"下記式Iの化合物、またはその塩、またはその単離された立体異性体、または、メチルアミド官能基が脱メチル化され、または1以上の尿素窒素がヒドロキシ基によって置換され、またはピリジン窒素がN-オキシド型である式Iの化合物と、そして生理学的に許容し得る担体を含んでいる、raf,VEGFR,PDGFR,p38および/またはflt-3キナーゼが含まれる一以上の信号形質導入経路が含まれる一以上のタンパクキナーゼによって調節されるヒトまたは他の哺乳類における病気の処置のための薬剤組成物。式Iの化合物の塩が、a塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、トリフロロメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸トシレート塩、1-ナフタレンスルホン酸、2-ナフタレンスルホン酸、酢酸、トリフロロ酢酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、乳酸、シュウ酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、安息香酸、サリチル酸、フェニル酢酸、またはマンデル酸である有機酸または無機酸の塩基塩;またはbアルカリ金属カチオン、アルカリ土類金属カチオン、アンモニウムカチオン、脂肪族置換アンモニウムカチオン、または芳香族置換アンモニウムカチオンを含有する有機または無機塩基の酸塩;である請求項1の薬剤組成物塩。式Iの化合物の塩が、N-4-クロロ-3-トリフルオロメチルフェニル-N’-2-フルオロ-4-2-N-メチルカルバモイル-4-ピリジルオキシフェニル尿素の塩酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、またはメタンスルホン酸塩である請求項1の薬剤組成物。4-{4-3-4-クロロ-3-トリフロロメチルフェニルウレイド-3-フロロフェノキシ}ピリジン-2-カルボン酸アミド;4-{4-3-4-クロロ-3-トリフロロメチルフェニルウレイド-3-フロロフェノキシ}-1-ヒドロキシピリジン-2-カルボン酸メチルアミド;または4-{4-3-4-クロロ-3-トリフロロメチルフェニルウレイド-3-フロロフェノキシ}-1-ヒドロキシピリジン-2-カルボン酸アミド;から選ばれた化合物を含む請求項1の薬剤組成物。本明細書において使用した略号は以下のとおり。HPLC高速液体クロマトグラフィーMS質量スペクトル分析ESエレクトロスプレーDMSOジメチルスルホキシドNMR核磁気共鳴スペクトル分析TLC薄層クロマトグラフィーrt室温4-アミノ-3-フルオロフェノールの製造アルゴンでパージした乾燥フラスコへ、10Pd/C80mgと、次いで酢酸エチル40ml中に溶液として3-フルオロ-2-ニトロフェノール1.2g,7.64mmolを加えた。混合物をH2雰囲気下4時間かきまぜた。混合物をセライトのパッドを通して濾過し、溶剤を減圧下蒸発し、黄褐色固体として所望の生成物を得た940mg,7.39mmol,収率97;1H-NMRDMSO-d64.38s,2H,6.29-6.35m,1H,6.41dd,J=2.5,12.7,1H,6.52-6.62m,1H,8.76s,1H4-4-アミノ-3-フルオロフェノキシピリジン-2-カルボン酸メチルアミドの製造0°Cへ冷却したN,N-ジメチルアセタミド6ml中の4-アミノ-3-フルオロフェノール500mg,3.9mmolの溶液をカリウムt-ブトキサイド441mg,3.9mmolと加熱し、褐色溶液を0°Cで25分かきまぜた。この混合物へジメチルアセタミド4ml中の溶液として4-クロロ-N-メチル-2-ピリジンカルボキサマイド516mg,3.0mmolを加えた。反応混合物を100°Cで16時間加熱した。混合物を室温に冷やし、水で反応停止し、そして酢酸エチル4×40mlで抽出した。合併した有機層を水2×30mlで洗い、乾燥MgSO4し、蒸発して赤褐色オイルを得た。1H-NMRが残ったジメチルアセタミドの存在を示したので、このオイルをジエチルエーテル50mlに取り、食塩水5×30mlでさらに洗った。有機層を乾燥MgSO4し、濃縮して赤褐色固体として所望の生成物950mgを得た。このものは精製することなく次の工程に使用された。4-クロロ-N-メチル-2-ピリジンカルボキサマイドの製造法は、Bankstonetal,Org.Pro.Res,Dev.2002,66,778-781に記載されている。実施例1:4-4-3-4-クロロ-3-トリフルオロメチルフェニル-ウレイド-3-フルオロフェノキシピリジン-2-カルボン酸メチルアミドの製造トルエン3ml中の4-4-アミノ-3-フルオロフェノキシピリジン-2-カルボン酸メチルアミド177mg,0.68mmolの溶液を4-クロロ-3-トリフルオロメチルフェニルイソシアネート150mg,0.68mmolへ加えた。混合物を室温で72時間かきまぜた。反応混合物を減圧濃縮し、残渣をジエチルエーテルとこねた。生成した固体を濾過により集め、4時間減圧下乾燥して題記化合物155mg,0.32mmol,収率47を得た。1H-NMRDMSO-d62.76d,J=4.9,3H,7.03-7.08m,1H,7.16dd,J=2.6,5.6,1H,7.32dd,J=2.7,11.6,1H,7.39d,J=2.5,1H,7.60s,2H,8.07-8.18m,2H,8.50d,J=5.7,1H,8.72s,1H,8.74-8.80m,1H,9.50s,1H;MSHPLC/ES483.06m/z=M1実施例2:4-4-3-4-クロロ-3-トリフルオロメチルフェニル-ウレイド-3-フルオロフェノキシピリジン-2-カルボン酸メチルアミド塩酸塩の製造遊離塩基として実施例1の化合物2.0gを無水テトラヒドロフラン15mlに溶かし、そして4MHCl/ジオキサン過剰を加えた。次に溶液を真空濃縮し、灰白色固体2.32gを得た。この粗製塩を熱エタノール125mlに溶かし、活性炭を加えて15分間還流加熱した。熱い懸濁液をセライトパッドを通して濾過し、室温へ冷却した。フラスコを一夜フリーザー中に入れた。結晶性固体を吸引濾過し、エタノール、次にヘキサンで洗い風乾した。母液は濃縮し、一夜結晶化フリーザー中を許容した。固体の2回目のクロップを集め、1回目のクロップと合併した。無色の塩を2日間60°Cで真空オーブン中で乾燥した。得られた塩酸塩の収量は1.72g79であった。m.p.215°C元素分析:計算値実施値C48.5748.68H3.112.76N10.7910.60Cl13.6513.63F14.6314.88実施例3:4-4-3-4-クロロ-3-トリフルオロメチルフェニル-ウレイド-3-フルオロピリジン-2-カルボン酸メチルアミドメシレートの製造遊離塩基として実施例1の化合物2.25gをエタノール100mlに溶かし、メタンスルホン酸のストック溶液過剰を加えた。溶液を次に減圧濃縮し、黄色オイルを得た。エタノールを加え、濃縮を繰り返した灰白色固体2.41gを得た。粗製塩を熱エタノール~125mlに溶かし、徐々に冷却化して結晶化させた。室温へ達した後、フラスコを一夜フリーザー中へ置いた。無色結晶性物質を吸引濾過により集め、フィルターケーキをエタノール、次にヘキサンで洗い風乾して物質2.05gを得た。これを一夜60°Cで真空オーブン中で乾燥した。m.p.231°C元素分析:計算値実施値C45.6445.34H3.313.08N9.689.44Cl6.126.08F13.1313.42S5.545.59実施例4:4-4-3-4-クロロ-3-トリフルオロメチルフェニル-ウレイド-3-フルオロピリジン-2-カルボン酸メチルアミドフェニルスルホン酸塩の製造遊離塩基として実施例1の化合物2.25gをエタノール50mlに懸濁し、エタノール50ml中のベンゼンスルホン酸0.737gを加えた。混合物を激しくかきまぜながら加熱した。すべての固体が溶解し、赤色溶液を与えた。この溶液を室温へ冷やし、フラスコを引掻いた。結晶生成を達成するのは困難で、いくらかの種晶が発見され、これを溶液へ加え、一夜フリーザー中へ置いた。フラスコ中に灰褐色の固体が生成し、この物質を砕き、そして吸引濾過により集めた。固体をエタノール、次にヘキサンで洗い、風乾した。秤量した生成物は2.06gであり、収率は69であった。m.p.213°C元素分析:計算値実施値C50.5950.24H3.303.50N8.748.54Cl5.535.63F11.8611.79S5.005.16実施例5:c-rafraf-1生化学アッセイc-RAF生化学アッセイは、Lckキナーゼによって活性化ホスホリル化したc-Raf酵素で実施された。Lck-活性化c-RafLck-Rafは、Sf9昆虫細胞中にポリヘドリンプロモーターのコントロール下にGST-c-Rafアミノ酸302からアミノ酸684までとLck全長を発現するバキュロウイルスで同時感染させることによって生産した。両方のバキュロウイルスは2.5の感染倍数で使用し、そして細胞は感染後48時間で収穫した。MEK-1タンパクは、Sf9昆虫細胞中に感染倍数5においてGST-MEK-1全長融合タンパクを発現するバキュロウイルスで細胞を感染させ、そして細胞を感染48時間後に収穫することによって生産した。GST-C-Raf302-648およびGST-MEK-1のために同様な精製操作が使用された。形質転換した細胞は、10mMリン酸ナトリウム、140mM塩化ナトリウムpH7.3,0.5トリトンX-100、およびプロテアーゼ阻害剤カクテルを含んでいるバッファー中mLあたり湿った細胞バイオマス100mg懸濁した。細胞をポリトロンホモナイザーで破壊し、30,000gで30分遠心した。30,000g上清をGSH-セファローズへ適用した。樹脂を50mgトリス,pH8.0,150mMNaClおよび0.01トリトンX-100を含んでいるバッファーで洗った。GST-標識タンパクをグルタチオン100mM、50mMトリス、pH8.0、150mMNaClおよび0.01トリトンX-100を含む溶液で溶出した。精製したタンパクは、20mMトリス、pH7.5、150mMNaClおよび20グリセロールを含むバッファー中へ透析した。テスト化合物は3倍希釈液を用いて典型的には50μMないし20nMの範囲ストック濃度へ1μMないし0.4nMのアッセイ範囲の最終濃度DMSO中に段階希釈した。c-Raf生化学アッセイは96ウエルコスターポリプロピレンプレートコスタ336中で放射活性フィルターマットアッセイとして行われた。プレートへ50mMHEPES,pH7.5、70mMNaCl、80ngのLck/c-Rafおよび1μgMEK-1を含む溶液75μLを負荷した。次に段階希釈した個々の化合物の2μLをATP添加の前に反応へ加えた。反応は5μMATPおよび0.3uCi33P-ATPを含む25μLATP溶液によって開始された。プレートはシールされ、32°Cで1時間インキュベートされた。反応は4リン酸50μLの添加により停止され、そしてWallacTomtecハーベスターを用いてP30フィルターマットパーキンエルマー上に収穫された。フィルターマットは最初1リン酸で、2番目に脱イオン水で洗った。フィルターをマイクロウェーブで乾燥し、シンチレーション液に浸し、そしてWallac1205ベータープレートカウンターWallacInc.,Atlanta,GA,U.S.A.中で読取られた。結果はパーセント阻害として表される。阻害=100-Tib/Ti×100ここでTib=阻害剤ありのカウント/分-バックグラントTi=阻害剤なしのカウント/分-バックグラント本発明化合物は、このアッセイにおいてrafキナーゼの強力な阻害を示した。実施例6:p38キナーゼインビトロアッセイ精製し、His-標識したp38α2E.Coli中に発現をMMK-6により高比活性へインビトロで活性化した。マイクロタイターフォーマットを使用し、すべての反応はアッセイパッファー25mMHEPES7.4,20mMMgCl2,150mMNaCl中に活性化p38α2の0.05μg/ウエルとミエリン塩基性タンパク10μg/ウエルを得るように希釈された試薬で100μL体積において実施された。テスト化合物水中10DMSO溶液5μLが調製され、そして5nMから2.5μMまでの最終濃度をカバーするように希釈された。キナーゼアッセイはウエルあたりコールドATP10μMおよびγ-33PATP0.2μCi200-400dpm/pmolATP最終濃度を与えるようにATPカクテル25μLの添加によって開始された。プレートを32°Cにおいて35分間インキュベートし、反応を1NHCl水溶液の7μLで停止した。サンプルはTomTec1295ハーベスターWallac,Inc.を用いてP30フィルターマットWallac,Inc.上に収穫され、そしてLKB1205ベータプレート液体シンチレーションカウンターWallac,Inc.中でカウントされた。陰性対照は基質プラスATP単独を含んでいた。SW1353細胞アッセイ:細胞ヒトコンドロ肉腫が96ウエルプレート中に接種1000細胞/100μLDMEM10FCS/ウエルされ、そして一夜インキュベートされた。培地置換後、細胞はテスト化合物へ37°Cにおいて1時間曝露され、その時ヒトIL-11ng/ml,Endogen,Woburn,WAと、組換えヒトTNFα10ng/mlが添加された。培養物は37°Cで48時間インキュベートされ、次に上清IL-6値がELISAによって決定される。本発明の化合物はp38キナーゼの有意な阻害を示す。実施例7:Bio-PLexPhospho-ERK1/2イムノアッセイレーザーフローサイトメトリープラットフォームを使用する96-ウエルホスホ-ERKpERKイムノアッセイは、細胞ライン中のベーサルpERKの阻害を測定するために確立された。MDA-MB-231細胞を完全成育培地中、96-ウエルマイクロタイタープレート中で50,000細胞/ウエルにおいてプレートした。ベーサルpERK1/2阻害に対するテスト化合物の効果のため、プレート翌日にMDA-MB-231細胞を0.1BSAを有するDMEMへ移し、0.1DMSO中3μMないし12nMの最終濃度へ1:3希釈した。細胞をテスト化合物と2時間インキュベートし、洗浄し、Bio-Plex全細胞溶解バッファーAに溶解した。サンプルはバッファーB1:1v/vで希釈し、アッセイプレートへ直接移すか、または処理するまで-80°Cで凍結した。希釈したMDA-MB-231溶解物の50μLを抗ERK1/2抗体を接合した5ミクロンBio-Plexビーズ約2000と一夜シエカー上で室温でインキュベートした。翌日、ビオチニル化ホスホERK1/2サンドイッチイノムアッセイを実施し、ビーズを各インキュベーションの間3回洗い、次に現像剤としてPE-ストレプトアビジン50μLを使用した。pERK1/2の相対的蛍光単位が高感度において25ビーズをBio-Plexフローセルプローブでカウントすることによって検出された。IC50が最大として未処理細胞をそしてバックグランドとして細胞なしビーズのみを用いて計算された。本発明化合物はこのアッセイにおいて有意な阻害を示す。実施例8:Flk-1ネズミVEGFR-2生化学アッセイこのアッセイは、TR-FRETフォーマット中の96ウエルオパックプレートCostar3915中で実施された。反応条件は以下のとおり。10μMATP,25nMポリGT-ビオチン、2nMEn標識ホスホ-TryAb,10nMAPC,7nMFlk-1キナーゼドメイン、1DMSO,30mMHEPESpH7.5,10mMMgCl2,0.1mMEDTA,0.015BRU,0.1mg/mlBSA,0.1メルカプトエタノール。反応は酵素の添加により開始される。各ウエル中の最終容積は100μLである。プレートは、反応開始後約1.5ないし2.0時間においてパーキンエルマービクターVマルチラベルカウンター上で615および665nmの両方において読まれる。信号は各ウエルあたり比:665nm/615nm10000として計算される。本発明化合物は有意なVEGFR-2キナーゼ阻害を示す。実施例9:ネズミPDGFRFRET生化学アッセイこのアッセイは96ウエルブラックプレートCostar3915中にフォーマット化された。以下の試薬およびそれらのソースが使用された。ユーロピウム標識抗ホスフォチロシン抗体pY20およびストレプトアビジン-APC;ポリGT-ビオチン、およびDRT中のマウスPDGFR。反応条件は以下のとおり。1nMマウスPDGFRがアッセイバッファー50mMHEPESpH7.5,10mMMgCl2,0.1mMEDTA,0.015BRIJ35,0.1mg/mLBSA,0.1メルカプトエタノール中、20μMATP,7nMポリGT-ビオチン、1nMpY20抗体、5nMストレプトアビジン-APCおよび1DMSOと混合される。各ウエル中の最終反応容積は100μLである。90分後10μL/ウエルの5μMスタウロスポリンを添加して反応を停止する。反応停止約1時間後、プレートはPerkinElmerVictorVマルチラベルカウンター上615および665nmにおいて読取られる。信号は各ウエルについて比:665nm/615nm×1000として計算される。本発明化合物はPDGFRキナーゼの有意な阻害を示す。PDGFR-βのためのIC50の発生のため、酵素開始前に化合物が加えられた。50倍ストックプレートは50DMSO/50dH2O溶液中段階的に1:3希釈した化合物でつくられた。ストックの2μL添加は1DMSO中10μMないし4.56nMの範囲の化合物最終濃度を与えた。データは阻害として表わされた。阻害=100-阻害剤あり信号-バックグランド/阻害なしの信号-パックグランド×100実施例10:MDA-ME231増殖アッセイヒト乳癌細胞MDAMB-231,NCIが10熱不活性化FBSを補給した標準成長培地DMEM中で加湿インキュベーター中5CO2vol/vol中37°Cで培養された。細胞は96ウエル培養皿中90μL成長培地中3000細胞/ウエルの密度にプレートされた。TohCTG値を決定するため、プレート24時間後CellTiter-Gloルミネセント試薬の100μLが各ウエルへ加えられ、室温で30分インキュベートされた。WallacVictorII機器上で発光が記録された。CellTiter-Glo試薬は細胞溶解をもたらし、存在する細胞の数に正比例する、存在するATPの量に比例するルミネセント信号を発生した。阻害=1-T72htest-Toh/T72hctr1-Toh×100ここで、T72htest=テスト化合物の存在下72時間におけるATP依存ルミネセンスT72hctr1=テスト化合物なしの72時間におけるATP依存ルミネセンスToh=時間ゼロにおけるATP依存ルミネセンス本発明化合物はこのアッセイを用いて増殖の有意な阻害を示す。実施例11:AoSMC細胞中のpPDGFRサンドイッチELISA100KP3-P6大動脈SMCが標準的細胞技術を用いて12ウエルクラスターの各ウエルへSGM-2の100μL/ウエルにおいてプレートされた。翌日細胞を100μLD-PBSGibcoで1回リンスし、0.1BSAシグマ、CatA9576で500μLSBM平滑筋細胞ベーサル培地中で一夜餓えさせた。化合物はDMSO中に10μMないし1nMまで10倍希釈ステップにおいて希釈された。流し中で急速に反転することによって古い培地を除去し、次に各希釈液の100μLを細胞の対応するウエルへ37°Cにおいて1時間加えた。次に細胞を10ng/mLのPDGFBBリガンドで37°Cにおいて7分間刺激した。培地を傾斜し、プロテアーゼ阻害剤錠完全、EDTAなしと0.2mMNaバナデートを含む等張溶解バッファーを加えた。細胞は冷室内で-4°Cにおいて15分間溶解される。溶解物をエッペンドルフ管へ入れ、それへアガロース接合抗PDGFR-β抗体15μLを加えSantaCruz,sc-339、4°Cで一夜インキュベートする。翌日ビーズをPBSの50ボリュームで3回リンスし、1×LDSサンプルバッファーInvitrogen中5分間沸騰する。サンプルを3-8勾配トリス-アセテートゲルInvitrogenを通し、ニトロセルロース上へ移した。膜は、ブロッキングバッファー1:1000希釈中抗ホスホPDGFR-β中1時間インキュベートする前に、1BSA/TBS-T中で1時間ブロックした。TBS-T中で3回洗った後、膜をヤギ抗ウサギHRPIgGAmersham,1:25000希釈中で1時間インキュベートした。ECL基質の添加前にもう3回の洗浄が続いた。膜をハイパーフィルムECLへ露出した。その後膜を剥がし、トータルPDGFR-βについて抗PDGFR-βSantaCruzで再プローブした。表1は、p38キナーゼ:PDGFRキナーゼ、およびVEGFR2キナーゼに対するインビトロキナーゼ生化学アッセイの結果を示す。これら3キナーゼ標的は、血管形成へ導き、そして腫瘍組織へ血液供給を提供する、ストローマ活性化および内皮細胞増殖にすべて含まれる。表1mPDGFRmVEGFR2p38IC50,nMIC50,nMIC50,nM実施例1835.524表2は、irafキナーゼ活性の機械的読取りである、MDA-MB231細胞中のpERKの阻害、およびiirafキナーゼ活性の機能的アッセイである、MAD-MB231細胞中の増殖アッセイの、rafキナーゼ活性のための二つの細胞アッセイの結果を示す。加えて、表2は、PDGFRキナーゼ阻害の機械的読取りである、大動脈平滑筋細胞中のPDGFR-βのPDGFR誘導ホスフォリル化の結果を示す。表2細胞中のpERK増殖pPDGFRMDA-MB231MDA-MB231AoSMCIC50,nMIC50,nMIC50,nM実施例12260043.5全体として、本発明の化合物は血管形成および腫瘍細胞増殖の阻害のユニークな組合せを提供する。それらはまた、すべて骨粗しょう症、炎症病および癌を含む高増殖病の処置のための関心ある分子標的である、raf,p38,PDGFRおよびVEGFR-2のようないくつかのキーキナーゼ標的に対する改良された阻害プロファイルを提供する。当業者は、以上の情報および当分野で利用可能な情報を使用して本発明をその全範囲において利用とできるものと信じられる。当業者には、ここに述べた本発明の精神および範囲から逸脱することなく変更および修飾をなすことができることを認識すべきである。以上および以下に引用したすべての刊行物、出願および特許は参照としてここに取り入れられる。以上および以下に述べたトピックの標題は、本出願に或種の情報が見られる場合のガイダンスを意味し、そのようなトピックについての情報が見られる場合本出願中の唯一の情報源であることを意図するものではない。"