"固相抗体スクリーニング検定で抗体を精製して、抗体または抗原の存在または非存在を示すための検定の成分として使用可能な高密度に官能化された指標細胞を産生する方法であって、A、B、AB、およびMNS抗原のうちの1つである所定の抗原で親和性カラムを被覆する段階と、ヒト血漿を前記親和性カラムに導入して、前記ヒト血漿に分散された抗体を前記所定の抗原に付着させる段階と、免疫親和性クロマトグラフィを用いて前記抗体を精製し、精製された前記抗体を残留させ、その他の非所望の抗体を除去する精製段階と、精製された前記抗体を赤血球に暴露して、精製された前記抗体を前記赤血球に結合させ、前記赤血球を被覆する段階と、被覆された前記赤血球を、精製された前記抗体に特異性を有する追加的な抗体に暴露して、前記追加的な抗体を精製された前記抗体に付着させ、前記赤血球を被覆することにより、指標細胞を形成する段階とを備える方法。前記所定の抗原はA抗原であり、前記抗体は抗A抗体である請求項1に記載の方法。免疫親和性クロマトグラフィ精製を用いて、前記抗A抗体をIgG抗体またはIgM抗体に分離する段階をさらに備える請求項2に記載の方法。前記精製の産物はIgG抗体であり、前記追加的な抗体は抗IgG抗体である請求項3に記載の方法。被覆された前記赤血球を、前記追加的な抗体に暴露する前に、洗浄する段階をさらに供える請求項1に記載の方法。前記精製段階は、前記ヒト血漿を洗浄する段階と、緩衝液を用いて前記所定の抗体を溶出する段階とを有する請求項1に記載の方法。前記親和性カラムにおいて2つ以上の抗原を用いて、前記赤血球上の前記抗体の被覆密度を高める請求項1に記載の方法。前記2つ以上の抗原は、Rh、Kell、Kidd、およびDuffy抗原を含む請求項7に記載の方法。前記洗浄する段階は、所定の遊離抗体を含まない溶液を用いる請求項6に記載の方法。所定の抗原プロファイルを持つ赤血球で被覆された基質を有する固相システムに、少なくとも血漿およびタンパク質を導入して、前記所定の抗体を前記基質上の前記赤血球に結合させる段階と、前記システムを緩衝溶液で洗浄して、非結合のタンパク質および残留する所定の抗体を除去する段階と、前記追加的な抗体で被覆された前記指標細胞を導入して、前記基質上の前記赤血球上に結合した前記所定の抗体に、前記追加的な抗体を結合させる段階とをさらに備える請求項1に記載の方法。前記固相システムに導入された前記少なくとも血漿およびタンパク質を37°Cで定温放置する段階をさらに備える請求項10に記載の方法。前記指標細胞を被覆する前記追加的な抗体は抗IgG抗体であり、前記所定の抗体はIgG抗体であり、前記抗IgG抗体は前記IgG抗体に結合する請求項10に記載の方法。凝集反応が期待される結合が存在する場合を判定する請求項10に記載の方法。前記所定の抗原の発現レベルは、赤血球1個当たり、抗原1万から3万個である請求項1に記載の方法。従来用いられてきたD抗原よりも、A、B、AB、およびMNS抗原のほうが発現度が顕著に高いので、本発明では、特定の抗体または抗原の存在または非存在を示すべく用いることができるより高密度に官能化された指標細胞を産生するべく、本願発明者らは、より発現度が高い抗原系を標的とした。本発明のこれらの抗原系は、A、B、もしくはAB抗原、またはMNS抗原を含んでよい。当業者には周知であるように、ABO血液型系はヒトについての最重要の血液型系であり、A型、B型、AB型、およびO型を含む。ABO抗原は、赤血球RBC膜の陰イオン交換体であるバンド3タンパク質に主に付着する長いポリラクトサミン鎖の末端に発現し、少数の抗原決定基は、中性スフィンゴ糖脂質に発現する。MNS抗原系は、第四染色体上のグリコフォリンA遺伝子およびグリコフォリンB遺伝子に基づいたヒト血液型系である。46個の抗原のうち最重要のものは、M、N、S、s、およびU抗原である。たとえば、抗A抗体13等の抗体図1B参照に高い親和性がある本発明のこれらの抗原系は、発現度が顕著であり、1個の赤血球10当たり100万個の抗原という発現度に近いIgG部位の数が100倍に増える可能性がある。したがって、A抗原部位として1個の赤血球10当たり約100万個の抗原14があることは、従来、D抗原部位として、1個の細胞10当たり約1万個から3万個の抗原12があること図1A参照とは、大いに対照的である。抗原系の発現度におけるこの顕著な増加によって、指標細胞が固相に結合する運動性および強度が引き上げられ、これにより検定性能が向上しうる。本発明の一典型的実施形態では、図2に示すように、カラム親和性精製たとえば、免疫親和性クロマトグラフィを用いて、親和性および濃度が高い抗A抗体を精製することができる。免疫親和性クロマトグラフィでは、固形培地をカラム15に詰め、初期混合物16をカラム15に流して凝固settingさせ図2a、洗浄緩衝液17をカラム15に流し図2b、その後に溶出緩衝液18をカラム15に適用して図2c回収するカラムクロマトグラフィにより、固相への結合を実現してよい。これらの段階は、通常、周囲圧力下で実行される。この手順において、ヒト血液16からの抗体19の親和性精製は、たとえば、血液型がB型の供血者から得られるヒト血漿16つまり、天然の抗体を用いて行われる図2a参照。したがって、ヒト血漿16が特定の抗原20に対する抗体19を含有していることが分かっている場合、それを親和性精製を用いて精製することができる。次に、関心対象19の特異性に対応する抗原を、アガロース等の固体担体に共有結合させて、ヒト血漿16から抗体19を精製するときに、親和性リガンドとして用いることができる。カラムへの炭水化物つまり、A抗原の親和性分離/結合は、たとえば、RobertK.Scopesによるタンパク質精製第3版、Springer,NY,NY、1993、およびGregT.Hermansonによる生物学的結合bioconjugate技術第2版、Elsevier,NY,NY20008に開示されており、これらを参照として本明細書に組み込む。本発明のこの典型的実施例では、段階100で、アミンハンドルaminehandleを有する合成A抗原20を市販の親和性カラム15に結合させる。カラム15は、当該A抗原20で被覆される。次に、段階101図2a参照で、血液型がB型のヒト供血者からのソース血漿16の粗生成物をカラム15に暴露すると、抗A抗体19が固体担体上のA抗原20に付着する。次に、段階102で、抗A抗体19を、RobertK.Scopesによるタンパク質精製上記に開示されるように、周知の沈殿技術もしくは親和性技術により精製して、関心対象の抗体19を取り出す。これらの技術には、洗浄17図2b参照と、pHが2.8のグリシン等の低pH緩衝液18を用いた関心対象の抗体19の溶出図2c参照とが含まれる。溶出液を中性のトリス緩衝液もしくはリン酸緩衝液に回収して、低pH溶出緩衝液を中和し、抗体19の活動の低下を阻止する。この手順により、ヒト血漿16から非所望の抗体19が除去され、標的の抗体19が精製される。抗A抗体19は、上記の同じ技術を用いて、さらに、IgGまたはIgM抗体21に分離することができるたとえば、タンパク質Gカラムは、IgMでなくIgGに選択的に結合する。したがって、次に、段階103で、血液型がA型の赤血球10A抗原20を有するを、この精製産物つまり、IgG抗体21に暴露する図2d参照と、IgG抗体21の精製産物は、赤血球10に結合して被覆する。次に、段階104で、被覆された細胞10を、Sinorらに記載されるように、周知の方法にしたがって洗浄する。次に、段階105で、細胞10を抗IgG抗体22に暴露する。抗IgG抗体22は、IgG抗体21に特異性を有するので、IgG抗体21に付着し、指標細胞23を被覆する図2e参照。この段階は、使用前に実行してよくつまり、IgGで被覆された赤血球を抗IgGで予め感作する、または使用中に実行してよい単に、IgGで被覆された指標を抗IgGと混合する。したがって、本発明は、D抗原よりも発現度が高いA、B、AB、およびMNS抗原を用いることにより、抗体または抗原の存在または非存在を示すべく、その他の成分とともに用いることができる、より高密度に官能化された指標細胞23が産生されるべき新規かつ予期されない手順を開示するものである。本発明に係る別の実施形態では、ヒト赤血球は多数の抗原系を有しているので、たとえば、IgG抗体被覆の密度を高めるべく、同時に複数の抗原系を標的としてよい。たとえば、Rh抗原、Kell抗原、およびDuffy抗原を発現する赤血球を選択してこの赤血球を、これらの群groupsに特異性を有する抗体の混合物に暴露してよい。したがって、同時に複数の群を標的とすることにより、被覆密度をより高くすることができる。本発明の技術によって、洗浄サイクルに対する制約も減少しうる。クラス特異的class-specificな免疫グロブリンつまり、抗IgG抗体に頼る従来の多くの検定では、非結合の抗体19をシステムから除去することが必要であるたとえば、図2b参照。これをしない場合は、抗IgG抗体22図2e参照が、非特異的genericなIgG抗体21で飽和し、特異結合が検出されない。これは、遊離IgG抗体21を含まない溶液でシステムを洗浄することにより防止される。しかし、残留IgG抗体21が超低レベルとなることが求められる場合は、この洗浄プロセスでは不十分となり得るので、抗IgG抗体22が残留IgG抗体21で飽和しないことを確実にすることが重要である。これは、発現度が高い抗原系を選択し、抗IgG抗体22のいくつかが飽和してもしたがって、非活性となっても、特異結合が検出されるように十分な数の抗IgG抗体22が残るようにすることで、達成できる。本発明に係る一典型的実施形態において、図3aは、段階200で、血漿、タンパク質等24が固相システムに導入され、37°Cで定温放置される様子を示す。基質25は、既知の抗原プロファイルを持つヒト赤血球10で被覆されている。段階201で、所望の特異抗体21この場合は、IgG抗体21が、基質25上で赤血球10つまり、Kell系のK抗原に特異結合する。段階202図3b参照で、システムを溶液26つまり、生理食塩水で洗浄し、非結合のタンパク質を除去する。血漿24は、複数種類の抗体を多数含んでいるので、洗浄工程を良好に実行して、システムに残存遊離する残留IgG抗体21を除去することが重要である。段階203図3c参照で、多数の結合部位を有する指標赤血球23上記の方法で産生された、抗IgG抗体22で被覆されたプローブ赤血球10をシステムに導入し、抗IgG抗体22を基質25上の赤血球10の上のIgG抗体21に結合させる。上記したように、システムに血漿24からのIgG抗体21が過剰に存在すると、プローブ赤血球23が被覆され、基質25での結合が阻止されるので、多数の結合部位を有するプローブ指標細胞23を用いることと同様、システムを念入りに洗浄することが重要である。固相上での凝集反応が予想される溶液内でも、結合が存在するかを判定するべく、本発明を用いてよい。本発明の上記の実施形態は、本発明の原理が明瞭に理解されるように記載された可能な実施例にすぎないということを強調する。本発明の趣旨および原理から逸脱することなく、本発明の上記の実施形態に変更および改変を行ってよい。このような変更および改変の全てが、本明細書において本発明の範囲に含まれ、以下の特許請求の範囲により保護されることが意図されている。"