"配列番号1のゲノム配列を含むことを特徴とするブタサーコウイルス2型PCV2ウイルス。中国典型培養物保蔵センターCCTCCに寄託番号CCTCCV201117として寄託されていることを特徴とする請求項1に記載のブタサーコウイルス2型PCV2ウイルス。PK-15細胞系またはその派生細胞系に細胞変性効果CPEを引き起こすことができることを特徴とする請求項1に記載のブタサーコウイルス2型PCV2ウイルス。請求項1に記載のブタサーコウイルス2型PCV2ウイルスを含むことを特徴とする免疫原性組成物。薬学的に許容される媒体を更に含むことを特徴とする請求項4に記載の免疫原性組成物。前記薬学的に許容される媒体はアジュバントであることを特徴とする請求項5に記載の免疫原性組成物。前記PCV2ウイルスは不活化プロセスで処理されていることを特徴とする請求項4に記載の免疫原性組成物。前記PCV2ウイルスは弱毒化されているか、または請求項1に記載のPCV2に由来および産生されるサブユニット構築体、DNA構築体、もしくは他の形態であることを特徴とする請求項4に記載の免疫原性組成物。ブタインフルエンザウイルスSIVの抗原、ブタ生殖器呼吸器症候群ウイルスPRRSVの抗原、マイコプラズマの抗原、ブタパルボウイルスPPVの抗原、丹毒の抗原、および仮性狂犬病ウイルスの抗原からなる群から選択される少なくとも1つの病原体抗原を更に含むことを特徴とする請求項4に記載の免疫原性組成物。ブタサーコウイルス2型感染からブタを防御する方法であって、請求項4に記載の免疫原性組成物を前記ブタに接種して当該ブタのPCV2に対する免疫力を増加させるステップを含むことを特徴とするブタサーコウイルス2型感染からブタを防御する方法。請求項1に記載のPCV2ウイルスに由来する抗ブタサーコウイルス2型PCV2抗体。前記抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、および遺伝子操作抗体の少なくとも1つを含むことを特徴とする請求項11に記載の抗ブタサーコウイルス2型PCV2抗体。請求項1に記載のPCV2ウイルスのポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、前記ポリペプチドは、配列番号3、配列番号5、および配列番号7の配列の少なくとも1つを有することを特徴とするポリヌクレオチド。前記ヌクレオチドは、配列番号2、配列番号4、および配列番号6の配列の少なくとも1つを含むことを特徴とする請求項13に記載のポリヌクレオチド。ブタサーコウイルス2型PCV2試験キットであって、請求項1に記載のウイルスのウイルス抗原、請求項1に記載のウイルスに由来する抗体、請求項13に記載のポリヌクレオチド、および配列番号1の配列を検出する核酸断片からなる群から選択される1以上の検出ユニットを含むことを特徴とする試験キット。前記ウイルス抗原はプレートに堆積されていることを特徴とする請求項15に記載のブタサーコウイルス2型PCV2試験キット。前記ウイルス抗原は不活化プロセスで処理されていることを特徴とする請求項16に記載のブタサーコウイルス2型PCV2試験キット。前記抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、および遺伝子操作抗体の少なくとも1つを含むことを特徴とする請求項15に記載のブタサーコウイルス2型PCV2試験キット。前記ポリヌクレオチドは、配列番号2、配列番号4、および配列番号6の少なくとも1つを含むことを特徴とする請求項15に記載のブタサーコウイルス2型PCV2試験キット。前記核酸断片は、配列番号8、配列番号9、配列番号10、および配列番号11の少なくとも1つを含むことを特徴とする請求項15に記載のブタサーコウイルス2型PCV2試験キット。PCV2感染は、世界中のほとんどの養豚場に蔓延している。PCV2は、感染したブタの生存率および飼料効率FCRの低下を引き起こし、養豚に大きな経済的損失をもたらすことが判明している。したがって、PCV2試験キットおよびPCV2に対するワクチンを開発することは重要である。本発明の第1の態様は、離乳後多臓器消耗症候群PMWSの臨床症状を示すブタから単離され、更に分析されて、新規PCV2株PCV2H株であると確認されたPCV2株に関する。新規PCV2株PCV2H株のゲノムのプラス鎖は、配列番号1のDNA塩基配列を有する。新規PCV2株は、2011年11月5日に、寄託番号CCTCCV201117として中国典型培養物保蔵センターCCTCC、ChinaCenterforTypeCultureCollectionに寄託された。本発明の第2の態様は、新規PCV2株PCV2H株を含有する免疫原性組成物に関する。1つの好ましい実施形態では、免疫原性組成物は、新規PCV2株PCV2H株の非活化ウイルスまたは弱毒化ウイルスおよび薬学的に許容される媒体を含むワクチンである。しかしながら、ワクチンのタイプには、これらに限定されないが、以下のものが含まれる:不活化ワクチン、生弱毒化ワクチンウイルスの弱毒化による、サブユニットワクチン、DNAワクチン、および新規PCV2株PCV2H株または新規PCV2株PCV2H株のDNAもしくはアミノ酸配列に由来または生成される他のワクチン。本発明の不活化プロセスには、これらに限定されないが、不活化試薬による処理、熱処理、および当業者に公知の他の処理が含まれる。不活化試薬には、これらに限定されないが、ホルムアルデヒド、パラホルムアルデヒド、ベータ-プロピオラクトンBPL、バイナリーエチレンイミンBEI、binaryethyleneimine、または本発明に好適な他の不活化試薬が含まれる。薬学的に許容される媒体には、これらに限定されないが、溶媒、乳化剤、懸濁化剤、分解剤、結合剤、賦形剤、安定化剤、キレート剤、希釈液、ゲル化剤、保存剤、潤滑剤、界面活性剤、アジュバント、または他の好適な媒体が含まれる。アジュバントには、これらに限定されないが、以下のものが含まれる:油性アジュバント鉱油、植物油、動物油、フロインド完全アジュバント、フロインド不完全アジュバント等、水性アジュバント水酸化アルミニウム等、2相性乳化アジュバント水中油中水w/o/w型乳剤アジュバント等、生物学的アジュバントCpGオリゴデオキシヌクレオチドおよびトキソイド等等。2相性乳化アジュバントは、界面活性剤および油性物質を含む。界面活性剤は、以下のものからなる群から選択される1つまたは複数である:ソルビトール脂肪酸エステル;ソルビトール脂肪酸エステルおよびエチレンオキシドまたはプロピレンオキシドの濃縮物;マンニトール脂肪酸エステル:マンニトール脂肪酸エステルおよびエチレンオキシドまたはプロピレンオキシドの濃縮物;カルボン酸、アミン、アミド、アルコール、ポリオール、エーテル、およびオキシドからなる群から選択される1つまたは複数である親水基を有する修飾マンニトール脂肪酸エステル;アンヒドロマンニトール脂肪酸エステル;カルボン酸、アミン、アミド、アルコール、ポリオール、エーテル、およびオキシドからなる群から選択される1つまたは複数である親水基を有する修飾アンヒドロマンニトール脂肪酸エステル;サッカロース脂肪酸エステル;サッカロース脂肪酸エステルおよびエチレンオキシドまたはプロピレンオキシドの濃縮物;グリセロール脂肪酸エステル;グリセロール脂肪酸エステルおよびエチレンオキシドまたはプロピレンオキシドの濃縮物;脂肪酸およびエチレンオキシドまたはプロピレンオキシドの濃縮物;脂肪アルコールおよびエチレンオキシドまたはプロピレンオキシドの濃縮物;およびグリセロリン脂質。油性物質は、鉱油、植物油、および動物油からなる群から選択される1つまたは複数である。本発明の免疫原性組成物は、少なくとも1つの病原体抗原を更に含む。病原体抗原には、これらに限定されないが、以下のものが含まれる:ブタインフルエンザウイルスSIVの抗原、ブタ生殖器呼吸器症候群ウイルスPRRSVの抗原、マイコプラズマの抗原、ブタパルボウイルスPPVの抗原、丹毒の抗原、および仮性狂犬病オーエスキー病ウイルスの抗原。病原体抗原のタイプには、これらに限定されないが、組換えタンパク質、サブユニットタンパク質、遺伝子欠陥を有する病原体、不活化病原体抗原等が含まれる。本発明の第3の態様は、ブタをPCV2感染から防御する方法であって、免疫学的有効用量の前記PCV2免疫原性組成物をブタに投与して、PCV2感染に対するその免疫を増強し、ウイルス血症および臨床症状の重症度を低下させ、生存率および体重を増加させることを含む方法に関する。本発明の第4の態様は、新規PCV2株PCV2H株に由来する抗PCV2抗体に関する。抗体には、これらに限定されないが、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、および遺伝子操作抗体が含まれる。1つの好ましい実施形態では、抗体は、新規PCV2株PCV2H株を動物に注射することにより得られるポリクローナル抗体である。別の好ましい実施形態では、抗体は、モノクローナルハイブリドーマライブラリーのスクリーニングにより得られるモノクローナル抗体である。本発明の第5の態様は、新規PCV2株PCV2H株のDNA断片に関する。DNA断片は、配列番号1、2、4、および6のヌクレオチド配列を有する。DNA断片の応用には、これらに限定されないが、DNAワクチンおよびサブユニットワクチンの製造、および試料中のPCV2ウイルスを検出するためのプライマーまたはプローブの設計が含まれる。1つの好ましい実施形態では、DNA断片は、新規PCV2株PCV2H株の全長ゲノム配列配列番号1である。別の好ましい実施形態では、DNA断片は、新規PCV2株PCV2H株のオープンリーディングフレームORFであり、これらに限定されないが、以下のものが含まれる:配列番号3のアミノ酸配列をコードする配列番号2のヌクレオチド配列を有するオープンリーディングフレーム1ORF1、配列番号5のアミノ酸配列をコードする配列番号4のヌクレオチド配列を有するオープンリーディングフレーム2ORF2、および配列番号7のアミノ酸配列をコードする配列番号6のヌクレオチド配列を有するオープンリーディングフレーム3ORF3。本発明の第6の態様は、PCV2の試験キットに関する。試験キットは、検査試料中のPCV2ウイルスまたは抗PCV2抗体を検出するために使用される。試験キットには、これらに限定されないが、以下のものが含まれる:11つの好ましい実施形態では、新規PCV2株PCV2H株の抗原であり、上記抗原は、抗原プレートに配置されており、不活化試薬で不活化されている;2新規PCV2株PCV2H株に由来するモノクローナル抗体またはポリクローナル抗体;3新規PCV2株PCV2H株の全長ゲノム配列配列番号1またはヌクレオチド断片配列番号2、4、および6に由来する遺伝子操作抗原または抗体;および4新規PCV2株PCV2H株の全長ゲノム配列配列番号1またはヌクレオチド断片配列番号2、4、および6に由来するポリヌクレオチド。ポリヌクレオチドには、これらに限定されないが、プライマーおよびプローブが含まれる。1つの好ましい実施形態では、ポリヌクレオチドは、新規PCV2株PCV2H株を検出するために使用でき、配列番号8~11のヌクレオチド配列を有するプライマーである。試験キットのタイプには、これらに限定されないが、以下のものが含まれる:酵素結合免疫吸着測定キットELISA、マイクロチップキット、免疫蛍光アッセイIFAキット、ポリメラーゼ連鎖反応PCRキット、および新規PCV2株PCV2H株に由来する他の試験キット。1つの好ましい実施形態では、試験キットは、新規PCV2株PCV2H株を含む少なくとも1枚の抗原プレートを含み、試験キットを使用して、検査試料中の抗PCV2抗体を検出できる。本発明の新規PCV2株PCV2H株は、サブカルチャーされた継代培養、および新規PCV2株PCV2H株と同様のウイルス特徴、ゲノム、または病原性を有する変異体を全て含む。本発明での用語DNA核酸およびポリヌクレオチドは、天然、単離、組換え、または合成状態で存在し得る。本発明での用語アミノ酸、ペプチド、ポリペプチド、およびタンパク質は、天然、単離、組換え、または合成状態で存在し得る。用語予防する、防御する、およびに対するは、開示された免疫原性組成物によるワクチン接種を受けない動物と比較して、開示された免疫原性組成物によるワクチン接種を受けた動物が、PCV2感染およびPCV2感染に起因する関連疾患に対する能力の増強を示すことができるという観察に関する。本明細書に記載の技術用語および科学用語の意味は、当業者であれば明白に理解できる。本発明は、以下の例示的な例において、より詳細に説明される。これらの例は、本発明の単なる選択された実施形態を表し得るものの、以下の例は例示であり限定ではないことが理解されるべきである。本発明は、以下の詳細な説明および添付の図面を用いるとより容易に理解可能になるが、それらは例示目的で示されているに過ぎず、したがって本発明を限定するものではない。本発明は、以下の例により説明されることになるが、本発明は、それらに限定されることはない。実施例1:PCV2ウイルスの単離および特定1.種ウイルスの供給源および単離:組織試料は、Hsin-Chu台湾の養豚場の子ブタの肺およびリンパ節から採取した。これら子ブタは8週齢であり、離乳後多臓器消耗症候群PWMSの臨床症状を示していた。肺およびリンパ節試料を採取し、-70°Cで凍結した。ウイルスを単離するために、組織試料をホモジナイズし、0.2mlの各ホモジネートを、ブタサーコウイルスPCV、ブタコレラウイルスCSFV、ブタアデノウイルス、ブタパルボウイルス、ブタ生殖器呼吸器症候群ウイルスPRRSV、仮性狂犬病ウイルスPRV、ブタ水疱病ウイルスSVDV、マイコプラズマ、および細菌に感染していないPK-15単層細胞またはその派生細胞系に播種した。細胞を、37°C、5CO2で1時間インキュベートした後、無菌リン酸緩衝生理食塩水PBSで3回洗浄した。その後、細胞を、37°C、5CO2にて4時間、2FBSを含有するMEM培地でインキュベートした。その後、MEM培地を廃棄し、細胞を、300mMD-グルコサミンと共に30分間インキュベートした。その後、細胞を無菌PBSで3回洗浄し、37°C、5CO2にて72時間、8FBSを含有するMEM培地でインキュベートした。最後に、細胞培養を、免疫蛍光アッセイIFAでPCV2について試験した。IFAのプロトコールは、以下のように記述される。最初に、試料細胞を、無菌PBSで3回、毎回5分間洗浄し、75μlの80アセトンで4°Cにて30分間固定した。その後、アセトンを廃棄し、細胞を、無菌PBSで3回、毎回5分間洗浄した。その後、細胞を、75μlのブタサーコウイルス抗ウイルスポリクローナル抗血清VMRD登録商標一次抗体、PBSで1:1500希釈と共に37°Cで30分間インキュベートした。その後、抗血清を廃棄し、細胞を、無菌PBSで3回、毎回5分間洗浄した。その後、細胞を、75μlのウサギ抗ブタIgG-FITC分子全体Sigama社、F1638二次抗体、PBSで1:1000希釈と共に、37°Cで30分間インキュベートした。その後、抗体を廃棄し、細胞を、無菌PBSで3回、毎回5分間洗浄した。最後に、96ウエル培養皿中の細胞試料の各々を、蛍光顕微鏡検査用に200μlのPBS中にマウントした。細胞に感染し、IFAの結果が最も陽性だったウイルスを、種ウイルスとして選択した。その後、配列番号1に示されているように、種ウイルスのゲノム配列を決定した。配列をアラインし、分析し、最終的にPCV2の新株であることを確認した配列アラインメントの分析および結果は、下記に記載されている。この新規PCV2株を、PCV2H株と命名する。2.種ウイルスのサブカルチャー新しく調製したPK-15細胞またはその派生細胞系に、新規PCV2株PCV2H株を播種した。播種細胞から回収したウイルスは、PCV2H株の継代1P1だった。PCV2H株のP1を含有する細胞培養上清を収集し、希釈1:2し、新しく調製したPK-15細胞またはその派生細胞系に播種した。播種細胞を3日間インキュベートした後、PCV2H株の継代2P2を含有する細胞培養上清を収集し、希釈1:2し、新しく調製したPK-15細胞またはその派生細胞系に播種した。播種細胞を3日間インキュベートし、次に、PCV2H株の継代3P3を含有する細胞培養上清を収集した。このプロセスを、更に3回繰り返して、PCV2H株の継代6P6を得た。図1Bに示されるように、PCV2H株を播種したPK-15細胞またはその派生細胞系の培養過程中、播種細胞に細胞変性効果CPEが観察された。加えて、図1Aには、培養4日後の非播種PK-15細胞の形態および増殖100×が示されており、図1Bには、PCV2H株を播種したPK-15細胞の培養4日後の形態および増殖100×が示されている。同様に、PCV2H株を播種したPK-15由来細胞系で観察されたCPEは、図1Bを参照すれば参考にできる。3.種ウイルスの特定:本発明で単離されたPCV2H株のゲノムは、配列番号1のヌクレオチド配列を有する。配列番号1のヌクレオチド配列を、国立バイオテクノロジー情報センターNCBIのGenBankデータベースの配列と比較した。比較の結果は、PCV2H株が、幾つかのPCV2配列表1と99相同性であったことを示したが、データベースには、PCV2H株のゲノム配列配列番号1と同一100相同性である配列は存在しない。したがって、アラインメントの結果に基づくと、本発明で単離されたウイルス、PCV2H株は、PCV2ファミリーに属し、新しい株であることが示されている。図2に示されているPCV2H株のゲノム配列の系統発生解析に基づくと、PCV2H株は、PCV22dサブグループのメンバーであることが示されている。解析により、本発明のPCV2H株が、オープンリーディングフレームORF1、2、および3を有することが示されている。ORF1は、配列番号3のアミノ酸配列をコードする配列番号2のヌクレオチド配列を有する。ORF2は、配列番号5のアミノ酸配列をコードする配列番号4のヌクレオチド配列を有する。ORF3は、配列番号7のアミノ酸配列をコードする配列番号6のヌクレオチド配列を有する。PCV2ORF2遺伝子によりコードされるカプシドタンパク質は、中和抗体の産生を誘導する抗原である可能性が最も高いと考えられるため、PCV2H株のORF2のヌクレオチド配列配列番号4およびアミノ酸配列配列番号5を、NCBIGenBankデータベースの配列と比較した。比較の結果は、PCV2H株のORF2のヌクレオチド配列配列番号4またはアミノ酸配列配列番号5と同一100相同性の配列が、NCBIGenBankデータベースには存在しないことを示している。PCV2H株のORF2のアミノ酸配列配列番号5とGenbankデータベース配列との最も高い相同性は、98であった。図3には、PCV2H株のORF2のアミノ酸配列配列番号5と最も高い相同性を示す上位3つの配列とのアラインメントが示されており、このアラインメントによると、配列番号5の6つのアミノ酸が、上位3つの配列と異なっていることが示されている。PCV2H株のORF2のアミノ酸配列配列番号5を、PCV22dサブグループプロトタイプGenBank登録番号:ZJ0955bのORF2のアミノ酸配列GenBank登録番号:ADD25772と更に比較した。図4に示されている結果は、この2配列間では7つのアミノ酸が異なっており、この2配列は、97相同性を共有していることを示す。加えて、PCV2H株のORF1およびORF3のヌクレオチド配列配列番号2および6およびアミノ酸配列配列番号3および7を、NCBIGenBankデータベースの配列と比較した。比較の結果は、PCV2H株のORF1またはORF3のヌクレオチド配列もしくはアミノ酸配列と同一100相同性の配列が、NCBIGenBankデータベースには存在しないことを示している。この解析により、本発明のPCV2H株は、ブタサーコウイルス2型PCV2の新規株であることが示されている。新規PCV2株は、2011年11月5日に、寄託番号CCTCCV201117として中国典型培養物保蔵センターCCTCCに寄託された。実施例2:PCV2H株ワクチンの調製1.ウイルス培養ブタサーコウイルスPCV、ブタコレラウイルスCSFV、ブタアデノウイルス、ブタパルボウイルス、ブタ生殖器呼吸器症候群ウイルスPRRSV、仮性狂犬病ウイルスPRV、ブタ水疱病ウイルスSVDV、マイコプラズマ、および細菌に感染していないPK-15細胞を、37°C、5CO2にて細胞培養増殖培地5FBSを含有するMEM培地pH7.2±0.2で培養した。PK-15細胞の単層が形成された後、PK-15細胞を、0.2トリプシン-EDTAを用いて剥離し、細胞計数用の細胞培養維持培地2FBSを含有するMEM培地pH7.4±0.2に懸濁した。その後、細胞を、細胞培養増殖培地で3.0×105細胞/mlの終濃度に希釈し、ローラーボトルに配分し、37°Cにて3~4日間培養してコンフルエント単層に到達させた。その後、ローラーボトル内部の細胞培養培地を廃棄し、細胞をPBSで洗浄した。PCV2H株のウイルス原液を、細胞培養維持培地で1040TCID50/mlの終濃度に希釈し、ローラーボトルのPK-15細胞単層に播種した。ウイルスを増殖させるため、感染細胞を、37°Cで48~96時間インキュベートした。PCV2H株のウィルス力価を、免疫蛍光アッセイIFAによりモニターした。その後、PCV2H株のウイルス溶液を収集するため、ウイルス力価が1060TCID50/ml以上に達したか、または細胞変性効果CPEが70~80に達した時点で、細胞培養の上清を回収した。2.不活化プロセス37パーセント37重量のホルムアルデヒドを、前述のステップで収集したPCV2H株のウイルス溶液に添加して、終濃度を0.2w/vにし、その後ウイルスを、37°Cにて少なくとも24時間、好ましくは48時間、ホルムアルデヒドと共に連続振とうすることにより不活化した。ウイルスを完全に不活化した後、ホルムアルデヒドを含有するPCV2H株のウイルス溶液を遠心分離して、ホルムアルデヒドを除去した。その後、遠心分離したウイルス溶液を、蒸留水またはリン酸緩衝生理食塩水PBS等の緩衝溶液に懸濁し、懸濁ウイルス溶液を、PCV2H株不活化ワクチンの不活化抗原原液とし、後の使用のために4°Cで保管した。3.PCV2H株不活化ワクチンの調製水中油中水型W/O/W乳剤用のMONTANIDE登録商標ISA206油性ワクチンアジュバント等の無菌2相性乳化アジュバントを、混合および乳化するために、乳剤タンク内のPCV2H株不活化ワクチンの不活化抗原原液に添加して、終濃度50v/vにした。乳化産物は、油性アジュバントを有するPCV2H株不活化ワクチンである。本発明のPCV2不活化ワクチンに好適な、当業者に知られている他のアジュバントも、本発明においてアジュバントとして使用できる。この例で使用される2相性乳化アジュバント水中油中水型乳剤アジュバント等は、これらに限定されないが、以下のものに置き換えることができる:油性アジュバント鉱油、植物油、動物油、フロインド完全アジュバント、フロインド不完全アジュバント等、水性アジュバント水酸化アルミニウム等、生物学的アジュバントCpGオリゴデオキシヌクレオチドおよびトキソイド等。実施例3:PCV2試験キットの調製-1この例におけるPCV2試験キットは、PCV2H株のウイルス抗原を含有する抗原プレートである。最初に、PK-15細胞またはその単クローン細胞系を培養し、トリプシン処理し、2×105細胞/mlの終濃度で細胞培養培地に再懸濁した。50マイクロリットルμlのPK-15細胞および50μlのPCV2H株のウイルス原液1×103TCID50/mlを、96ウエル細胞培養プレート平底の各ウエルに添加し、37°C、5CO2にて72時間インキュベートした。PCV2H株に感染した細胞を、無菌PBSで2回洗浄し、室温にて15分間80アセトンで固定した。その後、アセトンを廃棄し、細胞を、無菌PBSで3回洗浄した。その後、プレートを逆さまにし、次いで37°Cのインキュベータで乾燥させた。乾燥させたプレートは、PCV2H株のウイルス抗原を含有する抗原プレートであり、ELISA試験に使用して、血清試料中のPCV2に対する抗体量を検出できる。その後、プレートを、後の使用のために-20°Cで保管したTischeretal.,1995。実施例4:PCV2試験キットの調製-2この例におけるPCV2試験キットは、PCV2H株の組換えカプシドタンパク質を含有する抗原プレートである。組換えカプシドタンパク質は、抗原プレートの抗原である。カプシドタンパク質は、PCV2H株のORF2遺伝子によりコードされており、配列番号5のアミノ酸配列を有する。最初に、PCV2H株のORF2ヌクレオチド配列を、ポリメラーゼ連鎖反応PCRにより増幅した。PCV2H株のウィルスDNAを、PCR反応のテンプレートDNAとして使用した。順方向プライマーおよび逆方向プライマーは、ORF2ヌクレオチド配列を増幅するように設計した。この例における順方向プライマーは、HindIII切断部位を有しており、この例における逆方向プライマーは、XhoI切断部位を有する。当業者であれば、本発明のORF2ヌクレオチド配列配列番号4に従って、プライマーを設計できる。PCR反応には、8μlのテンプレートDNA、5μlの10×PCR緩衝液MDBio社、8μlのdNTP各1.25mM、1μlの各プライマー各50μM、および0.5μlのPfuDNAポリメラーゼMDBio社を含有ししており、最終容積が50μlであるPCR混合液を、GeneAmpPCRシステム2400反応装置AppliedBiosystems社に設置した。PCR反応は、PCR混合液を95°Cで5分間予熱する初期ステップから開始し、DNA増幅は、以下のパラメーターのサイクルを25回繰り返すことにより実施した:95°Cで30秒間の変性、55°Cで30秒間のアニーリング、および72°Cで30秒間の伸長。PCR反応は、72°Cで5分間の最終伸張ステップで終了した。PCR産物を、PCR-MクリーンアップキットViogene社で精製した。精製した後、PCR産物を、pET24a発現ベクターに構築した。精製したPCR産物およびpET24a発現ベクターNovagen社を、2つの制限酵素NewEnglandBiolabs社、HindIIIおよびXhoIで、37°Cにて8時間それぞれ消化した。制限酵素切断反応の後、消化したPCR産物およびpET24a発現ベクターを、PCR-MクリーンアップキットViogene社を用いてそれぞれ精製した。精製したPCR産物を、精製したpET24a発現ベクターにライゲーションし、ライゲーション産物を宿主細胞大腸菌、E.coliに導入した。形質転換体を選択し、DNA塩基配列決定法により正確な配列を有するクローンを特定し、pET24a-ORF2と命名した。pET24a-ORF2を有する細菌を、2mlのLB培地中で16~18時間37°Cにて培養し、その後培養物を、25μg/mlカナマイシンを含有する新しいLB培地に1:50の比率で添加し、37°C、200rpmにて培養した。波長600nmにおける培養物の光学密度OD600が0.6に達したら、イソプロピル-β-D-チオガラクトシドIPTGを、1mMの終濃度になるように培養に添加し、培養物を、37°C、200rpmにて更に6時間インキュベートした。1ミリリットルの培養物を遠心分離し10,000×g、次いで、B-PERTM細菌タンパク質エクストラクションPierceProteinResearchProduces社を用いて、組換えタンパク質が、可溶性タンパク質かまたは封入体かを決定した。40マイクロリットルμlの試薬を、遠心分離した細菌に添加し、1分間ボルテックスミキサーで振とうした。その後、混合物を10,000×gで遠心分離した。上清に懸濁されていたタンパク質は、可溶性タンパク質であり、下部ペレットのタンパク質は封入体だった。可溶性タンパク質を、SDS-PAGE分析用の1×試料緩衝液に溶解し、封入体を、SDS-PAGE分析用の2×試料緩衝液と混合した。試料は両方とも、20分間沸騰させ、その後遠心分離した。両試料の上清中のタンパク質を、15SDS-PAGEで分離し、PCV2H株の組換えカプシドタンパク質の発現を分析した。分析後、PCV2H株の組換えカプシドタンパク質を使用して、抗原プレートを製作した。PCV2H株の組換えカプシドタンパク質を、PBSpH9.6で希釈して、終濃度を10μg/mlにした。希釈した組換えタンパク質を、37°Cで2時間、その後4°Cで一晩、96ウエル細胞培養プレート平底にコーティングした100μL/ウエル。その後、プレートの各ウエルをPBSで3回3~5分間洗浄し、200μlの0.15BSAブロッキング溶液を添加し、組換えタンパク質を37°Cで2時間ブロッキングした。プレートの各ウエルをPBSで洗浄した後、後の使用のためプレートを4°Cで保管した。実施例5:抗PCV2H株抗体の調製1.抗PCV2H株ポリクローナル抗体十分なウィルス力価を有する不活化PCV2H株を、フロインド完全アジュバント等の好適なアジュバントと混合した。混合物を、マウス、ブタ、ヤギ、およびウサギ等の動物に一次接種した。必要に応じて、適切な期間をおいて2~3週間等二次免疫を実施してもよい。更に適切な期間をおいて2~3週間等、接種した動物の血清を、抗PCV2H株ポリクローナル抗体として採取した。抗PCV2H株ポリクローナル抗体は、必要に応じて、発色リポーターまたは蛍光体と結合させることができる。必要に応じて、一次または二次免疫後、接種した動物に更にワクチン接種を行って抗体価を増加させることができる。抗PCV2H株ポリクローナル抗体を産生するために接種できる動物には、これらに限定されないが、マウス、ウサギ、トリ卵、ブタ、ヤギ、ウシ、および水生動物が含まれる。2.抗PCV2H株モノクローナル抗体十分なウイルス力価を有する不活化PCV2H株またはPCV2H株の特異的抗原断片ORF2等を、動物マウス等に一次接種した。必要に応じて、非活化ウイルスまたは抗原断片を、フロインド完全アジュバント等の好適なアジュバントと混合できる。また、必要に応じて、適切な期間をおいて2~3週間等二次免疫を実施してもよい。更に適切な期間をおいて2~3週間等、接種した動物の血清を採取して、動物の脾臓細胞が、抗PCV2H株モノクローナル抗体の産生に好適か否かを評価した。接種した動物から採取した好適な脾臓細胞およびミエローマ細胞FO細胞系およびNS細胞系等の細胞融合は、ポリエチレングリコールPEG1500等のPEGを使用して達成した。適切な特異性を有する抗体を産生するハイブリドーマを融合細胞から選択し、次いで、抗PCV2H株モノクローナル抗体を産生するのに好適なハイブリドーマにサブクローニングした。抗PCV2H株モノクローナル抗体は、試験キット、治療、または動物の免疫を増強する食品もしくは飼料サプリメントに使用できる。実施例6:不活化PCV2ワクチンの効力試験-11.ワクチン接種プロトコールおよび試料採取5~6週齢の特定病原体除去SPFBalb/cマウスを、無作為に各群15匹マウスの4群に分割した。ELISA試験は、60匹のマウス全てが、抗PCV2抗体に陰性だったことを示した。3ワクチン接種群第1群~第3群のマウスに、3つのロット違いの0.2ml不活化PCV2H株ワクチンをそれぞれ筋肉内注射した。一次免疫p.i.の2週間後に、3ワクチン接種群のマウスを、同じ用量の3つのロット違いのワクチンで追加免疫した。第4群のマウスにはワクチン接種をせず、陰性対照とした。一次免疫p.i.の2、3、4、および5週間後に、各群から5匹のマウスを無作為に選択し、血清試料を採取した。血清試料は全てELISAにより試験した。2.ELISAによる抗PCV2抗体の検出実施例3または4で調製した抗原プレートは、この例ではELISAプレートとして使用できる。ELISAプレートを、500μl/LのTween-20を含有する50mmol/LのPBSpH7.2つまり、PBSTで、3回、毎回3~5分間洗浄した。ELISAプレートをブロッキングするために、200μLの0.15BSAブロッキング溶液を、ELISAプレートの各ウエルに添加し、その後、ELISAプレートを37°Cで2時間インキュベートした。その後、ELISAプレートをPBSで洗浄した。マウス血清試料を、PBSで50倍1:50希釈し、その後、2倍連続希釈を行った。希釈した血清試料を、ELISAプレートのウエルに添加し100μl/ウエル、プレートを37°Cで1時間インキュベートした。インキュベーション後、プレートをPBSで洗浄した。その後、西洋ワサビペルオキシダーゼHRP結合二次抗体ウサギ抗マウス二次抗体等を、ウエルに添加した。37°Cで1時間インキュベートした後、プレートをPBSで洗浄した。結果を視覚化するため、3,3’,5,5’-テトラメチルベンジジンTMBをウエルに添加した。インキュベーションした後、2mMH2SO4を添加することにより反応を停止させた。結果は、陽性対陰性P/N比として報告した。P/N比は、所与の試験試料の450nmにおける光学密度OD450を、標準陰性対照のOD450で除算することにより算出した。P/N比≧2.1を、陽性とみなした。P/N比≧2.1の最大希釈を、血清試料のELISA抗体価とみなした。HRPおよびTMBに加えて、アルカリホスファターゼAP、4-メチルウンベリフェリルホスフェート4-MUP、およびフルオレセインイソチオシアネートFITC等の同じ機能を有する他の発色リポーターまたは蛍光体も、この例で使用できる。3.結果一次免疫p.i.の2週間後に、抗PCV2H株抗体が全てのワクチン接種マウスで検出された。二次免疫後、ワクチン接種マウスのELISA抗体価は、一次免疫後日数d.p.i.35日で1800~2000に達した図5。したがって、これらの結果は、本発明の不活化PCV2H株ワクチンが、マウスの免疫応答を効果的に誘導できたことを示した。実施例7:不活化PCV2ワクチンの効力試験-21.ワクチン接種プロトコールおよび試料採取5~6週齢の2匹の健常子ブタに、1mlの不活化PCV2H株ワクチンをそれぞれ筋肉内注入した。一次免疫p.i.の3週間後に、同じ用量のワクチンで子ブタを追加免疫した。血清試料を、一次免疫前5~6週齢、二次免疫前8~9週齢、および二次免疫の2週間後10~11週齢に両子ブタから採取した。血清採取と同じ時点で、両子ブタを計量した。血清試料は全てELISAにより試験した。2.ELISAによる抗PCV2抗体の検出実施例3または4で調製した抗原プレートは、この例ではELISAプレートとして使用できる。ELISAプレートを、500μl/LのTween-20を含有する50mmol/LのPBSpH7.2つまり、PBSTで、3回、毎回3~5分間洗浄した。ELISAプレートをブロッキングするために、200μLの0.15BSAブロッキング溶液を、ELISAプレートの各ウエルに添加し、その後、ELISAプレートを37°Cで2時間インキュベートした。その後、ELISAプレートをPBSで洗浄した。ブタ血清試料を、PBSで50倍1:50希釈し、その後、2倍連続希釈を行った。希釈した血清試料を、ELISAプレートのウエルに添加し100μl/ウェル、プレートを37°Cで1時間インキュベートした。インキュベーション後、プレートをPBSで洗浄した。その後、西洋ワサビペルオキシダーゼHRP結合二次抗体ヤギ抗ブタ二次抗体等を、ウエルに添加した。37°Cで1時間インキュベートした後、プレートをPBSで洗浄した。結果を視覚化するために、3,3’,5,5’-テトラメチルベンジジンTMBをウエルに添加した。インキュベーション後、2mMH2SO4を添加することにより反応を停止させた。結果は、陽性対陰性P/N比として報告した。P/N比は、所与の試験試料の450nmにおける光学密度OD450を、標準陰性対照のOD450で除算することにより算出した。P/N比≧2.1を、陽性とみなした。P/N比≧2.1の最大希釈を、血清試料のELISA抗体価とみなした。3.結果一次免疫p.i.の3週間後に、抗PCV2H株抗体が両ワクチン接種子ブタで検出された。二次免疫の2週後、ワクチン接種した子ブタのELISA抗体価は、11,000を超えていた表2。したがって、これらの結果は、本発明の不活化PCV2H株ワクチンが、ブタの免疫応答を効果的に誘導できたことを示した。実施例8:不活化PCV2ワクチンの効力試験-31.ワクチン接種プロトコールおよび試料採取2週齢の40匹の健常子ブタを、各群10匹子ブタの4群に無作為に分割した。3週齢時に、3ワクチン接種群第1群~第3群の子ブタに、3つのロット違いの1ml不活化PCV2H株ワクチンをそれぞれ筋肉内注射した。一次免疫p.i.の3週間後に、同じ用量のワクチンで子ブタを追加免疫した。第4群の子ブタにはワクチン接種をせず、陰性対照とした。血清試料を、一次免疫の1週間前2週齢、ならびに一次免疫の1、2、3、および5週間後それぞれ、4週齢、5週齢、6週齢、および8週齢に、全ての子ブタから採取した。子ブタは全て、3、4、5、6、および8週齢時に計量した。血清試料は全てELISAにより試験した。2.IFAによる抗PCV2抗体の検出実施例3で調製した抗原プレートを、この例で使用した。抗原プレートを、-20°Cから取り出し、37°Cで解凍および乾燥した。ブタ血清試料を、PBSで50倍1:50希釈し、その後2倍連続希釈を行った。希釈した血清試料を、抗原プレートのウエルに添加し50μl/ウエル、プレートを37°Cで30分間インキュベートした。インキュベーション後、プレートをPBSで3回洗浄し、未結合抗体を除去した。その後、50マイクロリットル50μlのFITC結合ウサギ抗ブタIgG1:100、Sigma社を、ウエルに添加した。暗所で30分間インキュベートした後、プレートをPBSで3回洗浄し、蛍光顕微鏡で検査して、抗PCV2H株抗体の力価を算出した。Rodriguez-Arriojaら、2000年3.結果3.1抗体価一次免疫p.i.の2週間後、ワクチン接種子ブタ5週齢に由来する血清試料は、約600のIFA力価を示したが、対照群に由来する血清試料は、約200のIFA力価を示した表4および図6。二次免疫後、ワクチン接種子ブタ6週齢のIFA力価は劇的に増加したIFA力価は、13,000を超えている。8週齢では、ワクチン接種子ブタは、46,000を超えるIFA力価を示したが、非ワクチン接種子ブタは、約170の非常に低いIFA力価を示した。3.2体重増加ワクチン接種子ブタは、対照群の非ワクチン接種子ブタよりも高い体重増加を示した表5および図7。8週齢では、ワクチン接種子ブタは、非ワクチン接種子ブタよりも体重が約2kg重かった。したがって、これらの結果は、本発明の不活化PCV2H株ワクチンが、ブタの免疫応答を効果的に誘導し、ブタの免疫を増強し、その後ブタの体重を増加させることができたことを示した。実施例9:不活化PCV2ワクチンの効力試験-41.ワクチン接種プロトコールおよびPCV2感染14~16日齢の子ブタを、各群5匹子ブタの4群に無作為に分割した。20匹の子ブタは全て、抗PCV2抗体に陰性だった。3ワクチン接種群第1群~第3群の子ブタに、3つのロット違いの1ml不活化PCV2H株ワクチンをそれぞれ筋肉内注射した。一次免疫p.i.の2週間後、同じ用量のワクチンで子ブタを追加免疫した。第4群の子ブタにはワクチン接種をせず、陰性対照とした。一次免疫の5週間後に、全ての子ブタを、1ml当たり1060の50組織培養感染用量1060TCID50/mlのPCV2H株毒性株ウイルス原液で負荷した。各子ブタを、1mlのウイルス原液で鼻腔内に、および2mlのウイルス原液で筋肉内に負荷した。血清および鼻腔スワブ試料を、負荷の7、11、19、および25日後に採取して、PCRによりPCV2ウイルス血症を検出した。2.PCRによるPCV2ウイルス血症の検出PCRを使用して、PCV2負荷後に採取したブタ血清試料中のウィルスDNAレベルを決定した。ウィルスDNAを、DNAzol登録商標試薬で抽出した。最初に、400μlのDNAzol登録商標試薬を、200μlの血清に添加し、混合物を12,000rpmで15分間遠心分離した。上清を2倍容積の無水エタノールと混合して、DNAを沈殿させた。混合物を、12,000rpmで15分間遠心分離した後、上清を廃棄した。DNAペレットを75エタノールで洗浄し、12,000rpmで15分間遠心分離してエタノールを除去し、最終的に8mMNaOHに溶解した。PCV2ウイルス血症を検出するために使用されるPCRプライマーは、以下の配列を有する。PCV2-F1:5’GTGAAGTGGTATTTTGGTGCC3’配列番号8PCV2-R1:5’GTCTTCCAATCACGCTTCTGC3’配列番号9PCV2-F1順方向およびPCV2-R1逆方向プライマーを使用して、PCV2のORF1に由来する284bp断片を増幅した。最終容積を25μlとしたPCR混合物は、1μlの順方向プライマー、1μlの逆方向プライマー、1.5μlの25mMMg2、2.0μlの2.5mMdNTP、2.5μlの10×無Mg2緩衝液、0.2μlのTaqDNAポリメラーゼ、11.8μlの蒸留水、および5μlのテンプレートDNAを含有していた。PCR反応は、PCR混合液を95°Cで5分間予熱する初期ステップから開始し、DNA増幅は、以下のパラメーターのサイクルを38回繰り返すことにより実施した:94°Cで30秒間の変性、55°Cで30秒間のアニーリング、および72°Cで30秒間の伸長。PCR反応は、72°Cで5分間の最終伸長ステップで終了し、その後4°Cで維持した。次に、PCR産物を、1アガロースゲルで分析し、臭化エチジウム染色により視覚化した。加えて、PCV2ウイルス血症を検出するために使用した別の対のPCRプライマーは、以下の配列を有する。PCV2-F2:5’TGTTGGCGAGGAGGGTAATG’3配列番号10PCV2-R2:5’TGGGACAGCAGTTGAGGAGT’3配列番号11PCV2-F2順方向およびPCV2-R2逆方向プライマーを使用して、PCV2に由来する676bp断片を増幅した。3.解剖学的構造および病理学的分析負荷の25日後、子ブタを犠牲にして解剖し、器官の病理学的異常を観察し、リンパ節および肺を採取した。組織試料を、4ホルムアルデヒドで固定し、パラフィンに包埋し、その後薄片にした。組織切片をヘマトキシリンおよびエオジンHEで染色し、顕微鏡で観察した。4.結果4.1ウイルス血症の評価PCRの結果は、負荷の25日後に、ワクチン接種子ブタ第1群~第3群におけるウイルス血症の発症率が、非ワクチン接種子ブタ第4群における発症率より、40~60低かったことを示した表6。これらの結果は、本発明の不活化PCV2H株ワクチンが、ブタの免疫を誘導し、ブタのウイルス血症の重症度および持続期間を低減し、PCV2感染からブタを防御できたことを示した。4.2病理組織検査負荷の25日後に子ブタを犠牲にして解剖した。鼠径部、縦隔、および腸間膜リンパ節の肥大が、2匹の非ワクチン接種子ブタに見られ、リンパ節の切片は蒼白だった。別の非ワクチン接種子ブタは、虚脱していない弾力性のある肺、肺水腫、および白斑腎white-spottedkidneyを有していた。ワクチン接種子ブタは全て、肉眼でわかる病理学的異常を示さなかった表7及び表8。表8には、組織切片の顕微鏡病理組織検査の結果、およびPCRによるPCV2ウイルス血症の評価結果が示されている。リンパ球枯渇およびマクロファージ浸潤等のリンパ節の組織病理学的病変が、ほとんど全ての非ワクチン接種子ブタ第4群で観察され、非ワクチン接種子ブタから試料採取したリンパ節は全て、PCV2ウイルス血症に陽性だった。加えて、炎症性細胞浸潤等の肺の組織病理学的病変が、3匹の非ワクチン接種子ブタに観察され、非ワクチン接種子ブタから試料採取した肺組織のうちの2つが、PCV2ウイルス血症に陽性だった。非ワクチン接種子ブタと比較して、ワクチン接種子ブタは、組織病理学的病変およびPCV2ウイルス血症の著しい低減を示した。リンパ節の組織病理学的病変は、ワクチン接種子ブタ15匹第1群~第3群中1匹ブタ番号A4でしか観察されず、ワクチン接種子ブタブタ番号A4から試料採取したリンパ節が、PCV2ウイルス血症陽性の唯一のリンパ節だった。これらの結果は、本発明の不活化PCV2H株ワクチンが、PCV2伝染からブタを防御できたことを示した。防御比率は、80から100だった。これらの結果全てに基づき、本発明の不活化PCV2H株ワクチンは、ブタの免疫を効果的に誘導し、ワクチン接種ブタをPCV2感染から防御し、ブタのウイルス血症の重症度および持続期間を低減し、臨床症状を最小限に抑え、体重増加量を増加させた。無論、本発明の前述した実施形態の多くの変更および改変は、その範囲から逸脱せずに実施できる。このように、本発明は、科学および有用な技術の発展を促進するために開示されるものであり、添付の特許請求の範囲によってのみ限定されることが意図されている。"