"フロログルシノール、フロロタンニン及び褐藻類抽出物のうちから選択される何れか1つ以上の化合物または抽出物を有効成分とするGABAA-ベンゾジアゼピン受容体活性用組成物。前記組成物は、抗不安、抗痙攣anti-convulsant、鎮静及び不眠症治療用薬学組成物であることを特徴とする請求項1に記載のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体活性用組成物。前記フロロタンニンは、エコール類、フコール類、フロレトール類、フハロール類及びエクストロノールのうちから選択される何れか1つ以上の化合物であることを特徴とする請求項1に記載のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体活性用組成物。前記フロロタンニンは、エクストロノール、トリフロレトールA、フコジフロレトールG、エコール及び6,6’-ビエコールのうちから選択される何れか1つ以上の化合物であることを特徴とする請求項3に記載のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体活性用組成物。前記褐藻類は、ヘラヤハズ、カジメ、クロメ、ツルアラメ、アカモク、ハバノリ、ネバリモ、イワヒゲ、フクロノリ、ヤツマタモク、サナダグサ、アミジグサ、コンブ、ワカメ及びイシゲのうちから選択される何れか1つ以上の褐藻類であることを特徴とする請求項1に記載のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体活性用組成物。前記褐藻類は、カジメEckloniacavaまたはクロメEckloniakuromeであることを特徴とする請求項5に記載のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体活性用組成物。前記褐藻類抽出物は、褐藻類水抽出物、褐藻類エタノール抽出物、褐藻類メタノール抽出物、または水、エタノール及びメタノールのうちから選択される何れか2種以上の溶媒の混合溶媒による褐藻類抽出物であることを特徴とする請求項1に記載のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体活性用組成物。前記褐藻類水抽出物は、40~100°Cの水で2~48時間褐藻類を抽出して製造し、褐藻類エタノール抽出物は、褐藻類を35~75のエタノールで20~60°Cで2~36時間抽出して製造し、前記褐藻類メタノール抽出物は、褐藻類を35~85のメタノールで20~60°Cで2~36時間抽出して製造することを特徴とする請求項7に記載のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体活性用組成物。前記褐藻類水抽出物は、セルラーゼ、ビスコザイム、アルカラーゼ及びペクチンからなる群から選択される1種以上の酵素を添加した水で40~55°Cで2~24時間褐藻類を抽出して製造されることを特徴とする請求項8に記載のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体活性用組成物。フロログルシノール、フロロタンニン及び褐藻類抽出物のうちから選択される何れか1つ以上の化合物または抽出物を有効成分とする抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善用食品組成物。前記フロロタンニンは、エコール類、フコール類、フロレトール類、フハロール類及びエクストロノールのうちから選択される何れか1つ以上の化合物であることを特徴とする請求項10に記載の抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善用食品組成物。前記フロロタンニンは、エクストロノール、トリフロレトールA、フコジフロレトールG、エコール及び6,6’-ビエコールのうちから選択される何れか1つ以上の化合物であることを特徴とする請求項11に記載の抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善用食品組成物。前記褐藻類は、ヘラヤハズ、カジメ、クロメ、ツルアラメ、アカモク、ハバノリ、ネバリモ、イワヒゲ、フクロノリ、ヤツマタモク、サナダグサ、アミジグサ、コンブ、ワカメ及びイシゲのうちから選択される何れか1つ以上の褐藻類であることを特徴とする請求項10に記載の抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善用食品組成物。前記褐藻類は、カジメまたはクロメであることを特徴とする請求項13に記載の抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善用食品組成物。前記褐藻類抽出物は、褐藻類水抽出物、褐藻類エタノール抽出物、褐藻類メタノール抽出物、または水、エタノール及びメタノールのうちから選択される何れか2種以上の溶媒の混合溶媒による褐藻類抽出物であることを特徴とする請求項10に記載の抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善用食品組成物。前記組成物は、錠剤、散剤、顆粒剤及びカプセル剤のうちから何れか1つの形態で製剤化された健康機能食品であることを特徴とする請求項10に記載の抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善用食品組成物。本発明が解決しようとする第1の課題は、GABAA受容体のベンゾジアゼピンサイトに結合して親和力を有するフロログルシノール、フロロタンニンまたは褐藻類抽出物を含むGABAA-ベンゾジアゼピン受容体活性用組成物を提供するところにある。本発明が解決しようとする第2の課題は、フロログルシノール、フロロタンニンまたは褐藻類抽出物を含む抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善用食品組成物を提供するところにある。本発明は、前記第1の課題を果たすために、フロログルシノール、フロロタンニンまたは褐藻類抽出物を有効成分とするGABAA-ベンゾジアゼピン受容体活性用組成物を提供する。本発明の一実施形態によれば、前記組成物は、抗不安、抗痙攣anti-convulsant、鎮静及び不眠症治療用薬学組成物であり得る。本発明の一実施形態によれば、前記フロロタンニンは、エコール類、フコール類、フロレトール類、フハロール類及びエクストロノールのうちから選択される何れか1つ以上の化合物であり得る。本発明の一実施形態によれば、前記フロロタンニンは、エクストロノール、トリフロレトールA、フコジフロレトールG、エコール及び6,6’-ビエコールのうちから選択される何れか1つ以上の化合物であり得る。本発明の一実施形態によれば、前記褐藻類は、ヘラヤハズ、カジメ、クロメ、ツルアラメ、アカモク、ハバノリ、ネバリモ、イワヒゲ、フクロノリ、ヤツマタモク、サナダグサ、アミジグサ、コンブ、ワカメ及びイシゲのうちから選択される何れか1つ以上の褐藻類であり得る。本発明の一実施形態によれば、前記褐藻類は、カジメEckloniacavaまたはクロメEckloniakuromeであり得る。本発明の一実施形態によれば、前記褐藻類抽出物は、褐藻類水抽出物、褐藻類エタノール抽出物、褐藻類メタノール抽出物、または水、エタノール及びメタノールのうちから選択される何れか2種以上の溶媒の混合溶媒による褐藻類抽出物であり得る。本発明の一実施形態によれば、褐藻類水抽出物は、40~100°Cの水で2~48時間褐藻類を抽出して製造し、褐藻類エタノール抽出物は、褐藻類を35~75のエタノールで20~60°Cで2~36時間抽出して製造し、前記褐藻類メタノール抽出物は、褐藻類を35~85のメタノールで20~60°Cで2~36時間抽出して製造することであり得る。前記褐藻類水抽出物は、セルラーゼ、ビスコザイム、アルカラーゼ及びペクチンからなる群から選択される1種以上の酵素を添加した水で40~55°Cで2~24時間褐藻類を抽出して製造することであり得る。本発明は、前記第2の課題を果たすために、フロログルシノール、フロロタンニンまたは褐藻類抽出物を有効成分とする抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善用食品組成物を提供する。本発明の一実施形態によれば、前記フロロタンニンは、エコール類、フコール類、フロレトール類、フハロール類及びエクストロノールのうちから選択される何れか1つ以上の化合物であり得る。本発明の一実施形態によれば、前記フロロタンニンは、エクストロノール、トリフロレトールA、フコジフロレトールG、エコール及び6,6’-ビエコールのうちから選択される何れか1つ以上の化合物であり得る。本発明の一実施形態によれば、前記褐藻類は、ヘラヤハズ、カジメ、クロメ、ツルアラメ、アカモク、ハバノリ、ネバリモ、イワヒゲ、フクロノリ、ヤツマタモク、サナダグサ、アミジグサ、コンブ、ワカメ及びイシゲのうちから選択される何れか1つ以上の褐藻類であり得る。本発明の一実施形態によれば、前記褐藻類は、カジメまたはクロメであり得る。本発明の一実施形態によれば、前記褐藻類抽出物は、褐藻類水抽出物、褐藻類エタノール抽出物、褐藻類メタノール抽出物、または水、エタノール及びメタノールのうちから選択される何れか2種以上の溶媒の混合溶媒による褐藻類抽出物であり得る。本発明の一実施形態によれば、前記組成物は、錠剤、散剤、顆粒剤及びカプセル剤のうちから何れか1つの形態で製剤化された健康機能食品であり得る。本発明によるフロログルシノール、フロロタンニンまたは褐藻類抽出物は、GABAA-ベンゾジアゼピン受容体に親和力を有して、それを含む組成物は、抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善に効果的であり、天然物から得られた物質を利用するために、副作用を誘発せず、安全性を確保し、薬学組成物や健康機能食品などの食品組成物としても非常に有用である。以下、本発明を詳細に説明する。GABAA受容体は、抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善効果と関連しており、GABAA受容体に作用する薬物としては、作用剤agonistとしては、ベンゾジアゼピン、ジアゼパムdiazepam、DZP、ゾルピデムzolpidemなどがあり、拮抗剤antagonistとしては、フルマゼニルflumazenil、FLUがある。前述したように、GABAA受容体に作用する薬物の場合、依存性及び副作用をもたらす問題点がある。褐藻類抽出物は、緑藻類や紅藻類とは異なって、GABAA-benzodiazepineベンゾジアゼピン受容体に作用して、抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善効果を有していることを確認した。前記睡眠改善は、入眠潜時sleeplatencyが減少し、睡眠時間sleepdurationが増加する効果でありうるが、これに本発明の範囲が制限されるものではない。前記褐藻類抽出物でGABAA-ベンゾジアゼピン受容体に作用して、抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善効果を表わす有効成分は、褐藻類にのみ特異的に存在するポリフェノール化合物であるフロログルシノールまたはフロロタンニンであることを確認した。前記フロロタンニンは、フロログルシノールのオリゴマーである。フロロタンニンは、例えば、エコール類、フコール類、フロレトール類、フハロール類及びエクストロノールのうちから選択されうる。前記エコール類は、エコール、ダイエコール、ビエコール、フロロエコール、フロエコール、フコフロエコール、フロロフコフロエコールなどがあり、フコール類は、2ないし10個のフロログルシノールがアリール-アリール結合されたオリゴマーであり、フロレトール類は、2ないし10個のフロログルシノールがアリール-エーテル結合されたオリゴマーであり、フハロール類は、3ないし10個のフロログルシノールがパラまたはオルト位置でエーテル結合され、3番目の環ごとに水酸基をさらに含むオリゴマーである。GABAA-ベンゾジアゼピン受容体に作用して、抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善効果に優れたフロロタンニンとしては、エクストロノール、トリフロレトールA、フコジフロレトールG、エコール及び5,6’-ビエコールがある。本発明の組成物の有効成分であるフロログルシノールまたはフロロタンニンは、褐藻類から個別化合物に分離されたものを使うか、1つ以上のフロロタンニンが混合されている状態で抽出された抽出物、その抽出物を再び分画した濃縮物を使うことができ、または人工的に合成または半合成されたものを使うこともできる。前記褐藻類は、例えば、ヘラヤハズ、カジメ、クロメ、ツルアラメ、アカモク、ハバノリ、ネバリモ、イワヒゲ、フクロノリ、ヤツマタモク、サナダグサ、アミジグサ、コンブ、ワカメ及びイシゲのうちから選択される何れか1つ以上の褐藻類であり、望ましくは、カジメまたはクロメであり、さらに望ましくは、カジメである。前記褐藻類抽出物は、水、有機溶媒またはこれらの混合物を抽出溶媒として用いて抽出されたものであり得る。この際、使われる有機溶媒の種類や水と有機溶媒との混合比率は、特に制限されるものではない。例えば、前記有機溶媒は、低級アルコール、ヘキサン、アセトン、酢酸エチル、クロロホルム、及びジエチルエーテルからなる群から選択された1つ以上の溶媒であり得る。前記低級アルコールは、炭素数1ないし6のアルコールであり得る。例えば、低級アルコールとしては、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ノルマルプロパノール、イソプロパノール、ノルマルブタノール、1-ペンタノール、2-ブトキシエタノールまたはエチレングリコールなどを利用できる。有機溶媒は、それ以外にも、酢酸、DMFOdimethyl-formamide、DMSOdimethylsulfoxideなどの極性溶媒、アセトニトリル、酢酸エチル、酢酸メチル、フルオロアルカン、ペンタン、2,2,4-トリメチルペンタン、デカン、シクロヘキサン、シクロペンタン、ジイソブチレン、1-ペンテン、1-クロロブタン、1-クロロペンタン、o-キシレン、ジイソプロピルエーテル、2-クロロプロパン、トルエン、1-クロロプロパン、クロロベンゼン、ベンゼン、ジエチルエーテル、硫酸ジエチル、クロロホルム、ジクロロメタン、1,2-ジクロロエタン、アニリン、ジエチルアミン、エーテル、四塩化炭素及びTHFTetrahydrofuranなどの非極性溶媒を使うこともできる。前記褐藻類抽出物は、褐藻類水抽出物、褐藻類エタノール抽出物、褐藻類メタノール抽出物、または水、エタノール及びメタノールのうちから選択される何れか2種以上の溶媒の混合溶媒による褐藻類抽出物であり得るが、これに本発明の範囲が制限されるものではない。水抽出物の製造は、褐藻類を40~100°Cの水で2~48時間抽出して製造し、さらに望ましくは、水抽出による水溶性成分の抽出効率を増大させるために、セルラーゼ、ビスコザイム、アルカラーゼ及びペクチンからなる群から選択される1種以上の酵素を添加した水で40~55°Cで2~24時間抽出して製造することができる。エタノール抽出物の製造は、褐藻類を35~75のエタノールで20~60°Cで2~36時間、望ましくは、40~50°Cで2.5~6時間抽出して製造し、より望ましくは、70のエタノール水溶液で45°Cで3時間抽出して製造する。メタノール抽出物の製造は、褐藻類を35~85のメタノールで20~60°Cで2~36時間抽出して製造し、望ましくは、20~30°Cで22~26時間抽出して製造し、より望ましくは、80のメタノールで25°Cで24時間抽出して製造する。本発明の褐藻類抽出物のうちから、カジメ水抽出物は、前記GABAA-ベンゾジアゼピン受容体の結合測定でIC50が1.02~1.03μmであり得る。また、カジメエタノール抽出物は、前記GABAA-ベンゾジアゼピン受容体の結合測定でIC50が0.45~0.46μmであり得る。また、カジメメタノール抽出物は、前記GABAA-ベンゾジアゼピン受容体の結合測定でIC50が1.25~1.26μmであり得る。また、クロメメタノール抽出物は、前記GABAA-ベンゾジアゼピン受容体の結合測定でIC50が0.62~0.63μmであり得る。本明細書で使われる用語‘抽出物’は、抽出物を追加的に分画fractionationした分画物も含む。すなわち、褐藻類抽出物は、前述した抽出溶媒を用いて得たものだけではなく、これに錠剤過程を追加的に適用してフロロタンニンを濃縮させて得たものも含む。また、前記抽出物や分画物を一定の分子量カットオフ値を有する限外濾過膜を通過させて得た分画、多様なクロマトグラフィーサイズ、電荷、疎水性または親和性による分離のために製作されたものによる分離など、追加的に実施された多様な錠剤方法を通じて得られた分画も、本発明の褐藻類抽出物に含まれる。本発明のフロログルシノール、フロロタンニンまたは褐藻類抽出物を有効成分とするGABAA-ベンゾジアゼピン受容体活性用組成物は、抗不安、抗痙攣、鎮静及び不眠症治療用薬学組成物であり得る。前記抗不安、抗痙攣、鎮静及び不眠症治療用薬学組成物の薬学的投与形態は、これらの薬学的許容可能な塩の形態で使うことができ、単独で他の薬学的活性化合物と結合だけではなく、適当な集合の形態で使用できる。また、本発明による抗不安、抗痙攣、鎮静及び不眠症治療用薬学組成物は、それぞれ通常の方法によって、散剤、顆粒剤、阻剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン、シロップ、エアロゾルなどの経口剤剤型、外用剤、座剤及び滅菌注射溶液の形態で剤型化されて使うことができ、剤型化のために、薬学組成物の製造に通常使われる適切な担体、賦形剤または希釈剤を含みうる。前記担体、または、賦形剤または希釈剤としては、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、澱粉、アカシアゴム、アルギン酸、ゼラチン、燐酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、セルロース、メチルセルロース、非晶質セルロース、ポリビニルピロリドン、水、ヒドロキシ安息香酸メチル、ヒドロキシ安息香酸プロピル、タルク、ステアリン酸マグネシウム及び鉱物油などを含んだ多様な化合物あるいは混合物が挙げられる。製剤化する場合には、普通使う充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩解剤、界面活性剤などの希釈剤または賦形剤を使って製造することができる。経口投与のための固型製剤は、前記抽出物に少なくとも1つ以上の賦形剤、例えば、澱粉、ホウ酸カルシウム、スクロースまたはラクトース、ゼラチンなどを混ぜて製造することができる。また、単純な賦形剤以外に、ステアリン酸マグネシウム、タルクのような潤滑剤も使うことができる。経口のための液状製剤としては、懸濁液、内用液剤、乳剤、シロップ剤などが該当するが、よく使う単純希釈剤である水、リキッドパラフィン以外に、さまざまな賦形剤、例えば、湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などを含みうる。非経口投与のための製剤には、滅菌された水溶液、非水溶性剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤、座剤が含まれる。非水性用剤、懸濁剤としては、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブオイルのような植物性油、オレイン酸エチルのような注射可能なエステルなどを使うことができる。座剤の基剤としては、ハードファットwitepsol、マクロゴール、トウイーンtween61、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロールゼラチンなどを使うことができる。本発明による抗不安、抗痙攣、鎮静及び不眠症治療用薬学組成物の望ましい投与量は、患者の状態、体重、疾病の程度、薬物形態、投与経路及び期間によって異なるが、当業者によって適切に選択されうる。しかし、望ましい効果のためには、1日0.0001ないし2,000mg/kgで、望ましくは、0.001ないし2,000mg/kgで投与することができる。投与は、1日に1回投与することもでき、数回分けて投与することもできる。但し、前記投与量によって、本発明の範囲を限定するものではない。本発明による抗不安、抗痙攣、鎮静及び不眠症治療用薬学組成物は、ラット、マウス、家畜、人間などの哺乳動物に多様な経路で投与することができる。投与のあらゆる方式は、例えば、経口、直腸または静脈、筋肉、皮下、子宮内硬膜または脳血管内intracerebroventricular注射によって投与することができる。また、本発明は、フロログルシノール、フロロタンニンまたは褐藻類抽出物を有効成分とする抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善用食品組成物であることを特徴とする。本発明によるフロログルシノール、フロロタンニンまたは褐藻類抽出物を健康機能食品または一般食品の有効成分添加物として使う場合、本発明による抽出物をそのまま添加するか、他の食品または食品成分と共に使うことができ、通常の方法によって適切に使うことができる。有効成分の混合量は、予防、健康または治療などの各使用目的によって適するように決定することができる。一般的に、食品または飲料の製造時に、本発明によるフロログルシノール、フロロタンニンまたは褐藻類抽出物は、原料に対して15重量部以下、望ましくは、10重量部以下の量で添加することができる。しかし、健康及び衛生を目的とするか、または健康調節を目的とする長期間の摂取の場合には、前記量は、前記範囲以下であり、また、本発明は、天然物からの抽出物を利用する点で安全性面で問題がないので、前記範囲以上の量でも使うことができる。前記食品の種類には、特に制限はなく、前記物質を添加することができる食品の例としては、肉類、ソーセージ、パン、チョコレート、キャンディー類、スナック類、菓子類、ピザ、ラーメン、その他の麺類、ガム類、アイスクリーム類を含んだ酪農製品、各種スープ、飲料水、茶、ドリンク剤、アルコール飲料及びビタミン複合剤などがあり、通常の意味での食品をいずれも含みうる。本発明による健康機能食品のうち、飲料食品は、通常の飲料のようにさまざまな香味剤または天然炭水化物などを追加成分として含有することができる。前述した天然炭水化物は、葡萄糖、果糖のようなモノサッカライド、マルトース、スクロースのようなジサッカライド及びデキストリン、シクロデキストリンのようなポリサッカライド、キシリトール、ソルビトール、エリスリトールなどの糖アルコールであり得る。甘味剤としては、タウマチン、ステビア抽出物のような天然甘味剤や、サッカリン、アスパルテームのような合成甘味剤などを使うことができる。前記天然炭水化物の比率は、本発明による機能性食品100mL当たり約0.01~0.04g、望ましくは、約0.02~0.03gであり得る。前記以外に、本発明による抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善用食品組成物は、さまざまな営養剤、ビタミン、電解質、風味剤、着色剤、ペクチン酸及びその塩、アルギン酸及びその塩、有機酸、保護性コロイド増粘剤、pH調節剤、安定化剤、防腐剤、グリセリン、アルコール、炭酸飲料に使われる炭酸化剤を含有することができる。その他に、本発明の睡眠改善用組成物は、天然果汁、果汁飲料及び野菜飲料の製造のための果肉を含有することができる。このような成分は、独立してまたは混合して使うことができる。このような添加剤の比率は、制限されるものではないが、本発明の組成物100重量部に比べて、0.01~0.1重量部の範囲で選択されることが一般的である。以下、望ましい実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明する。しかし、これら実施例は、本発明をより具体的に説明するためのものであって、本発明の範囲が、これに制限されるものではないということは当業者に自明である。[実験例1:海藻類抽出物でのGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性の探索]抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善効果を有する海藻類を探索するために、5種の緑藻類、7種の紅藻類及び6種の褐藻類、総18種の海藻類のメタノール抽出物を韓国の済州テクノパークの済州生物資源抽出物銀行で購入して、GABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合力を測定した。証拠見本Voucherspecimenは、済州生物資源抽出物銀行に寄託した。GABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性の測定は、SDラットの大脳皮質を摘出した後、即時30mMトリス塩酸バッファーpH7.4、4°Cで維持20mLに入れてホモジナイズさせ、10秒間超音波を処理した。引き続き27,000×g及び4°Cの条件で15分間遠心分離した後、上澄み液を捨て、再びバッファー20mLを取って遠心分離し、この過程を3回繰り返した。脳組職内のGABAを除去するために、37°Cの水槽で30分間インキュベーションさせ、遠心分離した後、ペレットを収集して-80°Cで凍結保管して使った。凍結された膜組織を解凍させた後、27,000×g及び4°Cの条件で10分間遠心分離した後、上澄み液を捨て、50mMクエン酸トリスバッファー結合バッファー、pH7.1、4°Cで維持20mLを入れて遠心分離した。この過程を3回繰り返した後、膜組織を結合バッファーに500mLバッファー/オリジナル組織gの濃度で懸濁させて、結合力評価試験に使った。96-ウェルプレートに膜組織懸濁液180μl、それぞれの抽出物試料10μl及び[3H]フルマゼニル1nM、終末濃度Ro15-1788;PerkinElmerLifeandAnalyticalSciences、Waltham、MA、USA10μlを入れ、氷浴で40分間インキュベーションした。引き続きガラス繊維フィルタGF/C、Whatmanを用いて収集した。サンプルの放射線は、Tri-Carb液体シンチレーションアナライザPerkin-Elmer、Shelton、CT、USAを通じて測定された。非特異的結合NSBは、クロナゼパム1uM、終末濃度を用いて、その値を決定し、結合の置換は、下記の式1のように計算した。式1結合の置換=[1-試料のDPM-NSBDPM/TBDPM-NSBDPM]×100DPM:1分当りの崩壊disintegrationsperminute、TB:全結合totalbinding、NSB:非特異的結合抽出物の濃度をそれぞれ0.1mg/mL、1mg/mL及び10mg/mLに異ならせて、緑藻類メタノール抽出物のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性の結果は、[表1]に表わし、紅藻類メタノール抽出物の結果は、[表2]に表わし、褐藻類メタノール抽出物の結果は、[表3]に表わした。緑藻類でボタンアオサUlvaconglobataKjellmanと紅藻類でオゴノリGracilariaverrucosaPapenfussとが10mg/mL濃度で80以上の[3H]-フルマゼニルの結合を置換するGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性を表わしたが、残りのほとんどの緑藻類と紅藻類では、効果的なGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性を表わすことができなかった。しかし、褐藻類では、サナダグサDictyotacoriacea及びヤツマタモクSargassumpatensC.Agardhを除いては、ほとんど結合活性を10mg/mL濃度で55以上のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性を表わし、特に、カジメEckloniacavaKjellmanは、90以上のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性を表わした。[実験例2:抽出溶媒によるカジメ抽出物のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性]実験例1で、90以上のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性が最も優れたカジメECKで抽出溶媒を異ならせた時、活性の差があるかを確認するために、抽出溶媒を異ならせたカジメ抽出物を製造した。カジメエタノール抽出物は、70エタノールで50°Cで3時間抽出し、カジメ水抽出物は、酵素ビスコザイム、アルカラーゼ、ペクチンを添加して45°Cで3時間抽出し、カジメメタノール抽出物は、80メタノールで常温で24時間抽出した。あらゆる抽出物は、抽出後、濾過及び濃縮過程を経た後、凍結乾燥して粉末化した。図1は、カジメ水、エタノール、メタノール抽出物の放射性標職されたGABAA-ベンゾジアゼピンリガンド[3H]フルマゼニルの結合置換効果を示すグラフである。これは、睡眠効果を表わす成分を探索するために、一般的に使われる方法で[3H]フルマゼニルの置換効果が高いほど、その物質の結合活性が高いことを意味する。カジメの3種の抽出物いずれもGABAA-ベンゾジアゼピン受容体に対する親和力が濃度依存的に高くなり、IC50値は、ECK-W水抽出物=1.026、ECK-Mメタノール抽出物=1.256、ECK-Eエタノール抽出物=0.456mg/mLを表わした。[実験例3:抽出溶媒及び濃度によるカジメ抽出物の睡眠誘導効果]1実験材料ペントバルビタールPentobarbitalは、翰林製薬会社から購入し、GABAA-ベンゾジアゼピン受容体の拮抗剤であるジアゼパムDZPは、よく知られた睡眠剤の1つであって、鎮静及び睡眠誘導効果の陽性対照群として使った。実験動物として、重量18~22gの雄ICRマウスKoatechAnimal社を温度24°C、湿度55、蛍光灯明暗12時間サイクル照明午前8時の条件下で試料及び飮水は自在に摂取させ、新たな環境に適応させるために、実験前1週間飼育した。また、GABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合評価のためのメンブレン準備のために、重量200~250gのSDラットを使った。動物実験と関連したあらゆる手続きは、韓国食品研究員動物管理委員会KFRI-IACUC、KoreaFoodResearchInstitutionalAnimalCareandUseCommitteeの実験動物使用指針に基づいて行った。2実験方法あらゆる実験は、午後1時から5時の間に進行し、マウスは、実験前24時間前に節食させた。経口投与のために、カジメエタノール抽出物を0.5カルボキシメチルセルロース0.5、CMC-食塩水saline10mL/kgに希釈させ、陽性対照群であるジアゼパムDZPは、やはり0.5CMC-食塩水に希釈させた。カジメエタノール抽出物及び水抽出物それぞれ100、250、500、1000mg/kgとジアゼパムDZP、2mg/kgとをペントバルビタール投与45分前に経口投与した。また、陰性対照群Controlgroup、CONとしては、別途の薬物を投与せず、0.5CMC-食塩水10mL/kgを投与した。それぞれマウスにペントバルビタールサブ-ヒプノティックsub-hypnotic用量30mg/kg、ヒプノティック用量45mg/kgを腹腔注射した後、入眠潜時と睡眠時間とを測定した。ペントバルビタールをマウスに腹腔内に注射した後から背中で底に寄り掛けながら、頭位反射を喪失するまでの経過時間を、すなわち、ペントバルビタール注射後、睡眠開始sleeponsetまでの時間を入眠潜時と見なし、箱内のマウスのうちからペントバルビタール投与後に1分以上動きがない場合、眠ったと見なした。睡眠時間は、マウスが箱に移された後、動きがない時から自律行動を回復するまでの時間と見なした。ペントバルビタールのサブ-ヒプノティック用量の実験で、睡眠開始計算方法は、下記の式2の通りである。式2睡眠開始=睡眠状態数/全体数×1003ヒプノティック濃度のペントバルビタールによって誘導されたラットでカジメエタノール及び水抽出物の睡眠誘導効果カジメエタノール抽出物ECK-E及び水抽出物ECK-Wを100、250、500、1,000mg/kgの濃度で経口投与p.o.した後、ペントバルビタール45mg/kg、i.p.による睡眠誘導効果に及ぼす影響を、下記の図2a及び図2bに表わした。各グラフは、平均値means±SEM、n=10を表わす。は、対照区と比較して、p<0.05で、は、対照区と比較して、p<0.001で有意差があることDunnet’stestを意味し、は、p<0.05で、は、p<0.01で併用投与したグループと単一投与したグループとの間の有意差があるということを意味する。カジメエタノール抽出物ECK-Eは、用量依存的に入眠潜時を減少させ、100mg/kgを除いた濃度で用量依存的に睡眠時間を増加させて、睡眠増進効果を表わした。カジメ水抽出物ECK-Wの場合は、低濃度では睡眠効果が表われなかったが、500、1,000mg/kgの濃度で用量依存的に睡眠時間の有意な増加p<0.01と入眠潜時の有意な減少p<0.01とが表われた。特に、カジメ水抽出物ECK-W1,000mg/kgの濃度では、カジメエタノール抽出物ECK-Eと陽性対照positivecontrolであるDZPよりも有意的に減少p<0.01した入眠潜時を確認することができた。4Sub-hypnotic濃度のペントバルビタールによって誘導されたラットでカジメエタノール及び水抽出物の睡眠誘導効果カジメエタノール及び水抽出物が、サブ-ヒプノティックペントバルビタール30mg/kg、腹腔注射濃度での入眠潜時と睡眠時間とを測定して、睡眠誘導効果に及ぼす影響を、下記の[表4]と[表5]とに表わした。実験の結果、カジメエタノール抽出物は、サブ-ヒプノティック濃度のペントバルビタールで対照グループは睡眠を誘導することができなかったが、ジアゼパム2mg/kg、経口投与は、睡眠開始が100で最も高く測定され、いずれもが睡眠状態に入った。カジメエタノール及び水抽出物では、濃度依存的に睡眠開始の入眠潜時の増加と睡眠時間の増加とが表われ、特に、1000mg/kgの濃度では、睡眠開始がそれぞれ92と90とで高く表われた。睡眠時間も、それぞれ38.7±6.3分と39.93±4.7分とで有意な増加p<0.05を表わした。前記[表4]と[表5]は、CON0.5、CMC-食塩水10mL/kg、カジメエタノール抽出物ECK-E、それぞれ100、250、500、1000mg/kg、カジメ水抽出物ECK-W、それぞれ100、250、500、1000mg/kgとDZP2mg/kgとをペントバルビタール投与45分前に経口投与した結果であって、睡眠開始=睡眠状態数/全体数×100睡眠時間は、平均値mean±SEM、n=12は、対照区と比較して、p<0.05で有意差があり、は、対照区と比較して、p<0.01で有意差があるDunnet’stest。CON:対照群0.5CMC-食塩水10mL/kgを経口投与後、ペントバルビタール投与DZP:ジアゼパム2mg/kgを経口投与後、ペントバルビタール投与ECK-E:カジメエタノール抽出物100、250、500、1000mg/kgを経口投与後、ペントバルビタール投与ECK-W:カジメ水抽出物100、250、500、1000mg/kgを経口投与後、ペントバルビタール投与前記[表4]及び[表5]から見るように、カジメエタノール及び水抽出物は、濃度依存的に入眠潜時の増加と睡眠時間の増加とがあることを確認することができる。[実験例4:カジメ抽出物分画のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性及び睡眠誘導効果]1カジメ抽出物分画の製造GABAA-ベンゾジアゼピン受容体に結合して、鎮静及び睡眠誘導などの活性を表わす有効成分を確認するために、図3に示すように、n-ヘキサン、酢酸エチル、n-ブタノール及び水分画を製造した。2GABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性及び睡眠誘導効果の実験結果GABAA-ベンゾジアゼピンリガンド[3H]フルマゼニルの結合置換効果は、実験例1の方法で確認して、それぞれのカジメ抽出物分画の[3H]フルマゼニルの結合置換効果を、図4aに表わし、Hypnotic濃度のペントバルビタールによって誘導されたラットでカジメ抽出物分画の睡眠誘導効果を、実験例3の方法で確認して、図4bに表わした。酢酸エチルEtOAc分画が最も低いIC50値0.0185mg/mLを表わし、n-ブタノール、n-ヘキサン及び水分画は、IC50値がそれぞれ0.1033、0.1405及び0.9607を表わした図4a。睡眠誘導効果と関連しても、前記[3H]フルマゼニルの結合置換活性と類似した傾向を表わした。酢酸エチル分画は、100及び200mg/mLいずれもで睡眠時間が著しく増加し、水分画は、200mg/mLでも、意味ある睡眠誘導活性を表わすことができなかった図4b。前記結果からカジメ抽出物の酢酸エチル分画にGABAA-ベンゾジアゼピン受容体に親和力を有して、抗不安、抗痙攣、鎮静作用、及び睡眠誘導及び改善効果を表わす有効成分含量が多いと判断された。[実験例5:カジメ抽出物分画の総フェノール含量とGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性及び睡眠誘導効果との相関関係]カジメ抽出物の酢酸エチル分画には、褐藻類特有のポリフェノールであるフロロタンニンが多数含まれているので、前記酢酸エチル分画のGABAA-ベンゾジアゼピンリガンド[3H]フルマゼニルの結合置換効果及び睡眠誘導効果が、フロロタンニンによることである可能性を確認するために、前記それぞれのカジメ抽出物分画の総フェノール含量を分析し、総フェノール含量とGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性及び睡眠誘導効果との相関関係を分析した。[表6]は、カジメ抽出物分画の総フェノール含量を表わしたものであって、酢酸エチル分画で総フェノール含量TPCが最も高く、水分画で最も低いことを確認した。カジメエタノール抽出物ECK-Eの総フェノール含量は、138.5mgPEG/gで酢酸エチル分画及びn-ブタノール分画がカジメエタノール抽出物に比べて、総フェノール含量が高かった。前記各カジメ抽出物分画の総フェノール含量TPCと[3H]フルマゼニルの結合に対するIC50との相関関係を、図5aに表わし、各カジメ抽出物分画の総フェノール含量TPCと睡眠時間との相関関係を、図5bに表わした。前記図5a及び図5bによれば、各抽出物分画の結合活性と睡眠誘導効果は、総フェノール含量に比例することが分かった。結合活性の非線形回帰分析による係数R2は、0.9544であり、睡眠時間と総フェノール含量との間にも、100mg/kg濃度ではR2が0.8396、200mg/kg濃度ではR2が0.9051であって、相関関係が高いということが分かった。また、前記カジメ抽出物分画とカジメエタノール抽出物とに含まれたフロロタンニン化合物の種類及び含量mg/gを分析して、[表7]に表わした。前記各カジメ抽出物分画及びカジメエタノール抽出物から検出されたフロロタンニン化合物は、フロログルシノール、エコール、エクストロノール、トリフロレトールA及びダイエコールであった。各フロロタンニン化合物の構造は、図6に表わした。結合活性と睡眠誘導効果とが高かった酢酸エチル分画とn-ブタノール分画とで総フロロタンニン化合物の含量が、367.42mg/g及び177.11mg/gでn-ヘキサン分画及び水分画に比べて、著しく高かった。また、それぞれの分画で総フロロタンニン化合物の含量と睡眠時間との相関関係は、100mg/kg濃度ではR2が0.9682、200mg/kg濃度ではR2が0.9434であって、非常に高いということを確認することができた。[実験例6:フロロタンニン化合物のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性]前記各カジメ抽出物分画に存在するフロロタンニン化合物のGABAA-ベンゾジアゼピンリガンド[3H]フルマゼニルの結合置換効果を表わすIC50値と結合親和度Kiを計算して、[表8]に表わした。結合親和度Kiは、下記の式3のように計算した。式3Ki=IC50/1[L]/Kd[L]:使用された放射性リガント[3H]フルマゼニルの濃度、Kd:[3H]フルマゼニルの競合リガントcompetitor-ligand解離平衡定数。Kd値は1.6nMである。フロロタンニン化合物の結合親和度の相対的強度を確認するために、陽性対照区としてジアゼパムDZPを使った。エコールとエクストロノールは、トリフロレトールAやダイエコールに比べて、結合親和度が高く、フロロタンニンの基本骨格となるフロログルシノールの場合、1000μMで42.25の阻害を表わして、結合親和度が異なるフロロタンニンに比べて、高くなかった。[実験例7:褐藻類抽出物の総フェノール含量とGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性及び睡眠誘導効果との相関関係]前記[表3]の褐藻類のうちからGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性が異なるサナダグサ、ヘラヤハズDictyopterisproliferaOkamura、カジメを選別し、GABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性が高かったカジメと同一属のクロメとを追加して、それぞれのメタノール抽出物の総フェノール含量を測定し、総フェノール含量とGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性及び睡眠誘導効果との相関関係を確認した。[表9]は、4種の褐藻類メタノール抽出物の総フェノール含量を測定したものであって、カジメ抽出物分画の総フェノール含量を表わしたものであって、クロメは、カジメと総フェノール含量が類似し、ヘラヤハズ、サナダグサの順序で含量が低くなった。前記クロメメタノール抽出物、カジメメタノール抽出物、ヘラヤハズメタノール抽出物及びサナダグサメタノール抽出物の総フェノール含量TPCと10mg/mL濃度での[3H]フルマゼニルの結合活性との相関関係を、図7aに表わし、各褐藻類メタノール抽出物の総フェノール含量TPCと睡眠時間との相関関係を、図7bに表わした。前記図5a及び図5bで、カジメ抽出物分画の総フェノール含量によって結合活性と睡眠誘導効果が、総フェノール含量に比例すると同様に、図7a及び図7bでも、それぞれの褐藻類の総フェノール含量と結合活性や睡眠誘導効果が、比例関係にあることを確認することができた。[実験例8:フロログルシノールまたはフロロタンニンの睡眠誘導効果及びフルマゼニルが睡眠誘導に及ぼす影響]フロログルシノールphloroglucinol、PG及びフロロタンニンのうちからエクストロノールeckstolonol、ETN、トリフロレトールAtriphloretholA、TPE-A、フコジフロレトールGfucodiphloretholG、FDE-G、エコールeckol及び6,6’-ビエコール6,6’-bieckolの濃度による睡眠誘導効果及びフルマゼニルが、睡眠誘導に及ぼす影響を確認した。フロログルシノールまたはフロロタンニンの濃度による睡眠誘導効果を確認するために、実験例3の方法を利用するが、フロログルシノールまたはフロロタンニンを5、10、25、50mg/kgの濃度で経口投与p.o.した後、ペントバルビタール45mg/kg、i.p.による睡眠誘導効果を確認した。陰性対照群CONは0.5、CMC-saline10mL/kgであり、陽性対照群としてジアゼパムDZP2mg/kgとゾルピデムZPD10mg/kgとをペントバルビタール投与45分前に経口投与して、入眠潜時と睡眠時間とを測定した。フルマゼニルが、睡眠誘導効果に及ぼす影響に対して調べるために、フロログルシノールまたはフロロタンニンは、50mg/kg、DZPは、2mg/kg、ZPDは、10mg/kgをペントバルビタール投与hypnoticdosage45mg/kg45分前に経口投与し、FLUは、8mg/kgを前記試料の経口投与10分前にあらかじめ腹腔注射して、入眠潜時と睡眠時間とを測定した。図8a及び図8bは、フロログルシノールPGの濃度による入眠潜時及び睡眠時間をそれぞれ示すグラフであり、図8c及び図8dは、フロログルシノールのフルマゼニル投与の有無による入眠潜時及び睡眠時間をそれぞれ示すグラフである。図9a及び図9bは、エクストロノールETNの濃度による入眠潜時及び睡眠時間をそれぞれ示すグラフであり、図9c及び図9dは、エクストロノールのフルマゼニル投与の有無による入眠潜時及び睡眠時間をそれぞれ示すグラフである。図10a及び図10bは、トリフロレトールATPE-Aの濃度による入眠潜時及び睡眠時間をそれぞれ示すグラフであり、図10c及び図10dは、トリフロレトールAのフルマゼニル投与の有無による入眠潜時及び睡眠時間をそれぞれ示すグラフである。図11a及び図11bは、フコジフロレトールGFDE-Gの濃度による入眠潜時及び睡眠時間をそれぞれ示すグラフであり、図11c及び図11dは、フコジフロレトールGのフルマゼニル投与の有無による入眠潜時及び睡眠時間をそれぞれ示すグラフである。図12a及び図12bは、エコールの濃度による入眠潜時及び睡眠時間をそれぞれ示すグラフであり、図12c及び図12dは、エコールのフルマゼニル投与の有無による入眠潜時及び睡眠時間をそれぞれ示すグラフである。図13a及び図13bは、6,6’-ビエコールの濃度による入眠潜時及び睡眠時間をそれぞれ示すグラフであり、図13c及び図13dは、6,6’-ビエコールのフルマゼニル投与の有無による入眠潜時及び睡眠時間をそれぞれ示すグラフである。図14a及び図14bは、前記睡眠誘導効果の確認試験で陽性対照群として使われたジアゼパムDZPとゾルピデムZPDとの有効濃度を確認するために、濃度による入眠潜時及び睡眠時間をそれぞれ確認したグラフである。前記結果によれば、本発明のフロログルシノール及びフロロタンニンは、5ないし25mg/kgの非常に低濃度で有意な入眠潜時の減少及び睡眠時間の増加の効果を表わした。また、前記本発明のフロログルシノール及びフロロタンニンの睡眠効果は、ジアゼパムと同様に、GABAA-ベンゾジアゼピン拮抗剤であるフルマゼニルによって抑制された。[実験例9:クロメ抽出物のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性及び睡眠誘導効果]カジメ抽出物と同様に、同じ属に属するクロメも、GABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性及び睡眠誘導効果を表わすかを確認した。図15aは、クロメメタノール抽出物の放射性標職されたGABAA-ベンゾジアゼピンリガンド[3H]フルマゼニルの結合抑制効果を示すグラフであって、クロメメタノール抽出物EKO-Mの場合、GABAA-ベンゾジアゼピン受容体に対する親和力が濃度依存的に高くなり、IC50値は、0.626mg/mLであった。また、図15bと図15cは、カジメメタノール抽出物ECK-Mとクロメメタノール抽出物EKO-Mが、hypnotic濃度のペントバルビタール45mg/kg、腹腔注射での入眠潜時と睡眠時間とを測定して表わしたものであって、クロメメタノール抽出物は、睡眠時間において有意な効果があることを確認することができる。[実験例10:褐藻類抽出物とジアゼパムとの併用経口投与に対するペントバルビタール睡眠誘導シナジー効果]カジメエタノール及び水抽出物とジアゼパムとの併用経口投与に対する睡眠誘導シナジー効果を調べるために、ペントバルビタールの睡眠誘導効果に影響を与えないほどの低濃度で、ECK-Eは、100mg/kg、ECK-Wは、100mg/kg、DZPは、0.5mg/kgをペントバルビタール投与hypnoticdosage45mg/kg45分前に経口投与して、入眠潜時と睡眠時間とを測定したその結果を、図16a及び図16bに表わした。各グラフは、平均値means±SEM、n=10を表わす。は、対照区と比較して、p<0.05で、は、対照区と比較して、p<0.001で有意差があることDunnet’stestを意味し、は、p<0.05で、は、p<0.01で併用投与したグループと単一投与したグループとの間の有意差があるということを意味する対応のないスチューデントのt検定。そして、NSは、有意差がないということを意味する。図16a及び図16bから見るように、本発明によるカジメエタノール及び水抽出物をDZPと併用投与した時、睡眠時間において有意な効果があることを確認することができる。[実験例11:フルマゼニルが褐藻類抽出物の睡眠誘導効果に及ぼす影響]GABAA-ベンゾジアゼピン拮抗剤であるフルマゼニルFLUが、実験例2の方法で製造されたカジメエタノール抽出物ECK-E、カジメ水抽出物ECK-W及び実験例4の方法で製造された酢酸エチル分画EtOAcの睡眠誘導効果に及ぼす影響に対して調べるために、ECK-Eは、1000mg/kg、ECK-Wは、1000mg/kg、EtOAcは、200mg/kg、DZPは、0.5mg/kgをペントバルビタール投与hypnoticdosage45mg/kg45分前に経口投与し、FLUは、8mg/kgをECK-E、ECK-W、EtOAc、DZP経口投与10分前にあらかじめ腹腔注射して、入眠潜時と睡眠時間とを測定した。その結果を、下記の図17a及び図17bに表わした。各グラフは、平均値means±SEM、n=10を表わす。は、対照区と比較して、p<0.05で、は、p<0.01で、は、p<0.001で有意差があることDunnet’stestを意味し、は、p<0.05で、は、p<0.01で、は、p<0.001で、フルマゼニルを処理したグループと処理しないグループとの間の有意差があるということを意味する対応のないスチューデントのt検定。そして、NSは、有意差がないということを意味する。図17a及び図17bから見るように、代表的な睡眠剤の1つであるジアゼパムは、よく知られたGABAA-ベンゾジアゼピンの活性効能剤であって、ジアゼパムの睡眠効果は、GABAA-ベンゾジアゼピン拮抗剤であるフルマゼニルによって抑制された。また、本発明によるカジメ水抽出物ECK-W、エタノール抽出物ECK-E及び酢酸エチル分画EtOAcも、睡眠剤ジアゼパムと同様に、GABAA-ベンゾジアゼピン拮抗剤であるフルマゼニルによって、その効果が抑制された。前記結果から、褐藻類抽出物は、既存の睡眠剤であるジアゼパムと同様に、GABAA-ベンゾジアゼピン受容体に親和力を有し、効能剤の役割を行うことを確認することができる。そして、マウスを利用した動物実験でも、睡眠誘導効果を表わし、ジアゼパムと同様に、GABAA-ベンゾジアゼピン拮抗剤によって、その効果が減少することが分かる。[実験例12:褐藻類抽出物がラットの睡眠構造に及ぼす影響]SDラット200-250gを1週間適応させた後、脳波Electroencephalogram、EEG及び筋電図Electromyogram、EMGの測定のために、電極挿入手術を実施した。Ratをペントバルビタール50mg/kg、i.p.で痲酔させ、脳定位器stereotaxicinstrumentに頭部を固定させた。頭部皮下結合組織を切開した後、EEG及びEMG測定のために、ステンレス鋼スクリューと銀電極ラインとを挿入した。引き続き歯科用セメントで固定させて縫合した。手術部位の消毒及び抗生剤投与を3日間実施して、手術による炎症を予防し、7日間回復期間を置いた。測定環境に適応させるために、測定4日前からcontrol実験群に使う0.5CMC-食塩水溶液を経口投与p.o.した後、記憶装置を連結して、本実験過程に順応するように誘導した。EEG及びEMGは、PAL-8200seriesPinnacleTechnologyInc,Oregon,USAを用いて、10:00から16:00まで6時間測定した。EEG及びEMGのsamplingrateは、200Hzに設定しepochtime:10秒、EEGは、0.1-25Hz、EMGは、10-100Hzのフィルター領域を設定してデータを記録した。睡眠構造分析は、高速フーリエ変換FFTアルゴリズムによって行われ、SleepSignプログラムVer.3.0,KisseiComtec,Nagono,Japanを利用した。分析結果は、wake、REMレム睡眠、シータ帯域:6-10Hz、NREMノンレム睡眠、デルタ帯域:0.65-4Hzに区分して表わした。入眠潜時は、10秒エポック単位のNREM睡眠が12回以上連続して表われるのにかかる時間として設定した。図18aから見るように、本発明によるカジメエタノール抽出物500mg/kgを経口投与して睡眠構造を分析した結果、入眠潜時が40.7分から31.8分に約9分程度有意的に短縮された。また、図18bの睡眠構造で、NREM睡眠時間が、42.5から54.6に約12増加しながら、睡眠増進に効果があった。[実験例13:フロロタンニン濃縮分画の抗痙攣効果]実験例1で、90以上のGABAA-ベンゾジアゼピン受容体結合活性が最も優れたカジメECKで酵素を利用した酵素抽出物を得て、その酵素抽出物でフロロタンニン濃縮分画を得て、酵素抽出物ECEE及びフロロタンニン濃縮分画PTRFの総フェノール含量及び抗痙攣効果を確認した。1酵素抽出物ECEE及びフロロタンニン濃縮分画PTRFの製造1kgの凍結乾燥カジメ粉末と蒸溜水10Lとを混合した後、セルラーゼCelluclast、NovoNordisk,Bagsvaerd,Denmark10mLを添加し、50°Cで24時間反応させ、100°Cで10分間酵素を不活性化させた。3000xgで20分間遠心分離して、加水分解されていない残渣を除去して得た濾液を得て、これを濃縮した後、凍結乾燥して酵素抽出物ECEEを得た。前記酵素抽出物を凍結乾燥する前の濃縮物を70エタノールと混合した後、24時間撹拌し、該撹拌した混合物を3500xgで20分間遠心分離した後、ワットマン濾過紙No.1で残渣を除去して濾液を得て、これを濃縮した後、凍結乾燥してフロロタンニン濃縮分画PTRFを得た。2ピクロトキシンpicrotoxin誘導発作seizure試験実験動物は、実験例3のように準備し、ラットに対照群CON、0.5、CMC-食塩水10mL/kg、ECEE及びDZPを経口投与し、経口投与45分後、7mg/kgのピクロトキシンを静脈注射して発作を誘導した。ピクロトキシンを投与したラットは、直ちに個別ケージに入れて90分間観察して、痙攣の回数とピクロトキシン投与後から発作の発現までの発作潜在期間とを記録した。90分間発作が発現されない場合、発作潜在期間は、0分と記録した。3実験の結果[表10]は、酵素抽出物ECEE及びフロロタンニン濃縮分画PTRFの総フェノール含量を表わしたものであり、残留物は、RTRFを除いたECEE部分を意味する。フロロタンニン濃縮分画には、酵素抽出物に比べて、6倍以上多い総フェノール含量を表わした。酵素抽出物ECEEの抗痙攣効果は、[表11]に表わし、フロロタンニン濃縮分画PTRFの抗痙攣効果は、[表12]に表わした。は、対照区と比較して、p<0.01で有意差があるDunnet’stest。[表11]で、対照群CONの最終死亡率は、80であり、陽性対照群として使われたジアゼパムDZPは、発作潜在期間が著しく遅延された。酵素抽出物ECEEの場合にも、用量依存的に最終死亡率を低め、発作潜在期間を遅延させる効果を表わし、特に、1000mg/kg容量で有意味な発作潜在期間の増加が表われた。[表12]で、フロロタンニン濃縮分画PTRFは、酵素抽出物ECEEと同様に、最終死亡率を低め、発作潜在期間を遅延させる効果を表わし、特に、ECEEに比べて、1/4ないし1/10程度の容量でも、ECEEと同等のレベルの抗痙攣効果を表わした。[実験例14:統計分析]50抑制濃度IC50値は、Prism5.0プログラムを用いてone-sitecompetitionbindingmodelを適用させて算出した。あらゆる実験の結果は、平均と標準誤差means±SEMとで表わし、各群と対照区との統計的な比較は、Dunnet’stestによる一元配置分散分析ANOVAを通じて評価した。有意レベルの表示は、p<0.05、p<0.01、p<0.001レベルで有意性を見せる結果を別表で表示した。2つのグループ間のデータ比較は、対応のないスチューデントのt検定によって分析し、p<0.05、p<0.01、p<0.001レベルで2つのグループ間に統計的に有意差があることを表示した。統計分析プログラムは、Prism5.0ソフトウェアを使って行った。下記に、本発明のフロログルシノール、フロロタンニンまたは褐藻類抽出物を含有する組成物の製剤例を説明するが、本発明は、これを限定しようとすることではない、単に具体的に説明しようとすることである。<製剤例1.散剤の製造>実験例1で得たカジメエタノール抽出物粉末20mg乳糖100mgタルク10mg前記の成分を混合し、気密布に充填して散剤を製造する。<製剤例2.錠剤の製造>実験例8のエコール10mgトウモロコシ澱粉100mg乳糖100mgステアリン酸マグネシウム2mg前記の成分を混合した後、通常の錠剤の製造方法によって、打錠して錠剤を製造する。<製剤例3.カプセル剤の製造>実験例8のフロログルシノール10mg結晶性セルロース3mgラクトース14.8mgステアリン酸マグネシウム0.2mg通常のカプセル剤の製造方法によって、前記の成分を混合し、ゼラチンカプセルに充電してカプセル剤を製造する。<製剤例4.注射剤の製造>実験例8のエクストロノール10mgマンニトール180mg注射用滅菌蒸溜水2974mgNa2HPO4、12H2O26mg通常の注射剤の製造方法によって、1アンプル当たり前記の成分含量で製造する。<製剤例5.液剤の製造>実験例1で得たカジメエタノール抽出物粉末20mg異性化糖10gマンニトール5g精製水適量通常の液剤の製造方法によって、精製水にそれぞれの成分を加えて溶解させ、レモン香を適量加えた後、前記の成分を混合した後、全体を精製水を加えて、全体100に調節した後、褐色瓶に充填して滅菌させて、液剤を製造する。<製剤例6.健康機能食品の製造>実験例1で得たカジメエタノール抽出物粉末1,000mgビタミン混合物適量ビタミンAアセテート70μgビタミンE1.0mgビタミンB10.13mgビタミンB20.15mgビタミンB60.5mgビタミンB120.2μgビタミンC10mgビオチン10μgニコチン酸アミド1.7mg葉酸50μgパントテン酸カルシウム0.5mg無機質混合物適量硫酸第一鉄1.75mg酸化亜鉛0.82mg炭酸マグネシウム25.3mg第一燐酸カリウム15mg第二燐酸カルシウム55mgクエン酸カリウム90mg炭酸カルシウム100mg塩化マグネシウム24.8mg前記のビタミン及びミネラル混合物の組成比は、比較的健康機能食品に適した成分を望ましい実施例で混合組成したが、その配合比を任意に変形実施しても良く、通常の健康機能食品の製造方法によって、前記の成分を混合した後、顆粒を製造し、通常の方法によって、健康機能食品組成物の製造に使うことができる。<製剤例7.機能性飲料の製造>実験例1で得たカジメエタノール抽出物粉末1,000mgクエン酸1,000mgオリゴ糖100g梅濃縮液2gタウリン1g精製水全体900mL通常の健康飲料の製造方法によって、前記の成分を混合した後、約1時間85°Cで撹拌加熱した後、作られた溶液を濾過して、滅菌された2L容器に取得して密封滅菌した後、冷蔵保管した後、本発明の機能性飲料組成物の製造に使う。"