ヒトCD48に特異的に結合し、ヒトCD48とCD48受容体との間の相互作用を遮断する、単離された抗体、またはその抗原結合断片。CD48受容体が、ヒトCD2である、請求項1に記載の抗体または抗原結合断片。CD48受容体が、ヒト2B4である、請求項1に記載の抗体または抗原結合断片。初代ヒト末梢血単核細胞の活性化をインビトロで阻害する、請求項1から3のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合断片。ヒトCD48のIgドメイン1内のエピトープに結合する、請求項1から4のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合断片。配列番号384のアミノ酸60から125内に位置する1つまたは複数のアミノ酸と相互作用する、請求項5に記載の抗体または抗原結合断片。配列番号384のアミノ酸60から68およびまたは配列番号384のアミノ酸107から125内に位置する1つまたは複数のアミノ酸と相互作用する、請求項6に記載の抗体または抗原結合断片。配列番号384のアミノ酸60から68内に位置する1つまたは複数のアミノ酸と、および配列番号384のアミノ酸107から125内に位置する1つまたは複数のアミノ酸と相互作用する、請求項7に記載の抗体または抗原結合断片。配列番号368のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域の相補性決定領域および配列番号370のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域のCDRを含む、請求項1から8のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合断片。配列番号354、356、358、362、364および366のアミノ酸配列を有する重鎖および軽鎖CDRを含む、請求項9に記載の抗体または抗原結合断片。配列番号368のアミノ酸配列を有するHCVR、および配列番号370のアミノ酸配列を有するLCVRを含む、請求項10に記載の抗体または抗原結合断片。ヒトCD48のIgドメイン1を含むポリペプチドへの結合について参照抗体と競合する、単離された抗体、またはその抗原結合断片であって、前記参照抗体が、請求項1から11のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合断片である、抗体または抗原結合断片。請求項1から12のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合断片と、薬学的に許容される担体または賦形剤とを含む医薬組成物。CD48とCD48受容体との間の相互作用を遮断することによって治療可能な疾患または障害に罹患している、それと診断された、またはそれに罹患するリスクのある患者を治療するのに使用するための、請求項13に記載の医薬組成物。CD48とCD48受容体との間の相互作用を遮断することによって治療可能な疾患または障害が、セリアック病、全身性紅斑性狼瘡、潰瘍性大腸炎および乾癬からなる群から選択される疾患または障害である、請求項14に記載の医薬組成物。CD48とCD48受容体との間の相互作用を遮断することによって治療可能な疾患または障害に罹患している、それと診断された、またはそれに罹患するリスクのある患者を治療するのに使用するための医薬の製造における、請求項1から12のいずれか一項に記載の単離された抗体もしくは抗原結合断片、または請求項13に記載の医薬組成物の使用。CD48とCD48受容体との間の相互作用を遮断することによって治療可能な疾患または障害が、セリアック病、全身性紅斑性狼瘡、潰瘍性大腸炎および乾癬からなる群から選択される疾患または障害である、請求項16に記載の使用。セリアック病、全身性紅斑性狼瘡、潰瘍性大腸炎または乾癬を治療するための方法であって、それを必要としている対象に、請求項1から12のいずれか一項に記載の抗体もしくは抗原結合断片、または請求項13に記載の医薬組成物を投与するステップを含む方法。治療目的のためのCD48アンタゴニストの使用は、例えば、US20070212353およびWO9735614において言及されている。それにもかかわらず、CD48に媒介される疾患および状態を治療するために使用することができる、抗CD48抗体を含む新規なCD48調節剤が、当技術分野において依然として必要である。本発明は、ヒトCD48に結合する抗体を提供する。本発明の抗体は、CD48に媒介されるシグナル伝達を阻害するために、ならびにCD48活性およびまたはシグナル伝達によって引き起こされるまたはそれに関連する疾患および障害を治療するために、とりわけ有用である。本発明の抗体は、CD48とCD48受容体との間の相互作用を遮断し、かつまたは初代ヒト末梢血単核細胞の活性化を阻害する。ある特定の実施形態によれば、本発明の抗体は、ヒトCD48の第1の免疫グロブリンドメイン内のエピトープに結合する。本発明の抗体は、完全長とすることができ、または抗原結合部分2またはscFv断片のみを含んでいてもよく、機能性に影響を及ぼす、例えば、残りのエフェクター機能を排除するために変更されてもよい。本発明は、配列番号2、18、34、50、66、82、98、114、130、162、178、192、208、212、228、232、248、252、268、272、288、292、308、312、328、332、348、352および368からなる群から選択されるアミノ酸配列、または少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98もしくは少なくとも99の配列同一性を有するその実質的に類似した配列を有する重鎖可変領域を含む抗体または抗体の抗原結合断片を提供する。本発明はまた、配列番号10、26、42、58、74、90、106、122、138、146、154、170、180、182、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、360、370、372および380からなる群から選択されるアミノ酸配列、または少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98もしくは少なくとも99の配列同一性を有するその実質的に類似した配列を有する軽鎖可変領域を含む抗体または抗体の抗原結合断片も提供する。本発明はまた、配列番号210、1826、3442、5058、6674、8290、98106、114122、130138、162170、178180、162182、178190、192200、208210、212220、228230、232240、248250、252260、268270、272280、288290、292300、308310、312320、328330、332340、348350、352360、368370、352372および368380からなる群から選択されるHCVRおよびLCVR配列対を含む抗体またはその抗原結合断片も提供する。本発明はまた、配列番号8、24、40、56、72、88、104、120、136、168、198、218、238、258、278、298、318、338および358からなる群から選択されるアミノ酸配列、または少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98もしくは少なくとも99の配列同一性を有するその実質的に類似した配列を有する重鎖CDR3ドメインならびに配列番号16、32、48、64、80、96、112、128、144、152、160、176、188、206、226、246、266、286、306、326、346、366および378からなる群から選択されるアミノ酸配列、または少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98もしくは少なくとも99の配列同一性を有するその実質的に類似した配列を有する軽鎖CDR3ドメインを含む抗体または抗体の抗原結合断片も提供する。ある特定の実施形態において、抗体または抗体の抗原結合部分は、配列番号816、2432、4048、5664、7280、8896、104112、120128、136144、168176、168188、198206、218226、238246、258266、278286、298306、318326、338346、358366および358378からなる群から選択されるHCDR3LCDR3アミノ酸配列対を含む。本発明はまた、配列番号4、20、36、52、68、84、100、116、132、164、194、214、234、254、274、294、314、334および354からなる群から選択されるアミノ酸配列、または少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98もしくは少なくとも99の配列同一性を有するその実質的に類似した配列を有する重鎖CDR1ドメイン配列番号6、22、38、54、70、86、102、118、134、166、196、216、236、256、276、296、316、336および356からなる群から選択されるアミノ酸配列、または少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98もしくは少なくとも99の配列同一性を有するその実質的に類似した配列を有する重鎖CDR2ドメイン配列番号12、28、44、60、76、92、108、124、140、148、156、172、184、202、222、242、262、282、302、322、342、362および374からなる群から選択されるアミノ酸配列、または少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98もしくは少なくとも99の配列同一性を有するその実質的に類似した配列を有する軽鎖CDR1ドメインならびに、配列番号14、30、46、62、78、94、110、126、142、150、158、174、186、204、224、244、264、284、304、324、344、364および376からなる群から選択されるアミノ酸配列、または少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98もしくは少なくとも99の配列同一性を有するその実質的に類似した配列を有する軽鎖CDR2ドメインをさらに含む抗体またはその断片も提供する。ある特定の非限定的な、例示的な本発明の抗体および抗原結合断片は、配列番号468121416202224283032363840444648525456606264687072767880848688929496100102104108110112116118120124126128132134136140142144164166168172174176164166168184186188194196198202204206214216218222224226234236238242244246254256258262264266274276278282284286294296298302304306314316318322324326334336338342344346354356358362364366および354356358374376378からなる群から選択されるアミノ酸配列をそれぞれ有する、HCDR1HCDR2HCDR3LCDR1LCDR2LCDR3ドメインを含む。本発明はまた、以下のアミノ酸配列HCDR1GFTFSNYGHCDR2IWYDDSXKHCDR3ARDRWTYSHXFEYLCDR1QXISSWLCDR2AASおよびLCDR3QQANSFPRTをそれぞれ有する、HCDR1HCDR2HCDR3LCDR1LCDR2LCDR3ドメインを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。これらの配列特徴を有する本発明の非限定的な例示的な抗体は、H4H1774N、H4H1775N、H4H1778N、H4H1779NおよびH4H1781Nを含む。関連する実施形態において、本発明は、CD48に特異的に結合する抗体または抗体の抗原結合断片であって、配列番号210、1826、3442、5058、6674、8290、98106、114122、130138、162170、178180、162182、178190、192200、208210、212220、228230、232240、248250、252260、268270、272280、288290、292300、308310、312320、328330、332340、348350、352360、368370、352372および368380からなる群から選択される重鎖および軽鎖配列内に含有される重鎖および軽鎖CDRドメインを含む、抗体または断片を含む。HCVRおよびLCVRアミノ酸配列内のCDRを同定するための方法および技術は、当技術分野においてよく知られており、本明細書において開示されている特定のHCVRおよびまたはLCVRアミノ酸配列内のCDRを同定するために使用することができる。CDRの境界を同定するために使用することができる例示的な規則は、例えば、Kabat定義、Chothia定義およびAbM定義を含む。大まかに言えば、Kabat定義は配列変動性に基づき、Chothia定義は構造的ループ領域の位置に基づき、AbM定義はKabat手法とChothia手法の間の中間物である。例えば、Kabat、SequencesofProteinsofImmunologicalInterest、NationalInstitutesofHealth、Bethesda、MdAlLazikaniら、JMolBiol273927~948およびMartinら、ProcNatlAcadSciUSA869268~9272を参照されたい。公開データベースもまた、抗体内のCDR配列を同定するために利用可能である。別の態様において、本発明は、抗CD48抗体またはその断片をコードしている核酸分子を提供する。本発明の核酸を保有する組換え発現ベクター、およびそのようなベクターが導入された宿主細胞もまた、抗体の産生を許容する条件下で宿主細胞を培養すること、および産生された抗体を回収することによって抗体を生成する方法と同様に、本発明によって包含される。一実施形態において、本発明は、配列番号1、17、33、49、65、81、97、113、129、161、177、191、207、211、227、231、247、251、267、271、287、291、307、311、327、331、347、351および367からなる群から選択される核酸配列、またはその少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98もしくは少なくとも99の相同性を有する実質的に同一な配列によってコードされているHCVRを含む抗体またはその断片を提供する。本発明はまた、配列番号9、25、41、57、73、89、105、121、137、145、153、169、179、181、189、199、209、219、229、239、249、259、269、279、289、299、309、319、329、339、349、359、369、371および379からなる群から選択される核酸配列、またはその少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98もしくは少なくとも99の相同性を有する実質的に同一な配列によってコードされているLCVRを含む抗体またはその断片も提供する。本発明はまた、配列番号7、23、39、55、71、87、103、119、135、167、197、217、237、257、277、297、317、337および357からなる群から選択されるヌクレオチド配列、またはその少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98、もしくは少なくとも99の相同性を有する実質的に同一な配列によってコードされているHCDR3ドメインならびに配列番号15、31、47、63、79、95、111、127、143、151、159、175、187、205、225、245、265、285、305、325、345、365および377からなる群から選択されるヌクレオチド配列、またはその少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98もしくは少なくとも99の相同性を有する実質的に同一な配列によってコードされているLCDR3ドメインを含む抗体または抗体の抗原結合断片も提供する。本発明はまた、配列番号3、19、35、51、67、83、99、115、131、163、193、213、233、253、273、293、313、333および353からなる群から選択されるヌクレオチド配列、またはその少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98もしくは少なくとも99の相同性を有する実質的に同一な配列によってコードされているHCDR1ドメイン配列番号5、21、37、53、69、85、101、117、133、165、195、215、235、255、275、295、315、335および355からなる群から選択されるヌクレオチド配列、またはその少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98もしくは少なくとも99の相同性を有する実質的に同一な配列によってコードされているHCDR2ドメイン配列番号11、27、43、59、75、91、107、123、139、147、155、171、183、201、221、241、261、281、301、321、341、361および373からなる群から選択されるヌクレオチド配列、またはその少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98もしくは少なくとも99の相同性を有する実質的に同一な配列によってコードされているLCDR1ドメインならびに、配列番号13、29、45、61、77、93、109、125、141、149、157、173、185、203、223、243、263、283、303、323、343、363および375からなる群から選択されるヌクレオチド配列、またはその少なくとも90、少なくとも95、少なくとも98もしくは少なくとも99の相同性を有する実質的に同一な配列によってコードされているLCDR2ドメインをさらに含む抗体またはその断片も提供する。ある特定の実施形態によれば、抗体またはその断片は、配列番号配列番号1および9、17および25、33および41、49および57、65および73、81および89、97および105、113および121、129および137、161および169、177および179、161および181、177および189、191および199、207および209、211および219、227および229、231および239、247および249、251および259、267および269、271および279、287および289、291および299、307および309、311および319、327および329、331および339、347および349、351および359、367および369、351および371、または367および379の核酸配列によってコードされている重鎖および軽鎖CDR配列を含む。本発明は、変更されたグリコシル化パターンを有する抗CD48抗体を含む。いくつかの適用において、望ましくないグリコシル化部位を除去するための変更、またはオリゴ糖鎖上に存在するフコース部分を欠く抗体が、例えば、抗体依存性細胞傷害機能を増加させるために、有用であることがあるJBC27726733を参照されたい。別の適用において、ガラクトシル化の変更を、補体依存性細胞傷害を変更するために行うことができる。別の態様において、本発明は、CD48に特異的に結合する組換えヒト抗体またはその断片と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。関連する一態様において、本発明は、CD48阻害剤と第2の治療剤との組合せである組成物を特徴とする。一実施形態において、CD48阻害剤は、抗体またはその断片である。一実施形態において、第2の治療剤は、CD48阻害剤と有利に組み合わせた任意の作用物質である。CD48阻害剤と有利に組み合わせてもよい例示的な作用物質は、CD48活性を阻害する別の作用物質およびまたはCD48上流もしくは下流シグナル伝達を妨害する作用物質を含むがこれらに限定されない。さらに他の態様において、本発明は、本発明の抗CD48抗体または抗体の抗原結合部分を使用してCD48活性を阻害するための方法であって、治療有効量の、本発明の抗体または抗体の抗原結合断片を含む医薬組成物を投与するステップを含む方法を提供する。治療される障害は、CD48活性の除去、阻害または低減によって改善、軽減、阻害または予防される任意の疾患または状態である。本発明の抗CD48抗体または抗体断片は、CD48とCD48受容体との間の相互作用を遮断する、またはCD48のシグナル伝達活性を別の方法で阻害するように機能し得る。本発明はまたは、患者における、CD48活性に関連するまたはそれによって引き起こされる疾患または障害の治療のための医薬の製造における、本発明の抗CD48抗体または抗体の抗原結合部分の使用を含む。別の実施形態は、後に続く詳細な説明の閲覧から明らかとなるであろう。本発明を説明する前に、本発明は、記載されている特定の方法および実験条件に限定されず、したがって方法および条件は様々であってよいことが理解されるべきである。本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるため、本明細書において使用される専門用語は、特定の実施態様を説明することのみを目的としており、限定的であることを意図していないこともまた理解されるべきである。別途定義されない限り、本明細書において使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者により理解されるものと同じ意味を有する。本明細書において使用される場合、約という用語は、特定の列挙されている数値に関して使用されているとき、その値が、列挙されている値から1以下変動してもよいことを意味する。例えば、本明細書において使用される場合、約100という表現は、99および101および間にあるすべての値を含む。本明細書に記載されているものと同様のまたは等価の任意の方法および材料を、本発明の実施または試験において使用することができるが、好ましい方法および材料を、以下に記載する。定義本明細書において使用されるCD48およびCD48断片という表現は、ヒト以外の種由来であることが明記されていない限り、ヒトCD48タンパク質または断片を指す。ヒトCD48は、配列番号384のアミノ酸配列を有する。ヒト以外の種由来のCD48分子のアミノ酸配列は、GenBankなどの公開されている供給源から入手可能であるDAA319661EDL946631など。本明細書において使用されるCD48受容体という用語は、インビボでヒトCD48タンパク質が相互作用して生物学的シグナルを送るタンパク質を意味する。CD48受容体という用語は、ヒト2B4およびヒトCD2を含む。本明細書において使用されるヒト2B4という用語は、配列番号390のアミノ酸配列、またはCD48と相互作用することができるその部分を含むタンパク質を意味する。本明細書において使用されるヒトCD2という用語は、配列番号392のアミノ酸配列、またはCD48と相互作用することができるその部分を含むタンパク質を意味する。本明細書において使用される抗体という用語は、ジスルフィド結合によって相互に接続された4つのポリペプチド鎖、2つの重鎖および2つの軽鎖を含む免疫グロブリン分子、ならびにその多量体を指すことを意図している。各重鎖は、重鎖可変領域および重鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は、3つのドメイン、CH1、CH2およびCH3を含む。各軽鎖は、軽鎖可変領域および軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は、1つのドメインを含む。VHおよびVL領域は、フレームワーク領域と呼ばれるより保存されている領域が散在している、相補性決定領域と呼ばれる超可変性の領域にさらに細分することができる。各VHおよびVLは、以下FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4の順序でアミノ末端からカルボキシ末端まで並んだ3つのCDRおよび4つのFRで構成される。本発明の様々な実施形態において、抗CD48抗体のFRは、ヒト生殖系列配列と同一であってもよく、または天然にもしくは人工的に変更されていてもよい。アミノ酸コンセンサス配列は、2つ以上のCDRのサイドバイサイド分析に基づいて定義することができる。本明細書において使用される抗体という用語はまた、完全な抗体分子の抗原結合断片も含む。抗体の抗原結合部分、抗体の抗原結合断片などの用語は、本明細書において使用される場合、抗原と特異的に結合して複合体を形成する、任意の天然に存在する、酵素的に得ることができる、合成の、または遺伝子工学的に作製されるポリペプチドまたは糖タンパク質を含む。抗体の抗原結合断片は、例えば、完全な抗体分子から、タンパク質分解による消化、または抗体可変ドメインおよび任意選択により定常ドメインをコードしているDNAの操作および発現を伴う組換え遺伝子工学技術などの任意の適した標準的な技術を使用して、得られてもよい。そのようなDNAは知られており、かつまたは、例えば、商業用供給源、DNAライブラリーから容易に入手可能であり、または合成することができる。例えば、1つまたは複数の可変およびまたは定常ドメインを適したコンフィギュレーションに配置するために、またはコドンを導入する、システイン残基を作出する、アミノ酸を変更する、付加するもしくは欠失させるなどのために、DNAをシーケンシングし、化学的にまたは分子生物学技術を使用することによって操作してもよい。抗原結合断片の非限定的な例は、Fab断片F2断片Fd断片Fv断片単鎖Fv分子dAb断片および抗体の超可変領域を模倣するアミノ酸残基、CDR3ペプチドなど、または拘束されたFR3CDR3FR4ペプチドからなる最小認識単位を含む。ドメイン特異的抗体、単一ドメイン抗体、ドメイン欠失抗体、キメラ抗体、CDR移植抗体、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ミニボディ、ナノボディ、小モジュール免疫薬剤、およびサメ可変IgNARドメインなどの別の改変分子もまた、本明細書で使用される抗原結合断片という表現の範囲内に包含される。抗体の抗原結合断片は、典型的には、少なくとも1つの可変ドメインを含む。可変ドメインは、任意の大きさまたはアミノ酸組成であってよく、1つまたは複数のフレームワーク配列と隣接しているまたはそれとインフレームである少なくとも1つのCDRを一般に含む。VLドメインと会合したVHドメインを有する抗原結合断片において、VHおよびVLドメインは、任意の適した配置で互いに対して置かれてもよい。例えば、可変領域は二量体であり、VHVH、VHVLまたはVLVL二量体を含有してもよい。代替として、抗体の抗原結合断片は、単量体のVHまたはVLドメインを含有してもよい。ある特定の実施形態において、抗体の抗原結合断片は、少なくとも1つの定常ドメインに共有結合により連結されている少なくとも1つの可変ドメインを含有してもよい。本発明の抗体の抗原結合断片内に見出され得る可変および定常ドメインの非限定的な、例示的なコンフィギュレーションは、以下を含むVHCH1VHCH2VHCH3VHCH1CH2VHCH1CH2CH3VHCH2CH3VHCLVLCH1VLCH2VLCH3VLCH1CH2VLCH1CH2CH3VLCH2CH3およびVLCL。上記に列挙された例示的なコンフィギュレーションのいずれかを含む、可変および定常ドメインの任意のコンフィギュレーションにおいて、可変および定常ドメインは、互いに直接連結していてもよく、または完全なもしくは部分的なヒンジまたはリンカー領域によって連結していてもよい。ヒンジ領域は、単一のポリペプチド分子において隣接した可変およびまたは定常ドメイン間の柔軟なまたはやや柔軟な連結をもたらす少なくとも2アミノ酸からなってもよい。さらに、本発明の抗体の抗原結合断片は、互いにおよびまたは1つもしくは複数の単量体VHもしくはVLドメインと非共有結合により会合した、上記に列挙された可変および定常ドメインコンフィギュレーションのいずれかのホモ二量体またはヘテロ二量体を含んでいてもよい。完全な抗体分子と同様に、抗原結合断片は、単一特異性または多重特異性であってよい。抗体の多重特異性抗原結合断片は、典型的には、少なくとも2つの異なる可変ドメインを含み、各可変ドメインは、同じ抗原上の別個の抗原または異なるエピトープに特異的に結合することができる。本明細書において開示されている例示的な二重特異性抗体フォーマットを含む任意の多重特異性抗体フォーマットは、当技術分野において利用可能である常法に従う技術を使用して、本発明の抗体の抗原結合断片との関連における使用に適合させることができる。本発明の抗体は、補体依存性細胞障害または抗体依存性細胞媒介性細胞傷害によって機能してもよい。補体依存性細胞障害は、補体の存在下における本発明の抗体による抗原発現細胞の溶解を指す。抗体依存性細胞媒介性細胞傷害は、Fc受容体細胞、好中球およびマクロファージを発現する非特異的細胞傷害性細胞が、標的細胞上の結合している抗体を認識し、それにより標的細胞の溶解をもたらす、細胞媒介性反応を指す。CDCおよびADCCは、当技術分野においてよく知られており、利用可能であるアッセイを使用して測定することができる。ProcNatlAcadSci95652~656を参照されたい。抗体の定常領域は、補体を固定し、細胞依存性細胞傷害を媒介する抗体の能力において重要である。したがって、抗体のアイソタイプは、抗体にとって、細胞傷害を媒介することが望ましいかどうかに基づいて選択してもよい。ヒト抗体という用語は、本明細書において使用される場合、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列由来の可変および定常領域を有する抗体を含むことが意図されている。本発明のヒト抗体は、例えばCDR、特にCDR3中に、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列によってコードされていないアミノ酸残基を含んでもよい。しかしながら、ヒト抗体という用語は、本明細書において使用される場合、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖系列由来のCDR配列がヒトフレームワーク配列上に移植された抗体を含むことを意図していない。本明細書において使用される組換えヒト抗体という用語は、組換え手段によって調製、発現、作出または単離されるすべてのヒト抗体、例えば、宿主細胞中にトランスフェクトされた組換え発現ベクターを使用して発現される抗体、組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリーから単離される抗体、ヒト免疫グロブリン遺伝子のトランスジェニック動物から単離される抗体NuclAcidsRes206287~6295を参照されたい、または別のDNA配列へのヒト免疫グロブリン遺伝子配列のスプライシングを伴う任意の別の手段によって調製、発現、作出または単離される抗体などを含むことが意図されている。そのような組換えヒト抗体は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列由来の可変および定常領域を有する。しかしながら、ある特定の実施形態において、そのような組換えヒト抗体は、インビトロでの突然変異誘発に供され、したがって組換え抗体のVHおよびVL領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖系列VHおよびVL配列由来でありそれに関連するが、インビボでヒト抗体生殖系列レパートリー内に天然に存在しない可能性がある配列である。ヒト抗体は、ヒンジ異質性と関連した2つの形態で存在する可能性がある。1つの形態において、免疫グロブリン分子は、二量体が鎖間重鎖ジスルフィド結合によって結び付いている、約150~160kDaの安定な4つの鎖構築物を含む。第2の形態において、二量体は、鎖間ジスルフィド結合を介して連結しておらず、共有結合によりカップリングした軽鎖および重鎖で構成される約75~80kDaの分子が形成されている。これらの形態は、アフィニティ精製の後であっても、分離させることが極めて困難であった。様々なインタクトなIgGアイソタイプにおける第2の形態の出現頻度は、それだけに限らないが、抗体のヒンジ領域アイソタイプと関連した構造的差異による。ヒトIgG4ヒンジのヒンジ領域における単一アミノ酸置換は、ヒトIgG1ヒンジを使用して典型的に観察されるレベルまで、第2の形態の出現を顕著に低減することができるMolecularImmunology30105。本発明は、所望される抗体形態の収率を改善するために、例えば生成において、望ましい場合がある、ヒンジCH2またはCH3領域中に1つまたは複数の突然変異を有する抗体を包含する。本明細書において使用される単離された抗体は、その天然の環境の少なくとも1つの成分から同定および分離およびまたは回収された抗体を意味する。例えば、生物の少なくとも1つの成分から、または抗体が天然に存在するもしくは天然に産生される組織もしくは細胞から、分離されたまたは取り出された抗体は、本発明の目的のための単離された抗体である。単離された抗体はまた、組換え細胞内のinsituでの抗体を含む。単離された抗体は、少なくとも1つの精製または単離ステップに供された抗体である。ある特定の実施形態によれば、単離された抗体は、別の細胞物質およびまたは化学物質を実質的に含まないものであってもよい。特異的に結合するなどの用語は、抗体またはその抗原結合断片が、生理学的条件下で比較的安定である抗原との複合体を形成することを意味する。抗体が抗原に特異的に結合するかどうかを決定するための方法は、当技術分野においてよく知られており、例えば、平衡透析、表面プラズモン共鳴などを含む。例えば、ヒトCD48に特異的に結合する抗体は、本発明との関連において使用される場合、表面プラズモン共鳴アッセイにおいて測定して、約1000nM未満、約500nM未満、約300nM未満、約200nM未満、約100nM未満、約90nM未満、約80nM未満、約70nM未満、約60nM未満、約50nM未満、約40nM未満、約30nM未満、約20nM未満、約10nM未満、約5nM未満、約4nM未満、約3nM未満、約2nM未満、約1nM未満または約05nM未満のKDでヒトCD48に結合する抗体またはその部分を含む。。しかしながら、ヒトCD48に特異的に結合する単離された抗体は、別の種のCD48分子などの別の抗原に対する交差反応性を有してもよい。本明細書において使用される中和または遮断抗体は、CD48へのその結合が、CD48またはCD48断片とCD48受容体との間の相互作用を妨害する、かつまたはCD48の少なくとも1つの生物学的機能の阻害をもたらす抗体を指すことを意図している。CD48中和または遮断抗体によって引き起こされる阻害は、適切なアッセイを使用して検出可能である限り、完全である必要はない。CD48阻害を検出するための例示的なアッセイは、本明細書において記載されている。本明細書において開示されている抗CD48抗体は、重鎖および軽鎖可変ドメインのフレームワークおよびまたはCDR領域において、抗体の由来となった対応する生殖系列配列と比較して1つまたは複数のアミノ酸置換、挿入およびまたは欠失を含んでいてもよい。そのような突然変異は、本明細書において開示されているアミノ酸配列を、例えば、公開されている抗体配列データベースから入手可能である生殖系列配列と比較することによって容易に確かめることができる。本発明は、1つまたは複数のフレームワークおよびまたはCDR領域内の1つまたは複数のアミノ酸が、抗体の由来となった生殖系列配列の対応する残基に対して、または他のヒト生殖系列配列の対応する残基に対して、または対応する生殖系列残基の保存的アミノ酸置換に対して、突然変異している、本明細書において開示されているアミノ酸配列のいずれかに由来する抗体およびその抗原結合断片を含む。当業者は、本明細書において開示されている重鎖および軽鎖可変領域配列から出発して、1つまたは複数の個々の生殖系列突然変異またはその組合せを含む非常に多くの抗体および抗原結合断片を容易に生成することができる。ある特定の実施形態において、VHおよびまたはVLドメイン内のフレームワークおよびまたはCDR残基のすべてを、抗体の由来となったもとの生殖系列配列において見出される残基に復帰突然変異させる。別の実施形態において、ある特定の残基のみを、例えば、FR1の最初の8アミノ酸内またはFR4の最後の8アミノ酸内に見出される突然変異した残基のみ、またはCDR1、CDR2もしくはCDR3内に見出される突然変異した残基のみを、もとの生殖系列配列に復帰突然変異させる。別の実施形態において、フレームワークおよびまたはCDR残基の1つまたは複数を、異なる生殖系列配列の対応する残基に突然変異させる。さらに、本発明の抗体は、例えば、もとの生殖系列配列とは異なるある特定の別の残基は維持する、または異なる生殖系列配列の対応する残基に突然変異させるが、ある特定の個々の残基は、特定の生殖系列配列の対応する残基に突然変異させる、フレームワークおよびまたはCDR領域内の2つ以上の生殖系列突然変異の任意の組合せを含有してもよい。得られたら、1つまたは複数の生殖系列突然変異を含有する抗体および抗原結合断片は、改善された結合特異性、増加した結合親和性、改善または増強されたアンタゴニストまたはアゴニスト生物学的特性、低減した免疫原性などの1つまたは複数の所望の特性について容易に試験することができる。この一般的な方法において得られる抗体および抗原結合断片は、本発明の範囲内に包含される。本発明はまた、1つまたは複数の保存的置換を有する、本明細書において開示されているHCVR、LCVRおよびまたはCDRアミノ酸配列のいずれかの変異体を含む抗CD48抗体も含む。例えば、本発明は、本明細書において開示されているHCVR、LCVRおよびまたはCDRアミノ酸配列のいずれかに対して、例えば、10個以下、8個以下、6個以下、4個以下などの保存的アミノ酸置換を有するHCVR、LCVRおよびまたはCDRアミノ酸配列を有する抗CD48抗体を含む。本明細書において使用される表面プラズモン共鳴という用語は、例えば、BIAcoreシステムを使用した、バイオセンサーマトリックス内のタンパク質濃度の変化の検出による、リアルタイムの相互作用解析を可能にする光学現象を指す。本明細書において使用されるKDという用語は、特定の抗体抗原相互作用の平衡解離定数を指すことを意図している。エピトープという用語は、パラトープとして知られている抗体分子の可変領域中の特異的抗原結合部位と相互作用する抗原決定基を指す。単一の抗原は、複数のエピトープを有してもよい。したがって、異なる抗体は、抗原上の異なるエリアに結合してもよく、異なる生物学的作用を有してもよい。エピトープは、立体構造または線状のいずれかであってよい。立体構造エピトープは、線状のポリペプチド鎖の異なるセグメントから空間的に並置されたアミノ酸によって生成される。線状エピトープは、ポリペプチド鎖中の隣接したアミノ酸残基によって生成されるエピトープである。ある特定の事情において、エピトープは、抗原上の糖、ホスホリル基またはスルホニル基の部分を含んでもよい。実質的な同一性または実質的に同一なという用語は、核酸またはその断片を指す場合、適切なヌクレオチド挿入または欠失を用いて他の核酸と最適にアラインメントされたときに、下記に論じられているFASTA、BLASTまたはGapなどの任意のよく知られている配列同一性のアルゴリズムによって測定して、ヌクレオチド塩基の少なくとも約95、より好ましくは少なくとも約96、97、98または99におけるヌクレオチド配列同一性があることを示す。参照核酸分子への実質的な同一性を有する核酸分子は、ある特定の場合において、参照核酸分子によってコードされているポリペプチドと同じまたは実質的に類似したアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードしていてもよい。ポリペプチドに適用される場合、実質的な類似性または実質的に類似したという用語は、2つのペプチド配列が、デフォルトのギャップの重みを使用してGAPまたはBESTFITプログラムなどによって最適にアラインメントされた場合、少なくとも95の配列同一性、さらにより好ましくは少なくとも98または99の配列同一性を共有することを意味する。好ましくは、同一ではない残基ポジションは、保存的アミノ酸置換によって異なる。保存的アミノ酸置換は、アミノ酸残基が、類似した化学的特性を有する側鎖を有する他のアミノ酸残基によって置換されている置換である。一般に、保存的アミノ酸置換は、タンパク質の機能的特性を実質的に変化させない。2つ以上のアミノ酸配列が保存的置換によって互いに異なる場合において、配列同一性パーセントまたは類似性の程度を上向きに調整して、置換の保存的性質について補正してもよい。この調整を行うための手段は、当業者によく知られている。例えば、PearsonMethodsMolBiol24307~331を参照されたい。類似した化学的特性を有する側鎖を有するアミノ酸の群の例は、以下を含む脂肪族側鎖グリシン、アラニン、バリン、ロイシンおよびイソロイシン脂肪族ヒドロキシル側鎖セリンおよびトレオニンアミド含有側鎖アスパラギンおよびグルタミン芳香族側鎖フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファン塩基性側鎖リシン、アルギニンおよびヒスチジン酸性側鎖アスパラギン酸およびグルタミン酸、ならびに硫黄含有側鎖はシステインおよびメチオニンである。好ましい保存的アミノ酸置換群は、バリンロイシンイソロイシン、フェニルアラニンチロシン、リシンアルギニン、アラニンバリン、グルタミン酸アスパラギン酸、およびアスパラギングルタミンである。代替として、保存的置換は、GonnetらScience2561443~1445において開示されているPAM250対数尤度マトリックスにおいて正の値を有する任意の変化である。中程度に保存的な置換は、PAM250対数尤度マトリックスにおいて負でない値を有する任意の変化である。ポリペプチドについての配列類似性は、配列同一性とも称されるが、典型的には、配列解析ソフトウェアを使用して測定される。タンパク質解析ソフトウェアは、保存的アミノ酸置換を含む様々な置換、欠失および別の変更に割り当てられた類似性の尺度を使用して、類似した配列を照合する。例えば、GCGソフトウェアは、デフォルトパラメータを用いて、異なる種の生物由来の相同なポリペプチドなどの密接に関連するポリペプチド間のまたは野生型タンパク質とその突然変異タンパク質との間の、配列相同性または配列同一性を決定することができる、GapおよびBestfitなどのプログラムを含む。例えば、GCGVersion61を参照されたい。ポリペプチド配列はまた、デフォルトまたは推奨されるパラメータ、GCGVersion61中のプログラムを使用して、FASTAを使用して比較することもできる。FASTAは、クエリと検索配列との間の最大のオーバーラップの領域のアラインメントおよび配列同一性パーセントを提供する上記を参照。異なる生物由来の多数の配列を含むデータベースに対して本発明の配列を比較するときの他の好ましいアルゴリズムは、デフォルトパラメータを使用した、コンピュータプログラムBLAST、特にBLASTPまたはTBLASTNである。例えば、AltschulらJMolBiol215403~410およびAltschulらNucleicAcidsRes253389~402を参照されたい。抗体の生物学的特徴本発明の抗体は、ヒトCD48と少なくとも1つのCD48受容体との間の相互作用を遮断する。本明細書において使用される場合、ヒトCD48と少なくとも1つのCD48受容体との間の相互作用を遮断するという表現は、CD48とCD48受容体との間の物理的相互作用を検出およびまたは定量することができるアッセイにおいて、本発明の抗体の添加が、CD48と受容体との間の相互作用を少なくとも50低減することを意味する。抗体がヒトCD48とCD48受容体との間の相互作用を遮断するかどうかを決定するために使用することができる非限定的な例示的なアッセイは、本明細書において実施例5において例示されている。この実施例において、抗体を、CD48タンパク質と混合し、次いで、抗体CD48混合物を2B4タンパク質で被覆された表面に適用する。結合していない分子を洗い流した後、2B4被覆表面に結合しているCD48の量を測定する。このアッセイフォーマットにおいて様々な量の抗体を使用することによって、2B4へのCD48結合の50を遮断するために必要とされる抗体の量を計算することができ、IC50値として表す。本発明は、上述したCD48CD48受容体結合アッセイ、または実質的に類似したアッセイにおいて試験される場合、約400pM未満のIC50を示す抗CD48抗体を含む。例えば、本発明は、上述したCD48CD48受容体結合アッセイ、または実質的に類似したアッセイにおいて試験される場合、約400、300、290、280、270、260、250、240、230、220、210、200、190、180、170、160、150、140、130、120、110、100、90、80、70、60、50、40、30、20、10、18、16、14、12、10、9、8、7、6、5、4、3、2または1pM未満のIC50を示す抗CD48抗体を含む。本発明の抗体はまた、初代ヒト末梢血単核細胞の活性化を阻害することができる。本明細書において使用される場合、初代ヒト末梢血単核細胞の活性化を阻害するという表現は、PBMCの活性化を検出およびまたは定量することができるアッセイにおいて、本発明の抗体の添加が、放出されるIFNγの量を少なくとも50低減することを意味する。抗体がPBMCの活性化を阻害するかどうかを決定するために使用することができる非限定的な例示的なアッセイは、本明細書において実施例6および7において例示されている。一例において、抗CD48抗体を、アゴニスト抗CD3および抗CD28抗体によるPBMCの活性化の前に、単離されたヒトPBMCに添加する。インキュベーション期間の後、放出されたIFNγの量を測定する。このアッセイフォーマットにおいて様々な量の抗体を使用することによって、最大IFNγ放出の50を阻害するために必要とされる抗体の量を計算することができ、IC50値として表す。本発明は、上述したPBMC活性化アッセイまたは実質的に類似したアッセイにおいて試験される場合、約500pM未満のIC50を示す抗CD48抗体を含む。例えば、本発明は、上述したPBMC活性化アッセイまたは実質的に類似したアッセイにおいて試験される場合、約500、400、300、290、280、270、260、250、240、230、220、210、200、190、180、170、160、150、140、130、120、110、100、90、80、70、60、50、40、30、20、10、18、16、14、12、10、9、8、7、6、5、4、3、2または1pM未満のIC50を示す抗CD48抗体を含む。エピトープマッピングおよび関連する技術ヒトCD48タンパク質は、本明細書においてIgドメイン1およびIgドメイン2と称される2つの免疫グロブリン様ドメインを含有する。Igドメイン1は、配列番号384のアミノ酸29から127によって表されるアミノ酸の配列であり、Igドメイン2は、配列番号384のアミノ酸132から212によって表されるアミノ酸の配列である。本発明は、ヒトCD48のIgドメイン1内のエピトープに特異的に結合する抗CD48抗体を含む。エピトープは、CD48のIgドメイン1内に位置する3個以上のアミノ酸の単一の連続的な配列からなってもよい。代替として、エピトープは、CD48のIgドメイン1内に位置する複数の非連続的なアミノ酸からなってもよい。本発明のある特定の実施形態によれば、配列番号384のアミノ酸60から125内に位置する1つまたは複数のアミノ酸と相互作用する抗CD48抗体が提供される。例えば、本発明は、配列番号384のアミノ酸60から68およびまたは107から125内に位置する1つまたは複数のアミノ酸と相互作用する抗CD48抗体を含む。当業者に知られている様々な技術を使用して、抗体が、ポリペプチドまたはタンパク質内の1つまたは複数のアミノ酸と相互作用するかどうかを決定することができる。例示的な技術は、例えば、Antibodies、HarlowおよびLaneにおいて記載されているものなどの常法に従う交差遮断アッセイ、アラニンスキャニング突然変異分析、ペプチドブロット分析、およびペプチド切断分析を含む。加えて、抗原のエピトープ切除、エピトープ抽出および化学修飾などの方法を用いることができる。抗体が相互作用するポリペプチド内のアミノ酸を同定するために使用することができる他の方法は、質量分析によって検出される水素重水素交換である。。大まかに言えば、水素重水素交換方法は、対象とするタンパク質を重水素標識すること、続いて抗体を、重水素標識されたタンパク質に結合させることを伴う。次に、タンパク質抗体複合体を水に移して、抗体によって保護されている残基を除いてすべての残基において水素重水素交換を起こさせる。抗体が解離した後、標的タンパク質をプロテアーゼ切断および質量分析に供し、それにより抗体が相互作用する特異的アミノ酸に相当する重水素標識された残基を明らかにする。例えば、EhringAnalyticalBiochemistry267252~259EngenおよびSmithAnalChem73256A~265Aを参照されたい。本発明は、本明細書において記載されている特定の例示的な抗体のいずれかと同じエピトープに結合する抗CD48抗体をさらに含む。同じく、本発明はまた、CD48またはCD48断片への結合について、本明細書において記載されている特定の例示的な抗体のいずれかと競合する抗CD48抗体も含む。当技術分野において知られている常法を使用することによって、抗体が、参照抗CD48抗体と同じエピトープに結合するかどうか、またはそれとの結合について競合するかどうかを容易に決定することができる。例えば、試験抗体が、本発明の参照抗CD48抗体と同じエピトープに結合するかどうかを決定するために、参照抗体を、飽和条件下でCD48タンパク質またはペプチドに結合させる。次に、CD48分子に結合する試験抗体の能力を評価する。試験抗体が、参照抗CD48抗体による飽和結合の後にCD48に結合することができれば、試験抗体は、参照抗CD48抗体と異なるエピトープに結合すると結論付けることができる。一方、試験抗体が、参照抗CD48抗体による飽和結合の後にCD48分子に結合することができなければ、試験抗体は、本発明の参照抗CD48抗体によって結合しているエピトープと同じエピトープに結合し得る。次いで、さらなる常法に従う実験を行って、観察された試験抗体の結合の欠如が実際に参照抗体と同じエピトープへの結合によるものであるかどうか、または立体遮断が観察された結合の欠如に関与しているかどうかを確認することができる。この種の実験は、ELISA、RIA、Biacore、フローサイトメトリーまたは当技術分野において利用可能である任意の別の定量的または定性的な抗体結合アッセイを使用して実施することができる。本発明のある特定の実施形態によると、2つの抗体は、例えば、1、5、10、20または100倍過剰の一方の抗体が、競合的結合アッセイにおいて測定して他方の結合を少なくとも50であるが好ましくは75、90またはさらには99阻害するならば、同じエピトープに結合する。代替として、2つの抗体は、一方の抗体の結合を低減または排除する抗原中の本質的にすべてのアミノ酸突然変異が他方の結合を低減または排除するならば、同じエピトープに結合すると考えられる。2つの抗体は、一方の抗体の結合を低減または排除するアミノ酸突然変異の一部分のみが他方の結合を低減または排除するならば、オーバーラップしているエピトープを有すると考えられる。抗体が、参照抗CD48抗体との結合について競合するかどうかを決定するために、上述した結合方法体系を2つの方向から実施する第1の方向において、参照抗体を、飽和条件下でCD48分子に結合させ、続いてCD48分子への試験抗体の結合を評価する。第2の方向において、試験抗体を、飽和条件下でCD48分子に結合させ、続いてCD48分子への参照抗体の結合を評価する。両方向において、第1の抗体のみがCD48分子に結合することができるならば、試験抗体および参照抗体は、CD48への結合について競合すると結論付けられる。当業者には理解されるように、参照抗体との結合について競合する抗体は、必ずしも参照抗体と同じエピトープに結合しなくてもよいが、オーバーラップしたまたは隣接したエピトープに結合することによって参照抗体の結合を立体的に遮断し得る。ヒト抗体の調製完全ヒトモノクローナル抗体を含むモノクローナル抗体を作製するための方法は、当技術分野において知られている。任意のそのような既知の方法を、本発明との関連において使用して、ヒトCD48に特異的に結合するヒト抗体を製造することができる。VELOCIMMUNE技術またはモノクローナル抗体を作製するための任意の別の知られている方法を使用して、ヒト可変領域およびマウス定常領域を有するCD48に対する高親和性キメラ抗体を最初に単離する。下記の実験の部のように、親和性、選択性、エピトープなどを含む望ましい特徴について抗体を特徴付け、選択する。マウス定常領域を、所望のヒト定常領域と置き換えて、本発明の完全ヒト抗体、例えば、野生型または変更されたIgG1またはIgG4を作製する。選択される定常領域は特定の用途に応じて様々であってよいが、高親和性抗原結合および標的特異性特徴は可変領域中に存する。生物学的等価物本発明の抗CD48抗体および抗体断片は、記載されている抗体の配列とは違うがヒトCD48に結合する能力を保持しているアミノ酸配列を有するタンパク質を包含する。そのような変異体抗体および抗体断片は、親配列と比較した場合、アミノ酸の1つまたは複数の付加、欠失または置換を含むが、記載されている抗体のものと本質的に等価な生物学的活性を示す。同じく、本発明の抗CD48抗体をコードしているDNA配列は、開示されている配列と比較した場合、ヌクレオチドの1つまたは複数の付加、欠失または置換を含むが、本発明の抗CD48抗体または抗体断片と本質的に生物学的に等価である抗CD48抗体または抗体断片をコードしている配列を包含する。そのような変異体アミノ酸およびDNA配列の例は、上記で論じられている。2つの抗原結合タンパク質、または抗体は、例えば、それらが、同じモル用量で同様の実験条件下、単回用量または反復用量のいずれかで投与された場合にその吸収の速度および程度が顕著な差異を示さない医薬等価物または医薬代替物であれば、生物学的に等価であるとみなされる。いくつかの抗体は、それらが、それらの吸収の程度は等価であるがそれらの吸収速度は等価でなく、それにもかかわらず、吸収の速度のそのような差異が、意図的であり標識に反映される、例えば慢性的使用における、有効な体内薬物濃度の到達に必須ではない、および研究されている特定の製剤にとって医学的に重要でないとみなれされるという理由から、生物学的に等価であるとみなされ得るならば、等価物または医薬代替物とみなされる。一実施形態において、2つの抗原結合タンパク質は、それらの安全性、純度、および力価において臨床的に重要な差異がないならば、生物学的に等価である。一実施形態において、2つの抗原結合タンパク質は、患者が、そのような切り替えをせずに継続される療法と比較して、免疫原性の臨床的に重要な変化を含む有害事象のリスクの予期される増加、または有効性の減少がなく、参照製品と生物学的製品とを1回または複数回切り替えることができるならば、生物学的に等価である。一実施形態において、2つの抗原結合タンパク質は、それらが、使用条件について、そのような機構が知られている程度まで、共通の作用機構によって両方とも作用するならば、生物学的に等価である。生物学的等価性は、インビボおよびインビトロ方法によって実証することができる。生物学的等価性測定は、例えば、抗体またはその代謝産物の濃度を、血液、血漿、血清または別の体液において時間の関数として測定する、ヒトまたは別の哺乳動物におけるインビボ試験ヒトインビボ生物学的利用能データと相関させ、それをある程度予測するインビトロ試験抗体の適切な急性の薬理作用を時間の関数として測定する、ヒトまたは別の哺乳動物におけるインビボ試験および抗体の安全性、効力またはバイオアベイラビリティもしくは生物学的等価性を確立する十分に管理された臨床試験を含む。本発明の抗CD48抗体の生物学的に等価な変異体は、例えば、残基もしくは配列の様々な置換を行うこと、または生物学的活性に必要とされない末端のもしくは内部の残基もしくは配列を欠失させることによって構築することができる。例えば、生物学的活性のために必須ではないシステイン残基を欠失させて、または別のアミノ酸と置き換えて、再生時の不必要なまたは不適当な分子内ジスルフィド架橋の形成を防止することができる。別の状況において、生物学的に等価な抗体は、抗体のグリコシル化特徴を変更するアミノ酸変化、例えば、グリコシル化を排除または除去する突然変異を含む抗CD48抗体変異体を含んでもよい。種選択性および種交差反応性本発明のある特定の実施形態によれば、抗CD48抗体は、ヒトCD48に結合するが、別の種由来のCD48には結合しない。本発明はまた、ヒトCD48および1つまたは複数のヒト以外の種由来のCD48に結合する抗CD48抗体も含む。例えば、本発明の抗CD48抗体は、ヒトCD48に結合してもよく、マウス、ラット、モルモット、ハムスター、アレチネズミ、ブタ、ネコ、イヌ、ウサギ、ヤギ、ヒツジ、ウシ、ウマ、ラクダ、カニクイザル、マーモセット、アカゲザルまたはチンパンジーCD48のうちの1つまたは複数に、場合により結合しても結合しなくてもよい。イムノコンジュゲート本発明は、細胞毒素、化学療法薬、免疫抑制薬または放射性同位体などの、治療用部分にコンジュゲートされた抗CD48モノクローナル抗体を包含する。細胞傷害剤は、細胞に有害である任意の作用物質を含む。イムノコンジュゲートを形成するための適した細胞傷害剤および化学療法剤の例は、当技術分野において知られている。多重特異性抗体本発明の抗体は、単一特異性、二重特異性または多重特異性であってよい。多重特異性抗体は、1つの標的ポリペプチドの異なるエピトープに特異的であってもよく、または複数の標的ポリペプチドに特異的な抗原結合ドメインを含有してもよい。例えば、Tuttら、1991、JImmunol14760~69Kuferら、2004、TrendsBiotechnol22238~244を参照されたい。本発明の抗CD48抗体は、他の機能的分子、例えば、他のペプチドまたはタンパク質に連結する、またはそれと共発現させることができる。例えば、抗体またはその断片を、他の抗体または抗体断片などの1つまたは複数の別の分子的実体に機能的に連結して、第2の結合特異性を有する二重特異性または多重特異性抗体を生成することができる。例えば、本発明は、免疫グロブリンの一方のアームがヒトCD48またはその断片に特異的であり、免疫グロブリンの他方のアームが第2の治療標的に特異的であるか、またはトリプシン阻害剤などの治療用部分にコンジュゲートされている、二重特異性抗体を含む。本発明との関連において使用することができる例示的な二重特異性抗体フォーマットは、第1の免疫グロブリンCH3ドメインおよび第2のIgCH3ドメインの使用を伴い、ここで、第1および第2のIgCH3ドメインは、少なくとも1つのアミノ酸が互いに異なり、少なくとも1つのアミノ酸の差異は、アミノ酸の差異を欠く二重特異性抗体と比較してプロテインAへの二重特異性抗体の結合を低減する。一実施形態において、第1のIgCH3ドメインは、プロテインAに結合し、第2のIgCH3ドメインは、H95R変更などの、プロテインA結合を低減するまたは消失させる突然変異を含有する。第2のCH3は、Y96F変更をさらに含んでもよい。第2のCH3内で見出され得るさらなる変更は、IgG1抗体の場合にはD16E、L18M、N44S、K52N、V57MおよびV82IIgG2抗体の場合にはN44S、K52NおよびV82IならびにIgG4抗体の場合にはQ15R、N44S、K52N、V57M、R69K、E79QおよびV82Iを含む。上記の二重特異性抗体フォーマットにおける変形形態は、本発明の範囲内で想定される。治療用製剤および投与本発明は、本発明の抗CD48抗体またはその抗原結合断片を含む医薬組成物を提供する。本発明の医薬組成物は、適当な担体、添加剤および改善された移動、送達、耐性などをもたらす別の作用物質とともに製剤化される。多数の適切な製剤を、すべての薬剤師に知られている処方集RemingtonsPharmaceuticalSciences、MackPublishingCompany、Easton、PAにおいて見出すことができる。これらの製剤は、例えば、粉剤、ペースト剤、軟膏剤、ゼリー剤、ろう、油、脂質、脂質含有ベシクルなど、DNAコンジュゲート、無水の吸収ペースト剤、水中油型および油中水型乳剤、乳剤カーボワックス、半固形ゲル剤およびカーボワックスを含有する半固形混合物を含む。PowellらのCompendiumofexcipientsforparenteralformulations、PDAJPharmSciTechnol52238~311もまた参照されたい。患者に投与される抗体の用量は、患者の年齢および大きさ、標的疾患、状態、投与経路などに応じて様々であってよい。好ましい用量は、典型的には体重または体表面積に従って計算される。成人患者においてCD48活性と関連した状態または疾患を治療するために本発明の抗体が使用される場合、通常、約001~約20mgkg体重、より好ましくは約002~約7、約003~約5または約005~約3mgkg体重の単回用量で本発明の抗体を静脈内投与することが有利であり得る。状態の重症度に応じて、治療の頻度および継続期間を調整することができる。CD48抗体を投与するための有効な投薬量およびスケジュールは経験的に決定してもよい例えば、患者進行を周期的な評価によってモニターし、それに応じて用量を調整することができる。さらに、投薬量の種間のスケーリングは、当技術分野においてよく知られている方法を使用して実施することができる。様々な送達系、例えば、リポソーム中へのカプセル化、微粒子、マイクロカプセル、突然変異ウイルスを発現させることができる組換え細胞、受容体媒介エンドサイトーシスが知られており、本発明の医薬組成物を投与するために使用することができる。導入の方法は、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、皮下、鼻腔内、硬膜外、および経口経路を含むがこれらに限定されない。組成物は、任意の好都合な経路によって、例えば、注入またはボーラス注射によって、上皮層もしくは粘膜層を通した吸収によって投与されてもよく、別の生物学的活性物質と一緒に投与されてもよい。投与は、全身または局所的とすることができる。本発明の医薬組成物は、標準的な針およびシリンジを用いて皮下または静脈内に送達することができる。加えて、皮下送達に関して、ペン型送達デバイスは、本発明の医薬組成物の送達に容易に適用される。そのようなペン型送達デバイスは、再使用可能または使い捨てとすることができる。再使用可能なペン型送達デバイスは一般に、医薬組成物の入った交換可能なカートリッジを利用する。カートリッジ内の医薬組成物のすべてが投与され、カートリッジが空であれば、空のカートリッジは容易に捨てて医薬組成物の入った新しいカートリッジと交換することができる。その後、ペン型送達デバイスは再使用される。使い捨てペン型送達デバイスにおいて、交換可能なカートリッジはない。そうではなく、使い捨てペン型送達デバイスは、デバイス内のリザーバー中に入っている医薬組成物が充填済みになっている。リザーバーの医薬組成物が空になったら、デバイス全体を捨てる。非常に多くの再使用可能なペン型および自己注射器送達デバイスが、本発明の医薬組成物の皮下送達に適用される。例は、ほんの数例を挙げれば、AUTOPEN、DISETRONICペン、HUMALOGMIX7525ペン、HUMALOGペン、HUMALIN7030ペン、NOVOPENI、IIおよびIII、NOVOPENJUNIOR、BDペン、OPTIPEN、OPTIPENPRO、OPTIPENSTARLET、およびOPTICLIKを含むがこれらに限定されない。本発明の医薬組成物の皮下送達に適用される使い捨てペン型送達デバイスの例は、ほんの数例を挙げれば、SOLOSTARペン、FLEXPEN、およびKWIKPEN、SURECLICK自己注射器、PENLET、EPIPEN、およびHUMIRAペンを含むがこれらに限定されない。ある特定の状況において、医薬組成物は、制御放出系において送達することができる。一実施形態において、ポンプが使用されてもよい。別の実施形態において、ポリマー材料を使用することができるMedicalApplicationsofControlledRelease、LangerおよびWise、1974、CRCPres、BocaRaton、Floridaを参照されたい。さらに別の実施形態において、制御放出系は、組成物の標的の近くに置くことができ、したがって、全身用量のごく一部を必要とする。別の制御放出系は、Langerによる総説、1990、Science2491527~1533において論じられている。注射可能な調製物は、静脈内、皮下、皮内および筋肉内注射、点滴注入などのための剤形を含んでもよい。これらの注射可能な調製物は、公知の方法によって調製することができる。例えば、注射可能な調製物は、例えば、上記の抗体またはその塩を、注射用に従来から使用されている無菌の水性媒体または油性媒体中に溶解、懸濁または乳化することによって調製することができる。注射用の水性媒体として、例えば、生理食塩水、グルコースおよび別の助剤などを含有する等張溶液があり、これは、アルコール、多価アルコール、非イオン性界面活性剤例えば、ポリソルベート80、HCO50付加物などの適切な可溶化剤と組み合わせて使用されてもよい。油性媒体として、例えば、ゴマ油、大豆油などが用いられ、これは、安息香酸ベンジル、ベンジルアルコールなどの可溶化剤と組み合わせて使用されてもよい。このように調製される注射剤は、好ましくは適切なアンプル中に充填される。有利には、上記の経口または非経口用途のための医薬組成物は、活性成分の用量に適合するように合わせた単位用量で剤形に調製される。そのような単位用量の剤形は、例えば、錠剤、丸剤、カプセル剤、注射剤、坐剤、などを含む。含有される前述の抗体の量は、一般に、単位用量の剤形当たり約5~約500mgであり、特に注射剤の形態では、前述の抗体は、約5~約100mg、別の剤形については約10~約250mgで含有されることが好ましい。抗体の治療的使用本発明の抗体は、CD48活性と関連したもしくはそれによって媒介される、またはCD48とCD48受容体との間の相互作用を遮断することによって治療可能な、任意の疾患または障害の治療、予防およびまたは軽減のために、とりわけ有用である。本発明の抗CD48抗体を用いて治療することができる例示的な疾患および障害は、例えば、喘息、アレルギー、アトピー性皮膚炎、結膜炎、炎症性腸疾患、セリアック病およびがんを含む。本発明の抗CD48抗体はまた、患者に投与して乾癬を治療することもできる。本発明の抗CD48抗体を用いて治療することができる他の疾患および障害は、例えば、全身性紅斑性狼蒼、リウマチ性関節炎、移植片対宿主病および移植片拒絶反応を含む。併用療法本発明は、本発明の抗CD48抗体を、少なくとも1つのさらなる治療活性成分と組み合わせて投与することを含む治療的投与レジメンを含む。そのようなさらなる治療活性成分の非限定的な例は、別のCD48アンタゴニスト、サイトカイン阻害剤阻害剤IL18阻害剤IL4阻害剤IL6阻害剤アスピリンNSAIDステロイド低用量シクロスポリンA腫瘍壊死因子もしくはTNF受容体阻害剤尿酸合成阻害剤尿酸排泄促進剤別の炎症阻害剤およびまたはコルチコステロイドを含む。さらなる治療活性成分は、本発明の抗CD48抗体の投与の前に、それと同時にまたはその後に投与されてもよい。抗体の診断的使用本発明の抗CD48抗体をまた使用して、例えば、診断目的のために、試料中のCD48を検出およびまたは測定することができる。例えば、抗CD48抗体、またはその断片を使用して、CD48の異常な発現によって特徴付けられる状態または疾患を診断することができる。CD48についての例示的な診断アッセイは、例えば、患者から得られた試料を、本発明の抗CD48抗体と接触させることを含んでもよく、ここで抗CD48抗体は、検出可能な標識またはレポーター分子で標識されている。代替として、標識の付いていない抗CD48抗体を、それ自身が検出可能に標識されている二次抗体と組み合わせて、診断的用途において使用することができる。検出可能な標識またはレポーター分子は、3H、14C、32P、35Sまたは125Iなどの放射性同位体フルオレセインイソチオシアネート、もしくはローダミンなどの蛍光または化学発光部分またはアルカリホスファターゼ、βガラクトシダーゼ、セイヨウワサビペルオキシダーゼもしくはルシフェラーゼなどの酵素とすることができる。試料中のCD48を検出または測定するために使用することができる特定の例示的なアッセイは、酵素結合免疫吸着アッセイ、ラジオイムノアッセイおよび蛍光活性化細胞選別を含む。本発明によるCD48診断アッセイにおいて使用することができる試料は、通常のまたは病理学的条件下で患者から得ることができる、検出可能な量のCD48タンパク質またはその断片を含有する任意の組織または体液試料を含む。一般に、健康な患者から得られる特定の試料中のCD48のレベルを測定して、ベースラインまたは標準的なCD48のレベルを最初に確立する。次いで、このCD48のベースラインレベルを、CD48関連疾患または状態を有すると思われる個体から得られる試料において測定されるCD48のレベルに対して比較することができる。以下の実施例は、本発明の方法および組成物を製造および使用する方法の完全な開示および説明を当業者に提供するために提示され、本発明者らが本発明者らの発明とみなすものの範囲を限定することを意図しない。使用される数字に関して正確さを確実にする努力がなされたが、いくらかの実験的誤差および逸脱が考慮されるべきである。別途示されない限り、部は重量部であり、分子量は平均分子量であり、温度は摂氏度であり、圧力は大気圧または大気圧付近である。ヒト抗体からヒトCD48の作製ヒトCD48の外部ドメインを含む免疫原を、ヒト免疫グロブリン重鎖およびκ軽鎖可変領域をコードしているDNAを含むVELOCIMMUNEマウスに、免疫反応を刺激するためのアジュバントとともに直接投与した。CD48特異的イムノアッセイによって抗体免疫応答をモニターした。所望の免疫応答が達成されたら、脾細胞を回収し、マウス骨髄腫細胞と融合して、それらの生存可能性を保ち、ハイブリドーマ細胞系を形成した。ハイブリドーマ細胞系をスクリーニングおよび選択して、CD48特異的抗体を産生する細胞系を同定した。この技術を使用して、いくつかの抗CD48キメラ抗体を得たこのように作製された例示的な抗体を、以下の通り称したH2M1707N、H2M1709N、H2M1710N、H2M1712N、H2M1713N、H2M1763N、H2M1811N、H3M1766N、H2M1798NおよびH2M1711N。抗CD48抗体をまた、US20070280945A1において記載されている通り、骨髄腫細胞と融合していない抗原陽性B細胞から直接単離した。この方法を使用して、いくつかの完全ヒト抗CD48抗体を得たこのように作製された例示的な抗体を、以下の通り称したH4H1769Na、H4H1769Pa、H4H1769Nb、H4H1769Pb、H4H1770N、H4H1770P、H4H1771N、H4H1771P、H4H1772N、H4H1772P、H4H1774N、H4H1774P、H4H1775N、H4H1775P、H4H1778N、H4H1778P、H4H1779N、H4H1779P、H4H1781N、H4H1781P、H4H1789Na、H4H1789Pa、H4H1789Nb、H4H1789Pb。この実施例の方法に従って作製された例示的な抗CD48抗体の生物学的特性は、下記に記載の実施例において詳細に記載されている。重鎖および軽鎖可変領域アミノ酸配列Table1は、選択された抗CD48抗体の重鎖および軽鎖可変領域アミノ酸配列対およびそれらの対応する抗体識別名を記載している。N、PおよびGの呼称は、同一なCDR配列を有するが、CDR配列の範囲外の領域において配列変異を有する重鎖および軽鎖を有する抗体を指す。このように、特定の抗体のN、PおよびG変異体は、それらの重鎖および軽鎖可変領域内では同一であるがそれらのフレームワーク領域内では互いに異なるCDR配列を有する。本明細書において使用される抗体の呼称の前に置かれているH2M、H3M、H4Hなどは、抗体の特定のFc領域を示す。例えば、H2M抗体はマウスIgG2Fcを有し、一方、H4H抗体はヒトIgG4Fcを有する。当業者には理解されるように、H2MまたはH3M抗体は、H4H抗体に変換することができ、逆もまた同様であるが、可変ドメインは同じままである。表面プラズモン共鳴によって決定される可溶性CD48への抗体結合ヒトおよびサル可溶性組換えCD48へのヒトモノクローナル抗hCD48抗体結合の結合親和性および速度定数を、表面プラズモン共鳴によって、25°Cおよび37°Cの両方で、CD48の単量体および二量体のコンフィギュレーションの両方について決定した。測定は、T1002BIACORE機器において実施した。抗体を、抗Fcチップ表面を通じて捕捉し、CD48を、単量体のまたは二量体のフォーマットのいずれかで、表面上に流した。この実施例において使用された試薬のアミノ酸配列識別名は、Table2において記載されている。可溶性CD48を、別個の注入において異なる濃度でフローセルにアプライし、反応速度論的結合および解離速度定数を、Biacoreソフトウェアを使用した反応速度論的結合データへの適合によって決定した。結合解離平衡定数および解離半減期を、反応速度論的速度定数から以下の通り計算したKDkdkat12。Table3~6において示されているように、この実施例において試験された例示的な抗体は、ヒトおよびサルCD48可溶性タンパク質の両方への高親和性結合を示した。一価CD48と比べて、溶液相分析物として二価CD48を使用した場合、結合親和性の顕著な増加が観察された。HD交換によるCD48へのH4H1789Pa結合のエピトープマッピング実験を実施して、H4H1789Paが相互作用するCD48のアミノ酸残基を決定した。この目的のために、HD交換エピトープマッピングを行った。HD交換方法の全般的な説明は、例えば、EhringAnalyticalBiochemistry267252~259およびEngenおよびSmithAnalChem73256A~265Aにおいて記載されている。HD交換を介してH4H1789Paに結合するためのCD48のエピトープをマッピングするために、組換えヒトCD48mycmychis融合構築物を使用した。hCD48mmHをまず、PNGaseFを用いてネイティブな条件下で脱グリコシル化した。次いでH4H1789Paを、架橋剤BS3によって、抗ヒトIgGアガロースビーズに共有結合により結び付けた。オン溶液オフビーズ実験において、リガンドを5分間または10分間、D2Oで調製したPBS緩衝液中で重水素化し、次いで、2分間のインキュベーションの間、H4H1789Paビーズに結合させた。CD48結合ビーズをPBS水性緩衝液で洗浄し、オン交換時間の半分にわたってインキュベートした。オフ交換の後、結合しているCD48を、氷冷した低pHのTFA溶液でビーズから溶出した。次いで、溶出したCD48を固定されたペプシンで5分間消化した。得られたペプチドを、ZipTipクロマトグラフィーピペットチップを使用して単離し、UltrafleXtremeマトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間型TOF質量分析によって直ちに分析した。オンビーズオフビーズ実験において、まずCD48をH4H1789Paビーズに結合させ、次いで、オン交換のためにD2O中で5分間または10分間インキュベートした。続くステップを、オン溶液オフビーズ手順に記載されている通り行った。すべての検出されたペプチドの重心値を計算し、これらの2つの実験セット間で比較した。結果を、HD交換およびペプシン消化手順に続く液体クロマトグラフィーマトリックス支援レーザー脱離イオン化MSによって同定されたすべての検出されたペプチドについて、重心質量対電荷比の定量的比較を示すTable7においてまとめている。観察される消化ペプチドの大部分は、オン溶液オフビーズおよびオンビーズオフビーズ実験の両方について同様の重心質量対電荷比を与えるが、配列番号384の残基60~76に対応する3つの異なる消化ペプチドおよび配列番号384の残基107~125に対応する7つのペプチドは、オン溶液オフビーズ実験において一貫してより高い重心値を与える。本実施例の目的のために、少なくとも020のプラス方向の差異は、抗体結合によって保護されたアミノ酸を示す。そのような残基は、Table7aにおいて太線テキストおよびアスタリスクで示す。Table7aにおいてまとめたHD交換結果は、2つの領域が、オン交換後のCD48上のこれらの特異的エピトープへのH4H1789Pa結合によって、プロトンオフ交換から保護されることを示す。残基69~76に対応するペプチドは顕著な質量の差異を示さなかったため、N末端エピトープ領域は、配列番号384の残基60~68まで縮小することができる。したがって、CD48上の2つのセグメントは、HD交換方法によって、可溶性ヒトCD48タンパク質への抗体H4H1789Pa結合のための不連続エピトープと定義される。抗体相互作用のこれらのエリアは、CD48のIgドメイン1内に位置し、図1において図式で示す。前述のエピトープマッピングアッセイの妥当性および正確性を確認するために、以前に定義されたエピトープを有する対照抗体を使用してさらなる実験を実施した。特に、HD交換実験を、上記のCD48mmH構築物および抗Myc抗体9E10を使用して実施した。Mycエピトープは、配列番号391のアミノ酸195~216に対応する。これらの確認用実験についてのすべての実験手順は、試験抗体として抗Myc抗体9E10を使用したことを除いて、上記のH4H1789Pa実験と同じであった。確認用の抗Myc実験の結果を、Table7bにおいてまとめている。の第1の列に示されている残基番号付けは、hCD48mmH構築物配列番号391の実際のアミノ酸番号付けに対応し、一方、Table7aの第1の列に示されている残基番号付けは、完全長ヒトCD48ポリペプチド配列番号384のアミノ酸番号に対応するように調整されていることに留意されたい。前述と同様に、少なくとも020のプラス方向の差異は、抗体結合によって保護されたアミノ酸を示す。そのような残基は、Table7bにおいて太線テキストおよびアスタリスクで示す。予期される通り、9E10によって認識されるエピトープは、配列番号391のアミノ酸199~222によって定義される領域中にあると同定される。したがってTable7bにおいてまとめた結果は、この実施例において使用されたHD方法体系を使用して、抗体が相互作用するポリペプチド抗原上のアミノ酸残基を高い信頼性で正確に同定することができることを裏付ける。ELISAによって測定されるCD482B4相互作用の抗体遮断ヒト同族リガンドであるヒト2B4へのヒトCD48およびサルCD48結合を遮断する、ヒト抗CD48モノクローナル抗体の能力を、競合サンドイッチELISAを使用して測定した。一定量のマウスIgG2aFcとの融合体として発現されるビオチン化二量体ヒトCD48タンパク質または2つのmycおよび1つの6Hisエピトープからなるタグとともに発現される単量体サルCD48を、様々な量の抗体を用いて別々に力価測定した。これらの抗体タンパク質複合体を、インキュベートした後、ヒトIgG1またはマウスIgG2aFcのいずれかと融合したヒト2B4受容体を発現する二量体の構築物で被覆したマイクロタイタープレートに移した。25°Cで1時間後、ウェルを洗浄し、結合しているヒトCD48を、セイヨウワサビペルオキシダーゼとコンジュゲートされているストレプトアビジンで検出し、サルCD48を、HRPコンジュゲート抗mycポリクローナル抗体で検出した。ELISAを、TMB溶液で顕色させて、比色反応を生じさせ、硫酸でクエンチした後、VictorX5プレートリーダーにおいて450nmで吸光度を読み取った。S字型用量応答曲線を、Prismソフトウェアを使用してデータに適合させた。2B4へのhCD48またはmfCD48の結合の50を遮断するために必要とされる抗体の濃度と定義される、計算したIC50値を、遮断する潜在力の指標として使用した。、NB結合は観察されないTable8および9において示されているように、すべての試験された抗体が、CD48と2B4との間の相互作用を効率的に遮断した。初代ヒトPBMCにおけるIFNγ放出の抗体遮断本発明のヒト抗CD48モノクローナル抗体の、初代ヒト末梢血単核細胞の活性化を遮断する能力を、IFNγ放出アッセイを使用して測定した。ヒトPBMCを、数人のドナーの白血球濃縮物から、FicollHypaque勾配で遠心分離によって単離した。細胞を、10ウシ胎仔血清を添加したRPMI1640培地中に、1000000mlの最終濃度で再懸濁させ、96ウェルマイクロタイタープレート中にプレーティングした。細胞を、様々な量のCD48特異的抗体とともにインキュベートした後、プロテインGと予め混合されたアゴニスト抗CD3および抗CD28抗体を添加した。37°Cおよび5CO2で48h後、上清を集め、IFNγ濃度を、ELISAキットを製造業者のプロトコール通りに使用して決定した。S字型用量応答曲線を、Prismソフトウェアを使用してデータに適合させた。最大IFNγ放出の50を遮断するために必要とされる抗体の濃度と定義される、計算したIC50値を、遮断する潜在力の指標として使用した。NB結合は観察されないND決定せずNCデータ収束せず。Table10、11および12において示されているように、試験された抗体の大部分が、初代ヒトPBMCにおけるIFNγ放出を効率的に遮断した。初代ヒト混合リンパ球反応アッセイにおけるIFNγ放出の抗体遮断ヒト抗CD48モノクローナル抗体の、初代ヒト末梢血単核細胞の活性化を遮断する能力を、混合リンパ球反応アッセイを使用して測定した。ヒトPBMCを、白血球濃縮物または全血試料から、FicollHypaque勾配での遠心分離によって単離した。細胞を、10ウシ胎仔血清を添加したRPMI1640培地中に、1000000mlの最終濃度まで再懸濁させた。新たに単離された細胞を、異なるドナーの事前に照射を受けた細胞と101の比で混合し、96ウェルマイクロタイタープレート中にプレーティングした。細胞をプレーティングした直後に、抗体を、001nMから10nMの範囲の最終濃度まで添加した。細胞を7日間、37°Cおよび5CO2でインキュベートした。上清を集め、IFNγ濃度を、ELISAキットを製造業者のプロトコール通りに使用して決定した。S字型用量応答曲線を、Prismソフトウェアを使用してデータに適合させた。IFNγ遮断レベルは、用量応答データに適合させた曲線の最大値と最小値との間の差異と定義し、最大値によって正規化したにおける遮断nb結合は観察されないNCデータ収束せず。最大IFNγ放出の50を遮断するために必要とされる抗体の濃度と定義される、計算したIC50値を、遮断する潜在力の指標として使用した。Table13および14において示されているように、すべての試験された抗体が、初代ヒト混合リンパ球反応におけるIFNγ放出を効率的に遮断した。候補の抗CD48抗体の、初代ヒトPBMCにおいてIFNγ放出を効率的に遮断する能力は、実施例6および7において実証されているように、これらの抗体が、全身性紅斑性狼瘡、リウマチ性関節炎、移植片対宿主病、炎症性腸疾患、アレルギー、セリアック病、乾癬、喘息などの疾患および状態において不適切な自己免疫反応を遮断するのに有用であることを示唆する。ヒト造血幹細胞を用いて再構成したRag2γcマウスにおけるヒトサイトカイン放出の抗体遮断ヒト抗CD48モノクローナル抗体の、インビボでのヒト免疫細胞の活性化を遮断する能力を、ヒト造血幹細胞を用いて再構成した免疫不全のRag2γcマウスからなるキメラ動物モデルを使用して測定した。動物を、出生のすぐ後にヒト幹細胞を用いて再構成し、フローサイトメトリーによって再構成を確認した。完全に再構成された動物に、5mgkgのCD48特異的抗体または適切なアイソタイプ対照抗体を、アゴニストマウス抗ヒトCD3抗体またはアイソタイプ対照による処置の24h前に腹腔内注射した。血液試料を、刺激の24h後に得、9つのヒトサイトカインの血清中レベルを、MSDマルチプレックスキットを製造業者のプロトコール通りに使用して測定した。試験された両方の抗体が、ヒトサイトカインの産生を阻害した。Table15および16において示されているように、両方の試験された抗体が、キメラインビボ系においてヒト免疫細胞のポリクローナル刺激によって誘導されるサイトカイン放出を効率的に遮断した。移植片対宿主病の異種モデルにおける体重減少および長期生存の抗体阻害インビボでのヒト免疫細胞の活性化を遮断する、ヒト抗CD48モノクローナル抗体、H4H1789Paの能力を、ヒト末梢血単核細胞を移植した免疫不全のNODscidγcマウスにおいて確立された移植片対宿主病の異種動物モデルを使用して決定した。8週齢のマウスに、健康で正常なボランティアから新たに単離されたPBMCを静脈内注射した。移植成功率を、PBMC注射の3日後の末梢血中のヒトCD45細胞表面マーカーについて陽性の細胞のパーセントとして評価した。ヒトPBMCによる誘導の24h前に投与された単回腹腔内用量のH4H1789Paは、ヒト細胞の移植を完全に阻害した。未処置の動物の100において、ヒト細胞の移植の成功が観察され、PBMC注射の7~8日後にGvHD症状の発症に至った。3日目に単回腹腔内用量のH4H1789Paで処置されたマウスは、体重減少の遅延および長期生存の傾向を示した。さらに、ヒトサイトカインレベルを、放血致死から得られた血清においてMSDマルチプレックスキットを製造業者のプロトコール通りに使用して測定した。H4H1789Paによる処置は、低減したレベルのヒトIL8、IL10、IL6、およびTNFαをもたらした。ヒトGMCSFおよびIFNγのレベルの低減は観察されなかった。ヒトIL1β、IL2およびIL12p70のレベルは検出限界未満であった。図2において示されているように、抗CD48抗体H4H1789Paは、GvHDの異種モデルにおいて体重減少を遅延させ、生存を延長した。これらの結果は、GvHDの治療における抗CD48療法の有用性を裏付ける。セリアック病の治療のための抗CD48抗体の臨床試験セリアック病は、慢性のHLADQ2またはDQ8拘束性CD4T細胞に媒介される腸疾患であり、これらの特定のHLAクラスII分子への高い結合親和性を有する、小麦、大麦およびライ麦由来の特定の食事性脱アミド化グルテンペプチドに応答したインターフェロンγの分泌の結果として生じる。6週間の二重盲検プラセボ対照作用機序実証試験を実施して、抗CD48抗体を用いた治療の効力、安全性および忍容性を、経口グルテンを投与された、生検により確定診断された鎮静期のセリアック病において評価した。12人の患者は、12mgkgの本発明の抗CD48抗体またはプラセボの単回の静脈注射を投与される。この試験に含めた患者は、少なくとも2年間、グルテンを含まない食事を常食とし、グルテン不耐性を8週間欠き、陽性のHLADQ2遺伝子型を有し、グリアジンインキュベーションに対して陰性の抗トランスグルタミナーゼ抗体および陰性のPBMCインターフェロンγELISpot応答を有する。プラセボ対照治療の2週間後、すべての患者は、オレンジ果汁または豆乳と混合した小麦粉スラリーとして摂取される1日当たり16gのグルテン用量を3日間投与される。セリアック病症状を、グルテンチャレンジの2週間前に始めて、その間、およびその2週間後まで、毎日の症状日誌によって記録し、悪心の存在および重症度、腹部膨満感、腹痛、嗜眠、嘔吐、下痢または別の症状を記録する。mRNA、組織学検査、免疫組織化学検査、絨毛高陰窩深の決定および上皮内リンパ球カウントのために、無作為化2週間後および経口グルテンチャレンジ2週間後、小腸生検を十二指腸の第二部から採取する。小腸粘膜の全体のアーキテクチャを、変更したMarsh分類によって評価する。正常な粘膜、上皮内リンパ球増加のある低いグレードの炎症、上皮内リンパ球増加および陰窩過形成を伴う低いグレードの炎症、ならびに上皮内リンパ球増加および陰窩過形成および絨毛萎縮を伴うセリアック病診断を確立するための至適基準。経口グルテンチャレンジの前、ならびにチャレンジの1週間および2週間後に、末梢血を、患者からサンプリングし、精製したTリンパ球を、脱アミド化および対照グリアジンペプチドとともにインキュベートする。これらの対象におけるT細胞応答を、脱アミド化対ネイティブなαグリアジン57~73ペプチドへの示差的なIFNγELISpot応答を測定することによって定量化し、グルテンチャレンジの後に改変されると予期されないpanHLADRインフルエンザペプチドヘマグルチニンペプチドHA307~319へのIFNγELISpot応答に対して正規化する。安全性および忍容性を、理学的検査、臨床実験室試験および有害事象報告によって評価する。グルテンチャレンジ2週間後における主要評価項目は、VhCd指標中央値の改善であるだろう。副次的評価項目は、全体のMarsh腸生検組織学的スコアの改善、毎日のセリアック病の症状スコアの低減、およびαグリアジン57~73ペプチドチャレンジに対するPBMCインターフェロンγELISpot応答の低減を含むであろう。予備的な評価項目は、組織およびWBmRNAの変化、末梢T細胞表現型、組織IELカウント中央値、ならびにELISAによって測定される血清サイトカインを含むであろう。全身性紅斑性狼瘡の治療のための抗CD48抗体の臨床試験SLEは、炎症および組織損傷に至る可能性があるアポトーシスの内因性の核酸に対する自己抗体の産生を含む、多数の免疫系異常によって特徴付けられる自己免疫疾患である。体液性および細胞性免疫系の両方が、活性化される。免疫複合体を含有する自己抗体および慢性ウイルス感染症は、T細胞、B細胞、樹状細胞およびNK細胞を含む自然免疫系および適応免疫系の両方を制御し、自己免疫の自己永続的なサイクルを作り出すI型インターフェロンを刺激する。12週間の二重盲検プラセボ対照作用機序実証試験を実施して、抗CD48抗体を用いた治療の効力、安全性および忍容性を、安定な軽度~中等度から重度のSLEにおいて評価する。20人の患者は、12mgkgの本発明の抗CD48抗体またはプラセボの単回の静脈注射を投与される。エストロゲン安全性および紅斑性狼瘡国内評価全身性紅斑性狼瘡疾患活動性指標、SLE再燃指標ならびに医師による疾患の全般評価により、患者を定期的に評価する。生物学的マーカー評価は、以下を含むCD20B細胞およびCD138形質細胞様細胞、CD40LT細胞、抗dsDNA、ANA、免疫グロブリンおよび補体成分C1q、C3、C4およびC5aELISAによるインターフェロンαおよびインターフェロンγ、IL10、IL6、IL15、IL21およびBLySを含むサイトカインのレベルFACSによる表面マーカー分析を用いた循環T、B、NKおよびT制御細胞の合計数ならびにまたは全血中の白血球数の変化の測定および関与する皮膚mRNA遺伝子制御。実験室測定はまた、一連のPKおよび抗薬物抗体を含んでいてもよい。重要な試験組み入れ除外基準は、以下を含む成人年齢18から70スクリーニング前少なくとも2カ月間の安定なSLE疾患活動性および薬物療法なしでの、または低用量プレドニゾン、抗マラリア薬、NSAID、アザチオプリンまたはミコフェノール酸モフェチルの安定な治療レジメンによる維持。この試験のために選択された患者は、測定可能な抗dsDNA、抗Smith、抗RNP、または抗シェーグレン抗体を有する。血液透析、シクロホスファミドまたは高用量プレドニゾンを必要とする活動性のループス腎炎を有する患者は除外される。4週間以内に重度の感染症の病歴を有する患者は除外される。ベースラインと抗CD48治療の4週目との間の、抗dsDNA抗体の低減ならびに補体C3およびC4の増加によって、効力を評価する。改善の予備的な評価項目は、SELENASLEDAI、PGAおよびSLE再燃指標を含む。安全性および忍容性を、理学的検査、臨床実験室試験および有害事象報告によって評価する。乾癬の治療のための抗CD48抗体の臨床試験乾癬の病態生理は、ケラチン生成細胞を活性化し増殖させることができるサイトカイン、ケモカインおよび成長因子の分泌をもたらす、異常な免疫媒介性Th1およびTh17リンパ球炎症反応に関する。これらのプロセスは、乾癬プラークの特質である病理を特徴付ける実質的な白血球の浸潤および表皮の肥厚をもたらす。12週間の二重盲検プラセボ対照概念実証試験を実施して、本発明の抗CD48抗体を用いた治療の効力、安全性および忍容性を、中等度から重度の乾癬において評価する。20人の患者は、12mgkgの抗CD48抗体またはプラセボの単回の静脈注射を投与される。乾癬面積および重症度指標スコア、医師の全般評価スコア、DLQ、写真撮影、臨床の観察ならびにPKおよび抗薬物抗体を含む実験室測定により、患者を定期的に評価する。ベースラインと抗CD48治療の8週目との間のPASIの変化によって、効力を評価する。主要評価項目は、ベースラインから8週目までのPASIスコアの75改善である。副次的評価項目は、ベースラインと8週目との間のPASI、PGAおよびDLQの50改善を含む。安全性および忍容性は、理学的検査、臨床実験室試験および有害事象報告によって評価する。重要な試験組み入れ除外基準は、以下を含む成人年齢18から70少なくとも6カ月の継続期間の慢性プラーク乾癬BSA病変範囲≧10PASI≧12全身療法または光線療法の候補全身療法の現在の使用もしくは特定のウォッシュアウト期間内の使用なしおよびまたは効力の欠如による乾癬の生物学的療法の以前の中止なし。潰瘍性大腸炎の治療のための抗CD48抗体の臨床試験潰瘍性大腸炎の病態生理は、腸管の共生叢に対する、消化管壁における過敏性のCD4T細胞適応免疫応答によって特徴付けられる。活性化されたTh1およびTh17リンパ球は、好中球および単球を腸に動員させる炎症誘発性ケモカインおよびサイトカインを放出する。抗CD48による同時刺激遮断は、微生物により活性化されたAPCに、ナイーブなTヘルパー細胞と相互作用させないようにする潜在能を有し、これは、慢性の粘膜炎症応答を強化し持続させる。12週間の二重盲検プラセボ対照概念実証試験を実施して、抗CD48抗体を用いた4週間の治療の効力、安全性および忍容性を、潰瘍性大腸炎の中等度から重度の症状を有する患者において評価する。70人の患者は、ベースライン時に単回の静脈注射として、本発明の抗CD48抗体またはプラセボを投与される。この試験に含めた患者は、18~70歳の年齢であり、スクリーニング時に、6~10の疾患活動性指標スコアにより潰瘍性大腸炎を有すると診断される。患者は、アミノサリチル酸塩薬物療法を、スクリーニングの前に少なくとも1カ月間、無作為化の前に少なくとも2週間は安定な用量で投与されている。患者が潰瘍性大腸炎のための何らかの別の薬物療法を試験の前に投与されているなら、そのような薬物療法の用量は、無作為化の前少なくとも1カ月間は安定にする。アザチオプリンまたは6メルカプトプリンを投与されている患者に関して、これらの薬物療法をスクリーニングの前に少なくとも3カ月間投与されていた患者のみが、この試験に含まれる。主要効力分析は、治療群割当てに応じて、ベースラインから4週目までの潰瘍性大腸炎疾患活動性指標スコアの平均変化を評価する。治療群当たり35人の患者のサンプルサイズは、プラセボ群と積極的治療群との間の差異を検出するために、5レベルの有意性で、少なくとも80検出力を有し、少なくとも3点の治療群間の平均差異を4以下の共通のSDで推定する。副次的効力分析は、ベースラインから4週目までの3点以上の疾患活動性指標スコアの低減を有する患者の割合を評価する。プラセボ奏功率が60以下である、かつ積極群における応答率がプラセボ群よりも少なくともより40高いと仮定すれば、1群当たり35人の対象のサンプルサイズは、プラセボ群と積極的治療群との間の差異を検出するために、5レベルの有意性で少なくとも80検出力を有する。副次的効力評価項目もまた、ベースラインから4週目まで、治療群に応じて比較する。加えて、白血球の浸潤の定量のために腸組織生検を回収し、免疫組織化学的表面マーカー分析を使用した細胞の表現型決定によって確認する。本発明は、本明細書において記載されている特定の実施形態による範囲に限定されるものではない。実際に、本明細書に記載されているものに加えて本発明の様々な変更が、前述の説明および添付の図面から、当業者には明らかとなるであろう。そのような変更は、添付の特許請求の範囲内に入ることが意図される。