"以下の一般式I:{式中、R1およびR9は、それぞれ独立して、-H、C1-4アルキル、C2-4アルケニルおよびハロゲン化C1-4アルキルから選ばれ;R3NAおよびR3NBは、それぞれ独立して、-H、C1-4アルキル、C2-4アルケニルおよびハロゲン化C1-4アルキルから選ばれ;R7NAおよびR7NBは、それぞれ独立して、-H、C1-4アルキル、C2-4アルケニルおよびハロゲン化C1-4アルキルから選ばれ;さらに、ここで、RAおよびRBは、それぞれ独立して、C1-4アルキル、ハロゲン化C1-4アルキル、およびC6-10アリールから選ばれるか;またはRAおよびRBは、連結して、C1-6アルキレンおよびC6-10アリーレンから選ばれる基を形成する}の化合物、および医薬として許容可能なその塩から選ばれる化合物。RAおよびRBが、それぞれ独立して、C1-4アルキルである、請求項1に記載の化合物。RAおよびRBが、それぞれ独立して、メチルである、請求項1に記載の化合物。R1およびR9が、それぞれ独立して、-Hである、請求項1~3のいずれか1項に記載の化合物。R3NAおよびR3NBが、それぞれ独立して、C1-4アルキルである、請求項1~4のいずれか1項に記載の化合物。R3NAおよびR3NBが、それぞれ独立して、メチルである、請求項5に記載の化合物。R7NAおよびR7NBが、それぞれ独立して、C1-4アルキルである、請求項1~6のいずれか1項に記載の化合物。R7NAおよびR7NBが、それぞれ独立して、メチルである、請求項7に記載の化合物。以下の式:の化合物または医薬として許容可能なその塩、溶媒和物、もしくは水和物である、請求項1に記載の化合物。結晶形態である、請求項1~9のいずれか1項に記載の化合物。図11~16によって表される結晶構造を有する、結晶形態の請求項9に記載の化合物。実質的に精製された形態である、請求項1~11のいずれか1項に記載の化合物。請求項1~12のいずれか1項に記載の化合物および医薬として許容可能な担体または希釈剤を含む、組成物。請求項1~12のいずれか1項に記載の化合物および医薬として許容可能な担体または希釈剤を混合するステップを含む、医薬組成物の調製方法。請求項1~12のいずれか1項に記載の化合物および乾式圧縮に好適な少なくとも1つの希釈剤を含む、固体剤形である、請求項13に記載の医薬組成物。前記固体剤形が、直接打錠によって生成される、請求項15に記載の組成物。前記固体剤形が、乾式造粒によって生成される。請求項15に記載の組成物。前記固体剤形が、米国薬局方USP総則<711>に定義された標準的な薬局方の方法によって評価して、30分以内に少なくとも80まで溶出する、請求項15~17のいずれか1項に記載の組成物。前記少なくとも1つの希釈剤が、微結晶性セルロース、ラクトース、マンニトール、第二リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、炭酸カルシウムなどのカルシウム塩、およびラクトース、シュークロース、デキストロースおよびマルトデキストリンなどの糖から選ばれる、請求項15~18のいずれか1項に記載の組成物。少なくとも1つの崩壊剤をさらに含む、請求項15~19のいずれか1項に記載の組成物。前記崩壊剤が、架橋ポリビニルピロリドンクロスポビドン、デンプングリコール酸ナトリウム、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウムクロスカルメロースナトリウム、またはアルファ化デンプンから選ばれる、請求項20に記載の組成物。前記固体剤形が、フィルムコーティングされている、請求項15~21のいずれか1項に記載の組成物。1.5超のpK1を有する酸をさらに含む、請求項15~22のいずれか1項に記載の組成物。前記酸が、マレイン酸、リン酸、アスコルビン酸、ソルビン酸、アスパラギン酸およびシアル酸から選ばれる、請求項23に記載の組成物。マンニトール、セルロース系材料、デンプンまたはそれらの混合物から選ばれる担体をさらに含む、請求項23または請求項24に記載の組成物。前記組成物が粒子を含み、該粒子の10超が10ミクロンより大きなサイズを有することを特徴とする、請求項15~25のいずれか1項に記載の組成物。ElcemaTM、エチルセルロース、マンニトール、またはStarch1500TMなどの水を嫌う粒子形状を有する担体を含む、請求項15~25のいずれか1項に記載の組成物。請求項1~12のいずれか1項に記載の化合物、および乾式圧縮に好適な少なくとも1つの希釈剤、および場合により、1つまたは複数の他の賦形剤を含む、自由流動性の凝集性粉末であって、前記粉末が固体剤形に圧縮可能である、前記粉末。請求項1~12のいずれか1項に記載の化合物および乾式圧縮に好適な少なくとも1つの希釈剤および場合により1つまたは複数の他の賦形剤を含む、密な粉末混合物の乾式圧縮を含む、医薬組成物の製造のための請求項14に記載の方法。請求項29に記載の方法であって、該方法が、直接打錠法を含み、ここで、前記化合物、少なくとも1つの希釈剤、および任意の賦形剤が、一緒に固体微粒子形態に混合されて前記密な混合物を作り出し、次いで、打錠機を用いて圧縮される、前記方法。前記少なくとも1つの希釈剤が、微結晶性セルロース、ラクトース、マンニトール、第二リン酸カルシウム、硫酸カルシウムおよび炭酸カルシウムなどのカルシウム塩、ならびにラクトース、シュークロース、デキストロースおよびマルトデキストリンなどの糖から選ばれる、請求項30に記載の方法。前記少なくとも1つの希釈剤が、1つまたは複数の賦形剤の湿式造粒によって調製された造粒生成物である、請求項30に記載の方法。造粒液を使用する1つまたは複数の賦形剤の湿式塊状化のステップ、および乾燥して前記造粒生成物を形成するステップを含む、請求項32に記載の方法。前記方法が乾式造粒法を含み、ここで、前記化合物、少なくとも1つの希釈剤、および任意の賦形剤が、圧縮された塊に形成され、粉砕され、次いで打錠機を用いて圧縮される、請求項29に記載の方法。結果として生じる錠剤にフィルムコーティングを適用するステップをさらに含む、請求項28~33のいずれか1項に記載の方法。治療によるヒトまたは動物の体の処置または予防方法における使用のための、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物。タンパク質凝集性疾患の処置または予防方法における使用のための、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物。タウオパチーの処置または予防方法における使用のための、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物。アルツハイマー病AD、ピック病、進行性核上性麻痺PSP、前頭側頭型認知症FTD、17番染色体に連鎖するパーキンソニズムを伴うFTDFTDP-17、前頭側頭葉変性FTLD症候群、脱抑制認知症パーキンソニズム筋萎縮症複合DDPAC、淡蒼球橋黒質変性症PPND、グアムALS症候群、淡蒼球黒質ルイ体変性症PNLD、大脳皮質基底核変性症CBD、嗜銀顆粒性認知症AgD、ボクサー認知症DPもしくは慢性外傷性脳障害CTE、ダウン症候群DS、レビー小体認知症DLB、亜急性硬化性全脳炎SSPE、MCI、C型ニーマンピック病NPC、B型サンフィリポ症候群MPSIIIB、または筋緊張性ジストロフィーDM、DM1もしくはDM2の処置または予防方法における使用のための、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物。アルツハイマー病の処置または予防方法における使用のための、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物。パーキンソン病の処置または予防方法における使用のための、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物。PSP、ALS、またはFTLDの処置または予防方法における使用のための、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物。ハンチントン病または球脊髄性筋萎縮症ケネディ病、歯状核赤核淡蒼球ルイ体委縮症もしくは脊髄小脳失調症などの他のポリグルタミン病の処置または予防方法における使用のための、請求項1~12のいずれか1項に記載の化合物。皮膚癌もしくは黒色腫;またはウイルス性、細菌性もしくは原虫性疾患状態の処置または予防方法における使用のための、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物。前記ウイルス性、細菌性または原虫性疾患が、C型肝炎、HIV、西ナイルウイルスWNVおよびマラリアから選ばれる、請求項44に記載の使用のための化合物または組成物。タンパク質凝集性疾患の処置または予防における使用のための医薬品の製造における、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の使用。タウオパチーの処置または予防における使用のための医薬品の製造における、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の使用。アルツハイマー病AD、ピック病、進行性核上性麻痺PSP、前頭側頭型認知症FTD、17番染色体に連鎖するパーキンソニズムを伴うFTDFTDP-17、前頭側頭葉変性FTLD症候群、脱抑制認知症パーキンソニズム筋萎縮症複合DDPAC、淡蒼球橋黒質変性症PPND、グアムALS症候群、淡蒼球黒質ルイ体変性症PNLD、大脳皮質基底核変性症CBD、嗜銀顆粒性認知症AgD、ボクサー認知症DPもしくは慢性外傷性脳障害CTE、ダウン症候群DS、レビー小体認知症DLB、亜急性硬化性全脳炎SSPE、MCI、C型ニーマンピック病NPC、B型サンフィリポ症候群またはムコ多糖症IIIB、または筋緊張性ジストロフィーDM、DM1もしくはDM2の処置または予防における使用のための医薬品の製造における、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の使用。アルツハイマー病の処置または予防における使用のための医薬品の製造における、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の使用。パーキンソン病の処置または予防における使用のための医薬品の製造における、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の使用。PSP、ALSまたはFTLDの処置または予防における使用のための医薬品の製造における、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の使用。ハンチントン病または球脊髄性筋萎縮症ケネディ病、歯状核赤核淡蒼球ルイ体委縮症もしくは脊髄小脳失調症などの他のポリグルタミン病の処置または予防における使用のための医薬品の製造における、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の使用。皮膚癌もしくは黒色腫;またはウイルス性、細菌性もしくは原虫性疾患状態の処置または予防における使用のための医薬品の製造における、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の使用。前記ウイルス性、細菌性または原虫性疾患が、C型肝炎、HIV、西ナイルウイルスWNVおよびマラリアから選ばれる、請求項53に記載の使用。対象に、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の予防的または治療的有効量を投与するステップを含む、前記対象におけるタンパク質凝集性疾患の処置または予防方法。対象に、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の予防的または治療的有効量を投与するステップを含む、前記対象におけるタウオパチーの処置または予防方法。対象に、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の予防的または治療的有効量を投与するステップを含む、前記対象におけるアルツハイマー病の処置または予防方法。対象に、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の予防的または治療的有効量を投与するステップを含む、前記対象におけるパーキンソン病の処置または予防方法。対象に、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の予防的または治療的有効量を投与するステップを含む、前記対象におけるPSP、ALSまたはFTLDの処置または予防方法。対象に、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の予防的または治療的有効量を投与するステップを含む、前記対象におけるハンチントン病または球脊髄性筋萎縮症ケネディ病、歯状核赤核淡蒼球ルイ体委縮症もしくは脊髄小脳失調症などの他のポリグルタミン病の処置または予防方法。対象に、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の予防的または治療的有効量を投与するステップを含む、前記対象における皮膚癌もしくは黒色腫;またはウイルス性、細菌性もしくは原虫性疾患の処置または予防方法。前記ウイルス性、細菌性または原虫性疾患が、C型肝炎、HIV、西ナイルウイルスWNVおよびマラリアから選ばれる、請求項61に記載の方法。タンパク質の凝集を逆転させ、および/または阻害する方法であって、前記タンパク質を請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の有効量と接触させるステップを含む、前記方法。哺乳動物の脳内のタンパク質の凝集を逆転させ、および/または阻害する方法であって、前記凝集が病態に関連しており、前記処置が、前記処置を必要とする前記哺乳動物に、請求項1~12または15~27のいずれか1項に記載の化合物または組成物の予防的または治療的有効量を投与するステップを含む、前記方法。サンプル中の病原体を不活性化する方法であって、以下の:請求項1~12のいずれか1項に記載の化合物を前記サンプル中に導入するステップ;と次いで、前記サンプルを光に曝露するステップとを含む、前記方法。N-保護された3,7-ジアミノ-10H-フェノチアジンからの請求項1~12のいずれか1項に記載の化合物の調製方法であって、以下の:環アミノ脱保護DPステップ;と塩形成SFステップとを含む、前記方法。前記N-保護された3,7-ジアミノ-10H-フェノチアジンが、以下の式II:{式中、RProtは、アミン保護基であり、R1、R9、R3NA、R3NB、R7NA、R7NB、RAおよびRBは、先に定義したとおりである}の化合物である、請求項66に記載の方法。RProtがアシルである、請求項67に記載の方法。環アミノ脱保護DPおよび塩形成SFが同時に実施される、請求項66~68のいずれか1項に記載の方法。環アミノ脱保護DPおよび塩形成SFが、少なくとも1つのスルホン酸による前記N-保護された3,7-ジアミノ-10H-フェノチアジンの処理を含む、請求項69に記載の方法。環アミノ脱保護DPおよび塩形成SFが、ビスメタンスルホネート塩を生成するための、有機溶媒中での前記N-保護された3,7-ジアミノ-10H-フェノチアジンのメタンスルホン酸および水による処理を含む、請求項70に記載の方法。以下の実施例は、本発明を例解するためにのみ提供され、その範囲を限定することを意図しない。実施例1-合成および特徴づけ10-アセチル-NN,N’,N’-テトラメチルフェノチアジン-3,7-ジアミンの実験室合成3,7-ジニトロ-10H-フェノチアジンの合成2温度計、滴下漏斗および凝縮器を備えた1リッターの三つ首丸底フラスコRBFに、フェノチアジン分子量199,28g/モル、25.00g、125.5ミリモルおよびジメチルスルホキシド250mlを添加し、2分間またはフェノチアジンが溶解するまで混合物を撹拌した。次いで、水を半分満たしたドレッシェルボトルDreschelbottleに凝縮器を連結した。亜硝酸ナトリウム分子量69.00g/モル、51.94g、752.7ミリモルをRBFに添加し、酢酸150mlを滴下漏斗に添加した。次いで、20分間にわたって酢酸をRBFに滴加した。明るい黄色のスラリーが赤い色になり、溶液から固体が沈殿した。酢酸の添加が完了後、周囲温度36~20°Cにおいて混合物を2時間撹拌し、その後、温度を95°Cまで上昇させ、17時間撹拌した。この後、混合物を50°Cまで冷却し、メタノール100mlを添加し、混合物をさらに22°Cまで冷却した。次いで、冷却された混合物を濾過し、ケークcakeをメタノール3×25mlで洗浄した。真空を適用しながら洗浄されたケークをフィルター上に30分間放置し、その後、50°Cにおいて15時間乾燥させて、茶色固体として生成物を生じた。分子量289.27g/モル、29.45g、81。備考1.酢酸の添加は、NOxガスを生じさせ、これは水を半分満たしたドレッシェルボトル中でこのガスを泡立てることによって、硝酸に変換させた。2.酢酸の添加は、発熱性であり、混合物は22°Cから36°Cまで上昇した。3.任意の酢酸ナトリウムの溶解を助けるため、および生成物の収率を最大化するための反溶媒antisolventとして、メタノールを添加した。4.ジメチルホルムアミドDMF、アセトニトリルMeCN、テトラヒドロフランTHF、アセトンまたはジメトキシエタンDMEを反応溶媒として用いても、合成は成功した。NMR:生成物5mgをDMSO-d61.5mlに溶解し、完全に固体を溶解させるために温める必要があるかもしれない。3,7-ジニトロ-10-アセチルフェノチアジンの合成3温度計および凝縮器を備えた500mlの三つ首丸底フラスコに、3,7-ジニトロ-10H-フェノチアジン分子量289.27g/モル、29.00g、100ミリモル、ジメチルホルムアミド58ml、無水酢酸分子量102.09g/モル、102.09g、1000ミリモルおよびトリエチルアミン分子量101.19g/モル、40.88g、401ミリモルを添加した。混合物を105°Cまで加熱し、この温度において3時間撹拌した。混合物を周囲温度21°Cまで冷却し、その後、5°Cまで冷却するまで1時間撹拌した。生成物を濾過により単離し、メタノール3×30mlで洗浄して、明るい黄色の結晶固体を生じさせ、これを50°Cにおいて15時間乾燥した分子量331.31g/モル、26.94g、81。備考1.生成物の結晶は、反応の間、105°Cにおいて約1時間後に形成する。2.冷却後、生成物のバルクが約70°Cにおいて沈殿する。3.生成物は、メタノールで洗浄する前はオレンジ色であった。NMR:生成物10mgをDMSO-d61.5mlに溶解した。10-アセチル-N,N,N’,N’-テトラメチルフェノチアジン-3,7-ジアミンの合成5温度計および凝縮器を備えた100mlの三つ首丸底フラスコに、3,7-ジニトロ-10-アセチルフェノチアジン分子量331.31g/モル、5g、15.09ミリモル、パラジウム炭素10、乾燥、0.5gおよび2-メチルテトラヒドロフラン25mlを添加した。混合物を56°Cまで加熱する前に、フラスコを排気し、水素で5回パージした。17時間後、還元が完了して化合物4を生じたことを判定しtlc条件を参照のこと、ホルマリンを添加した分子量30.03g/モル、14.7g、181.1ミリモル。フラスコをもう一度排気し、水素で5回パージした。ホルマリン添加から71時間後総時間88時間、56°Cにおいてtlcによってテトラ-メチル化の完了を判定した。混合物を50°Cにおいて濾過し、灰色の触媒を2-メチルテトラヒドロフランで洗浄し3×5ml、濾液および洗液を併合した。混合物を均一化するために、この溶液にメタノール5mlを添加した。5°Cまで冷却すると、無色の固体が溶液から沈殿した。さらに2容のメタノール10mlを添加し、スラリーを5°Cにおいて50分間撹拌した。粗生成物を濾過によって単離して、無色の固体を生じさせ、これをメタノールで洗浄し3×5ml、50°Cにおいて16時間乾燥した分子量327.45g/モル、2.26g、46。単離過程からの濾液に水50mlを添加すると、さらに固体が生じた。懸濁液を5°Cにおいて2時間撹拌し、その後、濾過によって集めメタノールで洗浄し3×5mlそして50°Cにおいて13時間乾燥した分子量327.45g/モル、0.83g、17。生成物の総収量は3.09g、63であった。備考1.順相tlc条件、溶出液75酢酸エチル、25石油精40~60°C、および254nmのUVランプ。2.ジニトロ出発材料の保持因子は、黄色のスポットとしての0.68であり、水素化生成物の保持因子は、青のスポットとしての0.25であり、メチル化生成物の保持因子は、明るい青のスポットとしての0.67である。3.水素化ステップのtlc分析のための方法は、直接スポッティングであったが、メチル化生成物の分析は、反応アリコートに添加した水を含み、これを酢酸エチルで抽出してスポットした。4.17時間後、tlcは2つのスポットを示し、主要スポットは還元生成物であり、微量スポットは未知である。5.88時間後、tlcは主要スポットとしてテトラ-メチル化生成物を主に示した。6.典型的に、還元およびメチル化は72時間以内に完了するであろう。7.2つのサンプルの1HNMR分光分析は、同一のスペクトルを生じ、微量の2-メチルテトラヒドロフランを5ppmにおける未知のシグナルとともに検出した。NMR:生成物10mgをCDCl31.5mlに溶解した。10-アセチル-N,N,N’,N’-テトラメチルフェノチアジン-3,7-ジアミンの代替合成550mlの丸底フラスコに、3,7-ジニトロ-10H-アセチルフェノチアジン分子量331.31g/モル、1g、3.02ミリモル、亜鉛末分子量65.39g/モル、1.38g、21.13ミリモル、メタノール6mlおよびテトラヒドロフラン2mlを添加した。混合物を50°Cまで加熱し、その後、水性塩化アンモニウム6mlの水に溶解した、分子量53.49g/モル、2.26g、42.26ミリモルの温溶液45~50°Cをゆっくりと添加して穏やかな還流を維持した。次いで、混合物を70°Cまで加熱し、この温度で2時間撹拌し、その後、周囲温度23°Cまで冷却した。冷却した混合物を濾過して亜鉛塩を除去し、化合物4を含有する濾液をパラホルムアルデヒド分子量30.03g/モル、1.09g、36.22ミリモル、シアノ水素化ホウ素ナトリウム分子量62.84g/モル、1.14g、18.11ミリモルおよび酢酸2mlで処理した。混合物を50°Cまで加熱し、この温度で3時間撹拌した。周囲温度23°Cまで冷却後、水2×10mlを添加し、無色のスラリーを16時間撹拌した。次いで、固体を濾過により集め、メタノール3×2mlで洗浄して、表題化合物分子量327.45g/モル、0.91g、92をオフホワイトの固体として生じさせた。備考1.亜鉛および水性塩化アンモニウムを用いる還元反応は、速くかつクリーンで、完了に至るまでわずか2時間しかかからず、tlc分析によって他のスポットは記録されなかった。2.シアノ水素化ホウ素ナトリウム、パラホルムアルデヒドおよび酢酸を用いる還元的メチル化は、速くかつクリーンで、完了に至るまでわずか3時間しかかからなかった。NMR:生成物10mgをCDCl31.5mlに溶解した。合成1:N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミニウムビスメタンスルホネートLMT.2MsOHの合成10-アセチル-NN,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミンAcMT150gを三つ首の丸底フラスコに添加した。トルエン1.8lを添加し、混合物を還流温度まで30分間加熱した。5μのインラインフィルターを通過させて、蒸留装置1を備えたジャケット付き容器に入れる前に、溶液を70°Cまで放冷した。トルエン150mlを丸底フラスコに添加した。移送ラインおよびフィルターをすすぐためにこれを使用した。減圧下2でおよそ1.4lのトルエンを留去した。水42mlを添加する3前に、温度を18°Cまで低下させた。この後、メタンスルホン酸MSA65.5ml、99。2.2当量を5分間にわたって4添加した。2回目の水18mlを添加した。混合物を85°Cまで3時間加熱し、この時までにtlc分析によって反応が完了したことを判定した。無水EtOH150mlを20分間にわたって添加する5前に、この二相性溶液を50°Cまで放冷した。150mgのN,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミニウムビスメタンスルホネートを用いて、混合物にシーディングした6-8。2回目のEtOH600mlを90分間にわたって添加し9、反応を1時間にわたって20°Cまで放冷した10。固体を濾過により集める前に、それをこの温度で1時間撹拌した。ケークを3×300mlのMeCNで洗浄し11、乾燥するまで5分間吸引し、一夜、真空下に置いて、黄色の結晶性固体として生成物を生じさせた収率85~90。備考1.還流温度までの加熱は、5μフィルターを通る移送のためのAcMTの完全な溶解を確実にする。トルエンは、良好な溶媒であり、70°Cを標的とすることは、材料が溶液中に留まることを確実にすることとプラスチック製の移送ホースとフィルターへの損傷の可能性を最小化することとの間の折衷案である。2.500mlの残りのトルエンは、反応体積が反応容器の最小撹拌深度を満たすことを確実にする。3.生成物が自由流動性の沈殿として結晶化することを確実にするために、水の体積を制御した。反応のシーディングは、水の体積の小さな変動の影響を低下させる。4.加水分解を実行し、十分量の過剰の酸0.2当量を残しつつ塩を形成して、溶液中での生成物の安定性を確実にするために、2.2当量のMSAを使用する。MSAの添加は、わずかな発熱を引き起こし、したがって添加時間は5分間である。5.EtOHは、生成物を沈殿させるための対抗溶媒countersolventとして使用する。シードが溶解しないことを確実にするために、一部をシードの前に添加する。添加時間の延長は、生成物の制御された結晶化を確実にする備考7および8を参照のこと。6.シードを使用せずに反応を実施することが可能であるが、その取り込みは、LMT.2MsOHの早期の沈殿を確実にし、これは次に潜在的な遺伝毒性副生成物であるアルコールエステルEMS-合成過程においては検出されない、などの副生成物の形成およびEtOHの封入inclusionを防止する。7.シードは、生成物の粒径を制御する手段としても有用である。乳鉢と乳棒で100μm未満まですり潰されたシード材料を使用した場合、生成物の平均粒径の顕著な低下が観察される。すり潰されていない100μ未満のシードを使用した場合、そのような効果は観察されなかった。したがって、理論に束縛されることを望むことなく、粒径を制御するシードの能力は、シードの粒径の関数ではなく、本来のまたはシードの破砕が露出させた新しい結晶面の比率に連係しているとみられる。8.最後に、シード材料が比較的大きくかつ破砕されていなかった場合、かなりの量の生成物薄い膜が、EtOH添加の間に反応容器の側面に付着しうる。これは、EtOH添加後に加熱/冷却サイクルをプロセスに導入することによって低減することができる。しかしながら、破砕されたシードの利用の予想外のおまけは、EtOH添加後に存在する薄い膜の物質skinnedmaterialのレベルを約90減少させることであった。したがって、加熱/冷却サイクルを実施することはもはや必要なかった。これは、新たな表面よりも小さなシードサイズに連係していると見られ、それは、100μ未満の未破砕のシードを用いて反応を実施した場合に、同様の被覆の減少が観察されたからである。9.EtOH添加の速度は、粒径およびEtOHの封入に効果がある。急速な添加1時間未満は、粒径を減少させるが、EtOH封入は増加する。遅い添加2時間は、反対の効果を有し、したがって、釣り合いをとらなければならない。10.冷却速度は、同様であるがより低い効果を有する。迅速な冷却1時間未満は、粒径の減少と付随するEtOHレベルの増加をもたらす。遅い冷却は、反対の効果を有する。11.EtOHは、関連物質の除去においてMeCNと等しく有効であるが、その使用は、保持されるEtOHのレベルのわずかな増加を伴う。N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミニウムビスメタンスルホネートLMT.2MsOHの特徴づけ元素分析微量分析分析は、炭素、窒素、水素および硫黄に関する理論値と分析値の間の良好な相関関係を有する。1H-核磁気共鳴NMR分光法1H-NMRスペクトルを、重水素化メタノールCD3OD中、Varian600MHz装置において得て、図1に示す。1HNMRスペクトルの帰属は以下のとおりである:13C-核磁気共鳴NMR分光法13CNMRスペクトルを、重水素化メタノールCD3OD中、Varian400MHzNMR装置において100.56MHzの周波数で得て、図2に示す。13C-NMRスペクトルの最初の帰属は、既知の化学シフトのチャートとの相関に基づいた参考文献StructureDeterminationofOrganicCompoundsTablesofSpectralDataPretschEetalSpringerLondonp122。さらなる帰属は、帰属を明確に確認するために、DEPT-135、HSQCおよびHMBC実験を利用した。DEPT-135DistortionlessEnhancementbyPolarisationTransfer、HSQCHeteronuclearSingleQuantumCoherenceおよびHMBCHeteronuclearMultipleBondCorrelationスペクトルを、Varian400MHzNMR装置において100.56MHzの周波数で得た図3~5を参照のこと。赤外分光法IRサンプルを徹底的に混合し、200mgの無水KBrとともに乳鉢と乳棒ですり潰した。次いで、1500psiの圧力でダイを用い、この混合物を円盤状に圧縮した。次いで、NicoletAvatar320FT-IR分光計においてIRスペクトルを得た。スペクトルを図6に示す。質量分析MSWaters,LCTPremierXE質量分光計を用いて質量分光分析を実施した。1ml/時間の流速を採用した。活性成分の分析に使用した供給源は、陽性モードの電子衝突電離であった。メタンスルホネート対イオンの分析に使用した供給源は、陽性モードのエレクトロスプレーイオン化であった。電子衝突電離を用いて、主要ピークは285において観察される図7を参照のこと。これは、分子イオンC16H19N3Sに相当する。測定された実際の質量と理論値の比較を以下に提供する:測定した正確な質量は、C16H19N3Sについての計算した質量とよく一致した。エレクトロスプレーイオン化を用いて、主要ピークは95において観察される図8を参照のこと。これは、対イオンCH3O3Sの分子イオンに相当する。紫外-可視分光法UV-Vis5mgのサンプルを脱イオン水に溶解し、メモリ付フラスコ中で合計100mlとした。PerkinElmerLambda25UV/Vis分光計において、水晶キュベットを用いて分析を実施した。UV-Visスペクトルを図9に示す。255におけるλmaxについての減衰係数εは、34254.64であった。これは、以下のランベルトベールの法則にしたがって計算した:高速液体クロマトグラフィーHPLC100mgのサンプルをHPLC分析のために提出した。以下の表にまとめた方法に従って、同一性についてVWDDetectorまたはPDAを備えたAgilent1200シリーズにおいて分析を実施した。HPLCトレースを図10に示す。有機物純度は、99.45w/wであると確認した。結晶形態上記方法において、LMT.2MsOHは、結晶形態で生成する。LMT.2MsOHの結晶形態を、図11に示すX線粉末回折スペクトルによって図示する。XRPDは、高度な結晶秩序の指標である鋭いシグナルを示す。相対ピーク強度の変化が観察され、これは、粒径の相違とともに配向効果に起因しうる。相対ピーク強度のわずかな変化50未満のみが、サンプルの厚さの関数として観察される0.1mm対1.0mm。結晶形態は、FT-ラマン、熱重量TG、示差走査熱量DSC、動的水蒸気吸着DVS分析、および顕微鏡検査によってさらに特徴づけされる図12~16。この形態は、都合よくA形態と呼ばれることができる。単結晶X線分析のための結晶を、エタノール、メタンスルホン酸および水から得た。図17cを参照のこと。機器の詳細X線粉末回折:Bruker08Advance、CuKa照射λ=1.54180Å、40kV/40mA、LynxEye検出器、2θステップ幅0.02°、ステップあたり37秒、2θスキャン範囲2.5°~50°。平坦な表面とするためのわずかな圧力を加えた以外はいかなる特別な処理もせずに、深さ0.1または1.0mmのシリコン単結晶サンプルホルダー上でサンプルを調製した。測定の間、すべてのサンプルを回転させた。示差走査熱量測定:PerkinElmerDSC7。N2下、密閉した金るつぼ、加熱速度20°C/分、-50°Cから280°Cまでスキャン。動的水蒸気吸着:ProjektMesstechnikSPS11-100n水蒸気吸着分析器。微量てんびんの上のアルミニウムるつぼ中にサンプルを置き、25°Cでのあらかじめ定めた湿度プログラム相対湿度50~0~95~50、Δ相対湿度=5時間-1および極値における等湿isohumid平衡期間によるスキャニングを開始する前に、25°Cおよび50相対湿度において平衡化した。FT-ラマン分光法:BrukerRFS100.Nd:YAG1064nm励起、50mWレーザーパワー、Ge検出器、128スキャン、範囲50~3500cm-1、2cm-1分解能、アルミニウムサンプルホルダー。偏光顕微鏡検査:LeicaOFC280CCOカメラを備えたLeitzOrthoplan顕微鏡。TG:TAInstrumentsTGAQ5000。開放アルミニウムるつぼ、N2雰囲気、加熱速度10°C分-1、範囲25~300°C。TG-FTIR:BrukerFT-IRSpectrometerVector22を備えたNetzschThermo-MicrbalanceTG209。マイクロホールを有するアルミニウムるつぼ、N2雰囲気、加熱速度10°C分-1、範囲25~250°C。理論に束縛されることを望むことなく、この形態が、LMT.2MsOHの唯一の安定な多形をあらわすことが示唆される。多形性試験は、A形態がほとんどすべての晶析システムにおいて再現されることを示している脱気した溶媒を用いて不活性雰囲気下で試験を実施した。LMT.2MsOHの水溶液の蒸発によってアモルファスなLMT.2MsOHを調製することができるが、さらなる乾燥後にアモルファス材料がA形態に再結晶化する。AcMTおよびLMT.2MsOHの工業的規模の合成10-アセチル-N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミンAcMTの大規模合成アセトニトリルMeCN300lをリアクター1R1に添加し、-5~0°Cに冷却した。塩化メチルチオニニウム三水和物MTC.3H2O150kgを添加し、温度を15~25°Cに上昇させた。トリエチルアミンEt3N100l、続いてMeCN20lを添加した。ヒドラジン水和物N2H4.H2O12lを30分間にわたって添加した。反応温度を1時間にわたって60~70°Cに上昇させ、次いで、40~50°Cに低下させる前に1時間、この温度に維持した。無水酢酸Ac2O240lを1時間にわたって添加し、続いてMeCN20lですすいだ。バッチ温度を2時間、90~100°Cに高めた。温度を55~65°Cに低下させ、温度を維持しつつ、水340lを2時間にわたって加えた。次いで、バッチ温度を2時間にわたって-5~5°Cに低下させ、その温度に6時間維持した。固体を濾過によって集めた。水400lをR1に添加する前に、ケークから完全に液体を除去deliquoreした。放置してR1中の温度を15~25°Cまで上昇させたあと、水を分けて添加してフィルターケークを洗浄した。取り出す前に、生成物を窒素流下で6時間乾燥させた収量:90~110kg。10-アセチル-N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミンAcMTの大規模精製水300l、続いて10-アセチル-N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミンAcMT100kgをR1に添加した。トルエン400lおよび80の酢酸水溶液40lを添加し、続いて水ですすいだ50l。バッチ温度を1時間、75~85°Cまで上昇させた。攪拌機を停止し、30分間、層を落ち着かせた。下部の水性層を除去し、新しい水300l、80酢酸水溶液40lを添加し、続いて、すすぎ水50lを添加した。75~85°Cにおいて1時間、混合物を撹拌した後、攪拌機を停止させ、30分間、層を落ち着かせた。下部の水性層を除去し、新しい水300l、80酢酸水溶液40lを添加し、続いて、すすぎ水50lを添加した。混合物を75~85°Cにおいて1時間撹拌した後、撹拌器を停止させた。30分間、層を落ち着かせた後、下部層を除去し、水390lを添加し、混合物を1時間撹拌した。攪拌機を停止させ、30分間、層を落ち着かせた。下部の水性層を除去し、温度を-5~5°Cに低下させた。ジャケット温度を80°Cに上昇させ、次いで、それが60°Cに達したら、2時間にわたって温度を-10~0°Cに低下させた。混合物を4時間撹拌した後、フィルターに移した。ケークから完全に液体除去したあと、トルエン150lをR1に添加した。R1中でトルエンを30分間にわたって撹拌した後、フィルターケークを洗浄するためにそれを分けて使用した。生成物を、窒素流下、フィルター上で48時間、乾燥による損失が1未満まで乾燥させた後、取り出した収量:75~90kg。N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミニウムビスメタンスルホネートLMT.2MsOHの大規模合成AcMT18~22kgをR1に添加した。トルエン体積l=16×AcMT重量を添加し、混合物を90~100°Cまで、30分間加熱した。溶液を60~80°Cまで放冷した後、リアクター2R2まで5μのインラインフィルターを通過させた。トルエン50lをなお、約70°Cのリアクター1に添加し、30分間撹拌した。これを移送ラインおよびフィルターをすすぐために使用した。上記過程をもう一回繰り返した。次いで、減圧下、蒸留によってR2から過剰のトルエンを除去する過程を開始した。さらに2回分のAcMTそれぞれ18~22kgを許容するR2の限度容量を、上記方法にしたがって、R1からR2に移した。R2中のバッチ体積が約340lに減少したところで蒸留を完了した。15~30分間、温度を95~105°Cに上昇させた後、15~25°Cに冷却した。水20lをR2に添加した。この後、バッチ温度を15~30°Cに保持しつつ、メタンスルホン酸MSA33l、99、2.2当量を添加した。2回目の水10lを添加し、この温度において混合物を2時間撹拌した。3~4時間、混合物を80~90°Cまで加熱した。該二相性溶液を48~58°Cまで放冷した後、無水EtOH75lを15~30分にわたって添加した。スターラーを停止させ、150gの破砕した100μ未満N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミニウムビスメタンスルホネートを用いて混合物にシーディングした。2回目のEtOH300lを80~110分間にわたって添加した。ジャケット温度を10°Cに設定し、温度が25°Cに達したら、ジャケット温度を20°Cに再設定した。それを15~25°Cにおいて2時間撹拌した後、濾過によって固体を集めた。ケークから完全に液体除去した。MeCN300lをR2に添加し、15分間撹拌した後、フィルターケークを洗浄するために分けて使用した。2回目の300lのMeCNをR2に添加し、洗浄過程を繰り返した。生成物を、フィルター上で、乾燥による損失が0.2未満まで乾燥させた後、取り出した収率80~90。合成2:N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミニウムビスエタンスルホネートLMT.2EsOHの合成および分析LMT.2EsOHのための合成法LMT.2EsOHの合成を、10-アセチル-N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミンの酸加水分解によって実施した。使用した酸は、エタンスルホン酸であり、溶媒の組み合わせは、水性メタノールであった。実験の詳細100mlの丸底フラスコに、10-アセチル-N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミン5g、15.27ミリモル、分子量327.45g/モル70、水性、エタンスルホン酸7.21g、45.81ミリモル、分子量110.13g/モルおよびメタノール25mlを添加した。この混合物を75°Cまで加熱し、この温度で4時間撹拌した後、混合物を氷水の上で冷却した。固体は形成せず、真空下でメタノールを除去すると、粘ちょうな緑色の油が生じた。この油にイソプロパノール25mlを添加し、混合物を還流温度まで加熱して、確実に均一な溶液とした。冷却した後、沈殿が形成するまでアセトンを添加した。懸濁液を1時間、氷水の上で冷却した後、濾過して黄色の固体として粗生成物を生じさせ、これは空気に曝露すると緑色に変わった。該粗製物をアセトン3×5mlで洗浄し、3日間空気乾燥して、粗生成物3.35g、43、分子量505.68g/モルが明るい緑色の固体として生じた。結晶学1gのLMT.2EsOHサンプルを酢酸約0.1gに溶解し、酢酸エチルを上に重ね、暗所で3日間、ゆっくりと拡散させた。結晶が発生し、これを集め、X線回折によって分析して、生成物をビスエタンスルホネートであると確認した。図17aを参照のこと。合成3:N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミニウムビスp-トルエンスルホネートLMT.2TsOHの合成および分析LMT.2TsOHのための合成法LMT.2TsOHの合成を、炭酸ナトリウムによりN,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミニウムジクロライドを中和し、中性種を有機溶媒中に抽出することによって実施した。抽出物をp-トルエンスルホン酸で処理し、混合物を乾燥するまで濃縮した。実験の詳細50mlのビーカーに、炭酸ナトリウム0.59g、5.58ミリモル、分子量105.99g/モルおよび水10mlを添加し、固体が溶解するまで混合物を撹拌した。100mlの分離漏斗に、N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミニウムジクロライド1g、2.79ミリモル、分子量358.33g/モル、テトラヒドロフラン35mlおよびジエチルエーテル5ml、次いで、炭酸ナトリウムの水溶液を添加した。中性種を有機溶媒層中へ抽出し、水性層から分離した。テトラヒドロフラン5mlに予め溶解したp-トルエンスルホン酸一水和物1.06g、5.58ミリモル、分子量190.20g/モルを有機抽出物に添加し、混合物を乾燥するまで濃縮して、シャリシャリとした緑色のアモルファスな泡として生成物を生じさせた分子量629.8216g/モル。合成4:N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミニウムエタンジスルホネートLMT.EDSAの合成および分析10-アセチル-N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミンの酸加水分解によってLMT.EDSAの合成を実施した。使用した酸は、12-エタンジスルホン酸であり、溶媒の組み合わせは水性エタノールであった。実験の詳細25mlの丸底フラスコに、10-アセチル-N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミン1g、3.05ミリモル、分子量327.45g/モル、1,2-エタンジスルホン酸一水和物0.95g、4.58ミリモル、分子量208.21g/モル、水1mlおよびエタノール5mlを添加した。この混合物を85°Cまで加熱し、この温度において2.5時間撹拌し、ここで、溶液から黄緑色の固体が沈殿した。スラリーを氷水の上で30分間冷却した後、濾過して、黄緑色の固体として粗生成物が生じた。該粗製物をエタノール3×3mlで洗浄し、15分間空気乾燥した後、70°Cの温度において3.5時間オーブン乾燥して、黄色の固体として粗生成物1.33g、91、分子量475.61g/モルが生じた。LMT.EDSAの精製50mlのコニカルフラスコに、粗LMT.EDSA1g、2.10ミリモル、分子量475.61g/モルおよび水10mlを添加した。スラリーを95°Cまで加熱し、固体が溶解するまでこの温度において撹拌した。次いで、溶液を25°Cまで放冷し、ここで、明るい緑色の結晶固体が形成した。次いで、スラリーを氷水の上で30分間冷却した後、濾過した。集めた固体をメタノール3×3mlで洗浄し、18時間空気乾燥して、結晶性の明るい緑色の固体として精製された生成物が生じた0.88g、88、分子量475.61g/モル。結晶学40mgのLMT.EDSAサンプルを熱い重水素化水約1mlに溶解し、暗所にてゆっくりと放冷した。発生した結晶を集め、X線回折により分析して、生成物がLMT対EDSA付加物が1:1の一水和物であることを確認した。図17bを参照のこと。合成5:N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミニウムナフタレンジスルホネートLMT.NDSAの合成および分析LMT.NDSAのための合成法LMT.NDSAの合成を、10-アセチル-N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミンの酸加水分解により実施した。使用した酸は、1,5-ナフタレンジスルホン酸であり、溶媒の組み合わせは水性エタノールであった。実験の詳細25mlの丸底フラスコに、10-アセチル-N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミン1g,3.05ミリモル、分子量327.45g/モル、1,5-ナフタレンジスルホン酸四水和物1.65g、4.58ミリモル、分子量360.36g/モル、水1mlおよびエタノール5mlを添加した。この混合物を85°Cまで加熱し、この温度において30分間撹拌し、ここで、混合物はまだ不溶性であった。この熱い混合物に、水4mlを添加し、反応を95°Cまで加熱し、この温度において8時間撹拌した。懸濁液を氷水の上で10分間冷却した後、濾過して、明るい緑色の固体として粗生成物が生じた。該粗製物をエタノール3×5mlで洗浄し、3日間空気乾燥して、明るい青緑色の固体として粗生成物1.75g、100、分子量573.71g/モルが生じた。実施例2-溶解度試験iN,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミニウムジブロミド、ジクロライドおよびビスメタンスルホネートLMT.2HBr、LMT.2HClおよびLMT.2MsOH塩の溶解度2つの水性溶液21.4°Cにおいて、pH2.00および3.01を、HCl5Mを注意深く脱イオン水に添加することによって調製した。各実験において、上記溶液のうちの1つの5mlアリコートを37°Cに加熱した。適切な塩LMT.2MsOH、LMT.2HClまたはLMT.2HBrの一部を添加し、この混合物をしばらく撹拌して、固体を完全に溶解させた。さらなる溶解が起こらなくなるまで、このステップを繰り返した。結果を以下の表に示す:見てわかるとおり、LMT.2MsOHは良好な水溶解度を有する。iiLMT.2MsOH塩のpH依存性関連する実験において、以下の3種の緩衝原液を調製したpH2、pH3、およびpH7:pH2緩衝水溶液塩化カリウムKClの溶液0.2M50mLの脱イオン水中、0.745gを最初に調製した。この溶液から50mLをとり、約80mLの脱イオン水で希釈した。次いで、pHを2に調整するために0.2Mの塩酸HCl溶液を使用し、その後、脱イオン水でさらに希釈して、合計200mLとした。21.6°Cにおける2.00の最終pHを記録した。pH3緩衝水溶液フタル酸水素カリウムの溶液0.1M100mLの脱イオン水中、2.042gを最初に調製した。この溶液から100mLをとり、約50mLの脱イオン水で希釈した。次いで、pHを3に調整するために0.2MのHCl溶液を使用し、その後、脱イオン水でさらに希釈して、合計200mLとした。21.7°Cにおける2.99の最終pHを記録した。pH7緩衝水溶液第一リン酸カリウムKH2PO4の溶液0.1M100mLの脱イオン水中、1.370gを最初に調製した。この溶液から100mLをとり、約80mLの脱イオン水で希釈した。次いで、pHを7に調整するために0.5Mの水酸化ナトリウムNaOH溶液を使用し、その後、脱イオン水でさらに希釈して、合計200mLとした。22°Cにおける7.07の最終pHを記録した。方法水性緩衝溶液の5mLアリコートを、マイクロフリーmicrofleaを入れたバイアルに添加した。このバイアルを25°Cに設定した水浴中に置いた。該溶液に1回1~1.5gずつLMT.2MsOHを添加した。各添加後に、10分の撹拌時間を許容して、溶解のための最大の機会を保証した。混合物の均一性を目視により判定した。上記撹拌時間の後、視覚による検査により判定して固体がまだ存在する場合、飽和点に到達したと判断した。結果得られた混合物の粘度は、過剰の固体の適切な単離を不可能とするため、正確な溶解度を決定することは不可能であった。結論として、結果はそれぞれ、飽和点前に添加したLMT.2MsOHが下限を構成し、飽和点後に添加したLMT.2MsOHの総質量が上限を提供する範囲として報告する。3つの実験からの結果を以下に示す:見てわかるとおり、pHが低下するにつれて溶解度はわずかに減少するが、LMT.2MsOHは、3つの水性系それぞれにおいてよく機能した。結論として、LMT.2MsOHは、MTC示さないよりも優れた水溶解性を示し、対応する塩化物および臭化物塩に比べて亢進した溶解度を有する。これは、本明細書に開示された処置および用途に関するさらに高い有用性を示唆する。実施例3-凝集および毒性の阻害方法:タウ凝集に関する固相アッセイタウ-タウ凝集アッセイは、精製された組換えタウ断片を固相イムノアッセイにおいて使用する。方法は、例えば、PCT国際特許出願公開第WO96/30766号に詳細に記載される。すなわち、このアッセイは、溶液中の切断型タウアミノ酸297~391の固相に結合した切断型タウ残基297~390への結合を測定する。前者の結合は、C-末端Glu-391残基を含むペプチドを特異的に認識する抗体mAb423により検出する。インビトロで形成されたタウ複合体は、対らせん状細線維のタンパク質分解安定なコアにおいて見出される、94/95-アミノ酸反復ドメイン残基297~390を介した病的なタウ-タウ結合相互作用の安定性の結果としてアルツハイマー病において形成する凝集複合体に類似している。平均±SEとして表されるB50値は、タウ-タウ結合が50減少する化合物の濃度として決定される。方法:細胞に基づくタウ凝集アッセイこのアッセイは、誘導性プロモーターpOPRSVIの制御下で完全長ヒトタウタンパク質htau40を、および構成的プロモーターpcDNA3.1の制御下で低レベルの切断型タウ295~390、dGAを発現するように遺伝子操作された3T6マウス細胞に基づく。大量のhtau40の発現は、IPTG10~50μMの添加によって誘導され、これは次に、テンプレートとして作用するdGAタウの存在下で完全長タウの凝集とプロセシングが起こる過程によってさらなる切断型タウの生成をもたらす。タウ-タウ凝集阻害剤のアッセイへの添加は、この過程をブロックする。方法は、PCT国際特許出願公開第WO02/055720号により詳細に記載される。結果を、12kD断片の生成が50阻害される濃度として表す。これは、EC50値と呼ばれる。10cmディッシュにおいて細胞4Aおよびそのクローンを約80コンフルエントまで増殖させた後、2つの24ウエルプレートに分割し、24時間増殖させた。供試品を様々な濃度で添加し、24時間後、IPTGを添加する。一夜のインキュベーション後、培地を除去し、PBSでウエルを洗浄し、レムリLaemmliバッファーの添加によって細胞を集めた。その後のゲル電気泳動、ウエスタンブロッティングおよび抗体標識のために、サンプルを-20°Cで貯蔵した。SDS-PAGEによってサンプルを分離し、PVDFメンブレンに移し、7/51抗体で標識したタウをKodakImageStationにおいてECLにより検出する。化合物は典型的に、一連の濃度範囲にわたり、4つの濃度で3回反復して試験し、すべてのサンプルを1つのゲルに流す。薬剤の存在しない対照サンプルに正規化した、dGAのhtau40バンドに対する強度の比を薬剤濃度に対してプロットし、EC50値を、上記比が0.5となる濃度からグラフにより決定した。上記方法をすぐ下の表1に要約する。すべての実験において、MTCTRx0014.047を対照として流し、EC50=0.59μMを有するMTCに対してEC50値を正規化した。方法:細胞毒性アッセイ細胞3T6マウス線維芽細胞を、10cmディッシュ中で約80コンフルエントまで増殖させた後、96ウエルプレートあたり10cmディッシュの10、1ウエルあたり50μlで、96ウエルプレートに分割した。8ウエルの1列は、アッセイにおける試薬ブランクとするために空のままとした。細胞を一夜増殖させた後、開始濃度典型的に、MTCまたはLMT.2HBrについては200μMで4つのウエルに添加し、続くウエルにおいては、順次1:2希釈し、細胞の最後の4つのウエルは薬剤を含まない対照として使用した。これは、96ウエルプレートあたり、2種の薬剤を試験することを可能とする。薬剤の存在下で48時間、細胞を放置し、その後、培地を除去し、PBSで細胞を洗浄した。ラクテートデヒドロゲナーゼLDHアッセイに基づくCytotox96ウエルキットPromegaを用いて細胞数を決定した。アッセイは、細胞溶解により放出される安定な細胞質酵素であるLDHを定量的に測定する。放出されたLDHを、結果としてテトラゾリウム塩の赤いホルマザン生成物への変換が起こる、酵素的アッセイによって測定する。生じた色の量は、溶解した細胞数に比例する。すなわち、細胞を45~60分間、50μl/ウエルの1×溶解バッファーによって溶解し、続いて、30分間の50μl/ウエルのLDHアッセイ試薬、そして、50μl/ウエルの停止バッファーにより反応停止する。吸光度を490nmにおいて読み取る。未処理ウエル未処理細胞=1.0に対する相対的な吸光度を薬剤濃度に対してプロットした。グラフにより、吸光度が50減少した濃度からLD50を決定した。LMT.2HBrの試験に際して、MTCTRx0014.047をすべての実験において対照として流し、LD50=65μMを有するMTCに対してLD50値を較正した。結果:本発明による様々なビススルホネート塩を試験し、ビスハライド塩N,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミニウムジクロライドLMTC、LMT.2HClおよびN,N,N’,N’-テトラメチル-10H-フェノチアジン-3,7-ジアミニウムジブロミドLMT.2HBrと塩化メチルチオニニウムMTCを比較した。異なるメチルチオニニウム塩形態についてのインビトロのデータを、すぐ下の表2に要約する:コメントLMT.2MsOHおよびLMT.2HClについてのEC50値平均±SEは、それぞれ0.19±0.04μMおよび0.63±0.10μMであり、対応する治療指数は179および102である。タウ-タウ凝集の細胞に基づくモデルにおける化合物の相対的効力は、LMT.2MsOH>MTC、LMT.2HBr、LMT.2HClである。MTCに比べて、LMT.2MsOHの治療指数は63高い。細胞に基づくアッセイにおける効力の順番は、MTC、LMT.2MsOH>LMT.2HCl>LMT.2HBrである。LMT.2MsOHおよびLMT.2HClについてのB50値は、それぞれ238.2±74.2μMおよび360.8±38.2μMである。細胞を含まないアッセイにおける相対的効力の順番は、LMT.2MsOH>MTC、LMT.2HCl、LMT.2HBrである。実施例4-毒性学、不純物および造血系に対する効果LMT.2HBr、LMT.2HCl、LMT.2MsOHまたはMTCを、毎日、14日間、雌性Wistarラットに投与し;用量は、1日目から10日目までは95mgMT/kg/日および11日目から14日目までは60mgMT/kg/日であった。体位を高くすることraisedbodyposture、行動抑制および全身的虚弱の臨床兆候がすべての処置群において見られた。処置関連死がLMT.2HBr処置群およびMTC処置群において発生した。赤血球パラメータの変化が、すべての処置群の血液および骨髄において見られ、これは再生性貧血の指標であった。これらは以下の:血液中の赤血球数の減少、低濃度のヘモグロビンおよび網状赤血球数の増加ならびに骨髄中の赤血球前駆細胞数の増加を含んだ。これは、脾臓における赤血球生成レベルの増加によって病理学的に実証された。好中性顆粒球数の減少がすべての処置動物の骨髄において見られたが、この効果の強さは他の群よりもLMT.2HBr処置群においてかなり大きかった。この相違は、作製した血液塗抹標本中で観察された好中球減少症の重症度においても認められ、LMT.2HBr処置動物においては成熟した好中球の顕著な枯渇が、MTCでは中程度の減少があり、そして、LMT.2HClまたはLMT.2MsOH群においては減少しなかった。この試験の結果は、少なくともラットにおいて、LMT.2HBrが、LMT.2HCl、LMT.2MsOHまたはMTCよりも好中球枯渇を引き起こす傾向が高いことを示唆する。成熟した好中球および顆粒球数の減少も、ラットにおけるLMT.2HBrの6か月の試験で、高用量45mgMT/kg/日において骨髄中で観察された。LMT.2HBr後に観察された好中球の減少または好中球減少症は、可逆的ではあるが、その主要な役割が細菌の破壊であるため、患者を細菌感染により罹りやすくするであろう。したがって、ラットにおける耐容性用量依存性の死および好中球反応に関して、LMT.2MsOHは、LMT.2HBrに比較して改善された性質を示す。LMT.2HClおよびLMT.2MsOHは、上記分析において同等であったが、該2つの塩形態において見出された不純物に相違があった。LMT,2HClに関しては、塩化メチルの存在が合成中に検出され、完全に除去することが困難なやり方で生成物中に捕捉された。対照的に、LMT.2MsOHの合成過程において、エチルおよびメチルメタンスルホネートEMS、MMSなどの不純物は、はるかに低いレベルまで制御可能であった。ラット、サルおよびミニブタにおいて、造血系に対する試験を実施した。メトヘモグロビン血症が観察された最低用量は、ラットにおいて15mgMT/kg/日MTCおよびLMT.2HBrまたは30mgMT/kg/日LMT.2MsOH、霊長類において5.3mgMT/kg/日MTC、およびミニブタにおいて10mgMT/kg/日LMT.2MsOHおよびLMT.2HBrであった。ミニブタにおける9ヶ月のLMT.2MsOH試験において、投薬の最初の28日間の後、3mgMT/kg/日ではメトヘモグロビン血症の兆候はなかった。しかしながら、予想されるとおり、MTC、LMT.2HBrまたはLMT.2MsOHの用量レベルが増加すると、メトヘモグロビンレベルの増加および究極的には耐容性を示さなかった用量におけるハインツ体赤血球内の変性し、沈殿したヘモグロビンの凝集体の形成により証明される、RBCsへの酸化的ストレスの徴候が用量依存的に現れた。実施例5-薬物動態図18は、ブタにおける、2種の経口投与量2および15mg/kgのLMT.2HBr、LMT.2HClおよびLMT.2MsOH投与後の、MT部分の血漿濃度の時間経過の比較を示す。見てわかる通り、LMT.2MsOHについての1時間のTmaxにおけるCmaxは、LMT.2HClまたはLMT.2HBrについてのそれよりも2倍高かった。したがって、LMT.2MsOHは、LMT.2HClまたはLMT.2HBrよりもMTへのより有効な曝露を提供することができる。実施例6-胃刺激試験試験MTCまたはLMT.2HBrによる、28日齢ラット:最終的な動物からの、選ばれた胃の顕微鏡所見の発生および重症度上記から、1群あたり10匹で以下のことが予測できる。試験LMT.2MsOHによる、28日齢ラット:最終的な動物からの、選ばれた胸骨、肝臓、脾臓および胃の顕微鏡所見の発生および重症度これらの結果は、LMT.2MsOHが、LMT.2HBrよりも胃刺激を起こしにくいことを示す。実施例7-製剤製剤例1:直接打錠法を用いるLMTM錠剤の調製直接打錠法によって、以下の組成を有する錠剤を調製した。LMTM、スプレー乾燥されたマンニトール、微結晶性セルロース、クロスポビドンおよびステアリン酸マグネシウムを、タンブリングブレンダー中で混合し、次いで、打錠機を用いて圧縮した。次いで、錠剤コアをOpadryブルーColorconの一連のフィルムコーティング材料に関する登録商標の水性懸濁液でフィルムコーティングした。製剤例2-乾式造粒法ローラー圧縮によるLMTM錠剤の調製乾式造粒法によって、以下の組成を有する錠剤を調製した:LMTM、スプレー乾燥されたマンニトール、微結晶性セルロース、クロスポビドンおよびステアリン酸マグネシウムを、タンブリングブレンダー中で混合した。次いで、この混合物をローラー圧縮機を用いて造粒し、好適なスクリーンを用いて振動造粒機により粉砕した。この場合、ローラー圧縮の前にステアリン酸マグネシウムの半量を使用し、その後、慣用の打錠機における圧縮の前に、ステアリン酸マグネシウムの半量を造粒処理に添加して混合した。次いで、錠剤コアをOpadryブルーColorconの一連のフィルムコーティング材料に関する登録商標の水性懸濁液でフィルムコーティングした。製剤例3-乾式造粒スラッギングによるLMTM錠剤の調製さらなる乾式造粒法によって、以下の組成を有する錠剤を調製した:LMTMおよび賦形剤を、タンブリングブレンダー中で混合し、次いで、打錠機を用いて圧縮してスラッグプレーンな、平坦な表面の錠剤を生成した。次いで、20メッシュのスクリーンを備えた振動造粒機を用いてスラッグを粉砕した。この実施例において、ステアリン酸マグネシウムの半量をスラッギングの前に使用し、その後、慣用の打錠機における圧縮の前に、ステアリン酸マグネシウムの半量を造粒処理に添加して混合した。次いで、錠剤コアをOpadryブルーColorconの一連のフィルムコーティング材料に関する登録商標の水性懸濁液でフィルムコーティングした。製剤例4:賦形剤の湿式造粒およびさらに造粒しながらのLMTMの取り込みによるLMTM錠剤の調製湿式造粒法によって、以下の組成を有する錠剤を調製した:マンニトール、クロスポビドン全体の3分の1および微結晶性セルロースをタンブリングブレンダー中で混合した。次いで、混合した材料を水中のPVP溶液を用いて造粒した。湿った塊を流動層乾燥機中で乾燥し、好適なスクリーンを備えた振動造粒機を用いて粉砕した。次いで、慣用の打錠機における圧縮の前に、粉砕された材料を残りのクロスポビドンおよびステアリン酸マグネシウム、ならびにLMTMと混合した。次いで、錠剤コアをOpadryブルーColorconの一連のフィルムコーティング材料に関する登録商標の水性懸濁液でフィルムコーティングした。製剤例5:LMTMカプセル剤の調製以下の組成を有するカプセル剤を調製した。LMTMおよび賦形剤を、タンブリングブレンダー中で混合した。得られた薬剤混合物をカプセルに50、75、100、125および150mgの製剤をサイズ1のカプセルに、200mgの製剤をサイズ0のカプセルに、カプセル充填機を用いて充填した。ゼラチンカプセルおよびHPMCカプセルの両方を調製した。製剤例6:LMTM75mgフィルムコート錠剤の安定性試験の結果製剤例7:LMTM100mgフィルムコート錠剤の安定性試験の結果製剤例8:LMTM75mgフィルムコート錠剤の安定性試験の結果製剤例9:LMTM100mgフィルムコート錠剤の安定性試験の結果製剤例10:LMTB100mgフィルムコート錠剤製剤例11:LMTM75mgフィルムコート錠剤製剤例12-溶出試験製剤例10および11のとおりに調製した、LMTBフィルムコート錠剤3×100mgおよびLMTM錠剤4×75mgを、50rpmのパドルスピードで撹拌し図19を参照のこと、標準的な薬局方の方法USP34および以下に特定する条件を用いて評価した。結果を以下の表に示す。通常の条件25°C/60RHまたはストレス条件40°C/75RH下、様々な期間貯蔵した錠剤も、同じ方法を用いて試験した。結果を以下の表に示す。付録-結晶学データLMT.EDSAに関する結晶学データ図17aLMT.2EsOHに関する結晶学データ図17bLMT.2MsOHに関する結晶学データ図17c"