モダンメディア
50巻５号 2004〔新しい測定法〕 117
モダンメディア 第50巻
５号 2004年〔糞便中のH.pylori抗原検査〕

糞便中の抗原検査

H. pylori stool antigen test

たなかあきふみ

たかはししんいち

田 中 昭 文：高 橋 信 一
Akifumi TANAKA

Shin ichi TAKAHASHI

本稿では，便中 H. pylori 抗原測定法として世界はじめに的に最も広く用いられ精度が検討されている
Premier Platinum HpSA とわが国で開発されたテス

近年，新しい非侵襲的な Helicobacter pylori（H.

トメイトピロリ抗原 EIA について述べる。

pylori）感染診断法として便中 H. pylori 抗原測定法

Ⅰ．Premier Platinum HpSA

（H. pylori stool antigen test：HpSA） が 開 発 さ れた。米国の Meridian Bioscience 社により最初に開（日本商品名：メリディアン HpSA ELISA，

発 さ れ た Premier Platinum HpSA は，1998 年 に 米

製造：Meridian Bioscience，輸入販売：テイエフビー）

国で H. pylori の感染診断および除菌判定法として
米国食品医薬品局（Food and Drug Administration：FDA） で 認 可 さ れ て い る。 ま た，2000 年 9 月 に（ａ）測定原理と基礎性能

European Helicobacter pylori Study Group（EHPSG）

米国の Meridian Bioscience 社により最初に開発より作成されたマーストリヒト 2-2000 コンセンサ

された H. pylori 便中抗原測定キットである Premier

スレポートにおいて，HpSA は H. pylori 感染診断にPlatinum HpSA は，世界中で最も広く用いられ精度おいて尿素呼気試験（urea breath test：UBT）と同が検討されており，基礎的，臨床的論文が多数発表

じく推奨され，除菌判定においては UBT の代替法されている。現在，単に HpSA と言うとこのキット１）として推奨されている 。

を指すことが多い。
１）測定原理（図１）

HpSA は欧米で高い評価を得ているが，2000 年 6月に日本ヘリコバクター学会より発表された H. pylori
感染の診断と治療のガイドライン

２）

希釈糞便中の H. pylori 抗原をアフィニティ精製においてそのしたポリクローナル抗体で捕捉，酵素反応による基精度は検討中とされ，同年 11 月より胃・十二指腸質の発色により検出するサンドイッチ ELISA 法で潰瘍に対する H. pylori の感染診断と除菌治療が保ある。抗体には H. pylori ATCC43504 株を免疫し，険適用となった際にも HpSA は保険適用とならなアフィニティ精製して得たウサギポリクローナル抗かった。しかし，2003 年 2 月に発表された H. pylori体を用いており，単一ではなく広範に抗原を認識し３）感染の診断と治療のガイドライン 2003 年改訂版にている。
２）測定方法

おいて HpSA は診断法の 1 つとして加えられ，同年11 月よりついに HpSA は保険適用となり，Premier

便少量を検体希釈液に加え攪拌する。希釈した検Platinum HpSA（日本商品名：メリディアン HpSA

体 50ll とペルオキシダーゼ標識抗 H. pylori ポリクELISA）とわが国のわかもと製薬が開発したモノク

ローナル抗体 1 滴をマイクロウェルに加えて室温ローナル抗体を用いた HpSA キットであるテストメ（22 〜 27℃）で１時間反応後，5 回洗浄を行い未反４）

イトピロリ抗原 EIAが認可された。

杏林大学医学部第三内科〠 181-8611 東京都三鷹市新川 6-20-2

応物質を除去する。基質液 2 滴を加え室温で 10 分

The Third Department of Internal Medicine, Kyorin University School of Medicine(6-20-2, Shinkawa, Mitaka-shi, Tokyo)（ 19 ）

118

モダンメディア 第50巻 ５号 2004年〔糞便中のH.pylori抗原検査〕

�

図１ Premier Platinum HpSA の測定原理（ELISA 法）

間反応させ，反応停止液を 1 滴加える。検体中に H.

form においても検出可能であることを報告した。

pylori 抗原が存在する場合には，ポリクローナル抗

６）糞便検体の安定性

体− H. pylori 抗原−ペルオキシダーゼ標識抗 H. pylori

添付文書には糞便検体は 2 〜 8℃で 72 時間保存

ポリクローナル抗体の免疫複合体が形成され，発色可能としている。また，すぐに検査できない場合はする。判定はマイクロプレートリーダーにより吸光− 20℃以下で凍結保存としている。伊藤ら５）は 4℃度（450/630nm または 450nm）を測定をする。ま

以下の保存では安定であり，25℃では数日間安定，た，キットに添付されている色見本を用いて目視判

35℃の高温では数日間で抗原性が失われることを報定も可能である。

告している。

３）判定

７）薬剤による影響
Bravo ら ７） は HpSA は プ ロ ト ン ポ ン プ 阻 害 剤①吸光度 450nm の場合：陽性≧ 0.160，0.160 ＞判定保留≧ 0.140，陰性＜ 0.140（proton pump inhibitor：PPI），ビスマス製剤内服② 吸 光 度 450/630nm の 場 合： 陽 性 ≧ 0.120，0.120

により UBT 同様に偽陰性となること，内服終了２＞判定保留≧ 0.100，陰性＜ 0.100

週間後で影響がなくなることを報告している。製造

保留域は繰り返し測定すべきであり，再度保留で元の説明書は，PPI，ビスマス製剤のほか抗菌薬服あれば新しい検体を採取することが望ましい。

用後は２週間以上空けて検査するように注意してい４）検出感度る。

製造元データでは 184ngH. pylori 蛋白/ml（糞便検体），伊藤ら５）は H. pylori 超音波破砕抗原で 120ng/ml（ｂ）診断精度から，神谷ら６）は菌数で 10 3 〜 10 4cfu 程度から陽

これまでに海外および国内で多数の論文報告があ性を示すと報告している。HpSA は helical form とる。これらのうち主な報告を除菌前の感染診断，除同 様 に， 糞 便 内 の 主 な 存 在 状 態 と 考 え ら れ る

菌判定別にそれぞれ表 1，2 に示した。

coccoid form においても検出可能であることが報告

１）感染診断（表 1）６）

これまでの主な論文報告を表１に示す。Vaira ８）

されている 。
５）特異性

らは 501 例を対象としたヨーロッパの多施設検討に製造元における各種細菌およびウイルス株との交おいて，培養，組織鏡検法，迅速ウレアーゼ試験を

差反応性の検討では，H. mustelae に陽性反応を認め

gold standard と し て HpSA は 感 度 94 ％， 特 異 度たと報告している。神谷ら

６）は類縁菌 H. mustelae，92％と良好な成績を報告した。他の報告者も同様に

C. jejuni，C. coli を含む 16 菌種 18 菌株に反応せず，有用性を報告している５, ８〜14）。また，Vaira ら 15）は用いた H. pylori 10 菌株すべてに陽性反応を示した

1999 〜 2000 年における Premier Platinum HpSA をと報告している。また，HpSA は helical form と同用いた 19 の研究（合計 2924 例）を加算平均し，H.

様に，糞便内の主な存在状態と考えられる coccoid

pylori 感染診断において HpSA は感度は 93.1％，特（ 20 ）

モダンメディア 第50巻 ５号 2004年〔糞便中のH.pylori抗原検査〕 119および感度が劣るとする報告９, 13, 23） もある。Vaira

異度 92.8％と良好な成績を報告している。
我々も 136 例を対象として培養法，組織鏡検法，

ら 15） は 1999 〜 2000 年 に お け る Premier Platinum

迅速ウレアーゼ試験に基づく H. pylori 感染診断と比HpSA を用いた 10 の研究（合計 945 例）を加算平

較検討を行い，HpSA は感度 98.3％，特異度 95.0％，一均 し，H. pylori 除 菌 判 定 に お い て HpSA は 感 度

致率 97.8％と良好な成績であった （表３）。

89％，特異度 88.5％と報告している。gold standard

16）２）除菌判定（表２）として，２つの方法を使用した３つの研究（n=332）
17）

これまでの主な論文報告を表２に示す。Vaira らにおいて HpSA は感度 92％，特異度 88％，UBT のは Europe における prospective multicenter study にみを用いた７つの研究（n=613）において HpSA はおいて除菌治療 4 週後に 162 例を対象に培養法，組感度 88％，特異度 88％であり，HpSA の除菌判定

織鏡検法 , 迅速ウレアーゼ試験を対照とし HpSA は精度の報告に相違がみられるのは，gold standard

感度 93.8%，特異度 96.9%，235 名を対象に C-UBTに問題があるかもしれないと指摘している 15）。

13を対照とし HpSA は感度 95.6%，特異度 94.7% と良好

HpSA の偽陰性は，除菌後 H. pylori 菌量低下によな成績を報告している。その他多くの報告が HpSAるものが考えられる。われわれも，H. pylori の菌量の除菌判定における有用性を報告している。

低下による HpSA 偽陰性と考えられる症例を１例経我々も 54 例を対象に除菌 6 〜 10 週後の判定にお験した 16）。Vaira ら 20），Odaka ら 22） は除菌終了後いて，培養法，組織鏡検法，迅速ウレアーゼ試験，

１ 週 お き に HpSA を 測 定 し，Vaira ら は 5 週 目，

C-UBT に 基 づ く 診 断 と 比 較 し て HpSA は 感 度

Odaka らは 8 週目で感度が 100% となり，偽陰性例90.0％，特異度 97.7%，一致率 96.3％と良好な成績を認めない成績となった。判定時期を遅らせれば，であった （表３）。

より確実に判定することが可能であることを示して

14, 18〜22）

1316）

しかし，一部では除菌前に比べ除菌後の特異度，
表１
報告者いる。

HpSA の感染診断精度

国例数基準法Vaira et al.
Trevisani et al. ９）
Vakil et al.10）
Oderda et al. ＊11）

EuropeItaly
USAItaly501
146108203

Ohkura et al.12）
伊藤ら５）
石塚ら 13）
福田ら 14）
Tanaka et al.16）

日本
日本
日本
日本
日本

3098768201136８）

感度（％）

特異度（％）

RUT, H, C
RUT, H
RUT
RUT, H

94.1
94
86
100

91.8
909193

RUT, H, UBT
H, C
RUT, H, C, UBT
RUT, H, C, UBT
RUT, H.C

93.9
9996.7
96.6
98.3

95.7
100
87.5
98.2
95

RUT：迅速ウレアーゼ試験，H：組織鏡検法，C：培養法，UBT：尿素呼気試験，＊小児

表２

HpSA の除菌判定精度

報告者

国例数

除菌判定
時期（日）

Vaira et al. 17）
Vaira et al. 17）
Braden et al. ＊18）
Trevisani et al. ９）
Forne et al. 23）
Costa et al. 19）
Costa et al. 19）
Vaira et al. 20）

EuropeEurope
Germany
Italy
Spain
Italy
Italy
Eu & US

162
235
115
116
142
155
153
81

Ishihara et al. 21）
Odaka et al. 22）
福田ら 14）
Tanaka et al. 16）

日本
日本
日本
日本

112
4369
54

基準法

感度（％）

特異度（％）

2828＞28
56
42
30
90
35

RUT, H, C
UBTUBTRUT, H, UBT
UBT
UBT
UBT
RUT, H, C

93.8
95.6
91.3
9370.492969496.994.7
94.6
8281.682
9797282828＞42UBT
RUT, H, UBT
RUT, H, C, UBT
RUT, H, C, UBT

9088.9809098
94.1
96.8
97.7

RUT：迅速ウレアーゼ試験，H：組織鏡検法，C：培養法，UBT：尿素呼気試験，＊小児（ 21 ）120

モダンメディア 第50巻 ５号 2004年〔糞便中のH.pylori抗原検査〕

表３

H. pylori 感染診断，除菌判定（６-10 週後）における HpSA の評価（Tanaka et al. 16））
感染診断

H.pylori
HpSA＋−計精度（95％信頼区間）
感度
特異度
一致率
陽性反応適中率
陰性反応適中率

除菌判定

＋−＋−

11421161192091101434498.3％（95.9-100）
95.0％（75.1-99.9）
97.8％（95.3-100）
99.1％（97.4-100）
90.5％（69.6-98.8）

90.0％（55.5-99.7）
97.7％（93.3-100）
96.3％（91.3-100）
90.0％（55.5-99.7）
97.7％（93.3-100）

HpSA は製造元の Meridian Bioscience 社推奨の判定基準を用いた。
（吸光度 450/630nm: 陽性≧ 0.120, 0.120 ＞判定保留≧ 0.100, 陰性＜ 0.100）

２）測定方法一方，HpSA の偽陽性は，死菌の排泄遅れによるdelayed clearance が原因という指摘がある。わ

検体希釈液 400ll に 5 〜 6mm 程度の便塊を加え，において，除菌治療後 HpSA は，

試 験 管 ミ キ サ ー で 30 秒 間 よ く 混 和 す る。 抗 H.

除菌成功，不成功例にかかわらず除菌終了直後に菌

pylori マウスモノクロナール抗体固相化マイクロプ量の低下により陰性化すると考えられたが，同様のレートに糞便検体を滴下し，酵素標識抗体液を一滴成績が Vaira らから報告されてい加える。１時間室温で静置後洗浄を５回行い洗浄液る。 こ れ ら の 結 果 は HpSA の delayed clearance をを完全に除去した後に基質液を加え室温で 10 分間否定する成績であるが，この現象についてはさらに静置し，反応停止液を加えて発色をプレートリー検討が必要と考えられる。

ダーにて吸光度 450/630nm，または 450nm で測定

れわれの検討16），Odaka ら

20）

22）

19）

９）

Trevisani ら

は除菌後特異性が低下すると報告しする。キットに添付されている比色紙を用いて目視ているが，偽陽性はカットオフ値を若干上回る値で判定も可能である。

あった。われわれは不十分な洗浄によるバックグラ

判定：①吸光度 450nm: 陽性≧ 0.140, 陰性＜ 0.140

ウンドの上昇を経験しており，偽陽性の原因になると考えられた。この点は Vaira らも指摘している② 吸 光 度 450/630nm: 陽 性 ≧ 0.100, 陰 性 ＜。

24）

0.100
３）交差反応性

カットオフ値近傍の結果は，再度検査を行うなど判定には注意が必要である。

製造元による Helicobacter felis, hepaticus, musterae,
cinaedi, Campylobacter jejuni, Bacteroides vulgatus,

Ⅱ．テストメイトピロリ抗原 EIA

Escherichia coli, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium
breve の標準菌株の菌体破砕物における検討におい（わかもと製薬）てはいずれも陰性を示した。
テストメイトピロリ抗原 EIA は，わが国のわかもと製薬が開発したモノクローナル抗体を用いた（ｂ）診断精度

HpSA キットである。報告例は少ないが良好な結果が報告されている。

福田ら 25）は 79 例を対象に内視鏡的検査，UBT，抗体検査を用いた判定を基準にしてテストメイトピ
ロリ抗原 EIA は感度，特異度ともに 100% と報告し（ａ）測定原理と基礎性能ている。

１）測定原理おわりに便中の H. pylori 抗原（native カタラーゼ）に対し特異的に反応するモノクロール抗体を ELISA 法で検出する方法である。

新しく保険適用となった便中 H. pylori 抗原測定

（ 22 ）

モダンメディア 第50巻 ５号 2004年〔糞便中のH.pylori抗原検査〕 121

法は H. pylori 感染診断の精度は高く，除菌判定においても，除菌治療後 4 週を超える間隔をあけて判定すること，カットオフ値近傍の結果は再度検査を行うなどの注意をすることによって，より確実な判定結果を得ることが可能と考えられた。HpSA は患者負担が少なく，小児にも適した検査と考えられ，小児における検討も進んでおり，有用性が報告されている 11, 18, 26）。
また，イムノクロマト法を用いた迅速 HpSA キット で あ る Immuno Card STAT! HpSA（MeridianBioscience Europe），およびテストメイトラピッド
ピロリ抗原（わかもと製薬）も開発され，精度が検Gastroenterol 95：1699-1701, 2000.
11）Odera G., et al.: Detection of Helicobacter pylori in stool
specimens by non-invasive antigen enzyme immunoassay
in children: Multicentre Italian study. Br Med J 320：347-348, 2000.
12）Ohkura R., et al.: Usefulness of a novel enzyme
immunoassay for the detection of Helicobacter pylori infeces. Scand J Gastroenterol 35：49-53, 2000.
13）石塚 淳ほか：便中抗原測定キットによる Helicobacter
pylori 診断および除菌判定の試み . 日消誌 96：1196, 1999.
14）福田能啓ほか：糞便抗原検出キットによる H. pylori 感
染診断 . Current Therapy 18：1677-1681, 2000.
15）Vaira D., Vakil N.: Blood, urine, stool, breath, money, andHelicobacter pylori. Gut 48：287-289, 2001.
16）Tanaka A., et al.: Evaluation of Helicobacter pylori stool
antigen test before and after eradication therapy. J
Gastroenterol Hepatol 18：732-738, 2003.

討されており，今後臨床応用が期待される。

文17）Vaira D., et al.: Noninvasive antigen-based assay forassessing Helicobacter pylori eradication. Am J献１）Malfer theiner P., et al.: Cur rent concepts in themanagement of Helicobacter pylori infection−The

Gastroenterol 95：925-929, 2000.
18）Braden B., et al.: Comparison of new faecal antigen testwith 13C-urea breath test for detecting Helicobacter pylori

Maastricht 2-2000 Consensus Report. Aliment PharmacolTher 16：167-180, 2002.
２）日本ヘリコバクター学会ガイドライン作成委員会：H.
pylori 感染の診断と治療のガイドライン．日本ヘリコバ
クター学会誌２（Suppl）：1-12, 2000.

infection and monitoring eradication treatment: Prospective clinical evaluation. Br Med J 320：148, 2000.
19）Costa F., et al.: Post-treatment diagnostic accuracy of a
new enzyme immunoassay to detect Helicobacter pylori instools. Aliment Pharmacol Ther 15：395-401, 2001.

３）日本ヘリコバクター学会ガイドライン作成委員会：H.
pylori 感染の診断と治療のガイドライン 2003 年改訂版．

20）Vaira D., et al.: The stool antigen test for detection ofHelicobacter pylori after eradication therapy. Ann Intern

日本ヘリコバクター学会誌４（Suppl）：1-16, 2003.
４）Suzuki N., et al.: Production and application of new
monoclonal antibodies specific for a fecal Helicobacter
pylori antigen. Clin Diagn Lab Immunol 9：75-78, 2002.

Med 136：280-287, 2002.
21）Ishihara S., et al.: Diagnostic accuracy of a new noninvasive enzyme immunoassay for detecting Helicobacter
pylori in stools after eradication therapy. Aliment
Pharmacol Ther 14：611-614, 2000.
22）Odaka T., et al.: Evaluation of the Helicobacter pylori stool
antigen test for monitoring eradication therapy. Am J Gastroenterol 97：594-599, 2002.
23）Forne M., et al.: Accuracy of an enzyme immunoassay forthe detection of Helicobacter pylori in stool specimens in
the diagnosis of infection and posttreatment check-up.
Am J Gastroenterol 95：2200-2205, 2000.
24）Vaira D., et al.: Diagnosis of Helicobacter pylori infection
by HpSA test. Lancet 354：1732, 1999.
25）福田能啓ほか：Helicobacter pylori 感染診断における便中 H. pylori 抗原検出キット（テストメイトピロリ抗原５）伊藤喜久ほか：Helicobacter pylori 便中抗原測定キット（HpSA）の有用性について . 医学と薬学 44：137-142,
2000.
６）神谷茂ほか：糞便中 Helicobacter pylori 抗原検出キット（HpSA）の基礎的評価−その特異性およびコッコイドフォームとの反応性 . 感染症誌 76：378-384, 2002.
７）Bravo L.E., et al.: Effects of Acid suppression and bismuth
medications on the performance of diagnostic tests for
Helicobacter pylori infection. Am J Gastroenterol 94：2380-2383, 1999.
８）Vaira D., et al.: Diagnosis of Helicobacter pylori infection
with a new non- invasive antigen-based assay. Lancet
354：30-33, 1999.

EIA）の有用性．第８回日本ヘリコバクター学会抄録

９）T revisani L., et al.: Evaluation of a new enzyme
immunoassay for detecting Helicobacter pylori in feces: A
prospective pilot study. Am J Gastroenterol 94：
1830-1833, 1999.
10）Vakil N., et al.: Prospective blinded trial of a fecal antigen
test for the detection of Helicobacter pylori infection. Am J

集 : 105, 2002.
26）Kato S., et al.: Accuracy of the stool antigen test for thediagnosis of childfood Helicobacter pylori infection: amulticenter Japanese study. Am J Gastroenterol 98：
296-300, 2003.

（ 23 ）