"心臓障害を治療するための治療的介入の有効性を評価またはモニターする方法であって、前記治療的介入を受けた患者からの生物学的サンプル中の少なくとも1種のmiRNAのレベルを測定することを含み、前記少なくとも1種のmiRNAの測定されたレベルが前記治療的介入の治療有効性の指標となる、方法。前記生物学的サンプルが血漿または血清である、請求項1に記載の方法。前記生物学的サンプルが心臓組織である、請求項1に記載の方法。前記少なくとも1種のmiRNAが、表2~4のいずれか1つに列挙されたmiRNAから選択される、請求項1に記載の方法。コントロールサンプル中のmiRNAのレベルに対するmiRNAの測定されたレベルの減少が、前記治療的介入の治療有効性の指標となる、請求項4に記載の方法。前記少なくとも1種のmiRNAが、hsa-miR-16、hsa-miR-320、hsa-miR-223、hsa-miR-93、hsa-miR-106b、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-185、hsa-miR-92a、hsa-miR-210、hsa-miR-140、hsa-miR-27a、hsa-miR-20b、hsa-miR-150、hsa-miR-20a、hsa-miR-378、hsa-miR-22、hsa-miR-21、hsa-miR-378、hsa-miR-122、hsa-miR-126、hsa-miR-133a、およびhsa-miR-499から選択される、請求項5に記載の方法。前記コントロールサンプル中のmiRNAのレベルに対するmiRNAの測定されたレベルの増加が、前記治療的介入の治療有効性の指標となる、請求項4に記載の方法。前記少なくとも1種のmiRNAが、hsa-miR-19b、hsa-miR-199b-5p、hsa-miR-204、hsa-miR-145、hsa-miR-195、hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-143、およびhsa-miR-214から選択される、請求項7に記載の方法。前記治療的介入がmiRNAベースの治療剤である、請求項1に記載の方法。前記miRNAベースの治療剤が、心臓組織で発現されるmiRNAを標的とする化学修飾アンチセンスオリゴヌクレオチドである、請求項9に記載の方法。前記化学修飾アンチセンスオリゴヌクレオチドが、miR-208aおよび/またはmiR-208bを標的とする、請求項10に記載の方法。前記少なくとも1種のmiRNAが、miR-19b、miR-223、miR-423-5p、miR-106b、miR-16、miR-92a、miR-378、miR-210、miR-378、miR-20b、およびmiR-93から選択される、請求項11に記載の方法。前記少なくとも1種のmiRNAがmiR-19bまたはmiR-223である、請求項12に記載の方法。前記少なくとも1種のmiRNAが、前記アンチセンスオリゴヌクレオチドの投与の1~6週間後に測定される、請求項12に記載の方法。参照レベルまたは前記コントロールサンプル中のmiRNAのレベルに対するmiRNAの測定されたレベルの変化が、心臓組織中のmiR-208aおよび/またはmiR-208bの発現の減少の指標となる、請求項11に記載の方法。前記治療的介入がアンギオテンシン変換酵素阻害剤である、請求項1に記載の方法。前記少なくとも1種のmiRNAが、miR-150、miR-21、miR-223、miR-423-5p、miR-106b、miR-16、miR-92a、miR-378、miR-210、miR-378、miR-20b、およびmiR-93から選択される、請求項16に記載の方法。前記少なくとも1種のmiRNAがmiR-21またはmiR-150である、請求項17に記載の方法。前記心臓障害が、心筋梗塞、病的心肥大、心不全、または高血圧である、請求項1に記載の方法。前記生物学的サンプルが、前記治療的介入開始の少なくとも1週間後に患者から取得される、請求項1に記載の方法。前記少なくとも1種のmiRNAの測定されたレベルが、コントロールサンプル中の前記少なくとも1種のmiRNAのレベルと比較され、前記比較が、前記治療的介入の治療有効性の指標となる、請求項1に記載の方法。前記少なくとも1種のmiRNAの測定されたレベルが、あらかじめ決められた参照値と比較され、前記比較が、前記治療的介入の治療有効性の指標となる、請求項1に記載の方法。前記生物学的サンプル中の前記少なくとも1種のmiRNAの測定されたレベルに基づいて前記治療的介入を変更することをさらに含む、請求項1に記載の方法。心臓障害を治療するための治療的介入の有効性を評価またはモニターするのに有用な情報を提供する方法であって、患者の生物学的サンプル中の少なくとも1種のmiRNAのレベルを決定することと、前記少なくとも1種のmiRNAのレベルの増加または減少に基づいて前記有効性の決定を提供するエンティティーに前記少なくとも1種のmiRNAのレベルを提供することと、を含む、方法。生物学的サンプル中の表2~4のいずれか1つから選択される少なくとも1種のmiRNAを測定するための試薬と、患者において心臓障害を治療するための治療的介入の有効性を評価またはモニターするために前記少なくとも1種のmiRNAを測定するための説明書と、を含むキット。前記試薬が、hsa-miR-16、hsa-miR-320、hsa-miR-223、hsa-miR-93、hsa-miR-106b、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-185、hsa-miR-92a、hsa-miR-210、hsa-miR-140、hsa-miR-27a、hsa-miR-20b、hsa-miR-150、hsa-miR-20a、hsa-miR-378、hsa-miR-22、hsa-miR-21、hsa-miR-378、hsa-miR-122、hsa-miR-126、hsa-miR-133a、hsa-miR-499、hsa-miR-19b、hsa-miR-199b-5p、hsa-miR-204、hsa-miR-145、hsa-miR-195、hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-143、およびhsa-miR-214から選択されるmiRNAを逆転写または増幅するためのmiRNA特異的プライマーを含む、請求項25に記載のキット。1種以上の標準化コントロールをさらに含む、請求項25に記載のキット。前記1種以上の標準化コントロールが、サンプルまたは反応にスパイクするための1種以上の個別の試薬として提供される、請求項27に記載のキット。少なくとも1種の標準化コントロールが、非内因性のRNAもしくはmiRNAまたは前記サンプル中で発現されないmiRNAである、請求項28に記載のキット。少なくとも1種の標準化コントロールがC.エレガンスmiRNAである、請求項29に記載のキット。少なくとも1種の標準化コントロールが、cel-miR-2、cel-lin-4、またはath-miR-159aである、請求項30に記載のキット。前記キットの各miRNAに特異的なTaqManプローブをさらに含む、請求項25~29のいずれか一項に記載のキット。前記生物学的サンプルが、心臓障害の治療を受けている患者から取得した血漿または血清である、請求項25に記載のキット。前記心臓障害が、心筋梗塞、病的心肥大、心不全、または高血圧である、請求項33に記載のキット。患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルを予測または評価する方法であって、前記患者からの生物学的サンプル中の表1から選択される少なくとも1種のmiRNAのレベルを測定することを含み、前記少なくとも1種のmiRNAの測定されたレベルが、前記患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルの指標となる、方法。前記コントロールサンプルが、心不全に罹患していないかまたは心不全と診断されていない健常対象から取得される、請求項35に記載の方法。前記少なくとも1種のmiRNAの測定されたレベルが、コントロールサンプル中の前記少なくとも1種のmiRNAのレベルと比較され、前記比較が、前記患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルの指標となる、請求項35に記載の方法。前記少なくとも1種のmiRNAの測定されたレベルが、あらかじめ決められた参照値と比較され、前記比較が、前記患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルの指標となる、請求項35に記載の方法。前記コントロールサンプル中の前記miRNAのレベルまたは前記あらかじめ決められた参照値に対する前記miRNAの測定されたレベルの減少が、前記患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルの指標となる、請求項37または38に記載の方法。前記少なくとも1種のmiRNAが、hsa-miR-204、hsa-miR-199b-5p、hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-143、およびhsa-miR-195から選択される、請求項39に記載の方法。前記コントロールサンプル中の前記miRNAのレベルまたは前記あらかじめ決められた参照値に対する前記miRNAの測定されたレベルの増加が、前記患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルの指標となる、請求項37または38に記載の方法。前記少なくとも1種のmiRNAが、hsa-miR-16、hsa-miR-223、hsa-miR-320、hsa-miR-150、hsa-miR-378、hsa-miR-92a、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-133a、hsa-miR-22、hsa-miR-21、hsa-miR-210、hsa-miR-20b、hsa-miR-499、hsa-miR-378、hsa-miR-106b、hsa-miR-155、およびhsa-miR-93から選択される、請求項41に記載の方法。前記生物学的サンプルが血漿または血清である、請求項35に記載の方法。生物学的サンプル中の表1から選択される少なくとも1種のmiRNAを測定するための試薬と、患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルを予測または評価するために前記少なくとも1種のmiRNAを測定するための説明書と、を含むキット。前記試薬が、hsa-miR-204、hsa-miR-199b-5p、hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-143、hsa-miR-195、hsa-miR-16、hsa-miR-223、hsa-miR-320、hsa-miR-150、hsa-miR-378、hsa-miR-92a、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-133a、hsa-miR-22、hsa-miR-21、hsa-miR-210、hsa-miR-20b、hsa-miR-499、hsa-miR-378、hsa-miR-106b、hsa-miR-155、およびhsa-miR-93から選択されるmiRNAを逆転写または増幅するためのmiRNA特異的プライマーを含む、請求項44に記載のキット。心不全の患者を治療する方法であって、前記患者が、高レベルまたは低レベルの表1に列挙された1種以上のmiRNAを有し、前記方法が、miR-208a阻害剤またはmiR-208b阻害剤を前記患者に投与することを含む、方法。前記患者が、高レベルのmiR-223、miR-16、miR-93、miR-106b、および/またはmiR-423-5pを有する、請求項46に記載の方法。miR-223、miR-16、miR-93、miR-106b、および/またはmiR-423-5pのレベルが、心不全の治療前に決定される、請求項46に記載の方法。miR-19bのレベルが、治療の過程で少なくとも1回モニターされる、請求項46~48のいずれか一項に記載の方法。発明の概要本発明は、心臓障害を治療するための治療的介入の有効性を評価またはモニターする方法を提供する。そのような方法は、治療的介入を受けた患者からの生物学的サンプル中の少なくとも1種のmiRNAのレベルを測定もしくは検出することまたは一群のmiRNAを検出することを含む。いくつかの実施態様において、生物学的サンプル中の少なくとも1種のmiRNAのレベルは、参照レベルまたはコントロールサンプル中の少なくとも1種のmiRNAの測定レベルと比較される。前記少なくとも1種のmiRNAの測定レベルは、治療的介入の治療有効性の指標となる。いくつかの場合には、miRNAのレベルの増加または減少は、治療的介入の有効性の指標となる。いくつかの実施態様において、少なくとも1種のmiRNAは、表2~4のいずれかに列挙されたmiRNAから選択される。いくつかの実施態様において、表2~4からの複数のmiRNAは、治療を評価またはモニターするために、測定されて参照レベルまたはコントロールサンプル中のレベルと比較される。患者サンプル中の一群のmiRNAを決定する場合、患者サンプルは、分類アルゴリズムに基いて有効介入または非有効介入の指標として分類され得る。いくつかの実施態様において、治療的介入は、miR-208aおよび/もしくはmiR-208bを標的とする化学修飾アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは標準治療剤、たとえば、アンギオテンシン変換酵素ACE阻害剤である。測定miRNAレベルに基づいて、治療は、継続してもよく、あるいはたとえば、用量もしくは投与頻度の変化により、または他の活性剤の追加により、または治療レジメン全体の変化により、変更してもよい。いくつかの実施態様において、治療前または治療レジメン初期に患者から採取したサンプルを基準にした少なくとも1種のmiRNAの測定レベルの変化は、治療的介入の治療有効性の指標となる。いくつかの実施態様において、心臓障害は、心筋梗塞、病的心肥大、心不全、または高血圧である。本発明はまた、治療的介入を受けた患者からの生物学的サンプル中の少なくとも1種のmiRNAのレベルを検出することと、前記生物学的サンプル中の少なくとも1種のmiRNAのレベルの増加または減少に基づいて治療レジメンを変更することと、を含む治療物質の治療レジメンを変更する方法を提供する。本発明はさらに、患者の生物学的サンプル中の少なくとも1種のmiRNAのレベルを決定することと、少なくとも1種のmiRNAのレベルの増加または減少に基づいて有効性の決定を提供するエンティティーに少なくとも1種のmiRNAのレベルを提供することと、を含む、心臓障害を治療するための治療的介入の有効性を評価またはモニターするのに有用な情報を提供する方法を提供する。本発明はまた、患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルを予測または評価する方法を包含する。一実施態様において、本方法は、患者からの生物学的サンプル中の表1から選択される少なくとも1種のmiRNAのレベルを測定することと、測定されたレベルを参照レベルまたはコントロールサンプル中の前記少なくとも1種のmiRNAのレベルと比較することと、を含み、前記少なくとも1種のmiRNAの測定されたレベルは、患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルの指標となる。いくつかの実施態様において、miRNAのレベルの増加または減少は、患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルの指標となる。さらに他の態様において、本発明は、心不全の患者を治療する方法を提供する。ただし、この患者は、miR-223、miR-16、miR-93、miR-106b、および/またはmiR-423-5pあるいは表1に列挙されたアップレギュレートまたはダウンレギュレートされるマーカーの他の組合せたとえば、少なくとも2種の組合せの1つ以上がレベルたとえば、血清中または血漿中のレベルの上昇を有する。この態様によれば、患者は、従来の治療剤たとえばACE阻害剤を用いて、または本明細書に記載のanti-miR治療戦略たとえばanti-miR-208bを用いて、心不全の治療を受ける。miR-223、miR-16、miR-93、miR-106b、および/またはmiR-423-5pのレベルは、治療前および/またはレジメンの有効性をモニターするために治療中に決定し得る。いくつかの実施態様において、治療剤はanti-miR-208bであり、miR-19bまたは表2~4の1つ以上に列挙されたマーカーの組合せのレベルが治療中にモニターされる。本発明の他の態様は、生物学的サンプル中の少なくとも1種のmiRNAを測定するための試薬と、少なくとも1種のmiRNAを測定するための説明書と、少なくとも1種のmiRNAのレベルに基づいて患者における心臓障害を治療するための治療的介入の有効性を評価またはモニターするための説明書と、を含むキットである。いくつかの実施態様において、キットは、表2~4からの少なくとも1、2、3種、またはそれ以上を含めて2~約20種のヒトmiRNAを測定するための試薬を含有する。対象の心不全の重症度または進行を評価または予測するためのキットは、生物学的サンプル中の少なくとも1種のmiRNAを測定するための試薬と、少なくとも1種のmiRNAのレベルに基づいて心不全の重症度または進行を評価するための説明書と、を含み得る。これもまた、本発明に含まれる。いくつかの実施態様において、キット試薬は、本明細書に記載の1種以上のmiRNAを逆転写、増幅、および/またはハイブリダイズするためのmiRNA特異的プライマーおよび/またはプローブを含む。そのようなキットは、1種以上の標準化コントロールおよび/またはキットの各miRNAに特異的なTaqManプローブをさらに含み得る。発明の詳細な説明本発明の方法は、部分的には、1種以上のmiRNAのレベルが、心臓障害に対する治療的介入の治療有効性の指標としてまたは心不全などの心臓障害の重症度もしくは疾患進行を評価する指標として使用可能であるという驚くべき発見に基づく。いくつかの実施態様において、本発明は、心臓障害を治療するための治療的介入の有効性を評価および/またはモニターする方法を提供する。この方法は、治療的介入を受けた患者からの生物学的サンプル中の少なくとも1種のmiRNAのレベルを測定する工程と、測定されたレベルを参照レベルまたはコントロールサンプル中の少なくとも1種のmiRNAのレベルと比較する工程と、を含み得る。少なくとも1種のmiRNAの測定されたレベルは、治療的介入の治療有効性の指標となる。ある種の実施態様において、本方法は、生物学的サンプル中の前記少なくとも1種のmiRNAの測定されたレベルに基づいて治療的介入を変更することをさらに含む。したがって、本発明の方法の一態様は、生物学的サンプル中の少なくとも1種のmiRNAのレベルの測定または検出を提供する。いくつかの実施態様において、レベルの測定または検出が行われるmicroRNAは、イントロンに埋め込まれたmiRNAである。いくつかの実施態様において、レベルの測定または検出が行われるmicroRNAは、心臓組織中で発現される。特定の実施態様において、レベルの測定が行われるmicroRNAは、表1~4のいずれか1つに列挙されたmicroRNAから選択される。ある種の実施態様において、表2~4のいずれか1つから選択される一群のmicroRNA中の各microRNAのレベルが測定される。たとえば、本方法のいくつかの実施態様において、表1~4の1つ以上から選択される2種以上、3種以上、4種以上、5種以上、10種以上、15種以上、20種以上、25種以上、30種以上、35種以上、40種以上、50種以上、60種以上、70種以上、80種以上、または90種以上のmicroRNAが測定される。特定の実施態様において、表4から選択される1種以上のmicroRNAまたは一群のmicroRNAのレベルが測定される。いくつかの実施態様において、20種未満、15種未満、10種未満、または5種未満の一群のmiRNAが試験され、この一群は、表1~4のいずれか1つからの1種、2種、3種、4種、または5種のmiRNAを含む。患者が心不全であると推測される場合および/または治療を必要とすると推測される場合、この一群は、表1に列挙されたmiRNAを含み得る。患者が心不全の治療を受けている場合、この一群は、表2、3、または4から選択されるmiRNAを含み得る。サンプル中のマイクロRNA量の測定または検出は、当業者に公知の任意の方法で実施可能であり、miRNAのレベルを測定または検出する技術は、周知であり、容易に利用可能である。miRNAを検出するための種々の方法は、記載されており、ノーザンブロッティング法、マイクロアレイ法、電気化学的方法miRNAにライゲートされたナノ粒子の酸化、生物発光法、生物発光タンパク質再集合法、BRETに基づく方法BRET:生物発光共鳴エネルギー移動、RT-PCR法、蛍光相関分光法、および表面増強ラマン分光法を含むたとえば、CissellAandDeoSKTrendsinmicroRNAdetectionAnalBioanalChenx39411091116を参照されたい。その全体について参照により本明細書に援用する。また、定量的逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応を用いてmicroRNAの検出および定量に使用し得るAmbionUSAから入手可能なqRTPCRmiRNADetectionKitなどの市販のキットが存在する。成熟miRNAの短い長さを補償するために標的特異的ステムループ逆転写プライマーを利用するTaqManMicroRNAAssaysもまた、AppliedBiosystemsLifeTechnologiesIncUSAから入手可能である。OriGeneIncから市販されているqSTARMicroRNADetectionAssaysを使用することも可能である。18ヌクレオチド以上のmiRNAを単離するために、QiagenUSAから入手可能なPAXgeneBloodmiRNAKitこれはシリカベースのRNA精製技術を使用するなどの他の市販のキットを利用することが可能である。miRNAおよびmRNAをcDNAに変換し、SYBRGreenベースのリアルタイムPCRを用いてmiRNAの検出を可能にする三成分系のmiScriptPCRSystemは、単一のサンプルから成熟miRNA、前駆体miRNA、およびmRNAのすべてを定量すべく利用可能である同様にQiagenUSAから入手可能。GeneCopoeiaは、miRNAの定量のためにSYBRGreenと組み合わされたRT-PCRの使用に基づく市販のキットGeneCopoeiaIncUSAから入手可能なAllinOneから入手可能なmirVANAは、低分子RNAを単離すべくガラス繊維フィルターGFFベースの方法を利用する。また、miRNAを検出する方法は、ハイブリダイゼーションに基づく技術プラットフォームおよび複数のmicroRNAの同時検出を可能にする大規模並列次世代低分子RNA配列決定法を含み得る。ハイブリダイゼーションに基づく市販の技術の1つは、標識分岐DNAにより提供されるシグナル増幅を用いたサンドイッチハイブリダイゼーションアッセイを利用するPanomics。ハイブリダイゼーションに基づく他の技術は、NanostringTechnologynCountermiRNAExpressionAssayから入手可能であり、この場合、蛍光標識配列タグを用いて複数のmiRNA配列が検出および識別される。次世代配列決定法の例は、LifeTechnologiesSOLiDプラットフォームおよびIlluminaIncから入手可能である。また、miRNAは、低分子RNA分子を単離するための当技術分野で記載される方法により単離可能であるたとえば、米国特許出願公開第20100291580号、米国特許出願公開第20100222564号、米国特許出願公開第20060019258号、米国特許出願公開第20110054009号、および米国特許出願公開第20090023149号を参照されたい。これらはすべて、その全体について参照により本明細書に援用する。。サンプルからmiRNAを単離する他の方法は、次の工程、すなわち、amiRNAを有するサンプルを取得する工程、b抽出溶液をサンプルに添加する工程、c抽出されたサンプルにアルコール溶液を添加する工程、dサンプルを無機またはポリマーの担体に適用する工程、およびeイオン溶液を用いてmiRNAを含むRNAを無機担体またはポリマー担体から溶出させる工程を含む方法を利用することを含む。サンプルからmiRNA分子を単離する他の手順は、aアルコール溶液をサンプルに添加すること、bサンプルを無機またはポリマーの固体担体に適用すること、cイオン溶液を用いてmiRNA分子を担体から溶出させること、およびdmiRNA分子を使用または特性解析することを含み得る。米国特許出願公開第20100222564号を参照されたい。その全体について参照により本明細書に援用する。miRNAはまた、mRNAからmiRNAを分離することを含む方法、たとえば、米国特許出願公開第20060019258号その全体について参照により本明細書に援用するに記載の方法により単離することが可能である。この方法は、a5’キャップ構造を有するmRNAと5’リン酸を有する低分子RNAとを含む生物学的単離物を提供する工程、b標識部分が5’キャップ構造よりも5’リン酸に優先的に付加されて標識された低分子RNAを生成する条件下で、標識部分を有するリン酸反応性試薬に単離物を接触させる工程、およびc標識の存在により低分子RNAをmRNAと識別する工程を含む。microRNAを単離および/または定量する方法の例は、microRNAの少なくとも一部を蛍光核酸蛍光プローブとハイブリダイズさせること、ハイブリダイズされたmicroRNAを蛍光試薬と反応させて、ハイブリダイズされたmicroRNAが蛍光を発するようにすること、またはmicroRNAの少なくとも一部を放射性標識された相補的核酸にハイブリダイズさせること、を含み得るが、これらに限定されるものではない。miRNAの蛍光標識および検出のための市販の製品が存在する。NCodemiRNARapidLabelingSystemおよびNCodeRapidAlexaFluor3miRNALabelingSystemは両方とも、LifeTechnologiesIncから市販されている。さらに、蛍光標識は、市販されており、AlexaFluor3、AlexaFluor5、AlexaFluor350、AlexaFluor405、AlexaFluor430、AlexaFluor488、AlexaFluor500、AlexaFluor514、AlexaFluor532、AlexaFluor546、AlexaFluor555、AlexaFluor568、AlexaFluor594、AlexaFluor610、AlexaFluor633、AlexaFluor647、AlexaFluor660、AlexaFluor680、AlexaFluor700、およびAlexaFluor750を含む、LifeTechnologiesIncから入手可能なMolecularProbesAlexaFlour染料を含み得る。Cy2、Cy3、Cy3B、Cy35、Cy5、Cy55、およびCy7を含むLumiprobesCy染料。DyLight350、DyLight405、DyLight488、DyLight550、DyLight594、DyLight633、DyLight650、DyLight680、DyLight750、およびDyLight800を含む、ThermoScientificから入手可能なDyLightフルオロフォア。FluoProbesは、FluoProbes390、FluoProbes488、FluoProbes532、FluoProbes547H、FluoProbes594、FluoProbes647H、FluoProbes682、FluoProbes752、およびFluoProbes782を含む。また、ロックド核酸プローブを利用することも可能である。たとえば、miRCURYLNAmicroRNAISHOptimizationKitsは、microRNAの検出を提供する。このキットは、insituハイブリダイゼーションに使用可能なdoubleDIGlabeledmiRCURYLNAから市販されている。いくつかの実施態様において、miRNAを検出するためのプローブは、一本鎖デオキシリボ核酸分子、一本鎖リボ核酸分子、一本鎖ペプチド核酸PNA、または一本鎖ロックド核酸LNAを含めて、一本鎖分子を含み得る。いくつかの実施態様において、プローブは、プローブがmiRNAを検出し得るように、実質的に相補的であり、たとえば、検出されるmiRNAの相補体に対して80、85、90、95、96、97、9899、または100の同一性である。いくつかの実施態様において、プローブは、プローブがmiRNAの相補体を検出し得るように、miRNAに実質的に同一、すなわち、miRNAに対して80、85、90、95、96、97、98、99、または100の同一性である。いくつかの場合には、プローブは、少なくとも5ヌクレオチド、少なくとも10ヌクレオチド、少なくとも15ヌクレオチド、少なくとも20ヌクレオチド、少なくとも25ヌクレオチド、少なくとも30ヌクレオチド、または少なくとも40ヌクレオチドである。いくつかの場合には、プローブは、25ヌクレオチド以下、35ヌクレオチド以下、50ヌクレオチド以下、75ヌクレオチド以下、100ヌクレオチド以下、または125ヌクレオチド以下の長さであり得る。いくつかの実施態様において、プローブは、miRNAの少なくとも5連続ヌクレオチド、たとえば、少なくとも6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、20、21、および22、またはそれ以上の連続ヌクレオチドに実質的に相補的または実質的に同一である。いくつかの実施態様において、プローブは、5~20、5~25、5~50、50~100、または100超の連続ヌクレオチド長であり得る。いくつかの好ましい実施態様において、miRNAを検出する方法は、リアルタイムPCR法、miRNATaqmanアレイカード法、およびノーザンブロット分析法を含む。いくつかの実施態様において、検出されるmiRNAは、hsa-miR-542-3p、hsa-miR-185、hsa-miR-199a-5p、hsa-miR-20b、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-451、hsa-miR-140-5p、hsa-miR-93、hsa-miR-27a、hsa-miR-365、hsa-miR-148a、hsa-miR-20a、hsa-miR-133a、hsa-miR-106b、hsa-miR-16、hsa-miR-18a、hsa-miR-26b、hsa-miR-192、hsa-miR-320a、hsa-miR-223、hsa-miR-744、hsa-miR-301a、hsa-miR-188-5p、hsa-miR-195、hsa-miR-122、hsa-miR-197、hsa-miR-125b-5p、hsa-miR-486-5p、hsa-miR-484、hsa-miR-184、hsa-miR-17、hsa-miR-324-5p、hsa-miR-182、hsa-miR-181c、hsa-miR-29c、hsa-miR-25、hsa-miR-218、hsa-miR-30a、hsa-miR-30b、hsa-miR-92a、hsa-miR-340-5p、hsa-miR-27b、hsa-miR-24、hsa-miR-103a、hsa-miR-203、hsa-miR-222、hsa-miR-101a、hsa-let-7b、hsa-miR-335-5p、hsa-miR-142-3p、hsa-miR-296-5p、hsa-miR-125a-3p、hsa-miR-196b、hsa-miR-143、hsa-miR-28、hsa-miR-107、hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-204、hsa-miR-19b、hsa-miR-199a-3p、hsa-let-7g、hsa-miR-181a、hsa-miR-449a、hsa-miR-29b、hsa-miR-487b、hsa-miR-99b、hsa-miR-130a、hsa-miR-574-3p、hsa-miR-339-5p、hsa-miR-302a、hsa-miR-145、hsa-miR-152、hsa-miR-126-5pmiR-126、hsa-miR-142-5p、hsa-let-7d、hsa-miR-19a、hsa-miR-340-3p、hsa-miR-186、hsa-miR-128a、hsa-miR-155、hsa-miR-532-3p、hsa-let-7e、hsa-miR-187、hsa-miR-214、hsa-let-7c、hsa-miR-331-3p、hsa-miR-31、hsa-miR-26a、hsa-miR-30c、hsa-miR-375、hsa-miR-29a、hsa-miR-30d、hsa-miR-126、hsa-miR-130b、hsa-miR-191、hsa-miR-146a、hsa-miR-342-3p、hsa-miR-139-5p、hsa-miR-138、hsa-miR-324-3p、hsa-miR-30e、またはそれらの組合せを含む。他の実施態様において、検出されるmiRNAは、hsa-miR-16、hsa-miR-320、hsa-miR-223、hsa-miR-93、hsa-miR-106b、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-185、hsa-miR-92a、hsa-miR-210、hsa-miR-140、hsa-miR-27a、hsa-miR-20b、hsa-miR-150、hsa-miR-20a、hsa-miR-378、hsa-miR-22、hsa-miR-21、hsa-miR-378、hsa-miR-122、hsa-miR-126、hsa-miR-133a、hsa-miR-499、hsa-miR-19b、hsa-miR-199b-5p、hsa-miR-204、hsa-miR-145、hsa-miR-195、hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-143、hsa-miR-214、またはそれらの任意の組合せを含む。さらに他の実施態様において、検出されるmiRNAは、miR-423-5p、miR-106b、miR-16、miR-92a、miR-378、miR-210、miR-378、miR-20b、miR-93、miR-19b、miR-223、miR-21、miR-150、またはそれらの組合せを含む。心臓障害に対する治療的介入の治療有効性の指標として使用するために、miRNAのレベルを決定しなければならない。患者サンプル中のmicroRNAの量は、心臓障害たとえば心不全の患者または健常集団たとえば、そのそれぞれは参照レベルとして参照され得るに存在するmicroRNAの標準量と比較することが可能である。他の実施態様において、レベルは、コントロールサンプル心臓障害対象からでないサンプル中のmicroRNAの量と比較され、または治療的介入による治療前の患者から採取されたサンプル中もしくは未治療患者から採取されたサンプル中のmicroRNAの量と比較される。microRNAの標準レベルは、あらかじめ決められた参照値または閾値を得るために、正常な健常コントロール対象から取得した十分に多数のサンプル中のmicroRNAのレベルを決定することにより、決定可能である。本明細書で用いられる場合、参照値とは、既知のサンプルから確認されたmiRNAのレベルまたは濃度のあらかじめ決められた値を意味する。標準レベルはまた、治療的介入による治療前の患者からのサンプル中のmicroRNAのレベルを決定することにより、決定することも可能である。さらに、標準レベルの情報および標準レベルの決定方法は、公用データベースさらには他の供給源から取得可能である。たとえば、BunkDMReferenceMaterialsandReferenceMeasurementProceduresAnOverviewfromaNationalMetrologyInstituteClinBiochemRev28131137、およびRemingtonTheScienceandPracticeofPharmacyTwentyFirstEditionを参照されたい。。いくつかの実施態様において、サンプル中に通常は存在しない既知量の他のmiRNAをサンプルに添加しすなわち、サンプルを既知量の外因性miRNAでスパイクし、スパイクされたmiRNAの既知量に基づいて、目標の1種以上のmiRNAのレベルを計算する。1種以上のmiRNAの測定されたレベルと、参照量またはコントロールサンプル中の1種以上のmiRNAのレベルと、の比較は、当業者に公知の任意の方法により実施可能である。たとえば、サンプル中のmicroRNAの量と標準量との比較は、5SrRNAまたはスパイクされたmiRNAとサンプル中のmiRNAとの比を、5SrRNAまたはスパイクされたmiRNAとコントロールサンプル中のmiRNAとの発表されたまたは既知の比と比較することを含む。microRNAの量をコントロールと比較する場合、コントロールサンプルは、心臓障害に罹患していないことがわかっている任意の供給源から取得可能である。治療的介入が施された後の患者から採取されたサンプル中のmiRNAのレベルはまた、治療的介入の施行前の患者から採取されたサンプル中のmiRNAのレベルと比較することも可能である。本発明によれば、いくつかの実施態様において、コントロールサンプルたとえば、治療前の患者もしくは未治療の患者のサンプル中のmiRNAのレベルまたはあらかじめ決められた参照値に対するmiRNAの測定されたレベルの差増加または減少は、治療的介入の治療有効性の指標となる。いくつかの実施態様において、コントロールサンプル中のmiRNAのレベルまたはあらかじめ決められた参照値に対するmiRNAの測定されたレベルの増加は、治療的介入の治療有効性の指標となる。たとえば、そのような実施態様において、表3または4に列挙されたmiRNAから選択される1種以上のmiRNAのレベルが、治療的介入に応答してコントロールサンプル中のレベルまたはあらかじめ決められた参照値と比較して増加した場合、増加は、治療的介入の治療有効性の指標となる。ある種の実施態様において、hsa-miR-19b、hsa-miR-199b-5p、hsa-miR-204、hsa-miR-145、hsa-miR-195、hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-143、およびhsa-miR-214から選択される1種以上のmiRNAのレベルが、治療的介入に応答してコントロールサンプル中のレベルまたはあらかじめ決められた参照値と比較して増加した場合、増加は、治療的介入の治療有効性の指標となる。本発明によれば、いくつかの実施態様において、コントロールサンプルたとえば、治療前の患者もしくは未治療の患者のサンプル中のmiRNAのレベルまたはあらかじめ決められた参照値に対するmiRNAの測定されたレベルの低下または減少は、治療的介入の治療有効性の指標となる。たとえば、そのような実施態様において、表2または4に列挙されたmiRNAから選択される1種以上のmiRNAのレベルが、治療的介入に応答してコントロールサンプル中のレベルまたはあらかじめ決められた参照値と比較して減少した場合、減少は、治療的介入の治療有効性の指標となる。ある種の実施態様において、hsa-miR-16、hsa-miR-320、hsa-miR-223、hsa-miR-93、hsa-miR-106b、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-185、hsa-miR-92a、hsa-miR-210、hsa-miR-140、hsa-miR-27a、hsa-miR-20b、hsamiR-150、hsa-miR-20a、hsa-miR-378、hsa-miR-22、hsa-miR-21、hsa-miR-378、hsa-miR-122、hsa-miR-126、hsa-miR-133a、およびhsa-miR-499から選択される1種以上のmiRNAのレベルが、治療的介入に応答してコントロールサンプル中のレベルまたはあらかじめ決められた参照値と比較して減少した場合、減少は、治療的介入の治療有効性の指標となる。サンプリング法は、当業者に周知であり、いかなるタイプの生物学的サンプルを取得するためのいかなる適合技術も、可能と考えられ、本発明の方法で利用可能である。たとえば、ClinicalProteolyticsMethodsandProtocolsVol428inMethodsinMolecularBiologyEdAntoniaVlahouを参照されたい。サンプルは、miRNAが単離され得る任意の生物学的サンプルを含み得る。そのようなサンプルは、血清、血液、血漿、全血、およびそれらの派生物、心臓組織、皮膚、毛髪、毛嚢、唾液、口腔粘液、膣粘液、汗、涙、上皮組織、尿、精液、精漿、前立腺液、射精前液カウパー液、排泄物、生検試料、腹水、脳脊髄液、リンパ液、心臓組織、さらには他の組織抽出物サンプルまたは生検試料を含み得る。いくつかの実施態様において、生物学的サンプルは、血漿または血清である。他の実施態様において、生物学的サンプルは、心臓組織である。開示された方法で使用するための生物学的サンプルは、治療的介入開始後の任意の時点で患者から取得可能である。いくつかの実施態様において、サンプルは、治療的介入開始の少なくとも1、2、3、または6ヶ月後に取得される。いくつかの実施態様において、サンプルは、治療的介入開始の少なくとも1、2、3、4、6、または8週間後に取得される。いくつかの実施態様において、サンプルは、治療的介入開始の少なくとも1、2、3、4、5、6、または7日後に取得される。いくつかの実施態様において、サンプルは、治療的介入開始の少なくとも1時間、6時間、12時間、18時間、または24時間後に取得される。他の実施態様において、サンプルは、治療的介入開始の少なくとも1週間後に取得される。いくつかの実施態様において、表2~4のいずれか1つから選択される1種以上のmiRNAは、miRNAを標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドなどのmiRNAベースの治療剤たとえば、anti-miR治療剤の投与の1~8週間後に測定される。いくつかの実施態様において、miRNAの1種以上は、anti-miR治療の2~7週間後に血漿サンプルで測定される。いくつかの実施態様において、miRNAの1種以上は、anti-miR治療の1、2、3、4、5、6、7、または8週間後に血漿サンプルで測定される。いくつかの実施態様において、miRNAの1種以上は、anti-miR治療の7週間後に血漿サンプルで測定される。いくつかの実施態様において、miRNAの1種以上は、anti-miR治療の2週間後に血漿サンプルで測定される。本発明の方法により可能と考えられるmicroRNAを検出するために、分析用サンプルは、いくつかの実施態様において、約1ng~約100ngのRNAを含有し得る。いくつかの実施態様において、サンプルは、約10ng~約90ngのRNAを含有する。いくつかの実施態様において、サンプルは、約20ng~約80ngを含有する。本発明の方法により可能と考えられるmicroRNAを検出するために、分析用サンプルはまた、0.1~10μlの血漿中RNA等価物多量の血漿から精製されたRNAを含有し得る。いくつかの場合には、分析用サンプルは、0.5μl~5μlの血漿中RNA等価物多量の血漿から精製されたRNAを含有し得る。いくつかの場合には、分析用サンプルは、約0.1μl、0.5μl、1μl、2μl、3μl、4μl、5μl、6μl、7μl、8μl、9μl、または10μlの血漿中RNA等価物多量の血漿から精製されたRNAを含有し得る。本発明の方法はまた、治療的介入の治療レジメンを変更する方法を含み得る。そのような方法は、治療的介入を受けた患者からの生物学的サンプル中の少なくとも1種のmiRNA、たとえば、表2~4のいずれか1つに列挙された1種以上のmiRNAのレベルを検出することと、前記生物学的サンプル中の少なくとも1種のmiRNAのレベルの増加または減少に基づいて治療レジメンを変更することと、を含む。いくつかの実施態様において、本方法は、表2~4の1つ以上に列挙された2、3、4、5、10種、またはそれ以上のmiRNAたとえば、すべてのmiRNAを含むを検出することを含む。いくつかのそのような実施態様において、miRNAは、カスタマイズされた検出プラットフォームを用いて検出され、その際、表2~4のmiRNAを含めて、100種未満、50種未満、または25種未満のmiRNAが検出される。治療レジメンの変更は、治療的介入のタイプ、治療的介入の施行時の投与量、治療的介入の施行頻度、治療的介入の施行経路、さらには変化および/または改変することが医師に周知と思われる任意の他のパラメーターを変化および/または改変することを含み得るが、これらに限定されるものではない。たとえば、表2のmiRNAが治療中に減少するもしくは参照レベルに一致する場合およびまたは表3のmiRNAが治療中に増加するもしくは参照レベルに一致する場合、治療的介入は継続される。いくつかの実施態様において、表2のmiRNAが治療中に減少もせず参照レベルにも一致しない場合および/または表のmiRNAが治療中に増加もせず参照レベルにも一致しない場合、治療的介入は変更される。ある種の実施態様において、一群のmiRNAは、表1~4の1つから決定され、この一群は、分類アルゴリズムに基づいて分類される。たとえば、サンプルは、記載の閾値に基づいて、または1つの集団でもしくは1つの集団対他の集団で平均値および/もしくは中央値のmiRNAレベルに基づいて、分類可能であるたとえば、健常コントロール集団および心不全患者集団、または有効治療対無効治療に基づくレベル。2つ以上のクラス間または群間でサンプルを分類するための種々の分類方式が知られており、限定されるものではないが、これらには、主成分分析法、ナイーブベイズ法、サポートベクターマシン法、最近傍法、決定木法、ロジスティック法、人工ニューラルネットワーク法、ペナルティー付きロジスティック回帰法、およびルールベース方式が含まれる。それに加えて、複数のモデルからの予測を組み合わせて全体の予測を生成することが可能である。したがって、分類アルゴリズムまたはクラス予測は、サンプルが分類されるように組立て可能である。好適なクラス予測の作製プロセスは、RSimonDiagnosticandprognosticpredictionusinggeneexpressionprofilesinhighdimensionalmicroarraydataBritishJournalofCancer8915991604に概説されており、その概説はその全体について参照により本明細書に援用する。いくつかの実施態様において、少なくとも1種のmiRNAのレベルの増加または減少に関する情報は、治療的介入による治療の治療有効性を決定したり、さらには治療的介入の治療レジメンを調整したりするために使用可能である。いくつかの実施態様において、治療有効性は、治療的介入を継続するかを決定するために使用可能である。いくつかの実施態様において、治療有効性は、治療的介入を中断するかを決定するために使用可能である。いくつかの実施態様において、治療有効性は、治療的介入を改変するかを決定するために使用可能である。いくつかの実施態様において、治療有効性は、治療的介入の投与量を増加または減少させるかを決定するために使用可能である。いくつかの実施態様において、治療有効性は、治療的介入の投与頻度を変化させるかを決定するために使用可能である。いくつかの実施態様において、治療有効性は、治療的介入の施行の回数または頻度を変化させるかを決定するために使用可能である。いくつかの実施態様において、治療有効性は、1日あたり、1週間あたりの投与回数、1日間あたりの回数を変化させるかを決定するために使用可能である。いくつかの実施態様において、治療有効性は、投与量を変化させるかを決定するために使用可能である。本発明の方法はまた、心臓障害を治療するための治療的介入の有効性を評価またはモニターするのに有用な情報を提供する方法を提供する。この方法は、患者の生物学的サンプル中の少なくとも1種のmiRNA、たとえば、表2~4のいずれか1つに列挙された1種以上のmiRNAのレベルを決定することと、少なくとも1種のmiRNAのレベルの増加または減少に基づいて有効性の決定を提供するエンティティーに少なくとも1種のmiRNAのレベルを提供することと、を含み得る。治療有効性の指標となるという表現およびその変形表現は、治療的介入が患者に利点を提供することを決定する任意の方法を含み得る。治療有効性という用語およびその変形語は、一般的には、心臓障害に関連付けられる1つ以上の徴候または症状の軽減により表され、治療される心臓障害の1つ以上の徴候または症状の軽減は、当業者であれば容易に決定可能である。また、治療有効性とは、心臓障害に対する標準的な治療的介入に典型的に関連付けられる毒性の徴候および症状の予防または改善をも意味し得る。治療有効性を決定する方法は、治療される心臓障害に特異的であってもよく、治療が心臓障害患者に有益な効果を提供することを決定する当技術分野で周知の任意の方法を含み得る。たとえば、治療有効性の証拠は、対象の心臓肥大、心不全、もしくは心筋梗塞の1つ以上の症状の改善もしくは軽減、または心臓肥大から心不全への移行の遅延を含み得るが、これらに限定されるものではない。1つ以上の改善または軽減される症状は、たとえば、運動能力増加、心駆出量増加、左室拡張末期圧低下、肺毛細血管楔入圧低下、心拍出量増加、心係数増加、肺動脈圧低下、左室の収縮末期および拡張末期の大きさの減少、心臓線維化減少、心筋中のコラーゲン堆積減少、左右室壁ストレス減少、壁張力低下、生活の質の向上、および疾患関連の罹患率または死亡率の低下を含み得る。さらに、治療有効性はまた、患者の全身の健康状態の全体的改善、たとえば、患者の生活の質の向上、予測生存率の増加、抑鬱症の減少、または適応症の再発率の減少を含み得るが、これらに限定されるものではない。たとえば、PhysiciansDeskReferenceを参照されたい。治療的介入の有効性はまた、対照の心臓肥大、心不全、もしくは心筋梗塞の1つ以上の症状の改善、または心臓肥大から心不全への移行の遅延のために、評価またはモニターすることを含み得る。1つ以上の改善される症状は、たとえば、運動能力増加、心駆出量増加、左室拡張末期圧低下、肺毛細血管楔入圧低下、心拍出量増加、心係数増加、肺動脈圧低下、左室の収縮末期および拡張末期の大きさの減少、心臓線維化減少、心筋中のコラーゲン堆積減少、左右室壁ストレス減少、壁張力低下、生活の質の向上、および疾患関連の罹患率または死亡率の低下を含み得る。いくつかの実施態様において、血漿中miRNAたとえば、表2~4に列挙されたmiRNAのいずれかの測定されたレベルは、治療的介入の有効性のサロゲートマーカーとして機能する。本明細書に記載の組成物のいずれかは、キットに含まれ得る。一実施態様において、キットは、生物学的サンプル中の表2~4のいずれか1つから選択される少なくとも1種のmiRNAを測定するための試薬と、少なくとも1種のmiRNAを測定するための説明書と、少なくとも1種のmiRNAのレベルに基づいて患者における心臓障害を治療するための治療的介入の有効性を評価またはモニターするための説明書と、を含有する。いくつかの実施態様において、キットは、表2もしくは3の1つまたは表2および3から合計で、少なくとも2、3、4、5、10、または20種のmiRNAまたはそれ以上のレベルを測定するための試薬を含有する。いくつかの実施態様において、キットは、心不全に対する治療の有効性を決定するようにカスタマイズされ、その際、表2および3のmiRNAを含めて、50種以下、40種以下、30種以下、または25種以下のmiRNAを決定するための試薬を提供する。いくつかの実施態様において、キットは、hsa-miR-16、hsa-miR-320、hsa-miR-223、hsa-miR-93、hsa-miR-106b、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-185、hsa-miR-92a、hsa-miR-210、hsa-miR-140、hsa-miR-27a、hsa-miR-20b、hsa-miR-150、hsa-miR-20a、hsa-miR-378、hsa-miR-22、hsa-miR-21、hsa-miR-378、hsa-miR-122、hsa-miR-126、hsa-miR-133a、hsa-miR-499、hsa-miR-19b、hsa-miR-199b-5p、hsa-miR-204、hsa-miR-145、hsa-miR-195、hsa-miR-125-5p、hsa-miR-143、およびhsa-miR-214から選択される1種以上のmiRNAを測定するための試薬と、これらのmiRNAの1つ以上を測定するための説明書と、これらのmiRNAの1つ以上のレベルに基づいて患者における心臓障害を治療するための治療的介入の有効性を評価またはモニターするための説明書と、を含有する。特定の実施態様において、キットは、miR-423-5p、miR-106b、miR-16、miR-92a、miR-378、miR-210、miR-378、miR-20b、miR-93、miR-19b、miR-223、miR-21、miR-150から選択される1種以上のmiRNAを測定するための試薬と、これらのmiRNAの1つ以上を測定するための説明書と、これらのmiRNAの1つ以上のレベルに基づいて患者における心臓障害を治療するための治療的介入の有効性を評価またはモニターするための説明書と、を含有する。いくつかの実施態様において、キットは、hsa-miR-16、hsa-miR-320、hsa-miR-223、hsa-miR-93、hsa-miR-106b、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-185、hsa-miR-92a、hsa-miR-210、hsa-miR-140、hsa-miR-27a、hsa-miR-20b、hsa-miR-150、hsa-miR-20a、hsa-miR-378、hsa-miR-22、hsa-miR-21、hsa-miR-378、hsa-miR-122、hsa-miR-126、hsa-miR-133a、hsa-miR-499、hsa-miR-19b、hsa-miR-199b-5p、hsa-miR-204、hsa-miR-145、hsa-miR-195、hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-143、hsa-miR-214、およびそれらの組合せから選択されるmiRNAの逆転写または増幅のためのmiRNA特異的プライマーを含有する。いくつかの実施態様において、キットは、miRNAベースの治療剤の治療有効性の指標となる生物学的サンプル中の1種以上のmiRNAを測定するための試薬を含有する。たとえば、一実施態様において、キットは、生物学的サンプル中のmiR-19b、miR-223、miR-423-5p、miR-106b、miR-16、miR-92a、miR-378、miR-210、miR-378、miR-20bおよびmiR-93から選択される1種以上のmiRNAを測定するための試薬と、これらのmiRNAの1つ以上を測定するための説明書と、これらのmiRNAの1つ以上のレベルに基づいて患者における心臓障害を治療するためのmiR-208aおよび/またはmiR-208bを標的とする化学修飾アンチセンスオリゴヌクレオチドの有効性を評価またはモニターするための説明書と、を含有する。いくつかの実施態様において、キットは、表2もしくは3の1つまたはまとめて表2および3から少なくとも2、3、4、5、10、または20種のmiRNAまたはそれ以上のレベルを測定するための試薬を含有する。いくつかの実施態様において、キットは、心不全に対する治療の有効性を決定するようにカスタマイズされ、その際、表2および3のmiRNAを含めて、50種以下、40種以下、30種以下、または25種以下のmiRNAを決定するための試薬を提供する。他の実施態様において、キットは、アンギオテンシン変換酵素ACE阻害剤などの標準治療剤の治療有効性の指標となる生物学的サンプル中の1種以上のmiRNAを測定するための試薬を含有する。たとえば、一実施態様において、キットは、生物学的サンプル中のmiR-150、miR-21、miR-223、miR-423-5p、miR-106b、miR-16、miR-92a、miR-378、miR-210、miR-378、miR-20b、およびmiR-93から選択される1種以上のmiRNAを測定するための試薬と、これらのmiRNAの1つ以上を測定するための説明書と、これらのmiRNAの1つ以上のレベルに基づいて患者における心臓障害を治療するためのACE阻害剤の有効性を評価またはモニターするための説明書と、を含有する。いくつかの実施態様において、キットは、表2もしくは3の1つまたは表2および3から合計で、少なくとも2、3、4、5、10、または20種のmiRNAまたはそれ以上のレベルを測定するための試薬を含有する。いくつかの実施態様において、キットは、心不全に対する治療の有効性を決定するようにカスタマイズされ、その際、表2および3のmiRNAを含めて、50種以下、40種以下、30種以下、または25種以下のmiRNAを決定するための試薬を提供する。いくつかの実施態様において、キットは、1種以上の標準化コントロールをさらに含有し得る。いくつかの他の実施態様において、1種以上の標準化コントロールは、サンプルまたは反応にスパイクするための1種以上の個別の試薬として提供される。標準化コントロールは、約0.1fmol~約5molの範囲内で添加可能である。いくつかの実施態様において、標準化コントロールは、約0.1fmol、0.5fmol、1fmol、2fmol、3fmol、4fmol、または5fmolで添加される。いくつかの実施態様において、少なくとも1種の標準化コントロールは、非内因性のRNAもしくはmiRNAまたはサンプル中で発現されないmiRNAである。いくつかの実施態様において、少なくとも1種の標準化コントロールは、C.エレガンスC.elegansmiRNAである。いくつかの実施態様において、少なくとも1種の標準化コントロールは、cel-miR-2、cel-lin-4、またはath-miR-159aである。いくつかの実施態様において、使用したC.エレガンス配列は、cel-miR-2UAUCACAGCCAGCUUUGAUGUGC、配列番号5、およびcel-lin-4UCCCUGAGACCUCAAGUGUGA、配列番号6であった。使用したath-miR159aの配列は、UUUGGAUUGAAGGGAGCUCUA、配列番号7であった。いくつかの実施態様において、キットは、キットの各miRNAに特異的なTaqManプローブをさらに含有し得る。いくつかの実施態様において、TaqManプローブは、hsa-miR-16、hsa-miR-320、hsa-miR-223、hsa-miR-93、hsa-miR-106b、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-185、hsa-miR-92a、hsa-miR-210、hsa-miR-140、hsa-miR-27a、hsa-miR-20b、hsa-miR-150、hsa-miR-20a、hsa-miR-378、hsa-miR-22、hsa-miR-21、hsa-miR-378、hsa-miR-122、hsa-miR-126、hsa-miR-133a、hsa-miR-499、hsa-miR-19b、hsa-miR-199b-5p、hsa-miR-204、hsa-miR-145、hsa-miR-195、hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-143、およびhsa-miR-214よりなる群から選択されるmiRNAに特異的である。いくつかの実施態様において、キットは、心臓障害の治療を受けた患者からの生物学的サンプルで使用可能と考えられる。さらなる実施態様において、生物学的サンプルは、心臓障害の治療を受けた患者から取得した血漿または血清である。そのほかのさらなる実施態様において、心臓障害は、心筋梗塞、病的心肥大、心不全、または高血圧である。キットの成分は、水性媒体または凍結乾燥形態のいずれかでパッケージ化し得る。キットの容器手段は、一般的には、成分を配置し得る、好ましくは好適に分注し得る、少なくとも1つのバイアル、試験管、フラスコ、瓶、シリンジ、または他の容器手段を含むであろう。キット中に1つ以上の成分が存在する場合、キットはまた、一般的には、追加成分を個別に配置し得る第2、第3、または他の追加容器を含有するであろうたとえば、無菌の薬学的に許容可能な緩衝液および/または他の希釈剤。しかしながら、成分の種々の組合せは、1つのバイアル中に含まれ得る。本発明のキットはまた、典型的には、核酸を収容するための手段および商業販売のために厳重に密閉された任意の他の試薬容器を含むであろう。そのような容器は、所望のバイアルが保持される射出成形またはブロー成形されたプラスチック容器を含み得る。キットの成分が1つおよび/または複数の液体溶液中に提供される場合、液体溶液は水性溶液であり、無菌水性溶液は特に好ましい。しかしながら、キットの成分は、乾燥粉末として提供され得る。試薬および/または成分が乾燥粉末として提供される場合、粉末は、好適な溶媒の添加により再構成可能である。溶媒はまた、他の容器手段中に提供し得ると考えられる。そのようなキットはまた、試薬を保存もしくは維持するまたは分解から保護する成分を含み得る。そのような成分は、DNAseフリー、RNAseフリーであってもよく、またはヌクレアーゼたとえば、RNAseおよびDNAseから保護されていてもよい。そのようなキットは、一般的には、好適な手段で、それぞれ個々の試薬または溶液に対して個別の容器を含むであろう。キットはまた、キット成分の利用さらにはキットに含まれない他のいずれかの試薬の使用のための説明書を含むであろう。説明書は、実施可能な変形態様を含み得る。そのような試薬は、本発明のキットの実施態様であると考えられる。しかしながら、そのようなキットは、以上に規定された特定の項目に限定されるものではなく、miRNAの操作または特性解析に使用される任意の試薬を含み得る。本発明の治療的介入は、心臓障害を治療するために使用される治療剤の任意の組合せを含み得る。例としては、miRNAベースの治療剤アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む、抗高リポタンパク血症剤、抗動脈硬化剤、抗血栓剤/フィブリン溶解剤、血液凝固剤、抗不整脈剤、抗高血圧剤、昇圧剤、鬱血性心不全治療剤、抗狭心症剤、抗細菌剤、またはそれらの組合せを含み得るが、これらに限定されるものではない。たとえば、米国特許出願公開第2010/0317713号を参照されたい。その全体について参照により本明細書に援用する。いくつかの実施態様において、治療的介入は、miRNAベースの治療剤である。いくつかの実施態様において、miRNAベースの治療剤は、アンチセンスオリゴヌクレオチドである。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、リボヌクレオチドであってもデオキシリボヌクレオチドであってもよい。いくつかの実施態様において、miRNAベースの治療剤は、心臓組織で発現されるmiRNAを標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドである。いくつかの実施態様において、治療的介入は、miR-208aおよび/またはmiR-208bを標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドである。ある種のそのような実施態様において、コントロールサンプル中のmiRNAのレベルまたはあらかじめ決められた参照値に対するmiRNAの測定されたレベルの変化は、心臓組織中のmiR-208aおよび/またはmiR-208bの発現の減少の指標となる。そのような実施態様において、コントロールサンプル中の前記1種以上のmiRNAのレベルまたはあらかじめ決められた参照値と比較される、miR-19b、miR-223、miR-423-5p、miR-106b、miR-16、miR-92a、miR-378、miR-210、miR-378、miR-20b、およびmiR-93から選択される1種以上のmiRNAのレベルは、miR-208aおよび/またはmiR-208bを標的とする化学修飾アンチセンスオリゴヌクレオチドの治療有効性の指標となる。特定の一実施態様において、コントロールサンプル中のmiR-19bおよび/またはmiR-223のレベルまたはあらかじめ決められた参照値と比較されるmiR-19bおよび/またはmiR-223のレベルは、miR-208aおよび/またはmiR-208bを標的とする化学修飾アンチセンスオリゴヌクレオチドの治療有効性の指標となる。ある種の実施態様において、コントロールサンプル中のmiR-19bのレベルまたはあらかじめ決められた参照値と比較されるmiR-19bのレベルの増加は、心臓組織中のmiR-208aおよび/またはmiR-208bの発現の減少の指標となる。他の実施態様において、コントロールサンプル中のmiR-223のレベルまたはあらかじめ決められた参照値と比較されるmiR-223のレベルの減少は、心臓組織中のmiR-208aおよび/またはmiR-208bの発現の減少の指標となる。好ましくは、アンチセンスオリゴヌクレオチド治療剤は、少なくとも1つの化学修飾を有するすなわち、オリゴヌクレオチドは化学修飾される。たとえば、好適なアンチセンスオリゴヌクレオチドは、1つ以上の配座拘束型または二環式の糖ヌクレオシド修飾、たとえばロックド核酸で構成され得る。いくつかの実施態様において、miRNAベースの治療剤は、化学修飾アンチセンスオリゴヌクレオチドである。いくつかの実施態様において、miRNAベースの治療剤は、心臓組織で発現されるmiRNAを標的とする化学修飾アンチセンスオリゴヌクレオチドである。いくつかの実施態様において、化学修飾アンチセンスオリゴヌクレオチドは、miR-208aおよび/またはmiR-208bを標的とする。miR-208aおよびmiR-208bmicroRNAは、国際公開第2008/016924号パンフレット、国際公開第2009/018492号パンフレット、および国際公開第2010/091204号パンフレットに記載されている。ヒトmiR-208aの配列をコードするpre-miRNAは、以下に配列番号8として示され、成熟miR-208a配列は、配列番号9において提供されるたとえば、米国特許出願公開2010/023234号その全体について参照により本明細書に援用するを参照されたい。。ヒトmiR-208bの配列をコードするpre-miRNAは、以下に配列番号10として示され、成熟miR-208b配列は、配列番号11に提供される。ヒトpre-miR-208a配列番号8ACGGGCGAGCTTTTGGCCCGGGTTATACCTGATGCTCACGTATAAGACGAGCAAAAAGCTTGTTGGTCAGA成熟miR-208a配列番号9AUAAGACGAGCAAAAAGCUUGUヒトpre-miR-208b配列番号10CCUCUCAGGGAAGCUUUUUGCUCGAAUUAUGUUUCUGAUCCGAAUAUAAGACGAACAAAAGGUUUGUCUGAGGGCAG成熟miR-208b配列番号11AUAAGACGAACAAAAGGUUUGUmiR-208a/miR-208bを標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドは、LNAまたは他の修飾ヌクレオチドと、リボヌクレオチドまたはデオキシリボヌクレオチドと、の組合せを含有し得る。あるいは、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、糖-リン酸骨格ではなくペプチド系骨格を含有するペプチド核酸PNAを含み得る。アンチセンスオリゴヌクレオチドが含有し得る他の化学修飾としては、糖修飾、たとえば、2’-O-アルキルたとえば、2’-O-メチル、2’-O-メトキシエチル、2’-フルオロ、および4’チオ修飾、ならびに骨格修飾、たとえば、1つ以上のホスホロチオエート、モルホリノまたはホスホノカルボキシレートリンケージたとえば、米国特許第6,693,187号および同第7,067,641号それらの全体について参照により本明細書に援用するを参照されたいが含まれるが、これらに限定されるものではない。たとえば、アンチセンスオリゴヌクレオチド、特定的には、より短い長さたとえば15ヌクレオチド未満のものは、1つ以上の親和性促進修飾、たとえば、LNA、二環式ヌクレオシド、ホスホノホルメート、2’Oアルキル修飾などを含み得るが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施態様において、好適なアンチセンスオリゴヌクレオチドは、5’末端および3’末端の両方に2’-O-メトキシエチル修飾リボヌクレオチドを含有し、その中心に少なくとも10デオキシリボヌクレオチドを有する2’-O-メトキシエチルギャップマーである。このギャップマーは、RNA標的のRNaseH依存的分解機序を開始可能である。安定性を向上させかつ有効性を改善するアンチセンスオリゴヌクレオチドの他の修飾、たとえば、米国特許第6,838,283号その全体について参照により本明細書に援用するに記載のものは、当技術分野で公知であり、本発明の方法で使用するのに好適である。miRNAの活性の抑制に有用な好ましいアンチセンスオリゴヌクレオチドは、約5~約50ヌクレオチド長、約10~約30ヌクレオチド長、または約20~約25ヌクレオチド長である。ある種の実施態様において、miR-208aおよび/またはmiR-208bを標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドは、約8~約18ヌクレオチド長であり、他の実施態様において、約12~約16ヌクレオチド長である。特定的には、miR-208aまたはmiR-208bに相補的な、すなわち、miRの5’末端から出発して成熟配列の3’末端まで、miR-208a中またはmiR-208b中の任意の連続配列に相補的な任意のantimir配列の、任意の8merまたはそれよりも長いものを使用し得る。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、いくつかの場合、成熟miRNA配列に少なくとも部分的に相補的な配列を含み得、たとえば、成熟miRNA配列に対して少なくとも約75、80、85、90、95、96、97、98、または99の相補性を有する。いくつかの実施態様において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、成熟miRNA配列に実質的に相補的であり得る。すなわち、標的ポリヌクレオチド配列に対して少なくとも約95、96、97、98、または99の相補性を有する。一実施態様において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、成熟miRNA配列に対して100の相補性を有する配列を含む。ロックド核酸LNAは、LNAを含有するオリゴヌクレオチドに高い熱安定性を付与するロックされたlockedコンフォメーションをもたらすリボース糖部分の2’および4’炭素間に追加の架橋を含有する修飾リボヌクレオチドである。LNAは、たとえば、米国特許第6,268,490号、米国特許第6,316,198号、米国特許第6,403,566号、米国特許第6,770,748号、米国特許第6,998,484号、米国特許第6,670,461号および米国特許第7,034,133号それらはすべて、その全体について参照により本明細書に援用するに記載されている。LNAは、ロックされたコンフォメーションをもたらすリボース糖部分の2’および4’炭素間の追加の架橋を含む修飾ヌクレオチドまたは修飾リボヌクレオチドである。本発明のオリゴヌクレオチドに導入可能な他の好適なロックドヌクレオチドは、米国特許第6,833,361号その全体を参照により本明細書に援用するに記載のものを含む。他の実施態様において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、アンタゴmirである。アンタゴmirとは、miRNA配列に少なくとも部分的に相補的な一本鎖化学修飾リボヌクレオチドのことである。アンタゴmirは、2’-O-メチル糖修飾などの1つ以上修飾ヌクレオチドを含み得る。いくつかの実施態様において、アンタゴmirは、修飾ヌクレオチドのみを含む。アンタゴmirはまた、部分的または完全なホスホロチオエート骨格を生じる1つ以上のホスホロチオエートリンケージを含み得る。たとえば、invivo送達および安定性を向上させるために、アンタゴmirは、コレステロールなどのステロイド、脂肪酸、ビタミン、炭水化物、ペプチド、または他の小分子リガンドに、その3’末端で連結することが可能である。miRNAの阻害に好適なアンタゴmirは、約15~約50ヌクレオチド長、より好ましくは約18~約30ヌクレオチド長、最も好ましくは約20~約25ヌクレオチド長である。部分的に相補的とは、標的ポリヌクレオチド配列に対して少なくとも約75、80、85、90、95、96、97、98、または99の相補性を有する配列を意味する。アンタゴmirは、成熟miRNA配列に対して少なくとも約75、80、85、90、95、96、97、98、または99の相補性を有する。いくつかの実施態様において、アンタゴmirは、成熟miRNA配列に実質的に相補的である。すなわち、標的ポリヌクレオチド配列に対して少なくとも約95、96、97、98、または99の相補性を有する。他の実施態様において、アンタゴmirは、成熟miRNA配列に対して100の相補性を有する。治療的介入はまた、以上に記載のmicroRNA標的化治療剤に加えて、他の標準的心臓治療剤を含む。これらの実施態様において、本発明の治療的介入は、抗高リポタンパク血症剤、抗動脈硬化剤、抗血栓剤/フィブリン溶解剤、血液凝固剤、抗不整脈剤、抗高血圧剤、昇圧剤、鬱血性心不全治療剤、抗狭心症剤、抗細菌剤、またはそれらの組合せを含み得る。たとえば、米国特許出願公開第2010/0317713号その全体について参照により本明細書に援用するを参照されたい。一実施態様において、本発明は、生物学的サンプル中の少なくとも1種のmiRNAのレベルを測定することにより、ACE阻害剤などの標準心臓治療剤の有効性を評価またはモニターする方法を提供する。いくつかの実施態様において、本方法は、ACE阻害剤の投与を受けた患者からの生物学的サンプル中のmiR-150、miR-21、miR-223、miR-423-5p、miR-106b、miR-16、miR-92a、miR-378、miR-210、miR-378、miR-20b、およびmiR-93から選択される少なくとも1種のmiRNAのレベルを測定することと、測定されたレベルをコントロールサンプル中の前記少なくとも1種のmiRNAのレベルまたはあらかじめ決められた参照値と比較することと、を含み、前記少なくとも1種のmiRNAの測定されたレベルは、ACE阻害剤の治療有効性の指標となる。他の実施態様において、本方法は、ACE阻害剤の投与を受けた患者からの生物学的サンプル中のmiR-21および/またはmiR-150のレベルを測定することと、測定されたレベルをコントロールサンプル中のmiR-21および/またはmiR-150のレベルまたはあらかじめ決められた参照値と比較することと、を含み、前記少なくとも1種のmiRNAの測定されたレベルは、ACE阻害剤の治療有効性の指標となる。ある種の実施態様において、コントロールサンプル中の前記1種以上のmiRNAのレベルまたはあらかじめ決められた参照値に対する1種以上のmiRNAの測定されたレベルは、併用療法の治療有効性の指標となる。併用療法は、2種以上のmiRNAベースの治療剤、2種以上の標準治療剤、またはmiRNAベースの治療剤と標準治療剤との組合せであり得る。たとえば、併用療法は、心臓で発現されるmiRNAを標的とする化学修飾アンチセンスオリゴヌクレオチドおよびACE阻害剤などの標準治療剤であり得る。特定の一実施態様において、併用療法は、miR-208aおよび/またはmiR-208bを標的とする化学修飾アンチセンスオリゴヌクレオチドおよびカプトプリルなどのACE阻害剤である。そのような実施態様において、コントロールサンプル中のmiRNAの1つ以上のレベルまたはあらかじめ決められた参照値に対するmiR-21、miR-150、miR-378、miR-378、およびmiR-93から選択される1種以上のmiRNAのレベルは、antimiR-208オリゴヌクレオチドおよびACE阻害剤たとえば、カプトプリルの併用療法の治療有効性の指標となる。いくつかの実施態様において、コントロールサンプル中のmiR-378および/またはmiR-378のレベルまたはあらかじめ決められた参照値に対するmiR-378および/またはmiR-378のレベルは、antimiR-208オリゴヌクレオチドおよびACE阻害剤たとえば、カプトプリルの併用療法の治療有効性の指標となる。さらに他の態様において、本発明は、心不全の患者を治療する方法を提供する。ただし、この患者は、miR-223、miR-16、miR-93、miR-106b、および/もしくはmiR-423-5pまたは表1に列挙されたアップレギュレートもしくはダウンレギュレートされるマーカーの他の組合せたとえば、少なくとも2種の組合せの1つ以上がレベルたとえば、血清中または血漿中のレベルの上昇を有する。この態様によれば、患者は、従来療法たとえばACE阻害剤を用いてまたは本明細書に記載のanti-miR治療戦略を用いて心不全の治療を受ける。いくつかの実施態様において、治療は、anti-miR-208aアンチセンス阻害剤またはanti-miR-208bアンチセンス阻害剤を用いて行われる。miR-223、miR-16、miR-93、miR-106b、および/またはmiR-423-5pのレベルは、治療前および/またはレジメンの有効性をモニターするために治療中に決定し得る。いくつかの実施態様において、治療剤はアンチセンスのanti-miR-208bであり、miR-19bまたは表2~4の1つ以上に列挙されたマーカーの組合せのレベルが治療中にモニターされる。いくつかの実施態様において、anti-miR-208b治療は、本明細書または米国仮出願第61/495,224号その全体について参照により本明細書に援用するに記載のとおりである。たとえば、阻害剤は、10~18ヌクレオチドたとえば16ヌクレオチドのおよび/または他の化学モチーフに加えて9つのロックド核酸を含有するアンチセンス阻害剤であり得る。阻害剤は、米国仮出願第61/495,224号に記載のM-10101であってもよく、皮下に投与され得る。いくつかの実施態様において、治療的介入は、抗高リポタンパク血症剤として本明細書中において既知の、1種以上の血中の脂質および/またはリポタンパク質の濃度を低下させる作用剤の投与を含み、本発明の治療的介入の一部であり得る。抗高リポタンパク血症剤の例としては、アシフラン、アザコステロール、ベンフルオレックス、p-ベンザルブチルアミド、カルニチン、コンドロイチン硫酸、クロメストロン、デタキストラン、デキストラン硫酸ナトリウム、5,8,11,14,17-エイコサペンタエン酸、エリタデニン、フラザボール、メグルトール、メリナミド、ミタトリエンジオール、オルニチン、γ-オリザノール、パンテチン、ペンタエリトリトールテトラアセテート、α-フェニルブチルアミド、ピロザジル、プロブコールロレルコ、p-シトステロール、スルトシル酸ピペラジン塩、チアデノール、トリパラノール、およびキセンブシンが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施態様において、抗高リポタンパク血症剤は、アリールオキシアルカン酸/フィブリン酸誘導体、樹脂/胆汁酸捕捉剤、HMGCoAレダクターゼ阻害剤、ニコチン酸誘導体、甲状腺ホルモンもしくは甲状腺ホルモン類似体、その他の作用剤、またはそれらの組合せをさらに含み得る。アリールオキシアルカン酸/フィブリン酸誘導体の例としては、ベクロブラート、ベンザフィブラート、ビニフィブラート、シプロフィブラート、クリノフィブラート、クロフィブラートアトロミドS、クロフィブリン酸、エトフィブラート、フェノフィブラート、ゲムフィブロジルロビド、ニコフィブラート、ピリフィブラート、ロニフィブラート、シンフィブラート、およびテオフィブラートが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。樹脂/胆汁酸捕捉剤の例としては、コレスチラミンコリバー、クエストラン、コレスチポールコレスチド、およびポリデキシドが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。HMGCoAレダクターゼ阻害剤の例としては、ロバスタチンメバコール、プラバスタチンプラボコール、およびシンバスタチンゾコールが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。ニコチン酸誘導体の例としては、ニコチネート、アセプルモックスaceplmox、ニセリトロール、ニコクロナート、ニコモール、およびオキシニアシン酸が含まれ得るが、これらに限定されるものではない。甲状腺ホルモンおよびその類似体の例としては、エトロキサート、チロプロープ酸、およびチロキシンが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。抗動脈硬化剤の例としては、ピリジノールカルバメートが含まれ得るが、これに限定されるものではない。いくつかの実施態様において、血餅の除去または予防を支援する作用剤の投与は、特にアテローム硬化症および血管たとえば動脈閉塞の治療で、モジュレーターと併用され得る。抗血栓剤および/またはフィブリン溶解剤の例としては、抗凝固剤、抗凝固剤アンタゴニスト、抗血小板剤、血栓溶解剤、血栓溶解剤アンタゴニスト、またはそれらの組合せが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施態様において、抗血栓剤は、経口投与されるもの、たとえば、アスピリンおよびワルファリンクマジンなどを含み得る。抗凝固剤は、アセノクマロール、アンクロッド、アニシンジオン、ブロミンジオン、クロリンジオン、クメタロール、シクロクマロール、デキストラン硫酸ナトリウム、ジクマロール、ジフェナジオン、エチルビスクムアセテート、エチリデンジクマロール、フルインジオン、ヘパリン、ヒルジン、リアポレートナトリウム、オキサジジオン、ペントサンポリ硫酸、フェニンジオン、フェンプロクモン、ホスビチン、ピコタミド、チオクロマロール、およびワルファリンを含み得るが、これらに限定されるものではない。抗血小板剤は、アスピリン、デキストラン、ジピリダモールペルサンチン、ヘパリン、スルフィンピラノンアンツラン、およびチクロピジンチクリドを含み得るが、これらに限定されるものではない。血栓溶解剤は、組織プラスミノーゲンアクチベーターアクチバーゼ、プラスミン、プロウロキナーゼ、ウロキナーゼアボキナーゼ、ストレプトキナーゼストレプターゼ、およびアニストレプラーゼAPSACエミナーゼを含み得るが、これらに限定されるものではない。他の実施態様において、対象が出血を生じているまたは出血の可能性が高い場合、血液凝固を増強し得る作用剤を利用することも可能である。血液凝固促進剤の例としては、血栓溶解剤アンタゴニストおよび抗凝固剤アンタゴニストが含まれる。血栓溶解剤アンタゴニストは、アミノカプロン酸アミカールおよびトラネキサム酸アムスタットを含み得るが、これらに限定されるものではない。抗凝固剤アンタゴニストは、プロタミンおよびビタミンKを含み得るが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施態様において、治療的介入は、抗血栓剤/フィブリン溶解剤である。抗血栓フィブリン溶解剤は、アナグレリド、アルガトロバン、シルスタゾール、ダルトロバン、デフィブロチド、エノキサパリン、フラキシパリン、インドブフェン、ラモパラン、オザグレル、ピコタミド、プラフィブリド、テデルパリン、チクロピジン、およびトリフルサルを含み得るが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施態様において、治療的介入は、抗不整脈剤である。抗不整脈剤は、クラスI抗不整脈剤ナトリウムチャネルブロッカー、クラスII抗不整脈剤βアドレナリンブロッカー、クラスIII抗不整脈剤再分極延長剤、クラスIV抗不整脈剤カルシウムチャネルブロッカー、およびその他の抗不整脈剤を含み得るが、これらに限定されるものではない。ナトリウムチャネルブロッカーの例としては、クラスIA、クラスIB、およびクラスIC抗不整脈剤が含まれ得るが、これらに限定されるものではない。クラスIA抗不整脈剤の例としては、ジソピラミドノルペース、プロカインアミドプロネスチル、およびキニジンキニデックスが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。クラスIB抗不整脈剤の例としては、リドカインキシロカイン、トカイニドトノカード、およびメキシレチンメキシチルが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。クラスIC抗不整脈剤の例としては、エンカイニドエンカイドおよびフレカイニドタンボコールが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。pアドレナリンブロッカー、pアドレナリンアンタゴニスト、またはクラスII抗不整脈剤としても知られるβブロッカーの例としては、アセブトロールセクトラール、アルプレノロール、アモスラロール、アロチノロール、アテノロール、ベフノロール、ベタキソロール、ベバントロール、ビソプロロール、ボピンドロール、ブクモロール、ブフェトロール、ブフラロール、ブニトロロール、ブプラノロール、塩酸ブチドリン、ブトフィロロール、カラゾロール、カルテオロール、カルベジロール、セリプロロール、セタモロール、クロラノロール、ジレバロール、エパノロール、エスモロールブレビブロック、インデノロール、ラベタロール、レボブノロール、メピンドロール、メチプラノロール、メトプロロール、モプロロール、ナドロール、ナドキソロール、ニフェナロール、ニプラジロール、オクスプレノロール、ペンブトロール、ピンドロール、プラクトロール、プロネタロール、プロパノロールインデラル、ソタロールベタペース、スルフィナロール、タリノロール、テルタトロール、チモロール、トリプロロール、およびキシビノロールが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施態様において、βブロッカーは、アリールオキシプロパノールアミン誘導体を含み得る。アリールオキシプロパノールアミン誘導体の例としては、アセブトロール、アルプレノロール、アロチノロール、アテノロール、ベタキソロール、ベバントロール、ビソプロロール、ボピンドロール、ブニトロロール、ブトフィロロール、カラゾロール、カルテオロール、カルベジロール、セリプロロール、セタモロール、エパノロール、インデノロール、メピンドロール、メチプラノロール、メトプロロール、モプロロール、ナドロール、ニプラジロール、オクスプレノロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロパノロール、タリノロール、テルタトロール、チモロール、およびトリプロロールが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。クラスIII抗不整脈剤としても知られる再分極を延長する作用剤の例としては、アミオダロンコルダロンおよびソタロールベタペースが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。クラスIV抗不整脈剤としても知られるカルシウムチャネルブロッカーの例としては、アリールアルキルアミンたとえば、ベプリジル、ジルチアゼム、フェンジリン、ガロパミル、プレニラミン、テロジリン、ベラパミルジヒドロピリジン誘導体フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニソルジピン、ニトレンジピンピペラジン誘導体たとえば、シンナリジン、フルナリジン、リドフラジン、またはその他のカルシウムチャネルブロッカー、たとえば、ベンシクラン、エタフェノン、マグネシウム、ミベフラジル、またはペルヘキシリンが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施態様において、カルシウムチャネルブロッカーは、長時間作用性ジヒドロピリジンニフェジピンタイプカルシウムアンタゴニストを含む。その他の抗不整脈剤の例としては、アデノシンアデノカード、ジゴキシンラノキシン、アセカイニド、アジマリン、アモプロキサン、アプリンジン、ブレチリウムトシレート、ブナフチン、ブトベンジン、カポベン酸、シフェンリン、ジソピラミド、ヒドロキニジン、インデカイニド、臭化イパトロピウム、リドカイン、ロラジミン、ロルカイニド、メオベンチン、モリシジン、ピルメノール、プラジマリン、プロパフェノン、ピリノリン、ポリガラクツロン酸キニジン、硫酸キニジン、およびビキジルが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施態様において、治療的介入は、抗高血圧剤である。抗高血圧剤の例としては、交感神経遮断剤、α/βブロッカー、αブロッカー、抗アンギオテンシンII剤、βブロッカー、カルシウムチャネルブロッカー、血管拡張剤、およびその他の抗高血圧剤が含まれ得るが、これらに限定されるものではない。αアドレナリンブロッカーまたはαアドレナリンアンタゴニストとしても知られるαブロッカーの例としては、アモスラロール、アロチノロール、ダピプラゾール、ドキサゾシン、メシル酸エルゴロイド、フェンスピリド、インドラミン、ラベタロール、ニセルゴリン、プラゾシン、テラゾシン、トラゾリン、トリマゾシン、およびヨヒンビンが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。ある種の実施態様において、αブロッカーは、キナゾリン誘導体を含み得る。キナゾリン誘導体は、アルフゾシン、ブナゾシン、ドキサゾシン、プラゾシン、テラゾシン、およびトリマゾシンを含み得るが、これらに限定されるものではない。ある種の実施態様において、抗高血圧剤は、αおよびβアドレナリンアンタゴニストの両方である。α/βブロッカーの例としては、ラベタロールノルモジン、トランデートが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。抗アンギオテンシンII剤の例としては、アンギオテンシン変換酵素阻害剤およびアンギオテンシンIIレセプターアンタゴニストが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。アンギオテンシン変換酵素阻害剤ACE阻害剤は、アラセプリル、エナラプリルバソテック、カプトプリル、シラザプリル、デラプリル、エナラプリラート、フォシノプリル、リシノプリル、モベルトプリル、ペリンドプリル、キナプリル、およびラミプリルを含み得るが、これらに限定されるものではない。アンギオテンシンIIレセプターアンタゴニスト、ANGレセプターブロッカー、またはANG-IIタイプ1レセプターブロッカーARBSとしても知られるアンギオテンシンIIレセプターブロッカーの例としては、アンギオカンデサルタン、エプロサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、およびバルサルタンが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。交感神経遮断剤の例としては、中枢性交感神経遮断剤または末梢性交感神経遮断剤が含まれる。中枢神経系CNS交感神経遮断としても知られる中枢性交感神経遮断剤の例としては、クロニジンカタプレス、グアナベンズウィテンシングアンファシンテネックス、およびメチルドパアルドメットが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。末梢性交感神経遮断剤の例としては、神経節遮断剤、アドレナリン作動性ニューロン遮断剤、βアドレナリン遮断剤、またはα1アドレナリン遮断剤が含まれ得るが、これらに限定されるものではない。神経節遮断剤の例としては、メカミラミンインベルシンおよびトリメタファンアルフォナードが含まれる。アドレナリン作動性ニューロン遮断剤の例としては、グアネチジンイスメリンおよびレセルピンセルパシルが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。βアドレナリンブロッカーの例としては、アセニトロールセクトラール、アテノロールテノーミン、ベタキソロールケルロン、カルテオロールカルトロール、ラベタロールノルモジン、トランデート、メトプロロールロプレッサー、ナダノールコルガード、ペンブトロールレバトール、ピンドロールビスケン、プロプラノロールインデラル、およびチモロールブロカドレンが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。α1アドレナリンブロッカーの例としては、プラゾシンミニプレス、ドキサゾシンカルジュラ、およびテラゾシンヒトリンが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施態様において、治療的介入は、血管拡張剤たとえば、脳血管拡張剤、冠血管拡張剤、または末梢血管拡張剤を含み得る。他の実施態様において、血管拡張剤は、冠血管拡張剤を含む。冠血管拡張剤の例としては、アモトリフェン、ベンダゾール、ヘミコハク酸ベンフロジル、ベンズヨーダロン、クロラシジン、クロモナール、クロベンフロール、クロニトレート、ジラゼプ、ジピリダモール、ドロプレニラミン、エフロキサート、エリトリチルテトラニトラート、エタフェノン、フェンジリン、フロレジル、ガングレフェン、ヘレストロールherestrolビスp-ジエチルアミノエチルエーテル、ヘキソベンジン、イトラミントシレート、ケリン、リドフラニン、マンニトールヘキサニトレート、メジバジン、ニトログリセリン、四硝酸ペンタエリトリトール、ペントリニトロール、ペルヘキシリン、ピメフィリン、トラピジル、トリクロミル、トリメタジジン、リン酸トロルニトレート、およびビスナジンが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施態様において、血管拡張剤は、長期治療血管拡張剤または高血圧緊急症血管拡張剤を含み得る。長期治療血管拡張剤の例としては、ヒドララジンアプレソリン、およびミノキシジルロニテンが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。高血圧緊急症血管拡張剤の例としては、ニトロプルシドニプリド、ジアゾキシドヒペルスタットIV、ヒドララジンアプレソリン、ミノキシジルロニテン、およびベラパミルが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施態様において、治療的介入は、抗高血圧剤を含み得る。その他の抗高血圧剤の例としては、アジマリン、γ-アミノ酪酸、ブフェニオド、シクレタイニン、シクロシドミン、タンニン酸クリプテナミン、フェノルドパム、フロセキナン、ケタンセリン、メブタメート、メカミラミン、メチルドパ、メチル4-ピリジルケトンチオセミカルバゾン、ムゾリミン、パルギリン、ペンピジン、ピナシジル、ピペロキサン、プリマペロン、プロトベラトリン、ラウバシン、レスシメトール、リルメニデン、サララシン、ニトロプルシドナトリウム、チクリナフェン、カンシル酸トリメタファン、チロシナーゼ、およびウラピジルが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。ある種の実施態様において、抗高血圧剤は、アリールエタノールアミン誘導体ベンゾチアジアジン誘導体、N-カルボキシアルキルペプチド/ラクタム誘導体、ジヒドロピリジン誘導体、グアニジン誘導体、ヒドラジン/フタラジン、イミダゾール誘導体、第四級アンモニウム化合物、レセルピン誘導体、またはスルホンアミド誘導体を含み得る。アリールエタノールアミン誘導体の例としては、アモスラロール、ブフラロール、ジレバロール、ラベタロール、プロネタロール、ソタロール、およびスルフィナロールが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。ベンゾチアジアジン誘導体の例としては、アルチジド、ベンドロフルメチアジド、ベンズチアジド、ベンジルヒドロクロロチアジド、ブチアジド、クロロチアジド、クロルタリドン、シクロペンチアジド、シクロチアジド、ジアゾキシド、エピチアジド、エチアジド、フェンキゾン、ヒドロクロロチアジド、ヒドロフルメチアジド、メチクロチアジド、メチクラン、メトラゾン、パラフルチジド、ポリチアジド、テトラクロルメチアジド、およびトリクロルメチアジドが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。N-カルボキシアルキルペプチド/ラクタム誘導体の例としては、アラセプリル、カプトプリル、シラザプリル、デラプリル、エナラプリル、エナラプリラート、フォシノプリル、リシノプリル、モベルチプリル、ペリンドプリル、キナプリル、およびラミプリルが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。ジヒドロピリジン誘導体の例としては、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニルバジピン、ニソルジピン、およびニトレンジピンが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。グアニジン誘導体の例としては、ベタニジン、デブリソキン、グアナベンズ、グアナクリン、グアナドレル、グアナゾジン、グアネチジン、グアンファシン、グアノクロル、グアノキサベンズ、およびグアノキサンが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。ヒドラジン/フタラジンの例としては、ブドララジン、カドララジン、ジヒドララジン、エンドララジン、ヒドラカルバジン、ヒドララジン、フェニプラジン、ピルドララジン、およびトドララジンが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。イミダゾール誘導体の例としては、クロニジン、ロフェキシジン、フェントラミン、チアメニジン、およびトロニジンが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。第四級アンモニウム化合物の例としては、臭化アザメトニウム、塩化クロルイソンダミン、ヘキサメトニウム、ビスメチル硫酸ペンタシニウム、臭化ペンタメトニウム、酒石酸ペントリニウム、塩化フェナクトロピニウム、およびメト硫酸トリメチジニウムが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。レセルピン誘導体の例としては、ビエタセルピン、デセルピジン、レシナミン、レセルピン、およびシロシンゴピンが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。スルホンアミド誘導体の例としては、アンブシド、クロパミド、フロセミド、インダパミド、キネタゾン、トリパミド、およびキシパミドが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。鬱血性心不全の治療のための作用剤の例としては、抗アンギオテンシンII剤、後負荷前負荷軽減治療、利尿剤、および変力剤が含まれ得るが、これらに限定されるものではない。利尿剤の例としては、チアジド誘導体またはベンゾチアジアジン誘導体たとえば、アルチアジド、ベンドロフルメチアジド、ベンズチアジド、ベンジルヒドロクロロチアジド、ブチアジド、クロロチアジド、クロロチアジド、クロルタリドン、シクロペンチアジド、エピチアジド、エチアジド、エチアジド、フェンキゾン、ヒドロクロロチアジド、ヒドロフルメチアジド、メチクロチアジド、メチクラン、メトラゾン、パラフルチジド、ポリチアジド、テトラクロロメチアジド、トリクロルメチアジド、有機水銀剤たとえば、クロルメロドリン、メラルリド、メルカンファミド、メルカプトメリンナトリウム、メルクマリル酸、マーキュマチリンナトリウム、塩化第一水銀、メルサリル、プテリジンたとえば、フルテレン、トリアムテレン、プリンたとえば、アセフィリン、7-モルホリノメチルテオフィリン、パマブロム、プロテオブロミン、テオブロミン、アルドステロンアンタゴニストを含むステロイドたとえば、カンレノン、オレアンドリン、スピロノラクトン、スルホンアミド誘導体たとえば、アセタゾラミド、アンブシド、アゾセミド、ブメタニド、ブタゾラミド、クロラミノフェナミド、クロフェナミド、クロパミド、クロレキソロン、ジフェニルメタン4,4’ジスルホンアミド、ジスルファミド、エトキシゾラミド、フロセミド、インダパミド、メフルシド、メタゾラミド、ピレタニド、キネタゾン、トラセミド、トリパミド、キシパミド、ウラシルたとえば、アミノメトラジン、アミソメトラジン、カリウム保持性アンタゴニストたとえば、アミロリド、トリアムテレン、またはその他の利尿剤、たとえば、アミノジンaminozine、アルブチン、クロラザニル、エタクリン酸、エトゾリン、ヒドラカルバジン、イソソルビド、マンニトール、メトカルコン、ムゾリミン、ペルヘキシリン、チクマフェンticmafen、およびウレアが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。強心剤としても知られる陽性変力剤の例としては、アセフィリン、アセチルジギトキシン、2-アミノ-4-ピコリン、アムリノン、ヘミコハク酸ベンフロジル、ブクラデシン、セルベロシンcerberosine、カンフォタミド、コンバラトキシン、シマリン、デノパミン、デスラノシド、ジギタリン、ジギタリス、ジギトキシン、ジゴキシン、ドブタミン、ドーパミン、ドペキサミン、エノキシモン、エリトロフレイン、フェナルコミン、ギタリン、ギトキシン、グリコシアミン、ヘプタミノール、ヒドラスチニン、イボパミン、ラナトシド、メタミバム、ミルリノン、ネリフォリン、オレアンドリン、ウアバイン、オキシフェドリン、プレナルテロール、プロシラリジン、レシブホゲニン、シラレン、シラレニン、ストロファンチン、スルマゾール、テオブロミン、およびキサモテロールが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施態様において、変力剤は、強心配糖体、ベータ-アドレナリン作動性アゴニスト、またはホスホジエステラーゼ阻害剤である。強心配糖体の例としては、ジゴキシンラノキシンおよびジギトキシンクリストジギンが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。βアドレナリン作動性アゴニストの例としては、アルブテロール、バンブテロール、ビトルテロール、カルブテロール、クレンブテロール、クロルプレナリン、デノパミン、ジオキセテドリン、ドブタミンドブトレックス、ドーパミンイントロピン、ドペキサミン、エフェドリン、エタフェドリン、エチルノルエピネフリン、フェノテロール、フォルモテロール、ヘキソプレナリン、イボパミン、イソエタリン、イソプロテレノール、マブテロール、メタプロテレノール、メトキシフェナミン、オキシフェドリン、ピルブテロール、プロカテロール、プロトキロール、レプロテロール、リミテロール、リトドリン、ソテレノール、テルブタリン、トレトキノール、ツロブテロール、およびキサモテロールが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。ホスホジエステラーゼ阻害剤の例としては、アムリノンイノコールが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。抗狭心症剤は、有機ニトレート、カルシウムチャネルブロッカー、βブロッカーおよびそれらの組合せを含み得る。ニトロ血管拡張剤としても知られる有機ニトレートの例としては、ニトログリセリンニトロ-ビド、ニトロスタット、二硝酸イソソルビドイソルジル、ソルビトラート、および硝酸アミルアスピロール、バポロールが含まれ得るが、これらに限定されるものではない。エンドセリンETは、心不全の進行に関与すると思われる強力な生理学的および病態生理学的な作用を有する21アミノ酸ペプチドである。ETの作用は、2つのクラスの細胞表面レセプターとの相互作用により媒介される。細胞を刺激するETの能力の阻害は、ETとそのレセプターとの相互作用を遮断する作用剤の使用を含む。エンドセリンレセプターアンタゴニストERAの例としては、Bosentan、Enrasentan、Ambrisentan、Darusentan、Tezosentan、Atrasentan、Avosentan、Clazosentan、Edonentan、シタクスセンタン、TBC3711、BQ123、およびBQ788が含まれ得るが、これらに限定されるものではない。ある種の実施態様において、治療的介入は、二次療法面、たとえば、予防的、診断的、または病期分類的手術、治癒的手術、および待期的手術を含む、たとえば、いくつかのタイプの手術を含み得る。手術、特定的には、治癒的手術は、本明細書に記載の1つ以上の他の手段を含む、他の治療と組み合わせて使用してもよい。血管および心血管の疾患および障害に対するそのような手術療法手段は、当業者に周知であり、生体に手術を行うこと、心血管機械的プロテーゼ、血管形成、冠動脈再灌流、カテーテルアブレーションを提供すること、対象に植込み型除細動器、機械的循環補助を提供すること、またはそれらの組合せを含み得るが、これらに限定されるものではない。本発明で使用可能な機械的循環補助の例としては、大動脈内バルーンカウンターパルセイション、左心補助装置、またはそれらの組合せが含まれる。本発明はまた、患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルを予測または評価するための方法およびキットを包含する。一実施態様において、本発明は、患者からの生物学的サンプル中の表1から選択される少なくとも1種のmiRNAのレベルを測定することと、測定されたレベルをコントロールサンプルたとえば、健常な年齢の一致する対象から取得したサンプルまたは心不全を患っていないもしくは心不全と診断されていない対象から取得したサンプル中の前記少なくとも1種miRNAのレベルまたはあらかじめ決められた参照値と比較することと、を含み、前記少なくとも1種のmiRNAの測定されたレベルが、患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルの指標となる、患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルを予測するまたは評価する方法を提供する。生物学的サンプルは、本明細書に記載の任意のサンプルであり得る。ある種の実施態様において、血漿または血清のサンプルが好ましい。いくつかの実施態様において、コントロールサンプル中のmiRNAのレベルまたはあらかじめ決められた参照値に対するmiRNAの測定されたレベルの増加は、患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルの指標となる。たとえば、そのような実施態様において、hsa-miR-16、hsa-miR-223、hsa-miR-320、hsa-miR-150、hsa-miR-378、hsa-miR-92a、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-133a、hsa-miR-22、hsa-miR-21、hsa-miR-210、hsa-miR-20b、hsa-miR-499、hsa-miR-378、hsa-miR-106b、hsa-miR-155、およびhsa-miR-93から選択される1種以上のmiRNAのレベルは、コントロールサンプル中のレベルまたはあらかじめ決められた参照値と比較して増加し、増加は、患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルの指標となる。他の実施態様において、コントロールサンプルたとえば、健常な年齢の一致する対象から取得したサンプルまたは心不全を患っていないもしくは心不全と診断されていない対象から取得したサンプル中のmiRNAのレベルまたはあらかじめ決められた参照値に対するmiRNAの測定されたレベルの低下または減少は、患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルの指標となる。たとえば、そのような実施態様において、hsa-miR-204、hsa-miR-199b-5p、hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-143、およびhsa-miR-195から選択される1種以上のmiRNAのレベルが、コントロールサンプル中のレベルまたはあらかじめ決められた参照値と比較して減少した場合、減少は、患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルの指標となる。本発明はまた、患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルを予測または評価するためのキットを包含する。一実施態様において、キットは、生物学的サンプル中の表1から選択される少なくとも1種のmiRNAを測定するための試薬と、患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルを予測または評価するために前記少なくとも1種のmiRNAを測定するための説明書と、を含む。たとえば、ある種の実施態様において、キットは、hsa-miR-204、hsa-miR-199b-5p、hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-143、hsa-miR-195、hsa-miR-16、hsa-miR-223、hsa-miR-320、hsa-miR-150、hsa-miR-378、hsa-miR-92a、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-133a、hsa-miR-22、hsa-miR-21、hsa-miR-210、hsa-miR-20b、hsa-miR-499、hsa-miR-378、hsa-miR-106b、hsa-miR-155、およびhsa-miR-93から選択されるmiRNAを逆転写または増幅するためのmiRNA特異的プライマーと、患者における心不全の重症度または心不全の進行のレベルを予測または評価するための前記少なくとも1種のmiRNAを測定するための説明書と、を含む。キットは、心臓治療の治療有効性を評価またはモニターするためのキット用の本明細書に記載の追加の試薬、たとえば、標準化コントロールおよびキット中のmiRNAのそれぞれに特異的なTaqmanプローブをさらに含み得る。心臓障害は、心臓および/または血管、たとえば、動脈および静脈を含む、心血管系に影響を及ぼす任意の障害を含み得る。本発明の方法により可能と考えられる心臓障害は、心疾患さらには心不全を含み得る。心臓障害はまた、腎臓に影響を及ぼす障害を含み得る。心臓障害は、心不全、心臓肥大、冠心疾患、心血管疾患、心筋症、虚血性心疾患、高血圧性心疾患、炎症性心疾患、弁膜性心疾患、アテローム硬化症、心腎疾患、腎疾患および他の腎障害を含み得るが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施態様において、心臓障害は、心筋梗塞、病的心肥大、心不全、または高血圧である。心血管疾患は、糖尿病、高血圧、高ホモシステイン血症、および高コレステロール血症を含み得るが、これらに限定されるものではない。心筋症は、アルコール性心筋症、冠動脈疾患、先天性心疾患、虚血性心筋症、高血圧性心筋症、弁膜性心筋症、炎症性心筋症、および心筋ジストロフィーを含み得るが、これらに限定されるものではない。高血圧性心疾患は、左心室肥大、冠心疾患、心不全鬱血性のものを含む、高血圧性心筋症、心不整脈、および腎障害を含み得るが、これらに限定されるものではない。炎症性心疾患は、心内膜炎、炎症性心肥大、および心筋炎を含み得るが、これらに限定されるものではない。以下の実施例は、単に本発明の種々の態様を例示するために含まれる。しかしながら、当業者であれば、本開示に照らして、本発明が任意のヒトまたは他の動物に同等に適用可能であることはわかるはずである。実施例1:心臓病状に対する薬効のサロゲートマーカーとしての血中miRNA心臓の機能および機能不全に対するmiRNAの重要性から、心疾患の場合にmiRNAの生物学を治療的に活用する可能性が示唆される。一本鎖RNAオリゴヌクレオチドは、相補的塩基対合を介してinvivoでmiRNAを不活性化するのに有効であることが示されておりElmenJetalNature452896899、ElmenJetalNucleicAcidsRes3611531162、KrutzfeldtJetalNucleicAcidsRes3528852892、KrutzfeldtJetalNature438685689、LanfordREetalScience327198201、病的miRNAを不活性化する潜在的に有効な手段となる。この実施例では、miR-208aを標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドの心不全モデルでの治療有効性について説明する。特定的には、我々は、miR-208aに対するロックド核酸LNA修飾アンチセンスオリゴヌクレオチドの全身送達が、心臓でのmiR-208aの特異的、強力、かつ持続的なサイレンシングを誘導するのに十分であることを示す。さらに、anti-miR-208aは、ストレス起因性リモデリング、機能悪化、および心臓ミオシンスイッチングを用量依存的に減弱すると同時に、拡張期心不全のラットモデルダール食塩感受性ラットで全般的健康状態および生存率を改善する。興味深いことに、我々は、高血圧ラットのantimiR-208aの生理学的作用が、循環miRNAの血漿中レベルの有意な変化に反映されることから、この循環miRNAは、薬効のサロゲートマーカーであることが示唆される。invivoでmiR-208a阻害の治療可能性を決定するために、我々は、成熟miR-208aの5’領域の塩基2~17を標的とするかつホスホロチオエート結合により連結されたLNAとDNAとの組合せを含有するantimiRを設計した。M-10101として参照されるantimiR-208aの配列は、5’-CTTTTTGCTCGTCTTA-3’配列番号12であった。miR-208a阻害の治療適合性を試験するために、我々は、8週齢から始めて、低食塩LS食0.25NaClまたは高食塩HS食8.0NaClのいずれかが給餌されたダール食塩感受性ラットを使用した。ダール食塩感受性ラットでHS食を開始すると、慢性高血圧になり、これは、進行して主に拡張機能不全に関連付けられる鬱血性心不全のモデルになるRodenbaughetalAmJPhysiolHeartCircPhysiol293H1705H1713。1週間のHS食の後、生理食塩水、25mg/kgのantimiR-208a、または25mg/kgのスクランブルコントロールオリゴを2週間ごとにラットに皮下投与した。3~4週間のHS食の後、生理食塩水およびコントロールの治療動物は、不快感の徴候を示し始め、そして死亡したが、antimiR-208aの皮下送達では、この症状が有意に緩和された図1A。健康の指標として、我々は、試験期間中、体重をモニターした。生理食塩水またはコントロールオリゴのいずれかが注入されたHS食のダールラットは、LS食のコントロールと比較して、有意な体重増加の低減を呈した。しかしながら、HS/antimiR-208a治療ラットは、同程度の体重増加を示した図1B。antimiR-208a治療動物が8HS食のより少ない摂取により体重を維持していた可能性を排除するために、食物摂取をモニターしたところ、すべてのHS給餌群間で同等の摂取を示した図4。antimiR-208aに応答して観測される保護作用の基礎的なさらなる知見を得るために、4.0NaCl食を用いて、後続試験を行い、その間、ラットは、生理食塩水、5もしくは25mg/kgのantimiR-208a、または25mg/kgのantimiRコントロールのいずれかを2週間ごとに摂取した。体重分析から、HS食のダールラットは、LS食のコントロールと比較して、体重増加の有意な低減を呈するが、HS/antimiR-208a治療ラットは、体重増加の増大を維持することが示唆された図1C。心エコー検査を用いた機能評価から、antimiR-208a治療ラットは、HS食8週間後、HS/生理食塩水コントロールと比較して、等容弛綬時間IVRTの有意な用量依存的減少を呈し、さらにはHS/生理食塩水コントロールと比較して、僧帽弁早期対能動期充満速度比mitralvalveearlytoactivefillingvelocityratioMVE/Aの標準化を呈することが示唆された図1D。HS食の後、2週間ごとに時間依存的心エコー検査を行ったところ、HS/生理食塩水コントロールと比較して、anti-miR-208a治療ラットで等容弛綬時間の有意な減少を示したデータは示していない。心筋細胞サイズの定量化では、antimiR-208aによる治療の後、心筋細胞肥大の有意な減少を示した図1E~F。そのほかに、antimiR-208a治療は、ピクロシリウスレッド染色の定量化により評価したとき、HS食により誘導される細動脈周囲線維症を低減した図1E~F。anti-miR-208aは、anti-miR-208aの最終注入2週間後に左室および右室の両方でmiR-208aの用量依存的阻害を引き起こしたが、コントロールオリゴは、生理食塩水と比較して差を示さなかった図2A。miR-499はまた、miR-208aの持続的阻害後に発現の用量依存的減少を示した図2A。miR-208bは、βミオシン重鎖のアップレギュレーションと併行して、HS/生理食塩水およびHS/コントロールの治療動物の両方で誘導されたが、anti-miR-208a治療では、miR-208bレベルの用量依存的減少を生じた図2A。ノーザンブロット分析から、miR-499およびmiR-208bのこの制御が確認された図2B。ミオシン宿主遺伝子の制御を評価するために、我々は、Myh6、Myh7、およびMyh7bのmRNAレベルを調べた。Myh7は、HS/生理食塩水群およびHS/コントロール群の両方でHSに応答して有意に増大された。この増大は、anti-miR-208aに応答して用量依存的に減弱された。そのほかに、anti-miR-208a治療は、HS/生理食塩水群およびHS/コントロール群の両方で観測されるMyh6mRNAの発現の減少を標準化した図2C。Myh7の発現は、miR-499レベルを反映し、anti-miR-208a治療により用量依存的減少を呈した。さらに、Myh7の用量依存的制御は、ウェスタンブロットにより確認された図2D。それに加えて、anti-miR-208a治療は、これまで特性解析されたmiR-208a標的Hp1βの脱抑制を引き起こしたことから、anti-miR-208a作用がmiR-208a阻害を介して起こることがさらに示唆される図2E。種々の疾患状況での血漿中のmiRNAの検出は、増大する診断の有望性を示していているCortezMAandCalinGAExpertOpinBiolTher9703711。antimiR-208aの有効性と相関する特異的miRNAが存在することを確認するために、我々は、HS治療時、一群の筋肉関連miRNAを調べた。注目すべき点として、miR-499は、高食塩下では血漿中検出の中程度の増加を示すにすぎなかったが、antimiR-208a治療動物では有意に低減されたことから、miR-499は、antimiR-208aの有効性の血漿ベースのマーカーとして作用し得ることが示唆される図3。そのほかに、これまでヒト心不全に相関付けられてきた血漿中miR-423-5pレベルTijsenAJetalCircRes10610351039は、antimiR-208aで治療された動物において低減されることが判明した図3。他の筋特異的miRNAは、試験群間で有意差を示さなかった図5。この試験の結果から、miR-208の治療的阻害は、心臓リモデリングの低減をもたらすかことが示唆され、これは、心疾患時の生存率および心臓機能の有意な改善と一致する。心臓でのmiR-208a阻害の有効性は、miR-499およびmiR-423-5pの血漿中レベルを測定することによりモニターすることが可能である。なぜなら、これらのmiRNAの血漿中レベルは、antimiR-208オリゴヌクレオチドによる心臓組織でのmiR-208aノックダウンと相関付けられたからである。特に、血漿中miRNA分析から、anti-miR-208a治療は、血清中のmiR-499およびmiR-423-5pの減少をもたらし、これは、anti-miR-208a治療に応答してMyh7b/miR-499の心臓発現の低下と併行して起こることが示唆される。血漿ベースのmiR-499/miR-423-5pレベルとanti-miR-208aの有効性との相関を仮定すれば、これらのデータから、血漿中のmiR-499およびmiR-423-5pレベルは、患者に移行した場合、心臓へのanti-miR-208aの効果的送達のバイオマーカーをとして機能することが示唆される。特異的方法動物およびLNA修飾antimiRの送達。LNA-antimiRオリゴヌクレオチドは、成熟miR-208a配列の5’領域に完全に相補的な非接合および完全にホスホロチオレート化されたオリゴヌクレオチドとしてmiRagenTherapeuticsIncで合成した。LNAコントロールオリゴヌクレオチドは、C.エレガンス特異的miRNAに対する配列からなるものであった。特に指定がないかぎり、オリゴヌクレオチド化学物質のinvivo送達は、成体雄C56B16マウスまたは成体雄ダール食塩感受性ラットHarlanIndianapolisのいずれかに、尾静脈または皮下注入を介して低圧静脈内i.v.注入により達成した。すべての化学物質を同等の最終体積の生理食塩水に溶解させて注入し、その後、化学物質の明確な副作用に関して動物を調べた。指定の時点で組織サンプルを採取し、分子的または組織学的検査に供した。8週齢でダールラットを0.25NaClで維持し、または4もしくは8NaCl食で給餌したHarlanIndianapolis。定量的リアルタイムPCR分析。invivoリアルタイムPCR分析のために、TrizolInvitrogenを用いて心臓組織からRNAを取り出し、その後、各組織サンプルからの2μgのRNAを用いて、製造業者の仕様Invitrogenに従ってSuperScriptII逆転写酵素によりcDNAを産生した。miR-208のレベルを検出するために、10~100ngの全RNAを用いて、製造業者の推奨基準に従ってTaqmanMicroRNAアッセイAppliedBiosystemsABIによりRT-PCRを行った。ABIから購入したTaqmanプローブを用いて定量的リアルタイムPCRにより遺伝子の一部の発現を分析した。ノーザンブロット分析。Trizol試薬GibcoBRLを用いて心臓組織サンプルから全RNAを単離した。以上に記載したように、microRNAを検出するノーザンブロットを行った。U6プローブは、ローディングコントロールとして機能したIDT。心筋細胞または心臓組織からの10μgの全RNAを20アクリルアミド変性ゲル上に充填し、電気泳動によりZetaprobeGTゲノムブロット膜BioRadに移した。転写後、ブロットを架橋して、80°Cで1時間焼成した。miRNA検出感度を最大化するために、StarfireOligosKitIDTCoralvilleIAおよびα-32PdATPAmershamまたはPerkinElmerを用いて、オリゴヌクレオチドプローブを標識した。Rapidhyb緩衝液Amersham中39°Cでプローブを膜に一晩ハイブリダイズさせ、その後、0.1SDSを含む0.5×SSCを用いて39°Cで10分間2回洗浄した。ブロットを露出させて、PhosphorImager分析GEHealthCareLifeSciencesにより定量化し、U6プローブをローディングコントロールとして機能させたABI。phosphorimagerおよびImageQuantBioRadを用いて、放射性シグナルの強度により発現の変化倍率を定量化した。ウェスタンブロット分析。ウェスタンブロット分析のために、記載されるとおり心臓細胞または心臓組織からミオシンを抽出したHamalainenNPetteDPatternsofmyosinisoformsinmammalianskeletalmusclefibresMicroscResTech30381389。4~15グラジエントゲル上に0.1μgのタンパク質溶解物を充填することによりMHCアイソフォームを検出し、SDSPAGEにより分離し、Myh7にきわめて特異的なマウスモノクローナル抗ミオシン遅筋型、骨格M8421SigmaMOを用いてウェスタンブロッティングを行った。血漿からの定量的リアルタイムPCR分析。製造業者のプロトコルにより、TrizolLSReagentInvitrogenを用いて、血漿サンプルからのRNAを単離した。RNA単離前、250pmolの2つの異なる合成C.エレガンスmiRNA配列を添加して、標的miRNAの標準化内部コントロールとして機能させた。使用したC.エレガンス配列は、cel-miR-2UAUCACAGCCAGCUUUGAUGUGC、配列番号5およびcel-lin-4UCCCUGAGACCUCAAGUGUGA、配列番号6Dharmaconであった。以上に記載したように、初期血漿体積に等しい最終体積で最終RNAペレットを再懸濁させ、5μlを後続のRT-PCR反応に使用した。統計解析。一元配置ANOVAおよびニューマンクールズ多重比較事後検定を用いて有意性を決定した。P<0.05は、統計的に有意とみなした。実施例2:血漿中miRNAは、心不全の疾患進行およびantimiR-208オリゴヌクレオチドの治療有効性のバイオマーカーである。血漿中バイオマーカーを経時的に評価するために、実施例1に記載の鬱血性心不全のダール食塩感受性ラットモデルで非侵襲的隔週採血を行うべく外科的埋め込みカテーテルを使用した。疾患の進行およびmiR-208aを標的とするLNA修飾アンチセンスオリゴヌクレオチドM-10101、配列番号12による治療処置と共に血漿中miRNAバイオマーカーの変化を評価した。次の実験群を試験した。M-10591オリゴヌクレオチド配列番号13は、哺乳動物組織で発現されないC.エレガンス由来のmiR-67を標的とするので、対照として使用した。0週目にダール食塩感受性ラットにカテーテルを埋め込み、ベースライン血液を採取した。カテーテル移植手術後、高食塩食を開始した。4.0NaCl食の開始1週間後、生理食塩水または25mg/kgのantimiRをラットに2週間に1回皮下s.c.投与した。隔週注入を行わない週で、血漿単離のために1.5mlの血液をカテーテルから採取した。初期注入の8週間後、動物を屠殺した。TaqmanRTPCRアッセイを用いて血漿および組織の分子評価項目を評価した。特定的には、TrizolLSInvitrogenを用いて血漿サンプルからRNAを単離した。lin-4およびmiR-2に対する合成C.エレガンスmiRNA配列を一定濃度で各サンプルに添加し、精製効率をモニターして標準化に供した。標準的TrizolRNA単離法を用いて、組織RNAを単離した。標準的ABITaqmanmiRNAアッセイプロトコルを用いて、相対miRNAレベルを決定した。antimiR-208治療の有効性を評価するために、心臓組織マーカーを測定した。高食塩食HSは、miR-208aレベルの有意な減少をもたらした。M-10101antimiR-208aオリゴヌクレオチドによる治療は、HS/生理食塩水群と比較して心臓組織中のmiR-208aのより大きい阻害をもたらした図6A。Myh6発現miR-208aに対する宿主遺伝子を調べたところ、低食塩LS/生理食塩水群の動物と比較して、生理食塩水またはM-10591コントロールオリゴヌクレオチドのいずれの投与を受けたHS食の動物でも、有意な減少が明らかにされた図6B。これとは対照的に、antimiR-208aによる治療では、Myh6発現の高食塩食起因性減少が予防された図6B。Myh7遺伝子の発現は、LS/生理食塩水群と比較して、HS/生理食塩水群およびHS/コントロールオリゴヌクレオチド群の動物で有意に増大された図6C。antimiR-208a治療は、Myh7発現の高血圧症起因性増加を減弱させた図6C。これらの結果から、antimiR-208オリゴヌクレオチド治療は、高血圧病状により誘導される遺伝子発現変化を低減するうえで分子レベルで有効であることが示される。miRNATaqmanアレイカード分析により、ダール食塩感受性ラットの高血圧進行時の血漿中の種々のmiRNAのレベルの変化を測定し低食塩食/生理食塩水群対高食塩/生理食塩水群、低食塩食または高食塩食のいずれでも、8週間後にリアルタイムPCR分析により確認した表1。これらの血漿中miRNAは、疾患重症度および心不全進行を経時的に評価するためのバイオマーカーとして機能し得る。miRNATaqmanアレイカード分析表2および3およびリアルタイムPCR分析表4の両方により、高血圧症起因性心不全に罹患しているラットHS/生理食塩水群とantimiR-208aオリゴヌクレオチドHS/M-10101で治療されたラットとの間の血漿中miRNAレベルの変化を8週間で評価した。興味深いことに、この試験の結果から、心不全の進行および重症度、antimiR-208a治療の治療有効性、ならびにその両方の血漿中miRNAバイオマーカーが存在することが示される。また、疾患進行マーカーはすべて、antimiR-208治療の治療有効性のマーカーであった。しかしながら、antimiR-208aオリゴヌクレオチドの治療有効性のみのバイオマーカーであるいくつかの血漿中miRNA、たとえば、miR-19b、miR-199、miR-145、miR-214、miR-185、miR-140、miR-27a、miR-20a、miR-122、およびmiR-126が存在した。実験全体を通して、miR-423-5p、miR-19b、miR-499、およびmiR-16の血漿中レベルの経時変化を図7に示す。これらの実験の結果から、特異的miRNAの血漿中レベルたとえば、存在量は、心臓治療剤、特にantimiR-208治療剤の有効性のサロゲートマーカーとして、さらには心不全の進行および重症度のマーカーとして機能し得ることが示される。実施例3:antimiR治療およびカプトプリル治療は両方とも、循環miRに影響を及ぼす。鬱血性心不全のダール食塩感受性ラットモデル実施例1参照を用いて、血漿中miRNAレベルに及ぼすさまざまな治療剤の効果を評価した。特定的には、LNA含有antimiR-208オリゴヌクレオチドM-10101、カプトプリルアンギオテンシン変換酵素ACE阻害剤、または両者の組合せM-10101カプトプリルでラットを治療した。次の実験群を評価した。6.0NaCl食の開始1週間後、生理食塩水または25mg/kgのオリゴヌクレオチドM-10101、5’-CTTTTTGCTCGTCTTA-3’配列番号12、またはM-I0591、5’-TCCTAGAAAGAGTAGA-3’配列番号13を2週間ごとにラットに皮下sc投与した。カプトプリルまたは水は、経口胃管注入により毎日投与した。静脈内投与1週間後に開始して、2週間ごとに心エコー検査を行った。ラットに対するカプトプリル用量は、人間における標準的ヒト用量に一致するように選択した。TaqmanRT-PCRアッセイを用いて血漿および組織の分子評価項目を評価した。antimiR-208aオリゴヌクレオチドM-10101による治療は、高食塩食により誘導される体重低下を部分的に予防した図8A。これとは対照的に、コントロールオリゴヌクレオチドM-10591による治療は、体重増加に対して明確な効果を及さなかった。15mg/kgのカプトプリルで治療されたラットは、レギュラー低食塩LS食の動物と比較して、より低い体重を呈したが、高食塩食の動物と比較して、より高い体重を呈した図8B。したがって、カプトプリルは、体重の高食塩HS食起因性減少をわずかに低減したが、antimiR-208a治療剤と同定度に効果的ではなかった。体重グラフは、試験終了前に死亡したラットの最終体重のキャリーオーバーにより作成した。図9に示されるように、antimiR-208aM-10101単独による治療のみで、動物に高食塩食を給餌した後、生存率が有意に改善されたp<0.05;M-10101、水で治療されたラット対高食塩食、生理食塩水で治療されたラット。LS、生理食塩水コントロール治療ラットでもHS、M-10101治療ラットでも、死亡は観測されなかった。myomiRmiR-208a、miR-499、およびmiR-208bのリアルタイムPCR分析から、6HS食は、miR-208aの心臓中レベルを低減するが、miR-208aレベルは、M-10101によるmiR-208a阻害によりさらに低減されることが示された図10A。antimiR-208aオリゴヌクレオチドによる治療はまた、miR-499およびmiR-208bの心臓中レベルの減少をもたらした図10BおよびC。ミオシン遺伝子のリアルタイムPCR分析から、6HS食は、心臓中のαMHCMyh6を低減するが、antimiR-208aオリゴヌクレオチドM-10101治療、カプトプリル治療、またはantimiR-208aとカプトプリル治療との両者の組合せにより標準化されることが示された図11A。Myh7bレベルは、antimiR-208aオリゴヌクレオチドの投与を受けた動物では特異的に低減された図11B。しかしながら、カプトプリル治療単独では、Myh7b発現に対して明確な効果を及さなかった。カプトプリル治療およびantimiR-208aオリゴヌクレオチド治療は両方とも、HS食たとえば心臓ストレス要因により誘導されるβMHCMyh7発現の増加を低減したが、antimiR-208aオリゴヌクレオチドはより有効であった図11C。実際に、antimiR-208a治療動物のβMHCレベルは、LS食の動物との有意差がなかった。図12に示されるように、miR-208aの直接標的遺伝子のリアルタイムPCR分析から、anitmiR-208aオリゴヌクレオチドM-10101による動物の治療は、これらの遺伝子の発現の増加を引き起こすことが判明したことから、M-10101は、miR-208a機能を効果的に阻害したことが示唆される。以上に記載された結果から、antimiR-208aおよび標準治療剤カプトプリルは両方とも、高血圧により引き起こされる生理学的および分子的な変化の両方を低減するのに有効であることが実証される。しかしながら、antimiR-208aは、ダール食塩感受性ラットモデルで高血圧症起因性心不全の治療にカプトプリルよりも有効であると思われる。種々のmiRNAの血漿中レベルがantimiR-208aオリゴヌクレオチド治療の有効性と相関したので実施例2参照、異なる治療群のそれぞれのラットからの血漿中miRNAレベルを測定して、血漿中miRNAレベルがカプトプリルなどの他の心臓治療剤の影響を受けるかを決定した。いくつかのmiRNAの血漿中レベルは、antimiR-208aオリゴヌクレオチド治療およびカプトプリル治療の両方の有効性と相関すると思われた図13A-I。たとえば、リアルタイムPCR分析から、miR-423-5p、miR-106b、miR-16、miR-92a、miR-378、miR-210、miR-378、miR-20b、およびmiR-93は、antimiR-208a治療およびカプトプリル治療の両方に応答して低減されることが示された。興味深いことに、miR-378およびmiR-378の血漿中レベルは、antimiRとACE阻害剤との両者の併用療法と特異的に相関すると思われた図13EおよびG。他のmiRNAの血漿中レベルは、antimiR-208aオリゴヌクレオチド治療またはカプトプリル治療のいずれかと相関した。たとえば、miR-19Bの血漿中レベルは、antimiR-208aオリゴヌクレオチドの投与を受けた動物で有意に増大された図14A。miR-223の血漿中レベルは、両方のタイプの治療に応答して有意に低減されたが、antimiR-208aオリゴヌクレオチドの投与を受けて動物では、より有意な減少が観測された図14B。これとは対照的に、血漿中のmiR-21およびmiR-150のレベルは、カプトプリル治療図14CDで特異的に低減された。これらの結果から、異なる心臓治療剤に応答して血漿中レベルの変化が観測され得る一群のmiRNAが存在することが示される。興味深いことに、特定のタイプの心臓治療剤たとえば、miR-208a治療剤またはACE阻害剤とレベルが相関する特異的な血漿中miRNAが存在すると思われるが、他の血漿中miRNAのレベルは、両方のタイプの治療と相関すると思われる。血漿中miRNAのさらに他のサブセットは、併用療法のみの有効性のマーカーであると思われる。したがって、血漿中miRNAレベルは、心臓治療剤全般の有効性をモニターするだけでなく、特異的な治療的介入または併用治療の有効性をモニターするためにも、使用可能である。特異的方法動物およびLNA修飾antimiRの送達。LNA-antimiRオリゴヌクレオチドは、成熟miR-208a配列の5’領域に完全に相補的な非接合および完全にホスホロチオレート化されたオリゴヌクレオチドとしてmiRagenTherapeuticsIncで合成した。LNAコントロールオリゴヌクレオチドは、C.エレガンス特異的miRNAに対する配列からなるものであった。別段の指定がないかぎり、オリゴヌクレオチド化学物質のinvivo送達は、成体雄ダール食塩感受性ラットHarlanIndianapolisの尾静脈または皮下注入を介して低圧静脈内i.v.注入により達成した。すべての化学物質を同等の最終体積の生理食塩水に溶解させて注入し、その後、化学物質の明確な副作用に関して動物を調べた。指定の時点で組織サンプルを採取し、分子的または組織学的検査に供した。8週齢でダールラットを0.25NaClで維持し、または4、6、もしくは8NaCl食で給餌したHarlanIndianapolis。定量的リアルタイムPCR分析。invivoリアルタイムPCR分析のために、TrizolInvitrogenを用いて心臓組織からRNAを取り出し、その後、各組織サンプルからの2μgのRNAを用いて、製造業者の仕様Invitrogenに従ってSuperScriptII逆転写酵素によりcDNAを産生した。miR-208のレベルを検出するために、10~100ngの全RNAを用いて、製造業者の推奨基準に従ってTaqmanMicroRNAアッセイAppliedBiosystemsABIによりRT-PCRを行った。ABIから購入したTaqmanプローブを用いて定量的リアルタイムPCRにより遺伝子の一部の発現を分析した。血漿からの定量的リアルタイムPCR分析。製造業者のプロトコルにより、TrizolLSReagentInvitrogenを用いて、血漿サンプルからのRNAを単離した。RNA単離前、250pmolの2つの異なる合成C.エレガンスmiRNA配列を添加して、標的miRNAの標準化内部コントロールとして機能させた。使用したC.エレガンス配列は、cel-miR-2UAUCACAGCCAGCUUUGAUGUGC、配列番号5およびcel-lin-4UCCCUGAGACCUCAAGUGUGA、配列番号6Dharmaconであった。以上に記載したように、初期血漿体積に等しい最終体積で最終RNAペレットを再懸濁させ、5μlを後続のRT-PCR反応に使用した。統計解析。一元配置ANOVAおよびニューマンクールズ多重比較事後検定を用いて有意性を決定した。P<0.05は、統計的に有意とみなした。本明細書で考察および引用された出版物はすべて、それらの全体について参照により本明細書に援用する。開示された本発明は、記載の特定の方法、プロトコル、および材料に限定されるものではない。なぜなら、これらは、変更可能であるからである。同様に、本明細書中で用いられる用語は、特定の実施態様を説明することだけを目的としたものにすぎず、添付の特許請求の範囲によってのみ限定される本発明の範囲を限定しようとするものではない。当業者であれば、通常の実験の域を出ることなく、本明細書に記載の本発明の特定の実施態様に対する多くの等価態様がわかるであろう。またはそれらを確認することができるであろう。そのような等価態様は、添付の特許請求の範囲内に包含されるものとする。"