"治療有効量の1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を産生するように遺伝子操作されたARPE-19細胞を含む細胞株であって、該1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子が反復トランスフェクションプロセスによって該ARPE-19細胞に導入され、該反復トランスフェクションが、1回のトランスフェクション、2回のトランスフェクション、または3回のトランスフェクションを含む細胞株。前記反復トランスフェクションが1回のトランスフェクションである場合に、前記細胞株が、細胞106個当たり1日当たり10,000~30,000ngの前記1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を産生する、請求項1に記載の細胞株。前記細胞株が、細胞106個当たり1日当たり約15,000ngの前記1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を産生する、請求項2に記載の細胞株。前記反復トランスフェクションが2回のトランスフェクションである場合に、前記細胞株が、細胞106個当たり1日当たり30,000~50,000ngの前記1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を産生する、請求項1に記載の細胞株。前記細胞株が、細胞106個当たり1日当たり約35,000ngの前記1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を産生する、請求項4に記載の細胞株。前記反復トランスフェクションが3回のトランスフェクションである場合に、前記細胞株が、細胞106個当たり1日当たり50,000~75,000ngの前記1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を産生する、請求項1に記載の細胞株。前記細胞株が、細胞106個当たり1日当たり約70,000ngの前記1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を産生する、請求項6に記載の細胞株。前記ARPE-19細胞が、配列番号1の核酸配列によりコードされる可溶性VEGF受容体を含むベクターを用いて遺伝子操作されている、請求項1に記載の細胞株。前記ARPE-19細胞が、配列番号2のアミノ酸配列を含む可溶性VEGF受容体を含むベクターを用いて遺伝子操作されている、請求項1に記載の細胞株。治療有効量の1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を産生するように遺伝子操作されたARPE-19細胞を含む細胞株であって、該治療有効量が細胞106個当たり1日当たり少なくとも10,000ngである細胞株。a.請求項1に記載の細胞株または請求項10に記載の細胞株を含むコアと、b.該1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子が通って拡散するのを許容する、該細胞株または細胞の周囲の半透性膜とを含む埋め込み型細胞培養デバイス。前記コアが0.5~1.0×106個のARPE-19細胞を含有する、請求項11に記載のデバイス。前記コアが、前記半透性膜の内部に配置されたマトリックスをさらに含む、請求項11に記載のデバイス。前記マトリックスが複数のモノフィラメントを含み、該モノフィラメントが、a.撚り合わせて糸にされているか、もしくは織って網目にされているか、またはb.撚り合わせて不織撚糸状の糸にされており、ここで、前記細胞がその上に分布している、請求項13に記載のデバイス。前記モノフィラメントが、アクリル、ポリエステル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリアセトニトリル、ポリエチレンテレフタラート、ナイロン、ポリアミド、ポリウレタン、ポリブテステル、絹、綿、キチン、炭素、および生体適合性金属からなる群から選択される生体適合性材料を含む、請求項14に記載のデバイス。前記モノフィラメントが、前記デバイスの内容積の40~85を占めるポリエチレンテレフタラートPET繊維を含む、請求項15に記載のデバイス。つなぎアンカーをさらに含む、請求項11に記載のデバイス。前記つなぎアンカーがアンカーループを含む、請求項17に記載のデバイス。前記アンカーループが、前記デバイスを眼構造につなぎ止めるように適合させている、請求項18に記載のデバイス。眼または脾臓、耳、心臓、結腸、肝臓、腎臓、乳房、関節、骨髄、皮下、および腹膜腔からなる群から選択される別の標的領域に埋め込まれる、請求項11に記載のデバイス。硝子体、房水、テノン嚢下腔、眼周囲腔、後眼房、または前眼房に埋め込まれる、請求項20に記載のデバイス。前記半透性膜が、選択透過性免疫保護性膜を含む、請求項11に記載のデバイス。前記半透性膜が、限外濾過膜または精密濾過膜を含む、請求項11に記載のデバイス。前記半透性膜の細孔サイズの中央値が100nmである、請求項22または23に記載のデバイス。前記半透性膜が無孔膜材料を含む、請求項11に記載のデバイス。前記無孔膜材料がヒドロゲルまたはポリウレタンである、請求項25に記載のデバイス。前記半透性膜の公称分画分子量MWCOが500kDである、請求項11に記載のデバイス。前記半透性膜の厚さが90~120μmである、請求項11に記載のデバイス。カプセルが中空繊維または平らなシートとして構成されている、請求項11に記載のデバイス。長さが4mm~11mmである、請求項11に記載のデバイス。内径が0.9mm~1.2mmである、請求項11に記載のデバイス。メタクリル酸メチルを使用して端部が密閉されている、請求項11に記載のデバイス。少なくとも1種の追加的な生物活性分子を前記デバイスから共送達する、請求項11に記載のデバイス。前記少なくとも1種の追加的な生物活性分子が非細胞性供給源由来である、請求項11に記載のデバイス。前記少なくとも1種の追加的な生物活性分子が細胞性供給源由来である、請求項11に記載のデバイス。前記少なくとも1種の追加的な生物活性分子が、前記コア内の1またはそれより多くの遺伝子操作されたARPE-19細胞によって産生される、請求項35に記載のデバイス。a.前記コアが、0.5~1.0×106個のARPE-19細胞を含むこと;b.前記デバイスの長さが4mm~11mmであること;c.前記デバイスの内径が0.9mm~1.2mmであること;d.前記デバイスの端部がメタクリル酸メチルを使用して密閉されていること;e.前記半透性膜の細孔サイズの中央値が約100nmであること;f.前記半透性膜の公称分画分子量MWCOが500kDであること;g.前記半透性膜の厚さが90~120μmであること;h.前記コアが内部足場を含み、該足場が、前記デバイスの内容積の40~85を占めるポリエチレンテレフタラートPET繊維を含むこと;およびi.それらの組み合わせからなる群から選択される1またはそれより多くの追加的な特性をさらに含む、請求項11に記載のデバイス。前記追加的な特性のうちの2つ、3つ、4つ、5つ、6つ、7つ、または全てを含む、請求項37に記載のデバイス。前記1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を、被験体の眼に適切な治療用量で送達するための、請求項11に記載のデバイスの使用であって、前記治療用量が眼当たり1日当たり少なくとも100ngである使用。眼科障害を治療するための方法であって、請求項11に記載の埋め込み型細胞培養デバイスを患者の眼に埋め込むステップと、前記1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を該デバイスから眼内に拡散させ、VEGF、PDGF、またはVEGFとPDGFの両方に結合させ、それにより、前記眼科障害を治療するステップとを含む方法。前記眼科障害が、未熟児網膜症、糖尿病黄斑浮腫、糖尿病性網膜症、加齢黄斑変性症、緑内障、網膜色素変性症、白内障の形成、網膜芽細胞腫および網膜虚血からなる群から選択される、請求項40に記載の方法。加齢黄斑変性症が滲出型加齢黄斑変性症である、請求項41に記載の方法。前記眼科障害が糖尿病性網膜症である、請求項40に記載の方法。1日当たり患者当たり眼当たり0.1pg~1000μgの前記抗血管新生抗体足場または前記抗血管新生分子が眼内に拡散し、前記抗血管新生分子が可溶性VEGF受容体または可溶性PDGF受容体である、請求項40に記載の方法。内皮細胞の増殖または血管化を阻害するための方法であって、請求項11に記載の埋め込み型細胞培養デバイスを、細胞増殖障害に罹患している患者に埋め込むステップと、前記抗血管新生抗体足場または前記抗血管新生分子を該デバイスから拡散させ、VEGF、PDGF、またはVEGFとPDGFの両方に結合させるステップとを含み、該結合により、該患者における内皮細胞の増殖または血管化が阻害される方法。前記障害が、血液障害、アテローム性動脈硬化症、炎症、血管透過性の亢進および悪性腫瘍からなる群から選択される、請求項45に記載の方法。1日当たり患者当たりの治療有効量の前記抗血管新生抗体足場または前記抗血管新生分子が前記デバイスから拡散する、請求項45に記載の方法。抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子をレシピエント宿主に送達する方法であって、請求項11に記載の埋め込み型細胞培養デバイスを該レシピエント宿主の標的領域に埋め込むステップを含み、カプセル封入された1またはそれより多くのARPE-19細胞が、該標的領域において該抗血管新生抗体足場または該抗血管新生分子を分泌する方法。前記標的領域が、脳、脳室、脊髄を含めた中枢神経系、眼の房水および硝子体液、脾臓、耳、心臓、結腸、肝臓、腎臓、乳房、関節、骨髄、皮下、ならびに腹膜腔からなる群から選択される、請求項48に記載の方法。前記抗血管新生抗体足場または前記抗血管新生分子が1日当たり患者当たりの治療有効量で前記標的領域内に拡散する、請求項48に記載の方法。請求項11に記載の埋め込み型細胞培養デバイスを作製するための方法であって、a.少なくとも1つのARPE-19細胞を、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を分泌するように遺伝子操作するステップと、b.前記遺伝子改変されたARPE-19細胞を半透性膜の中にカプセル封入するステップであって、該半透性膜が、該1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子が該半透性膜を通って拡散するのを許容する、ステップとを含む方法。前記1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子が、配列番号1、配列番号3、配列番号5、配列番号7、配列番号9、配列番号11、配列番号13、配列番号15、配列番号17、配列番号19、配列番号21、配列番号23、配列番号25、配列番号27、配列番号29、および配列番号31からなる群から選択される核酸配列によりコードされる、請求項51に記載の方法。したがって、例えば、神経栄養因子、抗血管新生因子、抗炎症因子、酵素、ホルモン、または他の因子などの必要物質を適切な分量で送達する方法、または他の必要な代謝機能を眼または体の他の部分に長期間もたらす方法が必要である。本明細書では、抗体足場、可溶性血管内皮増殖因子VEGF受容体、および/または血小板由来増殖因子PDGF受容体を含めた抗血管新生タンパク質をコードする単離された核酸であって、配列番号1、配列番号3、配列番号5、配列番号7、配列番号9、配列番号11、配列番号13、配列番号15、配列番号17、配列番号19、配列番号21、配列番号23、配列番号25、配列番号27、配列番号29、および配列番号31からなる群から選択される配列を含む、またはそれからなる核酸が提供される。本発明は、配列番号2、配列番号4、配列番号6、配列番号8、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16、配列番号18、配列番号20、配列番号22、配列番号24、配列番号26、配列番号28、配列番号28、配列番号30、および配列番号32からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、またはそれからなるポリペプチドをコードする核酸分子も提供する。配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、または32のいずれかと少なくとも95同一である配列を有するポリペプチドをコードする核酸分子も提供される。あるいは、核酸分子は、そのような核酸分子の相補物であってよい。本明細書で使用される場合、核酸分子という用語は、DNA分子例えば、cDNAまたはゲノムDNA、RNA分子例えば、mRNA、ヌクレオチド類似体を用いて生成したDNAまたはRNAの類似体、ならびにその誘導体、断片およびホモログを含むものとする。核酸分子は一本鎖または二本鎖であってよいが、二本鎖DNAであることが好ましい。本明細書で使用される場合、単離された核酸分子とは、その核酸の供給源に存在する他の核酸分子から分離された核酸分子である。単離された核酸は、その核酸が由来する生物体のゲノムDNAにおいてその核酸に隣接する配列すなわち、その核酸の5’末端および3’末端に位置する配列を含まないことが好ましい。例えば、種々の実施形態では、本発明の核酸分子は、その核酸が由来する細胞のゲノムDNAにおいてその核酸分子に隣接する約5kb未満、4kb未満、3kb未満、2kb未満、1kb未満、0.5kb未満、または0.1kb未満のヌクレオチド配列を含有してよい。さらに、cDNA分子などの単離された核酸分子は、組換え技法によって作出される場合は他の細胞性材料もしくは培地を、または化学的に合成された場合は化学的前駆体もしくは他の化学物質を実質的に含まなくてよい。例えば、単離された核酸は、もともとはファージディスプレイスクリーニングによってもたらされた完全な合成分子であってよいことが当業者には理解されよう。したがって、この場合、単離された核酸は、他の細胞性材料、培地、化学的前駆体、化学物質などを実質的に含まない合成分子であってよい。本発明の核酸分子例えば、配列番号2、配列番号4、配列番号6、配列番号8、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16、配列番号18、配列番号20、配列番号22、配列番号24、配列番号26、配列番号28、配列番号30、および配列番号32からなる群から選択される配列を有するポリペプチドまたはこれらのヌクレオチド配列のいずれかの相補物をコードする、配列番号1、配列番号3、配列番号5、配列番号7、配列番号9、配列番号11、配列番号13、配列番号15、配列番号17、配列番号19、配列番号21、配列番号23、配列番号25、配列番号27、配列番号29、および配列番号31からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有する核酸分子は、標準の分子生物学技法および本明細書において提供される配列情報を用いて作製することができる。これらの核酸配列の全部または一部を用いて、ハイブリダイゼーションプローブ、または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体分子を、標準のハイブリダイゼーションおよびクローニング技法を用いて単離することができる例えば、Sambrookら編、MolecularCloning:ALaboratoryManual第2版、ColdSpringHarborLaboratoryPress、ColdSpringHarbor、NY、1989年;およびAusubelら編、CurrentProtocolsinMolecularBiology、JohnWileySons、NewYork、NY、1993年に記載の通り。本発明の核酸はいずれも、cDNA、mRNA、あるいは、鋳型としてゲノムDNA、および適切なオリゴヌクレオチドプライマーを使用して、標準のPCR増幅および組み立て技法に従って増幅することができる。そのように増幅された核酸は、適切なベクターにクローニングし、DNA配列解析によって特徴付けることができる。さらに、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRもしくはPDGFRのヌクレオチド配列に対応するオリゴヌクレオチドは、標準の合成技法によって、例えば、自動DNA合成機を使用して調製することができる。本明細書で使用される場合、オリゴヌクレオチドという用語は、一連の連結したヌクレオチド残基を指し、オリゴヌクレオチドは、PCR反応において使用するために十分な数のヌクレオチド塩基を有する。短いオリゴヌクレオチド配列は、ゲノム配列またはcDNA配列に基づいてよい、またはそれから設計することができ、特定の細胞または組織における同一の、同様のまたは相補的なDNAまたはRNAを増幅するため、確認するため、またはその存在を示すために使用される。オリゴヌクレオチドは、長さが約10nt、50nt、または100nt、好ましくは長さが約15nt~30ntである核酸配列の部分を含む。一実施形態では、長さが100nt未満の核酸分子を含むオリゴヌクレオチドは、配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、または31の少なくとも6つの連続したヌクレオチド、またはその相補物をさらに含む。オリゴヌクレオチドは化学的に合成することができ、プローブとして使用することができる。他の実施形態では、本発明の単離された核酸分子は、配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、または31に示されているヌクレオチド配列の相補物である核酸分子を含む。これらのヌクレオチド配列と相補的な核酸分子は、ミスマッチをほとんどまたは全く伴わずに水素結合し、それにより、安定な二重鎖を形成することができる、ヌクレオチド配列と十分に相補的な核酸分子である。本明細書で使用される場合、相補的なという用語は、核酸分子のヌクレオチド単位間のワトソン-クリック塩基対合またはフーグスティーン塩基対合を指し、結合という用語は、2つのポリペプチドもしくは化合物または関連するポリペプチドもしくは化合物またはそれらの組み合わせの間の物理的または化学的な相互作用を意味する。結合としては、イオン性相互作用、非イオン性相互作用、ファンデルワールス相互作用、疎水性相互作用などが挙げられる。物理的な相互作用は、直接的であっても間接的であってもよい。間接的な相互作用は、別のポリペプチドまたは化合物の作用を通じたもの、またはそれに起因するものであってよい。直接的な結合とは、別のポリペプチドまたは化合物の作用を通じて、またはそれに起因して起こらないが、その代わりに、他の実質的な化学的中間体を伴わない相互作用を指す。さらに、本発明の核酸分子は、配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、2、29、または31の核酸配列の一部、例えば、プローブもしくはプライマーとして使用することができる断片、または本発明の抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体のいずれかの生物活性のある部分をコードする断片を含んでよい。本明細書で提供される断片は、少なくとも6つの連続した核酸または少なくとも4つの連続したアミノ酸の配列と定義され、この長さはそれぞれ、核酸の場合では特異的なハイブリダイゼーションを可能にするために、またはアミノ酸の場合ではエピトープの特異的な認識を可能にするために十分な長さであり、長くても全長配列よりも短い一部分である。断片は、選択された核酸またはアミノ酸配列の任意の連続した部分から得ることができる。誘導体とは、ネイティブな化合物から、直接、または修飾もしくは部分的な置換によって形成された核酸配列またはアミノ酸配列である。類似体とは、ネイティブな化合物と同様であるが同一ではない構造を有するが、特定の成分または側鎖に関してネイティブな化合物とは異なる核酸配列またはアミノ酸配列である。類似体は、合成であってよい、または進化的起源が異なってよく、野生型と比較して同様または逆の代謝活性を有し得る。ホモログとは、異なる種に由来する特定の遺伝子の核酸配列またはアミノ酸配列である。誘導体および類似体は、誘導体または類似体が、修飾された核酸またはアミノ酸を含有する場合、全長または全長以外であり得る。本発明の核酸またはタンパク質の誘導体または類似体としては、これらに限定されないが、本発明の核酸またはタンパク質と、種々の実施形態では、同一サイズの核酸またはアミノ酸配列に対して、またはアラインメントされた配列と比較して少なくとも約30、50、70、80、または95の同一性好ましい同一性は50~95であるにより、実質的に相同な領域を含む分子が挙げられ、アラインメントは、当技術分野で公知のコンピュータ相同性プログラムによって行う、またはそれをコードする核酸は、ストリンジェントな条件下、中程度にストリンジェントな条件下、または低ストリンジェントな条件下で、上述のタンパク質をコードする配列の相補物とハイブリダイズすることができる。例えば、Ausubelら、CurrentProtocolsinMolecularBiology、JohnWileySons、NewYork、NY、1993年、および下記を参照されたい。本発明は、配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、または31に示されているヌクレオチド配列とは遺伝暗号の縮退により異なり、したがって、配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、または31に示されているヌクレオチド配列によりコードされるものと同じ抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRもしくはPDGFRタンパク質をコードする核酸分子をさらに包含する。別の実施形態では、本発明の単離された核酸分子は、長さが少なくとも6ヌクレオチドであり、ストリンジェントな条件下で配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、または31のヌクレオチド配列を含む核酸分子とハイブリダイズする。別の実施形態では、核酸は、長さが少なくとも10ヌクレオチド、25ヌクレオチド、50ヌクレオチド、100ヌクレオチド、250ヌクレオチド、500ヌクレオチド、1000ヌクレオチド、1500ヌクレオチド、2000ヌクレオチド、またはそれ以上である。別の実施形態では、本発明の単離された核酸分子は、コード領域、例えば、配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、または31とハイブリダイズする。本明細書で使用される場合、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするという用語は、一般には互いと少なくとも60相同なヌクレオチド配列が互いにハイブリダイズしたままである、ハイブリダイゼーションおよび洗浄の条件を説明するものとする。さらに、本明細書で使用される場合、ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件という句は、プローブ、プライマーまたはオリゴヌクレオチドがその標的配列とはハイブリダイズするが、他の配列とはハイブリダイズしない条件を指す。ストリンジェントな条件は、配列依存性であり、異なる状況では異なる。長い配列は短い配列よりも高い温度で特異的にハイブリダイズする。一般に、ストリンジェントな条件は、定義済みのイオン強度およびpHにおける特異的な配列の熱的融点Tmよりも約5°C低くなるように選択される。Tmは、平衡状態で、標的配列と相補的なプローブの50が標的配列とハイブリダイズする温度定義済みのイオン強度、pHおよび核酸濃度の下でである。一般に標的配列が過剰に存在するので、Tmでは、平衡状態でプローブの50が占有される。一般には、ストリンジェントな条件とは、pH7.0~8.3で塩濃度が約1.0M未満のナトリウムイオン、一般には、約0.01~1.0Mのナトリウムイオンまたは他の塩であり、温度が、短いプローブ、プライマーまたはオリゴヌクレオチド例えば、10nt~50ntに対しては少なくとも約30°Cであり、長いプローブ、プライマーおよびオリゴヌクレオチドに対しては少なくとも約60°Cである条件である。ストリンジェントな条件は、ホルムアミドなどの不安定化剤を添加することによって実現することもできる。ストリンジェントな条件は、当業者に公知であり、Ausubelら編、CurrentProtocolsinMolecularBiology、JohnWileySons、N.Y.1989年、6.3.1~6.3.6に見いだすことができる。条件は、互いと少なくとも約65、70、75、85、90、95、98、または99相同な配列が一般に互いにハイブリダイズしたままであるような条件であることが好ましい。ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件の非限定的な例は、6×SSC、50mMのトリス-HClpH7.5、1mMのEDTA、0.02PVP、0.02Ficoll、0.02BSA、および500mg/mlの変性サケ精子DNAを含む高塩濃度の緩衝液中、65°Cでハイブリズさせた後、0.2×SSC、0.01BSA中、50°Cで1回または複数回洗浄するものである。中程度のストリンジェンシーハイブリダイゼーション条件の非限定的な例は、6×SSC、5×デンハート液、0.5SDSおよび100mg/mlの変性サケ精子DNA中、55°Cでハイブリダイズさせ、その後1×SSC、0.1SDS中、37°Cで1回または複数回洗浄するものである。用いることができる他の中程度のストリンジェンシー条件は、当技術分野で周知である。例えば、Ausubelら編、1993年、CurrentProtocolsinMolecularBiology、JohnWileySons、NY、およびKriegler、1990年、GeneTransferandExpression、ALaboratoryManual、StocktonPress、NYを参照されたい。低ストリンジェンシーハイブリダイゼーション条件の非限定的な例は、35ホルムアミド、5×SSC、50mMのトリス-HClpH7.5、5mMのEDTA、0.02PVP、0.02Ficoll、0.2BSA、100mg/mlの変性サケ精子DNA、10wt/volデキストラン硫酸中、40°Cでハイブリダイズさせ、その後、2×SSC、25mMのトリス-HClpH7.4、5mMのEDTA、および0.1SDS中、50°Cで1回または複数回洗浄するものである。用いることができる他の低ストリンジェンシー条件は当技術分野で周知である例えば、異種間ハイブリダイゼーションのために用いられる。例えば、Ausubelら編、1993年、CurrentProtocolsinMolecularBiology、JohnWileySons、NY、およびKriegler、1990年、GeneTransferandExpression、ALaboratoryManual、StocktonPress、NY;ShiloおよびWeinberg、1981年、ProcNatlAcadSciUSA78巻:6789~6792頁を参照されたい。本明細書に記載の核酸分子のいずれかによりコードされるポリペプチドも提供される。例えば、これらのポリペプチドは、抗血管新生抗体足場および/または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体であってよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗血管新生抗体足場および/または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体は、VEGFに結合する例えば、優先的に。これらの抗血管新生抗体足場および/または可溶性VEGF受容体とVEGFの結合により、またはPDGF受容体とPDGFの結合と併せて、内皮細胞の増殖および血管透過性が阻害される。本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、または32のアミノ酸配列を有するポリペプチドと少なくとも80同一である、単離されたポリペプチドにも関する。あるいは、単離されたポリペプチドは、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、または32のアミノ酸配列を有するポリペプチドの断片すなわち、少なくとも6つの連続したアミノ酸と少なくとも80相同である。さらに、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、または32のアミノ酸配列を有するポリペプチドの誘導体、類似体、またはホモログと少なくとも80相同である、単離されたポリペプチドも包含する。同様に、本発明は、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、2022、24、26、28、30、または32のアミノ酸配列を有するポリペプチドの対立遺伝子変異体と少なくとも80同一である、単離されたポリペプチドも提供する。そのようなポリペプチドは、配列番号1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、または31の核酸分子とストリンジェントな条件下でハイブリダイズすることができる核酸分子によりコードされるべきであることが当業者には理解されよう。本明細書で使用される場合、タンパク質およびポリペプチドという用語は、互換的であるものとする。本発明の新規のポリペプチドとしては、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、または32に配列が提供される抗血管新生抗体足場および可溶性のVEGF受容体またはPDGF受容体ポリペプチドが挙げられる。本発明は、その残基のいずれかが配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、または32に示されている対応する残基から変化している可能性があるが、それでもその抗血管新生抗体足場および/または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体の活性および生理機能を維持するポリペプチドまたはその機能的断片複数可をコードする突然変異体または変異体ポリペプチドも包含する。突然変異体または変異体タンパク質では、残基の20またはそれ以上に至るまでがそのように変化し得る。一般に、抗血管新生性または可溶性のVEGFR様またはPDGFR様機能が保存されている抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体の変異体としては、配列内の特定の位置における残基が他のアミノ酸で置換されている任意の変異体が挙げられ、これは、親タンパク質の2つの残基間に追加的な1またはそれより多くの残基が挿入される可能性、ならびに親配列から1またはそれより多くの残基が欠失する可能性をさらに含む。任意のアミノ酸の置換複数可、挿入複数可、または欠失複数可が本発明に包含される。好都合な状況では、置換は、保存された置換である。本発明は、単離された抗血管新生抗体足場および可溶性のVEGFRポリペプチドまたはPDGFRポリペプチド、およびその生物活性のある部分、またはその誘導体、断片、類似体もしくはホモログにも関することが当業者には理解されよう。本明細書に記載の抗血管新生抗体足場および可溶性のVEGFR構築物またはPDGFR構築物は、細胞または組織供給源から、標準のタンパク質の精製技法を用いた適切な精製スキームによって単離することができる。別の実施形態では、本発明の抗血管新生抗体足場および可溶性のVEGFRポリペプチドまたはPDGFRポリペプチドは、組換えDNA技法によって作出される。組換え発現に対する代替として、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRもしくはPDGFRタンパク質もしくはポリペプチドを、標準のペプチド合成技法を用いて化学的に合成することができる。単離されたまたは精製されたポリペプチドまたはその生物活性のある部分は、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRポリペプチドもしくはPDGFRポリペプチドが由来する細胞または組織供給源由来の細胞性材料または他の汚染タンパク質またはポリペプチドを実質的に含まない、または、化学的に合成された場合は、化学的前駆体または他の化学物質を実質的に含まない。細胞性材料を実質的に含まないという語は、ポリペプチドが、ポリペプチドをそれから単離した、またはそれから組換えによって作出した細胞の細胞性成分から分離されている抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRポリペプチドもしくはPDGFRポリペプチドの調製物を含む。例えば、細胞性材料を実質的に含まないという語は、約30乾燥重量で未満の非抗血管新生抗体足場または非VEGFRもしくはPDGFRタンパク質本明細書では汚染タンパク質とも称される、より好ましくは約20未満の非抗血管新生抗体足場または非VEGFRもしくは非PDGFRタンパク質、さらに好ましくは約10未満の非抗血管新生抗体足場または非VEGFRもしくは非PDGFRタンパク質、最も好ましくは、約5未満の非抗血管新生抗体足場または非VEGFRもしくは非PDGFRタンパク質を有する、抗血管新生抗体足場またはVEGFRポリペプチドもしくはPDGFRポリペプチドの調製物を含む。抗血管新生抗体足場またはVEGFRポリペプチドもしくはPDGFRポリペプチドまたはその生物活性のある部分を組換えによって作出する場合、培地を実質的に含まない、すなわち、培地がタンパク質調製物の体積の約20未満、より好ましくは約10未満、最も好ましくは約5未満に相当することも好ましい。同様に、化学的前駆体または他の化学物質を実質的に含まないという語は、ポリペプチドが、ポリペプチドの合成に関与する化学的前駆体または他の化学物質から分離されている抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRポリペプチドもしくはPDGFRポリペプチドの調製物を含む。例えば、化学的前駆体または他の化学物質を実質的に含まないという語は、約30乾燥重量で未満の化学的前駆体または非抗血管新生抗体足場または非VEGFRもしくは非PDGFR化学物質、より好ましくは約20未満の化学的前駆体または非抗血管新生抗体足場または非VEGFRもしくは非PDGFR化学物質、さらに好ましくは約10未満の化学的前駆体または非抗血管新生抗体足場または非VEGFRもしくは非PDGFR化学物質、最も好ましくは約5未満の化学的前駆体または非抗血管新生抗体足場または非VEGFRもしくは非PDGFR化学物質を有する抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRポリペプチドもしくはPDGFRポリペプチドの調製物を含む。本発明の抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRポリペプチド構築物もしくはPDGFRポリペプチド構築物の生物活性のある部分は、本明細書に記載の全長の抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFR構築物もしくはPDGFR構築物よりも少ないアミノ酸を含み、本発明の抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRポリペプチドもしくはPDGFRポリペプチドの少なくとも1つの活性を示す、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRポリペプチドもしくはPDGFRポリペプチドのアミノ酸配列、例えば、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、または32に示されているアミノ酸配列と十分に相同である、またはそれに由来するアミノ酸配列を含むペプチドを含む。一般には、生物活性のある部分は、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRポリペプチドもしくはPDGFRポリペプチドの少なくとも1つの活性を有するドメインまたはモチーフを含む。2つのアミノ酸配列または2つの核酸のパーセント相同性を決定するために、最適に比較するために配列をアラインメントする例えば、第2のアミノ酸配列または核酸配列との最適なアラインメントのために、第1のアミノ酸配列または核酸配列の配列にギャップを導入することができる。さらに、対応するアミノ酸位またはヌクレオチド位におけるアミノ酸残基またはヌクレオチドを比較する。第1の配列内のある位置が、第2の配列内の対応する位置と同じアミノ酸残基またはヌクレオチドによって占有されている場合、それらの分子は、その位置において相同であるすなわち、本明細書で使用される場合、アミノ酸または核酸の相同性は、アミノ酸または核酸の同一性と等しい。核酸配列の相同性は、2つの配列間の同一性の程度として決定することができる。相同性は、当技術分野で公知のコンピュータプログラム、例えば、GCGプログラムパッケージで提供されるGAPソフトウェアなどを使用して決定することができる。NeedlemanおよびWunsch1970年JMolBiol48巻:443~453頁を参照されたい。配列同一性という用語は、2つのポリヌクレオチド配列またはポリペプチド配列が、特定の比較領域にわたって残基ごとに同一である程度を指す。配列同一性の百分率という用語は、2つの最適にアラインメントされた配列をその比較領域にわたって比較し、両方の配列に存在する核酸塩基例えば、核酸の場合ではA、T、C、G、U、またはIが同一である位置の数を決定して、マッチする位置の数をもたらし、マッチする位置の数を、比較領域すなわち、ウィンドウサイズ内の位置の総数で割り、その結果に100を掛けて配列同一性の百分率をもたらすことによって算出される。実質的な同一性という用語は、本明細書で使用される場合、比較領域にわたって、参照配列と比較して少なくとも80パーセントの配列同一性、好ましくは少なくとも85パーセントの同一性、および多くの場合、90~95パーセントの配列同一性、通常は少なくとも99パーセントの配列同一性を有する配列を含むポリヌクレオチド配列の特性を指す。本発明は、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFもしくはPDGFR受容体のキメラタンパク質または融合タンパク質も提供する。本発明の抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRもしくはPDGFRのキメラタンパク質または融合タンパク質は、標準の組換えDNA技法によって作出することができる。例えば、異なるポリペプチド配列をコードするDNA断片を、従来の技法に従って、例えば、ライゲーション用の平滑末端または付着末端、適切な末端をもたらすための制限酵素消化、必要に応じて突出末端を埋めること、望ましくない接合を回避するためのアルカリホスファターゼ処理、および酵素によるライゲーションを用いることによって、一緒にインフレームでライゲーションする。別の実施形態では、自動DNA合成機を含めた従来の技法によって融合遺伝子を合成することができる。あるいは、2つの連続した遺伝子断片間に相補的なオーバーハングを生じさせるアンカープライマーを使用して遺伝子断片のPCR増幅を行い、その後それをアニーリングし、再増幅してキメラ遺伝子配列を生成することができる例えば、Ausubelら編CurrentProtocolsinMolecularBiology、JohnWileySons、1992年を参照されたい。さらに、すでに融合部分をコードしている多くの発現ベクターが市販されている例えば、GSTポリペプチド。本発明は、さらに、本発明の核酸分子のいずれかを含有するベクターを提供する。詳細には、本発明は、ベクター、好ましくは、本発明の抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRポリペプチドもしくはPDGFRポリペプチド、またはその誘導体、断片、類似体もしくはホモログをコードする核酸を含有する発現ベクターにも関する。本明細書で使用される場合、ベクターという用語は、それが連結した別の核酸を運搬することができる核酸分子を指す。プラスミドはベクターの1種であり、追加的なDNAセグメントをライゲーションすることができる環状の二本鎖DNAループを指す。別の種類のベクターはウイルスベクターであり、ウイルスのゲノムに追加的なDNAセグメントをライゲーションすることができる。特定のベクターは、それが導入された宿主細胞において自律複製することができる例えば、細菌の複製開始点を有する細菌ベクターおよび哺乳動物のエピソームベクター。他のベクター例えば、哺乳動物の非エピソームベクターは、宿主細胞に導入されると宿主細胞のゲノム内に組み込まれ、それにより、宿主ゲノムと一緒に複製される。さらに、特定のベクターは、それが作動可能に連結された遺伝子の発現を導くことができる。そのようなベクターは、本明細書では発現ベクターと称される。一般に、組換えDNA技法において有用な発現ベクターは、多くの場合、プラスミドの形態である。本明細書では、プラスミドは、最も一般的に使用されるベクターの形態であるのでプラスミドおよびベクターは、互換的に使用することができる。しかし、本発明は、同等の機能を果たす他の形態の発現ベクター、例えば、ウイルスベクター例えば、複製欠損性レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、およびトランスポゾンに基づく組換え系などを含むものとする。本発明の組換え発現ベクターは、本発明の任意の核酸を、宿主細胞において核酸を発現するために適した形態で含み、これは、組換え発現ベクターが、発現のために用いる宿主細胞に基づいて選択され、発現される核酸配列に作動可能に連結した1またはそれより多くの調節配列を含むことを意味する。組換え発現ベクターでは、作動可能に連結したとは、対象のヌクレオチド配列が、ヌクレオチド配列が発現すること例えば、invitro転写/翻訳系において、またはベクターを宿主細胞に導入した場合は宿主細胞においてが可能になるように調節配列複数可に連結していることを意味するものとする。調節配列という用語は、プロモーター、エンハンサーおよび他の発現調節エレメント例えば、ポリアデニル化シグナルを含むものとする。そのような調節配列は、例えば、Goeddel;GeneExpressionTechnology:MethodsinEnzymology185巻、AcademicPress、SanDiego、Calif.1990年に記載されている。調節配列としては、多くの種類の宿主細胞においてヌクレオチド配列の構成的発現を導く調節配列、および特定の宿主細胞においてのみヌクレオチド配列の発現を導く調節配列例えば、組織特異的な調節配列が挙げられる。当業者には、発現ベクターの設計は、形質転換される宿主細胞の選出、所望のタンパク質の発現レベルなどの因子に左右され得ることが理解されよう。本発明の発現ベクターを宿主細胞に導入し、それにより、本明細書に記載の核酸によりコードされる、融合タンパク質またはペプチドを含めたタンパク質またはペプチドを産生させることができる例えば、抗血管新生抗体足場、可溶性のVEGFRポリペプチドまたはPDGFRポリペプチド、抗血管新生抗体足場の突然変異体型、可溶性のVEGFRポリペプチドまたはPDGFRポリペプチドの突然変異体型、融合タンパク質など。本発明の組換え発現ベクターは、本発明の抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFR構築物もしくはPDGFR構築物を原核細胞または真核細胞において発現させるために設計することができる。原核細胞および真核細胞の両方に適した他の発現系が当技術分野で公知である例えば、Sambrookら、MolecularCloning:ALaboratoryManual.第2版、第16章および17章、ColdSpringHarborLaboratory、ColdSpringHarborLaboratoryPress、ColdSpringHarbor、N.Y.、1989年を参照されたい。さらに、本発明は、そのようなベクターまたは本明細書に記載の任意の核酸分子を含有する宿主細胞または細胞株も提供する。本明細書で使用される場合、宿主細胞および組換え宿主細胞という用語は、本明細書では互換的に使用される。そのような用語は、特定の対象細胞だけではなく、そのような細胞の後代または潜在的な後代も指すことが理解される。続く世代では、突然変異または環境の影響のいずれかによって特定の改変が起こり得るので、そのような後代は実際には親細胞と同一ではない可能性があるが、それでも本明細書で使用されるこの用語の範囲内に含まれる。宿主細胞は、任意の原核細胞または真核細胞であってよい。非限定的な例として、宿主細胞は、ARPE-19細胞であってよい。しかし、他の適切な宿主細胞が当業者に公知である。ベクターDNAは、慣習的な形質転換またはトランスフェクション技法によって原核細胞または真核細胞に導入することができる。本明細書で使用される場合、形質転換およびトランスフェクションという用語は、リン酸カルシウム共沈澱または塩化カルシウム共沈澱、DEAE-デキストラン媒介性トランスフェクション、リポフェクション、または電気穿細孔を含めた、外来核酸例えば、DNAを宿主細胞に導入するための当技術分野で認められている種々の技法を指すものとする。宿主細胞を形質転換またはトランスフェクトするための適切な方法は、SambrookらMolecularCloning:ALaboratoryManual.第2版、ColdSpringHarborLaboratory、ColdSpringHarborLaboratoryPress、ColdSpringHarbor、N.Y.、1989年、および他の実験マニュアルに見いだすことができる。哺乳動物の細胞の安定なトランスフェクションに関して、使用する発現ベクターおよびトランスフェクション技法に応じて、細胞のごく一部のみが、それらのゲノム内に外来DNAを組み込み得ることが公知である。これらの組み込み体を同定し選択するために、一般に、選択マーカー例えば、抗生物質に対する耐性をコードする遺伝子を、対象の遺伝子と一緒に宿主細胞に導入する。種々の選択マーカーとしては、G418、ハイグロマイシン、メトトレキサート、および/またはブラストサイジンなどの薬物に対する耐性を付与するものが挙げられる。選択マーカーをコードする核酸は、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体構築物もしくはPDGF受容体構築物をコードするベクターと同じベクター上で、宿主細胞に導入することができる、または別々のベクター上で導入することができる。導入された核酸で安定にトランスフェクトされた細胞は、薬物選択によって同定することができる例えば、選択マーカー遺伝子が組み入れられた細胞は生存するが、他の細胞は死ぬ。培養物中の原核宿主細胞または真核宿主細胞などの本発明の宿主細胞を用いて、本明細書に記載の任意の抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRポリペプチド構築物もしくはPDGFRポリペプチド構築物を産生させるすなわち、発現させることができる。したがって、本発明は、さらに、本発明の宿主細胞を用いてこれらの抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRポリペプチドもしくはPDGFRポリペプチドを産生させるための方法を提供する。一実施形態では、該方法は、本発明の宿主細胞抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRもしくはPDGFRをコードする組換え発現ベクターが導入されたを、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRポリペプチドもしくはPDGFRポリペプチドが産生されるように適切な培地中で培養することを含む。別の実施形態では、該方法は、培地または宿主細胞から抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGFRもしくはPDGFRを単離することをさらに含む。同様に、本発明は、配列番号1、配列番号3、配列番号5、配列番号7、配列番号9、配列番号11、配列番号13、配列番号15、配列番号17、配列番号19、配列番号21、配列番号23、配列番号25、配列番号27、配列番号29および配列番号31からなる群から選択される核酸配列によりコードされる抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体の治療量を産生するように遺伝子操作されたARPE-19細胞の細胞株も提供する。同様に、本発明は、配列番号2、配列番号4、配列番号6、配列番号8、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16、配列番号18、配列番号20、配列番号22、配列番号24、配列番号26、配列番号28、配列番号30および配列番号32からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体を産生するように遺伝子操作されたARPE-19細胞の細胞株も提供する。治療量は、6mmのデバイス当たり1日当たり少なくとも1pg~1000μgであることが好ましい。治療量はこの範囲両端を含むに入る任意の量であってよいことが当業者には理解されよう。さらに、本発明の細胞株およびデバイスは、この治療量を少なくとも3週間にわたって発現することができる。いくつかの実施形態では、治療量は1日当たり少なくとも100~10,000ngである。非限定的な一実施形態では、この量は少なくとも1日当たり4μgである。本明細書には、本発明の細胞株すなわち、本明細書に記載の抗血管新生抗体足場および/または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGFR受容体のいずれかの治療量で産生するように遺伝子操作されたARPE-19細胞のうちの1つまたは複数、およびコアの周囲の、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体が通って拡散するのを許容する半透膜を含有する埋め込み型implantable細胞培養デバイスも記載されている。カプセルおよびデバイスという用語は、本明細書では、互換的に使用され、遺伝子操作された細胞および細胞株例えば、ARPE-19細胞または細胞株を含有する任意のバイオ人工臓器を指す。いくつかの実施形態では、コアは、半透膜の内部に配置されたマトリックスをさらに含有する。非限定的な例として、マトリックスは、ヒドロゲルまたは細胞外マトリックス成分を含んでよい。例えば、ヒドロゲルは、多価イオンと架橋したアルギン酸を含有してよい。他の実施形態では、マトリックスは、撚り合わせて糸にした、もしくは織って網目にした、または撚り合わせて不織撚糸non-wovenstrand状の糸にした複数のモノフィラメントを含み、その上に細胞または組織が分布している。繊維状の細胞支持マトリックスは、アクリル、ポリエステル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリアセトニトリル、ポリエチレンテレフタラート、ナイロン、ポリアミド、ポリウレタン、ポリブテステルpolybutester、絹、綿、キチン、炭素、および/または生体適合性金属からなる群から選択される生体適合性材料から作製することができることが当業者には理解されよう。本明細書で使用される場合、内部足場とは、本発明の任意のデバイスにおいて使用するために適したマトリックスの非限定的な一例である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の細胞カプセル封入デバイスは、つなぎアンカーも有する。例えば、つなぎアンカーは、カプセルを眼構造につなぎ留めるために適したアンカーループであってよい。本明細書に記載のデバイスはいずれも、眼、または脾臓、耳、心臓、結腸、肝臓、腎臓、乳房、関節、骨髄、皮下、および腹膜腔から選択される別の体の標的領域に埋め込むために適している。非限定的な例として、硝子体、房水、テノン嚢下腔、眼周囲腔、後眼房、および/または前眼房にカプセルを埋め込むことができる。本明細書に記載のデバイスの包被は、選択透過性免疫隔離性immunoisolatory膜で作製することが好ましい。例えば、包被は限外濾過膜または精密濾過膜で作製する。限外濾過膜の細孔サイズは一般には1~100nmであり、精密濾過膜の細孔サイズは一般には0.1~10μmであることが当業者には理解されよう。他の実施形態では、包被は、無孔膜材料例えば、ヒドロゲルまたはポリウレタンで作製することができる。包被および半透性膜という用語は、本明細書では互換的に使用される。本明細書に記載のデバイスのいずれにおいても、カプセルは中空繊維または平板として構成することができる。さらに、種々の実施形態では、少なくとも1種の追加的な生物活性分子をこれらのデバイスから共送達することができる。例えば、少なくとも1種の追加的な生物活性分子は、非細胞性供給源または細胞性供給源すなわち、少なくとも1種の追加的な生物活性分子が、コア内の1またはそれより多くの遺伝子操作されたARPE-19細胞によって産生される由来であってよい。本明細書では、本発明の埋め込み型細胞培養デバイスを患者の眼に埋め込み、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をデバイスから眼内に拡散させ、VEGFおよび/またはPDGFに結合させ、それにより、眼科障害を治療することによって眼科障害を治療するための方法も提供される。例えば、治療される眼科障害は、未熟児網膜症、糖尿病黄斑浮腫、糖尿病性網膜症、加齢黄斑変性症、緑内障、網膜色素変性症、白内障の形成、網膜芽細胞腫および網膜虚血からなる群から選択することができる。好ましい一実施形態では、加齢黄斑変性症は滲出型wetform加齢黄斑変性症である。別の好ましい実施形態では、眼科障害は糖尿病性網膜症である。本発明は、さらに、本発明の埋め込み型細胞培養デバイスを、細胞増殖障害に罹患している患者に埋め込み、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をデバイスから拡散させ、VEGFまたはPDGFに結合させることによって内皮細胞の増殖を阻害するための方法であって、その結合により、患者における内皮細胞の増殖が阻害される方法を提供する。例えば、障害は、血液障害、アテローム性動脈硬化症、炎症、血管透過性の亢進および悪性腫瘍からなる群から選択される。本明細書に記載の埋め込み型細胞培養デバイスをレシピエント宿主の標的領域に埋め込むことによって、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をレシピエント宿主に送達する方法であって、カプセル封入された1またはそれより多くのARPE-19細胞が、標的領域において抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体を分泌する方法も提供される。好ましい標的領域としては、脳、脳室、脊髄、または眼の房水および硝子体液を含めた中枢神経系が挙げられる。他の標的領域としては、これらに限定されないが、全身送達については全身、ならびに/または乳房、結腸、脾臓、卵巣、精巣、および/もしくは骨髄などの体内の臓器の内部またはその付近に局在する標的部位を挙げることができる。眼への埋め込みおよび/または眼の障害に関する本明細書に記載の任意の方法では、本発明の抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体を、埋め込み型細胞培養デバイスから1日当たり患者当たり0.1pg~1000μg拡散させることができることが当業者には理解されよう。しかし、体の他の標的領域への全身的な埋め込みに関しては、治療有効量は1日当たり患者当たり1000mgを上回り得る。そのような全身的適応のためには、はるかに大きなECTデバイスを使用しなければならないことが当業者には理解されよう。眼への埋め込みに関して、治療量は6mmのデバイス当たり1日当たり1pg~1000μg両端を含むの任意の量であることが好ましい。いくつかの実施形態では、治療量は1日当たり少なくとも1000ng1.0pcdである。さらに、本発明の細胞株およびデバイスは、この治療量を少なくとも3週間にわたって発現することができる。さらに、本発明は、本発明の埋め込み型細胞培養デバイスを作製するための方法も提供する。1つの方法では、少なくとも1つのARPE-19細胞を、配列番号1、配列番号3、配列番号5、配列番号7、配列番号9、配列番号11、配列番号13、配列番号15、配列番号17、配列番号19、配列番号21、配列番号23、配列番号25、配列番号27、配列番号29および配列番号31からなる群から選択される核酸配列によりコードされる抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体を分泌するように遺伝子操作し、遺伝子改変されたARPE-19細胞を、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体を通って拡散するのを許容する半透膜内部にカプセル封入する。別の方法では、少なくとも1つのARPE-19細胞を、配列番号2、配列番号4、配列番号6、配列番号8、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16、配列番号18、配列番号20、配列番号22、配列番号24、配列番号26、配列番号28、配列番号30および配列番号32からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体を分泌するように遺伝子操作し、遺伝子改変されたARPE-19細胞を、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体が通って拡散するのを許容する半透膜内部にカプセル封入する。本発明は、眼における血管障害を含めた血管障害を、例えば、デバイスを患者の眼に、または、局在化かつ標的化された抗血管新生因子の送達のためには、他の疾患にかかっている部位に埋め込むことによって治療するための、本発明による埋め込み型細胞培養デバイスのいずれかの製造における、本発明のポリペプチドのいずれか例えば、配列番号2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、または32を産生するように遺伝子操作された1またはそれより多くのARPE-19細胞の使用についても記載する。さらに、本明細書に記載の埋め込み型細胞培養デバイスはいずれも、デバイスを患者の眼に埋め込むことによって、および本発明の抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をデバイスから眼内に拡散させ、VEGFおよび/またはPDGFに結合させることによって、眼科障害を治療するために使用することができる。本発明の埋め込み型細胞培養デバイスのいずれかを患者の眼に埋め込むことによって、および抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をデバイスから眼内に拡散させ、VEGFまたはPDGFに結合させることによって、眼科障害を治療するための、本発明のポリペプチドのいずれかを産生するように遺伝子操作された1またはそれより多くのARPE-19細胞も提供される。本明細書に記載の単離された核酸分子はいずれも、患者の眼に本発明の埋め込み型細胞培養デバイスを埋め込むことによって、および抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をデバイスから眼内に拡散させ、VEGFまたはPDGFに結合させることによって眼科障害を治療するための、本発明のポリペプチドのうちの1つを産生するように遺伝子操作された1またはそれより多くのARPE-19細胞の製造においても使用することができる。さらに、本発明の単離された核酸分子はいずれも、眼科障害を治療するためにも使用することができ、治療は、患者の眼に本発明による埋め込み型細胞培養デバイスを埋め込むこと、および抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をデバイスから眼内に拡散させ、VEGFおよび/またはPDGFに結合させることを含み、前記デバイス内の前記1またはそれより多くのARPE-19細胞は、前記単離された核酸分子を用いて、単離された本明細書に記載のポリペプチドのいずれかを産生するように遺伝子操作されている。本明細書に記載の実施形態のいずれにおいても、血管障害は、これに限定されないが、例えば、未熟児網膜症、糖尿病黄斑浮腫、糖尿病性網膜症、加齢黄斑変性症例えば、滲出型wetform加齢黄斑変性症、緑内障、網膜色素変性症、白内障の形成、網膜芽細胞腫および網膜虚血から選択される。本明細書に記載のデバイスはいずれも、種々の眼以外の血管障害を治療するためにも使用することができることが当業者には理解されよう。本発明は、細胞増殖障害に罹患している患者の眼にデバイスを埋め込むことによって、および抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をデバイスから眼内に拡散させ、VEGFおよび/またはPDGFに結合させ、それにより、前記患者における内皮細胞の増殖を阻害することによって内皮細胞の増殖を阻害するための、本発明による埋め込み型細胞培養デバイスの製造における、本発明のポリペプチド例えば、抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を産生するように遺伝子操作された1またはそれより多くのARPE-19細胞の使用も提供する。同様に、本発明は、細胞増殖障害に罹患している患者の眼にデバイスを埋め込むことによって、および抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をデバイスから眼内に拡散させ、VEGFおよび/またはPDGFに結合させ、それにより、前記患者における内皮細胞の増殖を阻害することによって内皮細胞の増殖を阻害するための、本発明の埋め込み型細胞培養デバイスも提供する。他の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の埋め込み型細胞培養デバイスのいずれかを、細胞増殖障害に罹患している患者の眼に埋め込むことによって、および抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をデバイスから眼内に拡散させ、VEGFまたはPDGFに結合させ、それにより、前記患者における内皮細胞の増殖を阻害することによって内皮細胞の増殖を阻害するための、本発明のポリペプチドのいずれかを産生するように遺伝子操作された1またはそれより多くのARPE-19細胞を提供する。細胞増殖障害に罹患している患者の眼に本発明による埋め込み型細胞培養デバイスを埋め込むことによって、および抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をデバイスから眼内に拡散させ、VEGFまたはPDGFに結合させ、それにより、前記患者における内皮細胞の増殖を阻害することによって内皮細胞の増殖を阻害するための、本発明のポリペプチド複数可を産生するように遺伝子操作された1またはそれより多くのARPE-19細胞の製造における、本明細書に記載の単離された核酸分子のいずれかの使用も意図されている。さらに、本発明は、内皮細胞の増殖を阻害するための本発明による単離された核酸分子のいずれかも提供し、治療は、細胞増殖障害に罹患している患者の眼に本発明による埋め込み型細胞培養デバイスを埋め込むこと、および抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をデバイスから眼内に拡散させ、VEGFおよび/またはPDGFに結合させ、それにより、前記患者における内皮細胞の増殖を阻害することを含み、前記デバイス内の前記1またはそれより多くのARPE-19細胞は、前記単離された核酸分子を用いて、本発明のポリペプチドを産生するように遺伝子操作されている。細胞増殖障害は、血液障害、アテローム性動脈硬化症、炎症、血管透過性の亢進および悪性腫瘍からなる群から選択することができ、これに限定されないが、眼を含めた体の種々の部分に局在し得ることが当業者には理解されよう。したがって、言及された障害を治療するために、これらの局在領域の近くにECTデバイスを置くことができる。本明細書では、デバイスをレシピエント宿主の標的領域に埋め込むことによって抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をレシピエント宿主に送達するための、本発明による埋め込み型細胞培養デバイスであって、カプセル封入された1またはそれより多くのARPE-19細胞が、標的領域において抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体を分泌するデバイスの製造における、本明細書に記載のポリペプチドのいずれかを産生するように遺伝子操作された1またはそれより多くのARPE-19細胞の使用も提供される。同様に、本発明の埋め込み型細胞培養デバイスはいずれも、デバイスをレシピエント宿主の標的領域に埋め込むことによって、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をレシピエント宿主に送達するために使用することができ、カプセル封入された1またはそれより多くのARPE-19細胞は、標的領域において抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体を分泌する。さらに、本明細書に記載のポリペプチドのいずれかを産生するように遺伝子操作された1またはそれより多くのARPE-19細胞は、本発明の埋め込み型細胞培養デバイスのいずれかをレシピエント宿主の標的領域に埋め込むことによって抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をレシピエント宿主に送達するために使用することができ、カプセル封入された1またはそれより多くのARPE-19細胞は、標的領域において抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体を分泌する。同様に、本明細書に記載の単離された核酸分子はいずれも、レシピエント宿主の標的領域に本発明の埋め込み型細胞培養デバイスを埋め込むことによって抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をレシピエント宿主に送達するための、本明細書に記載のポリペプチドのいずれかを産生するように遺伝子操作された1またはそれより多くのARPE-19細胞の製造において使用することができ、カプセル封入された1またはそれより多くのARPE-19細胞は、標的領域において抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体を分泌する。本明細書に記載の単離された核酸分子はいずれも、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をレシピエント宿主に送達するためにも使用することができ、前記送達は、レシピエント宿主の標的領域に本発明の埋め込み型細胞培養デバイスを埋め込むことを含み、カプセル封入された1またはそれより多くのARPE-19細胞は、標的領域において抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体を分泌し、前記デバイス内の前記1またはそれより多くのARPE-19細胞は、前記単離された核酸分子を用いて、本発明のポリペプチドのいずれかを産生するように遺伝子操作されている。標的領域は、脳、脳室、脊髄、および眼の房水および硝子体液を含めた中枢神経系から選択されることが当業者には理解されよう。他の標的領域が体内の他の所に位置し得、ECTデバイスをそれらの領域の近くに置く。領域としては、これらに限定されないが、脾臓、耳、心臓、結腸、肝臓、腎臓、乳房、関節、骨髄、皮下、および腹膜腔を挙げることができる。さらに、本発明は、単離されたポリペプチドを作出する方法も提供し、該方法は、本明細書に記載の単離された核酸分子のいずれかを発現させ、発現されたポリペプチドを回収することを含む。本発明は、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を治療有効量で産生するように遺伝子操作されたARPE-19細胞例えば、細胞106個当たり1日当たり少なくとも10,000ngを含む細胞株も提供する。細胞株により、少なくとも3ヶ月間にわたってすなわち、3ヶ月、6ヶ月、9ヶ月、12ヶ月、15ヶ月、18ヶ月、21ヶ月、24ヶ月、またはそれ以上治療有効量が産生されることが好ましい。いくつかの非限定的な実施形態では、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子は、反復トランスフェクションプロセスを用いてARPE-19細胞に導入することができる。詳細には、反復トランスフェクションは、1回のトランスフェクション、2回のトランスフェクション、3回のトランスフェクション、またはそれ以上のトランスフェクション例えば、1回、2回、3回、4回、5回、6回、7回、8回、9回、10回、またはそれ以上のトランスフェクションであってよい。反復トランスフェクションプロセスが1回のトランスフェクションである場合、細胞株は、1つの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を含有することになる。反復トランスフェクションプロセスが2回のトランスフェクションである場合、細胞株は、2つの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を含有することになる。これらは、同じ抗血管新生抗体足場もしくは抗血管新生分子、または異なる抗血管新生抗体足場もしくは抗血管新生分子であってよい。反復トランスフェクションプロセスが3回のトランスフェクションである場合、細胞株は、3つの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を含有することになる。これらは、同じ抗血管新生抗体足場もしくは抗血管新生分子、または異なる抗血管新生抗体足場もしくは抗血管新生分子であってよい。反復トランスフェクションプロセスにおけるトランスフェクションの数により、生じる細胞株における同じまたは異なる抗血管新生抗体足場および/または抗血管新生分子の数が決定されることが当業者には理解されよう。いくつかの実施形態では、反復トランスフェクションが1回のトランスフェクションである場合に、細胞株は、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を細胞106個当たり1日当たり10,000~30,000ng産生する。細胞株は、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を細胞106個当たり1日当たり、約15,000ng、または少なくとも15,000ng産生することが好ましい。他の実施形態では、反復トランスフェクションが2回のトランスフェクションである場合に、細胞株は、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を細胞106個当たり1日当たり30,000~50,000ng産生する。細胞株は、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を細胞106個当たり1日当たり、約35,000ng、または少なくとも35,000ng産生することが好ましい。さらに他の実施形態では、反復トランスフェクションが3回のトランスフェクションである場合に、細胞株は、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を細胞106個当たり1日当たり50,000~75,000ng産生する。細胞株は、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を細胞106個当たり1日当たり、約70,000ngまたは少なくとも70,000ng産生することが好ましい。抗血管新生分子は、例えば、可溶性VEGF受容体および/または可溶性PDGF受容体であってよい。反復トランスフェクションプロセスを用いて、同じ抗血管新生抗体足場複数可および/または抗血管新生分子複数可の多数のコピーをARPE-19細胞に導入することができる。あるいは、反復トランスフェクションプロセスを用いて、異なる抗血管新生抗体足場複数可および/または抗血管新生分子複数可の多数のコピーをARPE-19細胞に導入することもできる。一実施形態では、ARPE-19細胞を、配列番号1の核酸配列によりコードされる可溶性VEGF受容体または配列番号2のアミノ酸配列を含む可溶性VEGF受容体を含むベクターを使用して遺伝子操作する。本発明は、さらに、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を治療有効量で産生するように遺伝子操作されたARPE-19細胞を含む任意の細胞株を提供し、ここで、治療有効量は、細胞106個当たり1日当たり少なくとも10,000ng例えば、細胞106個当たり1日当たり少なくとも15,000ng、20,000ng、25,000ng、30,000ng、35,000ng、40,000ng、45,000ng、50,000ng、55,000ng、60,000ng、65,000ng、70,000ng、75,000ng、またはそれ以上である。そのような細胞株は、この治療有効量を少なくとも3ヶ月例えば、少なくとも6ヶ月、9ヶ月、12ヶ月、15ヶ月、18ヶ月、21ヶ月、または24ヶ月またはそれよりも長くにわたって産生することができる。そのような細胞株は、いくつかの実施形態では、本明細書に記載の反復トランスフェクションプロセスを用いて作出することができることが当業者には理解されよう。しかし、当技術分野で公知の他の方法を用いて、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を治療有効量で産生させることもできる。本明細書に記載の細胞株はいずれも、配列番号1、配列番号3、配列番号5、配列番号7、配列番号9、配列番号11、配列番号13、配列番号15、配列番号17、配列番号19、配列番号21、配列番号23、配列番号25、配列番号27、配列番号29および配列番号31からなる群から選択される核酸配列によりコードされる抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体を分泌するように遺伝子操作することができる。同様に、本明細書に記載の細胞株はいずれも、配列番号2、配列番号4、配列番号6、配列番号8、配列番号10、配列番号12、配列番号14、配列番号16、配列番号18、配列番号20、配列番号22、配列番号24、配列番号26、配列番号28、配列番号30および配列番号32からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体を分泌するように遺伝子操作することができる。本明細書には、本発明の細胞株すなわち、本明細書に記載の抗血管新生抗体足場および/または抗血管新生分子のいずれかを治療有効量で産生するように反復トランスフェクションプロセスを用いて遺伝子操作されたARPE-19細胞、または細胞106個当たり1日当たり少なくとも10,000ngを分泌するように遺伝子操作されたARPE-19細胞のうちの1つまたは複数を含有するコア、およびコアの周囲の、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場および/または抗血管新生分子が通って拡散するのを許容する半透膜を含有する埋め込み型細胞培養デバイスも記載されている。いくつかの実施形態では、コアは、0.5~1.0×106個の細胞を含有する。コアは、半透膜の内部に配置されたマトリックスさらに含有してよい。他の実施形態では、マトリックスは、撚り合わせて糸にした、もしくは織って網目にした、または撚り合わせて不織撚糸状の糸にした複数のモノフィラメントを含み、その上に細胞または組織が分布している。モノフィラメントは、アクリル、ポリエステル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリアセトニトリル、ポリエチレンテレフタラート、ナイロン、ポリアミド、ポリウレタン、ポリブテステル、絹、綿、キチン、炭素、および/または生体適合性金属から選択される生体適合性材料から作製することができることが当業者には理解されよう。例えば、モノフィラメントは、デバイスの内容積の40~85を占めるポリエチレンテレフタラートPET繊維である。本明細書に記載の細胞カプセル封入デバイスは、つなぎアンカーも有してよい。例えば、つなぎアンカーは、デバイスを眼構造につなぎ留めるために適したアンカーループであってよい。本明細書に記載のデバイスはいずれも、眼または別の体の標的領域、例えば、脾臓、耳、心臓、結腸、肝臓、腎臓、乳房、関節、骨髄、皮下、および/または腹膜腔などに埋め込むことができるまたは、埋め込むためのものである。非限定的な例として、デバイスは、硝子体、房水、テノン嚢下腔、眼周囲腔、後眼房、および/または前眼房に埋め込むことができるまたは、埋め込むためのものである。本明細書に記載のデバイスの半透性膜は、選択透過性免疫保護性immunoprotective膜から作製することが好ましい。他の実施形態では、半透性膜は限外濾過膜または精密濾過膜から作製する。半透性膜の細孔サイズの中央値は一般には約100nmであることが当業者には理解されよう。さらに他の実施形態では、半透性膜は、無孔膜材料例えば、ヒドロゲルまたはポリウレタンから作製することができる。本明細書に記載のデバイスのいずれにおいても、半透性膜の公称分画分子量MWCOは500kDである。半透性膜の厚さは約90~120μmであることが好ましい。本明細書に記載のデバイスはいずれも、中空繊維または平板として構成することができる。デバイスの長さは、約4mm~11mmであってよい。いくつかの実施形態では、デバイスの内径internaldiameterは約0.9mm~1.2mmである。好ましい一実施形態では、デバイスの端部がメタクリル酸メチルを使用して密閉されている。本発明の任意のデバイスは、以下の追加的な特性の1つ、2つ、3つ、4つ、5つ、6つ、7つまたは全てを含んでよい:a.コアが、0.5~1.0×106個のARPE-19細胞を含有すること;b.デバイスの長さが4mm~11mmであること;c.デバイスの内径internaldiameterが0.9~1.2mmであること;d.デバイスの端部がメタクリル酸メチルを使用して密閉されていること;e.半透性膜の細孔サイズの中央値が約100nmであること;f.半透性膜の公称分画分子量MWCOが500kDであること;g.半透性膜の厚さが90~120μmであること;h.コアが、デバイスの内容積の40~85を占めるポリエチレンテレフタラートPET繊維を含む内部足場を含有すること;およびi.その任意の組み合わせ複数可。さらに、種々の実施形態では、少なくとも1種の追加的な生物活性分子をこれらのデバイスから共送達することができる。例えば、少なくとも1種の追加的な生物活性分子は、非細胞性供給源由来または細胞性供給源由来すなわち、少なくとも1種の追加的な生物活性分子が、コア内の1またはそれより多くの遺伝子操作されたARPE-19細胞によって産生されるであってよい。本発明は、さらに、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を被験体の眼に適切な治療用量で送達するための、本発明の埋め込み型細胞培養デバイスのいずれかの使用を提供し、ここで、治療用量は、眼当たり1日当たり少なくとも100ng例えば、眼当たり1日当たり少なくとも100ng、200ng、300ng、400ng、500ng、1000ng、1500ng、2000ng、2500ng、3000ng、3500ng、4000ng、またはそれ以上である。同様に、本発明は、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を被験体の眼に適切な治療用量で送達することによって、それを必要とする被験体を治療することにおいて使用するための、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子も提供し、ここで、治療用量は、眼当たり1日当たり少なくとも100ng例えば、眼当たり1日当たり少なくとも100ng、200ng、300ng、400ng、500ng、1000ng、1500ng、2000ng、2500ng、3000ng、3500ng、4000ng、またはそれ以上である。本明細書では、本発明の埋め込み型細胞培養デバイスのいずれかを患者の眼に埋め込み、抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子をデバイスから眼内に拡散させ、VEGFおよび/またはPDGFに結合させ、それにより、眼科障害を治療することによって眼科障害を治療するための方法も提供される。いくつかの実施形態では、本発明は、眼科障害の治療において使用するための細胞株すなわち、本明細書に記載の細胞株のいずれかを提供し、ここで、細胞株は埋め込み型細胞培養デバイスに組み入れられ、デバイスは患者の眼に埋め込まれ、抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子がデバイスから拡散し、眼内のVEGFおよび/またはPDGFに結合し、それにより、眼科障害が治療される。例えば、治療される眼科障害は、未熟児網膜症、糖尿病黄斑浮腫、糖尿病性網膜症、加齢黄斑変性症、緑内障、網膜色素変性症、白内障の形成、網膜芽細胞腫および網膜虚血から選択することができる。好ましい一実施形態では、加齢黄斑変性症は滲出型wetform加齢黄斑変性症である。好ましい一実施形態では、眼科障害は糖尿病性網膜症である。本発明は、さらに、本発明の埋め込み型細胞培養デバイスを、細胞増殖障害に罹患している患者に埋め込み、抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子をデバイスから拡散させ、VEGFおよび/またはPDGFに結合させることによって内皮細胞の増殖または血管化を阻害するための方法であって、結合により、患者における内皮細胞の増殖または血管化が阻害される方法を提供する。例えば、障害は、血液障害、アテローム性動脈硬化症、炎症、血管透過性の亢進および悪性腫瘍から選択することができる。そのような方法では、1日当たり患者当たりの治療有効量の抗血管新生抗体足場複数可または抗血管新生分子複数可がデバイスから拡散する。本明細書に記載の埋め込み型細胞培養デバイスのいずれかをレシピエント宿主の標的領域に埋め込むことによって抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子をレシピエント宿主に送達する方法であって、カプセル封入された1またはそれより多くのARPE-19細胞が、標的領域において抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を分泌する方法も提供される。好ましい標的領域としては、これらに限定されないが、脳、脳室、脊髄、眼の房水および硝子体液、脾臓、耳、心臓、結腸、肝臓、腎臓、乳房、関節、骨髄、皮下、および/または腹膜腔を含めた中枢神経系を挙げることができる。他の標的領域としては、これらに限定されないが、全身送達については全身、ならびに/または乳房、結腸、脾臓、卵巣、精巣、および/もしくは骨髄などの体内の臓器の内部またはその付近に局在する標的部位を挙げることができる。そのような方法では、1日当たり患者当たりの治療有効量の抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子が標的領域内に拡散する。眼への埋め込みおよび/または眼の障害に関する本明細書に記載の任意の方法では、1日当たり患者当たりの治療有効量の本発明の抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子が埋め込み型細胞培養デバイスから拡散することが当業者には理解されよう。例えば、1日当たり患者当たり0.1pg~1000μgの本発明の抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を埋め込み型細胞培養デバイスから拡散させることができる例えば、標的領域複数可内に。本発明は、本発明の埋め込み型細胞培養デバイスを作製するための方法も提供する。例えば、少なくとも1つのARPE-19細胞を、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子例えば、配列番号1、配列番号3、配列番号5、配列番号7、配列番号9、配列番号11、配列番号13、配列番号15、配列番号17、配列番号19、配列番号21、配列番号23、配列番号25、配列番号27配列番号29および配列番号31からなる群から選択される核酸配列によりコードされるものを分泌するように遺伝子操作し、遺伝子改変されたARPE-19細胞を、抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子が通って拡散するのを許容する半透膜の中にカプセル封入する。好ましい一例では、本発明の抗血管新生分子は、可溶性VEGF受容体および/または可溶性PDGF受容体である。特に定義されていなければ、本明細書において使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般に理解されているものと同じ意味を有する。本発明の実施または試験において本明細書に記載のものと同様または同等である方法および材料を用いることができるが、適切な方法および材料が下に記載されている。本明細書において言及されている全ての刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は、その全体が参照により組み込まれる。矛盾する場合には、定義を含めた本明細書に支配される。さらに、材料、方法、および実施例は単に例示的なものであり、限定するものではない。本発明の他の特徴および利点は、以下の発明を実施するための形態および特許請求の範囲から明らかになるであろう。タンパク質は、眼疾患の治療において使用される治療薬の優勢なクラスである。しかし、大きな抗体に基づくタンパク質薬物は血液網膜関門を回避することができず、したがって、治療するためには繰り返し眼内投与する必要がある。ヒト臨床試験において、2年間一貫して、カプセル封入細胞技術ECT眼内デバイスにより生物学的治療薬biotherapeuticを眼に直接送達することができることが以前実証されており、これにより、この技術を他の眼科用生物製剤、例えば滲出型wetAMDに関連するものにも拡張することができることが示されている。例えば、抗体全体、抗体のFab断片、単鎖のScFv抗体、および融合受容体-Fc分子を含めた抗体足場生物製剤の主要なクラスを表すcDNA配列を合成した。cDNA発現ベクターを使用して、所望の抗体に基づく生物製剤を分泌する安定なヒト細胞株を創出した。その後、細胞株をカプセル封入して、眼用のECT埋め込み物を創出した。タンパク質分泌の速度をELISAによって決定した。培養したクローン細胞株は抗体足場タンパク質の全てのクラスを分泌し、その多くがCHO細胞株に基づく製造系と同等であった。クローン細胞株は頑強な組換えタンパク質分泌を示し、一部の細胞株のレベルは1日当たり細胞百万個当たり200~20,000ng20pcdに近づいた。いくつかの実施形態では、1回、2回、3回またはそれ以上のトランスフェクションの反復トランスフェクションプロセスを用いて、細胞を遺伝子操作することができる。驚いたことに、反復DNAトランスフェクションおよび選択により、細胞株の、組換えタンパク質分泌を生じさせる能力が、1日当たり細胞百万個当たり50,000ngから70,000ng超70pcdまで有意に増大する。反復トランスフェクションプロセスを用いて、同じまたは異なる抗血管新生抗体足場および/または抗血管新生分子の多数のコピーを細胞例えば、ARPE-19細胞導入することができる。1回のトランスフェクションを伴う反復トランスフェクションプロセスで作出した分子は、第1世代分子と称することができる。2回のトランスフェクションを伴う反復トランスフェクションプロセスで作出した分子は、第2世代分子と称することができる。3回のトランスフェクションを伴う反復トランスフェクションプロセスで作出した分子は、第3世代分子と称することができる。活性な抗体足場に基づく生物製剤および受容体融合タンパク質を産生する細胞株を首尾よくカプセル封入し、個々のECTデバイスからの組換えタンパク質の最初の産生が1日当たり50~1000ngに至るまでのレベルで最初に検出された。その後の反復的にDNAトランスフェクトした細胞株により、培地の最適化と関連して、眼科用ECTデバイスのレベルが1日当たり4,000ng~10,000ngに至るまで上昇した。したがって、これらのECTデバイスは、眼科適応症、ならびに局在的適応症および/または全身的適応症に対する、抗体、抗体足場、および/または受容体融合タンパク質を含めた大きな生物学的分子の有効な薬物送達プラットフォームであり得る。血管内皮増殖因子VEGFは、胚循環系の形成である脈管形成と、既存の脈管構造からの血管の成長である血管新生のどちらにも関与するシグナル伝達タンパク質である。VEGFは主に、血管内皮の細胞に対するその効果が公知であるが、広範囲の他の細胞種、例えば、単球/マクロファージ遊走の刺激、ニューロン、癌細胞、腎臓上皮細胞などにも影響を及ぼす。VEGFファミリーにはいくつものタンパク質が存在し、これは、mRNAの代替スプライシングの結果として生じる。種々のスプライス変異体により、生じたタンパク質が血管新生促進性であるか、または抗血管新生性であるかが決定されるので、それらはVEGFの機能に影響を与える。さらに、スプライス変異体は、細胞表面上でのVEGFとヘパランheparin硫酸プロテオグリカンHSPGおよびニューロピリンneuripilinコレセプターとの相互作用に影響を及ぼし、今度は、それにより、VEGFの、VEGFシグナル伝達受容体VEGFRに結合し、それを活性化する能力が増強される。VEGFスプライス変異体は、グリコシル化されたジスルフィド結合二量体として細胞から放出される。構造的に、VEGFはシステインノット増殖因子のPDGFファミリーに属し、したがって、いくつかの密接に関連するタンパク質、すなわち、増殖因子のVEGFサブファミリーを共に構成する胎盤増殖因子P1GF、VEGF-B、VEGF-CおよびVEGF-Dが存在する。VEGF自体は、一般には、これらの他の関連する増殖因子と区別するためにVEGF-Aと称される。タンパク質のVEGFファミリーは、VEGFRまたは細胞表面上に存在するチロシンキナーゼ受容体に結合することによって細胞の応答を刺激する。VEGF受容体は、7つの免疫グロブリン様ドメインからなる細胞外部分、単一の膜貫通領域、および開裂チロシンキナーゼドメインを含有する細胞内部分を有する。VEGF-Aは、VEGFR-1Flt-1およびVEGFR-2KDR/Flk-1のどちらにも結合する。VEGFR1は、全長の受容体チロシンキナーゼRTKとして、ならびに可溶性の形態で発現され、細胞外ドメインのみを保有する。VEGFR-2は、VEGFに対する公知の細胞応答のほとんど全てを媒介すると思われ、血管芽細胞hemangioblastおよび血管芽細胞angioblastに分化する運命にある中胚葉前駆細胞において発現される。VEGFR-1の機能はあまり明確には定義されていないが、VEGFR-2シグナル伝達を調節すると考えられている。VEGF-Aは違うが、VEGF-CおよびVEGF-Dも第3の受容体VEGFR-3のリガンドであり、リンパ脈管新生を媒介する。血小板由来増殖因子PDGFは、同様に血管新生において役割を果たす増殖因子である。PDGFの多数の形態が存在し、2つのA鎖AA、2つのB鎖BB、または混合A/B鎖ABを含有する二量体を構成する。PDGFは、内皮細胞の増殖に対する支持体としての機能を果たす細胞のクラスである周皮細胞に対する強力なマイトジェンである。PDGF受容体PDGFRは、アルファおよびベータの2つの形態で存在する。PDGFRベータはPDGF-BBに対する親和性が最も高く、融合タンパク質-Fcの形態で、または細胞外可溶性受容体としてのいずれかで、分泌タンパク質として抗血管新生性の生物学的効果を発揮することが示されている。最近、抗VEGF分子と拮抗PDGF分子の組み合わせを伴うマウス眼血管新生モデルにおいて、強力な相乗的抗血管新生活性が実証された。したがって、抗PDGF、抗VEGF併用療法では、抗VEGF療法単独よりも高い抗血管新生活性が発揮される可能性がある。対象の遺伝子すなわち、本発明によるVEGF受容体構築物またはPDGF受容体構築物などの所与の抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子をコードする遺伝子を、当技術分野で公知の標準の技法を用いて適切な発現ベクターのクローニング部位に挿入することができる。VEGF受容体分子をコードするヒトおよび他の哺乳動物遺伝子の核酸配列およびアミノ酸配列は公知である。例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第4,997,929号;同第5,141,856号;同第5,364,769号;同第5,453,361号;WO93/06116;WO95/30686を参照されたい。本発明では、種々の特異的な切断されたVEGF受容体構築物および/またはPDGF受容体構築物が意図されている。VEGFとその受容体の結合またはPDGFとその受容体の結合を攪乱する抗血管新生抗体足場すなわち、抗体および抗原結合性断片およびそれらの誘導体、単鎖抗体なども意図されている。例えば、本明細書に記載の可溶性VEGFR受容体タンパク質は、分泌性VEGF受容体1sVR1、分泌性VEGF受容体2sVR2の断片、および/またはVEGF受容体1のVEGF結合ドメインと分泌性VEGF受容体2のVEGF結合ドメインのキメラを含む。これらの分泌性タンパク質はVEGFと結合し、また、多数のIg様ドメインを含有する。VR1由来およびVR2由来の両方のいくつかの免疫グロブリン様ドメインが、本明細書に開示されている可溶性VEGF受容体構築物において使用されている。ドメイン2D2はsVR1のVEGF結合ドメインVBDであるが、VEGFの親和性の高い結合のためにはドメイン3D3が必要であることが当業者には理解されよう。ドメイン1~3D1~3またはドメイン2~3D-3を含有するsVR1の切断体は、ドメイン2単独よりも高い親和性でVEGFと結合する。さらに、これらの切断体は、VEGFの血管新生作用の中和もする。VR2は、親和性の高いVEGF結合のために同様の要件を有するが、さらに、単量体型は非常に低い親和性で結合するので、二量体でなければならない。本明細書に記載の種々の受容体構築物としては、VR2のドメイン1、2、および3ならびにVR1のドメイン2とVR2のドメイン3のキメラが挙げられる。型は、単量体の形態または二量体の形態であってよい。本明細書に記載されている可溶性VEGF受容体構築物の二量体形成成分は全長のFc領域である。別の例では、PDGFRベータの細胞外ドメイン1~5は、PDGFと結合することが示されている。PDGFRベータの細胞外ドメインを1~3に切断してもPDGFと結合する。したがって、これらの可溶性のネイティブな細胞外ドメインを組み合わせることにより、または融合タンパク質として、PDGFに対する可溶性アンタゴニストを創出することが可能になる。眼の新血管形成の多数のモデルにおいて示されているように、PDGFRベータアンタゴニストの使用により、VEGFアンタゴニストの抗血管新生作用が補足されるJoら、2006年。本発明は、公知の抗VEGF化合物およびその生体反応性断片に由来するおよび/またはそれに対するバイオシミラーである抗血管新生抗体足場および受容体融合タンパク質も提供する。例えば、公知の抗VEGF化合物としては、これらに限定されないが、抗VEGF受容体断片すなわち、アフリバーセプトおよび/または抗VEGF抗体またはその抗原結合性断片すなわち、ベバシズマブ、DrugBankDB00112;またはラニビズマブDrugBankDB01270が挙げられる。これらの公知の抗VEGF化合物の配列は当技術分野で公知である。他の例では、生理活性拮抗PDGF受容体断片も文献に記載されているHeidaranら、1990年;Heidaranら、1995年;Nakamuraら、2001年。本発明の特異的な抗血管新生抗体足場およびVEGF受容体構築物は、1p834VEGFR-Fc1、[RS-VEGF受容体1、ドメイン2およびVEGF受容体2、ドメイン3R1D2-R2D3]-EFEPKSC-hIgG1Fc2p838VEGFR-Fc2、[VEGF受容体2、ドメイン1、2、および3R2D1-R2D2-R2D3]3p876VEGF抗体ScFv1、Hisタグを有する4p913VEGF抗体ScFv2、Hisタグを有さない5p873アフリバーセプト、VEGFR-Fc3、VEGF受容体1、ドメイン2およびVEGF受容体2、ドメイン3R1D2-R2D3hIgG1Fc6p874/p875ベバシズマブ、VEGF抗体全体1、重鎖/軽鎖7p915/p914ラニビズマブ、VEGF抗体Fab、重鎖断片/軽鎖8p916/p914ラニビズマブ、VEGF抗体全体2、重鎖/軽鎖9p917VEGFR-Fc1、[RS-VEGF受容体1、ドメイン2およびVEGF受容体2、ドメイン3R1D2-R2D3]-hIgG1Fcを含む。本明細書において初めて記載されたVEGF構築物は、WO09/149205に記載のVEGF受容体構築物よりも優れている。詳細には、Fc尾部を欠くVEGF受容体構築物例えば、WO09/149205の配列番号12を参照されたいは、動物モデルにおいて高度に炎症性であるか、または安定な細胞株にすることができない可能性がある。WO09/149205出願の構築物のそれぞれは、IgGヒンジ領域を含むが、Fc尾部は含まない。結果として、これらの構築物は全てFab-2様分子である。Fab’2タンパク質は免疫原性を示すことが報告されていることが当業者には理解されよう。それぞれの全体が参照により本明細書に組み込まれるFumiaら、MolecularImmunology45巻:2951~61頁2008年;Lutzら、AutoinflammatoryReviews7巻:508~13頁2008年を参照されたい。本発明の1つの驚くべき発見は、IgGヒンジ領域プラスFc尾部を含有するVEGF受容体構築物、例えば、構築物p834配列番号1などにより生じる免疫学的応答は、ウサギにおいてははるかに少なく、臨床の場では全くないことである。本明細書に記載の構築物のうちの3種、p834VEGF-Fc、p873アフリバーセプト、およびp917アフリバーセプトRSは、わずかに異なるアミノ酸配列を有する。例えば、p834とp873の間の差異としては、以下が挙げられる:a.834は、シグナルペプチドと成熟タンパク質の間にRSアミノ酸を含有するb.834は、ヒンジにおいてEFEPKSCを含有するc.834は、末端のK天然を含有するd.873は、5’attB1および3’attB2組換え部位翻訳されないを含有するさらに、p873に基づくが、attB1およびattB2を取り除き、シグナルペプチドと成熟タンパク質の間にRSアミノ酸を戻した新規のアフリバーセプトRS分子p917を創出した。これらの配列の差異が図14に概略的に例示されており、また、配列アラインメントが図15に示されている。p834とアフリバーセプトの配列アラインメントが図16に示されている。驚いたことに、p834は、予想外に、p873構築物およびp917構築物のどちらよりも優れていたすなわち、抗血管新生抗体足場がより多く産生された。したがって、p834は、当技術分野で公知の他の構築物すなわち、p873およびこれらの公知の構築物に基づいて生成された構築物すなわち、p917とは構造的に異なり、それらに勝る驚くべき予想外の利点を示した。834、873、および917に基づいて細胞株を生成し、抗血管新生抗体足場生産量を測定した。結果が以下に要約されている。p834同様にp910、p969もをトランスフェクトすることにより、高発現クローンが毎回生成する。したがって、p834に関して、873または917にはない、いくつかの利点-潜在的に、追加的な分子の安定性を付与する付加的なシステインを有する長いヒンジであることが存在すると思われる。本発明の特異的な抗血管新生性PDGF受容体構築物としては、10p964PDGFR-ベータドメイン1~5受容体-IgG4Fc融合体11p963PDGFR-ベータドメイン1~5受容体-IgG1Fc融合体12p974PDGFR-ベータドメイン1~3受容体-IgG1Fc融合体13p978PDGFR-ベータドメイン1~5受容体14p977PDGFR-ベータドメイン1~5受容体プラスHis6タグが挙げられる。これらの構築物のそれぞれの特定のヌクレオチド配列およびアミノ酸配列が以下に示されている。明瞭にするために、本出願では、本発明の構築物、細胞株および抗血管新生抗体足場および/または抗血管新生分子を以下の通り識別する:pXXXとは、プラスミドを指し例えば、プラスミドp834、XXX-X-XXとは、細胞株を指し例えば、細胞株834-10-5、XXXとは、分子を指す例えば、分子834。しかし、本発明に基づく足場および構築物および細胞株はいずれも、本明細書では互換的に称し、識別し、かつ/または区分することができることが当業者には理解されよう。いくつかの実施形態では、同じ分子を異なる発現ベクターに導入し、それにより、異なるプラスミドを作製することができる。例えば、分子834のcDNAを、pCpGvitrofreeブラストサイジン耐性ベクターに導入して、プラスミドp834のcDNAを作製することができる。あるいは、分子834をpCpGvitrofreeネオマイシン耐性ベクターに導入して、プラスミドp910を作製すること;またはpCpGハイグロマイシン耐性ベクターに導入して、プラスミドp969を作製することもできる実施例7を参照されたい。本明細書に記載の反復トランスフェクションプロセスを用いて、同じまたは異なる抗血管新生抗体足場および/または抗血管新生分子の多数のコピーを、細胞例えば、ARPE-19細胞に組み入れることができる。例えば、反復トランスフェクションプロセスにより2回のトランスフェクションを導入する場合、第2世代の構築物910が生成し、これは、834のcDNAの2つのコピーを含有する。同様に、反復トランスフェクションプロセスにより3回のトランスフェクションを導入する場合、第3世代の構築物969が生成し、これは、834のcDNAの3つのコピーを含有する。図17に示されている通り、963PDGFR-Fc細胞株および910834第2世代VEGFR-Fc細胞株を、単一の細胞株としてか、または細胞株の混合物として複合ローディング、単一のECTデバイスにカプセル封入した。2時間培養した後のデバイス馴化培地のウエスタンブロット分析により、複合ローディングデバイスが963PDGFR-Fcタンパク質および910834VEGFR-Fcタンパク質の両方を同時に分泌することが示されている。多種多様な宿主/発現ベクターの組み合わせを使用して、増殖因子、または他の対象の生物活性分子複数可をコードする遺伝子を発現させることができる。長期の安定なinvivo発現は、抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子、例えば、VEGF受容体またはPDGF受容体などをコードする遺伝子が、哺乳動物宿主にinvivoで埋め込んだ際に下方制御に向かわないプロモーターに作動可能に連結されている発現ベクターすなわち、組換えDNA分子を使用して実現される。適切なプロモーターとしては、例えば、強力な構成的な哺乳動物のプロモーター、例えば、ベータアクチン、eIF4A1、GAPDHなどが挙げられる。ストレス誘導性プロモーター、例えば、メタロチオネイン1MT-1プロモーターまたはVEGFプロモーターなども適切であり得る。さらに、コアプロモーターおよびカスタム5’UTRまたはエンハンサーエレメントを含有するハイブリッドプロモーターを用いることができる。遺伝子発現を制御することができる他の公知の非レトロウイルスプロモーター、例えば、CMVプロモーターまたはSV40の初期プロモーターおよび後期プロモーターまたはアデノウイルスなどが適切である。ストレス環境、例えば、低O2などの下で追加的な遺伝子発現を付与するために、エンハンサーエレメントを置くことができる。一例は、低酸素誘導されると関連する遺伝子エレメントの上方制御を付与するエリスロポエチンエンハンサーである。次いで、対象の遺伝子を含有する発現ベクターを使用して、所望の細胞株をトランスフェクトすることができる。標準のトランスフェクション技法、例えば、リポソーム、リン酸カルシウム共沈澱、DEAE-デキストラントランスフェクションまたは電気穿細孔などを利用することができる。市販の哺乳動物トランスフェクションキット、例えば、Fugene6RocheAppliedSciencesなどを購入することができる。さらに、ウイルスベクターを使用して、所望の細胞株を変換することができる。適切なウイルスベクターの例は市販のpLentiファミリーのウイルスベクターInvitrogenである。ヒト哺乳動物の細胞を使用することができる。全ての場合において、デバイスに含有される細胞または組織が、汚染されていない、または不純物が混和していないことが重要である。重鎖成分および軽鎖成分を必要とする抗体足場タンパク質については、それぞれが関連する抗体の重鎖または軽鎖をコードする二重構築物を同時トランスフェクトし、それにより、機能的な二価のFabおよび四価の抗体全体分子を発現する細胞株をもたらすことができる。開示されている構築物において使用する好ましいプロモーターとしては、図1に示されている通り、SV40プロモーターおよびCMV/EF1アルファプロモーターが挙げられる。他の有用な発現ベクターは、例えば、染色体DNA配列、非染色体DNA配列および合成DNA配列のセグメント、例えば、SV40の種々の公知の誘導体および公知の細菌プラスミドなど、例えば、pUC、pBR322を含めたE.coli由来のpBlueScript商標プラスミド、pCR1、pMB9およびそれらの誘導体からなってよい。ジェネテシンG418薬物選択遺伝子、ハイグロマイシン薬物選択遺伝子またはブラストサイジン薬物選択遺伝子を含有する発現ベクターSouthern,P.J.、InVitro、18巻、315頁1981年、Southern,P.J.およびBerg,P.、J.Mol.Appl.Genet.、1巻、327頁1982年も有用である。これらのベクターでは、種々の異なるエンハンサー/プロモーター領域を使用して、対象の生物遺伝子および/またはG418、ハイグロマイシンB、またはブラストサイジンなどの毒素による選択に対する耐性を付与する遺伝子の発現を駆動することができる。種々の異なる哺乳動物プロモーターを使用して、G418およびハイグロマイシンBの遺伝子および/または対象の生物遺伝子の発現を導くことができる。G418耐性遺伝子は、培地に添加されたG418100~1000μg/μlを酵素的に不活化するアミノグリコシドホスホトランスフェラーゼAPHをコードする。APH遺伝子を発現している細胞のみが薬物選択を生き抜くことになり、通常、これにより、第2の生物遺伝子も発現する。ハイグロマイシンBホスホトランスフェラーゼHPH遺伝子は、ハイグロマイシン毒素を特異的に修飾し、それを不活化する酵素をコードする。ハイグロマイシンBホスホトランスフェラーゼ遺伝子と同時トランスフェクトされた、またはそれと同じプラスミド上に含有される遺伝子は、ハイグロマイシンBが50~200μg/mlの濃度で存在する際に優先的に発現される。使用することができる発現ベクターの例としては、これらに限定されないが、市販のpRC/CMVInvitrogen、pRC/RSVInvitrogen、pCDNA1NEOInvitrogen、pCI-NeoPromega、pcDNA3.3InvitrogenおよびGSベクター系LonzaGroup、Switzerlandが挙げられる。他の適切な市販のベクターとしては、pBlast、pMono、またはpVitroが挙げられる。好ましい一実施形態では、発現ベクター系は、ネオマイシンG418耐性遺伝子、ハイグロマイシン耐性遺伝子、およびブラストサイジン耐性遺伝子InvivoGen、SanDiego、CAと一緒に利用可能なpCpGfree-vitro発現ベクターである図1参照。一実施形態では、突然変異体DHFRのcDNAおよびポリリンカーを含むpUC18配列全体を含有するpNUT発現ベクターを使用することができる。例えば、Aebischer、P.ら、Transplantation、58巻、1275~1277頁1994年;Baetgeら、PNAS、83巻、5454~58頁1986年を参照されたい。pNUT発現ベクターは、DHFRコード配列がG418薬物耐性またはハイグロマイシン薬物耐性のコード配列で置き換わるように改変することができる。pNUT発現ベクター内のSV40プロモーターを上記のものなどの任意の適切な構成的に発現される哺乳動物プロモーターと交換することもできる。任意の他の適切な、市販の発現ベクター例えば、pcDNAファミリーInvitrogen、pBlast、pMono、pVitro、またはpCpG-vitroInvivogenも使用することができることが当業者には理解されよう。一般には、発現を調節する主要なエレメントが発現カセット内に見いだされる。これらのエレメントとしては、プロモーター、5’非翻訳領域5’UTRおよび3’非翻訳領域3’UTRが挙げられる。プラスミドの組み込みまたは発現のためには適切な発現ベクターの他のエレメントが重要である可能性があるが、それは容易に明らかでない場合がある。当業者は、特許請求された発明において使用するために適切な発現ベクターを設計し、構築することができる。適切なベクターの選択、設計、および/または構築は、十分当業者の常套的なレベルの範囲内である。VEGF1受容体、VEGF2受容体、PDGFアルファ受容体、およびPDGFベータ受容体をコードする遺伝子およびcDNAがクローニングされ、それらのヌクレオチド配列が公開されているGenBank受託U01134およびAF063658、NM_006206、BC032224。公的に入手可能でない、本発明において有用な生物活性分子をコードする他の遺伝子は、標準の組換えDNA法、例えば、PCR増幅、オリゴヌクレオチドプローブを用いたゲノムライブラリーおよびcDNAライブラリーのスクリーニングなどを用いて得ることができる。生物活性分子をコードする公知の遺伝子はいずれも本発明の方法において用いることができる。選択された細胞は、自然に生じる連続的なヒト網膜色素上皮細胞株であるARPE-19細胞株である。しかし、これらに限定されないが、CHO細胞、BHK細胞、RPE初代細胞または不死化細胞を含めた他の適切な細胞も使用することができることが当業者には理解されよう。細胞の選択は、意図された適用に左右される。特定の抗血管新生抗体足場またはVEGF受容体構築物の分泌のために、カプセル封入細胞を選択することができる。活性である、構築物のアゴニスト、類似体、誘導体または断片を合成し、分泌する細胞も使用することができる。他の適切な細胞型を、本明細書に記載の抗血管新生抗体足場またはVEGF受容体構築物のいずれかを分泌するように遺伝子操作することもできることが当業者には理解されよう。カプセル封入細胞に基づく送達系のためのプラットフォーム細胞株であるためには、細胞株は、以下の特性をできるだけ多く有するべきである:1細胞は、ストリンジェントな条件下で頑丈であるべきであるカプセル封入細胞は、無血管性組織腔において、例えば、中枢神経系または眼において、特に眼内の環境においてなどで機能的であるべきである;2細胞は、遺伝子改変することができるべきである所望の治療因子を工学的に操作して細胞内に入れることが必要である;3細胞は、比較的長い寿命を有するべきである細胞は、預け、特徴付け、工学的に操作し、安全性試験し、臨床的なロット製造するために十分な後代を生じるべきである;4細胞は、好ましくはヒト起源であるべきであるカプセル封入細胞と宿主の間の適合性が増す;5細胞は、1ヶ月より長い期間にわたってinvivoにおいてデバイス内で80超の生存能力を示すべきであるそれにより長期送達が確実になる;6カプセル封入細胞は、有用な生物学的製剤を効果的な分量で送達するべきであるこれにより、治療の有効性が確実になる;7細胞は、低レベルの宿主免疫応答を有するべきであるこれにより、移植片の長寿命が確実になる;8細胞は非腫瘍形成性であるべきであるデバイスが漏出した場合に、宿主に安全性をもたらすために。ARPE-19細胞株Dunnら、62巻Exp.EyeRes.155~69頁1996年、Dunnら、39巻Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.2744~9頁1998年、Finnemannら、94巻Proc.Natl.Acad.Sci.USA12932~7頁1997年、Handaら、66巻Exp.Eye.411~9頁1998年、Holtkampら、112巻Clin.Exp.Immunol.34~43頁1998年、Maidjiら、70巻J.Virol.8402~10頁1996年;米国特許第6,361,771号により、カプセル封入細胞に基づく送達系のための上首尾のプラットフォーム細胞の特性の全てが実証される。ARPE-19細胞株は、AmericanTypeCultureCollectionから入手可能であるATCC番号CRL-2302。ARPE-19細胞は、正常な網膜色素上皮RPE細胞であり、網膜色素上皮細胞に特異的なマーカーであるCRALBPおよびRPE-65を発現する。ARPE-19細胞は、形態学的極性および機能的極性を示す安定な単層を形成する。本発明の遺伝子操作されたARPE-19細胞は、抗血管新生抗体足場および/または抗血管新生分子を治療量で産生するための1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または本発明の抗血管新生分子を発現する。いくつかの実施形態では、遺伝子操作されたARPE-19細胞は、細胞106個当たり1日当たり少なくとも10,000ng産生することができる。これらの細胞は、この量を少なくとも3ヶ月間にわたって産生することができることが好ましい。他の実施形態では、これらの分子は、反復トランスフェクションプロセスを用いてARPE-19細胞に導入することができる。反復トランスフェクションは、少なくとも1回のトランスフェクション、2回のトランスフェクション、3回のトランスフェクション、またはそれ以上のトランスフェクション例えば、4回、5回、6回、7回、8回、9回、10回、またはそれ以上のトランスフェクションを含有する。本発明の細胞株は、反復トランスフェクションが1回のトランスフェクションである場合に、1またはそれより多くの抗体足場に基づく生物製剤および受容体融合タンパク質すなわち、抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を細胞106個当たり1日当たり10,000~30,000ng、好ましくは細胞106個当たり1日当たり約15,000ngまたは少なくとも15,000ng産生することができる。あるいは、細胞株は、反復トランスフェクションが2回のトランスフェクションである場合に、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を細胞106個当たり1日当たり30,000~50,000ng、好ましくは細胞106個当たり1日当たり約35,000ngまたは少なくとも35,000ng産生することができる。他の実施形態では、細胞株は、反復トランスフェクションが3回のトランスフェクションである場合に、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を細胞106個当たり1日当たり50,000~75,000ng、好ましくは細胞106個当たり1日当たり約70,000ngまたは少なくとも70,000ngを産生する。いくつかの実施形態では、そのような反復トランスフェクションを用いて同じ抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を細胞に導入することができる。あるいは、反復トランスフェクションの各トランスフェクションで異なる抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を細胞に導入する。本発明のデバイスを使用する場合、好ましくは工学的に操作されたARPE-19細胞を102~108個、最も好ましくは本明細書に記載の1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場またはVEGF受容体構築物またはPDGF受容体構築物を分泌するように遺伝子操作されたARPE-19細胞を0.5~1.0×106個または5×102~6×105個、各デバイスにカプセル封入する。投与量は、少数または多数のカプセル、好ましくは患者当たり1~50個のカプセルを埋め込むことによって調節することができる。本明細書に記載の眼科用デバイスにより、抗血管新生抗体足場複数可または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体構築物複数可を、1日当たり患者当たり眼当たり約0.1pg~1000μg送達することができる。非限定的な一例では、治療量は、眼当たり定常状態で500~50,000ngである。別の例では、治療量は、眼当たり定常状態で少なくとも10μg/mlである。さらに、本発明の細胞株およびデバイスは、この治療量を少なくとも3ヶ月間にわたって発現することができる。選択された産物を産生する細胞または組織を隔離するための技法および手順は当業者に公知である、または、常套的な実験だけを用いて公知の手順から適合させることができる。隔離しようとする細胞が複製性細胞である、またはinvitroにおける増殖に適合させた細胞株である場合、これらの細胞の細胞バンクを生成することが特に有利である。細胞バンクの特定の利点は、それが、同じ培養物または細胞のバッチから調製された細胞性供給源であることである。すなわち、全ての細胞が同じ細胞性供給源から生じ、同じ条件およびストレスに曝露されている。したがって、バイアルを均一な培養物として処理することができる。移植の状況では、これにより、同一または代替のデバイスの作出が著しく容易になる。これにより、埋め込まれた細胞がレトロウイルスなどを含まないことが保障される簡易化試験プロトコールも可能になる。これにより、ビヒクルをinvivoおよびinvitroで平行してモニタリングすることも可能になり、invivoに残留することに独特の影響または因子を調査することが可能になる。本明細書で使用される場合、個体またはレシピエントまたは宿主という用語は、互換的に使用され、ヒトまたは動物被験体を指す。生物活性分子BAMとは、本発明のデバイスが埋め込まれる個体の体に対する生物学的に有用な作用を発揮することができる物質である。例えば、本明細書に記載の抗血管新生抗体足場およびVEGF受容体構築物がBAMの例である。カプセルおよびデバイスおよびビヒクルという用語は、本明細書では、互換的に使用され、本発明のECTデバイスを指す。別段の指定がない限り、細胞という用語は、これらに限定されないが、組織内に保持される細胞、細胞クラスター、および個別に隔離された細胞を含めた、任意の形態の細胞を意味する。本明細書で使用される場合、生体適合性カプセルまたは生体適合性デバイスまたは生体適合性ビヒクルとは、カプセルまたはデバイスまたはビヒクルにより、個体に埋め込まれた際に、カプセルの拒絶反応がもたらされる、またはカプセルが、例えば分解によって作動不能になるのに十分な有害な宿主応答が引き出されないことを意味する。本明細書で使用される場合、免疫隔離性カプセルまたは免疫保護性カプセルまたは免疫隔離性デバイスまたは免疫保護性デバイスまたは免疫隔離性ビヒクルまたは免疫保護性ビヒクルとは、カプセルが、個体に埋め込まれた際に、デバイスの細胞性内容物を好都合に分配し、そのコア内部の細胞に対する宿主の免疫系の有害作用を最小限にすることを意味する。本明細書で使用される生物活性分子の長期の安定発現とは、生物活性分子が、1ヶ月を超える期間、好ましくは3ヶ月を超える期間、最も好ましくは6ヶ月を超える期間にわたって、その有用な生物活性が維持されるのに十分なレベルで継続して産生されることを意味する。デバイスの埋め込みおよびその内容物は、3ヶ月超にわたって、多くの場合には1年より長く、いくつかの場合には2年以上、invivoで機能性を保持することができる。包被および半透性膜という用語は、本明細書では互換的に使用される。内部足場という用語は、本明細書に記載のデバイスにおいて使用することができるマトリックスの一例である。コアの周囲の包被膜の半透性により、細胞によって産生される分子例えば、代謝産物、栄養分および/または治療用物質がデバイスから周囲の宿主眼組織に拡散するが、コア内の細胞を、宿主による有害な免疫学的攻撃から保護するためには十分に不浸透性であることが可能になる。標的細胞または組織の細胞溶解が生じるのにIgG単独では不十分であるので、ビヒクルのコアからIgGを排除することは免疫隔離immunoisolationの試金石ではない。したがって、免疫隔離性カプセルに関して、最大1000kDの包被の公称分画分子量MWCO値が意図されている。好ましくは、MWCOは50~700kDである。最も好ましくは、MWCOは70~300kDである。例えば、WO92/19195を参照されたい。好ましい一実施形態では、MWCOは500kDである。本発明は、本明細書に記載の抗血管新生抗体足場または可溶性VEGF受容体のうちの1つまたは複数を眼に送達するための生体適合性、場合によって免疫隔離性かつ/または免疫保護性のデバイスにも関する。そのようなデバイスは、抗血管新生抗体足場、VEGF受容体、またはPDGF受容体を産生または分泌する生細胞を含有するコアと、コアの周囲の生体適合性包被を含有し、包被は、抗血管新生抗体足場またはVEGF受容体が、眼内、および脳、脳室、脊髄を含めた中枢神経系に拡散することを可能にする分画分子量MWCOを有する。本発明は、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を産生または分泌する細胞を有するコアと、1またはそれより多くの抗血管新生抗体足場または抗血管新生分子を通して拡散させる、細胞の周囲の半透性膜とを含有する、生体適合性かつ埋め込み型であり、場合によって免疫隔離性かつ/または免疫保護性のデバイスも提供する。そのようなデバイスは、以下の追加的な特性の1つ、2つ、3つ、4つ、5つ、6つ、7つまたは全てを含んでよい:a.コアが約0.5~1.0×106個のARPE-19細胞を含有すること;b.デバイスの長さが約4mm~11mmであること;c.デバイスの内径internaldiameterが0.9mm~1.2mmであること;d.デバイスの端部がメタクリル酸メチルを使用して密閉されていること;e.半透性膜の細孔サイズの中央値が約100nmであること;f.半透性膜の公称分画分子量MWCOが500kDであること;g.半透性膜の厚さが90~120μmであること;h.コアが、デバイスの内容積の40~85を占めるポリエチレンテレフタラートPET繊維を含む内部足場を含有すること;i.その任意の組み合わせ複数可。種々の生体適合性カプセルは、本発明による分子を送達するために適している。有用な生体適合性ポリマーカプセルは、a液体培地に浮遊させたか、または生体適合性マトリックスの内部に固定化した1またはそれより多くの細胞を含有するコアと、b隔離された細胞を含有せず、生体適合性であり、かつ、細胞により産生される生物活性分子を眼内に拡散させる膜を含む、周囲の包被とを含む。多くの形質転換された細胞または細胞株は、例えば、栄養培地を含み、場合によって細胞の生存能力および機能を持続させるための追加的な因子の供給源を含有する液体コアを有するカプセルの内部に有利に隔離される。本発明のデバイスのコアは、増殖因子例えば、プロラクチン、またはインスリン様増殖因子2、増殖調節物質、例えば、形質転換増殖因子βTGF-βなど、または網膜芽細胞腫遺伝子タンパク質または栄養分輸送エンハンサー例えば、コア内の溶存酸素の濃度を増強することができるパーフルオロカーボンの貯蔵器として機能し得る。特定のこれらの物質は、液体培地内に含めるためにも適している。さらに、当該デバイスはいずれも、必要な薬物または生物学的治療薬を制御送達するための貯蔵器として使用することもできる。そのような場合では、コアは、選択された薬物または生物学的治療薬単独で、または細胞または組織と組み合わせてを高濃度で含有する。さらに、本発明によるデバイスが埋め込まれる体の領域内の好適な環境を調製または創出する物質を含有するサテライトビヒクルもレシピエントに埋め込むことができる。そのような例では、免疫隔離された細胞を含有するデバイスを、例えば、レシピエントからの炎症性応答を下方調節または阻害する物質例えば、抗炎症性ステロイド、または毛細血管床の内植を刺激する物質例えば、血管新生因子を制御された量で放出するサテライトビヒクルと一緒に領域内に埋め込む。あるいは、コアは、細胞の位置を安定化するヒドロゲルの生体適合性マトリックスまたは他の生体適合性材料例えば、細胞外マトリックス成分を含んでよい。ヒドロゲルという用語は、本明細書では、架橋した親水性ポリマーの三次元網状構造を指す。この網状構造は、実質的に水で構成されるゲルの形態であり、ゲルは90超が水であることが好ましい。ヒドロゲルを形成する組成物は3つのクラスに入る。第1のクラスは、正味の負電荷を有する例えば、アルギン酸。第2のクラスは、正味の正電荷を有する例えば、コラーゲンおよびラミニン。市販の細胞外マトリックス成分の例としては、Matrigel商標およびVitrogen商標が挙げられる。第3のクラスは、正味の中性の電荷である例えば、高度に架橋結合したポリエチレンオキシド、またはポリビニルアルコール。沈殿キトサン、合成ポリマーおよびポリマー混和物、マイクロキャリアなどを含めた任意の適切なマトリックスまたはスペーサーを、カプセル封入される細胞の増殖特性に応じてコア内に用いることができる。あるいは、デバイスは、内部足場を有してよい。足場により、細胞が凝集することを防ぎ、デバイス内の細胞分布を改善することができるPCT公開第WO96/02646号を参照されたい。足場により、カプセル封入細胞の微小環境が規定され、細胞がコア内によく分布した状態に保たれる。特定のデバイスに対する最適な内部足場は、使用する細胞型に高度に左右される。そのような足場の不在下では、接着細胞が凝集してクラスターを形成する。例えば、内部足場は、糸または網目であってよい。糸または網目状の内部足場を形成するために使用するフィラメントは、生体適合性であり、実質的に非分解性の任意の適切な材料から形成されている参照により本明細書に組み込まれる米国特許第6,303,136号および同第6,627,422号を参照されたい。本発明のカプセルは、参照により組み込まれるPCT国際特許出願第WO92/19195号または同第WO95/05452号;または参照により組み込まれる米国特許第5,639,275号;同第5,653,975号;同第4,892,538号;同第5,156,844号;同第5,283,187号;または同第5,550,050号に記載されているものに類似することが好ましい。糸または織網目の形成において有用な材料としては、例えば、アクリル、ポリエステル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリアクリロニトリル、ポリエチレンテレフタラート、ナイロン、ポリアミド、ポリウレタン、ポリブテステルなどの繊維に形成することができる任意の生体適合性ポリマー、または、綿、絹、キチンもしくは炭素などの天然繊維が挙げられる。繊維形成性を有する任意の適切な熱可塑性ポリマー、熱可塑性エラストマー、または他の合成材料または天然材料を、予め製作された中空繊維膜または平膜板から形成された中空の円柱に挿入することができる。例えば、材料を縫合するため、または移植血管の製造において使用される絹、PETまたはナイロンフィラメントは、この種類の適用を高度に促す。他の実施形態では、金属リボンまたは針金を用い、織ることができる。これらのフィラメント材料はそれぞれ、よく制御された表面および幾何的性質を有し、大量生産することができ、埋め込み使用の長い歴史を有する。ある特定の実施形態では、フィラメントは、粗い表面および細胞突起が付着し得る取っ手をもたらすためにテクスチャライズすることができる。フィラメントは、フィラメントへの細胞の接着を増強するために、細胞外マトリックス分子でコーティングすること、または表面処理例えば、血漿放射線照射することができる。いくつかの実施形態では、非ランダムな一方向に組織化されていることが好ましいフィラメントを束に撚り合わせて、厚さおよび空隙容量がさまざまである糸を形成する。空隙容量は、フィラメント間に存在する空間と定義される。糸の空隙容量は、20~95で変動するべきであるが、50~95であることが好ましい。好ましい一実施形態では、内部足場は、PET繊維から作製され、それはデバイスの内容積の40~85を満たす。好ましいフィラメント間の空隙空間は、糸の長さに沿って足場に細胞を播種することを可能にするため、および細胞がフィラメントに付着することを可能にするために十分な20~200μmである。糸を構成するフィラメントの好ましい直径は5~100μmである。これらのフィラメントは、束に撚り合わせて糸を構成することを可能にするために十分な機械的強度を有するべきである。フィラメント断面の形状は変動し得、環状、直角、楕円形、三角形、および星印の形状の断面が好ましい。あるいは、フィラメントまたは糸は織って網目にすることができる。網目は、製紐機で、織っている間に糸またはフィラメントを網目に供給するために役立つ、モノフィラメントまたはマルチフィラメントを含有する糸巻きに類似した担体を使用して作出することができる。担体の数は調整可能であり、同じフィラメント、または組成および構造が異なるフィラメントの組み合わせに巻きつけることができる。ピックカウントによって規定される組みひもの角度は、担体の回転速度および作出スピードによって制御される。一実施形態では、心棒を使用して網目の中空管を作出する。ある特定の実施形態では、組みひもは単層として構築され、他の実施形態では、組みひもは多層構造である。組みひもの引っ張り強さは個々のフィラメントの引っ張り強さの線形和である。他の実施形態では、管状の組みひもを構築する。細胞を播種する中空繊維膜に組みひもを挿入することができる。あるいは、細胞を網目管の壁に浸透させて、細胞を付着させるために利用可能な表面積を最大にすることができる。そのような細胞の浸透が起こる場合、組みひもは細胞の足場マトリックスとして、およびデバイスの内部支持体としての両方の機能を果たす。組みひもに支持されたデバイスの引っ張り強さの増加は、代替の手法よりも有意に高い。言及した通り、免疫学的特権がない埋め込み部位、例えば、眼周囲の部位、ならびに前眼房房水および後眼房硝子体の外側の他の領域などに対しては、カプセルは免疫隔離性であることが好ましい。生体適合性材料の成分は、周囲の半透膜および内部の細胞支持足場を含んでよい。上記の選択透過性膜によりカプセル封入された足場上に形質転換された細胞を播種することが好ましい。また、張り合わせた繊維構造を、細胞を埋め込むために使用することができる。参照により組み込まれる米国特許第5,512,600号を参照されたい。生分解性ポリマーとしては、例えば、ポリ乳酸PLA、ポリ乳酸-co-グリコール酸PLGA、およびポリグリコール酸PGAおよびそれらの等価物で構成されるものが挙げられる。移植細胞を接着させることができる表面をもたらすために発泡足場が使用されているPCT国際特許出願第98/05304号、参照により組み込まれる。移植血管として織った網目管が使用されているPCT国際特許出願第WO99/52573号、参照により組み込まれる。さらに、コアは、細胞の位置を安定化する、ヒドロゲルから形成された固定化マトリックスで構成されてよい。ヒドロゲルは、実質的に水で構成されるゲルの形態の、架橋した親水性ポリマーの三次元網状構造である。周囲の半透膜を製造するために、ポリアクリレートアクリル共重合体を含む、ポリビニリデン、ポリ塩化ビニル共重合体、ポリウレタン、ポリスチレン、ポリアミド、酢酸セルロース、硝酸セルロース、ポリスルホンポリエーテルスルホンを含む、ポリホスファゼン、ポリアクリロニトリル、ポリアクリロニトリル-co-塩化ビニル、ならびにそれらの誘導体、共重合体および混合物を含めた種々のポリマーおよびポリマー混和物を使用することができる。周囲の半透膜は、生体適合性半透性の中空繊維膜であることが好ましい。そのような膜、およびそれらを作製する方法は、参照により組み込まれる米国特許第5,284,761号および同第5,158,881号に開示されている。周囲の半透膜は、参照により組み込まれる米国特許第4,976,859号または米国特許第4,968,733号に記載されているものなどのポリエーテルスルホン中空繊維から形成する。代替の周囲の半透膜材料はポリスルホンである。カプセルは、例えば、円柱状、直角、円板形状、パッチ形状、卵形、星状、または球状を含めた、生物活性を維持するため、および産物または機能を送達するための進路をもたらすために適した任意の構成であってよい。さらに、カプセルは、渦巻き状に巻くこと、または網目様構造または入れ子状の構造に巻きつけることができる。カプセルを埋め込み後に回収する場合、埋め込み部位からのカプセルの移動を導きやすい構成、例えば、レシピエント宿主の血管内を移行するのに十分小さな球状カプセルなどは好ましくない。四角形、パッチ、円板、円柱、および平板などの特定の形状は、高度な構造的完全性をもたらし、回収が望まれる場合に好ましい。デバイスは、埋め込まれている間のデバイスの位置を維持するために役立ち、回収に役立つつなぎを有することが好ましい。そのようなつなぎは、カプセルを定位置に固定するように適合させた任意の適切な形状を有してよい。例えば、縫合は、ループ、円板、または縫合糸であってよい。いくつかの実施形態では、つなぎは鳩目様の形状であり、したがって、縫合糸を用いてつなぎしたがってデバイスを強膜、または他の適切な眼構造に固定することができる。別の実施形態では、つなぎは一方の端がカプセルと接続され、他方の端で予め糸が通された縫合針を形成する。好ましい一実施形態では、つなぎは、カプセルを眼構造につなぎ留めるように適合させたアンカーループである。つなぎは、形状記憶金属および/または任意の他の適切な当技術分野で公知の医療グレード材料で構築することができる。中空繊維の構成では、繊維の内径insidediameterは2000ミクロン未満であり、1200ミクロン未満であることが好ましい。外径outsidediameterが300~600ミクロン未満であるデバイスも意図されている。好ましい一実施形態では、内径innerdiameterは0.9mm~1.2mmである。中空繊維の構成で眼に埋め込むためには、カプセルは長さ0.4cm~1.5cmであることが好ましく、長さ0.4~1.0cmであることが最も好ましい。好ましい一実施形態では、デバイスの長さは4mm~11mmである。より長いデバイスを眼内に適応させることができるが、安全かつ適切な設置のためには曲がった形状または弓状の形状が必要になり得る。眼内に設置するためには中空繊維の構成が好ましい。眼周囲に設置するためには、中空繊維の構成実質的に上記の寸法を有するまたは平板の構成のいずれかが意図されている。平板に対する上限は、平方形状であると仮定するとおよそ5mm×5mmである。表面積がだいたい同じである他の形状も意図されている。抗血管新生抗体足場、可溶性VEGFRまたは可溶性PDGFRを送達するために製造されるマイクロデバイスは、長さ1~2.5ミリメートル、内径innerdiameter300~500ミクロン、外径outerdiameter450~700ミクロンであってよい。そのような微粒子化デバイスでは、10~60モノフィラメントのPETを含有する内部足場を利用することができる。これらの微粒子化デバイスからの分画分子量範囲は100~2000kDaである。対照的に、70kDaのデキストランの受動拡散は、100~2000×10-10cm2/秒にわたる。これらの微粒子化デバイスでは本明細書に記載の任意の適切な膜材料複数可を使用することができるが、2つの好ましい材料はポリエーテルスルホンおよび/またはポリスルホンである。さらに、マイクロデバイスは、適切な材料例えば、ニチノールで作製されたアンカーを伴っても伴わなくても製造することができる。微粒子化デバイスについての徹底した考察については、参照により本明細書に組み込まれるWO2007/078922を参照されたい。本明細書に記載の抗体足場、VEGFR構築物およびPDGFR構築物の送達において使用することが意図されている膜の選択透過性の特徴は、当業者に公知の転相プロセスにより、膜の内面層内に存在するように作られている。内部表面上に拒絶性皮の選択透過性の特徴が発生することにより、細孔構造の製造の一貫性および拒絶性の制御が改善され、同時に膜の性質もカプセル封入デバイスの下流の製造全体を通して保護される。治療的必要性に求められる分子サイズを通過させることを可能にするために、本発明に記載されている膜の選択透過性の特徴を発生させるが、この特性は、必要な最大サイズを放出させながら、意図されたタンパク質サイズよりもほんのわずかだけ大きな分子がカプセルに進入することは制限することを可能にするためにも最適化されている。本発明において使用される細胞と宿主レシピエントとの間の相互作用は同種性であるので、拒絶反応に対する最大の懸念は、細胞溶解性補体に媒介される攻撃複合体に由来するもの、または抗体と補体の相互作用によるものではなく、移植されたカプセル封入細胞に対する宿主の免疫細胞複合体に媒介される直接攻撃に由来するものである。本発明において使用する膜は、免疫グロブリンGのサイズに至るまでの分子の通過が可能になるように設計するが、それでも膜は、細胞の攻撃複合体の組み立てに必要な最大分子であるClq約400kDaなどの分子の輸送を制限する。したがって、本発明において使用する膜の設計により、宿主との栄養分および代謝産物の交換速度は最大になり、移植された細胞の宿主での長期の生存能力が支持され、標的治療分子をカプセル封入細胞から宿主に実質的に送達することが可能になり、同時にカプセル封入細胞の補体認識および細胞が宿主と直接接触することが防止される。本明細書に記載の抗血管新生抗体足場、VEGFR構築物およびPDGFR構築物と一緒に使用することが意図されている有孔膜openmembraneの公称分画分子量MWCO値は最大で1000kDである。MWCOは50~700kDであることが好ましく、およそ300kDであることが理想的である。好ましい一実施形態では、MWCOは500kDである。意図されている膜の公称細孔サイズの公称細孔サイズはおよそ100nmであり、細孔のガウス分布に基づいて、最大の絶対的細孔は150nm未満である。サイズが70kDaのデキストラン分子の受動拡散は100~2000×10-10cm2/秒であり、70kDaのデキストランの拡散係数は2000×10-10cm2/秒により近いことが好ましい。抗血管新生抗体足場およびVEGFR構築物と一緒に使用する有孔膜の透水率の上限値はおよそ100mls/分/m2/mmHgである。あるいは、非常に細孔の多い膜veryopenmembraneを利用しない場合、より免疫隔離性かつ/または免疫保護性の膜を使用する。そのような免疫隔離性の膜については、透水率は一般には0.4~170mls/分/m2/mmHgの範囲内、例えば、0.5~100mls/分/m2/mmHgであり、15~50mls/分/m2/mmHgの範囲内であることが好ましい。当業者に理解される単一の分子量阻止率を決定するための試験手順を用いると、より免疫隔離性の膜の公称分画分子量は、ウシのアルブミンの90を阻止するが、70kDaのデキストラン分子の拡散フラックスは、およそ2000×10-10cm2/秒のままである。Dionneら、ASAIOAbstracts、99頁1993年、およびColtonら、TheKidney編、BrennerBMおよびRectorFC、2425~89頁1981年に記載されている通り定義し、測定し、算出したカプセルのグルコース物質移動係数は、10-6cm/秒超であり、10-4cm/秒超であることが好ましい。好ましい一実施形態では、細孔サイズの中央値は約100nmである。当該デバイスのコアを囲む周囲または周辺の領域包被は、選択透過性、生体適合性、かつ/または免疫隔離性であってよい。包被は、隔離された細胞を含まず、コアを完全に取り囲みすなわち、隔離、それにより、コア内およびレシピエントの体内のいかなる細胞との接触も防止されるように作出する。生体適合性半透性の中空繊維膜、およびそれらを作製する方法は、それぞれの全体が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第5,284,761号および同第5,158,881号に開示されているWO95/05452も参照されたい。例えば、カプセル包被は、それぞれが参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第4,976,859号および同第4,968,733号、および同第5,762,798号に記載のものなどのポリエーテルスルホン中空繊維から形成されていてよい。選択透過性にするために、包被は、デバイスを埋め込んだ後に起こることが予測される免疫学的応答の種類および程度、ならびにデバイスを出入りして眼に入ることが望ましい最も大きな物質の分子サイズの両方に適した範囲の分画分子量MWCOを有するように形成する。デバイスを埋め込んだ後にレシピエントにより開始される可能性がある免疫学的攻撃の種類および程度は、一部はデバイス内に隔離された部分の種類複数可に左右され、一部はレシピエントとの同一性すなわち、レシピエントがBAMの供給源と遺伝的にどのくらい密接に関連するかに左右される。埋め込まれた組織または細胞がレシピエントと同種異系である場合、免疫学的拒絶反応は、埋め込まれた細胞に対するレシピエントの免疫細胞による細胞媒介性攻撃を通じて大きく進行し得る。組織または細胞がレシピエントに対して異種である場合、抗体と相補物の相互作用だけでなく、レシピエントの細胞溶解性補体攻撃複合体の組み立てを通じた分子攻撃が優性であり得る。包被は、所定のサイズまでの物質は通過させるが、それよりも大きな物質の通過は妨げる。より詳細には、周囲または周辺の領域は、所定の範囲のサイズの細孔または空隙を有するように作出し、その結果として、デバイスは選択透過性になる。周囲の包被のMWCOは、コアに対する免疫学的攻撃を行うために必要な物質の出入りを妨げるために十分に低いが、それでも抗血管新生抗体足場またはVEGF受容体またはPDGF受容体をレシピエントに送達させるために十分に高くければならない。切断された抗血管新生抗体足場またはVEGF受容体またはPDGF受容体を使用する場合、本発明のデバイスの生体適合性包被のMWCOは約1kD~約150kDであることが好ましい。しかし、切断されていない抗血管新生抗体足場または受容体を送達することが望まれる場合、MWCOが200kDを超える有孔膜を使用するべきである。デバイスの包被に関して本明細書で使用される場合、生体適合性という用語は、デバイスおよびその内容物を集合的に指す。詳細には、生体適合性とは、埋め込まれたインタクトなデバイスおよびその内容物の、体の種々の保護系の有害な影響を回避する能力、および、かなりの期間にわたって機能的なままである能力を指す。本明細書で使用される場合、保護系という用語は、当該ビヒクルが埋め込まれた個体の免疫系により開始される可能性のある免疫学的攻撃の種類、ならびに他の拒絶反応機構、例えば、線維形成反応、異物反応および個体の体に外来物が存在することによって誘導される可能性がある他の種類の炎症性応答などを指す。免疫系による防御応答または異物線維形成反応からの回避に加えて、生体適合性という用語は、本明細書で使用される場合、ビヒクルおよびその内容物によって、特異的な望ましくない細胞傷害性または全身性の影響、例えばビヒクルまたはその内容物の所望の機能に干渉する影響が引き起こされないことも意味する。デバイスの外面は、選択された部位への埋め込みに特に適するように選択または設計することができる。例えば、外面は、周囲の組織の細胞が付着することが望ましいかどうかに応じて、平滑、点状または粗面であってよい。形状または構成は、選択された埋め込み部位に特に適するように選択または設計することもできる。デバイスの周囲または周辺の領域包被の生体適合性は、因子の組み合わせによって作出する。生体適合性および継続した機能性に重要であるのは、デバイスの形態、疎水性および望ましくない物質がデバイス自体の表面上にも存在せず、そこから浸出することもないことである。したがって、異物反応を引き出すブラシ表面、ひだ、中間層または他の形状または構造は回避する。さらに、デバイスを形成する材料は、望ましくない物質がデバイス材料自体から浸出しないことを保証するために十分に純粋である。さらに、デバイスを調製した後、デバイスに接着し、またはそれに吸収され、その後、デバイスの生体適合性を害する可能性がある、流体または材料例えば、血清を用いたデバイスの外面の処理は回避する。第1に、デバイス包被を形成するために使用する材料は、デバイスが埋め込まれたレシピエントの組織と適合し、許容されるそれらの能力に基づいて選択された物質である。レシピエントまたは隔離された細胞に対して有害でない物質を使用する。好ましい物質としては、ポリマー材料、すなわち、熱可塑性ポリマーが挙げられる。特に好ましい熱可塑性ポリマー物質は、疎水性がそれほど大きくない物質、すなわち、BrandrupJ.らPolymerHandbook第3版、JohnWileySons、NY1989年において定義されている通り、溶解パラメータが8~15ジュール/m31/2、またはより好ましくは、9~14ジュール/m31/2である物資である。ポリマー物質は、溶解パラメータが、有機溶媒に可溶性であるように十分低いが、それでも分配して適切な膜を形成するために十分に高くなるように選択する。そのようなポリマー物質は、不安定な求核性部分を実質的に含まず、安定化剤の不在下であってもオキシダントおよび酵素に対して高度に耐性であるべきである。特定のビヒクルについて意図されているinvivoにおける残留期間も考慮しなければならず、生理的条件およびストレスに曝露させた時に適切に安定である物質を選択するべきである。長期にわたるinvivoにおける残留期間、例えば、1年または2年を超える期間などにおいてさえも十分に安定である多くの熱可塑性物質が公知である。デバイスを構築するために使用する材料の選択は、参照により本明細書に組み込まれるDionneWO92/19195に詳細が記載されている通り、いくつもの因子によって決定される。簡単に述べると、種々のポリマーおよびポリマー混和物を使用してカプセル包被を製造することができる。デバイスおよびその中の増殖表面を形成するポリマー膜としては、ポリアクリレートアクリル共重合体を含む、ポリビニリデン、ポリ塩化ビニル共重合体、ポリウレタン、ポリスチレン、ポリアミド、ポリメチルメタクリレート、ポリビニルジフルオリドpolyvinyldifluoride、ポリオレフィン、酢酸セルロース、硝酸セルロース、ポリスルホン、ポリホスファゼン、ポリアクリロニトリル、ポリアクリロニトリル-co-塩化ビニル、ならびにそれらの誘導体、共重合体および混合物が挙げられ得る。好ましい膜キャスティング溶液は、水混和性溶媒ジメチルアセトアミドDMACSOに溶解させたポリスルホンまたは水混和性溶媒ブチロラクトンに溶解させたポリエーテルスルホンのいずれかを含む。このキャスティング溶液は、場合によっては、完成した膜の浸透特性に影響を及ぼす親水性または疎水性の添加物を含んでよい。ポリスルホンまたはポリエーテルスルホンに対して好ましい親水性添加物はポリビニルピロリドンPVPである。他の適切なポリマーは、ポリアクリロニトリルPAN、ポリメチルメタクリレートPMMA、ポリビニルジフルオリドPVDF、ポリエチレンオキシド、ポリオレフィン例えば、ポリイソブチレンまたはポリプロピレン、ポリアクリロニトリル/ポリ塩化ビニルPAN/PVC、および/またはセルロース誘導体例えば、酢酸セルロースまたは酪酸セルロースを含む。これらおよび他の適切なポリマーおよび共重合体に適合する水混和性溶媒は米国特許第3,615,024号の教義において見いだされる。第2に、デバイスの生体適合性包被の調製に使用する物質は、浸出可能な発熱性または他の点で有害な物質、刺激性物質または免疫原性物質を含まないか、または徹底的に精製して、そのような有害な物質が除去されている。その後、埋め込む前のデバイスの製造および維持の全体を通して最新の注意を払い、デバイスまたは包被に、その生体適合性に悪影響を及ぼす物質が不純物混和またはコンタミネーションすることを防ぐ。第3に、テクスチャーを含めたデバイスの外部構成は、それにより、埋め込んだ後にレシピエントの眼との最適なインターフェースがもたらされるように形成する。特定のデバイスの幾何学的配置により、異物線維形成反応が特異的に引き出されることが見いだされており、これは回避するべきである。したがって、デバイスは、中間層を有する構造、例えば、ブラシ表面またはひだなどを含有するべきではない。一般に、同じビヒクルまたは近接するビヒクル由来の向かい合うビヒクル表面または辺は、少なくとも1mm、好ましくは2mm超、最も好ましくは5mm超離れているべきである。好ましい実施形態は、外径outerdiameterが約200~1600μmであり、長さが約0.4~1mmである円柱を含む。本発明のデバイスのコアの体積はおよそ2μl~20μlであることが好ましい。しかし、コア体積が0.5μl未満例えば、約0.3μlである微粒子化デバイスを使用することも可能であることが当業者には理解されよう。生体適合性デバイスの周囲の包被は、場合によって、埋め込まれたビヒクルに対する局所的な炎症性応答を減少させるまたは抑止する物質および/または埋め込まれた細胞または組織に適した局所的な環境を生成または助長する物質を含んでよい。例えば、1またはそれより多くの免疫応答のメディエーターに対する抗体を含めることができる。利用可能な潜在的に有用な抗体、例えば、リンフォカイン腫瘍壊死因子TNFに対する抗体、およびインターフェロンIFNに対する抗体などをマトリックス前駆体溶液に含めることができる。同様に、抗炎症性ステロイドを含めることができる。参照により本明細書に組み込まれるChristenson,L.ら、J.Biomed.Mat.Res.、23、705~718頁1989年;Christenson,L.、Ph.D.thesis、BrownUniversity、1989年を参照されたい。あるいは、血管新生毛細血管床の内植を刺激する物質を含めることができる。いくつかの実施形態では、本デバイスの包被は、免疫隔離性かつ/または免疫保護性である。すなわち、包被により、デバイスのコア内の細胞がデバイスを埋め込む個体の免疫系から保護される。これは、1個体の体の有害な物質のコアへの進入を妨げることによって、2個体と、コア内に存在する可能性がある炎症性材料、抗原性材料、または他の点で有害な材料との接触を最小にすることによって、および3隔離された部分と個体の免疫系の有害な部分との免疫学的接触を妨げるために十分な空間的関門および物理的関門をもたらすことによってなされる。いくつかの実施形態では、外部の包被は、限外濾過膜または微細孔性膜のいずれかであってよい。限外濾過膜は、細孔サイズの範囲が約1~約100ナノメートルのものであり、一方、微細孔性膜の範囲は約1~約10ミクロンであることが当業者には理解されよう。この物理的関門の厚さは変動してよいが、常に、関門のいずれかの側面上の細胞および/または物質の間の直接接触を妨げるために十分な厚さである。この領域の厚さは、一般に、5~200ミクロンにわたり、10~100ミクロンの厚さが好ましく、20~50ミクロンまたは20~75ミクロンの厚さが特に好ましい。好ましい一実施形態では、半透性膜は厚さ90~120μmである。当該デバイスを使用することによって妨げるまたは最小限にすることができる免疫学的攻撃の種類としては、マクロファージ、好中球による攻撃、細胞性免疫応答例えば、ナチュラルキラー細胞および抗体依存性T細胞媒介性細胞溶解ADCC、および体液性応答例えば、抗体依存性補体媒介性細胞溶解が挙げられる。カプセル包被は、ポリアクリレートアクリル共重合体を含む、ポリビニリデン、ポリ塩化ビニル共重合体、ポリウレタン、ポリスチレン、ポリアミド、酢酸セルロース、硝酸セルロース、ポリスルホンポリエーテルスルホンを含む、ポリホスファゼン、ポリアクリロニトリル、ポリアクリロニトリル-co-塩化ビニル、ならびにそれらの誘導体、共重合体および混合物を含めた種々のポリマーおよびポリマー混和物から製造することができる。そのような材料から製造されたカプセルは、例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第5,284,761号および同第5,158,881号に記載されている。例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第4,976,859号および同第4,968,733号に記載のものなどの、ポリエーテルスルホンPES繊維から形成されたカプセルも使用することができる。外面の形態に応じて、カプセルは、1型T1、2型T2、1/2型T1/2、または4型T4にカテゴリー化されている。そのような膜は、例えば、Lacyら、MaintenanceOfNormoglycemiaInDiabeticMiceBySubcutaneousXenograftsOfEncapsulatedIslets、Science、254巻、1782~84頁1991年、Dionneら、WO92/19195およびBaetge、WO95/05452に記載されている。平滑な外面の形態が好ましい。選択透過性、免疫隔離性の膜を有するカプセル包被は、免疫学的特権のない部位に対して好ましいことが当業者には理解されよう。対照的に、微細孔性膜または選択透過性膜が免疫学的特権部位に適する場合がある。免疫学的特権部位に埋め込むためには、PES膜またはPS膜から作製されたカプセルが好ましい。ポリマー接着剤および/または圧着、節止めおよび熱密閉の使用を含めた、当技術分野で公知のカプセルを密閉する任意の適切な方法を用いることができる。さらに、任意の適切な乾燥密閉方法も使用することができる。そのような方法では、細胞を含有する溶液がそれを通じて導入される実質的に無孔の取り付け具が提供される。充填後、カプセルを密閉する。そのような方法は、例えば、米国特許第5,653,688号;同第5,713,887号;同第5,738,673号;同第6,653,687号;同第5,932,460号;および同第6,123,700号に記載されており、これらは参照により本明細書に組み込まれる。1つの好ましい方法では、デバイスの端部を、メタクリル酸メチルを使用して密閉する。本発明の方法に従って、本明細書に記載の抗血管新生抗体足場またはVEGF受容体に加えて、他の分子を共送達することができる。例えば、栄養因子複数可を抗血管新生因子と一緒に送達することが好ましい場合がある。共送達は、いくつものやり方で実現することができる。本実施例では、抗体および抗体断片は、軽鎖配列および重鎖配列をコードする構築物を必要とする。第1に、細胞に、記載の分子をコードする遺伝子を含有する別々の構築物をトランスフェクトすることができる。第2に、細胞に、2種以上の遺伝子ならびに必要な制御エレメントを含有する単一の構築物をトランスフェクトすることができる。第3に、2つ以上の別々に工学的に操作された細胞株を、一緒にカプセル封入すること、または2つ以上のデバイスを対象の部位に埋め込むことができる。いくつかの適応症については、BAMを眼内の2つの異なる部位に同時に送達することが好ましい場合がある。例えば、神経栄養因子を硝子体に送達して、神経網膜RPEに対する神経節細胞を補うこと、およびテノン嚢下腔を介して抗血管新生因子例えば、本発明の抗血管新生抗体足場またはVEGF受容体のうちの1つまたは複数などを送達して脈絡膜の脈管構造を補うことが望ましい場合がある。本発明は、治療レジメンの過程中に異なる細胞型を使用することも意図している。例えば、患者に、第1の細胞型例えば、BHK細胞を含有するカプセルデバイスを埋め込むことができる。その後、患者においてその細胞型に対する免疫応答が発生したら、カプセルを回収する、または外植することができ、そして、第2の細胞型例えば、CHO細胞を含有する第2のカプセルを埋め込むことができる。このように、患者においてカプセル封入細胞型のうちの1つに対する免疫応答が発生した場合でさえ、治療分子を連続的に提供することが可能である。本発明の方法およびデバイスは、霊長類、好ましくはヒト宿主、レシピエント、患者、被験体または個体において使用することが意図されている。本発明のデバイスおよび方法のために、いくつもの異なる眼への埋め込み部位が考えられている。適切な埋め込み部位としては、これらに限定されないが、眼の房水および硝子体液、眼周囲腔、前眼房、および/またはテノン嚢下が挙げられる。体内の埋め込み部位は、皮下、腹腔内、またはCNS内を含んでよい。さらに、埋め込みは、所望の生物学的療法を必要とする病変またはその付近への局在化送達に向けることができる。そのような疾患部位の例は、炎症を起こした関節、脳およびCNS病変、良性腫瘍または悪性腫瘍の部位であってよい。デバイスが循環系に出入りすることにより、体内の潜在的な疾患部位の範囲を患部臓器および組織からさらに遠位に広げることができる。レシピエントによる、埋め込まれたデバイスに対する免疫学的応答の種類および程度は、レシピエントとコアの内部に隔離された細胞との関係に影響される。例えば、コアが、同系の細胞を含有する場合、レシピエントがデバイスの内部の特定の細胞型または組織型に対して自己免疫に罹患していない限り、これらは活発な免疫学的応答を引き起こさない。同系の細胞または組織はほとんど利用できない。多くの場合、同種異系または異種の細胞または組織すなわち、予想されるレシピエントと同じ種由来、またはそれとは異なる種由来のドナーが利用可能であり得る。免疫隔離性デバイスを使用することにより、同種異系または異種の細胞または組織を、レシピエントを同時に免疫抑制する必要なく埋め込むことが可能になる。また、免疫隔離性カプセルを使用することにより、不適合細胞非自己allographを使用することも可能になる。したがって、当該デバイスにより、慣習的な移植技法により治療することができる個体よりもはるかに多くの個体を治療することが可能になる。異種移植組織に対する免疫応答の種類および強さは、同系または同種異系の組織をレシピエントに埋め込んだ場合に起こる応答とは異なることが予想される。この拒絶反応は、主に細胞媒介性攻撃によって、または相補物媒介性攻撃によって進行し得る。ビヒクルのコアからIgGを排除することは、標的細胞または組織の細胞溶解が生じるのにIgG単独では不十分であるので、免疫保護immunoprotectionの試金石ではない。免疫学的攻撃の媒介に必要な重要な物質が免疫隔離性カプセルから排除されるのであれば、免疫隔離性デバイスを用いて、必要な高分子量産物を送達すること、または高分子量物質に関する代謝機能をもたらすことが可能である。これらの物質は、補体攻撃複合体成分Clqを含んでよい、または、食作用性細胞または細胞傷害性細胞を含んでよい。免疫隔離性カプセルを使用することにより、これらの有害な物質と隔離された細胞の間に保護的な関門がもたらされる。本発明のデバイスはマクロカプセルであるが、例えば、Rha、Lim、およびSunに記載のものなどのマイクロカプセルも用いることができることが当業者には理解されようRha,C.K.ら、米国特許第4,744,933号;MethodsinEnzymology137巻、575~579頁1988年;米国特許第4,652,833号;米国特許第4,409,331号を参照されたい。一般に、マイクロカプセルは、1細胞がデバイスの外層から完全に排除されること、および2デバイスの外層の厚さにより、マクロカプセルとは異なる。一般には、マイクロカプセルの体積はおよそ1μlであり、104個未満の細胞を含有する。より詳細には、マイクロカプセル封入では、一般に、カプセル当たりおよそ500~50,000個の細胞がカプセル封入される。低MWCOのカプセルを使用して、患者の免疫系の分子とカプセル封入細胞の相互作用をさらに妨げることができる。本明細書に記載の方法に従って使用されるデバイスはいずれも、隔離された細胞の生存能力および機能を維持するために、少なくとも1次元において、コア内の隔離された細胞のいずれかをレシピエントの周囲の眼組織に対して十分に極めて近傍にもたらされなければならない。しかし、全ての場合にデバイスを形成するために使用する材料の拡散の制限だけによってその構成上の制限が規定されるのではない。基本的なビヒクルの拡散性、または栄養分または酸素の輸送性を変化させるまたは増強する特定の添加物を使用することができる。例えば、コアの内部の培地に、酸素飽和型のパーフルオロカーボンを補充し、したがって即時に血液由来の酸素と接触させる必要性を低下させることができる。これにより、隔離された細胞または組織を、例えば、アンジオテンシンの勾配をビヒクルから周囲の組織内に放出し、毛細血管の内植を刺激する間、生存可能なままにすることが可能になる。パーフルオロカーボンを使用するための参考文献および方法は、参照により本明細書に組み込まれるFaithful,N.S.Anaesthesia、42巻、234~242頁1987年およびNASATechBriefsMSC-21480、U.S.Govt.PrintingOffice、Washington、D.C.20402により得られる。あるいは、PC12細胞などのクローン細胞株については、遺伝子操作されたヘモグロビン配列を細胞株に導入して、優れた酸素の貯蔵庫を作出することができる。NPO-17517NASATechBriefs、15巻、54頁を参照されたい。カプセル封入細胞は、分泌を増強するために、環境制御および主要栄養素および微量栄養素の補充によってさらに刺激することができる。組換え細胞の上流の開発の分野において、培地、pHおよび温度を最適化することが、細胞の増殖、密度および組換えタンパク質の生産量に極めて大きな影響を有し得ることが周知である。そのように刺激した細胞およびECTデバイスを宿主に埋め込むと生産性が増大し、それにより、療法に対して有用であり得る持続性の増強した生産性表現型が可能になり得る。例として、そのような栄養化合物は、これらに限定されないが、トリス、HEPES、グルコース、スクロース、リン脂質、コレステロール、アスコルビン酸、マグネシウム、ナトリウム、ビタミン、カリウム、およびカルシウム、細胞の馴化培地、ウシ胎仔血清、アルブミン、レシチン、スフィンゴミエリン、リポタンパク質、HDL、LDL、ポリアミン、エタノールアミン、フィブロネクチン、転移、ラミニン、コレラ毒素、ヒドロコルチゾンおよび他のステロイド、プロスタグランジン、インスリン、EGF、FGF2および他の増殖因子、デキサメタゾン、ベータ-メルカプトエタノールおよび他の還元剤、およびセレンであってよい。さらに、商業的な培地の供給者、例えば、Biowhittaker、Gibco/Invitrogen、Hyclone、JRH、ExpressionSystems、Sigma、PAAおよびIrvineScientificなどからの予め配合された培地を用いることができる。デバイス包被の厚さは、デバイスの存在に対する患者による免疫応答を妨げるために十分であるべきである。この目的のために、デバイスの最小の厚さは1μm以上であり、細胞を含まないことが好ましい。さらに、強化性の構造エレメントもデバイスに組み入れることができる。例えば、これらの構造エレメントは、不浸透性であり、デバイスをレシピエントの眼組織につなぐ、または縫合するように適切に構成されるように作製することができる。ある特定の状況では、これらのエレメントは、包被を安全に密閉し例えば、円柱の端において、それにより、コア材料の隔離を完全にする例えば、成形熱可塑性クリップように作用し得る。多くの実施形態では、これらの構造エレメントが選択透過性の包被のかなりの面積を塞がないことが望ましい。本発明のデバイスは、埋め込み後に完全に回収するために十分なサイズおよび耐久性のものである。本発明の1つの好ましいデバイスは、体積がおよそ1~3μLのコアを有する。微粒子化デバイスの内部の幾何学的形状の体積はおよそ0.05~0.1μLである。本明細書に記載の抗血管新生抗体足場および/または可溶性VEGF受容体と一緒に、少なくとも1つの追加的なBAMも、デバイスから眼に送達することができる。例えば、少なくとも1つの追加的なBAMを、細胞性供給源または非細胞性供給源からもたらすことができる。非細胞性供給源から少なくとも1つの追加的なBAMがもたらされる場合、追加的なBAM複数可を、これらに限定されないが、a密閉材;b足場;c包被膜;dつなぎアンカー;および/またはeコア培地を含めた細胞系の1またはそれより多くの成分にカプセル封入すること、その中に分散させること、またはそれに付着させることができる。そのような実施形態では、非細胞性供給源からのBAMの共送達は、細胞性供給源からのBAMと同じデバイスから起こってよい。あるいは、2つ以上のカプセル封入細胞系を使用することができる。例えば、少なくとも1つの追加的な生物活性分子は、核酸、核酸断片、ペプチド、ポリペプチド、ペプチド模倣体、炭水化物、脂質、有機分子、無機分子、治療剤、またはそれらの任意の組み合わせであってよい。詳細には、治療剤は、抗血管新生性薬、ステロイド性抗炎症薬、非ステロイド性抗炎症薬、抗有糸分裂薬、抗腫瘍薬、駆虫薬、IOP低下剤、ペプチド薬、および/または商業用途について認可された任意の他の生物活性分子薬物であってよい。適切な賦形剤としては、これらに限定されないが、任意の非分解性ポリマーまたは生分解性ポリマー、ヒドロゲル、溶解性エンハンサー、疎水性分子、タンパク質、塩、または製剤として認可された他の複合剤が挙げられる。非細胞性投与量は、当技術分野で公知の任意の適切な方法、例えば、治療剤の濃度および/もしくは眼当たりのデバイスの数を変動させること、ならびに/またはカプセル封入賦形剤の組成を改変することによって変動させることができる。細胞性投与量は、1デバイス当たりの細胞の数、2眼当たりのデバイスの数、および/または3細胞当たりのBAM産生のレベルを変化させることによって変動させることができる。細胞による産生は、例えば、形質導入された細胞におけるBAMの遺伝子のコピー数、またはBAMの発現を駆動するプロモーターの効率を変化させることによって変動させることができる。細胞性供給源からの適切な投与量は、1日当たり約1pg~約1000mgにわたってよい。本発明は、本明細書に記載のマクロカプセルデバイスを作製するための方法にも関する。デバイスは、当技術分野で公知の任意の適切な方法によっても形成することができる。例えば、それぞれが参照により本明細書に組み込まれる米国特許第6,361,771号;同第5,639,275号;同第5,653,975号;同第4,892,538号;同第5,156,844号;同第5,283,138号;および同第5,550,050号を参照されたい。使用する膜は、抗血管新生抗体足場または可溶性VEGF受容体などの分子の拡散を、それらの分子量に基づいて制御するために合わせて調整することもできるLysaghtら、56巻J.CellBiochem.196頁1996年、Colton、14巻TrendsBiotechnol.158頁1996年を参照されたい。カプセル封入技法を用いて、細胞を宿主に、免疫抑制薬を使用して、または使用せずに、免疫拒絶反応を伴わずに移植することができる。カプセルは、宿主に埋め込んだ後に、カプセルの拒絶反応がもたらされる、またはカプセルが、例えば分解によって作動不能になるのに十分な有害な宿主応答を引き出さない生体適合性材料から作製することができる。生体適合性材料は、宿主の免疫系の成分などの大きな分子に対しては比較的不浸透性であるが、インスリン、増殖因子、および栄養分などの小分子に対しては浸透性であり、同時に、代謝廃棄物は除去される。種々の生体適合性材料が、本発明の組成物によって増殖因子を送達するために適している。種々の外面形態および他の機械的特性および構造特性を有する多数の生体適合性材料が公知である。熱可塑性またはポリマーの膜の包被を有するデバイスが望まれる場合、細孔のサイズの範囲および分布は、米国特許第3,615,024号により教示されている通り、前駆体材料の溶液キャスティング溶液の固体含有量、水混和性溶媒の化学組成を変動させることによって、または場合によって、親水性または疎水性の添加物をキャスティング溶液に含めることによって決定することができる。細孔サイズは、凝固薬および/または槽の疎水性を変動させることによっても調整することができる。一般には、キャスティング溶液は、溶解させた水不溶性のポリマーまたは共重合体を含有する極性有機溶媒を含む。このポリマーまたは共重合体の沈殿物は、溶媒混和性の水相と接触すると、インターフェースの部位で選択透過性膜を形成する。膜内の細孔のサイズは、水相が溶媒相に拡散する速度に左右され、親水性または疎水性の添加物は、この拡散の速度を変更することによって細孔サイズに影響を及ぼす。水相が溶媒中をより遠くへ拡散するにつれ、残りのポリマーまたは共重合体が沈殿して小柱状の支持体が形成され、これにより、完成したデバイスに機械的強度が付与される。デバイスの外面は、溶解したポリマーまたは共重合体を沈殿させる条件すなわち、有孔の小柱状または海綿様の外皮を生成する空気への曝露、平滑な選択透過性膜二重層をもたらす水を含む沈殿槽への浸漬、または中間の構造をもたらす水蒸気を含んだ空気への曝露によって同様に決定される。デバイスの表面テクスチャーは、一部において、押出しノズルが槽の上に位置するか、または槽中に浸漬しているかに左右され、ノズルが槽の表面の上に位置する場合には粗い外皮が形成され、ノズルが槽に浸漬している場合には平滑な外面が形成される。周囲または周辺のマトリックスまたは膜は、コアを形成する材料を充填し例えば、シリンジを使用して、その後、コア材料が完全にカプセル封入されるように密閉することによって前もって形成することができる。次いで、マトリックス前駆体材料がコアに存在する場合は、デバイスを、コアマトリックスの形成をもたらす条件に曝露させる。本発明のデバイスにより、完全に分化した細胞または組織、足場依存性の細胞または組織、胎児もしくは新生児の細胞または組織、または形質転換された、足場非依存性の細胞または組織を含めた多様な細胞型または組織型の埋め込みをもたらすことができる。隔離される細胞は、ドナーすなわち、成人の細胞または組織、新生児の細胞または組織、および胎児の細胞または組織を含めた初代細胞または組織から、またはinvitroで複製する細胞すなわち、遺伝子改変された細胞を含めた不死化細胞または細胞株から調製する。全ての場合において、必要な産物を有効なレベルで産生させるため、または必要な代謝機能を有効なレベルで供給するために十分な数量の細胞を、一般に滅菌条件下で調製し、隔離する前に適切に維持する例えば、ハンクス塩などの平衡塩類溶液中で、またはHam’sF12などの栄養培地中で。本発明のECTデバイスは、患者由来の栄養分が細胞内に容易に到達すること、または代謝機能をもたらすように細胞が作用する患者のタンパク質が細胞に進入することを可能にするために、デバイスの中心部と包被の最も近い部分の距離を縮小しやすい形状である。その点で、非球状の形状、例えば、円柱などが好ましい。本発明のデバイスのコアの内部に置かれる細胞の数または組織の量すなわち、ローディング密度に影響を及ぼす4つの重要な因子は:1デバイスのサイズおよび幾何学的形状;2デバイス内部での有糸分裂活性;3コアの調製および/またはローディングのための粘性の必要性;および4埋め込み前のアッセイおよび定性化の必要性である。第1のこれらの因子に関してデバイスのサイズおよび幾何学的形状、重要な栄養分および代謝性要求の細胞内への拡散ならびに代謝産物の細胞からの拡散は、細胞の生存能力の継続に欠かせない。ARPE-19細胞などのRPE細胞の場合では、隣接する細胞は瀕死の細胞を食菌し、壊死組織片をエネルギー供給源として使用することができる。代謝性要求の中で、デバイス内への物質の拡散と適合するのは酸素の要求である。特異的な細胞の酸素要求を、選択された細胞について決定しなければならない。WilsonD.F.ら、J.Biol.Chem.、263巻、2712~2718頁、1988年において示されている酸素代謝の決定についての方法および参考文献を参照されたい。第2の因子細胞分裂に関して、選択された細胞が、デバイス内にある間活発に分裂することが予測される場合、その細胞は、利用可能な空間を満たすまで、または接触阻止などの現象によりさらなる分裂が制限されるまで分裂し続ける。複製性細胞については、デバイスコアが完全に満たされることが、拡散が制限されることに起因した重要な栄養分の欠乏につながらないように、デバイスの幾何学的形状およびサイズを選択する。第3の因子コア材料の粘性に関して、デバイス容積の最大70を占有する密度の細胞が生存可能であるが、この濃度範囲の細胞溶液はかなりの粘性を有する。非常に粘性の溶液中の細胞をデバイスに導入することは極めて難しい。一般に、二段階押出し戦略および同時押出し戦略のどちらについても、細胞のローディング密度が30を超えるとほとんど有用ではなく、一般に、最適なローディング密度は20以下である。例えば、組織の断片については、内部細胞の生存能力を保存するために、上記と同じ一般的なガイドラインに従うことが重要であり、組織断片は、直径250ミクロンを超えるべきではなく、それらと、最も近い拡散表面の間に15個未満、好ましくは10個未満の細胞を有する内部細胞を伴う。最後に、第4の因子埋め込み前アッセイの必要性に関して、多くの場合、デバイスの調製と埋め込みの間に一定の時間が必要になる。例えば、デバイスをその生物活性の点で定性化することが重要であり得る。したがって、有糸分裂が活発な細胞の場合では、好ましいローディング密度は、定性化アッセイを実施するために存在しなければならない細胞の数も考慮する。ほとんどの場合、invivoに埋め込む前に、invitroアッセイを用いて、デバイスの内部のBAM例えば、抗血管新生抗体足場またはVEGF受容体またはPDGF受容体の有効性を確立することが重要になる。デバイスは、細胞当たりまたは単位容積に基づいてビヒクルの有効性を決定することを可能にするために分析されたモデル系を使用して構築することができる。デバイスのローディングおよびデバイスの有効性の決定についてこれらのガイドラインに従って、次に、埋め込むための実際のデバイスサイズを、特定の適用のために必要な生物活性の量によって決定する。デバイスの数およびデバイスサイズは、埋め込んだ際に治療効果をもたらすために十分であるべきであり、特定の適用のために必要な生物活性の量によって決定される。治療用物質を放出する分泌性細胞の場合では、当技術分野で公知の標準の投与量の考察および基準を使用して、必要な分泌物質の量を決定する。考慮される因子としては、レシピエントのサイズおよび体重;細胞の生産性または機能レベル;および、適切な場合には、機能が交換または増強された臓器または組織の正常な生産性または代謝活性が挙げられる。細胞の一部分が免疫隔離および埋め込み手順で生き残らない可能性があることを考慮することも重要である。さらに、レシピエントが埋め込みの有効性に干渉する可能性がある既存の状態を有するかどうかも考慮しなければならない。何千もの細胞を含有する本発明のデバイスは容易に製造することができる。例えば、現行の眼科用臨床デバイスは、200,000~750,000個の細胞を含有するが、微粒子化デバイスは、10,000~100,000個の細胞を含有する。他の大規模デバイスは、1,000,000~100,000,000個の細胞を含有し得る。カプセル封入細胞療法は、細胞を、宿主に埋め込む前に半透性の生体適合性材料を有する周囲の細胞によってレシピエント宿主の免疫系から隔離するという概念に基づく。例えば、本発明は、遺伝子操作されたARPE-19細胞が免疫隔離性カプセル内にカプセル封入されており、レシピエント宿主に埋め込まれると、デバイスのコア内のARPE-19細胞に対する宿主の免疫系の有害作用を最小限にするデバイスを包含する。ARPE-19細胞は、それを微細孔性膜によって形成された埋め込み型のポリマーカプセル内にカプセル封入することによって宿主から免疫隔離する。この手法により、宿主と埋め込まれた組織の間の細胞間の接触が防がれ、それにより、直接提示による抗原認識が排除される。本明細書に記載の抗血管新生抗体足場またはVEGF受容体またはPDGF受容体はいずれも単独でまたは任意の組み合わせで、眼内に例えば、前眼房および硝子体腔内に、眼周囲に例えば、テノン嚢の内部または下に、またはその両方に送達することができる。本発明のデバイスは、眼への影響を有する種々の眼科障害、眼科疾患、および/または他の疾患を治療するために抗血管新生抗体足場または受容体の制御放出および持続的放出をもたらすためにも用いることができる。本明細書に記載の抗血管新生抗体足場または可溶性VEGF受容体のいずれかなどの抗血管新生因子を、眼内好ましくは硝子体内または眼周囲好ましくはテノン嚢下空間または領域に、1日当たり患者当たり眼当たり0.1pg~1000μg例えば、0.1pg~500μg;0.1pg~250μg;0.1pg~100μg;0.1pg~50μg;0.1pg~25μg;0.1pg~10μg;0.1pg~5μg;0.1pg~100ng;0.1pg~50ng;0.1pg~25ng;0.1pg~10ng;または0.1pg~5ngの投与量範囲で送達することが意図されている。非限定的な一例では、治療量は、眼において定常状態で少なくとも0.5~50μg/mlである。適切な治療量は、例えば、0.5μg、0.6μg、0.7μg、0.8μg、0.9μg、1μg、2μg、3μg、4μg、5μg、6μg、7μg、8μg、9μg、10μg、11μg、12μg、13μg、14μg、15μg、16μg、17μg、18μg、19μg、20μg、21μg、22μg、23μg、24μg、25μg、26μg、27μg、28μg、29μg、30μg、31μg、32μg、33μg、34μg、35μg、36μg、37μg、38μg、39μg、40μg、41μg、42μg、43μg、44μg、45μg、46μg、47μg、48μg、49μg、50μg、51μg、52μg、53μg、54μg、55μg、56μg、57μg、58μg、59μg、60μg、61μg、62μg、63μg、64μg、65μg、66μg、67μg、68μg、69μg、70μg、71μg、72μg、73μg、74μg、75μg、76μg、77μg、78μg、79μg、80μg、81μg、82μg、83μg、84μg、85μg、86μg、87μg、88μg、89μg、90μg、91μg、92μg、93μg、94μg、95μg、96μg、97μg、98μg、99μg、100μg、150μg、200μg、250μg、300μg、350μg、400μg、450μg、500μg、550μg、600μg、650μg、700μg、750μg、800μg、850μg、900μg、950μg、1000μgを含んでよい。さらに、本発明の細胞株およびデバイスは、この治療量を少なくとも3ヶ月間にわたって発現することができる。本発明の種々の実施形態によって治療することができる眼科障害としては、これらに限定されないが、糖尿病性網膜症、糖尿病黄斑浮腫、増殖性網膜症、網膜の血管疾患、血管異常、加齢黄斑変性症および他の後天性障害、眼内炎、感染症、炎症性非感染症、AIDS関連障害、眼虚血症候群、妊娠に関連する障害、末梢性網膜変性症、網膜変性症、毒性網膜症、網膜腫瘍、脈絡膜腫瘍、脈絡膜障害、硝子体障害、網膜剥離および増殖性硝子体網膜症、非穿通性外傷、穿通性外傷、白内障手術後合併症、および炎症性の視神経症が挙げられる。加齢黄斑変性症としては、これらに限定されないが、滲出型wet加齢黄斑変性症、萎縮型dry加齢黄斑変性症、滲出型exudative加齢黄斑変性症、および近視性変性が挙げられることが当業者には理解されよう。いくつかの好ましい実施形態では、治療される障害は、滲出型wetform加齢黄斑変性症または糖尿病性網膜症である。本発明は、眼の新血管形成、多くの眼の疾患および障害に付随する状態を治療するためにも有用であり得る。例えば、網膜虚血に付随する眼の新血管形成は、糖尿病および多くの他の疾患における失明の主要な原因である。本発明の細胞株およびデバイスは、眼の症状および眼以外の症状の両方を有する疾患または状態によって生じる眼の症状を治療するためにも用いることができる。一部の例として、AIDSならびに他の状態および硝子体障害におけるサイトメガロウイルス網膜炎;妊娠の結果としての網膜における高血圧性の変化;および種々の感染症、例えば、結核、梅毒、ライム病、寄生虫症、イヌ回虫、眼蛆病ophthalmonyiasis、嚢虫症cystcercosisおよび真菌感染症などの眼への影響が挙げられる。デバイスおよび細胞株は、他の眼内の新血管形成に基づく疾患に関する状態を治療するためにも用いることができる。例えば、そのような新血管形成は、糖尿病性網膜症、網膜中心静脈閉塞症、および、おそらく加齢黄斑変性症などの疾患において起こり得る。角膜の新血管形成は、それにより、視覚が妨げられ、患者に角膜の移植片不全の素因を与えるので、主要な問題である。大多数の重篤な視力喪失は、眼の新血管形成を招く障害に関連づけられる。本発明は、眼の環境内またはその外の体内の所望の標的位置における細胞増殖性障害、例えば、血液障害、アテローム性動脈硬化症、炎症、血管透過性の亢進、および悪性腫瘍などを治療するための、抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体の方法および送達にも関する。本明細書に記載のデバイスおよび技法の使用により、他の送達経路を超えるいくつかの有利な点がもたらされる:抗血管新生抗体足場またはVEGF受容体またはPDGF受容体は、眼に直接送達することができ、これにより、望ましくない末梢性の副作用が減少するまたは最小限になり、また、局部的適用と比較して非常に低用量の抗血管新生抗体足場または受容体すなわち、ミリグラムではなく、ナノグラムまたは低マイクログラムの分量を送達することができ、これによっても、潜在的に副作用が緩和される。さらに、生存細胞は新しく合成された抗血管新生抗体足場および受容体を連続的に産生するので、これらの技法は、注射間で用量が著しく上下する抗血管新生抗体足場またはVEGF受容体の注射による送達よりも優れているはずであり、また、抗血管新生抗体足場または受容体は連続的に分解されるが、連続的に補給はされない。本発明の抗血管新生抗体足場または可溶性VEGF受容体を分泌するように遺伝子操作された生細胞および細胞株は、本発明のデバイスにカプセル封入し、眼の任意の適切な解剖学的構造に外科的に挿入眼球後の麻酔下ですることができる。例えば、デバイスは、眼の硝子体に外科的に挿入することができ、そこで、デバイスは、除去を補助するために強膜とつながれていることが好ましい。デバイスは、所望の予防法または療法を実現するために必要な限りは硝子体に残すことができる。例えば、所望の療法は、ニューロンもしくは光受容体の生存もしくは修復を促進すること、または網膜もしくは脈絡膜の血管新生を阻害すること、および/もしくは逆転させること、ならびにぶどう膜の炎症、網膜の炎症および視神経の炎症を阻害することを含んでよい。硝子体に設置すると、抗血管新生抗体足場またはVEGF受容体を、網膜または網膜色素上皮RPEに送達することができる。他の実施形態では、細胞をローディングしたデバイスを、硝子体に埋め込むよりも浸潤性の低い、眼周囲、テノン嚢として公知の空間の内部またはその下に埋め込む。したがって、硝子体出血および/または網膜剥離などの合併症は潜在的に排除される。この投与経路により、本明細書に記載の抗血管新生抗体足場または可溶性のVEGF受容体もしくはPDGF受容体をRPEまたは網膜に送達することも可能になる。脈絡膜血管新生ならびに視神経およびぶどう膜の炎症を治療するためには、眼周囲の埋め込みが特に好ましい。一般に、眼周囲の埋め込み部位から送達することにより、抗血管新生抗体足場または可溶性VEGF受容体が脈絡膜の脈管構造、網膜の脈管構造、および視神経を循環することが可能になる。抗血管新生因子、例えば、本発明の抗血管新生抗体足場または可溶性VEGF受容体などを、本明細書に記載のデバイスおよび方法を用いて脈絡膜の脈管構造に眼周囲に、または硝子体に眼内に直接送達することにより、先行技術の治療方法およびデバイスに付随する問題を軽減または緩和することができ、また、十分に定義されていないまたは肉眼で見えない脈絡膜血管新生を治療することが可能になり、さらに、補助的療法または維持療法による脈絡膜血管新生の再発を低下または予防する手段がもたらされる。本発明の生体適合性デバイスの埋め込みは、滅菌条件下で実施する。デバイスは、シリンジまたは当業者に公知の任意の他の方法を用いて埋め込むことができる。一般に、デバイスは、レシピエントへの分泌物または機能の適切な送達、および埋め込まれた細胞または組織への栄養分の適切な送達を可能にし、デバイスを回収および/または交換するために接近することも可能にするレシピエントの体内の部位に埋め込む。いくつもの異なる埋め込み部位が意図されている。これらとしては、例えば、房水、硝子体液、テノン嚢下、眼周囲腔、および前眼房が挙げられる。免疫学的特権のない埋め込み部位、例えば、眼周囲の部位、ならびに前眼房房水および後眼房硝子体の外側の他の領域などに対しては、カプセルは免疫隔離性であることが好ましい。デバイスの内部に固定化された細胞が、埋め込みの前後どちらにおいても適正に機能することを検証することが好ましい。当技術分野で周知の任意のアッセイまたは診断検査をこれらの目的のために用いることができる。例えば、ELISA酵素結合免疫吸着検定法、クロマトグラフィーによるアッセイまたは酵素的アッセイ、または分泌物に特異的なバイオアッセイを用いることができる。所望であれば、埋め込み物の分泌機能を、適切な試料例えば、血清をレシピエントから採取し、それをアッセイすることによって経時的にモニターすることができる。先行技術のデバイスおよび外科的技法の多くは、その使用により、多数の網膜剥離を招く。本発明のデバイスおよび方法はいくつかの他の療法と比較して浸潤性が低いので、この合併症の出現は減少する。本明細書に記載の抗血管新生抗体足場およびVEGF受容体の、修飾された、切断されたおよび/または突然変異したタンパク質の形態も、本発明に従って使用することができる。さらに、これらの抗血管新生抗体足場または受容体の活性断片すなわち、治療効果を実現するために十分な生物活性を有する断片の使用も意図されている。1またはそれより多くのポリエチレングリコールPEGまたは他の反復ポリマー部分ならびにこれらのタンパク質およびそのポリシストロニック型の組み合わせを付着させることによって修飾された抗血管新生抗体足場または受容体分子も意図されている。本明細書に記載の方法に従って多くの状態を治療するには、適切な治療用量を供給するために、眼当たりただ1つ、または最大で50個未満の埋め込まれたデバイスが必要である。治療的な投与量は、1日当たり患者当たり眼当たり約0.1pg~1000μg例えば、1日当たり患者当たり眼当たり0.1pg~500μg;0.1pg~250μg、0.1pg~100μg;0.1pg~50μg;0.1pg~25μg;0.1pg~10μg;0.1pg~5μg;0.1pg~100ng;0.1pg~50ng;0.1pg~25ng;0.1pg~10ng;または0.1pg~5ngであり得る。非限定的な一例では、治療量は、眼において定常状態で少なくとも0.5~50μg/mlである。適切な治療量は、例えば、0.5μg、0.6μg、0.7μg、0.8μg、0.9μg、1μg、2μg、3μg、4μg、5μg、6μg、7μg、8μg、9μg、10μg、11μg、12μg、13μg、14μg、15μg、16μg、17μg、18μg、19μg、20μg、21μg、22μg、23μg、24μg、25μg、26μg、27μg、28μg、29μg、30μg、31μg、32μg、33μg、34μg、35μg、36μg、37μg、38μg、39μg、40μg、41μg、42μg、43μg、44μg、45μg、46μg、47μg、48μg、49μg、50μg、51μg、52μg、53μg、54μg、55μg、56μg、57μg、58μg、59μg、60μg、61μg、62μg、63μg、64μg、65μg、66μg、67μg、68μg、69μg、70μg、71μg、72μg、73μg、74μg、75μg、76μg、77μg、78μg、79μg、80μg、81μg、82μg、83μg、84μg、85μg、86μg、87μg、88μg、89μg、90μg、91μg、92μg、93μg、94μg、95μg、96μg、97μg、98μg、99μg、100μg、150μg、200μg、250μg、300μg、350μg、400μg、450μg、500μg、550μg、600μg、650μg、700μg、750μg、800μg、850μg、900μg、950μg、1000μgを含んでよい。さらに、本発明の細胞株およびデバイスは、この治療量を少なくとも3ヶ月間にわたって発現することができる。本発明の眼科用デバイスのそれぞれは、個体内に約1,000~約750,000個の細胞を貯蔵すること、または、それらの種類に応じてクラスター形成することができる。以下の実施例において本発明がさらに説明され、これにより特許請求の範囲に記載の本発明の範囲は限定されない。実施例1細胞のサブクローニング種々の抗血管新生抗体足場および可溶性VEGF受容体をNTC-200細胞において発現させた。NTC-200およびARPE-19細胞という用語は、本明細書で記載される場合、本発明の抗血管新生抗体足場および可溶性のVEGF受容体およびPDGF受容体を発現するように遺伝子操作された好ましい細胞型を記載するために互換的に使用される。タンパク質の分泌を実現するために、構築物はネイティブなまたはIgSPマウス免疫グロブリンリーダー配列を含有し、後者は、NTC-200細胞からのCNTFの分泌を導くために以前に使用した。意図されているタンパク質のヌクレオチド配列およびアミノ酸配列および対応する核酸配列は、本明細書では以下の通り記載されている:1p8342p8383p8764p8735p8746p8757p9158p9149p91610p91311p91712p96413p96314p97415p97816p977可溶性VEGF受容体例えば、p834、p838、およびp873については、所望の産物に特異的なオリゴヌクレオチドプライマー対を使用したPCRによって、sVEGFR1hFltまたはsVEGFR2hKDRのcDNAそれぞれGenBank受託番号U01134およびAF063658から遺伝子断片を増幅した。本明細書に記載の抗血管新生抗体足場例えば、p876、p874、p875、p895、p896、p913およびp897をベバシズマブおよびラニビズマブGenentechなどの公知の抗VEGF化合物の配列の部分に基づいて設計した。増幅産物を適切な制限エンドヌクレアーゼを用いて消化し、図1に概略図が示されているNeurotech哺乳動物発現ベクターpCpGfree-vitroInvivoGenにライゲーションした。pCpGfree-vitroは、CpGジヌクレオチドを完全に欠くだけでなく、戦略的に位置付けられたS/MARSインスレーターが組み入れられ、したがってサイレンシングまたは遺伝子相互作用の可能性が低下した市販のベクターである。さらに、S/MARS配列は、宿主ゲノム内の染色体の組み込みに役立ち得る。この設計により、挿入された遺伝子の発現が細胞機構によりサイレンシングされるオフになる可能性が低くなる。他の発現ベクターpcDNA、pKan、pCI-Neoなどと比較すると、pCpGfree-vitroは、安定な、高産生組換え細胞株を一貫して生成する。pCpGfree-vitroベクター系は、ネオマイシン耐性遺伝子、ブラストサイジン耐性遺伝子、またはハイグロマイシン耐性遺伝子のいずれかの存在により区別される3つの形態の発現ベクターを含む。同一のcDNA配列をネオマイシン耐性に基づく発現ベクター、ブラストサイジン耐性に基づく発現ベクターおよびハイグロマイシン耐性に基づく発現ベクターのそれぞれにサブクローニングすることによって、細胞株を、各反復に対して異なる選択マーカーを使用して繰り返しトランスフェクトすることができる。そのような方法により、一般にはCHO製造細胞株において見いだされるDHFR株を生成することを必要とせずに遺伝子量genedoseを増幅することが可能になる。形質転換された組換えクローンを、ブラストサイジンもしくはネオマイシンG418、またはハイグロマイシンを用いて選択し、精製されたミニプレッププラスミドDNAを、制限消化およびアガロースゲル電気泳動分析によって分析した。適切な挿入断片を含有する推定上のプラスミドクローンを全て、自動ジデオキシ配列決定GeneWiz、Edison、NJ、その後のVectorNTIv10.0配列解析ソフトウェアInvitrogenCorp、Carlsbad、CAを使用したクロマトグラムの組み立てによって検証した。実施例2細胞株構築検証されたプラスミドクローンを使用して、NTC-200細胞をトランスフェクトして、安定なポリクローナル細胞株を得た。簡単に述べると、18時間前に播いた細胞200~300K個に、6.0μlのFugene6トランスフェクション試薬RocheAppliedScience、IndianapolisINを製造者の推奨に従って用いて、3.0μgのプラスミドDNAをトランスフェクトした。トランスフェクションは10FBS、内皮SFMを伴うDMEM/F12培地またはOptimem培地InvitrogenCorp、Carlsbad、CA3.0ml中で実施した。24~48時間後、細胞に1.0μg/μlのG418を含有する新鮮な培地を供給したか、または細胞を、G418を含有するT-25組織培養フラスコに継代した。細胞株を、14~21日間、正常な増殖が再開するまで選択下で継代し、その後、薬物を除去し、細胞を回復させた約1週間後に特徴付けた。これらのポリクローナル細胞株を分散させ、次いで、ディッシュに播種した。適切に増殖させた後、何百から何千もの個々のコロニーを顕微鏡によって見分け、選び取り、クローンとして拡大した。サブクローン上清を、組換え分子の産生についてELISAによって分析し、細胞数の決定と組み合わせ、クローンの生産性の順位の作成を可能にした。安定性、生産性およびECTデバイス内でのinvivo生物物理学的特性および動物試験における生物学的生産量について望ましいクローン細胞株を選択した。これらの細胞株による組換えタンパク質の発現の安定性を、数週間にわたって、ヒトsVEGFR1/Flt1QuantikineELISAKitRDSystems、Minneapolis、MNまたはポリクローナル抗ヒトIgG1FcELISANeurotechを用いて測定した。簡単に述べると、10FBSを伴うDMEM/F12中の12ウェル組織培養物プレートに予め播いておいた細胞50K個を、HBSSInvitrogenCorp、Carlsbad、CA中で2回洗浄し、次いで、1.0mlの内皮SFMInvitrogenCorp、Carlsbad、CAを2時間パルスした。パルス培地を-20°Cで保管し、採取してから1週間以内に、製造者のプロトコールの通りアッセイした。以下の抗血管新生抗体足場および切断されたVEGF受容体およびPDGF受容体によりコードされるタンパク質を分泌する安定な細胞株が首尾よく創出された:1p8342p8383p8764p8735p8746p8757p9158p9149p91610p91311p91712p96413p96314p97415p97816p977実施例3細胞株のスクリーニングおよびヒットの決定抗血管新生分子を発現している組換えNTC-200細胞株を記載の通り生成し、スクリーニング選択の一例が、VEGFR-Fc分子である分子p834についてここに示されている。クローンの上清に対して抗VEGFRELISAアッセイを適用し、細胞計数キット8法CCK-8、DojindoInc.を用いて分析したクローンの細胞数を数え上げた。本実施例では、クローンの順位付けにより、このスクリーニングELISAにおいて1日当たり細胞百万個当たり10,000ng1日当たり細胞当たり10ピコグラムpcdを超える生産性を有する少なくとも8つのクローンのヒットが示されている。図2に示されている散布図では、p834サブクローンを、ELISA生産量対細胞数を用いてプロットし、有益なECT規模拡大繁殖に有益な増殖性および分泌性を示し得るクローン株の可視化を可能にした。表1に示されている通り、9種の異なる抗体および受容体に基づくFc分子の現行の細胞株による産生により、7~20pcdの範囲内の細胞株による生産量がもたらされる。これらのレベルは、常套的なCHO株による製造プロセスによって得られる生産量レベルと同等である。それぞれの場合において、ECTについて首位に順位付けされたクローンに加えて、各分子実体について少なくとも5種の独立したサブクローンを、バックアップ細胞株として選択した。細胞株に基づく抗体および受容体Fcの高生産性の生成の成功により、NTC-200細胞株/pCpG発現系を生物学的治療薬分子、特に公知のCHOにより製造された産物に代表されるものに広範に適用することができることが示されている。実施例4タンパク質の特徴付けタンパク質の発現p834分子の構造は、ヒトIgG1Fcドメインとインフレームで分子融合したキメラVEGF-受容体1ドメイン2およびVEGF-受容体2ドメイン3に基づく。細胞株馴化培地中のp834-10-5タンパク質の予測二量体分子量は100kDaグリコシル化されていないであり、非還元ウエスタンブロットにおける実測は約130kDaグリコシル化されているである。834-10-5の予測単量体分子量は50kDaであり、還元ウエスタンブロットにおける実測分子量は約60kDaグリコシル化されているである。834-10-5細胞株馴化培地のプロテインGアフィニティー精製では、非還元SDS-PAGEの下で単一のバンドが示され、これはウエスタンブロット分析において観察された結果と一致する。ハイパーフラスコ培養物1リットル当たり15mgの収量で、834-10-5細胞株の高い生産性が実証された。図3参照。HUVECバイオアッセイVEGF-Aは、invitroにおいてHUVEC細胞の増殖を刺激するその能力について公知である。したがって、VEGF-A阻害を測定するための適切なバイオアッセイは、HUVEC細胞の刺激器としての公知量のVEGF-Aに対する阻害性分子を滴定することであるRDSystems。p834-10-5細胞株由来の馴化培地を回収し、段階的に希釈して、HUVEC細胞のVEGF-A刺激を阻害した。図4に示されている通り、このアッセイではp834-10-5馴化培地がEC50=約50pM、100阻害=約100pMを示すことが見いだされた。p834-10-5の阻害活性は、VEGFR-Fc対照RDSystemsの生物活性と同様であり、p838-6ポリクローナル細胞株馴化培地の生物活性とも同様である。要約すると、これらの細胞株由来の組換えタンパク質は、対照タンパク質VR1D1-3-Fcと同様に内皮細胞の増殖を効率的に阻害することができる。しかし、偽トランスフェクトした親の細胞WT由来の馴化培地ではHUVECの増殖は阻害されなかった。溶液結合アッセイトランスフェクトされた細胞株由来の馴化培地を用いたVEGFの溶液結合試験を実施した。簡単に述べると、滴定量の馴化培地を、VEGFの存在下、室温で一晩インキュベートした。遊離のVEGFを、高感度EIARDSystems、Minneapolis、MNを使用して測定し、非線形回帰分析を実施したGraphPadSoftwareInc.、SanDiego、CA。p834-10-5ECT由来の組換え分子の結合活性を、p834-10-5ECT硝子体および外植片の馴化培地試料の、市販のVEGFサンドイッチELISARDSystemsの応答性を阻害する能力またはそれに干渉する能力によって生物物理学的に検証した。図5に示されている通り、p834-10-5試料はIC50=約12pMを示し、約100pMで>90阻害が観察される。この阻害活性は、p834-10-5ECTデバイスを含有する免疫抑制されていないウサギ硝子体由来の精製タンパク質から1ヶ月の時点または3ヶ月の時点で、またはウサギの外植したp834-10-5ECTデバイスから産生される分泌タンパク質から検出された。陰性対照として、偽トランスフェクトした親の細胞WT由来の馴化培地はVEGFと結合しなかったことが示された。実施例5デバイスの特徴付けおよび埋め込みの結果細胞株安定性試験組換え細胞株の製造可能性についての1つの基準は、クローンの拡大による生産性の限界である。40世代のクローン細胞の増殖および生産性の分析により、生産量の安定性が確認され、マスター細胞バンク約17継代までおよびワーキング細胞バンク約23継代までの創出についての十分な情報が供給されることが算出された。1つのワーキング細胞バンクは、少なくとも100,000,000個のデバイスを製造するために十分であると算出される。p834-10-5細胞株を段階的に継代することにより、組織培養物中で40世代を超えて安定であり、アッセイの一連の時点にわたる平均生産量が10.4pcdピコグラム/細胞/日であることが明らかになった。図6参照。デバイスによる生産量の時間経過の試験研究細胞バンクの一定分量から拡大したp834-10-5細胞株を拡大した後にデバイスに充填した。細胞を、ポリスルホン半透膜で構築された壁を有する6mmのECTデバイスに注射し、細胞を付着させるためのポリエチレンテレフタラートPET糸を充填することによってカプセル封入した。デバイスを、栄養培地を伴う密閉容器の一次包装内に個別に置き、37°Cで10週間インキュベートした。インキュベーション保持の時間経過の間、ECTデバイスからの組換えタンパク質の生産量を、包装から取り出すことにより定期的に調査し、p834-10-5タンパク質分泌についてELISAによってアッセイした。結果は、最初のデバイスによる生産量はデバイス1日当たりp834-10-5タンパク質480ngであり、6週間後の、デバイス1日当たり約60ngのベースラインの生産量まで徐々に減少したことを示している。図7では、2つのデバイスの組織切片は、頑強な834-10-5細胞の内部での増殖を示し、これは、1ヶ月のデバイス培養を通じた高い生存能力を実証している。p838VEGFR構築物およびp834VEGFR構築物を分泌するように遺伝子操作されたARPE-19細胞を含有するデバイスは、埋め込みの1ヶ月後および3ヶ月後に優れた安全性プロファイルを示した。さらに、これらのデバイスNT-503デバイスは、埋め込みの1ヶ月後および3ヶ月後にinvivoで安定である。表2は、これらのNT-503デバイスについてのPKデータを示す:表3は、NT-503デバイスの貯蔵寿命の結果を示す:上記の通り、p834デバイスにより、p838と比較して13倍高いレベルのVEGF受容体が送達された。それにもかかわらず、NT-503について、invitroにおけるデバイスによる生産量およびinvivoにおける性能硝子体におけるレベルについて測定したはどちらも安定に維持された。さらに、埋め込まれたNT-503デバイスのinvitroでの保持期間および対応するinvivoにおける性能の評価により、4週間に至るまでの貯蔵寿命安定性が実証された。したがって、p834デバイスを、ヒトにおける概念の上首尾の証拠を確実にするために持続的なヒト臨床試験に利用する。さらに、この臨床試験現行のp838細胞株はポリクローナル細胞株であるの第2のコホートのための高産生p838クローンを選択するために追加的な研究を行う。最後に、可能であれば、NT-503デバイスの貯蔵寿命を、4週間を越えて延長するための継続した試みを行う。しかし、現在は、当技術分野において使用される大多数の細胞療法製品の貯蔵寿命は1週間であるので、これは必要ではない。実施例6動物試験包装した4週間後に、デバイスを免疫抑制されていないNewZealand白色ウサギの眼に埋め込んだ。埋め込みの1ヶ月後および3ヶ月後のp834-10-5による生産量を決定するために、動物の眼球を摘出し、抽出した硝子体からp834-10-5の濃度を数量化し、外植デバイスの生産性と比較した。埋め込みの1ヶ月後に、外植デバイスからのp834-10-5タンパク質は100ng/ml/日を超え、定常状態の硝子体における濃度は250ng/ml超であった。埋め込みの3ヶ月後には、外植デバイスによる産生は200ng/ml超で継続されたが、硝子体における濃度は、700ng/ml超が検出された表4参照。1年後、ウサギ硝子体試料は、350ng/mlのp834-10-5タンパク質を含有し、これは、12ヶ月の間、組換え受容体が継続して産生されていることを実証している。図8に示されている通り、埋め込みの3ヶ月後の外植デバイスの組織学的検査により、図7に示されている容器で保持したデバイス由来の試料において観察された細胞の形態と類似した頑強な細胞の増殖が明らかになった。眼科獣医が定期的に検査したところ、試験期間中、処置したウサギの眼において臨床的に有意な有害事象は観察されなかった。実施例7反復的な遺伝子投薬により、組換えタンパク質の産生が増加する反復トランスフェクションを用いて、特にp834cDNAの遺伝子量genedosageを増加させた。同一の834cDNAを有する3種の発現プラスミド:p834pCpGvitrofreeブラストサイジン耐性、p910pCpGvitrofreeネオマイシン耐性およびp969pCpGvitrofreeハイグロマイシン耐性を作出した。p910をブラストサイジン耐性p834-10-5細胞株にトランスフェクトし、生じた二重の組み込み体クローンを、ネオマイシン選択を適用することによって回収し、p834-10-5のPCD生産量レベルを超えるサブクローンを単離した。図9に示されている通り、最初の1回1×のトランスフェクションにより、上述のp834-10-5細胞株がもたらされ、裸の細胞の生産量レベルFcELISAは15~20PCDであった。親の834-10-5クローンからp910クローンをトランスフェクションし選択することにより、910834-10-5-4-47クローンがもたらされ、生産量レベルは35~40PCDであった。p969を910834-10-5-4-47サブクローンに反復トランスフェクションし選択することにより、多数のハイグロマイシン耐性p969由来クローンがもたらされ、最初の分離株は50PCD~>100PCDにわたるレベルの組換えタンパク質を分泌した。3つ全ての遺伝子組み込み事象からの発現の維持を、969個のクローン株をブラストサイジン培地、ハイグロマイシン培地、およびネオマイシン培地のそれぞれにおいて培養することによって確認した。組換えタンパク質とVEGFを結合させたプレートの直接結合、その後の抗ヒトFcを使用した検出に基づいたELISAアッセイによって決定された通り、効力の最小の損失が実証された三重トランスフェクションクローンが存在していた。驚いたことに、3×トランスフェクションに基づいて遺伝子量genedosageを単純に算術的付加した8倍に至るまでの組換えタンパク質の値が検出され、これは、段階的なトランスフェクション例えば、反復トランスフェクションプロセスを用いたによる遺伝子量genedosageの増加に、予想外の相乗的な生物学的選択が関与することを示唆している。実施例8反復的にトランスフェクトされた細胞株の用量漸増の前臨床試験実施例6の方法に従って、二重トランスフェクタント細胞株910834-10-5-4-47、および三重トランスフェクタント細胞株969910834-10-5-4-47-33を用いて、ECTデバイスを生成し、その後、ウサギに埋め込んだ。埋め込みの1ヶ月後に、ウサギの眼球を摘出し、硝子体を抽出して834タンパク質のレベルを定量化した。同時に、デバイスを外科的に除去し、外植デバイスを細胞の増殖培地でさらに培養して、デバイスによる組換えタンパク質の生産性を確認した。表5に示されているように、910デバイスおよび969デバイスからの生産量により、834の1回トランスフェクトタンパク質で観察されたレベルの、それぞれほぼ5倍および10倍の定常状態の硝子体834タンパク質のレベルがもたらされた表5。細胞株のPCD生産量データと一致して、invivoにおいて観察された834タンパク質の定常状態の濃度は、段階的にトランスフェクトした遺伝子量genedoseの単純な相加効果により予測される濃度よりも高く表6対表4、これにより、反復トランスフェクション方法体系による相乗的な分泌増強の予想外の相乗的な生物学的選択が重ねて示唆されている。実施例9834-10-5細胞株に適用したp544CNTFのトランスフェクション逐次的なDNAトランスフェクションの一実施形態では、関連のないすなわち、異なるcDNAをコードする発現ベクターを使用して、異なる機能を有する2つの異なるタンパク質を分泌する細胞株を生成することができる。網膜色素変性症患者および地図状萎縮患者の網膜において神経保護作用を有するサイトカインである毛様体神経栄養因子をコードするCNTF発現ベクターp544を、834-10-5細胞株にトランスフェクトした。トランスフェクトされた細胞を抗生物質に対して選択し、CNTFおよび834タンパク質を産生する最高産生細胞株を、それぞれのELISAアッセイに基づいて回収した。反復トランスフェクションを用いて、いくつものCNTF/834陽性クローンを得、それが表6に記載されている。興味深いことに、これらの首位の産生クローンでは、親の834-10-5クローンに基づいて、またはp544由来のCNTF発現により、歴史的なCNTF細胞株対照約0.5pcdと比較して産生の損失は観察されず、これは、親の発現レベルと比較して産生忠実度の損失を伴わない、二重発現細胞株のカプセル封入による併用療法の潜在性を実証している。これらの結果は、ECT療法が単一の分子実体の産生に限定されないこと、および多数の治療分子を分泌する細胞株を生成することができることを示している。この場合、CNTFは萎縮型AMDに対する神経保護療法として機能し、VEGFアンタゴニストは滲出型wetAMDに対する抗血管新生療法として機能する。p544の核酸およびアミノ酸配列が以下に提供される:実施例10可溶性PDGFRアンタゴニスト二重分子コンビナトリアルECT療法を、例えば、別々の抗血管新生因子を分泌する二重デバイス、または2つの異なる分子を分泌する組み合わせ細胞株により、血管新生にターゲティングすることができる。例えば、抗血管新生抗体足場および/またはPDGFR可溶性アンタゴニスト細胞株を、それぞれが可溶性受容体として、または可溶性融合タンパク質としてPDGFRベータをコードするプラスミドp963、p964、p974、p978、およびp977を使用して構築した。捕捉抗体が抗Fcであり、検出抗体が抗PDGFRベータ抗体であるPDGFRベータに特異的なELISAを展開し図10、これによりNTC-200細胞を一過性にトランスフェクションすることにより、p963PDGFR-IgG1Fc、およびp964PDGFR-IgG4Fcの予測された構造に対応する免疫原性材料が産生されることが示されている。実施例11PDGFR-Fc産生細胞株以前の実施例において言及されているVEGFアンタゴニスト産生細胞株を生成するための手法と同様の手法を用いて、PDGFRアンタゴニスト産生細胞株も生成した。表8に示されているように、p963のクローン選択により、クローン963G2がもたらされ、産生速度は7.7pcdであった。反復トランスフェクションによる963G2のさらなる操作を用いて、p963タンパク質の産生速度を上昇させることができる。実施例12ECTにおける他の抗血管新生抗体足場、およびデバイスによる生産量に対する培地の影響834-10-5VEGFR-Fcアンタゴニストに加えて、1回のトランスフェクションおよびクローンの選択から他の細胞株を得た。図12の一例に示されているように、モノクローナル抗体Mab-p874、Fab断片Fab-p915、単鎖FvScFv-p918およびVEGFR-Fc受容体-Fc-p834を示す細胞株を生成し、これは8pcd~35pcdMabを産生した。ECTデバイス形式に置くと、広範囲の組換えタンパク質の生産量が観察され、これは、使用する細胞株に左右された。さらに、試験したDMEM10FBS培地および内皮の血清を含まない培地Endo-Gibcoに基づいて、培地がタンパク質分泌において大きな役割を果たすことも注目に値した。834-10-5受容体Fcデバイスおよび913-9-45Fabデバイスにおいて見られるように、デバイスによる生産量のわずかな差異を、endoまたはDMEM10FBSでの培養物に基づいて測定した。しかし、918-4-35ScFvデバイスおよび874-1-23Mabデバイスは、Endoにおける培養物に対して感度が高く、DMEM10FBSで培養した際に、Mabについて最大デバイス当たり1日当たり3μgの最高の生産量がもたらされた。これらの結果は、宿主に埋め込む前に細胞を最適化するために、適切な培地を用いてデバイスを前準備することが必要な場合があり、それにより、最大の産生速度および生存性が可能になることを示唆している。例えば、874-1-23デバイスをDMEM10FBS中で4週間馴化させた後にウサギの眼に埋め込んだ。埋め込みの1ヶ月後にウサギの眼球を摘出し、874Mabタンパク質の硝子体におけるレベルを、VEGF-FcELISAにより評価し、Fc-ELISAによっても評価した。表9に見られるように、400ng/ml~最大1.7μg/mlの874Mabタンパク質が、ECTデバイスに埋め込まれたウサギ硝子体において検出された。さらに、874-1-23ECTデバイスを、SCIDマウスを用いて全身性環境におけるMab生産量について評価した。874は抗VEGF抗体であるが、ヒトVEGFに対するその特異性は報告されているが、げっ歯類VEGFに対する特異性は報告されていない。したがって、この分子の抗ヒト血管新生機能は、SCIDマウスモデルにおいて有害な生理作用を有さないと推定された。各マウスについて、4つの874-1-23ECTデバイスをDMEM10FBSで培養した後に、SCIDマウスの背中の皮下に埋め込み、合計6匹のマウスを試験した。1ヶ月後に、マウス血清を心臓穿刺によって抽出し、874タンパク質の血清濃度をVEGF-FcELISAによって評価した。したがって、表10に見られるように、VEGF-FcELISAの直接結合によって測定したところ、874-1-23ECT埋め込み物は、定常状態で最大19μg/mlの874Mabを産生することができた。これらのECTデバイス切片を接着組織と一緒に組織学的検査することにより、埋め込みの極めて近傍において多数の新しく発生した血管化が見られた。ECTデバイス表面の血管化が実現され、これにより、拡散した組換えタンパク質の動物の循環系への取り込みおよび輸送が可能になった。等価物本発明の1またはそれより多くの実施形態の詳細が上記の添付明細書に記載されている。本明細書に記載の方法および材料と類似した、またはそれと等しい任意の方法および材料を本発明の実施または試験において使用することができるが、好ましい方法および材料がここに記載されている。本発明の他の特徴、目的、および利点は、明細書から、および特許請求の範囲から明らかになるであろう。明細書および添付の特許請求の範囲では、単数形は、文脈により明確に別段の規定がなされない限り、複数の指示対象を包含する。別段の定義のない限り、本明細書において使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般に理解されているものと同じ意味を有する。本明細書において引用されている特許および刊行物は全て、参照により組み込まれる。前述の説明は、単に例示するために提示されており、本発明を開示されている形態そのものに限定されるものではないが、添付されている特許請求の範囲により限定される。"