"葉酸受容体アルファFRAに特異的に結合するモノクローナル抗体であって、該モノクローナル抗体は、C末端のリシンを伴うかまたは伴わない配列番号1または配列番号5の重鎖アミノ酸配列を含み、さらに、配列番号2のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、配列番号6のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、または配列番号7のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列から選択される軽鎖アミノ酸配列を含み、該モノクローナル抗体は、基準の培養条件下で調製した場合のモノクローナル抗体の抗体依存性細胞傷害作用ADCCと比較して、変化したADCCを有する、モノクローナル抗体。前記ADCCが増大させられている、請求項1に記載のモノクローナル抗体。前記ADCCが減少させられている、請求項1に記載のモノクローナル抗体。基準の培養条件下で調製したモノクローナル抗体の内在化速度と比較して、増大した内在化速度を有する、請求項2に記載のモノクローナル抗体。葉酸受容体アルファFRAに特異的に結合するモノクローナル抗体であって、該モノクローナル抗体は、C末端のリシンを伴うかまたは伴わない配列番号1または配列番号5の重鎖アミノ酸配列を含み、さらに、配列番号2のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、配列番号6のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、または配列番号7のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列から選択される軽鎖アミノ酸配列を含み、該モノクローナル抗体は、基準の培養条件下で調製した場合のモノクローナル抗体の内在化速度と比較して、変化した内在化速度を有する、モノクローナル抗体。前記内在化速度が増大させられている、請求項5に記載のモノクローナル抗体。前記内在化速度が減少させられている、請求項5に記載のモノクローナル抗体。葉酸受容体アルファFRAに特異的に結合するモノクローナル抗体であって、該モノクローナル抗体は、C末端のリシンを伴うかまたは伴わない配列番号1または配列番号5の重鎖アミノ酸配列を含み、さらに、配列番号2のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、配列番号6のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、または配列番号7のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列から選択される軽鎖アミノ酸配列を含み、該モノクローナル抗体は、基準の培養条件下で調製した場合のモノクローナル抗体の中性N結合グリカンのプロファイルと比較して、変化した中性N結合グリカンのプロファイルを有する、モノクローナル抗体。前記変化した中性N結合グリカンのプロファイルが、a増大もしくは減少したM3N2、b増大もしくは減少したM3N2F、c増大したNA2、d増大もしくは減少したNA2F、e増大もしくは減少したMAN5、f増大したNGA2、g増大もしくは減少したNGA2F、またはh増大もしくは減少したNA2G1Fのうちの1つまたは複数を含む、請求項8に記載のモノクローナル抗体。葉酸受容体アルファFRAに特異的に結合するモノクローナル抗体であって、該モノクローナル抗体は、C末端のリシンを伴うかまたは伴わない配列番号1または配列番号5の重鎖アミノ酸配列を含み、さらに、配列番号2のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、配列番号6のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、または配列番号7のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列から選択される軽鎖アミノ酸配列を含み、該モノクローナル抗体は、基準の培養条件下で調製した場合のモノクローナル抗体と比較して、増大したADCCを有し、かつ増大したNGA2および増大した全非フコシル化糖型を含む中性N結合グリカンのプロファイルを有する、モノクローナル抗体。増大した内在化速度をさらに有する、請求項10に記載のモノクローナル抗体。葉酸受容体アルファFRAに特異的に結合するモノクローナル抗体であって、該モノクローナル抗体は、C末端のリシンを伴うかまたは伴わない配列番号1または配列番号5の重鎖アミノ酸配列を含み、さらに、配列番号2のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、配列番号6のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、または配列番号7のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列から選択される軽鎖アミノ酸配列を含み、該モノクローナル抗体は、基準の培養条件下で調製した場合のモノクローナル抗体の内在化効率と比較して、減少した内在化効率を有する、モノクローナル抗体。前記内在化効率が28ng/ml以下である、請求項12に記載のモノクローナル抗体。前記内在化効率が990ng/ml以下である、請求項13に記載のモノクローナル抗体。前記内在化効率が1632ng/ml以下である、請求項13に記載のモノクローナル抗体。葉酸受容体アルファFRAに特異的に結合するモノクローナル抗体であって、該モノクローナル抗体は、C末端のリシンを伴うかまたは伴わない配列番号1または配列番号5の重鎖アミノ酸配列を含み、さらに、配列番号2のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、配列番号6のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、または配列番号7のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列から選択される軽鎖アミノ酸配列を含み、該モノクローナル抗体は、基準の培養条件下で調製した場合のモノクローナル抗体の結合アフィニティーと比較して、変化した結合アフィニティーを有する、モノクローナル抗体。前記結合アフィニティーが増大させられている、請求項16に記載のモノクローナル抗体。前記結合アフィニティーが減少させられている、請求項16に記載のモノクローナル抗体。前記結合アフィニティーが10以上増大させられている、請求項17に記載のモノクローナル抗体。前記結合アフィニティーが10以上減少させられている、請求項18に記載のモノクローナル抗体。請求項1から20のいずれか一項に記載の抗体を含む組成物。さらなる活性薬剤をさらに含む、請求項21に記載の組成物。真核宿主細胞を含む細胞培養物であって、該宿主細胞は、配列番号1または配列番号5のアミノ酸をコードし、かつ配列番号2のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、配列番号6のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、または配列番号7のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列から選択されるアミノ酸配列をコードする核酸を含み、細胞培養条件は、ガラクトース、低下した溶存酸素分圧、低下した温度、酪酸ナトリウム、塩化銅、高い容量オスモル濃度、および高CO2からなる群より選択されるパラメータを含む、細胞培養物。請求項1から20のいずれか一項に記載の抗体をさらに含む、請求項23に記載の細胞培養物。前記真核宿主細胞がCHO細胞である、請求項23に記載の細胞培養物。請求項24に記載の細胞培養物から単離された宿主細胞。請求項24に記載の細胞培養物から単離された、葉酸受容体アルファFRAに特異的に結合するモノクローナル抗体。FRAに特異的に結合するモノクローナル抗体を生成するための方法であって、該モノクローナル抗体は、C末端のリシンを伴うかまたは伴わない配列番号1または配列番号5の重鎖アミノ酸配列を含み、さらに、配列番号2のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、配列番号6のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、または配列番号7のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列から選択される軽鎖アミノ酸配列を含み、該モノクローナル抗体は、基準の培養条件下で調製した場合のモノクローナル抗体のADCCと比較して、変化したADCCを有し、該方法は、ガラクトース、低下した溶存酸素分圧、低下した温度、酪酸ナトリウム、塩化銅、高い容量オスモル濃度、および高CO2からなる群より選択されるパラメータを含む細胞培養条件で、該重鎖アミノ酸配列および該軽鎖アミノ酸配列をコードする核酸を含むCHO細胞を培養するステップを含む、方法。前記ADCCが増大させられ、前記培養条件が低下した溶存酸素分圧および低下した温度から選択される、請求項28に記載の方法。前記抗体が、増大した内在化速度をさらに有する、請求項29に記載の方法。FRAに特異的に結合するモノクローナル抗体を生成するための方法であって、該モノクローナル抗体は、C末端のリシンを伴うかまたは伴わない配列番号1または配列番号5の重鎖アミノ酸配列を含み、さらに配列番号2のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、配列番号6のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、または配列番号7のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列から選択される軽鎖アミノ酸配列を含み、該モノクローナル抗体は、基準の培養条件下で調製した場合のモノクローナル抗体の内在化速度と比較して、変化した内在化速度を有し、該方法は、ガラクトース、低下した溶存酸素分圧、低下した温度、酪酸ナトリウム、塩化銅、高い容量オスモル濃度、高CO2、13日間未満での採取または15日間を超えた後での採取からなる群より選択されるパラメータを含む細胞培養条件で、該重鎖アミノ酸配列および該軽鎖アミノ酸配列をコードする核酸を含むCHO細胞を培養するステップを含む、方法。前記内在化速度が増大させられ、前記培養条件が低下した溶存酸素分圧または13日間未満での採取もしくは15日間を超えた後での採取から選択される、請求項31に記載の方法。葉酸受容体アルファFRAに特異的に結合するモノクローナル抗体であって、該モノクローナル抗体は、C末端のリシンを伴うかまたは伴わない配列番号1または配列番号5の重鎖アミノ酸配列を含み、さらに、配列番号2のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、配列番号6のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列、または配列番号7のアミノ酸配列と99同一であるアミノ酸配列から選択される軽鎖アミノ酸配列を含み、請求項28から32のいずれか一項に記載の方法により作製される、モノクローナル抗体。FRAの増大した発現と関連する異形成細胞の成長の低減を必要とする被験体において、FRAの増大した発現と関連する異形成細胞の成長を低減する方法であって、該被験体に請求項1から20、27、または33のいずれか一項に記載のモノクローナル抗体を投与するステップを含む、方法。前記異形成細胞が、卵巣がん細胞、乳がん細胞、腎臓がん細胞、結腸直腸がん細胞、肺がん細胞、子宮内膜がん細胞、脳のがん細胞、卵管がん細胞、子宮がん細胞、または白血病細胞である、請求項34に記載の方法。前記被験体がヒトである、請求項34に記載の方法。がんの処置を必要とする被験体において、がんを処置するための方法であって、該被験体に請求項1から20、27、または33のいずれか一項に記載のモノクローナル抗体を投与するステップを含む、方法。前記がんが、卵巣がん、乳がん、腎臓がん、結腸直腸がん、肺がん、子宮内膜がん、または脳のがんから選択される、請求項37に記載の方法。FRAを発現する細胞を検出するための方法であって、該細胞を、請求項1から20、27、または33のいずれか一項に記載の抗体と接触させるステップと、結合を検出するステップとを含む、方法。前記細胞が異形成細胞である、請求項39に記載の方法。生物学的試料中のFRAを検出するための方法であって、該生物学的試料を、請求項1から20、27、または33のいずれか一項に記載の抗体と接触させるステップと、結合を検出するステップとを含む、方法。したがって、特に、FRA媒介性がんなどのFRA媒介性疾患を処置する使用のために、抗ヒトFRA抗体が必要とされている。特に、異なる特性を伴う抗FRA抗体、ならびにこのような抗体を作製する方法、ならびに抗体の機能的特徴を多様な治療的使用および診断的使用に適合させる方法が必要とされている。例えば、所望の使用のために、抗FRA抗体の結合アフィニティー、抗体依存性細胞傷害作用、内在化効率、および/または内在化速度を変化させることができる。一態様では、本発明は、中性N結合グリカンプロファイルが異なり、かつ/または特性が異なる抗ヒトFRAモノクローナル抗体、特に、MORAb-003モノクローナル抗体、ならびに糖供給源としてのブドウ糖をガラクトースで置換すること、温度を低下させること、溶存酸素DOレベルを低減すること、CO2レベルを増大させること、CuClもしくは酪酸ナトリウムを培養培地に添加すること、または容量オスモル濃度を増大させること、あるいは異なる長さの時間にわたる培養後に抗FRA抗体を採取することにより、このような抗体を作製して用いる方法に関する。本発明はまた、結合アフィニティー、抗体依存性細胞傷害作用、内在化効率、および/または内在化速度を変化させた抗ヒトFRA抗体、特に、MORAb-003抗体、ならびに糖供給源としてのブドウ糖をガラクトースで置換すること、温度を低下させること、溶存酸素DOレベルを低減すること、CO2レベルを増大させること、CuClもしくは酪酸ナトリウムを培養培地に添加すること、または容量オスモル濃度を増大させること、あるいは異なる長さの時間にわたる培養後に抗FRA抗体を採取することにより、このような抗体を生成する方法にも関する。別の態様では、本発明は、本明細書で記載される方法のうちのいずれかを介して生成する抗ヒトFRA抗体、および前記抗体を含む組成物に関する。別の態様では、本発明は、抗ヒトFRA抗体、特に、MORAb-003抗体の重鎖および軽鎖を発現するように操作した細胞培養物であって、細胞培養条件が、ガラクトースの補充、DOの低減、温度の低下、酪酸ナトリウムまたは塩化銅の補充、高い容量オスモル濃度、および高CO2から選択されるパラメータを含む細胞培養物に関する。本発明はまた、このような細胞培養物から単離された宿主細胞にも関する。本発明の具体的な非限定的実施形態を、以下の番号付けされた段落に示す。1.宿主細胞において、所望の中性N結合グリカンのプロファイルを伴う抗ヒト葉酸受容体アルファFRA抗体を生成する方法であって、前記宿主細胞が、前記抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含み、1宿主細胞を、第1の期間にわたり、ブドウ糖を糖供給源として用いて培養するステップと、2宿主細胞を、第2の期間にわたり、ガラクトースを糖供給源として用いて培養するステップとを含む方法。2.宿主細胞を、培養の開始から0日目~14日目に、ガラクトースを糖供給源として用いて培養する、実施形態1に記載の方法。3.第2の期間が、培養の開始から2日目~10日目から選択される日に始まる、実施形態1に記載の方法。4.第2の期間が、培養の開始から5日目~7日目から選択される日に始まる、実施形態1に記載の方法。5.結合アフィニティーを低下させた抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を、第1の期間にわたり、ブドウ糖を糖供給源として用いて培養するステップと、次いで、前記宿主細胞を、第2の期間にわたり、ガラクトースを糖供給源として用いて培養するステップとを含み、抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを、前記宿主細胞をガラクトースを伴わずに培養することにより生成させる抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーと比較して低減する方法。6.抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを少なくとも10低減する、実施形態5に記載の方法。7.抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを少なくとも15低減する、実施形態5に記載の方法。8.ADCCが低減された抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を、第1の期間にわたり、ブドウ糖を糖供給源として用いて培養するステップと、次いで、前記宿主細胞を、第2の期間にわたり、ガラクトースを糖供給源として用いて培養するステップとを含み、抗ヒトFRA抗体のADCCを、前記宿主細胞をガラクトースを伴わずに培養することにより生成する抗体のADCCと比較して低減する方法。9.抗ヒトFRA抗体のADCCを少なくとも5低減する、実施形態8に記載の方法。10.抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを少なくとも65低減する、実施形態8に記載の方法。11.前記宿主細胞を哺乳動物宿主細胞とする、実施形態1、5、または8のいずれか1つに記載の方法。12.前記哺乳動物宿主細胞をGSCHOチャイニーズハムスター卵巣細胞系に由来する組換え細胞とする、実施形態11に記載の方法。13.前記ブドウ糖濃度を1g/L~4g/Lの間とする、実施形態1、5、または8のいずれか1つに記載の方法。14.前記ガラクトース濃度を0.01g/L~20g/Lとする、実施形態1、5、または8のいずれか1つに記載の方法。15.前記ガラクトース濃度を1g/L~10g/Lとする、実施形態14に記載の方法。16.前記ガラクトース濃度を2g/L~4g/Lとする、実施形態14に記載の方法。17.抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養するステップを含み、培養するステップのうちの少なくとも一部をガラクトースを糖供給源として用いて行う方法。18.ガラクトースを糖供給源として用いて行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から0日目~14日目に行う、実施形態17に記載の方法。19.ガラクトースを糖供給源として用いて行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から2日目~10日目から選択される日に開始する、実施形態17に記載の方法。20.ガラクトースを糖供給源として用いて行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から3日目~7日目から選択される日に開始する、実施形態17に記載の方法。21.ガラクトース濃度を0.01g/L~20g/Lとする、実施形態17に記載の方法。22.ガラクトース濃度を1g/L~10g/Lとする、実施形態17に記載の方法。23.ガラクトース濃度を2g/L~4g/Lとする、実施形態17に記載の方法。24.抗ヒトFRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、0~6.3のG0、21~68のG0F、24~63のG1F、0~0.8のG2、3~11のG2F、0~0.39のM3N2、0~0.35のM3N2F、および0~5のMAN5を含む、実施形態1に記載の方法。25.抗ヒトFRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、M3N2:M3N2F:NA2:NA2F:MAN5:NGA2:NA2G1F:NGA2Fを、約1:1:1.7:60:20:16:365:370とする比を含む、実施形態1に記載の方法。26.抗ヒトFRA抗体が、配列番号1を含む重鎖アミノ酸配列と、配列番号2または配列番号2と99同一な配列を含む軽鎖アミノ酸配列とを含む、実施形態1、5、8、または17のいずれか1つに記載の方法。27.中性N結合グリカンのプロファイルを、CHO細胞において、配列番号1を含む重鎖アミノ酸配列と、配列番号2または配列番号2と99同一な配列を含む軽鎖アミノ酸配列とを含む抗体を用いて得られるプロファイルとする、実施形態1に記載の方法。28.抗ヒトFRA抗体の相対結合アフィニティーを、前記宿主細胞をガラクトースを伴わずに培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して81.3~88.3とする、実施形態5に記載の方法。29.抗ヒトFRA抗体が、前記宿主細胞をガラクトースを伴わずに培養することにより生成する抗体のADCCと比較して39.0~97.4の範囲でADCCを誘導する、実施形態8に記載の方法。30.宿主細胞において、所望の中性N結合グリカンのプロファイルを伴う抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、前記宿主細胞が前記抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含み、1宿主細胞を第1の温度で培養するステップと、次いで、2宿主細胞を第1の温度より低い第2の温度で培養するステップとを含む方法。31.宿主細胞を、培養の開始から2日目~10日目から選択される日に始めて低温で培養する、実施形態30に記載の方法。32.宿主細胞を、培養の開始から3日目~5日目から選択される日に始めて低温で培養する、実施形態30に記載の方法。33.内在化速度を増大させた抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を第1の温度で培養するステップと、次いで、宿主細胞を第1の温度より低い第2の温度で培養するステップとを含み、抗ヒトFRA抗体の内在化速度を、前記宿主細胞を第1の温度で培養することにより生成する抗体の内在化速度と比較して増大させる方法。34.抗ヒトFRA抗体の内在化速度を少なくとも15増大させる、実施形態33に記載の方法。35.抗ヒトFRA抗体の内在化速度を少なくとも25増大させる、実施形態33に記載の方法。36.内在化効率を増大させた抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を第1の温度で培養するステップと、次いで、宿主細胞を第1の温度より低い第2の温度で培養するステップとを含み、抗体の内在化効率を、前記宿主細胞を第1の温度で培養することにより生成する抗体の内在化効率と比較して低減する方法。37.抗ヒトFRA抗体の内在化効率を少なくとも15低減する、実施形態36に記載の方法。38.抗ヒトFRA抗体の内在化効率を少なくとも25低減する、実施形態36に記載の方法。39.前記宿主細胞を哺乳動物細胞とする、実施形態30、33、36、または230のいずれか1つに記載の方法。40.前記哺乳動物宿主細胞を、GSCHOチャイニーズハムスター卵巣細胞系に由来する組換え細胞とする、実施形態39に記載の方法。41.宿主細胞を増殖させる前記第1の温度を約36~38°Cとする、実施形態30、33、36、または230のいずれか1つに記載の方法。42.前記第2の温度を28~35°Cとする、実施形態30、33、36、または230のいずれか1つに記載の方法。43.前記第2の温度を30~33°Cとする、実施形態42に記載の方法。44.前記第2の温度を30~31°Cとする、実施形態42に記載の方法。45.抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養するステップを含み、培養するステップのうちの少なくとも一部を低温で行う方法。46.低温で行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から0日目~14日目に行う、実施形態45に記載の方法。47.低温で行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から2日目~10日目から選択される日に開始する、実施形態45に記載の方法。48.低温で行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から3日目~5日目から選択される日に開始する、実施形態45に記載の方法。49.低温を28~35°Cとする、実施形態45に記載の方法。50.低温を30~33°Cとする、実施形態45に記載の方法。51.低温を30~31°Cとする、実施形態45に記載の方法。52.抗ヒトFRA抗体のN結合グリカンのプロファイルが、0~6.3のG0、21~68のG0F、24~63のG1F、0~0.8のG2、3~11のG2F、0~0.39のM3N2、0~0.35のM3N2F、および0~5のMAN5を含む、実施形態30に記載の方法。53.抗ヒトFRA抗体が、前記第1の温度だけで生成する抗体の内在化速度と比較して117~143の速度で標的細胞に内在化する、実施形態33に記載の方法。54.抗ヒトFRA抗体が、配列番号1を含む重鎖アミノ酸配列と、配列番号2または配列番号2と99同一な配列を含む軽鎖アミノ酸配列とを含む、実施形態30、33、36、45または230のいずれか1つに記載の方法。55.宿主細胞において、所望の中性N結合グリカンのプロファイルを伴う抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、前記宿主細胞が前記抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含み、1宿主細胞を通常の容量オスモル濃度の細胞培養培地中で培養するステップと、次いで、2宿主細胞を高い容量オスモル濃度の細胞培養培地中で培養するステップとを含む方法。56.結合アフィニティーを低下させた抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を通常の容量オスモル濃度の細胞培養培地中で培養するステップと、次いで、宿主細胞を高い容量オスモル濃度の細胞培養培地中で培養するステップとを含む方法。57.抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを、前記宿主細胞を通常の容量オスモル濃度の培養培地中で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して少なくとも25低減する、実施形態56に記載の方法。58.抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを、前記宿主細胞を通常の容量オスモル濃度の培養培地中で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して少なくとも40低減する、実施形態56に記載の方法。59.ADCCが低減された抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を通常の容量オスモル濃度の細胞培養培地中で培養するステップと、次いで、宿主細胞を高い容量オスモル濃度の細胞培養培地中で培養するステップとを含む方法。60.抗ヒトFRA抗体のADCCを、前記宿主細胞を通常の容量オスモル濃度の培養培地中で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して少なくとも50低減する、実施形態59に記載の方法。61.抗ヒトFRA抗体のADCCを、前記宿主細胞を通常の容量オスモル濃度の培養培地中で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して少なくとも65低減する、実施形態59に記載の方法。62.内在化速度を増大させた抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を通常の容量オスモル濃度の細胞培養培地中で培養するステップと、次いで、宿主細胞を高い容量オスモル濃度の細胞培養培地中で培養するステップとを含む方法。63.抗ヒトFRA抗体の内在化速度を、前記宿主細胞を通常の容量オスモル濃度の培養培地中で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して少なくとも5増大させる、実施形態62に記載の方法。64.抗ヒトFRA抗体の内在化速度を、前記宿主細胞を通常の容量オスモル濃度の培養培地中で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して少なくとも10増大させる、実施形態62に記載の方法。65.内在化効率が低減された抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を通常の容量オスモル濃度の細胞培養培地中で培養するステップと、次いで、宿主細胞を高い容量オスモル濃度の細胞培養培地中で培養するステップとを含む方法。66.抗ヒトFRA抗体の内在化効率を少なくとも98.6低減する、実施形態65に記載の方法。67.前記宿主細胞を哺乳動物細胞とする、実施形態55、56、59、62または65のいずれか1つに記載の方法。68.前記宿主細胞をGSCHOチャイニーズハムスター卵巣細胞系に由来する組換え細胞とする、実施形態67に記載の方法。69.前記細胞培養培地の通常の容量オスモル濃度を250~350mOsm/Lの範囲とする、実施形態55、56、59、62、または65のいずれか1つに記載の方法。70.前記高い容量オスモル濃度培地の容量オスモル濃度を360~800mOsm/Lとする、実施形態55、56、59、62、または65のいずれか1つに記載の方法。71.前記高い容量オスモル濃度培地の容量オスモル濃度を400~650mOsm/Lとする、実施形態70に記載の方法。72.抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、前記抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養するステップを含み、培養するステップのうちの少なくとも一部を高い容量オスモル濃度で行う方法。73.高い容量オスモル濃度で行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から0日目~14日目に行う、実施形態72に記載の方法。74.高い容量オスモル濃度で行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から2日目~10日目から選択される日に開始する、実施形態72に記載の方法。75.高い容量オスモル濃度で行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から3日目~5日目から選択される日に開始する、実施形態72に記載の方法。76.高い容量オスモル濃度を360~800mOsm/Lとする、実施形態72に記載の方法。77.高い容量オスモル濃度を400~650mOsm/Lとする、実施形態72に記載の方法。78.抗ヒトFRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、0~7のG0、49~95のG0F、0~39のG1F、0~0.7のG2、0~6のG2F、0~0.35のM3N2、0.04~0.46のM3N2F、および1.2~5.6のMAN5を含む、実施形態55に記載の方法。79.抗ヒトFRA抗体の相対結合アフィニティーを、前記宿主細胞を通常の容量オスモル濃度の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して66.8~78.9とする、実施形態56に記載の方法。80.抗ヒトFRA抗体が、ADCCを、前記宿主細胞を通常の容量オスモル濃度の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体のADCCと比較して101の範囲で誘導する、実施形態62に記載の方法。81.抗ヒトFRA抗体が、前記宿主細胞を通常の容量オスモル濃度の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体の内在化速度と比較して107の速度で標的細胞に内在化する、実施形態62に記載の方法。82.抗ヒトFRA抗体が、前記宿主細胞を通常の容量オスモル濃度の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体の内在化効率と比較して1.40~1.42の効率で標的細胞に内在化する、実施形態65に記載の方法。83.抗ヒトFRA抗体が、配列番号1を含む重鎖アミノ酸配列と、配列番号2または配列番号2と99同一な配列を含む軽鎖アミノ酸配列とを含む、実施形態55、56、59、62、65、または72のいずれか1つに記載の方法。84.宿主細胞において、抗ヒトFRA抗体の所望の中性N結合グリカンのプロファイルを生成する方法であって、前記宿主細胞が前記抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含み、1宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養するステップと、次いで、2酪酸ナトリウムを通常の細胞培養培地に添加するステップとを含む方法。85.結合アフィニティーを低下させた抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養するステップと、次いで、酪酸ナトリウムを通常の細胞培養培地に添加するステップとを含む方法。86.抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して少なくとも40低減する、実施形態85に記載の方法。87.抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して少なくとも50低減する、実施形態85に記載の方法。88.ADCCが低減された抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養するステップと、次いで、酪酸ナトリウムを通常の細胞培養培地に添加するステップとを含む方法。89.抗ヒトFRA抗体のADCCを、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体のADCCと比較して少なくとも25低減する、実施形態88に記載の方法。90.抗ヒトFRA抗体のADCCを、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体のADCCと比較して少なくとも50低減する、実施形態88に記載の方法。91.内在化効率を低下させた抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養するステップと、宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養するステップと、次いで、酪酸ナトリウムを通常の細胞培養培地に添加するステップとを含む方法。92.抗ヒトFRA抗体の内在化効率を、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体の内在化効率と比較して少なくとも20低減する、実施形態91に記載の方法。93.抗ヒトFRA抗体の内在化効率を、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体の内在化効率と比較して少なくとも50低減する、実施形態91に記載の方法。94.前記宿主細胞を哺乳動物細胞とする、実施形態84、85、88または91のいずれか1つに記載の方法。95.前記宿主細胞をGSCHOチャイニーズハムスター卵巣細胞系に由来する組換え細胞とする、実施形態94に記載の方法。96.前記通常の細胞培養培地が酪酸ナトリウムを含有しない、実施形態84、85、88、または91のいずれか1つに記載の方法。97.前記酪酸ナトリウムの濃度を0.5mMとする、実施形態84、85、88、または91のいずれか1つに記載の方法。98.前記酪酸ナトリウムの濃度を10mMとする、実施形態84、85、88、または91のいずれか1つに記載の方法。99.抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養するステップを含み、培養するステップのうちの少なくとも一部を酪酸ナトリウムを含む培養培地中で行う方法。100.酪酸ナトリウムを含む培養培地中で行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から0日目~14日目に行う、実施形態99に記載の方法。101.酪酸ナトリウムを含む培養培地中で行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から2日目~10日目から選択される日に開始する、実施形態99に記載の方法。102.酪酸ナトリウムを含む培養培地中で行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から3日目~7日目から選択される日に開始する、実施形態99に記載の方法。103.酪酸ナトリウムの濃度を0.01mM~90mMとする、実施形態99に記載の方法。104.酪酸ナトリウムの濃度を0.01mM~16mMとする、実施形態99に記載の方法。105.酪酸ナトリウムの濃度を0.5mM~10mMとする、実施形態99に記載の方法。106.抗ヒトFRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、0~8のG0、39~86のG0F、9~48のG1F、0~1.0のG2、0~7のG2F、0~0.41のM3N2、0.03~0.45のM3N2F、および0~4.4のMAN5を含む、実施形態84に記載の方法。107.抗ヒトFRA抗体の相対結合アフィニティーを、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して59~64とする、実施形態85に記載の方法。108.抗ヒトFRA抗体の相対結合アフィニティーを、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して44~55とする、実施形態85に記載の方法。109.抗ヒトFRA抗体が、抗体依存性細胞傷害作用を、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体のADCCと比較して26~91の範囲で誘導する、実施形態88に記載の方法。110.抗ヒトFRA抗体が、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体の内在化効率と比較して45~84の効率で標的細胞に内在化する、実施形態91に記載の方法。111.抗ヒトFRA抗体が、配列番号1を含む重鎖アミノ酸配列と、配列番号2または配列番号2と99同一な配列を含む軽鎖アミノ酸配列とを含む、実施形態84、85、88、91、または99のいずれか1つに記載の方法。112.宿主細胞において、抗ヒトFRA抗体の所望の中性N結合グリカンのプロファイルを生成する方法であって、前記宿主細胞が前記抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含み、1宿主細胞を第1の溶存酸素DO濃度で培養するステップと、次いで、2宿主細胞を第1のDO濃度より低い第2のDO濃度で培養するステップとを含む方法。113.結合アフィニティーを低下させた抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を第1のDO濃度で培養するステップと、次いで、宿主細胞を第1のDO濃度より低い第2のDO濃度で培養するステップとを含む方法。114.抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを、前記宿主細胞を第1のDO濃度で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して少なくとも30低減する、実施形態113に記載の方法。115.抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを、前記宿主細胞を第1のDO濃度で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して少なくとも50低減する、実施形態113に記載の方法。116.ADCCを増大させた抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を第1のDO濃度で培養するステップと、次いで、宿主細胞を第1のDO濃度より低い第2のDO濃度で培養するステップとを含む方法。117.抗ヒトFRA抗体のADCCを、前記宿主細胞を第1のDO濃度で培養することにより生成する抗体のADCCと比較して少なくとも25増大させる、実施形態116に記載の方法。118.抗ヒトFRA抗体のADCCを、前記宿主細胞を第1のDO濃度で培養することにより生成する抗体のADCCと比較して少なくとも50増大させる、実施形態116に記載の方法。119.内在化効率を低下させた抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を第1のDO濃度で培養するステップと、次いで、宿主細胞を第1のDO濃度より低い第2のDO濃度で培養するステップとを含む方法。120.抗ヒトFRA抗体の内在化効率を、前記宿主細胞を第1のDO濃度で培養することにより生成する抗体の内在化効率と比較して少なくとも30低減する、実施形態119に記載の方法。121.抗ヒトFRA抗体の内在化効率を、前記宿主細胞を第1のDO濃度で培養することにより生成する抗体の内在化効率と比較して少なくとも60低減する、実施形態119に記載の方法。122.前記宿主細胞を哺乳動物細胞とする、実施形態112、113、116または119のいずれか1つに記載の方法。123.前記宿主細胞をGSCHOチャイニーズハムスター卵巣細胞系に由来する組換え細胞とする、実施形態122に記載の方法。124.宿主細胞を増殖させうる前記第1の溶存酸素濃度を30~100の間とする、実施形態112、113、116、または119のいずれか1つに記載の方法。125.前記第2のDO濃度を0~25とする、実施形態112、113、116、または119のいずれか1つに記載の方法。126.抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養するステップを含み、培養するステップのうちの少なくとも一部を低DOで行う方法。127.低DOで行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から0日目~14日目に行う、実施形態126に記載の方法。128.低DOで行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から2日目~10日目から選択される日に開始する、実施形態126に記載の方法。129.低DOで行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から3日目~7日目から選択される日に開始する、実施形態126に記載の方法。130.低DOを0~30とする、実施形態126に記載の方法。131.低DOを5~25とする、実施形態130に記載の方法。132.低DOを5~10とする、実施形態130に記載の方法。133.抗ヒトFRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、2~11のG0、32~79のG0F、12~52のG1F、0~1.0のG2、0~7のG2F、0~0.28のM3N2、0.01~0.43のM3N2F、および0.1~4.4のMAN5を含む、実施形態112に記載の方法。134.抗ヒトFRA抗体の相対結合アフィニティーを、前記宿主細胞を第1のDO濃度で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して50~63とする、実施形態113に記載の方法。135.抗ヒトFRA抗体が、抗体依存性細胞傷害作用を、前記宿主細胞を第1のDO濃度で培養することにより生成する抗体のADCCと比較して100超~200以上の範囲で誘導する、実施形態116に記載の方法。136.抗ヒトFRAが、前記宿主細胞を第1のDO濃度で培養することにより生成する抗体の内在化効率と比較して39~64の効率で標的細胞に内在化する、実施形態119に記載の方法。137.抗ヒトFRA抗体が、配列番号1を含む重鎖アミノ酸配列と、配列番号2または配列番号2と99同一な配列を含む軽鎖アミノ酸配列とを含む、実施形態112、113、116、119または126のいずれか1つに記載の方法。138.宿主細胞において、抗ヒトFRA抗体の所望の中性N結合グリカンのプロファイルを生成する方法であって、前記宿主細胞が前記抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含み、1宿主細胞を第1のCO2濃度で培養するステップと、次いで、2宿主細胞を第1のCO2濃度より高い第2のCO2濃度で培養するステップとを含む方法。139.結合アフィニティーを低下させた抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を第1のCO2濃度で培養するステップと、次いで、宿主細胞を第1のCO2濃度より高い第2のCO2濃度で培養するステップとを含む方法。140.抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを、前記宿主細胞を第1のCO2濃度で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して少なくとも25低減する、実施形態139に記載の方法。141.抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを、前記宿主細胞を第1のCO2濃度で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して少なくとも50低減する、実施形態139に記載の方法。142.ADCCを低減させた抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を第1のCO2濃度で培養するステップと、次いで、宿主細胞を第1のCO2濃度より高い第2のCO2濃度で培養するステップとを含む方法。143.抗ヒトFRA抗体のADCCを、前記宿主細胞を第1のCO2濃度で培養することにより生成する抗体のADCCと比較して少なくとも50低減する、実施形態142に記載の方法。144.抗ヒトFRA抗体のADCCを、前記宿主細胞を第1のCO2濃度で培養することにより生成する抗体のADCCと比較して少なくとも65低減する、実施形態142に記載の方法。145.内在化速度を増大させた抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を第1のCO2濃度で培養するステップと、次いで、宿主細胞を第1のCO2濃度より高い第2のCO2濃度で培養するステップとを含む方法。146.抗ヒトFRA抗体の内在化速度を、前記宿主細胞を第1のCO2濃度で培養することにより生成する抗体の内在化速度と比較して少なくとも5増大させる、実施形態145に記載の方法。147.抗ヒトFRA抗体の内在化速度を、前記宿主細胞を第1のCO2濃度で培養することにより生成する抗体の内在化速度と比較して少なくとも25増大させる、実施形態145に記載の方法。148.内在化効率が低減された抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を第1のCO2濃度で培養するステップと、次いで、宿主細胞を第1のCO2濃度より高い第2のCO2濃度で培養するステップとを含む方法。149.抗ヒトFRA抗体の内在化効率を、前記宿主細胞を第1のCO2濃度で培養することにより生成する抗体の内在化効率と比較して少なくとも25低減する、実施形態148に記載の方法。150.抗ヒトFRA抗体の内在化効率を、前記宿主細胞を第1のCO2濃度で培養することにより生成する抗体の内在化効率と比較して少なくとも50低減する、実施形態148に記載の方法。151.前記宿主細胞を哺乳動物細胞とする、実施形態138、139、142、145または148のいずれか1つに記載の方法。152.前記宿主細胞をGSCHOチャイニーズハムスター卵巣細胞系に由来する組換え細胞とする、実施形態151に記載の方法。153.前記第1のCO2濃度を約5以下とする、実施形態138、139、142、145、または148のいずれか1つに記載の方法。154.前記高CO2濃度を10~30とする、実施形態138、139、142、145、または148のいずれか1つに記載の方法。155.抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養するステップを含み、培養するステップのうちの少なくとも一部を高CO2濃度で行う方法。156.高CO2濃度で行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から0日目~14日目に行う、実施形態155に記載の方法。157.高CO2濃度で行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から2日目~10日目から選択される日に開始する、実施形態155に記載の方法。158.高CO2濃度で行う培養するステップのうちの一部を、培養の開始から3日目~7日目から選択される日に開始する、実施形態155に記載の方法。159.高CO2濃度を10~30とする、実施形態155に記載の方法。160.高CO2濃度を20とする、実施形態155に記載の方法。161.抗ヒトFRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、0~7のG0、50~97のG0F、0~39のG1F、0~0.7のG2、0~6のG2F、0~0.46のM3N2、0.06~0.48のM3N2F、および0~3.8のMAN5を含む、実施形態138に記載の方法。162.抗ヒトFRA抗体の相対結合アフィニティーを、前記宿主細胞を第1のCO2濃度で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して45~56とする、実施形態139に記載の方法。163.抗ヒトFRA抗体が、前記宿主細胞を第1のCO2濃度で培養することにより生成する抗体のADCCと比較して23~89の範囲でADCCを誘導する、実施形態142に記載の方法。164.抗ヒトFRA抗体が、前記宿主細胞を第1のCO2濃度で培養することにより生成する抗体の内在化速度と比較して105~125の速度で標的細胞に内在化する、実施形態145に記載の方法。165.抗ヒトFRA抗体が、前記宿主細胞を第1のCO2濃度で培養することにより生成する抗体の内在化効率と比較して40~68の効率で標的細胞に内在化する、実施形態148に記載の方法。166.抗ヒトFRA抗体が、配列番号1を含む重鎖アミノ酸配列と、配列番号2または配列番号2と99同一な配列を含む軽鎖アミノ酸配列とを含む、実施形態138、139、142、145、148または155のいずれか1つに記載の方法。167.宿主細胞において、抗ヒトFRA抗体の所望の中性N結合グリカン構造を生成する方法であって、前記宿主細胞が前記抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含み、1宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養するステップと、次いで、2塩化銅を通常の細胞培養培地に添加するステップとを含む方法。168.結合アフィニティーを低下させた抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養するステップと、宿主細胞を宿主細胞が増殖しうる通常の細胞培養培地中で培養するステップと、次いで、塩化銅を通常の細胞培養培地に添加するステップとを含む方法。169.抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して少なくとも40低減する、実施形態168に記載の方法。170.抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して少なくとも50低減する、実施形態168に記載の方法。171.ADCCが低減された抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養するステップと、次いで、塩化銅を通常の細胞培養培地に添加するステップとを含む方法。172.抗ヒトFRA抗体のADCCを、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体のADCCと比較して少なくとも20低減する、実施形態171に記載の方法。173.抗ヒトFRA抗体のADCCを、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体のADCCと比較して少なくとも80低減する、実施形態171に記載の方法。174.内在化効率を低下させた抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養するステップと、次いで、塩化銅を通常の細胞培養培地に添加するステップとを含む方法。175.抗ヒトFRA抗体の内在化効率を、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体の内在化効率と比較して少なくとも30低減する、実施形態174に記載の方法。176.抗ヒトFRA抗体の内在化効率を、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体の内在化効率と比較して少なくとも60低減する、実施形態174に記載の方法。177.前記宿主細胞を哺乳動物細胞とする、実施形態167、168、171または174のいずれか1つに記載の方法。178.前記宿主細胞をGSCHOチャイニーズハムスター卵巣細胞系に由来する組換え細胞とする、実施形態177に記載の方法。179.前記通常の細胞培養培地が塩化銅を含有しない、実施形態167、168、171、または174のいずれか1つに記載の方法。180.前記塩化銅の濃度を0.01μM~0.5mMとする、実施形態167、168、171、または174のいずれか1つに記載の方法。181.抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養するステップを含み、培養するステップの少なくとも一部を、塩化銅を含む培養培地中で行う方法。182.塩化銅を含む培養培地中で行う培養するステップの一部を、培養の開始から0日目~14日目に行う、実施形態181に記載の方法。183.塩化銅を含む培養培地中で行う培養するステップの一部を、培養の開始から2日目~10日目から選択される日に開始する、実施形態181に記載の方法。184.塩化銅を含む培養培地中で行う培養するステップの一部を、培養の開始から3日目~6日目から選択される日に開始する、実施形態181に記載の方法。185.塩化銅の濃度を0.01μM~0.5mMとする、実施形態181に記載の方法。186.塩化銅の濃度を0.01mM~0.5mMとする、実施形態181に記載の方法。187.塩化銅の濃度を0.5mMとする、実施形態181に記載の方法。188.抗ヒトFRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、0~8のG0、34~81のG0F、13~53のG1F、0~0.7のG2、0~7のG2F、0.07~0.61のM3N2、0.16~0.58のM3N2F、および0~4.3のMAN5を含む、実施形態167に記載の方法。189.抗ヒトFRA抗体の相対結合アフィニティーを、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体の結合アフィニティーと比較して41~56とする、実施形態に記載の方法。190.抗ヒトFRA抗体が、抗体依存性細胞傷害作用を、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体のADCCと比較して21~87の範囲で誘導する、実施形態171に記載の方法。191.抗ヒトFRA抗体が、前記宿主細胞を通常の細胞培養培地中で培養することにより生成する抗体の内在化効率と比較して41~71の効率で標的細胞に内在化する、実施形態174に記載の方法。192.抗ヒトFRA抗体が、配列番号1を含む重鎖アミノ酸配列と、配列番号2または配列番号2と99同一な配列を含む軽鎖アミノ酸配列とを含む、実施形態167、168、171、174、または181のいずれか1つに記載の方法。193.a抗ヒトFRA抗体の中性Nグリカンプロファイル、b結合アフィニティー、cADCC、d内在化速度、およびe内在化効率からなる群より選択される抗ヒトFRA抗体の1または複数の特性を変化させる方法であって、前記抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養するステップと、培養開始後13日間未満でありまたは15日間を超える時点において、抗ヒトFRA抗体を生成する宿主細胞を採取するステップとを含む方法。194.抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを、培養開始の13~15日後に採取した細胞を介して生成する抗体の結合アフィニティーと比較して低減する、実施形態193に記載の方法。195.抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを、培養開始の13~15日後に採取した細胞を介して生成する抗体の結合アフィニティーと比較して少なくとも25低減する、実施形態193に記載の方法。196.抗ヒトFRA抗体の結合アフィニティーを、培養開始の13~15日後に採取した細胞を介して生成する抗体の結合アフィニティーと比較して少なくとも50低減する、実施形態193に記載の方法。197.抗ヒトFRA抗体のADCCを、培養開始の13~15日後に採取した抗体と比較して低減する、実施形態193に記載の方法。198.抗ヒトFRA抗体のADCCを、培養開始の13~15日後に採取した抗体と比較して少なくとも50低減する、実施形態194に記載の方法。199.抗ヒトFRA抗体のADCCを、培養開始の13~15日後に採取した抗体と比較して少なくとも65低減する、実施形態195に記載の方法。200.抗ヒトFRA抗体の内在化速度を、培養開始の13~15日後に採取した抗体と比較して増大させる、実施形態193に記載の方法。201.抗ヒトFRA抗体の内在化速度を、培養開始の13~15日後に採取した抗体と比較して少なくとも5増大させる、実施形態193に記載の方法。202.抗ヒトFRA抗体の内在化速度を、培養開始の13~15日後に採取した抗体と比較して少なくとも25増大させる、実施形態193に記載の方法。203.抗ヒトFRA抗体の内在化効率を、培養開始の13~15日後に採取した抗体と比較して低減する、実施形態193に記載の方法。204.抗ヒトFRA抗体の内在化効率を、培養開始の13~15日後に採取した抗体と比較して少なくとも25低減する、実施形態193に記載の方法。205.抗ヒトFRA抗体の内在化効率を、培養開始の13~15日後に採取した抗体と比較して少なくとも50低減する、実施形態193に記載の方法。206.抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養するステップを含み、培養の開始から13日後以前の時点または15日後以後の時点に宿主細胞を採取する方法。207.前記宿主細胞を哺乳動物細胞とする、実施形態193または206に記載の方法。208.前記宿主細胞をGSCHOチャイニーズハムスター卵巣細胞系に由来する組換え細胞とする、実施形態207に記載の方法。209.前記採取する時点が、培養を開始して240時間~312時間後の時点、および培養を開始して360時間~480時間後の時点からなる群より選択される、実施形態193または206に記載の方法。210.前記採取する時点を培養開始の240時間後とする、実施形態209に記載の方法。211.前記採取する時点を培養開始の408時間後とする、実施形態209に記載の方法。212.前記採取する時点を培養開始の480時間後とする、実施形態209に記載の方法。213.抗ヒトFRA抗体が、配列番号1を含む重鎖アミノ酸配列と、配列番号2または配列番号2と99同一な配列を含む軽鎖アミノ酸配列とを含む、実施形態193または206に記載の方法。214.抗ヒトFRA抗体の重鎖および軽鎖を発現するように操作した真核宿主細胞を含む細胞培養物であって、細胞培養条件が、ガラクトースの補充、溶存酸素DOの低減、温度の低下、酪酸ナトリウム、塩化銅、高い容量オスモル濃度、および高CO2からなる群より選択されるパラメータを含む細胞培養物。215.DOレベルを0~約25とする、実施形態214に記載の細胞培養物。216.CO2濃度を約10~約30とする、実施形態214に記載の細胞培養物。217.温度を28°C~約35°Cとする、実施形態214に記載の細胞培養物。218.ガラクトース濃度を0.01g/L~20g/Lとする、実施形態214に記載の細胞培養物。219.酪酸ナトリウムの濃度を0.5mM~10mMとする、実施形態214に記載の細胞培養物。220.塩化銅の濃度を0.01μM~0.5mMとする、実施形態214に記載の細胞培養物。221.細胞培養物の容量オスモル濃度を360~800mOsm/Lとする、実施形態2114に記載の細胞培養物。222.真核宿主細胞をCHO細胞とする、実施形態214に記載の細胞培養物。223.CHO細胞をCHO-K1細胞とする、実施形態222に記載の細胞培養物。224.抗ヒトFRA抗体がIgG1アイソタイプのヒト重鎖定常領域を含む、実施形態214に記載の細胞培養物。225.抗ヒトFRA抗体が配列番号1を含む重鎖アミノ酸配列を含み、配列番号2または配列番号2と99同一な配列を含む軽鎖アミノ酸配列を含む、実施形態214に記載の細胞培養物。226.実施形態214に記載の細胞培養物から単離された宿主細胞。227.実施形態1、5、8、17、30、33、36、45、55、56、59、62、65、72、85、88、91、99、113、116、119、126、139、142、145、148、155、168、171、174、181、206、もしくは230のいずれか1つに記載の方法を介して生成した抗ヒトFRAアルファ抗体、または前記抗体の抗原結合部分。228.実施形態227に記載の抗ヒトFRA抗体と薬学的に許容される担体とを含む組成物。229.さらなる治療剤をさらに含む、実施形態228に記載の組成物。230.ADCCを増大させた抗ヒトFRA抗体を生成する方法であって、抗ヒトFRA抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を第1の温度で培養するステップと、次いで、宿主細胞を第1の温度より低い第2の温度で培養するステップとを含む方法。231.実施形態225に記載の細胞培養物から単離された宿主細胞。232.配列番号1を含む重鎖アミノ酸配列を含み、配列番号2または配列番号2と99同一な配列を含む軽鎖アミノ酸配列を含む、実施形態227に記載の抗ヒトFRAアルファ抗体。233.実施形態232に記載の抗ヒトFRA抗体と薬学的に許容される担体とを含む組成物。本発明は、抗FRA抗体、特に、MORAb-003抗FRAモノクローナル抗体を組換え生成するための特定の細胞培養条件を変化させることにより、この抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを変化させることができ、場合によっては、抗FRA抗体の1または複数の特性を変化させうることの驚くべき発見に部分的に基づく。特に、本発明者らは、糖供給源としてのブドウ糖をガラクトースで置換すること、温度を低下させること、溶存酸素DOレベルを低減すること、CO2レベルを増大させること、CuClもしくは酪酸ナトリウムを培養培地に添加すること、容量オスモル濃度を増大させること、または異なる長さの時間にわたる培養後に抗FRA抗体を採取することにより、抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを変化させることができ、前述の培養条件の各々により中性N結合グリカンのプロファイルが変化することを発見した。すなわち、プロファイルを構成する1または複数の中性グリカンは、本明細書で定義した基準条件下で生成する抗FRA抗体のプロファイル中の前記グリカンの量と比べて高量または低量で存在する。中性N結合グリカンを変化させたMORAb-003抗体などの抗FRAモノクローナル抗体は、pKおよび/またはpDの変化、半減期の変化、可溶性の改善、免疫原性の低減、または副作用の低減が含まれるがこれらに限定されない、1または複数の所望の特性を有しうるため、代替的な治療分子として有用である。本発明者らはさらに、これらの条件のうちのいずれかの下で抗FRA抗体を生成することにより、抗FRA抗体の結合アフィニティー、ADCC、内在化速度、および/または内在化効率が変化することも発見した。したがって、一態様では、本発明は、1または複数の中性グリカンの相対量を、本明細書で定義した基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体と比較して増大または減少させる点で、新規の中性N結合グリカンプロファイルを伴う抗FRA抗体を提供する。本発明は、FRAへの結合の変化典型的には、低減、抗体依存性細胞傷害作用ADCCの変化、ならびに/またはFRA発現細胞における内在化速度および/もしくは内在化効率の変化を伴う抗FRA抗体をさらに提供する。多様な実施形態では、抗FRA抗体が、配列番号1もしくは配列番号5の重鎖アミノ酸配列または少なくとも95同一である配列と、配列番号2もしくは配列番号6もしくは配列番号7の軽鎖アミノ酸配列または少なくとも95同一である配列とを含む。具体的な実施形態では、抗体が、配列番号1の重鎖アミノ酸配列および配列番号2の軽鎖アミノ酸配列と99同一である軽鎖アミノ酸配列、配列番号1の重鎖アミノ酸配列および配列番号6の軽鎖アミノ酸配列、もしくは配列番号5の重鎖アミノ酸配列および配列番号7の軽鎖アミノ酸配列、または上述の配列と少なくとも95同一である配列を含むEbelら、2007年、CancerImmunity、7巻:6頁。一部の実施形態では、抗FRA抗体が、配列番号1または配列番号5と少なくとも96、少なくとも97、少なくとも98、または少なくとも99同一である重鎖アミノ酸配列と、配列番号2、配列番号6、または配列番号7と少なくとも96、少なくとも97、少なくとも98、または少なくとも99同一である軽鎖アミノ酸配列とを有する。一部の実施形態では、抗FRA抗体が、配列番号8のヌクレオチド配列によりコードされる重鎖リーダー配列をコードするヌクレオチドを伴う場合もあり、伴わない場合もあると、配列番号9のヌクレオチド配列によりコードされる軽鎖リーダー配列をコードするヌクレオチドを伴う場合もあり、伴わない場合もあるとを含む。一部の実施形態では、重鎖アミノ酸配列が、C末端のリシンを欠く。多様な実施形態では、本発明の抗FRA抗体が、2006年4月24日、ブダペスト条約に従う条項の下、AmericanTypeCultureCollectionATCC、10801UniversityBlvd.、Manassas、VA20110-2209に、受託番号:PTA-7552で寄託された細胞系を介して生成する抗体のアミノ酸配列、または重鎖C末端のリシンを欠くこのような配列を有する。関連する態様では、本発明は、本発明の抗FRA抗体を含む細胞培養物、このような培養物から単離された細胞、ならびに本発明の抗FRA抗体を含むキットおよび組成物を提供する。別の態様では、本発明は、細胞培養条件を変化させることにより抗FRA抗体を生成する方法であって、変化が、ガラクトースを糖供給源として用いること、温度を低下させること、溶存酸素DOレベルを低減すること、CO2レベルを増大させること、CuClまたは酪酸ナトリウムを培養培地に添加すること、容量オスモル濃度を増大させること、または異なる長さの時間にわたる培養後に抗FRA抗体を採取することから選択される方法と、本方法を介して生成する抗FRA抗体とを提供する。本発明は、抗FRA抗体の中性N結合プロファイルおよび/または1もしくは複数の特性を変化させるか、あるいは所望の中性N結合糖型のプロファイルまたは特性を伴う抗FRA抗体を、抗FRA抗体を発現する宿主細胞を本明細書で記載される変化させた培養条件下で培養することにより生成する方法をさらに提供する。なおさらなる態様では、本発明は、本発明の抗FRA抗体を用いる方法を提供する。一部の実施形態では、抗体を用いて、invitroまたはinvivoにおいて、FRAまたはFRA発現細胞の存在を検出するかまたはこれを定量化する。他の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、単剤で、または1もしくは複数のさらなる治療剤との組合せで治療に用いる。本発明の抗体は、ヒト葉酸受容体アルファFRAに特異的に結合する。本明細書で用いられる、FRA本明細書ではまた、抗FRA抗体とも称するに特異的に結合する抗体は、FRAではないタンパク質にそれほどは結合しない。抗体は、解離定数KDが≦1mM、≦100nM、または≦10nMであるとき、抗原に特異的に結合すると言う。特定の実施形態では、KDが、1pM~500pMである。他の実施形態では、KDが、500pM~1μMの間、1μM~100nMの間、または100mM~10nMの間である。好ましい実施形態では、FRAが、配列番号3に示されるアミノ酸配列または配列番号4のヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列を含むヒトFRAなどのヒトFRAである。本発明の一部の実施形態では、抗FRA抗体が、2本の重鎖と2本の軽鎖とを含む四本鎖抗体また、免疫グロブリンとも称するである。本発明の抗FRA抗体の重鎖は、重鎖可変ドメインVHと重鎖定常領域CHとからなる。軽鎖は、軽鎖可変ドメインVLと軽鎖定常ドメインCLとからなる。本出願の目的では、成熟重鎖可変ドメインおよび成熟軽鎖可変ドメインの各々が、4つのフレームワーク領域FR1、FR2、FR3、およびFR4内に3つの相補性決定領域CDR1、CDR2、およびCDR3を含み、N末端からC末端へと、FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、およびFR4の順に配置されている。本明細書におけるアミノ酸の各ドメインへの割当ては、Kabat、SequencesofProteinsofImmunologicalInterestNationalInstitutesofHealth、Bethesda、Md.1987年および1991年、ChothiaおよびLesk1987年、J.Mol.Biol.、196巻:901~917頁、またはChothiaら、Nature1989年、342巻:878~883頁の定義に従う。本発明の抗体は、ヒトカッパ軽鎖を伴うヒト免疫グロブリンGの亜型1IgG1である。抗体という用語は、文脈に応じて、個別の抗体分子を指す場合もあり、複数の抗体分子を指す場合もある。当業者は、例えば、中性グリカンのプロファイルが、複数の抗体分子に関することを理解するであろう。多様な実施形態では、本発明は、図3に示されるかまたは以下の培養条件の節で記載される中性N結合グリカンのプロファイルのうちのいずれかを有する抗FRA抗体を提供する。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の培養条件下で生成する抗体のプロファイルと比較して、M3N2、NA2、NA2F、MAN5、およびNA2G1Fの量の増大と、NGA2Fの減少とを含む。一部の実施形態では、抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の培養条件下で生成する抗体のプロファイルと比較して、NGA2の量の増大、例えば、NGA2の少なくとも2倍または少なくとも3倍の増大を有する。一部の実施形態では、抗FRA抗体が、約9の非フコシル化糖型を含む。本発明はまた、基準の培養条件下で生成する抗体のプロファイルと比較してNA2、NGA2F、およびMAN5の量の増大と、NA2G1Fの量の減少とを含む中性N結合グリカンのプロファイルを有する抗FRA抗体も提供する。一部の実施形態では、抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の培養条件下で生成する抗体のプロファイルと比較して、M3N2およびNA2の量の増大を含む。一部の実施形態では、抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の培養条件下で生成する抗体のプロファイルと比較して、NA2およびNGA2の量の増大を含む。一部の実施形態では、抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の培養条件下で生成する抗体のプロファイルと比較して、M3N2およびNA2の量の増大と、NA2Fの減少とを含む。一部の実施形態では、抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の培養条件下で生成する抗体のプロファイルと比較して、M3N2F、NA2、およびMAN5の量の増大を含む。一部の実施形態では、抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の培養条件下で生成する抗体のプロファイルと比較して、M3N2、M3N2F、およびNA2の量の増大を含む。このようなプロファイルでは、M3N2、M3N2F、およびMAN5が、少なくとも約2倍以上増大する可能性がある。NA2は、少なくとも約10倍以上増大する可能性がある。NA2Fは、少なくとも約2倍以上増大する可能性がある。NA2Fは、少なくとも約40以上減少する可能性もあり、少なくとも約2倍以上増大する可能性もある。NA2G1Fは、少なくとも約25または30以上減少する可能性があり、NGA2Fは、少なくとも約10または15以上増大する可能性がある。具体的な実施形態では、抗FRAモノクローナル抗体を、MORAb-003モノクローナル抗体とする。MORAb-003とは、配列番号5の重鎖アミノ酸配列と配列番号7の軽鎖アミノ酸配列とを含み、基準の培養条件下で生成し、外部の製造元が供給する抗FRA抗体を指す。MORAb-003抗体の参照基準物質と精製されたFR-αとの間の動態結合定数および定常状態結合定数は、表面プラズモン共鳴分光法により決定されている。オン速度kaは、2.25±0.02M-1秒-1であると決定し、オフ速度kdは、5.02±0.08秒-1であると決定した。定常状態解離定数KDは、2.23nMであると決定した米国特許公開第20050232919号。多様な実施形態では、本発明は、基準の培養条件下で生成した抗FRA抗体と比較して、結合アフィニティーを減少させるか、ADCCを増大もしくは減少させるか、内在化効率を低減するか、または内在化速度を増大させた抗FRA抗体を提供する。本明細書で用いられる中性N結合グリカンは、保存的なグリコシル化部位または対応する位置配列番号5のAsn299において結合させる。本明細書で用いられる抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルは、図1に示される中性グリカン構造を含む。このような構造は、部分的にプロセシングされたグリカンであるM3N2、M3N2F、およびMAN5と、完全にプロセシングされたグリカンであるNGA2G0、NGA2FG0F、NA2G1FG1F、NA2G2、およびNA2FG2Fとを包含する。本出願の目的では、G0とは、ガラクトシル化されていないグリカンを指し、G1とは、モノガラクトシル化グリカンを指し、G2とは、ジガラクトシル化グリカンを指す。本発明の抗体のグリカンプロファイルは、実施例2で記載される通りに決定することができる。略述すると、抗体の重鎖に結合したN結合グリカンは、ペプチジル-N-グリコシダーゼFPNGアーゼFを用いて酵素的に除去し、ゲル濾過クロマトグラフィーを介して精製する。結果として得られるグリカン混合物は、例えば、2-アミノベンザミド2-ABを用いて蛍光標識し、順相HPLCを介して分解する。蛍光標識したグリカンは、蛍光を介して定量化する。分離時に生じるピークによるグリカンの同定は、直列型質量分析による検出を介して達成する。複合体であるN結合グリカンは、酵素的除去の後、任意の適切なフルオロフォア例えば、2-アミノ安息香酸2-AA、2-アミノベンザミド2-AB、2-アミノピリジン2-AP、8-アミノナフタレン-1,3,6-トリスルホン酸ANTS、2-アミノアクリドンAMAC、または9-アミノピレン-1,3,6-トリスルホン酸APTSを用いて標識することもでき、放射性同位元素を用いて標識することもでき、それら自体が他の手段例えば、ビオチンを用いて検出されうる低分子の化学的タグを用いて標識することもできる。次いで、標識されたものであれ、標識されていないものであれ、複合体であるグリカンは、HPLC逆相、順相、アニオン交換、およびゲルベースの電気泳動法またはキャピラリー電気泳動法を含めた多様な方法を介して分離することができ、蛍光法、パルス電流測定法、屈折率法、蒸発光散乱法、または質量分析法を介して計数することができる。本発明の方法によれば、本発明の抗FRA抗体は、抗体を発現する細胞を培養することにより生成する。一部の実施形態では、重鎖、軽鎖、またはこれらの両方をコードする核酸を、発現ベクターへと挿入し、転写制御配列および翻訳制御配列などの発現制御配列に作動可能に連結することができる。作動可能に連結した配列は、対象の遺伝子と隣接する発現制御配列およびトランスまたは遠位で作用して対象の遺伝子を制御する発現制御配列の両方を包含する。本明細書で用いられる発現制御配列という用語は、それらがライゲーションされるコード配列の発現およびプロセシングに影響を及ぼすポリヌクレオチド配列を意味する。発現制御配列には、適切な転写開始配列、終結配列、プロモーター配列、およびエンハンサー配列;スプライシングシグナルおよびポリアデニル化シグナルなどのRNAプロセシングシグナル;細胞質mRNAを安定化させる配列;翻訳効率を増強する配列すなわち、Kozakコンセンサス配列;タンパク質の安定性を増強する配列;および、所望の場合、タンパク質の分泌を増強する配列が含まれうる。このような制御配列の性質は、宿主生物に応じて異なり、真核生物では一般に、このような制御配列が、プロモーター配列および転写終結配列を包含する。制御配列という用語は、少なくとも、それらの存在が発現およびプロセシングに不可欠な全ての構成要素を包含することを意図し、また、それらの存在が有利であるさらなる構成要素、例えば、リーダー配列および融合パートナー配列も包含しうる。発現ベクターには、プラスミド、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルスAAV、EBVに由来するエピソームなどが含まれる。場合によっては、ベクター内の転写制御配列および翻訳制御配列が、抗体遺伝子の転写および翻訳を制御するそれらの意図される機能を果たすように、本発明の抗体、抗体鎖または抗原結合断片をコードする核酸を、ベクターへとライゲーションする。当業者には周知の通り、発現ベクターおよび発現制御配列は、所望の発現レベル、用いられる発現宿主細胞などと適合可能であるように選択する。抗体の軽鎖または断片および抗体の重鎖または断片をコードする核酸は、別個のベクターに挿入することもでき、同じ発現ベクターに挿入することもできる。核酸は、標準的な方法例えば、抗体をコードする核酸複数可およびベクターにおける相補的制限部位のライゲーション、または制限部位が存在しない場合の平滑末端ライゲーションを介して発現ベクターへと挿入する。当技術分野では、発現用の宿主として有用な哺乳動物細胞系が周知であり、これらには、AmericanTypeCultureCollectionATCCから入手可能な多くの不死化細胞系が含まれる。これらには、とりわけ、チャイニーズハムスター卵巣CHO細胞CHO-K1細胞など、NS0細胞、SP2細胞、HEK-293T細胞、NIH-3T3細胞、HeLa細胞、ベビーハムスター腎臓BHK細胞、アフリカミドリザル腎臓細胞COS、ヒト肝細胞がん細胞例えば、HepG2細胞、A549細胞、および他の多数の細胞系が含まれる。特に好ましい細胞系は、発現レベルが高い細胞系を決定することを介して選択する。一実施形態では、細胞を温度感受性の突然変異体の細胞系としない。別の実施形態では、細胞を温度感受性の突然変異体の細胞系とする。一部の実施形態では、宿主細胞をCHO細胞、CHO-K1細胞、またはGSCHO-K1細胞とする。一部の実施形態では、抗体をコードする組換え発現ベクターを哺乳動物宿主細胞へと導入し、宿主細胞における抗体の発現または抗体の宿主細胞を増殖させる培養培地への分泌を可能とするのに十分な期間にわたり宿主細胞を培養することにより抗体を生成する。抗体は、標準的なタンパク質精製法を用いて培養培地から回収することができる。さらに、生成用細胞系からの発現は、多数の公知の技法を用いて増強することができる。例えば、グルタミンシンターゼ遺伝子発現系GS系は、特定の条件下で発現を増強する一般的な手法である。GS系は、参照によりそれらの全体において本明細書に組み込まれる、欧州特許第216846号、同第256055号、同第323997号、および同第338841号との関連で全体的または部分的に論じられている。一態様では、本発明は、多様な細胞培養条件を用いて抗FRA抗体を生成する方法を提供する。本明細書で用いられる基準の培養条件とは、2Lの撹拌タンク型生成用バイオリアクター内のCD-CHOInvitrogen培地中、180rpmで培養した細胞を指す。基準の細胞培養物のpHは、6.9~7.1の範囲内とする。例えば、pHを、7.0とすることができる。基準の細胞培養物のブドウ糖濃度は、1g/L~4g/L、または1g/L~3g/Lとする。基準の細胞培養物の温度は、約36~38°Cとする。例えば、温度を、36.5°Cとすることができる。CO2濃度は、約5とする。細胞培養培地の基準の容量オスモル濃度は、250~350mOsm/Lの範囲内とする。基準の細胞培養培地は、酪酸ナトリウムまたは塩化銅を含有しない。基準の細胞培養培地の溶存酸素分圧DOは、30~100の範囲内とする。例えば、基準の細胞培養培地のDOは、30~40の間とする。基準の細胞培養条件下で培養した抗体の採取時点は、細胞培養を開始して13~15日後、例えば、14日後すなわち、336時間後とすることができ、これは、培養物の生存率が50となる時点であることが予測される。図で記載されるMORAb-003参照基準物質試料、MORAb-003refstd試料、参照基準物質試料は、配列番号5の重鎖アミノ酸配列と配列番号7の軽鎖アミノ酸配列とを含み、既に記載した基準の培養条件下で培養した細胞を介して生成し、外部の製造元が供給したものである。一部の実施形態では、培養条件を、成長期および/または誘導期において変化させる。バッチ培養とは、閉鎖系において増殖させる細胞集団である。バッチ培養における細胞集団の典型的な成長曲線は、誘導期、対数期、定常期、および死滅期を含む。誘導期とは、集団を旧来の成長環境から新規の環境へと移し、細胞を新規の栄養物質供給源に適合させ、RNA、タンパク質、および他の分子を合成させるが、いまだ分裂させはしない、成長周期の第1期を指す。この期間の長さは、培養歴および成長条件に応じて短い場合もあり、長い場合もある。例えば、本発明は、抗FRA抗体を、培養時間の少なくとも一部にわたり、ガラクトースを糖供給源として用いて抗体を発現することが可能な細胞を培養することにより生成する方法を提供する。一部の実施形態では、0日目を接種日とする場合、0日目以降にガラクトースを糖供給源として用いる。他の実施形態では、第1の期間にわたり、ブドウ糖を糖供給源として用いて細胞を培養し、第2の期間にわたり、ガラクトースを糖供給源として用いて細胞を培養する。例えば、本発明の方法によれば、誘導期にブドウ糖を糖供給源として用い、成長期にガラクトースを糖供給源として用いる細胞培養を介して本発明の抗FRA抗体を生成する。一部の実施形態では、細胞を、ガラクトースを糖供給源として用いて、0日目~14日目に、または2~10日目の任意の日に始めて、または好ましくは3日目、4日目、5日目、6日目、もしくは7日目から開始して培養する。上記の方法のうちのいずれかでは、ガラクトース濃度を0.01g/L~20g/Lとすることもでき、好ましくは1g/L~10g/Lとすることもでき、より好ましくは2g/L~4g/Lとすることもできる。一部の実施形態では、ガラクトース濃度を2g/Lとすることができる。本発明によれば、ガラクトースを糖供給源として用いて培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、抗FRA抗体の参照基準物質と比較して、M3N2、NA2、NA2F、MAN5、およびNA2G1Fの増大と、NGA2Fの減少とを含む。一部の実施形態では、ガラクトースを糖供給源として用いて培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB810-10と比較して、M3N2Fの減少、および/またはNA2Fの増大、および/またはNA2G1Fの増大、および/またはNGA2Fの減少を含む。一部の実施形態では、ガラクトースを糖供給源として用いて培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるM3N2F糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB810-10と比較して、少なくとも30低減することができる。一部の実施形態では、ガラクトースを糖供給源として用いて培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるNA2F糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB810-10と比較して、少なくとも2倍に増大させることができる。一部の実施形態では、ガラクトースを糖供給源として用いて培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるNA2G1F糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB810-10と比較して、少なくとも40増大させることができる。一部の実施形態では、ガラクトースを糖供給源として用いて培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるNGA2F糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB810-10と比較して、少なくとも25減少させることができる。一部の実施形態では、ガラクトースを糖供給源として用いて培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、M3N2:M3N2F:NA2:NA2F:MAN5:NGA2:NA2G1F:NGA2Fを、約1:1:1.7:60:20:16:365:370とする比を含む。一部の実施形態では、ガラクトースを糖供給源として用いて培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約0.12のM3N2、0.14のM3N2F、0.2のNA2、7.06のNA2F、2.42のMAN5、1.9のNGA2、43.73のNA2G1F、および44.43のNGA2Fとする。一部の実施形態では、ガラクトースを糖供給源として用いて培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体における中性グリカンのうちの少なくとも6または7を、NA2F糖型とすることができる。一部の実施形態では、ガラクトースを糖供給源として用いて培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約4.64の非フコシル化糖型および95.36のフコシル化糖型とする。本発明は、抗FRA抗体を、抗体を発現することが可能な細胞を培養時間の少なくとも一部にわたり低温で培養することにより生成する方法をさらに提供する。一部の実施形態では、0日目を接種日とする場合、0日目以降に低温で細胞を培養する。他の実施形態では、第1の期間にわたり第1の温度で細胞を培養し、第2の期間にわたり低温で細胞を培養する。例えば、本発明の方法によれば、本発明の抗FRA抗体を、誘導期に第1の温度を用い、成長期に低温を用いる細胞培養を介して生成する。第1の温度を、約36~38°Cとすることができる。低温を、約28~35°C、または約30~33°C、または約30~31°Cとすることができ、約28°C、29°C、30°C、31°C、32°C、33°C、34°C、または35°Cとすることができる。一部の実施形態では、第1の期間にわたり温度を36.5°Cとして細胞を培養し、第2の期間にわたり30°Cで細胞を培養する。細胞を、0日目~14日目に、または2~10日目の任意の日に始めて、または好ましくは3日目、4日目、もしくは5日目から開始して低温で培養することができる。本発明によれば、低温で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、抗FRA抗体の参照基準物質と比較してNGA2の増大を含む。本発明によれば、低温で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB810-10と比較して、NGA2の増大、および/またはNA2G1Fの減少を含む。一部の実施形態では、低温で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB810-10と比較して、非フコシル化糖型の増大を含む。一部の実施形態では、低温で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるNGA2糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB810-10と比較して、少なくとも2倍に増大させることができる。一部の実施形態では、低温で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるNA2G1F糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB810-10と比較して、少なくとも30減少させることができる。一部の実施形態では、低温で培養した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、M3N2:M3N2F:NA2:NA2F:MAN5:NGA2:NA2G1F:NGA2Fを、約1:13:2.5:70:100:350:1050:3500とする比を含む。一部の実施形態では、低温で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約0.02のM3N2、0.25のM3N2F、0.05のNA2、1.36のNA2F、2.04のMAN5、6.98のNGA2、68.52のNA2G1F、および90.92のNGA2Fとする。一部の実施形態では、低温で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体における中性グリカンのうちの少なくとも6または7を、NGA2糖型とすることができる。一部の実施形態では、低温で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体が、約9の非フコシル化糖型を含みうる。一部の実施形態では、低温で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約9.09の非フコシル化糖型および90.92のフコシル化糖型とする。本発明はまた、抗FRA抗体を、抗体を発現することが可能な細胞を培養時間の少なくとも一部にわたり高い容量オスモル濃度で培養することにより生成する方法も提供する。一部の実施形態では、0日目を接種日とする場合、0日目以降に高い容量オスモル濃度で細胞を培養する。他の実施形態では、第1の期間にわたり基準の容量オスモル濃度で細胞を培養し、第2の期間にわたり高い容量オスモル濃度で細胞を培養する。例えば、本発明の方法によれば、本発明の抗FRA抗体を、誘導期に基準の容量オスモル濃度を用い、成長期に高い容量オスモル濃度を用いる細胞培養を介して生成する。基準の容量オスモル濃度を、250~350mOsm/Lの範囲とすることができる。高い容量オスモル濃度を、360~800mOsm/L、または400~650mOsm/Lとすることができる。一部の実施形態では、約450mOsm/L、475mOsm/L、500mOsm/L、525mOsm/L、550mOsm/L、575mOsm/L、600mOsm/L、625mOsm/L、または650mOsm/Lで細胞を培養する。一部の実施形態では、第1の期間にわたり250~350mOsm/Lで細胞を培養し、第2の期間には600mOsm/Lで細胞を培養する。細胞を、0日目~14日目に、または2~10日目の任意の日に始めて、好ましくは3日目~5日目の任意の日に始めて、高い容量オスモル濃度で培養することができる、すなわち、2日目、3日目、4日目、もしくは5日目に始めて、本明細書で記載される高い容量オスモル濃度で細胞を培養することができる。本発明によれば、高い容量オスモル濃度で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、抗FRA抗体の参照基準物質と比較して、NA2、MAN5、およびNGA2Fの増大と、NA2G1Fの減少とを含む。本発明によれば、高浸透で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB810-10と比較して、MAN5の増大、および/またはNA2G1Fの減少、および/またはNGA2Fの増大を含む。一部の実施形態では、高い容量オスモル濃度で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるMAN5糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB810-10と比較して、少なくとも40増大させることができる。一部の実施形態では、高い容量オスモル濃度で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるNA2G1F糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB810-10と比較して、少なくとも30減少させることができる。一部の実施形態では、高い容量オスモル濃度で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるNGA2F糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB810-10と比較して、少なくとも15増大させることができる。一部の実施形態では、高い容量オスモル濃度で培養した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、M3N2:M3N2F:NA2:NA2F:MAN5:NGA2:NA2G1F:NGA2Fを、約1:3:3:15:43:33:250:900とする比を含む。一部の実施形態では、高い容量オスモル濃度で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約0.08のM3N2、0.25のM3N2F、0.23のNA2、1.23のNA2F、3.4のMAN5、2.63のNGA2、19.57のNA2G1F、および72.6のNGA2Fとする。一部の実施形態では、高い容量オスモル濃度で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体における中性グリカンのうちの少なくとも3または4を、MAN5糖型とすることができる。一部の実施形態では、高い容量オスモル濃度で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約6.34の非フコシル化糖型および93.65のフコシル化糖型とする。本発明は、抗FRA抗体を、抗体を発現することが可能な細胞を培養時間の少なくとも一部にわたり酪酸ナトリウムの存在下で培養することにより生成する方法をさらに提供する。一部の実施形態では、0日目を接種日とする場合、0日目以降に酪酸ナトリウムの存在下で細胞を培養する。他の実施形態では、第1の期間にわたり酪酸ナトリウムの非存在下で細胞を培養し、第2の期間にわたり酪酸ナトリウムの存在下で細胞を培養する。例えば、本発明の方法によれば、本発明の抗FRA抗体を、誘導期に酪酸ナトリウムの非存在下にあり、成長期に酪酸ナトリウムの存在下にある細胞培養を介して生成する。一部の実施形態では、酪酸ナトリウムを、0.01mM~90mM、または0.01mM~16mMの濃度で用いることができる。一部の実施形態では、酪酸ナトリウムを、0.5mMまたは10mMの濃度で用いることができる。一部の実施形態では、酪酸ナトリウムを、培養を開始して6日後に添加する。細胞を、0日目~14日目に、または2~10日目の任意の日に始めて、好ましくは3日目、4日目、5日目、6日目、もしくは7日目から開始して、酪酸ナトリウムの存在下で培養することができる。本発明によれば、酪酸ナトリウムの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、抗FRA抗体の参照基準物質と比較して、M3N2およびNA2の増大を含む。一部の実施形態では、酪酸ナトリウムの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、MAN5の減少を含む。他の実施形態では、酪酸ナトリウムの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、M3N2の減少、および/またはM3N2Fの増大、および/またはNA2の減少、および/またはMAN5の増大を含む。一部の実施形態では、酪酸ナトリウムの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるMAN5糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも25減少させることができる。一部の実施形態では、酪酸ナトリウムの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるMAN5糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも30増大させることができる。一部の実施形態では、酪酸ナトリウムの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるM3N2糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも75減少させることができる。一部の実施形態では、酪酸ナトリウムの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるM3N2F糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも70増大させることができる。一部の実施形態では、酪酸ナトリウムの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるNA2糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも75減少させることができる。一部の実施形態では、酪酸ナトリウムの存在下で培養した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、M3N2:M3N2F:NA2:NA2F:MAN5:NGA2:NA2G1F:NGA2Fを、約1:1.7:3:18:16:23:200:450とする比を含む。他の実施形態では、酪酸ナトリウムの存在下で培養した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、M3N2:M3N2F:NA2:NA2F:MAN5:NGA2:NA2G1F:NGA2Fを、約1:8:3:40:80:55:500:1500とする比を含む。一部の実施形態では、酪酸ナトリウムの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約0.14のM3N2、0.24のM3N2F、0.47のNA2、2.49のNA2F、2.19のMAN5、3.26のNGA2、28.66のNA2G1F、および62.55のNGA2Fとする。一部の実施形態では、酪酸ナトリウムの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約0.05のM3N2、0.4のM3N2F、0.13のNA2、1.83のNA2F、4.11のMAN5、2.77のNGA2、25.33のNA2G1F、および65.38のNGA2Fとする。一部の実施形態では、酪酸ナトリウムの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体における中性グリカンのうちの少なくとも4または5を、MAN5糖型とすることができる。一部の実施形態では、酪酸ナトリウムの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約6.06の非フコシル化糖型および93.94のフコシル化糖型とする。一部の実施形態では、酪酸ナトリウムの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約7.06の非フコシル化糖型および92.94のフコシル化糖型とする。本発明は、抗FRA抗体を、抗体を発現することが可能な細胞を培養時間の少なくとも一部にわたり低溶存酸素分圧DOで培養することにより生成する方法をさらに提供する。一部の実施形態では、0日目を接種日とする場合、0日目以降に低DOで細胞を培養する。他の実施形態では、第1の期間にわたり基準のDOで細胞を培養し、第2の期間にわたり低DOで細胞を培養する。例えば、本発明の方法によれば、本発明の抗FRA抗体を、誘導期に基準のDOを用い、成長期に低DOを用いる細胞培養を介して生成する。基準のDOを、30~100の範囲とすることができる。例えば、基準の細胞培養培地のDOを、30~40の間とすることができる。低DOを、0~25、または5~25、好ましくは約5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、または15など、5~20、5~15、5~10のDOとすることができる。一部の実施形態では、第1の期間にわたりDO分圧を30として細胞を培養し、第2の期間にはDO分圧を5として細胞を培養する。細胞を、2日目~10日目の任意の日に始めて、好ましくは3日目、4日目、5日目、6日目、もしくは7日目など、3日目~7日目に始めて、低DOで培養することができる。本発明によれば、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成する抗FRA抗体と比較して、NA2およびNGA2の増大を含む。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成する抗FRA抗体と比較して、NA2およびM3N2の増大を含む。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較してM3N2の減少、および/またはMAN5の減少、および/またはNGA2の増大、および/またはNA2G1Fの増大、および/またはNGA2Fの減少を含む。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して非フコシル化糖型の増大を含む。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB859-25と比較してM3N2の減少を含む。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるM3N2糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも95減少させることができる。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるMAN5糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも25減少させることができる。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるNGA2糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも2倍に増大させることができる。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体における非フコシル化糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも40増大させることができる。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるNA2G1F糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも20増大させることができる。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるNGA2F糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも15減少させることができる。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるM3N2糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB859-25と比較して、少なくとも80減少させることができる。一部の実施形態では、低DOで培養した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、M3N2:M3N2F:NA2:NA2F:MAN5:NGA2:NA2G1F:NGA2Fを、約1:20:50:280:220:650:3200:5500とする比を含む。他の実施形態では、低DOで培養した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、M3N2:M3N2F:NA2:NA2F:MAN5:NGA2:NA2G1F:NGA2Fを、約1:8:30:40:55:80:550:1800とする比を含む。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約0.01のM3N2、0.22のM3N2F、0.48のNA2、2.8のNA2F、2.22のMAN5、6.53のNGA2、31.98のNA2G1F、および55.75のNGA2Fとする。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約0.04のM3N2、0.31のM3N2F、0.3のNA2、1.59のNA2F、2.23のMAN5、3.17のNGA2、21.9のNA2G1F、および70.46のNGA2Fとする。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体における中性グリカンのうちの少なくとも6または7を、NGA2糖型とすることができる。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体が、約9または10の非フコシル化糖型を含みうる。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約9.24の非フコシル化糖型および90.75のフコシル化糖型とする。一部の実施形態では、低DOで培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約5.74の非フコシル化糖型および94.26のフコシル化糖型とする。本発明はまた、抗FRA抗体を、抗体を発現することが可能な細胞を培養時間の少なくとも一部にわたり高CO2濃度で培養することにより生成する方法も提供する。一部の実施形態では、0日目を接種日とする場合、0日目以降に高CO2濃度で細胞を培養する。CO2濃度は、誘導期後に増大させることが好ましい。他の実施形態では、第1の期間にわたり基準のCO2濃度で細胞を培養し、第2の期間にわたり高CO2濃度で細胞を培養する。例えば、本発明の方法によれば、本発明の抗FRA抗体を、誘導期に基準のCO2濃度を用い、成長期に高CO2濃度を用いる細胞培養を介して生成する。基準のCO2濃度を、約5とすることができる。高CO2濃度を、10~30、または10~20、すなわち、約10、約11、約12、約13、約14、約15、約16、約17、約18、約19、約20、約21、約22、約23、約24、約25、約26、約27、約28、約29または約30とすることができる。一部の実施形態では、第1の期間にわたりCO2濃度を約5として細胞を培養し、第2の期間にはCO2濃度を最大20として細胞を培養する。細胞を、2日目~10日目の任意の日に始めて、すなわち、2日目、3日目、4日目、5日目、6日目、7日目、8日目、9日目、または10日目に始めて、高CO2濃度で培養することができる。本発明によれば、高CO2濃度で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、抗FRA抗体の参照基準物質と比較して、M3N2およびNA2の増大とNA2Fの減少とを含む。本発明によれば、高CO2濃度で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較してNA2の減少、および/またはMAN5の減少を含む。一部の実施形態では、高CO2濃度で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるNA2糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも60減少させることができる。一部の実施形態では、高CO2濃度で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるMAN5糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも40減少させることができる。一部の実施形態では、高CO2濃度で培養した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、M3N2:M3N2F:NA2:NA2F:MAN5:NGA2:NA2G1F:NGA2Fを、約1:1.5:1:7:8:16:100:400とする比を含む。一部の実施形態では、高CO2濃度で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約0.19のM3N2、0.27のM3N2F、0.23のNA2、1.34のNA2F、1.61のMAN5、3.04のNGA2、19.51のNA2G1F、および73.81のNGA2Fとする。一部の実施形態では、高CO2濃度で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約5.07の非フコシル化糖型および94.93のフコシル化糖型とする。本発明は、抗FRA抗体を、抗体を発現することが可能な細胞を培養時間の少なくとも一部にわたり塩化銅CuClの存在下で培養することにより生成する方法をさらに提供する。一部の実施形態では、0日目を接種日とする場合、0日目以降にCuClの存在下で細胞を培養する。他の実施形態では、第1の期間にわたりCuClの非存在下で細胞を培養し、第2の期間にわたりCuClの存在下で細胞を培養する。例えば、本発明の方法によれば、本発明の抗FRA抗体を、誘導期にCuClの非存在下にあり、成長期にCuClの存在下にある細胞培養を介して生成する。CuClを、0.01μM~0.5mM、または0.01mM~0.5mMの任意の濃度で用いることができる。一部の実施形態では、CuClを、0.5mMの濃度で用いる。一部の実施形態では、CuClを、培養を開始して0日後~14日後の任意の日に始めて添加することができる。一部の実施形態では、CuClを、培養を開始して6日後に添加する。本発明によれば、CuClの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、抗FRA抗体の参照基準物質と比較して、M3N2、M3N2F、およびNA2の増大を含む。本発明によれば、CuClの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、M3N2の増大、および/またはM3N2Fの増大、および/またはNA2の減少、および/またはMAN5の減少、および/またはNA2G1Fの増大、および/またはNGA2Fの減少を含む。一部の実施形態では、CuClの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるM3N2糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも50増大させることができる。一部の実施形態では、CuClの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるM3N2F糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも60増大させることができる。一部の実施形態では、CuClの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるNA2糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも75減少させることができる。一部の実施形態では、CuClの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるMAN5糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも25減少させることができる。一部の実施形態では、CuClの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるNA2G1F糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも30増大させることができる。一部の実施形態では、CuClの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるNGA2F糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB809-65と比較して、少なくとも10減少させることができる。一部の実施形態では、CuClの存在下で培養した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、M3N2:M3N2F:NA2:NA2F:MAN5:NGA2:NA2G1F:NGA2Fを、約2:2:1:17:14:25:220:400とする比を含む。一部の実施形態では、CuClの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約0.34のM3N2、0.37のM3N2F、0.15のNA2、2.6のNA2F、2.16のMAN5、3.88のNGA2、33.03のNA2G1F、および57.46のNGA2Fとする。一部の実施形態では、CuClの存在下で培養した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約6.53の非フコシル化糖型および93.46のフコシル化糖型とする。本発明によれば、抗FRA抗体は、細胞培養を開始して約10日後240時間後、13日後、14日後336時間後、15日後、17日後408時間後、または20日後480時間後に採取することができる。本発明によれば、10日後に採取した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、抗FRA抗体の参照基準物質と比較して、M3N2およびNA2の増大を含む。本発明によれば、17日後に採取した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成する抗FRA抗体と比較して、M3N2、NA2およびMAN5の増大を含む。本発明によれば、20日後に採取した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成する抗FRA抗体と比較して、M3N2およびNA2の増大を含む。本発明によれば、10日後に採取した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB859-25と比較して、M3N2の減少、および/またはM3N2Fの減少および/またはMAN5の減少を含む。一部の実施形態では、10日後に採取した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB859-25と比較して、非フコシル化糖型の減少を含む。一部の実施形態では、10日後に採取した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるM3N2糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB859-25と比較して、少なくとも80減少させることができる。一部の実施形態では、10日後に採取した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるM3N2F糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB859-25と比較して、少なくとも25減少させることができる。一部の実施形態では、10日後に採取した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるMAN5糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB859-25と比較して、少なくとも50減少させることができる。一部の実施形態では、10日後に採取した細胞を介して生成する抗FRA抗体における非フコシル化糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB859-25と比較して、少なくとも25減少させることができる。一部の実施形態では、10日後に採取した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、M3N2:M3N2F:NA2:NA2F:MAN5:NGA2:NA2G1F:NGA2Fを、約1:6:8:40:30:70:550:1800とする比を含む。一部の実施形態では、10日後に採取した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約0.04のM3N2、0.24のM3N2F、0.31のNA2、1.48のNA2F、1.28のMAN5、2.64のNGA2、22.33のNA2G1F、および71.68のNGA2Fとする。一部の実施形態では、10日後に採取した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約4.27の非フコシル化糖型および95.73のフコシル化糖型とする。本発明によれば、17日後に採取した細胞を介して生成する抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB859-25と比較してNA2の増大を含む。一部の実施形態では、17日後に採取した細胞を介して生成する抗FRA抗体におけるNA2糖型の量を、基準の細胞培養条件下で生成した抗FRA抗体ロット番号:NB859-25と比較して、少なくとも50増大させることができる。一部の実施形態では、17日後に採取した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、M3N2:M3N2F:NA2:NA2F:MAN5:NGA2:NA2G1F:NGA2Fを、約1:2:3:13:20:18:170:440とする比を含む。一部の実施形態では、17日後に採取した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約0.15のM3N2、0.34のM3N2F、0.51のNA2、1.9のNA2F、3.16のMAN5、2.77のNGA2、24.87のNA2G1F、および66.3のNGA2Fとする。一部の実施形態では、17日後に採取した細胞を介して生成する抗FRA抗体における中性グリカンのうちの少なくとも3または4を、MAN5糖型とすることができる。一部の実施形態では、17日後に採取した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約6.59の非フコシル化糖型および93.41のフコシル化糖型とする。一部の実施形態では、20日後に採取した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルが、M3N2:M3N2F:NA2:NA2F:MAN5:NGA2:NA2G1F:NGA2Fを、約1:1.8:2.5:10:19:17:140:430とする比を含む。一部の実施形態では、20日後に採取した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約0.16のM3N2、0.29のM3N2F、0.4のNA2、1.66のNA2F、2.96のMAN5、2.64のNGA2、22.43のNA2G1F、および69.45のNGA2Fとする。一部の実施形態では、20日後に採取した抗FRA抗体の中性N結合グリカンのプロファイルを、約6.16の非フコシル化糖型および93.83のフコシル化糖型とする。本発明は、上記の条件のうちの任意の1または複数を用いて抗FRA抗体を生成する方法を包含する。一実施形態では、本発明の抗FRA抗体が、抗FRAの参照基準物質と比べてヒトFRAに対する結合アフィニティーを変化させている。一部の実施形態では、結合アフィニティーを、MORAb-003参照基準物質と比較して低減することができ、かつ、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成する抗体陽性対照と比較して低減することができる。このような抗体は、本明細書で記載される通り、ガラクトースを糖供給源として用いて、低温で、高い容量オスモル濃度で、酪酸ナトリウムの存在下で、低DOで、高CO2濃度で、塩化銅の存在下で、抗FRA抗体を発現する宿主細胞を培養し、または培養を開始して10、17、もしくは20日後に抗FRA抗体を発現する細胞を採取することにより生成することができる。ガラクトースを糖供給源として用いる実施形態では、2g/Lのガラクトースを、培養を開始して5日後に添加することができる。低温を用いる実施形態では、培養温度を、培養を開始して5日後に36.5°Cから30°Cへとシフトすることができる。容量オスモル濃度の増大を用いる実施形態では、培養を開始して7日後にNaClを添加することにより、培養物の容量オスモル濃度を600mOsm/Lへと増大させることができる。溶存酸素分圧の低下DOを用いる実施形態では、DOを、培養を開始して6日後に30から5へと変化させることができる。酪酸ナトリウムを用いる実施形態では、0.5mMまたは10mMの酪酸ナトリウムを、培養を開始して6日後に添加することができる。塩化銅を用いる実施形態では、0.5mMの塩化銅を、培養を開始して6日後に添加することができる。他の実施形態では、培地中のCO2濃度を、培養を開始して5日後に20へと増大させた。前出の実施形態のうちのいずれかでは、培養物が、配列番号1もしくは配列番号5の重鎖アミノ酸配列または少なくとも95同一である配列、および配列番号2もしくは配列番号6もしくは配列番号7の軽鎖アミノ酸配列または少なくとも95同一である配列をコードする核酸を含むCHO細胞、例えば、CHO-K1細胞からなることが可能である。特に、細胞は、配列番号1の重鎖アミノ酸配列および配列番号2の軽鎖アミノ酸配列と99同一である軽鎖アミノ酸配列、配列番号1の重鎖アミノ酸配列および配列番号6の軽鎖アミノ酸配列、もしくは配列番号5の重鎖アミノ酸配列および配列番号7の軽鎖アミノ酸配列、または上述の配列と少なくとも95同一である配列をコードする核酸を含みうる。一部の実施形態では、重鎖をコードする核酸が、リーダー配列をコードするヌクレオチドを伴う場合もあり、伴わない場合もある、配列番号8のヌクレオチド配列を含み、軽鎖をコードする核酸が、リーダー配列をコードするヌクレオチドを伴う場合もあり、伴わない場合もある、配列番号9のヌクレオチド配列を含む。多様な実施形態では、抗FRA抗体が、配列番号1もしくは配列番号5の重鎖アミノ酸配列または少なくとも95同一である配列と、配列番号2もしくは配列番号6もしくは配列番号7の軽鎖アミノ酸配列または少なくとも95同一である配列とを含む。具体的な実施形態では、抗体が、配列番号1の重鎖アミノ酸配列および配列番号2の軽鎖アミノ酸配列と99同一である軽鎖アミノ酸配列、配列番号1の重鎖アミノ酸配列および配列番号6の軽鎖アミノ酸配列、もしくは配列番号5の重鎖アミノ酸配列および配列番号7の軽鎖アミノ酸配列、または上述の配列と少なくとも95同一である配列を含む。抗FRA抗体の結合アフィニティーは、ELISA、RIA、フローサイトメトリー、またはBIACORE登録商標などの表面プラズモン共鳴により測定することができる。本明細書で用いられる表面プラズモン共鳴という用語とは、例えば、BIACORE登録商標システムPharmaciaBiosensorAB、Uppsala、Sweden、およびPiscataway、N.J.を用いるバイオセンサーマトリックス内のタンパク質濃度の変化を検出することにより、リアルタイムの生体特異性の相互作用の解析を可能とする光学現象を指す。さらなる説明については、JonssonU.ら、Ann.Biol.Clin.、51巻:19~26頁1993年;JonssonU.ら、Biotechniques、11巻:620~627頁1991年;JonssonB.ら、J.Mol.Recognit.、8巻:125~131頁1995年;およびJohnssonB.ら、Anal.Biochem.、198巻:268~277頁1991年を参照されたい。抗FRA抗体の結合アフィニティーは、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成する抗FRA抗体と比べて、少なくとも5、少なくとも10、少なくとも15、少なくとも20、少なくとも25、少なくとも30、少なくとも35、少なくとも40、少なくとも45、少なくとも50、少なくとも55、少なくとも60、少なくとも65、少なくとも70、少なくとも75、少なくとも80、少なくとも85、少なくとも90、または少なくとも95低減することができる。多様な実施形態では、ヒトFRAへの結合を低減した本発明の抗FRA抗体が、配列番号1もしくは配列番号5の重鎖アミノ酸配列または少なくとも95同一である配列と、配列番号2もしくは配列番号6もしくは配列番号7の軽鎖アミノ酸配列または少なくとも95同一である配列とを含む。特に、抗体は、配列番号1の重鎖アミノ酸配列および配列番号2の軽鎖アミノ酸配列と99同一である軽鎖アミノ酸配列、配列番号1の重鎖アミノ酸配列および配列番号6の軽鎖アミノ酸配列、もしくは配列番号5の重鎖アミノ酸配列および配列番号7の軽鎖アミノ酸配列、または上述の配列と少なくとも95同一である配列を含む。ヒトFRAに対する結合アフィニティーを低減した抗FRAモノクローナル抗体は、がんを処置するのに有用である。理論により拘束されることなく述べると、結合アフィニティーの低減は、内部腫瘍塊のターゲティングを可能とするように、腫瘍へのより深い浸透を可能とすることができる。Adamsら、HighAffinityRestrictstheLocalizationandTumorPenetrationofSingle-ChainFvAntibodyMolecules、CancerRes、61巻:4750~4755頁2001年6月15日を参照されたい。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体の抗体依存性細胞傷害作用ADCCを、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成する抗FRA抗体と比べて変化させることができる。一部の実施形態では、ADCCを、抗FRA抗体の参照基準物質と比較して増大させる。一部の実施形態では、変化させた培養条件下における培養を介して生成する抗体もまた、基準条件下で生成する抗体陽性対照と比較してADCCを増大させる。他の実施形態では、ADCCを、陽性対照と比較して増大させるが、抗体の参照基準物質と比較して低減する。さらに他の実施形態では、ADCCを、陽性対照および抗体の参照基準物質と比較して低減する。ADCCを増大させた抗FRAモノクローナル抗体は、作用方式を、FRA発現標的細胞に対する免疫エフェクター機能を誘発すること、例えば、FRA発現細胞を死滅させることが所望される疾患および状態を処置することとする療法に有用である。ADCCを低減させた抗FRAモノクローナル抗体は、作用方式を、抗体をターゲティング剤として用いて、細胞傷害性のペイロードを標的細胞に送達することとする療法において有用である。理論により拘束されることなく述べると、ADCC活性を低減して抗体コンジュゲートの局所濃度ならびに抗体の内在化効率を最大化することが所望されうる。ADCCに必要であるように、抗体が免疫エフェクター細胞と相互作用すれば、細胞表面における抗体コンジュゲートのアベイラビリティーが低減され、抗体コンジュゲートの有効性が減少することが予測されるであろう。本明細書で用いられるADCCとは、抗体の免疫エフェクター活性である。ADCCは、細胞溶解および/またはFRA発現標的細胞の死滅をもたらす、細胞傷害性T細胞、ナチュラルキラーNK細胞、またはマクロファージが含まれるがこれらに限定されないエフェクター細胞におけるFc受容体によって媒介されうる。本発明の抗FRA抗体のADCCは、当技術分野において公知である標準的なアッセイ例えば、参照によりその全体において組み込まれる、米国特許出願公開第2006/0239911号を参照されたいを用いて測定することができる。例えば、FRA発現細胞は、多様な濃度の抗FRA抗体または抗体なしなどの陰性対照もしくは対照Igおよび末梢血単核細胞PBMCなどの活性化したエフェクター細胞に曝露することができる。ADCCは、FRA発現細胞による細胞溶解時に生じる乳酸デヒドロゲナーゼLDH放出を介してモニタリングすることができる。LDHの活性は、分光光度アッセイを介して測定することができる。ADCCはまた、FRA発現細胞をカルボキシフルオレセインジアセテートスクシンイミジルエステルCFDASEで標識することによっても測定することができる。次いで、標識された細胞を、抗FRA抗体およびPBMCに由来する標識されていないエフェクター細胞の希釈液と混合する。インキュベーション後、細胞集団を、フローサイトメトリーにより、残存する標識されたFRA発現生細胞について評価する。多様な実施形態では、本発明の抗FRA抗体は、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成する抗FRA抗体すなわち、抗体の参照基準物質および/または陽性対照と関連して生じるADCCより少なくとも5、少なくとも10、少なくとも15、少なくとも20、少なくとも25、少なくとも30、少なくとも35、少なくとも40、少なくとも45、少なくとも50、少なくとも55、少なくとも60、少なくとも65、少なくとも70、少なくとも75、少なくとも80、少なくとも85、少なくとも90、または少なくとも95高度なADCCを誘発しうる。他の実施形態では、本発明の抗FRA抗体は、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成する抗FRA抗体と関連して生じるADCCより少なくとも5、少なくとも10、少なくとも15、少なくとも20、少なくとも25、少なくとも30、少なくとも35、少なくとも40、少なくとも45、少なくとも50、少なくとも55、少なくとも60、少なくとも65、少なくとも70、少なくとも75、少なくとも80、少なくとも85、少なくとも90、または少なくとも95低度なADCCを誘発しうる。本発明の方法によれば、本明細書で記載される通り、抗体を発現する宿主細胞を低温または低DOで培養することにより、抗FRA抗体のADCCを増大させることができる。一部の実施形態では、培養を開始して5日後に、低温を36.5°Cから30°Cへとシフトすることができる。一部の実施形態では、培養を開始して6日後に、DOを30から5へと変化させることができる。他の方法によれば、培養の開始から13日後以前または15日後以降に、抗体を培養物から採取することにより、ADCCを減少させることができる。前出の実施形態のうちのいずれかでは、培養物が、配列番号1もしくは配列番号5の重鎖アミノ酸配列または少なくとも95同一である配列、および配列番号2もしくは配列番号6もしくは配列番号7の軽鎖アミノ酸配列または少なくとも95同一である配列をコードする核酸を含むCHO細胞、例えば、CHO-K1細胞からなることが可能である。特に、細胞は、配列番号1の重鎖アミノ酸配列および配列番号2の軽鎖アミノ酸配列と99同一である軽鎖アミノ酸配列、配列番号1の重鎖アミノ酸配列および配列番号6の軽鎖アミノ酸配列、もしくは配列番号5の重鎖アミノ酸配列および配列番号7の軽鎖アミノ酸配列、または上述の配列と少なくとも95同一である配列をコードする核酸を含みうる。一部の実施形態では、重鎖をコードする核酸が、リーダー配列をコードするヌクレオチドを伴う場合もあり、伴わない場合もある、配列番号8のヌクレオチド配列を含み、軽鎖をコードする核酸が、リーダー配列をコードするヌクレオチドを伴う場合もあり、伴わない場合もある、配列番号9のヌクレオチド配列を含む。本発明によれば、ADCCの増大は、抗FRA抗体におけるNGA2G0グリカンまたは非フコシル化グリカンの量の増大と相関し、抗FRA抗体におけるM3N2Fグリカンの量と逆相関する。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体が、細胞表面においてFRAに結合すると、細胞へと内在化する。このような内在化抗体は、抗毒素、放射性核種、または細胞傷害剤および細胞増殖抑制剤などの化学療法剤にコンジュゲートすることができる。一実施形態では、本発明の抗FRA抗体の内在化効率または内在化速度を、基準の培養条件下で生成する抗体と比べて変化させることができる。この文脈では、内在化効率が、抗FRA抗体が標的細胞の内部に保持されうる能力を指すのに対し、内在化速度は、抗FRA抗体が標的細胞の細胞膜を透過しうる速度を指す。当技術分野で公知の標準的なアッセイを用いてFRA発現細胞における本発明の抗FRA抗体の内在化をモニタリングすることができる例えば、参照によりその全体において組み込まれる、米国特許出願公開第2006/0239911号を参照されたい。例えば、Hum-ZAPアッセイAdvancedTargetingSystems、SanDiego、CA、USAなどの二次抗毒素を用いて本発明の抗FRA抗体の内在化をモニタリングすることができる。二次抗毒素とは、ヤギ抗ヒトIgGおよびリボソーム不活化タンパク質であるサポリンなど、二次抗体のコンジュゲートである。このような二次抗毒素は、それらが本発明の抗FRA抗体に結合するように選択することができる。抗FRA抗体が内在化されると、サポリンがタンパク質の合成を阻害し、細胞の死滅を引き起こす。本発明の抗FRA抗体および二次抗毒素または陰性対照に曝露したFRA発現細胞の細胞生存率は、分光分析を介して生細胞数を読み取る細胞生存率アッセイなど、標準的な細胞生存率アッセイにより測定することができる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体が、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成する抗FRA抗体より、少なくとも5、少なくとも10、少なくとも20、少なくとも30、少なくとも40、少なくとも50、少なくとも60、少なくとも70、少なくとも80、少なくとも90、少なくとも99、または少なくとも99.9高度な内在化速度を呈示しうる。内在化速度を増大させた抗FRAモノクローナル抗体は、例えば、迅速な内在化が良好な薬力学的特性および潜在的に低頻度または低用量の投与と等価でありうる抗体コンジュゲートに有用である。加えて、抗体-抗原複合体を内在化させることにより細胞表面から抗原を除去することが所望される療法では、内在化速度を速めれば、抗原の細胞表面からの除去の効率を増大させることが予測されるであろう。例えば、がん細胞の成長に関与するFRA媒介性シグナル伝達経路を標的とする療法では、抗FRA抗体が、内在化を介して受容体を細胞表面から除去することにより、受容体のシグナル伝達を低減する。他の実施形態では、本発明の抗FRA抗体が、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成する抗FRA抗体より少なくとも5、少なくとも10、少なくとも15、少なくとも20、少なくとも25、少なくとも30、少なくとも35、少なくとも40、少なくとも45、少なくとも50、少なくとも55、少なくとも60、少なくとも65、少なくとも70、少なくとも75、少なくとも80、少なくとも85、少なくとも90、または少なくとも95低度な内在化速度を呈示する。内在化速度を低減した抗FRAモノクローナル抗体は、治療作用方式が細胞内機構およびエフェクター機能の両方を伴う場合に有用でありうる。理論により拘束されることなく述べると、内在化が緩徐な抗FRA抗体は、細胞表面に滞留し、ADCCおよびCDCを含めたエフェクター活性の機会を増大させる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体の最大半量の内在化定常状態を、約57分間または58分間とすることができる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体の最大半量の内在化定常状態を、約36分間、37分間、41分間、42分間、45分間、または46分間とする。最大半量の内在化定常状態は、FACS解析を含めた、本明細書で記載される内在化アッセイにより決定することができる。一実施形態では、本発明の抗FRA抗体が、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成する抗FRA抗体の内在化効率と比較して、内在化効率の低減を呈示しうる。内在化効率を低減した抗FRA抗体は、抗体の免疫系へのアベイラビリティーを増大させるのに有用であり、ADCCまたは補体依存性細胞傷害作用CDCをさらに強化する。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体が、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成する抗FRA抗体より少なくとも5、少なくとも10、少なくとも15、少なくとも20、少なくとも25、少なくとも30、少なくとも35、少なくとも40、少なくとも45、少なくとも50、少なくとも55、少なくとも60、少なくとも65、少なくとも70、少なくとも75、少なくとも80、少なくとも85、少なくとも90、または少なくとも95低度な内在化効率を呈示しうる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体の内在化IC50を、1632ng/mLまたは990ng/mLとすることができる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体の内在化IC50を、1632ng/mLまたは990ng/mLとする。IC50およびEC50は、本明細書で記載される内在化アッセイにより決定することができる。本明細書で記載される通り、内在化速度は、抗FRA抗体を発現する宿主細胞を低DOで培養することにより増大させることもでき、抗FRA抗体を培養を開始して17または20日後に採取することにより増大させることもできる。一部の実施形態では、培養を開始して6日後に、DOを30から5へと変化させることができる。前出の実施形態のうちのいずれかでは、培養物が、配列番号1もしくは配列番号5の重鎖アミノ酸配列または少なくとも95同一である配列、および配列番号2もしくは配列番号6もしくは配列番号7の軽鎖アミノ酸配列または少なくとも95同一である配列をコードする核酸を含むCHO細胞、例えば、CHO-K1細胞からなることが可能である。特に、細胞は、配列番号1の重鎖アミノ酸配列および配列番号2の軽鎖アミノ酸配列と99同一である軽鎖アミノ酸配列、配列番号1の重鎖アミノ酸配列および配列番号6の軽鎖アミノ酸配列、もしくは配列番号5の重鎖アミノ酸配列および配列番号7の軽鎖アミノ酸配列、または上述の配列と少なくとも95同一である配列をコードする核酸を含みうる。一部の実施形態では、重鎖をコードする核酸が、リーダー配列をコードするヌクレオチドを伴う場合もあり、伴わない場合もある、配列番号8のヌクレオチド配列を含み、軽鎖をコードする核酸が、リーダー配列をコードするヌクレオチドを伴う場合もあり、伴わない場合もある、配列番号9のヌクレオチド配列を含む。医薬組成物さらなる態様では、本発明は、本発明の抗FRA抗体、特に、本明細書で記載される特徴の変化のうちの1または複数を伴うMORAb-003抗体と、薬学的に許容される担体または媒体とを含む組成物を提供する。薬学的に許容される担体とは、生理的に適合性である溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などでありうる。単に例示を目的として述べると、薬学的に許容される担体の一部の例は、水、生理食塩液、リン酸緩衝生理食塩液、デキストロース、グリセロール、エタノールなどのほか、これらの組合せである。多くの場合、組成物中に等張剤、例えば、糖、マンニトール、ソルビトールなどの多価アルコール、または塩化ナトリウムを組み入れることが好ましいであろう。薬学的に許容される物質のさらなる例は、抗体の保管寿命または有効性を増強する保湿剤または乳化剤、防腐剤または緩衝剤など、保湿剤または少量の補助物質である。本発明の抗FRA抗体を含む組成物は、被験体への投与に適する任意の形態、例えば、溶液例えば、注射溶液および注入溶液、分散液または懸濁液、エアゾール、錠剤、丸薬、粉末、リポソーム、および座薬など、液体剤形、半固体剤形、および固体剤形でありうる。当業者が理解する通り、形態は、意図される投与方式および治療適用に依存する。一部の実施形態では、本発明の抗FRA組成物が注射溶液または注入溶液の形態であり、例えば、組成物は、ヒトの受動的免疫化に用いられる組成物と類似しうる。好ましい投与方式は、静脈内注入または静脈内注射を介するなど、非経口投与例えば、静脈内投与、皮下投与、腹腔内投与、筋肉内投与であるが、また、筋肉内注射または皮下注射、経口経路および鼻腔内経路を介する投与も目論まれる。本発明により目論まれる他の投与方式には、気管支内投与、経粘膜投与、髄腔内投与、滑膜内投与、大動脈内投与、眼内投与、耳内投与、局所投与、および口腔内投与、ならびに腫瘍内投与が含まれる。一部の実施形態では、治療用の抗FRA抗体組成物は、製造条件下および保存条件下で無菌および安定である。本発明は、溶液、マイクロエマルジョン、分散液、リポソーム、または高薬物濃度に適する他の秩序構造として調合された組成物を包含する。本発明の無菌注射溶液は、抗FRA抗体を、上記で列挙した1つの成分または成分の組合せを伴う適切な溶媒中に要請される量で組み込んだ後、要請に応じて濾過による滅菌処理を行うことにより調製することができる。本発明の抗FRA抗体を含む分散液は、活性化合物を、基本分散媒および上記で列挙した成分に由来する、要請される他の成分を含有する無菌媒体へと組み込むことにより調製することができる。本発明の抗FRA抗体を含む無菌注射溶液を調製するための無菌粉末の場合、調製の好ましい方法は、活性成分の粉末に加えて、あらかじめ無菌濾過されたその溶液に由来する任意のさらなる所望の成分をもたらす、真空乾燥および凍結乾燥である。溶液の適正な流体性は、例えば、レシチンなどのコーティングを用いることにより、分散液の場合は要請される粒子サイズを維持することにより、および界面活性剤を用いることにより維持することができる。当業者は、本発明の注射用組成物の吸収を延長させるには、組成物中に吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸塩およびゼラチンを組み入れうることを理解するであろう。特定の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、急速な放出に対して抗体を保護する担体と共に、すなわち、インプラント、経皮パッチ、およびマイクロ封入された送達系を含めた制御放出処方物として調製することができる。エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸などの生体分解性、生体適合性ポリマーを用いることができる。当業者には、このような処方物を調製する多くの方法が一般に公知である。例えば、SustainedandControlledReleaseDrugDeliverySystemsJ.R.Robinson編、MarcelDekker,Inc.、NewYork、1978年を参照されたい。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を含む組成物が、さらなる活性化合物をさらに含む。特定の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、1または複数のさらなる治療剤、診断剤、または予防剤と共に共調合し、かつ/またはこれらと共に共投与する。限定なしに述べると、治療剤には、異なる微細な特異性を伴う抗FRA抗体、他の標的に結合する抗体、非ステロイド系抗炎症剤、鎮痛剤、抗がん剤、ステロイド、抗アレルギー剤、化学療法剤、抗新生物剤、および細胞傷害剤が含まれる。本発明によれば、本発明の抗FRA抗体を、腫瘍またはがん細胞の増殖を阻害することが公知である抗体または他の薬剤、例えば、erbB2受容体、E-セレクチン、EGF-R、CD20、VEGF例えば、AVASTIN登録商標ベバシズマブ、LUCENTIS登録商標ラニビズマブ、およびMACUGEN登録商標ペガプタニブ、VEGF受容体1VEGFR1、VEGF受容体2VEGFR2、またはVEGF受容体3VEGFR3を阻害する抗体または薬剤と共に共調合することができる。限定なしに述べると、化学療法剤の例には、GLEEVEC登録商標イマチニブ、ERBITUX登録商標セツキシマブ、L-アスパラギナーゼ、IRESSA登録商標ゲフィチニブ、TARCEVA登録商標エルロチニブ、およびVELCADE登録商標ボルテゾミブなどが含まれる。より具体的に述べると、本発明の抗FRA抗体を、アルキル化剤と共に共調合することができる。限定なしに述べると、有用なアルキル化剤の例には、アルトレタミンヘキサメチルメラミン、ブスルファン、カルボプラチン、カルムスチンBCNU、クロランブシル、シスプラチン、CYTOXAN登録商標シクロホスファミド、ダカルバジンDTIC、イホスファミド、ロムスチン、メクロレタミンナイトロジェンマスタード、メルファラン、オキサリプラチンoxalaplatin、ストレプトゾシン、TEMODAR登録商標テモゾロミド、およびチオテパなどが含まれる。本発明の抗FRA抗体は、代謝拮抗物質と共に共調合することができる。限定なしに述べると、有用な代謝拮抗物質の例には、5-フルオロウラシル5-FU、6-メルカプトプリン6-MP、XELODA登録商標カペシタビン、ARA-C登録商標シタラビン、フルダラビン、GEMZAR登録商標ゲムシタビン、メトトレキサート、およびALIMTA登録商標ペメトレキセドなどが含まれる。本発明の抗FRA抗体を、トポイソメラーゼI阻害剤およびトポイソメラーゼII阻害剤と共に共調合することができる。限定なしに述べると、CAMPTOSAR登録商標イリノテカンHCl、SN-38、カンプトテシン、HYCAMTIN登録商標トポテカン、エトポシド、テニポシド、ELLENCE登録商標エピルビシン、ADRIAMYCIN登録商標ドキソルビシン、イダルビシン、ミトキサントロン、ラメラリンD、およびHU-331参照により本明細書に組み込まれる、Koganら2007年、MolecularCancerTherapeutics、6巻:173~183頁などが含まれる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、アクチノマイシンD、ブレオマイシン、およびマイトマイシンCなどの抗腫瘍抗生剤と共に共調合することができる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、有糸分裂阻害剤と共に共調合することができる。有用な有糸分裂阻害剤の非限定的な例には、EMCYT登録商標エストラムスチン、IXEMPRA登録商標イキサベピロン、TAXOTERE登録商標ドセタキセル、TAXOL登録商標パクリタキセル、VELBAN登録商標ビンブラスチン、ONCOVIN登録商標ビンクリスチン、およびNAVELBINE登録商標ビノレルビンなどが含まれる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、分化剤と共に共調合することができる。有用な分化剤の非限定的な例には、三酸化ヒ素、レチノイド、トレチノイン、およびTARGRETIN登録商標ベキサロテンなどが含まれる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、例えば、プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、およびデキサメタゾンなどのステロイド化合物と共に共調合することができる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、ホルモン関連化合物と共に共調合することができる。有用なホルモン関連化合物の非限定的な例には、エストロゲン、プロゲスチンMEGACE登録商標酢酸メゲストロールなど、FASLODEX登録商標フルベストラント、タモキシフェン、トレミフェン、LUPRON登録商標ロイプロリド、ZOLADEX登録商標ゴセレリン、ARIMIDEX登録商標アナストロゾール、FEMARA登録商標レトロゾール、AROMASIN登録商標エキセメスタン、CASODEX登録商標ビカルタミド、EULEXIN登録商標フルタミド、およびNILANDRON登録商標ニルタミドが含まれる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、COX-IIシクロオキシゲナーゼII阻害剤と共に共調合することができる。有用なCOX-II阻害剤の非限定的な例には、CELEBREX登録商標セレコキシブ、バルデコキシブ、およびロフェコキシブなどが含まれる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、免疫治療剤と共に共調合することができる。有用な免疫治療剤の非限定的な例には、インターフェロンインターフェロン-アルファなど、BCG、インターロイキン2IL-2、サリドマイド、レナリドミド、CAMPATH登録商標アレムツズマブ、およびRITUXAN登録商標リツキシマブなどが含まれる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、MMP阻害剤と共に共調合することができる。例えば、抗FRA抗体は、MMP-2マトリックスメタロプロテイナーゼ2阻害剤またはMMP-9マトリックスメタロプロテイナーゼ9阻害剤などの抗血管新生剤と共に共調合することができる。好ましいMMP阻害剤は、関節痛を示さないMMP阻害剤である。他のマトリックスメタロプロテイナーゼすなわち、MMP-1、MMP-3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、MMP-8、MMP-10、MMP-11、MMP-12、およびMMP-13と比べて、MMP-2および/またはMMP-9を選択的に阻害するMMP阻害剤がより好ましい。本発明において有用なMMP阻害剤の一部の具体例は、AG-3340、RO32-3555、RS13-0830、および以下のリスト:3-[[4-4-フルオロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニル]-1-ヒドロキシカルバモイル-シクロペンチル-アミノ]-プロピオン酸;3-exo-3-[4-4-フルオロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニルアミノ]-8-オキサ-ビシクロ[3.2.1]オクタン-3-カルボン酸ヒドロキシアミド;2R,3R1-[4-2-クロロ-4-フルオロ-ベンジルオキシ-ベンゼンスルホニル-]-3-ヒドロキシ-3-メチル-ピペリジン-2-カルボン酸ヒドロキシアミド;4-[4-4-フルオロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニルアミノ]-テトラヒドロ-ピラン-4-カルボン酸ヒドロキシアミド;3-[[4-4-フルオロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニル]-1-ヒドロキシ-カルバモイル-シクロブチル-アミノ]-プロピオン酸;4-[4-4-クロロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニルアミノ]-テトラヒドロ-ピラン-4-カルボン酸ヒドロキシアミド;R3-[4-4-クロロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニルアミノ]-テトラヒドロ-ピラン-3-カルボン酸ヒドロキシアミド;2R,3R1-[4-4-フルオロ-2-メチル-ベンジルオキシ-ベンゼンスルホニル]-3-ヒドロキシ-3-メチル-ピペリジン-2-カルボン酸ヒドロキシアミド;3-[[4-4-フルオロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニル]-1-ヒドロキシカルバモイル-1-メチル-エチル-アミノ]-プロピオン酸;3-[[4-4-フルオロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニル]-4-ヒドロキシカルバモイル-テトラヒドロ-ピラン-4-イル-アミノ]-プロピオン酸;3-exo-3-[4-4-クロロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニルアミノ]-8-オキサ-ビシクロicyclo[3.2.1]オクタン-3-カルボン酸ヒドロキシアミド;3-endo-3-[4-4-フルオロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニルアミノ]-8-オキサ-ビシクロ[3.2.1]オクタン-3-カルボン酸ヒドロキシアミド;およびR3-[4-4-フルオロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニルアミノ]-テトラヒドロ-フラン-3-カルボン酸ヒドロキシアミドなどにおいて列挙される化合物;ならびに前記化合物の薬学的に許容される塩および溶媒和物である。一部の実施形態では、抗FRA抗体を、インテグリン阻害剤と共に共調合することができる。限定なしに述べると、インテグリン阻害剤には、オブツスタチン、ロドセチン、VitaxinMedImmune、シレンギチドEMD121974;Merck、S137Pfizer、S247Pfizer、およびJSM6427Jeriniが含まれる例えば、それらの全てが参照により本明細書に組み込まれる、Brownら2008年、InternationalJournalofCancer、123巻:2195~2203頁;Stuppら2007年、JournalofClinicalOncology、25巻:1637~1638頁;Ebleら2003年、BiochemJ.、376巻:77~85頁を参照されたい。本発明の組成物には、治療有効量または予防有効量の本発明の抗FRA抗体が含まれうる。治療有効量とは、必要な用量で、かつ、必要な期間にわたり、所望の治療的結果を達成するのに有効な量を指す。治療有効量の抗体または抗体部分は、個体の疾患状態、年齢、性別、および体重、ならびに抗体または抗体部分が個体において所望の応答を誘発する能力などの因子により変化しうる。治療有効量とはまた、抗体または抗体部分の任意の毒性作用または有害作用を治療的に有益な作用が凌駕する量でもある。予防有効量とは、必要な用量で、かつ、必要な期間にわたり、所望の予防的結果を達成するのに有効な量を指す。典型的には、被験体において予防用量を用いるのは疾患の初期段階の前または疾患の初期段階であるので、予防有効量は、治療有効量より低量でありうる。投薬レジメンは、最適の所望の応答例えば、治療的応答または予防的応答をもたらすように調整することができる。例えば、単回のボーラスを投与することもでき、複数回に分割された用量をある期間にわたり投与することもでき、治療状況の要件が示すのに応じて比例的に用量を低減するかまたは増大させることもできる。投与の容易さおよび用量の均一性のために、非経口組成物を単位剤形に調合することがとりわけ有利である。本明細書で用いられる単位剤形とは、哺乳動物被験体を処置するための単一の用量として適する物理的に個別の単位を指し、各単位が、要請される医薬担体と共に所望の治療効果をもたらすように計算された所定量の活性化合物を含有する。本発明の単位剤形の仕様は、a抗FRA抗体の固有の特徴および達成される特定の治療効果または予防効果、ならびにb個体において感受性を処置するためにこのような抗体を混合することの当技術分野における固有の限界により決定され、これらに直接に依存する。本発明の抗FRA抗体の治療有効量または予防有効量の例示的で非限定的な範囲は、0.025~50mg/kg、0.1~50mg/kg、0.1~25mg/kg、0.1~10mg/kg、または0.1~3mg/kgである。一実施形態では、抗FRA抗体を、pHが約5.0~約6.5の範囲にあり、約1mg/ml~約200mg/mlの抗体、約1ミリモル~約100ミリモルのTween、約0.01mg/ml~約10mg/mlのポリソルベート80またはポリソルベート20、約100ミリモル~約400ミリモルのトレハロースまたはスクロースから選択されるがこれらに限定されない非還元性糖、約0.01ミリモル~約1.0ミリモルのEDTA二ナトリウム二水和物を含み、場合によって、キレート化剤に加えて薬学的に許容される抗酸化剤を含む、無菌水溶液としての処方物により投与する。適切な抗酸化剤には、メチオニン、チオ硫酸ナトリウム、カタラーゼ、および白金が含まれるがこれらに限定されない。例えば、組成物は、1mM~約100mMの範囲にあり、特に、約27mMである濃度でメチオニンを含有しうる。一部の実施形態では、処方物が、20mMのクエン酸ナトリウム、pH5.5、140mMのNaCl、および0.2mg/mlのポリソルベート80による緩衝液中に5mg/mlの抗体を含有する。用量値は、緩和される状態の種類および重症度と共に変化しうることに注意されたい。任意の具体的な被験体について、特定の投薬レジメンを、個別の必要および組成物を投与するかまたは投与を監視する担当者の医師としての判断により、ある期間にわたり調整すべきであり、本明細書で示される用量範囲は例示的なものであるにとどまり、特許請求される組成物の範囲または実施を限定することを意図するものではないことをさらに理解されたい。本発明の別の態様は、本発明の抗FRA抗体またはこのような抗FRA抗体を含む医薬組成物を含むキットを提供する。キットは、抗体または医薬組成物に加えて、診断剤または治療剤を包含しうる。キットはまた、診断法または治療法における使用のための指示書のほか、氷、ドライアイス、発泡スチロール、発泡体、プラスチック、セロファン、シュリンクラップ、バブルラップ、段ボール、およびスターチピーナツなどであるがこれらに限定されない梱包材も包含しうる。一実施形態では、キットが、抗体、または抗体および本明細書で記載される方法において用いうる診断剤を含む医薬組成物を包含する。さらに別の実施形態では、キットが、抗体、または抗体および本明細書で記載される方法において用いうる1または複数の治療剤を含む医薬組成物を包含する。本発明はまた、哺乳動物におけるがんを阻害するための組成物およびキットであって、ある量の化学療法剤と組み合わせたある量の本発明の抗体を含み、ある量の化合物、塩、溶媒和物、またはプロドラッグ、および化学療法剤が、併せて異常な細胞成長を阻害するのに有効な組成物およびキットにも関する。当技術分野では現在、多くの化学療法剤が公知である。一部の実施形態では、化学療法剤が、有糸分裂阻害剤、アルキル化剤、抗代謝物質、挿入抗生剤、ケモカイン阻害剤、細胞周期阻害剤、酵素、トポイソメラーゼ阻害剤、生物学的応答修飾剤、抗ホルモン剤、例えば、抗アンドロゲン剤、および抗血管新生剤からなる群より選択される。診断的方法本発明の抗FRA抗体は、生物学的試料中のFRAまたはFRA発現細胞をinvitroまたはinvivoにおいて検出するのに用いることができる。抗FRA抗体は、限定なしに述べると、ELISA、RIA、フローサイトメトリー、免疫細胞化学、免疫組織化学、ウェスタンブロット、または免疫沈澱が含まれる従来のイムノアッセイにおいて用いることができる。本発明の抗FRA抗体を用いてヒトからFRAを検出することができる。別の態様では、本発明は、生物学的試料中のFRAを検出する方法を提供する。方法は、生物学的試料を本発明の抗FRA抗体と接触させるステップと、結合した抗体を検出するステップとを含む。抗FRA抗体は、検出用標識で直接標識することもでき、標識しないでおくこともできる。標識されない抗体を用いる場合は、この抗FRA抗体に結合しうる、標識した二次抗体または他の分子を用いてFRAに結合した抗体を検出する。当業者には周知である通り、特定の種およびクラスの一次抗体に特異的に結合することが可能な二次抗体を選択する。例えば、抗FRA抗体がヒトIgGを含む場合は、二次抗体を、標識した抗ヒトIgG抗体とすることができる。限定なしに述べると、抗体に結合しうる他の分子には、それらの両方が、例えば、PierceChemicalCoから市販されている、プロテインAおよびプロテインGが含まれる。抗体に適切な標識または第2の分子が開示されており、これらには、多様な酵素、補欠分子族、蛍光物質、発光物質、磁気作用物質、および放射性物質が含まれる。適切な酵素の例には、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、O-ガラクトシダーゼ、またはアセチルコリンエステラーゼが含まれ、適切な補欠分子族複合体の例には、ストレプトアビジン-ビオチンおよびアビジン/ビオチンが含まれ、適切な蛍光物質の例には、ウンベリフェロン、フルオレセイン、イソチオシアン酸フルオレセイン、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセイン、ダンシルクロリド、またはフィコエリトリンが含まれ、発光物質の例には、ルミノールが含まれ、磁気作用物質の例にはガドリニウムが含まれ、適切な放射性物質の例には、125I、131I、35S、または3Hが含まれる。本発明の抗FRA抗体を用いて、組織に由来する異形成細胞など、組織または細胞におけるFRAの存在および/またはレベルを決定することができる。組織は、腫瘍またはその生検などの疾患組織でありうる。細胞は、例えば、卵巣がん細胞、膵臓がん細胞、前立腺がん細胞、または肺がん細胞でありうる。検出は、組織試料中で行うこともでき、invivoで行うこともできる。本発明の抗FRA抗体を本発明に従って用いて、上記で論じた方法を介して、組織におけるFRA、FRAの細胞表面レベル、またはFRAの局在化を検出および/または定量化することができる。また、本発明の抗体、とりわけ、ヒト化抗体をinvivoにおいて用いて、組織および器官、例えば、FRA発現腫瘍においてFRAを検出することもできる。invivoにおいてFRAを検出するには、標識した抗FRA抗体を、このような診断検査を必要とする患者に投与し、患者をFRA発現組織の場所を決定するための画像解析にかける。医療技術分野では、画像解析が周知であり、限定なしに述べると、これには、x線解析、核磁気造影MRI、またはコンピュータ断層撮影CEが含まれる。本方法の別の実施形態では、腫瘍または組織の生検を患者から得て、それがFRAを発現するかどうかを決定する。造影では、抗FRA抗体を、患者において造影されうる検出用薬剤で標識することができる。例えば、抗FRA抗体は、x線解析に用いられうるバリウムなどの造影剤、またはMRIまたはCEに用いられうるガドリニウムキレートなどの磁気造影剤で標識することができる。限定なしに述べると、他の標識剤には、99Tcなどの放射性同位元素が含まれる。本発明によれば、抗FRA抗体はまた、標識しないでおくことも可能であり、造影は、検出可能であり抗FRA抗体に結合しうる二次抗体または他の分子を投与することを介する。治療法別の態様では、本発明は、本発明の抗FRA抗体を治療に用いる方法を提供する。本発明の方法は、invitroまたはinvivoにおけるFRA発現細胞の成長、増殖、または生存を低減するステップを包含する。本発明は、それを必要とする被験体におけるがんを処置する方法であって、被験体に本発明の抗FRAモノクローナル抗体を投与するステップを含む方法をさらに提供する。多様な実施形態では、がんが、卵巣がん、乳がん、腎臓がん、結腸直腸がん、肺がん、子宮内膜がん、脳のがん、卵管がん、もしくは子宮がん、または白血病である。本発明はまた、それを必要とする被験体におけるFRAの発現の増大と関連する異形成細胞の成長を低減する方法であって、被験体に本発明の抗FRAモノクローナル抗体を投与するステップを含む方法も提供する。多様な実施形態では、異形成細胞が、卵巣がん細胞、乳がん細胞、腎臓がん細胞、結腸直腸がん細胞、肺がん細胞、子宮内膜がん細胞、脳がん細胞、卵管がん細胞、子宮がん細胞、または白血病細胞である。好ましい実施形態では、被験体がヒトである。一実施形態では、本発明は、FRA活性を阻害する方法であって、FRA発現細胞を抗FRA抗体と接触させるかまたはこれに曝露するステップを含む方法を提供する。方法によっては、抗FRA抗体を、それを必要とする被験体に投与する。被験体は、異形成またはFRA発現の増大を特徴とする疾患または状態を患っている可能性がある。非限定的な例には、がん、腫瘍の成長、および過剰増殖性障害が含まれる。被験体は、ヒト被験体の場合もあり、ヒト疾患の非ヒト動物モデルを含めた獣医学的被験体の場合もある。抗FRA抗体は、異形成またはFRA発現の増大を特徴とする状態を処置するための薬物の製造において用いることができる。本発明の方法によれば、本発明の抗FRA抗体は、そのまま投与することもでき、被験体への投与に適する医薬組成物へと組み込むこともできる。医薬組成物は、生理的に適合性である溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤など、薬学的に許容される担体を含みうる。薬学的に許容される担体の例には、水、生理食塩液、リン酸緩衝生理食塩液、デキストロース、グリセロール、エタノールなどのうちの1または複数のほか、これらの組合せが含まれるがこれらに限定されない。多くの場合、等張剤、例えば、糖、マンニトール、ソルビトールなどの多価アルコール、または塩化ナトリウムを組成物中に組み入れることが好ましいであろう。保湿剤または乳化剤、防腐剤または緩衝剤などの保湿物質または少量の補助物質など、薬学的に許容される物質は、抗体または抗体部分の保管寿命または有効性を増強する。抗FRA抗体は、1回で投与することもでき、複数回にわたり投与することもできる。複数回投与を用いる場合、複数回投与は、毎日複数回投与の場合もあり、毎週複数回投与の場合もあり、毎月複数回投与の場合もあり、毎日複数回投与を含む任意の適切な間隔を置いた複数回投与の場合もある。投与は、毎日3回、毎日2回、毎日1回、隔日1回、3日間ごとに1回、毎週1回、隔週1回、毎月1回、隔月1回、3カ月ごとに1回、および6カ月ごとに1回などのスケジュールで行うことができる。抗FRA抗体はまた、例えば、ミニポンプを介して持続的に投与することもできる。抗FRA抗体は、例えば、経粘膜経路、口腔内経路、鼻腔内経路、吸入経路、静脈内経路、皮下経路、筋肉内経路、非経口経路、または腫瘍内経路を介して投与することができる。抗FRA抗体は、1回、少なくとも2回、または少なくとも状態が処置されるか、緩和されるか、または治癒するまでの時間にわたり投与することができる。抗FRA抗体は一般に、状態が見られる限り、または状態の再発を防止するために、それより長期間にわたり投与する。上記で説明した通り、抗FRA抗体は一般に、医薬組成物の一部として投与する。抗FRA抗体の用量は一般に、0.1~100mg/kg、より好ましくは0.5~50mg/kg、より好ましくは1~20mg/kg、およびなおより好ましくは1~10mg/kgの範囲内とする。抗FRA抗体の血清濃度は、当技術分野で公知である任意の方法を介して測定することができる。別の実施形態では、抗FRA抗体を、別の抗FRA抗体を含めた別の治療剤と共に共投与することができる。さらなる治療剤はまた、一本鎖核酸分子または二本鎖核酸分子を含めたRNA干渉を介してFRAの発現を低減するオリゴヌクレオチドでもありうる。がんまたは腫瘍などの過剰増殖性障害を患う被験体の場合は、さらなる治療剤を抗新生物剤とすることができる。一態様では、本発明は、それを必要とする被験体における過剰増殖性障害を処置する方法であって、前記被験体に、有糸分裂阻害剤、アルキル化剤、抗代謝物質、挿入剤、成長因子阻害剤、細胞周期阻害剤、酵素、トポイソメラーゼ阻害剤、生物学的応答修飾剤、抗ホルモン剤、キナーゼ阻害剤、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤、遺伝子治療剤、抗アンドロゲン剤、抗新生物剤、および細胞傷害剤からなる群より選択されるがこれらに限定されない抗腫瘍剤と組み合わせた治療有効量の本発明の抗FRA抗体を投与するステップを含む方法に関する。別の好ましい実施形態では、抗FRA抗体または組合せ療法を、放射線療法、化学療法、光力学療法、手術、または他の免疫療法と共に投与する。本発明によれば、本発明の抗FRA抗体を、腫瘍またはがん細胞の増殖を阻害することが公知である抗体または他の薬剤、例えば、erbB2受容体、E-セレクチン、EGF-R、CD20、VEGF例えば、AVASTIN登録商標ベバシズマブ、LUCENTIS登録商標ラニビズマブ、およびMACUGEN登録商標ペガプタニブ、VEGF受容体1VEGFR1、VEGF受容体2VEGFR2、またはVEGF受容体3VEGFR3などを阻害する抗体または薬剤と共に投与することができる。本発明の抗FRA抗体は、限定なしに述べると、GLEEVEC登録商標イマチニブ、ERBITUX登録商標セツキシマブ、L-アスパラギナーゼ、IRESSA登録商標ゲフィチニブ、TARCEVA登録商標エルロチニブ、およびVELCADE登録商標ボルテゾミブなどが含まれる化学療法剤と共に共投与することができる。より具体的に述べると、本発明の抗FRA抗体を、アルキル化剤と共に共投与することができる。限定なしに述べると、有用なアルキル化剤の例には、アルトレタミンヘキサメチルメラミン、ブスルファン、カルボプラチン、カルムスチンBCNU、クロランブシル、シスプラチン、CYTOXAN登録商標シクロホスファミド、ダカルバジンDTIC、イホスファミド、ロムスチン、メクロレタミンナイトロジェンマスタード、メルファラン、オキサリプラチン、ストレプトゾシン、TEMODAR登録商標テモゾロミド、チオテパなどが含まれる。本発明の抗FRA抗体は、代謝拮抗物質と共に共投与することができる。限定なしに述べると、有用な代謝拮抗物質の例には、5-フルオロウラシル5-FU、6-メルカプトプリン6-MP、XELODA登録商標カペシタビン、ARA-C登録商標シタラビン、フルダラビン、GEMZAR登録商標ゲムシタビン、メトトレキサート、ALIMTA登録商標ペメトレキセドなどが含まれる。本発明の抗FRA抗体を、トポイソメラーゼI阻害剤およびトポイソメラーゼII阻害剤と共に共投与することができる。限定なしに述べると、CAMPTOSAR登録商標イリノテカンHCl、SN-38、カンプトテシン、HYCAMTIN登録商標トポテカン、エトポシド、テニポシド、ELLENCE登録商標エピルビシン、ADRIAMYCIN登録商標ドキソルビシン、イダルビシン、ミトキサントロン、ラメラリンD、HU-331Koganら2007年、MolecularCancerTherapeutics、6巻:173~183頁などが含まれる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、アクチノマイシンD、ブレオマイシン、マイトマイシンCなどの抗腫瘍抗生剤と共に共投与することができる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、有糸分裂阻害剤と共に共投与することができる。有用な有糸分裂阻害剤の非限定的な例には、EMCYT登録商標エストラムスチン、IXEMPRA登録商標イキサベピロン、TAXOTERE登録商標ドセタキセル、TAXOL登録商標パクリタキセル、VELBAN登録商標ビンブラスチン、ONCOVIN登録商標ビンクリスチン、NAVELBINE登録商標ビノレルビンなどが含まれる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、分化剤と共に共投与することができる。有用な分化剤の非限定的な例には、三酸化ヒ素、レチノイド、トレチノイン、およびTARGRETIN登録商標ベキサロテンなどが含まれる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、例えば、プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾンなどのステロイド化合物と共に共投与することができる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、ホルモン関連化合物と共に共投与することができる。有用なホルモン関連化合物の非限定的な例には、エストロゲン、プロゲスチンMEGACE登録商標酢酸メゲストロールなど、FASLODEX登録商標フルベストラント、タモキシフェン、トレミフェン、LUPRON登録商標ロイプロリド、ZOLADEX登録商標ゴセレリン、ARIMIDEX登録商標アナストロゾール、FEMARA登録商標レトロゾール、AROMASIN登録商標エキセメスタン、CASODEX登録商標ビカルタミド、EULEXIN登録商標フルタミド、NILANDRON登録商標ニルタミドなどが含まれる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、COX-IIシクロオキシゲナーゼII阻害剤と共に共投与することができる。有用なCOX-II阻害剤の非限定的な例には、CELEBREX登録商標セレコキシブ、バルデコキシブ、ロフェコキシブなどが含まれる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、免疫治療剤と共に共投与することができる。有用な免疫治療剤の非限定的な例には、インターフェロンインターフェロン-アルファなど、BCG、インターロイキン2IL-2、サリドマイド、レナリドミド、CAMPATH登録商標アレムツズマブ、RITUXAN登録商標リツキシマブが含まれる。一部の実施形態では、本発明の抗FRA抗体を、MMP阻害剤と共に共投与することができる。例えば、抗FRA抗体は、MMP-2マトリックスメタロプロテイナーゼ2阻害剤またはMMP-9マトリックスメタロプロテイナーゼ9阻害剤などの抗血管新生剤と共に共投与することができる。好ましいMMP阻害剤は、関節痛を示さないMMP阻害剤である。他のマトリックスメタロプロテイナーゼすなわち、MMP-1、MMP-3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、MMP-8、MMP-10、MMP-11、MMP-12、およびMMP-13と比べて、MMP-2および/またはMMP-9を選択的に阻害するMMP阻害剤がより好ましい。本発明において有用なMMP阻害剤の一部の具体例は、AG-3340、RO32-3555、RS13-0830、および以下のリスト:3-[[4-4-フルオロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニル]-1-ヒドロキシカルバモイル-シクロペンチル-アミノ]-プロピオン酸;3-exo-3-[4-4-フルオロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニルアミノ]-8-オキサ-ビシクロ[3.2.1]オクタン-3-カルボン酸ヒドロキシアミド;2R,3R1-[4-2-クロロ-4-フルオロ-ベンジルオキシ-ベンゼンスルホニル-]-3-ヒドロキシ-3-メチル-ピペリジン-2-カルボン酸ヒドロキシアミド;4-[4-4-フルオロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニルアミノ]-テトラヒドロ-ピラン-4-カルボン酸ヒドロキシアミド;3-[[4-4-フルオロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニル]-1-ヒドロキシ-カルバモイル-シクロブチル-アミノ]-プロピオン酸;4-[4-4-クロロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニルアミノ]-テトラヒドロ-ピラン-4-カルボン酸ヒドロキシアミド;R3-[4-4-クロロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニルアミノ]-テトラヒドロ-ピラン-3-カルボン酸ヒドロキシアミド;2R,3R1-[4-4-フルオロ-2-メチル-ベンジルオキシ-ベンゼンスルホニル]-3-ヒドロキシ-3-メチル-ピペリジン-2-カルボン酸ヒドロキシアミド;3-[[4-4-フルオロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニル]-1-ヒドロキシカルバモイル-1-メチル-エチル-アミノ]-プロピオン酸;3-[[4-4-フルオロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニル]-4-ヒドロキシカルバモイル-テトラヒドロ-ピラン-4-イル-アミノ]-プロピオン酸;3-exo-3-[4-4-クロロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニルアミノ]-8-オキサ-ビシクロ[3.2.1]オクタン-3-カルボン酸ヒドロキシアミド;3-endo-3-[4-4-フルオロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニルアミノ]-8-オキサ-ビシクロ[3.2.1]オクタン-3-カルボン酸ヒドロキシアミド;およびR3-[4-4-フルオロ-フェノキシ-ベンゼンスルホニルアミノ]-テトラヒドロ-フラン-3-カルボン酸ヒドロキシアミドにおいて列挙される化合物;ならびに前記化合物の薬学的に許容される塩および溶媒和物である。一部の実施形態では、抗FRA抗体を、インテグリン阻害剤と共に共投与することができる。限定なしに述べると、インテグリン阻害剤には、オブツスタチン、ロドセチン、VitaxinMedImmune、シレンギチドEMD121974;Merck、S137Pfizer、S247Pfizer、およびJSM6427Jeriniが含まれる例えば、それらの全てが参照により本明細書に組み込まれる、Brownら2008年、InternationalJournalofCancer、123巻:2195~2203頁;Stuppら2007年、JournalofClinicalOncology、25巻:1637~1638頁;Ebleら2003年、BiochemJ.、376巻:77~85頁を参照されたい。本発明の抗FRA抗体のさらなる治療剤組合せ療法との共投与は、抗FRA抗体およびさらなる治療剤を含む医薬組成物を投与するステップのほか、2つ以上の別個の医薬組成物:抗FRA抗体を含む医薬組成物およびさらなる治療剤複数可を含む他の医薬組成物複数可を投与するステップも包含する。さらに、共投与または組合せ療法は、同時的もしくは逐次的に、またはこれらの両方で投与される抗FRA抗体およびさらなる治療剤を包含する。例えば、抗FRA抗体を3日間ごとに1回投与しうる一方、さらなる治療剤は、毎日1回抗FRA抗体と同時に、または異なる時点に投与する。抗FRA抗体は、さらなる治療剤による処置の前に投与することもでき、その後で投与することもできる。同様に、本発明の抗FRA抗体の投与は、放射線照射、手術、身体運動、レーザー療法を含めた光線療法、および栄養補助食品を含めた他の処置モダリティーを包含する処置レジメンの一部でありうる。組合せ療法を投与して、状態の再発を防止することができる。組合せ療法は、複数回にわたり投与することが好ましい。組合せ療法は、毎日3回~6カ月ごとに1回投与することができる。投与は、毎日3回、毎日2回、毎日1回、隔日1回、3日間ごとに1回、毎週1回、隔週1回、毎月1回、隔月1回、3カ月ごとに1回、および6カ月ごとに1回などのスケジュールで行うこともでき、例えば、ミニポンプを介して持続的に投与することもできる。組合せ療法は、例えば、経口経路、経粘膜経路、口腔内経路、鼻腔内経路、吸入経路、静脈内経路、皮下経路、筋肉内経路、または非経口経路を介して投与することができる。一実施形態では、抗FRA抗体を、pHを約5.0~約8.0、好ましくは約6.5~約7.5、およびより好ましくは約7.0~約7.2の範囲とする無菌水溶液としての処方物により投与する。処方物は、約1mg/ml~約200mg/ml、約5mg/ml~約50mg/ml、または約10mg/ml~約25mg/mlの抗体を含みうる。処方物は、約1ミリモル~約100ミリモルのTween、約0.01mg/ml~約10mg/mlのポリソルベート80、約100ミリモル~約400ミリモルのトレハロース、および約0.01ミリモル~約1.0ミリモルのEDTA二ナトリウム二水和物を含みうる。好ましい実施形態では、抗体を、10mMのリン酸ナトリウム、150mMの塩化ナトリウム、pH7.2、0.01のUSPグレードのTween80中に抗体を5.0±0.5mg/mLとする処方物により投与する。なおさらなる実施形態では、抗FRA抗体を、放射性標識、抗毒素、または毒素で標識するか、または細胞傷害性ペプチドを含む融合タンパク質とする。抗FRA抗体または抗FRA抗体の融合タンパク質は、放射性標識、抗毒素、毒素、または毒性ペプチドを、FRA発現腫瘍細胞またはFRA発現がん細胞へと方向付ける。好ましい実施形態では、抗FRA抗体が腫瘍細胞またはがん細胞の表面におけるFRAに結合した後で、放射性標識、抗毒素、毒素、または毒性ペプチドを内在化させる。本明細書で記載される実施例および実施形態は、例示だけを目的とするものであり、当業者には、これに照らした多様な改変または変化が明らかであり、これらは、本発明の真の範囲内に包含されるものとし、本発明の真の範囲から逸脱しない限りにおいてこれらを行いうることが理解される。実施例1変化させる条件下で培養した抗FRA抗体の培養および精製配列番号5の重鎖アミノ酸配列と配列番号7の軽鎖アミノ酸配列とを含む抗FRA抗体を生成するCHO-K1細胞を極低温保存から回復させ、表1に示される条件下で継代培養した。接種物の増殖および継代培養は、125mLおよび500mLの振とうフラスコにより実施した。回復および継代培養の後、細胞を、多様な実験的な細胞培養条件の変化および陽性対照を伴う2Lの撹拌タンク型生成用バイオリアクターB-DCU、Sartoriusによる流加培養で培養した表2および3。MORAb-003抗FRA抗体の培養物は、以下の通りに精製した。MORAb-003を分泌する細胞に由来する条件付け培養培地各条件について1.5Lずつを、遠心分離10,000g、20分間を介して清明化させた。結果として得られる上清を、0.22mmの膜を介して濾過した。条件付け培地中のMORAb-003抗体を、AktaExplorer100AGEHealthcareの補助を伴うプロテインAによるアフィニティークロマトグラフィーを介して精製した。略述すると、ProSepvA型番:113115830、Milliporeを充填した、ベッド容量を20mLとするカラムを、PBS0.02Mのリン酸カリウム、0.15Mの塩化ナトリウム、pH7.2で平衡化した。清明化させた後、MORAb-003を含有する条件付け培地を、5.0mL/分の流速でカラムへと投入した。樹脂を、12カラム容量CVにわたりPBSで洗浄した後、3.5CVの溶出緩衝液10mMの酢酸、100mMのグリシン、pH3.8を用いて、結合したMORAb-003抗体を溶出させた。樹脂を、6Mの塩酸グアニジン2CVで洗浄した。投入するステップを除く全てのステップにおける流速は、7.0mL/分とした。プールされた溶出画分は、カットオフを10kDaとするSnakeSkinPleatedDialysisTubing型番:68100、ThermoScientificを用いて、4°Cで約15時間にわたり、2LのPBSに対して透析した。実施例2変化させる条件下で培養した抗FRA抗体のグリカンプロファイリング実施例1で記載した通りにMORAb-003抗FRA抗体を培養および精製した後で、抗体において見い出される中性N結合複合体の炭水化物構造を、以下の通りに除去、分離、同定、および定量化した。変化させる条件下で培養した抗FRA抗体の試料に割り当てたロット番号を、表4に示す。MORAb-003抗体の重鎖におけるN結合グリカンを、ペプチジル-N-グリコシダーゼFPNGアーゼFを用いて酵素的に除去し、ゲル濾過クロマトグラフィーを介して精製した。結果として得られるグリカン混合物を、2-アミノベンザミド2-ABを用いて蛍光標識し、TosohTSK-Gel80-Amideカラムを用いる順相HPLCを介して分解した。蛍光標識したグリカンは、蛍光励起波長:330nm/発光波長:420nmを介して定量化した。分離時に生じるピークに由来するグリカンの同定は、AgilentESI-TOF質量分析器を全イオンクロマトグラムモードまたは抽出イオンクロマトグラムモードで用いる直列型質量分析による検出を介して達成した。回収されたグリカン構造の概略図を図1に示す。ロットNB859-25は、陽性対照ロットであるNB810-10およびNB809-65に用いられる条件下で増殖させた培養物に由来した。ロットNB859-25は、実験結果をラウンド3で生成した他のロットと比較するための陽性対照として指定した。MORAb-003抗FRA抗体試料中の主要な中性N結合グリカンの分布についての予備的結果を図2に示す。MORAb-003抗FRA抗体試料中の中性グリカンの分布についてのさらなる結果を図3に示す。MORAb-003参照基準物質とは、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成し、外部の製造元が供給する、MORAb-003抗FRA抗体である。実施例3抗FRA抗体の結合アフィニティーの、抗体の培養条件およびグリカンの構造との相関MORAb-003抗FRA抗体試料の相対結合アフィニティーを、表面プラズモン共鳴分光法を介して決定した。組換えヒト葉酸受容体アルファFRA配列番号3を、アミン結合反応を介して研究グレードのCM5チップ表面に固定化した。0.02~44mg/mLの範囲の、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成し、外部の製造元が供給する、MORAb-003抗FRA抗体の参照基準物質の希釈液または変異体試料調製物を表面上に連続注入し、40秒間にわたり会合の進行を可能とした後で、結合レベルを測定した。サイクル間には、10mMのグリシン、pH2.0でフラッシュすることにより表面を更新した。MORAb-003濃度の関数としての結合レベルを、BiaEvaluation4.1GEHealthcareを用いて、参照基準物質および全ての試料についてプロットした。データを、5パラメータのロジスティック曲線近似に照らして近似し、参照基準物質と比較した各試料の相対結合効力を、STATLIAversion3.2BrendanTechnologiesを用いる平行線解析を介して決定した。結果を図4に示す。測定された効力欄の結果を計算するため、参照基準物質の結合効力を100と定めた。陽性対照を含めた全ての培養条件による結合アフィニティーが、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成し、外部の製造元が供給するMORAb-003抗FRA抗体と比較して低かった。実施例4抗FRA抗体のADCCの、抗体の培養条件およびグリカンの構造との相関MORAb-003抗FRA抗体試料を介するinvitroにおける抗体依存性細胞傷害作用ADCCを、以下の通りに測定した。FRA発現IGROV-1ヒト卵巣腺がん細胞Bernardら1985年、CancerRes、4巻:4970~4979頁を、カルボキシフルオレセインジアセテートスクシンイミジルエステルCFDASEで標識した。標識された細胞を、MORAb-003抗FRA抗体試料およびヒト末梢血単核細胞PBMCから誘導した標識されていないエフェクター細胞の希釈液と混合した。4時間のインキュベーション後、細胞集団を、残存する標識されたIGROV-1生細胞についてのフローサイトメトリーを介して評価した。MORAb-003抗FRA抗体の変異体試料ロットで処置した後で残存する細胞画分を、同一濃度の、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成し、外部の製造元が供給する、MORAb-003抗FRA抗体の参照基準物質調製物で処置した細胞の画分と比較した。結果を図5に示す。測定された効力欄の結果を計算するため、参照基準物質のADCCを100と定めた。相対効力欄の結果を計算するため、2つの陽性対照の測定されたADCCの平均を100と定めた。低温および低DOの細胞培養条件は、NGA2G0グリカンの百分率が高いMORAb-003抗FRA抗体のアイソフォームをもたらした。NGA2G0グリカンの存在は、ADCCの増大と相関した図6。この相関は、統計学的に有意であった。非フコシル化グリカンの存在は、ADCCの増大と相関した図7。この相関は、統計学的に有意であった。M3N2Fグリカンの存在は、ADCCの増大と逆相関した図8。実施例5抗FRA抗体の内在化活性の、抗体の培養条件およびグリカンの構造との相関MORAb-003抗FRA抗体試料の内在化活性を、抗ヒト二次抗毒素を用いるFRA発現細胞の殺滅度を介して評価した。MORAb-003抗FRA抗体試料の希釈液と、細胞傷害性の植物タンパク質であるサポリンHum-ZAP、AdvancedTargetingSystems,Inc.にコンジュゲートした一定量のヤギ抗ヒトIgG二次抗体とを、ウェル1つ当たりのヒトFRA発現IGROV-1細胞2,000個を含有する96ウェルの組織培養処理用マイクロ滴定プレートのウェルへと添加した。抗原が結合してMORAb-003-Hum-ZAP複合体が内在化する結果として、MORAb-003依存的な形での細胞毒素のIGROV-1細胞内への放出がもたらされる。したがって、内在化したMORAb-003抗FRA抗体の画分は、IGROV-1細胞の殺滅度に基づいて評価することができる。IGROV-1細胞の増殖は、SpectraMax190マイクロプレートリーダーMolecularDevicesCorp.を用いる、残存する生細胞のSulforhodamineBlue染色を介して測定した。データOD540対MORAb-003抗FRA抗体の濃度は、5パラメータのロジスティック曲線近似アルゴリズムに照らして近似した。IGROV-1細胞の50の殺滅を結果としてもたらすMORAb-003抗FRA抗体の濃度IC50は、各曲線について測定した曲線近似パラメータから計算した図9および図10を参照されたい。MORAb-003抗FRA抗体試料の内在化活性はまた、FACSを介しても測定した。ヒトFRA発現IGROV-1細胞を、1μg/mLのMORAb-003抗FRA抗体試料と共に4°Cで30分間にわたりインキュベートし、PBSで洗浄した。次いで、細胞を、40μg/mLのFITCコンジュゲート抗ヒトIgG抗体と共に4°Cで30分間にわたりインキュベートし、PBSで洗浄した。次いで、細胞を、37°Cで所与の時間にわたりインキュベートして、内在化を開始させた。細胞を、4°Cで酸性のグリシン緩衝液で洗浄して、膜結合した全ての抗体を除去した。酸性のグリシン緩衝液による洗浄後、4°Cの細胞についてフローサイトメトリーを実施した。細胞膜内に内在化された抗体だけが、酸性の洗浄後においても保持され、蛍光シグナルをもたらすので、全ての実験において、内在化は、時間依存的な平均蛍光強度MFIの増大として定義した。図11は、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成し、外部の製造元が供給する、MORAb-003抗FRA抗体の参照基準物質により実施したFACSによる結合実験の結果についてのヒストグラムを示す。影を付した領域P1集団は、FITCコンジュゲート抗ヒトIgG抗体と共にインキュベートした細胞に対応する。P2集団0の対照は、対照としての非関与のヒトIgGおよびFITCコンジュゲート抗ヒトIgG抗体と共にインキュベートした細胞に対応する。P3集団は、抗FRA抗体およびFITCコンジュゲート抗ヒトIgG抗体と共にインキュベートし、酸性のグリシン緩衝液で洗浄した細胞に対応する。P4集団100の対照は、抗FRA抗体およびFITCコンジュゲート抗ヒトIgG抗体と共にインキュベートし、PBS緩衝液により洗浄した細胞に対応する。MORAb-003抗FRA抗体の内在化百分率は、以下:MFI[試料]-MFI[0の対照]/MFI[100の対照]-MFI[0の対照]×100の通りに、相対蛍光強度から計算した。図12は、時間と、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成し、外部の製造元が供給する、MORAb-003抗FRA抗体の参照基準物質の、IGROV-1細胞による内在化との間の関係を示す。y軸は、ある時間x軸にわたり、IGROV-1細胞集団についてのフローサイトメトリーを介して測定したMFIの、各時点における全結合と比べた百分率を表す。図13は、時間と、表4で記載されるMORAb-003抗FRA抗体試料のほか、本明細書で定義した基準の培養条件下で生成し、外部の製造元が供給する、MORAb-003抗FRA抗体の参照基準物質の、IGROV-1細胞による内在化との間の関係を示し、MORAb-003refstdと表示された3つの試料は、FACS実験の異なる試行において用いられる同じバッチの抗体を表す。図14は、図13におけるデータの、4パラメータのロジスティック曲線への非線形回帰を介する近似を示す。結果として得られるEC50曲線の近似パラメータを用いて、図15にデータを追加した。図15は、FACSによるMORAb-003抗FRA抗体試料の内在化研究の結果をまとめ、EC50値を示す。EC50が低値であれば、迅速な内在化が示される。本明細書で定義した基準の培養条件下で生成し、外部の製造元が供給する、MORAb-003抗FRA抗体の参照基準物質は、約2時間120分間で内在化のピークに達した。試料NB859-26およびNB859-27培養の17および20日後における生成物のEC50値が低いことから、陽性対照より迅速な内在化過程が示される。また、試料NB859-28低溶存酸素で処置した培養物も、陽性対照より迅速な内在化過程を示した。図16は、実施例3、4、および5で記載される活性データをまとめる。本明細書で別段に定義しない限り、本発明との関連で用いられる科学技術用語は、当業者により一般に理解される意味を有するものとする。さらに、文脈により別段に要請されない限り、単数形の用語は、複数形を包含するものとし、複数形の用語は単数形を包含するものとする。一般に、本明細書で記載される細胞培養および組織培養、分子生物学、免疫学、微生物学、遺伝学、ならびにタンパク質化学および核酸化学およびハイブリダイゼーションとの関連で用いられる専門用語およびこれらの技法は、当技術分野において周知であり、一般的に用いられる専門用語および技法である。別段に示さない限り、本発明の方法および技法は一般に、当技術分野において周知であり、本明細書の全体で引用されて論じられている多様な一般的参考文献およびより特殊な参考文献で記載されている、従来の方法を介して実施する。例えば、参照により本明細書に組み込まれる、SambrookJ.RussellD.、MolecularCloning:ALaboratoryManual、3版、ColdSpringHarborLaboratoryPress、ColdSpringHarbor、N.Y.2000年;Ausubelら、ShortProtocolsinMolecularBiology:ACompendiumofMethodsfromCurrentProtocolsinMolecularBiology、Wiley,JohnSons,Inc.2002年;HarlowおよびLane、UsingAntibodies:ALaboratoryManual、ColdSpringHarborLaboratoryPress、ColdSpringHarbor、N.Y.1998年;ならびにColiganら、ShortProtocolsinProteinScience、Wiley,JohnSons,Inc.2003年を参照されたい。酵素反応法および精製法は、当技術分野で一般に達成されるか、または本明細書で記載される通り、製造元の仕様により実施する。本明細書で記載される分析化学、有機合成化学、ならびに医薬品化学および薬化学との関連で用いられる専門用語、ならびにこれらの実験手順および実験法は、当技術分野において周知であり、一般的に用いられる専門用語ならびに実験手順および実験法である。本明細書で引用される全ての刊行物、特許、特許出願、または他の文書は、各個別の刊行物、特許、特許出願、または他の文書が、全ての目的について、参照により、組み込まれることが個別に示されたと仮定した場合と同程度に、全ての目的について、参照により、それらの全体において本明細書に組み込まれる。本明細書および実施形態の全体において、~を含むcompriseという語または~を含むcomprisesまたは~を含むcomprisingなどのその変化形は、言及された整数または整数群の包含を含意するものであり、他の任意の整数または整数群の除外を含意するものではないことが理解される。"