ImmunoTox Letter

日本免疫毒性学会：The Japanese Society of Immunotoxicology Vol. 8 No. 1（通巻15号）
2003
aa 目

次

aa

第９回日本免疫毒性学会を開催して ………… １
第10回日本免疫毒性学会学術大会（予告２） … １

第10回日本免疫毒性学会学術大会（予告２）

第９回日本免疫毒性学会座長のまとめ（追加）… ３

第10回日本免疫毒性学会学術大会を下記の要領で開医薬品に関する免疫毒性試験ガイダンス（案）について ………………………………………… ３
国立医薬品食品衛生研究所 機能生化学部 澤田純一他

催いたしますのでご案内申し上げます。

医薬品の免疫毒性試験の国際調和ガイドライン
作成のためのICH免疫毒性データ調査 ………… ８
塩野義製薬株式会社新薬研究所 中村和市

日時：平成15年９月25日（木）〜26日（金）会

場：グリーンホール相模大野（相模原市文化会館）
神奈川県相模原市相模大野4-4-1（〒228-0803）
TEL: 042-749-2200, FAX: 042-749-2772

協Society of Toxicology 42nd Annual Meeting参加記 … ９
独立行政法人国立環境研究所 環境健康研究領域 伊藤智彦

賛：日本トキシコロジー学会

サブテーマ：「免疫毒性研究10年―免疫毒性研究の新たな展開―」

ドイツ研究室訪問記 …………………………… 10
川崎医療福祉大学 医療福祉環境デザイン学科 植木絢子

プログラム：
特別講演「遺伝要因と環境要因の相互作用：
アレルギー疾患をモデルに」ddddddddddddddddddddd

白川太郎

第９回日本免疫毒性学会を開催して京都大学大学院医学研究科教授

記念シンポジウム「免疫毒性研究の進展と課題」

本学会は1994年に免疫毒性研究会として発足し、さらに昨年からは新たに学会として再出発しておりますが、

基調講演

大沢基保

日本免疫毒性学会会長

シンポジウムⅠ「化学物質過敏症」

年々盛会を重ねて今回で第９回目となりました。今大会

Ⅱ「バイオ医薬品の毒性評価と副作用」

は静岡に皆様をお迎えし、静岡・グランシップを会場にワークショップ「医薬品に関する免疫毒性評価法の国

して平成14年９月19日（木）、20日（金）に開催されました。今大会は２日間を丸々使った欲張ったプログラムとなりましたが、特別演題として特別講演２題、教育講

際調和」、「抗原性試験の課題」
一般演題：口頭またはポスター発表、口頭発表は一演
題当たり発表時間10分、討論時間５分

演２題、シンポジウム４題、ワークショップ４題、ラン

演題講演要旨申込締切：７月31日（木）チョンセミナー２題の計14題、一般演題として口演発表

申込先：http://www.shoyaku.ac.jp/j-home/eisei/JSIT2003

14題、ポスター・口演発表９題の計23題となりました。

（不具合が生じた時は、eisei@ac.shoyaku.ac.jp

今大会では１）「「免疫の病的老化」―環境因子による粘膜免疫および胸腺免疫の病的老化―」、２）「保健機能食品と免疫―その有用性と安全性」３）「環境化学物質の免疫系からみた安全性評価」の３つを主要テーマとして、特別講演Ⅰでは名倉宏先生（東北大医・名誉教授・病理）をお招きして「侵襲抗原による粘膜免疫担当組織までご連絡下さい）
事前登録参加申込締切：８月31日（日）、
会員5,000円、非会員8,000円（当日各2,000円増）
懇親会：９月25日（木）18:10~19:50
事前会費5,000円（当日7,000円）
詳細は上記のホームページをご覧下さいの障害」について、特別講演Ⅱでは清野宏先生（東大・医科研・炎症免疫）をお招きして「粘膜免疫のダイナミズム」についてそれぞれ最先端の示唆に富んだお話を拝聴することができました。また教育講演Ⅰでは上野川修

第10回日本免疫毒性学会学術大会事務局
東京都町田市東玉川学園3-3165（〒194-8543）
昭和薬科大学衛生化学研究室内一先生（東大・院・農学生命科学）をお招きして「機能Tel & Fax: 042-721-1563

性食品と免疫」について、教育講演Ⅱでは和田攻先生

E-mail: hojo@ac.shoyaku.ac.jp

― 1 ―

大会会長

北條博史

ImmunoTox Letter（埼玉医大、東大医・名誉教授・衛生）をお招きしてり優秀な研究に会長賞を、発展を期待したい研究に奨励「微量環境化学物質の免疫系からみたリスク評価―とく賞を授与することにいたしましたが、会長賞には坂部貢にダイオキシンを中心として―」についてそれぞれ含蓄

先生（北里研・臨床環境医学センター）グループの「微のある示唆に富んだお話を拝聴することができました。

量環境化学物質と胸腺の微細構造―フタル酸エステル類

また、会長講演では「環境因子による胸腺免疫の病的老を中心として―」が、また奨励賞には二瓶萩尾先生（日化」と題して荒川泰昭（静岡県立大学・公衆衛生・生体

大・生物資源科学）グループの「ギンブナの細胞性免疫衛生）が担当させていただきました。また、シンポジウに及ぼす環境ホルモンの影響」が受賞されました。以上

ム「環境・化学物質・免疫毒性」では４先生方をお招きのように、お蔭様で、大変内容のあるレベルの高い会として、櫻井照明先生（東京薬大）にはヒ素について、野なり、会員の皆様におかれましても大変収穫の多い会に

原恵子先生（国立環境研）にはダイオキシンについて、なったのではないかと拝察している次第です。

別役智子先生（北大医・一内）には喫煙について、藤巻本学会の趣意は疾病予防、健康の保持・増進のための秀和先生（国立環境研）にはディーゼル排気についてそ

健康阻害要因の検索、分析、認知、作用機序解析、毒性

れぞれ先端の研究を解かりやすく解説していただきまし

評価、対策、生体機能の保持・増進、さらに疾病におけた。また、従来継続しておりますワークショップでは「医る診断、治療などの領域において、免疫修飾、免疫機能

薬品の免疫毒性評価の進め方、考え方」をテーマに中村

障害、免疫疾患と医療、免疫老化、胸腺免疫、腸管免疫、

和市先生（塩野義製薬）、澤田純一先生（国立衛研）、中免疫制御、免疫寛容、免疫における有効性と毒性ならび澤隆弘先生（日本イーライリリー）、小林孝好先生（アムに安全性、免疫毒性評価など、健康阻害要因を免疫毒性ジェン）にそれぞれ最新の情報や問題提起をまじえたご学的見地から科学的に究明し、健康の維持、増進に寄与

講演をしていただきました。さらに今回はランチョンセ

することを目的とする学術集会であると考えます。このミナー２題を持つ事ができました。ランチョンセミナーⅠ

ような「免疫毒性学」なる研究ならびに学問の必要性はではハンチンドン・ライフサイエンス㈱（英国）のお世話

以前より叫ばれ、そうした研究も個々においては成されでマーク・ウイングMark Wing博士（英国）をお招きしていましたが、このように学会としてお互いに啓発し合て Regulatory immunotoxicology and immunopharmacology

えるようになったことは大きな力であり、この分野の発

in non-clinical drug developmentについて、またラン展に益々貢献できるものと確信いたします。今日の健康

チョンセミナーⅡではシイベルヘグナー㈱（スイス）のブームの中で、そしてまた「前向き対策」が肝心であるお世話でアルブレヒト・ポスAlbrecht Poth博士（ドイツ）

予防医学の領域において、医薬品から食品、環境化学物

Routine immunotoxicity testing of

質に至るまで、免疫毒性学的なアセスメントの必要性はをお招きしてpharmaceuticals: Lessons from the first two yearsにつ

国の内外を問わず性急に高まっております。それだけに、いて講演していただきました。一般演題においても発展

本学会の果たす役割は大きく、その存在価値は今後益々の跡が窺えるレベルの高いものばかりでした。今大会よ高まってくるものと思われます。本学会の益々の発展を第９回日本免疫毒性学会

平成14年９月19日― 2 ―於グランシップ

Vol. 8 No. 1 (2003)
反応のT細胞活性および分化の抑制を経て、Th2細胞由祈念する次第です。
今大会は将来の学会発展を想定して、開催事業の運営

来サイトカイン産生を抑制し抗体産生応答が低下するこ形態においても幾つか新規のものを取り入れてみましとが見出されダイオキシンによる免疫毒性機序の一端がた。すなわち、オンライン演題登録システムを確立し、解明された。

演題登録をオンライン化いたしました。また、演題発表
では十分にデイスカッションできるようにポスターセッ

PP-9ションを設けました。また、講演抄録集も体裁を改め変食物アレルギー誘発試験の一環としてのin vitro分
解性試験

形A４版に大型化いたしました。さらにまた、今大会よ人工胃液を用いた蛋白の分解性試験法の国際validation

り優秀な研究に会長賞を、発展を期待したい研究に奨励試験に参画して食事由来の蛋白質の分解性を検討した研賞を授与することにいたしました。本学会の益々の活性究である。９種類の蛋白質について、人工胃液、人工膵化に繋がればと祈念しております。

液による分解性をSDS-PAGE後の蛋白染色にて評価し最後に、学会開催に当りまして、絶大なるご協力を賜た。その結果、陰性対照としての酵素類が易分解であっりました特別講演、教育講演、シンポジウム、ワーク

たのに対して、食物アレルゲンとして知られるものではショップ招待講演の先生方はじめ会の運営にご助力いた

難分解であることが判明した。また、過熱前処理にて分だきました役員や実行委員の方々、そしてご発表や討論

解の促進されるものもある一方、抵抗性を示すものもあっに活発にご参加いただきました会員の皆様方、また本学た。食物アレルギー試験の一環として人工消化液を用い会の趣意にご賛同いただき、ご支援を賜りました団体企る試験の有用性が示された。

業の皆様方に心から御礼を申し上げます。
第９回

日本免疫毒性学会大会会長

荒川泰昭

医薬品に関する免疫毒性試験
ガイダンス（案）について

座長のまとめ（追加）座長：吉田貴彦（旭川医科大学）
PP-７

澤田
大沢
今井
手島
中村
筒井
久田
牧

海洋深層水中のマクロファージ活性化に影響する有機物質の性状と分布

近年の健康ブームにのり海洋深層水（水深200m以深の海水）の利用が盛んであるが、その有効性や安全性に関しての情報が不足していた。本報告では駿河湾から採取された海洋深層水中の溶存有機物がマクロファージ活性化作用を有するLPSであること、その性状が糖鎖が短く

純一（国立衛研・機能生化学部）
基保（帝京大学・薬学部）
俊夫（国立衛研・病理部）
玲子（国立衛研・機能生化学部）
和市（塩野義製薬・新薬研究所）
尚久（三菱ウェルファーマ・安全性研究所）
茂（帝国臓器製薬・安全性研究部）
栄二（ヤンセンファーマ・研究開発本部）

０多糖を殆ど持たないコア糖鎖とLipid Aの基本構造に近いものであることを明らかとした。海洋深層水の利用に

前回の報告で述べたように、EUでは既に、全ての新関しての安全配慮と有効利用への糸口となる興味のある規医薬品に関して、免疫毒性試験項目を反復投与毒性試知見であった。

験に追加して行うガイダンスが制定されている。米国においても、免疫毒性に関するガイダンスが最終化された。

PP-8

T細胞活性化および分化に対するダイオキシンの日本においては、医薬安全総合研究「国際的動向を踏ま抑制効果

えた医薬品等の新たな有効性及び安全性の評価に関するダイオキシンを経口投与したC57BL/6N雌性マウスを研究」の分担研究の一つである「免疫毒性試験法の標準OVAにて免疫した後、血清中OVA特異的IgG1測定、脾細化に関する調査研究」班において、免疫毒性試験法ガイ胞CD3+T細胞比率、脾細胞培養上清のサイトカイン類測ダンス案を作成した。この間、ICHにおいて、免疫毒性

定などを行った。また、曝露群および対照群のT細胞、試験のトピック化に関する議論がなされたため、研究班

非T細胞を再構成した培養系を用いてダイオキシンの標において作成された中間案を参考資料として提示したこ的細胞を特定した。その結果、ダイオキシンが一次免疫とは、前回報告したとおりである。中間案では、反復投― 3 ―ImmunoTox Letter
与毒性試験の結果により、段階的な免疫毒性試験を追加

胞の発生により、初めてその有害性が明示される点であして行うこととし、異常が認められた場合には、第一段る。医薬品の承認申請に係る非臨床の免疫毒性試験に関階の免疫毒性試験（抗体産生試験）を行う。そこで、異しては、その必要性が指摘されていたものの、免疫系を常がある場合には、さらに、詳細な第二段階の免疫毒性構成する細胞群及びそれらの相互作用が複雑であるこ試験を行い、その免疫異常の原因等を明らかにすることと、免疫機能の評価項目が非常に多岐にわたること、マが必要とされる。その後、当研究班では寄せられたコメ

ウス以外の試験動物、特に、通常の毒性試験で用いられント等を検討し、研究班としての最終案を作成した。最るラットにおける免疫機能試験法の評価が充分に行われ終案では、中間案に「前文」の追加を行い、一部の字句ていなかったこと等の事情もあり、その設定等が遅れて等の修正を行った。

いた。しかし、ここ10年の間に、国際的な共同研究も含今後、本ガイダンス（案）は、引き続き、ICHの討議

めて免疫毒性試験法の評価も進み、ラットを用いる免疫の場で日本案として取り扱われることとなろう。日本に

毒性試験法に関しても、充分に実用に耐える段階に至っ

おける免疫毒性ガイダンスの最終化は、ICHでの検討のている。

進行状況を考慮して決定されるものと予想される。

本ガイダンスでは、免疫毒性を有する多くの化学物質

以下に、ガイダンス（案）の全文を掲載した。

が反復投与毒性試験の免疫毒性関連検査項目において異常を示すことを利用し、原則として、反復投与毒性試験の結果に基づき免疫毒性が疑われる場合に、さらに免疫

免疫毒性試験ガイダンス（案）本ガイダンスは、医薬品の安全性の適正な評価に資す

毒性試験を行うこととした。

るために、医薬品の承認申請等のために行われる免疫毒性試験の標準的な実施方法を示したものである。しかし、［本ガイダンスの適用範囲及び対象薬物］

全ての医薬品について、一律の免疫毒性試験を行うこと

免疫毒性には、免疫機能抑制、アレルギー、自己免疫、は合理的ではない場合もあり、対象とされる医薬品の特及びその他の免疫機能異常亢進が含まれるが、本ガイダ

性に応じて、最適な試験法を用いることが重要である。

ンスでは、被験薬物に特異的な免疫反応（薬物アレルギー及び薬物特異的自己免疫）は対象としない（注１）。

［背表１のいずれかに該当する場合には、本ガイダンスに景］

免疫系は、細菌やウイルス等の外来の病原体や体内に基づき、免疫毒性試験を実施すること。なお、生物製剤発生した癌細胞の除去を行う等、生体の恒常性維持に重及びバイオテクノロジー応用医薬品に関しては、本ガイ要な役割を果たしている。免疫機能の低下が、日和見感

ダンスの対象としない。

染や腫瘍の発症を招きやすいことは、先天性免疫不全症
や後天性免疫不全症候群（AIDS）の例で、よく知られ［本ガイダンスの目的］ている。免疫系への有害作用（免疫毒性）が他の毒性と薬物の免疫毒性の検出及びその性質の検討を効率的に異なる点は、それ自体が直接投薬患者の生存そのものを行うためには、予想される免疫毒性に応じた最適な試験

脅かすというよりも、外来性病原体の侵襲や内在性癌細法の選択及びプロトコールの設定が必要とされる。本ガ表１

本ガイダンスの免疫毒性試験の対象とされる薬物

１．次の（１）から（３）までのいずれかにより、被験薬物の免疫毒性が疑われる場合（１）その薬物の反復投与毒性試験又はその他の毒性試験の結果（２）免疫毒性を示す既知の薬物との化学構造の類似性（３）その他の知見
２．被験薬物の臨床適応が、次の（１）から（２）に該当する場合（注１）（１）免疫不全症（２）免疫抑制作用を有する薬剤（注２）との併用（注１）合理的な理由がある場合には、試験対象から除くことができる。
（注２）免疫抑制剤、抗癌剤、抗アレルギー剤、ステロイド剤等の中で免疫抑制作用を有する薬剤を指す。
― 4 ―Vol. 8 No. 1 (2003)
イダンスの目的は、非臨床免疫毒性試験を行う際に参考れ、且つ、その毒性の性質から第１段階試験を行う必要とすべき手順及び検査項目の選択基準を示すことである。

性が低いと判断される場合（注３）には、第２段階試験

本ガイダンスにおいては、免疫毒性を検出する試験とを直接行ってもよい。
必要に応じ、免疫毒性の可逆性を検討するため、異常して、従来より用いられている反復投与毒性試験に加えて、第１段階免疫毒性試験（第１段階試験）及び第２段が認められた項目について、回復性試験を行う。

階免疫毒性試験（第２段階試験）を設けた。反復投与毒性試験に含まれる免疫毒性関連の検査項目及び第１段階［試験実施の時期］

試験の主な目的は、免疫系に対する直接又は間接の毒性

第１段階試験は、通常反復投与毒性試験の後に行われを示す薬物のスクリーニングである。第１段階試験におるが、可能であれば、反復投与毒性試験と同時に行うこいては、同時に体液性免疫への影響を知ることが可能ととができる。第１段階試験は、原則として、臨床試験開される。また、第２段階試験の目的は示された免疫毒性

始以前に行う。第２段階試験は、その必要に応じて、適を質的及び量的に明らかにすることである。

切な時期に行う。

なお、免疫毒性試験の実施方法に関しては、技術的な進歩も速く、本ガイダンスに記載された試験法よりも優［試験プロトコール］

れた方法が開発されることが予想される。試験の実施に

第１段階試験プロトコールは、以下の条件に従う。第当たっては、本ガイダンスを参照すると同時に、常に最２段階試験が必要とされる場合には、その目的に最も適新の技術を取り込み、検査法の改良に努めることが望ましたプロトコールを設定する。

れる。

１．動物種、性及び週齢：反復投与毒性試験の免疫毒性
関連検査または追加の検査により異常が認められた動物と同一の種、系統、性及び週齢を用いることが［検査項目の選択］
本ガイダンスで示された検査項目は、最小限必要と考望ましい（注４）。反復投与毒性試験において雌雄えられるものであり、被験薬物の性質に応じて、適宜、差が認められなかった場合、雌雄いずれか一方の動検査項目を追加することも考慮すべきである。

物を用いることができる（注５）。

反復投与毒性試験における免疫毒性関連検査項目は、

２．動物数：１群８匹以上とし、統計学上十分な数の動器官重量、血液検査（血液学的検査及び血液化学的検査）物数を設定する。各群への割り付けには、適切な無及び病理組織学的検査の中の免疫系に関連する項目であ

作為抽出法を用いる。

る。また、反復投与毒性試験において、末梢血のリンパ３．投与経路：原則として、臨床適用経路とする。

球サブセット検査又は脾臓の免疫組織化学的検査の項目

４．用量段階：原則として、３段階以上の投与群を設け、を追加して行うことが勧められる（表２-Ⅰ）。反復投与

別に対照群を置く。反復投与毒性試験の免疫毒性関

毒性試験の免疫毒性関連検査または追加の検査により異連検査又は追加の検査により異常が認められた用量常が認められた場合（注２）には、免疫毒性試験を実施

を参考に、用量段階を設定する（注６）。
５．対照群：溶媒のみを投与する陰性対照群を置く。必する。

要に応じて、無投与対照群（注７）又は陽性対照群

免疫毒性試験は、２段階に分けて行われる。第１段階（注８）を加えることを考慮する。

試験では、抗体産生の検査及び脾臓及び胸腺の器官重量測定等の検査（表２-Ⅱ）を実施する。NK細胞活性の検６．投与期間：原則として、反復投与毒性試験に準ずる投与期間を採用する。投与は原則として週７日とす

査を第１段階試験に、追加してもよい。

る。

第１段階試験で異常が認められない場合には、第２段
階試験を行う必要はない。第１段階試験により異常が認

７．観察等：一般状態の観察及び体重測定を行う。

められる場合には、反復投与毒性試験の結果も考慮にいれ、適切な検査項目（表２-Ⅲ）を含む第２段階試験を実［免疫毒性関連検査項目］

施する。第２段階試験においては、示された免疫毒性の

反復投与毒性試験及び免疫毒性試験において対象とさ性質を明らかにすることが必要とされるが、特に影響をれる免疫毒性関連検査項目を表２にまとめて示した。こ受ける細胞または免疫機能の同定と影響の強さを明らか

れらの検査項目より、被験薬物の性質及び試験の目的ににすることが重要である。

応じて、必要な項目を選択し、適切な試験プロトコール1）

反復投与毒性試験において明確な免疫毒性が認めらを設定すること。

― 5 ―ImmunoTox Letter
表２

免疫毒性関連検査項目

Ⅰ．反復投与毒性試験における検査項目
１．一般状態、体重２．血液学的検査：免疫毒性関連検査としては、血球数、白血球型別百分率が必要とされる。
３．血液化学的検査：免疫毒性関連検査としては、アルブミン/グロブリン（A/G）比が必要とされる。
４．器官重量：免疫毒性関連検査としては、脾臓、胸腺、副腎の重量測定が必要とされる。
５．病理組織学的検査：免疫毒性関連検査としては、脾臓、胸腺、リンパ節、骨髄、腸管（パイエル板を含む）、肝臓、腎臓、副腎、皮膚の検査が必要とされる。
６．末梢血のリンパ球サブセット検査又は脾臓の免疫組織化学的検査を追加して行うことが望ましい。
Ⅱ．第１段階の免疫毒性試験における検査項目
１．抗体産生：投与期間中の適切な時期に、ヒツジ赤血球等のTリンパ球依存性抗原により免疫する。ヒツジ赤血球を免疫原として用いる場合には、PFC（plaque-forming cell）アッセイでは、４日前に、血清抗体価測定では、６から７日前に免疫を行う。ヒツジ赤血球による免疫は、静脈内投与により行う。PFCアッセイの場合には、被験薬物最終投与の翌日に、動物毎に脾臓細胞を調製し、プラークアッセイを行う。血清抗体価測定の場合には、被験薬物最終投与の翌日に血液を動物毎に採取し、血清を調製し、測定時まで（必要に応じて凍結）保存する。
抗体価測定は、酵素免疫測定法（ELISA）により行うことが望ましい。
２．抗体産生検査に用いた試験動物について、一般状態、体重、脾臓重量、胸腺重量、及びその他特に必要とされる項目の検査を行う。
３．必要に応じて、NK細胞活性の検査を行ってもよい。NK細胞活性の検査を行うためには、抗体産生の検査とは別に、投与群及び対照群を設定する必要がある。被験薬物最終投与の翌日に、脾臓細胞を調製し、適切な標的細胞を用いてアッセイを行う。
Ⅲ．第２段階の免疫毒性試験における検査項目
１．骨髄細胞の型別百分率：大腿骨を用いて行う。
２．リンパ球サブセット検査：末梢血または脾臓のBリンパ球、Tリンパ球、Tリンパ球サブセット、NK細胞を、適切な表面マーカー等に対する特異的抗体を用いて計数し、その構成比を求める。フローサイトメトリーにより検査を行ってもよい。
３．血液化学的検査：血清タンパク質の電気泳動を行う。
４．免疫グロブリンクラス検査：投与終了後の翌日に血液を採取し、血清を調製し、（必要に応じて凍結）保存する。
ELISA等により、血清の免疫グロブリンクラス（IgM、IgG、IgA、IgE）のレベルの測定を行う。
５．免疫組織化学的検査：リンパ系組織、腎臓（免疫複合体沈着）、皮膚等の免疫組織化学染色を行う。
６．免疫機能検査：（１）抗体産生：上述。
（２）NK細胞活性：上述。
（３）その他の免疫機能検査：マイトゲン等によるリンパ球増殖反応、細胞障害性T細胞活性、血清補体価、サイ
トカイン産生、マクロファージ又は多型核白血球の貪食活性、遅延型アレルギー反応（注１）、宿主抵抗性、
膝窩リンパ節反応（注１、注２）、即時型アレルギー反応（注１）、自己抗体、尿タンパク、及びその他の検査を適宜追加する。
（注１）これらのアレルギー反応を指標に用いて、その抑制または亢進を検討する。
（注２）自己免疫の誘発活性の指標として用いる場合もある。

― 6 ―Vol. 8 No. 1 (2003)

免疫毒性試験のフローチャート（説明用に概略を記した参考資料であり、正確には、ガイダンス本文を参照すること）

新規候補薬物
生物製剤、バイオテクノロジー応用医薬品を除く

反復投与毒性試験（表２-Ⅰ）
器官重量、血液検査、病理組織学的検査
末梢血のリンパ球サブセット検査又は脾臓の免疫組織化学的検査の追加が望ましい

異常所見

（注１）

第１段階の免疫毒性試験（表２-Ⅱ）
抗体産生
器官重量等、その他必要とされるもの（オプション：NK細胞活性）

（注２）

異常所見

第２段階の免疫毒性試験（表２-Ⅲの適切な試験系）（注１）表１第１項（１）を除き、表１に該当する薬物（注２）反復投与毒性試験の免疫毒性関連検査または追加の検査で明確な異常が認められ、且つ抗体産生試験を行う必要性が低いと判断される場合には、第２段階試験を直接行ってもよい。

の他の異常が認められない場合等を指す。

（注）
注１：遅延型の薬物アレルギーに関しては、皮膚感作性

注４：通常、ラットまたはマウスを用いる。

試験のガイドラインが既に設定されているが、即注５：同一ケージで複数の雄性動物を飼育する場合には、時型薬物アレルギーのよい予知試験法は、現在の闘争等の飼育上の問題が生じないように、ケージ

ところ未確立である。

の大きさ等を考慮するべきである。

注２：表１の第１項（１）において免疫毒性が疑われる

注６：高用量群に用いる用量は、対照群と比較して体重場合を指す。免疫毒性関連検査における異常とは、抑制が10%以上でない用量とする。高用量群で十当該検査において投与群と陰性対象群の間に統計分な異常が認められ、低用量群で異常が認められ学的に有意の相違が認められることを指すが、試ないように用量を設定し、用量反応関係が得られ験動物における基準値等の範囲及び変動を考慮することが望ましい。高用量群における異常の変化る。

が小さく、明らかに３段階の用量を用いる必要が

注３：例えば、末梢血の好中球の減少のみ認められ、そ― 7 ―ない場合には、２段階の用量の投与群を用いてもImmunoTox Letter
た。調査票に関する免疫毒性専門家間の議論がほぼ終了よい。
注７：通常は必要とされないが、用いる溶媒が免疫毒性するなか、日本製薬工業協会は厚生労働省と共同で2002試験に影響を与える場合には、無投与対照群を設

年９月12日のICH運営委員会会議において「医薬品の免ける必要がある。

疫毒性試験の国際調和ガイドライン作成のためのICH免注８：陽性対照群を設ける目的は、検査手技の妥当性を

疫毒性データ調査」の提案を行った。会議では秘密保持評価することにある。別途、少数の動物を用いて（化合物の特定）に対する懸念が示されたが、まず欧州

シクロホスファミド等の陽性対照薬物の投与の影

医薬品庁、米国食品医薬品庁、国立衛研が各地域の所属

響をみる試験を行ってあれば省略してもよい。

会社から免疫毒性データを受け取り会社情報を切り離したのち、さらに国立衛研で再度秘密保持の最終点検を受

参考文献等：

け解析にかかることで合意が得られた。そして、2003年

１）種々の試験法に関しては、Methods in Immunotoxicology

２月５日のICH運営委員会会議において調査の実施が正Vols. 1 and 2 (ed. by Burleson, G.R., et al.) (1995);

式に承認され、2003年３月28日には調査票がICH事務局

Environmental Health Criteria 180. Principles andを通じてICH各極の団体に送付された。

Methods for Assessing Direct Immunotoxicity

医薬品の非臨床安全性評価においては、反復投与毒性

Associated with Exposure to Chemicals. pp.164-225

試験で体重、相対臓器重量（胸腺、脾臓、リンパ節、副(1996); ImmunoTox Letter（日本免疫毒性学会発行）

腎）、血液（白血球数、リンパ球数）、血清イムノグロブに掲載の免疫毒性試験プロトコール等を参照するこ

リン、病理組織（骨髄、胸腺、脾臓、リンパ節、パイエと。

ル板、皮膚、肝臓、腎臓、副腎）や一般状態が調べられている。最近では、EUの免疫毒性ガイダンスに沿い免疫組織化学やフローサイトメトリーによって、胸腺、脾
臓、リンパ節あるいは末梢血中のリンパ球サブセットの分布が調べられる場合も多いと思われる。さらに特異抗体産生能、NK細胞活性、遅延型過敏症反応、宿主抵抗

医薬品の免疫毒性試験の国際調和ガイドライン作成のためのICH免疫毒性データ調査

性などの免疫機能が検討されることもあるであろう。本
調査においては、これらの数値データをかなり詳細に求め、まず反復投与毒性試験における所見とフローサイト

中村

和市（塩野義製薬株式会社）

メトリーや各種免疫機能検査の結果との相関性を調べ、医薬品の免疫毒性評価におけるフローサイトメトリーや2002年２月７日のICH非公式免疫毒性専門家会議にお各種免疫機能検査の位置付けを行う。さらに、化合物にいて、将来最終的にはICH国際調和ガイドラインを作成

よっては、臨床試験の段階に進んだり、また医薬品とししていくことが合意されたが、現行のガイダンス（あるて既に上市されているものもあると思われる。このよういは案）の妥当性を評価するために、さらにデータを集な化合物あるいは医薬品については、人における免疫毒

めて解析することになった。本合意事項はICH運営委員

性についても問い、非臨床免疫毒性試験の予知性にまで会においても承認された。

踏み込もうと考えている。

これを受け、米国のある民間団体が医薬品の免疫毒性

2003年５月30日には調査票の回収を締め切り、2003年

データに関する調査を企画するなか、日本製薬工業協会

７月15日から18日までの日程でICH非公式免疫毒性専門においても日本国内で調査を行う準備を始めた。しかし、

家会議が開催され、回収された調査票の解析を開始する

その後日本製薬工業協会としては異なった質問による予定となっている。また、2003年11月12日から15日にか種々の調査を統合することの難しさなどを考慮しICHのけて大阪で開催されるICH６においては免疫毒性試験に枠内で統一した調査を提案する方針を固めた。そこで、関するワークショップが企画されており、本調査の進捗

久田あるいは解析結果が報告される予定である。

茂 氏（帝国臓器製薬）を中心にチームを編成、調査票案を作成し、これを厚生労働省の「免疫毒性試験法

大規模な国際的調査が実施されることになったが、まの標準化に関する調査研究」班会議（分担研究責任者：

ずは数多くのデータが集まることを期待したい。そして、

澤田純一

機能生化学部長）においてご議論

本調査においてICH各極の免疫毒性専門家の間で科学的いただいた。また、欧・米の専門家にも送り意見を求めな議論がしっかりと成され、予知性が高く、かつ無駄の

国立衛研

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ない評価手順の盛り込まれたICH国際調和免疫毒性試験

月だったことから相当寒いはずであると予想していたのガイドラインが作成されることを願ってやまない。

ですが、実際に到着してみると非常に暖かくて驚きました。日本の冬よりは格段に暖かく、５、６月ぐらいの陽気でした。半袖半ズボンで歩いている方も見受けられました。会場のコンベンショナルセンターのあるダウンタ
ウンは非常に小さく、歩いて全てを行き渡れる程度の大きさでした。またソルトレイクシティはモルモン教徒のSociety of Toxicology 42nd
Annual Meeting参加記

地でもあり、非常に穏やかな都市でした。人口の約60%がモルモン教徒であるといわれ、ダウンタウンの北にモ

伊藤智彦（独立行政法人国立環境研究所）

ルモン教の総本山、テンプルスクエアがあります。建物は荘厳であり、敷地内には博物館の様なものや、時間の平成13年３月９日から13日までユタ州ソルトレイクシ
ティで開催されたSociety of Toxicology（SOT）、42nd

都合上聴くことは出来ませんでしたがコンサート会場もあり、とても興味深いものでした。

Annual Meetingに参加してきました。今回のSOT参加は学会の方ですが、９日は演題発表がなかったのでホテ

私にとって国際学会はもとより海外に出ること自体も初

ルにチェックイン後、夕方からのwelcoming receptionにめてとあって、アメリカに行く前から非常に緊張と不安

参加し、本格的な参加は10日からとなりました。今年ので一杯でした。ましてや３月はイラクとの戦争が始まり

SOTでは現在の私のテーマであるダイオキシンの生体影かけていた時期でもあって、アメリカ入国はかなり大変

響関連の演題は比較的大会後半に集まっていて、私のポであるとの噂を耳にし、一層不安になりました。私は英スター演題がエントリーされたポスターセッション

会話が苦手なので以前から取り組もうとは思ってはいた「TCDD&POPS」が最終日にあり43演題。同じく「TCDD

ものの、なかなか忙しいことを理由に避けてきていまし&POPS」のプラットフォームが三日目にあり９演題。そた。実際に国際学会参加が決定し、練習せざるを得ない

れ以外にもいくつかのセッションでダイオキシン関連の状況にあって始めたものの、やはりというか実験の方が演題がありましたが、全体が約2000演題ということから多忙を極めたためになかなか思うようにはいきませんで考えると少ない印象がありました。また、時期が時期でした。英会話は継続的な日頃の練習が必要で、本腰を入もあるせいか、演題を取り消された研究者も結構いたよ

れて取り組まなくてはいけないという、当たり前のことうでした。大会前半は、自分が以前にテーマとしていたなのですが改めて身をもって実感しました。

酸化ストレス関連や循環器系のプラットフォームがあり

今回、SOTの会場となったユタ州ソルトレイクシティ

ましたので、興味あるということもありましたが、まずは2002年の冬季オリンピック開催で知られた都市で、そは慣れるということで参加しました。話している内容はのことからもソルトレイクは寒いであろう、ましてや３

スライドを見ればおおよそのことがわかるのですが、や― 9 ―ImmunoTox Letter
はりアメリカ人の英語は速くて聞き取るのは困難でした。

ドイツの研究室訪問記

それに比べて中国人などのアジア系の人が話す英語は単
語ごとにはっきりと発音してくれるので、私にとって非植木

常にわかり易い英語でした。ポスター会場では質問をし（川崎医療福祉大学

絢子

医療福祉環境デザイン学科）

ましたが、文や単語が直ぐに出てこなく、紙に書いて相手に意思は伝えられたものの勉強不足をとにかく痛感し

１．まえがきました。何とか自分の発表の日までに慣れようとしましドイツの研究室訪問記を書くようにと御下命を頂いた

たが、慣れるというよりも疲労感の方が先行してきてしのは、2002年秋のことで、丁度古巣のミュンヘンに滞在

まった感じでした。

していた時でした。かねてから尊敬を抱いていた環境医

さてSOTも最終日となり、いよいよ私のポスター発表

学の父とも言えるProf. Max von Pettenkoferの足跡を訪になりましたが、6人の研究者の方々が聞きにきてくれ

ねて、果ては弟子の１人である森鴎外の住んでいた辺りました。ダイオキシンの免疫毒性の分野で有名なOregon

までうろついていたところでした。ミュンヘン大学には、State UniversityのDr. KerkvlietやVirginia Commonwealth「医学史」と言う講座もあり（現教授はProf. Wolfgang G.

UniversityのDr. Nagarkatti、前日に食事に誘っていただ

Locher）、様々な研究者の生きた背景や研究の詳細が今いたNorthwestern Universityの奈良橋先生、また若手のもきちんと整理保存され、現代の研究を行う上での貴重研究者も来てくれました。結果としては内容についてのなアイデアを提供し続けています。話が脱線しています

比較的簡単な話は出来ましたが、詳細な話が出来ず色々が、免疫学の役割の大きさに関することなので敢て脱線な意見や情報を聞くことが出来なかった点については反をお許しください。
19世紀のヨーロッパはまだコレラの流行に悩まされて省すべき今後の課題になりました。
学会終了後には、自治医科大学の香山先生や食品医薬

いましたが、Prof. Pettenkoferは早くから、患者の排泄品研究所の小西先生、国立環境研究所から参加した先生

物中に原因物質があると考えていました。しかし、流行方と食事に行きました。アメリカの食事は私にとってあ

時に同じ飲料水を使用しても発病しない人が沢山いるこ

まり合わないものでしたが、ステーキは流石に美味しかとが、彼を汚染された飲料水中の単一な原因説に向かうったです。しかし、味付けされたライスはどうしても慣ことを躊躇させ、何か別の要素の重要性を強調させるこれずに日本のお米が恋しくなりました。あと日本人にととになりました。ベルリンのProf. Robert Kochは原因物っては量が多すぎで、ホットコーヒーをSサイズで注文

質を一つに絞り込んでコレラ菌を発見し、相次いで他のしたら500ccも出てきて唖然としてしまいました。

菌の発見に成功しました。Prof. Pettenkoferは篤実な人

学会を終えて、初めての国際学会参加ということで苦物として知られ、どうみても嫉妬からではなく本気でコい思いを多くしましたが、普段論文を読むことでしか知

レラ菌説に反対し、聴衆の前でコレラ菌の培養濃縮液をらない研究者の方々に実際に会って話をすることが出来飲んでみせ、発病しないことを実証したりしました。したことは自分にとってとても貴重な経験となりました。

かしコレラ菌説が世の中に定着し、老後の鬱状態もあっ

このような経験は研究者としてだけでなく、それ以外のてProf. Pettenkoferは自殺に至りました。その翌年Prof.

人生においても大きな経験となることでしょう。今後、Kochはノーベル賞を受賞しました。ある友人の教授に、行く機会がありましたら、なかなか思うようには行かな

何故Pettenkoferは発病しなかったのだろうかと尋ねてみいでしょうが、もっと余裕を持って参加し楽しみたいとたところ、答えは「免疫があったから」でした。当時、思います。

衛生事情が悪くて多くの人がコレラ菌に感染していた筈

最後にこの場をかりて、この度のSOT参加の機会の場だというのです。医師と薬剤師の両方の資格をもち、有を与えていただいた国立環境研究所の遠山先生および野

名なLiebigの弟子として、化学の分野でも沢山の業績を原先生に感謝いたします。

残した彼は、同じ原因物質が病気を起こしたり起こさな
かったりする再現性の無さに耐えられなかったのだと思います。多分、Prof. Pettenkoferの観察力があまりにも鋭く、遠くを見渡せたが故の悲劇だったのでしょう。素
晴らしく多くの知識を詰め込んだ免疫学という学問が、まだ200年の歴史しか持っていないことに深い感銘を覚えたのです。
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２．ミュンヘン工科大学のZentrum Allergie undUmwelt（アレルギーおよび環境研究所）訪問記

内科など）、アレルギーを持つ患者さんの病態の把握、

ミュンヘンにはミュンヘン大学とミュンヘン工科大学

学的手法による免疫毒性の解析（ミクロでの曝露実験等とがあります。このアレルギーおよび環境研究所（以下を含む）など、大きく分けて４つのグループから構成さ研究所と略）は、1999年12月に開所しており、バイエル

れています。それぞれのグループには責任者がいて、よン州によって建てられたものです。案内用パンフレット

り具体的な５−10のテーマについて研究が行われていまにも記載されている様に、近年何らかのアレルギーに悩す。専属のスタッフ（バイエルン州に所属）はそれほどむ人の数が激増し、天然および人工的な環境因子の関与

多人数ではありませんが、グラントによる研究者や臨床が注目されています。これらの因果関係を科学的に解明の各科からやってくるスタッフ、ハンブルグ大学などかし、治療に、更には予防に役立てることを差し迫った目ら必要に応じてやってくるスタッフなどから成っていま標として計画されたものです。所長のProf. Heidrum

す。ドイツは大学間の連携が容易に行われる所ですが、Behrendtは女性で、ハンブルグ大学やデュッセルドルフ

まだ完成したばかりの、明るい雰囲気で、情熱に溢れた大学で環境とアレルギーについての研究で知られていた集団に加わってくる人が今後増えるものと思われます。

方です。（写真１）日本が大変お好きで、以前に多田富清潔で明るい研究所を案内して頂きましたが、機器に関雄先生と御話をした折に、日本文化は「間」の文化だとしては日本の研究室とほぼ同じような感じです。建物は伺ったなどと話しておられました。尊敬の念をこめてこ

地下１階、地上２階建て、総面積574平方メートルとドのように記すと年配の方と思われそうですが、まだ50代

イツの建物としてはこじんまりしており、各階は研究テー前半と思われる、大変きさくで、底抜けに明るい方です。

マごとに分割して占有され、新しいデータや学会発表の彼女の名はもう少し正確に言うと、Prof. Heidrum Ring-

ポスターなどがそれぞれの壁を見事に彩っていました。

病因の究明、治療法の検討と確立などに当たる他、動物を用いたアレルギーの実験、細胞免疫の研究、分子生物

Behrendtで、ご主人のProf. Johannes Ringは同じ大学のドイツの大学でいつも感じるのは、建物が大きいこと、教授でAllergologeアレルギー学者であり、このセンター

スタッフの数が多いこと、そして殆どが官営であるのにの立ち上げに重要な役割を果たした方です。彼女は結婚が遅かったので、公式には前の名前を使うことが多いとのことです。私は彼女をFrau Ringと呼んでいます。
この研究所ではいくつかの臨床の科と連携して（特に深い関係があるのは皮膚アレルギー科、耳鼻科、呼吸器

写真１

写真２
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ImmunoTox Letter
隅々までが清潔に光っておりメンテナンスにも相当の資金が投入されていると思われることです。また、御互いの仕事について実に素直に評価し合うことも確かで、天井が空に向かって開いているような開放感と充実感が味
わえるように思います。これは多分、人間の力のはるかに及ばない宇宙を支配する力、絶対なる正義、神といったものを意識する長い歴史と文化が根底にあるためかと思います。
機器の中で一つ印象に残ったのは、炎症反応によるヒスタミンの放出量を、生体にセンサーを挿入してin vivoで測定することの出来る機械で、精密機器メーカーとの協力による試作品とのことでした。初めてみるこの機械は、かなりのすぐれものと思いました。（写真２）

所長のProf. Behrendtは環境中物質による人の免疫系への作用について強い関心を持っています。今日急速に、様々なアレルギーを持つ人が増えていることもあり、環境因子による免疫毒性が注目されていることもあります
が、彼女自身silicaの免疫に与える影響を白血球（顆粒球）
を使ってデュッセルドルフ大学で研究していたという経緯にもよると思います。私もsilicaについて興味をもって来ましたので、気の合う間柄です。
明るく広々とした空間、清潔でセンスのある建物内部の構築、細部までよく計画されて作られた部署ごとの設
備を大変羨ましく思い、５年先、10年先の大きな成果を期待しているところです。

編集後記
今年の１月に発行されたNatureに掲載された迷走神経を介した経路によってマクロファージが関与する炎症反応を抑制する機構についての論文を読むと、改めて神経―免疫軸での制御機構が果たしている役割にははかりしれない重要性が隠れていると感じられました。経済発展
した人間社会の中で、５感を通して生体に入る情報にはものすごい量があり、それを巧みに処理をして恒常性を保ちつつ生存しているわけですから、SARSのような感染因子情報が突然加わると、免疫系への負担が大きくな
り恒常性の維持機構に更なる負荷が加わっているのでは編集・発行：日本免疫毒性学会
発行日：平成15年６月

ないでしょうか。今回、視覚をほど良く刺激する試みとして、カラー写真を多く掲載させていただきました。
（HF記）― 12 ―

編集発行責任者：大沢 基保
編集委員会：香山不二雄、中村 和市、
牧
栄二、藤巻 秀和
原稿送付先：fujimaki@nies.go.jp