株式会社山田養蜂場（本社：岡山県鏡野町、代表：山田英生）は、プラジル産プロポリスが季節性き¹ならびに新型き²インフルエンザウイルスによるダメージから細胞を保護することを確認しました。これまで、季節性インフルエンザウイルスに対するプロポリスの作用として、細胞への感染を抑制すること、ウイルス感染したマウスの死亡率を減少させることが報告されています。しかし、新型インフルエンザウイルスに対するプロポリスの研究報告はほとんどありません。そこで本研究では、細胞を用いた試験により、プラジル産プロポリスの季節性ならびに新型インフルエンザウイルスへの作用を調べました。
[研究概概要]
I . 試酸方法
試験には、 (1)プラジル産プロポリスの水抽出エキスと、 (2)プロポリスエキスを主成分としマヌカ蜂蜜賞4などを含む液状食品（以下、プロポリス含有液）を用いました。培養細胞に季節性または新型のインフルエンザウイルスを添加し、同時にプロポリスの水抽出エキスまたはプロポリス含有液を加えて3日間培養後、生き残った細胞の数を調べました。

※生き残った細胞の割合は、ウイルスを加えなかった場合を100%として算出。プラジル童プロポリスの航インフルエンザ作用
II.結果
季節性もしくは新型のインフルエンザウイルスを感染させた細胞において、3日間の培養後にほとんどの細胞が死滅しますが、プロポリスの水抽出エキスを0. 04%（w/v ɨ5）以上、またはプロポリス含有液を0.6%（v/v）以上加えた場合には、細胞の死滅を完全に抑えました。
II.まとめ
季節性および新型インフルエンザウイルスに対し、プラジル産プロポリスが抗インフルエンザ作用を持つ可能性があることが分かりました。 ー本件に関するお問い合わせ株式会社山田養蜂場文化広報室寺田、木村〒708-0393岡山県苫田郡鏡野町市場194 TEL:0868-54-1906 (月～金9:00～17:30、土日祝除く) FAX:0868-54-3346      http://www.3838.com
1．研究の背景
( 1 )インフルエンザの流行
インフルエンザは38℃を超える発熱と、長期にわたる頭痛、関節痛、全身の倦怠感といった強い全身性症状が突然発症することが特徴の呼吸器感染症です。免疫力の低下している高齢者などでは肺炎を引き起こし、また小児では脳炎･脳症を併発し、重篤な合併症に陥るという報告もあります。日本における季節性インフルエンザ達の流行時期は例年11月から翌年4月頃で、報告患者数は毎年数十万人、多いときには百万人を超えます。さらに、2009年には、これまでヒトの間で流行していなかった新型インフルエンザň ²が全世界で流行し、爆発的に大流行する脅威（パンデミック許³)として社会問題となりました。この新型インフルエンザは季節性インフルエンザの流行が少ないとされる夏季を通じて感染者数を増加させ、今もなお感染報告が続いています。
(2)インフルエンザの予防
インフルエンザの治療に用いられる薬としては、抗インフルエンザウイルス薬があり、主にタミフルが用いられています。抗インフルエンザウイルス薬は適切な時期（発症から48時間以内）に使用すると効果を発揮しますが、それ以降に服用した場合には十分な効果が期待できないとされています。また、副作用が問題となる場合があるため、インフルエンザは予防が最も重要です。
(３)プロポリスのインフルエンザに対する作用に関する研究
プロポリスはミツバチが巣を清潔に保つためにハーブの新芽や樹脂から作る物質です。プラジル産プロポリスは強い抗菌活性を持つことが知られており、数多くの研究報告がされています。これまでのプロポリスの抗インフルエンザ作用に関する研究では、1988年、H. Neychevらがマウスを用いた試験で、プロポリスの水抽出物がA型インフルエンザウイルス（H3N2）感染による死亡率を減少させたと報告しています。近年では、インフルエンザの流行とともに、プロポリスのインフルエンザに対する研究が活発化し、2008年には清水らの研究グループが、細胞試験において、プロポリスのエタノール抽出物がA型インフルエンザウイルス（H1N1）の感染を抑えたこと、また、同型ウイルスを感染させたマウスの死亡率を減少させたことを発表しています。
(4)研究の目的
今回の研究では、プラジル産プロポリスの抗インフルエンザ作用を調べる為、(1)プロポリスの水抽出エキスおよび(2)プロポリスエキスを主成分とし、マヌ力蜂蜜**などを含む液状食品（以下、プロポリス含有液）を用い、A型インフルエンザウイルス（H1N1：季節性インフルエンザウイルス）および新型インフルエンザウイルス（H1N1）への作用を調べました。
2.プロポリスの抗インフルエンザ作用
(1)試験方法
今回の試験には、プラジル産プロポリスの水抽出エキスおよびプロポリス含有液(プロポリスエキス、マヌカ蜂蜜、ローズバッツエキス、緑茶エキスなどを含む）を用いました。培養細胞(MDCK:イヌ腎由来細胞)に季節性または新型インフルエンザウイルスを加え、3日間培養すると、細胞はインフルエンザウイルスに感染して死滅します。本試験では、インフルエンザウイルスと同時に、プロポリスの水抽出エキスまたはプロポリス含有液を加え、3日間培養後、生き残った細胞数を数えました。
(2)試験結果
プロボリスの水抽出エキスおよびプロボリス含有液は、季節性または新型インフルエンザウイルスが細胞を死滅させることを抑えました(図1)。プロポリス水抽出エキスは0.04%(w/v)以上の濃度で、季節性および新型インフルエンザウイルスによる細胞の死滅を完全に抑制しました。プロポリス含有液は0.6%(v/v)以上の濃度で、季節性および新型インフルエンザウイルスによる細胞の死滅を完全に抑制しました。
国1
プラジル産プロポリスの抗インフルエンザ作用
インフルエンザウイルスを感染させずに培養した場合の細胞数を100%とした。インフルエンザウイルスを細胞に添加した場合には細胞が全滅したのに対し、ウイルスを細胞に添加するとともにプロポリスの水抽出エキスを0.04%以上、またはプロポリス含有液を0.6%以上加えた場合には、ほぼすべての細胞が生き残った。
3.まとめ
プラジル産プロポリスの水抽出エキスおよびプロポリス含有液は、季節性インフルエンザウイルスならびに新型インフルエンザウイルスによる細胞の死滅を抑えたことから、両ウイルスによるインフルエンザの予防に役立つ可能性があることが分かりました(図 2)。今後、詳細なメカニズムやヒトへの影響については、詳しく調べていく予定です。
園2　試験結果のまとめ
4.用語解説
注1）季節性インフルエンザ・・・日本では例年11月から翌年4月頃まで流行し、報告患者数は年間数十万人にのぼるウイルス性の感染症。インフルエンザウイルスにはＡ型、B型、C型があり、流行的な広がりを見せるのはA型とB型である。A型はその抗原性を毎年のように変化させるため、多くの亜型が存在する。近年、ヒトの間で流行しているのは、A型であるH3N2とH1N1、およびB型の3種である。注2）新型インフルエンザ・・・ 2009年4月にメキシコと米国より新型インフルエンザウイルス(A型、H1N1)として発生が報告されたブタ由来のインフルエンザ。6月にはWHO (世界保健機関：190 カ国以上が加盟）より世界的流行（パンデミック）であることが宣言されている。新型インフルエンザウイルスは弱毒性だが、動物実験において季節性のH1N1ウイルスよりも肺での増殖率が高く、より重症の肺炎を起こすことが報告されている。注3）パンデミック・・・ある感染症が世界的に流行すること。WH0は警戒すべき感染症の感染力や流行状況に応じていくつかのフェーズを設定しており、パンデミックはフェーズ6にあたる。フェーズ6とは、効率よく持続的にヒト−ヒト感染が確立している状態であり、具体的には、WH0の地域区分（アメリカ、欧州、中東、東南アジア、西太平洋）において、同地域で2カ国以上、異なる地域で1カ国以上の感染拡大があることである。注 4） マヌカ蜂蜜・・・ニュージーランドの原生植物マヌカから採集した蜂蜜。胃潰瘍・十二指腸潰瘍の原因となるピロリ菌を殺菌する働きがあると言われている。マヌカ蜂蜜の抗菌力は、ニュージーランド国立ワイカト大学のピーター・モラン博士が確立した抗菌力の指標、UMF (Unique Manuka Factor)値で表される。UMF値が大きいほど抗菌力が高く、UMF  10以上のものが高品質とされている。注5）  w/v, v/v・・・・溶液の濃度を示す単位の説明。ｗはweight（重量：例えばgやmgで表される）、vはvolume（体積：例えばLやmLで表される）を示す。通常、1 gの粉末を溶かして100 mLとした場合は1% (w/v =重量/体積)、1 mLの液体を100 mLに希釈した場合は1%（v/v =体積/体積）となる。