"Th1/キラー細胞を含む組成物であって、前記Th1/キラー細胞はTh1特性と細胞溶解活性を有する組成物。前記細胞溶解活性はNK特性を含む、請求項1に記載の組成物。前記Th1/キラー細胞はグランザイムBおよびパーフォリンを発現する、請求項1に記載の組成物。前記Th1/キラー細胞は、IFN-ガンマを発現する、請求項1に記載の組成物。前記Th1/キラー細胞は、IL-4の発現を実質的に減少させるかあるいはIL-4を全く発現しない、請求項1に記載の組成物。前記Th1/キラー細胞は、CD4細胞である、請求項1に記載の組成物。前記Th1/キラー細胞は、CD3およびCD28の架橋剤で調合される、請求項1に記載の組成物。前記Th1/キラー細胞は、正常なドナーの末梢血液から得られる、請求項1に記載の組成物。前記組成物は、臨床的に意義のある数のTh1/キラー細胞を含む、請求項1に記載の組成物。前記組成物は、少なくとも約1x107個の細胞を含む、請求項1に記載の組成物。前記組成物は、少なくとも約1x108個の細胞を含む、請求項1に記載の組成物。前記Th1/キラー細胞の前記細胞溶解活性は、正常細胞ではなく異常細胞を特に不活性にする、請求項1に記載の組成物。前記異常細胞は、癌細胞、感染細胞またはそれらの細胞の組合わせを含む、請求項12に記載の組成物。Th1/キラー細胞を含む組成物であって、前記Th1細胞/キラー細胞は、腫瘍細胞株に対して細胞溶解活性を有するCD4細胞である組成物。前記Th1/キラー細胞は、Th1特性を含む、請求項14に記載の組成物。前記Th1/キラー細胞は、グランザイムBおよびパーフォリンを発現する、請求項14に記載の組成物。前記Th1/キラー細胞は、IFN-ガンマを発現する、請求項14に記載の組成物。前記腫瘍細胞株は、ARH77である、請求項14に記載の組成物。前記Th1/キラー細胞は、正常細胞を不活性化しない、請求項14に記載の組成物。異常細胞を破壊するための方法であって、前記異常細胞を同種異系のTh1/キラー細胞を含む組成物と接触させるステップを含み、前記異常細胞と前記Th1/キラー細胞との相互作用により前記異常細胞が破壊される方法。前記Th1/キラー細胞は、CD4細胞である、請求項20に記載の方法。前記Th1/キラー細胞は、Th1特性および細胞溶解活性を発現する、請求項20に記載の方法。前記Th1/キラー細胞の前記細胞溶解活性は、グランザイムB-パーフォリンの発現を含む、請求項22に記載の方法。前記Th1特性は、IFN-ガンマの発現を含む、請求項22に記載の方法。前記Th1/キラー細胞は、IL-4の発現を欠く、請求項22に記載の方法。前記Th1/キラー細胞は、架橋抗CD3/抗CD28モノクローナル抗体とともにCD4T細胞の活性化により得られる、請求項20に記載の方法。前記異常細胞は、癌細胞、感染細胞、またはそれらの細胞の組合せを含む、請求項20に記載の方法。患者を治療する方法であって、臨床的に意義のある数のTh1/キラー細胞を含む組成物を投与することを含む方法。前記Th1/キラー細胞は、CD4細胞である、請求項28に記載の方法。前記Th1/キラー細胞は、Th1特性と細胞溶解活性を発現する、請求項28に記載の方法。前記Th1/キラー細胞は、抗CD3/抗CD28モノクローナル抗体に結合され架橋されるビーズにより活性化される、請求項30に記載の方法。前記Th1/キラー細胞は、正常なドナーの末梢血液から得られる、請求項28に記載の方法。前記Th1/キラー細胞は、患者にとって同種異系である、請求項28に記載の方法。前記臨床的に意義のある細胞数は、少なくとも1x108個である、請求項28に記載の方法。この開示は独特の特性を有する細胞を含む組成物に関する。本組成物は、Th1ヘルパー細胞特性と細胞溶解性顆粒の両方およびNK活性を有する細胞型の細胞を含む。Th1特性とNK特性を組み合わせたCD4T-細胞は、様々な疾病を持った患者に対して高い治療能力を提供することができる。Th1の特性には、例えば、IL-4を産生しないIFN-γの産生を含むことができる。NKの特性には、グランザイムBとパーフォリンの発現を利用して正常細胞を殺すことなく腫瘍細胞を殺すことを含むことができろ。本発明は、養子免疫療法のために、この新規な細胞型を臨床的に意義のある数へと分化と増殖を引き起こす方法を含む。新規の細胞を得る方法は、末梢血液または他のT-細胞ソースからT-細胞、特にCD4T細胞を分離することを含むことができる。これらのCD4T細胞は、本願に記載される方法に従って臨床的に意義のある数まで分化と増殖が行われ、免疫療法に利用されることができる。意外なことに、本願に記載されるような方法で調製されたCD4T細胞は、一般的にNK/CTL細胞において見られる細胞溶解活性に類似する細胞溶解活性を示し、かつまたTh1特性とTh1活性を示すことができる。一般的にT-ヘルパー細胞は、直接的に細胞溶解活性を示さず、異常細胞を非活性化するか殺すためにサイトカインおよびNK細胞やCTLsのような他の細胞を後に引き出す因子を産生する。本発明の組成物においてCD4T細胞は、直接異常細胞を殺すことができ、また後に細胞溶解活性を実行するNK細胞のような他の細胞を刺激するためのサイトカインを産生することができる。これらCD4T細胞の細胞溶解活性は、グランザイムBおよびパーフォリンを介して調節され、その結果腫瘍または感染細胞の死につながる。本願で述べるように細胞溶解活性は、エフェクター細胞が標的細胞と相互作用をした場合に、標的腫瘍細胞または細胞株のエフェクター細胞により直接殺すことに関する。直接的致死は、他の細胞型は存在せず、エフェクター細胞と標的細胞のみの存在によって発生することができる。本発明に記載される新規の細胞は、本願ではTh1/キラー細胞と呼称される。Th1/キラー細胞は、Th1の特性と、正常細胞ではなく腫瘍細胞を殺すことと、グランザイムBおよびパーフォリンの発現メカニズムを介するNK活性の発現とを組合せて示すことができる。本願に記載される臨床的に意義のある細胞数とは、直接的であるか間接的であるかを問わず、抗腫瘍効果を引き出すために十分なTh1/キラー細胞の数に関する。一般的に1回の投与で投与されるTh1/キラー細胞の数は少なくとも1x106個の細胞数、好ましくは少なくとも1x107個の細胞数、より好ましくは少なくとも約1x108個の細胞数である。より多くの細胞数での複数投与もこの発明の範囲である。複数の患者対して十分な投与量を生産するために1人の献血者から十分な量の細胞を生産することが好ましい。臨床的に意義のある数は、少なくとも1人、より好ましくは10人まで、最も好ましくは100人以上の患者ために十分な細胞数であることを含む。本発明の組成物は様々な異常細胞を有する患者に対して投与されることができる。患者は動物、ヒトまたは他の哺乳類であることができる。異常細胞は癌細胞もしくは感染組織からの細胞であることができる。異常細胞はウイルスおよび/または細菌性病原体で感染されてもよい。本発明の組成物は、乳癌、肺癌、大腸癌、胃癌、膵臓癌などの固形癌を有する患者に投与され得る。また本発明の組成物は血液性悪性腫瘍例えば、慢性リンパ性白血病、多重骨髄炎、非ホジキン性リンパ腫またはウイルス性感染症例えば、肝炎Bまたは肝炎C、ヘルペス、HIV、およびその他の障害を有する患者に投与され得る。本願に記載される組成物は生細胞である。生細胞とは、トリパンブルー押出法、MTT法、または、適切な条件下で増殖、分化および/または活性などのエキソビボでの細胞操作が可能であるようなATPレベルの生体発光検出法、などの適切なアッセイ法を用いた測定により、70より多くの細胞が生存可能であることを意味する。しかしながら組成物はいくらかの、不活性細胞、放射性細胞および/または生育不能細胞、および非生存成分を含み得る。一般的に組成物は、例えば、まずドナーの血液に由来するCD4細胞を含む。ドナーは疾患のない正常者であることができる。CD4細胞は、本願に記載される方法で処理され、次に同じドナーに、または血縁関係者あるいは非血縁関係者の受容者に輸液として処方され得る。CD4の細胞ソースは末梢血液から精製されるものが好ましい。CD4細胞は種々の方法で精製されることができる。一般的に、CD4細胞は正の選択により末梢血液のバフィーコート軟膜から精製される。バフィーコートからのCD4の正の選択は、例えば磁気ビーズおよびカラムミルテニーバイオテク社製オーバン、カリフォルニア州を用いて行われることができる。これにより、細胞組成物は約90より多く、好ましくは95より多く、さらに好ましくは98より多くの純粋CD4細胞を得ることができる。バフィーコートから分離されTh1細胞/キラー細胞の産生のための原料物質として用いられるCD4細胞は、幾つかの細胞表面マーカーの発現により特徴付けられることができる。末梢血液のバフィーコートから精製されたCD4細胞集団は、CD45RA/CD45ROマーカーの混合集団を有することができる。通常CD4T細胞の大部分はCD25-である。好ましくはCD4細胞ソースは、ほとんどがナイーブCD45ROでなくCD45RAを発現である。またソースCD4T細胞はCD62L発現およびCD40発現により評価される。一般的にソースCD4T細胞は極めて少量のCD40Lを発現する。CD62Lの発現は二峰性の高および低平均蛍光強度MFIピークであることができる。ソースCD4細胞は高CD62L発現を有することが好ましい。ソースCD4T細胞は複数の活性化ステップにより、Th1/キラー細胞に分化するように処理されることができる。CD4細胞は3日ごとに9日間活性化することが好ましい。これらのCD4細胞は、CD3およびCD28細胞の表面分子を架橋することで活性化されることが好ましい。CD3およびCD28の架橋は、固定化抗CD3およびCD28のモノクローナル抗体を添加することで達成できる。通常Th1/キラー細胞は細胞培養で分化と増殖により得られる。多重活性化されたCD4細胞は細胞培養液から採取されて液体窒素中に凍結保存される。患者に投与する前に細胞は最終活性化される。活性剤は細胞と共に残される。活性剤が添付された細胞は、例えば、注射器のような注入または注射に適した器具内で調合される。本願で用いられる活性化は、モノクローナル抗体のような作用体による細胞表面分子の結合およびを架橋剤によるこれらの作用体の架橋の両方を指す。このタイプの活性化は例えば米国特許第7,435,592号および米国特許第7,402,431号に記載されており、両明細書は参照のために本願に援用される。CD4T細胞は、T-細胞表面分子に特異的な固定化モノクローナル抗体を用いることを含む様々な方法で活性化され得る。好適な活性化T-細胞は、例えば、米国特許第7,435,592号に記載されている。細胞は、後に架橋されるモノクローナル抗体もしくは他の結合剤によって結合された細胞表面部分を有することが好ましい。これらのモノクローナル抗体および/または結合剤は、例えばT-細胞を活性化するために固体表面上に固定するような結合剤により架橋することが好ましい。これらは、培養液活性化細胞CACとして本願に称される。これらエキソビボで調合されたCACは、将来使用するためにあるいは輸液を処方するために凍結されることができる。CACは、例えば分注されて液体窒素タンクのガス相で凍結され得る。CACは後述するように予め定義されている同一性と機能的放出の基準を一貫して満たすことができる。工程および最終品質管理において、無菌と非毒性の状態を確認するためのテストが定められている。一実施の形態において、CD4T細胞は、インビトロジェン社カールスバッド、カリフォルニア州から購入したCD3/CD28クリネックスビボダイナルビーズClinExVivoDynalBeadsで9日間培養される。細胞は、37°C、5CO2のライフセルフラスクバクスターサイエンティフィック社製ディアフィールド、イリノイ州中で成育され、培養の3日目および6日目にビーズで再刺激される。9日間の培養の後、ビーズは取り除かれて得られた細胞はCACと称されることができる。活性化のための他の細胞培養方法もまた本発明の範囲内である。好ましい実施の形態において、エキソビボで調製されたCACは、患者への投与または他の用途に必要とされるまで冷凍保存される。患者への投与をする前に、必要があればCACは解凍されて洗浄され、例えば米国特許第7,402,431号に記載されたようにCD3およびCD28のような細胞表面結合部分の架橋により栄養培地で再活性化される。CACは、次に活性剤および架橋剤とともに洗浄されかつ調合用緩衝液のような非栄養緩衝液に移される。調合用緩衝液中の再活性化細胞は、本願では調合用緩衝液内細胞CFBと呼ばれる。また本願ではCFBはTh1/キラー細胞とも呼ばれ得る。CFBとTh1/キラー細胞とは本願において置き換え可能に用いられる。Th1/キラー細胞は、注射器または他の適切な容器内に充填され、必要に応じて治療現場に移されることができる。次いでTh1/キラー細胞は、治療目的のために患者に投与されることができる。Th1/キラー細胞は、静脈内投与、腹腔内投与、皮内投与または他の適切な方法によって投与され得る。Th1/キラー細胞は、一旦非栄養緩衝液に移されると保存期間が制限される。細胞は、少なくとも1ml当たり約106個の細胞密度、好ましくは約107個の細胞密度またはそれ以上の密度に調合されることができる。ある実施の形態では、細胞は1ml当たり約108個の細胞密度、あるいはそれ以上の細胞密度に調合される。細胞の固有濃度は、細胞の特定の使用または治療プロトコルにより決定され得る。組成物には、Th1/キラー細胞に加えて、幾つかの他の構成成分を含み得る。これらの成分には、例えば、細胞を望ましい活性化状態で維持する薬剤を含むことができる。1つの例示的な実施の形態では、構成成分には、以下の実施例において記載されるダイナビーズクリネックスビボDynabeadsClinExVivo登録商標のようにT-細胞を活性化状態に維持する薬剤を含むことができる。一般的に、細胞は患者への輸液に適した非栄養緩衝液に移される。細胞は種々の非栄養緩衝液中に入れることができる。本願で述べられる非栄養緩衝液は、細胞増殖および/または細胞拡大を支持するために適切な構成成分に欠ける任意のタイプの媒体、緩衝液あるいは他の液体である。非栄養緩衝液は一般的に、等張性で、USPステライルUSPsterileで、発熱物質がなく、無傷の生細胞を維持するために適切な構成成分および/または緩衝システムを含み、かつヒトの非経口使用が許可されているものである。1つの例示的な実施の形態では、非栄養緩衝液は1のヒト血清アルブミンマッケソン社製サンフランシスコ、カリフォルニア州を添加したプラズマライトAPlasmalyteAバクスターサイエンティフィック社製ディアフィールド、イリノイ州である調合用緩衝液である。Th1/キラー細胞の幾つかの実施の形態では、細胞に対する活性化信号は、細胞が非栄養緩衝液に移される場合でも維持される。例えば、細胞表面の結合部分を架橋することで細胞が活性化される幾つかの実施の形態では、架橋は非栄養緩衝液中で維持されることが好ましい。保存期間中の架橋のメンテナンスは、保存場所から移動させた後に組成物の機能的特性を回復させるために重要であり得る。組成物中のTh1/キラー細胞は機能特性の新規な組合せを示すことができる。これらの機能は、Th1特性およびNK機能に類似した細胞溶解機能を含む。Th1/キラー細胞は、通常IFN-ガンマを産生し、また実質的にIL-4の産生は減少または無産生である。IL-4の産生は50pg/106個の細胞より少なくIFN-ガンマの産生は1000pg/106個の細胞よりも多いことが好ましい。Th1/キラー細胞の付加的な機能特性は、例えばCD40L、FasL、パーフォリンおよびグランザイムBのような機能性分子、4-IBBL、CD28、CTLA4およびTWEAK、PD-1、B7ファミリーなどのTNF関連活性化誘導サイトカインTRANCEなどの共刺激分子、インテグリン、カドへリンおよび種々のサイトカインとケモカインのセレクチンと分泌物などの粘着分子を発現することと、およびこれらサイトカインとケモカインの受容体を発現すること含むことができる。Th1/キラー細胞は、大量のサイトカインを産生し分泌することができる。産生されたサイトカインは、例えば、残留するIL4分泌物のみを伴ったINFα、GMCSFおよびTNF-αである。また本願に記載されるTh1/キラー細胞は、細胞溶解活性も示すことができる。細胞溶解活性はCTL細胞/NK細胞の特徴に類似する。一般的に、CTL細胞/NK細胞の細胞溶解活性は、Th1/キラー細胞と同様に、腫瘍細胞または異常細胞に対して特異性があるが正常細胞に対して特異性はない。すなわち、Th1/キラー細胞は異常細胞を殺すことはできるが、正常細胞を殺すことはできない。細胞溶解活性は様々なメカニズムを介して生じることができる。例えば細胞溶解活性は、グランザイムB-パーフォリンメカニズムを介して生じることができる。細胞溶解活性は細胞溶解やアポトーシスにより細胞の破壊につながり得る。Th1/キラー細胞の細胞溶解活性をEGTAにより阻止することができる。例えば、EGTA濃度約1mMで活性Th1細胞の細胞溶解活性を減少させることができる。本発明のTh1/キラー細胞は、グランザイムB分子とパーフォリン分子を発現することができる。グランザイムBとパーフォリンは、通常ナイーブまたは分化や活性などによる成熟後であってもCD4細胞には発現されない。活性Th1細胞のグランザイムBとパーフォリンの用量は変えることができる。通常、発現されるグランザイムBとパーフォリンの用量は、異常細胞を破壊するのに十分な量である。好ましい実施の形態では、本発明はTh1/キラー細胞を含む組成物を含む。本発明に含まれる組成物のTh1/キラー細胞は、ARH77などの骨髄腫瘍細胞株を含む様々な腫瘍細胞を不活性化することができる。異常細胞の不活性化は、EGTAに対して感受性があるメカニズムを介してできる。エフェクター細胞Th1/キラー細胞と標的細胞異常細胞の比率は変化させることができる。エフェクター細胞と標的細胞の比率は、少なくとも1:9、好ましくは少なくとも1:5、より好ましくは少なくとも1:1、とすることができる。本発明は異常細胞を破壊する方法を含む。異常細胞は患者の体内に存在することができる。例えば、患者は悪性腫瘍を有してもよく、またはウイルス感染により感染した細胞組織を含んでもよい。患者は充実性腫瘍または血液の悪性腫瘍を有してもよい。本発明の方法は、患者に本願に記載されるTh1/キラー細胞を含む組成物を投与することを含むことができる。Th1/キラー細胞は患者にとって同種異系であることが好ましい。同種異系細胞は1人の正常な同種異系のドナーから得られてもよい。あるいは、同種異系細胞は複数のドナーから得られて治療用組成物に結合されてもよい。患者と同種異型細胞間の組織適合性の不一致を最大化することが好ましい。患者と同種異系細胞間の組織適合性は許容されることができ、依然として所望の結果を得ることができる。Th1/キラー細胞は、皮内、静脈内、腹腔内などの様々な経路で患者に投与されることができる。患者は1投与量または複数投与量を投与され得る。患者に投与される細胞数は様々であることができるが、特異的疾患、患者、活性化の方法および他の要因によって決まり得る。通常、患者は少なくとも107個の、好ましくは少なくとも108個の、より好ましくは109個の活性Th1細胞が投与される。また本発明はTh1/キラー細胞を含む組成物を投与することにより患者を治療する方法を含む。患者はTh1/キラー細胞の1以上の投与量を受けてよい。投与量および投与の頻度は変わることができ、特異的疾患により決定することができる。好ましい実施の形態では、Th1/キラー細胞は患者に対して同種異系であり、Th1/キラー細胞の患者への投与は、移植片対宿主病を起こさずに宿主対移植片効果に加えて宿主対腫瘍効果をもたらす。[実施例]材料PE結合CD40Lは、ベックマンコールター社ブレア、カリフォルニア州から購入し、7-アミノーアクチノマイシンD7-AAD1000xは、ケイマンケミカル社アナーバー、ミシガン州から購入し、プラズマライトAPlasmaLyteAは、バクスターサイエンティフィック社ディアフィールド、イリノイ州から購入し、ヒト血清アルブミンHSAは、マッケソン社サンフランシスコ、カリフォルニア州から購入し、FcR結合阻害剤は、eバイオサイエンス社サンディエゴ、カリフォルニア州から購入し、ダイナビーズクリネックスビボDynabeadsClinExVivo商標は、インビトロジェン社カールスバッド、カリフォルニア州から購入した。培養で活性化される細胞の調製CACCD4T細胞は、インビトロジェン社から購入したCD3/CD28クリネックスビボダイナルビーズClinEXVivoDynalBeadsの存在下で9日間培養されたロケーション。細胞は、37°Cで5のCO2のライフセルフラスクバクスター社中で培養され、培養の3日目と6日目にビーズで再び刺激された。培養から9日目にビーズを取り除くことができ、これらの細胞はCACと呼ばれる。調合用緩衝液中の細胞の調製CFBCACは、洗浄のためcRPMI培地に置かれた。調合プロトコルの始まりを指示するために時間が記録された。cRPMI培地中の細胞は遠心分離されて上澄み液は除去されて、細胞はcRPMI緩衝液中に再懸濁された。細胞生存率はトリパンブルー法を用いて測定された。生細胞の総数と濃度を用いて生細胞の割合を決定した。生細胞が80より大きいサンプルの場合には、処置は細胞の再活性化および調合のために続けられた。CAC細胞は、1mlあたり1x107個の細胞濃度中に再懸濁された。1x107個の生細胞濃度で再活性化が行われた。再活性化は容積によるが24ウエルプレート、6ウエルプレートまたは75cm3のフラスコで行われた。ダイナビーズクリネックスビボDynabeadsClinExVivo登録商標CD3CD28は、細胞を再活性化するために添加され、36-38°Cで5のCO2で4時間培養された。4時間培養した後、次に細胞は取り除かれて最終調合用緩衝液FFBの入った50mlのチューブに移された。FFBは、1のHSAを添加したプラズマライトAPlasmaLyteAである。再活性化細胞は、遠心分離され、上澄み液は取り除かれてFFB中で再懸濁された。これらは、調合用緩衝液内細胞CFBと呼ばれる。CFBは、1mlあたり107個の細胞濃度のFFB中で再懸濁された。CFBは、皮内ID投与、脊椎内IT投与または静脈内IV投与のために懸濁された。細胞懸濁液の1mlは、皮内ID投与調合剤として3ml、脊椎腔内IT投与配合剤として3ml、静脈内IV投与配合剤として5ml、それぞれの注射器に加えられた。適切な調合剤の入ったこれらの注射器は平均温度約4°Cで冷蔵保存された。保存後のサンプルの採取細胞および上澄み液は異なる時点で回収された。回収された時点は以下の通りであった:0、室温RTで2時間、4°Cで48時間、および4°Cで48時間保存後室温で2時間。各時点で、100ulμlの細胞懸濁液が採集されて、細胞は400gで5分間4°Cで回転された。次に、上澄み液は後にELISA法でIFN-γを検出するために別のチューブに移し変えられた。細胞はフローサイトメトリーのために染色バッファ150ul中に再懸濁された。いくつかの実験では、細胞は100ulのcRPMI培地に再懸濁され、37°Cで24時間5CO2でインキュベータ中で培養された。24時間培養した後上澄み液は取り除かれELISA法によりIFN-γを検出した。フローサイトメトリーCD40Lおよび7-ADD50ulの細胞懸濁液は上記150ulから3つのエッペンドルフチューブに移されて、それぞれ染色なし、CD40L、および7-ADDと標識された。染色なしのチューブは、氷上で20分間培養された。CD40Lチューブは、製造者の指示によれば氷上で20分間FcR結合阻害剤とともにプレインキュベートされた。次に、染色バッファ40ulPBS1FBSとPE-CD40L抗体10ulは、細胞懸濁液に添加されて、さらに20分間暗闇の氷上で培養された。細胞の生存は、7-AADを用いたフローサイトメトリーにより試験された。7-AADは死細胞または損傷を受けた細胞のDNA中にインターカレートし、7-AAD陽性細胞の決定は細胞生存性の指標となる。7-AADのチューブは400gで5分間、6°Cで遠心分離された。上澄み液を取り除いた後、細胞ペレットは100ulの1x7-AAD液中に再懸濁された。チューブは、氷上において15分間暗闇中で培養された。染色バッファ1mlがCD40Lチューブに添加され、次に3つのチューブが一緒に遠心分離された。上澄み液を捨てた後で、細胞ペレットは0.4mlの染色バッファで再懸濁されてFACS機器が操作された。実施例1CD4細胞の精製および細胞表現型正常なドナーの抹消血液を得てミルテニーバイオテク社オーバーン、カリフォルニア州から入手したミルテニー磁気ビーズとカラムを用いてバフィーコートからCD4細胞を精製した。図1は、CD4に対する測方散乱細胞の大きさと密度を測定のフローサイトメトリープロットである。図1は、CD4細胞は総数N=22の約46を示す。CD4細胞の正の選択の結果として、98.69の純粋CD4細胞N=22が得られた。図1Bに見ることができるように、カラム後のCD4の集団はリンパ球と単球の両方を含む。各バッチは異なるドナーから生産されるので、抗原マーカーは生産の始めと終わりにテストされた。培養で活性化される細胞CAC図2Bに対するCD4細胞の細胞表現型図2Aがテストされた。結果はナイーブCD4表現型CD45RAから記憶表現型CD45ROへと非常に一貫性のあるシフトを示す。図2Aは、CD45RA、CD45RO及びCD25に対してCD4細胞の表現型をそれぞれ示す。図2Bは、培養9日後のCACの表現型と、CD45RA、CD45RO及びCD25のそれぞれの表面発現の分析を示す。CD45RA/CD45ROの混合集団から、CR45RA陰性CD45RO陽性集団が得られる。CD25細胞は発現工程の開始時には約10である。9日目にはCD25細胞は約85であった。これは細胞の活性化状態によるものである。図2Aは、カラム後のCD4細胞が、CD45RA細胞平均44.76、n=29、CD45RO細胞平均53.44、n=29およびCD25細胞平均10.83、n=29のナイーブ表現型であることを示す。図2Bは、継続して刺激を与えた培養で9日後を示すが、表現型はThメモリ様細胞に変化する。CD45RAは急激に減少し平均4.22、n=29、CD45ROは平均97.8n=29に増加し、またCD25も平均90.03n=29に増加する。CD62L発現パターン図3は第0日目デイ0を示し、CD4シード細胞は最大ピーク約103算術平均は541、n=17の二峰性CD62L平均蛍光強度MFIを発現する。MFIは、培養9日後に算術平均は1541まで増加しCAC、次いで最後の4時間の活性化の後、極端に減少する算術平均の平均は190.3CFB。CD40L発現パターンCD40LのCAC上の発現密度は、CD3/CD28ビーズで4時間刺激した後にCACの表面上で一貫して上昇する。図4は、代表的なバッチにおけるCD40L発現の算術平均と割合の変化を示し、第0日目図4A、最終活性前にCACを採取した第9日目図4B、および4時間活性化させた後のCFB図4Cと比較する。見られるように、不活性細胞と活性細胞の違いは、CD40L細胞の割合においてはさほど大きくはないが、むしろ算術平均において大きいCFBの算術平均は112であるがn=29、CACの算術平均は20n=29である。最終活性化中のサイトカイン分泌物第9日目の各生産物バッチからCAC細胞を採取したサンプルはCD3/CD28ビーズで4時間活性化され、上澄み液は収集され、ELISA分析法を用いてサイトカイン生産物IFN-γ,IL-4,IL-8,TNFαおよびGM-CSFを試験した。表1は、これらの実験の結果を示す。IFN著作権とIL-4の数値のみが機能的な放出基準に使用された。19の連続したバッチの結果を表1に示す数値はpg/106個の細胞/4時間として示される。報告される平均はパッシングバッチpassingbatchesのみを含む。実施例2活性化Th1/キラー細胞による直接致死CFBが腫瘍細胞に直接影響があり得るかどうかをテストするために、ARH77細胞株を殺す細胞能力が試験された。ARH77の細胞株は樹立骨髄腫細胞株である。ARH77細胞は、ARH77細胞をCFBと区別するためにCFSEで染色された。CFBは、標的ARH77に対して異なるエフェクターCFBで18時間染色されたARH77と混合された。その後、7AADが添加されて、細胞はFC500MPLフローサイトメトリーを用いて得られた。この実験は異なるCACバッチを用いて、新鮮で解凍されたCFBを用いて繰り返し行われる。ARH77単独、ダイナビーズDynaBeads、CD4細胞と供に、またはCACと供にでは、示されてはいないが、著しい致死10以下データは見られない。図5に示される結果は、CAC、CD4細胞またはビーズではなく、CFBがARH77細胞株に対して直接致死効果があることを示す。直接致死効果の性質は、その効果がパーフォリン-グランザイム経路によるものであるかどうかを見るために試験された。パーフォリンとグランザイムBを染色するために内部染色とウエスタンブロット法の両方を用いた。見られるように、図6AはCACがグランザイムBをほとんど発現しないことを示す。図6BはCFBがかなり多量のグランザイムBを発現することを示す。図6Cは、ウエスタンブロット法の使用によってのみパーフォリンが検出可能であることを示す。レーン1は、ポジティブコントロールとして活性PBMCsの抽出物である。レーン2及び4は、異なるバッチからのCACである。レーン3およびび5は、同一バッチからのCFBである。阻害アッセイはまた、直接致死メカニズムの性質を明らかにするために行われた。下の表2に示すように、CFBは上記のようにARH77細胞と混合されて異なる阻害剤が添加された。CD40LおよびまたはFAS-Lに対する抗体が、CFBARH77混合物に添加された。表2は、最も高い濃度でも致死プロファイルを妨げなかったことを示す。直接致死メカニズムにおけるEGTAの効果が試験された。EGTAは、パーフォリンの重合を妨げ、パーフォリン/グランザイムBメカニズムの阻害剤として作用する。1mMのEGTAが上記の直接致死アッセイに添加された。図7に示すように、1mMのEGTAは平均50致死を減少させたn=7。ペアt検定のP値は0.0002である。CFBが示す直接致死効果は、パーフォリン-グランザイム経路に由来する。本発明は、好ましい実施の形態に関して記載されているが、本発明の精神と範囲を逸脱することなく当業者は形式上のおよび詳細において変更がされ得ることは認識されるであろう。"