アシル化されたプロテアーゼ安定化インスリンであり、N末端修飾が、生理学的pHにおいて正に荷電している1つまたは複数のN末端修飾基によるものである、N末端修飾インスリン。ペプチド部、親油性置換基およびN末端修飾基からなる、請求項1に記載のN末端修飾インスリン。生理学的pHにおいて正に荷電している修飾基が、親インスリンのN末端とコンジュゲートしている、生理学的pHにおいて正に荷電しており、1モル当たり200g未満のMWを有している1つまたは2つの有機置換基である、請求項1または2に記載のN末端修飾インスリン。生理学的pHにおいて正に荷電している修飾基が、式Iまたは、代替表示として中でYおよびZと指定される、請求項1から3のいずれか一項に記載のN末端修飾インスリン。アシル化されたプロテアーゼ安定化インスリンが、ペプチド部としてのプロテアーゼ安定化インスリンおよびペプチド部と接続している親油性置換基からなり、ペプチド部が、少なくとも1つの疎水性アミノ酸が親水性アミノ酸で置換されているように置換されているヒトインスリンであり、前記置換が、インスリンの1つまたは複数のプロテアーゼ切断部位内であるか近接している、請求項1から4のいずれか一項に記載のN末端修飾インスリン。アシル化インスリンであり、N末端修飾が、生理学的pHにおいて中性であるか負に荷電している1つまたは複数のN末端修飾基によるものである、N末端修飾インスリン。ペプチド部、親油性置換基およびN末端修飾基からなる、請求項6に記載のN末端修飾インスリン。生理学的pHにおいて中性であるか負に荷電している修飾基が、親インスリンのN末端とコンジュゲートしている、生理学的pHにおいて中性であるか負に荷電しており、1モル当たり200g未満のMWを有している1つまたは2つの有機置換基である、請求項6または7に記載のN末端修飾インスリン。N末端修飾が、カルバモイル、チオカルバモイル、C1~4鎖アシル基、オキサリル、グルタリルおよびジグリコリルからなる群から選択される、請求項6から8のいずれか一項に記載のN末端修飾インスリン。アシル化インスリンが、ペプチド部およびペプチド部と接続している親油性置換基からなり、ペプチド部が、ヒトインスリン、desB30ヒトインスリン、修飾が8個未満のヒトインスリンまたは修飾が8個未満のdesB30ヒトインスリンである、請求項6から9のいずれか一項に記載のN末端修飾インスリン。1つまたは複数の脂質およびN末端修飾インスリンを含む経口医薬組成物。N末端修飾インスリンが、ペプチド部、N末端修飾基および、場合により、親油性置換基からなる、請求項11に記載の経口医薬組成物。N末端修飾インスリン、N末端修飾インスリンのための少なくとも1つの極性有機溶媒、少なくとも1つの界面活性剤、少なくとも1つの親油性構成成分、および、場合により、少なくとも1つの固体親水性構成成分を含む固体または半固体医薬組成物であり、自然に分散可能である、請求項11または12に記載の経口医薬組成物。N末端修飾インスリン、N末端修飾インスリンのための少なくとも1つの極性有機溶媒、少なくとも1つの親油性構成成分、および、場合により、少なくとも1つの界面活性剤を含む水を含まない液体医薬組成物であり、澄明な溶液の形態である、請求項11または12に記載の経口医薬組成物。N末端修飾インスリンが、ヒトインスリン、desB30ヒトインスリン、修飾が8個未満のヒトインスリンまたは修飾が8個未満のdesB30ヒトインスリンであるペプチド部を有する、請求項11から14のいずれか一項に記載の経口医薬組成物。しかしながら、組成物へエチレンジアミンまたは他の安定化化合物を添加することなく、医薬組成物、特に、非水性脂質組成物中のインスリンを安定化するための方法は見いだされないままである。本発明は、N末端修飾インスリン誘導体に関連している。本発明のある態様において、アシル化されたプロテアーゼ安定化インスリンであり、N末端修飾が、生理学的pHにおいて正に荷電している1つまたは複数のN末端修飾基によるものである、N末端修飾インスリンが提供される。本発明のある態様において、アシル化インスリンであり、N末端修飾が、生理学的pHにおいて中性であるか負に荷電している1つまたは複数のN末端修飾基によるものである、N末端修飾インスリンが提供される。本発明は、1つまたは複数の脂質およびN末端修飾インスリンを含む経口医薬組成物も企図している。前記N末端修飾インスリン誘導体を製造する方法についても記載される。本発明は、本明細書でN末端保護インスリンとも命名されている新規N末端修飾インスリン、およびそれらを作製する方法に関連している。新規N末端修飾インスリンは、経口製剤における使用に特に適している。したがって、本発明のある態様は、N末端修飾インスリンを含む経口医薬組成物を企図している。驚いたことに、本発明によるインスリンは、それらの痕跡量などのアルデヒドおよびまたはケトンを含む医薬組成物中で安定である一方、インスリンの生物学的特性および薬理学的特性は、親インスリン、すなわち、N末端修飾のない同様のインスリンと比較した場合に保持されることが発明者らにより見いだされた。本発明の一態様において、本発明によるN末端修飾インスリンは、皮下注射インスリン療法のために水性製剤中で使用される。本発明の一態様において、本発明によるN末端修飾インスリンは、水性製剤での注射療法としてまたは経口療法として超長時間作用性インスリンとして有用である。一態様において、本発明によるN末端修飾インスリンのN末端修飾は、アルデヒドおよびまたはケトンに対する化学的安定性を付与することに加えて、インスリン受容体親和性を変えることができる。例えば、下に記載されているように、生理学的pHにおいて、N末端を中性にするかまたは負に荷電させるN末端修飾は、インスリン受容体に、より低い親和性を付与することができる。本発明のさらなる態様は、経口で投与された場合に、満足のいく生物学的利用能を有する、アシル化N末端修飾インスリンなどのN末端修飾インスリンを供給することに関する。同様の用量で与えられるN末端修飾のない類似インスリンの生物学的利用能と比較して、本発明の好ましいN末端修飾インスリンの生物学的利用能は、同じようである。一態様において、生物学的利用能は、同様の用量で与えられるN末端修飾のない同様のアシル化インスリンの生物学的利用能よりも少なくとも10高く、一態様において、生物学的利用能は、親インスリンのそれよりも20高く、一態様において、生物学的利用能は、25高く、一態様において、生物学的利用能は、30高く、一態様において、生物学的利用能は、35高く、一態様において、生物学的利用能は、40高く、一態様において、生物学的利用能は、45高く、一態様において、生物学的利用能は、50高く、一態様において、生物学的利用能は、55高く、一態様において、生物学的利用能は、60高く、一態様において、生物学的利用能は、65高く、一態様において、生物学的利用能は、70高く、一態様において、生物学的利用能は、80高く、一態様において、生物学的利用能は、90高く、一態様において、生物学的利用能は、100高く、一態様において、生物学的利用能は、100超高い。本明細書で使用される場合、親インスリンという用語は、N末端修飾のない同様のインスリンを意味するものとする。例えば、N末端修飾インスリンが、アシル化N末端修飾インスリンであれば、親インスリンは、ペプチド部が同じでかつ親油性置換基が同じであるがN末端修飾のないアシル化インスリンであり、または、例えば、N末端修飾インスリンが、アシル化されたプロテアーゼ安定化N末端修飾インスリンであれば、親インスリンは、ペプチド部が同じでかつ親油性置換基が同じであるがN末端修飾のないアシル化されたプロテアーゼ安定化インスリンである。本発明のさらなる態様は、経口で投与された場合に、静脈内投与として投与された場合と比べて満足のいく生物学的利用能を有する、N末端修飾インスリンを供給することに関する。本発明の好ましい化合物の生物学的利用能は、N末端修飾インスリンが静脈内に投与された場合の生物学的利用能と比べて少なくとも03、一態様において、少なくとも05、一態様において、少なくとも1、一態様において、少なくとも15、一態様において、少なくとも2、一態様において、少なくとも25、一態様において、少なくとも3、一態様において、少なくとも35、一態様において、少なくとも4、一態様において、少なくとも5、一態様において、少なくとも6、一態様において、少なくとも7、一態様において、少なくとも8、一態様において、少なくとも9、一態様において、少なくとも10である。本発明のさらなる態様は、経口で投与された場合に、sc投与として投与された場合と比べて満足のいく生物学的利用能を有する、N末端修飾インスリンを供給することに関する。本発明好ましい化合物の生物学的利用能は、N末端修飾インスリンが皮下に投与された場合の生物学的利用能と比べて少なくとも03、一態様において、少なくとも05、一態様において、少なくとも1、一態様において、少なくとも15、一態様において、少なくとも2、一態様において、少なくとも25、一態様において、少なくとも3、一態様において、少なくとも35、一態様において、少なくとも4、一態様において、少なくとも5、一態様において、少なくとも6、一態様において、少なくとも7、一態様において、少なくとも8、一態様において、少なくとも9、一態様において、少なくとも10である。インスリン生物学的利用能を測定するための標準的アッセイは、当業者に知られており、とりわけ、同じ種において経口でおよび静脈内に投与される対象とするインスリンの濃度についての相対的曲線下面積の測定を包含する。血液サンプルにおけるインスリン濃度の定量化は、例えば、抗体アッセイを使用するか質量分析法により行うことができる。本発明のさらなる態様は、満足のいく効力を有するN末端修飾インスリンを供給することに関する。ヒトインスリンの効力と比較して、本発明の好ましいN末端修飾インスリンの効力は、ヒトインスリンの効力の、少なくとも5、一態様において、少なくとも10、一態様において、少なくとも20、一態様において、少なくとも30、一態様において、少なくとも40、一態様において、少なくとも50、一態様において、少なくとも75、一態様において、少なくとも100であってよい。見かけのインビボ効力は、対象とするインスリンの血液グルコース対時間プロファイルの、同様の用量で与えられる比較インスリンとの比較により測定することができる。インビボ効力を測定するための他の手段は、実施例中に与えられる。インスリンインビトロ効力を測定するための標準的アッセイは、当業者に知られており、とりわけ、インスリンの相対的効力が、細胞膜、例えば、ラット肝原形質膜画分上に存在するインスリン受容体と特異的に結合している125Iインスリンの50を置き換えるのに必要とされるインスリン類似体に対するインスリンの比と定義されるインスリンラジオレセプターアッセイ相対的インスリン効力が、33Hグルコースの有機抽出可能な材料への最大変換の50を達成するのに必要とされるインスリン類似体に対するインスリンの比と定義される、例えば、ラット脂肪細胞で実施される脂質生成アッセイインスリン類似体の相対的効力が、グルコース114Cの14CO2への最大変換の50を達成するためのインスリン類似体に対するインスリンの比と定義される単離脂肪細胞におけるグルコース酸化アッセイインスリンまたはインスリン類似体が、特異的抗インスリン抗体と結合するのに際して125Iインスリンと競合する有効性を測定することによりインスリン類似体の免疫原性を決定することができるインスリンラジオイムノアッセイおよび特異的インスリン抗体を保有するELISAアッセイなどの動物血漿サンプル中の抗体とのインスリンまたはインスリン類似体の結合を測定する他のアッセイを包含する。本発明によるN末端修飾インスリンは、長期にわたる時間作用プロファイルを有し、すなわち、ヒトインスリンよりも長く続く高血糖性の、例えば、糖尿病性の患者におけるインスリン効果を提供することがある。言い換えれば、時間作用プロファイルが長期にわたるインスリンは、ヒトインスリンと比較してグルコースレベルの長期にわたる低下を有する。一態様において、本発明によるN末端修飾インスリンは、インスリン分子の単一投与後の約8時間から約2週間までにわたってインスリン効果を提供する。一態様において、インスリン効果は、約24時間から約2週間まで続く。一態様において、効果は、約24時間から約1週間まで続く。さらなる態様において、効果は、約1週間から約2週間まで続く。さらなる態様において、効果は、約1週間続く。さらなる態様において、効果は、約2週間続く。一態様において、効果は、約1日から約7日まで続く。さらなる態様において、効果は、約7日から約14日まで続く。さらなる態様において、効果は、約7日続く。さらなる態様において、効果は、約14日続く、一態様において、効果は、約2日から約7日まで続く。さらなる態様において、効果は、約3日続く。さらなる態様において、効果は、約7日続く。一態様において、本発明によるN末端修飾インスリンは、インスリン分子の単一投与後の約8時間から約24時間までにわたってインスリン効果を提供する。一態様において、インスリン効果は、約10時間から約24時間まで続く。一態様において、効果は、約12時間から約24時間まで続く。さらなる態様において、効果は、約16時間から約24時間まで続く。さらなる態様において、効果は、約20時間から約24時間まで続く。さらなる態様において、効果は、約24時間続く。一態様において、インスリン効果は、約24時間から約96時間まで続く。一態様において、インスリン効果は、約24時間から約48時間まで続く。一態様において、インスリン効果は、約24時間から約36時間まで続く。一態様において、インスリン効果は、約1時間から約96時間まで続く。一態様において、インスリン効果は、約1時間から約48時間まで続く。一態様において、インスリン効果は、約1時間から約36時間まで続く。作用の持続期間は、血液グルコースが抑えられる時間により、または関連する薬物動態学的特性、例えば、t12またはMRTを測定することにより測定することができる。本発明のさらなる態様は、ヒトインスリンと比べて経口投与に続いて満足のいく長期にわたる作用を有するN末端修飾インスリンを供給することに関する。ヒトインスリンと比べて、本発明の好ましいN末端修飾インスリンの作用の持続時間は、少なくとも10長い。一態様において、持続時間は、ヒトインスリンのそれよりも、少なくとも20長く、一態様において、少なくとも25長く、一態様において、少なくとも30長く、一態様において、少なくとも35長く、一態様において、少なくとも40長く、一態様において、少なくとも45長く、一態様において、少なくとも50長く、一態様において、少なくとも55長く、一態様において、少なくとも60長く、一態様において、少なくとも65長く、一態様において、少なくとも70長く、一態様において、少なくとも80長く、一態様において、少なくとも90長く、一態様において、少なくとも100長く、一態様において、100超長い。一態様において、LysB29desB30ヒトインスリンまたはA21GlyB31ArgB32Argヒトインスリンなどの1日1回インスリンと比較して、本発明の好ましいN末端修飾インスリンの作用の持続時間は、少なくとも10長い。一態様において、持続時間は、LysB29desB30ヒトインスリンまたはA21GlyB31ArgB32Argヒトインスリンなどの1日1回インスリンのそれよりも、少なくとも20長く、一態様において、少なくとも25長く、一態様において、少なくとも30長く、一態様において、少なくとも35長く、一態様において、少なくとも40長く、一態様において、少なくとも45長く、一態様において、少なくとも50長く、一態様において、少なくとも55長く、一態様において、少なくとも60長く、一態様において、少なくとも65長く、一態様において、少なくとも70長く、一態様において、少なくとも80長く、一態様において、少なくとも90長く、一態様において、少なくとも100長く、一態様において、100超長い。一態様において、LysB29desB30ヒトインスリンまたはA21GlyB31ArgB32Argヒトインスリンなどの1日1回インスリンと比較して、本発明の好ましいN末端修飾インスリンの作用の持続時間は、少なくとも100長い。一態様において、持続時間は、LysB29desB30ヒトインスリンまたはA21GlyB31ArgB32Argヒトインスリンなどの1日1回インスリンのそれよりも、少なくとも200長く、一態様において、少なくとも250長く、一態様において、少なくとも300長く、一態様において、少なくとも350長く、一態様において、少なくとも400長く、一態様において、少なくとも450長く、一態様において、少なくとも500長く、一態様において、少なくとも550長く、一態様において、少なくとも600長く、一態様において、少なくとも650長く、一態様において、少なくとも700長く、一態様において、少なくとも800長く、一態様において、少なくとも900長く、一態様において、少なくとも1000長く、一態様において、1000超長い。本発明において使用するためのN末端修飾基は、生理学的pHにおいて中性であるか正に荷電しているか負に荷電しているかであってよい。N末端修飾インスリンのN末端修飾基の電荷は、N末端修飾インスリンが、親インスリンのインスリン受容体親和性と比較してインスリン受容体に対して保持されるか変化された親和性を有するように選ばれてよい。例えば、生理学的pHにおいて、中性であるか負に荷電しているN末端修飾基は、N末端修飾のない親インスリンと比較して低下したIR親和性をもたらすことがある。別の例として、生理学的pHにおいて、正に荷電しているN末端修飾基は、N末端修飾のない親インスリンと比較して保持されるかほんのわずかに低下したIR親和性をもたらすことがある。本発明の一態様において、アシル化されたプロテアーゼ安定化インスリンであり、N末端修飾が、正に荷電しているN末端修飾基によるものである、N末端修飾インスリンが得られる。さらなる態様において、本発明のN末端修飾インスリンは、ペプチド部、親油性置換基およびN末端修飾基からなる。本明細書において、プロテアーゼ安定化インスリンという用語は、ヒトインスリンと比べてプロテアーゼからの分解に対して改善された安定性を有するインスリンを意味する。アシル化されたプロテアーゼ安定化インスリンとは、本明細書において、ヒトインスリンと比べて1つまたは複数のプロテアーゼによるより遅い分解を受ける、アシル化インスリンとして理解されるべきである。一実施形態において、本発明によるプロテアーゼ安定化インスリンは、ヒトインスリンと比べて1つまたは複数のプロテアーゼによるより遅い分解を受ける。本発明のさらなる実施形態において、本発明によるアシル化されたプロテアーゼ安定化インスリンは、ペプシン、キモトリプシン、トリプシン、インスリン分解酵素、エラスターゼ、カルボキシペプチダーゼ、アミノペプチダーゼ、カテプシンDおよびラット、ブタまたはヒトに由来する腸抽出物中に存在する他の酵素からなる群から選択される1つまたは複数の酵素による分解に対して安定化される。一実施形態において、本発明によるアシル化されたプロテアーゼ安定化インスリンは、キモトリプシン、トリプシン、インスリン分解酵素、エラスターゼ、カルボキシペプチダーゼ、アミノペプチダーゼおよびカテプシンDからなる群から選択される1つまたは複数の酵素による分解に対して安定化される。さらなる実施形態において、本発明によるアシル化されたプロテアーゼ安定化インスリンは、キモトリプシン、カルボキシペプチダーゼおよびIDEからなる群から選択される1つまたは複数の酵素による分解に対して安定化される。さらなる実施形態において、本発明によるアシル化されたプロテアーゼ安定化インスリンは、キモトリプシンおよびカルボキシペプチダーゼからなる群から選択される1つまたは複数の酵素による分解に対して安定化される。本明細書に記載されているようなN末端修飾基に関して使用される場合の生理学的pHにおいて正に荷電しているという用語は、N末端修飾ポリペプチドを含む溶液中で、N末端修飾基のうちの少なくとも10が、生理学的pHにおいて1の電荷を有することを意味する。一態様において、N末端修飾ポリペプチドの溶液中のN末端修飾基のうちの少なくとも30が、生理学的pHにおいて1の電荷を有する。さらなる態様において、N末端修飾ポリペプチドの溶液中のN末端修飾基のうちの少なくとも50が、生理学的pHにおいて1の電荷を有する。さらなる態様において、N末端修飾ポリペプチドの溶液中のN末端修飾基のうちの少なくとも70が、生理学的pHにおいて1の電荷を有する。さらなる態様において、N末端修飾ポリペプチドの溶液中のN末端修飾基のうちの少なくとも90が、生理学的pHにおいて1の電荷を有する。生理学的pHにおいて正に荷電しているN末端修飾基の例は、NNジメチルおよびNNジエチルなどのNNジC1~4アルキル、Nアミジニル、4ブタノイル、3プロピオニル、3プロピオニル、NNジメチルグリシル、およびNNNトリメチルグリシルを包含するが、それらに限定されるものではない。本発明の一態様において、インスリンのN末端位以外の位置における脂肪二酸アシル化などの脂肪酸アシル化であり、N末端修飾が、中性であるか負に荷電しているN末端修飾基によるものである、N末端修飾インスリンが得られる。本明細書で使用される場合、本明細書に記載されているようなN末端修飾基に関して使用される場合の生理学的pHにおいて中性であるという用語は、N末端修飾インスリンを含む溶液中で、N末端修飾基のうちの少なくとも10が、生理学的pHにおいて中性の電荷を有することを意味する。一態様において、N末端修飾ポリペプチドの溶液中のN末端修飾基のうちの少なくとも30が、生理学的pHにおいて中性の電荷を有する。さらなる態様において、N末端修飾ポリペプチドの溶液中のN末端修飾基のうちの少なくとも50が、生理学的pHにおいて中性の電荷を有する。さらなる態様において、N末端修飾ポリペプチドの溶液中のN末端修飾基のうちの少なくとも70が、生理学的pHにおいて中性の電荷を有する。さらなる態様において、N末端修飾ポリペプチドの溶液中のN末端修飾基のうちの少なくとも90が、生理学的pHにおいて中性の電荷を有する。生理学的pHにおいて中性であるN末端修飾基の例は、カルバモイル、チオカルバモイル、ならびにホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリルなどのC1~4鎖アシル基、およびピログルタミルを包含するが、それらに限定されるものではない。本明細書で使用される場合、本明細書に記載されているようなN末端修飾基に関して使用される場合の生理学的pHにおいて負に荷電しているという用語は、N末端修飾インスリンを含む溶液中で、N末端修飾基のうちの少なくとも10が、生理学的pHにおいて1の電荷を有することを意味する。一態様において、N末端修飾ポリペプチドの溶液中のN末端修飾基のうちの少なくとも30が、生理学的pHにおいて1の電荷を有する。さらなる態様において、N末端修飾ポリペプチドの溶液中のN末端修飾基のうちの少なくとも50が、生理学的pHにおいて1の電荷を有する。さらなる態様において、N末端修飾ポリペプチドの溶液中のN末端修飾基のうちの少なくとも70が、生理学的pHにおいて1の電荷を有する。さらなる態様において、N末端修飾ポリペプチドの溶液中のN末端修飾基のうちの少なくとも90が、生理学的pHにおいて1の電荷を有する。生理学的pHにおいて負に荷電しているN末端修飾基の例は、オキサリル、グルタリル、ジグリコリルを包含するが、それらに限定されるものではない。一態様において、本発明による生理学的pHにおいて負に荷電しているN末端修飾基は、マロニルでもスクシニルでもない。一態様において、本発明による生理学的pHにおいて負に荷電しているN末端修飾基は、マロニルではない。一態様において、本発明による生理学的pHにおいて負に荷電しているN末端修飾基は、スクシニルではない。本発明の一態様において、N末端修飾され、さらに、インスリンのN末端のうちの一つ以外の位置において親油性置換基で置換されているインスリンが得られ、親油性置換基は、場合によりリンカーを介してインスリンと接続している脂肪酸またはジ脂肪酸からなる。リンカーは、脂肪酸または脂肪二酸とインスリンへの接続点の中間にある任意の適当な部分であってよく、その部分は、リンカー部分、スペーサーなどと呼ばれることもある。一態様において、リンカーは、存在し、それらから水素原子およびまたはヒドロキシル基が除去されたGly、DAla、LAla、DαGlu、LαGlu、DγGlu、LγGlu、DαAsp、LαAsp、DβAsp、LβAsp、βAla、4アミノ酪酸、5アミノ吉草酸、6アミノヘキサン酸、DGluαアミド、LGluαアミド、DGluγアミド、LGluγアミド、DAspαアミド、LAspαアミド、DAspβアミド、LAspβアミド、またはからなる群から選択される1つまたは複数の実体を含み、式中、qは、0、1、2、3または4であり、この実施形態において、あるいは、7アミノヘプタン酸または8アミノオクタン酸であってよく、式中、矢印は、プロテアーゼ安定化インスリンのアミノ基への接続点、または、より多くのリンカーが存在すれば、その方向への接続点を示す。一態様において、リンカーは、存在し、ガンマGlu実体、1つまたは複数のOEG実体またはそれらの組合せを含む。本明細書において、脂肪酸という用語は、少なくとも2個の炭素原子を有し、飽和または不飽和である直線か分岐した、脂肪族カルボン酸をカバーする。脂肪酸の非限定的な例は、ミリスチン酸、パルミチン酸、およびステアリン酸である。本明細書において、脂肪二酸という用語は、少なくとも2個の炭素原子を有し、飽和または不飽和である直線か分岐した、脂肪族ジカルボン酸をカバーする。脂肪二酸の非限定的な例は、ヘキサン二酸、オクタン二酸、デカン二酸、ドデカン二酸、テトラデカン二酸、ヘキサデカン二酸、ヘプタデカン二酸、オクタデカン二酸、およびエイコサン二酸である。N末端修飾インスリンを含む経口医薬組成物も、本発明により企図されている。一態様において、経口医薬組成物は、1つまたは複数の脂質およびN末端修飾インスリンを含む組成物である。本発明のN末端修飾インスリンは、驚いたことに、脂質医薬製剤中で使用される場合に化学的に安定である。一態様において、本発明によるN末端修飾インスリンを含む脂質医薬製剤は、少なくとも2週間の使用および1年間の貯蔵に対して化学的に安定である。一態様において、本発明によるN末端修飾インスリンを含む脂質医薬製剤は、少なくとも4週間の使用および1年間の貯蔵に対して化学的に安定である。一態様において、本発明によるN末端修飾インスリンを含む脂質医薬製剤は、少なくとも4週間の使用および2年間の貯蔵に対して化学的に安定である。一態様において、本発明によるN末端修飾インスリンを含む脂質医薬製剤は、少なくとも6週間の使用および2年間の貯蔵に対して化学的に安定である。水性医薬製剤においてインスリンを安定化するための一般的方法は、医薬製剤に亜鉛を添加し、それによって、亜鉛とのインスリン6量体を形成することであることは当業者に知られている。本発明の一態様において、N末端修飾インスリンを含み、亜鉛を含まないか痕跡量の亜鉛のみを含む医薬脂質組成物は、N末端修飾インスリンおよび亜鉛を含む水性医薬製剤と同様に化学的に安定である。驚いたことに、N末端修飾インスリン、1つまたは複数の脂質および、場合により、1つまたは複数の界面活性剤を含む非水性液体インスリン医薬組成物は、化学的に安定であることが見いだされた。一態様において、本発明の医薬組成物は、N末端修飾インスリン、1つまたは複数の脂質、1つまたは複数の界面活性剤および共溶媒を含む。本発明の一態様において、共溶媒は、プロピレングリコールである。本発明の一態様において、N末端修飾インスリンは、組成物中の成分の総量の01から30までの間の濃度で医薬組成物中に存在する。別の態様において、インスリンは、05から20までの間の濃度で存在する。別の態様において、インスリンは、1から10までの間の濃度で存在する。本発明の一態様において、N末端修飾インスリンは、02mMから100mMまでの間の濃度で医薬組成物中に存在する。別の態様において、N末端修飾インスリンは、05から70mMまでの間の濃度で存在する。別の態様において、N末端修飾インスリンは、05から35mMまでの間の濃度で存在する。別の態様において、N末端修飾インスリンは、1から30mMまでの間の濃度で存在する。本明細書で使用される場合、脂質という用語は、本明細書において、水とよりも油とより混ざる物質、材料または成分のために使用される。脂質は、水に溶けないかほとんど溶けないが、油または他の非極性溶媒に溶けやすい。脂質という用語は、1つまたは複数の親油性物質、すなわち、水とではなく油と均一な混合物を形成する物質を含むことができる。複数の脂質は、非水性脂質医薬組成物の親油性相を構成し、油態様を形成することがある。室温において、脂質は、固体、半固体または液体であってよい。例えば、固体脂質は、ペースト、粒状形態、粉末またはフレークとして存在することができる。2つ以上の賦形剤が、脂質を含んでいれば、脂質は、液体、固体、または両方の混合物であってよい。固体脂質、すなわち、室温において固体または半固体である脂質の例は、下記を包含するが、それらに限定されるものではない1SasolGermanyからWITEPSOLHI5として市販されている水素化ココグリセリドなどのモノ、ジおよびトリグリセリドの混合物脂肪酸トリグリセリドの例、例えば、C10~C22脂肪酸トリグリセリドは、植物油などの天然油および水素化油を包含する2GattefosseCorpからMONOSTEOLとして市販されているプロピレングリコールステアレートなどのエステルGattefosseCorpからHYDRINEとして市販されているジエチレングリコールパルミトステアレート3GattefosseCorpまたはGelucire3301からLABRAFILM2130CSとして市販されている水素化パームパーム核油PEG6エステルなどのポリグリコシル化飽和グリセリド4CognisCorpからLANETTE14として市販されているミリスチルアルコールなどの脂肪アルコール脂肪酸の脂肪アルコールとのエステル、例えば、パルミチン酸セチル例えば、約43°Cの融点を有する、例えば、Uniqemaから商品名ARLAMOLISMLの下で市販されているイソソルビドモノラウレート5約33°Cの融点を有する、例えば、UniqemaからBRIJ52として市販されているポリオキシエチレンセチルエーテル、または、例えば、約43°Cの融点を有するUniqemaからBRIJ72として市販されているポリオキシエチレンステアリルエーテルを包含するPEG脂肪アルコールエーテル6ソルビタンエステル、例えば、ソルビタン脂肪酸エステル、例えば、それぞれUniqemaからSPAN40またはSPAN60として市販されており、約43°Cから48°Cまたは約53°Cから57°Cおよび41°Cから54°Cの融点を有するソルビタンモノパルミテートまたはソルビタンモノステアレートならびに7グリセリルモノC6~C14脂肪酸エステル。これらは、グリセロールを植物油でエステル化することと、続く、分子蒸留により得られる。モノグリセリドは、対称モノグリセリドならびに非対称モノグリセリドの両方を包含するが、それらに限定されるものではない。それらは、同形グリセリドならびに混合グリセリドの両方も包含する。脂肪酸構成要素は、例えば、C8~C14からの鎖長を有する飽和脂肪酸と不飽和脂肪酸の両方を包含していてよい。特に適しているのは、例えば、SasolNorthAmericaからIMWITOR312として市販されているグリセリルモノラウレート、SasolからIMWITOR928として市販されているグリセリルモノジココエートIMWITOR370として市販されているモノグリセリルシトレート、または、例えば、SasolからIMWITOR900として市販されているグリセリルモノステアレートまたは、例えば、SasolからIMWITOR960として市販されている自己乳化性グリセロールモノステアレートである。液体脂質および半固体脂質、すなわち、室温において液体または半固体である脂質の例は、下記を包含するが、それらに限定されるものではない1AbitecCorpからCAPMULMCMとして市販されている中鎖モノおよびジグリセリド、グリセリルカプリレートカプレートなどのモノ、ジおよびトリグリセリドの混合物およびDANISCOからRYLOMG08Pharmaとして市販されているグリセロールモノカプリレート、RYLOMG10Pharmaとして市販されているグリセロールモノカプレート。2例えば、C6~C18、例えば、C6~C16例えば、C8~C10、例えば、C8、脂肪酸のグリセリルモノまたはジ脂肪酸エステル、またはそのアセチル化誘導体、例えば、EastmanChemicalsからのMYVACET945もしくは908またはSasolからのIMWITOR308もしくは3123例えば、C8~C20、例えば、C8~C12、脂肪酸のプロピレングリコールモノまたはジ脂肪酸エステル、例えば、AbitecCorpまたはGattefosseからのLAUROGLYCOL90、SEFSOL218、またはCAPRYOL90もしくはCAPMULPG84ベニバナ油、ゴマ油、アーモンド油、ピーナッツ油、ヤシ油、コムギ胚芽油、トウモロコシ油、ヒマシ油、ココナッツ油、綿実油、ダイズ油、オリーブ油および鉱油などの油5脂肪酸またはアルコール、例えば、C8~C20、飽和またはモノもしくはジ不飽和の、例えば、オレイン酸、オレイルアルコール、リノール酸、カプリン酸、カプリル酸、カプロン酸、テトラデカノール、ドデカノール、デカノール6中鎖脂肪酸トリグリセリド、例えば、C8~C12、例えば、MIGLYOL812、または長鎖脂肪酸トリグリセリド、例えば、植物油7例えば、GattefosseCorpからLABRAFILM2125CSとして市販されているエステル交換されたエトキシル化植物油8脂肪酸および一級アルコール、例えば、C8~C20、脂肪酸およびC2~C3アルコールのエステル化化合物、例えば、NikkoChemicalsからNIKKOLVFEとして市販されているリノール酸エチル、酪酸エチル、カプリル酸エチルオレイン酸、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピルおよびカプリル酸エチル9精油、またはスペアミント油、チョウジ油、レモン油およびペパーミント油などのそれらの特徴的な臭いを植物に与えるある種の揮発油のいずれか10メントール、カルバクロールおよびチモールなどの精油の分画または構成要素11トリアセチン、トリブチリンなどの合成油12クエン酸トリエチル、クエン酸アセチルトリエチル、クエン酸トリブチル、クエン酸アセチルトリブチル13ポリグリセロール脂肪酸エステル、例えば、NikkoChemicalsからのジグリセリルモノオレエート、例えば、DGMOC、DGMO90、DGDOならびに14ソルビタンエステル、例えば、ソルビタン脂肪酸エステル、例えば、UniqemaからSPAN20として市販されているソルビタンモノラウレート15リン脂質、例えば、アルキルOリン脂質、ジアシルホスファチジン酸、ジアシルホスファチジルコリン、ジアシルホスファチジルエタノールアミン、ジアシルホスファチジルグリセロール、ジOアルキルホスファチジン酸、Lアルファリゾホスファチジルコリン、Lアルファリゾホスファチジルエタノールアミン、Lアルファリゾホスファチジルグリセロール、Lアルファリゾホスファチジルイノシトール、Lアルファホスファチジン酸、Lアルファホスファチジルコリン、Lアルファホスファチジルエタノールアミン、Lアルファホスファチジルグリセロール、カルジオリピン、Lアルファホスファチジルイノシトール、Lアルファホスファチジルセリン、リゾホスファチジルコリン、リゾホスファチジルグリセロール、LARODANから市販されているsnグリセロホスホリルコリン、またはLipoidGmbHから市販されているダイズリン脂質。16ポリグリセロールオレエートなどのポリグリセロール脂肪酸エステル。本発明の一態様において、脂質は、モノ、ジ、およびトリグリセリドからなる群から選択される1つまたは複数である。さらなる態様において、脂質は、モノおよびジグリセリドからなる群から選択される1つまたは複数である。さらなる態様において、脂質は、CapmulMCMまたはCapmulPG8である。さらなる態様において、脂質は、CapmulPG8である。さらなる態様において、脂質は、グリセロールモノカプリレートである。一態様において、脂質は、グリセロールモノカプリレートおよびグリセロールモノカプレートからなる群から選択される。別の態様において、脂質は、プロピレングリコールカプリレートからなる群から選択される。本発明の一態様において、脂質は、組成物中のインスリンを包含する成分の総量の10から90までの間の濃度で医薬組成物中に存在する。別の態様において、脂質は、10から80までの間の濃度で存在する。別の態様において、脂質は、10から60までの間の濃度で存在する。別の態様において、脂質は、15から50までの間の濃度で存在する。別の態様において、脂質は、15から40までの間の濃度で存在する。別の態様において、脂質は、20から30までの間の濃度で存在する。別の態様において、脂質は、約25の濃度で存在する。本発明の一態様において、脂質は、組成物中のインスリンを包含する成分の総量の100mggから900mggまでの間の濃度で医薬組成物中に存在する。別の態様において、脂質は、100mggから800mggまでの間の濃度で存在する。別の態様において、脂質は、100mggから600mggまでの間の濃度で存在する。別の態様において、脂質は、150mggから500mggまでの間の濃度で存在する。別の態様において、脂質は、150mggから400mggまでの間の濃度で存在する。別の態様において、脂質は、200mggから300mggまでの間の濃度で存在する。別の態様において、脂質は、約250mggの濃度で存在する。本発明の一態様において、共溶媒は、組成物中のインスリンを包含する成分の総量の0から30までの間の濃度で医薬組成物中に存在する。別の態様において、共溶媒は、5から30までの間の濃度で存在する。別の態様において、共溶媒は、10から20までの間の濃度で存在する。本発明の一態様において、共溶媒は、組成物中のインスリンを包含する成分の総量の0mggから300mggまでの間の濃度で医薬組成物中に存在する。別の態様において、共溶媒は、50mggから300mggまでの間の濃度で存在する。別の態様において、共溶媒は、100から200mggまでの間の濃度で存在する。本発明の一態様において、経口医薬組成物は、油もいかなる他の脂質構成成分もHLBが7未満の界面活性剤も含有しない。さらなる態様において、組成物は、油もいかなる他の脂質構成成分もHLBが8未満の界面活性剤も含有しない。さらなる態様において、組成物は、油もいかなる他の脂質構成成分もHLBが9未満の界面活性剤も含有しない。さらなる態様において、組成物は、油もいかなる他の脂質構成成分もHLBが10未満の界面活性剤も含有しない。本発明の液体非水性医薬組成物の非イオン性界面活性剤の各々の親水性親油性バランスは、10を超え、それにより、高いインスリンペプチド薬物負荷容量および高い経口生物学的利用能が達成される。一態様において、本発明による非イオン性界面活性剤は、HLBが11を超える非イオン性界面活性剤である。一態様において、本発明による非イオン性界面活性剤は、HLBが12を超える非イオン性界面活性剤である。本明細書で使用される約という用語は、プラスまたはマイナス10などの、記述されている数値の妥当な近傍内であることを意味する。脂質医薬組成物の非限定的な例は、例えば、特許出願WO08145728、WO2010060667およびWO2011086093中に見いだすことができる。一態様において、本発明のN末端修飾インスリンは、A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB16HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB16HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1プロピオニルA14EB1プロピオニルB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1ブタノイルA14EB1ブタノイルB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1プロピオニルA14EB1プロピオニルB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EBB16HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EBB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンからなる群から選択される。一実施形態において、本発明によるN末端修飾インスリンは、下記のインスリンペプチドA14EB25HdesB30ヒトインスリンA14HB25HdesB30ヒトインスリンA14EB1EB25HdesB30ヒトインスリンA14EB16EB25HdesB30ヒトインスリンA14EB25HB28DdesB30ヒトインスリンA14EB25HB27EdesB30ヒトインスリンA14EB1EB25HB27EdesB30ヒトインスリンA14EB1EB16EB25HB27EdesB30ヒトインスリンA8HA14EB25HdesB30ヒトインスリンA8HA14EB25HB27EdesB30ヒトインスリンA8HA14EB1EB25HdesB30ヒトインスリンA8HA14EB1EB25HB27EdesB30ヒトインスリンA8HA14EB1EB16EB25HB27EdesB30ヒトインスリンA8HA14EB16EB25HdesB30ヒトインスリンA14EB25HB26DdesB30ヒトインスリンA14EB1EB27EdesB30ヒトインスリンA14EB27EdesB30ヒトインスリンA14EB28DdesB30ヒトインスリンA14EB28EdesB30ヒトインスリンA14EB1EB28EdesB30ヒトインスリンA14EB1EB27EB28EdesB30ヒトインスリンA14EB1EB25HB28EdesB30ヒトインスリンA14EB1EB25HB27EB28EdesB30ヒトインスリンA14DB25HdesB30ヒトインスリンB25NB27EdesB30ヒトインスリンA8HB25NB27EdesB30ヒトインスリンA14EB27EB28EdesB30ヒトインスリンA14EB25HB28EdesB30ヒトインスリンB25HB27EdesB30ヒトインスリンB1EB25HB27Edesb30ヒトインスリンA8HB1EB25HB27EdesB30ヒトインスリンA8HB25HB27EdesB30ヒトインスリンB25NB27DdesB30ヒトインスリンA8HB25NB27DdesB30ヒトインスリンB25HB27DdesB309ヒトインスリンA8HB25HB27DdesB30ヒトインスリンAPAPA14EB25HdesB30ヒトインスリンA14EBPBPB25HdesB30ヒトインスリンAPAPA14EBPBPB25HdesB30ヒトインスリンA14EB25HB30TB31LB32EヒトインスリンA14EB25HヒトインスリンA14EB16HB25HdesB30ヒトインスリンA14EB10PB25HdesB30ヒトインスリンA14EB10EB25HdesB30ヒトインスリンA14EB4EB25HdesB30ヒトインスリンA14HB16HB25HdesB30ヒトインスリンA14HB10EB25HdesB30ヒトインスリンA13HA14EB10EB25HdesB30ヒトインスリンA13HA14EB25HdesB30ヒトインスリンA14EA18QB3QB25HdesB30ヒトインスリンA14EB24HB25HdesB30ヒトインスリンA14EB25HB26GB27GB28GdesB30ヒトインスリンA14EA21GB25HB26GB27GB28GdesB30ヒトインスリンA14EA18QA21QB3QB25HdesB30ヒトインスリンA14EA18QA21QB3QB25HB27EdesB30ヒトインスリンA14EA18QB3QB25HdesB30ヒトインスリンA13HA14EB1EB25HdesB30ヒトインスリンA13NA14EB25HdesB30ヒトインスリンA13NA14EB1EB25HdesB30ヒトインスリンAGAPAPA14EB25HdesB30ヒトインスリンA14EBGBPBPB25HdesB30ヒトインスリンAGAPAPA14EBGBPBPB25HdesB30ヒトインスリンA14EB27RB28DB29KdesB30ヒトインスリンA14EB25HB27RB28DB29KdesB30ヒトインスリンA14EB25HB26TB27RB28DB29KdesB30ヒトインスリンA14EB25HB27RdesB30ヒトインスリンA14EB25HB27HdesB30ヒトインスリンA14EA18QB3QB25HdesB30ヒトインスリンA13EA14EB25HdesB30ヒトインスリンA12EA14EB25HdesB30ヒトインスリンA15EA14EB25HdesB30ヒトインスリンA13EB25HdesB30ヒトインスリンA12EB25HdesB30ヒトインスリンA15EB25HdesB30ヒトインスリンA14EB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EdesB27desB30ヒトインスリンA14HdesB27desB30ヒトインスリンA14EB16HdesB27desB30ヒトインスリンA14HB16HdesB27desB30ヒトインスリンA14EB25HB26DB27EdesB30ヒトインスリンA14EB25HB27RdesB30ヒトインスリンA14EB25HB27NdesB30ヒトインスリンA14EB25HB27DdesB30ヒトインスリンA14EB25HB27QdesB30ヒトインスリンA14EB25HB27EdesB30ヒトインスリンA14EB25HB27GdesB30ヒトインスリンA14EB25HB27HdesB30ヒトインスリンA14EB25HB27KdesB30ヒトインスリンA14EB25HB27PdesB30ヒトインスリンA14EB25HB27SdesB30ヒトインスリンA14EB25HB27TdesB30ヒトインスリンA13RA14EB25HdesB30ヒトインスリンA13NA14EB25HdesB30ヒトインスリンA13DA14EB25HdesB30ヒトインスリンA13QA14EB25HdesB30ヒトインスリンA13EA14EB25HdesB30ヒトインスリンA13GA14EB25HdesB30ヒトインスリンA13HA14EB25HdesB30ヒトインスリンA13KA14EB25HdesB30ヒトインスリンA13PA14EB25HdesB30ヒトインスリンA13SA14EB25HdesB30ヒトインスリンA13TA14EB25HdesB30ヒトインスリンA14EB16RB25HdesB30ヒトインスリンA14EB16DB25HdesB30ヒトインスリンA14EB16QB25HdesB30ヒトインスリンA14EB16EB25HdesB30ヒトインスリンA14EB16HB25HdesB30ヒトインスリンA14RB25HdesB30ヒトインスリンA14NB25HdesB30ヒトインスリンA14DB25HdesB30ヒトインスリンA14QB25HdesB30ヒトインスリンA14EB25HdesB30ヒトインスリンA14GB25HdesB30ヒトインスリンA14HB25HdesB30ヒトインスリンA8HB10DB25HヒトインスリンおよびA8HA14EB10EB25HdesB30ヒトインスリンからなる群から選択されるペプチド部を有し、この実施形態は、場合により、B25HdesB30ヒトインスリンおよびB25NdesB30ヒトインスリンを含んでいてもよい。好ましい実施形態において、本発明によるN末端修飾インスリンは、A14EB25HdesB30ヒトインスリンA14EB16HB25HdesB30ヒトインスリンA14EB16EB25HdesB30ヒトインスリンA14EdesB27desB30ヒトインスリンA14EB16HdesB27desB30ヒトインスリンA14EB25HB26GB27GB28GdesB30ヒトインスリンB25HdesB30ヒトインスリンおよびA14EB25HdesB27desB30ヒトインスリンからなる群から選択されるペプチド部を有する。好ましい実施形態において、本発明によるN末端修飾インスリンは、加えて、desB27変異を含有している上に述べられているインスリンのいずれか一つから選択されるペプチド部を有する。好ましい実施形態において、本発明によるN末端修飾インスリンは、A14EB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EB16HB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EdesB27desB30ヒトインスリンA14EB16EB25HdesB27desB30ヒトインスリンおよびB25HdesB27desB30ヒトインスリンからなる群から選択されるペプチド部を有する。一実施形態において、本発明によるN末端修飾インスリンは、上述のインスリンのいずれかから選択され、加えて、化学的安定性を改善するためにA21位およびまたはB3位に下記の変異のうちの1つまたは2つを含むペプチド部を有するA21G、desA21、B3Q、またはB3G。好ましい実施形態において、本発明によるN末端修飾インスリンは、A14EA21GB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB16HB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB16EB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EA21GB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EA21GB25HB26GB27GB28GdesB30ヒトインスリンA21GB25HdesB30ヒトインスリンおよびA21GB25NdesB30ヒトインスリンからなる群から選択されるペプチド部を有し、好ましくは、下記のプロテアーゼ安定化インスリンから選択されるA14EA21GB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GdesB27desB30ヒトインスリンA14EA21GB16HB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB16EB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EA21GB25HdesB27desB30ヒトインスリンA21GB25HdesB30ヒトインスリンおよびA21GB25NdesB30ヒトインスリン。本明細書において、アシル化インスリンという用語は、場合により、インスリンペプチドへのリンカーを介する1つまたは複数の親油性置換基の接続によるインスリンの修飾をカバーする。親油性置換基とは、本明細書において、場合により、LysB29などのアミノ酸位置において、リンカーまたは等価物を介してインスリンと接続している脂肪酸または脂肪二酸からなる側鎖として理解される。一実施形態において、N末端修飾インスリンと接続している親油性置換基は、一般式AcyAA1nAA2mAA3pを有し、式中、nは、0または1から3までの範囲の整数でありmは、0または1から10までの範囲の整数でありpは、0または1から10までの範囲の整数でありAcyは、約8個から約24個までの炭素原子を含む脂肪酸または脂肪二酸でありAA1は、中性の直線または環状のアミノ酸残基でありAA2は、酸性のアミノ酸残基でありAA3は、中性の、アルキレングリコール含有アミノ酸残基でありAA1、AA2およびAA3が式中に現れる順序は、独立して交換することができAA2は、式に沿って数回現れることができAA2は、式に沿って数回独立して現れることができAcy、AA1、AA2およびまたはAA3の間の連結は、形式的に、Acy、AA1、AA2およびAA3の各々からの水素原子またはヒドロキシル基の除去により得ることができるアミド結合でありペプチド部への接続は、式のアシル部分におけるAA1、AA2、またはAA3残基のC末端から、または式の部分に存在するAA2残基の側鎖のうちの1つからであってよい。本発明に従って使用されてよい親油性置換基の非限定的な例は、例えば、特許出願WO2009115469中に見いだすことができ、WO2009115469の25頁、3行から始まる一節に記載されているようなアシル化ポリペプチドの親油性置換基を包含する。本発明の一態様において、親油性置換基は、からなる群から選択される。本発明の一態様において、親油性置換基は、からなる群から選択される。本発明の一態様において、親油性置換基は、からなる群から選択される。N末端修飾インスリンとは、本明細書において、N末端保護インスリンと同じであり、本明細書でN末端保護基とも命名されている1つまたは複数のN末端修飾基を含むインスリンと定義される。N末端修飾基とは、本明細書において、N末端保護基と同じであり、本発明によれば、インスリンのA鎖およびまたはB鎖のN末端アミノ基とコンジュゲートしている場合に、例えば、医薬製剤中の賦形剤のうちの1つまたは複数のアルデヒド不純物と反応することから、それぞれ、インスリンのN末端アミノ酸の前記アミノ基、A鎖およびB鎖のグリシンおよびフェニルアラニンを守る基である。本発明の一態様において、N末端修飾は、親インスリンのN末端とコンジュゲートしている、1モル当たり200g未満のMWを有する1つまたは2つの有機置換基である。一態様において、本発明のN末端修飾インスリン誘導体は、示されているインスリンA鎖の最初の4個の残基と共に式Iに図示されているような、少なくとも1つの、好ましくは、2つのN末端アミノ酸と接続しているN末端修飾基YおよびZを含む。式Iまたは、代替表示として本発明の一態様において、YおよびZは、異なり、Yは、RCであり、Zは、Hであり、Rは、H、NH2、直鎖または分岐したC1~C4アルキル、、C5~C6シクロアルキル、5または6員の飽和ヘテロシクリルであり、Xは、OまたはSである。本発明の一態様において、Yが、RCであり、Zが、Hである場合、インスリンは、desA1およびdesB1変異を含有することができる。本発明の別の態様において、YZは、C1~C4アルキルである。本発明の一態様において、A鎖およびB鎖のN末端アミノ基のN末端保護基の各々は、同じである。本発明の一態様において、本発明の2つのN末端保護基の各々は、150Da未満の分子量を有している。本発明の一態様において、本発明のN末端保護基の各々は、生理学的pHにおいて正に荷電しており、すなわち、N末端保護基が、N末端アミノ基と接続コンジュゲートしている場合、アミノ基、またはアミノ基上の置換基は、正電荷を有する。本発明の一態様において、N末端保護基は、ジメチル、ジエチル、ジnプロピル、ジsecプロピル、ジnブチル、ジiブチルなどからなる群から選択される。本発明の別の態様において、N末端保護基は、ジメチルおよびジエチルから選択される。本発明の別の態様において、N末端保護基は、ジメチルである。本発明の一態様において、N末端保護基は、NNジメチルグリシル、NNジメチルアミノブタノイル、NNジメチルアミノプロピオニルおよび3プロピオニルからなる群から選択される。本発明の一態様において、本発明のN末端保護基の各々は、生理学的pHにおいてN末端アミノ基の正常な正の電荷を除去する。本発明の一態様において、本発明のN末端保護基の各々は、小さなアシル残基から選択される。本発明の一態様において、本発明のN末端保護基の各々は、ホルミル、アセチル、プロパノイル、およびブタノイル基から選択される。本発明の一態様において、本発明のN末端保護基の各々は、環状アシル残基、例えば、ピログルタミニル基から選択される。本発明の一態様において、本発明のN末端保護基の各々は、生理学的pHにおいてN末端アミノ基の正常な正の電荷を除去する。本発明の一態様において、本発明のN末端保護基の各々は、カルバモイルおよびチオカルバモイルから選択される。本発明の一態様において、本発明のN末端保護基の各々は、カルバモイルである。本発明の一態様において、本発明のN末端保護基の各々は、生理学的pHにおいてN末端アミノ基の正常な正の電荷を除去する。本発明の一態様において、本発明のN末端保護基の各々は、オキサリル、グルタリル、またはジグリコリルから選択される。本発明の一態様において、本発明のN末端保護基の各々は、グルタリルおよびジグリコリルから選択される。本発明の一態様において、本発明のN末端保護基の各々は、グルタリルである。本発明の一態様において、本発明のN末端保護基の各々は、ジグリコリルである。本明細書で使用される場合、コンジュゲートという用語は、ポリペプチドへ置換基を結合させて前記ポリペプチドの特性を修飾するプロセスを示すことが意図されている。したがって、分子およびポリペプチドのコンジュゲーションまたはコンジュゲーション生成物とは、ポリペプチドのアミノ酸と結合している前記置換基のための用語であり、したがって、本明細書に記載されているような置換基とは、ポリペプチドと接続している置換基を意味する。モノアルキル化とは、本明細書において、ポリペプチドの遊離アミノ基との1つのアルキル置換基のコンジュゲーションとして理解されるべきであり、ジアルキル化とは、下に図示されているように、ポリペプチドの遊離アミノ基との2つのアルキル置換基のコンジュゲーションとして理解されるべきであり、ここで、遊離アミノ基とは、一級アミン、RNH2、または二級アミン、R1NHR2として理解されるべきである。グアニジニル化とは、本明細書において、下に図示されているように、グアニジニル基へのアミノ基の変換をもたらす、ポリペプチドの遊離アミノ基とのアミジニル置換基NR2の置換基のコンジュゲーションとして理解されるべきである。本明細書で使用されるインスリン、インスリンまたはインスリンとは、CysA7とCysB7の間およびCysA20とCysB19の間のジスルフィド架橋ならびにCysA6とCysA11の間の内部ジスルフィド架橋を持つヒトインスリン、ブタインスリンもしくはウシインスリンまたはそれらのインスリン類似体もしくは誘導体を意味する。ヒトインスリンは、2つのポリペプチド鎖、それぞれ21個および30個のアミノ酸残基を含有するA鎖およびB鎖からなる。A鎖およびB鎖は、2つのジスルフィド架橋により相互に連結している。大部分の他の種からのインスリンは、同じようであるが、一部の位置にアミノ酸置換を含有することがある。本発明で使用されるインスリン類似体は、天然インスリン中に存在する少なくとも1つのアミノ酸残基を欠失させかつまたは置換することにより、およびまたは少なくとも1つのアミノ酸残基を付加することにより、天然に存在するインスリンの構造、例えば、ヒトインスリンのそれから形式的に誘導することができる分子構造を有するポリペプチドである。一態様において、本発明によるインスリン類似体は、ヒトインスリンと比べて8個未満の修飾を含む。一態様において、インスリン類似体は、ヒトインスリンと比べて7個未満の修飾を含む。一態様において、インスリン類似体は、ヒトインスリンと比べて6個未満の修飾を含む。別の態様において、インスリン類似体は、ヒトインスリンと比べて5個未満の修飾を含む。別の態様において、インスリン類似体は、ヒトインスリンと比べて4個未満の修飾を含む。別の態様において、インスリン類似体は、ヒトインスリンと比べて3個未満の修飾を含む。別の態様において、インスリン類似体は、ヒトインスリンと比べて2個未満の修飾を含む。インスリンの誘導体は、例えば、インスリン骨格の1つまたは複数の位置に側鎖を導入することにより、またはインスリン中のアミノ酸残基の基を酸化もしくは還元することにより、または遊離カルボキシル基をエステル基もしくはアミド基に変換することにより、化学的に修飾された天然に存在するヒトインスリンまたはインスリン類似体である。他の誘導体は、ヒトインスリンまたはdesB30ヒトインスリンのB29位におけるなどの、遊離アミノ基またはヒドロキシ基をアシル化することにより得られる。したがって、インスリンの誘導体は、インスリンペプチドの1つまたは複数のアミノ酸と接続している側鎖などの少なくとも1つの共有結合修飾を含むヒトインスリンまたはインスリン類似体である。本明細書において、インスリンの命名は、下記の原則に従って行われる名称は、ヒトインスリンと比べた変異および修飾として与えられる。アシル部分の命名については、ペプチド命名法として行われる。例えば、アシル部分の命名は、例えば、オクタデカンジオイルγLGluOEGOEG、オクタデカンジオイルγGlu2×OEG、オクタデカンジオイルgGlu2×OEG、17カルボキシヘプタデカノイルγLGluOEGOEG、または17カルボキシヘプタデカノイルγLGlu2×OEGであってよく、式中OEGは、アミノ酸残基NH2O2OCH2COの簡易表記であり、γLGluは、アミノ酸ガンマグルタミン酸部分のL体の簡易表記である。ガンマグルタミン酸部分のエナンチオマー形態が指定されていなければ、部分は、キラルなアミノ酸部分の立体配置が、DかまたはLである純粋なエナンチオマーの形態であってよいか、エナンチオマーの混合物の形態であってよい。修飾されたペプチドまたはタンパク質のアシル部分は、キラルなアミノ酸部分の立体配置が、DかまたはLである純粋なエナンチオマーの形態であってよいか、エナンチオマーの混合物の形態であってよい。本発明の一態様において、アシル部分は、エナンチオマーの混合物の形態である。一態様において、アシル部分は、純粋なエナンチオマーの形態である。一態様において、アシル部分のキラルなアミノ酸部分は、L体である。一態様において、アシル部分のキラルなアミノ酸部分は、D体である。desB30ヒトインスリンとは、B30アミノ酸残基を欠くヒトインスリンの類似体を意味する。同様に、desB29desB30ヒトインスリンとは、B29およびB30のアミノ酸残基を欠くヒトインスリンの類似体を意味する。B1、A1などは、それぞれインスリンのB鎖中の1位におけるアミノ酸残基およびインスリンのA鎖中の1位におけるアミノ酸基を意味する。具体的位置にあるアミノ酸残基は、例えば、B1位におけるアミノ酸残基が、フェニルアラニン残基であることを意味するPheB1として表記されることもある。例えば、実施例1のインスリンは、ヒトインスリン中のA14位にあるアミノ酸、Yが、Eに変異され、ヒトインスリン中のB25位にあるアミノ酸、Fが、Hに変異され、A1位およびB1位にあるアミノ酸が、N末端アミノ基のジメチル化により修飾され、ヒトインスリン中のB29位にあるアミノ酸、Kが、残基オクタデカンジオイルγGlu2×OEGにより、Nεと表記されるB29のリシン残基中のイプシロン窒素上のアシル化により修飾され、ヒトインスリン中のB30位にあるアミノ酸、Tが、欠失されたことを示すためにA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンと命名される。下の式中のアスタリスクは、対象とする残基が、ヒトインスリンと比較して異なっていることを示す。あるいは、実施例1のインスリンは、A1位およびB1位にあるアミノ酸残基が、それぞれGおよびFであることをさらに示すためにA1GA14EB1FB25HB29KdesB30ヒトインスリンと命名することもできる。さらに、表記NαおよびNεは、それぞれNまたはNとして、およびNまたはNと書くこともできる。配列番号1同じインスリンは、代替表示で図示されてもよい。加えて、本発明のインスリンは、IUPAC命名法に従っても命名される。この命名法によれば、上のアシル化N末端修飾インスリンには、下記の名称が割り当てられるNA1NA1ジメチルNB1NB1ジメチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB30インスリンN末端修飾の表記N末端修飾は、アルファアミノ基なしで描かれ、下の例に示されているように理解されるべきである。式IIは、を意味し、は、を意味する。ポリペプチドの製造は、当技術分野においてよく知られている。本発明によるN末端修飾インスリンのペプチド部などのポリペプチドは、例えば、古典的ペプチド合成、例えば、tBocもしくはFmoc化学反応を使用する固相ペプチド合成または他の十分に確立した技法により製造することができ、例えば、GreeneおよびWuts、ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis、JohnWileySons、1999年を参照されたい。ポリペプチドは、ポリペプチドをコード化するDNA配列を含有し、ペプチドの発現を可能にする条件下で適当な栄養培地中でポリペプチドを発現する能力のある宿主細胞を培養することを含む方法により製造することもできる。非天然アミノ酸残基を含むポリペプチドについては、組み換え細胞は、非天然アミノ酸が、例えば、tRNA変異体の使用により、ポリペプチド中に組み込まれるように修飾されるべきである。安定性という用語は、本明細書において、組成物の貯蔵寿命について記載するためにN末端修飾インスリンを含む医薬組成物について使用される。したがって、N末端修飾インスリンへ言及する場合の安定化されたまたは安定なという用語は、N末端修飾されていないインスリンを含む組成物と比べて化学的安定性が増加したか物理的および化学的安定性が増加した組成物を指す。本明細書で使用されるN末端修飾インスリンの化学的安定性という用語は、天然のタンパク質構造と比較して生物学的効力が潜在的に低くかつまたは免疫原性特性が潜在的に増加した化学分解生成物の形成につながるタンパク質構造の化学的共有結合変化を指す。様々な化学分解生成物が、天然タンパク質のタイプおよび性質ならびにタンパク質が暴露される環境に応じて形成されうる。化学分解の排除は、おそらく、完全に避けることができず、増加する量の化学分解生成物は、当業者によりよく知られているように医薬組成物の貯蔵および使用中に見られることが多い。大部分のタンパク質は、グルタミニル残基またはアスパラギニル残基中の側鎖アミド基が加水分解されて遊離カルボン酸を形成するプロセスである脱アミドを起こしやすい。他の分解経路には、2つ以上のタンパク質分子が、共有結合性のダイマー、オリゴマーおよびポリマー分解生成物につながるアミド基転移およびまたはジスルフィド相互作用を通してお互いと共有結合している高分子量変換生成物が関わる。酸化は、化学分解の別の変形形態として述べることができる。N末端修飾インスリンの化学的安定性は、異なる環境条件への暴露後の様々な時点において化学分解生成物の量を測定することにより評価することができる。各個別の分解生成物の量は、様々なクロマトグラフィー技法を使用して分子サイズ、親水性、疎水性およびまたは電荷に応じて分解生成物を分離することにより決定されることが多い。それ故に、上で概説されているように、N末端修飾インスリンへ言及する場合の安定化されたまたは安定なとは、化学的安定性が増加したか物理的および化学的安定性が増加したN末端修飾インスリンを指す。一般に、医薬組成物は、期限期日に達するまで使用および貯蔵中に安定でなければならない。本発明の一態様において、N末端修飾インスリンを含む脂質医薬組成物などの医薬組成物は、6週間を超える使用に対しておよび2年間を超える貯蔵に対して安定である。本発明の別の態様において、N末端修飾インスリンを含む脂質医薬組成物などの医薬組成物は、4週間を超える使用に対しておよび2年間を超える貯蔵に対して安定である。本発明のさらなる態様において、N末端修飾インスリンを含む脂質医薬組成物などの医薬組成物は、4週間を超える使用に対しておよび3年間を超える貯蔵に対して安定である。本発明のさらなる態様において、N末端修飾インスリンを含む脂質医薬組成物などの医薬組成物は、2週間を超える使用に対しておよび2年間を超える貯蔵に対して安定である。下記は、本発明による態様の非限定的なリストである1アシル化されたプロテアーゼ安定化インスリンであり、N末端修飾が、生理学的pHにおいて正に荷電している1つまたは複数のN末端修飾基によるものである、N末端修飾インスリン。2ペプチド部、親油性置換基およびN末端修飾基からなる、態様1に記載のN末端修飾インスリン。3生理学的pHにおいて正に荷電している修飾基が、親インスリンのN末端とコンジュゲートしている、生理学的pHにおいて正に荷電しており、1モル当たり200g未満のMWを有している1つまたは2つの有機置換基である、態様1または2に記載のN末端修飾インスリン。4生理学的pHにおいて正に荷電している修飾基が、式Iまたは、代替表示として中でYおよびZと指定される、態様1から3のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。5YおよびZが、異なり、Yが、直鎖または分岐したC1~C4アルキル、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジプロピルアミノ、トリメチルアンモニウム、トリエチルアンモニウムまたはジプロピルアンモニウムで置換されている直鎖または分岐したC2~C4アシル、5または6員の飽和ヘテロシクリル、置換された5または6員の飽和ヘテロシクリル、アミジニルであり、Zが、Hである、態様4に記載のN末端修飾インスリン。6YおよびZが、異なり、Yが、直鎖C1~C4アルキル、5または6員の飽和ヘテロシクリルであり、Zが、Hである、態様4に記載のN末端修飾インスリン。7YZC1~C4アルキルである、態様4に記載のN末端修飾インスリン。8YおよびZが、同じで、ジメチル、ジエチル、ジnプロピル、ジsecプロピル、ジnブチル、ジiブチルからなる群から選択される、態様4に記載のN末端修飾インスリン。9YおよびZが、同じで、ジメチルおよびジエチルから選択される、態様4に記載のN末端修飾インスリン。10YおよびZが、同じで、ジメチルである、態様4に記載のN末端修飾インスリン。11N末端修飾が、NNジC1~4アルキル、Nアミジニル、4ブタノイル、3プロピオニル、3プロピオニル、NNジメチルグリシルおよびNNNトリメチルグリシルからなる群から選択される、態様1から4のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。12N末端修飾が、NNジC1~4アルキルである、態様11に記載のN末端修飾インスリン。13N末端修飾が、NNジメチルまたはNNジエチルである、態様12に記載のN末端修飾インスリン。14アシル化されたプロテアーゼ安定化インスリンが、ペプチド部としてのプロテアーゼ安定化インスリンおよびペプチド部と接続している親油性置換基からなり、ペプチド部が、少なくとも1つの疎水性アミノ酸が親水性アミノ酸で置換されているように置換されているヒトインスリンであり、前記置換が、インスリンの1つまたは複数のプロテアーゼ切断部位内であるか近接している、態様1から13のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。15ペプチド部が、A8H、A14E、A14H、A14D、A21G、desA21、B1E、desB1、B3Q、B3G、B16H、B16E、B25H、B25N、B26G、B26D、B26E、B27G、B27E、B27D、desB27、B28G、B28E、B28D、desB28、およびdesB30からなる群から選択される少なくとも1つの位置で置換されている修飾が8個未満のヒトインスリンである、態様14に記載のN末端修飾インスリン。16ペプチド部が、A14E、A21G、B3Q、B16H、B16E、B25H、B25N、B26G、B27G、desB27、B28G、およびdesB30からなる群から選択される少なくとも1つの位置で置換されている修飾が8個未満のヒトインスリンである、態様14に記載のN末端修飾インスリン。17ペプチド部が、A8H、A14E、A14H、A14D、A21G、desA21、B1E、desB1、B3Q、B3G、B16H、B16E、B25H、B25N、B26G、B26D、B26E、B27G、B27E、B27D、desB27、B28G、B28E、B28D、desB28、およびdesB30からなる群から選択される少なくとも2つの位置で置換されている修飾が8個未満のヒトインスリンである、態様14に記載のN末端修飾インスリン。18ペプチド部が、A14E、A21G、B3Q、B16H、B16E、B25H、B25N、B26G、B27G、desB27、B28G、およびdesB30からなる群から選択される少なくとも2つの位置で置換されている修飾が8個未満のヒトインスリンである、態様14に記載のN末端修飾インスリン。19ペプチド部が、A14EB25HdesB30ヒトインスリンA14EB16HB25HdesB30ヒトインスリンA14EB16EB25HdesB30ヒトインスリンA14EdesB27desB30ヒトインスリンA14EB16HdesB27desB30ヒトインスリンA14EB25HB26GB27GB28GdesB30ヒトインスリンB25HdesB30ヒトインスリンおよびA14EB25HdesB27desB30ヒトインスリンからなる群から選択される、態様14に記載のN末端修飾インスリン。20ペプチド部が、A14EB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EB16HB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EdesB27desB30ヒトインスリンA14EB16EB25HdesB27desB30ヒトインスリンおよびB25HdesB27desB30ヒトインスリンからなる群から選択される、態様14に記載のN末端修飾インスリン。21ペプチド部が、A14EB25HdesB30ヒトインスリンA14EB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EB16HB25HdesB30ヒトインスリンA14EdesB27desB30ヒトインスリンA14EB25HB27EdesB30ヒトインスリンA14EA21GB16HB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB25HdesB27desB30ヒトインスリンおよびA14EA21GdesB27desB30ヒトインスリンからなる群から選択される、態様14に記載のN末端修飾インスリン。22アシル化されたプロテアーゼ安定化インスリンが、ペプチド部としてのプロテアーゼ安定化インスリンおよびペプチド部と接続している親油性置換基からなり、親油性置換基が、ペプチド部のアミノ酸位置において、場合により、リンカーを介して、インスリンと接続している脂肪酸または脂肪二酸からなる側鎖である、態様1から21のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。23ペプチド部が、ただ一つのリシン残基を含み、親油性置換基が、前記リシン残基と、場合によりリンカーを介して、接続している、態様22に記載のN末端修飾インスリン。24親油性置換基が、一般式AcyAA1nAA2mAA3pAA2は、式に沿って数回独立して現れることができAcy、AA1、AA2およびまたはAA3の間の連結は、形式的に、Acy、AA1、AA2およびAA3の各々からの水素原子またはヒドロキシル基の除去により得ることができるアミド結合でありペプチド部への接続は、式のアシル部分におけるAA1、AA2、またはAA3残基のC末端から、または式の部分に存在するAA2残基の側鎖のうちの1つからであってよいを有する、態様22または23に記載のN末端修飾インスリン。25アシル化インスリンであり、N末端修飾が、生理学的pHにおいて中性であるか負に荷電している1つまたは複数のN末端修飾基によるものである、N末端修飾インスリン。26ペプチド部、親油性置換基およびN末端修飾基からなる、態様25に記載のN末端修飾インスリン。27生理学的pHにおいて中性であるか負に荷電している修飾基が、親インスリンのN末端とコンジュゲートしている、生理学的pHにおいて中性であるか負に荷電しており、1モル当たり200g未満のMWを有している1つまたは2つの有機置換基である、態様24または25に記載のN末端修飾インスリン。28生理学的pHにおいて中性であるか負に荷電している修飾基が、式Iまたは、代替表示として中のYおよびZと指定される、態様25から27のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。29本発明による生理学的pHにおいて負に荷電しているN末端修飾基が、マロニルでもスクシニルでもない、態様25から28のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。30本発明による生理学的pHにおいて負に荷電しているN末端修飾基が、マロニルではない、態様25から28のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。31本発明による生理学的pHにおいて負に荷電しているN末端修飾基が、スクシニルではない、態様25から28のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。32N末端修飾が、カルバモイル、チオカルバモイル、C1~4鎖アシル基、オキサリル、グルタリルおよびジグリコリルからなる群から選択される、態様25から31のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。33N末端修飾が、カルバモイル、チオカルバモイル、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、ピログルタミル、オキサリル、グルタリルおよびジグリコリルからなる群から選択される、態様25から31のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。34N末端修飾が、生理学的pHにおいて中性である、態様25から28のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。35N末端修飾が、カルバモイル、チオカルバモイル、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、およびピログルタミルからなる群から選択される、態様25から28のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。36N末端修飾が、生理学的pHにおいて負に荷電している、態様25から31のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。37N末端修飾が、オキサリル、グルタリルおよびジグリコリルからなる群から選択される、態様25から28のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。38アシル化インスリンが、ペプチド部およびペプチド部と接続している親油性置換基からなり、ペプチド部が、ヒトインスリン、desB30ヒトインスリン、修飾が8個未満のヒトインスリンまたは修飾が8個未満のdesB30ヒトインスリンである、態様25から37のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。39ペプチド部が、A8H、A14E、A14H、A14D、A21G、desA21、B1E、desB1、B3Q、B3G、B16H、B16E、B25H、B25N、B26G、B26D、B26E、B27G、B27E、B27D、desB27、B28G、B28E、B28D、desB28、およびdesB30からなる群から選択される少なくとも1つの位置で置換されている修飾が8個未満のヒトインスリンである、態様38に記載のN末端修飾インスリン。40ペプチド部が、A14E、A21G、B3Q、B16H、B16E、B25H、B25N、B26G、B27G、desB27、B28G、およびdesB30からなる群から選択される少なくとも1つの位置で置換されている修飾が8個未満のヒトインスリンである、態様38に記載のN末端修飾インスリン。41ペプチド部が、A8H、A14E、A14H、A14D、A21G、desA21、B1E、desB1、B3Q、B3G、B16H、B16E、B25H、B25N、B26G、B26D、B26E、B27G、B27E、B27D、desB27、B28G、B28E、B28D、desB28、およびdesB30からなる群から選択される少なくとも2つの位置で置換されている修飾が8個未満のヒトインスリンである、態様38に記載のN末端修飾インスリン。42ペプチド部が、A14E、A21G、B3Q、B16H、B16E、B25H、B25N、B26G、B27G、desB27、B28G、およびdesB30からなる群から選択される少なくとも2つの位置で置換されている修飾が8個未満のヒトインスリンである、態様38に記載のN末端修飾インスリン。43ペプチド部が、少なくとも1つの疎水性アミノ酸が親水性アミノ酸で置換されているように置換されている、修飾が8個未満のヒトインスリンであり、前記置換が、インスリンの1つまたは複数のプロテアーゼ切断部位内であるか近接している、態様25から42のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。44ペプチド部が、A14EB25HdesB30ヒトインスリンA14EB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EB16HB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EdesB27desB30ヒトインスリンA14EB16EB25HdesB27desB30ヒトインスリンおよびB25HdesB27desB30ヒトインスリンからなる群から選択される、態様25から43のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。45ペプチド部が、A14EA21GB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB16HB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB16EB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EA21GB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EA21GB25HB26GB27GB28GdesB30ヒトインスリンA21GB25HdesB30ヒトインスリンおよびA21GB25NdesB30ヒトインスリンからなる群から選択される、態様25から43のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。46ペプチド部が、A14EA21GB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GdesB27desB30ヒトインスリンA14EA21GB16HB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB16EB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EA21GB25HdesB27desB30ヒトインスリンA21GB25HdesB30ヒトインスリンおよびA21GB25NdesB30ヒトインスリンからなる群から選択される、態様25から43のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。47ペプチド部が、A14EB25HdesB30ヒトインスリンA14EB16HB25HdesB30ヒトインスリンA14EB16EB25HdesB30ヒトインスリンA14EdesB27desB30ヒトインスリンA14EB16HdesB27desB30ヒトインスリンA14EB25HB26GB27GB28GdesB30ヒトインスリンB25HdesB30ヒトインスリンおよびA14EB25HdesB27desB30ヒトインスリンからなる群から選択される、態様25から43のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。48アシル化されたプロテアーゼ安定化インスリンが、ペプチド部としてのプロテアーゼ安定化インスリンおよびペプチド部と接続している親油性置換基からなり、親油性置換基が、ペプチド部のアミノ酸位置において、場合により、リンカーを介して、インスリンと接続している脂肪酸または脂肪二酸からなる側鎖である、態様25から47のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。49ペプチド部が、ただ一つのリシン残基を含み、親油性置換基が、前記リシン残基と、場合によりリンカーを介して、接続している、態様48に記載のN末端修飾インスリン。50親油性置換基が、一般式AcyAA1nAA2mAA3p式AA2は、式に沿って数回独立して現れることができAcy、AA1、AA2およびまたはAA3の間の連結は、形式的に、Acy、AA1、AA2およびAA3の各々からの水素原子またはヒドロキシル基の除去により得ることができるアミド結合でありペプチド部への接続は、式のアシル部分におけるAA1、AA2、またはAA3残基のC末端から、または式の部分に存在するAA2残基の側鎖のうちの1つからであってよいを有する、態様48または49に記載のN末端修飾インスリン。51A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB16HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB16HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1プロピオニルA14EB1プロピオニルB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1ブタノイルA14EB1ブタノイルB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1プロピオニルA14EB1プロピオニルB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンからなる群から選択される、態様1から50のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。52A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB16HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB16HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1プロピオニルA14EB1プロピオニルB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1ブタノイルA14EB1ブタノイルB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1プロピオニルA14EB1プロピオニルB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンからなる群から選択される、態様1から51のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。53A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB27desB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB27desB30ヒトインスリンA1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB27desB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンA1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンからなる群から選択される、態様1から52のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。54上の明細書で具体的に述べられている化合物のいずれか一つである、態様1から53のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン。55態様1から54のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリンを含む医薬組成物。56経口医薬組成物である、態様55に記載の医薬組成物。571つまたは複数の脂質およびN末端修飾インスリンを含む経口医薬組成物。58N末端修飾インスリンが、ペプチド部、N末端修飾基および、場合により、親油性置換基からなる、態様57に記載の経口医薬組成物。59N末端修飾インスリンが、ペプチド部、N末端修飾基および親油性置換基からなる、態様57に記載の経口医薬組成物。60無水である、態様57から59のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。61脂質が、グリセロールモノカプリレートおよびグリセロールモノカプレートからなる群から選択される、態様57から60のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。別の態様において、脂質は、プロピレングリコールカプリレートからなる群から選択される。62N末端修飾インスリン、N末端修飾インスリンのための少なくとも1つの極性有機溶媒、少なくとも1つの界面活性剤、少なくとも1つの親油性構成成分、および、場合により、少なくとも1つの固体親水性構成成分を含む固体または半固体医薬組成物であり、自然に分散可能である、態様57から61のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。63N末端修飾インスリン、N末端修飾インスリンのための少なくとも1つの極性有機溶媒、少なくとも1つの親油性構成成分、および場合により、少なくとも1つの界面活性剤を含む水を含まない液体医薬組成物であり、澄明な溶液の形態である、態様57から61のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。64界面活性剤が、非イオン性界面活性剤である、態様57から63のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。65界面活性剤が、ポロキサマーおよびPluronicF127またはPluronicF68などのポロキサマーの混合物からなる群から選択される固体界面活性剤である、態様57から63のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。66親油性構成成分が、モノジグリセリドである、態様57から65のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。67親油性構成成分が、親油性構成成分がプロピレングリコールと混ぜられる場合に溶液が得られるように選択される、態様57から66のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。68親油性構成成分が、モノおよびもしくはジグリセリドまたはプロピレングリコールカプリレートである、態様57から67のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。69少なくとも1つのN末端修飾インスリン、少なくとも1つの極性有機溶媒およびHLBが10を超える少なくとも2つの非イオン性界面活性剤を含む液体医薬組成物であり、油もいかなるの他の液体構成成分もHLBが7未満の界面活性剤も含有しない、態様57から61のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。70組成物が、水性媒体における希釈後にマイクロエマルジョンまたはナノエマルジョンを形成する、態様57から69のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。71有機溶媒が、ポリオールからなる群から選択される、態様57から70のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。72有機溶媒が、プロピレングリコール、グリセロールおよびそれらの混合物からなる群から選択される、態様57から71のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。73有機溶媒が、プロピレングリコールである、態様57から72のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。74前記非イオン性界面活性剤のうちの1つまたは複数が、C8脂肪酸、C10脂肪酸またはC12脂肪酸などの中鎖脂肪酸基を含む、態様69から73のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。75前記非イオン性界面活性剤のうちの1つまたは複数が、Labrasol、Tween20、Tween80、ジグリセロールモノカプリレート、ポリグリセロールカプリレートおよびCremophorRH40からなる群から選択される、態様69から73のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。76有機溶媒が、約1から約15までの量で存在する、態様57から75のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。77生理学的pHにおける修飾基が、親インスリンのN末端とコンジュゲートしている、1モル当たり200g未満のMWを有している1つまたは2つの有機置換基である、態様57から76のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。78生理学的pHにおける修飾基が、式Iまたは、代替表示として中のYおよびZと指定される、態様57から77のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。79YおよびZが、異なり、Yが、RCであり、Zが、Hであり、Rが、H、NH2、直鎖または分岐したC1~C4アルキル、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジプロピルアミノ、ジメチルアンモニウム、ジエチルアンモニウムまたはジプロピルアンモニウムで置換されている直鎖または分岐したC2~C4アシル、C5~C6シクロアルキル、置換されたC5~C6シクロアルキル、5または6員の飽和ヘテロシクリル、置換された5または6員の飽和ヘテロシクリルであり、Xが、OまたはSである、態様78に記載の経口医薬組成物。80YおよびZが、異なり、Yが、RCであり、Zが、Hであり、Rが、H、NH2、直鎖または分岐したC1~C4アルキル、C5~C6シクロアルキル、5または6員の飽和ヘテロシクリルであり、Xが、OまたはSである、態様78に記載の経口医薬組成物。81YZC1~C4である、態様78に記載の経口医薬組成物。82YおよびZが、同じで、ジメチル、ジエチル、ジnプロピル、ジsecプロピル、ジnブチル、ジiブチルおよびアミジニルからなる群から選択される、態様78に記載の経口医薬組成物。83YおよびZが、同じで、ジメチルおよびジエチルから選択される、態様78に記載の経口医薬組成物。84YおよびZが、同じで、ジメチルである、態様78に記載の経口医薬組成物。85N末端修飾が、生理学的pHにおいて正に荷電している、態様57から84のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。86N末端修飾が、NNジC1~4アルキル、Nアミジニル、4ブタノイル、3プロピオニル、3プロピオニル、NNジメチルグリシンおよびNNNトリメチルグリシンからなる群から選択される、態様57から84のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。87N末端修飾が、NNジC1~4アルキルである、態様86に記載の経口医薬組成物。88N末端修飾が、NNジメチルまたはNNジエチルである、態様87に記載の経口医薬組成物。89N末端修飾基が、マロニルでもスクシニルでもない、態様57から80のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。90N末端修飾基が、マロニルではない、態様57から80のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。91N末端修飾基が、スクシニルではない、態様57から80のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。92N末端修飾基が、NNジメチル、NNジエチル、カルバモイル、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、グルタリル、およびジグリコリルからなる群から選択される、態様57から80のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。93N末端修飾が、カルバモイル、チオカルバモイル、短鎖アシル基、オキサリル、グルタリルおよびジグリコリルからなる群から選択される、態様57から80のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。94N末端修飾が、カルバモイル、チオカルバモイル、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、ピログルタミル、オキサリル、グルタリルおよびジグリコリルからなる群から選択される、態様57から80のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。95N末端修飾が、生理学的pHにおいて中性である、態様57から80のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。96N末端修飾が、カルバモイル、チオカルバモイル、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、およびピログルタミルからなる群から選択される、態様57から80のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。97N末端修飾が、生理学的pHにおいて負に荷電している、態様57から80のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。98N末端修飾が、オキサリル、グルタリルおよびジグリコリルからなる群から選択される、態様57から80のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。99N末端修飾インスリンが、ペプチド部、N末端修飾基および、場合により、ペプチド部と接続している親油性置換基からなり、ペプチド部が、ヒトインスリン、desB30ヒトインスリン、修飾が8個未満のヒトインスリンまたは修飾が8個未満のdesB30ヒトインスリンである、態様57から98のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。100ペプチド部が、A8H、A14E、A14H、A14D、A21G、desA21、B1E、desB1、B3Q、B3G、B16H、B16E、B25H、B25N、B26G、B26D、B26E、B27G、B27E、B27D、desB27、B28G、B28E、B28D、desB28、およびdesB30からなる群から選択される少なくとも1つの位置で置換されている修飾が8個未満のヒトインスリンである、態様99に記載の経口医薬組成物。101ペプチド部が、A14E、A21G、B3Q、B16H、B16E、B25H、B25N、B26G、B27G、desB27、B28G、およびdesB30からなる群から選択される少なくとも1つの位置で置換されている修飾が8個未満のヒトインスリンである、態様99に記載の経口医薬組成物。102ペプチド部が、A8H、A14E、A14H、A14D、A21G、desA21、B1E、desB1、B3Q、B3G、B16H、B16E、B25H、B25N、B26G、B26D、B26E、B27G、B27E、B27D、desB27、B28G、B28E、B28D、desB28、およびdesB30からなる群から選択される少なくとも2つの位置で置換されている修飾が8個未満のヒトインスリンである、態様99に記載の経口医薬組成物。103ペプチド部が、A14E、A21G、B3Q、B16H、B16E、B25H、B25N、B26G、B27G、desB27、B28G、およびdesB30からなる群から選択される少なくとも2つの位置で置換されている修飾が8個未満のヒトインスリンである、態様99に記載の経口医薬組成物。104ペプチド部が、少なくとも1つの疎水性アミノ酸が親水性アミノ酸で置換されているように置換されている、修飾が8個未満のヒトインスリンであり、前記置換が、インスリンの1つまたは複数のプロテアーゼ切断部位内であるか近接している、態様57から104のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。105ペプチド部が、A14EB25HdesB30ヒトインスリンA14EB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EB16HB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EdesB27desB30ヒトインスリンA14EB16EB25HdesB27desB30ヒトインスリンおよびB25HdesB27desB30ヒトインスリンからなる群から選択される、態様57から104のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。106ペプチド部が、A14EA21GB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB16HB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB16EB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EA21GB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EA21GB25HB26GB27GB28GdesB30ヒトインスリンA21GB25HdesB30ヒトインスリンおよびA21GB25NdesB30ヒトインスリンからなる群から選択される、態様57から104のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。107ペプチド部が、A14EA21GB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GdesB27desB30ヒトインスリンA14EA21GB16HB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB16EB25HdesB30ヒトインスリンA14EA21GB25HdesB27desB30ヒトインスリンA14EA21GB25HdesB27desB30ヒトインスリンA21GB25HdesB30ヒトインスリンおよびA21GB25NdesB30ヒトインスリンからなる群から選択される、態様57から104のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。108ペプチド部が、A14EB25HdesB30ヒトインスリンA14EB16HB25HdesB30ヒトインスリンA14EB16EB25HdesB30ヒトインスリンA14EdesB27desB30ヒトインスリンA14EB16HdesB27desB30ヒトインスリンA14EB25HB26GB27GB28GdesB30ヒトインスリンB25HdesB30ヒトインスリンおよびA14EB25HdesB27desB30ヒトインスリンからなる群から選択される、態様57から104のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。109N末端修飾インスリンが、ペプチド部、N末端修飾基およびペプチド部と接続している親油性置換基からなり、親油性置換基が、ペプチド部のアミノ酸位置において、場合により、リンカーを介して、インスリンと接続している脂肪酸または脂肪二酸からなる側鎖である、態様57から108のいずれか一態様に記載の経口医薬組成物。110ペプチド部が、ただ一つのリシン残基を含み、親油性置換基が、前記リシン残基と、場合によりリンカーを介して、接続している、態様109に記載のN末端修飾インスリン。111親油性置換基が、一般式AcyAA1nAA2mAA3pAA2は、式に沿って数回独立して現れることができAcy、AA1、AA2およびまたはAA3の間の連結は、形式的に、Acy、AA1、AA2およびAA3の各々からの水素原子またはヒドロキシル基の除去により得ることができるアミド結合でありペプチド部への接続は、式のアシル部分におけるAA1、AA2、またはAA3残基のC末端から、または式の部分に存在するAA2残基の側鎖のうちの1つからであってよいを有する、態様109または110に記載のN末端修飾インスリン。112態様1から111のいずれか一態様に記載のN末端修飾インスリン誘導体を製造する方法。本明細書で引用されている刊行物、特許出願、および特許を包含するすべての参考文献は、各参考文献が参照により組み込まれると個別にかつ具体的に指示され、本明細書にその全体が記載されているのと同じ程度に、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。すべての表題および小見出しは、本明細書において便宜のためのみに使用され、決して本発明を限定するものと解釈されるべきではない。本明細書において提供されるありとあらゆる実施例、または例示的な言葉の使用は、単に、本発明をより良く解明することが意図されており、別段の主張がない限り、本発明の範囲に対する限定をもたらすものではない。明細書におけるどの言葉も、本発明の実施に不可欠として任意の主張されていない要素を指示していると解釈されるべきではない。本明細書における特許文書の引用および組み込みは、便宜のためのみに行われ、そのような特許文書の妥当性、特許性、およびまたは法的強制力のいかなる見解も反映しない。本発明は、適用可能な法律で認められているような本明細書に添付されている特許請求の範囲に列挙されている主題のすべての変更形態および等価形態を包含する。下記の実施例は、限定ではなく、例証のために提供される。本明細書で使用される略語は、下記のものであるβAlaは、ベータアラニルであり、Aocは、8アミノオクタン酸であり、tBuは、tertブチルであり、CVは、カラム体積であり、DCMは、ジクロロメタンであり、DICは、ジイソプロピルカルボジイミドであり、DIPEADIEAは、NNジイソプロピルエチルアミンであり、DMFは、NNジメチルホルムアミドであり、DMSOは、ジメチルスルホキシドであり、EtOAcは、酢酸エチルであり、Fmocは、9フルオレニルメチルオキシカルボニルであり、γGluは、ガンマLグルタミルであり、HClは、塩酸であり、HOBtは、1ヒドロキシベンゾトリアゾールであり、NMPは、Nメチルピロリドンであり、MeCNは、アセトニトリルであり、OEGは、2エトキシエチルカルボニルであり、Suは、スクシンイミジル1イル25ジオキソピロリジン1イルであり、OSuは、スクシンイミジル1イルオキシ25ジオキソピロリジン1イルオキシであり、RPCは、逆相クロマトグラフィーであり、RTは、室温であり、TFAは、トリフルオロ酢酸であり、THFは、テトラヒドロフランであり、TNBSは、246トリニトロベンゼンスルホン酸であり、TRISは、トリスアミノメタンであり、TSTUは、テトラフルオロホウ酸O1133テトラメチルウロニウムである。下記の実施例および一般手順は、明細書および合成スキームで同定された中間体化合物および最終生成物に言及する。本発明の化合物の調製は、下記の実施例を使用して詳細に記載されるが、記載されている化学反応は、本発明の化合物の調製へのそれらの一般的適用性の観点から開示されている。たまに、反応は、本発明の開示されている範囲内に包含される各化合物に記載されているように適用可能でないことがある。これが生じる化合物は、当業者により容易に認識されるであろう。これらの場合に、反応は、当業者に知られている従来の改変により、すなわち、妨害する基の適切な保護により、他の従来の試薬に変えることにより、または反応条件の常法に従う改変により成功裏に行うことができる。あるいは、本明細書に開示されているかさもなければ従来の他の反応は、本発明の対応する化合物の調製に適用可能になるであろう。すべての調製方法において、すべての出発材料は、知られているか知られている出発材料から容易に調製することができる。すべての温度は、セ氏温度で記載され、別段の指示がない限り、すべての部および百分率は、収率へ言及する場合には重量により、すべての部は、溶媒および溶離液へ言及する場合には体積による。本発明の化合物は、当技術分野内で典型的である下記の手順のうちの1つまたは複数を用いることにより精製することができる。これらの手順は、必要とされれば、グラジエント、pH、塩、濃度、流量、カラムなどに関して改変されてよい。不純物プロファイル、対象とするインスリンの溶解性などの要因に応じて、これらの改変は、当業者により容易に認識され行われうる。酸性HPLCまたは脱塩後、化合物は、純粋な画分の凍結乾燥により単離される。中性HPLCまたは陰イオン交換クロマトグラフィー後、化合物は、脱塩され、等電pHにおいて沈降され、または酸性HPLCにより精製される。典型的な精製手順HPLCシステムは、下記からなるGilsonシステムである215型液体ハンドラー、322H2型ポンプおよび155型UV検出器。検出は、典型的には、210nmおよび280nmにおける。AktaPurifierFPLCシステムは、下記からなるP900型ポンプ、UV900型UV検出器、pHC900型pHおよび電導度検出器、Frac950型フラクションコレクター。UV検出は、典型的には、214nm、254nmおよび276nmにおける。AktaExplorerAirFPLCシステムは、下記からなるP900型ポンプ、UV900型UV検出器、pHC900型pHおよび電導度検出器、Frac950型フラクションコレクター。UV検出は、典型的には、214nm、254nmおよび276nmにおける。酸性HPLCカラムPhenomenex、Gemini、5μ、C18、110Å、250×30cm流量20ml分溶離液A水中の01TFABCH3CN中の01TFAグラジエント075分10B75875分10Bから60B875925分60B925975分60Bから100B中性HPLCカラムPhenomenex、Gemini、C18、5μm250×3000mm、110Å流量20ml分溶離液A水性10mMTRIS中の20CH3CN15mMSO4pH73B80CH3CN、20水グラジエント075分0B75525分0Bから60B525575分60B57558分60Bから100B5860分100B6063分10B陰イオン交換クロマトグラフィーカラムRessourceQ、6ml、流量6ml分緩衝液A009NH4HCO3、025NH4OAc、425エタノールpH84緩衝液B009NH4HCO3、25NH4OAc、425エタノールpH84グラジエント30CVの間に100Aから100BカラムSource30Q、30×250mm流量80ml分緩衝液A50エタノール中の15mMTRIS、30mM酢酸アンモニウム、pH75緩衝液B50エタノール中の15mMTRIS、300mM酢酸アンモニウム、pH75グラジエント40CVにわたって15Bから70B脱塩カラムDaiso200Å15umFeFgel304、30×250mm緩衝液A20vvエタノール、02酢酸緩衝液B80vvエタノール、02酢酸グラジエント15CVにわたって0~80B流量80ml分カラムHiPrep2610流量10ml分グラジエント6CV緩衝液10mMNH4HCO3一般式AcyAA1nAA2mAA3pAct、、または1ヒドロキシベンゾトリアゾールなどの活性エステルの脱離基であり、アシル部分のAcyおよびAA2部分内のカルボン酸は、tertブチルエステルとして修飾されているのアシル化試薬の固相合成のための一般手順。本発明による一般式の化合物は、固相ペプチド合成の分野において当業者によく知られている手順を使用して固体支持体上で合成することができる。この手順は、ポリスチレン2クロロトリチルクロリド樹脂へのFmoc保護アミノ酸の接続を含む。接続は、例えば、トリエチルアミンまたはNNジイソプロピルエチルアミンのような三級アミンの存在下に遊離のN末端修飾アミノ酸を使用して達成することができる。このアミノ酸のC末端は、本発明のインスリンとカップリングしている合成配列の末端部にあたる。樹脂へのFmocアミノ酸の接続後、Fmoc基は、例えば、ピペリジンまたはジエチルアミンのような二級アミンを使用して脱保護され、続いて、別のFmoc保護アミノ酸とカップリングされ、脱保護される。合成配列は、ヘキサデカン二酸、ヘプタデカン二酸、オクタデカン二酸またはエイコサン二酸のモノtertブチルエステルのようなモノtertブチル保護脂肪二酸のカップリングにより終了される。樹脂からの化合物の切断は、05~5TFADCMのような希釈された酸、酢酸、またはDCM中のヘキサフルオロイソプロパノールを使用して達成される。これは、カルボン酸保護基として化合物中に存在するtertブチルエステルが脱保護されないことを保証している。最後に、C末端カルボキシル基は、例えば、Nヒドロキシスクシンイミドエステルとして活性化され、本発明のインスリンとの接続におけるカップリング試薬として直接かまたは精製後に使用される。この手順は、WO09115469中の実施例9に記載されている。あるいは、上の一般式のアシル化試薬は、下に記載されているような溶液相合成により調製することができる。ヘキサデカン二酸、ヘプタデカン二酸、オクタデカン二酸またはエイコサン二酸のモノtertブチルエステルなどのモノtertブチル保護脂肪二酸は、例えば、下に記載されているようなOSuエステルとしてまたはHOBtエステルもしくはHOAtエステルなどの当業者に知られている任意の他の活性化エステルとして活性化される。この活性エステルは、DIPEAまたはトリエチルアミンなどの適当な塩基の存在下にTHF、DMF、NMPなどの適当な溶媒中でアミノ酸AA1、モノtertブチル保護AA2、またはAA3のうちの1つとカップリングされる。中間体は、例えば、抽出手順により、またはクロマトグラフィー手順により単離される。得られる中間体は、活性化および上に記載されているようなアミノ酸AA1、モノtertブチル保護AA2、またはAA3のうちの1つとのカップリングに再び供される。この手順は、望ましい保護中間体AcyAA1nAA2mAA3pOHが得られるまで繰り返される。これは、一般式AcyAA1nAA2mAA3pActのアシル化試薬を得るために、同様に活性化される。この手順は、WO09115469中の実施例11に記載されている。上の方法のいずれかにより調製されるアシル化試薬は、OSuエステルとしての活性化後に脱保護することができる。これは、OSu活性化tertブチル保護アシル化試薬のTFA処理により行うことができる。任意のインスリンのアシル化後、結果として生じる本発明の脱保護されたアシル化プロテアーゼ安定化インスリンが得られる。この手順は、WO09115469中の実施例16に記載されている。上の方法のいずれかにより調製される試薬が、OSuエステルとしての活性化後に脱保護されなければ、任意のインスリンのアシル化は、対応する本発明のtertブチル保護アシル化インスリンを与える。本発明の脱保護されたアシル化インスリンを得るために、保護インスリンは、脱保護されなければならない。これは、本発明の脱保護されたアシル化インスリンを得るためのTFA処理により行うことができる。この手順は、WO05012347中の実施例1に記載されている。N末端保護のないアシル化インスリンを調製するための出発材料を調製するための方法は、WO09115469中に見いだすことができる。本発明のアシル化インスリンの還元Nメチル化のための調製のための一般手順アシル化インスリンを、Nメチルホルムアミド、DMF、NMP、THFまたはDMSOなどの極性の非プロトン性またはプロトン性の溶媒と02Mクエン酸塩緩衝液、酢酸ナトリウム緩衝液または希酢酸、pH45の混合物に溶かし、混合物を、穏やかに撹拌する。37水性ホルムアルデヒド溶液または、NNジエチル誘導体が望まれるならばアセトアルデヒドを添加し、続いて、メタノールまたは水中のシアノ水素化ホウ素ナトリウムの新たに調製した溶液を添加する。混合物を、穏やかに撹拌する。反応の終了後、混合物を、1N塩酸の滴下添加によりpH2~3まで注意深く酸性化する。生成物を、調製用HPLCにより単離する。一般手順は、実施例1において例証される。一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1NA1ジメチルNB1NB1ジメチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB30インスリンA14EB25HB29KdesB30ヒトインスリンを、DMFに溶かし、クエン酸塩緩衝液を添加した。この溶液に、水性ホルムアルデヒドと、続いて、メタノールに溶かしたシアノ水素化ホウ素ナトリウムを添加した。得られた混合物を、15時間にわたって室温において放置し、次いで、水を添加し、pHを、1N塩酸で2に調整した。類似体は、調製用HPLCにより精製したカラムPhenomenex、Gemini、5μ、C18、110Å、250×30cm流量20ml分溶離液A水中の01TFABCH3CN中の01TFAグラジエント075分10B75875分10Bから60B875925分60B925975分60Bから100B975100分100B100103分10B純粋な画分をプールし、凍結乾燥した。乾燥材料を、水に溶かし、pH81まで01NNaOHを添加し、凍結乾燥すると、表題インスリン類似体026gが得られた。MALDIMSmz6434計算値6434LCMS4160965同様に、下記の類似体を調製した一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1NA1ジエチルNB1NB1ジエチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB30インスリンこの類似体は、アセトアルデヒドを使用するが、上に記載されているように同様に調製した。類似体は、上に記載されているような酸性HPLCにより最初に、続いて、中性HPLCにより精製したカラムPhenomenex、Gemini、5μ、C18、110Å、250×30cm流量20mL分溶離液A水性10mMTRIS中の20CH3CN15mMSO4pH73B80CH3CN、20水グラジエント075分0B75525分0Bから60B525575分60B57558分60Bから100B5860分100B6063分10B純粋な画分を、真空中で濃縮し、水に溶かし、pHを、1N塩酸を使用して2に調整し、HPLCにより脱塩したカラムPhenomenex、Gemini、5μ、C18、110Å、250×30cm流量20mL分溶離液A水中の01TFABCH3CN中の01TFAグラジエント075分0B75275分0Bから60B275325分60B32538分60Bから100B3840分100B4043分10B純粋な画分をプールし、凍結乾燥した。乾燥材料を、水に溶かし、pH81まで01NNaOHを添加し、凍結乾燥すると、表題インスリン類似体014gが得られた。MALDIMSmz6493計算値6491LCMS416236一般手順A1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1NA1ジメチル、NB1NB1ジメチル、NイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14HisB16HisB25desThrB30インスリンA14EB16HB25HdesB30ヒトインスリンを、水性炭酸ナトリウムに溶かし、pH11まで水性水酸化ナトリウムを添加した。激しい撹拌下で、Nメチルピロリドンに溶かした2ペンタン二酸5エステルを添加し、得られた混合物を、5分にわたって撹拌した。水を添加し、pHを、塩酸の添加により57に調整した。沈殿物を、遠心分離およびデカンテーションにより単離した。残渣を、NNジメチルホルムアミドに溶かし、水性クエン酸緩衝液を添加した。水性ホルムアルデヒドおよびメタノール中のシアノ水素化ホウ素ナトリウムの溶液を添加し、得られた混合物を、6日にわたって放置した。水およびpH16まで塩酸を添加し、混合物を、HPLCにより精製した。これにより、表題化合物130mgが得られた。MALDIMSmz6086計算値6090LCMS4152356計算値152353一般手順A1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1NA1ジメチルNB1NB1ジメチルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14HisB25desThrB27ThrB30インスリンA14EB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンを、DMFおよびNMPに添加した。得られた懸濁液へ、クエン酸塩緩衝液を添加した。得られた混合物へ、pH45まで1N塩酸を添加した。水性ホルムアルデヒドおよびシアノ水素化ホウ素ナトリウムを、混合物へ添加し、得られた混合物を、30分にわたって室温において穏やかに撹拌した。水を、混合物へ添加し、pHを、12に調整した。混合物を、調製用HPLCにより精製した。純粋な画分をプールし、凍結乾燥した。インスリンを、水に溶かし、pHを、1NNaOHで84に調整した。凍結乾燥すると、表題インスリン042gが得られた。LCMS4151169計算値15118一般手順A1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1NA1ジメチルNB1NB1ジメチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB27ThrB30インスリン水およびTHF中のA14EB25HB29KdesB27desB30ヒトインスリンの溶液を、氷酢酸を使用して42にpH調整した。ホルムアルデヒドと、続いて、シアノ水素化ホウ素ナトリウムを添加した。混合物を、30分にわたって室温において撹拌した。pHを、1NNaOHで115に調整した。混合物を、1NNaOHで8にpHを再調整する前に30分にわたって放置した。混合物を、50エタノールで400mlおよび14mScmまで希釈した。混合物を、AktaExplorerAirを使用して下記の通り陰イオン交換により精製したカラムSource30Q、30×250mm流量60ml分緩衝液A50エタノール中の15mMTRIS、30mM酢酸アンモニウム、pH75緩衝液B50エタノール中の15mMTRIS、300mM酢酸アンモニウム、pH75グラジエント7CVにわたって15Bから70B化合物を、400ml中に集め、脱塩前に水で800mlまで希釈したカラムDaiso200Å15umFeFgel304、30×250mm緩衝液A20vvエタノール、02酢酸緩衝液B80vvエタノール、02酢酸グラジエント15CVにわたって0~80B流量80ml分集められた化合物を、真空中で濃縮してエタノールを除去した。pHを、1NNaOHで81に調整し、凍結乾燥した。LCMS4158415計算値158436一般手順A1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1NA1ジメチルNB1NB1ジメチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14desThrB27ThrB30インスリンこの類似体は、一般手順Aに従って調製した。LCMS4158631計算値158685一般手順A1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1NA1ジメチルNB1NB1ジメチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB16HisB25desThrB30インスリンこの類似体は、ホルムアルデヒドを使用し、上に記載されているように同様に調製した。類似体は、上に記載されているような酸性HPLCにより精製したLCMS41610計算値16101一般手順A1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1NA1ジメチルNB1NB1ジメチルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14HisB25desThrB27ThrB30インスリンLCMSmz15054計算値1505一般手順A1GA14EB1FNB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1NA1ジメチルNB1NB1ジメチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB27ThrB30インスリンLCMSmz15774計算値1577下記の実施例中の類似体は、同様に調製することができる一般手順A1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1NA1ジメチルNB1NB1ジメチルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14desThrB27ThrB30インスリン一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1NA1ジメチルNB1NB1ジメチルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14HisB25desThrB30インスリン本発明のアシル化インスリンのカルバモイル化のための調製のための一般手順アシル化インスリンを、生理学的pH近辺の緩衝液に溶かし、過剰のシアン酸ナトリウムまたはシアン酸カリウムを添加する。混合物を、反応の終了まで放置する。必要ならば、より多くのシアン酸塩を添加する。生成物を、調製用HPLCイオン交換クロマトグラフィー、または脱塩により単離する。一般手順は、下記の実施例において例証される。一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB30インスリンA14EB25HB29KdesB30ヒトインスリンを、リン酸ナトリウム緩衝液に溶かし、シアン酸カリウムを添加した。混合物を、3日にわたって室温において放置した。場合により、より多くのシアン酸カリウムを反応中に添加する。塩酸を、pH16まで添加し、類似体を、調製用HPLCにより精製したカラムPhenomenex、Gemini、5μ、C18、110Å、250×30cm流量20ml分溶離液A水中の01TFABCH3CN中の01TFAグラジエント075分0B75225分0Bから60B225275分60B27533分60Bから100B3338分100B純粋な画分をプールし、凍結乾燥した。水を添加し、pHを、01NNaOHで81に調整し、混合物を凍結乾燥すると、表題インスリン0172gが得られた。MALDIMSmz6465計算値6464。LCMS416169計算値16172一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14HisB25desThrB30インスリンLCMS41538計算値1538一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14HisB25desThrB30インスリンこの類似体は、上に記載されているように同様に調製した。類似体は、実施例10で上に記載されているような酸性HPLCにより精製した。MALDIMSmz620275計算値620216LCMS4155129計算値155155一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB30インスリンこの類似体は、上に記載されているように同様に調製した。類似体は、実施例10で上に記載されているような酸性HPLCにより精製した。MALDIMSmz649352計算値649184LCMS4162396計算値16241一般手順A1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB16HisB25desThrB30インスリンこの類似体は、上に記載されているように同様に調製した。類似体は、実施例10で上に記載されているような酸性HPLCにより精製した。MALDIMSmz646946計算値646645LCMS416174計算値16176一般手順A1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14HisB25desThrB27ThrB30インスリンA14EB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンを、リン酸ナトリウム緩衝液に溶かした。水中のシアン酸カリウムを、5時間かけて5回に分けて添加した。より多くのシアン酸カリウムを添加し、混合物を、終夜にわたって穏やかに撹拌した。続いて、混合物を、調製用HPLCにより精製した。純粋な画分をプールし、凍結乾燥し、次いで、水に溶かし、pHを、1NNaOHで78に調整した。凍結乾燥すると、表題インスリン359mgが得られた。LCMS4151938計算値15193一般手順A1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB27ThrB30インスリン。A14EB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンを、上に記載されているように正確にシアン酸カリウムで処理した。表題インスリンの収量210mgLCMS4159184計算値15918一般手順A1GカルバモイルA14EB1FカルバモイルdesB27B29KヘキサデカンジオイルgGludesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14desThrB27ThrB30インスリンLCMSmz15154計算値1515一般手順A1GカルバモイルA14EB1FカルバモイルdesB27B29KヘキサデカンジオイルgGlu2×OEGdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14desThrB27ThrB30インスリンLCMSmz15884計算値1588一般手順A1GカルバモイルA14EB1FカルバモイルdesB27B29KエイコサンジオイルgGludesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14desThrB27ThrB30インスリンLCMSmz15294計算値1529一般手順A1GA14EB1FB16HdesB27B29KエイコサンジオイルgGlu2×OEGdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB16HisB25desThrB27ThrB30インスリンLCMSmz1592374計算値159233一般手順A1A14EB1、desB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14desThrB27ThrB30インスリンLCMSmz152234計算値15218下記の実施例中のインスリンは、同様に調製することができる。一般手順A1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14HisB16HHisB25desThrB30インスリン下記の実施例中のインスリンは、同様に調製することができる。一般手順A1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14desThrB27ThrB30インスリンLCMSmz159434計算値15944下記の実施例中のインスリンは、同様に調製することができる。一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14HisB25desThrB30インスリン一般手順A1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14HisB16HisB25desThrB30インスリン下記の類似体は、上に記載されているように同様に調製することができる。一般手順A1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB27ThrB30インスリンLCMSmz159904計算値15989一般手順A1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14desThrB27ThrB30インスリンLCMSmz160174計算値16014一般手順A1GA14EB1FB16HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモイルNB1カルバモイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB16desThrB27ThrB30インスリンLCMSmz1594984計算値159485下記のインスリンは、同様に調製することができる。一般手順A1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1カルバモチオイルNB1カルバモチオイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB27ThrB30インスリンこの類似体は、シアン酸カリウムの代わりにチオシアン酸カリウムを使用し、カルバモイル誘導体について上に記載されているように同様に調製することができる。本発明のアシル化インスリンのN末端アシル化のための調製のための一般手順リシンアシル化インスリンを、場合により有機共溶媒を含有する緩衝液に溶かす。混合物のpHは、中性からアルカリ性までであってよく、例えば、Nヒドロキシスクシンイミドエステルとして、過剰のアシル化試薬を添加する。混合物を、反応の終了まで放置する。必要ならば、より多くのアシル化試薬を添加する。生成物を、調製用HPLCにより単離する。あるいは、反応を、無水条件下、例えば、有機塩基、例えば、トリエチルアミンを含有するDMSO中で行うことができる。一般手順は、下記の実施例において例証される。一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1アセチルNB1アセチルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14HisB25desThrB30インスリン。A14EB25HB29KdesB30ヒトインスリンを、エタノールと01M水性Na2CO3の11混合物に溶かし、pHを、1N塩酸で74に調整した。NNジメチルホルムアミドに溶かした酢酸Nヒドロキシスクシンイミドエステルを手早く滴下添加した。混合物を、3時間にわたって放置すると、pHは、9まで上昇した。数滴の水性メチルアミンを添加し、混合物を凍結乾燥した。乾燥材料を、氷酢酸、エタノールおよび水に溶かし、HPLCにより精製した。純粋な画分をプールし、凍結乾燥した。これにより、表題インスリン245mgが得られた。LCMS41537計算値1537一般手順A1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1アセチルNB1アセチルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14HisB25desThrB27ThrB30インスリンA14EB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンを、H2ODMSO、30mLに溶かし、NNジイソプロピルエチルアミン100μLを、pH79まで添加した。アセトニトリルに溶かした酢酸Nヒドロキシスクシンイミドエステルを、15分かけて少しずつ添加すると、pHは、添加中に108まで変化した。2時間後、混合物を、塩酸の滴下添加により17まで酸性化し、得られた混合物を、調製用HPLCにより精製した。純粋な画分をプールし、凍結乾燥した。得られた生成物を、水に溶かし、pHを、1NNaOHを使って78に調整し、凍結乾燥した。これにより、表題インスリン160mgが得られた。LCMS4151871計算値15188一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1アセチルNB1アセチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB30インスリンこの化合物は、上に記載されているように調製した。A14EB25HB29KdesB30ヒトインスリンを、35時間にわたって酢酸Nヒドロキシスクシンイミドエステルで処理した。続いて、pHを、15に調整し、続いて、調製用HPLCで精製した。凍結乾燥と、続く、78へのpH調整および凍結乾燥により、表題インスリン184mgが得られた。LCMS416169計算値16166一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1NA1ジメチルNB1NB1ジメチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGlyA1GlyB1GluA14HisB25desThrB30インスリンA14EB25HB29KdesB30ヒトインスリンを、アセトニトリルに溶かし、15mLまで水で希釈した。アセトニトリルに溶かしたNNジメチルグリシンNヒドロキシスクシンイミドエステルを滴下添加し、混合物を、100分にわたって撹拌し、数滴のメチルアミンを添加した。混合物を、氷酢酸で酸性化し、HPLCにより精製した。これにより、表題インスリンが得られた。LCMS41638計算値1638NNジメチルグリシンNヒドロキシスクシンイミドエステルNNジメチルグリシンおよびテトラフルオロホウ酸O1133テトラメチルウロニウムを、アセトニトリルと混ぜ、NNジイソプロピルエチルアミン46μLを添加した。混合物を、溶液が形成されるまで穏やかに加熱した。この混合物を、アシル化反応で、さらに特徴付けすることなく直接使用した。一般手順A1プロピオニルA14EB1FプロピオニルB25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA13プロパノイルNB13プロパノイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB30インスリン3NNジメチルアミノプロピオン酸を、アセトニトリル中でTSTUと共に溶かした。DIPEAを、pH8まで添加し、混合物を、30分にわたって室温において撹拌した。次いで、得られた混合物を、水アセトニトリル、20mLに溶かしたA14EB25HB29KdesB30ヒトインスリンの溶液に添加した。pHを、1NNaOHで79に調整し、得られた混合物を、30分にわたって室温において穏やかに撹拌した。続いて、pHを、1NNaOHを使用して5分にわたって103まで上げ、続いて、4N塩酸でpH13まで酸性化した。得られた混合物を、調製用HPLCにより精製した。純粋な画分をプールし、凍結乾燥すると、表題インスリン17mgが得られた。LCMS416451計算値16452一般手順A1ブタノイルA14EB1ブタノイルB25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA14ブタノイルNB14ブタノイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB30インスリン4ブタン酸を、アセトニトリル中でTSTUと混ぜた。DIPEAを、pH8まで滴下添加し、混合物を、室温において1時間にわたって撹拌した。これにより、茶色がかった液体となり、真空中で濃縮して油とした。続いて、これを、アセトニトリルに溶かし、水に溶かしたA14EB25HB29KdesB30ヒトインスリンの溶液に添加した。pHは、78であったが、30分の反応後に63へ変化した。次いで、溶液を、1N塩酸の滴下添加でpH25まで酸性化し、得られた溶液を、調製用HPLCにより精製した。純粋な画分をプールし、凍結乾燥し、続いて、水に溶かし、pHを79に調整した。最終凍結乾燥後、表題インスリン100mgが得られた。LCMS416520計算値16522一般手順A1プロピオニルA14EB1FプロピオニルB25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA13ピペリジン1イルプロパノイルNB13ピペリジン1イルプロパノイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB30インスリン3プロピオン酸を、アセトニトリル中でTSTUと共に溶かし、pHをDIPEAの滴下添加で8に調整した。混合物を、30分にわたって室温において撹拌し、次いで、蒸発させて油とし、アセトニトリルに再び溶かし、水中のA14EB25HB29KdesB30ヒトインスリンの溶液に添加した。pHは、74であったが、活性化された酸の添加後に67へ変化した。15分にわたって室温において撹拌した後、pHを、1NNaOHの添加により102に調整し、混合物を、5分にわたって撹拌した。続いて、混合物を、4N塩酸の滴下添加によりpH1まで酸性化した。得られた混合物を、調製用HPLCにより精製した。純粋な画分をプールし、凍結乾燥し、続いて、水に溶かし、pHを1NNaOHを使って79に調整した。凍結乾燥すると、表題インスリン111mgが得られた。LCMS416652計算値16652一般手順A1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1NA1ジメチルNB1NB1ジメチルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGlyA1GlyB1GluA14HisB25desThr27ThrB30インスリンA14EB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンを、水およびアセトニトリルに溶かすと、得られた溶液のpHは75であった。上に記載されているように調製した粗製のジメチルアミノ酢酸25ジオキソピロリジン1イルエステルを、激しい撹拌下で添加し、得られた混合物を、室温において1時間にわたってさらに撹拌した。メチルアミンを添加し、pHを、1NNaOHで12に調整した。30分後、pHを、酢酸で4に調整し、混合物を、調製用HPLCにより精製した。純粋な画分をプールし、凍結乾燥し、続いて、水に溶かし、pHを01NNaOHを使って78に調整した。凍結乾燥すると、表題インスリン517mgが得られた。LCMS415400計算値154029一般手順A1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1アセチルNB1アセチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB27ThrB30インスリンLCMSmz15944計算値1591一般手順A1GA14EB1FB25HdesB27B29KオクタデカンジオイルgGlu2×OEGdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1ピリジン2カルボニルNB1ピリジン2カルボニルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB27ThrB30インスリンこの類似体は、アシル化試薬として2ピコリン酸Nヒドロキシスクシンイミドエステルを使用して上に記載されているように同様に調製した。LCMS4162274計算値162288下記の実施例中の類似体は、同様にして調製することができる。一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1アセチルNB1アセチルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14HisB25desThrB30インスリン一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1アセチルNB1アセチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB30インスリン一般手順A1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1アセチルNB1アセチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB16HisB25desThrB30インスリン一般手順A1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1アセチルNB1アセチルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14HisB16HisB25desThrB30インスリン一般手順A1A14EB1B16HB25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1NA1ジメチルNB1NB1ジメチルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGlyA1GlyB1GluA14HisB16HisB25desThrB30インスリン一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA12アセチルNB12アセチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB30インスリンこの類似体は、アシル化試薬としてNNNトリメチルグリシンOSuエステルを使用してA1B1ジアセチル類似体と同様に調製することができる。一般手順A1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1アセチルNB1アセチルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14desThrB27ThrB30インスリン一般手順A1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1アセチルNB1アセチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14desThrB27ThrB30インスリン一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1アセチルNB1アセチルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14HisB25desThrB30インスリン一般手順A1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1アセチルNB1アセチルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14desThrB27ThrB30インスリン一般手順A1GA14EB1FdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1アセチルNB1アセチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14desThrB27ThrB30インスリン一般手順A1GA14EB1FB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA1アセチルNB1アセチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB27ThrB30インスリンカルボン酸無水物を使用する本発明のアシル化インスリンのN末端アシル化のための調製のための一般手順リシンアシル化インスリンを、場合によりトリエチルアミンまたはNNジイソプロピルエチルアミンなどの有機塩基を含有する極性非プロトン性溶媒に溶かし、過剰の、例えば、コハク酸無水物またはグルタル酸無水物として、アシル化試薬を添加する。混合物を、反応の終了まで放置する。必要ならば、より多くのアシル化試薬を添加する。生成物を、例えば、調製用HPLCによりまたは陰イオン交換クロマトグラフィーにより単離する。一般手順は、下記の実施例において例証される。あるいは、手順を、実施例55に例証されているようなNヒドロキシスクシンイミド活性化二酸を使用して水性媒体中で行うことができる。一般手順A1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA13カルボキシプロパノイルNB13カルボキシプロパノイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB27ThrB30インスリンA14EB25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンを、DMSOに溶かし、NNジイソプロピルエチルアミンを添加し、得られた混合物を、30分にわたって放置した。無水コハク酸を添加し、得られた混合物を、1時間にわたって穏やかに撹拌した。混合物を、水およびエタノールで希釈し、pHを、1N塩酸で8に調整した。生成物を、陰イオン交換クロマトグラフィーにより精製したA緩衝液50エタノール中の15mMTRIS、30mM酢酸アンモニウム、pH8B緩衝液50エタノール中の15mMTRIS、300mM酢酸アンモニウム、pH8カラム30×250mm、Source30Q流量40mL分カラムを、A緩衝液で平衡化した。混合物を、カラムに適用し、2CVのA緩衝液と、続く、30分をかける0~80Bのグラジエントで溶離した。生成物を含有する画分を、おおよそ100mLまで真空中で濃縮し、生成物を、1N塩酸で49にpH調整することにより沈殿させた。沈殿物を、遠心分離により単離し、少しの水で洗浄し、30アセトニトリル水に溶かした。pHを、1N水酸化ナトリウムで80に調整し、混合物を凍結乾燥した。これにより、表題化合物620mgが得られた。LCMSmz16204計算値1620一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA13カルボキシプロパノイルNB13カルボキシプロパノイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB30インスリンこの類似体は、上に記載されているように同様に水性方法により調製したTHFDMF11に溶かしたコハク酸に、TSTUおよびDIPEAを添加した。混合物を、2時間にわたって室温において放置した後、混合物の半分を、1MNaOHでpH93に調整された01MNaHCO3中のA14EB25HB29KdesB30ヒトインスリンの溶液に添加した。2時間にわたって穏やかに撹拌した後、OSu活性化コハク酸のもう半分を添加した。4時間後、pHを、1MHClで7に調整した。表題化合物を、RPHPLCにより単離したカラムPhenomenex、Gemini、5μ、C18、110Å、250×20cm流量10ml分溶離液A10mMTRIS、15mM硫酸アンモニウム、20CH3CN、pH73BCH3CN中の20水グラジエント075分0B75475分0Bから40B475525分40B525575分40Bから100B57560分100B6063分0B純粋な画分をプールし、凍結乾燥した。乾燥材料を、水およびCH3CN中の01TFAに溶かし、RPHPLCにより脱塩した。カラムPhenomenex、Gemini、5μ、C18、110Å、250×20cm流量10mL分溶離液A水中の01TFABCH3CN中の01TFAグラジエント075分25B75375分25Bから60B375425分60B42548分60Bから100B4850分100B5053分25BMALDIMSmz65800計算値65785。LCMS4164568一般手順A1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA13カルボキシプロパノイルNB13カルボキシプロパノイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14desThrB27ThrB30インスリンこの類似体は、上に記載されているように同様に調製した。LCMSmz16234計算値1623一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA14カルボキシブタノイルNB14カルボキシブタノイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB30インスリンこの類似体は、上に記載されているように同様に調製した。LCMSmz16234計算値1623一般手順A1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA14カルボキシブタノイルNB14カルボキシブタノイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14desThrB27ThrB30インスリンLCMSmz16304計算値1630一般手順A1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA12アセチルNB12アセチルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB27ThrB30インスリンこの類似体は、アシル化試薬として無水ジグリコール酸を使用して上に記載されているように同様に調製した。LCMSmz1628144計算値162835一般手順A1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA14カルボキシブタノイルNB14カルボキシブタノイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB27ThrB30インスリンLCMSmz162744計算値16274一般手順A1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA13カルボキシプロパノイルNB13カルボキシプロパノイルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14desThrB27ThrB30インスリンLCMSmz155014計算値15503下記の類似体は、同様に調製することができる。一般手順A1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA13カルボキシプロパノイルNB13カルボキシプロパノイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB27ThrB30インスリン一般手順A1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA13カルボキシプロパノイルNB13カルボキシプロパノイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14desThrB27ThrB30インスリン一般手順A1A14EB1B16HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA13カルボキシプロパノイルNB13カルボキシプロパノイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB16desThrB27ThrB30インスリン一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA13カルボキシプロパノイルNB13カルボキシプロパノイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB30インスリン一般手順A1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA13カルボキシプロパノイルNB13カルボキシプロパノイルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14desThrB27ThrB30インスリン一般手順A1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA14カルボキシブタノイルNB14カルボキシブタノイルNイプシロンB294カルボキシ4ブタノイルGluA14desThrB27ThrB30インスリン下記の類似体は、同様に調製した。一般手順A1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名:NA14カルボキシブタノイルNB14カルボキシブタノイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14desThrB27ThrB30インスリンLCMSmz163714計算値16369一般手順A1A14EB1B25HdesB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名LCMSmz163444計算値16344下記の類似体は、同様に調製することができる。一般手順A1A14EB1desB27B29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名一般手順A1A14EB1B25HB29KdesB30ヒトインスリンIUPAC名NA14カルボキシブタノイルNB14カルボキシブタノイルNイプシロンB292222224カルボキシ4ブタノイルアミノエトキシエトキシアセチルアミノエトキシエトキシアセチルGluA14HisB25desThrB30インスリン本発明の選択されたインスリン誘導体のインスリン受容体親和性ヒトインスリン受容体に対する本発明のアシル化インスリン類似体の親和性は、SPAアッセイマイクロタイタープレート抗体捕捉アッセイにより決定される。SPAPVT抗体結合性ビーズ、抗マウス試薬を、結合緩衝液25mlと混合する。単一のPackardOptiplate用の試薬ミックスは、15000に希釈された精製組み換えヒトインスリン受容体24μl、試薬ミックス100μl当たり5000cpmに相当する量のA14Tyr125Iヒトインスリンのストック溶液、11000希釈のF12抗体12μl、SPAビーズ3mlおよび合計12mlまでの結合緩衝液からなる。次いで、試薬ミックス合計100μlを、PackardOptiplate中の各ウェルに添加し、インスリン誘導体の希釈系列を、適切なサンプルからOptiplate中で作製する。次いで、サンプルを、穏やかに振盪させながら16時間にわたってインキュベートする。次いで、相を、1分にわたる遠心分離により分離し、プレートを、Topcounter中でカウントする。結合データは、GraphPadPrism201における非線形回帰アルゴリズムを使用して適合させた。親和性は、ヒトインスリンの親和性に対してで表される。生理学的条件を模倣するために、結合緩衝液が15HSAも含有する関連アッセイも使用する。本発明のインスリン誘導体の疎水性インスリン誘導体の疎水性は、定組成条件下での逆相HPLCの実行により見いだされる。インスリン誘導体の溶離時間を、同じ条件下で、疎水性が知られているヒトインスリンおよび別の誘導体と比較する。疎水性、krelは、krelderivkrelrefとして算出される。参照としてのHIを使用すると、krelrefkrelHI1。HPLCシステムの空隙時間、t0は、01mMNaNO35μlを注入することにより決定される。実行条件カラムLichrosorbRPC18、5μm、4×250mm緩衝液A01Mリン酸ナトリウム、pH73、10volCH3CN緩衝液B50volCH3CN注入体積5μl実行時間最大60分初期グラジエントを実行した後、誘導体および参照を実行するための定組成レベルを選択し、定組成条件下での誘導体および参照の溶離時間を、上の式で使用し、krelderivを算出する。データは、上の表に与えられている。十二指腸管腔酵素を使用するインスリン類似体の分解SPDラットからの十二指腸管腔酵素を使用するインスリン類似体の分解。アッセイは、インスリン類似体および標準品に対して16ウェルが使用可能な96ウェルプレート中でロボットにより行われる。インスリン類似体約15μMを、37°Cにおいて100mMHepes、pH74中で十二指腸酵素と共にインキュベートし、サンプルを、1、15、30、60、120および240分後に採取し、反応を、TFAの添加によりクエンチする。各点におけるインタクトなインスリン類似体を、RPHPLCにより決定する。分解半減時間を、データの指数関数フィッティングにより決定し、各アッセイにおいて参照インスリン、A14EB25HdesB30ヒトインスリンまたはヒトインスリンについて決定される半減時間に対して正規化する。分解のために添加される酵素の量は、参照インスリンの分解半減時間が60分と180分の間であるようになっている。結果は、同じ実験からの参照インスリンの分解半減時間により除されるラット十二指腸中のインスリン類似体についての分解半減時間として与えられる。ヒトインスリンに対する本発明のインスリンの相対的安定性は、一般的に、A14EB25HdesB30ヒトインスリンに対するよりも12倍高い。データは、下の表に与えられている。ラット脂肪細胞における脂質生成本発明のインスリンのインビトロ効力の尺度として、脂質生成を使用することができる。初代ラット脂肪細胞を、精巣上体の脂肪体から摘出し、例えば、01無脂肪HSAおよび標準品かまたは本発明のインスリンを含有する緩衝液中で3Hグルコースと共にインキュベートする。標識グルコースは、用量依存的に抽出可能な脂質に変換され、完全な用量反応曲線をもたらす。結果は、標準品と比較した本発明のインスリンの95信頼限界付きの相対的効力として表される。データは、上の表に与えられている。脂質製剤で製剤化されるインスリン類似体の化学的安定性脂質製剤で製剤化されるインスリン類似体の化学的安定性を、ここに記載されているプロトコルに従って評価した。コンパレーターとして、N末端保護基のない実施例1の類似体を使用し、本明細書において従来技術と表示した。製剤の組成試験されることになるインスリン15プロピレングリコール30Tween20、ポリソルベート2055ジグリセロールカプリレート試験されることになるインスリンを、16時間にわたって暗所でプロピレングリコールに溶かす。ジグリセロールカプリレートを添加し、混合物を撹拌する。Tween20を添加し、混合物を、5分にわたって撹拌する。混合物を、均一になるまで穏やかにかき混ぜる。アッセイ抽出抽出ミックス1ブタノール01Tween80、01MNa2HPO4NaH2PO4pH701製剤を、室温に到達させる。2各エッペンドルフチューブに、製剤20μlを添加する。31ブタノール490μlと、続いて、リン酸塩緩衝液990μlを添加する。ボルテックスにかけて30分にわたって室温においてインキュベートする。4再びボルテックスにかけ、20分にわたって14000rpmで室温において遠心分離する。純度およびHMWP形成について下部水相を分析する。あるいは、別の抽出方法を使用することができる1製剤を、室温に到達させる。2各エッペンドルフチューブに、製剤50μlを添加する。3抽出緩衝液950μlを添加する。十分にボルテックスにかける。直後に、スピンカラム上の精製のために800μlをロードする。下のスピンプロトコルを参照されたい。SartoriusからのQスピンカラム上のイオン交換緩衝液平衡化緩衝液25mMNa2HPO4NaH2PO4pH70洗浄緩衝液100mMNaCl、25mMNa2HPO4NaH2PO4pH70溶離緩衝液500mMNaCl、25mMNa2HPO4NaH2PO4pH70スピンカラムVivapureIEXQスピンカラムスピンプロトコル1各スピンカラムに平衡化緩衝液400μlを適用し、スピンさせる。フロースルーを捨てる。2各抽出サンプル2×400μlを適用する。各適用間にカラムをスピンさせる。フロースルーを捨てる。3洗浄緩衝液400μlを適用して各スピンカラムを洗浄し、スピンさせる。洗浄液を捨てる。4各スピンカラムに溶離緩衝液400μlを適用し、スピンさせる。純度およびHMWP形成について溶離物を分析する。純度方法パラメーターカラムWatersBEHShieldRP18UPLCカラム波長215nmカラム温度50°C流量04ml分実行時間185分負荷量75μl緩衝液A009Mリン酸水素ジアンモニウムpH30、10アセトニトリル緩衝液B90アセトニトリル。HMWP方法パラメーターカラムWatersInsulinHMWPSECカラム波長215nmカラム温度50°C流量05ml分実行時間30分負荷量40μl緩衝液500mMNaCl、10mMNaH2PO4、5mMH3PO4、502プロパノール化学的安定性研究の結果は、図1~22にさらに示されている。ラット薬物動態、静脈内ラットPK麻酔ラットに、様々な用量でインスリン類似体を静脈内に投与し、用いられた化合物の血漿濃度を、投与後4~6時間または最高で48時間以上までにわたる指定された間隔でイムノアッセイまたは質量分析法を使用して測定する。続いて、薬物動態パラメーターを、WinNonLinProfessionalを使用して算出する。おおよそ200グラムの重さがある非絶食雄性ウィスターラットを使用する。体重を測定し、続いて、ラットを、HypnormDormicumで麻酔する。麻酔は、2mlkgHypnormDormicum混合物皮下により開始され、30分間隔での1mlkg皮下の2回の維持用量および45分間隔での1mlkg皮下の2回の維持用量が続く。必要とされれば、初めから終わりまでラットを軽い麻酔状態に保つために、さらなる用量1~2mlkg皮下が供給される。秤量および初期麻酔は、ラットを一つの部屋から別の部屋へと移動することにより動物にストレスを与えるのを避けるためにラット保持室内で行われる。ラット薬物動態、小腸内注射に続くラットPK麻酔ラットに、インスリン類似体を小腸内に投与する。用いられた化合物の血漿濃度ならびに血液グルコース変化を、投薬後4時間以上にわたって指定された間隔で測定する。続いて、薬物動態パラメーターを、WinNonLinProfessionalを使用して算出する。約18時間にわたって絶食させた250~300gの重さがある雄性スプラーグドーリーラットを、初回用量としてのHypnormDormicum皮下2mlkg、20分後の1mlkgと、続く、40分毎の1mlkgを使用して麻酔する。小腸内注射モデルで試験されることになるインスリンは、上の胃管モデルについて製剤化されたように製剤化される。麻酔ラットを、37°Cにおいて安定化された恒温ブランケット上に置く。20cmのポリエチレンカテーテルを取り付けた1mlシリンジに、インスリン製剤またはビヒクルを満たす。4~5cmの正中切開を腹壁に行う。カテーテルを、腸壁の貫通により盲腸から約50cmの空腸中に穏やかに挿入する。腸内容物が存在すれば、適用部位を±10cm移動する。カテーテル先端を、腸セグメントの管腔内のおおよそ2cmに置き、結紮を使用せずに固定する。腸を、腹腔中で注意深く元に戻し、腹壁および皮膚を、各層にオートクリップで閉じる。時間0において、ラットに、カテーテルを介して試験化合物またはビヒクル04mlkgを投与する。全血液グルコース濃度を決定するための血液サンプルを、尾端における毛細血管の穿刺によりヘパリン処置した10μlの毛細管に集める。血液グルコース濃度を、Biosen自動分析装置を使用してグルコースオキシダーゼ法により500μl分析緩衝液中の希釈後に測定する。平均血液グルコース濃度経過を、各化合物に対して作成する。サンプルを、血漿インスリン濃度を決定するために集める。血液サンプル100μlを、EDTAを含有する冷やしたチューブ中に抜き取る。サンプルを、遠心分離するまで氷上に保ち、血漿を、Micronicチューブ中にピペットで移し、次いで、アッセイまで20°Cにおいて凍結させる。インスリン類似体の血漿濃度を、個々の類似体について適切と考えられるか検証されているイムノアッセイで測定する。血液サンプルを、t10、t1および投薬後4時間以上にわたって指定された間隔で抜き取る。ヒトインスリンと比べた本発明のアシル化インスリン類似体の効力実験日に238~383gの重さがあるスプラーグドーリー雄性ラットを、クランプ実験のために使用する。ラットは、制御された周囲条件下で自由に餌を食べることができ、クランプ実験に先立って終夜にわたって絶食させられる。実験プロトコルラットを、外科手順に先立って少なくとも1週間にわたり動物施設において馴化させる。クランプ実験のおおよそ1週間前に、Tygonカテーテルを、頸静脈および頸動脈中にハロタン麻酔下で挿入し、露出させて頸部の裏に固定する。ラットに、手術後にStreptocilinvetを与え、回復期間中は動物ケアユニットに入れる。無痛覚を得るために、アノルフィンを、麻酔中に投与し、リマディルを、麻酔からの完全な回復後後および2日にわたって1日1回再び投与する。実験日の午前7時に、終夜にわたって絶食させたラットを計量し、サンプリングシリンジおよび注入システムにつなぎ、次いで、ラットが実験の始まる前に約45分休む個々のクランプゲージに入れる。ラットは、全実験中にその通常の床敷上を自由に動くことができ、自由に飲料水を飲むことができる。血漿グルコースレベルを10分間隔で測定した30分の基礎的期間後、試験されることになるインスリン誘導体およびヒトインスリンを、300分にわたって一定速度にて注入する。場合により、試験されることになるインスリン誘導体の初回ボーラス注入が、血漿中の定常状態レベルに直ぐに到達させるために投与される。初回ボーラス注入の用量は、薬物動態当業者により静脈内ボーラス薬物動態から得られるクリアランスデータに基づいて算出することができる。血漿グルコースレベルを、初めから終わりまで10分間隔で測定し、正常血糖を維持するために、20水性グルコースの注入を調整する。再懸濁させた赤血球のサンプルを、各ラットからプールし、頸動脈カテーテルを介して約12ml体積で戻す。各実験日に、試験されることになる個々のインスリン誘導体の溶液およびヒトインスリン溶液のサンプルを、クランプ実験の前および終了時に採取し、ペプチドの濃度を、HPLCにより確認する。ラットインスリンおよびCペプチドならびに試験されることになるインスリン誘導体およびヒトインスリンの血漿濃度を、研究の前および終了時の関連時点に測定する。ラットを、ペントバルビタール過用量を使用して実験の終了時に殺す。対照インスリン誘導体と比べた本発明のアシル化インスリン誘導体の効力、ラットへの皮下投与雄性スプラーグドーリーラットは、ビヒクルまたはインスリン類似体の皮下単回用量を受ける。血液を抜き取り、血漿を、それぞれ、作用持続時間が中程度か作用持続時間が長い類似体について、投薬後の時点0、1、2、4、8、24および48または0、2、4、8、24、48、72および96時間に集める。血漿を、グルコースについてアッセイする。グルコース低下効果を、時間の関数としてデルタ血漿グルコースの曲線下面積として算出し、対照インスリン誘導体と比較する。イヌ薬物動態、静脈内イヌPK雄性ビーグル犬は、インスリン類似体の静脈内単回用量を受ける。血液を抜き取り、血漿を、投薬後の時点017、0、0083、025、05、075、1、125、15、2、25、3、35、4、5、8、10、12、16、24、32、48、72、96、120、144および168時間に集める。血漿サンプルを、サンドイッチイムノアッセイかまたはLCMSにより分析する。血漿濃度時間プロファイルを、WinNonlinProfessional52を使用する非コンパートメント薬物動態解析により分析する。血液グルコースまたは血漿グルコースの同時測定も行うことができる。イヌ薬物動態、経口投薬雄性ビーグル犬は、腸溶コーティングされたサイズ00のカプセルに製剤化されたインスリン類似体の経口単回用量を受ける。血液を抜き取り、血漿を、投薬後の時点0、15、30、45、60、75、90、105、120、135、150、165、180、210、240、270、300、360、480、600、720、1440分、30時間、48時間および72時間に集める。血漿サンプルを、サンドイッチイムノアッセイかまたはLCMSにより分析する。血漿濃度時間プロファイルを、WinNonlinProfessional52を使用する非コンパートメント薬物動態解析により分析する。血液グルコースまたは血漿グルコースの同時測定も行うことができる。