Effect of calcium channel blockers long-term use on blood level of luteinizing hormone and estradiol in rats

<jats:p>Aim. To define the effect of calcium channel blockers long-term use on blood level of luteinizing hormone and estradiol in female rats.                   Methods. 82 mature female outbreed rats were distributed to seven groups. The rats of the first (control) group were administered 0.2 ml of 0.9% saline intraperitoneally for 21 day. Instead of saline, 5 and 25 mg/kg of verapamil were used in rats of the second and third groups, 5 and 10 mg/kg of nifedipine - in rats of the 4th and 5th groups, 5 and 20 mg/kg of diltiazem - in rats of the 6th and 7th groups accordingly. Blood levels of luteinizing hormone and estradiol were determined by ELISA after animals were withdrawn from the study.                   Results. In rats treated with calcium channel blockers, a dose-dependent decrease of luteinizing hormone and estradiol blood levels were observed. High doses of verapamil (group 3) decreased the level of luteinizing hormones and estradiol by 50% compared to control group, high doses of diltiazem (group 7) - by 50%. Only minor changes were observed in rats who were administered nifedipine, even in high doses.                   Conclusion. Observed decrease of blood estradiol level indicate the influence of calcium channel blockers directly on ovarian function; decrease of blood luteinizing hormone level might by secondary due to positive feedback between the estradiol and luteinizing hormone secretion and reflect decreased estradiol blood level.</jats:p>

section_content: Среди населения земного шара сердечносо судистые заболевания находятся в первом ряду среди причин смертности и утраты трудоспособ ности. По статистическим данным 2008 г. 26% населения планеты страдают артериальной ги пертензией, и 24% из них пользуются антигипер тензивными средствами [14]. По данным Мин здрава Азербайджанской Республики, в 2012 г. было зарегистрировано 258 870 больных, стра дающих сердечнососудистыми заболеваниями, из них 1,5% в возрасте 14-17 лет, 7,6% -18-29 лет, большинство пациентов (85,8%) -в возрасте 30 лет и старше. Несмотря на многосторонность �армакотерапии сердечнососудистых заболева ний, наиболее широко применяют антагонисты кальция (АК) [4]. 

В литературе вопрос влияния АК на репро дуктивную �ункцию самцов эксперименталь ных животных освещён достаточно полно [6, 10, 11]. При этом влияние широко используемых в кардиологической, неврологической, гинеколо гической и урологической практике АК [4, 12] верапамила, дилтиазема и ни�едипина -на уровень женских половых гомонов не в полной мере освещено в доступной литературе. Омоложе ние возраста сердечнососудистых заболеваний среди женщин, как и среди мужчин, и наличие у данных препаратов антиоксидантного, анти агрегантного и токолитического действия [8] расширяют спектр их применения у женщин как репродуктивного возраста, так и беремен ных, и обусловливают актуальность дальнейшего изучения их репродуктивной токсичности. 

Цель настоящего исследования -определе Таким образом, опыты проводили на 82 жи вотных, которые были разделены на контроль ную (первая группа, 10 животных) и шесть опытных групп (по 12 особей в каждой). Живот ным контрольной группы ежедневно вводили 0,2 мл 0,9% раствора натрия хлорида. Живот ным второй и третьей опытных групп ежеднев но вводили верапамил (изоптин, «Abbott», Италия) соответственно в дозах 5 и 25 мг/кг, животным четвёртой и пятой групп -ни�еди пин (farmadipin, «Farmak», Украина) в дозах 5 и 10 мг/кг, животным шестой и седьмой группдилтиазем (diltizem�, «MNİSİstanbul») в дозах 5 и 20 мг/кг. 

Все исследуемые препараты вводили внутри брюшинно в течение 21 дня. Дозы препаратов подбирали на основании литературных данных [1]. Через 3 ч после последней инъекции живот ных забивали. 

Группировали забиваемых животных по эстральному циклу, определяемому по ежеднев но проводимым цитологическим исследовани ям вагинальных мазков. Под э�ирном наркозом декапитировали животных, находящихся в пе риоде проэструс или эструс эстрального цикла, и производили интракардиальный забор крови. Концентрацию ЛГ и эстрадиола в сыворотке крови определяли иммуно�ерментным мето дом типа «сэндвичс» стандартным набором ре активов «�HElisaKitIFA», «EstradiolElisaKitIFA» и использовали «BioScreen VS 500». 

Статистический анализ проведён с приме нением программы Microsoft Excel, непарамет рических методов по критерию U (Уилкоксона-Манна-Уитни) [3]. 

У животных второй группы уровень эстради ола уменьшился на 31,6% по сравнению с контро лем. В четвёртой группе содержание эстрадиола уменьшилось на 3,9% (p 1 >0,05), что по сравне нию с показателями животных второй группы оказалось выше на 40,4%. У животных шестой опытной группы содержание данного гормона уменьшилось на 29,3% (р 1 <0,001) по сравнению контрольными крысами, превысив показатель второй группы на 3,3% (p 2 >0,05). Самое незначи тельное уменьшение уровня эстрадиола отмече но у самок четвёртой группы (p 1 >0,05) (табл. 1). 

На �оне длительного введения 5 мг/кг ве рапамила у животных второй группы уровень ЛГ в крови уменьшился на 16,3% (р 1 <0,001) по сравнению с контролем. При введении 5 мг/кг ни�едипина у животных четвёртой группы со держание данного гормона снизилось на 4,6% (р >0,05), что по сравнению с показателями животных второй группы оказалось выше на 13,9% (р <0,001). На �оне применения 5 мг/кг дилтиазема у животных шестой подопытный группы снижение содержания ЛГ в крови по от ношению к контрольной группе составило 15,5% (р 1 <0,001) и было выше на 1% (p 2 >0,05) по срав нению со второй группой (см. табл. 1). 

Увеличение дозы верапамила до 25 мг/кг статистически значимо привело к уменьшению уровня эстрадиола у самок третьей подопытный группы на 52,4% (р 1 <0,001) в сравнении с живот <0,001) в сравнении с живот ными контрольной группы. На �оне ежедневно го введения ни�едипина в дозе 10 мг/кг у самок пятой подопытной группы концентрация эстра диола в крови уменьшилась на 9,8% (p 1 <0,05). У самок седьмой группы (дилтиазем, 20 мг/кг) со держание данного гормона было меньше пока зателей контрольной группы на 45,5% (р 1 <0,001) и на 14,6% выше показателей третьей группы (р 1 <0,01) (табл. 2). 

По всей видимости, уменьшение уровня эстрадиола связано с нарушением созревания �олликулов, для которого ионы кальция игра ют существенную роль [8, 9,