松　孝　義（藤沢薬品工業株式会社・特薬事業部） (6R,7R)-3-[(5-methyl-1, 3, 4-thiadiazol-2-yl)thio]- methyl-8-oxo-7-[2-(1H-tetrazol-1-yl)acetamido]-5- thia-1-azabicyclo [4.2.0] oct-2-ene-2-carboxylic acidに36カ月まで安定である（森本行洋ら，藤沢薬品，1987，未発表）。
数
安　全
3.
1）一般毒性
表1に示すように，急性毒性試験（マウス及びラット)智, （泰田茂ら,大阪市立環境科学研究所，1985，未発表）及び亜急性・慢性毒性試験(ラット及びイヌ)®の結果，いずれも可及的最大量を投与しても死亡例は認められず，安全性の高いことが確認された。
2）特殊毒性
表2に示すように，催奇形性”，変異原性（藤井登志之ら，藤沢薬品， 1985,  1986, 未発表),粘膜刺激性（上谷利治ら，藤沢薬品，1980，未発表）及び腎毒性試験"の結果，いずれも薬剤によると考えられる異常所見は認められなかった。 3）ウシに対する安全性ウシの乳房に， CEZ  DC を臨床常用量(250 mg）投与したととろ，一般状態，乳量，乳汁検査及び血液検査等に薬剤によると考えられる異常
1. 開発の経緯
セファゾリン(CEZ)は，藤沢薬品工業雑中央研究所で合成された第一世代の注射用セフェム系の半合成抗生物質である。 CEZの抗菌スペクトルは広範囲で，Staphylo coccus, Streptococcus等のグラム陽性菌及びE. coli, Klebsiella等のグラム除性菌に抗菌活性を有している®。また殺菌作用を示し®，ペニシリナーゼに対して安定である》。なお，抗菌活性は乳汁の存在下においてもほとんど影響を受けず（原俊彦ら，藤沢薬品，1985,未発表）, 種々の媒体中でも安定した効果を発揮するいわとれらの特長を生かし，近年増加の兆しを見せているペニシリン(PCG) 酎性  Staphylococcus及びグラム陰性菌による牛の乳房炎治療用途に,乾乳期用乳房注入剤(CEZ DC)及び必乳期用乳房注入剤（CEZ QR）を開発し，1987年に動物用医薬品製造承認を取得した。
性
物
2.
CEZはは， Cephalosporium acremonium が産生するCephalosporin C から得られる 7-ACA (7-Aminocephalosporanic Acid)を母核とする半合成の物質である（図1)。本品は，日本薬局方「セファゾリンナトリウム」の遊離酸であり，白色〜淡黄白色の結晶性の粉末である。なお，安定性は極めて良好で，原体，製剤とも
18 家畜抗菌会報(1991)

所見は認められなかった（佐藤邦忠ら，帯広畜産大学，1985，未発表）。 CEZ QRでも常用量(150 mg)の4倍にあたる600mgを注入したが，一般状態，乳量，乳汁検査，血液検査及び解剖所見等に薬剤によると考えられる異常所見は認められなかった（小野斉ら，帯広畜産大学，1985，未発表）。
機
数
4.
1）作用機序
抗生物質の作用機序には細胞壁合成阻害，細胞質膜阻害，リポゾームでの蛋白合成阻害及び核酸合成阻害の４タイプが存在するととが知られており◇， CEZ の作用はその内の細胞壁合成阻害である"。 CEZは，殺菌的な効果を発揮し，かつ宿主の動物細胞には悪影響を及ぼさず，選択毒性に優れた抗生物質である。
2）抗菌スペクトル
CEZ の各種参照猶株に対する抗菌スペクトルと抗菌力を図２に示した。 CEZは，グラム陽性菌では，Staphylococcus, Streptococcus, Diplococcus, Corynebacterium及びClostridium等，グラム陰性菌では E. coli, Klebsiellaペクトルを示した。 CEZの最小発育阻止濃度(MIC)は，とれら
ペニシリナーゼ分離株: II : P. mirabilis No. 133, II : E. coli, IV : K. pneumoniae No. 134, V : Ps. aeruginosa No. 47のグラム陽性菌及び陰性菌に対し，いずれも0.2 ～1.56 μg/mlの狭い範囲に分布していた。 3）ベニシリン分解酵素に対する安定性表３に各種ペニシリン分解酵素に対する  CEZの安定性を，PCGの分解速度を100とした時の相対値で示した。 CEZ　は各タイプのペニシリン分解酵素に対し安定であるが，タイプIVのようにセフェム剤も分解できるような特殊なペニシリン分解酵素にはやや不安定である"。
**ヒト由来株(S. aureus ht PCG耐性株)注）社内成績：原俊彦ら(1985)
20 家畜抗菌会報(1991)
4）乳汁存在下でのCEZの抗菌力
乳汁の存在下でのCEZの抗菌力の変化を表4に示した。乳汁を80%添加した培地中でもCEZの抗菌力は変化せず，乳房炎治療に安定した効果を発揮することが示唆された（原　俊彦ら，藤沢薬品， 1985,未発表)。
性
5.残留
1）乳汁中移行
CEZ　の乳房内での分散は良好であるが，血液中への移行はほとんど認められない（佐藤邦忠，小野斉ら，帯広商産大学，浦重義ら，京都動物検査センター, 1985,未発表)。 CEZ  DC を乾乳開始時に１回分房に注入した時のCEZの乳汁中濃度の推移を図3に示した。乳汁中のCEZ濃度は徐々に減少し，28日目には検出されなくなった（山田耕司ら，京都助物検蛮センター, 1985,未発表)。 CEZ QRを必乳期の牛に投与した時のCEZの乳汁中濃度を表5に示した。 CEZ  QR  の常用量を３日間注入した後の分房乳と合乳を調べた結果，乳汁中のCEZは最終注入後60時間目に疲跡を認める程度になり，72時間以後には検出されなくなった（山田耕司ら，京都助物検査センター，1985，未発表）。
2） 魔器内残留
CEZ DC及びCEZ  QR の隣器内残留を表 6に示した。 CEZ  DC  の常用量を１回注入した後，血漿及び脂肪を除いて注入３日目までCEZが検出されたが，15日目になると乳房のみに検出され，30日目以後には全ての隣器から検出されなくなった(佐藤邦忠ら，帯広畜産大学，1985，未発表)。常用量を３日間注入したCEZ QRでは，最終注入の２日目までの乳房にCEZが検出されただけで，３日目以後には全ての隣器から検出されなくなった（小野斉ら，帯広畜産大学，1985，未発装）。以上の結果から，CEZ DCは牛で30日間，CEZ QRでは牛で３日間，また牛乳では72時間と休薬期間が設定されている。

6.
臨床応用試験
1）試験方法
供試分房数は表7に示したように， CEZ  DCでは873分房， CEZ  QRでは235分房であった。臨床試験での用法・用量は，CEZ DCでは乾
乳開始時に１分房当たりCEZとして250mgを1回注入，CEZ  QR では１日１回１分房当たり150 mgを３日間注入した。なお，対照薬剤としては，クロキサシリン(MCIPC),ジクロキサシリン(MDIPC),ペニシリン(PCG)及びストレプトマイシン(SM)の合剤等，通常汎用されているものを使用した。 2）乳房炎の診断基準及び効果判定方法表8に臨床試験における検査項目とその判定方法を示したが，原則として「家畜共済における特殊疾病の診察指針」に従った。乳房の熱感，腫膜及びプツの有無等の臨床所見の記録，CMT変法による検査及び細菌検査を実施し，それぞれ表9の基準に従い（十）あるいは（一）の判定を行い，表9に示したように乳房
*検査結果を考慮しない炎を臨床型，潜在型，非特異性，乳汁感染，正常の５つの型に分類した。効果の判定は，原則として臨床症状の改善，凝樂及び細菌の消失が認められたものを有効としたが，それぞれの型にあわせ，とれらの検査結果を総合して判定を行った。
3）試験成績
(1) CEZ DCの臨床試験成績
表10に乾乳期用剤の試験成績を示した。薬剤の効果は，臨床型，潜在型及び非特異性乳房炎と診断された分房に対する効果を「治療効果」，乳汁感染及び正常分房と診断された分房に対する効果を「予防効果」として判定した。とれらに対する治療効果は， CEZ  DC 群で93 %，薬剤対照群で92%と両群とも高い有効率を示した。なお，無投薬対照群は１例のみであり，治癒しなかった。一方，予防効果も，CEZ DC群で83%，薬剤対照群で81%と高い有効率を示し，無投薬対照群では36%であった。治療効果及び予防効果の総計では，CEZ DCで88%，薬剤対照群で86%となり，両群とも無投薬対照群の有効率 33% との間に1%の危険率で有意差が認められた。 (2) CEZ QRの臨床試験成績表11にCEZ QRの試験成績を示した。有効率は，CEZ QR群で79%，薬剤対照群では66%で，無投薬対照群38%に対し，それぞれ危険率1％で有意差が認められた。 (3)臨床試験における細菌学的効果図４に CEZ  DC 試験群では乾乳時，CEZ  QR試験群では注入前に採取した乳汁の細菌学的検査成療を示した。 CEZ DC試験群では，Staphylococcus等のグラム陽性菌が全体の92%, E. coli等のグラム酸性菌が7%を占めていた。 CEZ QR試験群では，グラム勝性菌が78%,グラム陰性菌が20%を占めており，グラム陰性菌による乳房炎の増加が示唆された。
小松华幾／セファゾリンについて／1991　23分離された主要細菌の CEZ DC 及びCEZ QR注入後の除菌率を図5に示した。 CEZ DC及びCEZ QRともに，90%以上の除菌率を示し，ペニシリン耐性を含むStaphylo- coccus, Streptococcus及び Corynebacterium等のグラム隠性菌及びE. coli RU  Klebsiella等のグラム陰性菌に対し優れた効果を示した。 (4)臨床試験成績のまとめ上記の結果をまとめると，図6に示したようK, CEZ DC, CEZ QRともに乳房炎に対し,優れた臨床効果と細菌抑制効果が確認された。なお，この臨床試験期間を通じて本剤の注入によると思われる副作用は認められなかった。

7.乳房炎起因菌の検出動向及び耐性菌
出現状況
とれまでCEZの基礎とその応用について並べてきたが，さらに乳房炎防除対策の一助として乳房炎起因菌の検出動向及び最近の耐性菌の出現状祝について述べる。 1）乳房炎起因菌の検出動向乳房炎の起因菌の検出率から見ると，従来は大部分かStaphylococcus等のグラム陽性菌で占められていたようであるが，最近はグラム腸性菌の検出頻度が低下し，E. coli等のグラム陰性菌の検出頻度が上昇してきている。図7に乳房炎起因菌の検出率とその推移について示した。前述の臨床試験においても，泌乳期の乳房炎ではグラム陰性菌が約20%検出されたが，野村らの報告》でも1978年には検出菌の実に95%がグ
26 家帝抗菌会報(1991)
ラム陽性菌で占められていたが，1985年には約60 %に後退し，E. coli等のグラム陰性菌が34%と大幅に上昇している。
2）耐性菌出現状況
図8及び図9に1989年度に乳汁から分離されたStaphylococcus感受性の分布を示した。 Staphylococcusに対するCEZのMICは, 0.39 μg/ml を中心とした非常に狭い範囲に分布しており，耐性菌は認められなかった。しかし他の薬剤ではMIC分布が広く，特にオキシテトラサイクリン(OTC)では２峰性の稼相を示していた。 E. coliに対してもCEZのMICは1.56 μg /ml を中心に狭い範囲に分布しており耐性菌は認められなかった。しかし，他の薬剤ではかなり耐性側に広がりを見せており，それぞれ高度耐性株の存在が認められた。以上のことから，Staphylococcusに代表される他剤耐性のグラム陽性菌やE. coliに代表されるグラム陰性菌による乳房炎が増加しつつある現在，従来の薬剤で以って乳房炎に対応していくのは限界点に近づいてきていると考えられる。 CEZ は，第一世代のセフェム系抗生物質の中でもグラム陰性菌に対して作用が最も強い薬剤である"。今後の乳房炎防除対策の中で，CEZは耐性菌が出現していないことからも，グラム陽性菌のみならず，グラム陰性菌対策においても有用な薬剤になると考えられる。
(参　考)
最後にCEZの助物用医薬品承認内容を表12に示す。
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