腸内細菌科のLアミノ酸生産細菌であって、bssR遺伝子の発現が増強されるように改変された、細菌。前記発現が、bssR遺伝子の発現調節配列を改変することにより増強された、請求項1に記載の細菌。エシェリヒアEscherichia属に属する、請求項1又は2に記載の細菌。エシェリヒアコリEscherichiacoliである、請求項3に記載の細菌。パントエアPantoea属に属する、請求項1又は2に記載の細菌。前記Lアミノ酸が、芳香族Lアミノ酸及び非芳香族Lアミノ酸からなる群より選択される、請求項1~5のいずれか1項に記載のLアミノ酸生産細菌。前記芳香族Lアミノ酸が、Lフェニルアラニン、Lチロシン、及びLトリプトファンからなる群より選択される、請求項6に記載のLアミノ酸生産細菌。前記非芳香族Lアミノ酸が、Lスレオニン、Lリジン、Lシステイン、Lメチオニン、Lロイシン、Lイソロイシン、Lバリン、Lヒスチジン、グリシン、Lセリン、Lアラニン、Lアスパラギン、Lアスパラギン酸、Lグルタミン、Lグルタミン酸、Lプロリン、Lアルギニン、Lシトルリン、及びLオルニチンからなる群より選択される、請求項6に記載のLアミノ酸生産細菌。前記Lアミノ酸が、Lアルギニンである、請求項1~5のいずれか1項に記載のLアミノ酸生産細菌。Lアミノ酸を生産する方法であって、請求項1~9のいずれか1項に記載の細菌を培地中で培養すること、および前記Lアミノ酸を培地から回収すること、を含む、方法。前記Lアミノ酸が、芳香族Lアミノ酸及び非芳香族Lアミノ酸からなる群より選択される、請求項10に記載の方法。前記芳香族Lアミノ酸が、Lフェニルアラニン、Lチロシン、及びLトリプトファンからなる群より選択される、請求項11に記載の方法。前記非芳香族Lアミノ酸が、Lスレオニン、Lリジン、Lシステイン、Lメチオニン、Lロイシン、Lイソロイシン、Lバリン、Lヒスチジン、グリシン、Lセリン、Lアラニン、Lアスパラギン、Lアスパラギン酸、Lグルタミン、Lグルタミン酸、Lプロリン、Lアルギニン、Lシトルリン、及びLオルニチンからなる群より選択される、請求項11に記載の方法。前記Lアミノ酸が、Lアルギニンである、請求項10に記載の方法。1.細菌ここに開示する主題に基づく細菌は、腸内細菌科のLアミノ酸生産細菌であって、bssR遺伝子の発現が増強されるよう改変された細菌である。Lアミノ酸生産細菌という記載は、培地で培養した場合にLアミノ酸を生産して培地中に分泌する能力を有する細菌を意味してよい。Lアミノ酸生産細菌という用語は、腸内細菌科の細菌、例えば、EcoliK12等のEcoli、の野生株又は親株よりも多い量で、Lアミノ酸を生産して培地中への蓄積を引き起こすことのできる細菌を意味してもよく、微生物が、05gL以上、他の例では10gL以上の量で、培地中への標的Lアミノ酸の蓄積を引き起こすことができることを意味してもよい。細菌は、1種類のLアミノ酸を生産してもよく、2種類以上のLアミノ酸の混合物を生産してもよい。Lアミノ酸という用語は、例えば、Lアラニン、Lアルギニン、Lアスパラギン、Lアスパラギン酸、Lシステイン、Lグルタミン酸、Lグルタミン、グリシン、Lヒスチジン、Lイソロイシン、Lロイシン、Lリジン、Lメチオニン、Lフェニルアラニン、Lプロリン、Lセリン、Lスレオニン、Lトリプトファン、Lチロシン、及びLバリンを含む。芳香族Lアミノ酸という用語は、例えば、Lフェニルアラニン、Lチロシン、及びLトリプトファンを含む。非芳香族Lアミノ酸という用語は、例えば、Lスレオニン、Lリジン、Lシステイン、Lメチオニン、Lロイシン、Lイソロイシン、Lバリン、Lヒスチジン、グリシン、Lセリン、Lアラニン、Lアスパラギン、Lアスパラギン酸、Lグルタミン、Lグルタミン酸、Lプロリン、及びLアルギニンを含む。具体例は、Lスレオニン、Lリジン、Lシステイン、Lロイシン、Lヒスチジン、Lグルタミン酸、Lフェニルアラニン、Lトリプトファン、Lプロリン、及びLアルギニンである。腸内細菌科は、エシェリヒアEscherichia属、エンテロバクターEnterobacter属、エルビニアErwinia属、クレブシエラKlebsiella属、パントエアPantoea属、フォトラブダスPhotorhabdus属、プロビデンシアProvidencia属、サルモネラSalmonella属、セラチアSerratia属、シゲラShigella属、モルガネラMorganella属、エルシニアYersinia属等に属する細菌を包含する。特に、NCBINationalCenterforBiotechnologyInformationデータベースhttpwwwncbinlmnihgovTaxonomyBrowserwwwtaxcgiid543で使用される分類により腸内細菌科Enterobacteriaceaeに分類されるものを使用することができる。具体例は、Escherichia属又はPantoea属に属する細菌である。Escherichia属に属する細菌という記載は、細菌が、微生物学の当業者に公知の分類に従って、Escherichia属に分類されることを意味してよい。Escherichia属に属する細菌としては、限定されるものではないが、エシェリヒアコリEscherichiacoliEcoliが挙げられる。Escherichia属に属する細菌は特に限定されないが、例えば、NeidhardtFCらによって記載された細菌EscherichiacoliandSalmonellatyphimuriumAmericanSocietyforMicrobiologyWashingtonDC1208Table1を使用することができる。Pantoea属に属する細菌という記載は、細菌が、微生物学の当業者に公知の分類に従って、Pantoea属に分類されることを意味してよい。エンテロバクターアグロメランスEnterobacteragglomeransの幾つかの種は、最近では、16SrRNAの塩基配列解析等に基づいて、パントエアアグロメランスPantoeaagglomerans、パントエアアナナティスPantoeaananatis、パントエアスチュアールティPantoeastewartii等に再分類されているIntJSystBacteriol43162173。遺伝子の発現が増強されるように細菌が改変されたという記載は、遺伝子の発現が、非改変株、例えば、野生株、より高いことを意味してよい。このような改変としては、発現する遺伝子の細胞当たりのコピー数の増加、遺伝子の転写レベルの増加、遺伝子から転写されるmRNAの翻訳レベルの増加等が挙げられる。発現した遺伝子のコピー数の量は、例えば、染色体DNAを制限酵素処理した後、遺伝子の配列に基づくプローブを使用するサザンブロッティングや蛍光insituハイブリダイゼーションfluorescenceinsituhybridizationFISH等を行うことにより測定する。遺伝子の転写のレベルは、ノーザンブロッティングや定量的RTPCR等を含む種々の公知の方法により測定することができる。mRNAの翻訳レベル又は遺伝子産物の量は、抗体を使用するウエスタンブロッティングを含む種々の公知の方法により測定することができる。ウエスタンブロッティング分析は、翻訳レベルだけでなく、転写レベルも反映する。更に、対照の役目を果たす野生株には、例えば、EcoliK21又はPantoeaananatisFERMBP6614が含まれる。bssR遺伝子yliHb0836と同義は、バイオフィルム形成のレギュレーターであるBssRをコードする。bssR遺伝子GenBankaccessionnumberNC0009132gi49175990におけるヌクレオチド877471~877854は、EcoliK12の染色体上のrimO遺伝子反対方向に配向しているとyliI遺伝子との間に位置している。bssR遺伝子の塩基配列及びbssR遺伝子によってコードされるBssRタンパク質のアミノ酸配列を、それぞれ配列番号1及び配列番号2に示す。腸内細菌科の属又は株の間でDNA配列に幾分かの差異があり得るため、発現が増強されるように改変されるbssR遺伝子は、配列番号1に示される遺伝子に限定されず、配列番号1に相同な遺伝子を含んでいてよい。したがって、bssR遺伝子によってコードされるタンパク質バリアントproteinvariantは、BssRタンパク質の活性を有する限り、配列番号2に示すアミノ酸配列全体に対して、80以上、他の例では90以上、他の例では95以上、他の例では98以上、他の例では99以上の相同性を有していてよい。相同性という用語は、同一性を意味し得る。タンパク質バリアントという記載は、1若しくは数個のアミノ酸の欠失、挿入、付加、又は置換のいずれであるかにかかわらずその配列中に変異を有するタンパク質を意味してよい。バリアントタンパク質における変異の数は、タンパク質の三次元構造における位置又はアミノ酸残基の種類に依存する。バリアントタンパク質における変異の数は、配列番号2において、1~30、他の例では1~15、更に他の例では1~5であってよい。バリアントにおけるこのような変異は、タンパク質の三次元構造に重要ではないタンパク質の領域において生じうる。これは、幾つかのアミノ酸は互いに高い相同性を有しているため、そのような変異によっては三次元構造は影響を受けないからである。2つのアミノ酸配列の間の相同性は、周知の方法、例えば、3つのパラメータスコア、同一性、及び類似性を計算するコンピュータプログラムBLAST20を使用して決定することができる。1若しくは数個のアミノ酸残基の置換、欠失、挿入、又は付加は、活性が維持されるよう、保存的変異であるべきである。代表的な保存的変異は、保存的置換である。保存的置換としては、Ser又はThrによるAlaの置換、Gln、His、又はLysによるArgの置換、Glu、Gln、Lys、His、又はAspによるAsnの置換、Asn、Glu、又はGlnによるAspの置換、Ser又はAlaによるCysの置換、Asn、Glu、Lys、His、Asp、又はArgによるGlnの置換、Asn、Gln、Lys、又はAspによるGluの置換、ProによるGlyの置換、Asn、Lys、Gln、Arg、又はTyrによるHisの置換、Leu、Met、Val、又はPheによるIleの置換、Ile、Met、Val、又はPheによるLeuの置換、Asn、Glu、Gln、His、又はArgによるLysの置換、Ile、Leu、Val、又はPheによるMetの置換、Trp、Tyr、Met、Ile、又はLeuによるPheの置換、Thr又はAlaによるSerの置換、Ser又はAlaによるThrの置換、Phe又はTyrによるTrpの置換、His、Phe、又はTrpによるTyrの置換、及びMet、Ile、又はLeuによるValの置換が挙げられる。更に、bssR遺伝子は、機能的なBssRタンパク質をコードする限り、配列番号1に示す塩基配列又はこの塩基配列から調製することのできるプローブと、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするバリアントであってよい。ストリンジェントな条件は、特異的なハイブリッド、例えば、60以上、他の例では70以上、他の例では80以上、他の例では90以上、他の例では95以上、他の例では98以上、他の例では99以上の相同性を有するハイブリッドが形成され、非特異的なハイブリッド、例えば、前記より低い相同性を有するハイブリッドが形成されないような条件を含む。例えば、ストリンジェントな条件としては、1×SSC、01SDS、他の例では01×SSC、01SDSの塩濃度で、60°Cで、1回またはそれ以上、他の例では2回又は3回、洗浄することが挙げられる。洗浄時間は、ブロッティングに使用する膜の種類に依存し、原則として、製造業者によって推奨されているものとすべきである。例えば、ストリンジェントな条件下でHybond商標名Nナイロン膜アマシャムについて推奨される洗浄時間は15分である。洗浄工程は、2~3回行うことができる。プローブの長さは、ハイブリダイゼーション条件に応じて適宜選択することができ、通常は100bp~1kbpである。遺伝子の発現を増強する方法には、遺伝子のコピー数を増加させることが含まれる。腸内細菌科の細菌内で機能することのできるベクターに遺伝子を導入することにより、遺伝子のコピー数が増加する。低コピーベクターlowcopyvectorを使用することができる。低コピーベクターとしては、限定されるものではないが、pSC101、pMW118、pMW119等が挙げられる。低コピーベクターという用語は、コピー数が細胞当たり最大で5コピーまでのベクターについて使用される。しかしながら、pBR系プラスミド等の高コピーベクターhighcopyvectorを使用することもできる。遺伝子発現の増強は、例えば相同組換えやMu組み込み等によって、細菌の染色体中に遺伝子を多コピー導入することによっても達成できる。例えば、1回のMu組み込み作用により、最大3コピーまでの遺伝子を細菌の染色体中に導入することができる。遺伝子のコピー数の増加は、細菌の染色体DNA中に遺伝子を多コピー導入することによっても達成できる。細菌の染色体中に遺伝子を多コピー導入するためには、染色体DNA中の多コピーな配列を標的として相同組換えを実施する。染色体DNA中に多コピー存在する配列には、限定されるものではないが、反復性DNArepetitiveDNA、又は転移因子transposableelementの末端に存在する逆方向反復invertedrepeatsが含まれる。また、遺伝子をトランスポゾンに組み込むことが可能であり、これを転移させ、染色体DNAに遺伝子を多コピー導入することができる。遺伝子発現の増強は、プロモーター、ターミネーター、及びシャインダルガーノSD配列等の遺伝子の発現調節配列を改変すること、例えば、目的遺伝子を強力なプロモーターの制御下に配置すること、によっても達成できる。例えば、lacプロモーター、trpプロモーター、trcプロモーター、λファージのPR又はPLプロモーターは、いずれも強力なプロモーターであることが知られている。強力なプロモーターの使用は、遺伝子の多コピー化と組み合わせてよい。あるいは、プロモーターの効果は、例えば、プロモーターに変異を導入し、プロモーターの下流に位置する遺伝子の転写レベルを増加させることにより増強することができる。また、リボソーム結合部位RBSと開始コドンとの間のスペーサー領域、特に開始コドンの直ぐ上流の配列、における数個のヌクレオチドの置換は、mRNAの翻訳性translatabilityに大きく影響し得ることが知られている。例えば、開始コドンに先行する3つのヌクレオチドの性質によっては、発現レベルが20倍に及ぶことが分かっているGoldら、AnnuRevMicrobiol353654031981Huiら、EMBOJ36236291984。更に、細菌の染色体上の遺伝子のプロモーター領域にヌクレオチド置換を導入することもでき、この結果、より強いプロモーター機能が得られる。発現調節配列の改変は、例えば、WO0018935及びJP1215280Aに開示されているような、温度感受性プラスミドを使用する遺伝子置換と同様のやり方で行うことができる。プラスミドDNAの調製、DNAの消化及び連結、形質転換、オリゴヌクレオチドのプライマーとしての選択のための方法等は、当業者に周知の通常の方法であってよい。これらの方法は、例えば、SambrookJFritschEFandManiatisTMolecularCloningALaboratoryManualSecondEditionColdSpringHarborLaboratoryPressに記載されている。Lアミノ酸生産細菌bssR遺伝子の発現が増強されるよう改変された、ここに開示する主題に基づく細菌としては、芳香族又は非芳香族Lアミノ酸のいずれを生産することのできる細菌でも使用することができる。ここに開示する主題に基づく細菌は、Lアミノ酸を生産する能力をもともとinherently有する細菌内において、bssR遺伝子の発現を増強することにより取得することができる。あるいは、ここに開示する主題に基づく細菌は、bssR遺伝子の発現が既に増強されている細菌に、Lアミノ酸を生産する能力を付与することにより取得することができる。Lスレオニン生産細菌Lスレオニン生産細菌、又はLスレオニン生産細菌を誘導するのに使用することのできる親株としては、限定されるものではないが、Escherichia属に属する株、例えば、EcoliTDH6pVIC40米国特許第5175107号、米国特許第5705371号、Ecoli472T23pYN7米国特許第5631157号、EcoliNRRL21593米国特許第5939307号、EcoliFERMBP3756米国特許第5474918号、EcoliFERMBP3519及びFERMBP3520米国特許第5376538号、EcoliMG442Gusyatinerら、Genetikaロシア語、14947956、並びにEcoliVL643及びVL2055EP1149911A等が挙げられる。TDH6株は、thrC遺伝子を欠損し、さらに、スクロース資化性で、ilvA遺伝子にリーキーleaky変異を有する。この株は、rhtA遺伝子にも変異を有し、これにより高濃度のスレオニン又はホモセリンに対する耐性が付与されている。B3996株は、変異型thrA遺伝子を含むthrABCオペロンをRSF1010系ベクターに挿入することによって得られたプラスミドpVIC40を有する。この変異型thrA遺伝子は、スレオニンによるフィードバック阻害から実質的に脱感作されたアスパルトキナーゼホモセリンデヒドロゲナーゼIをコードする。B3996株は、1987年11月19日に、受託番号RIA1867の下で、AllUnionScientificCenterofAntibioticsに寄託された。この株は、1987年4月7日に、受託番号VKPMB3996の下で、RussianNationalCollectionofIndustrialMicroorganismsにも寄託された。EcoliVKPMB5318は、Lスレオニン生産細菌を誘導するための親株として使用してもよい。B5318株は、イソロイシン非要求性prototrophicであり、プラスミドpVIC40中のスレオニンオペロンの調節領域が温度感受性のλファージC1リプレッサー及びPRプロモーターにより置換されている。VKPMB5318株は、1990年3月3日に、受託番号VKPMB5318の下で、RussianNationalCollectionofIndustrialMicroorganismsに寄託された。細菌は、以下の遺伝子の1またはそれ以上の発現が増強されるよう、さらに改変されていてよい:スレオニンによるフィードバック阻害に耐性のアスパルトキナーゼホモセリンデヒドロゲナーゼIaspartokinasehomoserinedehydrogenaseIをコードする変異型thrA遺伝子;ホモセリンキナーゼhomoserinekinaseをコードするthrB遺伝子;スレオニン合成酵素threoninesynthaseをコードするthrC遺伝子;推定上の膜貫通タンパク質putativetransmembraneproteinをコードするrhtA遺伝子;アスパルテート-β-セミアルデヒドデヒドロゲナーゼaspartateβsemialdehydedehydrogenaseをコードするasd遺伝子;及びアスパルテートアミノトランスフェラーゼaspartateaminotransferaseアスパルテートトランスアミナーゼaspartatetransaminaseをコードするaspC遺伝子。EscherichiacoliのアスパルトキナーゼホモセリンデヒドロゲナーゼIをコードするthrA遺伝子は明らかとなっているヌクレオチド位置337~2799、GenBankaccessionnoNC0009132gi49175990。thrA遺伝子は、EcoliK12の染色体上のthrL遺伝子とthrB遺伝子との間に位置する。EscherichiacoliのホモセリンキナーゼをコードするthrB遺伝子は明らかとなっているヌクレオチド位置2801~3733、GenBankaccessionnoNC0009132gi49175990。thrB遺伝子は、EcoliK12の染色体上のthrA遺伝子とthrC遺伝子との間に位置する。Escherichiacoliのスレオニン合成酵素をコードするthrC遺伝子は明らかとなっているヌクレオチド位置3734~5020、GenBankaccessionnoNC0009132gi49175990。thrC遺伝子は、EcoliK12の染色体上のthrB遺伝子とyaaXオープンリーディングフレームとの間に位置する。これら3つの遺伝子は全て、単一のスレオニンオペロンとして機能する。スレオニンオペロンの発現を増強するためには、望ましくは、転写に影響を与えるアテニュエーター領域を同オペロンから除去するWO2005049808、WO2003097839。スレオニンによるフィードバック阻害に耐性のアスパルトキナーゼホモセリンデヒドロゲナーゼIをコードする変異型thrA遺伝子は、thrB遺伝子及びthrC遺伝子と共に、スレオニン生産Ecoli株VKPMB3996中に存在する周知のプラスミドpVIC40から単一のオペロンとして取得することができる。プラスミドpVIC40については、米国特許第5705371号に詳細に記載されている。rhtA遺伝子は、Ecoli染色体上の18分に位置し、グルタミン輸送系の構成要素をコードするglnHPQオペロンに近接している。rhtA遺伝子は、ORF1ybiF遺伝子、ヌクレオチド位置764~1651、GenBankaccessionnoAAA218541gi440181と同一であり、pexB遺伝子とompX遺伝子との間に位置する。ORF1によってコードされるタンパク質を発現するユニットは、rhtA遺伝子と呼ばれているrht:ホモセリン及びスレオニンに対する耐性resistancetohomoserineandthreonine。また、rhtA23変異が、AGT開始コドンに対する-1位におけるG→A置換であることが明らかにされているABSTRACTSofthe17thInternationalCongressofBiochemistryandMolecularBiologyinconjugationwithAnnualMeetingoftheAmericanSocietyforBiochemistryandMolecularBiologySanFranciscoCaliforniaAugust24291997abstractNo457EP1013765A。Ecoliのasd遺伝子は既に明らかとなっておりヌクレオチド位置3572511~3571408、GenBankaccessionnoNC0009131gi16131307、同遺伝子の塩基配列に基づいて調製したプライマーを利用するPCRポリメラーゼ連鎖反応、WhiteTJら、TrendsGenet5185を参照のことによって取得することができる。他の微生物のasd遺伝子は、同様の手法で取得することができる。また、EcoliのaspC遺伝子も既に明らかとなっておりヌクレオチド位置983742~984932、GenbankaccessionnoNC0009131gi16128895、PCRによって取得することができる。他の微生物のaspC遺伝子は、同様の手法で取得することができる。Lリジン生産細菌Escherichia属に属するLリジン生産細菌としては、Lリジンアナログに対する耐性を有する変異体が挙げられる。Lリジンアナログは、Escherichia属に属する細菌の生育を阻害するが、培地中にLリジンが存在する場合、この阻害は完全に又は部分的に脱感作される。Lリジンアナログとしては、限定されるものではないが、オキサリジン、リジンハイドロキサメート、SLシステインAEC、γ‐メチルリジン、α‐クロロカプロラクタム等が挙げられる。これらのリジンアナログに対する耐性を有する変異体は、Escherichia属に属する細菌を従来の人工的な変異誘発処理に供することによって得ることができる。Lリジンを製造するのに有用な細菌株としては、特に、EscherichiacoliAJ11442及びH9343米国特許第6344347号、EcoliH9341、EcoliAI80pFM201米国特許第6258554号等が挙げられる。Lヒスチジン生産細菌を誘導するのに使用することのできる親株としては、Lヒスチジンの生合成酵素をコードする1またはそれ以上の遺伝子の発現が増強された株も挙げられる。そのような遺伝子としては、ATPホスホリボシルトランスフェラーゼhisG、ホスホリボシルAMPシクロヒドラーゼhisI、ホスホリボシルATPピロホスホハイドロラーゼhisIE、ホスホリボシルホルムイミノ5アミノイミダゾールカルボキシアミドリボタイドイソメラーゼhisA、アミドトランスフェラーゼhisH、ヒスチジノールホスフェートアミノトランスフェラーゼhisC、ヒスチジノールホスファターゼhisB、ヒスチジノールデヒドロゲナーゼhisD等をコードする遺伝子が挙げられる。hisG及びhisBHAFIによりコードされるLヒスチジン生合成酵素は、Lヒスチジンによって阻害されることが知られており、よって、Lヒスチジン生産能は、ATPホスホリボシルトランスフェラーゼにフィードバック阻害に対する耐性を付与する変異を導入することにより効率的に増強することもできるロシア連邦特許第2003677号及び2119536号。Lヒスチジン生産能を有する株として、具体的には、Lヒスチジン生合成酵素をコードするDNAを担持するベクターを導入したEcoliFERMP5038及び5048JP56005099A、アミノ酸排出のための遺伝子であるrhtを導入したEcoli株EP1016710A、スルファグアニジン、DL124トリアゾール3アラニン、及びストレプトマイシンに対する耐性を付与したEcoli80株VKPMB7270、ロシア連邦特許第2119536号等が挙げられる。Lグルタミン酸生産細菌Lグルタミン酸生産細菌、又はLグルタミン酸生産細菌を誘導するのに使用することのできる親株としては、限定されるものではないが、Escherichia属に属する株、例えば、EcoliVL334thrCが挙げられる。EcoliVL334は、thrC及びilvA遺伝子に変異を有するLイソロイシン及びLスレオニン要求性の株である米国特許第4278765号。thrC遺伝子の野生型アレルは、野生型EcoliK12細胞で生育させたバクテリオファージP1を使用する一般的なトランスダクション法によって導入した。この結果、Lグルタミン酸を生産することのできるLイソロイシン要求性株VL334thrCが得られた。Lグルタミン酸生産細菌を誘導するのに使用することのできる親株としては、限定されるものではないが、α-ケトグルタル酸デヒドロゲナーゼ活性を欠損した株、又はLグルタミン酸生合成酵素をコードする1またはそれ以上の遺伝子が増強された株が挙げられる。Lグルタミン酸生合成に関与する遺伝子としては、グルタミン酸デヒドロゲナーゼgdhA、グルタミン合成酵素glnA、グルタミン酸合成酵素gltAB、イソクエン酸デヒドロゲナーゼicdA、アコニテートヒドラターゼacnAacnB、クエン酸合成酵素gltA、ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼppc、ピルビン酸カルボキシラーゼpyc、ピルビン酸デヒドロゲナーゼaceEFlpdA、ピルビン酸キナーゼpykApykF、ホスホエノールピルビン酸合成酵素ppsA、エノラーゼeno、ホスホグリセロムターゼpgmApgmI、ホスホグリセレートキナーゼpgk、グルセルアルデヒド3リン酸デヒドロゲナーゼgapA、トリオースリン酸イソメラーゼtpiA、フルクトースビスリン酸アルドラーゼfbp、ホスホフルクトキナーゼpfkApfkB、及びグルコースリン酸イソメラーゼpgiをコードする遺伝子が挙げられる。クエン酸合成酵素遺伝子、ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼ遺伝子、及び/又はグルタミン酸デヒドロゲナーゼ遺伝子の発現が増強されるよう改変された株としては、EP1078989A、EP955368A、及びEP952221Aに開示された株が挙げられる。クエン酸合成酵素遺伝子及び/又はホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼ遺伝子の発現が低下し、且つ/又はα-ケトグルタル酸デヒドロゲナーゼの活性を欠損するよう改変された株としては、EP1078989A、EP955368A、及びEP952221Aに開示された株が挙げられる。Lグルタミン酸生産細菌を誘導するのに使用することのできる親株としては、Lグルタミン酸生合成経路から分岐してLグルタミン酸以外の化合物の合成を触媒する酵素の活性が低下または消失した株が挙げられる。そのような酵素としては、イソクエン酸リアーゼaceA、α-ケトグルタル酸デヒドロゲナーゼsucA、ホスホトランスアセチラーゼpta、アセテートキナーゼack、アセトヒドロキシ酸合成酵素ilvG、アセト乳酸合成酵素ilvI、ギ酸アセチルトランスフェラーゼpfl、乳酸デヒドロゲナーゼldh、及びグルタミン酸デカルボキシラーゼgadABが挙げられる。α-ケトグルタル酸デヒドロゲナーゼの活性が欠損または低下したEscherichia属に属する細菌、及びこれらを取得する方法は、米国特許第5378616号及び5573945号に記載されている。特に、これらの株には以下のものが含まれる:EcoliW3110sucAKmREcoliAJ12624EcoliAJ12628EcoliAJ12949EcoliW3110sucAKmRは、EcoliW3110のα-ケトグルタル酸デヒドロゲナーゼ遺伝子以下、sucA遺伝子ともいうを破壊することにより得られた株である。この株は、α-ケトグルタル酸デヒドロゲナーゼを完全に欠損している。Lグルタミン酸生産細菌として、他には、Escherichia属に属し、アスパラギン酸の代謝拮抗物質に対する耐性を有するものが挙げられる。これらの株は、α-ケトグルタル酸デヒドロゲナーゼ活性を欠損していてもよく、そのような株としては、例えば、EcoliAJ13199米国特許第5908768号、さらにLグルタミン酸分解能が低下したFERMP12379米国特許第5393671号、AJ13138米国特許第6110714号等が挙げられる。Lグルタミン酸生産細菌としては、α-ケトグルタル酸デヒドロゲナーゼ活性が欠損または低下したPantoeaに属する変異株が挙げられ、上記のようにして取得することができる。そのような株には、PantoeaananatisAJ13356米国特許第6331419号が含まれる。PantoeaananatisAJ13356は、通産省工業技術院生命工学工業技術研究所現、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター、日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6郵便番号3058566に、1998年2月19日、FERMP16645の受託番号の下で寄託された。その後、同株は1999年1月11日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、FERMBP6615の受託番号が付与された。PantoeaananatisAJ13356は、αKGDHE1サブユニット遺伝子sucAが破壊された結果、α-ケトグルタル酸デヒドロゲナーゼ活性を欠損している。同株は、分離された当時はEnterobacteragglomeransとして同定され、EnterobacteragglomaeransAJ13356として寄託された。しかしながら、同株は、最近、16SrRNAの塩基配列解析等に基づきPantoeaananatisとして再分類された。AJ13356は、Enterobacteragglomeransとして上記寄託機関に寄託されたが、この明細書の目的のためには、Pantoeaananatisとして記載する。Lフェニルアラニン生産細菌Lフェニルアラニン生産細菌、又はLフェニルアラニン生産細菌を誘導するのに使用することのできる親株としては、限定されるものではないが、Escherichia属に属する株、例えば、EcoliAJ12739、変異型pheA34遺伝子を保有するEcoliHW1089米国特許第5354672号、EcoliMWEC101b、EcoliNRRLB12141NRRLB12145NRRLB12146、及びNRRLB12147米国特許第4407952号が挙げられる。また、親株としては、EcoliK12W3110pPHAB、EcoliK12W3110pPHAD、EcoliK12W3110pPHATerm、及びEcoliK12W3110pBParoG4pACMABAJ12604と命名を使用することができるEP488424B1。更に、yedA遺伝子又はyddG遺伝子によりコードされるタンパク質の活性が増強されたEscherichia属に属するLフェニルアラニン生産細菌を使用してもよい米国特許出願第20030148473A1号及び20030157667A1号。Lトリプトファン生産細菌Lトリプトファン生産細菌、又はLトリプトファン生産細菌を誘導するのに使用することのできる親株としては、限定されるものではないが、Escherichia属に属する株、例えば、変異型trpS遺伝子によりコードされるトリプトファニルtRNA合成酵素を欠損したEcoliJP4735pMU3028及びJP6015pMU91米国特許第5756345号、セリンによるフィードバック阻害が解除されたホスホグリセレートデヒドロゲナーゼをコードするserAアレル及びトリプトファンによるフィードバック阻害が解除されたアントラニレート合成酵素をコードするtrpEアレルを有するEcoliSV164米国特許第6180373号、トリプトファナーゼ酵素を欠損したEcoliAGX17及びAGX6aroP米国特許第4371614号、ホスホエノールピルビン酸生産能が増強されたEcoliAGX17pGX50pACKG4ppsWO9708333、米国特許第6319696号等が挙げられる。yedA遺伝子又はyddG遺伝子によりコードされる同定済みのタンパク質の活性が増強されたEscherichia属に属するLトリプトファン生産細菌を使用してもよい米国特許出願第20030148473A1号及び20030157667A1号。Lトリプトファン生産細菌を誘導するための親株としては、アントラニレート合成酵素、ホスホグリセレートデヒドロゲナーゼ、及びトリプトファン合成酵素から選択される1またはそれ以上の酵素の活性が増強された株も挙げられる。アントラニレート合成酵素及びホスホグリセレートデヒドロゲナーゼは、いずれもLトリプトファン及びLセリンによるフィードバック阻害を受けることから、フィードバック阻害を脱感作する変異をこれらの酵素に導入してもよい。そのような変異を有する株として、具体的には、脱感作されたアントラニレート合成酵素を保有するEcoliSV164、及びフィードバックから脱感作されたホスホグリセレートデヒドロゲナーゼをコードする変異型serA遺伝子を含むプラスミドpGH5をEcoliSV164に導入することにより得られた形質転換株が挙げられる。Lトリプトファン生産細菌を誘導するための親株としては、脱感作されたアントラニレート合成酵素をコードする遺伝子を含むトリプトファンオペロンが導入された株も挙げられるJP5771397A、JP62244382A、米国特許第4371614号。更に、Lトリプトファン生産能は、トリプトファンオペロンの内、トリプトファン合成酵素をコードする遺伝子trpBAの発現を増強することによって付与することができる。トリプトファン合成酵素は、それぞれtrpA及びtrpB遺伝子によってコードされるα及びβサブユニットからなる。加えて、Lトリプトファン生産能は、イソクエン酸リアーゼ-リンゴ酸合成酵素オペロンの発現を増強することによって改良することができるWO2005103275。Lプロリン生産細菌Lプロリン生産細菌、又はLプロリン生産細菌を誘導するのに使用することのできる親株としては、限定されるものではないが、Escherichia属に属する株、例えば、ilvA遺伝子を欠損し、Lプロリンを生産することのできるEcoli702ilvAEP1172433が挙げられる。細菌は、Lプロリン生合成に関与する1またはそれ以上の遺伝子の発現を増強することにより改良することができる。Lプロリン生産細菌に好ましい遺伝子としては、Lプロリンによるフィードバック阻害が脱感作されたグルタメートキナーゼをコードするproB遺伝子が挙げられるDE特許3127361。さらに、細菌は、菌体からLアミノ酸を排出するタンパク質をコードする1またはそれ以上の遺伝子の発現を増強することにより改良されていてよい。そのような遺伝子としては、b2682及びb2683遺伝子ygaZH遺伝子が挙げられるEP1239041A2。Lプロリン生産活性を有するEscherichia属に属する細菌としては、以下のEcoli株が挙げられる:NRRLB12403及びNRRLB12404イギリス特許2075056、VKPMB8012ロシア連邦特許出願第2000124295号、ドイツ特許3127361に記載されたプラスミド変異体、BloomFRら第15回Miamiwintersymposium1983p34に記載されたプラスミド変異体等。Lアルギニン生産細菌Lアルギニン生産細菌、又はLアルギニン生産細菌を誘導するのに使用することのできる親株としては、限定されるものではないが、Escherichia属に属する株、例えば、Ecoli237株米国特許出願第2002058315A1号及び変異型Nアセチルグルタミン酸合成酵素を保有するその誘導体株ロシア連邦特許出願第2001112869号、Ecoli382株EP1170358A1、ならびにNアセチルグルタミン酸合成酵素をコードするargA遺伝子が導入されたアルギニン生産株EP1170361A1等が挙げられる。Lアルギニン生産細菌を誘導するための親株としては、Lアルギニンの生合成酵素をコードする1またはそれ以上の遺伝子の発現が増強された株も挙げられる。このような遺伝子としては、Nアセチルグルタミルリン酸レダクターゼargC、オルニチンアセチルトランスフェラーゼargJ、Nアセチルグルタミン酸キナーゼargB、アセチルオルニチントランスアミナーゼargD、オルニチンカルバモイルトランスフェラーゼargF、アルギノコハク酸合成酵素argG、アルギノコハク酸リアーゼargH、及びカルバモイルリン酸合成酵素carABをコードする遺伝子が挙げられる。Lシトルリン生産細菌Lシトルリン生産細菌、又はLシトルリン生産細菌を誘導するのに使用することのできる親株としては、限定されるものではないが、Escherichia属に属する株、例えば、Ecoliの変異型Nアセチルグルタミン酸合成酵素株である237pMADS11237pMADS12、及び237pMADS13、Ecoli333株両者は、フィードバック耐性の変異型カルバモイルリン酸合成酵素を保有するロシア連邦特許第RU2264459C2号、α‐ケトグルタル酸合成酵素の活性が増加し、さらにフェレドキシンNADPレダクターゼ、ピルビン酸合成酵素、又はα‐ケトグルタル酸デヒドロゲナーゼの活性が改変されたEcoli株EP2133417A1号、ならびに、コハク酸デヒドロゲナーゼ及びα‐ケトグルタル酸デヒドロゲナーゼの活性が減少したPananatisNA1sucAsdhA株米国特許出願第2009286290号等が挙げられる。Lシトルリンは、Lアルギニンの生合成経路の中間体であるため、Lシトルリン生産細菌を誘導するのに使用することのできる親株としては、Lアルギニン生合成酵素をコードする1またはそれ以上の遺伝子の発現が増強された株が挙げられる。このような遺伝子としては、限定されるものではないが、Nアセチルグルタミン酸合成酵素argA、Nアセチルグルタミン酸キナーゼargB、Nアセチルグルタミルリン酸レダクターゼargC、アセチルオルニチントランスアミナーゼargD、アセチルオルニチンデアセチラーゼargE、オルニチンカルバモイルトランスフェラーゼargFI、及びカルバモイルリン酸合成酵素carABをコードする遺伝子又はこれらの組合せが挙げられる。また、Lシトルリン生産細菌は、いずれかのLアルギニン生産細菌、例えばEcoli382株から、argG遺伝子によってコードされるアルギノコハク酸合成酵素を不活化させることにより容易に得られる。アルギノコハク酸合成酵素の不活化という記載は、細菌が不活性なアルギノコハク酸合成酵素を含有するように改変されたことを意味してもよく、細菌がアルギノコハク酸合成酵素を合成することができないことを意味してもよい。アルギノコハク酸合成酵素の不活化は、argG遺伝子の不活化によって行うことができる。argG遺伝子の不活化という記載は、改変された遺伝子が、完全に非機能的なタンパク質をコードすることを意味する。遺伝子の一部または全体の欠失、遺伝子のリーディングフレームのシフト、ミスセンス/ナンセンス変異の導入、又は遺伝子の隣接領域プロモーター、エンハンサー、アテニュエーター、リボソーム結合部位等の遺伝子の発現を制御する配列を含むの改変により、改変されたDNA領域が遺伝子を本来の形で発現できないことも可能である。細菌の染色体上のargG遺伝子の有無は、PCRやサザンブロッティング等を含む周知の方法によって検出することができる。また、遺伝子発現のレベルは、ノーザンブロッティングや定量的RTPCR等を含む種々の周知の方法を使用し、遺伝子から転写されたmRNAの量を測定することによって見積もることができる。argG遺伝子によってコードされるタンパク質の量は、SDSPAGEとそれに続けてイムノブロッティングアッセイウエスタンブロッティング分析を行うこと等を含む周知の方法によって測定することができる。argG遺伝子の発現は、遺伝子によってコードされるタンパク質の細胞内の活性が非改変株と比較して減少するよう、染色体上の遺伝子に変異を導入することにより、弱化させることができる。遺伝子の発現の弱化をもたらす変異には、遺伝子によってコードされるタンパク質におけるアミノ酸の置換を引き起こす1以上の塩基の置換ミスセンス変異、終止コドンの導入ナンセンス変異、フレームシフトを引き起こす1又は2塩基の欠失、薬剤耐性遺伝子の挿入、又は遺伝子の一部若しくは遺伝子の全体の欠失が含まれるQiuZandGoodmanMFJBiolChem27286118617KwonDHetalJAntimicrobChemother46793796。argG遺伝子の発現は、プロモーターやシャインダルガルノSD配列等の発現調節配列を改変することによっても弱化させることができるWO9534672CarrierTAandKeaslingJDBiotechnolProg155864。例えば、遺伝子組換えによって変異を導入するために、以下の方法を用いることができる。活性の低下した変異型タンパク質をコードする変異型遺伝子を調製し、その変異型遺伝子を含むDNA断片を用いて、改変すべき細菌を形質転換する。その後、相同組換えによって、染色体上の本来のnative遺伝子を変異型遺伝子によって置換し、この結果得られる株を選択する。相同組換えを使用する遺伝子置換または遺伝子破壊は、直鎖DNAを用いて行うことができ、これはRedドライブンインテグレーションとして知られているDatsenkoKAandWannerBLProcNatlAcadSciUSA9712p66406645。または、相同組換えを使用する遺伝子置換は、温度感受性複製開始点を有するプラスミドを用いて行うことができる米国特許第6303383号又はJP05007491A。更に、宿主中で複製できないプラスミドを使用する上記のような相同組換えを使用して、遺伝子置換による部位特異的変異を組み込むこともできる。遺伝子の発現は、遺伝子のコード領域にトランスポゾン又はIS因子ISfactorを挿入することによっても弱化させることができ米国特許第5175107号、又は、従来の方法、例えば、UV照射又はニトロソグアニジンNmethylNnitroNnitrosoguanidineを用いる変異誘発によっても弱化させることができる。Lオルニチン生産細菌Lオルニチン生産細菌は、いずれかのアルギニン生産細菌、例えば、Ecoli382株VKPMB7296から、argF及びargIの両遺伝子によりコードされるオルニチンカルバモイルトランスフェラーゼを不活化させることにより容易に取得することができる。オルニチンカルバモイルトランスフェラーゼを不活化させる方法は、上記の通りである。Lバリン生産細菌Lバリン生産細菌、又はLバリン生産細菌を誘導するのに使用することのできる親株としては、Escherichia属に属する細菌、例えば、H81、NRRLB12287及びNRRLB12288米国特許第4391907号、VKPMB4411米国特許第5658766号、VKPMB7707欧州特許出願第EP1016710A2号等が挙げられる。Lバリン生産細菌を誘導するための親株としては、限定されるものではないが、ilvGMEDAオペロン米国特許第5998178号を過剰発現するよう改変された株が挙げられる。生産されるLバリンによってオペロンの発現がアテニュエーション減衰を受けないよう、ilvGMEDAオペロン中のアテニュエーションに必要な領域を除去するのが望ましい。更に、スレオニンデアミナーゼ活性が減少するよう、望ましくはオペロン中のilvA遺伝子を破壊する。Lバリン生産細菌を誘導するための親株としては、アミノアシルtRNA合成酵素の変異を有する変異体米国特許第5658766号も挙げられる。例えば、イソロイシンtRNA合成酵素をコードするileS遺伝子に変異を有するEcoliVL1970を使用することができる。EcoliVL1970は、1988年1月24日、受託番号VKPMB4411の下で、RussianNationalCollectionofIndustrialMicroorganismsに寄託された。また、生育にリポ酸を要求し、且つ/又はHATPアーゼを欠く変異体を、親株として使用することもできるWO9606926。Lイソロイシン生産細菌Lイソロイシン生産細菌、又はLイソロイシン生産細菌を誘導するのに使用することのできる親株としては、限定されるものではないが、6ジメチルアミノプリンに対する耐性を有する変異体JP5304969A、チアイソロイシンやイソロイシンヒドロキサメート等のイソロイシンアナログに対する耐性を有する変異体、及びDLエチオニン及び/又はアルギニンヒドロキサメートに対する耐性をさらに有する変異体JP5130882Aが挙げられる。さらに、Lイソロイシン生合成に関与するタンパク質、例えば、スレオニンデアミナーゼやアセトヒドロキセート合成酵素、をコードする遺伝子により形質転換された組換え株を親株として使用することもできるJP2458A、FR0356739、及び米国特許第5998178号。Lメチオニン生産細菌Lメチオニン生産細菌、及びLメチオニン生産細菌を誘導するための親株としては、限定されるものではないが、Lスレオニン要求性変異株やノルロイシン耐性変異株JP2000139471Aが挙げられる。また、メチオニンリプレッサー欠損株や、Lメチオニン生合成に関与するタンパク質、例えばホモセリントランススクシニラーゼやシスタチオニンγ-合成酵素、をコードする遺伝子により形質転換された組換え株JP2000139471Aを親株として使用することもできる。2.方法ここに開示した主題に基づく例示的な方法には、ここに開示した主題に基づく細菌を培地中で培養して培地中にLアミノ酸を生産および分泌させ、培地からLアミノ酸を回収することにより、Lアミノ酸を製造することが含まれる。培養、ならびに培地からのLアミノ酸の回収及び精製等は、細菌を使用してアミノ酸を製造する従来の発酵法と同様のやり方で行うことができる。培養のために選択される培地は、炭素源、窒素源、ミネラル、および必要に応じて、選択された細菌が生育のために要求する適量の栄養素を含む限り、合成培地であってもよく、天然培地であってもよい。炭素源には、グルコースおよびスクロース等の種々の炭水化物および種々の有機酸が含まれ得る。用いる微生物の同化の様式によっては、エタノール及びグリセリンを含むアルコールを使用してよい。窒素源としては、アンモニア及び硫酸アンモニウム等の種々のアンモニウム塩、アミン等の他の窒素化合物、ペプトン、大豆加水分解物、及び消化された発酵微生物等の天然の窒素源を使用することができる。ミネラルとしては、モノリン酸カリウム、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウム、硫酸第一鉄、硫酸マンガン、塩化カルシウム等を使用することができる。ビタミンとしては、チアミン、酵母エキス等を使用することができる。培養は、20~40°Cの温度で、他の例では30~38°Cの温度で、振盪および/または通気攪拌によるような好気的な条件下で、行うことができる。培養のpHは、通常は5~9、他の例では65~72である。培養のpHは、アンモニア、炭酸カルシウム、種々の酸、種々の塩基、及び緩衝液を用いて調整することができる。通常は、1~5日間の培養により、液体培地中に標的のLアミノ酸が蓄積する。培養後、細胞等の固形分は、遠心分離又は膜ろ過によって液体培地から除去することができ、その後、Lアミノ酸は、イオン交換、濃縮、及び/又は結晶化の方法によって回収および精製することができる。以下の非限定的な実施例を参照し、以下、本発明を更に具体的に説明する。実施例1.EcoliMG1655PLtacbssR株の構築EcoliMG1655PLtacbssR株を、MG1655株のbssR遺伝子の本来のnativeプロモーター領域をPLtacプロモーターで置換することにより取得した。bssR遺伝子の本来のプロモーター領域を置換するために、PLtacプロモーター及びcat遺伝子によりコードされるクロラムフェニコール耐性マーカーCmRを有するDNA断片を、DatsenkoKAとWannerBLによって記載されたRedを介したインテグレーションRedmediatedintegration及び/又はRedドライブンインテグレーションとも呼ばれる方法により、本来のプロモーター領域に代えて、EcoliMG1655の染色体中に組み込んだ。cat遺伝子に接続したPLtacプロモーターの断片は、EcoliMG1655PLtacxylE株WO2006043730の染色体DNAをテンプレートとして使用するPCRにより取得した。PLtacプロモーターの塩基配列を配列表に示す配列番号3。プライマーP1配列番号4及びP2配列番号5をPCR増幅に使用した。プライマーP1は、後の細菌の染色体中への組み込みのためにプライマーに導入された、bssR遺伝子の開始コドンから166bp上流に位置する領域に相補的な36ヌクレオチドを含み、プライマーP2は、bssR遺伝子の5配列と同一の36ヌクレオチドを含む。PCRは、GeneAmpPCRSystem2700増幅装置amplificatoryアプライドバイオシステムズを使用して行った。反応混合物合計容量50μlは、15mMMgCl2を含む5μlの10×PCR緩衝液Fermentas、リトアニア、200μlの各dNTP、25pmolの各設計したプライマー、及び1UのTaqポリメラーゼFermentas、リトアニアよりなるものとした。約20ngのEcoliMG1655PLtacxylEゲノムDNAを、PCRのためのテンプレートとして反応混合物に添加した。温度プロファイルは以下の通りとした:95°Cで5分の最初のDNA変性を行った後、95°Cで30秒の変性、54°Cで30秒のアニーリング、72°Cで15分の伸長を35サイクル行い、72°Cで5分の最後の伸長を行った。次いで、増幅したDNA断片は、アガロースゲル電気泳動により精製し、GenEluteSpinColumnsシグマ、米国を使用して抽出し、エタノールで沈殿させた。得られたDNA断片は、EcoliMG1655pKD46の細菌染色体中へのエレクトロポーレーション及びRedを介したインテグレーションRedmediatedintegrationに使用した。pKD46プラスミドDatsenkoKAandWannerBLProcNatlAcadSciUSA20009712664045は、温度感受性の複製開始点、λファージの2154塩基のDNA断片ヌクレオチド位置31088~33241GenBankaccessionnoJ02459、並びにアラビノース誘導性ParaBプロモーターの制御下にあるλRed相同組換え系の遺伝子γ、β、およびエキソexo遺伝子を含む。pKD46プラスミドは、MG1655株の染色体へのPCR産物の組み込みに必要である。MG1655株は、アメリカンタイプカルチャーコレクションPOBox1549ManassasVA20108USAから入手することができる。MG1655pKD46細胞を、アンピシリン100μgmlを添加した液体LB培地中で30°Cで一夜生育させた後、アンピシリン100μgml及びLアラビノース10mMアラビノースは、Red系の遺伝子をコードするプラスミドを誘導するのに用いられるを添加したSOB培地酵母エキス5glNaCl05glトリプトン20glKCl25mMMgCl210mMを用いて1:100に希釈し、細菌培養物の光学密度がOD600=04~07に達するまで30°Cで生育させた。細菌培養液10ml分の生育細胞を、氷冷した脱イオン水を用いて3回洗浄した後、100μlの水に懸濁した。脱イオン水に溶解した10μlのDNA断片100ngを細胞懸濁液に添加した。エレクトロポーレーションは、BioRadエレクトロポーレーション装置electroporatorUSANo1652098、バージョン289を用いて、製造元のマニュアルに従って行った。通電した細胞を、1mlのSOC培地SambrooketalMolecularCloningALaboratoryManualSecondEditionColdSpringHarborLaboratoryPressに添加し、37°Cで2時間インキュベートした後、25μgmlのクロラムフェニコールを含有するL寒天上に塗布した。24時間以内に生育したコロニーについて、プライマーP3配列番号6及びP4配列番号7を使用するPCRにより、bssR遺伝子の本来のプロモーター領域に代わるCmRマーカーの存在を試験した。この目的のために、新たに単離したコロニーを20μlの水に懸濁し、次いで、1μlの得られた懸濁物をPCRに使用した。以下の温度プロファイルを使用した:95°Cで10分の最初のDNA変性を行った後、95°Cで30秒の変性、55°Cで30秒のアニーリング、及び72°Cで1分の伸長を30サイクル行い、72°Cで7分の最後の伸長を行った。試験したCmRコロニーのいくつかが、所望の約2000bpのDNA断片を有しており、bssR遺伝子の255bpの本来のプロモーター領域に代えて、Pltacプロモーター及びCmRマーカーDNAの存在が確認された。これらの株の1つについて、37°Cで培養することにより熱感受性プラスミドpKD46を除去し、この結果得られた株をEcoliMG1655PLtacbssRと命名した。実施例2.Ecoli382PltacbssRによるLアルギニンの生産Lアルギニン生産におけるPLtacプロモーター制御下でのbssR遺伝子の発現増強の効果を試験するために、上記EcoliMG1655PLtacbssRの染色体由来のDNA断片を、Ecoliのアルギニン生産株382にP1トランスダクションMillerJHExperimentsinMolecularGeneticsColdSpringHarborLabPressPlainviewNYによって導入した。382株は、RussianNationalCollectionofIndustrialMicroorganismsに2000年4月10日に受託番号VKPMB7926の下で寄託された。両株、382及び382PLtacbssRを、それぞれ3mlのニュートリエントブロス中で37°Cで18時間振盪しながら培養し、03mlの得られた培養液をロータリーシェーカー上の20×200mmの試験管中の2mlの発酵培地で37°Cで48時間植菌した。培養後、培地中に蓄積したLアルギニンの量を、以下の移動相:ブタノール:酢酸:水=4:1:1vvを用いたペーパークロマトグラフィーにより測定した。ニンヒドリン2のアセトン溶液asolutionofninhydrininacetoneを、発色試薬として使用した。Lアルギニンを含むスポットを切り出し、CdCl2の05水溶液を用いてLアルギニンを溶出させ、Lアルギニンの量を540nmで分光学的に見積もった。発酵培地の組成glは以下の通りである。グルコース4802SO4350KH2PO420MgSO47H2O10チアミンHCl00002酵母エキス10Lイソロイシン01CaCO350グルコース及び硫酸マグネシウムは別々に滅菌する。CaCO3は、180°Cで2時間乾熱滅菌する。pHは70に調整する。試験管発酵の結果を表1に示す。表1から分かるように、bssR遺伝子の発現を増強した382PltacbssR株は、親のEcoliLアルギニン生産株382と比較して、より高い蓄積量のLアルギニンを生産することができた。実施例3.EcoliB3996PltacbssR株によるLスレオニンの生産スレオニン生産におけるbssR遺伝子の発現増強の効果を試験するために、上記EcoliMG1655PltacbssRの染色体由来のDNA断片を、Ecoliのスレオニン生産株VKPMB3996にP1トランスダクションMillerJHExperimentsinMolecularGeneticsColdSpringHarborLabPress1972PlainviewNYによって導入し、B3996PltacbssR株を得ることができる。B3996株は、1987年11月19日に受託番号RIA1867の下で、AllUnionScientificCenterofAntibioticsに寄託された。同株は、受託番号VKPMB3996の下で、RussianNationalCollectionofIndustrialMicroorganismsにも寄託された。両Ecoli株、B3996及びB3996PltacbssRは、それぞれ、L寒天プレート上で37°Cで18~24時間生育させることができる。種培養を得るために、4のグルコースを補填した2mlのLブロスLbrothが入った20×200mmの試験管中で32°Cで18時間、ロータリーシェーカー250rpm上でこれらの株を生育させることができる。その後、021ml10の種原料seedmaterialを発酵培地に植菌することができる。発酵は、20×200mmの試験管中の2mlの発酵用最少培地中で行うことができる。細胞は、250rpmで振盪しながら32°Cで65時間生育させることができる。培養後、培地中に蓄積したLスレオニンの量を、以下の移動相:ブタノール:酢酸:水=4:1:1vvを用いたペーパークロマトグラフィーにより測定できる。ニンヒドリン2のアセトン溶液を、発色試薬として使用できる。Lスレオニンを含むスポットを切り出し、CdCl2の05水溶液を用いてLスレオニンを溶出させ、Lスレオニンの量を540nmで分光学的に見積もることができる。発酵培地の組成glは以下の通りである。グルコース8002SO4220NaCl08KH2PO420MgSO47H2O08FeSO47H2O002MnSO45H2O002チアミンHCl00002酵母エキス10CaCO3300グルコース及び硫酸マグネシウムは別々に滅菌する。CaCO3は、180°Cで2時間乾熱滅菌する。pHは70に調整する。抗生物質は、滅菌後に培地に導入する。実施例4.EcoliAJ11442PltacbssRによるLリジンの生産リジン生産におけるbssR遺伝子の発現増強の効果を試験するために、上記EcoliMG1655PltacbssR株の染色体由来のDNA断片を、Ecoliのリジン生産株AJ11442にP1トランスダクションMillerJHExperimentsinMolecularGeneticsColdSpringHarborLabPress1972PlainviewNYによって導入し、AJ11442PltacbssR株を得ることができる。AJ11442株は、工業技術院生命工学工業技術研究所現、産業技術総合研究所特許生物寄託センター、日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6郵便番号3058566に、1981年5月1日に寄託され、FERMP5084の受託番号が付与された。その後、1987年10月29日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管され、FERMBP1543の受託番号が付与された。両Ecoli株、AJ11442及びAJ11442PltacbssRは、L培地中で37°Cで培養することができ、03mlの得られた培養物を、500mlフラスコ中の必要な薬剤を含む20mlの発酵培地中に植菌することができる。培養は、115rpmの攪拌速度で往復振盪装置を使用して37°Cで16時間実施することができる。培養の後、培地中のLリジン量及び残存グルコース量を、公知の方法サクラ精機製のBiotechanalyzerAS210により測定することができる。その後、それぞれの株について、消費されたグルコースに対するLリジンの収率を算出することができる。発酵培地の組成glは以下の通りである。グルコース402SO424K2HPO410MgSO47H2O10FeSO47H2O001MnSO45H2O001酵母エキス20pHをKOHにより70に調整し、115°Cで10分間培地をオートクレーブする。グルコース及びMgSO47H2Oは別々に滅菌する。CaCO3は、180°Cで2時間乾熱滅菌し、30glの終濃度で培地に添加する。実施例5.EcoliJM15PltacbssR株によるLシステインの生産Lシステイン生産におけるbssR遺伝子の発現増強の効果を試験するために、上記EcoliMG1655PltacbssRの染色体由来のDNA断片を、EcoliのLシステイン生産株JM15にP1トランスダクションMillerJHExperimentsinMolecularGeneticsColdSpringHarborLabPress1972PlainviewNYによって導入し、JM15PltacbssR株を得ることができる。EcoliJM15株は、EcoliJM15株米国特許第6218168号の派生株であり、JM15株は、膜タンパク質をコードし、いずれのLアミノ酸の生合成経路にも関与していないydeD遺伝子を含むDNAにより形質転換することができる米国特許第5972663号。JM15株は、イェール大学MCD生物学部門EcoliGeneticResourceCenterのColiGeneticStockCollectionから取得することができる。Lシステイン生産の評価のための発酵条件は、米国特許第6218168号の実施例6に詳細に記載されている。実施例6.Ecoli57PltacbssRによるLロイシンの生産Lロイシン生産におけるbssR遺伝子の発現増強の効果を試験するために、上記EcoliMG1655PltacbssR株の染色体由来のDNA断片を、EcoliのLロイシン生産株57VKPMB7386、米国特許第6124121号にP1トランスダクションMillerJHExperimentsinMolecularGeneticsColdSpringHarborLabPress1972PlainviewNYによって導入し、57PltacbssR株を得ることができる。57株は、1997年5月19日に受託番号VKPMB7386の下で、RussianNationalCollectionofIndustrialMicroorganismsに寄託された。両Ecoli株、57及び57PltacbssRは、L寒天プレート上で37°Cで18~24時間培養することができる。種培養を得るために、4のスクロースを補填した2mlのLブロスLbrothが入った20×200mmの試験管中で32°Cで18時間、ロータリーシェーカー250rpm上でこれらの株を生育させることができる。その後、021ml10の種原料を、発酵培地に植菌することができる。発酵は、20×200mmの試験管中の2mlの最少発酵培地中で行うことができる。細胞は、250rpmで振盪しながら32°Cで48~72時間生育させることができる。Lロイシンの量は、ペーパークロマトグラフィー液相の組成:ブタノール:酢酸:水=4:1:1により測定することができる。発酵培地pH72の組成glは以下の通りである。グルコース6002SO4250K2HPO420MgSO47H2O10チアミン001CaCO3250グルコース及びCaCO3は別々に滅菌する。実施例7.Ecoli80PltacbssR株によるLヒスチジンの生産Lヒスチジン生産におけるbssR遺伝子の発現増強の効果を試験するために、上記EcoliMG1655PltacbssRの染色体由来のDNA断片を、Ecoliのヒスチジン生産株80にP1トランスダクションMillerJHExperimentsinMolecularGeneticsColdSpringHarborLabPress1972PlainviewNYによって導入し、80PltacbssR株を得ることができる。80株は、ロシア連邦特許第2119536号に記載されており、1999年10月15日に受託番号VKPMB7270の下で、RussianNationalCollectionofIndustrialMicroorganismsに寄託された後、2004年7月12日にブダペスト条約に基づく寄託に移管された。両Ecoli株、80及び80PltacbssRは、それぞれLブロスLbroth中で29°Cで6時間培養することができる。その後、01mlの得られた培養物を、20×200mmの試験管中の2mlの発酵培地に植菌し、ロータリーシェーカー350rpm上で振盪しながら29°Cで65時間培養することができる。培養の後、培地中に蓄積するヒスチジンの量を、ペーパークロマトグラフィーにより決定することができる。ペーパーは、ブタノール:酢酸:水=4:1:1vvからなる移動相を用いて展開することができる。ニンヒドリン05のアセトン溶液を、発色試薬として使用できる。発酵培地の組成glは以下の通りであるpH60。グルコース1000豆濃大豆加水分解物02全窒素としてLプロリン102SO4250KH2PO420MgSO47H2O10FeSO47H2O001MnSO4001チアミン0001ベタイン20CaCO3600グルコース、プロリン、ベタイン、及びCaCO3は別々に滅菌する。pHは滅菌前に60に調整する。実施例8.EcoliVL334thrCPltacbssR株によるLグルタミン酸の生産Lグルタミン酸生産におけるbssR遺伝子の発現増強の効果を試験するために、上記EcoliMG1655PltacbssR株の染色体由来のDNA断片を、EcoliのLグルタミン酸生産株VL334thrCにP1トランスダクションMillerJHExperimentsinMolecularGeneticsColdSpringHarborLabPress1972PlainviewNYによって導入し、VL334thrCPltacbssR株を得ることができる。VL334thrC株は、2004年12月6日に受託番号VKPMB8961の下で、RussianNationalCollectionofIndustrialMicroorganismsに寄託された後、2004年12月8日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管された。両株、VL334thrC及びVL334thrCPltacbssRは、L寒天プレート上で37°Cで18~24時間生育させることができる。その後、1ループ分の細胞を、2mlの発酵培地が入った試験管に移すことができる。発酵培地は、グルコース60gl、硫酸アンモニウム25gl、KH2PO42gl、MgSO41gl、チアミン01mgml、Lイソロイシン70μgml、及びCaCO325glを含有する。pHは72に調整する。グルコース及びCaCO3は別々に滅菌する。培養は、振盪しながら30°Cで3日間実施することができる。培養の後、生産されるLグルタミン酸の量は、ペーパークロマトグラフィー液相の組成はブタノール:酢酸:水=4:1:1に続けてニンヒドリンアセトン中の1溶液による染色を行い、更に05CdCl2を含有する50エタノール中で化合物の溶出を行うことにより決定することができる。実施例9.EcoliAJ12739PltacbssR株によるLフェニルアラニンの生産Lフェニルアラニン生産におけるbssR遺伝子の発現増強の効果を試験するために、上記EcoliMG1655PltacbssRの染色体由来のDNA断片を、Ecoliのフェニルアラニン生産株AJ12739にP1トランスダクションMillerJHExperimentsinMolecularGeneticsColdSpringHarborLabPress1972PlainviewNYによって導入し、AJ12739PltacbssR株を得ることができる。AJ12739株は、2001年11月6日に受託番号VKPMB8197の下で、RussianNationalCollectionofIndustrialMicroorganismsに寄託された後、2002年8月23日にブダペスト条約に基づく寄託に移管された。両株、AJ12739及びAJ12739PltacbssRは、ニュートリエントブロス中で37°Cで18時間培養することができ、03mlの得られた培養物を、それぞれ20×200mmの試験管中の3mlの発酵培地に植菌し、ロータリーシェーカー350rpm上で振盪しながら37°Cで48時間培養することができる。培養の後、培地中に蓄積するフェニルアラニンの量をTLCにより決定することができる。蛍光インジケータを含まないSorbfilシリカゲルの011mmの層でコーティングした10×15cmのTLCプレートStockCompanySorbpolymerKrasnodarRussiaを使用することができる。Sorbfilプレートは、プロパン2オール:酢酸エチル:25アンモニア水:水=40:40:7:16からなる移動相を用いて展開することができる。ニンヒドリン2のアセトン溶液を、発色試薬として使用できる。発酵培地の組成glは以下の通りである。グルコース4002SO4160K2HPO401MgSO47H2O10FeSO47H2O001MnSO45H2O001チアミンHCl00002酵母エキス20チロシン0125CaCO3200グルコース及び硫酸マグネシウムは別々に滅菌する。CaCO3は、180°Cで2時間乾熱滅菌する。pHは70に調整する。実施例10.EcoliSV164PltacbssR株によるLトリプトファンの生産Lトリプトファン生産におけるbssR遺伝子の発現増強の効果を試験するために、上記EcoliMG1655PltacbssR株の染色体由来のDNA断片を、Ecoliのトリプトファン生産株SV164にP1トランスダクションMillerJHExperimentsinMolecularGeneticsColdSpringHarborLabPress1972PlainviewNYによって導入し、SV164PltacbssR株を得ることができる。SV164株は、トリプトファンによるフィードバック阻害が解除されたアントラニレート合成酵素をコードするtrpEアレルを、trpE欠損株であるEcoliKB862WO9408031、特開平7507693号に導入することにより取得した。プラスミドpGH5は、セリンによるフィードバック阻害が解除されたホスホグリセレートデヒドロゲナーゼをコードする変異型serA遺伝子を保有する。SV164株は、米国特許第6180373号又は欧州特許第0662143号に詳細に記載された。KB862株はAJ13828と命名され、2000年12月21日、工業技術院生命工学工業技術研究所現、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター、日本国茨城県つくば市東1丁目1番地1中央第6郵便番号3058566に、FERMBP7405の受託番号でブダペスト条約に基づく国際寄託として寄託された。両株、SV164及びSV164PltacbssRは、テトラサイクリン10mgml、pGH5プラスミドのマーカーを補填した3mlのニュートリエントブロス中で振盪しながら32°Cで18時間培養することができる。得られた培養物それぞれ03mlは、20×200mmの試験管中のテトラサイクリン10mgmlを含有する3mlの発酵培地中に植菌し、ロータリーシェーカーを用いて250rpmで32°Cで72時間培養することができる。培養の後、培地中に蓄積するトリプトファンの量は、実施例9に記載したようにしてTLCにより決定することができる。発酵培地の成分を表2に列記するが、滅菌中の好ましくない相互作用を回避するために、示したように別々のグループA、B、C、D、E、F、G及びHで滅菌すべきである。実施例11.Ecoli702ilvAPltacbssR株によるLプロリンの生産Lプロリン生産におけるbssR遺伝子の発現増強の効果を試験するために、上記EcoliMG1655PltacbssR株の染色体由来のDNA断片を、Ecoliのプロリン生産株702ilvAにP1トランスダクションMillerJHExperimentsinMolecularGeneticsColdSpringHarborLabPress1972PlainviewNYによって導入し、702ilvAPltacbssR株を得ることができる。702ilvA株は、2000年7月18日に受託番号VKPMB8012の下で、RussianNationalCollectionofIndustrialMicroorganismsに寄託された後、2001年5月18日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管された。両Ecoli株、702ilvA及び702ilvAPltacbssRは、L寒天プレート上で37°Cで18~24時間生育させることができる。その後、これらの株は、実施例8と同様の条件下で培養することができる。実施例12.Ecoli382ΔargGPltacbssR株によるLシトルリンの生産Lシトルリン生産におけるbssR遺伝子の発現増強の効果を試験するために、上記EcoliMG1655PltacbssR株の染色体由来のDNA断片を、EcoliのLシトルリン生産株382ΔargGにP1トランスダクションMillerJHExperimentsinMolecularGeneticsColdSpringHarborLabPress1972PlainviewNYによって導入し、382ΔargGPltacbssR株を得ることができる。382ΔargG株は、DatsenkoKAとWannerBLによって最初に開発されたRedドライブンインテグレーションと呼ばれる方法ProcNatlAcadSciUSA20009766406645により、382株VKPMB7926の染色体上のagrG遺伝子を欠損させることにより取得することができる。この手順に従い、argG遺伝子に隣接する領域及びテンプレートプラスミド中の抗生物質耐性を付与する遺伝子の両方に相同なPCRプライマーを構築することができる。プラスミドpMW118attLCmattRWO05010175を、PCR反応のテンプレートとして使用することができる。両Ecoli株、382ΔargG及び382ΔargGPltacbssRは、それぞれ3mlのニュートリエントブロス中で37°Cで18時間振盪しながら培養することができる。03mlの得られた培養物は、20×200mmの試験管中の2mlの発酵培地に植菌し、ロータリーシェーカー上で32°Cで48時間培養した。培養後、培地中に蓄積するシトルリンの量を、以下の移動相:ブタノール:酢酸:水=4:1:1vvを用いたペーパークロマトグラフィーにより測定できる。ニンヒドリン2のアセトン溶液を、発色試薬として使用できる。シトルリンを含むスポットを切り出し、CdCl2の05水溶液を用いてシトルリンを溶出させ、シトルリンの量を540nmで分光学的に見積もることができる。発酵培地の組成glは以下の通りとすることができる。グルコース4802SO4350KH2PO420MgSO47H2O10チアミンHCl00002酵母エキス10Lイソロイシン01Lアルギニン01CaCO350グルコース及び硫酸マグネシウムは別々に滅菌する。CaCO3は、180°Cで2時間乾熱滅菌する。pHは70に調整する。実施例13.Ecoli382ΔargFΔargIPltacbssR株によるLオルニチンの生産Lオルニチン生産におけるbssR遺伝子の発現増強の効果を試験するために、上記EcoliMG1655PltacbssR株の染色体由来のDNA断片を、EcoliのLオルニチン生産株382ΔargFΔargIにP1トランスダクションMillerJHExperimentsinMolecularGeneticsColdSpringHarborLabPress1972PlainviewNYによって導入し、382ΔargFΔargIPltacbssR株を得ることができる。382ΔargFΔargI株は、DatsenkoKAとWannerBLによって最初に開発されたRedドライブンインテグレーションと呼ばれる方法ProcNatlAcadSciUSA20009766406645により、382株VKPMB7926の染色体上のargF及びargI遺伝子を順次欠損させることにより取得することができる。この手順に従い、argF又はargI遺伝子に隣接する領域及びテンプレートプラスミド中の抗生物質耐性を付与する遺伝子の両方に相同な2対のPCRプライマーを構築することができる。プラスミドpMW118attLCmattRWO05010175を、PCR反応におけるテンプレートとして使用することができる。両Ecoli株、382ΔargFΔargI及び382ΔargFΔargIPltacbssRは、それぞれ3mlのニュートリエントブロス中で37°Cで18時間振盪しながら培養することができる。03mlの得られた培養物は、20×200mmの試験管中の2mlの発酵培地に植菌し、ロータリーシェーカー上で32°Cで48時間培養した。培養後、培地中に蓄積するオルニチンの量を、以下の移動相:ブタノール:酢酸:水=4:1:1vvを用いたペーパークロマトグラフィーにより測定できる。ニンヒドリン2のアセトン溶液を、発色試薬として使用できる。オルニチンを含むスポットを切り出し、CdCl2の05水溶液を用いてオルニチンを溶出させ、オルニチンの量を540nmで分光学的に見積もることができる。発酵培地の組成glは以下の通りとすることができる。グルコース4802SO4350KH2PO420MgSO47H2O10チアミンHCl00002酵母エキス10Lイソロイシン01Lアルギニン01CaCO350グルコース及び硫酸マグネシウムは別々に滅菌する。CaCO3は、180°Cで2時間乾熱滅菌する。pHは70に調整する。実施例14.EcoliH81PltacbssR株によるLバリンの生産Lバリン生産におけるbssR遺伝子の発現増強の効果を試験するために、上記EcoliMG1655PltacbssR株の染色体由来のDNA断片を、Ecoliバリン生産株H81にP1トランスダクションMillerJHExperimentsinMolecularGeneticsColdSpringHarborLabPress1972PlainviewNYによって導入し、H81PltacbssR株を得ることができる。H81株は、2001年1月30日に受託番号VKPMB8066の下で、RussianNationalCollectionofIndustrialMicroorganismsに寄託された後、2002年2月1日にブダペスト条約に基づく国際寄託に移管された。H81株及びH81PltacbssR株は、ニュートリエントブロス中で37°Cで18時間培養することができ、01mlの得られた培養物を、それぞれ20×200mmの試験管中の2mlの発酵培地に植菌し、ロータリーシェーカーを用いて32°Cで72時間培養することができる。48時間及び72時間の培養の後、Lバリンの蓄積量をTLCにより測定することができる。蛍光インジケータを含まないSorbfilシリカゲルの011mmの層でコーティングした10×15cmのTLCプレートStockCompanySorbpolymerKrasnodarRussiaを使用することができる。Sorbfilプレートは、プロパン2オール:酢酸エチル:25アンモニア水:水=40:40:7:16からなる移動相を用いて展開することができる。ニンヒドリン2のアセトン溶液を、発色試薬として使用できる。発酵培地の組成gl:グルコース6002SO4180KH2PO418MgSO47H2O12CaCO3200チアミンHCl0001CaCO3は、180°Cで2時間乾熱滅菌する。pHは70に調整する。本発明をその好適な態様を参照して詳細に説明したが、本発明の範囲を逸脱することなく、種々の変更を行うことができ、また、等価物を用いることができることは、当業者に明らかであろう。ここに引用した参考文献は全て、参照によりこの出願の一部として組み込まれる。