II型糖原病の治療用組成物の投与のための指示書を含むラベルを有する容器内にヒト酸α-グルコシダーゼを含有してなる医薬組成物。本発明は、II型糖原病を有する個体を治療するための最初の有効な手段を提供することを目的とする。本発明の要旨は、II型糖原病の治療用組成物の投与のための指示書を含むラベルを有する容器内にヒト酸α-グルコシダーゼを含有してなる医薬組成物、に関する。発明の要旨本発明は、酸α-グリコシダーゼの治療有効量例えば、体重の1kg当たり約15mg未満の酵素、好ましくは体重の1kg当たり約1~10mgの酵素、より好ましくは体重の1kg当たり約10酵素または体重の1kg当たり約5mg酵素を規則的な間隔例えば、毎月、月に2回、毎週、週に2回、毎日で個体に投与することによる個体におけるII型糖原病幼児、若年または成人-発症の治療方法に関する。酸α-グリコシダーゼは、ヒト酸α-グリコシダーゼ、好ましくは組換えヒト酸α-グリコシダーゼ、より好ましくはヒト酸α-グリコシダーゼの前駆体形態、およびさらにより好ましくはチャイニーズハムスター卵巣細胞において産生されるヒト酸α-グリコシダーゼの前駆体形態である。酸α-グリコシダーゼは、周期的例えば、毎月、月に2回、毎週、週に2回、毎日に投与される。好ましい態様では、酸α-グリコシダーゼは、静脈内;筋肉内;髄腔内;または脳室内に投与される。本発明の方法は、II型糖原病を有する個体を治療するための最初の有効な手段を提供する。発明の詳細な説明本発明は、酵素、酸α-グリコシダーゼGAAを個体に投与することによる、個体におけるII型糖原病GSDIIの治療方法、ならびにII型糖原病の治療のための医薬の製造における酵素、GAAの使用に関する。本明細書に記載されるように、出願人は、規則基礎により幼児にGAAを投与することによりGSDIIを患う幼児を首尾良く治療した;前記幼児は、心臓状態、肺機能、および神経発生の改善、ならびに組織におけるグリコーゲンレベルの減少を示した。これらの知見の結果として、幼児、若年および成人-発症GSDIIを含むGSDIIを治療することが初めてここで可能となった。本明細書中に記載される結果は、最も重篤な形態のGSDII幼児GSDIIを有する個体を考察するが、この方法は、若年または成人発症GSDIIを発症した個体において等しく有効であり、実際、若年性または成人発症GSDIIを有する個体が、より高いレベルの残余GAA活性それぞれ、1~10、または10~40を有し、それゆえ投与されるGAAにより免疫学的寛容であるようである場合例えば、それらは一般に、内因性GAAに対して交差反応性免疫反応性物質CRIM-陽性であり、その結果、それらの免疫系は外来タンパク質としてGAAを認識せず、それらは抗GAA抗体を発生しない、より効果的でさえありうると予想される。かかる個体における増強された効力は、CRIM-陰性患者1および2抗GAA抗体を発生したにおいて見られた変化しやすい課程とは対照的に、CRIM-陽性であり、抗-GAA抗体を発生せず、発育上の重大時点の正常な進行を示した患者3において見られ得る。本明細書中で使用される用語治療するおよび治療は、疾患に関連する1つまたはそれより多くの症状の改善、疾患の1つまたはそれより多くの症状の発症の防止または遅延、および/または疾患の1つまたはそれより多くの症状の重篤度または頻度の低減をいう。例えば、治療は、心臓の状態の改善例えば、拡張終期および/または収縮終期の容積の増大、あるいはGSDIIにおいて典型的に見出される進行性心筋症の減少、改善または防止または肺機能の改善例えば、ベースライン容量に対する泣き叫ぶ肺活量、および/または泣いている間の酸素不飽和化の規準化;神経発生および/または運動スキルmotorskillにおける改善例えば、AIMSスコアにおける増大;疾患に罹った個体の組織におけるグリコーゲンレベルの減少;またはこれらの効果の任意の組み合わせをいい得る。1つの好ましい態様では、治療は、心臓の状態の改善、特にGSDII関連心筋症の減少または防止を含む。本明細書中で使用される用語改善、増大、または減少は、本明細書中に記載される治療の開始の前の同じ個体における測定値、または本明細書中に記載される治療の非存在下での対照個体または複数の対照個体における測定値等のベースライン測定値と比べた値を示す。対照個体は、治療対象の個体と同じ形態のGSDII幼児、若年または成人発症のいずれかに罹った個体であり、治療対象の個体とおおよそ等しい年齢である治療個体および対照個体における疾患の段階が比較可能であることを確実にするために。治療対象の個体は、GSDIIすなわち、幼児GSDII、若年性GSDII、または成人発症GSDIIのいずれかを有する個体胎児、子供、青年、または成人のヒトである。個体は、残余のGAA活性を有するか、または測定可能な活性を有さない。例えば、GSDIIを有する個体は、正常なGAA活性の約1未満幼児GSDIIであるGAA活性、正常なGAA活性の約1~10若年GSDIIであるGAA活性、または正常なGAA活性の10~40成人GSDIIであるGAA活性を有しうる。個体は、内因性GAAに対してCRIM陽性またはCRIM陰性でありうる。好ましい態様では、個体は、内因性GAAに対してCRIM陽性である。別の好ましい態様では、個体は、疾患を最近診断した個体である。初期治療診断後、可能な限りすぐに開始する治療は、疾患の影響を最小化し、治療の利益を最大化するために重要である。本発明の方法において、ヒト酸αグリコシダーゼGAAは個体に投与される。GAAは、投与される場合、疾患を発症した組織例えば、心臓、筋肉等の組織を標的化する形態である。1つの好ましい態様では、ヒトGAAは、GAAの効率的なレセプター媒介性取り込みを可能にするモチーフを含むようなその前駆体形態で投与される。あるいは、GAAの効率的な取り込みを可能にするモチーフを含むように修飾されたヒトGAAの成熟形態が投与されうる。特に好ましい態様では、GAAは、組換えヒトGAAの前駆体形態である。GAAは種々の供給源から得られうる。特に好ましい態様では、チャイニーズハムスター卵巣CHO細胞培養で産生された組換えヒト酸α-グリコシダーゼrhGAAが使用される例えば、FullerMら、EurJBiochem234903909VanHoveJLKら、ProcNatlAcadSciUSA936570を参照のこと;これらの参考文献の全教示が参考として本明細書中に援用される。CHO細胞におけるGAAの産生は、所望の組織心臓および筋肉におけるGAAの有意かつ効率的な取り込みを可能にするグリコシル化を有する産物を生じるようである;グリコシル化がトランスジェニックマウスおよびウサギのミルクにおいて産生されるGAAのグルコシル化とは異なることが仮定される例えば、BijvoetAGAら、HumMolGenet718151824BijvoetAGAら、HumMolGenet821452153を参照のこと。GAAは、約1035μmol分mgタンパク質の範囲、好ましくは約2~35μmol分mgタンパク質の範囲において比酵素活性を有する。1つの好ましい態様では、GAAは、少なくとも約10μmol分mgタンパク質の比酵素活性;より好ましくは、少なくとも約20μmol分mgタンパク質の比酵素活性;さらにより好ましくは、少なくとも約25μmol分mgタンパク質の比酵素活性;なおより好ましくは、少なくとも約275μmol分mgタンパク質の比酵素活性を有する。GAAは、本明細書中に記載されるように、単独で、またはGAAを含む組成物または医薬例えば、疾患の治療のための医薬の製造におけるで投与されうる。組成物は、生理学的に許容されるキャリアまたは賦形剤とともに製剤化されて医薬組成物が調製されうる。キャリアおよび組成物は無菌でありうる。製剤は、投与の様式に適合しなければならない。適切な薬学的に許容されうるキャリアとしては、水、塩溶液例えば、NaCl、生理食塩水、緩衝化生理食塩水、アルコール、グリセロール、エタノール、アラビアガム、植物油、ベンジルアルコール、ポリエチレングリコール、ゼラチン、ラクトース、アミロースまたはデンプン等の炭水化物、マンニトール、スクロース等の糖、ブドウ糖、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ケイ酸、粘稠性パラフィン、芳香油、脂肪酸エステル、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等、ならびにその組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。医薬調製物は、所望であれば、活性化合物と有害に反応しない補助薬剤、例えば、潤滑剤、保存剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響する塩、緩衝液、着色剤、香味料および/または芳香族物質等を混合することができる。好ましい態様では、静脈内投与に適切な水溶性キャリアが使用される。組成物または医薬は、所望であれば、少量の湿潤剤または乳化剤、またはpH緩衝化剤も含みうる。組成物は、液体溶液、懸濁物、エマルジョン、タブレット、ピル、カプセル、持続放出製剤、または粉体でありうる。組成物はまた、伝統的な結合材およびトリグリセリド等のキャリアを有する坐薬として製剤化されうる。経口製剤は、医薬グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウム等の標準的なキャリアを含みうる。組成物または医薬は、ヒトへの投与に適した医薬組成物として日常的な手順に従って製剤化されうる。例えば、好ましい態様では、代表的な静脈内投与のための組成物は、無菌等張水性緩衝液中の溶液である。必要であれば、組成物はまた、注射の部位の痛みを和らげるために可溶性薬剤および局所麻酔薬を含みうる。一般に、成分は、別々にまたは例えば、活性薬剤の量を示すアンプルまたは匂い袋sachette等の密閉にして測定される容器中に凍結乾燥粉体または水非含有濃縮物として単位投薬形態で一緒に混合されるかのいずれかで供給される。組成物が注射で投与される場合、無菌医薬グレード水、生理食塩水またはブドウ糖/水を含有する注入ボトルに分配されうる。組成物が注射で投与される場合、注射のための無菌水または生理食塩水のアンプルは、投与の前に成分が混合されうるように提供されうる。GAAは、中性または塩の形態として製剤化されうる。薬学的に許容されうる塩は、塩酸、リン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸等に由来する遊離アミノ基を用いて形成されるもの、およびナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、水酸化第二鉄、イソプロピルアミン、トリエチルアミン、2-エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカイン等に由来するもの等の遊離カルボキシル基を用いて形成されるものが挙げられる。GAAまたはGAAを含む組成物もしくは医薬は、適切な経路で投与される。1つの態様では、GAAは静脈内投与される。他の態様では、GAAは、心臓または筋肉例えば、筋肉内等の標的組織または神経系例えば、脳への直接注射;脳室内;髄腔内への直接投与により投与される。所望であれば、1つより多くの経路が同時に使用されうる。GAAまたはGAAを含む組成物または医薬は、単独、あるいは抗ヒスタミン例えば、ジフェンヒドラミンもしくは免疫抑制剤または抗GAA抗体を中和する他の免疫療法剤等の他の薬剤と組み合わせて投与されうる。用語組み合わせては、薬剤がGAAまたはGAAを含む組成物とおおよそ同時に投与されることを示す。例えば、薬剤は、GAAを含む組成物に混合され、それによりGAAと同時に投与されうる;あるいは、薬剤は混合することなく同時に投与される例えば、GAAがまた投与される静脈ラインでの薬物のピギーバックpiggybacking送達、または逆も同様。別の例では、薬物は、GAAの投与の短い時間フレーム内例えば、24時間内に別々に投与されうる例えば、混ぜないで。1つの好ましい態様では、個体が内因性GAAについてCRIM陰性である場合、GAAまたはGAAを含む組成物は、抗GAA抗体の量を減少するように、または抗GAA抗体の産生を防止するように設計された免疫抑制療法または免疫治療法と組み合わせて投与される。例えば、血友病患者において使用されるのと類似したプロトコルNilssonIMら、NEnglJMed31894750が抗GAA抗体を減少するために使用される。かかる療法はまた、内因性GAAに対してCRIM陽性であるが、抗GAA抗体を有するか、または有する危険性がある個体において使用されうる。特に好ましい態様では免疫抑制療法または免疫治療法は、抗GAA抗体の産生の可能性を最小化するためにGAAの最初の投与の前に始められる。GAAまたはGAAを含む組成物もしくは医薬は、治療有効量すなわち、規則的間隔で投与される場合、上記のように、疾患に関連する症状を軽減し、疾患の発症を防止もしくは遅延し、および/または疾患の症状の重篤度もしくは頻度を低減することにもより、疾患を治療するのに十分である投薬量で投与される。疾患の治療において治療的に有効である量は、疾患の影響の特性および程度に依存し、標準的な臨床技術により決定されうる。さらに、インビトロまたはインビボアッセイは、任意に、最適な用量範囲を同定することを補助するために使用されうる。使用される正確な用量はまた、投与の経路、疾患の重篤さに依存し、担当医の判断および各患者の状況により決定されるべきである。効果的な用量は、インビトロまたは動物モデル試験系に由来する用量応答曲線から推定されうる。好ましい態様では、治療有効量は、約15mg酵素個体のkg体重未満、好ましくは約1~10mg酵素kg体重の範囲、さらにより好ましくは約10mg酵素kg体重または約5mg酵素kg体重である。特定の個体に関する有効用量は、個体の必要性に応じて、時間経過とともに変化例えば、増大または減少しうる。例えば、物理的疾病もしくはストレスのときには、または抗GAA抗体が存在するかもしくは増大する場合、または疾患症状が悪化した場合、量は増大されうる。GAAまたはGAAを含む組成物もしくは医薬の治療有効量は、疾患の影響の特性および程度、および進行基礎に応じて、規則的な間隔で投与される。本明細書中で使用される規則的な間隔での投与は、治療有効量が周期的一回の用量とは区別されるようにに投与されることを示す。間隔は標準的な臨床技術により決定されうる。好ましい態様では、GAAは、毎月、月に2回;毎週;週に2回;または毎日投与される。単独の個体に関する投与間隔は、固定された間隔を必要とはしないが、個体の必要性に応じて時間経過にともなって変化しうる。例えば、物理的疾病またはストレスのときには、抗GAA抗体が存在するようになるかもしくは増大する場合、または疾患症状が悪化する場合、投薬間の間隔は減少されうる。1つの好ましい態様では、10mgの酵素kg体重の治療有効量が毎週投与される。別の好ましい態様では、5mgの酵素kg体重の治療有効量が週に2回投与される。本発明はさらに、本明細書中に記載される方法などによるII型糖原病の治療用組成物の投与のための使用説明書を含むラベルを有する容器例えば、バイアル、ボトル、静脈投与のためのバッグ、シリンジなど中に、本明細書中に記載されるように、ヒト酸α-グルコシダーゼを含む医薬組成物に関する。本発明はさらに、以下の実施例によってさらに、かつより詳細に記載される。実施例:組換えヒト酸α-グルコシダーゼの使用の第I/II相試験材料および方法患者:包含基準は、GAA活性が事実上ない皮膚線維芽細胞および/または筋肉生検において正常の1未満幼児性GSD-IIに罹患している幼児ならびに1歳未満の幼児であった。排除基準としては、ベースラインでの重篤な心肺機能不全および/または生存を減少するような他の医学状態を挙げた。診断後の疾患の限られた生存期待に起因して、プラセボ対照を使用しなかった。歴史的な対照データは、事実上全ての患者が1歳前に死亡することを示した表1。幼児性GSD-IIに罹患している3人の幼児皮膚線維芽細胞および/または筋肉生検において正常の1未満まで減少した酸α-グルコシダーゼ活性によって証明されるを、本研究に登録した。タンパク質レベルにおいて、患者1および2の両者は、検出可能なGAAタンパク質を有していなかったが、患者3は免疫ブロット分析によって検出すると、GAAタンパク質のレベルが減少していた。治療の開始前のベースライン臨床データを、表2にまとめる。患者1は、2ヶ月齢で鼡径ヘルニアの人工外科的修復中に心停止を示した。彼が4ヶ月齢時の次の評価は、3週齢の運動発達と等価であると評価される運動発達年齢を伴う重篤な低血圧の兆候を示した。彼はまた、重篤な心筋症および左肺の部分的無気肺を生じる左主気管支の圧迫に伴う重篤な心臓肥大、および摂食困難および成長不全を有していた。患者2および3は、出生前にポーンプ病と診断された;重要なことに、それぞれは、幼児性GSD-IIに典型的に寄与する症状で死亡した兄弟姉妹を以前に有していた。両患者は、運動遅延の兆候を有していた;さらに患者2は、摂食困難、成長不全および重篤な心筋症を有していた。基本設計:本研究を、第I/II相、オープンラベル、単一用量、幼児性ポーンプ病に罹患する3人の患者における週2回投与のrhGAAの安全性および有効性研究として設計した。本研究は、倫理調査委員会によって承認され、そして親の十分な説明に基づく同意を得た。本研究は、初期スクリーニング相、13週治療相、および追跡治療相からなった。スクリーニング相中、患者の初期臨床状態を評価し;さらに、GAAおよびグリコーゲンレベルを骨格筋生検サンプルにおいて測定した。治療相中、患者は、週2回rhGAAの静脈注入5mgkgを受けた。患者を、酵素注入に対する任意の有害反応について、およびrhGAA投与が幼児性GSD-IIの臨床的進行上有する任意の影響について綿密にモニターした。一般的な臨床評価としては、慣用的な物理的試験、完全な尿で補った分析、血液分析、および臨床的化学分析電解質、グルコース、クレアチニン、BUN、CO2、タンパク質、アルブミン、ALT、AST、ビリルビン、アルカリホスファターゼ、CKおよびアイソザイム、尿酸が挙げられる。徹底的な神経学的評価および運動機能評価としては、手動筋肉強度試験、デンバー発達試験、およびAIMSAlbertaInfantMotorScale;PiperMCおよびDarrahJMotorAssessmentoftheDevelopingInfantWBSandersCompanyPhiladelphia1994を参照のことが挙げられる。二次元、M-モードおよびドップラー心エコー検査を使用して、左心室質量、壁厚みならびに収縮期機能および拡張期機能を評価した。さらに、種々の肺機能泣いているときの肺活量、トレンドtrendパルスオキシメトリーおよび一回呼吸後endtidal二酸化炭素測定、および陰性吸入力操作negativeinspiratoryforcemaneuverを、研究を通してモニターした。13週治療相のまとめとして、前治療生検の反対の外大腿contralateralthigh四頭筋から得た筋肉生検のGAA活性、グリコーゲンレベルおよび組織病理学を測定した。この筋肉生検をrhGAA注入後3日目に採取した。酵素供給源:rhGAA分泌CHO細胞の培養培地から精製したrhGAAVanHoveJLKら、ProcNatlAcadSciUSA936570を、GMP-グレード滅菌および無色溶液として提供したSynpacInc99AlexanderDriveSuiteNW20ResearchTriangleParkNorthCarolina27709製。rhGAAを、277~302μmol分mgタンパク質の特異的酵素活性を有する110kD前駆体タンパク質として最初に精製した。抗rhGAA抗体に対するELISA:抗rhGAA抗体に対するELISAは、PhoenixInternationalLifeSciencesIncによって実施される標準的なサンドイッチアッセイであった。簡単には、マイクロタイタープレートを20μgmlのrhGAAを用いて一晩コーティングし、次いでウシIgGを用いてブロックした。患者血清1:100に希釈し、次いで1:2で連続して希釈するを、プレート上でrhGAAと反応させた。結合抗体の量を、ホースラディシュペルオキシダーゼ結合体化ヤギ抗ヒト二次抗体およびテトラメチルベンジジン基質を用いて、450nmでの吸光度を測定することによって検出した。陽性サンプルを、陰性カットオフよりも高い吸光度を有するとして規定した。これは、正常なヒト血清陰性対照のA450値の2倍として規定した。力価を、陰性カットオフ値より上のA450読み取り値をさらに有する血清の希釈として規定した。GAA活性、グリコーゲン含有量およびウエスタンブロット分析:GAA活性を、以前に記載ReuserAJJら、AmJHumGenet30132143されたようにpH43での4-メチル-アンベリフェリルumbelliferyl-α-D-グルコシド切断の測定によって評価した。初期標準として、酸-β-ガラクトシダーゼ活性を、基質として4-メチル-アンベリフェリルumbillliferyl誘導体を用いて同様にアッセイしたWengerDAおよびWilliamsCScreeningforlysosomaldisordersHommesFA編TechniquesindiagnostichumanbiochemicalgeneticsalaboratorymanualWileyLissNewYork1991pp587617。グリコーゲン含有量を、Anigerアミログルコシダーゼを用いた組織抽出物の処理およびグルコース放出の測定によって測定したVanHoveJLKら、ProcNatlAcadSciUSA936570。ウエスタンブロット分析を、精製胎盤GAAに対してウサギにおいて惹起した抗体を用いて実施したVanHoveJLKら、前出。組織学:筋肉の1検体を、トラガカントゴムを有するチャック上にマウントし、液体窒素で冷却したイソペンテン中で急速冷凍した。5ミクロンの切片を得、ヘマトキシリンおよびエオシン、修飾ゴモリトリクローム、ATPasepH435および94、ニコチンアミドデヒドロゲナーゼテトラゾリウムtetrazolinmブルーレダクターゼ、ならびにホスホリラーゼで染色した。第二検体をインサイチュでクランプして、25グルタルアルデヒド中に置いた。この組織を、グリコーゲンの損失を防ぐため、一括してenbloc染色せずに酢酸ウラニルで処理した。やや薄いsemithin切片05ミクロンを、トルイジンブルーで染色して、薄い切片を酢酸ウラニルおよびクエン酸鉛で染色して、電子顕微鏡検査のために銅のグリッド上にマウントした。結果治療に対する患者の反応:幼児性ポーンプ病に罹患している3人の患者は、21~25ヶ月間、週2回、rhGAAの静脈注入を受けた。重篤なアレルギー反応は、酵素治療中に生じなかった。しかし、軽い発熱および被刺激性の増加を伴う皮膚発疹の3つのエピソードが、2人の患者において生じた患者1は2つのエピソード、患者2は1つのエピソード。これらの症状は、ジフェニルヒドラミンの静脈投与後に直ちに回復した。皮膚発疹の第二エピソード後、患者1に、さらなるエピソードを防ぐため、全ての引き続くrhGAA注入の直前に経口用ジフェニルヒドラミンで前投与した。患者2に、さらなるエピソードを防ぐため、全ての引き続く注入の直前に経口用ジフェニルヒドラミンで同様に前投与した。全ての治療患者において、複数の血液学的パラメータ、肝機能、腎機能、および尿検査は全て、治療期間を通して正常な範囲であった。IgGクラスの抗rhGAA抗体を、酵素治療の開始後3週間ほどで患者1および2において検出した図1A~1C。抗rhGAA抗体力価は、患者1において16週で1:1600まで図1A、患者2において11~19週間で1:6400~1:12800までに増加した図1B。抗rhGAA抗体力価が増加する場合、本発明者らは、臨床的な改善治療中の初期に示される-以下参照はもはや進展していないと言及した。面倒な影響も抗rhGAA抗体のいずれも、患者3においては検出されなかった図1C。心臓状態:酵素治療の開始前、患者1および2は、左心室LV質量の増加、心室壁の同心性肥厚および心室腔のサイズの減少に関連する重篤な肥大性心筋症、を有していた図2B、患者2における腔は、収縮期の終わりにほとんど閉塞されている。これらの特性全ては、幼児型ポーンプ病に罹患している未治療患者に典型的に見られる。さらに、患者2は、超動的短縮を反映した増加したLV駆出画分短縮画分、84を有することを示した。しかし、患者は、心室流出路の閉塞の兆候を全く有していなかった。患者において評価したrhGAAの最初の3ヶ月間の縦断心エコーデータを、図2A~2Cに示す。治療期間中、患者1および2の両者において、LV拡張終期容積および収縮終期容積2D測定は、治療相中に測定した値と比較して連続的に増加し、治療の3ヶ月終了までにほぼ2~3倍まで増加したそれぞれ、図2Aおよび2B。類似の増加を、Mモード分析によって示したデータは示さない。二次元LV質量測定図2D~2Fは、LV容積が増加するように初めは増加したが、次いで治療中に着実に、治療前LV質量値未満まで減少した治療前レベルベースラインの60~70まで減少。質量の初期増加は、LV壁厚みにおける変化ではなく、LV容積における増加にほとんど起因するようであった。心臓パラメータにおけるこれら全般的な改善を、最後の追跡評価を通して維持したが、患者1は、ウイルス性肺炎によってLV質量がさらに増加して、心機能に障害が生じた10日間、集中的な毎日の酵素注入を必要とした。一方、両患者における心室機能は、正常であり、かつ最終追跡で正常なままであった。従って、治療されていない幼児性ポーンプ病に通常示される進行性心臓病的状態を明らかに防いだ。患者3は、64gβ2正常な上限は65のLv質量を有していたが、他の点では治療開始時で正常なベースライン心臓評価であり、治療後7ヶ月まで正常現在33gβ2のLV質量でありつづけた。肺機能:治療の初期2ヶ月において、肺機能の改善が、ベースライン肺活量を超えての泣いているときの肺活量増加患者1および2において、それぞれ28および70より大きな改善ならびに泣いている間のO2脱飽和の正常化最大に泣いている間、患者1において70のO2飽和および患者2において81によって明白であった。呼吸筋強度の減少もまた、45cmH2Oの陰性吸入力操作NIFMによって、治療前の患者1において証明した。治療によって、NIFMは55cmH2Oまで増加した。しかし、両患者の肺機能において示された初期改善は、次の2~3ヶ月にわたってプラトーであり、その後抗rhGAA抗体の上昇に伴って衰えた。次いで両患者は、呼吸不全に陥ったウイルス性肺炎のエピソード後、人工呼吸器依存となった。患者3は、治療初期では正常な肺機能を有しており、最終追跡で正常な肺機能試験を示すまで続いた。神経発達および運動評価:AlbertaInfantMotorScaleAIMSを使用して、幼児において運動発達を評価した。3人の患者全てに対するAIMSスコアは、年齢に対して5パーセンタイルより下で開始した図1A~1C。患者1は、5パーセンタイルより下を維持したが、治療13週での減退が始まる前は範囲内の増加を示した図1A。患者2は、5週で25パーセンタイルまで上昇し、スキルが増加しているにも関わらず7週後、結局5パーセンタイルより下まで後退し、次いで13週と17週との間で急速な減少およびスキルの損失を示した図1B。臨床的な減少の始まりは再び、抗rhGAA抗体の上昇を伴った図1A、1B。同時に投与された神経学的評価およびデンバー発達評価は、患者1において、進行性のはなはだしい運動遅延を伴うがプラトーおよび次の後退が明らかになる10週までに改善するはなはだしい運動遅延を有する、正常な個人社会personalsocial領域、言語領域、および良好な運動発達領域を示した。重要なことに、はなはだしい運動スキルは、10週まで有意な進行を示しているが、決して正常に達していない。患者2は、後退が生じる14~16週まで、良好な運動領域、個人社会領域、および言語領域における正常な発達スキルの達成を伴うだけの、はなはだしい運動範囲motorsphereにおける中程度の発達遅延を示した。現今、両患者は、年齢に対して正常な個人社会発達を有するが、他全ての領域においては遅延している。患者3は、AIMSスコアの安定した増加を示し、治療11週までに10パーセンタイル以上に上昇し、20週までに25パーセンタイルより上に上昇し図1C、そして最終追跡では90パーセンタイルより上に上昇した。9ヶ月齢で、彼は自主的に座りつづけ、移動のために相互にはい、そして手で掴むことで立ちつづけた。著しく、彼は12ヶ月齢までに自主的に歩き、14ヶ月齢までに手を使わずにしゃがみ、立つことができた。現今、彼はまた、全ての領域において歳相応の正常な神経学的評価およびデンバー発達評価である。筋肉GAA活性およびグリコーゲン含有量:筋肉生検を、rhGAA治療の開始2ヶ月前の診断と同時になされた生検を有する患者1を除いてrhGAA治療の開始1週間前にベースラインで実施した。rhGAA治療4ヵ月後、筋肉生検を、酵素注入3日後に反対の外側四頭筋から得た谷troughレベル。rhGAA治療で、GAA活性は、患者1および2の両者においてベースライン治療前レベルより2~3倍以上増加し、患者3においては18倍増加した表3。GAA活性の絶対レベルは、正常筋肉に見られるGAA活性の8に近づいた。患者1および2において筋肉グリコーゲン含有量には目に見えるほどの変化はなかったが、グリコーゲンレベルは、患者3において正常な範囲内まで減少した。組織学:全ての患者の治療前生検は、冷凍切片において筋線維の著しい空胞化を示した。やや薄い切片の評価は、線維がグリコーゲンたまりlakeの形成を伴ったグリコーゲンによって膨脹していることを示した。いくつかの線維においては、残りの膜のかすかな輪郭を認め得た。電子顕微鏡検査により、膨脹したリソソームおよび細胞質中で溶解してなくなったlyingfreeリソソームの両方においてグリコーゲンの存在を確認した。患者3からの生検は、他の2人の患者よりもリソソーム内にグリコーゲンが残留したデータは示さない。患者1および2の治療後4ヶ月の生検は、グリコーゲン蓄積の点で治療前生検と類似していた。しかし、患者3の治療後生検は、可視visibleグリコーゲンにおいて著しい減少があり、そしてほとんどの筋線維において本質的に正常な組織学であった。電子顕微鏡検査により、多くの残留膨脹リソソームにおいてグリコーゲンが枯渇していることを示した。いくつかのグリコーゲンたまりおよびグリコーゲンリッチリソソームが残っていた。ウエスタンブロット分析抗rhGAA抗体が患者1および2において発達するが患者3においては発達しない理由を研究するため、本発明者らは、各患者由来の線維芽細胞において発現されたしかし、非機能的GAAタンパク質の検出に特異的なウエスタンブロット分析を実施した。GAAタンパク質は、患者1および2の線維芽細胞において検出されず、一方、GAAタンパク質の容易に検出可能な前駆体110kD形態を患者3において見出した。これらのパターンは、幼児性GSDIIに罹患している他の患者において以前に見られていたVanderPloegATら、AmJHumGenet44787793。予期される正常な線維芽細胞は、主として95kDおよび76kDのGAAタンパク質を有する。さらなる研究さらに3人の患者を、さらなる研究に登録した。3人全てがCRIM陽性である。3~6週間の治療10mgkg体重、rhGAAの毎週静脈注入後、心機能、筋強度、および運動発達の改善が見られた。本明細書中に引用される全ての広報の教示は、その全体が参考として本明細書中に援用される。本発明は、詳細に示され、その好ましい実施形態を参照して記載されるが、形態および詳細における種々の変更が、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の趣旨および範囲から逸脱せずになされ得ることが当業者によって理解される。本発明の態様として、以下のものが挙げられる。[1]ヒト酸α-グリコシダーゼの治療有効量を規則的な間隔で個体に投与することを含む、個体におけるII型糖原病の治療方法。[2]ヒト酸α-グリコシダーゼの治療有効量を規則的な間隔で個体に投与することを含む、個体におけるII型糖原病に関連する心筋症の治療方法。[3]II型糖原病が、幼児II型糖原病、若年性II型糖原病、または成人発症II型糖原病である、[1]または[2]記載の方法。[4]ヒト酸α-グリコシダーゼの治療有効量が個体の体重の1キログラム当たり約15mg未満の酸α-グリコシダーゼである、[1]または[2]記載の方法。[5]ヒト酸α-グリコシダーゼが組換えヒト酸α-グリコシダーゼおよび/または組換えヒト酸α-グリコシダーゼの前駆体である、[1]または[2]記載の方法。[6]組換えヒト酸α-グリコシダーゼがチャイニーズハムスター卵巣細胞において産生される、[5]記載の方法。[7]規則的な間隔が、毎月、月に2回、毎週、週に2回または毎日である、[1]または[2]記載の方法。[8]ヒト酸α-グリコシダーゼが、静脈内、筋肉内、髄腔内および脳室内からなる群より選ばれた経路によって投与される、[1]または[2]記載の方法。[9]ヒト酸α-グリコシダーゼが、免疫抑制剤の投与に組み合わせて、または引き続いて投与される、[1]または[2]記載の方法。[10]II型糖原病の治療用組成物の投与のための指示書を含むラベルを有する容器内にヒト酸α-グリコシダーゼを含有してなる医薬組成物。[11]個体におけるII型糖原病の治療のための医薬の製造のための治療有効量のヒト酸α-グリコシダーゼの使用。[12]個体におけるII型糖原病に関連する心筋症の治療のための医薬の製造のための治療有効量のヒト酸α-グリコシダーゼの使用。[13]ヒト酸α-グリコシダーゼの治療有効量が、個体の体重の1キログラム当たり約15mg未満の酸α-グリコシダーゼである、[11]または[12]記載の使用。[14]ヒト酸α-グリコシダーゼが、組換えヒト酸α-グリコシダーゼおよび/または組換えヒト酸α-グリコシダーゼの前駆体である、[11]または[12]記載の使用。[15]組換えヒト酸α-グリコシダーゼがチャイニーズハムスター卵巣細胞において産生される、[14]記載の使用。[16]医薬が、毎月、月に2回、毎週、週に2回または毎日の規則的な間隔で投与されるように調製される、[11]または[12]記載の使用。[17]医薬が、静脈内、筋肉内、髄腔内および脳室内からなる群より選ばれた経路で投与されるように調製される、[11]または[12]記載の使用。[18]医薬が免疫抑制剤をさらに含んでなる、[11]または[12]記載の使用。