"不活化された水痘帯状疱疹ウイルスVZVであって、前記VZVの感染性が検出限界以下であり並びに前記不活化VZVが患者に投与されたときにVZVに対する免疫応答を誘発する前記ウイルス。治療上有効量の請求項1記載のVZV及び薬学的に許容可能な担体を含む医薬組成物。不活化VZVの感染性が0.040プラーク形成単位PFU‘s/mL以下である請求項2記載の医薬組成物。不活化VZVの感染性が0.010プラーク形成単位PFU‘s/mL以下である請求項3記載の医薬組成物。不活化VZVの感染性が0.002プラーク形成単位PFU‘s/mL以下である請求項4記載の医薬組成物。VZV株が岡株又は岡株の派生株である任意の請求項2~5記載の医薬組成物。組成物が凍結乾燥されている請求項6記載の医薬組成物。VZVがガンマ線照射によって不活化されている請求項7記載の医薬組成物。組成物によって誘発される免疫応答が同量の不活化されていないVZVを含む対照試料によって誘発される免疫応答と著しく異ならない請求項8記載の医薬組成物。不活化VZVによって誘発される免疫応答が対照試料によって誘発される免疫応答と25以下だけ異なる請求項9記載の医薬組成物。VZVの感染性が水痘帯状疱疹プラークアッセイによって定量される請求項2~5のいずれかに記載の医薬組成物。約5から50kGyのガンマ線を使用してVZVを含む試料にガンマ線照射することを含む、不活化水痘帯状疱疹ウイルスVZVを調製する方法。ガンマ線が試料を60Co線に暴露することによってガンマ線を試料に供給する請求項12記載の方法。VZVが岡株又は岡株の派生株である請求項13記載の方法。試料が照射される前に凍結乾燥される請求項13記載の方法。使用されるガンマ線照射線量が約25kGy以下である請求項14又は請求項15記載の方法。ワクチンが液体バルク製剤であり、使用されるガンマ線照射量が約5kGyから12.5kGyである請求項16記載の方法。使用されるガンマ線照射量が約10kGyから約25kGyである請求項15記載の方法。請求項12~18のいずれかに記載の方法によって産生される又は得られる不活化VZV。治療上有効量の請求項19記載の不活化VZV及び薬学的に許容可能な担体を含むワクチン。対象における帯状疱疹の治療のための方法であって、前記方法が、治療上有効量の不活化水痘帯状疱疹ウイルスVZV及び薬学的に許容可能な担体を含む医薬組成物を対象に投与することを含み、ここで前記VZVがガンマ線照射により不活化されている前記方法。医薬組成物の投与経路が皮下又は筋肉内である請求項21記載の方法。対象が50歳以上である請求項22記載の方法。対象が免疫不全状態である請求項22又は23記載の方法。対象が、血液系腫瘍罹患、免疫抑制療法受容、同種造血幹細胞被移植、臓器被移植、HIV感染、及び自己免疫疾患罹患から成る群から選択される少なくとも1容態を有する請求項24記載の方法。当該方法が、予め決められた時間を終過させて、1又は複数用量の当該医薬組成物を対象に投与することをさらに含む請求項22又は23記載の方法。水痘帯状疱疹プラークアッセイ水痘帯状疱疹ウイルスVZV調製品の感染性力価は、KrahらJ.VirolMethods199027:319-326によって記載された液体オーバーレイ法を使用して測定した。アッセイは以下の通り実施した。MRC-5ヒト二倍体胚線維芽細胞を、乳糖100mg/L、ネオマイシン50μg/mL、2mMのL-グルタミンを含むBMEイーグル基礎培地ハンクス液5mL容中600、000細胞にて60mmの組織培養プレートに播種し、それから5±1CO2の湿った雰囲気下、35±1°Cでインキュベートした。24~56時間インキュベートした後に、細胞は50~80の培養密度に達し、プラークアッセイに使用した。細胞増殖培地を吸引で除去し、PGS安定剤ショ糖及び加水分解ゼラチンを含むPBS等の適切な希釈剤で希釈したVZV溶液の一定分量100μLで細胞を感染させた。ウイルスは、5±1CO2の湿った雰囲気下、35±1°Cで1時間以上吸着させた。次に培養液は、5mL容の維持培地加熱不活化ウシ胎児血清2、ネオマイシン50μg/mL及び2mMのL-グルタミンを含む最小必須培地アール塩MEMでオーバーレイし、プラーク形成のために5±1CO2の湿った雰囲気下、35±1°Cで6~7日間のインキュベーションに戻した。次に培地はプレートから吸引し、プラークを0.2w/vクマシーブルーR-250エタノール溶液1酢酸を含むによる細胞染色によって可視化した。プラーク数は、3~5枚のレプリカプレートの平均であり、プラーク形成単位/mLPFU/mLを与えるために希釈係数試験ウイルスの相当する希釈度の逆数及び接種容量補正係数10、0.1mLから1mLに調整するためによって乗じた。不活化試料に対する偽陽性のPFU結果がないことを保証する必要が不可欠であることを考慮してここで偶発性の単層のひっかきのために又は細胞凝集隗の存在のために、プラークアッセイに使用した細胞単層中にプラーク様のスポットが現れるかもしれない、1の免疫染色法を開発しそれからプラークとして計数された増殖巣が実際にVZV感染した細胞の増殖巣VZVプラークであることを確認するために適用した。手短に言えば、標準プラークアッセイにおけるクマシーブルーによる染色の後に、目に見えるプラークを有する培養液を、0.05Tween20を含むPBSで希釈したポリクローナル抗VZV血清と共に35°Cで1時間インキュベートした。結合していない抗体を除去するために細胞を0.05Tween20を含むPBSにより洗浄し、結合した抗体は、ペルオキシダーゼ結合ヤギ抗ヒトIgG抗体及びペルオキシダーゼと反応して沈殿を生じるペルオキシダーゼ基質ジアミノベンジジン溶液を使用して検出した。褐色の沈殿がVZVを含有する増殖巣の周りに生じ、クマシーブルー染色を使用して観察された増殖巣以外にいかなる追加のプラークも検出されなかった。従って、本免疫染色法は、抗VZV一次血清、ペルオキシダーゼ結合抗一次種抗体及びペルオキシダーゼ基質の組み合せを使用して、不活化試料中の疑わしいプラークが実際に残存する感染性VZVを表しているかどうか確認する方法を提供する。VZV抗原の競合ELISA及びVZV抗原の直接結合吸着DirectBindingELISAアッセイVZV抗原を特性化し及び定量化するために、2の抗原アッセイフォーマットを使用した。VZV市販品中のVZV抗原を推定するために使用される試験法を模倣し、VZV抗原を検出するために単一のポリクローナル血清を利用する、1の競合ELISAを選抜研究に使用した。ガンマ線照射又は他の不活化処理の後のVZV抗原の反応性の特性評価をさらに提供するために、1の直接結合ELISAを開発し使用し、ここで試験試料はELISAのマイクロタイタープレートに直接吸着し、次にモノクローナル又はポリクローナル抗体を使用して検出した。VZV抗原定量のための競合ELISA手短に言えば本アッセイは、一定量のポリクローナル抗VZV血清と試験試料由来のVZV抗原とを溶液中のインキュベーションによって実施した。残存する遊離抗体抗原非結合は、ELISAのマイクロタイタープレートに固相化されたVZV標準抗原に結合させた。プレートに結合可能な抗体量は、試験試料中の抗原量に逆比例する。プレートに結合する抗体は、酵素結合抗ヒト抗体と、分光測定で定量される着色産物を提供する適切な基質との反応によって定量した。試験方法には次の段階が含まれた:1ELISAプレートをVZV感染又は非感染のMRC-5細胞由来の糖タンパク質gpsにより被覆し、プレートへの非特異的な抗体の吸着を減らすために1w/vウシ血清アルブミンでその上から被覆した。2試験VZV抗原をポリプロピレンのマイクロチューブ中のPGS安定剤で希釈した。抗原力価が既知のVZV抗原調製品を対照として含めた。試料は、2.6から0.9抗原単位/mLの範囲の抗原濃度を含むように、典型的には1:1.25倍系列希釈により希釈した。試験試料中の抗原測定用の標準曲線を作製するために、VZV標準品の希釈系列を使用した。32の倍数の所期の最終希釈まで、ヒト抗VZV血清をPGS安定剤で希釈した。4300μL容の希釈した抗原をポリプロピレンのマイクロチューブに分注し、300μLの希釈抗VZV血清と混合し、33~37°Cで15~30分間インキュベートした。抗VZV血清に希釈剤を加えてもの抗原不含を対照として使用した。5各血清-抗原混合液及び対照由来の一定分量100μLを、VZVgpを被覆した2のレプリカウェル及びMRC-5gpを被覆した2のウェルに添加した。6プレートは、プレート上に固相化されたgp抗原に遊離抗体溶液中の試験抗原と複合化していないを結合させるために、35~37°Cで15~30分間インキュベートした。7結合していない抗体を洗浄によって除去し、結合したヒト抗体を検出するためにアルカリフォスファターゼヤギ抗ヒトIgG抗体複合体溶液をウェルに分注した。835~37°C、15~30分間のインキュベーション後、非結合複合体を洗浄により除去した。結合複合体を基質p-ニトロフェニルリン酸と35~37°C、10~15分間のインキュベーションによって検出した。9発色405nmでのODは、3MのNaOH50μLの添加による基質反応停止後にマイクロプレート分光光度計を使用して定量した。試験の計算及びその解釈には以下の段階が含まれた:1VZV及びMRC-5gp被覆レプリカウェルに対するそれぞれの繰り返しのOD値を平均した。経験からMRC-5のODは、異なる試料及び希釈の間で矛盾しないことが知られていた。そこで、試験したセット全部に対するMRC-5gpのOD値を典型的に平均し、一次抗体抗VZV血清の非特異的結合を較正するために使用した。VZVに特異的な値ΔODを与えるために、それぞれのVZVgpの平均ODからMRV-5gpの平均ODを差し引いた。2抗原量測定用標準曲線の作製:既知の抗原濃度VZV抗原単位/mLに対して標準曲線のΔOD値をプロットした。データを適切なグラフィックプログラムに入力し、曲線の直線部を確認し、この線形曲線に対する直線当てはめ式y=abxを得た。3試験試料の抗原量の計算:a及びbに対する値は直線当てはめ式によって与えられ、yΔODは既知であるので、次に単位/mL抗原を表す未知の値xを計算することができ、元の未希釈の試験試料の抗原濃度を得るために試料の希釈度によって修正することができた。報告した抗原濃度は、標準曲線の直線部内でΔOD値を提供する最小希釈試料により得られたものである。VZV抗原の直接吸着ELISA手短に言えば本アッセイは、抗原を固相化するための96ウェルマイクロタイタープレート中での試験試料由来のVZV抗原の希釈液のインキュベーションを実施し、引き続いてモノクローナル又はポリクローナル抗VZV抗体と結合した抗原の検出を行った。結合した抗VZV抗体は、酵素結合抗指標種抗体と分光光度的に定量される着色産物を与える適切な基質との反応によって定量した。次に試料の希釈度に対するODの滴定曲線を比較した滴定曲線間の希釈系列の差異曲線シフトとして定量。試験方法には以下の段階が含まれた:1高結合ELISAプレートをPBSの2倍系列希釈で1:20から1:2560まで希釈した抗原ワクチン200μLで被覆した。プレートに蓋をして2~8°Cで一晩保管した。2段階1の液体を注ぎ出して、プレートを0.05のTween20を含むPBSで3回すすいだ。最後のすすぎ液を除去して希釈した抗体100μl/ウェルを添加した。プレートを35°Cで1時間インキュベートした。3段階2の液体を注ぎ出して、プレートを0.05のTween20を含むPBSで3回すすいだ。最後のすすぎ液を除去して希釈した複合体100μl/ウェルを添加した。プレートを35°Cで1時間インキュベートした。4段階3の液体を注ぎ出して、プレートを0.05のTween20を含むPBSで3回すすいだ。最後のすすぎ液を除去して基質無希釈を添加した。次にプレートを35°Cで30分間インキュベートした。5NaOHで反応を停止した。6405nmでプレートを読み取って光学密度ODを定量した。本試験に使用した抗体は以下の通りであった:EPP流行性肺炎ブタ血清及びgEBiodesigncatalogmab8612、gBChemiconcatalogC05102M,MilliporeCorp.,Billerica,MA、及びgHBiodesigncatC05104M及びVirusyscatVA033-100,VirusysCorp.,Taneytown,MDに対する精製モノクロール抗体。使用した複合体は、抗ヒトIgGBioSourcecatalogAHI0305,InvitrogenCorp.,Carlsbad,CA又はヤギ抗マウスIgGPiercecatalog31322,PierceBiotechnologyInc.,Rockford,ILのいずれかであった。アルカリフォスファターゼpNPPp-ニトロフェニルリン酸Sigmacatp7988,Sigma-AlcrichCo.,St.Louis,MO100mLを基質として使用した。VZVのIFNγELISPOTアッセイ手短に言えば、1から0.125までのVZV抗原単位/mLの試験抗原の系列希釈液を6名のドナー由来のPBMCと共に二つ組ウェル中でインキュベートした。インキュベーション後、VZV抗原に応答する細胞をそのインターフェロンガンマ産生能によって同定した。インターフェロンガンマ産生は、マイクロタイタープレート上に被覆したマウス抗インターフェロンガンマ、及び同等の酵素抗マウスIgG二次抗体複合体及び基質を使用し、インターフェロンガンマ産生細胞のまわりに沈殿した物質スポットの検知に導いて検出した。スポット形成細胞SFC:インターフェロンガンマ分泌を示すスポットを形成する細胞の数を自動ELISPOTリーダーで定量し、結果を106PBMC当たりのSFCとして表した。結果ガンマ線照射VZVの不活化動力学発明者らは以前、免疫不全患者用ワクチンとして使用するために、凍結乾燥したワクチンを不活化する一方法として熱処理を検討したが、当該方法はウイルス調製品の残存感染性という結果になることを見出した以下を参照。当該残存感染性は、不活化ワクチンの最適の特性ではないと考えられた。凍結乾燥ワクチンと比較して液体バルクワクチンの不活化がより広範囲に行われたが、バルクワクチンの熱処理は最適の製造工程を提供しないと判定された。そこで、熱処理よりもより広範な感染性の不活化より好ましい安全特性をもたらす方法と確認され得るか否かを見るために、60Co線ガンマ線照射を使用する水痘帯状疱疹ウイルス凍結乾燥ワクチン岡/メルクに対する代わりの不活化方法が研究された。当該評価の目標は、第一に60Co線照射によってより広範な感染性の不活化が達成され得るか否かを特定することであり、第二にガンマ線照射後に達せられる抗原特性が熱処理物質のそれと異なるかいなか及び臨床応用研究に許容可能か否かを特定することであった。VZV入りのバイアルを~1、2、3、4、5、6、7、8kGy2007又は0.45、1.35、及び2.7kGyで照射した。照射は、Gammacell登録商標60Co線照射器BestTheratronicsLtd.Corporation,Ottawa,Ontario,Canadaを使用して実施した。照射線量Gy当たりの各バイアルの残存PFU/mLは、MRC-5細胞における水痘帯状疱疹プラークアッセイを使用して定量した。照射線量に対してlogPFU/mLをプロットしたところ、データポイントは不活化の線形回帰を示した図1。動力学的検討後に発明者らは、不活化範囲に関する拡張した確証を可能とするためにより大きな総容積を検討することによって、60Co線により12kGyに照射した100mLの不活化VZVワクチン凍結乾燥品の不活化を試験した。試料100mLにプラークは検出されなかった。VZVバルクを照射するためにさらに60Co線を使用した。バルクを解凍して、0.5、1、2、3、4、5、6kGyでの照射のためにPETGボトルに分取した図2。残存感染性に関しMRC-5細胞を使用する水痘帯状疱疹プラークアッセイで照射バルクを分析した。照射バルク6kGyの試料100mLにプラークは検出されなかった。照射時間に対してlogpfu/mL力価をプロットすることによって線形の不活化動力学が観察された。VZVのIFNγELISPOTアッセイによる免疫原性評価異なる不活化方法の免疫原性に関する影響を評価するために、実施例3記載の通り6名のドナーの末梢血単核球PBMC試料を使用して、VZVのIFNγELISPOTアッセイを実施した。本研究は、VZVが異なる条件下で不活化された後にIFN‐γ応答が減少するか否かを判定するために行った。2のガンマ線照射VZVバルク調製品と共に、5の熱処理VZVバルク調製品を試験した。熱処理VZV調製品は、以下の条件下で処理された試料から成った:140°C、24時間、245°C、3.5時間、345°C、4.5時間、456°C、30分間、及び556°C、90分間。ガンマ線照射試料は、5.92kGyで3又は4時間、ガンマ線照射したVZVバルクから成った。また比較のために、不活化試料を作製するために上で使用したのと同じバルク調製品由来の生未処理のVZV試料も試験した。また紫外線処理によって不活化したVZVのロットも、PHA陽性対照及び培地陰性対照と共にアッセイ行程の対照としてと同様にELISPOTの抗原VZVロット番号96.07として含めた。全ての抗原は、1:40から1:320にわたる2倍系列希釈で評価した。1アッセイ行程は、VZV応答レベルの範囲を代表するように選択された6名のPMBC試料を試験して実施した。VZVスポット数SFC/106PBMCの結果を図3A~Fに示す。試験したドナーの間で未処理の抗原調製品と比較して不活化した抗原調製品に対する、VZV応答における差異を示唆する証拠は認められなかった。また、個々の希釈レベルでの調製処理と応答の間の顕著な相互作用に関する証拠も認められなかった。生VZV調製品と比較して、元のVZVロット番号96.07を含む8の不活化VZV調製品に対するELISOT数の差異は、生VZV調製品の1.15倍低いもの56°C、90分間から1.14倍高いもの40°C、24時間;ロット番号96.07まで変動する。生VZV調製品と比較して8の不活化VZV調製品のいずれも、試験したドナーで統計的に有意差のある低いELISPOT数を得るものはなかった。従って、ヒトELISPOT試験は、異なる方法バルクの40°C、45°C、56°C熱処理又はガンマ線照射によって不活化されたVZV調製品に関し、ドナーパネル由来のPBMCを使用する応答において顕著な差異を示さなかった。不活化VZVワクチンの電子顕微鏡分析熱処理及びガンマ線照射バルク及び凍結乾燥ワクチンのEM分析は、不活化VZV調製品への不活化の影響の追加の特性化を提供するために実施した。選択した分析方法は、EM分析の間ウイルスのインテグリティを最良に保つために、ガラス状氷中でのクライオ透過電子顕微鏡法であった。クライオTEMは、NanoImagingServices,IncSanDiego,CAによって実施した。不活化VZVC試料は、粒子のインテグリティ/外観への不活化の影響を評価するためにpEM分析用に調製した。凍結乾燥試料は、滅菌水700μLで再水和して、画像撮影の前にそれ以上希釈しなかった。試料は、400メッシュ銅グリッド上の2.0x0.5μmC-Flat穴開カーボンフィルムProtochips,Inc.,Raleigh,NC上に支持されたガラス状氷の薄膜中に保持した。グリッドは、使用直前にSolarusプラズマ洗浄装置の中で洗浄した10秒間、25O2、75Ar。全ての試料は、FEIのVitrobot登録商標4°C、RH95を使用して、試料懸濁液の1滴~3μLをプラズマ洗浄したグリッドへ載せ、ろ紙でブロッティングして、液体エタン中で即時ガラス化処理することによって調製した。グリッドは、画像撮影のために電子顕微鏡に移すまで液体窒素下に貯蔵した。電子顕微鏡法は、FEIのTecnai登録商標T12電子顕微鏡FEICompany,Hillsboro,ORを使用し、FEIのEagle登録商標4Kx4KCCDカメラFEICompanyを装備して120KeVで作動して実施した。各グリッドの画像は、検体の全体的な分布を評価するために複数のスケールで撮影した。低倍率で画像撮影のための標的領域を確認した後に、1対の高倍率画像を撮影した。試料は、NanoImagingSystemsinstrument倍率21K~52Kを使用して評価した。未処理凍結乾燥VZV、56°C、77日間の熱処理凍結乾燥VZV、及び60Co線源を使用して25又は50kGyで照射した凍結乾燥VZVを比較した。クライオEMの結果は、電子密度の減少おそらくウイルスDNAの分解を反映しているを伴う高ガンマ線照射量での潜在的な粒子効果を示すが、凍結乾燥試料に対する総体的な粒子及びタンパク質の外観への著しい効果は示さない。しかしながら、凍結乾燥不活化試料が電子密度の減少を示したので、凍結乾燥はこれらの変化から保護するのかもしれないが、粒子は高線量において無傷のままであった。図4参照抗原反応性の定量VZV抗原ELISAアッセイは、熱若しくはガンマ線照射不活化バルク試料又はガンマ線照射凍結乾燥VZVの抗原Ag含量を定量するために、検出抗体としてヒトポリクローナル血清及びVZVのgB、gH、gEに対するモノクローナル抗体mAbを使用して実施した。ガンマ線照射バルク又は凍結乾燥試料は抗原反応性において変化を示さなかった。しかし56°C、90分間で熱処理した試料は、ポリクローナル抗体、gE及びgHモノクローナル抗体との抗原反応性において変化を示した。最終滅菌のための暴露限度として50kGyの使用を支持するために、VZVバルク試料を25kGy及び50kGyでさらにガンマ線照射した。これらの試料は、ポリクローナル抗VZV血清及びgpE、gB、及びgHのmAbに対し直接抗原結合吸着ELISAアッセイで試験した。凍結乾燥VZVワクチンの滅菌条件25~50kGyでのガンマ線照射は、ポリクローナル血清又はgE若しくはgBのモノクローナル抗体とのELISAの抗原反応性に検出可能な悪影響を及ぼさなかった。gHのmAbを使用した結果は、高いバックグラウンド染色のために確定的でなかった。当該モノクローナル抗体gE又はgBに対する抗体ではなくに伴うバックグランド信号の増加は、また他のELISAプレートMaxisorpの使用の際にも観察された。マウス免疫原性マウス免疫原性研究は、不活化のための種々の方法を使用して作製した一組の不活化VZViVZV調製品を評価するために実施した。当該研究から作製された血清試料は、異なる不活化VZV製剤によって作製されたVZVに対する抗体の相対力価を定量するために、VZVのELISAアッセイで評価した。異なる2のVZVバルク調製品を作製し評価した。1VZVバルク、熱処理56°C、90分間、及び2VZVバルク、ガンマ線照射5、924.7グレイGy、3時間。また異なる2のVZV凍結乾燥ワクチン調製品も作製し評価した。1VZV凍結乾燥ワクチン、熱処理56°C、50日間、及び2VZV凍結乾燥ワクチン、ガンマ線照射25、000Gy。生未処理VZVバルク及び生未処理VZV凍結乾燥ワクチンを、iVZVバルク調製品との比較のために評価した。BALB/cマウス各群n=16を4.5VZV抗原単位U/マウス9U/mLにより、0、14及び29日目に腹腔内でi.p.免疫した。瀉血血清を-1前-瀉血及び13、28及び43日目に採取した。28日の血清投与2の14日は、IgG応答に関してVZVのELISAで評価した。調整VZV力価VZV力価マイナスMRC-5力価を図5に示す。MRC-5及びVZVに対する力価の足きり値titercut-offを決定するために、28日からの相当する群に関して前瀉血の血清を試験した。ELISAプレートのウェルは、UV処理VZV又はMRC-5抽出液で被覆し、次にマウス血清中のVZVに特異的な抗体の相対量を定量するために試験マウス血清の希釈液とインキュベートした。結果は熱処理バルクのIgG力価が未処理バルクと比較して、平均して5.57倍低く95CI信頼区間=3.45、8.99並びにガンマ線照射バルクのIgG力価が平均して2.43倍低かった95CI=1.51、3.93ことを示す。熱処理凍結乾燥力価は、未処理凍結乾燥ウイルスよりも平均して1.38倍低く95CI=1.00、1.90並びにガンマ線照射凍結乾燥力価は平均して1.66倍低かった95CI=1.22、2.26。ガンマ線照射バルクの抗体力価は、熱処理バルクによる免疫化後に得られた力価よりも平均して2.29倍高かった95CI=1.54、3.41。ガンマ線照射凍結乾燥ウイルスの抗体力価は、熱処理凍結乾燥調製品による免疫化後に得られた力価よりも平均して1.20倍低かった95CI=0.89、1.61。全体のデータは、本モデルにおいて免疫原性へ最小の影響しか有さないゆえに、凍結乾燥ウイルスのガンマ線照射を支持している。結果は抗体IgG応答が未処理バルクと比較して、不活化調製品の2用量による免疫化後にマウスにおいて減少したことを示している。50~59歳の健康な患者への不活化VZVワクチン投与ワクチンの安全性、耐容性、及び免疫原性を評価するために計画された、ランダム化された、二重盲検の、2部構成の、多施設治験において、ガンマ線照射VZVワクチンを50ないし59歳の健康な成人に投与した。本治験の目的は、ガンマ線照射又は熱処理方法によって不活化されたワクチンロットの安全性、耐容性、及び免疫原性を研究することであった。16ないし25kGyで不活化されたガンマ線照射VZVワクチンAn=65、熱処理VZVワクチンn=63、又はプラセボn=33のいずれかを4用量の投与計画で投与するために、総計161名の50ないし59歳の健康な個体を2:2:1にランダム化した。各用量を約30日の間隔で投与した。熱処理ワクチン及びガンマ線放射ワクチンAは、別個のバルクロット由来であったが同一の抗原濃度を標的にすることによって制御した。第一の仮説は、16ないし25kGyレベルで不活化されたガンマ線照射VZVワクチンAが、投与4の28日後にgpELISAによって測定されたときに、許容可能なVZV特異的免疫応答を誘発するだろうということだった。第二の仮説は、熱処理VZVワクチンが、投与4の28日後にgpELISAによって測定されたときに、許容可能なVZV特異的免疫応答を誘発するだろうということだった。成功の統計的基準は、熱処理VZVワクチンのレシピエントにおける幾何平均上昇倍数GMFR、抗体変化比に関する両側95信頼区間の下限が>1.0であることに相当する。本研究におけるワクチンのレシピエント間の免疫原性の結果を図6に提供する。結果は、第一及び第二の仮説の試験に関する成功基準が満たされたこと、すなわちガンマ線照射VZVワクチンA及び熱処理VZVワクチンが健康な個体に投与されたときに免疫原性であったことを示している。双方のワクチン群は、プラセボ群と同様の安全性プロファイルを有していた。50ないし59歳の健康なボランティアへの異なるガンマ線照射レベルで不活化したVZVワクチンロットの投与第二の研究は、より広範囲なガンマ線照射により不活化されたワクチンロットに関する臨床データを提供するために実施した。本研究において、16ないし25kGyで照射されたガンマ線照射VZVワクチンBn=64、又は25ないし50kGyで照射されたガンマ線照射VZVワクチンCn=65のいずれかを、各用量を約30日の間隔で投与する4用量の投与計画に従って投与するために、総計129名の50ないし59歳の健康な個体を1:1にランダム化した。本研究で利用したワクチンロットBCは、同一のVZV抗原含量を有する同一のバルクロット及び同一の充填/製剤に由来するが、異なるガンマ線照射レベルで不活化した。本研究の第一の仮説は、25ないし50kGyレベルで不活化されたガンマ線照射VZVワクチンCが、投与4の28日後にgpELISAによって測定されたときに許容可能なVZV特異的免疫反応を誘発するだろうということであった。第二の仮説は、16ないし25kGyレベルで不活化され同時に25ないし50kGyで不活化されたワクチンと抗原含量を一致されたガンマ線照射VZVワクチンBが、投与4の28日後にgpELISAによって測定されたときに許容可能なVZV特異的免疫応答を誘発するだろうということであった。各仮説の成功の統計的基準は、ガンマ線照射ワクチンのレシピエントにおけるGMFRに関する両側95信頼区間の下限が>1.0であることに相当する。本研究におけるワクチンのレシピエント間の免疫原性の結果を図7に提供する。本研究の結果は、主要な仮説の試験に関する成功基準が満たされたこと、すなわちガンマ線照射VZVワクチンBガンマ線照射16~25kGy及びガンマ線照射VZVワクチンCガンマ線照射25~50kGyが健康な個体に投与されたときに免疫原性であったことを示している。ワクチン群の双方とも同様の安全性プロファイルを有していた。また本研究の結果は、ベースラインの幾何平均力価GMTの不均衡群BのベースラインのGMTが~313であり群CのベースラインのGMTが~429であったが存在したことも示す。上昇倍数の差異は著しくなかったとはいえ、ベースライン力価の差異が試験中に観察された上昇倍数の差異を説明するかもしれない。さらに分析データは、ガンマ線照射量が高いほど>25kGy結果として抗原の分解が高くなることを示している。"