容積測定上の莢膜多糖CP産生量をより高くするための莢膜形成細菌を培養する細菌培養方法であって、以下を含む方法:a前記CPを発現する細菌株の接種源を提供すること;b前記菌株を、pH7.2で発酵させることにより培養すること、但し、流加培地の添加速度が、予め設定したpHを維持するためのアルカリ混合物添加の速度と同等である;c培地を35~38°C、50~150rpmの攪拌下、0.1~0.5vvmの空気流量で発酵させること。前記バクテリアが流加培養で増殖される、請求項1に記載の細菌培養方法。流加培養によるCP収量における容積測定上の増加率が、回分培養又は連続培養の条件と比較して150~400である、請求項2に記載の細菌培養方法。流加培養によるCPの収量が900mg/L~2000mg/Lである、請求項3に記載の細菌培養方法。前記流加培地が、少なくとも一つの炭素源、少なくとも一つの窒素源、少なくとも一つの塩、及び少なくとも一つのアミノ酸を含み得る、請求項1に記載の細菌培養方法。前記炭素源がグルコースである、請求項5に記載の細菌培養方法。前記窒素源が、以下のリストからの3つ以下から成る、請求項5に記載の細菌培養方法:酵母自己分解物、イーストナイトロジェンベース、ペプトン、トリプトン、カザミノ酸、大豆粕、ハイソイHySoy、酵母エキス、及びトリプチックソイブロス。前記塩が、硫酸カリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、硫酸マグネシウム、及びそれらの混合物から選択され得る、請求項5に記載の細菌培養方法。前記流加培地が、以下の成分を含み得る、請求項5に記載の細菌培養方法:100~500g/Lの範囲のグルコース、1~7.5g/Lの範囲の硫酸マグネシウム、40~150g/Lの範囲のハイソヤHy-Soya、5~50g/Lの範囲の酵母エキス、0.002~0.005g/Lの範囲のチアミン塩酸塩、0.2~0.5g/Lの範囲のシステイン、0.2~0.5g/Lの範囲の塩化カルシウム。前記流加培地が、以下の成分を含み得る、請求項9に記載の細菌培養方法:100~500g/Lの範囲のグルコース、5~50g/Lの範囲の酵母エキス、0.002~0.005g/Lの範囲のチアミン塩酸塩、0.2~0.5g/Lの範囲のシステイン、0.2~0.5g/Lの範囲の塩化カルシウム。前記流加培地が、以下の成分を含み得る、請求項9に記載の細菌培養方法:100~200g/Lの範囲のグルコース、1~3g/Lの範囲の硫酸マグネシウム、50~150g/Lの範囲のハイソヤHy-Soya、及び15~25g/Lの範囲の酵母エキス。前記アルカリ混合物が、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウム、及び水酸化カルシウムから成る群から選択される少なくとも2つの塩基を含有する、請求項1に記載の細菌培養方法。水酸化ナトリウムと炭酸ナトリウムとの指定比率が、容積測定上のCP産生量をより高めるように選択される、請求項12に記載の細菌培養方法。前記比率が1:4~4:1の範囲にある、請求項13に記載の細菌培養方法。水酸化ナトリウムの濃度が1.5~3.0Mである、請求項13に記載の細菌培養方法。炭酸ナトリウムの濃度が10~20w/vである、請求項13に記載の細菌培養方法。前記細菌が、ストレプトコッカスニューモニエ、ナイセリアメニンジティディス、スタフィロコッカスアウレウス、ヘモフィルスインフルエンゼ、A群連鎖球菌、及びB群連鎖球菌から選択される、請求項1に記載の細菌培養方法。本開示は、細菌を培養するプロセスであって、流加発酵の際の流加添加の速度が、予め設定したpHを維持するためのアルカリ混合物添加の速度と同等である、プロセスを提供する。本発明のその他態様によれば、特定の比率のNaOH及びNa2CO3から成るアルカリ混合物が、a予め設定したpHを維持するために、かつbより高い莢膜多糖収量を得るために用いられ得る。Na2CO3単独の使用は、増殖及びpH制御に好適な培地を提供し得るが、このようなNa2CO3の制限条件は、莢膜多糖を産生するのには過酷な条件であり、Na2CO3必要量を高くしてしまう。従って、NaOHとNa2CO3との混合物がpHを維持するために用いられる場合、増殖は低くなり得るが、アルカリ消費量がより少ないことに起因して、莢膜多糖の特異的生産性並びに容積測定上の生産性をより高める。本発明によれば、グルコースが乳酸に変化し、pHが低下し始めた際には、pHは、アルカリ混合物を添加することにより維持することができ、それと同時に培地中の枯渇したグルコースを補給するためにグルコースが添加される。本発明の好ましい実施形態では、発酵流加成分は、少なくとも1つの炭素源、少なくとも1つの窒素源、少なくとも1つのマグネシウム源を含むことができ、それら成分は、アルカリ混合物の添加速度と同等の流加速度で、特定の細胞密度の回分発酵に流加され得る。本発明の一実施形態によれば、前記アルカリ混合物は、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウム、及び水酸化カルシウムから成る群から選択される少なくとも2つの塩基を含有する。また、水酸化ナトリウムと炭酸ナトリウムとの指定比率が、容積測定上のCP産生量をより高めるように選択される。炭酸ナトリウムに対する水酸化ナトリウムの指定比率は、1:1~4:1であり得る。本発明によれば、NaOHは、pHを維持するための混合物としてNa2CO3と共に用いられた場合に、CPの生産性をさらに増強した。pHを維持するためにNa2CO3を単独で用いた場合、増殖に好適な培地を提供した。しかしながら、Na2CO3の同制限条件では、莢膜多糖を産生するのには過酷な条件を提供するものであった。pHを維持するためにNaOHとNa2CO3との混合物を使用した場合、増殖は低かったが、CPの生産性は増加した。好ましくは、本発明によれば、流加培養においてストレプトコッカス属を培養する方法であって、高収量のCPが生産される、方法が提供される。好ましくは、培養培地からのCPの収量が、900~2000mg/L、或いはそれ以上である。従って、本流加培養法によれば、容積測定上の収量におけるCPの生産が回分培養と比較して150~350増加することが可能になる。場合によっては、収量が、回分培養を用いて生産した量の少なくとも2倍、より好ましくは4倍になり得る。本発明の他の実施形態によれば、前記流加培地は、少なくとも1つの炭素源、少なくとも1つの窒素源、少なくとも1つの塩、及び少なくとも1つのアミノ酸を含み得る。好ましくは、前記炭素源はグルコースである。窒素源は、酵母自己分解物、イーストナイトロジェンベース、ペプトン、トリプトン、カザミノ酸、大豆粕、ハイソイHySoy、酵母エキス、及びトリプチックソイブロスから選択され得る。塩は、硫酸カリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、硫酸マグネシウム、及びそれらの混合物から選択され得る。本発明によれば、流加培地は、以下の成分を含み得る:100~500g/Lの範囲のグルコース、1~7.5g/Lの範囲の硫酸マグネシウム、40~150g/Lの範囲のハイソヤ、5~50g/Lの範囲の酵母エキス、0.002~0.005g/Lの範囲のチアミン塩酸塩、0.2~0.5g/Lの範囲のシステイン、0.2~0.5g/Lの範囲の塩化カルシウム。また、流加培地は、以下の成分を含み得る:100~500g/Lの範囲のグルコース、5~50g/Lの範囲の酵母エキス、0.002~0.005g/Lの範囲のチアミン塩酸塩、0.2~0.5g/Lの範囲のシステイン、0.2~0.5g/Lの範囲の塩化カルシウム。或いは、前記流加培地は、以下の成分を含み得る:100~500g/Lの範囲のグルコース、0.5~7.5g/Lの範囲の硫酸マグネシウム、40~150g/Lの範囲のハイソヤ、及び5~50g/Lの範囲の酵母エキス。本発明の好ましい実施形態によれば、流加培地は、以下の成分を含み得る:100~200g/Lの範囲のグルコース、1~3g/Lの範囲の硫酸マグネシウム、50~150g/Lの範囲のハイソヤ、及び15~25g/Lの範囲の酵母エキス。本発明によれば、前記新規流加培養プロセスが、エシェリキアコリEscherichiacoli、フランシセラツラレンシスFrancisellatularensis、ヘモフィルスインフルエンゼHaemophilusinfluenzae、クレブシエラ属Klebsiella、モラクセラカタラーリスMoraxellacatarrhalis、ナイセリアメニンジティディスNeisseriameningitidis血清型A、C、W135、Y及びX、ポルフィロモナスジンジバリスPorphyromonasgingivalis、シュードモナスエルギノーサPseudomonasaeruginosa、バークホルデリアセパシアBurkholderiacepacia、サルモネラチフィSalmonellatyphi、サルモネラチフィムリウムSalmonellatyphimurium、サルモネラパラチフィSalmonellaparatyphi、シゲラディゼンテリエShigelladysenteriae、シゲラフレックスネリShigellaflexneri、シゲラソネイShigellasonnei、ビブリオコレラVibriocholera、エンテロコッカスフェカーリスEnterococcusfaecalis、エンテロコッカスフェシウムEnterococcusfaecium、A群連鎖球菌、B群連鎖球菌、マイコバクテリウムツベルクローシスMycobacteriumtuberculosis、スタフィロコッカスアウレウスStaphylococcusaureus、スタフィロコッカスエピデルミディスStaphylococcusepidermidis及びストレプトコッカスニューモニエStreptococcuspneumoniaeから成る群から選択されるものの莢膜多糖を調製するために利用され得る。<実施例1>ストレプトコッカスニューモニエ血清型1に関する流加培養開発の最適化のための流加法評価:各種流加法を、流加について評価した。DOスタット法は、ストレプトコッカスニューモニエの発酵には適用可能ではなかった。ストレプトコッカスニューモニエは、微好気性細菌であるので、発酵プロセスの際は、表面のみの曝気エアレーションが必要であった。回分方式発酵の際、発酵槽におけるストレプトコッカスニューモニエの部分的な増殖の後、溶存酸素は0付近であった。5つの異なる流加法を流加発酵に試した。1.pHスタット法:pHスタット流加を、設定pHポイントによって制御するものであり、培養物のpHが設定pHを越えて上昇した場合には炭素源を培地に添加し、培養物のpHが設定pHを下回った場合には、炭素流加を停止した。2.定速流加法:本方法では、1Lの濃縮フィードが1.6Lのブロス培養物に4時間、4.2mL/分で与えた。3.指数的流加法:流加速度は、1mL/分から開始し、ODに伴って増加させた。流加速度は、ODにおける1ユニット増分当たり0.5mL/分ずつ増加させた。4.一定グルコース濃度:残留グルコース濃度を、流加発酵の際、0.5g/L付近に維持するようにした。5.pH依存流加法:本方法では、pHは、Na2CO3を用いて維持した。培地中のグルコース枯渇に対して、pHを維持するために培地に流加したNa2CO3と同じ速度で、グルコースを添加した。エヌビーエスバイオフロ115NBSBioflo115及びバイオエンジニアリングエージー発酵槽BioengineeringAGfermenterを、これら全ての実験に使用した。本試験は、3L型のエヌビーエスバイオフロ115発酵槽モデルで実施し、30L型のバイオエンジニアリングエージー発酵槽にスケールアップした。さらなるスケールアップは、450L型のバイオエンジニアリング発酵槽で実施できた。200g/Lのグルコース及び5g/LのMgSO4を、全ての流加発酵に流加培地として用いた。発酵条件は、全ての流加実験において同一とした。pHは、発酵プロセスの間、20Na2CO3溶液で維持した。流加発酵の際、以下のパラメータを維持した。温度36.5±0.5、pH7.1±0.2、RPM:100、気流表面曝気:0.5vvm表1:各種流加法に関する血清型1のCP収量<実施例2>ストレプトコッカスニューモニエ血清型1のCPの流加発酵のための流加培地の最適化:以下の各種培地を発酵の際、流加に用いた。1.グルコース:200g/L2.グルコース200g/L、MgSO42.5g/L3.グルコース:200g/L、MgSO4:2.5g/L、酵母エキス:25g/L4.グルコース:100g/L、MgSO4:5g/L、酵母エキス:15g/L、ハイソヤHy-soya:50g/L5.グルコース:200g/L、MgSO4:2.5g/L、酵母エキス:25g/L、ハイソヤHy-soya:100g/L6.グルコース:200g/L、MgSO4:2.5g/L、酵母エキス:25g/L、ハイソヤHy-soya:100g/L、チアミン塩酸塩:0.02g/L、CaCl22H2O:0.0.02g/L、システイン:0.2g/L7.グルコース:100g/L、MgSO4:1g/L、酵母エキス:10g/L、ハイソヤHy-soya:40g/L、チアミン塩酸塩:0.04g/L、CaCl22H2O:0.04g/L、システイン:0.4g/L全ての発酵条件を上述の通り維持した。pH依存流加法が、全てのバッチに対して流加発酵の流加のために用いられた。第4番目の流加培地をさらなる流加実験のために利用した。表2:各種流加培地組成物に対する血清型1のCP収量<実施例3>pHを維持するために用いたアルカリ混合物:NaOHは、pHを維持するための混合物としてNa2CO3と共に用いた場合に、CPの生産性をさらに増強した。Na2CO3単独では、pHを維持するために用いた場合、増殖に好適な培地を提供した。このようなNa2CO3の制限条件ではCPを産生するのには過酷な条件が提供された。NaOHとNa2CO3との混合物をpHを維持するために用いた場合、増殖は低かったが、CP生産性は増加した。8NaOHと20Na2CO3を、1:1、2:1、3:1、及び4:1の比率で用いた。実施例2の流加培地組成物3を以下の流加培養に流加物として用いた。表3:ストレプトコッカスニューモニエ血清型1の流加発酵に関しpH維持のために用いたアルカリ混合物<実施例4>各種血清型のストレプトコッカスニューモニエを最適化した流加培養条件で試した。血清型1のための流加培養条件を、その他血清型についても用いた。流加発酵を実施する上で、以下の条件を考慮した。1.pH依存流加法2.用いたアルカリ混合物3.最適化流加培地4.その他発酵は、上記と同様であった。流加培養プロセスの新規に最適化した条件を利用し、血清型1、5、6A、6B、7F、9V、14、19A、19F及び23Fを用いた。表4:各種血清型に関する流加発酵におけるCP収量このように、本発明の流加培養法は、150~350に渡りCP収率の容積測定上の増加をもたらし、最終CP収量は900~2000mg/Lに渡る。本発明が前述の説明のための実施例の詳細に限定されるものではなく、かつ本発明が、その本質的な属性から逸脱することなくその他特定の形態に具体化され得ることは、当業者に明らかである。従って、本実施形態及び実施例は、あらゆる点で説明のためのものであって、前述の説明よりも添付の特許請求の範囲を参照すべきことが要求されており、特許請求の範囲と同等の意味ないし範囲内に入るあらゆる変更は包含され、或いはそれ故に包含されることが意図されている。