少なくとも50gの重量の凍結物質を有する商業用パッケージ中のペレット凍結乳酸菌培養物であって、当該凍結物質が個別のペレット形態で存在し、1gの凍結物質あたり少なくとも109コロニー形成ユニットの生菌量を有し、そして凍結物質のwwとして計測される05~13の添加化合物であって、凍結物質のwwとして計測される10の量の当該添加化合物を使用することにより、添加化合物を伴わない場合に70°C~46°CのTm’値を有する凍結乳酸菌培養物のTm’を、46°Cを超えるTm’値、例えば45°C~15°Cに増加できる化合物の群から選ばれる上記添加化合物を含み、そしてここで、当該凍結乳酸菌培養物が約-46°Cで、7~14日間貯蔵された場合に、凍結培養物の個別のペレットが互いにくっ付かず、それゆえ実質的に個別のペレットとして残ることにより特徴付けられ、ここで当該特徴決定は、以下の試験:当該凍結培養物の個別のペレットが液体窒素中で凍結されたペレットであり、そして100個の個別のペレットが、ペトリ皿に入れられ、こうして固まっていない個別の単一ペレットの薄層であって、当該ペレットの多くが1以上のその近隣のペレットと物理的に接触していることにより特徴付けられる上記薄層を形成し、約-46°Cで7~14日間置かれ、そしてペレットが未だに固まっていないか、又はペレットが塊を形成する若しくは互いにくっ付くかを観察するために試験され、当該試験において、凍結培養物の個別のペレットが個別のペレットとして残るという判断基準は、100個の個別のペレットの内の少なくとも80個が個別の固まっていない単一ペレットとして残るということであるにより測定される、前記ペレット凍結乳酸菌培養物。但し、スクロースを利用できるLABを含む凍結乳酸菌培養物であって、凍結物質のw/wとして計測される2~13の量のスクロース;及び凍結物質のw/wとして計測される4~6の量のトレハロース;並びに凍結物質のw/wとして計測される13の量のトレハロース/スクロース両方の混合物からなる群から選ばれる抗凍結薬剤化合物を含む、前記培養物を除く。前記培養物が、約30°Cにて最適増殖温度を有する中温性細菌からなる、混合された中温性の培養物である、請求項1に記載のペレット凍結培養物。前記LABが、ビフィドバクテリウム属、ブレビバクテリウム属、プロピオニバクテリウム属、ラクトコッカスラクチスサブスピーシーズラクチス及びラクトコッカスラクチスサブスピーシーズクレモリスを含むラクトコッカス属、ラクトバチルスアシドフィラスを含むラクトバチルス属、ストレプトコッカス属、エンテロコッカス属、ペディオコッカス属、オエノコッカス属、並びにペニシリウム属、クリプトコッカス属、デブラヨマイシス属、クリベロマイシス属、及びサッカロマイシス属を含む菌類を含む群から選ばれるLABである、請求項1又は2に記載のペレット凍結培養物。前記凍結乳酸菌培養物が、請求項1に記載の添加化合物を含まない場合に70°C~46°CのTm’を有する培養物である、請求項1~3のいずれか一項に記載のペレット凍結培養物。前記凍結乳酸菌培養物が、凍結物質のwwとして計測される5~10の添加化合物を含む、請求項1~4のいずれか一項に記載のペレット凍結培養物。前記添加化合物が、シクロデキストリン、マルチトール、トレハロース、魚ゼラチン、マルトデキストリン、酵母抽出物、及びスプレーガムからなる群から選ばれる添加化合物である、請求項1~5のいずれか一項に記載のペレット凍結培養物。以下のステップ:添加化合物を生菌に加えて、物質1gあたり少なくとも109コロニー形成ユニットの生菌量を有する少なくとも50gの物質を得て、そして物質のwwとして計測される05~13の量で当該添加化合物を含み、当該物質を凍結して、ペレット凍結物質を獲得し、そしてペレット凍結物質を適切な方法でパッキングして、請求項1~6のいずれか一項に記載のパックされた凍結乳酸菌培養物を得るを含む、請求項1~6のいずれか一項に記載のペレット凍結乳酸菌培養物の製造方法。請求項7のステップに記載の添加化合物を加える前に、添加化合物を含まない凍結乳酸菌のTm’値を計測し、そして当該培養物が70°C~-46°CのTm’値を有することを同定し;そして添加化合物を加えた後に、添加化合物を含む凍結乳酸菌培養物のTm’値を計測し、そしてTm’値が-49°C~-15°C、より好ましくは-39°C~-15°Cであることを確認する、請求項7に記載の方法。請求項7又は8に記載の凍結乳酸菌培養物の製造方法により獲得できる、ペレット凍結乳酸菌培養物。食品又は飼料の製造工程における、請求項1~6、及び9のいずれか一項に記載のペレット凍結乳酸菌培養物の使用。定義本発明の詳細な実施態様を議論する前に、本発明の主態様に関連する特定の用語の定義を与える。スクロースを利用できるLABという用語は、酸を産生しながら糖であるスクロースを発酵できるLABを指す。当該用語は、PCT公開番号WO2004/065584A1における定義と同一である。培養物の物質という用語は、生菌及び抗凍結物質の両者を含む培養物の適切な構成要素を指す。パッキングは含まれない。結果として、培養物の物質の重量は、パッキングの重量を含んでいない。パッキング又はパッケージという用語は、広く理解されるべきである。ユーザーに提供するために、ペレット凍結乳酸菌培養物はパッキングされるべきである。当該培養物は、ボトル、テトラパック登録商標コンテナなどにパッキングされてもよい。添加化合物という用語は、本文脈において、単一の特異的添加化合物であってもよいし、又は2以上の異なる添加化合物であってもよい。従って、培養物質内の添加化合物のw/w割合は、添加化合物の量の合計として理解されるべきである。好ましくは、当該用語は、発酵後に培養物に加えられる化合物に関する。従って、そのようなものとして、当該化合物は、培養物発酵培地に有意な量で存在しない化合物であってもよい。ペレット凍結及びペレット凍結培養物という用語は、凍結培養物のペレット又は顆粒をもたらす方法の使用により凍結された培養物を指す。ペレット凍結培養物は、培養物を滴下して液体N2に加えることにより上手く作られて、培養物の凍結ペレット又は顆粒を形成する。典型的に、当該方法は、従来の工業的凍結乾燥工場におけるトレー上で行われるが、必ずしもそうではない。ペレット又は顆粒という用語は、小さい固体状の物体であって、01~10mmの平均サイズの凍結した液体により形成される物体を指す。本発明の実施態様は、例示のみの様式により、以下に記載される。Tm’値上に説明されるように、Tm’値は、物理化学において標準的に知られている用語であり、融解の開始が生じる温度を指す。本文脈では、Tm’は、凍結LAB培養物の融解の開始が生じる温度を指す。好ましくは、Tm’値は、本明細書において実施例1のTmの計測と名づけられる欄において記載されるDSC法の使用により計測される。ペレット塊試験本発明の第一態様に関して説明されるように、ペレット凍結乳酸菌培養物が、約46°Cで、7~14日貯蔵されるとき、凍結培養物の個別のペレットは、互いにくっつかず、その結果、個別のペレットとして実質的に残ることにより特徴付けられる培養物であるかを分析する試験は、以下の試験を含む:凍結された培養物の個別のペレットは、液体窒素中で凍結されたペレットであり、そして100個の個別のペレットを、ペトリ皿に注ぎ、そうして、固まっていない個別の単一のペレットの薄層を形成させる。当該層は、多くのペレットが、その隣のペレットの1以上と物理的に接触しており、約46°Cで7~14日置かれ、そして当該ペレットが未だに固まっていないか、又は当該ペレットが塊を形成する若しくは互いにくっ付くかを観察するために試験した。ここで凍結培養物の個別のペレットが実質的に個別のペレットとして残るということの基準は、100個の個別のペレットのうちの少なくとも80が、個別の単一のペレットとして残っているということである。より好ましくは、100個の個別のペレットのうちの少なくとも90個が、固まっていない個別の単一のペレットとして残り、そしてさらにより好ましくは、100個の個別のペレットのうちの少なくとも95が、固まっていない個別の単一のペレットとして残る。固まっていない個別の単一のペレットとして残っている個別のペレットを試験及び計数することは、視覚的に行われうる。これを継続的に行うことは当業者の能力の範囲内であり、ここで当該結果は、通常の限定された技術的不確定性の範囲内で一貫しており、そして反復可能である。本明細書の実施例1はさらに技術的詳細を提供する。ペレット凍結乳酸菌培養物好ましくは、凍結乳酸菌培養物という用語は、本明細書中に記載されるように、添加化合物を含まないときに、70~46°CのTm’値を有する培養物を指す。当該培養物は、ペレット又は顆粒の形態で凍結されることもあり、ペレット凍結乳酸菌培養物を形成する。ペレット凍結乳酸菌培養物は、当該培養物を、液体N2に滴下して加えて、当該培養物の凍結ペレット又は顆粒を形成することにより都合よく作られうる。培養物のLABは、適切なAPI試験キットの利用による国際IDF基準146A:1998微生物特徴の同定に従ったスクロースを利用しない任意の商業用LABでありうる。APIキットrapidID32STREP及び50CHLMediumを使用して、多くのLAB属についてスクロース利用状態を確立する。好ましくは、LABは、ビフィドバクテリウム属、ブレビバクテリウム属、プロピオニバクテリウム属、ラクトコッカス、例えばラクトコッカスラクチスサブスピーシーズラクチス及びラクトコッカスラクチスサブスピーシーズクレモリス、ラクトバチルス属、例えばラクトバチルスアシドフィラス、ストレプトコッカス属、エンテロコッカス属、ペディオコッカス属、ロイコノストック属、オエノコッカス属、及び菌類、例えばペニシリウム属、クリプトコッカス属、デブラヨマイシス属、クリベロマイシス属、及びサッカロマイシス属を含む群から選ばれるLABである。これらの種の幾つかは、一般的にスクロースを利用できると記載されているけれども、スクロースを利用できない突然変異体が、単離されてきており、そして継続して単離されるであろう。このような突然変異体がどんなに単離され、又は獲得されようとも、それらは本発明の一の態様である。工業的に最も有用な乳酸菌は、ラクトコッカス種、ストレプトコッカス種、エンテロコッカス種、ラクトバチルス種、ロイコノストック種、及びペディオコッカス種の中から見られる。混合された乳酸菌培養物という用語は、2以上の異なるLAB種を含む混合された培養物を指す。純粋な乳酸菌培養物という用語は、単一のLAB種のみを含む純粋な培養物を指す。本明細書中に記載される培養物は、約30°Cの最適成長温度を有する中温菌からなる中温培養物でありうる。中温培養物は、2以上の異なる中温LAB種を含む培養物である。中温菌の群に属する典型的な生物は、ラクトコッカスラクチスサブスピーシーズラクチス、ラクトコッカスラクチスサブスピーシーズクレモリス、ロイコノストックメセンテロイデスサブスピーシーズクレモリス、ペディオコッカスペントサセウス、ラクトコッカスラクチスサブスピーシーズラクチス次亜種ジアセチラクチス、及びラクトバチルスカゼイサブスピーシーズカゼイを含む。本明細書中に記載される培養物は、スクロースを利用できないLABを含んでもよい。いわゆるO培養物は、穴がないチーズを作るために使用され、そして典型的にラクトコッカスラクチスサブスピーシーズラクチス、及びラクトコッカスラクチスサブスピーシーズクレモリスを含む群から選ばれる1以上の生物を含む。一般的に、O培養物はスクロースを利用しないと考えられている。高濃縮ペレット凍結乳酸菌培養物本明細書中に記載される凍結培養物は、食品工業において高濃縮ペレット凍結乳酸菌培養物と名づけられる培養物である。十分な細菌を含むようにするため、かかる培養物は、比較的高濃度の生菌と混合された比較的大きい量であるべきである。比較的多くの細菌が必要とされるならば、生菌の重量及び/又は濃度を増加させるべきであることは明らかである。好ましくは、本明細書中に記載されるペレット凍結乳酸菌培養物は、少なくとも100gの凍結物質、より好ましくは少なくとも250gの重量の凍結物質、さらにより好ましくは少なくとも500gの重量の凍結物質、そして最も好ましくは少なくとも900gの重量の凍結物質を有する。好ましくは、凍結物質の重量は、500kg未満である。好ましくは、本明細書中に記載されるペレット凍結乳酸菌培養物は、少なくとも5×109コロニー形成ユニット/g凍結物質の生菌量、より好ましくは少なくとも1010のコロニー形成ユニット/g凍結物質の生菌量、そして最も好ましくは少なくとも2×1010コロニー形成ユニット/g凍結物質の生菌量を有する。LABの発酵及び適切な発酵培地は、当該技術分野に知られており、そして当業者は、特定のLABについて適切な培地及び発酵条件を選ぶことができる。適切な培地及び発酵を本明細書の実施例において与える。十分な量の細菌を得るために、本文脈において、適切な巨大発酵タンク中で比較的大規模の発酵を行うことが好ましい。少なくとも50l、好ましくは90l、さらにより好ましくは500l、又はそれ以上の発酵タンクが好ましい。適切な発酵の後に、生菌は、好ましくは、発酵培地の液体を取り除くことにより単離される。単離された生菌は、単離バイオマスと名づけられうる。単離された生菌は、好ましくは少なくとも109コロニー形成ユニット/g凍結物質の生菌量、より好ましくは5×109CFU/g凍結物質の生菌量、そして最も好ましくは少なくとも1010CFU/g凍結物質の生菌量を有するべきである。添加化合物を濃縮培養物に加えた後に、培養物は、当該混合物を液体N2中に滴下して加えることにより都合よく凍結されて、当該混合物の凍結ペレット又は顆粒を形成しうる。適した凍結方法は、DE2805676及びFR2393251に記載されている。ペレット凍結培養物は、次に、使用者に提供するために適切な方法でパッケージされる。添加化合物上で記載されるように、好ましくは適切な添加化合物は、凍結培地のTm’値を貯蔵温度、例えば46°Cより高い値に増加させる、例えば、45°C~15°CのTm’値、より好ましくは43°Cから15°CTm’値、そしてさらにより好ましくは39°Cから15°CのTm’値に増加させることができるということにより特徴付けられる。本明細書の実施例2は、適切な添加化合物を同定するための迅速な実験戦略を記載する。様々な適切な化合物を46°C未満のTm’値を有するモデル凍結培養物に加え、そして添加前後においてTm’値をDSCにより計測した。実施例2のモデル培養物及び実施例2の試験プロトコルは、好ましくは、関心の特定の添加化合物が凍結培養物のTm’値を46°Cを越える値、例えば45°C~15のTm’値、より好ましくは43°C~15°CのTm’値、さらに好ましくは39°C~15°CのTm’値に増加できるということにより、当該添加化合物が特徴付けられるかを評価するために使用される。実施例2において、シクロデキストリンが、Tm’を44°Cに増加させ、マンニトールがTm’値を42°Cに増加させ、トレハロースがTm’を38°Cに増加させ、魚ゼラチンがTm’値を37°Cに増加させ、マルトデキストリンがTm’値を32°Cに増加させ、そしてスプレーガムがTm’値を31°Cに増加させることを見ることができる。好ましくは添加化合物は、150~100000g/mol、より好ましくは250~100000g/mol、さらにより好ましくは300~40000g/mol、そして最も好ましくは500~15000g/molの分子量を有する化合物である。好ましい実施態様では、添加化合物は、抗凍結剤である。抗凍結剤という用語は、培養物の生存率により計測される凍結培養物の貯蔵安定性を改善することができる物質を指す。本文脈では、抗凍結剤は、一の特異的抗凍結薬剤であってもよいし、又は2以上の異なる薬剤であってもよい。従って、培養物質中の抗凍結物質のw/wパーセントは、抗凍結剤の量の合計として理解されるべきである。抗凍結剤は、タンパク質又はタンパク質加水分解物から選ばれてもよい。好ましい適切な抗凍結剤の例は、小麦抽出物、スキムミルク粉末、乳清粉末、酵母抽出物、グルテン、コラーゲン、ゼラチン、エラスチン、ケラチン、及びアルブミンからなる群から選ばれる物質を含む。より好ましくは、抗凍結剤は、炭水化物又は核酸の清合成に関与する化合物である。好ましい適切な炭水化物は、ペントース、ヘキソース、二糖類、オリゴ糖、オリゴフルクトース、フリブロロース、多糖類、及び糖アルコールからなる群から選ばれる炭水化物を含む。最も好ましくは、当該炭水化物は、150~100000g/mol、より好ましくは、250~100000g/mol、さらにより好ましくは300~40000g/mol、及び最も好ましくは500~15000g/molを有する炭水化物である。かなり好ましい実施態様では、添加化合物は、シクロデキストリン、マルチトール、魚ゼラチン、マルトデキストリン、、スプレーガム、イノシン5モノホスフェート、及びイノシンからなる群から選ばれる添加化合物である。凍結培養物は、凍結物質のw/wとして計測される05~13の添加化合物を含み、凍結物質のw/wとして計測される1~12の添加化合物、より好ましくは凍結物質のw/wとして計測される2~10の添加化合物、そしてさらにより好ましくは、凍結物質のw/wとして計測される添加化合物の5~10を含む。発酵後における添加化合物の単離生菌への添加は、適切な温度にて例えば30分間バイオマスと固体添加化合物とを混合することにより行われてもよい。或いは、添加化合物の滅菌溶液は、バイオマスと混合されてもよい。ペレット凍結乳酸菌培養物の製造法上で記載されるように、本発明の第二態様は、本発明の第一態様のペレット凍結乳酸菌培養物の製造方法であって、以下のステップ:添加化合物を生菌に加えて、少なくとも109コロニー形成ユニット/g物質の生菌量を有する少なくとも50gの物質を取得し、当該物質を凍らせて、ペレット凍結物質を取得し、当該ペレット凍結物質を適切な方法でパッキングするを含む、前記方法に関する。上で記載されるように、ここで最も適切な問題の培養物は、ペレット凍結乳酸菌培養物であって、本明細書中に記載される添加化合物を含まない場合に、70°C~46°CのTm’値を有する、前記培養物である。従って、好ましい実施態様では、上記ステップに従って添加化合物を加える前に、添加化合物を含まない凍結乳酸菌培養物のTm’値を計測し、そして70°C~46°C、又はそれ以下のTm’値を有することを同定する。上記ステップに従って添加化合物を加える前に、ペレット塊試験を行い、そして凍結培養物の個別のペレットが46°Cでの貯蔵で互いにくっ付くことを同定する。好ましくは、添加化合物を加えた後の、添加化合物を含む凍結乳酸菌培養物のTm’値を計算し、そしてTm’値が46°Cを超えているか、好ましくは45°C~15°C、より好ましくは43°C~15°C、そしてさらにより好ましくは39°C~15°Cであるかを確かめる。最後に、添加化合物を加えた後に、培養物をペレット凍結し、そして、100個の個別のペレットのうちの少なくとも80個が、固まっていない個別の単一ペレットとして残っていることを保証するペレット塊試験を行う。凍結乳酸菌培養物の使用本明細書中に記載される凍結乳酸菌培養物は、当該技術分野に従って、食品又は飼料の製造方法において使用されうる。実施例1:R604Eは、凍結貯蔵の間粘着性のペレットを形成する傾向がある。本研究において、融点について詳細に調べること、そしてカゼイン塩、スクロース、又はマルトデキストリンを加えることにより融点を増大する試みによって、この問題に取り組む。目的:R604-EのFDVSの融点を、添加物を用いることにより高めることが可能であるかを評価することを目的とする。添加物を用いてR604Eの融点を増大させる効果が、視覚的に評価され、そして試験製剤の各々についてDSCによりTm’を計測することにより評価される。i材料:市販の培養物であるFDVSR604E、2キロii融点を上昇させるために製剤について使用される添加溶液50スクロース溶液。10カゼイン酸Na溶液30マルトデキストリンDE10溶液。30マルトデキストリンDE2溶液。iiiF-DVSR604-Eの製法凍結濃縮物を融解し、そして以下の表1に記載の添加物と混合する:F-DVSR604の融点の視覚的な評価F-DVSR604Eの6個の製剤を、液体窒素中でペレット凍結し、そして100の個別のペレットをペトリ皿に移し、そうして固まっていない単一ペレットの薄層を形成した。各製剤の一のサンプルを、-50°Cに設定された冷凍庫に配置した。実際のサンプル温度は-46°Cであった。貯蔵から7日後、サンプルが未だに固まっていないか、又はペレットが塊を形成する若しくは粘着性でありそうかを観察するためにサンプルを試験し、そしてもしそのような場合、揺すって固まっていない粒子に再び戻るかを試験した。Tm’の計測:サンプルを100μlのアルミナるつぼの中で調製し、そして液体窒素中で凍結した。各製剤の一のサンプル及びF-DVSR604を6日間-46°Cで置いた。相転移を、100μlのアルミナるつぼ、温度プログラム、インサート温度-90°C、実行温度プログラム:5°C/分-130°C~0°Cを備えたMettlerToledo822e示差走査熱量形で計測した。Tm’値により定義されるを計測した。結果を表2に示す。我々は、6超のスクロース及び6のマルトデキストリンの使用が、凍結ペレットのTm’値を増大させることを観測した。カゼイン酸Naの効果を見ることができなかった。目視検査から、10スクロース及び2の異なるマルトデキストリンが、粘着性のペレットを形成する傾向に対して、正の効果を示した。実施例2:目的どの種類の添加物が凍結培養物の融点を増加できるかを同定するために、スクリーニング研究を行った。以下の添加物を試験した:トレハロース、マルトデキストリン12、シクロデキストリン、スプレーガム、PEG、魚ゼラチン、マルチトール、塩化ナトリウム、グリセロール。i材料FDVSR604詳細については実施例を参照のこと。ii融点を上昇させるために製剤に使用する添加溶液50トレハロース30マルトデキストリンDE12、RoquetteFreres、LestremFrance30シクロデキストリン30スプレーガム30PEG30魚ゼラチン粉20030マルチトール30塩化ナトリウム30グリセロールFDVSR604Eの製造方法:凍結FDVSR604E濃縮物を融解し、そして様々な添加物と混合して最終製剤の10にした。Tm’の計測:サンプルを100μlのアルミナるつぼ中に調製し、そして液体窒素中で凍結させた。相転移曲線をMettlerToledo822eDifferentialScanningCaloriometerで、9の製剤について記録し、そしてレファレンスサンプルと比較した。90°CでサンプルをDSCに挿入し、そして以下の温度プログラム:挿入温度90°C;温度スキャン130°C~0°Cにおいて7°C/分を使用して実行した。結果相転移曲線を作成し、そしてRoosにより記載されるようにTm’値を測定した。当該値を以下の表3に与える。レファレンスサンプルについてのTm’は、54°Cであることが分かった。以下の添加物はTm’を増加させる:PEGシクロデキストリンマルチトールトレハロース魚ゼラチンマルトデキストリン12スプレーガム。グリセロール及び塩化ナトリウムは凍結培養物ペレットの融点を増加させなかった。実施例3この試験に、添加物の量とDSCで測ったTm’の増加との間の関係を評価することが含まれる。i材料FDVSCHN19。ii融点を上昇させるために製剤に用いた添加溶液1gのバイオマスあたりのスクロースの濃度を、3~13で変化させた。トレハロースは、5レベルでのみ試験した。全てのスクロース濃度を、50スクロース溶液をバイオマスに加えることから調製した。トレハロース濃度は、40溶液から調製した。Tm’値の計測:凍結FDVSR604Eの濃縮物を融解し、そして表4に記載されるように様々な添加物と混合した。次にサンプルを100μlのアルミナるつぼに移し、そして液体窒素中で凍結させ、そして分析するまで46°Cで貯蔵した。相転移曲線を8の製剤についてDSCで記録し、そしてレファレンスサンプルと比較した。当該サンプルをDSCに90°Cで挿入し、そして以下の温度プログラム:挿入温度90°C;温度スキャン:5°C/分で130°C~0°Cを用いて実行した。相転移曲線からTm’と添加された二糖類の量との間の相関を図1において見ることができる。図1から、8以上のスクロースにより、凍結培養物が46°Cの貯蔵において融解を開始しないということが保証されるということが分かる。実施例4ChrHansenASDenmarkから市販される培養物をマルトデキストリンの添加前後において初融点を分析した。当該製品は凍結ペレットとして販売されており、そしてこれらはかたまらない状態を維持すべきであり、当該状態は貯蔵温度より高い初融点により保証される。目的:本発明の研究の目的は、固まっていないペレットを得るために、貯蔵温度より高く初融点を上昇させることである。材料と方法i材料グルシデックス12を添加化合物として使用した。以下の表5に記載される100gの各培養物を用いた。Bは、グリセリンが培養物に加えられていないことを示し、一方、Aは、10v/vのグリセリンがペレット凍結前に加えられたことを示す。iiサンプルの製剤の製法:凍結濃縮培養物を融解し、そして様々な量のグルシデックス12溶液と混合して、最終製剤の35~101とした。様々な製剤を以下の表6に記載する。iiiTm’の計測サンプルを、100μlアルミナるつぼ中で調製した。相転移曲線を全ての製剤についてMettletDSCで記録した。サンプルをDSCに90°Cで挿入した。スキャン温度プログラムは、7°C/分で100°C~0°Cであった。iiiiF-DVSR604の融点の目視評価製剤を、液体窒素中でペレット凍結し、そして100の個別のペレットをペトリ皿に移し、そうして固まっていない単一のペレットの薄い層を形成した。各製剤の一のサンプルを46°Cで置いた。14日間の貯蔵後、サンプルがいまだに固まっていないか、又はサンプルが塊を形成する若しくは粘着性でありそうかを観察するために試験した。もしそのような場合、揺すって固まっていない粒子に戻るかを観察するために試験した。結果:様々な量でマルトデキストリンを様々な培養物へと加えた結果を図1に示す。マルトデキストリンの濃度を増加させることがTm’値を増加させることが明らかである。表2において、粘着性/塊形成の評価についての結果が記載されている。46°Cの貯蔵温度より高いTm’を有するサンプルは、固まっていないペレットであり、一方、46°Cより低いTm’を有するサンプルは互いにくっ付いた。結果を表6及び図2に示す。マルトデキストリンが、10v/vグリセリンを含む培養物並びにグリセリンを含まない培養物において、Tm’を増加させるために有効な薬剤であるということが示される。この実験により、既知の抗凍結剤が、ペレット凍結培養物の貯蔵の間、物理的安定性を増大させるためには使用できないということがさらに示される。参考文献