"血液脳関門機能を強化するための、ビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩を有効成分とする医薬。前記血液脳関門機能の強化が血液脳関門機能の低下の予防、抑制又は抑制の促進である、請求項1のいずれか一項に記載の医薬。前記血液脳関門機能の低下が、糖尿病、肥満、高血圧、脳梗塞、脳外傷、敗血症、多発性硬化症、アルツハイマー病又はその組合せからなる群から選ばれる疾患によるものである、又は中枢性副作用誘発物質によるものである、請求項2に記載の医薬。前記中枢性副作用誘発物質が免疫抑制薬又は血栓溶解薬である、請求項3に記載の医薬。脳梗塞若しくは脳外傷に伴う脳浮腫を予防、抑制又は改善するための薬物と併用される、請求項1に記載の医薬。前記薬物が血栓溶解薬である、請求項5に記載の医薬。前記血栓溶解薬が組織型プラスミノゲンアクチベーターt-PAである、請求項6に記載の医薬。前記医薬が薬物の脳移行を予防又は抑制する、請求項1の医薬。前記薬物が動物又はヒトの中枢神経での作用を期待しない薬物である、請求項8に記載の医薬。前記薬物の脳移行を予防又は抑制することにより、前記医薬が動物又はヒトの中枢神経性作用の有害症状を予防、抑制又は改善する、請求項8又は9に記載の医薬。前記有害症状が、振戦、痙攣、白質脳症、頭痛、眠気、意識障害、異常行動、せん妄、幻覚、妄想、てんかん及びそれらの組み合わせから選ばれる、請求項10に記載の医薬。前記ビグアナイド系薬剤がメトホルミン又はブホルミンである、請求項1~11のいずれか一項に記載の医薬。前記ビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩がメトホルミン塩酸塩又はブホルミン塩酸塩である、請求項12に記載の医薬。有効成分投与量が125~3000mg/人/日である、請求項1~13のいずれか一項に記載の医薬。疾患を予防、抑制又は改善するための方法であって、前記疾患が、振戦、痙攣、白質脳症、頭痛、眠気、意識障害、異常行動、せん妄、幻覚、妄想、てんかん、脳梗塞、脳外傷、敗血症、アルツハイマー病、及びそれらの組み合わせからなる群から選択され、前記方法が、必要としている者に請求項1に記載の医薬を投与する工程を含む、方法。血液脳関門障害症候群を治療するための方法であって、前記方法が、必要としている者にビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩を有効成分として含む医薬を投与して、血液脳関門機能を強化する工程を含む、方法。本発明の目的は、血液脳関門機能を強化することにより種々の疾患を治療又は予防するための医薬組成物を提供することである。鋭意研究の結果、本発明者は、ビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩を有効成分とする医薬又は前記医薬を含有する医薬組成物が脳血管内皮細胞の密着結合能や経細胞輸送能などを含む血液脳関門機能を強化することにより、脳毛細管内に存在するアルブミンや密着結合能マーカーであるフルオレセインナトリウムの脳組織側への漏出を抑制することを見出し、本発明を完成した。なお、本明細書及び特許請求の範囲において使用する強化という用語は、先天的に又は後天的に低下している機能の強化の他、正常の機能の強化も意味し、さらに、先天的に又は後天的に低下している機能を改善する、再構築による機能の強化も意味する。さらにまた、機能が低下することの抑制も意味する。その他、外的又は内的要因によって機能が強化することの促進も意味する。したがって、密着結合能や経細胞輸送能などを含む血液脳関門機能の強化には、血液脳関門機能の強化ばかりではなく、血液脳関門機能の再構築も、血液脳関門機能の低下の抑制も、血液脳関門機能の強化再構築低下の抑制の促進も、含まれるものと解釈される。すなわち、本願は、血液脳関門機能を強化するためのビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩を有効成分とする医薬又は医薬組成物である血液脳関門障害症候群治療薬を提供する。より具体的には、本願は、脳梗塞の悪化又は再発を予防するための、本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬を提供する。また、本願は、脳梗塞に伴う脳浮腫を予防、抑制又は改善するための、本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬を提供する。また、本願は、敗血症に伴う脳症を予防、抑制又は改善するための、本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬を提供する。また、本願は、多発性硬化症における白血球脳内浸潤を予防、抑制又は改善するための、本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬を提供する。また、本願は、アルツハイマー病におけるアミロイドベータタンパク質Aβの脳内での蓄積を予防、抑制又は改善するための、本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬を提供する。さらにまた、本願は、薬物の脳移行を予防又は抑制することにより、動物又はヒトの中枢神経性有害症状を予防、抑制又は改善するための、本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬を提供する。いくつかは上記と重複するが、本発明を以下に記す。発明1血液脳関門機能を強化するための、ビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩を有効成分とする医薬。発明2前記血液脳関門機能の強化が血液脳関門機能の低下の予防、抑制又は抑制の促進である、発明1のいずれか一項に記載の医薬。発明3前記血液脳関門機能の低下が、糖尿病、肥満、高血圧、脳梗塞、脳外傷、敗血症、多発性硬化症、アルツハイマー病又はその組合せからなる群から選ばれる疾患によるものである、又は中枢性副作用誘発物質によるものである、発明2に記載の医薬。発明4前記中枢性副作用誘発物質が免疫抑制薬又は血栓溶解薬である、発明3に記載の医薬。発明5脳梗塞若しくは脳外傷に伴う脳浮腫を予防、抑制又は改善するための薬物と併用される、発明1に記載の医薬。発明6前記薬物が血栓溶解薬である、発明5に記載の医薬。発明7前記血栓溶解薬が組織型プラスミノゲンアクチベーターt-PAである、発明6に記載の医薬。発明8前記医薬が薬物の脳移行を予防又は抑制する、発明1の医薬。発明9前記薬物が動物又はヒトの中枢神経での作用を期待しない薬物である、発明8に記載の医薬。発明10前記薬物の脳移行を予防又は抑制することにより、前記医薬が動物又はヒトの中枢神経性作用の有害症状を予防、抑制又は改善する、発明8又は9に記載の医薬。発明11前記有害症状が、振戦、痙攣、白質脳症、頭痛、眠気、意識障害、異常行動、せん妄、幻覚、妄想、てんかん及びそれらの組み合わせから選ばれる、発明10に記載の医薬。発明12前記ビグアナイド系薬剤がメトホルミン又はブホルミンである、発明1~11のいずれか一項に記載の医薬。発明13前記ビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩がメトホルミン塩酸塩又はブホルミン塩酸塩である、発明12に記載の医薬。発明14有効成分投与量が125~3000mg/人/日である、発明1~13のいずれか一項に記載の医薬。発明15疾患を予防、抑制又は改善するための方法であって、前記疾患が、振戦、痙攣、白質脳症、頭痛、眠気、意識障害、異常行動、せん妄、幻覚、妄想、てんかん、脳梗塞、脳外傷、敗血症、アルツハイマー病、及びそれらの組み合わせからなる群から選択され、前記方法が、必要としている者に発明1に記載の医薬を投与する工程を含む、方法。発明16血液脳関門障害症候群を治療するための方法であって、前記方法が、必要としている者にビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩を有効成分として含む医薬を投与して、血液脳関門機能を強化する工程を含む、方法。さらに、いくつかは上記と重複するが、本発明を以下に記す。発明1a薬物の脳移行を予防又は抑制するための、ビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩を有効成分とする血液脳関門障害症候群治療薬。発明2a前記薬物が動物又はヒトの中枢神経での作用を期待しない薬物である、発明1aに記載の血液脳関門障害症候群治療薬。発明3a前記薬物の脳移行を予防又は抑制することにより、動物又はヒトの中枢神経性作用の有害症状を予防、抑制又は改善するための、発明1a又は2aに記載の血液脳関門障害症候群治療薬。発明4a前記有害症状が、振戦、痙攣、白質脳症、頭痛、眠気、意識障害、異常行動、せん妄、幻覚、妄想、てんかん及びそれらの組み合わせから選ばれる、発明3aに記載の血液脳関門障害症候群治療薬。発明5a脳梗塞若しくは脳外傷に伴う脳浮腫を予防、抑制又は改善するための、ビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩を有効成分とする血液脳関門障害症候群治療薬。発明6a敗血症に伴う脳症を予防、抑制又は改善するための、ビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩を有効成分とする血液脳関門障害症候群治療薬。発明7a多発性硬化症における白血球脳内浸潤を予防、抑制又は改善するための、ビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩を有効成分とする血液脳関門障害症候群治療薬。発明8aアルツハイマー病におけるアミロイドベータタンパク質Aβの脳内での蓄積を予防、抑制又は改善するための、ビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩を有効成分とする血液脳関門障害症候群治療薬。発明9a脳梗塞の悪化又は再発を予防又は抑制するための、ビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩を有効成分とする血液脳関門障害症候群治療薬。発明10a血液脳関門機能を強化するための、ビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩を有効成分とする血液脳関門障害症候群治療薬。発明11a前記血液脳関門機能の強化が血液脳関門機能の低下の予防、抑制又は抑制の促進である、発明10aに記載の血液脳関門障害症候群治療薬。発明12a前記血液脳関門機能の低下が、糖尿病、肥満、高血圧又はその組合せからなる群から選ばれる疾患によるものである、発明11aに記載の血液脳関門障害症候群治療薬。発明13a前記ビグアナイド系薬剤がメトホルミン又はブホルミンである、発明1a~12aのいずれか一つに記載の血液脳関門障害症候群治療薬。発明14a前記ビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩がメトホルミン塩酸塩又はブホルミン塩酸塩である、発明13aに記載の血液脳関門障害症候群治療薬。発明15a有効成分投与量が125~3000mg/人/日である、発明1a~14aのいずれか一つに記載の血液脳関門障害症候群治療薬。本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬は、脳血管内皮細胞の密着結合能や経細胞輸送能などを含む血液脳関門機能の強化により、血液脳関門障害を素因とする疾患又は症状を予防、抑制又は改善する効果を有している。本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬は、脳血管内皮細胞の密着結合能や経細胞輸送能などを含む血液脳関門機能を強化する。その結果、本発明の医薬又は医薬組成物は、血液脳関門機能障害により生じる前記病態を予防、抑制又は改善することにより、前記疾患等の血液脳関門機能障害を素因とする疾患又は症状の予防、抑制又は改善に貢献する。本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬の有効成分としては、例えば、メトホルミン、ブホルミンなどのビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩が挙げられる。本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬がビグアナイド系薬剤の医薬的に許容される塩を有効成分とする場合において、その塩の種類は、限定されない。無機酸塩でも有機酸塩でもよい。無機酸塩のための無機酸として、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、ホウ酸等が挙げられる。有機酸塩のための塩として、例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、乳酸、安息香酸、シュウ酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸等が挙げられる。好ましい塩として、塩酸塩が挙げられる。なお、メトホルミン塩酸塩並びにブホルミン塩酸塩は、血糖降下剤として市販されている。本発明のビグアナイド系薬剤又はその医薬的に許容される塩は、製造方法に限定されず、公知の方法により製造できる。また、そのまま、又は、公知の薬学的に許容される医薬用担体と組合せて常法に従って製剤化することが出来る。本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬に関し、投与方法は限定されない。例えば、経口投与、静脈内注射による投与、筋肉内注射による投与、腹腔内注射による投与、皮下又は皮内注射による投与、直腸内投与、経粘膜投与、経気道投与等が挙げられる。好ましい投与方法として、経口投与が挙げられる。本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬に関し、剤形は限定されない。経口投与用の剤形として、例えば、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、散剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤等が挙げられる。非経口投与用の剤形として、例えば、注射剤、点滴剤、坐剤、経皮吸収剤などが挙げられる。前記剤形の医薬組成物を製造するために、公知の薬学的に許容される医薬用担体を使用出来る。例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定化剤、着色剤、矯味矯臭剤等を使用出来る。賦形剤としては、例えばアクリル酸デンプン、アラビアゴム、乳糖、コーンスターチ、白糖、ブドウ糖、ソルビット、結晶セルロース、二酸化ケイ素ケイ酸カルシウム、ケイ酸マグネシウムなどが挙げられる。結合剤としては、例えばポリビニルアルコール、クエン酸カルシウム、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルエチルセルロース、ポリビニルエーテル、メチルセルロース、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、シェラック、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、デキストリン、ポリリン酸ナトリウム、ペクチンなどが挙げられる。崩壊剤としては、例えばクロスポビドン、クロスカルメロースナトリウム、カルメロースカルシウム等のスーパー崩壊剤と称される崩壊剤;ヒドロキシプロピルセルロース;カルボキシメチルスターチナトリウム;コーンスターチなどが挙げられる。滑沢剤としては、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、ステアリン酸アルミニウム、乳糖、炭酸マグネシウム、カルメロースカルシウム、カルメロースナトリウム、硬化植物油などが挙げられる。安定化剤としては、例えばエデト酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、ブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエンなどが挙げられる。着色剤としては、例えばカラメル、食用黄色5号、食用赤色2号、食用青色2号等の食用色素や食用レーキ色素、ベンガラなどが挙げられる。矯味矯臭剤としては、例えば塩酸、オレンジ油、ウイキョウ、ココア末、ハッカ脳、芳香酸、ハッカ油、ケイヒ油などが挙げられる。錠剤や顆粒剤には糖衣、ゼラチン衣、その他必要に応じてコーティングすることもできる。本発明に係る医薬又は医薬組成物は、ヒトに、メトホルミン塩酸塩として125~3000mg/人/日で投与出来る。例えば、250mg/人/日でも、500mg/人/日でも、750mg/人/日でも、850mg/人/日でも、1500mg/人/日でも、1700mg/人/日でも、2250mg/人/日でも、2550mg/人/日でも、投与出来る。上述したように、血液脳関門機能障害は、様々な病態の発症や病態増悪や再発を引き起こし、血液脳関門機能障害に関連する疾患の発症や悪化又は再発などの素因となっている。例えば、敗血症により血液脳関門機能が低下することで、血液中の神経毒が脳内に入り、脳症が引き起こされると考えられている非特許文献3。また、血液脳関門を構成する脳血管内皮細胞上の接着分子の発現が増えることで、白血球が血液脳関門を透過しやすくなり、多発性硬化症が進展すると考えられている非特許文献3及び4。また、血液脳関門機能の不良によりアミロイドベータタンパク質Aβが脳内に蓄積することがアルツハイマー症を進展させると考えられている非特許文献3。したがって、本発明の血液脳関門機能強化薬は、血液脳関門機能障害を素因とする前記疾患又は症状の予防、抑制又は改善に有用である。例えば、脳梗塞の悪化又は再発を予防又は抑制するために、本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬を使用出来る。また、脳梗塞に伴う脳浮腫を予防、抑制又は改善するために、本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬を使用出来る。また、脳外傷に伴う脳浮腫を予防、抑制又は改善するために、本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬を使用出来る。また、敗血症に伴う脳症を予防、抑制又は改善するために、本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬を使用出来る。また、多発性硬化症における白血球脳内浸潤を予防、抑制又は改善するために、本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬を使用出来る。また、アルツハイマー病におけるアミロイドベータタンパク質Aβの脳内での蓄積を予防、抑制又は改善するために、本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬を使用出来る。本発明の他の実施態様として、本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬を、薬物の脳移行を予防又は抑制するために使用出来る。前記薬物は、動物又はヒトの中枢神経での作用を期待しない薬物であってもよい。また、前記薬物が動物又はヒトの中枢神経での作用を期待する薬物であり、且つ、期待を超える量の脳移行を抑制するためにも、本発明の医薬又は医薬組成物を使用してもよい。また、前記薬物の脳移行を予防又は抑制することにより、動物又はヒトの中枢神経性の有害症状を予防、抑制又は改善するために、本発明の医薬又は医薬組成物を使用出来る。例えば、シクロスポリン、タクロリムス等の免疫抑制薬による血液脳関門機能低下とそれに伴う血液脳関門透過を原因とする、振戦、痙攣、白質脳症、頭痛等の、中枢性副作用による有害症状が知られている非特許文献5~12。本発明は血液脳関門機能低下を抑制、血液脳関門機能を強化又は再構築することによって上記有害症状を予防、抑制又は改善することが出来る。また、本発明は、組織型プラスミノゲンアクチベーター等の血栓溶解薬による血液脳関門機能低下を予防、抑制又は改善することが出来る。また、本発明は、前記血液脳関門機能低下に伴う出血性梗塞を予防、抑制又は改善することが出来る。また、本発明は、脳梗塞の治療の際の前記血栓溶解薬の使用時における治療可能時間therapeuticwindowの拡張に用いることが出来る。そのため、本発明は、前記血栓溶解薬と併用して、脳梗塞治療薬として用いることが出来る。その他、本発明は、抗ヒスタミン薬による眠気や、タミフルによる意識障害、異常行動、せん妄、幻覚、妄想、痙攣等や、インターフェロンインフリキシマブ抗うつ薬ニューキノロン系抗菌薬による痙攣てんかんや、カルモフールテガフールフルオロウラシルによる白質脳症を予防、抑制又は改善することが出来る。本発明の他の実施態様として、本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬を、血液脳関門機能の低下を予防、抑制又は改善するために、本発明の医薬又は医薬組成物を使用出来る。例えば、糖尿病、肥満、高血圧等により血液脳関門機能が低下する可能性があることが知られている非特許文献14、15。そのため、本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬を、糖尿病、肥満、高血圧等による血液脳関門機能の低下を予防、抑制又は改善するために使用出来る。前記血液脳関門機能の低下を予防、抑制又は改善は、脳梗塞の悪化又は再発を予防すること、薬物の脳移行を予防又は抑制すること、等へつながる。また逆に、血液脳関門機能の低下により糖尿病及び/又は肥満が発症又は悪化するとも考えられる。そのため、本発明に係る血液脳関門障害症候群治療薬を、血液脳関門機能の低下に起因する上記疾患の予防、抑制又は改善するためにも使用出来る。さらにまた、上記各作用又は用途のための動物試験用試薬としても、ビグアナイド系薬剤若しくはその塩又はそれを有効成分とする物質又は組成物を使用出来る。前記動物としては、例えば、メダカ、カエル、トカゲ、ニワトリ、マウス、ラット、モルモット、ハムスター、ウサギ、イヌ、ネコ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ウシ、サルなどから選択することができる。以下の実施例によって本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例により何ら限定されるものでない。例1例1-1―invitroBBBモデルの作成―脳血管内皮細胞RBECを下記参考文献1に従って単離した。詳細は下記の通りである。3週齢のWistar系ラットをエーテル麻酔後、断頭し大脳を摘出し氷上のディッシュに入れた。髄膜を剥がした後に氷上のディッシュにて大脳皮質を細断し、collagenaseCLS21mg/ml;WorthingtonとdeoxyribonucleaseI50units/ml;Sigmaで37°C、1.5時間振とう200rpmし、酵素処理を行った。遠心分離後、得られたペレットに20bovineserumalbuminBSA-DMEMを加え、遠心分離1000×g、20分することでニューロンやグリア細胞を取り除いた。その後collagenase/dispase1mg/ml;BoehringerMannheimとdeoxyribonucleaseI50units/ml;Sigmaで37°C、30分振とう200rpmして酵素処理をした。遠心分離後、得られたペレットを少量のDMEMで懸濁し、あらかじめ4°C、30000×g、1時間で密度勾配を形成させておいた、33percollGEhelthcare溶液に加え、遠心分離することで脳毛細血管片を単離した。上記の方法で単離した脳毛細血管片を、コラーゲン及びフィブロネクチンでコーティングしたculturedishを用いて37°C、5CO2/95大気下で、plasmaderivedserumPDS10、gentamicin50μg/mL、L-glutamine1mM、heparin1mg/mL、bFGF1.5ng/mL、insulin5μg/mL、transferring5μg/mL、selenium5ng/mL、puromycin4μg/mLを含むDMEM/F12RBEC培養液Iにて培養した。48時間後に、puromycinを除去したRBEC培養液IRBEC培養液IIに置換し、さらに培養することで脳血管内皮細胞RBECを得た。Transwell登録商標24-welltype、Costar、MAを用いて、上記の方法で得られたRBECからRBEC単層培養系であるmonolayerのinvitroBBBモデルを作製した。すなわち、Polycarbonatemembrane0.4μmporesizeをコラーゲン及びフィブロネクチンでコーティングしたTranswellインサート12-welltype、Costar、MAを24-wellcultureplateCostar、MAのwellに設置し、RBEC5.0×104cells/wellを前記インサートの内側に播種したmonolayer。RBECを播種した翌日、hydrocortisone500nMを含むRBEC培養液IIに交換し、その2日後に完成したinvitroBBBモデルを用いて実験を行った。例1-2―透過実験―メトホルミンのBBB機能への影響は、フルオレセインナトリウムNa-FSigma、St.Louis、MO及びEvansblue-albuminアルブミンEvansblue;Sigma、E2129Bovineserumalbumin;Sigma、A7906の透過係数を指標として、確認された。なお、血管弛緩因子であるadrenomedullinは血液脳関門機能を強化することにより、invitro及びinvivoにおいてフルオレセインナトリウムの透過を抑制する非特許文献16、発明者未発表データ。つまりフルオレセインナトリウムの透過に関するinvitro試験とinvivo試験は正の関係である。試験サンプルとして、PDSを除去したRBEC培養液IIに溶解した0.1mMメトホルミンメトホルミン塩酸塩;Sigma、D15,095-9、0.5mMメトホルミン同、1mMメトホルミン同を用いた。対照群として、PDSを除去したRBEC培養液IIを用いた。上記で完成したinvitroBBBモデル中の培養液を全て取り除き、試験サンプルで置換し、24時間後に透過性の試験を行った。フルオレセインナトリウム100μg/ml又はアルブミン0.04g/mlを含んだphysiologicalbuffer0.1mlをインサートの血管側に添加した後、10、20、30、60、120、180分後にwell脳側からサンプル0.4mlを採取し、新たにphysiologicalbufferを同量加えた。蛍光プレートリーダーCytoFluor登録商標Series4000,PerSeptiveBiosystems、Framingham、MAを用いてフルオレセインナトリウムの蛍光強度を測定し励起波長485nm、蛍光波長530nm、吸光プレートリーダーSunrise登録商標、TECAN、Mannedorf、Switzerlandを用いてアルブミンの吸光強度を測定し波長630nm、検量線よりフルオレセインナトリウム及びアルブミンの濃度を算出した。クリアランスと透過係数Pの算出は下記参考文献1及び2に従った。クリアランスは、血管側のchamberから脳実質側のchamberに移行したフルオレセインナトリウム及びアルブミンの量をμLで表し、血管側に入れたフルオレセインナトリウム及びアルブミンの初濃度[C]Lと脳実質側に移行したフルオレセインナトリウム及びアルブミンの最終濃度[C]Aから、以下の式より算出した。Clearanceμl=[C]A×VA/[C]LVA:脳実質側chamberの容積1.5ml透過係数Pcm/minは以下の式より求めた。1/PSapp=1/PSmembrane1/PStransPSは時間に対してクリアランスをプロットした直線の傾きで、透過係数×membraneの表面積を表している。Pappはみかけの透過係数、Ptransは真の透過係数を表す。Pmembraneは、チャンバーのmembraneのみの透過係数を表す。上記試験の概略図を図1に示す。上記試験に関しては、上記の各先行技術文献や下記の各参考文献を参考にした。[参考文献1]Isobe,I.,Watanabe,T.,Hazemoto,N.,Yamagata,K.,Ueki,T.,Nakanishi,K.,Asai,K.,Kato,T.、Astrocyticcontributionstoblood-brainbarrierBBBformationbyendothelialcells:apossibleuseofaorticendothelialcellforinvitromodel、NeurochemistryInternational、1996、28、p.523-533[参考文献2]Dehouck,M.-P.,Jolliet-Riant,P.,Bree,F.,FruchartJ.-C.,Cecchelli,R.,Tillement,J.-P.,Drugtransferacrosstheblood-brainbarrier:correlationbetweeninvitroandinvivomodels、JournalofNeurochemistry、1992、58、p.1790-1797[参考文献3]HayashiY.,NomuraM.,YamagishiS.,HaradaS.,YamashitaJ.,YamamotoH.,Inductionofvariousblood-brainbarrierpropertiesinnon-neuralendothelialcellsbycloseappositiontoco-culturedastrocytes、Glia、1997、19、p.13-26[参考文献4]TakataF,SumiN,NishiokuT,HaradaE,WakigawaT,ShutoH,YamauchiA,KataokaY.、OncostatinMinducesfunctionalandstructuralimpairmentofblood-brainbarrierscomprisedofratbraincapillaryendothelialcells、NeuroscienceLetters、2008、4412、p.163-166対象群を用いた試験結果透過係数を100としたときの、各濃度0.1mM、0.5mM及び1mMのメトホルミンを用いた試験結果を図2及び図3に示す。図2には、アルブミン透過係数の測定結果を、図3にはフルオレセインナトリウム透過係数の測定結果を示す。アルブミン透過係数の測定試験において、4群の一元ANOVA法での有意確率Pは0.0009であり、有意水準0.05として有意差があった。さらに、対照群と各メトホルミン群を、有意水準0.05とするDunnett多重比較検定法を用いて有意差検定を行った結果、1mMメトホルミン群に有意差があった。図2中ではその群に印を付した。フルオレセインナトリウム透過係数の測定試験において、4群の一元ANOVA法での有意確率Pは0.0001未満であり、有意水準0.05として有意差があった。さらに、対照群と各メトホルミン群を、有意水準0.05とするDunnett多重比較検定法を用いて有意差検定を行った結果、0.5mMメトホルミン群及び1mMメトホルミン群に有意差があった。図3中ではそれらの群に印を付した。図2及び図3に示すように、対照群に比べて有意に、メトホルミンが脳毛細管内に存在するアルブミンや密着結合能マーカーであるフルオレセインナトリウムの脳組織側への漏出を抑制した。例2中枢性副作用誘発薬物CsAによる血液脳関門機能低下に対するメトホルミンの保護作用免疫抑制薬cyclosporinACsAは、移植の成功率を向上させる有益な医薬品である。一方で副作用も多く、振戦痙攣などの中枢性副作用が発現すると投与中止を余儀なくされる。これまでに我々は、中枢性副作用発現にCsAの血液脳関門機能低下作用に伴うCsAの脳移行増大が関与することを明らかにした。そこで、CsAによる血液脳関門機能低下に対するメトホルミンの作用について検討した。例2-1例1-1にしたがって、invitroBBBモデルを作成した。例2-2例1-2と同様に、透過実験を行った。ただし、薬物の刺激方法が異なる。試験サンプルとして、エタノールに溶解したCsA及びPDSを除去したRBEC培養液IIに溶解した1mMメトホルミンメトホルミン塩酸塩;Sigma、D15,095-9を用いた。対照群として、エタノール及びPDSを除去したRBEC培養液IIを用いた。上記で完成したinvitroBBBモデル中の培養液を全て取り除き、試験サンプルで置換し、24時間後に透過性の試験を行った。この試験結果を図4に示す。図に示されるように、CsAを負荷したところ、フルオレセインナトリウム透過性は上昇したが、メトホルミンの併用により、CsAによる血液脳関門機能低下が抑制されて、フルオレセインナトリウムの透過性上昇が有意に抑制された。例3中枢性副作用誘発薬物t-PAによる血液脳関門機能低下に対するメトホルミンの作用invitro脳梗塞に対する血栓溶解薬組織型プラスミノゲンアクチベーターt-PAは、発症から3~4.5時間までの静脈投与で極めて良好な効果が示されている。しかし、t-PAによる血栓溶解療法には問題点が存在する。虚血病態化でのt-PA使用に伴う血液脳関門障害により、出血性梗塞を合併することがあるため非特許文献17及び18、治療可能時間therapeuticwindowが脳梗塞後3時間と極めて短いことがその一つである非特許文献2。そこで、invitroBBBモデルに虚血及びt-PAを負荷した、t-PABBB障害モデルを作製し、メトホルミンの血液脳関門機能保護作用について検討した。例3-1例1-1にしたがって、invitroBBBモデルを作成した。例3-2例1-2と同様に、透過実験を行った。ただし、薬物の刺激方法が異なる。試験サンプルとして、t-PA注射剤アクチバシン;協和発酵及びPDSを除去したRBEC培養液Iに溶解した1mMメトホルミンメトホルミン塩酸塩;Sigma、D15,095-9を用いた。対照群として、PDSを除去したRBEC培養液Iを用いた。上記で完成したinvitroBBBモデル中の培養液を全て取り除き、試験サンプルで置換し、N295/CO25虚血条件下で48時間放置した後に透過性の試験を行った。この試験結果を図5及び図6に示す。両図に示されるように、虚血状態下でt-PAを負荷したところ、フルオレセインナトリウム及びアルブミンEvansblue-albumin:EBAの透過性は上昇したが、メトホルミンの併用により、t-PAによる血液脳関門機能低下が抑制されて、フルオレセインナトリウム及びアルブミンの透過性上昇が有意に抑制された。例4中枢性副作用誘発薬物t-PAによる血液脳関門機能低下に対するメトホルミンの作用invivo例4-1t-PAによるinvivoBBB障害モデルの作製ddyマウスの両側の総頸動脈を30分間結紮2VOして脳梗塞モデルマウスを作製した。血管を再開通した後に鎖骨下静脈よりt-PA10mg/kgを投与し24時間放置したマウスを、t-PAによるBBB障害モデルマウスとして用いた。メトホルミンはt-PAと同時に100mg/kgを投与した。対照群として、薬物を投与していない脳梗塞モデルマウスを用いた。例4-2BBB機能評価t-PAを投与して、又はt-PA及びメトホルミンを投与して24時間後に、フルオレセインナトリウムNa-F6mg/mL及びEvansblueEB20mg/mLの混合液200μLを鎖骨下静脈に投与して60分放置した後に全脳を摘出した。BBB機能は全脳の写真及びホモジナイズした全脳のNa-F及びEB濃度を用いて評価した。結果脳梗塞モデルマウスにt-PAを負荷すると脳が青く染まり、血管からEBが脳全体に漏れ出ているのが認められた図7真ん中。これにメトホルミンを併用すると脳の青色は薄くなったことから図7右、血管外へのEB漏出が抑制されたことがわかる。このことよりt-PA負荷によるBBB機能障害がメトホルミン併用により抑制されたと考えられる。脳梗塞モデルマウスにt-PAを負荷するとNa-F及びEBの脳内移行量はそれぞれ16及び20上昇した図8及び9。メトホルミン併用によりNa-F及びEBの上昇は78及び66抑制された図8及び9。"