"以下の性質を有するモノクローナル抗体を含むことを特徴とするインスリン測定試薬。1抗インスリン抗体が結合していないインスリンとは反応しない2前記1の抗インスリン抗体が結合したインスリンとは反応する2の性質が、1の抗インスリン抗体が結合したことによって起きるインスリンの構造の変化を認識する性質である、請求項1に記載のインスリン測定試薬。1の抗インスリン抗体が、受託番号FERMBP-11233で国際寄託されたハイブリドーマ66221である請求項1または2に記載のインスリン測定試薬。以下の性質を有することを特徴とする、モノクローナル抗体。1抗インスリン抗体が結合していないインスリンとは反応しない2前記1の抗インスリン抗体が結合したインスリンとは反応する2の性質が、1の抗インスリン抗体が結合したことによって起きるインスリンの構造の変化を認識する性質である、請求項4に記載のモノクローナル抗体。1の抗インスリン抗体が、受託番号FERMBP-11233で国際寄託されたハイブリドーマ66221である請求項4または5に記載のモノクローナル抗体。さらに、プロインスリンおよびインスリン類似化合物のいずれとも反応しないという性質を有する請求項4~6のいずれかに記載のモノクローナル抗体。本発明は、プロインスリン及びインスリン類似化合物の影響を受けず、インスリンのみを高感度に正確に測定することのできる、インスリン特異的な測定方法及び測定試薬の提供を課題とする。本発明者らは上記課題を解決するために、鋭意検討した結果、驚くべきことに、インスリンに反応する第1のモノクローナル抗体と、当該第1のモノクローナル抗体が結合していないインスリンとは反応しないが、当該第1のモノクローナル抗体が結合したインスリンとは反応する第2モノクローナル抗体を組み合わせることで、プロインスリン及びインスリン類似化合物の影響を受けず、インスリンのみを高感度に正確に測定できることを見出した。さらに検討した結果、上記、抗インスリン抗体が結合したインスリンインスリン-抗インスリン抗体複合体:以下インスリン-抗体複合体ということがあるに反応する抗体を使用して、さまざまな態様のインスリン測定方法を構築できることを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は以下の構成を有する。1抗インスリン抗体が結合していないインスリンとは反応しないが、抗インスリン抗体が結合したインスリンとは反応する性質を有する抗体を用いることを特徴とする、インスリン測定方法。22種の抗体を用いるインスリン測定方法であって、1第1の抗体は、インスリンと反応する性質を有し、2第2の抗体は、第1の抗体が結合していないインスリンとは反応しないが、第1の抗体が結合したインスリンとは反応する性質を有する、1に記載のインスリン測定方法。3第1の抗体及び第2の抗体が、ともにモノクローナル抗体である2に記載のインスリン測定方法。4第1の抗体がポリクローナル抗体であり、第2の抗体がモノクローナル抗体である、2に記載のインスリン測定方法。5第1のモノクローナル抗体が、互いに認識部位が異なる2以上のモノクローナル抗体である、3に記載のインスリン測定方法。6少なくとも1種のモノクローナル抗体が、プロインスリン、インスリン類似化合物のいずれとも反応しない抗体である、3~5のいずれかに記載のインスリン測定方法。7第2のモノクローナル抗体が、プロインスリン、インスリン類似化合物のいずれとも反応しない抗体である、3~6のいずれかに記載のインスリン測定方法。8第1のモノクローナル抗体及び第2のモノクローナル抗体が、ラテックスにそれぞれ固定化されており、ラテックス免疫凝集法によりインスリンを測定する3,5,6,7のいずれかに記載のインスリン測定方法。9第1のモノクローナル抗体は固相に固定化されており、第2のモノクローナル抗体は標識物質で標識されている、ELISA法によりインスリンを測定する3,5,6,7のいずれかに記載のインスリン測定方法。10第1のモノクローナル抗体は標識物質で標識されており、第2のモノクローナル抗体は固相に固定化されている、ELISA法又はイムノクロマトグラフ法によりインスリンを測定する3,5,6,7のいずれかに記載のインスリン測定方法。11抗インスリン抗体が結合していないインスリンとは反応しないが、該抗インスリン抗体が結合したインスリンとは反応する性質を有する抗体を含むことを特徴とするインスリン測定試薬。122種の抗体を含むインスリン測定試薬であって、1第1の抗体はインスリンと反応する性質を有し、2第2の抗体は、第1の抗体が結合していないインスリンとは反応しないが、第1の抗体が結合したインスリンとは反応する性質を有する、11に記載のインスリン測定試薬。13第1の抗体及び第2の抗体がともにモノクローナル抗体である12に記載のインスリン測定試薬。14第1の抗体がポリクローナル抗体であり、第2の抗体がモノクローナル抗体である、12に記載のインスリン測定試薬。15第1のモノクローナル抗体が、互いに認識部位が異なる2以上のモノクローナル抗体である、13に記載のインスリン測定試薬。16少なくとも1種のモノクローナル抗体が、プロインスリン、インスリン類似化合物のいずれとも反応しない抗体である、13~15のいずれかに記載のインスリン測定試薬。17第2のモノクローナル抗体は、プロインスリン、インスリン類似化合物のいずれとも反応しない抗体である、13~16のいずれかに記載のインスリン測定試薬。18第1のモノクローナル抗体及び第2のモノクローナル抗体が、ラテックスにそれぞれ固定化されており、ラテックス免疫凝集法によりインスリンを測定する13,15,16,17のいずれかに記載のインスリン測定試薬。19第1のモノクローナル抗体は固相に固定化されており、第2のモノクローナル抗体は標識物質で標識されている、ELISA法によりインスリンを測定する13,15,16,17のいずれかに記載のインスリン測定試薬。20第1のモノクローナル抗体は標識物質で標識されており、第2のモノクローナル抗体は固相に固定化されている、ELISA法又はイムノクロマトグラフ法によりインスリンを測定する13,15,16,17のいずれかに記載のインスリン測定試薬。21以下の性質を有ることを特徴する、モノクローナル抗体。1インスリンに結合する抗体が結合していないインスリンとは反応しない2インスリンに結合する抗体が結合したインスリンとは反応する22さらに、プロインスリン、インスリン類似化合物のいずれとも反応しないという性質を有する21に記載のモノクローナル抗体。23下記工程を含むモノクローナル抗体のスクリーニング方法。1インスリンと反応する抗体を選択する工程21で選択した抗体が結合していないインスリンとは反応せず、当該抗体が結合したインスリンと反応するモノクローナル抗体を選択する工程本発明によれば、プロインスリン及びインスリン類似化合物の影響を受けずに、感度の高い、正確なインスリン測定が可能となった。また、本発明によれば、β細胞からのインスリン分泌を正確に把握できることから、糖尿病の病態把握に用いることもでき、非常に有用である。以下、本発明の代表的な態様である下記発明3を例として、発明を実施するための形態について説明する。発明3を詳説すると以下である。2種のモノクローナル抗体を用いるインスリン測定方法であって、1第1のモノクローナル抗体は、インスリンと反応する性質を有し、2第2のモノクローナル抗体は、第1のモノクローナル抗体が結合していないインスリンとは反応しないが、第1のモノクローナル抗体が結合したインスリンとは反応する性質を有する、インスリン測定方法。本発明のモノクローナル抗体には、第1のモノクローナル抗体と第2のモノクローナル抗体があり、インスリンの測定に際してはこれらを組み合わせて用いる。第1のモノクローナル抗体は、インスリンと反応するモノクローナル抗体であればいずれのモノクローナル抗体でもよく、抗体分子全体のほかに、抗体のFab’部分などインスリンと反応することができる、抗体の機能性断片であってもよい。第2のモノクローナル抗体は、以下の1と2の性質を有するモノクローナル抗体であればいずれのモノクローナル抗体でもよい。1第1のモノクローナル抗体が結合していないインスリンとは反応しない2第1のモノクローナル抗体が結合したインスリンとは反応する上記第1のモノクローナル抗体が結合したインスリンとは反応する場合の第2のモノクローナル抗体の反応部位認識部位は、第1のモノクローナル抗体が結合したことによって起きるインスリンの構造の変化を認識して、当該構造が変化したインスリンに反応するものが望ましい。ここで、インスリンの構造の変化とは、インスリン-抗体複合体の形成により、インスリン分子自体に独立して生じた構造の変化や、抗体が結合したインスリンにおいて抗体とインスリン分子が協働して構成する構造等をいう。また、本発明の測定方法はプロインスリン及びインスリン類似化合物の影響を受けないことが望ましいため、少なくとも1種のモノクローナル抗体は、プロインスリン及びインスリン類似化合物と反応しないことが望ましい。インスリン類似化合物としては、具体的には、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングラルギン、インスリンデテミル、インスリングルリジンなどのインスリンアナログ製剤などが挙げられる。本発明の第2のモノクローナル抗体の一態様として、これらの化合物のいずれとも交差反応しない抗体が挙げられ、本抗体をインスリンの測定に用いた場合には、当該化合物が試料中に存在しても、インスリンを特異的に測定することができる。一方のモノクローナル抗体がこれらプロインスリン及びインスリン類似化合物と反応しない性質を有していれば、他方のモノクローナル抗体はこれらの類似化合物と反応するものでも、反応しないものでもいずれでもよい。本明細書中、インスリンと反応する、インスリンを認識する、インスリンと結合する、インスリンと交差反応性を示すは、同義で用いられるが、これらの例示に限定されることはなく、最も広義に解釈する必要がある。抗体がインスリンなどの抗原化合物と反応するか否かの確認は、後述する抗原固相化ELISA法、競合ELISA法、サンドイッチELISA法などにより行うことができるほか、表面プラズモン共鳴surfaceplasmonresonanceの原理を利用した方法SPR法などにより行うことができる。SPR法は、Biacore登録商標の名称で市販されている、装置、センサー、試薬類を使用して行うことができる。本発明の抗体と、ある化合物が反応しないとは、本発明の抗体がある化合物と実質的に反応しないことをいい、実質的に反応しないとは、例えば、上記SPR法に基づき、Biacore登録商標T100を使用し、本発明の抗体を固定化して測定を行った場合に、本発明の抗体の反応性の増強が認められないことをいう。詳細には、抗体と化合物との反応性が、コントロール化合物非添加の反応性と比べて有意な差がないことをいう。上記SPR法以外の当業者に周知の方法手段によっても実質的に反応しないことを確認できるのはいうまでもない。本発明の抗体によって抗原として認識されるインスリンは、インスリン分子の全体であってもよく、その一部であってもよい。第1のモノクローナル抗体としては、具体的にはハイブリドーマFERMBP-11233が産生するモノクローナル抗体66221抗体が挙げられ、第2のモノクローナル抗体としては、ハイブリドーマFERMBP-11234が産生するモノクローナル抗体66226抗体が挙げられる。本発明の抗体は、抗原免疫原としてインスリンをリン酸緩衝生理食塩水などの溶媒に溶解し、この溶液を動物に投与して免疫することによりに容易に製造できる。必要に応じて前記溶液に適宜のアジュバントを添加した後、エマルジョンを用いて免疫を行ってもよい。アジュバントとしては、油中水型乳剤、水中油中水型乳剤、水中油型乳剤、リポソーム、水酸化アルミニウムゲルなどの汎用されるアジュバントのほか、生体成分由来のタンパク質やペプチド性物質などを用いてもよい。例えば、フロイントの不完全アジュバント又はフロイントの完全アジュバントなどを好適に用いることができる。アジュバントの投与経路、投与量、投与時期は特に限定されないが、抗原を免疫する動物において所望の免疫応答を増強できるように適宜選択することが望ましい。免疫に用いる動物の種類も特に限定されないが、哺乳動物が好ましく、例えばマウス、ラット、ウシ、ウサギ、ヤギ、ヒツジなどを用いることができ、より好ましくはマウスを用いることができる。動物の免疫は、一般的な手法に従って行えばよく、例えば、抗原の溶液、好ましくはアジュバントとの混合物を動物の皮下、皮内、静脈、又は腹腔内に注射することにより免疫を行うことができる。免疫応答は、一般的に免疫される動物の種類及び系統によって異なるので、免疫スケジュールは使用される動物に応じて適宜設定することが望ましい。抗原投与は最初の免疫後に何回か繰り返し行うことが好ましい。モノクローナル抗体を得る場合、引き続き以下の操作が行われるが、それらの操作に限定されることはなく、モノクローナル抗体それ自体の製造方法については、例えば、Antibodies,ALaboratoryManualColdSpringHarborLaboratoryPress,1988に記載の方法に準じて行うことができる。最終免疫後、免疫した動物から抗体産生細胞である脾臓細胞あるいはリンパ節細胞を摘出し、高い増殖能を有するミエローマ細胞と細胞融合させることによりハイブリドーマを作製することができる。細胞融合には抗体産生能質量が高い細胞を用いることが好ましく、またミエローマ細胞は融合する抗体産生細胞の由来する動物と適合性があることが好ましい。細胞融合は、当該分野で公知の方法に従って行うことができるが、例えば、ポリエチレングリコール法、センダイウイルスを用いた方法、電流を利用する方法などを採用することができる。得られたハイブリドーマは公知の方法に従って増殖させることができ、産生される抗体の性質を確認しつつ所望のハイブリドーマを選択することができる。ハイブリドーマのクローニングは、例えば限界希釈法や軟寒天法などの公知の方法により行うことが可能である。第1のモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマの選択について説明する。ハイブリドーマの選択は、産生される抗体が実際の測定に用いられる条件を考慮し、選択の段階で効率的に行うことができる。例えば、ELISA法、RIA法等により、インスリンに反応する抗体を産生するハイブリドーマを選択することにより得られる。具体的には、まず、培養上清中のモノクローナル抗体を、固相化したインスリンと反応させ、次いで標識抗IgG抗体を反応させる抗原固相化ELISA法により、インスリンに対し高い反応性を有するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマを選択する。このようにして選別されたハイブリドーマを大量培養することにより、所望の特性を有するモノクローナル抗体を製造することができる。大量培養の方法は特に限定されないが、例えば、ハイブリドーマを適宜の培地中で培養してモノクローナル抗体を培地中に産生させる方法や、哺乳動物の腹腔内にハイブリドーマを注射して増殖させ、腹水中に抗体を産生させる方法などを挙げることができる。モノクローナル抗体の精製は、例えば陰イオン交換クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、硫安分画法、PEG分画法、エタノール分画法などを適宜組み合わせて行うことができる。また、第2のモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマの選択は、上記第1のモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマの選択の場合における固相化したインスリンを、第1のモノクローナル抗体と結合したインスリンに置き換えた選択方法固相化した第1のモノクローナル抗体にインスリンを結合させ、第2のモノクローナル抗体候補とのサンドイッチ形成を確認する方法や第2のモノクローナル抗体候補を固相化し、予め第1のモノクローナル抗体とインスリンをインキュベートして形成させたインスリン-抗体複合体抗体との反応を確認する選択方法、あるいはBiacore登録商標T100を用いてインスリンとの反応性を示さないものを選択する方法を適宜組み合わせて確認することにより得ることができる。本発明の抗体としては、抗体分子全体のほかに抗原抗体反応活性を有する抗体の機能性断片を使用することも可能であり、前記のように動物への免疫工程を経て得られたもののほか、遺伝子組み換え技術を使用して得られるものや、キメラ抗体を用いることも可能である。抗体の機能性断片としては、例えば、Fab’2、Fab’などが挙げられ、これらの機能性断片は前記のようにして得られる抗体をタンパク質分解酵素例えば、ペプシンやパパインなどで処理することにより製造できる。また、本発明のモノクローナル抗体は、第1または第2のモノクローナル抗体のいずれか、あるいは両方を不溶性担体上に固定された固定固相化抗体として使用したり、後述する当業者に周知慣用の標識物質で標識した標識抗体として使用することができる。このような固定化抗体や標識抗体はいずれも本発明の範囲に包含される。例えば、不溶性担体にモノクローナル抗体を物理的に吸着させ、あるいは化学的に結合適当なスペーサーを介してもよいさせることにより固定化抗体を製造することができる。不溶性担体としては、ポリスチレン樹脂などの高分子基材、ガラスなどの無機基材、セルロースやアガロースなどの多糖類基材などからなる不溶性担体を用いることができ、その形状は特に限定されず、板状例えば、マイクロプレートやメンブレン、ビーズあるいは微粒子状例えば、ラテックス粒子、金コロイド粒子、筒状例えば、試験管など任意の形状を選択できる。本発明の第2のモノクローナル抗体と結合可能な標識抗体、標識プロテインA又は,標識プロテインG等を用いることにより、試料中のインスリンを測定することができる。標識抗体を製造するための標識物質としては、例えば酵素、蛍光物質、化学発光物質、ビオチン、アビジン、又は放射性同位体、金コロイド粒子、着色ラテックスなどが挙げられる。標識物質と抗体との結合法としては、当業者に利用可能なグルタルアルデヒド法、マレイミド法、ピリジルジスルフィド法、又は過ヨウ素酸法などの方法を用いることができるが、固定化抗体や標識抗体の種類、及びそれらの製造方法は前記の例に限定されることはない。例えば、パーオキシダーゼやアルカリホスファターゼなどの酵素を標識物質として用いる場合にはその酵素の特異的基質酵素が西洋ワサビパーオキシダーゼ以下、HRPというの場合には、例えばO-フェニレンジアミン以下、OPDというあるいは3,3’,5,5’-テトラメチルベンジジン、ALPの場合には、p-ニトロフェニルホスフェートなどを用いて酵素活性を測定することができ、ビオチンを標識物質として用いる場合には少なくともアビジンあるいは酵素修飾アビジンを反応させるのが一般的である。本明細書において、不溶性担体を固相、抗原や抗体を不溶性担体に物理的あるいは化学的に担持させることあるいは担持させた状態を固定、固定化、固相化、感作、吸着と表現することがある。また、検出又は測定という用語は、インスリンの存在の証明及び/又は定量などを含めて最も広義に解釈する必要があり、いかなる意味においても限定的に解釈してはならない。本発明の抗体を用いる測定方法における検出対象の試料としては、主に生体生物由来の体液を挙げることができる。具体的には、血液全血、血清、血漿、尿、唾液、喀痰、膵臓抽出液、涙液、耳漏又は前立腺液などを挙げることができるが、これらに限定されるものではない。本発明により提供される測定用試薬キットの態様としては、インスリンの測定ができる試薬であれば、特に限定されるものではない。以下、代表的な標識イムノアッセイ法であるELISA法、イムノクロマトグラフ法と、代表的な粒子凝集イムノアッセイ法であるラテックス免疫凝集法以下、LTIA法というを例にそれぞれを説明する。<標識イムノアッセイ法:ELISA法>試料中に存在するインスリンを検出するための測定用試薬キットの態様として、以下の要素:a第1のモノクローナル抗体を固定化した固相プレートなど、及びb標識物質で標識された第2のモノクローナル抗体、をあげることができる。第1のモノクローナル抗体を固定化した固相プレートなどは、試料中のインスリンを捕捉してインスリン-抗体複合体を形成する。標識物質で標識された第2のモノクローナル抗体は、当該インスリン-抗体複合体に反応してサンドイッチを形成し、標識物質に応じた方法により標識物質の量を測定することにより、試料中のインスリンを測定することができる。第1のモノクローナル抗体の固相への固定化の方法、第2のモノクローナル抗体の標識物質での標識の方法など、測定試薬キットを構成する上での具体的な方法は本明細書中に記載された方法のほか、当業者に周知の方法を制限なく使用することができる。この構成の場合、ホモジーニアスな測定系として構成することもできるが、ヘテロジーニアスな測定系として構成することが好ましい。特に好適な態様として、発明19第1のモノクローナル抗体は固相に固定化されており、第2のモノクローナル抗体は標識物質で標識されている、ELISA法によりインスリンを測定する発明13,15,16,17のいずれかに記載のインスリン測定試薬をあげることができる。また、測定用試薬の感度や特異性を考慮して、a標識物質で標識された第1のモノクローナル抗体、及びb第2のモノクローナル抗体を固定化した固相プレートなど、という上記とは逆の構成を採用することもできる。この構成の場合、被検試料と標識物質で標識された第1のモノクローナル抗体含有溶液を混合し、予めインスリン-抗体複合体を溶液中で形成させておき、第2のモノクローナル抗体を固定化した固相に添加することが好ましい。この構成においては、感度の向上などを意図して、発明15第1のモノクローナル抗体が、互いに認識部位が異なる2以上のモノクローナル抗体である、発明13に記載のインスリン測定試薬のように標識物質で標識された第1のモノクローナル抗体として、互いに認識部位が異なる2以上のモノクローナル抗体を使用することが好適に可能である。特に好適な態様として、発明20第1のモノクローナル抗体は標識物質で標識されており、第2のモノクローナル抗体は固相に固定化されている、ELISA法によりインスリンを測定する発明13,15,16,17のいずれかに記載のインスリン測定試薬をあげることができる。<標識イムノアッセイ法:イムノクロマトグラフ法>一般的なイムノクロマトグラフ法では、メンブレンなどのシート状の固相支持体上、長さ方向に対して、端から順番に1.被検試料供給部位、2.第1のモノクローナル抗体を含む標識試薬第1のモノクローナル抗体は金コロイド粒子などの標識物質で標識されているを、メンブレン上において展開可能に保持した標識試薬部位、3.標識物質で標識された第1のモノクローナル抗体とインスリンの複合体を捕捉するための第2のモノクローナル抗体を固定化した捕捉試薬部位を被検試料溶液が毛細管現象により連続的に移動するよう構成されている。具体的には、まず、インスリンを含む被検試料を被検試料供給部位に所定量添加すると、試料が固相支持体を展開移動する過程で標識試薬部位に侵入し、インスリンが標識試薬第1のモノクローナル抗体を含むと結合しインスリン-標識試薬の複合体が形成される。インスリン-標識試薬複合体はそのままメンブレン上を展開移動し、メンブレン上の第2のモノクローナル抗体を含む捕捉試薬部位に侵入すると、固相支持体上に固定化された捕捉試薬に捕捉され、捕捉試薬第2のモノクローナル抗体-インスリン-標識試薬第1のモノクローナル抗体の複合体が捕捉試薬位置に形成される。そして、標識試薬を任意の方法可視可能な金コロイド粒子の場合はその凝集像、酵素の場合は基質を添加することによる発色反応で検出することで、被分析物質の存在を判定することができる。なお、理解を容易にするため、1.被検試料供給部位と2.第1のモノクローナル抗体を含む標識試薬第1のモノクローナル抗体は金コロイド粒子などの標識物質で標識されているを、メンブレン上において展開可能に保持した標識試薬部位を、独立して被検試料の移動方向順に記載したが、上から1、2の順で積み上げられた構造など、当業者に周知の態様構成が採用されうることを当業者は当然に理解することができる。イムノクロマトグラフ法においては、被検試料が2.第1のモノクローナル抗体を含む標識試薬第1のモノクローナル抗体は金コロイド粒子などの標識物質で標識されているを、メンブレン上において展開可能に保持した標識試薬部位を通過する時点で、インスリン-抗体複合体が形成させるので、前記ELISA法と同様に感度の向上などを意図して、発明15第1のモノクローナル抗体が、互いに認識部位が異なる2以上のモノクローナル抗体である、発明13に記載のインスリン測定試薬のように標識物質で標識された第1のモノクローナル抗体として、互いに認識部位が異なる2以上のモノクローナル抗体を使用することが好適に可能である。イムノクロマトグラフ法の測定試薬の特に好適な態様として、発明20第1のモノクローナル抗体は標識物質で標識されており、第2のモノクローナル抗体は固相に固定化されている、イムノクロマトグラフ法によりインスリンを測定する発明13,15,16,17のいずれかに記載のインスリン測定試薬をあげることができる。<粒子凝集イムノアッセイ法:LTIA法>試料中に存在するインスリンを検出するための測定用試薬キットのA~Dの4態様として、それぞれ少なくとも以下の要素:A.a第1のモノクローナル抗体を固定化したラテックス粒子及びb第2のモノクローナル抗体を固定化したラテックス粒子B.a第1のモノクローナル抗体を固定化したラテックス粒子及びb第2のモノクローナル抗体C.a第1のモノクローナル抗体及びb第2のモノクローナル抗体を固定化したラテックス粒子D.a第1のモノクローナル抗体及び第2のモノクローナル抗体の両抗体を固定化したラテックス粒子をあげることができる。これらの測定用試薬キットはLTIA法に好適に使用できる。A~Dに使用されるラテックス粒子は、感度向上などの所望の性能を得るため、粒子径や種類を適宜選択することができる。ラテックス粒子としては、抗原あるいは抗体の担持に適したものであれば良い。例えば、ポリスチレン、スチレン-スルホン酸塩共重合体、スチレン-メタクリル酸共重合体、アクリルニトリル-ブタジエン-スチレン共重合体、塩化ビニル-アクリル酸エステル共重合体、酢酸ビニル-アクリル酸エステル共重合体等が挙げられる。ラテックス粒子の形状は特に限定されないが、その平均粒子径は、ラテックス粒子表面の抗体又は抗原と測定対象物との凝集反応の結果生じる凝集体が、肉眼又は光学的に検出できるに十分な大きさを有することが好ましい。好ましい平均粒子径としては0.02~1.6μmであり、特に0.03~0.5μmが好ましい。また、金属コロイド、ゼラチン、リポソーム、マイクロカプセル、シリカ、アルミナ、カーボンブラック、金属化合物、金属、セラミックス又は磁性体等の材質よりなる粒子をラテックス粒子に代えて使用することもできる。例えば、臨床検査で使用されるLTIA法の試薬は、通常、第一試液、第二試液の形態で提供され、順次被検試料と混合して使用される。上記A~Dの各態様における、a、bは、その両方又は一方を、第一試液あるいは第二試液に含有させることができる。これらの含有のさせかたは、臨床検査における測定機器の仕様や測定試薬の設計性能や使い易さなどを考慮し、適宜選択しうる。一般にはAの態様のa,bの両方を第二試液に含有させることが好適であるが、Aの態様のaを第一試液、bを第二試液に含有させることなども好適に使用しうる。特に好適な態様として、発明18第1のモノクローナル抗体及び第2のモノクローナル抗体が、ラテックスにそれぞれ固定化されており、ラテックス免疫凝集法によりインスリンを測定する発明13,15,16,17のいずれかに記載のインスリン測定試薬をあげることができる。以上、本発明の代表的な態様である発明3を例として、本発明を実施するための形態を説明したが、インスリン-抗体複合体に対する抗体を使用することを限度として、例えば発明4のように、第1の抗体にポリクローナル抗体を使用することや、発明5のように、第1の抗体に、互いに認識部位が異なる2以上のモノクローナル抗体を使用することなど、本発明が種々の態様をとりうることを当業者は当然に理解することができる。以下、実施例をあげて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。試験例1本発明のモノクローナル抗体の製造方法1.免疫用抗原の調製ヒトインスリンFitzgerald社製30-AI51をコンプリートフロインドアジュバントWako社製と1:1で混合後、連結シリンジを用いてエマルジョンを作製し、免疫用抗原とした。2.ハイブリドーマの作製上記、免疫用抗原を雌のBALB/cマウスの背部皮下に注入した1匹当たり20~50μg。この操作免疫を1週間毎に2回繰り返した。免疫開始3週間後、試験採血にて高い抗体価が確認されたマウスから脾臓を摘出し、50-PEG1450シグマ社製を用いた常法により細胞融合を行った。ミエローマ細胞はSP2/Oを用いた。得られた融合細胞は、脾臓細胞として2.5×106個/mLになるようにHAT、15ウシ胎児血清及び10のBM-CondimedH1HybridomaCloningSupplementRoche社製を含むRPMI1640培地に懸濁し、96穴培養プレートに0.2mLずつ分注した。これを5CO2インキュベーター中で37°Cにて培養した。3.第1のモノクローナル抗体産生ハイブリドーマのスクリーニング細胞融合7日後に1次スクリーニングとして、培養上清を用いて後述する抗原固相化ELISA法を行い、インスリンに対し高い反応性を示したwellを1次陽性wellとして選別した。該1次陽性well中の細胞は、24穴プレートにおいて継代した。継代2日後、2次スクリーニングとして、培養上清を用いて後述する競合ELISA法を行い、インスリンに対し高い反応性を示すwellを2次陽性wellとして選択した。3-1.抗原固相化ELISA用プレートの作製150mM塩化ナトリウムを含む10mMリン酸緩衝液pH7.2;以下、PBSというで1μg/mLの濃度に調製したインスリンをスクリーニング用抗原として、50μL/wellずつ96穴プレートに固相化し、4°Cで一晩静置した。0.05Tween登録商標20及び0.1プロクリン300SUPELCO社製を含むPBS溶液以下、PBSTという400μL/wellで3回洗浄後、1BSAを含むPBST以下、BSAPBSTというを100μL/wellずつ分注し、室温で1時間静置してブロッキングを行い、ELISA用プレートを作製した。該ELISA用プレートは、PBSTで3回洗浄後、各試薬を添加して実施例記載の各ELISA法試験に用いた。3-2.抗原固相化ELISA法i抗原固相化したELISA用プレートに、BSA-PBSTにより段階希釈した各マウス抗血清、あるいは融合細胞の培養上清を50μL/wellずつ分注し、室温で1時間静置した。iiPBSTで3回洗浄後、HRP-GtFab’2-Anti-MouseIg’sBIOSOURCE社製AMI4404をBSA-PBSTで5000倍希釈した溶液を50μL/wellずつ分注し、室温で1時間静置した。iiiPBSTで3回洗浄後、0.02過酸化水素水を含む0.2Mクエン酸緩衝液以下、基質溶解液というにOPD東京化成工業社製を2mg/mLにて溶解し、50μL/wellずつ添加して室温で1時間静置した。iv1mMEDTAを含む1.5N硫酸以下、反応停止液というを50μL/wellずつ添加し、タイターテック登録商標マルチスキャンプラスMKIIFlowLaboratories社製を用いて波長492nmにて吸光度を測定した。3-3.競合ELISA法i抗原固相化したELISA用プレートにヒトインスリンFitzgerald社製30-AI51をBSA-PBSTで各0μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、10μg/mLに希釈した溶液を25μL/wellずつ分注した。ii次いで、BSA-PBSTで各5倍、25倍に希釈した融合細胞の培養上清あるいはその原液を25μL/wellずつ分注し、室温で1時間静置した。iii以降の操作は、前記3-2.抗原固相化ELISA法の工程ii~ivと同様に行った。4.第2のモノクローナル抗体産生ハイブリドーマのスクリーニング細胞融合7日後に、培養上清を用いて後述のサンドイッチELISA法を行い、後述のクローニング及びモノクローナル抗体採取にて、予め採取したFab’2処理化した第1のモノクローナル抗体と結合させたインスリンに対し高い反応性を示すwellを選択した。4-1.サンドイッチELISA法iImmunoPure登録商標Fab’2PreparationKitPIERCE社製Prod44888を使用して第1のモノクローナル抗体ここでは66221抗体をFab’2処理化した。iiPBS溶液に2μg/mLの濃度に調製したFab’2処理化済み第1のモノクローナル抗体を50μL/wellずつ96穴プレートに固相化し、4°Cで一晩静置した。PBST400μL/wellで3回洗浄後、BSAPBSTを100μL/wellずつ分注し、室温で1時間静置してブロッキングを行い、ELISA用プレートを作製した。iiiELISA用プレートに、ヒトインスリンFitzgerald社製30-AI51をBSA-PBSTで0.5μg/mLに希釈した溶液を50μL/wellずつ分注し、室温で1時間静置した。ivPBSTで3回洗浄後、BSA-PBSTで段階希釈した融合細胞の培養上清を50μL/wellずつ分注し、室温で1時間静置した。vPBSTで3回洗浄後、HRP-Gt-Anti-MouseIgG-FcBETHYLLABORATORIES社製A90―131PをBSA-PBSTで10000倍希釈した溶液を50μL/wellずつ分注し、室温で1時間静置した。PBSTで3回洗浄後、基質溶解液にOPD東京化成工業社製を2mg/mLにて溶解し、50μL/wellずつ添加して室温で1時間静置した。vii反応停止液を50μL/wellずつ添加し、タイターテック登録商標マルチスキャンプラスMKIIFlowLaboratories社製を用いて波長492nmにて吸光度を測定した。5.クローニング及びモノクローナル抗体採取上記3.及び4.のスクリーニングで選択したハイブリドーマを限界希釈法にてクローニングし、それぞれハイブリドーマ66221、66226を得た。次いで各ハイブリドーマが産生するモノクローナル抗体を採取するため、2週間前にプリスタン0.5mLを腹腔内に注射しておいた12週齢の雌BALB/cマウスに、ハイブリドーマを細胞数0.5×106個の量で腹腔内に投与した。14日後に腹水を採取し、遠心処理して上清を得た。上清を等量の吸着用緩衝液3mol/LNaCl、1.5mol/LGlycine-NaOH緩衝液、pH8.5と混和後、ろ過した。該ろ液を、吸着用緩衝液で平衡化したプロテインAセファロースカラムに通し、ろ液中の抗体をカラムに吸着させた後、0.1mol/Lクエン酸緩衝液pH3.0で溶出させた。該溶出液を、1mol/LTris-HCl緩衝液pH8.0で中和後、PBSで透析を行い、抗体を採取した。以下、66221抗体、66226抗体としてそれぞれ試験に用いた。66221抗体及び66226抗体を産生するハイブリドーマは、出願人によって独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター住所:日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6に2009年4月8日に寄託手続がされ、受託番号FERMP-21800、FERMP-21801が付与され、その後2010年2月17日に原寄託に基づくブタペスト条約に基づく寄託へ移管され、受託番号FERMBP-11233、FERMBP-11234が付与されている。試験例2本発明のモノクローナル抗体のプロインスリン及びインスリン類似化合物との交差反応性66221抗体及び66226抗体のプロインスリン及びインスリン類似化合物との交差反応性についてBiacore登録商標T100を用いて試験を行った。インスリン類似化合物としては、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングラルギン、インスリンデテミルなどのインスリンアナログ製剤を用いた。1.試薬及び器具1-1.モノクローナル抗体i66221抗体:2.30mg/mLii66226抗体:3.99mg/mL1-2.アナライトiリコンビナントヒトインスリン:Fitzgerald社製30-AI51プロインスリン:IRR社製Proinsulin,Human,forImmunoassay,NIBSCcode:84/611iiiインスリンアナログ製剤1インスリンリスプロ100単位/mL:日本イーライリリー社製、2インスリンアスパルト100単位/mL:ノボノルディスクファーマ社製3インスリングラルギン100単位/mL:サノフィアベンティス社製4インスリンデテミル100単位/mL:ノボノルディスクファーマ社製1-3.Biacore登録商標機器及び専用試薬類一式Biacore社製:現GEHealthcare社製、次のi~viiiはBiacore社製当時の製品及びカタログNo.であるが、現在はGEHealthcare社より入手可能である。iBiacore登録商標T100:Biacore社製JJ-1037-02iiSeriesSSensorChipCM5:Biacore社製BR-1005-30iiiAmineCouplingKit:Biacore社製BR-1000-50ivAcetate5.0:Biacore社製BR-1003-51vα-MouseImmunoglobulins:Biacore社製BR-1005-14viGlycine1.5:Biacore社製BR-1003-54viiGlycine2.0:Biacore社製BR-1003-55viiiHBS-EP10×ランニングバッファー:Biacore社製BR-1006-69使用時、NaOHでpH8.5に調製後、精製水にて10倍希釈して用いる。2.試験方法SensorChipに固定化したα-MouseImmunoglobulinsに66221抗体あるいは66226抗体をキャプチャーさせ、アナライトとしてインスリン、プロインスリン、各種インスリンアナログ製剤を添加することでそれぞれの反応性を評価した。具体的な操作手順は以下のとおりである。iSensorChipCM5にα-MouseImmunoglobulinsを固定化した付属の取扱説明書に従った。iiHBS-EPpH8.5で66221抗体あるいは66226抗体を5μg/mLとなるよう希釈し、流速30μL/minで300秒間添加した。iiiHBS-EPpH8.5で各種抗原を10ng/mLに希釈し、0ng/mL、10ng/mLの2濃度につき各120秒間添加した。またその際にフリーランニングによる解離時間を120秒間と設定した。ivGlycine1.5とGlycine2.0を1:1で混合して再生溶液とし、再生処理を180秒間行った。3.結果3-1.インスリンとの反応結果66221抗体及び66226抗体について、Biacore登録商標T100を用いてインスリンとの反応性を確認した。結果を図2及び図3に示す。インスリン濃度10ng/mLにおいて、66221抗体では8.5RUの反応性が認められた図2。一方、66226抗体では全く反応性が認められなかった図3。なお、縦軸RUとはBiacore登録商標測定系における独自の単位を示しており、センサー表面上での反応による質量変化を表している。3-2.プロインスリン及びインスリンアナログ製剤との反応結果66221抗体及び66226抗体について、Biacore登録商標T100を用いてプロインスリンあるいは各種インスリンアナログ製剤インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングラルギン、インスリンデテミルとの反応性を確認した。結果を図4-1、図4-2、図5-1及び図5-2に示す。抗原濃度10ng/mLにおいて、66221抗体ではいずれも5.5~13RUのレスポンスが認められた。一方、66226抗体では全く反応性が認められなかった。実施例1本発明のモノクローナル抗体の組み合わせによるインスリンの測定1<LTIA法>1.ラテックス粒子の作製攪拌機、還流用冷却器、温度検出器、窒素導入管及びジャケットを備えたガラス製反応容器容量2Lに、蒸留水1100g、スチレン200g、スチレンスルホン酸ナトリウム0.2g、及び、蒸留水50gに過硫酸カリウム1.5gを溶解した水溶液を仕込み、容器内を窒素ガスで置換した後、70°Cで攪拌しながら48時間重合した。重合終了後、上記溶液をろ紙にてろ過処理し、ラテックス粒子を取り出した。得られたラテックス粒子の粒子径を透過型電子顕微鏡装置日本電子社製、JEM-1010型を用いて10000倍の倍率でラテックス粒子を撮影し、最低100個以上の粒子について画像解析することにより平均粒子径を測定した。得られた平均粒子径は0.3μmであった。2.抗インスリン抗体感作ラテックス粒子の調製2-1.66221抗体感作ラテックス粒子溶液の作製平均粒子径0.3μmの1.0ラテックス溶液5mMトリス緩衝液以下、Tris-HClというpH8.5に、等量の5mMTris-HClpH8.5で0.60mg/mLに希釈した66221抗体溶液を添加して4°C2時間攪拌した。その後、等量の0.5BSA含有5mMTris-HClpH8.5を添加して4°C1時間攪拌した。次に、これを遠心して上清を除去後、沈殿を5mMTris-HClpH8.5で再懸濁し、66221抗体感作ラテックス粒子溶液を作製した。2-2.66226抗体感作ラテックス粒子溶液の作製平均粒子径0.3μmのラテックスを用いて上記と同じ方法により66226抗体感作ラテックス粒子溶液を作製した。3.試薬の調製3-1.第一試薬の調製500mMの塩化ナトリウム及び0.2BSAを含む5mMTris-HClpH8.5を調製し第一試薬とした。3-2.第二試薬の調製66221抗体感作ラテックス粒子溶液及び66226抗体感作ラテックス粒子溶液を等量混合し、5mMTris-HClpH8.5で波長600nmでの吸光度が5.0Absとなるように希釈して第二試薬とした。4.測定方法第一試薬と第二試薬を組合せ、日立7170形自動分析装置を用いてインスリン濃度依存的な粒子凝集塊の形成を確認した。具体的には、濃度0μU/mL、5μU/mL、25μU/mL、50μU/mL、100μU/mL、200μU/mLのインスリン溶液10μLに、第一試薬150μLを加えて37°Cで5分間加温後、第二試薬50μLを加えて攪拌した。その後5分間の凝集形成に伴う吸光度変化を、主波長570nm、副波長800nmにて測定した。5.測定結果表1よりインスリン濃度依存的に感度が上昇し定量が可能であることが確認された。実施例2本発明のモノクローナル抗体の組み合わせによるインスリンの測定2<ELISA法>66221抗体及び66226抗体をそれぞれ固相化し、2次抗体としてそれぞれ別の抗体を組み合わせてインスリン、プロインスリン及びインスリン類似化合物の反応性についてELISA法を用いて試験を行った。1.使用した抗体及び抗原種1モノクローナル抗体66221抗体:2.30mg/mL66226抗体:3.99mg/mL2抗原種インスリン、プロインスリン、インスリンアナログ製剤インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングラルギン、インスリンデテミルは、試験例2と同じものを用いた。2.ELISA測定方法iPBSに66221抗体あるいは66226抗体を2μg/mLに希釈した溶液を96穴プレートに50μL/wellずつ固相化し、室温で2時間静置した。iiPBST400μL/wellで3回洗浄後、BSA-PBSTを100μL/wellずつ分注し、室温で1時間静置してブロッキングを行い、ELISA用プレートを作製した。iiiELISA用プレートに、ヒトインスリン、プロインスリン及びインスリンアナログ製剤をBSA-PBSTで各0ng/mL、1ng/mL、5ng/mL、10ng/mLに希釈した溶液を50μL/wellずつ分注し、室温で1時間静置した。ivPBSTで3回洗浄後、ビオチン標識化した66221抗体あるいは66226抗体をBSA-PBSTで1μg/mLに希釈した溶液を50μL/wellずつ分注し、室温で1時間静置した。vPBSTで3回洗浄後、ImmunoPure登録商標Streptavidin,HRPConjugatedPIERCE社製Prod21126をBSA-PBSTで5000倍に希釈した溶液を50μL/wellずつ分注し、室温で1時間静置した。viPBSTで3回洗浄後、基質溶解液にOPD東京化成工業社製を2mg/mLにて溶解し、50μL/wellずつ添加して室温で1時間静置した。vii反応停止液を50μL/wellずつ添加し、タイターテック登録商標マルチスキャンプラスMKIIFlowLaboratories社製を用いて波長492nmにて吸光度を測定した。3.結果3-1.66221抗体固相化プレート測定結果試験結果を表2及び図6に示す。66221抗体を1次抗体、66226抗体を2次抗体とした場合、インスリンでは濃度依存的な吸光度の上昇が認められたものの、プロインスリン及びインスリンアナログ製剤インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングラルギン、インスリンデテミルでは濃度依存的な吸光度の上昇がまったく認められなかった。3-2.66226抗体固相化プレート測定結果試験結果を表3及び図7に示す。66226抗体を1次抗体、66221抗体を2次抗体とした場合、インスリン、プロインスリン及びインスリンアナログ製剤インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングラルギン、インスリンデテミルのいずれに対しても濃度依存的な吸光度の上昇が全く認められなかった。4.考察前記結果より、66221抗体を1次抗体、66226抗体を2次抗体とした場合、プロインスリン及びインスリンアナログ製剤とは交差反応性を示さないことから、それらの影響を受けずにインスリンのみを定量できることがわかる。また、66226抗体を1次抗体、66221抗体を2次抗体とした場合には、インスリンを測定できなかったことから、66226抗体は、インスリンとは反応性を示さず、66221抗体が結合したインスリンと反応することがわかる。一方、前記試験例2のBiacore登録商標T100を用いた本発明のモノクローナル抗体の交差反応性試験結果では、66221抗体は、インスリン、プロインスリン及びインスリンアナログ製剤のいずれとも反応するものの、66226抗体では、それらいずれとも反応しなかった。これらのことから、本測定系の反応機序としては、66221抗体が先にインスリンに結合することで、インスリンに何らかの構造変化が起こり、66226抗体は当該構造変化部位を特異的に認識することでサンドイッチが成立するものと考えられる。試験例3本発明のモノクローナル抗体のインスリン類似化合物との交差反応性66221抗体及び66226抗体のインスリン類似化合物との交差反応性についてBiacore登録商標T100を用いて試験を行った。インスリン類似化合物として、インスリンアナログ製剤であるインスリングルリジンを用いた。1.試薬及び器具1-1.モノクローナル抗体i66221抗体:2.30mg/mLii66226抗体:3.99mg/mL1-2.アナライトインスリンアナログ製剤iインスリングルリジン100単位/mL:サノフィアベンティス社製1-3.Biacore登録商標機器及び専用試薬類一式Biacore登録商標機器及び専用試薬類一式は、試験例2と同じものを用いた。2.試験方法アナライトとしてインスリンアナログ製剤であるインスリングルリジンを用いた以外は試験例2に記載の方法と同様に行った。3.結果3-1.インスリンアナログ製剤との反応結果66221抗体及び66226抗体について、Biacore登録商標T100を用いてインスリンアナログ製剤インスリングルリジンとの反応性を確認した。結果を図8に示す。66221抗体及び66226抗体のいずれも全く反応性が認められなかった。なお、縦軸RUとはBiacore登録商標測定系における独自の単位を示しており、センサー表面上での反応による質量変化を表している。実施例3本発明のモノクローナル抗体の組み合わせによるインスリンの測定3<ELISA法>66221抗体及び66226抗体をそれぞれ固相化し、2次抗体としてそれぞれ別の抗体を組み合わせてインスリン、プロインスリン及びインスリン類似化合物の反応性についてELISA法を用いて試験を行った。1.使用した抗体及び抗原種1モノクローナル抗体66221抗体:2.30mg/mL66226抗体:3.99mg/mL2抗原種インスリン、プロインスリン、インスリンアナログ製剤インスリングルリジン。2.ELISA測定方法インスリンアナログ製剤としてインスリングルリジンを用いた以外は、すべて実施例2と同様の方法で行った。3.結果3-1.66221抗体固相化プレート測定結果試験結果を表4及び図9に示す。実施例2と同様、66221抗体を1次抗体、66226抗体を2次抗体とした場合、インスリンでは濃度依存的な吸光度の上昇が認められたものの、プロインスリン及びインスリンアナログ製剤インスリングルリジンでは濃度依存的な吸光度の上昇がまったく認められなかった。3-2.66226抗体固相化プレート測定結果試験結果を表5及び図10に示す。実施例2と同様、66226抗体を1次抗体、66221抗体を2次抗体とした場合、インスリン、プロインスリン及びインスリンアナログ製剤インスリングルリジンのいずれに対しても濃度依存的な吸光度の上昇が全く認められなかった。4.考察前記結果より、66221抗体を1次抗体、66226抗体を2次抗体とした場合、66226抗体を1次抗体、66221抗体を2次抗体とした場合のいずれも、インスリンアナログ製剤インスリングルリジンとは交差反応性を示さないことがわかった。"