培養セロトニン産生細胞に、大建中湯を含有する被験試料を添加し、次いで培養上清中のセロトニン含量を測定することを特徴とする大建中湯の薬理活性のバイオアッセイ方法。セロトニン産生細胞が、エンテロクロマフィン様細胞である請求項第1項記載の大建中湯の薬理活性のバイオアッセイ方法。セロトニン産生細胞が、RIN-14B細胞、QGP-1細胞およびKRJ-I細胞から選ばれる細胞株である請求項第1項または第2項記載の大建中湯の薬理活性のバイオアッセイ方法。請求項1ないし3の何れかの項記載の大建中湯の薬理活性のバイオアッセイ方法により、大建中湯として臨床的に薬理効果が認められた基準製剤と被検製剤を同一条件で薬理活性を評価し、基準製剤と被検製剤の同一性を評価することを特徴とする大建中湯製剤の品質管理方法。大建中湯の濃度として、90~900μg/mLの範囲でバイオアッセイ方法を行う請求項4記載の大建中湯製剤の品質管理方法。従って本発明の課題は、大建中湯について簡便な試験管内試験によるバイオアッセイ方法を提供し、更にこれを利用した大建中湯のより正確性の高い品質管理方法を提供することである。本発明者らは、大建中湯の腸管運動亢進作用や腸管血流増加作用や、これらの作用とセロトニンの関与についての報告非特許文献1に着目し、大建中湯とセロトニンの関係に関し鋭意研究を行った。そしてその結果、大建中湯がセロトニン産生細胞に対して、セロトニン放出促進作用を有すること、および放出されるセロトニンの量を測定することにより、大建中湯の薬理活性価を測定することが可能であること、並びにこのバイオアッセイ系を利用することで、適切に大建中湯の品質管理を行うことができることを見出し、本発明を完成した。すなわち本発明は、培養セロトニン産生細胞に、大建中湯を含有する被験試料を添加し、次いで培養上清中のセロトニン含量を測定することを特徴とする大建中湯の薬理活性のバイオアッセイ方法である。また本発明は、上記の大建中湯の薬理活性のバイオアッセイ方法により、大建中湯として臨床的に薬理効果が認められた基準製剤と被検製剤を同一条件で薬理活性を評価し、基準製剤と被検製剤の同等性を評価することを特徴とする大建中湯製剤の品質管理方法である。本発明のバイオアッセイ方法によれば、試験施設、試験動物、処理能力等の制約なく、簡単な試験管内試験により、大建中湯の薬理活性価セロトニン放出活性を測定することが可能であると共に、品質を評価するために適切な濃度範囲で本試験をおこなうことにより、大建中湯について正確性の高い品質管理を行うことができる。大建中湯は、一般に表1の組成の混合生薬の抽出エキスを粉末化したもの無コウイ大建中湯と称されることがある。に、抽出エキスの8倍量程度の粉末飴コウイ膠飴英名:maltoseを配合したものである。そして、本発明のバイオアッセイ法の対象になる大建中湯としては、大建中湯にさらに医薬品添加物として添加が認められている成分を加えて顆粒等に製剤化した大建中湯製剤も含まれる。このような製剤化した大建中湯製剤としては、例えば、ツムラ大建中湯エキス顆粒医療用のような医療用医薬品として市販されているものを挙げることができる。なお、上記の医薬品添加物として添加が認められている成分とは、デンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩等の賦形剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着色剤、香料等が挙げられる。本発明の大建中湯のバイオアッセイ方法は、培養セロトニン産生細胞に大建中湯を含有する被験試料を添加し、添加後のセロトニン産生細胞におけるセロトニン放出量から大建中湯の薬理活性値を評価するものである。本発明で用いるセロトニン産生細胞の例として、エンテロクロマフィン細胞を挙げることができる。このエンテロクロマフィン細胞は、内分泌細胞であり、生体内に存在するセロトニンを大量に産生、分泌することができる細胞である。そして、生体内に存在するセロトニンの90が腸管のエンテロクロマフィン細胞内に存在しているという事実から腸管のエンテロクロマフィン細胞を好ましく用いることができる。さらに、上記セロトニン産生細胞としては、一定の安定したセロトニンを産生できるエンテロクロマフィン様の細胞株を用いることもできる。エンテロクロマフィン様の細胞株とは、たとえば、ラット膵臓癌由来のRIN-14B細胞、ヒト膵臓癌由来のQGP-1細胞、ヒト小腸カルチノイド由来のKRJ-I細胞等が挙げられる。このうち、特に好ましい細胞株としては、増殖性に優れる点でRIN-14B細胞が挙げられる。本発明の大建中湯のバイオアッセイ方法は、まずセロトニン産生細胞を、その生育に適した培地、例えば、抗生物質、血清等を含むRPMI1640等の培地で、例えば、1日間ないし3日間、37°Cにおいて培養した後、リン酸緩衝液等で置換し、これに所定量の被験試料を加えた後、同じ温度で、更に20分間から3時間培養した後、培地中へのセロトニン放出量を測定することにより行われる。大建中湯を含有する被験試料は、一般には、ジメチルスルホキシドDMSOのような溶媒に溶解ないし懸濁し、前記培地中に加えられる。また、セロトニン放出量を測定する方法としては、セロトニン放出量が測定できる方法であれば特に制約なく公知方法を利用できるが、好ましい方法としては、酵素免疫測定法EIA法や、HPLC法が挙げられる。本発明で用いられるEIA法とは、特異的な抗原抗体反応をする抗原または抗体に酵素を付着させ、酵素の活性を測定することによって抗原抗体反応の結合量を測定する方法であり、具体的には例えば、EIAセロトニンキットEIAserotoninkit;ベックマンコールター社製等の市販のキットを用いて行うことができる。更に、高速液体クロマトグラフィーHPLC法によりセロトニン放出量を測定するにあたっては、試料のチャージ量、分析用カラムの種類、分析用カラムの直径及び長さ、分析用カラムの温度、移動相の組成、移動相流量等の条件は、適宜選択することができ、セロトニンの分離に最も適した条件を選択すればよい。このような条件としては、セロトニンのリテンションタイムが他の検出物と重ならないような条件が好ましい。なお、分析用カラムとしては、通常使用されるカラム、例えば、ODS等を充填したカラム等、また検出器としては、一般に汎用される電気化学検出器ECD等が使用できる。本発明のバイオアッセイ方法においては、実施例1の結果にみられるように濃度に依存した反応が得られる濃度範囲0~900μg/mLにおいて、さらに好ましくは統計学的に有意な反応が得られる濃度範囲90~900μg/mLにおいて、同時に複数、好ましくは3点以上測定し、これから被験試料中の大建中湯の薬理活性価セロトニン放出活性を定量することが好ましいが、条件がほとんど変わらないのであれば、上記濃度範囲の濃度の大建中湯を含む試料で既に作製された検量線を使用して測定しても良い。本発明のバイオアッセイ方法により製品である大建中湯の品質評価を行う場合は、まず、臨床的に薬理効果が認められた大建中湯の複数ロットについて、その薬理活性価セロトニン放出活性を測定し、その値に基づいて規格範囲を設定する。次いで、同じ方法により、評価すべき大建中湯の品質試験用サンプルについて薬理活性価セロトニン放出活性を測定する。そして、このサンプルの薬理活性値が、設定した規格の範囲内であるかどうかで同等性を評価し、同等と認められるものを合格品とすることで品質管理を行なえばよい。次に実施例を挙げ、本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例に何ら制約されるものではない。実施例1大建中湯のバイオアッセイ試験:1被験試料の調製:表1の配合割合の生薬混合物を、その混合物重量の10倍量の精製水で1時間、100°Cで加熱抽出し、粉末化することにより無コウイ大建中湯エキス末を得た。この無コウイ大建中湯エキス末を100mg/mL濃度のDMSO懸濁液とし、これを、88.8mg/mL濃度の膠飴水溶液に対して1:9の割合で混和し、90mg/mL濃度の大建中湯溶液を調製した。これを0.1BSA-Hanks緩衝液で希釈して9mg/mL濃度としたのち15分間の超音波処理を行い、大建中湯被験試料を調製した。また、陽性対照試料として、アリルイソチオシアネ-トAITC、和光純薬工業をDMSOに加え、100mmol/LAITCのDMSO溶液を調製した。0.1BSA-Hanks緩衝液1リットルの蒸留水に1gウシ血清アルブミン、1gブドウ糖、8g塩化ナトリウム、400mg塩化カリウム、47.9mgリン酸一水素ナトリウム、60mgリン酸二水素カリウム、46.8mg塩化マグネシウム、48.8mg硫酸マグネシウム、140mg塩化カルシウムを溶解し、pH7.2~7.4に調製した。2セロトニン産生細胞RIN-14B細胞の培養:ラット膵臓癌細胞株RIN-14BDSファーマバイオメディカル社製を、10牛胎児血清FBSを加えたRPMI1640培地10mmol/LHEPES、1.5g/LNaHCO3、100U/mLペニシリンGおよび100μg/mLストレプトマイシン中で継代培養し、セロトニン産生細胞とした。なお、細胞の回収にあたっては、トリプシン-EDTA液を用いた。3セロトニン5-HT放出試験:上記2で得られたセロトニン産生細胞を、96穴平底プレートに3×104cells/100μL/wellで分注した。72時間の前培養を行なった後、培養上清を上記1で得た各被験試料を含む0.1BSA-Hanks緩衝液に置換し、5炭酸ガスインキュベーターの中で更に1時間培養した。被験試料は、1DMSOを含む0.1BSA-Hanks緩衝液で段階希釈して培養系中で最終濃度27、90、270、900μg/mLとなるように添加し、培養系でのDMSOの最終濃度は0.1とした。また、陽性対照群では、被験試料に変え、上記1で得た陽性対照試料を、培養系中で最終濃度100μmol/L、DMSOの最終濃度が0.1となるように加えた。最後に、培養上清を320gで、5分間、4°Cで遠心処理し、その上清を5-HT濃度測定用試料以下、測定用試料というとした。4EIA法によるセロトニン5-HT測定:EIA法による5-HT放出測定は、EIAセロトニンキットベックマンコールター社製を用い、製品の添付プロトコールに準じて行った。すなわち、アシル化試薬の入ったチューブに、上記3で得た測定用試料を加え、さらにアシル化バッファー50μLを添加して試薬が溶解するまでボルテックスにて攪拌した。室温、遮光条件下で30分間反応を行い、アシル化反応液を得た。測定試料を加えない系でも上記と同様に処理し、コントロールとした。次に抗5-HT抗体がコートされた96穴プレートの適当なウェルに、各アシル化反応液20μLを移し、アセチルコリンエステラーゼACE-5-HT結合体200μLを加えて、室温、遮光条件下、プレートミキサーで振盪しながら3時間、競合的にインキュベートした。キットに添付のウォッシュバッファーを用い、300μL/wellで3回プレートを洗浄し、未結合のものを除いた後、ACE基質を200μL/well加えて15~20分放置した。発色を確認した後、反応停止剤50μLを加えて反応を停止し、405nmの吸光度を測定した。その結果を図1に示す。図1の結果に示すように、27、90、270、900μg/mL濃度の大建中湯を加えた測定試料では、無添加のコントロールに比べ、明らかに上清中の5-HT量が多く、しかも濃度依存的であり、検量線が形成しうるものであった。また、陽対照のAITCを加えた測定試料も、コントロールに比べ、明らかに高い5-HT濃度を示し、大建中湯がセロトニン産生細胞に作用したことによる5-HTであることが示された。5HPLCによるセロトニン5-HT測定:次に、3で得られた測定用試料のうち、900μg/mL大健中湯のものと、コントロールのものの培養試料液について、HPLCを用い、これに含まれる5-HTを検出した。その結果を図2のaおよびbに示す5-HTの保持時間は、aで1627分、bで16.11分である。なお、HPLCによる5-HT分析は、以下の条件でおこなった。また、5-HT標準液は、終濃度100mg/L濃度となるようにEDTAを添加した0.1mol/L酢酸水溶液で調製した。HPLC分析条件微量生体試料分析システム:HTEC-500EICOMデータ処理装置:EPC-300EICOMデータ解析ソフトウェア:PowerChromversion2.5.7eDAQ分析カラム:EICOMPAKCA-5ODS2.1mmΦ×150mmプレカラム:EICOMPREPAKSET-CA3.0mmΦ×4mm移動相:800.1Mリン酸緩衝液NapH620メタノール500mgL1-オクタンスルホン酸ソーダSDS50mg/LEDTA2Na流速:230μL/min分析温度:25°C設定加電圧:450mV400~450mVvsAg/AgCl作用電極:グラファイト電極WE-3Gガスケット:GS-25分析カラム:80図2の結果から、HPLCによる測定でもセロトニン放出活性が測定できることがわかった。