"次の式Iの第四級化合物及び次の式IIのスルホネートエステルを含んでなる前駆体組成物であって、式IIのスルホネートエステルを3未満含むことを特徴とする前駆体組成物。式中、Aはフェニル環又はナフチル環を完成するために必要な原子を表し、Y1は-O-、-S-、-NR1-又は-CR2R3-であり、Y2はR基であって、式II中のすべての位置で同一であり、各M1は独立にH又はBcここで、Bcは生体適合性陽イオンである。であり、R1はR基であり、R2及びR3は独立にC13アルキル又はC16カルボキシアルキルであり、各Rは独立にC15アルキル又はC16カルボキシアルキルであり、qは1~4の値を有する整数であり、xは1~4の値を有する整数であり、yは0~3の値を有する整数であって、x及びyはxy=qとなるように選択される。Y1が-CR2R3-である、請求項1記載の前駆体組成物。qが1又は2である、請求項1又は請求項2記載の前駆体組成物。第四級化合物が次の式IAを有し、スルホネートエステルが次の式IIAを有する、請求項1乃至請求項3のいずれか1項に記載の前駆体組成物。式中、zは1又は2であり、fは0又は1であり、gは1又は2であって、fg=zである。zが1である、請求項4記載の前駆体組成物。次の式IVの非対称シアニン色素並びに次の式VI及び式VIIの対称シアニン色素を含んでなる色素組成物であって、式VI及び式VIIの対称色素を合計で8未満含むことを特徴とする色素組成物。式中、A1及びA2は独立に請求項1乃至請求項5のいずれか1項で定義したA基であり、M1a及びM1bは独立に請求項1で定義したM1基であり、Y1a及びY1bは独立に請求項1乃至請求項5のいずれか1項で定義したY1基であり、Y2a及びY2bは独立に請求項1乃至請求項5のいずれか1項で定義したY2基であり、a及びbは独立に請求項1又は請求項3で定義したq基であり、A1、Y1a及びY2aの少なくとも1つはそれぞれA2、Y1b及びY2bと異なる。次の式Vのアミド及び次の式Xのポリエン塩を含んでなる中間体組成物であって、ポリエン塩Xを1未満含むことを特徴とする中間体組成物。式中、A1、M1a、Y1a及びY2aは請求項6で定義した通りである。さらに次の式IIIの対称シアニン色素を1未満含む、請求項7記載の中間体組成物。式中、A、M1、Y1、Y2及びqは請求項1乃至請求項5のいずれか1項で定義した通りである。請求項6記載の色素組成物の製造方法であって、請求項7又は請求項8記載の中間体組成物を適当な溶媒中で請求項1乃至請求項5のいずれか1項に記載の前駆体組成物の1モル当量と反応させることを含んでなり、前記前駆体組成物に関しては第四級化合物が次の式IBを有しかつスルホネートエステルが次の式IIBを有する、方法。式中、A2、M1b、Y1b、Y2b及びbは請求項6で定義した通りであり、xは1~4の値を有する整数であり、yは0~3の値を有する整数であって、x及びyはxy=bとなるように選択される。請求項7に記載した式IIIの対称シアニン色素製造方法であって、請求項1乃至請求項5のいずれか1項に記載の前駆体組成物を適当な溶媒中で請求項7に記載した式Xのポリエン塩の2モル当量以上と反応させることを含んでなる方法。スルホン化色素の合成、或いは請求項7又は請求項8記載の色素中間体組成物の合成における、請求項1乃至請求項5のいずれか1項に記載の前駆体組成物の使用。スルホン化色素の合成における請求項7又は請求項8記載の中間体組成物の使用。スルホン化色素が請求項8に記載した式IIIの対称シアニン色素又は請求項6に記載した式IVの非対称シアニン色素である、請求項11又は請求項12記載の使用。請求項6記載の色素組成物を哺乳動物への投与に適した無菌形態で生体適合性キャリヤー媒質中に含んでなる医薬組成物。式IVの非対称色素と生物学的ターゲティング部分又は合成巨大分子とのコンジュゲートの製造における、請求項6記載の色素組成物又は請求項14記載の医薬組成物の使用。生物学的ターゲティング部分が、i3~100量体ペプチド、ii酵素基質、酵素アンタゴニスト又は酵素阻害剤、iiiレセプター結合化合物、ivオリゴヌクレオチド、及びvオリゴDNA又はオリゴRNAフラグメントから選択される、請求項15記載の使用。本発明は、スルホン化光学色素の合成において有用な組成物であって、以前には認識されなかった不純物が同定されかつ抑制される組成物を提供する。かかる不純物の同定及び制御は、医薬品製造品質管理基準GMPにとって重要である。非対称光学色素の合成において有用な色素中間体組成物、並びに主要不純物の抑制によって改良された色素組成物を与える色素製造方法も提供される。本発明は、不要の不純物を抑制しながら医薬品グレードにおいてグラム単位の量でスルホン化色素を製造することを可能にする。本組成物及び方法は、生物学的用途、特にインビボ光学イメージングのためのかかるスルホン化色素を製造する場合に特に有用である。第1の態様では、本発明は、次の式Iの第四級化合物及び次の式IIのスルホネートエステルを含んでなる前駆体組成物であって、式IIのスルホネートエステルを3未満含むことを特徴とする前駆体組成物を提供する。式中、Aはフェニル環又はナフチル環を完成するために必要な原子を表し、Y1は-O-、-S-、-NR1-又は-CR2R3-であり、Y2はR基であって、式II中のすべての位置で同一であり、各M1は独立にH又はBcここで、Bcは生体適合性陽イオンである。であり、R1はR基であり、R2及びR3は独立にC13アルキル又はC16カルボキシアルキルであり、各Rは独立にC15アルキル又はC16カルボキシアルキルであり、qは1~4の値を有する整数であり、xは1~4の値を有する整数であり、yは0~3の値を有する整数であって、x及びyはxy=qとなるように選択される。かかる前駆体組成物では、A、Y1及びY2は式I及び式II中において同一である。第1の態様の前駆体組成物は、本発明の以後の態様で記載されるようなスルホン化色素の合成において有用である。本発明の組成物を用いて製造できる色素には、シアニン色素がある。かかる色素はスルホン化されている。スルホン化されているという用語は、前記色素が1個以上のスルホン酸置換基を有することを意味する。スルホン酸置換基という用語は式-SO3M1の置換基を意味し、式中のM1はH又はBcここで、Bcは生体適合性陽イオンである。である。-SO3M1置換基は炭素原子に共有結合しており、かかる炭素原子はアリール例えば、式I中のA基又はアルキルであり得る。生体適合性陽イオンBcという用語は、イオン化して負に帯電した基この場合にはスルホネート基と共に塩を形成する正に帯電した対イオンを意味する。ここで、前記正に帯電した対イオンも無毒性であり、したがって哺乳動物体特に人体への投与に適している。好適な生体適合性陽イオンの例には、アルカリ金属であるナトリウム及びカリウム、アルカリ土類金属であるカルシウム及びマグネシウム、並びにアンモニウムイオンがある。好ましい生体適合性陽イオンはナトリウム及びカリウムであり、最も好ましくはナトリウムである。式IIにおいて、-SO2-OY2置換基はスルホネートエステルと呼ばれる。それは、Y2及びRの定義により、-SO2-OC-エステル共有結合が存在することが要求されるからである。式I及び式IIにおいて、Aがフェニル環を完成するために必要な原子である場合には、式IA及び式IIA下記に示される環系に対応するインドール環が生成される。Aがナフタレン環を完成するために必要な原子である場合には、式IA又は式IIAに類似した環構造であって、その中のフェニル環に追加のフェニル環が縮合したものが表される。第1の態様の組成物が式I/II中にナフタレン環を含む場合、スルホネート置換基及びスルホネートエステル置換基はナフタレン環の任意の位置に存在し得る。式I/IIにおいて、フェニル環又はナフタレン環は追加の置換基で任意に置換されていてよい。スルホネートエステルを3未満含むという用語は、組成物が式IIのスルホネートエステルを3.0モル未満含むことを意味する。前駆体組成物がスルホネートエステルを3未満含む場合、残部は好適には90モル以上の式Iの第四級化合物である。式IIのスルホネートエステルは、式Iの化合物を含む組成物中において以前には知られていない不純物である。これらは、式Iの第四級化合物の合成時における所望のN-アルキル化に加えて、望ましくないO-アルキル化から生じる。前駆体組成物中における前記スルホネートエステルの抑制は重要である。それは、これらが存在すると、次の合成段階即ち、第2の実施形態の式Vのアミドの製造或いは対称又は非対称色素の製造においてさらに反応するからである。その結果、不要のスルホン化エステル不純物が色素組成物生成物中にまで持ち越され、かかる不純物をその段階で分離することは困難になろう。含むという用語は、本願全体を通してその通常の意味を有していて、組成物は記載された成分を有していなければならないが、それに加えて他の明記されない化合物又は化学種が存在してもよいことを意味する。含むという用語は、好ましい部分集合として、組成物が他の化合物又は化学種の存在なしに記載された成分を有することを意味するから本質的になるを包含する。好ましい態様好ましくは、第1の態様の前駆体組成物は式IIのスルホネートエステルを2未満及び式Iの化合物を94モル以上含み、最も好ましくは式IIのスルホネートエステルを1未満及び式Iの化合物を95モル以上を含む。前駆体組成物中で、Y1は好ましくは-CR2R3-である。Y1が-CR2R3-である場合、R2及びR3は好ましくはいずれも独立にC13アルキルであり、最も好ましくはR2=R3=CH3である。前駆体組成物中で、qは好ましくは1又は2であり、最も好ましくは1である。前駆体組成物中で、好ましくは第四級化合物は次の式IAを有し、スルホネートエステルは次の式IIAを有する。式中、zは1又は2であり、fは0又は1であり、gは1又は2であって、fg=zである。式IA/IIAの前駆体組成物中で、zは好ましくは1である。zが1である場合、-SO3M1置換基は好ましくはインドールN原子に対してパラ位にある。式IA/IIA中で、好ましい及び最も好ましいR2、R3及びY2基は式I/II上記に関して記載した通りである。特に好ましい前駆体化合物は、第四級化合物が次の式IAAを有しかつスルホネートエステルが次の式IIAAを有する場合である。式IAA/IIAA中で、好ましい及び最も好ましいY2基は式I/II上記に関して記載した通りである。第1の態様の前駆体組成物は、適当な溶媒中で次の式Bの化合物を式Y2-Hal式中、Halはハロゲンであり、Y2は式I及び式IIに関して定義した通りである。のアルキル化剤でアルキル化することによって得ることができる。Y2-Halに関しては、Halは好ましくはCl、Br又はIであり、最も好ましくはBrである。適当な溶媒は通例はスルホランであり、反応は好適には80~120°C、好ましくは90~120°Cで6~16時間実施される。化合物15-スルホ-2,3,3-トリメチルインドレニンナトリウム塩は、IntatradeChemicals社から商業的に入手できる。一実施形態では、式IIのスルホネートエステル不純物は改良された処理方法によって最小限に抑えられる。即ち、化合物Bのアルキル化後、溶媒を真空中で除去し、残留物を10容の水に溶解し、酢酸エチル5容で洗浄した。酢酸エチル洗浄によって微量のアルキル化剤Y2-Halが除去されるが、さもないと後続の段階の微酸性条件下でスルホネートエステル不純物の生成をもたらすであろう。化合物3の場合には、式Bの化合物のアルキル化後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、数分間撹拌して濃厚なタール様沈殿を得た。過剰のアルキル化剤及びスルホランを含む酢酸エチル層をデカントし、残留物を酢酸エチルで洗浄して酢酸エチル層をデカントすることを繰り返してスルホラン及びアルキル化剤の大部分を除去した。残留物中に捕捉された微量の残留アルキル化剤は、残留物を10容の水に溶解し、さらに水性層を酢酸エチルで洗浄することで除去した。次いで、水酸化ナトリウムを用いて水性層に加水分解を施した。化合物3図1参照に関しては、このような改良処理方法の結果、組成物中のスルホネートエステル不純物IIのレベルは5~6から<1に低下し、それによって化合物3の純度は89から96に上昇した。さらに、化合物3は反応後に常に濃厚で粘着性の塊状物として単離されたが、これは取扱いが難しかった。化合物3の再結晶は大きな問題であった。それは、アセトン、イソプロピルアルコール、アセトニトリル、酢酸及びDMFジメチルホルムアミドのような多くの常用有機溶媒に対する溶解性が非常に悪いことが判明したからである。メタノール及びエタノールのような単純アルコールに対する溶解性は良好であったが、これらは化合物3の対応カルボン酸エステルを不純物として容易に生成するので不適当である。本発明者らは、アセトンとイソプロピルアルコールIPAとの混合物が問題を解決し得ることを観察し、アセトン/イソプロピルアルコール70/30比の混合物と共にトリチュレートすることで化合物3を結晶として単離することに成功した。上述の通り、処理後の化合物3はアセトン及びIPAのような個々の溶媒には不溶であるが、粗化合物をアセトン/IPA70:30の混合物と共にトリチュレートすれば生成物が晶出した。達成された純度は96であった。このような劇的な改善をもたらしたのは、極性溶媒の組合せによる不純物の効果的な除去である。再結晶は1又は2時間以内に実施すべきである。それは、イソプロパノールの反応性がメタノール及びエタノールに比べて低く、カルボン酸のイソプロピルエステルの生成は遙かに起こりにくいからである。しかし、化合物3をイソプロパノール/アセトン混合物中に長時間16時間放置した場合には、カルボン酸のイソプロピルエステルをLCMSによって検出することができた。化合物2は、先行技術[Mujumdaretal,Bioconj.Chem.,42,105-1111993]に記載されている。化合物2に関しては、アルキル化反応の粗生成物は90~92の純度を有していた。本発明者らは、化合物2に関し、メタノールからの再結晶によってスルホネートエステルが除去され、純度が90~92から98に向上したことを見出した。前駆体組成物の純度は、2種の波長254nm及び270nmにおける分析HPLC測定曲線下の面積によって評価されている。スルホネート不純物はLCMSによって特性決定された。第2の態様では、本発明は、次の式IVの非対称シアニン色素並びに次の式VI及び式VIIの対称シアニン色素を含んでなる色素組成物であって、式VI及び式VIIの対称色素を合計で8未満含むことを特徴とする色素組成物を提供する。式中、A1及びA2は独立に第1の態様で定義したA基であり、M1a及びM1bは独立に第1の態様で定義したM1基であり、Y1a及びY1bは独立に第1の態様で定義したY1基であり、Y2a及びY2bは独立に第1の態様で定義したY2基であり、a及びbは独立に第1の態様で定義したq基であり、A1、Y1a及びY2aの少なくとも1つはそれぞれA2、Y1b及びY2bとは異なる。式VI及び式VIIの対称色素を合計で8未満含むという用語は、組成物が該組成物中に存在する[対称色素VI及び対称色素VII]の合計量を8.0モル未満含むことを意味する。残部は、好適には90モル以上の式IVの非対称シアニン色素である。第2の態様における様々なA、M1、Y1及びY2基の好ましい態様は、第1の態様上記に記載した通りである。第2の態様では、式IVの色素は、好ましくはR1基及びR基から選択される1個以上さらに好ましくは1個のカルボキシアルキル置換基を含んでいる。その結果、さらに別の態様下記に記載されるように、色素を生物学的分子に結合するための官能基カルボキシルを提供することによって色素は二官能性となる。式IVの非対称シアニン色素のいくつかは先行技術で知られているものの、第2の態様の非対称シアニン色素組成物は理解されていなかった。それは、主要不純物の正体が知られていなかったからである。かかる不純物を同定することに加えて、本発明は、かかる不純物を制御して第2の態様の改良組成物を与えるための方法を提供する。式VI及び式VIIの対称不純物色素は、色素組成物中にまで持ち越されれば、非対称色素IVと同様な化学的特性のために分離して除去することは極めて困難になろう。同様な光学的性質を有するので、これらはインビトロ及びインビボでの式IVの色素の生物学的用途を妨害するであろう。第2の態様の色素組成物では、A1及びA2は好ましくはいずれもフェニル環を完成するために必要な原子である。a及びbは好ましくはzここで、zは上記に定義した通りである。であり、最も好ましくは1である。Y1a及びY2aは好ましくはいずれも独立に-CR2R3-である。第2の態様の色素組成物では、組成物はまた、好ましくは色素組成物中にスルホネートエステル不純物を4未満、さらに好ましくは2未満、最も好ましくは1未満含んでいる。前記スルホネートエステルは、-SO3M1a及び/又は-SO3M1b置換基が-SO2スルホネートエステルとして存在している式IV、式VI及び式VIIの類似体に相当している。ここで、M1a、M1b及びY2は第1の態様上記に関して定義した通りである。第2の態様の色素組成物は、第3の態様の中間体組成物及び第4の態様の方法によって得ることができる。第3の態様では、本発明は、次の式Vのアミド及び次の式Xのポリエン塩を含んでなる中間体組成物であって、ポリエン塩Xを1未満含むことを特徴とする中間体組成物を提供する。式中、A1、M1a、Y1a及びY2a並びにこれらの好ましい態様は第2の態様で定義した通りである。第3の態様の中間体組成物は、スルホン化色素、特に第2の態様の非対称シアニン色素組成物の合成、又は第5の態様の対称色素製造方法において有用である。非対称シアニン色素が好ましいのは、かかる色素が例えばただ1つのカルボキシアルキル置換基を有し、したがって生物学的分子にコンジュゲートするための二官能性色素誘導体を製造する場合にただ1つの結合点を有し得るからである。式Xのポリエン塩を1未満含むという用語は、組成物が中間体組成物中にポリエン塩を1.0モル未満含むことを意味する。好ましくは、中間体組成物は式Xのポリエン塩を0.5未満、最も好ましくは0.1未満含む。本発明者らは、中間体組成物中におけるポリエン塩Xのレベルを抑制することが極めて重要であることを見出した。ポリエン塩Xが残留すると、それは第4の態様の方法段階で反応して、上述したような式VI及び式VIIの望ましくない対称色素を生成するからである。即ち、本発明者らは、先行技術による非対称シアニン色素化合物4Cy7の合成では、不要の対称色素VI及びVIIがそれぞれ最大10~15生成されることを見出した。ひとたび生成されて組成物中に存在すると、これらの不純物色素はもちろん所望の生成物IVと同様な特性を有する。その結果、これらを製造規模でクロマトグラフィーにより分離するのは困難であり、したがって最初にこれらの生成を抑制することが重要である。したがって、第3の態様の中間体組成物は第2の態様の改良色素組成物を得るための重要な手段である。かかる中間体組成物は、好ましくはさらに1モル未満、さらに好ましくは0.5未満、最も好ましくは0.1未満のアセトアニリドを含んでいる。アセトアニリド[即ち、C6H5NHCH3]は、前駆体組成物とポリエン塩Xとの反応の副生物である。本発明者らは、第2の態様の色素組成物中にアセトアニリドが存在する場合、それは分取HPLC上で化合物4と共溶出するので分離して除去するのが困難であり得ることを見出したので、アセトアニリドを除去することは重要である。かかる中間体組成物は、好ましくはさらに次の式IIIの対称シアニン色素を1未満含んでいる。式中、A、M1、Y1、Y2及びqは第1の態様で定義した通りである。式Xのポリエン塩は、例えばSigma-Aldrich社から商業的に入手できる。シアニン色素を合成するための標準的な文献方法では、酢酸と無水酢酸との混合物が溶媒として使用され、酢酸カリウムが塩基として使用される。本発明は、許容される溶媒中での規模変更可能な高収率合成法を提供する。したがって、無水酢酸の役割は溶媒から反応体に変更され、有機溶媒の使用量は最小化される。かくして、第3の態様の中間体組成物は、適当な溶媒中で第1の態様の前駆体組成物を1.2~1.8当量、好ましくは1.4~1.6当量、最も好ましくは約1.5当量の上述したポリエン塩Xと反応させることで得られる。過剰のポリエン塩Xの使用は、中間体組成物中に対称色素不純物の生成が起こらないことを保証するためである。過剰のポリエン塩Xは、中間体組成物を第4の態様の色素組成物合成法で使用する前に、酢酸エチルを用いて<1まで除去される。適当な溶媒はアセトン又はアセトニトリルであり得るが、好ましくはアセトニトリルである。ポリエン塩Xは、温度に対して非常に敏感であることが判明している。したがって、反応混合物を110°Cの温度に加熱しようとすると、ポリエン塩Xの分解及び損失を引き起こすことが判明した。それはひいては、ポリエン塩に対してインドール前駆体が過剰であるため、式IIIの対称色素不純物のレベルを増加させた。そのため、反応は室温で実施される。化合物7図1参照に関しては、反応は、N,N-ジイソプロピルエチルアミンDIPEA、1.5当量及び無水酢酸5当量の存在下において、アセトニトリル中25°Cで1時間実施される。反応の完了後、アセトニトリルを真空中25°Cで除去した。低温での溶媒の除去は極めて重要であることが判明した。即ち、それより高い温度45°Cでのアセトニトリルの蒸発は、不純物である化合物5の生成をもたらすことが認められた。アセトニトリルの除去後に得られた残留物を、100容の酢酸エチルと共に30分間トリチュレートした。これは赤色の結晶質固体の生成をもたらした。固体の化合物7が90の収率及び550nmでのHPLCによれば92~93の純度で単離された。アセトアニリド及び過剰のポリエン塩Xは、上述したように酢酸エチル及び低温蒸発を使用することで効果的に抑制された。第4の態様では、本発明は、第2の態様の色素組成物の製造方法であって、第3の態様の中間体組成物を適当な溶媒中で第1の態様の前駆体組成物の1モル当量と反応させることを含んでなり、前記前駆体組成物に関しては第四級化合物が次の式IBを有しかつスルホネートエステルが次の式IIBを有する方法を提供する。式中、A1、A2、M1a、M1b、Y1a、Y1b、Y2a、Y2b、a及びb並びにこれらの好ましい態様は第2の態様上記に記載した通りである。第4の態様に関しては、A1=A2及びY1a=Y1bであることが好ましい。適当な溶媒及びその好ましい態様は、第3の態様上記に記載した通りである。第4の態様の製法は、化合物4に関してスキーム1に要約されている。反応は、第1の態様の前駆体組成物から出発して2つの段階で実施される。この場合、第四級化合物は化合物3である。第1の段階では、図示されるように前駆体化合物を化合物Xと反応させることで、化合物7を含む第3の態様の色素中間体組成物が製造される。中間体組成物は、好ましくは単離及び/又は精製した後に次の段階で使用される。第2の段階では、中間体組成物は、今回は化合物2を含む別の前駆体化合物との反応によって第2の態様の所望非対称組成物に転化される。化合物2前駆体組成物、続いて5当量のDIPEAを添加したところ、直ちに化合物4が生成された。1当量未満好ましくは約0.75当量の化合物2を使用した場合、化合物4は微量の対称色素しか含んでいなかった。得られた反応混合物は、主として化合物4を含むと共に、2当量のアセトアニリド並びに6当量を超えるDIPEA及び塩類を含んでいる。本発明者らは、粗化合物4からアセトアニリド及び残留化合物7の両方を除去するためには、反応混合物を過剰の酢酸エチル中に注いで沈殿させるのが有効であることを見出した。DIPEAの酢酸塩を除去するためには、単離された化合物4をアセトン中でトリチュレートすることが有効であった。式VI及び式VIIの対称色素不純物は分取HPLCによって除去された。別法として、アセトニトリルを蒸発させた後の残留物を水に溶解し、酢酸エチルでの連続抽出によってアセトアニリド及び他の不純物を除去することができる。さらなる詳細は実施例下記中に示される。式中、Ra=5CO2H、Rb=-CH2CH3、DIPEA=N,N-ジイソプロピルエチルアミン。第5の態様では、本発明は、第3の態様に記載した式IIIの対称シアニン色素製造方法であって、第1の態様の前駆体組成物を適当な溶媒中で第3の態様に記載した式Xのポリエン塩の2モル当量以上と反応させることを含んでなる方法を提供する。。適当な溶媒及びその好ましい態様は、第3の態様上記に記載した通りである。このように、第1の態様の前駆体組成物は、対称及び非対称色素組成物の両方を製造するために有用である。第6の態様では、本発明は、スルホン化色素の合成又は第3の態様の中間体組成物の合成における第1の態様の前駆体組成物の使用を提供する。第7の態様では、本発明は、スルホン化色素の合成における第3の態様の中間体組成物の使用を提供する。第6又は第7の態様の使用では、スルホン化色素は好ましくは第5の態様の式IIIの対称シアニン色素又は第2の態様の式IVの非対称シアニン色素である。第8の態様では、本発明は、第2の態様の色素組成物を哺乳動物への投与に適した無菌形態で生体適合性キャリヤー媒質中に含んでなる医薬組成物を提供する。生体適合性キャリヤー媒質は、1種以上の薬学的に許容される補助剤、賦形剤又は希釈剤を含んでいる。それは、好ましくは、組成物が生理学的に認容されるようにして即ち、毒性又は過度の不快感なしに哺乳動物体に投与できるようにして式Iの化合物を懸濁又は溶解するための流体特に液体である。生体適合性キャリヤー媒質は、好適には、無菌のパイロジェンフリー注射用水、有利には注射用の最終生成物が等張性又は非低張性になるように平衡させ得る食塩水のような水溶液、或いは1種以上の張度調整物質例えば、血漿陽イオンと生体適合性対イオンとの塩、糖例えば、グルコース又はスクロース、糖アルコール例えば、ソルビトール又はマンニトール、グリコール例えば、グリセロール又は他の非イオン性ポリオール物質例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコールなどの水溶液のような注射可能なキャリヤー液体である。生体適合性キャリヤー媒質はまた、エタノールのような生体適合性有機溶媒を含んでいてもよい。かかる有機溶媒は、親油性の高い化合物又は配合物を可溶化するために有用である。好ましくは、生体適合性キャリヤー媒質はパイロジェンフリー注射用水、等張食塩水又はエタノール水溶液である。静脈内注射用生体適合性キャリヤー媒質のpHは、好適には4.0~10.5の範囲内にある。かかる医薬組成物は、抗菌防腐剤、pH調整剤、フィラー、安定剤又は重量オスモル濃度調整剤のような追加賦形剤を任意に含むことができる。抗菌防腐剤という用語は、潜在的に有害な微生物例えば、細菌、酵母又はかびの増殖を阻止する薬剤を意味する。抗菌防腐剤はまた、使用する用量に応じて多少の殺菌性を示すこともある。本発明の抗菌防腐剤の主な役割は、医薬組成物中におけるこのような微生物の増殖を阻止することである。しかし、抗菌防腐剤は、任意には投与に先立って前記組成物を製造するために使用されるキットの1種以上の成分中における潜在的に有害な微生物の増殖を阻止するためにも使用できる。好適な抗菌防腐剤には、パラベン類即ち、メチル、エチル、プロピル又はブチルパラベン或いはこれらの混合物、ベンジルアルコール、フェノール、クレゾール、セトリミド及びチオメルサールがある。好ましい抗菌防腐剤はパラベン類である。pH調整剤という用語は、組成物のpHがヒト又は哺乳動物への投与のために許容される範囲およそpH4.0~10.5内にあることを保証するために有用な化合物又は化合物の混合物を意味する。好適なかかるpH調整剤には、トリシン、リン酸塩又はTRIS[即ち、トリスヒドロキシメチルアミノメタン]のような薬学的に許容される緩衝剤、及び炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム又はこれらの混合物のような薬学的に許容される塩基がある。組成物をキットの形態で使用する場合には、pH調整剤を任意には独立のバイアル又は容器に入れて供給することができ、その結果としてキットのユーザーは多段操作の一部としてpHを調整することができる。フィラーという用語は、製造及び凍結乾燥中における材料の取扱いを容易にすることができる薬学的に許容される増量剤を意味する。好適なフィラーには、塩化ナトリウムのような無機塩、及びスクロース、マルトース、マンニトール又はトレハロースのような水溶性糖又は糖アルコールがある。かかる医薬組成物は、無菌製造条件下で即ち、クリーンルーム内で製造して所望の無菌で非発熱性の生成物を得ることができる。基本構成部分、特に関連する試薬並びにイメージング剤に接触する装置部品例えば、バイアルは無菌であることが好ましい。かかる構成部分及び試薬は、無菌濾過或いは例えば、γ線照射、オートクレーブ処理、乾熱又は例えば、エチレンオキシドによる化学処理を用いる終末滅菌をはじめとする、当技術分野で公知の方法によって滅菌できる。一部の構成部分を予め滅菌しておけば、最小数の操作を実施すれば済むので好ましい。しかし、予防策として、医薬組成物の製造における最終段階として少なくとも無菌濾過段階を含めることが好ましい。第8の態様の組成物中における色素の好ましい態様は、第2の態様に記載した通りである。さらに別の態様では、本発明は、式IVの非対称色素と生物学的ターゲティング部分又は合成巨大分子とのコンジュゲートの製造における、第2の態様の色素組成物又は第8の態様の医薬組成物の使用を提供する。さらに別の態様の使用は、第2の態様の色素組成物又は第8の態様の医薬組成物から出発して前記コンジュゲートを製造する方法を包含する。この態様の色素-BTMコンジュゲートは、インビトロ及びインビボでの用途を有している。さらに別の態様の使用では、色素の好ましい態様は第2の態様に記載した通りである。かかる色素は、好ましくは第8の態様の医薬組成物として使用される。生物学的ターゲティング部分BTMという用語は、投与後、インビボで哺乳動物体の特定部位に選択的に取り込まれるか又は特定部位に局在する化合物を意味する。かかる部位は、例えば、特定の疾患状態に関係するものであるか、或いは器官又は代謝過程がいかに機能しているかを表すものであり得る。合成巨大分子という用語は、分子量2~100kDa、好ましくは3~50kDa、最も好ましくは4~30kDaのポリマーを意味する。かかるポリマーは、ポリリシン又はポリグリコール酸のようなポリアミノ酸、或いはポリエチレングリコールPEGであり得る。合成という用語は下記に定義される通りである。BTMは合成品又は天然品であり得るが、好ましくは合成品である。合成品という用語はその通常の意味を有し、即ち、天然の供給源例えば、哺乳動物体から単離されるものではなく人造のものをいう。かかる化合物は、その製造及び不純物プロファイルを完全に制御できるという利点を有している。したがって、天然由来のモノクローナル抗体及びそのフラグメントは、本明細書中で使用する合成品という用語の範囲外にある。BTMの分子量は、好ましくは30000ダルトン以下である。さらに好ましくは、分子量は200~20000ダルトンの範囲内にあり、最も好ましくは300~18000ダルトンの範囲内にあり、400~16000ダルトンが特に好ましい。BTMが非ペプチドである場合、BTMの分子量は好ましくは3000ダルトン以下、さらに好ましくは200~2500ダルトン、最も好ましくは300~2000ダルトンであり、400~1500ダルトンが特に好ましい。生物学的ターゲティング部分は、好ましくは、線状ペプチド、環状ペプチド又はこれらの組合せであり得る3~100量体ペプチド、ペプチド類似体、ペプトイド又はペプチド模倣体、単一のアミノ酸、酵素基質、酵素アンタゴニスト、酵素アゴニスト部分アゴニストを含む又は酵素阻害剤、レセプター結合化合物レセプター基質、アンタゴニスト、アゴニスト又は基質を含む、オリゴヌクレオチド、或いはオリゴDNAフラグメント又はオリゴRNAフラグメントからなる。ペプチドという用語は、ペプチド結合即ち、1つのアミノ酸のアミンを別のアミノ酸のカルボキシルに連結するアミド結合によって連結された下記に定義するような2以上のアミノ酸を含む化合物を意味する。ペプチド模倣体又は模倣体という用語は、ペプチド又はタンパク質の生物学的活性を模倣するが、化学的性質がペプチド的でない即ち、いかなるペプチド結合つまり、アミノ酸間のアミド結合も含まない生物学的活性化合物をいう。ここでは、ペプチド模倣体という用語は広い意味で使用され、性質が完全にはペプチド的でない分子例えば、プソイドペプチド、セミペプチド及びペプトイドを包含する。ペプチド類似体という用語は、下記に記載するような1種以上のアミノ酸類似体を含むペプチドをいう。SynthesisofPeptidesandPeptidomimetics,M.Goodmanetal,Houben-WeylE22c,Thiemeも参照されたい。アミノ酸という用語は、L-又はD-アミノ酸、アミノ酸類似体例えば、ナフチルアラニン或いはアミノ酸模倣体を意味し、これらは天然のもの又は純粋に合成由来のものであってよく、光学的に純粋なもの即ち、単一の鏡像異性体、したがってキラルなものであるか、或いは鏡像異性体の混合物であってよい。本明細書中では、アミノ酸に関する通常の三文字略語又は一文字略語が使用される。好ましくは、本発明のアミノ酸は光学的に純粋なものである。アミノ酸模倣体という用語は、アイソスター即ち、天然化合物の立体構造及び電子構造を模倣するように設計されたものである天然アミノ酸の合成類似体を意味する。かかるアイソスターは当業者にとって公知であり、特に限定されないが、デプシペプチド、レトロ-インベルソペプチド、チオアミド、シクロアルカン又は1,5-二置換テトラゾールを包含する[M.Goodman,Biopolymers,24,1371985を参照されたい]。放射性標識されたアミノ酸例えば、チロシン、ヒスチジン又はプロリンは、有用なインビボイメージング剤であることが知られている。BTMが酵素基質、酵素アンタゴニスト、酵素アゴニスト、酵素阻害剤又はレセプター結合化合物である場合、それは好ましくは非ペプチドであり、さらに好ましくは合成品である。非ペプチドという用語は、いかなるペプチド結合即ち、2つのアミノ酸残基間のアミド結合も含まない化合物を意味する。好適な酵素の基質、アンタゴニスト、アゴニスト又は阻害剤には、グルコース及びグルコース類似体例えば、フルオロデオキシグルコース、脂肪酸、或いはエラスターゼ、アンギオテンシンII又はメタロプロテイナーゼ阻害剤がある。好適な合成レセプター結合化合物には、エストラジオール、エストロゲン、プロゲスチン、プロゲステロン及び他のステロイドホルモン、ドーパミンD-1又はD-2レセプター用リガンド又はトロパンのようなドーパミン輸送体用リガンド、並びにセロトニンレセプター用リガンドがある。BTMは、最も好ましくは3~100量体ペプチド又はペプチド類似体である。BTMがペプチドである場合、それは好ましくは4~30量体ペプチドであり、最も好ましくは5~28量体ペプチドである。BTMが酵素基質、酵素アンタゴニスト、酵素アゴニスト又は酵素阻害剤である場合、本発明の好ましいかかる生物学的ターゲティング分子は合成の薬物様小分子即ち、医薬品分子である。その好ましい例は、トロパンのようなドーパミン輸送体リガンド、脂肪酸、ドーパミンD-2レセプターリガンド、ベンズアミド類、アンフェタミン類、ベンジルグアニジン類、イオマゼニル、ベンゾフランIBF又は馬尿酸である。BTMがペプチドである場合、好ましいかかるペプチドには以下のものがある。-ソマトスタチン、オクトレオチド及び類似体。-STレセプターに結合するペプチドここで、STとは大腸菌E.coli及び他の微生物によって産生される耐熱性毒素をいう。。-ボンベシン。-血管作用性小腸ペプチド。-ニューロテンシン。-ラミニンフラグメント、例えばYIGSR、PDSGR、IKVAV、LRE及びKCQAGTFALRGDPQG。-白血球集積部位をターゲティングするためのN-ホルミル走化性ペプチド。-血小板第4因子PF4及びそのフラグメント。-例えば血管形成をターゲティングし得るRGDArg-Gly-Asp含有ペプチド[R.Pasqualinietal.,NatBiotechnol.1997Jun;156:542-6]、[E.Ruoslahti,KidneyInt.1997May;515:1413-7]。-α2-抗プラスミン、フィブロネクチン、β-カゼイン、フィブリノーゲン又はトロンボスポンジンのペプチドフラグメント。α2-抗プラスミン、フィブロネクチン、β-カゼイン、フィブリノーゲン及びトロンボスポンジンのアミノ酸配列は、以下の参考文献中に見出すことができる。α2-抗プラスミン前駆体[M.Toneetal.,J.Biochem,102,1033,1987]、β-カゼイン[L.Hanssonetal,Gene,139,193,1994]、フィブロネクチン[A.Gutmanetal,FEBSLett.,207,145,1996]、トロンボスポンジン1前駆体[V.Dixitetal,Proc.Natl.Acad.Sci.,USA,83,5449,1986]、R.F.Doolittle,Ann.Rev.Biochem.,53,195,1984。-アンギオテンシンII:Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-PheE.C.Jorgensenetal,J.Med.Chem.,1979,Vol22,9,1038-1044及び[Sar,Ile]アンギオテンシンII:Sar-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-IleR.K.Turkeretal.,Science,1972,177,1203のようなアンギオテンシンの基質又は阻害剤であるペプチド。-アンギオテンシンI:Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu。BTMがペプチドである場合、ペプチドの一方又は両方の末端好ましくは両方の末端に代謝阻害基MIGがコンジュゲートされる。このようにして両方のペプチド末端を保護することは、インビボイメージング用途のために重要である。さもないと、急速な代謝の結果としてBTMペプチドに対する選択的結合親和性が失われると予想されるからである。代謝阻害基MIGという用語は、アミノ末端又はカルボキシ末端におけるBTMペプチドの酵素特にカルボキシペプチダーゼのようなペプチダーゼ代謝を阻止又は抑制する生体適合性基を意味する。かかる基はインビボ用途のために特に重要であって、これらは当業者にとって公知であり、好適にはペプチドアミン末端に関してはN-アシル化基-NHRG式中、アシル基-RGはC16アルキル基及びC310アリール基から選択されるRGを有するか、或いはポリエチレングリコールPEG構成単位を含む。から選択される。好ましいかかるアミノ末端MIG基はアセチル、ベンジルオキシカルボニル又はトリフルオロアセチルであり、最も好ましくはアセチルである。ペプチドカルボキシル末端に関して好適な代謝阻害基には、カルボキサミド、tert-ブチルエステル、ベンジルエステル、シクロヘキシルエステル、アミノアルコール及びポリエチレングリコールPEG構成単位がある。BTMペプチドのカルボキシ末端アミノ酸残基にとって好適なMIG基は、アミノ酸残基の末端アミンをC14アルキル基好ましくはメチル基でN-アルキル化したものである。好ましいかかるMIG基はカルボキサミド又はPEGであり、最も好ましいかかる基はカルボキサミドである。さらに別の態様では、式IVの色素は、好ましくはR1基及びR基から選択される1個以上さらに好ましくは1個のカルボキシアルキル置換基を含んでいる。その結果、色素をBTMに結合するための官能基カルボキシルを提供することによって色素は二官能性となる。シアニン色素を生物学的分子にコンジュゲートするための一般的方法は、Lichaetal[TopicsCurr.Chem.,222,1-292002;Adv.DrugDeliv.Rev.,57,1087-11082005]によって記載されている。本発明で使用するためのペプチド、タンパク質及びオリゴヌクレオチド基質は、末端位置で標識することができ、或いは別法として1以上の内部位置で標識することもできる。蛍光色素標識試薬を用いるタンパク質標識の総説及び例に関しては、Non-RadioactiveLabelling,aPracticalIntroduction,Garman,A.J.,AcademicPress,1997、及びBioconjugation-ProteinCouplingTechniquesfortheBiomedicalSciences,Aslam,M.andDent,A.,MacmillanReferenceLtd.1998を参照されたい。合成ペプチドにおいて部位特異的標識を達成するためのプロトコルが利用できる。例えば、Hermanson,G.T.,BioconjugateTechniques,AcademicPress1996を参照されたい。以下の非限定的な実施例によって本発明を例証する。実施例1は、化合物3に基づく本発明の前駆体組成物の製造を示している。実施例2は、化合物2に基づく本発明の前駆体組成物の製造を示している。実施例3は、化合物7に基づく本発明の中間体組成物の製造を示している。実施例4は、化合物4Cy7に基づく本発明の色素組成物の製造を示している。実施例5は、第2の態様の色素組成物の分析及び精製を行うためのHPLC条件を示している。実施例6は貯蔵安定性データを示している。略語ACN又はMeCN:アセトニトリルAcOH:酢酸Ac2O:無水酢酸DIPEA;N,N-ジイソプロピルエチルアミンDMF:ジメチルホルムアミドHPLC:高速液体クロマトグラフィーLC-MS:液体クロマトグラフィー質量分析法TLC:薄層クロマトグラフィー図1:本発明の特定の化合物実施例1:1-ε-カルボキシペンチル-2,3,3-トリメチルインドレニウム-5-スルホネート化合物3の製造5-スルホ-2,3,3-トリメチルインドレニンナトリウム塩Inta.Trade社から購入、化合物1、100g、0.381molを反応器3Lに仕込んだ。スルホランSigma-Aldrich社、400mlをそれに添加した。次いで、エチル-6-ブロモヘキソネートSigma-Aldrich社、140ml、0.760molを混合物に添加した。内容物を撹拌しながら110°Cに加熱し、反応混合物をこの温度に16時間保った。次いで、反応混合物を約25°Cに冷却した。酢酸エチル1Lを添加した。混合物を15分間撹拌し、酢酸エチル層をデカントした。フラスコ内の赤褐色の残留物を酢酸エチル300ml×2で洗浄した。脱イオン水1Lを添加し、混合物を15分間撹拌して透明な溶液を得た。新鮮な酢酸エチル500ml×2を用いて溶液を再び洗浄した。得られた溶液から、ロータリーエバポレーター上で微量の酢酸エチルを除去した。上記の溶液に水酸化ナトリウム36g、0.90molを添加し、pHを10~12の範囲内に保った注意:pH>10は反応の完結のために極めて重要である。反応混合物を70°Cに1時間加熱した。反応混合物をHCl60mlで中和し、ロータリーエバポレーター上で水を蒸発乾固した。この物質を真空中30°Cで16時間乾燥した。上記の乾燥物質にアセトニトリル900mlを添加した。撹拌しながら、濃塩酸126mlをゆっくりと添加した。混合物を約25°Cで15分間撹拌した。懸濁液を濾過し、9:1のアセトニトリル/濃HCl100ml×2で洗浄し、乾燥した。濾液を濃縮して粘稠な塊状物とした注意:完全に乾燥した物質は結晶化するために長い時間を要し、化合物3のイソプロピルカルボキシレートエステルを生成する危険がある。得られた残留物をイソプロピルアルコール/アセトン150ml/350mlの混合物と共に15分間トリチュレートしたイソプロピルエステルの生成を回避するために混合物を直ちに濾過すべきである。懸濁液を濾過し、イソプロピルアルコール/アセトン混合物30/70mlで洗浄し、真空下50°Cで8時間乾燥した。収量:90g66。HPLC純度:270nmで95。実施例2:1-エチル-2,3,3-トリメチル-3H-インドリウム-5-スルホネート化合物2の合成化合物1Inta.Trade社、50g、0.19molをスルホラン350ml中に懸濁し、90~100°Cで30分間加熱して透明な溶液を得た。上記の透明な溶液にヨウ化エチル34ml、2.2molを添加した。反応塊の温度を90~100°Cに5~6時間保った。反応塊を約25°Cに冷却し、次いで撹拌しながら酢酸エチル1L中に注いだ。沈殿した固体を濾別し、酢酸エチル400mlで洗浄した。得られた固体を250mlのアセトニトリルと共に6時間トリチュレートし、濾別し、アセトニトリルで洗浄した。新鮮なアセトニトリル300mlを固体に添加し、混合物を1時間還流した。懸濁液を濾過し、アセトニトリル50mlで洗浄し、真空下で乾燥して粗生成物を得た。収量:40g78。HPLC純度:270nmで90~93。粗生成物40gを還流温度でメタノール20mlに溶解した。次いで、混合物を室温25°Cに冷却し、一晩16時間撹拌した。混合物を5°Cに冷却し、30分間撹拌した。得られた固体を濾別し、冷メタノール40mlで洗浄し、真空中45°Cで8時間乾燥した。収量:25g62。HPLC純度:270nmで98.7。実施例3:1-5-カルボキシペンチル-3,3-ジメチル-2-1E,3E,5E-6-N-フェニルアセトアミドヘキサ-1,3,5-トリエニル-5-スルホ-3H-インドリウム化合物7の合成N-[5-フェニルアミノ-2,4-ペンタ-ジエニリデン]アニリン一塩酸塩化合物X、Sigma-Aldrich社、8g、28.09mmolをアセトニトリル150ml中に懸濁した。無水酢酸10.5ml、続いてN,N-ジイソプロピルエチルアミン4.8ml、29.39mmolを添加し、25°Cで1時間撹拌して透明な溶液を得た。次いで、反応混合物を15°Cに冷却した。化合物3実施例1、5g、1.12mmolをアセトニトリル/酢酸混合物10ml/20mlに溶解した溶液を上記の冷溶液に15分かけて滴下した。滴下の完了後、冷却浴を取り除き、混合物を25°Cで1時間撹拌した。次いで、ロータリーエバポレーター上でアセトニトリルを除去した。残留物を酢酸エチル10mlで希釈し、得られた混合物を過剰の酢酸エチル450mlを含むフラスコ内にゆっくりと注いだ。次いで、混合物を30分間撹拌した。赤色の懸濁液を濾過し、酢酸エチルで洗浄し、真空中で2時間乾燥した。収量:7g90。HPLC純度:93550nm及び80273nm。実施例4:2-1E,3E,5E,7E-7-1-5-カルボキシペンチル-3,3-ジメチル-5-スルホインドリン-2-イリデンヘプタ-1,3,5-トリエニル-1-エチル-3,3-ジメチル-5-スルホ-3H-インドリウム化合物4、Cy7の合成化合物7実施例3、6g、10.88mmolをアセトニトリル150mlに溶解した。化合物2実施例2、3g、0.112mmolを酢酸/アセトニトリル20/10mlに溶解した溶液を添加した。反応混合物を15°Cに冷却した。N,N-ジイソプロピルエチルアミン12mlを15分かけて滴下した。滴下の完了後、冷却浴を取り除き、混合物を25°Cで1時間撹拌した。次いで、反応塊を過剰の酢酸エチル600mlを含むフラスコ内に注いだ。混合物を1時間撹拌し、得られた緑色の生成物を濾別し、酢酸エチル100mlで洗浄し、真空中で乾燥した。乾燥した物質をアセトン90ml中に懸濁し、室温で一晩撹拌した。次いで、懸濁液を濾過し、アセトン50ml、続いて酢酸エチル50mlで洗浄し、真空中で乾燥することで、生成物を緑色の固体として得た。収量:8g90。ピーク面積によるHPLC純度:98.4750nm、0.085の化合物7及び0.15の対称色素を含む、110.0550nm及び99.7273nm。実施例5:LC-MS精製及び分析方法各試料は、2~3mgの試料を水1mlに溶解し、溶液を0.22ミクロンのナイロンフィルターで濾過することで調製した。使用したクロマトグラフィーカラムは、Column-Agilent,Zorbax,C18,5μ4.6mm×150mmであった。検出はフォトダイオードアレイ検出器によった。化合物2及び化合物3の保持時間は、それぞれ13.4分及び14.4分であった。化合物4及び化合物7の保持時間は、それぞれ4.88分及び4.59分であった。実施例6:化合物4Cy7の貯蔵安定性本発明の方法によって製造された化合物7Cy7の凍結乾燥試料を貯蔵安定性に関して調べた。データは、暗所において室温で12ヶ月以上貯蔵した場合の良好な安定性を示している。"