"乳脂肪分解性の高いムラキアブロロピス又はムラキアフリディダに属する微生物。乳脂肪分解性の高いムラキアブロロピスがムラキアブロロピスSK4株FERMP22126である請求項1記載の微生物。乳脂肪分解性の高いムラキアフリディダがムラキアフリディダSK2株FERMAP22153である請求項1記載の微生物。請求項1~3のいずれか1項に記載の微生物を用いた脂肪含有排水の処理方法。0°C~15°Cで活性汚泥処理を行う請求項4記載の脂肪含有排水の処理方法。脂肪含有排水がパーラー排水である請求項4又は5記載の処理方法。ムラキア属に属する微生物の生産する下記の理化学性質1作用:炭素鎖長4から18の飽和脂肪酸を含む脂質を加水分解し、脂肪酸を生成する2至適温度:60~65°C3熱安定性:50mMTrisHCl緩衝液pH85中で30分間保温した場合、65°Cまで安定である4至適pH:75~95安定pH範囲:4~106分子量:約60000を有するリパーゼ。ムラキア属に属する微生物がムラキアブロロピスである請求項7に記載のリパーゼ。ムラキア属に属し、請求項7又は請求項8記載のリパーゼを生産する能力を有する菌株を培養し、培養物から当該リパーゼを採取することを特徴とするリパーゼの製造方法。本発明の課題は、低水温下においてパーラー排水中の乳脂肪分等の脂肪を分解できる微生物又は微生物由来の低温で脂肪分解することができる酵素を提供することである。本発明者らは、前記課題を達成すべく鋭意研究を重ねた結果、南極産ムラキアブロロピスMrakiablollopis等の担子菌酵母が低水温下で乳脂肪を分解することを見出し、本発明を完成するに至った。即ち、本発明は以下の発明を包含する。1乳脂肪分解性の高いムラキアブロロピス又はムラキアフリディダに属する微生物。2乳脂肪分解性の高いムラキアブロロピスがムラキアブロロピスSK4株FERMAP22126である1記載の微生物。3乳脂肪分解性の高いムラキアフリディダがムラキアフリディダSK2株FERMAP22153である1記載の微生物。41~3のいずれかに記載の微生物を用いた脂肪含有排水の処理方法。50°C~15°Cで活性汚泥処理を行う4記載の脂肪含有排水の処理方法。6脂肪含有排水がパーラー排水である4又は5記載の処理方法。7ムラキア属に属する微生物の生産する下記の理化学性質イ作用:炭素鎖長4から18の飽和脂肪酸を含む脂質を加水分解し、脂肪酸を生成する、ロ至適温度:60~65°Cハ熱安定性:50mMTrisHCl緩衝液pH85中で30分間保温した場合、65°Cまで安定である、ニ至適pH:75~9ホ安定pH範囲:4~10ヘ分子量:約60000を有するリパーゼ。8ムラキア属に属する微生物がムラキアブロロピスである7に記載のリパーゼ。9ムラキア属に属し、7又は8に記載のリパーゼを生産する能力を有する菌株を培養し、培養物から当該リパーゼを採取することを特徴とするリパーゼの製造方法。本発明により、低水温下においてパーラー排水中の乳脂肪分を分解できるリパーゼを生産する微生物を提供することが可能となる。本明細書においてリパーゼとは、当技術分野における通常の意味のとおり、脂質を基質とし、加水分解する酵素を意味する。1.ムラキア属に属する微生物本発明は、低温下での乳脂肪分解能を有するムラキア属に属する微生物、当該微生物による低温下での乳脂肪分解方法、これに関わるリパーゼ、及びムラキア属に属する微生物の培養物を包含する。本発明に用いるムラキア属微生物は低温下で乳脂肪を分解する菌株であれば、いずれの菌株でもよいが、10°C以下の低温で生育可能な菌株が好ましい。このような菌株として、具体的には担子菌門ハラタケ亜門シロキクラゲ菌綱シストフィロバシディウム目シストフィロバシディウム科ムラキア属の菌類、例えばムラキアブロロピスMrakiablollopis、及びムラキアフリディダMrakiafrigida等が挙げられる。ムラキアブロロピスSK4株FERMP-22126株及びムラキアフリディダSK2株FERMAP-22153が最も好ましい。また、本願発明は、低温下で乳脂肪分解性の高いムラキアブロロピス又はムラキアフリディダに属する微生物を包含する。乳脂肪分解性の高いとは、乳脂肪を含む固体培地中で培養した際にコロニー周辺に速やかなハロー形成を意味する。より具体的には、生クリームを含む寒天培地、培養温度10°C、7日間培養した際にコロニー周辺に5mm以上のハロー形成が認められるものを意味する。より具体的には、ムラキアブロロピスSK4株FERMP-22126株及びムラキアフリディダSK2株FERMAP-22153株が挙げられるが、これに限らない。また、本願発明は、低温での乳脂肪分解性の高いムラキアブロロピスに属する微生物としては、例えばムラキアブロロピスSK4株FERMP-22126株及びムラキアフリディダSK2株FERMAP-22153株が挙げられる。ここで低温とは、0°Cから20°C、より好適には、4°Cから10°Cのことを意味する。ムラキアブロロピスSK4株は、自然界より新たに分離した菌株であり、下記のような微生物学的性質を示す。ポテトデキストロース寒天培地にて培養温度10°Cにて培養した場合、帯白色の酵母状菌叢の周囲に白色の菌糸がみられる。培養菌株より常法によりDNAを調製し、菌類系統解析に用いられている代表的PCRプライマーITS1F及びITS4を用いてPCR反応を行い、得られたPCR産物の遺伝子配列を決定した配列表参照ところ、本菌株のITS配列はデータベースのムラキアブロロピスのITS配列と99以上の相同性を有していることから、ムラキアブロロピスと見なした。尚、本菌株はMrakiablollopisSK4株として、平成23年6月13日付で、独立行政法人産業技術総合研究所特許微生物寄託センター日本国茨城県つくば市東一丁目一番地一号郵便番号3058566に受託番号FERMP-22126として寄託されている。また、ムラキアフリディダSK2株は、自然界より新たに分離した菌株であり、下記のような微生物学的性質を示す。ポテトデキストロース寒天培地にて培養温度10°Cにて培養した場合、帯白色の酵母状菌叢の周囲に白色の菌糸がみられる。培養菌株より常法によりDNAを調製し、菌類系統解析に用いられている代表的PCRプライマーITS1F及びITS4を用いてPCR反応を行い、得られたPCR産物の遺伝子配列を決定した配列表参照ところ、本菌株のITS配列はデータベースのムラキアストッケシのITS配列と99以上の相同性を有していた。IndexFungorumによる現時点の分類体系において、ムラキアストッケシはムラキアフリディダのシノニムとすることから、本菌株をムラキアフリディダと見なした。尚、本菌株はMrakiafrigidaSK2株として、平成23年7月20日付で、独立行政法人産業技術総合研究所特許微生物寄託センター日本国茨城県つくば市東一丁目一番地一号郵便番号3058566に受託番号FERMAP-22153として寄託されている。上記ムラキアブロロピスSK4株及びムラキアフリディダSK2株は、本願出願前には本発明者らの管理下にあり、一切分譲はされておらず、また分譲要求があったとしても、本願出願後までは分譲する意図は全くない。2.ムラキア属に属する微生物の菌体及びリパーゼ並びのその製造2-1.ムラキア属に属する微生物の菌体及びリパーゼの製造本発明の菌体及びリパーゼは、ムラキア属に属する微生物、好ましくはムラキアブロロピス、特に好ましくはムラキアブロロピスSK4株を培地にて低温下で培養し、該培養液から菌体及びリパーゼを回収することにより製造することができる。本発明の微生物の培養に使用する培地としては、菌類が資化し得るのに必要な炭素源,窒素源,無機物,その他必要な栄養素を適量含有するものであれば特に制限されず、天然培地、合成培地のいずれも使用できる。具体的な培地としては、例えば菌類培養に一般に使用されるポテトデキストロース培地,コーンミール培地,麦芽煎汁培地等が挙げられる。合成培地の炭素源としては、例えば、生クリーム,オリーブ油,ツィーン80等が使用される。窒素源としては、例えば、ペプトン類,酵母エキス,肉エキス等の窒素含有天然物,及び硝酸ナトリウム,塩化アンモニウム等の無機窒素含有化合物が使用される。無機物としては、例えば、リン酸カリウム,リン酸ナトリウム,硫酸マグネシウム,塩化カルシウム,塩化第二鉄等が使用される。培養方法は特に制限されないが、通常、振とう培養,通気撹拌培養又は置地培養で行う。培養温度は、特に制限されないが、低温下、例えば、1~15°Cの範囲が好ましく、10°C以下がさらに好ましい。また、菌体を至適増殖温度にて十分に増殖させた後、新たな培地に移し10°C以下で培養することもできる。培養期間は通常2週間程である。本発明のリパーゼの精製には、当技術分野において一般に使用される精製法を用いることができる。菌体の分離には、例えば、遠心分離、濾過、限外濾過等を用いることができる。菌体の分離後に得られる培養上清液に含まれるリパーゼは硫酸アンモニウムや硫酸ナトリウム等による塩析法,アセトンやエタノールによる有機溶媒沈殿法,陽イオン交換体例えば、CM,S,SP又は陰イオン交換体例えば、DEAE,Q,QAE等を用いたカラムクロマトグラフィー法,アガロース誘導体等を用いたゲル濾過法等により単離精製することができる。これらの方法で得られた粗精製リパーゼ及び精製リパーゼはグリセロール,シュークロース,エチレングリコール等の安定化剤を添加して液状で使用することができ、又は、スプレードライや凍結乾燥等の乾燥法を用いて粉末として使用することもできる。上記のように、本発明の菌体及びリパーゼは、ムラキア属に属する微生物、好ましくはムラキアブロロピスを培養し、培養液から回収することにより製造できる。本菌類は安価な培地を用いて容易に大量培養が可能なことから、安価にかつ大量に本発明のリパーゼおよびリパーゼ生産能力を有する酵母細胞を得ることができる。2-2.本願発明のリパーゼ本願発明は、ムラキア属に属する微生物の生産するリパーゼを包含する。本願発明のリパーゼは、次のような理化学的性質を備えている。1作用として、炭素鎖長4から18の飽和脂肪酸を含む脂質を加水分解し、脂肪酸を生成する。2至適温度は60~65°Cである。3低温での脂質分解能を有する。4熱安定性としては、50mMTrisHCl緩衝液pH85中で30分間保温した場合、65°Cまで安定である。5至適pHは75~9である。6安定pH範囲は4~10である。7分子量は約60000である。3.ムラキアに属する微生物を用いる排水の処理方法ムラキア属微生物例えば、ムラキアブロロピス又はムラキアフリディダに属する微生物は、活性汚泥に含めることができる。このように本願発明の微生物を活性汚泥に含めることで、乳脂肪を高濃度で含有する排水を、低温でも効率的に処理することができる。本願発明には、上記ムラキアブロロピス又はムラキアフリディダに属する微生物を活性汚泥に含む、活水汚泥法による排水の処理方法が包含される。好適には、上記ムラキアブロロピス又はムラキアフリディダに属する微生物を、乳脂肪を高濃度に含有する排水を活水汚泥法で処理に用いることができる。より具体的には、前記ムラキアブロロピスに属する微生物を用いる活性汚泥を用いて、0-15°C、例えば10°C程度の低温下で、パーラー排水などの乳脂肪を高濃度に含有する排水を処理することができる。活性汚泥法は、曝気槽において、微生物を含む活性汚泥により、排水など汚染物を分解することを中心とするが、本願発明のムラキアブロロピスに属する微生物は、この曝気槽の活性汚泥に添加することができる。活性汚泥法としては、通常用いられているいずれの方法、又は工程を採用することができる。例えば、本願発明で利用できる活性汚泥法としては、回分式活性汚泥法、連続式活性汚泥法など、種々の方法があり、曝気槽における活性汚泥処理の前に、種々の、分離工程や沈殿工程などの前処理工程を設けたり、曝気槽活性汚泥処理の後に、活性汚泥の沈殿工程、あるいは消毒工程などの後処理工程を設けることもできる。より具体的には活性汚泥法以外にこの変法である接触安定化法,長時間曝気法,ステップエアレーション法,高濃度酸素活性汚泥法,膜分離活性汚泥法に利用可能である。また、活性汚泥法以外の代表的な好気的生物処理法として生物膜法がある。本発明の本法への利用も可能である。本法はプラスチック片,プラスチック網,貝殻,砂利などを担体として利用し、その表面上に膜状に付着した微生物により通気を行いながら排水浄化を行うことができる。以下に、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明の範囲はこれらに限定されるものではない。実施例1乳脂肪分解能の比較南極産担子菌酵母との比較2007年1月宗谷海岸スカルブスネスの湖沼にて採集した堆積物を同年4月に50μgmlのクロラムフェニコールを含むポテトデキストロース寒天培地に直接接種し、培養温度10°Cにて培養し、得られた酵母を以後用いた。分離菌株の同定は、分子生物学的手法を用いた。すなわち分子マーカーとして菌類系統解析に広く用いられているITS領域を用いた。培地より菌体を掻き取り、市販DNA抽出キットを用いてDNAを抽出した。このDNAを鋳型とし、菌類用プライマーであるITS1FおよびITS4を用いてWhiteらの条件に準じてITS領域の増幅を行った。アニーリング温度は50~55°Cの範囲で行った。PCR産物を精製した後、ITS1Fをプローブとしてダイレクトシークエンスを行い、ITS領域の塩基配列を得た。これをデータベース上の既知の配列との相同性比較を行い、最近縁種を検索した。上記同定の結果、表1に示されるように、単離した酵母は、ムラキアブロロピス、クリプトコッカスアクアティクスCryptococcusaqaticus,クリプトコッカスsp.,ディオスゲギアフリスティンゲンシスDioszegiafristingensis,ロドトルーラグラシアリスRhodotorulaglaciallis,及びロドトルーラsp.と相同性の高い6群に大別された。これら菌株間の乳脂肪の分解能を生クリーム含有寒天培地にて培養し、培地上に形成するハローの大きさにて評価した表1。ムラキアブロロピスDBVPG4974株と相同性の高い菌株であるムラキアブロロピスSK4株が最も大きなハローを形成したことから、ムラキア属の菌株に高い乳脂肪分解能を持つことを確認した。このため分離したムラキア属の菌株全ての乳脂肪分解能の検討を行った表2。乳脂肪分解能は供試菌株によって大きく異なった。10°C、10日間培養を行った結果、75菌株全てが生クリーム寒天培地上で生育したが、19菌株はハローを形成しなかった。56菌株は同条件で明確なハローを形成し、このうち30菌株は幅1cm以上のハローを形成した。上記75株のうち、23株について、得られたITS領域の配列を配列表に示した。分離菌株およびデータベース上に登録されたムラキア属菌株のITS領域を用いて、近隣接合法による系統図を作成した図1。外群としてムラキア属に近縁なムラキアラ属に属するムラキアラクライオコニティMrakiallacryoconitiDBVPG5180株を外群として用いた。系統樹作成を1000回の繰り返しブーツストラップ値を得た。本発明のSK4株を始め乳脂肪分解能の高い生クリームを含む寒天培地、培養温度10°C、7日間培養した際にコロニー周辺に5mm以上のハローを形成する菌株,あげは池7株,あげは池9株及びとっくり池6株はいずれもムラキアブロロピスと同一のクレードを形成した図1。これ以外に乳脂肪分解能の高い菌株はムラキアフリディダのクレードに含まれる孫鉢池2株ムラキアフリディダSK2株のみである。従来から、ムラキアフリディダ,ムラキアspムラキアフリディダに対して98の相同性を有する菌株,ムラキアspYSAR9株ムラキアサイクロフィラに対して996の相同性を有する菌株は、細胞外のTween80又はトリブチリンを分解する活性が報告されている非特許文献8-11。一方、ムラキアspYSAR11株ムラキアフリディダに対して993の相同性を有する菌株およびムラキアspYSAR12株ムラキアフリディダに対して100の相同性を有する菌株は、細胞外リパーゼ活性が無いとされる非特許文献11。これらの報告は、ムラキア属の生産する細胞外リパーゼの生産量あるいは生産条件が、種レベルで大きく異なる可能性を示唆している。ITS配列により種同定を行った23菌株中、ムラキアブロロピスでは14株中4株が、ムラキアフリディダでは6株中1株が、ムラキアロベルティでは2株中0株が高い乳脂肪分解能を示した.本発明では、系統的にムラキアブロロピス又はムラキアフリディダに属する菌株の乳脂肪分解能が高いことを初めて明らかにした。実施例2乳脂肪分解能の比較パーラー排水施設中の細菌との比較本発明のムラキアブロロピスSK4株及び北海道上士幌町の牧場にてパーラー排水を活性汚泥処理している曝気槽から得た乳脂肪分解細菌ジャニバクターアノフェリスJanibacteranophelisAC16株,シュウドモナスアルカリゲネスPseudomonasalcaligenesSB34株を生クリーム寒天培地にて接種し、培養温度10°Cにて乳脂肪分解を観察した図2。ムラキアブロロピスSK4株の周囲には明確なハローが確認されたが、ジャニバクターアノフェリスAC16株は細胞増殖は確認されたが、培養期間中のハロー形成は確認できなかった。また、シュウドモナスアルカリゲネスSB34株は、上記培養条件において細胞成長を目視にて確認できなかった。さらにムラキアブロロピスSK4株およびジャニバクターアノフェリスAC16株を用い、乳脂肪の微生物分解能を酸素消費量にて評価した。供試菌株として測定対象とする各検体は次のように調製した。すなわち、容量500mlの培養びんに生クリームを蒸留水で1000倍希釈した水溶液100mlに無機栄養塩、菌体および水道水を加えて全量を200ml調整し、測定温度は10°Cにて自動記録式好気性微生物呼吸計北開試式クーロメーター大倉電気製を用いて酸素消費量を測定した。無機栄養塩は1l当りリン酸二水素カリウム19g,リン酸一水素二ナトリウム26g,塩化アンモニウム019g,塩化カルシュウム二水0037g,硫酸マグネシウム七水01g塩化第一鉄0015gとした。ムラキアブロロピスSK4株は酸素消費が始まるまでの遅滞時間は約15時間であり、その後は急激な酸素消費を示した図3。一方、ジャニバクターアノフェリスAC16株の遅滞時間は約45時間であり、その後の酸素消費速度はムラキアブロロピスSK4株と比較して遅かった。以上のことからも低水温下においてムラキアブロロピスSK4株の乳脂肪分解能力の高いことが証明された。実施例3パーラー排水の微生物処理パーラー排水のモデル排水として牛乳希釈液を用いて本発明のムラキアブロロピスSK4株を添加した活性汚泥による処理を行った。供試した活性汚泥は、北海道上士幌町の牧場で実際にパーラー排水を活性汚泥処理している曝気槽から得た。これを25Lの曝気槽で牛乳を基質とし、無機栄養塩類も少量添加しながら室温20~23°Cで約1ヶ月間馴養した。10°Cでポテトデキストロース液体培地を用いて培養したムラキアブロロピスSK4株乾燥重量約1gを室温で馴養した活性汚泥MLSS:約3000mgl,MixedLiquorSuspendedSolid混合液浮遊物質濃度700mlに加え10°Cにて培養を行った。培養7日目までは、1日1回曝気を止め汚泥を沈降させた後、上澄み液を除去した。沈殿した汚泥に、新たに市販牛乳BOD:約14000mgl28mlおよび水道水を添加するfillanddraw法で低温に馴養させた。培養7日目および12日目に再度MLSSを約3000mglに調整した後、牛乳原液56mlおよび84mlをそれぞれ添加し、24時間後のBODを測定した。8~11日間の培養は培養7日目までと同様に行った。また、ムラキアブロロピスSK4株を添加していない室温で馴養した活性汚泥を用いて同様の処理を行い、結果を比較した。ムラキアブロロピスSK4株を添加した活性汚泥のBOD除去率は、添加していない活性汚泥に比べて向上した表3。一般的な排水処理におけるBOD汚泥負荷kgBODkgMLSSd,MLSSkg当たりのBOD処理量は02~04,BOD容積負荷kgBODm3d,曝気槽1m3当たりのBOD処理量は04~08とされている。培養7日後および12日後に牛乳原液56mlおよび84mlをそれぞれ添加した活性汚泥のBOD汚泥負荷は約035と052,BOD容積負荷は10と15であった。これらの結果から、本発明のリパーゼを生産するムラキアブロロピスSK4株を活性汚泥に添加することにより比較的負荷の高い排水のBOD除去率が向上することを確認した。以上の結果から、本発明の菌株をパーラー排水処理に利用することにより、低水温下でも乳脂肪を含むパーラー排水の処理効率の向上が明らかとなった。実施例4ムラキアブロロピス由来リパーゼの製造本発明のムラキアブロロピスSK4株が示す低温下での高い乳脂肪分解活性は、脂質分解に関わる酵素に原因があると考え、細胞外リパーゼの精製を行った。1ツィーン80,05酵母エキス,02リン酸二水素カリウム,029リン酸二ナトリウム,002塩化アンモニウム,004塩化カルシュウム,0001塩化第二鉄を含む液体培地1lを3l容三角フラスコに移し、121°Cにて20分間オートクレーブ滅菌を行った。種菌としてムラキアブロロピスSK4株FERMP-22126を接種し、10°Cで2週間培養し、培養液を得た。該培養液を遠心分離し、得られた上清液を限外濾過により濃縮した後、分画分子量1万~8千の透析膜を用いて10mMTrisHCl緩衝液pH85にて透析した。同緩衝液にて平衡化したブチルトヨパール650Mカラムクロマトグラフィーで分画し、ドデシル硫酸ナトリウム-ポリアクリルアミド電気泳動法により単一バンドになることを確認した。得られたタンパク質は下記の性質を有していた。タンパク質の分子量は、ドテシル硫酸ナトリウム-ポリアクリルアミド電気泳動法で測定したところ、それぞれ約60kDa図4であった。実施例5脂質分解活性の測定1.基質特異性:炭素鎖長4,5,8,10,14,16,18の脂肪酸p-ニトロフエェニル誘導体を基質に用い、1mM基質を含む50mMリン酸緩衝液pH70に酵素を加え、30°Cにて30分間酵素反応を行った。南極産担子菌酵母ムラキアブロロピスSK4株由来リパーゼ以下、本発明のリパーゼと称するは炭素鎖長の異なる全ての基質の加水分解が確認された図5。この性質は乳脂肪に含まれる多様な脂肪酸の効率的分解が可能となると思われる。2.温度の影響:本発明のリパーゼの各温度における酵素活性を測定した図6。至適温度は60~65°Cに存在した。また、低温域での比活性は0°Cで08,10°Cで28,20°Cで115であった。本発明のリパーゼは65°C,30分の熱処理で残存活性がほとんど変わらなかった図7。同様の用途が検討されているクリプトコッカスsp.2株由来のリパーゼでは、至適温度40°C付近であり、反応温度60°Cでの比活性が60以下であることと比較すると非特許文献12、これらの結果から本発明のリパーゼが熱に対する高い安定性を有しながら、低温下で活性を示す酵素であることが確認された。3.pHの影響:本発明のリパーゼの各pHの酵素活性を測定した。pH3~pH5までをクエン酸緩衝液,pH6~pH8までをリン酸緩衝液,pH9はグリシン水酸化ナトリウム緩衝液,pH10は炭酸緩衝液を用いた。至適pHは75~9であり図8,4~10までの幅広いpH域で高い安定性を示した図9。4.金属塩の影響:本発明のリパーゼに対する金属塩の影響を表1に示す。本発明のリパーゼは金属塩によって活性が失われることは無かった。以上の結果から、本発明のリパーゼは幅広い基質特異性を有し、従来の低温環境に適応した菌類が生産する酵素に比較して安定性が高く、広範囲な環境で機能することが示された。"