"以下の一般式I又はIIのペプチド化合物:Ra-R1-R2-R3-R4-RbI又はRa-R4-R3-R2-R1-RbIIここで、‐Raは、アミノ酸R1又はR4のN末端第1級アミノ基を表しており、遊離しているか、又は、保護基で置換されており、‐Rbは、アミノ酸R1又はR4のC末端カルボキシル基のヒドロキシル基を表しており、遊離しているか、又は、保護基で置換されており、‐R1-R2-R3-R4又はR4-R3-R2-R1は、HADD,KADD,DDAK,RADD,DDAR,KAED,DEAK,RAED,DEAR,HADE,EDAH,KADE,EDAK,RADE,EDAR,HAEE,EEAH,KAEE,EEAK,RAEE及びEEARを表している。R1-R2-R3-R4又はR4-R3-R2-R1がHAEE,EDAR,EEAH,EEAK,EEAR,HADD,HADE,KADD,KAEE,RADD,RADE,RAEE,DDAK,KAED,DEAR又はKADEを表している、一般式I又はIIの化合物から選ばれることを特徴とする、請求項1に記載のペプチド化合物。R1-R2-R3-R4又はR4-R3-R2-R1がテトラペプチドHADD,DDAK,RADD,KAED,DEAR,KADE,HAEE及びRAEEのうちの1つを表している、一般式I又はIIの化合物から選ばれることを特徴とする、請求項2に記載のペプチド化合物。R1-R2-R3-R4又はR4-R3-R2-R1が2つのテトラペプチドHAEE及びRADDうちの1つのテトラペプチドを表している、一般式I又はIIの化合物から選ばれることを特徴とする、請求項2に記載のペプチド化合物。純度が98以上、好ましくは99以上であり、前記アミノ酸R1,R2,R3及びR4が天然異性体Lであり、かつ、Ra及びRbがいわゆる保護基を表していることを特徴とする、請求項1~4の何れか1項に記載のペプチド化合物。式Ac‐HAEE‐NH2又はAc‐RADD‐NH2に一致することを特徴とする、請求項1~5の何れか1項に記載のペプチド化合物。前記ペプチド化合物をアミロイド‐βペプチドと結合させることによって、ZnIIイオンと前記アミロイド‐βペプチドとの結合を低減又は抑制するための使用のための、請求項1~6の何れか1項に記載のペプチド化合物。前記ペプチド化合物をアミロイド‐βペプチドと結合させることによって、ZnIIイオンの存在下において前記アミロイド‐βペプチドの重合及び/又は凝集を低減又は抑制するための使用のための、請求項1~6の何れか1項に記載のペプチド化合物。薬剤としての使用のための、請求項1~6の何れか1項に記載のペプチド化合物。アミロイド斑の形成が認められる疾患の治療のための使用のための、請求項9に記載のペプチド化合物。神経変性疾患の治療用の薬剤としての使用のための、請求項9又は10に記載のペプチド化合物。アルツハイマー病の治療用の薬剤としての使用のための、請求項11に記載のペプチド化合物。請求項1~6の何れか1つに記載のペプチド化合物のR1-R2-R3-R4残基又はR4-R3-R2-R1残基の少なくとも1つを含む作用物質を含む組成物。請求項13に記載の組成物を、好ましくは非経口投与、経皮的投与又は経粘膜投与のための、生理学的に許容されるキャリアーと共に含む、医薬組成物。前記キャリアーが、血管内、筋肉内、皮下、髄腔内又は脳脊髄への投与に適していることを特徴とする、請求項14に記載の組成物。本発明の目的は、神経変性疾患障害に関する疾患、及び/又は、アミロイドβペプチドの重合又は凝集によるアミロイド斑の形成に関係する疾患を、治療又は抑制する薬剤を決定する又は作製する際に用いることができる新規の化合物を提供することである。より具体的には、本発明の目的は、アミロイド‐βペプチドとZnIIイオンとの相互作用を抑制できる新規の化合物を提供することである。実際、アミロイド‐βペプチドの凝集又は重合によるアミロイド斑の形成が、アミロイド‐βペプチドの亜鉛錯体complexesofzincwithamyloidβpeptideの形成によって誘発されて、亜鉛が多少この凝集又は重合の補助因子として機能することは、公知である。より具体的には、本発明の目的は、アミロイド‐β斑の形成を抑制でき、かつ、アルツハイマー病又はアミロイド斑の形成に関係する他の変性疾患の治療又は抑制を可能とする、新規の化合物を提供することである。これを実施するために、本発明は、以下の一般式I又はIIのペプチド化合物を提供する:Ra-R1-R2-R3-R4-RbI又はRa-R4-R3-R2-R1-RbIIただし、-R1は、アミノ酸H,R又はK残基;-R2は、アミノ酸A残基;-R3は、アミノ酸E又はD残基;-R4は、アミノ酸E又はD酸基;-Raは、アミノ酸R1又はR4のN末端第1級アミノ基Nterminalprimaryaminofunctionを示しており、遊離しているfreeか、それとも保護基望ましくはアセチル基Acで置換されており、-Rbは、アミノ酸R1又はR4のC末端カルボキシル基のヒドロキシル基thehydroxylfunctionoftheCterminalcarboxylgroupを示しており、遊離しているfreeか、それとも保護基望ましくは、NH2基、NHR基又はNRR基ここで、RはC1-C4アルキル鎖を示す、すなわちアミド型のグループに一致し、望ましくはアミド基NH2で置換されている。本発明に係るペプチド化合物は、単独で単離され及び精製された、好ましくは純度98より好ましくは純度99以上の化合物で、残部はとりわけ他のペプチドで形成されていてもよい、と解される。知られているように、そして好ましくは、アミノ酸R1、R2、R3、R4はそれらの自然な異性体L型で構成されているであろうが、しかし、アミノ酸R1、R2、R3、R4はD型の類似体であってもよい。より好ましくは、本発明に係るペプチド化合物が、98よりも高いL型異性体の純度を有し、好ましくは99以上のL型異性体の純度を有することであろう。発明者らは、テトラペプチドがアミロイド‐βの11~14領域のEVHHサイトSEQ.ID.No.28と結合することによる異なるアミノ酸を特定し、一方で、イオン的に反対の符号ionicallyofoppositesign、すなわち、R1は位置11のアミノ酸Eグルタミン酸塩glutamateと、R3及びR4はそれぞれ位置13及び14のアミノ酸Hヒスチジンと、すなわちZnIIイオンとアミロイド‐βとの結合において電位的に関係するサイトpotentiallyinvolvedsiteのうちの3つと、それぞれ強いイオン結合を形成し得るアミノ酸R1、R3及びR4と、アミノ酸Vと最も強い疎水性効果を形成し得る疎水性アミノ酸Aアラニンとを特定することによって、これらのテトラペプチドを決定している。それによって定義されたテトラペプチドは、アミロイド‐βの11~14領域のEVHH標的と、平行式I及び逆平行式IIの非共有結合性相互作用を形成する。EVHH標的領域の4つのアミノ酸のうちの3つが、強い荷電基chargedgroupを有しているという事実を考慮して、これら3つのアミノ酸とのイオン相補性ioniccomplementarityを有するアミノ酸が好ましいとされ、その一方で、アミノ酸R2の選択は、アラニン及びバリンの側鎖間の立体相補性stericcomplementarityと、さらにVとAとの疎水性接触、E及びHとのイオン結合によるさらなる安定化を考慮することによって行われた。発明者らは、上記のとおり定義された、3つのZnIIイオンキレート剤すなわち、位置11、13及び14のアミノ酸と結合しているテトラペプチドが、位置6、11、13及び14から選択されるとりわけ、9~11、10~12、11~13、12~14、13~15、14~16、11~16、5~14及び9~14の領域から選択される1~4個のZnIIキレート剤を含んでいる、異なるサイズの関連する標的と比較すると、最適な妥協anoptimalcpmpromiseに相当するということと、さらに、他の定義基準とりわけ、ペプチドサイズに相当する、すなわち、ZnIIイオンを結合するためのドメインを有するテトラペプチドをアミロイド‐βペプチドAβと結合させることによって、ZnIIイオンとアミロイド‐βペプチドAβとの結合の抑制と、アミロイド‐βペプチドのオリゴマー化の抑制とのための体内での前記化合物の使用の可能性の最適な妥協anoptimalcpmpromiseに相当するということとを、実験的に証明した。相互作用力は、位置6における結合によって損なわれているようである。逆に、位置6及び11、又は、位置13及び14の2つのサイトだけをカバーしている標的は、ZnIIイオンの結合を抑制するのには不十分である。本発明に係るテトラペプチドの他の利点は、テトラペプチドが強く電荷を帯びており、それによって血液脳関門bloodbrainbarrierを通過する能力が促進されるということである。本発明に係るペプチド化合物は、それゆえ、特に表1に明示された式I及びIIの配列R1R2R3R4及びR4R3R2R1を含んでいる。以下、明細書に追加された配列表の配列SEQ.ID.No.1~24において繰り返される。アミロイド‐βペプチドの1~16領域の断片に対応するリガンドを有するこれらのテトラペプチドの親和力が、実施例1~3で解離定数Kdを計算することによって試験された。それらの解離定数は、試験された次の他のペプチドこの定義に入らないテトラペプチド、トリペプチド、ヘキサペプチド又はデカペプチドの解離定数よりも104倍小さかった。知られているように、前記保護基は、体内の製薬学的用途pharmaceuticaluseに適合する基である。保護基の機能は、ペプチドのアミノ末端及びカルボキシル末端の電荷を中性にすることである。さらに具体的には、N末端がホルミル基HCO又はアセチル基CH3COで保護されていてよく、C末端が-NH2基、-NHR基、-NRR基ここで、RはC1-C4アルキル基、又はさらに-O-R基ここで、RはC1-C4アルキル又はアルキルアミンで例えばOCH3、-OCH2CH3又は-OCH2CH2NH2で保護されていてよい。次のことを念頭においておく:‐無極性基を有する疎水性アミノ酸は、アラニンA、バリンV、ロイシンL、イソロイシンI、メチオニンM、フェニルアラニンF、プロリンP及びトリプトファンWである。‐極性基を有する疎水性アミノ酸は、グリシンG、セリンSトレオニンT、システインC、チロシンY、アスパラギンN及びグルタミンQである。‐中性酸性pHで負に帯電している基を有するアミノ酸は、アスパラギン酸D及びグルタミン酸Eである。‐中性塩基性pHで正に帯電している基を有するアミノ酸は、リシンK、アルギニンR及びヒスチジンHである。天然のαアミノ酸は、全てキラルであるので、グリシンを除いて光学的に活性であり、そしてフィッシャー立体配置に準ずるL型立体配置又はカーンインゴルドプレローグ表記法に準ずるS型立体配置である。3つの重要なタイプの相互作用が、ペプチド間の結合、又は、ペプチド骨格のCO基とNH基との間で水素ブリッジが形成された結果生じるαへリックス又はβ折り畳みシートにおける、ペプチドの二次構造間の結合において起こる。すなわち、:‐疎水性効果:アミノ酸で、その基が疎水性であるものは、タンパク質を取り囲んでいる水分子に対してよりも、アミノ酸自体に対してより高い親和性を有する。逆に、親水性のアミノ酸は、自身が水と接するように配列する傾向にある。‐イオン結合:基は、それは正に帯電しているのだが、負に帯電している基とイオン結合を形成する。‐イオン結合の結果得られる相互作用及び疎水性効果によって得られる相互作用よりも強くない相互作用を有する水素結合好ましくは、本発明に係るペプチド化合物は、式I又はIIの化合物から選択されるだろう。これらの式において、R1R2R3R4又はR4R3R2R1は、それぞれ、HAEE,EDAR,EEAH,EEAK,EEAR,HADE,KADD,KAEE,RADD,RADE,RAEE,HADD,DDAK,KAED,DEAR又はKADEを表している。これらのペプチドは、配列SEQ.ID.No.1,3,4,5,9,12,13,15,17,18,19,20,21,22,23及び24と異なる順番に相当する。上記のテトラペプチドは、アミロイド‐βの1~16領域の断片との相互作用の解離定数Kdを有している。その解離定数Kdは、以下の実施例1~3で計算されたように、試験された他のペプチドよりも低い。より好ましくは、本発明に係るペプチド化合物が、式中のR1R2R3R4又はR4R3R2R1が次のテトラペプチド:HADD,DDAK,RADD,KAED,DEAR,KADE,HAEE及びRAEEの中の1つを表している、式I又はIIの化合物の中から選択されることである。それらの化合物は、実施例1~3で計算されたように、試験された他のペプチドよりもより一層低い解離定数Kdを有している。より好ましくは、本発明に係るペプチド化合物が、式中のR1R2R3R4又はR4R3R2R1が2つのテトラペプチドHAEE及びRADDの1つを表している、式I又はIIの化合物から選択されることである。‐R1はアミノ酸Hの残基である。‐R2はアミノ酸Aの残基である。‐R3はアミノ酸Eの残基である。‐R4はアミノ酸Eの残基である。最も好ましいペプチド化合物は、式Ac-HAEE-NH2及びAc-RADD-NH2と一致するものである。アミロイド‐βの1~16領域の断片に対応するリガンドを備えたこれらペプチドの両方の相互作用の解離定数Kdは、実施例1において、試験された全てのペプチドの中で最も低かった。これらのペプチド化合物は共に、また、ZnIIイオンの生理学的濃度下、特に100~400μMの濃度下で前記アミロイド‐βペプチドと結合することによって、ZnIIイオンとアミロイド‐βペプチドとの結合を抑制することと、斑状のアミロイド‐βペプチドの重合又は凝集を抑制することとについて、最も有効な化合物と考えられる。しかし、とりわけ、これらのペプチド化合物は共に、マウスの生体内モデルにおいてアミロイド斑の形成を抑制する特性を有していて、以下の実施例で報告されたように最も有効な化合物である。本発明の対象theobjectofthepresentinventionは、また、本発明に係るペプチド化合物をアミロイド‐βペプチドと結合させることによってZnIIイオンがアミロイド‐βペプチドと結合することを低減又は抑制するための、本発明に係るペプチド化合物の使用である。さらにより詳しくは、本発明の対象は、ZnIIイオンの存在下、より詳しくはZnIIイオンの生理学的濃度、特に100~400μMで、本発明に係るペプチド化合物をアミロイド‐βペプチドと結合させることによって、アミロイド‐βペプチドの重合及び/又は凝集を低減又は抑制するための、本発明に係るペプチド化合物の使用である。したがって、本発明は、アミロイド斑の形成に関係する疾患を治療するための、本発明に係るペプチド化合物の使用を提供する。また、本発明の対象は、本発明に係るペプチド化合物の薬剤として、特に神経変性疾患の治療のための薬剤として、好ましくはアルツハイマー病の治療のための薬剤としての使用である。また、本発明の対象は、本発明に係る使用において有用な組成物であり、その組成物のための作用物質activesubstanceが、本発明に係るペプチド化合物であるR1R2R3R4又はR4R3R2R1の少なくとも1つの残基を含んでいる、組成物である。前記作用物質は、生体内で分解可能な結合を介して結合されており、それによって作用モノマーであるテトラペプチドを長時間にわたって放出可能な、配列R1R2R3R4又はR4R3R2R1のいくつかのモノマーからなるマルチマーであってもよい。知られているように、本発明に係るペプチド化合物は、エステルまたは生理学的に許容される塩の誘導体physiologicallyacceptablesaltderivativesの形で調合formulateされてもよい。さらに詳しくは、本発明の対象は、本発明に係る組成物、又は、本発明に係るペプチド化合物のR1R2R3R4又はR4R3R2R1残基の少なくとも1つ含む作用物質を、生理学的に許容されるキャリアーと共に含む医薬組成物であって、好ましくは非経口的、経皮的又は経粘膜的に投与される医薬組成物である。さらに詳しくは、本発明に係る医薬組成物は、注入可能、特に血管内、筋肉内、皮下、髄腔内又は脳脊髄に注入可能なように調合formulateされるだろう。本発明に係るペプチド化合物が脳の標的細胞に到達するまで分解に耐え得るように調合されるならば、経口の、バッカルの、経鼻の、直腸の又は局所的な経路での他のやり方の投与が是認されてもよい。より好ましくは、前記組成物がフリーズドライ状であることであろう。より詳しくは、本発明に係る組成物において、前記ペプチド化合物の濃度は20~2000μMである。以下の実施例は、本発明に係るペプチド化合物の効率を、本発明の限定として解釈されるべきでない例示を単に示して、説明及び実証している。本発明の他の特徴及び利点は、以下の実施例の観点から明らかになるであろう。図1は、異なる濃度すなわち、曲線A=2μM、曲線B=5μM、曲線C=10μM、曲線D=15μM、曲線E=20μM、曲線F=25μM及び曲線G=0μMにおいて、実施例1の装置を用いてさらに実施例1の手順に従って実験した際の、ペプチドAc-HAEE-NH2とアミロイド‐βの1~16領域に対応するリガンドとの結合を表す動的曲線kineticcurvesを示す。図2~9は、実施例3の装置を用い、実施例3の手順に従って、さらに実施例1のものよりも精製された前記テトラペプチドを用いて実験した際の、配列SEQ.ID.No.1,4,5,9,12,15,19及び23のそれぞれのペプチドの結合を表す動的曲線kneticcurvesを示している。実施例1及び3において報告されているように、縦軸RU=反応単位Responseunitにおける分光計の反応単位の時間に対する変化によって、テトラペプチドとアミロイド‐βペプチドの領域1~16の断片との結合の解離定数Kdを計算することができる。実施例1:テトラペプチドAc-HAEE-NH2SEQ.ID.No.19とアミロイド‐βペプチドの1~16領域に対応する固定化ペプチド断片との結合分析は、テトラペプチドAc-HAEE-NH2とアミロイド‐βペプチドの1~16領域に対応する固定化ペプチド断片との結合の、表面プラズモン共鳴SPR分光法によって実施された。この分析によって、ペプチドの固定化リガンドとの相互作用の解離定数Kdを算出することができ、リガンドとの相互作用によってKdの値がより一層小さくなり、それゆえ形成された相互作用錯体interactioncomplexの安定性が高くなると理解される。これらの方法において、もしKdが104M以下であれば、重要で特異的な相互作用asignificantspecificinteractionが存在すると考えられる。一方、もしKdが103M以上であれば、重要な結合又は相互作用はないと考えられる。表面プラズモン共鳴は物理的現象であり、金属層の表面に吸着したレセプター上へのリガンドの結合を測定する方法としての使用で主に知られている。リガンドがレセプターと結合した場合に、SPR検出システムは、結合部分近辺の屈折率の変化を測定する。表面プラズモン共鳴分光法の原理は、永田和宏及び半田宏共著、シュプリンガーフェアラーク東京、2000NagataKandHandaHSpringerVerlagTokyo2000、に記載されている。より詳しくは、SPR分光法システム、例えばビアコアBIACOREのバイオセンサを適用した場合において、チップタイプのセンサ表面へのリガンドの固定化後、ここでの場合はアミロイド‐β断片の固定化後に、検体試料analytereagentが、マイクロ流体チャネルのシステムを介して一定の流速で前記表面に注入される。光源から発光された分極光は、チップの金被覆表面goldcoveredsurfaceで反射され、それからダイオードリーダーによって検出される。リガンドと検体分子との結合に応じて、反射光の強度が異なる。分光計RU=反応単位Responseunitの反応の変化により、相互作用の解離定数の計算が可能となる。バイオセンサのチップは、GEヘルスケア米国から入手された。SPR分光法の実験は、ビアコア3000機BIACORE3000apparatusによって実施された。アミロイド‐βペプチド断片EDC、NHS、PDEA及びシステインを固定化するための試料は、GEヘルスケア米国から入手された。チオール結合の形成によってペプチドリガンドを固定化するために用いられた緩衝液は、10mMのpH4.5の酢酸ナトリウムであった。再生緩衝液は、10mMのHEPES及び3mMのEDTAを備えた媒質と、0.005の界面活性剤P20と、150mMのpH7.4のNaClとを含んでいるHBS緩衝液であった。固定化緩衝液は、反応性テトラペプチドAc-HAEE-NH2のためのZnIIイオンを100μMで含む、50mMのpH7.4のHBS緩衝液及びpH6.8のHEPES緩衝液であった。全ての緩衝液は使用前にフィルタ処理された。リガンドのペプチド断片は、Ac-DAEFRHDSGYEVHHQKGGGGC-NH2であり、これは配列SEQ.ID.No.26に相当する。21個のアミノ酸を備えたこのペプチドは、アミロイド‐βの結合ドメインのN末端の16個のアミノ酸、すなわちDAEFRHDSGYEVHHQKSEQ.ID.No.25を含んでおり、この16個のアミノ酸に4個のグリシンアミノ酸と1つのシスティンC末端が続いている。システインは、供給者の手順theprocedureofthesupplierに従いチオール結合によってチップ表面上にリガンドを結合させるのに必要である。4個のグリシンアミノ酸は、それゆえチップとリガンドとの間に結合テトラペプチドリンカーlinkerを形成する。さらに、それによって固定化されたリガンドは、前記表面に対して十分な柔軟性を有し、その結果テトラペプチド試料とリガンドとの相互作用の状態と確かによく似る。供給者であるGEヘルスケア米国によって供給されたセンサのハンドブックに説明されている条件下で、チオール結合を介する標準的な手順によって、このリガンドはバイオセンサのCM5チップ上に結合される。全ての工程において適用された流速は5μl/minであった。カルボキシメチルデキストランマトリックスは、pH8.5の0.1Mのホウ酸ナトリウムの溶液に、1-エチル-33-ジメチルアミノプロピル-カルボジイミド1-ethyl3carbodiimideEDCとN‐ヒドロキシスクシンイミドN-hydroxysuccinimideNHSとの1対1の混合物、すなわち400mMのEDCと100mNのNHSを30μlが注入され、続いて、80mMのPDEA2-2-ピリジニルジチオ-エタン-アミンethane-amineが注入さることによって、活性化された。0.05mg/mlの酢酸ナトリウム緩衝液における溶液中のペプチドリガンドが、それから注入された。対照液体サンプルcontrolliquidsampleに対して約700任意単位の反応単位RUの変化を示す表面を提供するために、CM5チップの表面で反応しなかったチオール基は、pH4の0.1M酢酸ナトリウム緩衝液における50mMのシステイン溶液で除去された。同じ手順に従って、対照液体をチップの表面と反応させた。試料Ac-HAEE-NH2は、7つの濃度、すなわち0、2、5、10、15、20及び25μMに希釈されることによって調製され、そしてマルチチャネルモード20μLクイックインジェクト、5μL/minで注入された。その結合を追跡するために、チップの表面は試料緩衝液に330秒間曝された。チップの表面は、再生緩衝液20μLを注入することによって、それから再生された。対照レーンのデータは、固定化試料ペプチドimmobilizedreagentpeptidesに対応するレーンの生データから差し引かれた。次に、解離定数Kdが、BIA評価4.1プログラムにおいて濃度Mに対して平衡Reqでの反応に設定された曲線から、公知の方法を用いて計算された。異なる濃度の7つの試料サンプルは、それゆえ、リガンドがチップの表面に固定された状態でチャネルに注入された。対照の反応が差し引かれた後の、Ac-HAEE-NH2の固定化ペプチドとの動的結合曲線が、図1に報告されている。図1の曲線は、相互作用の解離定数の計算の可能性を付与し、前記解離定数は2.2×108Mと評価された。ZnIIイオンの生理学的濃度100~400μMでの存在において、解離定数は実質的には変化しなかった。しかし、高濃度10mMのZnIIイオンは、リガンドと試料との相互作用を抑制した。もし、ZnIIイオンとAβペプチドとの結合がマイクロモーラーμMのKdによって特徴づけられると考えられるならば、Aβペプチド上への結合について試料Ac-HAEE-NH2がZnIIイオンと競合すると推測される。しかし、Aβペプチドに対する試料の親和性は、Aβペプチドに対するZnIIイオンの親和性よりも大きく、その結果、ペプチドAc-HAEE-NH2は、生理学的濃度でのZnIIイオンのペプチドAβとの結合を抑制する。より詳しくは、Aβアミロイドに対し、Ac-HAEE-NH2試料の親和性は、ZnIIイオンの親和性よりも大きい。実験によって、マイクロモーラーレベル500μM未満でのZnIIイオンの生理学的濃度下では、HAEEとアミロイド‐βの1~16断片との結合は、ZnIIイオンの存在の有無によっては変化しないことが証明された。一方、より高濃度の、1ミリモーラーmMオーダーのZnIIイオンは、HAEEとAβの1~16ドメインとの相互作用を抑制する。これらのデータは、ZnIIイオンが生理学的濃度である場合は、HAEEが、標的ドメインに対してZnIIイオンよりも大きい親和性を有しており、そして、ZnIIイオンとAβとの相互作用を阻止することができる、ということを示している。実施例2:比較例アミロイド‐βの1~16領域に対応する標的ペプチドリガンドとの結合の実験は、実施例1で説明した手順に従って実施された。1‐上記の表1に列挙された23個の他のテトラペプチドの全ては、同じ保護基Ra=Ac及びRb=NH2を備えている配列SEQ.ID.No.1~18及び20~24に対応しており、試験された。それらのテトラペプチドの解離定数Kdは、105~106Mであった。これらの解離定数は、亜鉛の100~400μMの生理学的濃度下では、実質的には変化しなかった。本発明に係るテトラペプチドで、最も低い解離定数Kdを有しているものHAEEを除くは、EDAR,EEAH,EEAK,EEAR,HADE,KADD,KAEE,RADD,RADE,RAEE,HADD,DDAK,KAED,DEAR及びKADEであった。これらの値は、アミロイド‐βペプチドの1~16領域の標的リガンドとの強い結合に相当する。2‐10個の異なるテトラペプチドの他の比較例は、表1のテトラペプチドに類似するものの、1つのアミノ酸がアラニンAによって置換されており、すなわち次のテトラペプチド:AAEE,HAEA,HAAE,AADD,HAAD,HADA,AADE,RADA,RAAE及びKAAEである。これらのテトラペプチドは、それぞれ、配列SEQ.ID.No.29~38に対応しており、標的リガンドとの非特異性の又は重要でない相互作用に相当する非常に大きい解離定数、すなわち103~104MのKdを有していた。SEQ.ID.No.29はSEQ.ID.No.23から得られ、SEQ.ID.No.23において第1アミノ酸RがAで置換されている。SEQ.ID.No.30はSEQ.ID.No.19から得られ、SEQ.ID.No.19において最終アミノ酸EがAで置換されている。SEQ.ID.No.31はSEQ.ID.No.19から得られ、SEQ.ID.No.19において第3アミノ酸EがAで置換されている。SEQ.ID.No.32はSEQ.ID.No.5から得られ、SEQ.ID.No.5において第1アミノ酸RがAで置換されている。SEQ.ID.No.33はSEQ.ID.No.7から得られ、SEQ.ID.No.7において第3アミノ酸EがAで置換されている。SEQ.ID.No.34はSEQ.ID.No.1から得られ、SEQ.ID.No.1において最終アミノ酸DがAで置換されている。SEQ.ID.No.35はSEQ.ID.No.13から得られ、SEQ.ID.No.13において第1アミノ酸HがAで置換されている。SEQ.ID.No.36はSEQ.ID.No.5から得られ、SEQ.ID.No.5において最終アミノ酸DがAで置換されている。SEQ.ID.No.37はSEQ.ID.No.23から得られ、SEQ.ID.No.23において第3アミノ酸EがAで置換されている。SEQ.ID.No.38はSEQ.ID.No.21から得られ、SEQ.ID.No.21において第3アミノ酸EがAで置換されている。3‐SEQ.ID.No.19HAEEのテトラペプチドに対応する10個の異なるトリペプチドが試験された。その試験において、次の配列SEQ.ID.No.59~68:AEE,HAE,SHA,GHA,EEQ,AHA,IAH,FSH,ESD,ISHに対応する1、2又は3個のアミノ酸が除去された。トリペプチドAEEは、前述の相補性の基準によれば12~14領域の相補的トリペプチドに対応するといえるだろう。これらのトリペプチドは、Aβペプチドの領域9~11、10~12、11~13、12~14、13~15及び14~16に相補的であった。これらの10個の異なるトリペプチドも、103~104Mの解離定数を有しており、これは標的との重要な又は特異的な相互作用の欠如を反映している。4‐さらに、10個の異なるヘキサペプチド、それらは2つのアミノ酸がN末端又はC末端に加えられた、本発明に係る好ましいテトラペプチドSEQ.ID.No.19HAEEを含んでいるのだが、が試験された。すなわち、それらのヘキサペプチドは次のヘキサペプチドであった:HAEESD,HAEEAD,HAEESE,HAEEGE,HAEEQE,LAHAEE,IAHAEE,FSHAEE,LGHAEE,ISHAEE。これらのヘキサペプチドは、Aβペプチドの11~16及び9~14の領域に対して相補的であった。これらの10個のヘキサペプチドは、配列SEQ.ID.No.39~48における配列のリストで繰り返されており、103~104Mの比較的高い解離定数Kdを有していた。これは、アミロイド‐βの1~16領域のリガンドとの重要な又は特異的な相互作用の欠如を反映している。これらの10個のヘキサペプチドは全て、前述のイオン相互作用又は疎水性相互作用に従って、2個の付加的アミノ酸が、N末端伸長のためにアミロイド‐βのアミノ酸15~16QKと相互作用し、及び、アミロイド‐βの領域9~10GYのアミノ酸GYと相互作用するだろう配列に対応していた。5‐最後に、次の配列SEQ.ID.No.49~58における配列のリストから選択された10個のデカペプチドが試験された:HSLAHAEESD,KNIAHAEEAD,RNFSHAEESE,KQLGHAEEGE,RQISHAEEQE,DDHSLAHAEE,EEKNIAHAEE,EERNFSHAEE,DEKQLGHAEE,DERQISHAEE。これらのデカペプチドは、103~104Mの解離定数Kdを有しており、これは標的との重要な又は特異的な相互作用の欠如を反映している。これらのデカペプチドも、本発明に係る好ましいテトラペプチドであるSEQ.ID.No.19HAEEを取り込んでおり、SEQ.ID.No.49~53のN末端に2個の付加的アミノ酸及びC末端に4個の付加的アミノ酸を備えており、SEQ.ID.No.54~58に6個の付加的アミノ酸を備えている。デカペプチドSEQ.ID.No.49~58は、全て、SEQ.ID.No.49~53についてはアミロイド‐βの7~10及び15~16領域のアミノ酸と相互作用し得ると考えられ、SEQ.ID.No.54~58についてはアミロイド‐βの5~10領域のアミノ酸と相互作用し得ると考えられている付加的アミノ酸を含んでおり、Aβペプチドの5~14領域を標的としていた。試験された上記セクション1~5の全てのペプチドは、N末端アミノ基の保護基であるRa=Acと、C末端カルボキシル基のヒドロキシル基の保護基であるRb=NH2を含んでいた。実施例3:本発明に係るテトラペプチドと、アミロイド‐βペプチドの1~16領域に対応する固定化ペプチド断片との結合実施例1で説明された結合試験が、以下の重要な相違点を除いて、同じ材料、反応及び手順を用いて再現された:‐適用されたビアコア機BIACOREapparatusは、ビアコアT100機BIACORET100apparatusであった。このビアコアT100機は、検出器に検体を注入する際のガス抜きシステムを含んでいることと、CM5チップ上の固定化リガンド/検体の分子間複合体immobilizedligandanalyteintermolecularcomplexesの検出方法がより正確であることとにより、ビアコア3000よりも正確な結果を生じさせる。‐使用された本発明に係るテトラペプチドは、HPLCデータによりL異性体が99以上となるまで精製されて、合成の際に、D異性体が形成されないように抑制された、及び/又は、除去された。実施例1では、テトラペプチドは98のL異性体を含んでいるだけであった。‐本発明に係るテトラペプチドの適用された濃度は、50、100、200、500、1,000、1,500及び2,000μMであった。‐これらの実験は、亜鉛無しで実施された。‐CM5チップの表面は、対照液体サンプルcontrolliquidsampleに対して約1,023任意単位の反応単位RUの変化を示す表面を提供した。図2~9の動的曲線によれば、先の出願特に、参考文献[39]参照で説明されている方法に従って、解離定数Kdを計算できる。すなわち、前記曲線によってkon及びkoff定数を次の式で計算できる:dR/dt=konCRmax-R-koffRここで、‐Rは、縦軸における反応を示し、‐Cは、検体の濃度を示し、‐Rmaxは、Rの理論上の最大値を示し、解離定数Kdは式Kd=koff/konによって求められる。表2に、配列SEQ.ID.No.1,4,5,9,12,15,19及び23のテトラペプチドについて計算された解離定数Kdの値、それらは最小値であるが、が示されている。この場合、配列SEQ.ID.No.5及び19を含む検体が、最も低い解離定数Kdを有し、その値は104~105Mの間に含まれていた。配列SEQ.ID.No.1、4、9、12、15及び23の他の6個のテトラペプチドは、103~102Mの間に含まれるKd値を示した。このモデルに係る他のテトラペプチドは、102Mよりも大きい解離定数Kdを示した。実施例4:重合又は凝集によるアミロイド‐β斑の形成の阻害アミロイド斑の形成におけるAβペプチドの凝集現象は、クオリティコントロールドバイオケミカルズ社米国QUALITYCONTROLLEDBIOCHEMICALSIncUSAのシンタロイドスクリーニングプレートSYNTHALOIDSCREENINGPLATE登録商標キットを用いることによって体外でinvitro実証されて、Aβペプチドの結晶化中心で被覆された斑と、凝集を検出するために蛍光マーカーでマークされたAβペプチドを利用している37、38。完全なβペプチドcompleteβpeptide1~40が用いられた。それらは、pH7.4、BSA0.1及びFCS10の50mMのHEPES媒質を含む緩衝液において蛍光マーカーによってマークされた。この緩衝液は、もともと、生理学的濃度のZnIIイオンと、プロテアーゼの阻害剤とを含んでいた。前記プレートは、96ウェルを含むプレートであり、そのウェルの中に、100μLの濃度100nMのマークされたAβペプチド1~40が注がれた。それらは、インキュベートのために、ウェルにおいて室温で3時間放置された。Aβペプチドの凝集現象についての本発明に係るテトラペプチドの効果を調べるために、あるウェルにおいて、本発明に係るテトラペプチドAC-HAEE-NH2及びAc-RADD-NH2が、ウェルに応じて異なる濃度で導入された0,5,10,20,40,80,100及び150μM。これを実施するために、インキュベーションの終わりに、上記の緩衝液を用いることによって、ウェル中の未結合のタンパク質が3回の洗浄によって除去された。凝集体の形で結合されたタンパク質で、ウェルに結合されたものの量は、蛍光強度を測定することによって測定された。本発明に係るテトラペプチドHAEE及びRADDは、実際に、抑制濃度IC50が20μMで、Aβペプチドの凝集を阻害する。なお、濃度IC50とは、ウェルに導入されたAβペプチドの50の凝集が抑制されるであろう濃度を表している。シンタロイドスクリーニングプレートSYNTHALOIDSCREENINGPLATE登録商標のキットの使用者マニュアルに記載されている試験に従い、もしある化合物のIC50濃度が100μMよりも低ければ、その化合物が固体支持体上へのタンパク質の結合を阻害すると考えられる。長年の研究によって、濃度20,40,80,100及び150μMのHAEE及びRADDテトラペプチドと共に行われるアミロイド凝集体の1時間以上の長時間のインキュベーションは、さらに、アミロイド凝集体の不可逆の解離を引き起こすことが証明されている。書誌参照1CummingsJLAlzheimersdiseaseNEnglJMed35156672SelkoeDJAlzheimersdiseasegenesproteinsandtherapyPhysiolRev81741663GlennerGGandWongCWAlzheimersdiseaseandDownssyndromesharingofauniquecerebrovascularamyloidfibrilproteinBiochemBiophysResCommun122113154MastersCLSimmsGWeinmanNAMulthaupGMcDonaldBLandBeyreutherKAmyloidplaquecoreproteininAlzheimerdiseaseandDownsyndromeProcNatlAcadSciUSA82424595MayeuxRetalPlasmaamyloidbetapeptide142andincipientAlzheimersdiseaseAnnNeurol4641266SeubertPetalIsolationandquantificationofsolubleAlzheimersbetapeptidefrombiologicalfluidsNature35932577HardyJandSelkoeDJTheamyloidhypothesisofAlzheimersdiseaseprogressandproblemsontheroadtotherapeuticsScience29735368LuhrsTRitterCAdrianMRiekLoherDBohrmannBDobeliHSchubertDandRiekR3DstructureofAlzheimersamyloidbetafibrilsProcNatlAcadSciUSA1021734279GowingERoherAEWoodsASCotterRJChaneyMLittleSPandBallMJChemicalcharacterizationofAbeta1742peptideacomponentofdiffuseamyloiddepositsofAlzheimerdiseaseJBiolChem269109879010MattsonMPUntanglingthepathophysiochemistryofbetaamyloidNatStructBiol2926811GuilloreauLDamianLCoppelYMazarguilHWinterhalterMandFallerPStructuralandthermodynamicalpropertiesofCuIIamyloidbeta1628complexesassociatedwithAlzheimersdiseaseJBiolInorgChem1110243812KozinSAZirahSRebuffatSHoaGHandDebeyPZincbindingtoAlzheimersAbetapeptideresultsinstablesolublecomplexBiochemBiophysResCommun2859596413MekmoucheYCoppelYHochgrafeKGuilloreauLTalmardCMazarguilHandFallerPCharacterizationoftheZnIIbindingtothepeptideamyloidbeta116linkedtoAlzheimersdiseaseChembiochem616637114ZirahSetalZincbindingagonisteffectontherecognitionofthebetaamyloidepitopebyantibetaamyloidantibodiesBiochemBiophysResCommun321324815LovellMARobertsonJDTeesdaleWJCampbellJLandMarkesberyWRCopperironandZincinAlzheimersdiseasesenileplaquesJNeurolSci158475216FredericksonCJandBushAISynapticallyreleasedzincphysiologicalfunctionsandpathologicaleffectsBiometals143536617FredericksonCJSuhSWSilvaDandThompsonRBImportanceofzincinthecentralnervoussystemthezinccontainingneuronJNutr1301471S83S18FriedlichALetalNeuronalzincexchangewiththebloodvesselwallpromotescerebralamyloidangiopathyinananimalmodelofAlzheimersdiseaseJNeurosci243453919BushAICopperzincandthemetallobiologyofAlzheimerdiseaseAlzheimerDisAssocDisord171475020MaynardCJBushAIMastersCLCappaiRandLiQXMetalsandamyloidbetainAlzheimersdiseaseIntJExpPathol861475921AuldDSKarSandQuirionRBetaamyloidpeptidesasdirectcholinergicneuromodulatorsamissinglinkTrendsNeurosci2143922KellyJFFurukawaKBargerSWRengenMRMarkRJBlancEMRothGSandMattsonMPAmyloidbetapeptidedisruptscarbacholinducedmuscariniccholinergicsignaltransductionincorticalneuronsProcNatlAcadSciUSA936753823MijailovicBMladenovicTKaradaglicDNinkovicMJovicPandPavlovicMClinicalandlaboratorystudiesofcholinergicurticariaVojnosanitPregl5349750124PedersenWAKloczewiakMAandBlusztajnJKAmyloidbetaproteinreducesacetylcholinesynthesisinacelllinederivedfromcholinergicneuronsofthebasalforebrainProcNatlAcadSciUSA9380687125WuJKuoYPGeorgeAAXuLHuJandLukasRJbetaAmyloiddirectlyinhibitshumanalpha4beta2nicotinicacetylcholinereceptorsheterologouslyexpressedinhumanSHEP1cellsJBiolChem279378425126CoyleJandKershawPGalantamineacholinesteraseinhibitorthatallostericallymodulatesnicotinicreceptorseffectsonthecourseofAlzheimersdiseaseBiolPsychiatry492899927MaelickeASamochockiMJostockRFehrenbacherALudwigJAlbuquerqueEXandZerlinMAllostericsensitizationofnicotinicreceptorsbygalantamineanewtreatmentstrategyforAlzheimersdiseaseBiolPsychiatry492798828NewhousePAPotterAKeltonMandCorwinJNicotinictreatmentofAlzheimersdiseaseBiolPsychiatry492687829WangHYLiWBenedettiNJandLeeDHAlpha7nicotinicacetylcholinereceptorsmediatebetaamyloidpeptideinducedtauproteinphosphorylationJBiolChem278315475330ChristensenDDChangingtheCourseofAlzheimersDiseaseAntiAmyloidDiseaseModifyingTreatmentsontheHorizonJClinPsychiatry9324131GervaisFetalTargetingsolubleAbetapeptidewithTramiprosateforthetreatmentofbrainamyloidosisNeurobiolAging285374732VelazquezPCribbsDHPoulosTLandTennerAJAspartateresidue7inamyloidbetaproteiniscriticalforclassicalcomplementpathwayactivationimplicationsforAlzheimersdiseasepathogenesisNatMed377933GiulianDetalTheHHQKdomainofbetaamyloidprovidesastructuralbasisfortheimmunopathologyofAlzheimersdiseaseJBiolChem273297192634BronfmanFCGarridoJAlvarezAMorganCandInestrosaNCLaminininhibitsamyloidbetapeptidefibrillationNeurosciLett218201335CastilloGMLukitoWPeskindERaskindMKirschnerDAYeeAGandSnowADLaminininhibitionofbetaamyloidproteinfibrillogenesisandidentificationofanAbetabindingsitelocalizedtotheglobulardomainrepeatsonthelamininachainJNeurosciRes624516236MurtomakiSRisteliJRisteliLKoivistoUMJohanssonSandLiesiPLamininanditsneuriteoutgrowthpromotingdomaininthebraininAlzheimersdiseaseandDownssyndromepatientsJNeurosciRes322617337CaplanMRSchwartzfarbEMZhangSKammRDandLauffenburgerDAControlofselfassemblingoligopeptidematrixformationthroughsystematicvariationofaminoacidsequenceBiomaterials232192738ZhangSEmergingbiologicalmaterialsthroughmolecularselfassemblyBiotechnolAdv203213939BuneevaOProteomics2010102337"