アデニンヌクレオチドトランスケータ2低分子干渉RNAANT2siRNAまたはANT2短ヘアピンRNAshRNAを有効成分として含有する乳房癌治療用組成物であって、乳房癌細胞の転移を抑制することを特徴とする組成物。前記ANT2siRNAまたはANT2shRNAは、配列番号3で記載されたアンチセンス配列が配列番号1で記載されたセンス配列と結合し、ANT2mRNAの分解を誘導することを特徴とする請求項1に記載の組成物。前記組成物は、HER2/neuヒト上皮成長因子受容体2の発現を低下させることを特徴とする請求項1に記載の組成物。前記組成物は、TRAILTNF関連アポトーシス誘導リガンドの乳房癌治療効果を増加させることを特徴とする請求項1に記載の組成物。前記組成物は、乳房癌細胞表面のDR4死受容体4及びDR5死受容体5の発現を増加させ、DcR1死デコイ受容体1及びDcR2死デコイ受容体2の発現を減少させることを特徴とする請求項4に記載の組成物。前記組成物は、p53タンパク質の発現及び活性を増加させることを特徴とする請求項4に記載の組成物。アデニンヌクレオチドトランスケータ2低分子干渉RNAANT2siRNAまたはANT2短ヘアピンRNAshRNAを有効成分として含有する乳房癌幹細胞治療用組成物。前記組成物は、ABCG2ATP結合カセットサブファミリーGメンバー2の発現及び活性を減少させることを特徴とする請求項7に記載の組成物。前記組成物は、抗癌剤と併用投与時に抗癌剤に対する癌細胞の反応性を増加させ、耐性を減少させて乳房癌治療効果を増進させることを特徴とする請求項7に記載の組成物。前記抗癌剤は、ドキソルビシンであることを特徴とする請求項9に記載の組成物。アデニンヌクレオチドトランスケータ2低分子干渉RNAANT2siRNAまたはANT2短ヘアピンRNAshRNAを患者に投与し、乳房癌を治療する方法であって、乳房癌細胞の転移を抑制することを特徴とする方法。アデニンヌクレオチドトランスケータ2低分子干渉RNAANT2siRNAまたはANT2短ヘアピンRNAshRNAを患者に投与し、乳房癌幹細胞を治療する方法。本発明者は、ANT2mRNA発現水準を特異的に減少させることができるANT2siRNAまたはANT2shRNAが乳房癌細胞の転移を特異的に抑制するだけでなく、乳房癌幹細胞を治療することができることを知見し、本発明に至った。したがって、本発明の目的は、乳房癌治療用組成物及び乳房癌幹細胞を治療する方法などを提供することにある。具体的に、本発明は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAを有効成分として含有する乳房癌治療用組成物、及びANT2siRNAまたはANT2shRNAを有効成分として含有する乳房癌幹細胞治療用組成物などを提供する。本発明は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAを有効成分として含有する乳房癌治療用組成物であって、乳房癌細胞の転移を抑制することを特徴とする組成物を提供する。本発明の一実施形態において、上記ANT2siRNAまたはANT2shRNAは、配列番号3で記載したアンチセンスanti-sense配列が配列番号1で記載したセンスsense配列と結合し、ANT2mRNAの分解を誘導することを特徴とする。本発明の他の実施形態において、上記組成物は、HER2/neuヒト上皮成長因子受容体2humanepidermalgrowthfactorreceptor2の発現を低下させることを特徴とする。本発明のさらに他の実施形態において、上記組成物は、TRAILTNF関連アポトーシス誘導リガンドTNF-relatedapoptosis-inducingligandの乳房癌治療効果を増加させることを特徴とする。本発明のさらに他の実施形態において、上記組成物は、乳房癌細胞表面のDR4死受容体4deathreceptor4及びDR5死受容体5deathreceptor5の発現を増加させ、DcR1死デコイ受容体1deathdecoyreceptor1及びDcR2死デコイ受容体2deathdecoyreceptor2の発現を減少させることを特徴とする。本発明のさらに他の実施形態において、上記組成物は、p53タンパク質の発現及び活性を増加させることを特徴とする。また、本発明は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAを有効成分として含有する乳房癌幹細胞治療用組成物を提供する。本発明の一実施形態において、上記組成物は、ABCG2ATP結合カセットサブファミリーGメンバー2ATP-bindingcassettesub-familyGmember2の発現及び活性を減少させることを特徴とする。本発明の他の実施形態において、上記組成物は、抗癌剤と併用投与時に抗癌剤に対する癌細胞の反応性を増加させ、耐性を減少させて、乳房癌治療効果を増進させることを特徴とする。上記抗癌剤は、ドキソルビシンdoxorubicinを含む。また、本発明は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAを患者に投与し、乳房癌を治療する方法であって、乳房癌細胞の転移を抑制することを特徴とする方法を提供する。また、本発明は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAを患者に投与し、乳房癌幹細胞を治療する方法を提供する。本発明のANT2siRNAまたはANT2shRNAは、乳房癌細胞のANT2遺伝子発現を減少させて、効果的に細胞死滅を誘導するだけでなく、TRAIL耐性を克服することができる長所を有している。特に、本発明のANT2siRNAまたはANT2shRNAは、乳房癌細胞の転移を抑制する効果を示す。これに加えて、乳房癌細胞の母体になる細胞progenitorcellsでも治療効果が確認され、これにより、乳房癌幹細胞治療剤としての可能性が期待される。窮極的に、本発明は、乳房癌細胞転移抑制効果及び抗癌剤耐性を克服することができる優れた効能を有する乳房癌治療剤を提供することができ、ひいては、乳房癌幹細胞治療剤の開発に利用されることができるものと期待される。本発明は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAを有効成分として含有する乳房癌治療用組成物であって、乳房癌細胞の転移を抑制することを特徴とする組成物を提供する。具体的に、本発明者は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAが乳房癌細胞の他の組職への移動及び浸潤を抑制することを知見し、本発明を完成するに至った。乳房癌細胞は、細胞表面に発現する上皮成長因子受容体EGFR:Epidermalgrowthfactorreceptorを通じて細胞内に特定の信号伝逹体系を活性化させて、細胞の増殖、生存、他の組職への移動と浸潤を可能にすると知られている。特に上皮成長因子受容体EGFRのうちHER2/neuの場合、乳房癌患者の30程度が癌細胞の表面に過発現していると報告されており、HER2/neuが過発現されている場合、治療の予後が悪く、抗癌治療に対する強い耐性multi-drugresistanceを示すと知られている。また、HER2/neuを通じて活性化される代表的な信号伝達体系としては、PI3K/Akt信号伝達体系が知られており、この信号伝達体系の活性が乳房癌細胞の増殖、生存、他の組職への移動と浸潤に関与すると報告されている。したがって、HER2/neuの発現を低減するか、またはHER2/neuを用いた信号伝達体系の活性を妨害する方法を利用して乳房癌を治療しようとする様々な試みが現在なされている。本発明者は、乳房癌細胞で過発現し、乳房癌細胞のエネルギー生産ATPproductionに決定的な役目をすると知られたANT2遺伝子に対してANT2siRNAまたはANT2shRNAを利用して発現を抑制させた場合、癌細胞が生きて行くのに必要なエネルギー供給が円滑ではないため、癌細胞の死滅をもたらすと共に、これに加えて癌細胞が他の組職に移動するかまたは浸潤することを防止し、転移を抑制させることができることを知見した。一方、乳房癌細胞表面のHER2/neuの発現は、HSP90熱ショックタンパク質90Heatshockprotein90というタンパク質によって維持されると報告されており、HSP90タンパク質は、ATPが結合するとき、その機能を行うことができると知られている。したがって、本発明者は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAを利用して癌細胞内のATPを欠乏させるようになれば、HSP90に十分なATPが結合せず、すなわちHSP90が本来の機能を行わないので、HER2/neuの分解が促進されると予想し、HER2/neuの分解は、HER2/neuを用いたPI3K/Akt信号伝達体系の活性弱化につながって、結局、乳房癌細胞が他の組職に移動し浸潤することができる能力が減少するという仮説を立てた。これを検証するために、人間乳房癌細胞株のうちHER2/neuが高く発現していると知られたSK-BR3という人間乳房癌細胞株を対象としてANT2shRNAを導入させて、ANT2発現を低下させた。その結果、細胞内ATP欠乏がHSP90タンパク質の活性を低下させて、HER2/neu発現を減少させることを観察し、これに加えて、HER2/neuを用いたPI3K/Akt信号伝達体系の活性が弱化され、乳房癌細胞の他の組職への移動と浸潤能力が抑制されるということを実験的に確認した。本発明の他の局面は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAを有効成分として含有する乳房癌治療用組成物であって、TRAILの乳房癌治療効果を増加させることを特徴とする組成物を提供する。腫瘍死滅因子であるTRAIL/apo2リガンドは、正常細胞は殺さず、癌細胞のみを選択的に殺すという長所を有している。しかし、TRAILを抗癌剤として使用するにあたって、癌細胞がこれに対して耐性を有するという限界を有していて、これを克服するための様々な研究が行われている。したがって、本発明者は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAを利用してTRAILに対する耐性を克服する方案を模索しようとした。本発明者は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAを乳房癌細胞に導入する場合、TRAILによる癌細胞の死滅を増加させ、細胞培養条件invitroと動物モデルでinvivoTRAILによる腫瘍成長抑制効果を増幅させるということを確認した。この際、ANT2siRNAまたはANT2shRNAがTRAILによる乳房癌細胞死滅効果を増幅させる機作でTRAIL受容体TRAILreceptorの発現を調節するということを明らかにした。TRAILの受容体には、DR4TRAILR1:TRAILreceptor1とDR5TRAILR2:TRAILreceptor2があり、DR4とDR5にTRAILが結合する場合、細胞内に細胞死滅の信号が伝達され、癌細胞が死に至るようになる。しかし、TRAILの受容体のうちDcR1デコイ受容体1decoyreceptors1:TRAILR3とDcR2デコイ受容体2decoyreceptors2:TRAILR4の場合、DR4とDR5による癌細胞死滅から癌細胞を保護する役目をするようになる。すなわちTRAILがDcR1とDcR2に結合する場合、癌細胞の内部に正常な細胞死滅信号が伝達されない。すなわち、癌細胞がTRAILに対して耐性を示す原因には、様々な理由があるが、癌細胞表面のDR4とDR5の発現が減少し、DcR1とDcR2の発現が増加することが重要な原因として作用すると知られている。本発明者は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAによる癌細胞内部の信号伝逹体系の変化が癌細胞表面のDR4とDR5の発現を増加させ、DcR1とDcR2の発現を減少させて、TRAILに対する反応性を高め、耐性を克服することができるということを糾明した。結論的に、本発明者は、乳房癌細胞を治療するにあたって、ANT2siRNAまたはANT2shRNAがTRAILに対する治療効果を増幅させることができ、TRAILに対する耐性を克服することができるということを細胞培養実験invitroと動物実験invivoを通じて最初に糾明し、その機作は、TRAIL受容体の発現調節によるものであることを最初で実験的に証明した。本発明のさらに他の局面は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAを有効成分として含有する乳房癌幹細胞治療用組成物を提供する。現在、乳房癌細胞を対象として抗癌治療と放射線治療が行われているが、最大の問題点は、治療以後に新しい腫瘍が生成される現象癌の再発が現われることである。これは、癌の塊を構成する癌細胞は効果的に殺すことができるが、癌の塊を構成する細胞のうち非常に少ない数字を占める乳房癌幹細胞breastcancerstemcellsが生き残って新しい腫瘍を生成するようになるためと考えられる。したがって、乳房癌幹細胞を効果的に除去することができる治療法を開発することが非常に重要であり、本発明者は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAが乳房癌幹細胞治療剤として効果を有することを明らかにした。本発明者は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAの乳房癌幹細胞治療剤としての可能性と効果を確認するために、乳房癌幹細胞で乳房癌細胞の母体になる細胞progenitorcellsに該当するCD44/CD24-細胞集団のみを分離し、実験を進行した。具体的に、乳房上皮細胞であるMCF10Aに発現するE-カドヘリン遺伝子の発現を抑制させて、人為的に間葉細胞mesenchymalcellへの分化を誘導し、ANT2shRNAの治療効果を確認した。これは、上皮細胞が間葉細胞mesenchymalcellに転換されるときepithelial-to-mesenchymaltransition、EMT、乳房癌幹細胞の特性を有すると知られたことに基礎したものである。そして、乳房癌幹細胞内にANT2shRNAを効果的に伝達するために、アデノウイルスシステムを利用した。すなわちANT2shRNAを発現するアデノウイルスを製作生産し、乳房癌幹細胞に感染させて使用した。その結果、乳房癌幹細胞の特徴を有する2つの細胞集団においていずれも効果的にANT2shRNAによって細胞死滅が誘導され、乳房癌幹細胞の抗癌剤耐性を克服し、抗癌剤に対する効果を増幅させるという結果を得ることができた。また、上記本発明の組成物は、既存の抗癌剤治療法例えば、ドキソルビシンdoxorubicinを並行する場合、抗癌剤に対する反応性を高め、耐性を減少させて、乳房癌治療効果を増進させることを特徴とする。本発明のさらに他の局面は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAを患者に投与し、乳房癌を治療する方法であって、乳房癌細胞の転移を抑制することを特徴とする方法を提供する。本発明のさらに他の局面は、ANT2siRNAまたはANT2shRNAを患者に投与し、乳房癌幹細胞を治療する方法を提供する。上記投与量は、患者の体重、年齢、性別、健康状態、食餌、投与回数、投与方法、排泄率及び疾患の重症度などによってその範囲が多様に調節されることができることは当業者に明白である。以下、本発明の理解を助けるために好ましい実施例を提示する。しかし、下記の実施例は本発明をより易しく理解するために提供されるものに過ぎず、下記実施例によって本発明の内容が限定されるものではない。ANT2shRNA発現ベクターの製作米国国立生命工学情報センターNationanlCenterforBiotechnologyInformation、NCBI、http://www.ncbi.nlm.nih.gov/から入手したANT2mRNA塩基配列は、GenebankAccessionNo.NM_001152である。この塩基配列をsiRNA予測プログラムhttp://www.ambion.com/technical、resources/siRNAtargetfinderに代入し、適合なANT2siRNA候補塩基配列を確保し、様々な候補塩基配列のうち、ANT2mRNAの二番目エクソンに該当する塩基配列である5GCAGAUCACUGCAGAUAAG3に結合するsiRNAを製作し、ANT2siRNAによるANT2mRNAの減少silencing効果を細胞水準invitroで確認した[この際、ANT2siRNA製作は、Bioneer韓国に依頼した]。この結果に基づいて、shRNAを製作するために、次のような塩基配列のオリゴマー二本を合成し[この際、ANT2siRNA製作は、Bioneer韓国に依頼した]、上記二本のオリゴマーを結合annealingさせた後、pSilencer3.1-H1puroプラスミドベクターAmbion社のMCSmulti-cloningsite内のBamHIとHindIII部位にクローニングして製作した。この際、上記センス配列に引き続いて、siRNA発現誘導の効率を増加させるようにTTを添加した。また、ANT2shRNAの効果を確認するために進行したすべての実験には、ANT2発現を遮断せず、細胞内の特定mRNAの発現には影響を及ぼさないスクランブルscrambledshRNAを陰性対照群として使用し、これは、同一の条件を提供する役目をするもので、Ambion社で購入して使用した。上記ベクターから発現されるshRNAの塩基配列は、配列番号1~3で配列目録に別に記載した。実施例1.HER2/neuの発現に対するANT2shRNAの効果本発明者は、人間乳房癌細胞株であるSK-BR3の表面に高く発現するHER2/neuがANT2shRNAの導入によって減少することを流動細胞分析機FACS:flowcytometryandcellsortingを通じて確認した。この際、ANT2shRNAを乳房癌細胞株であるSK-BR3に導入するために使用された方法は、非ウイルス性伝達体であるLipofectamineTM2000Invitrogen製品という物質を使用し、細胞内にshRNAが入る原理は、LipofectamineTM2000の正電荷を呈する親水性部分とshRNAの負電化が互いに相互作用することにより結合体を作って、LipofectamineTM2000が細胞膜と融合し、shRNAが細胞内に入るようになる。具体的に、流動細胞分析機を利用した実験は、細胞表面に発現するHER2/neuと結合する抗体を付着し[1次抗体:anti-humanHER2/neuantibodySantaCruzbiotechnology、Heidelberg、Germany]、この抗体に結合する抗体である2次抗体FITC-conjugated-anti--rabbit-IgG:SantaCruzbiotechnology、Heidelberg、Germanyを付着した。2次抗体の場合、蛍光物質が結合されていて、流動細胞分析機がこれを認知するようになり、HER2/nenが発現されている細胞と発現されていない細胞を区分するようになる。その結果、SK-BR3は、HER2/neuを高く発現するようになるがscshRNA、ANT2shRNAを導入する場合、HER2/neuの発現が減少することを確認した図1参照。また、本発明者は、人間乳房癌細胞株であるSK-BR3にANT2shRNAを導入させてANT2発現を減少させ、細胞からタンパク質を抽出し、HER2/neuとHSP90の相互作用interactionの変化を確認した。具体的に、まず、HER2/neuと結合する抗体[anti-humanHER2/neuantibody:SantaCruzbiotechnologyHeidelberg、Germany]で免疫沈降immuno-precipitationをさせ、HSP90に結合する抗体[anti-humanHSP90antibody:SantaCruzbiotechnologyHeidelberg、Germany]でタンパク質発現程度western-blotを確認し、その結果を図2に示した。図2に示されたように、ANT2shRNAによってANT2発現が減少した場合、HER2/neuとHSP90の相互作用が減少し、細胞内でタンパク質が分解される前に現われる現象であるユビキチン化ubiquitinationが増加していることを確認した。すなわちANT2shRNAによってHER2/neuとHSP90との相互作用が減少し、そのため、HER2/neuのユビキチン化が増加し、HER2/neuの分解が増加するので、結果的に、HER2/neu発現が減少することを確認した。この際、陽性対照群positivecontrolとして17-AAGというHSP90抑制薬物[HSPinhibitor/17-AAG17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin:A.G.ScientificInc.SanDiego、CA]を使用し、実験に使用されたタンパク質の量が同一であることを示すために、細胞骨格を構成するタンパク質として細胞外部や内部の変化に影響を受けないbeta-actinタンパク質の量が同一であることを示す[anti-beta-actinantibody:CellsignalingTech.Beverly、MA]。実施例2.Akt活性変化に対するANT2shRNAの効果乳房癌細胞株であるSK-BR3に高く発現されているHER2/neuは、Aktというタンパク質を活性化させ、活性化されたAktは、乳房癌細胞の生存を維持する機作だけでなく、他の組職への移動と浸潤に関与すると知られており、Aktの活性化は、特定アミノ酸のリン酸化phosphorylation程度を通じて確認することができる。本発明者は、人間乳房癌細胞株であるSK-BR3にANT2shRNAの導入させて活性化されたAktタンパク質の量phosphorylatedAktを確認した[Anti-Aktandanti-phospho-Aktantibodies:CellsignalingTech.Beverly、MA]。その結果、普段高い活性度を示すAktがANT2shRNAの導入によって減少することを確認することができ、陽性対照群としてHSP90抑制薬物である17-AAGを使用したが、これは、HSP90を抑制し、HER2/neuを用いたAktの活性を抑制させると知られている図3A参照。また、ANT2shRNAがAktの活性を低下させるということを再確認する実験を行った。ANT2shRNAによってANT2発現が減少するとき、減少したリン酸化した-Aktphospho-Aktの量が、ANT2を過発現させるベクターを導入し、ANT2の発現を増加させるとき、さらに回復することを確認し、陽性対照群としてAktのリン酸化を誘導するタンパク質であるPI3Kの抑制薬物[LY294002:CalbiochemSanDiego、CA]を使用した図3B参照。これに加えて、本発明者は、ANT2shRNAがAktの活性を低下させることと関連して、HSP90がAktとも相互作用をしているという報告に基づいてANT2shRNAがHSP90の活性を低下させ、そのため、Aktとの相互作用が低下するかを確認する実験を行った。まず、HSP90と結合する抗体[HSPinhibitor/17-AAG17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin:A.G.ScientificInc.SanDiego、CA]で免疫沈降immuno-precipitationをさせ、Aktと結合する抗体[Anti-Aktantibody:CellsignalingTech.Beverly、MA]でタンパク質発現程度western-blotを確認した。その結果、ANT2shRNAによってHSP90とAktとの相互作用が減少し、活性化されたAktphospho-Aktの量が減少することを確認した図3C参照。上記結果は、ANT2shRNAによるHSP90の活性度低下は、HSP90とAktとの相互作用を減少させるだけでなく、Aktの活性度を抑制させるということを意味する。実施例3.VEGFの生産に対するANT2shRNAの効果本発明者は、人間乳房癌細胞株であるSK-BR3にANT2shRNAを導入させる場合、Akt活性が低下しPI3K/Akt信号伝逹体系の弱化、窮極的に、癌細胞周辺の新生血管形成angiogenesisに関与するVEGFタンパク質の生産を低下させることを確認した。具体的に、ANT2shRNAを細胞に導入した後、一定時間24h培養し、全体RNAstotalRNAsを抽出した後、mRNAのみをoligo-dTを利用してmRNA3’末端にpolyTがあることを利用する逆転写反応を通じてcDNAを合成した後、VEGF血管内皮増殖因子Vascularendothelialgrowthfactorに特異的に結合するプライマーを利用してVEGFの発現を分析した。図4Aに示されたように、ANT2shRNAを乳房癌細胞株であるSK-BR3に導入させる場合、新生血管形成angiogenesisに関与するVEGFmRNAの発現が減少することを逆転写重合酵素増幅反応RT-PCRを通じて確認した。また、VEGFの細胞内タンパク質の量が減少することを流動細胞分析機FACS:flowcytometryandcellsortingを通じて確認した。この際、VEGFは、細胞内で生産されてから、細胞外に分泌されるタンパク質なので、これを阻止するために、BFAbrefeldinAという薬物を処理し、細胞内に蓄積させた後、VEGFタンパク質の量の差異を比較した。具体的に、BFAを処理して細胞内にVEGFを蓄積させた後、細胞膜に孔を形成し、VEGFと結合する1次抗体[anti-VEGFantibody:BDPharmingenSanDiego、CA]を細胞内に投入し、VEGFと結合させ、次に、蛍光物質が結合された2次抗体[FITC-conjugated-anti-mouseIgGantibody:BDPharmingenSanDiego、CA]を1次抗体と結合させた後、流動細胞分析機で分析した図4B参照。これに加えて、ANT2shRNAがVEGFのmRNA発現を低下させることを再確認する実験を行った。ANT2を過発現するベクターpcDNA3.0-ANT2expressionvectorを導入させてANT2の発現を増加させる場合、VEGFmRNAの発現が回復することを確認し、陽性対照群としてAktのリン酸化を誘導するタンパク質であるPI3Kの抑制薬物LY294002を使用した図4C参照。これは、PI3K/Akt信号伝逹体系の活性によってVEGFmRNA発現が誘導されるという事実に基づくものである。実施例4.MMPs発現及び活性に対するANT2shRNAの効果本発明者は、人間乳房癌細胞株であるSK-BR3にANT2shRNAを導入させる場合、Akt活性が低下しPI3K/Akt信号伝逹体系の弱化、癌細胞周辺の組職ECM:extracellularmatrixを分解し、癌細胞の移動と浸潤に関与するタンパク質であるMMPsマトリックスメタロプロテアーゼMatrixmetalloproteinasesの発現と活性を低下させることを確認した。具体的に、MMPsのうちVEGFによって発現が調節されると報告されているMT1-MMPの発現変化を調査し、次に、MT1-MMPによって発現と活性が調節されると知られているMMP2とMMP9の発現と活性の変化を観察した。まず、ANT2shRNAを乳房癌細胞株であるSK-BR3に導入させる場合、癌細胞周辺組職の分解に関与するMT1-MMPのmRNAの発現が減少することを逆転写重合酵素増幅反応RT-PCRを通じて確認し図5A参照、且つ、MT1-MMPのタンパク質の量が減少することを確認したWestern-blot図5B参照。また、ANT2shRNAがMT1-MMPのmRNA発現を低下させることを再確認するために、PI3Kを過発現するベクター[wild-typePI3K/p110vectorsprovidedbyDr.KarinReif]を導入させて人為的にPI3K/Akt信号伝達体系を活性化させる場合、MT1-MMPmRNAの発現が回復することを逆転写重合酵素増幅反応RT-PCRで確認し図6A参照、且つ、MT1-MMPのタンパク質の量が回復することを確認したWestern-blot図6B参照。これに加えて、ANT2shRNAを乳房癌細胞株であるSK-BR3に導入させる場合、MT1-MMPによって調節されるMMP2mRNA及びMMP9mRNAの発現が減少することを逆転写重合酵素増幅反応RT-PCRを通じて確認した図7A参照。この際、実験に使用されたmRNA量が同一であることを示すために細胞外部や内部の変化に影響を受けないGAPDH遺伝子のmRNAの量が同一であることを示した。且つ、ANT2shRNAを乳房癌細胞株であるSK-BR3に導入させる場合、MT1-MMPによって調節されるMMP2とMMP9のタンパク質の活性が減少することをゼラチンザイモグラフィGelatinZymographyを通じて確認し、この際、MMP2とMMP9のゼラチン分解能力が大きいほど、白色バンドが強く現われ、活性化形態activeformのMMP2とMMP9の量が増加することを観察した図7B参照。実施例5.乳房癌細胞株の移動能力と他の組職への浸潤能力に対するANT2shRNAの効果上記実施例4から、ANT2shRNAの導入で癌細胞の移動と浸潤に関与するタンパク質であるMMPsMatrixmetalloproteinasesの発現と活性が低下することを確認し、これに加えて、実際に癌細胞の移動能力と浸潤能力がどれほど低下したかを観察するために下記実験を行った。ANT2shRNAが癌細胞の浸潤と移動能力を低下させることができることを確認するために、マトリゲル浸潤アッセイmatrigelinvasionassay及びトランスウェル遊走アッセイtranswellmigrationassayを実施した。マトリゲル浸潤アッセイは、マトリゲルmatrigelを分解して移動した癌細胞を染色することによって、癌細胞の浸潤能力を分析する方法である。具体的に、ANT2shRNAを導入した乳房癌細胞株SK-BR3を18時間培養し、これをマトリゲル浸潤チャンバーmaterigelinvasionchamberBectonDickinsonlabware、USAの上層に100μLの0.1BSA、α-MEMに細胞2×104細胞が入っているようにして培養した。24時間後、上部の培地を除去し、PBSで3回洗浄した後、耳掻きで上部の細胞を除去した。Matrigelを通過してウェルの外側の底部に付いている細胞を10ホルマリンで10分間固定し、0.1クリスタルバイオレットで20分間染色した。染色された細胞の数を顕微鏡下で計測した。そして、癌細胞の移動能力を比較確認するために、トランスウェル遊走アッセイ方法を利用した。まず、細孔径8μmのtranswellinsertCorningの下面をgelatinSigmaでコーティングした後、transwellinsertの内部に細胞浮遊液をそれぞれ添加した。この際、外部容器には、10ng/mLのbFGFSigmaを添加した無血清培地を入れた。一定時間18時間培養が終了すれば、insertの内面を耳掻きで拭いて、移動しない内皮細胞を除去し、下方に移動した細胞の数はDiff-Quick溶液で染色し、200倍顕微鏡視野で計測した。その結果、ANT2shRNAを導入した場合、マトリゲルとトランスウェルを通過し、染色される細胞の数が減少することを確認し、これを通じて癌細胞の浸潤と移動能力が減少したことを確認することができた図8参照。実施例6.TRAILに対する反応性に対するANT2shRNAの効果乳房癌細胞株にANT2shRNAを導入する場合、TRAILに対する反応性癌細胞死滅に対する効果を考察した。この実験では、乳房癌細胞株としてTRAILに対して耐性を示すMCF7、及びTRAILに対して高い反応性を示すMDA-MB-231を使用した。MCF7及びMDA-MB-231を対象としてTRAILを濃度別に処理した後、細胞の死滅程度をCCK8試薬を利用して確認した。CCK8分析法は、生きている細胞を計測する方法である。具体的に、細胞培養液100μL1x104細胞/ウェルを各ウェルに分株し、TRAILを最終濃度が1μg/mLで0になるように10倍ずつ階段希釈して、処理した後、12時間培養し、CCK8試薬を10μL添加した後、適当時間4時間CO2インキュベータで培養し、450nmで吸光度を測定し、細胞の死滅程度を測定した。その結果、MDA-MB-231の場合、TRAILによって効果的な死滅が誘導される一方で、MCF7細胞の場合、TRAILによる細胞死滅がほとんど誘導されないことを観察した図9A参照。この際、使用した実験方法は、培養する細胞にCCK8試薬を入れる場合、生きている細胞だけが色の変化が現われ、特定波長で吸光度を測定し、細胞の生存率を確認する方法だ。乳房癌細胞株のうちTRAILに対して耐性を示すMCF7細胞は、100ng/mLで細胞死滅が誘導されない。しかし、MCF7細胞にANT2shRNAを導入する場合、ANT2shRNA単独によっても細胞死滅が誘導されるが~25、TRAILと同時処理する場合、細胞死滅が誘導されなかったTRAIL単独効果とは異なって、細胞死滅が強く誘導されることを~65CCK8試薬を通じて確認した図9B参照。この際、ANT2shRNAの導入によって細胞内のANT2タンパク質発現が減少することをWestern-blotで確認した。TRAILに対する陰性対照群としては、PBSを使用し、ANT2shRNAに対する陰性対照群としては、特定mRNAの発現に影響を及ぼさないscshRNAscrambledshRNAを導入した。次に、TRAILに対して耐性を示すMCF7細胞に対してTRAIL単独処理時に、ANT2shRNA単独導入時に、ANT2shRNAとTRAILを同時処理時に細胞死滅程度を顕微鏡で観察し、その結果を図9Cに示した。図9Cに示されたように、ANT2shRNAとTRAILを同時処理時に細胞死滅が最も強く誘導されることが分かる。また、乳房癌細胞株のうち、TRAILに対して耐性を有すると報告されているT47DとBT474細胞株においても、同一の方法で上記実験を実施した結果、MCF7と同一の効果を示すことを観察した図10A参照。この際、CCK8試薬を通じて細胞死滅程度を定量化した。これに加えて、TRAILに対する反応性が増加した理由は、ANT2shRNAによるANT2発現減少によるものであることを再確認するために、ANT2遺伝子を発現するベクターpcDNA-ANT2を利用して人為的にANT2を過発現させて、TRAILによる細胞死滅が抑制されることを観察し、CCK8試薬を通じて細胞死滅程度を定量化した図10B参照。pcDNA-ANT2に対する陰性対照群としては、何らの遺伝子も発現しない空きのベクターemptyvectorであるpcDNAベクターを導入し、ANT2shRNAによってTRAILに対する反応性が増加し、細胞死滅が誘導されるとき、細胞死滅によって隋伴される細胞内タンパク質の変化PARPタンパク質の開裂cleavage、カスパーゼ-8/9/7タンパク質の開裂、Bidタンパク質の切断truncationをWestern-blotで確認した。また、ANT2shRNAとTRAILによる細胞死滅がミトコンドリアを媒介として行われるので、破壊されるとき、ミトコンドリアから細胞質に流出されるタンパク質であるシトクロムC量の変化を観察した。同一の量のミトコンドリアタンパク質が実験に使用されたことをミトコンドリアタンパク質であるCOXIVタンパク質の量に変化がないことから確認した。その結果、TRAIL単独によっては細胞死滅によって誘導されるタンパク質の変化が観察されなかったが、ANT2shRNAとTRAILを同時に処理したとき、ANT2shRNA単独よりもさらに大きい変化が観察されることを確認した図10C参照。すなわち、細胞内のタンパク質変化を通じてANT2shRNAがTRAILによる細胞死滅を増加させたことをもう一度確認した。実施例7.TRAIL受容体発現に対するANT2shRNAの効果乳房癌細胞株のうちTRAILに対して互いに異なる反応性を示すMCF7とMDA-MB-231細胞株を対象としてTRAILと結合する受容体であるDR4、DR5、DcR1、およびDcR2の発現程度をWestern-blotで確認した。DR4とDR5の場合、TRAILが結合すれば、正常な細胞死滅信号を細胞内部に伝達するが、DcR1とDcR2の場合、TRAILが結合しても、細胞死滅信号を伝達しない。すなわちDR4とDR5の発現は高いほど、DcR1とDcR2の発現は低いほど、TRAILに対する反応性が高くなることができる。図11Aに示されたように、TRAILに対する反応性が低いMCF7細胞の場合、DR4とDR5の発現は低く、DcR1とDcR2の発現は高く観察され、TRAILに対する反応性が高いMDA-MB-231細胞の場合、DR4とDR5の発現は高く、DcR1とDcR2の発現は低く観察された。次に、ANT2shRNAを導入時にTRAIL受容体発現の変化を調査し、その結果を図11Bに示した。図11Bに示されたように、ANT2shRNAの導入がDR4とDR5の発現を増加させ、DcR1とDcR2の発現を減少させることが分かる。乳房癌細胞株のうち、TRAILに対して耐性を有すると報告されているT47DとBT474細胞株でもMCF7と同一の効果を観察した。すなわちANT2shRNAの導入がDR4とDR5の発現を増加させ、DcR1とDcR2の発現を減少させることを観察した図11C参照。実施例8.p53の活性に対するANT2shRNAの効果ANT2shRNAの導入がDR4とDR5の発現を増加させる機作を糾明する実験を行った。腫瘍抑制因子であるp53は、DR4とDR5の発現を誘導すると報告されているので、これを根拠としてANT2shRNAの導入がp53タンパク質の発現を増加させるか、そして、活性化されたp53タンパク質phosphorylated-p53の量が増加するかどうかを確認するために、ANT2shRNAを導入させて活性化されたp53タンパク質の量phosphorylatedp53とp53タンパク質の量を確認した[anti-Thr81phospho-p53及びanti-p53antibodies:SantaCruzBiotechnologyHeidelberg、Germany]。図12Aに示されたように、ANT2shRNAの導入がp53タンパク質の発現と活性を増加させることが分かる。次に、ANT2shRNAの導入がp53タンパク質の活性を増加させ、実際にp53DNAに結合し、遺伝子発現を誘導する能力が増加したことをレポーター遺伝子分析法reportergeneassayを通じて確認した。この分析法は、特定タンパク質がDNAに結合し、遺伝子発現を誘導する場合、レポーター役目をする遺伝子発現が誘導され、誘導された遺伝子の発現程度を吸光度を測定して定量化する方法である。具体的に、ANT2shRNAとp53タンパク質が結合するプローモータpromoterを有するルシフェラーゼluciferaseを発現するベクターpGL-p53bindingsite-luciferaseexpressionvectorを同時に導入させて、一定時間細胞を培養した後、発現されたルシフェラーゼと反応する基質を入れ、ルシフェラーゼの活性度をルミノメータluminometerFB12luminometer;BertholdDetectionSystems、Pforzheim、Germanyで測定した。図12Bに示されたように、ANT2shRNAを導入する場合、p53によってレポーター遺伝子の発現が著しく増加されることが分かる。ANT2shRNAに対する陰性対照群としては、特定mRNAの発現に影響を及ぼさないscshRNAscrambledshRNAを導入した。上記結果は、ANT2shRNAがp53タンパク質の遺伝子発現誘導能力を増加させることを意味する。また、ANT2shRNAの導入がp53タンパク質の発現と活性を誘導し、これを通じてTRAIL受容体であるDR4とDR5の発現が増加することを再確認する実験を行った。その結果、図12Cに示されたように、p53タンパク質の活性を抑制するp53抑制物質[p53inhibitorpifithrin-alpha:BiovisionZ、Switzerland]を前処理する場合、ANT2shRNAによるDR4とDR5の発現増加が抑制されることを確認したWestern-blot。これに加えて、ANT2shRNAの導入がp53タンパク質の発現と活性を誘導し、これを通じてTRAILに対する反応性を増加させることを再確認するために、p53タンパク質の活性を抑制するp53抑制物質p53inhibitor:pifithrin-alphaを処理した場合、ANT2shRNAによるTRAILの細胞死滅増加効果が抑制されることを確認した。この際、CCK8試薬を通じて細胞死滅程度を定量化し、p53抑制物質に対する陰性対照群としてPBSを使用した図13参照。上記結果から、乳房癌細胞株にANT2shRNAを導入する場合、p53の活性を増加させ、これにより、窮極的に癌細胞表面のDR4とDR5の発現が増加されることが分かる。実施例9.ANT2shRNAを導入時に動物モデルinvivoでTRAILに対する反応性増加を用いた腫瘍成長抑制効果ANT2shRNAがTRAILによる細胞死滅効果を増幅させて、腫瘍成長を抑制するかどうかを確認するために動物モデルで実験を実施した。TRAILに対する耐性を示すMCF7乳房癌細胞株を免疫機能が欠乏されたマウスであるBalb/cヌードマウスに移植し、100mm3程度サイズの腫瘍が生成されたとき、ANT2shRNAとTRAILで治療を実施した。この際、TRAILは、腹腔注射10mg/kgを行い、ANT2shRNAは、腫瘍に注射100μg:200μLLipofectamineTM2000を追加を行い、注射を行うとき、ANT2shRNAの癌細胞内への伝達を助けるためにLipofectamineTM2000という物質とともに注射し、3回にわたって処置をした後、45日間腫瘍のサイズを測定した。この際、TRAILに対する陰性対照群として同一ボリュームのPBSを使用し、ANT2shRNAの陰性対照群としてscshRNAを使用した。図14Aから明らかなように、細胞培養実験invitroと同様に、TRAIL単独によっては腫瘍成長に大きい影響を及ぼさず、ANT2単独によっても腫瘍成長を抑制したが、ANT2shRNAとTRAILを同時に処理した場合、最も効果的に腫瘍成長を抑制することが分かる。次に、動物モデルでANT2shRNAとTRAILを処理した後、一定期間腫瘍のサイズを測定し、45日目にマウスを安楽死させた後、腫瘍を摘出し、腫瘍細胞でTRAIL受容体の発現変化を逆転写重合酵素増幅反応RT-PCRを通じて確認し、その結果を図14Bに示した。図14Bに示されたように、ANT2shRNAの導入がDR4とDR5の発現を増加させ、DcR2の発現を減少させることが分かる。上記結果は、ANT2shRNAによるTRAILの腫瘍成長抑制効果は、TRAIL受容体の発現調節によるものであることを意味する。ANT2shRNAアデノウイルスの製作腫瘍の母体になる細胞progenitorcellsにANT2shRNAを効果的に移入するために、アデノウイルスシステムを使用したANT2をターゲットとするshRNAの塩基配列及びループシーケンスは、ANT2shRNA発現ベクター製作時に使用したものと同一である。組み換えアデノウイルスrecombinantadenovirusを製作するために、pSilencer-ANT2shRNADNAでPca14シャトルベクターshuttlevectorのEcoRI/HindIII位置でサブクローニングsub-cloningを進行した。これは、アデノウイルスベクターにクローニングを容易にするために作られたベクターでまず行われるクローニング段階である。PvuIEnzymemapping酵素でDNAを切断し、電気泳動してみたとき、正確なサイズに現われるかを判別する実験法でリアルクローンreal-cloneを捜し出し、BJ5183コンピテント細胞competentcellアデノウイルスベクターとシャトルベクターDNAとの間にsequence-同種組み換えが可能にするE.colistraincell内でPcaI酵素で切断され線形化されたPca14-mANT2shRNADNAとBstBI酵素で切断され線形化されたアデノウイルス-dl324E1deleted:複製欠損ベクターreplication-defectivevectorsベクターDNAを一緒に同種組み換え8homologuesrecombinationを行った後、得たDNAをさらにDH5α細胞中で形質転換transformation過程を経てDNAを多量確保した。ここで、リアルクローンreal-cloneを確認した後、これを293aパッケージング細胞packagingcellDNAを細胞内に流入することが容易な細胞であり、且つアデノウイルス複製遺伝子E1が含まれていて、この細胞内でのクローン化アデノウイルスcloned-adenovirusを大量確保することができるようにする細胞に細胞内DNA流入transfectionを行い、細胞内でアデノウイルス増殖を誘導した。多量増殖されたアデノウイルス-mANT2shRNAは、PEG-CsCl密度勾配層分離方法で純粋分離した後、実験に適用した。実施例10.乳房癌細胞株腫瘍母体細胞progenitorcellsに対するANT2shRNAの効果乳房癌細胞株は、腫瘍の母体になる細胞progenitorcellsとそうでない細胞non-progenitorcellsで構成され、にANT2タンパク質は、この2つの細胞集団ですべて高く発現されている。本実験では、ANT2shRNAを導入する場合、2つの種類の細胞に対する細胞死滅効果を観察した。腫瘍の母体になる細胞progenitorcellsは、細胞表面にCD44分子陽性/CD24分子陰性CD44/CD24-に分類され、乳房癌細胞株のうち、MDA-MB-231細胞株は、腫瘍の母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-が占めるパーセントが高く80以上、MCF7細胞株の場合、低いと10未満報告されている。本実験では、2つの細胞株を対象として腫瘍の母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-を分類した場合と分類しない場合にANT2遺伝子の発現程度を逆転写重合酵素方法RT-PCRで確認し、これを再確認するために、リアルタイム重合酵素増幅方法Real-timePCRを実施した。2つの細胞株を対象としてCD44単一抗体[anti-PE-conjugatedCD44monoclonalantibody:BD-PharMingen、SanDiego、California、USA]とanti-PEmicrobeads[MiltenyiBiotec。BergischGladbach、Germany]を処理した後、MACSMagneticActivatingcellsortorを使用して必要な細胞のみを分離した後、母体になる細胞のみを分離したものと分離しない細胞を対象として逆転写重合酵素方法RT-PCRとリアルタイム重合酵素増幅方法Real-timePCRを実施し、ANT2mRNA発現程度を確認した。図15に示されたように、2つの細胞株で腫瘍の母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-を分類した場合と分類しない場合、いずれもANT2発現が高いことが分かる。上記結果は、ANT2shRNAを利用してANT2発現を減少させるとき、腫瘍の母体になる細胞とそうではない細胞がすべて死滅が誘導されることができ、治療可能性を有することを意味する。これに加えて、ANT2shRNAを利用して乳房癌細胞を構成する腫瘍の母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-を治療することができることを確認する実験を行った。本実験のための細胞システムとしては、正常乳房上皮細胞株MCF10AにE-カドヘリン遺伝子の発現を抑制させて、人為的に間葉細胞mesenchymalcellに転換されるように誘導して使用した。間葉細胞mesenchymalcellは、乳房癌幹細胞の特性を有すると知られている。図16Aの顕微鏡写真に示されたように、E-カドヘリン遺伝子の発現を抑制させるために正常乳房上皮細胞株MCF10AにE-カドヘリンshRNAを導入した場合、互いに密集するように付着して成長した細胞が緩く離れて成長する模様間葉細胞が有する特徴を有することを観察することによって、正常上皮細胞が間葉細胞mesenchymalcellに転換されることが分かる。この際、E-カドヘリン発現が低下し、ANT2遺伝子発現が増加したことを逆転写重合酵素方法RT-PCRで確認した図16B参照。また、乳房癌細胞株であるMDA-MB-231とMCF7細胞株で腫瘍の母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-のみを分類し、ANT2shRNAを導入した場合、細胞死滅が誘導される程度をAnnexinV-FITCとPIで染色stainingし、流動細胞分析機FACSで分析した。この方法は、細胞が死ぬようになれば、細胞膜の内側に位置するタンパク質が細胞膜の外に出るようになるが、このタンパク質にAnnexinV-FITCが結合するようになり、細胞内側のDNAが細胞の外に流出されれば、PIと結合をするようになり、AnnexinV-FITCとPIで染色された程度を通じて細胞の死滅を定量的に分析する一般的な方法である。その結果を図17に示し、2つの細胞株でいずれも腫瘍の母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-のみを分類した場合にも、ANT2shRNAによって効果的に細胞死滅が誘導されることが分かる。陰性対照群としては、scshRNAを導入して比較した。次に、正常乳房上皮細胞株MCF10AにE-カドヘリンshRNAを導入し、乳房癌幹細胞の特徴を有する細胞を対象としてANT2shRNAを導入したときにも、効果的に細胞死滅が誘導されるかどうかを考察し、その結果を図18に示した。この際、使用した方法は、Annexin-V-FITCとPIを細胞に染色し、細胞の死滅程度を確認する方法であるが、AnnexinVは、細胞が細胞自殺時には初期段階で膜構造が壊れるようになり、細胞内部だけで露出していたホスファチジルセリンのようなリン脂質が細胞外に露出するが、これと結合し、細胞が今細胞自殺の初期段階にあることを示す方法である。また、PIpropiumiodideは、細胞が死ぬときに起きる細胞核のブレブ形成nuclearblebingや凝縮condensationを見るために、DNAの間に立ち入るpropiumiodideを処理してから、これら自体の蛍光fluorescenceを利用して細胞の死を判別する方法であり、この実験の陰性対照群としては、正常乳房上皮細胞株MCF10Aを使用した。その結果、ANT2発現が低い正常乳房上皮細胞株MCF10Aの場合、ANT2shRNAを導入しても、細胞死滅がほとんど誘導されない一方図18A、MCF10AにE-cadshRNAを導入し、間葉細胞mesenchymalcellで誘導した場合、ANT2発現が増加し、この細胞E-cadshRNAtransfected-MCF10AにANT2shRNAを導入する場合、効果的に細胞死滅が誘導された図18B。上記結果は、ANT2shRNAが乳房癌幹細胞を効果的に殺すが、正常上皮細胞には影響を及ぼさないことを意味する。実施例11.母体細胞progenitorcellsの腫瘍成長能力に対するANT2shRNAの効果乳房癌細胞の母体になる細胞progenitorcellsの腫瘍成長能力に対するANT2shRNAの効果を考察するための実験を行った。具体的に、乳房癌細胞株であるMDA-MB-231とMCF7細胞株で腫瘍の母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-のみを分類した後分類方法は、実施例10と同一、MDA-MB-231とMCF7細胞株にANT2shRNAを導入し、細胞がよく付着しない培養ディッシュ細胞が培養ディッシュに付着することを最小化し、細胞塊の形成を促進させるための方法であるに細胞を培養し、細胞塊が形成される程度とサイズを観察した。図19Aに示されたように、ANT2shRNAを導入しない場合には、多い個数の細胞塊が生成される一方、ANT2shRNAが導入された場合、細胞塊がほとんど生成されないことが分かり、図19Bに示されたように、ANT2shRNAが導入された場合、細胞塊の個数だけでなく、サイズも非常に小さいことを観察した。上記結果は、ANT2shRNAが乳房癌細胞の母体になる細胞progenitorcellsの腫瘍成長能力を抑制させることを意味する。実施例12.乳房癌母体細胞progenitorcellsの抗癌剤耐性に対するANT2shRNAの効果乳房癌細胞の母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-は、抗癌剤に対して高い耐性を示すが、ANT2shRNAを導入する場合、抗癌剤に対する反応性に及ぶ効果を考察した。乳房癌細胞株のうち母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-が占めるパーセントが高いMDA-MB-231細胞株を対象として乳房癌治療に広く使用される抗癌剤であるドキソルビシンを10μMで10倍ずつ階段希釈し、処理した後、一定時間24時間培養した後、濃度別に細胞死滅程度をCCK8試薬を通じて定量的に分析し、その結果を図20に示した。この際、使用した実験方法は、実施例6と同一である。図20から明らかなように、母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-を分離した細胞及び分離しない細胞がいずれもドキソルビシンによってほとんど反応性を示さない一方、ANT2shRNAを導入した場合、濃度依存的に細胞死滅が誘導されることを確認した。また、乳房癌細胞株のうち母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-が占めるパーセントが低いMCF7細胞株を対象として乳房癌治療に広く私用される抗癌剤であるドキソルビシンを濃度別に処理し、CCK8試薬を通じて細胞死滅程度を定量的に分析し、その結果を図21に示した。図21から明らかなように、母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-を分離した細胞の場合、分離しない細胞に比べてドキソルビシンに対してさらに低い反応性を示し、一方、ANT2shRNAを導入する場合、2つの細胞集団がいずれも濃度依存的に細胞死滅が誘導されることを確認した。上記結果は、ANT2shRNAの導入が抗癌剤であるドキソルビシンに対する反応性を増加させ、耐性を克服することができることを意味する。実施例13.乳房癌母体細胞progenitorcellsで抗癌剤耐性に関与する受容体ABCG2の発現に対するANT2shRNAの効果乳房癌を構成する細胞のうち母体になる細胞が抗癌剤薬物に対して低い反応性、すなわち高い耐性を示す代表的な原因として細胞膜に位置しながら、細胞内に入る薬物を細胞外に排出する受容体MDR:multi-drugresistancereceptorが過発現されるからであると報告されており、このような受容体のうち乳房癌細胞に特に高く発現しているものがABCG2である。したがって、本発明者は、ANT2shRNAによる抗癌剤に対する反応性の増加がABCG2の発現と反応性の調節によるものであるかを調査するために下記実験を行った。乳房癌細胞株のうち母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-が占めるパーセントが高いMDA-MB-231細胞株及び母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-が占めるパーセントが低いMCF7細胞株を対象として、腫瘍の母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-を分類した場合、分類しない細胞、及び正常乳房上皮細胞株MCF10AにE-カドヘリン遺伝子の発現を抑制させて人為的に間葉細胞mesenchymalcellで誘導した細胞を対象としてABCG遺伝子の発現程度を逆転写重合酵素方法RT-PCRで確認し、これに加えて、ABCGのタンパク質発現程度をanti-ABCG2antibodySantaCruzBiotechnology、Inc.、SantaCruz、CA、USAを使用してWestern-blotで確認した。図22に示されたように、2つの細胞株で腫瘍の母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-を分類した場合と分類しない場合、そして、正常乳房上皮細胞株MCF10AにE-カドヘリン遺伝子の発現を抑制させて人為的に間葉細胞mesenchymalcellで誘導した場合、ABCG2のmRNA発現が増加することを確認した。また、図23に示されたように、2つの細胞株で腫瘍の母体になる細胞progenitorcells:CD44/CD24-を分類した場合と分類しない場合、そして、正常乳房上皮細胞株MCF10AにE-カドヘリン遺伝子の発現を抑制させて人為的に間葉細胞mesenchymalcellで誘導した場合、ABCG2タンパク質水準で発現が増加することを確認した。また、ANT2shRNAを導入するとき、増加されたABCG2の発現を低下させることを観察した。上記結果は、高いABCG2発現を示す乳房癌母体になる細胞及び乳房癌幹細胞にANT2shRNAを導入すれば、ABCG2発現を抑制させることを意味する。これに加えて、本発明者は、乳房癌を構成する細胞のうち母体になる細胞で実際にABCG2の活性が増加しているかを測定してみた。具体的に、MDA-MB-231細胞株及びMCF7細胞株に対して、腫瘍の母体になる細胞を分類した場合、分類しない細胞、及び正常乳房上皮細胞株MCF10AにE-カドヘリン遺伝子の発現を抑制させて人為的に間葉細胞mesenchymalcellで誘導した細胞を対象としてABCG2活性程度を考察した。この際、Hoechst33342という薬物を利用してこの薬物が細胞内に蓄積される程度を通じてABCG2の活性度を定量的に分析し、その結果を図24に示した。図24に示されたように、2つの細胞株で腫瘍の母体になる細胞を分類した場合及び正常乳房上皮細胞株MCF10AにE-カドヘリン遺伝子の発現を抑制させて人為的に間葉細胞mesenchymalcellで誘導した場合、いずれもABCG2の活性度が増加していることが分かる。上記結果に基づいて、本発明者は、ANT2shRNAの導入がABCG2の活性度に及ぶ効果を考察した。ABCG2の活性度を測定するために、Hoechst33342Sigmaという薬物を細胞に処理した後、蛍光励起細胞分離分析を実施し、ABCG2の活性度を定量的に分析し、その結果を図25に示した。図25に示されたように、ANT2shRNAによってABCG2の活性度が効果的に減少することが分かる。上記結果は、乳房癌細胞の母体になる細胞progenitorcellsの場合、抗癌剤の耐性に関与する受容体であるABCG2が高い発現と高い活性を示すが、ANT2shRNAの導入は、ABCG2の発現と活性を減少させることを示す。すなわち、ANT2shRNAが乳房癌の母体になる細胞のABCG2の活性度を減少させて、抗癌剤に対する耐性を克服することができることを意味する。実施例14.乳房癌母体細胞progenitorcellsに対するANT2shRNAの選択的伝達及び細胞死滅効果ANT2shRNAが乳房癌細胞の母体になる細胞を効果的に治療することができるか否かを確認する実験を行った。ANT2shRNAを利用して癌患者を対象として治療する場合、ANT2shRNAが効果的に所望の細胞によく伝達されるかが重要な問題なので、本発明者は、乳房癌の母体になる細胞表面に高く発現されているCD44を利用して、これを標的する運搬物質としてナノ粒子[PEI/ヒアルロン酸hyaluronicacid、HAナノ結合体nano-complex]を製作した。実際にCD44を高く発現する乳房癌細胞株であるMDA-MB-231と低く発現するT47Dを対象としてANT2shRNAが効果的に伝達されるか否かを確認した。蛍光物質が付着しているナノ粒子[PEI/ヒアルロン酸HAナノ結合体]にANT2shRNAを入れ、結合体complexを形成した後、それぞれの細胞に処理し、一定時間後、細胞内に蛍光の強さを分析し、ナノ粒子によってANT2shRNAが細胞内に流入された程度を測定した。図26に示されたように、CD44を高く発現する乳房癌細胞株であるMDA-MB-231に選択的によく伝達されることを確認した。上記結果は、乳房癌細胞の母体になる細胞progenitorcellsの表面に高く発現されているCD44を標的とする運搬物質であるナノ粒子[PEI/hyaluronicacidHAnano-complexes]を利用してANT2shRNAを運搬する場合、乳房癌細胞の母体になる細胞にのみ選択的にANT2shRNAを伝達させ、治療細胞死滅を誘導することができることを示す。前述した本発明の説明は、例示のためのものであり、本発明の属する技術分野における通常の知識を有する者は、本発明の技術的思想や必須的な特徴を変更することなく、他の具体的な形態に容易に変形可能であることを理解することができる。したがって、以上で記述した実施例は、すべての面で例示的なものであり、限定的でないものと理解すべきである。