"重鎖可変領域、軽鎖可変領域、ヒト軽鎖定常領域及び変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含むヒト化抗α2インテグリン抗体であって、変異ヒトIgG1重鎖定常領域は、親ヒト化抗α2インテグリン抗体のヒトIgG1重鎖定常領域と比較して少なくとも1つのアミノ酸修飾を含み、そして該抗体は、親ヒト化抗α2インテグリン抗体と比較して変化したエフェクター機能を示す、上記ヒト化抗α2インテグリン抗体。変異ヒトIgG1重鎖定常領域が、ヒトIgG1由来のCH1、ヒトIgG1由来のヒンジ及びヒトIgG3由来のFc領域を含むアイソタイプ変異体である、請求項1に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。変異ヒトIgG1重鎖定常領域が、ヒトIgG3由来のCH1、ヒトIgG1由来のヒンジ及びヒトIgG3由来のFc領域を含むアイソタイプ変異体である、請求項1に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体変異ヒトIgG1重鎖定常領域が、親ヒト化抗α2インテグリン抗体のヒトIgGFc領域と比較して少なくとも1つのアミノ酸修飾を含む変異ヒトIgG1Fc領域を含む、請求項1に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。アミノ酸修飾が、269、298、及び324からなる群より選択されるアミノ酸位置でのアミノ酸置換を含み、ここで群の各メンバーのアミノ酸位置は、Kabatにおいて示される付番方式を利用して示される、請求項4に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。アミノ酸修飾が、E269D、S298A、及びS324Nからなる群より選択されるアミノ酸置換を含み、ここで群の各メンバーのアミノ酸位置は、Kabatにおいて示される付番方式を利用して示される、請求項4に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。アミノ酸修飾が、269/298、269/324、298/324、及び269/298/324からなる群より選択されるアミノ酸位置でのアミノ酸置換の組み合わせを含み、ここで群の各メンバーのアミノ酸位置は、Kabatにおいて示される付番方式を利用して示される、請求項4に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。アミノ酸修飾が、E269D/S298A、E269D/S324N、S298A/S324N、及びE269D/S298A/S324Nからなる群より選択されるアミノ酸置換の組み合わせを含み、ここで群の各メンバーのアミノ酸位置は、Kabatにおいて示される付番方式を利用して示される、請求項4に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。エフェクター機能が、補体依存性細胞傷害CDC及び/又は抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCである、請求項1~8のいずれか1項に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。ヒト化抗α2インテグリン抗体が、親ヒト化抗α2インテグリン抗体と比較して改善された補体依存性細胞傷害CDCを示す、請求項1~4のいずれか1項に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。ヒト化抗α2インテグリン抗体が、親ヒト化抗α2インテグリン抗体と同等の抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCを示す、請求項10に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。アミノ酸修飾が、S324N、S298A/S324N、及びE269D/S298A/S324Nからなる群より選択されるアミノ酸置換であり、抗体が親ヒト化抗α2インテグリン抗体と比較して改善された補体依存性細胞傷害CDCを示す、請求項4に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。ヒト化抗α2インテグリン抗体が、親ヒト化抗α2インテグリン抗体と同等の抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCを示す、請求項12に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。アミノ酸修飾が、E269D、S298A、S298A/S324N、及びE269D/S298A/S324Nからなる群より選択されるアミノ酸置換であり、抗体が親ヒト化抗α2インテグリン抗体と比較して改善された抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCを示す、請求項4に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。アミノ酸修飾が、アミノ酸置換S298A/S324N又はE269D/S298A/S324Nであり、抗体は、親ヒト化抗α2インテグリン抗体と比較して、改善された補体依存性細胞傷害CDC及び改善された抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCを示す、請求項4に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。配列番号35を含む変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含む、請求項2に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。配列番号36を含む変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含む、請求項3に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。配列番号37~43からなる群より選択される変異ヒトIgG1Fc領域を含む、請求項4に記載のヒト抗α2インテグリン抗体。重鎖可変領域が、アミノ酸配列GFSLTNYGIH配列番号1を含むHCDR1、アミノ酸配列VIWARGFTNYNSALMS配列番号2を含むHCDR2、及びアミノ酸配列ANDGVYYAMDY配列番号3を含むHCDR3を含む、請求項1~18のいずれか1項にヒト化抗体。軽鎖可変領域が、アミノ酸配列SAQSSVNYIH配列番号4を含むLCDR1、アミノ酸配列DTSKLAS配列番号5を含むLCDR2、及びアミノ酸配列QQWTTNPLT配列番号6を含むLCDR3を含む、請求項1~18のいずれか1項に記載のヒト化抗体。重鎖可変領域が、アミノ酸配列GFSLTNYGIH配列番号1を含むHCDR1、アミノ酸配列VIWARGFTNYNSALMS配列番号2を含むHCDR2、及びアミノ酸配列ANDGVYYAMDY配列番号3を含むHCDR3を含み;かつ/又は軽鎖可変領域が、アミノ酸配列SAQSSVNYIH配列番号4を含むLCDR1、アミノ酸配列DTSKLAS配列番号5を含むLCDR2、及びアミノ酸配列QQWTTNPLT配列番号6を含むLCDR3を含む、請求項1~18のいずれか1項に記載のヒト化抗体。重鎖可変領域が、配列番号7のアミノ酸配列を含む、請求項1~18のいずれか1項に記載のヒト化抗体。重鎖可変領域は、a位置71がLysであるか、b位置73がAsnであるか、c位置78位がValであるか、又はda~cのいずれかの組み合わせである配列番号7のアミノ酸配列を含む、請求項22に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。重鎖可変領域が、配列番号8~19からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項1~18のいずれか1項に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。重鎖可変領域が配列番号17のアミノ酸配列を含む、請求項1~18のいずれか1項に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。重鎖可変領域が、アミノ酸配列WGQGTLVTVSS配列番号20を含むFW4領域をさらに含む、請求項22~25のいずれか1項に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。軽鎖可変領域が配列番号21のアミノ酸配列を含む、請求項1~18のいずれか1項に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。軽鎖可変領域は、a位置2がPheであるか、b位置45がLysであるか、c位置48がTyrであるか、又はda~cのいずれかの組み合わせである配列番号21のアミノ酸配列を含む、請求項27に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。軽鎖可変領域が、配列番号22~33からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、請求項1~18のいずれか1項に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。軽鎖可変領域が配列番号30のアミノ酸配列を含む、請求項1~18のいずれか1項に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。軽鎖可変領域が、アミノ酸配列FGQGTKVEIK配列番号34を含むFW4領域をさらに含む、請求項27~30のいずれか1項に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。配列番号47を含む重鎖及び配列番号56を含む軽鎖を含む、請求項1に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。配列番号48を含む重鎖及び配列番号56を含む軽鎖を含む、請求項1に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。配列番号49~55からなる群より選択される重鎖及び配列番号56を含む軽鎖を含む、請求項1に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体。請求項1~34のいずれか1項に記載のヒト化抗α2β1インテグリン抗体をコードする単離された核酸。請求項35に記載の核酸を含むベクター。請求項35に記載の核酸又は請求項36に記載のベクターを含む宿主細胞。請求項1~34のいずれか1項に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体及び薬学的に許容しうる担体を含む組成物。対象者においてα2β1インテグリン関連障害を処置する方法であって、対象者に治療有効量の請求項1~34のいずれか1項に記載の抗α2インテグリン抗体又は請求項38に記載の組成物を投与することを含む、上記方法。α2β1インテグリン関連障害が、炎症性疾患、自己免疫疾患、及び異常な血管新生又は増加した血管新生を特徴とする疾患から選択される、請求項39に記載の方法。α2β1インテグリン関連障害が、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、移植に対する反応、視神経炎、脊髄外傷、関節リウマチ、全身性エリテマトーデスSLE、糖尿病、多発性硬化症、レイノー症候群、実験的自己免疫性脳脊髄炎、シェーグレン症候群、強皮症、若年型糖尿病、糖尿病性網膜症、加齢性黄斑変性、心血管疾患、乾癬、がん、さらには炎症反応を誘発する感染から選択される、請求項39に記載の方法。α2β1インテグリン関連障害が、多発性硬化症、関節リウマチ、視神経炎及び脊髄外傷から選択される、請求項39に記載の方法。α2β1インテグリン関連障害が、扁平上皮がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺の腺がん、及び肺の扁平上皮がんを含む肺がん、腹膜のがん、肝細胞がん、消化器がんを含む胃がん、膵臓がん、神経繆芽腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、ヘパトーマ、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜又は子宮がん、唾液腺がん、腎臓がん又は腎がん、肝臓がん、前立腺がん、外陰部がん、甲状腺がん、肝がん及び種々の型の頭頸部がん、さらには低悪性度/濾胞性非ホジキンリンパ腫NHL;小リンパ球性SLNHL;中悪性度/濾胞性NHL;中悪性度びまん性NHL;高悪性度免疫芽球性NHL;高悪性度リンパ芽球性NHL;高悪性度小型非切れ込み核細胞性NHL;巨大腫瘤病変NHL;マントル細胞リンパ腫;AIDS関連リンパ腫;ワルデンシュトレームマクログロブリン血症;慢性リンパ性白血病CLL;急性リンパ芽球性白血病ALL;ヘアリーセル白血病;慢性骨髄芽球性白血病;及び移植後リンパ増殖性障害PTLDを含むB細胞リンパ腫、さらには母斑症に関連する異常血管増殖、脳腫瘍に関連する浮腫のような浮腫、メイグス症候群、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、線維肉腫、骨肉腫、及び類表皮がんからなる群より選択されるがんである、請求項39に記載の方法。α2β1インテグリン関連障害が、非小細胞肺がん、膵臓がん、神経繆芽腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝臓がん、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、腎臓がん、前立腺がん、転移性前立腺がん、中皮腫、線維肉腫、骨肉腫、及び類表皮がん、転移性結腸直腸がん、転移性前立腺がん及び転移性乳がんからなる群より選択されるがんである、請求項39に記載の方法。α2β1インテグリン関連障害が、膵臓がん、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、非小細胞肺がん、線維肉腫、転移性結腸直腸がん、前立腺がん、転移性前立腺がん及び転移性乳がんからなる群より選択されるがんである、請求項39に記載の方法。a血小板活性化、b血小板凝集、c循環血小板数の減少、d出血性合併症、又はea~dのいずれかの組み合わせを伴なわない、請求項39に記載の方法。コラーゲンに対する白血球の結合を阻害するための方法であって、コラーゲンに対する白血球の結合を阻害するために有効な量の、請求項1~34のいずれか1項に記載の抗α2β1インテグリン抗体又は請求項38に記載の組成物を対象者に投与することを含む、上記方法。請求項1~34のいずれか1項に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体又は請求項38に記載の組成物の、薬剤としての使用。請求項1~34のいずれか1項に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体又は請求項38に記載の組成物の、α2β1インテグリン関連障害の処置のための使用。α2β1インテグリン関連障害の処置のための方法における使用のための、請求項1~34のいずれか1項に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体又は請求項38に記載の組成物。α2β1インテグリン関連障害の処置のための薬剤の製造のための、請求項1~34のいずれか1項に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体又は請求項38に記載の組成物の使用。請求項1~34のいずれか1項に記載のヒト化抗α2インテグリン抗体又は請求項38に記載の組成物、及びα2β1インテグリン関連障害の処置のための指示書を含むキット。親抗体のアミノ酸位置324においてセリンをアスパラギンに置き換えるアミノ酸置換S324Nを含む変異ヒトIgGFc領域を含む抗体であって、該抗体は、親抗体と比較して改善された補体依存性細胞傷害CDC及び改善された抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCを示す、抗体。親抗体のアミノ酸位置269におけるグルタミン酸をアスパラギン酸に置き換えるアミノ酸置換E269D、及び親抗体のアミノ酸位置298におけるセリンをアラニンと置き換える置換S298Aをさらに含む、請求項53に記載の抗体。キメラ抗体、ヒト化抗体、及び完全ヒト抗体からなる群より選択される、請求項53又は54に記載の抗体。ヒト化抗α2インテグリン抗体である、請求項53又は54に記載の抗体。発明の要旨本発明は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、ヒト軽鎖定常領域及び変異ヒトIgG1重鎖定常ドメインheavyconstantdomainを含むヒト化抗α2インテグリン抗体を提供するが、該変異ヒトIgG1重鎖定常領域は、親ヒト化抗α2インテグリン抗体のヒトIgG1重鎖定常領域と比較して少なくとも1つのアミノ酸修飾を含み、該抗体は親ヒト化抗α2インテグリン抗体と比較して変化したエフェクター機能を示す。本発明はさらに、上述のヒト化抗α2β1インテグリン抗体をコードする単離された核酸を提供する。本発明はさらに、上述の核酸を含むベクターを提供する。本発明はさらに、上述の核酸又は上述のベクターを含む宿主細胞を提供する。本発明はさらに、上述のヒト化抗α2インテグリン抗体及び薬学的に許容しうる担体を含む組成物を提供する。本発明はさらに、上述のヒト化抗α2インテグリン又は上述の組成物、及び2β1インテグリン関連障害の処置のための指示書を含むキットを提供する。本発明はさらに、対象者においてα2β1インテグリン関連障害を処置する方法を提供し、該方法は、対象者に治療有効量の上述の抗α2インテグリン抗体又は上述の組成物を投与することを含む。本発明はさらに、コラーゲンに対する白血球の結合を阻害するための方法を提供し、該方法は、コラーゲンに対する白血球の結合を阻害するために有効な量の、上述の抗α2β1インテグリン抗体又は上述の組成物を対象者に投与することを含む。本発明はさらに、上述のヒト化抗α2インテグリン抗体又は上述の組成物の、薬剤としての使用を提供する。本発明はさらに、α2β1インテグリン関連障害の処置のための、上述のヒト化抗α2インテグリン抗体又は上述の組成物の使用を提供する。本発明はさらに、α2β1インテグリン関連障害の処置のための方法における使用のための、上述のヒト化抗α2インテグリン抗体又は上述の組成物を提供する。本発明はさらに、α2β1インテグリン関連障害の処置のための薬剤の製造のための、上述のヒト化抗α2インテグリン抗体又は上述の組成物の使用を提供する。本発明はさらに、親抗体のアミノ酸位置324におけるセリンをアスパラギンと置き換えるアミノ酸置換S324Nを含む変異ヒトIgGFc領域を含む抗体を提供するが、該抗体は、親抗体と比較して改善された補体依存性細胞傷害CDC及び改善された抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCを示す。発明の詳細な説明本発明は、親ヒト化抗α2インテグリン抗体と比較して変化したエフェクター機能を示すヒト化抗α2インテグリン抗体に関する。α2β1インテグリンは、アルファインテグリンファミリーからのα2インテグリンサブユニット、及びベータインテグリンファミリーからのβ1インテグリンサブユニットから構成される分子であり、そして哺乳動物を含むいずれの対象者由来でもよいが、好ましくはヒト由来である。α2β1インテグリンは、いずれかの天然供給源から精製されてもよく、合成的に製造されてもよい例えば、組み換えDNA技術の使用により。α2インテグリン及びβ1インテグリンについての配列をコードする核酸は、それぞれTakadaandHemlerJ.CellBiol.1091:397-4071989;GenBank寄託X17033;その後エントリーNM002203に更新及びArgraves、W.S、J.Cell.Biol.Sep1053:1183-901987;Genbank寄託X07979.1及び選択的スプライシングされた変異体を表す関連する配列に記載される。α2β1インテグリン分子のIドメインは、α2サブユニット内のこのα2β1インテグリン分子の領域を指し、そして例えばKamataetal.、JBiol.Chem.269:9659-96631994;Emsleyetal.、J.Biol.Chem.272:285121997及びCell101:472000に記載される。α2インテグリンのIドメインは、MIDAS型のリガンド結合部位金属イオン依存性接着部位MetalIonDependentAdhesionSiteを含み、これはリガンド結合を支持するための所定の二価カチオンに対する要件及び特異性を有する。α2インテグリン関連障害には、標的組織内で異常な細胞応答を媒介するα2インテグリン依存性のプロセス/機能例えば、結合、活性を含む障害、疾患又は状態が含まれる。疾患に含まれるα2インテグリン依存性プロセスの例としては、サイトカイン発現及び増殖における増加に関与するようなコラーゲン依存性細胞応答、T細胞機能、マスト細胞機能及び好中球機能の局面、炎症性障害、乳腺管形態形成、表皮創傷治癒、並びに新脈管形成が挙げられる。α2インテグリン関連障害の例としては、限定されないが、炎症性腸疾患例えばクローン病及び潰瘍性大腸炎を含むがこれらに限定されない炎症性疾患、移植に対する反応移植拒絶反応を含む、視神経炎、脊髄外傷、関節リウマチ、多発性硬化症それに伴う神経系続発症の処置、さらには再発を特徴とする多発性硬化症の処置を含む、自己免疫疾患又は障害全身性エリテマトーデスSLE、糖尿病、レイノー症候群Reynaudssyndrome、実験的自己免疫性脳脊髄炎、シェーグレン症候群Sjorgenssyndrome、強皮症を含む、若年型糖尿病、及び異常な血管新生又は通常よりも増加した血管新生を伴う障害例えば糖尿病性網膜症、加齢性黄斑変性、心血管疾患、乾癬、関節リウマチ及びがん、さらには炎症反応を誘発する感染症が挙げられる。α2β1インテグリン関連障害の処置は、本明細書に記載される抗α2インテグリン抗体の治療的使用及び予防的prophylactic又は予防的preventative使用の両方を含む。処置を必要とする者には、障害と既に診断された者に加えて、障害の発生を予防又は遅延させようとする者が含まれる。用語抗α2インテグリン抗体又はα2に結合する抗体又はα2インテグリンサブユニットに結合する抗体又は抗VLA-2抗体は、本明細書において同意語として使用され、そしてヒトα2インテグリンに結合する抗体、例えば固定化α2β1に50nM又はそれ以下、好ましくは10nM又はそれ以下、より好ましくは1nM又はそれ以下、特に0.5nM又はそれ以下の親和性Kdで結合する抗体、好ましくはヒト化IgG抗体を含む。本明細書において同意語として使用される用語親ヒト化抗α2インテグリン抗体又は親抗α2インテグリン抗体又は親抗VLA-2抗体は、ヒトα2インテグリンに結合する抗体、例えば変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含むように改変され得るヒト化IgG1抗α2インテグリン抗体を意味する。親ヒト化抗α2インテグリン抗体は、ヒトIgG1重鎖定常領域におけるアミノ酸修飾を除いて、変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含む抗体と同一であり、通常は天然ヒトIgG1重鎖定常領域を有する抗体である。アミノ酸修飾は、好ましくはアイソタイプではない。用語抗体又は免疫グロブリンは最も広い意味で使用され、そしてそれらが望ましい生物学的活性を示す限り、モノクローナル抗体全長モノクローナル抗体を含む、ポリクローナル抗体、及び多特異的抗体を網羅する。抗体又は免疫グロブリンという用語は、全長抗体、さらには抗原結合特性を有するすなわちα2インテグリンに結合するそのフラグメントも含む。用語抗体には、ジスルフィド結合により相互接続された少なくとも2つの重H鎖及び2つの軽L鎖を含む糖タンパク質、又はその抗原結合フラグメントが含まれる。各重鎖は重鎖可変領域本明細書においてVHと略される及び重鎖定常領域から構成される。重鎖定常領域は3つのドメイン、CHI、CH2及びCH3から構成される。各軽鎖は、軽鎖可変領域本明細書においてVLと略される及び軽鎖定常領域本明細書においてCLと略されるから構成される。軽鎖定常領域は1つのドメインから構成される。VH及びVL領域は、フレームワーク領域FR又はFWと呼ばれるより保存的な領域に組み入れられている、相補性決定領域CDRと呼ばれる超可変性の領域にさらに細分され得る。VH及びVLはそれぞれ3つのCDR及び4つのFRから構成され、アミノ末端からカルボキシ末端へと以下の順序で配置される:FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。重鎖及び軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含有する。抗体の定常領域は、免疫グロブリンの宿主組織又は因子免疫系の種々の細胞例えば、エフェクター細胞及び古典的な補体系の第一成分C1qを含むへの結合を媒介し得る。本明細書で使用される用語全長抗体は、可変領域及び定常領域を含む、抗体の天然の生物学的形態を構成する構造を含む。例えば、ヒト及びマウスを含む大部分の哺乳動物において、IgGクラスの全長抗体は四量体であり、そして2つの免疫グロブリン鎖の2つの同一の対からなり、各対は1つの軽鎖及び1つの重鎖を有し、各軽鎖は免疫グロブリンドメインVL及びCLを含み、そして各重鎖は免疫グロブリンドメインVH、CH1C[ガンマ]1、CH2C[ガンマ]2、及びCH3C[ガンマ]3を含む。いくつかの哺乳動物において、例えばラクダ及びラマにおいて、IgG抗体は2つの重鎖のみからなるものであってもよく、各重鎖はFc領域に結合した可変ドメインを含む。本明細書で使用される用語キメラ抗体は、可変領域配列が1つの種に由来し、かつ定常領域配列が別の種に由来するものである抗体、例えば可変領域配列がマウス抗体に由来し、そして定常領域配列がヒト抗体に由来する抗体を含む。本明細書で使用される用語ヒト化抗体は、別の哺乳動物種例えばマウスの生殖系列に由来するCDR配列がヒトフレームワーク配列上に移植されている抗体を含む。さらなるフレームワーク領域の修飾は、ヒトフレームワーク配列内、さらには別の哺乳動物種の生殖系列に由来するCDR配列内で作製され得る。本明細書で使用される用語ヒト抗体は、フレームワーク領域及びCDR領域の両方がヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する抗体を含む。さらに、抗体が定常領域を含む場合、その定常領域もヒト生殖系列免疫グロブリン配列由来である。本発明のヒト抗体は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列によりコードされないアミノ酸残基を含んでいてもよい例えば、インビトロでのランダム又は部位特異的変異誘発により、又はインビボでの体細胞変異により導入された変異。しかし、本明細書で使用される用語ヒト抗体は、別の哺乳動物種例えばマウスの生殖系列由来のCDR配列がヒトフレームワーク配列上に移植されている抗体を含むことを意図されない。モノクローナル抗体は、実質的に均質な抗体の集団例えばその集団を含む個々の抗体が、少量で存在し得る可能性のある天然に存在する変異を除けば同一であるから得られた抗体を含む。モノクローナル抗体は高度に特異的であり、単一の抗原部位に対して向けられたものである。さらに、典型的に抗原上の異なる決定基例えばエピトープに対するものである異なる抗体を含む従来の例えばポリクローナル抗体調製物と対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の少なくとも単一の決定基に向けられたものである。修飾語句モノクローナルは、抗体の実質的に均質な集団から得られた抗体の特徴を示し、そしていずれかの特定の方法による抗体の製造を必要とするとは解釈されるべきではない。例えば、モノクローナル抗体は、Kohleretal.、Nature256:4951975により最初に記載されたハイブリドーマ法により作製され得、又は組み換えDNA法により作製され得る例えば、米国特許第4,816,567号を参照のこと。モノクローナル抗体はまた、例えばClacksonetal.、Nature352:624-6281991及びMarksetal.、J.Mol.Biol.222:581-5971991に記載される技術を使用してファージ抗体ライブラリーから単離され得る。モノクローナル抗体はまた、米国特許第6,025,155号及び同第6,077,677号、さらには米国特許出願公開第2002/0160970号及び同第2003/0083293号例えば、Lindenbaum、etal.、NucleicAcidsResearch3221:01772004も参照のことに記載される技術を使用して単離することもできる。超可変領域は、抗原結合に関与する抗体のアミノ酸残基を含む。超可変領域は、相補性決定領域すなわちCDRからのアミノ酸残基例えば、軽鎖可変ドメインにおける残基24~34L1、50~56L2及び89~97L3並びに重鎖可変ドメインにおける31~35H1、50~65H2及び95~102H3;Kabatetal.、SequencesofProteinsofImmunologicalInterest、5thEd.PublicHealthService、NationalInstitutesofHealth、Bethesda、Md.1991、及び/又は超可変ループからの残基例えば、軽鎖可変ドメインにおける残基26~32L1、50~52L2及び91~96L3、並びに重鎖可変ドメインにおける26~32H1、53~55H2及び96~101H3;ChothiaandLeskJ.Mol.Biol.196:901-9171987を含む。フレームワーク又はFR残基は、超可変領域の残基以外の可変ドメイン残基である。本明細書において記載される抗体については、CDR及びフレームワーク領域は、重鎖のCDR1がOxfordMolecularsAbM定義により残基26~35に及ぶと定義されることを除いて、Kabat付番方式に基づいて識別される。OxfordMolecularsAbM抗体モデリングソフトウェアhttp://people.cryst.cck.ac.uk/~ubc07s/Martinetal.、Proc.NatlAcad.Sci.USA、86、9268-92721989;Martinetal.、MethodsEnzymol.、203、121-1531991;Pedersenetal.、Immunomethods、1、1261992;及びReesetal.、InSternbergM.J.E.ed.、ProteinStructurePrediction.OxfordUniversityPress、Oxford、141-172.1996は、KabatCDR及びChothia超可変領域付番方式を組み合わせてCDRを定義する。本明細書における用語アミノ酸修飾は、ポリペプチド配列におけるアミノ酸の置換、挿入、及び/又は欠失を含む。アミノ酸置換又は置換は、親ポリペプチド配列中の特定の位置でのアミノ酸を別のアミノ酸と置き換えることを意味する。例えば、置換R94Kは変異ポリペプチドを指し、この場合は重鎖可変フレームワーク領域変異体であり、ここで位置94のアルギニンがリジンで置き換えられる。前の例について、94Kは位置94のリジンでの置換を示す。本明細書における目的のために、複数の置換は典型的にはスラッシュで区切られる。例えば、R94K/L78Vは置換R94K及びL78Vを含む二重変異を指す。本明細書で使用されるアミノ酸挿入又は挿入は、親ポリペプチド配列中の特定の位置においてアミノ酸を加えること意味する。例えば、挿入-94は位置94での挿入を示す。本明細書において使用されるアミノ酸欠失又は欠失は、親ポリペプチド配列中の特定の位置におけるアミノ酸の除去を意味する。例えば、R94-は位置94におけるアルギニンの欠失を示す。本発明において考察される全ての免疫グロブリン重鎖定常領域の位置について、番号付けはKabatKabatetal.、1991、SequencesofProteinsofImmunologicalInterest、5thEd.、UnitedStatesPublicHealthService、NationalInstitutesofHealth、Bethesda参照により全体として加入されるにおけるEUインデックスに従う。免疫グロブリン重鎖定常領域の位置の番号付けは、Kabatにおいて示される付番方式又はKabatにおけるEUインデックスと呼ばれ、これは本明細書において同等に使用され、そしてKabatにおけるEUインデックスに従う番号付けを示す。KabatにおけるEUインデックスは、Edelmanetal.、1969、PNAS63:78-85に記載されるヒトIgGlEU抗体の残基番号付けを指す。抗体は、定常領域により遺伝学的に決定されるクラスアイソタイプとも呼ばれるに分類される。ヒト定常軽鎖はカッパCK軽鎖及びラムダC[ラムダ]軽鎖に分類される。重鎖は、ミュー、デルタ、ガンマ、アルファ、又はイプシロンとして分類され、そして抗体のアイソタイプをそれぞれIgM、IgD、IgG、IgA、及びIgEと定義する。IgGクラスは治療目的のために最も一般的に使用される。ヒトにおいて、このクラスはサブクラスIgG1、IgG2、IgG3、及びIgG4を含む。マウスにおいて、このクラスはサブクラスIgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3を含む。IgMはIgM1及びIgM2を含むがこれらに限定されないサブクラスを有する。IgAはIgA1及びIgA2を含むがこれらに限定されないいくつかのサブクラスを有する。従って、本明細書で使用されるアイソタイプは、それらの定常領域の化学的及び抗原性の特徴により定義される免疫グロブリンのクラス又はサブクラスのいずれかを意味する。公知のヒト免疫グロブリンアイソタイプは、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1、IgA2、IgM1、IgM2、IgD、及びIgEである。本明細書で使用される用語Fc又はFc領域は、第一定常領域免疫グロブリンドメインを除いて抗体の定常領域を含むポリペプチドを含む。従ってFcは、IgA、IgD、及びIgGの最後の2つの定常領域免疫グロブリンドメイン、並びにIgE及びIgMの最後の3つの定常領域免疫グロブリンドメイン、並びにこれらのドメインに対する可動性ヒンジN末端を指す。IgA及びIgMについては、FcはJ鎖を含み得る。IgGについては、Fcは免疫グロブリンドメインCガンマ2及びCガンマ3C[ガンマ]2及びC[ガンマ]3、並びにCガンマlC[ガンマ]lとCガンマ2C[ガンマ]2との間のヒンジを含む。Fc領域の境界は変化し得るが、ヒトIgG重鎖Fc領域は通常、そのカルボキシル末端に対して残基C226又はP230を含むように定義され、ここで番号付けはKabatにおけるEUインデックスに従う。Fcはこの領域のことを分離して指していてもよいし、Fcポリペプチド、例えば抗体と関連してこの領域を指していてもよい。本明細書で使用される変異ヒトIgG1重鎖定常領域は、親ヒトIgG1重鎖定常領域とは少なくとも1つのアミノ酸修飾によって異なるヒトIgG1重鎖定常領域を意味する。本明細書で使用されるFc変異体又は変異Fc又は変異ヒトIgG1Fc領域は、親Fc配列の配列とは少なくとも1つのアミノ酸修飾によって異なるFc配列を意味する。変異ヒトIgG1重鎖定常領域又はFc変異体は、親Fcポリペプチドと比較して1つ又はそれ以上のアミノ酸修飾を含み、ここでこのアミノ酸修飾単数又は複数は、1つ又はそれ以上の最適化された特性を生じる。本発明の変異ヒトIgG1重鎖定常領域又はFc変異体は、アミノ酸配列において、その親IgG1と少なくとも1つのアミノ酸修飾によって異なる。従って、本発明の変異ヒトIgG1重鎖定常領域又はFc変異体は、親と比較して少なくとも1つのアミノ酸修飾を有する。あるいは、本発明の変異ヒトIgG1重鎖定常領域は、親と比較して1つより多くのアミノ酸修飾を有し得、例えば定常領域免疫グロブリンドメイン全体の、又は好ましくは異なるアイソタイプの1つのアイソタイプのFc領域の変換、例えばヒトIgG1重鎖定常領域のFc領域のヒトIgG3由来のFc領域への変換を含み得、これはヒトIgG1由来のCH1、ヒトIgG1由来のヒンジ及びヒトIgG3由来のFc領域を含むアイソタイプ変異体を生じる。修飾は、分子生物学を使用して遺伝子的に行われ得、又は酵素的若しくは化学的に行われ得る。本発明のFc変異体は、いずれかの免疫グロブリン遺伝子のいずれかのアロタイプ又は同型アロタイプisoallotypeにより実質的にコードされ得る。好ましい実施態様において、本発明のFc変異体は、G1m1、G1m2、G1m3、G1m17、nG1m1、nG1m2、及び/又はnG1m17として分類されるIgG1配列を含む抗体又はFc融合において用途を見出す。従って、IgGIアイソタイプの文脈において、本発明のFc変異体は、位置214においてLysG1m17若しくはArgG1m3、Asp356/Leu358G1m1若しくはGlu356/Met358nG1m1、及び/又は位置431においてGIyG1m2若しくはAlanG1m2を含み得る。本明細書において使用される用語アイソタイプ変異体は、1つのアイソタイプの少なくとも1つのアミノ酸、好ましくは1つのアイソタイプの重鎖定常領域の少なくとも1つのアミノ酸を、整列された異なるアイソタイプにおける対応するアミノ酸に変換するアミノ酸修飾を含む。アミノ酸修飾は、定常領域免疫グロブリンドメイン全体の、又は好ましくは異なるアイソタイプにおける1つのアイソタイプのFc領域の変換、例えばヒトIgG1由来のCH1、ヒトIgG1由来のヒンジ及びヒトIgG3由来のFc領域を含むアイソタイプ変異体を生じるヒトIgG1重鎖定常領域のFc領域のヒトIgG3由来のFc領域への変換を含み得る。本明細書においてヒンジ又はヒンジ領域又は抗体ヒンジ領域は、抗体の第一の定常ドメインと第二の定常ドメインとの間のアミノ酸を含む可動性ポリペプチドを意味する。構造的には、IgGCH1ドメインはEU位置220で終わり、そしてIgGCH2ドメインはEU位置237の残基で始まる。従ってIgGについては、抗体ヒンジは位置221IgGIにおいてD221~位置231IgGIにおいてA231を含むように本明細書において定義され、ここで番号付けはKabatにおけるEUインデックスに従う。本明細書で使用される用語エフェクター機能は、抗体Fc領域のFc受容体又はリガンドとの相互作用から生じる生化学的事象を含む。本明細書で使用される用語エフェクター機能としては、ファゴサイトーシス、オプソニン作用、細胞結合、リセット、補体依存性細胞傷害CDC、C1q結合、Fc[ガンマ]受容体に対する抗体の結合親和性、又は抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCが挙げられる。好ましくは、エフェクター機能は補体依存性細胞傷害CDC及び/又は抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCである。エフェクター機能は、当該分野で公知であり市販されている標準的なインビトロアッセイにより測定される。通常、ADCCは本出願の実施例2において記載されるような乳酸デヒドロゲナーゼLDH放出アッセイにより測定され、そしてCDCは、本出願の実施例1において記載される細胞ベースのアッセイにより測定される。本明細書で使用される用語エフェクター機能を変更する又は変化したエフェクター機能を示すは、変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含む抗体、例えばヒト化抗α2インテグリン抗体が、親抗体と比較して増強されたエフェクター機能を示すこと、すなわち、変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含む抗体のエフェクター機能は、親抗体のエフェクター機能より、10より多く、好ましくは20より多く、より好ましくは30より多く、最も好ましくは50より多く、特に60より多く、最も特定には70より多く高いということを含む。本明細書で使用される用語ADCC又は抗体依存性細胞媒介性細胞傷害は、Fc[ガンマ]Rsを発現する非特異的細胞傷害性細胞が標的細胞上に結合した抗体を認識し、その後標的細胞の溶解を引き起こす細胞媒介性の反応を含む。種々の局面において、増強されたADCCエフェクター機能は、増強された効力又は増強された有効性を意味し得る。実験の文脈において使用される効力は、特定の治療効果が観察される場合の抗体の濃度EC50最大半量有効濃度を意味する。実験の文脈において使用される有効性は、飽和レベルの抗体での最大の可能なエフェクター機能を意味する。本明細書で使用される用語CDC又は補体依存性細胞傷害は、1つ又はそれ以上の補体タンパク質成分が標的細胞上に結合した抗体を認識し、その後標的細胞の溶解を引き起こす反応を含む。本明細書で使用される用語対象者はヒト又は非ヒト動物を含む。用語非ヒト動物は、全ての脊椎動物、例えば、哺乳動物及び非哺乳動物、例えば非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ニワトリ、両生類、は虫類などを含む。好ましくは対象者はヒトである。細胞傷害性薬剤には、細胞の機能を阻害若しくは防止し、かつ/又は細胞の破壊を引き起こす物質が含まれる。それらTheには、放射性同位体例えば131I、125I、90Y及び186Re、化学療法剤、及び毒素、例えば細菌、真菌、植物若しくは動物起源の酵素的に活性な毒素、又はそれらのフラグメントが含まれ得る。非細胞傷害性薬剤は、細胞の機能を阻害も防止もせず、かつ/又は細胞の破壊を引き起こさない物質を指す。非細胞傷害性薬剤には、活性化されて細胞傷害性になることができる薬剤が含まれ得る。非細胞傷害性薬剤はビーズ、リポソーム、マトリックス又は粒子を含み得る例えば、米国特許公開第2003/0028071号及び同第2003/0032995号これらは参照により本明細書に加入されるを参照のこと。このような薬剤は、本明細書に記載される抗α2β1インテグリン抗体に結合、カップリング、連結又は付着され得る。化学療法剤は、がんの処置において有用な化学化合物を指す。化学療法剤の例としては、限定されないが、アドリアマイシン、ドキソルビシン、5-フルオロウラシル、シトシンアラビノシドAra-C、シクロホスファミド、チオテパ、タキソテールドセタキセル、ブスルファン、シトキシンCytoxin、タキソール、メトトレキサート、シスプラチン、メルファラン、ビンブラスチン、ブレオマイシン、エトポシド、イホスファミド、マイトマイシンC、ミトキサントロン、ビンクレイスチンVincreistine、ビノレルビン、カルボプラチン、テニポシド、ダウノマイシン、カルミノマイシン、アミノプテリン、ダクチノマイシン、マイトマイシン、エスペラミシン米国特許第4,675,187号を参照のこと、メルファラン及び他の関連するナイトロジェンマスタードが挙げられる。単離された核酸分子は、同定され、そして通常は供給源例えば抗体核酸の天然供給源中にある付随する少なくとも1つの混入核酸分子から分離された核酸分子を指す。単離された核酸分子は、天然で見出される形態又は状態以外のものである。従って単離された核酸分子は、天然細胞に存在するままの核酸分子とは区別される。しかし、単離された核酸分子は、例えば核酸分子が天然細胞とは異なる染色体上の位置にある場合の、通常その抗体を発現する細胞中に含有する核酸分子を含む。細胞、細胞株、及び細胞培養物は、しばしば交換可能に使用され、そして全てのこのような表示は子孫を含む。形質転換体及び形質転換された細胞例えば、核酸、ベクター、ウイルスなどのトランスフェクション、形質転換又は形質導入により得られるは、初代対象者細胞、及び移入transfersの数に関係なくそれらから誘導される培養物を含む。計画的又は偶発性の変異のために、全ての子孫がDNAの内容において正確に同一でなくてもよいということも理解される。元の形質転換された細胞についてスクリーニングされたものと同じ機能又は生物学的活性を有する変異体子孫が含まれる。別の表示が意図される場合、それは文脈から明らかだろう。変異ヒトIgG1重鎖定常heavyconstantドメインを含むヒト化抗α2インテグリン抗体本発明は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、ヒト軽鎖定常領域及び変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含むヒト化抗α2インテグリン抗体を提供するが、変異ヒトIgG1重鎖定常領域は、親ヒト化抗α2インテグリン抗体のヒトIgG1重鎖定常領域と比較して少なくとも1つのアミノ酸修飾を含み、該抗体は親ヒト化抗α2インテグリン抗体と比較して変化したエフェクター機能を示す。一局面において、本開示は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、ヒト軽鎖定常領域及び変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含むヒト化抗α2インテグリン抗体を提供し、ここで変異ヒトIgG1重鎖定常領域は、ヒトIgG1由来のCH1、ヒトIgG1由来のヒンジ及びヒトIgG3由来のFc領域を含むアイソタイプ変異体である。一実施態様において、アイソタイプ変異ヒトIgG1重鎖定常領域は配列番号35を含む。一局面において、本開示は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、ヒト軽鎖定常領域及び変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含むヒト化抗α2インテグリン抗体を提供し、ここで変異ヒトIgG1重鎖定常領域は、ヒトIgG3由来のCH1、ヒトIgG1由来のヒンジ及びヒトIgG3由来のFc領域を含むアイソタイプ変異体である。一実施態様において、アイソタイプ変異ヒトIgG1重鎖定常領域は配列番号36を含む。一局面において、本開示は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、ヒト軽鎖定常領域及び変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含むヒト化抗α2インテグリン抗体を提供し、ここで変異ヒトIgG1重鎖定常領域は、親ヒト化抗α2インテグリン抗体のヒトIgGFc領域と比較して少なくとも1つのアミノ酸修飾を含む変異ヒトIgG1Fc領域を含む。一実施態様において、アミノ酸修飾は、269、298、及び324からなる群より選択されるアミノ酸位置でのアミノ酸置換、好ましくはアミノ酸位置298及び/又は324におけるアミノ酸置換を含み、ここで群の各メンバーのアミノ酸位置は、Kabatにおいて示される付番方式を利用して示される。別の実施態様において、アミノ酸修飾は、E269D、S298A、及びS324Nからなる群より選択されるアミノ酸置換、好ましくはアミノ酸置換S298A及び/又はS324Nを含み、ここで群の各メンバーのアミノ酸位置は、Kabatにおいて示される付番方式を利用して示される。別の実施態様において、アミノ酸修飾は、269/298、269/324、298/324、及び269/298/324からなる群より選択されるアミノ酸位置でのアミノ酸置換の組み合わせ好ましくは298/324、又は269/298/324を含み、ここで群の各メンバーのアミノ酸位置はKabatにおいて示される付番方式を利用して示される。別の実施態様において、アミノ酸修飾は、E269D/S298A、E269D/S324N、S298A/S324N、及びE269D/S298A/S324Nからなる群より選択されるアミノ酸置換の組み合わせ好ましくはS298A/S324N又はE269D/S298A/S324Nを含み、ここで群の各メンバーのアミノ酸位置は、Kabatにおいて示される付番方式を利用して示される。一実施態様において、変異ヒトIgG1Fc領域は、配列番号37~43からなる群より選択される配列を含む。変更されるエフェクター機能は、通常は補体依存性細胞傷害CDC及び/又はC1q結合及び/又は抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCC及び/又はFc[ガンマ]受容体に対する抗体の結合親和性、好ましくは補体依存性細胞傷害CDC及び/又は抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCである。CDC、C1q結合、ADCC、及びFc[ガンマ]受容体に対する抗体の結合親和性は標準的なインビトロアッセイで測定され、これらは当該分野で公知であり、市販されている。通常、ADCCは例えば本出願の実施例2において記載されるような乳酸デヒドドロゲナーゼLDH放出アッセイにより測定され、そしてCDCは例えば本出願の実施例1において記載される細胞ベースのアッセイによる測定である。好ましくは、変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含む本開示のヒト化抗α2インテグリン抗体は、親ヒト化抗体と比較して、上記のようなインビトロアッセイにおいて改善されたCDCを示す。本明細書で使用される改善されたCDCを示すことExhibitionofimprovedCDC又は改善されたCDCを示すことexhibitingimprovedCDCは、a親抗体と比較して増強されたCDCを示すこと、すなわち、親ヒト化抗α2インテグリン抗体が既にCDCを示し、これがヒトIgG1重鎖定常領域のアミノ酸修飾により増強されること、及びb親ヒト化抗α2インテグリン抗体と比較して新たにCDCを示すこと、すなわち親ヒト化抗α2インテグリン抗体はCDCを示さず、それ故CDCはヒトIgG1重鎖定常領域のアミノ酸修飾により新たに導入されたということを含む。従って、さらなる局面において、本開示は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、ヒト軽鎖定常領域及び変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含むヒト化抗α2インテグリン抗体を提供するが、変異ヒトIgG1重鎖定常領域は、親ヒト化抗α2インテグリン抗体のヒトIgG1重鎖定常領域と比較して少なくとも1つのアミノ酸修飾を含み、そして該抗体は、親ヒト化抗体と比較して改善された補体依存性細胞傷害CDCを示す。親ヒト化抗体と比較して改善された補体依存性細胞傷害CDCを示すヒト化抗α2インテグリン抗体の好ましい変異ヒトIgG1重鎖定常領域は、S324N、S298A/S324N、及びE269D/S298A/S324Nからなる群より選択されるアミノ酸置換を含む変異ヒトIgG1Fc領域を含み、より好ましくは、変異ヒトIgG1Fc領域は、配列番号39、42及び43からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む。一実施態様において、親ヒト化抗α2インテグリン抗体と比較して改善された補体依存性細胞傷害CDCを示す、変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含むヒト化抗α2インテグリン抗体は、親ヒト化抗体と同等の抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCを示す。親ヒト化抗体と同等のADCCを示すことは、親ヒト化抗体のADCCの±50、好ましくは±40、より好ましくは±30、最も好ましくは±20、特に±10のADCCを含む。親抗体としてのIgG1抗体、例えばヒト化IgG1抗α2インテグリン抗体がADCCを示すことは公知である。しかし、IgG1重鎖定常領域の改善された補体依存性細胞傷害CDCを生じる修飾、例えばアミノ酸の置換がADCCに影響を有するかどうかは予測不可能である。従って、改善されたCDCを示す、変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含む本発明のヒト化抗α2インテグリン抗体は、驚くべきことに親ヒト化抗体と同等のADCCを示す。さらなる局面において、本開示は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、ヒト軽鎖定常領域及び変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含むヒト化抗α2インテグリン抗体を提供し、ここで変異ヒトIgG1重鎖定常領域は、親ヒト化抗α2インテグリン抗体のヒトIgGFc領域と比較して少なくとも1つのアミノ酸修飾を含む変異ヒトIgG1Fc領域を含み、一方で該抗体は親ヒト化抗体と比較して改善された抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCを示す。親ヒト化抗体と比較して改善された抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCを示すヒト化抗α2インテグリン抗体の好ましい変異ヒトIgG1重鎖定常領域は、E269D、S298A、S298A/S324N、及びE269D/S298A/S324Nからなる群より選択されるアミノ酸置換を含む変異ヒトIgG1Fc領域を含み、より好ましくは、変異ヒトIgG1Fc領域は、配列番号37、38、42及び43からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む。さらなる局面において、本開示は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、ヒト軽鎖定常領域及び変異ヒトIgG1重鎖定常領域を含むヒト化抗α2インテグリン抗体を提供し、ここで変異ヒトIgG1重鎖定常領域は、親ヒト化抗α2インテグリン抗体のヒトIgGFc領域と比較して少なくとも1つのアミノ酸修飾を含む変異ヒトIgG1Fc領域を含み、ここでアミノ酸修飾は、アミノ酸置換S298A/S324N又はE269D/S298A/S324Nであり、一方で該抗体は、親ヒト化抗α2インテグリン抗体と比較して改善された補体依存性細胞傷害CDC及び改善された抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCを示す。マウスモノクローナル抗体クローンBHA2.1の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域の両方からのCDRを含む本発明の抗体が構築されたHanganetal.、CancerRes.56:3142-31491996。抗体を構築するための好ましい出発物質は、ヒトα2インテグリンに特異的な機能遮断抗体であり、かつ標的にされたα2インテグリン内のインタクトなI-ドメインの存在に結合及び活性が依存性である、BHA2.1ハイブリドーマ例えば、TMC-2206により分泌されるような抗α2インテグリン抗体である。TMC-2206又はBHA2.1のエピトープ特異性を有するヒト化抗体が好ましく、これにはα2インテグリン分子の不活性コンホメーションに結合する抗体、及び/又はリガンド模倣物として作用しない抗体が含まれる。白血球及び血小板の両方に存在するα2β1インテグリンと相互作用するが、血小板活性化、コラーゲン上の活性化血小板の凝集不全を引き起こさず、出血に対して最小の効果しか有していないか若しくは効果を有しておらず、かつ/又は投与された濃度インビボでの治療用量を含むで出血合併症を伴わない、TMC-2206又はBHA2.1のエピトープ特異性を有するヒト化抗体が好ましい。従って、アミノ酸配列GFSLTNYGIH配列番号1を含むHCDR1、アミノ酸配列VIWARGFTNYNSALMS配列番号2を含むHCDR2及びアミノ酸配列ANDGVYYAMDY配列番号3を含むHCDR3を含む重鎖可変領域を含む上述のヒト化抗α2インテグリン抗体もまた提供される。アミノ酸配列SAQSSVNYIH配列番号4を含むLCDR1、アミノ酸配列DTSKLAS配列番号5を含むLCDR2及びアミノ酸配列QQWTTNPLT配列番号6を含むLCDR3を含む軽鎖可変領域を含む上述のヒト化抗α2インテグリン抗体もまた提供される。アミノ酸配列GFSLTNYGIH配列番号1を含むHCDR1、アミノ酸配列VIWARGFTNYNSALMS配列番号2を含むHCDR2及びアミノ酸配列ANDGVYYAMDY配列番号3を含むHCDR3を含む重鎖可変領域;並びに/又はアミノ酸配列SAQSSVNYIH配列番号4を含むLCDR1、アミノ酸配列DTSKLAS配列番号5を含むLCDR2及びアミノ酸配列QQWTTNPLT配列番号6を含むLCDR3を含む軽鎖可変領域を含む上述のヒト化抗α2インテグリン抗体もまた提供される。一実施態様において、上述の重鎖可変領域は配列番号7のアミノ酸配列を含む。一実施態様において、上述の重鎖可変領域は、a位置71がLysであるか、b位置73がAsnであるか、c位置78がValであるか、又はda~cのいずれかの組み合わせである、配列番号7のアミノ酸配列を含む。一実施態様において、上述の重鎖可変領域は、配列番号8~19から選択されるアミノ酸配列を含む。一実施態様において、上述の重鎖可変領域は、配列番号17のアミノ酸配列を含む。一実施態様において、上述の重鎖可変領域は、アミノ酸配列WGQGTLVTVSS配列番号20を含むFW4領域をさらに含む。一実施態様において、上述の軽鎖可変領域は、配列番号21のアミノ酸配列を含む。一実施態様において、上述の軽鎖可変領域は、a位置2がPheであるか、b位置45がLysであるか、c位置48がTyrであるか、又はda~cのいずれかの組み合わせである、配列番号21のアミノ酸配列を含む。一実施態様において、上述の軽鎖可変領域は、配列番号22~33から選択されるアミノ酸配列を含む。一実施態様において、上述の軽鎖可変領域は、配列番号30のアミノ酸配列を含む。一実施態様において、上述の軽鎖可変領域は、アミノ酸配列FGQGTKVEIK配列番号34を含むFW4領域をさらに含む。上述の変異ヒトIgG1重鎖定常領域、上述の重鎖及び軽鎖可変領域並びにヒト軽鎖定常領域を含む上述のヒト化抗α2インテグリン抗体がさらに提供される。従って、さらなる実施態様において、抗α2インテグリン抗体は、配列番号47を含む重鎖及び配列番号56を含む軽鎖を含む。さらなる実施態様において、抗α2インテグリン抗体は、配列番号48を含む重鎖及び配列番号56を含む軽鎖を含む。さらなる実施態様において、抗α2インテグリン抗体は、配列番号49~55からなる群より選択される重鎖及び配列番号56を含む軽鎖を含む。親抗体のアミノ酸位置324におけるセリンをアスパラギンと置き換えるアミノ酸置換S324Nを含む変異ヒトIgGFc領域を含む抗体がさらに提供されるが、該抗体は、改善された補体依存性細胞傷害CDCを示す。親抗体のアミノ酸位置324におけるセリンをアスパラギンと置き換えるアミノ酸置換S324Nを含む変異ヒトIgGFc領域を含む抗体がさらに提供されるが、該抗体は、親抗体と比較して改善された補体依存性細胞傷害CDC及び改善された抗体依存性細胞媒介性細胞傷害ADCCを示す。本抗体はさらに、親抗体のアミノ酸位置269におけるグルタミン酸をアスパラギン酸に置き換えるアミノ酸置換E269D、及び/又は親抗体のアミノ酸位置298におけるセリンをアラニンと置き換える置換S298Aを含み得る。本抗体は、キメラ抗体、ヒト化抗体及び完全ヒト抗体からなる群より選択され得る。本抗体は、好ましくはヒト化抗体であり、より好ましくはヒト化抗α2インテグリン抗体である。一実施態様において、上述のヒト化抗α2インテグリン抗体は、ヒトα2インテグリンのIドメインを認識する。一実施態様において、上述のヒト化抗α2インテグリン抗体は、α2β1インテグリンに結合する。一実施態様において、上述のヒト化抗α2インテグリン抗体は、α2又はα2β1インテグリンのα2β1インテグリンリガンドに対する結合を阻害する。通常、α2β1インテグリンリガンドは、コラーゲン、ラミニン、エコーウイルス-1、デコリン、E-カドヘリン、マトリックスメタロプロテイナーゼIMMP-I、エンドレペリンendorepellin、コレクチン及び補体C1qタンパク質から選択され、そして好ましくはコラーゲンである。上述のヒト化抗α2インテグリン抗体をコードする単離された核酸、該核酸を含むベクター、及び該核酸又はベクターを含む宿主細胞もまた提供される。上述のヒト化抗α2インテグリン抗体及び薬学的に許容しうる担体を含む組成物もまた提供される。対象者におけるα2β1インテグリン関連障害を処置する方法もまた提供され、該方法は、対象者に治療有効量の上述のヒト化抗α2インテグリン抗体又は上述の組成物を投与することを含む。α2β1インテグリン関連障害としては、炎症性疾患、自己免疫疾患及び異常な血管新生又は増加した血管新生を特徴とする疾患が挙げられ、特に炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、移植に対する反応、視神経炎、脊髄外傷、関節リウマチ、全身性エリテマトーデスSLE、糖尿病、多発性硬化症、レイノー症候群Reynaudssyndrome、実験的自己免疫性脳脊髄炎、シェーグレン症候群Sjorgenssyndrome、強皮症、若年型糖尿病、糖尿病性網膜症、加齢性黄斑変性、心血管疾患、乾癬、がん、さらには炎症反応を誘発する感染であり、より特定の多発性硬化症、関節リウマチ、視神経炎及び脊髄外傷である。上述のヒト化抗α2インテグリン抗体又は上述の組成物により処置され得るがんは、扁平上皮がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺の腺がん、及び肺の扁平上皮がんを含む肺がん、腹膜のがん、ヘパトーマ、消化器がんを含む胃がんgastricorstomachcancer、膵臓がん、神経繆芽腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、ヘパトーマ、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜又は子宮がん、唾液腺がん、腎臓がん又は腎がんkidneyorrenalcancer、肝臓がん、前立腺がん、外陰部がん、甲状腺がん、肝がん及び種々の型の頭頸部がん、さらには低悪性度/濾胞性非ホジキンリンパ腫NHL;小リンパ球性SLNHL;中悪性度/濾胞性NHL;中悪性度びまん性NHL;高悪性度免疫芽球性NHL;高悪性度リンパ芽球性NHL;高悪性度小型非切れ込み核細胞性NHL;巨大腫瘤病変NHL;マントル細胞リンパ腫;AIDS関連リンパ腫;ワルデンシュトレームマクログロブリン血症;慢性リンパ性白血病CLL;急性リンパ芽球性白血病ALL;ヘアリーセル白血病;慢性骨髄芽球性白血病;及び移植後リンパ増殖性障害PTLDを含むB細胞リンパ腫、さらには母斑症phakomatosesに関連する異常血管増殖、脳腫瘍に関連する浮腫のような浮腫、メイグス症候群、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、線維肉腫、骨肉腫、及び類表皮がんからなる群より選択される。本明細書に記載される抗α2インテグリン抗体を使用して好ましく処置されるがんは、乳がん、結腸直腸がん、直腸がん、非小細胞肺がん、非ホジキンリンパ腫NHL、腎細胞がん、前立腺がん、肝臓がん、膵臓がん、軟部組織肉腫、カポージ肉腫、カルチノイドがん、頭頸部がん、黒色腫、卵巣がん、中皮腫、及び多発性骨髄腫からなる群より選択される。本発明の処置を受け入れやすいamendibleforがん性状態としては転移性がんが挙げられる。従って、乳がん、結腸直腸がん、直腸がん、非小細胞肺がん、非ホジキンリンパ腫NHL、腎細胞がん、前立腺がん、転移性前立腺がん、肝臓がん、膵臓がん、軟部組織肉腫、カポージ肉腫、カルチノイドがん、頭頸部がん、黒色腫、卵巣がん、中皮腫、多発性骨髄腫、転移性結腸直腸がん及び転移性乳がんからなる群より選択されるがんはさらにより好ましい。非小細胞肺がん、膵臓がん、神経繆芽腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝臓がん、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、腎臓がん、前立腺がん、転移性前立腺がん、中皮腫、線維肉腫、骨肉腫、類表皮がん、転移性結腸直腸がん、転移性前立腺がん及び転移性乳がんからなる群より選択されるがんは特に好ましい。非小細胞肺がん、膵臓がん、神経繆芽腫、肝臓がん、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、腎臓がん、前立腺がん、中皮腫、線維肉腫、転移性結腸直腸がん、転移性前立腺がん及び転移性乳がんからなる群より選択されるがんはより特に好ましい。膵臓がん、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、非小細胞肺がん、線維肉腫、転移性結腸直腸がん、前立腺がん、転移性前立腺がん及び転移性乳がんからなる群より選択されるがんはさらにより特に好ましい。膵臓がん、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、非小細胞肺がん、及び線維肉腫からなる群より選択されるがんは最も特に好ましい。膵臓がん、乳がん又は転移性乳がんは最も好ましく、特に膵臓がんが好ましい。前立腺がん又は転移性前立腺がんは等しく最も特に好ましい。本明細書で言及される乳がんは乳腺がんを含む。本発明の方法は、血管化腫瘍の処置に特に適している。好ましくは、本方法は、a血小板活性化、b血小板凝集、c循環血小板数の減少、d出血性合併症、又はea~dのいずれかの組み合わせと関連づけられない。コラーゲンに対する白血球の結合を阻害するために有効な量の、上述のヒト化抗α2インテグリン抗体を対象者に投与することを含む、コラーゲンに対する白血球の結合を阻害するための方法も提供される。上述のヒト化抗α2インテグリン抗体又は上述の組成物を従ってaccording、及びα2β1インテグリン関連障害の処置のための指示書を含むキットも提供される。ヒト化抗α2インテグリン抗体及び複合体の構築軽鎖可変領域のヒトアクセプター分子が、可能性のあるアクセプター分子可変領域とマウス抗体の軽鎖可変領域との間の相同性の考慮に基づいて選択される抗体が構築され得る。生殖系列候補ヒトアクセプター分子は、潜在的な免疫原性を低減するために好ましい。生殖系列データベースは、重鎖FW3領域の末端を通って部分的にCDR3配列までを読み取る抗体配列で構成されている。FW4領域の選択については、選択された生殖系列分子から誘導された成熟抗体配列のデータベースを検索することが好ましく、そして組み換え抗体分子における使用のための適度に相同なFW4領域を選択することも好ましい。ヒトアクセプター分子は、好ましくはマウスドナー分子と同じ軽鎖クラスから選択され、そしてマウスドナー分子の可変領域の同じ標準的canonical構造クラスのものである。軽鎖可変領域についてのヒトアクセプター分子の選択に関する二次的な考慮は、マウスドナー分子とヒトアクセプター分子との間のCDR長における相同性を含む。ヒトアクセプター抗体分子は、好ましくはV-BASEデータベースに対する相同性検索により選択され、そしてKabat、及び公開NCBIデータベースのような他のデータベースも同様に使用され得る。TMC-2206と同じか又は類似したエピトープ特異性及び/若しくは機能特性を有するヒト化抗α2インテグリン抗体については、好ましい軽鎖ヒトアクセプター分子は、FW1-3領域については生殖系列抗体配列A14、及びFW4については配列FGQGTKVEIK配列番号34であり、これは成熟カッパ1軽鎖例えば、軽鎖配列AAB24132NCBIエントリーgi/259596/gb/AAB24132の共通FW-4を表す。重鎖可変領域のヒトアクセプター分子が、可能性のあるアクセプター分子可変領域とマウス抗体の重鎖可変領域との間の相同性の考慮に基づいて選択される抗体が構築され得る。生殖系列候補ヒトアクセプター分子は、潜在的な抗原性を低減するために好ましい。生殖系列データベースは、重鎖FW3領域の末端を通って部分的にCDR3配列までを読み取る抗体配列で構成されている。FW4領域の選択については、選択された生殖系列分子から誘導された成熟抗体配列のデータベースを検索することが好ましく、そして組み換え抗体分子における使用のために適度に相同なFW4領域を選択することも好ましい。ヒトアクセプター分子は、好ましくはマウスドナー分子と同じ重鎖クラスから選択され、そしてマウスドナー分子の可変領域の同じ標準的構造クラスのものである。重鎖可変領域についてのヒトアクセプター分子の選択についての二次的な考慮は、マウスドナー分子とヒトアクセプター分子との間のCDR長における相同性を含む。ヒトアクセプター抗体分子は、好ましくはV-BASEデータベースに対する相同性検索により選択されるが、Kabat及び公開NCBIデータベースのような他のデータベースも同様に使用され得る。TMC-2206と同じか又は類似するエピトープ特異性及び/若しくは機能特性を有する抗α2インテグリン抗体については、好ましい重鎖アクセプター分子は、FW1-3領域については生殖系列抗体配列4-59、及びFW4領域については抗体、CAA48104.1NCBIエントリー、gi/33583/emb/CAA48104.1、生殖系列配列4-59から誘導される成熟抗体である配列番号20。モノクローナル抗体は、最初にKohleretal.、Nature、256:4951975により記載されたハイブリドーマ法を使用して作製され得、又は組み換えDNA法例えば米国特許第6,204,023号により作製され得る。モノクローナル抗体はまた、米国特許第6,025,155号及び同第6,077,677号、さらには米国特許出願公開第2002/0160970号及び同第2003/0083293号例えばLindenbaum、etal.、NucleicAcidsResearch3221:01772004も参照のことに記載される技術を使用しても作製され得る。ヒト化抗α2β1インテグリン抗体のアミノ酸配列変異体は、適切なヌクレオチド変化をヒト化抗α2β1インテグリン抗体DNAに導入することにより、又はペプチド合成により製造される。このような変異体は、例えば、本発明の抗α2インテグリン抗体について示されるアミノ酸配列内の残基からの欠失、これらの残基への挿入及び/又はこれらの残基の置換を含む。アミノ酸の欠失、挿入、及び置換のいずれかの組み合わせが、最終構築物に到達するために行われるが、ただし最終構築物は望ましい特徴を有する。アミノ酸変化はまた、グリコシル化部位の数及び位置の変更のように、ヒト化抗α2インテグリン抗体の翻訳後プロセスを変更し得る。抗体をヒト又はヒト様にする例えばヒト化ために使用される多数の方法がある。抗体をヒト化するためのアプローチは長年にわたって変化してきた。1つのアプローチはヒト定常領域に融合されたマウス可変領域、いわゆるマウス-ヒトFcキメラを生成することであった例えば、Morrisonetal、Proc.Natl.Acad.Sci.USA81:6851-68551984;米国特許第5,807,715号を参照のこと。別のアプローチは、CDRがそれらの超可変性Kabatetal、J.Biol.Chem.252:6609-66161977、Kabat、Adv.ProteinChem.32:1-751978及び標準的構造ChothiaandLesk、J.Mol.Biol.1964:901-171987;Lazakanietal.、J.Mol.Biol.272:9291997に基づいて容易に同定され得、そして例えばJonesetal.、Nature3216069:522-51986;例えば、米国特許第5,225,539号;米国特許第6,548,640号を参照のことにより示されるように、単に非ヒトCDR領域ドナーCDRと呼ばれるをヒトフレームワークアクセプターフレームワークと呼ばれる上に移植することによりヒト化され得るということを利用する。6つのCDRループがかたまって存在し、そして結晶解析に基づいて、CDRに隣接するか又は重鎖-軽鎖境界におけるいわゆるバーニアVernier帯内の決定的なフレームワーク残基が容易に同定され得る例えば、ChothiaandLesk、J.Mol.Biol.1964:901-171987;Chothiaetal.、J.Mol.Biol.1863:651-631985;Chothiaetal.、Nature3426252:877-831989を参照のこと。これらの残基は、6つのCDRの正確な相対的定位を回復するためにマウス残基に復帰変異され得る例えば、Verhoyenetal.、Science2394847:1534-61988;Reichmanetal.、Nature3326162:323-71988;Tempestetal.、BiotechnologyNY93:266-711991を参照のこと。可変領域は、マウスとヒトとの間に比較的高い相同性を有するファミリーに分類され得るので例えば、PascualandCapraAdv.Immunol.49:1-741991において概説される、これらの初期の研究は、親和性の損失の可能性が、ヒトアクセプター分子としての使用のために目的のマウス抗体に対して最も高い相同性を有するヒト生殖系列配列を選択することにより、移植された抗体において最少にされ得るということも示した例えば、米国特許第5,225,539号;Verhoyenetal.、Science2394847:1534-61988を参照のこと。非ヒトα2インテグリン抗体をヒト化するための方法は、例えばWO2007/056858に記載される。抗α2インテグリン抗体をヒト化するために、免疫化からの製造又は市販の抗体の購入を含めて、非ヒト抗体出発物質を入手する。本発明において使用される抗体をヒト化するため、例えばTMC-2206をヒト化するための例となる技術はWO2007/056858に記載される。抗体の生物学的特性の実質的な改変は、a置換の領域における、例えばシート若しくはらせんコンホメーションのようなポリペプチド骨格の構造、b標的部位における分子の電荷若しくは疎水性、又はc側鎖の体積の維持に対するそれらの効果において有意に異なる置換を選択することにより達成される。天然に存在する残基は、共通の側鎖特性に基づいてグループに分けられる:1疎水性:ノルロイシン、met、ala、val、leu、ile;2中性親水性:cys、ser、thr;3酸性:asp、glu;4塩基性:asn、gln、his、lys、arg;5鎖の配向に影響を与える残基:gly、pro;及び6芳香族:trp、tyr、phe。ヒト化抗α2インテグリン抗体の適切な確認confirmationの維持に関与しないいずれのシステイン残基も、分子の酸化的安定性を改善するため及び異常な架橋を防止するために、一般的にはセリンと置換され得る。反対に、システインの結合がその安定性を改善するために抗体に加えられ得る特に抗体がFvフラグメントのような抗体フラグメントである場合。抗体の別の型のアミノ酸変異体は、抗体の元のグリコシル化パターンを変更する。変更するということは、抗体において見られる1つ若しくはそれ以上の炭水化物部分を除去すること、及び/又は抗体に存在しない1つ若しくはそれ以上のグリコシル化部位を加えることを意味する。抗体のグリコシル化は、典型的にはN連結又はO連結のいずれかである。N連結とは、炭水化物部位がアスパラギン残基の側鎖に結合することを指す。トリペプチド配列アスパラギン-X-セリン及びアスパラギン-X-スレオニン[ここでXはプロリンを除くいずれかのアミノ酸である]は、炭水化物部分のアスパラギン側鎖への酵素的結合の認識配列である。従って、ポリペプチド中のこれらのトリペプチド配列のいずれかの存在は、潜在的なグリコシル化部位を生じる。O連結グリコシル化は、糖N-アセイルガラクトサミンaceylgalactosamine、ガラクトース、又はキシロースのうちの1つの、ヒドロキシアミノ酸、最も一般的にはセリン又はスレオニンへの結合を指すが、5-ヒドロキシプロリン又は5-ヒドロキシリジンも使用され得る。抗体に対するグリコシル化部位の付加又は欠失は、N連結グリコシル化部位については上記のトリペプチド配列の1つ又はそれ以上を含有するか又は欠くようにアミノ酸配列を変更することにより都合よく達成され得る。この変更は、O連結グリコシル化部位については元の抗体の配列への1つ又はそれ以上のセリン又はスレオニン残基の付加、これらの残基での置換、又はこれらの残基の欠失によっても行われ得る。ヒト化抗α2インテグリン抗体のアミノ酸配列変異体をコードする核酸分子は、当該分野で公知の様々な方法により製造される。これらの方法としては、限定されないが、天然に存在するアミノ酸配列変異体の場合は天然供給源からの単離、又は前に製造された変異体若しくはヒト化抗α2インテグリン抗体の非変異バージョンのオリゴヌクレオチド媒介又は部位特異的変異誘発、PCR変異導入、若しくはカセット式変異誘発による製造が挙げられる。通常、ヒト化抗α2インテグリン抗体のアミノ酸配列変異体は、元のヒト化抗体アミノ酸配列と少なくとも75、より好ましくは少なくとも80、より好ましくは少なくとも85、より好ましくは少なくとも90、そして最も好ましくは少なくとも95例えば80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、及び100を含むのアミノ酸配列同一性を有する、重鎖又は軽鎖のいずれか例えば、それぞれ配列番号17又は配列番号30におけるような可変領域配列のアミノ酸配列を有する。この配列に関して同一性又は相同性は、本明細書において、必要な場合は最大の配列同一性パーセントを達成するように、そしていずれの保存的置換上記のとおりも配列同一性の一部として考慮せずに、配列を整列させてギャップを導入した後、候補配列中でヒト化抗α2インテグリン残基と同一であるアミノ酸残基のパーセントとして定義される。抗体配列へのN末端、C末端、又は内部の伸長、欠失又は挿入はどれも配列同一性にも相同性にも影響を及ぼさないと解釈されるものとする。従って、配列同一性は、2つのポリペプチドのアミノ酸の位置における類似性を比較するために一般的に使用される標準的な方法により決定され得る。BLAST又はFASTAのようなコンピュータープログラムを使用して、2つのポリペプチドを、一方もしくは両方の配列の全長に沿って、又は一方若しくは両方の配列の所定の部分に沿ってそれらのそれぞれのアミノ酸の最適なマッチングのために整列される。これらのプログラムは、デフォルトオープンペナルティopeningpenalty及びデフォルトギャップペナルティを提供し、そしてPAM250のようなスコアリングマトリクス標準的なスコアリングマトリクス;Dayhoffetal.、inAtlasofProteinSequenceandStructure、vol5、supp.31978を参照のことがコンピュータープログラムと共に使用され得る。例えば、同一性パーセントは:完全な一致の総数に100をかけて、次いで一致した範囲内のより長い配列の長さ及び2つの配列を整列させるためにより長い配列中に導入されたギャップの数の合計で割ったものとして計算され得るcanthebe。いくつかの実施態様において、少なくとも2つの異なるエピトープに対する結合特異性を有する多重特異性例えば二重特異性ヒト化抗α2インテグリン抗体を生成することが望ましいかもしれない。例となる二重特異性抗体例えば、2つの異なる結合アームを有するは、α2β1インテグリンタンパク質の2つの異なるエピトープに結合し得る。あるいは、抗α2インテグリンアームは、その表面に結合したα2β1インテグリンを有する細胞に対する細胞防御機構に集中するように、白血球上のトリガー分子、例えばT細胞受容体分子例えばCD2又はCD3、又はIgGのFc受容体Fc又は関節リウマチについて承認されたいずれかの処置と関連して投与され得る。多発性硬化症については、インターフェロンβ、Avonex、Copaxon、又は多発性硬化症の徴候及び症状の処置のための他の認証された治療と関連して投与され得る。移植については、抗体は、シクロスポリンAのような上で定義された免疫抑制剤と同時に、又は別々に、免疫抑制効果を調節するために投与され得る。あるいは、又はさらに、α2β1インテグリンアンタゴニストは、α2β1インテグリン関連障害に罹患している哺乳動物に投与され得る。このような他の薬剤の有効量は、製剤中に存在する抗α2インテグリン抗体の量、障害又は処置の型、及び上で考察された他の因子に依存する。これらは一般的に、同じ投薬量で、そして本明細書で以前に使用された投与経路で、又は従来使用される投薬量のおよそ1~99で使用される。以下の実施例は例示のために提供されるのであり、限定のためではない。明細書中の全ての引用の開示は、参照により本明細書に明示的に加入される。実施例1:増強された補体媒介性エフェクター機能を有するヒト化抗アルファ2インテグリン抗体変異体そこで記載されるヒト化抗α2インテグリン抗体は、抗α2抗VLA2抗体の新規なサブグループを表し、これらは予期せずインビボ出血合併症がないこと、及び/又は血小板α2β1インテグリン活性化がないことを特徴とする。しかしWO2007/056858において開示されるIgG4抗体は、ADCC及び/又はCDCのようなエフェクター機能を有しておらず、これらは特定の状況下、例えばα2β1インテグリン関連がんの処置のためには望ましく、この場合この機能は、処置の増加した有効性をもたらし得る。従って、これらのエフェクター機能を高度に示す抗α2β1インテグリン抗体を開発することが望ましいだろう。ヒトIgGの4つのアイソタイプは、エフェクター機能及び他の活性の効力において互いに異なる。一般に、効力の順位は、ADCCについてIgG1≧IgG3>>IgG4≧IgG2であり、そしてCDCについてIgG3≧IgG1>>IgG2=IgG4であるNiwaR.etal.、JImmunolMethods2005;306:151-60。この研究において、WO2007/056858に開示される1つの抗VLA-2IgG4抗体重鎖配列番号57、及び軽鎖配列番号56を有するを、天然に存在するヒト抗体アイソタイプ変異体IgG1、IgG2、及びIgG3;操作されたヒトIgG1アイソタイプ変異体、並びにヒトIgG1及びヒトIgG3アイソタイプ変異体のキメラからなる抗VLA2抗体の新しいサブグループを作製するために使用した。全ての変異体を、オーバーラップPCRアセンブリ法に基づく変異誘発技術により作製した。全長抗体変異体を生成するために、それぞれ新しく作製された重鎖ベクターを、軽鎖配列配列番号56をコードする抗VLA-2カッパ軽鎖cDNAを有しそして以下に記載される重鎖ベクターと同一の発現調節エレメントを有する同じ抗VLA-2カッパ軽鎖ベクターを用いてトランスフェクトした。結果として、新規な抗VLA2抗体変異体の重鎖は、新規な全長抗体変異体を規定し;従って重鎖及び対応する全長抗体は同じ名称指定される。天然に存在するヒト抗体アイソタイプに基づく変異体天然に存在するアイソタイプ変異体重鎖を作製するために、重鎖ヒンジ及び配列番号57の定常ドメインそのC末端にに対してKabat残基119配列番号57における残基121に相当するをコードする抗VLA-2IgG4抗体のcDNAを、ヒトIgG1NCBIGenBank受入番号J00228.1、残基1からそのC末端までの配列、ヒトIgG2NCBIGenBank受入番号J00230.1、残基1からそのC末端までの配列、及びヒトIgG3NCBIGenBank受入番号X03604.1、残基2からそのC末端までの配列のヒンジ及び定常ドメインについてのアミノ酸をコードする対応するcDNA配列で置き換えた。これらの天然に存在する重鎖変異体が、その後それぞれ重鎖抗VLA2IgG1配列番号44、重鎖抗VLA2IgG2配列番号45、及び重鎖抗VLA2IgG3配列番号46と指定される新規な抗VLA2抗体を規定する。ヒトIgG1/IgG3ヒンジ-Fcドメインシャフリングに基づく変異体ヒトIgG3抗体は、ヒトIgG1抗体と比較して一般的に増強されたCDCを有し、これは部分的に、IgG3FcがIgG1Fcより高いC1q結合親和性を有するためであるSchumakerVNetal.、Biochemistry、1976、15:5175-81。増強されたCDCを有する抗VLA-2IgG4のキメラを生成するために、ヒトIgG1ヒンジ及び定常ドメインとヒトIgG3のヒンジ及び定常ドメインとのシャフリングストラテジーに着手した。2つのキメラを構築した。抗VLA-2IgG4に基づく第一のキメラを、CH1及びヒトIgG1由来のヒンジをヒトIgG3のFc部分に融合させるように操作し、そしてこれを本明細書では重鎖抗VLA-2IgG-1133配列番号47と呼び;一方、抗VLA-2IgG3に基づく第二の構築物を、ヒトIgG3由来のヒンジをヒトIgG1由来のヒンジと置き換えるように操作し、この後者のキメラを本明細書では重鎖抗VLA-2IgG-3133配列番号48と呼ぶ。抗VLA-2IgG-1133重鎖cDNAコード配列配列番号47を作製するため、抗VLA-2IgG1のための発現ベクター中のCH2及びCH3定常ドメインをコードするKabat残基231からそのC末端までをコードする抗VLA-2IgG1の重鎖cDNAの一部を、ヒトIgG3重鎖遺伝子の対応する部分NCBIGenBank受入番号X03604.1、残基161~377と置き換えた。抗VLA-2IgG-3133重鎖cDNAコード配列配列番号48については、抗VLA-2IgG3重鎖についての発現ベクターにおけるヒンジ領域NCBIGenBank受入番号X03604.1からのELKTPLGDTTHTCPRCPEPKSCDTPPPCPRCPEPKSCDTPPPCPRCPEPKSCDTPPPCPRCPをコードする抗VLA-2IgG3の重鎖cDNAの部分を、ヒトIgG1重鎖遺伝子NCBIGenBank受入番号J00228.1の対応する部分EPKSCDKTHTCPPCPと置き換えた。増強されたCDCを有するアミノ酸変異抗VLA2抗体抗VLA-2IgG1の多数の変異体を、補体依存性細胞傷害CDCを増強させる目的で設計した。Fcγ受容体とのFc相互作用がADCCを媒介するのと同様に、補体構成要素C1qとのFc相互作用がCDCを媒介する。現在Fc/C1q複合体に関して利用可能な3D構造は存在しないが、いくつかの研究は、ヒトIgG上のC1qに対する結合部位を、残基D270、K322、P329及びP331を中心とする領域に位置づけたIdusogieetal.、JImmunolMethods2000、164:4178-4184。抗VLA-2IgG1抗体について増強されたCDCを媒介し得る変異体を調べるために、CH2ドメインのD269-K334領域においてアミノ酸修飾を設計した。これらの変異体cDNAコード配列を作製するために、抗VLA-2IgG1重鎖配列番号44をコードするcDNA、cDNAを以下の置換を含むように変異させた:S324N本明細書では抗VLA-2IgG1-S324Nと呼ばれる;配列番号49、E269D本明細書では抗VLA-2IgG1-E269Dと呼ばれる;配列番号50、及びS298A本明細書では抗VLA-2IgG1-S298Aと呼ばれる;配列番号51。これらの点変異を対で組み合わせることによりさらなる変異体を作製した:E269D、S298Aを組み合わせて本明細書で抗VLA-2IgG1-E269D/S298A配列番号52と呼ばれる変異体を作製した;本明細書で抗VLA-2IgG1-E269D/S324N配列番号53と呼ばれる別の組み合わせはE269D及びS324Nからなる;本明細書で抗VLA-2IgG1-S298A/S324N配列番号54と呼ばれる第三の組み合わせは、S298A及びS324Nの変異を組み合わせた。最後に、全ての3つの変異を加えて本明細書で抗VLA-2IgG1-E269D/S298A/S324N配列番号55と呼ばれる変異体を作製した。これらの変異体をコードするDNA配列を、CMVプロモーター及びウシ成長ホルモンポリアデニル化シグナルを有する改変pREP4Invitrogen、CA、USAベクターに基づくベクターにおいて連結した。この発現ベクターにおいて、マウスVJ2Cリーダーペプチドにより分泌を促進させた。抗VLA2抗体変異体の製造一過性発現のために、等量の各ベクター重鎖上記及び抗VLA-2カッパ軽鎖ベクターを、ポリエチレンイミンPEIを使用して懸濁適応HEK-EBNA細胞ATCC-CRL-10852中に同時トランスフェクトした。典型的には、1mlあたり80万~120万細胞の密度で懸濁状態の細胞100mlを、変異重鎖をコードする発現ベクター50μg及び発現ベクター軽鎖50μgを含有するDNA-PEI混合物を用いてトランスフェクトした。それぞれの操作された鎖の遺伝子をコードする組み換え発現ベクターが宿主細胞中に導入される場合、細胞を4~5日間さらに培養して、0.1プルロニック酸pluronicacid、4mMグルタミン、及び0.25μg/mlジェネティシンを補充した培地EX-CELL293、HEK293-無血清培地、Sigma、Buchs、Switzerland中への分泌を可能にすることにより構築物を製造した。次いでこの構築物を組み換えStreamlinerProteinA媒体mediaGEHealthcareEuropeGmbH、Glattbrugg、Switzerlandを使用して無細胞上清から精製し、そしてさらなる分析に使用した。これらの変異体のうちのいくつかの発現レベルを表1に列挙する。HT1080細胞に対する補体媒介毒性細胞ベースのアッセイを使用して、変異体がCDCを媒介する能力を測定した。仔ウサギ補体による変異体-オプソニン化HT1080細胞の溶解をモニタリングするために乳酸デヒドロゲナーゼLDHの放出を使用して溶解を測定したHarlanLaboratories、C-0099F、ANVENRAY、TheNetherlands。標的細胞HT1080、ATTCNo.CCL-121を完全培地10ウシ胎仔血清FBS、ChemieBrunschwigAG、PAA、Basel、Switzerland及び1UltraglutamineLonza、Verviers、Belgiumを補充したRPMI-1640培地ChemieBrunschwigAG、PAA、Basel、Switzerlandで遠心分離及び再懸濁により2回洗浄した。変異体-抗体を最終濃度1μg/mlで加えた。仔ウサギ血清を完全培地で7.5まで希釈し、そして抗体-オプソニン化標的細胞に加えた。プレートを3時間37°Cでインキュベートした。細胞傷害性を、CytoTox96非放射性細胞傷害性アッセイキットPromega、Madison、USAを使用して測定した。図1は、三つ組で行われたデータ±標準偏差を用いたこのアッセイの典型的な結果を示す。このアッセイにおいて、IgG1コントロールデータ点12番又は親抗VLA-2IgG4抗体データ点1番又は抗VLA-2IgG2データ点3番抗体に起因する特異的な溶解はほとんど観測されなかった。後者の天然に存在するアイソタイプからはCDCは全く期待されないか非常に低いレベルのCDCしか期待されないが、IgG1抗体アイソタイプはIgG4及びIgG2アイソタイプに勝るCDCを有することが予測されていたので、抗VLA-2IgG1データ点2番がCDCの有意な増加をもたらさなかったことはむしろ驚くべきことである。S324N変異が存在する場合のみ、抗VLA-2IgG1-S324Nについて少なくとも6.4倍データ点7番、抗VLA-2IgG1-S298A/S324Nについて6.6倍データ点11番、及び抗VLA-2IgG1-E269D/S298A/S324Nについて9倍データ点10番CDCが増加した。補体誘導溶解はまた、ヒトIgG3抗体アイソタイプ定常領域の構成要素を有する抗体変異体について大いに増加し、CDCは抗VLA-2IgG-1133について少なくとも5.6倍増加しデータ点5番、そして抗VLA-2IgG-3133について少なくとも8.6倍増加したデータ点6番。最大のCDCの増加は、天然に存在する変異体抗VLA-2IgG3データ点4番について観察され、親抗VLA-2IgG4抗体に対して少なくとも9.6倍の増加であった。結論として、これらの結果は、抗VLA-2IgG1抗体の状況におけるS324N変異は強力な補体誘導溶解を回復させることができ、一方で抗VLA-2IgG3変異体はCDCの誘発において抗VLA2抗体変異体のうち最も強力であるということの証拠を提供した。実施例2:増強された抗体依存性細胞傷害ADCCを有するヒト化抗アルファ2インテグリン抗体変異体実施例1におい記載される研究で調べられた抗VLA2抗体変異体を、それらがADCCを誘発する能力について評価した。抗体のADCC活性を、乳酸デヒドロゲナーゼLDH放出アッセイによりCytoTox96非放射性細胞傷害性アッセイキットPromega、Madison、USAを使用して測定した。ヒト末梢血単核細胞PBMCをクエン酸塩加全血から標準的なFicoll-paque分離により精製し、完全培地10ウシ胎児血清FBS、ChemieBrunschwigAG、PAA、Basel、Switzerland、2mMultraglutamine1Lonza、Verviers、Belgium及び1ペニシリン/ストレプトマイシンChemieBrunschwigAG、PAA、Basel、Switzerlandを補充したRPMI-1640培地ChemieBrunschwigAG、PAA、Basel、Switzerland、及び100U/mlのヒトIL-2Sigma、Missouri、USAに再懸濁し、そして終夜37°Cでインキュベートした。翌日に、遠心分離によりPBMCを集め、2回洗浄し、そして培地に8x106細胞/mlの密度で再懸濁した。細胞株HT1080を標的細胞として使用した。HT1080細胞を2回洗浄し、そして完全培地に0.2x106細胞/mlの密度で再懸濁した。1.5μg/mlで希釈された抗体50マイクロリットルを、最終濃度0.1μg/ml図2又は0.01μg/ml図3で標的細胞50μlと混合し、そしてU底96ウェルプレート中の等体積のPBMCに加えた。標的対エフェクター比1:40を実験の間中使用した。37°Cで4時間インキュベートした後、細胞を遠心分離して無細胞上清の50μlサンプルを集めて、平底96ウェルプレートに移し、そしてアッセイを行った。溶解パーセントを以下のように計算した:サンプル放出-標的自発性放出-エフェクター自発性放出/最大放出-標的自発性放出100;ここで標的自発性放出は、標的細胞のみを含有するウェルからの蛍光であり、エフェクター自発性放出は、エフェクター細胞のみを含有するウェルからの蛍光であり、そして最大放出は、溶解緩衝液で処理された標的細胞を含有するウェルからの蛍光である。抗体が存在しない場合標的エフェクター細胞に得られた溶解のバックグラウンドパーセントを、サンプルの溶解パーセントから差し引いた;示されるデータは、1つのドナーから単離されたPBMCを使用した三つ組のウェルの平均細胞傷害パーセント±標準偏差である。図2は、IgG1コントロール抗体又は親抗VLA-2IgG4抗体それぞれデータ点1番及び12番に起因するほとんど特異的でないADCCを示す;示されるデータは、抗VLA2抗体の天然に存在するヒトIgG1アイソタイプがVLA-2を発現する細胞に対して増強された細胞傷害性を有することを実証し、そしてより好ましくは、以下の効力の順位を有する抗VLA2-IgG1抗体点変異体を実証した:抗VLA2-IgG1-S298A/S324Nデータ点11番;2倍増加>抗VLA2-IgG1-S298Aデータ点8番;1.8倍増加>抗VLA2-IgG1データ点2番;1.7倍増加又は抗VLA2-IgG1-E269D/S298A/S324Nデータ点10番;1.7倍増加>抗VLA2-IgG1-E269Dデータ点9番;1.5倍増加。図3は、抗VLA2抗体変異体について類似した順位のADCC効力が10倍希釈の抗体において維持されたことを示す。"