TỔNG HỢP KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM HIỆUQUẢ KHÁNG KHUẨN CỦA DUNG DỊCHCALCIUM NUNG THIÊN NHIÊNTên sản phẩm : ABANTDung dịch nước Calcium nung thiên nhiên 【Tên sản phẩm : ABANT】

bắt đầu được phát triển từ tháng 4 năm 2010. Sản phẩm sử dụng100% thành phần thiên nhiên có nguồn gốc tự nhiên. Là sản phẩman toàn có tác dụng diệt khuẩn, khử mùi mạnh mẽ đang được sửdụng rộng rãi.

300ml

30ml
ARROWFIELD Co., Ltd.
5-16 Honjo, Koyoen, Nishinomiya, Hyogo 662-0015,
Nhật Bản.
TEL +81-798-75-1100✉ abant@arrowfield.co.jp

Có khả năng diệt khuẩn vượt trội,phát huy hiệu quả với hầu hết cácvi khuẩn gây ngộ độcKhông chỉ có tác dụng diệt khuẩn với các loại vi khuẩn gây ngộ độc thựcphẩm thông thường như Vibrio parahaemolyticus, Salmonella spp, O-157,vân vân... mà còn có hiệu quả chống lại ngộ độc thức ăn do virus.
Số lượng tế bào sốngVi khuẩn

Thời giankhử khuẩnKhi bắt đầuE.coli : serotype O157 : H7

10 phút

2.8×10 5

Staphylococcus aureus

10 phút

2.7×10 5＜10 Trung tâm Công nghệThực phẩm Tokyo
40Salmonella

10 phút

2.3×10 5≤ 30

Pseudomonas aeruginosa

10 phút

3.2×10 5≤ 30

Listeria monocytogenes

60 phút

6.0×10 5≤ 30

Bacillus subtilissau 3 phút

1.3×10 5≤ 300

Histamine-producing bacteria

5 phút3.0×10 5≤ 300

Vibrio parahaemolyticus

5 phút1.2×10 5

Methicillin-resistant
Staphylococcus aureus

sau 3 giờ1.6×10＜10 Viện Nghiên cứu Vi sinh vậtKyoto＜10Legionella

10 phút

0.82×10Campylobacter

10 phút

Sau khikhử khuẩn

55P ha loãng dung khuẩn 10 lần

Cơ quan thử nghiệmViện Nghiên cứu Vệ sinh
Môi trường Thực phẩmViện Nghiên cứu Khoa học
Không phát sinhCông nghệ Thịt＜10Thêm huyền phù khuẩn vào dung dịch nước bão hòa Calcium nung thiên nhiên, sau khi khuấy đều,đo số lượng vi khuẩn theo phương pháp đo số lượng vi khuẩn chung.

VirusThời gianloại bỏ virus

Norovirus (Feline calicivirus)

10 phút

Hàm lượng nhiễm virus
Sau khi Cơ quan thử nghiệmKhi bắt đầudiệt khuẩnTrung tâm Phân tích
7.0
＜ 1.5
Thực phẩm Nhật BảnDù hiện tại vẫn chưa có thuốc hay vacxin hữu hiệu để điều trị Norovirusnhưng với tác dụng diệt virus của dung dịch nước bão hòa Calcium nungthiên nhiên có thể ngăn ngừa virus trước khi phát bệnh.

DIỆT 99.99%

CORONAVIRUS
Thử nghiệm tác dụng khử hoạt tính của virus
với nguyên liệu Calcium nung thiên nhiên【Thử nghiệm khử hoạt tính của virus】
・Cho 0.1 ml dung dịch virus trộn với 0.9ml sản phẩm thử nghiệm, để cho tác động trong
một khoảng thời gian quy định.
・ Sau khi tác động, thu thập 0.1 ml từ dung dịch đã pha và pha loãng khoảng 10 lần vớidung dịch đệm HEPES 0,1 M (㏗ 7,0) để ngăn tác động đối với virus của sản phẩm thửnghiệm.
・Sử dụng dung dịch này như là dung dịch gốc của mẫu thử dùng để đo lường hàm lượnglây nhiễm bằng phương pháp TCID50.

Mẫu thí nghiệm : Feline enteric coronavirus (WSU 79-1683)
Sản phẩmmẫu
試験品Hàm lượng lây nhiễm感染価（TCID50/ml）(TCID50/ml)
0 (lúc đầu)０（初期）Đốichiếu (PBS)
対照（PBS)
Calcium nung

有機焼成カルシウムthiên nhiên

5 phútsau
5分後

2.4E+05

10分後

10 phút sau

LRVLRV
5 phútsau
5分後

5.0E+05
1.1E＋02<1.3E+01

1010分後phút sau-0.33.3>4.2

Sử dụng nước muối đệm phosphate (PBS) để kiểm soát.
Giá trị giới hạn phát hiện : 1.3E+01 TCID50/ml.
LRV (giảm hàm lượng lây nhiễm): log10 (hàm lượng lây nhiễm ban đầu / hàm lượng lây nhiễm sau
mỗi thời gian tác động).
Cơ quan thử nghiệm : Trung tâm Khoa họcMôi trường Kitasato

Dựa vào kết quả trên, nguyên liệu Calcium nung thiên nhiên đã chứng minh

Sau 5 phút ➡99.95%
Sau 10 phút ➡99.99% vi khuẩn Coronavirus bị tiêu diệtKIỀM HÃM SỰ SINH SÔI CỦA NẤM MỐC＜Phương pháp thử nghiệm＞(1) Thêm một lượng xác định trước bột Calcium nung thiên nhiên vào môi trường nuôi cấy Potato Destrose*.
* Môi trường bao gồm nước tinh khiết, glucose, chiết xuất khoai tây, thạch để thử nghiệm nuôi cấy và nhângiống nấm mốc.
(2) Trồng khoảng 10 bào tử nấm mốc trong mỗi đĩa chia nhỏ petri (khoảng 20ml)(3) Bảo quản ở nhiệt độ phòng và quan sát bằng mắt thường sự phát triển của nấm mốc qua thời gian.

LoạinấmmốcLượngCalciumnung thiênnhiên thêmvào

0.3g/200ml(khoảng0.15%)

0.3g/200ml(khoảng0.15%)

2 ngày5 ngàyNgăn chặn sự phát triểncủa nhiều loại nấm mốc

0.3g/200ml(khoảng0.15%)

Thời gianDUNG DỊCH CALCIUM NUNG THIÊN NHIÊNCHẤT KHỬ MÙI KHÔNG MÙIThí nghiệm rỗngNồng độ khí khi cho vào 5ml dung dịch bão
hòa Calcium nung thiên nhiênNồng độ khí khi cho vào 15ml dung dịchbão hòa Calcium nung thiên nhiênMùi tanh của trứngMùi tất ẩmPhương pháp kiểm tra :Mùi giấmMùi nước tiểuBơm khí vào thân túi bằngphương pháp ống dò. ChoABANT vào mỗi túi mùi. Sau khi
hàn nhiệt, 3 L không khí đượcniêm phong kín. Thêm vào lượngkhí kiểm tra để đạt nồng độ nhưđã cài đặt. Để yên qua mộtkhoảng thời gian và đo lại nồngđộ khí trong túi bằng ống dò khí.
Ngoài ra, thử nghiệm được thựchiện theo cách tương tự màkhông có ABANT được sử dụnglàm thí nghiệm rỗng.

Cơ quan thử nghiệm : Trung tâm
Phân tích Thực Phẩm Nhật BảnMùi thối của hành tâyMùi khó chịu của cây cỏ(thành phần mùi thuốc lá)Mùi tanh của cáTHỬ NGHIỆM TÍNH AN TOÀNCỦA NGUYÊN LIỆU CALCIUM NUNG
THIÊN NHIÊNNguyên liệu Calcium nung thiên nhiên dạng bột đãvượt qua bốn bài kiểm tra tính an toàn dưới đây1. Thử nghiệm độc tính cấp tính qua đường miệngSố kiểm tra N17137-1

2. Thử nghiệm kích ứng da ban đầuSố kiểm tra N17137-2

3. Thử nghiệm tính nhạy cảm với daSố kiểm tra N17137-3

4. Thử nghiệm đột biến ngược

Số kiểm tra AN17137-1

THỬ NGHIỆM ĐỘC TÍNH CẤP TÍNHQUA ĐƯỜNG MIỆNGTính an toàn đã được đánh giá thông qua xem xét thử nghiệmđộc tính cấp tính trên chuột và thử nghiệm kích ứng da banđầu trên thỏ.
Thử nghiệm dung dịch bão hòa Calcium nung thiên nhiên để thực hiện thí nghiệm độctính cấp tính trên chuột.
Thử nghiệm liều dùng 2000mg/kg trên nhóm thí nghiệm. Trong nhóm đối chứng , thựchiện quan sát trong 14 ngày.
(Cơ quan thử nghiệm : Trung tâm Phân tích Thực Phẩm Nhật Bản)Thay đổi trọng lượng (con đực)Nhóm chỉ địnhTrước chỉ địnhNhóm thí nghiệm 33.5±2.5 (5 con)
Nhóm đối chứng 33.3±1.7 (5 con)

Sau chỉ định71437.1±2.7 40.1±3.7
37.9±2.1 40.9±2.5

Trong thời gian quan sát không có trườnghợp bất thường hoặc tử vong được ghi nhậnở cả chuột đực và chuột cái trong nhóm chỉđịnh.
Sau khi dùng thuốc 7 và 14 ngày, khi đocân nặng, không có sự khác biệt về cânnặng khi so sánh nhóm thử nghiệm vànhóm đối chứng ở cả con đực và con cái.

Thay đổi trọng lượng (con cái)
Nhóm chỉ địnhTrước chỉ địnhNhóm thí nghiệm 27.7±1.6 (5 con)
Nhóm đối chứng 27.8±1.4 (5 con)

Sau chỉ định71430.1±2.1 32.7±3.1
30.0±1.4 32.7±1.5

Khám nghiệm tử thi vào cuối giai đoạnquan sát cho thấy không có bất thường ở tấtcả các con vật thử nghiệm, cả con đực vàcon cái.

Từ những điều trên, thử nghiệm độc tính cấp tính qua đường miệng trên chuột cho thấygiá trị LD50 của mẫu được đánh giá là trên 2000mg/kg đối với cả con đực và con cái.

HẠNG MỤC ĐÁNH GIÁ KÍCH ỨNG DA「CHẤT KHÔNG GÂY KÍCH ỨNG」

THỬ NGHIỆM KÍCH ỨNG DA BAN ĐẦUBa con thỏ trắng Nhật Bản cái được sử dụng làm động vật thử nghiệm, phần chỉ định làphần lưng của con vật đã được cắt bỏ lông, các bộ phận da khỏe mạnh và bị thương đượcchia ra.
Đối với phương pháp sử dụng, 0,5 g mẫu quản lý được đặt trên một miếng vải xơ 2,5 ×2,5 cm, đóng chặt và dán trong 24 giờ bằng cách sử dụng thạch cao kết dính không thấmnước, thạch cao kết dính bằng bọt biển và băng đàn hồi kết dính.
Sau khi gỡ bỏ, thực hiện quan sát phản ứng kích thích sau 3, 24 và 48 giờ.
(Cơ quan thử nghiệm : Trung tâm kiểm nghiệm an toàndược phẩm, phòng nghiên cứu Yoshimi)
Số thứ tự
con vật

Trọng lượng (kg)
Ngày
Ngày lấythí nghiệmkết quả

1

2.29

2.36

2

2.24

2.29

3

2.21

2.3

Số thứ tựcon vậtTình trạng thông thườngNgày
1 ngày sau 2 ngày sau 3 ngày sau
thí nghiệm thí nghiệm thí nghiệm thí nghiệmkhông cókhông cókhông cókhông cóbất thường bất thường bất thường bất thường
không cókhông cókhông cókhông cóbất thường bất thường bất thường bất thường
không cókhông cókhông cókhông cóbất thường bất thường bất thường bất thườngDa khỏe mạnhBan đỏ ・ Đóng vảyDa tổn thương
Phù nề

Ban đỏ ・ Đóng vảyPhù nề3 tiếng

48 tiếng3 tiếng48 tiếng3 tiếng

48 tiếng

3 tiếng48 tiếng

1

00

0

0

0

0

0

0

20

0

000

000

300000000Trung bìnhCường độ0000
000

P.1.1

Không có phản ứng da nào được quan sát thấy trên cả da lành và da bịthương, và P.I.I là 0. Không phát hiện bất thường về tình trạng chung trongsuốt thời gian quan sát. Cân nặng cũng có dấu hiệu tăng lên.
Từ kết quả trên, kết luận chất thử nghiệm này có P.I.I = 0 và loại đánh giákích ứng da là không gây kích ứng.

Nhóm phản ứng P.I.IPhân loại đánh giá

0Không gây kích ứngTHỬ NGHIỆM TÍNH NHẠY CẢMVỚI DA TRÊN CHUỘT LANGSử dụng chuột lang để thử nghiệm nguyên liệu Calcium nung thiên nhiên bằngphương pháp Guinea Pig Maximization Test.
Các con vật được sử dụng trong thí nghiệm bao gồm 4 con dự bị, 10 con trongnhóm nhạy cảm và 5 con trong nhóm đối chứng. Tổng cộng là 19 con.

Đối với độ nhạy cảm trong da : dung dịch a : dạng nhũ tương của tá dược hoànchỉnh Freund (FCA) và nước muối sinh lý. Dung dịch b : 0.05w/w% dung dịchcủa chất bị kiểm tra (dung môi : nước muối sinh lý). Dung dịch c : 0.1w/w% dungdịch của chất bị kiểm tra (dung môi : nước muối sinh lý) và chất nhũ hóa như làFCA được tiêm vào mỗi vùng da cổ với liều lượng 0.1ml x 2 chỗ. Tuy nhiên, rútngắn khoảng cách liều dùng của mẫu thử a và b. Đối với sự nhạy cảm khi tiếpxúc : vào ngày thứ 7 lấy một miếng vải thưa kích thước 2x4 cm thấm 0.2g chất bịkiểm tra nguyên chất (100%) và dán vào chỗ tiêm trong vòng 48 giờ. Nhóm đốichứng cũng được xử lý tương tự bằng cách ngâm vải thưa kích thước 2x4 cm vào
0.2ml nước dùng để tiêm. Vì bản chất ban đầu của chất bị kiểm tra này là một chấtkhông gây kích ứng, khoảng 0.5g gam hỗn hợp Vaseline gồm IO ¾ SDS được bôi
lên vị trí tiêm trên da (đã được loại bỏ lông vào ngày thứ 6).
Vào ngày thứ 21 sau khi bắt đầu đo độ nhạy cảm, dùng một miếng vải thưa kíchthước 1.5x1.5 cm thấm 0.1g chất bị kiểm tra nguyên chất và dán vào bên sườntrong vòng 24 giờ. Quan sát phản ứng của da 24 và 48 giờ sau khi gỡ bỏ miếngdán.
Kết quả là không có kích ứng da nào được quan sát thấy ở cả nhóm nhạy cảm vànhóm đối chứng. Tình trạng chung không nhìn thấy bất thường, cân nặng tăng.
(Cơ quan thử nghiệm : Trung tâm kiểm nghiệm an toàn dượcphẩm, phòng nghiên cứu Yoshimi)Từ kết quả trên,Công nhận chất thử nghiệm này không gây mẫn cảm cho da.

THỬ NGHIỆM ĐỘT BIẾN NGƯỢCLà một phần của quá trình đánh giá độ an toàn củanguyên liệu Calcium nung thiên nhiên có sử dụng vikhuẩn, mục đích là để làm rõ có hay không khả nănggây đột biến gen.
Salmonella typhimurium (sau đây viết tắt là S. typhimurium) TAIOO, TAl535,TA98, TAl 537 và Escherichia coli Escher ichia coli (sau đây viết tắt là E. coli)
WP2 uvrA đã được sử dụng để kiểm tra khả năng gây đột biến gen của nguyênliệu Calcium nung thiên nhiên. Được thực hiện bằng phương pháp ủ trước trongcác điều kiện kích hoạt chuyển hóa và kích hoạt không chuyển hóa. Nước dùngđể tiêm được sử dụng làm dung môi của chất thử.
Để thiết lập cho thử nghiệm này, một thử nghiệm đã được cài đặt tiến hành với 5 liều1250, 313, 78,1 và 19,5 µg /plate, được pha loãng theo tỷ lệ chung 4 với 5000 µg /plate làtối đa. Dựa trên kết quả, liều thấp nhất cho thấy sự ức chế tăng trưởng được đặt làm liềucao nhất, và liều thử nghiệm trong nghiên cứu này là nơi mà quá trình trao đổi chất khôngđược kích hoạt đối với tất cả các chủng. 6 liều 313, 156, 78.1, 39.1, 19.5, 9,77 μg /plateđược dùng để kích hoạt chuyển hóa chủng S. Typhimurium TA. Đối với E. coli WP2 uvrAđể kích hoạt chuyển hóa : thực hiện với 6 liều 1250, 625, 313, 156, 78,1, 39,1 μg /plate.
Trong cả thử nghiệm cài đặt liều lượng và thử nghiệm này, số lượng khuẩn đột biếnhoàn nguyên, nhiều hơn hai lần giá trị đối chứng âm tính, không tăng lên ở cả kiểuthay thế cặp bazơ và kiểu thay đổi khung bất kể có hay không có sự hoạt hóa chuyểnhóa. Không có phản ứng với liều được quan sát.
(Cơ quan thử nghiệm : Trung tâm kiểm nghiệm an toàn dượcphẩm, phòng nghiên cứu Yoshimi)

Dựa trên kết quả thử nghiệm trên, nhận định rằng nguyên liệu Calciumnung thiên nhiên không có khả năng gây đột biến gen đối với vi khuẩn(âm tính) trong điều kiện của thử nghiệm này.