"分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質を含む溶液にメレジトースを添加することにより、前記分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質を安定化する方法。所望により凍結乾燥により前記溶液を固体状態に転移させる、請求項1に記載の方法。前記メレジトースが、最大1,000mM、特に約10~約200mM、特に約10~約100mMの量で存在する、請求項1または2に記載の方法。前記分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質が、薬学的または生物学的意義のあるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質である、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。前記薬学的または生物学的意義のあるタンパク質が、組換えにより生成された、分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質である、請求項4に記載の方法。前記薬学的または生物学的意義のあるタンパク質が、ヒトのタンパク質、植物、昆虫等のその他の供給源のタンパク質、変異タンパク質、人工タンパク質、合成タンパク質、融合タンパク質、キメラタンパク質、または1もしくは複数の化学物質と結合した誘導体およびこれらの組合せである、請求項4または5に記載の方法。前記分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質が、フィブリノーゲン、フィブリンモノマー、プロトロンビン、トロンビン、FV、FVa、FX、FXa、FIX、FIXa、FVII、FVIIa、FVIII、FXI、FXIa、FXII、FXIIa、FXIII、FXIIIa、フォンヴィルブランド因子、ADAMTS13ならびにこれらの誘導体および変異タンパク質等の血液凝固因子である、請求項6に記載の方法。前記分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質が、アルブミン、トランスフェリン、セルロプラスミン、ハプトグロビン、ヘモグロビン、ヘモペキシン等の輸送タンパク質、β-アンチトロンビン、α-アンチトロンビン、α2-マクログロブリン、C1インヒビター、組織因子経路阻害剤TFPI、ヘパリンコファクターII、プロテインCインヒビターPAI-3、プロテインC、プロテインS、プロテインZ等のプロテアーゼ阻害剤、ポリクローナル抗体IgG、モノクローナル抗体、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgA1、IgA2、IgM、IgE、IgD、ベンスジョーンズタンパク質等の免疫グロブリン、フィブロネクチン、トロンボグロブリン、血小板因子4等の細胞関連血漿タンパク質、apoA-I、apoA-II、apoE等のアポリポプロテイン、因子B、因子D、因子H、因子I、C3b不活性化因子、プロペルジン、C4結合タンパク質等の補体因子;血小板由来成長因子PDGF、上皮成長因子EGF、形質転換成長因子アルファTGF-α、形質転換成長因子ベータTGF-β、線維芽細胞成長因子FGFおよび肝細胞成長因子のような成長因子、潜在型アンチトロンビンおよびプレ潜在型アンチトロンビン等の抗血管新生タンパク質、アルファ-1-酸糖タンパク質、アンチキモトリプシン、インター-α-トリプシンインヒビター、α-2-HS糖タンパク質、C反応性タンパク質を初めとする高グリコシル化タンパク質、ならびにヒスチジンリッチ糖タンパク質、マンナン結合レクチン、GC-グロブリン、プラスミノーゲン、α-1ミクログロブリン、C反応性タンパク質、エリスロポエチン、インターフェロン、腫瘍因子、tPA、G-CSF等の血液因子等のその他の分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質ならびにこれらの誘導体および変異タンパク質である、請求項6のいずれか一項に記載の方法。組換えアルブミン、ポリソルベート80、ポリソルベート20またはポロキサマー、特にポロキサマー188等の少なくとも1つの界面活性剤が存在する、請求項1~8のいずれか一項に記載の方法。ヒスチジン、クエン酸ナトリウム、HEPES、Tris、MOPSまたはPIPES等の少なくとも1つの緩衝剤が存在する、請求項1~9のいずれか一項に記載の方法。糖、アミノ酸、ポリオール、補因子もしくはその組合せ等の少なくとも1つの更なる安定化剤が存在し且つ/または塩化ナトリウム、アルギニン、グリシン、塩化カリウム、糖もしくは糖アルコール等の少なくとも1つの浸透圧調節剤が存在し且つ/またはグリシン、マンニトール、塩化ナトリウム、アルギニンもしくはスクロース等の少なくとも1つの増量剤が存在する、請求項1~10のいずれか一項に記載の方法。分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質およびメレジトースを含む組成物。液体または固体状態である、請求項12に記載の組成物。増量剤、界面活性剤、緩衝剤、更なる安定化剤および/または浸透圧調節剤を更に含む、請求項12または13に記載の組成物。特にプロセス内安定化、凍結乾燥プロセス中、溶液中、精製中、および特に細胞培養での産生において分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質を安定化するための、または有効期間を延長するために長期間安定化するための、メレジトースの使用であって、前記長期間が、少なくとも6ヶ月、好ましくは少なくとも12ヶ月、より好ましくは少なくとも18ヶ月、更により好ましくは24ヶ月または36ヶ月である、使用。前記タンパク質が第VIII因子である、請求項12~14のいずれか一項に記載の組成物。前記タンパク質が第IX因子である、請求項12~14のいずれか一項に記載の組成物。前記タンパク質がHES-G-CSFである、請求項12~14のいずれか一項に記載の組成物。本発明は、分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質を含む溶液にメレジトースを添加することにより、分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質を安定化する方法を提供する。好ましくは、上記ヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質の分子量は10KDaを超える。より好ましくは、分子量は10KDa~300KDaである。最も好ましくは、分子量は20KDa~200KDaである。ヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質の分子量が50KDa~100KDa、100KDa~150KDa、または150KDa~200KDaであることが有益であり得る。特に、分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質は薬学的または生物学的意義のあるタンパク質である。本発明によって安定化され得る分子量が10KDaを超える薬学的または生物学的意義のあるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質は、組換えにより生成されたヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質であってよい。タンパク質という用語は、化学合成されたタンパク質、培養細胞の遺伝子にコードされる天然合成タンパク質および細胞によって分泌された組換えタンパク質を含む。組換えタンパク質とは、分子生物学的技術により細胞中に導入された導入遺伝子にコードされるものである。タンパク質は化学的方法によってまたは翻訳後プロセス中に酵素によって修飾されてよい。本発明において、タンパク質は、ヒトのタンパク質、特に細胞培養によって産生されたものを含むが、更に、植物、昆虫等のその他の供給源のタンパク質および変異タンパク質、人工タンパク質、合成タンパク質、融合タンパク質またはキメラタンパク質も含む。分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質という用語は、特に、ヒト血液凝固因子、例えばフィブリノーゲン、フィブリンモノマー、プロトロンビン、トロンビン、FV、FVa、FX、FXa、FIX、FIXa、FVII、FVIIa、FVIII、FXI、FXIa、FXII、FXIIa、FXIII、FXIIIa、フォンヴィルブランド因子、ADAMTS13等、輸送タンパク質、例えばアルブミン、トランスフェリン、セルロプラスミン、ハプトグロビン、ヘモグロビン、ヘモペキシン等、プロテアーゼ阻害剤、例えば6-アンチトロンビン、α-アンチトロンビン、α2-マクログロブリン、C1インヒビター、組織因子経路阻害剤TFPI、ヘパリンコファクターII、プロテインCインヒビターPAI-3、プロテインC、プロテインS、プロテインZ等、免疫グロブリン、例えばポリクローナル抗体IgG、モノクローナル抗体、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgA1、IgA2、IgM、IgE、IgD、ベンスジョーンズタンパク質等、細胞関連血漿タンパク質、例えばフィブロネクチン、トロンボグロブリン、血小板因子4等、アポリポタンパク質、例えばapoA-I、apoA-II、apoE、補体因子、例えば因子B、因子D、因子H、因子I、C3b不活性化因子、プロペルジン、C4結合タンパク質等、成長因子、例えば血小板由来成長因子PDGF、上皮成長因子EGF、形質転換成長因子アルファTGF-α、形質転換成長因子ベータTGF-β、線維芽細胞成長因子FGFおよび肝細胞成長因子、抗血管新生タンパク質、例えばlatent-アンチトロンビンおよびprelatent-アンチトロンビン等、高グリコシル化タンパク質、例えばアルファ-1-酸糖タンパク質、アンチキモトリプシン、インター-α-トリプシンインヒビター、α-2-HS糖タンパク質、C反応性タンパク質、ならびにその他の分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質、例えばヒスチジンリッチ糖タンパク質、マンナン結合レクチン、C4結合タンパク質、フィブロネクチン、GC-グロブリン、プラスミノーゲン、α-1ミクログロブリン、C反応性タンパク質、血液因子、例えばエリスロポイエチン、インターフェロン、腫瘍因子、tPA、gCSFならびにその誘導体および変異タンパク質を含む。特に興味深いのは、第IX因子、第VIII因子、G-CSF、vWF、アンチトロンビンAT、肝細胞成長因子HGF、ポリクローナルIgG、アルファ-1アンチトリプシン、因子H、因子I、C1-エステラーゼインヒビター、第VII因子およびこれらの組合せである。しかし、インスリンは単純に分子量が約5,700Daであるので、インスリン等のポリペプチドは分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質という用語に含まれない。ヒト血液タンパク質およびヒト血漿タンパク質という用語は、誘導体、特に半減期が延長されるように改変された分子を含む。半減期延長のための改変としては、限定されるものではないが、融合タンパク質、突然変異誘発によって修飾されたタンパク質および共有結合または非共有結合によりコンジュゲートに連結されたタンパク質が含まれる。本発明によれば、ヒト血漿タンパク質またはヒト血液タンパク質は、特に分子の分子量を20~200KDaにするようにヒドロキシエチルデンプンHES分子に共有結合していてよい。分子量に言及する場合、これは化合物の分子量を指すすなわち、タンパク質に共有結合した任意の化学物質の分子量を含む。本発明は、特に、溶液を固体状態に転移させる方法を提供する。本発明は、医薬品のための分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質の新規な安定化剤の発見に関する。驚くべきことに、組換え第VIII因子170KDa、第IX因子55kDaおよびHES化G-CSF120kDa等の分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質の安定化剤としてメレジトースを用いることができることが見出された。同様な分子量のヒト血液タンパク質およびヒト血漿タンパク質は同様な安定化要件を有することが予想される。例えば、第IX因子は、ビタミンK依存性のヒト血漿タンパク質であり、他の全てのビタミンK依存性のヒト血漿タンパク質と生化学的類似点を有する。Glaドメインはこれら全てのビタミンK依存性タンパク質に共通する構造的特徴であり、Glaドメインのすぐ後ろに各タンパク質プロトロンビンを除くは1または複数のEGF様ドメインを有する。ビタミンK依存性タンパク質はその生理学的機能を発揮するためにCa2イオンを必要とし、カルシウム結合部位には少なくともGlaドメインおよびEGF様ドメインが含まれる。カルシウム結合により、これらのタンパク質はリン脂質/細胞膜に結合でき、したがってその生物学的活性を完全に発揮することができる。7個のヒト血漿タンパク質がその生合成についてビタミンK依存性であることが知られている。これらは、プロトロンビン第II因子、72KDa、第VII因子/第VIIa因子50/50KDa、第IX因子55KDaまたは第IXa因子、第X因子59KDaまたは第Xa因子、プロテインC62KDa、プロテインS69KDaおよびプロテインZ62KDaである。驚くべきことに、分子量が20~200KDaのヒドロキシルエチルデンプンHES分子に共有結合したヒト血液タンパク質およびヒト血漿タンパク質がメレジトースを用いた安定化に適していることが見出された。メレジトースは、凍結乾燥製剤および溶液の両方においてタンパク質活性を維持する優れた能力を示した。本発明において、溶液を固体状態に転移させるステップは、メレジトース添加後の凍結乾燥である。メレジトースをトレハロースまたはスクロース等のその他の糖と併用してもよい。メレジトースmelezitoseまたはmelicitoseは、例えばCinarapilicornis等のアブラムシを初めとする植物の樹液を食べる多くの昆虫により酵素反応で生成される非還元性の三糖である。IUPAC名は2R,3R,4S,5S,6R-2-[[2S,3S,4R,5R-4-ヒドロキシ-2,5-ビスヒドロキシメチル-3-[[2R,3R,4S,5S,6R-3,4,5-トリヒドロキシ-6-ヒドロキシルメチル-2-テトラヒドロピラニル]オキシ]-2-テトラヒドロフラニル]オキシ]-6-ヒドロキシルメチル-テトラヒドロピラン-3,4,5-トリオールである。メレジトースの分子量は504.44g/molである。代表的な構造は以下の式で表される。通常、メレジトースは約1000mMまでの量で存在する。下限は目的のタンパク質に対する十分な安定化効果が得られるメレジトースの量によって異なる。実施例の方法論および当業者の通常の知識を用いて当業者は好適な量を容易に決定することができる。可能な範囲は、例えば、最終製剤に関連して、10mM~約200mMまたは約10mM~約100mMである。好ましくは、量は20mM超または30mM超である。好ましくは、ヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質の量に対するメレジトースの量は、重量に基づく計算で、1:10~1:5000、好ましくは1:50~1:150または1:1000~1:3000であり、すなわち、メレジトースの量はタンパク質の量より多い。好ましい実施形態では、薬学的1回投与量のタンパク質中に10~100mgのメレジトースが含まれる。本発明の主題は、分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質およびメレジトースを含む組成物である。当該組成物は液体または固体状態で存在し得る。本発明の一実施形態では、本発明の組成物は、増量剤、界面活性剤、緩衝剤、更なる安定化剤および/または浸透圧調節剤tonicitymodifierを更に含んでいる。本発明に係る界面活性剤は、表面および界面に吸着し、それにより、吸着によるタンパク質の活性消失を抑制する化合物である。この種の活性消失は、製薬プロセス全体ならびに患者への投与前および投与中における再構成された製品の取扱い中に起こり得る。一般的に用いられている界面活性剤はポリソルベート80、ポリソルベート20およびポロキサマー、特にポロキサマー188である。更に、アルブミン、特に組換えアルブミン等のタンパク質も界面活性剤として用いることができる。組換えアルブミンも本発明の実施形態に従って用いることができる。pH緩衝剤とは、製剤化するタンパク質の最適なpH範囲に緩衝する能力を有する化合物を指す。本発明は、適宜、クエン酸ナトリウム、マレイン酸、ヒスチジン、2-4-2-ヒドロキシ-エチル-1-ピペラジニル-エタンスルホン酸HEPES、3-N-モルホリノプロパンスルホン酸MOPS、2-N-モルホリノエタンスルホン酸MES、ピペラジン-N,N’-ビス2-エタンスルホン酸PIPES、またはTrisトリスヒドロキシメチルアミノメタンをpH緩衝剤として含む。緩衝剤は、タンパク質の機能性が維持される範囲にpHを維持する量で存在する。これはタンパク質によって異なる。各タンパク質の好ましい範囲、特に分子量が10KDaを超えるヒト血液タンパク質またはヒト血漿タンパク質の好ましい範囲は当業者に知られている。例として、クエン酸ナトリウムはpHを6.5~7.5に維持する。クエン酸ナトリウムの好適な形態は二水和物の形態である。一般的に、本発明に係る組成物は、凍結乾燥形態であり得るが、凍結乾燥される溶液、凍結乾燥された組成物から再構成された溶液等の溶液形態も取り得る。浸透圧調節剤とは、浸透圧のバランスをとるために製剤中に存在する化合物を指す。本発明は、適宜、塩化ナトリウム、アルギニン、グリシン、塩化カリウム、糖または糖アルコールを浸透圧調節剤として含む。メレジトースは凍結乾燥保護特性を示すが、更なる凍結乾燥保護剤cryo/lyoprotectantが存在してもよい。これは、凍結乾燥プロセスの凍結ステップおよび乾燥ステップ中ならびにその後の凍結乾燥生成物の保存中におけるタンパク質活性の消失を更に低減または防止するために製剤中に存在する化合物である。本発明は、適宜、スクロースおよびトレハロース等の非還元性二糖ならびにマルトースおよびラクトース等の還元性二糖を更なる凍結乾燥保護剤として含む。増量剤とは、凍結乾燥ケーキを機械的に支えるためおよび乾燥重量を増やすために製剤中に存在する補形剤を指す。増量剤は、塩化ナトリウムのように結晶状であってもよく、アルギニンのようにアモルファス状であってもよい。増量剤の量は、最終製剤に対して10重量まで可能である。本発明は、適宜、塩化ナトリウム、グリシン、マンニトール、スクロースまたはアルギニンを増量剤として含む。本発明の更なる主題は、凍結乾燥製剤等の乾燥状態のタンパク質を長期間、少なくとも6ヶ月、好ましくは少なくとも12ヶ月、より好ましくは少なくとも18ヶ月、更により好ましくは24ヶ月安定化するためのメレジトースの使用である。以下に非限定的な例を用いて本発明を更に説明する。活成分析-第VIII因子発色性アッセイchromogenicassayまたは1段階アッセイonestageassayを用いて第VIII因子活性を測定し、第VIII因子の単位を国際単位IUで表した。発色性アッセイは欧州薬局方に記載されている方法である。この方法は、補因子としての第VIII因子の生物学的活性を測定する2段階の測光法である。第VIII因子は第X因子を第Xa因子へと活性化し、これが酵素切断されて、分光測定で定量可能な生成物が生じる。1段階凝固アッセイone-stageclottingassayは、リン脂質、コンタクトアクチベーターcontactactivatorおよびカルシウムイオンの存在下で第VIII因子欠乏血漿の凝固時間を補正する第VIII因子含有サンプルの能力に基づく。フィブリン塊fibrinclotが出現するまでの時間を1段階で測定する。活成分析-第IX因子1段階凝固アッセイおよび/または発色性アッセイを用いて第IX因子の生物学的活性を測定し、現在のWHOの第IX因子濃縮物標準によって定義される国際単位IUで第IX因子の単位を表した。1段階凝固アッセイは欧州薬局方に記載されている方法である。当該アッセイの原理は、リン脂質、コンタクトアクチベーターおよびカルシウムイオンの存在下で第IX因子欠乏血漿の凝固時間を補正する第IX因子含有サンプルの能力に基づく。フィブリン塊が出現するまでの時間を1段階で測定する。第IX因子活性は凝固時間に反比例する。発色性アッセイは2段階の測光法である。第1段階では、トロンビン、リン脂質およびカルシウムの存在下で活性化第XI因子XIaが第IX因子を活性化して第IXa因子にする。第IXa因子はトロンビン活性化第VIII因子VIIIaと酵素複合体を形成し、これがリン脂質およびカルシウムの存在下で第X因子を活性化して第Xa因子にする。第2段階では、第Xa因子が第Xa因子特異的発色基質を加水分解することにより、分光測定で定量可能な発色団基pNAを遊離させる。第IX因子活性は、生成した第Xa因子の量に正比例する。分析-組換えHES化G-CSFHES-G-CSFのResourceSHPLC分析溶離液Aでサンプルを0.1mg/mLに希釈する。20μgをResourceS1mLカラムGEヘルスケア社、ドイツ、ミュンヘンに注入する。溶離液A:20mM酢酸ナトリウム、pH4.0溶離液B:20mM酢酸ナトリウム、0.5MNaCl、pH4.0流量:1mL/分グラジエント:0~8、1.8~2.0分8~52、2.0~13.0分52~100、13.0~13.6分凝集したHES-G-CSFはピーク幅が大きくなることが示されているので、HES-G-CSFのピーク幅を品質基準として取る。ピーク幅の増加は、熱応力または剪断応力の前後のHES-G-CSFピーク幅の差として定義される。実施例組換え第VIII因子実験に用いる第VIII因子は、欧州特許出願公開第1739179A号Schroderetalに記載のプロセスに従ってヒト細胞系HEK293F中で産生された組換えヒトBドメイン欠失第VIII因子タンパク質である。精製プロセスは、5つのクロマトグラフィーステップからなり、ヒトグリコシル化様パターンSandbergetal、国際出願第PCT/EP2009/060829号を示す高純度の第VIII因子タンパク質標品が得られたWingeetal、国際公開第2009/156430A号。血漿由来第IX因子これらの実験に用いる材料は、SD処理およびナノ濾過された高純度の第IX因子濃縮物である市販の製品Nanotiv登録商標に由来する。これらの実験に使用する前に、ゲル濾過カラムを用いて材料を更に精製し、第IX因子のモノマーピークをその後の実験に用いた。組換えHES化G-CSF用いる細胞系は、無血清増殖に適応させたヒト胚腎臓細胞293HEK293に由来する細胞系である。この宿主、HEK293Fを、G-CSFのcDNAコード配列を有する発現カセットで安定的にトランスフェクトした。カセットに強力なプロモーターを用いた。一般的なプロセスは欧州特許第1739179Schroderetalにも記載されている。精製プロセスは、4つのクロマトグラフィーステップからなり、高純度なG-CSFタンパク質標品が得られた。G-CSFタンパク質を、分子量が約100KDaのヒドロキシルエチルデンプンHES誘導体に結合させた。最後に、1ステップのクロマトグラフィーにより未反応HES誘導体およびG-CSFからHES-G-CSFを精製し、全体の分子量が約120KDaの分子を得た。実施例1:溶液中でのメレジトースによるrFVIIIの安定化調製上記実験セクションの記載に従って組換え第VIII因子rFVIIIを調製した。この実験では、溶液中のrFVIIIに対するメレジトースの安定化効果を、一般的に用いられている安定化剤であるトレハロースと比較した。rFVIII濃度は100IU/mlとした。本実験で調べた製剤の組成を表1に示す。製剤を25°Cで7日間保存して経時的タンパク質活性を評価した。一定の間隔でサンプルを取り、上記実験セクションに記載の通り、発色性アッセイで分析した。結果を、初期値に対するパーセンテージとして表2に要約する。実施例1の結論:本実験は、驚くべきことに、メレジトースが、より低いモル濃度にも関わらず、溶液中のrFVIIIに対してトレハロースと同等な安定化効果を有することを示している。実施例2:凍結乾燥形態でのメレジトースによるrFVIIIの安定化調製上記実験セクションの記載に従って組換え第VIII因子rFVIIIを調製した。本実験では、凍結乾燥プロセス中および凍結乾燥製剤中でのメレジトースの安定化効果を、一般的に用いられている安定化剤であるトレハロースと比較した。rFVIII濃度は100IU/mlとした。本実験で調べた製剤の組成を表3に示す。溶液を1.5mlずつ実験室規模の凍結乾燥器で凍結乾燥した。凍結乾燥ステップのタンパク質回収率は製剤2Bで93、製剤2Aで86であった。経時的タンパク質活性を評価するために、凍結乾燥サンプルを25°Cおよび40°Cで最大4週間保存した。サンプルを注射用蒸留水1.5mLで再構成し、上記実験セクションに記載の発色性アッセイで分析した。結果を表4に要約する。実施例2の結論:驚くべきことに、本実験は、凍結乾燥ステップにおいてメレジトースがトレハロースより低いモル濃度でrFVIIIを保護できること、および保存中にメレジトースがトレハロースよりも良くrFVIIIを安定化することを示している。実施例3:凍結乾燥形態でのメレジトースによるrFVIIIの安定化調製上記実験セクションの記載に従って組換え第VIII因子rFVIIIを調製した。本実験では、凍結乾燥プロセスおよび凍結乾燥製剤中における種々の濃度のメレジトースの安定化効果を比較し、更に安定化効果を四糖であるスタキオースと比較した。rFVIII濃度は170IU/mlでとした。本実施例で調べた製剤の組成を表5に示す。溶液を1.5mlずつ実験室規模の凍結乾燥器で凍結乾燥した。凍結乾燥ステップのタンパク質回収率はメレジトースを含む製剤で91~100、安定化剤としてスタキオースを含む製剤3Dでは84であった。経時的タンパク質活性を評価するために、凍結乾燥サンプルを25°Cおよび40°Cで最大12ヶ月保存した。サンプルを注射用蒸留水1.5mLで再構成し、上記実験セクションに記載の発色性アッセイで分析した。結果を表6にまとめる。実施例3の結論:本実験は、メレジトースが凍結乾燥ステップおよび凍結乾燥形態中でのrFVIIIの安定化剤として極めて良く機能することを示している。本実験は更に、スタキオースがメレジトース含有製剤と比べて25°Cおよび40°Cの両方で保存中にあまり十分な結果を示していないことから、スタキオースが凍結乾燥製剤のための好ましい安定化剤でないことを示している。実施例4:凍結乾燥形態でのメレジトースによる血漿第IX因子の安定化調製上記実験セクションの記載に従って血漿由来第IX因子pFIXを調製した。本実験は、pFIXに対するメレジトースの安定化効果を調べる。pFIX濃度は100IU/mlとした。本実験で調べた製剤の組成を表7に示す。溶液を1.5mlずつ実験室規模の凍結乾燥器で凍結乾燥した。凍結乾燥サンプルを5°C、25°Cおよび40°Cで最大6ヶ月保存して経時的タンパク質活性を評価した。注射用蒸留水1.5mlでサンプルを再構成し、上記実験セクションに記載の発色性アッセイで分析した。結果凍結乾燥ステップのタンパク質回収率は約100であった。安定性試験の結果を表8に示す。実施例4の結論:本実験は、驚くべきことに、メレジトースが凍結乾燥形態の第IX因子の安定化剤として良く機能することを示している。実施例5:凍結乾燥形態でのメレジトースによるHES化組換えG-CSFの安定化調製上記実験セクションの記載に従って組換えHES化G-CSFrHES-G-CSFを調製した。本実験では、凍結乾燥形態のrHES-G-CSFに対するメレジトースの安定化効果を、一般的に用いられている安定化剤トレハロースと比較した。rHES-G-CSF濃度は0.3mg/mlとし、調べた製剤の組成を表9に示す。溶液を1.5mlずつ実験室規模の凍結乾燥器で凍結乾燥した。40°Cで4週間保存後に、上記実験セクションに記載のResourceS法を用いてタンパク質回収率を測定した。結果を表10に要約する。実施例5の結論:本実験は、メレジトースが、rHES-G-CSFに対して、等モル濃度の一般的に用いられている安定化剤トレハロースよりも優れた安定化効果を有することを示している。実施例6:凍結乾燥ステップでのメレジトースによる血漿第IX因子の安定化調製上記実験セクションの記載に従って、血漿由来第IX因子pFIXを調製した。本実験では、四糖であるスタキオースと比べた凍結乾燥ステップでのpFIXに対するメレジトースの安定化効果を調べた。pFIX濃度は100IU/mlとした。本実験で調べた製剤の組成を表11に示す。溶液を1.5mlずつ実験室規模の凍結乾燥器で凍結乾燥した。上記実験セクションに記載の発色アッセイで、凍結乾燥ステップ前後にサンプルを分析した。結果凍結乾燥ステップのタンパク質回収率は、製剤6Aでは約100であったが、製剤6Bでは84であった。実施例6の結論:本実験は、凍結乾燥ステップにおける第IX因子の安定化剤としてメレジトースが良く機能することを示している。しかし、スタキオースは、凍結乾燥ステップで有意な活性の消失が生じていることから、安定化剤として好適な候補ではない。"