lSSN

Japanese

第11巻

Joumalof

Tropical Medicine and Hygiene

第1号

昭和58年、3月15日

内原O304−2146

容著
パラテニックホストを持つ肺吸虫（英文）………・……一・……・……一t一・………波部 重久 1−6、B耀8毎ρ4hσn8 の酵素組織化学 L蚊（・4β48s磁gy，切内発育幼虫における酸性フォスファターゼ活性の局在（英文）……・・…………・…木村 英作，・中島 康雄，青木 克己 7」15
イ ンドネシア，北スマトラ州，アサハン地域におけるマラリア疫学調査（英文）・・神原廣二，Panjaitan，W．17−24

オンコセルカ症患者の仔虫密度とブユによる仔虫とり込み量の日周パターンぐ英文）・

橋口 義久，川端真人，高岡正敏，OttoFloresC．25−33

蛋白質，カロリー欠乏症候群におけるTr綱胞の増加について（英文）・開場 慶博・小島 滋恒・門井 伸暁・・田沼

悟・大原 徳明 35−39

学術記録
日本熱帯医学会九州支部第6回大会講演要旨一f……一・・41−54

投稿規程…・…

55−56

会員名簿一…一…一……一……………………・』…・一∵…

57−87

誌旺

P︑

会M
工
医工
熱肌

日狛

日本熱帯医学会

Japan . J. Trop. Med. Hyg., Vol . l l, No. l 1983, pp. 1‑6

1

A NEWLY RECOGNIZED PARATENIC HOST
OF PARAGONIMUS SPP.
SHIGEHISA HABE
Received for phblication October 2 l 982

Abstract: The possibility of albino rats as the hosts of 3 species of the lung‑flukes isexperimentally detected. Rats were each orally infected with I O to 20 metacercariae of thebisexual type of P. westermani. P. mlyazakii and P. mexicanus and were necropsied 60 to 1 50
days after infection. All ofthe worms of P. westermani and a part of P. mlyazakii (2 1 /0) andP. mexicanus (740/0) were found in the muscles of the rats. They were morphologicallysimilar to excysted metacercariae and contained many excretory granules in their bladder.
Worms of the youngest stage selected from them were fed to dogs and cat and 37.3‑66.70/0
ofworms were recovered from the animals after 103‑202 days. These worms were parasitic
within cysts in the lungs and most of them were fully mature. Thus, it was revealed thatthe bisexual type of P. westermani. P. rmjazakii and P. mexicanus also take the rat as theirparatenic hosts.

INTRODUCTION
It was revealed that the infection with the parthenogenetic type of P. westermani

was caused by ingesting not only its metacercariae parasitic in fresh‑water crabs
and/or crayflsh but immature worms living in muscles of the paratenic hosts (Miyazaki
and Habe, 1976; Habe, 1978). Especially, the Japanese wild boar, Sus scrofa leu‑

comystax, was a very important natural paratenic host of human paragonimiasis
westermani in the southern part of Kyushu District (Miyazaki et al.. 1 978a ; Tokudome
et al.. 1 977). Other species of Paragonimus, however, were not investigated on theirparatenic hosts, and the present study attempt to some species of Paragonimus on thisproblem.

MATERIALS AND METHODSThe used species of Paragonimus in the present study were the bisexual type of

P. westermani (Kerbert, 1878), P. mlyazakii Kamo et al., 1961 and P. mexicanus
Miyazaki and Ishii, 1 968. The metacercariae of P. westermani obtained from a
potamonid crab, Geothelphusa dehaani, collected at Nishiki‑mura, Akita Prefecture,
Japan. Those of P. rmjazakii were obtained from G. dehaani collected at Rokuroshi,

lwakuni city, Yamaguchi Prefecture, Japan, and of P. mexicanus, from Pseudo‑
thelphusa chilensis collected at Tabacal in the Condebamba Valley, Department ofCajamaruca, Peru. From 10 to 20 metacercariae of those species were infected tofemale albino rats of the wistar strain weighing about 200 g (Table I ) . They were
Department ofParasitology, School of Medicine Fukuoka University, Fukuoka 814‑01 Japan2administered by oral infection to the experimental animals with water using an in‑jection syringe with a slender vinyl tube. These rats were necropsied 60 to 1 50 days
after infection (Table I ) . Their visceral organs and cavities were examined forlung fluke infection and the worms were recovered. After being isolated from eachanimal, the lung, Iiver and muscle of the whole body were cut into slices 3 to 4 mm

thick and kept in Ringer's solution at 37‑38 C. Worms came out of them spon‑taneously and were collected in the solution after 6 to 8 hours. The juvenile worms
recovered from the muscle of the rats were orally given to 3 dogs and a cat, which
are known to be favorable hosts of those fluke, and these animals were necropsied
l03 to 202 days postinfection (Table 2). The worms recovered were flxed in 700/0

alcohol, stained with carmine and mounted with permount. Morphological obser‑
vations were made on these mounted specimens.

RESULTS
I. Developments and parasitic sites of Paragonimus in rat
The bisexual type of P. westermani

Five rats were each infected with I O to 1 5 metacercariae and were necropsied
1 26 and 1 50 days after infection. All of the rats harbored 1‑9 worms in the muscle.

All of the 25 worms removed from the muscle were immature and were morphologi‑
cally same as the metacercariae. Occasionally a small stylet was still visible in
the oral sucker and excretory granules were seen in the bladder. No worms recoveredfrom other parts of all of the animals except the muscle and no abnormal sign was
found in their visceral organs.

P. uajazakii

Six rats were each infected with 20 metacercariae and were necropsied 100 days
after infection. A summary of observations is shown in Table I . A total of 57 worms(47.50/0) was recovered and 20 of them were found from the cysts in the lung. Cysts

were also formed in the livers (Nos. 2, 3, 4 and 5) and I I worms were recoveredfrom them and 2 worms were found to be migrating in the livers of both rats, Nos. 2
and 4. There was each one worm cyst in the renal adipose tissue and on the dia‑phragm and each contained 2 worms. Moreover, 6 worms were found in thecavities and hypoderm. From the muscle of these animals were recovered 1 2 worms.
Fifteen worms in all from capsules in the liver, kidney and diaphragm and 6 fromcysts in the lung and a worm from the pleural cavity were fully mature. Developmentof the remaining 1 7 worms from the lung and pleural cavity and 5 worms in the
hypoderm, Iiver and abdominal cavity were fairly advanced, but were still young.
The 12 worms in the muscle of 4 rats (Nos. 3, 4, 5 and 6) and I worm in the liver(No. 2) were very young and their morphology was similar to that of excysted meta‑cercariae.

P. mexicanus

Five rats were each infected with I O metacercariae and were necropsied 60 days

3

Table I Distribution of worms of the bisexual type of P. westermani, P. mlyazakii and
P. mexicanus in rats after infection with its metacercariae (Mc.)

No. of worms recovered from

Days No. ofRat. ofm‑No. ofLung fluke No. Mc. .

worms
re‑

grven fection covered

ab‑ cyst

muscle dominal Pleural in others
cavity cavity lung

126

9

9*

O

O

o

o

lO

126

8

8*

O

o

O

o

P westermani 3

10

1 50

4

o

o

o

o

4

10

150

3

4*
3*

o

O

15

l 50

l*

o

o
o

o

5

o

o

N

55

1

20
20

1 OO

. 34
P. mlyazaku

20

5

1

lO

2

2

6

25

25 (100"/･)

9

O

o

2

l OO

7

O

o

o

3

4 (1)*

1 OO

6

2*

o

o

2

2

20

l OO

12

4*

o

o

7

20
20

l OO

13

5*

o

2

6

l OO

lO

l*

57

12 (21'/*) 1

4

20 20

N 120

O

O

6

l

10

6*

o

o

o

O

10

60
60

6

2

4

o

o

2

o

P mexlcanus 3

lO

60

5

2*
5*

o

o

o

o

4

10

60

2*

o

o

5

lO

60

4
4

1*

3*

o

o

o

N

50

23

17 (74･/ ) 2

o

4

O

* The worms are similar morphology to excysted Mc.

after infection. All of the rats harbored I to 6 worms in the muscle. All of the

1 7 worms removed from the muscle and 2 worms from abdominal cavity (No. 4)
were very young and morphologically similar to excysted metacercariae. Occa‑
sionally a stylet was still visible in the oral sucker and pink granules were observedin the body parenchyma of the worms. One (Nos. l, 4 and 5) or 2 (No. 2) worm
cysts were found in the lung of these animals and they contained numerous eggs or
1 to 2 dead or almost dead worms.
II. Oral infection of dog and cat with juvenile flukes

The results of experimental infection of dog and cat with the different speciesof juvenile flukes which were collected from rat in the muscle are summarized inTable 2. Worm recovery rates of 2 dogs infected with P. westermani (bisexual type)were 53.30/0 (8/15) and 37.30/0 (3/8) which were examined at 103 and 202 days after

infection, respectively. Ten worms from 5 worm cysts in the lungs were fully
mature. A worm from the pleural cavity was less developed and without eggs in

4

the uterus. Worm recovery rate of a dog infected with P. mlyazakii was 58.30/0(7/12) when it was examined at 132 days postexposure. Six worms from 3 worm
cysts in the lung were fully mature but a worm from the pleural cavity was lessdeveloped. Worm recovery rate of a cat infected with P. mexicanus was 66.70/0(l0/16) when it was examined 103 days postexposure. A11 of the 10worms re‑covered from 5 worm cysts in the lung were fully mature. The prepatent period
was 36 days after infection in the cat.
Table 2 Experimental infection to dogs or cat with immature worms of the bisexual
type of P. westermani. P. mlyazakii and P. mexicanus removed from rats

No. of worms

Host Days ofI.ung fluke
animal infection recovered/fed ( o/o )No. of worms recovered frommuscle Pleural cyst incavity lungP. westermani dog

1 03

8/15 (53.3)

o

O

8*

d og

202

318 (37.3)

o

1

2*

P. mlyazakii

dog

132

7/12 (58.3)

o

l

6*

P. mexicanus

cat

l 03

l0/16 (66.7)

o

o

lO*

* mature worms.

DISCUSSION

Paragonimiasis had been fairly prevalent in Japan but it is rare nowadays.
Norimatsu et al. ( 1 975) found 1 36 persons of pulmonary paragonimiasis, who werepositive for the eggs of the parthenogenetic type of P. westermani, in Aira‑gun, Kago‑
shima Prefecture. Most of the patients, however, did not eat fresh‑water crabs and,moreover, the crabs distributed there (Eriocheir japonicus and Geothelphusa dehaani)

were mostly negative for metacercariae of the lung fluke. They ate sliced raw

flesh of wild boars. Miyazaki and Habe (1976) and Habe (1978) revealed byexperiments that the lung fluke did not mature in the wild boar. Almost all worms

were recovered from its muscle and were immature at 123 and 213 days post‑
infection. Most of these immature worms completely matured 64 and 80 days after
feeding to dogs. These results suggested that the wild boar could be a new sourseof human infection with the lung fluke. This conclusion was supported by the
results of an epidemiological study (Tokudome et al., 1977). Miyazaki et al. (1978a)examined muscles of 3 wild boars captured in the endemic area and found immature
P. westermani (parthenogenetic type) from 2 of them. It has been clear by exper‑
iments that the wild boar, pig, rat, mouse, hamster, guinea pig, rabbit, hen (Habe,
1978) and monkey (Miyazaki et al., 1978b; Habe, 1982) could play a role as theparatenic host of this fluke. It has become clear also that the bisexual type of
P. westermani. P. mlyazakii and P. mexicanus take the rat as a paratenic host as theparthenogenetic type of P. westermani and sometimes the rat serves as the final host of

P. mexicanus in the present studies. Such juvenile worm of P. westermani (bisexualtype) as collected from the muscle of the rat in the present experiments was already5

found from mouse, hamster, monkey, pig (Shibahara, 1981) and guinea pig (Habe,
unpublished) . The juvenile worm of P. mlyazakii was collected from mouse (Yoshida,1970), rabbit, hamster and guinea pig (Habe, 1979). Consequently, these speciesof Paragonimus have many paratenic hosts and this mode of infection may commonly

take place among animals in nature. Man can be infected with some species ofParagonimus other than the parthenogenetic type of P. westermani by eating raw or
undercooked meat of mammals which would serve as their paratenic hosts.

ACKNOWLEDGEMENTS
I would like to express my gratitude to Prof. T. Kifune for reviewing the mau‑script. I also express my thanks to Prof. I. Miyazaki who planned and led thescientific expedition to Peru to which I participated.

REFERENCES
1) Habe, S: (1978) : Experimental studies on the mode of human infection with the lung fluke,
Paragonimus westermani (Kerbert, 1878), Jap. J. Parasit., 27, 261‑292 (In Japanese with English
abstract)

2) Habe, S. ( 1979) : Experimental infection of a variety of animals with Paragonimus ohirai andP. mlyazakii, Jap. J. Parasit., 28 (Suppl.), 82 (InJapanese)

3) Habe, S. ( 1982) : Experimental infection of crab‑eating monkey with the parthenogenetic typeofP. westermani and P. w.filipinus. Med. Bull. Fukuoka Univ., 9, 329‑333

4) Miyazaki, I. and Habe, S. (1976) : A newly recognized mode of human infection with lung
fluke, Paragonimus westermani (Kerbert, 1878), J. Parasit., 62, 646‑648

5) Miyazaki, I., Terasaki, K. and lwata, K. ( 1978a) : Natural infection of muscle of wild boars
in Japan by immature Paragonimus westermani (Kerbert, 1878), J. Parasit., 64, 559‑560
6) Miyazaki, I., Terasaki, K. and lwata, K. ( 1978b) : [Experimental infection to the Japanesemonkey, Macaca .fuscata, with larval Paragonimus pulmonalis (Baelz, 1880)], Jap. Med. J., 2843,
43 :6 (In Japanese)

7) Norimatsu, K., Arikawa, K. and lkehata, M. ( 1975) : [Pulmonary paragonimiasis in thesedays], Rinsho to Kenkyu, 52, 1046‑1051 (InJapanese)8) Shibahara, T. (1981) : On the lung fiuke, Paragonimus westermani, found from the freshwater
crab, Geothelphusa dehaani, in Tajima district, Hyogo Prefecture, Japan (II) A survey of the natural

final host and experimental infections of various animals with metacercariae, Jap. J. Parasit.,

30 (Suppl.), 61 (InJapanese)9) Tokudome, I., Nishizumi, M., Ikeda, M., Kono, S., Jimi, S., Nagayama, J., Kuratsune, M.,
Habe, S., Hayashi, E. and Hirose, H. (1977) : Epidemiologic study on a new mode of infectionof Paragonimiasis westermani, Jap. J. Publ. Hlth., 24, 3 1‑36 (In Japanese with English summary)10) Yoshida, T. (1970) : Studies on experimental infection with Paragonimus mlyazakii to small labo‑
ratory animals, Jap. J. Parasit., 19, 76‑91 (InJapanese with English abstract)6

パラテニックホストを持つ肺吸虫
波

部

重

久

ウェステルマン肺吸虫単為生殖型の終宿主への感染は，カニ類に寄生するメタセルカリアを経口的に摂取する他に，パラテニックホストになる哺乳類や鳥類を介しても成立する。特に南九州では，本虫のパラテニックホストであるイノシシの生食による患者が多発し，疫学上きわめて重要な間題となっている。そこで今回，他種肺吸虫について，このような感染経路があるかをみた。ラットにウェ

ステルマン肺吸虫有性生殖型，宮崎肺吸虫およびメキシコ肺吸虫のメタセルカリアを10あるいは20個

ずっ感染させ，60〜150日の間に剖検した。ウェステルマン肺吸虫は回収虫体のすべてが筋肉から，

メキシコ肺吸虫と宮崎肺吸虫は，回収虫体の74および2％が筋肉からであった。これらの虫体は，すべてメタセルカリアと類似した形態で，ほとんど発育していなかった。これらの幼若虫体を好適宿主であるイヌあるいはネコに経口投与したところ，その37．3〜66．7％が感染し，肺に虫嚢を形成し，成熟した。この実験でウェステルマン肺吸虫有性生殖型，宮崎肺吸虫およびメキシコ肺吸虫が，パラテ
ニックホストを介する感染経路を持つことが明らかになった。

福岡大学医学部寄生虫学教室

Japan. J. Trop. Med. Hyg., Vol. I l, No. 1 1983 pp 7 15

7ENZYME HISTOCHEMISTRY OF BRUGIA PAHANGI
1 . Localization of Acid Phosphatase Activity in Developing Larvae in
Mosquito (Aedes aegypti)

EISAKU KIMURA, YASUO NAKAJIMAI AND YOSHIKI AOKI
Received for publication October 15 1982

Abstract: Histochemical localization of acid phosphatase was reported on the
microfilariae isolated from the peripheral blood of the dog and their developing larvae inmosquitoes in comparison with the localization in those from the jird's peritoneal cavity
and their larvae. Whole body of microfilariae stained red with dark red excretory vesicle
and anal vesicle. The sheaths were negative in those from the dog, while positive in mostmicrofilariae from the jird. During the first two days after the intake unstained larvae
were frequently found in the mosquitoes fed jird microfilariae in contrast to those fed on

the dog. From the third day on, positive developing intestine was observed. After the
first molt the esophagus appeared as a red double line. On the 7th day strong activity

was found at the esophagus, intestine, developing anus and amphids, while the nerve
ring was negative. Positive reaction was detected at the hypodermis and anus of infec‑
tive larvae.

INTRODUCTION
A considerable amount of research has been reported on the acid phosphataseactivity in parasitic helminths. The enzyme is supposed to play an important rolein the absorption of nutrients and excretion of metabolites by the parasites. Reportsthat two species of microfllariae which could hardly be differentiated from each otherby the morphological characteristics (Aoki et al., 1 976) were easily classifled by thedifferent localization of acid phosphatase (Chalifoux and Hunt, 1971; Redington
et al., 1 975) gave a new light on this enzyme from a stand point of taxonomic impor‑tance.

When the infective larvae of Brugia pahangi were inoculated into the peritoneal
cavity of the jird (Meriones unguiculatus) , adults and microfilariae were recovered fromthe peritoneal cavity (McCall et al., 1973). The adults and microfilariae localized
in the peritoneal cavity seem to follow an aberrant mode of development, although
the microfilariae from the peritoneal cavity have been proved to reach stage 111(i.e. infective stage) in mosquitoes as those from the peripheral blood of the dog which

is a normal host of B, pahangi (Chuang et al., 1979).

In this paper, a report is made on the localization of acid phosphatase in thedeveloping stages of B. pahangi from the microfilariae in the canine pepipheral blood
Department of Parasitology, Institute for Tropical Medicine, Nagasaki Univ rsity.
address : Department of Parasitology, Yamanashi Medical College.

l . Present

8

to the infective larvae in mosquitoes. Also described is the localization of the same
enzyme in B, pahangi microfilariae produced in the peritoneal cavity of the jird andtheir developing larval stages in mosquitoes in comparison with those from the dog.

MATERIALS AND METHODS
The microfilariae frorn the canine peripheral blood and those from the peritoneal

cavity of the jird were smeared on coverslips. The mosquitoes used were Liverpool
strain of Aedes aegypti maintained in our laboratory. A group of mosquitoes were
fed on the infected dog with B. pahangi microfilaremia for about 1 5 minutes. Anothergroup of mosquitoes were fed on the artificial feeding apparatus in which microfilariae
from the peritoneal cavity of the jird were suspended in Dulbecco's phosphate‑buffured

saline without calcium or magnesium added with adenosine 5'triphosphate, 10‑3 M(Chuang et al., 1979). The mosquitoes from each group were then dissected in adrop ofphysiological saline on cover slips 2 hours and every 24 hours after the infect‑

ing feed. The preparations were then air‑dried and stored at ‑20 C until the use.
The stored preparations were used within 2 weeks with no recognizable decrease of
the enzyme activity. Frozen sections of thoracic muscles of infected mosquitoes weremade on 7th, 9th and I Ith day after the infecting feed.
For the demonstration of acid phosphatase activity, the technique of Barka wasused following the description by Cha].ifoux and Hunt (1971), in which naphthol
AS‑BI phosphate was a substrate and pararosanilin was a capturing agent. The
pH of incubation medium was adjusted to 5.0. The time of incubation was from 60
to 90 minutes at 37 C. Localization of acid phosphatase was recognized as red todark red precipitations of azo dye, depending on the strength of the reaction. Stained

frozen sections were mounted according to the method of Wharton (1957).
Some preparations were processed without the substrate as a control. Sodium
fluoride, l0‑2 M was also used as a specific inhibitor of the enzyme.

RESULTS
I. Direct Feeding on the Infected Dog
The whole body of microfilaria in the peripheral blood was stained red withtwo distinct dark red spots, excretory vesicle and anal vesicle (Figure I ) . The inner

body showed slightly weaker reaction in most of the microfilariae. With a few ex‑
ceptions, microfilarial sheaths were negative for acid phosphatase. Occasionallythe enzyme activity was recognized at the regions of amphids and phasmids.
Two hours after feeding, in the stomach of the mosquito, microfilariae showed
the same staining pattern as in the peripheral blood.
Exsheathed first stage larvae were becoming shorter and thicker in the thoracic
muscles of the mosquito 24 hours after feeding. The red excretory vesicle and analvesicle were clearly seen in a light red tint of the larval body surface (Figure 2). On
the second day, the strongest red reaction was found at the anal vesicle (Figure 3).
In the light pink col̲or of larval surface, the excretory vesicle became indistinguishable

9

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{==

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‑

Figure I The microfilaria i'rom dog peripheral blood stained red with dark red excrctory vesicle andanal veslcle, Note the negative sheath,
Figure 2 Body surface of exsheathed Ist stage larva stained light red. Excretory and anal vesicles
showed strong reaction,
Figure 3 Reaction of anal vesicle became sttonger while that of excrett)ry vesicle dec.re LSed ou 2ndday.
Figure 4 Anal vesicle stained deep red, while excretary vesicle was indistinct in 3rd day larva,.
Note the positiv<e developing intestine.

Figurc 5 The paaitive intestine reached anal vesicle ai'ter Ist molt. Notc the weak reaction at
buccal cavity and esophagus.
Figure 6 Vague red staining was sometimes f'ound at ex(;retory vesicle ()n 4th and 5th day.

in about 40 o o of the larvae

The larva became shortest on the third day with increasing redness on the bodysurface. The anal. vesicle was prominent, with strong red color, but the exc,retory

10

vesicle was indistinct. Around at this time a dark red linear spot, which must be adeveloping intestine, first appeared in the region formerly occupied by the inner bodyand gradually grew backward to the anal vesicle (Figure 4).
During the 4th and the 5th day of development, when the first molt occurred,
the red intestine reached the anal vesicle. Buccal cavity began to show weak activityof acid phosphatase and then esophagus appeared as a light red double line (Figure5). In this stage, a vague red dot was found at the place of excretory vesicle in somelarvae (Figure 6).
After the sixth day, when all larvae might be in the second stage, a daily rapid

growth in larval size with strong phosphatase activity on the body surface began to
disturb close observation of the internal structures in most of whole body preparations(Figures 7, 8).

Frozen sections of the 7th and 9th day larvae showed strong enzyme activity
in the esophagus, intestinal cells and developing anus (Figure 9). The amphids wereclearly positive (Figure I O), but nerve ring was negative. We failed to find thephasmids in the sections.
At the I Oth day, whole body of third stage larva was deep red and the internal
structures eluded observation, but ano‑rectal area was still prominent with a strong
enzyme activity, especially at the anterior wall of the rectum (Figure 1 1 ) .

A mature infective larva (1 1 day old) had an open anus and whole body was
evenly stained in deep red in whole body preparation. Frozen section of this stage
showed positive enzyme reaction at main bulky parts of hypodermis which constitutelateral, dorsal and ventral cords, and very week reaction in muscle tissues (Figure 1 2).
Cuticle seemed to be negative, although it was not easy to distinguish cuticle and its

underlying hypodermis under light‑microscopical examination.
III. Artificial Feeding of Microfilariae from Peritoneal Cavity
The microfilariae from the peritoneal cavity of the jird were stained more clearly
than those in the peripheral blood of the dog. The whole body except the inner bodywas pure red and the two vesicles were distinguished as dark red dots. Interestingly,
most microfilarial sheaths (about 800/0) were stained to variable extent from thinpink to strong red. Occasionally red small granules and/or red amorphous masses
were observed in the space between the microfilaria and its sheath (Figure 1 3).
Acid phosphatase staining of the filarial larvae during the first two days after
the infecting feed with artificial apparatus was unstable. Some larvae were stained

fairly well but others were negative or poorly stained even at excretory and analvesicles. After the second day, however, the enzyme activity of the larvae was foundto be almost the same as in the direct feeding on the dog.
Control slides without substrate were all negative. Sodium fluoride ( I 0‑2 M)
inhibited the reaction completely except a deep interior portion of anal region of third
stage larva in whole body preparations. Most probably it resulted from a cuticularbarrier against the penetration of the inhibitor.

11

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The positive esophagus and intestine were still viaible in early 2nd stage larva.

Internal structures except developing anus becam,e inviaible due to strong activity ofbody surface accompanied with rapid growth of 2nd stage larva in the whole body
preparation.
Note the strong reaction

Lt amphids, esophagus and intestinal cells in frozen sectionof 7th day larva.
Note the strongly poaitive amphids in fr02len section of 9th day larva.

Deep red stained whole body preparation of 10th day larva prevented observation ofinternal structures except strongly reacted ano‑rectal area.
Note the positive reaction at inte tinal cells as well as lateral, ventral and dorsal cords
in the cross ection of infective larva.

Figure 1 3

The microfilaria from jird peritoneal cavity stained well except the inner body. Notethe positive granulcs in the space bytween the positive sheath and the body,

12

DISCUSSION

Many studies have been reported on the distribution of phosphatases and thefunctional significance in parasitic helminths. In earlier days, Rogers (1947) foundalkaline phosphatase activity at intestinal cells of Ascaris lumbricoides and at cuticle ofMoniezia expansa, and supposed that the enzyme might have relationship with carbo‑
hydrate absorption by the parasites. Erasmus (1957) showed the existence of bothacid and alkaline phosphatases in Taenia pisiformis and related the enzymatic function
to an active transport of materials. Robinson (1961) studied alkaline phosphataseofSchistosoma mansoni and speculated the possibility ofcarbohydrate absorption throughcuticle. More recently, Parshad et al. (1977) showed the activities of phosphatases
in excretory system of several different kinds of parasites. Stood et al. (1977) recog‑
nized acid phosphatase activity in the cuticle and hypodermis of Haemonchus contortus

and considered that these are metabolically active sites. Maki and Yanagisawa( 1 979a) studied Angiostrongylus cantonensis electronmicroscopically and showed extra‑
lysosomal acid phosphatase which may suggest the transport of substances through the

cuticle. Although there are few reports which show clearly the definite function ofacid phosphatase in parasites, it is widely accepted that the enzyme plays an importantrole in absorbing or excreting substances through the mechanism of active transport.
From this view, the excretory and anal vesicles must be main places of metabolism
in B. pahangi microfilaria and the presence of acid phosphatase activity on the filarial
body surface may suggest a transport of substance through the cuticle, although we
could not clearly define the localization of the enzyme among the surface structures.
Interestingly, Redington et al. (1975) reported that the body surface of B. malayi
showed negative reaction for the enzyme.
In the early first stage, anal vesicle seems to be the most active place of metabo‑lism, whereas the enzyme activity of excretory vesicle and body surface decreased
rapidly. In the late first stage, partial development of buccal cavity, esophagus andintestine is observed (Laurence and Simpson, 1971), which will be followed by func‑

tional maturation on the 6th and the 7th day, although it may not be complete at
this time. This is partially supported by the present findings and our observationthat acetylcholinesterase activity appears in glandular region of esophagus from the
6th day of development (in preparation), and also by some electronmicroscopicalstudies by Buckett et al. (1970) and Tongu et al. (1978), who showed mitochondria ofmosquito host in the larval intestine of B. pahangi on the 6th and 7th day, respectively.
In the third stage larvae, the esophago‑intestinal system is the positive structureof the enzyme as in the earlier stages, indicating its absorptive function. Functional

importance of enzyrne activity in hypodermal cells has been discussed by many
authors. It may work for transport of substance through the cuticle or production
and maintenance of the cuticle (Dusanic, 1959; Sood, 1977). Recently Maki and
Yanagisawa (1979b, 1980a, b, c) reported that gastro‑intestinal nematodes showed
high enzymic activity in the intestine and low in the body wall, and that tissue nema‑
todes including filarial worms showed high activity in the body wall. They speculated

that the body wall of tissue nematodes may play a role comparable to that of the13intestine of the gastro‑intestinal nematodes.

Microfilariae from the peritoneal cavity of Mongolian jird showed a character‑istic staining pattern of the phosphatase. It is very interesting that most of the fllarial

sheaths were stained to variable extent from pink to deep red, making a clear contrast

to microfilariae from the peripheral blood of the dog. Acid phosphatase was also
found in the space between the microfllaria and its sheath in a shape of small granules

and/or amorphous masses. Omar ( 1977) studied the localization of acid phosphataseactivity in the larval stages of B. pahangi in Aedes togoi and stressed the positive reactionof the enzyme in microfilarial sheath. But Redington et al. (1975) did not mention
the acid phosphatase activity in the sheath ofB. pahangi, in spite of the same technique

as of Omar. Our present results made these conflicting reports more complicating,although the substrate used in our study was different from those of Redington andOmar. Our suggestion is that environmental factors may influence the metabolismof parasites and change the distribution or intensity of enzyme activity even in thesame species. Moore and Halton (1976) reported a pronounced change in acid phos‑
phatase distribution and its isozyme pattern between starved and nourished Fasciola
hepatica. Edwards et al. (1971) and Pavlov et al. (1975) also reported the influence of

host immunity on the parasitic acid phosphatase. At the same time, we have to keep
in mind a fact that microfilariae in the peritoneal cavity are a mixture of young andold microfllariae (Chuang et al., 1979). Aging, if any, may cause changes in staining
pattern of the enzyme. In case of artificial feeding, many larvae were stained poorly
during the first two days after feeding. The finding may also be related to the factthat the artificial feeding produces less infective larvae than the direct feeding (Chuang
et al., 1979).

Omar (1977) observed acid phosphatase activity at the phasmids and the nerve
ring of B. pahan.qi larvae on the 6th and 7th day. Alkaline phosphatase was also foundto be positive in the nerve ganglion of Fasciola hepatica (Humiczewska, 1 975) and thenerve cord of Ligula intestinalis (Arme, 1 966). However, we could not detect any
positive reaction at the nerve ring, although the amphids and phasmids were positivein microfilarial stage and amphids were stained red on the 7th and 9th day larvae.

ACKNOWLEDGMENT
Grateful acknowledgment is made to Dr. D. Katamine for his constant interest
and guidance in this investigation. Thanks are tendered to Mrs. T. Miyazaki for
raising vector mosquitoes.

REFERENCESl) Aoki, Y., Nakajima, Y. and Katamine, D. (1976) : Studies on Malayan filariasis in Che‑ju Is.,
Korea. 3. Microfilarial surface architecture of Brugia malayi (Che‑ju strain) in comparison withthat of Brugia pahangi. Jap. J. Trop. Med. Hyg., 4, 129‑137
2) Arme, C. (1966) : Histochemical and biochemical studies on some enzymes of Ligula intestinalis(Cestoda: Pseudophyllidea), J. Parasit., 52, 63‑68
3) Beckett, E. B. and Boothroyd, B. (1970) : Mode ofnutrition ofthe larvae of the filarial nematode
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8) Erasmus, D. A. ( 1957) : Studies on phosphatase system of cestodes I. Studies on Taenia
pistformis (cysticercus and adult), Parasitology, 47, 70‑80

9) Humiczewska, M. ( 1975) : Specific and non‑specific phosphatases in the miracidium of Fasciola

hepatica L., Folia Histochem. Cytochem., 13, 231‑236
10) Laurence, B. R. and Simpson, M. G. (1971) : The microfilaria ofBrugia : A flrst stage nematodelarva. J. Helminth, 14, 23‑40
1 1) Maki, J. and Yanagisawa, T. ( 1979a) : Ultrastructural localization ofphosphatase(s) in the bodywall of Angiostron.gylus cantonesis. Jap. J. Parasit., 28, 323‑327

12) Maki, J. and Yanagisawa, T. ( 1979b) : Acid phosphatase activity demostrated by intact
Angiostrongylus cantonensis with special reference to its function, Parasitology, 79, 41 7‑423l 3) Maki, J. and Yanagisawa, T. ( 1980a) : Acid phosphatase activity demonstrated in thenematodes, Dirofilaria immitis and Angiostrongylus cantonensis with special reference to the charactersand distribution, Parasitology, 80, 23‑38
14) Maki, J. and Yanagisawa, T. (1980b) : Histochemical studies on acid phosphat.ase of the bodywall and intestine of adult filarial worms in comparison with that of other parasitic nematodes,

J. Helminth., 54, 39 :7

15) Maki, J. and Yanagisawa, T. (1980c) : A comparison of the sites of acid phosphatase activity
in an adu]t filaria, Setaria sp. and in some gastrointestinal nematodes, Parasitology, 81, 603‑608

16) Moore, M. N. and Halton, D. W. ( 1976) : Fasciola hepatica : Histochemical observations onjuveniles and adults and the cytopathological changes induced in infected mouse liver, Exp.
Parasit., 40, 2 12‑224l 7) Omar, M. S. ( 1977) : Distribution of acid phosphatase activity in the larval stages of Wuchereriabancrofti. Brugia malayi. B. pahangi and Dirofilaria immitis in the mosquito, Tropenmed. Parasit.,

28, 100‑108

18) Parshad. V. R. and Guraya, S. S. (1977) : Comparative histochemical observations on theexcretory system of helminth parasites. Z. Parasitenk., 52, 81‑89

19) Pavlov, A. V. and Chesnokova. T. T. ( 1975) : The effect of host immunity on the activity ofnon‑specific phosphomonoesterases in Ascaridia galli. ‑from Helminthological Abstract, SeriesA, 1977, 46 (4), 354

20) Redington, B. G., Montgomery, C. A., Jervis, H. R. and Hockmeyer, W. T. ( 1975) : His‑
tochemical differentiation of the microfllariae of Brugia pahangi and sub‑periodic Brugia malayi,

Ann. Trop. Med. Parasit., 69, 489‑492
2 l) Robinson, D. L. H. ( 1961) : Phosphatases in Schistosoma mansoni, Nature, 191, 473‑474
22) Rogers, W. P. ( 1947) : Histological distribution of alkaline phosphatase in helminth parasites

Nature, 159, 37 t375
23) Sood, M. L. and Kalra, S. ( 1977): Histochemical studies on the body wall of nematodes :Haemonchus contortus (Rud, 1803) and Xiphinema insigne (Loos, 1949), Z. Parasitenk., 51, 265‑273

24) Tongu, Y., Vincent. A. L. and Ash, L. R. (1978): The ultrastructure of early larval mor‑
phogenesis in Brugia pahangi (Nematoda : Filarioidea), Jap. J. Parasit., 27, 245‑260

25) Wharton, R. H. (1957) : A simple method of mounting and preserving filarial larvae, Bull.
Wld Hlth Org, 20, 729‑730

15β耀g如ραhσngiの酵素組織化学
1．蚊（・4θ48sαθ8塑紛内発育幼虫における酸性フォスファターゼ活性の局在木村英作・中島 康雄1・青木 克己

イヌ末梢血中ならびにスナネズミ腹腔中のミクロフィラリアと，それらの蚊体内で発育中の幼虫について，酸性フォスファターゼの局在を組織化学的に比較した。ミクロフィラリアは全体が赤く染まり，excretory

vesicleとanal vesicleが暗赤色を呈する。イヌのミクロフィラリアでは鞘は陰性であるのに対し，スナネズミのものは大部分が陽性である。イヌを吸血した蚊とは対照的に，スナネズ

ミのミクロフィラリアを摂取した蚊では，最初の2日間に頻回に染色されない幼虫を認める。3日目
以降，陽性の発育中の腸管を見る。1回目の脱皮後に，食道は赤色の複線として見える。7日目に，食道，腸管，発育中の肛門，amphidは強い活性を示すが，神経輪は陰性である。感染幼虫の角皮下層と肛門に陽性反応を認める。

長崎大学熱帯医学研究所寄生虫学部門

1現所属：山梨医科大学寄生虫学教室

Japan. J. Trop. Med. Hyg Vol I I No I 1983 pp 17 24

17

THE EPIDEMIOLOGICAL SURVEY OF MALARIA IN ASAHANDISTRICT, NORTH SUMATRA, INDONESIAHIROJI KANBARA* AND W. PANJAITAN **Received for publication November 5 1982

Abstract: The blood and spleen examination for malaria was carried out in six
villages (Desa) of Asahan district (Kabupaten), North Sumatra from February 1980 toMarch 1981. In general, parasite rate proved to be low (average 2.00/0) in this area andboth species of Plasmodium vivax and P. falciparum were detected. Besides this, interesting

aspects of malaria endemic in this area were revealed. First, positive cases were foundonly in four villages bordering the sea, and, again, malaria endemic area was restricted toa few subvillages (Lorong) close to the coast in each village. Secondly the regular survey

perfomed in Lorong I and 11 of Desa Perupuk, one of six villages, at intervals of a month

showed that the active transmission of malaria took place during the dry season fromJanuary to July but the transmission became inactive during rainy season from August to
December. The role of Anopheles sundaicus, which was determined as a main vector, in thelimitation of endemic area and in the seasonal fluctuation of transmission was discussed.

INTRODUCTION
Since 1 977, the malaria epidemiological studies have been conducted in Asahan
district of the North Sumatra Province as one of the main activities in "The project

for the promotion of health in North Sumatra", the international cooperation
program between the republic of Indonesia and Japan.
The present survey was undertaken from February 1 980 to March 1 981 at three
Kecamatan (subdistricts) in Kabupaten (district) Asahan to determine the current
status and the epidemiological character of malaria. The entomological survey
was also carried out by K. Tanaka and T. Ikemoto at the same place and the sametime.

DESCRIPTION OF AREA
Six villages in three Kecamatan of Kabupaten Asahan were selected for thesurvey (Fig. I ) . They are situated on a plain and approximately 200 km southeastof Medan, the capital of North Sumatra, and the population of each village varies
from 2,000 to 6,000. Four villages border the Straits of Malacca and two villages
are 5 to 1 5 km far from the coast. Inhabitants of the former engage in fishing and* Department of Protozoology, Research Institute for Microbial Diseases, Osaka University,
Yamadaoka, Suita, Osaka 565, Japan** Communicable Disease Control, Provincial Health Service of North Sumatra, Jalan Prof., H. M.
Yamin SH, Medan, Indonesia

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Map of six villages for the survey in Kabupaten Asahan, North Sumatra
Province and results of blood examination for malaria parasite.

rice farming and inhabitants of the latter engage in rice farming. Rainfall patterns

take maximum precipitation from September to November and minimum in January
or February.

MATERIALS AND METHODS
I. General surveyl ) Blood specimens were obtained from finger tips of children aged O to 7 years.
Thick and thin smears were made onto respective microscope slides and dried in the

air. Thick smears were hemolyzed in distilled water after six hours drying andstained with Giemsa on the next day. Thin smears were flxed in methanol andstained with Giemsa on the next day.
2) Spleen palpation was applied to the same samples. When the number ofsamples was not enough, it was extended to children aged 8 to I O years.

II. Regular survey
At the Lorong (subvillage) I and 11 in Desa (village) Perupuk, one of six
villages where higher parasite rate was discovered in the preliminary survey, theregular blood examination of children aged O to 7 years was carried out at intervalsof one month from June 1 980 to March 1 981. Furthermore, parasite rate in other
Lorong was examined at a proper time.

19

RESULTSThe results of blood and spleen examination in six villages were shown on
Table I and Fig. I . Parasite positive cases of malaria were found in four villages,

namely Desa Perupuk, Desa Guntung, Desa Medang and Desa Sei Buah Keras,
all of which were located along the coast, but no case was found in other two villages,

Desa Limau Sundai and Desa Tanjung Muda which w re located apart from thecoast. Plasmodium vivax and P. falciparum were detected in three villages and only
P. vivax was found in one village. Spleen rate also showed high in Desa Perupuk

and Desa Guntung, where higher parasite rate was shown. The distribution of
positive cases in Desa Medang and Desa Guntung were shown on Fig. 2 and Fig. 3,
respectively. All positive cases of malaria parasites and spleen palpation were foundonly at the Lorong VIII facing the sea in Desa Medang, and mostly at the Lorong II
also close to the sea in Desa Guntung. Comparative studies of parasite rate by Lorongin Desa Perupuk clearly showed the relation between malaria prevalence and distancefrom the sea (Fig. 4, Table 2). As the inhabitants mainly live along the main road,the distance from the sea to each Lorong is approximately indicated by the distancefrom the sea to the main road passing there. High malaria prevalence was found in

Lorong I, II, 111, IV, and V, Iow in Lorong VII and X and none in Lorong IX,
XI and XII. Monthly fluctuation of parasite rate at the Lorong I and 11 showedthat parasite rate rapidly increased from June and reached to a peak in August,and thereafter sharply declined u'ntil January (Fig. 5). The decline from August
was more predominant in P. falciparum than in P. vivax. All the positive cases wereranged on a graph by their density of parasitemia and by the month when they were
examined (Fig. 6) to differenciate new infections (acute cases) from old ones (chronic
cases), based on the idea that new infection generally showed higher parasitemia!

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to the coast. NP: number of positive cases, NE : number
ofsamples examined, PR : parasite rate, L: Lorong.
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Figure 4

Map of Desa Perupuk. Comparison of parasite rate by Lorong.

Highparasite rate was found in some Lorong near the coast but none or low
parasite rate was found in Lorong apart from the sea. L : Lorong

than old one. New infections were dominant from June to August while old infec‑
tions were dominant from September to January. Again, new infections started
increase from February.

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6 7 8 9 10 11 12 1 2 3 4 5

1 980 1 981

Figure 5

Monthly fluctuation of parasite rate in Lorong I and 11 of

Desa Perupuk. Sharp rise from June to August and sharp

decline from September to January was shown. Total
parasite rate ( OO), P.falciparum (O O), P. vivax
x
).
The
data
of parasite rate on April and May(x
was gotten from Dr. H. Amano, the successor to the present
reporter.

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,a,

IO

x
eo

e
x

,,

,e

x

,,

J,

e
o

,,
,,

1,

K

,cle

J,

,c

Figure 6

X

e

o ,F

,,

x

,r

t

O

e

,,,

X

June Ju[y AUg Sept Ct Ov ec Jan Feb arch

1 980 1 981

Ranging of positive cases of malaria by parasite density and by month when examined.

P.falciparum (O), P, vivax ( x), mix infection (e).

22
Table 1

The results of blood and spleen examination in six villages of Asahan district

from February 1980 to November 1980

No exammed P vwax P. falciparum Parasrte Rate
Perupuk(Feb‑March)

217

13

Guntungl 12

3Medang

181

2

209

2

Spleen Rate

7.00/05. I olo

3.60/010.70/0Ol.lo/o2.80/0OOOo/o

1 .Oo/o

1 84

O

O

Oo/o

OO/o

Sei Bua Keras
(Nov)

279

2

1

l.lo//o0.40/0Guntung
(Oct)

370

2

5

l .90/0

Total

1,552

22

9

2.00/0(March‑Apr)
(Apr

Jun)

Tanjung Muda
( July‑Aug)

Limau Sundai(Sept)

Table 2Comparison of parasite rate by Lorong and by month in Desa Perupuk fromFebruary 1980 to March 1981

Lorong NumberI

Feb‑Mar
June
July
A ug

Sept

Oct

Nov
Dec
Jan
Feb

Mar

5/19
(26.3)
l 2/8 1XI
II 111IV V VI VII IX
X
Ojl5 2167
l 143

6136

(2.3)

(16.7)(O) (3.0)

XII
0128
(O)

7161

(14.8)( I I .4)

9/64

1 3149( 14. I )(26.9)

9/24

7131(37.5)(22.4)

1 1 /43

12/57

5163

1 4135(25.6)(21.1)(7.9)(40.0)

8144

l I /62

6127

1/52

(18.2)(17.7)(22.2)

(1.9)

6j55

10j53

0/60

( I 0.9)(18.9)

(O)

5/35

2 /42

12/58

(14.3)(4.8)(20.7)

0134

6/59

0184

(O)

(10.2)

(O)

0173
(O)

4147

8149

(8.5)

(16.3)

3 148
(6.3)

3139

3132

0/27

(7.7)

(9.4)

(O)

Each fraction shows number ofpositive cases!number of examined samples.
parenthesis shows parasite rate ( o/o ) 'A number in a

23

DISCUSSION
Recently, the malaria control project was begun in Asahan district, North Suma‑
tra by Indonesian Government, therefore the epidemiological condition of malaria
in this area is clarified gradually. Up to date, some reports on malaria in the Suma‑

tra island showed the absence of malaria in Bireuen and Takengon, Aceh Province(Stafford et al., 1976), and very low malaria parasite rate in West Sumatra (1 o/o) andin South Sumatra (20/0) (Carney et al., 1974, 1975). From these data, malaria
endemic was expected to be low in Asahan district, North Sumatra, and our results
confirmed this expectation in general. Besides this, some epidemiological char‑acteristics became clear. First, the malaria endemic area proved to be distributed
patchily along the coast and to be smaller than a village in extent. Tanaka andlkemoto carried out the entomological survey in the same area and pointed outthat Anopheles sundaicus, a suspected primary vector, was dominant among the man‑
biting anopheline mosquitoes in four villages where malaria positive cases were
found while A. sundaicus was not discovered in two villages where no malaria cases

were found. Furthermore, Ikemoto ( 1 982) performed the comparative study of
man‑hour density of A. sundaicus by Lorong in Desa Perupuk. His result was wellcorresponding to our result of parasite rate by Lorong (Fig. 4) . Accordingly weconcluded that malaria endemic in the survey area was restricted to the narrow
region close to the sea where A. sundaicus was able to breed. Secondly the malariatransmission proved to have seasonal fluctuation. It is known that the incubation
period in human varies from 6 to 25 days for P. falciparum and from 8 to 27 daysfor P. vivax and that the extrinsic phase of P. falciparum requires 1 1 days and that of

P. vivax. 8 days at temperature above 28 C. Considering these periods, the present
parasite rate is thought to be the reflection of the malaria transmission around amonth before. The parasite rate increased rapidly and new infections were dominantfrom June to August, whereas the parasite rate declined sharply and new infections
were rare from September to January (Figs. 5, 6). New infections again appeared

from February. These results m ant that the active malaria transmission took
place from May to July but declined from August. , During the rainy season from
August to December, the malaria transmission probably ceased but it recovered fromJanuary, the beginning of dry season, and became active thereafter ; that was con‑firmed by the raised parasite rate in following April and May (Amano, unpublisheddata). The more rapid decline of parasite rate in P. falciparum than that in P. vivax
is caused by its shorter clinical course. The seasonal fluctuation of parasite rate
was also corresponding to the seasonal fluctuation of the density and longevity ofA. sundaicus with nearly one month delay.

ACKNOWLEDGEMENT
We wish to express our gratitude to all the staff of malaria control section for
their technical cooperation and to all those in Indonesia who concern to the Asahan
health project. Furthermore, we wish to express our gratitude to all Japanese experts

24
丘）r

their

kind

cooperation．

REFERENCES
1）Camey，w・P・，Atmosoe両onoラs．，s勾idimanンH、andJoesoe￡A、（1974）：Intestinal
malariain

Sukamenati，Pasaman

Regency，Westparasites

and

Sumatra，Bull．Hlth．Studies Indonesia，2，61

2）camey，w・P・，Atmosoe司ono，s・，sajidiman，H、and Joesoe￡A．（1975）：Intestinal parasites
and malaria in Musi Banyu Asin and Ogan Komering Ulu Regencies，South Sumatra，Bull．
Hlth．Studies

Indonesia，3，53） Ikemoto，T．（1982）：Studies

principal
Teikyo4）

malaria

vectorin

Universityフ5（1），レ15

Staflbrd，E

E・，andontheacoastal（lnbionomics

areaof』nψh8」θ∬観伽o郷（Rodenwaldt，1925），the

of

North

SumatraナIndonesia，Medical

JoumalofJapanese）

Joesoe￡A．（1976）：

Intestinal

andTakengon，Aceh province，Sumatra，Indonesia，Southeast

blood

parasites

Asian

of

man

in

Bireuen

and

J．TroP．Med．Pub．Hlth．，7，518−522

インドネシア，北スマトラ州，アサハン地域におけるマラリア疫学調査
神原廣二1・PANJAITAN，W．2

この報告はインドネシア共和国と日本政府による「北スマトラ地域保健プロジェクト」の一員としてマラリア疫学調査を行った結果をまとめたものである。調査は1980年2月より1981年3月まで北ス

マトラ州アサハン県の6力村において行った。0−7歳までの乳幼児を対象として血液検査，脾触診を行った。またPerupuk村においては，2つの部落を選んで6月より翌年3月まで毎月同じ集団よりの定期血液検査を行った。結果全体としてはマラリア寄生率2％と低いものであった。検出されたマ
ラリアは熱帯熱と三日熱マラリアであり特に両者間の流行の差はない。ただこの調査を通じてこの地域に特徴的マラリア流行状況が明らかとなった。1つはこの地域のマラリア流行は海岸線に沿って存在し，しかも1つの村落内でも非常に海岸線に近接した小地域に限って行われている事である。もう1つは流行時期が乾期に限定される事である。寄生率の季節変動および個々の症例の原虫濃度による分類から，マラリア伝播は1月または2月頃より増加し始め，6−7月で最流行期を迎えるが，雨量の増加と共に減少して来る事が明らかとなった。この2つの特徴は池本，田中らによって調査された媒介蚊オngρhθZθ∬耽吻ic娚の生態的特徴によって十分説明された。

1大阪大学微生物病研究所・原虫学部門，2北スマトラ州衛生局

Japan. J. Trop. Med. Hyg., Vol. 1 1, No. 1 1983 pp 25 33

25

MICROFILARIAL DENSITY IN GUATEMALAN ONCHOCERCI‑ASIS PATIENT'S SKIN WITH SPECIAL REFERENCE TO THE

HOURLY INTAKE BY SIMULIUM OCHRACEUM*
YOSHIHISA HASHIGUCH11, MASATO KAWABATA2, MASATOSHI TAKAOKAAND OTTO FLORES C.4
Received for publication November 16 1982

Abstract: The present work was designed to assess the relationship between thehourly O. volvulus microfllarial density (mfd) in patient's skin and the hourly microfilarialintake by S. ochraceum. From two experiments employing 14 patients, it is suggested that
there may be a little elevation of mfd during the period from evening through mid‑night,

but not pronounced. The microfilarial intake by the fly revealed two peaks, one in themorning and the other in the afternoon. Thus, the pattern of microfilarial intake did notcorrelate with the present diurnal pattern ofmfd. The hourly intake was briefly discussed
in relation to the biting activity and the parous rates of S. ochraceum. This report is thefirst case dealing with the hourly microfilarial intake by the black fly. Further such in‑formation would be required for a better understanding of the transmission mechanism of

onchocerciasis in given endemic areas.

INTRODUCTION
The relationship between the microfilarial density in patient's skin and the hourly

intake of Onchocerca volvulus microfilariae by Simulium ochraceum seems to have par‑ticular importance in the transmission of onchocerciasis in endemic areas. Recently,

Campbell et al. ( 1 980) working with Guatemalan onchocerciasis, stated that anearly linear relationship was found between the mean skin mfd and the mean
microfilarial uptake by S. ochraceum performing examination in the morning hours.
Hitherto, there have been many works on the dermal microfilarial density (mfd) of
onchocerciasis patients in connection with the biting activity of the vector, black
fly, in endemic areas of the disease. In examinations at various times of the day,correlations between the peak mfd and biting activities of the vectors have been foundin some geographical regions (Wegesa, 1966; Duke et al., 1967; Lartigue, 1967;
Thomas et al., 1973; Duke & Moore, 1974; Anderson et al.. 1975). However, Picq
andJardel (1973), and Tada and Figueroa (1974) observed no diurnal periodicity inthe mfd of O. volvulus in endemic areas of West Africa and Guatemala, respectively.
1 Department of Parasitology, Kochi Medical School, Nankoku City, Kochi 781‑5 1 , Japan.
2 Department of Parasitology, National Institute of Health, Tokyo 141, Japan.

3 Institute of Public Health in Saitama, Kami‑Okubo, Urawa 336, Japan.
4 National Service of Malaria Eradication, Ministry of Public Health. Guatemala, Guatemala, C. A.

* This study was supported by the Ministry of Public Health, Republic of Guatemala, and by theJapan International Cooperation Agency (JICA). (ORCOP series No. 63) .

26

Thus, the information on the diurnal periodicity of O. volvulus microfilariae inpatient's skin still remains uncertain. In the light of transmission of the disease,
however, it would be important to examine the intake of microfilariae by the vector,
at various times of the day. Nevertheless, so far, Iittle such an examination has
been carried out. The microfilariae of O. volvulus may be attracted by the vector,

black fly, when the flies are engorging on infected subjects (WHO, 1976; Hashi‑
guchi et al., 198la) ; the number of microfilariae ingested may be very high incomparison with the densities observed in the human skin. It is assumed that theattracting condition, if any, may be influenced by times of the day in the given
endemic area of onchocerciasis, since the black flies have a diurnal periodicity intheir biting activity having two distinct peaks, one in the early morning and the otherin the early afternoon (Collins et al., 1981).
The present paper deals with hourly densities of the microfilariae in Guatemalan

onchocerciasis patient's skin and hourly intake of O. volvulus microfilariae by S.
ochraceum .

MATERIALS AND METHODS
The study area

The study was carried out frorn June 1978 through March 1979 in the following
three coffee plantations with relatively high endemicity ; Finca Santa Momca lvone(Department of Suchitepequez), Finca San Rafael Sumatan and Finca Nimaya(Department of Chimaltenango) in Guatemala. They are located in the moun‑tainous region 700 m to 800 m above sea level on the Pacific slopes of the Sierra Madre.
Skin biopsies on the subjects

Aiming at the assessment of microfilarial density in patient's skin, the skinbiopsy was made at intervals of two to four hours, examining a total of 1 4 volunteers

in the two study areas (Finca San Rafael Sumatan and Finca Nimaya). During night
examinations, all the volunteers were permitted to sleep on bed, except the biopsy

time. A Holth type sclerocorneal punch was used for the biopsy. Skin samples
were taken from the left scapular region of the subjects approximately 0.5 cm awayfrom the previous ones. The snips were incubated at 30 C in 0.850/0 NaCl for twohours and the numbers of microfilariae emerged were counted under a compound
microscope at 40 x magnification. The microfilarial density was expressed as thenumber per mm2 of patient's skin.
Black ,fly collections

A11 the fly catches were made on the three infected adult male volunteers whowore the shirts with a 10x 10 cm grid at the back near the left scapula. The ob‑jective of the grid was to restrict the exposed skin for fly biting. In the three
volunteers two skin snips each were taken from the exposed area ; the mean rates
obtained were used as mfd of the volunteers. The fly catches were performed from
0600 to 1800 of one day with hourly interval in Finca Santa Monica lvone. All the27flies were captured after satiation with infected blood meal and then fixed immediately
with I O o/o formalin and kept in the solution until dissection.
Dissection offlies

Since the migration of ingested microfilariae from stomach into other organs
were prevented by above procedure, only abdominal parts of the fly were examined
for the larvae. As the fixed flies with formalin had a coagulated blood meal in theirstomach, they were treated in the laboratory as follows. The flies were washedwith running water for two hours, incubated at 37 C in 0.50/0 KOH solution for 40
hours and then preserved in glycerin until examination. The abdominal regionof flies was separated with insect needles under dissecting microscope, and thengently crushed with a slender teflon bar in a glass test tube with a drop of 0.850/0

NaCl solution. Care was taken to avoid any darnage on the microfilariae. The
materials were centrifuged at I ,OOO rpm for 5 minutes ; the supernatant was discarded,and Loffler's methylene blue solution was added to the sediments for the purpose ofstaining the microfilariae. All the samples were mounted on a slide with a cover‑slip. They were then examined under the microscope with 100 x or 400 X
magnification. Since many microfilariae were destroyed by, the cibarial armatureof the fly during ingestion, the typical tail parts of the microfilariae were marked andcounted, eliminating other fragments of the larvae. The microfllariae with only asmall cut (less than about 10 pm) on the tail parts were counted as normal; thus verysmall fragments of the tail were also eliminated. The status of destruction in thepresent microfilariae ingested was similar to that found in our previous study in which
the examination was carried out immediately after fly collections (Hashiguchi et al.,l 98 1 b) .

RESULTS
Microfilarial densities in the patient's skin

In order to assess the diurnal patterns of the skin density of O. volvulus mrcro‑
Table I Microfilarial density in patient's skin, expressed as percentage per total mfd

in an endemic area, Finca San Rafael Sumatan, in Guatemala
o/o mfd in each subject

Times

Av. (o/o) s, d. Gm**

No. I (59.6*) No. 2 (180.4) No. 3 (94 8) No 4 (20 8)
7.2

0900

13.l

1 200

24.2

9.9
12.0

1 500

5.2

1 7.6

l 800

10.6

22. 1

6.8
7.0

2 1 OO

8.6

16.5

15.0

2400
0400
0600

19. 1

5.5

l 9. 1

11.7
7.6

10. 1

12.8

6.3

25.0

7.3

* Total mfd/mm8/day, ** Geometric mean.

6.7
2.9

l 1.6 12.2

6.0
6.0

20. 7

12.6 12.9

7.2

9.6
14.9
9.6
26.9
8.7

12.3

9.2

1 1 . l

13. 1

7.6

13.8+ 14.2

9.0
8.0
9.7

13.3

1 3.5

15.4 7.8
11.9 8.8

6.8

28

●

15

o

10

●

o

で↑E

o
●

o
評

●

5

o

0

●

●
●

●

0
91113．15171192123135−7
τime
Figヲrel

MicroHlarial

densityofO．∂oJ∂ぬ5inlO◎f
Guatemalandaypatientsskin，expressed

as

per−

centagepe「totalm飼pe「day，in瓦πσαNimaya，Guatemala・●mean％m蝕O
triple−runningaverageofmean％mfd．

29

fllariae, quantitative skin biopsies were done at two endemic areas. In the first ex‑

periment, the biopsy was performed on four volunteers at intervals of two to fourhours throughout the day, but the mfd varied with time and no clear‑cut diurnal
periodicity was recognized (Table I ) . Table 2 and Fig. I give the results of second
experiment by skin biopsies on I O volunteers at the intervals of two hours in anotherendemic area. In this case, the mfds tended to show a higher rate during the period
from evening to mid‑night, 1 700‑0 1 OO (Fig. I ) , though individual subjects revealed

a considerable fluctuation by the time of day in their mfds (Table 2). From thepresent two experiments, therefore, it is suggested that the mfds in Guatemalan
onchocerciasis patient's skin may have a slight elevation from evening through mid‑night, but not pronounced.
Table 2 Microfilarial density in patient's skin, expressed as percentage per total mfd,

in an endemic area, Finca Nimaya, in Guatemala
o/o mfd in each subject

Times No. I No. 2 No. 3 No. 4 No. 5 No. 6 No. 7 No. 8 No. 9 No. 10 Av. (o/o) Gm**s. d.

(37.5*) (29.8) (23.4) (87 8) (66 2) (9 2) (155 1) (lO1 l) (40 9) (l08 O)

0900

8.8

l 100

2.0

l .7

8.2

7.9

6.4

0.3

1 .4

6.6

5.6

0.3

5.6

6.2

l .8

0.0

0.3

8.4

1 300

16.3

1 .3

33.8

2.3

0.6

3.2

3.2

1 500

1.6

1 .O

ll.l

3. 1

6.2

4.3

5.0

1 700

14.9

12.1

0.0

13.2

22.2

14.9

l 900

l 7. 1

16.4

3.8

l 6.6

23. l

2. l

2 1 OO

7.2

13. l

l 1.5

5.0

0.0

2300

l0.7

27.5

4.7

3.3

l 1.3

O I OO

5.9

4.0

l0.7

13.8

0300

5.3

11.1

0.0

0500
0700

4.0

9.4

2.7

1.7

8. l

5.1:1: 3.4

1 .8

0.5

0.0

2.9

3.2

0.7

3.2

7.3

6. l

7.7

10.2

2.2

6.0

0.5

9.7

4.9

3.6

l .8

47.0

17.7

8.8

13.9

16.5

12.2

5.7

5.4

8.7

5.4

12.7

17.2

10.9

6. 1

1 7.2

14.9

O. 1

12.8

24.4

3.8

ll.O

26.6

4.3

14.8

25.2

6.6

7.0
5.4
9.l
8.1

4.6

9.6

11.1
9.8
11.4
12.3

16.5

13.7

16.0

0.9

7.4

4.4

14.2

0.8

2.3

1.l

0.0

6.0

7.6

1 0.8

0.7

16.2

9.6

1.1

2.1

10.4

1.1

0.0

6.9

9.0 6.2
4.3 3.9
5.2 5.4

3.3
3.3
5. 1

2.9
1 .4
1 .5

* Total mfd/mm2/day, ** Geometric mean.
Hourly microfilarial intake by S, ochraceum

Table 3 and Fig. 2 show the hourly microfilarial intake by the fly, S. ochraceum,
which fed each microfllaria carrier. A total of 360 flies, 1 32 from No. I , 73 fromNo. 2 and 1 55 from No. 3 volunteers, were examined for the microfilariae, performinga mass dissection of three to six flies per batch. The total mean numbers of micro‑
filariae per fly in each human bait, thus obtained, was 94.5 in No. 1, 20.4 in No. 2

and 42.6 in No. 3 throughout the day. The hourly intake of microfilariae by S.
ochraceum had two peaks, one in the early morning, 0700‑1000 and the other in themid‑ or late afternoon, 1 400‑1600. To know the variation of microfilarial numbers
ingested by a fly, a part of the samples collected from each patient during the morning

hours (0700‑0800) was dissected individually. The mean number of microfllariae
per fly was 15.1 13.11 (n=15) in No. I (l0,1 mfd), 3.5 7.43 (n=12) in No. 2

30
Table 3O, volvulus microfilarial intake by S. ochraceum, expressed as percentage per total mean

recovery of microfilariae from flies in each volunteer, at various times of the day

Volunteer No. and (mfd/mm2/skin*)Times

No. 1 (l0.1 mfd)

No. 2 (13.9 mfd)

No 3 (11 7 mfd) Av. (o/o)

No. fiyNo. flyNo. fiy

exam.

0600‑
0700‑
0800
0900‑

o/o mfexam.

o/o mf

d'

s

mf

exam.

4.9 4.9

7.8

1 1 .5

14.2

9
24
20

18.3

13.9 4.6

l .5

19

8.0

4.3

12

1 1 .3

18

13.l

9. 7

4.4

3.5

lO

5.4

6.6

5.2

I .6

4.6

3

6.4

20
8

4.7

5.2:1: I .O

54.2

5.4 I .7

8.9

1 1 .5 2.3

12.4

13.3 I .3

13.2

9
9
8

1 1 .5

12.5 0.9

3.4

6

3

8.3

17

15.3

9

1 1 .3

13

9.2

11

8

3.3

4

1 OOO‑

12

4.8

l 100

1 200‑

20
8

1 300‑

ll

6.6

1 40C

lO

13.4

6

12.3

1 500‑

10

14.8

5

12.7

l 600‑

15

12.8

7

l 700‑

8

ll.7

3

l .4

3. 1

6. I

3.8

3.4

4.9

* Two skin snips each were taken from the volunteers at 1 5 :30.

20
10
‑

E 5
4
o ,o

3
2

1

Figure 2

17
12 1 3 14
6 7 9Ti101115
16
me of day
The intake of O' volvulus microfilariae by S' ochraceum, expressed as percentage per total

recovery from flies in each human bait. e
triPle‑running average of mean o/o mf recovery'e mean o/o mf recovery;

O

O

31

(13.9 mfd) and 3.8 4.32 (n=15) in No. 3 (1 1.7 mfd). Thus, the fly load indicateda great variation among the volunteers with a similar skin mfd. A similar observa‑
tion on the low microfilarial intake by S, ochraceum was sometirnes seen in the otherfield study.

Almost all of the microfilariae intaken by the fly were destroyed by the cibarialarmature during ingestion ; the damage reached 8 1 .2 o/o to I OO o/o among those counted
in the dissections of flies. Very low microfilarial intakes resulted in a high proportionof the destruction of microfilariae ingested.

DISCUSSION
It has been unknown whether the biting activity of black flies, Simulium spp.,
is influencing directly or indirectly on the O. volvulus microfilarial intakes. But there

is a possibility that the microfilariae may be attracted by the vector, S. ochraceum,

during ingestion (WHO, 1976; Hashiguchi et al., 198la). Therefore, the attracting
condition of the black fly against skin microfilariae may be influenced by various
factors, such as ecological and physiological ones, of the fly in various times of the day

in endemic areas of the disease.

There were two peaks in the microfilarial intake, one in the early morning andthe other in the late afternoon. However, this study is the first case reporting on
the hourly intake of O. volvulus microfilariae by the vector, S. ochraceum. In order tohave a more detailed and conclusive information, further such an examination should

be done paying special attention to the parous ratios of S. ochraceum which showeddistinct diurnal patterns (Collins et al., 1981).

In the present study, the mfd of O. volvulus in 14 patient's skin was examinedthroughout the day in connection with microfilarial intakes by the fly, performing
skin biopsies at 2 to 4 hour intervals. In patient's skin of one of the two experiments,
the mfd rose slightly during the period from the late evening to mid‑night indicating
a considerable variation in individual volunteers. As to the mfd in skin snips taken
at various times of the day, several studies are available in connection to the biting
activity of the vector of Guatemalan onchocerciasis (Duke and Moore, 1 974 ; Anderson
et al., 1 975). Tada and Figueroa ( 1 974) , however, observed no diurnal periodicity inthe skin microfllariae of O. volvulus in endemic areas of Guatemala. The discrepancy
among investigators on the diurnal patterns of skin mfd may be due to the differenceof sensitivities in skin biopsies. With the reason, it may be very difficult to know thetrue patterns of mfd m patrent s skin by the biopsy techniques which are available inthe moment. Collins et al. ( 1 980), however, demostrated that the sensitivity of theskin biopsy is enhanced by incubation for at least eight hours.
The result obtained suggests that there may be a diurnal pattern of microfilarialintakes of O. volvulus by S. ochraceum ; the pattern, however, did not show any correlation
with the present diurnal pattern of mfd in patient's skin. Further such an informationon the hourly microfilarial intake would be necessary for a better understanding of

the transmission mechanism of onchocerciasis. This study also showed that very
10w microfilarial intake resulted a high proportion of the destruction of microfilariaeby the cibarial armature of S. ochraceum. The individual flies ingested such a low

32

density of microfilariae may be negligible in the light of their actual roles as a vector
in the transmission of onchocerciasis.

ACKNOWLEDGEMENTS
Thanks are due to Professor George S. Nelson, Liverpool School of Tropical
Medicine and Professor I. Tada of Kumamoto University for invaluable commentson the manuscript. We also thank Drs. J. J. Castillo O., H. A. Godoy B., H. Taka‑hashi and S. Hayashi for their encouragement throughout the study. Sincere
gratitude is extended to Drs. I. Tanaka, T. Yoshimura and the owners of the coffee

plantations (Fincas San Rafael Sumatan, Nimaya and Santa Monica lvone) for
their cooperation.

REFERENCESl ) Anderson, R. I., Fazen, L. E. and Buck, A. A. ( 1975) : Onchocerciasis in Guatemala 11 Daytime
periodicity of microfilariae in skin, Am. J. Trop. Med. Hyg., 24, 62‑65

2) Campbell, C. C.. Collins, R. C., Huong, A. Y. and Figueroa, H. M. (1980) : Quantitative
aspects of the infection of Simulium ochraceum by Onchocerca volvulus : The relation of skin micro‑
filarial density to vector infection, Tropenmed. Parasit., 31, 475‑478

3) Collins, R. C., Brandling‑Bennet, A. D., Hollman, R. B., Campbell, C. C. and Darsie, R. F.
( 1980) : Parasitological diagnosis of onchocerciasis : Comparison of incubation media and in‑cubation times for skin snips, Am. J. Trop. Med. Hyg., 29, 35‑41

4) Collins, R. C., Merino, M. M. and Cupp, E. W. (1981) : Seasonal trends and diurnal patterns
of manbiting activity of four species of Guatemalan black flies (Simuliidae), Am. J. Trop. Med.

Hyg., 30, 728‑733
5) Duke, B. O. L. and Moore, P. J. ( 1974) : The concentration of microfilariae of a Guatemalanstrain of Onchocerca volvulus in skin snips taken from chimpanzees over 24 hours, Tropenmed.
Parasit., 25, 153‑159

6) Duke, B. O. L., Scheffel, P. D., Guyon, J. and Moore, P. J. ( 1967): The concentration of
Onchocerca volvulus microfi]ariae in skin snips taken over twenty‑four hours, Ann. Trop. Med.
Parasit., 6 1 , 206‑2 1 97) Hashiguchi. Y., Kawabata, M., Tanaka, I., Okasawa, T., Flores, O. C. and Recinos, M. M.
( 198la) : Seasonal variation in the microfilarial skin density of Onchocerca volvulus and in thebiting activity ofSimulium spp. in Guatemala, Trans. Roy. Soc. Trop. Med. Hyg., 75, 839‑845
8) Hashiguchi, Y., Kawabata, M., Ito; S. and Recinos, M. M. ( 198lb) : Limited fly load and de‑velopment of Onchocerca volvuluf microfilariae in Guatemalan Simulium ochraceum, Journal ofHelminthology, 55, 189‑196
9) Lartigue, J.J. ( 1967) : Variations du nombre de microfilarires d'Onchocerca volvulus contenues
dans des biopsies cutan6es pratiqu 6s a differentes heures de la journ e, Bull. Wld Hith Org..
36, 491J 94
l O) Picq, J.J. and Jardel, J. P. ( 1973): Une m6thode d'evaluation des densit6s microfilariennesd'Onchocerca volvulus, Leuckart 1893, chez des onchocerciens. Rtpartition des densit6s micro‑
filariennes suivant les sites et niveaux de prel vement des biopsies cutan6es. Variations desdensit6smicrofilariennes au cours des 24 heures, World Health Organization unpublishedmimeographed document, WH010NCH0173, 103, 25

3311）Tada，1．andFigueroa，M．H。（1974）：ThedensityofOη ho θ繊びoあぬ3microHlariaein
dif琵rent

times

ofthe

day inGuatemala，Jap．J．Parasit・，23，220−225

12）Thomas，D．B．ンAnderson，R．1．andOηohoo8惚oo伽傭micronlariae

inMcCrae，A．A．11973）：Daytime

humanskin，Bull．Wld

13）Wegesa身P．（1966）：Variation ofmicro且larial dcnsities
timeof day，Annual Report of

PP、31−32
14）World Health

East

A飯icanOrganization（1976）：Reportof onchocerciasis，World

theskinat

Healthavariationin

6繊むoJ∂ぬ5inofMalariaandWHO

Expertcommittee

Organization TechnicalthedensityofOrg．，49，493−498

ofOnoho

Institute

of

Hith

ReporttheskinVector−Bome

on

with

the

Diseases，

epidemiology

Series，No．597，p．35

オンコセルカ症患者の仔虫密度とブユによる仔虫とり込み量の日周パターン1
橋口義久2・川端真人3・高岡正敏4・オットー フローレスC．5

グアテマラ共和国のオンコセルカ症流行地において，患者皮膚での仔虫密度とブユ5加㍑1如規oc伽oc釧規による仔虫とり込み量について，継時的観察を行った。患者4名について，2〜4時間毎
24時間，検皮法を実施した第1回目の実験では，仔虫密度に日周性を認めなかった。しかし，10名にっいて2時間毎24時間の検皮では，午後5時から午前1時にかけて，仔虫密度の増加を認めた。一方，
ブユにおける仔虫とり込み量は，午前と午後に高くなる傾向を示した。従って，今回の実験では，患者仔虫密度の日周性とブユによるとり込み量の間に，相関を見出すことはできなかった。仔虫とり込

み量の2つの山 は，ブユの吸血活動に何らかの形で関与する可能性が示唆された。Onchoc8rco

voJv㍑1硲仔虫のブユによるとり込み量についての継時的な観察は，従来，皆無である。しかし，オ
ンコセルカ症の伝搬機構を解明していく上で，同様な研究が今後必要であると思われる。

1本研究はグアテマラ共和国厚生省ならびに国際協力事業団の援助による（ORCOP

2高知医科大学寄生虫学教室

3国立予防衛生研究所寄生虫部

ラ共和国厚生省マラリア研究所オンコセルカ部

series

No．63）．

4埼玉県衛生研究所

5グアテマ

Japan. J. Trop. Med. Hyg., Vol. I l, No. 1, 1983, pp. 35‑39

35

INCREASED T, CELLS IN PROTEIN CALORIE

MALNUTRITIONYOSHIHIRO SEKIBA, SHIGETSUNE KOJIMA, NoBUAKI KADOI,SATORU TANUMA AND NoRIAKI OHARA
Received for publication January 1 1 1983

Abstract: A Iowered T cell percentage and a raised T1 cell percentage during theacutely ill period in Protein Calorie Malnutrition were observed. These values generally

returned to normal after treatment. It is suggested that T cell immunodeficiency inProtein Calorie Malnutrition could be due to the alterations of T cell subsets coming froman increase of Tr cells

It is a well known fact that malnourished children have an increased susceptibility

to infection. The interaction of malnutrition and infection results in a marked in‑crease in morbidity and mortality among these malnourished children. Several
investigators have shown atrophy of lymphatic tissue, impairment of delayed cutane‑
ous hypersensitivity, suppression of phytohemagglutinin‑induced DNA synthesis anddecrease of T cell count. These suggest that there must be some immunodeficiency
in malnutrition. To investigate immunodeficiency in malnutrition we examined thechanges of T cells and T7 cells at the acutely ill condition on admission and after aperiod of therapy and convalescence. This report deals with these results.

PATIENTS AND METHODS
Fifty‑flve young children aged 2 months to 5 years were diagnosed to be sufferingfrom Protein Calorie Malnutrition (PCM) on the basis of clinical features (growth
failure, Ioss of subcutaneous tissue, skin and hair changes), decreased weight for height

and low serum protein. A11 patients were admitted at Princess Marie Louis Hospitalin Accra, the capital of The Republic of Ghana. Twenty‑flve healthy infants aged
6 months to 5 years served as controls.
Heparinized peripheral blood was collected, diluted to two times with Phosphate

Buffer Solution (PBS), and lymphocytes were isolated by Ficoll‑Hypaque gradientcentrifugation. Cells were washed twice with PBS and resuspended in PBS at aconcentration of 2 x I 06 cells per ml.

Into a small test tube 0.1 ml of the lymphocyte suspension was transferred and1 x 107 Sheep Red Blood Cell (SRBC) in Fetal Calf Serum (FCS) were added to it.
The mixture was centrifuged at 200 X g for 5 min and allowed to stand overnight in* Reprint address : Department of Pediatrics, Fukushima Medical College, 4t45 Sugitsuma‑cho,

Fukushima City, 960 Japan36

ice water. Thereafter the cell pellets were resuspended by gentle agitation andexamined for the proportion of cells forming rosettes with SRBC.
The determination of T7 cells was in accordance with the double rosette method.

Both the lymphocyte suspension and Chicken Red Blood Cell (CkRBC) coated withanti‑CkRBC antibodies of lgG class were transferred into a small test tube, and the
mixture was allowed to stand overnight in ice water. After removal of the superna‑tant, SRBC in FCS were added to the remainder. The mixture was centrifuged at
200 x g for 5 min and was allowed to stand overnight in ice water. The cell pellets
were resuspended by gentle agitation and examined for the proportion of the double
rosette cells (T7 cells) binding both the SRBC and the CkRBC coated with anti‑
CkRBC antibodies of lgG class.

RESULTST cell percentage in normal Ghanaian children was found to be 79.8 3.40/0(male: 79.9 3.80/0' female: 79.8 1.60/0) and T7 cell percentage to be 2.2 0.80/0(male: 2.4 0.80/0' female: 1.8 0.60/0)' No difference between the sexes was ob‑
served.

Three different types of PCM, such as marasmus, marasmic kwashiorkor andkwashiorkor, showed similar changes between the acutely ill condition on admission
and after a period of therapy and convalescence. Namely, the low T cell percentage
and the high Tv cell percentage on admission generally returned to normal ranges
after therapy (Figs. I , 2).

('G)

IOO

eo

'

:""":S:!':::
R

wr' 'L::S 'i::::i;i: 1:::::;i;:::::i:::# #S":SS :' :

:S

70

eo

f

F:

f
}

50

40
30

20
10

on admissbn after therapy on 8dmissba Ifter therapy on admissbn atter therapy(eo.6:t6.9,6) (77.9:t6.1,G) (56:tll.7,e) (79.1:t5.7,e) (53.5d:6.7,6) (78.7:t4.4,6)

Kwashiorkor Marasmic Kwashierkor Marasmus
Figure I T cell percentages on admission and after therapy in kwashiorkor,
marasmic kwashiorkor and marasmus.

37
(,e)

30

20

10

{ }
*:i･

==== ===*j*:=.{･t:*: +::,; *

'c;:

O

adm ssbn afteron adfnissbn after onttl'rapy
ontherapy
Idmissbn after therapy(7.9d:5.0,e) (1 .7:t I(8.3:1:4.5,e).4,G) (6.(2.9:t2.5,G)
I :3. I ,6) (1 .9:t I .2,,)

Kwashiorkor Marasmus
M8rasmic Kwashiorkor

Figure 2 Tr cell percentages on admission and after therapy in kwashiorkor.

marasmic kwashiorkor and marasmus.

DISCUSSION

There have been no previous reports examining the T cell percentage and theT7 cell percentage in Ghanaian children. Our T cell percentage of 79.8 3.40/0 andT7 cell percentage of 2.2 0.80/0 are comparable with the values published for othernational groups.
Concerning the immunological studies of PCM, there are some reports on theatrophy of lymphatic tissue, impaired delayed cutaneous hypersensitivity, the reduc‑tion of the in vitro lymphocyte transformation response to phytohemagglutinin
stimulation and the decrease of T cell count (Smythe, et al., 1 971 ; Sellmeyer, et al.,1972 ; Chandra, 1972 ; Schlesinger, 1974; Ferguson, 1974; Chandra, 1974; Neumann,
1975; Beatty, 1978). Moreover there is a report stating the normal B cell countand serum immunoglobulin value (Rafli, 1 977). Looking through these reports it
seems that there is T cell immunodeficiency in PCM.
We observed a lowered T cell percentage and a raised T7 cell percentage during
the acetely ill period in PCM. These values generally returned to normal after
treatment.

PCM is divided into three types : Kwashiorkor which develops from marked
deficiency of protein and a relatively excessive state of calorie marasmus which sets
in at an absolutely deficient state of calorie, and marasmic kwashiorkor which is anintermediate type (Jelliffe, 1 959). No significant difference was observed among
them so far as the above changes of T cells and Tv cells were concerned.
The T7 cell is one of the T cell subsets, but functionally it is a heterogenous
populatron contammg several subsets such as the suppressor T cell which suppresses
the production of immunoglobulin from B cells and the killer T cell which possesses
cytotoxicity.

38

It is suggested that T cell immunodeficiency in PCM could be due to the altera‑tions of T cell sunsets coming from an increase of T7 cells.
Further investigation of the increasing T7 cells in PCM from a functional aspectis expected.

ACKNOWLEDGEMENT
This study was supported by the grant from the Japan‑Ghana Cooperative
Medical Science Program.

REFERENCESl ) Beatty, D. W. and Dowdle, E. B. (1978) : The effects of kwashiorkor serum on lymphocytetransformation in vitro, Clin. Exp. Immunol., 32, 134 l43
2) Chandra, R. K. ( 1972) : Immunocompetence in undernutrition, J. Pediatr., 81, I 194il200
3) Chandra, R. K. ( 1974) : Rosette‑forming T Iymphocytes and cell‑mediated immunity in mal‑nutrition, Br. Med. J., 7, 608‑609
4) Ferguson, A. C., Lawlor, G. J., Neumann, C. G., Oh, W. and Stiehm. E. R. ( 1974) : Decreased
rosette‑forming lymphocytes in malnutrition and intrauterine growth retardation, J. Pediatr.,
85, 717‑723
5) Jelliffe, D. B. (1959): Protein‑calorie malnutrition in tropical preschool children. J. Pediatr.,

54, 227‑256
6) Neumann, C. G., Lawlor, G.J. Jr. and Stiehm, E. R. ( 1975) : Immunologic response in mal‑nourished children. Am. J. Clin. Nutr., 28, 89‑104

7) Rafli, M., Hashemi, S., Nahani, J. and Mohagheghpour, N. ( 1977) : Immune response inmalnourished children, Clin. Immunol. Immunopathol., 8, 1‑68) Schlesinger, L. and Stekel, A. ( 1974) : Impaired cellular immunity in marasmic infants, Am.
J. Clin. Nutr., 27, 615‑620

9) Sellmeyer, E., Bhettay, E., Truswell, A. S., Meyers, O. L. and Hansen, J. D. L. (1972) : Lym‑
phocyte transformation in malnourished children, Arch. Dis. Child., 47, '429 L34

10) Smythe, P. M., Schonland. M., Brereton‑stiles, G. G., Coovadia, H. M., Grace, H.J., Loening,
W. E. K., Mafoyane, A. and Vos, G. H. (1971) : Thymolymphatic deficiency and depressionof cell‑mediated immunity in protein‑calorie malnutrition, Lancet, 30, 939‑943

39

蛋白質・カロリー欠乏症候群におけるTγ細胞の増加について
関場慶博・小島滋恒・門井伸暁・田沼悟・大原徳明低栄養状態にある小児が感染症に罹患し易いのは，古くから良く知られた事実である。リンパ組織の萎縮，遅延型過敏反応の減弱，リンパ球幼若化反応の低下，丁細胞数の減少など，低栄養下での丁細胞性免疫不全を示唆する報告が多い。私たちは，この低栄養下での丁細胞性免疫不全にさらに検討を加える目的で，蛋白質・カロリー欠乏症候群での丁細胞，T，細胞の変動を，病盛期と回復期とで比較検討した。病盛期での丁細胞の低値，丁丁細胞の高値が，病態の回復とともに正常域へ回復して行くのが観察された。低栄養状態でのT，細胞の増加という丁細胞subsetsの乱れが，丁細胞性免疫不全の一因をなしている可能性が示唆された。

福島県立医科大学小児科学教室

日本熱帯医学会雑誌

第11巻

第1号

41

198341−54頁

日本熱帯医学会九州支部第6回大会講演要旨
日場長期会会

昭和57年1月23日（土）大分県医師会館大会議室
三舟求真人

大分医科大学微生物学講座（鹿児島大・医・熱研・熱帯病）

特別 講

R，K．Anteson

演（ガーナ大・野口研，医・微生物）

7 ペルー産毒蛇Shushupe（Lαohε廊灘∫α）及真菌症の病理直江

史郎

びJergon（．80（東邦大・医・大橋病院・病理）

いてhrop30ガrox）の毒素性状につIsabelFukusaki

後藤勲，坂本 信一，山田（サンマルコス大・ペルー）

一
1

般

演

題

野中 実男

急速に分布を拡大しつつある新しい衛生害虫

ヒロヘリアオイラガについて・宮田 彬（大分医大・生物）8

原田 隆二，横山 孝一，上田 博章，
尾辻

光抗体法を用いて一
渡辺 繁徳，一ノ瀬休生，重野 秀明，

高岡 宏行（大分医大・医動物）

江原 雅彦，岩永 正明

宮崎県における寄生虫感染調査成績

石井

明，今井

大橋

真，下村

坂本

淳一，阿部

（長崎大・熱帯医研・病原細菌）

達也，浩，堀井洋一郎，

10

ガス産生Sh魯811α60y4ff14型による輸入赤痢
明石 光伸

修，常俊 義三（大分大・保健管理センター）（宮崎医大・寄生虫・公衆衛生）

荒谷 弘康，原 耕平

4大分県北部のサワガニから見出されたウェス（長崎大・医・第二内科）

テルマン肺吸虫有性生殖型
波部

重久，宮崎

一郎

11

中国の克山病の原因とその発病機序
新宮 正久（久留米大・医・ウイルス）（福岡大・医・寄生虫）

5

ケニア国タベタ地区における住血吸虫症

一マンソン住血吸虫とビルハルッ住血吸虫の混合感染について一嶋田 雅暁，佐藤 克之（長崎大・熱帯医研・寄生虫）6

義人（鹿児島大・医・第二内科）

9 コレラ毒素の細胞内局在性一免疫電顕及び螢

調査
3

（化血研）

ハブ毒による腎障害に関する研究

2グアテマラにおけるOnchoσ8rcαvolvμ1硲の媒介可能ブユ種S加μ1加規horαc妨の生態

昭，

12

狂犬病研究のためのマウス横紋筋肉腫細胞の樹立

七條 明久，三舟求真人（大分医大・微生物）

飯田芙佐枝，板倉 英世（長崎大・熱帯医研・病理）

ガーナ国アクラおよびアクラ周辺における寄生虫感染状況
水上 惟文

森内

昭，中山

厳
（大分医大・病理）

n∠3

41

狂犬病ウイルスの細胞侵入機構

一ウイルス粒子の溶血能と細胞融合能の発シンポジウム現一

ケニアにおける熱帯病研究の現状と展望

万年 和明，大内 正信，三井求眞人（大分医大・微生物）
14

1

温度適応に関する2，3の問題点について
小坂

光男，土屋 勝彦，大渡ケニア国伝染病対策プロジェクトとその周辺
の事情

林

伸，

井元 孝章
（長崎大・熱帯医研・疫学）
152

細菌学の立場から

岩永

高温環境下の運動中の発汗反応佐々木正明（長崎大・熱帯医研・病原細菌）

隆（熊本大・体質医研・生理）

薫（長崎大・熱帯医研・ウイルス）3

原虫学の立場から

井関

4

基弘

（阪市大・医・医動物）

寄生虫学の立場から

青木克己（長崎大・熱帯医研・寄生虫）5

病理学の立場から

板倉 英世（長崎大・熱帯医研・病理）

43

特

別

講

演

真菌症の病理直江 史郎（東邦大・医・大橋病院・病理）

感染症は近年になり著しく変貌している。その基盤には抗生物質，免疫抑制剤，副腎皮質ホル剖検例からみると真菌症はカンジダ症（36．1％）が最も多い。続いてアスペルギルス症（26・0％），

モンが一般的に使用されるようになったことがあ

クリプトコッカス症（10，1％），ムコール菌症

ろう。すなわち，これらの薬剤の普遍化により以（3．6％）が多くみられるものの代表的な疾患であ前は病原性の面からは重視されていなかった弱毒る。

菌といわれているものの感染症が増加している。

一方，熱帯地真菌症といっても，幾つかのもの

それらはしばしばOpportunisticinfectionとしを除き熱帯地だけにみられるものはあまり多くなて一括されることが多い。そのなかで真菌感染症

い。熱帯地で発生頻度が高いというにすぎない。

は非常に大きな割合を占めているといえよう。

このような疾患にはHistoplasmosis，Coccidioi−

真菌感染症として臨床的に最も頻繁にみられる

domycosis，North

ものはカンジダ症，白癬菌症であろう。症例が多SouthAmerican

くても臨床的にあまり間題がない療風や外耳道真

domycosis），African

Americanblastomycosis，

blastomycosis（Paracoccidioi−
histoplasmosis，Lobo s dis一菌症なども存在する。一方，症例としても比較的 、ease（Keloidal blastomycosis），Rhinosporidiosis，
多く，かっ臨床的には重要なものとしてアスペル

Mycetomaなどがあげられる。また，これらの疾

ギルス症，ムコール菌症，クリプトコッカス症，

患はしばしば地方病的様相を有していることが特黒色菌症，放線菌症などがあげられる。しかし，

徴といえよう。このうち，Mycetoma（Madura

臨床的には重要でありながらも本邦ではほとんど

foot）を除くと本邦ではまず経験することはなく，経験しない真菌があるが，これが熱帯地真菌症ともしこれらの症例に遭遇したとしても外国にて感それに準ずるものが相当する。

染したものと断言しても良い位である。

以上のことから，本邦では基礎疾患がなく比較真菌症の成立には個体の抵抗力の強弱が大きい

的感染力の強い真菌による原発性真菌症は非常にが，それと共に真菌が臓器に到達し，定着そして症例が少ないことから，病理学的観点から研究対増殖することが必要である。このとき菌量とその象となるのはほとんどが続発性真菌症である。つ菌のもっ病原性が重要な因子として働くものと考まり，Opportunisticfungusinfectionのものが中心とならざるを得ない。すなわち，熱帯地に多えられる。

くみられる原発性真菌症とは自ずから研究対象が100種類にすぎず，一般に真菌が5万とも10万種異なっているといえよう。

ともいわれていることから考えれば「医真菌学」

病理学分野においてヒトを中心に真菌症の発生頻度をみる場合には主に日本病理剖検輯報を用い

このような感染症を発来せしめる病原真菌は約

は「真菌学」のなかではかなり狭いというか特殊な真菌を扱っているにすぎないといえよう。

ることが多い。それによれば，1958年から1977年

しかし，真菌は病原真菌としてばかりでなく，の20年間に390，673例の剖検例が登録されており，

毒キノコなど食中毒の原因ともなる。また，最近

そのうち真菌症は6，532例（1・67％）が記載されではアレルゲンとしての真菌が大きな問題となりている。1958年の真菌症の発生頻度は0・59％でつつある。さらには，真菌の代謝産物が生体傷害あったのが，20年後の1977年には2．78％と非常に性を有したり，また発癌性（マイコトキシン）を増加している。

産生するなどの有害な面がある。これに対し，薬44

剤や醸造その他の利用面とを勘案するならば真菌

Mycotoxin

andmycotoxicosisのテーマがとはヒトの生活と密接な関連を有していることがわ

りあげられることになり，少しずつ医真菌学の範かる。このことからも，医真菌学領域においても囲が広くなりつつあるといえる。

もっと広範囲な知識が必要となろう。それを示す

今回は，真菌感染症の一般的事項を，熱帯地真かのように本年2月New Zealandで行われる
第8回国際人獣医真菌学会のシンポジウムにて菌症にっいて触れながら，病理学的な面から述べ
た。

45

一

般 演

題

い。刺されると激痛があり赤くはれ上り，医師に
1 急速に分布を拡大しつつある新しい衛生害虫ヒロヘリアオイラガについてかかった者も多いので，市街地や住宅地の衛生害虫として注意する必要がある。

宮田彬 （大分医大・生物）
2グアテマラにおける0πcゐoeθrcα o置・

ヒロヘリアオイラガL躍o如Zの掘α（CRAMER）は，

捌伽8の媒介可能ブユ種，S加麗」勘肌

中国，インド，セイロン，ジャワ，スマトラ，ゐorαcj扉の生態調査

スンダ列島に分布する蛾である。日本からは河田（1930）の報告した，鹿児島の

Toso

高岡

（福島英雄

教授によると鹿児島市唐湊）産の雌1頭だけが知宏行（大分医大・医動物）

中米グアテマラにおいてOnchooεroαvolvμ1μs

られていただけである。ところが1960年になっての媒介可能種と報告されたS〃nμ1∫μ〃！ho雁co∫竹村により，鹿児島市内で本種が再発見され，ま（灘翅1加規グループ）の幼虫と成虫の生態を明た1969年には鹿児島市内だけではなく，鹿屋市，

らかにするため，オンコセルカ症浸淫地の3地区

佐多岬，屋久島などでも採集された。演者は1979

で周年調査を行った。5「∫年に大分医科大学に転勤したが，ヒロヘリアオイ

は，年間を通じて発生がみられ，特に年中恒常的ラガが大分市およびその周辺の住宅地の街路樹にに流れる小さな水系に多かった。また，雨期（5−発生していることに気づいた。そこで同年秋の日10月）にのみ出現する季節的水系にも発生するこ朋1∫麗〃1ho雌co∫の幼虫

本鱗翅学会総会（福岡）で他の演題のついでにとが観察された。人おとり法により捕集されたブ

本種の幼虫および成虫のカラースライドを供覧し

ユ雌個体群のなかで乱horαc∫oは，地区により異た。すると福岡県下の田主丸町や北九州市などでなるものの，0，06〜29．0％を占め，S・ochrαcεμ脱も発生しているという追加発言があった。その後やS．吻θ∫o〃∫cμ〃！s．str．とともに主要人吸血性ブ

さらに熊本市，大阪府下（豊中市，池田市），兵庫

ユであることが判明した。この種の吸血活動には，

県下（宝塚市），静岡県下（浜松市，湖西市，清水

9月ないし10月に極期となる明らかな季節変動が市），岡山県下（玉野市宇野）などでも発生が確認められた。Onchooεroロvolv麗1μs幼虫の自然感染認された。いずれも近年急に発生するようにない

は＆00かOC8μ〃！（第1，III期とも）および＆〃！θ一たという。成虫の発生は年2回6−7月と8−9月

o〃c〃ns．str．（第1期のみ）にみられたが，S．

で，後者に由来する幼虫はマユの中で前蠕状態でhoroc∫o∫では743個体を解剖した限りではいずれ越冬するが，一部は蠕化して年内に羽化することの発育期の幼虫も見出せなかった。しかしながら，があるので，年3化もあるらしい。幼虫はナンキ

不明フィラリアの第III期幼虫，Mermithidの幼ンハゼ，サルスベリ，サンゴジュ，カキノキ，ク虫およびカビに感染されていた雌個体が少数みら

リ，ヒイラギモクセイ，ナッメ，アカメガシワ，れた。今回の調査で明らかにされた知見を考慮しセイヨウギズタ，サクラ，ウメ，モミジ，カナメて，今後のグアテマラにおけるオンコセルカ症のなど種々の植物を食する。本種はもともと日本本伝搬調査では，3．ochrooθμ nや乱 n8孟o〃ioμ n

土に土着していた種ではなく，1920年代に栽培植

str．と同様，乱hor40∫o∫も検討の対象とする必要物の移入に伴ってインドあるいは中国から日本にがあろう。

入り，鹿児島市内で細々と世代を繰りかえしていたらしい。しかし近年の宅地造成に伴う街路樹や庭木の移動が原因で，急速に分布を拡大したらし
く，今後さらに他の地点にも侵入する可能性が強

s．

46

4大分県北部のサワガニから見出された

3 宮崎県における寄生虫感染調査成績

石井

明，今井

淳一，阿部 達也，

大橋

真，下村

浩，堀井洋一郎，

坂本

修，常俊

義三

ウェステルマン肺吸虫有性生殖型

波部 重久，宮崎 一郎（福岡大・医・寄生虫）（宮崎医大・寄生虫・公衆衛生）

周防灘にそそぐ駅館川の支流，恵良川上流（大近年日本における寄生虫対策は腸管寄生線虫な

分県宇佐郡院内町）で採集したサワガニに，ウェ

どに見事な成果を納めつつあるが，一方少ないとステルマン肺吸虫有性生殖型の寄生を認めた。サ

はいえ山間村落などに未だ感染があるので手をゆ

ワガニのエラ，および肝臓の検査でのメタセルカ

るめる事は出来ない。1978年以来，宮崎県農山村

リア寄生率は，23彩（23／100匹）〜89．7％（26／29匹）

を主な対象として検査を実施した。鉤虫感染が特で，漢谷で採集したものに高率に感染していた。

に山間村落にみられ，高い所で43彩があったが，筋肉を含め検査したカニ50匹の結果は，26匹にメ

平均9．7彩であった。高年齢層にやはり高い。ズビ

タセルカリアがみられ，合計835個のメタセルカ

ニ鉤虫が優位であった。鉤虫感染者にアンケート

リアを回収した。陽性カニ1匹あたりの平均寄生調査を行ったら，頭痛，肩こり，たちくらみ等をメタセルカリア数は32個，最も多いものでは199

訴える者も多く，貧血といわれた者が女性で半数個であった。メタセルカリアのカニ体内での分布みられた。尿尿処理を自家で行う者が89％であっは，回収メタセルカリア総数の86．5％が筋肉，次た。多数の検便は手間のかかる熟練作業なので，いで肝臓7．8％，エラ4．0彩の順であった。メタセ

皮内反応他によるスクリーニングについて検討しルカリアの大きさは92個の平均で361x351μm

た。感染幼虫抗原のタンパク濃度20μg／m

で良（296〜412×276〜404μm）で，これまで本邦で報い感度と特異性が得られた。膨疹は7mm，発赤は20mmを境界に陽性とした。対策が実施され告されている同型のメタセルカリアの中で最も小たりして，ある程度に感染率が低い状態で有用でリアを感染させたところいずれも高率に感染したある。ELISAを用いて検討したが，IgG抗体では特異性が不良で，IgE抗体の方が良かった。

が，虫体は筋肉に侵入したまま発育を示さなかっ

RASTも用いられる。治療後IgE抗体は下がる

ころ高率に感染し，成熟した。このことからウェ傾向にあった。回虫，鞭虫の感染は少数であった

ステルマン肺吸虫の有性生殖型は，単為生殖型とさい。ラット，マウス，モルモットにメタセルカ

た。この未発育の虫体を回収し，イヌに与えたとが，横川吸虫感染が特に河川流域地に多かった。

同様paratenic

高い所で21％，平均で9．4勉であった。アユをセえる。イヌおよびネコにメタセルカリアを感染さ

hostを介する発育環をもつといゴシで生食するためと思われる。肺吸虫VBS抗せて得た成虫は，皮棘は単生，卵巣は多くのもの

原による皮内反応は平均23彩陽性で，高い所で40が6葉に分れているが，100個体のうち16個体が％があった。イノシシの生肉を食べる事は少なく

4〜5葉あるいは7〜8葉に分岐する異常がみらなりつつある様子である。これら陽性者の寄生虫れた。精巣は卵巣側のものが6葉に，反対側のも学的確定診断は仲々困難な課題として残されていのが5葉に分れており，分葉異常を起こしているる。1980年2例の熱帯熱マラリア患者がアフリカ

ものは少なかった。虫卵は卵形で，大きさは100

旅行帰国者に発生し，救急処置で救命した。糞線

個平均で79、4±5．6×43．7±2。0μmで，無蓋端に虫，アニサキス，嶢虫，眼虫，トリコモナス，ト

顕著な肥厚部を持つものが少数であるが，多くのキソプラズマなどについては今回は対象として取ものは肥厚部を持たないか，軽度のものであっ

上げられなかった。

た。

47

5

ケニア国タベタ地区における住血吸虫症

一マンソン住血吸虫とビルハルツ住血吸虫の混合感染について一
嶋田

雅暁，佐藤

克之

（長崎大・熱帯医研・寄生虫）

住血吸虫症の感染防御免疫のうち，特に交差免行ったので，成績の一部について報告する。調
査地は，Greater

Accra

Regionの西部5部落およびアクラ市内の3病院，PML

babi

Hospital，Koto・

Policlinic，UssherClinicで，PMLHospita1

は小児専門病院，他はKotobabi，Ussher地区の公立病院。検査法は，各被検者より，糞便，尿，血液塗抹標本を，一部被検者からはこの他に静脈疫については，animalmodelによる報告は多数 血を取り，身長，体重の測定を行った。糞便は，あるが，流行地における疫学調査に基づいた報告

直接塗抹，ホルマリン・エーテル法，濾紙培養をは少ない。

併せ行い（試料収集の場所の関係上，原虫検査に我々の教室では，1974年以来ケニア国タベタ地は必ずしも好適な条件ではない），尿は遠沈後検区において，住血吸虫症の調査を続けてきたが，鏡，血液はギムザ染色を行った。Accra市内の一今回混合感染地区における159名の住民について

般住民では，被検者369例中，寄生率49．6％，回の1974年の調査結果と，1980年のそれとを比較し，

虫20、6％，鉤虫20．0％，大腸アメーバ13．5％，糞交差免疫の存在を示唆する結果を得た。それによ線虫7．1％，ランブル鞭毛虫4．3％，鞭虫2．4％，ビ

れば，

ルハルツ住血吸虫2．4％，マンソン住血吸虫0．5％，
マンソン住血吸虫卵だけ陽性のグループは，

小形条虫0．5％，腔トリコモナス0．3％，広節裂頭

両種の虫卵とも陰性だったグループに比べ，6年

条虫0．3勉だった。このうち，鉤虫は47例中46例

後の再調査においてビルハルッ住血吸虫に対してがアメリカ鉤虫で1例がズビニ鉤虫であった。混かかりにくい傾向が見られた。

合感染は，2種混合感染38例（10．3％），3種混合

1）2） ビルハルツ住血吸虫卵だけ陽性のグループ

感染9例（2．4％）。農村部の就学前児童の寄生虫と，両種の虫卵とも陰性だったグループとの間に感染状況は，寄生率51．8％（総被検者226例中117は，6年後の再調査においてマンソン住血吸虫の例）で，回虫35．4彩，ビルハルツ住血吸虫20．4彩，感染に対しては差がなかった。

熱帯熱マラリア原虫9．3彩，鉤虫4．4％，糞線虫

3）

またタベタ地区では，6年の間に治療が行3．5％，ランブル鞭毛虫L8彩，四日熱マラリア原

われていたが，外来治療による投薬では治療群と虫0．4％であった。下痢症の小児274例では，寄生非治療群との間に差は見られず，マンソン住血吸率35．4％で，回虫20．8彩，熱帯熱マラリア原虫

虫卵だけ陽性のグループでは，むしろ治療を受け12．8彩，鞭虫3．6％，メニール鞭毛虫2．6％，糞線た方が，ビルハルッ住血吸虫に対してかかりやす

虫2，6％，鞭毛虫類2．2彩，大腸アメーバ1．1彩，くなっている傾向が見られた。

ランブル鞭毛虫1．1％，鉤虫0．7彩，小形条虫0．7％，ビルハルツ住血吸虫0．7彩であった。同一検
6

ガーナ国アクラおよびアクラ周辺におけ体の細菌検査から，次の病原細菌が認められた。

る寄生虫感染状況

3α伽onθ〃αA，B，E4，砂ph∫，Shを8〃α万εxnεr∫4例，

水上惟文

EPECO125：K70，011：K58，055：K59，026：（鹿児島大・医・熱研・熱帯病）

K60。下痢と寄生虫との因果関係についても，検R．K．Anteson（ガーナ大・野口記念研究所，

ガーナ大・医・微生物）

西アフリカのガーナにおいては，寄生虫の疫学的研究は殆ど行われていない。昭和55年6月より

昭和56年12月まで，同地において寄生虫の調査を討を行った。

48

天ゲル内沈降反応を行った。その結果Shushupe7

ペルー産毒蛇Shushupe（Lαc加3」5脚∫σ）

及ぴJergo皿（、Bo伽oρ3碗mエ）の毒素性状について
IsabelFukusaki

野中勲，坂本に共通抗原の存在を推定させる沈降線を認めた。
4． 毒素成分の分析（サンマルコス大・ペルー）

後藤

及びJergon毒素とHabu，Mamushi毒素との間

信一，山田

実男

昭，

（化血研）

ペルー産毒蛇Shushupe（L．脚∫α）及びJergon

Shushupe毒素をDEAE−sepharose

CL−6Bによって分画した結果，6つの蛋白のピークを得た。

それぞれのピークを溶出順にピーク1から6と名づけると，致死活性はピーク1及び2に，出血活性はピーク1，2及び3，4に認められた。ピーク（丑o！roκ）の毒素性状を日本産毒蛇Habu（T5及び6には毒素活性を認めなかった。各ピーク

ガovovfr顔触）及びMamushi（オ・ho1アs）と比較検をディスク電気泳動で調べてみると，各ピークに討したので，その成績を報告する。

なおいくつかの蛋白が認められるので，今後更に

1．毒素量測定
各毒素の出血活性，致死活性，及び培養細胞に対する毒性に対して検討した。出血活性はウサギの背部皮内に希釈毒素を接種し，直径10mmの出血斑を生ずる毒素量を最小出血量（MHD）として表わした。その結果，Shushupe5．8μg／MHD，Jergon55μg／MHDに対し・HabuO・7μg／MHD，検討を進めたい。

8ハブ毒による腎障害に関する研究
原田

隆二，横山

孝一，上田

博章，

尾辻 義人
（鹿児島大・医・第二内科）

蛇毒の毒作用には神経毒作用，血液循環障害作

O．1μg／MHDであり，日本産毒蛇の毒用，溶血作用，出血作用，壊死作用および血液凝素が強い毒性を示した。致死活性はマウス尾静脈

固阻止または促進作用などがある。実験的にはハ内に希釈毒素を接種し，50％致死量（LD5。）で表ブ毒を動物に投与することによって腎に特異的なわした。Shushupe，Jergon，Habuの各毒素が変化一すなわちハブ毒投与初期には腎糸球体毛細Mamushi

32μ9／LD50であるのに対し，Mamushiは14・7 血管の，のう胞状変化がみられ次第に増殖性変化
μg／LD5。であった。

へと変貌していくことが川路，坂口，森田，上田

培養細胞に対する毒性は，5種類（VERO，HEL，ら多くの研究者によって報告されている。今回私FL，RK、3，BHK）の株化細胞に希釈毒素を接種し，共は奄美大島を始めとする日本南西部諸島に生息

50彩CytopathogenicDose（CPD5。）で表わした。

するハブより得たハブ粗毒をSephadex75，溶出液として0．02M，pH7．2のホウ酸緩衝液を用い
各毒素ともVEROとHELでは0。32μg／CPD5。
を示したのに対し，FL，RK、3，BHKでは3・20 てゲル濾過して得られた分画FI，FIIa，FIlb，FIII
をおのおの単独に体重当たり05，0．l mgを雄家
μg／CPD50であり，VEROとHELが他の細胞より10倍高い感受性を示した。

兎に投与して腎の変化を観察し以下の如き結果を

2．抗毒素産生性得た。分画Fl投与後24時間目に糸球体毛血管の，Shushupe，Jergon，Habu，Mamushiの各毒素 のう胞状変化を認め，その内腔にフィブリン，赤でウサギを免疫し，その抗血清中の抗出血価，抗血球，多核白血球を認め，次第にのう胞状変化は致死価，及び抗細胞毒性価について調べた。抗出減少して，増殖性変化が増加，それと同時にフィ

血価8〜32倍，抗致死価4〜16倍，抗細胞毒性価

ブリンの析出はみられなくなった。こののう胞状は共に64倍であった。Shushupe毒素でヒツジを腎にFITC標識抗家兎γ一グロブリン抗血清を用免疫したところ，抗出血価16倍，抗致死価8倍，いての螢光抗体法では全く螢光はみられなかった。

抗細胞毒性128倍の抗毒素を得た。

また電顕でのelectron dense depositはみられな

3． 各毒素とそれぞれの抗血清を用いて，交差寒かった。分画FIIa，FIlb，FIII投与群ではのう胞

49

状変化も増殖性変化もみられなかった。またFI投与による腎糸球体内で増殖した単核細胞の貧食

10ガス産生S配gθJJαゐoγdjH4型による輸入赤痢能をみるための墨粒を投与すると著明に墨粒が貧明石食されているのが観察された。丸山によると分画（大分大・保健管理センター）

FIにはヒト血小板凝集惹起作用が，FIIa，FIIb，

荒谷

FIIIにはヒト血小板凝集抑制作用があるといわれ，今回の実験からハブ毒による腎障害発症には免疫学的機序より，むしろ血小板が何らかの関与

光伸

弘康，原

耕平

（長崎大・医・第二内科）

症例は34歳の男性で3日間のフィリピン旅行から帰国後殆ど毎日2〜3回の泥状便が持続したが，をしていることが示唆された。

発熱や腹痛もなくアルコール過飲のためと思い放9 コレラ毒素の細胞内局在性置していた。6カ月後長男（11歳）が，発熱や膿

一免疫電顕及ぴ螢光抗体法を用いて一渡辺

繁徳，一ノ瀬休生，重野

江原

雅彦，岩永

秀明，

正明

粘血便などの典型的な赤痢様の症状を呈し，便より赤痢菌を分離した。さらにその1ヵ月後に父親である本人が発熱や腹痛を呈し水様下痢便を認め（長崎大・熱帯医研・病原細菌）

Ohtomoら（1977），ついでNicholsら（1980）

入院した。便から長男と同じく3h，わoン読∫14型が分離された。入院時所見では左下腹部に抵抗がA（SA）がcytosolあり圧痛を認める以外特記するような所見はな

B（SB）がmembrane分画に局かった。入院時検査では白血球増加，CRP3＋，

在することを報告している。本研究はその確認を

便潜血反応3＋と炎症所見がみられ，また下痢に目的として，全菌体にいずれも間接法の酵素抗体

よる脱水の傾向が伺われた。細菌学的検査では，法及び螢光抗体法を適用したものである。

分離菌の生物学的性状はグルコースを分解，または，コレラ菌毒素のsubunit

分画に，subunit

抗SA血清を用いた場合，螢光抗体法では菌体ガスの産生がみられインドールの産生はなく，ラ内に強く螢光が認められ，periplasmからouter

クトースやマンニットを分解しないところからガ

membraneにかけては観察されず，酵素抗体法でス産生マンニット非分解の赤痢菌と考えられ血清

はDNAフィラメントが強度にelectron lucent 学的に舗．δoy読i14型と同定した。同居家族5となって，通常はDAB反応の結果としてosmio− 人から分離された4株の薬剤感受性はテトラサイ
philicとなりelectron

denseな所見が得られるのとは逆ではあるが，periplasmからoutermem−

クリンとストレプトマイシン耐性であった。本例
はガス産生5h．60ア漉∫14型による細菌性赤痢のbraneには反応が認められなかったことと合わせ本邦初の症例であるが，その生物学的性状が異て，有意な所見と考える。抗SB血清を使用したなっていたため防疫的行政的には大腸菌として処場合は両法とも，periplasmからouter

理されており，輸入感染症が増加してきている今

membraneに強い反応が認められ，cytoplasmには有意な所

日，注意を喚起させられた症例であった。

見はなかった。以上は前記先業を支持するものである。

11

中国の克山病の病因とその発病機序
新宮 正久（久留米大・医・ウイルス）

克山病（Keshan disease）は1935年中国，東北地方黒龍江省克山ではじめて報告された慢性の地

方病性心筋疾患である。しかし調査がすすむに従って東北地方に限らず，中国大陸の黒龍江省から西南部の雲南省にかけて，幅狭い範囲で大陸を50

縦断するように長く帯状の地域に発生しているこ

ddY，C3H／He系のマウスに，横紋筋肉腫を作らせ，その腫瘍細胞をinとが知られてきた。

v酔oで培養し，継代細胞

はじめ冬期に多く発生し女子に多いことから一系を樹立した。今回は，C3H／He系マウスから取

酸化炭素中毒説があったが，地域集積性があるた

り出した腫瘍細胞について検討を加えた。細胞はめ食物中の痕跡元素，特にセレン欠乏説，あるい30代継代後クローニングして，5株の細胞クローは患者血液からコクサッキーB群ウイルスを分ンを分離した。得られた結果は次のようであっ

離した報告があるためにウイルス説等がある。

た。

患者は北部では冬に成人女性に多発し，南部で（1） 摘出した腫瘍組織についてPTAH染色，は夏に小児に多発するという。このような疫学的

HE染色，次に，継代したクローン細胞について，

知見から単一の病因と考えられないとも言えよう。

今回，中国黒龍江省より克山病患者血清30例と対電子顕微鏡的観察，HE染色，PAS染色，PTAH
染色の結果，このクローンがnlamentに富んだ照正常人血清15例についてコクサッキーB群ウイ

横紋筋肉細胞由来であることが判明した。

ルスに対する中和抗体価を測定した。ただ，克山（2） クローン細胞の狂犬病ウイルスに対する病患者血清はいずれも発病後6カ月より15年まで感受性をみるため，ウィルス接種48時間後，螢光の，しかも単一血清であったため中和抗体価から抗体染色した結果，細胞質内に多数のウイルス抗病原を推定することは極めて困難なことであった。

原が検出され，感受性であることがわかった。

抗体価の算術平均値からみてコクサッキーB2（3） クローン細胞がmyoblastからmyotube型とB5型にっいては検討の必要はないが，B、型， への分化が可能かどうかについて検討した。培養
B3型，B4型，B6型については更に症例を増やし，液中への2彩DMSOの添加，または1．4mM

特にB4型については発病初期血清について検討

Ca＋＋イオンを過剰に加えたり，減少したりするすべきと考えられた。また，inmigra−

ことによって，myoblastからmyotubeへの分

tioninhibitiontestを行い，ヒト心筋抽出液で高化を制御することが可能であった。この点でもク

vitro

cell

度免疫モルモットのマクロファージの遊走がコクローン細胞が横紋筋肉細胞由来であることがわ

サッキーB4型ウイルスの添加によって阻止されかった。

ることを知った。これは細胞性免疫の面からヒト

心筋とB4型ウイルスに共通抗原の存在を示すも

13

狂犬病ウイルスの細胞侵入機構

ので，反復したB4型ウイルス感染は細胞性免疫

一ウイルス粒子の溶血能と細胞融合能のという作用機序でヒト心筋を障害する可能性を示

発現一万年 和明，大内 正信，三舟求眞人

すものであろう。

（大分医大・微生物）

12

狂犬病研究のためのマウス横絞筋肉腫細
胞の樹立

七條

明久，三舟求真人（大分医大・微生物）

飯田芙佐枝，板倉 英世（長崎大・熱帯医研・病理）森内

狂犬病ウイルスやVSV（牛水胞性口炎ウイルス）はヒト赤血球を凝集しないが，トリプシンま昭，中山厳（大分医大・病理）

たはセミアルカリプロテアーゼで処理したヒト赤血球はこれらのウイルスでよく凝集されるようになり，酸性条件で溶血と著しい細胞融合が見られた。中性条件あるいは低温ではウイルスの溶血能および細胞融合能は見られなかった。一方，0．1

mMクロロキン存在下では狂犬病ウイルスおよ

狂犬病ウイルスの筋肉内での増殖あるいは潜伏びVSVの感染が阻害され，VSVの感染効率はの基礎的研究の目的で，継代可能な筋肉細胞系のクロロキンの存在で約1／100に低下した。以上の樹立を試みた。そこで4−HAQOを用いて，ICR，

成績から狂犬病などのラブドウイルスの侵入機構

51

として，ウイルスはまずviropexisで細胞内に順化ラットの心拍変化は皮膚の温熱刺激に，一方，とり込まれ，その水胞がライソゾームと融合して寒冷順化ラットの心拍数は冷刺激にそれぞれよりpHの低下が起こるやいなや，ウイルスエンベ

高感度に反応する。同様に短期の暑熱一寒冷一順化

ロープはライソゾーム膜と融合しウイルス遺伝子

ウサギの耳介及皮膚血管拡張一収縮反応は非順化が細胞質内に侵入するというセムリキ森林ウイル

対照群に比し増強されるが，逆に脳血流量は温度スで提唱された機構と同様な事が考えられた。

順化ウサギで減弱・減量がみられ，一見，慣れの現象を呈する。以上，温度順化の形成過程にみら

14 温度適応に関する2，3の問題点について
小坂

光男，土屋

井元

孝章

勝彦，大渡

伸，

れる生体反応は測定時点において，量的かつ発現
閾値に修飾がみられるので反応データ解析に問題を残している実状である。

（長崎大・熱帯医研・疫学）

15

温度適応の形成過程にみられる生体側の温度感受性変化や温度刺激による生体側の調節反応の量佐々木

梢機序に関しては今日尚統一見解を欠いている。

この原因としては，各研究者で温度順化の形成過隆（熊本大・体質医研・生理）的変化，さらに反応発現の様式に関する薪究報告は多いが，これらを総合した温度適応の中枢一末

高温環境下の運動中の発汗反応

高温環境における作業中の発汗応答を連続的に観察し，体温との関連にっいて検討を加えた。

4名の被験者（成人男子，28〜30歳）を環境温程における反応・データの記録時点に差があり，度30Cの室で30分間座位安静をとらせた後に，報告結果に偏差が大きい事，記録される反応示標30Cあるいは40C（湿度45％）の人工気候室での数が少ない事，かつ，多種類の反応を同時記録

自転車エルゴメーターによる運動負荷を行った。

した報告結果が乏しい事などが考えられる。

負荷の強度は360kgm／minで17分間を課した。

一般に，温度刺激によって誘発される①急性反発汗量はベッドバランスを用いて連続的に，また応である神経性調節は比較的早期に慣れはやの現7ヵ所の皮膚温および直腸温はそれぞれ熱電対，象をみるが，②続く体液性一内分泌性の慢性反応

サーミスターを用いて経時的に測定した。汗の蒸は比較的緩徐な馴れを生じ，③その時点において発を完全にするために，被験者の背部から送風を生体側には徐々に器質性変化が生じ，その増量と行った。

共に①②の反応は量的減少や反応発現閾値温度の変化が認められる。

安静時の発汗パターンは30Cと40C環境で分時汗量は異なるが，ほぼ一定した変化を示した。

例えば，発汗に関する実験報告では，皮膚の短これに対して作業時の場合は30Cでは13〜14分，

期暑熱鍛練では発汗量の増加，季節的には夏期

40Cでは4〜10分ごろを境として分時汗量の著は冬期に比し発汗量の増加及び汗の電解質濃度

明な増加による発汗パターンに変化が認められた。

（Na＋）の低下，発汗開始の直腸温度は夏は冬に比また30Cでは作業終了後3〜4分で安静レベルに達するのに対して，40Cでは10分以上を要す

し低温側に移動（閾値変化）すると報告されている。しかし，熱帯地気候に長期生活しているフィる。平均皮膚温の低下は40Cより30Cにおいリピン人は日本人に比し同じ暑熱刺激に対して発て著しく，いずれの環境においても分時汗量の水汗量が極めて少量であると報告されていて，所謂，準と皮膚温の低下度との間には有意な相関があっ

Habituation（慣れ）の現象を示す。短期の暑熱

た。

52

シンポジウム
ケニアにおける熱帯病研究の現状と展望

国際機関の活動状況，医療行政と医学教育，など
1

ケニア国伝染病対策プロジェクトとその

周辺の事情
林

について触れ，プロジェクト推進のためわが国の特に若手研究者の参加を期待し，その参考として
薫

諸事情について述べた。

（長崎大・熱帯医研・ウイルス）2

1976年8月，ヶニア国から伝染病対策に関する

細菌学の立場から岩永

協力要請がなされ，1977年，1978年の事前調査の正明（長崎大・熱帯医研・病原細菌）

後，1979年3月，プロジェクトが開始された。そ昭和55年6月から56年8月の間，ケニア国伝染の目的はケニア国における主要伝染病に関する基礎調査と研究から得られる資料に基づいて疾病予病研究対策プロジェクトに細菌学グループとして防に関する基礎対策を具申することであり，期間最初に参加し，主として細菌性下痢症に関する予は5力年である。ウイルス，細菌，原虫寄生虫の備的調査を行った。当プロジェクトは5年計画で各分野から，ケニア国内で広く問題視される下痢あり，初期着任者は任期の大半を人間関係の設立，症の解析と住血吸虫症に関する疫学解明を主題と実験室の設営，研究活動をするための現地側とのして調査研究が行われている。現在まで派遣専門交渉，日本側チーム内での意見調整等に費さざる家は既に14名に達している。上記疾患についてのを孝尋なカ〉った。

調査対象は低地帯と高地帯とを選定し病因論的に

細菌学グループの活動はコレラおよび一般下痢

比較対比することにし，今日まで両地帯の都市を症の2つをテーマとして開始した。一般下痢症は中心に調査が行われてきた。現在では調査対象をニエリ・ナイロビ・モンバサの各州中央病院にお村落集団へ移し，村落形態に伴う環境要因の分析，いて，外来下痢患者からの病原菌分離を試みた。
コ︐

季節的変動などを検討し，流行要因の解析を行う

レラに関しては，全国各地で分離されたコレラことにしている。一方，わが国側の特別の配慮に

菌の生物学的性状を調査すると同時に，血清型およってプロジェクト推進のためCommunicable

よびファージ型からケニア国内におけるコレラの

Diseases

伝播ルートを推定した。結局，初年度に得た知見

Research＆Control ProjectLaboratoryの建設が進められ1981年度で完成される。この研としては，1．下痢性疾患の少なくとも50彩嵐上

究棟では応用研究を行い，野外調査と平行して調は細菌感染によるものであろう。2．そのうち最査資料を検討してゆくことになっている。プロも重大視すべきは細菌性赤痢である。3．ケニア

ジェクトの進行過程にはケニア国研究者，技術者

国内におけるコレラの伝播はビクトリア湖周辺地との協同作業を通じて技術移転を行うと共に質的区から中部高原都市へ，南部海岸地区から中部高向上を計り，他方，わが国の派遣研究者の学問的原都市へ，またッルカナ地区（北西部）からの南向上をも努めなければならないことは論を侯たな

下などが主たる経路であると考えられたことなど

いo

であった。

ケニア国における伝染病対策プロジェクトは以次に細菌感染症研究に関するケニアの現状を一上のような方向性をもって既に各分野ともかなり言で述べると，それは極めて遅れているとしかいの業績が集積されてきているが，その背景となる

いようがない。細菌学者といえる者は全国でほんヶニア国の地理的一般事情，医学研究態勢の推移，の1〜2名しか居ない。臨床医も細菌感染症に対53する興味が少ないようで，特に下痢便が細菌検査の学童や一般住民2，977名の糞便のうち約30％かに提出されることはむしろ稀であるともいえる。

らシストが検出された。

しかしたとえ臨床医が検査を依頼しても，そこにトキソプラズマについてはNyeriの州立病院はもう一つの問題，即ち検査技術の問題をかかえの外来患者222名について血清調査を行ったが，ていることが明らかであった。現状は全国的にみ55．9％の高率に抗体陽性が認められた。

ると単純な染色と鏡検によって判定出来るものま

さて，これら原虫性疾患に対するケニア側の研でといった段階であり，淋菌・髄膜炎菌はよく鏡究の取り組みであるが，研究機関としては，ナイ

検されている。今は分離・同定の検査が地方まで

ロビ大学医学部，ケニア医学研究所，ケニアトリ可能になる一歩手前の状態であり，もう少しの努

パノソーマ症研究所，保健省疾病撲滅研究部，獣力で大きな進歩が期待される。

医学研究室，医学研究センター（ナイロビにあるオランダ王立熱帯病研究所がケニア側に移管され
3

原虫学の立場からたもの），臨床研究センター，それに国際研究機

井関

関として国際昆虫生理生態研究センターと国際動基弘（阪市大・医・医動物）

ケニアで問題となる原虫性疾患としてはマラ

物病研究所などがある。それぞれの取り組んでいリア，トリパノソーマ症，リーシュマニア症（カる研究内容については紙面の都合で省略するが，

ラ・アザール），赤痢アメーバ症，トキソプラズ

各研究施設単独あるいはいくつかが協力して疫学，マ症などがあげられる。

診断，治療，免疫学，生化学，生態学など各方面

マラリアは熱帯熱マラリアが95彩以上を占め，から調査・研究が進められている。これに米国の四日熱マラリア，卵型マラリアが少数あり，三CDCやWalter

日熱マラリアは殆どみられない。媒介蚊は・4．

ランダ熱帯医学研究所，英国，ソ連などの研究者8α〃めが参加しての共同研究もみられる。

αθとオ．ルn8S∫μSである。流行の主な地域

Reed陸軍（医学）研究所，オはvictoria湖周辺，海岸地方，Tana川流域，

あらゆる疾病が豊富にあるという点でケニアはそれにVoi，Taveta地方で，1980年Victoria湖
北東にあるNandi地方での調査結果では住民の熱帯病研究の宝庫である。将来，日本としてケニ

40％以上，ある小学校では学童の50％以上が原虫

機関と緊密に連絡を取って，現地研究者との共同陽性であったと報告されている。

研究として，ケニア側の受ける利益を充分に考慮

トリパノソーマ症はVictoria湖東岸のSouth
Nyanza地方に流行がみられ，Trho飽s蜘sεにアで研究を進めるには，これらケニア側の諸研究しつつ活動するよう方策を定めなければならないだろう。

よるもので，σ10s5∫nopo〃∫4ゆ召3，6もルscゆθsが媒介する。1980年には6カ月間に61例の患者が検出

4 寄生虫学の立場から青木されている。

（長崎大・熱帯医研・寄生虫）

カラ・アザールは中北部の乾燥地帯に流行がみられるが，Kituiの定着住民の間では内科的診断

克己

伝染病対策プロジェクト（JICA）における1981

調査を行った19，255名のうち3，668名（19％）に

年5月以後の寄生虫班の活動内容を紹介した。

感染が疑われたと報告されている。北部一帯では

1．寄生虫性下痢について

遊牧民の間に流行がある。・Ph1帥o∫o脚s脚or珈」

Coast

Provincial

GeneralHospital，Mombasa

が媒介者であり，これはシ・アリの巣（蟻塚）のにおいて，下痢を起こす病原体の検査が行われた。

通気孔内にひそんでいる。L卿ρ∫ooによる皮膚便の性状による検出される寄生虫種の違い等はみリーシュマニア症は西部のエルゴン山南側スローられず，寄生虫学的観察のみからは寄生虫性下痢

プに流行地がある。

は論じられない。腸管病原菌，ロタウイルスが検赤痢アメーバは演者が滞在中に調査した6地域出されない下痢便には鞭虫，赤痢アメーバ，ラン

54

ブル鞭毛虫が高頻度に検出され，これらは寄生虫

1971年に国際協力事業団の医療協力のもとに東ア性下痢の重要な病原虫と考えられる。

フリカ・ケニア共和国において病理解剖業務およ2．住血吸虫症の研究について

び臨床外科材料診断業務を開始したことから熱帯

1981年8月より南部海岸沿いのKwale地区に病の病理学的調査研究を始め現在に至っている。

おいて住血吸虫症の研究がスタートした。本研

ここ数年間は文部省科学研究費もしくは特別事業

究のPilot

費によって支援されている。学術調査の主題は，areaを設定すべく，南部海岸沿いの

Kwale地区における3ch∫3

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nα云oわiμ〃！

熱帯病の病理学全般について検討した結果，目下，の分布を調査した。Kwale地区の小学校135校よ

肝炎・肝硬変・肝癌を主とした肝臓疾患の疫学とり任意に41校を選び，その学校の4，5，6年生 病理学，およびカポジ肉腫の疫学と病理学のこのの検尿を行った。尿検査を受けた学童数は学校
2つの課題を選んでいる。もちろん感染症を主とによって異なる（15〜124）が，すべての学校に＆hαε〃1006∫μ吻虫卵陽性者が認められ（3〜93彩）

Kwale地区全域にS．hαθ㎜∫oδ

した熱帯地域風土病について様々な面からの資料を集積している。これらの調査研究の最終目標は

μ肌が流行して基礎的な情報を提供することによって治療と予防いることが明らかとなった。特に内陸のKinangoに貢献することである。また同時に，温熱環境と地区では1校を除き，55〜93彩と高い虫卵陽性率

病態像の特異性との関連性を探るべく人体材料のがみられた。海岸沿いの学校の陽性率は一般に低基礎的資料の収集と今後の同方面の研究の見通し

いが，80％を越える陽性率を示す学校も数校みらを確立したい。

れた。

現在行っている研究課題：1．ケニアにおける1981年12月より行われる予定の本格的疫学調査

B型肝炎ウイルスの浸淫状況について血清学的調の内容，実験室内で行われる各研究課題，本プロ査研究。2．ケニアにおける肝硬変，肝細胞癌とジェクトに関与するケニア国の共同研究者，プロ

B型肝炎ウイルスとの関連性。3．ケニアにおけジェクトを進めるにあたっての残された間題点等

る萎縮性肝硬変の組織像の特徴一特に炎症像のについて報告した。

強さについて。4．ケニアにおける一般病理解剖や臨床外科材料に現われる主な肝臓疾患について。

5

病理学の立場から

板倉英世（長崎大・熱帯研医・病理）調査研究のいきさつと目的：私共の研究室では

5．東アフリカの食品に寄生するマイコトキシン

産生真菌類の分離。6．アフリカ・バンツー語族の鉄沈着症。7．カポジ肉腫の疫学と病理組織発生。8．熱帯環境と疾患の病態像。

JAPANESE JOURNALOF
TROPICAL MEDICINE AND HYGIENE
Vol．11Ng．1

March，1983

CONTENTS
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Kimura，E．，Nakajima，Y．and

Enzymehistochemistryof

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Kanbara，H．and

Panjaitan，W．

The epidemiologicalsurvey ofmalariain

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