"一般式I:式中、R1は、水素、ORa、OCORa、OCOORa、NRaRb、NRaCORb及びNRaCNRaNRaRbから選択され;R2及びR3は、それぞれ独立して、水素、置換又は非置換C1~C12アルキル、置換又は非置換C2~C12アルケニル及び置換又は非置換C2~C12アルキニルから選択され;R41、R42、R43、R44、R45、R46、R47及びR48は、それぞれ独立して、水素、置換又は非置換C1~C12アルキル、置換又は非置換C2~C12アルケニル及び置換又は非置換C2~C12アルキニルから選択され;R5、R6及びR7は、それぞれ独立して、水素、CORa、COORa、置換若しくは非置換C1~C12アルキル、置換若しくは非置換C2~C12アルケニル及び置換若しくは非置換C2~C12アルキニルから選択されるか、又はR5及びR48は、それらが結合している対応するN原子及びC原子と一緒になって、置換若しくは非置換複素環式基を形成してもよく;Ra及びRbは、それぞれ独立して、水素、置換又は非置換C1~C12アルキル、置換又は非置換C2~C12アルケニル、置換又は非置換C2~C12アルキニル、置換又は非置換アリール及び置換又は非置換複素環式基から選択され;並びに点線は、それぞれ任意の追加的な結合を表すの化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。以下の式II:式中、R1、R41、R43及びR48、R5、R6及びR7は、請求項1で定義されたとおりであるを有する、請求項1に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。R2及びR3が、それぞれ独立して、水素及び置換又は非置換C1~C6アルキルから選択される、請求項1に記載の化合物、又はその薬学的に許容される塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。R2及びR3が水素である、請求項3に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。R1が、水素、ORa及びOCORaから選択され、ここでRaが、水素及び置換又は非置換C1~C6アルキルから選択される、前記請求項のいずれか1項に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。R1が、水素又はメトキシである、請求項5に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。R42、R44、R45、R46及びR47基が、独立して、水素及び置換又は非置換C1~C6アルキルから選択される、請求項1及び3~6のいずれか1項記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。R42、R44、R45、R46、R47基が、独立して、水素、置換又は非置換メチル、置換又は非置換イソプロピル及び置換又は非置換tert-ブチルから選択される、請求項7に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。R42、R44、R45、R46及びR47が水素である、請求項8に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。R41、R43及びR48基が、独立して、水素及び置換又は非置換C1~C6アルキルから選択される、前記請求項のいずれか1項に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。R41、R43及びR48基が、独立して、水素、置換又は非置換メチル、置換又は非置換イソプロピル及び置換又は非置換tert-ブチルから選択される、請求項10に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。R41及びR43がメチルである、請求項11に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。R48が、イソプロピル、tert-ブチル及びベンジルから選択される、請求項12に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。R5及びR6が、それぞれ独立して、水素及び置換又は非置換C1~C6アルキルからなる群から選択される、前記請求項のいずれか1項に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。R5及びR6が水素である、請求項14に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。R7が、水素、置換又は非置換C1~C12アルキル及び置換又は非置換C2~C12アルケニルから選択される、前記請求項のいずれか1項に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。R7が、水素及び置換C2~C12アルケニルから選択される、請求項16に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。R7が、1つ以上の位置において、ハロゲン、OR′、=O、OCOR′、OCONHR′、OCONR′2及び保護OHで置換されているアルケニル基であり、ここでR′基が、それぞれ独立して、水素、置換又は非置換C1~C12アルキル、置換又は非置換C2~C12アルケニル、置換又は非置換C2~C12アルキニル及び置換又は非置換アリールから選択される、請求項17に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。追加的な結合が点線で示された全ての場所において存在する、前記請求項のいずれか1項に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。以下の式:を有する、請求項1若しくは2に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ又は立体異性体。以下の式:を有する、請求項1若しくは2に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ又は立体異性体。リトプロカミアリチストイデスLithoplocamialithistoidesからの抽出及び単離工程を実施することを含む、前記請求項のいずれか1項で定義された化合物又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体を得るための方法。請求項1~21のいずれか1項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体及び薬学的に許容される希釈剤又は担体を含む医薬組成物。薬剤としての使用のための、請求項1~21のいずれか1項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。癌を治療するための薬剤としての使用のための、請求項1~21のいずれか1項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体。薬剤の調製における、請求項1~21のいずれか1項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体の使用。薬剤が癌の治療において使用される、請求項26に記載の使用。本発明により解決される問題は、癌の治療に有用な化合物を提供することである。一つの態様において、本発明は、一般式Iの化合物又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体を対象とし、式中、R1は、水素、ORa、OCORa、OCOORa、NRaRb、NRaCORb及びNRaCNRaNRaRbから選択され;R2及びR3は、それぞれ独立して、水素、置換又は非置換C1~C12アルキル、置換又は非置換C2~C12アルケニル及び置換又は非置換C2~C12アルキニルから選択され;R41、R42、R43、R44、R45、R46、R47及びR48は、それぞれ独立して、水素、置換又は非置換C1~C12アルキル、置換又は非置換C2~C12アルケニル及び置換又は非置換C2~C12アルキニルから選択され;R5、R6及びR7は、それぞれ独立して、水素、CORa、COORa、置換若しくは非置換C1~C12アルキル、置換若しくは非置換C2~C12アルケニル及び置換若しくは非置換C2~C12アルキニルから選択されるか、又はR5及びR48は、それらが結合している対応するN原子及びC原子と一緒になって、置換若しくは非置換複素環式基を形成してもよく;Ra及びRbは、それぞれ独立して、水素、置換又は非置換C1~C12アルキル、置換又は非置換C2~C12アルケニル、置換又は非置換C2~C12アルキニル、置換又は非置換アリール及び置換又は非置換複素環式基から選択され;そして点線は、それぞれ任意の追加的な結合を表す。別の態様において、本発明は、薬剤として、特に癌を治療するための薬剤として使用される、式Iの化合物又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体を対象とする。更なる態様において、本発明は、また、癌の治療における又は好ましくは癌の治療のための薬剤の調製における、式Iの化合物又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体の使用を対象とする。本発明の別の態様は、治療方法及びこれらの方法において使用される化合物である。したがって、本発明は、更に、上記で定義された化合物の治療有効量を罹患している個体に投与することを含む癌に罹患している任意の哺乳動物、特にヒトを治療する方法を提供する。別の態様において、本発明は、式Iの化合物又は薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ若しくは立体異性体を薬学的に許容される担体又は希釈剤と一緒に含む、医薬組成物を対象とする。本発明は、また、ラスパイリイダRaspailiidae科リトプロカミアLithoplocamia属リチストイデスlithistoides種の海綿動物からの式Iの化合物の単離、それらを得るための方法、及びこれらの化合物からの誘導体の形成に関する。本発明は、上記で定義された一般式Iの化合物に関する。これらの化合物において、置換基を以下の指針に従って選択することができる。アルキル基は、分岐鎖又は非分岐鎖であることができ、好ましくは1~約12個の炭素原子を有することができる。一つのより好ましい部類のアルキル基は、1~約6個の炭素原子を有する。さらにより好ましいものは、1、2、3又は4個の炭素原子を有するアルキル基である。メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、並びにtert-ブチル、sec-ブチル及びイソブチルを含むブチルが、本発明の化合物において特に好ましいアルキル基である。別の好ましい部類のアルキル基は、6~約10個の炭素原子;さらにより好ましくは、7、8又は9個の炭素原子を有する。ヘプチル、オクチル及びノニルが、この部類の最も好ましいアルキル基である。本発明の化合物において好ましいアルケニル及びアルキニル基は、分岐鎖又は非分岐鎖であることができ、1つ以上の不飽和架橋及び2~約12個の炭素原子を有することができる。一つのより好ましい部類のアルケニル及びアルキニル基は、2~約6個の炭素原子を有する。さらにより好ましいものは、2、3又は4個の炭素原子を有するアルケニル及びアルキニル基である。別の好ましい部類のアルケニル及びアルキニル基は、4~約10個の炭素原子、なおより好ましくは6~約10個の炭素原子、さらにより好ましくは7、8又は9個の炭素原子を有する。本発明の化合物において適切なアリール基には、単環化合物、並び別々の及び/又は縮合したアリール基を含有する多環化合物を含む多環化合物が含まれる。典型的なアリール基は、1~3個の分離又は縮合環及び6~約18個の炭素環原子を含有する。好ましくは、アリール基は、6~約10個の炭素環原子を含有する。特に好ましいアリール基には、置換又は非置換フェニル、置換又は非置換ナフチル、置換又は非置換ビフェニル、置換又は非置換フェナントリル及び置換又は非置換アントリルが含まれる。適切な複素環式基には、1~3個の分離又は縮合環及び5~約18個の環原子を含有する複素環式芳香族基及び複素脂環式基が含まれる。好ましくは、複素環式芳香族基及び複素脂環式基は、5~約10個の環原子を含有する。本発明の化合物において適切な複素環式芳香族基は、N、O又はS原子から選択される1、2又は3個のヘテロ原子を含有し、例えば、8-クマリニルを含むクマリニル、8-キノリルを含むキノリル、イソキノリル、ピリジル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリミジニル、フリル、ピロリル、チエニル、チアゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、イミダゾリル、インドリル、イソインドリル、インダゾリル、インドリジニル、フタラジニル、プテリジニル、プリニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、フラザニル、ピリダジニル、トリアジニル、シンノリニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾフラザニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、キナゾリニル、キノキサリニル、ナフチリジニル及びフロピリジルが含まれる。本発明の化合物において適切な複素脂環式基は、N、O又はS原子から選択される1、2又は3個のヘテロ原子を含有し、例えば、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペリジル、モルホリニル、チオモルホリニル、チオキサニル、ピペラジニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、ホモピペリジル、オキセパニル、チエパニル、オキサゼピニル、ジアゼピニル、チアゼピニル、1,2,3,6-テトラヒドロピリジル、2-ピロリニル、3-ピロリニル、インドリニル、2H-ピラニル、4H-ピラニル、ジオキサニル、1,3-ジオキソラニル、ピラゾリニル、ジチアニル、ジチオラニル、ジヒドロピラニル、ジヒドロチエニル、ジヒドロフラニル、ピラゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、3-アザビシクロ3.1.0ヘキシル、3-アザビシクロ4.1.0ヘプチル、3H-インドリル及びキノリジニルが含まれる。上記に記述された基は、OR′、=O、SR′、SOR′、SO2R′、NO2、NHR′、NR′2、=N-R′、NHCOR′、NCOR′2、NHSO2R′、NR′C=NR′NR′R′、CN、ハロゲン、COR′、COOR′、OCOR′、OCONHR′、OCONR′2、保護OH、置換又は非置換アリール及び置換又は非置換複素環式基のような1つ以上の適切な基により1つ以上の利用可能な位置において置換されていることができ、ここでR′基は、それぞれ独立して、水素、OH、NO2、NH2、SH、CN、ハロゲン、COH、COアルキル、CO2H、置換又は非置換C1~C12アルキル、置換又は非置換C2~C12アルケニル、置換又は非置換C2~C12アルキニル、置換又は非置換アリール及び置換又は非置換複素環式基からなる群より選択される。上記基がそれ自体置換される場合、置換基は、前記のリストから選択することができる。本発明の化合物において適切なハロゲン置換基には、F、Cl、Br及びIが含まれる。OHに対する適切な保護基は当業者によく知られている。有機化学の保護基についての一般的な概観が、有機合成における保護基ProtectingGroupsinOrganicSynthesis、第4版、ウィリーインターサイエンスWileyInterscienceにおいてウッツ、第4版、第8巻、G.シームThieme、シュットガルト、1952年、137頁により達成して、化合物1を得ることができる。工程の順序を取り替えて最終化合物を得ることができる。例えば、フラグメントBCを第1工程で調製し、次にフラグメントA及びBと連続カップリングさせて、化合物1の炭素骨格を得ることができる。同様に、化合物1は、フラグメントA、B、C及びDを任意の順番で連続カップリングして調製することができる。別の選択肢は、任意の他のフラグメントとのカップリングの前に、フラグメントAにおけるラクトン部分の形成を実施することである。化合物1の類似体は、それぞれの場合において中間体化合物の適切な置換基を選択して、化合物1について記載したものと同等の方法により合成することができる。必要な場合、置換基に対して適切な保護基を使用して、反応性基が影響を受けないことを確実にすることができる。合成は、適切な工程で所望の置換基に変換することができる前駆体置換基を用いるように設計することができる。環構造における飽和又は不飽和を、合成の一部として導入又は除去することができる。出発材料及び試薬を、望ましいように変更して、意図される化合物の合成を確実にすることができる。加えて、類似体を、当業者に既知の合成有機化学における通常の手順によって、化合物1から合成することもできる。上記の合成経路を、望ましいように変更して、立体特異的化合物、並びに立体異性体の混合物を与えることができる。立体特異的試薬の使用又は合成の際にキラル中心を化合物に導入することを含む多様な方法により、特定の立体異性体又は特定の混合物を合成することが可能である。合成の際に1つ以上の立体中心を導入すること、また、存在する立体中心を反転することが可能である。加えて、化合物が当業者に既知の標準的な溶解技術により合成されると、立体異性体を分離することが可能である。式I及びIIの上記の化合物の重要な特徴は、それらの生体活性、特にそれらの細胞毒性及び抗有糸分裂活性である。本発明によって、細胞毒性及び抗有糸分裂活性を有する一般式I及びIIの化合物の新規医薬組成物、並びに抗腫瘍剤としてのそれらの使用が提供される。したがって、本発明は、更に、本発明の化合物、薬学的に許容されるその塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグ又は立体異性体と薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物を提供する。医薬組成物の例には、経口、局所又は非経口投与用の任意の固体錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤など又は液体液剤、懸濁剤又は乳剤組成物が挙げられる。本発明の化合物又は組成物の投与は、静脈内注入、経口調合剤、並びに腹腔内及び静脈内投与のような任意の適切な方法によることができる。24時間までの注入時間を使用することが好ましく、より好ましくは1~12時間であり、1~6時間が最も好ましい。治療を病院に一晩入院することなく実施することを可能にする短い注入時間が、特に望ましい。しかし、注入は、必要であれば12~24時間又はそれ以上であることができる。注入は、例えば1~4週間の適切な間隔で実施することができる。本発明の化合物を含有する医薬組成物は、リポソーム又はナノ球体封入により、持続放出製剤において、又は他の標準的な送達手段により送達することができる。化合物の正確な投与量は、特定の製剤、適用様式、並びに特定の位置、宿主及び治療される腫瘍に応じて変わり得る。年齢、体重、性別、食事、投与時間、排出速度、宿主の状態、薬剤の組み合わせ、反応感受性及び疾患の重篤度のような他の要因が考慮され得る。投与は、最大耐量の範囲内で継続的に又は周期的に実施することができる。本発明の化合物及び組成物を他の薬剤と共に使用して、併用療法を提供することができる。他の薬剤は、同じ組成物の一部分を形成することができるか、又は同時若しくは異なる時に投与される別個の組成物として提供されうる。これらの化合物の抗腫瘍活性には、肺癌、結腸癌、乳癌及び子宮頸癌が含まれるが、これらに限定されない。実施例実施例1:海洋生物及び収集の側面の記載リトプロカミアリチストイデスLithoplocamialithistoidesは、マダガスカル南17度06.071分/東49度51.385分において、6~20mの範囲の深さでのスキューバダイビングを用いて手動で収集された。動物材料は、ホセルイスカルバジョJoseLuisCarballoメキシコ自治大学UniversidadAutonomadeMejicoにより同定された。検体試料は、メキシコのマサトランMazatlanにあるメキシコ国立自治大学UniversidadNacionalAutonomadeMexicoの海洋及び陸水学の科学研究所InstitutodeCienciasdelMaryLimnologiaに、参照コードLEB-ICML-UNAM-11-2004で寄託された。実施例2:化合物1の単離実施例1の冷凍検体61gを角切りし、H2O3×200mL、続いてMeOH:ジクロロメタンの混合物1:1、3×200mLにより室温で抽出した。合わせた有機抽出物を濃縮して、粗物質1.11gを得た。この物質を、H2OからMeOHへの段階勾配によるLichroprepRP18のVLCに付した。化合物11.6mgを、半分取逆相HPLCSymmetryPrepC187μm、7.8×150mm、MeCNが35~100の勾配H2O:MeCNを30分、UV検出、流速2.5mL/分、保持時間14.4分により、MeOHを用いて溶離してフラクションから単離した。化合物1:無定形の白色固体。HRESIMSm/z606.2940[MH]C31H4535ClN3O7で計算606.2946;1H500MHz及び13CNMR125MHz表1を参照すること。実施例3:化合物2、3、4、5、6及び7の単離リトプロカミアリチストイデスLithoplocamialithistoidesの試料の第2群7.66kgを粉砕し、MeOH:ジクロロメタンの混合物1:1、14L、2×5L、4Lで、徹底的に抽出した。溶媒を真空下で除去し、残留水溶液をEtOAc12L、3×8Lで抽出した。有機層を蒸発させて、粗物質21.71gを得た。この物質を、H2O:MeOH4:6からMeOHの段階勾配を用いるRP18カラムクロマトグラフィーに付した。H2O:MeOH2:8、430mgで溶離したフラクションをプールし、分取HPLCAtlantisdC18、OBD、5μm、19×150mm、定組成H2O:MeOH39:61、流速:20mL/分、UV検出に付して、純粋な化合物1160.8mg、213.2mg及び71.89mg、並びに3と4の混合物11.4mg及び5と6の混合物10.0mgを得た。純粋な化合物35.1mg及び42.6mgは、半分取HPLCXTerraPrepRP18、10μm、10×150mm、MeOHが50~70の勾配H2O:MeOHを70分、流速:2.5mL/分、UV検出による混合物の最終精製の後で得た。化合物53.6mg及び61.0mgは、半分取HPLCXTerraPrepRP18、10μm、10×150mm、定組成H2O:MeOH45:55、流速:2.5mL/分、UV検出により、同様の方法で分離した。化合物2:無定形の白色固体。MSESm/z606.3[MH],628.3[MNa];1H500MHz及び13CNMR125MHz表2を参照すること。化合物3:無定形の白色固体。HRESIMSm/z628.2774[MNa]C31H4435ClN3O7Naで計算628.2760;1H500MHz及び13CNMR125MHz表3を参照すること。化合物4:無定形の白色固体。HRESIMSm/z594.3152[MNa]C31H45N3O7Naで計算594.3150;1H500MHz及び13CNMR125MHz表4を参照すること。化合物5:無定形の白色固体。MSESm/z592.3[MH],614.3[MNa];1H500MHz及び13CNMR125MHz表5を参照すること。化合物6:無定形の白色固体。MSESm/z592.3[MH],614.3[MNa];1H500MHz及び13CNMR125MHz表6を参照すること。化合物7:無定形の白色固体。HRESIMSm/z427.2207[MNa]C22H32N2O5Naで計算427.2203;1H500MHz及び13CNMR125MHz表7を参照すること。実施例4:化合物8の単離実施例3に開示された抽出手順からもたらされた化合物161.6mg含有フラクションを、半分取HPLCSymmetryprepC18、7μm、7.8×150mm、定組成H2O:CH3CN55:45、流速:2.3mL/分、UV検出により更に精製して、0.9mgの化合物8を純粋な形態で得た。化合物8:無定形の白色固体。MSESm/z606.2[MH],628.3[MNa];1H500MHz及び13CNMR125MHz表8を参照すること。実施例5:フラグメントAの合成スキーム2は、スキーム1において提供された命名法に従って、フラグメントAの合成の幾つかの例を提供する。中間体9の合成ジクロロメタン/DMSO331mL/149mLの混合物中の2S,3S-3,5-ビス{tert-ブチルジメチルシリルオキシ}-4-メチルペンタン-1-オールP.プーカンPhukan、S.サスマールSasmal及びM.E.マイヤーMaier有機化学ヨーロピアンジャーナルEurJOrgChem2003年、1733~174050g、0.14molの0°Cの溶液に、Et3N96.1mL、0.69molを、添加漏斗により加えた。10分後、SO3Pyr54.8g、0.34molを少量ずつ加え、溶液を0°Cで更に2時間撹拌した。次に、それをジクロロメタン800mlで希釈し、HCl0.5N、800mLで停止させた。有機層をデカントし、MgSO4で乾燥し、真空下で濃縮した。カラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc100:0~10:1による精製によって、45g収率:90のアルデヒド9を得た。1HRMNδ97943036525116910408508800300713CRMNδ205469459651737526126018418280434552中間体10の合成トルエン625mL中のアルデヒド945g、0.2molの溶液に、カルボエトキシエチリデン-トリフェニルホスホラン113g、0.31molを加え、混合物を60°Cで17時間加熱した。次に、溶媒を減圧下で除去し、得られた油状物をカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc100:0~10:1により精製して、53.3g収率:96のエステル化合物10を得た。1HRMNδ67141937736626118516813009809000513CRMNδ168314541267722604597384380259182181143143126444654中間体11の合成無水THF525mL中のエステル1046.7g、0.105molの-78°Cに冷却した溶液に、アルゴン雰囲気下、トルエン231mL、0.231mol中の1M水素化ジイソブチルアルミニウムDIBALを10分間かけて加え、混合物を-78°Cで撹拌した。4時間後、反応をMeOH10mLで停止させ、酒石酸ナトリウムカリウムの飽和溶液800mLを加え、EtOAc1000mLで希釈した。この混合物を2時間撹拌し、次に有機層をデカントした。水性残渣を追加のEtOAc2×400mLで抽出し、合わせた有機層を乾燥しNa2SO4、溶媒を蒸発させた。得られた油状物をカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc20:1~10:1により精製して、32.5g収率:77のアルコール11を得た。1HRMNδ53139836624916717016209108800313CRMNδ13391298731691599378375259183181159139444453中間体12の合成エチルエステル387mL中のアルコール1131.2g、77.5mmolの溶液に、アルゴン雰囲気下、MnO2101g、1.16molを加え、混合物を室温で2時間撹拌した。この混合物を、EtOAc3Lにより溶離するシリカゲルカラムで濾過し、得られた溶液を減圧下で乾燥して、29.1g収率:94のアルデヒド12を得た。1HRMNδ93764438236528217416710208600400113CRMNδ195415781383134572059536737525818218114394444554中間体13の合成THF727mL中のヨウ化ヨードメチルトリフェニルホスホニウムギルバートストークGilbertStork,KZ.テトラへドロンレターズTetrahedronletters1989年、3017、217396.3g、181.7mmolの懸濁液に、0°Cで、ヘキサメチルジシラザンナトリウムNaHMDSの1M溶液181.7mL、181.7mmolを、添加漏斗により10分間かけてゆっくりと加えた。更に5分間撹拌した後、溶液を-78°Cに冷却し、次に1,3-ジメチル-3,4,5,6-テトラヒドロ-21H-ピリミジノンDMPU43.9mL、363.4mmolをカニューレにより加え、続いてTHF727mLに溶解したアルデヒド1229.1g、72.7mmolを加えた。温度を-78°Cに保持し、その間、反応混合物を2時間撹拌した。ヘキサン1Lを加え、得れたスラリーをセライトで濾過し、追加のヘキサン3Lで洗浄した。濾液を減圧下で蒸発させ、得られた油状物をカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc100:0~20:1により精製して、32g収率:84のヨウ化物13を得た。1HRMNδ67360955736337125819017009608800413CRMNδ142313811318746729598381379260183182157157445252中間体14の合成EtOH114mL中のヨウ化物1312g、22.9mmolの溶液に、ピリジニウムp-トルエンスルホネートPPTS2.01g、8.0mmolを加え、反応混合物を室温で25時間撹拌した。次に、溶媒を減圧下で除去し、得られた油状物をカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc10:1により精製して、8.7g収率:93のアルコール14を得た。1HRMNδ6696125473673872711891731861010910087011513CRMNδ1424136413267587526003813642611821711604142中間体15の合成ジクロロメタン/DMSO50.9mL/22.9mLの混合物中のアルコール148.7g、21.2mmolの0°Cの溶液に、Et3N14.8mL、106mmolを添加漏斗により加えた。10分後、SO3Pyr8.43g、53.0molを少量ずつ加え、溶液を0°Cで更に2時間撹拌した。次に、それをジクロロメタン800mlで希釈し、HCl0.5N、50mLで停止させた。有機層をデカントし、MgSO4で乾燥し、真空下で濃縮した。カラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc10:1による精製によって、6.9g収率:80のアルデヒド15を得た。1HRMNδ98966761354339825926918510108600600313CRMNδ20181419135213337637194933932581801671594445中間体16aの合成アルゴン雰囲気下、-78°Cで撹拌した、無水THF390mL中のジエチルメトキシメトキシカルボニルメチルホスホネート5.51g、14.45mmol及び18-クラウン-611.5g、43.34mmolの溶液に、0.5Mカリウムビストリメチルシリルアミド溶液KHMDS43.34mL、21.67mmolを滴加した。15分後、無水THF中のアルデヒド155.9g、14.45mmolを30分間かけて滴加し、-78°Cで90分間撹拌した。次に、反応を飽和NH4Cl溶液200mLで停止させ、室温に温め、ジクロロメタン1000mLで希釈した。有機層を乾燥しNa2SO4、減圧下で蒸発させた。カラムクロマトグラフィーヘキサン/Et2O20:1による精製によって、純粋な4.2g59のE-16aを得た。1HRMNδ67060854753737836036027925226718309908900500413CRMNδ1637145914211373132111047547485545193813232591811651574345中間体16bの合成アルゴン雰囲気下、0°Cで撹拌した、無水THF2.4mL中のビス2,2,2-トリフルオロエトキシホスフィニル酢酸エチル0.16mL、0.66mmol及び18-クラウン-6350mg、1.32mmolの溶液に、KHMDS1.23mL、0.62mmolを滴加した。30分後、無水THF中のアルデヒド15180mg、0.44mmolを滴加し、-78°Cで60分間撹拌した。次に、反応を飽和NH4Cl溶液で停止させ、室温に温め、EtOAcで希釈した。有機層を乾燥しNa2SO4、減圧下で蒸発させた。カラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc100:1~15:1による精製によって、172mg収率:82のZ-16bを得た。1HRMNδ670644636609586581547414369364306300285275259251184128100089006005MSmz5010MNa中間体17aの合成MeOH125mL中のエステル16a4.15g、8.39mmolの溶液に、室温で、37のHCl1.04mLを加え、反応混合物を6時間撹拌した。次に、混合物をNaHCO3の飽和溶液で中和しpH7~8、有機溶媒を減圧下で蒸発させた。得られた懸濁液をジクロロメタン3×200mLで抽出し、乾燥し、蒸発させた。カラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc10:1~2:1による濾過によって、2.76g収率:94のラクトン17aを得た。1HRMNδ66862056354341936528425524318711613CRMNδ161614521418134413271083817774554371266165161中間体17bの合成MeOH4.5mL中のエステル16b172mg、0.36mmolの溶液に、室温で、37のHCl0.03mLを加え、反応混合物を3時間撹拌した。次に、混合物をNaHCO3の飽和溶液で中和しpH7~8、有機溶媒を減圧下で蒸発させた。得られた懸濁液をジクロロメタンで抽出し、乾燥し、蒸発させた。カラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc10:1~5:1による濾過によって、70mg収率:61のラクトン17bを得た。1HRMNδ691685668662602545419365426418292279257248239228188117実施例6:フラグメントDの合成スキーム3は、スキーム1において提供された命名法に従って、フラグメントDの合成の幾つかの例を提供する。中間体19の合成ジクロロメタンDCM918mL中の中間体1872.3gの溶液に、室温で、3-クロロ過安息香酸m-CPBA100g、0.58molを少量ずつ加え、混合物を室温で18時間撹拌した。白色の沈殿を、NaHCO3の飽和溶液で停止させ、DCM3×250mLで抽出し、再びNaHCO3の飽和溶液3×250mLで洗浄した。有機層を合わせ、Na2SO4で乾燥し、真空下で濃縮した。得られた油状物をシリカゲルヘキサン-AcOEt;15:1で精製して、エポキシドを無色の油状物64.5g、82として得た。無水THF7.5mL中のラセミエポキシド30gの溶液に、R,RCoII錯体448mg、0.74mmolを加え、続いてAcOH0.14mLを加えた。溶液を0°Cに冷却し、水1.2mLを滴加した。反応混合物を室温に温め、18時間撹拌した。その時間の後、揮発性物質を真空下で濃縮し、粗物質をシリカゲルカラムに直接装填した。溶離剤としてヘキサン/EtOAc15:1~12:1を使用するフラッシュクロマトグラフィーによって、キラルエポキシド-1913.6g、収率:46を無色の油状物として得た。αD1411HNMRδ37430127424817008700413CRMNδ60250247336126118452中間体20の合成プロピンを-78°Cで濃縮し、無水THF165mLに溶解した。n-ブチルリチウムをAr下で30分間かけて滴加し、得られた白色の懸濁液を-78°Cで更に30分間撹拌した。次に、無水THF125mL中のR-2-2-tert-ブチルジメチルシリルオキシエチルオキシラン1923.7gの溶液を滴加し、続いてBF3OEt2を加えた。混合物を-78°Cで1時間、0°Cで更に1時間撹拌した。反応をNH4Clの飽和水溶液150mLで停止させ、Et2O3×150mLで抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc10:1~1:1によって、22.7g収率:80のアルコール20を無色の油状物として得た。αD561HRMNδ37539034723417917508900713CRMNδ778758707624376276261183375354MSmz2432MH2652MNa中間体21aの合成DCM中の中間体2022.7g及びp-メトキシベンジルトリクロロアセトイミデートPMBTCAの溶液を、ScOTf3で処理した。混合物を室温で2時間撹拌しTLCで検査、反応を真空下で濃縮し、カラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc50:1~15:1により精製して、21aを黄色の油状物18.3g;収率:55として得た。1HNMRδ725690445380365240182179092005中間体21bの合成N,N-ジメチルホルムアミドDMF14mL中のアルコール202.88g、11.9mmol、tert-ブチルジフェニルシリルクロリド4.39mL、16.89mmol及び4-ジメチルアミノピリジン43.6mgの溶液を、室温で一晩撹拌した。混合物を水で希釈し、Et2Oで抽出し、有機相をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc、95:1によって、シリルエーテル21b5.3g、収率:93を無色の液体として得た。1HNMRδ77076674073439939537036222322218418116910508400113CRMNδ13611346129712787787626996013962752722621961853751中間体22aの合成無水トルエン中の21aの溶液に、Ar下及び0°Cで、シュワルツSchwartz試薬ビスシクロペンタジエニルジルコニウムIVクロリドヒドリド、Cp2ZrHClを加え、反応を室温で5分間撹拌した。反応温度を20分間かけて50°Cに増加し、50°Cで2.30時間撹拌した。この時間の間に反応溶液は橙色になった。反応を0°Cに冷却し、N-クロロスクシンイミドを一度に加えた。撹拌を室温で30分間続け、反応をヘキサン/EtOAc95:5;500mLで希釈した。固体を濾過により除去し、揮発物を蒸発させて、22aを黄色の油状物として得て、それを更に精製することなく使用した15.1g;収率:86。αD2051HNMRδ72568756444538037036222720317008900513CRMNδ15941309130712961242114075271459855537733826121218551中間体22bの合成酢酸エチル中の21b4.73g、9.85mmol、キノリン0.582mL、4.92mmol及びリンドラー触媒2.18gの混合液を含有するフラスコを、排気し、H2でフラッシュした。反応混合物を、H2下1atm、室温で2時間撹拌し、次にセライトプラグで濾過した。プラグを酢酸エチルですすぎ、合わせた濾液を0.1のHClで洗浄した。有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して、中間体22b4.27g、収率:90を無色の油状物として得て、それを更に精製することなく使用した。1HNMRδ77076774473654853652739538737135521617316614110508400213CRMNδ13621348129812781264125870960439634827326219718513151中間体23aの合成無水THF中の22a23gの溶液に、Ar下及び0°Cで、フッ化テトラブチルアンモニウムTBAFの溶液を20分間かけて滴加した溶液は赤色になった。反応混合物を室温で2時間撹拌し、次にNH4Clの飽和水溶液200mlで停止させた。合わせた層を分離し、水相をEtOAc3×150mlで十分に抽出した。合わせた有機層をNaSO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc4:1~1:1によって、23aを無色の油状物11.9g;収率:73として得た。1HNMRδ725686562445380370235203175中間体23bの合成PPTS837.7mg、3.33mmolを、エタノール80mL中の22b4g、8.33mmolの溶液に、一度に加えた。反応混合物を室温で7時間撹拌し、次に濃縮した。残渣をDCMで希釈し、NaHCO3の飽和溶液で洗浄した。有機層を抽出し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc、95:1によって、シリルエーテル23b2.12g、収率:69を無色の油状物として得た。1HNMRδ77376974473654453852151740139438437636936423221418917817016013710713CRMNδ136213411300127812631259723601377343272195130中間体24aの合成ジアセトキシヨードベンゼンBAIB11.5g、35.7mmolを、ジクロロメタン無水物92mL中のアルコール23a9.2g、32.4mmol及び2,2,6,6-テトラメチルピペリジン1-オキシルTEMPO515mg、3.3mmolの溶液に加えた。反応混合物を、アルコールが検出されなくなるまでTLC、室温で20時間撹拌し、次に、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、DCM3×100mLで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc4:1~1:1により精製して、24aを無色の油状物6.3g;収率:70として得た。1HNMRδ97872568556444540238026023520313CRMNδ201159613211301129712281141733715555483335213中間体24bの合成BAIB1.97g、6.11mmolを、25mLのDCM中のアルコール23b2.05g、5.56mmol及びTEMPO86.87mg、0.56mmolの溶液に加えた。反応混合物を、アルコールが検出されなくなるまでTLC、室温で16~18時間撹拌し、次に、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、DMCで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/DCM5:1~1:2により精製して、24b1.733mg、収率:79を無色の油状物として得た。1HNMRδ97277476774873755654553252342942025124823122714310613CRMNδ2023136113401301127912741251694501351272195131中間体25aの合成無水THF126mL中のヨウ化ヨードメチルトリフェニルホスホニウム16.6g;31mmolの懸濁液に、室温で、THF31.27mL中のNaHMDSの1M溶液をゆっくりと加えた。2分間撹拌した後、黄色の混合物を-78°Cに冷却し、次にTHF82mL中の24a6.3g、22mmolの溶液を加えた。反応混合物を-78°Cで2時間、室温で5分間撹拌し、ヘキサンで希釈し、セライトプラグで濾過した。プラグをヘキサンですすぎ、合わせた濾液を減圧下で蒸発させ、得られた油状物をカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc12:1~8:1により精製して、25aを黄色の油状物5.6g;収率:62として得た。1HNMRδ725685625564442380355240225203中間体25bの合成THF60mL中のヨードメチルトリフェニルホスホラン3.32g、6.38mmolの懸濁液に、室温で、THF中のNaHMDS6.38mmolの1M溶液6.83mLをゆっくりと加えた。2分間撹拌した後、黄色の混合物を-78°Cに冷却し、次にTHF40mL中の24b1.67g、4.56mmolの溶液を加えた。反応混合物を-78°Cで90分間、次に室温で5分間撹拌し、ヘキサンで希釈し、セライト/SiO2のプラグで濾過した。プラグをヘキサン/EtOAc10:1~5:1によりすすいで、化合物25b2g、収率:89を無色の油状物として得て、それを更に精製することなく使用した。1HNMRδ77076674573462163154954353552739437523022722420414310613CRMNδ1382136213431299127812641260841719416345272196132中間体25cの合成2,3-ジクロロ-5,6-ジシアノ-p-ベンゾキノンDDQ3.6g、16mmolを、DCM-H2O20:1中の25a5g;12mmolの溶液に、Ar雰囲気下、室温で加えた。1:30h後ヘキサン/EtOAc4:1のTLCでは出発物質を示さなかった、反応を、Et2O200mLに注ぐことにより停止させ、1MNaOH3×50ml及びブライン50mLで洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。p-メトキシベンズアルデヒドのクロマトグラフ分離を、p-メトキシベンジルアルコールへの還元により促進した。この終点に向かって、Ar雰囲気下でNaBH4を有するMeOHにおいて得られた残渣の溶液を、室温で1時間保持した。次に反応混合物を、Et2O100mLに注ぐことによって停止させ、1MHCl40mL及びブライン40mLで洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。得られた油状物をシリカゲルヘキサン/EtOAc10:1~4:1で精製して、第二級アルコールを無色の油状物として得た2.8g;収率:80。無水DCM中の第二級アルコール2.8g;10mmolの溶液に、Ar下及び0°Cで、2,6-ルチジンを滴加し、続いてtert-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネートTBSOTfを加えたヘキサン/EtOAc4:1のTLCでは出発物質を示さなかった。この時点で、粗混合物を0.5MHCl25mLで停止させ、DCM2×25mLで抽出した。合わせた有機層をNaHCO3の飽和水溶液及びブラインで洗浄した。有機相をNaSO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc100:1~20:1によって、25cを無色の油状物3.14g;収率:80として得た。1HNMRδ62556438223822020308600513CRMNδ13771309124384670642536625921318244実施例7:フラグメントBCDの合成スキーム4は、スキーム1において提供された命名法に従って、フラグメントBCDの合成の幾つかの例を提供する。中間体26aの合成再密封可能なシュレンク管に、ヨウ化銅I148mg、0.78mmol、炭酸カリウム1.076g、7.78mmol及びBoc-tert-LeuCONH2ポズネフPozdnevV.F.、テトラヘドロンレターズTetrahedronLetters1995年、36、7115~7118に記載された手順に従って調製0.96g、4.15mmolを投入し、排気し、アルゴンを充填した。N,N′-ジメチルエチレンジアミンDMEDA0.166mL、1.55mmol、ヨウ化ビニル25c1.04g、2.59mmol及び無水DMF15mLをアルゴン下で加えた。シュレンク管を密閉し、90°Cで16~18時間加熱し、室温に冷却した。得られた混合物をEtOAcで希釈し、水で停止させた。有機層を、水で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc、20:1~15:1により精製した。中間体26a670mg、収率、53を油状物として得た。1HNMRδ772670554535476389373368212198097108400200113CNMRδ1689156013111239122610827997166253653483382812672592121834344中間体26bの合成再密封可能なシュレンク管に、ヨウ化銅I232.4mg、1.22mmol、炭酸カリウム1.688g、12.23mmol及びBoc-tert-LeuCONH22.474g、6.12mmolを投入し、排気し、アルゴンを充填した。N,N′-ジメチルエチレンジアミン0.26mL、2.45mmol、ヨウ化ビニル25b2g、4.08mmol及び無水DMF35mLをアルゴン下で加えた。シュレンク管を密閉し、90°Cで16~18時間加熱し、室温に冷却した。得られた混合物をEtOAcで希釈し、水で停止させた。有機層を、水で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc、20:1~15:1により精製した。中間体26b1.06g、収率:44を油状物として得た。1HNMRδ770767743735713667556545536528486478388377226204144143106096中間体26cの合成再密封可能なシュレンク管に、ヨウ化銅I40.4mg、0.213mmol、炭酸カリウム294mg、2.13mmol及びBoc-Val-CONH2ポズネフPozdnevV.F.、テトラヘドロンレターズTetrahedronLetters1995年、36、7115~7118に記載された手順に従って調製230mg、1.06mmolを投入し、排気し、アルゴンを充填した。N,N′-ジメチルエチレンジアミン45μL、0.426mmol、ヨウ化ビニル25c283mg、0.71mmol及び無水DMF35mLをアルゴン下で加えた。シュレンク管を密閉し、90°Cで16~18時間加熱し、室温に冷却した。得られた混合物をEtOAcで希釈し、水で停止させた。有機層を、水で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc、7:1~3:1により精製した。中間体26c270g、収率:77を油状物として得た。1HNMRδ78067967355850248547639338037321222220214509809308900700613CNMRδ169313111240122710897163653383062852612131961831794344中間体26dの合成再密封可能なシュレンク管に、ヨウ化銅I14.2mg、0.075mmol、炭酸カリウム104mg、0.75mmol及びFmoc-Phe-CONH2ポズネフPozdnevV.F.、テトラヘドロンレターズTetrahedronLetters1995年、36、7115~7118に記載された手順に従って調製145mg、0.375mmolを投入し、排気し、アルゴンを充填した。N,N′-ジメチルエチレンジアミン16μL、0.15mmol、ヨウ化ビニル25c100mg、0.25mmol及び無水DMF2.5mLをアルゴン下で加えた。シュレンク管を密閉し、90°Cで16~18時間加熱し、室温に冷却した。得られた混合物をEtOAcで希釈し、水で停止させた。有機層を、水で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc、4:1~1:1により精製した。中間体26d46mg、収率:42を油状物として得た。1HNMRδ919736721677560482478m1H37937136733226922021119908900500413CNMRδ1719137913091295129112721241122510797145664093633362612131834445MSmz4371MH4590MNa中間体27aの合成エチレングリコール30mL中のアミノ保護誘導体26a670mg、1.33mmolの溶液を、200°Cで10~20分間加熱した。次に反応混合物を室温に冷却し、DCMで希釈し、ブラインで停止させ、水に注いだ。数滴の3MNaOHを、溶液がpH14に達するまで加え、次にDCMで十分に抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮して、第一級アミン27a510mg、収率:95を黄色の油状物として得て、それを更に精製することなく使用した。1HNMRδ87767155647137231421419709708400213CRMNδ171213101241122510717156433623453382652602121824445中間体27bの合成エチレングリコール50mL中のアミノ保護誘導体26b847mg、1.43mmolの溶液を、200°Cで10~20分間加熱した。次に反応混合物を室温に冷却し、DCMで希釈し、ブラインで停止させ、水に注いだ。数滴の3MNaOHを、溶液がpH14に達するまで加え、次にDCMで十分に抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮して、第一級アミン27b435mg、62を、フラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc10:1~1:2による精製の後で、白色の泡状物として得た。1HNMRδ85077076674573366754854053652847938737930822221414310509713CRMNδ171013611345129812781263126212211076726644340344328272269196132中間体27cの合成エチレングリコール15mL中のアミノ保護誘導体26c255mg、0.52mmolの溶液を、200°Cで10~20分間加熱した。次に反応混合物を室温に冷却し、DCMで希釈し、ブラインで停止させ、水に注いだ。数滴の3MNaOHを、溶液がpH14に達するまで加え、次にDCMで十分に抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮して、第一級アミン27c170mg、85を黄色の油状物として得て、それを更に精製することなく使用した。1HNMRδ92767656148047238137333124423322021620315910008908200513CNMRδ172113111241122510747153653373082602132001614344中間体28aの合成DCM/DMF10:1、39.6mL中のアミン27a918mg、2.27mmolの溶液に、無水DCM中のZ-3-トリブチルスタンニルプロペン酸1028mg、2.84mmolの溶液を、アルゴン雰囲気下で加え、次に0°Cに冷却した。ジイソプロピルエチルアミンDIPEA0.6mL、3.4mmol、1-ヒドロキシ-7-アザベンゾトリアゾールHOAt310mg、2.27mmol及びN,N,N′,N′-テトラメチル-O-7-アザベンゾトリアゾール-1-イルウロニウムヘキサフルオロホスフェートHATU860mg、2.27mmolを溶液に加え、30分後、冷浴を取り外した。反応混合物を室温で2時間撹拌し、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、水に注ぎ、DCMで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc20:1~15:1により精製して、アミド28a1110mg;収率:66を油状物として得た。1HNMRδ76369767567265055648344137621720114512510088084006中間体28bの合成DCM/DMF4:1、12.5mL中のアミン27b575mg、1.17mmolの溶液に、無水DCM中のZ-3-トリブチルスタンニルプロペン酸505.6mg、1.4mmolの溶液を、アルゴン雰囲気下で加え、次に0°Cに冷却した。DIPEA0.243mL、1.76mol、7-ヒドロキシベンゾトリアゾールHOBt189.2mg、1.4mmol及びHATU532.28mg、1.4mmolを溶液に加え、30分後、冷浴を取り外した。反応混合物を室温で2時間撹拌し、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、水に注ぎ、DCMで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc20:1~15:1により精製して、アミド28b780.4mg;収率:77を白色の泡状物として得た。1HNMRδ77076874373670270067566662655753453852848343138938222620215014214313312010609609508313CRMNδ168016621538136313611343130012781267126012161090726607357340327295277272267195140132118中間体28cの合成DCM/DMF10:1、7.7mL中のアミン27c170mg、0.437mmolの溶液に、無水DCM中のZ-3-トリブチルスタンニルプロペン酸197.2mg、0.546mmolの溶液を、アルゴン雰囲気下で加え、次に0°Cに冷却した。DIPEA0.11mL、0.655mmol、HOAt59.4mg、0.437mmol及びHATU166mg、0.437mmolを溶液に加え、30分後、冷浴を取り外した。反応混合物を室温で2時間撹拌し、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、水に注ぎ、DCMで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc20:1~15:1により精製して、アミド28c250mg、収率:78を白色の泡状物として得た。1HNMRδ79470067567265055648344137621720114512508808400613CRMNδ169216681538136213111239122610877165923653373142952942762612131951851831401184344中間体28dの合成DCM/DMF10:1、1.3mL中のアミン26d44mg、0.1mmolの溶液に、無水DCM中のZ-3-トリブチルスタンニルプロペン酸45mg、0.125mmolの溶液を、アルゴン雰囲気下で加え、次に0°Cに冷却した。DIPEA26μL、0.15mmol、HOAt13.6mg、0.1mmol及びHATU38mg、0.1mmolを溶液に加え、30分後、冷浴を取り外した。反応混合物を室温で2時間撹拌し、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、水に注ぎ、DCMで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc20:1~15:1により精製して、アミド28d60mg、収率:80を油状物として得た。1HNMRδ74373472270267066663455148147136835931826921120420119618718017015314313112408908508800400113CNMRδ1685166515441367135913101295129112741240122310887155513883663332952942762602131821401184345MSmz7812MH8032MNa中間体28eの合成DCM/DMF10:1、1mL中のアミン27a30mg、0.075mmolの溶液に、無水DCM中のE-3-トリブチルスタンニルプロペン酸33.5mg、0.095mmolの溶液を、アルゴン雰囲気下で加え、次に0°Cに冷却した。DIPEA19μL、0.11mol、HOAt10mg、0.075mmol及びHATU27.5mg、0.075mmolを溶液に加え、30分後、冷浴を取り外した。反応混合物を室温で2時間撹拌し、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、水に注ぎ、DCMで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc6:1により精製して、アミド28e25mg、収率:45を油状物として得た。1HNMRδ76875267362862556048344037721720114512510088084006実施例8スキーム5は、本発明の幾つかの化合物の合成を提供する。化合物29aの合成1-メチル-2-ピロリジノンNMP14.7mL中のアルケニルスタンナン28a1.1g、1.47mmol及び17a0.62g、1.77mmolの溶液に、0°Cで、チオフェンカルボン酸銅CuTC422mg、2.2mmolを加えた。反応を、0°Cで45分間、室温で20分間撹拌した。次に、粗混合物を中性アルミナのプラグで濾過し、EtOAc/エーテル50:50で洗浄し、合わせた濾液を0.5NHCl3×15mLで洗浄した。有機溶液を乾燥し、蒸発させて粗生成物を得て、それをカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc5:1~1:1により精製して、トリエン29a0.66g、収率:66を油状物として得た。1HNMRδ789722686670635613566560555526484476434204163773693632892772412332192132001821131020860400313CRMNδ1685166416181454140313731344134313101243124112241212108710848207166065563753653513382652602131831741694344化合物29bの合成NMP9mL中のアルケニルスタンナン28b780.4mg、0.904mmol及び17a377.4mg、1.085mmolの溶液に、0°Cで、チオフェンカルボン酸銅258.5mg、1.36mmolを加えた。反応を、0°Cで45分間、室温で20分間撹拌した。次に、粗混合物を中性アルミナのプラグで濾過し、EtOAc/エーテル50:50で洗浄し、合わせた濾液を0.5NHCl3×10mLで洗浄した。有機溶液を乾燥し、蒸発させて粗生成物を得て、それをカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc5:1~1:1により精製して、トリエン29b459.7mg、収率:66を油状物として得た。1HNMRδ76676474373272368566264161156656054954153252752548347543242241538337836228627824023522020418114011310309713CRMNδ1683166316181454140213731361134813441343129912781264126112441217121210841091820726606556375352327311272268265195174169131化合物29cの合成NMP2.5mL中のアルケニルスタンナン28c250mg、0.34mmol及び17a142mg、0.409mmolの溶液に、0°Cで、チオフェンカルボン酸銅97mg、0.51mmolを加えた。反応を、0°Cで45分間、室温で20分間撹拌した。次に、粗混合物を中性アルミナのプラグで濾過し、EtOAc/エーテル50:50で洗浄し、合わせた濾液を0.5NHCl3×10mLで洗浄した。有機溶液を乾燥し、蒸発させて粗生成物を得て、それをカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc10:1~6:1により精製して、トリエン29c150mg、収率:67を油状物として得た。1HNMRδ8217286886726426155665615565274854774304244163793723662882802422372182142001831140970960860413CRMNδ1692166816181454140513771346134313101243124212261212108610848207155895563753643383082652612131961851831741694344化合物29dの合成NMP1mL中のアルケニルスタンナン28d60mg、0.08mmol及び17a32.4mg、0.09mmolの溶液に、0°Cで、チオフェンカルボン酸銅22mg、0.12mmolを加えた。反応を、0°Cで45分間、室温で20分間撹拌した。次に、粗混合物を中性アルミナのプラグで濾過し、EtOAc/エーテル50:50で洗浄し、合わせた濾液を0.5NHCl3×10mLで洗浄した。有機溶液を乾燥し、蒸発させて粗生成物を得て、それをカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc4:1~1:1により精製して、トリエン29d13mg、収率:25を油状物として得た。1HNMRδ75973372472369066662461756355855152847946742441736636536232230428928124323721120420018419317211608600300113CNMRδ16841665161714551408138113681345134313101295129112741242124112231204108710838207145575493833753663342652602131821741694344MSmz7112MH化合物29eの合成NMP1mL中のアルケニルスタンナン28e50mg、0.067mmol及び17a28mg、0.08mmolの溶液に、0°Cで、チオフェンカルボン酸銅19.1mg、0.10mmolを加えた。反応を、0°Cで45分間、室温で20分間撹拌した。次に、粗混合物を中性アルミナのプラグで濾過し、EtOAc/エーテル50:50で洗浄し、合わせた濾液を0.5NHCl3×10mLで洗浄した。有機溶液を乾燥し、蒸発させて粗生成物を得て、それをカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc5:1~1:1により精製して、トリエン29e33mg、収率:50を油状物として得た。1HNMRδ77377067163061360459356355855353448547844142441637737236429027824524121921220119111610208700600413CNMRδ1685166116181454140713801353134913111258124912401224108710858197166095563763653523382992682612131831731694344化合物29fの合成NMP0.9mL中のアルケニルスタンナン28a60mg、0.083mmol及び17b29mg、0.09mmolの溶液に、0°Cで、チオフェンカルボン酸銅24mg、0.12mmolを加えた。反応を、0°Cで45分間、室温で20分間撹拌した。次に、粗混合物を中性アルミナのプラグで濾過し、EtOAc/エーテル50:50で洗浄し、合わせた濾液を0.5NHCl3×10mLで洗浄した。有機溶液を乾燥し、蒸発させて粗生成物を得て、それをカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc5:1~1:1により精製して、アミド29f27mg、収率:50を油状物として得た。1HNMRδ762725694684673623617606601566560555529488480434427419379372290281236230221213203185117103089008006化合物30aの合成THF6mL中の29a275mg、0.41mmolの溶液に、N2下及び室温で、THF0.82mL、0.82mmol中の1MTBAFを加えた。反応を室温で18時間撹拌し、次に、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、EtOAcで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc3:1~1:2により精製して、アルコール30a175mg;収率:76を白色の固体として得た。1HNMRδ900725686672668613568563558527485476442425417370369363348289275242236222211204182114103化合物30aの異性体21S-は、合成方法をラセミフラグメントDから出発して実施したときに得た。異性体21S-化合物30a及び21R-化合物30aの最終混合物を、半分取逆相HPLCSymmetryPrepC187μm、7.8×150mm、MeCNが50~60の勾配H2O:MeCNを30分、UV検出、流速2.5mL/分、保持時間21S-30a:15.4分、保持時間21R-30a:14.7分により分離し、21S-化合物30aを純粋な形態で得た。1HNMRδ86272822693686681675632617568558528493484432425417378367366289281243238228220208184116102化合物30bの合成THF7.5mL中の29b586mg、0.76mmolの溶液に、N2下及び室温で、THF1.53mL、2mmol中の1MTBAFを加えた。反応を室温で18時間撹拌し、次に、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、EtOAcで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc3:1~1:2により精製して、アルコール30b320mg、収率:80を白色の固体として得た。1HNMRδ89572568567365761256756156355854453552648643842441638137136429629228627924123722821418216111410213CRMNδ168716661618145414031375134413431277126012441237121110891084820721609557376350348332269265174169133化合物30cの合成THF4.8mL中の29c150mg、0.23mmolの溶液に、N2下及び室温で、THF0.45mL、0.45mmol中の1MTBAFを加えた。反応を室温で18時間撹拌し、次に、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、EtOAcで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc3:1~1:2により精製して、アルコール30c90mg、収率:73を白色の固体として得た。1HNMRδ91672668767967061456856355852748547643542441737036936334328927624223622121420318211309613CRMNδ169716711618145414051378134613421316124412391238120710851084820591557375364335310265213195187174168MSmz5490MH5711MNa化合物30dの合成THF0.32mL中の29d11mg、0.02mmolの溶液に、N2下及び室温で、THF0.03mL、0.03mmol中の1MTBAFを加えた。反応を室温で18時間撹拌し、次に、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、EtOAcで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc3:1~1:2により精製して、アルコール30d6mg、収率:65を白色の固体として得た。1HNMRδ85473472372068967262761756355352848447647546842541736636736531830628928124323821521020619218718411613CNMRδ168616661608145814081381136813461342129612901272124112401234120410831082820716557550384375364330265213174169MSmz5972MH化合物30eの合成THF1mL中の29e32mg、0.047mmolの溶液に、N2下及び室温で、THF0.094mL、0.094mmol中の1MTBAFを加えた。反応を室温で18時間撹拌し、次に、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、EtOAcで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc3:1~1:2により精製して、アルコール30e14mg、収率:55を白色の泡状物として得た。1HNMRδ89777167465761560359556555853548747844242541837236836532528727924524022321220418911510313CNMRδ16881665161681453140913821354134713201256812461239123610861084819717613557375365363349333269267213170167MSmz5633MH5852MNa化合物30fの合成THF1mL中の29f28mg、0.04mmolの溶液に、N2下及び室温で、THF0.09mL、0.09mmol中の1MTBAFを加えた。反応を室温で18時間撹拌し、次に、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、EtOAcで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc3:1~1:2により精製して、アルコール30f17mg;収率:75を白色の固体として得た。1HNMRδ90573570673656605563558530478450368348245242236222211204182114103化合物1の合成ジクロロメタン7.5mL中の30a300mg、0.53mmolの溶液に、0°Cで、トリクロロアセチルイソシアネートTCAI76μl、0.64mmolを加えた。反応を0°Cで30分間撹拌し、次に中性酸化アルミニウムを加えた。混合物を5~30分間撹拌し、次に酸化アルミニウムパッドに浸漬させた。生成物を、DCM/MeOH50:1の混合物を使用して洗浄した。濾液を真空下で蒸発させて、粗生成物を得て、それをカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc2:1~1:2により精製した。化合物10.26g、収率:81を白色の固体として得て、実施例2に報告されているものと同等の物理的特性及び分光特性1H、13CRMN及びMSを示した。化合物1の異性体21S-を、この2つの方法のいずれかにより得た:A.-異性体21R-及び21S-化合物30aの混合物から出発し、半分取逆相HPLCSymmetryPrepC187μm、7.8×150mm、MeOHが50~100の勾配H2O:MeOHを30分、UV検出、流速2.5mL/分、保持時間21S-1:19.2分、保持時間21R-1:19.8分による21S-化合物1の最終分離と同じ手順に従う。B.-化合物1について開示されたものと同じであるが、純粋な21S-化合物30aから出発する手順に従う。1HNMRδ86973069068668263461756656456255955652948147745044544242542036628928124423122421720618411610413CRMNδ1684166115721483145214021374134113401320124712421224120710811047818750608554372348325303267262210171166化合物4の合成ジクロロメタン1mL中の30b56mg、0.105mmolの溶液に、0°Cで、トリクロロアセチルイソシアネート15μL、0.126mmolを加えた。反応を0°Cで30分間撹拌し、次に中性酸化アルミニウムを加えた。混合物を5~30分間撹拌し、次に酸化アルミニウムパッドに浸漬させた。生成物を、DCM/MeOH50:1の混合物を使用して洗浄した。濾液を真空下で蒸発させて、粗生成物を得て、それをカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc3:1~1:2により精製した。化合物457.6mg、収率:96を白色の泡状物として得て、実施例3に報告されているものと同等の物理的特性及び分光特性1H、13CRMN及びMSを示した。化合物5の合成ジクロロメタン2mL中の30c115mg、0.21mmolの溶液に、0°Cで、トリクロロアセチルイソシアネート27μl、0.23mmolを加えた。反応を0°Cで30分間撹拌し、次に中性酸化アルミニウムを加えた。混合物を5~30分間撹拌し、次に酸化アルミニウムパッドに浸漬させた。生成物を、DCM/MeOH50:1の混合物を使用して洗浄した。濾液を真空下で蒸発させて、粗生成物を得て、それをカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc3:1~1:2により精製した。化合物571mg、収率:57を白色の泡状物として得て、実施例3に報告されているものと同等の物理的特性及び分光特性1H、13CRMN及びMSを示した。異性体の最終混合物15mgを、半分取逆相HPLCSymmetryPrepC187μm、7.8×150mm、MeOHが50~70の勾配H2O:MeOHを75分、UV検出、流速2.5mL/分、保持時間15R-7:18.15分、保持時間15S-7:19.62分により分離し、3.1mgの純粋な15R-化合物7及び2.9mgの純粋な15S-化合物7を得た。化合物5の異性体21S-は、5を半逆相HPLCSymmetryPrepC8、MeCNが45~50の勾配H2O:MeCNを30分、UV検出、流速4.7mL/分保持時間21-S-5:21.6分、保持時間21R-5:23.6分により精製したときに単離した。両方の異性体を含有する試料50mgから出発して、上記の分離の後、39mgの純粋な21R-化合物5及び6.1mgの純粋な21S-化合物5を得た。1HNMRδ874729694684622568563542481452441423366291249238235231224217205182115099096MSmz5923MH化合物31の合成ジクロロメタン0.7mL中の30d5mg、0.008mmolの溶液に、0°Cで、トリクロロアセチルイソシアネート1.1μl、0.009mmolを加えた。反応を0°Cで30分間撹拌し、次に中性酸化アルミニウムを加えた。混合物を5~30分間撹拌し、次に酸化アルミニウムパッドに浸漬させた。生成物を、DCM/MeOH50:1の混合物を使用して洗浄した。濾液を真空下で蒸発させて、粗生成物を得て、それをカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc3:1~1:2により精製した。化合物313.5mg、収率:66を白色の固体として得た。1HNMRδ84372971969167765161656956355955453151249148447647043141336632030928928124823522822320520119018111513CNMRδ16891665161915711454140613791364134413391321129712881272124612461227120710851056821748557546387372331305262212173164化合物8の合成ジクロロメタン1.7mL中の30e13mg、0.023mmolの溶液に、0°Cで、トリクロロアセチルイソシアネート3μl、0.025mmolを加えた。反応を0°Cで30分間撹拌し、次に中性酸化アルミニウムを加えた。混合物を5~30分間撹拌し、次に酸化アルミニウムパッドに浸漬させた。生成物を、DCM/MeOH50:1の混合物を使用して洗浄した。濾液を真空下で蒸発させて、粗生成物を得て、それをカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc3:1~1:2により精製した。化合物814.3mg、収率:100を白色の固体として得て、実施例4に報告されているものと同等の物理的特性及び分光特性1H、13CRMN及びMSを示した。実施例9スキーム6は、本発明の幾つかの化合物の合成プロセスを示す。中間体32の合成アルゴン雰囲気、-78°Cで撹拌した、無水THF59mL中の4-ホスホノクロトン酸トリエチル3.7g、14.66mmol及び18-クラウン-66.2g、23.46mmolの溶液に、KHMDS28.1ml、14.07mmolを滴加した。15分後、アルデヒド122.35g、5.86mmolを滴加し、室温で20時間撹拌した。次に、反応を飽和NH4Cl溶液200mLで停止させ、EtOAcで希釈した。有機相を乾燥しNa2SO4、減圧下で蒸発させた。カラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc20:1~10:1による精製によって、2.7g収率:93のトリエン32を得た。1HRMNδ731653621584561417372363261178167126094087001中間体33の合成EtOH38mL中の323.75g、7.54mmolの溶液に、pトルエンスルホン酸ピリジニウム663mg、2.64mmolを加えた。反応混合物を室温で17時間撹拌した。次に、溶媒を減圧下で除去し、得られた油状物をカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc4:1~1:1により精製して、2.11g収率:73のアルコール33を得た。1HRMNδ731652623586552418372273182168128098088008中間体34の合成アルコール33130mg、0.34mmolをDCM3.4mL中、不活性雰囲気下、室温で撹拌し、ペルヨージナンDMP288.5mg、0.68mmolを一度に加えた。反応を、完了するまでTLC、約1時間撹拌し、次に、NaHCO3飽和溶液で停止させ、DCMで抽出し、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。生成物を、EtOAc/ヘキサン1:4を用いて溶離するカラムクロマトグラフィーにより精製して、約125mg収率:96のアルデヒド34を無色の油状物として得た。1HRMNδ979731652625587548419403269254180129101088006中間体35の合成アルゴン雰囲気、-78°Cで撹拌した、無水THF10mL中のホスホネート170mg、0.67mmol及び18-クラウン-6357mg、1.35mmolの溶液に、KHMDS1.34ml、0.67mmolを滴加した。15分後、無水THF8.5mL中のアルデヒド34170mg、0.45mmolの溶液を30分間かけて滴加し、-78°Cで90分間撹拌した。次に、反応を飽和NH4Cl溶液で停止させ、室温に温め、ジクロロメタンで希釈した。有機相を乾燥しNa2SO4、減圧下で蒸発させた。カラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc20:1~10:2による精製によって、170mg収率:82のE-35を得た。1HRMNδ729650619583548533417371361358273257171125097088003中間体36の合成LiOH15.8mg、0.66mmolを、20水/ジオキサン7mL中のエステル35140mg、0.30mmolの溶液に加え、混合物を60°Cで4時間撹拌した。混合物を冷却し、DCMで希釈し、HCl0.5N、10mLで洗浄した。水相をDCMで繰り返し抽出し、合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、蒸発させて、粗二酸を得て、それを更に精製することなく次の工程に使用した。濃HCl43μLを、MeOH5.2mL中の粗物質の溶液に加え、得られた混合物を室温で1時間撹拌した。次に、溶媒を減圧下で除去し、得られた油状物をカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc1:4からEtOAc/MeOH5:1により精製して、72mg収率:70の酸36を無色の油状物として得た。1HRMNδ740657631589560552422364290238184115化合物37の合成DCM/DMF10:1、1.3mL中のアミン27a37.6mg、0.093mmolの溶液に、無水DCM中の酸3630mg、0.103mmolの溶液を、アルゴン雰囲気下で加え、次に0°Cに冷却した。DIPEA26μL、0.14mmol、HOAt12.7mg、0.093mmol及びHATU35.4mg、0.093mmolを溶液に加え、30分後、冷浴を取り外した。反応混合物を室温で3時間撹拌し、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、水に注ぎ、DCMで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc2:1~1:4により精製して、アミド3734.7mg、収率:55を油状物として得た。1HNMRδ7887266726506316225945615545444874794454244163773443642962281239235216215201182114102087006005化合物38の合成THF0.6mL中の3728mg、0.04mmolの溶液に、N2下及び室温で、THF83μL、0.08mmol中の1MTBAFを加えた。反応を室温で18時間撹拌し、次に、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、EtOAcで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc3:1~1:2により精製して、アルコール3822mg、収率:96を白色の固体として得た。1HNMRδ9067246766746506255995655605454874814454244163743643643223172952282240235223216205181113103化合物3の合成ジクロロメタン0.35ml中の化合物3820mg、0.04mmolの溶液に、0°Cで、トリクロロアセチルイソシアネート5.1μL、0.04mmolを加えた。反応を0°Cで30分間撹拌し、次に中性酸化アルミニウムを加えた。混合物を5~30分間撹拌し、次に酸化アルミニウムパッドに浸漬させた。生成物を、DCM/MeOH50:1の混合物を使用して洗浄した。濾液を真空下で蒸発させて、粗生成物を得て、それをカラムクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc1:1~1:3により精製した。化合物313.6mg、収率:63を白色の泡状物として得て、実施例3に報告されているものと同等の物理的特性及び分光特性1H、13CRMN及びMSを示した。実施例10スキーム7は化合物7の合成プロセスを示す。中間体40の合成MeOH中のBoc-tert-LeuCONH239ポズネフPozdnevV.F.、テトラヘドロンレターズTetrahedronLetters1995年、36、7115~7118に記載された手順に従って調製1.9g、8.26mmolの溶液に、MeOH中1.25MのHClの溶液66mLを加えた。反応混合物を室温で2時間撹拌し、次に減圧下で濃縮した。次に固体をMeOHに懸濁し、濃水酸化アンモニウムで中和した。溶媒をロータリー蒸発で除去し、粗物質をジクロロメタンに溶解した。溶液をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して、730mg収率:68の中間体40を白色の固体として得た。1HNMRδ665655565555318165155105中間体41の合成DCM/DMF10:1、7.7mL中のアミン40100mg、0.77mmolの溶液に、無水DCM中のZ-3-トリブチルスタンニルプロペン酸306mg、0.85mmolの溶液を、アルゴン雰囲気下で加え、次に0°Cに冷却した。DIPEA0.27mL、1.54mmol、HOAt115.6mg、0.85mmol及びHATU323mg、0.85mmolを溶液に加え、30分後、冷浴を取り外した。反応混合物を室温で2時間撹拌し、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、水に注ぎ、DCMで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc10:1~1:1により精製して、アミド41228mg、収率:63を白色の泡状物として得た。1HNMRδ69967764763861244614814013111910008908313CNMRδ1734166615341366600350296276268140117化合物7の合成NMP5mL中のアルケニルスタンナン41227.6mg、0.48mmol及び17a200.9mg、0.58mmolの溶液に、0°Cで、チオフェンカルボン酸銅19.1mg、0.10mmolを加えた。反応を、0°Cで45分間、室温で20分間撹拌した。次に、粗混合物を中性アルミナのプラグで濾過し、EtOAc/エーテル50:50で洗浄し、合わせた濾液を0.1のHClで洗浄した。有機溶液を乾燥し、蒸発させて粗生成物を得て、それをカラムクロマトグラフィージクロロメタン/MeOH100:1~10:1により精製して、化合物765.7mg、収率:34を白色の泡状物として得た。この合成生成物は、実施例3に報告されているものと同等の物理的特性及び分光特性1H、13CRMN及びMSを示した。化合物7の異性体15R-は、アミノ酸Boc-tert-LeuCONH2のラセミ混合物を使用してこれらの反応を実施したときに得た。異性体の最終混合物15mgを、半分取逆相HPLCSymmetryPrepC187μm、7.8×150mm、MeOHが50~70の勾配H2O:MeOHを75分、UV検出、流速2.5mL/分、保持時間15R-7:18.15分、保持時間15S-7:19.62分により分離し、3.1mgの純粋な15R-化合物7及び2.9mgの純粋な15S-化合物7を得た。1HNMRδ72369461859158858653443342836429228824724418511710213CNMRδ17531686164014601408138213541354125512191111835618559384350272271173168実施例11スキーム8は、化合物42及び43を得る方法を示す。化合物42の合成ピリジン0.45mL中のアルコール30a5mg、8.8μmolの溶液に、フェニルイソシアネート29mL、0.27mmolを加えた。反応を室温で20時間撹拌し、次に、NH4Clの飽和水溶液で停止させ、EtOAcで抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーヘキサン/EtOAc20:1~1:1により精製して、化合物422.7mg、収率:44を白色の固体として得た。1HNMRδ881877746743734723711706688677639610567557527485478462456454425417366287280241238221213208182116107化合物43の合成アルコール30a5mg、8.88μmolをDCM0.1mL中、不活性雰囲気下、室温で撹拌し、ペルヨージナン7.5mg、0.018mmolを一度に加えた。反応を、完了するまでTLC、約1時間撹拌し、次に、NaHCO3飽和溶液で停止させ、DCMで抽出し、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。生成物を、EtOAc/ヘキサン1:1を用いて溶離するカラムクロマトグラフィーにより精製して、約4.5mg収率:90のケトン43を無色の油状物として得た。1HNMRδ832731723691684626618578573568564561530527494486441425417366318289275244238204184116105実施例12:抗腫瘍活性の検出のためのバイオアッセイこのアッセイの目的は、試験する試料のインビトロでの細胞増殖抑制性腫瘍細胞増殖を遅延又は阻止する能力又は細胞毒性腫瘍細胞を死滅させる能力の活性を評価することである。細胞株SBR比色アッセイを使用する細胞毒性活性の評価スルホローダミンBSRB反応を使用する比色型のアッセイは、細胞増殖及び生存度の定量的測定のために採用されてきたスケハンSkehanPら、国立癌研究所ジャーナルJNatlCancerInst1990年、82、1107~1112に記載されている教示に従う。この形態のアッセイは、SBS標準96ウエル細胞培養マイクロプレートを用いるフェアクロスFairclothら、細胞科学における方法Methodsincellscience、1988年、114、201~205;モスマンMosmannら、免疫学方法ジャーナルJournalofImmunologicalMethods1983年、651~2、55~63。異なる型のヒト癌に由来する、この研究に使用した全ての細胞株は、アメリカンタイプカルチャーコレクションATCCから得た。細胞を、10ウシ胎児血清FBS、2mMのL-グルタミン、100UmLのペニシリン及び100UmLのストレプトマイシンを補充したダルベッコー修飾イーグル培地DMEMに、37°C、5CO2及び98湿度で維持した。実験のために、細胞を、トリプシン処理を使用してサブコンフルエント培養から採取し、カウント及び平板培養する前に、新たな培地に再懸濁した。細胞を、150μLのアリコートにより1ウエルあたり5×103細胞で95ウエルマイクロタイタープレートに接種し、薬剤無含有培地において、18時間かけてプレート表面に結合させた。それぞれの細胞株に1つの対照未処理プレートを固定し下記に記載するように、0時間基準値として使用した。その後、試験試料を、50μLのアリコートにより、10~0.00262μgmLの範囲で10個の段階希釈で培養に加えた。48時間の暴露後、抗腫瘍効果をSRB法により推定した:簡潔には、細胞をPBSで2回洗浄し、1グルタルアルデヒド溶液で15分間固定し、PBSで2回すすぎ、0.4SRB溶液により室温で30分間染色した。次に細胞を1酢酸溶液で数回すすぎ、風乾した。次にSRBを10mMトリズマ塩基溶液で抽出し、自動分光光度プレート読取機により490nmで吸光度を測定した。細胞生存は、対照細胞増殖の百分率として表した。試験した試料の最終効果は、NCIアルゴリズムボイドBoydMR及びポールPaullKD、薬剤開発研究DrugDevRes1995年、34,91~104を適用することにより評価した。三重培養の平均±SDを使用して、用量反応曲線を非線形回帰分析を使用して自動的に生成した。3つの基準パラメーターを自動補間法により計算したNCIアルゴリズム:GI50=50の増殖阻害を生じる濃度;TGI=総増殖阻害細胞増殖抑制効果及びLC50=50の純細胞死滅細胞毒性効果を生じる濃度。抗有糸分裂アッセイプロトコール細胞培養の有糸分裂率有糸分裂が阻止された細胞の百分率を、特異的有糸分裂マーカーを定量的に検出する特異的96ウエルマイクロプレート免疫アッセイを使用して評価した。HeLa細胞h-子宮頸癌、ATCC番号CCL-2を、試験する試料の存在下又は不在下で18時間インキュベートした。その後、細胞をPBSで洗浄し、75μLの新たに調製した溶解緩衝剤1mMのEGTApH7.5、0.5mMのPMSF及び1mMのNaVO3中の氷により30分間溶解した。細胞抽出物のアリコート60μLを、高結合表面ELISAプレートに移し、speedvacにより室温で2時間乾燥した。次にプレートを、100μLのPBS-1BSAにより30°Cで30分間ブロックし、抗MPM2一次マウスモノクローナル抗体アップステートバイオテクノロジーUpstateBiotechnology、カタログ番号05-368により4°Cで18時間及び適切なペルオキシダーゼ結合二次抗体により30°Cで1時間連続的にインキュベートした。0.02のツイーン20による集中的な洗浄の後、ペルオキシダーゼ反応を、30μLのTMB3,3′,5,5′-テトラメチル-ベンジジンを使用して30°Cで30分間実施した。反応を、30μLの4H2SO4溶液を加えることにより停止させた。アッセイを、マイクロプレート分光光度計により450nmでO.D.を測定することにより定量化した。結果を、未処理培養の対照と比較して、処理細胞培養において50の有糸分裂阻止を生じた試料濃度をIC50として表した。表9及び10は、本発明の化合物の生物学的活性についてのデータを例示する。"