遺伝子工学的に操作された抗体で治療された実質的により低い百分率の患者が、元のヒト化抗IgE抗体で治療された患者の百分率と比較してHAHA応答を生じると予想される。また、遺伝子工学的に操作された抗体が、元のヒト化抗IgE抗体と比較してより多数の患者において喘息の治療にとって有効であることも予想される。以下の実施例は、本発明を例示することを意図するものであり、限定を意図するものではない。実施例1低い免疫原性を有するヒト化アクセプター抗体の作製ヒト補体成分C5に特異的に結合するマウスモノクローナル抗体mαC5抗体を以下のようにヒト化して、エクリズマブとして公知の抗体を作製した。mαC5抗体のCDRを、mαC5抗体のフレームワークに対する高い程度の配列相同性を有するヒトフレームワーク領域上に移植した。mαC5抗体のCDRのためのアクセプター配列として選択されたヒト可変領域を、問い合わせ配列としてマウス可変重鎖VHおよび可変軽鎖VL配列を用いて、プログラムTFASTANCBIを用いてGenbankサブディレクトリGB-PRを走査することにより選択した。検索から同定されたヒトVH領域は、クローンH20C3HGenbankLocus番号HUMIGHRL;受託番号L02325であった。例えば、Wengら1992年JImmunol149巻7号:2518~2529頁を参照されたい。このヒトVH領域は、ヒトゲノムVH遺伝子HG3およびヒトゲノムJH5遺伝子から誘導されたものであり、これらのゲノム遺伝子からのフレームワーク領域に変化を含まない。検索から同定されたヒトVL領域は、クローンI.23Genbank受託番号X72477であった。例えば、Kleinら1993年EurJImmunol23巻:3248~3271頁を参照されたい。このヒトVL領域は、ヒトゲノムVκ遺伝子012およびゲノムJκ1遺伝子から誘導されたものであり、012ゲノム遺伝子中のコードされたグルタミンQ残基と比較して、成熟可変領域の位置38でフレームワーク領域2FR2中にアルギニンR残基を導入したものである。H20C3VHおよびI.23VL配列のアミノ酸配列は、本明細書でそれぞれ配列番号7および8として記載されている。CDR-フレームワーク移植Kabatにより定義されたCDRに基づくを、重複伸長PCR技術を用いて実施した。アミノ酸置換を、位置28および30でH20C3VH配列に導入した。具体的には、位置28のトレオニンおよび位置30のトレオニンを、それぞれ、イソロイシンおよびセリンで置換した。位置28のイソロイシンおよび位置30のセリンが、エクリズマブのCDRが得られたマウス抗C5抗体配列中に存在した。エクリズマブの軽鎖可変領域およびI.23の軽鎖可変領域のアミノ酸配列を、図1に示す。エクリズマブの重鎖可変領域およびH20C3の重鎖可変領域のアミノ酸配列を、図2に示す。エクリズマブの完全な軽鎖のアミノ酸配列を、配列番号1に示す。エクリズマブの完全な重鎖のアミノ酸配列を、配列番号4に示す。位置28および30はChothiaのCDR内にあり、Kabat-Chothiaの組合せCDRを移植した場合、位置28および30に置換を行う必要がなく、同じ最終的な結果が得られたことがわかる。実施例2ヒト抗エクリズマブ抗体を検出するためのアッセイ以下のアッセイを用いて、エクリズマブで治療された患者から得た生物学的試料中のヒト抗エクリズマブ抗体の存在を検出した。このアッセイは、2つの段階:スクリーニング段階および確認段階を含む。スクリーニング段階のアッセイは、陰性対照正常なヒト血清;対照試料および陽性対照参考標準に照らした患者の血液試料試験試料の評価を含んでいた。エクリズマブで治療された患者から得た25μLの血清の2溶液v/vを、96穴丸底プロピレンアッセイプレートのウェルに添加することにより、患者の血清または試験試料を評価した。陰性対照試料のために、この場合、25μLの2v/v正常ヒト血清NHSプールを、プレートのウェルに添加した。一連の陽性対照標準試料も調製し、この標準はエクリズマブに対して生じた様々な所定の量400、100、50、25、10、5、2および0ng/mLの抗体を含む。25μLの標準試料を、プレートのウェルのセットに添加した。それぞれの試験試料、対照試料および標準試料を、3回評価した。次に、それぞれ、iビオチンにコンジュゲートさせたエクリズマブおよびiiルテニウムTAGにコンジュゲートさせたエクリズマブを2μg/mL含む25μLの溶液を、プレートの各ウェルに添加した。添加後、プレートを密封し、光から保護し、室温で18時間、振とうしながらインキュベートした。インキュベーション後、ストレプトアビジンでコーティングされたDynaBeadsInvitrogen;Carlsbad、Californiaの0.5mg/mL溶液の25μLアリコートを、プレートの各ウェルに添加した。プレートを再度密封し、光から保護し、室温で3時間、振とうしながらインキュベートした。インキュベーション後、リン酸緩衝生理食塩水中に1ウシ血清アルブミンBSAおよび0.5Tween-20を含む150mLのバッファーを、各ウェルに添加した。プレートの各ウェルから生成された光の量光放射を、BioVerisM-384DetectionSystemRocheを用いて測定した。試料が陽性であったか、および確認段階におけるさらなる試験に進めるべきかを決定するために、以下のスクリーニングアッセイを行った。試験試料を含むウェルから生成された平均光放射を、対応する対照試料を含むウェルから生成された平均光放射で除算した。得られた数が1.2以下であった場合、試験試料は陰性であると考えた。得られた数が1.2より大きかった場合、試験試料はスクリーニングアッセイ陽性であると考え、確認アッセイ段階に進めた。確認アッセイは、薬剤投与後の試験試料エクリズマブで治療された患者から得られた血液と、エクリズマブの投与前に患者から得られた対応する血液試料以後、薬剤投与前試料とするとの直接比較を含んでいた。薬剤投与後の試験試料中に存在するエクリズマブの量を決定した。次いで、その決定された濃度のエクリズマブを薬剤投与前試料に添加して、薬剤投与前ec試料を作製した。薬剤投与前試料へのエクリズマブの添加は、未標識の薬剤干渉に起因する血清マトリックス効果の程度を正常化した。さらに、確認アッセイはまた、アッセイシグナル阻害剤としての過剰量のエクリズマブの存在下での薬剤投与後試験試料および薬剤投与前ec試料本明細書では試験INHIBITORおよび薬剤投与前ecINHIBITOR試料と呼ぶの評価も含んでいた。過剰のエクリズマブの添加は、アッセイシグナルが薬剤特異的であるか否かを評価するためのものである。25μLの試験試料2v/vを、96穴アッセイプレートの6個のウェルに添加した。同様に、25μLの薬剤投与前ec試料2v/vを、アッセイプレートの別の6個のウェルに添加した。試験INHIBITOR条件を作製するために、25μLの50μg/mLのエクリズマブ溶液を、試験試料を含む6個のウェルのうちの3個に添加した。同様に、薬剤投与前ecINHIBITOR条件を作製するために、25μLの50μg/mLのエクリズマブ溶液を、薬剤投与前ec試料を含む6個のウェルのうちの3個に添加した。次いで、上記のように、それぞれ、iビオチンにコンジュゲートさせたエクリズマブおよびiiエクリズマブ-TAGを2μg/mL含有する25μLの溶液を、プレートの各ウェルに添加した。添加後、プレートを密封し、光から保護し、室温で18時間、振とうしながらインキュベートした。インキュベーション後、ストレプトアビジンでコーティングされたDynaBeadsの0.5mg/mL溶液の25μLアリコートを、プレートの各ウェルに添加した。プレートを再度密封し、光から保護し、室温で3時間、振とうしながらインキュベートした。インキュベーション後、リン酸緩衝生理食塩水中に1ウシ血清アルブミンBSAおよび0.5Tween-20を含有する150μLのバッファーを、各ウェルに添加した。プレートの各ウェルからの光放射を、BioVerisM-384DetectionSystemRocheを用いて測定した。試験試料が陽性であるすなわち、試料がヒト抗エクリズマブ抗体を含有するか否かを決定するために、それぞれのウェル群からの平均光放射を以下のように評価した。まず、薬剤投与前ecINHIBITOR試料を含有するウェルから生成された平均光放射により除算した、薬剤投与前ec試料を含有するウェルから生成された平均光放射として、比Aを決定した。比Aは、阻害剤の存在下で減少したバックグラウンド血清の非特異的シグナル変化を示す。次に、試験INHIBITOR試料を含有するウェルから生成された平均光放射により除算した、試験試料を含有するウェルから生成された平均光放射として、比Bを算出した。比Bは、阻害剤の存在下で減少した試験試料における任意の光放出の変化を反映する。比Aにより除算した比Bとして、第3の比である比Cを決定した。かくして、比Cは、存在する場合、試験試料が得られた患者におけるヒト抗エクリズマブ抗体応答の生成の結果得られた光放出の増加を反映する。比Cが1.3未満であった場合、試験試料は確認アッセイにおいて陰性であると考えた。比Cが1.3より大きかった場合、試験試料はヒト抗エクリズマブ抗体の存在の可能性について陽性であると考えた。実施例3中和ヒト抗エクリズマブ抗体を検出するためのアッセイ次いで、スクリーニングアッセイおよび確認アッセイの両方において陽性であると考えられた試験試料HAHA陽性試験試料を、試験試料中に存在するヒト抗エクリズマブ抗体がエクリズマブを中和することができるか否かを決定するために分析した。アッセイのための試料を調製するために、薬剤投与前試料およびHAHA陽性試験試料中の補体成分C5の量も決定した。その結果を用いて、薬剤投与前またはHAHA陽性試験試料に添加されるC5の量を、そのC5濃度が同一となるように決定した。HAHA陽性試験試料中のエクリズマブの量を決定した。決定された量のエクリズマブを、対応する正規化された薬剤投与前試料に添加して、薬剤投与前ec試料を作製した。アッセイプレートを調製するために、150μLのブロッキングバッファー[リン酸緩衝生理食塩水中の3BSA]を、ストレプトアビジンでコーティングされた96穴アッセイプレートの各ウェルに添加した。プレートを密封し、室温で1時間、振とうしながらインキュベートした。インキュベーション後、各ウェルの内容物を除去し、150μLの洗浄バッファー[リン酸緩衝生理食塩水中の0.05Tween-20]で3回、ウェルを洗浄した。最後の洗浄の後、バッファーを除去し、ビオチンにコンジュゲートされたエクリズマブを含有する1μg/mL溶液の25μLを各ウェルに添加した。プレートを密封し、暗室中、37°Cで3時間、振とうしながらインキュベートした。インキュベーション後、ウェルの内容物を除去し、洗浄バッファーで3回、ウェルを洗浄した。ウェルを洗浄した後、25μLの試験試料2v/vを、プレートの3個のウェルに添加した。同様に、25μLの薬剤投与前ec試料2v/vを、アッセイプレートの3個のウェルに添加した。さらに、一連の陽性対照標準溶液も調製し、エクリズマブに結合し、これを中和することが公知の様々な所定の量50、25、10、5、2および0ng/mLの抗体を含有する、25μLの標準物をプレートのウェルのセットに添加した。プレートを再度密封し、暗室中、37°Cで1時間、振とうしながらインキュベートした。インキュベーション後、ウェルの内容物を除去し、洗浄せずに、ルテニウムにコンジュゲートさせたC5の250ng/mL溶液の25μLを各ウェルに添加した。次いで、プレートを被覆し、室温で1時間、振とうしながらインキュベートした。インキュベーション後、プレートを150μLの洗浄バッファーで3回洗浄した。次に、150μLの2XReadBufferT界面活性剤;MSD登録商標、カタログ番号R92TC-1を含有するを各ウェルに添加した。アッセイプレートの各ウェルから生成された光放射を、MSD登録商標WorkbenchSoftwareを用いるMSD登録商標SectorImager2400を用いて決定した。データを分析するために、以下の計算を行った。薬剤投与前ec試料を含有するウェルからの平均光放射を、HAHA陽性試験試料を含有するウェルから生成された平均光放射で除算した。得られた数値が1.3未満である場合、試験試料中のHAHA応答が非中和的であることを示すと考えた。1.3より大きかった数値は、HAHA陽性試験試料が中和抗エクリズマブ抗体を含有し得ることを示していた。HAHA陽性試験試料に関するデータをさらに分析して、患者の試料中の存在する抗エクリズマブ抗体により、中和の程度、またはエクリズマブ結合活性の抑制率を決定した。抑制率は、100-[抗エクリズマブ抗体が存在しない試料を用いてNabアッセイにおいて得られたシグナル/1つまたは複数の抗エクリズマブ抗体を含有する確認アッセイ陽性試料を用いてNabアッセイにおいて得られたシグナル]×100と計算された。この分析において有意なシグナル抑制率を表すものに等しいか、またはそれより上であるカットオフ値は23である。実施例4ヒト患者におけるエクリズマブの低レベルの免疫原性臨床試験において、エクリズマブをヒト患者に4週間にわたって毎週600mg、1週間後に900mg、次いで、その後2週間毎に900mgの用量を維持して静脈内投与した。各患者は、2年半にわたって少なくとも68治療用量のエクリズマブを受けた。多くの患者は、少なくとも5年にわたって130用量にわたって治療濃度のエクリズマブを受けた。161人の患者から得た合計793の血清試料を試験して、ヒト抗ヒト抗体HAHA応答が患者において生じたか否かを決定した。49の血清試料が上記スクリーニングアッセイにおいて陽性であると決定された。49の試料のうち、20はエクリズマブを投与する前に得られた患者試料薬剤投与前試料であり、29の試料はエクリズマブを投与した後の患者から得られたものであった薬剤投与後試料。薬剤投与後試料に対してのみ、確認アッセイを行った。試験した29の薬剤投与後試料のうちの7は、上記の確認アッセイを用いて陽性であったが確認アッセイ陽性試料、これは抗エクリズマブ抗体が7の試料中に存在し得ることを示唆していた。確認アッセイ陽性試料を、確認アッセイ陽性試料に対応する薬剤投与前試料と共に上記の中和抗体アッセイNabアッセイにかけた。上記のように、薬剤投与前試料に、薬剤投与後対応試料中で測定された濃度までエクリズマブおよび補体成分C5を補給した。Nabアッセイにおいて、3つの確認アッセイ陽性試料のみが、カットオフ値よりわずかに高い抑制率の値を有すると決定された3つの試料のうちの1つは第1の患者から得られたものであり、他の2つの試料は第2の患者から得られたものであった。3つの試料に関する抑制率の値は、それぞれ、25.7、27.5および36.2であると決定された。注目すべきことに、前記抗体の薬物動態PKおよび薬力学PD特性は、試料中に存在する低レベルの抗エクリズマブ抗体によって影響されなかった。これらのデータは、エクリズマブ抗体が、治療用量でヒト患者に長期投与した場合、一般的には免疫原性が低く、抗エクリズマブ抗体応答が免疫原性試験において検出可能であった少数の患者161人の患者のうち2人において、その応答は前記抗体の治療効果を中和しなかったことを示している。実施例5新規ヒト化治療抗体を作製するための本明細書に記載の足場の使用マウス抗ヒトC5a抗体の可変領域を、ヒト化にかけた。マウス軽鎖および重鎖可変領域のアミノ酸配列を、以下の表6に示す。日常的な分子生物学的方法を用いて、ヒト生殖細胞系列フレームワーク足場上にマウス抗体CDRを移植した。重鎖のCDR2中のセリン残基をアスパラギンと交換して、それによって潜在的なグリコシル化部位を除去することにより、さらなるヒト化を行った。ヒト化抗ヒトC5a抗体のアミノ酸配列を、表7に示す。表7に示されるように、ヒト化抗C5a抗体は、エクリズマブ抗体の軽鎖フレームワーク領域1配列番号9、2配列番号10および3配列番号11ならびにエクリズマブ抗体の重鎖フレームワーク領域1配列番号17、2配列番号14および3配列番号15全てKabat-Chothiaの定義の下で定義されるを含む。上記の表1および2を参照されたい。軽鎖フレームワーク4LFR4は、1個のアミノ酸上記の表7において太字で示されるによりエクリズマブのLFR4と異なる。同様に、重鎖フレームワーク4HFR4は、1個のアミノ酸これも上記の表7において太字で示されるによりエクリズマブのHFR4と異なる。ヒト化抗体をBIAcore分析にかけて、ヒトC5aに対するその親和性を定量し、部分的に、ヒト化がその抗原に対する抗体の結合親和性に影響したか否かを決定した。例えば、KarlssonおよびLarsson2004年MethodsMolBiol248巻:389~415頁を参照されたい。簡単に述べると、捕捉技術を用いてヒト化抗体を3~4つの濃度のヒトC5a抗原を用いてスクリーニングした。センサーチップ表面上を通過させた0.6nM~5.9nMの範囲の様々な濃度のヒトC5aを用いてCM5センサーチップ上に直接固定された抗Fcヒト抗体により、抗体を捕捉した。各サイクルの後に20mMHCl、0.02P20を用いて表面を再生して、結合した抗体および抗原を除去した。1:1LangmuirModelFitRmax:GlobalFit;RI:LocalFitを用いるBiacoreBIAevaluationソフトウェアを用いて、データを評価した。ka結合速度定数、kd解離速度定数、およびKD平衡解離定数などの動力学情報を、適合から得た。分析の結果は以下の通りである:ka≒1.93×106M-1s-1;kd≒5.76×10-4s-1;およびKD≒2.98×10-10M。同様の条件下で、ヒトC5aに結合したマウス抗C5a抗体対応物は以下のパラメータを有する:ka≒2.76×106M-1s-1;kd≒1.41×10-4s-1;およびKD≒5.12×10-10M。これらのデータは、マウス抗体のヒト化がヒトC5aに対する抗体の結合親和性を改善することを示唆していた5.12×10-10M~2.98×10-10MのKD。ドナー抗体と比較して、ヒトにおける低下した免疫原性についてヒト化抗体を試験するための方法は当業界で公知であり、本明細書に記載される。少なくとも、これらの結果は、本明細書に記載のエクリズマブフレームワーク領域を用いて、その同種抗原に対する抗体の親和性に有害に影響することなく他の非ヒト抗体をヒト化することができることを示唆している。本開示をその特定の実施形態を参照して説明してきたが、当業者であれば、本開示の真の精神および範囲を逸脱することなく、様々な変更を行い、均等物と置換することができることを理解すべきである。さらに、特定の状況、材料、物質の組成、プロセス、プロセスステップまたは複数のステップに適合させるために、本開示の対象、精神および範囲に対して多くの改変を行うことができる。そのような改変は全て、本開示の範囲内にあると意図される。"