Situado en la calle de Ramón y Cajal, frente al palacio de los Vivero, y a calles de San Martín y del Prado. Fue fundado para MM. Descalzas Franciscanas hacia 1550 en Villalcázar de Sirga; en 1552 se trasladó a Valladolid por intervención del Conde de Osorno que, junto con otros favorecedores de la orden, adquirieron varias casonas para convertirlas en convento. Con la instalación de la Corte en Valladolid (1601) se comenzó uno nuevo con trazas de Francisco de Mora por iniciativa de la reina doña Margarita de Austria y bajo patronato real, aunque la escritura no se firmó hasta 1615. Estaba concluido en 1616 y el ejecutor material fue Diego de Praves.
Se conservaron algunos edificios del anterior, como la casona de Alonso de Argüelles y un palacio con torreón de tres alturas, ambos con puerta de arco de medio punto, un claustro detrás, y la huerta en un lateral con su crujía y cerrada por muros. El proyecto de Mora incorporó nuevo claustro con dependencias en torno y la iglesia, al extremo.
El templo, construido en ladrillo y tapial sobre basamento de piedra, tiene una sola nave de cuatro tramos divididos por fajones sobre pilastras, crucero marcado en planta y presbiterio rectangular de escasa profundidad al que se entra por arco triunfal de medio punto; se cubre con bóveda de cañón con lunetos y cúpula, ésta ciega y resuelta al exterior con cimborrio. En el muro de la Epístola se abre una puerta adintelada. La fachada principal es muy plana y conformada por un rectángulo vertical, parecida a la del Escorial de Abajo, del mismo tracista; la puerta es adintelada y flanqueada por medias pilastras toscanas, sobre su friso un nicho rematado por frontón, ambos decorados con medias bolas y éste contiene una Asunción atribuida a Gregorio Fernández, encima una ventana rectangular para iluminar el coro y los lados escudos reales; se remata con frontón triangular.
El claustro procesional, cuadrado, tiene dos plantas con arcos de medio punto la inferior y de tres puntos la alta, en ambos sobre columnas toscanas, y según el estilo seco de Mora. Otras dependencias notables son la escalera de tipo claustral, el refectorio, de tres tramos, bóvedas de arista y zócalo con azulejería representando temas de la Pasión y el emblema franciscano, las bodegas (la "cueva") y la cripta conventual.
Entre sus valiosas obras de arte destacan en la iglesia los retablos del crucero y el retablo mayor, todos de Juan de Muniátegui (1612), éste con pinturas de Santiago Morán y anónimo italiano y esculturas de Gregorio Fernández (1614) en el remate; en el convento varias pinturas de la colección de doña Margarita de Austria, un escaparate de cera de fray Eugenio de Torices (1698), un San Francisco de Fernández y una cabeza de El Graco.
Autor: Javier Rivera Blanco.
Bibliografía: J.J. MARTIN GONZALEZ, La arquitectura barroca vallisoletana, Valladolid, 1969; J.J. JUNQUERA, "Las Descalzas Reales de Valladolid y algunas pinturas y esculturas",. A.E.A, 1973; A. BUSTAMANTE, La arquitectura clasicista del foco vallisoletano (1561-1640), Valladolid, 1983; J.J. MARTIN GONZALEZ y F.J. DE LA PLAZA, Catálogo monumental... Monumentos religosos de la ciudad de Valladolid, parte seg., Valladolid, 1987.