ImmunoTox Letter

日本免疫毒性学会：The Japanese Society of Immunotoxicology Vol. 14 No. 2（通巻28号）2009
aa

目

次

aa

第17回日本免疫毒性学会学術大会（JSIT2010）(予告１)

第16回日本免疫毒性学会学術大会報告 ……… 1
旭川医科大学 吉田 貴彦

日本免疫毒性学会の第17回学術大会を下記の要領で開催いたしますので、ご案内申し上げます。

第17回日本免疫毒性学会学術大会（予告１）… 1
独立行政法人国立環境研究所 藤巻 秀和

期日：平成22年９月９日（木）〜 10日（金）会

場：独立行政法人国立環境研究所

第16回大会 年会賞
培養細胞を用いた新しいアレルギー検査法の開発…………………………………… 2
国立医薬品食品衛生研究所 中村 亮介ほか

大山記念ホール
茨城県つくば市小野川16-2（TEL：029-850-3665）（交通：つくばエクスプレス つくば駅下車、
バス10分

第16回大会 奨励賞
石綿曝露後NK細胞上NKp46発現抑制機構の解析、
NKp46の抗腫瘍免疫機能予測分子指標としての可能性……………………………………………… 5
川崎医科大学 西村 泰光ほか

車

常磐線

ひたち野うしく駅下

バス13分）

大会テーマ：「感受性を考慮した免疫毒性研究の新展開―
環境・遺伝・時間要因」
内

容：招待講演：「Mast cells: to the expression of
innate and acquired immunity」

日本免疫毒性学会へ期待するもの……………… 7
岩手医科大学名誉教授 角田 文男

A Dean Befus, Ph.D. (Chair in Asthma
Research, Division of Pulmonary Medicine,
Department of Medicine, Faculty of Medicine

WHO/IPCS 免疫毒性ガイダンス（Harmonized
Guidance of Immunotoxicity Risk Assessment）
作成に向けた動きについて……………………… 8
国立医薬品食品衛生研究所 手島 玲子& Dentistry, University of Alberta, CANADA)
特別講演：「自然免疫システムにおける病原体認識の分子基盤とその制御機構」
三宅

SOT免疫毒性部会メンバーの日本免疫毒性学会学術大会参加記……………… 8

健介

東京大学医科学研究所教授

教育講演：「アレルゲン性試験法の現状と課題（仮題）」
澤田

English pages …………………………………… 10

純一

日本免疫毒性学会理事長

シ ンポジウム：「免疫毒性を修飾する感受性要因」MaryJane Selgrade, Ph.D.（Chief,
Cardiopulmonary and Immunotoxicology

第16回日本免疫毒性学会、第55回日本産業衛生学会
アレルギー・免疫毒性研究会開催の報告
吉田

Branch Environmental Public Health
Division, USEPA）ほか
ワークショップ、学生セッション、一般演

貴彦（旭川医科大学健康科学講座）

題を予定
発表形式：口頭発表とポスター発表

2009年８月27・28日の２日間にわたって、旭川市の旭川市民文化会館小ホールおよびホワイエにおいて、第16回日本免疫毒性学会学術大会を、日本産業衛生学会アレ
ルギー免疫毒性研究会第55回研究会と共催にて開催いた

演題申し込み締切日：７月５日（月）年 会 長：藤巻秀和（独立行政法人国立環境研究所

環境リスク研究センター）
事 務 局：野原恵子（独立行政法人国立環境研究所

環境健康研究領域）しました。
本学会が免疫毒性研究に特化した小規模な学術集会であることから、講演会場も一つとし全参加者が全ての発表に触れることで学会員の相互の情報共有を図るアット─ 1 ─

第17回日本免疫毒性学会学術大会・年会事務局
TEL: 029-850-2500

FAX: 029-850-2574

e-mail: jsit17@nies.go.jp

ImmunoTox Letter
ホームな雰囲気を保つとの方針にのっとり、かつ10分間

生によるピアノの弾語りの余興があるなど、学会員の親の口頭発表に加えて質疑応答を５分間とるなどに十分な睦が図られた。

時間を取ることで、互いの学問的な向上につなげること

大会２日目の特別講演２では、全国的な人気スポットを目指しました。さらに、本学会が目指す国際化に合わとなった旭川市旭山動物園の小菅正夫名誉園長に「旭山せて、海外からの参加者にも理解していただきやすくす

動物園の役割」として講演を受け、世界の歴史の中で果ることを意識して講演集の英文スペースの拡大と、発表たしてきた動物園の意義と旭山動物園が先駆的に取組ん（スライド、ポスターともに）の際の図表などの英文表

でいる新しい動物園像について聞かせていただいた。同記を心がけることへの協力を得るなどの工夫を図るなど、日午後には、免疫毒性試験法についてのワークショッ

新しい試みを取り入れました。特別講演、シンポジウム、

プ「免疫毒性試験法の標準化−KLMを用いる抗体産生応

ランチョンセミナーなどの発表に６名の海外からの参加

答試験（TDAR）−」を行ない、製薬企業の安全性試験が得られ、総数163名の参加者でした。しかし、折からのを担当する部署に所属する先生により、「KLH-TDARの

経済不況のために昨年に数演題の参加があったアジア諸標準化を議論するにあたって」（筒井尚久先生）、「ラッ

国からの参加者が無かったことは残念でした。

ト を 用 い たkeyhole limpet hemocyaninを 用 い るT cell

今回の学術会議では、「免疫と子ども」というテーマを

dependent」（河井良太先生）、「武田におけるKLH-TDAR

設定しました。少子高齢化が進む我が国にあって、次世

試 験 法 に つ い て 」（ 森 香 奈 子 先 生 ）、「 市 販 のKLH抗 体

代を担う子どもの健全な発育が望まれています。特別講

ELISA kitを用いたTDAR法−SRBC法との比較−」（小松演１として、米国国立環境健康科学研究所（NIEHS, NIH）

弘幸先生）、「抗KLH IgMおよびIgG抗体産生量を指標とのDori R. Germolec先生には、「Does immunomodulation

したTDAR試験系の検討」（原田英樹先生）の発表があり、early in life increase disease risk in children and beyond?」

本学会が社会的に果たすべき役割の一つが担われました。

という演題にて、ヒトの発生段階から幼小児期に受ける両日合わせて一般演題は、22題の口演と13題のポスター

免疫変容が子どもの現在から将来にかけての疾病発生にの発表があり、いずれも熱心かつ活発な討論がなされま影響するかという内容で講演をしていただきました。動

した。

物実験を用いた基礎的研究から、ヒトでの疫学研究の結全体を通して、世界的な経済不況と地方開催であるた果を総合的にまとめ公衆衛生的な意義にまでふれる内容

めの参加者の減少があったものの、十分な発表数があり、の濃い講演であり、当日午後の学会テーマと同じ名称の発表内容も充実しており、好評のうちに閉会することがシンポジウムにつながる意義深いものでした。シンポジ

出来ました。ご参加いただきました方々を始め、学術大

ウム「免疫と子ども」は、自治医科大学の香山不二雄先会の運営にご支援いただきました各団体、各位に心より生、塩野義製薬の中村和市先生の座長により進めまし御礼申し上げます。

た。東京大学大学院医学系研究科分子予防医学の石川昌先生に「ダイオキシンによる腸管免疫の破綻とアレ
ルギー感作」、千葉大学予防医学センターの森千里先生

年に「胎児の複合汚染とアレルギー疾患との関連、そして次世代の健康を守るための化学物質の健康診断シス会

賞

培養細胞を用いた
新しいアレルギー検査法の開発

テム」、米国ニューヨーク大学のJudith T. Zelikoff先生に「Prenatal exposure to cigarette smoke increases tumor

中村
樋口

susceptibility of juvenile mice via changes in anti-tumor

亮介、内田
雅一、手島

（国立衛研

immune mechanisms.」の演題で講演をしていただき、活好海玲子

代謝生化学部）

発な討論がなされた。なお、午後のプログラムの初めに総会を開催しました。初日のプログラムの後に、旭背景

川グランドホテルにて懇親会を開催し、米国のSociety

食物アレルギーは、小児にとって最も多い疾患の一つ

of Toxicology, Immunotoxicology specialty section（SOTである。患児の多くは加齢と共に寛解するが、一部はア

ITSS）との交流事業について本学会担当理事の中村和市

トピー性皮膚炎や気管支喘息へと症状が進行することが先生から両学会の交流についての説明をうけ、引き続き知られている。治療の基本はアレルゲン除去療法となる

SOT ITSSより本学術大会に派遣されたZelikoff先生からため、実際に症状を引き起こすアレルゲンを早期に同定

コメントをいただきました。また、学会事務局の大槻先することが極めて重要である。

─ 2 ─

Vol. 14 No. 2 (2009)
しかし、現在臨床的に広く用いられているCAP-RASTの後、各種臨床情報と共に血清が提供された。

法は、比較的偽陽性が多いことが知られている。この場
合、本来除去する必要のない食物を遠ざけてしまうこと

結果になるが、特に成長期にある小児にとって、不適切な食

健常人の血清を段階希釈してRS-ATL8細胞を感作し、物除去は、健康な発育の阻害要因ともなりかねない。一

翌日１μg/mlの抗ヒトIgE抗体により受容体を架橋刺激方、信頼度の高いin vivoアレルギー試験法としては確定したところ、15 pg/ml（0.006 IU/ml）の時点でバックグ診断法である食物負荷試験（OFC）や簡便なスキンプリッ

ラウンドの２倍の閾値を超えることが確認された（notクテストなどがあるが、患者への負担が問題となる。患

shown）。

者の全血から採取した好塩基球の活性化を調べるex vivo

EXiLE法の非常に高い感度が示されたため、次に、段法も知られているが、全血は保存ができないため後方視階希釈した卵白アレルギー患者血清を用いてRS-ATL8細的研究には適用できず、また、再試験のためには再度患胞を感作し、１μg/mlのオボアルブミンによってこれを者に来院してもらう必要があった。このような背景から、刺激した。その結果、血清希釈率100倍以上においても閾

長期保存可能な血清を用い、より信頼度の高いin vitroア

値を超える応答が観察された（Fig. 1a）。一方、同様の条

レルギー試験法の開発が望まれていた。

件で感作したRBL-SX38細胞を用いてその脱顆粒を測定

ヒト高親和性IgE受容体（FcεRI）を安定発現させたラッしたところ、抗原刺激による脱顆粒の誘導は観察されたト培養マスト細胞株を用いて脱顆粒を測定することによ

ものの、感作のみで刺激を行なわない条件下でも高いレり同目的を達成しようという試みはいくつかなされたが、

a 15

ヒトの血清はラットの培養細胞に対して細胞傷害性を有Lucifferase (fold)

するため、安定した結果が得られないという問題があった。
そこで我々は、ヒトFcεRIを発現するラット培養マス
ト細胞株に、転写因子NF-ATの活性化依存的にルシフェラーゼを発現するレポーター遺伝子を組み込んだ細胞株を作製し、これにより、IgEの架橋に基づくマスト細胞の

10
5
2.5
2.0
15
1.5
1.0
0.5

活性化をルシフェラーゼアッセイによって検出するシス

0
None

テムを開発し、これをEXiLE（IgE Crosslinking-induced

10000

1000

100

10

Dilution of Human Serum

Luciferase Expression）法と命名した。

b 80
Degranulation (%)

材料および方法
ラット培養マスト細胞株（RBL-2H3）にヒト高親和性
IgE受容体（FcεRI）を安定的に発現させたRBL-SX38細胞に、NF-ATによって転写が誘導されるルシフェラー
ゼ遺伝子を組み込んだ細胞株、RS-ATL8細胞を樹立した（特願2009-168530）。この細胞を96ウェル白色クリア

60
50
40
30
20
10

ボトムプレートに播種し、培地で100倍あるいは様々な濃0None度に希釈したヒト血清により一晩感作した。滅菌PBSに

10000

1000

100

10

Dilution of Human Serumより１回洗浄後、10％ FCSを含む培地に溶解した様々な濃度の抗原または抗ヒトIgE抗体により37℃で３時間刺70

Fig. 1

激し、ルシフェラーゼの発現量をホモジニアス系基質液（ONE-Glo; Promega社）およびルミノメータ（EnVision;
PerkinElmer社）により測定した。活性化の判定は、バッ
クグラウンド発現レベルの２倍をもって閾値とした。脱顆粒測定はβ-hexosaminidase活性によった。OFCとの対比の実験については、藤田保健衛生大学坂文種報徳會病院において負荷試験が実施された患者について、匿名化─ 3 ─

Comparison of luciferase expression and degranulation
RS-ATL8 cells (a) and RBL-SX38 cells (b) weresensitized with serial dilutions of egg white allergy
patient's serum (total IgE, 12,700 IU/ml; egg white
specific IgE, >100UA/ml) overnight. Cells were
stimulated with 1μg/ml ovalbumin (shaded circles),
1μg/ml anti-human IgE (closed circles), or solvent alone(open circles). Luciferase expression after 3h-stimulation(a), and degranulation after 30min-stimulation (b) are
shown. Dashed line in a, two-fold level of background(control without serum) luciferase expression. Data aremeans ± SEM (n = 3 in a, n = 4 in b).

ImmunoTox Letter
ベルの自発的な放出が起き、バックグラウンドが非常にレルゲンによるFcεRIの架橋によって活性化され、発現高いことが示された（Fig. 1b）。

したルシフェラーゼによりその活性化を容易かつ感度よ

次に、卵白に関するOFCを実施した19人の患者につく定量できることが示された。

いてEXiLE法による解析を行なった。Table１に示す通Fig. 1bに示したように、従来法の脱顆粒法では、ヒトり、19人の患者中、OFC陽性であったものは12名、陰性血清のラット培養細胞への細胞傷害性が問題となり、高であったものは７名であった。CAP-RAST法による血清い濃度の血清を用いることはできなかった。しかし、低中卵白特異的IgE量は０〜６の７段階のクラスに分類さい濃度の血清では十分な感作が成立せず、明確な応答もれ、通常はクラス２以上（0.70 U A/ml 〜）を陽性と判定

観察できない。ここでは述べなかったが、OFC陽性患者

するが、この場合、OFC陽性患者はすべてCAP-RAST陽のうち、#83や#84などクラス３の卵白特異的IgEを持つ性となる一方で、OFC陰性患者についても７名中６名が患者血清について脱顆粒法で検討すると、どちらも陰性

陽性となった。OFCとの相関は、Fisher’s exact testでの結果となった。マスト細胞の脱顆粒を誘導するには、

P = 0.3684であった。一方、EXiLE法による判定は、１〜やはりある程度の量の特異的IgEが必要なのであろう。

1000 ng/mlの卵白抽出抗原（EWP）により３時間刺激し一方、EXiLE法は100倍希釈という低い血清濃度で細胞た際の発現量の最大値が刺激前に比して２倍以上に達しを感作できるため、細胞傷害性は問題にならない（Fig.

たときに陽性と判定した。その結果、EXiLE法による判1a）。 そ の 結 果 はOFCの 結 果 と 非 常 に 高 い 相 関 を 示 し定結果はOFCの結果と非常に高い相関を示し、Fisher’s

た（Table 1）。なお、EXiLE法の最大値はCAP-RAST法

exact testでP = 0.001687であった。

の数値と高い相関を示す（R = 0.9127, Spearman’s ranktest） た め、 基 本 的 にEXiLE法 の 結 果 は 血 清 中 の ア レ
ルゲン特異的IgE濃度を反映しているものと考えられ考察
我々が開発したRS-ATL8細胞は、希釈したヒト血清にる。今回CAP-RASTとOFCとの相関が低かった理由は、

より効率的に感作され、抗ヒトIgE抗体および特異的ア

CAP-RAST法におけるクラス２という閾値の設定は、少Table 1EXiLE in RS-ATL8 cells sensitized with egg-allergy patients’ sera

Patient
#79
#77
#78
#80
#74
#90
#84
#83
#85
#81
#76
#94
#73
#67
#82
#95
#75
#100
#99

OFCa
test

totIgE(IU/ml)

CAP b(UA/ml)

CAP
class

CAPa
test*

+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+

1922
1273
844
381
2663
12323
331
772
619
795
509
653
>5000
22600
1470
578
1006
5356
475

76.8
68.6
48.3
35.1
29.9
25.6
13.2
8.98
5.57
4.54
3.91
2.99
33.4
4.46
3.45
2.03
1.17
0.89
<0.34

5
5
4
4
4
4
3
3
3
3
3
2
4
3
2
2
2
2
0

+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+

–
–
–
–
–
–
–

–

1
2.3
4.1
4.8
1.5
3.9
1.5
1.5
1.3
1.6
1.5
1.4
0.8
1.8
1.0
1.2
1.1
0.8
0.9
1.1

EXiLE (fold) by
EWP (ng/ml)
10
100
3.4
4.5
8.8
9.5
8.3
8.4
3.0
3.9
3.3
4.5
2.5
2.8
1.7
2.3
1.7
2.6
2.5
3.5
1.8
2.2
1.7
2.0
1.3
1.3
2.2
2.2
1.2
1.4
1.2
1.5
1.2
1.3
0.9
0.9
1.3
1.5
1.1
1.3

1000
3.5
7.5
8.6
5.0
4.8
2.8
1.9
3.2
3.1
2.7
2.2
1.5
1.9
1.6
1.4
1.5
1.0
1.4
1.5

Maxb
EXiLE
(fold)
4.5
9.5
8.6
5.0
4.8
2.8
2.3
3.2
3.5
2.7
2.2
1.5
2.2
1.6
1.5
1.5
1.0
1.5
1.5

EXiLEatest **
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
–

+
–
–
–
–
–
–

RS-ATL8 cells were sensitized with 1:100-diluted egg-allergy patients’ sera overnight, and stimulated with the indicated concentrationsof EWP for 3 hrs. * CAP test was considered positive if the class was ≥2 (i.e. ≥ 0.70 UA/ml). ** EXiLE test was judged to be positive if Max
EXiLE was more than the cut-off level (2.0). Values greater than cut-off levels are represented in Bold. a Correlation between OFC and
CAP tests was P = 0.3684, and that between OFC and EXiLE tests was P = 0.001687 (Fisher’s exact test). b Correlation between CAP
and Max EXiLE values was R = 0.9127 (Spearman’s rank test).
─ 4 ─

Vol. 14 No. 2 (2009)
なくとも卵白アレルギー患者については厳しすぎたため存在する。これらのことは、石綿曝露後の生体内で、抗であろう。しかし、たとえば#67の患者のように、4.46

腫瘍免疫が一定の働きを果たしていること、また石綿曝U A/ml（クラス３）の特異的IgEを持つにもかかわらず露の慢性的影響が抗腫瘍免疫減衰に作用している可能性

OFC陰性となる場合に、EXiLE法は正しく陰性の判定をを示唆する。

出すことができており、このような患者においてアレル

抗腫瘍免疫において、NK細胞と細胞傷害性T細胞は、ゲンの除去を開始する前に本試験を行なうことは、臨床

形質転換細胞や腫瘍細胞を傷害し、その除去に働いて上有用であろうと思われる。今後は、例数を増やすと共いる。T細胞による抗原特異的な標的細胞の認識とは異に様々なアレルゲンについて解析を重ね、信頼性の向上なり、NK細胞は細胞表面に発現する多様なNK細胞活性に努めたい。

化受容体を用いて異常なリガンドを認識し、標的細胞を傷害する。NK細胞活性化受容体には、NKG2 family,
signaling lymphocytic activating molecule (SLAM) family,

謝辞
このたびは本発表が第16回日本免疫毒性学会学術大会

natural cytotoxicity receptor (NCR) familyなどが知られ年会賞に選出され、誠に光栄に思います。皆様ご存じのる。最近我々は、NK細胞活性化受容体に注目した末梢ように本大会は旭川医大の吉田先生のもと「子どもと免血NK細胞 の機能解析を行い、悪性中皮腫（MM）患者疫」というテーマで開催され、発達期にある子どもへののNK細胞においてNCRの一つであるNKp46の発現低下

化学物質暴露が免疫系の発達に及ぼす影響などについて、を伴う細胞傷害性低下が見られること、同様な細胞表

精力的なご研究の数々が発表されました。その中で、私面NKp46発現量の抑制が石綿chrysotile B（CB）曝露下どもの研究は、「子どもにとって最もポピュラーな免疫

PBMC培養中のNK細胞において見られることを明らかに疾患」としての食物アレルギーを対象にしたものであり、した３）。

正直なところ「少々浮いているかな？」と危惧しており

そこで、石綿曝露を伴う幾つかの培養環境下におけるましたが、予想もしていなかった年会賞という栄誉を受

NK細胞の機能解析を行い、また、MM患者だけでなく石け、驚くと共に身が引き締まる思いでございます。今後

綿曝露指標である胸膜プラーク（PL）陽性者を含めた石とも皆様のご指導・ご鞭撻を頂戴できれば幸いでござい

綿被曝露者の末梢血NK細胞の機能解析を行った。これらます。

の中で、石綿曝露によるNKp46発現量抑制の機構解明を最後になりましたが、本研究は食品健康影響評価技術

試行し、またNKp46の石綿被曝露者における抗腫瘍免研究の支援を受けて遂行されました。また、貴重な患者

疫機能を測る分子指標としての可能性を考察した。

血清をご提供くださった藤田保健衛生大学の宇理須厚雄
教授に深く感謝いたします。

材料と方法
健常人（HV）由来PBMC又はflow cytometer（FCM）（Becton Dickinson）を用いて単離したCD3−CD56+NK

奨

励

細 胞 を 石 綿 ５μg/ml chrysotile B（CB） 曝 露 下 で ５賞

ng/ml IL-2 を加え７日間培養した。細胞膜上・細胞内のNKp46発現量解析にはFCMを用い、発現量は平均蛍石綿曝露後NK細胞上NKp46発現抑制機構の解析、NKp46の抗腫瘍免疫機能
予測分子指標としての可能性
西村林

泰光1、熊谷宏明1、岸本

直子1、前田卓巳2、大槻

光 強 度（MFI） で 表 し た。 培 養 後PBMCよ りFCMを 用
いてCD3−CD56+NK細胞を単離し、抗体を用いて細胞表

恵1
剛巳1

0.1％ Triton 100で固定・浸透化し、PE標識抗体を用い（1川崎医科大学衛生学、2岡山労災病院）て細胞内NKp46染色を行った。またNKp46 mRNA量の面NKp46のブロックを行った後、3.7％ formaldehydeと解析にはReal-time PCR（Stratagene）を用いた。HV、
PL、MM各 群 のPBMCを 調 製 し、 ％ NK細 胞、NKGD、

緒言
アスベスト（石綿）は肺癌や中皮腫などの腫瘍疾患を

2B4、NKp46発現量およびK562細胞への細胞傷害性（％

引き起こす。石綿は、ROS産生、組織傷害、DNA傷害を

specific lysis）をFCMで測定した。％ specific lysis を ％

１,２）

。

NK細胞で除しlysis/NK値を求め、NK細胞あたりの細胞

しかし、石綿曝露が必ずしも腫瘍疾患を引き起こす分け

傷害性を測る値とした。患者末梢血は、岡山労災病院副ではなく、特に中皮腫の発症には30−40年の潜伏期間が院長・岸本卓巳氏のご協力のもと、同意を得た各患者か誘導し、これにより発癌作用を持つと考えられている

─ 5 ─

ImmunoTox Letter
PL陽 性 者 とMM患 者 をNKp46highPL群・NKp46lowPL群・ら提供を受けた。

MM群に分け、各群にスコア=1、2、3を与えたところ、

結果

スコアはlysis/NK値と負の相関性を示し、スコアの上昇

１）培養後NK細胞におけるNKp46の細胞内発現量とmRNAに伴いlysis/NK値が低下することが分かった（ p =−0.646,
p<0.01）。

レベル
CB曝露培養後PBMCより回収したNK細胞における細胞内NKp46発現量は、対照培養由来NK細胞と同程度に低考察値であり、細胞内NKp46の異常な蓄積は見られなかった。

CB曝露がPBMC培養時の液性因子産生への影響を介対照的に、NK細胞中のNKp46 mRNAレベルはCB曝露条

し て、NKp46 mRNAレ ベ ル 抑 制 に 作 用 し、NK細 胞 上

件で有意に低く抑えられていた。また、NCRに属し、活NKp46発現量の減少を引き起こすことが明らかとなっ性化に伴い発現増加を示すNKp44 mRNAレベルも有意にた。CB曝露によるNK細胞活性化に関わるサイトカイン

低値であった。

産生の抑制が示唆される。他方で、抑制性サイトカインの産生誘導も否定できない。間接的石綿曝露影響の存在

２）液性因子を介したchrysotile曝露影響

は、直接会合せずとも石綿がNK細胞機能に影響する可能

NK細胞単独培養時にも、CB曝露によるNKp46発現量性があることを意味する。実際に、吸入された石綿の所の有意な抑制が示された。しかし、PBMC培養時と比較し、属リンパ節への蓄積がヒトや実験動物モデルで示されて

NK細胞上NKp46発現量は全体的に低く、CB曝露影響もおり、石綿がリンパ節内環境への影響を介してNK細胞機

小さい傾向を示した。この結果は、CB曝露影響がPBMC

能低下に作用している可能性を示唆する４−６）。MM患者

培養時の液性因子産生を介した間接的影響を中心としてだけでなく、PL陽性者の一部でもNKp46発現低下を伴ういることを示唆する。そこで、0.2μm孔経透過膜を持つ

NK細胞における細胞傷害性低下が見られ、NKp46発現量

培養インサートを用いて、膜を隔てたPBMCとNK細胞に基づくスコアはlysis/NK値と負の相関性を示しており、の共培養を行った。NK細胞は、PBMCとの共培養下でNKp46発現量評価の抗腫瘍免疫評価指標としての有用性

NKp46発現量の増加を示した。この培養条件で、PBMCが示唆される。MM疾患の診断には、胸部X線やCTおよにCB曝露を行ったとき、共培養下のNK細胞におけるび病理組織が用いられているが、何れも習熟を必要としNKp46発現量が有意に低下した。

難しい判断を伴う。我々は、今回報告したNKp46だけでなく、T細胞においても幾つかの分子指標候補を同定し

３）NKp46発現量とNK細胞傷害性の相関性、PL陽性者ている７−９）。これらの指標群に関する末梢血の定期的な診断を行えば、既存の診断方法と組み合わせ、MM疾患

NK細胞の細胞傷害性
HV、PL陽性者、MM患者から成る全集団を解析したの早期発見や予防が改善する可能性がある。今後、更にとき、末梢血NK細胞のNKp46発現量はlysis/NK値と正石綿曝露後NKp46発現抑制機構の解明を試み、関係するの相関性を示した（coefficient=0.608, p<0.0001）。MM

分子や遺伝子を同定し、末梢血を用いた石綿曝露後の抗患 者 のNK細 胞 が、HVと 比 べ 有 意 に 低 いNKp46発 現 量

腫瘍免疫抑制指標の確立を目指し、さらにはMM患者にとlysis/NK値を示したのに対し、PL患者ではNKp46発

おける免疫療法への道標を模索したい。

現量は低値から高値に幅広く分布し、lysis/NK値もHVと 差 を 示 さ な か っ た。 そ こ で、PL患 者 をNKp46highPL

謝辞

low

群 とNKp46 PL群 に 分 け て 両 群 を 比 較 し た と こ ろ、low

NKp46 PL群のlysis/NK値はNKp46

high

PL群よりも有意に

第16回免疫毒性学会奨励賞を賜り、年会長の吉田貴彦
先生はじめ選考委員の諸先生方に厚く御礼申し上げます。
奨励賞の名に恥じぬよう、今後も益々免疫毒性研究に取低いことが分かった。

り組みたく存じます。何卒皆様、今後もご指導ご鞭撻賜４）NKp46発現量に基づくスコアとNK細胞の細胞傷害性

りますよう、宜しくお願いいたします。

との関係
これまでの結果は、NK細胞上のNKp46発現量が石綿

文献

曝露環境で抑制されること、PL患者の一部やMM患者の

１）Mossman, B. T., and A. Churg. 1998. Mechanisms in

NK細胞においてNKp46発現量とlysis/NK値の低下が見ら

the pathogenesis of asbestosis and silicosis. Am. J. Respir.

れることを示している。そこで、これらの知見に基づき、Crit. Care Med. 157:1666-1680.

─ 6 ─

Vol. 14 No. 2 (2009)

日本免疫毒性学会へ期待するもの

２）Mossman, B. T., D. W. Kamp, and S. A. Weitzman.

角田

1996. Mechanisms of carcinogenesis and clinical（第17〜19期日本学術会議会員

features of asbestos-associated cancers. Cancer Invest.

文男

岩手医科大学名誉教授）

14:466-480.
３）Nishimura, Y., Y. Miura, M. Maeda, N. Kumagai,

日本免疫毒性学会は、医学、薬学、理学、農学等の諸S. Murakami, H. Hayashi, K. Fukuoka, T. Nakano,

分野の研究者から構成される学際的学会として2001年にand T. Otsuki. 2009. Impairment in cytotoxicity and設立され、国際的にユニークな学会と、その発展が大い

expression of NK cell- activating receptors on humanに期待される。
学際的領域における研究は、自分がこれまで専攻してNK cells following exposure to asbestos fibers. Int J

きた学術・技術と違う、時には全く異なる科学分野の学術・

Immunopathol Pharmacol 22:579-590.
４）Dodson, R. F., M. G. Williams, Jr., C. J. Corn, A. Brollo,

技術を学び習得して、自分のそれに上乗せし、初めて取and C. Bianchi. 1991. A comparison of asbestos burden

り掛かれる。また異なる科学分野の習得が、研究課題に

in lung parenchyma, lymph nodes, and plaques. Ann. N.

よっては更に、２、３分野を広げざるを得ないこともある。

Y. Acad. Sci. 643:53-60.

医学部卒業の研究者は、他の学部卒業研究者よりも他分

５）Miserocchi, G., G. Sancini, F. Mantegazza, and G.
Chiappino. 2008. Translocation pathways for inhaled

野を多く習得しないと、学際的領域の研究に従事し難い
ものがあるように思う。
筆者の場合、1958年に北海道大学大学院医学研究科へ

asbestos fibers. Environ Health 7:4.
６）Trosic, I., M. Matausic-Pisl, and N. Hors. 2000.

進学し、畏敬の恩師

安倍三史教授（公衆衛生学）の薫

Pathways and quantification of insoluble particles in

陶を得て四年間の大学院生活を、「発がん性炭化水素によthe lung compartments of the rat. Int. J. Hyg. Environ.

る大気汚染に関する研究」に従事できた。
この研究は、学際的研究の走りとも言えるもので、院Health 203:39-43.
７）Miura, Y., Y. Nishimura, H. Katsuyama, M. Maeda,

生一年次には、北海道大学に当時一台しか設置しなかっ

H. Hayashi, M. Dong, F. Hyodoh, M. Tomita, Y. Matsuo,

た薬学部分析化学研究室の高性能蛍光分光光度計による

A. Uesaka, K. Kuribayashi, T. Nakano, T. Kishimoto,

環境中の超微量の各種発がん性炭化水素定量分析法を分and T. Otsuki. 2006. Involvement of IL-10 and Bcl-2 in

析化学研究室の研究員らと共同で確立した。
院生二年次には、大学工学部機械工学科の研究員の協

resistance against an asbestos-induced apoptosis of T

力で、自動車排気ガス捕集装置や極寒豪雪地帯におけるcells. Apoptosis 11:1825-1835.
８）Murakami, S., Y. Nishimura, M. Maeda, N. Kumagai,

大気捕集装置の開発に成功した。これらの学際的研究に

H. Hayashi, Y. Chen, M. Kusaka, T. Kishimoto, and

よって得た分析法や大気捕集装置を駆使し、北海道の大T. Otsuki. 2009. Cytokine alteration and speculated

気汚染現象の特徴を把握し、北海道中央部住民の肺がん

immunological pathophysiology in silicosis and

死亡率との間に有意の関連を認めたとする論文を発表しasbestos-related diseases. Environ Health Prev Medて学会から高い評価を得た。
爾後ほぼ50年、齢80歳間近な今も、大気汚染研究論文

14:216-222.
９）Otsuki, T., M. Maeda, S. Murakami, H. Hayashi,

や学会誌を読んで楽しんでいる。

Y. Miura, M. Kusaka, T. Nakano, K. Fukuoka, T.

さて、日進月報の本学会の研究分野について、興味こKishimoto, F. Hyodoh, A. Ueki, and Y. Nishimura. 2007.

そあれ、さすがに此の齢では到底追従しきれず、諦めざImmunological effects of silica and asbestos. Cell Mol

るを得ない。願わくば、現役から退いた老いた研究者をImmunol 4:261-268.

対象とした本学会の最近の歩みや興味深い研究内容を紹介してほしいものである。

─ 7 ─

ImmunoTox Letter
WHO/IPCS 免疫毒性ガイダンス（Harmonized Guidance of Immunotoxicity
Risk Assessment）作成に向けた動きについて手島（国立医薬品食品衛生研究所

autoimmunityの事例として、トリクロロエチレンが６章のneoantigenの事例として選ばれた。
・2009.10.1：プラチナの事例研究が提出され、事例研究
報告の作成に関する専門家を加えた事例研究ワーキン玲子

グチームが結成された。

代謝生化学部）

３．今後の予定
１．WHO/IPCS化学物質に対する免疫毒性リスク評価に関するガイダンス作成の目的れたガイダンス案に加え，個別事例研究の結果を加え当 初 は、2009年 度 中 に、2009年 ４ 月 の 会 議 で 作 成 さ

WHO/IPCSは、
オランダ国立公衆衛生環境研究所（RIVM）て，一般の方からのコメント募集のために公表される予の免疫毒性アレルギー過敏症に関するWHO協力センター定であったが、個別事例研究のまとめが若干遅れているを中心に免疫毒性のリスク評価に関して、各国で用いる

ため、個別事例研究のまとめの期限を2010年２月まで延ことのできる国際的にハーモナイズされたガイダンスをばし、ワーキンググループでの議論を経て、来年５−６

作成することを目的としている。

月に一般の方からのコメント募集のために公表される予

具体的には、化学物質に対する免疫毒性を、国際的に定となった。その後、ピアレビュー等を受ける必要があ同意された方法を用いて評価し、これらの評価が適切なるため、ガイダンスが最終化されるのは、2011年になる

リスク管理に用いられることをめざしている。そのためと思われる。

に、免疫毒性専門家よりなるワーキンググループを設置し、リスク評価を行う際の範例を示す作業を行う。

免疫毒性学会の会員の先生方には、来年５−６月に一般の方からのコメント募集のために公開されましたら、
是非、積極的なご意見をいただければと思っています。

２．ワーキンググループ活動経緯

また、今後、日本としても身近な化合物を選択して、個・2008.2.28-29：WHO/IPCS Scoping meeting for the

別事例研究を行ってゆくことが重要と考えます。以上、development of guidance

WHO/IPCS 免疫毒性ガイダンス作成に向けた動きの経過：RIVMセンター長であるHenk van Loveren教授を座報告とさせていただきます。

長に、ヨーロッパ，米国EPAの免疫毒性専門家を中心に10名がオランダRIVMに集まりガイダンスのスコープにつき会合がもたれた。
・2008.12.1, 2009.2.26：Teleconference・2009.4.27-29：WHO/IPCS Immunotoxicity drafting

SOT免疫毒性部会メンバーの日本免疫毒性
学会学術大会参加記：

group meeting：オランダRIVMにて、２回目の会合がもたれた。こ

今年８月27日、28日に旭川で開催されました第16回学の会合から、日本から手島が会議に加わった。ガイ

術大会では、米国毒性学会（SOT）免疫毒性部会メン

ダンスのドラフト案（１−７章）の議論と、それぞバーのDr. GermolectとDr. Zelikoffを迎え、それぞれ特れの章に書かれているリスク評価を行うための範例

別講演とシンポジウムでの講演をしていただきました。

となる個別事例研究としてのモデル化合物の選定がImmunoTox Letter第２号の恒例となりました寄稿文をお行われた。ドラフト案（１−７章）は、異なったタ寄せいただきましたので、紹介させていただきます。

イプの免疫毒性が議論されていて、１章：序論、２
章：背景、３章：免疫毒性リスク評価のフレームワー
ク、４章：免疫抑制、５章：免疫促進、６章：感作性とアレルギー反応、７章：自己免疫誘発性、で構成された。また、事例研究のためのモデル化合物として、プラチナが６章のsensitizationの事例として、
鉛が４章のimmunosuppressionの事例として、芳香剤 が ６ 章 のsensitizationの 事 例 と し て、HCBが ５ 章のimmunostimulationの 事 例 と し て、 水 銀 が ７ 章 の─ 8 ─Vol. 14 No. 2 (2009)

編集後記
本号は、恒例によって本年８月下旬に旭川で開催された第16回学術大会の総括を中心に構成されています。大会は、吉田貴彦大会長（旭川医科大学）のお計らいで旭川地方がまだ穏やかな気候の時期に開催されたこともあ
り、大会終了後の週末には、旭山動物園や富良野、美瑛、大雪山などの周辺景勝地に足を運ばれた大会参加者の方々もいらしたと聞いております。
大会が終了するとすぐに、学会運営委員会と大会実行委員会では、翌年の学術大会（９月、つくば）に向けての準備を始めています。現在は、大会会長の藤巻秀和先生（国立環境研究所）を中心に、「感受性を考慮した免疫
毒性研究の新展開−環境・遺伝・時間要因−」というサブテーマに即した大会プログラムの構成を練りつつある段階です。免疫毒性学会は、約250名の学会員から構成される小規模な研究者の集まりですので、学会運営や学術大会の企画立案にあたっては、学会員の皆様方の要望に柔軟に応えることができます。何かございましたら、学会事務局（jsit-office@med.kawasaki-m.ac.jp）にご連絡頂けますと幸いです（NT記）。

編集・発行：日本免疫毒性学会
発行日：平成21年12月
編集発行責任者：澤田 純一
編集委員会：角田 正史、筒井 尚久、
手島 玲子、野原 恵子、
藤巻 秀和
原稿送付先：fujimaki@nies.go.jp

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