2016/7/8

蚊媒介ウイルス感染症とその対策

節足動物（昆虫etc）媒介性ウイル
節足動物（昆虫etc）媒介性ウイルスは、arthropod
スは、
arthropod--borne virus
virusアルアルボウイルスと総称される～デング熱・ジカ熱を中心に～

アルボウイルスは、節足動物によりヒト
や脊椎動物にウイルスが伝播するという疫学的な共通性に基づいた概念であり ウイルス学的な分類上その中にはり、ウイルス学的な分類上その中には、
フラビウイルス科、トガウイルス科、ブン
ヤウイルス科、レオウイルス科などのウイルスが含まれる。

2016年7月8日@九都県市感染症対策研修会【県民ホール】
高崎智彦 （神奈川県衛生研究所）
1

フラビウイルス属の系統樹
デングウイルス
３ １

２

４

日本脳炎血清型群
WN KunMVE JE SLE

黄熱

ダニ媒介性脳炎ウイルス群

デング熱の症状・検査所見
ほとんどの •突然の発熱（多くは３８℃以上の高熱）症例で認め •急激な血小板減少・白血球減少（発病後られる所見 数日で急激に減少する）～発病日に減少しているわけではない～

1.

よく認め 2.
2
られる所 3.
見4.
5.

発疹（多くは解熱傾向とともに出現する）
悪心 嘔吐 下痢
悪心、嘔吐、下痢
痛み（頭痛、目の奥の痛み、筋肉痛、関節痛）
点状出血などの出血傾向
肝機能低下

1

2016/7/8

デング熱の症状
目そのものが痛いというより目の奥の方が痛いという感じです。

発疹が出る人は、発病して数
日たってから。
でない人もいます。

37℃台の発熱の人もいますよ。

とにかく全身が痛いという患者もいます。

デング熱の鑑別疾患• 発疹チフス• チクングニア熱• ジカ熱• マラリア
• チフス
• 麻疹
• 風疹
• レプトスピラ症• 発疹熱• ウエストナイル熱• 急性HIV感染症• 伝染性紅斑（成人初発例）• 伝染性単核症

デング熱患者の発疹

ウイルス血症と抗体上昇の関係
P/N 比

106~7 pfu/mL

NS1抗原
IgM
デングウイルス
ウイルス血症

IgG,
中和抗体‐3 ‐2 ‐1

発疹は発熱より少し遅れて出現する

0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

発病日からの日数22016/7/8

デングウイルスNS1抗原検査（イムノクロマト法）の保険適用について
区分 Ｅ３（新項目）

測定項目
デングウイルス
抗原及び抗体同時測定定性法

測定方法

主な測定目的

イムノクロマト 全血又は血清中のデングウイルス NS1 抗原、抗デングウ イルス IgG 抗体及び抗デングウイ
ルス IgMI M 抗体の検出 （デングウイルス感染の診断の補助）ELISAにはReaderが必要です

点数
２３３点

デングウイルスNS1抗原検出ELISAキット

ウイルスの型別は決められません！
＜留意事項案＞（１）本検査は、デングウイルスNS1抗原、IgG抗体及びIgM抗体を、イムノクロマト法を用いて同時に測定した場
合に算定 できる。
（２）国立感染症研究所が作成した「蚊媒介感染症の診療ガイドライン」に基づきデング熱を疑う患者が、当該患者の集中 治療に対応できる下記のいずれかに係る届出を行っている保険医療機関に入院を要する場合に限り算定できる。
(イ) 区分番号「Ａ３００」救命救急入院料「１」から「４」までのいずれか(ロ) 区分番号「Ａ３０１」特定集中治療室管理料「１」から「４」までのいずれか(ハ) 区分番号「Ａ３０１－２」ハイケアユニット入院医療管理料「１」又は「２」のいずれか(二) 区分番号「Ａ３０１－４」小児特定集中治療室管理料（３）感染症の発生の状況、動向及び原因を明らかにするための積極的疫学調査を目的として実施された場合は算定できな い。

デング出血熱ELISA reader （吸光度を測定する）

デング出血熱症例【胸水貯留】＜デング熱の症状に加えて＞
 出血症状 血小板減少（
血小板減少（100,000/mm
100,000/mm3以下）
 血管透過性亢進による血漿漏出（胸水、腹水などを伴う。
デング出血熱が重篤化し 循環不全が合併するとデング出血熱が重篤化し、循環不全が合併すると、デングショック症候群となる。迅速な治療がなされても、致死率は12～20％と高率である。
これらの症状（重症化）は、解熱傾向が認められる時期に発症することが多い。

（単純CT）

3

2016/7/8

デング熱患者の眼底出血
急性期

回復期

RL

L
２ヶ月後

LR

小児のデングウイルス初感染と再感染におけるデング出血熱/ショック症候群の発生頻度
デング出血熱(DHF grade 1, 2)

デングショック症候群
デングシ
ク症候群
（DHF grade 3,4)

初感染
（１－１４y）

0.18%

0.007%

再感染（１－１４y）

2.01%

1.14%

R
２ヶ月後
国立国際医療研究センター症例

デングウイルス抗体によるEnhancement
デングウイルス抗体による
Enhancement 効果
交差防
御的に
働く抗体

Out patients

ただ結合
するだけ
の抗体

抗原抗体複合物

ウイルスレセプターが少なかったり、中和抗体でブロックされてもFcレセプターを介してFc
レセプターを介して感染が成立する。

生体内には多くのFcレセプター
生体内には多くのFc
レセプター発現細胞が存在する！

4

2016/7/8

DHF patients, 2 years old

デングウイルスの感染環
蚊
吸血中のヒトスジシマカ

ウイルス

ネ タイシマカ
ネッタイシマカ

The mortality rate was 8.4%
(January-February,2005)
336 cases→ 263 had clinical features compatible with DHF(22 deaths)
73 were diagnosed as suspected DF

自然宿主

私たち待ち伏せ型の蚊です！

ヒトスジシマカ、ネッタイシマカが媒介する発熱性疾患• デング熱• ジカ熱• チクングニア熱

Aedes albopictus•デングウイルス；フラビウイルス科•ジカウイルス；フラビウイルス科•チクングニアウイルス；トガウイルス科

日本脳炎ウイルスの生活環
妊娠ブタが日脳ウイルスに感染すると流産・死産
することがあるが、それ以外に発病
することはない。

吸血中のヒトスジシマカ

ウマ↑ネッタイシマカの吸血シーン

52016/7/8

コガタアカイエカ

時間帯による蚊の活動性

Culex tritaeniorhynchus
わたしは、１０km
位は飛べるんだよ。
風に乗っかればもっと遠くまで移動しちゃうよ！

コガタアカイエカは、田んぼや池のような大きなところに産卵する。
出典「蚊のいない国」細井輝彦（岩波書店、昭和27年発行）

ネッタイシマカ、ヒトスジシマカの発生母地

高雄市（台湾）の雨水マス水が流れていないがきれいである（上段）
水が流れている雨水マス（下段）ではネッタ
イシマカは発生しない。

62016/7/8

屋内のネッタイシマカの産卵場所
ヒトスジシマカの産卵場所

とんでもないところ産卵するのがネッタイシマカ！

デング熱に関する熱心な研究が日本人によるデングウイルス
世界初分離につながった！

沖縄では戦前にもデング
熱流行があった。流行地との人の行ききの頻度が大きな要因である。

1943年に堀田進博士、木村廉博士らが長崎でデング熱患者からデングウイルス1型を分離した。この時の分離ウイルスは患者さんの名前にちなんでデングウイルス 1 型望月株（Dengue
virus type 1, Mochizuki strain）と名付けられ，世界で最初のデングウイルス分離株として認められている。

7

2016/7/8

デング熱動物モデルは？
• 旧世界ザルは感受性があるが、ウイル
ウイルス血症は低く期間も短い
症は低く期間も短• 新世界ザルであるマーモセットは、ウイルス血症も高く期間も長い。（ヒトと比べると低い）• 遺伝子改変マウスでは、ウイルス血症が認められる。（例） humanized
NOD/SCID/interleukin 2 receptor gamma (IL-2Rγ)null (hu-NSG) mice⇒自然なマウスでは

1942－45年のデング熱流行における流行都市別推計患者数
福岡

広島 呉
広島・呉

人口

市

長崎 佐世保 大阪・神戸
長崎・佐世保大阪 神戸
458,000

4,219,000

306,000

582,000

1942
1943
1944
1945
1946

50,0005,000

No epidemic

No epidemic

20,00010,000200

No epidemic

5,000

100,000
00,000

100
00

200
00

3,000

No epidemic

Unknown

No epidemic No epidemic

No epidemic

Unknown

No epidemic

血中にウイルスを検出できない。

2010年の我が国におけるデング熱輸入症例

Susumu Hotta. Dengue epidemics in Japan, 1942-1945. J. Trop. Med. Hygiene. 56: 83. 1953.

デング熱輸入症例数
243名
350

162
300

244

250

292

249

[値]

220

0

0
患 200
者
報
告
数 150

137

179
113
0

100

18

0

0

0

18

0
50
0
18

0

0

50

52

0
32

49

2001

2002

2003

2004

0

0
74

89

104

92

58

0
2000

2005

2006

2007

2008

2009

2010

2011

2012

2013

2014

2015

2016

年
1/1

3/1

5/10

7/12

9/20

ヒトスジシマカの活動期

11/29

2016年第21週まで

8

2016/7/8

デング熱輸入症例_国別

検出デングウイルス型別_2016年

2016年21週時点
ミャン
マー, 2

東ティモール, 1
モルディブ, 1

仏領ポリネシア, 2 イン
ド, 3

25

I型
型 20

マレーシ
ア, 7

II型 2120

ベトナム, 915

III型 14ブラジル, 710

フィリピン, 12[分類名], [値]

IV型 6

5

バングラデシュ, 1
パラグアイ, 1
パプアニューギニア, 1

0

タイ, 14

I型
II型
III型

スリランカ, 2

IV型

シンガポール, 4サモア, 1

グアテマラ, 1

カンボディア, 3

都道府県別デング熱輸入症例_2016 21週時点

都道府県
北海道
青森県
岩手県
宮城県
秋田県
山形県
福島県
茨城県
栃木県
群馬県
埼玉県
千葉県
東京都
神奈川県
新潟県
富山県
石川県
福井県
山梨県
長野県
岐阜県
静岡県
愛知県
三重県
滋賀県
京都府
大阪府
兵庫県
奈良県
和歌山県
鳥取県
島根県
岡山県
広島県
山口県
徳島県
香川県
愛媛県
高知県
福岡県
佐賀県
長崎県
熊本県
大分県
宮崎県
鹿児島県
沖縄県
合計

報告数
1
1
1
0
0
0
0
1
1
1
6
10
38
14
2
0
1
0
1
2
2
3
6
1
3
2
10
7
7
0
0
1
0
7
0
0
0
1
0
1
0
0
2
1
0
1
2
137

日本におけるデング熱の感染成立のシナリオ
ヒトスジ
シマカ
刺咬
デングウイルス血症期のヒト（発症前日～発症５日後）
感染
ヒトスジ
シマカ

刺咬後約７日目にヒトへの感染性を獲得（成虫の生存、最長40日間）
刺咬
未感染のヒト感染

92016/7/8

ヒトスジシマカの国内分布と温度条件世界におけるヒトスジシマカの分布

Albania
1979
Trinidad
1983
USA
1985
Brazil
1986
Mexico
1988
Italy
1990
Nigeria
1991
South Africa 1991
Cuba
1995
Guatemala 1995
Honduras
1995
Bolivia
1997
Argentina
1998
Colombia
1998
Paraguay
1998
France1999
Cameroon
2000
Panama2002
Nicaragua
2003
Swiss
2003
Greek
2003
Belgium
2004
Spain
2004

MIROC(k-1)モデルによる
年平均気温の予測分布図

ヒトスジシマカの分布域拡⼤（1998-2013）

ヒトスジシマカの侵入・定着が確認された国(1979～)

確認地
未確認地

⼋峰

盛岡(2009〜)
(
)

能代
本荘

秋⽥

酒⽥

2010年
宮古(2007)
⼤槌(2011〜)
花巻(2007〜）
気仙沼

横⼿

新庄
⼭形

2000年
⽯巻

会津若松

本来の分布地域
新たに侵入定着した地域
防除によって駆除された地域

Dengue endemic area

仙台
⽩河

軽井沢

〜1950年

確認地
未確認地
11ºC以上の地域

⽇光100 Km東京

ヒトスジシマカは年平均気温が11ºC以上の地域に定着し、気温の上昇に伴い、徐々に分布域を拡⼤している。

38

デングウイルス

ヒト単核球内で増殖したデングウイルス
蚊細胞で増殖（C6/36細胞）

102016/7/8

このドイツ人女性は外国人の人気のスポットを旅行！

日本での感染が疑われたドイツ人デング熱症例
2013年9月発生、2014年1月報告
51歳女性、生来健康
日
本
国
内
旅
行
*

成田着（フランクフルトからの直行便）

day‐15

8/19

day‐15~‐13

8/19~21

day‐13~‐10

8/21~24

笛吹（山梨）

day‐10~‐9

8/24~25

広島

day‐9~‐6

8/25~28

京都 （欧米人に人気の町屋旅館）

上田（長野）

Yamanashi
Winery東京 （新宿御苑を訪れた）←2014年に聞き取り

day‐6~‐3

8/28~31

day‐3

8/31

成田発（フランクフルトへの直行便）

発 day 0症
後 day 6
経過

9/3

発熱（最高体温40℃）・嘔気→紅斑丘疹性発疹を伴う

9/9

ベルリンの医療機関に入院
IgG (IFA): 1:20,480 （陽性）,IgM (IFA): 1:320 （陽性）NS1 抗原(ELISA): 陽性, RT‐PCR: 陰性
中和試験：デングウイルス2型の感染

Eurosurveillance, Volume 19, Issue 3, 23 January 2014 (*旅程情報はProMedより）

デング熱の国内感染症例の発生状況
発症日別報告数

Yoyogi story（発症日不明の4例を除く151例）
報告数

12

代々木公園8/28午後5時-8/29朝閉鎖

代々木公園またはその周辺のみ
n=122

10

9/4～代々木公園
A地区閉鎖

厚労省第1報発表（8/27）

ウイルス遺伝子配列は一致する！

新宿中央公園のみ n=886

代々木公園のヒトスジシマカの数は半端な数ではない！

移
動
移
動

その他・不明 n=21

4
2
0
8月

9月

発症日

【厚生労働省発表（2014年10月6日11時現在）に基づく。】

11

2016/7/8

代々木公園イベント一覧
６月•カリブ・ラテンアメリカフェスティバル•メコンフェスティバル2014•エコライフ・フェア2014•ASEANフェスティバル
ASEANフェスティバル•カリブ・アフリカ ダンスフェスティバル•One Love Jamaica Festival•大江戸骨董市•第３回ワールドダンスフェスティバル•アースデイ マーケット
７月•アース・ガーデン夏ガ デ•地球愛祭り2014 in 東京•オーシャンピープルズ２０１４•第９回ブラジルフェスティバル•アースデイマーケット

デング熱の国内感染症例の居住地別状況（n=162）

７月•第２回タイフェア― in 東京２０１４•大江戸骨董市
８月•第２回アセアンフェスティバル２０１４バ•アースデイマーケット•うた会 ～２０１４夏～•ユーロフェス２０１４•カリブ中南米フェスティバル•PEDAL DAY 2014
•灼熱！マチャドナミーフェス•スーパーよさこい２０１４•フリ マ ケット
•フリーマーケット•Pipes of piece vol. 31•大江戸骨董市

全国で19都道府県

公園以外で体育館などでも全日本小中学生ダンスコンクールなど催し物多数！

どのようなデングワクチンが望まれるか

デングウイルスキメラワクチンはまだ完全ではない
Construction of CYD‐TDY; Sanofi Pasteur
NS2B

5’ NTR
1000

0

C prM

１）デングウイルス1－4型すべてに対して
１）デングウイルス1
4型すべてに対して高レベルの防御免疫（中和抗体）を誘導する。
２）ワクチン接種者にデング出血熱が多発
しない。
３）安価

D1

prM
M&

D2

prM &

2000

3000

E

NS1 NS2A

E
E

4000

3’ NTR

NS4A
6000

5000

NS3

7000

8000

NS4B

9000

10000

NS5

RNA transfection in Vero cells

Exchange with prM/E
genes of wt DEN1 ‐ 4

D3 prM & E

Individually transcribed to RNA

D4 prM & E

4 chimeric cDNAs

2型ウイルス感染を防御できなかった！（タイでの臨床試験で）4 individual
chimeric
Dengue viruses(CYD 1‐4)

D1

D2

D3

D4

12

2016/7/8

Is NT Ab against D2 protective ?
In the Sanofi Pasteur tetravalent dengue vaccine.
80
70
60

ジカウイルス（Zika virus）～ウイルスと実験室診断～

50
40
30
20
10
0
D1

D2
Homo NT Ab

D3

D4

デングウイルス、日本脳炎ウ
イルス、黄熱ウイルス、ウエストナイルウイルスと仲間！

Hetero NT Ab
Not real data, speculated by Takasaki

ジカウイルス病（ジカ熱）の症状 症状は４～５ジカ熱の発疹と結膜炎

日で治まることがほとんど！

• 発熱 (38.5℃以上になることは稀）• 発疹（掻痒感を伴うことが多い）• 関節痛• 結膜充血・結膜炎
• 筋肉痛
• 頭痛
• 悪心、嘔吐など消化器症状
 感染者の5人に4人は不顕性感染
 症状は数日から一週間
 重病感がない！比較的元気 病院に行くほどではない！⇒発疹が出て皮膚科受診

Common

しばしば時にBy US-CDC

血小板減少、白血球減少をきたしても軽度である。

13

2016/7/8

ジカウイルス血症と抗体上昇の関係

フラビウイルスの構造について
デングウイルスもジカウイルスも同様である！
P/N 比ZIKV Viremia
デング熱より短い?!

10 pfu/mL
7

プラス鎖RNAウイルス（11kb長）
3つの構造蛋白、7つの非構造蛋白、非翻訳領域から構成される

IgM
デング熱の場合同様
NS1抗原は検出できると考えられるが、まだキットは開発中である！

5’ Nontranslated region (NTR)
01000

3’ NTR

2000

3000

4000

E

NS1

NS2A

5000

6000

7000

8000

NS4A

NS4B

9000

10000

IgG, 中和抗体
尿中ウイルス
遺伝子検出でカバ する
カバーする‐3 ‐2 ‐1

0

1

2

3

4

5

6

C

7

8

9

10

Days Post Onset

イムノクロマト検査法の注意点

prM

M

Structuralproteins

NS2B

NS3

NS5

Nonstructuralproteins

NS1(non‐structural protein 1)抗原は、46kDのタンパクであり、デングウイルス感染哺乳類細胞質内、細胞膜表面から感染細胞外に分泌されるウイルス抗原である。

1947年にアカゲザルからジカウイルスを分離した研究所

決められた時間でバンドを確認すること！
１～２時間もたてばうっすらバンドが見えます！

抗体のバンドは、フラビウイルス間で交差反応や非特異反応がおきることがあります！

発熱、
発熱したアカゲザルは、
野生のサルではありませんでした！ロックフェラー研究所で黄熱の研究は続いていました。

妊婦さんでは非特異反応がおきやすい！

こんな時は、結果の解釈は慎重に！
• 発病日や第１～２病日にIgM抗体が陽性？
• 発病から１０日目以降なのにIgM抗体陽性、IgG抗体陰性

14

2016/7/8

Zika virus infections in humans in the 20th century, confirmed by virus isolation

Zika virus infections in humans in the 20th century, confirmed by virus isolation
Year

Location

Description

1

Case No

1954

Nigeria

10‐yr‐old African female with fever and headache

MacNamara 19541

2

1956

Nigeria

Experimentally induced in a 34‐yr‐old
European male, residing in Nigeria for 4 ½
months before inoculation; symptoms
included headache and fever

Bearcroft 19562

3

1962‐’63

UgandaSimpson 19643

4, 5, 6

1968

Nigeria

28‐yr‐old European male, residing in
Uganda for 2 ½ months before illness; withheadache, rash, and fever
Virus isolated from 3 febrile children, aged:• 10 months• 2 ½ years• 3 years
No clinical details available

7, 8

1979

Nigeria• 2 ½ yr‐old boy with fever• 10‐yr‐old boy with fever, headache, andbody pains

Fagbami 19795
40% persons tested hadneutralising antibodies to Zika
virus (more frequently inyounger people),demonstrating high prevalenceof immunity in Nigeria.
Unreported cases likely
misdiagnosed as malaria.

実験室感染

Moore 19754

ジカ熱流行地域におけるウイルスが分離または疫学的に推定された媒介蚊

Aedes luteocephalus
Aedes aegypti formosus
Aedes africanus

Aedes vittatus

Case No

Reference/ notes
9

実験室感染

10‐16

Year

Location

1973

Male arbovirus laboratory worker who had
been vaccinated against yellow fever 2 months
before infection; with chills, fever, sweating,retro‐orbital pain, and pain in the back of theneck and in the joints
Indonesia 7 cases in hospitalized patients:• 16‐yr‐old female• 14‐yr‐old male
• 12‐yr‐old male
• 32‐yr‐old female• 12‐yr‐old female• 25‐yr‐old female• 13‐yr‐old male
All cases had fever; none had rash

1977‐
’78

Portugal

Description

Reference/ notes

Filipe 19736

Olson 19817

1 MacNamara FN. Zika virus: a report on three cases of human infection during an epidemic of jaundice in Nigeria. Trans R Soc Trop Med Hyg. 1954 Mar;48(2):139–45.
http://dx.doi.org/10.1016/0035-9203(54)90006-1 PMID:13157159.
2 Bearcroft WGC. Zika virus infection experimentally induced in a human volunteer. Trans R Soc Trop Med Hyg. 1956 Sept;50(5):442-48. doi: 10.1016/0035-9203(56)900918.
3 Simpson DI. Zika virus infection in man. Trans R Soc Trop Med Hyg. 1964 Jul;58(4):335–8. http://dx.doi.org/10.1016/0035-9203(64)90201-9 PMID:14175744.
4 Moore DL, Causey OR, Carey DE, Reddy S, Cooke AR, Akinkugbe FM, et al. Arthropod-borne viral infections of man in Nigeria, 1964–1970. Ann Trop Med Parasitol. 1975
Mar;69(1):49–64.
5 Fagbami AH. Zika virus infections in Nigeria: virological and seroepidemiological investigations in Oyo State. J Hyg (Lond). 1979 Oct;83(2):213–9.
http://dx.doi.org/10.1017/S0022172400025997 PMID:489960.
6 Filipe AR, Martins CM, Rocha H. Laboratory infection with Zika virus after vaccination against yellow fever. Arch Gesamte Virusforsch. 1973;43(4):315–9.
http://dx.doi.org/10.1007/BF01556147 PMID:4799154.
7 Olson JG, Ksiazek TG, Suhandiman, Triwibowo. Zika virus, a cause of fever in Central Java, Indonesia. Trans R Soc Trop Med Hyg. 1981;75(3):389–93.
http://dx.doi.org/10.1016/0035-9203(81)90100-0 PMID:6275577.

ジカ熱の世界的拡がり 2013～2016

Aedes albopictus
Aedes aegypti

ウガンダ(1947)

Aedes hensilli
ヤップ(2007)

Aedes albopictus
Aedes aegypti

ブラジル(2015)
フランス領ポリネシア(2013)

Aedes polynesiensis

Aedes aegypti
Aedes albopictus

Aedes aegypti

地図上の●または★印はジカウイルスの活動確認地域を示す

15

2016/7/8

ジカウイルス感染症の実験室診断（検査）について【病原体検出】
遺伝子検出&ウイルス分離
検体は、血液（血漿、血清でも可）および尿【血清診断】
特異的IgM抗体の検出
中和抗体測定有症状期間；発病から７日目まで。ただし、ウイルス血症はデング熱より短い。
尿を併用する理由である。
IgM抗体は早い患者で発症後4日目以降で検出される。
中和抗体は発病7日目頃から検出されるが、10日目以降であればまず検出できる。

If immunoglobulin (Ig) M test results are positive, equivocal, or inconclusive, performing a plaquereduction neutralization test (PRNT) is needed to confirm the diagnosis. However, recent evidence
suggests that a 4‐fold higher titer by PRNT might not discriminate between anti‐Zika virus antibodies andcross‐reacting antibodies in all persons who have been previously infected with or vaccinated against a
related flavivirus. MMWR June 3 2016 by US‐CDC• 血清または血漿、全血としたのはジカ熱の場合は症状が軽く、検査部門のないクリが軽く、検査部門のないクリニックを受診することも想ックを受診することも想定したためである。
• 尿は発病初期のウイルス血症がある時期であれば、不要ともいえるが症状が軽快傾向であれば、血液とともに必要である。過去の輸入症例の経験からも尿は有用であった。
• 抗体検査は、IgG抗体はデングウイルス、日本脳炎ウイ抗体検査は I G抗体はデングウイルス 日本脳炎ウイルス、黄熱ウイルスと近縁であり、交差反応がある。
IgM抗体、中和抗体測定で鑑別可能であるが、これも多少の交差反応を示す。日本脳炎ワクチン、黄熱ワクチンの接種歴、接種日の確認が重要である。

ジカウイルスと他のフラビウイルスの系統樹•尿を３mL程度静置あるいは軽く遠沈し、
尿を
程度静置あ
軽
沈 、
尿（液体）から抽出キットを用いてRNAを抽出する。
•必要な尿量は決して多くない！５０ｍLも送ってもらっても困ります。
•沈査が多少混ざってもOKであるが、尿沈沈査が多少混ざもあるが 尿沈渣を検査するのではない。細胞成分が多いと非特異反応をきたす場合がある。

Derek Gatherer, Alain Kohl. Zika virus: a previously slow pandemic spreads rapidly through the Americas. J. General Virol.

16

2016/7/8

フラビウイルス属の系統樹

2013年ポリネシアで分離されたジカ熱ウイルスの系統樹解析

カンボジア

フランス領ポリネシア

日本脳炎血清型群

ミクロネシア ヤップ島

デングウイルス
３ １

２

４

WN Kun黄熱

ダニ媒介性脳炎ウイルス群

MVE JE SLE

ジカ
ウイルス

ジカ
ウイルス

E，NS5領域による系統樹、フルゲノム解析では赤線の位置に来る！

Zika virus realtime RT‐PCR (TaqMan)ZIKV 860-FAMは、ミクロネシア株に対して1107-FAMのセットより感度が高い！
Primer &probe

Genomeposi on†Sequence (5′ → 3′)

ZIKV 835

835–857ZIKV 911c

911–890

CCTTCCACAAAGTCCCTATTGCZIKV 860‐FAM

860–886

CGGCATACAGCATCAGGTGCATAGGAGZIKV 1086

1086–1102 CCGCTGCCCAACACAAGZIKV 1162c

1162–1139 CCACTAACGTTCTTTTGCAGACATZIKV 1107‐FAM

1107–1137 AGCCTACCTTGACAAGCAGTCAGACACTCAA

Sensitivity,
no. copies Specificity

TTGGTCATGATACTGCTGATTGC

100

ZIKV

25

ZIKV

全国９アルボウイル
スセンター及び感染
研に配備
全地衛研に
配布

プライマー・プローブ領域配列*の比較
EU545988 Micronesia2007
KU321639.ZikaSPH2015.Brazil2015
JN860885 Cambodia2010
Zika (MR766-NIID)LC002520
AY632535.MR766full

ZIKV 911c
ZIKV1 (860)ZIKV 835
1 GTCATATACTTGGTCATGATACTGCTGATTGCCCCGGCATACAGCATCAGGTGCATAGGAGTCAGCAATA 70
1 GTCATATACTTGGTCATGATACTGCTGATTGCCCCGGCATACAGCATCAGGTGCATAGGAGTCAGCAATA 70
1 GTCATATACTTGGTCATGATACTGCTGATTGCCCCGGCATACAGCATCAGGTGCATAGGAGTCAGCAATA 70
1 GTCATATACTTGGTCATGATACTGCTGATTGCCCCGGCATACAGTATCAGGTGCATTGGAGTCAGCAATA 70
1 GTCATATACTTGGTCATGATACTGCTGATTGCCCCGGCATACAGTATCAGGTGCATTGGAGTCAGCAATA 70

EU545988 Micronesia2007
KU321639.ZikaSPH2015.Brazil2015
JN860885 Cambodia2010
Zika (MR766-NIID)LC002520
AY632535.MR766full

71 GGGACTTTGTGGAAGGTATGTCAGGTGGGACTTGGGTTGATGTTGTCTTGGAACATGGAGGTTGTGTTAC 140
71 GGGACTTTGTGGAAGGTATGTCAGGTGGGACTTGGGTTGATATTGTCTTGGAACATGGAGGTTGTGTCAC 140
71 GGGACTTTGTGGAAGGTATGTCAGGTGGGACTTGGGTTGATGTTGTCTTGGAACATGGAGGTTGTGTTAC 140
71 GAGACTTCGTGGAGGGCATGTCAGGTGGGACCTGGGTTGATGTTGTCTTGGAACATGGAGGCTGCGTTAC 140
71 GAGACTTCGTGGAGGGCATGTCAGGTGGGACCTGGGTTGATGTTGTCTTGGAACATGGAGGCTGCGTTAC 140

EU545988 Micronesia2007
141 CGTAATGGCACAGGACAAACCGGCTGTCGACATAGAGCTGGTTACAACAACAGTCAGCAACATGGCGGAG 210
KU321639.ZikaSPH2015.Brazil2015 141 CGTAATGGCACAGGACAAACCGACTGTCGACATAGAGCTGGTTACAACAACAGTCAGCAACATGGCGGAG 210
JN860885 Cambodia2010
141 CGTAATGGCACAGGACAAACCGACTGTCGACATAGAGCTGGTTACAACAACAGTCAGCAACATGGCGGAG 210
Zika (MR766-NIID)LC002520
141 CGTGATGGCACAGGACAAGCCAACAGTTGACATAGAGTTGGTCACGACGACGGTTAGTAACATGGCCGAG 210
AY632535.MR766full
141 CGTGATGGCACAGGACAAGCCAACAGTCGACATAGAGTTGGTCACGACGACGGTTAGTAACATGGCCGAG 210
EU545988 Micronesia2007
211 GTAAGATCCTATTGCTATGAGGCATCAATATCGGACATGGCTTCGGACAGCCGCTGCCCAACACAAGGTG 280
KU321639.ZikaSPH2015.Brazil2015 211 GTAAGATCCTACTGCTATGAGGCATCAATATCAGACATGGCTTCGGACAGCCGCTGCCCAACACAAGGTG 280
JN860885 Cambodia2010
211 GTAAGATCCTACTGCTATGAGGCATCAATATCGGACATGGCTTCGGACAGCCGCTGCCCAACACAAGGTG 280
Zika (MR766-NIID)LC002520
211 GTAAGATCCTATTGCTACGAGGCATCGATATCGGACATGGCTTCGGACAGTCGTTGCCCAACACAAGGTG 280
211 GTAAGATCCTATTGCTACGAGGCATCGATATCGGACATGGCTTCGGACAGTCGTTGCCCAACACAAGGTG 280
AY632535.MR766full

ZIKV 1086

Lanciotti RS, Kosoy OL, Laven JJ, Velez JO, Lambert AJ,
Johnson AJ, Stanfield SM, Duffy MR. Genetic and Serologic
Properties of Zika Virus Associated with an Epidemic, Yap State,
Micronesia, 2007. Emerg Infect Dis. 2008;14(8):1232-9.

ZIKV 860-FAM，1107-FAMのセットは、ブラジルの流行株に対してどちらもそれ程感度は悪くない。

EU545988 Micronesia2007
281 AAGCCTACCTTGACAAGCAGTCAGACACTCAATATGTCTGCAAAAGAACGTTAGTGGACAGAGG
KU321639.ZikaSPH2015.Brazil2015 281 AAGCCTACCTTGACAAGCAATCAGACACTCAATATGTCTGCAAAAGAACGTTAGTGGACAGAGG
JN860885 Cambodia2010
281 AAGCCTACCTTGACAAGCAATCAGACACTCAATATGTCTGCAAAAGAACGTTAGTGGACAGAGG
Zika (MR766-NIID)LC002520
281 AAGCCTACCTTGACAAGCAATCAGACACTCAATATGTCTGCAAAAGAACATTAGTGGACAGAGG
AY632535.MR766full
281 AAGCCTACCTTGACAAGCAATCAGACACTCAATATGTCTGCAAAAGAACATTAGTGGACAGAGGZIKV2 (1107)

344
344
344
344
344

ZIKV 1162c*最上段のMicronesia2007をベースに設計。
Lanciotti et al. EID 14: 1232-1239 (2008)17

2016/7/8

マウスモデルの開発

IgM capture ELISA
Substrate (TMB)
総計４時間
Conjugate(HRP,AP,etc
Conjugate(
HRP,AP,etc))
Anti--Flavi Mono Antibody (6B6C)
Anti
30 min. at RT• マウスでの感受性はそれ程高くない！
• 遺伝子改変マウス（インターフェロンノックアウトマ
ウス If 1-/-/ など）による胎児への影響をみた論
ウス；Ifnar1
文は多い！

Virus Antigen；
Antigen；ZIKV antigen

C57BL/6 mouseはフラビウイルスに感受性は高いが、ZIKVにはそれほどではない。

incubate 2 hours at room
temperature or overnight at 4℃
4℃
Test Serum
containing AntiAntiVirus IgM
g Antibody
y1hr. at RT
Anti-human IgM mAb
AntiCapture Antibody

Blocking

SJL mice

SJLマウスでは、胎児の発育障害を発現できた！

Plastic Solid Phase

ブラジルにおけるジカ熱の流行地域と小頭症の出現

ジカ熱流行後ブラジルで大きな問題となっている小頭症とは定義
後頭前頭を結ぶ周囲径が年齢や性別を合わせた標準値-3SDより小さい (客観的)An abnormally small head, often associated with developmental delay and mentalretardation; any brain or head that is ≥ 3 standard deviati
ons below the mean for a person's age, sex, height, weight, race.

大きな流行地域

測定法：頭囲は眉間 (鼻根部より上部で前頭骨上,最も前に突出している部分)から後頭部の後頭骨
上 最も後ろに突出している部分を巻き尺で測定
上,最も後ろに突出している部分を巻き尺で測定する。

ブラジルでは、新生児の頭囲が31.5 〜32 cm以下

18

2016/7/8

ジカウイルス感染症 なにが優先するのか！

•ワクチン開発＞抗ジカウイルス剤
新規抗ジカウイルス剤で催奇形でもおきたら意味がない
新規抗ジカウイルス剤で催奇形でもおきたら意味がない。
抗ジカウイルス剤は、不妊治療中の御主人が流行地から帰国した時などに限定。

•国内侵入防止；蚊対策⇒国内発生があれば、妊婦さんの検査をどうする！
•羊水からウイルス遺伝子を検出した場合
羊水からウイルス遺伝子を検出した場合どうする？先天性風疹症候群と同じ悩みが発生する！

TORCH症候群を起こすウイルス
Viral TORCH
Pathogen

風疹ウイルス
Rubella virus

サイトメガロウイルス

Cytomegalovirus
単純ヘルペスウイルス

Herpes simplex
Virus

Zika virus

先天性ジカウイルス感染症による小頭症発生率• ポリネシア地域の疫学データから⇔約4200人/年が出生する地域• 2013.10月～2014年4月：ジカ熱流行
1. この流行で全人口の66%がジカウイルスに感染。
2 ８例の小頭症児が発生。うち７例は、2014年3～7月
2.
８例の小頭症児が発生 うち７例は 2014年3～7月
小頭症の発生率
ベースライン・・・新生児1万人対 2例
ジカウイルス感染による・・・妊娠初期感染妊婦 1万人対 95例 （約１%）（Cauchemetz S, et al., Lancet, 2016)

もし、日本で全国規模のパンデミックが起こったら、100万分娩の1/3が妊娠初期=30万人
そのうち約70%がジカウイルスに感染=20万人
その約1%が小頭症
小頭症=2000=2000人
人 /年

•
•

小頭症

流産・
死産

－

＋

＋

第１、２期

第３期

＋

•
•
•

白内障、小眼球症、緑内障
心臓奇形（動脈管開存、心室中隔欠損など）難聴（感音性or伝音性難聴、）精神発育障害
低体重児

•
•
•
•

精神発育障害
黄疸
早産
子癇前症

•
•
•

感音性難聴
肝脾腫
点状出血班

＋

－

＋

＋

•
•

脳炎
白内障 脈絡網膜
白内障、脈絡網膜
炎
心筋炎

•
•
•

肝脾腫
肺炎
精神発育障害

＋

＋

＋

＋

皮膚病変
眼球異常
神経障害

•
•
•

四肢形成不全胎児成長障害多臓器形成不全

＋

－

＋/
－

＋

＋

＋

＋

＋

•

水痘・帯状疱疹ウイルス •Varicella zoster
virus

催奇形性

Symptoms••

略（既出のため）

先天性風疹症候群 ～耳鼻咽喉科医から～• 白内障、先天性心疾患、難聴を三大主徴とする先天性風疹症候群（CRS）の
ほとんどの臨床症状は妊娠8週までに罹患した場合に出現する症状である。しかし、難聴は8週以降の感染でも発症する頻度は高く、CRSの80～90％に認められるとされる。
められるとされる• 難聴の機序は、風疹ウイルスの血管障害による基底膜、血管条と球形嚢の変性が指摘されているが、アブミ骨の固着なども報告され、伝音難聴、感音難聴のどちらも生じる。また、聴力レベルも軽度から重度まで、左右聴力レベルも非対称で一側性難聴のこともある。
• 出生直後の聴力が正常であったとしても2～3歳までに遅発性難聴を生じるた
め注意が必要である。
• 難聴が発見された場合、早期発見・早期介入の原則通り、補聴器装用を開始するべきである。しかし、実際にはウイルスの排泄が止まらない症例もあり、その場合排泄が治まるまで集団の中に入れることができないため、地域の聾学校や療育施設での指導・介入ができず、医療機関でさえも受診抑制せざるをえないこともある。
http://www.nih.go.jp/niid/ja/allarticles/surveillance/2315-iasr/related-articles/related-articles-425/5774-dj4254.html

国立成育医療研究センター
耳鼻咽喉科 守本倫子

19

2016/7/8

国/地域
地域//地方ス

ジカ熱が流行し、ギ ブラジル、コロンビア、ドミニカ
ラン バレ 症候群 共和国、エルサルバドル、フララン・バレー症候群
共和国 エルサルバドル フラが増加した国、地 ンス領ポリネシア、ホンジュラ
域ス、スリナム、ベネズエラ
ジカウイルス感染 フランス領ギアナ、ハイチ、パ後のギラン・バレー
後のギラン
レ
ナマ、プエルトリコ、マルティナ、プ ルトリ 、 ルティ
ニーク症候群は確認されたが増加はなかった国、地域

チクングニアウイルス感染症

ニジカウイルス感染と関連するギラン・バレー症候群が発生した国、地域

チクングニア熱もデン
グ熱、ジカ熱とよく似た症状を示します。
媒介蚊は
ヒトスジシマカ
ネッタイシマカ

直径はデングウイルスの約1.5倍

チクングニア熱の臨床• 以前は不顕性感染がかなりあると考えられていたが、現在の流行では多くの患者が何らかの症状を呈すると考えられている。

チクングニア熱の関節炎（急性期）と発疹像（日本人症例）• 潜伏期間は通常 3–7 日間である。教科書的には3～12日間。デング熱と同様に発熱中はウイルス血症があるが、解熱とともに血液中のウイルスは消失する。
• 発熱と関節痛が最も多い症状である。熱発がなく「関節痛、関節炎だけの症例もある！」• その他の症状として頭痛、筋肉痛、関節腫張、発疹があげられる。
• チクングニアウイルス感染による死亡率は低いが、症状は重症化あるいは機能障害（関節の変形など）をきたすことがある。
• 多くの患者は一週間程度で回復するが、関節症状が回復後も数ヶ月持続する場合がある。
• 新生児や高齢者(≥65 years)、高血圧、糖尿病、心臓疾患を有する人では, 重症化することが多い。
• 終生免疫と考えられている。

（インド人症例）

発疹像
Hochedez et al.
EID 12(10), 2006.

20

2016/7/8

ヒトスジシマカ成⾍の潜み場所

2005‐‐’06
2005’06の西インド洋諸国での流行の西インド洋諸国での流行

ツツジやアオキ、アジサイのような低⽊の葉裏や茂みの中地⾯を覆うように繁るツタなども、葉裏に成⾍が潜んでいる国内におけるデング熱媒介蚊対策フローチャート

ヒトスジシマカ幼⾍の発⽣源*「デング熱国内感染事例発⽣時の対応・対策の⼿引き」から改変
媒介蚊対策の対象エリアの決定と調査・対策
チームの編成（所管部局・保健所）

幼⾍対策

成⾍対策

家屋、建物周辺における調査

捕⾍網を⽤いた採集

幼⾍採集と幼⾍発⽣容器の記録
幼⾍発⽣源の処分

種類の同定
種類と採集数の記録

重要な幼⾍発⽣源の特定

ヒトスジシマカ・アカイエカの発⽣場所

コガタアカイエカ・ハマダラカの発⽣場所

調査は半⽇程度で終了させる

幼⾍発⽣源および成⾍密度の地図上への記録と図化

結果報告（所管部局）

・防除計画の⽴案（所管部局、保健所、PCO協会 ほか）
・作業予定の公表および住⺠への協⼒要請と注意事項の発信・防除作業 → PCO協会への委託
・デング熱に関する啓発
・個⼈所有地での幼⾍対策の協⼒要請•平成25年度厚⽣労働科学研究費補助⾦（⾼崎班）の研究事業の⼀環として作成、厚⽣労働省により8/27に（案）、9/12に第1版がそれぞれ公表された防除対策の実施と発⽣状況の監視

84

83
成⾍
幼⾍

ヒトスジシマカは発⽣しない環境
ヒトスジシマカは⼩さな⽔域に発⽣する（10⽉下旬まで継続する）

21

2016/7/8

今夏も全国規模
全国規模で必ず展開-幼虫対策-

カントリー（缶取り）大作戦

デング熱・ジカ熱が日本国内で発生した場合！
・ヒトスジシマカのいるところに行かない・ヒトスジシマカに刺されないようにする
by Miho Kobayashi

え～！
全国規模？
かなんなー!!

・ヒトスジシマカの発生場所をなくす

流行しているところでは、専門家に成虫対策は任せましょう!!

虫よけ剤について蚊・調査&対策時の注意！

• DEETやイカリジンを含む虫よけ剤が最も効果がある！通常、露出した肌に塗布する。
• 日焼け止めを使うときは、日焼け止めを塗り十分乾いてから虫よけ剤を塗る。
• DEETを含まない、ユーカリオイルやレモン
オイルベースの虫よけ剤は、持続時間などに関するデ タの蓄積が少ないに関するデータの蓄積が少ない。

1. 耳に虫よけ剤を塗る時は、手に取ってくぼみ（窩）にも忘れず
塗ること！
2. ズボンや、ダボッとした感じがよい。ぴっちりしていると上から刺しにくる。
刺しにくる
3. トラップを調整したりするためにしゃがむ時に、ズボンの上から
太腿やお尻を刺されることがある。
4. トラップを調整したりするために、しゃがむときは灌木や草むらから離れたところで！

殺虫剤と虫よけ剤の違いを認識してもらう！
★ピレスロイド系殺虫剤は、蚊取り線香の主成分である！

22