"大腸菌で発現させた、配列番号1に示されるアミノ酸配列からなる組換えポリペプチドを抗原として用いることにより得られる、MLQタンパク質を特異的に認識するポリクローナル抗体。ヒトMLQ遺伝子を大腸菌で発現させて得られる配列番号1に示されるアミノ酸配列からなるポリペプチドを抗原としてウサギに注射して免疫し、その後免疫したウサギの血清を得ることを特徴とする、MLQタンパク質を特異的に認識するポリクローナル抗体の製造方法。本発明の課題は、高等真核生物におけるミトコンドリアの内膜に局在するタンパク質であるMLQタンパク質を特異的に認識する、高感度のポリクローナル抗体や、その製造方法を提供することにある。本発明者らは、配列番号1に示されるアミノ酸からなるペプチドを、大腸菌タンパク質発現システムを利用して作製して抗原とし、かかる抗原を用いてポリクローナル抗体を作製することにより、MLQタンパク質を特異的に認識する、高感度のポリクローナル抗体を提供できることを見いだし、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は大腸菌で発現させた、配列番号1に示されるアミノ酸配列からなる組換えポリペプチドを抗原として用いることにより得られる、MLQタンパク質を特異的に認識するポリクローナル抗体に関する。また、本発明はヒトMLQ遺伝子を大腸菌で発現させて得られる配列番号1に示されるアミノ酸配列からなるポリペプチドを抗原としてウサギに注射して免疫し、その後免疫したウサギの血清を得ることを特徴とする、MLQタンパク質を特異的に認識するポリクローナル抗体の製造方法に関する。本発明によると、特異性が非常に高く、MLQ以外のタンパク質には反応しない、抗MLQポリクローナル抗体を提供することができる。また、本発明の手法によって特異性の高い抗MLQポリクローナル抗体を作製することができる。本発明者は、配列番号1に示されるヒトMLQタンパク質を抗原としてウサギに免疫することにより、特異性が高く感度が高い抗MLQポリクローナル抗体を作製することができることを見いだした。以下、本発明の実施の形態についてさらに具体的に説明する。本発明の大腸菌で発現させた、配列番号1に示されるアミノ酸配列からなる組換えポリペプチド以下本発明の抗原ポリペプチドということもあるは、その塩基配列情報により、遺伝子工学的手法を用いて大腸菌に導入して、常法にて調製することができる。このようにして得られる本発明のポリペプチドは、通常の方法に従って、例えばイオン交換樹脂、分配クロマトグラフィー、ゲルクロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、向流分配法等のペプチド化学の分野で汎用されている方法に従って、適宜その精製を行うことができる。本明細書において抗体とは、MLQタンパク質、その断片/部分ペプチドなど以下の抗体に関する説明では、これらを総称して、MLQタンパク質というに対して特異的に結合する抗体を包含する。ここで、特異的に結合するとは、上記抗体のMLQタンパク質に対する親和性が、他のアミノ酸配列からなるタンパク質に対する親和性と比較して実質的に高いことを意味しており、より具体的には、所定の測定装置によって、MLQタンパク質を他のアミノ酸配列から区別して検出することが可能な程度に高い親和性を上記抗体が有すること意味している。上記高い親和性とは、典型的には、結合定数Kaが少なくとも107M-1、好ましくは、少なくとも108M-1、より好ましくは、109M-1、さらにより好ましくは、1010M-1、1011M-1、1012M-1またはそれより高い、例えば、最高で1013M-1またはそれより高いものであるような結合親和性を意味する。なお、本発明の抗MLQポリクローナル抗体は、そのクラスとして、IgG、IgM、IgA、IgD、IgE等のいずれのアイソタイプを含むのであってもよい。本発明の抗MLQポリクローナル抗体の製造方法としては、本発明の抗原ポリペプチドを抗原として作製される抗体であれば特に制限されないが、以下の例を挙げることができる。まず、本発明の抗原ポリペプチドを免疫用の動物に免疫する。免疫用の動物としては、ウサギ、マウス、ラット、ニワトリ、ブタ、ヤギ、ヒツジなどを挙げることができるが、中でもウサギが好ましい。抗原の動物1匹当たりの投与量は、動物の体の大きさに合わせて適宜調節することができるが、ウサギの場合でアジュバントを用いないときは0.1~100mgであり、アジュバントを用いるときは10~1000μgを好適に例示することができる。上記アジュバントとしては、特に制限されるものではないが、フロイント完全アジュバントFCA、フロイント不完全アジュバントFIA、水酸化アルミニウムアジュバント等を例として挙げることができる。免疫は、主として静脈内、皮下又は腹腔内等に注入することにより行うことができ、免疫の間隔や回数は特に限定されず、数日から数週間間隔、好ましくは5日~5週間間隔、さらに好ましくは1~3週間間隔で、1~10回、好ましくは2~6回免疫を行う。そして、最終の免疫日から6~60日後に、抗血清を得る。血清中の抗体価は、価酵素免疫測定ELISA法、放射性免疫測定RIA法等で測定し、抗血清を得る時期を適宜調製することができる。得られた抗体の精製が必要とされる場合は、硫安塩析法、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル濾過、アフィニティークロマトグラフィーなどの公知の方法を適宜選択して、単独又はこれらの方法を組み合わせて抗体を精製することができる。本発明の抗体は必要に応じて標識物質により標識することができ、上記標識物質としては、例えば、フルオレセインイソシアネートFITCローダミン、フィコエリトリン、フルオレスカミン等の蛍光物質や、125I、32P、14C、35S、3H等の放射性物質や、アルカリホスファターゼ、ペルオキシダーゼ、β-ガラクトシダーゼ等の酵素を挙げることができる。また、本発明の抗体と、マーカータンパク質/マーカーペプチドとを融合させた融合タンパク質を作製することもでき、上記マーカータンパク質/マーカーペプチドとしては、例えば、緑色蛍光タンパク質GFP、シアン蛍光タンパク質CFP、ルシフェラーゼluciferase等の蛍光タンパク質や、HA、FLAG、Myc等のエピトープタグなどを挙げることができる。これらの標識化抗体を用いることにより、MLQタンパク質の生体内における局在や濃度を検討することができるほか、MLQタンパク質の機能解析を行うこともできる。上記標識化抗体を用いた免疫学的測定方法としては、例えば、ELISA法、RIA法、ウエスタンブロット法、免疫沈降法、プラーク法、スポット法、血球凝集反応法、オクタロニー法等の方法を挙げることができる。[抗原の準備抗血清の回収]ヒトMLQの配列はGenbankNP_004885より入手し、HeLa細胞からillustraRNAspinMiniRNAIsolationKitGEHealthcare社製を用いて抽出したmRNAを鋳型として、配列番号1に示されるアミノ酸配列のヒトMLQ遺伝子をPCR法により増幅、分離した。このDNA配列をpETベクターメルク社製に組み込み、pETシステムメルク社製により大腸菌でタンパク質を発現させ、SDS-PAGE法により目的の配列番号1に示される58アミノ酸からなるタンパク質を単離した。このタンパク質1mgを日本白色種ウサギ2匹に週1回、全6回注射して免疫した後、最終の免疫から1週間後にその全血を採取し、血清を全回収した。この抗血清には保存料として0.09のアジ化ナトリウムを加えた。[抗体価の検定]抗体価の検定はELISA法により行った。この方法は、96穴プレートに抗原ペプチドを固相化し、血清免疫前ウサギ血清と免疫後のウサギ抗血清の希釈系列100倍、500倍、2,500倍、12,500倍、62,500倍、血清なしを反応させ、洗浄後、PODPeroxidase標識抗ウサギ抗体MBL社製、CODE458と反応させた。これを洗浄後、TMBOneSolutionプロメガ社製にて呈色反応を行い、反応停止後、450nmにおける吸光度OD450nmを測定することで検定をおこなった。450nmにおける吸光度OD450nmの測定値を表1に、そのグラフを図1に示す。その結果、2羽のウサギ01又は02いずれから採取した免疫前の血清は、いずれの希釈倍率においても抗体価は見られなかったが、配列番号1に示されるアミノ酸配列からなるペプチドを抗原として免疫した2羽のウサギ01又は02から採取した抗血清を用いた場合全採血は、希釈倍率に依存した抗体力価が見られ、希釈倍率2,500においても高い抗体力価を保持していることが確認された。この結果から、本発明の方法を用いることによって、抗MLQポリクローナル抗体を作製することができることが示された。[ウェスタンブロッティングによる単離ミトコンドリアのMLQタンパク質の検出]作製した抗MLQポリクローナル抗体を用いて、ウェスタンブロッティングによってMLQタンパク質を検出した。HeLa細胞よりPallottiFLGMethodsCellBiol80344に記載の方法を用いて細胞質画分及びミトコンドリア画分を単難し、SDS-PAGEポリアクリルアミドゲル電気泳動法によりポリアクリルアミドゲル上でタンパク質を分子量で分離した。このタンパク質をポリアクリルアミドゲルからPVDF膜BioRad社製に転写させ、ブロッキング液2ECLAdvanceblockingagentinTNTGEHealthcare社製でブロッキングした後、一次抗体として抗MLQポリクローナル抗体を反応させた。一次抗体は上記の抗血清をブロッキング液でそれぞれ5,000倍、10,000倍、50,000倍に希釈して用いた。TNTで洗浄後、10万倍に希釈したHRPhorseradishperoxidase標識抗ウサギ抗体を二次抗体として用い、検出はECLAdvanceGEHealthcare社製により蛍光検出した図2。その結果、ミトコンドリア画分mitochondriaのレーンにのみ、一次抗体が反応したバンドが一本だけ検出され、その分子量はMLQタンパク質の分子量に相当した。MLQタンパク質はミトコンドリアに局在し、細胞質へは局在していないタンパク質であるため、この結果は作製した抗MLQポリクローナル抗体が確かにMLQタンパク質のみを特異的に検出していることを示している。また、全ての希釈倍率において、希釈倍率50,000倍の一次抗体を用いた場合にもはっきりとMLQタンパク質のバンドが検出されていることは、本発明の抗MLQポリクローナル抗体が高い感度をもつ抗体であることを示している。すなわち、本発明の方法によって作製された本発明の抗MLQポリクローナル抗体が、高い親和性と特異性を持つことが示された。"