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1.はじめに
去る2022年5月18日から20日にかけて仙台国際センターで開催された第69回日本実験動物学会総会において，表記のタイトルでの講演の機会を頂いた。名前の通りセンダイウイルス（SeV）発見の地である仙台で，ウイルス発見70周年の節目に，ウイルス発見の当時を知る先生方に初めてお目にかかり,ご講演を拝聴し、ウイルス発見当時の空気を感じられたことは，多くの先輩方の培ってこられた歴史を受け継いでセンダイウイルス研究を進めている著者にとって，大変ありがたく，刺激になる体験であった。本編に入る前に，この度の講演の機会を下さった関係の先生方に心より感謝申し上げたい。
2.序論
センダイウイルス（Sendai virus,  SeV) は、1952年に東北大学で新生児肺炎の原因ウイルスとして初めて分離された。その後ほどなくして，本ウイルスが新生児肺炎の原因ウイルスであることは否定され,マウスを用いてウイルス分離を試みたことによるコンタミネーション, すなわちSeVはマウス由来のウイルスであることが明らかとなり,本来ならばそのまま忘れ去られるはずであった。しかし以下の２つの点から,ヒトの病原ウイルスではなかったにも関わらず注目をあびることとなった。まず1つは、日本各地の大学、研究所のみならず、世界中の実験用マウスから次々とこのウイルスが分離され、多くの実験用マウスがSeVに汚染されている実態が明らかとなり，実験動物対策上の問題が浮き彫りにされたことである。もう1つは、 1958年に大阪大学の岡田善雄博士らにより,ウイルスが細胞同士を融合させる能力をもつことがセンダイウイルスで初めて発見されたことである[1]。この性質を利用して異種細胞の融合を簡便に行うことが可能となり，ハイブリドーマの作製だけでなく，癌免疫・ワクチン研究や再生医療・細胞治療研究など、現在も様々な分野で幅広く活用されている。その後，SeV粒子の表面に突出するスバイク蛋白質の１つであるＦ蛋白質を介した膜融合による感染メカニズムが明らかとなり，さらに名古屋大学の永井美之博士らによって,近縁のニューカッスル病ウイルス（Newcastle Disease Virus, NDV）を用いて，この融合活性と病原性の関連が解明された［2］。これはSeVやNDVにとどまらず、インフルエンザウイルスなど多くのウイルスに適用可能な主要な病原性規定原理の1つであった。これらの大きな発見の後もSeV研究は勢いを失わず，ウイルス学研究の中でも先頭を走る成果を上げてきた。1986年には、塩田達雄博士（現大阪大学微生物病研究所）らによりSeVゲノム全長の塩基配列が解読された[3]。1996年には,これを基に永井美之・加藤篤博士ら（東京大学）によって,マイナス鎖RNAウイルスでは1994年ドイツのConzelmann博士らのグループの狂犬病ウイルスに続いて[4], cDNA化したウイルスゲノムからの感染性ウイルスのレスキューに成功した[5]。これにより組換えウイルスの作製が可能となり，任意の変異を導入したウイルスを用いた研究が可能となっただけでなく，これを応用したウイルスペクター開発への道が開けた。 SeVは、細胞宿主域が広く高増殖性で、安全性も高いことから扱いやすく，また実験動物として広く利用されているげっ歯類を自然宿主とするため，分子から個体レベルまでのシームレスな研究が可能である。これらの利点から，ヒトや家畜の病原ウイルスでは無いにも関わらず，ヒト及び動物の重要な病原ウイルスを数多く含むマイナス領RNAウイルスのプロトタイプとしてのウイルス学的研究だけでなく,自然免疫など宿主免疫との相互作用についても多くの研究がなされ,その発展に貢献してきた。また,蓄積されてきた成果は，遺伝毒性の無い様々な用途でのウイルスペクターの開発へと応用されている。以下では，ウイルス学的研究の例として，多彩な機能を発揮するSeVアクセサリー蛋白質,  SeV感染とI型インターフェロン系の関係,ウイルスペクターとしての応用などについて簡単に紹介したい。
3.アクセサリー蛋白質
マイナス領RNAウイルスでは共通して、ゲノム上にヌクレオカプシド蛋白質(N),リン酸化蛋白質(P),マトリクス蛋白質(M),スバイク糖蛋白質(F, HN,  Gなど),  RNA依存性RNAポリメラーゼ(L)がこの順に直列にコードされている（図1）。バラミクソウイルス科のウイルスのうち, SeV,麻疹ウイルス,ニバウイルス,ムンプスウイルスなどを含むバラミクソウイルス亜科では，他のマイナス領RNAウイルスとは異なり，P遭伝子のP蛋白質とは異なるフレームからＣ蛋白質が，また転写時に特定の部位にG残基が挿入されるRNA編集によりVやW蛋白質が発現する（図1)。これらのP遭伝子から発現するP蛋白質以外の蛋白質の欠損は，増殖効率を低下させる場合があるものの，ウイルスの複製は維持されることから「お飾り」すなわち「アクセサリー」蛋白質と呼ばれている。SeVのC蛋白質欠損ウイルスを作製した場合,増殖効率は著しく低下する。しかし，数回の継代で，複数箇所導入した欠損変異が復帰し，増殖性が回復する[6]。このことから, C蛋白質はただの[お飾り]では無く，ウイルスの増殖に重要な機能を担っていることが示唆される。実際に，著者らを含む様々なグループにより，SeVのＣ蛋白質が，ウイルス増殖の本質を担う,また免疫などの宿主応答をコントロールする様々な機能を発揮することが明らかとなった(表1)。
4. I型インターフェロン系との関係
近年様々な病原体関連分子パターン(Pathogen- associated molecular patterns,  PAMPs)と, これを認識して自然免疫応答を活性化するパターン認識受容体 (Pattern recognizing receptors,  PRRs)が同定されてきた。例えばRNAウイルス感染では，ウイルス由来RNA分子が宿主のRLRs（RIG-I-like receptors）と呼ばれるRIG-I (retinoic acid inducible gene-I) やMDA5 (melanoma differentiation-associated protein 5)などの細胞質内レセプターによって認識される。この認識により、宿主にI型IFN産生が誘導され、I型IFN受容体を介して様々なエフェクター分子(Interferon-stimulated genes; ISGs)の発現により抗ウイルス状態に至る（図2)。宿主内での自身の感染,増殖を有利に進めるために，様々なウイルスがこの自然免疫経路を阻害し，回避する能力を有しており,病原性発現の重要な一因となっていることが明らかにされてきている。他のウイルスに先駆けて，SeVのアクセサリー蛋白質であるＣ及びＶ蛋白質が，I型IFN経路を阻害することが明らかにされた[7, 8]。その後，I型IFN経路の単一の段階だけでなく，複数の段階を抑制していること[9–13],経路の抑制だけでなく，そもそもウイルス感染が宿主に認識されないようにRLRsを刺激するようなRNA分子の産生を抑制していること[14–16]などが明らかとなり,ウイルスが確実に宿主への感染をスタートさせ、効率よく増殖して子孫を拡散させるために，様々な側面から自然免疫を回避する危機対応策を薄じている様子が明らかとなった（図2)。また，その詳細な意義は不明だが，アクセサリー蛋白質は細胞死にも関与しており，Ｃ蛋白質がアポトーシスを抑制，Ｃ蛋白質のヴァリアントであるY蛋白質がネクロトーシスを亢進することが報告されている[17, 18]。この様にSeVは，多種多様に，かつ強力に宿主のI型IFN系を抑制，回避する仕組みを持つことが明
らかにされてきた。一方で，特に自然免疫研究の分野においては，I型IFN誘導時にSeVが用いられている。この相反する性質は何に起因するのであろうか？ 2010年にBaumらによって，実際のSeV感染でRIG-Iが認識するPAMPとして、コピーバック型欠損干渉（copyback-type defective interfering,  cbDI)ゲノムのRNAが同定された[19]。以前からマイナス鎮RNAウイルスを高力価で継代を繰り返すとcbDIゲノムが発生して，ウイルス様粒子（DI粒子）中に取り込まれ、ウイルスサンプル中に蓄積することが知られていた。著者らが自然免疫研究で広く用いられているSeVカンテル株（ATCC，VR-907）を入手したところ，その市販サンプル中に大量のDI粒子が含まれており，これが強力なIFN誘導因子となっていることが示された[20, 21]。DI粒子の存在はウイルスの増殖に抑制的に働くことから，著者の学生時代の恩師（河合明彦博士［京都大学］）より，DIゲノム／ DI粒子の発生を防ぐためにウイルスを増やす際には低いウイルス量からじわじわと増やさないといけない，と教わったことを思い出し，詳細な解析を行ったところ、このDI粒子の由来は、ウイルス増殖中に，DI産生性を獲得したウイルスが偶発的に出現したことによることが明らかとなった[21]。ここで得られたDI産生性ウイルスクローンは, cbDIゲノムを恒常的に産生し，I型IFN産生を強力に誘導する。自然免疫を賦活化するPAMPsがアジュバント効果を発揮することが知られており、実際にSeVのdbDIゲノムが高いアジュバント効果を発揮することが報告されている[22]。著者らは，上記のcbDIゲノム産生性クローンの高いアジュバント効果を確認しており，新しい高効率ワクチンペクターのバックボーンとしての応用が期待される。
5.その他の研究と応用
①自然界でのウイルスの長期維持メカニズムについてセンダイウイルスがげっ歯類に呼吸器病を起こすウイルスであることは間違いなく，世界中の研究用マウスが感染していたことは事実であるが、実は自然界での宿主は同定されておらず、自然界のぼっ歯類で蔓延している事実も確認されていないだけでなく，野生のネズミからの分離例も知られていない。その一方で，最近，メタゲノム解析によりセンザンコウからコロナウイルスに加えてセンダイウイルスが検出されている[23]。また，げっ歯類が自然宿主だとしても，SeVのような急性感染性のウイルスが自然界で長期に渡ってどの様に維持され続けているのか，そのメカニズムは全く明らかにされていない。 SeVを始めとする様々なマイナス鎖RNAウイルスでは，偶発的な変異により持続感染性が獲得される場合があることが知られており、著者らも生体温度での増殖性を保持した持続感染性ウイルスを得ることに成功している。このようなウイルスの出現が自然界でのウイルスの維持に関与しているのかもしれない。
②ウイルスゲノム遺伝子間配列により遺伝子発現調
節機構
先に述べたように，一本領マイナス鎖RNAウイルスのゲノム上には，全てのウイルスで同じ順番に各ウイルス蛋白質をコードする遺伝子が直鎖状に並んでコードされている（図1）。これらの各遺伝子は, 1から数十塩基の遺伝子間領域で隔てられており,上流遺伝子から順番に転写されるが，下流に行くに従って転写量が減少する。すなわち,各遺伝子のコードされた順番は，各蛋白質の必要量を反映している。著者らは最近，この並び順だけではなく，各遺伝子間に存在する塩基配列によっても遺伝子の転写量が創御されていることを見出した。
③ウイルスベクターとしての活用
SeVは，これまでにも述べてきたように，ぼっ歯類以外に病原性が無いこと，染色体に傷をつけず遺伝毒性が無いこと，細胞宿主域が広いこと，増殖性が高いことなど，ウイルスペクターとして優れた性質を有している。さらに，基礎研究により蓄積した豊富な知識を利用した性能の改変が可能であり，例えば複数の外来遺伝子を発現させたり，持続感染性を付与したり（上記①など）温度感受性変異体やウイルス干渉作用を利用することで任意の時点で感染ウイルスを除去したり，自立増殖性を欠損した半生ウイルス化を行ったり，スパイク蛋白質の改変により細胞種や組織に対する特異性を変更したり，導入遊伝子の発現量を調節したり(上記②)といった,様々な用途に応じた性能のチューニングが可能である。実際、様々な遺伝子治療用ペクターとして臨床試験が進められており，株式会社IDファーマの発売する高効率iPS細胞作製用ベクター（CytoTune®シリーズ）は広く世界中で使用されている。これらに加え，基礎研究用途でも特定組織のトラッキングペクターやゲノム編集用ペクターなども開発されている。また著者らも，様々な真核細胞で適用可能な高効率蛋白質産生用ペクターの開発を進めている。
6.終わりに
SeVは，ヒトや家畜に病原性を示さない「重要でない」ウイルスであるにも関わらず，この日本で発見されたウイルスは，主として日本の研究者による教密で粘り強い研究やセレンディピティにより発展し続けており，ウイルス学的貢献の蓄積のみならず，多様な分野への広がりを見せている。今後も、多くの先生方との共同研究,ディスカッションを通じて,この日本初のウイルスを広く役立つツールとしてさらに発展させる一翼を担うことができれば、これほど光栄なことはない。最後に，本稿の趣旨とはすこし外れるが，現在著者は，東京大学医科学研究所の佐藤佳教授が主宰するウイルス学研究コンソーシアム「G2P-Japan」のコアメンバーとしても活動を行っている。このコンソーシアムでは，国内の複数の研究機関の若手，中堅研究者がそれぞれの得意分野を担当し、2019年から現在に至るコロナバンデミックの勃発という有事において,海外グループを変駕する質の成果を, Nature誌, Cell誌などの所謂TOPジャーナルにいち早く発表し続けている。このような研究コンソーシアムの構築は，感染症分野のみならず様々な分野の研究を効率化し，発展させるものであると考える。現在，基礎研究者を志す若手の減少が問題となっているが、本コンソーシアムでは次代につながる若手研究者の育成を進めることも目標としている。少しでも興味を持たれた若手研究者（とその卵）の方は，主宰の佐藤教授または著者にご一報いただければ幸いである。 1. 2. 3. Okada Y. The fusion of Ehrlich's tumor cells caused by HVJ virus in vitro. 1958. Biken's J. 1: 103–110. Nagai Y, Klenk HD, Rott R. Proteolytic cleavage of the viral glycoproteins and its significance for the vi- rulence of Newcastle disease virus. 1976. Virology, 72: 494–508. Shioda T, Iwasaki K, Shibuta H. Determination of the complete nucleotide sequence of the Sendai virus genome RNA and the predicted amino acid se- quenced of the F, HN, and L proteins. 1986. Nucleic Acids Res. 15: 2927–2944. Conzelmann KK, Schnell M. Rescue of synthetic ge- 4: nomic RNA analogs of rabies virus by plasmid-en- coded proteins. 1994. J Virol. 68: 713–719. Kato A, Sakai Y, Shioda T, Kondo M, Nakanishi M, 5. Nagai Y. Initiation of Sendai virus multiplication from transfected cDNA or RNA with negative or po- sitive sense. 1996. Genes Cells, 1: 569–579. Yoshida A, Sakaguchi T, Irie T. Passage of a Sendai 6. virus recombinant in embryonated chicken eggs le- ads to markedly rapid accumulation of U-to-C tran- sitions in a limited region of the viral genome. 2012. PLoS One, 7: e49968. Gotoh B, Takeuchi K, Komatsu T, Yokoo J, Kimura 7. Y, Kurotani A, Kato A, Nagai Y. Knockout of the Sendai virus C gene eliminates the viral ability to 8. prevent the interferon-alpha/beta-mediated respon- ses. 1999. FEBS Lett. 459: 205–210. Komatsu T, Takeuchi K, Yokoo J, Gotoh B. C and V proteins of Sendai virus target signaling pathways leading to IRF-3 activation for the negative regula- tion of interferon-beta production. 2004. Virology, 325: 137-148. Takeuchi K, Komatsu T, Yokoo J, Kato A, Shioda T, 9. 10. Nagai Y, Gotoh B. Sendai virus C protein physically associates with Statl. 2001. Genes Cells, 6: 545–557. Kiyotani K, Sakaguchi T, Kato A, Nagai Y, Yoshida T. Paramyxovirus Sendai virus V protein counte- racts innate virus clearance through IRF-3 activa- tion, but not via interferon, in mice. 2007. Virology, 359: 82-91. 11. Irie T, Nagata N, Igarashi T, Okamoto I, Sakaguchi T. Conserved charged amino acids within Sendai virus C protein plays multiple roles in the evasion of innate immune responses. 2010. PLoS One, 5: e10719. 12. Irie T, Kiyotani K, Igarashi T, Yoshida A, Sakaguchi T. Inhibition of interferon regulatory factor 3 activa- tion by paramyxovirus V protein. 2012. 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Virus multiplication and induction of apoptosis by Sendai virus: role of the C proteins. 2003. Microbes infect. 5: 373–378. Schock SN, Chandra NV, Sun Y, Irie T, Kitagawa Y, 18. Gotoh B, Coscoy L, Winoto A. Induction of necrop- totic cell death by viral activation of the RIG-I and STING pathway. 2017. Cell Death Differ. 24: 615–625. 19. Baum A, Sachidanandam R, García-Sastre A. Prefe- rence of RIG-I for short viral RNA molecules in in- fected cells revealed by next-generation sequencing. 2010. Proc Natl Acad Sci USA. 107: 16303–16308. 20.  Mercado-López X, Cotter CR, Kim WK, Sun Y, Muñoz L, Tapia K, López CB. Highly immunosti- mulatory RNA derived from a Sendai virus defective viral genome. 2013. Vaccine, 31: 5713–5721. 21. Yoshida A, Kawabata R, Honda T, Sakai K, Ami Y, Sakaguchi T, Irie T. A Single Amino Acid Substitu- tion within the Paramyxovirus Sendai Virus Nucle- oprotein Is a Critical Determinant for Production of Interferon-Beta-Inducing Copyback-Type Defective Interfering Genomes. 2018. J Virol. 92: e02094-17. 22.  Martínez-Gil L, Goff PH, Hai R, García-Sastre A, Shaw ML, Palese P. A Sendai virus-derived RNA agonist of RIG-I as a virus vaccine adjuvant. 2013. J Virol. 87: 1290–1300. 23.  Liu P, Chen W, Chen JP. Viral Metagenomics Re- vealed Sendai Virus and Coronavirus Infection of Malayan Pangolins (Manis javanica). 2019, Viruses, 11: 979.維持会員便り～ライフサイエンスに貢献する。それが私たちの仕事です。～三協ラボサービス株式会社営業部 営業3課（札幌営業所） 小玉雄介私は三協ラボサービス株式会社営業部営業３課に所属している小玉雄介と申します。この度は我々の事業についてご紹介させていただくとても貴重な機会をいただきまして誠にありがとうございます。私が所属している札幌営業所は北の大地北海道の札幌市清田区（札幌市の一番端っこ）にございます。我々の拠点として札幌営業所の他に３拠点ありまして、東京本社(営業１課,受託部,総務部,事業推進室／東京都江戸川区） 北陸営業所(営業2課／富山県富山市)，つくばラボ(技術部／茨城県土浦市）がございます。この４拠点を中心に動物実験に関わる薬務を多岐にわたって行っております。少しでも多くの方々に「三協ラボサービス株式会社」を知っていただけますと幸いです。 1976年9月に東京都町田市に設立と同時に北陸エリアの拠点として北陸営薬所も開設した所からスタート致しました。札幌営業所は1980年11月に開設されました。 「人類の福祉と繁栄に寄与し，社会に奉仕する」という経営理念のもと，動物福祉を理解・認識して衆務にあたることはもちろん、関係者の皆様と協力しながら動物福祉に配慮した動物実験のサポートに努めております。事業内容としては，弊社は実験動物プリーダーである日本エスエルシー株式会社の代理店として，実験動物の販売(マウス,ラット,モルモット,ハムスター，ウサギ等）を主軸に実験動物用飼料の販売，実験動物用床敷の販売,動物実験関連機器・器材の販売,実験動物施設・設備・機器の販売,実験動物飼育管理薬務受託，動物実験の支援・代行，実験動物の維持・繁殖薬務受託，実験動物施設クリーンアップ，実験動物の輸送と幅広く対応しております。次に事業内容の中でいくつかピックアップしてご紹介いたします。札幌営業所の主力業務の１つです。ご注文をいただいたマウス,ラット,モルモット,ハムスター,ウサギ等の動物は，生産所である日本エスエルシー株式会社(静岡県浜松市)より夜中の0:00頃に出荷され,我々の各拠点に届けられます。関東エリアは東京本社，北陸エリアは北陸営業所，北海道エリアは羽田空港から空輸で新千歳空港まで輸送されます。そこからはトラック,ハイエース,コンテナ型軽トラックなどの動物輸送用に空調設備を搭載した車両を用いて輸送されます。ドライバーは猛暑になる夏も極寒に写真　札幌営業所の動物輸送用2tトラックなる冬(特に北海道)も輸送中のコンテナ内が適温になる様に温度管理をしながら輸送ストレスを最小限に抑える輸送経路を選択し，出荷から凡そ８～ 16時間程度でお客様の元までお届けいたします。ドライバーの殆どが営業マンでもあるところが特徴です。株式会社星野試験動物飼育所,一般財団法人動物繁殖研究所などが生産する実験動物も弊社でお取り扱いしており，げっ歯類以外にもプタなどの大動物まで幅広く対応が可能です。 1976年に国立衛生試験所からサービスを開始した長い歴史と実績を基に，飼育管理業務及び実験動物施設運営をトータルにサポートいたします。長年のノウハウと豊富な人材により，一般飼育管理から高度技術の提供に至る幅広い業務を展開しております。各部署との連携により，新規施設の稼働時及び施設クリーンアップとSPF化, 器具器材のご提案と調達、動物入荷と飼育管理及び環境管理など、全社を挙げてバックアップいたします。 Germ-free animalsと呼ばれ，検出できる微生物が一切存在しないマウスです。無菌状態に維持されたビニールアイソレータにおいて,与えられる床敷,飼料,飲水はすべて減菌されたものを使用しており，アイソレータ内のエアーは菌を通さないフィルターから強制的に送風された環境で飼育されております。無菌マウスはつくばラボにて維持・繁殖しております。 2007年10月に無菌化されたTsl:BALB/cCr[GF], 2009年５月に無菌化されたTsl:C57BL/6NCr[GF], 2013年８月に無菌化されたTsl:ICR[GF]の３系統がございます。輸送には無菌マウス専用コンテナを使用して無菌状態が維持された状態でお客様の元へお届け致します。 Russell, Burchによって「3Rの原則」が提唱されたのは1959年です。しかし，その理念が日本の法律に盛り込まれたのは2006年に「動物の愛護及び管理に関する法律」が改正されてからです。更にその理念の実現に至る道程は決して簡単ではありません。特に「できる限り動物を供する方法に代わり得るものを利用する」ためには，研究の性質上多くの制約が伴います。「代わり得るもの」つまり代替物を「発見」することは容易ではありません。そこで，実験動物販売，実験動物飼育管理業務受託及び自社施設での動物実験受託試験業務を行っている我々にしかできない「何か」があるはずだ，と考え，模索を続けてまいりました。そして生まれたのが本シミュレーター [Mimicky*Mouse]です。実験動物として汎用性のある動物は，一般の人にとって決して身近な動物ではありません。動物実験を必要とする研究にこれから携わろうとする人々,また初心者でも事情は同じです。慣れない動物を扱おうとすれば恐怖心が先立つものです。この恐怖心を動物は敏感に感じます。そしてそれは動物にとって激しいストレスになります。たとえば保定という最もシンプルな動作ですら，習熟者であっても尻尾をつかまれて，宙に浮かされるだけで動物はストレスを感じます。初心者による保定であれば，動物の感じるストレスは一層大きくなります。実験動物技術者は導入教育や手技練習の機会,例えば一般状態観察や経口投与などの実際の観察や投与をする前に，受講者の手つきや保定を見ただけで,その最終的な仕事(動作・作業)が「できる」か「できないか」がわかります。それは，自らが繰り返し行ってきた手技がすべて頭の中で動線(流れ)として完成しているからです。 Mimicky®Mouseを使用することにより，実験動物取扱手技の一定の習熟が可能になります。実際の動物の「使用数の削減」のみならず,「できる限り苦痛を与えない」という3Rのすべての理念の実現に貢献できるシミュレーターがMimicky®Mouseです。生体を使用する前に保定・投与等の反復トレーニングに用いることで，より動物福祉に則った，精度の高い動物実験を行っていただくこと，これがMimicky®Mouseのコンセプトです。東京・富山・札幌の営業拠点はもちろん,協力会社のネットワークにより北海道から沖縄まで全国の研究機関へ輸送実績がございます。動物輸送用に空調設備を搭載した車両を用いて輸送中の温度環境を創御いたします。また，長年の経験を活かし、動物へのストレスを最小限に抑えた輸送経路の提案をいたします。遭伝子改変の有無に関わらず，専用の輸送ボックスを使用し，輸送動物の逃亡防止については万全を期しております。動物施設の移設・移転，改修工事などによる動物の一時預かりにも対応が可能です。ここまでいくつか事業内容をご紹介いたしましたが，私が勤める北海道事情をちょっとした苦労話を交えて少しご紹介いたします。皆様もご存じの通り，北海道は島国です。実験動物がお客様のお手元に届くまでに必ず空輸が必要となります。基本的には新千歳空港及び旭川空港まで輸送された動物を引き取り，配送薬務がスタートいたします。雪の影響で航空便が新千歳空港に予定通り到着しないことがあります。羽田空港に引き返してしまうなんてこともあります。搭載便が欠航して変更になったり，滑走路の除害が完了するまで着陸出来ないため空中で旋回しながら待機している航空便を眺めながら我々も何時間も空港貨物エリアで待機もします。ちなみに旭川空港は最高の除雪技術を有し滑走路が新千歳空港と比べてコンバクトなこともあるためか，天候を理由とした欠航がほぼなく，就航率99.7％！と言われております。遅延したとしても羽田空港に引き返したりはせずに到着します。企業努力,本当に尊敬します。以前に，害ではありませんが，初夏に台風の影響で新千歳空港に着陸出来ず，函館空港に到着空港が変更となり，札幌から函館空港まで動物を引き取りに行ったこともありました。ちなみに札幌から函館空港までは約300 kmです。高速道路を使用しても4 ～ 5時間程度要します。動物を載せて札幌に帰着した頃にはAM0:00をまわっておりました。その際は実験動物の到着をお待ちになられているお客様に事情をお伝えし，翌日納品で対応いたしました。航空便だけではなく，高速道路も我々にはとても重要です。しかし、冬は雪の影響でかなりの頻度で通行止めになります。旭川市内に向かう道央自動車道は特に止まります。そうなると下道の国道は渋滞し，高速道路は「ここで出よ！」と電光掲示板に表示され，降りたくもないICで渋滞に巻き込まれながら降りる羽目になります。北海道はあまり渋滞することがないので渋滞に慣れておらず，その時点で体力が相当前られます。ちなみに札幌から旭川までは約150 kmです。帯広に動物を届けることもあり,峠を越えます。基本的には道束自動車道を使用いたしますが，なんと1車線です。走行車線と追い越し車線が分かれていないため、いつも我々の後続車は渋滞しがちです。札幌から帯広は約200 kmです。昨シーズンは札幌市内の何年振りかの大害で害害の年となりました。幹線道路は車線が半分になり大渋滞。ナビではどこの道路も真っ赤っかの渋滞表示をはじめて見ました。私は普段の通勤時間が車通勤で35分程ですが，４時間掛かる日もありました。中道は0.75車線くらいになり，除雪が追いつかずに道路がガタガタで雪にハマってしまい，ロードサービスの到着を待ちわびている人がそこら中にいます。もちろん，スタッドレスタイヤは皆装備しております。車高の低い車はバンバーが外れたり割れたりで車屋さんは修理依頼が殺到し，大変だったと伺いました。住宅街ではほとんどの家の人が何時間もかけて雪掻きでクタクタになっていました。弊社は積雪10 cm以上で害除をしていただける契約を結んでおり，通常は出勤する頃には駐車場が綺麗に除害されていますが，除害依頼が殺到しすぎて弊社まで除害が間に合わず，私が出勤しても会社前の駐車場は雪で車も入れません。先ずは車を入れるための雪掻きから１日がスタートすることが続きました。今シーズンはそうならない事を願っております。同じ北海道の主要都市でも都市間で結構距離があります。北海道の大きさと雪の脅威が伝われば幸いです。我々は研究者の皆様の動物実験に少しでもお力になりたく日々薬務を行っております。第一に実験動物を安定供給することはもちろんですが，動物実験でお困りの事であったり，実験に必要な物をお求めの際は弊社を思い出していただいてお声掛けいただけますと幸いです。研究者の皆様と近い距離感でこの業界に貢献する事を目指しております。今後もご愛願いただけますようどうぞ宜しくお願い申し上げます。最後までお読みいただきまして誠にありがとうございました。関西医科大学  附属生命医学研究所  モデル動物部門村山正承この度，日本獣医生命科学大学倉岡睦季先生からのご紹介で会員便りを執筆させて頂くことになりました。関西医科大学の村山正承(まさのり)と申します。『テーマはお任せ』とお話を頂いたのですが，さてどうしようかと悩み，改めて実験動物ニュースを読み返しています。どのテーマも興味深いですね。盆々何を書こうか悩んでしまいました。。悩んだ挙句，実験動物を用いた研究活動のきっかけは恩師である岩倉先生との出会いだったので，懐かしみつつ書き出してみます。まず簡単に自己紹介です。現在，関西医科大学附属生命医学研究所モデル動物部門で働いています。基本的には一人で仕事をしているのでなかなか思うように仕事が進んでいませんが，学内外の共同研究者の先生方にサポートして頂いてどうにかやっています。好きなことはバドミントンです。中学から始めて大学でもほとんど毎日と言ってよいくらいバドミントンをしていました。大阪に引っ越してからは新型コロナウイルスの流行もあって全然ラケットを握っていないので寂しいものです。コロナが落ち着いたら関西医大の部活にお邪魔して学生を研究医養成コースに勤誘したいと思っていますがどうなることやら。さて，真面目に自己紹介をしますが，群馬大学工学部を卒業後に東京大学新領域創成科学研究科情報生命科学専攻に進みました(今はメディカルゲノム専攻と合併してメディカル情報生命専攻と改組したようです)。そこで配属を希望したのが，岩倉洋一郎教授の主宰する研究室でした。当時，岩倉先生は東京大学医科学研究所のヒト疾恵モデル研究センターのセンター長としてご活躍されていました。大学院に進学することで初めて医科学研究に触れたので新鮮で刺激的な毎日だったのを思い出します。東京理科大学へ移られた現在もそうですが，岩倉先生の居室はいつでもドアが開放されていたので気軽に話を出来たのが良い思い出となっています。ミーティングでは学生としてというより,岩倉先生とドイツ, Bambergにて一人の研究者として対等に議論をして下さった経験が今の研究活動にも活かされています。生意気な学生だったとは思いますが辛抱強く指導して頂きました。時には大声を張り上げて激しい議論をしましたが，今は私も大人になりましたよ（笑）。印象深い指導の1つが実験動物に対する姿勢でした。岩倉先生自身が２系統の関節リウマチモデルマウスを見出されたこともあり(Iwakura et al., Science. 1991, Horai et al., J Exp Med. 2000), 毎日マウスを観察することの重要性を指南して頂きました。その指導のおかげで，まだ未発表ながら疾患を自然発症する遺伝子改変マウスを見出すことが出来ました。また，直属の上司として指導して下さったのが角田茂先生（現東大農学部准教授）です。指導する側になって痛感していますが，茶人の学生に指導するのは大変だったと思います。本当にお世話になりました。角田先生に伝授して頂いた焼肉の焼き方はちゃんと今も実践しています！冗談はさておき，ご存知の先生方も多いと思いますが、角田先生は博識なので実験で行き詰まると未だに助けを求めてしまいます。背中を追いかけて頑張っていますが，まだまだ追いつけないので精進あるのみです。広い視野で研究をするには常に勉強をして知識を積み重ねることが大事であることを学びました。もう一人，とても可愛がってくれた先生が西城忍先生（現千葉大真菌センター准教授）です。愛情がなければ実験しても良いデータは出ないよ！と言われたことを今でも思い出します。たしかにその通りです。その教えを引き継ぎ，私は学生を勧誘するときやオープンキャンパスで受験生や保護者の方々に「自分の研究テーマを誰が一番知ってると思う？」と聞きます。学生は『教授じゃないですか？』と言いますが、「違うよ！手を動かして研究してる自分なんだよ.世界で誰も知らないことを今初めて自分が明らかにしてるんだよ！だから研究は面白いんだよ」と話します。そうすることで興味を持ってくれる学生もいるので研究者冥利に尽きます。さて前置きが長くなってしまいましたが，岩倉先生の門下生となった私は，角田先生の指導の下で遺伝子改変マウスの作製と解析を始めました。関節リウマチの治療薬として炎症性サイトカインであるIL-6とTNF-αを標的とした抗体製剤が知られています。これらは非常に有効ではありますが，残念ながら治療が功を奏しない患者さんもいらっしゃいます。岩倉研の２系統の関節リウマチモデルはIL-6とTNF-αに対する依存性が異なることから,これらを比較解析することで関節リウマチを根本から治療する標的を見つけようとしていました。その中で私の研究標的となったものは補体Clqに類似した構造を持つタンバク質, CTRPファミリー分子でした。幸いなことに，遺伝子改変マウスを３系統樹立することに成功し，学位取得は少し遅れてしまいましたが学術論文として報告することが出来ました(Murayama et al., BBRC. 2014, Nat Commun. 2015, Front Immunol. 2021）。今はCRISPR-Cas9システムによる遺伝子改変マウス作製が主流となっていますが，当時はES細胞を使った凝集胚キメラ法で遭伝子欠損マウスを作製しました。このとき初めてキメラマウスを目にして感動した覚えがあります(図1)。「世界で初めて！」の研究に一歩足を踏み込んだ瞬間でした。作製したマウスを用いて関節リウマチ・多発性硬化症・乾癬など様々な疾患モデルを誘導した経験は、今の研究を支える基盤となっています。 5年間東大医科研で過ごした後に，東大を定年退職された岩倉先生と共に東京理科大学へ移動し研究を継続しました。理科大では岩倉先生の尽力により新しい実験動物施設が建設され，新たに設置されたヒト疾患モデル研究センターでは発生工学支援に携わり,国内外の研究者と交流することが出来ました。学生の指導も大変でしたが楽しい思い出が残っています。 10年の長い時間を岩倉研で過ごした後は鈴木登先生が主宰する聖マリアンナ医科大学免疫学・病害動物学教室へ移動し、新たな疾患モデルマウスの解析に携わりました。特に認知症モデルマウスを用いた行動解析は初めての経験でしたが，免疫学研究にも応用できる点が多々ありました。岩倉研・鈴木研での研究成果に関連して実験動物学会で奨励賞を頂けたことに感謝しています。現在所属している関西医科大学では細々と実験を続けていますが，これまでの研究経験を活かしていくつか免疫疾患のモデルマウスを導入し共同研究を進めています。また，共同研究者として岩倉先生には引き続きご指導頂いています。先に所属していた聖マリアンナ医大は教授が代替わりし宮部斉重教授が新たに着任されました。宮部先生とは「世界で初めて！」の疾患モデルマウスの開発を進めているところです。再来年,もう少し遅くなるかもしれませんが,実験動物学会でお披露目できるように精一杯頑張っていきたいと思います。徒然と思いついたことを書き殴ってしまいましたが，恩師である岩倉先生・角田先生の指導により研究者として自立することが出来ました。この場をお借りして感謝申し上げます。昨日，京都の五山送り火を初めて鑑賞しました。まだまだコロナ禍ではありますが，一日も早く終息するよう我々研究者も頑張らねば！と身を引き締めました。ですが何より心身ともに健康であることが一番大切です。読者の先生方もくれぐれもご自愛ください。 NBRPラットで得られた貴重な経験京都大学大学院医学研究科  附属動物実験施設予田昂太郎有用な生物資源を「収集・保存・提供」する我が国の事業,ナショナルバイオリソースプロジェクト(NBRP)は2002年度から始まり，今日では国内外の研究者にはなくてはならない事業となっています。私は博士号取得後に2018年度からプロジェクトの一つであるNBRP「ラット」に参加させていただきました。ラットリソースを運営する仕事をする傍らで自由に研究もさせていただきましたが，一般的なポスドクと呼ばれる立場ではなかなか経験できない貴重な経験をたくさんさせていただきましたので，本会貝便りで書かせていただきます。 NBRPラットは京都大学大学院医学研究科附属動物実験施設を中核的拠点として，2002年から現在まで近交系,自然発症ミュータントの近交系,コンジェニック,リコンビナント近交系,トランスジェニック，ゲノム編集等，様々な系統を国内外から収集し続け，凍結胚・凍結精子・生体で保存を行い，2022年10月現在で785系統のラットが提供可能となっております。全ての系統はNBRPラットのWebサイトで検索して系統情報を簡単に確認することができます（http://www.anim.med.kyoto-u.ac.jp/NBR/strainsx/ Strains_listJp.aspx）。また，系統情報はアメリカのラットゲノムデータベース(RGD) (https://rgd.mcw.edu/)にもリンクさせており，より多くの研究者に見ていただけるようになっています。また，アメリカにもRat Resource & Research Center (RRRC) (https://www. rrrc.us/)と呼ばれるラットリソースを収集して提供する機関がありますが，こちらは提供可能数が502系統であり，NBRPラットが世界最大のリソースセンターとなっています。近年では，CRISPR/Cas9の普及によって遺伝子改変が困難だったラットでもノックアウトやノックインができるようになり，ラットの利用価値がさらに高まってきました。実際に最近の寄託の多くはゲノム編集ラットになっています。奇託されたラットの情報はWeb上で公開されることになりますが，対象系統を用いた論文が採択されるまでは情報の公開を待つなど，ユーザーにとって利用しやすい対応もしております。また，飼育スペースの関係でご自身のラボや施設で飼育・繁殖・実験が困難な場合，実験群を用意したり，NBRPラットの系統を使う代わりに，こちらの施設でスタッフが飼育や繁殖をしたり，実験室の一部を使用できるレンタルラボも今年度から始めるなど，様々な要望に応えられるようにしております。 NBRPラットで仕事をするようになった経緯実は，私はNBRPで仕事を始めるまではラットを触ったこともなく，知識も全くありませんでした。大学院時代はマウスの箸床前胚を対象にしたラボに在籍し，受精卵のリプログラミングについて研究していました。体外受精やマイクロインジェクションを主な実験手法として，受精前後に働くタンパク質やDNA ・ヒストンのエピジェネティック修飾について調べていました。当時は論文がうまくまとまらず，投稿直前というところまで来ては指導教員と話し合って書き直すということを何度も繰り返していました。学位取得後は,ポスドクになりたいと思っていましたので、就職活動もしておらず、D3の後半になった頃には精神的にかなり追い込まれた状態でつらかったです。今となっては，データを多面的に見られるようにするトレーニングだったのだと思いますが.生きた心地がしませんでした(笑)。学部生の時は高校の理科の教員を目指して教職の勉強をしていましたので,やはり研究者の道ではなく,教員の道へ方向を戻そうかと思っていた丁度そのタイミングで，京都大学大学院医学研究科附属動物実験施設の浅野雅秀先生のラボで当時大学院生をしていた友達から, 「NBRPラットで研究員を募集するけどどう？」という情報をいただき，浅野先生にコンタクトをとって応募し，採用していただきました。投稿論文は本当にギリギリでしたが何とかアクセプトいただき，博士論文を提出後，公聴会で発表して学位を取ることができました。研究対象がマウスからラットに変わって感じた苦労2018年4月から浅野先生のラボに移り，NBRPで広報活動や寄託・提供の事務手続きの一部を行う傍ら、浅野先生のテーマ＋自由な研究をしてよいと言われ，新しい研究生活が始まりました。ラットで研究を始めたときは，テーマを考えるのにとても苦労しました。まずはラットの扱いに慣れるところからでしたが，ラットはマウスよりも約10倍もの大きさがあり，噛まれたらと思うと，恐怖でなかなか保定できませんでした。また，ラットの場合は体外受精させた受精卵を移植してもほとんど生まれず，非常に難しいということを初めて知りました。私はマウスの精子と卵子を体外受精させる技術を使って生命現象を明らかにする手法を学んできたため，胚発生に関するテーマを考えても,マウスより大きく,生殖工学の技術が遅れているラットをわざわざ扱うよりも，初期胚に関する研究は技術が確立してデータが蓄積されているマウスを使った方がよいという考えがあったので、なかなか進めることができませんでした。研究のバックグラウンドが元々ラットなら,そのまま抵抗がなくラットを使っていたかもしれません。 2018年の当時，NBRPラットで生殖工学部門を担当されていた特定准教授の本多新先生(現自治医科大学教授）が，個体復元・飼育管理等の業務を行いつつ，安定的にラットの体外受精をできるようにする技術を開発されました。この時期は私がテーマ選びについて悩んでいた頃ですが，本多先生のこの研究のお手伝いさせていただきながら,体外受精卵を使って効率よくゲノム編集ラットを作製する技術を開発した論文を共著で発表することができました(Honda et al., Sci. Rep., 2018)。この研究を通して，ラットの生殖工学を学び，エレクトロポレーションによる簡便なゲノム編集も一人でできるようになりました。しかしながら,このノックアウト技術はインデル変異を導入する効率が高過ぎるために，両アリルで欠損すると致死となる遺伝子についてはヘテロ欠損の個体を作製することが困難となります。浅野先生のテーマで，マウスでホモ欠損になると致死となる遺伝子について，ラットでも調べるために，まずはヘテロ欠損の個体を作製しようとしましたが，何度行ってもすべての個体が致死となり，生まれてきませんでした。それだけ両アリルにインデル変異を入れる効率が高いということになると思います。このときは，受精卵ではなく，翌日まで培養した2細胞期胚の片側割球の細胞質にだけgRNAとCas9タンバク質の複合体をマイクロインジェクションすることでキメララットを作製し,そのラットをWTと交配させてヘテロ欠損個体を得ることができました。 2020年，本多先生が自治医科大学へ移られることになり，特定助教として個体復元や生殖工学技術の開発業務を引き継ぐことになりました。先ほども書きましたが，ラットでは生殖工学の技術開発が遅れており，マウスのように液体窒素で凍結保存された精子を融解して体外受精することがとても困難と言われています。麻布大学ではラットの生殖工学の技術開発が進められており，卵黄を用いた保存液で凍結した精子を使い，体外受精で産仔を得られるようになってきていますが(Seita et al., Biol Reprod, 2009),体外受精で産仔を得るのは難しいということもあり，これまでNBRPラットでは顕微授精で個体復元をしていました。ラットの精子はマウスとは異なり，先端が曲がった形状で，インジェクションの針では細くて複数の精子の頭部を充填することができないので，連続して卵子に精子の頭部を手早くインジェクションしていくことができません。毎回，精子の頭部を1つだけインジェクション針に充填してから卵子に注入し、また精子を1つ充填する作業を1日中繰り返すことになります。とても大変な作業になり，複数の系統の個体復元依頼があると同時に行うのは困難です。一方で，インジェクションの針を太く作製して，精子頭部を複数充填してマウスの方法で頭微授精しようとすると卵子の死亡率が高くなります。そのため，やはり凍結精子を用いた安定的な体外受精の技術開発が必要になります。熊本大学もラットの生殖工学の研究を進められ，凍結精子を用いて高効率に体外受精ができる技術を2020年に確立されました(Nakagata et al., Si. Rep., 2020)。私たちはこの方法を少し改変し，これまでにNBRPで凍結してきた精子をそのまま利用して新鮮精子と同程度(80 ～ 90％程度）の高い受精率で受精卵を得て，産仔を取ることに成功しました。さらに，現在，理化学研究所バイオリソース研究センターとの共同研究で卵黄を用いず，化学的組成が明らかでロット差がほとんどない全く新しい保存液の開発も進めています。このように，ラットの生殖工学技術の発展によって，数年で個体復元の寒務効率が大幅に上がり，提供体制もこれまで以上によくなってきました。マウスと比べるとラットはまだまだ扱いが難しいですが，マウスで研究していたバックグラウンドを持っているとラットの強みを生かせる発見もいくつかありました。研究を始めた当時の私は初期胚発生の分子機構はマウスと同じと思っていましたが、調べてみるとラットはどちらかというとヒト,プタやウサギ等に近い場合もあることが分かってきました。ラットの生殖工学技術の開発が遅れていた分,明らかにされていないことが多いですが，調べるとマウスでは気がつかなかった現象もラットでは明らかにできる可能性が出てきました。研究を始める前は，ラットは大きなマウスのような生物という印象でしたが,全く異なる生物であることに気づかされました。また,ラットはマウスよりも学習能力が高く,脳神経科学の分野で行動実験によく用いられている動物です。マウスももちろん行動実験に用いられる実験動物ですが，高度な実験にはやはりラットの方が適しています。そのため，ラットをより普及させるためにもマウスしか扱ったことがない研究者やラボにマウス用の設備しかない方にもラットを利用してもらえないかと考え，一般的に実験に用いられるCrlj:WIのラットをバックグラウンドに，ゲノム編集で成長ホルモン受容体(Ghr)遵伝子を欠損させた小型ラットを作製しました(図1)。実際に、行動解析を依頼して調べていただくと，マウス用の行動解析装置で実験ができ，マウスと比較すると学習能力が高いことが分かりました。これが通常のラットと比較しても全く変わらない学習能力かどうかは今後解析が必要です。実はNBRPラットには，通称ミニラットと呼ばれるJcl:WistarをバックグラウンドとしたGhlのmRNA量が抑制されるトランスジェニック系統がすでに寄託されています。WTを用いて繁殖を繰り返すことでトランスジーンのコピー数が減り，成長ホルモンの阻害効果が弱まりますが，Ghr遺伝子を欠損させる方法は様々な系統で簡単に小型ラットを作製できるというメリットがあります。実際に，私は標準系統のラットの中でも小型であるF344/Jclを用いてGhr遺伝子欠損ラットを作製したところ，性成熟後もマウスのICR系統のようなサイズで成長が抑制され，ホモ欠損どうしで交配も可能な小さいラットができました(図2)。まだまだ基礎データが必要ですが,将来的にこうした系統をマウスユーザーにも使っていただけるのではないかと期待しています。 NBRPラットでは基盤技術整備プログラムの支援を受けて，体外受精が安定的にできるようになり,この技術を普及させるために2019年～ 2021年度にラット生殖工学技術研修を行いました。主に，マウスの胚を扱われている方を対象に，ラットの保定やホルモン投与,採卵,体外受精,エレクトロポレーション，胚移植のトレーニングを行う内容となっています。2020年度は新型コロナウイルスが広まり，ほとんど研修を行うことができませんでしたが，2021年度は感染者数が減少を見せ研修を開催することができました。研修を修了された方々からは後日，体外受精で産仔が得られたと連絡をいただき，普及活動も進められていると思います。2022年度からはNBRPラットの第5期が始まり，更なる発展を目指していますが，第４期から始めた生殖工学研修も引き続き無料で行っていく予定です。参加を希望される方はぜひお問い合わせをお願いします(nbrp-rat@mail2.adm. kyoto-u.ac.jp) 。 NBRPラットで多くの経験をさせていただいた浅野先生,本多先生や動物実験施設の皆様,基盤技術整備プログラムの研究でお世話になりました理化学研究所バイオリソース研究センターの小倉淳郎先生,持田慶司先生，並びに研究室の皆様に感謝申し上げます。また，本会員便りを執筆するにあたり，実験動物ニュースのご担当者様および私をご紹介いただいた理化学研究所バイオリソース研究センターの綾部信哉先生には，私自身の研究生活を振り返る大変よい機会をいただきまして心から感謝申し上げます。
I . 実験動物技術者資格認定試験1.  2級 実技試験開催日：令和４年11月26日（土）会 場: (1)東京会場 日本獣医生命科学大学(2)名古屋会場 imy (アイ.エム.ワイ)会議室(3)大阪会場　新大阪丸ビル新館(4)熊本会場　TKP熊本カンファレンスセンター 2. 1級　実技試験開催日：令和４年11月27日（日）会 場: (1)東京会場日本獣医生命科学大学(2)京都会場京都大学医学部（吉田キャンパス） II.研修会について例年行っているウサギ実技研修会及びプタ実技研修会は，今年度の開催を見送らせていただきます。受講を予定していた皆様にはご迷惑をお掛けしますが、何卒ご理解いただきますようお願い申し上げます。 (その他,実験動物技術者資格認定試験及び研修会の詳細については,日動協ホームページhttps://www.nichidokyo.or.jp/をご覧ください。)
雑持会員懇談会は，コロナ禍でオンライン開催が読いておりましたが，今回は３年ぶりに現地開催+ライプ配信で実施いたします。老化に関わる最新研究と題したテーマにて講演会を企画いたしました。維持会員の皆様に限らず，実験動物や動物実験にかかわる多くの方のご参加お待ちしております。財務特別委員会一同テーマ：“老いと死”老化に関わる最新研究時：令和4年11月11日（金）13:00 ～ 17:00山場：川崎生命科学・環境研究センター（LiSE）金(現地開催+ライブ配信)参加黄：無料参加申込：JALAS HP維持会員懇談会より申込書を入手（10月27日締切） 1.理事長挨拶 13:00 ～ 13:15 「動物実験の機関管理体制の推進」公益社団法人日本実験動物学会三好一郎理事長2.特別講演13:15 ～ 14:15座長：今井良悦・桑原正貴「生物はなぜ死ぬのか」東京大学　定量生命科学研究所ゲノム再生研究分野　小林武彦　先生14:15 ～ 14:35 3.話題提供14:35 ～座長：西田 淳・山田久陽1） 14:35 ～ 15:05 「体内時計の加齢変容」明治大学農学部動物生理学研究室中村孝博先生2） 15:05 ～ 15:35 [自然老化マウスの長期飼育による環境統御と表現型解析システムの構築について]国立長寿医療研究センター研究所研究推進基盤センター 実験動物管理室小木曽昇先生休憩3） 15:55 ～ 16:25 「老化と腸内細菌」理化学研究所生命医科学研究センター粘膜システム研究チーム中西裕美子　先生4) 16:25 ～ 16:55 「慢性腎臓病とサルコペニアの現状」日本赤十字社医療センター 腎臓内科山田将平先生II意見交換会   17:30 ～ 19:00場　所：TREX Kawasaki River Café参加費：5,000円（維持会員，非維持会員のいずれも）定 員：40名（先着）
（公社）日本実験動物学会理事長　三好一郎学術集会委員会委員長伊川正人（公社）日本実験動物学会と鳥取大学染色体工学研究センター及び鳥取バイオサイエンス振興会は，令和４年１１月１8日（金），鳥取大学医学部記念講堂（米子市）にて『第１0回実験動物科学シンポジウム』を開催する運びとなりました。本シンポジウムのテーマは『創薬研究のためのヒト化動物最前線」であり，＜第一部　ヒト化動物作製基盤となるゲノム操作技術＞，＜第二部異種胚キメラ作製技術＞, ＜第三部　ヒト化動物＞の３部構成にて, 11名の演者の先生方にご講演頂く内容の濃い企画となっております。2年越しの対面開催を予定しておりますので、是非,皆様には現地に足をお運び頂けましたら幸いです。タイトル：「創薬研究のためのヒト化動物最前線」時：令和4年11月18日（金）12:00受付開始,  13:00開始山場：鳥取大学医学部記念講堂AK (現地開催の予定,感染状況によりオンラインに変更の可能性もあり)アクセスhttps://www.med.tottori-u.ac.jp/introduction/access.htmlキャンパスマップhttps://www.tottori-u.ac.jp/1798.htm参加費：無料事前登録：https://docs.google.com/forms/d/1snicleGzGttrHfBu7_aXP-8xpDX8v-pZFLZjAV40x10/edit?ts=62d0ba9c事前登録締切　2022年10月28日（金）催：日本美験動物学会主済：烏取大学大学院講義，烏取大学染色体工学研究センター,共鳥取バイオサイエンス振興会プログラム13:00 ～ 13:10開会挨拶：鳥取大学医学部長中村廣繁鳥取大学染色体工学研究センター長久郷裕之日本実験動物学会理事長三好一郎ヒト化動物オーバービュー：鳥取大学香月康宏13:10 ～ 13:20第一部　ヒト化動物作製基盤となるゲノム操作技術　13:20 ～ 15:00座長：鳥取大学大林徹也ゲノム編集マウスと精子研究への応用13:20 ～ 13:45
第二部　異種胚キメラ作製技術　15:10 ～ 16:25座長：大阪大学伊川正人逆胚盤胞補完法による臓器欠損モデルへのアプローチと15:10 ～ 15:35
第三部　ヒト化動物16:35 ～ 18:15
大会長：杉山文博（筑波大学生命科学動物資源センター）テーマ：語ろう実験動物〜より広く・より深く〜日時：令和５年５月２４日（水）～ 26日（金）会　場：つくば国際会議場（〒 305-0032茨城県つくば市竹園2-20-3）参加費：無料開催案内は大会URL（https://cfmeeting.com/jalas70/）をご覧ください。
Suppression of lysosomal-associated protein transmembrane 5 ameliorates cardiac function and inflammatory response by inhibiting the nuclear factor-kappa B (NF-κB) pathway after myocardial infarction in mice… Zhanchun SONG 1 , Xiaozeng WANG 2 , Lianqi HE 1 , Liang CHEN 3 , Zhichao REN 11 and Siyu SONG 11 1)Department of Cardiology, Fushun Central Hospital, No. 5, Middle Section of Xincheng Road, Shuncheng District, Fushun, Liaoning, 113006, P.R. China, ²¹Department of Cardiology, The General Hospital of Northern Theater Command, No. 17, Middle Section of Hunnan Road, Hunnan District, Shenyang, Liaoning, 110000, P.R. China, 3Department of General Surgery, Fushun Central Hospital, No. 5, Middle Section of Xincheng Road, Shuncheng District, Fushun, Liaoning, 113006, P.R. China Myocardial infarction (MI) as the remarkable presentation of coronary artery disease is still a reason for morbidity and mortality in worldwide. Lysosomal-associated protein transmembrane 5 (LAPTM5) is a lysosomal-related protein found in hematopoietic tissues and has been confirmed as a positive regulator of pro-inflammatory pathways in macrophages. However, the role of LAPTM5 in MI remains unknown. In this study, we found that both mRNA and protein expression levels of LAPTM5 were significantly elevated in MI mice. Suppression of LAPTMS in myocardial tissues decreased cardiac fibrosis and improved cardiac function after MI. At the molecular level, downregulated LAPTM5 dramatically suppressed the macrophage activation and inflammatory response via inhibiting the activation of the nuclear factor-kappa B (NF-kB) pathway. Collectively, suppression of LAPTM5 in myocardial tissues inhibits the pro-inflammatory response and the cardiac dysfunction caused by MI. This study indicated that LAPTM5 as a pro-inflammatory factor plays a crucial role in MI disease.カニクイザルに適した卵胞発育刺激法の検討…下澤律浩ﾘ・岩田　岳² ・保富康宏¹ . ³) 19医薬基盤・健康・栄養研究所・霊長類医科学研究センター ²²東京医療センター・臨床研究センター（感覚器センター）分子細胞生物学研究部, ³³三重大学大学院医学系研究科病態解明医学講座免疫制御分野本研究はカニクイザルにおいて，より適した卵胞発育刺激法を開発するために行った。カニクイザルは投与前の一年間の月経回数(7回以下あるいは8回以上)およびGnRHアゴニスト(GnRH-a)あるいはGnRHアンタゴニスト(GnRH-ant)の投与によって4つの群(7AG, 8 AG, 7ANおよび8AN)に分けられた。両投与方法ともに卵の成長および成熟はFSHおよびhCGの投与によって誘導された。7AG, 8AG, 7ANおよび8AN群から採取されたM II期卵およびM I期卵はそれぞれ12.1および10.4個, 12.0および13.8個, 9.1および8.3個,そして15.5および8.8個であった(P>0.05)。7ANおよび8AN群における受精率(85.3%および74.7%)は7AGおよび8AG群のそれら(59.1%および47.3%)よりも有意差はなかったけれども高い傾向にあった(P>0.05)。カニクイザル1頭から得られた受精卵数は7AN群における19.9個が最多であった。さらに，投与開始時と卵の回収時の体重減少を調べた時，7ANおよび8AN群は7AGおよび8 AG群の減少よりも有意に小さく，GnRH-antを用いた卵胞発育刺激法はカニクイザルの負担を軽減することを示唆した。以上から、カニクイザルにGnRH-antを使用した卵胞発育刺激方法は，GnRH-aを使用した場合よりもいくつかの利点を有する。新規ENU誘発性Cpox変異はマウスの小球性低色素性貧血を引き起こす…………433–441宮坂勇輝り・奥田健斗ﾘ・三浦郁生²・茂木浩未³ﾘ・若葵茂晴² ⁴ﾘ・大野民生ﾘ1 ⁄名古屋大学大学院医学系研究科附属医学教育研究支援センター・実験動物部門, ²²建化学研究所バイオリソースセンターマウス表現型解析開発チーム, ³理化学研究所バイオリソースセンター疾患モデル評価研究開発チーム, 41公益財団法人神戸医療産業都市推進機構動物実験飼育施設理研ENUミュータジェネシスによって作出されたマウスDBA.B6-Mhaコンジェニック系統は血中フェリチンの上昇を伴う優性の小球性低色素性貧血を発症する。本研究ではDBA.B6- Mha系統の小球性低色茶性貧血の原因遭伝子を特定する為、コンジェニック化の過程で得られた戻し交配個体を用いた連鎖解析を実施した。その結果，原因遺伝子の存在領域を第16番染色体の約1.95Mb内に限局した。当該領域にはヘム合成系酵素であるコプロポルフィリノーゲンオキシダーゼ(Cpox)遺伝子が存在していた。そこで，Cpox遺伝子の変異スクリーニングを実施した結果、第４イントロンのアクセプターサイトにDBA.B6-Mha系統特異的な塩基置換(A>G)が検出された。更に，DBA.B6-Mha系統のCpox遺伝子の発現をRT-PCRにより調査した結果、異常なスプライシング産物が検出された。マウスでは既に小球性低色素性貧血を発症するCpox変異体が報告されている。以上より，DBA.B6-Mha系統の小球性低色茶性貧血はCpox遭伝子のスプライシング変異によるヘムの合成異常に起因する事が示唆された。DBA.B6-Mha系統はCpox遭伝子の突然変異に起因する小球性低色素性貧血の分子機構を解明する為のモデルになる可能性がある。なお，赤血球異常症は宿主にマラリア抵抗性効果を付与する事が報告されているが、DBA.B6-Mha系統のマラリア感受性に有意な変化は認められなかった。 The establishment and application of CD3E humanized mice in immunotherapy.....442–450 Rufeng ZHANG 1), Jing ZHANG 2), Xiaofei ZHOU 2), Ang ZHAO 2) and Changyuan YU 1) 1)College of life science and technology, Beijing University of Chemical Technology, 15 Beisanhuan East Road, Chaoyang District, Beijing 100029, P.R. China ²²Biocytogen Pharmaceuticals (Beijing) Co., Ltd., 12 Baoshen South Street, Daxing District,102609, Beijing, P.R. China In the field of cancer immunotherapy, monoclonal antibody drugs, bispecific antibodies, and antibody-conjugated drugs have become the focus of current research, and gene-edited animal models play an essential role in the entire drug development process. In this study, CD3E humanized mice were established by replacing the second to the seventh exon of the Cd3e mouse gene with the same exon of the human gene. The expression of human CD3E in CD3E humanized mice was detected by RT-PCR as well as flow cytometry, also a tumor model was established based on CD3E humanized mice, and the pharmacodynamic effects of CD3E monoclonal antibodies were evaluated. The results showed that CD3E humanized mice expressed only human CD3E, and the proportion of each lymphocyte in the thymus and spleen was not significantly changed compared with wild-type mice. CD3E monoclonal antibody could promote tumor growth after treatment, which may be related to the activation-induced cell death effect caused by this CD3E antibody. In contrast, Bispecific antibody blinatumomab inhibited tumor growth significantly. Thus, the CD3E humanized mice provided an adequate animal model for evaluating the efficacy and safety of CD3E antibody drugs.マウス外生殖器雄性化におけるテストステロンの機能的補償作用の可能性………451–459上田祐子¹・² ⁄鈴木堅太郎² ⁄ ³¹・梶本みずき² ⁄ ⁴¹・藤本幸太²¹・Mala Mahendroo 51・依馬正次6)・山田　源²・原　勲19 ¹¹和歌山県立医科大学泌尿器科学講座，²¹和歌山県立医科大学先端医療研究所遺伝子制御学研究部, ³山梨大学生命環境学部生命工学科、 ¹株式会社新日本科学薬物代謝分析センター 51Department of Obstetrics and Gynecology, Green Center for Reproductive Biological Sciences, University of Texas Southwestern Medical Center, 努波賀医科大学動物生命科学研究センター雄の外生殖器原基は，5αジヒドロテストステロン(DHT)に依存して陰茎勃起組織などの男性特有の構造物に発達する。陰茎海綿体(CC)は成人の勃起機能に必須であることはよく知られているが、その発生過程におけるDHTの役割は不明であった。本研究は、CCの主要な構成成分である血管内皮細胞,血管平滑筋細胞,コラーゲンのマーカーであるFLK1, ACTA2, COLIAIの発現を解析し、胎生期からそれらの発現に性差が出現することを明らかにした。 SRD5A2遺伝子にコードされる5-α還元酵素II型は，雄の外生殖器局所でテストステロン（T）をDHTに変換することにより，外生殖器を雄型に誘導する重要な酵素である。我々は，マウスCC形成過程におけるSRD5A2の発現解析を行ない，SRD5A2がCCの血管平滑筋細胞に発現していることを見出した。CC形成におけるSRDSA2の役割を明らかにするため，雄Srd5a2 KOマウスの外生殖器を解析したところ，雄Srd5a2 KOマウスのCCには明らかな異常はみられなかった。液体クロマトグラフィータンデム質量分析(LC-MS/MS)による組織中TおよびDHT濃度の測定結果から，雄Srd5a2 KOマウス外生殖器の正常な形成は，組織中T濃度の増加によるものであると推察された。本研究は，外生殖器形成におけるＴの機能的補償作用を初めて示唆するものである。 Effect of taxifolin on cyclophosphamide-induced oxidative and inflammatory bladder injury in rats Nergis AKBAS 11, Bahadır SULEYMAN 21, Renad MAMMADOV 21, Gülce Naz YAZICI 31 , Seval BULUT 21 and Halis SÜLEYMAN 21 1)Department of Medical Biochemistry, School of Medicine, Erzincan Binali Yıldırım University, 24030, #Erzincan, Turkey, 21Department of Pharmacology, School of Medicine, Erzincan Binali Yıldırım University, 24030, #Erzincan, Turkey, 3)Department of Histology and Embryology, School of Medicine, Erzincan Binali Yıldırım University, 24030, #Erzincan, Turkey The role of oxidative stress and inflammation in the pathogenesis of cyclophosphamide-related side effects has been demonstrated in previous studies. This study aimed to investigate the effect of taxifolin, due to its antioxidant and anti-inflammatory properties, on cyclophosphamide-induced oxidative and inflammatory bladder injury in albino Wistar rats. The taxifolin+cyclophosphamide (TCYC) group was given 50 mg/kg of taxifolin orally by gavage. Normal saline was used as a solvent for the cyclophosphamide (CYC) group and the healthy control (HC) group. One hour after taxifolin administration, 75 mg/kg of cyclophosphamide was intraperitoneally injected in the TCYC and CYC groups. This procedure was repeated once a day for 30 days. At the end of this period, biochemical markers were studied in the excised bladder tissues and histopathological evaluations were conducted. In the histopathological evaluation of the CYC group, severe epithelial irregularity, dilatation, congestion, and polymorphonuclear leukocyte accumulation in the vascular structures were observed. Additionally, the malondialdehyde (MDA), tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin-1β (IL-1β), and interleukin-6 (IL-6) levels, the total oxidant status (TOS), and the oxidative stress index (OSI) values were significantly higher, and the total glutathione (tGSH) levels and total antioxidant status (TAS) were significantly lower in the CYC group in comparison to the HC group ( P <0.001). Taxifolin reduced the cyclophosphamide-induced increases in the MDA, TNF-α, IL-1β, and IL-6 levels and the TOS and OSI values; it decreased the tGSH and TAS levels and reduced histopathological damage ( P<0.001). Taxifolin may be useful in the treatment of cyclophosphamide-induced bladder damage. Influence of high-fat diet on host animal health via bile acid metabolism and benefits of oral-fed Streptococcus thermophilus MN-ZLW-002 Yating LUO 19 , Ruyue CHENG 19 , Huijing LIANG 19 , Zhonghua MIAO 19 , Jiani WANG 19 , Qingqing ZHOU 1 ⁄ , Jianguo CHEN 2 ⁄ , Fang HE 1 ⁄ and Xi SHEN 1 ⁄ 1)Department of Nutrition and Food Hygiene, West China School of Public Health and West China Fourth Hospital, Sichuan University, No.16, 3rd Section, South Renmin Road, 610041, Chengdu, Sichuan, China, 27R&D Center, Inner Mongolia Meng Niu Dairy Industry (Group) Co.,Ltd, 011500, Hohhot, Inner Mongolia, China In this study, C57BL/6J male mice were fed normal chow (NC; control) or a high-fat diet (HFD) for 12 weeks, and HFD mice were supplemented with oral administration of Streptococcus thermophilus MN-ZLW-002 (HFD + MN002; n=20/group. Body weight, visceral fat, blood glucose, blood lipids and liver lipid deposition increased in the HFD group, and the composition of gut microbiota, cecum short-chain fatty acids and fecal bile acids (BAs) also changed. Oral-fed MN-002 increased the relative abundances of Ruminococcaceae , Lachnospiraceae and Streptococcaceae and improved blood glucose, liver cholesterol deposition, and serum IL-10, CCL-3 and the fecal BAs composition. In conclusion, the high-fat diet changed the composition of bile acids by shaping the gut microbiota into an obese type, leading to metabolic disturbances. Streptococcus thermophilus MN-ZLW-002 regulated gut microbiota by adjusting the composition of bile acids and improved the perturbation caused by high-fat diets. However, the effect of MN002 observed in animal experiments needs to be verified by long-term clinical trials. Abietic acid attenuates sepsis-induced lung injury by inhibiting nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells (NF-κB) pathway to inhibit M1 macrophage polarization… Honglong FANG 1), Juan CHEN 2), Jian LUO 1), Jianhua HU 1), Danqiong WANG 1), Liang LV 1 ⁄ and Weiwen ZHANG 1 ⁄ 1)Department of Critical Care Medicine, The Quzhou Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University, Quzhou People's Hospital, Quzhou Zhejiang, 324000, P.R. China, 21 Department of Laboratory Medicine, The Quzhou Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University, Quzhou People's Hospital, Quzhou Zhejiang, 324000, P.R. China Lung injury is one of the leading causes of death in sepsis. Abietic acid (AA) has demonstrated anti- inflammatory and bacteriostatic properties. Herein, we established a mouse model of sepsis by cecal ligation and puncture, and intraperitoneally injected AA to treat. Lung injury was assessed by H&E staining and the inflammation in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) were assessed by counting the number of inflammatory cells and detecting the content of inflammatory factors. Meanwhile, we also designed to study the effect of AA on lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammatory response and macrophage marker gene expression in RAW264.7 cells in vitro . In this study, we found that AA inhibited LPS-induced secretion of inflammatory mediators (IL-1 β, TNF-α, IL-6 and MIP-2), and decreased the expression of M1 macrophage e markers ( CD16 and iNOS ) and p-p65 protein, while increased the expression of M2 macrophage markers ( CD206 and Arg-I ) in RAW264.7 cells in vitro. In vivo , the therapy of AA not only rescued septic animals, but also attenuated lung injury in sepsis mice. Moreover, AA decreased the number of total cells, neutrophils and macrophages, the conceration of total protein, and the levels of inflammatory mediators in BALF of sepsis mice. Further, we found that AA inhibited M1 macrophage polarization and blocked nuclear factor kappa- light-chain-enhancer of activated B cells (NF-κB) pathway in BALF of sepsis mice. In conclusion, Abietic acid attenuates sepsis-induced lung injury, and its mechanism may be related to reducing inflammation by inhibiting NF-kB signaling to inhibit M1 macrophage polarization. Effect of tocilizumab on ischemia-reperfusion-induced oxido-inflammatory renal damage and dysfunction in rats Kezban Tuna Ozkaloglu ERDEM 1 ⁄ , Zehra BEDIR ² ⁄ , Ufuk KUYRUKLUYILDIZ³³, Hakan Gokalp TAS 4 ), Zeynep SULEYMAN 5 ), Seval BULUT 5 ), Ali Sefa MENDIL 6 ), Cengiz SARIGUL 7) , Edhem UNVER 8) and Halis SULEYMAN 5) 1)Department of Anesthesiology and Reanimation, Antalya Provincial Health Directorate, Antalya Training and Research Hospital, Kazım Karabekir Cd., 07100 Muratpasa/Antalya- Turkey, 21Department of Anesthesiology and Reanimation, Erzurum Provincial Health Directorate, Erzurum Regional Education and Research Hospital, Atatürk District Cat Road Street Number: 36 25240 Yakutiye/Erzurum-Turkey, 31 Department of Anesthesiology and Reanimation, Faculty of Medicine, Erzincan Binali Yildirim University, Associate Professor, Basbağlar Mahallesi 1429. Street No:2/1 24100 Erzincan-Turkey, 4 1 Department of Anesthesiology and Reanimation, Siran State Hospital, Karaca Mahallesi Hoca Ahmet Yesevi Street 29100 Siran/Gumushane-Turkey, 59Department of Pharmacology, Faculty of Medicine, Erzincan Binali Yildirim University, Başbağlar Mahallesi 1429. Street No:2/1 24100 Erzincan-Turkey, 61 Department of Veterinary Medicine, Faculty of Veterinary Medicine, Erciyes University, Yenidoğan Mahallesi Turhan Baytop Sokak No:1 38280 Talas/Kayseri- Turkey, 71Department of Biochemistry, Faculty of Medicine, Erzincan Binali Yildirim University, Başbağlar Mahallesi 1429. Street No:2/1 24100 Erzincan-Turkey, 81 Department of Chest Diseases, Faculty of Medicine, Erzincan Binali Yildirim University, Başbağlar Mahallesi 1429. Street No:2/1 24100 Erzincan-Turkey Ischemia-reperfusion-induced (I/R) renal damage is a pathogenic process that starts with ischemia, then progresses through oxidative stress and inflammation. Tocilizumab (TCZ), a recombinant human monoclonal antibody produced against the IL-6 receptor, will be tested against renal I/R injury. TCZ is known to lower the levels of proinflammatory cytokines and oxidant mediators while raising the amounts of antioxidant molecules. Our purpose is to evaluate the biochemical and histological effects of TCZ against I/R-induced oxido-inflammatory kidney damage and dysfunction in rats. Animals were divided into 3 groups as renal I/R (RIR), I/R+ TCZ (IRT), and healthy group (HG). TCZ was administered at a dose of 8 mg/kg to the IRT group (n=6) of the animals, and distilled water as a solvent was administered intraperitoneally (ip) to the RIR (n=6) and HG (n=6) groups. Then, two hours of ischemia and six hours of reperfusion were applied to the left kidneys of IRT and RIR animals. TCZ significantly inhibited the increase in the levels of malondialdehyde (MDA), nuclear kappa B (NF- κ B), tumour necrosis factor alpha (TNF- α ), interleukin 1- β (IL- 1 β), IL- 6, creatinine (Cr) and blood urea nitrogen (BUN) and decrease in total glutathione (tGSH) with I/R in renal tissue. TCZ also attenuated severe histopathological damage due to I/R in renal tissue. TCZ protected renal tissue from I/R-induced oxidative and inflammatory damage. These results indicate that TCZ may be useful in the treatment of renal I/R injury. in BALB/c mice Hai LI 1 ), Hu REN 1 ), Lei CAO 1 ), Jinyuan GUO 1 ), Jingjing SONG 1 ), Yan ZHANG¹²) and Wenbo XU¹.²) 1)NHC Key Laboratory of Medical Virology and Viral Diseases, National Institute for Viral Disease Control and Prevention, Chinese Center for Disease Control and Prevention, 155 Changbai Road, Changping District, Beijing, P.R. China, 21 Center for Biosafety Mega-Science, Chinese Academy of Sciences, 44 Xiaohongshan Zhong District, Wuchang District, Wuhan City, Hubei Province, P.R. China Human respiratory syncytial virus (HRSV) is a major cause of lower respiratory tract infection in infants. The lack of ideal animal models is one of the major obstacles in evaluateing the efficacy of HRSV vaccines. In this study, HRSV-50 was obtained from Hep-2 cells at the 50th passage of the original Long strain (ATCC VR-26). BALB/c mice (6 weeks) were challenged with different titers of HRSV-50. Shockingly, all mice died after 4 days of challenge (6 × 10 6 PFU/mouse). Whole-genome sequencing revealed 7 amino acid mutations compared with the original Long strain. To verify whether the lethal model can be used to effectively evaluate the efficacy of HRSV candidate vaccines, we studied the protective effect of FRBD protein (Pre-F of HRSV and S receptor binding domain of SARS-CoV-2) with Adju-phos or MA103 adjuvant. All mice in the PBS group died after the HRSV- 50 challenge, whereas Adju-phos provided partial protection. These results suggest that we have successfully established a lethal model of HRSV in BALB/c mice.早期発症し持続的高血糖を示す新たな２型糖尿病モデルマウス………………………510–518大野民生ﾘ・宮坂勇輝ﾘ・吉田勘太ﾘ・小林美里²・堀尾文彦ﾘ・横井伯英ﾘ・水野正司5 ・池上博司6 ）り名古屋大学大学院医学系研究科実験動物部門、²名古屋学芸大学管理栄養学部. ³¹名古屋女子大学家政学部,  *¹京都大学大学院農学研究科動物遺伝育種学分野, §名古屋大学大学院医学系研究科腎不全システム治療学寄附講座・腎臓内科, 61近畿大学医学部内分泌・代謝・糖尿病内科様々な２型糖尿病モデルマウスが樹立されているが、持続的な高血糖を示すモデルは少ない。我々は加齢に伴い耐糖能異常を示すマウスNSY系統に過食肥満を起こす自然発症突然変異遺伝子agouti yellow（ A ′ )を導入したコンジェニック系統( NSY.B6-Tyr + ,A ′ )を樹立した。この系統は過食肥満を示す黄色( f /a )雄個体と正常黒色( a /a )雄個体の交配による分離型近交系として維持されている。黄色雄個体は生後10週齢から24週齢まで全ての個体が顕著な肥満と高血糖(平均血糖値は400 mg/dl以上)を示した。黄色雄個体は耐糖能異常，インスリン抵抗性を示し，典型的な２型糖尿病モデルとして有用であるだけでなく，高脂血症や脂肪肝に加え腎糸球体に合併症が認められた。黄色離個体も顕著な肥満を示したが，糖尿病の発症率や各種病態の程度は雄と比較して軽度であった。一方、黒色個体は雌雄とも一切高血糖を示さなかった。 NSY.B6-Tyr*,4系統は良好な繁殖性に加え雄同士の群飼も可能であることから、早期発症し持統的高血糖を示す新たな２型糖尿病モデルとして有用な研究材料になると考えられた。 Angiotensin 1-7 and its analogue decrease blood pressure but aggravate renal damage in preeclamptic mice . Yuan LIU 1 ), Ruonan ZHAI 1 ), Jiahao TONG 1 ), Ying YU 1 ), Lin YANG 1 ), Yong GU¹.²) and Jianying NIU¹) 1)Department of Nephrology, Shanghai Fifth People's Hospital, Fudan University, 801 Heqing Road, Shanghai 200240, P.R. China, ² 1 Department of Nephrology, Huashan Hospital, Fudan University, 12 Wulumuqi Zhong Road, Shanghai 200040, P.R. China Preeclampsia (PE) is a multisystem disease that affects the health of both the pregnant women and the fetus during pregnancy. Agonistic autoantibodies to the angiotensin II type I receptor (AT1- AA) play a significant role in the pathogenesis of PE. This study aimed to determine the effects of Angiotensin 1-7 (Ang 1-7) and its analogue AVE0991 on AT1-AA-induced PE model. Pregnant mice were divided into five groups: the normal pregnant group, AT1-AA-induced preeclampsia group, and AT1-AA-induced preeclampsia group treated with Losartan, Ang 1-7, and AVE0991, respectively. AT1-AA-induced PE model was established on gestational day 13 by tail intravenous injection of purified AT1-AA polyclonal antibody from serum of guinea pigs. Blood urea nitrogen (BUN), urine albumin and urinary creatinine were measured on day 18 of pregnancy. The systolic blood pressure (SBP) was measured from gestational day 13 to day 18. Renal structure changes were observed via light and electron microscopy. Compared with the normal pregnant group (NP group), AT1-AA- induced preeclampsia group (PE group) exhibited elevated blood pressure and proteinuria, consistent with the characteristics of PE. Ang 1-7 or AVE0991 treatment decreased blood pressure without showing renoprotective effects. The findings indicated that Ang 1-7 and its analogue reduced blood pressure but aggravated renal damage in AT1-AA-induced PE mice.
(令和4年10月18日現在)
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動物実験•遺伝子組換え実験の計画申請から飼育管理まで動物実験業務の一連の流れをサポート審査の支援機能、各種確認作業の自動化により、審査業務の作業負荷を軽減/委員会向け：付箋機能、変更点表示事務局向け：教育受講・申請必須項目などのチェック自動化、停滞した審議のリマインド、審査状況の把握申請者向け：過去申請のコピー、関連実験紐づけ獣医担当・飼育担当の連携強化、飼育室・飼育動物の情報を-元管理、飼育管理業務をトータルサポート獣医学的ケア支援：異常所見の共有迅速化、処置記録の管理飼育管理業務支援：匹数管理、飼育室予約個体情報の管理  ：体重、飼育履歴などを個体毎に管理転記作業の削減 ：タプレットで飼育室内から観察記録登録動物管理システム[PLACT]に関するお問い合わせは、下記までご連絡くださいPLACT担当〒103-0015　東京都中央区日本橋箱崎町24-1 E-mail pharma@cac.co.jp URL https://service cac co jp/pharma/drug_discovery/plact株式会社シーエーシー私たちは、生命科学発展のサポートを通じて人々の幸せと社会に貢献してまいりますMET自然〒396-0025長野県伊那市荒井8052番地1 TEL.0265-78-8115 FAX.0265-78-8885
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