以下の工程を含む、微生物を用いた適合溶質Aの製造方法:1適合溶質Bの生合成能を低下又は欠失させ、且つ適合溶質A生合成に関連する外来遺伝子を導入した微生物を高浸透圧条件下で培養し、微生物中で適合溶質Aを生合成させる工程;2前記微生物中で生合成した適合溶質Aを、低浸透圧条件下で微生物から排出させ、回収する工程。高浸透圧条件が、塩化ナトリウム濃度NaClで換算した場合に05~4Mであり、低浸透圧条件が、同様に塩化ナトリウム濃度で換算した場合に0~05Mであることを特徴とする、請求項1に記載の製造方法。微生物が、ハロモナス属に属する微生物であることを特徴とする、請求項1又は2に記載の製造方法。ハロモナス属に属する微生物が、Halomonaselongataに属する微生物であることを特徴とする、請求項3に記載の製造方法。適合溶質Bが、エクトインであることを特徴とする、請求項3又は4に記載の製造方法。適合溶質Bの生合成能を低下又は欠失させることが、前記微生物のゲノム上に存在するエクトイン生合成オペロンのうち、エクトイン生合成に特異的な遺伝子の一部若しくは全部を除去することである、請求項5に記載の製造方法。適合溶質Aが、メチル化グリシンであることを特徴とする、請求項1~6のいずれかに記載の製造方法。メチル化グリシンが、グリシンからサルコシンを合成する経路を介して生合成されることを特徴とする、請求項7に記載の製造方法。メチル化グリシンが、少なくともグルコース、グリセロール及び/又はキシロースを炭素源として生合成されることを特徴とする、請求項7又は8に記載の製造方法。適合溶質Aの生合成に関連する外来遺伝子が、少なくともグリシンサルコシンメチル基転移酵素GSMTに関連する遺伝子である、請求項7~9のいずれかに記載の製造方法。グリシンサルコシンメチル基転移酵素GSMTに関連する遺伝子が、以下に示すいずれかの塩基配列からなる、請求項10に記載の製造方法:1配列表の配列番号1に示す塩基配列;2前記1に記載の塩基配列のうち、1若しくは数個の塩基が置換、欠失、挿入又は付加といった変異された配列からなる塩基配列;3前記1又は2に記載の塩基配列に対して縮重し、グリシンサルコシンメチル基転移酵素GSMTが有するアミノ酸配列をコードする塩基配列;4前記1~3のいずれかに記載の配列と、80以上の相同性を有する塩基配列。適合溶質Aの生合成に関連する外来遺伝子が、さらに、ジメチルグリシンメチル基転移酵素DMTに関連する遺伝子である、請求項10又は11に記載の製造方法。メチルグリシンメチル基転移酵素DMTに関連する遺伝子が、以下に示すいずれかの塩基配列からなる、請求項12に記載の製造方法:1配列表の配列番号2に示す塩基配列;2前記1に記載の塩基配列のうち、1若しくは数個の塩基が置換、欠失、挿入又は付加といった変異された塩基配列;3前記1又は2に記載の塩基配列に対して縮重し、メチルグリシンメチル基転移酵素DMTが有するアミノ酸配列をコードする塩基配列;4前記1~3のいずれかに記載の塩基配列と、80以上の相同性を有する塩基配列。適合溶質Aの生合成に関連する外来遺伝子が、さらにS-アデノシルメチオニンSAM合成酵素に関連する遺伝子である、請求項10~13のいずれかに記載の製造方法。S-アデノシルメチオニンSAM合成酵素に関連する遺伝子が、以下に示すいずれかの塩基配列からなる、請求項14に記載の製造方法:1配列表の配列番号3に示す塩基配列;2前記1に記載の塩基配列のうち、1若しくは数個の塩基が置換、欠失、挿入又は付加といった変異された塩基配列;3前記1又は2に記載の塩基配列に対して縮重し、S-アデノシルメチオニンSAM合成酵素が有するアミノ酸配列をコードする塩基配列;4前記1~3のいずれかに記載の塩基配列と、80以上の相同性を有する塩基配列。外来遺伝子の導入が、ハロモナス属に属する微生物のゲノム上に存在するエクトイン生合成オペロンのうち、浸透圧応答性プロモーターの制御下にある領域に、請求項11に記載のいずれかの塩基配列からなる遺伝子を導入することによる、請求項3~11に記載製造方法。外来遺伝子の導入が、ハロモナス属に属する微生物のゲノム上に存在するエクトイン生合成オペロンのうち、浸透圧応答性プロモーターの制御下にある領域に、さらに請求項13に記載のいずれかの塩基配列からなる遺伝子を導入することによる、請求項16に記載の製造方法。外来遺伝子の導入が、ハロモナス属に属する微生物のゲノム上に存在するエクトイン生合成オペロンのうち、浸透圧応答性プロモーターの制御下にある領域に、請求項15に記載のいずれかの遺伝子を導入することによる、請求項16又は17に記載の製造方法。浸透圧応答性プロモーターが、ハロモナス属に属する微生物のゲノム上に存在するエクトインの生合成オペロンの上流配列UectA中に含まれることを特徴とする、請求項16~18のいずれかに記載の製造方法。メチル化グリシンが、グリシンベタインである、請求項7~19のいずれかに記載の製造方法。メチル化グリシンが、ジメチルグリシンである、請求項7~11、14~16、18~19のいずれかに記載の製造方法。ハロモナス属に属する微生物のゲノムにおいて、エクトインの生合成オペロンのうち、浸透圧応答性のプロモーターを含み、エクトインの生合成に特異的な遺伝子領域の一部又は全部を欠損あるいは置換していることを特徴とする微生物。エクトインの生合成に特異的な遺伝子領域が、Lアスパラギン酸βセミアルデヒドからエクトインへの代謝において、Lジアミノ酪酸アミノ基転移酵素及び/又はLジアミノ酪酸アセチル基転移酵素の発現に必須な領域であることを特徴とする請求項22に記載の微生物。受領番号FERMAP22094で特定される微生物である、請求項22又は23に記載の微生物。本発明は、所望の適合溶質を容易に高生産可能な製法を提供することを課題とする。具体的には、微生物内に所望の適合溶質を生合成させ、容易に分離回収可能な製法を提供することを課題とする。本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、微生物が本来産生しうる主要な適合溶質の生合成能を低下又は欠失させ、且つ所望の適合溶質生合成に関連する外来遺伝子を導入した微生物を高浸透圧条件下で培養し、当該微生物中で所望の適合溶質を生合成させる工程を含み、さらに当該微生物中で生合成した所望の適合溶質を、低浸透圧条件下で微生物から排出させ、回収する工程を含む製造方法により、上記課題を解決しうることを見出し、本発明を完成した。すなわち本発明は、以下よりなる。1.以下の工程を含む、微生物を用いた適合溶質Aの製造方法:1適合溶質Bの生合成能を低下又は欠失させ、且つ適合溶質A生合成に関連する外来遺伝子を導入した微生物を高浸透圧条件下で培養し、微生物中で適合溶質Aを生合成させる工程;2前記微生物中で生合成した適合溶質Aを、低浸透圧条件下で微生物から排出させ、回収する工程。2.高浸透圧条件が、塩化ナトリウム濃度NaClで換算した場合に05~4Mであり、低浸透圧条件が、同様に塩化ナトリウム濃度で換算した場合に0~05Mであることを特徴とする、前項1に記載の製造方法。3.微生物が、ハロモナス属に属する微生物であることを特徴とする、前項1又は2に記載の製造方法。4.ハロモナス属に属する微生物が、Halomonaselongataに属する微生物であることを特徴とする、前項3に記載の製造方法。5.前記適合溶質Bが、エクトインであることを特徴とする、前項3又は4に記載の製造方法。6.適合溶質Bの生合成能を低下又は欠失させることが、前記微生物のゲノム上に存在するエクトイン生合成オペロンのうち、エクトイン生合成に特異的な遺伝子の一部若しくは全部を除去することである、前項5に記載の製造方法。7.適合溶質Aが、メチル化グリシンであることを特徴とする、前項1~6のいずれかに記載の製造方法。8.メチル化グリシンが、グリシンからサルコシンを合成する経路を介して生合成されることを特徴とする、前項7に記載の製造方法。9.メチル化グリシンが、少なくともグルコース、グリセロール及び/又はキシロースを炭素源として生合成されることを特徴とする、前項7又は8に記載の製造方法。10.適合溶質Aの生合成に関連する外来遺伝子が、少なくともグリシンサルコシンメチル基転移酵素GSMT関連遺伝子である、前項7~9のいずれかに記載の製造方法。11.グリシンサルコシンメチル基転移酵素GSMT関連遺伝子が、以下に示すいずれかの塩基配列からなる、前項10に記載の製造方法:1配列表の配列番号1に示す塩基配列;2前記1に記載の塩基配列のうち、1若しくは数個の塩基が置換、欠失、挿入又は付加といった変異された配列からなる塩基配列;3前記1又は2に記載の塩基配列に対して縮重し、グリシンサルコシンメチル基転移酵素GSMTが有するアミノ酸配列をコードする塩基配列;4前記1~3のいずれかに記載の配列と、80以上の相同性を有する塩基配列。12.適合溶質Aの生合成に関連する外来遺伝子が、さらに、ジメチルグリシンメチル基転移酵素DMT関連遺伝子である、前項10又は11に記載の製造方法。13.メチルグリシンメチル基転移酵素DMT関連遺伝子が、以下に示すいずれかの塩基配列からなる、前項12に記載の製造方法:1配列表の配列番号2に示す塩基配列;2前記1に記載の塩基配列のうち、1若しくは数個の塩基が置換、欠失、挿入又は付加といった変異された塩基配列;3前記1又は2に記載の塩基配列に対して縮重し、メチルグリシンメチル基転移酵素DMTが有するアミノ酸配列をコードする塩基配列;4前記1~3のいずれかに記載の塩基配列と、80以上の相同性を有する塩基配列。14.適合溶質Aの生合成に関連する外来遺伝子が、さらにS-アデノシルメチオニンSAM合成酵素関連遺伝子である、前項10~13のいずれかに記載の製造方法。15.S-アデノシルメチオニンSAM合成酵素関連遺伝子が、以下に示すいずれかの塩基配列からなる、前項14に記載の製造方法:1配列表の配列番号3に示す塩基配列;2前記1に記載の塩基配列のうち、1若しくは数個の塩基が置換、欠失、挿入又は付加といった変異された塩基配列;3前記1又は2に記載の塩基配列に対して縮重し、S-アデノシルメチオニンSAM合成酵素が有するアミノ酸配列をコードする塩基配列;4前記1~3のいずれかに記載の塩基配列と、80以上の相同性を有する塩基配列。16.外来遺伝子の導入が、ハロモナス属に属する微生物のゲノム上に存在するエクトイン生合成オペロンのうち、浸透圧応答性プロモーターの制御下にある領域に、前項11に記載のいずれかの塩基配列からなる遺伝子を導入することによる、前項3~11に記載製造方法。17.外来遺伝子の導入が、ハロモナス属に属する微生物のゲノム上に存在するエクトイン生合成オペロンのうち、浸透圧応答性プロモーターの制御下にある領域に、さらに前項13に記載のいずれかの塩基配列からなる遺伝子を導入することによる、前項16に記載の製造方法。18.外来遺伝子の導入が、ハロモナス属に属する微生物のゲノム上に存在するエクトイン生合成オペロンのうち、浸透圧応答性プロモーターの制御下にある領域に、前項15に記載のいずれかの遺伝子を導入することによる、前項16又は17に記載の製造方法。19.浸透圧応答性プロモーターが、ハロモナス属に属する微生物のゲノム上に存在するエクトインの生合成オペロンの上流配列UectA中に含まれることを特徴とする、前項16~18のいずれかに記載の製造方法。20.メチル化グリシンが、グリシンベタインである、前項7~19のいずれかに記載の製造方法。21.メチル化グリシンが、ジメチルグリシンである、前項7~11、14~16、18~19のいずれかに記載の製造方法。22.ハロモナス属に属する微生物のゲノムにおいて、エクトインの生合成オペロンのうち、浸透圧応答性のプロモーターを含み、エクトインの生合成に特異的な遺伝子の一部又は全部を欠損あるいは置換していることを特徴とする微生物。23.エクトインの生合成に特異的な遺伝子が、Lアスパラギン酸βセミアルデヒドからエクトインへの代謝において、Lジアミノ酪酸アミノ基転移酵素及び/又はLジアミノ酪酸アセチル基転移酵素の発現に必須な領域であることを特徴とする前項22に記載の微生物。24.受領番号FERMAP22094で特定される微生物である、前項22又は23に記載の微生物。本発明の適合溶質の製造方法により、所望の適合溶質Aを微生物内に生合成させ、高密度で蓄積させることを可能とし、かつ、蓄積された微生物内の適合溶質Aを容易に分離回収することができる。これにより、適合溶質Aを高生産することができる。具体的には、微生物が本来有する適合溶質Bの生合成能を低下又は欠失させ、且つ適合溶質Aの生合成に関連する外来遺伝子を導入した微生物を高浸透圧条件下で培養することにより、適合溶質Aを微生物内に生合成させ、高密度で蓄積させることができる。また、当該微生物を低浸透圧条件で処理することで、微生物を破砕することなく適合溶質Aを容易に微生物該へ排出させ、回収することができる。さらに、使用した微生物を繰り返し利用することで、適合溶質Aを連続して高生産することができ、安定的に供給可能となる。本発明は、微生物を利用することを特徴とする適合溶質の製造方法に関する。本発明は、高浸透圧条件下で適合溶質を生合成蓄積しうる微生物を宿主として用いて、所望の適合溶質を製造する方法に関する。本明細書において所望の適合溶質は、微生物が本来産生しうる主要な適合溶質とは異なる別の物質の意味で用いられる。以下、本明細書において、所望の適合溶質を適合溶質Aといい、当該微生物が本来産生しうる主要な適合溶質を適合溶質Bとして区別して述べる。また、本明細書において適合溶質全般を意味し、両者を区別しない場合は、AやBなどの識別する用語を用いないものとする。本明細書において、適合溶質Aの製造方法は以下の工程を含む。1微生物が本来有する適合溶質Bの生合成能を低下又は欠失させ、且つ適合溶質A生合成に関連する外来遺伝子を導入した微生物を高浸透圧条件下で培養し、微生物中で適合溶質Aを生合成させる工程;2前記微生物中で生合成した適合溶質Aを、低浸透圧条件下で微生物から排出させ、回収する工程。本発明の製造方法において、高浸透圧条件及び低浸透圧条件は、上記の工程1の浸透圧条件高浸透圧条件に比べて、工程2の浸透圧条件が相対的に低い浸透圧条件低浸透圧条件であればよい。微生物を、工程1の浸透圧条件に比べて、工程2で相対的に低い浸透圧条件で処理することにより、適合溶質Aを微生物から排出させることができる。本明細書において、高浸透圧条件とは、塩化ナトリウム濃度で換算した場合に、05~4M程度の条件とすることができ、例えば051~36Mであり、好ましくは075~36Mであり、より好ましくは10~32Mであり、さらに好ましくは約20~26Mである。また、本発明における低浸透圧条件とは、同様に塩化ナトリウム濃度で換算した場合に0~05M程度の条件とすることができ、好ましくは、0~034Mとすることができ、例えば水の条件であってもよい。ただし、本発明の製造方法に使用する微生物を製造において複数回使用することを考慮すると、微生物が破裂しない程度の低浸透圧条件であることが好適である。そのような条件としては、002~006Mである。上記の範囲から、工程1で選択した高浸透圧条件に比べ、工程2では工程1で選択した条件より相対的に低い浸透圧条件を適宜選択することができる。本明細書において、微生物とは、高浸透圧条件下で適合溶質を生合成蓄積しうる微生物であり、例えば好塩性菌が挙げられる。好塩性菌の種類としては、至適塩濃度により、低度好塩性菌、中度好塩性菌、高度好塩性菌等が挙げられる。本発明に使用可能な微生物としては、好ましくは中度好塩性菌であり、具体的にはハロモナス属、クロモハロバクター属、アクロモバクター属Achromobacter、アシディフィラム属Acidiphilium、アルカニボラクス属Alcanivorax、アミコラトプシス属Amycolatopsis、バチルス属Bacillus、ヘルミニイモナス属Herminiimonas、ハイフォモナス属Hyphomonas、キトコッカス属Kytococcus、マリノバクター属Marinobacter、マリノモナス属Marinomonas、マイコバクテリウム属Mycobacterium、ニトロソプミルス属Nitrosopumilus、ノカルジア属Nocardia、オクロバクテリウム属Ochrobactrum、パエニバチルス属Paenibacillus、リゾビウム属Rhizobium、ロドコッカス属Rhodococcus、サッカロモノスポラ属Saccharopolyspora、サッカロポリスポラ属Saccharopolyspora、スフィンゴピキシス属Sphingopyxis、スチグマテラ属Stigmatella、ストレプトマイセス属Streptomycesなどに属する微生物等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。上記のうち、ハロモナス属に属する微生物としては、Helongata、Hboliviensis、Hcampisalis、Hhalmophila、Hhalophila、Hhalodenitrificans、Hvariabilisが挙げられ、入手可能な菌株としては、HboliviensisDSM15516T、HcampisalisATCC700597、HelongataATTC33173T、HelongataDSM142、HelongataDSM2581T、HelongataOUT30018、HhalmophilaCCM2833T、HhalophilaCCM3662T、HhalodenitrificansDSM735T、HvariabilisDSM3051Tが挙げられる。また、クロモハロバクター属に属する微生物としては、Cmarismortui及びCsalexigensが挙げられ、入手可能な菌株としては、CmarismortuiATCC17056及びCsalexigensDSM3043Tが挙げられる。上記のうち、エクトイン生合成遺伝子を有する全ゲノム解読済みの菌株としてはHelongataDSM2581T及びCsalexigensDSM3043が挙げられる。その他、エクトイン生合成遺伝子を有する全ゲノム解読済みの菌株としては、例えばAchromobacterxylosoxidansA8、AcidiphiliumcryptumJF5、AcidiphiliummultivorumAIU301、AlcanivoraxborkumensisSK2、AmycolatopsismediterraneiU32、BacillusclausiiKSMK16、BacilluspseudofirmusOF4、Bordetellaavium197N、BrachybacteriumfaeciumDSM4810、Herminiimonasarsenicoxydans、HyphomonasneptuniumATCC15444、KytococcussedentariusDSM20547、MarinobacteraquaeoleiVT8、MarinomonasspMWYL1、MycobacteriumgilvumPYRGCK、MycobacteriumsmegmatisstrMC2155、MycobacteriumspJLS、MycobacteriumspKMS、MycobacteriumspMCS、MycobacteriumvanbaaleniiPYR1、NitrosopumilusmaritimusSCM1、NocardiafarcinicaIFM10152、OchrobactrumanthropiATCC49188、PaenibacillusspY412MC10、Rhizobiumleguminosarumbvviciae3841、Rhodococcusequi103S、RhodococcusopacusB4、SaccharomonosporaviridisDSM43017、SaccharopolysporaerythraeaNRRL2338、SphingopyxisalaskensisRB2256、StigmatellaaurantiacaDW431、StreptomycesavermitilisMA4680、StreptomycesgriseussubspgriseusNBRC13350、Streptomycesscabiei8722等が挙げられる。その他、エクトインを産生しうる微生物として、BrevibacteriumepidermisDSM20659、Brevibacteriumlinens、BrevibacteriumspstrainJCM6894、KocuriavariansCCM3316、NesterenkoniahalobiaDSM20541T、NocardiopsisspA51、StreptomycescoelicolorA3、StreptomycesgriseolusDSM40067T、BacillusalcalophilusDSM485T、BacillusagaradhaerensDSM8721T、BacillusclarkiiDSM8720T、BacillushaloduransDSM497T、BacillusmojavensisDSM9205T、BacilluspseudalcaliphilusDSM8725T、BacilluspseudofirmusDSM8715T、GracilibacillushalotoleransDSM11805T、HalobacillushalophilusDSMZ2266THalobacillustrueperiDSM10404T、MarinococcushalophilusDSM20408T、MarinococcusspM52、SalimicrobiumalbusDSM20748T、SporosarcinapasteuriiDSM33T、SporosarcinapsycrophilaDSM3T、VirgibacillusmarismortuiDSM12325T、VirgibacilluspantothenticusDSM26、VirgibacillussalexigensDSM11438、RhodovibriosalinarumBN40、RhodovulumsulfidophilumDSM1374T、HalorhodospiraabdelmalekiiDSM2110T、HalorhodospirahalochlorisDSM1059T、HalorhodospirahalophilaDSM244T、PantoeaagglomeransstrainCPA2、PseudomonashalophilaDSM3050T、PseudomonashalosaccharolyticaCCM2851、ThioalkalibacterhalophilusDSMZ19224、VibrioalginolyticusDSM2171T、VibriocholeraeO139strainMO10、VibriocosticolaCCM2811、VibriofischeriDSM507、VibriofischeriDSM7151、VibrioharveyiDSM2165、VibrioharveyiDSM6904、VibrioparahaemolyticusRIMD2210633等が挙げられる。本明細書において、適合溶質Bとは、高浸透圧条件下で適合溶質を生合成蓄積しうる微生物が、本来産生しうる適合溶質であればよく、特に当該微生物内に高密度に蓄積される適合溶質が好ましい。例えばハロモナス属に属する微生物では、エクトイン、ヒドロキシエクトイン、Nγアセチルジアミノ酪酸などが挙げられ、特に好ましくはエクトインである。アクチノポリスポラActinopolyspora属に属する微生物では、グリシベタイン、トレハロースなどが挙げられ、バシラスBacillus属に属する微生物では、プロリン、グルタミン酸、グルタミンなどが挙げられる。本明細書において、適合溶質Bの生合成能を低下又は欠失とは、適合溶質Bの生合成能が通常の場合より低い量に抑制されていること、又は全く生合成されないことをいう。この場合において、適合溶質Bの生合成能は低いほうが適合溶質Aを高密度に生合成することができる。従って、適合溶質Bの生合成能は、野生型を100とした場合に、60以下、好ましくは、40以下、より好ましくは20以下に低下しているのか好ましく、生合成能が欠失しているのが最も好ましい。適合溶質Bの生合成能を低下又は欠失させるための手段として、適合溶質Bを生合成するのに必須の酵素をコードする遺伝子のコード領域内の変異導入による酵素活性の低下又は欠失させることができればよい。遺伝子のコード領域内の変異導入は、微生物のゲノム上に存在する適合溶質B生合成に特異的な遺伝子の一部又は全部を欠損させることが考えられる。適合溶質B生合成に特異的な遺伝子としては、例えば適合溶質Bを生合成するのに必須の酵素関連遺伝子が挙げられる。適合溶質Bの生合成において複数の酵素が必須の場合は、それらの酵素のうちいずれか1種以上又は全ての酵素関連遺伝子の一部又は全部を欠損させてもよい。生合成に特異的な遺伝子の一部又は全部を欠損させる方法は、遺伝子組み換えの手法等、自体公知の方法によることができる。例えば、目的遺伝子の部分配列を改変し、正常に機能する酵素を産生しないようにした変異型遺伝子を作製し、当該変異型遺伝子を含むDNA、或いは遺伝子の一部又は全部を欠損させたDNAで、微生物のゲノム上の遺伝子と相同組換えを起こさせることにより、ゲノム上の目的遺伝子の一部又は全部を欠損させることが出来る。このような相同組換えを利用した遺伝子置換は、Redドリブンインテグレーションと呼ばれる方法ProcNatlAcadSciUSAVol97p66406645、Redドリブンインテグレーション法とλファージ由来の切り出しシステムJBacteriolVol184p52005203と組合わせた方法WO2005010175号参照等を参照することができる。さらに、ハロモナス属に属する菌株の遺伝子操作に参考となる公知文献としては、JournalofBacteriologyVol184p30783085が挙げられる。上記において、適合溶質Bを本来産生する微生物のゲノム上に有する浸透圧応答性のプロモーターは、除去しないことが必要である。当該微生物が有する浸透圧応答性プロモーターの下流に、適合溶質Aの生合成に関連する外来遺伝子を導入することで、高浸透圧条件下で適合溶質Aを生合成することが可能となるからである。この場合において、適合溶質Aは、適合溶質Bとは異なる適合溶質であればよく、特に限定されない。本発明における浸透圧応答性プロモーターとは、微生物の適合溶質Bの産生系に必要な浸透圧応答性プロモーターが挙げられる。具体的には、例えばハロモナス属に属するHelongataの適合溶質Bであるエクトインの産生系に必要な浸透圧応答性プロモーターが挙げられる。Helongataの場合は、浸透圧応答性プロモーターは、当該微生物のゲノム上に存在するエクトインの生合成オペロンの上流配列UectA中に含まれる図1、2参照。本明細書において、適合溶質Aの生合成に関連する外来遺伝子とは、本明細書の微生物がゲノム上に本来有する遺伝子とは異なる遺伝子であって、適合溶質Aの生合成に必須のタンパク質等に関連する遺伝子が挙げられる。生合成に必須のタンパク質として、例えば、微生物内で所望の適合溶質Aを生合成するために必要な酵素等が挙げられる。例えば、ハロモナス属に属する微生物では、適合溶質Bとしてのエクトインの生合成能を低下又は欠失させて、適合溶質Aの生合成に関連する外来遺伝子を導入することで、高浸透圧条件下で適合溶質Aを生合成することができる図1参照。エクトインの生合成能を低下又は欠失させるためには、ハロモナス属に属する微生物のゲノムにおいて、エクトインの生合成オペロンのうち上流配列UectA中に含まれる浸透圧応答性プロモーターを残しておけば、エクトイン生合成に特異的な遺伝子の一部又は全部を欠損させてもよい。エクトイン生合成に特異的な遺伝子として、Lアスパラギン酸βセミアルデヒドからエクトインへの代謝に必要な酵素関連遺伝子が挙げられる。当該必要な酵素として、Lジアミノ酪酸アミノ基転移酵素及び/又はLジアミノ酪酸アセチル基転移酵素が挙げられる非特許文献1参照。これらの酵素は、EctA、EctB、EctCで表すことができ、これらに関連する遺伝子を各々ectA、ectB、ectCで表すことができる図3参照。本明細書において、エクトインの生合成能を低下又は欠失は、エクトインの生合成オペロンのうち、ectA、ectB、ectCから選択される1種又は複数の遺伝子の、一部又は全部を欠損させることにより、達成することができる図3参照。この場合において、エクトインの生合成能は低いほうが適合溶質Aを高密度に生合成することができる。従って、エクトインの生合成能は、野生型を100とした場合に、60以下、好ましくは40以下、より好ましくは20以下に低下しているのか好ましく、生合成能が欠失しているのが最も好ましい。上記において、適合溶質Aの種類は、上記のハロモナス属に属する微生物がゲノム上に有する浸透圧応答性プロモーターの制御下、即ち、当該浸透圧応答性プロモーターの下流に、適合溶質Aの生合成に関連する外来遺伝子を導入することができるのであれば特に限定されない。本発明の製造方法において、適合溶質Aとして、具体的にはメチル化グリシンを製造することができる。本明細書のメチル化グリシンとしては、例えばグリシンベタイン、ジメチルグリシンやサルコシンが挙げられ、最も好適にはグリシンベタインが挙げられる。グリシンベタインは、種々の生物が乾燥や塩ストレスなど外的浸透圧変化に応じて細胞内の浸透圧を維持するために蓄積する適合溶質の1種である。細菌、植物、動物は、乾燥又は塩ストレスの条件のもとでベタインを生合成し、蓄積するが、これらの多くの生物においては、コリンからベタインアルデヒド、さらにベタインアルデヒドからグリシンベタインへの二段階酸化反応によってグリシンベタインが生合成される図4。大腸菌を含む多くの細菌や植物の葉緑体などでは、コリンデヒドロゲナーゼBetA及びベタインアルデヒドデヒドロゲナーゼBetBが各段階の反応を触媒することが知られている。古細菌のメタン細菌、好気性従属真正細菌、嫌気性光栄養細菌、シアノバクテリアの中には単純な炭素源からグリシンベタインを生合成する能力を有する生物種が発見されている。これまでに、好気性従属真正細菌であるActinopolysporahalophila、嫌気性光栄養細菌であるEctothiorhodopspirahalochloris、シアノバクテリアであるAphanothecehalophyticaにおいて、アミノ酸であるグリシンからサルコシン、サルコシンからジメチルグリシン、ジメチルグリシンからグリシンベタインの三段階のメチル化反応によってグリシンベタインが生合成されることが明らにされている図4、5。グリシンからサルコシンを合成する経路を介してメチル化グリシンを産生する場合には、グリシンからのメチル基転移反応にメチル基転移酵素を必要とする。グリシンからサルコシンへ、サルコシンからジメチルグリシンへのメチル化反応に必須のメチル基転移酵素は、グリシンサルコシンメチル基転移酵素以下単に、GSMTともいう。である。また、ジメチルグリシンからグリシンベタインへのメチル化反応に必須の酵素は、ジメチルグリシンメチル基転移酵素以下、単にDMTともいう。である図4、5参照。また、グリシンへのメチル基供与体として、Sアデノシルメチオニン以下、単にSAMともいう。が挙げられる図5参照。メチオニンにアデノシン三リン酸ATPとSAM合成酵素が作用してSAMが生合成される。適合溶質Aとしてのメチル化グリシンは、微生物中にグリシンからサルコシンを生合成する経路が存在しない場合に、グリシンからサルコシンを生合成する経路に関連する外来遺伝子を導入することで、生合成することができる。より詳しくは、当該微生物の適合溶質Bの生合成能を低下又は欠失させ、且つグリシンからサルコシンを合成するのに必要なメチル基転移酵素に関連する外来遺伝子を導入し、当該微生物を高浸透圧条件下で培養することで、微生物中でメチル化グリシンを生合成することができる。この場合に使用可能な微生物は、上述の本明細書における微生物であって、グリシンからサルコシンを生合成する経路が存在しない微生物であればよく、特に限定されない。前記微生物に、メチル基転移酵素に関連する遺伝子を導入することにより、グリシンからサルコシンを合成する経路を介してメチル化グリシンを生合成することができる図4参照。グリシンからサルコシンを生合成する経路に関連する外来遺伝子として、上述のごとく、グリシンからサルコシンへのメチル基転移反応に必要なメチル基転移酵素関連遺伝子が挙げられる。具体的には、上述のGSMT関連遺伝子が挙げられる。GSMT関連遺伝子を本発明の微生物に導入することで、グリシンからサルコシンを合成する経路を、微生物に導入することができる。さらに、GSMTは、サルコシンからジメチルグリシンの生合成にも作用する。従って、本発明の適合溶質の製造方法のうち、メチル化グリシンの製造方法においては、微生物に少なくともGSMT関連遺伝子を導入することが必要である。また、ジメチル化グリシンからグリシンベタインを生合成させるために、DMT関連遺伝子を導入することが必要である。また、GSMT及びDMTがつながった酵素もクローニングされておりJBiologicalChemistry278pp49324942、GSDMT関連遺伝子を本発明の微生物に導入してもよい。グリシンのメチル化を効率的に行うために、SAM合成酵素関連遺伝子を本発明の微生物にさらに導入してもよい。SAM合成酵素を発現させるために、本発明の微生物のゲノム上に存在するSAM合成酵素関連遺伝子を利用してもよい。本発明の微生物が、ハロモナス属に属する微生物、具体的にはHelongataの場合は、メチル化グリシンのうち、特にサルコシン及び/又はジメチルグリシンを生合成させるために、エクトインの産生系に必要な浸透圧応答性プロモーターの下流領域に、少なくともGSMT関連遺伝子を導入することができる。さらに、グリシンベタインを生合成させるために、DMT関連遺伝子を導入することができる図3参照。GSMT関連遺伝子及びDMT関連遺伝子を、エクトインの産生系に必要な浸透圧応答性プロモーターの下流領域に導入することにより、グリシンベタイン産生用のポリシストロン性オペロンを構築することができる。当該グリシンベタイン産生用のポリシストロン性オペロンには、SAM合成酵素関連遺伝子を含んでいてもよい図3参照。本発明の微生物が、ハロモナス属に属する微生物、具体的にはHelongataの場合では、野生型の場合に、グリシンベタインは脂質の代謝経路であるコリンからの二段階酸化反応によって生合成されるが図4参照、コリンから産生されるグリシンベタインの産生量は限られている。一方、本発明の製造方法によれば、植物バイオマス由来の主要な炭素源である、グルコース、グリセロール及び/又はキシロースなどの豊富で単純な炭素源を利用し、これより産生される必須アミノ酸のグリシンを介して、微生物内にメチル化グリシンを生合成し、高密度に蓄積することができる。本発明において、GSMT関連遺伝子は、以下に示すいずれかの塩基配列からなる。1配列表の配列番号1に示す塩基配列;2前記1に記載の塩基配列のうち、1若しくは数個の塩基が置換、欠失、挿入又は付加といった変異された配列からなる塩基配列;3前記1又は2に記載の塩基配列に対して縮重し、GSMTが有するアミノ酸配列をコードする塩基配列;4前記1~3のいずれかに記載の配列と、80以上の相同性を有する塩基配列。本発明において、DMT関連遺伝子は、以下に示すいずれかの塩基配列からなる。1配列表の配列番号2に示す塩基配列;2前記1に記載の塩基配列のうち、1若しくは数個の塩基が置換、欠失、挿入又は付加といった変異された塩基配列;3前記1又は2に記載の塩基配列に対して縮重し、DMTが有するアミノ酸配列をコードする塩基配列;4前記1~3のいずれかに記載の塩基配列と、80以上の相同性を有する塩基配列。本発明において、SAMS関連遺伝子は、以下に示すいずれかの塩基配列からなる。1配列表の配列番号3に示す塩基配列;2前記1に記載の塩基配列のうち、1若しくは数個の塩基が置換、欠失、挿入又は付加といった変異された塩基配列;3前記1又は2に記載の塩基配列に対して縮重し、SAM合成酵素が有するアミノ酸配列をコードする塩基配列;4前記1~3のいずれかに記載の塩基配列と、80以上の相同性を有する塩基配列。各酵素遺伝子の塩基配列のうち、1若しくは数個の塩基が置換、欠失、挿入又は付加の変異を生じさせる方法としては、PCR法、エラープローンPCR法、DNAシャッフリング法やキメラ酵素を作製する手法等の公知の方法を利用することができる。これらの手法を用いて得られた各酵素遺伝子の塩基配列によりコードされる各アミノ酸配列を有する酵素の比活性や安定性の評価を行うことで、本願に適した高活性酵素又は高安定性酵素を選抜することができる。この場合において、1若しくは数個の塩基が置換、欠失、挿入又は付加とは、1~15個程度の塩基が置換、欠失、挿入又は付加していてもよいことを意味する。本発明は、ハロモナス属に属する微生物のゲノムにおいて、エクトインの生合成オペロンのうち、浸透圧応答性のプロモーターを含み、エクトインの生合成に特異的な遺伝子領域の一部又は全部を欠損あるいは置換していることを特徴とする微生物にも及ぶ。エクトインの生合成に特異的な領域とは、エクトインの生合成オペロンのうち、エクトインの生合成に特異的な酵素をコードする遺伝子領域が挙げられる。エクトインの生合成に特異的な酵素とは、Lアスパラギン酸βセミアルデヒドからエクトインへの代謝において、Lジアミノ酪酸アミノ基転移酵素及び/又はLジアミノ酪酸アセチル基転移酵素が挙げられる非特許文献1:BiotechnologyAdvances28782801参照。これらの酵素は、EctA、EctB、EctCで表すことができ、これらに関連する遺伝子を各々ectA、ectB、ectCで表すことができる図3参照。エクトインの生合成に特異的な遺伝子領域の一部又は全部を欠損あるいは置換しているとは、具体的にはectA、ectB及びectCから選択される1種又は複数の遺伝子の一部又は全部を欠損し図3参照、あるいは他の遺伝子に置換されている例えば図3~参照ことをいう。具体的には、Helongataのエクトインの生合成オペロンectABC領域を欠失している株HalomonaselongataKA1が挙げられ、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター〒3058566茨城県つくば市東111つくばセンター中央第6に寄託申請され、受領番号FERMAP22094として平成23年3月31日に受領されている。本発明において、適合溶質Bの生合成能を低下又は欠失させ、且つ適合溶質A生合成に関連する外来遺伝子を導入した微生物を高浸透圧条件下で培養して生合成された適合溶質Aは、微生物中に生合成され、高密度に蓄積されており、係る微生物を低浸透圧条件で処理することで微生物を破砕することなく、適合溶質Aを容易に微生物該へ排出させ、回収することができる。具体的には、ハロモナス属に属する微生物例えば、Helongataが本来産生しうるエクトインの生合成能を低下又は欠失させ、且つメチル化グリシン生合成に関連する外来遺伝子を導入した微生物を高浸透圧条件下で培養して生合成されたメチル化グリシン例えば、グリシンベタイン、ジメチルグリシンは、微生物中に高密度で蓄積されており、係る微生物を低浸透圧条件で処理することで微生物を破砕することなく、メチル化グリシンを容易に微生物外へ排出させ、回収することができる。例えば当該低浸透圧溶液に微生物を懸濁することで、微生物を破砕することなく、メチル化グリシンを容易に微生物外へ排出させ、回収することができる。本発明の理解を深めるために、以下に実施例及び実験例を示して具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではないことは明らかである。実施例1グリシンベタイン生合成のための組換型ハロモナス菌株の作製本実施例では、中度好塩性細菌が高浸透圧条件下で適合溶質のエクトインを高密度に生合成する機構を活用し、エクトインに替わりグリシンベタインを高密度に生合成する組換型ハロモナス菌株を作製した。1使用菌株以下の実施例、実験例でも同様エクトイン生合成オペロンを欠損したHelongataKA1株以下、ハロモナス菌KA1株を使用した。即ち、ハロモナス菌KA1株は、エクトイン非産生株である。ハロモナス菌の培養は37°Cで行い、LB培地、M63最小培地炭素源として、02グリセロール又はグルコースを添加、又は人工海水培地炭素源として02グルコース、グリセロール、又はキシロースを添加を基本として使用し、必要に応じて2×又は4×ダイゴIMK培地及びNaClを適当量添加した培地を使用した。2グリシンベタイン生合成のための遺伝子の設計ハロモナス菌KA1株に、グリシンを出発物質としたグリシンベタイン生合成能力を付与するのに必要な2種類の酵素、GMST及びDMTに関連する各遺伝子は、耐塩性シアノバクテリアAphanothecehalophyticaにおいて同定された酵素のアミノ酸配列をもとに設計した。GSMT関連遺伝子及びDMT関連遺伝子については、それらのコドン使用頻度をハロモナス菌KA1株での発現用に最適化した人工遺伝子HeGSMT配列番号1及びHeDMT配列番号2を設計して使用した。さらに、SAMの供給に機能するSAM合成酵素については、ハロモナス菌ゲノム上にコードされたSAMS関連遺伝子配列番号3をサブクローニングして使用した。また、遺伝子発現量を解析するためのレポーターとして赤色蛍光タンパク質をコードしたmCherry遺伝子赤色蛍光タンパク質レポーター遺伝子配列番号4を使用した。各遺伝子について、遺伝子組換え操作等のために制限酵素認識部位を付加したものは、各々配列番号7~10に示した図6~9参照。3相同組換用プラスミドの構築ハロモナス菌が高浸透圧条件下で適合溶質のエクトインを高密度に生合成する機構を活用し、ハロモナス菌KA1株を用いて、エクトインの替わりにグリシンベタインを高密度に生合成する組換型ハロモナス菌株を作製するためのプラスミドを構築した。プラスミドは、必要な相同組換領域として、エクトイン生合成オペロンectABCの上流配列UectA配列番号5及び下流配列DectC配列番号6をゲノムPCR法によりクローン化し、赤色蛍光タンパク質mCherryをコードしたレポーター遺伝子配列番号4と連結して、pK18mobsacBUectAmCherryDectCプラスミドとした。そして、mCherryの下流に目的遺伝子X、具体的には2種類のメチル基転移酵素関連遺伝子をポリシストロン性のオペロンとして挿入し、pK18mobsacBUectAmCherryGSMTDMTDectCプラスミドを構築した図1参照。さらに、配列番号3に示す配列からなるSAMS関連遺伝子をポリシストロン性のオペロンとして挿入し、pK18mobsacBUectAmCherryGSMTSAMSDMTDectCプラスミドを構築した。コントロールとして、mCherry遺伝子単独発現のプラスミドを同様に構築した。エクトイン生合成オペロンectABCの上流配列UectAには、エクトインの産生に必要なプロモーター領域が含まれる図2参照。UectA及びDectCについて、制限酵素認識部位を付加したものは、各々配列番号11及び12に示した図10~11参照。4組換型ハロモナス菌株の作製上記3で構築した各種オペロンを含む上述の各種相同組換用プラスミドを、接合伝達法によりハロモナス菌KA1株へ導入した。そして、導入した相同組換用プラスミドDNAとハロモナス菌ゲノム上の標的DNAの相同領域配列UectA又はDectC間で起きる二段階の相同組換反応により、目的遺伝子Xを標的領域、即ち高浸透圧条件に応答して発現が誘導される適合溶質エクトインの生合成オペロンectABCのプロモーター領域を含むUectA配列の下流に挿入した組換型ハロモナス菌株を作製した図1参照。ハロモナス菌野生型株及び組換型ハロモナス菌株におけるエクトイン生合成オペロン領域のゲノム構造を図3に示した。図3に示したエクトイン非生産性のハロモナス菌株KA1は、野生型のハロモナス菌がゲノム上に有する適合溶質エクトインの生合成オペロンectABCのうち、ectAの第2コドンからectCの最終コドンの領域を欠損したゲノム構造を有しており、ectABCオペロンのプロモーター領域を含むUectA配列とectABCオペロンのターミネーター領域を含むDectCを保持している。野生型株:エクトイン生合成オペロンectABCを有する野生型株△ect株:ectABCを欠損した株KA1株△ectmCherry株:ectABCオペロンのプロモーター領域を含むUectA配列の下流にmCherryを挿入した株△ectmCherryGSMTDMT株:ectABCオペロンプロモーター領域を含むUectA配列の下流にmCherry、HeGSMT、及びHeDMTを挿入した株△ectmCherryGSMTSAMSDMT株:ectABCオペロンのプロモーター領域を含むUectA配列の下流にmCherry、HeGSMT、HeDMT、及びSAM合成酵素遺伝子を挿入した株上記のうち、Helongataよりエクトインの生合成オペロンectABC領域を欠損させた△ect株HalomonaselongataKA1は、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター〒3058566茨城県つくば市東111つくばセンター中央第6に寄託申請され、受領番号FERMAP22094として平成23年3月31日に受領されている。実験例1-1発現解析本実験例では、実施例1で作製した組換型ハロモナス菌株に導入したグリシンベタイン生合成オペロンの発現解析を行った。レポーターとして導入したmCherry遺伝子の発現量を蛍光シグナルとして検出することにより、塩ストレスに応答したグリシンベタイン生合成オペロンの遺伝子発現様式を解析した。2又は6NaClを含む改変LB寒天培地上で培養した組換型ハロモナス菌株の赤色蛍光シグナルを検出した。mCherry蛍光の写真はLAS4010GE社製にて撮影した。その結果、2NaCl条件に対し、6NaClの高浸透圧条件下でより強い蛍光シグナルが検出されたことから、高浸透圧条件に応答して人工グリシンベタイン生合成オペロンを強発現する組換型ハロモナス菌株の創製に成功したことが示された図12。図12における色が濃いものについて、mCherry由来の赤色蛍光シグナル強度が強いことを示す。実験例1-2組換型ハロモナス菌株によるグリシンベタインの検出本実験例では、実施例1で作製した組換型ハロモナス菌株において、導入したグリシンベタイン生合成オペロンが機能的に発現しているかを検証するため、3NaClを含むM63最少培地炭素源として02グルコースを含むで各種ハロモナス菌株を培養した。各種ハロモナス菌株から超純水による低浸透圧処理により抽出された適合溶質成分ジメチルグリシン、グリシンベタイン、エクトインをHPLCにより分析した。HPLCの分析手法は、ClinicalChemistry44919371941を参照した。具体的には、細胞抽出液中のカルボニル基を有するグリシンベタインやエクトインを含む化合物を4ブロモフェナシルブロミドでラベル化して行った。HPLC分析カラムは、SupelcosilTMLCSCX5μm25cm×46cmを使用し、カラム温度28°C、流速15mLmin、UV検出器の波長254nmの条件により検出した。溶媒は22mMコリンを添加した90アセトニトリル溶液を使用した。その結果、野生型ハロモナス菌株ではエクトインのみが顕著量検出されたのに対し、エクトイン生合成遺伝子を欠損したハロモナス菌株~ではエクトインが検出されなかった。その一方で、グリシンベタイン生合成オペロンを導入した組換型ハロモナス菌株△ectmCherryGSMTDMT株及び△ectmCherryGSMTSAMSDMT株では、グリシンベタインが顕著量検出された。それに対して、コントロールの△ectmCherry株ではエクトイン及びグリシンベタインは顕著量検出されなかった。さらに、△ectmCherryGSMTDMT株よりも、△ectmCherryGSMTSAMSDMT株の方が多量のグリシンベタインが検出されたことから、SAMの供給を強化した△ectmCherryGSMTSAMSDMT株がグリシンベタインを高密度で生合成しうる株として有用であることが示された図13。また、4×ダイゴIMK培地を含むM63最少培地炭素源として02グルコースを含むに6NaClを添加した高浸透圧条件では、エクトインを生産しないコントロールの△ectmCherry株は増殖できないのに対し、グリシンベタインを生産する△ectmCherryGSMTSAMSDMT株は増殖が可能であったことから、エクトイン非生産株で生産されたグリシンベタインが適合溶質として機能することが示された図14。実施例2高浸透圧条件下でのグリシンベタイン産生本実施例では、実施例1で作製した組換型ハロモナス菌株△ectmCherryGSMTSAMSDMT株について、各濃度のNaClを含むLB培地で培養したときのグリシンベタインの産生を確認した。培養は37°Cで24時間行い、培地はNaCl濃度を2~12に増量したLB培地5mLを使用した。そして、培養液から組換型ハロモナス菌株の細胞を遠心分離によりペレットとして回収し、回収細胞量の新鮮重量を測定した。抽出は、10mg新鮮重量あたり40μLの超純水を加えて細胞を懸濁することにより行い、遠心分離した上澄み液を抽出液として回収した。その結果、2の低NaCl濃度条件に比べて、36912のNaCl濃度の上昇に伴い、組換型ハロモナス菌株の細胞から抽出されたグリシンベタイン濃度の顕著な上昇がみられた図15A。しかしながら、9以上のNaCl濃度域では回収された細胞量が減少していたため、6条件でのグリシンベタインの培養液あたりの生産量が最大であった図15B。高浸透圧条件でグリシンベタインを高密度で生合成した組換型ハロモナス菌株の細胞からのグリシンベタイン抽出は、細胞を破砕することなく超純水での懸濁による低浸透圧処理のみで十分であることが示唆された。以上の結果から、△ectmCherryGSMTSAMSDMT株を用いることにより、高浸透圧条件でのグリシンベタインを高密度で生合成させるプロセスの構築が可能であることが示された。また、菌株の細胞内に高密度に生合成され、蓄積されたグリシンベタインの抽出には細胞破砕を必要とせず、超純水を用いた低浸透圧処理によるグリシンベタインの抽出プロセスの構築が可能であることが示唆された。実施例3高浸透圧条件での二段階培養によるグリシンベタイン生産本実施例では、実施例1で作製した組換型ハロモナス菌株△ectmCherryGSMTSAMSDMT株について、高浸透圧条件での二段階培養によるグリシンベタインの高生産プロセスの検討を行った。実施例2の結果より、NaCl濃度が高すぎると、当該組換型菌株の細胞増殖が阻害されたが、グリシンベタインの生産性はNaCl濃度が高いほど向上していた。そこで、6のNaCl濃度条件で当該組換型菌株を培養して細胞をあらかじめ増殖させておき、続いて15のNaCl濃度条件下で継続して培養する二段階培養によるグリシンベタインの高生産プロセスの検討を行った。培養は37°Cで行い、培地はNaCl濃度を6又は15に増量したLB培地50mLを使用した。分析は実施例1と同手法にて行った。その結果を図16に示した。LB培地に6のNaClを添加した条件下で24時間培養した組換型ハロモナス菌株より、22mMのグリシンベタイン抽出液が得られた624時間。その一方で、LB培地に6のNaClを添加した条件下で24時間培養した後、さらに継続して15のNaClを添加した条件で12時間の二段培養を行った当該組換型菌株からは、50mMのグリシンベタイン抽出液が得られ624時間→1512時間、24時間まで二段目の培養を行った当該組換型菌株からは、60mMのグリシンベタイン抽出液が得られた624時間→1524時間。上記の結果、二段階培養を開始して12時間目で50mMのグリシンベタイン抽出液を得ることができた。さらに24時間目には、60mMのグリシンベタイン抽出液が得られた。以上の結果により、二段階培養により、ハロモナス菌株の細胞増殖を確保したうえで、グリシンベタインを高生産することに成功した。実施例4人工海水培地によるグリシンベタイン生産実施例2及び3で使用したLB培地の成分中には、コリンやグリシンベタインそのものなどが含まれるため、コリンやグリシンベタインを取り込む活性が生産性の評価に影響を及ぼすことが懸念された。また、実施例1で使用したM63最少培地ではグリシンベタイン生合成量が低いため、塩ストレス下での細胞増殖自体が悪いという結果が得られた。そのため、グリシンベタイン生合成に適した無機塩培地を検討した。ハロモナス菌株を使用する利点として、水資源枯渇問題に対応するため、海水を直接使用可能である点があげられる。そこで、本実施例では、微細藻類の培養用に開発されたダイゴIMK培地を含む人工海水培地の利用を検討した。微細藻類の細胞増殖が良くなるとされる、2×ダイゴIMK培地を含む人工海水を使用した。また、炭素源として、植物バイオマス由来の主要な炭素源であるグルコース、グリセロール、キシロースの3種について検討を行った。その結果、いずれの炭素源においても、組換型ハロモナス菌株△ectmCherryGSMTDMT株及び△ectmCherryGSMTSAMSDMT株において、グリシンベタインの生合成が確認できたことから、海水及び植物バイオマス由来炭素源を用いたグリシンベタインの生合成が可能であることが示唆された図17~19。