第334回
回GC研究会特別講演会（研究会特別講演会（2014年年12月月12日）日）研究会特別講演会（「安全・安心な生活と豊かな文化を支えるガスクロマトグラフィー」

QuEChERS法（クエッチャーズ法）を用いたGCによる食品中の残留農薬の分析
Restek Corporation
北見 秀明

Copyrights: Restek Corporation

1目次• Restekの簡単なご紹介の簡単なご紹介• QuEChERS法について
法について• GCによる分析についてによる分析について

Copyrights: Restek Corporation

2

弊社の概要Restek Corporation
レステックコーポレーション
• 本社
•
•••
•

ペンシルべペンシルべニア州
ベルフォント
創業 1985年
年
従業員数 300名
名
従業員持株制度（ESOP））100%
従業員持株制度（代表取締役：Bryan
Wolcott代表取締役：設立者：PaulSilvis
設立者：
Copyrights: Restek Corporation3

弊社の主力製品（QuEChERS：RESTEK Q-sep）

GC カラムHPLC/UHPLC カラム

LC アクセサリ

リークディテクター
フローメーター

GC アクセサリ
その他の消耗品
Copyrights: Restek Corporation

4目次• Restekの簡単なご紹介の簡単なご紹介• QuEChERS法について
法について• GCによる分析についてによる分析について

Copyrights: Restek Corporation5背景
平成18年月（2006.
5.））
平成 年5月（月（
食品中に残留する農薬等に関するポジティブリスト制度
残留基準がある農薬等約250種から約800種へと拡大より迅速で，より簡易的なより迅速で，より簡易的な試料の前処理法と多成分同時分析法の必要性が高まる．
（ふるい分け＝スクリーニング検査
ふるい分け＝スクリーニング検査）
ふるい分け＝スクリーニング検査
食品に残留する農薬等の試験方法（厚生労働省の通知）2014.
10. 現在食品に残留する農薬等の試験方法（厚生労働省の通知）
http://www.mhlw.go.jp/topics/bukyoku/iyaku/syoku-anzen/zanryu3/
Copyrights: Restek Corporation

6

QuEChERS法（クエッチャーズ法）
法（クエッチャーズ法）“catchers”
法（クエッチャーズ法）“キャッチャーズキャッチャーズ”
キャッチャーズ
Quick（迅速），（迅速），Easy（簡単），（簡単），Cheap（安価），（安価），（迅速），（簡単），Effective（効率的），（効率的），Rugged（高い耐久性），（高い耐久性），Safe（安全）（安全）（効率的），（高い耐久性），
2003年に発表（オリジナル）
M. Anastassiades, S. J. Lehotay, D. Stajnbaher, F. J. Schenck,
J. AOAC International, 86(2), 421-431 (2003)

試料の前処理法（QuEChERS法）
多成分同時分析法（GC-MS又はLC-MS/MSなど）
Copyrights: Restek Corporation

7海外の公定分析法
海外の公定分析法
2008年に発表（EU法：European EN 15662 ）Foods of Plant Origin-Determination of Pesticide Residues Using
GC-MS and / or LC-MS/MS Following Acetonitrile Extraction /Partitioning and Clean up by Dispersive SPE -QuEChERS method.

2007年に発表（AOAC法）
Pesticide Residues in Foods by Acetonitril Extraction andPartitioning with Magnesium Sulfate.

更なる改良法，試料の適用範囲の拡大が求められていて，その検討も国内外でなされている．
Copyrights: Restek Corporation

8

QuEChERSの概略フローの概略フローオリジナル（2003年）年）

EU法（法（EN15662））
法（（2008年）
年）

AOAC法
法
（2007年）年）

試料10 g↓
ACN：10 mL↓ 振とう1分
無水硫酸Mg：4 g
塩化Na：1 g↓ 振とう1分
ISTD：：50 µL添加
添加
↓ 振とう30秒↓ 遠心分離5分
固相抽出（分散式）

試料10 g↓
ACN：10 mL
ISTD：：100 µL添加
添加
↓ 振とう1分
無水硫酸Mg：4 g
塩化Na：1 g
クエン酸3Na：1 g
クエン酸2Na：0.5 g↓ 振とう1分↓ 遠心分離5分
固相抽出（分散式）

試料15 g↓1%酢酸含有ACN：15 mL
無水硫酸Mg：6 g
無水酢酸Na：1.5 g
ISTD 75 µL添加
添加
↓ 振とう1分↓ 遠心分離1分
固相抽出（分散式）

Copyrights: Restek Corporation9従来法とQuEChERS法の概略フローとその利点
従来法と法の概略フローとその利点
QuEChERS法
法（約20分検体）（約 分/検体）

従来法（約60分検体）（約 分/検体）
試料20 g↓
ACN：45 mL↓抽出↓塩析（で100 mL
塩析（ACNでに定容する）↓脱水↓
固相カラム精製

分析時間の短縮（約3分の1）
溶媒量の削減（約10分の1）

試料10 g↓
ACN：：10 mL↓
抽出・塩析・脱水を同時に行う↓固相抽出（精製）（分散式）

Copyrights: Restek Corporation

10

QuEChERS（前処理操作の概略）（前処理操作の概略）Fig.
1～～3（前処理操作の概略）
RESTEK Q-sep（レステック（レステック キューセップ）

Fig. 1
Fig. 2

試料をホモジナイズする．
試料を10，50 mLチューブに分取する．
チューブに分取する．
試料を g，さらにアセトニトリルを10加え，1分間激しく振とうする．
さらにアセトニトリルを mL加え，加え， 分間激しく振とうする．
Fig. 3 試薬を振り混ぜる．（試薬の秤量を必要としない
試薬を振り混ぜる．（試薬の秤量を必要としない＝試薬の秤量を必要としない＝検査キット）
検査キット）
Copyrights: Restek Corporation

11

QuEChERS（前処理操作の概略）（前処理操作の概略）Fig.
4～～6（前処理操作の概略）
RESTEK Q-sep（レステック（レステック キューセップ）

Fig. 4
Fig. 5
Fig. 6

抽出塩が入ったパッケージを開封する．
抽出塩をチューブ内に加える．
抽出塩をできるだけ全量加える．
Copyrights: Restek Corporation

12

QuEChERS（前処理操作の概略）（前処理操作の概略）Fig.
7～～9（前処理操作の概略）
RESTEK Q-sep（レステック（レステック キューセップ）

Fig. 7

1分間激しく振とうし，内部標準物質（分間激しく振とうし，内部標準物質（IS）を添加して，分間激しく振とうし，内部標準物質（ ）を添加して，さらに30秒激しく振とうする．
さらに 秒激しく振とうする．
Fig. 8 遠心分離（3000～～3500 rpm）をする．
）をする．
遠心分離（Fig. 9 上澄み液をdSPEチューブに分取する．
チューブに分取する．
上澄み液を
Copyrights: Restek Corporation

13

QuEChERS法（試料の状態）法（試料の状態）
RESTEK Q-sep（遠心分離後，（遠心分離後，Fig.
8の後）の後）（遠心分離後，ホウレンソウ

赤とうがらしキュウリ
Copyrights: Restek Corporation

14

QuEChERS（前処理操作の概略）（前処理操作の概略）Fig.
10～～12（前処理操作の概略）
RESTEK Q-sep（レステック（レステック キューセップ）

Fig. 10

上澄み液を精製用充填剤が入ったチューブに上澄み液を精製用充填剤が入ったdSPEチューブに液を精製用充填剤が入った分取した後に，1分間激しく振とうする．
分取した後に， 分間激しく振とうする．
Fig. 11 遠心分離（3000～～3500 rpm）をする．
）をする．
遠心分離（Fig. 12 上澄み液をバイアルに分取した後，機器分析（GC又は機器分析（ 又はLCなど）を行う．
又は など）を行う．
Copyrights: Restek Corporation

15

QuEChERS法の選択
法の選択（）
法の選択（RESTEK Q-sep）
AOAC法
法

EU法（法（EN15662））
法（

一般的な野菜・果物
セロリ，レタス，キュウリ，メロン

Q-sep Q250
2 mL, 100-pk.
Q-sep Q350
15 mL, 50-pk.

Q-sep Q210
2 mL, 100-pk.
Q-sep Q370
15 mL, 50-pk.

脂質・ろう脂質・ろう質を含む
ろう質を含む
野菜・果物
アボガド，ナッツ，種，乳製品，シリアル

Q-sep Q251
2 mL, 100-pk.
Q-sep Q351
15 mL, 50-pk.

色素を含む野菜・果物
イチゴ，サツマイモ，トマト

Q-sep Q352
15 mL, 50-pk.

Q-sep Q212
2 mL, 100-pk.
Q-sep Q371
15 mL, 50-pk.

Q-sep Q252
2 mL, 100-pk.

Q-sep Q213
2 mL, 100-pk.
Q-sep Q372
15 mL, 50-pk.

色素を多く含む野菜・果物
赤トウガラシ，ホウレンソウ，ブルーベリー

注）その他の改良法も取り揃えています．
Copyrights: Restek Corporation

16

目次

• Restekの簡単なご紹介の簡単なご紹介• QuEChERS法について
法についてによる分析について• GCによる分析について

Copyrights: Restek Corporation17

サツマイモ（SweetPotato））
サツマイモ（Copyrights: Restek Corporation18

サツマイモ（SweetPotato））
サツマイモ（Copyrights: Restek Corporation19

パルミチン酸（palmiticacid））
パルミチン酸（IUPAC系統名：ヘキサデカン酸（hexadecanoic acid）
融点63℃，沸点351℃，白色固体，水に不溶，エーテル，ベンゼンには可溶，エタノールには難溶
エンドスルファン（Endosulfan））
エンドスルファン（
化審法の第一種特定化学物質（農薬類）
融点106℃，沸点106℃，黒褐色固体，水に不溶，芳香有機溶剤に可溶，エンドリン（Endrin）と類似

Copyrights: Restek Corporation20

サツマイモ（SweetPotato））
サツマイモ（Copyrights: Restek Corporation21

サツマイモ（SweetPotato））
サツマイモ（Copyrights: Restek Corporation22

サツマイモ（SweetPotato））
サツマイモ（Copyrights: Restek Corporation23

イチゴ（）
イチゴ（Strawberry）
添加回収率について（前処理条件）
添加回収率について（前処理条件）

Copyrights: Restek Corporation24

イチゴ（）
イチゴ（Strawberry）
添加回収率について（分析条件）
添加回収率について（分析条件）

Copyrights: Restek Corporation25

精製用固相充てん剤の種類
MgSO4（硫酸マグネシウム）：水分の除去（脱水）（硫酸マグネシウム）：水分の除去（脱水）PSA（第（第1級・第（第 級・第2級アミン）：糖，脂肪酸，有機酸，色素等の除去級・第 級アミン）：糖，脂肪酸，有機酸，色素等の除去
C18（オクタデシルシリカ：（オクタデシルシリカ：ODS）：疎水性の夾雑物の除去）：疎水性の夾雑物の除去（オクタデシルシリカ：
GCB（グラファイトカーボン）：色素，ステロール等の夾雑物の除去（グラファイトカーボン）：色素，ステロール等の夾雑物の除去

Copyrights: Restek Corporation26

イチゴ（）
イチゴ（Strawberry）
添加回収率（％）について
添加回収率（％）について

Copyrights: Restek Corporation27

イチゴ（）
イチゴ（Strawberry）
添加回収率（％）について
添加回収率（％）について

Copyrights: Restek Corporation28

第334回
回GC研究会特別講演会（研究会特別講演会（2014年年12月月12日）
日）
研究会特別講演会（「安全・安心な生活と豊かな文化を支えるガスクロマトグラフィー」

ご清聴ありがとうございました
ご問い合わせは以下のメールアドレスまで
restekjapan@restek.com
URL: www.restek.com
Copyrights: Restek Corporation29