"[式中、R1は、R4で置換され、1または2個の置換基R5および/またはR6で適宜置換されていてもよい5または6員の単環式ヘテロアリールであり、ここで、該ヘテロアリールは-NH-に近接する窒素原子を有し;R4は、-CH2n-Z-CH2m-POOR7OR8、または-CH2nZ-CH2m-POOR7R9、または-CH2n-Z-CH2m-O-POOR7R9、または-CH2nZ-CH2m-O-PO-R9R10、または-CH2nZ-CH2m-POR9R10であり、ここで、R4は環窒素または炭素を介してR1と結合し;R7およびR8は、同一または異なって、C1-C3アルキルから独立して選択され;R9およびR10は、同一または異なって、C1-C3アルキル、フェニル、フェニル-C1-C3-アルキル、5から6員のヘテロアリールおよび5から6員のヘテロアリール-C1-C3-アルキルから独立して選択され、そのいずれも適宜置換されていてもよく;さらに、R7およびR8は、環ここでq=1から3であるに環化していてもよく;同様に、R7およびR9は、環ここでq=1から3である、またはここで、q=1から3であるに環化していてもよく;同様に、R9およびR10は、環ここで、q=1から3である、またはここで、q=1から3であるに環化していてもよく;Zは、結合、C1-C3アルキレンおよびC2-C4アルキニレンから選択され、そのいずれもヒドロキシ、C1-C3アルコキシ、アミノ-C1-C3-アルキル、アミノフェニル-C1-C3-アルキル、5から6員のヘテロアリール-C1-C3-アルキル、アミノ5から6員のヘテロアリール-C1-C3-アルキル、5から6員のヘテロアリール-C1-C3-アルキル、アミノフェニル、アミノ5から6員のヘテロアリール、またはカルボキシで適宜置換されていてもよく;mは0、1または2であり;nは0、1または2であり;mが1または2であるか、nが1または2の場合、ZはO、S、SO2でもよく;R5およびR6は、同一または異なって、水素、C1-C3アルキル、ハロゲンまたはカルボキシルから独立して選択されるか、あるいは不存在であり;XはNまたはCHであり;YはOまたはSであり;R3は、H、ハロゲン、C1-C3アルキル、OH、OCH3、SH、またはSCH3であり;R2は、C1-C6アルキル、分枝鎖のC3-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、C3-C6シクロアルキルアルキル、フェニル、フェニル-C1-C3-アルキル、5から6員のヘテロアリール、4から7員のヘテロシクリル、または5から6員のヘテロアリール-C1-C3-アルキルであり;ここで、各R2は、0から3個のR11基で独立して置換され;各R11は、ハロゲン、-CH3-aFa、CN、NO2、NH2、C1-C3アルキル、O-C1-C3-アルキル、-COOH、OH、フェニルオキシ、5から6員のヘテロアリールオキシ、4から7員のヘテロシクリルオキシ、-S-R12、-SO-R12、-SO2R13、-SO2NR14R15、-NR14R15、-CO2R13、-COnR14R15、-NR7COR15、-NR7SO2R12、-NR7CO2R12、-OCONR14R15、-NR7COnR14R15、フェニル、5から6員のヘテロアリール、または4から7員のヘテロシクリルから独立して選択され;ここで、R11における各フェニル、ヘテロアリール、またはヘテロシクリル環は、ハロゲン、-CH3-aFa、CN、NO2、NH2、-COOH、OH、C1-C3アルキル、-O-C1-C3-アルキル、-COO-C1-C3-アルキル、-NR14R15、-COnR14R15、-NR7COR15、-NR7SO2R12、-NR7COOR12、-NR7CONR14R15、または-SO2NR14R15で適宜置換されていてもよく;各aは、独立して1、2または3から選択される整数であり;各R12は、C1-C3アルキル、フェニル、5から6員のヘテロアリール、フェニル-C1-C3-アルキルおよび/または5から6員のヘテロアリール-C1-C3-アルキルから独立して選択され;各R13は、H、C1-C3アルキル、フェニル、5から6員のヘテロアリール、フェニル-C1-C3-アルキル、および/または5から6員のヘテロアリール-C1-C3-アルキルから独立して選択され;R14およびR15は、同一または異なって、H、C1-C3アルキル、C3-C6シクロアルキル、フェニル、フェニル-C1-C3-アルキル、5から6員のヘテロアリール、および/または5から6員のヘテロアリール-C1-C3-アルキルから独立して選択されるか;R14およびR15は一緒になって環化して3から7員のヘテロシクリルを形成する]の構造を有する化合物、またはその全ての立体異性体、プロドラッグエステル、もしくは医薬的に許容される塩。XがCHである、請求項1で定義される化合物。部分が、である、請求項1で定義される化合物。R4が、-CH2n-Z-CH2m-POOR7OR8または-CH2n-Z-CH2m-POOR7R9ここで、Zは結合であり、nは1または2であるである、請求項1で定義される化合物。R4が、である、請求項1で定義される化合物。R5およびR6がそれぞれHであり、Zが結合またはCHである、請求項1で定義される化合物。R3がHであり;R4がであり;YがOであり;R2が、0から2個のR11で置換されたC1-C3アルキル、または4から7員のヘテロシクロであり;各R11が、ハロゲンおよび/または-O-C1-C3-アルキルから独立して選択される、請求項1で定義される化合物。R2がi-プロピル、である、請求項7で定義される化合物。R4が-CH2n-Z-CH2m-PO-OR7OR8ここで、Zは結合であり、nは1または2であるである、請求項1の化合物。構造を有する、請求項1で定義される化合物、またはその医薬的に許容される塩。請求項1から10のいずれか一項で定義される化合物;ならびに医薬的に許容される担体を含む医薬組成物。糖尿病、高血糖症、耐糖能障害、インスリン抵抗性、高インスリン血症、網膜症、神経障害、腎障害、創傷治癒の遅延、アテローム動脈硬化症およびその続発症、心機能異常、心筋虚血、脳卒中、メタボリックシンドローム、高血圧症、肥満症、脂質異常症、高脂血症、高トリグリセライド血症、高コレステロール血症、低HDL、高LDL、非心臓性虚血、感染症、癌、血管疾患、膵炎、神経変性疾患、脂質障害、認知障害および認知症、骨疾患、HIVプロテアーゼ関連リポジストロフィー、または緑内障の治療剤の製造における、請求項1-10のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩の使用。糖尿病、高血糖症、耐糖能障害、インスリン抵抗性、高インスリン血症、網膜症、神経障害、腎障害、創傷治癒の遅延、アテローム動脈硬化症およびその続発症、心機能異常、心筋虚血、脳卒中、メタボリックシンドローム、高血圧症、肥満症、脂質異常症、高脂血症、高トリグリセライド血症、高コレステロール血症、低HDL、高LDL、非心臓性虚血、感染症、癌、血管疾患、膵炎、神経変性疾患、脂質障害、認知障害および認知症、骨疾患、HIVプロテアーゼ関連リポジストロフィー、または緑内障の治療における、請求項1-10のいずれか一項に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩の使用。実施例以下の実施例は、いくつかの本発明の好ましい実施態様をよりよく説明するために提供され、本発明を限定するものではない。一般的事項用語HPLCは、下記の方法の1つを用いた島津高速液体クロマトグラフィーを意味する:方法A:YMCまたはPHENOMENEX登録商標C185ミクロン4.6X50mmカラム、0-100溶媒B[90MeOH:10H2O:0.2H3PO4]および100-0溶媒A[10MeOH:90H2O:0.2H3PO4]の4分間のグラジエントを使用、流速4mL/分、1分間ホールド、紫外UV検出器の設定:220nm.方法B:PHENOMENEX登録商標S5ODS4.6x30mmカラム、0-100B/A、2分間のグラジエント溶出溶媒A=10MeOH/H2O、0.1TFA含有、溶媒B=90MeOH/H2O、0.1TFA含有、流速5mL/分、UV検出:220nm.方法C:YMCS7ODS3.0x50mmカラム、0-100B/A、2分間のグラジエント溶出溶媒A=10MeOH/H2O、0.1TFA含有、溶媒B=90MeOH/H2O、0.1TFA含有、流速5mL/分、UV検出:220nm.用語プレパラティブHPLCは、溶媒A10MeOH/90H2O/0.2TFAおよび溶媒B90MeOH/10H2O/0.2TFAの混合物を用いる自動化島津HPLCシステムを意味する。プレパラティブカラムはYMCもしくはPHENOMENEX登録商標ODSC185ミクロン樹脂、または同等物をパックした。中間体の合成中間体1A.BioorganicMedicinalChemistryLetters14:111-114B.撹拌したパートAの化合物172mg、0.77mmolのメタノール3mL溶液にアンモニウム/メタノール7N、6mL、42mmolを加えた。1時間後、該反応物を濃縮し、水20mLを加えた。得られた混合物を濾過して中間体1110mg、80を白色の固形物として回収した。中間体2A.二炭酸ジ-tert-ブチル11.3g;51.83mmolのTHF50mL溶液にエチル2-アミノチアゾール-4-カルボキシレート8.59g;49.36mmolのTHF150mL冷溶液0°Cを加えた。TEA7.57mL;54.30mmol、次いで、触媒量の4-DMAP30mgを加えた。該反応混合物を室温で16時間撹拌し、減圧濃縮した。残渣をEtOAc300mLおよび0.5NHCl水溶液250mLで分液処理した。有機相をブライン150mLで洗浄し、乾燥しMgSO4、減圧濃縮し、パートAの化合物12.38g;下のパートBで示される収量を得た。粗生成物をさらに精製することなく次工程に用いた。B.LiAlH4の溶液1.0M/THF48.0mL;48.0mmolをパートAの化合物12.38g;45.3mmolのTHF130mL冷溶液0°Cに加えた。0°Cで3時間後、H2O5mLを滴加して該反応物を注意深くクエンチした。10分後、5NNaOH水溶液2.5mLを加えた。さらに10分後、該溶液を減圧濃縮した。残渣をEtOAc300mLおよびH2O200mLで分液処理した。水相をEtOAc100mLで抽出した。有機相を合わせて乾燥しMgSO4、減圧濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーSiO2;0から100溶媒B、16分間の連続グラジエント、100溶媒Bで5分間ホールド、溶媒A=ヘキサン、溶媒B=EtOAcで精製し、パートBの化合物8.67g;67-2工程を得た。C.方法1:メタンスルホニルクロリド318μL;4.10mmolのDCM3mL溶液にゆっくりとパートBの化合物900mg;3.91mmolおよびTEA600μL;4.30mmolのDCM10mL溶液0°Cを加えた。25分間撹拌後、該反応混合物をアセトン13mLで希釈した。LiBr2.03g;23.46mmolを加えた。該反応物を室温で1時間撹拌し、飽和NH4Cl水溶液20mLで洗浄し、Et2O2x40mLで抽出した。有機抽出物を合わせて飽和NH4Cl2x20mLおよびブライン20mLで洗浄した。溶液を乾燥しMgSO4、減圧濃縮し、パートCの化合物1.03g;89を得た。粗生成物をさらに精製することなく次工程に用いた。方法2:N-Bocチオ尿素428mg;2.427mmolを1,3-ジブロモアセトン524mg;2.427mmolのアセトン9.7mL溶液に加えた。室温で24時間後、該反応混合物を減圧濃縮し、パートCの化合物0.78g;定量的収率を茶色の泡状物質として得た。粗生成物をさらに精製することなく次工程に用いた。D.トリエチルホスファイト3.6mL;20.96mmolをパートCの化合物878mg;2.99mmolのTHF6mL溶液に加えた。反応容器をキャップし、80°Cで16時間加熱し、室温に冷却した。該溶液を減圧濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーSiO2;0から100溶媒B、8分間の連続グラジエント、100溶媒Bで10分間ホールド、溶媒A=ヘキサン、溶媒B=EtOAcで精製し、パートDの化合物0.86g;82を得た。E.TFA3.0mLをパートDの化合物0.86g;2.45mmolのDCM7mL溶液0°Cに加えた。該反応混合物を室温で2.5時間撹拌し、次いで、減圧濃縮した。残渣をEtOAc15mLおよび飽和NaHCO3水溶液10mLで分液処理した。水相をEtOAc10mLで抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥しMgSO4、減圧濃縮し、中間体2488mg;80を得た。1HNMR中間体3A.ジエチルメチルホスホナイト690mg;5.07mmolを中間体2、パートCの化合物496mg;1.69mmolのTHF0.5mL溶液に加えた。該反応混合物を75°Cで16時間加熱し、次いで、室温に冷却した。該溶液を直接12gSiO2カラムにロードし、粗生成物をクロマトグラフィー0から100EtOAc/ヘキサン、4分間の連続グラジエント、5MeOH/EtOAcにスイッチし、10分間ホールドで精製し、パートAの化合物493mg;91を薄黄色の固形物として得た。B.TFA2.0mLをパートAの化合物768mg;2.40mmolのDCM6mL溶液0°Cに加えた。該反応混合物を室温で3時間撹拌し、次いで、減圧濃縮した。残渣をEtOAc15mLおよび飽和NaHCO3水溶液10mLで分液処理した。水相をEtOAc2x10mLで抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥しMgSO4、減圧濃縮し、中間体3203mg;38を得た。中間体4A.二炭酸ジ-tert-ブチル1.66g;7.59mmolのTHF10mL溶液に0°Cのメチル2-アミノチアゾール-5-カルボキシレート1.20g;7.59mmolのTHF20mL溶液を加えた。TEA1.11mL;7.97mmol、次いで、触媒量の4-DMAP10mgを加えた。次いで、該反応混合物を室温で20時間撹拌し、減圧濃縮した。残渣をEtOAc80mLおよび0.2NHCl水溶液40mLで分液処理した。有機相をブライン40mLで洗浄し、乾燥しMgSO4、減圧濃縮し、パートAの化合物1.70g;下のパートBで示される収量を得た。粗生成物をさらに精製することなく次工程に用いた。B.LiAlH47.60mLの1.0M溶液/THF;7.60mmolにパートAの化合物1.70g;6.58mmolのTHF30mL溶液0°Cを加えた。該反応混合物を室温で1時間撹拌し、次いで、0°Cに冷却し、H2O0.76mLを滴加して注意深くクエンチした。10分後、5NNaOH水溶液0.38mLを加えた。さらに10分後、該溶液をCELITE登録商標のパッドに通して濾過し、濾液を減圧濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーSiO2;0から100溶媒B、13分間の連続グラジエント、100溶媒Bで6分間ホールド、溶媒A=ヘキサン、溶媒B=EtOAcで精製し、パートBの化合物0.80g;462工程を得た。C.パート1:塩化チオニル253μL;3.47mmolをパートBの化合物200mg;0.869mmolのDCM0.40mL混合物0°Cに加えた。該反応混合物を0°Cで2時間撹拌し、減圧濃縮し、クルードな塩化物を得た。パート2:クルードな塩化物をTHF3.0mLに溶解した。EtO3P1.20mL;6.95mmolを加えた。該反応混合物を80°Cで16時間加熱し、室温に冷却し、減圧濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィーSiO2;0から100溶媒B、8分間の連続グラジエント、溶媒Cにスイッチ、100溶媒Cで7分間ホールド、溶媒A=ヘキサン、溶媒B=EtOAc、溶媒C=3MeOH/EtOAcで精製し、パートCの化合物270mg;89-2工程を得た。D.TFA0.80mLをパートCの化合物0.31g;0.885mmolのDCM2.4mL溶液0°Cに加えた。該反応混合物を室温で3時間撹拌し、次いで、減圧濃縮した。残渣をCHCl310mLおよび飽和NaHCO3水溶液10mLで分液処理した。水相をCHCl310mLで抽出した。有機抽出物を合わせて乾燥しMgSO4、減圧濃縮し、中間体4198mg;89を得た。中間体51H-ピラゾール-3-アミン1.00g、12.03mmolのDMF25mL溶液0°Cにカリウムtert-ブトキシド2.70g、24.07mmolを加え、該反応混合物を0°Cで1時間撹拌した。ICH2PO3Et23.35g、12.03mmolを加え、該反応混合物を0°Cで1.5時間撹拌し、次いで室温に昇温し、室温で終夜撹拌した。揮発性物質を減圧除去し、残渣をブライン30mLおよびEtOAc30mLで分液処理した。生成物をEtOAc5x30mLで抽出し;有機抽出物を合わせて乾燥しMgSO4、減圧濃縮した。残渣をプレパラティブHPLCPHENOMENEX登録商標LunaAxia5μmC1830x100mmカラム;検出:220nm;流速=40mL/分;100Aから20B、25分間の連続グラジエント、2分間、20Bでホールド、A=90:10H2O:MeCN、B=90:10MeCN:H2Oで精製し、中間体50.470g、収率16.8を淡黄色の油状物として得た。MH=2339;1HNMR:δ729中間体6A.3-ニトロ-1H-ピラゾール1.00g、8.84mmolの水31mL懸濁液にアルデヒド37重量/水、1.317mL、17.69mmolを加えた。該反応混合物を室温で48時間該反応混合物が淡黄色の均一な溶液となってから2時間後撹拌した。該反応混合物を飽和NaHCO3水溶液20mLで希釈し、CH2Cl24x40mLおよびEtOAc3x50mLで抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥しMgSO4、減圧濃縮し、パートAの化合物1.26g、収率99を白色の固形物として得た。1HNMR695B.パートAの化合物1.809g、12.64mmolのMeCN54mL溶液75°CにPBr31.788mL、18.96mmolを10分間かけて滴下して加えた。該反応混合物を75°Cで15分間撹拌し、室温に冷却し、濾過した。濾過ケークをCH3CN2x2mLで洗浄し、濾液を合わせて減圧濃縮した。残渣をEtOAc50mLおよび飽和NaHCO330mLで分液処理した。有機相をブライン20mLで洗浄し、乾燥しMgSO4、減圧濃縮した。残渣をクロマトグラフィーSiO2:0EtOAc/ヘキサンから70EtOAc/ヘキサンの連続グラジエントで精製し、パートBの化合物1.693g、収率65を淡黄色の油状物として得た。1HNMRC.パートBの化合物1.7366g、8.43mmolのTHF4mL溶液にCH3POEt21.377g、10.12mmolを加えた。該反応混合物を75°Cで15時間撹拌した。さらなるCH3POEt20.53g、3.89mmolを加え、該反応混合物を75°Cで24時間撹拌し、次いで、室温に冷却した。揮発性物質を減圧除去し、クロマトグラフィーSiO2:0MeOH/CH2Cl2から15MeOH/CH2Cl2の連続グラジエントで精製し、パートCの化合物1.56g、収率80をオレンジ色の油状物として得た。MH=2341;1HNMRD.撹拌したパートCの化合物33mg、0.142mmolのMeOH4ml溶液にパラジウム炭素15.06mg、0.014mmolを加えた。該反応物を水素ガスH20.285mg、0.142mmol下に3時間置いた。HPLCにより反応が完了していることが示された。該反応物をCELITE登録商標のパッドに通して濾過し、濃縮し、中間体625.6mg、収率89を白色の固形物として得た。以下の実施例は、好ましい本発明の化合物を説明するものである。実施例1A.撹拌した中間体170mg、0.39mmol、1,3-ジフルオロ2-プロパノール112mg、1.16mmolおよびトリフェニルホスフィン304mg、1.16mmolのTHF3mL溶液にDEAD202mg、1.16mmolを滴下して加えた。該反応物を2時間室温に維持し、濃縮した。残渣をCH2Cl2で希釈し、飽和NaHCO3溶液で洗浄した。有機相をブライン10mLで洗浄し、乾燥しMgSO4、減圧濃縮した。得られた混合物をシリカゲルカラム10-100EtOAc/ヘキサンで精製し、パートAの化合物80mg、収率80を白色の固形物として得た。B.方法1.パートAの化合物0.02g、0.077mmol、中間体20.023g、0.093mmol、炭酸セシウム0.126g、0.387mmol、酢酸パラジウムII0.347mg、1.546μmolおよびBINAP1.926mg、3.09μmolをマイクロ波容器に加え、固形物にArを20分間パージした。トルエン1mLを加え、該反応容器を脱気し、Arで再平衡化を3回行った。次いで、該反応混合物を80°Cで2時間撹拌した。該反応混合物をCELITE登録商標に通して濾過し、該CELITE登録商標ケークをEtOAc2x5mLで洗浄し、濾液を黄色/オレンジ色の固形物に減圧濃縮した。該固形物をプレパラティブHPLCSunfire5u19x100mmカラム;検出:220nm;流速=20mL/分;0Aから100B、15分間の連続グラジエント100Bで2分間のホールド、A=90:10:0.1H2O:MeOH:TFA、B=90:10:0.1MeOH:H2O:TFAで精製し、実施例119mg、52を黄色の固形物として得た。方法2.マグネティックスターラー、Arインレット、および還流冷却器を装着した25mL、1口ナシフラスコ内のパートAの化合物0.100g、0.387mmol、中間体20.145g、0.580mmolおよびフェノール3.33g、35.4mmolの混合物を温油浴内において140°Cで12時間加熱した。該反応混合物を1NNaOH40mLおよびEtOAc15mLで分液処理し、相を分離し、水相をEtOAc15mLで抽出し、有機相を合わせ、混合物を1NNaOH15mLで逆洗し、MgSO4で乾燥し、35°Cで黄色の油状物に減圧濃縮した。これをプレパラティブHPLCLuna5u30x100mmカラム;検出:220nm;流速=40mL/分;20Aから100B、25分間の連続グラジエント100Bで2分間のホールド、A=90:10H2O:MeOHおよびB=90:10MeOH:H2Oで精製し、実施例151mg、28を黄色の固形物として得た。MH=4734;1HNMR実施例2から7以下の実施例2から7は、実施例1に記載されるものと同じ方法により製造された。グルコキナーゼ活性化アッセイ本発明の式Iの化合物はグルコキナーゼを活性化する。本発明の式Iの化合物のグルコキナーゼ活性化の評価に用いることができるアッセイは、当該分野で周知のものであり、例えば、米国特許番号第6,320,050、6,384,200および6,610,846号、ならびにWO004/052869、CastellanoALetalGlucokinaseactivatingureasBioorgMedChemLetters15:15011504で開示されるものである。概して、特に以下の実施例で開示されるもののような本発明の化合物は、100μM、好ましくは10μM、より好ましくは1μMの濃度と同等またはそれより強い度合いにおいてグルコキナーゼ活性を増強することが示され、故に、本発明の化合物が特に効果的なグルコキナーゼ活性の増強剤であることが証明された。活性化能はEC50完全な活性化の50を達成する濃度および/またはバックグラウンドに対しての最大活性化パーセントとして算出および表記することができ、前記のアッセイ系を用いて測定した活性を意味する。アッセイおよび生物学的データ本明細書の実施例に記載される化合物を含む本発明の式Iの化合物を以下のアッセイを用いて試験し、グルコキナーゼのアクチベーターであることを示した。グルコキナーゼタンデム酵素アッセイヒトグルコキナーゼGKの酵素活性は、GK、ATPおよびグルコースを個別の時間インキュベートし、次いで、EDTAエチレンジアミンテトラ-酢酸でクエンチすることにより測定した。次いで、G6Pデヒドロゲナーゼを用いてThioNADチオ-ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドのThioNADHチオ-ジヒドロニコチンアミドアデニンジヌクレオチドへの変換を405nmの波長で測定する検出アッセイを行い、生成物グルコース-6-リン酸G6Pの相対量を測定した。この非共役酵素反応をGKタンデムアッセイと呼ぶ。化合物によるGKの活性化はこのアッセイを用いて評価することができる。以下に記載されるGKタンデムアッセイプロトコルは、5および12mMのグルコース存在下において0から100μMのアクチベーター化合物濃度の範囲を用いたものに従う。ヒト全長グルコキナーゼGK、15nMを、384ウェルのクリアボトムの黒色マイクロタイタープレート内で5または12mMのグルコースと共にインキュベートした。GKの反応を開始させるため、マグネシウム-ATP最終濃度3mMをバッファー最終的なバッファー条件は、25mMHEPESバッファー、pH7.1、1mMジチオトレイトールおよび5DMSO含有中のGKに加えた。総反応容積は20μLであった。反応を10分間進行させ、次いで、5μLEDTA最終濃度45mMでクエンチした。検出反応の成分、ThioNADおよびG6PDHグルコース-6-リン酸デヒドロゲナーゼ最終濃度は、それぞれ、650μMおよび3.33ユニットを25μLの体積に合わせて加えた総容積は50μLとなった。吸光度測定は450nmにおいてSPECTRAMAX登録商標Plus384吸光度プレートレーダーMolecularDevicesで測定した。吸光度を測定し、バックグラウンドのグルコース-6-リン酸量を差し引き、その後、活性化をコントロールの活性のパーセントとして算出した。コントロールの活性は、ベヒクルDMSOの存在下でGKを用い、バックグラウンドのグルコース-6-リン酸を差し引いて決定した。バックグラウンドのグルコース-6-リン酸は、ATPで反応を開始する前にGKをEDTAでプレクエンチすることにより決定した。ヒトGKの発現および精製全長ヒト肝GKタグ無しは、Mookhtiaretalの記載に従い、BL21STARDE3pLysS株Invitrogenで25°Cにおいて発現した。タンパク質は、主にLangeの記載に従い、僅かな改変を加えて精製した。簡便に述べると、菌体のペレットを3回の凍結融解により溶菌し、15000gで遠心して分画し、40-65NH42SO4で沈殿させた。生じたペレットをバッファーで再懸濁し、透析し、直接Q-HAROSE登録商標カラムSigmaにアプライし、100-600mMKClの直線グラジエントで溶出した。GKを含むフラクションを集め、25mMHepes、pH7.2/1mMMgCl2/1mMEDTA/0.1MKCl/1mMDTTで終夜透析し、次いで、10グリセロールを加えた同じバッファーで再度透析した。引用文献1.MookhtiarKAetalHeterologousexpressionandcharacterizationofratliverglucokinaseregulatoryproteinDiabetes45:1670-1677.2.LangeAJetalExpressionandsite-directedmutagenesisofhepaticglucokinaseBiochemJ277:159-163.いくつかの実施例の生物学的データを以下の表に示す。他の実施例に関してはEC50値が活性化曲線から算出できなかったため、いくつかの実施例の最大活性化データ基底状態における活性化ので表示を下の表に示す。インビボの研究:経口グルコース負荷試験OGTT実験に先立って26週間高脂肪飼料60kcalが脂質由来を摂取させたオスDIO食餌誘発性肥満C57BL/6Jマウスで経口グルコース負荷試験を行った。実験に用いる前にマウスを終夜絶食させた。試験化合物またはベヒクル140PEG40010Cremophore50水、または210ジメチルアセトアミド10エタノール10Cremophore70水のどちらかをグルコース溶液2g/kg体重の経口投与経口グルコース負荷試験の60分前に経口投与した。血糖値は、グルコース投与前および後の異なる時点において尾部採血サンプルから測定した2時間のタイムコース。血糖値の時間曲線を作成し、0-120分間のベースラインからの変化の曲線下面積ΔAUCを算出したグルコースを投与した時間が0分である。下の表に示す実施例は前記のDIOマウスのOGTT試験においてグルコースAUCを減少させた。"