*2023 年 4 月改訂（第二版）
2020 年 1 月作成（第一版）

この添付文書をよく読んでからご使用ください。

*Strep B Carrot Broth™

B 群レンサ球菌選択増菌・鑑別用培地* 基本組成

本添付文書中に記載されている製品名 Strep B Carrot Broth™
One-Step と本製品 Strep B Carrot Broth™ は同一製品です。

培地 1,000mL あたりの成分 ※ 1:
Strep B Carrot Broth™

使用目的

ペプトン

Strep B Carrot Broth™ は、妊婦の膣入口部ならびに肛門部から採取した検体から B 群レンサ球菌（GBS）の検出を目的とした選択増菌・鑑別用培地です。この培地は、妊婦が保菌する GBS の定性的検出の補助として用いられます。

概要と原理

女性の膣入口部ならびに肛門部における GBS の保菌率は約 10 ～35％です（1）。GBS は新生児に対して重篤な疾患と死亡の原因となるため、膣入口部ならびに肛門部からの採取検体から GBS を検出することは新生児 GBS 感染症予防のために重要です。GBS による新生児敗血症および髄膜炎の発生率は地域および人種による差
異はありますが、現在のところ出生数 1,000 当たり 0.5 ～ 3 例であると報告されています（2）。早期発見と適切な治療により、現在死亡率は低下傾向にあります（3）。
米国疾病対策予防センター（The Centers for Disease Control
and Prevention; CDC）は、全妊婦に対する膣入口部ならびに肛門部から採取したスワブ検体の GBS スクリーニングについて、妊娠 35 ～ 37 週に増菌培地を用い、続いて羊血液寒天培地や他の適切な培地によるサブカルチャーを行うことを推奨しています。
Strep B Carrot Broth™ One-Step のような選択増菌・鑑別培地の使用は、CDC の GBS 感染症予防対策の一つです（4）。Strep B
Carrot Broth™ One-Step は、従来の培養方法と比較すると、培養時間の短縮と GBS を同定するための追加培養の必要性を減少させることが報告されています（5-9、23-26）。
デンプン、ペプトン、血清、および葉酸経路阻害剤のような基質との反応による淡いオレンジ色からオレンジ色さらに赤橙色への色素産生は、β溶血を示す GBS に特徴的です。1977 年に Islam
によってデンプン血清含有寒天培地が最初に紹介されて以来、その原処方に多くの改良が加えられてきました（10）。
Strep B Carrot Broth™ One-Step には、ペプトンやデンプン、緩衝液など、β溶血を示す GBS の色素検出に必要な成分が含まれています。この培地の利点は、わずか 16 時間で陽性結果が得られ、結果が陰性でない限り血液寒天培地へのサブカルチャーを必要としません。増菌培地を用いた方法は、直接塗抹法よりも保菌された GBS の検出感度が高いことが報告されています。β溶血を示す
GBS は、臨床検体から分離された全 GBS 株の 95.3 ～ 99.5％を占めています（18-20）。Block らと Czerepuszko らによる二つの異なる研究では、Strep B Carrot Broth™ One-Step と PCR 法ま
たは PNA FISH™ 法をそれぞれ組み合わせて使用できることが報告されています（24、26）。

25.0g

デンプン

10.0g

選択剤

38.8mg

MOPS（3- モルホリノプロパンスルホン酸）

11.0g

リン酸二ナトリウム

8.5g

デキストロース2.5g

ピルビン酸ナトリウム

1.0g

硫酸マグネシウム

0.2g

最終 pH 7.0±0.2（25°C）※1

性能基準に合うように成分量を調整または追加

外観

Strep B Carrot Broth™ はやや不透明な無色の液体培地です。培
地底部に白い沈殿物がある場合がありますが、培地の性能に問題はありません。

貯法・使用期限

本製品は非常に光に敏感のため、遮光のうえ、高温多湿と凍結を避け、2 ～ 8℃で保存してください。また、劣化や汚染の兆候がある場合や使用期限が過ぎている場合は使用しないでください。
使用期限が切れた場合や製品が適切に保管されていない場合には、最適な反応性が得られません。製品ラベルに記載の使用期限は、
本貯法どおりに保管され未使用の製品に適用されます。

本製品以外に必要となる器材および試薬

10µL の定量性マイクロループ、検体輸送容器、検体輸送培地、スワブ、インキュベーターなどの標準的な微生物学的消耗品および装置、ならびに必要に応じた血清学的および生化学的試薬を使用します。なお、Liquid Amies、Amies Gel、Liquid Stuart's
および Stuart's Gel 中に保存された膣・肛門部より採取した検体
は、Strep B Carrot Broth™」で使用する適切な検体です。
注意；U.S. Federal law restriction については、Strep B Carrot
Broth™ の英文 IFU（製品同梱）の Page 3 を参照してください。

検査の手順

検査材料：
本試験の検査材料は、妊婦の膣入口部ならびに肛門部から採取したスワブ検体です。
検体の輸送と保存 :Liquid Amies、Amies gel、Stuart's liquid および Stuart's Gelに保存された膣入口部ならびに肛門部から採取されたスワブ検体を使用して培地の評価を行いました。採取した検体を保存する場
合、製造元が検討した結果、ゲル状の輸送培地入りの採取キット（Liquid Amies、Amies Gel、Liquid Stuart'sおよび Stuart's Gel）の場合は 2 ～ 8°C で最長 4 日間、フロックスワブ（TransPRO™
Liquid Amies）で採取した場合は 2 ～ 8°C で最長 5 日間まで、1

陽性の色調パターン

オレンジ色を呈しました。24 時間室温で保存後に輸送した場合、GBS の回収が低下しました。検体は速やかに検査室に直接提出し、極端な温度変化のない環境での保管が必要です。処理が遅れる場合
は、適切な輸送培地に検体を接種し、培養するまで冷蔵してください。
検体の収集に関する情報については、記載されている参考文献をご参照ください（2-5）。

GBS 陽性

色の変化なし暫定的陰性／
弱いβ溶血を示す、または非溶血の GBS の存在を確認するため、羊血液寒天培地へ
サブカルチャーを実施

完全な発色

球状の発色

縞状の発色

GBS 2+ 〜 3+

GBS 1+GBS 1+ または以下

注意事項

1.	完全に同定するためには、純培養のコロニーに対して生化学的試験や免疫学的試験、または遺伝学的手法や質量分析による試験を実施することを推奨します。
2.	稀に少数の GBS はβ溶血を引き起こさないことがあります。
Strep B Carrot Broth™ に よ る GBS 検 出 は β 溶 血 を 示 す
コロニーのみです。β溶血を示す GBS は臨床検体から分離された全 GBS 株の 95.3 ～ 99.5％で生じます（18-20）。このような理由により、S. agalactiae ATCC®13813 は特徴的なオレンジの色素を産生しないので、品質管理の目的には使用しな
いでください。
3.	使用方法の章で概説したように、ゲル状の輸送培地を適切に乳化しないと、GBS の適切な発色および回収が阻害される場
合があります。
4.	Strep B Carrot Broth™ の性能は、活性炭を含む輸送スワブ
では検証されていません。
5.	Strep B Carrot Broth™ の性能は、ヒト DNA の存在下では検証されていません。
6.	E. faecalis のいくつかの株は、膣入口部ならびに肛門部から採取したスワブ検体中に 105CFU/mL 以上存在した時、GBS株の培養と回収を抑制することがあります。
7.	陰性と判定されたチューブは、羊血液寒天培地にサブカルチャーする前に転倒混和してください。
8.	Strep B Carrot Broth™ は感受性試験には対応していません。非選択培地へのサブカルチャーが必要です。
9.	膣入口部ならびに肛門部から採取したスワブ検体を室温で 24
時間以上保存することは避けてください。発色および GBS の回収に影響を及ぼします。
10.	GBS 血清型 VII、VIII および IX は、Strep B Carrot Broth™
で性能が確認されていません。
11.	Strep B Carrot Broth™ の臨床的な性能は、臨床試験で実施された以外の輸送スワブでは確認していません。

Strep B Carrot Broth™ において、β溶血を示す GBS が増殖す
ると 16 ～ 24 時間以内に淡いオレンジ色、オレンジ色、赤橙色に色調が変化します。このような発色が見られた場合は、検体中のβ溶血を示す GBS の存在を意味します。検体中の GBS 数が少ない場合は、ブロス全体がオレンジ色に変わるのではなく、スワブ
上またはブロス内に小さなオレンジ色から赤橙色の球状コロニー
または縞状の変化が観察され、GBS は陽性と判定します。結果の解釈および色調パターンと GBS 生育の特徴は以下の表に示すとおりです。
結果の解釈／対応

赤橙色

GBS コロニー数に応じた
発色パターンの特徴

結果の解釈

24 時間まで培養

オレンジ色

GBS
2+ 〜 3+
陽性発色パターン

使用方法 :
1.	Strep B Carrot Broth™ の使用する本数のみを冷蔵庫から取り出し、室温にもどします。
2.	チューブのキャップを外し、検体スワブを挿入します。ゲル状の輸送培地中に保存されたスワブを使用する場合は、液体培地中でスワブを回転させてゲルを乳化させます。振とうや
混和、ボルテックス等の操作は避けてください。スワブの軸をチューブの高さより若干低い位置で注意深く切断し、スワブをチューブ内に残します。チューブにキャップをし、スクスク
リューをしっかり閉めてください。チューブの底部を嫌気的リューをしっかり閉めてください。
状態とするために、キャップをしっかりと密封することが重要です。
3. 検体を接種したチューブを 35 ～ 37°C で培養します。
4.	16 時間後にチューブを観察し、淡いオレンジ色、オレンジ色
または赤橙色への発色または GBS に典型的な球状コロニーの有無を確認します。後述の「結果の解釈」をご参照ください。
もしオレンジ色が認められない場合は 24 時間まで継続して培養します。
5.	24 時間後にオレンジ色が認められない場合は羊血液寒天培地
でサブカルチャーを行います。羊血液寒天培地を 35 〜 37°C、
5 〜 10％ CO2 環境下で 18 ～ 24 時間培養します。GBS に典型的なβ溶血を示すまたは非溶血のコロニーを確認します。
GBS が疑われるコロニーについては、群別ラテックス凝集試
験を実施してください。
	検体中の菌を確実に接種するために 3 秒以上ブロス中でスワブを旋回させれば、スワブをチューブに入れた状態でなくても、培養結果に影響はありません。また、必要に応じて、フロック
スワブから輸送培地 30µL を Strep B Carrot Broth™ に分注し培養しても問題ありません。

淡いオレンジ色～赤橙色

淡いオレンジ色

培地の性能概要

以後の性能試験は本製品の製造元である Hardy Diagnostics にて取得したデータです。以下の「性能上の特性」に示す前向き臨
床試験においては、標準法による GBS の全体の陽性率は 21.1％（163/771）であり、そのうちの 4.3％（7/163）は非溶血の GBSでした。
2性能上の特性結果が乖離した分離株を Brucella Broth と共に CryoSavers™
で凍結し、製造元に移送しました。各分離株の同定（β溶血を示
す GBS、非溶血の GBS、または GBS 以外の菌）を確認しました。これらのうち陽性の菌株（β溶血を示す GBS または非溶血のGBS）を陰性の膣・肛門部検体中に検出限界濃度（103CFU/mL）に調整し、Strep B Carrot Broth™ One-Step における発色と、続いて羊血液寒天培地における培養により、GBS の検出率を検証しました。結果は表 1 下部の詳細を参照ください。

Strep B Carrot Broth™ One-Step の性能を、膣入口部ならびに肛門部から採取したスワブ検体を用いて、米国の 4 つの異なる地域の病院で評価しました。Strep B Carrot Broth™ OneStep における GBS の検出状況を LIM Broth による選択的増菌を行った後のルーチン培養と比較しました。一方、Strep B Carrot
Broth™ One-Step による増菌培養後、全例を続いて羊血液寒天培地へサブカルチャーを行い、生化学性状試験により同定しました。これらの選択増菌後、それぞれの羊血液寒天培地上で増殖した微生物をグラム染色、カタラーゼ試験、ラテックス凝集反応を用いて GBS の同定を行いました。
884 検体を対象とし、ルーチン培養に対して試験を行い、113 検
体は試験の登録基準を満たさなかったため、分析から除外しました。試験を行った残りの有効な 771 検体のうち、35 ～ 37°C で
24 時間培養後、Strep B Carrot Broth™ One-Step においてオ
レンジ色を呈した 143 検体は GBS 陽性であり、LIM Broth を標準法としたルーチン培養（以下、LIM 標準法）により得られた結果と一致しました。その結果を表 1 に示しています。性能評価に使用した検体は、3 つの異なるタイプの輸送スワブ／培地、すな
わち Liquid Stuart's Sponge（n=284）、Liquid Amies Sponge（n=111）および Liquid Amies ESwab（n=376）で採取・輸送されました。

LIM 標 準 法 で 検 出 さ れ た GBS 陽 性 検 体 と、Strep B Carrot
Broth™ One-Step による選択増菌後の暫定陰性を羊血液寒天培
地にサブカルチャーした結果と比較すると、18 検体が一致しており、合計 161 検体が真の陽性でした。LIM 標準法には培養同定されたβ溶血を示す GBS および非溶血の GBS が含まれています。
結果は表 2 下部の詳細を参照してください。

最小検出感度Strep B Carrot Broth™ の検出限界（Limit of Detection; LoD）
を測定するために、GBS の二つのβ溶血を示す ATCC® 株を 10 倍ずつ連続希釈後、培地に接種し、色調変化を評価しました。オレンジ色の陽性反応が認められた最低濃度を LoD と決定し、そのStrep B Carrot Broth™ による 20 回の反復試験により確認しま

表 1. LIM 標準法と Strep B Carrot Broth™ One-Step 発色反応結果との比較
施設

陽性

偽陽性 1

偽陰性 2

陰性

感度（％）

1

47

1

4

141

92.2

81.5

96.9

99.3

96.1

99.9

2

35

4

8

136

81.4

67.4

90.3

97.1

92.9

98.9

3

26

0

2

83

92.9

77.4

98.0

100.0

95.6

100.0

4

35

3

6

240

85.4

71.6

93.1

98.8

96.4

99.6

全体

143

8

20

600

87.7

81.8

91.9

98.7

97.4

99.3

3

95% 信頼区間（CI）

特異性（％）

3

95% 信頼区間（CI）

LIM 標準法では陰性で Strep B Carrot Broth™ One-Step で陽性が 8 検体認められました。すべての分離株を再試験し、これらの不一致を製造元で確認しました。これらの中で 6 つの分離株は、LIM 標準法では陰性であり、Strep B Carrot Broth™ One-Step において陽性の発色反応を示し、羊血液寒天培地上でサブカルチャーした結果、β溶血を示す GBS であることが確認されました。1 検体は GBS 分離株が凍結されておらず検証できませんでしたが、もう 1 つの検体は羊血液寒天培地上にβ溶血を示すコロニーを有していました。しかしながら、Proteus が培地上にスウォーミング（遊走）し、β溶血を示すコロニーを分離することができませんでした。
2
LIM 標準法では陽性で Strep B Carrot Broth™ One-Step が陰性であった 20 検体について、これらの分離株を再試験し、製造元で確認しました。14 検
体は LIM 標準法でβ溶血を示す GBS 分離株が培養され、元々の検体では Strep B Carrot Broth™ One-Step の色調反応は陰性でしたが、サブカルチャー
でβ溶血を示す GBS として確認され、続いて Strep B Carrot Broth™ One-Step 陽性の発色反応が確認されました。2 つの分離株は非常に弱いβ溶血を示す GBS として同定されましたが、Strep B Carrot Broth™ One-Step において発色反応を生じませんでした。4 つの分離株は、Strep B Carrot
Broth™ One-Step において発色反応を呈しない非溶血の GBS であることが確認されました。
3
非溶血の GBS は培地の色調変化では検出できず、サブカルチャーが必要であるが、5 検体が非溶血の GBS でした。これらの結果を真の陰性として考慮
すると、LIM 標準法によるβ溶血を示す GBS の回収と Strep B Carrot Broth™ One-Step 発色反応での検出率を比較した時、観察された全体的な感度と特異度の値は、それぞれ 90.4％（141/156）［95％ CI:84.7-94.1］と 98.4％（605/615）［95％ CI:97.0-99.1］でした。
1

表 2. LIM 標準法と Strep B Carrot Broth™ One-Step 発色反応および暫定的陰性のサブカルチャーと生化学的性状による検証
施設

陽性

偽陽性 1

偽陰性 2

陰性

感度（％）

1

50

0

1

142

98.0

95% 信頼区間（CI）
89.7

99.7

2

43

6

0

134

100.0

91.8

3

28

0

0

83

100.0

87.9

特異性（％）

95% 信頼区間（CI）

100.0

97.4

100.0

100.0

95.7

91.0

98.0

100.0

100.0

95.6

100.0

4

40

5

1

238

97.6

87.4

99.6

97.9

95.3

99.1

全体

161

11

2

597

98.8

95.6

99.7

98.2

96.8

99.0

LIM 標準法では陰性で Strep B Carrot Broth™ One-Step で陽性が 11 検体認められました。すべての分離株を再試験し製造元で検証しました。Strep
B Carrot Broth™ One-Step の発色反応に続くサブカルチャーによって回収されたすべての分離株は、GBS であることが確認され、LIM 標準法の偽陰性でした。
2
LIM 標準法では陽性で Strep B Carrot Broth™ One-Step が陰性であった 2 検体の不一致について、これらの分離株を表 1 の乖離した検体の検証と同様に製造元で試験しました。LIM 標準法で検出したβ溶血を示す GBS 分離株は、確かにβ溶血を示す GBS であることが確認されました。
1

3

共存微生物の影響した。Strep B Carrot Broth™ は、S. agalactiae ATCC®12386
および S. agalactiae ATCC®12403 において、１スワブ検体に103CFU/mL 含む（30CFU ／チューブ）場合、検出することができました。

Strep B Carrot Broth™ を用いて、低濃度の標的微生物が高濃度の非標的微生物の共存下で回収できるかどうかを検討しました。
Strep B Carrot Broth™ からサブカルチャーして回収したすべての菌を用いました。高濃度（1.5×108CFU/mL）の非標的微生物を LoD 濃度の各標的微生物と混合し、Strep B Carrot Broth™
に接種しました。標的微生物が回収されない場合には、回収されるまで非標的微生物の濃度を 10 倍段階希釈しました。Strep B
Carrot Broth™ は標的微生物の発色反応を生じ、本研究で用いた非標的微生物の一つを除き、すべての高濃度（1.5×108CFU/
mL）の存在下でβ溶血および非溶血の GBS 株を回収できました。
回収に影響した唯一の微生物は E. faecalis ATCC®29212 でした。E. faecalis ATCC®29212 の濃度が 105CFU/mL 以下のとき、
S. agalactiae ATCC®12386 は発色反応を生じました。
E. faecalis
6
ATCC29212 の 濃 度 が 10 CFU/mL 以 下 の 場 合、 非 溶 血 のS. agalactiae ATCC13813 はサブカルチャーで回収できました。

反応性

LoD の濃度（103CFU/mL）において、既知の９つの血清型のうち７つに相当する 54 種類の ATCC® 標準株と臨床 GBS 株がStrep B Carrot Broth™ で検出されました。本研究で使用した
GBS 血清型は、Ia、Ib、II、III、IV、V および VI でした。9 つの既知血清型に未決定の型の 4 株も含めました。GBS すべてのβ溶血を示す株は、Strep B Carrot Broth™ においてオレンジ色を呈し、非溶血の株はオレンジ色を呈しませんでしたが、羊血液寒天培地へのサブカルチャーによって検出することができました。

特異性

GBS に系統発生的に関連するか、または膣入口部ならびに肛門部より検体採取したスワブに存在する可能性のある 78 種類の非標的菌種 108CFU/mL を添加し、Strep B Carrot Broth™ で試験を行いました。試験したすべての菌種を以下の表 3 に示します。
24 時間培養後、すべての Strep B Carrot Broth™ について、発色反応を評価しました。Strep B Carrot Broth™ が発色反応を呈しない時に非標的菌種を増殖させるかどうかを確認するために、すべての陰性検体を非標的菌種の適切な培地にサブカルチャーをしました。試験した全菌種は Strep B Carrot Broth™ で陰性を示しましたが、増菌培養後のサブカルチャーで非標的菌種の45/78（57.7％）が検出されました。

その他物質による影響

膣入口部ならびに肛門部から採取したスワブ検体に存在する可能性がある、一般的に使用される、あるいは遭遇する内因性および外因性物質について、Strep B Carrot Broth™ における増菌または発色反応への潜在的影響について検討しました。下表に試験物質を示しています。GBS 陰性検体中の臨床上考えられる最も高い濃度では、いずれの物質に対しても影響は認められませんでした。
外因性物質
区分

表 3. 分析特異性試験における非標的微生物のリスト
Acinetobacterbaumannii

Enterococcus faecalis

Proteus mirabilis

Aeromonas hydrophilaEnterococcus faecium

Providencia alcalifaciens

Aspergillus brasiliensis

Enterococcus flavescens

Bacillus cereusEnterococcus hirae

Bacillus subtilisEnterococcus raffinosus

Bacteroides fragilisEnterococcus
saccharolyticus

Bifidobacterium breve

Escherichia coli

Campylobacter coli

Salmonella enterica
subsp. arizonae

Shigella flexneri

Klebsiella oxytoca

Staphylococcus aureus

Klebsiella aerogenes

Candida tropicalis

Klebsiella pneumoniae

Citrobacter braakii

Lactobacilllus
acidophilus

Citrobacter freundii

Lactobacillus gasseri

Citrobacter koseri

Lactobacillus
leichmannii

Lactococcus lactis

Clostridium novyi

Legionella pneumophila

Clostridium perfringens

Listeria monocytogenes

Clostridium sporogenes

Micrococcus luteus

Shigella boydii

Shigella sonnei

Stenotrophomonas
maltophilia
Streptococcus mutans
Streptococcus anginosus
Streptococcus bovis
Streptococcus
dysgalactiae

Morganella morganii

Streptococcus pyogenes

Neisseria gonorrhoeae

Streptococcus salivarius

Pediococcus acidilacti

Streptococcus uberis

Enterococcus dispar

Peptostreptococcus
anaerobius

Enterococcus cecorumEnterococcus durans

Plesiomonas shigelloides

ニュートロジーナボディオイル

2% v/v

ボディ
パウダー

ゴールドボンドボディパウダー

1% w/v

避妊ゲル

Options Gynol II®（ノノキシノール -9）

0.59% w/v

浣腸液

生理食塩液

0.25% v/v

潤滑ゲル

K-Y® ゼリー

0.57% w/v

マグネシアのミルク

1.78% v/v

Dulcolax®（ピコスルファートナトリウム溶液）

1% w/v

ポリソル
ベート 80Tween®80

10% v/v

直腸緩下薬

Fleet グリセリン坐剤

10% v/v

局所痔核軟膏

Preparation-H®

0.26% w/v

膣用かゆみ
止め

Vagisil® クリーム

0.41% w/v

Monistat®（硝酸ミコナゾール）

0.29% w/v

Lotrimin®（クロトリマゾール）

0.29% w/v®

ヒト羊水

Medfusion

2% v/v

ヒト糞便

Central Coast Pathology

2% v/v

ヒト胎便

LEE Biosolutions

2% v/v

ヒト尿Central Coast Pathology

2% v/v

ヒト全血液In-house

2% v/v

ムチン

Sigma、M2378

0.05% w/v

1g=1mL と仮定して C1V1=C2V2 を用いて計算した膣・肛門部検体に添加した物質量。
1

Streptococcus mitis

Enterococcus
casseliflavus

Enterobacter cloacae

ボディオイル

内因性物質

Staphylococcus
saprophyticus

Moraxella cartarrhalis

2% w/v

膣用抗真菌薬Staphylococcus
epidermidis

Corynebacterium
jekeium

1% v/v

Imodium A-D®（塩酸ロペラミド）

経口緩下薬

Salmonella serotype
Typhi

Hafnia alvei

Candida glabrata

Clostridium difficile

Saccharomyces
cerevisiae

Serratia marcescens

Geotrichum candidum

Candida parapsilosis

Pseudomonas
fluorescens

Gardnerella vaginalis

Campylobacter jejuni
Candida albicans

Pseudomonas
aeruginosa

サンプル
マトリックス 1中の濃度

Pepto-Bismol®（次サリチル酸ビスマス溶液）

下痢止め薬

微生物

物質／供給者

Streptococcus
pneumoniae

Vibrio parahaemolyticus
Yersinia enterocolitica

4

培養条件

品質管理

推奨される培養時間の範囲を決定するために、35°C で 12 ～ 24
時間、GBS の９つのβ溶血を示す株および１つの非溶血の株を用いて、LoD 付近の濃度で Strep B Carrot Broth™ の性能を検討しました。増菌後、5％羊血液を含むトリプチックソイアガープ
レートに２時間ごとにサブカルチャーし、GBS の存在を確認しました。試験したすべてのβ溶血を示す GBS は、16 時間までに何らかのオレンジの発色を生じ、20 時間までに明確なオレンジ色か
ら赤橙色の発色を認めました。試験した非溶血の株を含むすべての微生物は、12 時間の Strep B Carrot Broth™ のサブカルチャーで回収できました。これらの結果から Strep B Carrot Broth™
の培養時間の範囲を 16 ～ 24 時間としました。

製造元では適切な品質管理用の微生物および品質条件によって当
該製品の各ロットを試験し、その結果を Certificates of Analysis（COA）に概説しています。製造元では、以下の微生物を検定に使用しています。
培養
検査微生物
Streptococcus
agalactiae
ATCC®12386

Streptococcus
agalactiae
臨床株

検体の安定性Streptococcus
pyogenes

いくつかの検体輸送スワブを用いて、Strep B Carrot Broth™ で
GBS を検出するため、保存条件を検討しました。スワブに GBS
および膣細菌叢に一般的に見られる微生物からなる擬似検体をスパイクし、室温および冷蔵で保存後、0、24、48、72、96 お
よび 120 時間後に Strep B Carrot Broth™ に接種しました。本試験では 8 種類の GBS 株を LoD 付近の擬似検体にスパイクしました。非標的微生物を含む擬似検体は、E. faecalis 、E. coli 、
C. albicans および L. acidophilus から構成されていました。本
試験では、Liquid Amies（フロックスワブ液体輸送システム）および Healthlink 移送システムの 4 つのタイプ（スポンジ状のLiquid Amies および Liquid Stuart、ゲル状の Amies Gel および Stuart Gel を用いた TransPRO™ スワブ）を使用しました。
Strep B Carrot Broth™ は、GBS 株 を 100 ％（8/8） 検 出 し、Healthlink ス ワ ブ の Liquid Amies、Stuart's liquid、Amies
Gel、および Stuart's Gel に 2 ～ 8°C で最大 96 時間保存したところ、オレンジ色を呈しました。これらの GBS 株は、2 ～ 8°C
で 120 時間まで保存したフロックスワブ TransPRO™ LiquidAmies においてもオレンジ色を呈しました。試験したすべての輸送培地は、検体を 24 時間室温で保存した場合は GBS の検出が低下しました。

ATCC®19615

Escherichia
coli
ATCC®25922

Proteusmirabilis
ATCC®12453

接種方法※2 温度

大気
要求性

予想される結果
時間

結果

反応

A

35°C

好気性

16 ～ 24時間

陽性

生育明るいオレンジ色
や赤橙色の変化

A

35°C

好気性

24 時間

陽性

生育
淡いオレンジ色の
変化

A

35°C

好気性

24 時間

陽性

生育
色の変化なし

B

35°C

好気性

24 時間

陰性

部分的から
完全に抑制：
色の変化なし

B

35°C

好気性

24 時間

陰性

部分的から
完全に抑制：
色の変化なし各ロットの品質管理試験は、製造元の Web サイトから入手できる
COA に記載されています。
*	COA については下記の URL よりアクセス後、Catalog Number
は Z40、Lot Number は製品外箱記載の LOT を入力して入手をお願いいたします。
https://catalog.hardydiagnostics.com/cp_prod/Hardy_COA.aspx

接種方法
方法 A
	分離した 3 ～ 5 個のコロニーを釣菌し少量のトリプチックソイ
ブロス（Tryptic Soy Broth; TSB）に懸濁させ、4 ～ 5 時間
培養します。その濁度を 0.5 McFarland に合わせます。その細胞懸濁液を TSB または生理食塩水で 1:100 に希釈します。
定量性マイクロループで 10µL を試験培地に接種し、チューブあたり約 103 から 104CFU となります。
※2

再現性

この試験を開始する前に、製造元から提供された分離株 12 株のパネルを用いて、再現性試験を実施しました。３つの異なる研究施設で５労働日に３回試験を行いました。施設ごとに少なくとも1 人の検査員と 2 人の技師によって行われ、互いの結果はブライン
ドとしました。再現性パネルの菌株は、Strep B Carrot Broth™ を用いて、24 時間で 95％を超える発色結果をもたらしました。試験
したすべての非溶血の GBS 分離株（100％）を、羊血液寒天培地にサブカルチャーして確認しました。

方法 B	方法 A と同様に細胞懸濁液（0.5 McFarland 相当）
を調製します。
TSB で 1:10 に希釈します。方法 A と同様に、定量性マイクロループで 10µL を試験培地に接種すると、プレートあたり 104
から 105CFU になります。非抑制プレート（例えば Tryptic
Soy Agar; TSA）に同時に接種して陽性対照とします。

5

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ATCC は、American Type Culture Collection の登録商標です。

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製造元：	HARDY DIAGNOSTICS
1430 West McCoy Lane, Santa Maria,
CA 93455, USA
Phone: (805) 346-2766 Fax: (805) 346-2760
www.HardyDiagnostics.com

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Strep B Carrot Broth™ は、Hardy Diagnostics の商標または登録商標です。

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Copyright © Hardy Diagnostics. All rights reserved.

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Hardy Diagnostics の製造施設および品質管理システムは、ISO13485 の認証を受けています。

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Copyright © Shimadzu Diagnostics Corporation. All rights reserved.

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* 販売元：
お問い合わせ先：カスタマーサポート担当

TEL : 03-5846-5707
URL : https://corp.sdc.shimadzu.co.jp/

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IFU-10894[D]BO3C1S

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