"a黒色腫を有する被験対象に抗がん剤を投与する工程と、b前記被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、c以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかを、前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。a黒色腫を有する被験対象に抗がん剤を投与する工程と、b前記被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、c以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するか否かを前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかを、前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するか否かを前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を含む情報を受け取る工程であって、前記バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかを、前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかを前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う意思決定者に、前記バイオマーカーの存在、不在または量を転送する工程と、を含む方法。a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかが前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいたものである指示を転送する工程と、を含む方法。a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかを、前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む、被験対象における黒色腫の処置の治療有効性を至適化するための方法。a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかを、前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む、被験対象における黒色腫の処置の毒性を低減するための方法。被験対象における黒色腫の処置に有効な量のmicroRNA組成物を送達する組成物を、それを必要とする被験対象に投与する工程であって、前記microRNA組成物がmicroRNA-10、microRNA-126、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む工程、を含む、被験対象における黒色腫を処置するための方法。黒色腫細胞を、黒色腫細胞の増殖を阻害するのに有効な量のmicroRNA組成物に接触させる工程であって、前記microRNA組成物が、microRNA-126、microRNA-193、microRNA-206、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む工程、を含む方法。黒色腫細胞を、黒色腫細胞のアポトーシスを誘発するのに有効な量のmicroRNA組成物に接触させる工程であって、前記microRNA組成物が、microRNA-10、microRNA-126、microRNA-193、microRNA-203、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む工程、を含む方法。被験対象における黒色腫の処置に有効な量のmicroRNA阻害剤組成物を送達する組成物を、それを必要とする被験対象に投与する工程であって、前記microRNA阻害剤組成物が、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせの阻害剤を含む工程、を含む、被験対象における黒色腫を処置するための方法。黒色腫細胞を、黒色腫細胞の増殖を阻害するのに有効な量のmicroRNA阻害剤組成物に接触させる工程であって、前記microRNA阻害剤組成物が、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAの阻害剤を含む工程、を含む方法。黒色腫細胞を、黒色腫細胞のアポトーシスを誘発するのに有効な量のmicroRNA阻害剤組成物に接触させる工程であって、前記microRNA阻害剤組成物が、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAの阻害剤を含む工程、を含む方法。microRNA-21、microRNA-146およびmicroRNA-155の存在、不在または量を判定する、請求項1~9のいずれか1項に記載の方法。microRNA-21、microRNA-146およびmicroRNA-155からなる群から選択されるmicroRNAの1つ以上のmicroRNA阻害剤を含む組成物が利用される、請求項13~15のいずれか1項に記載の方法。microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513およびmicroRNA-514の存在、不在または量を判定する、請求項1~9のいずれか1項に記載の方法。microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508およびmicroRNA-513の存在、不在または量を判定する、請求項1~9のいずれか1項に記載の方法。microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513およびmicroRNA-514からなる群から選択されるmicroRNAの1つ以上のmicroRNA阻害剤を含む組成物が利用される、請求項13~15のいずれか1項に記載の方法。microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508およびmicroRNA-513からなる群から選択されるmicroRNAの1つ以上のmicroRNA阻害剤を含む組成物が利用される、請求項13~15のいずれか1項に記載の方法。前記microRNA-193がmicroRNA-193bである、請求項1~12のいずれか1項に記載の方法。前記microRNA-10がmicroRNA-10aである、請求項1~12のいずれか1項に記載の方法。前記microRNA-146がmicroRNA-146aである、請求項1~9または請求項13~15のいずれか1項に記載の方法。前記microRNA-509がmicroRNA-509-1、-2または-3である、請求項1~9または請求項13~15のいずれか1項に記載の方法。前記黒色腫細胞が腫瘍内にある、請求項11、12、14または15のいずれか1項に記載の方法。被験対象における黒色腫の処置に有効な量の組成物を、それを必要とする被験対象に投与する工程であって、前記組成物がiイミダゾールカルボキサミドと、iiイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物と、を前記被験対象に送達する1種以上の成分を含む工程、を含む、被験対象における黒色腫を処置するための方法。黒色腫細胞を、黒色腫細胞の増殖を阻害するのに有効な量の組成物に接触させる工程であって、前記組成物がiイミダゾールカルボキサミドと、iiイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物と、を送達する1種以上の成分を含む工程、を含む方法。黒色腫細胞を、黒色腫細胞のアポトーシスを誘発するのに有効な量の組成物に接触させる工程であって、前記組成物がiイミダゾールカルボキサミドと、iiイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物と、を送達する1種以上の成分を含む工程、を含む方法。aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を、黒色腫を有する被験対象に投与する工程と、b前記被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、c以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかを、前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を、黒色腫を有する被験対象に投与する工程と、b前記被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、c以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するか否かを前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかを、前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、前記バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するか否かを前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を含む情報を受け取る工程であって、前記バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかを、前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかを前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う意思決定者に、前記バイオマーカーの存在、不在または量を転送する工程と、を含む方法。aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかが前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいたものである指示を転送する工程と、を含む方法。aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかを、前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む、被験対象における黒色腫の処置の治療有効性を至適化するための方法。aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかを、前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む、被験対象における黒色腫の処置の毒性を低減するための方法。a黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、bイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を前記被験対象に投与するか否かを、バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。a黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を含む情報を受け取る工程であって、前記バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、bイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を前記被験対象に投与するか否かを、バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。a黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、bイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を前記被験対象に投与するか否かを、前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する意思決定者に、前記バイオマーカーの存在、不在または量を転送する工程と、を含む方法。a黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、bイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を前記被験対象に投与するか否かの指示を、前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて提供する工程と、を含む方法。前記組成物を投与するかまたは投与しない工程を含む、請求項39~42のいずれか1項に記載の方法。前記組成物を投与する工程を含み、前記組成物がイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物を含む、請求項39~42のいずれか1項に記載の方法。前記組成物を投与する工程と、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物を含む組成物を投与する工程と、を含む、請求項39~42のいずれか1項に記載の方法。a黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいてイミダゾールカルボキサミド剤を前記被験対象に投与する工程と、を含む方法。意思決定者が組成物を投与するか否かは、前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づく、請求項46に記載の方法。イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物を送達する1種以上の成分を含む組成物を前記被験対象に投与する工程を含む、請求項46に記載の方法。a黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b同定された前記バイオマーカーの不在または量に基づいてイミダゾールカルボキサミド剤を前記被験対象に投与しないようにする工程と、を含む方法。前記被験対象に投与されるイミダゾールカルボキサミド剤を送達しない組成物を選択する工程を含む、請求項49に記載の方法。前記組成物がアルキル化剤を送達しない、請求項50に記載の方法。前記被験対象に前記組成物を投与する、請求項50または51に記載の方法。前記microRNA組成物が、microRNA-27、microRNA-143、microRNA-215、microRNA-335、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む、請求項27~52のいずれか1項に記載の方法。前記microRNA-10がmicroRNA-10aである、請求項53に記載の方法。前記microRNA-27がmicroRNA-27aまたはmicroRNA-27bである、請求項53に記載の方法。前記microRNA-143がmicroRNA-143aである、請求項53に記載の方法。前記microRNAが、非癌性の静止細胞と比較して相対的に低いレベルで黒色腫細胞内に存在する、請求項27~52のいずれか1項に記載の方法。前記microRNAがIL-6受容体またはIL-6受容体経路メンバーの発現を調整する、請求項27~52のいずれか1項に記載の方法。前記黒色腫細胞が腫瘍内にある、請求項28または29に記載の方法。a転移性黒色腫を有する被験対象に抗がん剤を投与する工程と、b前記被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、c以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかを、前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。a転移性黒色腫を有する被験対象に抗がん剤を投与する工程と、b前記被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、c以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するか否かを前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかを、前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するか否かを前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を含む情報を受け取る工程であって、前記バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかを、前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかを前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う意思決定者に、前記バイオマーカーの存在、不在または量を転送する工程と、を含む方法。a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、前記バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降前記薬物投与量を維持するかまたは以降前記被験対象に投与される前記薬物投与量を調整するかが前記被験対象において同定された前記バイオマーカーの存在、不在または量に基づいたもので本明細書において強調されているように、癌例えば、黒色腫処置をパーソナライズすることによって薬物の治療効果が至適化される。一部の実施形態においては、a黒色腫を有する被験対象に抗がん剤を投与する工程と、b被験対象における少なくとも1つのバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、c以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法が提供されている。microRNA506-514クラスタを構成するmicroRNAは、次のとおりである:microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513およびmicroRNA-514。microRNA506-513クラスタを構成するmicroRNAは、次のとおりである:microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508およびmicroRNA-513。一部の実施形態において方法はa黒色腫を有する被験対象に抗がん剤を投与する工程と、b被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、c以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するか否かを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む。或る実施形態において方法は、a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、c以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む。一部の実施形態において方法は、a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、c以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するか否かを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む。様々な実施形態において方法は、a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を含む情報を受け取る工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む。或る実施形態において方法は、a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む。一部の実施形態において方法はa黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかが被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいたものである指示を転送する工程と、を含む。また、一部の実施形態においては、a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む、被験対象における黒色腫の処置の治療有効性を至適化するための方法も、提供されている。また、一部の実施形態においては、a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む、被験対象における黒色腫の処置の毒性を低減するための方法も、提供されている。また、一部の実施形態においては、被験対象における黒色腫の処置に有効な量のmicroRNA組成物を送達する組成物を、それを必要とする被験対象に投与する工程であって、microRNA組成物がmicroRNA-10、microRNA-126、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、および前述のものの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む工程を含む、被験対象における黒色腫を処置するための方法も、提供されている。また、或る実施形態においては、黒色腫細胞を黒色腫細胞の増殖を阻害するのに有効な量のmicroRNA組成物に接触させる工程であって、microRNA組成物がmicroRNA-126、microRNA-193、microRNA-206、および前述のものの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む工程を含む方法も、提供されている。また、一部の実施形態においては、黒色腫細胞を黒色腫細胞のアポトーシスを誘発するのに有効な量のmicroRNA組成物に接触させる工程であって、microRNA組成物がmicroRNA-10、microRNA-126、microRNA-193、microRNA-203、および前述のものの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む工程を含む方法も、提供されている。また、或る実施形態においては、被験対象における黒色腫の処置に有効な量のmicroRNA阻害剤組成物を送達する組成物を、それを必要とする被験対象に投与する工程であって、microRNA阻害剤組成物が、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAの阻害剤を含む工程と、を含む、被験対象における黒色腫を処置するための方法も、提供されている。また、一部の実施形態においては、黒色腫細胞を黒色腫細胞の増殖を阻害するのに有効な量のmicroRNA阻害剤組成物に接触させる工程であって、microRNA阻害剤組成物が、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAの阻害剤を含む工程を含む方法も、提供されている。また、或る実施形態においては、黒色腫細胞を黒色腫細胞のアポトーシスを誘発するのに有効な量のmicroRNA阻害剤組成物に接触させる工程であって、microRNA阻害剤組成物が、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAの阻害剤を含む工程と、を含む方法も、提供されている。様々な実施形態においては、microRNA-21、microRNA-146およびmicroRNA-155からなる群から選択されるmicroRNAの存在、不在または量を判定する。或る実施形態において、microRNA-21、microRNA-146およびmicroRNA-155からなる群から選択される1つ以上のmicroRNA阻害剤を含む組成物が利用される。一部の実施形態において、microRNA-193はmicroRNA-193bである。一部の実施形態において、microRNA-10はmicroRNA-10aである。或る実施形態において、microRNA-146はmicroRNA-146aである。一部の実施形態において、黒色腫細胞は腫瘍内にある。また、或る実施形態においては、被験対象における黒色腫の処置に有効な量の組成物を、それを必要とする被験対象に投与する工程であって、組成物がiイミダゾールカルボキサミドと、iiイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物と、を被験対象に送達する1種以上の成分を含む工程を含む、方法も、提供されている。或る実施形態において方法は、黒色腫細胞を黒色腫細胞の増殖を阻害するのに有効な量の組成物に接触させる工程であって、組成物がiイミダゾールカルボキサミドと、iiイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物と、を送達する1種以上の成分を含む工程を含む。様々な実施形態において方法は、黒色腫細胞を黒色腫細胞のアポトーシスを誘発するのに有効な量の組成物に接触させる工程であって、組成物がiイミダゾールカルボキサミドと、iiイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物と、を送達する1種以上の成分を含む工程を含む。一部の実施形態において方法は、イミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を、黒色腫を有する被験対象に投与する工程と、被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAを含む工程と、以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む。或る実施形態において方法は、イミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を、黒色腫を有する被験対象に投与する工程と、被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAを含む工程と、以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するか否かを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む。一部の実施形態において方法は、イミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAを含む工程と、以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む。方法は時には、イミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAを含む工程と、以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するか否かを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を備え得る。また、一部の実施形態においては、イミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を含む情報を受け取る工程であって、バイオマーカーがイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAを含む工程と、以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法も、提供されている。一部の実施形態において方法は、イミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAを含む工程と、以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う意思決定者に、バイオマーカーの存在、不在または量を転送する工程と、を含む。方法は時には、イミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAを含む工程と、以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかが被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいたものである指示を転送する工程と、を含む。また、一部の実施形態においては、イミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAを含む工程と、以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む、被験対象における黒色腫の処置の治療有効性を至適化するための方法も、提供されている。また、一部の実施形態においては、イミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAを含む工程と、以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む、被験対象における黒色腫の処置の毒性を低減するための方法も、提供されている。方法は時には、黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAを含む工程と、イミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を被験対象に投与するか否かを、バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む。また、一部の実施形態においては、黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を含む情報を受け取る工程であって、バイオマーカーがイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAを含む工程と、イミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を被験対象に投与するか否かを、バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法も、提供されている。或る実施形態において方法は、黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAを含む工程と、イミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を被験対象に投与するか否かを、バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する意思決定者に、バイオマーカーの存在、不在または量を転送する工程と、を含む。また、或る実施形態においては、黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAを含む工程と、イミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を被験対象に投与するか否かの指示を、バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて提供する工程と、を含む方法も、提供されている。方法は時には、組成物を投与するかまたは投与しない工程を含み得る。或る実施形態において方法は、組成物を投与する工程であって、組成物がイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物を含む工程を含む。一部の実施形態において方法は、組成物を投与する工程と、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物を含む組成物を投与する工程と、を含む。様々な実施形態において方法は、黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAを含む工程と、同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいてイミダゾールカルボキサミド剤を被験対象に投与する工程と、を含む。或る実施形態において、意思決定者は、バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて組成物を投与するか投与しないようにする。様々な実施形態において方法は、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物を送達する1種以上の成分を含む組成物を被験対象に投与する工程を含む。方法は時には、黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAを含む工程と、同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいてイミダゾールカルボキサミド剤を被験対象に投与しないようにする工程と、を含む。或る実施形態において方法は、被験対象に投与されるイミダゾールカルボキサミド剤を送達しない組成物を選択する工程を含む。様々な実施形態において、組成物はアルキル化剤を送達しない。本明細書における方法の一部の実施形態では、被験対象に組成物を投与する。また、或る実施形態においては、microRNA組成物がmicroRNA-27、microRNA-143、microRNA-215、microRNA-335、前述のものの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む方法も、提供されている。様々な実施形態において、microRNA-27はmicroRNA-27aまたは-27bである。或る実施形態において、microRNA-143はmicroRNA-143aである。microRNAは時には、非癌性の静止細胞と比較して相対的に低い濃度で黒色腫細胞内に存在する。或る実施形態において、microRNAはIL-6受容体またはIL-6受容体経路メンバーの発現を調整する。一部の実施形態において、黒色腫細胞は腫瘍内にある。また、一部の実施形態においては、a転移性黒色腫を有する被験対象に抗がん剤を投与する工程と、b被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、c以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法も、提供されている。或る実施形態において方法は、a転移性黒色腫を有する被験対象に抗がん剤を投与する工程と、b被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、c以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するか否かを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む。また、或る実施形態においては、転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法も、提供されている。一部の実施形態において方法は、転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するか否かを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む。或る実施形態においては、a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を含む情報を受け取る工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法が提供されている。また、一部の実施形態において、a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う意思決定者に、バイオマーカーの存在、不在または量を転送するための方法も、提供されている。また、一部の実施形態においては、a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降の薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかが被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいたものである指示を転送する工程と、を含む方法も、提供されている。また、或る実施形態においては、a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降の薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む、被験対象における転移性黒色腫の処置の治療有効性を至適化するための方法も、提供されている。また、一部の実施形態においては、a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む、被験対象における転移性黒色腫の処置の毒性を低減するための方法も、提供されている。また、或る実施形態においては、a被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、またはその組み合わせからなる群から選択される工程と、b被験対象が転移性黒色腫に罹患する危険にさらされているか否かをバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法も提供されている。一部の実施形態においては、a被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を含む情報を受け取る工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、b被験対象が転移性黒色腫に罹患する危険にさらされているか否かをバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法が提供されている。或る実施形態においては、a黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択される工程と、b被験対象が転移性黒色腫に罹患する危険にさらされているか否かをバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する意思決定者に、バイオマーカーの存在、不在または量を転送する工程と、を含む方法が提供されている。また、一部の実施形態においては、a黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせを含む工程と、b被験対象が転移性黒色腫に罹患する危険にさらされているか否かの指示をバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて提供する工程と、を含む方法も、提供されている。また、一部の実施形態においては、転移性黒色腫の危険にさらされている被験対象に黒色腫を処置する組成物を投与する工程を含む方法も、提供されている。或る実施形態において方法は、転移性黒色腫の危険にさらされていない被験対象に黒色腫を処置する組成物を投与しないようにするようにする工程を含む。一部の実施形態において、被験対象は黒色腫を有する。或る実施形態において、被験対象は黒色腫を有すると診断されている。また、或る実施形態においては、被験対象における黒色腫細胞の転移を阻害するのに有効な量のmicroRNA組成物を送達する組成物を、それを必要とする被験対象に投与する工程であって、microRNA組成物がmicroRNA-let7、microRNA-193、microRNA-206、および前述のものの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む工程を含む、被験対象における転移性黒色腫を処置するための方法も、提供されている。一部の実施形態においては、転移性黒色腫細胞を黒色腫細胞の転移を阻害するのに有効な量のmicroRNA組成物に接触させる工程であって、microRNA組成物がmicroRNA-let7、microRNA-193、microRNA-206、および前述のものの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む工程を含む方法が提供されている。また、或る実施形態においては、転移性黒色腫細胞を黒色腫細胞の転移を阻害するのに有効な量のmicroRNA組成物に接触させる工程であって、microRNA組成物がmicroRNA-let7、microRNA-193、microRNA-206、および前述のものの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む工程を含む方法も、提供されている。様々な実施形態において、被験対象における転移性黒色腫を処置するための方法は、被験対象における黒色腫細胞の転移を阻害するのに有効な量のmicroRNA阻害剤組成物を送達する組成物を、それを必要とする被験対象に投与する工程であって、microRNA阻害剤組成物が、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAの阻害剤を含む工程を含む。一部の実施形態においては、転移性黒色腫細胞を黒色腫細胞の転移を阻害するのに有効な量のmicroRNA阻害剤組成物に接触させる工程であって、microRNA阻害剤組成物が、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および前述のものの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAの阻害剤を含む工程を含む方法が提供されている。或る実施形態において、転移は非癌組織の黒色腫細胞による浸潤である。一部の実施形態において、組織は皮膚でない。様々な実施形態において、転移は黒色腫細胞の遊走である。一部の実施形態において、転移性黒色腫細胞は腫瘍内にある。或る実施形態において、黒色腫は転移性黒色腫である。一部の実施形態において、microRNAはヒトmicroRNAである。或る実施形態において、被験対象はヒトである。microRNA-let7は時にはmicroRNA-let7cである。或る実施形態においては、microRNA-10がmicroRNA-10aである。或る実施形態においては、microRNA-193がmicroRNA-193bである。様々な実施形態においては、microRNA-146がmicroRNA-146aである。一部の実施形態において、microRNA-509はmicroRNA-509-1、-2または-3である。様々な実施形態においては、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513およびmicroRNA-514の存在、不在または量が判定され、時にはmicroRNA-506、microRNA-507、microRNA-508およびmicroRNA-513の存在、不在または量が判定される。或る実施形態においては、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513およびmicroRNA-514のmicroRNA阻害剤を含む組成物が利用され、時にはmicroRNA-506、microRNA-507、microRNA-508およびmicroRNA-513のmicroRNA阻害剤を含む組成物が利用される。また、一部の実施形態において、バイオマーカーの存在、不在または量を被験対象由来の生物学的標本から判定するための方法も、提供されている。或る実施形態においては、標本に血液または血液画分が含有されている。様々な実施形態においては、標本に皮膚生検生成物が含有されている。図面は本技術の実施形態を例示したものであって限定的なものではない。例証を明確化し且つ簡略化するために、図面を一定の縮尺倍率に合わせていないが、状況によっては特定の実施形態を理解しやすくするために様々な態様を誇張または拡大して示す場合もある。本明細書に記載されている技術は黒色腫の治療処置を提供し、或る実施形態においては黒色腫に対しパーソナライズされた医療処置を提供する。各被験対象が治療薬物を新陳代謝できる率および方法はそれぞれ異なる。こうした多様性のため、黒色腫を処置する際の薬物の効果は、被験対象ごとに異なり得る。本明細書に記載されている技術は、黒色腫に関連するバイオマーカーの追跡、および以降被験対象に投与する薬物の用量を維持すべきかまたは低減または増加すべきかの決定を臨床医に委ねることによって、黒色腫を処置するための治療方法を至適化する。黒色腫一部の形態では悪性黒色腫である黒色腫は、重篤な皮膚癌の形態であり、リンパ節および内部臓器にまで弥漫する可能性がある。黒色腫は現在、皮膚癌を死因とする全死亡者数の77を占める。黒色腫は、メラノサイトの悪性腫瘍であり、主に皮膚に見出されるが腸および眼球にも見出されている。メラノサイトは通常、皮膚に存在し、濃い色素メラニンの産生を司っている。黒色腫は皮膚癌としては稀少なタイプであるが、皮膚癌に関連する過半数の死の原因となっている。米国においては毎年新たに約6万例が浸潤性黒色腫と診断されており、その多くは男性および白人である。白人の母集団は他の群に比べて、日照時間の長い気候にてまたは日焼けサロンを使用して生活することがよくある。世界保健機関の報告によると、年間世界中で発生する黒色腫関連の死亡者数は約4万8千人に及んでいる。黒色腫の初期徴候としては、既存のほくろの形状または色の変化が挙げられる。ほくろは痒みを起こす場合もあれば、潰瘍化または出血する場合もあり得る。転移性黒色腫がよく引き起こし得る一般症状には、食欲不振、嘔気、嘔吐、および疲労などがある。転移は黒色腫の最初の症候として起こり得るが、転移性になっていくものは早期に診断を下された黒色腫の1/5未満である。処置は、時には手術、化学療法、および/または放射線療法である。表在拡大型黒色腫表在拡大型黒色腫SSMは米国内で最もよく見られるタイプの黒色腫であり、黒色腫と診断される全症例の約70を占める。この種類の黒色腫は年齢を問わず発症する可能性があり、発症率は男性よりも女性の方が僅かに高い。SSMは、若年成人においては癌死亡の第一の原因となっている。女性においてSSMが発症した場合、最も一般的には脚に現れる。男性においては頸部から骨盤にかけて発症する可能性が高いが、この形態の黒色腫は皮膚表面のどこにでも発症することがあり得る。典型的なSSM病変は辺縁不整で、黒、茶、グレー、青、ピンク、赤または白色の不単調な濃淡を帯びる。病変内部では、白、ピンク、茶色、および黒を含めた色のバリエーションがあり得る。初期の段階においてSSMは、扁平斑flatspotとして出現するのが通例であり、皮膚の上を横向きに弥漫するそばかすfreckleのように見える。病変の色素沈着は経時的に黒ずむ場合があり、病変が拡大し、不整な辺縁が漸増して、病変内に炎症領域を有する可能性もある。病変の周辺領域が痒み始める場合もある。被験対象の免疫応答がSSMを破壊しようとした場合に、時にはSSMの色素が薄くなることもあり得る。ただし、これは病変が今後の処置を必要としなくなったことを示すものではない。結節型黒色腫結節型黒色腫NMは侵襲型の黒色腫で、米国において黒色腫と診断される症例の約15を占め、身体のどこにでも発症する可能性があり、その発症頻度は女性より男性の方が高い。NMは年齢を問わず発症し得るが、60歳以上の高齢者に最も多く見られる。NMは色素が濃く沈着する場合が多いが、NM病変によっては淡褐色または無色色素沈着なしの場合もあり得る。薄色または色素沈着なしのNM病変は、外観上は注目を引くものではないため、検出を免れる可能性がある。よく見られるのは、潰瘍化した病変および出血性の病変である。NMは、直径方向でなく深さ方向に迅速に拡大皮膚に浸潤する傾向がある。NMは先在するほくろから生じる代わりに、以前なら病変が存在しなかった斑spotに出現することもあり得る。NMが予後不良を招く原因は、幅方向でなく深度方向に素速く拡大する傾向があり、過去に病変のなかった斑spotに出現する可能性もあることから、早期発見の見込みを低減させてしまうためである。悪性黒子型黒色腫悪性黒子型黒色腫LMMは、初老者および高齢者において日光で損傷した皮膚特に顔面に起こる場合が多い。この黒色腫は最も処置の容易な初期段階において、良性の老人性のシミagespotまたは日焼けによるシミsunspotと間違えられる場合がある。米国においてLMMは黒色腫と診断される症例の約10を占めており、良性の病態と間違えられがちなため、何年も気付かない状態のまま進行してしまう可能性がある。LMMは多くの場合、弥漫性の扁平斑flatpatchであり、その辺縁は不整で褐色の濃淡が変わりやすい。この病変は悪性黒子lentigoと呼ばれる。この弥漫性の褐色がかった斑点は、何年もかかってゆっくり成長する可能性が場合があり、単純黒子lentigosimplexと間違えられることの多い良性非癌性の褐色がかった斑点で、高齢者において長年にわたる日光露光後に発病し得る。病変が発展し進展するにつれ、色素沈着および辺縁の両方が不整度を増す傾向がある。この病態は多くの場合、10~15年の期間をかけてゆっくりと出現する。また、数週間または数か月のうちに迅速に進行する可能性もある。病変が皮膚の奥深くに拡大するにつれて、濃淡の不単調な黒および茶色を帯びてくることがあり得る。不整辺縁内に濃いこぶが現れる場合もある。これらのこぶは浸潤癌であり、触れて感知できる程度に十分大きい場合は、しこりのように感じられることもあり得る。肢端黒子型黒色腫肢端黒子型黒色腫ALMは、米国で黒色腫と診断されている症例の約5を占める。ALMはまた、アジア人および皮膚が浅黒い人種に最もよく見られる形態の黒色腫でもあり、こうした皮膚タイプの人種に発生する黒色腫の50を占めている。ALMは時には潜伏黒色腫と呼ばれる。その理由は、この病変は身体に部分的に起こり、検査が容易でない場合もあれば、検査が必要と見なされない場合もあるためである。ALMは手掌、足裏、粘膜、ならびに手指の爪および足指の爪の下部または近辺に発病する。初期の段階においてALMは、挫傷または爪甲線条のように見える場合が多いため、かなり進行するまで見過ごされてしまうこともしばしばである。手掌または足裏の黒色腫は通常、不整形状の褐色、茶色、または黒色斑として発生する。色素斑の全体的領域内の挫傷または叩打が比較的最近のものだったことが患者に思い出される場合は特に、最近受けた何かの外傷のせいだと間違われる場合が多い。黒色腫が粘膜に発病した場合、大概は鼻内または口腔内に発病する。初期症候としては、鼻出血および鼻詰まり、ならびに口腔内部の色素性腫瘤が挙げられる。黒色腫はまた、肛門、尿路、および女性生殖器の粘膜にも発病し得る。平爪の下部における黒色腫の初期徴候は爪甲線条である場合があり、爪甲の下部に幅狭の濃い縞として出現し得る。ALMはしばしば母指または親指に発病するが、手指の爪または足指の爪の下部にも出現する可能性がある。完全に良性な固定性の爪甲線条は、多くの個人、特に浅黒い人々が有し得る。最近の外傷に関連のない新たな爪甲条斑、拡大性の爪甲線条、広範なもしくは極めて濃く色素が沈着した線条、または爪床から分離もしくは隆起する爪甲は、ALMの兆候である可能性がある。ALMが進行した場合に起こり得る兆候としては、ほかにも、爪郭部皮膚の色素沈着または爪板の破壊に付随する爪甲線条が挙げられる。手指または足指のALMはまた、明らかな爪甲線条特に、色素沈着なしの変種を伴わずに発病し得る。ALMは、例えば、爪床の慢性感染症に極めて似て見える場合がある。ALM腫瘍は大きさが増すにつれ、形状および色が不規則になる場合が多い。ただし、ALM病変によっては、淡色または無色のものもあり得る。ALM病変の表面は、腫瘍が皮膚に深く浸潤した場合でも、扁平な状態のままであり得る。脚の足裏にある肥厚性ALMは、歩行中に痛みを伴い、足底のいぼと間違われることがあり得る。黒色腫の病期第0期の黒色腫は、insitu生体内原位置を示すラテン語の黒色腫として知られる、ごく初期の疾患である。insitu黒色腫を有する患者は、TisN0Minsitu腫瘍として分類される。腫瘍は周囲組織、リンパ節、または遠位部位の浸潤のない表皮に限られている。insitu黒色腫は、疾患再発またはリンパ節または遠位部位に弥漫する危険度が極めて低いと見なされている。第I期の黒色腫は、腫瘍の深さ、細胞分裂の存在および数、ならびに潰瘍状態によって特徴付けられる。所属リンパ節転移または遠隔転移の形跡は存在しない。第I期の黒色腫再発および転移の危険度が低いと見なされている。第I期の黒色腫には2つのサブクラスがある。i腫瘍が1mm以下で且つ潰瘍化および細胞分裂がない第IA期T1aN0M0と、ii腫瘍が1mm以下で且つ潰瘍化および細胞分裂がない第IB期T1bN0M0またはT2aN0M0である。センチネルリンパ節生検は、1.0mmよりも厚い第I期の腫瘍、および厚さを問わない任意の潰瘍腫瘍に推奨される。その目的は、何らかの癌細胞が、原発腫瘍から排液を受け取る最初のリンパ節であるセンチネルリンパ節に弥漫されるかどうかを判定することにある。生検の結果は、処置過程を手引きする助けになり得る。センチネルリンパ節生検の精度が最も高まるのは、通例、腫瘍および周囲皮膚の摘出手術の前に実施された場合である。手術は第I期の黒色腫に対して主として用いられる処置である。手術の目標は、生検後に残存した癌を除去することにある。この処置は、広範囲局所切除と呼ばれる。生検部位、外科的縁辺、正常な外観の皮膚の周囲領域、および基底皮下組織を含めた腫瘍は、外科医によって除去される。切除される縁辺の幅は、原発腫瘍の厚さに依存する。昨今では手術が進歩し、外科医が縁辺を従来に比べ幅狭に切除できるようになったため、正常皮膚の保持量が多くなった。第II期の黒色腫はまた、腫瘍厚さおよび潰瘍化状態により特徴付けられる限局性腫瘍である。所属リンパ節転移または遠隔転移の形跡は概して存在しない。第II期の疾患は治療ありの場合、局所再発または遠隔転移の危険度が中程度であると見なされる。第II期の黒色腫には3つのサブクラスが存在する。a第IIA期T2bN0M0またはT3aN0M0であってi腫瘍が1.01~2.0mmの厚さで且つ潰瘍化を伴う2bと、ii腫瘍が2.01~4.0mmの厚さで且つ潰瘍化を伴わないT3aと、iii腫瘍が近傍のリンパ節に弥漫していないN0と、iv腫瘍が原発腫瘍から遠位の部位に弥漫していないM0と、を含む第IIA期、b第IIB期T3bN0M0またはT4aN0M0第IIB期、T3bN0M0またはT4aN0M0であってi腫瘍が2.01~4.0mmの厚さで且つ潰瘍化を伴うT3bと、ii腫瘍が4.0mm超の厚さで且つ潰瘍化を伴わないT4aと、iii腫瘍が近傍のリンパ節に弥漫していないN0と、iv腫瘍が原発腫瘍から遠位の部位に弥漫しないM0と、を含む第IIB期、およびc第IIC期T4bN0M0であってi腫瘍が4.0mm超の厚さで且つ潰瘍化を伴うT4bと、ii腫瘍が近傍のリンパ節に弥漫していないN0と、iii腫瘍が原発腫瘍から遠位の部位に弥漫しないM0と、を含む第IIC期である。第II期の処置には、第I期に関して記載されている生検および手術のほかに、原発性癌の処置に付加して与えられる処置としての補助療法を含めてもよい。全身療法は、血流を通して運ばれる物質を使用して、身体全体の癌細胞に到達して影響を与える。処置にはインターフェロン即ち、ほとんどの体組織の正常細胞がウイルス感染および疾患に応答して産生する天然タンパク質が含まれる。インターフェロン療法は、身体の免疫系がより効果的に疾患と闘うための助けをすることが明らかされてきた。研究によって、インターフェロンの一製造形態である低用量インターフェロンalfa-2aは、第II期の黒色腫およびより危険度の高い第IIB期疾患を持つ患者における再発を一貫して遅延させるが、全体的生存期間を延長しないことが示唆されている。高用量インターフェロンalfa-2bは、危険度の高い第IIB期および第III期の黒色腫を持つ患者における無病生存期間および全体的生存期間を有意に延長させることが明らかにされてきた。インターフェロンのようなワクチンは、黒色腫の復活と闘う免疫系の増強を助け得る。ワクチン療法は、インターフェロンなどの免疫療法の副作用に耐えられない患者のための療法として究明されてきた。第III期の黒色腫は、所属リンパ節に弥漫したか、またはin-transit転移もしくは衛星病巣に発病した腫瘍である。多くの場合、遠隔転移の形跡は存在しない。第III期の疾患は治療ありの場合、局所再発または遠隔転移の危険度が中程度から高であると見なされる。第III期の黒色腫は一般に、腫瘍が弥漫したリンパ節の数、リンパ節に弥漫した腫瘍が顕微鏡的かまたは肉眼的であるか、in-transit腫瘍または衛星腫瘍の有無、弥漫したリンパ節の源である原発腫瘍が潰瘍化の形跡を示しているかどうかによって定義される。原発性黒色腫の一部を覆い隠す表皮は、無傷でない場合が多い。潰瘍化は、病理学者が肉眼で認識できるものに依らず顕微鏡的に組織を評価して定量する。微小転移巣は、肉眼では見えない小さい腫瘍である。センチネルリンパ節の生検後、または選択的リンパ節郭清後に、検出され得る。肉眼的リンパ節転移はしばしば、身体検査を通じて感知されることもあれば、またはそれが外科医または病理学者による検査を受けたときに肉眼で確認されることもあり得る。存在はしばしば、リンパ節郭清によって、または腫瘍がリンパ節嚢を越えて延在したことが認められたときに場合に確認される。第III期の黒色腫のサブクラスは、a第IIIA期T1-T4aN1aM0またはT1-T4aN2aM0であってi腫瘍が潰瘍化しておらずその大きさが1.0mm未満~4.0mm超の厚さの範囲にわたるT1~4aと、ii1つの近傍リンパ節において微小転移巣が診断されるN1aと、iii2~3つの近傍リンパ節において微小転移巣が診断されるN2aと、iii腫瘍が原発腫瘍から遠位の部位に弥漫していないM0と、を含む第IIIA期、b第IIIB期T1-T4bN1aM0、T1-T4bN2aM0、T1-T4aN1bM0、T1-T4aN2bM0、またはT1-T4a/bN2cM0であってi腫瘍が潰瘍化しておらずその大きさが1.0mm未満~4.0mm超の厚さの範囲にわたるT1~4aと、ii腫瘍が潰瘍化しておりその大きさが1.0mm未満~4.0mm超の厚さの範囲にわたるT1~4bと、iii1つの近傍リンパ節において肉眼的リンパ節転移が診断されるN1bと、iv2~3つの近傍リンパ節において肉眼的リンパ節転移が診断されるN2bと、vin-transit転移/衛星転移として存在しているN2cと、vi腫瘍が原発腫瘍から遠位の部位に弥漫していないM0と、を含む第IIIB期、およびc第IIIC期T1-4bN1bN0、T1-4bN2bM0、T1-4aN3MOまたはT1-4bN3MOであってi腫瘍が潰瘍化しておらずその大きさが1.0mm未満~4.0mm超の厚さの範囲にわたるT1~4aと、ii腫瘍が潰瘍化しておりその大きさが1.0mm未満~4.0mm超の厚さの範囲にわたるT1~4bと、iii1つの近傍リンパ節において肉眼的リンパ節転移が診断されるN1bと、iv2~3つの近傍リンパ節において肉眼的リンパ節転移が診断されるN2bと、v4つ以上のリンパ節における転移、広範囲にわたるリンパ節の存在、またはin-transit転移/衛星転移と所属との組み合わせであるN3と、vi腫瘍が原発腫瘍から遠位の部位に弥漫していないM0と、を含む第IIIC期を包含する。第III期の黒色腫処置は、上に記載した手術および補助療法に加えて、癌性リンパ節が発見された領域から所属リンパ節を除去する手術である治療リンパ節郭清TLNDを含む場合が多い。そのような手術は、肉眼的リンパ節転移を有する患者に大いに推奨される。手術の目標は、疾患がリンパ系を通して更に弥漫するのを予防することにある。TLNDはまた、未処置のリンパ節疾患によって頻繁に引き起こされる苦痛を抑えるうえで重要な役割を果たす。臨床的に診断された第III期の疾患を有する患者には一般に、リンパ節マッピングおよびセンチネルリンパ節生検は推奨されない。ただし、これらの処置は、第III期の疾患に属する或る種の亜群を有する患者には推奨され得る。補助放射線療法は、ランダム化対照試験において有益性が証明されてこなかったが、腫瘍がリンパ節の外部から周囲組織に拡大嚢外に弥漫した場合、時には推奨されることがある。目標は、疾患の更なる弥漫を抑制することにある。第IV期の黒色腫はしばしば、所属リンパ節を越えた、身体の遠隔部位への転移に関連する。一般によくある転移部位は、生体器官肺、腹部器官、脳、および骨、ならびに軟組織皮膚、皮下組織、および遠隔リンパ節である。第IV期の黒色腫は、遠隔転移の位置、腫瘍の数および大きさ、ならびに血清乳酸デヒドロゲナーゼLDHレベルによって特徴付けられる。LDHは、血液中および多くの体組織内に見つかる酵素である。LDHレベルの上昇は通常、腫瘍が内部臓器に弥漫したことを示唆する。第IV期の黒色腫は一般に、TまたはN分類を含まず、a腫瘍が遠位皮膚、皮下層または遠隔リンパ節に転移し、血清LDHが正常であるM1aと、b腫瘍が肺に転移し、血清LDHが正常であるM1bと、c腫瘍が肺以外の生体器官に転移し、血清LDHが正常であり、LDHの上昇を伴う何らかの遠隔転移があるM1cと、を含む。第IV期の黒色腫においては、これまで無処置の場合でも、生存が延長するかまたは疾患が治癒することが明確に示されてきた。代わりに処置ありの場合、疾患に起因する不快症候の軽減に焦点が当てられる。処置には、身体の他の領域に転移した癌性腫瘍またはリンパ節僅かな数で且つ症候の原因となっている場合を摘出する手術、確立されている実験的全身療法および放射線療法とが包含される。ラジアン療法は一般に、手術不能であるか複雑である可能性がある状況において脳または骨に転移する疾患の症候を軽減したい場合の、進行症例専用とされている。黒色腫の浸潤基底膜は、上皮および内皮細胞の下に位置しこれらの組織を支質から分け隔てている、薄い細胞外基質である。腫瘍細胞は、組織に浸潤し遠隔転移を形成する際に、脈管基底膜を交差して基底支質に透過する。腫瘍細胞は、浸潤工程において細胞外基質を分解するためのプロテアーゼを生成し得る。invivoおよびinvitroアッセイを使用して、黒色腫細胞の可動性および浸潤を試験できる。被験対象LDHレベルをアッセイすることで、器官破裂によってLDSが放出されたとき黒色腫が器官に浸潤したかどうかを判定する指標になり得る。本明細書中の他の箇所に記載されているように、invitro浸潤アッセイは、収集された黒色腫細胞標本を使用して実施できる。いくつかのinvitro浸潤アッセイは、羊膜、I型コラーゲンジェル、およびマトリゲルと呼ばれる再組成済み基底膜を含む様々な細胞外基質バリヤーを使用して開発されてきた。一部のアッセイの実施態様においては、多孔性フィルターをマトリゲルの薄層でコーティングし、ボイデン遊走チャンバBoydenmigrationchamberの下側ウェルに化学誘引物質を入れ上側ウェルに腫瘍細胞を入れたものに置く。その後、使用される腫瘍細胞に応じて約3~10時間にわたってチャンバ全体をインキュベートする。インキュベーションの後、フィルターを取り出し、固定して染色し、フィルターの下側表面上の細胞を定量する。浸潤を促進または阻害する分子は、アッセイの対象となり得る。アッセイの終了時には、浸潤性細胞を回収して、更に研究するために使用できる。一部の実施形態において、試験材料の量および細胞の個数を少なくしても済むという条件では、浸潤アッセイを使用して48ウェルチャンバにおいて種々の化合物を検査できる。浸潤アッセイを行うためのキットは市販品が出回っている。そのようなアッセイ例えば、マトリゲル性浸潤アッセイを使用して得られる結果は、腫瘍細胞がinvitroで浸潤する能力とinvivoでの浸潤作用との相関を示し得る。黒色腫細胞系黒色腫細胞は、当該技術分野において公知の技術を使用して、細胞培養から採取し得る。本明細書に記載されているように、黒色腫細胞系は、最初に黒色腫から誘導され、初代培養物または例えば、細胞が黒色腫から誘導されて以来1回以上通過した二次培養物中に存在し得る細胞を含んで構成される。黒色腫細胞系は、任意の黒色腫から誘導され得る。そのような細胞は時には、培養物中の原発性細胞または非癌性細胞例えば、非癌性細胞の培養期間はしばしば有限であるに勝る増殖、成長および排出passagingを経ることができるような変更を受けたものであり得る。黒色腫細胞系は、任意の好適な処置によって採取し得る。一部の実施形態において、方法はa哺乳類宿主から黒色腫標本を採取する工程と、b黒色腫標本から単一細胞懸濁液を生ずる工程と、c黒色腫細胞をペレット化する工程と、d標準の無菌培養技術を使用して黒色腫細胞を組織培養に移す工程と、e黒色腫細胞の成長を可能にする条件下で、組織培養にて黒色腫細胞を維持する工程と、を含む。黒色腫標本は、適切な任意の時点で例えば、手術時に採取し得る。黒色腫標本はしばしば、組織の損傷を最小限に抑えるような方法で、滅菌技術を用いて処理および操作される。無菌箱に入れた氷の上に黒色腫標本を載せて、実験室のラミナーフローフードに移動してもよい。黒色腫細胞系を単離するために同定された一部の黒色腫標本を摘出してもよい。残りの黒色腫標本は好適な温度例えば、-70°Cで貯蔵し得る。時には細胞を酵素処理で一夜消化して、細胞懸濁液を生じ得る。一部の実施形態においては、例えば、コラゲナーゼ含有の溶液中に標本を懸濁してもよい。或る実施形態において、溶液はまたDNaseおよび/またはヒアルロニダーゼを含有してもよく、細胞培地を使用して消化を行うことができる。結果として得られる単一細胞懸濁液は多くの場合、ペレット化される。ペレットを小体積の組織培養培地中に再懸濁してもよい。再懸濁された細胞を、培養物中の細胞の成長に適した組織培養培地に、好適な密度例えば、約5×105腫瘍細胞/mlで接種してもよい。時には、新鮮な腫瘍標本を細かな小片に切り刻み、直接培養物中に入れてもよい。こうした黒色腫細胞系の単離方法は、a哺乳類宿主から黒色腫の標本を採取する工程と、b標本を細かく切り刻み、その断片を採取する工程と、c新鮮な腫瘍の断片を組織培養に移す工程と、d細胞の成長および/または増殖を可能にする条件下で、組織培養にて黒色腫細胞を維持する工程と、を含み得る。黒色腫細胞を組織培養に移す際に使用された方法に関係なく、いったん移された培養物は約5~8のCO2の存在下で約35~約40°Cに維持し得る。当該技術分野において公知の、細胞増殖および/または成長に適した培地例えば、重炭酸塩緩衝系、ならびに各種のアミノ酸およびビタミンを利用する培地を使用できる。利用される培地は、時にはRPMI1640培地であり、時には約5~約20の濃度のウシ血清例えば、ウシ胎児血清を補給し得る。培地は、必要に応じて例えば、黒色腫細胞の成長に必要とされる場合、または未分化状態の黒色腫細胞の維持のために、更なる様々な因子を含み得る。培地および培地成分は多くの場合、例えば、商業的サプライヤから容易に入手できる。細胞培養物を供給し、必要に応じて例えば、典型的には1~10日ごとに再培養できる。また、腫瘍細胞に分別的トリプシン処理differentialtrypsinizationを施すことによって、原発腫瘍培養物を過剰繁殖させ得る他の細胞例えば、支質細胞を摘出できる。また、培地にコレラ毒素例えば、10ng/mlを補給することによって、線維芽細胞肥大の抑制を遂行できる。採取した黒色腫細胞の培養物が見かけ上例えば、培養物の外観または成長動作で判断されるようにほぼ精製されたものである場合に培養物の純度を確認する目的で実施できる試験は、様々なものがある。例えば、培養物純度をフローサイトメトリーまたは免疫細胞学で確認し、黒色腫関連のタンパク質またはガングリオシドの発現を検証できる。当該技術分野において公知であるように、そのような分析は、容易に入手可能な抗体を使用して実施できる。黒色腫細胞系は市販品例えば、WistarInstitutePhiladelphia,TrenzymeBiotechnologyGermanyが出回っている。黒色腫細胞系の非限定例としては、MALME-3M[HTB-64]、SK-MEL-5[HTB-70]、SK-MEL-2[HTB-68]、A375[CRL-1619]、およびRPMI-7951[HTB-66]が挙げられる。核酸本明細書において用語核酸は一般に、核酸塩基を含むDNA、RNAもしくは誘導体、またはこれらの類似体の分子一本鎖、二本鎖またはそれ以上を意味する。核酸塩基としては、例えば、天然のプリン塩基またはピリミジン塩基が挙げられる。これらの塩基は、DNAに見出されるもの例えば、アデニンA、グアニンG、チミンTもしくはシトシンC、またはRNAに見出されるもの例えば、A、G、ウラシルUもしくはCがある。用語核酸は、用語オリゴヌクレオチドおよびポリヌクレオチドを包含する。これらはそれぞれ用語核酸の亜属である。本明細書に記載の核酸としては、限定はされないが、microRNA、siNA、およびアンチセンスRNAが挙げられる。核酸は少なくとも、多くとも、または約3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、360、370、380、390、400、410、420、430、440、441、450、460、470、480、490、500、510、520、530、540、550、560、570、580、590、600、610、620、630、640、650、660、670、680、690、700、710、720、730、740、750、760、770、780、790、800、810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990もしくは1000ヌクレオチド、またはその中から導き出せる任意の長さ範囲であり得る。プロセシングされたmicroRNA、またはsiNA、microRNA、またはsiNA分子、前駆体microRNA、またはsiNA、microRNA、またはsiNAを含むベクター、対照核酸、ならびに他の分子、プローブおよびプライマーの長さをカバーする。多くの実施形態において、ヒトにおいてmicroRNAは長さ19~24個のヌクレオチドであり、一方microRNA前駆体は一般に62~110個のヌクレオチドである。本明細書中に記載の核酸は、別の核酸に対する同一性または相補性の領域を有し得る。相補性または同一性の領域は少なくとも5つの連続した残基であり得ると考えられるが、少なくとも、多くとも、または約6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、360、370、380、390、400、410、420、430、440、441、450、460、470、480、490、500、510、520、530、540、550、560、570、580、590、600、610、620、630、640、650、660、670、680、690、700、710、720、730、740、750、760、770、780、790、800、810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990、または1000の連続したヌクレオチドであることが特に考えられる。そのような相補性の長さは前駆体microRNA内またはmicroRNA薬物間にあることと、標的分子またはmicroRNA遺伝子がそのような長さであることは、更に了解されよう。核酸はまた、限定はされないがプラスミドもしくはウイルスを含むベクターを構成し得る。ベクターは、前処理済み核酸分子、または成熟した後処理済み分子例えば、前処理済みまたは後処理済みのmicroRNAまたはsiRNAをコードし得る。本明細書に記載の合成核酸とは、核酸が化学構造または天然の核酸配列を有しないことを意味する。それゆえ、合成microRNAは、細胞から単離されず且つ人工的に製造されたものであるが、時には細胞内でまたは生理的条件下で機能し得る合成核酸を指すことも了解されよう。いくつかの実施形態では合成microRNAまたは他の合成核酸を含み得る一方、或る実施態様において核酸分子は合成である必要はない。そのような実施形態において、方法および組成物に使用されている非合成microRNAは、天然microRNA前駆体または成熟microRNAの配列全体および構造を有し得る。例えば、本明細書中に記載の方法および組成物に使用されている非合成microRNAは、1種以上の修飾ヌクレオチドまたはヌクレオチド類似体を持たない場合がある。これらの実施形態において、非合成microRNAは再結合的に生成される場合もあれば、または生成されない場合もある。特定の実施形態において、本明細書に記載されている方法および/または組成物の核酸は、具体的には合成microRNAであり、非合成microRNAつまり、合成と称されるmicroRNA以外ではない。一部の実施形態においては、合成microRNAでなく非合成microRNAを利用し得る。合成microRNAの使用について考察した任意の実施形態は、非合成microRNAに関して適用可能である。その逆もまた同様で、非合成microRNAの使用について考察した任意の実施形態は、合成microRNAに関して適用可能である。本明細書において用語天然は、人による何らかの介入なしに生体内に見つかる何かを指し、天然の野生型分子または変異体分子を指し得る。一部の実施形態において、合成microRNA分子は天然microRNA分子の配列を有さない。他の実施形態において、合成microRNA分子は天然microRNA分子の配列を有し得るが、とりわけ精密な配列とは無関係な部分における分子の化学構造非配列の化学構造は、その配列を有する天然microRNA分子の化学構造とは異なる。場合によっては、合成microRNAは、天然microRNAには見つからない配列および非配列化学構造を有する。そのうえ、合成分子の配列は、効果的に提供されるmicroRNA、または阻害されるmicroRNAを同定し得る。内在性microRNAは、本明細書において対応するmicroRNAと呼ばれている。本明細書中に記載されているような方法で使用することの可能な対応するmicroRNA配列としては、限定はされないが、本明細書において上述された全部または一部の配列のほかに、他の任意のmicroRNA配列、microRNA前駆体配列、またはその任意の相補配列も挙げられる。本明細書において用いられているハイブリダイゼーションhybridization、ハイブリダイズhybridizesまたはハイブリダイズ可能capableofhybridizingは、二本鎖もしくは三本鎖分子即ち、部分的な二本鎖もしくは三本鎖の性質を有する分子を形成することであると理解される。本明細書において用語アニールannealは、ハイブリダイズhybridizeと同義である。用語ハイブリダイゼーションhybridization、ハイブリダイズhybridizeまたはハイブリダイズ可能capableofhybridizingは、用語ストリンジェントな条件stringentconditionまたは高ストリンジェンシーhighstringencyおよび用語低ストリンジェンシーlowstringencyまたは低ストリンジェントな条件lowstringencyconditionを包含する。本明細書に用いられているストリンジェントな条件stringentconditionまたは高ストリンジェンシーhighstringencyは、相補配列を含むがランダム配列のハイブリダイゼーションを妨げる1つ以上の核酸鎖同士の間または核酸鎖内でのハイブリダイゼーションを可能にする条件である。ストリンジェントな条件は、核酸と標的鎖との間のミスマッチを許容するにしてもほとんど許容しない。そのような条件は公知であり、高選択性を必要とする用途に好適である。非限定的な用途としては、核酸遺伝子もしくはその核酸部分等の単離、または少なくとも1つの特異的なmRNA転写産物もしくはその核酸セグメントの検出が挙げられる。ストリンジェントな条件は、例えば約42°C~約70°Cの温度にて約0.02M~約0.5MのNaClで提供される、低塩および/または高温条件を含み得る。所望のストリンジェンシーの温度およびイオン強度は一部には特定の核酸の長さ、標的配列の長さおよび核酸塩基含有量、核酸のチャージ組成物、ならびにハイブリダイゼーション混合物中のホルムアミド、テトラメチルアンモニウムクロリドもしくは他の溶媒の存在または濃度によって定量されることが了解されよう。こうしたハイブリダイゼーションのための範囲、組成物および条件は非限定例によってのみ言及され、特定のハイブリダイゼーション反応に望ましいストリンジェンシーは、多くの場合、1つ以上の陽性対照または陰性対照との比較によって経験的に定量されることが了解されよう。想定した用途に応じて、ハイブリダイゼーションの変動条件を使用して、標的配列に対する様々な度合いの核酸選択性を達成し得る。非限定例において、ストリンジェントな条件下では核酸にハイブリダイズしない関連する標的核酸の識別または単離は、低温および/または高イオン強度にてハイブリダイゼーションによって達成し得る。そのような条件は、低ストリンジェンシーlowstringencyまたは低ストリンジェント状態lowstringencyconditionと呼ばれ、低ストリンジェンシーの非限定例としては、約0.15M~約0.9MのNaClにて約20°C~約50°Cの温度範囲で実施されるハイブリダイゼーションが挙げられる。低または高ストリンジェンシー条件は、特定の用途に合うように更に変更してもよい。核酸は時には、本明細書に記載されているmicroRNAヌクレオチド配列と同一であるかまたは実質的に同一であるヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態において核酸は、aが本明細書に記載されているmicroRNAヌクレオチド配列に対して約60またはそれ以上、65またはそれ以上、70またはそれ以上、75またはそれ以上、80またはそれ以上、85またはそれ以上、90またはそれ以上、91またはそれ以上、92またはそれ以上、93またはそれ以上、94またはそれ以上、95またはそれ以上、96またはそれ以上、97またはそれ以上、98またはそれ以上、または99またはそれ以上の同一性を有し;bが本明細書に記載されているmicroRNA配列に対して、1、2、3、4、5、6、7、8、9または10塩基を追加または除去した結果として生じ;cが本明細書に記載されているmicroRNA配列に対して、1、2、3、4、5、6、7、8、9または10塩基置換を含み;dがa、bまたはcのヌクレオチド配列ヌクレオチド配列に対して相補的である、ヌクレオチド配列を含む。ヌクレオチド配列の同一性、およびヌクレオチド置換、削除または追加は、当該技術分野において公知のアラインメント工程およびツールによって判定し得る。例えば、配列アラインメントは利用可能なソフトウェアを使用して実行し得る。microRNA核酸は時にはmicroRNAmiRNAである。microRNA本明細書においてmiRNAとも呼ばれるは、長さが約15~30ヌクレオチドの非コード調整RNAの一部類である。用語microRNAは一本鎖の分子を指すのが一般的であるが、特定の実施形態においては同じ一本鎖の分子の別の領域に対してまたは別の核酸に対して部分的に鎖の全長に対して10~50相補的、実質的に鎖の全長に対して50超~100未満相補的、または完全に対して相補的な領域または追加鎖も包含する場合がある。ゆえに、microRNAは一本鎖分子、二本鎖分子、または部分的に一本鎖分子を包含し得る。例えば、前駆体microRNAは、最大100相補的な自己相補領域を有し得る。microRNAは、いくつかの種にわたって高度に保存され、主に、調節標的mRNAの3’非翻訳領域UTRと会合して、転写後に遺伝子発現を調節する。microRNAは細胞増殖、分化、およびアポトーシスに関係する。いくつかのmicroRNAは、ゲノム配列または遺伝子から誘導されることが了解されよう。この点で、所定のmicroRNAの前駆体microRNAをコードするゲノム配列を指す場合に簡略化する目的で遺伝子という用語を使用する。一方、一部の実施形態においては、発現に関与するmicroRNAのゲノム配列プロモータまたは他の調整配列などが関与し得る。組み換え型という用語を用いることも可能であり、これはinvitroで操作されてきた分子、またはそのような分子の複製もしくは発現による生成物である分子を一般に指す。生来のmicroRNAは、複合型のRNA誘導型サイレンシング複合体RISCリボタンパク質複合体の認識コンポーネントとして作用する調節RNAである。microRNAをコードする遺伝子は、プロセシングされた成熟microRNAよりも長い。ゲノムmicroRNAは、個々の遺伝子、複数のmicroRNAの遺伝子クラスタ、またはタンパク質コード遺伝子のイントロン内でコードされるものを含めた、多種多様な形態で存在する。microRNAは最初に、一次転写産物、または平均約1.2KbのRNA転写産物から構成されるpri-miRとして、または長いタンパク質コード転写産物のイントロン内に転写される。Pri-miRは、Drosha酵素によって、細胞核内のpre-miRNAとして知られている短いおよそ70~120個のヌクレオチドステムループ構造にプロセシングされる。その後、これらのpre-miRNAはエンドヌクレアーゼArgonaut、Dicerおよび他のものとの相互作用によって、細胞質内で成熟した機能性microRNAにまでプロセシングされ、RISC複合体が生成される。microRNAは一般に、調節標的mRNAの3’非翻訳領域UTR内の相補配列に塩基対合することによって、変換を阻害するかまたはmRNA分解を促進する。個々のメッセンジャーRNAmRNAはいくつかのmRNAを介して標的化され、複数の標的mRNAが単一のmicroRNAにより調節され得る。microRNAは、関連する機能群を持つタンパク質をコードする一連の遺伝子を同等に調節でき、それにより巨大な複合体enormouscomplexityを作って、遺伝子調節の可能性をもたらす。或る実施形態において、microRNAは阻害を受ける可能性がある。特定のmicroRNA発生期にあるmicroRNAは、例えばmicroRNA遺伝子またはイントロンセグメントの転写に干渉する分子によって阻害を受ける可能性がある。そのような分子によって、pri-microRNAの変性が促進されるか、pri-microRNAの適切な切断が阻害されるか、或いはpri-microRNAが不活性化されるか、或いは機能性microRNAへの成熟が阻止され得る。一部の実施形態において、microRNA阻害剤分子は、遺伝子、イントロンセグメント、転写産物、pri-microRNAおよび/または成熟microRNAに対して相互作用例えば、結合、開裂し得る。一部の実施形態において、microRNA阻害剤分子はDrosha、Argonaut、Dicer、または他のmicroRNAプロセシング酵素に対して相互作用例えば、結合し得る。或る実施形態において、microRNA阻害剤分子は一本鎖核酸例えば、DNA、RNAもしくは誘導体、またはそれらの組み合わせまたはsiNA例えば、siRNAである。一部の実施形態において、microRNA阻害剤分子は、アンチセンスDNA、または対応する成熟microRNAのRNA配列、または成熟microRNAの断片に対して相補的なアンチセンスオリゴヌクレオチド分子に対応する。他の実施形態において、アンチセンスDNA、アンチセンスRNAもしくはアンチセンスオリゴヌクレオチドであるmicroRNA阻害剤分子は、抑制を増強する追加のオリゴヌクレオチド配列を含み得るか、アンチセンス結合を増強し且つ/もしくは耐崩壊性を与えるホスフェート主鎖または修飾ヌクレオチド塩基に対する修正を含み得る。microRNAは標識化し得るか、アレイ分析に使用し得るか、または診断、治療、または予後の用途特に、黒色腫などの病理条件に関連する用途に使用し得る。microRNAは細胞を介して内因的に生成されていてもよいし、化学的にもしくは組み換え技術を介して合成または生成されていてもよい。microRNAは単離および/または精製が可能である。ヒトmicroRNA分子は本明細書においてしばしはプレフィックスhsa-miR-付きで示されている。特に明記しない限り、本出願において言及されているmicroRNAはヒト配列であり、非ヒトmicroRNA配列は、例えば、非ヒト被験対象の用途の非ヒト配列から定量、調整され得る。一部の実施形態において、使用し得るmicroRNAは、公知のヒトmicroRNAに対応しない。或る実施形態においては、これらの非ヒトmicroRNAを使用し得るか、または非ヒトmicroRNAに対して相同性を有するヒトmicroRNAが存在し得る。様々な実施形態においては、哺乳類の細胞、生物学的標本、またはその調製物を使用してもよい。siNA或る核酸は、短干渉核酸siNAであり得る。siNAは、配列特異的なRNA阻害を媒介する能力を有する核酸分子RNAi、例えば短干渉RNAsiRNA、二本鎖RNAdsRNA、microRNAmicroRNAまたはmiRNA、短ヘアピンRNAshRNA、短干渉オリゴヌクレオチド、短干渉核酸、短干渉修飾オリゴヌクレオチド、化学修飾siRNA、転写後遺伝子サイレンシングRNAptgsRNA、およびその他のものの部類を指す。加えて、本明細書において、用語RNAiは、配列特異的なRNA干渉転写後遺伝子サイレンシングまたは後成的発現などを説明する場合に使用される他の用語と同等であることを意味する。例えば、siNA分子を使用して、転写後レベルおよび転写前レベルのいずれか一方またはその両方にて遺伝子を後成的にサイレンシングすることも可能である。非限定例においては、本技術のsiNA分子による遺伝子発現の後成的調整は、クロマチン構造のsiNA媒介性修飾により生じて遺伝子発現を変化させることができる。ゆえに、siNAを治療的に使用して、ポリペプチドまたはタンパク質のレベルを媒介し得る。一部の実施形態においては、siNA例えば、siRNAがmiRNAの阻害剤として利用されておりmiRNAについては以降に詳述する、そのようなsiRNAの設計、選択、および作製のための方法が当該技術分野において知られている。siNAは、自己相補性センス領域とアンチセンス領域とを含む二本鎖ポリヌクレオチド分子であり得る。ここで、アンチセンス領域は標的核酸分子またはその一部内のヌクレオチド配列に対して相補的なヌクレオチド配列を含み、センス領域は標的核酸配列またはその一部に対応しているヌクレオチド配列を有する。siNAは、2つの独立したオリゴヌクレオチドから組み立て得る。ここで、一方の一本鎖はセンス鎖で、他方の一本鎖はアンチセンス鎖であり、且つアンチセンスおよびセンス鎖は自己相補性である。一部の実施形態において各鎖は、他の鎖内のヌクレオチド配列に対して相補的なヌクレオチド配列を含み、例えば、アンチセンス鎖とセンス鎖とがデュープレックス即ち、二本鎖構造を形成し、ここで、二本鎖領域は、例えば、約1、2、3、4、5,6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、または25もしくはそれ以上の塩基対になる。アンチセンス鎖は、標的核酸分子またはその一部内のヌクレオチド配列に対して相補的なヌクレオチド配列を含み、センス鎖は標的核酸配列またはその一部に対応するヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態において、siNAは単一のオリゴヌクレオチドから組み立ててもよく、ここで、siNAの自己相補的センス領域およびアンチセンス領域は、核酸系または非核酸系のリンカーにより連結されている。siNAは、自己相補性センス領域とアンチセンス領域とを含む、ヘアピン二次構造を有するポリヌクレオチドであり得る。ここで、アンチセンス領域は、別個の標的核酸分子またはその一部内のヌクレオチド配列に対して相補的なヌクレオチド配列を含み、センス領域は標的核酸配列またはその一部に対応しているヌクレオチド配列を有する。siNAは、2つまたはそれ以上のループ構造と、自己相補的センス領域およびアンチセンス領域を含むステムと、を有する環状一本鎖ポリヌクレオチドであってもよく、ここで、アンチセンス領域は標的核酸分子またはその一部内のヌクレオチド配列に対して相補的なヌクレオチド配列を含み、センス領域は標的核酸配列またはその一部に対応するヌクレオチド配列を有し、環状ポリヌクレオチドは、invivoまたはinvitroのいずれかでプロセシングされ、RNAiを媒介する能力を有する活性なsiNA分子を生成し得る。一部の実施形態において、siNAはRNAの二本鎖を含む。或る実施形態において、siNAはDNAの二本鎖を含む。siNAは時には、RNAの一本鎖とDNAの一本鎖とを含むハイブリッドであってもよい。一方または両方の鎖はまた、RNAとDNAとの混合物を含んでいてもよい。一部の実施形態において、siRNAの鎖例えば、siRNAの鎖は長さが約5~約60ヌクレオチド例えば、約6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58または59ヌクレオチドであり得る。siNA鎖は時には、60ヌクレオチドを超えることがあり得る。siNAはまた、標的核酸分子またはその一部内のヌクレオチド配列に対して相補的なヌクレオチド配列を有する一本鎖ポリヌクレオチドを含んでいてもよく例えば、そのようなsiNA分子がsiNA分子内に標的核酸配列またはその一部に対応するヌクレオチド配列の存在を必要としない場合、ここで、一本鎖ポリヌクレオチドは、5’-ホスフェートまたは5’,3’-ジホスフェートなどの末端ホスフェート基を更に含み得る。或る実施形態において、siNA分子は、別々のセンスおよびアンチセンス配列または領域を含んでいてもよく、ここで、センス領域およびアンチセンス領域は、当該技術分野において公知のヌクレオチドもしくは非ヌクレオチドリンカー分子を介して共有結合により連結しているか、またはイオン相互作用、水素結合、ファンデルワールス相互作用、疎水的相互作用、および/もしくはスタッキング相互作用により非共有結合的に連結している。或る実施形態において、siNA分子は標的遺伝子のヌクレオチド配列に対して相補的なヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態において、siNA分子は、標的遺伝子の発現の阻害が引き起こされるような形で、標的遺伝子のヌクレオチド配列と相互作用する。siNAは時には、microRNAmiRNAを中断または干渉することがあり得る。核酸の修飾本明細書に記載されている修飾はいずれも、適宜に核酸例えば、microRNAおよびsiRNAに適用し得る。修飾の例としては、RNA主鎖、糖または塩基に対する変更、およびこれらの様々な組み合わせが挙げられる。microRNAまたは他の核酸内の任意の好適な数の主鎖連鎖、糖および/または塩基は例えば、独立に約5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、最大100修飾され得る。非修飾microRNAヌクレオシドは、β-D-リボフラノースの1’炭素に結合される塩基アデニン、シトシン、グアニン、チミンまたはウラシルのいずれか1つである。修飾塩基は、1’位置のアデニン、グアニン、シトシン、およびウラシル以外のヌクレオチド塩基である。修飾塩基の非限定例としては、イノシン、プリン、ピリジン-4-オン、ピリジン-2-オン、フェニル、シュードウラシル、2,4,6-トリメトキシベンゼン類、3-メチルウラシル、ジヒドロウリジン、ナフチル、アミノフェニル、5-アルキルシチジン例えば、5-メチルシチジン、5-アルキルウリジン例えば、リボチミジン、5-ハロウリジン例えば、5-ブロモウリジン、または6-アザピリミジンもしくは6-アルキルピリミジン例えば、6-メチルウリジン、プロピン、およびこれらに類するものが挙げられる。他の修飾塩基の非限定例としては、ニトロピロリル例えば、3-ニトロピロリル、ニトロインドリル例えば、4-,5-,6-ニトロインドリル、ヒポキサンチニル、イソイノシニル、2-アザ-イノシニル、7-デアザ-イノシニル、ニトロイミダゾリル、ニトロピラゾリル、ニトロベンズイミダゾリル、ニトロインダゾリル、アミノインドリル、ピロロピリミジニル、ジフルオロトリル、4-フルオロ-6-メチルベンズイミダゾール、4-メチルベンズイミダゾール、3-メチルイソカルボスチリリル、5-メチルイソカルボスチリリル、3-メチル-7-プロピニルイソカルボスチリリル、7-アザインドリル、6-メチル-7-アザインドリル、イミジゾピリジニル、9-メチル-イミジゾピリジニル、ピロロピリジニル、イソカルボスチリリル、7-プロピニルイソカルボスチリリル、プロピニル-7-アザインドリル、2,4,5-トリメチルフェニル、4-メチルインドリル、4,6-ジメチルインドリル、フェニル、ナフタレニル、アントラセニル、フェナントラセニル、ピレニル、スチルベニル、テトラセニル、ペンタセニルおよびこれらに類するものが挙げられる。一部の実施形態において、例えば、ホスフェート主鎖修飾phosphatebackbonemodificationsで修飾された核酸分子を含んでいてもよい。主鎖修飾の非限定例としては、ホスホロチオネート、ホスホロジチオアート、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、モルホリノ、アミダートカルバメート、カルボキシメチル、アセトアミド、ポリアミド、スルホネート、スルホンアミド、スルファミン酸エステル、ホルムアセタール、チオホルムアセタール、および/またはアルキルシリル修飾が挙げられる。場合によっては、ヌクレオシドにおいて天然に発生するリボース糖残基は、ヘキソース糖、多環式ヘテロアルキルリング、またはシクロヘキセニル基で置換される。場合によっては、ヘキソース糖はアロース、アルトロース、グルコース、マンノース、グロース、イドース、ガラクトース、タロース、またはその誘導体である。ヘキソースはD-ヘキソース、グルコース、またはマンノースであり得る。場合によっては、多環式ヘテロアルキル基は、環内に1つの酸素原子を含む二環式であり得る。場合によっては、多環式ヘテロアルキル基はビシクロ[2.2.1]ヘプタン、ビシクロ[3.2.1]オクタン、またはビシクロ[3.3.1]ノナンである。ニトロピロリルおよびニトロインドリル核酸塩基は、ユニバーサル塩基として知られる化合物の部類のメンバーである。ユニバーサル塩基は、オリゴヌクレオチドデュープレックスの溶融挙動または活性に実質的に影響を及ぼすことなしに、4つの天然由来の塩基のいずれかで置き換えることができる。天然由来の核酸塩基に関連する安定化水素結合相互作用とは対照的に、3-ニトロピロリル核酸塩基を含有するオリゴヌクレオチドデュープレックスは、スタッキング相互作用を介してのみ安定し得る。ニトロピロリル核酸塩基との有意な水素結合相互作用がない場合、特定の相補的塩基の特異性が取り除かれる。加えて、4つの天然塩基に対して4-、5-および6-ニトロインドリルは、ごく僅かな特異性しか示さない。他のユニバーサル塩基としては、ヒポキサンチニル、イソイノシニル、2-アザ-イノシニル、7-デアザ-イノシニル、ニトロイミダゾリル、ニトロピラゾリル、ニトロベンズイミダゾリル、ニトロインダゾリル、アミノインドリル、ピロロピリミジニル、およびその構造誘導体が挙げられる。ジフルオロトリルは、ユニバーサル塩基として機能する非天然の核酸塩基である。ジフルオロトリルは、天然の核酸塩基チミンの同配体である。ただし、ジフルオロトリルはチミンとは異なり、一切の天然塩基に対して目に見えた選択性を示さない。ユニバーサル塩基として機能する他の芳香族化合物は、4-フルオロ-6-メチルベンズイミダゾール、および4-メチルベンズイミダゾールである。加えて、比較的に疎水性イソカルボスチリリル誘導体3-メチルイソカルボスチリリル、5-メチルイソカルボスチリリル、および3-メチル-7-プロピニルイソカルボスチリリルは、天然塩基のみを含有するオリゴヌクレオチド配列と比較してオリゴヌクレオチド二本鎖を僅かにのみ不安定化させるユニバーサル塩基である。他の非天然の核酸塩基としては、7-アザインドリル、6-メチル-7-アザインドリル、イミジゾピリジニル、9-メチル-イミジゾピリジニル、ピロロピリジニル、イソカルボスチリリル、7-プロピニルイソカルボスチリリル、プロピニル-7-アザインドリル、2,4,5-トリメチルフェニル、4-メチルインドリル、4,6-ジメチルインドリル、フェニル、ナフタレニル、アントラセニル、フェナントラセニル、ピレニル、スチルベニル、テトラセニル、ペンタセニル、およびその構造誘導体が挙げられる。より詳しく説明するために、ジフルオロトリル、4-フルオロ-6-メチルベンズイミダゾール、4-メチルベンズイミダゾール、および上述した他の非天然型塩基の合成手順を含む。加えて、化学置換基例えば、架橋剤を用い、安定性または反応に対する不可逆性を増強することもできる。架橋剤の非限定例としては、例えば、1,1-ビスジアゾアセチル-2-フェニルエタン、グルタルアルデヒド、N-ヒドロキシスクシンイミドエステル類、例えば、4-アジドサリチル酸を有するエステル類、ホモ二官能性イミドエステル類、例えば、3,3’-ジチオビススクシンイミジルプロピオネナートなどのジスクシニミヂルエステル類、ビス-N-マレイミド-1,8-オクタンなどの二官能性マレイミド、およびメチル-3-[p-アジドフェニルジチオ]プロピオイミデートなどの薬剤が挙げられる。ヌクレオチド類似体にはまた、ロックされたlocked核酸も包含され得る。或る組成物を使用して、実質的に内在性核酸を特定の構造に固着anchorまたはロックlockし得る。配列を固着anchorすると、核酸siNA複合体の分離を防ぐのに役立つ。例えば、内在性配列のコピーを防止できるだけでなく、標識化、修飾、および/またはクローン化も可能になる場合がある。ロックされた構造によって遺伝子発現の調節即ち、転写または複製を抑制するか促進することが可能なこともあれば、内在性核酸配列の標識或いは修飾に使用可能な安定な構造として使用できることもあれば、内在性配列の単離即ち、クローン化の用途に使用できることもある。核酸分子をRNAまたはDNAのみを含有する分子だけに限定する必要はない。寧ろ、化学修飾されたヌクレオチドおよび非ヌクレオチドも、核酸分子に更に包含される。非ヌクレオチドまたは修飾ヌクレオチドのパーセントは、1~100の間例えば、約5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90または95であり得る。或る実施形態においてsiNAは、ヌクレオチドを含有する2’-ヒドロキシ2’-OHが欠失している。或る実施形態において、siNAは2’-ヒドロキシ基を有するヌクレオチドの存在を必要とせずにRNAiを媒介することが可能なため、一切のリボヌクレオチド例えば、2’-OH基を有するヌクレオチドがsiNAに含有されない場合がある。この種のsiNA分子は、siNA分子内にリボヌクレオチドが存在しなくてもRNAiを支持できるが、結合リンカーを有していてもよいし、または2’-OH基を有する1種以上のヌクレオチドを含む結合または会合した基、残基もしくは鎖を有していてもよい。siNA分子は時には、約5、10、20、30、40、または50のヌクレオチド位置にリボヌクレオチドを含むことがあり得る。バイオマーカー本明細書に記載されているバイオマーカーは、黒色腫に関連するmicroRNAである本明細書中ではmiRNAとも呼ばれている。microRNAは、限定はされないが、哺乳動物例えば、ヒト由来の細胞に対応しているかまたは誘導されるヌクレオチド配列を含めた何らかの好適な源を有し得る。或る実施形態において、本明細書中の表1、ならびに表A、B、C、DおよびEに記載されているmicroRNAバイオマーカーはヒト形態のものである。本発明によるバイオマーカーはバイオマーカーファミリーを表すことができ、ここでバイオマーカーファミリーは、バイオマーカーファミリーのメンバーであるいくつかのmicroRNAを含んで構成される。例えば、microRNA-513は、miR-513-a-3p、miR-513-a-5p、miR-513-b、miR-513-cを含むmicroRNAのファミリーを表す。ゆえに、特定のバイオマーカーに適用される本発明による方法はまた、バイオマーカーファミリーの個々のファミリーメンバーにも適用できる。一部の実施形態において、microRNAバイオマーカーは黒色腫細胞内では過少に提示される。この場合のmicroRNAバイオマーカーは、本明細書ではmiRNA腫瘍サプレッサと呼ばれている。一部の実施形態において、microRNAバイオマーカーは黒色腫細胞内で過度に提示された。この場合のmicroRNAバイオマーカーは、本明細書ではmiRNAオンコジーンと呼ばれている。以下、microRNA腫瘍サプレッサおよびmRNAオンコジーンについて更に詳しく説明する。或る実施形態において、臨床医はバイオマーカーを分析することで、以降の薬物用量を低減または増加すべきかまたは維持すべきかを決定できる。例えば、臨床医は薬物処置後に過度に提示されたバイオマーカーレベルが有意に減少し、且つ/または過少に提示されたバイオマーカーレベルが有意に増加したことを確認することで、投与された薬物が治療効果を発揮しているという兆候を知ることができる。そのようなバイオマーカーの定量に基づいて、臨床医は以降の薬物用量を維持するかまたは以降の用量を減ずるかの決定を下すことができる。別の実施例においては、過度に提示されたバイオマーカーレベルが有意に減少していない、且つ/または過少に提示されたバイオマーカーレベルが有意に増加していないことを確認することによって、投与された薬物が治療効果を発揮していないという兆候が臨床医に与えられる。そのようなバイオマーカーの定量に基づいて、臨床医は以降の薬物用量の増加について決定を下すことができる。薬物が被験対象に有毒で且つ副作用を及ぼす可能性があると想定される場合、臨床医は本明細書に記載の方法で有効な薬物投与量に関してダイヤルインすれば、副作用を最小限に抑えることが可能になり、治療アプローチが至適化される。特定の実施例では、ダイヤルアップされた投与量が毒性閾値レベルを下回る状況において、臨床医は本明細書に記載された方法を用い、薬物投与量が治療的に有効なレベルであることをダイヤルアップできる。したがって、本明細書に記載されている処置方法は、有毒な副作用の可能性を減少する効力を増強できる。一部の実施形態においては、バイオマーカーの分析によって、臨床医は薬物に反応する可能性が高い被験対象と薬物に反応する可能性の低い被験対象とを同定できる。或る実施形態においては、臨床医はバイオマーカーの分析によって、黒色腫が侵襲性の高い形態になるかまたは黒色腫の臨床病期が更に進行する危険にさらされている被験対象を同定できる。或る実施形態において、臨床医はバイオマーカーが存在するか否かまたはバイオマーカーの量がバイオマーカーの閾値未満かそれを超えるかもしくはほぼ同じかに基づいて、そのような判定を行うことができる。バイオマーカー源多くの場合、存在、不在、またはexvivoの量を判定する目的で、被験対象から流体または組織試料を採取する。一部の実施形態において、組織試料を採取し得る身体の一部分の非限定例としては、脚、腕、腹部、上背部、腰部、胸部、人手、指、指の爪、足、足指、足の爪、頸部、直腸、鼻、咽喉、口腔、頭皮、顔面、脊椎、咽喉、心臓、肺、胸部、腎臓、肝臓、腸、結腸、膵臓、膀胱、頸部、精巣、筋肉、皮膚、毛髪、炎症部位、腫瘍、弥漫型癌細胞の部位、およびこれらに類するものが挙げられる。一部の実施形態において、組織試料を採取できる方法としては、限定はされないが、生検、例えば、剃毛、穿孔、切開、摘出、掻爬、細針吸引、スクープ、スカラップ、コア針、真空補助、下開腹生検、およびこれらに類するものを含む、当該技術分野において周知の任意の方法が挙げられる。一部の実施形態において、被験対象から採取できる流体の例としては、限定はされないが、血液、脳脊髄液、脊髄液、洗浄液例えば、気管支肺胞、胃、腹膜、管、耳、関節鏡検査、尿、間質液、便、痰、唾液、鼻粘液、前立腺の流体、洗浄、精液、リンパ流体、胆汁、涙、汗、母乳、胸部流体、炎症部位からの流体、腫瘍部位からの流体、弥漫型細胞肥大部位、およびこれらに類するものが挙げられる。バイオマーカーの存在、不在または量を判定する前に、被験対象由来の標本を処理してもよい。例えば、被験対象由来の血液標本を処理して、限定はされないが血漿、血清、軟膜、赤血球層およびこれらに類するものを包含する特定の画分を生成し、画分中のバイオマーカーの存在、不在または量を定量してもよい。或る実施態様においては、組織試料例えば、腫瘍生検標本は、組織試料をスライスする工程と、スライスされた標本を薬物に接触させてバイオマーカー例えば、抗体を可視化する前および/または後に、顕微鏡の下で標本を観察する工程と、によって処理してもよい。一部の実施形態において、組織試料は以下の非限定的な条件のうちの1つ以上に暴露してもよい:洗浄、高塩または低塩溶液例えば、高張性、低張性、等張性溶液への暴露、剪断条件例えば、音波破砕、成形機例えば、フレンチプレスへの暴露、微塵切り、遠心分離、細胞の分離、組織の分離、およびこれらに類するもの。或る実施形態においては、バイオマーカーを組織から切り離してバイオマーカーの存在、不在または量をinvitroで判定し得る。また、バイオマーカーの存在、不在または量を判定する前に、標本を一時期貯蔵してもよい例えば、保存培地例えば、ホルムアルデヒド内で標本を凍結、低温保存、維持してもよい。薬物が被験対象に送達された後、収集に好適な任意の時点で、被験対象から標本を採取してもよい。例えば、薬物が被験対象に送達されてから約1時間以内例えば、薬物投与の約5、10、15、20、25、30、35、40、45、55または60分以内、薬物が被験対象に送達されてから約1日以内例えば、薬物投与の約2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23または24時間以内、または薬物が被験対象に送達されてから約2週間以内例えば、薬物投与の約2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13または14日以内に標本を収集し得る。収集は、例えば、毎時、毎日、隔月、毎週、隔週、毎月、隔月、毎四半期、および毎年、ならびにこれらに類するものを含む指定されたスケジュールにて行ってもよい。薬物を一定時間にわたって継続的に投与例えば、点滴する場合、最初に薬物を被験対象に導入した時点から薬物投与を中断する時点または中間時点例えば、投与時間枠の中間時点もしくはその他の時点までの遅延を定量してもよい。バイオマーカーの検出1種以上のバイオマーカーの存在、不在または量は当該技術分野において公知の好適な方法で判定でき、本明細書中にはその非限定的な判定方法が記載されている。バイオマーカーの存在、不在または量の判定は時には、生物学的アッセイの使用を含む。生物学的アッセイにおいては、アッセイ中に検出された1つ以上の信号をバイオマーカーの存在、不在または量に変換し得る。アッセイ中に検出された信号の変換は、例えば、標準曲線、1つ以上の規格例えば、内部、外部、図表、信号をバイオマーカーの存在、不在または量に変換するコンピュータプログラム、およびこれらに類するもの、ならびに前述のものの組み合わせの使用を含み得る。バイオマーカーの存在、不在または量は、被験対象の体内例えば、insituまたは被験対象の体外例えば、exvivoで定量し得る。一部の実施形態においては、細胞内例えば、分化細胞、幹細胞でのバイオマーカーの存在、不在または量を判定でき、或る実施形態においてはバイオマーカーの存在、不在または量を実質的に無細胞培地例えば、invitro内で判定できる。本明細書において用いられている用語被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程は、当該技術分野において公知の、バイオマーカーの評価、および被験対象における存在、不在または量を推測するための任意の方法例えば、insitu、exvivoもしくはinvitro法を指す。アッセイで検出されるバイオマーカーは、例えば、全長バイオマーカー、バイオマーカーフラグメント、変更もしくは修飾バイオマーカー例えば、バイオマーカー誘導体、バイオマーカーの代謝物、または前述の2つ以上のものの合計である。変性バイオマーカーはしばしば、本明細書に記載されているバイオマーカーに対して実質的な配列同一性を有する。例えば、変性バイオマーカーと本明細書に記載されているバイオマーカーとの間の同一性パーセントは、15~20、20~30、31~40、41~50、51~60、61~70、71~80、81~90および91~100例えば、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、および100同一性パーセントの範囲であり得る。修飾バイオマーカーは多くの場合、本明細書に記載されているバイオマーカーの配列に対して90またはそれ以上の同一性を持つ配列例えば、アミノ酸配列またはヌクレオチド配列を有する。配列の同一性パーセントは、当該技術分野において公知のアラインメント方法を使用して定量し得る。バイオマーカーの検出は、限定はされないが、質量分析法、抗体アッセイ例えば、ELISA、核酸アフィニティ、マイクロアレイハイブリダイゼーション、ノーザンブロット、リバースPCRおよびRT-PCRを含む、当該技術分野において公知の任意の好適な方法を使用して実施できる。例えば、RNA純度は、Nanodrop1000で分光測光法260/280>1.9にて定量し得る。RNA品質は、当該技術分野において公知の方法例えば、Agilent2100Bioanalyzer;RNA6000NanoLabChip登録商標およびこれらに類するものを使用してアッセイし得る。microRNAは、判定の際および本明細書に記載されている治療方法に使用できるように、単離および/または合成し得る。microRNAは、核酸増幅法例えば、PCR、トランスフェクションおよびトランスダクションを含めた公知の分子生物学技術を使用して単離できる。一部の実施形態では、microRNAは当該技術分野において公知の合成方法を使用して合成できる。microRNAはアレイを使用して検出し得る。アレイまたは一連のプローブの調製後、および/または標本もしくはプローブ内の核酸の標識後に、ハイブリダイゼーション条件下にて標的核酸の母集団をアレイもしくはプローブと接触させ、そのような条件を要望とおり調整して、実施される特定のアッセイを鑑みて至適レベルの特異性を提供し得る。好適なハイブリダイゼーション条件は、当該技術分野において公知である。単一のアレイまたは一連のプローブを複数の標本に接触してもよい。標本は、標本同士を識別するための独特のラベルで標識してもよい。例えば、単一のアレイを、腫瘍組織試料および正常な組織試料に接触させてもよい。アレイ上のプローブに対応している特定のmicroRNAの標本同士の間の差異は、容易に確認して定量し得る。アレイの表面積が小さい場合、温度調節および塩分などの均一なハイブリダイゼーション条件が可能になる。そのうえ、小領域を占有するアレイが高密度になるため、ハイブリダイゼーションは極小な流体容積例えば、約250μl以下、約5、10、25、50、60、70、80、90、100μlもしくはおよそそれ未満、またはその中で導き出せる任意の範囲の体積を含むで実施され得る。小容量の場合、ハイブリダイゼーションの進行が極めて迅速になり得る。以降の薬物用量の調整または維持についての指示以降の薬物用量の調整または維持についての指示は、バイオマーカーの存在または不在に基づいて行うことができる。iバイオマーカーレベルを低感度で定量できる、iiバイオマーカーレベルが薬物に応答してシフトする、iii検出可能なレベルのバイオマーカーが存在する、および/またはivバイオマーカーの投与、存在、もしくは不在のレベルにて薬物が評価し得るほどの毒性を持たないといった条件を満たすならば、以降の薬物用量を調整するかまたは維持するかの指示を出すのに十分であり得る。以降の薬物用量の調整をするかまたは維持するかは多くの場合、バイオマーカーの量またはレベルに基づく。一部の実施形態において、バイオマーカーの量は、平均、メジアン、公称、範囲、中間、最大、最小または相対的な量であってもよい。或る実施形態においては、バイオマーカーの量を測定誤差範囲measurementerrorwindowありまたはなしで表し得る。一部の実施形態において、バイオマーカーの量はバイオマーカー濃度、バイオマーカー重量/単位重量、バイオマーカー重量/単位容量、バイオマーカーのモル数、バイオマーカーのモル数/単位容量、バイオマーカーのモル数/単位重量、バイオマーカー重量/単位細胞、バイオマーカー容量/単位細胞、バイオマーカーのモル数/単位細胞およびこれらに類するものとして表現し得る。重量は、例えば、フェムトグラム、ピコグラム、ナノグラム、マイクログラム、ミリグラム、およびグラムとして表現し得る。容量は、例えば、フェムトリットル、ピコリットル、ナノリットル、マイクロリットル、ミリリットル、およびリットルとして表現し得る。モル数は、例えば、ピコモル、ナノモル、マイクロモル、ミリモル、およびモルで表現し得る。一部の実施形態において、単位重量は被験対象の重量、または被験対象由来の標本の重量であってよく、単位容量は被験対象由来の標本の容量例えば、血液標本の容量であってよく、単位細胞は1細胞あたりまたは一定数の細胞あたりの数例えば、1000細胞あたりのバイオマーカーのマイクログラム数であってよい。一部の実施形態において、当該技術分野において公知であるように、或る組織または流体から定量されたバイオマーカーの量は、別の組織または流体におけるバイオマーカーの量と相関し得る。或る実施形態において、例えば、バイオマーカーの量が循環血液で定量される場合、バイオマーカーの量は黒色腫細胞内での量に外挿され得る。以降の薬物用量の調整または維持についての指示はしばしば、被験対象におけるバイオマーカーの確定済みレベルをバイオマーカーの所定レベルと比較することによって出される。或る実施形態において、バイオマーカーの所定レベルは時には、被験対象例えば、被験対象の黒色腫細胞における治療量または有効量の薬物に関連付けられることもあれば、時には薬物の毒性レベルに関連付けられることもあれば、時には条件の存在に関連付けられることもあれば、時には処置の中間時点に関連付けられることもあれば、時には処置の終了点に関連付けられることもある。バイオマーカーの所定レベルは時には時間を要素として含み、一部の実施形態において閾値は時間依存的シグネチャである。いくつかの処置方法は、i薬物を1回以上の投与回数例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9または10回の投与で被験対象に投与する工程と、iiiの後に被験対象におけるまたは被験対象由来のバイオマーカーの存在、不在または量を判定する工程と、iii被験対象に投与する以降の薬物用量を増減または維持するように指示を提供する工程と、iv任意選択的に以降の薬物用量を被験対象に投与する工程であって、iにおける早期用量を基準とした以降の薬物用量を増減または維持する工程と、を含む。一部の実施形態においては、被験対象に薬物を投与した後に毎回バイオマーカーの存在、不在または量を判定するが、時には薬物投与後に必ずしも毎回バイオマーカーの存在、不在または量の判定を行わないこともある例えば、1回、2回、3回、4回、5回、6回、7回、8回、9回または10回目の投与のうちの1つ以上の後にバイオマーカーを評価するが、投与後に必ずしも毎回評価を行うとは限らない。以降の薬物用量の調整についての指示は、以降の薬物用量を増やす必要性または減ずる必要性と考えることができる。或る実施形態において、以降の薬物用量の調整または維持についての指示は臨床医によって考慮され得る。臨床医は指示に基づいて行動できる。一部の実施形態において、臨床医は指示に基づいて行動しないことを選択できる。ゆえに、臨床医は、提供された指示に基づいて以降の薬物用量を調整するか否かを選択できる。以降の薬物用量および/または以降の薬物投与量を調整するかまたは維持するかの指示は、任意の好都合な方法で提供できる。一部の実施形態においては、指示を表形式で例えば、物理媒体または電子媒体でで提供してもよい。例えば、バイオマーカー閾値は表で提供される場合もあり、臨床医は被験対象について判定されたバイオマーカーの存在、不在または量を閾値と比較することができる。その後、臨床医は以降の薬物用量についての指示を表から同定できる。或る実施形態において、指示はバイオマーカーの存在、不在または量はコンピュータに提供されてから例えば、コンピュータ上のメモリーに入れられてからコンピュータにより提示例えば、表示される。例えば、被験対象について判定されたバイオマーカーの存在、不在または量はコンピュータに提供されてから例えば、ユーザーがコンピュータのメモリーに入れてから、またはコンピュータネットワーク内のリモートデバイスを介してコンピュータに転送されてから、およびコンピュータ内のソフトウェアは以降の薬物用量の調整または維持についての指示を生成し、且つ/または以降の薬物用量を提示できる。以降の用量を決定し得る基準としては、例えば、バイオマーカーの存在、不在または量を除く特定の因子被験対象の重量など、被験対象の代謝物濃度のうちの1種以上例えば、肝機能に関する代謝物濃度およびこれらに類するものが挙げられる。いったん指示に基づいて以降の用量が決定された後、臨床医は以降の用量を投与するか、または用量を別の個人または実体に合わせて調整するための指示を提供できる。本明細書に用いられている用語臨床医とは意思決定者を指し、或る実施形態において臨床医は医療専門家である。一部の実施形態において、意思決定者はコンピュータ、または表示されたコンピュータプログラムの出力であってもよく、保健サービスサービスプロバイダはコンピュータが表示する指示にまたは以降の薬物用量に基づいて行動できる。意思決定者は、以降の用量を直接投与例えば、以降の用量を被験対象に注射してもよいし、または遠隔操作で投与例えば、意思決定者がポンプパラメーターを遠隔操作で変更することもできる。被験対象の予備検査によって、特定のバイオマーカーの存在、不在または量を判定すべきか否かを決定できる。予備検査の非限定例としては、遺伝子マーカーの存在または不在例えば、多型性、特定のヌクレオチド配列の同定;特定の代謝物の存在、不在または量例えば、腫瘍活性、組織の保全、組織への浸潤、器官への浸潤、肝臓活性、腎臓活性を表す代謝物の同定が挙げられる。臨床医は予備検査の結果をバイオマーカーの存在、不在または量と組み合わせて用いることによって、以降の薬物用量を調整すべきかまたは維持すべきかを決定することができる。以下の表E、FおよびGに、黒色腫標本において非黒色腫標本における場合と比較して相対的に過少に提示されるかまたは過度に提示される、特定のmiRNAのレベルの倍率変化を示す。或る実施形態において、そのような倍率変化値は、以降の薬物用量を調整するかまたは維持するかの判定基準となる閾値として利用できる。黒色腫内の特定のmiRNAバイオマーカーの役割特定のmiRNAが黒色腫の特定の態様と相関していることが断定されてきた。miRNAによっては、例えば黒色腫細胞のアポトーシス、黒色腫細胞の増殖、黒色腫の転移、および黒色腫の薬物例えば、DTIC耐性と相関性を持ってきたものもある。表A、B、CおよびDは、そのような機能と関連する典型的なmiRNAを指定する。表はまた、各miRNAがi黒色腫細胞内で非黒色腫細胞内での場合と比較して相対的に過少に提示されているときに腫瘍サプレッサmiRNA-TSとして作用するか作用するか、またはii黒色腫細胞内で非黒色腫細胞内での場合と比較して相対的に過度に提示されているときにオンコジーンmiRNA-oncoとして作用するかを示す。そのようなmiRNAのヌクレオチド配列成熟配列およびmiRNAの前駆体ヌクレオチド配列pri-miR配列は、下掲の表1に示すとおりである。miRNA腫瘍サプレッサmiRNA-TS表A、B、およびCに示すように、一部のmiRNAは黒色腫細胞内で過少に提示されることから、黒色腫の腫瘍サプレッサとして機能する。表Dは、アポトーシスの減少、細胞増殖の増大、および/または転移の増加と相関しているmiRNAを対象として、黒色腫標本例えば、黒色腫を有する被験対象由来の非黒色腫細胞、血液標本中のmiRNAのレベルの低下倍率を、正常標本例えば、黒色腫を有さない被験対象由来の非黒色腫細胞、血液標本と比較して示したものである。一部の実施形態においては、処置済みの被験対象について定量された表D中のmiRNAバイオマーカーの量が、表に示す減少後の量より多い場合に、以降の用量を維持するかまたは減ずるかの指示が提供される。例えば、以降の用量を維持するかまたは減ずることができるのは、miRNA-206のレベルが、非黒色腫標本内でのレベルを基準として1/33~1/51に減少したレベルを超える場合である。或る実施形態において、miRNAバイオマーカーのレベルが、表Dに示す低下倍率レベルの或るパーセンテージを超える場合に、以降の用量を維持するかまたは減ずるかの指示が提供される。一部の実施形態において、或るパーセンテージは約10、20、30、40、50、60、70または80。例えば、以降の用量を維持するかまたは減ずることができるのは、miRNA-206のレベルが、正常標本内でのレベルを基準として1/13.2に減少1/33×40に減少したレベルを超える場合である。一部の実施形態において、処置済みの被験対象について定量された表D中のmiRNAバイオマーカーの量が、表に示す減少後の量とほぼ同じかまたはそれ未満の場合に、以降の薬物用量を増やすように指示が提供される。例えば、以降の用量を増やすことができるのは、miRNA-206のレベルが、非黒色腫標本内でのレベルを基準として1/33~1/51に減少したレベルとほぼ同じかまたはそれ未満の場合である。或る実施形態において、miRNAバイオマーカーのレベルが、低下倍率レベルの或るパーセンテージ未満の場合に、以降の用量を増やすように指示が提供される。一部の実施形態において、或るパーセンテージは約60、70、80または90である。例えば、以降の用量を増やすことができるのは、miRNA-206のレベルが、正常標本内でのレベルを基準として1/26.4に減少1/33×80に減少したレベル未満の場合である。以降の薬物用量の維持、増加または低減に関する指示は、表Dに示す1種以上のmiRNAバイオマーカーの存在、不在または量の判定に基づいて提供できる。例えば、表Dに示す1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14または15のバイオマーカーを、任意の適切な組み合わせで利用して、以降の薬物用量の維持、増加または低減に関する指示を提供できる。一部の実施形態においては、以降の薬物用量の維持、増加または低減に関する指示を、1種以上の他のバイオマーカーと表Dに示す1種以上のバイオマーカーとを組み合わせて使用して決定できる。miRNAオンコジーンmiRNA-onco表A、B、およびCに示すように、一部のmiRNAは黒色腫細胞内で過度に提示されることから、黒色腫のオンコジーンとして機能する。表Eは、アポトーシスの減少、細胞増殖の増加、および/または転移の増加と相関しているmiRNAを対象として、黒色腫標本例えば、黒色腫を有する被験対象由来の非黒色腫細胞、血液標本中のmiRNAのレベルの増加倍率を、正常標本例えば、黒色腫を有さない被験対象由来の非黒色腫細胞、血液標本と比較して示したものである。506-514メンバーおよびクラスタには、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタおよびmicroRNA-506-513クラスタが包含される。一部の実施形態においては、処置済みの被験対象について定量された表E中のmiRNAバイオマーカーの量が、表に示す増加後の量より少ない場合に、以降の用量を維持するかまたは減ずるかの指示が提供される。例えば、以降の用量を維持するかまたは減ずることができるのは、miRNA-146のレベルが、非黒色腫標本内でのレベルを基準として6.6倍~10.0倍に増加したレベル未満の場合である。或る実施形態において、miRNAバイオマーカーのレベルが、表Eに示す増加倍率レベルの或るパーセンテージ未満の場合に、以降の用量を維持するかまたは減ずるかの指示が提供される。一部の実施形態において、或るパーセンテージは約10、20、30、40、50、60、70または80である。例えば、以降の用量を維持するかまたは減ずることができるのは、miRNA-146のレベルが、正常標本内でのレベルを基準として2.6倍に増加6.6増加倍率×40したレベル未満の場合である。一部の実施形態において、処置済みの被験対象について定量された表E中のmiRNAバイオマーカーの量が、表に示す減少後の量とほぼ同じかまたはそれを超える場合に、以降の薬物用量を増やすように指示が提供される。例えば、miRNA-146のレベルが、非黒色腫標本のレベルを基準として6.6倍~10.0倍に増加したレベルとほぼ同じかまたはそれを超える場合に、以降の用量を増やしてよい。或る実施形態においては、miRNAバイオマーカーのレベルが低下倍率レベルの或るパーセンテージを超える場合に、以降の用量を増やすように指示が提供される。一部の実施形態において、或るパーセンテージは約60、70、80または90である。例えば、以降の用量を増やすことができるのは、miRNA-146のレベルが、正常標本内でのレベルを基準として5.3倍に増加6.6増加倍率×80したレベルを超える場合である。以降の薬物用量の維持、増加または低減に関する指示は、表Eに示す1種以上のmiRNAバイオマーカーの存在、不在または量の判定に基づいて提供できる。例えば、表Eに示す1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14または15のバイオマーカーを、任意の適切な組み合わせで利用して、以降の薬物用量の維持、増加または低減に関する指示を提供できる。一部の実施形態において、以降の薬物用量の維持、増加または低減に関する指示は、表Eに示す1種以上のバイオマーカーと1種以上の他バイオマーカーとを組み合わせて使用することにより提供できる。分子の調製分子によっては、本明細書に記載されている方法に使用する目的に調製できるものもある。一部の実施形態では、分子はアッセイにおいて対照もしくは標準として使用でき、または治療においては活性成分として使用できる。核酸の調製一部の実施形態において核酸は、例えば、アッセイまたは治療中に対照または標準として使用するために提供される。当該技術分野において公知の任意の技術例えば、化学合成、酵素生産または生物生産によって、核酸を製造し得る。酸は生物学的標本から回収するかまたは単離し得る。核酸は組み換え型であるか、または天然もしくは細胞に内在する細胞のゲノムから生成される。microRNAなどのような小核酸分子の回収率を増強するように、生物学的標本を処置し得ることが考えられる。方法は一般に、グアニジウムおよび清浄剤を含む溶液を用いて細胞を溶解させる工程を含み得る。核酸合成はまた、標準方法に従って実施できる。合成核酸例えば、合成オリゴヌクレオチドの非限定例としては、ホスホトリエステル、ホスファイトまたはホスホロアミダイト化学、および固相法を使用してinvitro化学合成により、またはデオキシヌクレオシドH-ホスホネート中間体を介して製造される核酸が挙げられる。オリゴヌクレオチド合成の多種多様な機構が、他の箇所に開示されてきた。核酸は、公知技術を使用して単離され得る。特定の実施形態においては、小核酸分子の単離方法および/またはRNA分子の単離方法を使用できる。クロマトグラフィは、タンパク質または他の核酸から核酸を分離または単離するために使用される工程である。そのような方法は、ゲルマトリックス、フィルターカラム、アルコール析出、および/または他のクロマトグラフィを用いた電気泳動法を含み得る。核酸、例えば細胞由来のmicroRNAを使用するか評価する場合、RNAの特定の母集団を単離する工程を実装する前に、一般に方法はカオトロピズム例えば、グアニジニウムイソチオシアン酸塩および/または洗浄剤例えば、N-ラウロイルサルコシンを用いて細胞を溶解する工程を含む。特に、例えばmicroRNAを他の核酸から分離するための方法においては、ゲルマトリックスを調製する場合にポリアクリルアミドを使用してもよいが、アガロースを使用することもできる。ゲルは濃度でグレード分けしてもよいし、均一な濃度であってもよい。プレートまたはチューブを使用して、電気泳動法用のゲルマトリックスを保持できる。核酸の分離には通常、一次元電気泳動法を使用する。スラブゲルを調製する場合はプレートを使用するが、チューブゲルを調製する場合はチューブ典型的には、ガラスまたはゴムを使用し得る。チューブ電気泳動法という語句は、プレートの代わりにチューブまたはチューブを使用してゲルを生ずることを指す。当業者であればチューブ電気泳動法を実施するための材料を容易に調製することもできるし、または例えばC.B.S.ScientificCo.,Inc.もしくはScie-Plasから購入することもできる。方法は、有機溶剤および/またはアルコールを使用して、核酸、特に、本明細書に記載されている方法および組成物に使用されるmicroRNAを単離する。一般に、アルコール溶液を細胞溶解液に添加する工程と、固体支持体からRNA分子を溶離する前にアルコール/ライセート混合物を固体支持体に適用する工程と、を含む方法を使用して、小RNA分子を細胞から単離できる。一部の実施形態において、細胞溶解液に添加されたアルコール分量は、アルコール濃度が約55~60に達する。使用できるアルコール類には様々な種類があるが、エタノールは効能が高い。固体支持体は、ビーズ、フィルター、およびカラムを含めた、いかなる構造であってもよく、鉱物または陰性基を有する高分子支持台を含み得る。グラスファイバーフィルターまたはカラムは、そのような単離処置に有効である。核酸単離プロセスは時には、aグアニジニウムを含有するライセートを用いて標本内の細胞を溶解する工程であって、濃度が少なくとも約1Mのグアニジニウムを含有するライセートを生成される工程と、bフェノールを含有する抽出溶液を用いてライセートから核酸分子を抽出する工程と、cライセート/アルコール混合物を生ずるためアルコール溶液をライセートに添加する工程であって、アルコール溶液の濃度が約35~約70の間である工程と、d固体支持体にライセート/アルコール混合物を塗布する工程と、eイオン溶液含有の固体支持体から核酸分子を溶離する工程と、f核酸分子を捕捉する工程と、を含み得る。標本を拭いて乾燥させて、以降の操作に適した液体および体積中に再懸濁し得る。抗体および小分子一部の実施形態において、抗体または低分子は、例えば、アッセイまたは治療中に対照または標準として使用するため提供される。一部の実施形態において、抗体または他の小分子は、黒色腫細胞に結合されるように構成される。抗体または低分子は、時には、過剰発現したタンパク質をコードするmRNA構造に結合され得る。本明細書に用いられている小分子という用語は、約1000、800またはそれ未満のダルトン数の有機分子を意味する。或る実施形態において、小分子は細胞膜全体に拡散して細胞間の作用部位に到達し得る。一部の実施形態において、小分子は高親和力を介してタンパク質、核酸または多糖類などの生体高分子に結合し、時には生体高分子の活性または機能を変化させ得る。様々な実施形態において、小分子は天然二次代謝物などまたは人工抗ウイルス性薬物などである場合があり、疾患に対して有益な作用を有し得る薬物などか、または有害なもの催奇形物質および発癌物質などであり得る。小分子の非限定例としては、リボースまたはデオキシリボヌクレオチド、アミノ酸、単糖類、およびジヌクレオチドなどの小オリゴマー、酸化防止剤グルタチオンなどのペプチド、および蔗糖などの二糖類を包含し得る。本明細書に用いられている抗体という用語は、脊椎動物の血液または他の体液中に見つかるγグロブリンタンパク質を意味するものとして理解すべきであり、この抗体は、免疫系が細菌およびウイルスなどの異物を同定し中和する際に用いる。抗体は典型的に、2つの大きい重鎖と2つの小さい軽鎖からなる基本構造単位を含む。抗体に特異的に結合するには、特定のタンパク質に対する親和性を確保するため選択される抗体が必要である。例えば、特定のタンパク質を産生するポリクローナル抗体、多型変異体、対立遺伝子、オルソログ、および保存的に修飾された変異体、またはスプライスバリアントもしくはこれらの一部を選択することによって、黒色腫マーカータンパク質または過剰発現したタンパク質と特異的に免疫反応するが他のタンパク質とは免疫反応しないポリクローナル抗体のみを得ることができる。この選択は、他の分子と交差反応する抗体を除外することによって行うことができる。薬物は、抗体またはこれらのフラグメントであり得る。抗体は時にはIgG、IgM、IgA、IgE、またはそのアイソタイプ例えば、IgG1、IgG2a、IgG2bまたはIgG3であり、時にはポリクローナルまたはモノクローナル、時にはそのような抗体のキメラ、ヒト化または二重特異性バージョンである。特定の抗原を結合するポリクローナルおよびモノクローナル抗体は市販のものが出回っており、そのような抗体を生成するための方法は公知である。一般に、ポリクローナル抗体は、単離された抗原を好適な動物例えば、ヤギまたはウサギに注射する工程と、抗原に特異的な抗体を含む動物から血液および/または他の組織を収集する工程と、抗体を精製する工程と、を介して生成される。本明細書において用語モノクローナルとは、B細胞などの抗体生成細胞の単一クローンから産生される抗体またはその対応するフラグメントを指定し、抗原境界上の単一エピトープを認識するものとして理解される。モノクローナル抗体を生成するための方法は、一般に、単離された抗原を動物例えば、多くの場合、マウスまたはラットに注射する工程と、動物から脾細胞を単離する工程と、脾細胞を骨髄腫細胞と融合してハイブリドーマを生ずる工程と、ハイブリドーマを単離する工程と、抗原を特異的に結合するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマを選択する工程と、を含む。モノクローナル抗体の例は、抗MDM2、抗p53抗体pAB421、DO1、およびホスホリル-ser15を結合する抗体、抗dsDNA抗体、ならびに抗BrdU抗体については、以下に説明する。キメラおよびヒト化抗体を発生させるための方法もまた公知であり、時には、或る種例えば、マウスの抗体可変領域を別の種例えば、ヒトの抗体定常ドメインに移植する工程を含む。抗体の抗原結合領域例えば、Fab領域は軽鎖と重鎖とを含み、可変領域は軽鎖からの領域と重鎖とから構成される。抗体の可変領域が、重鎖および軽鎖可変領域内の6つの相補性決定領域CDRから生じるという前提では、1つの抗体からの1つ以上のCDRを別の抗体のCDRで置換即ち、グラフト共重合して、キメラ抗体を生成し得る。また、アミノ酸置換を導入してヒト化抗体を生成する。これにより、結果として生成された抗体がヒトに投与されたときに、その抗体の免疫原性が低減する。薬物は、時にはFab、Fab’、Fab’2、Dab、Fvまたは一本鎖FvScFvフラグメントなどの抗体フラグメントであり、抗体を生成するための方法は公知である。一部の実施形態において1種以上のハイブリッド内の結合相手は一本鎖抗体フラグメントであり、時には、組み換え分子生物学プロセスによってポリペプチドリンカーを介して重鎖可変領域を軽鎖可変領域と結合して例えば、各鎖のC末端またはN末端にリンカーを付着して構成する。そのようなフラグメントは、多くの場合、元のモノクローナル抗体に類似する抗原に対して特異性および親和性を呈する。二官能性抗体は、時には2とおりの結合特異性を単一の抗体鎖にエンジニアリングして構成されることもあれば、時には2つの異なるFab’領域を結合して構成されることもあり、ここで各Fab’の領域は別々の抗体に由来するものである。抗体フラグメントは、CDR移植CDR-graftedまたはヒト化フラグメントなどのエンジニアリングされた領域を含んでもよい。或る実施形態において薬物は無傷な免疫グロブリンであり、一部の実施形態において薬物はFabモノマーまたはFabダイマーであり得る。様々な実施形態において、抗体またはそのフラグメントは特異的にエピトープ一部の実施形態において黒色腫マーカー、またはこれまでに発現したタンパク質の不連続性抗原決定基を含むに結合する。一部の実施形態においては、そのようなタンパク質が高度に特異的に認識されるように、言い換えると、標的分子と他の分子との混合物から抗体を構成し得る。つまり、例えば、これらの実施形態によるモノクローナル抗体またはそのフラグメントは、被験対象に投与されたときに、所望の標的のみに対して特異的に結合して中和する一方、他の望ましくない標的は結合も中和もされないことが予期され得る。或る実施形態において、抗体医薬は極めて高い親和力を有するため、黒色腫マーカータンパク質、または過剰発現したタンパク質に結合し得る。つまり、いったん一方のモノクローナル抗体またはそのフラグメントと他方の標的分子の複合体が形成されると、容易に分離しないかまたは少なくとも素速く分離しない。医薬製剤本明細書に記載されている分子は、薬学的に許容可能な処方で調製できる。薬学的に許容可能なという語句は、ヒトに投与されたときにアレルギー反応または他の副作用を起こさない分子実体および組成物を指す。本明細書に記載されているような活性な薬剤の溶液は、遊離塩基または薬理学的に許容可能な塩類として調製し得る。一部の実施形態において、そのような薬剤はまた、水中で、好適にはヒドロキシプロピルセルロースなどの界面活性剤と混合して、調製し得る。分散液はまた、グリセリン、液体ポリエチレングリコール類、それらの混合物、および油中で調製し得る。通常の貯蔵および使用条件下では、これらの調製物に微生物の繁殖を防ぐための防腐剤を含有させてもよい。注射可能用途に適した薬剤形態としては、無菌注射剤溶液または分散液を即座に調製するための、滅菌水溶液または分散液または無菌粉が挙げられる。形態は多くの場合は無菌で、注射針通過容易性easysyringabilityが存在する程度にまで流動的である。製造および貯蔵条件下で安定しやすく細菌および真菌などの微生物による汚染作用を防ぐように保存できる。キャリアは、例えば、水、エタノール、ポリオール例えば、グリセリン、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール、ならびにこれらに類するもの、それらの好適な混合物、および/または植物油を含む溶媒または分散媒であってよい。例えば、レシチンなどのコーティングを使用し、必要な粒子の大きさを維持し分散液の場合、且つ界面活性剤を使用して、適切な流動度を維持し得る。様々な抗細菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサール、およびこれらに類するものによって微生物の作用の予防を遂行できる。多くの場合、等張剤、例えば糖または塩化ナトリウムを含めてもよい。注射可能組成物の持続性吸収は、その組成物内に吸収遅延剤例えば、アルミニウムモノステアレートおよびゼラチンを用いて増強できる。処方によっては、水性製剤が使用される場合もあれば、製剤が脂質を主成分とする場合もある。特定の実施形態において、活性薬剤医薬品またはそれをコードする核酸を含む組成物は、水性製剤である。他の実施形態において、製剤は脂性である。水溶液の形で非経口投与する場合、例えば、しばしば必要に応じて溶液を好適に緩衝し、最初に十分な食塩水またはブドウ糖を用いて液体希釈液を等張性にする。これらの特定の水溶液は、静脈内、筋内、皮下、病巣内、および腹腔内投与に好適である。本開示を鑑みると、この点に関して使用できる滅菌水性培地は当業者に公知である。例えば、1回の投与量は1mlの等張性NaCl溶液に溶解され、1000mlの皮下注射流体に添加されるか、または提案された点滴部位に注射され得る。処置される被験対象の条件に応じて必然的に、投与量におけるバリエーションが多少は生じ得る。投与担当者は、いかなる場合も、個々の被験対象に適切な用量を判定し得る。そのうえ、ヒトへの投与の場合、米国食品医薬品局FDAOfficeofBiologics規格によって義務づけられているように、調製は滅菌、発熱原性、一般的な安全、および純度に関する規格を満たさなければならない。本明細書に用いられているキャリアとしては、任意およびあらゆる溶媒、分散媒、ビヒクル、コーティング、希釈液、抗菌および抗真菌剤、等張および吸収遅延剤、緩衝液、キャリア溶液、懸濁液、コロイド、ならびにこれらに類するものが挙げられる。そのような培地、および医薬活性物質用の薬剤の使用は、当該技術分野において周知である。従来の培地または薬剤が活性成分と適合しないことを除き、その医薬活性物質を治療組成物に使用することが考えられる。また、補助活性成分を組成物に配合してもよい。薬物投与本明細書に記載されている条件で、バイオマーカーを有するか、または処置を必要とする該当の任意の被験対象に薬物を投与し得る。被験対象の非限定例としては、哺乳動物、ヒト、類人猿、サル、有蹄動物例えば、ウマ、ウシ、ヤギ、ヒツジ、ブタ、バッファロー、ラクダおよびこれらに類するもの、イヌ、ネコ、齧歯動物例えば、ネズミ、マウス、ラット、ならびにこれらに類するものが挙げられる。被験対象は、男性または女性のどちらであってもよく、例えば、青少年、小児、若者、成年者などを含めた特定の年齢層の被験対象が、薬物投与の対象となり得る。黒色腫の処置にあたっては、任意の好適な薬物を投与し得る。或る実施形態において、薬物は抗増殖効果を発揮する。一部の実施形態において、薬物は免疫抑制効果を発揮し得る。或る実施形態において、薬物は活性成分抗体として、抗体フラグメント、一本鎖抗体、小分子、核酸、核酸誘導体、microRNA限定はされないが、microRNA-1、microRNA-10a、microRNA-21、microRNA27a、microRNA-31、microRNA-126、microRNA146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-193b、microRNA-203、microRNA-211、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、および関連する亜型、または前述のものの組み合わせを含む、microRNA阻害剤、siNA、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質抗体、抗体フラグメント、一本鎖抗体、小分子、ならびにこれらに類するものを含む。送達可能なmicroRNAまたはsiRNAとしては、後処理済みmicroRNAまたはsiRNA、前処理済みmicroRNA例えば、pri-miRNAもしくはsiRNA、または前処理済みまたは後処理済みmicroRNAもしくはsiRNAをコードするベクターを含めた、様々な形態のものが挙げられる。或る実施形態において、薬物活性成分は時には、本明細書に記載されているバイオマーカーと相互作用することもあれば、時にはバイオマーカーに特異的に結合する能力を有することもあり、或る実施形態において、時にはバイオマーカーの発現、持続性またはレベルを調節することもあれば、時にはバイオマーカーの構造を修飾する能力を有することもある。本明細書中に提示されている方法は、限定はされないが、有効量のmicroRNA、またはそれをコードする発現構築物の送達を含む。医薬組成物における有効量とは、一般に、記述されている所望の結果例えば、疾患またはその症候の程度の改善、低減、最小化または制限を検出可能的に且つ反復して達成するのに十分な量として定義される。疾患の除去、根絶、または治癒を含めた、他の厳密性の高い定義を適用することもできる。一部の実施形態においては、バイオマーカーをモニターして処置の有効度を評価し毒性を抑制する工程も存在し得る。治療的に有効であり得る量の薬物が、投与製剤に適合するような方法で投与される。核酸および関連する任意の成分が、注射に必要な特定の尺度のニードルを貫通し得る限り、シリンジ、または溶液の注射に使用される他の任意の方法で核酸の注射を行うことができる。所定量の溶液を正確に任意の深度で複数回にわたって注射できる遺伝子治療用のシリンジシステムは、当該技術分野において公知である。投与される量は、処置される被験対象例えば、疾患の侵襲性、患部の大きさ、および以前または他の治療クールを含むに応じて決定される。投与に要する正確な活性成分量は、専門家の判断によって決まる。初期投与および以降の投与に適したレジメンもまた多様であるが、後に他の投与が続く初期投与を代表するものとなっている。そのうえ、投与は、逐次継続放出機序または持続的放出機序を介したものであってよく、製剤および/または投与様式に従って履行される。投与経路は、部位と標的化部位の性質とに応じて様々に異なる場合があり、例えば、腫瘍内、筋内、皮内、皮下、局所、非経口、静脈内、鼻内、全身的および経口投与ならびに製剤を含む。注射は、直接注射、腫瘍内注射、または罹患した黒色腫細胞または腫瘍領域の脈管構造に対する注射であり得る。局所投与、限局投与、または全身投与もまた、適切であり得る。薬物は、標的化部位に複数回注射して投与してもよい。同様に、治療レジメンも多種多様であり得、黒色腫の種類、部位、免疫条件、標的部位、疾患の経過、患者の健康状態および年齢によって決まる場合も多い。黒色腫の種類によっては、より積極的な処置を必要とする場合がある。臨床医がそのような決定を下すための最適な基準には、治療製剤の公知の効力および毒性存在する場合が包含され得る。処置にはそれぞれの単位用量を含めてもよい。単位用量は、所定量の薬物を含むものとして定義される。投与される量、ならびに特定の経路および製剤は、臨床技術に習熟した人々の技術の範囲内に含まれる。単位用量は、単回注射として投与する必要はないが、一連の期間を通じた連続点滴を含めてもよい。本明細書に提示されているウイルス成分に関しては、便宜上、核酸または核酸模倣物のmgに換算した単位用量を記載してもよい。代替方法として、指定された量は、日次平均、週次平均、または月次平均の用量として投与される量であり得る。一部の実施形態は、薬物用量の漸増、即ち、i比較的低用量の薬物を被験対象に投与する工程と、iiバイオマーカーの存在、不在または量を評価する工程と、評価によって薬物に有意な効能がないことが示唆された場合iii以降被験対象に投与する薬物の用量を増やす工程と、を含み、治療効果が観察されるまでiiおよびiiiを繰り返す例えば、バイオマーカーの評価に基づいて治療効果を観察し得る。臨床医はそのような手法を使用して、被験対象に対する有効量の薬物に関してダイヤルインし、薬物量の漸増に付随する毒性の副作用を最小限に抑えることができる。一部の実施形態において、臨床医は投与された薬物の量が被験対象に有意な毒性副作用をもたらす可能性の高いことに関する情報を得て、以降の用量を増やしたときに有意な毒性副作用があることが予期される場合に、薬物の投与を中止できる例えば、臨床医は、指定された毒性閾値量にてまたは毒性閾値量に近づいたときに、薬物の投与を中止できる。投与は、invivo、exvivo、またはinvitroであり得る。一部の実施形態においては、薬物を薬学的に許容可能な塩として調製してもよい。或る実施形態において、薬物は薬学的に許容可能な製剤として調製してもよく、例えば、1種以上のリポソームまたは他のポリマトリックス、透過増強剤、界面活性剤、脂肪酸、胆汁酸塩、キャリア、賦形剤、補助薬、およびこれらに類するものを含む。invivoで投与する場合、限定はされないが、鼻、局所、経口、肺、非経口、髄腔内およびイントラニュートリカルintranutrical投与を含めた何らかの便宜的な投与経路に適合するように、薬物を処方できる。一部の実施形態においては、全身投与の場合、薬物を単位剤形の形態で調製してもよく、例えば、硬質または軟質のシェル型ゼラチンカプセルに配合してもよいし、錠剤に圧縮してもよいし、または被験対象の食餌の食物に直接配合してもよい。或る実施形態においては、経口治療投与の場合、摂取可能な錠剤、バッカル錠、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ、ウェーハ、およびこれらに類するものの形態で用いられる1種以上の賦形剤に、薬物を配合してもよい。そのような調製物は、時には活性剤を少なくとも0.001~0.1重量含有することもあれば、時には指定の単位剤形を約0.1~約60重量含有することもある。invitroで投与する場合、任意の便宜的な方法で薬物を細胞に送達してもよい。薬物は、例えば本明細書に記載されているように、処方してもよい。一部の実施形態においては、医薬製剤例えば、核酸剤に対して、カルシウムホスフェート共沈法またはカルシウムクロライド共沈法、トランスダクション/インフェクション、DEAE-デキストラン媒介トランスフェクション、リポ移入、電気穿孔法、およびイオン泳動法を施してもよい。一部の実施形態において、invitroでの投与は、薬物のスクリーニングまたは選択に関連するための方法に適用することが可能である。或る実施形態において、そのような方法は、i黒色腫細胞をinvitroで薬物に接触させる工程と、ii黒色腫に関連するバイオマーカーの存在、不在または量を判定する工程と、iii更にスクリーニングする薬物、または黒色腫を有する被験対象に投与する薬物を選択する工程と、を含む。一部の実施形態においては、過度に提示されたバイオマーカーの量が減少したか不在の場合、更なるスクリーニングまたは投与の対象となる薬物を選択する。或る実施形態においては、過少に提示されたバイオマーカーが増加したかまたは存在する場合、更なるスクリーニングの対象となる薬物を選択する。或る実施形態において、黒色腫細胞は、一次組織培養から採取してもよく、ここで、罹患した組織は身体の任意の好適な源例えば、皮膚、血液、器官、骨、筋肉、およびこれらに類するものに由来するものである。癌処置本明細書中の方法および組成物は、様々な癌もしくは他の異常増殖性疾患の処置または予防に有効であり得る。本明細書に記載されている方法および組成物で処置、予防、または管理できる癌および関連する疾患としては、限定はされないが、上皮細胞由来の癌が挙げられる。本明細書に用いられている用語処置するtreatおよび処置する工程treatingとは、i病理学的状態が起こるのを阻止例えば、予防する工程、ii病理学的状態を阻害するかまたはその進行を抑制する工程、iii病理学的状態を軽減する工程、および/またはiv疾患もしくは病態の症候を改善、緩和、軽減、および除去する工程を指す。本明細書に記載されている分子または化合物の候補は、製剤または薬剤において治療上有効量であってもよい。例えば、生体影響例えば、炎症の抑制につながり得るか、疾患または病態の症候の改善、緩和、軽減、免荷、減弱または除去につながり得る量である。この用語はまた、細胞増殖率の低減または中断例えば、腫瘍成長の緩慢化もしくは停止、または増殖性癌細胞の数の減少例えば、腫瘍の一部もしくは全体の除去に関連し得る。本明細書に記載されている分子は、それを必要とする被験対象に投与することによって、黒色腫を処置できる可能性がある。そのような処置において、用語処置する工程treating、処置treatment、および治療効果therapeuticeffectは、細胞増殖率の低減または細胞増殖停止例えば、腫瘍成長の緩慢化もしくは停止、増殖性癌細胞数の低減例えば、腫瘍の一部もしくは全体の焼灼、および黒色腫病態の完全または部分的な緩和に関連し得る。薬物は、予防的薬剤または治療剤であってよく、本明細書に記載されている黒色腫を有する適切な任意の被験対象に投与し得る。被験対象の非限定例としては、哺乳動物、ヒト、類人猿、サル、有蹄動物例えば、ウマ、ウシ、ヤギ、ヒツジ、ブタ、バッファロー、ラクダおよびこれらに類するもの、イヌ、ネコ、齧歯動物例えば、ネズミ、マウス、ラット、ならびにこれらに類するものが挙げられる。被験対象は、男性または女性のどちらであってもよく、例えば、青少年、小児、若者、成年者などを含めた特定の年齢層の被験対象が、薬物投与の対象となり得る。薬物の非限定例としては、タンパク様分子例えば、ペプチド、ポリペチド、タンパク質、翻訳後修飾型タンパク質、抗体、およびこれらに類するもの;小分子例えば、1000未満のダルトン;無機化合物もしくは有機化合物;または核酸分子例えば、二本鎖もしくは一本鎖DNA、二本鎖もしくは一本鎖RNA、三重螺旋核酸分子が挙げられる。一部の実施形態において、薬物は本明細書に記載されているmicroRNA分子のヌクレオチド配列を有する核酸を含む。薬物は任意の公知の生物限定はされないが、動物、植物、細菌、真菌、および原生生物もしくはウイルスを含むから誘導してもよく、または合成分子であってもよい。一部の実施形態において、薬物は化学療法に用いられる癌治療剤である。一部の実施形態においては、癌治療剤の非限定例として、アルキル化剤、タンパク質キナーゼ変調剤、腫瘍サプレッサタンパク質変調剤、および/または血管新生阻害剤が挙げられる。アルキル化剤の実施例は、ジメチル-トリアゼンイミダゾールカルボキサミドDTICである。多官能性アルキル化薬としては、DTICのほかに、プロカルバジンマチュレーヌ、メチルヒドラジン誘導体、アルトレタミンヘキサレンおよびシスプラチンプラチノールが挙げられる。アルキル化剤は一般にアルキル基の転送に有効であり、相互作用のほとんどはDNAのアルキル化である。一次DNAアルキル化部位はグアニンのN7位であり得るが、他の部位も存在し得る。この相互作用は、二官能II型反応中心の特性によって生じる架橋を有する一本または二本DNA鎖を含み得る。アルキル化薬はまた、他の細胞構成要素のカルボキシル基、スルフヒドリル基、アミノ基、ヒドロキシル基、およびホスフェート基と反応することもできる。そのような薬物は、反応中間体としてエチレンイモニウムイオンを生じ得る。リンパ節浸潤遠隔転移などの進行した疾患がある患者はそれぞれ、50および10の5年の生存率を有する。この予後不良はしばしば、制癌剤療法例えば、DTICの投与への抵抗によって起こる。併用療法療法は時には2種以上の治療剤の投与を含む。一部の実施形態において、1つ以上のmicroRNAを投与することによる療法は、1種以上の療法限定はされないが、化学療法、放射線療法、ホルモン療法、および/または生物学的療法例えば、免疫療法での投与と併用される。特定の実施形態において、本明細書中の方法には、本明細書に記載されているmicroRNAの投与と、1種以上の予防/治療剤例えば、癌治療剤の投与との組み合わせが包含される。黒色腫の処置に適した薬物は時には、1種以上の他の薬物または不活性成分と組み合わせて投与される。一部の実施形態において、或る療法において1種以上の他の薬物で黒色腫を処置できることもあれば、時には1種以上の他の薬物では黒色腫を特異的に処置できないこともあり得る。例えば、黒色腫を処置する1種以上の活性薬剤の副作用は、不活性成分例えば、抗利尿薬、悪心抑制薬、下痢抑制薬、抑制薬、刺激薬、およびこれらに類するものによって処置できる。或る薬物を追加することによって、主要な薬物の治療効果も増強され得る。或る実施形態においては、microRNA、その補体もしくはmicroRNA阻害剤分子、または前述のものをコードする発現構造物が、治療組成物に包含され得る。そのような組成物を補助的な療法と組み合わせて用いることによって、採用した療法の効果を増強できる。これらの組成物は、黒色腫の除去または改善などの所望の効果を得るうえで有効な総計量combinedamountで提供され得る。このプロセスは、microRNA即ち、これらの補体もしくは阻害剤、または前述のものをコードする発現ベクターの投与、または追加療法を同時にもしくは異なる時点で含み得る。そのような治療手法は、1種以上の組成物または薬理学的製剤1種以上の薬剤を含むものを投与するか2種以上の別個の組成物もしくは製剤を投与することによって実施でき、ここで、1microRNA、その補体もしくは阻害剤、または前述のものをコードする発現構築物;および/または2もう1つの別の療法が、1つの組成物によって提供される。或る実施形態において、例えば非限定例における免疫抑制薬などの追加療法は、本明細書に記載されている薬物療法と併用される。免疫抑制薬は典型的に、免疫系の活性を抑制または阻止する。概して、そのような薬物は数ある中でも糖質コルチコイド、細胞増殖抑止剤、抗体、イムノフィリンに作用する薬物として分類され得る。一部の実施形態において、追加療法は抗炎症薬である。概して、そのような薬物は数ある中でもステロイド、非ステロイド抗炎症薬NSAID、シクロオキシゲナーゼCOX阻害剤、COX-2阻害剤、COX-1阻害剤、非選択的COX阻害剤およびその他のものとして分類され得る。追加療法は時には、抗生物質であり得る。概して、そのような薬物は数ある中でもアミノグリコシド、アンサマイシン、カルバセフェム、カルバペネム、セファロスポリン、グリコペプチド、マクロライド、モノバクタム、ペニシリン、ポリペチド、キノロン、スルホンアミド、およびテトラサイクリンとして分類され得る。一部の実施形態において、追加療法は抗ウイルス薬である。概して、そのような薬物は数ある中でも非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤、ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、およびヌクレオチド類似体逆転写酵素阻害剤として分類され得る。或る実施形態において、追加療法はステロイド薬である。概して、そのような薬物は数ある中でもコルチコステロイドおよびタンパク同化ステロイドとして分類され得る。一部の実施形態において、追加療法は化学療法薬である。概して、そのような薬物は、数ある中でもとりわけアルキル化剤、代謝拮抗物質、制癌抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、分裂抑制剤、およびコルチコステロイドとして分類され得る。追加療法は時には、ホルモン療法薬であり得る。概して、そのような薬物は数ある中でも抗卵胞ホルモン、アロマターゼ阻害剤、プロゲスチン、エストロゲン、抗男性ホルモン、およびLHRHアゴニストとして分類され得る。以下に記載する実施例は、或る実施形態を例示するものであって、本技術を限定するものではない。実施例1:方法黒色腫病変において差次的に発現されるmicroRNAの機能を、正常ドナー皮膚と比較して検査し、悪性黒色腫の腫瘍形成に推定的に関与しているmicroRNAを同定した。患者および対照36例の悪性黒色腫皮膚生検および16例の正常皮膚生検をILSBioChestertown、MDから採取した。黒色腫標本は、第IIB~IV期にある女性および男性両方26~81歳の白人患者由来のものであった。36例中30例の黒色腫患者における身体の様々な領域への転移をドキュメント化した。正常皮膚標本は、健常ドナーから採取された。AmericanTypeCultureCollectionATCC,Manassas,VA;ATCC.orgからA375CRL-1619、MALME-3HTB-102、MALME-3MHTB-64、RPMI7951HTB-66、SK-MEL-2HTB-68、およびSK-MEL-5HTB-70黒色腫細胞系を購入して、10ウシ胎児血清FBS;Invitrogen,CatNo:16000-044を含有するDMEMInvitrogen.Carlsbad,CA,Cat.No:12430-104で培養した。LOX、M14、M19、M21、UACC.62、およびUACC.257黒色腫細胞系を内部的に成長させ例えば、MedImmune細胞系収集物、10FBSを含有するDMEMで培養した。ATCCから購入された正常ヒトの新生初代表皮性メラノサイトPCS-200-012を、MelanocyteGrowthKitATCCPCS-200-041を補給したDermalCellBasilMediaATCCPCS-200-030で培養した。LonzaAllendale、NJ;Lonza.comから購入されたメラノサイト系、NHEM-Ad-AdultNormalHumanEpidermalMelanocytesNHEM-ad-adultを、MelanocyteGrowthKitを補給したDermalCellBasilMediaで培養した。全ての細胞系を、サプライヤのプロトコールに従い、および提案された培地で培養した。506-514クラスタ内のmiRNAに関連するアッセイでは、細胞培養が次のように行われた。黒色腫細胞系のパネルのmiRNA発現パターンを評価し、黒色腫患者の標本と最も緊密にクラスタ化されたもの5つをinvitro機能アッセイ用に選択した。このパネルに含まれるのはA375、SK-MEL-2、SK-MEL-5、MALME-3M、およびRPMI-7951であった。全ての細胞系はAmericanTypeCultureCollectionATCC,Manassas,VAから購入されたもので、37°Cにて5のCO2を含む加湿雰囲気中、推奨される培地で培養された。初代表皮性メラノサイトはまたATCCから購入され、推奨される培地および生育条件を使用して維持された。総RNA抽出およびリアルタイム定量的RT-PCRプロセシング皮膚生検および培養細胞からの総RNA例えば、mRNA、miRNA、snoRNAなどを含む大小両方のRNAを、メーカーの総RNA用プロトコールに従い、mirVanamiRNAIsolationkitで精製したAppliedBiosystems/Ambion,Austin,TX。Agilent2100BioanalyzerでRNA6000NanoLabChipsを使用して、RNA品質を評価した。AffymetrixGeneChipOne-CyclecDNASynthesiskitおよびAffymetrixGeneChipIVTLabelingkitAffymetrix,SantaClara,CAを使用して、2マイクログラムの総RNAから、ビオチン標識された増幅cRNAを生成した。ハイブリダイゼーション用に、AffymetrixHumanGenomeU133Plus2.0GeneChipアレイ上で、ビオチン標識された20マイクログラムの各cRNAを断片化した。全てのGeneChip洗浄、染色、およびスキャニング手順をAffymetrix規格機器で実行した。データキャプチャおよび初期アレイ品質評価は、GeneChipOperatingSoftwareGCOSツールで実行した。TaqManmicroRNAReverseTranscriptionkitABI4366597およびMultiplexRTforTaqManmicroRNAAssays,HumanPoolSetABI4384791を使用して、発現プロファイリング用にmicroRNAを調製した。標準プロトコールを使用して、TaqManLow-DensityHumanmicroRNAArrayv1.0ABI4384792でmicroRNAの発現を定量した。リアルタイム定量的RT-PCRmicroRNA-506-514クラスタ内のmiRNAに対してリアルタイム定量的RT-PCRを次のように行った。TaqManLow-DensityArrayTLDAmicroRNACardsv3.0AppliedBiosystems,FosterCity,CAを使用して、miR-506-514クラスタの個々のメンバーごとの相対的な倍率変化を定量した。AppliedBiosystemsTaqManmicroRNAReverseTranscriptionKitandMegaplexRTPrimersを使用して、皮膚生検からの500ngの総RNAと細胞培養物からの500ngの総RNAとを基に、一本鎖cDNAを合成した。メーカーのプロトコールに従い、TaqManPre-AmpMasterMixキットおよびMegaplexPre-Ampプライマーを使用して、特異的cDNA標的のプレアンプリフィケーションを実行した。microRNAカードを装填し、AppliedBiosystems7900HTReal-TimePCRシステム上で作動させた。その際に使用したサイクルパラメーターは次のとおりである。即ち、まず94.5°C/10分、その後に97°C/30秒および59.7°C/1分を40サイクル分を続ける。SDSv2.2.2ソフトウェアAppliedBiosystemsで、各リアルタイムPCR方法による結果として得られたCt値のデータ分析を実施した。全ての標本をいくつかのキャリブレータ遺伝子TaqManキャリブレータ:U6snRNA、RNU44、RNU45の平均Ct値に正規化し、その後、正常皮膚からプールされたデルタCt値または正常メラノサイトにおけるデルタCt値を使用して、組織内および細胞系内のmiRNAごとの相対的な倍率変化レベルを計算した。ウェルチの二標本t検定を使用して、両方法について相対的な発現率の統計分析を実施した結果、p<0.05は有意であると見なされた。内在性コントロールendogenouscontrol即ち、RNU44、RNU48およびRNU6Bの一貫性のない発現プロファイルを有する標本は、これ以降の分析の対象から除外した。t検定においてボンフェローニBonferroniでp値<0.05に調整して、有意に差次的に発現したmiRNAを同定した。絶対的な倍率変化≧2、およびp値<0.05であるmicroRNAプローブは、差次的に調節されたものと見なされた。絶対的な倍率変化≧2、およびp値<0.01は、500クラスタ内のmiRNAに対して差次的に調節されたものと見なされた500クラスタ内のmiRNAの分析に使用される更なる実験的方法については、下記を参照のこと。黒色腫内のmicroRNAのうち、正常ドナー標本内での場合と比べ2倍を超えて有意に過剰発現することが見出されたものは更なる研究の対象となる潜在的なオンコジーンmiROnco-miRと見なされた。一方、1/2未満に過小発現したmicroRNAは潜在的な腫瘍サプレッサmiRTS-miRと見なされた。差次的に発現したmicroRNAの機能分析その後、GeorgantasらPNAS104:4344が以前に記述した方法を用い、差次的に発現したmicroRNAを、癌表現型において予測された機能に関して分析した。差次的に発現したmicroRNAの中からPubMedの腫瘍学関連のキーワードと関連するものを同定するための方法を使用した。加えて、TargetScanhttp://www.targetscan.org/、miRBaseTargetshttp://www.mirbase.org/およびPicTarpictar.mdc-berlin.deから、関心のあるmicroRNAに対して予測されたmRNA標的を収集した。これらのmRNA標的をPubmed、OMIM、およびKEGGデータベースで照合して調べ、癌表現型と関連のあるmRNAを同定した。最後に、IngenuityPathwayAnalysisIngenuitySystems,Inc,RedwoodCity,CAおよびDAVIDBioinformaticsResourcehttp://david.abcc.ncifcrf.gov/summary.jsp経路分析ツールを使用してmRNA標的を分析し、mRNA標的と関連している故、差次的に発現したmicroRNAの影響を受ける可能性のあることが最も高度に予測された癌関連の分子ネットワーク/経路を同定した。これらの分析を用いて同定されたmicroRNAを癌に関連するものと見なし、過剰発現したmicroRNAまたは腫瘍サプレッサmicroRNATS-miRが過小発現した場合、推定オンコジーンmicroRNAOnco-miRとして更に調査した。トランスフェクション試薬および条件microRNAミミックおよび阻害剤。miRIDIANmicroRNAヘアピン阻害剤、ヘアピン阻害剤陰性対照、miRIDIANmicroRNAミミックおよびミミック陰性対照を、DharmaconThermo-FisherLafayette,Coloradoから購入した。microRNA阻害剤は、miRNAの発現を阻害するように設計された合成miRNA特異的分子であり、黒色腫細胞系をトランスフェクションする目的に使用された。microRNAミミックは、内在性成熟miRNAを模倣するように設計された二本鎖RNAオリゴヌクレオチドであり、初代表皮性メラノサイトをトランスフェクションする目的に用いられた。メーカーのガイドラインに従い、PrimeFectsiRNAトランスフェクション試薬Lonza,Walkersville,MDを用い、全てのミミックまたは阻害剤を細胞にトランスフェクションした。標識化miRNAミミックおよび阻害剤対照Dharmaconを利用して、全ての細胞系に対するトランスフェクション効率を定量した。トランスフェクション条件を以下のように至適化した。ALEXA547で標識された非標的対照miRidianmicroRNAミミック250nmまたはmiRidianヘアピン阻害剤対照10nmのトランスフェクションによって、最適なトランスフェクション条件をPrimeFectsiRNALonza,Walkersville,MDで定量した。6ウェルプレートにて、PrimeFect試薬に添付されている至適化プロトコールに従った。トランスフェクション後24時間目に、FACScaliberBDでフローサイトメトリーを用い、トランスフェクションレベルを測定した。FlowJoを用いてデータを分析し、トランスフェクションされた細胞の割合および平均蛍光強度を定量した。更なる研究に合わせて至適条件を選択し、必要に応じて384ウェルまたは96ウェルプレート用の培養物表面積を基準としてスケーリングした。黒色腫およびメラノサイト細胞系を、以下のようにトランスフェクションした。トランスフェクションの前日に、エンドポイントアッセイに適したディッシュに黒色腫細胞を播種した。約24時間後に、標準培養培地をOpti-MEM血清使用量低減培地Invitrogenで置き換えた。推定onco-miRを阻害するため、細胞を10nmの各適切なmiRNAヘアピン阻害剤または阻害剤陰性対照のどちらかでトランスフェクションした。推定TS-miRを置換するため、細胞を100nmの各適切なmiRNAミミックまたはミミック陰性対照のいずれかでトランスフェクションした。黒色腫およびメラノサイト細胞系においてmicroRNA-506-514クラスタ中にmiRNAを含めたアッセイでは、次の条件および阻害剤濃度を使用した。約24時間後に、標準培養基をOpti-MEM血清使用量低減培地Invitrogenで置き換えて、細胞を10nmの各適切なmiRNAヘアピン阻害剤または70nmの最終混合濃度調査対象となった数の阻害剤の間で均等に分割されたまたは70nmの阻害剤陰性対照のいずれかでトランスフェクションした。次のヘアピン阻害剤でトランスフェクションされた黒色腫細胞は、次のように呼ばれる。フルクラスタに対する阻害剤例えば、全部で7種の阻害剤としてはmiR-506、miR-507、miR-508、miR-509、miR-510、miR-513、miR-514が挙げられ;サブクラスタAに対する阻害剤例えば、全部で4種の阻害剤としてはmiR-506、miR-507、miR-508、およびmiR-513が挙げられ;サブクラスタBに対する阻害剤例えば、全部で3種の阻害剤としてはmiR-509、miR-510、およびmiR-514が挙げられる。初代メラノサイト細胞を次のようにトランスフェクションした。トランスフェクションの前日に、エンドポイントアッセイに適したディッシュにメラノサイトを播種した。約24時間後に、細胞を10nmの各適切なmiRNAミミック、または120nmのミミック陰性対照のいずれかでトランスフェクションした。miR-506-514クラスタの一部のメンバーは、複数のイソ型および/または複数の成熟miRNAを有する。クラスタの全てのコンポーネントの適切な過剰発現を保証するために、特定のmiRNAに対して同定された各イソ型をトランスフェクションに含めた。次のmiRNAミミックとトランスフェクションされるメラノサイトは、次のように呼ばれる。フルクラスタに対するミミック例えば、全部で12個のミミックとしてはmiR-506、miR-507、miR-508-3p、miR-508-5p、miR-509-3p、miR-509-5p、miR-510、miR-513-a-3p、miR-513-a-5p、miR-513-b、miR-513-c、およびmiR-514が挙げられ、サブクラスタAに対するミミック例えば、全部で8個のミミックとしてはmiR-506、miR-507、miR-508-3p、miR-508-5p、miR-513-a-3p、miR-513-a-5p、miR-513-b、およびmiR-513-cが挙げられ、サブクラスタBに対するミミック例えば、全部で4個のミミックとしてはmiR-509-3p、miR-509-5p、miR-510、およびmiR-514が挙げられる。細胞成長アッセイ成長の阻害を次のように評価した。黒色腫細胞系および初代メラノサイトを384ウェルプレートに播種し、フルクラスタ、サブクラスタA、サブクラスタB、または陰性対照に対する阻害剤で示されているようにトランスフェクションした。トランスフェクション後3日目および5日目に、メーカーのプロトコールに従い、CellTiter-GloLuminescentCellViabilityAssayCTG;Promega,Madison,WIを使用して、細胞の成長を測定した。EnVisionPlateReaderPerkinElmer,Waltham,MAで発光データを収集した。ウェルチの二標本t検定を使用して統計学的比較を実施した結果、p<0.05は有意であると見なされた。アポトーシスアッセイアポトーシスを次のようにアッセイした。黒色腫細胞系および初代メラノサイトを384ウェルプレートに播種し、過剰発現したmiRに対する阻害剤、または過小発現したmiRのmicroRNAミミックに関して示されているようにトランスフェクションした。トランスフェクション後2日目にメーカーのプロトコールに従い、Caspase-Glo3/7アッセイPromegaを使用してカスパーゼの活性化を測定した。EnVisionPlateReaderPerkinElmerで発光データを収集した。ウェルチの二標本t検定を使用して統計学的比較を実施した結果、p<0.05は有意であると見なされた。VybrantApoptosisAssayKit2を使用し、AlexaFluor488annexinV/propidiumiodidePI;Invitrogenで、アポトーシスを経た細胞の比率を測定した。概略説明すると、上記のように、黒色腫細胞系を6ウェルプレート内に500,000細胞/ウェルの割合で播種してトランスフェクションした。安定なトリプシン様酵素であるTrypLEExpressInvitrogenを使用してディッシュから細胞を除去し、冷温のPBSで洗浄し、遠心分離し、Annexin結合用緩衝液中に1×106細胞/mLの割合で再懸濁させた。メーカーのプロトコールに従い、AnnexinVおよびPIを使用して室温にて96ウェルの丸底プレートで細胞をインキュベートした。陽性対照として、トランスフェクションされていない細胞を250nMのスタウロスポリンSigmaで一夜処理した後、AnnexinV/PIで染色した。BDLSRIIフローサイトメーターBDBiosciences,SanJose,Californiaを使用して標本をフローサイトメトリーで分析し、FlowJo分析ソフトウェアAshland,ORを使用して結果を評価した。AnnexinV陽性/PI陰性細胞およびAnnexinV陽性/PI陽性細胞のパーセントを定量し、未処置および非標的miRNA対照と比較した。浸潤および遊走アッセイCultrex96-wellBMECellInvasion/CellMigrationBoydenchamberTrevigenInc.,Gaithersburg,MDを使用して細胞浸潤および遊走アッセイを実施した。過剰発現したmiRに対する阻害剤、または過小発現したmiRのmicroRNAミミックに関して示されているように、Malme-3M細胞をトランスフェクションした。トランスフェクション後48時間目に、Cultrexディッシュの上部チャンバで無血清培地中に約50,000細胞を播種した。細胞浸潤アッセイでは、チャンバを0.25xの基底膜抽出液でコーティングした。遊走アッセイでは、チャンバをコーティングされていない状態にした。下部チャンバを150μLのRPMI培地10のFBSで充填した。トランスフェクションされていないMalme-3M細胞を陽性対照として使用し、トランスフェクションされていない初代メラノサイトを陰性対照として使用した。24時間後に、メーカーのプロトコールに従い、浸潤または遊走した細胞を解離してCalcein-AMで染色した。SpectraMaxM5MolecularDevicesを使用して励起485nm/発光520nmにて蛍光測定し、浸潤/遊走細胞数を定量した。ウェルチの二標本t検定を使用して統計学的比較を実施した結果、p<0.05は有意であると見なされた。軟寒天培地コロニー形成記載されているように、メラノサイトを播種し、所望のクラスタまたはサブクラスタのmiRNAミミック120nMでトランスフェクションした。36時間後、細胞をトリプシン処理して約25,000細胞を0.3の寒天培地と結合した。0.3の寒天培地/細胞混合物を0.5の寒天培地の上層に播種し、前もって6ウェルプレートの各ウェルに添加してから、30分間凝固させた。3週間にわたって成長させた後、NikonTE200顕微鏡を使用してコロニーを撮影してから、4つに分注されたウェルquadruplicatewellにて1ウェルあたり3フィールドで計数するか、またはCytoSelect商標CellTransformationAssaykitCellBiolabs,SanDiego,CAを使用して定量した。概略説明すると、基質可溶化matrixsolubilization溶液を添加して寒天培地を可溶化した後、CyQuant登録商標GRDyeで細胞をインキュベートした。条件ごとに生存可能な細胞を、4つに分注されたウェルquadruplicatewellにて蛍光測定した。ウェルチの二標本t検定を使用して統計学的比較を実施した結果、p<0.05は有意であると見なされた。実施例2:患者の悪性黒色腫生検および正常ドナーの皮膚生検のmiRNA発現の比較患者の悪性黒色腫生検は、正常ドナーの皮膚生検に比べてmicroRNAの発現において顕著な差異を示した。合計52個の皮膚標本黒色腫患者由来のもの36個、および健常な患者由来のもの16個を最初に選択した。52標本中の6標本5つの黒色腫標本および1つの健常標本を含むを、内在性コントロールendogenouscontrolの異型発現レベルにより除外した。本明細書に記載されているt検定を使用し、98個のmiRNAを健常対照と比較して、黒色腫皮膚生検で差次的に発現するmiRNAであると同定した。差次的に発現したmiRNAの分布には、hsa-miR-203、hsa-miR-26aおよびmiR-200ファミリーを含めた下方制御されたmiRNA83個と、miR146aおよびmiR-155を含めた上方制御されたmiRNA15個と、が包含される。本明細書においてmiR-506-514クラスタと呼ばれている推定X染色体miRNAクラスタもまた同定された。98個の差次的に発現したmiRNAのヒートマップは、図1に示すとおりである。標本に例えば、X軸に沿って教師なし階層クラスタリングunsupervisedhierarchicalclusteringを施し、被験対象を大雑把に3つの群に分類した例えば、図1では1、2および3のように標識されている。黒色腫患者を例えば、図1においては第3群として標識されている正常対象で充填されたクラスタのほかに2つの群例えば、図1では第1群および第2群に更にクラスタ化し、それらのうちの一方は例えば、図1に示す第2群として標識したB-Raf変異を有する黒色腫患者が過半数を占めていた。他の次元例えば、Y軸での階層状クラスタ化によって、miRNAの共発現パターンが明らかになった。miRNAクラスタのうちの3つは、注意を引きやすいように縦線で示されている図1。図1においてmiR-200ファミリーの2つのクラスタは例えば、下側にグレーの棒で強調表示され、図1においてmiR-506-514クラスタは例えば、上側に黒の棒で強調表示されている。実施例3:miRNAのバイオインフォマティクスBioinformatics調査による、黒色腫生検および正常生検における差次的発現の同定miRNA/mRNAインフォマティクスinformaticsを使用して、黒色腫生検および正常生検において差次的に発現したmicroRNAのうち黒色腫腫瘍形成に推定的に関与したものを判定した。選択されたmiRNA例えば、黒色腫生検および正常生検で差次的に発現したことが見出されたmiRNA、ならびに図1および図12において注意を引きやすいように縦線で示されたmiRNAについては、図2に示すGeorgantasらPNAS104:4344のインフォマティクスinformaticsを使用して更に調査し、推定microRNAオンコジーンおよび腫瘍サプレッサ例えば、onco-miRおよびTS-miRのそれぞれを同定した。本発明者らは、3つの想定可能な基準を用い、或るmicroRNAを黒色腫内でcancer-miRになる可能性のあるものであると呼んだ。最初に本発明者らは、他の癌内のonco-miRまたはTS-miRとして高度に関連付けられていることがPubMedにて見出されたmiRを選択した。例としては、黒色腫オンコジーンになる可能性のあるものとしてmiR-21およびmiR-155が挙げられる。これら両方は黒色腫内で過剰発現し図3、しかも他の癌内のオンコジーンであることを立証する文献が多数の存在するためである。次に、本発明者らは、他の癌に関与していることが以前に示唆されたmiRと、公知のオンコジーンまたはTS遺伝子であるmRNA標的および予測されたmiRに焦点を当てた。その好例が、MiR-Let-7cである。理由は、MiR-Let-7cは、以前に腫瘍サプレッサmiRとして公開されており、しかも、CCNF、E2F2、E2F6、RASなどを癌に関連したmRNA標的の一部としてインフォマティクスinformaticsにより同定されていたためである。最後に、公知のオンコジーンmRNAおよび腫瘍サプレッサ遺伝子mRNAを制御するものであると予測されたかを唯一の基準として、いくつかのmiRを選択した。その例としてはmiR-27aおよびmiR-335が挙げられる。これらは両方とも、細胞の薬物耐性に関連するいくつかのmRNAを標的とするためである。これらのmRNAとしては、ストレス誘導アポトーシスに関与するCTCF、細胞解毒に関与する多くのタンパク質のマスター転写因子であるNFE2L2、およびアポトーシスの阻害剤であるPLK2が挙げられる。これらの基準を用い、過剰発現した5つの個別microRNAおよび1つの推定クラスタクラスタX染色体から14個のmiRpre-miR/10個の一意な成熟miRからなるmiRNA-506-514クラスタを、黒色腫オンコジーンになる可能性のあるものとして同定した。14個の個々のmicroRNAクラスタおよび2個のmicroRNAクラスタmiR-200c-141およびmir-200a-200b-429を、黒色腫腫瘍サプレッサになる可能性のあるものとして同定した。黒色腫細胞内で変化したmiRの非限定例は、図3に示すとおりである。選択されたmicroRNAが黒色腫の癌特性にどのような役目を果たしているかを、更に調査した。細胞成長、アポトーシス、遊走、および浸潤は、調査が最も容易で、しかも臨床上意義のある癌特質であり、図4に概略的に示すような機能上の試験が可能である。図4は、miRの有効度を定量する場合に使用されるハイスループットスクリーニングHTS法を示す。5つの過剰発現したmiRおよび過剰発現したmiR-506-514クラスタ、ならびに10個の過小発現したmiRを、上掲の癌特性例えば、黒色腫細胞の成長、アポトーシス、遊走、および浸潤の変化について試験した。実施例4:黒色腫細胞系の成長を阻害するmicroRNAの評価トランスフェクション後3日目および5日目に、推定onco-miRおよびTS-miRが5種類の黒色腫細胞系および正常メラノサイトの細胞成長に及ぼす影響を、発光アッセイで測定した図5および6。このアッセイにおいては、少なくとも3種類の黒色腫細胞系内での黒色腫細胞の成長を正常メラノサイトと比較して統計学的に有意に低下させたmicroRNA修飾のみを、陽性としてスコアした。miR-21、miR-146a、miR-155の阻害剤のトランスフェクションによって、miR-21およびmiR-155の4/5黒色腫細胞系ならびにmiR-146aの5/5黒色腫細胞系における細胞成長が有意に減少した図5A。5つの推定onco-miRを全て同時に阻害しても相乗効果のないことが、観測されたデータは不図示。miR-31またはmiR-211の阻害は、3つ以上の細胞系において有意な結果を示さなかった図6A。miRミミックのトランスフェクションによって推定TS-miRの作用を置換した結果、miR-126aまたはmiR-193bが5/5黒色腫細胞系内での黒色腫細胞の成長を有意に減少させた一方、miR-206が3/5細胞系内での黒色腫細胞の成長を有意に減少させなかったことが見出された図5B。onco-miRの場合と同様に、これら3つのmiRを全て置換して、相乗効果に関するアッセイを行ったが、個々のmiR単独の場合と比較して阻害度の増大が見られなかったデータは不図示。試験対象となった他の推定TS-miRは全て、正常メラノサイトにおける影響と比較して、細胞系の成長に有意な影響が見られなかったかまたは1つまたは2つの細胞系においてのみ影響が見られた図6B。実施例5:黒色腫細胞系内でアポトーシスを増大させるmicroRNAの評価トランスフェクション後2日目および3日目に、推定onco-miRおよびTS-miRがアポトーシスに及ぼした影響特に、5種類の黒色腫細胞系内および正常メラノサイト内でのカスパーゼ3および7の活性化を発光アッセイで測定した。miRの修飾が黒色腫に及ぼす最も広範且つ最も永続的な影響を同定するために、少なくとも4/5の黒色腫細胞系において、正常メラノサイトと比較してカスパーゼ活性化を統計学的に有意に増大させた修飾のみを陽性としてスコアした。miR-21またはmiR-146aのアンチセンス阻害剤のトランスフェクションによって、4/5黒色腫細胞系におけるカスパーゼ3/7の活性化が有意に増大した図7A。本発明者らはまた、推定onco-miRを5つとも全て同時に阻害して相乗効果を確かめた。細胞成長のアッセイ中に観察されたように、5つの推定onco-miR全てに阻害剤を組み合わせて使用した結果、カスパーゼ活性化は、miR-146a単独使用の場合とかなり類似するものとなったデータは不図示。miR-31、miR-155、またはmiR-211の阻害剤は、1~2つの細胞系においてのみ有意な影響を示し黒色腫アポトーシスへの作用に関して陰性としてスコアされた図8A。miR-126aまたはmiR-193bに関しては、miRミミックのトランスフェクションによって、5/5および4/5黒色腫細胞系内でそれぞれ黒色腫のアポトーシスが有意に増大した図7B。試験対象となった他の推定TS-miRは全て、細胞系のカスパーゼ活性化に有意な影響が見られなかったか、または1つまたは2つの細胞系においてのみ影響が見られた図8B。実施例6:細胞系およびmicroRNAの遊走および浸潤阻害研究に関する評価96ウェルのBoydenchamberプレートを使用して、BasementMembraneExtract基質を通して、膜および浸潤全体の遊走に対する推定onco-miRおよびTS-miRの影響を確認する。本発明者らはまず、黒色腫細胞系および正常メラノサイトの遊走および浸潤の能力を調べることから開始した図9。正常メラノサイトおよびSK-MEL-5細胞が呈した遊走または浸潤は、ごく僅かであった。SK-MEL-2細胞の遊走および浸潤はそれぞれ、正常メラノサイトのおよそ4倍および2.5倍であった。A375細胞およびRPMI細胞が呈した遊走および浸潤レベルは高く、正常メラノサイトの約6倍であった。MALME-3M細胞は、メラノサイトと比較してはるかに極めて活発な遊走約12倍および浸潤約7倍を呈した。A375細胞およびMALME-3M細胞を使用して、microRNAが遊走および浸潤に及ぼす影響を更に調べた。miR-21、miR-31、またはmiR-146aの阻害によって、遊走および浸潤の両方が、スクランブル対照阻害剤でトランスフェクションされた黒色腫細胞と比較して有意に低減した図10A。miR-211を阻害したときに、浸潤に対する影響は一切なかったが、遊走が少し低減した図11A。最後に、miR-155の阻害によって遊走および浸潤が少しだけ低減した図11A。miR-let7c、miR-27a、miR-193b、miR-206、またはmiR-215の置換によって、黒色腫細胞遊走および浸潤の両方に有意な低減があった図10B。最も強い影響を示したのはMiR-193bおよびmiR-206である。MiR-let7cは遊走には僅かな影響しか呈さなかった一方、浸潤を強力に減少させた。それ以外のどのmicroRNAミミックのトランスフェクションも、遊走または浸潤のいずれに対しても目に見えた影響を及ぼさなかった図11B。実施例7:黒色腫患者の生検および細胞系において、miRNA-506-514クラスタ内の或るmiRNAを上方制御するmiRNA発現の調節解除は総じて腫瘍の発生および進行と関連していたが、黒色腫の腫瘍形成に直接関与した比較的少数のmiRNAを、詳細分析の対象とした。新規の治療標的およびバイオマーカーを黒色腫の研究および処置に用いるのが有益であることは、立証できたであろう。この目的のために、黒色腫皮膚パンチおよび隣接の正常皮膚のmiRNA発現プロファイルを分析して、黒色腫の発生および進行に関与する可能性のあるmiRNAを同定した。正常組織および黒色腫組織から生検材料を採取し、本明細書に記載されているように分析用に調製した。全ての標本をmiRNATaqmanLow-densityArrayTLDAでプロファイリングし、正常標本における明らかな発現の変化を、腫瘍標本と比較して確認した。結果は図12~13に示すとおりである。図12に示すように、黒色腫腫瘍生検では、miR-506-514クラスタの全ての成熟microRNAについて、正常皮膚と比較してかなりの過剰発現が認められた。図13に示すように、黒色腫標本においてmiRNA-506、508、509、および514は、約30倍~約100倍に過剰発現した。TLDAプラットフォームを使用して、miRNA-507、510および513を正常皮膚内に検出できなかった。ただし、腫瘍標本内には存在していた図13を参照。正常皮膚からプールされたデルタCT値を使用して、相対的な倍率変化レベルを計算した。miR-506、miR-508、miR-509、およびmiR-514に関しては、倍率変化のメジアン値を線分で表してある。miR-507、miR-510、およびmiR-513に関しては、TLDAでは正常皮膚内に検出できなかったため、定性的に差異を示す。図13においてアスタリスクは、腫瘍と正常との差異がp<0.001にて統計学的に有意であることを示す。miRNA-506-514クラスタ内のmiRNAは、黒色腫においても前述されていなかったか、または他のどの癌種においても機能的な関連性を割り当てられていなかった。黒色腫細胞系のパネルを組み立てて、更なる研究のために評価して、miRNA-506-514クラスタの役割について調べた。特にmiRNA-506-514クラスタの過剰発現という観点から、黒色腫皮膚標本と最も緊密にクラスタ化されたmiRNA発現プロファイルを持つ黒色腫細胞系の群を選択した。miRNATLDAを使用して、黒色腫細胞系内のmiRNA-506-514クラスタの成熟miRNAが、正常メラノサイトと比較して過剰発現することを見出した。ただし、図14に示すように、その過剰発現の大きさは組織において観測される大きさを下回った。原発性メラノサイトからのデルタCT値を使用して、黒色腫細胞系におけるmiRNA-506-514クラスタの相対的な倍率変化レベルを計算した。図表に示す3つの細胞系の倍率変化のメジアン値は、線分で表されている。本明細書に示す大きさの差異は、他のモデル内の細胞系および組織を比較することによって観測された。発現パターンが類似していることから、これらの細胞系が関連するinvitroモデルとして利用され得ることが示唆された。TLDA遺伝子発現プロファイリング分析に加え、BioMark商標DynamicArrayマイクロ流体システムFluidigmCorporationも使用して、同じプラットフォーム上でメラノサイト、正常皮膚、黒色腫細胞系、および黒色腫組織でのmiRNA-506-514クラスタクラスタの発現を比較した。図30に示すように、大多数の黒色腫標本23/33は一体にクラスタ化し、miR-506-514クラスタの全ての成熟miRNAが実質的に過剰発現した。もう1つの一連の黒色腫標本10/33においては、これらのmiRがいくつか過剰発現して一体にクラスタ化し、黒色腫細胞系は図14に示す結果と一貫していた。対照的に、正常皮膚およびメラノサイトにおいては、この一連のmiRNAが独立した別個のクラスタを形成し、有意に過小発現した。追加のプロファイリング分析では、特にmiRNA-506-514クラスタに焦点を当て、ベースラインをクラスタ内の発現レベルに合わせて調整したため、クラスタ内の大多数のmiRNAレベルは検出可能であった。miR-506-514クラスタは、黒色腫組織および5つの黒色腫細胞系内でメラノサイトおよび正常皮膚と比較して有意に過剰発現した図31においては平均約30倍~約60倍、図32においては約4~20倍を呈している。黒色腫細胞系のmiR-506-514クラスタの発現レベルの倍率変化は、初代メラノサイトを基準とした相対値にて、図表で示されている。miR-506-514クラスタのメンバーごとの倍率変化のメジアン値は、線分で表されている。図31においてアスタリスクは、腫瘍と正常との差異がp<0.001にて統計学的に有意であることを示す。実施例8:miRNA-506-miR514クラスタの阻害によって、黒色腫細胞の成長および黒色腫細胞の浸潤/遊走が実質的に阻害されるmiRNA-506-514クラスタの過剰発現が黒色腫の進行に関与しているかどうかを判定するために、市販のヘアピン阻害剤を使用して、5つの黒色腫細胞系SKMEL-2、SKMEL-5、A375、MALME-3M、およびRPMI-7951内のmiRNA-506-514クラスタの全てのメンバーを同時に阻害した。蛍光標識されたmiRNA阻害剤Dharmaconでの測定によると、全ての細胞系について75~85のトランスフェクション効率が達成された。トランスフェクション後3日目および5日目に細胞の成長を測定し、miRNA非標的阻害剤でトランスフェクションされた細胞と比較した。miRNA-506-514クラスタの阻害後に、5つの黒色腫細胞系の成長が25~35低下した図15を参照。図15に示す結果はトランスフェクション後3日目のもので、4つの独立した実験にわたって非標的対照0に設定を基準とした相対的な成長阻害率として表されている。アスタリスクは、黒色腫細胞系と正常メラノサイトとの差異がp<0.01にて統計学的に有意であることを示す。黒色腫細胞系内で成長が阻害される程度は、正常メラノサイトと比較して有意に異なったp<0.001ことから、過剰発現がmiRNA-506-514クラスタの黒色腫の増殖維持に対して影響力を持つことが示唆される。癌進行および転移は、制御不能な増殖に依存するだけでなく、細胞が新たな組織を遊走および/または浸潤させる能力にも依存し得る。成長の検査に使用される5つの細胞系のうち、MALME-3M細胞系は最高レベルまで浸潤し遊走したため、遊走/浸潤阻害アッセイに利用された。本明細書に記載されているように、MALME-3M細胞を播種し、トランスフェクションした。トランスフェクション後48時間目に、浸潤のため基底膜抽出液でコーティングしたか、または遊走のためコーティングしてない状態にした96ウェルのCultrexディッシュの各チャンバに、50,000個のMALME-3M細胞を播種した。アッセイプレートに播種してから24時間後に、遊走または浸潤した細胞をCalcein-AMで染色し、蛍光測定によって定量した。結果を浸潤または遊走の阻害率として示す。この阻害率は、非標的対照0に設定を基準とした相対値である。は、miRNA-506-514阻害剤でトランスフェクションされた細胞と非標的対照NTCとの差異が、p<0.001にて統計学的に有意であることを示す。MALME-3M細胞内でのmiRNA-506-514クラスタ阻害後に、対照の非標的阻害剤でトランスフェクションされた細胞と比較して、遊走および浸潤がそれぞれ約40および52減少した図16を参照。追加の実験では、MALME-3M細胞およびA375細胞内でのmiRNA-506-514クラスタの阻害を実施した。これらの細胞の浸潤および遊走もまた高いレベルであった。図33に示すように、MALME-3M細胞内でのmiR-506-514クラスタが阻害されてから約24時間目に、対照の非標的阻害剤でトランスフェクションされた細胞と比較して遊走および浸潤の両方が約50減少した。A375細胞においても同様の結果が観測され、遊走および浸潤がそれぞれ50および35減少した。図33に示すように、miRNAクラスタ阻害後のこうした減少は、トランスフェクション後6時間目のアポトーシスが僅かしか観測されなかった時点においてさえ明白であり、遊走および阻害に対する影響がアポトーシスのみに起因したものでなかったことが示唆された。黒色腫は高度に転移性の癌であり、この疾患に絡んだ死亡率の高まりに寄与している。この新規なクラスタは、黒色腫の浸潤および遊走能力に関与する。このことは、そのクラスタの過剰発現を、転移を示すバイオマーカーとして使用することも可能であるし、原発腫瘍の成長および以降の転移を阻止し得る標的として使用することも可能であることを示唆する。実施例9:miRNA-506-514クラスタ阻害後に、黒色腫細胞アポトーシスが実質的に増大したmiRNA-506-514クラスタの阻害によって細胞の成長が低下したことから、このクラスタが黒色腫において重要な機能的役割を果たすことが強調された。細胞数の減少は時には成長抑止の結果であることもあれば、時にはアポトーシスの増大に起因することもあれば、時には成長抑止の結果とアポトーシスの増大とに起因することもあり得る。癌細胞が変異を取得して増殖の遮断を克服できると想定した場合、黒色腫細胞死の増進は何らかの有望な処置の成功にとって有利であることを立証できよう。フルmiRNA-506-514クラスタの阻害後、適切なヘアピン阻害剤を各10nMにてトランスフェクションして、複数の黒色腫細胞系におけるアポトーシスを測定した。利用されたアポトーシスアッセイは、1カスパーゼ3/7の活性化例えば、カスパーゼはアポトーシスの判定の指標となる、および2AnnexinVフローサイトメトリーである。実施例9に記載されているように、黒色腫細胞系および初代メラノサイトを10nMの各抗miRNAでトランスフェクションした。トランスフェクション後2日目に、Caspase-Glo3/7Promegaでカスパーゼ3/7の活性化を測定した。図17に示す結果は、カスパーゼ3/7活性の増加率を示す。この増加率は、非標的対照NTC;0に設定を基準とした相対値である。図表中のアスタリスクは、黒色腫細胞株と正常メラノサイトとの差異がp<0.01にて統計学的に有意であることを示す。結果はカスパーゼ3/7の活性化を示唆しており、トランスフェクション後48時間目に、トランスフェクションされた細胞系内のアポトーシスの初期マーカーは、非標的のmiRNA対照細胞と比較してトランスフェクションされた細胞系内で50~75増大した図17を参照。AnnexinV/PropidiumiodidePIIフローサイトメトリーを使用して、細胞表面に存在するホスファチジルセリンPSの濃度を測定した。この濃度は、細胞がアポトーシスのプロセスを開始したという指標になる。細胞死の最終段階で、膜完全性が完全に失われたことが認められた。このため、生体染料PIを加えることによって初期アポトーシス細胞AnnexinV陽性/PI陰性と後期アポトーシス細胞AnnexinV陽性/PI陽性との判定が可能になり、カスパーゼの活性化の結果を確認できた。トランスフェクション後のA375、SKMEL-5、およびMALME-3M細胞内での典型的なフローサイトメトリーの結果は、図18に示すとおりである。初期アポトーシス細胞はAnnexin/PI-であり、四分円の右下に示されている。後期アポトーシス細胞はAnnexin/PIであり、四分円の右上に示されている。集計表には、総アポトーシス率および増加率が、対照に対する相対値で示してある。アスタリスクは、miR-506-514阻害剤でトランスフェクションされた細胞とNTCとの差異がp<0.01にて統計学的に有意であることを示す。A375細胞、SKMEL-5細胞およびMALME-3M細胞内でのmiRNA-506-514クラスタの阻害によって、総アポトーシス細胞初期および後期の両方のパーセンテージがそれぞれ56、54および56に増大した。これらは、非ターゲッティング対照NTCにおける18、15および19と比較して、図18に示してある。増殖および浸潤の結果をまとめたこれらのデータによって、miRNA-506-514クラスタ癌表現型を維持するうえで極めて重大な複数の経路を調整することが確認された。実施例10:miRNA-506-514クラスタの阻害後に、軟寒天培地内で黒色腫細胞の成長が有意に低下したin-vitroで形質転換された細胞および癌誘導細胞は、細胞外基質に対する足場anchorageが存在しなくても存続および成長が可能である。このプロセスを調節できれば腫瘍の進行に大きな意義があるであろう。したがって、本発明者らは、miRNA-506-514クラスタの阻害が軟寒天培地内での黒色腫細胞のコロニー形成能力に及ぼす影響を調べた。本明細書に記載されているように、黒色腫細胞を播種し、トランスフェクションした。48時間後、細胞をトリプシン処理して25,000細胞を0.3の寒天培地と結合した。0.3の寒天培地/細胞混合物を0.5の寒天培地の上層に播種し、あらかじめ6ウェルプレートの各ウェルに添加してから、30分間凝固させた。播種した細胞を3週間維持した後、0.01のクリスタルバイオレットで染色した。10×の拡大倍率で撮影されたコロニーの典型的な写真は、図19に示すとおりである。NikonTE2000顕微鏡を使用して2フィールド/ウェルで3回連続してintriplicate計数してコロニー数の漸増を、図20に図表で示す。結果は、miRNA-506-514クラスタの阻止によって軟寒天培地内のコロニーの数および大きさが非標的miRNA対照と比較して80減少したことを示唆している。図34および図35においてコロニーの典型的な写真で示されるように、SKMEL-5およびA375の両細胞系での同様な実験によって、コロニー形成は非標的対照NTC比較して50減少した。図20および35の図表中のアスタリスクは、フルクラスタでトランスフェクションされた細胞と、非標的miRNA対照NTCでトランスフェクションされた細胞と、を比較したときの差異が、p<0.01の信頼度にて統計学的に有意であることを示唆している。足場非依存性増殖anchorage-independentgrowth能力は、癌細胞の最も重要な腫瘍形成特性の1つであり、これらのデータによって、miRNA-506-514クラスタが黒色腫表現型の維持に極めて重要な機能役割を果たしていることが確認された。実施例11:miRNA-506-514クラスタのサブクラスタが、複数の癌作用CancerFunctionの変更に及ぼす影響は、フルmiRNA-506-514クラスタを使用した場合と比較して同等またはそれを上回った物理的距離マッピングおよびmiRNA-506-514クラスタメンバーの系統学的関係の分析によって、このクラスタ内の14個のmiRが、より小さい2つの推定サブクラスタmiR-506、miR-507、miR-508-3p、miR-508-5p、miR-513-a-3p、miR-513-a-5p、miR-513-b、およびmiR-513-cからなるサブクラスタAと、miR-509-3p、miR-509-5p、miR-510、およびmiR-514からなるサブクラスタBに明確に分離したことが示唆された。これらのクラスタを更により小さいサブクラスタに分割することも可能であり、ここでimiR-513-a-3p、miR-513-a-5p、miR-513-b、およびmiR-513-cと、iimiR-509-3p、およびmiR-509-5pと、iiimiR-510およびmiR-514というグルーピングには個別に3つのサブクラスタ候補が含まれる。miRNA-506-514クラスタの全てのメンバーは、X染色体上で100kb以内に位置する。miRNA-506-514クラスタのコード領域のゲノム機構を示す概略図は、図21に示すとおりである。図21では、このクラスタ内に存在する物理的距離をブロックで示し、系統学的クラスタを点線の長方形で例示してある。更に詳しく調べるために、個々のメンバーを物理的距離および系統学的クラスタ形成に基づいて各種のサブクラスタブラケットに分離した。図21は、Zhangetal,GenomeResearch,17:6122007を改変して作成されたものである。これらの推定サブクラスタが黒色腫細胞系の成長にどのように影響するかを調べるために、アッセイに関与したサブクラスタの全てのメンバーの間で均等に分割し、複数の黒色腫細胞系において終濃度70nMで各サブクラスタのメンバーを阻止した。細胞の播種およびトランスフェクションは、本明細書に記載されているように行った。トランスフェクション後3日目および5日目に、細胞の成長を測定した。トランスフェクション後5日目の細胞成長の阻害結果は、図22に示すとおりである。結果は、フルmiRNA-506-514クラスタの阻止後に観測された影響を基準とした変化の割合として表されている。この割合に基づいて、フルmiRNA-506-514クラスタと同等またはそれ以上の活性を有するあらゆるサブクラスタを同定できた。結果から、miRNA-506-507-508-513サブクラスタサブクラスタAが細胞成長に及ぼす影響は、フルクラスタと同等またはそれ以上であることが判明した。これらの推定サブクラスタ、つまり、個々のmiRNAまたは少数2つまたは3つの組み合わせのそれぞれについて複数の濃度を調べた。評価対象となった個々のmiRNAまたは少数のmiRNAの組み合わせはいずれも、フルクラスタまたはサブクラスタAと同じ影響を及ぼすことはなかった図22を参照のこと。データは不図示。MALME-3M細胞を使用し、全ての推定サブクラスタの組み合わせの阻害によってどのような影響が黒色腫細胞浸潤および遊走に及ぶかを調べた。本明細書に記載されているように、遊走/浸潤の研究を実施した。フルmiRNA-506-514クラスタの阻害後に観測された影響を基準とした変化の割合として表された結果は、図23に示すとおりである。図23において矩形で囲まれている結果は、影響がフルmiRNA-506-514クラスタを使用して観測された影響と同等またはそれ以上であることを示す。サブクラスタAの阻害によって浸潤および遊走がフルクラスタの阻害後に観測されたレベルと同等またはそれ以上の量だけ減少したことは、結果から明らかである。この影響は、サブクラスタBを阻害した場合図23を参照、または個々のmiRNAまたは少数2つまたは3つのmiRNAの組み合わせデータは不図示を阻害した場合は観測されなかった。推定サブクラスタAおよびBを阻害してから6時間目および24時間目に黒色腫細胞浸潤および遊走に及ぶ影響を研究し、加えて、MALME-3MおよびA375細胞の両方においても同様の実験を考察した。図36に示すように、サブクラスタAを阻害してから6時間および24時間の両方の時点で浸潤および遊走が低減したが、サブクラスタBの阻害ではこのような影響は認められなかった。フルmiRNA-506-514クラスタまたは同定された推定サブクラスタの阻害後に、複数の黒色腫細胞系内のアポトーシスを測定した。本明細書に記載されているように、カスパーゼ3/7の活性化およびAnnexinVフローサイトメトリーのアッセイを利用して、アポトーシスの変化を評価した。トランスフェクション後2日目に、カスパーゼ3/7Caspase-Gloの活性化を評価した。カスパーゼの活性化の結果は、図24に示すとおりであり、フルmiR-506-514クラスタを基準とする相対的な変化の割合として提示される。矩形で囲まれている結果は、影響がフルクラスタと同等またはそれ以上であることを示す。トランスフェクション後48時間目に、サブクラスタAカスパーゼの活性化が、フルクラスタにおいて認められたレベルと同等またはそれ以上のレベルまで増大したことは、結果から示唆される図24を参照。AnnexinV/PIフローサイトメトリーのアッセイでは、カスパーゼ活性化のデータが確認された。初期アポトーシス細胞Alexa/PI-は、四分円の右下に示されている。後期アポトーシス細胞Alexa/PIは、四分円の右上に示されている。集計表には、総アポトーシス率および増加率が、対照に対する相対値で示してある。アスタリスクは、miRNA阻害剤でトランスフェクションされた細胞とNTCとの差異がp<0.001にて統計学的に有意であることを示す。図25に示す3つの黒色腫細胞系を用いた実験の結果から示唆されるように、サブクラスタAにおける初期および後期アポトーシス細胞例えば、AnnexinV陽性/PI陰性およびAnnexinV陽性/PI陽性のそれぞれのパーセンテージが、フルクラスタにおいて認められたレベルと同等またはそれ以上のレベルまで増大した。この結果は、サブクラスタB図25を参照においてもまたは試験対象となった他のサブクラスタの組み合わせデータは不図示のいずれにおいても観測されなかった。サブクラスタAの阻害によって、軟寒天培地のコロニー形成をフルmiRNA-506-514クラスタの阻害後に認められたレベルまで有意に低減できたことは、図26~27に示されている。10×の拡大倍率で撮影されたコロニーの典型的な写真は、図26に示すとおりである。図27は、2フィールド/ウェルで3回連続してintriplicate計数してコロニー数の漸増を、図表で表したものである。図27においてアスタリスクは、フルクラスタまたはサブクラスタAでトランスフェクションされた細胞と、非標的miRNA対照NTCでトランスフェクションされた細胞と、を比較したときの差異が、p<0.01の信頼度にて統計学的に有意であることを示唆している。フルmiRNA-506-514クラスタおよびサブクラスタAで調整される表現型の影響が両方とも統計学的に有意で且つほとんど同一であると想定した場合、本発明者らは、サブクラスタAmiRNA-506、-507、-508、および-513が、黒色腫の増殖および進行にとって重要な経路を調節するうえで必要不可欠な役割を果たしていると結論づけることができよう。実施例12:フルmiRNA-506-514クラスタmiRNAの過剰発現によって正常メラノサイトが形質転換されたmiRNAについては、506-514クラスタおよび様々なサブクラスタにおいて黒色腫細胞の成長、アポトーシス、遊走/湿潤、および足場非依存性増殖anchorage-independentgrowthを制御する機能的役割が調査されてきており、本明細書中に記載されている。フルmiRNA-506-514クラスタ、または様々なサブクラスタの腫瘍形成能力は、関心の対象となる可能性がある。発癌能の特徴は足場非依存性増殖anchorageindependentgrowthにある。そのため、506-514クラスタのmiRNAの過剰発現が、軟寒天培地内にコロニー形成するようにメラノサイトを形質転換する工程に及ぼす影響を測定した。正常メラノサイトを播種し、記載されているように、miRNA-506-514クラスタまたは指示されたサブクラスタに対しては120nMのmiRNAミミックでトランスフェクションした。実施例10に記載されているように、細胞を軟寒天培地に播種した。miRNA-506-514クラスタまたは様々なサブクラスタを過剰発現させた結果は、図28~29に表す。10×の拡大倍率の典型的な写真は、図28に示すとおりである。図29は、2フィールド/ウェルで3回連続してintriplicate計数してコロニー数の漸増を、図表で表したものである。SKMEL-5細胞およびA375細胞の両方において実施された実験の結果は、図37および図38に図表で示すとおりである。図29および図38においてアスタリスクは、フルクラスタまたはサブクラスタでトランスフェクションされた細胞と、非標的miRNA対照NTCでトランスフェクションされた細胞と、を比較したときの差異が、p<0.01の信頼度にて統計学的に有意であることを示唆している。サブクラスタAまたはBでなくフルクラスタを過剰発現させることによって、メラノサイトの形質転換を誘発することができた。このことは、NTCでトランスフェクションされたメラノサイトを基準とした相対値でコロニー数が23倍に増加したことで示唆される図29を参照。サブクラスタAmiRNA-506、-507、-508-3p、-508-5p、-513-a-3p、-513-a-5p、-513-b、および-513-cは黒色腫の成長、アポトーシス、湿潤/遊走、足場非依存性増殖anchorage-independentgrowthを維持するうえで機能的役割を果たすように思われるが、フルクラスタにおいて観測される程度と同程度までメラノサイト形質転換を誘発することはできなかった。miRNAは複数の経路を標的化できることから、miRNA-506-514クラスタの全てのメンバーが癌形成の開始に必要とされるが、癌の成長を維持しアポトーシスを防止するうえで必要とされる経路はmiRNAサブクラスタAのサブセットによってのみ調節し得ることが明白であるモデルがサポートされる。フルクラスタについて予測された標的をサブクラスタAと比較することによって、黒色腫の開始および維持の両方に寄与するこの新規なクラスタの多機能的役割を説明し得る差次的遺伝子/経路を解明できる。miR-506-514クラスタの過剰発現によってメラノサイト形質転換に関連する遺伝子発現に生じた変化を評価するために、軟寒天培地内で成長したメラノサイトコロニーからRNAを単離し、黒色腫および癌特異的マーカーのパネルをTaqManRT-PCRで検査した。図39に示すように、軟寒天培地内でのmiR-506-514の過剰発現および成長は、E-カドヘリン、P-カドヘリン、p16/CDKN2A、DKK3、RAB33A、TYRP1、およびBADにおける実質的なダウンレギュレーション、ならびにKi67、MIA、DCTおよび幹細胞マーカーPROM1/CD133およびNestinにおける発現の顕著な増大と関連性があった。実施例13:実施形態の例以下、或る実施形態の例を挙げる。A1.a黒色腫を有する被験対象に抗がん剤を投与する工程と、b被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、c以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。A2.a黒色腫を有する被験対象に抗がん剤を投与する工程と、b被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、c以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するか否かを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。A3.a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。A4.a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するか否かを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。A5.a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を含む情報を受け取る工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。A6.a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う意思決定者に、バイオマーカーの存在、不在または量を転送する工程と、を含む方法。A7.a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかが被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいたものである指示を転送する工程と、を含む方法。A8.a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む、被験対象における黒色腫の処置の治療有効性を至適化するための方法。A9.a黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-10、microRNA-21、microRNA-126、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む、被験対象における黒色腫の処置の毒性を低減するための方法。B1.被験対象における黒色腫の処置に有効な量のmicroRNA組成物を送達する組成物を、それを必要とする被験対象に投与する工程であって、microRNA組成物がmicroRNA-10、microRNA-126、microRNA-193、microRNA-203、microRNA-206、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む工程を含む、被験対象における黒色腫を処置するための方法。B2.黒色腫細胞を黒色腫細胞の増殖を阻害するのに有効な量のmicroRNA組成物に接触させる工程であって、microRNA組成物が、microRNA-126、microRNA-193、microRNA-206、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む工程を含む方法。B3.黒色腫細胞を黒色腫細胞のアポトーシスを誘発するのに有効な量のmicroRNA組成物に接触させる工程であって、microRNA組成物が、microRNA-10、microRNA-126、microRNA-193、microRNA-203、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む工程を含む方法。B4.被験対象における黒色腫の処置に有効な量のmicroRNA阻害剤組成物を送達する組成物を、それを必要とする被験対象に投与する工程であって、microRNA阻害剤組成物が、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる阻害剤を含む工程と、を含む、被験対象における黒色腫を処置するための方法。B5.黒色腫細胞を黒色腫細胞の増殖を阻害するのに有効な量のmicroRNA阻害剤組成物に接触させる工程であって、microRNA阻害剤組成物が、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-155、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAの阻害剤を含む工程と、を含む方法。B6.黒色腫細胞を黒色腫細胞のアポトーシスを誘発するのに有効な量のmicroRNA阻害剤組成物に接触させる工程であって、microRNA阻害剤組成物が、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAの阻害剤を含む工程と、を含む方法。C1.microRNA-21、microRNA-146およびmicroRNA-155の存在、不在または量を判定する、請求項A1~A9のいずれか一項に記載の方法。C2.microRNA-21、microRNA-146およびmicroRNA-155からなる群から選択されるmicroRNAの1つ以上のmicroRNA阻害剤を含む組成物が利用される、請求項B4~B6のいずれか一項に記載の方法。C3.microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513およびmicroRNA-514の存在、不在または量を判定する、請求項A1~A9のいずれか一項に記載の方法。C3.1.microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508およびmicroRNA-513の存在、不在または量を判定する、請求項A1~A9のいずれか一項に記載の方法。C4.microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513およびmicroRNA-514からなる群から選択されるmicroRNAの1つ以上のmicroRNA阻害剤を含む組成物が利用される、請求項B4~B6のいずれか一項に記載の方法。C4.1.microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508およびmicroRNA-513からなる群から選択されるmicroRNAの1つ以上のmicroRNA阻害剤を含む組成物が利用される、請求項B4~B6のいずれか一項に記載の方法。C5.microRNA-193がmicroRNA-193bである、請求項A1~B3のいずれか一項に記載の方法。C6.microRNA-10がmicroRNA-10aである、請求項A1~B3のいずれか一項に記載の方法。C7.microRNA-146がmicroRNA-146aである、請求項A1~A9およびB4~B6のいずれか一項に記載の方法。C7.1.microRNA-509がmicroRNA-509-1、-2または-3である、請求項A1~A9、およびB4~B6のいずれか一項に記載の方法。C8.黒色腫細胞が腫瘍内にある、請求項B2、B3、B5およびB6のいずれか一項に記載の方法。D1.被験対象における黒色腫の処置に有効な量の組成物を、それを必要とする被験対象に投与する工程であって、組成物がiイミダゾールカルボキサミドと、iiイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物と、を被験対象に送達する1種以上の成分を含む工程を含む、被験対象における黒色腫を処置するための方法。D2.黒色腫細胞を黒色腫細胞の増殖を阻害するのに有効な量の組成物に接触させる工程であって、組成物がiイミダゾールカルボキサミドと、iiイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物と、を送達する1種以上の成分を含む工程を含む方法。D3.黒色腫細胞を黒色腫細胞のアポトーシスを誘発するのに有効な量の組成物に接触させる工程であって、組成物がiイミダゾールカルボキサミドと、iiイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物と、を送達する1種以上の成分を含む工程を含む方法。E1.aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を、黒色腫を有する被験対象に投与する工程と、b被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、c以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。E2.aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を、黒色腫を有する被験対象に投与する工程と、b被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、c以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するか否かを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。E3.aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。E4.aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するか否かを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。E5.aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を含む情報を受け取る工程であって、バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。E6.aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う意思決定者に、バイオマーカーの存在、不在または量を転送する工程と、を含む方法。E7.aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかが被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいたものである指示を転送する工程と、を含む方法。E8.aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定する工程であって、バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む、被験対象における黒色腫の処置の治療有効性を至適化するための方法。E9.aイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を投与されており且つ黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む、被験対象における黒色腫の処置の毒性を低減するための方法。E10.a黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、bイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を被験対象に投与するか否かを、バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。E11.a黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を含む情報を受け取る工程であって、バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、bイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を被験対象に投与するか否かを、バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。E12.a黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、bイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を被験対象に投与するか否かを、バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する意思決定者に、バイオマーカーの存在、不在または量を転送する工程と、を含む方法。E13.a黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、bイミダゾールカルボキサミド剤を送達する組成物を被験対象に投与するか否かの指示を、バイオマーカーの存在、不在または量に基づいて提供する工程と、を含む方法。E14.組成物を投与するかまたは投与しない工程を含む、請求項E10~E13のいずれか一項に記載の方法。E15.組成物を投与する工程を含み、組成物がイミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物を含む、請求項E10~E13のいずれか一項に記載の方法。E16.組成物を投与する工程と、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物を含む組成物を投与する工程と、を含む、請求項E10~E13のいずれか一項に記載の方法。E17.a黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいてイミダゾールカルボキサミド剤を被験対象に投与する工程と、を含む方法。E18.意思決定者が組成物を投与するか否かが、バイオマーカーの存在、不在または量に基づく、請求項E17に記載の方法。E19.イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNA組成物を送達する1種以上の成分を含む組成物を被験対象に投与する工程を含む、請求項E17に記載の方法。E20.a黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーが、イミダゾールカルボキサミド抗細胞増殖活性に対する黒色腫細胞の感応性を増強するmicroRNAからなる群から選択される工程と、b同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいてイミダゾールカルボキサミド剤を被験対象に投与しないようにする工程と、を含む方法。E21.被験対象に投与されるイミダゾールカルボキサミド剤を送達しない組成物を選択する工程と、を含む、請求項E20に記載の方法。E22.組成物がアルキル化剤を送達しない、請求項E21に記載の方法。E23.被験対象に組成物を投与する、請求項E21またはE22に記載の方法。F1.microRNA組成物がmicroRNA-27、microRNA-143、microRNA-215、microRNA-335、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む工程を含む、請求項D1~E23のいずれか一項に記載の方法。F2.microRNA-10がmicroRNA-10aである、請求項F1に記載の方法。F3.microRNA-27がmicroRNA-27aまたは-27bである、請求項F1に記載の方法。F4.microRNA-143がmicroRNA-143aである、請求項F1に記載の方法。F5.microRNAが非癌性静止細胞と比較して相対的に低いレベルで黒色腫細胞内に存在する、請求項D1~E23のいずれか一項に記載の方法。F6.microRNAがIL-6受容体またはIL-6受容体経路メンバーの発現を調整する、請求項D1~E23のいずれか一項に記載の方法。F7.黒色腫細胞が腫瘍内にある、請求項D2またはD3に記載の方法。G1.a転移性黒色腫を有する被験対象に抗がん剤を投与する工程と、b被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、c以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。G2.a転移性黒色腫を有する被験対象に抗がん剤を投与する工程と、b被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、c以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するか否かを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。G3.a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。G4.a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するか否かを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。G5.a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を含む情報を受け取る工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む方法。G6.a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う意思決定者に、バイオマーカーの存在、不在または量を転送する工程と、を含む方法。G7.a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかが被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいたものである指示を転送する工程と、を含む方法。G8.a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む、被験対象における転移性黒色腫細胞の治療の効力を至適化するための方法。G9.a転移性黒色腫を有し抗がん剤を投与された被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b以降薬物投与量を維持するかまたは以降被験対象に投与される薬物投与量を調整するかを、被験対象において同定されたバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて行う工程と、を含む、被験対象における転移性黒色腫の処置の毒性を低減するための方法。G10.a被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b被験対象が転移性黒色腫に罹患する危険にさらされているか否かをバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。G11.a被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を含む情報を受け取る工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b被験対象が転移性黒色腫に罹患する危険にさらされているか否かをバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する工程と、を含む方法。G12.a黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b被験対象が転移性黒色腫に罹患する危険にさらされているか否かをバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて判定する意思決定者に、バイオマーカーの存在、不在または量を転送する工程と、を含む方法。G13.a黒色腫を有する被験対象におけるバイオマーカーの存在、不在または量を同定または判定する工程であって、バイオマーカーがmicroRNA-let7、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-193、microRNA-206、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される工程と、b被験対象が転移性黒色腫に罹患する危険にさらされているか否かの指示をバイオマーカーの存在、不在または量に基づいて提供する工程と、を含む方法。G14.転移性黒色腫の危険にさらされている被験対象に、黒色腫を処置する組成物を投与する、請求項G10~G13のいずれか一項に記載の方法。G15.転移性黒色腫の危険にさらされていない被験対象に黒色腫を処置する組成物を投与しないようにするようにする工程を含む、請求項G10~G13のいずれか一項に記載の方法。G16.被験対象が黒色腫を有する、請求項G10~G15のいずれか一項に記載の方法。G17.被験対象が黒色腫を有すると診断されている、請求項G16に記載の方法。H1.被験対象における黒色腫細胞の転移を阻害するのに有効な量のmicroRNA組成物を送達する組成物を、それを必要とする被験対象に投与する工程と、microRNA組成物が、microRNA-let7、microRNA-193、microRNA-206、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む工程を含む、被験対象における転移性黒色腫を処置するための方法。H2.転移性黒色腫細胞を黒色腫細胞の転移を阻害するのに有効な量のmicroRNA組成物に接触させる工程であって、microRNA組成物が、microRNA-let7、microRNA-193、microRNA-206、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む工程を含む方法。H3.転移性黒色腫細胞を黒色腫細胞の転移を阻害するのに有効な量のmicroRNA組成物に接触させる工程であって、microRNA組成物が、microRNA-let7、microRNA-193、microRNA-206、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAを含む工程を含む方法。H4.被験対象における黒色腫細胞の転移を阻害するのに有効な量のmicroRNA阻害剤組成物を送達する組成物を、それを必要とする被験対象に投与する工程であって、microRNA阻害剤組成物が、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAの阻害剤を含む工程を含む、被験対象における転移性黒色腫を処置するための方法。H5.転移性黒色腫細胞を黒色腫細胞の転移を阻害するのに有効な量のmicroRNA阻害剤組成物に接触させる工程であって、microRNA阻害剤組成物が、microRNA-21、microRNA-146、microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513、microRNA-514、microRNA-506-514クラスタ、microRNA-506-513クラスタ、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるmicroRNAの阻害剤を含む工程と、を含む方法。I1.転移が非癌組織の黒色腫細胞による浸潤である、請求項G1~H5のいずれか一項に記載の方法。I1.1.組織が皮膚でない、請求項I1に記載の方法。I2.転移が黒色腫細胞の遊走である、請求項G1~H5のいずれか一項に記載の方法。I3.microRNA-let7がmicroRNA-let7cである、請求項G1~H3のいずれか一項に記載の方法。I4.microRNA-509がmicroRNA-509-1、-2または-3である、請求項G1~H3のいずれか一項に記載の方法。I5.microRNA-193がmicroRNA-193bである、請求項G1~H3のいずれか一項に記載の方法。I6.microRNA-146がmicroRNA-146aである、請求項G1~G17、H4およびH5のいずれか一項に記載の方法。I7.microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513およびmicroRNA-514の存在、不在または量を判定する、請求項G1~G17のいずれか一項に記載の方法。I8.microRNA-506、microRNA-507、microRNA-508およびmicroRNA-513の存在、不在または量を判定する、請求項G1~G17のいずれか一項に記載の方法。I9.microRNA阻害剤、またはmicroRNA-506、microRNA-507、microRNA-508、microRNA-509、microRNA-510、microRNA-513およびmicroRNA-514のmicroRNA阻害剤を含む組成物を利用する、請求項H4またはH5に記載の方法。I9.1.microRNA阻害剤、またはmicroRNA-506、microRNA-507、microRNA-508およびmicroRNA-513のmicroRNA阻害剤を含む組成物を利用する、請求項H4またはH5に記載の方法。I10.転移性黒色腫細胞が腫瘍内にある、請求項H2、H3またはH5に記載の方法。J1.黒色腫が転移性黒色腫である、請求項A1~I10のいずれか一項に記載の方法。J2.microRNAがヒトmicroRNAである、請求項A1~J1のいずれか一項に記載の方法。J3.被験対象がヒトである、請求項A1~J2のいずれか一項に記載の方法。J4.バイオマーカーの存在、不在または量を被験対象由来の生物学的標本から判定する、請求項A1~A9、C1、E1~E23、F1~F4、G1~G17およびI3~I9のいずれか一項に記載の方法。J5.標本に血液または血液画分が含有されている、請求項J4に記載の方法。J6.標本に皮膚生検生成物が含有されている、請求項J4に記載の方法。本明細書において参照されている各特許、特許出願、公報、および文書はその全体が、本明細書中に参照によって援用されている。上記特許、特許出願、公報、および文書の引用は、前述のいずれも関連性のある先行技術であることを承認するものでなく、これらの公報もしくは文書の内容または日付に関していかなる承認にもならない。前掲書に対する修正は、技術の基本的態様から逸脱することなく行うことができる。1つ以上の特定の実施形態を参照して、本技術について極めて詳細に説明してきたが、特に本出願において開示されている実施形態に変更を行うことが可能であり、依然として、これらの修正および改良は本技術の範囲および趣旨の範囲内にある。本明細書において例証的に記載されている技術は、本明細書中に具体的に開示されていない任意の要素なしに好適に実施され得る。ゆえに、例えば、本明細書における各例において~を備えるcomprising、実質的に~からなるconsistingessentiallyofおよび~からなるconsistingofという言い回しはいずれも、他の2つの言い回しのどちらか一方で置き換えてもよい。これまで使用されてきた用語および表現は、限定ではなく説明のための用語として使用されているため、そのような用語および表現を使用したとしても、記載され且つ説明されている特徴の任意の同等物またはその一部を除外するものではなく、クレームされている技術の範囲内で様々な変更を行うことが可能である。1つのaまたは1つのanという用語は、この用語によって修飾される要素のうちの1つまたは複数を指し得る例えば、1つの試薬areagentは1つ以上の試薬を意味し得る。ただし、当該の要素のうちの1つまたは当該の要素のうちの複数のいずれかが記述されていることが文脈上明らかである場合は、この限りではない。本明細書において用語約は、基底パラメーターの10以内即ち、±10の値を指し、約という用語が値の文字列の先頭に使用されている場合は、それぞれの値が修飾される即ち、約1、2および3は約1、約2および約3を指す。例えば、約100gの重量は、90g~110gの間の重量を包含し得る。更に、本明細書において値のリスト例えば、約50、60、70、80、85または86が記載されている場合、そのリストは全ての中間値およびその小数値例えば、54、85.4を包含する。ゆえに、典型的な実施形態および任意の特徴を挙げて本技術を具体的に開示してきたが、当業者は本明細書において開示した概念の修正および変形を行うことができ、そのような修正および変形は本技術の範囲内にあると見なされることを理解すべきである。本技術における或る種の実施形態は、下掲の特許請求の範囲に記載されている。"