"a線維芽細胞増殖因子23FGF23またはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチドであって、FGF23が、Q156、C206およびC244の1つ以上の位置で変異を有するポリペプチド、およびb減少したFc-ガンマ-受容体に対する親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたFcフラグメント、またはクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドのいずれか、またはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体、および、所望によりcリンカーを含む、融合ポリペプチド。aのポリペプチドが、bのポリペプチドのN-末端に作動可能に連結している、請求項1に記載の融合ポリペプチド。bのポリペプチドが、aのポリペプチドのN-末端に作動可能に連結している、請求項1に記載の融合ポリペプチド。aのポリペプチドおよびbのポリペプチドが、ポリペプチドリンカーにより連結している、請求項1に記載の融合ポリペプチド。ポリペプチドリンカーが、配列番号:11、配列番号:12、配列番号:13、配列番号:14、配列番号:15、配列番号:16、配列番号:17および配列番号:18からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項4に記載の融合ポリペプチド。ポリペプチドリンカーが、配列番号:12、配列番号:13、配列番号:14、配列番号:15、配列番号:16、配列番号:17および配列番号:18からなる群から選択されるアミノ酸配列の少なくとも1、最大約30の繰り返しを含む、請求項4に記載の融合ポリペプチド。aのポリペプチドが、該ポリペプチドリンカーのN-末端にペプチド結合により連結しており、bのポリペプチドが、該ポリペプチドリンカーのC-末端にペプチド結合により連結している、請求項4に記載の融合ポリペプチド。aのポリペプチドが、該ポリペプチドリンカーのC-末端にペプチド結合により連結しており、bのポリペプチドが、該ポリペプチドリンカーのN-末端にペプチド結合により連結している、請求項4に記載の融合ポリペプチド。クロトータンパク質の細胞外サブドメインが、KL-D1ドメインまたはKL-D2ドメインである、請求項1に記載の融合ポリペプチド。aのポリペプチドが、クロトータンパク質の少なくとも2つの細胞外サブドメインを含む、請求項1に記載の融合ポリペプチド。クロトータンパク質の少なくとも2つの細胞外サブドメインが、タンデムリピートにおける少なくとも2つのKL-D1ドメインである、請求項10に記載の融合ポリペプチド。クロトータンパク質の少なくとも2つの細胞外サブドメインが、タンデムリピートにおける少なくとも2つのKL-D2ドメインである、請求項10に記載の融合ポリペプチド。クロトータンパク質の少なくとも2つの細胞外サブドメインが、KL-D1ドメインおよびKL-D2ドメインを含む、請求項10に記載の融合ポリペプチド。aのポリペプチドが、クロトータンパク質の細胞外ドメインである、請求項1に記載の融合ポリペプチドシグナルペプチドをさらに含む、請求項1に記載の融合ポリペプチド。シグナルペプチドがクロトーシグナルペプチドである、請求項15に記載の融合ポリペプチド。シグナルペプチドがIgGシグナルペプチドである、請求項15に記載の融合ポリペプチド。線維芽細胞増殖因子受容体に特異的に結合する、請求項1に記載の融合ポリペプチド。クロトータンパク質がアルファ-クロトーである、請求項1に記載の融合ポリペプチド。クロトータンパク質がベータ-クロトーである、請求項1に記載の融合ポリペプチド。線維芽細胞増殖因子が、線維芽細胞増殖因子-23FGF23または線維芽細胞増殖因子-23変異体R179Qである、請求項19に記載の融合ポリペプチド。線維芽細胞増殖因子が、線維芽細胞増殖因子-19または線維芽細胞増殖因子-21である、請求項20に記載の融合ポリペプチド。配列番号:54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67または68のアミノ酸配列と95以上同一であるアミノ酸配列を含む、請求項1に記載の融合ポリペプチド。配列番号:58または配列番号:68のアミノ酸配列を有する、請求項1に記載の融合ポリペプチド。FcLALAを含む、請求項1に記載の融合ポリペプチド。請求項1に記載の融合ポリペプチドおよび薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。請求項1に記載の融合ポリペプチドをコードする配列を含む核酸。請求項27に記載の核酸を含む宿主細胞。請求項27に記載の核酸を含むベクター。a線維芽細胞増殖因子23FGF23またはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチドであって、FGF23が、Q156、C206およびC244の1つ以上の位置で変異を有するポリペプチド、およびb減少したFc-ガンマ-受容体に対する親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたFcフラグメント、またはクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドのいずれか、またはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体、および、所望によりcリンカーを含む、融合ポリペプチドを含む治療有効用量の医薬組成物を必要とする個体に投与することを含む、個体における加齢関連状態を処置または予防するための方法。加齢関連状態が、サルコペニア、皮膚萎縮、筋肉疲労、脳萎縮、アテローム性動脈硬化症、動脈硬化症、肺気腫、骨粗鬆症、骨関節症、免疫不全、高血圧、認知症、ハンチントン病、アルツハイマー病、白内障、加齢黄斑変性症、前立腺癌、卒中、期待寿命の低下、記憶障害、しわ、腎機能障害および加齢性難聴からなる群から選択される、請求項30に記載の方法。クロトータンパク質がアルファクロトータンパク質である、請求項30に記載の方法。加齢関連状態が筋肉疲労であり、クロトータンパク質がアルファクロトータンパク質であり、線維芽細胞増殖因子が線維芽細胞増殖因子23である、請求項31に記載の方法。a線維芽細胞増殖因子23FGF23またはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチドであって、FGF23が、Q156、C206およびC244の1つ以上の位置で変異を有するポリペプチド、およびb減少したFc-ガンマ-受容体に対する親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたFcフラグメント、またはクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドのいずれか、またはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体、および、所望によりcリンカーを含む、融合ポリペプチドを含む治療有効用量の医薬組成物を必要とする個体に投与することを含む、個体における代謝障害を処置または予防するための方法。代謝障害が、II型糖尿病、メタボリックシンドローム、高血糖および肥満からなる群から選択される、請求項34に記載の方法。融合ポリペプチドが、aベータ-クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチド、およびb線維芽細胞増殖因子21を含むポリペプチドを含む、請求項34に記載の方法。a線維芽細胞増殖因子23FGF23またはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチドであって、FGF23が、Q156、C206およびC244の1つ以上の位置で変異を有するポリペプチド、およびb減少したFc-ガンマ-受容体に対する親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたFcフラグメント、またはクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドのいずれか、またはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体、および、所望によりcリンカーを含む、融合ポリペプチドを含む治療有効用量の医薬組成物を必要とする個体に投与することを含む、個体における高リン血症または石灰沈着症を処置または予防するための方法。融合ポリペプチドが、aアルファクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチド、およびb線維芽細胞増殖因子23を含むポリペプチドを含む、請求項37に記載の方法。a線維芽細胞増殖因子23FGF23またはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチドであって、FGF23が、Q156、C206およびC244の1つ以上の位置で変異を有するポリペプチド、およびb減少したFc-ガンマ-受容体に対する親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたFcフラグメント、またはクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドのいずれか、またはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体、および、所望によりcリンカーを含む、融合ポリペプチドを含む治療有効用量の医薬組成物を必要とする個体に投与することを含む、個体における慢性腎臓疾患または慢性腎不全を処置または予防するための方法。クロトータンパク質がアルファクロトータンパク質である、請求項39に記載の方法。a線維芽細胞増殖因子23FGF23またはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチドであって、FGF23が、Q156、C206およびC244の1つ以上の位置で変異を有するポリペプチド、およびb減少したFc-ガンマ-受容体に対する親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたFcフラグメント、またはクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドのいずれか、またはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体、および、所望によりcリンカーを含む、融合ポリペプチドを含む治療有効用量の医薬組成物を必要とする個体に投与することを含む、個体における癌を処置または予防するための方法。癌が乳癌である、請求項41に記載の方法。クロトータンパク質がアルファクロトータンパク質である、請求項41に記載の方法。クロトータンパク質がヒトクロトータンパク質である、請求項1に記載の融合ポリペプチド。筋萎縮の処置または予防における使用のための、請求項1に記載の融合ポリペプチド。配列番号:47または配列番号:49の可溶性クロトー融合タンパク質を含む治療有効用量の医薬組成物を必要とする個体に投与することを含む本質的にからなる、またはからなる、筋萎縮を処置または予防する方法。a線維芽細胞増殖因子23FGF23またはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチドであって、FGF23が、Q156、C206およびC244の1つ以上の位置で変異を有するポリペプチド、およびb減少したFc-ガンマ-受容体に対する親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたFcフラグメント、またはクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドのいずれか、またはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体、および、所望によりcリンカーを含む、治療有効用量の医薬組成物を必要とする個体に投与することを含む本質的にからなる、またはからなる、筋萎縮を処置または予防する方法。4.詳細な説明本明細書は、加齢関連状態および代謝障害を予防または処置するための方法、キットおよび組成物、ならびに病理学的疾患の治療における該組成物の医薬としての使用または処置における使用に関する。本明細書の融合ポリペプチドは、クロトータンパク質またはその活性なフラグメントを含む。いくつかの態様において、本明細書の融合ポリペプチドは、線維芽細胞増殖因子ポリペプチドまたはその活性なフラグメントに作動可能に連結したクロトータンパク質またはその活性なフラグメントを含む。いくつかの態様において、融合ポリペプチドは、減少したFcRnへの結合する能力および/または増加した血清における安定性を有する修飾されたFcフラグメントをさらに含む。別の態様において、融合ポリペプチドは、FGF例えば、FGF23および減少したFcRnへの結合する能力および/または増加した血清における安定性を有する修飾されたFcフラグメントを含む。本明細書の融合タンパク質またはsクロトーは、種々の加齢関連状態、例えば、サルコペニア、皮膚萎縮、筋肉疲労、脳萎縮、アテローム性動脈硬化症、動脈硬化症、肺気腫、骨粗鬆症、骨関節症、免疫不全、高血圧、認知症、ハンチントン病、アルツハイマー病、白内障、加齢黄斑変性症、前立腺癌、卒中、期待寿命の低下、記憶障害、しわ、腎機能障害および加齢性難聴、ならびに代謝障害、例えば、II型糖尿病、メタボリックシンドローム、高血糖および肥満の処置および予防において有用である。本発明は、少なくとも一部分において、物理的制約条件例えば、クロトーおよびFGFポリペプチド両方の大きいサイズにもかかわらず、クロトー-FGF融合ポリペプチドがFGF受容体の活性化において非常に有効である発見に基づく。これらの2つのタンパク質の融合物がヘテロ二量化、したがってタンパク質の活性化を妨げるであろう;例えば、タンパク質の結合ドメインが融合物により乱され得るか、例えば、タンパク質の結合ドメインが融合物により乱され得るか、またはシス構造を構築するとき、タンパク質が空間的に間違った方向に向けられ得ることを考慮すると、この発見は予期されないものである。単独で、または別のポリペプチドと一緒に投与されるクロトーまたはFGFと比較して活性を増強させる、単一の治療タンパク質の投与を可能にするため、本明細書に記載されている融合ポリペプチドには利点がある。2つの別々のポリペプチドすなわち、クロトーポリペプチドおよび別のFGFポリペプチドよりもむしろ単一の融合ポリペプチドとしてのクロトーおよびFGFの使用が、FGF受容体の活性化にさらに有効である。定義本明細書において使用されるクロトーポリペプチド、クロトータンパク質またはクロトーは、野生型クロトーの活性なフラグメント、誘導体、模倣物、変異体および化学的に修飾された化合物またはそれらのハイブリッドを含む。活性なクロトーフラグメントは、FGFポリペプチドに結合する能力を有する。一般的に、活性なクロトーポリペプチドは少なくとも1つのクロトーサブドメイン例えば、KL-D1およびKL-D2を含む。野生型クロトーは天然で見出されたとおりのアミノ酸配列を有する。本明細書において使用するために適当な例のクロトーポリペプチドは、アルファ-クロトー配列番号:2およびベータ-クロトー配列番号:4を含む。アルファ-クロトーおよびベータ-クロトーのヌクレオチドおよびアミノ酸配列は、GenBankデータベースにおいてそれぞれ受入番号NM_004795、NP_004786およびNM_175737、NP_783864において見出せる。クロトーポリペプチドは米国特許第6,579,850号この内容をその全体において出典明示により本明細書に包含させるにおいて記載されているものを含む。クロトーポリペプチドは、マウスNP_038851、ラットNP_112626、ウサギNP_001075692のアルファ-クロトーおよびマウスNP_112457のベータ-クロトーを含むヒト以外の他の種のものを含む。アルファ-クロトーを有することが予測される種は、チンパンジーXP_522655、マカクXP_001101127、ウマXP_001495662、ウシXP_001252500、カモノハシXP_001510981およびニワトリXP_417105を含む。ベータ-クロトーを有することが予測される種は、チンパンジーXP_526550、マカクXP_001091413、ウマXP_001495248、イヌXP_536257、ラットXP_001078178、カモノハシXP_001512722およびニワトリXP_423224を含む。クロトーポリペプチドは、配列番号:2または配列番号:4のアミノ酸配列と実質的に同一である。すなわち、配列番号:2または配列番号:4のアミノ酸配列と少なくとも70、75、80、85、90、95、96、97、98、99またはそれ以上同一であるアミノ酸配列またはそれらの活性なフラグメントを有する。本明細書において使用される融合ポリペプチドまたは融合タンパク質は、天然に同じポリペプチドに存在しない2つ以上の別々のポリペプチドまたはそれらの活性なフラグメントを含むポリペプチドを意味する。いくつかの態様において、2つ以上の別々のポリペプチドは、ペプチド結合によりインフレームで、互いに作動可能に共有結合、例えば、化学的に結合または融合されている。本明細書において使用されるクロトー融合ポリペプチドは、クロトーポリペプチドのアミノ酸配列またはその活性なフラグメントを含む融合ポリペプチドである。融合ポリペプチドは、非限定的な例として、クロトー例えば、sクロトー、FGF例えば、FG23、および減少したFC-ガンマ-受容体に対する結合親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する所望により修飾されたFcフラグメント例えば、修飾されたFcフラグメントを含み得る。融合ポリペプチドのこの型の例は、配列番号46から49にに示される。別の態様において、融合タンパク質は、FGF例えば、FGF23および修飾されたFc例えば、FcLALAを含む。FGF23およびFcLALAを含む融合タンパク質は、配列番号50、51、52および53に記載されている。FcLALAは、効率低下でADCCを誘導し、弱くヒト補体に結合し、活性化するLALA変異L234A、L235Aを有するFcフラグメントである。Hessellら2007Nature449101104。繊維芽細胞増殖因子およびFGFは、本明細書において互換的に使用され、ヒト対象を含む動物における細胞増殖、移動、分化、ホメオスタシス、組織修復および損傷応答を調節するポリペプチドを示す。FGFは、繊維芽細胞増殖因子受容体に結合し、FGFRの自己リン酸化、FRS2FGF受容体基質2およびERK1/2細胞外シグナル-調節タンパク質キナーゼ1/2のリン酸化およびEgr-1初期増殖応答-1の活性化を含む活性を調節する能力を有する。FGFなる用語は、例えば、当分野で既知である、ならびに米国特許第7,223,563号および米国特許第7,259,248号これらの内容をその全体において出典明示により本明細書に包含させるにおいて記載されている、野生型FGFの活性なフラグメント、誘導体、模倣物、変異体および化学的に修飾された化合物またはそれらのハイブリッドを含む。野生型FGFは天然で見出されたとおりのアミノ酸配列を有する。本発明において使用するために適当な例の繊維芽細胞増殖因子は、繊維芽細胞増殖因子-19FGF19;配列番号:31、繊維芽細胞増殖因子-21FGF21;配列番号:33および繊維芽細胞増殖因子-23FGF23;配列番号:35を含む。FGFポリペプチドは、マウスFGFを含むヒト以外の他の種のものを含む。一般的に、FGFポリペプチドは、配列番号:31、配列番号:33または配列番号:35のアミノ酸配列と実質的に同一である。すなわち、配列番号:31、配列番号:33または配列番号:35のアミノ酸配列と少なくとも70、75、80、85、90、95、96、97、98、99またはそれ以上または100同一であるアミノ酸配列を有するアミノ酸配列またはそれらの活性なフラグメントを有する。FGF、特にFGF23のさらなる非限定的な例は、配列番号:47のaa1002-1228、配列番号:49のaa1002-1228、配列番号:51のaa1-251および配列番号:53のaa1-251、ならびに、これらの配列と少なくとも70、75、80、85、90、95、96、97、98、99またはそれ以上または100同一である配列で提供される。これらの配列をコードするヌクレオチドは、配列番号:46、48、50および52において提供される。FGFなる用語は完全長ポリペプチドの活性なフラグメントを含む。対応するFGF受容体に結合することができる活性なFGFフラグメントは、当分野で既知であり、本明細書の使用において考慮される。本明細書に記載されている配列に基づいて、FGFの重複フラグメントが、例えば、SambrookらおよびAusubelらに記載されている標準組換え技術を使用して生産することができることは、当業者に理解される。本明細書に存在する記載に基づいて、FGFフラグメントの生物学的活性がFGF受容体への結合を含む当分野で既知の、および本明細書に記載されている方法により試験することができることは、当業者に理解される。同様に、必要なFGFシグナル伝達機構すなわちFGF受容体を有する細胞培養モデルは、FGFフラグメントでトランスフェクトされ、次に野生型FGFと比較してFGFシグナル伝達における変化に関して試験され得る。FGFは、特に異なるFGFサブファミリー中で、長さおよび一次配列両方において高度に異なるN-およびC-末端配列の横に配置されている、FGF核相同性ドメイン約120アミノ酸長の相同性に基づいて7つのサブファミリーに分類されるGoetzらMolecularandCellularBiology2007Vol2734173428。FGF活性ポリペプチドは、一般的に少なくとも1つのFGF核相同性ドメインを含む。いくつかの態様において、FGF活性ポリペプチドは、FGF核相同性ドメインに加えて、結合FGF受容体においてさらなる特異性を与え得るフランキング配列を含み得る。リガンドの核領域が他のFGFと比較して高い配列同一性を共有するためFGF19対FGF21:38同一性、FGF19対FGF23:36同一性、FGF19、FGF21およびFGF23はFGF19サブファミリーに分類される。FGF19サブファミリーメンバーは内分泌腺系のシグナル伝達分子と同様に作用し、古典的なFGFに珍しくない異なる生理学的プロセスを調節する例えば、FGF19:エネルギーおよび胆汁酸ホメオスタシス、FGF21、グルコースおよび脂質代謝、およびFGF23、リン酸塩およびビタミンDホメオスタシス。本明細書において使用される繊維芽細胞増殖因子受容体およびFGFRは、当分野で既知のFGFR1-4のいずれか、またはそれらのスプライス変異体例えば、FGFR1cを示す。本明細書において使用するために適当な例の繊維芽細胞増殖因子受容体は、繊維芽細胞増殖因子受容体-19例えば、FGFR4-ベータクロトー、繊維芽細胞増殖因子受容体-21例えば、FGFR1c-アルファクロトーおよび繊維芽細胞増殖因子受容体-23例えば、FGFR1c-アルファクロトー、FGFR3-アルファクロトー、FGFR4-アルファクロトーを含む。本明細書において使用される細胞外ドメインは、細胞の外側に存在する例えば、細胞内または膜貫通領域を含まない膜貫通タンパク質のフラグメントを示す。クロトータンパク質の細胞外ドメイン、可溶性クロトーまたはsクロトー例えば、配列番号:7;配列番号:39は、繊維芽細胞増殖因子に結合することができる、および/または繊維芽細胞増殖因子に結合することにより繊維芽細胞増殖因子が繊維芽細胞増殖因子受容体に結合することを可能にすることができるクロトーポリペプチドの細胞外ドメインを示す。クロトー細胞外ドメインは、全長アルファクロトー配列配列番号:2のアミノ酸残基28-982および全長ベータクロトー配列配列番号:4のアミノ酸残基52-997に対応する。クロトータンパク質の細胞外サブドメインは、繊維芽細胞増殖因子を結合することができる、および/または繊維芽細胞増殖因子への結合により繊維芽細胞増殖因子の繊維芽細胞増殖因子受容体への結合を可能にすることができる、クロトーポリペプチドの細胞外ドメインの領域を示す。種々の態様において、融合ポリペプチドは、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチド、線維芽細胞増殖因子を含むポリペプチド、および、所望により、減少したFc-ガンマ-受容体に対する親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたFcフラグメントを含む。クロトー細胞外ドメインは、繰り返されている2つの相同サブドメイン、すなわち、KL-D1配列番号:5およびKL-D2配列番号:6を有する。KL-D1およびKL-D2は、それぞれ、全長アルファクロトーポリペプチド配列番号:2のアミノ酸残基58-506および517-953、ならびに、それぞれ、全長ベータクロトーポリペプチド配列番号:4のアミノ酸残基77-508および571-967に対応し、本明細書において使用するために適当である。一般的に、少なくとも1つのクロトーサブドメインを含むポリペプチドは活性なクロトーポリペプチドである。本明細書のポリペプチドにおいて使用するためのクロトー細胞外サブドメインは、それぞれ配列番号:5または配列番号:37のアミノ酸配列と実質的に同一であるアミノ酸配列を有するアルファクロトーまたはベータクロトーKL-D1ドメインであり得る。さらに、クロトーKL-D1ドメインは、配列番号:5または配列番号:37のアミノ酸配列と少なくとも70、75、80、85、90、95、96、97、98、99またはそれ以上同一であるアミノ酸配列を有し得る。クロトー細胞外サブドメインは、また、それぞれ配列番号:6または配列番号:38のアミノ酸配列と実質的に同一であるアルファまたはベータクロトーポリペプチドKL-D2ドメインであり得る。さらなる態様において、KL-D2ドメインは、配列番号:6または配列番号:38のアミノ酸配列と少なくとも70、75、80、85、90、95、96、97、98、99またはそれ以上同一であるアミノ酸配列を有する。いくつかの態様において、融合ポリペプチドは、クロトータンパク質の少なくとも2つの細胞外サブドメイン例えば、KL-D1およびKL-D2、タンデムリピートにおけるKL-D1およびKL-D1、タンデムリピートにおけるKL-D2およびKL-D2などを含む。本明細書において使用される修飾されたFcフラグメントは、修飾された配列を含む抗体のFcフラグメントを意味する。Fcフラグメントは、CH2、CH3およびヒンジ領域の部分を含む抗体の一部である。修飾されたFcフラグメントは、例えば、IgG1、IgG2、IgG3またはIgG4由来であり得る。FcLALAは、効率低下でADCCを誘導し、弱くヒト補体に結合し、活性化するLALA変異L234A、L235Aを有する修飾されたFcフラグメントであるHessellら2007Nature449101104。Fcフラグメントに対するさらなる修飾は、例えば、米国特許第7,217,798号に記載されている。例えば、種々の修飾されたFcフラグメントにおいて、aアミノ酸残基250はグルタミン酸であり、アミノ酸残基428はフェニルアラニンである、またはbアミノ酸残基250はグルタミンであり、アミノ酸残基428はフェニルアラニンである、またはcアミノ酸残基250はグルタミンであり、アミノ酸残基428はロイシンである。いくつかの態様において、アミノ酸残基250および428は、アミノ酸残基250がグルタミン酸またはグルタミンであり、アミノ酸残基428がロイシンまたはフェニルアラニンである修飾されていないFc融合タンパク質において存在する残基が異なっており、アミノ酸残基は米国特許第7,217,798号に記載されているEU番号制により番号付けされる。いくつかの態様において、修飾されたFc-融合タンパク質は、pH8.0でよりもpH6.0でFcRnに対するより高い親和性を有する。好ましくは、修飾されたFcフラグメントは、減少したFcRnに対する親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する。修飾されたFcフラグメントの非限定的な例は、配列番号:47のaaアミノ酸1234-1459、配列番号:49のaa1234から1450、配列番号:51のaa257から482および配列番号:53のaa257から473、ならびに、これらの配列と少なくとも70、75、80、85、90、95、96、97、98、99またはそれ以上または100同一である配列を含む。これらの配列をコードするヌクレオチドは、配列番号:46、48、50および52において提供される。本明細書において使用されるシグナルペプチドは、小胞体へのタンパク質の翻訳後輸送を指向して、切断され得るペプチド鎖3-60アミノ酸長を意味する。本明細書において使用するために例の典型的なシグナルペプチドはクロトーシグナルペプチド配列番号:19およびIgGシグナルペプチド配列番号:20を含む。産生細胞系により分泌および開裂されると、シグナルペプチド例えば、配列番号:19および配列番号:20に対応するペプチドのは開裂されることに注意すること。したがって、産生細胞系によるシグナルペプチドの分泌および開裂後、配列番号:19のペプチドは配列番号:41のペプチドを産生する。本明細書において使用されるリンカーは、互いに結合することができるように、共有結合が2つ以上のポリペプチドまたは核酸を結合する機能の基例えば、化学物質またはポリペプチドを意味する。本明細書において使用されるペプチドリンカーは、2つのタンパク質を互いに結合する例えば、クロトーの細胞外ドメインおよび繊維芽細胞増殖因子-23を結合するために使用される1つ以上のアミノ酸を意味する。本明細書において使用するために適当なペプチドリンカーは、配列番号:8、配列番号:9、配列番号:10、配列番号:11、配列番号:12、配列番号:13、配列番号:14、配列番号:15、配列番号:16、配列番号:17および配列番号:18により示されているアミノ酸配列を有するポリペプチドを含むが、これらに限定されない。ポリペプチドリンカーは、これらのアミノ酸配列のいずれかの少なくとも1、最大約30の繰り返しを含み得る。本明細書において使用される作動可能に連結しているは、生体分子と関連する生物学的機能、活性および/または構造を少なくとも保持することができるような2つ以上の生体分子の結合を意味する。ポリペプチドに関して、該用語は、2つ以上のポリペプチドの結合がそれぞれのポリペプチド成分の少なくともいくつかのそれぞれの個々の活性を保持する融合ポリペプチドとなることを意味する。2つ以上のポリペプチドは直接、またはリンカーを介して結合し得る。核酸に関して、該用語は、適当な分子例えば、転写活性化タンパク質が第2のポリヌクレオチドに結合しているとき、第1のポリヌクレオチドが第1のポリヌクレオチドの転写を指向する第2のポリヌクレオチドに隣接して配置されることを意味する。本明細書において使用される特異的に結合するは、第1の分子がそれ自体と他の標的分子間の非共有相互作用の形成をもたらす特定の構造を取ることができるため、第1の分子が暴露され得る多くの異なる型の分子の中から1つの標的分子に結合することができることを示す。第1の分子は安定な複合体を形成する標的に結合するが、他の何らかの非特異的な分子に対して、実質的にあまり、認識せず、接触せず、または第1の分子と複合体を形成しない。本明細書において使用されるポリペプチド変異体またはタンパク質変異体は、1つ以上のアミノ酸が参照配列から異なるアミノ酸により置換されているポリペプチドを示す。いくつかのアミノ酸が、以下に記載されているポリペプチド保存的置換の活性の性質を変化することなく広範に同様の性質を有して、他のものにより置換され得ることは当分野で理解されている。これらの用語は、また、1つ以上のアミノ酸が付加されたか、もしくは欠失されたか、または異なるアミノ酸で置換されたポリペプチド、例えば、タンパク質アイソフォームを包含する。本明細書において使用するために適当な繊維芽細胞増殖因子-23の変異体の例は、繊維芽細胞増殖因子-23変異体R179Qである。本明細書において使用される医薬組成物は、個体における疾患または障害を処置または予防するために投与され得る化合物例えば、本明細書の融合ポリペプチドを含む組成物を意味する。本明細書において使用される個体または対象は、ヒトまたは非ヒト哺乳動物、例えば、ウシ、ウマ、イヌ、ヒツジまたはネコを含むが、これらに限定されない哺乳動物を示す。本明細書において使用される処置は、疾患の発症または進行を減少、抑制、減衰、軽減、阻止または安定させることを意味する。本明細書との関係において、本明細書のポリペプチドの投与は、サルコペニア、皮膚萎縮、筋肉疲労、脳萎縮、アテローム性動脈硬化症、動脈硬化症、肺気腫、骨粗鬆症、骨関節症、免疫不全、高血圧、認知症、ハンチントン病、アルツハイマー病、白内障、加齢黄斑変性症、前立腺癌、卒中、期待寿命の低下、記憶障害、しわ、腎機能障害および加齢関連難聴を含む加齢関連状態、ならびにII型糖尿病、メタボリックシンドローム、高血糖および肥満を含む代謝障害を処置するために使用され得る。本明細書において使用される予防は、対象における障害の発症を減少させる、または障害またはそれに関連する症状を有する危険性を減少させることを意味する。本明細書との関係において、本明細書のポリペプチドの投与は、サルコペニア、皮膚萎縮、筋肉疲労、脳萎縮、アテローム性動脈硬化症、動脈硬化症、肺気腫、骨粗鬆症、骨関節症、免疫不全、高血圧、認知症、ハンチントン病、アルツハイマー病、白内障、加齢黄斑変性症、前立腺癌、卒中、期待寿命の低下、記憶障害、しわ、腎機能障害および加齢関連難聴を含む加齢関連状態、ならびにII型糖尿病、メタボリックシンドローム、高血糖および肥満を含む代謝障害を予防するために使用され得る。予防は、加齢関連状態または代謝障害の完全な、例えば、全体の欠如であり得る。予防は、また、対象における加齢関連状態または代謝障害の発症の可能性が本明細書を受けていない対象よりも発症する可能性を低くするような、部分的なものであり得る。本明細書において使用される疾患は、細胞、組織または臓器の正常機能を損なう、または妨げるすべての状態または障害を意味する。本明細書において使用される加齢関連状態は、母集団における発生率または個体における重症度が年齢の進行と関連があるすべての疾患または障害を意味する。1つの態様において、加齢関連状態は、100,000個体以上の選択された母集団中で、30-40歳のヒト個体と比較して60歳以上のヒト個体中で発生率が少なくとも1.5倍である疾患または障害である。本明細書に関連する加齢関連状態は、サルコペニア、皮膚萎縮、筋肉疲労、脳萎縮、アテローム性動脈硬化症、動脈硬化症、肺気腫、骨粗鬆症、骨関節症、免疫不全、高血圧、認知症、ハンチントン病、アルツハイマー病、白内障、加齢黄斑変性症、前立腺癌、卒中、期待寿命の低下、記憶障害、しわ、腎機能障害および加齢関連難聴を含むが、これらに限定されない。本明細書において使用される代謝障害は、細胞におけるエネルギー生産または細胞、組織、臓器もしくは個体における毒素の蓄積に影響することにより、細胞、組織または臓器における正常機能を損なう、または妨げるすべての疾患または障害を意味する。本明細書に関連する代謝障害は、II型糖尿病、メタボリックシンドローム、高血糖および肥満を含むが、これらに限定されない。有効用量または有効量は、有益な、または望ましい臨床結果をもたらすために十分な量である。本明細書との関係において、それは、意図された薬理学的、治療または予防結果を引き起こすために十分なクロトー融合ポリペプチドまたはsクロトーの量である。治療有効用量は、障害または障害の1つ以上の症状例えば、加齢関連状態または代謝障害の予防または改善をもたらす。治療有効用量は、対象および処置される疾患状態、対象の体重および年齢、疾患状態の重症度、投与様式などに依存して変化し、当業者によって容易に決定することができる。本明細書において使用されるクロトー核酸分子は、クロトータンパク質をコードする遺伝子である。例のヒトクロトー遺伝子は、GenBank受入番号NM_004795配列番号:1で提供される。クロトーのさらなる非限定的な例は、配列番号:47のaa1-982および配列番号:49のaa1-982、ならびに、これらの配列と少なくとも70、75、80、85、90、95、96、97、98、99またはそれ以上または100同一である配列で提供される。本明細書において使用されるフラグメントは、ポリペプチドまたは核酸分子の一部を示す。この一部は、好ましくは、参照核酸分子またはポリペプチドの全長の少なくとも10、20、30、40、50、60、70、80、90またはそれ以上を含む。フラグメントは10、20、30、40、50、60、70、80、90または100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000または最大3000ヌクレオチドまたはアミノ酸を含み得る。実質的に同一なる用語は、参照アミノ酸配列例えば、本明細書に記載されているアミノ酸配列のいずれか1つまたは核酸配列例えば、本明細書に記載されている核酸配列のいずれか1つと少なくとも50同一性を示すポリペプチドまたは核酸分子を示す。好ましくは、このような配列は、アミノ酸レベルまたは核酸において、比較のために使用される配列と少なくとも60、70、75、80または85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99またはそれ以上同一である。本明細書は、加齢関連状態および代謝障害を予防または処置するための方法、キットおよび組成物、および病理学的疾患の治療における使用のための、または、処置における使用のための医薬としての、該組成物の使用に関する。いくつかの態様において、本明細書は、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを有する融合ポリペプチドを提供する。いくつかの態様において、融合ポリペプチドは、線維芽細胞増殖因子またはその活性なフラグメントをさらに含む。いくつかの態様において、融合ポリペプチドは、減少したFc-ガンマ-受容体に対する親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたFcフラグメントをさらに含む。他の態様において、融合ポリペプチドは、修飾されたFc例えば、FcLALAに融合したFGF例えば、FGF19、FGF21、FGF23またはFGF23変異体R179Qを含む。FcLALAは、効率低下でADCCを誘導し、弱くヒト補体に結合し、活性化するLALA変異L234A、L235Aを有するFcフラグメントである。クロトー細胞外ドメインはアルファまたはベータクロトーアイソフォームのいずれか由来であり得る。さらに、クロトー融合ポリペプチドのFGF成分は繊維芽細胞増殖因子-19、繊維芽細胞増殖因子-21および繊維芽細胞増殖因子-23に関して主に記載されているが、23の既知のFGFまたはそれらの活性なフラグメントのすべてが本明細書の実施において使用することができると考えられる。クロトータンパク質の細胞外ドメインは、クロトータンパク質のKL-D1およびKL-D2ドメインの1つまたは両方を含むことができる。いくつかの態様において、クロトー融合ポリペプチドは、クロトータンパク質の少なくとも2つの細胞外サブドメインを有する。例えば、少なくとも2つの細胞外サブドメインは、タンデムリピートにおける少なくとも2つのKL-D1ドメイン、タンデムリピートにおける少なくとも2つのKL-D2ドメイン、または少なくとも1つのKL-D1ドメインおよび少なくとも1つのKL-D2ドメインであり得る。クロトータンパク質の細胞外サブドメインおよび繊維芽細胞増殖因子またはそれらの活性なフラグメントは、種々の方向および様式において互いに作動可能に連結することができる。例えば、クロトータンパク質の細胞外サブドメインは繊維芽細胞増殖因子のN-末端に作動可能に連結されていてよく、あるいは繊維芽細胞増殖因子はクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインのN-末端に作動可能に連結されていてもよい。本明細書の融合ポリペプチドは、クロトー細胞外ドメイン、すなわち、KL-D1配列番号:5およびKL-D2配列番号:6の1つまたは両方を含み得る。KL-D1およびKL-D2は、それぞれ全長アルファクロトーポリペプチド配列番号:2のアミノ酸残基58-506および517-953ならびに全長ベータクロトーポリペプチド配列番号:4のアミノ酸残基77-508および571-967に対応し、本明細書において使用するために適当である。クロトー融合ポリペプチドは、配列番号:5のアミノ酸配列と実質的に同一であるアミノ酸配列を有するアルファクロトーポリペプチドまたは配列番号:37のアミノ酸配列と実質的に同一であるアミノ酸配列を有するベータクロトーポリペプチドのKL-D1ドメインを有し得る。具体的には、クロトー融合ポリペプチドは、配列番号:5または配列番号:37と少なくとも70、75、80、85、90、95、96、97、98、99またはそれ以上同一であるアミノ酸配列を有し得る。クロトー融合ポリペプチドは、配列番号:6のアミノ酸配列と実質的に同一であるアミノ酸配列を有するアルファクロトーポリペプチドまたは配列番号:38のアミノ酸配列と実質的に同一であるアミノ酸配列を有するベータクロトーポリペプチドのKL-D2ドメインを有し得る。具体的には、クロトー融合ポリペプチドは、それぞれ配列番号:6または配列番号:38と少なくとも70、75、80、85、90、95、96、97、98、99またはそれ以上同一であるアミノ酸配列を有し得る。いくつかの態様において、本明細書のクロトー融合ポリペプチドは可溶性であり、FGF受容体に結合することができる。本明細書のクロトー融合ポリペプチドは、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを有するポリペプチドおよび繊維芽細胞増殖因子および任意の修飾されたFcフラグメントを接続するポリペプチドリンカーを含むことができる。適当なリンカーは当分野で既知であり、一般的にいくつかのGlyおよびいくつかのSer残基、例えば、Gly4Ser3配列番号:11、Gly4Serポリペプチド配列番号:12、Gly配列番号:13、GlyGly配列番号:14、GlySer配列番号:15、Gly2Ser配列番号:16、Ala配列番号:17およびAlaAla配列番号:18を含む。いくつかの態様において、リンカーは配列番号:12、配列番号:13、配列番号:14、配列番号:15、配列番号:16、配列番号:17または配列番号:18のいずれかに記載されているアミノ酸配列の少なくとも2から最大約30までの繰り返しを有する。ポリペプチドリンカーが本明細書のクロトー融合ポリペプチドに存在するとき、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを有するポリペプチドは、ポリペプチドリンカーのC-末端にペプチド結合により接続されているFGFと、リンカーポリペプチドのN-末端にペプチド結合により接続されていてもよい。あるいは、FGFは、ポリペプチドリンカーのC-末端にペプチド結合により接続されている、クロトーの少なくとも1つの細胞外サブドメインを有するポリペプチドと、リンカーポリペプチドのN-末端にペプチド結合により接続されていてもよい。化学的リンカーが、また、2つのポリペプチドを連結するために使用することができる。本明細書のクロトー融合ポリペプチドはシグナルペプチドを含み得る。クロトー融合ポリペプチドにおいて使用するためのシグナルペプチドの例は、クロトーシグナルペプチド配列番号:8およびIgGシグナルペプチド配列番号:9を含むが、これらに限定されない。いくつかの態様において、本明細書は、FGF例えば、FGF19、FGF21、FGF23またはFGF23変異体R179Qおよび修飾されたFc例えば、FcLALA間の融合ポリペプチドを提供する。融合ポリペプチドはまた、所望によりFGFおよびFc部分間のリンカーを含み得る。融合ポリペプチドはまた、所望によりシグナルペプチドを含み得る。種々の態様において、本明細書は、これらの融合ポリペプチドをコードする核酸、これらの核酸を含むベクターおよびこれらの核酸を含む宿主細胞を含む。4.1.クロトーおよび繊維芽細胞増殖因子ポリペプチド本明細書のクロトー融合ポリペプチドは、天然のFGFに相当する生物学的活性を示す、例えば、FGF受容体に結合し、FGF受容体、FRS2FGF受容体基質2およびERK1/2細胞外シグナル-調節タンパク質キナーゼ1/2のリン酸化を誘導し、Egr-1初期増殖応答-1遺伝子を活性化させることが期待される。FGFは、FGF受容体に結合する分泌ペプチド増殖因子である。FGFのアミノ酸および核酸配列は、当業者が容易に利用することができる。例えば、例のFGF19、FGF21およびFGF23の核酸配列配列番号:30、32および34として本明細書に記載されているは、GenBankデータベースにおいて、それぞれアクセッションナンバー:NM_005117、NM_019113およびNM_020638の下に見出すことができる。例のFGF19、FGF21およびFGF23のアミノ配列配列番号:31、33および35として本明細書に記載されているは、GenBankデータベースにおいて、それぞれアクセッションナンバー:NP_005108、NP_061986およびNP_065689の下に見出すことができる。さらに、FGFはタンパク質の発現に役立つ1つ以上の変化を含み得る例えば、FGF23R179Q変異体配列番号:36。クロトータンパク質は、細胞外ドメインおよび短い細胞質ドメインを有する130kDaの1回膜貫通型タンパク質である。クロトーのアミノ酸および核酸配列は、当業者が容易に利用することができる。例えば、例のアルファ-クロトーおよびベータ-クロトーの核酸配列配列番号:7および8として本明細書に記載されているは、GenBankデータベースにおいて、それぞれアクセッションナンバー:NM_004795およびNM_175737の下に見出すことができる。例のアルファ-クロトーおよびベータ-クロトーのアミノ酸配列配列番号:2および4として本明細書に記載されているは、GenBankデータベースにおいて、それぞれアクセッションナンバー:NP_004786およびNP_783864の下に見出すことができる。本明細書のクロトー融合ポリペプチドは、繊維芽細胞増殖因子受容体に結合することができ、繊維芽細胞増殖因子-19配列番号:31、繊維芽細胞増殖因子-21配列番号:33、繊維芽細胞増殖因子-23配列番号:35またはそれらの変異体繊維芽細胞増殖因子-23変異体R179Q配列番号:36を含むのいずれかに作動可能に連結しているアルファ-クロトーまたはベータ-クロトー細胞外ドメインを有する。具体的には、本明細書のクロトー融合ポリペプチドは、繊維芽細胞増殖因子-23配列番号:35または繊維芽細胞増殖因子-23変異体R179Q配列番号:36に作動可能に連結しているアルファ-クロトー配列番号:2を含み得る。さらに、本明細書のクロトー融合ポリペプチドは、繊維芽細胞増殖因子-19配列番号:31に作動可能に連結しているベータ-クロトー配列番号:4を有し得る。本明細書のクロトー融合ポリペプチドは、繊維芽細胞増殖因子-21配列番号:33に作動可能に連結しているベータ-クロトー配列番号:4を含み得る。本明細書は、種々のクロトーおよびFGF遺伝子およびこれらの遺伝子によってコードされるタンパク質のホモログを含む。遺伝子に関して、ホモログは、遺伝子の少なくとも一部と実質的に同一である核酸配列もしくはその相補鎖またはそれらの一部を意味する、ただし、核酸配列が遺伝子によってコードされるタンパク質と実質的に同じ活性/機能を有するタンパク質をコードする。本明細書に記載されている遺伝子のホモログは、推定ホモログのアミノ酸または核酸配列と遺伝子またはそれらによってコードされるタンパク質配列間の同一性パーセントにより同定することができる例えば、クロトーおよびFGFをコードする遺伝子に対する核酸配列またはそれらの相補鎖。同一性パーセントは、例えば、視覚的検査により、または当分野で既知の、または本明細書に記載されている種々のコンピュータープログラムを使用することにより測定され得る。配列同一性は、一般的に、配列分析ソフトウェア例えば、SequenceAnalysisSoftwarePackageoftheGeneticsComputerGroupUniversityofWisconsinBiotechnologyCenter1710UniversityAvenueMadisonWis53705BLASTBESTFITGAPまたはPILEUPPRETTYBOXプログラムを使用して測定される。このようなソフトウェアは、種々の置換、欠失および/または他の修飾に関して相同性の程度を割り当てることにより、同一または同様の配列を合わせる。保存アミノ酸置換は、一般的に、以下のグループ内の置換を含む。グリシンおよびアラニン、バリン、イソロイシンおよびロイシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギンおよびグルタミン、セリンおよびスレオニン、リジンおよびアルギニン、ならびにフェニルアラニンおよびチロシン。したがって、アラニンへのグリシンの変異、グリシンへのアラニンの変異、イソロイシンまたはロイシンへのバリンの変異、イソロイシンのバリンまたはロイシンでの置換、ロイシンのバリンまたはイソロイシンでの置換などは、保存アミノ酸置換である。本明細書は、少なくとも1つの保存アミノ酸置換を有する本明細書に記載されている全てのアミノ酸配列の変異体を提供する。同一性の程度を測定するための手段の例において、密接な関連配列を示すプロバビリティスコアe-3からe-100を使用するBLASTプログラムが使用され得る。1つの態様において、本明細書は、配列番号:19の融合ポリペプチドを提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:20の融合ポリペプチドを提供する。1つの態様において、本明細書は、配列番号:40の融合ポリペプチドを提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:41の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。1つの態様において、本明細書は、配列番号:46の融合ポリペプチドを提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:47の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:48の融合ポリペプチドを提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:49の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する1つの態様において、本明細書は、配列番号:50の融合ポリペプチドを提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:51の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。1つの態様において、本明細書は、配列番号:52の融合ポリペプチドを提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:53の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:54の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:55の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:56の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:57の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:58の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:59の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:60の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:61の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:62の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:63の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:64の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:65の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:66の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:67の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。別の態様において、本明細書は、配列番号:68の融合ポリペプチドまたは少なくとも1つの保存アミノ酸置換を含むその変異体を提供する。本明細書において使用される相同性および相同なる用語は、理論上共通の遺伝的先祖を有するタンパク質を示すことに限定せず、進化した遺伝的に関連し得ないが、それにもかかわらず、同様の機能を行い、および/または同様の構造を有するようなタンパク質を含む。本明細書に記載されている機能的相同性の種々のタンパク質は、また、ホモログである対応するタンパク質の活性を有するタンパク質を含む。機能的相同性を有するタンパク質に関して、それらがそれらのアミノ酸配列において有意な同一性を有する必要はなく、むしろ、機能的相同性を有するタンパク質は同様の、または同一の活性を有することにより定義される。例えば、クロトー分子に関して、ポリペプチドはFGFポリペプチドへの結合の機能的特徴と有し、FGFRへのFGFの結合が可能であるべきである。FGF分子に関して、ポリペプチドはFGFRに結合し、FGFRの活性化例えば、リン酸化を引き起こす機能的特徴を有するべきである。FGF受容体へのFGF結合および/またはFGFシグナル伝達経路の活性化を評価するためのアッセイは、当分野で既知であるか、または本明細書に記載されている実施例2参照。クロトー活性を評価するためのアッセイも、当分野で既知であるか、本明細書に記載されている例えば、FGFポリペプチドへの結合。構造的相同性を有するタンパク質は、類似の三次または四次構造を有するものとして定義されるが、それらをコードする遺伝子に対するアミノ酸同一性または核酸同一性は必ずしも必要ではない。ある特定の状況では、構造的ホモログはタンパク質の活性部位または結合部位のみで構造的相同性を維持するタンパク質を含み得る。構造的および機能的相同性に加えて、本明細書は、さらに本明細書に記載されている種々のクロトーおよびFGFアミノ酸配列とアミノ酸同一性を有するタンパク質を包含する。2つのアミノ酸配列の同一性/相同性パーセントを決定するために、該2つの配列を最適な比較目的のために並べる例えば、一方のタンパク質のアミノ酸配列と最適なアライメントのために、ギャップをもう一方のタンパク質のアミノ酸配列に導入することができる。次に、対応するアミノ酸位置のアミノ酸残基を比較する。一方の配列の位置がもう一方の配列の対応する位置に同じアミノ酸残基が存在するとき、それらの分子はその位置で同一である。2つの配列間の同一性パーセントは、配列において共有される同一の位置の数の関数であるすなわち、同一性=同一の位置の/位置の全×100。本明細書に記載されている本明細書の分子のアミノ酸配列は、本明細書に記載されているアミノ酸配列と少なくとも約60、70、80、90、95、96、97、98、99またはそれ以上同一または相同であるアミノ酸配列を有する。本明細書に記載されている本明細書の分子の核酸配列は、本明細書に記載されている核酸配列とハイブリダイズするか、または本明細書に記載されている核酸配列と少なくとも約60、70、80、90、95、96、97、98、99またはそれ以上同一または相同である核酸配列を有する。本明細書の融合ポリペプチドにおいて使用するために適当な核酸分子は、ストリンジェント条件下で、クロトーまたはFGFをコードする核酸分子の相補体にハイブリダイズするクロトーまたはFGF核酸配列を有し得る。本明細書において使用されるストリンジェント条件下でハイブリダイズするなる用語は、互いに少なくとも約70、80、85、90以上相同である核酸配列が一般的に互いにハイブリダイズの維持下にて、ハイブリダイゼーションおよび洗浄する条件を表すことを意図する。このようなストリンジェント条件は当業者に既知であり、AusubelらCurrentProtocolsinMolecularBiologyWileyInterscienceNewYork631636において見出すことができる。特定の非限定的な例のストリンジェントハイブリダイゼーション条件は、6×塩化ナトリウム/クエン酸ナトリウムSSC中で約45°Cでハイブリダイゼーション、次に0.2×SSC、0.1のSDS中で50-65°Cでの1回以上の洗浄である。4.2.本明細書のクロトー-FGF融合ポリペプチド本明細書のいくつかの態様において、クロトー融合ポリペプチドは、クロトーポリペプチドの第1のポリペプチド配列またはそれらの活性なフラグメントおよびFGFをコードする第2のポリペプチド配列またはそれらの活性なフラグメントを有するポリペプチド鎖を有する。いくつかの態様において、融合ポリペプチドは、減少したFc-ガンマ-受容体に対する親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたFcフラグメントをさらに含む。本明細書は、配列番号:19-28に存在するアミノ酸配列と少なくとも約95以上相同である融合ポリペプチドを含む。配列番号:19のアミノ酸配列は、FGF23R179Q変異体配列番号:36のN-末端に結合しているクロトー細胞外ドメインを有するクロトー融合ポリペプチドをコードする。配列番号:20のアミノ酸配列は、FGF23R179Q変異体のN-末端に結合しているシグナルペプチドを欠いているクロトー細胞外ドメインのN-末端に結合しているIgGシグナルペプチドを有するクロトー融合ポリペプチドをコードする。配列番号:21のアミノ酸配列は、FGF23R179Q変異体のN-末端に結合しているKL-D1細胞外サブドメインを有するクロトー融合ポリペプチドをコードする。配列番号:22のアミノ酸配列は、FGF23R179Q変異体のN-末端に結合しているKL-D2細胞外サブドメインを有するクロトー融合ポリペプチドをコードする。配列番号:23のアミノ酸配列は、FGF23R179Q変異体のN-末端に結合している2つのKL-D1細胞外サブドメインを有するクロトー融合ポリペプチドをコードする。配列番号:24のアミノ酸配列は、FGF23R179Q変異体のN-末端に結合している2つのKL-D2細胞外サブドメインを有するクロトー融合ポリペプチドをコードする。配列番号:25のアミノ酸配列は、クロトー細胞外ドメインのN-末端に結合しているFGF23R179Q変異体を有するクロトー融合ポリペプチドをコードする。配列番号:26のアミノ酸配列は、KL-D1細胞外サブドメインのN-末端に結合しているFGF23R179Q変異体を有するクロトー融合ポリペプチドをコードする。配列番号:27のアミノ酸配列は、KL-D2細胞外サブドメインのN-末端に結合しているFGF23R179Q変異体を有するクロトー融合ポリペプチドをコードする。配列番号:28のアミノ酸配列は、2つのKL-D1細胞外サブドメインのN-末端に結合しているFGF23R179Q変異体を有するクロトー融合ポリペプチドをコードする。配列番号:29のアミノ酸配列は、2つのKL-D2細胞外サブドメインのN-末端に結合しているFGF23R179Q変異体を有するクロトー融合ポリペプチドをコードする。いくつかの態様において、融合ポリペプチドは、減少したFc-ガンマ-受容体に対する親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたFcフラグメントをさらに含む。本明細書のクロトー融合ポリペプチドは、配列番号:7に記載されているアミノ酸配列と少なくとも約95同一であるアミノ酸配列を含み得る。配列番号:7のアミノ酸配列はシグナルペプチドを欠いているクロトー細胞外ドメインをコードする。いくつかの態様において、融合ポリペプチドは、減少したFc-ガンマ-受容体に対する親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたFcフラグメントをさらに含む。対象融合タンパク質は本明細書に記載されており、当分野で既知の方法を使用して製造することができる。例えば、本明細書の融合ポリペプチドは、米国特許第6,194,177号に記載されているとおりに構築され得る。クロトーポリペプチドの使用は、米国特許第6,579,850号に記載されている。FGF核酸分子の使用は、米国特許第7,223,563号に記載されている。いくつかの態様において、クロトーをコードする核酸分子は、PCRによりクローニングされ、インフレームで、FGFをコードする核酸分子と結合される。いくつかの態様において、融合ポリペプチドは、減少したFc-ガンマ-受容体に対する親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたFcフラグメントをさらに含む。融合ポリペプチドをコードする核酸は、発現を可能にするプロモーターに作動可能に連結している。次に、融合ポリペプチドをコードする核酸分子を発現のための宿主細胞にトランスフェクトする。最終構築物の配列はシーケンシングにより確認することができる。本明細書の融合タンパク質を製造するとき、クロトーの細胞外サブドメインをコードする核酸分子を、インフレームでFGFをコードする核酸分子および修飾されたFcフラグメントをコードする任意の核酸に融合する。得られた核酸分子の発現は、FGFポリペプチドに関してN-末端で融合しているクロトーの細胞外サブドメインを生じる。融合物は、クロトーの細胞外サブドメインがFGFポリペプチドに関してC-末端で融合しているものも可能である。融合タンパク質を製造するための方法は当分野で既知である。本明細書の融合ポリペプチドは、一方のポリペプチドが1つのタンパク質配列またはドメイン、例えばクロトー由来であり、そして、もう一方のポリペプチドが別のタンパク質配列またはドメイン、例えばFGF由来である、共有結合されてた少なくとも2つのポリペプチドを有する。いくつかの態様において、融合ポリペプチドは、減少したFc-ガンマ-受容体に対する親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたFcフラグメントをさらに含む。別の態様において、本明細書は、修飾されたFcフラグメントに融合したFGFを含む。本明細書の融合ポリペプチドのクロトーおよび/またはFGFおよび/または任意の修飾されたFcフラグメントは、当業者によく知られている方法により連結することができる。これらの方法は化学的および組換え方法両方を含む。本明細書の融合ポリペプチドに組み込まれるドメインをコードする核酸は、組換え遺伝の分野における通常の技術を使用して得ることができる。本明細書において使用される一般的な方法を記載している基本的な文献は、SambrookandRussellMolecularCloningALaboratoryManualKrieglerGeneTransferandExpressionALaboratoryManualおよびCurrentProtocolsinMolecularBiologyを含む。本明細書のクロトー融合ポリペプチドをコードする核酸において、配列番号:1および配列番号:3それぞれにより示されているアルファ-クロトーまたはベータ-クロトーをコードする核酸配列が使用され得る。クロトー融合ポリペプチドをコードする核酸において、配列番号:30、配列番号:32および配列番号:34それぞれにより示されているFGF19、FGF21またはFGF23をコードする核酸配列が使用され得る。本明細書に記載されている本明細書の分子の核酸配列は、配列番号:1、配列番号:3、配列番号:30、配列番号:32または配列番号:34とハイブリダイズするか、または少なくとも約60、70、80、90、95、96、97、98、99またはそれ以上同一または相同である核酸配列を含む。融合物の種々の成分[クロトーおよび/またはFGFペプチドおよび/または任意の修飾されたFcフラグメント]をコードする核酸配列は、種々の方法のいずれかを使用して得ることができる。例えば、ポリペプチドをコードする核酸配列は、プローブとのハイブリダイゼーションによりcDNAおよびゲノムDNAライブラリーからクローニングされるか、またはオリゴヌクレオチドプライマーとの増幅技術を使用して単離され得る。より一般的には、増幅技術はDNAまたはRNA鋳型を使用してクロトーおよびFGF配列を増幅および単離するために使用される例えば、DieffenfachDvekslerPCRPrimersALaboratoryManual、参照。あるいは、重複オリゴヌクレオチドは合成的に生産し、1つ以上のドメインを生産して連結することができる。クロトーまたはFGFをコードする核酸は、また、プローブとして抗体を使用して発現ライブラリーから単離することができる。本明細書において、融合物の種々の成分[クロトー、および/またはFGFおよび/または任意の修飾されたFcフラグメント]は、アミノ酸リンカーを含む共有結合リンカー、例えば、ポリグリシンリンカー、または炭水化物リンカー、脂質リンカー、脂肪酸リンカー、ポリエーテルリンカーを含む別のタイプの化学リンカー、例えば、PEGなどで直接、または、それらを介してのいずれかで連結することができる例えば、HermansonBioconjugatetechniques、参照。融合物/融合ポリペプチドを形成するポリペプチドは、一般的に、C-末端からN-末端に連結するが、それらは、C-末端からC-末端、N-末端からN-末端またはN-末端からC-末端に連結することもできる。1つ以上のポリペプチドドメインが、本明細書の融合ポリペプチド内の内部の位置に挿入され得る。融合タンパク質のポリペプチドは任意の順番であり得る。融合ポリペプチドは、隣接して融合タンパク質をコードする組換えポリヌクレオチドを製造することにより、1つのタンパク質配列からのアミノ酸鎖、例えば、クロトーの細胞外サブドメインと別のタンパク質配列からのアミノ酸鎖、例えば、FGFの共有結合により生産され得る。融合タンパク質におけるアミノ酸の異なる鎖は、互いに直接的にスプライシングされるか、化学結合基またはアミノ酸結合基を介して互いに間接的にスプライシングされ得る。アミノ酸結合基は、約200以上のアミノ酸長または一般的に1から100アミノ酸長であり得る。いくつかの態様において、プロリン残基がリンカーに組み込まれ、リンカーによる重要な二次構造成分の構成を妨げる。リンカーは、しばしば、組換え融合タンパク質の一部として合成されるフレキシブルなアミノ酸部分配列であり得る。このようなフレキシブルなリンカーは当業者に既知である。本明細書において、融合物[クロトーの細胞外サブドメインおよび/またはFGFおよび/または任意の修飾されたFcフラグメント]のアミノ酸配列は、ペプチドリンカーを介して連結されていてもよい。例のペプチドリンカーは当分野で既知であり、本明細書に記載されている。例えば、ペプチドリンカーは、一般的に、いくつかのGlyおよびいくつかのSer残基、例えば:Gly4Ser3配列番号:11、Gly4Serポリペプチド配列番号:12、Gly配列番号:13、GlyGly配列番号:14、GlySer配列番号:15、Gly2Ser配列番号:16、Ala配列番号:17およびAlaAla配列番号:18を含む。特に、本明細書の融合タンパク質において使用するためのペプチドリンカーは、フレキシブルなヒンジとして作用し得る。クロトーまたはFGFのシグナル配列は、本明細書の融合タンパク質へのクロトーの導入前に、除去され得る。融合タンパク質のクロトーまたはFGFに対するシグナル配列は、例えば、配列番号:19により示されているポリペプチドを含み得る。しかしながら、このような配列は、また、除去されるか、または異なるタンパク質のシグナル配列、例えば、IgGシグナル配列配列番号:9で置き換えられ得る。一般的に、本明細書の医薬組成物はクロトーおよびFGFの成熟形態を含む。一般的に、イントロンは、融合ポリペプチドへの導入の前に、クロトーまたはFGF部分のいずれか1つまたは両方から除外される。本明細書の融合ポリペプチドは、1つ以上の活性アミノ酸側鎖に共有結合した1つ以上のポリマーを含み得る。非限定的な例として、このようなポリマーは、1つ以上の遊離のシステインスルフヒドリル残基と結合することができるポリエチレングリコールPEGを含み、それにより、タンパク質が酸化条件に暴露されたとき、ジスルフィド結合および凝集の形成をブロックすることができる。加えて、本明細書の融合ポリペプチドのペグ化は、半減期、溶解度およびプロテアーゼ抵抗性の増加のようなこのような改良された特性を提供することが期待される。あるいは、本明細書の融合ポリペプチドは、遊離アミノ基、例えば、リシンイプシロンまたはN-末端アミノ基へのポリマーの共有結合的付加により修飾され得る。共有結合修飾に対して特定の特異的なシステインおよびリシンは、受容体結合、ヘパリン結合または適当なタンパク質フォールディングに関連しないものある。特定のアミノ酸残基の修飾が望ましいタンパク質の活性に影響するか否かを測定するために、融合ポリペプチドの生化学的および/または生物学的活性をアッセイするための方法が使用され得ることは、当業者に明らかである。他の同様の適当な修飾が考えられ、当分野で既知である。本明細書は、また、配列番号:19-28に存在するアミノ酸配列と少なくとも約95以上相同である融合ポリペプチドの発現に関する。本明細書は、aクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインまたはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチド、b線維芽細胞増殖因子またはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチド、およびc減少したFc-ガンマ-受容体に対する親和性および/もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたFcフラグメントを含む融合ポリペプチドを含む。それらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、生物学的活性を保持するが、対応する野生型ポリペプチドよりもより長い、より短いまたは改変されたアミノ酸配列を含む変異体もしくは誘導体を意味する。したがって、クロトータンパク質の細胞外サブドメインまたは線維芽細胞増殖因子の機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、野生型ポリペプチド配列の少なくとも1つの生物学的活性を保持するが、野生型クロトータンパク質の細胞外サブドメインまたは線維芽細胞増殖因子よりもより少ない、より多いまたは改変されたアミノ酸配列を含む。本明細書に記載されているポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体はまた、翻訳後修飾例えば、ペグ化、メチル化および/またはグリコシル化において変化しているか、またはそれに加えられたさらなる部分または因子を有するが、本明細書に記載されているポリペプチドの同じアミノ酸配列を含み得る。種々の態様において、FGF23の変異体もしくは誘導体は、R179Qを含むか、または含まない。1つの態様において、機能的に活性な変異体もしくは誘導体ポリペプチドは、本明細書に記載されている配列例えば、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外ドメインまたは線維芽細胞増殖因子と少なくとも約60同一であるアミノ酸配列を含む。好ましくは、ポリペプチドは、本明細書に記載されている配列と少なくとも55、60、65、70、75、80、85、90、95、98、99またはそれ以上同一である。本明細書において使用される2つのアミノ酸配列または2つの核酸配列の同一性パーセントは、KarlinおよびAltschulPNASUSA87226422681990のアルゴリズムを使用して決定され、KarlinandAltschulPNASUSA90587358771993において修飾される。このようなアルゴリズムは、AltschulらJMolBiol2154034101990のNBLASTおよびXBLASTプログラムに組み込まれる。BLASTヌクレオチド検索は、NBLASTプログラム、スコア=100、ワード長=12で行われる。BLASTタンパク質検索は、XBLASTプログラム、スコア=50、ワード長=3で行われる。比較目的のためのギャップアラインメントを取得するために、GappedBLASTを、AltschulらNucleicAcidsRes25338934021997に記載されているとおりに利用し得る。BLASTおよびGappedBLASTプログラムを利用するとき、それぞれのプログラム例えば、XBLASTおよびNBLASTのデフォルトパラメーターを、本発明の核酸分子に対して相同のヌクレオチド配列を得るために使用し得る。同一性または同一は、アミノ酸配列または核酸配列類似性を意味し、当分野で認識される意味を有する。同一性を有する配列は、同一の、または同様のアミノ酸または核酸を共有する。したがって、参照配列と85のアミノ酸配列同一性を共有する候補配列が、参照配列と候補配列の以下のアラインメントの後に、候補配列における85のアミノ酸が、参照配列における対応するアミノ酸と同一であり、そして/または保存アミノ酸変化を構成することを必要とする。本明細書に記載されているポリペプチドの機能的に活性な変異体は、元のポリペプチドまたはフラグメントの実質的に同じ機能活性を保持する。天然機能的に活性な変異体、例えば、対立遺伝子変異体および種変異体および非天然機能的に活性な変異体は、本発明において含まれ、例えば、変異誘発技術または直接合成により生産することができる。機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、本明細書に記載されているポリペプチドから約または少なくとも、例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30、35、40、45、50、55、60またはそれ以上のアミノ酸残基で異なっている。この比較がアラインメントを必要とするとき、配列は最大相同性となるようにアラインされる。変異部位は、本明細書に記載されているポリペプチドと実質的に同様の活性を有する限り、ポリペプチド中どこでも起こり得る。表現型でサイレントアミノ酸置換を有する変異体および誘導体を作製する方法についての案内は、BowieらScience24713061310において提供され、これは、アミノ酸配列の変化への耐用性を研究するための2つの主な戦略があることを教示している。第1の戦略は、進化の過程の自然選択によるアミノ酸置換の耐用性を利用する。異なる種中のアミノ酸配列を比較することにより、種間で保存されているアミノ酸位置を同定することができる。例えば、図5参照。これらの保存されたアミノ酸は、タンパク質機能のために重要であろう。対照的に、置換が自然選択によって耐用性であるアミノ酸位置は、タンパク質機能に重要でない位置を示す。したがって、アミノ酸置換に耐用性である位置は修飾することができるが、ポリペプチドの特定の結合活性を維持している。第2の戦略は、タンパク質機能に重要である領域を同定するために、クローン遺伝子の特定の位置にアミノ酸変化を導入する遺伝子操作を使用する。例えば、部位特異的変異誘発またはアラニン-スキャン変異誘発分子中の全ての残基において単一のアラニン変異の導入を使用することができるCunninghamらScience24410811085。タンパク質のアミノ酸に変異を導入する方法は、当業者によく知られている。例えば、AusubelCurrentProtocolsinMolecularBiologyJohnWileyandSonsIncTManiatisEFFritschandJSambrookMolecularCloningALaboratoryManualColdSpringHarborlaboratoryColdSpringHarborNY参照。変異もまた、市販のキット、例えば、QuikChangeTMSiteDirectedMutagenesisKitを使用して導入することができる。ポリペプチドに対してポリペプチドの機能に影響しないアミノ酸を置換することによるポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体の産生は、当業者により成し遂げることができる。変異体または誘導体は、例えば、少なくとも1つの生物学的活性を保持する1つ以上の保存的置換を有し得る。保存的置換は、ペプチド化学の当業者が、ポリペプチドの二次構造および水に対する性質が実質的に変化しないと予期されるように、アミノ酸を同様の特性を有する別のアミノ酸に置換された置換である。一般的に、アミノ酸の以下のグループは保存変化を示す:1ala、pro、gly、glu、asp、gln、asn、ser、thr、2cys、ser、tyr、thr、3val、ile、leu、met、ala、phe、4lys、arg、his、および5phe、tyr、trp、his。変異体および誘導体の特定の例は、限定はしないが、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドの機能的に活性な変異体および誘導体、例えば、野生型配列配列番号:5または6に記載されているとわずか約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30、35、40、45、50、55、60またはそれ以上のアミノ酸残基の違いを有する、少なくとも約100、150、200、250、300、350、375、400または425個の隣接するクロトーの細胞外ドメインのアミノ酸例えば、配列番号:5または6を含み、野生型ポリペプチドの少なくとも1つの生物学的活性を保持しているポリペプチドを含む。例えば、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、わずか約100個のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約400個の隣接する配列番号:5または6のアミノ酸を含むポリペプチドを含む。例えば、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、わずか約50個のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約400個の隣接する配列番号:5または6のアミノ酸を含むポリペプチドを含む。例えば、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、わずか約25個のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約425個の隣接する配列番号:5または6のアミノ酸を含むポリペプチドを含む。例えば、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、わずか約10個のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約425個の隣接する配列番号:5または6のアミノ酸を含むポリペプチドを含む。別の例においてクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、野生型配列とわずか約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30、35、40、45、50、55、60、70、75、80、85、90、95、100、110、120、140、150、160、170、180、190または200個のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、925、950または982個の隣接する配列番号:7のアミノ酸を含むポリペプチドを含む。例えば、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、わずか約100個のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約500個の隣接する配列番号:7のアミノ酸を含むポリペプチドを含む。例えば、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、わずか約100個のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約600個の隣接する配列番号:7のアミノ酸を含むポリペプチドを含む。例えば、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、わずか約100個のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約700個の隣接する配列番号:7のアミノ酸を含むポリペプチドを含む。例えば、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、わずか約100個のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約800個の隣接する配列番号:7のアミノ酸を含むポリペプチドを含む。例えば、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、わずか約100個のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約900個の隣接する配列番号:7のアミノ酸を含むポリペプチドを含む。例えば、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、わずか約50個のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約900個の隣接する配列番号:7のアミノ酸を含むポリペプチドを含む。変異体および誘導体の特定の例は、限定はしないが、線維芽細胞増殖因子を含むポリペプチドの機能的に活性な変異体および誘導体、例えば、野生型配列配列番号:31、33または35に記載されているとわずか約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30、35、40、45、50、55、60またはそれ以上のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約100、125、150、150、175、200、225または250個の隣接する線維芽細胞増殖因子のアミノ酸、例えば、FGF19配列番号:31、FGF21配列番号:33またはFGF23配列番号:35を含み、野生型ポリペプチドの少なくとも1つの生物学的活性を保持しているポリペプチドを含む。種々の態様において、変異体または誘導体は、R179Q変異を含み得るか、または含むことができない。例えば、線維芽細胞増殖因子を含むポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、わずか約25個のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約150個の隣接する配列番号:31、33または35のアミノ酸を含むポリペプチドを含む。例えば、線維芽細胞増殖因子を含むポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、わずか約25個のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約175個の隣接する配列番号:31、33または35のアミノ酸を含むポリペプチドを含む。例えば、線維芽細胞増殖因子を含むポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、わずか約25個のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約200個の隣接する配列番号:31、33または35のアミノ酸を含むポリペプチドを含む。例えば、線維芽細胞増殖因子を含むポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、わずか約50個のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約225個の隣接する配列番号:35のアミノ酸を含むポリペプチドを含む。例えば、線維芽細胞増殖因子を含むポリペプチドの機能的に活性な変異体もしくは誘導体は、わずか約25個のアミノ酸残基の違いを有する少なくとも約225個の隣接する配列番号:35のアミノ酸を含むポリペプチドを含む。4.3.本明細書の融合ポリペプチドの発現本明細書の融合タンパク質を発現するために、本明細書に記載されているいずれかの方法または当分野で既知である方法により得られるDNA分子を、当分野で既知の技術により適当な発現ベクターに挿入することができる。例えば、二本鎖cDNAは、ホモポリマーの付加または合成DNAリンカーの使用に関連する制限酵素結合または平滑末端ライゲーションにより、適当なベクターにクローニングすることができる。DNAリガーゼは、通常、DNA分子をライゲートするために使用され、望ましくない結合はアルカリホスファターゼでの処理により避けることができる。したがって、本明細書は、本明細書に記載されている核酸分子例えば、遺伝子または遺伝子をコードする組換え核酸分子を含むベクター例えば、組換えプラスミドおよびバクテリオファージを含む。組換えベクターなる用語は、組換えベクターが由来する天然または非人工の核酸分子において含まれる核酸配列よりも、より多い、より少ない、または異なる核酸配列を含むように、変化、修飾または加工されたベクター例えば、プラスミド、ファージ、ファスミド、ウイルス、コスミド、フォスミドまたは他の精製された核酸ベクターを含む。例えば、組換えベクターは、本明細書において定義されている調節配列、例えば、プロモーター配列、終結配列および/または人工リボソーム結合部位RBSに作動可能に連結しているクロトー-FGF23融合物をコードする核酸配列を含み得る。ベクターに包含されている遺伝子または核酸の発現が可能である組換えベクターを発現ベクターと称する。真核生物宿主において、異なる転写および翻訳調節配列は、宿主の性質に依存して使用され得る。それらはアデノウイルス、ウシパピローマウイルス、シミアンウイルスなどのウイルス源由来であり得、調節シグナルは高レベルの発現を有する特定の遺伝子と関連している。例えば、ヘルペスウイルスのTKプロモーター、SV40早期プロモーター、酵母菌ga14遺伝子プロモーターなどを含むが、これらに限定されない。転写開始調節シグナルは、遺伝子の発現を調節することができるように抑制または活性化することができるものを選択され得る。本明細書に記載されているいくつかの本明細書の分子において、融合ポリペプチドの1つ以上のポリペプチド鎖をコードする核酸配列を有する1つ以上のDNA分子は、望ましいDNA分子を宿主細胞に組み込むことができる1つ以上の調節配列に作動可能に連結している。導入されたDNAにより安定に形質転換された細胞は、例えば、発現ベクターを含む宿主細胞の選択を可能にする1つ以上のマーカーを導入することにより、選択することができる。選択可能なマーカー遺伝子は、発現する核酸配列に直接結合するか、または共トランスフェクションにより同じ細胞に導入することができる。さらなる因子が、また、本明細書に記載されているタンパク質の最適な合成のために必要であり得る。使用するさらなる因子がどれであるかは、当業者に明白である。特定のプラスミドまたはウイルスベクターの選択において重要な因子は、ベクターを含む受容細胞が認識され、ベクターを含まない受容細胞から選択される容易さ、特定の宿主において望ましいベクターのコピーの数、および、異なる種の宿主細胞間のベクターを往復することができることが望ましいかどうかを含むが、これらに限定されない。発現に関するDNA配列を含むようにベクターを構築するとき、例えば、形質転換、トランスフェクション、コンジュゲーション、プロトプラスト融合、エレクトロポレーション、リン酸カルシウム-沈降、直接マイクロインジェクションなどを含むが、これらに限定されない、当分野で既知の1つ以上の種々の適当な方法により、適当な宿主細胞に導入され得る。宿主細胞は、原核生物または真核生物のいずれかであり得る。真核生物宿主細胞の例は、例えば、哺乳動物細胞、例えば、ヒト、サル、マウスおよびチャイニーズハムスターCHO細胞を含む。このような細胞は、例えば、正しいフォールディングまたはグリコシル化を含むタンパク質の翻訳後修飾を容易にする。さらに、酵母細胞も本明細書の融合ポリペプチドを発現するために使用することができる。多くの哺乳動物細胞のように、酵母細胞も、例えば、グリコシル化を含むタンパク質の翻訳後修飾を可能にする。酵母菌におけるタンパク質の生産のために利用することができる強いプロモーター配列および高コピー数プラスミドのどれを利用するかにおいては、多くの組換えDNA戦略が存在する。酵母菌の転写および翻訳機構は、クローニングされた哺乳動物の遺伝子産物におけるリーダー配列を認識することができ、それによりリーダー配列を有するペプチドすなわち、前ペプチドの分泌を可能にする。本明細書の融合ポリペプチドの高収率生産の特定の方法は、DHFR-欠損CHO細胞におけるジヒドロ葉酸還元酵素DHFR増幅の使用を介して、米国特許第4,889,803号に記載されているメトトレキサートのレベルの連続的な増加の使用によるものである。得られたポリペプチドをグリコシル化してもよい。1つ以上のベクターの導入後、宿主細胞を、通常、ベクター含有細胞の増殖を選択する選択培地中で増殖させる。組換えタンパク質の精製は、当分野で既知の、または本明細書に記載されているいずれかの方法、例えば、抽出、沈降、クロマトグラフィーおよび電気泳動法に関するいずれかの慣用の方法により実施することができる。タンパク質を精製するために使用され得るさらなる精製方法は、標的タンパク質を結合するモノクローナル抗体を使用するアフィニティークロマトグラフィーである。一般的に、組換えタンパク質を含む粗製造物を、適当なモノクローナル抗体が固定されているカラムに通過させる。不純物は通過するが、タンパク質は、通常、特異的な抗体を介してカラムに結合する。カラムを洗浄後、タンパク質を、例えば、pHまたはイオン強度を変化させることにより、ゲルから溶離する。4.4.融合ポリペプチド活性を評価するためのアッセイ本明細書に記載されているアッセイ実施例2、参照および当分野で既知のものを、本明細書の融合ポリペプチドのクロトーまたはFGF活性を検出するために使用することができる。適当な活性アッセイは、受容体結合アッセイ、細胞増殖アッセイおよび細胞シグナル伝達アッセイを含む。例えば、融合ポリペプチドがクロトーまたはFGF活性を有するか否かを測定するために使用され得る結合アッセイは、融合ポリペプチドのFGF受容体への結合をアッセイすることを含む。FGF受容体結合アッセイは、競合および非競合アッセイ両方を含むが、これらに限定されない。例えば、FGF受容体結合は、FGF受容体を発現する細胞を標識FGF例えば、放射性標識と接触させ、非標識クロトー-FGF融合ポリペプチドの濃度を増加させることにより検出することができる。同じ受容体への結合に対して競合する2つのリガンドを、細胞を含む反応混合物に加える。次に細胞を洗浄し、標識FGFを測定する。非標識融合ポリペプチドの存在下で受容体に対する標識FGFの量の減少は、受容体へのクロトー-FGF融合ポリペプチドの結合を示す。あるいは、クロトー-FGF融合ポリペプチドを標識し、細胞への融合ポリペプチドの直接結合を検出してもよい。クロトーまたはFGF活性は、また、融合ポリペプチドが細胞応答を誘導するか否かを決定することにより測定することができる。例えば、いくつかの態様において、クロトー-FGF融合ポリペプチドの生物学的活性を検出するためのアッセイは、FGF受容体を発現する細胞を融合ポリペプチドと接触させ、細胞応答、例えば、細胞増殖またはEgr-1活性化、C2C12細胞における筋管直径をアッセイし、融合ポリペプチドの存在および非存在下で細胞応答を比較することを含む。融合ポリペプチド複合体の非存在下と比較して融合ポリペプチド複合体の存在下での細胞応答の増加は、融合ポリペプチドが生物学的活性を有することを示す。また、受容体からの下流シグナル伝達事象の増加も、生物学的活性例えば、FGFR、FRS2、ERK1/2、p70S6Kのリン酸化などの証拠として、測定することができる。4.5.医薬組成物および処置法本明細書は、また、1つ以上の本明細書の融合ポリペプチドおよび薬学的に許容される希釈剤または担体を含む医薬組成物に関する。該医薬組成物は薬学的有効用量のヘパリンをさらに含むことができる。このような医薬組成物はキットまたは容器に含まれ得る。このようなキットまたは容器には、融合ポリペプチドのインビボ半減期またはインビトロ寿命の延長に関する指示書と共にパッケージされていてもよい。所望により、このようなキットまたは容器には、医薬または生物学的製剤の製造、使用または販売を規制する行政機関により指示されている形での通知を添付することができ、この通知は、ヒト投与のための製造、使用または販売の行政機関による承認を反映する。このような組成物は、医薬組成物を患者に投与することにより、患者、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトにおける疾患または疾患症状例えば、加齢関連状態または代謝障害を処置、予防または改善する方法において使用され得る。一般的に、本明細書の医薬組成物の治療有効量は、約0.0001mg/kgから0.001mg/kg、0.001mg/kgから約10mg/kg体重または約0.02mg/kgから約5mg/kg体重である。一般的に、融合ポリペプチドの治療有効量は、例えば、約0.001mgから約0.01mg、約0.01mgから約100mgまたは約100mgから約1000mgである。好ましくは、融合ポリペプチドの治療有効量は、約0.001mg/kgから2mg/kgである。融合ポリペプチドに関する最適な医薬製剤は、投与経路および望ましい用量に依存して当業者により決定することができる例えば、RemingtonsPharmaceuticalSciences18thEdMackPublishingCoEastonPa、参照、この文献の全体を出典明示により本明細書に包含させる。本明細書の融合ポリペプチドは、固体、液体または気体エアロゾルの形態であってよい医薬組成物として投与され得る。典型的な投与経路は、経口、局所、非経腸、舌下、経直腸、膣、皮内および鼻腔内を含むが、これらに限定されない。非経腸投与は、皮下注射、静脈内、筋肉内、腹膜内、胸膜内、胸骨内注射または注入技術を含む。好ましくは、組成物は非経腸的に投与される。さらに好ましくは、組成物は静脈内に投与される。本明細書のポリペプチドが対象への組成物の投与時に生物学的に利用可能にするように、本明細書の医薬組成物を処方することができる。例えば、錠剤が単一の投与単位であり、エアロゾル形態の本明細書のポリペプチドの容器が複数の投与単位を入れることができるとき、組成物は1つ以上の投与単位の形態を取ることができる。医薬組成物の製造において使用される物質は使用される量において非毒性であり得る。医薬組成物における活性成分の最適な用量が種々の因子に依存することは当業者に明らかである。関連因子は、対象の型例えば、ヒト、対象の健康全般、処置の必要な対象の加齢関連状態または代謝障害の型、多剤レジメンの一部としての組成物の使用、本明細書のポリペプチドの特定の形態、投与様式および使用される組成物を含むが、これらに限定されない。薬学的に許容される担体またはビヒクルは、組成物が、例えば、錠剤または粉末形態で存在できるような粒子であり得る。担体は、例えば、経口シロップまたは注射可能な液体である組成物と共に液体であり得る。加えて、担体は、例えば、吸入投与に有用なエアロゾル組成物を提供するために気体であり得る。担体なる用語は、本明細書のポリペプチドと一緒に投与される希釈剤、アジュバントまたは賦形剤を示す。このような医薬担体は、液体、例えば、水および油石油、動物性、植物性または合成のものを含む、例えば、ピーナッツ油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油などであり得る。担体は、塩水、アカシアゴム、ゼラチン、デンプンペースト、タルク、ケラチン、コロイダルシリカ、ウレアなどであり得る。加えて、補助剤、安定剤、増粘剤、潤滑剤および着色剤を使用することができる。1つの態様において、対象に投与されるとき、本明細書のポリペプチドおよび薬学的に許容される担体は滅菌される。本明細書のポリペプチドが静脈内投与されるとき、水は特定の担体である。塩水および水性デキストロースおよびグリセロール溶液は、また、液体担体、特に注射可能溶液として使用され得る。適当な医薬担体は、また、賦形剤、例えば、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、モルト、ライス、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、乾燥スキムミルク、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノールなどを含む。望ましいとき、本組成物は少量の湿潤剤もしくは乳化剤またはpH緩衝剤を含み得る。組成物は、経口投与用であり得、そのとき、組成物は好ましくは固体または液体形態であり、半固体、半液体、懸濁液およびゲル形態が本明細書において固体または液体のいずれかとして考慮される形態内に含まれる。経口投与用の固体組成物として、組成物は、粉末、顆粒、圧縮錠剤、錠剤、カプセル、チューインガム、ウエハースなどの形態に製剤化することができる。このような固体組成物は一般的に1つ以上の不活性な希釈剤を含む。加えて、1つ以上の以下のものが存在し得る、結合剤、例えば、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、微結晶性セルロースまたはゼラチン、賦形剤、例えば、デンプン、ラクトースまたはデキストリン、崩壊剤、例えば、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、プリモゲル、コーンデンプンなど、滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウムまたはステロテックス、流動促進剤、例えば、コロイド状二酸化ケイ素、甘味剤、例えば、スクロースまたはサッカリン、香味剤、例えば、ペパーミント、サルチル酸メチルまたはオレンジ香味剤、ならびに着色剤。医薬組成物がカプセル、例えば、ゼラチンカプセルの形態であるとき、医薬組成物は、上記の型の物質に加えて、液体担体、例えば、ポリエチレングリコール、シクロデキストリンまたは脂肪油を含むことができる。医薬組成物は液体の形態、例えば、エリキシル、シロップ、溶液、エマルジョンまたは懸濁液であり得る。液体は経口投与または注射による送達のために有用であり得る。経口投与用のとき、組成物は1つ以上の甘味剤、防腐剤、色素/着色料および香味料を含み得る。注射による投与用の組成物において、また、1つ以上の界面活性剤、保存剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、緩衝剤、安定剤および等張剤を含み得る。溶液、懸濁液または他の形態であろうとなかろうと、本明細書の液体組成物は、また、1つ以上の以下のものを含むことができる、滅菌希釈剤、例えば、注射用水、塩水溶液、好ましくは生理食塩水、リンガー溶液、等張塩化ナトリウム、固定油、例えば、溶媒または懸濁媒体として働くことができる合成モノもしくはジグリセリド、ポリエチレングリコール、グリセリン、シクロデキストリン、プロピレングリコールまたは他の溶媒、抗菌剤、例えば、ベンジルアルコールまたはメチルパラベン、抗酸化剤、例えば、アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウム、キレート剤、例えば、エチレンジアミンテトラ酢酸、緩衝剤、例えば、酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩および等張化剤、例えば、塩化ナトリウムまたはデキストロース。非経腸用の組成物は、ガラス、プラスチックまたは他の物質製であるアンプル、使い捨て注射器または複数回バイアルに包まれていてもよい。生理食塩水は特定の好ましいアジュバントである。注射可能な組成物は好ましくは滅菌である。医薬組成物は、適当な用量が得られる有効量の本明細書の化合物例えば、融合ポリペプチドを含む。医薬組成物は、それぞれの障害に対して現在処方されている既知の有効量の化合物を含み得る。加齢関連状態または代謝障害の予防、処置および/または管理において有効である予防および/または治療レジメンにおいて使用される本明細書のポリペプチドの投与経路は、当分野で既知の他の治療に対して現在処方されている投与形路に基づくことができる。本明細書のポリペプチドは、任意の便利な経路、例えば、注入またはボーラス注射により、上皮性または皮膚粘膜裏当てを介する吸収例えば、経口粘膜、経直腸および腸粘膜などにより投与することができる。投与は全身的または局所的であり得る。種々の送達系は、例えば、マイクロ粒子、マイクロカプセル、カプセルなどが知られており、本明細書のポリペプチドを投与するために有用であり得る。1つ以上の本明細書のポリペプチドが対象に投与され得る。投与の方法は、経口投与および非経腸投与、皮内、筋肉内、腹膜内、静脈内、皮下、鼻腔内、硬膜外、舌下、鼻腔内、大脳内、脳室内、髄腔内、膣内、経皮を含むが、これらに限定されない非経腸投与、経直腸的、吸入による、または、眼、鼻、耳または皮膚への局所的を含むが、これらに限定されない。本明細書のポリペプチドは非経腸的に投与され得る。具体的には、本明細書のポリペプチドは静脈内に投与され得る。肺投与は、また、例えば、吸入器または噴霧器、およびエアロゾル剤との製剤の使用により、またはフルオロ炭素または合成肺界面活性剤でのかん流を介して、使用することができる。本明細書のポリペプチドは、また、伝統的な結合剤および担体、例えば、トリグリセリドと一緒に坐薬として製剤化することができる。本明細書のポリペプチドは制御放出系において送達することができる。例えば、ポンプを使用することができるSeftonCRCCritRefBiomedEng198714201BuchwaldらSurgery198088507SaudekらNEnglJMed1989321574、参照。ポリマー物質も、本明細書のポリペプチドの制御放出のために使用することができるMedicalApplicationsofControlledReleaseLangerandWiseCRCPresBocaRatonFL1974ControlledDrugBioavailabilityDrugProductDesignandPerformanceSmolenandBallWileyNewYork1984RangerandPeppasJMacromolSciRevMacromolChem19832361、参照;LevyらScience1985228190DuringらAnnNeurol198925351HowardらJNeurosurg198971105も参照。具体的には、制御放出系を、本明細書のポリペプチドの標的、例えば、脳の近接に置くことができ、したがって、全身投与量に対してほんのわずかしか必要としない例えば、GoodsoninMedicalApplicationsofControlledReleasesupravol21984pp115138、参照。Langerによる文献Science199024915271533において論じられている他の制御放出系を使用することができる。本明細書のポリペプチドの制御または持続放出を達成するために使用されるポリマー物質は、例えば、米国特許第5,679,377号、米国特許第5,916,597号、米国特許第5,912,015号、米国特許第5,989,463号、米国特許第5,128,326号、PCT公開WO99/15154およびPCT公開WO99/20253において記載されている。持続放出製剤において使用されるポリマーの例は、ポリ2-ヒドロキシエチルメタクリレート、ポリメチルメタクリレート、ポリアクリル酸、ポリエチレン-コ-ビニルアセテート、ポリメタクリル酸、ポリグリコリドPLG、ポリ酸無水物、ポリN-ビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリアクリルアミド、ポリエチレングリコール、ポリラクチドPLA、ポリラクチド-コ-グリコリドPLGAおよびポリオルトエステルを含むが、これらに限定されない。好ましくは、持続放出製剤において使用されるポリマーは、不活性で、浸出される不純物を含まず、保存安定性、滅菌性かつ生分解性である。一般的に、本明細書の医薬組成物の治療有効量は、約0.0001mg/kgから0.001mg/kg、0.001mg/kgから約10mg/kg体重または約0.02mg/kgから約5mg/kg体重である。他の態様において、予防および/または治療レジメンは、少なくとも0.01μg/mLから少なくとも400μg/mLの本明細書のポリペプチドの血漿レベルを達成する、有効量の本明細書のポリペプチドを患者に1回以上投与することを含む。予防および/または治療レジメンは、少なくとも0.01μg/mLから400μg/mLの本明細書のポリペプチドの血漿レベルを維持する、有効量の本明細書のポリペプチドを患者へ複数回投与することを含み得る。予防および/または治療レジメンにて、少なくとも1日、1ヶ月、2ヶ月、3ヶ月、4ヶ月、5ヶ月、6ヶ月、7ヶ月、8ヶ月または9ヶ月間投与され得る。予防および/または治療レジメンは、1つ以上のさらなる治療と組み合わせての本明細書のポリペプチドの投与を含み得る。加齢関連状態または代謝障害の予防、処置および/または管理のために現在使用されている1つ以上の治療の推奨される用量は、HardmanらedsGoodmanGilmansThePharmacologicalBasisOfBasisOfTherapeutics10thedMcGrawHillNewYork2001Physician’sDeskReferenceこの内容を出典明示により本明細書に包含させるを含むが、これらに限定されない当分野の参考文献から得ることができる。本発明は、クロトータンパク質およびFGFのアゴニスト活性が望ましい障害を処置するための方法を含む。本明細書は、クロトータンパク質およびFGFのアゴニスト活性が望ましい病理学的疾患の治療における、または処置のための医薬としての記載されているタンパク質、融合タンパク質、核酸分子または医薬組成物の使用をさらに含む。本明細書のこのような方法または使用の例は、加齢関連状態または代謝障害を含むが、これらに限定されない。本明細書は、個体における加齢関連状態を処置または予防するための方法、および個体における加齢関連状態を処置または予防するための治療における、または医薬としての記載されているタンパク質、融合タンパク質、核酸分子または医薬組成物の使用を含む。処置の必要な対象は、加齢関連状態を処置または予防するように、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインおよび繊維芽細胞増殖因子および任意の修飾されたFcフラグメントを有する、クロトー融合ポリペプチドを含む薬理学的有効用量の医薬組成物を投与される。いくつかの態様において、クロトー融合ポリペプチドは薬理学的有効用量のヘパリンと共投与される。加齢関連状態はサルコペニア、皮膚萎縮、筋肉疲労、脳萎縮、アテローム性動脈硬化症、動脈硬化症、肺気腫、骨粗鬆症、骨関節症、免疫不全、高血圧、認知症、ハンチントン病、アルツハイマー病、白内障、加齢黄斑変性症、前立腺癌、卒中、期待寿命の低下、記憶障害、しわ、腎機能障害および加齢関連難聴を含む。いくつかの態様において、クロトー融合ポリペプチドはアルファクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外ドメインを含む。特定の態様において、アルファクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外ドメインおよび繊維芽細胞増殖因子23を含むクロトー融合タンパク質は、筋肉疲労に対して処置の必要な対象に投与される。本発明は、また、個体における代謝障害を処置または予防するための方法、および個体における代謝障害を処置または予防するための治療における、または医薬としての記載されているタンパク質、融合タンパク質、核酸分子または医薬組成物の使用に関する。処置の必要な個体は、代謝障害を処置するように、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインおよび繊維芽細胞増殖因子およびFcRnへの減少した結合および/または増加した血清半減期および/または安定性を有する任意の修飾されたFcフラグメントを有する、クロトー融合ポリペプチドを含む薬理学的有効用量の医薬組成物を投与される。いくつかの態様において、クロトー融合ポリペプチドは薬理学的有効用量のヘパリンと共投与される。該方法はII型糖尿病、メタボリックシンドローム、高血糖および肥満の処置または予防において使用され得る。特定の態様において、ベータ-クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外ドメインおよび繊維芽細胞増殖因子21を含むクロトー融合タンパク質は、代謝障害に対して処置の必要な対象に投与される。本明細書はまた、個体における高リン血症または石灰沈着症を処置または予防するための方法、および個体における高リン血症または石灰沈着症を処置または予防するための治療における、または医薬としての記載されているタンパク質、融合タンパク質、核酸分子または医薬組成物の使用を提供する。処置の必要な個体は、高リン血症または石灰沈着症を処置するように、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメイン、繊維芽細胞増殖因子および任意の修飾されたFcフラグメントを有する、クロトー融合ポリペプチドを含む薬理学的有効用量の医薬組成物を投与される。いくつかの態様において、クロトー融合ポリペプチドは薬理学的有効用量のヘパリンと共投与される。特定の態様において、アルファクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外ドメインおよび線維芽細胞増殖因子23および任意の修飾されたFcフラグメントを含むクロトー融合タンパク質は、高リン血症または石灰沈着症に対して処置の必要な個体に投与される。本明細書は、また、個体における慢性腎臓疾患または慢性腎不全を処置または予防するための方法、および個体における慢性腎臓疾患または慢性腎不全を処置または予防するための治療における、または医薬としての記載されているタンパク質、融合タンパク質、核酸分子または医薬組成物の使用を提供する。処置の必要な個体は、慢性腎臓疾患または慢性腎不全を処置するように、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメイン、繊維芽細胞増殖因子および任意の修飾されたFcフラグメントを有する、クロトー融合ポリペプチドを含む薬理学的有効用量の医薬組成物を投与される。いくつかの態様において、クロトー融合ポリペプチドは薬理学的有効用量のヘパリンと共投与される。いくつかの態様において、アルファクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外ドメインを含むクロトー融合タンパク質は、慢性腎臓疾患または慢性腎不全に対して処置の必要な個体に投与される。本明細書はまた、個体における癌を処置または予防するための方法、個体における癌を処置または予防するための治療における、または医薬としての記載されているタンパク質、融合タンパク質、核酸分子または医薬組成物の使用を含む。処置の必要な個体は、癌を処置するように、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメイン、繊維芽細胞増殖因子および任意の修飾されたFcフラグメントを有する、クロトー融合ポリペプチドを含む薬理学的有効用量の医薬組成物を投与される。該方法は乳癌の処置または予防において使用され得る。いくつかの態様において、クロトー融合ポリペプチドは薬理学的有効用量のヘパリンと共投与される。いくつかの態様において、アルファクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外ドメインを含むクロトー融合タンパク質は、癌に対して処置の必要な個体に投与される。クロトー融合ポリペプチドを含む医薬組成物を投与することにより障害を処置する方法において、または、治療においてクロトー融合ポリペプチドを含む医薬組成物を使用するとき、クロトー融合ポリペプチドおよび任意の修飾されたFcフラグメントはクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメインおよび線維芽細胞増殖因子を有する。特定の態様において、クロトー融合タンパク質は、ベータクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外ドメインおよび繊維芽細胞増殖因子21を含む。別の態様において、融合ポリペプチドは、FGF例えば、FGF19、FGF21、FGF23またはFGF23変異体および減少したFcRnへの結合および/または増加した血清安定性を有する修飾されたFcフラグメントを含む。この型の融合ポリペプチドを、上記種々の疾患において使用することができる、または当分野で知られているあらゆるFGF関連疾患を処置または予防するために使用することができる。融合ポリペプチドをそれを必要とする個体に投与することができる。融合ポリペプチド組成物は、当業者に知られている、および本明細書に記載されている投与方法にしたがって投与することができる。投与の特定の方法は皮下または静脈内を含む。他の有効な投与様式は本明細書に記載されている。4.6.処置法および有効性を評価するためのアッセイ方法本明細書に記載されている融合ポリペプチドを個体に投与することを提供する本明細書の方法または使用は、加齢関連状態または代謝障害を含む種々の障害を処置するために使用することができる。何らかの特定の理論に限定されることなく、融合ポリペプチドは、クロトーまたはFGFの調節異常がある障害を処置するために使用され得る。例の障害は代謝障害および加齢関連状態を含む。例えば、FGF23またはクロトーノックアウトマウス両方は、低い物理的活性、成長遅延、筋肉疲労、皮膚萎縮、アテローム性動脈硬化症、寿命の短縮などを含む種々の同様の表現型を示すRazzaqueandLanskeJofEndrocrinology194110、参照これを出典明示により本明細書に包含させる。特に、本明細書の融合ポリペプチドは、筋肉疲労を含む老化関連障害の処置において特に有用である。理論に束縛されることなく、ミネラル例えば、リン酸塩およびカルシウムおよびビタミンDホメオスタシスをコントロールするクロトーおよびFGF23の能力は、これらのタンパク質が老化および筋萎縮を調節することを意味し得る。他方では、本明細書の融合ポリペプチドは、代謝障害を処置するために使用され得る。例えば、ベータ-クロトーおよびFGF19は、コレステロール7-α-ヒドロキシラーゼCYP7A1を調節することにより、胆汁酸ホメオスタシスをコントロールすることが示されている。胆汁ホメオスタシス障害の非限定的な例は胆汁うっ滞である。ベータ-クロトーおよびFGF21は、脂肪細胞における脂肪分解を誘導し、したがって、脂肪貯蔵を減少させ、グルコース摂取を増加させることが示されている。脂肪分解/脂肪貯蔵障害の非限定的な例は代謝関連肥満および心臓血管疾患である。少なくとも、FGF23が尿におけるリン酸塩の排出を刺激することができ、それにより血清中のリン酸塩レベルを減少させる発見の一部に基づいて、本明細書のクロトー-FGF23融合ポリペプチドは、個体における高リン血症または石灰沈着症を処置または予防するために使用することができる。例えば、患者におけるクロトーの欠損となるクロトーにおけるホモ接合型ミスセンス変異が深刻な腫瘍性石灰沈着症および動脈石灰化を引き起こし得ることが示されているIchikawaらJClinInvest11726842691これを出典明示により本明細書に包含させる。個体は、高リン血症または石灰沈着症を処置または予防するように、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメイン、線維芽細胞増殖因子および任意の修飾されたFcフラグメントを有するクロトー融合ポリペプチドを含む薬理学的有効用量の医薬組成物を投与される。特に、アルファクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外ドメイン、繊維芽細胞増殖因子および任意の修飾されたFcフラグメントを含むクロトー融合ポリペプチドは、高リン血症または石灰沈着症を処置するために有用である。本明細書のクロトー融合ポリペプチドはまた、個体における慢性腎臓疾患または慢性腎不全を処置または予防するために使用され得る。例えば、クロトー発現が、慢性腎不全を有さない患者の腎臓と比較して、慢性腎不全を有する患者の腎臓において減少していることが示されているKohらBiochemBiophysResComm28010151020これを出典明示により本明細書に包含させる。個体は、慢性腎臓疾患または慢性腎不全を処置または予防するように、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメイン、繊維芽細胞増殖因子および任意の修飾されたFcフラグメントを有する、クロトー融合ポリペプチドを含む薬理学的有効用量の医薬組成物を投与される。特に、アルファクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外ドメインを含むクロトー融合ポリペプチドは慢性腎臓疾患または慢性腎不全を処置するために有用である。本明細書のクロトー融合ポリペプチドはまた、個体における癌を処置または予防するために使用され得る。例えば、クロトー発現が、正常乳癌組織と比較して、乳癌組織において減少していることが示されているWolfらOncogeneオンライン先行出版これを出典明示により包含させる。個体は、癌または乳癌を処置または予防するように、クロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外サブドメイン、繊維芽細胞増殖因子および任意の修飾されたFcフラグメントを有する、クロトー融合ポリペプチドを含む薬理学的有効用量の医薬組成物を投与される。特に、アルファクロトータンパク質の少なくとも1つの細胞外ドメインを含むクロトー融合タンパク質は癌または乳癌を処置するために有用である。加齢関連状態または代謝障害における本明細書のクロトー融合ポリペプチドの有効性を評価する、および/または有効用量を決定するための方法は、例えば、哺乳動物例えば、マウス、ラット、霊長類またはいくつかの他の非ヒトまたは他の動物例えば、アフリカツメガエル、ゼブラフィッシュまたは無脊椎動物、例えば、昆虫または線虫を使用する生物ベースアッセイを含む。クロトー融合ポリペプチドは、1回またはレジメン定期的または不規則的のとおりに生物体に投与することができる。次に生物体のパラメーター、例えば、加齢関連パラメーターを評価する。興味あるクロトー融合ポリペプチドは、参照、例えば、コントロール生物体のパラメーターと比較して、パラメーターにおける変化をもたらす。他のパラメーター例えば、毒性、クリアランスおよび薬物動態学に関連するも評価され得る。本明細書のクロトー融合ポリペプチドは、特定の障害、例えば、本明細書に記載されている障害、例えば、加齢関連障害、代謝障害を有する動物を使用して、評価され得る。これらの障害は、また、生理学における試験ポリペプチドの効果を観察することができる感受性の系を提供することができる。例の障害は、脱神経、廃用性萎縮、代謝障害例えば、肥満および/または糖尿病動物、例えば、db/dbマウスおよびob/obマウスの障害、脳、肝臓虚血、シスプラチン/タキソール/ビンクリスチンモデル、種々の組織異種移植移植物、トランスジェニック骨モデル、疼痛症候群炎症性および神経障害を含む、パラコート、遺伝毒性および酸化ストレスモデル、および腫瘍Iモデルを含む。加齢関連状態を測定するために、動物モデルはカロリー制限されたときに変化した表現型を有する動物であり得る。例えば、F344ラットは、クロトー融合ポリペプチドを評価するために有用なアッセイ系を提供する。カロリー制限されたとき、F344ラットはネフロパシーに対して0から10の発生率を有する。しかしながら、自由食餌のとき、それらはネフロパシーに対して60から100の発生率を有する。本明細書のクロトー融合ポリペプチドを評価するために、それを動物例えば、F344ラットまたは他の適当な動物に投与し、動物のパラメーターを、例えば、期間後に評価する。動物は自由食餌または通常であり得る例えば、カロリー制限下ではないが、いくつかのパラメーターはこのような条件下で評価することができる。一般的に、このような動物のコホートはアッセイのために使用される。一般的に、試験ポリペプチドがカロリー制限と同様の動物対象の表現型の方向におけるパラメーターに作用するとき、試験ポリペプチドは動物における寿命調節を好ましく変化させるものとして示すことができる。このような試験ポリペプチドは、生物体からカロリー摂取を奪うことなく、少なくともいくつかのカロリー制限の寿命調節効果、例えば、このような効果の一部をもたらし得る。試験すべきパラメーターは、年齢関連または疾患関連パラメーター、例えば、動物モデルと関連する障害の症状であり得る。例えば、試験ポリペプチドをSHラットに投与することができ、血圧をモニタリングする。好ましいと示される試験ポリペプチドは、該ポリペプチドで処理されていない同様の参照動物と比較して、症状の改善を引き起こすことができる。障害または老化に関連する他のパラメーターは、抗酸化レベル例えば、抗酸化酵素レベルまたは活性、ストレス抵抗性例えば、パラコート抵抗性、中核温、グルコースレベル、インスリンレベル、甲状腺-刺激ホルモンレベル、プロラクチンレベルおよび黄体形成ホルモンレベルを含み得る。加齢関連状態を処置するための本明細書のポリペプチドの有効性を測定するために、減少したクロトー発現を有する動物が使用され得る、例えば、変異クロトーを有するマウス;KurooらNature39045および米国出願番号第20030119910号、参照これら両方をそれら全体において出典明示により本明細書に包含させる。例えば、試験ポリペプチドを変異マウスに投与し、加齢関連パラメーターをモニタリングする。好ましいと示される試験ポリペプチドは、該ポリペプチドで処理されていない同様の参照動物と比較して、症状の改善を引き起こすことができる。代謝障害または老化に関連するパラメーターは、体重の測定、生殖能力の獲得の検査、血糖レベルの測定、寿命の観察、皮膚の観察、歩行のような運動機能の観察などにより評価することができる。評価は、また、胸腺体重の測定、胸腔の内面上に形成された石灰化結節のサイズの観察などにより作ることができる。さらに、クロトー遺伝子またはクロトータンパク質に対するmRNAの定量も評価のために有用である。さらに、他のインビボモデルおよび生物アッセイは、代謝パラメーター、例えば、インスリン障害、II型糖尿病に関連するパラメーターに対して動物を評価することを含む。例の代謝パラメーターは、グルコース濃度、インスリン濃度およびインスリン感受性を含む。別の系の例は、例えば、動物モデルにおける腫瘍を特徴とする。腫瘍は自発的なものまたは誘導されたものであり得る。例えば、腫瘍は例えば、p53またはp53-であり得る種々の遺伝的構成を有する細胞から発生し得る。自己免疫疾患である生物体、例えば、SLEにかかりやすいNZBマウスを使用することも可能である。骨疾患の特徴を評価するために、例えば、骨粗鬆症におけるモデルとして卵巣摘出した動物を使用することが可能である。同様に、関節疾患において、モデルはアジュバント関節炎に基づき例えば、マウスが軟骨プロテオグリカン、高移動度グループタンパク質、連鎖球菌細胞壁物質またはコラーゲンの免疫を有し得る、腎臓疾患において、kd/kdマウスを使用することができる。認知、特に学習および記憶の動物モデルも利用することができる。糖尿病およびその合併症の動物モデル、例えば、ストレプトゾトシンモデルも利用することができる。イヌモデルを、例えば、卒中および虚血を評価するために使用することができる。試験ポリペプチドが寿命調節を変化することができるか否かの評価において、多くの加齢関連パラメーターまたはバイオマーカーをモニタリングまたは評価することができる。例の加齢関連パラメーターは、i細胞または生物体の寿命、ii生物学的加齢依存発現パターンを有する細胞または生物体における遺伝子転写物または遺伝子産物の存在または不存在、iiiストレスに対する細胞または生物体の抵抗性、iv細胞または生物体の1つ以上の代謝パラメーター例のパラメーターは循環インスリンレベル、血中グルコースレベル、脂肪含有量、中核温などを含む、v細胞または生物体に存在する複数の細胞の増殖能、およびvi細胞または生物体の外見または挙動を含む。平均寿命なる用語は、生物体のコホートの死の年齢の平均を意味する。いくつかの場合において、平均寿命は、コントロール環境条件下で、遺伝的に同一の生物体のコホートを使用して評価される。事故による死は除外される。平均寿命がコントロール環境条件下で決定できないとき例えば、ヒト、十分に大きな母集団に対する信頼性のある統計情報例えば、保険数理表からを平均寿命として使用することができる。2つのこのような生物体、例えば、1つの参照生物体およびクロトー融合ポリペプチドで処理された1つの生物体間の分子差の特性化は、生物体の生理学的状態における違いを示すことができる。参照生物体および処理された生物体は、一般的に同じ実年齢である。本明細書において使用される実年齢なる用語は、あらかじめ選択された事象、例えば、受胎、定義されている胎生または胎児期、または、さらに好ましくは、出生からの経過時間を示す。生物体が比較分析のための同じ実年齢であるかどうかを決定するために、種々の基準が使用することができる。一般的に、必要とされる精度の程度は、野生型生物体の平均寿命と相関関係である。例えば、実験室野生型株N2がいくつかのコントロール条件下で平均約16日間生存する線虫シーエレガンスにおいて、同じ年齢の生物体は同じ日数の生存であってよい。マウスに関して、同じ年齢の生物体は、同じ週または月数、霊長類またはヒトに関して、同じ年数または2、3または5年以内などの生存であってよい。一般的に、同じ実年齢の生物体は、その種の野生型生物体の平均寿命の15、10、5、3、2または1以内の時間の生存であってよい。好ましくは、生物体は成体であり、例えば、生物体は、少なくとも平均野生型生物体が繁殖能を有する齢に成熟する時間生存している。生物スクリーニングアッセイは、生物体が老化の明白な物理的特徴を示す前に実施することができる。例えば、生物体は、同じ種の野生型生物体の平均寿命の10、30、40、50、60または70だけ生存した成体であり得る。代謝、免疫能力および染色体構造における加齢関連変化が報告されている。あらゆるこれらの変化を、試験対象例えば、生物体ベースアッセイにおけるまたは患者例えば、本明細書に記載されている治療処置の前、中または後のいずれかに対して評価することができる。カロリー制限と関連するマーカーは、また、スクリーニングアッセイの対象生物体または処置される対象を評価することができる。これらのマーカーは加齢関連ではないかもしれないが、それらはクロトー経路が調節されるとき、変化する生理学的状態を示し得る。マーカーはmRNAまたはタンパク質であってよく、これらの多くはカロリー制限された動物において変化する。WO01/12851および米国特許第6,406、853号は例のマーカーを記載している。本明細書に記載されている動物細胞由来の細胞モデルまたは本明細書に記載されている動物モデルの類似物を細胞ベースアッセイのために使用することができる。筋萎縮における試験ポリペプチドの効果を評価するためのモデルは、1例えば、中部の腿で右坐骨神経を切断することによる脱神経から生じるラット内側腓腹筋の筋肉量喪失、2固定、例えば、90度の屈曲で固定された右足関節から生じるラット内側腓腹筋の筋肉量喪失、3後肢懸垂から生じるラット内側腓腹筋の筋肉量喪失例えば、米国2003-0129686、参照、4悪液質サイトカイン、インターロイキン-1IL-1での処理から生じる骨格筋萎縮RNCooneySRKimballTCVaryShock7116、および5グルココルチコイド、デキサメタゾンでの処理から生じる骨格筋萎縮ALGoldbergJBiolChem24432239を含む。AMDに対する例の動物モデルは、滲出性湿性黄斑変性症を模倣するレーザー-誘導マウスモデルBoraらProcNatlAcadSciUSA100267984、AMDの地図状萎縮型と関連する特徴となるカテプシンDの変異型を発現するトランスジェニックマウスRakoczyらAmJPathol161151524、およびCNVとなる網膜色素上皮においてVEGFを過剰発現するトランスジェニックマウスSchwesingerらAmJPathol158116172を含む。パーキンソン病の動物モデルの例は、ドーパミン神経毒1-メチル-4フェニル1,2,3,6-テトラヒドロピリジンMPTPでの処理によりパーキンソン病になった霊長類以下参照、例えば、米国特許公開第20030055231号およびWichmannらAnnNYAcadSci991199213、6-ヒドロキシドーパミン-障害ラット例えば、LabAnimSci4936371、およびトランスジェニック無脊椎動物モデル例えば、LaksoらJNeurochem8616572およびLinkMechAgeingDev122163949を含む。II型糖尿病の分子モデルの例は、欠損Nkx-2.2またはNkx-6.1を有するトランスジェニックマウス、米国特許第6,127,598号、ズッカー糖尿病肥満fa/faZDFラット米国特許第6,569,832号、および自発的に肥満を発症し、次に頻繁に明白な2型糖尿病に進行するアカゲザルHottaらDiabets50112633、および2型糖尿病-様インスリン抵抗性を有するドミナントネガティブIGF-I受容体KR-IGF-IRを有するトランスジェニックマウスを含む。ニューロパシーに対する例の動物および細胞モデルは、マウス米国特許第5,420,112号またはウサギOgawaらNeurotoxicology2150111におけるビンクリスチン誘導感覚運動ニューロパシー、自律性ニューロパシーの試験のためのストレプトゾトシンSTZ-糖尿病ラットSchmidtらAmJPathol163218、および進行性運動ニューロパシーpmnマウスMartinらgenomics75916を含む。高リン血症または腫瘍性石灰沈着症の動物モデルの例は、クロトーノックアウトマウスおよびFGF23ノックアウトマウスYoshidaらEndocrinology143683689を含む。慢性腎臓疾患または慢性腎不全の動物モデルの例は、COL4A3/-マウスBeirowskiらJAmSocNephrol1719861994を含む。癌の動物モデルの例は、当分野で既知であるヌードマウスへの癌細胞または組織の移植または注入を含むGiovanellaらAdvCancerRes4469120。例えば、乳癌の動物モデルは、乳癌細胞または組織を移植または注入されたヌードマウスを含む例えば、YueらCancerRes5450925095GlinskyらCancerRes5653195324VisonneauAmJPath15212991311。当該組成物は、対象、例えば、成体対象、特に健常成体対象または加齢関連疾患を有する対象に投与することができる。後者の場合、当該方法は、例えば、加齢関連疾患の症状または他の疾患のマーカーを特徴付けるために対象を評価し、それにより神経変性疾患、例えば、アルツハイマー病または加齢関連疾患を有するか、またはこのような疾患になりやすい対象を同定することができる。骨格筋萎縮クロトー融合ポリペプチドを個体に投与することを提供する本明細書の方法または使用は、骨格筋萎縮を処置するために使用することができる。筋萎縮は、多数の神経筋、代謝、免疫および神経障害および疾患ならびに飢餓、栄養欠損、代謝ストレス、糖尿病、老化、筋ジストロフィーまたはミオパシーを含む。筋萎縮は老化プロセス中に起こる。筋萎縮は、また、筋肉の使用の減少または不使用による。症状は骨格筋組織量の減少で引き起こされる。ヒト男性において、筋肉量は50から80齢の間に1/3に減少する。筋萎縮のいくつかの分子特徴は、ユビキチンリガーゼの上方調節および筋原線維タンパク質の喪失を含むFurunoらJBiolChem265855085571990。これらのタンパク質の崩壊は、例えば、アクチンの特異的成分であり、ミオシンの特定の筋肉中の3-メチル-ヒスチジン生産を測定することによって追跡することができるGoodmanBiochemJ241121121987andLowellらMetabolism3511211121986SteinandSchluterAmJPhysiolEndocrinolMetab272E688E6961997。クレアチンキナーゼの放出細胞損傷マーカーJacksonらNeurology411011041991も示され得る。非インスリン依存糖尿病クロトー融合ポリペプチドを個体に投与することを提供する本明細書の方法または使用は、非-インスリン-依存糖尿病を処置するために使用することができる。非-インスリン-依存糖尿病は、成人発症型糖尿病および2型糖尿病とも呼ばれる。2型糖尿病は、また、非-2型肥満および2型肥満を含む。II型糖尿病は、1血中グルコースレベルバランスを維持するために必要な量未満のインスリンが生産される、膵臓-ベータ-島-細胞のインスリンの分泌の減少、および/または2体がインスリンに正常に応答しないインスリン抵抗性米国特許第5,266,561号および米国特許第6,518,069号により特徴付けることができる。例えば、グルコース-刺激インスリンレベルは、一般的に4.0nmol/L以上に上がらない米国特許第5,266,561号。例のII型糖尿病の症状は、空腹時の高血糖米国特許第5,266,561号、疲労、過度の口渇、頻尿、視力障害および感染率の増加を含む。II型糖尿病の指標は膵島のアミロイド沈着を含む。ニューロパシーニューロパシーは、運動、感覚、感覚運動または自律神経を冒す全身性疾患、遺伝性疾患または毒物により引き起こされる中枢および/または末梢神経機能障害を含み得る例えば、米国特許出願第20030013771号、参照。症状は神経損傷の原因および冒されている神経の特定の型に依存して変化し得る。例えば、運動ニューロパシーの症状は、肉体作業の実施におけるぎこちなさまたは筋力低下、軽い運動後の極度の疲労、立位または歩行の困難および神経筋反射の減衰または欠損を含む米国特許出願第20030013771号。自律性ニューロパシーの症状は便秘、心臓の不規則性および姿勢低血圧反射の減衰を含む米国特許出願第20030013771号。感覚ニューロパシーの症状は疼痛および無感覚、手、脚または足のチクチク感、ならびに接触に対する極端な感度を含み、網膜症の症状は視力障害、突然の失明、黒斑および閃光を含む。アルツハイマー病クロトー融合ポリペプチドを個体に投与することを提供する本明細書の方法または使用は、アルツハイマー病ADを処置するために使用することができる。アルツハイマー病は、ニューロンの不可逆性喪失を引き起こす複雑な神経変性疾患である。それは、加齢関連状態でもある神経変性疾患の単に1つの例を提供する。アルツハイマー病の臨床的特徴は、記憶、判断、物理的周囲に対する見当識、および言語における進行性の障害を含む。ADの神経病理学的特徴は領域特異的なニューロン脱落、アミロイド斑および神経原線維変化を含む。アミロイド斑は、8-アミロイド前駆タンパク質APPとしても既知の分解産物であるアミロイドペプチドApまたはAp42としても既知を含む細胞外の斑である。神経原線維変化は異常に高リン酸化された微小管関連タンパク質のフィラメントから構成される不溶性細胞内凝集体であり、tautアミロイド斑および神経原線維変化はアポトーシスによりニューロン脱落となる二次事象に寄与し得るClarkandKarlawishAnnInternMed138400410。例えば、p-アミロイドは培養されたニューロンにおいてカスパーゼ-2-依存アポトーシスを誘導するTroyらJNeurosci2013861392。斑の沈着は、invivaで、同様の様式において近位ニューロンのアポトーシスを誘導し得る。遺伝学、生化学、生理学的および認知基準を含む種々の基準を、対象におけるADを評価するために使用することができる。ADの症状および診断は医師に知られている。ADのいくつかの症状およびマーカーの例は以下のものである。これらの徴候およびADと関連することが知られている他の徴候についての情報を、AD関連パラメーターとして使用することができる。AD関連パラメーターは定性的または定量的情報を含むことができる。定量的情報の例は、1つ以上の特徴の数値、例えば、タンパク質の濃度または断層マップである。定性的情報は評価、例えば、医師のコメントまたは二者択一イエス/ノーなどを含むことができる。AD-関連パラメーターは、対象がADと診断されないか、またはADの特定の徴候を有さないことを示す情報、例えば、典型的なADの典型ではない認知試験結果、またはADと関連しない遺伝的なAPOE多型を含む。進行性の認識機能障害はADの特徴である。この障害は、記憶、判断、意思決定、周りの物理的方向および言語の減衰として現れ得るNussbaumandEllisNewEngJMed3481356351364。他の型の認知症の排除はADの診断に役立てることができる。神経細胞死は、AD患者における進行性の脳萎縮を引き起こす。映像技術例えば、磁気共鳴映像法またはコンピューター断層撮影は、脳におけるAD関連病変および/または脳萎縮を検出するために使用することができる。AD患者は疾患の病状によって生じる生化学的異常を示し得る。例えば、脳脊髄液におけるタウタンパク質のレベルはAD患者において高まるAndreasenNらArchNeurol58349350。アミロイドベータ42A,B42ペプチドのレベルは、AD患者のCSFにおいて減少し得る。Ap42のレベルはAD患者の血漿において増加し得るErtekeinTanerNらScience29023032304。対象からのサンプルにおいて生化学異常を検出するための技術は、当分野で既知の細胞、免疫および他の生物学的方法を含む。一般的なアドバイスのために、例えば、SambrookRussellMolecularCloningALaboratoryManual3rEditionColdSpringHarborLaboratoryNYAusubelらCurrentProtocolsinMolecularBiologyAntibodiesALaboratoryManualColdSpringHarborLaboratoryPressColdSpringHarborNYならびにそれらの最新版に記載されている技術、参照。例えば、抗体、他の免疫グロブリンおよび他の特異的結合リガンドを、ADと関連する生体分子、例えば、タンパク質または他の抗原を検出するために使用することができる。例えば、1つ以上の特異抗体を、サンプルを調べるために使用することができる。種々の方法、例えば、ELISA、蛍光-ベースアッセイ、ウエスタンブロットおよびタンパク質アッセイが可能である。ポリペプチドアレイを生産する方法は、当分野において、例えば、DeWildtらNatureBiotech18989994LuckingらAnalBiochem270103111GeHNucleicAcidsRes28e3IVIIMacBeathGandSchreiberSLScience2891760to1763およびWO99/51773A1において記載されている。1つのアッセイにおいて、ADの非ヒト動物モデル例えば、マウスモデルが、例えば、ポリペプチドまたは治療レジメンを評価するために使用される。例えば、米国特許第6,509,515号は、天然に学習および記憶試験で使用することができる1つのこのようなモデル動物を記載している。該動物は、該動物が誕生から短期間内、一般的に誕生から1年以内、好ましくは誕生から2から6月以内に進行性の神経障害を発症するようなレベルで脳組織においてアミロイド前駆タンパク質APP配列を発現する。APPタンパク質配列を胚形成期の動物または動物の原細胞、好ましくは1つの細胞または受精卵母細胞期および一般的に約8細胞期より遅くない細胞に導入する。次に受精卵または胚を、里親のメスとして擬似-妊娠期に発達させる。アミロイド前駆タンパク質遺伝子を、脳の皮質辺縁領域、進行性の神経疾患状態、例えばADにおいて顕著に影響される脳の領域において、アミロイド前駆タンパク質の過剰な内因性発現および進行性の神経疾患の発症を引き起こす状態において、染色体に組み込まれるように動物胚に導入する。グリオーシスおよび臨床症状が、トランスジェニック動物モデルにおいて神経疾患を起こす。神経疾患の進行性の局面は、探索および/または運動行動の減少およびデオキシグルコース摂取/利用の減少および脳の皮質辺縁領域における異常肥大グリオーシスにより特徴付けられる。さらに、見られる変化は、いくつかの老化動物において見られるものと同様である。他の動物モデルは、また、US5,387,742、5,877,399、6,358,752および6,187,992に記載されている。パーキンソン病クロトー融合ポリペプチドを個体に投与することを提供する本明細書の方法または使用は、パーキンソン病を処置するために使用することができる。パーキンソン病は、運動機能を調節する黒質線条体ドーパミン系の変性となる、黒質におけるドーパミンニューロンの神経変性を含む。この病状は、同様に、運動機能障害を引き起こす例えば、LothariusらNatRevNeurosci393242、参照。例の運動症状は、無動症、前屈姿勢、歩行困難、姿勢の不安定、強硬症、筋硬直および振戦を含む。例の非運動症状は、鬱病、意欲の欠如、消極的な態度、認知症および消化器機能障害を含む例えば、FahnAnnNYAcadSci991114およびPfeifferLancetNeurol210716、参照。パーキンソン病は65から69歳の個体の0.5から1パーセントおよび80歳以上の個体の1から3パーセントで観察された例えば、NussbaumらNEnglJMed348135664、参照。パーキンソン病の分子マーカーは、芳香族性Lアミノ酸デカルボキシラーゼAADCの減少例えば、米国出願第20020172664号、参照、および黒質線条体におけるドーパミン含量の喪失例えば、FahnAnnNYAcadSci991114およびLothariusらNatRevNeurosci393242、参照を含む。いくつかの家族性症例において、PDはアルファ-シヌクレインおよびパーキンE3ユビキチンリガーゼタンパク質をコードする単一の遺伝子の変異に関連する例えば、RiessらJNeurol250Suppl1I310およびNussbaumらNEnglJMed348135664。ニューロン特異的C-末端ユビキチンヒドロラーゼ遺伝子におけるミスセンス変異もパーキンソン病と関連する例えば、NussbaumらNEnglJMed348135664。ハンチントン病クロトー融合ポリペプチドを個体に投与することを提供する本明細書の方法または使用は、ハンチントン病を処置するために使用することができる。ハンチントン病におけるクロトー融合ポリペプチドの有効性を評価および/または有効用量を決定するための方法は、例えば、哺乳動物例えば、マウス、ラット、霊長類または他の何らかの非ヒトまたは他の動物例えば、アフリカツメガエル、ゼブラフィッシュまたは無脊椎動物、例えば、昆虫または線虫を使用する生物ベースアッセイを含む。ハンチントン病において多くの動物モデル系が利用できる。例えば、BrouilletFunctionalNeurology15239251OnaらNature399263267BatesらHumMolGenet616337HanssonらJofNeurochemistry78694703およびRubinszteinDCTrendsinGeneticsVol1SNo4pp202209HDの種々の動物および非ヒトモデルにおける確認、参照。このような動物モデルの例は、R6/2系のトランスジェニックマウス系であるMangiariniらCell87493506。R6/2マウスはヒトHD遺伝子のエクソン1を過剰発現する内因性プロモーターのコントロール下トランスジェニックハンチントン病マウスである。R6/2ヒトHD遺伝子のエクソン1は広範なCAG/ポリグルタミン繰り返し平均で150のCAG繰り返しを有する。これらのマウスは、ヒトハンチントン病の多くの特徴を有する進行性の最終的に致命的な神経疾患を発症する。ハンチンチンHDエクソン1によってコードされるのN末端部分により構成される異常凝集体が、R6/2マウスにおいて、細胞質および細胞の核において両方とも45で観察されるDaviesらCell90537548。例えば、トランスジェニック動物におけるヒトハンチンチンタンパク質は、少なくとも55のCAG繰り返しおよびさらに好ましくは約150のCAG繰り返しを含む遺伝子によってコードされる。これらのトランスジェニック動物はハンチントン病様表現型を発現することができる。これらのトランスジェニックマウスは、誕生後8から10週の体重増加の減少、寿命の減少および異常な足取りにより特徴付けられる運動障害、静止振戦、後肢抱擁および過活動により特徴付けられる例えば、R6/2系;MangiariniらCell87493506、参照。表現型は運動機能低下の方向へ悪化する。これらのトランスジェニックマウスの脳は、神経化学的および組織学的異常、例えば、神経伝達物質受容体グルタミン酸塩、ドーパミンの変化、N-アセチルアスパラギン酸完全なニューロンのマーカーの濃度の減少ならびに線条体および脳サイズの減少を示す。したがって、評価は、神経伝達物質レベル、神経伝達物質受容体レベル、脳サイズおよび線条体サイズに関連するパラメーターを評価することを含むことができる。加えて、部分または完全長のトランスジェニックヒトハンチンチンタンパク質を含む異常凝集体は、これらの動物例えば、R6/2トランスジェニックマウス系の脳組織において存在する。例えば、MangiariniらCell87493506DaviesらCell90537548BrouilletFunctionalNeurology15239251およびChaらProcNatlAcadSciUSA9564806485、参照。動物モデルにおける本明細書に記載されている試験ポリペプチドまたは既知のポリペプチドの効果を試験するため、異なる濃度の試験ポリペプチドを、例えば、試験ポリペプチドを動物の循環系に注射することにより、トランスジェニック動物に投与する。ハンチントン病のような症状が動物において評価され得る。次に、例えば、マウスモデルに関して上記されているハンチントン病のような症状の進行を、試験ポリペプチドでの処理が症状の軽減または遅延をもたらすか否かを決定するためにモニタリングする。他のアッセイにおいて、これらの動物におけるハンチンチンタンパク質凝集体の分離をモニタリングする。次に動物を殺し、脳スライスを得ることができる。次に脳スライスを、トランスジェニックヒトハンチンチンタンパク質、その一部、またはヒトハンチンチンタンパク質もしくはその一部を含む融合タンパク質を含む凝集体の存在に関して分析する。この分析は、例えば、脳組織のスライスを抗-ハンチンチン抗体で染色し、抗-ハンチントン抗体を認識するFITCを結合させた二次抗体を加え例えば、抗-ハンチンチン抗体はマウス抗-ヒト抗体であり、二次抗体はヒト抗体に特異的である、蛍光顕微鏡法によりタンパク質凝集体を視覚化することを含むことができる。種々の方法がハンチントン病を評価および/またはモニタリングするために利用できる。該疾患に対する種々の臨床的症状および兆候は知られている。ハンチントン病は、運動障害、精神問題および認知変化を引き起こす。これらの症状の程度、発症年齢および症状は変化し得る。運動障害は速いランダムなダンスのような動きを含むことができ、舞踏病と呼ばれる。例の運動評価は、追跡眼球運動、サッカード開始、サッカード速度、構音障害、挺舌、指をたたく能力、回内/回外、げんこつ-手-手のひらの反復、腕の硬直、動作緩慢、最大のジストニア体幹、上および下肢、最大の舞踏病例えば、体幹、顔、上および下肢、足取り、タンデム歩行および後方突進を含む。例の処置は、例えば、1年間にわたって、TotalMotorScore4TMS-4、UHDRSの下位尺度を変化させることである。癌クロトー融合ポリペプチドを個体に投与することを提供する本明細書の方法または使用は、癌を処置するために使用することができる。癌は、不適当に高レベルの細胞分裂、不適当に低いレベルのアポトーシスまたはその両方により誘導されるか、または引き起こされるすべての疾患を含む。癌の例は、白血病例えば、急性白血病、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、急性骨髄芽球性白血病、急性前骨髄球性白血病、急性骨髄単球性白血病、急性単球性白血病、急性赤白血病、慢性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病、真性赤血球増加症、リンパ腫ホジキン病、非ホジキン病、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖病、および固形腫瘍、例えば、肉腫および癌腫例えば、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑液腫瘍、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、大腸癌腫、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌腫、基底細胞癌腫、腺癌、汗腺癌腫、皮脂腺癌腫、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支癌腫、腎細胞癌腫、肝臓癌、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎生期癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、子宮癌、精巣癌、肺癌腫、小細胞肺癌腫、膀胱癌腫、上皮性癌腫、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、神経鞘腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽腫および網膜芽腫を含むが、これらに限定されない。リンパ組織増殖性障害も増殖性疾患と考慮される。本明細書で引用するすべての特許、特許出願および刊行物は、出典明示によりそれらの全体を本明細書に包含する。本明細書はその態様について具体的に示され、記載されているが、本明細書の範囲から逸脱することなく、形態における種々の変化および詳細が添付の特許請求の範囲内に包含されることは理解される得ることは当業者に明らかである。5.実施例実施例1.クロトー融合ポリペプチドの発現および精製クロトー融合ポリペプチドの発現本明細書のポリペプチドは、HEK293T細胞をアルファクロトーの細胞外ドメインおよびFGF23R179Q変異体を有する、クロトー融合ポリペプチドをコードする発現ベクターで一時的にトランスフェクトすることにより作った。発現したポリペプチドを含む条件培地を、クロトー、FGF23およびクロトー-FGF23R179Q融合タンパク質のそれぞれの発現プラスミドの一時的なトランスフェクションにより製造した。トランスフェクションを、リポフェクタミン2000InvitrogenCat11668019を使用して6-ウェルプレートにて行った。トランスフェクションの5時間後、トランスフェクション混合物を、3mlのDMEMプラス1のFBSで置き換えた。条件培地を、3mlのDMEMプラス1のFBSの添加72時間後に回収した。種々の一時的にトランスフェクトされたHEK293T細胞の条件培地のサンプルをSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動法SDS-PAGEにより分離し、ウエスタンブロットにより分析するか図3A、またはクマシーブルーで染色した図3B。SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動法を種々のサンプルで実施したレーン1、コントロール;レーン2、FGF23;レーン3、sクロトー;レーン4-6、sクロトー-FGF23。クマシーブルー染色は、クロトー融合ポリペプチドをコードするベクターでトランスフェクトされていないサンプルを含むレーン1-3において存在しない、>180kDaバンド図3B、右側に矢印で示されているの高い発現を示した。培地に分泌されたクロトー融合ポリペプチドの質をウエスタンブロットにより評価した図3A。抗-FGF23ラットモノクローナルIgG2ARDSystemsCatMAB26291を、ウエスタンブロットによるクロトー融合ポリペプチドを検出するための一次抗体として使用した。クマシー染色ゲルにおいて観察されたさらなるバンドがクロトー融合ポリペプチドであることをウエスタンブロットで確認した。クロトー融合ポリペプチドがクロトー融合ポリペプチドの期待された分子量を有することをウエスタンブロットで確認した。この分析はクロトー-FGF23R179Q融合タンパク質の発現を示す。クロトー融合ポリペプチドの精製本明細書のポリペプチドを、アルファクロトーの細胞外ドメインおよびFGF23R179Q変異体を有するクロトー融合ポリペプチドをコードする発現ベクターで一時的にトランスフェクトされたHEK293T細胞の培養した条件培地から精製した。条件培地を製造するために、sクロトー-FGF23-6×Hisをコードする発現ベクターを、発現培地Freestype293発現培地GIBCOCat12338中で106細胞/mlで464mlのHEK293T細胞で懸濁液中で培養されたHEK293細胞にトランスフェクトした18mlの2μg/mlのポリエチレンイミンPEIと混合された18mlのOptiMEM1GIBCOCat11058中で500μgのDNA。トランスフェクション後、培養物を増殖させた120時間、37°C5CO2インキュベーター中、125rpmで振とう。インキュベーション終了後、条件培地を遠心分離1000rpmで5分により回収した。次に条件培地をニッケル-アガロースカラムに付した。sクロトー-FGF23-6×Hisがカラムにしっかりと結合し、50mMのイミダゾールで溶離した。次に得られた精製された物質をPBS中で透析し、イミダゾールと取り除いた。精製されたsクロトー-FGF23-6×HisのサンプルをSDS-PAGEにより分離しレーン1、精製されたsクロトー-FGF23-6×His;レーン2、分子量マーカー、クマシーブルーでの染色により分析した図3C。精製されたsクロトー-FGF23-6×Hisが期待された分子量を有することを染色されたSDS-PAGEゲルで確認した。精製された物質で負荷されたレーンにおける完全長sクロトー-FGF23-6×His以外のタンパク質に対応するバンドを検出しないということは、sクロトー-FGF23-6×Hisが精製されたことを示すものであった。実施例2.クロトー融合ポリペプチドの活性を評価するインビトロアッセイEgr-1-ルシフェラーゼ発現したアルファクロトー融合ポリペプチドの生物学的活性を、Egr-1-ルシフェラーゼレポーターアッセイで試験した。FGF23受容体へのクロトー融合ポリペプチドの結合により、Egr-1プロモーターにより調節される、Egr-1の下流活性化およびルシフェラーゼレポーターの発現を引き起こした。Egr-1-ルシフェラーゼレポーター遺伝子はUrakawaらの報告に基づいて構築した。48-ウェルポリ-D-リシンプレートに播種したHEK293T細胞を、トランスフェクション正規化レポーター遺伝子ウミシイタケルシフェラーゼと一緒にEgr-1-ルシフェラーゼレポーター遺伝子でトランスフェクトした。Egr-1ルシフェラーゼレポーター遺伝子のトランスフェクションの5時間後、トランスフェクション混合物を3mlのDMEMプラス1のFBSで置き換えた。条件培地を、3mlのDMEMプラス1のFBSの添加72時間後に回収した。5時間後、トランスフェクション混合物を活性を試験するサンプルと置き換えた。最初の実験において、20μg/mlのヘパリンSigmaCatH8537;2mg/mlの貯蔵物としてDMEMに溶解されているの存在または非存在下で、50の条件培地クロトー、FGF23、クロトーおよびFGF23、ならびにクロトー-FGF23R179Q融合タンパク質を含むおよび1のFBSを有する50のDMEMを、Egr-1-ルシフェラーゼレポーターアッセイにおいて試験した図4。さらなる実験では、定義された量の精製されたポリペプチドを使用した図5Aおよび5B。細胞を不活性な溶解緩衝剤PromegaCatE194A中で20時間で溶解し、ルシフェラーゼ活性をDual-Gloルシフェラーゼアッセイ系PromegaCatE2940を使用して決定した。最初の実験において、クロトー融合ポリペプチド活性を非分画条件培地中で実施した。Egr-1-ルシフェラーゼレポーター遺伝子を使用して、これらの実験ではルシフェラーゼレポーターの発現における倍数変化を定量した図4。FGF23およびクロトータンパク質の細胞外ドメインの組合せを含む条件培地はEgr-1-ルシフェラーゼを活性化させたが、FGF23のみを含む条件培地またはクロトーの細胞外ドメインのみを含む条件培地ではEgr-1-ルシフェラーゼを活性化させなかった。融合タンパク質sクロトー-FGF23R179Qを含む条件培地は、FGF23またはクロトーのいずれか単独を含む条件培地と対照的に、Egr-1-ルシフェラーゼレポーター遺伝子を活性化した。これらの実験において、融合タンパク質sクロトー-FGF23R179Qを含む条件培地は、FGF23およびクロトーの組合せを含む条件培地よりも有意に良くEgr-1-ルシフェラーゼレポーター遺伝子を活性化した。ヘパリンの存在下で、融合タンパク質sクロトー-FGF23R179Qを含む条件培地およびFGF23およびクロトーの組合せを含む条件培地による誘導ではわずかに高まった。表1は、Egr-1-ルシフェラーゼレポーターアッセイにおける、条件培地における種々のFGF-クロトー融合ポリペプチドの相対発現、および種々のFGF-クロトー融合ポリペプチドに対応する非分画条件培地の相対活性を示す。表1.sクロトー-FGF23融合物変異体の発現および活性活性の欠如は、低発現の結果であり得るEgr-1-ルシフェラーゼレポーターアッセイは、また、実施例1に記載されている精製方法を使用して、条件培地から精製された定義された量のタンパク質を使用して行った。発現したポリペプチドを含む非分画条件培地を使用する以前の結果と一致して、精製されたFGF23およびsクロトーの組合せでの処理ではルシフェラーゼレポーター活性が得られたが、精製されたFGF23単独での処理では得られなかった図5A。精製されたFGF23およびsクロトーの組合せによるルシフェラーゼレポーター活性は、さらに精製されたsクロトーの用量に依存し、該効果はヘパリンの存在20μg/mlにより高められた。ルシフェラーゼ活性におけるsクロトー-FGF23-6×His融合ポリペプチドの効果は、Egr-1-ルシフェラーゼレポーターアッセイにおいて、約1.21nM程度の低濃度1.2倍変化および少なくとも最大約19.3nMまで2.4倍変化で検出することができた図5B。ルシフェラーゼ活性におけるsクロトー-FGF23-6×His融合ポリペプチドの活性は、ヘパリン20μg/mlの存在下で有意に高まった。ヘパリンの存在下で、ルシフェラーゼ活性におけるsクロトー-FGF23-6×His融合ポリペプチドの効果は、約0.6nM程度の低濃度2.0倍変化で検出することができた。該結果は、精製されたsクロトー-FGF23-6×Hisが用量依存的にEGR-1-lucレポーター遺伝子を誘導したこと、およびsクロトー-FGF23-6×Hisにおける処置を示した。実施例3.筋肉細胞におけるクロトー融合ポリペプチドの効果を評価するインビトロアッセイ発現したクロトー融合ポリペプチドの生物学的効果をC2C12筋芽細胞で試験した。C2C12筋芽細胞をIGF-1、FGF2またはsクロトー-FGF23で処理することにより、筋管増殖およびシグナル伝達タンパク質のリン酸化を引き起こした。C2C12筋芽細胞を、6ウェルのポリ-D-リシンおよびフィブロネクチン被覆プレートにおいて40,000細胞/ウェルの密度で、増殖培地中にDMEMおよびF12、3対1、10のFBS、1のGlut、1のP/S、1のリノール酸、0.1のITS:[インスリン10mg/ml、トランスフェリン5.5mg/mlおよびセレン5ng/ml]播種した。筋芽細胞がコンフルエンスに達した後3日間、培地を分化培地に変えた2のウマ血清、1のGlut、1のP/Sを有するDMED。筋管直径実験のために、コンフルエント3日後、培地を分化培地に変え、細胞を、分化培地中でデキサメタゾン100μMの存在または非存在下で、IGF-110nM、FGF220ng/mlまたはsクロトー-FGF2320nMで24時間処理した。処置終了後、細胞をグルタルアルデヒドPBS中で5で固定し、多重蛍光像を回収した。筋管直径をPipelinePilotプログラムを使用して測定し、肥大または萎縮を測定した。シグナル伝達タンパク質リン酸化実験のために、コンフルエント3日後、培地を分化培地に変え、細胞を、FBSなしのDMEMで4時間飢餓にし、次にラパマイシン40nMの存在または非存在下で、IGF-110nM、FGF220ng/mlまたはsクロトー-FGF2320nMで30分処理した。細胞をプロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤の存在下でRIPA緩衝剤中で溶解した。ウエスタンブロット分析を行い、膜を図で示されるように異なる抗体で探査し、スキャンしたX線フィルムを現像した。この試験の結果は、sクロトー-FGF23が、コントロールと比較して筋管直径の増加を引き起こし、IGF-1およびFGF2の結果と同様にC2C12筋管肥大を誘導することを示した図5A。加えて、sクロトー-FGF23、IGF-1およびFGF2での処理は、筋管直径の測定に基づいて、デキサメタゾンにより誘導された筋管萎縮を部分的に逆転させることができた。デキサメタゾンの存在または非存在下で、筋管形態における筋管の厚さにより測定されるsクロトー-FGF23とFGF2間での差は、観察されなかった。sクロトー-FGF23、IGF-1およびFGF2の栄養作用は統計学的に有意であった。C2C12筋管における効果と一致して、sクロトー-FGF23融合タンパク質シグナル伝達はp70S6KおよびERKのリン酸化を誘導したが、C2C12筋管におけるAKTまたはFオキソにおいて誘導しなかった図5B。シグナル伝達におけるsクロトー-FGF23の効果はFGF2と同様であったが、IGF-1と異なっていた。sクロトー-FGF23によるERKリン酸化の程度は、IGF-1またはFGF2未満であることが観察された。sクロトー-FGF23によるp70S6Kのリン酸化は、ラパマイシン感受性であった。C2C12細胞に関する実験において、ヘパリンはシグナル伝達を活性化するために必要ではなかった。これらの結果は、sクロトー-FGF23融合ポリペプチドがC2C12筋管においてシグナル伝達を活性化させたことを示す。実施例4.sクロトー、FGF23およびFcLALAを含む融合ポリペプチド種々の融合ポリペプチドは、sクロトー、FGF23および抗体の修飾されたFcフラグメントを使用して構築される。これらの修飾されたFc分子は、改変された減少したFcRnへの結合、したがって増加した血清半減期を有する。それらはまた、修飾されたバイオアベイラビリティならびに改変された粘膜表面および体内の他の標的への輸送を有する。本実施例において、FGF23およびsクロトーは、米国特許第7,217,798号およびHessellら2007Nature449101104に記載されているFcLALAに融合される。これらの融合ポリペプチドの種々の成分間の仲介は、Lodeら1998ProcNatlAcadSciUSA9524752480に記載されているリンカーである。これらの融合物は、構築物、例えば、pcDNA3.1InvitrogenCarlsbadCAに挿入され、HEK293細胞において発現される。A.sクロトー-FGF23-FcLALAv1sクロトー、リンカー、FGF23、別のリンカーおよびFcLALAを含む融合物を構築する。この態様は、sクロトー-FGF23-FcLALAv1と称され、以下の配列番号:46および47に示される。sクロトー-FGF23-FcLALAv1のヌクレオチド配列1として開始ATGは配列番号:46に示されている。sクロトー-FGF23-FcLALAv1のアミノ酸配列は、配列番号:47として以下に記載されている。この配列において、融合物の種々の成分は以下のとおりである:sクロトー:1-982;リンカー1:983-1001;FGF23:1002-1228;リンカー2;1229-1233;FcLALA:1234-1459。B.sクロトー-FGF23-FcLALAv2sクロトー、リンカー、FGF23、別のリンカーおよびFcLALAを含む融合物を構築する。この態様は、sクロトー-FGF23-FcLALAv2と称され、以下の配列番号:48および49に示される。sクロトー-FGF23-FcLALAv2のヌクレオチド配列1として開始ATGは配列番号:48に示されている。sクロトー-FGF23-FcLALAv2のアミノ酸配列は、配列番号:49として以下に記載されている。この配列において、融合物の種々の成分は以下のとおりである:sクロトー:aaまたはアミノ酸1-982;リンカー1:983-1001;FGF23:1002-1228;リンカー2;1229-1233;FcLALA:1234-1450。他の融合ポリペプチドならびにその変異体および誘導体を、本明細書に記載されている、または当分野で知られているとおりに、種々の組合せにおいて、FGF、クロトー、修飾されたFcフラグメントおよび所望によりリンカー配列を組み合わせることにより構築することができる。実施例5.FGF23およびFcLALAを含む融合ポリペプチド種々の融合ポリペプチドは、米国特許第7,217,798号に記載されているとおりに、FGF23および抗体の修飾されたFcフラグメントを使用して構築される。これらの修飾されたFc分子は、改変された減少したFcRnへの結合、したがって増加した血清半減期を有する。それらはまた、修飾されたバイオアベイラビリティならびに改変された粘膜表面および体内の他の標的への輸送を有する。本実施例において、FGF23は、FcLALAに融合される。これらの融合ポリペプチドの種々の成分間の仲介は、Lodeら1998ProcNatlAcadSciUSA9524752480に記載されているリンカーである。これらの融合物は、例えば、pcDNA3.1InvitrogenCarlsbadCAに挿入され、HEK293細胞において発現される。C.FGF23-FcLALAv1FGF23、リンカーおよびFcLALAを含む融合物を構築する。この構築物は、FGF23-FcLALAv1と称され、以下の配列番号:50および51に示される。FGF23-FcLALAv1のヌクレオチド配列1として開始ATGは配列番号:50に示されている。FGF23R179Q-FcLALAv1のアミノ酸配列は、配列番号:51として以下に記載されている。この配列において、融合物の種々の成分は以下のとおりである:FGF23:aa1-251;リンカー:252-256;FcLALA:257-482。D.FGF23-FcLALAv2FGF23およびFcLALAを含むFGF23-FcLALAv2を含む融合物を構築する。FGF23-FcLALAv2のヌクレオチド配列1として開始ATGは配列番号:52に示されている。FGF23R179Q-FcLALAv2のアミノ酸配列は、配列番号:53として以下に記載されている。この配列において、融合物の種々の成分は以下のとおりである:FGF23:1-251;リンカー:252-256;FcLALA:257-473。他の融合ポリペプチドを、本明細書に記載されている、または当分野で知られているとおりに、種々の組合せにおいて、FGF配列、修飾されたFcフラグメントおよび所望によりリンカー、およびそれらの変異体および誘導体を組み合わせることにより構築することができる。E.sクロトー-FGF23R179Q-FcLALA融合タンパク質によるEgr-1-lucレポーター遺伝子の活性化、FGF23R179Q-FcLALAタンパク質によるEgr-1-lucレポーター遺伝子の活性化、およびFGF23R179Q対FGF23R179Q-FcLaLav2の薬物動態学プロフィールを決定する。図7は、sクロトー-FGF23R179Q-FcLALA融合タンパク質によるEgr-1-lucレポーター遺伝子の活性化を示す。HEK293T細胞を、Egr-1-lucレポーター遺伝子で一過性にトランスフェクトし、20μg/mlのヘパリンの非存在または存在下で示されている馴化培地でインキュベートする。次に、ルシフェラーゼ活性を18時間後に決定する。結果は、sクロトー-FGF23-FcLALA融合タンパク質がレポーター遺伝子活性を誘導することを示す。これらの誘導は、ヘパリンの存在において有意に増強される。sKF-Fcv1:sクロトー-FGF23-FcLALAv1;sKF-Fcv2:sクロトー-FGF23-FcLALAv2。図8は、FGF23R179Q-FcLALAタンパク質によるEgr-1-lucレポーター遺伝子の活性化を示す。HEK293T細胞を、クロトーの全長膜貫通形態と共にEgr-1-lucレポーター遺伝子で一過性にトランスフェクトし、示されている30の馴化培地でインキュベートする。次に、ルシフェラーゼ活性を18時間後に決定する。結果は、FGF23-FcLALA融合タンパク質がFGF23と同様の様式においてレポーター遺伝子活性を誘導することを示す。図9は、FGF23R179Q対FGF23R179Q-FcLALAv2の薬物動態学プロフィールを示す。グループあたり4匹のマウスに、FGF23R179Q-6×HisまたはFGF23R179Q-FcLALAv2を2mg/kgで皮下注射する。示されている時間に、血清サンプルを回収し、ELISAによりFGF23について分析する。血清中のFGF23R179Q-FcLALA濃度は、24時間時点で上昇を維持するが、FGF23R179Q-6×Hisは基底レベルに戻る。結果は、FcLALAの添加で、FGF23R179Qのインビボ半減期が有意に改善されることを示す。実施例6.デキサメタゾン誘導筋萎縮後の筋肉成長の増強におけるsクロトー-FGF23融合物のインビボ有効性実験データは、sクロトー-FGF23の筋肉内注射は、デキサメタゾン誘導筋萎縮後の筋肉量の成長を有意に増強することを示す。この実験において、配列番号:41に対応するペプチドを使用する。図10は、腓腹筋-ヒラメ筋-足底筋GSP筋肉の絶対重量Aおよび重量変化パーセントBを示し、sクロトー-FGF23KLOFGFの筋肉内注射は、sクロトーsKLOまたはリン酸緩衝生理食塩水PBSの筋肉内注射と比較して、デキサメタゾンDEX-誘導筋萎縮後の筋肉量の再成長を有意に増強することを示す。80匹の15週齢のオスC57BL/6マウスを、それぞれ10匹のマウスで8つのグループに体重においてランダム化する。2.4mg/kg/日で3週間、4つのグループにDEXなしの水を与えW21d、他の4つのグループにDEXありの飲料水を与えるD21d。3週間後、DEX処置を停止し、1つのW21dおよび1つのD21dグループを即座に殺し、DEX処置により誘導される筋萎縮の程度を確立する。残りの3つのグループのW21dまたはD21dマウスは、右側の腓腹筋-ヒラメ筋-足底筋の筋肉複合体に1日おきに、2×50μlのPBS、sクロトー-FGF23KLOFGF;1.6mg/mlまたはsクロトーsKLO;1.6mg/mlのいずれかを筋肉内注射で与える別の14日間R14d中に回復することができる。マウスを最後の筋肉内注射24時間後に殺し、筋肉体重を決定し、絶対重量AまたはW21dPBSグループと比較しての変化パーセントとして示す。これらのデータは、デキサメタゾン誘導筋萎縮後の筋肉成長の増強におけるsクロトー-FGF23融合物のインビボ有効性を示す。実施例7.凝集を減少させる、望ましくないプロテアーゼ誘導開裂を減少させる、および生産を増加させる融合タンパク質のFGF23部分におけるさらなる変異いくつかの変異を、sクロトー-FGF23およびFGF23-FcLaLa融合ポリペプチドのFGF23部分内で試験する。これらは、Q156、C206およびC244数字はFGF23アミノ酸配列に基づくを含む。実施例の個々の変異は、Q156A、C206SおよびC244Sを含み、これらの部位のいずれかでの変異は、R179例えば、R179Qでの変異と組み合わせることができる。実施例の配列は、図2の配列番号:54から68において提供される。C206およびC244は、二量化に関与することと考えられ、Q156は、プロテアーゼ感受性部位として本発明者らにより同定された部位である。他の任意のアミノ酸へのこれらのアミノ酸の変異は、FGF23活性を妨害することなく、凝集を減少させること、望ましくないプロテアーゼ誘導開裂を減少させること、および細胞からのタンパク質生産を増加させることによりタンパク質の質を増強する。これは、これらの3つの位置がヒト、アカゲザル、ウシ、マウスおよびラットにおいて見出されるFGF23タンパク質において保存されているため、予期し得ない結果である。この保存は、太字で下線のQ156、C206およびC244にて、配列番号:69、70、71、72および73間の比較において以下に示される。これらの3つの変異がFGF23活性を妨害しないという事実は、図11に示される。この図は、FGF23R179Q-FcLALAならびにQ156A、C206S、C244SおよびC206S/C244S変異体によるEgr-1-lucレポーター遺伝子の活性化を示す。HEK293T細胞を、HEK293T細胞を、クロトーの全長膜貫通形態と共にEGR-1-lucレポーター遺伝子で一過性にトランスフェクトし、FGF23-FcLaLa変異体を示す。次に、ルシフェラーゼ活性を18時間後に決定する。結果は、C206S、C244S、C206S/C244S3つの独立したクローンおよびQ156A3つの独立したクローン変異体が、EGR-1-Lucレポーター遺伝子活性の活性化において、FGF23-FcLALA融合タンパク質と同等に有効であることを示す。C244およびC206の変異がFGF23の二量化および凝集を変化させることを示すデータは、図12に示される。この図は、FGF23R179Q-FcLaLaのWT、Q156A、C206S、C244SおよびC206S/C244S変異体のタンパク質の質を示す。示されるFGF23-FcLaLa発現ベクターで一過性にトランスフェクトされたHEK293T細胞由来の馴化培地を、FGF23抗体を使用してウェスタンブロットにより分析する。結果は、C206S/C244S変異がタンパク質二量化を妨害し、Q156A変異が減少したタンパク質分解フラグメントを有することを示す。したがって、驚くべきことに、これらのQ156、C206およびC244残基が種間で保存されているにもかかわらず、それらは、FGF23活性を減少させることなく変異させることができ、凝集および開裂を減少させること、および生産を改善することにより、タンパク質の質を増強することができる。他に定義がない限り、本明細書において使用されている技術的および科学的用語は、本明細書が属する分野でよく知っている専門家により通常理解されるのと同じ意味を有する。他に示されていない限り、具体的に詳細に記載されていないすべての方法、工程、技術および操作は、当業者に明らかであるため、それ自体既知の方法で行うことができるか、または行われている。例えば、標準ハンドブックおよび本明細書に記載されている一般的な背景技術および本明細書で引用されているさらなる文献も参照されたい。特許請求の範囲は、非限定的であり、以下で提供される。特定の態様および特許請求の範囲は、本明細書に詳細に記載されているが、これは、説明の目的のためのほんの一例としてであり、特許請求の範囲、または、あらゆる対応するさらなる出願の特許請求の範囲の対象の範囲に対して限定することを意図しない。特に、種々の置換、変化および修飾が、特許請求の範囲により定義されている記載の精神および範囲から逸脱することなく、本記載から作られ得ると本発明者らは考える。核酸出発物質、興味あるクローンの選択は、本明細書に記載されている態様の知識を有する当業者に対して日常的な事柄であると考えられる。他の局面、有利なものおよび修飾は、特許請求の範囲内であると考える。後に出願された対応する出願における特許請求の範囲の補正は、種々の国の特許法による限定のためであって、特許請求の範囲の対象を放棄すると解釈されるべきではない。"