"感染症による死亡のより大きなリスクがある対象を特定し、および/または感染症発症のより大きなリスクがある対象を特定する、感染症をもつ対象の予後診断の方法であって、前記対象からの試料における遊離軽鎖FLCの量を検出することを含む方法であって、より高いFLCの量が、前記感染症に起因する生存の減少、および/または感染症のリスクの増加、および/または感染症発症の増加したリスクを有することと関連する、方法。感染症を有する患者からの試料における遊離軽鎖FLCの量を検出すること、および前記試料における前記FLCの量を、前記患者から以前に得た試料において検出されるFLCの量と比較することを含む、感染症を監視する方法であって、前記以前の試料と比べて、前記FLCの検出量の増加が、前記患者における前記感染症の増加を示し、前記FLCの量の減少が、前記患者における前記感染症の減少を示す、方法。前記感染症が、細菌感染症である、請求項1または請求項2に記載の方法。前記感染症が、下部呼吸器感染症例えば肺炎など、尿路感染症、クロストリジウムディフィシル感染症、敗血症または腹膜炎である請求項1~3のいずれかに記載の方法。前記遊離軽鎖の量が、前記試料における総遊離軽鎖の量である、請求項1~4に記載の方法。前記FLCが、前記対象の血清の試料において測定される、請求項1~5に記載の方法。前記総FLCが、抗遊離軽鎖抗体を使用する免疫アッセイにより測定される、請求項1~6に記載の方法。前記抗体が、抗遊離κ軽鎖および抗遊離λ軽鎖抗体の混合物である、請求項7に記載の方法。前記FLCの量を、比ろう法または比濁法によって検出することを含む、請求項1~8に記載の方法。前記対象が、B細胞関連疾患症状を有さない、請求項1および3~9に記載の方法。前記方法において使用される取扱説明書を追加として含む、請求項1~9に記載の前記方法に使用するためのアッセイキット。前記アッセイキットを使用して得たFLCの濃度が、対象の生存の増加を示す正常値を追加として含む、請求項11に記載のアッセイキット。1つ以上の抗FLC抗体および1つ以上の抗細菌性抗原抗体を含む、請求項1~10に記載の方法に使用するためのアッセイキット。感染症予後診断方法さまざまな程度の腎機能障害をもつ1300人の患者から、血清試料を採集し基準、その後、最長63カ月の期間にわたって追跡調査した。より詳細には、患者は、バーミンガム大学病院の腎臓クリニックから募った。患者は、例えば蛋白尿、血尿、慢性腎臓疾患すべての病期、末期腎不全血液透析および腹膜透析および腎移植レシピエントを含む、腎臓にさまざまな問題を有する患者であった。行われたテストおよび評価は以下の通り:血清クレアチニンおよび推定糸球体濾過率eGFR単位GFR当たりFLCの修正レベルは次のように計算した:総血清FLC濃度mg/Lを、コッククロフトゴールト式REFによりmls/min/1.73m2で計算した推定糸球体濾過率で除した。このようにして、腎機能に依存しない単位GFR当たりmg/Lでの、患者の血清総FLCレベルを得た。参照文献:CockcroftDW,GaultMH:血清クレアチニンからのクレアチニンクリアランスの予測PredictionofcreatinineclearancefromserumcreatinineNephron16:31‐41、1976尿アルブミン/クレアチニン比率カッパおよびラムダの両方の血清FLC濃度フリーライト、バインディングサイトリミテッド社、英国バーミンガム総血清FLC濃度は、カッパFLCおよびラムダFLCの値を合計することによって計算した。追跡調査:患者を、死亡するまでの期間および死因について追跡調査した。結果患者生存のカプランマイヤー分析は、より高いFLCレベルをもつ患者は、減少した生存を有したことを示したP<0.001。図1を参照されたい。死因を調査したとき、感染症に続いて死亡する可能性は、より高い総FLC濃度をもつ患者で著しくより高かった。また、感染症による死亡のリスクは、腎機能慢性腎臓病1~5病期にも関連したが、これは、リスク群を明確に描出しなかった。総FLCと腎機能eGFRは密接に相関したR-0.645、P<0.001。従って、総FLCを感染症の予測に利用する上で腎機能の影響を除外するために、総FLCをGFRに対して修正し、そのあと五分位に分けた。高い総修正FLC五分位4および5=下の線、図2は、重篤な感染症による死亡を予測したP<0.001。感染症による死亡に関するリスクマーカーとしてこれらの上位2つの五分位を使用し単位GFRあたり1.7mg/Lを超える総FLC修正レベルを異常と見なした、ROC曲線を使用して分析したとき、検査は有意に予測能があったP<0.0001。特定された主な感染症は、下部呼吸器感染症肺炎、尿路感染症、クロストリジウムディフィシル、敗血症または腹膜炎であった。考察何らかの形の腎機能障害をもつ患者で結果を集めた。しかし、総FLCの上昇と感染症との間の関係が腎機能と独立であることを考えれば、一般に集団において、総FLCは感染症を同じように予測しうると思われる。検査複数含むは、低下した腎機能によるFLC濃度のバックグラウンドの上昇がない一般の集団ではより感度が良いであろうと推測されうる。前述のように、FLCによって媒介される好中球の機能の抑制を報告する研究論文が、これまでに発表されている。好中球は、免疫防御系の一部を形成するにすぎず、我々の知る限りでは、血清FLC濃度を測定することが細菌感染症に起因する死亡のより大きなリスクがある患者を予測しうることは提案されていない。Cohenと同僚は、1995年に、インビトロにおけるFLCの白血球への影響について最初に報告したが、それ以降、生体内におけるFLC濃度を測定する研究を1報も発表していない。我々が観察した予測効果の程度は、特に血清FLC濃度を腎機能に対して修正した後、予想外であった。アッセイキット本発明の方法は、以下のアッセイキットを利用しうる。アッセイキットは、患者試料内の、例えば血清中に存在する総遊離κと遊離λ軽鎖を定量する。これは、抗遊離κおよび抗遊離λ軽鎖ヒツジ抗体の50:50混合物を用いて、100nmカルボキシル修飾ラテックス粒子をコーティングすることによって達成しうる。以下に例示されたアッセイでは、総遊離軽鎖に関する測定範囲は、1~80mg/Lである。しかしながら、他の測定範囲も同じように考慮されうる。抗遊離κおよび抗遊離λ抗血清は、一般に当該技術分野において公知の技術を使用して、この特定の場合ではヒツジで作製した。一般的な免疫化プロセスは、国際公開第97/17372号に記載されている。抗κおよび抗λ抗血清を、リン酸緩衝生理食塩水PBSを使用して等しい濃度まで希釈した。それら抗体を混ぜ合わせ、50の抗κ抗体および50の抗λ抗体を含む抗血清を作成した。抗体を、10mg/lotのコーティング量coatloadでカルボキシル修飾ラテックスにコーティングした。これは、標準的な手順を使用して達成した。例えば、微粒子試薬最適化:微粒子の専門家からの実験室参照マニュアルMicroparticleReagentOptimization:Alaboratoryreferencemanualfromtheauthorityonmicroparticles編者CarylGriffin、JimSutor、BruceShull、著作権SeradynInc、1994年P/N03478351294を参照されたい。この参照文献はまた、ポリエチレングリコールPEGを使用したアッセイキットの詳細も提供する。混合した抗体を市販のκおよびλフリーライト商標キット英国バーミンガム、バインディングサイトグループリミテッドBindingSiteGroupLimited社から入手を使用して得られた結果と比較した。そのようなフリーライト商標キットは、κ遊離軽鎖の量およびλ遊離軽鎖の量を、別々のアッセイにて特定する。総FLCキットを使用して曲線を作成し、対照濃度を使用して確認した。校正曲線は、1~80mg/Lの間の総遊離軽鎖について得ることができた。下記の結果の表において、κフリーライト商標、λフリーライト商標および総遊離軽鎖のアッセイを使用して、κ遊離軽鎖κFLC、λ遊離軽鎖λFLCおよび総FLCについて結果を得た。これらの結果を15の異なる正常血清試料について示す。比濁法により測定した結果を下表および図4に示す。予備結果は、抗κおよび抗λ遊離軽鎖抗体に基づく総遊離軽鎖アッセイを使用する原理は実行可能であることを示す。結果追加補助データ調査集団2005年11月8日から2006年1月10日の間、病院研究室は、血清タンパク質電気泳動SPEを依頼された723の血清試料血清を受け取った。小児患者、免疫グロブリン補充を受けた患者からの試料、同一患者の2次およびそれに続く試料は、分析から除外した。また、異常なκ/λ遊離軽鎖FLC比率0.25未満もしくは1.65を超える;Katzmannまたは異常なSPE結果免疫固定によって確認した場合によって示された、モノクローナルガンマグロブリン血症の証拠をもつ患者もすべて除外した。これにより、最終のデータ分析に528患者が残った。研究室分析すべての血清について、血清タンパク質電気泳動SPE;セビアSebia社、英国によって血清タンパク質異常について分析した。異常なSPEバンドが存在する、または疑いの高い指数をもつ人のすべての試料原因不明の低ガンマグロブリン血症、幅広β領域、または支持する臨床上の詳細を伴う低免疫グロブリンに関して、血清免疫固定IFE;セビア社を行った。診断の設定における血清の遊離軽鎖sFLC分析の評価の一部として、シーメンスデイドベーリングプロスペックProspec濁度計を使用して製造業者の取扱説明書に従い、FLC測定フリーライト、バインディングサイト社、英国バーミンガムをすべての血清について行った。患者追跡調査2010年7月、最初の研究の終わりから4年6カ月後、患者の記録を検討した。全患者について、最後の追跡調査の日付または死亡の日付を記録し、死亡診断書を入手した。死亡診断書に記載されている主要な死因を世界保健機関疾病および関連保健問題の国際統計分類第10改訂版ICD‐10に従って分類した。データ分析高い混合κλFLC濃度と死亡の確率の増加との関連性を、カプランマイヤー生存分析、コックス回帰分析およびカイ二乗分析を使用して調査した。50mg/L未満またはこれを超える、および、65mg/L未満またはこれを超える、両方のカテゴリー別カットオフについて調査した。結果4.5年の追跡調査で、死亡は99名であった=18.8死亡率。ポリクローナル血清遊離軽鎖カッパとラムダのより高い濃度は、死亡率の増加と関連することが判明した。これは、利用された予後診断のカットオフが50mg/Lまたは65mg/Lであった場合であり、すべての統計の分析で見られた。主な死因は循環器系心血管疾患および感染症/呼吸器系であった。図図5は、異なるカテゴリーにおける感染症/呼吸器系の原因による死亡の割合を表わす。統計的有意性は、カイ二乗分析によって決定した。"