少なくとも1つの抗ウイルス性オリゴヌクレオチドを含む抗ウイルス性オリゴヌクレオチド薬剤であって、該オリゴヌクレオチドの抗ウイルス活性が主として非配列相補性の作用機序によって生じる、抗ウイルス性オリゴヌクレオチド薬剤。少なくとも2つの異なる抗ウイルス性オリゴヌクレオチドの混合物を含む、請求項1記載の抗ウイルス性オリゴヌクレオチド薬剤。少なくとも1つの抗ウイルス性ランダマーオリゴヌクレオチドを含む抗ウイルス性ランダマーオリゴヌクレオチド薬剤であって、該ランダマーオリゴヌクレオチドの抗ウイルス活性が主として非配列相補性の作用機序によって生じる、ウイルス性ランダマーオリゴヌクレオチド薬剤。長さの異なる少なくとも2つの抗ウイルス性ランダマーの混合物を含む、請求項3記載の抗ウイルス性ランダマーオリゴヌクレオチド薬剤。標的ウイルスに対する抗ウイルス活性を有し、少なくとも1つの抗ウイルス性オリゴヌクレオチドを含むオリゴヌクレオチド薬剤であって、該オリゴヌクレオチドが少なくとも29ヌクレオチドの長さであり、該オリゴヌクレオチドの配列が該標的ウイルスのゲノム配列のいかなる部分とも相補的でない、オリゴヌクレオチド薬剤。標的ウイルスに対する抗ウイルス活性を有し、少なくとも1つの抗ウイルス性オリゴヌクレオチドを含むオリゴヌクレオチド薬剤であって、該オリゴヌクレオチドが少なくとも6ヌクレオチドの長さであり、該オリゴヌクレオチドの配列が該標的ウイルスのゲノム配列のいかなる部分とも相補的でなく、本質的にポリA、ポリC、ポリG、ポリT、Gカルテット又はGリッチ配列から成らない、オリゴヌクレオチド薬剤。010μM以下の標的ウイルスに対するIC50を有する、請求項1~6のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。005μM以下の標的ウイルスに対するIC50を有する、請求項1~6のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。0025μM以下の標的ウイルスに対するIC50を有する、請求項1~6のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。0015μM以下の標的ウイルスに対するIC50を有する、請求項1~6のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがDNAウイルスを標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがRNAウイルスを標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがヘルペスウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがHSV1を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがHSV2を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがCMVを標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがヘパドナウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがHBVを標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがパルボウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがポックスウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがパピローマウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがアデノウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがレトロウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがHIV1を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがHIV2を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがパラミクソウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがRSVを標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがパラインフルエンザウイルスを標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがブンヤウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがハンタウイルスを標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがピコルナウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがコクサッキーウイルスを標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがライノウイルスを標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがフラビウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが黄熱病ウイルスを標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがデング熱ウイルスを標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが西ナイルウイルスを標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがC型肝炎ウイルスを標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがフィロウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがエボラウイルスを標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがマールブルグイルスを標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがオルトミクソウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがインフルエンザウイルスを標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがトガウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがコロナウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがレオウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがラブドウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがアレナウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがカルシウイルス科の一員を標的とする、請求項1~10のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも6ヌクレオチドの長さである、請求項1~4及び6~49のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも10ヌクレオチドの長さである、請求項1~4及び6~49のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも20ヌクレオチドの長さである、請求項1~4及び6~49のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも29ヌクレオチドの長さである、請求項1~49のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも32ヌクレオチドの長さである、請求項1~49のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも34ヌクレオチドの長さである、請求項1~49のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも36ヌクレオチドの長さである、請求項1~49のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも38ヌクレオチドの長さである、請求項1~49のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも40ヌクレオチドの長さである、請求項1~49のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも46ヌクレオチドの長さである、請求項1~49のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも50ヌクレオチドの長さである、請求項1~49のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも80ヌクレオチドの長さである、請求項1~49のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも120ヌクレオチドの長さである、請求項1~49のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも1つのホスホジエステル結合を含む、請求項1~62のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが化学構造に対する少なくとも1つの修飾を含む、請求項1~62のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドそれぞれが少なくとも1つのホスホロチオエート化結合を含む、請求項1~62のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドそれぞれが少なくとも1つのホスホロチオエート化結合及び送達システムを含む、請求項1~62のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドそれぞれが少なくとも1つのホスホロチオエート化結合及びリポソーム送達システムを含む、請求項1~62のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがリボース部分への少なくとも1つの2Oメチル修飾を含む、請求項1~62のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがリボース部分への少なくとも1つの2修飾を含む、請求項1~62のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも1つのメチルホスホネート結合を含む、請求項1~62のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドそれぞれが少なくとも1つのホスホロジチオエート化結合を含む、請求項1~62のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドそれぞれが少なくとも1つのホスホロジチオエート化結合及び送達システムを含む、請求項1~62のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドそれぞれが少なくとも1つのホスホロジチオエート化結合及びリポソーム送達システムを含む、請求項1~62のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが、リンカーにより接続される2以上のオリゴヌクレオチド配列から成るコンカテマーである、請求項1~62のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが、オリゴヌクレオチドの特性を変更する分子に1以上のヌクレオチド残基で連結又は接続され、さらに高い安定性、さらに低い血清相互作用、さらに高い細胞への取り込み、さらに高いウイルスタンパク質相互作用、送達のために配合される能力の改善、検出可能なシグナル、さらに高い抗ウイルス活性、さらに良好な薬物動態性、組織特異的分布、さらに低い毒性から成る群より選択される1以上の特性を獲得する、請求項1~62のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが二本鎖である、請求項1~62のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが二本鎖又は一本鎖であり、非ワトソンクリック相互作用を介してハイブリッド形成が可能である少なくとも1つの塩基を含む、請求項1~62のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも1つのGカルテットモチーフ部分を含む、請求項1~77のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが少なくとも1つのCpGモチーフ部分を含む、請求項1~77のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドがウイルスのmRNAに相補的である部分を含む、請求項1~4及び7~77のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが1以上のウイルス構成成分と結合する、請求項1~77のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドが1以上の宿主構成成分と相互作用し、該相互作用がウイルスの活性又は産生の阻害を生じる、請求項1~77のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドの配列の少なくとも一部分がウイルスゲノムに由来する、請求項1~4及び7~77のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドの配列の少なくとも一部分がウイルスゲノムに由来し、主として非配列相補的な作用機序である抗ウイルス活性を有する、請求項1~4及び7~77のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドの配列の少なくとも一部分がウイルスのパッケージ配列又はアプタマー相互作用に関与するそのほかのウイルス配列に由来する、請求項1~4及び7~77のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドの配列の少なくとも一部分がウイルス構成成分又は宿主構成成分又はその両方とのアプタマー相互作用に関与する、請求項1~77のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドの配列の少なくとも一部分がポリA、ポリC、ポリG、ポリT、ポリAC、ポリAG、ポリAT、ポリCG、ポリCT又はポリGTを含む、請求項1~77のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。オリゴヌクレオチドの配列の少なくとも一部分が2以上の反復配列を含む、請求項1~77のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。少なくとも2つの異なる抗ウイルス性オリゴヌクレオチドの混合物を含む、請求項1及び5~88のいずれか一項記載のオリゴヌクレオチド薬剤。少なくとも10の異なる抗ウイルス性オリゴヌクレオチドの混合物を含む、請求項89記載のオリゴヌクレオチド薬剤。少なくとも100の異なる抗ウイルス性オリゴヌクレオチドの混合物を含む、請求項89記載のオリゴヌクレオチド薬剤。少なくとも1000の異なる抗ウイルス性オリゴヌクレオチドの混合物を含む、請求項89記載のオリゴヌクレオチド薬剤。少なくとも106の異なる抗ウイルス性オリゴヌクレオチドの混合物を含む、請求項89記載のオリゴヌクレオチド薬剤。複数の異なるオリゴヌクレオチドが少なくとも6ヌクレオチドの長さである、請求項89記載のオリゴヌクレオチド薬剤。複数の異なるオリゴヌクレオチドが少なくとも10ヌクレオチドの長さである、請求項89記載のオリゴヌクレオチド薬剤。複数の異なるオリゴヌクレオチドが少なくとも20ヌクレオチドの長さである、請求項89記載のオリゴヌクレオチド薬剤。複数の異なるオリゴヌクレオチドが少なくとも29ヌクレオチドの長さである、請求項89記載のオリゴヌクレオチド薬剤。複数の異なるオリゴヌクレオチドが少なくとも32ヌクレオチドの長さである、請求項89記載のオリゴヌクレオチド薬剤。複数の異なるオリゴヌクレオチドが少なくとも34ヌクレオチドの長さである、請求項89記載のオリゴヌクレオチド薬剤。複数の異なるオリゴヌクレオチドが少なくとも36ヌクレオチドの長さである、請求項89記載のオリゴヌクレオチド薬剤。複数の異なるオリゴヌクレオチドが少なくとも38ヌクレオチドの長さである、請求項89記載のオリゴヌクレオチド薬剤。複数の異なるオリゴヌクレオチドが少なくとも40ヌクレオチドの長さである、請求項89記載のオリゴヌクレオチド薬剤。複数の異なるオリゴヌクレオチドが少なくとも50ヌクレオチドの長さである、請求項89記載のオリゴヌクレオチド薬剤。複数の異なるオリゴヌクレオチドが少なくとも80ヌクレオチドの長さである、請求項89記載のオリゴヌクレオチド薬剤。複数の異なるオリゴヌクレオチドが少なくとも120ヌクレオチドの長さである、請求項89記載のオリゴヌクレオチド薬剤。治療上有効量の請求項1~105のいずれか一項記載の少なくとも1つの薬理学的に許容される抗ウイルス性オリゴヌクレオチド、及び薬学的に許容されるキャリアを含む抗ウイルス性薬学的組成物であって、該オリゴヌクレオチドの抗ウイルス活性が主として非配列相補的な作用機序によって生じる、抗ウイルス性薬学的組成物。ウイルスに病因のある疾患の治療、抑制又は予防に適合される、請求項105記載の抗ウイルス性薬学的組成物。プリオン病の治療、抑制又は予防に適合される、請求項105記載の抗ウイルス性薬学的組成物。眼内、経口摂取、経腸、吸入、皮膚注射、皮下注射、筋肉内注射、腹腔内注射、くも膜下注入、気管内注入及び静脈内注射から成る群より選択される方式による送達に適合される、請求項105記載の抗ウイルス性薬学的組成物。送達システムをさらに含む、請求項105記載の抗ウイルス性薬学的組成物。リポソーム製剤をさらに含む、請求項105記載の抗ウイルス性薬学的組成物。送達システム又はリポソーム製剤が特定の細胞又は特定の組織を標的とする、請求項110又は111記載の抗ウイルス性薬学的組成物。少なくとも1つのそのほかの抗ウイルス剤を組み合わせてさらに含む、請求項105記載の抗ウイルス性薬学的組成物。非ヌクレオチドの抗ウイルス性ポリマーを組み合わせてさらに含む、請求項105記載の抗ウイルス性薬学的組成物。請求項1~105記載の少なくとも1つの抗ウイルス性オリゴヌクレオチド又は抗ウイルス性オリゴヌクレオチド製剤を標識されたバッケージ中に含むキットであって、該オリゴヌクレオチドの抗ウイルス活性が主として非配列相補的作用機序により生じ、該パッケージ上の標識が少なくとも1つのウイルスに対して該抗ウイルス性オリゴヌクレオチドを使用することができることを示す、キット。少なくとも2つの異なる抗ウイルス性オリゴヌクレオチドの混合物を含有する、請求項115記載のキット。ヒトでの使用のために規制当局によって認可されている、請求項115記載のキット。少なくとも1種類の非ヒト動物での使用のために規制当局によって認可されている、請求項115記載のキット。抗ウイルス剤としての使用のための抗ウイルス性オリゴヌクレオチドを選択する方法であって、複数の異なるランダムオリゴヌクレオチドを合成し、感染性ビリオンを産生するウイルスの能力を阻害することにおける活性について該オリゴヌクレオチドを試験し、抗ウイルス剤としての使用のための薬学的に許容されるレベルの活性を有する該オリゴヌクレオチドを選択することを含む方法。異なるランダムオリゴヌクレオチドが異なる長さのランダマーを含む、請求項119記載の方法。異なるランダムオリゴヌクレオチドが1セットの長さの異なるオリゴヌクレオチドを含み、該セットにおける各オリゴヌクレオチドが該セットにおける最短オリゴヌクレオチドの配列を含む、請求項119記載の方法。異なるランダムオリゴヌクレオチドが少なくとも6ヌクレオチドの長さでランダマー断片を含む複数のオリゴヌクレオチドを含む、請求項119記載の方法。対象におけるウイルス感染を予防又は治療する方法であって、そのような治療が必要な対象に治療上有効量の、請求項1~105のいずれか一項記載の少なくとも1つの薬学的に許容されるオリゴヌクレオチドを投与することを含む方法。対象がヒトである、請求項123記載の方法。対象が非ヒト動物である、請求項123記載の方法。対象が植物である、請求項123記載の方法。ヒト又は非ヒト動物において腫瘍ウイルスにより起きる癌を予防的に治療する方法であって、そのような治療が必要なヒト又は非ヒト動物に治療上有効量の、請求項1~105のいずれか一項記載の少なくとも1つの薬学的に許容されるオリゴヌクレオチドを投与することを含む方法。オリゴヌクレオチドをヒトに投与する、請求項127記載の方法。少なくとも1つのウイルス構成成分へのオリゴヌクレオチドの結合を変更する化合物を同定するためのスクリーニング方法であって、スクリーニングされる化合物の存在下又は非存在下において、別々の反応で、該ウイルス構成成分とオリゴヌクレオチドを接触させ、該化合物の非存在下と比べて、該化合物の存在下では該ウイルス構成成分に対する該オリゴヌクレオチドの結合に差異が生じるかどうかを決定し、該差異の存在が該ウイルス構成成分への該オリゴヌクレオチドの結合を変更する化合物を指すことを含む方法。請求項129記載の方法により同定される、新規の抗ウイルス性化合物。オリゴヌクレオチドのプールから少なくとも1つのウイルス構成成分に結合するオリゴヌクレオチドを精製する方法であって、該プールを少なくとも1つのウイルス構成成分に接触させ、該ウイルス構成成分から該プールの結合したオリゴヌクレオチドを外し、外されたオリゴヌクレオチドを回収することを含む方法。配列決定すること、及び該固定相媒体から回収した結合オリゴヌクレオチドの抗ウイルス活性を試験することをさらに含む、請求項131記載の方法。少なくとも1つのウイルス構成成分に結合するオリゴヌクレオチドのプールからオリゴヌクレオチドを濃縮する方法であって、該プールを少なくとも1つのウイルス構成成分に接触させること、及び該ウイルス構成成分に結合したオリゴヌクレオチドを増幅して濃縮されたオリゴヌクレオチドのプールを提供することを含む方法。濃縮したオリゴヌクレオチドプールをオリゴヌクレオチドのプールとして用い、少なくとも1つの追加時間で該接触及び増幅を実施する、請求項133記載の方法。配列決定すること、及び該濃縮したオリゴヌクレオチドプールにおけるオリゴヌクレオチドの抗ウイルス活性を試験することをさらに含む、請求項133又は134記載の方法。請求項131~135のいずれか一項記載の方法を用いて同定された1以上のオリゴヌクレオチドを含む抗ウイルス性オリゴヌクレオチド調製物であって、該オリゴヌクレオチド調製物における該オリゴヌクレオチドが最初のオリゴヌクレオチドプールにおけるオリゴヌクレオチドの平均結合親和性よりも高い、少なくとも1つのウイルス構成成分に対する平均結合親和性を示す、抗ウイルス性オリゴヌクレオチド調製物。オリゴヌクレオチドの平均結合親和性が最初のオリゴヌクレオチドプールにおけるオリゴヌクレオチドの平均結合親和性よりも少なくとも2倍大きい、請求項136記載の抗ウイルス性オリゴヌクレオチド調製物。好ましい実施態様の詳細な説明本発明は、非配列相補的メカニズムによって作用する抗ウイルス性オリゴヌクレオチドの同定及び使用に関するものであり、多数のウイルスに対して、オリゴヌクレオチドが大きければ大きいほど抗ウイルス活性が大きく、抗ウイルス活性は、長さ40ヌクレオチド以上のオリゴヌクレオチドについて通常最適である。背景の項に記載したように、抗ウイルス活性について多数のアンチセンスオリゴヌクレオチドONを調べた。しかしながら、そのようなアンチセンスONは配列特異的であり、通常、長さ約16~20ヌクレオチドである。実施例1及び2の結果で明らかにしているように、ランダムPSODNの抗ウイルス効果は配列特異的ではない。これらの試験で使用されたPSODNの体積や濃度を考慮すると、混合物中に特定のランダム配列が1コピを超えて存在するのは理論的に不可能である。このことは、これらPSODNランダマーではアンチセンス効果がありえないことを意味する。後者の例では、抗ウイルス効果がPSODNの配列特異性で起きるのであれば、そのような効果はたった1分子で起きなければならず、それは、可能だとは思えない結果である。たとえば、長さ40塩基のONランダマーについて、集団中における任意の特定の配列は理論的に、全分画のたった1440又は827×1025により表される1モル=6022×1023分子、及び我々が現在行う最大の合成規模が15μMである事実を考えると、可能性のある配列がすべて存在するわけではなく、又、各配列はたった1コピーとして存在する可能性が高い。当然、本発明の教示を適用する当業者は、配列特異的ONを使用することもできようが、本発明で発見された非配列相補的活性を利用することもできる。従って、本発明は非配列相補的ONに制約されないが、ウイルス感染を治療するための配列特異的アンチセンスONに関する先行技術で開示されたものを放棄する。適用可能なウイルスたとえば、そのデータが本明細書に記載されているものを含むに対しては、ランダマーのサイズが大きくなるにつれて、抗ウイルス有効性も大きくなる。現在のホスホロアミダイト系DNAの合成の限界のために、さらに大きなPSODNたとえば、80量体や100量体は所望のサイズより小さな断片の混入が有意に生じる。さらに大きなオリゴ80bp及び120bpで見られるさらに弱い効果塩基基準当たりは、これらの集団での完全長のランダマーの濃度が低いことを反映している可能性があり、又、細胞への取り込みの低下を反映している可能性もある。妥当な純度75完全長のさらに大きなランダマー40塩基が合成され、これらODNのいずれかの細胞への取り込みが送達システムにより促進されるのなら、抗ウイルス活性においてはるかに大きな増加を達成することが可能であってもよい。本発明において、ランダマー又はそのほかのオリゴヌクレオチドは、以下を含むが、それに限定されない幾つかのメカニズムによってウイルスの複製を阻止してもよい。1ビリオンの吸着又は受容体相互作用を妨げるので、感染を妨げる。2ウイルス構成体をドープするか、又はウイルスゲノムをカプシドパッキングについてはウイルスDNA又はRNAと競合するの中にパッキングして欠陥のあるビリオンを生じる。3パッキング中のカプシド形成を破壊するか、若しくは妨げる、又はカプシドタンパク質のそのほかの構造タンパク質との相互作用を破壊するか、若しくは妨げて、ウイルス放出を阻害するか、又は欠陥のあるビリオンの放出を起こす。4ウイルスの鍵となる構成成分に結合してその活性を妨げるか、又は低下させる。5ウイルスの増殖に必要とされる宿主の鍵となる構成成分に結合する。本ウイルス阻害を達成するメカニズムを限定することなく、上記で示したように、ウイルス複製に対するONの阻害特性を説明しうる及び/又は予想しうる幾つかの可能なメカニズムが存在する。これらのうちの第1は、ONの一般的なアプタマー効果によってONが細胞表面のタンパク質又はウイルスタンパク質に結合し、ウイルスの吸着及び融合を妨げるものである。効果に対するサイズの閾値は、相互作用に必要とされる特定の累積変化の結果であってもよい。第2の可能なメカニズムは、ONがウイルスのパッケージング及び/又は構成を妨げることによって細胞の中で機能してもよいということである。特定のサイズ閾値を超えるONは、正常なカプシドと核酸との相互作用と競合してもよく、又は妨害してもよく、機能的なウイルスゲノムの新しいウイルスの中へのパッケージングを妨げる。又は、ONは正常なカプシド形成物を妨げてもよく、それは正常なウイルスの出芽を妨げ、ウイルスの安定性を変化させ、又は内部移行時の適切なビリオンの分解を妨げる。作用のメカニズムは未だ完全にははっきりしないが、アッセイ結果は、臨床的相関物、アシクロビル、ガンシクロビル、リバビリン、及びプロテアーゼ阻害剤に比べて、本ONは、ウイルス阻害においてさらに大きな有効性を呈することを明らかにしている。従って、本発明に係るONは、ウイルス感染を治療するために、又は予防するために使用することができる。治療されるウイルス感染は、ヒト、動物及び植物のウイルスで引き起こされるものである。広いスペクトルの抗ウイルス活性上記で議論された結論及び本明細書で報告されるデータに従って、ランダムON及びONランダマーは、ウイルスゲノムの集合及び/又はパッケージング及び/又はカプシド形成が複製に必要な工程であるウイルスとの広いスペクトルの抗ウイルス活性を有すると思われる。従って、この仮説を調べるために、サイズの異なる幾つかのPSODNを選択して、種々のウイルス感染の細胞モデルで試験した。多数のそのような試験を実施例において本明細書で記載するが、それには、CMV、HIV1、RSV、コクサッキーウイルスB2、DHBV、ハンタウイルス、パラインフルエンザウイルス、及びワクシニアウイルスによる試験が含まれ、並びに実施例1及び2に記載されるHSV1及びHSV2における試験も含まれる。試験オリゴヌクレオチドには高い活性レベルを呈するものもあったが、DOTAP、リポフェクトアミン又はオリゴフェクトアミンのようなオリゴ送達システムは結果として、特にさらに大きな40塩基以上のランダマーと共にさらに大きな有効性を生じた。広いスペクトルの抗ウイルス活性における結論様々なウイルスによる有効性試験は、ランダムON及びランダマーが種々の異なるウイルスに対して阻害特性を示すことを明らかにしている。さらに、これらの試験は、小さいランダマーよりも大きいランダマーの方がウイルス阻害についてさらに大きな有効性を示すという結論を指示している。このことは、カプシド形成するウイルスすべてにおけるランダムON又はONランダマーについて共通するサイズ依存性及び/又は電荷依存性のメカニズムを示唆している。HSV及びCMVは双方ともヘルペスウイルスファミリーの二本鎖DNAウイルスであるが、HIVは、レトロウイルス由来のRNAウイルスであり、又、RSVはパラミクソウイルス由来のRNAウイルスである。ONランダマーが種々の異なるウイルスのウイルス機能を阻害できるという事実を考えると、上述のように列記したメカニズムに限定されることなく、以下のメカニズムが合理的である:AON/ONランダマーはアプタマー効果を介してウイルス機能を阻害しており、原形質膜とのウイルスの融合を妨げる;及び/又は、BON/ONランダマーはビリオンの集合又はウイルスDNAのカプシド内へのパッケージングを妨げる又はドープして結果として欠陥のあるビリオンを生じる;及び/又は、CON/ONランダマーは、ウイルスの集合及び/又はパッケージング及び/又は遺伝子発現に必要とされる宿主のタンパク質又は構成成分を妨害している。抗ウイルス活性の必要条件無作為化されたDNA配列がウイルス阻害にとって十分であると思われるので、ホスホロチオエート非存在下で抗ウイルス活性を維持できるかどうか、又、有効性は、ランダム配列又はウイルスゲノムで見い出される特異的配列のいずれの選択によって増強されるかを見るのは興味深い。従って、ランダマーの抗ウイルス有効性に対するその効果に関してDNA及びRNAの修飾を調べた。ランダマーは非配列相補的メカニズムを介して作用するので、これらの実験は、核酸構成におけるわずかな変化及び抗ウイルス有効性における電荷分布を調べるように設計した。異なるヌクレオチド/ヌクレオシド修飾を持つODNがHSV1を阻害できるかどうかを調べるために、実施例に記載するように、HSV1PRAにおいてREP2024、2026、2059、及び2060を調べた。REP2024ODNの両端の4塩基上のリボースに2oメチル修飾を持つPSODN、REP2026ODNの両端の4塩基の間の結合にメチルホスホネート修飾を持つPOODN、REP2059長さ20塩基のRNAPSODNランダマー、及びREP2060長さ30塩基のRNAPSODNランダマーは抗HSV1活性を示した図11を参照のこと。後者の例では、抗ウイルス効果がDNAホスホロチオエート主鎖から成るONによってのみ生じるのであれば、そのような効果はたった1つの分子で生じることになる。しかし、そのほかの主鎖及び修飾も陽性の抗ウイルス活性を提供した。当然、本発明の教示を適用する当業者は、異なる化合物ONも使用できる。ホスホロチオエートのような、しかし、それに限定されないONの修飾は、抗ウイルス活性に有益であると思われる。このことは、媒体及び細胞内での双方でのONの必要とされる電荷及び/又はDNAの安定化に対する必要条件によるのが最も可能性が高く、又、PSODNのキラル性によってもよい。化合物REP2026は、分解から保護する両端で未修飾のPOヌクレオチド及び4つのメチルホスホネート結合を含む中心部分を有する一方で、抗ウイルス活性を示した。このことは、分解から保護する一方で抗ウイルス剤としてPOODNを使用できることを示している。末端でヌクレオチドを修飾し、及び/又は後に記載するような好適な送達システムを使用することによって、この保護を達成することができる。一般に、使用されるDNAの配列組成は、ランダマーであれ、ランダム配列であれ、又は特異的なHSV1配列であれ、全体としての有効性にはほとんど影響しない。しかしながら、中間の長さで、HSV1配列はランダム配列よりもほとんど3倍強力だった図10を参照のこと。このデータは、特異的なアンチセンスが特異的なHSV1に対して機能的に存在する一方で、本明細書で解明された非アンチセンスのメカニズム非配列相補的メカニズムがこの活性の優勢な部分を表してもよいことを示唆している。実際、ONが40塩基に増殖するにつれて、本質的に抗ウイルス活性はすべて非アンチセンス効果に起因しうる。低毒性ランダマーONランダマーを用いた目標の1つは、毒性を下げることである。動物では、異なる配列が、たとえば、一般毒性、血清タンパク質との相互作用及び免疫系との相互作用のような異なる応答を誘発することが知られているMonteithetalToxicolSci463653751998。従って、ONの混合物は、任意の特定の配列のレベルが極めて低いので、毒性効果を下げてもよく、だから、配列又はヌクレオチド組成による有意な相互作用はありそうにない。薬学的組成物本発明のONは、ウイルス性疾患を治療するのに又はその予防に有用な治療組成物又は製剤の形態であってもよく、ヒト又は非ヒト動物において、及び/又は特定のウイルス又はウイルス群に対して使用するために規制当局により認可されることができる。これらONは、生理学的に及び/又は薬学的に許容されるキャリアとともに組み合わせた場合、薬学的組成物の一部として使用してもよい。キャリアの特性は投与経路に依存してもよい。本発明の薬学的組成物は、そのほかの活性因子及び/又は活性を向上させる作用剤も含有してもよい。薬学的組成物又は製剤において使用される、又は動物を治療する方法を実践するために使用される本発明のONの投与は、種々の従来の方法、たとえば、眼内、経口摂取、腸内、吸入、又は皮膚、皮下、筋肉内、腹腔内、くも膜下、気管内、又は静脈内への注入において行うことができる。本発明の薬学的組成物又はオリゴヌクレオチド製剤はさらに、たとえば、限定なしで、リファンピン、リバビリン、プレコナリル、シドフォビル、アシクロビル、ペンシクロビル、ガンシクロビル、バラシクロビル、ファムシクロビル、フォスカーネット、ビダラビン、アマンタジン、ザナミビル、オセルタミビル、レスキモド、抗プロテアーゼ、HIV融合阻害剤、ヌクレオチドHIVRT阻害剤たとえば、AZT、ラミブジン、アバカビル、非ヌクレオチドHIVRT阻害剤、ドコノソル、インターフェロン類、ブチル化ヒドロキシトルエンBHT及びハイパーリシンのようなウイルス疾患の治療用化学療法剤を含有してもよい。たとえば、本発明のONとの相乗効果を生じるために、そのような追加因子及び/又は作用剤が薬学的組成物に包含されてもよい。本発明の薬学的組成物又はオリゴヌクレオチド製剤はさらに、たとえば、限定なしで、ポリ陰イオン作用剤、硫酸化多糖類、ヘパリン、硫酸デキストラン、ポリ硫酸ペントサン、硫酸ポリビニルアルコール、アセマナン、ポリヒドロキシカルボキシレート類、硫酸セルロース、スルホン化ベンゼン環又はナフタレン環を含有するポリマー類及びナフタレンスルホネートポリマー、アセチルフタロイルセルロース、ポリLリジン、カプリン酸ナトリウム、陽イオン系両親媒系物質、コール酸のようなポリマーを含有してもよい。ポリマーは場合によっては、ビリオン自体に結合する又は吸着することによって細胞におけるビリオンの侵入に影響を及ぼすことが知られている。抗ウイルス性ポリマーのこの特性は、ビリオンへの結合又は吸着についてONと競合するのに有用であることができ、その結果、細胞外活性に比べて、ONの細胞内活性が高められる。典型的な送達システム我々は、蛍光的に標識したランダマーを培養細胞にさらすことによってPSODNランダマーの取り込みをモニターし、次いで2回洗浄した後、溶解した細胞の蛍光強度を調べた。送達なし、及び以下の脂質系送達システム:リポフェクトアミン商標インビトロゲン、ポリフェクト商標キアゲン及びオリゴフェクトアミン商標インビトロゲンの1つにおいてカプセル封入した後、250nMのREP2004FLにさらした細胞への取り込みを調べた。4時間後、細胞をPBSで2回洗浄し、MPER溶解試薬プロメガを用いて溶解した。送達の有無での同一数のさらした細胞から得た相対蛍光収量を図34に示す。我々は、調べた3種の送達剤の存在下ではすべて、送達なしに比べて、細胞内のPSODNの有意な上昇があったことを認めている。試験結果と一致して、送達システムはONランダマーの抗ウイルス効能を有意に高めることができる。さらに、それらはこれらの化合物を血清との相互作用から保護するように作用し、副作用を減らし、且つ組織及び細胞の分布を最大化する。PSODNは、天然のホスホジエステルよりも内因性のヌクレアーゼに耐性ではあるが、完全には安定ではなく、血液及び組織で緩やかに分解される。PSオリゴヌクレオチド薬剤の臨床応用における限界は、iv投与において補体を活性化するというその性向である。一般に、リポソーム及びそのほかの送達システムは、毒性を減らし、血漿中での停留時間を増やし、超透過性脈管構造を介したキャリアの管外遊出により疾患組織にさらに活性の高い薬剤を送達することによって、ONを含む薬剤の治療指数を高める。さらに、PSODNの場合は、脂質のカプセル封入が、循環している間、可能性のあるタンパク質結合部位との相互作用を妨げるKlimuketalJPharmacolExpTher2924804882000。本明細書に記載される結果に従って、アプローチは、たとえば、しかし、制約なしで、本明細書に記載されるようなON送達のための親油性分子、極性脂質、リポソーム、単層、二重層、小胞、プログラム可能な膜融合性の小胞、ミセル、シクロデキストリン、PEG、イオン導入、粉末注入、及びナノ粒子たとえば、PIBCA、PIHCA、PHCA、ゼラチン、PEGPLAのような送達システムの使用である。そのような送達システムを使用する目的は、とりわけ、動物及びヒトにおいて活性化合物の毒性を低下させ、細胞への送達を高め、IC50を下げ、薬剤送達の見地から作用の持続時間を増やし、且つ血清タンパク質との非特異的結合からオリゴヌクレオチドを保護することである。我々は、PSODNランダマーの抗ウイルス活性はサイズの増加と共に上昇することを示してきた。さらに、この活性は、ウイルスタンパク質ウイルス溶解物中のへの親和性の増加と相関している。ホスホロチオエート修飾は、タンパク質DNA相互作用の親和性を高めることが当該技術で周知であるので、我々は、ウイルス溶解物との相互作用を測定するのに用いたのと同じFP系アッセイを用いて、次第に大きくなるPSODNランダマーのウシ胎児血清FBSに結合する能力を調べた図28a。このアッセイでは、結合mP値が飽和する条件下で250μgの熱非働化していないFBSが蛍光的に標識した20塩基のPSODNランダマーと複合体形成した。サイズが大きくなっていく非標識PSODNREP2003、REP2004、REP2006及びREP2007を用いて、標識したベイトbaitとFBSとの相互作用に競合させた。この試験の結果は、PSODNランダマーのサイズが大きくなるにつれて、FBSへの親和性も大きくなることを明瞭に示している。この結果は、最も活性の高い抗ウイルス性PSODNは、最も高い親和性データンパク質に結合するものであることを示唆している。ホスホロチオエートアンチセンスオリゴヌクレオチドの主な治療上の問題の1つは、Kandimalla及び共同研究者らにより記載されたように、主としてタンパク質具体的には血清タンパク質との高い相互作用による副作用であることが当該技術で知られているKandimallaetalBioorgMedChemLett8210321081998。我々のデータは、血清タンパク質との相互作用を妨げながら、抗ウイルス性ONを細胞に送達可能な好適な送達システムによる実質的な利益を示唆している。送達システムの利益を明らかにするために、我々は、リポソーム系の2つの異なる送達技術:サイトフェクチン及びDOTAPを試した。我々は、蛍光分光法により標識されたREP2006の細胞内濃度を測定することにより、高濃度50の血清の存在下、PSODNランダマーREP2006サイトフェクチン又はDOTAPのいずれかでカプセル封入されているの293A細胞への送達を測定した図28b、cを参照のこと。これらの結果は、送達により、REP2006の細胞内濃度が高まり、DOTAPの場合、24時間後の細胞内REP2006のレベルは、顕著に増加したことを示している。最後に、我々は、我々のインビトロFP系相互作用アッセイにおいてDOTAP28d及びサイトフェクチン28eによるREP2006の血清タンパク質相互作用からの保護を測定した。カプセル封入していないREP2006は、血清由来の結合した蛍光オリゴと競合することができたが、REP2006をDOTAP又はサイトフェクチンのいずれかでカプセル封入するとそれは血清の結合に対してもはや競合することはできなかった。これらのデータは、カプセル封入がオリゴを血清との相互作用から保護し、さらに少ない副作用でさらに有効な治療効果を生じることを示唆している。送達システムを使用することにおけるもう1つの可能性のある利益は、ビリオンの細胞侵入の増加のような異なるメカニズムを介してウイルス感染の増幅を妨げるために、吸着のような、感染性ビリオンとの相互作用からONを保護することである。もう1つのアプローチは、特異的な細胞との親和性を高める分子に送達システムを会合させることによって細胞特異的な送達を達成することであり、そのような分子は、制約なしで、抗体、受容体、リガンド、ビタミン、ホルモン及びペプチドである。送達システムに関する追加の選択肢は以下に提供される。連結されたODN特定の態様では、本発明のONは、ウイルス複製を阻害するというそれらの能力を危うくすることなく、多数の方法で修飾される。たとえば、ONは1以上のそのヌクレオチド残基にてもう1つの部分と連結されるか、又は共役される。従って、本発明のオリゴヌクレオチドの修飾は、活性を高める、細胞の分布及び細胞の取り込みを高める、特異的に又は非特異的に細胞膜を透過する輸送を増やす、又は分解若しくは排泄に対して保護する、又は有利な特性を提供する1以上の部分又は抱合体にオリゴヌクレオチドを化学的に連結することを含むことができる。そのような有利な特性には、たとえば、さらに低い血清相互作用、さらに高いウイルスタンパク質相互作用、送達用に配合される能力、検出可能なシグナル、改善された薬物動態特性、及びさらに低い毒性が挙げられる。そのような共役基は第1級又は第2級のヒドロキシル基のような官能基と共有結合することができる。たとえば、共役部分には、ステロイド分子、非芳香族親油性分子、ペプチド、コレステロール、ビスコレステロール、抗体、PEG、タンパク質、水溶性ビタミン、脂溶性ビタミン、もう1つのON、又はONの活性及び/又は生物利用性を改善するそのほかの任意の分子を挙げることができる。さらに詳細には、本発明の典型的な共役基には、干渉物質、リポータ分子、ポリアミン、ポリアミド、ポリエチレングリコール、ポリエーテル、SATE、TブチルSATE、オリゴマーの薬力学的特性を高める基、及びオリゴマーの薬物動態特性を高める基を挙げることができる。典型的な共役基には、コレステロール類、脂質、リン脂質、ビオチン、フェナジン、葉酸塩、フェナントリジン、アントラキノン、アクリジン、フルオレセイン類、ローダミン類、クマリン類、蛍光ヌクレオ塩基及び染料を挙げることができる。本発明に関連して、薬力学的特性を高める基には、オリゴマーの細胞への取り込みを高める基及び/又はオリゴマーの分解耐性を高める基及び/又は血清の相互作用に対して保護する基が挙げられる。本発明に関連して、薬物動態特性を高める基には、オリゴマーの取り込み、分布、代謝又は排泄を改善する基が挙げられる。典型的な共役基は1992年10月23日に出願され、参考として本明細書に組み入れられる国際特許出願PCTUS9209196号に記載されている。共役部分には、たとえば、コレステロール部分LetsingeretalProcNatlAcadSciUSA86655365561989、コール酸ManoharanetalBioorgMedChemLet4105310601994、チオエーテル、たとえば、ヘキシルSトリチルチオールManoharanetalAnnNYAcadSci6603063091992、ManoharanetalBioorgMedChemLet3276527701993、チオコレステロールOberhauseretalNuclAcidsRes205335381992、脂肪族鎖、たとえば、ドデカジオール若しくはウンデシル残基SaisonBehmoarasetalEMBOJ10111111181991、KabanovetalFEBSLett2593273301990、SvinarchuketalBiochimie7549541993、リン脂質、たとえば、ジヘキサデシルracグリセロール又はトリエチルアンモニウム12ジoヘキサデシルracグリセロ3HホスホネートManoharanetalTetrahedronLett36365136541995SheaetalNuclAcidsRes18377737831990、ポリアミン若しくはポリエチレングリコール鎖ManoharanetalNucleosidesNucleotides149699731995、又はアダマンタン酢酸ManoharanetalTetrahedronLett36365136541995、パールミチル部分MishraetalBiochimBiophysActa12642292371995、又はオクタデシルアミン若しくはヘキシルアミノカルボニルオキシコレステロール部分CrookeetalJPharmacolExpTher2779239371996のような脂質部分が挙げられるが、これらに限定されない。本オリゴヌクレオチドは、たとえば、限定することなく、アスピリン、ワルファリン、フェニルブタゾン、イブプロフェン、スプロフェン、フェンブフェン、ケトプロフェン、プラノプロフェン、カルプロフェン、ダンシルサルコシン、235トリオド安息香酸、フルフェナム酸、フォリン酸、ベンゾチアジアジド、クロロチアジド、ジアゼピン、インドメタシン、バルビツール酸塩、セファロプロリン、サルファ剤、抗糖尿病剤、抗菌剤又は抗生剤のような活性のある薬剤物質に共役してもよい。典型的なオリゴヌクレオチド抱合体の調製を記載する典型的な米国特許には、たとえば、が挙げられ、それぞれ参考としてその全体を本明細書に組み入れる。もう1つのアプローチは、たとえば、sアセチルチオエチル又はsピバシロイルチオエチルのような酵素的に切断可能な、電荷を中和する付加体による修飾によって親油性プロオリゴヌクレオチドのような抗ウイルス性ONを調製することであるVivesetalNuclAcidsRes27407140761999。そのような修飾は、ONの細胞への取り込みを高めることが示されている。非特異的ONの設計もう1つのアプローチにおいて、ヒト又はそのほかの対象生物のゲノムに対して低い、好ましくはできれば最低の相同性を示す抗ウイルス性ONを設計する。目標は、ヒト又は動物のゲノム配列及びmRNAとの相互作用による毒性が最低を示すONを得ることである。第1工程は、たとえば、手動で、又はさらに通例ではコンピュータプログラムを用いて、無作為方式にてヌクレオチド、A、C、G、Tを並べることにより、ONの所望の長さの配列を製造する。第2の工程は、GenBank及び/又はアンサンブルヒューマンゲノムデータベースのようなヒト配列のライブラリとONの配列を比較する。所望であれば、配列の生成及び比較を繰り返して行い、対象ゲノムとの所望の低い相同性を有する配列を同定することができる。望ましくは、ONの配列は、ゲノム全体とのできるだけ最低の相同性であり、一方、好ましくは自己相互反応をできるだけ抑える。アンチセンス活性を持つ非特異的ONもう1つのアプローチでは、抗ウイルス性の非特異的配列部分をアンチセンス配列部分に結合して最終的なONの活性を高める。ONの非特異的部分は本発明に記載されている。アンチセンス部分はウイルスmRNAに相補的である。Gリッチモチーフ活性を持つ非特異的ONもう1つのアプローチでは、抗ウイルス性の非特異的配列部分を、最終的なONの活性を改善するモチーフ部分に結合させる。ONの非特異的部分は本発明に記載されている。モチーフ部分は、非限定例として、免疫系の刺激剤として文献に記載されているCpG、Gカルテット、及び/又はCGを挙げることができる。AgrawaletalCurrCancerDrugTargets31972092001。非ワトソンクリックONもう1つのアプローチは、1以上の種類の非ワトソンクリック型ヌクレオチド/ヌクレオシドから構成されるONを使用することである。そのようなONは、PSODNに類似する以下の特性の一部を持つPSODNを模倣することができる:a全体の変化;b単位間の空間;c鎖の長さ;d一方の側での負の電荷の蓄積による正味の双極子;eタンパク質に結合する能力;fウイルスタンパク質に結合する能力;g細胞に侵入する能力;h許容される治療指数、i抗ウイルス活性。ONは好ましいホスホロチオエートの主鎖を有するが、それに限定されない。非ワトソンクリック型ヌクレオチド/ヌクレオシドの例は、KoolAccChemRes359369432002及び合成の脱塩基部位を含有するONを記載しているTakeshitaetalJBiolChem26210171101791987に記載されている。抗ウイルス性ポリマーもう1つのアプローチは、ホスホロチオエートODNの活性を模倣するポリマーを使用することである。文献に記載されているように、幾つかの陰イオン性ポリマーは抗ウイルス性の阻害活性を有することが示された。これらのポリマーは幾つかのクラスに属する:1多糖類の硫酸エステルデキストリン及び硫酸デキストラン;硫酸セルロース;2スルホン化されたベンゼン環又はナフタレン環を含有するポリマー及びスルホン酸ナフタレンポリマー;3ポリカルボキシレートアクリル酸ポリマー;及びアセチルフタロイルセルロースNeurathetalBMCInfectDis2272002及び4脱塩基オリゴヌクレオチドTakeshitaetalJBiolChem26210171101791987。非ヌクレオチドの抗ウイルス性ポリマーのそのほかの例は文献に記載されている。本明細書に記載されるポリマーは、本明細書に記載されるPSODNを模倣し、PSODNに類似する以下の特性を有する:a鎖の長さ;b一方の側での負の電荷の蓄積による正味の双極子;cタンパク質に結合する能力;dウイルスタンパク質に結合する能力;e許容される治療指数、f抗ウイルス活性。PSODNの効果を模倣するために、抗ウイルス性ポリマーは好ましくは、PSODNに比較されるように、その単位間で類似の空間を示すポリ陰イオンであってもよい。それは、単独で又は送達システムと組み合わせて、細胞に侵入する能力を有してもよい。二本鎖PSODNの抗ウイルス活性ランダム配列及びその相補体PSが修飾されている又はされていないのいずれかをどこかに記載したように蛍光で標識し、本発明に記載しているように蛍光分極により精製したHSV1及びHIV1に結合する能力を調べる。アクリルアミドゲル電気泳動により、ハイブリッド形成を検証した。修飾していないREP20172017Uは一本鎖ss又は二本鎖dsのいずれもHSV1又はHIV1の溶解物における結合活性を有さなかった。しかしながら、PS修飾したREP2017は、一本鎖又は二本鎖のいずれかでHSV1及びHIV1との相互作用が可能であった図33を参照のこと。本明細書で記載される我々の結果に従って、アプローチは有効な抗ウイルス剤として二本鎖ONを使用することである。好ましくは、そのようなONは、ホスホロチオエート主鎖を有するが、本明細書で一本鎖ONについて記載されるようなその送達及び/又は抗ウイルス活性及び/又は安定性を高めるそのほかの及び/又は修飾も有してもよい。創薬のためのインビトロアッセイ蛍光分極に基づいてインビトロアッセイを開発し、PSODNのウイルス構成成分、たとえば、ウイルスタンパク質に結合する能力を測定する。タンパク質又はもう1つの相互作用因子が蛍光的に標識されたベイトに結合すると、溶液中でベイトの三次元のタンブリングが遅れる。標識されたベイトに由来する励起された光の分極における固有の上昇によってこのタンブリングの遅延を測定する。従って、上昇した分極大きさのない測定値[mP]として報告されるは増加した結合に相関する。方法論の1つは、自由度のないリンカー36フルオレセインCPGを用いて、3でFITC標識したPSODNランダマーをベイトとして用いることである。このPSODNランダマーをアッセイ緩衝液10mMのトリス、pH72、80mMのNaCl、10mMのEDTA、100mMのbメルカプトエタノール及び1ツイーン20で2nMに希釈する。次いで、このオリゴを適当な相互作用因子と混合する。この場合、我々は、05MのKCl及び05トリトンX100HSV1及びHIV1又は10mMのトリス、pH75、150mMのNaCl、1mMのEDTA及び01のトリトンX100RSVに懸濁した、スクロース勾配で精製した、HSV1Maclntyre株、HIV1Mn株又はRSVA2株の溶解物を用いる。ベイトとの相互作用に続いて、種々の非標識のPSODNを複合体に暴露して、その複合体からベイトを置き換える能力を評価する。図29では、我々は、3種類の異なるサイズ:6塩基REP2032FL、10塩基REP2003FL及び20塩基REP2004FLのベイトによる予備試験を示す。HSV1図29a、HIV1図29b及びRSV図29cの溶解物と相互作用する能力についてこれらのベイトを調べた。ウイルス溶解物いずれかの存在下で、結合の程度は使用したベイトのサイズに依存し、ウイルス溶解物の存在下で2004FLがmP結合における最も大きなシフトを示した。我々は、このことがPSODNランダマーのサイズ依存性の抗ウイルス有効性に類似することに気付いている。次いで、このベイトを用いて、異なるサイズのPSODNの溶解物とベイトの相互作用に競合する能力を調べた。図30では、HSV1図30a、HIV1図30b及びRSV図30cの溶解物とREP2004FLとの相互作用に漸増サイズのPSODNを暴露する。調べた各ウイルス溶解物について、我々は、REP2003が溶解物から離れてベイトと競合できないことに気付いている。REP2004非標識ベイト競合物により引き出される相対的に弱い競合により示されるようにベイトの相互作用は極めて強かった。しかしながら、競合物PSODNのサイズが20塩基を超えて増えるにつれて、ベイトに取って代わるその能力がさらに強くなることが観察された。このことは、PSODNランダマーのサイズが増えるにつれて、ウイルス溶解物中のタンパク質構成成分への親和性が増すことを示している。この現象は、HSV1、HSV2、CMV、HIV1及びRSVに対するさらに大きなPSODNランダマーの上昇した抗ウイルス活性を映している。ベイト競合におけるPSODNランダマーの有効性及びPSODNランダマーの抗ウイルス活性の間の類似性は、このアッセイパラダイムが抗ウイルス活性の良好な予告者であることを示している。このアッセイは行うのに強力で且つ容易であり、極めて安定であり、特異的な標的の同定に基づかないが1以上の構成成分、たとえば、ウイルスタンパク質と相互作用する能力にもとづいて新規の抗ウイルス性分子を同定するために、高い処理能力のスクリーニングを行う上で良好な候補になっている。所望の供給源、たとえば、コンビナトリアルケミストリにより合成された又は天然物質の精製により単離されたライブラリから新規の化合物をスクリーニングするのに、本明細書に記載された方法を使用する。それを、a新規のONの適当なサイズ、修飾及び主鎖を決定するのに;b新規のポリマーを含む新規の分子を調べるのに;c新規のON又は新規の化合物に対する特定のウイルスの感受性を予測するのに;又はd特定のウイルスを最大限阻害するための一揃いの化合物を決定するのに用いられる。大きなサイズのPSODNランダマーとの溶解物の大きな親和性は、PSODNランダマーの作用の抗ウイルスメカニズムが、ビリオンの感染又は複製の修正のいずれかを妨げる1以上のウイルスタンパク質構成成分との相互作用に基づくことを示唆している。それはまた、この相互作用が、電荷サイズ依存性であり、配列に依存していないことを示唆している。これらPSODNランダマーは、幾つかの異なるファミリーにまたがって複数のウイルスにわたってサイズ依存性の活性を有するので、我々は、PSODNは、共通する、電荷依存性のタンパク質タンパク質相互作用、タンパク質DNARNA相互作用及び/又は分子分子相互作用を妨害することを示唆している。これらの相互作用には以下を挙げることができるこれらに限定されない。aカプシド形成中の個々のカプシドサブユニット間の相互作用bカプシド/ヌクレオカプシドタンパク質とウイルスゲノムとの間の相互作用c出芽中のカプシドと糖タンパク質との間の相互作用d感染中の糖タンパク質と受容体との間の相互作用eウイルス複製に関与するそのほかの鍵となるウイルス構成成分間の相互作用タンパク質タンパク質相互作用のこれら複数の同時阻害剤は、抗ウイルス性の阻害の新規のメカニズムを代表する。溶解物に対するPSODNの配列組成の効果我々は、異なる配列のPSODNの幾つかのウイルス溶解物と相互作用する能力をモニターした。各場合において、本明細書において前に記載したように20量体のPSODNを3’末端にてFITCで標識する。調べたPSODNは、A20、G20、T20、C20、AC10、AG10、TC10、TG10、REP2004及びREP2017から成った。これら配列のそれぞれをアッセイ緩衝液で4nMに希釈し1μgのHSV1、HIV1又はRSVの溶解物の存在下インキュベートした。蛍光分極によって相互作用を測定した。調べた配列すべてとの相互作用の特性がウイルス溶解物すべてで似ているということは、結合相互作用の性質は極めて類似していることを示している。均一な組成のPSODNA20、G20、T20、C20は各溶解物との最も弱い相互作用因子であり、A20は有意な余裕をもってこれらの中で最も弱い相互作用因子であった。調べた残りのPSODNについては、各溶解物と一貫して最大の相互作用を示したTG10を除いて、すべて類似した強い相互作用を示した図35を参照のこと。HIV1におけるPSODNランダマーの標的同定実施例9に記載するように、蛍光分極によって、PSODNランダマーの精製したHIV1タンパク質に結合する能力を調べた。漸増量の精製したHIV1p24又は精製HIV1gp41がREP2004FLと反応した図31を参照のこと。我々は、これら双方のタンパク質について、蛍光分極においてタンパク質の濃度依存性のシフトがあるということが、これら双方のタンパク質の相互作用を指してることに気付いている。REP2032、REP2003、REP2004、REP2006、及びREP2007の蛍光型を用いて、これらのタンパク質に結合するPSODNのサイズ範囲の能力を調べた図32を参照。我々は、p24について、p24とのサイズ依存性の相互作用がないことは観察したが図32aを参照のこと20塩基未満に比べて20塩基を超えるPSODNにおいてgp41の結合の増加を見た図32bを参照のこと。このことは、PSODNの長さが20塩基を超えて増えると、複数コピのgp41が個々のランダマーに結合してその分極を増やしうることを示唆している。このことは、それが、ウイルス合成の間構造タンパク質を隔離するさらに大きなONの能力を明らかにし、新しいビリオン形成への利用性を限定しているので、有意な所見である。高親和性のオリゴヌクレオチドもう1つのアプローチは、ウイルスタンパク質のようなウイルス構成成分に対する、ONの標準プールにおける平均親和性よりも高い親和性を有するONを濃縮する又は精製する方法である。従って、方法は1以上のウイルス構成成分に対する高い親和性を示し、たとえば、そのように高い結合親和性に寄与する三次元形状を有する1以上の非配列相補的ONを提供する。理論的根拠は、ONがウイルス構成成分との結合で直鎖分子として作用する一方でそのようなウイルス構成成分との相互作用を高める三次元形状にも折り畳むことができるということである。特定の技術に限定することなく、以下の方法によって高い親和性のONを精製又は濃縮することができる。高い親和性のON又は複数の高い親和性のONを精製する方法の1つは、ONを結合する親和性マトリクスとしてウイルスタンパク質を結合させた固定相媒体を用い、次いで、漸増する厳密性条件下たとえば、漸増する濃度の塩又はそのほかのカオトロピック剤、及び/又は漸増する温度及び/又はpHの変化でそれを溶出することができる。そのような方法はたとえば、以下によって行うことができる。a固定相に結合したウイルスタンパク質又は数種のウイルスタンパク質又はウイルス溶解物を有する交換カラムにONのプールを装填すること;bたとえば、漸増する塩溶液のような置換剤溶液を使用することによってカラムから結合したONを置換すること溶出すること;c異なる塩濃度で溶出されたONの分画を回収すること;d高い塩濃度で溶出されたONがウイルスタンパク質との高い親和性を有するように、異なる分画から、さらに好ましくは高い塩濃度の分画から溶出されたONをクローニングし、配列決定すること;及びe結合アッセイ及び/又はウイルス阻害アッセイ、たとえば本明細書で記載されたような蛍光分極結合アッセイ及び/又は細胞ウイルス阻害アッセイ及び/又は動物ウイルス阻害アッセイにおいて配列決定されたONの活性を調べること。第2の例では、SELEX方法論MorrisetalBiochemistry95290229071998に由来する及びそれから改変された方法を用いて、高い親和性のONを精製することができる。そのような方法の実施の1つは以下のように行うことができる。aたとえば1014~1016の異なる配列のような膨大な数の配列を含有する合成ランダムONの集団であるONの出発プールを提供すること。各ON分子は、各末端でのプライマ結合配列に隣接してランダム配列の断片を含有してポリメラーゼ鎖反応PCRを促進する。本質的にすべての分子のヌクレオチド配列が固有なので、集団では膨大な数の構造が試料採取される。これらの構造が、たとえば、所定のウイルス標的分子に結合する能力のような各分子の生化学的特性を決定する;bウイルスタンパク質又は数種のウイルスタンパク質又はウイルス溶解物にONを接触させること;cたとえば、元々のゲルシフト及びニトロセルロースろ過のような、結合したONと結合しないONを区分化することができる区分化技術を用いて、ウイルスタンパク質に結合したONを選択すること。これらの方法のいずれかが結合していない種から結合した種を物理的に分離し、最も結合した配列を優先的に回収することができる。また、小さなタンパク質に結合するONを選択するには、標的を固相支持体に結合させ、親和性精製マトリクスとしてその支持体を用いることが望ましい。結合しないそれらの分子は洗い流され、結合したものは遊離した標的とともに溶出され、再び、結合した種と結合しない種を物理的に分離する。dONの隣接配列とハイブリッド形成するプライマを用いたPCRを用いて、溶出された結合ONを増幅すること;eウイルスタンパク質への最高の結合親和性を示すONを優先的に回収するために、工程b、c及びdを複数回すなわち、複数サイクル又は複数回の濃縮及び増幅繰り返す。数サイクルの濃縮及び増幅の後、集団では所望の生化学的特性を示す配列が優勢である:f濃縮サイクル、たとえば、最後のサイクルから選択した1以上のONをクローニングし、配列決定すること;及びgアッセイ、たとえば本明細書で記載されたような蛍光分極結合アッセイ及び/又は細胞ウイルス阻害アッセイ及び/又は動物ウイルス阻害アッセイにおいて配列決定されたONの結合及び/又は活性を調べること。もう1つのアプローチは、スプリット合成方法論の修飾を適用して、YangetalNuclAcidsRes30182002に記載されているように1ビーズ1PSODN及び1ビーズ1PS2ODNを創製する。ウイルスタンパク質への特異的なビーズの結合及び選択を行うことができる。選択されたビーズのPCRに基づいた同定タグを用いて、双方の核酸塩基の配列決定及びチオエート/ジチオエート結合の位置決めを行うことができる。このアプローチによって、ウイルスタンパク質に結合する強力な抗ウイルス特性を呈するPSODN又はPS2ODNの同定を迅速に且つ都合よく行うことができる。ウイルスタンパク質に結合する高親和性の具体的配列がいったん決定されるとたとえば、個々の増幅及び配列決定によって1以上のそのような高親和性の配列を選択し、合成してたとえば、化学合成又は酵素的合成のいずれか、薬物動態特性を改善することを含む活性を改善するために修飾されうる高親和性ONの調製を提供する。そのような高親和性ONを本発明では使用することができる。プリオン病もう1つのアプローチは、プリオン病の治療、進行の制御又は予防のための本発明の別の態様で使用される。この致死的神経変性疾患は感染性であり、ヒト及び動物の双方を冒す。細胞性プリオンタンパク質、PrPCのスクレイピーアイソフォーム、PrPSCへの構造変化がプリオン病の発症及び進行の必須段階であるとみなされている。プリオン病の神経病理学にはアミロイドポリマーが関係している。プリオンタンパク質断片と二本鎖核酸とのインキュベートの結果、アミロイド線維形成物を生じるNandietalJMolBiol3221531612002。ホスホロチオエート類のようにタンパク質に親和性を有するONは、二本鎖核酸とPrPCとの相互作用と競合させる又はそれを阻害するのに使用され、その結果、アミロイドポリマー形成物を止める。異なるサイズ及び異なる組成のそのようなONを適当な送達形態で用いて、プリオン病に罹った患者を治療することができ、又はリスクの高い状況を予防することができる。そのような干渉するONは、試験ONの存在下で、Nandietal前記により記載されたように、アミロイドポリマーの折り畳み変化を測定することによって同定することができる。想定されるウイルスの病因もう1つのアプローチは、以下の例で限定することなく記載されるように、想定されるウイルス病因のある疾患又は症状の治療又は予防のための本発明のもう1つの態様で使用される。ウイルスは、ウイルスの一次感染に関係のない疾患及び症状において推定上の原因物質である。たとえば、関節炎はHCVOlivierietalRheumDisClinNorthAm291111222003、パルボウイルスB19、HIV、HSV、CMV、EBV及びVZVStahletalClinRheumatol192812862000に関係している。そのほかのウイルスも様々な疾患において役目を担っているとして同定されている。たとえば、パーキンソン病におけるインフルエンザATakahashietalJpnJInfectDis5289981999、多発性硬化症におけるコロナウイルス、EBV及びそのほかのウイルスTalbotetalCurrTopMicrobiolImmunol253247712001、慢性疲労症候群におけるEBV、CMV及びHSV6LerneretalDrugsToday385495612002、喘息WalteretalJClinInvest1101651752002及びパージェット病におけるパラミクソウイルス、及びGuillainBarre症候群におけるHBV、HSV及びインフルエンザ。これらの病因のために、本発明を用いた関連するウイルスの阻害は、相当する疾患若しくは症状、又は疾患の少なくとも症状の一部の進展を遅延させる、減速させる又は防ぐことができる。オリゴヌクレオチドの修飾及び合成上記の要約で示したように、修飾したオリゴヌクレオチドは本発明で有用である。そのような修飾されたオリゴヌクレオチドには、たとえば、修飾した主鎖又は非天然のヌクレオシド間結合を含有するオリゴヌクレオチドが挙げられる。修飾した主鎖を有するオリゴヌクレオチドには、主鎖にリン原子を保持するもの及び主鎖にリン原子を有さないものが挙げられる。そのような修飾されたオリゴヌクレオチドの主鎖には、たとえば、ホスホロチオエート類、キラルホスホロチオエート類、ホスホロジチオエート類、ホスホトリエステル類、アミノアルキルホスホトリエステル類、3アルキレンホスホネート類、5アルキレンホスホネート類及びキラルホスホネート類を含むメチル又はそのほかのアルキルホスホネート類、ホスフィネート類、3アミノホスホロアミダイト及びアミノアルキルホスホロアミダイトを含むホスホロアミダイト類、チオノホスホロアミダイト類、チオノアルキルホスホネート類、チオノアルキルホスホトリエステル類、セレノホスフェート類、カルバラニルホスフェート通常の35結合を有するボラノホスフェート類、25結合したこれらの類縁体、並びに1以上のヌクレオチド間結合が、3~3、5~5又は2~2の結合である反転した極性を有するものが挙げられる。反転した極性を有するオリゴヌクレオチドには通常、3のほとんどのヌクレオチド間結合で単一の3~3結合、すなわち、脱塩基ヌクレオ塩基を失っている又はそれに代わってヒドロキシル基を有するである単一の反転ヌクレオシド残基が挙げられる。種々の塩、混合塩及び遊離の酸の形態も挙げられる。上記で示されるようなリンを含有する結合を持つオリゴヌクレオチドは、たとえば、に記載されており、参考としてその全体を本明細書に組み入れる。リン原子を包含しない一部の典型的なオリゴヌクレオチドの主鎖は、短鎖アルキル又はシクロアルキルヌクレオチド間結合、混合へテロ原子及びアルキル又はシクロアルキルヌクレオチド間結合、又は1以上の短鎖へテロ原子の又は複素環のヌクレオチド間結合により形成される主鎖を有する。これらには、モルホリノ結合ヌクレオシドの糖部分から一部が形成される、シロキサン主鎖、硫化物、スルホキシド及びスルホンの主鎖;ホルムアセチル及びチオホルムアセチルの主鎖;メチレンホルムアセチル及びチオホルムアセチルの主鎖;リボセチル主鎖;アルケン含有主鎖;スルファメート主鎖;メチレンイミノ及びメチレンヒドラジノ主鎖;スルホネート及びスルホンアミド主鎖;アミド主鎖;及び混合されたN、O、S及びCH2の成分部分を有するそのほかのものを有するものが挙げられる。特に有利なのは、1以上の荷電された部分を包含する主鎖結合である。先行するオリゴヌクレオチドの調製を記載する米国特許の例には、が挙げられ、それぞれ参考としてその全体を本明細書に組み入れる。修飾されたオリゴヌクレオチドは1以上の置換された糖部分も含有してもよい。たとえば、そのようなオリゴヌクレオチドは、以下の2修飾:OH;F;O、S、又はNアルキル;O、S、又はNアルケニル;O、S、又はNアルキニル;又はOアルキルOアルキルの1つを包含することができ、その際、アルキル、アルケニル及びアルキニルは、置換された又は置換されないC1~C10のアルキル又はC2~C10のアルケニル及びアルキニル、あるいは2ooカルボラン1イルメチルであってもよい。特定の例は、OnOmCH3、OOCH3、OnNH2、OnCH3、OnONH2及びOnONCH2nCH32であり、その際、n及びmは1~10である。そのほかの典型的なオリゴヌクレオチドは、以下の2修飾:C1~C10の低級アルキル、置換低級アルキル、アルケニル、アルキニル、アルカリル、アラルキル、Oアルカリル又はOアラルキル、SH、SCH3、OCN、Cl、Br、CN、CF3、OCF3、SOCH3、SO2CH3、ONO2、NO2、N3、NH2、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルカリル、アミノアルキルアミノ、ポリアルキルアミノ、置換シリル、リポータ基、干渉物質、オリゴヌクレオチドの薬物動態特性を改善するための基、又はオリゴヌクレオチドの薬力学的特性を改善するための基の1つを包含する。例には、2メトキシエトキシ2O又は2MOEとしても知られる2OCH2CH2OCH3、すなわち、アルコキシアルコキシ基;2ジメチルアミノキシエトキシ、すなわち、2DMAOEとしても知られるO2ON2基;及び2ジメチルアミノエトキシエトキシ2Oジメチルアミノエトキシエチル又は2DMAEOEとしても知られるすなわち、2OCH2OCH2N2が含まれる。そのほかの修飾には、2ヒドロキシ基が糖環の3又は4の炭素に結合し、それによって二環式糖部分を形成するロックされた核酸LNAが挙げられる。結合は、2の酸素原子と4の炭素原子を架橋するメチレン基であることができ、その際、nは1又は2である。LNA及びその調製は、国際公開公報第9839352号及び同第9914226号に記載されており、参考としてその全体を本明細書に組み入れる。そのほかの修飾には、OrumetalCurrOpinMolTher32392432001に記載されているようなロックされた核酸のようなイオウ窒素架橋修飾が挙げられる。そのほかの修飾には、2メトキシ、2メトキシエチル、2アミノプロポキシ、2アリル、2Oアリル及び2フルオロが挙げられる。2修飾は、アラビノ位上であっても、リボ下位であってもよい。類似の修飾をオリゴヌクレオチドの他の位置で行ってもよく、特に3末端ヌクレオチド上の糖の3位又は25結合オリゴヌクレオチドで、及び5末端ヌクレオチドの5位で行ってもよい。オリゴヌクレオチドは、ペントフラノシル糖の代わりにシクロブチル部分として糖模倣体を有してもよい。そのような修飾された糖構造の調製を記載する典型的な米国特許には、たとえば、が挙げられる。さらにそのほかの修飾には、リンカーで連結された複数のオリゴヌクレオチドから成るONコンカテマーが挙げられる。リンカーはたとえば、修飾されたヌクレオチド及び非ヌクレオチド単位から成ってもよい。場合によっては、リンカーはONコンカテマーに自由度を提供する。そのようなONコンカテマーの使用は、さらに小さなオリゴヌクレオチド基礎単位を連結して所望の長さを得ることにより最終分子を合成する容易な方法を提供することができる。たとえば12個の炭素のリンカーC12ホスホロアミダイトを用いて2以上のONコンカテマーを連結し、長さ、安定性及び自由度を提供する。本明細書で使用されるとき、未修飾の又は天然の塩基ヌクレオ塩基には、プリン塩基のアデニンA及びグアニンG並びにピリミジン塩基のチミンT、シトシンC及びウラシルUが包含される。オリゴヌクレオチドは、塩基修飾又は塩基置換も包含してもよい。修飾された塩基は、5メチルシトシン5meC、5ヒドロキシメチルシトシン、キサンチン、ヒポキサンチン、2アミノアデニン、アデニン及びグアニンの6メチル及びそのほかのアルキル誘導体、アデニン及びグアニンの2プロピル及びそのほかのアルキル誘導体、2チオウラシル、2チオチミン及び2チオシトシン、5ハロウラシル及びシトシン、5プロピニルC≡CCH3ウラシル及びシトシン及びピリミジン塩基のそのほかのアルキル誘導体、6アゾウラシル、シトシン及びチミン、5ウラシル偽ウラシル、4チオウラシル、8ハロ、8アミノ、8チオール、8チオアルキル、8ヒドロキシル及びそのほかの8置換されたアデニン及びグアニン、5ハロ、特に、5ブロモ、5トリフルオロメチル及びそのほかの5置換されたウラシル及びシトシン、7メチルグアニン及び7メチルアデニン、2Fアデニン、2アミノアデニン、8アザグアニン及び8アザアデニン、7デアザグアニン及び7デアザアデニン及び3デアザグアニン及び3デアザアデニンのような合成塩基及び天然塩基を包含してもよい。追加の修飾された塩基には、フェノキサジンシチジンオン、フェノチアジンシチジンオン、置換されたフェノキサジンシチジンたとえば、9Hピリミド54b14ベンゾキサジン2オン、カルバゾールシチジン、ピリドインドールシチジンのようなGクランプのような三環式ピリミジン類が挙げられる。修飾された塩基にはプリン又はピリミジンが、たとえば、7デアザアデニン、7デアザグアノシン、2アミノピリジン及び2ピリドンのようなそのほかの複素環で置き換えたものを挙げてもよい。さらなるヌクレオチドには、米国特許第3687808号に記載されたもの、ポリマー科学および技術のコンサイス百科事典TheConciseEncyclopediaOfPolymerScienceAndEngineeringp858859KroschwitzJIedJohnWileySons1990に記載されているもの、EnglischetalAngewandteChemieInternationalEdition306131991に記載されるもの、及びアンチセンス研究と応用AntisenseResearchandApplications15章SanghviYSp289302CrookeSTandLebleuBedCRCPress1993に記載されているものが挙げられる。もう1つの修飾には、ホスホロジチオエート結合が挙げられる。ホスホロジチオエートODNPS2ODN及びPSODNがタンパク質に対して類似の結合親和性を有することTonkinsonetalAntisenseResDev42692781994ChengetalJMolRecogn101011071997は知っているが、及びODNの作用の可能性のあるメカニズムがウイルスタンパク質に結合することであるのは知っているが、本発明で記載される抗ウイルス性ODNにホスホロジチオエートを包含することが望ましい。ODNを修飾するもう1つのアプローチは、YuetalBioorgMedChem82752842000及びInagawaetalFEBSLett2548522002に記載されているような立体定義された又は立体濃縮されたODNを製造することである。従来の方法で調製されたODNは、ヌクレオチド間結合に関与するリン原子のまわりの不斉性によるジアステレオマーの混合物から成る。これは、ODNとウイルスタンパク質のようなウイルス構成成分との間の結合の安定性に影響を及ぼす可能性がある。以前のデータは、タンパク質の結合が有意に立体依存性であることを示していたYuetal。従って、立体定義された又は立体濃縮されたODNを使用することによって、タンパク質の結合特性を改善し、抗ウイルス有効性を改善することができた。上述のような修飾の組込みを多数の様々な組込みパターン及びレベルで利用することができる。すなわち、オリゴヌクレオチドでの各ヌクレオチド又は結合で特定の修飾が包含される必要はなく、単一のオリゴヌクレオチド又は単一のヌクレオチドにおいてさえ、様々な修飾を組み合わせて利用することができる。オリゴヌクレオチドの合成当該技術で既知の方法を用いて、本オリゴヌクレオチドを合成することができる。たとえば、標準のホスホロアミダイト試薬をヨウ素による酸化と共に用いて、自動DNAシンセサイザーたとえば、AppliedBiosystemsモデル380Bにて、非置換又は置換のホスホジエステルオリゴヌクレオチドを合成することができる。ホスホジエステルオリゴヌクレオチドについて、ホスフィト結合の段階的チオエート化のために02Mの31112ベンゾジチオール3オン11ジオキシドのアセトニトリル溶液により標準的な酸化瓶を置き換えることを除いて、ホスホロチオエートを合成することができる。チオエート化待機工程を68秒に増やすことができ、その後、キャッピング工程が続く。CPGカラムからの切断及び55°C18時間における濃縮水酸化アンモニウム中での脱ブロックの後、25容積のエタノールにより、05MのNaCl溶液から2回沈殿させることによりオリゴヌクレオチドを精製することができる。米国特許第5508270号に記載されるように、ホスフィネートオリゴヌクレオチドを調製することができ;米国特許第4469863号に記載されるように、アルキルホスホネートオリゴヌクレオチドを調製することができ;米国特許第5610289号及び同第5625050号に記載されるように、3デオキシ3メチレンホスホネートオリゴヌクレオチドを調製することができ;米国特許第5256775号及び同第5366878号に記載されるように、ホスホロアミダイトオリゴヌクレオチドを調製することができ;公表されたPCT出願、PCTUS9400902号及び同PCTUS9306976それぞれ国際公開公報第9417093号及び同第9402499号として公表に記載されるように、アルキルホスホノチオエートオリゴヌクレオチドを調製することができ;米国特許第5476925号に記載されるように、3デオキシ3アミノホスホロアミダイトオリゴヌクレオチドを調製することができ;米国特許第5023243号に記載されるように、ホスホトリエステルオリゴヌクレオチドを調製することができ;米国特許第5130302号及び同第5177198号に記載されるように、ボラノホスフェートオリゴヌクレオチドを調製することができ;米国特許第5378825号、同第5386023号、同第5489677号、同第5602240号及び同第5610289号に記載されるように、MMI結合オリゴヌクレオチドとしても同定されるメチレンメチルイミノ結合オリゴヌクレオチド、MDII結合オリゴヌクレオチドとしても同定されるメチレンジメチルヒドラゾ結合オリゴヌクレオチド、及びアミド3結合オリゴヌクレオチドとしても同定されるメチレンカルボニルアミノ結合オリゴヌクレオチド、及びアミド4結合オリゴヌクレオシドとしても同定されるメチレンアミノカルボニル結合オリゴヌクレオチド、並びにたとえば別のMMI及びPO又はPSの結合を有する混合主鎖化合物を調製することができ;米国特許第5264562号及び同第5264564号に記載されるように、ホルムアセタール及びチオホルムアセタール結合オリゴヌクレオチドを調製することができ;並びに米国特許第5223618号に記載されるように、エチレンオキシド結合オリゴヌクレオチドを調製することができる。引用した特許及び特許出願はそれぞれ、その全体を参考として本明細書に組み入れられる。オリゴヌクレオチド製剤及び薬学的組成物本オリゴヌクレオチドをオリゴヌクレオチド製剤又は薬学的組成物に調製することができる。従って、本オリゴヌクレオチドは、そのほかの分子、分子構造又は、たとえば、リポソーム、受容体標的分子、取り込み、分布及び/又は吸収を助けるための経口、経腸、局所又はそのほかの製剤のような化合物の混合物と混合されてもよく、内包されてもよく、共役されてもよく、さもなければ会合されてもよい。そのような取り込み、分布及び/又は吸収を助ける製剤の調製を記載する典型的な米国特許には、たとえば、が挙げられ、それぞれその全体を参考として本明細書に組み入れられる。本発明のオリゴヌクレオチド、製剤及び組成物は、ヒトを含む動物に投与する際、生物学的に活性のある代謝産物又はその残余を提供する直接的に又は間接的にすることが可能である、薬学的に許容される塩、エステル又はそのようなエステルの塩を包含する。従って、たとえば、開示もまた、本発明の化合物のプロドラッグ及び薬学的に許容される塩、そのようなプロドラッグの薬学的に許容される塩、及びそのほかの生物等価物に引き付けられる。用語プロドラッグは、内因性の酵素の作用又はそのほかの化学物質及び/又は条件によって体内又は細胞内で活性形態すなわち、薬剤に変換される不活性形態で調製される治療剤を指す。特定の態様では、本オリゴヌクレオチドのプロドラッグ版は、その全体を参考として本明細書に組み入れられる、Gosselinらの国際公開公報第9324510号及びImbachらの国際公開公報第9426764号及び米国特許第5770713号に開示されている方法に従って、SATEホスフェート誘導体として調製される。用語薬学的に許容される塩は、本化合物の生理学的に、且つ薬学的に許容される塩、すなわち、母型化合物の所望の生物活性を保持し、且つ、望ましくない毒性効果をそれに付与しない塩を言う。そのような薬学的に許容される塩の多数は既知であり、本発明で使用することができる。オリゴヌクレオチドについて、薬学的に許容される塩の有用な例には、たとえば、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、マグネシウム、カルシウムのような陽イオンと共に形成される塩、スペルミン及びスペルミジンなどのようなポリアミン類;たとえば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸などのような無機酸と共に形成される酸付加塩;たとえば、酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、グルコン酸、クエン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パルミチン酸、アルギニン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンスルホン酸、メタンスルホン酸、pトルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ポリガラクツロン酸などのような有機酸と共に形成される塩;並びに塩素、臭素及びヨウ素のような元素陰イオンから形成される塩が挙げられるが、これらに限定されない。本発明はまた、本発明の抗ウイルス性オリゴヌクレオチドを含有する薬学的に許容される組成物及び製剤を包含する。局所治療又は全身性の治療が所望なのかどうか、及び治療すべき場所によって、多数の方法でそのような薬学的に許容される組成物を投与してもよい。たとえば、投与は、局所眼並びに膣及び直腸への送達を含む粘膜であってもよく;噴霧器による粉末又はエアゾールの吸入又は吸い込みによる肺へのものであってもよく;気管支内;鼻内;上皮及び経皮;経口;又は非経口であってもよい。非経口投与には、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内、又は筋肉内の注射又は点滴;あるいはたとえば、くも膜下又は脳室内のような頭蓋内投与が挙げられる。局所投与用の薬学的に許容される組成物及び製剤には、経皮貼付剤、軟膏、ローション、クリーム、ジェル、ドロップ、座薬、スプレー、液体及び粉末が挙げられる。従来の薬学的キャリア、水溶液、粉末又は油性の基剤、濃厚剤などが必要であってもよいし、望ましくてもよい。被覆したコンドーム、手袋なども有用である。好ましい局所用製剤には、本発明のオリゴヌクレオチドが、たとえば、脂質、リポソーム、脂肪酸、脂肪酸エステル、ステロイド、キレート剤、及び界面活性剤のような局所送達剤との混合剤であるようなものが挙げられる。好ましい脂質及びリポソームには、中性のたとえば、ジオレオイルホスファチジルDOPEエタノールアミン、ジミリストイルホスファチジルコリンDMPC、ジステアロイルホスファチジルコリン、陰性のたとえば、ジミリストイルホスファチジルグリセロールDMPG及び陽イオンのたとえば、ジオレオイルテトラメチルアミノプロピルDOTAP及びジオレオイルホスファチジルエタノールアミンDOTMAが挙げられる。オリゴヌクレオチドは、リポソーム内に内包されてもよいし、それとの、特に陽イオンのリポソームとの複合体を形成してもよい。又は、オリゴヌクレオチドは、脂質、特に陽イオン脂質と複合体を形成してもよい。好ましい脂肪酸及びエステル類には、アラキドン酸、オレイン酸、エイコサン酸、ラウリン酸、カプリル酸、カプリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、リノール酸、リノレン酸、ジカプレート、トリカプレート、モノオレイン、ジラウリン、グリセリル1モノカプレート、1ドデシルアザシクロヘプタン2オン、アシルカルニチン、アシルコリン、若しくはC1~10のアルキルエステルたとえば、イソプロピルミリステトIPM、モノグリセリド、ジグリセリド又はこれらの薬学的に許容される塩が挙げられるが、これらに限定されない。経口投与用の組成物及び製剤には、粉末又は顆粒、微粒子、ナノ粒子、水若しくは非水性媒体における懸濁液若しくは溶液、カプセル、ジェルカプセル、サック、錠剤又は微小錠剤が挙げられる。濃厚剤、香味剤、希釈剤、乳化剤、分散助剤又は結合剤が望ましくてもよい。好ましい経口製剤は、本発明のオリゴヌクレオチドが1以上の浸透増強剤界面活性剤及びキレート剤と合わせて混合されるものである。典型的な界面活性剤には、脂肪酸及び/又はそのエステル類又は塩、胆汁酸及び/又はその塩が挙げられる。典型的な胆汁酸/塩には、ケノデオキシコール酸CDCA、及びウルソデオキシケネデオキシコール酸UDCA、コール酸、デヒドロコール酸、デオキシコール酸、グルコール酸、グリコール酸、グリコデオキシコール酸、タウロコール酸、タウロデオキシコール酸、タウロ2425ジヒドロフシジン酸ナトリウム、グリコジヒドロフシジン酸ナトリウムが挙げられる。典型的な脂肪酸には、アラキドン酸、ウンデカン酸、オレイン酸、ラウリル酸、カプリル酸、カプリン酸、ミリスチル酸、パルミチン酸、ステアリン酸、リノール酸、リノレン酸、ジカプレート、トリカプレート、モノオレイン、ジラウリン、グリセリル1モノカプレート、1ドデシルアザシクロヘプタン2オン、アクリルカルニチン、アクリルコリン、モノグリセリド、ジグリセリド又はこれらの薬学的に許容される塩たとえば、ナトリウムが挙げられる。また、好ましいのは、浸透増強剤の併用、たとえば、胆汁酸/塩と併用する脂肪酸/塩である。特に好ましい併用は、ラウリル酸、カプリン酸及びUDCAのナトリウム塩である。さらに典型的な浸透増強剤には、ポリオキシエチレン9ラウリルエーテル、ポリオキシエチレン20セチルエーテルが挙げられる。本発明のオリゴヌクレオチドは、スプレー乾燥した粒子を含む顆粒形態で経口的に送達してもよいし、又は複合化して微粒子又はナノ粒子を形成してもよい。オリゴヌクレオチド錯化剤には、ポリアミノ酸;ポリイミン類;ポリアクリレート類;ポリアルキルアクリレート類、ポリオキシエタン類、ポリアルキルシアノアクリレート類;カチオン化ゼラチン、アルブミン、デンプン、アクリレート類、ポリエチレングリコールPEG及びデンプン;ポリアルキルシアノアクリレート類;DEAE誘導体化ポリイミン類、ポルラン類、セルロース及びデンプンが挙げられる。特に有利な錯化剤には、キトサン、Nトリメチルキトサン、ポリLリジン、ポリヒスチジン、ポリオルニチン、ポリスペルミン、プロタミン、ポリビニルピリジン、ポリチオジエチルアミノメチルエチレンPTDAE、ポリアミノスチレンたとえば、pアミノ、ポリメチルシアノアクリレート、ポリエチルシアノアクリレート、ポリブチルシアノアクリレート、ポリイソブチルシアノアクリレート、ポリイソヘキシルシアノアクリレート、DEAEメタクリレート、DEAEヘキシルアクリレート、DEAEアクリルアミド、DEAEアルブミン及びDEAEデキストラン、ポリメチルアクリレート、ポリヘキシルアクリレート、ポリ、ポリMarcelDekkerIncNewYorkNYVol1p1991988。表面活性化剤としても知られる合成界面活性剤は、エマルションの配合において広い適用性が見い出されており、文献で概説されている。界面活性剤は、通常、両親媒性であり、親水性部分及び疎水性部分を含む。界面活性剤の親水性の性質と疎水性の性質の比は、親水性/親油性バランスHLBと呼ばれ、製剤の調製で界面活性剤を分類し、選択する有益なツールである。界面活性剤は、親水性基の性質:非イオン性、陰イオン性、陽イオン性及び両性イオン性に基づいて異なる部類に分類してもよいRiegerinPharmaceuticalDosageFormsLiebermanRiegerandBankerMarcelDekkerIncNewYorkNYVol1p2851988。エマルション配合で使用される天然に存在する乳化剤には、ラノリン、ハチミツ、ホスファチド、レシチン及びアカシアが挙げられる。吸収基剤は、無水ラノリンや親水性ワセリンのような半固体の一貫性を保持するけれども、水を吸収してwoエマルションを形成するように親水性特性を持つ。微細に分割された固体も特に、界面活性剤との併用で、及び種々の調製物中で良好な乳化剤として使用されている。これらには、重金属水酸化物のような極性無機固体、ベントナイト、アタパルガイト、ヘクトライト、カオリン、モントモリロナイトのような非膨張粘土、コロイド状珪酸アルミニウム及びコロイド状珪酸マグネシウムアルミニウム、色素、及び炭素又はトリステアリン酸グリセリルのような非極性固体が挙げられる。多種多様な非乳化材料がエマルション製剤に包含され、エマルションの特性に寄与する。これらには、脂肪、油、ワックス、脂肪酸、脂肪アルコール類、脂肪エステル類、湿潤剤、親水性コロイド類、防腐剤及び抗酸化剤が挙げられる。親水性コロイド類又は親水コロイド類には、天然に存在するゴム及び、多糖類のような合成ポリマー類たとえば、アカシア、寒天、アルギン酸、カラギーナン、グアーゴム、カラヤゴム及びトラガカント、セルロース誘導体たとえば、カルボキシメチルセルロース及びカルボキシプロピルセルロース、及び合成ポリマー類たとえば、カルボマー類、セルロースエーテル類及びカルボキシビニルポリマー類が挙げられる。これらは水に分散し、又は水中で膨潤し、分散相液滴の回りに強力な表面間の被膜を形成し、内部相の粘度を高めることによってエマルションを安定化するコロイド溶液を形成する。エマルションは、微生物の増殖を容易に支える炭水化物、タンパク質、ステロール及びホスファチドのような多数の成分を含有することが多いので、これらエマルションには防腐剤を組み入れることが多い。エマルション製剤に包含され一般に使用される防腐剤には、メチルパラベン、プロピルパラベン、四級アンモニウム塩、塩化ベンザルコニウム、pヒドロキシ安息香酸のエステル類、及びホウ酸が挙げられる。抗酸化剤も一般にエマルション製剤に添加され、製剤の劣化を防止する。使用される抗酸化剤は、トコフェロール類、没食子酸アルキル、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエンのような遊離のラジカルスカベンジャー、又はアスコルビン酸及びメタ重亜硫酸ナトリウムのような還元剤、並びにクエン酸、酒石酸及びレシチンのような抗酸化共力剤であってもよい。皮膚、経口及び非経口の経路を介したエマルション製剤の適用並びにその製造方法は、文献に概説されているIdsoninPharmaceuticalDosageFormsLiebermanRiegerandBankerMarcelDekkerIncNewYorkNYVol1p1991988。容易な製剤化、吸収及び生物利用性の観点からの有効性のために経口送達のためのエマルション製剤は非常に広く使用されている。鉱物油系の下剤、油溶性ビタミン及び高脂肪栄養剤は、owエマルションとして一般に経口で投与される物質のうちである。本発明の態様の1つでは、オリゴヌクレオチドの組成物がマイクロエマルションとして製剤化される。マイクロエマルションは、光学的に単一の等方性で、熱力学的に安定な溶液である、水、油及び両親媒性物質の系として定義されてもよいRosoffinPharmaceuticalDosageFormsLiebermanRiegerandBankerMarcelDekkerIncNewYorkNYVol1p2451988。通常、先ず、水性の界面活性剤溶液に油を分散し、次いで、十分量の第4の成分、一般的には中間鎖長のアルコールを加えて透明な系を形成することによりマイクロエマルションを調製する。従って、マイクロエマルションは、表面活性化分子の表面間被膜により安定化される2つの非混和性の液の熱力学的に安定な、等方的に透明な分散液としても記載されているLeungandShahinControlledReleaseofDrugsPolymersandAggregateSystemsRosoffMEdVCHPublishersNewYorkp1852151989。一般に、油、水、界面活性剤、界面活性剤共力剤及び電解質を含む3~5つの成分の組み合わせによってマイクロエマルションを調製する。マイクロエマルションが油中水型であるか、水中油型であるのかは、使用する油及び界面活性剤の特性、及び界面活性剤分子の極性頭部及び炭化水素の尾部の構造及び幾何的詰め込みに依存するSchottinRemingtonsPharmaceuticalSciencesMackPublishingCoEastonPap2711985。位相図を利用した現象論的アプローチが鋭意検討され、マイクロエマルションの製剤化方法の包括的な知識が当業者に与えられてきた。従来のエマルションに比べて、マイクロエマルションは、自然に形成される熱力学的に安定な液滴形成物における水不溶性薬剤の可溶化という利点を提供する。マイクロエマルションの調製で使用される界面活性剤には、イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、Brij96、ポリオキシエチレンオレイルエーテル類、ポリグリセロール脂肪酸エステル類、単独又は界面活性剤共力剤との組み合わせで、テトラグリセロールモノラウレートML310、テトラグリセロールモノオレートMO310、ヘキサグリセロールモノオレートPO310、ヘキサグリセロールペンタオレートPO500、デカグリセロールモノカプレートMCA750、デカグリセロールモノオレートMO750、デカグリセロールセスキオレートSO750デカグリセロールデカオレートDA0750が挙げられるが、これらに限定されない。界面活性剤共力剤は、通常、エタノール、1プロパノール及び1ブタノールのような短鎖アルコールであり、界面活性剤分子の間で生じる空隙のために、界面活性剤被膜に浸透し、その結果、無秩序の被膜を創製することによって表面間の流動性を高めるように作用する。しかしながら、マイクロエマルションは、界面活性剤共力剤を使用せずに調製されてもよく、アルコールを含まない自己乳化エマルションの系は当該技術で既知である。水性相は、通常、水、薬剤の水溶液、グリセロール、PEG300、PEG400、ポリグリセロール類、プロピレングリコール、及びエチレングリコール誘導体であってもよい。油相は、カプテックス300、カプテックス355、カプムールMCM、脂肪酸エステル、中鎖C8~C12モノ、ジ、及びトリグリセリド、ポリオキシエチル化グリセリル脂肪酸エステル、脂肪アルコール、ポリグリコール化グリセリド、飽和ポリグリコール化C8~C10のグリセリド、植物油及びシリコーン油を挙げてもよいが、これらに限定されない。マイクロエマルションは、薬剤の可溶化及び薬剤の吸収の向上の観点から特に興味深い。脂質系マイクロエマルションow及びwoの双方は、ペプチドを含む薬剤の経口の生物利用性を高めることが提案されているConstantinidesetalPharmaceuticalResearch11138513901994RitschetMetiFindExpClinPharmacol132051993。マイクロエマルションは、薬剤可溶化の改善、酵素的加水分解からの薬剤の保護、膜の流動性及び透過性における界面活性剤が誘発する変化による薬剤吸収の向上の可能性、容易な調製、固形投与形態での容易な経口投与、臨床的効能の改善及び毒性の低下という利点を提供するConstantinidesetalPharmaceuticalResearch1113851994HoetalJPharmSet851381431996。その成分を常温で一緒にするとマイクロエマルションが自然に形成してもよいことが多い。熱不安定性の薬剤、ペプチド又はオリゴヌクレオチドを配合する際、これは特に有利であってもよい。マイクロエマルションは、化粧品への適用及び薬学的な適用の双方において有効成分の経皮送達にも有効である。本発明のマイクロエマルション組成物及び製剤は、消化管、膣、口腔及び投与のそのほかの場所におけるオリゴヌクレオチド及び核酸の局所の細胞取り込みを改善すると共に、消化管からのオリゴヌクレオチド及び核酸の全身性の吸収を促進することが期待される。本発明のマイクロエマルションはまた、製剤の特性を改善し、本発明のオリゴヌクレオチド及び核酸の吸収を高めるソルビタンモノステアレートグリル3、ラブラソール、及び浸透増強剤のような追加成分及び添加剤を含有してもよい。本発明の浸透増強剤は、5つの大まかなカテゴリー、界面活性剤、脂肪酸、胆汁塩、キレート剤及び非界面活性剤の1つに属するとして分類することができるLeeetalCriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystemsp921991。リポソーム薬剤の製剤化に検討され、使用されているマイクロエマルションに加えて、整理された界面活性剤の構造体が多数ある。これらには、単層、ミセル、二重層及び小胞が挙げられる。小胞は、薬剤送達の作用の特異性及び延長した持続時間を提供する。従って、本明細書で使用されるとき、用語リポソームは、球状の二重層に配置された両親媒性脂質から構成される小胞を言い、すなわち、リポソームは、親油性物質から形成される膜及び水性の内部を有する単層状体又は複層状体である。水性部分は通常、送達されるべき組成物を含有する。無傷の哺乳類の皮膚を横切るために、脂質小胞は、好適な経皮勾配の影響下、それぞれ直径50nm未満の一連の微細孔を通過するべきである。従って、極めて変形しやすい、且つ、そのような微細孔を通過できるリポソームを使用することが望ましい。リポソームの追加の因子には、脂質表面の変化及びリポソームの水性容積が挙げられる。リポソームのさらなる利点には、天然のリン脂質から得られるリポソームは生体適合性であり、生分解性であること;リポソームは広範囲の水溶性及び脂溶性の薬剤を組み入れることができること;リポソームはその内部区画にて内包された薬剤を代謝及び分解から保護できることRosoffinPharmaceuticalDosageFormsLiebermanRiegerandBankerMarcelDekkerIncNewYorkNYVol1p2451988が挙げられる。局所投与については、リポソームはそのほかの製剤に対して幾つかの利点を提示するという証拠がある。そのような利点には、投与された薬剤の高い全身性の吸収に関連する副作用を減らすこと、所望の標的にて投与された薬剤の蓄積を増やすこと、皮膚に対して親水性及び疎水性の両方であることが挙げられる。鎮痛剤、抗体、ホルモン及び高分子量のDNAを含む化合物が皮膚に投与され、一般に上部上皮が標的とされる。リポソームは2つに大別される。陽イオンリポソームは、正に荷電したリポソームであり、負に荷電したDNAと相互作用して安定な複合体を形成する。正に荷電したDNA/リポソーム複合体は、負に荷電した細胞表面に結合し、エンドソームに内部移行する。エンドソーム内の酸性pHのために、リポソームは破裂し、細胞の細胞質にその内容物を放出するWangetalBiochemBiophysResCommun1479809851987。pH感受性又は負に荷電したリポソームは、DNAとの複合体よりもDNAを捕捉する。DNA及び脂質は似たように荷電しているので、複合体形成ではなく相反が生じる。従って、DNAは、これらリポソームの水性内部に捕捉される。pH感受性のリポソームは、たとえば、チミジンキナーゼ遺伝子をコードするDNAを培養における細胞の単層に送達するのに使用されているZhouetalJournalofControlledRelease192692741992。リポソーム組成物の主要な種類の1つに天然由来のホスファチジルコリン以外のリン脂質が挙げられる。中性のリポソーム組成物は、たとえば、ジミリストイルホスファチジルコリンDMPC又はジパルミトイルホスファチジルコリンDPPCから形成することができる。陰イオンリポソーム組成物は一般に、ジミリストイルホスファチジルグリセロールから形成されるが、陰イオン膜融合性のリポソームはジオレイルホスファチジルエタノールアミンDOPEから主として形成される。もう1つの種類のリポソームは、たとえば、大豆PC及び卵PCのようなホスファチジルコリンPCから形成される。もう1つの種類は、リン脂質及び/又はホスファチジルコリン及び/又はコレステロールから形成される。幾つかの研究によってリポソーム薬剤製剤の皮膚への局所送達が評価されている。インターフェロンを含有するリポソームのモルモット皮膚への適用により、皮膚のヘルペスによる傷を軽減したが、他の手段を介した送達たとえば、溶液として、又はエマルションとしては効果がなかったWeineretalJournalofDrugTargeting24054101992。追加の研究により、水性系を用いたインターフェロンの投与に対する、リポソーム製剤の一部として投与されたインターフェロンの有効性を調べ、リポソーム製剤は水性投与より優れていると結論付けたduPlessisetalAntiviralResearch182592651992。非イオン性のリポソーム系も調べられ、特に非イオン性界面活性剤及びコレステロールを含む系で、皮膚への薬剤送達における利便性が確定している。ノバソン商標Iグリセリルジラウレート/コレステロール/ポリオキシエチレン10ステアリルエーテル及びノバソーム商標IIグリセリルジステアレート/コレステロール/ポリオキシエチレン10ステアリルエーテルを含む非イオン性リポソーム製剤を用いて、マウスの皮膚の真皮にシクロスポリンAを送達した。結果は、そのような非イオン性リポソーム系が皮膚の異なる層へのシクロスポリンAの沈着を促進する上で有効であることを示したHuetalSTPPharmaSci464661994。リポソームはまた、立体的に安定化されたリポソームを包含し、その用語は、本明細書で使用されるとき、1以上の特殊化された脂質を含むリポソームを言い、特殊化された脂質はリポソームに組み入れられると、そのような特殊化された脂質を欠くリポソームに比べて循環寿命が長くなる。立体的に安定化されたリポソームの例は、小胞形成する脂質部分の一部がモノシアロガングリオシドGM1のような糖脂質を1以上包含するもの、又はポリエチレングリコールPEG部分のような親水性ポリマーの1以上で誘導体化されるものである。特定の理論に束縛されないで、ガングリオシド、スフィンゴミエリン、又はPEGで誘導体化された脂質を含有する立体的に安定化されたリポソームについては、これら立体的に安定化されたリポソームの循環寿命の延長は、網内系RESの細胞への取り込みの低下によると考えられているAllenetalFEBSLett223421987WuetalCancerResearch5337651993。1以上の糖脂質を含む種々のリポソームは、PapahadjopoulosetalAnnNYAcadSci507641987モノシアロガングリオシドGM1、硫酸ガラクトセレブロシド及びホスファチジルイノシトール;GabizonetalProcNatlAcadSciUSA8569491988Allenetal米国特許第4837028号及び国際出願公報、国際公開公報第8804924号スフィンゴミエリン及びガングリオシドGM1又は硫酸ガラクトセレブロシドエステル;Webbetal米国特許第5543152号スフィンゴミエリン;Limetal国際公開公報第9713499号12snジミリストイルホスファチジルコリンに報告されている。1以上の親水性ポリマーで誘導体化された脂質を含むリポソーム、及び調製方法は、たとえば、SunamotoetalBullChemSocJpn5327781980非イオン性界面活性剤、PEG部分を含む2C1215G;IllumetalFEBSLett167791984ポリマーグリコールによるポリスチレン粒子の親水性被覆;Sears米国特許第4426330号及び同第4534899号ポリアルキレングリコールたとえば、PEGのカルボキシル基の結合により修飾された合成リン脂質;KlibanovetalFEBSLett2682351990PEG又はPEGステアレートで誘導体化されたホスファチジルエタノールアミンPE;BlumeetalBiochimicaetBiophysicaActa1029911990PEGで誘導体化されたリン脂質、たとえば、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミンDSPEとPEGとの組み合わせから形成されるDSPEPEG;Fisher欧州特許第EP0445131B1号及び国際公開公報第9004384号リポソームの外側表面で共有結合したPEG部分;Woodleetal米国特許第5013556号及び同第5356633号、及びMartinetal米国特許第5213804号及び欧州特許第EP0496813B11~20モルパーセントのPEGで誘導体化したPEを含有するリポソーム組成物;Martinetal国際公開公報第9105545号及び米国特許第5225212号及びZalipskyetal国際公開公報第9420073号多数のそのほかの脂質ポリマー抱合体を含有するリポソーム;Choietal国際公開公報第9610391号PEGで修飾したセラミド脂質を含むリポソーム;Miyazakietal米国特許第5540935号及びTagawaetal米国特許第5556948号その表面で機能部分によりさらに誘導体化することができるPEGを含有するリポソームに記載されている。核酸を含むリポソームは、たとえば、Thierryetal国際公開公報第9640062高分子量の核酸をリポソームに内包する方法;Tagawaetal米国特許第5264221号タンパク質に結合した、RNAを含有するリポソーム;Rahmanetal米国特許第5665710号オリゴデオキシヌクレオチドをリポソームに内包する方法;Loveetal国際公開公報第9704787号アンチセンスオリゴヌクレオチドを含むリポソームに記載されている。もう1つの種類のリポソームである、トランスファーソームは極めて変形しやすい脂質の凝集体であり、薬剤送達ビヒクルに魅力的であるCevcetalBiochimBiophysActa1368201151998。トランスファーソームは、液滴よりも小さい孔を介して浸透することができる極めて変形しやすい脂質液滴として記載されてもよい。トランスファーソームはそれが使用される環境に適用可能であり、たとえば、それらは、形状適用可能であり、自己修復性であり、分断することなく標的に到達し、自己負荷することが多い。トランスファーソームは、たとえば、標準のリポソーム組成物に表面端活性化剤、通常、界面活性剤を添加することにより作製することができる。界面活性剤界面活性剤は、エマルションマイクロエマルションを含む及びリポソームのような製剤で広く使用されている。天然の及び合成の多数の異なる種類の界面活性剤を分類し、ランク付けする最も共通した方法は、親水性/親油性比HLBの使用による。親水性基頭部としても知られるの性質は、製剤で使用される様々な界面活性剤を分類する最も有用な手段を提供するRiegerinPharmaceuticalDosageFormsMarcelDekkerIncNewYorkNYp2851988。界面活性剤の分子がイオン化されていなければ、非イオン性界面活性剤として分類される。非イオン性界面活性剤は薬学的製品及び化粧品で広く使用されており、広い範囲のpHにわたって使用でき、典型的なHLB値は、構造によって2~約18である。非イオン性界面活性剤には、エチレングリコールエステル、プロピレングリコールエステル、グリセリルエステル、ポリグリセリルエステル、ソルビタンエステル、スクロースエステル、及びエトキシル化エステルのような非イオン性エステル;並びに脂肪アルコールエトキシレート、プロポキシル化アルコールのような非イオン性アルカノールアミドが挙げられ、エトキシル化/プロポキシル化ブロックポリマーもこの部類に包含される。ポリオキシエチレン界面活性剤は非イオン性界面活性剤の部類で最もよく使用されるものである。水に溶解するか、又は分散したとき負の電荷を持つ界面活性剤分子は陰イオン性に分類される。陰イオン性界面活性剤には、石鹸のようなカルボキシレート、アシルラクチレート、アミノ酸のアシルアミド、アルキルサルフェート及びエトキシル化アルキルサルフェートのような硫酸のエステル、アルキルベンゼンスルホネートのようなスルホネート、アシルイソチオネート、アシルラウレート及びスルホスクシネート及びホスフェートが挙げられる。アルキルサルフェート及び石鹸が、最もよく使用される陰イオン性界面活性剤である。水に溶解するか、又は分散したとき正の電荷を持つ界面活性剤分子は陽イオン性に分類される。陽イオン性界面活性剤には、四級アンモニウム塩及びエトキシル化アミンが挙げられ、四級アンモニウム塩が最も頻繁に使用される。正の電荷又は負の電荷のいずれかを持つことができる界面活性剤分子は両性として分類される。両性界面活性剤には、アクリル酸誘導体、置換アルキルアミド、Nアルキルベタイン及びホスファチドが挙げられる。薬剤製品、製剤及びエマルションにおける界面活性剤の使用は、RiegerinPharmaceuticalDosageFormsMarcelDekkerIncNewYorkNYp2851988に概説されている。浸透増強剤幾つかの態様では、組成物中で又は組成物と共に浸透増強剤を用いて核酸、特にオリゴヌクレオチドの動物皮膚への送達を高める。ほとんどの薬剤はイオン化された形態及び非イオン化の形態の双方で溶液中に存在する。しかしながら、普通、脂溶性又は親油性の薬剤だけが細胞膜を容易に横切る。横切るべき膜が浸透増強剤で処理されていれば、非親油性薬剤であっても細胞膜を横切ることができることが発見されている。非親油性の薬剤が細胞膜を横切るのを助けるのに加えて、浸透増強剤は、親油性薬剤の透過性も高める。浸透増強剤は、5つの大まかなカテゴリー、すなわち、界面活性剤、脂肪酸、胆汁塩、キレート剤及び非キレート性非界面活性剤の1つに属するとして分類されるLeeetalCriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystemsp921991。これらの部類の浸透増強剤のそれぞれを以下で詳細に説明する。界面活性剤:本発明に関連して、界面活性剤又は表面活性化剤は、水性溶液に溶解すると溶液の表面張力又は水性溶液と別の液体との界面張力を低下させ、その結果、粘膜を介したオリゴヌクレオチドの吸収が高められる化学構成要素である。これら浸透増強剤には、たとえば、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレン9ラウリルエーテル及びポリオキシエチレン20セチルエーテルLeeetalCriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystemsp921991;並びにFC43のようなパーフルオロ化合物エマルションTakahashietalJPharmPharmacol402521988が挙げられ、それぞれその全体を参考として本明細書に組み入れる。脂肪酸:浸透増強剤として作用する種々の脂肪酸及びその誘導体には、たとえば、オレイン酸、ラウリル酸、カプリン酸nデカン酸、ミリスチル酸、パルミチン酸、ステアリン酸、リノール酸、リノレン酸、ジカプレート、トリカプレート、モノオレイン1モノオレオイルracグリセロール、ジラウリン、カープリル酸、アラキドン酸、グリセロール1モノカプレート、1ドデシルアザシクロヘプタン2オン、アシルカルニチン、アシルコリン、それらのC1~10アルキルエステルたとえば、メチル、イソプロピル及びtブチル並びにそれらのモノ及びジグリセリドすなわち、オレート、ラウレート、カプレート、ミリステート、パルミテート、ステアレート、リノレートなどが挙げられ、それぞれその全体を参考として本明細書に組み入れる。胆汁塩:胆汁の生理学的役割には、脂質及び脂溶性ビタミンの分散及び吸収の促進が挙げられるBruntonChapter38inGoodmanGilmansThePharmacologicalBasisofTherpeutics9ThEdHardmanetalEdMcGrawHillNewYorkp9349351996。種々の天然の胆汁塩及びその合成誘導体が浸透増強剤として作用する。従って、用語、胆汁塩は、胆汁の天然に存在するいかなる成分及びそのいかなる合成誘導体も包含する。本発明の胆汁塩には、たとえば、コール酸又は薬学的に許容されるそのナトリウム塩、コール酸ナトリウム、ジヒドロコール酸ジヒドロコール酸ナトリウム、デオキシコール酸デオキシコール酸ナトリウム、グルコール酸グルコール酸ナトリウム、グリコール酸グリコール酸ナトリウム、グリコデオキシコール酸グリコデオキシコール酸ナトリウム、タウロコール酸タウロコール酸ナトリウム、タウロデオキシコール酸タウロデオキシコール酸ナトリウム、ケノデオキシコール酸ケノデオキシコール酸ナトリウム、ウルソデオキシコール酸UDCA、タウロ2425ジヒドロフシジン酸ナトリウムSTDHF、グリコジヒドロフシジン酸ナトリウム及びポリオキシエチレン9ラウリルエーテルPOEが挙げられる。キレート剤:本背景では、キレート剤は、それと錯体を形成することにより溶液から金属イオンを除き、その結果粘膜を介したオリゴヌクレオチドの吸収が高められる化合物とみなすことができる。本発明での浸透増強剤としてのその使用に関して、性状分析されたDNAヌクレアーゼのほとんどが触媒について二価の金属イオンを必要とし、キレート剤により阻害されるので、キレート剤はDNA分解酵素阻害剤として作用するという追加的な利点を有するJarrettJChromatogr6183153391993。限定することなく、キレート剤には、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウムEDTA、クエン酸、サリチレートたとえば、サリチル酸ナトリウム、5メトキシサリチレート及びホモバニレート、コラーゲンのNアシル誘導体、ベータジケトンのラウレス9及びNアミノアシル誘導体エナミンLeeetalCriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystemsp921991MuranishiCriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystems71331990BuuretalJControlRel1443511990が挙げられる。非キレート剤非界面活性剤:本明細書で使用されるとき、非キレート剤非界面活性剤の浸透を増強する化合物は、有意なキレート剤活性及び界面活性剤活性を有さず、消化器系粘膜を介したオリゴヌクレオチドの吸収を高める化合物であるMuranishiCriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystems71331990。そのような浸透増強剤の例には、不飽和環状尿素1アルキル及び1アルケニルアザシクロアルカノン誘導体LeeetalCriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystemsp921991並びにジクロフェナックナトリウム、インドメタシン及びフェニルブタゾンのような非ステロイド抗炎症剤YamashitaetalJPharmPharmacol396216261987が挙げられる。細胞レベルでオリゴヌクレオチドの取り込みを高める作用剤を本発明の薬学的組成物及びそのほかの組成物及び製剤に添加してもよい。たとえば、リポフェクチンJunichietal米国特許第5705188号のような陽イオン性脂質、陽イオン性グリセロール誘導体、及びポリリジンLolloetalPCT出願、国際公開公報第9730731号のようなポリ陽イオン分子は、オリゴヌクレオチドの細胞内への取り込みを高めることも知られている。エチレングリコール及びプロピレングリコールのようなグリコール類、2ピロールのようなピロール類、アゾン類azones、並びにリモネン及びメントンのようなテルペン類を含むそのほかの作用剤を利用して投与された核酸の浸透を高めてもよい。キャリア本発明の特定の組成物はまた、製剤中にキャリア化合物を組み入れる。本明細書で使用されるとき、キャリア化合物又はキャリアは、核酸又はその類縁体を言い、それは不活性すなわち、それ自体の生物活性を持たないであるが、たとえば、生物学的に活性のある核酸を分解する又は循環からのその除去を促進することによって生物活性を有する核酸の生物利用性を低下させる生体内の過程によって核酸として認識される。核酸とキャリア化合物の同時投与は、後者の物質が過剰であることが多いが、肝臓、腎臓、又は循環外のそのほかの貯蔵場所で回収される核酸の量の実質的低下を招く。たとえば、肝臓組織におけるホスホロチオエートの回収は、それが、ポリイノシン酸、硫酸デキストラン、ポリシチジン酸又は4アセトアミド4イソチオシアノスチルベン22ジスルホン酸と共に同時投与された場合、低下させることができMiyaoetalAntisenseResDev51151211995TakakuraetalAntisenseNuclAcidDrugDev61771831996、それぞれその全体を参考として本明細書に組み入れる。賦形剤キャリア化合物とは対照的に、薬学的キャリア又は賦形剤は1以上の核酸を動物に送達するための薬学的に許容される溶媒、懸濁剤又はそのほかの任意の薬学的に不活性のビヒクルであり、通常、液体又は固体である。薬学的キャリアは、所定の薬学的組成物の核酸及びそのほかの成分と組み合わせた場合、意図する投与方式の観点から一般的に選択され所望の嵩、濃度等を提供する。典型的な薬学的キャリアには、結合剤たとえば、予備ゲル化したトウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドン又はヒドロキシプロピルメチルセルロースなど;充填剤たとえば、ラクトース及びそのほかの糖、微結晶セルロース、ペクチン、ゼラチン、硫酸カルシウム、エチルセルロース、ポリアクリレート又はリン酸水素カルシウムなど;潤滑剤たとえば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、シリカ、コロイド状二酸化珪素、ステアリン酸、金属ステアレート、水素添加植物油、コーンスターチ、ポリエチレングリコール、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウムなど;崩壊剤たとえば、デンプン、デンプングリコテートナトリウムなど;並びに湿潤剤たとえば、ラウリル硫酸ナトリウムなどが挙げられるが、これらに限定されない。本発明の組成物を製剤化するのに、核酸と有害に反応しない非経口投与に好適な薬学的に許容される有機又は無機の賦形剤も使用することができる。好適な、薬学的に許容されるキャリアには、水、塩溶液、アルコール類、ポリエチレングリコール類、ゼラチン、ラクトース、アミロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、珪酸、粘度のあるパラフィン、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどが挙げられるが、これらに限定されない。核酸の局所投与のための製剤には、無菌及び非無菌の水溶液、アルコールのような一般の溶媒中での非水性溶液、又は液体若しくは固体油の基剤における核酸の溶液が挙げられてもよい。溶液は、緩衝液、希釈液及びそのほかの好適な添加剤を含有してもよい。核酸と有害に反応しない非経口投与に好適な薬学的に許容される有機又は無機の賦形剤を使用することができる。そのほかの薬学的組成物成分本組成物は、薬学的組成物に従来見い出されるそのほかの成分を、技術で確立した用途レベルで追加的に含有してもよい。従って、たとえば、組成物は、たとえば、かゆみ止め剤、収斂剤、局所麻酔剤又は抗炎症剤のような追加的な、相溶性の、薬学的に活性のある物質を含有してもよく、又は、たとえば、染料、香味剤、防腐剤、抗酸化剤、乳白剤、濃厚剤及び安定剤のような、本発明の組成物の種々の投与形態を物理的に製剤化するのに有用な追加の物質を含有してもよい。しかしながら、そのような物質は、添加した際、本発明の組成物の成分の生物活性に過度に干渉すべきではない。製剤を滅菌し、所望であれば、製剤の核酸と有害に相互作用しない補助剤、たとえば、潤滑剤、防腐剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を与える塩、緩衝液、着色剤、香味剤及び/又は芳香族物質などを混合する。水性懸濁液は、たとえば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール及び/又はデキストランを含む懸濁液の粘度を高める物質、及び/又は安定剤を含有してもよい。本発明の特定の態様は、a1以上の抗ウイルス性オリゴヌクレオチド及びb異なるメカニズムにより機能する1以上のそのほかの化学療法剤を含有する薬学的組成物を提供する。そのような化学療法剤の例には、ダウノルビシン、ダウノマイシン、ダクチノマイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、エソルビシン、ブレオマイシン、マフォスファミド、イフォスファミド、シトシンアラビノシド、ビスクロロエチルニトロソ尿素、ブスルファン、マイトマイシンC、アクチノマイシンD、ミトラマイシン、プレドニゾン、ヒドロキシプロゲステロン、テストステロン、タモキシフェン、ダカルバジン、プロカルバジン、ヘキサメチルメラミン、ペンタメチルメタミン、ミトキサントロン、アムサクリン、クロラムブシル、メチルシクロヘキシルニトロソ尿素、窒素マスタード、メラファラン、シクロホスファミド、6メルカプトプリン、6チオグアニン、シタラビン、5アザシチジン、ヒドロキシ尿素、デオキシコフォマイシン、4ヒドロキシパーオキシシクロホスホロアミド、5フルオロウラシル5FU、5フルオロデオキシウリジン5FUdR、メソトレキセートMTX、コルヒチン、タキソール、ビンクリスチン、ビンブラスチン、エトポシドVP16、トリメトレキサート、イリノテカン、トポテカン、ゲムシタビン、テニポシド、シスプラチン及びジエチルスチルベストロールDESが挙げられるが、これらに限定されない。一般に、診断と治療のメルクマニュアル、第15版1206~1228ペジ1987年、BerkowetaledRahwayNJを参照のこと。本発明の化合物と共に使用する場合、個々にたとえば、5FUとオリゴヌクレオチド、順にたとえば、5FUとオリゴヌクレオチドを一定期間、続いてMTXとオリゴヌクレオチド又は1以上のそのような化学療法剤と組み合わせてたとえば、5FU、MTX及びオリゴヌクレオチド、又は5FU、放射線療法及びオリゴヌクレオチドそのような化学療法剤を使用すればよい。抗炎症薬には、非ステロイド性抗炎症薬及びコルチコステロイド類が挙げられるが、これらに限定されず、抗ウイルス剤には、リバビリン、シドフォビル、ビダラビン、アシクロビル及びガンシクロビルが挙げられるが、これらに限定されず、本発明の組成物で組み合わせてもよい。一般に、診断と治療のメルクマニュアル、第15版2499~2506ページ、及び46~49ページ1987年、BerkowetaledRahwayNJを参照のこと。そのほかの非オリゴヌクレオチドの化学療法剤も本発明の範囲内である2以上の化合物を一緒に又は順に用いてもよい。実施例1.単純ヘルペスウイルス単純ヘルペスウイルスHSVはヒト集団の有意な割合を冒す。ランダムODN又はODNランダマーはHSVのようなウイルスの感染性を阻害することが本発明で見い出された。VERO細胞HSV1KOS株及びHSV2MS2株の感染に感受性におけるHSVの細胞性複製アッセイを用いて、HSVの複製開始点に相補的な一本鎖PSODNがHSV1及びHSV2の複製を阻害した。驚くべきことに、ヒト343ARS及びプラスミドpBR322/pUCの開始点に相補的な対照のPSODNもウイルスの感染性を阻害した。ランダム配列のPSODN及びPSODNランダマーによる実験は、ODNのサイズの増加に伴ってウイルス感染の阻害が高まることを実証した。これらのデータは、ONは、ウイルス感染の治療的処置に有用な強力な抗ウイルス剤であることを示している。本発明者らは、HHVのようなウイルスの広がりを阻止する可能性のあるメカニズムはそのDNAの複製を妨げることであると理論付けた。このことを念頭に置いて、HSV1及びHSV2の複製開始点に相補的なホスホロチオエートオリゴヌクレオチドODNを感染細胞に導入した。これらのODNは、ウイルスの複製開始点にてDNAの三重体形成を生じ、必要なトランス作用因子の会合及びウイルスDNAの複製を阻止した。驚くべきことに、実験的パーラダイムにおいて、ウイルス感染を阻害するODNの能力はそのサイズ長さが増加するにつれて高まることを示す結果が本明細書で提示される。HSV1の阻害プラーク減少アッセイPRAにてHSV1を阻害するPSODNの能力を測定した。不死化したアフリカミドリザルの腎臓細胞VEROを10のウシ胎児血清をプラスし、ゲンタマイシン、バンコマイシン及びアンフォテレシンBを補完したMEM最低必須培地中で、37°C、5CO2にて培養した。4日間の増殖で集密な単層細胞が得られる密度にて細胞を12穴プレートに播いた。集密に達すると、培地を5血清と上記の補完物だけを含有するものに代え、次いで、試験化合物の存在下、細胞を90分間、HSV1KOS株、総計およそ40~60PFUにさらした。ウイルスに暴露したのち、培地を、5血清、1ヒト免疫グロブリン、上記の補完物及び試験化合物を含有する新しい重層する培地に変更した。感染の3~4日後、感染培養物のホルマリン固定及びクレシルバイオレット染色に続いて、プラークの計数を行った。ONはすべて別に言及したものは除いてカルガリー大学、コアDNAサービスラボで合成した1又は15μMの合成スケルでON表1を参照のことを調製し、50cmのセファデックスG25カラムで脱保護し、脱塩した。UVシャドウゲル電気泳動により得られたONを分析し、約95の完全長、n1及びn2オリゴ並びに5までの短いオリゴ種これらはランダム欠失を有すると思われるを含有することを確定した。ランダムなオリゴ合成については、アデニン、グアノシン、シトシン及びチミジンのアミダイトを等モル量にて一緒に混合し、合成の間、ODNの各位置での取り込みの無作為さをできるだけ大きくした。PSODNがHSV1を阻害できるかどうかを調べるために、HSV1のPRAにてREP1001、2001及び3007を調べた。このPSODNがHSVの複製開始点に向けられているので他の2つはヒト及びプラスミドの複製開始点に向けられているのでREP2001だけが何らかの活性を示すと期待された。しかしながら、3つのPSODNはすべて抗HSV1活性を示した図1を参照のこと。さらに、抗HSV1効果の能力は、オリゴのサイズに依存していた図2を参照のこと。抗HSV1活性に対するPSODNのサイズ依存性及び配列非依存性を確認するために、我々は、サイズの異なるREP2002、2003、2004、2005及び2006PSODNを調べた。各PSODNが実際に同じサイズを持つ異なるランダム配列の集団を表すように各塩基を揺らぎNとして合成することにより配列特異的な効果に関してこれらのPSODNを不活性とし、ランダマーと称した。HSV1PRAにおいてこれらのオリゴを調べた際、我々は10塩基以下のオリゴは検出可能な抗HSV1活性を有さないが、PSODNのサイズが10塩基を超えて増加するにつれて、能力が増加することを見い出したIC50低下、図3及び4を参照のこと。我々はまた20塩基を超えるPSODNが臨床的に認可されている抗HSV1薬、アシクロビルより有意に低いIC50値を有することも見い出した図4を参照のこと。PSODNの抗HSV1活性についての有効サイズの範囲を定義するために、我々は10~120塩基の広い範囲のサイズを網羅するPSODNランダマーを調べた図5及び6を参照のこと。我々は12塩基以上のオリゴが検出可能な抗HSV1活性を有し、少なくとも120塩基までのPSODNの長さの増大とともに、HSV1に対する有効性も増加することを発見した。しかしながら、サイズにおける塩基の増大当たりの有効性における増加は、40塩基より大きいPSODNでは小さかった図7を参照のこと。非PSODNランダマー、ランダム配列のPSODN及びHSV1特異的配列のPSODNの有効性を比較するために、我々は10、20及び40塩基のサイズのODNにおけるこれら3種の修飾について調べた図8及び9を参照のこと。非修飾ODNランダマーは調べたサイズでは検出可能な抗HSV1活性は有していなかった図8a~cを参照のこと。ランダム配列及びHSV1特異的配列のPSODNは双方とも、サイズ依存性の抗HSV1活性を示したこれらの修飾ではいずれも10塩基では活性は認められなかった。図8d及びgを参照のこと。ランダム配列、HSV1特異的配列及びランダマーのPSODNを比較すると図10を参照のこと、長さ20塩基のPSODNでは、HSV1特異的配列による抗HSV1活性の上昇が示されたが、長さ40塩基では、ランダマーであれ、ランダム配列であれ、HSV1特異的配列あれ、修飾したものはすべて、HSV1に対して等しく有効であった。我々の知る限りでは、PSODNのHSV1に対するIC50が0059μM及び0043μMのように低いことを報告したのは、これが初めてである。実施例2:HSV2の阻害PRAにより、PSODNのHSV2を阻害する能力を測定した。不死化したアフリカミドリザルの腎臓細胞VEROを10のウシ胎児血清をプラスし、ゲンタマイシン、バンコマイシン及びアンフォテレシンBを補完したMEM最低必須培地中で、37°C、5CO2にて培養した。4日間の増殖後集密な単層細胞が得られる密度にて細胞を12穴プレートに播いた。集密に達すると、培地を5血清と上記の補完物だけを含有するものに代え、次いで、試験化合物の存在下、細胞を90分間、HSV2MS2株、総計およそ40~60PFUにさらした。ウイルスに暴露したのち、培地を、5血清、1ヒト免疫グロブリン、上記の補完物及び試験化合物を含有する新しい重層する培地に変更した。感染の3~4日後、感染培養物のホルマリン固定及びクレシルバイオレット染色に続いて、プラークの計数を行った。PSODNがHSV2を阻害できるかどうかを調べるために、HSV2のPRAにてREP1001、2001及び3007を調べた。このPSODNがHSV12の複製開始点に向けられているので他の2つはヒト及びプラスミドの複製開始点に向けられているのでREP2001だけが何らかの活性を示すと期待された。しかしながら、3つのPSODNはすべて抗HSV2活性を示した図12を参照のこと。さらに、抗HSV2効果の能力は、PSODNのサイズに依存しており、配列には依存していなかった図13を参照のこと。抗HSV2活性に対するPSODNのサイズ依存性及び配列非依存性を確認するために、我々は、サイズの異なるREP2001、2002、2003、2004、2005及び2006PSODNを調べた。各PSODNが実際に同じサイズを持つ異なるランダム配列の集団を表すように各塩基を揺らぎNとして合成することにより配列特異的な効果に関してこれらのPSODNを不活性とし、ランダマーと称した。これらのオリゴをHSV2PRAにて調べた際、我々は10塩基以下のオリゴは検出可能な抗HSV2活性を有さないが、PSODNのサイズが10塩基を超えて増加するにつれて、能力が増加することを見い出したIC50低下、図14及び15を参照のこと。我々はまた20塩基を超えるPSODNが臨床的に認可されている抗HSV2薬、アシクロビル商標より有意に低いIC50値を有することも見い出した図15を参照のこと。我々の知る限りでは、PSODNのHSV2に対するIC50が0012μMのように低いことを報告したのは、これが初めてである。非特異的配列組成がONの抗ウイルス活性に影響を有するかどうか確定するために、我々は、HSV1PRAにおける抗HSV1活性について、サイズは等しいが配列組成の異なる幾つかのPSODNを調べた。調べたPSODNは、REP2006N20、REP2028G40、REP2029A40、REP2030T40、及びREP2031C40であった。HSV1PRA図37を参照のことで生成したIC50値は、REP2006N40が調べたあらゆる配列の中で明らかに活性が最も高く、一方、REP2029A40は最も活性が低かった。我々はまた、そのほかすべてのPSODNがN40よりも有意に活性が低く、有効性という点で、N40C40T40A40G40とランク分けされた。我々はまた2つの異なるヌクレオチドを持つ様々な配列組成を有する様々なPSODNの有効性も調べた図37bを参照のこと。PSODNランダマーREP2006は、AC20REP2055、TC20REP2056、又はAG20REP2057よりも、HSV1に対して有意に有効であり、有効性は、以下:N40AGACTCのようにランク分けされた。このデータは、抗ウイルス活性は非配列相補性であるが、特定の非特異的配列組成すなわち、C40及びN40が最も強力な抗ウイルス活性を有することを示唆している。我々は、固有のタンパク質結合能を保持する一方で、C40、A40、T40及びG40のような配列は、おそらくこれらの配列で形成される何らかの拘束性三次構造のために、高い親和性でわずかなウイルスタンパク質に結合することを示唆する。他方、N40のランダムな性質のために、それは、高い親和性を持って広範囲の抗ウイルスタンパク質に結合する能力を保持し、強力な抗ウイルス活性に寄与する。実施例3:CMVの阻害PSODNのCMVを阻害する能力を、プラーク減少アッセイPRAにより測定した。このアッセイは、CMVAD169株をウイルス播種として使用し、ヒト線維芽細胞を宿主細胞として使用する以外、抗HSV1及び抗HSV2を調べるのに使用したアッセイと同一である。抗CMV活性におけるPSODNのサイズ依存性及び配列非依存性を調べるために、我々は、サイズの異なるPSODNランダマーを調べた図16a、bを参照のこと。CMVのPRAにてこれらのPSODNを調べた際、我々は、PSODNのサイズが増えるにつれて、能力も高まるIC50の低下、図16cを参照のことことを見い出した。PSODNの抗CMV活性についての有効なサイズの範囲をさらに明らかに解明するために、我々は10~80塩基の大まかなサイズ範囲を網羅するPSODNランダマーを調べた。我々はまた、幾つかの臨床的に認可された小分子のCMV治療剤ガンシクロビル、ホスカルネット及びシドフォビル並びにCMV網膜炎の治療用の市販のアンチセンス2種Vitravene商標、カルガリー大学により市販、合成されているも含めた図17を参照のこと。我々は、PSODNのサイズの増大が有効性の増加を招くが、この効果は40塩基で飽和することを発見した図18を参照のこと。さらに20、40及び80塩基のPSODNランダマーは、調べた小さな分子のいずれよりも有意に有効であった図17。さらに、40及び80塩基のPSODNランダマーはVitravene商標よりも有効であった。我々の知る限りでは、PSODNのCMVに対するIC50が0067μMのように低いことを報告したのは、これが初めてである。実施例4:HIV1の阻害2つの異なるアッセイにより、PSODNのHIV1を阻害する能力を測定した。細胞変性効果CPE細胞の代謝程度を報告するため、MTTダイを用いて細胞変性効果をモニターする。10ウシ胎児血清を加え、抗生物質を補完したMEM中で、37°C、5CO2にて不死化したヒトリンパ球MT4を培養する。96穴プレートにて適当な試験化合物を含有する培地に細胞を播き2時間インキュベートする。試験化合物との予備インキュベートの後、HIV1NL43株をウエルに加えた00002TCID50/細胞。6日間の追加のインキュベートの後、MTT変換によりCPEをモニターする。ウイルス播種の非存在下で6日間薬剤をインキュベートすることにより細胞障害性を測定する。MTTの吸収値を生存率に変換するには、非感染未処置細胞における吸収を100に設定し、感染未処置細胞の吸収を0に設定する。複製アッセイRA不死化したヒト胎児腎臓細胞293AにおいてHIVの複製能力をモニターする。2種のプラスミドをこれらの細胞に同時形質移入する。一方のプラスミドはルシフェラーゼ発現カセットを介入させたenv遺伝子を有する組換え野生型HIV1ゲノムNL43を含有しCNDO株として同定される、他方のプラスミドはマウス白血病ウイルスMLVに由来するenv遺伝子を含有する。これら2種のプラスミドは、MLVのenv遺伝子に由来するトランスで提供されるタンパク質産物を除いて、HIV1に由来するすべての成分を有する成熟キメラウイルスを産生するあらゆるタンパク質因子をトランスで提供する。これらの細胞から産生されるビリオンは感染性であり複製するが、env遺伝子を欠くために感染性ビリオンの次世代を産生することはできない。形質移入の24時間後、これらの細胞をトリプシン処理し、96穴プレートに播く。細胞が付着した後、培地を洗浄し、試験化合物を含有する培地と交換する。さらなる24時間の間にウイルス産生が進む。次いで、上清を回収し、元のままの293A細胞を再び感染させるのに使用する。ルシフェラーゼ遺伝子産物によって感染させた元の細胞を同定する。ルシフェラーゼ陽性細胞の数が、組換えHIV1による複製及び/又は感染の程度の測定値である。幾つかの異なる部類の抗HIV薬に耐性を誘導することが知られている幾つかの点突然変異を持つHIV1ゲノムを用いることにより多数の臨床的に認可されている抗HIV薬に対する耐性を調べるのにも、このアッセイが適用される。パーセント阻害は、検出可能なルシフェラーゼ陽性細胞がない場合を100、感染細胞における陽性細胞の数を0、未処置細胞を対照に設定する。抗HIV1活性におけるPSODNのサイズ依存性及び配列非依存性を調べるために、我々は、サイズの異なるPSODNランダマーを調べた。HIV1のCPEアッセイにてこれらのPSODNランダマーを調べた際、我々は、PSODNのサイズが増えるにつれて、能力も高まるIC50の低下、図19a、b及び20を参照のことことを見い出した。我々はまた、このアッセイにおいてPSODNランダマーが宿主細胞に対して有意な毒性を示さないことに気付いた図19c、dを参照のこと。我々の知る限りでは、PSODNのHIV1に対するIC50が0011μMのように低いことを報告したのは、これが初めてである。PSODNの抗HIV1活性についての有効なサイズの範囲をさらに明らかに解明するために、我々は、野生型HIV1組換えNL43CNDOを用いるRAによって10~80塩基の大まかなサイズ範囲を網羅するPSODNランダマーを調べた。さらに、我々は、現在臨床で使用されている4種のプロテアーゼ阻害剤アプレナビル、インジナビル、ロピナビル及びサキナビルを調べた。我々は10塩基以上のPSODNランダマーが抗HIV1活性を有し、PSODNの長さが増えると共にHIV1に対する有効性も高まるが、40塩基で飽和することを発見した図21e~h及び図22bを参照のこと。さらに、40塩基及び80塩基のPSODNランダマーは、4種の臨床対照と有効性においてほぼ同等であった図21a~d及び22aを参照のこと。我々の知る限りでは、PSODNのHIV1に対するIC50が0014μMのように低いことを報告したのは、これが初めてである。HIVの薬剤耐性株を阻害するPSODNの能力を調べるために、我々は、HIV1のMDRC4株を用いて上記試験を繰り返した。この組換え株は、あらゆる部類:ヌクレオチドRT阻害剤、非ヌクレオチドRT阻害剤、及びプロテアーゼ阻害剤に由来する16の異なる、臨床的に認可された薬剤に有意な耐性を呈する。PSODNランダマーはすべて、野生型株に対するのと同様に耐性株に対して機能した図23e~hを参照のこと。しかしながら、4種のうち3種のプロテアーゼ阻害剤が変異株に対する有効性の低下を示したので図23a~d及び24を参照のこと、40塩基及び80塩基のPSODNランダマーは今や耐性株に対してこれら薬剤よりも有効である。実施例5:RSVの阻害アラマーブルーによるCPEのモニタリング細胞代謝の間接的測定によってRSVを阻害するPSODNの能力を測定した。5ウシ胎児血清を加えたMEM中で37°C、5CO2にてヒト咽頭癌Hep2細胞を培養した。5~6日間の増殖で集密な単層細胞が得られるような密度にて細胞を96穴プレートに播いた。播いた翌日、減らした体積で試験化合物の存在下、細胞にRSVA2株1082TCID50mlを2時間感染させた。播種に続いて、培地を交換し、試験化合物を補完した。感染の6日後、アラマーブルーの蛍光変換を測定することによりCPEをモニターした。未感染細胞を7日間処理し、これらの細胞におけるアラマーブルー変換を測定することにより、Hep2における試験化合物の毒性をモニターした。未感染、未処理細胞におけるアラマーブルーの読み取りを100生存率に設定し、感染、未処理細胞における読み取りを0生存率に設定した。抗RSV活性におけるPSODNのサイズ依存性及び配列非依存性を調べるために、我々は、サイズの異なるPSODNランダマーを調べた。さらに、我々は、RSV感染用の臨床的に認可されている治療剤、リバビリンビラゾール商標を調べた。RSVのCPEアッセイで調べた際、我々は、PSODNランダマーのサイズが増すにつれて能力も高まるが、40塩基のサイズで飽和することを見い出した図25a~c及び26を参照のこと。我々はまた20、40及び80塩基のPSODNランダマーが、臨床的に認可されている抗RSV薬、リバビリンよりも有意に低いIC50を有することに気付いた図25a~d及び26を参照のこと。PSODNランダマーはHep2細胞において毒性を示さなかったが、リバビリンは有意に毒性だった治療指数=208、図25e~hを参照のこと。我々の知る限りでは、PSODNのRSVに対するIC50が0015μMのように低いことを報告したのは、これが初めてである。実施例6:コクサッキーウイルスB2の阻害アラマーブルーによるCPEのモニタリング細胞代謝の間接的測定によってCOXB2を阻害するPSODNの能力を測定した。5ウシ胎児血清を加えたMEM中で37°C、5CO2にてアカゲザル腎臓LLCMK2細胞を培養した。5~6日間の増殖で集密な単層細胞が得られるような密度にて細胞を96穴プレートに播いた。播いた翌日、減らした体積で試験化合物の存在下、細胞にCOXB2オハイオ1株1078TCID50mlを2時間感染させた。播種に続いて、培地を交換し、試験化合物を補完した。感染の6日後、アラマーブルーの蛍光変換を測定することによりCPEをモニターした。未感染細胞を7日間処理し、これらの細胞におけるアラマーブルー変換を測定することにより、LLCMK2細胞における試験化合物の毒性をモニターした。未感染、未処理細胞におけるアラマーブルーの読み取りを100生存率に設定し、感染、未処理細胞における読み取りを0生存率に設定した。我々は、COXB2のCPEアッセイにおいてREP2006の抗COXB2活性を調べた。我々は、LLCMK2細胞でやや毒性を示すものの図27bを参照のこと、このPSODNランダマーはCOXB2の感染から感染したLLCMK2細胞を部分的に救済できることを見い出した図27aを参照のこと。実施例7:ワクシニアウイルスの阻害我々は、天然痘ウイルスをはじめとするポックスウイルスに対する我々の化合物の可能性ある有効性の測定法としてワクシニア感染モデルを用いた。アラマーブルーによるCPEのモニタリング細胞代謝の間接的測定によってワクシニアを阻害するPSODNの能力を測定した。5ウシ胎児血清を加えたMEM中で37°C、5CO2にてVERO細胞を培養した。5~6日間の増殖で集密な単層細胞が得られるような密度にて細胞を96穴プレートに播いた。播いた翌日、減らした体積で試験化合物の存在下、細胞にワクシニア1079TCID50mlを2時間感染させた。播種に続いて、培地を交換し、試験化合物を補完した50μMで使用したシドフォビルを除いて、すべて10μMで。インキュベート後5日目に上清を回収した。1100に希釈した上清でVERO細胞を再感染させ、再感染後7日間CPEをモニターし、アラマーブルーの蛍光変換を測定することにより上清中のウイルス負荷を決定した。我々は、サイズの異なるREP2004、2006及び2007PSODNランダマーを調べた。さらに、我々はワクシニア感染に有効な既知の治療剤、シドフォビルビスチド商標を調べた。ワクシニアのCPEアッセイで調べた際、我々は、REP2004、2006及び2007による処理はすべて抗ウイルス活性を示したすなわち、再感染の際、低下したCPEを示す上清を生じたが、この活性は、シドフォビルで見られるものより弱かった図36を参照のこと。実施例8:DHBV、パラインフルエンザ3ウイルス及びハンタウイルスの阻害DHBV、パラインフルエンザ3ウイルス及びハンタウイルスは測定可能なプラーク又はCPEを容易に生じなかったので、我々は、蛍光フォーカス形成単位FFFUの検出を用いてこれらのウイルスにおけるREP2006の有効性を調べた。このアッセイでは、REP2006最終濃度10μMでウイルスと混合し、次いで細胞に吸収させた。吸収の後、感染細胞を7~14日間さらにインキュベートし、その時点でメタノール固定した。適当なウイルス抗原に対する免疫蛍光顕微鏡によってウイルス複製の領域を検出した。3種のウイルスのそれぞれについて、具体的な実験条件及び結果を以下に記載する:この当初のデータは10μMでのREP2006がDHBV、パラインフルエンザ2ウイルス及びハンタウイルスを阻害することにおいて有効であることを示している。我々は、IC50がさらに低くなるであろう予備試験において強力な反応が得られることを期待している。これらのデータは、ハンタウイルス及びB型肝炎ウイルスDHBVに密接に関係するのヒトへの感染の治療に対するPSODNランダマーの有効性を支持すると共に、始めるべき治療についての確定診断を必要としない、RSV及びパラインフルエンザ3による小児気管支炎の即時治療に対する理論的根拠を提供する。実施例9:現在非反応性のウイルス今日まで、我々は、以下のウイルスシステムで送達システム、薬剤の併用又は化学的修飾を用いずにPSODNランダマー10μMまでによる検出可能な抗ウイルス有効性を観察していない:現在の試験手順のもとでは、我々は活性を実証しなかった。しかしながら、抗ウイルス活性の欠如は、アッセイの条件下でのPSODNの細胞への浸透が小さいためである可能性がある。にもかかわらず、追加の試験を行って、これらウイルスによる有効な結果を達成する。細胞内濃度を上げるためにリポソーム製剤のような送達システムを用いた場合、これらのウイルスがPSODNに反応する可能性がある。また、本明細書で記載したように別の抗ウイルス薬との併用で、PSODNは、これらのウイルスに対して抗ウイルス有効性を示す可能性がある。これらのウイルスに対してPSODNを有効にするのに、細胞内濃度を高めるための化学修飾が有用であってもよい。我々は、PSODNの電荷特性が数種のファミリーに由来するウイルスの阻害に重要であるという良好な証拠を有しているので、ウイルス活性の阻害に関するこの電荷に依存したメカニズムがカプシドに包み込むウイルスすべての活性を阻害する能力を有することを予想している。これに対する必然的結果は、実施例9に列記したウイルスに対する検出される抗ウイルス有効性の欠如は、PSODNとこれらウイルスの構造タンパク質の相互作用がこれらウイルスの複製の間、ウイルスタンパク質の相互作用を妨げるほど十分に強くないことを示唆するということである。これらのウイルスに対する有効性を達成する方法の1つは、DNA又は抗ウイルス性ポリマーの荷電特性を変えたとえば、DNAにおけるホスホロチオエート結合の代わりにホスホロジチオエートを用いる、ウイルスタンパク質に対するその親和性を高めることである。実施例10:オリゴヌクレオチドが主として非配列相補性方式の作用によって作用するかどうかを確定する試験以下に概説する3種の試験のいずれか1つの基準を満たせば、該当するON、たとえば、ODNは、主として非配列相補性方式の作用によって作用するとみなさなければならない。試験1抗ウイルス有効性に対する部分的依存性の効果本試験は、配列の一部が変質させられた場合の特定のON配列の抗ウイルス活性を測定するのに役立つ。同一化学成分を有するONの変質形が以下に記載されるようにその活性を保持していれば、それは、主として非配列相補性の作用機序で作用していると判断される。以下の規則に従ってONを変質させる:LON=元々のONの塩基数X=変質させるべきオリゴの各末端における塩基数但し、元々のONと同一の化学成分を有するLONが偶数であれば、そのとき、X=LON4LONが奇数であれば、そのとき、X=整数LON41各変質塩基は、任意の好適な方法、たとえば、本明細書に記載されているPSODNランダマーの合成方法に従って合成されなければならない。ONが、ヘルペスウイルス、レトロウイルス又はパラミクソウイルスのファミリーの一員に対する抗ウイルス活性を有するように請求されていれば、そのウイルスファミリーについて、好ましくは示されたウイルス株を用いて本明細書で記載されるアッセイを用いてIC50の生成を行う。ONが上述されていない特定のウイルスファミリーの一員に対して抗ウイルス活性を有するように請求されていれば、そのときは、製薬業界で認可されている抗ウイルス有効性の試験によってIC50値を生成するべきである。最低7つの化合物の濃度を用いて、用量反応曲線の線形範囲での3以上の点によってIC50値を生成するべきである。この試験を用いて、前記ONのIC50をその変質相手と比較するべきである。変質ONのIC50が25塩基以下のONに関する元々のONより2倍未満大きい、又は26塩基以上のONに関する元々のONより10倍未満大きければ最低3連一組の測定に基づき、標準偏差は平均値の15を超えない、そのときは、ONは主として非配列相補性の作用機序で機能すると判断するべきである。試験2ランダマーによる有効性の比較本試験は、同一ウイルス又はウイルスファミリーにおける、ONの抗ウイルス有効性を同等サイズ及び同一化学成分のランダマーONの抗ウイルス有効性と比較するのに役立つ。ONが、ヘルペスウイルス、レトロウイルス又はパラミクソウイルスのファミリーの一員に対する抗ウイルス活性を有するように請求されていれば、そのウイルスファミリーについて、好ましくは示されたウイルス株を用いて本明細書で記載されるアッセイを用いてIC50の生成を行う。ONが上述されていない特定のウイルスファミリーの一員に対して抗ウイルス活性を有するように請求されていれば、そのときは、製薬業界で認可されている抗ウイルス有効性の試験によってIC50値を生成するべきである。最低7つの化合物の濃度を用いて、用量反応曲線の線形範囲での3以上の点によってIC50値を生成するべきである。この試験を用いて、ONのIC50を同等サイズ及び同一化学成分のONランダマーと比較するべきである。変質ONのIC50が25塩基以下のONに関する元々のONより2倍未満大きい、又は26塩基以上のONに関する元々のONより10倍未満大きければ最低3連一組の測定に基づき、標準偏差は平均値の15を超えない、そのときは、ONは主として非配列相補性の作用機序で機能すると判断するべきである。試験3異なるウイルスファミリーにおける有効性の比較本試験は、そのゲノムがONに相同である標的ウイルスに対するONの有効性をそのゲノムがONに相同ではない第2のウイルスに対するONの有効性と比較するのに役立つ。多くの場合、異なるウイルスは、標的ウイルスのウイルスファミリーよりも異なるウイルスファミリーから選択される。双方のウイルスにおける同一の長さ及び化学成分のランダマーの活性を用い2つのウイルスで得られたONに関するIC50を標準化することにより、標的ウイルスと第2のウイルスにおけるONの相対的活性の比較が達成される。従って、特定のウイルスに対して抗ウイルス活性を有するように請求されていれば、そのとき、IC50の生成は、ヘルペスウイルス、レトロウイルス又はパラミクソウイルスのファミリーについて本明細書に記載されたアッセイの1つを用いて、又は当該技術で既知のそのほかのアッセイを用いて、このウイルスにおいて決定される。同様に、そのゲノムがONの配列に相同ではないウイルスに関して本明細書で記載されたアッセイの1つを用いて、第2のウイルスに対するONについてIC50の生成を行う。IC50の生成は、ウイルスそれぞれに対する、同等のサイズ及び化学成分のランダマーについて行う2つのウイルスに対するランダマーのIC50有効性を用いて以下のように特定のONに関するIC50値を標準化する:1ランダマーのIC50が1になるように第1相同のウイルスにおけるON及びランダマーのIC50に代数変換を適用する。2ランダマーのIC50が1になるように第2非相同のウイルスにおけるON及びランダマーのIC50に代数変換を適用する。3非相同のウイルスにおけるONの変換したIC50を相同のウイルスにおけるONの変換したIC50で割ることにより相同ウイルス対非相同ウイルスにおけるONにIC50での倍差を算出する。長さ25塩基未満のONについては、倍差が2未満であれば、ONは非配列相補性の作用機序で作用していると判断するべきである。長さが25塩基以上のONについては、倍差が10未満であれば、ONは非配列相補性の作用機序で作用していると判断するべきである。試験4:異なるウイルスファミリーにおける有効性本試験は、ONがウイルスゲノムのどの部分とも相同ではないウイルスにおいて前記ONが薬剤様の活性を有するのかどうかを確定するのに役立つ。従って、調べられるONの配列が使用されるべきウイルスのゲノムのいかなる部分とも相同ではないように、ヘルペスウイルス、レトロウイルス又はパラミクソウイルスについて本明細書に記載されるアッセイの1つを用いて、ONを調べるべきである。最低7つのONの濃度を用いて、線形範囲での3以上の点によってIC50値を生成するべきである。得られた用量反応曲線が薬剤様活性を示すのなら通常、減衰曲線又はS字曲線であることができ、ONの濃度の低下と共に抗ウイルス有効性も低下する、且つ、前記曲線から生成したIC50が1μM未満であれば、ONは薬剤様活性を有すると判断されるべきである。ONは相補性ではないウイルスにおいてONが薬剤様活性を有すると判断され、よって、相補性配列依存性の活性を有しえないのであれば、それは非配列相補性の作用機序で作用しているとみなされるべきである。これらの試験で使用される閾値学問分野にも産業分野にも25塩基より長いアンチセンスONを設計するための科学的根拠も経験的根拠もない。さらに、我々の知る限り25ヌクレオチドより長いONを使用したヒト臨床試験で投与されたON製剤はない。これらの事実を考えて、我々は2つの異なる閾値を確立したが、それを用いて、主として非配列相補性の作用機序で作用する配列を定義する。25塩基以下のオリゴについては、アンチセンスメカニズムにより主として作用しているとみなされるためには、ONは、同一化学成分のランダマー又は変質ONよりも少なくとも2倍大きい抗ウイルス活性を有さなければならない。ONがランダマーや変質ONより少なくとも2倍良好ではなければ、我々は、半分を超える活性は非アンチセンスの作用機序に起因すると結論付ける。26以上のONについては、アンチセンスメカニズムにより作用しているとみなされるためには、ONは、同一化学成分のランダマー又は変質ONよりも少なくとも10倍1ログ大きい抗ウイルス活性を有さなければならない。この大きな閾値に対する我々の理論的根拠は、アンチセンスのためのONの設計に関する現在の技術状態を考えると26塩基より大きく且つ抗ウイルス活性を有するように請求されるオリゴが本明細書に含有される本発明の知識により設計されたことを前提とすることは合理的であるということであるアンチセンスONの最適な長さは一般に16~21塩基の間であるとされている。上記試験の1~3で記載された閾値は、暫定値閾値である。具体的に示せば、上述の比較試験1~3では他の閾値を使用することができる。従って、たとえば、長さ25未満の塩基のON及び/又は長さ25以上の塩基のONについて、具体的に示せば、ONが主として非配列相補性の作用機序で作用するかどうかを決定するための閾値は10倍、8倍、6倍、5倍、4倍、3倍、2倍、15倍又は等しいことが可能である。上記試験4で記載された閾値も暫定値閾値である。具体的に示せば、試験4においてONが主として非配列相補性の作用機序で作用するかどうかを決定するための閾値は1μM、08μM、06μM、05μM、04μM、03μM、02μM、又は01μM未満のIC50であることができる。同様に、暫定値は上記4試験のいずれか1つを満たせば十分であるが、具体的に示せば、ONは、いずれか2つたとえば、試験1と2、1と3、1と4、2と3、2と4及び3と4、又はいずれか3つたとえば1と2と3、1と3と4、及び2と3と4又は暫定値閾値での試験の4つすべて、又は具体的に示せば、上述のような別の閾値を満たすように求められうる。ヘルペスウイルスのための抗ウイルスアッセイ以下のように実施されたプラーク減少アッセイHSV1又はHSV2について10の熱非働化ウシ胎児血清、ゲンタマイシン、バンコマイシン及びアンフォテレシンBを補完したMEMの存在下、37°C、5CO2にてVERO細胞ATCCCCL81を12穴組織培養用プレートで集密に増殖させた。集密に達した際、5ウシ胎児血清及び上で詳説した抗生物質を含有し、HSV1KOS株、総計40~60PFU又はHSV2MS2株、総計40~60PFUのいずれかを補完した培地に交換した。ウイルス吸収を90分間進行させ、その後、細胞を洗浄し、5ウシ胎児血清及び1ヒト免疫グロブリンを含有する新しい重層培地に交換した。吸収の3~4日後、細胞をホルマリン固定し、ホルマリン固定に続いてプラークを計数した。CMVについては、HSV12アッセイにおいてVERO細胞で特定したようにヒト線維芽細胞を増殖させた。培地成分及び吸収/重層手順は以下の例外を伴うが、同一である。1.CMVAD169株、総計40~60PFUを用いて、吸収中、細胞を感染させた。2.重層培地中1ヒト免疫グロブリンを4シープラークアガロースに置き換えた。ヘルペスウイルスについては、上述のプラークアッセイにて吸収中に適当な宿主細胞及び40~60PFUのウイルスを用いて、試験を実施すべきである。この試験は、試験終了時、化合物の非存在下にて同定可能なプラークが存在すれば有効であるにすぎない。IC50は、未処理の対照に比較して50のプラークが存在する濃度である。吸収中及び重層において調べるべき化合物は存在する。レトロウイルスのための抗ウイルスアッセイHIV1感染細胞の上清におけるすべてのp24の検出は以下のように行った。化合物の存在下、HIV1の一次単離物でヒトPBMCを感染させた。次いで、化合物を補完した新鮮な培地で細胞をさらに7日間インキュベートし、その後、市販のp24ELISAキットBIOMERIEUS又は同等物を用いて、上清中のp24のレベルを測定した。この試験は、感染、未処理細胞の組織培養上清にてp24の蓄積があれば有効であるにすぎない。IC50は、検出可能なp24の量が未処理の対照の存在するp24の50である濃度である。調べるべき化合物は、吸収中及び吸収後の培地に存在する。パラミクソウイルスのための抗ウイルスアッセイRSVについては、CPEの測定を以下のように行った:Hep2細胞を96穴プレートに播き、5ウシ胎児血清を加えたMEM中で37°C、5CO2にて一晩増殖させた。翌日2時間の吸収によって細胞にRSVA2株100μL/ウエル中1082TCID50mlを感染させた。吸収に続いて培地を交換し、7日間の増殖の後、生細胞によるアラマーブルー染料の蛍光付加体への変換によってCPEを測定した。本試験は、化合物非存在下の感染細胞におけるCPE測定値アラマーブルー変換により測定されたときが非感染細胞で測定された変換の10であれば有効であるにすぎない。IC50の比較の目的で、感染細胞で見られた変換レベルで100CPEを設定し、非感染細胞で見られた変換で0CPEを設定した。従って、IC50は、50CPEを生成する化合物の濃度である。調べるべき化合物は、吸収中及び吸収後の培地に存在する。明細書に引用された特許及びそのほかの参考文献はすべて、本発明が関係する当業者の技量のレベルを示しており、いかなる表及び図も含めて、それぞれの参考文献が個々にその全体を参考として本明細書に組み入れたのと同等に、それら全体を参考として組み入れる。当業者は、本発明が上手く適用されて、言及された結果及び利点並びにその中で固有のものを得ることを容易に十分に理解するであろう。好ましい態様の現在の代表として本明細書に記載された方法、変異及び組成物は典型的なものであって、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。その中の変更及びそのほかの用途が当業者に生じるであろうが、それらは本発明の範囲内に包含され、請求の範囲によって定義されている。本発明の範囲と精神から逸脱することなく、本明細書で開示された発明に対して種々の置換及び修正を行ってもよいことは当業者には容易に明らかであろう。たとえば、合成条件及びオリゴヌクレオチドの組成物に対して変更を行うことができる。従って、そのような追加的態様は、本発明及び請求の範囲内である。本明細書で好適に、説明的に記載された本発明を、本明細書で具体的に開示されていないいかなる要素、限定の非存在下で実践してもよい。従って、たとえば、本明細書の各例において、用語含む、本質的に成る及び成るのいかなるものも、ほかの2つの用語のいずれかで置き換えてもよい。採用された用語及び表現は、説明の用語として使用され、限定の用語ではなく、そのような用語及び表現の使用において、示された及び記載された特徴の同等物、又はその一部を排除する意図はないが、請求された発明の範囲内で様々な改変が可能であることが認識される。従って、本発明は好ましい態様及び任意の特徴によって具体的に開示されているが、本明細書の概念の修正及び変更は当業者に頼ってもよく、そのような修正及び変更が、添付のクレームによって定義される本発明の範囲内であるとみなされることが理解されるべきである。さらに、本発明の特徴及び局面がマーカッシュ群又は代替の他の群という点で記載される場合、当業者は、本発明がそれによって、マーカッシュ群又はそのほかの群の個々の一員又は亜群の一員という点で記載されることを理解するであろう。また、それとは反対に、記載していなければ、様々な数値が態様に対して提供される場合、範囲の端点として任意の2つの異なる値を利用することによって追加の態様が記載される。そのような範囲も記載された本発明の範囲内である。従って、追加の態様も本発明の範囲内であり、請求の範囲内である。表1オリゴヌクレオチドの説明