lSSN

Japanese

Joumalof

Tropical Medicine

O304−2146

and Hygiene

第11巻 第2号

昭和58年6月15日

内容

第24回日本熱帯医学会総会講演抄録
目

次………・一……・……一一………・…・…・…・一……………一・…

シンポジゥム

ハブの生態研究と駆除対策…………・・……・……………・………

マラリアの基礎的研究………一…・…・…………・・
パネルディスカッション

一般講演……・一………●………

ハプ毒作用における各毒性因子の役割・………

会

・110−114

一115−137…｝…●…

・・139−201

昭和53，54年度決算・昭和55，56年度予算一…・……………………………・一

一202−203

昭和56年度役員会・会務総会記録一…………

−203−206………………

…………

一103−109………

英文抄録・……・…………・・…・……………

…………………甲94−97
98−102

海外在留邦人の健康管理・………・………・…………・

ラウンドテーブルディスカッション

89−93

1……………

報…・……………・・…・…………・…

昭和57年度役員会・会務総会記録・……………・…・………………………・………

−206−210

第10回国際生気象学会議・…・……………・・

・・210

日産科学振興財団研究助成……・……・……・………・…・……・……………・・…晶一−210

American

・・211

Board

ofTropical Medicineのアナウンスメント…・…・…………・・

会則……………一…・…・……一……層……………………・…一・………・・

投稿規定

P

誌H
会説
丁
医工
熱狐

日狙

日

本熱帯医学会−212−215

日本熱帯医学会雑誌 第11巻 第2号 198389−137頁

第24回日本熱帯医学会総会講演抄録
日堺長

期会会

昭和57年10月1日（金），2。日 （土），3日（日）
群馬県立東毛少年自然の家
日本蛇族学術研究所長

沢井

芳男

鈴木

（群馬大・医・寄生虫）

3マラリアにおける重症化と凝固異常につい

次

目

守

て
天野 博之

シンポジウム4東アジア地域におけるマラリア媒介者の進

化学的見解
神田 錬蔵，高井 憲治，小川 賢一

1ハブの生態研究と駆除対策
司会

田中

寛

（東大・医科研・寄生虫）（聖マリアンナ医大・病害動物）

1ハブの生態研究と駆除対策
田中

2

4

（東大・医科研・寄生虫）

電波追跡によるハブの行動研究
和田

3

寛
芳武

52・3の酵素の電気泳動像より見たハマダ
ラカ
塚本（東京女子医大・寄生虫）吉田朝啓（沖縄県公害衛研）

赤嶺博行（沖縄公衛協会）

宮本純之，小木曽重文

水納島におけるハブの生態研究と駆除
盛輝，吉田

朝啓

パネルディスカッション
海外在留邦人の健康管理

電気柵を用いたハブの侵入防止
林良博（東大・医科研・寄生虫）司会

章義（濁協医大・医動物）

中林

敏夫

神田

錬蔵

（阪大・微研・原虫）

海外在留邦人の罹患している疾病
海老沢功（東邦大・医・公衆衛生）

2 海外在留邦人の罹患している疾病

1マラリア感染赤血球のカルシウム代謝（阪市大・医・医動物）

R．B．Mikkelsen，D．F．H．Wallach（Tufts New England

MedicalCenter）

ワクチン開発をめざしたマラリア免疫学の
研究

藤田紘一郎

（1） マラリア（聖マリアンナ医大・病害動物）

田辺 和桁（長崎大・医・医動物）（長崎大・医・医動物）

1
IIマラリアの基礎的研究
司会

藤田紘一郎

司会のことば

奄美群島におけるハブ駆除対策
三島2（産業医大・医動物）（住友化学・農薬研）（沖縄県公害衛研）

6

増久

6殺虫剤抵抗性のメカニズム

ハブ生息の地域分布について

勝連

5（天理病院・海外医療科）

（2）肝炎
小幡

裕

（東京女子医大・消化器病センター内科）

3 海外在留邦人の罹患している疾病（3） その他の寄生虫病及び熱帯病

谷荘吉，小原博（金沢医大・医動物）90

海外在留邦人の寄生虫感染率と飲料水汚染

倉茂

達徳（群馬大・医）

との相関

杉原

久義

（名城大・薬・微生物）

4

藤田紘一郎

深見 征治，小此木 丘（三共・生物研）（長崎大・医・医動物）

5海外在留邦人の巡回健診とその間題点
松本慶蔵（長崎大・熱帯医研・内科）

一

6 海外プラント建設現場における医療対策と
正樹，井上

下山

7

孝

宏之，澤田

幸雄，

（兵庫医大・第四内科）

土屋幸男 （三井物産・人事部診療所）

いて一
小坂 光男，大渡題点

土屋 勝彦，井元 孝章

渡辺

9

榮

（上野原町立病院）

海外在留邦人の健康管理
小西 芳三（外務省・領事第一課）

ラウンドテーブルディスカッション
ハブ毒作用における各毒性因子の役割
沢井芳男（日本蛇族学術研）

司会のことば沢井芳男（日本蛇族学術研）

1ハブ咬症の病理
本間学（群馬大・医・第一病理）

3 ケニア産小哺乳動物寄生のシラミ類について弘夫（山之内製薬・中央研）

保4Micronlarial

物質説一夜間出現性仔虫内のRhodopsin
様物質
桝屋

富一

（福岡市）

真喜志金造

（琉球大・医・内科）

5東アフリ丸モザンビークのフィラリア症
藤田紘一郎，小田

弘

力，森

章夫，

（長崎大・医・医動物）（東京医歯大・医動物）

一仔虫保有率及び仔虫密度（MfD−50）に

ついて一
木村 英作
（長崎大・熱帯医研・寄生虫）

6腫脹因子
山川

periodicityにおける光力学

6西サモア国におけるフィラリア症の疫学（予研・細菌第二）5筋壊死因子鎮西博（長崎大・熱帯医研・ウイルス）大 （鹿児島大・医・第二生理）

ハブ毒の出血因子佐藤鈴木（愛知医大・寄生虫）

月舘 説子，上田 正勝

ホスホリパーゼA2
木原清俊

について（2）

2 プロティナーゼ
前野伸，藤原真理子，（長崎大・熱帯医研・疫学一環境生理）

金子

司会

孝章，

（長崎大・熱帯医研・疫学一環境生理）

海外在留邦人の罹患状況と健康管理上の問

8

4

伸，井元

2温度適応に関する研究一Habituationにっ

理対策とその問題点

3

勝彦，大渡

藤原真理子，小坂 光男

総合商社（三井物産）海外勤務者の健康管
増山

講 演

1温度順化過程における循環反射について

その問題点
中村

般

雅延，野崎 真敏
（沖縄県公害衛研・ハブ支所）

L．Penaia（西サモア国厚生省）

G．F．S．Spears

7蛋白分解酵素阻害物質（ISV）がハブ毒の（ニュージーランド・オタゴ大）腫脹，出血及び壊死に及ぼす作用について

7ハイティ・マラリア対策における殺虫剤散

徐

特別発言

正

堀

（韓国・慶北大・応用微生物）

布効果の間接螢光抗体法による疫学的アセ

スメント

91

鈴木

守

（群馬大・医・寄生虫）

ついて
大立目信六

V．Jean−Frangois，M．R．Hilaire，
L．Lafontant

Jr．（SNEM，Haiti）

13

8 インドネシアにおけるデングウイルスの分

インドネシアにおけるネッタイシマカとヒ

トスジシマカの生態とウイルスの分離

離五十嵐（福島医大・細菌）

章

小田

力

五十嵐

章

哉信力範聡樹進宣良 芳 春田野田原幡内田藤奥小船白池堀（長崎大・熱帯医研・ウイルス）（長崎大・医・医動物）（長崎大・熱帯医研・ウイルス）（神戸大・医・微生物）堀田進（阪大・微研・防疫）（神戸大・国際交流センター）（長崎大・医・医動物）

S．Djakaria，R．Hoedojo（神戸大・医・生理）（インドネシア大・医・寄生虫）（産業医大・小児科）

14ELISA法によるトキソプラズマIgG抗体（神戸大・医・小児科）

価測定及びProtein

A処理後IHAによる

特異IgM検出法に関する研究（神戸大・国際交流センター）

Agus

9

Sujahrurahman，Sumarmo

Sujidi

中島ひとみ，松本（長崎大・熱帯医研・臨床）

15細胞性免疫低下を示すフィラリア性乳康尿

ングウイルス増殖に及ぼす二・三の生物活症とトキソプラズマ感染の臨床免疫学的検性物質の影響討

博（神戸大・医・微生物）

吉田

俊昭，山本

S．Wiharta

堀田

眞志，松本

慶蔵

（長崎大・熱帯医研・内科）（インドネシア大・医・微生物）

16

酵素抗体法（ELISA）による糸状虫症の免疫血清学的診断の試み

進（神戸大・国際交流センター）

富里政秀（東京医歯大・医動物）

辻守康 （広島大・医・寄生虫）中島康雄（山梨医大・寄生虫）

中国におけるアカイエカ群の蚊の細胞質不野上貞雄（東大・医科研・寄生虫）

和合性について

末永

17

敏

刻維徳，徐

薇，纏建吾

（中国科学院・上海昆虫研究所）

日本脳炎ワクチン接種に対する幼児の中和

福永正三（奈良医大・寄生虫）尾崎文雄（高知医大）

古谷正人（徳島大・医・寄生虫）治療に関する実験的研究
豊，奥野 良信，只野昌之，

牧純，柳沢十四男

利彦，深井孝之助（阪大・微研・防疫）山田

猪木

18広東住血線虫症のフルベンダゾールによる

抗体応答
荘 榮

Trンpαnoso珈αのK−DNA及びN−DNAの∫n3∫砺miCrOnuOrOmetry（第4報）（長崎大・熱帯医研・資料室）

12

慶蔵

マウス腹腔マクロファージ培養におけるデ

Agus

11

寛，

（インドネシア大・医）堀田10

宮崎 昭行，土橋 賢治，鈴木明（阪大・医・小児科）

熱帯アフリカにおける腸管系ウイルスの生（北里大・医・寄生虫）19

日本住血吸虫虫卵のリンパ球に対する作用
について

石井

明，川越千恵子，八谷態

皿 ポリオウイルスの型内血清学的異同に

敏子（宮崎医大・寄生虫）
芦沢 広三（宮崎大・農・家畜病理）92今井20Toxoplasma感染マウス血清を使用した

21βoδθ3

28 中央アフリカ共和国における寄生虫調査

健一，中林 敏夫o

（宮崎医大・寄生虫）

0．Simanjuntak （北スマトラ州衛生局）

Toxoplasmaの抗原分析矢野淳一（阪大・微研・原虫）（1981年9月）特に腸管寄生原虫症の疫学

ro4肋∫n∫感染によるマウスの垂直

辻守康 （広島大・医・寄生虫）

感染の可能性について

高橋 宏昌，鈴木 直義（帯広畜産大・獣医・生理）

野上 貞雄（東大・医科研・寄生虫）

畑本 典昭（広島県公衆衛生課）

熊田

桂子，林

三由，加藤

（予研・寄生虫）

22Trγρo〃030〃2αcrμz∫の培養条件による脂質29名古屋市のドブネズミから見出された広東

組成の変化
金田 良雅，永倉 貢一，橘
合津 都世

裕司，

（東海大・医・寄生虫）23わが国に定住を希望するインドシナ難民の住血線虫（オn8io3

ron8

ついて
真喜屋 清

（名古屋大・医・医動物）鬼武

健康状況の解析山口 直人

浅見（慶大・医・公衆衛生）

敬三，竹内三浦左千夫，河村

勤，小林

30

一夫

建野 正毅

1972−1981年におけるわが国の輸入マラリ

大友 弘士，日置 敦巳

康司

大和難民定住促進センター出所後のインド

シナ難民の健康調査
竹内

勤，小林

河村

康司，浅見

（岐阜大・医・寄生虫）

中林

富沢

貞造

（甲賀病院・小児科）

正規，三浦左千夫，

中林敏夫（阪大・微研・原虫）

32 ベトナム難民に見られたアメーバ性肝膿瘍

敬三

例（慶大・医・公衆衛生）

天野博之（天理病院・海外医療科）

田畑

隆文（同・腹部一般外科）

森田

荘吉

博，猪木

正三，荒木

恒治

小原

博，谷

（金沢医大・医動物）（奈良医大・寄生虫）

海老沢功（東邦大・医・公衆衛生）

33 糞便中のシストからの赤痢アメーバ無菌株

大利 昌久（東大・医科研・感染症）の確立（青年海外協力隊）

小林

表

光代

正規，竹内

藤田紘一郎，月舘説子，黒川

34 ビルマの感染症
憲次（女子栄養大・微生物）杉山雅俊（順天堂大・医・衛生）朝倉健夫（熱帯医学協会）

インドネシア共和国北スマトラ州における腸管寄生虫調査敬三

1．地理と気象条件及び

マラリア
海老沢 功

（長崎大・医・医動物）
奥脇 義行

勤，浅見

（慶大・医・寄生虫）

インドネシア在留邦人の寄生虫感染率と飲料水汚染についての経年的観察

27（阪大・微研・原虫）（大和市立病院）

25熱帯地方長期滞在日本人の疾病

26

敏夫

31新生児期に発症したマラリアの1例
金光明，上野山裕己，吉村文秀，（慶大・医・寄生虫）山口 直人

oη8ns∫s）に

アの現状

正規，

（大和市立病院）

建野 正毅

硲ごon

（名古屋大・医短・生物）（慶大・医・寄生虫）

24

滋生

35

（東邦大・医・公衆衛生）

インドネシア各地における飲料水の細菌学的研究
奥脇 義行，矢内 寿恵，豊経子

（女子栄養大・微生物）藤田紘一郎，月舘説子

93（千葉県血清研）（長崎大・医・医動物）杉山雅俊（順天堂大・医・衛生）朝倉健夫（熱帯医学協会）

41

ハブ抗毒素の抗腫脹作用の研究
山川

雅延，野崎

（沖縄県公害衛研・ハブ支所）

36 マラウイ共和国におけるコレラと髄膜炎の42

検査について鹿住

赤尾 信吉（防衛医大・寄生虫）

37ハブの産卵・卿化と性比木原大（鹿児島大・医・第二生理）
中本英一（奄美ハブセンター）

吉岡

満城（鹿児島大・医・衛生）

38

良博

原田

隆二，中島

哲，上田 博章，

横山

孝一，水田

敏久，尾辻

43精製柿タンニンを用いたハブ蛇毒の血清反応について一間接血球凝集反応一
福重潤一郎，服部善八郎，古川加奈子，
小此木

44

丘

サキシマハブ毒の出血活性及び致死活性成

山川

善治

雅延，野崎

芳男

（日本蛇族学術研）

45

蛇毒の出血因子に作用する微生物由来の阻害物質について39沖縄県におけるハブ咬症について
新城 安哲，西村 昌彦

徐40（琉球大・医・保健管理）

ハブトキソイドの野外接種（第9報）
福島

英雄，水上 惟文，鳥入 佳輝，

正墳（韓国・慶北大・応用微生物）（沖縄県公害衛研・ハブ支所）
寛善

真敏（沖縄県公害衛研・ハブ支所）（日本蛇族学術研・沖縄支所）

照屋（三共・生物研）

分の精製に関する研究

について

沢井

義人

（鹿児島大・医・第二内科）（東大・医科研・寄生虫）

1981年における奄美大島のハブ咬症の現況

川村

ハブ毒による腎障害に関する研究（第ll報）

祐子（上尾中央総合病院，青年海外協力隊）

林真敏

46ハブ毒に含まれる新しいタイプのプロティ
ナーゼ：精製と酵素的性質

佐藤

保，貞弘

省二

鮫島 洋子，古賀

繁喜，東

勝観，

（予研・細菌第二）川畑 英機，山下

正策，香月

恭史，

47蛇毒の酵素化学的研究（29）タイワンハブ（鹿児島大・医）毒中に含まれる数種のアルギニンエステ
ラーゼの性質とその特徴

坂本 宗春
村田

良介，松橋

貞弘 省二

大井

清，近藤

了，

杉原

久義，二改

（予研・細菌第二）

鬼頭

玲子

直，近藤

久

俊章，二村

敦子，

（名城大・薬・微生物）

94

シ

ンポジウム

1ハブの生態研究と駆除対策
1．ハブの生態研究と駆除対策田中寛 （東大・医科研・寄生虫）

わが国におけるハブの生態研究はすでに20年以（林ら，1979）により証明されたが，さらに生理・生態学的な室内検定法を確立し，誘引物質の究明を行う必要があり，将来の最も重要課題であろう。

上前から始まっており，高良，木場の単行本はすでに1962年に発表されている。この時代は生物学
あるいは博物学的研究が主体をなすが，その後，

2

電波追跡によるハブの行動研究和田芳武（東京女子医大・寄生虫）

室内あるいは野外でのハブの行動の研究（田中，

ハブの行動を電波探知によって追跡するための1967）をはじめ，奄美大島では昭和45年度より系

小型のUHF発信器が開発され（池田ら，1971）

統的なグループ研究が始まり，昭和52年度からはてから，1979年まで徳之島，奄美大島の野外で実沖縄県と奄美群島でハブの駆除法を目標にした生験を続けて来た。計45匹のハブを用いたが，内29

態研究が拡大されて行われるに至った。これらの匹では野外での自発的行動観察を，残りの16匹で研究の進展は，我々にとっては当然のことに受けは砂糖キビ刈取作業中の人間の活動に対する反応止められているが，毒ヘビ1種について深く生を観察した。ハブに発信器を取付けるには，初期

物・生態学的研究の行われたものは世界に類がな

は切開手術による植込みを行ったが，中期からは

く，1980年8月に那覇市で開かれた毒ヘビ咬症の

粘着テープで体表に巻き付けた。

国際セミナーで注目を集めた。

自発的行動に関しては，下記の結果が得られた。

本シンポジウムでは，かなりまとまった研究成

ハブの活動は明らかに夜間に活発であるが，日中

果にっき，その主たる研究者に発表してもらうが，に移動する事もあり，一晩中ほとんど移動しな

その他の注目すべき二・三の点を指摘しておく。

いこともあった。夜間の活動は，通常1−2時間

ハブの生息密度の測定は，1970年に連続捕獲法

動くと1−2時間停止するといった具合で一晩中で行われ，奄美群島で5匹／ha以下，平均で3．16

動き続ける事は極めて稀であった。5−10分毎の（田中ら，1974）とされているが，その後の研究

観察でみると，移動速度は最高で3m／分，通常による補正ではその2倍の密度が推定される。ハ1m／分以下であった。詳細に連続探知が続けられ

ブ咬症発生と環境の関係の解析で，奄美群島ではた延15例について，一晩に動いた範囲をカバーす

部落別に咬症発生数をみると，実際に耕作している円の直径を取ってみると，雌は6例の平均で30る経営耕地面積と密な関係があった（田中ら，m弱，雄9例で平均44m強であり，雌は狭い範1978）。

この法則は沖縄で成立するとは考えられ

囲内を動き回る事が多く，雄はより直線的に長距

ず，地域毎の検討が必要であろう。ネズミの密度

離を移動する例がよく見られた。前記の平均値にが高い程，ハブ密度は高く（和田ら，1981），ネズ

は算入してないが一晩の最大移動距離は直線でミの密度低下はハブ密度の低下につながる（池田320mというのが雄で記録された。またハブは水ら，1971）という報告があるが，ハブ駆除がネズに入ると移動が速く，行動半径も大きくなる傾向

ミの増加にっながる可能性があり，相互関係をさがあった。1週間の観察から，一旦好適な日中のらに検討する必要がある。

隠場所を見つけたハブは，数日間はその場所を中

ハブの誘引効果は，沖縄におけるヒョコの実験，

心に動いて居り，あたかも行動圏を持つ様に見え

奄美におけるネズミを入れた捕獲箱を用いた実験

たg観察終了後29匹の内12匹が木の根の下をはじ

95

め土中の隙間や穴から，11匹が濃密な茂みの中かによりハブの生息分布を示す現況図が得られたが，ら回収された。

その中，那覇市内の孤立したハブ生息地が29区，

砂糖キビ生産組合によるキビ刈取りの際のハブ延面積が185ha，道路によって分断された生息の反応については以下の通りである。はじめに1−2名がキビ畑に入り，キビの梢頭部切落作業地12区，383ha，他の市町村に連続している部分

11区，856haが明示された。この現況図によれを行うが，この作業は人の移動が速い。この作業

ば，那覇市で全市域の45．3％を占めるハブ生息者の接近で逃げるハブは2例／10例であり，逆に地に28，096世帯（32．3％，約100，000人），西原町

1−2時間停止して後，動き出したものが6／10ででは90．9％の生息地に3，190世帯（83．4彩，約あった。この6例は人の速い接近で逃げる前に人

16，000人），佐敷町では80、9勉の生息地に1，437世が踏越えたため，攻撃体勢を取って停止していた

帯（60％，約6，000人）が住んでいることになる。

とも考えられる。キビの切倒作業はかなりの人数

また那覇市内のハブは1，189件中98％は林・草でゆっくりと前進するが，この作業者の接近でもしかし地の辺縁から30m以内で目撃されており，佐敷町，西原町の農業地帯でも95％以上が50m以内4月になると，5／6が数m〜10m逃げた。結果とで目撃されていて，ハブが草木に大きく依存してして2月には1／4が，4月には3／5〜5／7と半数以いる傾向がうかがわれた。

2月には3／5が逃げずに発見捕獲された。

上が刈取中に捕獲されず，畑の外に逃亡した。

さらに那覇市内の2車線道路の夜間（9：00pm．一
5：00a．m．）の交通量から車間距離・車間時間を求

3 ハブ生息の地域分布についてめると，最も車の少ない道路で27秒間隔となり，

吉田朝啓（沖縄県公害衛研）

市街地で13m道路（2車線）の両側の住宅地を含

赤嶺博行（沖縄公衛協会）

む40〜50mの距離をハブが横断して他の林・草毒蛇問題への対応策として，抗毒素による咬症
患者治療体系の確立が優先されているが，根本的地に移動する可能性は極めて小さいことが推定された。

な対策としては，ハブと人間の生活圏を人為的に一方，典型的な沖縄の農村と思われる佐敷町で，分離して双方の接触を防止することが・またすす全域に100mの方形区画を設け，目撃頻度と世帯められる。

数との関係をみると，1世帯当たりの目撃率は世

現在沖縄県では年間200名余の咬症患者が発生

帯数の増加につれて減少し，1ha当たり25世帯のしており，そのおよそ70％は農村集落内外及び

ほぼ飽和状態でハブの目撃が0に近づくことがわ

都市内住宅地周辺での事例で占められている。そかった。

こで，都市と農村におけるハブの生息分布を調べ

これらのことから，都市でも農村でもハブの分る手法を考案し，分布の様相を知るために，那覇

布は大きく林・草地に依存し，それが住宅地に市（人口30万人，面積38km2），西原町（1万6よって包囲された状態では辺縁から僅か50m以

千人，15km2），佐敷町（1万人，10km2）で実内に移動が限られ，さらに単位面積当たりの住宅態調査を行った。

が増えるに従って生息分布は0に近づく様相が理那覇市で85，000世帯中8，779世帯（約10％），西解できる。また，これらの実態を把握するのに，原町で3，824世帯中1，256世帯（約33％），佐敷町

戸別訪問による分布調査は有用な手段であると判で全2，384世帯を戸別訪問し，居住歴5年以上の断された。

成人に対して最近5年以内に目撃した蛇類の種
別・場所・年月について聞き取りを行い，脱皮・卵を含む総数でそれぞれ2，265件，439件，455件の目撃頻度を得た。これを地図化した目撃分布図と植物分布図・原色航空写真との照合，現地踏査

4

水納島におけるハブの生態研究と駆除
勝連

盛輝，吉田

朝啓
（沖縄県公害衛研）

ハブ駆除の手法は，人手による直接捕獲の他に，

96

トラップ，接触殺蛇剤，天敵，ヘビアメーバ，ハ

われないのは，幼蛇が捕獲されないことに起因す

ブ探索犬などが研究されてきており，現在も進行る。実数は自然死やトラップに捕獲されない個中である。我々は，環境汚染，生態系の撹乱の可体を加えることにより多少増えるが，4年目以後

能性の最も少ない方法として，トラップによる除の，推定総数の減少，捕獲効率の低下，また平均去法により，分布，密度，個体群動態，食物連鎖

体長の低下などから，同島のハブ個体群の縮少はに関する生態研究と，ハブの完全駆除を目的とし明らかであり，数年以内のハブの完全除去が期待て，1957年より，沖縄県水納島でハブ駆除実験をされる。

行っている。水納島は長径1km標高12m，面積約50haの小島で約50人の住民が住む。外周をモクマオウとアダンの防風林でおおわれ，中央部は5 電気柵を用いたハブの侵入防止

林良博（東大・医科研・寄生虫）

畑と牧草地で一角に約15軒の集落がある。同島にハブ咬症において注目すべきことは，その大半はハブの天敵が生息せず，他の地域ではハブの主が家敷内（20％）と耕地内（60％）で発生しているこ

要な餌であるネズミ類も生息せず，動物層は比較とである。一方，奄美大島及び徳之島の家敷・耕的単純である。小鳥やトカゲの数は極めて多く，地面積は全島面積のそれぞれ5％及び25％にすぎハブの主要な餌となっている。調査方法は，島全ない。このことは林野をハブ駆除の対象から除い

面に50m間隔で，185個のトラップを設置し，ても，人家及び耕地のハブ生息数を激減させ，そ毎日または隔日点検した。調査は4月一11月までの再侵入を防止することができるならば，咬症数行ったが，年により異なる。各年の調査日数，1を著しく減少させることができることを示唆する

日1罠当たり捕獲数は，1977年一114日・43匹・2ものである。長期的な観点からハブの駆除を行う

×10−3匹，1978年一139日・37匹・1．4×10−3匹，には，環境整備によるハブの生息適地の撤去が1979年一123日・51匹・2．2×10−3匹，1980年一もっとも抜本的方法であることに疑う余地はない。

229日・40匹・0．9×10−3匹，1981年一229日・20

しかし環境整備を進めるに際して2つの問題点が匹・05×10『3匹と，減少してきている。

5年間ある。第一は面積当たりの費用が高く，短期間にの捕獲総数は雄96，雌91，不明5の192匹で性比広域で十分な効果をあげることが困難である。第は1：1である。

防風林，畑・草地での捕獲が多二に，環境整備が時として環境の汚染を招く，あく，砂浜，住宅地で少ない。畑・草地での昼間のるいは住民にとって生活しづらい人工的な環境をハブ目撃は稀なので，防風林とともにハブの主増やすことになる恐れがある。電気柵はこうした要な餌場となっていると考えられる。捕獲ハブの問題点を解決するために開発が進められた。室内

全長は75cm〜150．5cmである。他の地域では実験で明らかになったのは以下の2点である。1）200cm前後まで成長する事から，同島のハブは500オームの負荷で波高値480mA，0．31mQ，周期

小型といえる。また，卿化直後のハブの大きさは約1秒の高電圧パルス電流を用いると，全長平均30cm前後であり，艀化後1・2年はトラップに140cmのハブは50cm以上の高さの柵を越える捕獲されることを示し，幼蛇に誘引餌のヒョコをことができない。2）電気ショックを受けたハブ

捕食しないものと考えられる。香村（1980）のは，それを記憶するイノシシなどの高等な動物と

ハブの実験

室内飼育

の飼育下のハブの体長に異なり，何度も柵を越えようと試みた。これは柵準じて作成した捕獲ハプの生命表によれば，1977

が完全に，しかも永続的に設置されない限り，ハ

年の同島のハブ数は雄74，雌59，計133となる。

ブの侵入が起こりうることを示唆するものである。

1978年は雄74・雌56・計130，1979年雄61・雌46・

一方，奄美大島の手安部落（6．75ha）に設置した計105と，ほとんど変化しないが，1980年一雄27・1，000mの電気柵による野外実験では，設置前の

雌24・計56，1981年一雄7・雌16・計23と減少し半数以下のハブが柵内で観察されるにとどまった。

ている。トラップによる除去効果が3年間殆ど表

現在，徳之島の3部落に合計7，000m以上の電97

気柵を設置して，本格的な野外実験を行っている。

であり，ネズミをおとりにしたハブ捕獲器の有効

このなかで注目される二・三の点をあげると，1）性も確認された。

管理の簡素化をはかるために電源として太陽電池

昭和55年度からは，これらの研究成果をもとにを用いていること。2）電気的なトラブルを減らして，総合ハブ駆除モデル研究を推進している。

すために金属製品をさけグラスファイバー製品を本研究は多用していること。3）ハブの侵入防止効果にとと誘引物質の研究開発，2）電気柵によるハブのどまらず，積極的に捕獲するトラップ機能をもつ

侵入防止実験，3）ハブの主要食物であるネズミ

電気柵を用いている等である。

の駆除実験，4）ハブの生息所となる石垣や土手

1）捕獲器によるハブの誘引捕獲実験を撤去し，ブロック塀やコンクリート擁壁に改善
6

奄美群島におけるハブ駆除対策三島章義（濁協医大・医動物）する環境整備実験などの4項目について実験を進めている。

奄美群島のハブ生息地では，例年ハブ咬症の55年度は人家の密集した徳之島町手々地区，56

55％以上が耕作地で発生しており，これについで年度は人家と耕作地が混在する同町轟木地区を実人の居住区すなわち集落内が25％前後を占めてい験区とした。実験は，周辺地域から実験区内へのる。従って奄美群島のハブ咬症を減らすには，住ハプの侵入を防止しながら，その中のハブを駆除

民の日常生活に密接したこれら耕作地帯と集落内

し，ハブの生息所となる石垣や土手を撤去改善すにおけるハブ咬症の発生を防止することが重要なるという方法をとった。すなわちこのような方法課題である。

によってハブの生息個体数を減らす努力と，ハブ

そこで国土庁と鹿児島県は，奄美群島振興開発の生息環境を変えることによってその生息密度を事業の一環として，昭和52年度から3年間，基礎下げ，さらに集落内および屋敷内へのハブの再侵的なハブ駆除対策調査研究を推進した。調査と実入を防止しようとするものである。

験的研究は，ハブの生態・疫学研究に関係していこれらの実験で，電気柵のハブ侵入防止効果，た研究者を中心にハブ駆除対策研究会を組織し，

ハブトラップの捕獲率は人力によるハブ狩りよりハブ駆除に関する基本的なハブの生態や駆除方法も高く，有効であること，ネズミの駆除効果などの研究開発を行った。

が実証された。更にハブの生息所を撤去改善する

これらの調査研究では，ハブの出現頻度の高いこととブロック塀やコンクリート擁壁が，ハブの場所や生息状況が明らかにされ，特に集落内では防除効果に極めて有効であることが証明された。

屋敷の境界構造をなす石垣や土手の多い場所が，以上の成績から，ハブ生息地域の集落内ハブ駆ハブの出現頻度の高いことが判明した。また電気除対策を進めるには，これらの方法を広く実施す柵を使ったハブ防除網が，ハブの侵入防止に有効ることが最も有効な方策であると考える。

98

II

マラリアの基礎的研究

コンドリアが現われてカルシウムを蓄積するから

1マラリア感染赤血球のカルシウム代謝
田辺和桁（阪市大・医・医動物）

R．B．Mikkelsen，D．F．H．Wallach（TuftsNew England

Medical Center）

マラリア原虫は赤血球内でヘモグロビンを取り込み，それを主なアミノ酸源にしたり，赤血球

カルシウム量が増加するのであろう。

2）感染

赤血球ではCa2＋の流入が増加し，流出は減少した。これはCa2＋透過性が感染赤血球膜において変化していることを示している。3）カルシゥム

ィオノフォアのA23187を使って正常赤血球に45Ca2＋を取り込ませ，

これをトリス・塩化アン

NADPHを利用してオキシダント障害の防止をモニウムで溶血すると，90彩以上の45Ca2＋が赤して，うまく赤血球内寄生に適応している。さら血球から溶出した。一方，同様な処理を感染赤血に，赤血球内は宿主の免疫監視機構の目は及びに球について行うと，10〜20％の45Ca2＋が出ただ

くい。ところが，赤血球膜が各種アミノ酸・糖・

けで，残りは原虫内に含まれたままであった。こ無機イオン類などの透過性が限られているので，の結果と，代謝阻害剤を用いた実験結果を考え合

赤血球内寄生は原虫にとって不都合のように思え

わすと，感染赤血球に取り込まれたCa2＋の殆どる。ここで，マラリア原虫による宿主赤血球膜のは原虫内にあることを示している。

性状の変化が間題となる。

真核細胞においてはカルシウムイオン（Ca2＋）

一方，H＋一ATP

aseの阻害剤のDicyclohexyl−

carbodiimide（DCCD），またH＋一イオノフォアのが多くの基本的細胞活動・機能に重要な役割を果珈一chlorophenylhydrazone（CCCP）で感染赤血す。細胞膜のCa2＋透過性の変化によるCa2＋濃球を処理するとCa2＋の流入が抑えられ，Ca2＋

度のわずかな上昇は数々の細胞障害を引き起この流出は促進した。これらの結果はマラリア原虫す。赤血球内でCa2＋量が増加すると赤血球の形のCa2＋トランスポートは原虫原形質膜のプロト態変化・可逆的変形能の低下・陽イオントランス

ン濃度勾配に依存していることを示唆する。

ポートの変化・膜蛋白質の変化・膜脂質の過酸化などの異常を引き起こす。マラリア原虫も真核細胞であり，Ca2＋が原虫の生存・発育にとって重要な働きをしているはずである。しかし，原虫は2

ワクチン開発をめざしたマラリア免疫学の

研究
鈴木

守

（群馬大・医・寄生虫）

Ca2＋濃度の極めて低い赤血球内という環境に寄マラリアのワクチンに関する実験的研究はすで生する点が特殊である。このことはただちに，どに1910年の早きにSergentによって行われた記のようなメカニズムで原虫はCa2＋を細胞外から録がある。1976年国連の熱帯病特別計画が，マラ取り，細胞内Ca2＋量をコントロールしている

リア・ワクチン開発を目指す計画をうちだして以のかという疑問を生じる。この点をP1αS醒04i麗襯来，マラリア・ワクチンに対する関心は，単に実choわ側読感染SDラット赤血球を用いて調べてみ験室レベルでこの種の仕事に従事している研究者た。

にとどまらず，実際のフィールドでマラリア対策

原子吸光分析による感染赤血球のカルシウム量を現実にすすめている従事者にとっても重要な関の測定，及び45Ca2＋トランスポートの解析から心事となった。実用可能なワクチンが開発された

次のような結果が得られた。1）メトリザマイドとすると，マラリア対策事業全体にとっても革命の比重勾配遠心により得られた感染赤血球では，的な変化が起こるに違いないからである。現在，感染により赤血球カルシウム量は増え，ことにシ

マラリアワクチン開発計画の主流は，効果的な防ゾン1・・生殖母細胞期では正常赤血球の10〜20倍

御免疫を生体に誘導する，マラリア原虫の抗原をの増加が見られた，生殖母細胞では機能的なミト

ハイブリドーマ由来単一クローン抗体産生の技法

99を使って単離することにあるように見受けられる。

不可欠である。我々は，現在マラリアの感染をう生体内に侵入してから後の原虫の各発育段階すな

けたマウスにつき，特に生体内の丁細胞の動態

わち，スポロゾィト，赤血球内原虫，生殖母体なにつき，一連の研究をすすめ以下の所見を得ていどについて，すでに単一クローン抗体は得られてる。1）マラリア感染に伴って防御的に働く丁細いる。しかしながら一方において少数派ではある胞と，逆に生体を障碍する丁細胞とがでてくる。

が，マラリア原虫を弱毒化し，生きた原虫そのも

2）マラリアの感染をうけると胸腺内の丁細胞ののを「生ワクチン」として使ってみようとする考大多数は放出され，流血中にでて最終的に肝臓にえもある。実際のマラリア流行地の観察，さらに局在するようになる。3）肝臓を電顕でみると，実験室内の観察をあわせて考えてみても premu−

マラリア原虫をとりこんだ細胞にリンパ球が接触

nitionという特殊な免疫状態が，すなわち弱毒している像がとらえられた。この所見は，感作丁化された原虫がごく少数生体内に存在することに細胞がマラリア原虫と，それをとりこんだ細胞とよって作りだされる免疫が，マラリアに対する生を，同時に破壊していることを示唆するものと解

体の防御を形作るという点において，もっとも有釈された。

効かつ持続性のある効果を生体に賦与することは生ワクチンは，防御上必要な生体の免疫反応を明らかである。我々はこうした視点にたって恒久的に弱毒化したマラリア原虫を作りだす研究に持続的に賦活し，マラリアに対する持続的・効果

現在従事している。研究の発端は，たまたま胸で，実際のコントロールに応用する上で有望な研

腺欠損動物のマラリア感染の免疫反応を研究して究対象と考えられる。

いる最中に恒久的に弱毒化したマラリア原虫株
P1αs

no4iμ1n加r8hθi（NK65XAT）（以下XAT株）を分離したことにある。40Kradという高照射量のX線により，完全に死滅したはずのマラリア的な抵抗力を生体に賦与するものと考えられるの3

マラリアにおける重症化と凝固異常につい

て
天野

博之

（天理病院・海外医療科）

原虫の中から免疫不全動物の中においてのみ増殖

熱帯熱マラリア死亡例の主要病理所見は，各臓ができる原虫が回収された。XAT株は極度に弱器におけるマラリア栓塞とマラリア色素の沈着で毒化しているため，正常マウス内では増殖しつづある。加えて，諸臓器の出血傾向が存在し，DIC

けることができず，ヌードマウス内においてのみの合併を疑わしめる。文献的にも，猿の実験，人従って継代が可能であったが，50回の継代をくり症例において，病理的に血栓症を証明して，DIC

返しても強毒株への逆もどり現象は見られなかっと確定診断されたものもある。しかしながら，一た。XAT株を生ワクチンに見たてて動物に接種 般にDICの病理学的診断は困難な場合が多く，
むしろDICを臨床概念と考え臨床検査所見からしたのち，強毒株を注射してみたところ，ワクチ
ンをうたれた11匹中，7匹までが，攻撃に耐えて診断する方が望ましい。 かかる観点からは，自生存した。

コントロール群のマウスは100％の致

験例に見られたようなPTAH染色による軽微な命率を示した。さらに死亡例について生存日数をFibrin析出も，DICによる変化の左証と考え得

比較すると生ワクチン接種グループは23．5日，コるであろうし，病理所見でマラリア栓塞のみとさ

ントロールグループは9．5日と明らかな差が認めれる例においてさえ，その臨床検査所見が，DICられた。ワクチンをうけた動物に特異的なIgG の臨床診断基準を満足するであろうと推察出来る。
が長期にわたって検出された事より判断して弱毒DICの診断基準には，PLT，Fbg，及びFDPを

原虫は長期にわたって生体内に生存しつづけて免使用するが，重症マラリア例でDICの合併があ

疫応答を誘発しつづけているものと考えられた。

るとすれば，マラリアにおけるPLTの減少を凝「生」のワクチン計画の研究推進においては，マ固異常に起因すると考えても不思議はない。さすラリアの感染に伴う生体の反応を研究することはればまた，PLTの変化により，マラリアの重篤化

100の時期を知ることも可能であろう。熱帯熱マラリ

アについて自験例に内外の文献に見られる症例を加えて検討するに，合併症を伴う重症例では，

4東アジア地域におけるマラリア媒介者の進

化学的見解
神田

DICの診断基準を満足するものが高率に認めら

錬蔵，高井

憲治，小川

賢一

（聖マリアンナ医大・病害動物）

れる。さらに合併症のない例にさえ，PLT減少，

FDP陽性の症例を散見する。Fbgは必ずしも減少しないごとくである。PLTとParasitemiaに関して，合併症のないSemi−immune群では，相発生関係を知るため，進化学的見地から形態，集関していなかった。一方，Non−immuneの白人群

団遺伝，細胞遺伝，そして蛋白体及びアイソザイ

及び日本人群では，5％以上のParasitemiaとムの遺伝子座の解析などによる分子遺伝学の立場

東アジア分布のマラリア媒介者の5種群についてそれら種と関連する各種群内メンバーとの系統

70，000／mm3以下のPLT減少を示す症例は，前をとり入れ分類学的に検討をしている。h野oo朋s

者で11／12，後者で7／8と高率であった。但し5％群ではθn80rεns∫5がs∫nεnsi5とは，2Rbなる逆以下のParasitemiaの例の中に重篤な血小板減少位となって固定し，自然界では異型逆位を認めな例，死亡例が含まれているので，単にParasitemia

いことと，同所性で生殖的隔離が両者の間に見らの程度のみを重症化の指標にすることは出来ない。

れることから別種であることを確認した。1顔θri

臨床病日とParasitemiaとの検討では，はs加θn5 5とは完全に独立した種であるが，西日日本人群で第1病日の平均Parasitemiaは2，000／mm3 本に一部と韓国内陸に，1ε5 8riとの交配でF・のParasitemiaが5彩の危険値を上回るのは，6．7日

X染色体のみが対合する集団の存在を認めた。し以後と考えられた。病日と血小板減少に関する検かも今尚B耀8如解01αア

討では，血小板は経過と共に徐々に減少するので媒介者である。18s砂iは北から沖縄までのものとはなく，ある時期に急速に減少する傾向にあるこマレーシアのものと蛋白体構成の相違が見られ形とが判明した。日本人群に於いて，その時期は態上のわずかの相違と一致していた。h野co朋5群

4−5病日と読み取られた。したがって，この時期

7種3 nθns13，1εs∫θr ，o雌吻br4i，ni 泓μs，nは，5％以上のParasitemiaになる以前に存在す

研8γr砂麗，ρε4∫08痂o

ることになり，重症化への変換点，DIC関与の出見られる。ss，18s∫8r∫，cro吻わr4i，n1

nθns，及び三日熱マラリアの9εrri瑠μs，硲の間には相互生殖隔離が蜘sで発点とみなすことが出来よう。この結論は，猿のは染色体相同型で種内多型は少ないが見られた。

実験によるこれまでの報告に見られる結果と相似

5inθro財θ5は・4〃ρρh81ε3んorθするものである。なお，コンゴの熱帯熱マラリアs肋εn3例の検討では，大人例で，子供例に比し，Para−

ご硲

と同型で，

3とはX染色体に異型を示した。

1εμσo凹h野μs種群では1躍o閃ρ妙rμs

s．s．は他のsitemiaが低いのに血小板が減少している症例がメンバーからは完全に独立種とみなされる。この多いという結果であった。これは，免疫を獲得し種群の形態をもつ台湾の1系統，タィの3系統そた大人では，獲得していない子供とは異なる因子してマレー半島の2系統とサバ州の1系統の媒介の関与を考慮する必要を示すものであろう。以上，

種7系統相互の遺伝的関係を調べ，相互に不完全

マラリアの病態生理の基礎的研究には，経過に左な生殖的隔離が見られ，F、の多系染色体の対合右される因子と，複雑に関係しあう因子に考慮をするものと不対合のものとが見られた。同一種内払う必要性を強調した。

亜種的関係にあるものと解せられ，アイソザイムのEsterase−1，0ctanol

dehydrogenase，Malic

enzyme，Amylaseをアクリルアミドゲル電気泳動法により，Neiの遺伝的隔離を算出したとこ
ろ，タイ3系統と台湾1系統に同一で，サバ1
系統は0・29マレー半島2系統に138を示した9

101

rθ

hopor粥群ではsμn吻 cμsとsψρic∫μsの交

これらのうちオn砂hε183亜属のハマダラカはρi−

配F、は生存力はあるが雄の妊性がなく生殖的隔

1 no∫μ用，11n吻SOア∫δθπ8μ8

離が見られるがF・の染色体は対合し遺伝的に近カonc∫SCO∫，vα耀S，P84i∫α8η如∫鰐，加εzα

いが，他のvo8麗，∫n鳳雛nびs∫nθns∫sの9種類であり，Cセ〃∫o亜属のハマ示した。用 n

雌は更に離れた関係を

脚s種群のうち，石垣島の

nin加一

8n3

S，PSεμ吻加rわかOSオr

S，，躍ρ8roi及

ダラカはノ7αv∫ros∫ri3，わ01αわαcθns∫3， ，n話φn∫躍3μsとタイ，カンチャナブリの規∫ni脚s2系統と1∫ orθ1i3，1μ410wo8及びs∫砂hεn5の6種，合計の間で形態的に似たKCH−1は生殖的隔離を認め15種類である。多くの研究者は成虫を用いている

るが，形態的に多少相違の見られるKCH−2とのが，蠕及び成虫における性別，吸血や卵巣の発間では生殖的隔離が見られなかった。しかし，ア達などの体内での生理的生化学的変化を考慮してィソザイムはKCH−1，KCH−2の2系統ともに相演者はすべて終齢期幼虫のホモジネートを遠沈し違が今のところ見られていない。〃！ασμ10硲は東た上清を用いた。蚊の種類や検出する酵素によっ南アジアでは8系が分けられているが，タイではて著しい個体変異の見られたものもあったが，そenzymeでの範囲を知った上で他種と比較すると，泳動像は異なったallelesを示し形態的にも相違が見られ種に特異的であるのみでなく，場合によってはグている。

ループや属に特徴的な酵素活性バンドの存在が推3系を発見し相互にpgm，ldh，Malic

定された。ハマダラカでは一般にLAPやEstの
5

2・3の酵素の電気泳動像より見たハマダ

主要活性バンドが適当な間隔で検出されるため，

ラカ

異なった種類やグループを比較する際の標準マー

塚本 増久（産業医大・医動物）

蚊の系統分類については従来主として形態学にカーとして利用することも可能である。しかし，亜属やマラリア媒介性と直接結びつけられるよう基づいて研究が進められ体系づけられてきたが，な活性バンドはLAPやEstでは検出されなかっ。

最近ではそのほかに交雑実験による類縁関係や唾た。LDHの場合には調査できた8種類のハマダ

腺染色体のバンドなどによる細胞遺伝学的方法もラカに関する限り，1本の主要バンドしか検出さ採用され著しい進歩をとげた。一方，電気泳動法

れなかったが，オn砂hε1θs亜属のバンドよりもによる蛋白質やアイソザイムの研究は，主として

αr11如亜属の活性バンドのほうが遅く泳動する傾同一種内または近縁種間における遺伝子レベルで向が見られた。従って，将来もっと多くの蚊でさの相違を蛋白質レベルでの相違として反映させる

らに多くの酵素について研究を進めることにより，遣伝生化学的な概念を導入することとなった。今直接マラリア媒介性や系統分類学的な種々のレベ迄多くの研究者によって電気泳動法的にアイソザ

ルを反映するような生化学的指標が発見される可イムの研究が始められてきたが，それらの大部分

能性があることがうかがえる。

は殺虫剤抵抗性との関連で進められたためアカイ

エカ群やネッタイシマカなど少数のグループの蚊やエステラーゼに関する論文が最も多かった。
従ってハマダラカの系統分類について電気泳動法

6

殺虫剤抵抗性のメカニズム宮本純之，小木曽重文（住友化学・農薬研）

的に検討された研究はそれほど多くない。演者は

殺虫剤にはシナプスのアセチルコリンエステ

最近日本及びフィリピンにおいて亜科や族，属，ラーゼ（AChE）を阻害することによって殺虫作

亜属，群，亜種など種々の分類学的レベルの蚊に用を示す有機リン剤及びカーバメィト剤，神経膜

ついてポリアクリルアミド5％ゲル平板を用いてに直接作用し，神経伝達を撹乱・遮断して殺虫作泳動を行い，乳酸脱水素酵素（LDH），ロイシン

用を示すピレスロイド剤及び有機塩素剤など，種アミノペプチダーゼ（LAP），非特異性エステラー

種の作用機構をもつものがある。これら殺虫剤

ゼ（Est）などの酵素のアイソザイムを比較した。

の使用量増大に伴い，害虫が淘汰・選抜を受けた

102

結果，現在428種の衛生害虫及び農業害虫が1つる。parathionまたはpropoxur抵抗性のオn砂hθ一またはそれ以上の殺虫剤に対して抵抗性を示すと

1θs

o1わi

ηon雄のAChEはparaoxon，propoxur

報告されている。イエバエ，カなどの薬剤抵抗性に対しおのおの500倍，15，300倍の低感受性を示昆虫を用いた研究により，抵抗性の主な要因としす。

て，1）代謝分解酵素による解毒の増大，2）作用

DDT抵抗性イエバエ，及び・4θ4θso㎎γp∫iでは，点の感受性の低下，3）皮膚透過性の減少，が明DDTをDDEに解毒するDDT脱塩酸酵素の活らかにされ，これらの要因の相互作用によって抵性が高くなっており，DDT抵抗性の一要因と考抗性レベルが決定されると考えられている。

えられている。ピレスロイド類は昆虫において酸

有機リン剤及びカーバメイト剤抵抗性に関与

化的及び加水分解的に代謝分解される。しかし，する代謝分解酵素として，非特異的な酸化酵素

これら代謝分解酵素がピレスロイド抵抗性発現に（mixed

寄与する程度はあまり大きくない。

functionoxidases，mfo）の他，

グルタ

チオンS一転移酵素，加水分解酵素などがある。

Permethrinなどのピレスロイド及びDDTに

carbanyl抵抗性イエバエではmfoによる解毒増対し100倍以上の高い抵抗性を示すイエバエ及び大が抵抗性の主要因となっているが，piperonyl

室内系統のα1εx g珈卯吻3c磁μsでは，作用点

butoxideなどのmfo阻害剤によって解毒を抑えである神経膜の感受性が低下している。神経膜のることができる。一方，malathion抵抗性，肋ρρh−

低感受性はKnock81θ5s吻hθn甜ではカルボキシルエステラーゼの活子により発現し，ピレスロィド抵抗性の重要な要性増大が抵抗性の主要因となっており，トリフェ

因であるが，Kdr遣伝子の存在割合は少ない。

down

resistance（Kdr）遺伝

ニルリン酸（TPP）などのエステラーゼ阻害剤でその他，薬剤の皮膚透過性の減少（ρθn因子）

解毒を抑えることができる。有機リン剤及びカーによる抵抗性がイエバエ，ゴキブリ，オε鹿s sp．でバメイト剤の作用点であるAChEの感受性が低知られている。透過性の減少は多剤抵抗性の原因

下して強い抵抗性を示す例はイエバエ，ハマダラになると考えられるが，その例は少ない。

カ，ツマグロヨコバイ，ハダニなどで知られてい103

パネルディスカッション
海外在留邦人の健康管理

1 海外在留邦人の罹患している疾病

司会のことば藤田紘一郎（長崎大・医・医動物）

わが国の経済の高度成長とともに，海外に渡航する日本人は増加の一途をたどり，昨年の海外への旅行者数は400万人を突破した。

また，発展途上国に対するわが国の協力援助も（1）マラリア
海老沢 功 （東邦大・医・公衆衛生）

マラリア流行地に滞在する邦人のマラリア予防と治療に必要なことは，特にその地域の熱帯熱マ
ラリア原虫の薬剤感受性を知ることである。

次第に増強され，それら諸国における開発プロ

クロロキン耐性熱帯熱マラリアは西はタイから

ジェクトは拡大化の傾向にある。それに伴い，わ

ビルマ，インドまで達し，オセアニアでは西イリが国各企業の進出および一般邦人の渡航が著しく

ァンからパプア・ニューギニアを越えてニューヘ

増加し，長期間海外に滞在している邦人数は20万

ブライズ島に達している。アフリカ大陸でもケニ人に達している。これらの医療水準の低い地域に

ア，タンザニア，ナイジェリア等にその徴候が見在留する邦人の間に，最近，種々の熱帯病や風土えて来た。ピリメサミン耐性熱帯熱マラリアはタ病などに感染する例が多数報告されるようになっ

イとその周辺，アフリカ大陸（ナイジェリア，ケ

た。

ニア，中央アフリカ連邦等）では，かなり広汎な

このような状況のもとに，わが国では，厚生省

地域に広がっている。

や外務省が中心となり，在留邦人の健康管理につ三日熱マラリア原虫のプリマキン感受性もパプいて種々の対策がなされてきた。また，（財）日ァ・ニューギニア，カリマンタン，タイ，インド，

本熱帯医学協会をはじめとする協会や，五大商社

フィリピン等で感染したものは1日15mg，14日間

会および各民間会社内で，在留邦人の健康を如何の内服では完治しない。1日30mg，7日間その他に管理するかについて，種々の工夫がなされ実行の変法が必要である。

に移されてきた。しかし，これらの諸策は，現実同じく熱帯地方といっても現地の状況をよく知には，まだまだ不完全で，相変らず，海外で発病らないと正しい指導ができない。ケニアのナイロ

し，犠牲となる邦人が数多く報告されているのがビは全くマラリアの心配はないがそこを離れて海現状である。

岸地方に数日間滞在しただけで頻死の重症になっ本日のパネルディスカッションでは，まず「海た例，乾期で蚊が全くいなくなり，休薬期間中の外在留邦人がどのような疾患に罹患しているか」者が同国の海岸地方湿潤地に出張して罹患する例，

その現実を各専門の諸氏に話していただき，次いあるいは熱帯アフリカの諸国を2日ごとの強行ス

で，海外在留邦人の健康管理のために現実に実施

ヶジュールで通過して来て死亡した例など，対策されている「医療対策とその問題点」について話を考えるには個人単位でその居住地や旅行地を含

しをうかがいたいと思う。そして最後に，外務省

めて内服計画を立てなければならない。

側から今後の在留邦人の健康管理体制について，将来の抱負を含めて，述べていただく。

発病した場合はマラリア流行地で発症する方が非流行地（日本やヨーロッパ等）で発症するより最後に，このパネルディスカッションが，在留安全である。流行地ではまずマラリアを疑って治邦人の健康管理を考える上で，現実的に実りある療してもらえるが，非流行地ではマラリアを疑わものになるよう期待している。

れなかったり，薬剤がないため治療が遅れる危険104があるからである。

が，長期滞在罹患者のなかに合併症などによる遷マラリア予防に用いた薬剤が流行地のマラリア延例が見られ，肝生検組織所見は殆どが定型的急原虫に有効で，定期的内服の実施により好成績を性肝炎像であり，一部に胆汁うっ滞型，慢性肝炎

おさめた1例としてラオスにおける経験にふれた。 像を示す例が認められた。予後は良好で全例治癒散在した集団のマラリア対策は，薬剤の入手難なども原因となって実施困難である。

2

海外在留邦人の罹患している疾病（2）肝炎

小幡裕（東京女子医大・消化器病センター内科）

している。

予防及び対策はA型ではfecal−oral感染のため個人衛生の徹底が重要であり，滞在状況職種に応じISGの投与が行われる。B型は体液を介しての感染でありHBIGは有用であるが，濃厚な個人接触（性行為など）は避けるべきである。

ヒト肝炎ウイルスにはA型（HAV），B型 NANB型は今後の課題である。
（HBV），及び非A非B型（NANBV）などがある。これらのウイルスの世界における蔓延状況についてA型，B型は明らかにされ，蔓延度の高い熱帯，亜熱帯地域における在留邦人の肝炎罹患

3

海外在留邦人の罹患している疾病（3）

その他の寄生虫病及び熱帯病

谷荘吉，小原博（金沢医大・医動物）の問題が重視されてきている。今回は海外で罹患した肝炎患者自験例を中心に，疫学及び臨床的事項について報告する。

日本人が熱帯地方に滞在する際，現地人の間に流行している熱帯病，風土病などの疾患に対する世界の疫学からみるとHAVはHA抗体陽性 予防対策が重要なのは当然である。しかし，健康率が蔓延度の指標となるが，80％以上の高蔓延国

管理上問題となる疾患は，これらの疾患のみではは東南アジア，オセアニア，アフリカ，中南米なない。渡航前の既往疾患や，現地人の間では必ずどの諸国である。HBVは無症候性HBsAgキャ
リアーの頻度から見て，高蔓延国はHAVとほぼ平行しているが一部にHAVに比し蔓延度の低い

しも罹患率は高くないが，抗体を保有しない日国も存在している。

本人が，病原体の蔓延している地域に入ることによって罹患する疾患なども極めて重要である。

青年海外協力隊員1，469名を対象に実施した調

過去約7年間に当施設に入院したいわゆる輸入

査結果によれば，熱帯地方滞在中に発生し医療を

肝炎患者は47例である。ウイルス型の確認は発病要した疾患の頻度は，急性上気道感染症107例，2ヵ月以内の血清中のIgM−antiHA（HAVABM マラリア101例，急性肝炎94例，交通事故71例，法）及びHBs Ag（R−PHA法）を検出し，前者 慢性下痢症59例などとなっている。その他，デング熱，性病，精神病などが高率に発生している。
陽性をA型，後者の一過性陽性をB型，両者陰性でEBウイルスに関連したVCAlgM抗体陰性病，精神病が実際に報告されることは比較的少性例をNANB型とした。これによる型別頻度

ないが，実態はかなりの者が，これらに罹患した

は，A型36例（76．6％），B型7例（14．9％），

り，神経症様の症状を自覚しているようである。

NANB型4例（8．5％）であり，平均年齢はA

成人病，慢性疾患の悪化または再発例も多く見ら

型29，B型37，NANB型33歳である。罹患国はれており，特に腰痛症，胃炎，高血圧，歯疾患，

A型では東南アジア，アフリカに多く，これらは鼻疾患にその傾向が強い。

母集団の多い地域に該当する。なお最多発生国は

日本人若年者において，A型肝炎の罹患率は極エジプトの12例であるが，うち7例はendemic

めて高く，2年間熱帯地方に滞在した後，抗HAに発生している。B型は東南アジアの一部の地域

抗体を測定した結果では，抗体保有率は出国前のであり，一方NANB型は散在的に発生している。

2．7倍にも増加していた。

輸入肝炎の臨床症状は国内散発例と同様である

2年間熱帯地方に滞在後，帰国時点で実施され105

た検査結果（山浦ら，1981）では，寄生虫陽性例

人の場合は全員陰性となった。一方，これらの地、は被験者の30．7％を占め，他の異常所見に比べる域で，在留邦人が飲用している飲料水の水質検査とかなり頻度が高い。内訳は原虫類ではランブルを行うと，多くの検水から大腸菌群が検出された。

鞭毛虫が最も多く，被験者の17。3彩に達し，次い

そして，この検出率と邦人の腸管寄生虫陽性率とで，大腸アメーバ2．1％，赤痢アメーバL6彩との間に高い相関（7＝0．957）が認められた。しかなっている。蠕虫類では，鞭虫9．3彩，回虫3．％し，寄生虫感染率と飲料水のKMnO。消費量となどが認められている。これらが慢性下痢症の原の間には相関関係は見出されなかった。また，在因となることもあると思われるが，消化管寄生虫

留邦人の子供を対象に施行した嶢虫感染の有無は，感染は罹患率は高いが，一般に軽症または無症状

飲料水の汚染とは全く無関係であった。

の例が多いようである。住血吸虫症などの経皮感以上の事実は，腸管寄生虫と同様に糞便を介し染症は，極めて稀であり，予防知識の普及によりて感染されるA型肝炎など重篤な経口感染症のかなり防げるものと考えられる。

伝播に飲料水が重要な役割を演じていることを意

消化器感染症以外のいわゆる 熱帯病 として味するものであろう。

は，マラリア，デング熱などの罹患率が高く，こ今回のパネルディスカッションにおいては，世れらの疾患，及び熱帯病一般に関する知識と対策

界各地の発展途上国に在留している邦人の寄生虫が重要であることはもちろんであるが，肝炎，交感染率と，彼らの飲用している飲料水の汚染度，通事故，性病，精神病，既往歴のある疾患の悪化

さらに両者の関係などにっいて，最近の我々の調もしくは再発例も高率に見られており，日本人が査結果に基づいて報告した。

熱帯地方に長期滞在する際には，これらの疾患に対する対策も重要であるといえる。

4

海外在留邦人の寄生虫感染率と飲料水汚染

との相関
藤田紘一郎

（長崎大・医・医動物）

海外在留邦人のうちで，環境の悪い，いわゆる5

海外在留邦人の巡回健診とその問題点
松本慶蔵（長崎大・熱帯医研・内科）

私共は1981年，1982年1−2月，2度にわたって東アフリカを中心とする外務省派遣の海外在留邦人の為の巡回健康相談に従事した。巡回国はマ

発展途上国に在留している邦人から，A型肝炎，

ダガスカル，タンザニア，ザンビア，ジンバブエ，

腸チフス及びアメーバ赤痢などの経口感染症にか

ザイール，スーダン，エチオピアの7力国であっかる人が，多数報告されている。

た。私共はこの巡回健診を通じてこれらの国の在演者らは，これらの経口感染症の重要な感染源

留邦人がかかえている最大の関心事の一つが健康が，発展途上国における飲料水にあると考え，世に関するものであることを知り得た。そしてまた界各地の発展途上国の飲料水を細菌学的及び化学

実際，在留邦人が罹患した時に，現地での病院，的に調査した。同時に各地で実際にその飲料水を医師の対応がスムーズでなかったり，たとえその飲んでいる邦人の腸管内寄生虫感染率を調べた。

国の第一級の病院といえども近代的医療設備を見

また，小児には別にセロファンテープ法による嶢なれた日本人の目には不安なものに映ることもあ

虫検査を行った。

る。各国別の医療事情に関する正確な情報の重要

その結果，在留邦人の糞便から主として回虫卵性について述べたい。

が見出され，その他，鞭虫，鉤虫，異形吸虫，無巡回健診で診る在留邦人の疾患分類は軽症のも鉤条虫，肝吸虫などの虫卵が検出された。腸管寄のでは感冒，胃腸炎，皮膚疾患などが多く，日本

生虫感染率はインドネシア在留邦人に最も高く，で診る疾患と大差はない。しかるにアフリカ特有

次いで南西アジア，東アフリカ，中南米などに在のものとしてエチオピアなど高地国での高山病や，留する邦人の順であり，中近東のカタール在留邦

タンザニア，ザイール，スーダンなど低地国共通

106のマラリア，ナイル川周辺の住血吸虫症がある。

疾病発生状況は，延べ人員1，964名の対象者で，そしてごく一部の国を除いて，経口感染症はたえ

感冒を含めた上気道感染症が最も多く218例，次ず在留邦人の健康を脅かしている。私共は地方にいで下痢を含めた胃腸障害が155例であった。次入りこんで献身的な活動をしている海外青年協力

いで白癬，湿疹などの皮膚疾患が54例となってお隊員がすすめられるままに現地の蛋白源である生り，日本で診る疾患と大差はなかった。他に耳・肉を食べてサナダムシに罹患しているのを数多く

眼異物を含む外傷45例，肩，腰痛26例，淋病18例，見，かかる仕事の困難な一面を痛感した。またハ

マラリア14例，結膜炎9例，肝障害5例，尿路系

エ，ウジ症で胸腹部に小指が入る位の穴がいくつ

疾患5例となっている。罹患頻度の高い上気道感もあいた邦人の子供が居る国では，洗たく物には染と胃腸障害は，乾季に発生する頻度が多い。こ下着にいたるまですべてアイロンがけが必要であ

れは，クーラーの使用にも関係が深く，また，労る。以上のことは十分な予備知識があれば予防で働環境がよくなる乾季には労働時間延長などの要きる疾患が多いことを示しており，正確な情報を因もあって，体力の消耗が疾患の発生に関係が深誤解なく在留邦人に伝達することの大切さを教えいと考えている。

現地の風土病であるマラリアは，乾季，雨季をている。

その他，アフリカ全体でみるとライ病，結核な問わず年間を通じて発生し，全例が熱帯熱マラリ

どまだあまり手がつけられていない大きな課題がアであった。マラリア予防薬の服用者は対象者の残されている。私共もエチオピアのラィ病院を見2／3程度であったが，服用者と非服用者との間でてこれらの事業の遠大なるを思った。他事でなくのマラリア罹患率には有意の差はないようである。

在留邦人の健康を守る意味でもこれらの疾患を素しかし，マラリア罹患後の症状は予防薬服用者の通り出来ないと考えるので，そのことについても方が明らかに軽症で，多くは感冒様症状を訴える

触れたい。

にとどまった。このような感冒様症状を訴えた患

6 海外プラント建設現場における医療対策と

その問題点
中村

正樹，井上 宏之，澤田 幸雄，

下山孝（兵庫医大・第四内科）者でも血液を塗抹してみるとマラリア原虫が見っかっている。

前述の乾季の労働時間増加と疾患発生増加に関連して肝炎の発生を労働時間やγ一グロブリンの予防注射の有無で検討した成績をのべる。すなわ

現在，海外に在住する邦人は商社，プラント企

ち，同一地区，同一時期に異なる3社の従業員を業や政府公官などを含めて約20万人と言われてい対象に，7一グロブリン予防注射の有無，及び，労る。教室では，ここ数年間西アフリカ，北アフリ

働時間の長短により比較してみた。7一グロブリン

カ及び中近東の，海外プラント建設に従事する日を予防的に注射せず，夜間まで超過勤務で労働時

本人の健康管理に協力してきた。今回は，1980年間の長かった会社が，一番多く肝炎が発生した。

6月から1981年12月までの1年7カ月，西アフリ

このことは，海外プラント現場では，労働時間をカ，ナイジェリア北部カチナの従業員約120人の180〜200時間以内とし，陽のあるうちに労働を切現場における診療状況とともに，海外プラント建り上げて，洗濯も早目に終え，余暇を楽しむ余裕

設現場の医療対策と問題点について述べてみた。

ある生活が疾病の発生や外傷事故の防止につなが現地における気候状態をみると，10月から翌4ることを意味している。

月までは乾季と言われ，最低気温は10。C位に落

次に，重症患者発生時の対処の仕方について述

ちこみ，乾季の終り頃になると最高気温が35。C

べてみたい。アフリカ諸国においては，専門医師以上になる日も少なくない。湿度変化は，当然のの不足，並びに，現地医療設備の不備のために欧ごとく乾季では十数％と低下し，雨期には80％を州の病院に重症患者を搬出することを第一と考え越す日が多くなる。

ている。このために現地で健康管理する医師，看107

護人，衛生管理者は，Trance−care社と契約し，一年に一回現地の医療機関に依頼して健康診断を

Air−Amburanceへの塔乗並びに，英国医師会と行う。開発途上国では，巡回医療相談と静養休暇の連絡が出来るシステムを確保した。しかし，こ制度を利用しての健康診断を行う。現地での生活

れとても必ずしも充分でなく，諸外国における他

は人間味豊かに，お互いの意志の疎通を図り，うのプラントでの重症患者搬出は，それぞれの地域

まくコミュニケートすることはもちろん，スポー

でそれぞれに対策が講じられているものの，まだッやその国の文化になじませ，海外勤務者の文化

まだ充分とはいえない点が多いようである。アフショック，不安の根を除くようにする。

リカ諸国における重症患者の搬出手続きとルート

海外勤務者は，心身ともに健康で，語学に堪能，を示したが，今後，プラントを始めるときはこの先見性，決断力，行動力をもち，忍耐力も合せも点を特に重視して，予め準備をして頂きたく強く

ち，任務を成し遂げる力が必要となる。以上の力

希望しておく。

量，適性を兼ね備えた人を選べば，海外不適応が以上を簡単にまとめると，第1に気候条件，労原因となって，任期途中で帰国を余儀なくされる

働条件で疾病発生に差があること，第2に予防薬

こ．とはないはずである。しかし現実には，生活環投与の実施の徹底，第3に現地医師，医療との連境の変化が大きく，少数精鋭主義で担当業務の範絡をとり合い，薬品の購入方法を確立するととも囲もふえ，その上商習慣の違いに悩まされ，時とに，第4に重症患者の搬出方法を確立する。第5

して適応の障害が起こる。何故であろうか。完壁に日本人医師の現地での医療行為を保障する医師なまでの業務遂行意欲と現地に同化しようとする

免許制度の確立，第6に外務省派遣の医務官の仕「過剰適応」との軋礫が心理的破掟や挫折感を引事内容の拡大，すなわち，民間人に対する医療のき起こす結果となっている。適応困難の悩みは自実施，第7に海外における日本人医療スタッフの分達ばかりではないという心のゆとり，構えのな

充実，第8に最低必要限度の検査器具の設置など

い自然体の生活指導も必要となる。

帰国時には，外国の感染症，病原体を日本へ移を提案したい。

以上，海外プラント建設現場の医療対策と問題入させないためにも念には念を入れて帰国時健康診断を行う。

点を述べた。

海外勤務者の医療施策は，海外にあっても，本7

総合商社（三井物産）海外勤務者の健康管理対策とその問題点
増山幸男（三井物産・人事部診療所）

国の自国民と同様に，「何時でも」，「何処でも」，「誰でも」が一定のレベルで受診出来ることを最終目標にして企画立案してゆくことが望ましい。

しかし海外での医療行為には，現地での医師免許

海外生活では，風俗，習慣，気象条件，衣食住，の問題もあり，また派遣する医師の確保，国家補

すべてにわたり日本のそれと異なる。そこで海外

助，企業体の医療面への積極的な援助など解決す生活の実態を知った上で，海外勤務者の人選，健べき幾多の問題が多い。

康管理の施策が立てられ，最終的には，現地の環今後は，各界の専門家の情報交換を積極的に行境に適応するために，自分の健康は自分で守る自い，ノウハウを蓄積すると同時に，これを活用し己管理が肝要となる。

て海外邦人の医療を担当する海外の医療機関作り

赴任前の留意点として，環境の変化に弾力的にに，また日本政府が考えている「病院船」構想を対応出来る海外医療の知識についての研修を行う。

「世界は一つのチェーン」という考え方で相手国

渡航前健康診断の結果，健康者であれば安心してのためにもなる共存共栄の立場で官民一体となっ赴任させられるが，慢性疾患がある場合，日常生て実現されることを期待する。

活上の注意を与え，疾病の悪化を防ぐ。

海外勤務時の健康管理は，先進国においては，

108

ば主として成人病であり赴任前の健康診断を厳重

8 海外在留邦人の罹患状況と健康管理上の問

題点
渡辺にチェックしておればいずれも現地死亡を防止できた疾病である。

榮（上野原町立病院）

海外在留邦人の罹患状況を外務省診療所で集計

最後に海外在留邦人の健康管理についての問題点を要約する。メディカルライセンスの未解決のした国際疾病分類によって考察すると昭和55年5

現在ではどうしても消極的にならざるを得ない。

月より翌年4月までの1年間に12，039名が在外外務省領事部及び民間ベースによる巡回医師団も公館の医務室で受診している。この内一般邦人は巡回地，滞在期間，携行資材などの点で制限され4，440名，36・9％で，これを公館別に見るとバラ

現地の要望を十分に満たし効果を拡大するには限ッキが多くインドネシア，ソ連，中国が上位グ界がある。現在海外に在って在留邦人の健康管理

ループを占めタイの35名はタィ在留邦人数を考えを担当できる唯一の邦人臨床医は，各公館に常駐ると極端に少ない。全受診者を疾患別に大分類すする外務省医務官であるが，それも多くの制約下

ると最も多いのは呼吸器系，次いで消化器系で関におかれている。間題点の一つとして国内的には心の高い感染症及び寄生虫は6．2彩で第5位であ訓令がある。しかし全受診者の9、1％は外国人でる。この感染症について公館別にみると

1）腸チフス，パラチフスはインドネシアにのみ22件ある。

しかも投薬率は73．6彩に及んでいる事実は任国の法令如何に拘らず医務官は現地人の診療にも関与していることを示している。在留邦人社会で医務

2） ウイルス性肝炎は52件，10、4鰯でインドネ官の診療を希求する要望が強いのは自然である。

シア，ケニア，ソ連，エジプトと続き東南アジア，

一般邦人に対する診療上の制約をはずすと共に医

中近東，アフリカ，ソ連など広い地域に見られる。

務官に対しては医療過誤に関する免責を含めて現

3） マラリアの32件，6，4％はケニア，ナイ

行の諸規則を見直す。第2点は渡航前の厳重な健

ジェリア，象牙海岸，エジプトなどのアフリカに

康チェックであり，家族も含めて実施する。検査多い。

種目は長期人間ドックを基準とし，既往症があれ

4）

シラミ，ダニ，ハエ寄生は74件，全体のば更に精密に検査する。

14．9％でアフリカ及び中近東に多い。

5）

細菌性赤痢，アメーパ症，細菌性胃腸炎を

消化器感染症として一括してみると88件で全体の9

海外在留邦人の健康管理
小西芳三（外務省・領事第一課）

17．7彩となりウイルス性肝炎と同様にアフリカ，

外務省は，海外在留邦人の健康管理対策として，

中近東，インド，東南アジア，ソ連，メキシコに

外務省巡回医師団の派遣，外務医務官の派遣，及多い。

び海外医療事情調査等の施策を推進している。

即ちこれによって地域の特殊性と衛生環境が推測される。

巡回医師団の目的は，年度内1回（医療事情の劣る国については，年度内2回）の巡回健康相談

次に昭和52年12月より56年12月まで医務官としに応じることのほか，簡単な検査を行い，在留邦て在インドネシア大使館に勤務した4年間に現地人の疾病を早期に発見して，現地での医療対策，で死亡した在留邦人の疾病を挙げると，心筋梗塞

第三国への移送，或いは本邦への帰国治療など，3例，クモ膜下出血2例，マラリア，肝硬変＋食患者に対する適切な指示を行うものである。

道静豚瘤破裂，肝臓癌，急性黄色肝萎縮症，癒着

外務医務官については，相手国政府との関係か

性腸閉塞症，腹部大動豚瘤破裂，脳悪性腫瘍，各ら，建前上は在外公館関係者を対象としているが，1例ずつと外因死として交通事故，電撃傷，自殺

医務官の殆どは「海外日本人学校」の校医の役割の各1例ずつ，計15例である。即ち感染症としてりも果たし，児童の健康診断に当たっているほか，

はマラリアのただ1例のみで外因死の3例を除け一般在留邦人に対する助言，相談，診療を行って109いるのが実情である。

現在，配置公館は20館に上っているが，今後更に増強して行く方針である。

このほか，日本語の通じる「日系人医師」や，日本政府留学制度により本邦において医学を研修

医師の個人データが整備されたので，昭和57年度
からは地域別，国別邦人医療対策の確立のため，

包括的な新調査事業を推進して行くべく検討中である。

海外邦人医療に関しては，日本人医師を海外にして帰国した，「日本留学医師」が少なからず存

派遣することが望ましいことは言うまでもなく，在しているので，外務省ではこれら医師のリスト

外務省としても，このための民間のイニシアチブを整備して在留邦人の利用に供している。

に協力してゆく用意はあるが，実際問題としては

海外医療事情調査事業については，昭和56年度
において「ドクター・バンク」開設準備調査が終了し，海外在留邦人のための医療活動に従事する

受入国側の「医師免許制度」の壁が厚く，難しい
面が多い。

110

ラウンドテーブルディスカッション
ハブ毒作用における各毒性因子の役割る。出血は毛細血管レベルを主体とし，一部の後司会のことば沢井芳男（日本蛇族学術研）

毛細血管細静脈でも認められる。形態学的には内皮細胞の変性，壊死，崩壊，間隙形成とともに周毒蛇咬症の治療あるいは予防を，特に血清ある

囲を囲む基底膜の消失の見られる微小血管からのいはワクチンという立場から考える場合には，そ

赤血球流出である。ハブ毒の出血因子は注射局所

れぞれの毒蛇咬症の病因を明らかにし，あるいはでのみその出血作用を発揮し，吸収されて臓器内

蛇毒の中の個々の毒性因子の役割を明らかにしたに出血をひき起こすことはない。

上で，それらの毒性が果して免疫学的な方法で防2．腫脹：咬症直後から約1週間にわたり増強ぐことができるかを検討していくのが最良の方法

し，以後次第に消退する。ハブ毒による腫脹は単であると考えられる。

純な水腫でなく，漿液性滲出液の貯溜であり，腫しかし現実には蛇毒の生化学的あるいは酵素学

脹の消退にはかなりの日数を要する。形態学的に的な分析がかなり進められたにも拘らず，分離精は間質に蛋白濃度の高い無構造物質の貯溜と微小製された毒性因子が粗毒の毒作用の中でどの様な血管の内皮細胞間隙の形成として認められ，しば役割を演じているか，あるいは実際の治療の上でしば好中球の血管外遊走を見る。

どの様にそれらの毒性を抑えていくことができる

3・筋壊死：毒注射1分後にすでに筋壊死を組かについては，あまり成果があげられていない。

織学的に認めることが出来，1−2日にわたり進

そこで今回はハブ咬症の局所病変を一つのテー

行拡大する。蛇毒による筋壊死には，筋融解型とマにして，病変を形成している因子の役割を検討

凝固優位型があり，ハブ毒は前者を，マムシ毒はすることによって，それらの病変の治療あるいは後者を示す。筋壊死は粗毒のみならず，耐熱性筋予防に貫献するために，これからの研究のヒント

壊死因子（HSMF）でもひき起こされるが，粗毒を得ようとするのが本討論の目的である。

による筋壊死は出血，漿液性滲出液の貯溜，小血1

ハブ咬症の病理本間学（群馬大・医・第一病理）

管の壊死崩壊などを伴うため，治癒の遷延がある。

これに比べて，HSMFによる壊死は限局し，治癒，再生ともに比較的容易である。

ハブ咬症は局所病変と全身病変に分けられる。

4．広範な筋壊死：下腿外脛骨部のハブ咬症例

全身性変化は抗血清投与と適切な治療で軽減されで広範な筋壊死を起こした組織を検索した。前脛る。しかし，腫脹，出血，軟部組織の壊死を主体

骨筋と長母趾伸筋が壊死に陥り，隣接して伴走すとした局所病変は咬症直後から速やかに進展し，る前脛骨動脈の閉塞性変化を認めた。この閉塞性血清治療に抵抗性である。すなわち，局所の壊死

動脈病変は実験的に再現できたが，局所の混合感と続発する後遺症の発生率は，咬症数の減少と治染を合併した場合にその発生頻度が高かった。

療の進歩に拘らず，ほぼ一定しており，血清治療

ハブ毒による変化は，出血，腫脹，壊死のいずに限界のあることを示唆している。ここでは局所れをとっても，毒注入直後から生じ，進展性であ病変の成り立ちとその進展について報告する。

る。現在，咬症後抗血清治療までには，少なくと1・出血：漸増性であり，毒注射後1分以内にも30分から1時間の経過を要しており，その間に注射部中心の蒼白化巣を囲むように点状から斑状生ずる局所病変は避け難いものである。また，運の出血が現れ，次第にその範囲を遠心性に拡大す

悪く毒が筋膜の発達した筋束や解剖学的に狭い区

111画に位置する筋束に注入された場合，しばしばその膵臓やその他の臓器から分離精製され，分子量の筋束全体の壊死を招き，機能障害を残すことがや酵素としての性質等が多数報告されている。一多い。筋束内での強い出血，微小血管系の破壊，

般にホスホリパーゼAは蛋白質としては比較的

血漿性滲出液の貯溜などによる筋束内組織圧の異低分子量（14，000〜15，000）で，ジスルフィド結常な上昇，さらには隣接動脈の閉塞性変化などが合を多く含み，熱に安定で有機溶媒中で基質に作該当筋全体の高度の阻血状態を招き，毒作用と相用し得る事等に特徴がある。

まって筋束全体の壊死を助長するものと推測されハブ毒ホスホリパーゼA2はSephadexG−100
によるゲル濾過，CM一セルロース，DEAE一セルる。

ロースによるイオン交換クロマトグラフィーに

2プロティナーゼ
前野弘夫

よって，比較的簡単に精製できる。Sephadex（山之内製薬・中央研）

G−

75によるゲル濾過とポリアクリルアミド電気泳

ハブ咬症患者の局所病変の特徴は，出血，腫脹動により，それぞれ28，000と14，000の分子量が得

及び筋の融解壊死であり，かような病変の生成機られた。この事から本酵素は分子量14，000の同じ序を解明するには病変をひき起こす各因子を相互サブユニット2個から構成されていることがわかに分離し，その作用を明らかにすることが大切でる。また等電点は7．9で，弱塩基性蛋白である。

ある。演者は三橋進教授指導の下に，主として蛋

アミノ酸組成はアスパラギン酸，グリシン，チロ

白分解酵素に着目し，この酵素がハブ毒による局

シン，リジンを多く含み，ヒスチジンとメチオニ

所病変をひき起こすことが重要な一因子であるこンを各1個，そして8個のジスルフィド結合を含とを小此木丘博士と共に明らかにした。

んでいる。

ハブ毒の蛋白分解酵素は易熱性で，SH化合物

本酵素はp一ブ・モフェナシルブロミド処理でやEDTAによって強く阻害される。EDTAによ

失活し，この時アミノ酸分析によりヒスチジンのり失われた蛋白分解酵素活性は2価金属イオンを消失が認められた。即ち1個しか含まれていない

添加することにより回復するので，ハブ毒の蛋白

ヒスチジンが，活性発現に重要な役割をしている。

分解酵素は金属酵素と思われる。他の蛋白分解酵

ブロムシアンで処理後ゲル濾過すると，本酵素素，例えばS爬μo用理θ38r∫08硲やBoci11硲躍かはメチオニル結合が切断され，大小2つのフラグ∫i1∫sから得られた蛋白分解酵素およびトリプシン

メントに分離できる。小フラグメントがN端も出血，筋融解をひき起こすが，その程度はハブ側ペフ。チドで，Pyr・Glu−Gly−Leu・Trp−Gln−Phe−

毒酵素に比べて著しく弱い。即ち，ハブ毒の蛋白

Asn−Met一という構造を持ち，N端がPyr・Gluで分解酵素はその病変の強さにおいて特徴的といえある点が他の蛇毒酵素と異なっている。大きいフる。また蛋白分解酵素活性の認められない出血性ラグメントは元のホスホリパーゼAの約6％の因子，致死因子，筋融解性ホスホリパーゼA等活性を持っているが，これに小フラグメントを加も分離されたが，これらの因子が蛋白分解酵素とえると，その量に応じて酵素活性が上昇し，同分ともに協調的に作用してハブ毒の悲惨な局所病変

子の再構成が起きることがわかる。

をひき起こすものと考えられる。

一方ホスホリパーゼAが溶血を起こすことは先に述べたが，生体内での作用は殆ど不明のまま

3

ホスホリパーゼA2
木原大（鹿児島大・医・第二生理）である。精製酵素をラットに静注し，経時的に血漿の550mμの吸収を測定すると時間とともに増加した。また松村によると受傷患者のハプトグロ

ホスホリパーゼAは蛇毒を代表する酵素の一ビン量は減少し，場合によっては検出できないまつで，古くから溶血因子としてよく知られている。

でになる。また重症例では血色素尿が見られるこハブ毒や他の蛇毒，ハチ毒，微生物及び哺乳動物となどから，生体内で溶血が起きている可能性が

112
強い。

同時にハブ毒のプロティナーゼ活性の大部分を占ラット大腿筋に精製酵素を注射して，経時的にめるH2・プロティナーゼが出血活性を持たない事

採血しCPK活性を測定すると，時間経過ととも実も明らかにした。したがってハブ毒出血活性のに活性が上昇した。また一定時間経過後，局所の大部分がプロティナーゼとは別個の蛋白質によっ筋肉を取り出し組織学的に観察して見ると，出血て発現されると結論した。HRIAと1Bには強いを伴わない筋壊死が起きている事が確認された。

致死活性を認めた。

これらの結果からハブ毒ホスホリパーゼA2は，

HRIAと1Bは分子量約60，000の酸性糖蛋白質で，一方HR2aと2bは分子量約20，000の塩基壊死形成に関与している可能性がある。
4性蛋白質であった。HR1（A＋B）とHR2（a＋b）はハブ毒の出血因子佐藤

保（予研・細菌第二）Crotalidaeに属する蛇毒が出血や壊死などの局所毒作用を示す一方，種々の加水分解酵素活性それぞれ免疫学的特異性が違っていた。いずれも易熱性で，酸性pH，EDTA及びシスティン等で容易に活性を失った。一方，DFPや大豆トリプ
シンインヒビターでは阻害されなかった。

を持つことから，毒素と酵素の関係が注目されて腸内膜を使って出血の作用機作を見た実験では，来た。我々は1960年にハブ毒を使って出血活性

赤血球は破壊されずに血管内皮細胞の間隙をくぐの定量方法を確立したことを機に，ハブ毒出血因

り抜け，基底膜の破れた部位から漏出することを子の研究に着手した。そしてその際，出血因子

明らカ、にした。

はプロティナーゼであるという従来の定説に注目して，両者の異同を常に念頭に置いて研究を進め

5筋壊死因子鎭西た。その結果，ハブ毒中には物理化学的性質や免弘（東京医歯大・医動物）

疫学的特異性などが違う2種類の出血因子（HR1

毒蛇咬傷で筋壊死を惹起する毒蛇の種類は少なとHR2）が含まれることを見出し，それぞれをくない。演者はハブ咬傷に見られる後遺症が主に精製しつつ酵素との異同や出血作用の機作などを

筋壊死に起因するとの考えで，ハブ毒からアセト明らかにすることができた。さらに精製した出血

ンによる分画沈殿で，筋壊死を速やかに起こす成因子からトキソイドを作り，ハブ咬傷の予後を軽分を分離し，これを筋壊死因子（MNF）とした。

減することにも努めて来た。今シンポジウムでは

MNFは耐熱性で，ゾーン電気泳動により3画分主として出血因子の精製を生化学的性質に重点を（A，B，C）に分かれ，筋壊死活性（予備的にCPK置いて討論した。

活性の測定）はAとB画分に，ウサギ血球を用

奄美大島産のハブ毒中の2種の出血因子がセ互分離することを見出した。高分子画分にはいた間接溶血活性はBとCに認められ，Aは分
子量約14，000，等電点pH9の蛋白で，活性の点からも，ホスホリパーゼAはBであろうと考HR1が，低分子画分にはHR2が溶出された。

えられる。A画分はMNFの約80鰯（280mμ）をファデックスG−100によるゲル濾過で簡単に相HR1はDEAE一セファデックス，TEAE一セル占める。

ローズなどの陰イオン交換体によるク1ロマトグラ

抗MNFウサギ（粗）血清で最も高い力価のフィーやセファデックスG−200によるゲル濾過

場合でも，そのα05m1がMNF40μ9までの中法で精製した結果，最終的にHRIAとHRIBの和能で，ハブ毒を抗原とした抗毒素ウマ血清は，2成分を得た。

1mg以上の毒による出血を中和しているにも拘一方，HR2はBio

Rex70（陽イオン交換体）

らず，16μgの毒による筋壊死を阻止するに過で精製した結果，やはりHR2aとHR2bを得た。

ぎなかった。他方，ホルマリン処理によるMNF

精製した出血因子のうちHRIAにのみプロ
ティナーゼ活性（カゼイン基質）が見出された。

トキソイドも筋壊死に対する防御能は低かった。

これらの点から，MNFの免疫原性は低いものと113のと出血の殆どないものがある。

考えられる。

蛇毒の生体に及ぼす作用を検討する場合，種々HR1画分は腫脹があまり強くなくてもかなりの条件により粗毒の100〜1，000倍，時にはそれ以多くの出血を伴って長時間腫脹が持続するので出上希釈された毒液を用いるのが一般的であるが，血効果の特に大きい毒画分である。このように蛇筋壊死のような受傷部位を中心とした局所的な組毒によるマウス足蹟の腫脹と出血の関係は毒成分

織障害の検討には，粗毒に近い高濃度の毒を用いの種類，注射量，観察時間などによって様々に変てみる必要もあるとの考えで試みた結果，希釈毒化するので一時点の腫脹量を測定しただけでは不に比べて大きな違いが見出された。即ち，後者で十分であり経時的観察結果も併せて考察されるべは出血と筋壊死とが混在している病変であるが，きである。

高濃度（300mg／m1で30μ1の筋注，50分後）の

マウス足踪注射法によるとHR2の腫脹活性は場合は，注射部位の限局された部分に出血，これ従って出血の周辺部では，Crotalidaeに属する中

注射後数時間以内に判定するとHR1よりもはる
かに高い活性を示すが，注射後8時間〜1晩経過して判定するとHR2の腫脹作用は殆ど回復してでも出血毒の代表格の一つであるハブ毒による病

いるのでHR1のみが腫脹作用を有することにな

変とは見えず，MNFのみによるものと似ている。

る。

を中心として遠心性に筋壊死が広範囲に認められ，

MNFは深見法により，ハブ粗毒の筋壊死活性

腫脹活性の判定は当初，注射後8時間に行っての約30％に過ぎないことが明らかにされたが，いたがその後注射後4時問に改められ，さらに

これは，1）分離操作過程での部分的失活，2）測定機器の発達によって迅速に計測できるように

MNFと他の生物活性因子との協同あるいは相乗一なったので現在では注射後2時間に判定すること作用による筋壊死活性の増強などが考えられる。

ができるようになった。

なお，抗HR1及び抗HR2力価の非常に高い

次にHR1，HR2及びH2．。の腫脹活性と毒量

抗血清（抗因子血清の場合）であっても，筋壊との関係を示す各用量反応曲線は粗毒と共に一定

死を中和し得ない実験結果と，HR1やHR2とMNFとは免疫原性の異なる点などから，治療用の範囲内で直線かつほぼ平行な関係が認められた。

抗血清の現行の力価項目のみでは，十分とは考えした液でも同様であるが混合液の活性は増強されこの近似的平行関係はHR1とHR2を等量混合ることが認められた。特にHR1＋H2．。，HR2＋られない。

H2督。及びHR1＋HR2＋H2一。の各等量混合液の6 腫脹因子山川

用量反応曲線のスロープは，おのおの単独の場合
雅延，野崎 真敏のスロープに比較して急激に大きくなることが認（沖縄県公害衛研・ハブ支所）められた。即ち，ハブ粗毒，HR1，HR2，H2．。及マウス足踪にハブ毒を注射して腫脹を起こしそびHR1＋HR2の各毒液の用量反応曲線の直線部の足蹄重量を測定して腫脹作用を見ると注射後約分のスローフ。b＝26〜31である。これに対して，30分に腫脹はピークに達するが足踪内のヘモグロ

HR1＋H2−o，HR2＋H2．o及びビン量はさらに2〜3時間遅れてピークに達する。

H2一。の各混合液の示す用量反応曲線のスロープ

次にハブ粗毒をセファデックスやアンバーライト

b＝39〜41である。このことは各混合液が混合前などで精製して得られるHR1，HR2，H2．。の各の各原液よりも活性が急激に強くなり相乗効果を画分はいずれも強い腫脹作用を示すがHR1は同

現わしていることになる。しかし，H2一・画分を時に強い出血を伴って腫脹の回復が遅いのに対し含有する混合液の場合のみ急激なスロープの上昇

HR2は殆ど出血のない腫脹で回復も早いことがが認められるのであるが，粗毒のスロープがbニ認められる。またH2．。画分も弱い出血を伴う腫27であり精製毒単独のスロープと近似している

脹作用を示す。このように腫脹には出血を伴うものはなぜなのか疑問が残る。

HR1＋HR2＋

114

7

蛋白分解酵素阻害物質（ISV〉がハブ毒の腫脹，出血及び壊死に及ぼす作用について徐正堀（韓国・慶北大・応用微生物）死を定量した結果，最高では壊死活性の80％が低下し，腫脹は40−60％に低下した。
またマウスの足踪法によると，毒量が2，5〜20μ9の範囲内での出血を比色計のODで測定した容量反応曲線は15μg以下の毒量では直線になるが，ペニシリウム属の1株から蛇毒のプロティナー

この方法を用いて毒量を10，15μ9に対し，ISV

ゼ活性を強く阻害する物質（ISV）が分離されたこを2．4，3、6μg混合してマウスに注射した後の病とは既に報告されたが，本研究ではハブ毒の腫脹，変を検討した結果，腫脹及び出血に対してISV

出血及び壊死活性に及ぼすISVの作用から，蛇が抑制効果を示すことが明らかにされた。

毒の毒作用の機作の解明を行った。

lSV30，120，240μgにハブ毒を120μgずっ加
えた後に，その0．2m1を深見法によりウサギの大腿の筋肉内に注射し，局所の腫脹，出血及び壊これらの結果から，ハブ毒中に含まれる蛋白分

解酵素が，ハブ毒の壊死，腫脹あるいは出血にかなりの程度に関与していることが推測された。

115

一

般

講 演
H群で一10．4±1．1beats／min・。C（nニ8），C群で1温度順化過程における循環反射について
土屋

勝彦，大渡

藤原真理子，小坂

伸，井元

孝章，

光男

（長崎大・熱帯医研・疫学一環境生理）

一5．0±1．Obeats／min・。C（nニ6）であった。一方

10。Cから20。CではH群で一2．7±α3beats／min・。C（nニ7），C群で一3．9±0，8beats／min・。C（n＝7）であった。すなわち無麻酔半拘束状態にお環境温度の変化が循環機能に与える影響についいて，環境温と心拍は有意の負の相関を示したがての報告は多いがその機序については不明な点がその回帰直線の勾配は高温域（20。C〜30。C）では，多い。本研究は特に皮膚の温度受容に起因する循
環反射に注目し，これらの反射が温度順化によっH群の方がC群におけるより急峻であり、低温域（10。C〜20。C）ではH群よりC群の方が急峻ていかに影響されるかを検討した。Wistar系雄であった。

ラットを30。C，23。C，10。Cで4週間以上飼育し，以上，実験A，Bの結果から，比較的高い温度

おのおのを暑熱順化群（H群），対照群，寒冷順域では皮膚に与えられた温度刺激に対して暑熱順

化群（C群）とした。

化群の方が寒冷順化群より大きな循環機能の変化（実験A） 室温27。Cから28。Cにて，ラットをを示すことが示唆される。

Nembutal（50mg／kg．i．p．，13mg／hr／body）で麻酔し，陰のう皮膚温（Tsc）を30。Cから42。Cまで2。C／3minで段階的に変化させ，血圧，心拍，直腸温，尾部皮膚温を同時記録した。陰のう

皮膚を局部的に加温すると，血圧の下降と心拍の減少が観察された。陰のう皮膚加温による心拍減2

温度適応に関する研究一Habituationにつ

いて一
小坂

光男，大渡

伸，藤原真理子，

土屋 勝彦，井元 孝章（長崎大・熱帯医研・疫学一環境生理）

少反応は陰のう皮膚温（Tsc）が38。Cのときに

環境温度の変化に対して，生体側の温度適応性

最も著しかった。Tscが30。Cのときの平均心や体温調節機序がどのように変化していくかを検

拍数（Mean±S．E．）はC群（444±7beats／min，

索するために，暑熱及び寒冷順化ウサギを用いてNニ9）＞対照群（435±6beats／min，N＝9）＞H群実験を行った。

（409±7beats／min，N＝6）の順であった。陰の平常環境条件（温度25。C，湿度60％）下で飼う皮膚温（Tsc）が30。Cと38。Cのときにおける育したウサギ（非順化群）の視束前野（PO／AH），

平均心拍数の差（心拍数の減少幅，旧RT，。．38C−

中脳網様体（RF），脊髄の各局所血流量はいずれもHRT，。、3。cl）はH群（12beats／min）＞対照群（2436〜37m1／100g／minで有意の差はないが，LPS

beats／min）＞C群（33beats／min）の順であった。

発熱物質投与による高体温時には，PO／AH，RF（実験B）無麻酔のラットを小型のケージ（5×の血流量は共に20％の有意の増加を示した。しか10×20cm）に入れ半拘東状態とし，室温を20。C

るに暑熱（30。C，60％〜）・寒冷（10。C，60％〜）環から30。C，または10。Cから20。Cの温度区間を10。C／30minで連続的に往復変化させた。そ境条件下で飼育した温度順化群ウサギでは，LPS一の間の心拍数，直腸温，尾部皮膚温を連続描記し25。Cの常温環境下で，暑熱順化ウサギのPO／た。室温の上昇により心拍数は減少し，室温の下AH・RFの血流量は38．8・39．1m1／1009／min，

降により心拍数は増加した。室温と平均心拍数の寒冷順化ウサギではそれぞれ31．7・28．9m1／100

間には有意の負の相関が見られた。回帰直線の勾g／minで，両者の間には有意の差があった。

配の平均値（M±SE）は20。Cから30。Cでは発熱期の血流量増加は殆ど観察されなかった。

以上3群のウサギに皮膚加温（室温40。C），冷116

却（15。C）を行ってPO／AHの血流量を測定する 2）∬ρρ1ρρ1εμ耀∫n卿用θ漉o Kellogg andと非順化対称群では加温によって18．8％，冷却で1915

一8．0彩，暑熱順化群では加温で1．6％，冷却でHost：No．1

一5・4％，寒冷順化群ではそれぞれ5．5彩，一2．8％μαs o nンsn伽1εnsの血流変化を認めた。これらの血流変化は非順化

Locality： Kedong

群の加温時の18．8％（P＜α005）を除いて全て有

3）

Host：

皮膚加温による高体温時には，温度非順化ウサギのPO／AH，RFの局所血流量は共に20％の増加を

Locality：Kedong

4） Po1塑10κo∫o消失，または減少する事を示し，一種のHabitua−

Ferris，1916

No．21／4rv∫oon∫h 3n認めるが，温度順化ウサギでは，この量的変化がsValley，25−XI−1979

Po1ンp1ακαわy3s加ico

意の差ではなかった。この事は，LPS一発熱時や10∫iごμs

Valley，5−X−1979

ηン4sCummings，1912

Host：No．40

tionの現象を示唆している。

0∫o〃那かρρ∫oo∫s以上の結果の温熱生理学的意義やその中枢機序（＝0．艀o履μ3）に関しては，今後，温度順化形成過程における各

Locality：Lemek，30−X−1979

種体温調節指標や器質的変化の経時的な観察を行

Ferris，5）

Po1〃10xΨ．（nymph

いつつ，さらに詳しく解析していく所存である。

only）

Host：No．28
・4ω規ア5W〃sonll

3ケニア産小哺乳動物寄生のシラミ類につい

て
金子

清俊

鈴木

博

（愛知医大・寄生虫）

Locality： Kedong Valley，5−X−1979

6）

PoJンpJαxn8sJ

Ferris，1916

Host：No．414θ∫ho脚塑＠塑i（長崎大・熱帯医研・ウイルス）

Locality：Lemek，30−X−1979

アフリカ産のシラミ類についてはJohnson（1960）及びKimandoμ〃：〃

4Micromariaゆeriodicityにおける光力学物

Emerson（1973）によって多くの新種あるいは新記録種が報告されている。

質説一夜間出現性仔虫内のRhodopsin様物

我々はケニア産のネズミ類6種より5種のシラミ

質桝屋を得た。調査した宿主のなかにはラッサ熱の病原体保有動物である．Mα5∫o解 no∫θ1θns

3及びペストの病原体保有動物として重要な．4rvたαn
nilo∫

his

ごμsも含まれており，吸血性の節足動物によ

富一

（福岡市）

真喜志金造

（琉球大・医・内科）

Guzzo＆Pool（1969）はRhodopsinの螢光F

maxを600nmとしたが諸家により該螢光のる動物間の伝播も考慮する必要がある。そこでケ存在は否定されBridges（1975）は色素上皮内のニア産げっ歯目を捕獲調査する機会に恵まれたの螢光はV・Aesterによるとした。演者らはルび．

で，このうちネズミ科ル毎ri吻θに寄生するシラ枷履ミについて報告する。同定できたシラミ類は次に網膜色素上皮の螢光穎粒の螢光曲線が酷似するこ示す通りである。

とを認めたが分光分析はMfについては成功し

1）∫1砂1ρρ18躍rozθ10∫o〃1y4∫5Johnson，1960

Host：No．8
ハ405

on？』ソsi5，ミミズ表皮の螢光穎粒とカエル，マウスていなかった。スリランカよりのルび加ncrψi

は穎粒が伽規所3のよりも多くかつ大型穎粒を
coμcho

混在し顕微分光分析が可能であった。そのλmax（＝M．no∫01θnsi5）

は406nm，ミミズ表皮，マウス色素上皮穎粒のZε10オoη！』ア3h 1あ680r4αθ

えmaxは414nm付近にあった。他方ウシのLocality：

KedongValley，25−Xl−1979

Metarhodopsin

II（MRll）のλmaxは380nm，

117

N−retinylideneopsin（NRO）のそれは酸性で440示し，その後減少した。α1θx属の蚊も同様の傾

nm，アルカリ性で365nmにshiftすることが知向を示したが，夜遅くなってもかなりの数が吸血られている。ルび．加ncrψi，ミミズ表皮の螢光穎に来ていた。、4槻ρhε18s属の蚊の吸血活動は，粒のえmaxは共に酸性で413nm，アルカリ性でMonson406nmとウシNROのそれに比し軽微であるがクを迎えた。

oやα18x属に比べ2時間程遅れてピー

明らかなshiftを示したがマウス色表上皮の螢光

一方，液浸標本を解剖した結果，Monsonfo属

穎粒のλmaxはpH5．7−8．8の範囲でなんらのの蚊83個体のうち，4個体がII期あるいはlll

shiftを示さず前二者の螢光物質はV．A

期のフィラリア幼虫を持っていた（自然感染率，

esterそのものでないことを示した。演者らの得た三者の4．8％）。しかし，本年度は37個体のα18x属，31

顕微螢光スペクトル，顕微分光スペクトルの所見

個体のオnρρh81θ3属より，いずれもフィラリア幼とRhodopsin及びそのbleached intermediates

虫を得ることができなかった。咋年，Cρ．gμ1n−のFmax，λmaxに関する既知の所見を比較す

gμ卿SC如 μSの胸部から得られたIC期及びM．

る時，夜間出現性仔虫及びミミズ表皮の螢光頼粒

μn加r〃7 sの胸部から得られたlb期，腹部からは視色素の分解産物中に類似を求めればウシの得られたIII期幼虫の大きさを測定すると，それNROに近い物質と考えられた。下等動物の視色 ぞれ，137μ，248μ（220〜280）及び932μとなっ素のλmaxが広汎に分布することも考慮に入れ た。これらを，長崎で実験的にCp．po〃θn3に吸るべきであろう。Kuwabraら（1968）の光によ 血させて得た，研．加ncrψ∫の幼虫の長さと比較る最初の組織変化が機体外節Rhodopsinの在位 すると，lc期，136−170μ，lb期，187−306μとなから始まるとの所見を参照してこれら色素の組織

り，いずれもこの範囲に入ったが，IIl期は1，190−

障害作用Photoirritatorの作用に言及した。

1，870μであり，モザンビークで得られた幼虫は幾分小さいことがわかった。

5東アフリカ，モザンビークのフィラリア症について（2）

同一部落で，無症状の現地人より採血した標本より，2種類のミクロフィラリアが得られた。1

藤田紘一郎，小田力，森

月舘説子，上田正勝

章夫，（長崎大・医・医動物）

昨年に引き続き，モザンビークのフィラリア症について基礎的調査を行った。

つは有鞘で大きさ160．6μ（145−175），他の1っは無鞘で9α3μ（83−105）の大きさであった。長崎

県の曜．加norψ∫の患者から得られたミクロフィ
ラリアの大きさは231．0μ（220〜240）であり，モザンビークの有鞘のミクロフィラリアの大きさはフィラリア患者（バンクロフトと思われる）がかなり小さく，また当地の無鞘のミクロフィラリ

多数居住するケリマン近郊の一部落を選び，住家

アは大きさが小さすぎて，該当するフィラリアは近くのヤシの木に小型のカヤを吊し，内にフィラ

見当たらない。現在これらについて調査中である。

リア患者を1人入れ，さらに周囲に10人から20人の半ズボン，裸足の現地人を置いて，夕方5時よ
り11時まで，6人が吸虫管を持って蚊を採集した（1982，5月5，6，7日，晴天）。

乾燥標本にして持ち帰った蚊を調べると，昨年同様，Mo那oniα（M．μnヴbr規isが主，他にM．
珈r∫conμS），α1θX（CP．9伽9喫地3C如∫μSが主），、4nρρhε1θ5（オ．coμ3∫on∫が主）及び・4θ4θsの4属であった。ルf侃son如属の蚊は5時すぎに吸血に来て，日没前後の6時30分頃吸血活動のピークを

6西サモア国におけるフィラリア症の疫学
一仔虫保有率及び仔虫密度（MfD−50）につ

いて一
木村

英作
（長崎大・熱帯医研・寄生虫）

L．Penaia（西サモア国厚生省）

G．F．S．Spears（ニュージーランド・オタゴ大）WHO及び西サモア国フィラリア症研究プロ118

ジェクトの一環として，1978年11月より1979年11月まで昼間亜定期出現性のバンク・フト糸状虫に

7ハイティ・マラリア対策における殺虫剤散よるフィラリア症の仔虫保有率等に関する実態調

布効果の間接螢光抗体法による疫学的アセ査が実施された。28調査部落において，年齢1歳

スメント
鈴木

以下を除く約1万名（全人口16万人の約6％）をFP法及び（或いは）NP法で検査された。

（群馬大・医・寄生虫）

V．Jean−Frangois，M．R．Hilaire，

対象に，従来の60mm3nnger−prick血液塗抹法（FP法）及び1m1Nucleporenltration法（NP法）を用いた血液検査が行われ，総計8，385名が守

L Lafontant Jr．

（SNEM，Haiti）

ハイティにおいて1979年来すすめられている殺虫剤Fenitrothionを主軸とした新しいマラリア

西サモア全体の仔虫保有率はNP法で4．5％対策が奏効したため，対象地域の年次マラリア有（陽性者381名），FP法で3．8彩（陽性者315名）で病率が著しい低値を示す状態が続いている。このあった。すなわちFP法では17％が偽陰性となっような状況下にあっては通例の血液塗抹標本検査た。4部落では10彩を越す高い仔虫保有率が見らによるparasiterateの算出によっては精密な疫学れた。性別・年齢による仔虫保有率を見ると，従的アセスメントが不可能となる。しかもマラリア

来の他地域での報告同様，成人男子に圧倒的多数

有病率が著明な低下を見たときこそ精密・正確なの患者が集積し（女子の23倍，全陽性者の70％），

疫学的アセスメントをすすめて残った火種を追求

男子30歳以上の平均仔虫保有率は約20％であった。

し集中的に強力な対策をすすめなければならない。

なお最年少保虫者は3歳の女児であった。

今般，ハイティにおいてマラリア低下が最も顕著

西サモア国全体として仔虫密度を見ると，1979であったWorfMesseと，マラリア流行がもとも年における血液60mm3当たりのMfD−50は，と極めて低いNavarreを比較してみると原虫が顕平均18．6（男21．4，女14．2）で，性・年齢別の仔微鏡検査で検出された例はそれぞれ1／136，1／151

虫保有率とMfD−50との関係は不明瞭であった

で，両地域の疫学的特性は解析不可能であった。

が，部落別仔虫保有率とMfD−50との間には正しかし間接螢光抗体法により有意の力価を示したの相関が見られた。

例はWorfMesseで235％，Navarre1．3％であある集団における仔虫数の度数分布について，

り両者の差が顕著に反映された結果が得られた。

Pichonら（1980）の提唱するnegativebinomial

マラリア流行が著しいvincendronにおいてはdistribution（truncatedナexponent＝0．3）をサモ

76．9％の例に1：160〜1：10，240の高力価が見られアで得られた資料に適用してみると，対数正規分た。以上の結果により効果的なマラリア対策が推布を適用した場合より良好な結果（ntness）が得進されるに伴い従来の顕微鏡検査だけによる疫学られた。この方法では偽陰性の数を推測すること

調査では感度が不充分であり，螢光抗体法によるが可能で，それによる推定偽陰性者数はNP法で血清疫学の手段により，感染フォーカスを決めて36．7人，FP法では100。6人であった。すなわち前いく方法が有効であることが示唆された。

者では発見された全仔虫保有者の約9％，後者で26％の偽陰性者が存在することを示唆している。

前述のようにFP法では17％の偽陰性があり，それにNP法の偽陰性9％を加えるとちょうど8 インドネシアにおけるデングウイルスの分
離

五十嵐

章

（長崎大・熱帯医研・ウイルス）26彩となり，理論値と実際に観察された結果は矛盾しない。しかしexponent＝0．3を固定すること

藤田 宣哉（神戸大・医・微生物）には間題があり，さらに詳しく検討中である。

奥野 良信（阪大・微研・防疫）

小田・ 力（長崎大・医・医動物）船原 芳範（神戸大・医・生理）白幡（産業医大・小児科）

聡

119

池内

堀田
Agus

春樹

（神戸大・医・小児科）

マゥス（BALB／c，7−12週齢）腹腔由来のマクロ進

ファージ（Mφ）の培養はデングウイルス（DENV）（神戸大・国際交流センター）に対し必らずしも感受性は高くない。しかしこのSujahrurahman，Sumarmo

Sujidi（インドネシア大・医）

デング出血熱（DHF）は東南アジアにおける最も重要なウィルス感染症である。

Mφ培養にある種の生物活性物質を加えるとDENV感受性が見掛け上増強され，ウイルスの増殖が有意に増大した。現在までに我々が検討した結果では，増強作用を示すものとしてphyto−hemagglutinin（PHA），3α伽onθ〃o

θn

θri

1is

我々は1981年と1982年のDHF流行期に，イン
lipopolysaccharide（LPS），数種の細菌細胞壁及
ドネシア大学医学部小児科入院DHF患者及び外来不明熱（FUO）患者末梢血，さらに1982年には患家及びその周辺で採集した媒介蚊からのウイ
ルス分離を，主としてヒトスジシマカ培養細胞ク

ローンC6／36を用いて行った。分離ウイルスの型同定は，免疫粘着血球凝集反応及びデングゥイ
ルスの各型に特異的な単一クローン抗体を用いた。

びその構築成分などがあった。，ただしその有効性は物質によって量的な差が示された。しかし一般にdose−response relationshipというべきものが認められた。Pokeweed

mitogen（PWM），

concanavalinA（conA）は我々の検した限り効果はなく，carrageenanはウィルス増殖に抑制的に働いた。寄生虫抗原，たとえば、廊cor

3s膨規，

1981年には99名のFUO患者中20名からデング
Pαmscori3εgμo耀 n，Anisakis larvaeからの抽出
ウイルスが分離され，1型，2型，3型のいずれ抗原も同様の活性を有した。これら活性物質で処かであることが判明したが，10名のDHF患者からのウイルス分離は不成功であった。1982年には16名のDHF患者中2名よりそれぞれ3型ウィルスが，56名のFUO患者中1名から2型ウイルスと2名からそれぞれ3型ウイルスが，さらにネッ

タイシマカから2株の1型ウイルスが分離された

他，ヒトスジシマカからC6／36に細胞病変を示す未知ウイルスも検出された。

FUO患者からデングウイルスが高率に分離されることは軽症のデングウイルス感染者が多数存在する事を直接証明すると共に，これらの軽症例が媒介蚊にウイルスを供給する増幅動物として作用している可能性を示すものとして疫学的に重要な知見である。

理された培養では，いわゆるinfectivecenterの数が増加しており，また螢光抗体染色により抗DEN陽性反応を呈するMφの数も増加した。一方，ある型のDENVで免疫されたマウスから得たMφの培養は，対照非免疫マウスから得たMφ培養に比べて，異なった型のDENVの増殖を有意に増強した。たとえば，DENV−1免疫マウスから得たMφ培養におけるDENV−2の増殖は，対照非免疫培養におけるよりも大であった。上記の諸成績は，胸腺欠除ヌードマウス（BALB／cnu／nu）から得たMφの培養を用いた実験においても同様に観察された。

10

中国におけるアカイエカ群の蚊の細胞質不和合性について9

マウス腹腔マクロファージ培養におけるデングウイルス増殖に及ぼす二・三の生物活性物質の影響堀田Agus

博（神戸大・医・微生物）末永敏（長崎大・熱帯医研・資料室）

刻維徳，徐 薇，暦建吾（中国科学院・上海昆虫研究所）

S．Wiharta（インドネシア大・医・微生物）

中国におけるアカイエカ群の交雑型を明らかに進するため，主に上海で野外調査と交雑実験を行っ（神戸大・国際交流センター）

た。1981年8月初めに上海市内の一公園の片すみ

辻守康（広島大・医・寄生虫）に水がめを設置して水をはり，毎週1回少量のふ

堀田

120

すまを投入して毎朝観察し，蚊の卵塊が発見され株と野生株であるJaGAr−01株及びE−50株に対た場合にはその全部を採集し，実験に供した。

してどのように異なるかを，中和抗体を測定する

1982年7月末までの1年間に採集された卵塊数はことによって調べた（E−50は，コガタアカイエカ

1，259で，この中1，245はアカイエカのものであっより蚊培養細胞を用いて分離された株）。

た。これらの卵塊の中，1，228はよく卿化したが，ワクチンは1カ月間隔で2回接種し，採血はワ

7卵塊は卿化率が悪く，5卵塊はかなり多くの卵クチン接種前，第2回接種前及び第2回接種1カが途中まで発育したにも拘らず全く卿化せず，野月後の3回行った。接種前に抗体が陰性で，3回外で不和合交雑が行われたことを示唆した。また目の採血ができた幼児は70名であった。

5卵塊は全く発育せず，不受精卵であったと思わ

3回目の採血標本中の3つの株に対する対数中れる。上海市内の3カ所，即ち復興公園，間北及

和抗体価の分布をみると，Anti−E−50株とAnti−

び川沙から採集された多数の卵塊の一部について，

JaGAr−01株の抗体価分布はよく似ているが，中卿化後卵塊別に飼育し，交雑実験を行った結果は，

山株に対する抗体価の分布は高い方にずれている。

それらのすべてが同じ交雑種であることを示した。

対数抗体価の幾何平均値をみると，E−50株，さらに，これらの上海の諸系統と中国内の他地区，

JaGAr−01株に対しては1．7と1．9であるが，中山

即ち福建省の福州，広西壮族自治区の賀県，広東株に対しては2．9であった。

省の広州と佛山等から集められたアカイエカ群の各系統間の交雑実験の結果は福州系の雌が聞北系

また，3回の採血標本が全て得られた幼児は27名であった。ワクチン1回接種でも中山株に対と賀県系の雄との間に不和合性を示した他はすべ

してはかなりの抗体上昇が認められ，陽転しなて和合性を示した。中国の7系統と日本の3系統

かったものは1／27例だけであった。しかし，E−50との間の交雑実験の結果，沖縄系のネッタイイエ株に対しては陽転しないものが9／27例もあり，

カと長崎系のチカイエカがそれぞれ中国の4系統

JaGAr−01株に対しては3／27例であった。この結のネッタイィエカとの間に不和合性を示すこと，果から中山株ワクチンによってE−50株に対する長崎のアカイエカの1系統の雌は賀県系を除く中中和抗体の上昇を期待するには，初回免疫におい国の6系統の雄との間に和合性を示すが，雄は間ては少なくとも2回の接種が必要と思われる。

北系を除く6系統の雌に対して不和合性を示すこ

日本脳炎の発症を抑えるには10倍，つまり対数と等が明らかになった。なお，調べた代表的な15で1・0の中和抗体価があればよいと考えられてい系統の蚊はすべて雌の生殖細胞中に多数のリケッる。我々のこの実験の結果から，現在のワクチン

チア様微生物を保有していた。

は中山株に対してだけではなく，他の2種類の野生日本脳炎ウイルス株に対しても，2回接種によll

日本脳炎ワクチン接種に対する幼児の中和

り有効な中和抗体価の上昇が起こることが明らか

抗体応答

となった。

荘

榮

福永
山田

豊，奥野

良信，只野

昌之，

利彦，深井孝之助
明12

熱帯アフリカにおける腸管系ウイルスの生（阪大・微研・防疫）態 IILポリオウイルスの型内血清学的異（阪大・医・小児科）

同について
大立目信六

近年，日本国内での日本脳炎（JE）の流行は減（福島医大・細菌）

少しており，その原因の1つとして学童に対する先に西アフリカ，ガーナの都市，農村におけるワクチン接種の普及が考えられる。一方，いくつ

腸管系ウイルスの生態について報告した。今回はかのアジア諸国においては，現在なお，JEは大そのうちのポリオウイルス分離株について強毒株

きな公衆衛生上の問題である。私達は，JEワクとの間の血清学的な差異を解析し，近縁関係を検チン接種による免疫応答がワクチン株である中山

討した。

121

ポリオウイルスの強毒標準株である1型のMahoney株，2型のMEF−1株，3型のSaukette

よって伝搬され，東南アジアにも広く分布してい株とそれらを抗原として作った家兎免疫血清を用

ネシアのジャカルタ市内の2，3の地区で両種蚊いた。分離株は1971年から78年にかけてガーナのの成虫を人家内と屋外で採集するとともに，幼虫る。我々は1982年1月中旬から約1カ月間インド

アクラ市内外で分離したものの一部である。型内の発生状況をも調査した。さらに，採集した蚊成

血清学的鑑別はMcBride法で中和恒数Neutral・虫についてヒトスジシマカ培養細胞クローンC6／

izing

36を用いてウイルス分離を行った。

coe伍cient（K値）を求めた。

ネッタイシマカの成虫は少数ではあるが，人家

中和恒数Kは反応0時間及びオ時間目のウイ
ルス量をそれぞれ％，竹とし血清希釈率をPと内で採集され，その幼虫は室内のバクマンディー

すると次式で求められる。

や水がめなどの人工的容器に発生している場合が並＿ε一た．左。rK＿ρ乞31。9血
吻

1）

∫

V∫

また強毒標準株のK値を100として分離株のそれと比較した値NK値で型間の比較をした。
成績：ポリオ1型の分離株は強毒株の抗血清では中和されにくい，異質（Heterologous）な抗原性を持つものが多かった。2型では強毒株に対し同質とも異質ともいえぬ中間型（lntermediate）

が大部分であった。3型は多くが強毒株の抗血清によってよく中和される同質（Homologous）であるが中にはHeterologousなものもあった。1972

多かったが，屋外にある空き缶などにも発生していた。これに対してヒトスジシマカの成虫は人家内では採集されず，屋外ではかなりのものが捕集された。その幼虫は戸外に放置されている水の溜った空き缶などに発生していた。

採集されたネッタイシマカからはデングウイル

スの1型が2株，またヒトスジシマカからは不明
ウイルスが分離された。蚊からのウイルス分離とは別にインドネシア大学医学部付属病院で患者の血液からもウイルス分離を行った。デング出血熱

患者16名中2名からデングウイルス3型が分離され，また不明熱患者56名からはデングウイルス2

年に周辺の農村でポリオ2型の潜在的流行が起型（1名）と3型（2名）が検出された。
こった時の分離株のK値はほぼ近似しており，単一型のウイルスによる寡占的流行であったことが示された。アクラ市内や農村部で継続的に調査した時の分離株のK値は不定であり，特徴的傾向はなかった。

結論：西アフリカで分離したポリオウイルス1型は強毒株とは抗原性が異なっていたが，3型は同質で，2型は中間型であった。
13

インドネシアにおけるネッタイシマカとヒ

トスジシマカの生態とウイルスの分離
小田

力

五十嵐

章

（長崎大・医・医動物）（長崎大・熱帯医研・ウイルス）堀田

ジャカルタ市内でもネッタイシマカがデング熱の主要伝搬蚊であることは間違いないが，ヒトス
ジシマカもかなり発生しているように思われるので，場所によっては本種蚊も本病の伝搬に関与している可能性もある。

14ELISA法によるトキソプラズマIgG抗体
価測定及びProtei皿A処理後IHAによる
特異IgM検出法に関する研究
宮崎

昭行，土橋

賢治，鈴木

寛，

中島ひとみ，松本 慶蔵（長崎大・熱帯医研・臨床）

トキソプラズマIgG抗体価をELISA法にて測進定し，Dyetest，IHA法と感度を比較した。対象（神戸大・国際交流センター）

及び方法はDyetest（小林の変法）で抗体価が均S．Djakaria，R．Hoedojo（インドネシア大・医・寄生虫）

デング熱はネッタイシマカやヒトスジシマカに等に分布するように70検体を選び，IHAをトキ
ソHA−KW（協和），ELISAをトキソエライザ・
テスト・キット（旭メディカル）で測定した。

122

その結果，ELISAはDye testとほぼ同等の感度

結果：フィラリア性乳魔尿症のトキソプラズマを示し，一致率は96彩であった。IHAの感度は抗体陽性率は38．9彩で，癌末期患者，流死産及び劣り，Dyetestとの一致率は75％であった。し奇型児出産歴のある妊婦及び同年代の健康成人とかし，ELISAは高抗体価群でプラトーを示すた

比較して抗体陽性率は有意に高率であった。まため，IHA2，560倍以上の域値での抗体価の変動を抗体価も高値を示すものが多かった。トキソプラ

調べるには血清希釈等の操作が必要であった。

ズマ抗体陽性者では陰性者と比較して末梢血リン

次に，特異IgM測定法に関して検討した。IHA

パ球数，丁細胞数及びPHAによるリンパ球幼若抗体陽性179検体についてProtein A処理にてIgGを除去し，IHAで特異IgM抗体価を測定し化反応の有意な低下が見られたが，抗体価との間には相関は認められなかった。PPD及びPHAた。その結果，9症例11検体でProtein A処理後

皮内反応陽性率に関してはトキソプラズマ抗体陽

抗体価は著しく低下したがIHA80倍以上を示し

性者・陰性者で差は認められなかった。また細胞た。これらの検体は全てレーザーネフェロメー

性免疫低下を示す3指標（リンパ球数，丁細胞数，

ターでIgGが検出されなかったため，特異IgMの存在が強く疑われた。しかし，これらの患者
血清に庶糖密度勾配遠心法を行い，各分画中のリンパ球幼若化反応）の重複性とトキソプラズマ

IgG・lgMならびにIHA抗体価を測定した結果，フィラリア性乳慶尿症とトキソプラズマ易感染性

感染率との関連性も認められた。

考察：以上の結果から細胞性免疫低下を示す

全例IgG分画にのみIHA抗体が見られ，IgM との関連性が認められ，さらにトキソプラズマ易
分画には1例も抗体価上昇を認めなかった。以上

感染に関する細胞性免疫の指標として末梢血リンより，Protein

パ球数，丁細胞数及びリンパ球幼若化反応の重要A処理後IHAで抗体価上昇を認めても，多くの場合，レーザーネフェロメーター性が示唆された。

測定感度以下の残存IgG，または非特異的反応に16よるものと推察された。

酵素抗体法（ELISA）による糸状虫症の免疫血清学的診断の試み

15

細胞性免疫低下を示すフィラリア性乳靡尿

富里政秀（東京医歯大・医動物）症とトキソプラズマ感染の臨床免疫学的検中島康雄（山梨医大・寄生虫）

討

野上

貞雄

（東大・医科研・寄生虫）

吉田

俊昭，山本

眞志，松本 慶蔵

（長崎大・熱帯医研・内科）

B規8 α、ρohon8 の成虫（Ad）とミクロフィラリ

ア（Mf）の炭酸塩緩衝液で抽出したものを抗原と近年種々の寄生虫感染とその宿主の免疫応答にして用い，B．pohon8i感染スナネズミ及び，種々

関しては多くの報告があり，特に細胞性免疫の関の寄生虫症患者血清について，lgG抗体価の測定

与については興味ある問題である。これまでフィを酵素抗体法で行った。

ラリア性乳魔尿症における細胞性免疫低下についた月齢30カ月以下のスナネズミは全てAd抗原とて本学会で報告してきた。今回，私共はフィラリ

Mf抗原両方に反応を示した。また抗Ad抗体とア性乳魔尿症の細胞性免疫低下とトキソプラズマ

抗Mf抗体はほぽ同等の抗体価を示した。ところ

易感染性との関連性について各種細胞性免疫の指がフィラリア寄生があるにも拘らず，抗体を有さ標を用いて検討を行い若干の知見を得たので報告ないスナネズミが一部に認められ，それらはいずする。

れも月齢30カ月以上であった。2）感染スナネズ

1）B．ρθhαn8iに感染し対象：フィラリア性乳魔尿症36症例

ミ血清にB．ραhαn却オス成虫抽出液を加え抗体方法：トキソプラズマ抗体価はIHA法，丁細吸収を行ったところ，抗Ad抗体は1／16以下に，胞数は橘法，PHAによるリンパ球幼若化反応は抗Mf抗体は1／3になった。このことはスナネズ

3H−thymidine取込みにより測定した。

ミ血清中にMfに特異的に反応する抗体を含んで123いる可能性を示している。3）腹腔内に感染させethidiumたスナネズミのAdとMfの寄生数とその血清抗のK−DNA，N−DNAのbasepair間にintercalate

bromide液で染色し，本色素を2重鎖体価に相関は認められなかった。またMf血症のさせ，波長535−550nmの光を照射し，そこに発有無は抗体価に差を生じなかった。4）感染経路

生する螢光の強度をPhoton counter for cell nu−（皮下もしくは腹腔内接種）によって，抗体価にorescence（山田・庄野）で測定する新しい方法

差を認めなかった。

5）感染後経時的に抗体価をを用い，40mg／kg量のnifurtimox（Lampit⑪）を調べていくと，2〜4週目に抗体は陽性となり，注射したT

以後徐々に上昇し，Mfの出現する約8週目に抗pomastigote）のK−DNA及びN−DNAの螢光強

体価の一時的低下が認められる。この抗体価の低度値変動を観察したが，上記の使用量では本原虫

o耀zi感染マウスの血流型原虫（try−下は，Mf出現によって血清中の抗体が消費されの両核酸にたいした影響が認められなかったと報たためによるものと思われる。6）Rpohθn却の告している。

抽出抗原を用いて種々の寄生虫症患者血清につい

そこで，今回はnifurtimoxの投与量を倍増し，て，交差反応をする抗体（IgG）をELISAにて80mg／kg（マゥスの感染致死を阻止するに充分な測定した。レV．加norφ量）を感染マウスの腹腔内に注射して，前報の如置ρin碧θrμ，Looloo，σnα∫hos

o加αnの患者血清は，Ad抗原とMf抗原両

く6時間後に原虫のK−DNA及びN−DNAの螢光

方に交差反応を示した。日本住血吸虫症患者血清測光を行ったが，このような治療に充分なnifurti−においては弱陽性の反応を示した。このような陽mox量を使用しても，Tcr砿1の両核酸に著明な性例において，抗Ad抗体価は抗Mf抗体価より変化が認められなかった。しかし，この結論はな

高値を呈した。ただしPV．加nor頭∫iの患者でMf

お再検討の余地を残している。例えば，本薬剤が血症を有している症例については，抗Adと抗核酸に障害を起こすと仮定した場合でも，測定をMfは同等の抗体価を示した。オn∫s磁∫s（type1），

行った時期は投薬6時間後であるから，その間にS01』ソ∫icθ，

傷が完全に修復（repair）される可能性が考えられsの患者血清は交差反る。従って，この疑問の解決には，薬剤投与直後

ron8ア10耐θs3∫θrco1θr

Ech∫nococcμs

s，En∫oη208わon麗1∫∫100μ10rh3

応を示さなかった。

17の両核酸の螢光測光を行ってみる必要があろう。

T〜

α

」

3」伽miCrOnuOrOmetry（第4報）

猪木

050醒σのK・DNA及びN−DNAの正三（奈良医大・寄生虫）

尾崎 文雄（高知医大）

古谷 正人（徳島大・医・寄生虫）

猪木らは，昨年（1981年）の本学会において，

18広東住血線虫症のフルベンダゾールによる治療に関する実験的研究
牧純，柳沢十四男（北里大・医・寄生虫）

広東住血線虫症の治療薬開発のために種々の医薬品がスクリーニングに供されているが未だ適切

dry法（本法では，あらかじめス

なものはない。演者らはマウス及びラットに実験

ライドグラス上に1．5彩の寒天を薄く塗り，その的に感染させた本虫に対するフルベンダゾール

上に遠心で集めた原虫を静かに塗抹し，これをド（Fb）及びそれと近縁の化合物であるメベンダ

ライヤーの冷風に当て，標本の表面が乾いた時期

ゾール（Mb）とサイアベンダゾール（Tb）の治療を見計ってすばやくethanol−aceton等量混和液

効果を検討したので報告する。〔材料・方法〕実に挿入し，4。Cで30分間固定，さらにethanol−

験的中間宿主Bめ醒phα1αr如81αケ躍oより得た本

buffer等量混和液に10分間，続いてbu鐸erに10虫の第3期幼虫を50匹ずつddYまたはICR系マ

分間浸した後，RNase液に37。C，30分間作用さゥス並びにウィスター系ラットにゾンデを用いてせ，混在するRNAを除去してから螢光測光に飲ませた。1％ッイーン80に懸濁させたFbをマかける）によって処理した原虫標本を螢光色素

ウスヘは感染後5−7日，10−12日，15−17日またいわゆるhalf124は5−10日にンラットヘは5−7日，15−17日，35−の順であった。BALB／cマウスにマンソン住血

37日または47−49日に経口投与した（5−100mg／

吸虫（マ住）セルカリア30匹を感染させたもの

kg／日）。対照群には1％ッイーン80のみを与えた。

は，日住より反応が弱く，脾細胞でconA，LPS，

Mb及びTbの投与はマウスとラットヘ感染後

SEA−Sj，SEA−Smの順で，LN細胞でconA，

5−7日（10mg／kg／日×3日）及びマウスヘ感染後

PHA，SEA−Sjの順であった。マ住100セルカリア

5−10日（10mg／kg／日×6日）にそれぞれ行った。

マウスでは投薬終了後通常5−6日に，ラットでを感染させたものでは，脾細胞でconA，SEA−
Sm，SEA−Sjの順で，LN細胞でSEA−Sm，con

は感染後60−63日に実体顕微鏡下で剖検した。〔成A，ダニ抗原の順であった。BALB／cのT−cel1欠績〕マウスでは感染後5−7日または10−12日のFb

損ヌードマウスに日住30セルカリアを感染させ10投与でほぼ完全な治療効果が認められた（10mg／

週後に虫卵結節を見ると，直径平均198μmで正kg／日×3日）。5−10日のFb投与では5mg／kg／

常320μmに比し小さく，細胞反応，線維化は弱日×6日に於てすら完全な治療効果が見られた。

く，好酸球も稀であったが，肝実質の壊死所見はしかし15−17日のFb投与では効果が不明であっ著明であった。腸管の結節でも同様で，内層に壊た（10mg／kg／日×3日）。ラットでは感染後5−7死変化が見られた。マウス骨髄細胞のコロニー形

日のFb投与で完全な治療効果を，15−17日のFb

成作用は虫卵と脾細胞反応上清に見られたが，虫投与群で74彩の虫体減少率を認めたがFbの35−

卵物質自体にはなかった。以上の成績を日住虫卵

37日及び47−49日の投与群では効果が見られな物質とリンパ球の反応，作用として報告する。

かった（いずれも10mg／kg／日×3日）。Mb投与

群ではほぽ完全な効果が見られたが，Tb投与群
では全く効果が認められなかった。以上マウス，

ラットいずれに於ても感染後約2週間以内であれ

20Toxoplasma感染マウス血清を使用した
Toxoolasmaの抗原分析
矢野 健一，中林 敏夫（阪大・微研・原虫）

ばFbによる治療効果を十分期待出来よう。
Toxρρ10s〃1080〃4∫19

日本住血吸虫虫卵のリンパ球に対する作用
について
石井

明，

川越千恵子，八谷 敏子（宮崎医大・寄生虫）

芦沢 広三（宮崎大・農・家畜病理）

4−6週齢BALB／cマゥスに日本住血吸虫（日，RHstrain感染マウス腹水中のToxoplasma（Toxo）抗原には，正常マウス

血清中には認められない11種の抗原が，家兎抗Toxo血清を使用した免疫電気泳動法により確認された（BikenJ．，23，33）。それら11種の中には，通常には血清中に存在しないが，Toxo感染により反応的に宿主マウスより産生されるもの（No．1，

住）セルカリア30匹を感染させ7−14週後に脾細No．3）も含まれていることが確認された。それ

胞と腸管膜リンパ節（LN）細胞を取り抗原とマイらマウスの非特異的反応物質を除外し，Toxo抗トジェンによる幼若化反応を3H−thymidineの取原のみを追求するために，マウスをり込みにより測定した。

抗原で免疫したもの〔anti−PE（m）〕，2）弱毒株

週齢による対照値にや

1）Toxoや変動が見られたが，日住感染で日住虫卵抗原（S−273strain）に感染させたもの（anti−Toxo−S），（SEA−Sj），conA，日住成虫抗原（Adult−Sj），マ

3）S−273株感染後にRH株を再感染させたもの

ンソン住血吸虫虫卵抗原（SEA−Sm）の順序が脾

（anti−Toxo−R）を用い，免疫電気泳動法でToxo

細胞反応に見られ，LN細胞ではconA，Adult− 抗原の分析を行った。
Sj，SEA−Sjの順に幼若化が起きた。CBA／Jマゥ

結果：1）これらの抗血清では，マウスによスでは脾細胞の反応が強く，．SEA−Sj，Adult−Sj，る反応性物質（No．1，3）に対する抗体は認められ

SEA−Sm，conA，ダニ抗原の順に幼若化反応を示なかった。2）anti−Toxo−Sでは，Latex

Agglu−

し，LN細胞では低くconA，SEA−Sj，ダニ抗原 tination Test（LAT）価の上昇とともに沈降抗体

125の数は増加し，LAT価が上限（1：512）に達する

血球は慢性あるいは健康マウス血清で37。C，30

感染後4週以後には，沈降線は6本（No．2，4，5，

分間感作後，マクロファージ単層培養液中に添加

6，7，9）確認された。3）anti−Toxo−Rでは，沈した。添加後30，60，120分に，マクロファージ

降線の数は変わらなかったが，LAT価は1：を固定，染色した。赤血球食食能は慢性マウス・

16，384で非常に高く，沈降線も個々の沈降線の抗マクロファージに慢性マウス血清処理赤血球添加

血清側に全体が一本にfuseした沈降線を認める群において有意に充進した。

っいでB．ro4h切n∫原虫の垂直感染の可能性をようになる。また，この状態ではToxocidalで検討した。バベシア慢性雌マウスからの新生仔1あり，マウス当たり107のToxo（RH株）を腹腔内接種しても，3日後には腹腔内にToxoを認 匹ずつの内臓を乳剤化し，健康マウスに接種して，めない。4）anti−PE（m）では，初回免疫後4週

発症の有無を観察したが，全例陰性であった。妊娠

目に二次免疫を行うとLAT価は1：2，048と上中感染マウス（交配後1ないし2週目に102個感

昇し，沈降線はNo．2，4，5，10の4本を認め，

染赤血球接種）からの胎児または新生仔について103のToxoの腹腔内接種に耐えられるようにな

同様な試験を行ったが，発症例は認められなかっる。5）Toxocidalの状態のマウスでは，おそた。以上のことから，マウスにおけるRro4ho加i

らく糖鎖の部位に対する抗体ができた結果と思わの垂直感染は通常認められないと推察された。

れる，全体にfuseした強い沈降線を生ずる。
21Bαδ8s∫α■04加22

質組成の変化感染によるマウスの垂金田 良雅，永倉

直感染の可能性について
高橋

宏昌，鈴木

Tア απ050脚c耀ζ の培養条件による脂

合津 都世

直義

（帯広畜産大・獣医・生理）Trγponoso

貢一，橘

裕司，

（東海大・医・寄生虫）

nαcrμz∫に感染して起こる

シャーn∫）はゲッ歯ガス病は現在もなお有効な治療薬が見出されてい類の赤血球内寄生原虫である。演者らはこのβ．

ない。虫体の脂質代謝を明らかにすることによっro4hθ∫ni感染マウスを用いて垂直感染の有無につてその代謝阻害による治療の可能性について検討

いての実験を行った。

を行うため，まず虫体の脂質組成及び培養条件の

Bo加s

αro4hon（以下B．ro4hα

B．rodhαin∫のマウスに対する毒性を知るために変化による脂質組成の変動を観察した。新しい

原虫含有マゥス赤血球の約101，102，104個をそ

LIT

medium中へ虫体を接種してから虫体の各れぞれICR−JCL成熟マウス3頭ずつの腹腔内に増殖期における脂質組成の検討を行った。接種後接種した。最少量である101個接種マウスは14日

1，4，7，15，30日目に虫体を集め，Folchの方法

目までに全頭死亡した。

により全脂質を抽出した。抽出した脂質をシリカ

感染に対するマウスの抵抗性獲得試

ゲル板に添加し，薄層クロマトグラフィーを行っ

験は感染の確実性の点から，原虫含有赤血球102た。各分画をかきとり，中性脂質については

個を，腹腔内接種によって行った。原虫接種マウ

Dichomatereagentを用い，リン脂質については

スは接種後1週目より，ジアゾアミノベンツアミ

リンの定量を行い，各分画の組成比を求めた。

ド製剤（Ganaseg）0．1mg／マウス／日を3日間連用，中性脂質の組成比をみると，Free

以後1日休薬，ついで同薬剤同一量を3日間投薬

Diglycerideに相当する分画が，対数増殖期の終した。これらのマウスは接種後4週目に102個のりから定常期にかけて増加してくるのが観察され

感染赤血球で攻撃し，4週以上経過したものをバた。リン脂質組成にはあまり大きな変化は見られ

ベシア感染耐過慢性マウスとした。

なかった。次いで培地中に脂肪酸を添加すること

B．ro4hαin

fatty

acidと

バベシア慢性マウス腹腔マクロファージのB．

による虫体脂質組成の変化を各分画に分けて観察

ro4hα∫ni感染マウス赤血球貧食能を検討したQ赤した9中性脂質に関してはいずれの培地で培養し126ても大きな変化は見られなからた。リン脂質に関（ALP）が高値を示す者が多数認められ，問題としてはpalmiticacid添加培地においてsterolのなっている。isozymeの測定を行っていないため，減少がわずかに見られた以外は大きな変化は見

その由来を直接知ることはできないが，主成分分られなかった。この全脂質をガスクロマトグラ

析，重回帰分析等により，他の肝機能検査との相フィーによって脂肪酸組成を観察した。stearic

acid添加培地で培養した虫体で18：1が増加して関を検討した結果，ALPの変動の75％程度は肝由来のisozymeによると推定された。しかし，いた。また・stearic acid及びpalmitic

他の肝機能検査が全く正常で，ALPのみが非常

acid添加の培地で培養した虫体では18：2が減少していに高値を示す例が，カンボジア難民を中心に多数た。このことはstearic

認められ，骨由来のisozymeによると考えられ

acid及びpalmitic acidが存在すると虫体自身のlinoleic

acidを消費する症例も含まれており，今後，さらに検討を加えることを示唆する結果とも考えられる。培地中へ添加する脂肪酸種が異なると虫体が脂肪酸を利てゆく必要があると考えられる。

用する方法にも違いが生ずる可能性が考えられ感染症を中心にさまざまな健康上の問題が見出さる。

れており，今後さらに健康保護のための体制を整

23わが国に定住を希望するインドシナ難民の
健康状況の解析山口直人（慶大・医・公衆衛生）

浅見

敬三，竹内

勤，小林 正規，三浦左千夫，河村 康司（慶大・医・寄生虫）
建野

正毅（大和市立病院）

以上述べた如く，インドシナ難民には，寄生虫備，充実させてゆく必要があると考えられる。本
研究は，トヨタ財団の援助によってなされた。

24

大和難民定住促進センター出所後のインド

シナ難民の健康調査
建野 正毅

竹内

勤，小林

正規，三浦左千夫，

河村 康司，浅見 敬三（慶大

1980年以来，わが国に定住を希望して入国した
インドシナ難民の数は，すでに1，000名を越えて（大和市立病院）山口 直人

医・寄生虫）（慶大・医・公衆衛生）

いるが，寄生虫感染症を中心に，健康上の問題も日本政府がインドシナ難民対策として設置したいくつか明らかとなっている。本調査では，大和定住促進センター開所以来，2年余が経過してい市に設立された難民定住促進センターに入所したる。本年3月末日までに大和定住促進センターを

難民385名を対象とし，健康診断等により得られ出所し，日本各地に定住した者は423名（男230名，た情報をもとに，難民の健康状況の解析を行った。

女193名）に達している。演者等は日本社会で生寄生虫感染症は75％と非常に高率に認められ，

活を始めたこれら難民の健康状態を知るためにア

その対策が重要であることが判明したが，中でもンケート調査，寄生虫学的検査及び血液検査等を多いのは，鉤虫41％，タイ肝吸虫24％，鞭虫22％

施行して来たのでその一部を報告する。

などである。鉤虫感染では合併症として貧血症がアンケート調査は日本語及び難民の母国語の2問題となるが，鉤虫感染が認められた者は，認め力国語の用紙を作製し，各雇用主に対して郵送でられなかった者と比較して，血中血色素濃度，ヘ依頼した。アンケートの内容は生活状況，健康管

マトクリットが有意に低いという結果が得られた。

理の状況，最近の健康状態等に関する78項目であまた，鉤虫，糞線虫，小形条虫，Rhabditis属のる。300名に発送し，217名（72．3％）の回答が得認められた者には，好酸球増多症が見られることられた。回答者の64．8彫が出所後何らかの医療機が多く，健診時には注意を要する。

関を受診しており，感冒，腹痛，歯痛，外傷等が健診時には数項目の肝機能検査を実施したが，その主な原因となっている。受診率を見ると，国そのうち，血清Alkaline phosphatase活性値 別ではヲオス人が他の国に較べて有意に低く，年

127

齢別では10歳未満が高く，10歳台が低かった。最HA及び抗HB抗体保有率は，出国前に比しそ近の症状としては「よく風邪をひく」と答えたもれぞれ，2．7倍，L3倍に増加していた。

のが55％，肩こり，めまい，虫歯等があると答え

帰国時の検査結果では，年次により，頻度はやや異なるが，寄生虫陽性例（山浦ら，1981）は，たものが40％以上であった。

寄生虫感染率は入所時の78．1％が5L6％と減少

1980年では被験者の30．7妬を占めていた。3年している。然しながら，ラオス人のタイ肝吸虫の間の総計では，好酸球増多症5．9彩，肝機能異常

感染は依然として高く，このことはラオス人の感

5，4％，尿道炎5．2％となっている。尿道炎は大部

染率を他の2国に比べて有意に高くしている。一分非淋菌性であった。好酸球増多症のうち，寄生方，フルベンダゾール投与例ではタイ肝吸虫排出虫感染が疑われたものは80％であった。

卵数の著明な減少をみており，他の蠕虫類では鞭既往歴のある疾患の悪化，または再発例も高率虫保有者の1例を除き全例が陰性化していた。

に認められており，特に腰痛症，胃炎，高血圧，

貧血状態をHb，Htでみると著明な改善が見られており，この傾向は女性の方により強く表れて歯疾患，鼻疾患にその傾向が強い。日本人が，熱いた。本研究はトヨタ財団の援助によってなされ通事故，精神病，性病に関する対策，及び成人病

た。

の管理が，現地で流行している疾患に対する対策

帯・亜熱帯地方に長期滞在する際には，肝炎，交同様に，極めて重要であると考えられる。

25

熱帯地方長期滞在日本人の疾病
小原

博，谷

荘吉
（金沢医大・医動物）

26

インドネシア在留邦人の寄生虫感染率と飲料水汚染についての経年的観察

功（東邦大・医・公衆衛生）

藤田紘一郎，月舘 説子，黒川 憲次

大利 昌久（東大・医科研・感染症）（長崎大・医・医動物）

海老沢

表

光代

奥脇

（青年海外協力隊）

海外長期滞在者の健康管理上の資料とするため

義行（女子栄養大・微生物）杉山一雅俊（順天堂大・医・衛生）

朝倉に，途上国に滞在し技術協力を行う青年海外協力

健夫（熱帯医学協会）

隊員の疾患罹患状況と検査成績を調査し分析した。

前回の本学会総会において，我々は世界各地に対象者は，過去3年間に3ヵ月以上滞在した者

在留する邦人の腸管寄生虫感染率について報告し1，469名である。なお，一部の対象者については，た。そして，この邦人の寄生虫陽性率はそれらの詳細な実態調査を実施した。

地域に供給されている飲料水から大腸菌群が検出

主要疾患について見ると，マラリア101例，急性肝炎94例，交通事故71例，慢性下痢症59例などされる度合と高率に相関（γ＝α957）することを証明した。

が上位を占めている。マラリア，デング熱につい

今回はインドネシア在留邦人の腸管寄生虫感染ては未報告例も多いと考えられるため，さらに詳率について1978年度から本年度までにわたる調査

細な調査を行った。その結果，熱帯アフリカでは結果を報告し，併せて飲料水水質検査の経年的変53．2彩がマラリアに，東南アジアでは16．4％がデ化及び飲料水汚染と寄生虫感染率の相互関係を検ング熱に罹患していると考えられる成績が得られ討した。

た。精神病は11例報告されたが，精神症状を呈する者は，かなり高率であると考えられている。

1978年度の邦人の腸管内寄生虫感染率は8．0彩であった。また嶢虫感染率も8・3彩であった。こ急性肝炎は，極めて罹患率の高い疾患となってれらの陽性者にコンバントリンを1クール分だけおり，過去3年間に発生した94例の内訳は，A型与えて翌年まで放置し，さらに翌年検査したとこ

73例，B型9例，非A非B型2例，型別不明の ろ，腸管内寄生虫陽性率は4．8％に減少し，以後もの10例であった92年間滞在後に測定した抗も減少したが，1981年度より増加傾向を示し，本128

年度は6・1％にまで陽性率が増加した。しかし，分布傾向が観察された。4）年齢別に見た虫卵陽性

蟻虫の感染率はあまり変化せず，むしろ最近では率は全体的には横ばいであるが，回虫，鞭虫の低逆に増加する傾向が見られた。寄生虫のうちで，年齢層における陽性率が高く，1歳台で62％を示

回虫の感染率は減少したが，，鞭虫の感染率は増加

し，3歳台では既に90％に達している。鉤虫でもの傾向にあった。

率は梢々低いが同様の傾向を示し，5歳台で成人

一方，インドネシアの飲料水の汚染度も，1978

層と同程度の感染率に達している。5）インドネシ

年より経年的に調べた。汚染の度合は常に高い割

アで市販されているTrivexan（pyrantalpamoate

合で見られたが，最近ではさらに糞便系汚染が進100mg＋mebendazole150mg／錠）とComban・

行しているように思えた。次に，寄生虫陽性者がtrinの2種駆虫剤を用いて回虫，鞭虫，鉤虫の各

飲用している飲料水のみを取り上げて，全体の水保虫者111−139名についての駆虫効果を比較した。

質検査成績と比較したところ，腸管内寄生虫陽性

回虫，鉤虫に対する陰転率はCombantrinで91．5

者が飲用している水は全体の飲料水より，糞便汚〜94・0％，Trivexanでは98，4〜99．2％を示し，染されている度合が幾分高いという結果がでた。

鞭虫に対してはTrivexanが64．7％の陰転率に比しかし，この結果は調査年度により異なり，今後は，寄生虫卵陽性者全員が大腸菌群陽性の飲料水

べCombantrinでは22．0彩と低く，全体的にTrivexanが良好な駆虫効果を示した。6）血中Hbはメトヘモグロビンーアザイド法により測定を使用していたが，1982年度においては，特に対した。北スマトラ農村住民の平均Hb値はWHO

照との差は見出せなかった。

方式により区分してみると2−6歳群：9．99／d1，の調査が必要である。例えば，1979年度において27

インドネシア共和国北スマトラ州における腸管寄生虫調査今井淳一（宮崎医大・寄生虫）0。simanjuntak（北スマトラ州衛生局）

インドネシア共和国北スマトラ州アサハン県の7−14歳群：1129／d1，15歳以上の男性：13．29／
d1，女性：11・7g／d1であった。これは日本人の平均正常値と比べて著しく低く，平均赤血球色素濃度（MCHC）の平均値が26．9〜30．0彩であることからも低色性小球性貧血を窺わせ，この傾向は低年齢層程顕著であった。鉤虫感染との関連については今回の調査で追究できなかった。

3力村（6部落）の一般住民977名について腸管
寄生蠕虫の感染調査を行い，同時に集団駆虫，血績を要約する。1）調査した3力村全体について見ると虫卵陽性率は97・5彩で，虫種別では回虫
85．4％，鞭虫93．0彩，鉤虫83．5％（ズビニ鉤虫53・6％，アメリカ鉤虫63．3％），糞線虫1．2％，桿

中央アフリ力共和国における寄生虫調査（1981年9月）特に腸管寄生原虫症の疫学

康雄昭由
守貞典三
上本田
辻野畑熊

中ヘモグ・ビンの測定も実施した。以下にその成28（広島大・医・寄生虫）（東大・医科研・寄生虫）（広島県公衆衛生課）

加藤

桂子，林

滋生

線虫類2・1男，小形条虫0．8％などであった。2）混（予研・寄生虫）

合感染は3種保虫者が虫卵陽性者の71．8彩を占め

中央アフリカ共和国における寄生虫感染の第7最も多く，更にこの中の98．7％が回虫，鞭虫，鉤次（1981）調査には，ブアール地区住民の他に首虫の保有者であった。3）部落別，性別に見た虫卵

府バンギーの2街区住民を新たに選び，総計303

陽性率は何れの虫種も大差ないが，ズビニ鉤虫

名について検診を行い，特に腸管内寄生原虫につ（A．d．）とアメリカ鉤虫（N．a．）の感染には著しい

いての疫学的特性の解析結果を示す。前回同様の地域差が認められた。即ち，水田地帯の2村落で検査により10種の蠕虫，7種の原虫感染が見出さ

はA．d，優占と両種均衡の分布が，ゴムや油椰子

れ，いずれかの1種に罹患するものが87彩を越え，

農園の丘陵地帯に存在する村落ではN．a．優占の多くの者が2種以上の感染を受けていた。各種別129

では検便で鉤虫34．3，回虫25，鞭虫5．0，糞線

1982），小笠原諸島（堀ら，1973）及び北日本（札虫・嶢虫各0．4，マンソン住血吸虫19．3，赤痢ア

幌：大林ら，1968；奥尻島・江差町：服部ら，1981，

メーバ15．6，大腸アメーバ19、9，ヨードアメーバ

1982；青函海底トンネル：高田ら，1982）の家鼠

6．5，小形アメーバ275，ランブル鞭毛虫3．3％，から報告されているが，西日本地域における分布

尿検査はまだ報告されていない。

（バンギーのみ）でビルハルッ住血吸虫

14．6彩，皮膚生検でオンコセルカ25・7％，血液検

今回演者らは，名古屋市内で捕獲したドブネズ

査でロア糸状虫7．4，常在糸状虫14、4，四日熱マ

ミ1匹から同線虫と見られる虫体4匹（♂3，♀

ラリア6．0，熱帯熱マラリア1L4％であった。本

1）を見出したので，その概要を報告する。ネズ

地域の特色として回虫が極めて少ないこと，鉤虫

ミの肺から得られた線虫の雄は体長が23．4〜23．9（アメリカ鉤虫）の感染が多いこと，またマンソmm，最大体幅0．35〜0．37，食道長0．29〜0。33及

ン住血吸虫は首府地区よりブアール地区に多く，び交接刺長1．21〜1．22mmで，特徴的な交接嚢

逆にビルハルッ住血吸虫は殆どブアール地区に見を持ち6対の助条が発達する。走査電顕によるられないがバンギーにはかなり浸淫が見られるこ観察では，2対の助条（anterolateralとexter−とである。その他は概して地方のブアールも首府

nodorsa1）先端の外側表面に乳頭状の突起（4個）の市街区も大きな差異はない。寄生虫感染を起こが認められた。雌は虫体が切断されたため，体長す状況は首府でも大同小異ということである。ブ

は正確さを欠くが約42mm，体幅058，食道長

アールの村落のみについて見れば感染率は全体に0．36，尾端・陰門間距離0．25そして尾端・肛門間

他地区よりも高い。腸管内寄生原虫の5種につい0．05mmで，子宮内に多数の虫卵（平均643×て見ると，地区により若干の種類構成の差異はあ3Z5μ）が内蔵され，腸管はらせん状を呈する。

るが性別による差は見出されない。恐らく共通しまた，ネズミの糞便から多数の第1期幼虫（体長た感染経路をもつものと思われるが，各種間の感0．26mm）が検出された。以上の結果から，この染の関連を検定すると意外にも赤痢アメーバ，大線虫は広東住血線虫と同定された。

腸アメーバ，ヨードアメーバ，小形アメーバの4宿主のネズミは名古屋市名東区の住宅地で1982

種の間に有意な正の関連が存在するのにランブル

年2月に捕獲されたもので，頭胴長21．3cm，体鞭毛虫のみは，独立または負の関連が証明された、

重170gの雌成獣である。この地域は港湾地区か

これは前者のグループは年齢が増すにつれ感染がら約14km離れた市東北部の丘陵地で，中間宿増加するのに，後者は10歳以下の小児に多く，以主になり得るカタツムリ，ナメクジ類が多数棲息

後急激に感染率が減少するという年齢分布の特徴

するが，現在のところ第3期幼虫の検索は陰性でに差があることに由来する。ランブル鞭毛虫感染ある。

の年齢分布における特色は注目すべきことである。

301972−1981年におけるわが国の輸入マラリ

29名古屋市のドブネズミから見出された広東住血線虫（∠

gJo5Jr侃gyJ麗C醐fo麗麗5 5）アの現状

大友 弘士，日置 敦巳（岐阜大・医・寄生虫）

について
真喜屋
鬼武

清 （名古屋大・医・医動物）
一夫 （名古屋大・医短・生物）

中林 敏夫（阪大・微研・原虫）

近年，熱帯・亜熱帯諸国への海外渡航者の激増

広東住血線虫は太平洋地域に広く分布し，好酸に伴い，わが国における輸入マラリア症例の増加

球性髄膜脳炎の原因虫として重視されている。わが見られるが，その実態は十分に究明されていなが国では南西諸島（西表島：Nishimuraら，1964；

いのが現状である。演者らが1972年から実施して沖縄・宮古・石垣島：Nishimuraら，1966），東いる医療機関1，300ヵ所に対するアンケート調査

日本（横浜・川崎：堀ら，1969；東京：内田ら，によれば，1972年の40例から1980年の90例に及ぶ

130

年間平均65例の輸入症例が存在し，1981年までの10年間に646例が集計された。これらの輸入症例の感染地はアフリカや南米よりオセアニアを含

査所見は以下の通りである。

肝35cm，脾3・5cm（いずれも肋弓下），CRP（耕），赤血球254×104／mm3，血色素8．3g／d1，ヘむ南アジアが多く，南アジアで感染した症例のマトクリット24彩，血小板5．6×104／mm3，白血72．0％が三日熱マラリア，アフリカ諸国で感染し球6，900／mm3（好中球55彩，リンパ球39彩），網た症例の53。6％が熱帯熱マラリアであった。また，

赤血球16％・，GOT157単位，GPT75単位，LDH

14例の卵型マラリアはすべてアフリカ諸国での感940単位，ALP19．0単位，総ビリルビン値

染であった。

mg／d1，腎機能及び検尿；WNL。なお生後37日の一方，熱帯熱マラリアの場合は診断と適正治療開始の遅延が重篤な合併症を惹起する危険が知ら

1．1

IgM値は220mg／d1とさらに上昇していた。
本症例では生直後よりマラリア感染の予防処置れている。アンケートに示された熱帯熱マラリアがとられており，生後の感染は考え難い。胎内感

14人の死亡例はこの事実を示唆するものと考えら

染または分娩時の感染と考えられるが，そのいずれる。アンケート項目について報告された収集症

れであるかは決定できなかった。

例の他の所見についても集計した。

なお本症例では症状出現以前にIgM値が上昇

31新生児期に発症したマラリアの1例
金

光明，上野山裕己，吉村

文秀，

富沢 貞造

（甲賀病院・小児科）

中林 敏夫（阪大・微研・原虫）

ベトナム難民の婦人より出生し，新生児期にマラリアを発症した1例を報告する。新生児期に発症するマラリアは流行地においても稀であり，日本国内では我々の調べた限り報告例はなく，恐らくこれが初めてのものと思われる。

しており，新生児のマラリア感染の早期診断にIgM値が実際的方法としてある程度利用できるように思われる。

32ベトナム難民に見られたアメーバ性肝膿瘍
例
天野

博之

（天理病院・海外医療科）

田畑

隆文（同・腹部一般外科）

森田

博，猪木

正三，荒木

恒治

（奈良医大・寄生虫）

患児の母親は1981年5月にベトナムから難民と症例は34歳，ベトナム人男性。1981年5月12日

して来日した。彼女は妊娠中に3回，三日熱マラ

ベトナム出国，同5月20日に日本へ入国した。悪リアの再発をきたし，妊娠後期には切迫早産を起

寒，発熱，右側胸部痛，黄色下痢便出現し，7月

こした。患児は1981年8月12日母親の3回目のマ

17日，当院入院となった。入院時，体温37．8。C，

ラリア再発中に満期安産，生下時体重2，680gで右下胸部に濁音あり，肝3横指触知，右側胸部叩出生した。生後の経過は順調で黄疸も軽度であっ打痛あり。脾・腎触知せず。RBC375×104／mm3，

た。ただ生後13日のlgM値は125mg／d1と上昇

Hb1αOg／d1，WBC11，100／mm3（Lymph．25．5％，

していた。

Mon、65彩，Eos．1．0彩，Bas．0．5％，N．Seg．645彩，

生後18日の朝より戦懐とともに39。C台の発熱

N．Band1．5彩，N．Metamyelo．0．5％），PLT58．9が出現し，生後20日には著明な肝脾腫大が認めら

×104／mm3，CRP6．5mg／d1，T．P．7．6g／d1，Alb

れた。血液塗抹標本より三日熱マラリア原虫が見3．Og／d1，Glb4．6g／d1，T．Bil．α3mg／d1，GOT35出されたためただちにファンシダールで治療され

KU，GPT33KU，LDH27．1HU／d1（21−47），ALP

た。症状及び所見は生後22日頃まで進行し，以後6。8B．U，7−GTP103mIU，T．Cholest．153mg／

次第に回復していった。

d1，IgG2，657mg／d1，IgA406mg／d1，IgM158

発熱は生後18日から20日まで持続し，生後22日

mg／d1，lgE268U／m1。尿異常なし，検便にて潜に再び一過性の発熱が見られた。血液中のマラリ

血（一），回虫卵（＋），鞭虫卵（＋），アメーバ

ア原虫は生後22日まで認められた。生後23日の検（一）。胸部レ線像にて右胸水貯留〜腹部エコーで

131

肝右葉に直径10cmのmassechoを認め，経皮的膿瘍穿刺により暗赤褐色排液を得，同液よりE

h醜01ン漉o栄養型を証明。また，同液及び患者の虫卵が見出されている。

このアメーバ嚢子を含む糞便約1gを10m1の生理的食塩水に溶解させた後ガーゼにて濾過し，血清に対しSerameba⑪testを施行，両者とも陽3回遠沈洗浄した。次いで5m1の蒸溜水に浮遊性所見を得てアメーバ性肝膿瘍と確診した。7月21日よりMetronidazole （29／日×10日×2

させ35％sucrose溶液（W／V）に重層して遠沈クール）を投与し，解熱，自覚症状の消失，肝膿後5m1の蒸溜水に浮遊させ25％sucrose溶液

瘍の著明な縮小，右胸水の消失等著効を見て8月（W／V）に重層し，同様に遠沈した。この操作を14日軽快退院した。その後，再発の徴は認められ回転数を変えて二度行い，二度目の遠心操作にない。そこで，不顕性感染者の発見を目的として，

よって得られた中間層を洗って1％塩酸に浮遊さ

彼の属するベトナム難民集団に対して，Sera−

せ15分間室温にて処理し殺菌と脱嚢のための前処

meba⑪test及び赤痢アメーバ抗原に対するゲル置とした。この後抗生剤を含むダルベッコのPBS

し，中間層を回収した。これを更に遠沈洗浄した内沈降反応を実施した。対象は14歳以上の32名にて5回洗った後得られた嚢子をTrγponoso脚α（男21名，女11名）で，Serameba⑪test陽性1名

ご耀z∫のEpimastigoteを含むBI−S−33培地に浮（3．1彩），ゲル内沈降反応陽性4名（125彩）の遊し35．5。Cで培養した。培養開始後2日目に活結果を得た。これらの陽性者は糞便中アメーバ嚢

発に運動するアメーバ栄養型が見出された。この

子陰性で，肝膿瘍も認められなかった。同時期に後4−6日毎に同じ培地を用いて継代していった

施行した糞便検査（MGL変法）では，虫卵保有が，約半年後に至って増殖速度が速くなったので率34．4％なるも，アメーバ嚢子は全例陰性であっトリパノソーマを含まない培地に移した。以来3た。また血液標本上，好酸球増多は34．4彩に認め

ヵ月以上無菌株として保存されているが増殖は良られ，マラリア症例は認められなかった。最近，好である。本分離株の同定はゲル内沈降反応と螢アメーバ性肝膿瘍の報告が散発ながら増加傾向を

光抗体法を用いて実施し，赤痢アメーバと認めた。

示しており，本邦土着の保虫者のみならず輸入例

この方法は赤痢アメーバの無菌化を容易にするもの二次感染が危惧されている折，感染源となり得のと思われる。

る症例として報告した。

33

34

糞便中のシストからの赤痢アメーバ無菌株

ビルマの感染症

ラリア
海老沢 功 （東邦大・医・公衆衛生）

の確立

小林

1・地理と気象条件及ぴマ

正規，竹内

勤，浅見

敬三

（慶大・医・寄生虫）

ビルマは社会主義共和国で正式名はThe
cialistRepublic

of

the

Union

So−

ofBurmaであ従来報告されている赤痢アメーパの無菌化の殆る。地理的には18−28。N，92−102。Eにわたる熱

どは細菌と共棲培養された栄養型を無菌化の材料

帯亜熱帯に位置し北部は山岳地帯，南はインド洋として用いていた。また，糞便中の嚢子から無菌に面する。行政的には7つの州Stateと7つの地化を試みた例においても嚢子を一度細菌共棲培地

区Divisionに分かれる。全国19ヵ所の気象観測において脱嚢させ栄養型とした後に無菌化されて所の5年間（1963，1973−1976）の最高と最低気いる。我々は今回一種のみの培地を用いて糞便中

温，年間雨量を日本の30年間（1951−1980）の値の嚢子から赤痢アメーバ栄養型の無菌株を確立しと比較してみた。ラングーンでは（以下平均値をたのでその方法の大要を報告する。用いた材料はのべる）最高32。C，最低22。C，その他の地域で大和難民定住センターに居住していたラオス難民

もインド洋に面するかそれに近い地点ではほぼ同の糞便で，糞便検査によって赤痢アメーバ，大腸様の値を示す。これに反し中，北部の山岳地ない

アメーバ，小形アメーバの嚢子，及びタイ肝吸虫

し高地では最高22，6。C，最低14。Cで鹿児島に近132

い気温を示すところがある。降雨量はTavoy

水とした。検水は，その場で滅菌キャピラールで（5，900mm），ラングーン（2，900mm）からPakokku

0．2m1をとり，我々が考案した輸送培地に滴下し（900mm）と多雨から乾燥地も含む。気温と同じて，日本に持ち帰って分離培養し，出現菌は鑑別くインド洋に近い地域に雨が多い。上記降雨量はを実施した。

5−9月の雨期に集中して記録されるのでその間の1日当たりの雨量はかなり多い。

今回の結果は，1ヵ月間の調査期間中にグラム陽性球菌は死滅しやすいためか，必ずしも良い成医療は原則として国営，無料であるが自由診療も認められている。全国の病院と診療施設から毎績は得られておらず，今後，さらに十分な検討が必要と考えられる。

月入院患者数と死亡数その他が疾患ごとに厚生省に届出されることになっているが必ずしも完全に報告されているわけではない。不完全とはいえビルマにおける諸疾患の概略を知ることができる。

1978年度のマラリア患者と死亡数（いずれも入院）は10，891人と2，208人，各地区，州の入院患者数のうち1〜2位を占める所が多い。罹患率は人

36

マラウイ共和国におけるコレラと髄膜炎の検査について鹿住祐子（上尾中央総合病院，青年海外協力隊）
赤尾 信吉（防衛医大・寄生虫）

1979年10月から，1981年10月までの2年間，マ

口10万人当たり333で一般に人口密度と逆比例しラウイ共和国のQueenて罹患率が高い。年齢別では15−24歳群に率が高菌検査室で，南部地方と，中部地方の一部からの

く，死亡は25−34歳群に高率である。季節的には検体を対象に検査を行った。

Elizabeth

Hospitalの細7−10月に多い地区，3−6月に多い地区，あるい1979年12月から，1981年8月までのコレラ菌検は年間を通じて患者数の変動に差が少ない地域が査用総検体数は6，309で，そのうち区oho1θroθ陽ある。マラリア原虫種は熱帯熱：三日熱が3：1で性は1，453であった。1972年にモザンビークからある。一般にスライド陽性率は薬剤内服と殺虫剤入ったZcho18rαθはその後減少し，1979年12月か

散布地域で約6％，監視地区で約3％である。ク

ら1980年5月に急増し，この6ヵ月間で7cho18rσε

ロロキン耐性熱帯熱マラリアは1974年に13ヵ所見

陽性は，1，092であった。例年には少ない地域か

つかっており，全域に広がりつつある。

ら検出が目立った。1980年11月末から1981年4月までのK cho1θ雌θ陽性184について血清型別を

35

インドネシア各地における飲料水の細菌学
的研究

奥脇

義行，矢内

寿恵，豊

経子

（女子栄養大・微生物）藤田紘一郎，月舘 説子（長崎大・医・医動物）杉山雅俊（順天堂大・医・衛生）朝倉健夫（熱帯医学協会）

我々は，インドネシア各地の飲料水について，

経年的にその水質について調査を行っている。

今回の研究では，インドネシア各地の飲料水から，皮膚あるいは皮下の感染症または炎症との関連に注目し，グラム陽性球菌類の検出を試みた。

調査は，1981年7月から8月にかけての約1カ月間で，インドネシア各地で採取した飲料水を検行ったところ，稲葉型はZomba，Chikwawaなど
から全体の95％で，残りの5％はChiradzuluからの小川型であった。

髄膜炎については，髄液の細胞数を算定し，細菌学的検査と生化学的に糖，蛋白量を測定した。

1980年10月から1981年2月までの総髄液検査数337のうち，細菌性髄膜炎は22で，原因菌は5t、ρn8μ脚oniαθ，Eoθ所ρ〃hθn∫θr∫∫i4

1硲属，ノV．脚θn加却

11s，8sで全体の60％以上が8ρnθ躍用o〃如θであった。問題はマラリアの熱発作と髄膜炎の症状が似ているため，マラリア患者から髄液がとられることが多いことである。

諏加oκθ〃o，働塵〃oの検査において，これらは一年を通じて検出され，オンコセルカ症は，

Thyolo地方で見られたg

133

我々は1957年以来奄美大島のハブ咬症患者の疫

37ハブの産卵・購化と性比
木原

学及び治療・予防・予後に関する調査を行って来大たが，今回は前年に引続いて1981年の調査につい（鹿児島大・医・第二生理）
中本英一（奄美ハブセンター）

吉岡

満城（鹿児島大・医・衛生）

林良博（東大・医科研・寄生虫）て報告する。患者数は153名で前年より15名減少
し最低の記録を更新した。

その内徳之島が97名（19減）で全咬症数の63％を占め奄美本島が56名（4増）で37％であった。

奄美・徳之島両島で捕獲されるハブは，毎年雄地域別受傷者数を町村別に見ると，本島では瀬戸が雌の約2倍を占める。その原因として雄が雌よ

内町での受傷が14で最も多く，名瀬市12，笠利町

り活動的であることがあげられている。我々は自10，竜郷町9，宇検町6，大和村3，住用村2の然状態での雌雄の比を知る目的で，ハブの艀化実順であった。徳之島では天城町が36で最も多く，験を試みた。38個体の親ハブから240個の卵を得，

伊仙町34，徳之島町が27であった。月別発生数でそのうち218個が卿化した（卿化率；約90％）。幼は，4月が28で最も多く，6月22，9月17，5月

蛇の性比は雄151匹に対し雌は67匹で，約7：3に16，10月15，7月14の順であった。

なり，捕獲ハブの性比と良い一致を見た。この事

即ち3月一10月までの8カ月に136（89彩）が，から捕獲ハブの性比の偏りは，卿化時の性比を反受傷していた。年齢別で最も多いのは40代の44映しているものと考えられた。

（28、8％）50代の32（20．9％）60代30（19．6％）

実験に用いた親ハブの体長は124〜185cmで，であった。男性の受傷は109（71・2％），女性

平均体長は1429±12．6cmであり，1個体当た

44（28．7％）で，2倍以上にのぼっている。受りの産卵数は3〜14個で，平均6・7±23個であっ

傷場所は，田畑で農作業中に受傷したものが81た。また親ハブの体長と産卵数とは密接な関係が（52．9彩）で最も多く，屋敷内が33（21・6％）であり，その関係はY＝一16・3＋0・16X（X；体長・これに次いでいたが両者が全咬症数の70％以上を占めていた。これを地区別にみると田畑での受cm）で示される。

41・6±3・Ocm

傷率は徳之島が本島より明らかに高い傾向を示で，雄と雌との間には有意差があるが，体重にはしている。受傷部位では上肢と下肢がそれぞれ87

雌雄の差が認められず，成蛇で観察される雄の（56．1％）及び66（42、6％）で受傷の大部分を占

ほっそりした感じは，贈化時より存在する。

めていた。最も多いのは手指48（3％）で手の卿化直後の仔ハブの平均体長は卿化に要する日数は温度に強く影響され，室温30（19．4彫）を加えると50彩を超える。下肢では放置すると42．5±L7日で，従来いわれてきた41〜

下腿及び足がそれぞれ28（18．1％），26（16．8彩）42日という日数と良く一致した。しかし25。C であった。受傷時刻では午前6時から午後6時と28。Cの部屋で卿化を試みると，卿化日数はそまでの明るい時刻に108（725％），午後6時かられぞれ51．9±2．0日と48．0±1．2日に延長した。

午前6時までの暗い時刻に41（27．5％）が受傷し産卵は7月5日から8月6日の期間に行われたているが，田畑では87．5％が昼間に受傷していが，そのうち約70％は7月14日から27日までの2るのが特徴的である。これに反して屋敷内及び週間に行われた。

道路では夜間の受傷が目立っている。ハブ咬傷の予後は受傷数153という最低記録が作られたにも

38 1981年における奄美大島のハブ咬症の現況

た死亡0の記録はストッフ。した。軽症例は131について（85．6％）及び高度の腫脹あるいは，嘔気，嘔吐

川村 善治（日本蛇族学術研・沖縄支所）

沢井

拘らず死亡2名が発生し1976年以来5年間続い

芳男（日本蛇族学術研）など全身症状を呈したが全治した4例，壊死12例，
或いは全身症状を合併した5例中両者から後遺症

134

は6例（3．9％）見られた。その内1名が死亡，

屋内及び道路での咬症は山林の多い農村と石灰岩

他の死亡例は経過が不明であり，致命率は1．3彩地域の農村ではほぼ半分に減少しているが，そのであった。受傷者は年々減少の傾向にあるにも拘他の農村や都市では変化していない。またキビ

らず，ハブ取扱い中，或いは捕獲中の受傷は相変

畑ではいずれの地域でも年による変化は見られならず多く，13例（8．5彩）にのぼっている事は注い。

意を要する。受傷の最も多いのが耕作地で52．9％

このように山林の多い農村と石灰岩地域の農村であり，これに次いで屋敷内の受傷が21．6％であの咬症の割合が急激に変化し，70彩から40彩までる。今年の死亡2名の内，1名は屋内で発生して減少している。最近5年間の咬症数は急激に変化いる。この予防の為には外からのハブの侵入源としているが，沖縄県におけるハブ咬症の減少の原なる環境の整備，ハブ侵入防御壁あるいは屋内の

因は，山林の多い農村や石灰岩地域の農村におけ

ネズミの駆除等も必要である。受傷部位で最も多る屋内や道路での咬症の減少が最も大きいといえ

いのは手指，手で両者で50％を占めている。またる。

後遺症の半数が手指である為，作業時に手指を防

39

40 ハブトキソイドの野外接種（第9報）

島島畑本
福鮫川坂

御する事が必要である。

沖縄県におけるハブ咬症について
新城 安哲，西村 昌彦（沖縄県公害衛研・ハブ支所）
寛善

惟文，鳥入

佳輝，

洋子，古賀

繁喜，東

勝観，

英機，山下

正策，香月

恭史，

宗春

（琉球大・医・保健管理）

田弘井
村貞大

照屋

英雄，水上

沖縄県においては近年ハブ・サキシマハブによる咬症が減少傾向にあるとはいえ，現在でも年間（鹿児島大・医）

良介，松橋

直，近藤

省二

（予研・細菌第二）清，近藤

約250人の咬症が発生している。演者らは約20年

1962−1971年まで米国民政府の施政権下では毎
年300〜370人咬まれており受傷率も高かったが，

久（千葉県血清研）

間のハブ咬症患者の咬症の起こり方について解析を行ったので報告する。

了，

新しい沈降ハブトキソイドLot

C−2の基礎免

疫時，追加免疫時（第3，4−5，6回接種）の免疫
原性と副反応，トキソイド反復接種群における皮日本復帰以後の1974年以後は300人以下になり減内反応成績ならびにハブトキソイドの臨床的な有少し始めている。

効性を確認するのを目的として研究を行った。

咬症時の人の活動・咬症の月変化や日変化には
年による大きな差は見られず，用便中の咬症が若干少なくなっていることと，ハブ採集・取扱い中の咬症がわずかに増加傾向にあるだけである。

ハブトキソイドLot

C−2の力価は，HR1は5．471MU／m1，HR2は3．871MU／m1である。
基礎免疫時（対象，昭和56年度接種群47名）の抗毒素価は，抗出血1価が1単位以上を示す者

ハプ生息地を4つの地域に分けて咬症の推移を40．4％，抗出血2価は平均16．10単位で，追加免見ると，咬症の最も多く発生しているのが石灰岩

疫時の抗毒素価は接種回数毎に述べると，第3回地域にある農村，次いで山林の多い農村でありい接種群（昭和55年度接種）の抗出血1価は，接種ずれも最近では減少し始めている。しかし，その直前

他の農村や都市での咬症はあまり変化していない。

以上の者83．3彩，接種後これらの4つの地域での屋内及び道路での（24名）（第2回接種後11ヵ月後）の1単位（17名）88．2％，うち5単位以上の者17．6％，抗出血2価はそれぞれ1，000人当たり受傷率とキビ畑での100ha当たり1335単位，13．68単位で，抗毒素産生は良好であの受傷率では，山林の多い農村・石灰岩地域の農る。第5−4回接種群（昭和53年度接種）の抗出

村・その他の農村・都市の順に低くなっている。

血1価は，接種直前（第4−3回接種25カ月後）

135の1単位以上の者はA群（14名）100．0％，B群とH2．。画分に分離した。この3種（HR1，HR2，（14名）92．8％，C群（5名）80・0％，うち5単

H2一。）の毒画分は強い腫脹作用を有しているので，位以上の者はそれぞれ，42．9％，35．7％，20．0％

これを試験毒素として各抗毒素製品の抗腫脹作用で，抗出血2価はそれぞれ15．96％，20．63彩，をおのおの測定した。

20．46％で，接種後は抗出血1価は1単位以上の1．6倍間隔に希釈した抗毒素液に一定量の試験者は3群（12，13，4名）とも100．0彩で，5単毒素を加え室温に1時間放置した後3，200rpm，位以上の者が83．3％，76．％，75．0％である。抗10分遠心してその上清を1群5匹のマウス右足踪

出血2価はそれぞれ21．28単位，14．45単位，15．98にそれぞれ20μ1宛注射。注射2時間後にマウス単位である。いずれも良好な抗毒素産生である。

の左右両足蹟を足関節より切断して腫脹率を求め

C−2，05m1接種のた。各試験毒素の毒力は160％〜180彩の腫脹率を基礎免疫群（2回接種），追加免疫群（第3−6回

示す程度に調整し，これに抗毒素を加えて中和さ接種）に於ても2，185名中，接種局所の痙痛，腫せたときの腫脹率と抗毒素量との関係を求めた。

脹，かゆみ，硬結，発赤，仕事を休んだ者などはその結果，腫脹率と抗毒素量との間には一定の範認められたが，重篤なアレルギー反応を示す者は囲内でほぼ平行かつ直線的な関係を認めた。この次に副反応であるが，Lot認められず，ハブトキソイドLot

C−2は，充分， 関係を利用して各種抗毒素製品の抗腫脹効果を比人体接種に適したものと考えられる。但し，第6較した。本法は注射後2時間で判定できるし，各回接種群は皮内反応の成績により減量した。

抗毒素の原液は数倍から100倍の希釈範囲で測定

ハブトキソイドの反復接種によるアレルギー反応を防止する為，皮内反応用ハプトキソイド（診断用，蛋白0．01mg／m1含有）による皮内反応（α1m1注射）を行った。陽性（発赤直径15mmできる。また，H2一。画分は出血作用が弱いので本法による測定法に適している。

42ハブ毒による腎障害に関する研究（第II報）

以上）の者が，5回接種者のうち，15分後16・2％，
24時間後10．3％である。

さらにトキソイドの有効性を確認するため，昭

原田

隆二，中島

哲，上田 博章，

横山

孝一，水田

敏久，尾辻

義人

（鹿児島大・医・第二内科）

和55年7月一56年6月迄のハブ咬症者中ハブトキ
ソイドの接種をうけている19例について，その経

私共は前回の本学会において家兎にハブ粗毒を過，予後を調査した。その結果，壊死は3例に認投与した時の腎の変化について報告した。今回は，められたが，全身反応，後遺症は認められず，入ハブ粗毒をSephadex

院期問も0〜66日である。以上の成績から臨床的られた分画FI，FIIa，FIIb，FIIlをおのおの単独にも，ハブトキソイドは有効と考えられる。

に雄家兎に体重当たり α5mgを投与して腎の変G75で，ゲル濾過して得化を観察した。分画FI投与後24時間目に糸球体
41

ハブ抗毒素の抗腫脹作用の研究

山川 雅延，野崎

毛細血管ののう胞状変化を認め，その内腔にフィ

真敏

ブリン，赤血球，多核白血球が見られたが，次第（沖縄県公害衛研・ハブ支所）にのう胞状変化は少なくなり，増殖性変化が増加

我々は本学会においてたびたび蛇毒の腫脹作用

し，それと同時にフィブリンの析出が見られなくにっいて報告してきた。今回はハブ毒の腫脹活性なった。この障害腎にFITC標識抗家兎7一グロ測定法を利用してハブ抗毒素の抗腫脹作用の測定

ブリン抗血清を用いての螢光抗体法で見てみるとを試みたので報告する。

全く螢光は見られなかった。また電顕でのelec−

ハプ粗毒をセファデックスG100カラムでゲ

tron

dense

depositも見られなくなった。分画

ル濾過しHR1及び粗HR2画分を得た。次に粗FIIa，Fllb，FIII投与群ではのう胞状変化も増殖

HR2画分はさらにアンバーライトCG50でHR2性変化も見られなかった。また，FI投与によっ136て腎糸球体で増殖した単核細胞の貧食能を見るた

明した。

めに墨粒を投与すると著明に墨粒が貧食されてい44るのが見られた。

サキシマハブ毒の出血活性及ぴ致死活性成分の精製に関する研究

FIにのみヒト血小板凝集惹起作用があり，FI，

山川 雅延，野崎 真敏

Flla，FIlb，FIIIおのおの単独投与で実際腎障害（沖縄県公害衛研・ハブ支所）を起こすのはFIのみで，しかも障害腎には血小板凝集，フィブリンの析出を認め，フィブリンの沖縄県の八重山諸島には，沖縄諸島及び奄美諸減少につれて単核細胞の増加が見られることより，

島に生息するハプ（Tr1〃1θr8s曜μs万ovovir14な）とハブ毒による腎障害の発症には血小板が関与しては別種のサキシマハブ（Tr∫〃7εrθs曜μsθ1880ns）がいることが示唆される。

生息し，最近では年間おおよそ50名の人がその被害を被っている。

43 精製柿タンニンを用いたハブ蛇毒の血清反応について一間接血球凝集反応一
福重潤一郎，服部善八郎，古川加奈子，
小此木

丘（三共・生物研）

サキシマハブ咬症は，ハブ咬症に比べて重篤な後遺症を残す例は極めて少ないが，出血，腫脹等の局所病変はかなり激しく決して軽視すべきではない。

蛇毒と抗毒素との間の試験管内血清反応は，従

我々は，1973年SephadexG−75，DEAE−Se−

来種々行われてきたが，定量的反応としては実用

phadexA−50及びAmberliteCG−50を用いてサの域に達していないように思われ，現在では主とキシマハブ毒中の出血活性成分ならびに致死活性して，動物を用いた中和反応による抗体価の測定

成分を部分精製し第20回毒素シンポジウム（東が行われている。

京）で報告したが，今回はSephadexG−200Su−

今回我々は，タンパク抗原に対する抗体の定量等に用いられている間接血球凝集反応，すなわちMiddlebrook−Dubos反応とタンニン酸を用いる

pernne及びSephadex

IEFを用いてさらに精製しその性質や性状等について検討した。

その結果

1）サキシマハブ毒中には3種（S2，Boyden試験が，ハブ毒に関する試験管内血清反S3−f，S3・9）の主要な毒成分があり，S2は出血活性応に利用できるのではないかと考え，実験を行いと致死活性，S3−fは出血活性のみ，S3−gは致死活

中和反応との比較を試みた。

性のみを有していた。2）主要な出血活性画分でまたBoyden試験においては，通常局方タン

あるS2は，分子量58，000，等電点4．3の酸性蛋白

ニン酸を使用するが，タンニン酸の純度・規格が質で，ハブ毒のHR−1によく似た性質のもので一定でないため，我々の開発した精製柿タンニンあった。3）S3・fは分子量24，500，等電点8．2の塩を用い比較検討した。その結果

基性蛋白でハブ毒のHR−2によく似た性質のも

1）ハブ毒の定量的試験管内血清反応として，間のであった。4）主要な致死活性画分であるS3−g

接血球凝集反応は十分利用できるだけでなく，従は分子量14，000，等電点9．8のpHならびに熱に来の中和反応に比べ，微量定量が可能であること

強い抵抗性を示す塩基性蛋白でハブ毒にはないサが明らかとなった。2）血球処理の条件は，抗原量

キシマハブ固有のものであった。

α25一α5mg／m1，タンニン量0．05−0．1mg／m1が最適と思われた。3）抗体過剰の場合に見られる前地帯現象は，抗体希釈によって解決できた。4）

Boyden試験に用いるタンニン酸は，局方タンニン酸よりも柿タンニンの方が優れているように思われた。5）測定可能な抗体N量は，通常の沈降反応におけるより遥かに微量で可能である点が判

45

蛇毒の出血因子に作用する微生物由来の阻害物質について徐正墳（韓国・慶北大・応用微生物）

Penici11ium属の菌株より分離した蛇毒のPro−
teinaseinhibitorについてはすでに報告したが，

137

今回はAspergillus属の菌株より得た蛇毒出血因

杉原

久義，二改

子阻害物質について報告する。

鬼頭玲子

本試料は土壌から分離した菌株を常法により培

水解酵素がSephadex

質で，ゲル濾過法により単一のピークを示した。

phadexスの足踪に注射し，一定時間後に下肢を切断し，（名城大・薬・微生物）

タィワンハブ毒より4種のアルギニンエステル

養した培養濾液より有機溶媒沈殿によって得た物
蛇毒の腫脹及び出血活性の測定には試料をマウ

俊章，二村 敦子，

G−100ゲル濾過，CM−Se−

C−50，DEAE−Sephadex

A−5αDEAE−

Sephacel各 column chromatography 及びlchromatofocusingなどの精製操作を経て単離

その重量の増加により腫脹を判定し，さらに水をされた。これらは

加えてホモジナイズし，その遠心上清の一定量をME−4と命名された。これらの分子量はそれぞれ

とりヘモグロビン量を定量した。

27，000，29，800，33，000，28，500と測定され，そ本試料はハブの粗毒，分画毒HR1及びHR2に作用してその出血作用を強く抑えた。またこの試料は韓国産マムシオ8㍑s ro40nわ10脚h顔加θv
c側伽5及び。48ん∫s∫ro吻n

sαxα

ME−1，ME−2，ME−3及び一

ilis毒の出血因子の等電点はpH5．95，5．62，6．93，5．31である。

これら4つの酵素の中，ME−1とME−2は収量が多く，活性も強い。4っの酵素は総て高い基
質特異性を有し，しかも極めて類似している。即にも強く作用し，ハブ毒による腫脹をも部分的にち合成アルギニンエステル（TAME，BAEE）は水抑えることを知った。この試料は耐熱性で90。C，

解するが，リジンエステル（TLME），チロシンェ

1時間の処理にも安定であった。

ステル（ATEE），アルギニンァミド（TAA，BAA），

46ハブ毒に含まれる新しいタイプのプロティ
ナーゼ：精製と酵素的性質
佐藤

保，貞弘

省二
（予研・細菌第二）カゼイン及びジメチルカゼインなどは水解しない。

これら4種の酵素のArginine

esterase活性はSBTl，LBTI，EWTI，trasylol，heparin，cysteine，

EDTA，PCMBなどによっては阻害を受けない

が，Benzamidineでは阻害され，しかもその阻害は拮抗性である。またME−3とME−4はDFP
ティナーゼをHR2画分から分離し，酵素的性質 によって阻害されるが，ME−1とME−2は阻害反応の過程で基質カゼインを白濁させるプロを明らかにした。その結果，本酵素は1）分子量約されない。これ迄に報告されている蛇毒中のAr−

25，000，2）pH9に至適pHを持っ，3）EDTA，システイン及びDFPでは阻害されたがNEMでginineesteraseは総てDFPで阻害されるセリン酵素であることから，このME−1とME−2は極は阻害されない，4）Zn＋2，Mn＋2で若干阻害されめて珍らしく，蛇毒中からは始めて報告されたもるがその他の2価金属の影響を受けない，5）アゾのである。

コラーゲン以外の各種蛋白質基質を分解するが，これらは耐熱性の酵素であるが，その中でもH2一プロティナーゼとは異なりZ−Gly−Pro−Leu−

ME−1とME−3が一層耐熱性に富んでいる。こGly−Pro−OHを水解しない。また酸化インシュ

れら4っの酵素は総て毛細血管透過性充進作用を

リンA，B鎖の水解位置からHゴプロティナーゼ

持っているが，ME−2とME−4はさらにキニンとは違った基質特異性を持つことなどが分った。

遊離活性をも併せ持っている。しかし，他の多く

47

蛇毒の酵素化学的研究（29）タイワンハブ

毒中に含まれる数種のアルギニンエステ
ラーゼの性質とその特徴の蛇毒から報告されている血液凝固活性を示すものはなかった。

Ja pan. J. Trop. Med. Hyg., Vol. 11, No. 2 1983 pp 139 201

PROCEEDINGS OF XXIV ANNUAL MEETING OF
JAPANESE SOCIETY OF TROPICAL MEDICINE
1‑3 Octobe' 1982 Y*bua*kaho*ch', G*n=a

CONTENTS
Symposium : Behavior and control of lhbu. Trimeresurus flavoviridis, avenomous snake
1 Behavior and control of Habu. Trimeresurusflavoviridis, a venomous snake

H. Tanaka

2 A study on the movement of Habu by radio tracking Y. Wada
3 Distribution of Habu ( Trimeresurus flavoviridis) in urban and rural areas

C. Yoshida and H. Akamine
4 Population study and experiment of extermination of Trimeresurus flavoviridis in

Minna Island, Okinawa S. Katsuren and C. Yoshida
5 Prevention of invasion of the snake, Habu, Trimeresurus flavoviridis, using an electric

6 Study on control of Habu on the Amami Island S. Mishima
Symposium : Basic research in malaria
1 Calcium metabolism of malaria‑infected erythrocytes K. Tanabe et al.
2 Studies on malaria immunology referring to development of a live type attenuated

3 The severrity of malaria and the coagulopathy H. Amano
4 Evolutionary genetics on the vectors of malaria and fila,riasis in East Asia

T. Kanda et al.

5 Electrophoretic patterns of some enzymes observed in anopheline mosquito larvae

M. Tsukamoto

6 Mechamsm of msectrcide resrstance J. Miyamoto and S. Kogiso
Panel discussion : Diseases contracted by Japanese overseas residentsl Diseases which affect the Japanese overseas I . Malaria and its prevention

I. Ebisawa
2 Diseases affecting oversea Japanese residents I I. Hepatitis
H. Obata et al.
3 Diseases affecting oversea Japanese residents 111. Other parasitic and/or tropicaldiseases

S. Tani and H. Ohara

4 Correlation of infection rate of intestinal helminths among Japanese inhabitants inthe tropical countries with degrees of drinking water pollution
K. Fujita
5 The traveling medical consultation and its problems ofJapanese residents in tropicalcountries

K. Matsumoto

6 Health care and its problems at oversea plant construction M. Nakamura et al.
7 Practices and considerations of health care for expartriate employees of "Sogo

Shosha" (MBK) Y. Masuyama

8 Diseases of Japanese residents in foreign countries and problems in their healthmanagement S. Watanabe

9 Health management for Japanese residents in foreign countries Y. Konishi

140

Round table discussion :Biological activities of toxic factors in Habu venom
Y. Sawai
Pathology of Habu‑bite
M. Honma
Proteinases in Habu venom
H. Maeno
Phospholipase A2 of Habu venom
H. Kihara
Hemorrhagic principles in Habu venom
T. Omori‑Satoh
Myonecrotic factors in Habu venom
H. Chinzei
Introduction to the round table discussion

2
3

4
6

M. Yamakawa and M. Nozaki

7

Swelling factor

8

The effect of proteinase inhibitory substance (ISV) on edema, hemorrhage andnecrosis of Habu ( Trimeresurusflavoviridis) venom
J‑H. Seu

General presentationl Effect of thermal acclimation on cardiovascular reflex K. Tsuchiya et al.
2 Studies on thermal acclimation ‑Thermal habituation‑‑ M. Kosaka et al.

3 The murine lice (Anoplura) from Kenya K. Kaneko and H. Suzuki
4 Photodynamic substance theory in the microfilarial periodicity ‑Rhodopsin‑like

substance in the nocturnal microfilariae‑ T. Masuya and K. Makishi

5 Studies on filariasis in Mozambique (2) K. Fujita et al.
6 Epidemiology offilariasis in Western Samoa ‑Studies on microfilarial prevalence andE. Kimura et al.
dencity (MfD‑50)
7 A Iarge scale malaria immunofluorescent test studied for measurement of loweredmalaria endemicity following fenitrothion spray in Haiti

M. Suzuki et al.

A. Igarashi et al.
8 Isolation of dengue viruses in Indonesia
9 Effects of biologic activators on the multiplication of dengue viruses in mouse peri‑

H. Hotta et al.
toneal macrophage cultureslO On the cytoplasmic incompatibility in natural populations of Culex pipience complex

in China

O. Suenaga et al.

1 1 Neutralizing antibody responses of children administered with Japanese encephalitis

vaccine

R‑F. Juang et al.

12 Ecology of enterovirus in tropical Africa 111. Intratypic antigenic differences

S. Otatsumeof polioviruses

13 On bionomics ofAedes aegypti and Aedes albopictus with the data on the virus isolationin Jakarta, Indonesia

T. Oda et al.

14 Toxoplasma antibody measurement by lgG‑ELISA and a study of toxoplasma
T. Miyazaki et al.
specific lgM measurementl 5 A clinico‑immunological study of the relationship between filarial chyluria andT. Yoshida et al.
toxoplasmosis
16 Brugia pahangi: Antibody responses to adult worms and microfilarial antigens inmongolian jirds and human cases as measured by the enzyme‑linked immuno‑
sorbent assay

M. Tomisato et al.

l 7 In situ microfluorometry of K‑DNA and N‑DNA in Trypanosoma (IV)
S. Inoki et al.

18 Effect of flubendazole on Angiostrongylus cantonensis in mice and rats

J. Maki and T. Yanagisawa
19 Biological activities of the egg extract of Schistosomajaponicum on lymphocytes
A. Ishii et al.

20 Immunoelectrophoretic analysis of toxoplasma antigens by using mouse sera ofexperimental toxoplasmosis K. Yano and T. Nakabayashi
2 1 Possibility of the vertical transmission to fetuses in mice infected with Babesia rodhaini

141

H. Takahashi and N. Suzuki
22 Effects of cultivating conditions on the lipid compositions of Trypanosoma cruzi

Y. Kaneda et al.
23 Further analyses ofhealth status of Indo‑China refugees in Yamato Refugee Center,

Kanagawa Pref., Japan N. Yamaguchi et al.

24 Health status of Indo‑China refugees as examined after their settlement in Japan

S. Tateno et al.

H. Ohara et al.

25 Diseases of the Japanese who stay long in the tropics
26 The parasitological infection ofJapanese inhabiting in Indonesia and the pollution
K. Fujita et al.
of the drinking water
27 Survey on the intestinal helminths infections in Indonesia; North Sumatra, Asahan

J. Imai and O. Simanjuntak

areas

28 Survey on the parasitic infections in The Republic of Central Africa (Results in
M. Tsuji et al.
Sep.‑Oct., 1981)
29 On the occurrence of Angiostrongylus cantonensis in the brown rat (Rattus norvegicus) in

K. Makiya and K. Onitake

Nagoya City

30 The present situation of imported malaria in Japan in 1972‑1981

H. Ohtomo et al.

3 1 A case of malaria in the neonatal period K‑M. Kim et al.
32 A Vietnamese refugee case ofamebic liver abscess and the results of SeramebaR test

to his associate H. Amano et al.

33 A simple method of axenization of Entamoeba histolytica from cysts, by passing bac‑teria‑associated cultures S. Kobayashi et al.

34 Infectious diseases in Burma I. Geographical and climatic conditions, and malaria

I. Ebisawa

35 Microbiological studies of drinking waters in Indonesia Y. Okuwaki et al.
36 An epidemiological aspect of Vibrio cholerae and meningitis in Republic of Malawi

Y. Kazumi and S. Akao

37 Egg‑laying, hatching and sex composition of Habu H. Kihara et al.
38 Snakebites on the Amami Islands in 1981 Y. Kawamura and Y. Sawai
39 Decrease of snake‑bites (Bites of Habu, Trimeresurusflavoviridis) in Okinawa Prefec‑

ture Y. Araki et al.

40 Studies on prophylaxis against Habu snake ( Trimeresurusflavoviridis) bite with Habu

toxoids in the Amami Islands, Kagoshima Prefecture, Japan (9)H. Fukushima et al.
41 Study of antiswelling potencies of Habu ( Trimeresurusflavoviridis) antivenom

M. Yamakawa and M. Nozaki
42 Renal injury caused Habu snake ( Trimeresurusflavoviridis) venom Report II
R. Harada et al.

43 Serologic reaction of Habu venom with persimmon extracts ‑Passive hemaggluti‑

nation‑ J. Fukushige et al.

44 Purification and characterization of hemorrhagic and lethal activity in the venomof Sakishima‑Habu ( Trimeresurus elegans) M. Nozaki and M. Yamakawa
45 The effect of an inhibitory substance isolated from microorganism on hemorrhagic

action of venoms J‑W. Seu

46 A nonel proteinase in the venom of Trimeresurus flavoviridis

T. Omori‑Satoh and S. Sadahiro
47 Enzymochemical studies on snake venom (29) Properties and their characteristics
Qf arginine est ras;n the v nqm qf Trimere uru

mucrosquamatu

H. Su ihara et al,

142

Symposium
Behavior and control of Habu, Trimeresurusflavoviridis, a venomous snake

1 BEHAVIOR AND CONTROL OF HABU, Trimeresurusflavoviridis, A VENOMOUS SNAKEHIROSHI TANAKA
Department of Parasitology, Institute of Medical Science, The University of Tokyo

Behavioral studies of Habu were initiated more than 20 years ago in this country

and monographs on this subject written by Takara or Koba and already been pub‑lished in 1 962. The contents of the study and researches on the fundamental anddescriptive biology of Habu expanded to the population ecology and to the movement
observed in the enclosure and in the field (Tanaka et al., 1 967). The joint studies
with various researchers started on the Amami Islands from the fiscal year (FY) 1 970.
Since FY 1977, systematic larger scale researches on behavior aiming at the control

of Habu have been performed in Okinawa Prefecture and on the Amami Islands.
The behavioral research on the particular species of venomous snakes must be uniquein the world, and was highly evaluated at the International Seminar on Epidemiology
and Treatment of Snakebite held at Naha in August 1 980.
In the present symposium, results of the studies will be discussed by the main
researchers on specific subjects. In addition to the topics to be presented a few
remarkable findings are pointed out as follows ;The density of Habu in the field, measured by the catch curve method in 1 970,
demonstrated to be no more than 5/ha and 3. 1 6 on the average (Tanaka et al., 1 974)
but by the later studies, it should be corrected to be doubled. Out of many epi‑
demiological analyses on the relationship between snakebite and environment, thenumber of snakebite in a village was well correlated with the area of actually cultivat‑
ing field (Tanaka et al., 1 978). Since this relationship may not be applied in Oki‑nawa, more analyses based on the local conditions must be necessary. The popula‑tion of Habu was larger in the area with larger population of field rats (Wada et al.,1981), and the snake population was reduced (Ikeda et al., 1971) by the control ofrats. A possible constraint is the growth of rat population after a successful snake

control. The relationship between both populations should be carefully studied
further more.

Attractancy to Habu has been proven in live chickens in Okinawa and in live
rats on the Amami Islands where the box trap with a live rat as bait was developed(Hayashi et al., 1979). The important subject ofstudy will be to find out a chemical
attractant, aside from the live baits, which will be screened from chemical samples
by physiological and/or ecological assess lents in the laboratory.

1 43

2 A STUDY ON THE MOVEMENT OF HABU BY
RADIO TRACKINGYOSHITAKE WADA
Department of Parasitology, Tokyo Women's Medical College

In order to observe the movement of nocturnally active "Habu", Trimeresurusflavoviridis, miniature UHF transmitter and receiver were developed by Dr. Ikeda inl 970. Using this system, a total of 45 Habu were released in the field from 1 970 to

1 979, and their autonomous movement or reaction to the contact with man wereobserved. At first, the transmitter was implanted subcutaniously, and later, it was
improved to attach on the body surface of Habu by adhasive plastic tape. Receiving
the radio wave from Habu, its direction was detected from two or more points at thesame time and the position of Habu was decided on a map by triangulation.
The results of the studies were as follows :l ) Obviously, Habu was active nocturnally, but in some case, the snake showedalmost no movement all through the night or Habu moved around in the daytime.
2) Usually, Habu moved not continuously through out the night. In many cases,
cyclic activity was revealed : after 1‑2 hours of movement, Habu stopped moving
for 1‑2 hours.

3) The speed of movement measured by every 5‑10 minute location was usually
lower than I meter per minute and 3 meters per minute at its maximum.
4) The range of action of the male was larger than that of the female. Most of thefemale moved around within a small range of less than 30 meter diameter to andfro, but many males run straight and moved longer distance. The longest tripof 320 meters was recorded on a male during one night.
5) When the snake got into the water, it could go faster than on the land and therange of action tended to be wider.
6) Once Habu found some good place for the daytime rest, it stayed there in thedaytime of the following few days. It appears that Habu might set up a "homerange"
7) At the recapture of 29 released Habu, twelve of them were found in the spaceof ground, such as hole like the nest of rodent, the crevice in the ground and treeroot or rock, and so on. And 1 1 snakes were found in the heavy thicket, 3 were
under the pile of dead leaves.
The reactions to the contact with men at suger cane cropping :1 ) When a man approached fast to Habu, many Habu did not run or escape fromhim but were not found. Then a man passed through the site where a Habu
was, and most of Habus held still at the site for 1‑2 hours. Then the snakes
moved and changed the site. It was thought that the Habu, pressed under theleaves of cane by the step of a man, took precautions with the posture of attackfor 1‑2 hours.

2) When croppers Qut down the cane and approach slowly to Habu, many Habus

144

can run away from men, especially in the warm season. In April, more thanhalf of the snakes in the suger cane field had escaped from capture by the
cropper .

3 DISTRIBUTION OF HABU ( Trimeresurus flavoviridis)

IN URBAN AND RURAL AREASCHOKEI YOSHIDAI AND HIROYUKI AKAMlNE2
Okinawa Prefectural Institute of Public Healthl and Okinawa Public Health Association2

Aside from the countermeasures of first priority such as subjecting snake‑bittenpatients to well prepared anti‑venom treatment, it is also considered a drastic measureof vital importance to isolate people from venomous snakes in terms of "artiflcial
segregation of niche"
In Okinawa Prefecture, annual incidence of Habu‑bites still remains higher than
200 and most of these cases occur in residential areas of rural and urban districts,
where habitats of snakes overlaps those of man.
In order to get a modus operandi of circumscribing the habitats of Habu incertain municipal districts, thorough investigations were carried out at Naha City
(principal city of Okinawa Prefecture‑population; 300 thousands, area; 38 km2)
and other two adjacent rural districts Nishihara and Sashiki.
Approximately 100/0 of all the households in Naha City and 300/0 in the othertwo towns were visited by well trained university gradualtes and questionairing wereconducted on the adults with at least 5 year history of residence to gather informations

about sighting snakes. Total numbers of sightings of Habus including eggs andsheddings in those municipalities were 2,265, 439 and 455 respectively, and werespotted on maps with a scale of I to 2,500.

Demarcation of habitats or "dangerous areas" was made by circumscribing aclosed shortest line arround the outermost spots of sightings which could be thought
to share common eco‑system to the adjacent green portion of land and by adding asurplus zone of 50 m width arround the closed line for the sake of safety. These
habitats or "dangerous areas" were coloured green.
"Cautionary areas" coloured with yellow were set further 50 m outside of every
one of the "dangerous area". All the rest of the municipal areas was coloured pink
as non‑habitat or "safe area"
Tricolour maps were thus made up as the result of demarcating the target areasof eradication of Habus, showing the dangerous areas with green, the cautionary
areas with yellow and the safe areas with pink.

Approximately 100 thousands or 32.30/0 of the whole population of Naha City
were found to live within the green "dangerous" areas, while in the other two towns
16 thousands or 830/0 (Nishihara), 6 thousands or 600/0 (Sashiki) Iive within the green
reas whi h c9ver 91 o/o and 81 O/o Of th whple municipal areas respectively.

145

980/0 of all the I , 1 89 points of sightings of Habus occurred within the distance of

30 m from the edge ofwoods and thickets in Naha City, whereas 950/0 were found not
more than 50 m far from the edges of forests and grassy areas in the other two rural
districts.

Interval time and distance between two sequent automobiles passing on the
double‑lane roads in Naha City, calculated from the data of traffic census, revealed

that Habus could hardly sprawl from one thicket to another across a road in 27
seconds, the longest interval time at midnight (21 : O0‑05 : OO) optimum for the activityof Habus.
In the rural district Sashiki, on the other hand, overall quadrates (net of 100 m
meshes) revealed a signiflcant negative correlation between the frequency of sighting

Habus per household and the number of household in a quadrate ( I ha).
Judging from all these findings, it was concluded that Habus could hardly expand
their habitats beyond the outskirt of a thicket on which they depend greatly. Motor
traffic, housings and other human activities play an important role in dividing theoriginal habitats of Habus into smaller ones giving a hint to us of the systematizedpartial eradication of Habus in these patchy habitats and of the procedures whichlead to the goal of our "artificial segregation of niche". Questionairing was verified
to be effective for the overall investigation on the distribution of Habus in rural andurban residential areas.

4 POPULATION STUDY AND EXPERIMENT OF EXTER‑MINATION OF Trimeresurus flavoviridis IN MINNAISLAND, OKINAWA
SEIKI KATSURF.N AND CHOKEI YOSHIDA
Okinawa Prefectural Institute of Public HealthThis paper presents a prototype of eradication programme of one of the Oki‑nawan venomous snakes Habu in a small island and the ecological features clarified
by the operations carried out for five years since 1977.

On the island Minna which resembles a horse‑shoe extending I km in the
distance across and has an area of 50 ha and an altitude of 12 m above sea level,
there live approximately 50 people raising sweet potatoes, carrots, water‑melons andcattles, etc. There inhabits no wild mammal such as mongoose, rat and mouse,
etc. Habus were supposed to feed on birds, Iizards and other small animals.
One hundred and eighty five traps were set on every center of qtladrates ruled
into 50 m covering all the land surface. Traps baited with live chickens (and micelater) captured 43 Habus (0.002/trap‑day) in 1977, 37 (0.0013) in 1978, 43 (0.002) in
1979, 41 (0.0009) in 1980 and 20 (0.0005) in 1981, all of them with the estimated ageof more than I year. Sex, body length and weight, gastric contents of the captured
were examined and their distribution in relation to the flora, atmospheric phenomena
and other environmental conditions were discussed.

l 46

5

PREVENTION OF INVASION OF THE SNAKE, HABU,

Trimeresurus flavoviridis, USING AN ELECTRIC FENCEYOSHIHIRO HAYASHI
Department of Parasitology, Institute of Medical Science, The University of Tokyo

It is reported that more than 80 /0 of Habu‑bite cases has occurred in agricultural

field and in residential areas in the Amami Islands ofJapan. Amami‑oshima whichis the biggest island having an area of 8 1 9 km2. Therefore, it seems difficult to con‑trol all the Habu from the island. However, it seems to be easy to remove Habu
from the human habitation, which is less than I o/o of the whole area of the island,
after protecting human habitation from the invasion of Habu. To prevent the inva‑
sion of the snake, the experiment of the efficacy of the electric fence was carried out
in this study.

It is widely known that the fence of 1 50 cm in height is needed to prevent theinvasion of Habu. In this experiment using an open enclosure, however, it was
found that the invasion of Habu was perfectly prevented by the electric fence of 65 cm

in height; the highest current is 480 mA under 500 ohm resistor, and the electric

power is 5VA flowing intermittently. When the animals have high intelligence,e.g. wild boars, they can recognize the danger of the electric fence and never comeup to the fence after suffering a single electric shock. In the case of Habu, however,it was observed that they did not stop the trial to climb the fence after suffering theshock.
To clarify the efficacy of the electric fence in the field, the fence of I .OOO m inlength was constructed in Te‑an Village (6.75 ha) in 1977. To compare the number
of Habu observed before setting the fence, Iess than 500/0 Of Habu was observed by
the village people in 1 980.

The subsequent experiments are being carried out in three villages in Tokuno‑
shima using the electric fence of more than 7,000 m in length.

6 STUDY ON CONTROL OF HABU

ON THE AMAMI ISLANDSHOGI MISHIMA

Department of Medical Zoology, School of Medicine, Dokkyo University

It is reported that more than 550/ of the Habu‑bites occurred in the agri‑
cultural fields, whereas 250/0 Occurred in residences. Thus it is important todecrease the number of bites in these area.

Since 1977, members of the Research Commettee for Studies on the Control of1 47

Habu in the Amami Islands (Chairman : Y. Sawai) engaged in the basic studies on
ecology and the method to control Habu. From these studies, it has been elucidated
that places where Habus appear frequently were around the stone fence which con‑sisted of boundary between residences and banks. It was found that a net combinedwith electric fence were effective to prevent the invasion of Habu. Effectiveness ofa trap with live rat as bait was also confirmed.
Based on these results, field trials were carried out at Tete and Todoroki area inl 980 and 1 981 respectively. The results indicated that the electric fences encircled

with the model areas were effective to prevent the invasion of Habu into villages,
and Habu traps put along the fence were effective to collect Habus that run against
the fence. It was also confirmed that removal of nests of Habu by substituting fenceof stones or banks for fence of block or concrete is also effective to decrease the number

of Habu.

148

Symposium
Basic research in ITlalaria

l CALCIUM METABOLISM OF MALARIA‑INFECTEDERYTHROCYTESKAZUYUKI TANABE1, RoSS B. MIKKELSEN2 AND

DONALD F. H. WALLACH2
Department of Medical Zoology, Osaka City University Medical Schooll andRadiobiology Division, Tufts New England Medical Center2

Mammalian plasmodial parasite incorporates erythrocyte hemoglobin as aminoacid source and utilizes a host cell reductant, NADPH, to avoid oxidant damage.
Moreover, the parasite in an erythrocyte evades host immune surveillance. Thesefeatures benefit plasmodial growth in the host erythrocyte. On the other hand, aselected metabolite (amino acids, sugars and ions) transport seen in the normal
erythrocyte membrane seems to restrict plasmodial survival in the host cell. Thus,
parasitization of Plasmodium in the host erythrocyte provides an intriguing question
about the parasite metabolism and the erythrocyte mernbrane transport.
The calcium ion is an essential component of many cellular regulatory processes.
An elevation of Ca2H induced by altered membrane Ca2+ transport leads to toxic
death of the cell. An increase in erythrocyte Ca2+ causes several cell lesions : altera‑tion of the cell shape, decrease in deformability, change in cation transport, modifica‑tion of membrane protein, and membrane peroxidation. Cellular functions ofmalarial parasite also must be regulated by Ca2+. Asexual development of theparasite occurs within the host erythrocyte which has extremely low levels of Ca2+.
Then we addressed the question of how the parasites take Ca2+ from the host cell andhow they control cellular Ca2+ Ievel.
The calcium content and transport processes of the Plasmodium chabaudi‑infected
rat erythrocytes were analysed by atomic absorption spectroscopy and 45Ca2+ flux
measurements. The infected erythrocytes, after fractionation on metrizamide gra‑dients according to stage of parasite development, exhibited progressively increasinglevels of Ca2+ with schizorit and gametocytes containing lO‑20‑fold greater calcium
levels than normal cells. Increased Ca2+ amount in the gametocyte‑infected cells

may be due to calcium accumulation by the gametocyte mitochondria. 45Ca2+
flux experiments showed both increased influx and decreased efflux in the infected
erythrocytes. Thus, change in Ca2+ transport contributes to an increase in Ca2
levels in the infected cells. Tris/NH4Cl lysis of normal erythrocytes preloaded with
45Ca2+ with the Ca2+ ionophore A23187 released > 900/0 Of cell calcium after incuba‑tion in ethyleneglycol bis (aminoethylether) N, N'‑tetra‑acetic acid containing buffer,
whereas lysis of the infected erythrocyte membrane resulted in release of l0‑200/Q cell

1 49

Ca2+ wrth the remaining portion associated with the isolated parasite fraction. These
results together with the effects of various metabolic inhibitors indicate the presenceof a parasite Ca2+ compartment in the P. chabaudi‑infected erythrocytes.

Dicyclohexylcarbodiimide (DCCD), an inhibitor of proton ATPases, and theproton ionophore, carbonyl cyanide m‑chlorophenylhydrazone (CCCP), inhibited
Ca2+ influx and stimulated Ca2H efflux from the infected cells. These results suggestthat Ca2+ transport of intraerythrocytic parasites is coupled to a proton‑motive force

across the Plasmodia plasma membrane.

2 STUDIES ON MALARIA IMMUNOLOGY REFERRING TO
DEVELOPMENT OF A LIVE TYPE ATTENUATED VACCINEMAMORU SUZUKI
Department of Parasitology, Gunma University School of Medicine

Vaccination against malaria was experimentally attempted as early as 1 9 1 O by

Sergent. Since the promotion by TDR programme which started in 1976, produc‑tion of a safe and effective vaccine against malaria has become the biggest concern
not only to those who are engaged in laboratory studies but also, to those who are
working in practical field operation. In fact, if an applicable vaccine should be
successfully developed, it will revolutionalize total malaria control campaign. Major
efforts are now being concentrated to define antigen of the parasite which induces
resistance in the host. Sporozoite, intraerythrocytic parasite and gametecyte are
now being analyzed using the techniques of hybridoma derived monoclonal antibodies
aiming at the final goal to define the parasite substance which provokes protective
immunity in the host. On the other hand, a minor group of researchers are interested
in the production of a live type malaria vaccine which will cause much more effective
resistance in terms of long lasting immunity. Enough reasons will be raised to justify
the studies on the induction of a living attenuated parasite aiming at the final goal
to produce live type vaccine. Field observation as well as laboratory findings has
shown that premunition derives the most potent and long lasting resistance.

Our group of Gunma University have been engaged in the studies to create
permanently attenuated parasite derivatives from the original parasite of high viru‑
lence. While we studied immune responses of athymic nude mice using high virulent
parasite irradiated by 40 Krad X‑ray, by chance, we were able to pick up an extremely
attenuated parasite derivative which could grow only in the immune deficient nude
mice. The attenuated parasite was stable ; reversion to virulence was not occurred,even after 50 times passage through nude mice. A single vaccination with the at‑tenuated strain induced complete resistance against challenge inoculation with thevirulent parasite in 7 mice out of 1 1 tested, and average survival time of the dead 4

was 23.5 days. While control mice showed 1000/0 Iethality (11/11) and the mean
survival time was 9.5 days. Specific lgG persisted at high titer for more than 9 weeks
in mice receiving a single inoculation of the attenuated strain. The finding suggested

1 50

that small number of attenuated parasite latently survived in the mice giving continu‑
ous stimulation to immune system of the host. In the studies on the live type vaccine,host responses occurring after parasite inoculation is indespensable. At this moment,
our attentions are concentrated to the behavior of T‑lymphocytes of mice receiving
virulent original P. berghei. In a series of studies on T‑cell dynamism in the infected
host, following findings were obtained. I ) Some T‑cell induce detrioration in thehost, while others work for protection against the reinvading parasites. 2) Whenmice were at the acute stage of infection, remarkable lymphorrhexis occurred in thethymus and other T‑cell dependent region of lymphoid organs. The released T‑cells
circulated in the blood and eventually localized in the liver. 3) Electron micro‑
scopic studies on the involved liver tissue demonstrated lymphocyte attachment onto
the cells harbouring malaria parasites. The observations implied destruction of thehost cells as well as parasites in the cells by the reaction of the attached T‑cells. Thus,

two aspects of immune reaction by sensitized T‑cells were suggested. The live typevaccine looks to induce a succession of immune responses of the host including cellularimmunity leading host to create a long lasting effective resistance against malaria.

3 THE SEVERRITY OF MALARIA AND

THE COAGULOPATHY
HIROYUKI AMANO

Department of Overseas Medical Services, Tenri Hospital

The main pathological findings in the fatal cases of malaria caused by P. falci‑

parum are malaria embolism and deposition of malaria pigments in many organs.
And bleeding tendency is usually found in those organs, and it reminds us of DIC.

According to some previous reports, the "true" DIC, diagnosed pathologically,occurred certainly in both experimental monkey and human cases of malaria. How‑ever, since the pathological diagnosis of DIC is generally difficult in most cases, it isconsidered that DIC is one of the clinical entities and should be diagnosed by clinicallaboratory data. Therefore, the slight fibrin deposits by PTAH staining in someorgans of our case may be regarded to be the results of DIC changes. And, even in
those cases which show only the pathological change of malaria embolism, the clinicallaboratory data will indicate the evidence of DIC, according to the clinical criteria of

DIC. When DIC occurred in the severe case of malaria, thrombocytopenia would
be said to be due to the coagulopathy of malaria. Moreover, we can presume theperiod of the severity of malaria by the examination of the changes of PLT counts.
Therefore, in this report, attempts were made to analyse the correlation between
the coagulopathy, especially the changes of PLT counts, and the progress of falci‑
parum malaria, in the case ofinternal and external reports as well as in our own cases.

The cases with clinical DIC were demonstrated in high rate among severe casesof falciparum malaria with complications. And even in the cases without complica‑
tions, decrease of PLT and positive on FDP were occasionally observed. Fbg was

151

not always decreased in all of these cases. In the semi‑immune group without com‑plication, PLT was not correlated with parasitemia. On the other hand, in non‑
immune Caucasian group and Japanese group, the cases, which revealed 5 o/o or moreof parasitemia and 7 x I 04lmm3 or less of thrombocytopenia, were 1 1 / 1 2 in the former
and 7/8 in the latter. However, for the determination of severity of malaria, it will

not be simply agreed to employ only the parasitemia because the severe thrombo‑
cytopenic case and fatal case occurred among the cases with 5 o/o Or less of parasitemia.

Concerning the days of illness and parasitemia, it was concluded that averageparasitemia was 0.2 x 104lmm3 on the first ill‑day and the parasitemia became 50/0
or more on the 6.7th ill‑day in Japanese group. On the days of illness and throm‑
bocytopenia, it was thought that PLT counts decreased not gradually but suddenly
at a certain period of illness, and it occurred on the 4th or 5th ill‑day in the Japanesegroup. This period was before the day when the parasitemia became 5 o//o or more,
and it could be said to be the turning point to the severity or the starting point of the

DIC mechanisms. This conclusion resembles to the results of the previous reports on
the experimental monkey malaria.
Additionally, on the study of falciparum malaria cases in Congo, the cases withlow parasitemia and thrombocytopenia were more frequently noted in the adult'scases than in the children's cases. This would indicate that some factors of theacquired immunity to malaria, might be more active in adults than in children.
In conclusion, it is emphasized that the course dependent factors of the disease
and the manifold related factors should be discussed in the basic studies for thepathophysiology of malaria.

4 EVOLUTIONARY GENETICS ON THE VECTORS OF
MALARIA AND FILARIASIS IN EAST ASIA

Tozo KANDA, KENJI TAKAI AND KEN ICHI OGAWA
Department of Pathogenic Zoology, St. Marianna University School of Medicine

Phylogenetic studies have been performed on the vectors and the related membersof their species groups of malaria and filariasis in East Asia based on the informations

from morphology, cytogenetics, hybridization experiments, molecular taxonomy byelectrophoretic analysis on protein components and isozyme gene analysis, andpopulation genetics.
In the hyrcanus group engarensis was cytotaxonomically separated from sinensis

by the finding of homozygote inversion of 2Rb. No heterozigote iversion was foundamong natural population at the sympatric area, Engaru, Hokkaido. Although
An. Iesteri is completely separated from sinensis, there exists a group of sinensis withsynaptic X chromosomes of Fl hybrid between lesteri, instead of others with asynaptic

X chromosomes of the one populaly distributed in Japan. The group distributed in
Korea and western Japan is the vector of Brugia malayi and vivax malaria in Korea.
Some differences in protein components which are coresponding with a few morpho‑

1 52

logical differences were found between northern 3 strains from Okinawa, Japan andsouthern 2 strains from Malaysia. Reproductive isolations existed among 7 membersof the group, sinensis, Iesteri, crawfordi, nitidus, nigerrinus, argiropus and peditaeniatus.

Homosequencial banding sequences among sinensis, craufordi, Iesteri and nitidus, whereas

intraspecific fioating polymorphism were found in a few cases. Sineroides has homo‑sequencial X chromosomes in comparison with An. koricus.
Among the members of the leucosphyrus group, Ieucosphyrus s. s. is a separate

species from other malaria vector members of the group. In the comparisons ofgenetic relationships among 7 strains, I from Taiwan, 3 from Thailand, 2 from thePeninsular Malaya and I from Sabah, East Malaysia, they had incomplete repro‑
ductive isolation, and some synaptic or some asynaptic polytene chromosomes were
found in the salivary gland of their F1 hybrids. Therefore, they were diverged respec‑tively each other combinations in. different grades, and indicated that they had
subspecific or racial relationships in respective combinations instead of specific in‑dependency. Isozyme analysis was also performed on esterase‑ I , octanol dehydro‑
genase, malic enzyme and amylase by using acrylamide gel electrophoresis. They
resulted that 3 strains from Thailand and I strain from Taiwan were in same genetic
distance in racial level. One strain from Sabah showed 0.29 and 2 strains from
Malaysia (Peninsula) showed I .38 due to Nei's genetic distance value.
In the pyrethophorus group, the F1 hybrid from cross between sundaicus andsubpictus showed synaptic homosequencial polytene salivary gland chromosomes, but
their Fl male were sterile. Vegus and indefinitus were completely separated fromsund aicus.

Among the minimus group, there exisisted some reproductive isolations due togeographical isolation between a strain from Ishigaki and Kanchanaburi (KCH)‑lwith similar morphological characters, whereas KCH‑2 with different morphologicalcharacters, pale spots on the distal end of the hind tibia etc. had no reproductive
isolation between Ishigaki strain. No different enzyme allele was found yet among
these strains.

Anopheles maculatus in Thailand can be separated for 3 groups by using isozyme
electrophoretic analysis in relation to their morphological differences among thegroups.

5 ELECTROPHORETIC PATTERNS OF SOME ENZYMESOBSERVED IN ANOPHELINE MOSQUITO LARVAE
MASUHISA TSUKAMOTO
Department of Medical Zoology, School of Medicine, University of Occupational andEnvironmental HealthPhylogenic studies of mosquitoes have usually been based on morphologicalcharacters. More recently, comparison of isozyme patterns using electrophoresis
has also been utilized in various ranges of mosquito studies. Although one of the most

153

extensively examined enzymes by previous investigators is esterase mainly in relation
to insecticide‑resistance problems in mosquitoes, such an approach has been proved
to be a useful tool to study intra‑ and inter‑specific biochemical relationship. Started
from 1 98 1 , extensive studies on mosquito isozymes of various grades of taxa, such assubfamily, tribe, genus, subgenus, group, species and subspecies, have been attemptedusing about one hundred species of mosquitoes in Japan and the Philippines. The
enzymes examined after polyacrylamide gel electrophoresis are lactate dehydrogenase(LDH), Ieucine aminopeptidase (LAP), and non‑specific esterase (Est) . Preliminary
analysis of data of isozyme patterns does not show any direct relationship between
such biochemical characters and ability for malaria transmission in 15 species ofanopheline mosquitoes examined for LAP or Est so far, but at least a tendency has
been suggested, using 8 species of anopheline mosquitoes, that 4 members ofsubgenus
Anopheles demonstrated LDH activity bands which moves rather fast than those ofsubgenus Cellia. Much more extensive researches for general biochemical backgroundof the mosquito are necessary to understand the ability of malaria transmission,
insecticides resistance and philogenic relationship.

6 MECHANISM OF INSECTICIDE RESISTANCEJUNSHI MIYAMOTO AND SHIGEHUMI KOGISO
Research Department, Pesticides Division, Sumitomo Chemical Co. Ltd.

Insectidides are classified into several groups by their mode of action. Organo‑phosphate and carbamate insecticides inhibit acetylcholinesterases and exhibit in‑secticidal activities. On the other hand, pyrethroid and organochlorine insecticides

directly act on nervous system and disturb and blockade membrane conductance.
According to the increase of the usage of insecticides, 428 species of arthropodepests, which are of agricultural and medical importance, show resistance to one ormore insecticides. Biochemical and electrophysiological study using resistanthouseflies and mosquitos revealed that major factors of resistance are : I ) increased
detoxification of insecticides by metabolic degradation enzymes, 2) decreased sen‑sitivity of site of action, 3) decreased penetration of insecticide into cuticle. It isthought that the level of resistance in one particular insect is determined by the
combined result of these above resistance factors.

The metabolizing enzymes of organophosphate and carbamate insecticides are
mixed‑function oxidases (mfo), glutathione S‑transferases, hydrolases and esterases.
The major factor in carbaryl resistant housefly is the increased activity of mfo, which
was inhibited by the addition of piperonyl butoxide (mfo inhibitor) . On the other
hand, increased activity of carboxylesterases is a major factor of resistance in malathion

resistant Anopheles stephensi. The degradation of malathion was inhibited by theaddition of an esterase inhibitor, triphenyl phosphate (TPP).
The sensitivity of acetylcholinesterases, which are the site of action of bothorganophosphate and carbamate insecticides, has decreased to show insecticide

1 54

resistance in housefly, anopheline mosquitos, rice plant hoppers and acarine. Acetyl‑cholinesterases of Anopheles albimanus, which is resistant to parathion and propoxur,are 500 and 1 5,300 fold less sensitive than that of susceptible mosquito to paraoxon
and propoxur, respectively.

The activity of DDT‑dehydrochlorinase, which is an enzyme detoxifying DDT
to DDE, was increased in DDT‑resistant housefly and Aedes aegypti. Some pyre‑throids are metabolised oxidatively and hydrolyticaly into less toxic metabolites in

insects. But the enzymes detoxifying pyrethroids do not play a prominent role inpyrethroid resistance.

The susceptibility of nerve membrane is decreased in housefly and a laboratory
strain of Culex quinquefasciatus, which is more than I OO‑fold resistant to DDT andpyrethroids such as permethrin. The decreased sensitivity of nerve membrane,
which is an important factor in pyrethroid resistance, were controled by knock‑down
resistant (kdr) gene. But the rate of existence of kdr gene are rare.
Another factor of resistance, decreased penetration of insecticides to cuticle,
is known in resistant strains of housefly, cockroach and Aedes species. The decreased
penetration is considered to cause multiresistance in insect, but there are a few ex‑
amples of resistance caused by decreased penetration.

155

Panel discussion
Diseases contracted by Japanese overseas residents
1

DISEASES WHICH AFFECT THE JAPANESE OVERSEAS
I. MALARIA AND ITS PREVENTIONISAO EBISAWA
Department of Public Health, Toho University School of Medicine

It is important to know the drug‑sensitivity of P. falciparum of the particularregion when plans are made to suppress malaria among the Japanese stationed in themalaria‑endemic areas. The areas where the chloroquine‑resistant P. falciparum isprevalent have extended into Burma and India in the west, and beyond Papua‑New
Guinea to New Hebrides Islands in the Oceania. Signs of prevalence of chloroquine‑
resistant P. falciparum are noticed in Nigeria, Kenya and Tanzania on the African
continent. Pyrimethamine‑resistance has been known in Thailand and in its sur‑rounding areas. It is also widespread in Africa, i.e. Nigeria, Central African Repub‑

lic, Ghana etc. Chlorguanide‑resistance has been reported from the Malayan
Pennisula.
The radical cure of P. vivax infection can not be achieved in the patients infected

in India, Thailand, Kalimantan, Papua‑New Guinea ! and the Philippine Islands
with the ordinary primaquine dosage of 1 5 mg daily for 1 4 days. Some patients
may be cured with primaquine 30 mg for 7 days, repeated 2 to 3 months later.
It is important to take into account the local condition when a malaria suppressive

regimen is planned. Nairobi in Kenya is free of malaria, but a Japanese, a 3 month‑resident in that city, developed near‑fatal malaria after a short trip to Mombasa, asea‑side town, and to a Natural Game Park. A Japanese in the central part of
Nigeria, who stopped medication as it was a dry season for some months and nomalaria transmission was present, made a short trip to Lagos where the weather was
humid and mosquitoes were present. He caught malaria and an instruction, "Anti‑malarial drug may be suspended during the dry season" became void.
When a traveller or a resident in the malaria endemic area develop malaria,
it is safter for the parient to become ill in the endemic area than in Japan. The
doctors in the former place consider malaria first and there will be no delay in the
inception of treatment. The doctors in the non‑endemic area are unfamiliar withmalaria, or antimalarial drug may not be available and the inception of treatment
is unduely delayed.

156

2 DISEASES AFFECTING OVERSEA JAPANESE RESIDENTS
II. HEPATITISHIROSHI OBATA, NoBUYUKI FUJINO AND TOJU HISAMITSU
Institute of Gastroenterology, Tokyo Women's Medical College

There are three main types of human hepatitis viruses, namely, type A (HAV),

type B (HBV) and type non‑A non‑B (NANBV). The prevalence of these viruses
throughout the world has been clarified in the case of types A and B. Here we areparticularly concerned with the hepatitis contraction rate among Japanese residingin the tropical and subtropical regions with high prevalence rates. In this paper wereport on the epidemiological and clinical aspects ofJapanese hepatitis patients who
contracted the disease overseas and whom we had a chance to observe personally.
From the standpoint of global epidemiology, the anti‑HA positive rate serves as
an index for HAV and the countries in Southeast Asia, Oceania, Africa, and Central
and South America are known to have prevalency rates above 80 o/o' If we look at

HBV based on the frequency of asymptomatic HBsAg carriers, the countries withhigh prevalency rates are for the most part the same countries but in some countries
the HBV prevalence rate is lower than the HAV prevalence rate.
During the past 7 years 58 patients with imported hepatitis have been hospitali‑
zed at our hospital. In order to identify the virus type, within two months of onset

we have detected lgM‑antiHA (HAVAB M method) and HBsAg (R‑PHA method).
If the first test proved positive we judged such cases as type A, and if the latter test
showed a transitory positivity as type B. If both proved negative and all cases thatproved negative to anti‑VCA IgM relating to the EB virus, we classified such cases
as NANB. Based on these test results, the frequency rates for the various types were
41 cases with type A (70.7 /o)' 1 1 cases with type B (19.00/0) and 6 cases with type
NANB (l0.30/0)' The mean age of the patients for type A was 29, for type B 36 andfor type NANB 33. The country of contraction was mainly in Southeast Asia andAfrica for type A. The country with the greatest occurrence rate was Egypt with 1 2

cases among whom 7 cases developed endemically. B‑type occurred mostly in someregions of Southeast Asia and NANB developed sporadically.
The clinical symptoms of imported hepatitis are similar to symptoms of sporadic
domestic cases of hepatitis but among the long‑term residents prolonged cases areobserved due to complications. The histological findings of biopsy show in mostcases a picture of typical acute hepatitis but in some cases a picture of chronic hepatitis

or cholestatic hepatitis was observed. The prognosis is favorable and a cure can beeffected in all cases.

Prevention and countermeasures are as follows. For type A, since it is due tofecal‑oral infection, thorough personal hygiene is very important and ISG should be
administered according to residency and working conditions. Since B type infects
via the body fluids. HBIG is useful but it is necessary to avoid all close human contact

157(including sexual relations) . Future studies are necessary to determine the infectious

route of NANB.

3 DISEASES AFFECTING OVERSEA JAPANESE RESIDENTS
III. OTHER PARASITIC AND/OR TROPICAL DISEASESSHOKICHI TANI AND HIROSHI OHARA
Department of Medical Zoology, Kanazawa Medical University

It is quite important for the Japanese who stay in the tropics to take precautions

against tropical diseases or endemic diseases which are prevalent among natives.
But these are not only diseases that are important for health administration of theJapanese staying in the tropical area.
According to the studies on 1,469 members of the Japan Overseas Cooperation
Volunteers, the incidences of major diseases that occured during their stay abroadwere as follows; malaria (lOl cases), acute hepatitis (94 cases), traific accidents (71cases), chronic diarrhea (59 cases) and dengue fever (12 cases). The reported cases
ofvenereal diseases or mental diseases are rather few, but it is estimated that the actual

incidence of these diseases must be much higher.
There is a high incidence of hepatitis A among young Japanese who stay in thetropical or sub‑tropical district. According to the results that measured anti‑HAVof both before and after assignment, the positive rate of the returned volunteers in‑creased 2.7 times compared with that of before assignment.
The stool examinations on the returned volunteers after two year stay in thetropical or sub‑tropical area were carried out, and the infection rate was 30.70/0'This was the highest among abnormal laboratory findings of the returned volunteers.
The highest infection rate among protozoas was observed on Giardia lamblia ( 1 7.3 o/o)'
and among helminths, Trichuris trichiura was recorded in 9.30/0 and Ascaris lumbricoides
in 3.70/0 (Yamaura et al., 1981). These parasites can be causes of chronic diarrhea,
but in general it is quite rare that parasitic infections cause severe simptoins.
It is true that such tropical diseases as malaria, dengue fever and intestinal infec‑

tions show high incidences, but acute hepatitis, traffic accidents, mental disease ,venereal diseases and the recurrent or aggravated cases of the diseases which havepast history are also seen frequently. This fact shows that it is important for a

Japanese who stays long in the tropical area to consider a counterplan for these
diseases as well as for the other tropical diseases.

158

4 CORRELATION OF INFECTION RATE OF INTESTINAL
H肌MINTHs AMoNG JAPANEsE INHABITANTs IN THE
TROPICAL COUNTRIES WITH DEGREES OF DRINKING

DepartmentofMedical

WATER

POLLU皿ON

KoIcHIRo

FuJITA

Zoology，Nagasaki University

School ofMedicine

ManyJapanesearelivinginthetropicalcountries，andsomeofthemaresuf艶ring盒om the in驚ctious diseases which was brought through the mouth．In this panel
discussion，I would like to emphasize the importance of the drinking water in theprevalence・fthesein驚cti・usdiseasessuchasin免cti・ushcpatitis，typh・id艶verandamebicdysentery．

In tota1，0ver300samples of drinking water f｝om the countries of Southeast
and SouthwestAsia，Middle East，EastAfヒica and Central and South America were
tested with potassium permanganate consumed test，and number of colifbrm bacilli
丘om

the

drinking

Relatively
Then，we

water

high

checkedwascounted afヒer

cultivation．

proportion ofsamples appeared to be polluted by琵acal matters．

parasite

eggs

in

the

stool

samplesofthoseJapanese

who

actually

used water samples in the tropical countries．Eggs of廊o副3伽か∫60魏5，7痂h漉5∫rゴ6h加α，7物6吻5α4π吻and（7Joηor6h∫55∫π6競5were fbund among those Japanese．
The infもction rate of intestinal helminths was proved to be highest among theJapanese in Indonesia，andAsia，inEast

the in免ction

water

was

colifbrm

tween thedegree
will
of

the

the

rate was fbllowed by those of people in southwest
in Central and South America．The relationship between

Significant

and

the

degreerelationshipwasobserved

infヒction

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EnJ6ro∂伽5∂8rη2蜘」αr∫5in

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CONS肌TATION

AND

IN

COUNTRIES

MATsuMoTo
fbr

thean important role in the prevalenceJAPANEsE REsIDENTs

TROPICAL

Department

Japanesefbund．Thesediseases．

ITs PRo肌EMs（Abstract nQt

ofthe

parasites ofJapanese and the rate of water containing1020r more／ml
and of total microorganisms（7＝0．957）．However，no relationship be−ofthesuggestandrate ofintestinal helminths

studied．

of intestinalofAfヒicaTropical

Mcdicine，Nagasaki

University

1 59

6 HEALTH CARE AND ITS PROBLEMS AT OVERSEA
PLANT CONSTRUCTION
MASAKI NAKAMURA, HIROYUKI INOUE, YUKIO SAWADA AND
TAKASHI SHIMOYAMAThe 4th Department of Internal Medicine, Hyogo Medical College

A Japanese population working at overseas is said to be about 200,000 altogether.

We have been practising a medical care ofJapanese working at West Africa, North
Africa and Middle East to construct industrial plants. We report their medical
situation and discuss about the medical care and its problems.

The medical practice among about 1 20 employees at north Katsina, Nigeria

between May in 1980 to December in 1981 was as follows. Common cold anddiarrhea were the highest incidence diseases, 2 1 8 and 1 55 cases being found respec‑tively. Then, dermal diseases such as eczema 54 cases, trauma including eye problems
45 cases, shoulder pai,n and lumbago 26 cases, gonorrhea 1 8 cases, malaria 1 4 cases

and liver damage 5 cases followed.

The most serious problems were malaria and accidents. The different occur‑
rence of malaria was observed by seasons, taking preventive pills, places such as cityor rural areas and degree of tiredness, on which points of view preventive measures

should be established urgently. In some cases certain drug resistant malaria werereported. Industrial hazards were reported to be the same as in Japan. The
medical care available in the local area was limited. Therefore, when a serious
accident happened, one should seek a way of sending the patient to a developed
country, not only contact with the local hospitals. Furthermore, the problem ofhepatitis A was discussed.

7 PRACTICES AND CONSIDERATIONS OF HEALTH CARE
FOR EXPARTRIATE EMPLOYEES OF "SOGO SHOSHA"(MBK)YUKIO MASUYAMA
General Manager of Medical Clinic, Mitsui & Co., Ltd.

For the Mitsui employees assigned to overseas posts, the living conditions abroad
are generally quite different from those in Japan particularly in regard to manners
and customs, weather, clothing, food, housing, etc. Therefore, overseas appointments

and health management measures are based on the accurate information and knowl‑edge of the living conditiQns Qverseas, and eventually the imp̲ ortance is placed Qn1 60

individual health management by which each employee looks after his own healthin accordance with the local environment.
As a precautionary step prior to despatching an employee overseas, he is madeto attend training courses on medical care overseas so that he can deal with environ‑mental changes with versatility. If the physical checkup prior to departure indicatesthat he is in normal health, he can be despatched without any anxiety, but if he isfound to have some chronic disorder, he is given instructions concerning his daily life
in order to prevent the disorder from getting worse.

For managing the health of persons stationed abroad, a physical checkup is
conducted once a year by a local medical institution at the request of the Company,in case the persons are serving in the advanced nations. If the persons are stationed

in the developing countries, the physical checkup is performed by utilizing the
touring clinic and the Rest and Recuperation System.
Life in a foreign country should be spent in a humane atmosphere in which
mutual understanding is maintained by good communication, and in addition theexpatriate employee should familiarize himself with the sports, culture, etc., of thehost country so that he will be free from any culture shock or apprehension.
Employees serving overseas should be healthy and mentally alert, having a goodcommand of a foreign language while being possessed of such qualities as foresight,
resolution, vitality, perseverance and the ability to discharge their duties. If all
overseas posts are filled with persons meeting the above criteria, there will be no

dropouts who are unable to complete their tour of duty, and have to be sent home
halfway through. In practice, however, we are at times faced with cases ofimproper
adaptation due to the large difference in the living conditions and the need to have asmall number of employees handle a great variety of commodities according todifferent trade customs. Why does this happen? The zealousness in performing
one's duties to perfection and an extreme wish for local adaptation seem to collide,causing friction and leading to a psychological breakdown and mental frustration.
It is necessary to provide consultation of life‑style in which the affected person isadvised to set his mind at ease and act naturally since he is not alone in suffering.
At the time of returning home, a physical examination is made to make sure thatno person will enter Japan with foreign infectious bacteria. It is desirable that
medical facilities for persons serving overseas should be planned with the final targetof enabling every one of them to receive the same medical c re as that in Japan at
any time and locality.
In providing such medical care overseas, however, we must solve many problems
such as local licences to practice medicine, the recruiting of doctors, government
subsidy, and business enterprises' positive assistance to medical services.

In future, the exchange of information with experts in all fields should be posi‑

tively promoted with a view to accumulating know‑how, and by utilizing suchknowledge, it is hoped that medical facilities can be established in foreign countries
for Japanese residents abroad and that the hospital ship project as conceived by theJapanese Government will be materialized on the idea that all people in the world
re bound in commQn and should help each other in improving their lives

161

8

DISEASES OF JAPANESE RESIDENTS IN FOREIGNCOUNTRIES AND PROBLEMS IN THEIRHEALTH MANAGEMENT
SAKAE WATANABE
Uenohara HospitalThis research of the diseases of Japanese residents in foreign countries was basedon the statistics collected by the clinics of the Ministry of Foreign Affairs according

to the International Classification of Diseases (WHO). In the years from May 1980
to April 1981, a total of 12,039 persons visited the medical facilities at Japanesediplomatic offices. Among these patients, 4,440 persons (36.90/0) were civilian
Japanese whose numbers varied greatly with location. There were proportionately
more patients in Indonesia, Russia, and China, but only 35 patients in Thailand was
extremely low considering the number of Japanese residents there . In the classi‑
fication of the patients' diseases, respiratory diseases were the greatest in number,
followed by digestive ones. Serious infections and parasitic diseases were 6.20/0'
being 5th in occurrence frequency. The following is a breakdown of the infectious
cases .

1) 22 cases of typhoid fever and paratyphoid fever in Indonesia only.
2) 52 cases of virus hepatitis (l0.40/0) in Indonesia, Kenya, Russia, Egypt, etc.,that is, over a wide range of districts such as Southeast Asia, Middle and Near
East, Africa, and Russia.

3) 32 cases of malaria (6.40/0)' mostly in Africa and around Kenya, Nigeria, Coted'lvoire, and Egypt.
4) Lice, ticks and flies were found in 74 cases ( 14.90/0)' mostly in Africa and the

Middle and Near East.
5) Bacillary dysentery, amoebic diseases and bacterial gastroenteritis were grouped
as digestive infectious diseases, and had 88 cases (17.70/0) ; these diseases weremore frequent in Africa, Middle and Near East, India, Southeast Asia, Russia
and Mexico, as was virus hepatitis. These results suggest a relationship bet,ween
the particular conditions of the individual districts and their hygienic environ‑

The author stayed in Indonesia as a medical officer in the Japanese diplomatic

office for 4 years from December 1977 to December 1981 and treated 15 Japanese
residents who ultimately died from various causes such as myocardial infarction (3),subarachnoid hemorrhage (2) and malaria, cirrhosis of the liver with bleeding esoph‑ageal varices, cancer of the liver, acute yellow atrophy of the liver, and malignant
brain tumor ( I each) , and external causes of traffic accident, electric injury and suicide(also I each). Except for the I case of malaria, the all other diseases except the 3external etiological cases were adult diseases, resulting in death which could have

1 62

been prevented, had the patients had a thoroughly physical examination before leav‑
ing Japan.
Finally, the pr(iblems of health management of Japanese residents in foreigncountries will be briefly described. The activities of medical officers in diplomatic
offices are somewhat restricted because of the problems of medical license. Doctor
groups are sent abroad by Ministry of Foreign Affairs and other private organizations,but they cannot fully satisfy the needs of patients because of limitations of the districts,

short term of visit and shortages of materials. The Japanese medical officers who aresent by the Ministry of Foreign Affairs to stay in Japanese foreign diplomatic offices
are under the various restricting conditions even though they can only be in chargeof the health management ofJapanese residents. One of the problems is the instruc‑tion in Japan. Of all the patients of the medical officers, 9. I O/o were foreigners andtheir ratio of medication was 73.60/0' However, in actuality, the medical officers
treat residents regardless of the law of the country, and thus it is reasonable for Japa‑
nese residents there to expect the Japanese doctors' services. The author proposes toeliminate restrictions for the medical treatment to Japanese residents as well as torevise the current regulations, including the means to discharge the medical officers
from the responsibility for inadequate treatment. Secondly, it is necessary for those
who are going abroad with their families to new posts to be subject to thorough healthexamination according to standard check items for adults.

9 HEALTH MANAGEMENT FOR JAPANESE RESIDENTS
IN FOREIGN COUNTRIESYOSHIZO KONISHI
Ministry of Foreign Affairs, Japan(Abstract not received in time)

163

Round table discussion
Biological activities of' toxic factors in Habu venom

1 INTRODUCTION TO THE ROUND TABLE DISCUSSIONYOSHIO SAWAI (Chairman)
The Japan Snake Institute

From the therapeutical and preventive purpose of snakebite, it is neccessary to
elucidate the pathogenesis of envenomation and to clarify the role of each toxic factor
in the venom, and to investigate the feasibility to prevent the toxic effect by immu‑

nological method.
Thus, the role ofvenom factors such as proteinases, phospholipase A, hemorrhagic
principles (HRI and HR2), necrotic factor, edema‑forming factor etc. separated fromcrude venom will be discussed in this meeting. Methods of quantitative determina‑tion of local swelling, hemorrhage and necrosis and results of analysis of local lesionusing proteinase inhibitor will be discussed.

2 PATHOLOGY OF HABU‑BITE
MANABU HONMA
The Ist Department of Pathology, School of Medicine, Gunma University(Abstract not received in time)

3 PROTEINASES IN HABU VENOMHIROO MAENO
Central Laboratories, Yamanouchi Pharmaceutical Co.

Local lesions of Habu‑bites is characterized by hemorrhage, edema and necrosis.
Thus, it is important to separate each pathogenic factor from the crude venom forthe clarification of cause of the intoxication.

The author and Professor S. Mitsuhashi and T. Okonogi elucidated that the
Habu proteinases were one of the main factors correlated with local lesion due toHabu venom. Habu proteinases are heat labile and easily inhibited by SH‑com‑p()unds and EDTA. It is suggested that Habu proteinases are a kind of metalic

1 64

enzyme, since they were activated by the addition of the di‑valent metalic ions. It
is also suggested that the characteristic nature of the proteinases is the ability to
induce intensive necrotic lesion of muscle tissues as compared with other proteinases
obtained frorn Streptomyces griceus or Bacillus subtilis and tripsin. Thus, it is concluded

that the Habu proteinases resulted severe local necrosis, cooperating with otherfactors of hemorrhagic and necrotic principles 'and phospholipase A which are freeof proteinase activity.

4 PHOSPHOLIPASE A･ OF HABU VENOMHIROSHI KIHARA
Department of Physiology, Faculty of Medicine, Kagoshima University

Many proteins with phospholipase A2 activity have been isolated from venom ofsnakes and bees and from mammarian tissues. Phospholipase A2 Of Habu ( Tri‑
meresurusflavoviridis) venom was purified via three steps consisting of Sephadex G‑ I OO,

CM‑cellulose and DEAE‑cellulose column chromatographies. The apparent molec‑
ullar weights determined by gel filtration on Sephadex G‑75 and by SDS‑polyacry‑lamaid gel electrophoresis were 28.000 and 14,000, respectively, suggesting that the
enzyme is composed of two identical subunits. The isoelectric point was 7.9.
The enzyme is characterized by high contents of aspartic acid, tyrosine, glysine
and lysine and contains one residue each ofhistidine and methionine and eight disul‑

fide bonds per subunit. The enzyme was inactivated by reaction with p‑bromophe‑
nacyl bromide following pseudo first order kinetics. The loss of activity was
accompanied by loss of histidine, indicating that a single histidine residue is essential
for activity.

This enzyme is split into two fragments by cyanogen bromide treatment. Whenthese two fragments lost the enzyme activity were mixed, the activity recovered.
It indicates that the reconstitution of this enzyme occures. N‑terminal residue ispyroglutamyl, unlike other phospholipase A2'
It is well known that phospholipases A2 cause hemolysis in viiro, but is unknown

whether the enzyme cause hemolysis in vivo or not. When purified phospholipase
A2 Of Habu venom was injected into rat, spectrophotmetric absorption of the plasma
at 550 nm increased. And haptoglobine contents of patients bited by Habu weredecreased, rapidly. These results suggest occurrences of hemolysis in vivo.

The measurments of CPK‑activity in plasma of the rat showed increase ofactivity when this enzyme was injected into the muscle. This enhancement of CPK‑
activity was related with the dose and the passage of time from the injection. In
histological studies the formations of necrosis were observed at the injected regionof the rat muscle without hemorrhagia. These results suggest that hospholipase A2of Habu venom may be one of factors causing the necrosis.

165

5 HEMORRHAGIC PRINCIPLES IN HABU VENOMTAMOTSU OMORI‑SATOH
The 2nd Department of Bacteriology, National Institute of Health, Tokyo

In 1 960 we established a quantitative determination method for the hemQrrhagic

activity of snake venoms. This enabled us to purify two hemorrhagic principles(HRI and HR2) in the venom of Amami Habu ( Trimeresurus flavoviridis) and tounderstand the correlation of the hemorrhagic principles to other ingredients in thevenom. We prepared toxoids from the purified hemorrhagic principles for theclinical use. We investigated also the mechanism of the hemorrhagic reaction. This
article deals with the hemorrhagic principles in Habu venom in special reference topurification and characterization.
The two hemorrhagic principles were separated from each other by gel filtration

on Sephadex G‑ I OO. HRI was purified by column chromatographies on anion ex‑changers such as DEAE‑Sephadex and TEAE‑cellulose, and it was shown to beresolved into two fractions (HRIA and HRIB). HR2 was purifled on a column of
Bio Rex 70 (cation exchanger) being separated into two fractions (HR2a and HR2b).

Among these hemorrhagic principles, only HRIA was associated with proteinase
activity (casein substrate). On the other hand, the main proteinase (designated as

H2‑proteinase) in the venom was separated from the hemorrhagic activity. These
results indicated that the most part of hemorrhagic activity evoked by the venom was
not due to proteinase. HRIA and HRIB were associated with potent lethal toxicity
in mice.

HRI (A+B) was an acidic glycoprotein having the molecular weight about
60,000, while HR2 (a+b) was a basic protein having the molecular weight of about

20,000. HRI and HR2 were distinguishable immunologically, and they were
inactivated by heat, acidic milieus, EDTA and cysteine, but not by DEP and soybean trypsin inhibitor.

Investigation on the mechanism of hemorrhagic reaction using the great omentumof rat indicated that the spurting of intact erythrocytes occured at the sites of disrupted

basement membrane through junctions of the vascular endotherial cells.

6 MYONECROTIC FACTORS IN HABU VENOMHIROSHI CHlNZEI
Department of Medical Zoology, Faculty of Medicine, Tokyo Medical and Dental University

The kind of snake venoms, which cause myonecrosis, is not so few. We are in‑terested in the sequela found in Habu ( Trimeresurus flavoviridis) bite and assume that

it is mainly based on myonecrosis.

166

A part of the component fractionated using gel‑filtration (Sephadex G‑ 100) was
found to cause primarily myonecrosis, so we have isolated the fraction from Habu

venom with acetone, which had myonecrotic activity without hemorrhagic one, andit was termed myonecrotic factor (MNF). It was observed histopathologically thatMNF began to cause myolysis within one minute after being injected intramuscularly
and was thermo stable. The value of creatine phosphokinase activity in the serumof mouse injected was refered to myonecrosis, because its value corresponded to thedegree of myonecrosis caused by MNF and Habu venom.
Three components (A, B and C) were separated from MNF with zone electro‑
phoresis, and myonecrotic activity was detected in A (MW : 1 4,000) and B, but in‑direct hemolytic activity to the rabbit red blood cell in B and C, besides pH of A
was approximately 9 and that of B was 8. These results indicated that phospholipase
A was B rather than A.

A‑component comprised about 800/0 of MNF (280 mp), and it was thought tohave main and primary myonecrotic activity in Habu venom. However, the activityof MNF was roughly 300/0 of that of the crude venom according to Fukami's method,
and the reasons why that of MNF was low in comparison with the activity of thecrude venom may be as follows : I ) The lowering activity of MNF on isolating
technique, and 2) The multiple actions of MNF and other biological activating
substances.
Generally, the main therapy for snake‑bite is antivenomtherapy, but is it effective

enough to protect myonecrosis ? Our experiments showed that very high potencyof anti HRI and anti HR2 horse serum could not always neutralize myonecrosis
and that the immunogenicity of MNF was not so high. Therefore, we think that
only these two kinds of potency applied now are incomplete in determining thepotency of Habu antivenom for therapy.

7 SWELLING FACTOR
MASANOBU YAMAKAWA AND MASATOSHI NoZAKI
Division of Venomous Snakes, Okinawa Prefectural Institute of Public Health

Swelling activity of Habu ( Trimeresurus flavoviridis) venoms was determined byinjection into the foot pads of mice. The swelling caused by Habu venom developed
quite quickly and reached the maximum in about 30 minutes after injection. How‑ever, hemoglobin content in a mouse leg reached the peak more than 2‑3 hours after
the injection.

Fractionated venoms of HR I , HR 2 and H which were separated from crude
2‑0

Habu venom by Sephadex and Amberlite column chromatography showed potent
swelling effect. The time course curves of swelling of these venoms showed various

patterns with or without hemorrhage. For example, the edema coused by HR 2
recovered more rapidly than that of HR I . It was found that fraction HR I has
much swelling activity as well as hemorrhagic activity. Fraction HR 2 had also

1 67

intensive edema forming effect without hemorrhage 1‑3 hours after the injection,
but it recovered rapidly after 8 hours.
Determination of edema forming activity two hours after injection is more supe‑rior than original method (Yamakawa et al., 1973) which determined after 8 hours,
for the reason of higher sensitivity and enshorterning the experimental time required.
It was demonstrated that there is linearity and parallelism between log doses ofeach frationated venoms and edema ratio. However, the equivalent volume of
mixture of the fractions (such as HR I +H 2‑0' HR 2+H2̲o and HR 1+HR 2
H2̲o) showed synergistic effects of swelling activity with up‑sloF of dosage‑response

curves (slope b = 39‑41) than that of each correspondmg orrgmal venom solutron(slope b = 26‑30). The swelling activity of the other mixture of HR I with HR 2
also increased with certain severity without changing of slope (b=30) from original

venoms.

From above experiments, it was deduced that fraction H2̲o assumed to be theactivator to potentiate swelling effect in Habu venom.

8 THE EFFECT OF PROTEINASE INHIBITORY SUBSTANCE(ISV) ON EDEMA, HEMORRHAGE AND NECROSIS OF
HABU ( Trimeresurus flavoviridis) VENOM

JUNG‑HWN SEU
Department of Chemistry, Agricultural College, Kyung‑Pook National University, Taegu, Korea

Using venom proteinase inhibiting substance (ISV) on the venom of Habu, it
was elucidated that ISV in amount of 30‑240 pg decreased 80 o/o Of necrosis and
60 o/o of edema at maximum induced by 1 20 /lg of the venom without any influenceon hemorrhage by intramuscular method in rabbits (Fukami's method).
A procedure of photometric determination of hemorrhage induced in the mouse
pad by the venom was designed. By this method, it was elucidated that dose‑
response curve in O. D. amount for the hemorrhage was linear in less than 1 5 pgof the venom used.
The results of inhibitory action of ISV on local lesions induced by the venom bymouse pad method indicated that 2.4 or 3.6 pg of ISV decreased lesions of edema
and hemorrhage. Those results suggested that proteinase of the venom is strongly
correlated with necrosis, edema and even hemorrhage due to the venom.

1 68

General presentationl EFFECT OF THERMAL ACCLIMATION ON
CARDIOVASCULAR REFLEXKATSUHIKO TSUCHlYA, NOBU OHWATARI, TAKAAKIRA INOMOTO,MARIKO FUJIWARA AND MITSUO KOSAKA
Department of Epidemiology and Environmental Physiology,
Institute for Tropical Medicine, Nagasaki University

The effect of thermal acclimation on the cardiovascular reflex triggered by
cutaneous thermal reception was studied. Adult Wistar rats were thermally accli‑
mated at lO'C, 24'C and 30'C for more than 4 weeks.
Experiment A : Scrotal skin was heated selectively by a thermode, of which tempera‑ture was changed stepwise 30 C to 42'C (2'C/3 min) in three groups of thermally
acclimated rats anesthetized with sodium pentobarbital (50 mg/kg, i.p., 13 mg/hr/body, i.v.) . Heart rate and blood pressure decreased during scrotal heating, althoughthese decreases were most marked in the scrotal temperature at 38'C in three groups.

The maximal change of heart rate due to scrotal heating was recorded in heatacclimated rats. The minimal change of heart rate was recorded in cold acclimatedrats.

Experiment B : Conscious rats were kept in a small wire‑netted cage (5 cm x 10 cm x

20 cm) individually. Environmental temperature was changed from lO'C to 20'C
and 20'C to 30'C at constant rate of 1'C/3 min and vice versa, respectively. Heartrate was counted continuously on electrocardiogram. An increase in heart rate
was observed during a fall of environmental temperature, while a decrease in heart
rate was observed during a rise of environmental air temperature.

These relationship vanished in rats anesthetized with sodium pentobarbital,
whereas heart rate increased with an increase of rectal temperature. When values ofheart rate were plotted agaist the air temperature, slopes of the regression lines weresteeper in the heat acclimated rats than those in cold ones in warm range of theenvironmental air temperature (20'C to 30'C), while in cold range of the environ‑mental air temperature (lO'C to 20'C), the slopes of the regression lines were steeper
in cold acclimated rats than those in warm acclimated ones.
From these results ofexperiments A and B, it is suggested that these cardiovascularresponses to cutaneous thermal reception in this range are affected in the process ofthermal acclimation.

169

2STUDIES

ON THERMAL−THERMALACCLIMA皿ON

HABITUATION一

MITsuo KosAKA，NoBu OHwATARI，MARIKo FuJlwARA，
KATsuHIKo TsucHIYA AND TAKAAKIRA INoMoTo
DepartmentofEpidemiology

andInstitute fbr TropicalEnvironmental

Physiology，Medicine，Nagasaki

University

Experiments were perfbrmed on conscious rabbits to explore thc mechanism of
thermal acclimation、Blood Hows of local cerebral tissues（hypothalamus and retic−ular fbrmation）and spinal cord were caluculated fヒom the initial slope of hydrogenclcarance curves．In thermally acclimated rabbits（30。C，60％〜ldecrease ofHow rate such as thermal habituation ，was observed．

3THE

MURINE

LICE（ANo肌uR△）FROMKIYoTosHI

KANEKol

Department ofParasitology，Aichi

AND

Medical

HIRosHI

UniversityllO。C，60％〜），

KENYA

SuzuKI2

andDepartmentofVirology，Institute fbr Tropical Medicine，Nagasaki University2

The

first

report oftheAnoplura魚una

Subsequently，papers pertaining

by Kimandincluding2

to theEmerson（1968，1973）．This
generaand5species：1）

Z6Jo∫o処ア3h〃469 zr4α6，2）ノヲ、伽∫87規6漉

of

East

Afdca

reportKello99and

z

made

by

Anopluradeals

Hρμgμ8躍z

wasAf｝icanwithJohnson（1960）．

have been publishedtheAnopluraofKenya，之6Jo孟o梶ア漉5Johnson，Ferris，19150nルfα認o処ア5η碗1960 0nzJ6π認3，

3）Po妙伽α伽5翻6αFerris，19160n。4漉o傭h歪5nぎ厩o麗5，4）P．o凄oηグ廊Cummings，19120n O孟oη往ア∫ケ勿リゴαzあ3，5）P．6麗規窺勉9∫∫Ferris，19160n
sp．on

z46孟ho吻5ん漉3αr歪，6）Po卯」ακz400η往ア3ω記50η砿4PHOTODYNAMIC

SUBSTANCETHEORYIN

THE

MICROFILARIAL PERIODICITY−RHODOPSIN−LIKE
SUBSTANCE IN THE NOCTURNAL MICROFILARIAE一ToMIIcHI MAsuYAI AND
Fukuoka

Cityl

and

KINzo

MAKIsHI2

Department

ofIntemal

Medicine，Faculty

Universityof

Ryukyus2

theofMedicineラ

V．Ahasalreadybeendetcctedinthcautofluorescentgranulesin琢．加7n魏5
by meansofLaser−Raman

analysis

andhistochemistry．The

fluorcsccnce

in

the

1 70

pigment epithelium (PE) of the retina is known to be due to V. A ester. Lambda
max of cattle metarhodopsin 11 is known to be 380 nm and that of N‑retinylidene
opsin (NRO) to be 440 nm in acid and 365 nm in alkali. Microscopic absorption
spectra of fluorescent granules in Mf bancrofti gave I max at 406 nm. Those granules

in earthworm epidermis and in PE ofmouse retina gave max near 414 nm. Those
granules in Mf. and in earthworm epidermis showed a shift of I max by pH (413 nm
in acid, 406 nm in alkali), while those granules in PE showed no shift inmax bypH. The fluorescent granules in the two worms are considered not to be V. A ester
itself. So far as concerned with microscopic fluorescence and spectroscopic findings,
heretofore obtained, the fluorescent granules in the nocturnal Mf, and in earthworm
epidermis were considered to contain certain common substance(s) , containing V. A.
Looking for the similarity among the bleached intermediates of rhodopsin, it wassurmised to be similar to NRO. The noxious effects of such substances, including
rhodopsin, were discussed, refering to the earliest changes in the outer rod segment,
induced by light, by Kuwabara et al (1968) .

5 STUDIES ON FILARIASIS IN MOZAMBIQUE (2)KOICHIRO FUJITAl, TSUTOMU ODAl, AKIO MORll, SETSUKO TSUKIDATE1MASAKATSU UEDAI AND TAKEO ASAKURA2
Department of Medical Zoology, Nagasaki University School of Medicinel andJapan Association for Tropical Medicine2

The basic studies on the filariasis in Mozambique were carried out also in thisyear. We have visited the village where many filarial patients, probably due to W.
bancrofti infection, were found, and collected mosqutoes which appeared to take humanblood meals during 5 to I O p. m. The Mansonia spp. (mainly M. uniformis and small
number of M. africanus) were found most frequently in this year too, and the Anopheles
spp. (mainly A. coustani) and the Culex spp. (mainly C. p. quinquefasciatus) were collected

next to the Mansonia spp. The mosquitoes of Mansonia as well as Culex appeared totake the human blood from 5 p. m., and the most number of these mosquitoes fed
the human blood in 6: 30 p. m. of the time of sunset in this village. The number ofthese kinds of mosquitoes gradually decreased by 1 1 p. m. But, the mosquitoes ofAnopheles appeared about 2 hours later than the appearance of the mosquitoes of
Mansonia and Culex. Some of the mosquitoes were preserved in 700/0 alcohol before

dissection. Among 83 Mansonia mosquitoes, four had 2nd or 3rd stage of larvaeof filaria, but among 37 Culex and 3 1 Anopheles, no larva was observed. The lengthsof the lc larva dissected from the thorax of C. p. quinquefasciatus in the last year and lb

larvae from the thorax and 3rd larva from the abdomen of M. uniformis were com‑pared with those of the larvae dissected from C. p. pallens experimentally infectedwith W. bancrofti in Nagasaki. The length of lc larva was 137 p, while that in
Nagasaki was 136 to 1 70 p. Ib was 248 ,l (220 ‑ 280) in Mozambique, but 187 to 306 p
in Nagasaki, and 3rd larva was 932 p, but longer in Nagasaki, 1,190 to 1,870 p.

171

The blood specimen taken from people living in this village showed two kinds ofmicrofiariae ; one had the sheath and the lengh was 1 60.6 p ( 1 45 ‑ 1 75), and the other

had no sheath and the lengh was 90.3 ke (83 ‑ I 05). The microfilariae obtained fromthe patient suffered from W. bancrofti in Nagasaki had the sheath and was 231.0 p(220 ‑ 240). The filaria of Mozambique was said to be nocturnally periodic formof W, bancrofti, but more detail identification of the two kinds of filariae was necessary

and conducted in our laboratory.

6 EPIDEMIOLOGY OF FILARIASIS IN WESTERN SAMOA‑‑STUDIES ON MICROFILARIAL PREVALENCE AND
DENCITY (MFD‑50)

EISAKU KIMURAl, L. PENAIA2 AND G F S SpEARS3
Department of Parasitology, Institute for Tropical Medicine, Nagasaki Universityl,

Filariasis Project, Department of Health, Government of Western Samoa2 andDepartment of Preventive and Social Medicine, Medical School, Otago University3

WHO/Samoa Filariasis Research Project has conducted microfilarial prevalenceand density studies of diurnally subperiodic bancroftian filariasis in Western Samoa

from November 1978 to November 1979.
28 sample villages were selected so that they would be representative of the whole

Samoa. A total of 9,745 people, roughly 6 o/o Of the total population in Western
Samoa, was covered by the study. Of these, 8,385 people were actually examinedby the conventional 60 mm3 finger‑prick blood smear method (FP method hereafter)

and/or I ml Nuclepore membrane filtration method (NP method hereafter) whichused I ml of venous blood.
The overall positive rate in Western Samoa was 4.50/0 by the NP method (381
positives) and 3.80/0 by the FP method (315 positives), implying that the FP method
resulted in some 1 7 o/o false negatives. In four villages, their prevalence rates exceeded

1 O o/o' The analysis of age‑sex distribution of the positive cases revealed that the
average prevalence of males was 2.3 times higher than that offemales, i.e., the males
accounted for 700/0 (270 cases) of the total positives, and that the positive rate among

adult males of age 30 and upward was as high as 200/0' The youngest carrierfound was a 3‑year‑old girl.

Microfllarial density (MfD‑50) was analysed by sex and age. The relationshipbetween village prevalence rate and MfD‑50 was also studied. The results of thesestudies indicated that MfD‑50 in 1979 was 18.6 (male : 21 .4, female: 14.2), that there
was no relation between the positive rate of a given age group and the corresponding

MfD‑50 and that the MfD‑50 moved in parallel with the village prevalence rate.
In analysing a frequency distribution of microfilarial counts in a population,
Pichon et al. ( 1 980) proposed the application of truncated negative binomial distri‑bution (BN). The BN was fitted to the data obtained by the NP method using avalue of the exponent of 0.3 as recommended. The fit to the data was excellent,1 72

whereas the fit of the more customary log‑normal distribution was not good. Having
fitted the BN, it is possible to determine the size of the class with zero count, i.e., thefalse negatives. The number of these was estimated as 36.7, which was about 90/0of the total cases in the survey population when the NP method was used.
A similar form of analysis was carried out upon 3 1 5 positives detected by the
FP method. This time, the estimated number of false negatives was 100.6, which
was about 260/0 of the total positive cases. This figure will be confirmed by the facts
that the FP method resulted in 1 70/0 false negatives and that if the number positiveby the NP method is inflated by 90/0 to allow for false negatives due to that method,then the percentage of false negatives by the FP method will be 260/0'

7 A LARGE SCALE MALARIA IMMUNOFLUORESCENTTEST STUDIED FOR MEASUREMENT OF LOWEREDMALARIA ENDEMICITY FOLLOWING FENITROTHIONSPRAY IN HAITIMAMORU SUZUKll, V. JEAN‑FRAN901S M. R. HILAIRE2
AND L. LAFONTANT JR.2
Department of Parasitology, Gunma University School of Medicinel and
SNEM, Republic of Haiti2

New anti‑malaria operation since 1979 using fenitrothion resulted in a successful

reduction of morbidity in SUMIT 111 region in Zone 111, Haiti. Usefulness ofindirect immunofluorescent test on serum specimens taken from inhabitants in Zone
III was studied during December 1981, because malaria transmission rate is highest
in December, in Haiti. In totalling 447 blood specimens were collected by filter
paper method from highly endemic uncontrolled area (Vincendron, 1 60 specimens),

from low endemic area (Navarre, 151 specimens), and also from well controlledmalarious area (Worf Messe, 1 36 blood specimens). Parasite rate in the examined
3 Iocalities was 49/1 60 in Vincendron, I / 1 5 1 in Navarre, I /1 36 in Worf Messe. Hencethe difference of malariometry between Worf Messe and Navarre was not shown byparasite rate, whereas, characteristic epidemiological features of the 3 Iocalities weredifferentiated clearly by indirect immunofluorescent antibody test. Frequency distri‑butions of titers by IFAT demonstrated that the titer higher than I : 1 60 was specificand significant. In Worf Messe, blood from 64.70/0 Of examined inhabitants had no
significant level of specific antibody. Levels of anti‑malarial antibody was I : 1 60
or greater in 23.50/0 Of these examined population. In Navarre, the serosurvey re‑vealed that 93.3 o/o Of the collected blood specimens had insignificant level of antibody

and only I .30/0 of the blood specimens had significant titer of antibody. In highly
endemic Vincendron, frequency of insignificant ( I : I O) titer decreased to 320/0' and76.90/0 Of examined specimens were as high as I : 160 ‑ I : 10,240. Comparative
study at each age groups in respective localities indicated that in the studied localities

so far, evaluation by parasite rate might be replaced by indirect immunofluorescent

173

test which was much more sensitive to make surveillance of epidemiological aspectsof malaria and derive some detailed information after effective insecticide spray.

8 ISOLATION OF DENGUE VIRUSES IN INDONESIAAKIRA IGARASH11, NOBUYA FUJITA2, YOSHINOBU OKUN03
TSUTOMU ODA4, YOSHlNORI FUNAHARA5, AKIRA SHIRAHATA6HARUKI IKEUCH17, SUSUMU HOTTA8, AGUS SUJAHRURAHMAN9SUMARM09 AND SUJUDI 9
Department of Virology, Institute for Tropical Medicine, Nagasaki Universityl

Department of Microbiology, Kobe University School of Medicine2, Depart‑
ment of Preventive Medicine, Research Institute for Microbial Diseases,
Osaka University3, Department of Medical Zoology, Nagasaki Uni‑
versity School of Medicine4, Department of Physiology, Kobe
University School of Medicine5, Department of Pediatrics,
School of Medicine, University of Occupational andEnvironmental Health6, Department of Pediatrics,
Kobe University School of Medicine7, Interna‑
tional Center of Medical Research, Kobe
University School of Medicine8 andIndonesia University, School of
Medicine9

During epidemic seasons of dengue hemorrhagic fever (DHF) in 1981 and 1982,
isolation of viruses were performed from peripheral blood of DHF and fever of un‑
known origin (FUO) patients as well as from vector mosquitoes collected in Jakarta,
Indonesia. In 1981 , 20 strains ofdengue viruses (type I , 2, and 3) were isolated from

FUO. In 1982, 2 strains of dengue viruses (type 3) from DHF, and 3 strains ofdengue viruses (type 2 and 3) from FUO patients were isolated, whereas 2 stains oftype I dengue viruses were isolated frorn Aedes aegypti.

174

9 EFFECTS OF BIOLOGIC ACTIVATORS ON THE
MULTIPLICATION OF DENGUE VIRUSES IN MOUSEPERITONEAL MACROPHAGE CULTURES

HAKU HOTTAI AGUS S. WIHARTA2, SUSUMU HOTTA3
AND MORlYASU TSUJ14
Department of Microbiology, Kobe University School of Medicinel, Department ofMicrobiology, Faculty of Medicine, University of Indonesia2, International Centerof Medical Research, Kobe University School of Medicine3 and Department of
Parasitology, Hiroshima University School of Medicinef

Cultures of peritoneal macrophages (Mo) from mice (BALB/C, 7‑12 weeks old)
are of comparatively low susceptibility to infection of dengue virus (DENV) . Whentreated with certain biologically active susbstances, e.g., phytohemagglutinin (PHA),
Salmonella enteritidis lipopolysaccharide (LPS), bacterial cell wall preparations andtheir subcomponents, however, the Mo cultures produced larger amounts of DENV
than those produced by control non‑treated cultures. The enhancing effect forvirus production differed quantitatively from one substance to another, while there

was a tendency of what could be called dose‑response relationship between theamounts of substances administered and viruses produced. Pokeweed mitogen(PWM) and concanavalin A (conA) were not effective and carrageenan suppressedthe viral multiplication. Parasitic antigens from Ascaris suum. Parascaris equorum andAnisakis larvae also showed the virus production enhancing effect. In the cultures
treated with those active substances, numbers of 'infective centers' and positive anti‑

DEN immunofluorescent Mo's increased compared with those in control non‑treatedcultures. When Mo cultures from mice immunized with DENV of a particularimmunologic type were inoculated with DENV of a different type, titers of the lattervirus newly produced were significantly high compared with that in control culturesfrom non‑immunized mice. Essentially the same results were obtained in experiments

similarly conducted using athymic nude mice (BALB/C nu/nu).

lO ON THE CYTOPLASMIC INCOMPATIBILITY IN
NATURAL POPULATIONS OF Culex pipience

COMPLEX IN CHINA, ,J ‑OSAMU SUENAGAI WEI‑DE LIU2 IAN WU MIA02 AND WEI Xu2
Reference Center, Institute for Tropical Medicine, Nagasaki Universityi andShanghai Institute of Entomology, Academia Sinica2

To make clear the crossing types of natural populations of Culex pipiens complex
in Ohina, field survey and crossing experiments were made in Shanghai from August175

1981 through July 1982. An earthen jar of about 18 Iitters in size and containing
wheat bran solution was set up as an ovi‑trap for house mosquitoes in a corner of apark in Shanghai. A11 egg rafts of Culex pipiens complex which were deposited on thewater surface in the jar were picked up every morning and incubated for 2 or 3 daysin a polyethylene cup of 90 ml separately in an insectarium of 27'C for observations of
the hatching conditions. Some of the egg rafts hatched were reared for several gener‑

ations separately in the insectarium for crossing experiments. Although 1,228, or
98.60/0' out of 1,245 egg rafts of Cx. pipiens complex collected have hatched well, 1 7
egg rafts produced no larvae or few larvae. Five out of I O egg rafts unhatched havecontained some developed eggs respectively, and the others have not developed.
The appearance of unhatched egg rafts containing some developed eggs in the fieldsuggest that the egg rafts have been laid by females which mated with incompatible
males. The results of the crossing experiments with many Chinese strains and someJapanese strains of Cx, pipiens complex are as follows : All Chinese strains examined

were compatible each other, although the females of a Fuzhou strains were incom‑
patible with the males of Zhabei and Hexian strains. An Okinawa strain of Cx.
pipiens quinquefasciatus and a Nagasaki strain of Cx. pipiens molestus were incompatible

with Fuzhou, Hexian, Guangzhou and Fushan strains of Cx. pipiens quinquefasciatus.
The females of a Nagasaki strain of Cx. pipiens pallens were compatible with the malesof 6 Chinese strains except Hexian, but the males of the same strain were incom‑
patible with 6 Chinese strains except Zhabei. A11 of 1 5 Chinese strains examined
and also used for the crossing experiments have been heavily infected with wolbachiae
respectively.

1 1 NEUTRALIZING ANTIBODY RESPONSES OF CHILDREN
ADMINISTERD WITH JAPANESE ENCEPHALITIS VACCINE
YOSHlNOBU OKUNO1, MASAYUKI TADANO1RONG‑FENG JUANG1TOSHIHIKO FUKUNAGA1, KONOSUKE FUKAll AND AKIRA YAMADA2
Department of Preventive Medicine, Research Institute for Microbial Diseases, Osaka
Universityi and Department of Pediatrics, School of Medicine, Osaka University2

In recent years, the cases ofJapanese encephalitis (JE) have been decreasing inJapan. The pervason of the JE vaccination among the school children may beconsidered to be one of the reasons of the decrease. However, JE is still one of the
big public health problems in some Asian countries, where the administration ofJE
vaccine have not been practiced on a large scale.

The current JE vaccine employed in Japan is prepared with the Nakayama
strain and the antigenicity of the strain may not be the same as those of the wild
strains ofJE virus. To compare the antibody responses against wild strains and thatagainst the homologous Nakayama strain, we have administered the current vaccine tochildren and their immune responses were examined by titration of the neutralizing
antibodies against three JE virus strains ; the Nakayama strain and two wild strains

1 76

ofJaGAr‑OI and E‑50 strains. The children were given two shots of the vaccine in
an interval of one month and were bled three times, the first bleeding before the first
vaccination, the second bleeding before the second vaccination and the third bleeding

one month after the second vaccination. The number of the vaccinees who had
had no antibody against JE before the first shot and bled one month after the second
vaccination was 70. The distribution patterns of the neutralizing antibody titers of

the third bleeding specimens against E‑50 and JaGAr‑OI strains appeared to be
similar but the distribution pattern of the titers against the Nakayama strain revealed
to be apparently shifted to the higher titers than those of the formers. The geometricmean titers (GMT) of the neutralizing antibody titers against E‑50 and JaGAr‑O1
strains were I .7 and I .9 in logarithm, respectively, and the GMT against Nakayama
strain was 2.9.

The number of the vaccinees who were bled for all three times were 27. Mostof them showed considerably high immune response after the first vaccination andonly one failed to show the seroconversion against the Nakayama strain. How‑ever, the antibody response to the E‑50 strain after the first vaccination appeared to

be rather low and 9 of 29 children did not show the seroconversion. Against the
JaGAr‑OI strain, 3 of 27 children failed to show the seroconversion. The results
indicate that two shots, at least, of the current vaccine is necessary to provoke theeffective immune responses to the wild strains ofJE virus for the initial immunization.
A neutralizing antibody titer of I : 10 that is 1.0 in logarithm, is considered to beeffective to prevent JE virus infection. Therefore, the results mentioned above
indicate that the current vaccine is effective not only against the homologous Naka‑yama strain but also against the wild strains ofJE viruses.

12 ECOLOGY OF ENTEROVIRUS IN TROPICAL AFRICA
III. INTRATYPIC ANTIGENIC DIFFERENCES
OF POLIOVIRUSESSINROKU OTATSUME
Department of Bacteriology, Fukushima Medica] School

Neutralizing kinetics of polioviruses isolated in West Africa was tested using

McBride method.
Neutralizing coeflicients of type I polioviruses differed from the virulent standard

strain, Mahoney strain. Therefore, those isolates were decided as heterologous.
Meanwhile, most of type 2 seemed to be intermediate, and type 3 were found to behomologous.

177

130N

BIONOMICS OF・4θ吻8αegγp面AND・4e伽8αεゐoμc伽
W皿H THE DATA ON THE VIRUS ISOLATIONIN JAKARTA，INDoNEsIA

TsuToMu

ODA1，AKIRAIGARAsHI2コSusuMu

HoTTA3，S．DJAKARIA4

ANDR．HOEDOJO4
DepartmentofMedical

Virology，Institutefbr

DengueZoology，Nagasaki
fbrUniversity School ofMedicine1，Departmentof

Tropical Medicine，Nagasaki University2，Intemational Center

Medical Research，Kobe University School ofMedicine3and Department of
Parasitology，School ofMedicinc，University ofIndonesia4

fbver

in

Southeast Asia

isgenerallytransmitted

by／46伽α6蹉あand■6．励吻ぬ∫、To know the habitat and distribution of thcse mosquitoes，collections
were made in certain areas ofJakarta City fbr about one month fヒom the middle ofJanuary1982．In addition，isolation of viruses was attempted fヒom the collected
免males ofα6翻あandα1ウ⑳6渉郷by inoculation toα必ψJo嬬clone C6／36cells．A small
numberofα68フ卿免males were caught indoors，butThe

immaturethanoutside．The

such as bak

On

the

stagesor

glass

handフmanycollected only
containers suchspecies

important

mandi

other

ofthiswere

breeding
floweralso

they were

fbund

placesmore

immature

stagesmajor

outdoors．

insideofhouscsfbrα6翻あwere artificial containervases indoors，and

outside of houses．Their

scarcely fbund

abundantly

tins

and

carthemjars

outdoors．

and adults ofα伽μ吻5were usually
brceding

sites

were

small

artificial

as tins．

Dengue virus of typc l and unknown virus were isolated fヒomα6翻あandα」一加μ蜘5，respectively． The results of this investigation showed that∠46．α6翻あis thep血cipal vector of dengue琵ver，but it is probable that。46。α16吻o伽免malcs
transmits this disease inJakarta，as they are commonly fbund．

14TOXO肌ASMA

ANTIBODY

IGG・肌ISA AND A
SPECIFIC

TERuYuKI
Department

Toxoplasma
thc

Dye

theDyetest

Medicine，Instituteantibody

BY

TOXOPLASMA

IGM MEASUREMENT

measuredbyfbr

TropicalMedicine，Nagasaki

University

was

with

IgG−ELISA

compared

thatofIHA．We chose70sera which distributed evcnly in cvery titcr oftest．Thuswe
Kit

OF

MIYAzAKI，KENJI TsucHIHAsHI，HIRosHI SuzuKI，
HIToMI NAKAsHIMA AND KElzo MATsuMoToofIntemal

and

MEASUREMENT

STUDY

also

examined

elisa

Test

Toxo

HA・KW manu魚cturcd

manu魚ctured

samples

by肌ISAand

IHA．Weused

by

M．A．Bioproducts

in

order

perfbrm

by

Kyowa

to

the

Toxo−

ELISA

and

Product in order to perfbrm IHA．The

1 78

results showed that ELISA was the same as the Dye test and better than IHA in
sensitivity at low titers. Also ELISA was superior to IHA in detecting antibody
titer change. But we had to dilute serum in high titer range in ELISA, because theantibody titer according to ELISA didn't rise in accordance with that shown by IHA.
In order to detect Toxoplasma lgM we used the IHA method after treating theserum with Protein A. In this way we found 1 1 samples which probably had Toxo‑

plasma lgM. These Protein A treated samples showed no lgG in the Hyland Laser

Nephelometer. But with the sucrose gradient method we detected Toxoplasma
antibody with IHA in the lgG fractions. Therefore we supposed that rise of the
IHA titer with Protein A treated serum was caused by a little remainder of lgG orby a nonspecific reaction.

15 A CLINIC0‑IMMUNOLOGICAL STUDY OF THE
RELATIONSHIP BETWEEN FILARIAL CHYLURIA
AND TOXOPLASMOSISTOSHIAKI YOSHIDA, MASASHI YAMAMOTO AND KEIZO MATSUMOTO
Department of Internal Medicine, Institute for Tropical Medicine, Nagasaki University

We have studied clinico‑immunological relationship between hypercellularimmunity and toxoplasma infection in filarial chyluria. Toxoplasma antibody wasmeasured by the IHA method in 36 cases with filarial chyluria.
Toxoplasma antibody titer was positive in 38.90/0 of these cases. The positive
rate of toxoplasma antibody in these cases was significantly higher than in cancer andpregnancy. In chyluria patients whose toxoplasma antibody titer was positive, thenumber of lymphocytes and T cells, as well as lymphocyte blastformation was signifi‑
cantly reduced, but there was not a significant difference on the PPD and PHA skintests. Overlapping of markers (Lymphocyte, T cell, Lymphocyte blastformation)
resulted in an increase of toxoplasma infection.
Therefore, these results suggest that hypocellular immunity in filarial chyluria
results in toxoplasma infection.

1 79

16 B･ngia pahangi = ANTIBODY RESPONSES TO ADULTWORMS AND MICROFILARIAL ANTIGENS IN MONGOLIANJIRDS AND HUMAN CASES AS MEASURED BY THE
ENZYME‑LINKED IMMUNOSORBENT ASSAYMASAHIDE TOMISATO1, YASUO NAKAZIMA2 AND SADAO NoGAM13
Department of Medical Zoology, Faculty of Medicine, Tokyo Medical and Dental
Universityl, Department of Parasitology, Yamanashi Medical College2 andDepartment of Parasitology, Institute of Medical Science, The

University of Toky08

The antibody (IgG) of the serum from jirds infected with B. pahangi or humancases of various parasitosis was detected by ELISA using crude extracts of adult worms(Ad) or microfilariae (Mf ) of B. pahangi recovered from the peritoneal cavity ofjirds as antigen. I ) A11 jirds younger than 30 months had the antibodies against
Ad and Mf antigens for 6‑24 months after an inoculation of B. pahangi. No signifi‑
cant difference of antibody titers between anti‑Ad and anti‑Mf was observed. A
small part ofjirds older than 30 months with Ad and Mf had no antibody detectedby ELISA because of a emaciation due to chronic infection ofparasites. 2) Although
the titers of anti‑Ad antibodies were parallel to those of anti‑Mf antibodies in jirds,
after the absorption by the male adult worms extracts, the titer of anti‑Ad became asixteenth, and the titer of anti‑Mf became a third. It indicates the possibility that
there is a part of Mf antigens different from Ad antigens in point of antigenic deter‑minants. 3) There was no significant difference of antibody titers among the groups
ofjirds divided by the numbers of worms recovered. And no differences of antibody
titers against Mf between microfilaremic and amicrofilaremic jirds was observed.
4) The comparison between subcutaneous and intraperitoneal inoculations indicatedno difference of antibody responses between them. 5) The transient decrease ofantibody titers in the course of infection by an intraperitoneal inoculation occured
just after the first Mf appearance in the peritoneal cavity ofjirds, it seems to be causedby antibody consumptions. 6) The sera from the human cases infected with W.
bancrofti, Loa loa or Gnathostoma spinigerum had antibodies cross‑reacting against Ad
and Mf antigens of B. pahangi. The serum of the patients infected with Schistosoma
japonicum was weakly positive. In these positive cases, the titers of anti‑Ad antibody

were higher than those of anti‑Mf antibody except the cases of W. bancrofti withmicrofilaremia. The patients with Anisakis (Type I ) , Strongyloides stercoralis. En‑
tambeba histolytica or Echinococcus multilocularis had no antibody cross‑reacting by ELISA.

1 80

17 IN SITU MICROFLUOROMETRY OF K‑DNA AND
N‑DNA IN Trypanosoma (IV)SHOZO INOK11, HUMIO OSAK12 AND MASATO FURUYA3
Department of Parasitology, Nara Medical Univcrsityl, Kochi Medical Scho012
and Department of Parasitology, School of Medicine,

The University of Tokushima3

Utilizing the half dry method and the photon counter for cell fluorescence,
Inoki and his associates first revealed that 40 mg/kg nifurtimox (LampitR) caused nobreak damage to either K‑DNA or N‑DNA in each bloodstream form (trypomasti‑gote) of T. cruzi.

In this study, similar experiment was attempted in order to determine if an in‑creased dose of nifurtimox, 80 mg/kg, would effect on the DNAS but this observation
also failed in showing the strand break in DNA, although it was a sufficient dosage
to save the fatally infected mice from their death. Further studies are needed toreach the final conclusion.

18 EFFECT OF FLUBENDAZOLE ON Angiostrongylus
cantonensis IN MICE AND RATS
JUN MAKI AND TOSHIO YANAGISAWA
Department of Parasitology, Kitasato University School of Medicine

Angiostrongylus cantonensis, a nematode parasitic in the pulmonary artery andheart of wild rats, has been recognized as a causative agent of eosinophilic meningo‑

encephalitis in Japan as well as Formosa, Southeast Asia and some Pacific islands(Alicata, 1965, Adv. Parasit, 3, 223‑248; Yii, 1976, Jap. J. Parasit., 25 (Suppl.), 26;

Kojima et al., 1979, Amer. J. Trop. Med. Hyg., 28,36‑41). In spite of the medical
importance of this nematode and many attempts to search for suitable chemothera‑
peutic agents, no results have been obtained until now without leaving anything to
be desired. In the present studies, mice and rats experimentally infected with A.
cantonensis have successfully treated with flubendazole (Fb).
Fifty 3rd‑stage larvae isolated from experimentally infected Biomphalaria glabrataby peptic digestion (1pepsin/1 o/o HC1) for 3 h at 370C were given orally with theaid of a stomach tube to each mouse (ddY or ICR strain) or rat (Wistar). The
infected mice and rats were divided into experimental and control groups of 4 to 7
mice or rats. These animals were orally given flubendazole suspended in I O/o Tween
80 (W/V) at the dose of 5, lO, 50 and 100 mg/kg/day for 3 consecutive days (5‑7,
10‑12 or 15‑1 7 days post‑infection) or 6 consecutive days (5‑lO days post‑infection).

In sQme experiments, thiabendazQle Qr mebendazQle was additionally examined for181

comparison. The control mice were given I

Tween 80 alone. The brains removed

from the crania of mice killed by cervical dislocation and lungs and hearts from rats
were closely scrutinized for the larvae under a dissecting microscope usually 4 6days after the termination of drug administration (mice) or 60‑63 days post‑infection(rats). In the prophylactic study, oral administration of Fb at the dose of 50 mg/

kg/day was made for 3 days before infection. The necropsy was performed 13‑15
days post‑infection.

Results obtained in mice were as follows. Fb, griven 5‑10 days post‑infection,
has been found to have high anthelmintic efficacy on larval A. cantonensis even when
the dose is as low as 5 mg/kg/day for 6 consecutive days. Several larvae have beenfound moving in or on the brain of the control mice and the mice treated with thi‑abendazole at the dose of 10 mg/kg/day for 6 consecutive days, while no larvae havebeen found in the brain of the mice medicated with Fb. Fb given 5‑7 or l0‑12 days
post‑infection (10 mg/kg/day) has also been found to have high anthelmintic efficacy
on larval A. cantonensis. The effect of mebendazole given 5‑7 days post‑infection at

the dose of 10 mgjkg/day on the larvae has been comparable to that of Fb. How‑ever, no difference between the worm recovery of the experimental and control grouphas been recognized, when Fb is given 15‑1 7 days post‑infection at the dose of 10 mg/
kgjday. No prophylactic effect of Fb on the infection of mice with A. cantonensis has
been found so far as the present experiment is concerned.
Results obtained in rats were as follows. Fb and mebendazole, given 5‑7 days
post‑infection, have been found to show complete anthelmintic efficacy at the dose oflO mg/kg/day for 3 days. Fairly high anthelmintic efficacy (worm reduction was
740/0) was seen in the rats treated with Fb at the dose of 10 mg/kg/day 15‑17 days
post‑infection. Fb was given also to rats 35‑37 or 47‑49 days post‑infection at thedose of 10 mg/kg/day. In these groups, however, no efficacy was seen.
In conclusion, Fb was found to be effective in the treatment of A. cantonensis inmice and rats, when it was administered to these animals within 15 days post‑infection.
The LD50 of Fb in acute toxicity tests has been more than 2,560 mg/kg in albino mice(Thienpont et al., 1978, Arzm. ‑Forsch., 28, 605‑612). And no side effects with re‑spect to blood pictures, Iiver function tests and other clinical symptoms have beenfound in adult Southeast Asian refugees in Japan infected with Trichuris trichiura andgiven Fb at the dose of 1.5 g/day for 5 days (Tateno et al., 1981, Jap. J. Parasit., 30,
485‑496) . Therefore, Fb is probably a drug of great potential utility in the treatmentof human angiostrongyliasis.

182

19 BlOLOGICAL ACTIVITIES

OF

THE

EGG

EXTRACTOF

sc肋 oεo㎜αノ叩oηεc砧η30N LYMPHOCYTESAKIRAIsHII1，CHIEKo
AND

KAwAGoE1，TosHIKo

Kozo

Department ofParasitology，Miyazaki

Veterinary

Lymphocyte
cariaeblastogenesisof36h∫5∫050撹αプ

MedicalCollegel

Pathology，University

was

YATANIlAsHIzAwA2
and DepartmentofofMiyazaki2

examined in BALB／c mice in驚cted with30cer−

ψo競麗7η．Spleen

cclls

and

mesentericlymph

node（LN）cells

were exposed to antigens or mitogens af㌔er7＿14weeks ofin免ction．Uptake of3H−
thymidine by the spleen cells occured in the order of stimulantsl egg antigen（SEA一笥），conA，adult worm antigen（adult一笥）and egg antigcn of S．規侃50痂（SEA−
Sm）．That of by LN cells was in the order of conA，adult一局，SEA．局and others．
The reaction was stronger in CBAσmice with3．プ ψoπ蜘7ηin色ction．The order fbr
spleen cells were SEA一局，adult一笥，SEA−Sm，conA and mite antigcn．The orderfbr LN cells were conA，SEA一笥，and mite antigen．BALB／c mice in驚ctcd withSoh∫5∫050規α 規απ50漉 showed lesser reaction values、 Pathological findings werecompared in T−cell deficient BALB／c nude mice in免cted with30cercariae of5しゴα一ρo肋徽with that ofnormal BALB／c mice afヒer loweeks ofinfヒction．Granuloma sizein the liver was smaller（198μm in average）than normal mice（320μm）．Ccllular
reactions and fibrosis were weak and eosinophil was rare．However，necrotic Hnding
in the parenchymal cells was rather conspicuous．Findings in the intestinal egg
granuloma were

the

same

as

above

and

necroticchangeinthe inner

layer

was

con．

spicuous．Colony fbrming activity of the bone marrow cells was stimulated by thesupematant fluid ofspleen cells and the egg antigen，but the activity was not induced
by

the

egg

interaction

antigenbetweenitsel￡ Thesethebiologicalactivities

are

and

egg

ofS．ブψon蜘η2．

lymphocytes

theextract

reported

201MMUNOELECTROPHORETIC ANALYSISTOXO肌ASMA ANTIGENS BY USING MOUSE
OF EXPERIMENTAL TOXO肌ASMOSISKENYIcHI YANo
Department

AntigensofProtozoology，ResearchInstituteof7㌃κ曜α辮αgoη疏（Toxo）have

Anti．Toxo−R

was

was got

obtaine（i丘om
af㌔er4weeks

OF

SERA

AND TosHIo NAKABAYAsHI
fbr

been

Microbial

mice

f｝om

mice

Diseases，Osaka

University

investigated in mouse

tal toxoplasmosis with anti−Toxo sera obtained f｝om
strain（virulent）and S−273strain（10w virulent）．

Anti．Toxo−S

as the results ofin琵cted

mice

with

in色ctedS−273strain

which had been primarily

experimcn．

with

Toxo，RH

after4weeks．
in飴cted with

183

Toxo S‑273 strain, and then 4 weeks later, RH strain.

These mouse anti‑Toxo sera did not precipitate reactive mouse substances
which were produced in ascites by stimulation of Toxoplasma infection.
Anti‑Toxo‑S was I : 5 1 2 as the titer of latex agglutination test (LAT) and anti‑

Toxo‑R was I : 16,384.
Anti‑Toxo‑S and anti‑Toxo‑R precipitated No. 2, 4, 5, 6, 7 and 9 antigen, andrecognized the same toxoplasma antigens contrary to their different virulence. The
mice from which anti‑Toxo‑R was obtained could resist to the rechallenge of Toxo,

RH strain (107/mouse). Anti‑Toxo‑R produced a wholly fused line near trough,and would probably react to the carbohydrate part of Toxoplasma antigens and besignificant for toxocidal state of mice.

21 POSSIBILITY OF THE VERTICAL TRANSMISSIONTO FETUSES IN MICE INFECTED WITH
Babesia rodhai i

HIROAKI TAKAHASHI AND NAOYOSHI SUZUKI
Department of Veterinary Physiology, Obihiro University

To examine the vertical transmission of B. rodhaini to fetuses form the acute or

subchronical infected mothers, mice were inoculated with approximate I x 102
parasitized erythrocytes intraperitoneally. In general, all mice died within 2 weeks
after inoculation. Parasite isolation from infants was made by inoculating pooledmaterial consisting of the infant organs into mice intraperitoneally and by examining
parasitemia and mortality in these mice thereafter. In results, neither parasite wasisolated nor mouse was died in all cases. In cosequence, the authors presumed thatthe vertical transmission of B. rodhaini might not be found in mice.

22 EFFECTS OF CULTIVATING CONDITIONS ON THE
LIPID COMPOSITIONS OF Trypanosoma cruzi

YOSHIMASA KANEDA, KOICHI NAGAKURA, HIROSHI TACHIBANAAND TOYO CJOHTSU
Department of Parasitology, School of Medicine, Tokai University

Very few studies have been done so far on the lipid metabolism of Trypanosoma
cruzi ( T. cruzi) . We have investigated the influences of cultivating conditions on lipid

composition of T. cruzi. Lipids were extracted according to the method of Folch
et al. ( 1 957). The separation of neutral and phospholipids in the total extracted
lipid was acomplished by thin‑layer chromatography. The individual fractions of1 84

neutral and phospholipids were removed from the appreciate areas of the plates
and estimated by the method of dichromate reagent or phosphorus determinants,
respectively. The percentage distribution of neutral and phospholipids fractions
was observed throughout the growth of T. cruzi in Liver‑Infusion‑Tryptose medium.
The results show the similarity in percentage distribution of neutral lipids throughout
the growth, being sterol‑ester, triglyceride and sterol the three major components.

Free fatty acids and diglyceride are detected in minor amounts in the exponential
and stationary growth phases. The distribution of phospholipids showed similar
pattern during the growth of culture.
In order to determine the influence of long chain fatty acids of the environment
on lipid composition ofthe organisms, T. cruzi cultured in basal medium supplmented
stearic, palmitic and linoleic acids in place of calf serum, hemoglobin and liver in‑fusion. In this case, the percentual distribution of neutral and phospholipids did
not vary significantly. Next, the composition of fatty acids of total lipid from theorganisms was checked by gas‑1iquid chromatography. It was observed that theratio of 18: 2 which was the major component in total lipids from the cultures instearic and palmitic acids, decreased as compared with the cultures in defatted
albumin, Iinoleic acid and LIT medium. These differences in the ratio of fatty acids
may be related to the metabolic functions of the parasites.

23 FURTHER ANALYSES OF HEALTH STATUS OF
INDO‑CHINA REFUGEES IN YAMATO REFUGEE
CENTER, KANAGAWA PREF., JAPANNAOHITO YAMAGUCH11, KEIZO ASAM12, TSUTOMU TAKEUCH12SEIKI KOBAYASH12, SACHIO MlURA2, KOJI KAWAMURA2
AND SEIKI TATEN03
Department of Public Health, School of Medicine, Keio Universityl, Department of
Parasitology, School of Medicine, Keio UniversityB and Yamato City Hospital3

Since the Refugee center was opened in 1 980, more than I ,OOO refugees haveentered Japan to settle in this country. Our previous health examination of theseimmigrants at Yamato City Hospital have demonstrated numerous problems withregard to their health status. In particular, parasitic infections seemed most impor‑tant. More than 750/0 Of the immigrants were found to be infected with at least one
species of intestinal parasites. Among the parasites detected, hookworms, Opisthorchis
viverrini and Trichuris trichiura exhibited high prevalence rates. In the present study,a relationship between hookworm infection and anemia, the major complication of
the infection, was investigated. Our statistical analyses indicated that Hb content
and hematocrit were significantly lower with the immigrants infected with hookworms.
It was also demonstrated that infection with hookworms, Strong̲yloides stercoralis.
Hymenolepis nana and Rhabditis sp. resulted in the higher prevalence of eosinophilia.
In regards to liver function tests, we have found many immigrants with abnormally

185high serum alkaline phosphatase (ALP) activity. Since we have not analyzed iso‑enzymes of ALP, it is not known what contributed to the increment of activity. At
present, however, our principal cornponent analysis and multiple regression analysis
suggested that approximately 750/0 of the increment of ALP activity was attributable

to the isoenzyme from liver. Moreover, because many Cambodian immigrants,
who only exhibited significant increment of serum ALP activity, were found, we feelthat further characterization of the incrernent of this enzyme appears to be needed.
We are currently analyzing other data in more detail and trying to improve our systemof health examination of Indo‑China refugees.
This study was partia,lly supported by the research grant from the Toyota Foun‑dation.

24 HEALTH STATUS OF INDO‑CHINA REFUGEES AS
EXAMINED AFTER THEIR SETTLEMENT IN JAPANSEIKI TATENol, TSUTOMU TAKEUCH12, SEIKI KOBAYASH12
SACHIO MIURA2, KOJI KAWAMURA2, KEIZO AsAM12

AND NAOHITO YAMAGUCH13
Yamato City Hospitall, Department of Parasitology, School of Medicine, Keio Universityz

and Department of Public Health, School of Medicine, Keio University3

Approximately 2 years have passed since the Japanese Government constructed

and opened Yamato Refugee Center in Yamato City, Kanagawa Prefecture. Up
to the end of this March, 423 immigrants (male : 230 ; female : 1 93) have flnished theircourses in the Center, and started their settlement in Japan. In order to knowhea]th status of the immigrants after settlement in various areas of Japan, we have sent

questionnaires to employers of the immigrants, and collected blood and stool fromthem. The questionnaire was written in their mother languages, and was composedof 78 questions with regard to status of daily life and health. In a few months, morethan 700/0 of the immigrants replied. Subsequent analyses of these replies indicatedthat 64.80/0 of them had consulted with doctors due to common cold, abdominal
pain, tooth ache and trauma. The frequency ofconsultation with doctors was signifi‑
cantly lower with Laotian immigrants and those of I O‑ 1 9 years of age. Approximately
550/0 of the immigrants complained of repeated common cold, and 40 o/o had shoulder
stiffness, dizziness and tooth ache. The prevalence rate of intestinal parasites de‑creased to 5 1 .60/0' However, that of OpisthoTchis viverrini was found to be still high,which made the prevalence rate of Laotian immigrants significantly higher than thoseof other immigrants of different nationalities, although the number of eggs of thistrematode in stool was lowered by treatment with Flubendazole. Prevalence ofanemia was also lowered as judged from HB content and hematocrit. This was moreevident with female than with male.
This study was supported by the research grant from the Toyota Foundation.

186

25 DISEASES OF THE JAPANESE WHO S TAY LONG
IN THE TROPICSHIROSHI OHARAl, SHOKICHI TArul, ISAO EBISAWA2, MASAHISA OHR13

AND MITSUYO OMOTE4
Department of Medical Zoology, Kanazawa Medical Universityl, Department of Public
Health, Toho University School of Medicine2, Department of Infectious
Disease, Institute of Medical Science, The University of

Toky03 and Headquarters of the Japan
Overseas Cooperation Volunteers4

Major diseases and laboratory findings of the 1,469 members of the Japan Over‑seas Cooperation Volunteers were studied.
Among major diseases reported to the head office, malaria (lO1 cases), acutehepatitis (94 cases), traffic accidents (71 cases) and chronic diarrhea (59 cases)

ranked high. As to malaria, there seemed to be many unreported cases, detailed
study was carried out and revealed that the incidence was within the range of 35.5‑
65.70/0 in tropical Africa. Some suffered from malaria in spite of regular preventive

ingestion of pyrimethamine‑sulfamonomethoxine mixture. Venereal diseases andmental diseases were reported 1 5 and 1 2 cases respectively, but actual incidence isestimated much higher.
Among the results of laboratory findings in the returned volunteers, positive
cases of parasite infection (30.7010)' eosinophilia (5.90/0)' abnormal hepatic function(5.40/0) showed high incidence.
It is important for the Japanese who stay long in the tropics to take precautions
against traffic accidents, mental diseases, venereal diseases and hepatitis as well as
diseases which are prevalent in the tropics.

26 THE PARASITOLOGICAL INFECTION OF JAPANESEINHABITING IN INDONESIA AND THE POLLUTION
OF THE DRINKING WATER
KOICHIRO FUJITAl, SETSUKO TSUKIDATE1, KENJI KUROKAWA1YOSHIYUKI OKUWAK12, MASATOSHI SUGlYAMA3

AND TAKEO ASAKURA4
Department of Medical Zoology, Nagasaki University School of Medicinei, Department ofMicrobiology, Kagawa Nutrition College2, Department of Hygiene,
Juntendo University School of Medicine3 and Japan
Association for Tropical Medicine4

In the previous meeting of this society, we have clearly demonstrated the signifi‑

187

cant relationship between the infection rate of intestinal parasites among Japaneseliving in the tropical countries and the rate of the drinking water containing I 02 or

more/ml of coliform (r=0.957). In this meeting, we will show the time coursechanges of the infection rate of intestinal helminths among Japanese living in Indo‑nesia as well as the rate of the drinking water polluted by feacal matters from 1 978
to 1982.

Infection rate of parasitosis among Japanese living in Indonesia in 1 978 was
8.00/0' The infection rate of Enterovius vermicularis showed also 8.30/0' Those who

were infected with helminths were given I O mg/kg of CombantrinR, and the rate
was studied revealing the value as low as 4.80/0' in the next year but recently the value
gradually increased to 6, I o/o in 1 982, except the rate of E. vermicularis. The infection
rate ofthe E. vermicularis was 7.70/0 in 1979, 20.00/0 in 1980, 140/0 in 1981 and 18.90/0

in 1 982, although the treatment was carried out exactly the same every year. The
infection rate of Ascaris lumbricoides gradually decreased, but that of Trichuris trichiura

increased.

On the other hand, the drinking water was also studied in Indonesia duringl 978 to 1 982. High proportion of samples appeared to be polluted by feacal mattersthroughout these periods. The water samples which Japanese infected with thesehelminths used in actually in Indonesia were picked up, and the degree of thepollution of these samples was studied. The drinking water used by these infected
person was proved to be polluted in relativ ly higher proportion than the control
water samples used by whole Japanese in Indonesia.

27 SURVEY ON THE INTESTINAL HELMINTHS

INFECTIONS IN INDONESIA ; NORTH SUMATRA,ASAHAN AREAS

JUN‑ICHI IMAll AND O. SIMANJUNTAK2
Department of Parasitology, Miyazaki Medical Collegel and Provintial
Health Service of North Sumatra, Indonesia2

Parasitological surveys were conducted to study the trend of intestinal helminths
infections in rural areas of North Sumatra, Indonesia during the period from October

to December, 1 981. The stool examination on 977 fecal specimens collected fromthe inhabitants of three villages showed that 85.40/0 were positive for Ascaris lum‑bricoides, 93.00/0 for Trichuris trichiura, 83.50/0 for hookworm, and Strongyloides ster‑colaris, Trichostrongylus orientalis. Rhabditis sp, and Hymenolepis nana were also detected,

but their prevalence was less than 4.80/0 in total. The overall prevalence rate of thetwo kinds of hookworm infections were 53.60/0 for Ancylostoma duodenale and 63.3 o/o for

Necator americanus. The dominancy of the two hookworms have shown a remarkabledifference among the three villages, though the prevalence rate of the hookworm egg
carriers were almost the same in every village.
Some mass treatment trials were carried out to determine the relative efficacy

188

of mass chemothetapy with the drugs of pyrantel pamoate (Combantrin, Pfizer) anda combination of mebendazole 150 mg and pyrantel pamoate 100 mg (Trivexan,
Mecosin) .

Combantrin had an efficacy of 9 1 .5‑94.00/0 estimated by negative conversion
rate (n. c. rate) in standard dosage against ascaris worms and hookworms, while
Trivexan showed an efficacy of98.4‑99.2 o/o by n. c. rate in the dosage ofone tablet/day

for 3 consecutive days, irrespective of age and body weight, and this drug was also
very effective against trichuris worms with cure rate of 64.70/0'

Average hemoglobin values in the blood obtained from rural inhabitants were
9.9 g/dl in 2 to 6‑year‑old children, I I .2 g/dl in 7 to 14‑year‑old children, 13.2 g/dl

in adult men and 1 1 .7 g/dl in adult women over 15 years of age. These values wereon low levels in comparison with normal values of individuals living in the city ofNorth Sumatra. Therefore, the incidence ofanemia was very high as 69.40/ , 69.40/0'
38.60/0 and 64.40/0' respectively in each age groups mentioned above.
In the present study, the difference of anemia or average hemoglobin levels

between hookworm carriers and uninfected groups could not be observed clearly
among these high endemic areas of the hookworm infection.

28 SURVEY ON THE PARASITIC INFECTIONS IN THE
REPUBLIC OF CENTRAL AFRICA (RESULTS IN
SEP.‑OCT., 1981)

MORIYASU TSUJ11, SADAO NOGAM12, NoRIAKI HATAMOT03
MITSUYOSHI KUMADA4, KEIKO KAT04 AND
SHIGEO HAYASH14
Department of Parasitology, School of Medicine, Hiroshima Universityl, Department of
Parasitology, Institute of Medical Science, The University of Toky02,

Department of Public Health, Hiroshima Prefecture3 andDepartment of Parasitology, National Instituteof Health, Toky04

The seventh systematic survey on the parasitic infections in the Republic ofCentral Africa was conducted in two areas; Bangui, Capital City and Bouar, a local
town in rural district; during the period from Sept. to Oct. in 1981. In total 303
inhabitants were subjected to fecal examinations for helminthic and intestinal proto‑
zoan infections, urine examination for haematobian schistosome ova, blood examina‑tion for malaria parasites and for filarial microfilariae and skin biopsies for oncho‑

cercal microfilariae. Seventeen parasites were detected including I O helminths
and 7 protozoa. Eighty seven per cent of the examinees was found infected with atleast one parasite and the majority of them showed combined infections by morethan two kinds of parasites. Remarkably high prevalence was noted with Necatoramericanus in 34.30/0' Schistosoma mansoni in 1 9.30/0' Entamoeba histolytica 1 5.60/0' E. coli

189

19.90/0' Endolimax nana 27.50/0' Plasmodium falciparum 1 1 .40/0' Pl. malariae 6.00/0' Dipe‑talonema perstans 14.4 , Loa loa 7.40/0 and Onchocerca volvulus 25.70/0' No remarkabledifferences in the status of parasitic infections were observed between the Capital City

area and the rural area except for that the infection of S. haematobium was as highas 14.60/0 in the urban area.

The epidemiological features were analyzed in more detail with the intestinal
protozoan infections. It was indicated that the infections of Ent. histolytica. Ent. coli.
End. nana and lodamoeba btitschlii were statistically significantly associated with eachother, but the infection of Giardia lamblia seemed to be independent from the otherinfections. This was confirmed not due to the difference in the way of getting
infections but the difference in the age distributions of the infections. In contrast
to other intestinal protozoan infections Giardia infection showed the highest peak in

the age group of below 10 and decreased rapidly and constantly according to theincrease of age. This might suggest that the protective immunity could be pro‑
duced more easily against Giardia than against others.

29 ON THE OCCURRENCE OF Angiostrongylus cantonensis
IN THE BROWN RAT (Rattus norvegicus)

IN NAGOYA CITY
KlYOSHI MAKIYAI AND KAZUO ONITAKE2
Departm.ent of Medical Zoology, Nagoya University School of Medicinel andBiological Laboratory, Nagoya University College of Medical Technology2

The lung worm of the rat, Angiostrongylus cantonensis, is known to be widely distri‑buted in many islands of the Paciflc Ocean and nearby areas, and has been recognized

as a major cause of eosinophilic meningoencephalitis. In Japan, the worms werereported from the house rats captured in Ryukyu Islands (Iriomote‑jima : Nishimura
et al., 1964; Okinawa‑, Miyako‑ and Ishigaki‑jima: Nishimura et al., 1966), EasternJapan (Yokohama and Kawasaki: Hori et al., 1969; Tokyo: Uchida et al., 1982),
Bonin Islands (Hori et al., 1973) and Northern Japan (Sapporo : Ohbayashi et al.,1968 ; Okushiri‑jima, Esashi‑cho : Hattori et al., 1981 , 1982 ; Seikan Undersea Tunnel :Takada et al., 1982). However, no report was made on the occurrence of the lungworms from the western parts ofJapan.
The present report outlines the occurrence of4 nematodes (3 males and I female)which were found from the lung of a brown rat in Nagoya City. The body lengthof male worms ranges from 23.4 to 23.9 mm, maximum body width 0.35 to 0.37,
oesophagus length 0.29 to 0.33 and spicule length I .21 to I .22. The copulatory
bursa develops well and 6 pairs of rays are recognized.

Observation by scanning electron microscopy showed the existence of two pairsof papilla‑like structures which lied on the outer surface of the bursa at the tip of theanterolateral and externodorsal rays.

In female wQrm (cut apart intQ two piecies), body length is about 42 mm,

1 90

maximum body width 0.58, oesophagus length 0.36, vulva to tail‑end distance 0.25

and anus to tail‑end distance 0.05. The female has many eggs (64.3x37.5 p on
average) in the uterus and a characteristic spiral intestine.

A number of the first‑stage larvae (0.26 mm long) were found in the feces of
the rat.

Judging from these results, the worms were identified as Angiostrongylus can‑tonensis.

The rat was captured in a residential quater of Meito‑ku, Nagoya City in Feb‑
ruary 1982, and it was an adult female measuring 21.3 cm (head and body length)
and weighing 1 70 g. This residential area is on a hill about 14 km northeast of
the sea port. At present, the third‑stage larvae have not yet been detected from thepossible intermediate snail and slug hosts in this area.

30 THE PRESENT SITUATION OF IMPORTED MALARIAIN JAPAN IN 1972‑1981

HIROSHI OHTOMO1, ATSUMI HIOK11 AND TOSHIO NAKABAYASH12
Department of Parasitology, Gifu University School of Medicinel and Department ofProtozoology, Research Institute for Microbial Diseases, Osaka University2With the drastic increase in overseas travellers to the tropical and subtropicalcountries in recent years, the imported malaria cases have been increasing year
after year. However, its actual situation has not been studied yet. Since 1972,
we have tried to summerize the imported malaria cases by the questionnaire technic
on malaria patients treated at 1,300 medical institutions in Japan. The number ofmalaria cases for ten years from 1972 to 1981, inclusive, was 646, average 65 perannum, ranging from 40 in 1 972 to 90 in 1 980. Geographically, infections in South
Asia (including Oceania) were most comparable to those in Africa and in SouthAmerica. P. vivax was responsible for 72.0 o/o of the patients infected in the South
Asia countries and P.falciparum for 53.6 o/o ofthese infected in the African countries.
A11 the fourteen patients infected with P. ovale were those infected in the Africancountries. On the other hand, it is known that a delay in diagnosis and the start ofadequate treatment offalciparum malaria involves the risk of causing serious compli‑
cations. The fourteen patients with falciparum malaria infection who have died andwho are reported in the answers to the questionnaire suggest this fact. Other findingof the collected cases reported according to the items summerized.

191

31 A CASE OF MALARIA IN THE NEONATAL PERIODKWANG‑MYONG KIMl, YASUSHI UENOYAMA1, TOMOHIDE YOSHIMURAl
TEIZO TOMISAWAI AND TOSHIO NAKABAYASH12
Department of Pediatrics, Koga Hospitall and Department of Protozoology, ResearchInstitute for Microbial Diseases, Osaka University2

A case ofmalaria in a Vietnamese neonate is reported. Malaria in the neonatal
period is extremely rare even in endemic areas and, so far as we know, this is thefirst case reported in Japan.

Patient's mother, who arrived at Japan from Vietnam in May 1 981 as a refugee,
suffered from relapses of vivax malaria and a threatening premature labor during
her pregnancy. A female baby was delivered at full term with a birth weight 2,680 g
on 1 2 August 1 981, when her mother was in the course of malarial relapse. Except
for an increased level of lgM ( 1 25 mg/dl) on the 1 3th day of age, she was apparently

well till 18th day when she developed high fever. On the 20th day physicalexamination revealed remarkable hepatosplenomegaly, and peripheral smear demon‑
strated ring form trophozoites of Plasmodium vivax. Therapy was immediately started
with Fansidar.
Symptoms and findings developed till about 22 days of age, and then improved
gradually. Fever subsided in three days and recurred transiently at an interval of
about 48 hours. Malarial parasites were seen in peripheral smears till 22 days of age.

Physical examination and laboratory data on the 23rd day were as follows ; Liver

3.5 cm) Spleen 3.5 cm (both below the costal margin), CRP (3+), RBC 254 X
104/mm3. Hb 8.3 gldl, Ht 24.00/0' Platelet 5.6 x 104/mm3, WBC 6,900lmm3 (Neutro.

550/0' Lym. 390/0)' Retrculocyte 160/0' GOT 157U GPT 75U LDH 940U ALP
19.0U, Total Bilirubin 1.1 mgldl, Renal function & Urinalysis; WNL.
In addition, IgM Ievel on the 37th day of age was 220 mg/dl.
It was not likely to be infected postnatally in this case because several preventive

measures of malarial infection had been performed. Congenital infection or infec‑
tion during the birth process was probable, but it was not able to clarify which ofthem had been the mode of infection.

1 92

32 A VIETNAMESE REFUGEE CASE OF AMEBIC LIVER
ABSCESS AND THE RESULTS OF SERAMEBEARTEST TO HIS ASSOCIATEHIROYUKI AMANO1, TAKAFUMI TABATA2, HIROSHI MORITA3SHOZO INOK13 AND TSUNEJI ARAK13
Department of Overseas Medical Services, Tenri Hospitall, Department of General
Surgery, Tenri Hospital2 and Department of Parasitology,

Nara Medical University3

Recently, cases of amebic liver abscess have been sporadically reported and seemto be increasing in Japan. On these infectious source, one is apprehensive ofsecond
infection from the imported cases by international travellers and refugees as well as
the problem of the Japanese native carriers.
We report a 34‑year‑old Vietnamese refugee male case of amebic liver abscess.

He came to Japan in May 1981, and was admitted to our hospital in July 1981,
suffering from fever and right lateral chest pain. Although E. histolytica was notdemonstrated in his feces, the mass echo, I O cm in diameter, in right lobe of liver was

revealed by abdominal echography and the vegetative forms of E. histolytica weredetected in the exhausted fluid by puncture of this abscess. SeramebaR test was
positive. He was discharged after complete cure by the treatment with Metroni‑
dazole (2 g/day x 10 days x 2 courses).
SeramebaR tests were carried out on 32 cases (21 male, I I female) ofhis associate
and only one case (3. I O/o) was found to be positive. This positive case had fortunately
no liver abscess and amebas in his feces.

33 A SIMPLE METHOD OF AXENIZATION OF Entamoeba.
histolytica FROM CYSTS, BY PASSING BACTERIA‑ASSOCIATED CULTURESSEIKI KOBAYASHI, TSUTOMU TAKEUCHI AND KEIZO ASAMI
Department of Parasitology, School of Medicine, Keio University

A method for axenic cultivation of Entamoeba histolytica was first established by

Diamond in 1961. Also in the several laboratories, axenization of trophozoites of
E. histolytica has been improved. But up to present, there have been no reports on
the establishment of axenized E. histolytica from cysts in stools, bypassing bacteria‑
associated cultures. Accordingly, an atempt was done to axenize trophozoites of
E. histolytica, bypassing bacteria‑associated cultures.

Cysts of the parasite were enriched from a stool of an asymptomatic carrier
by repeated centrifu ation and density radient centrifu ation. After incubatiQn

193

in I o/'o HCI solution for 15 min at the room temperature, isolated cysts were washed,transferred into 1 5 ml of BI‑S‑33 medium containing 2 x I 08 epimastigotes of Try‑panosoma cruzi with penicillin and streptomycin, and placed at 35.5'C. Two days
after the transfer, a few actively motile trophozoites of amoeba were observed. Be‑
cause the amoeba grew as rapidly as previously axenized E. histolytica (H‑303 : NlH)
after 37 transfers in the monoxenic culture, we inoculated these amoebae into thesame medium with no trypanosomes. Subsequent observation of the cultures overa period of 3 months suggested that the amoebae grew under axenic conditions.
The axenized amoebae were identified as E. histolytica by immunofiuorescence anti‑
body and gel diffusion precipitin tests. Our procedure may significantly sirnplify
axenization of E. histolytica from cysts.

34 INFECTIOUS DISEASES IN BURMA I. GEOGRAPHICALAND CLIMATIC CONDITIONS, AND MALARIAISAO EBISAWA
Department of Public Health, Toho University School of Medicine

The official name of Burma is The Socialist Republic of the Union of Burma.
It is located between 18‑28'N and 92‑l02'E, hilly in the north, and faces the Indian
Ocean in the south. Politically it is divided into 7 States and 7 Divisions. Climatic

observation spots are located in 19 places in the country. Maximal and minimal
temperatures and the rainfall during the 5 years of 1963, 1973‑1976 in Burma, andthose parameters in Japan during the 30 years from 1951 to 1980 are compared.

The average values are mentioned in the following. The maximal and minimal
temperatures in Rangoon are 32 and 22'C. Similar values are found in the areas
which are faced to, or near to the Indian Ocean. However, the max. and min.
temperatures in the areas in the northern hilly or plateau regions are max. 22.6 andmin. 14'C. These values are similar to those in Kagoshima. The rainfall in Tavoy(5,900 mm) and Rangoon (2,900 mm) is heavy in the southern parts and mild in thenorth such as Pakokku (900 mm) . However, as the rainfall is usually limited to themonths of May to September, the per day rainfall must be very heavy in the southernparts of the country.

The medical care is usually nationalized and is free of charge. The hospitalmanager is requested to report monthly every diseases they treat, although this re‑quest is not always completely met with. However, the report from the Ministry of
Health, based on the monthly reports, nevertheless indicate general trend of diseases
in that country.
The number of patients and fatal cases of malaria in I ,978 was 10,891 and 2,208.

Malaria occupies the flrst or second place among the leading causes of admission to
the hospital in most States/Divisions. The morbidity of malaria per 105 population
is 333. It is usually high in reverse relation to the population density per square km.
The morbidity is highest in the 15 to 24‑year‑old group, and the mortality is highest

1 94

in the 25 to 34‑year‑old group. The seasonal variation differs from place to place.

It is more prevalent in June‑October in some areas, in March‑June in some, andalmost equal during the year in some areas. P. falciparum : P. vivax ratio is 3 : I .

The slide‑positivity rates range from 6 o/ to 3 o/o in an average. Chloroquine‑
resistant P. falciparum malaria was reported from 13 places in 1974 and is considered
to be expanding in its prevalence.

35 MICROBIOLOGICAL STUDIES OF DRINKINGWATERS IN INDONESIAYOSHIYUKI OKUWAKll, HISAE YANAll, KYOKO YUTAKAl
KOICHIRO FUJITA2, SETSUKO TSUKIDATE2, MASATOSHI SUGIYAMA3

AND TAKEO ASAKURA4
Department of Microbiology, Kagawa Nutrition Collegel, Department of Medical Zoology,
Nagasaki University School of Medicine8, Department of Hygiene, Juntendo Uni‑
versity School of Medicine3 and Japan Association for Tropical Medicine4

We have continued the examination ofdrinking water in Indonesia for 14 years.
This time, we report the results of Gram positive cocci in the drinking water inIndonesia.
During the period from July to August 1 98 1 in Jakarta, and other main cities ofJava, Kalimantan and Sulawesi, we collected samples. Each samples of 0.2 ml was

dropped into the transport medium which we have modified. After coming backto Japan, these were cultivated with Horse blood agar, Phenylethyl alcohol agar,
Mannitol salt agar and others. The isolated colonies were identified.
Bacteriological examination revealed that Staphylococcus epidermidis. Staphylococcus

saprophyticus, Streptococcus faecalis were isolated frequently. However, isolation ofGram possitive cocci in the drinking water in Indonesia was not successful.

36 AN EPIDEMIOLOGICAL ASPECT OF Vibrio cholerac

AND MENINGITIS IN REPUBLIC OF MALAWIYUHKO KAZUMll AND SHINKICHI AKA02

Ageo Central Hospital, Japan Overseas Cooperation Volunteersl andNational Deffense Medical College2

Surveys were carried out during the period from December 1 979 to August 1 981

in Malawi. A total number 6,309 specimens were examined, Vibrio cholerae weredetected in I ,453 of them. Vibrio cholerae in Malawi invaded from Mozambique wasdue to bio‑type El‑tor and sero‑type Inaba, but the disease has become less andendetnic.

195

However, it has shown upward trend during December 1 979 to May 1980.
In November 1980 to April 1981, Vibrio cholerae was found in 184. The ratio of
Inaba type was 950/0' and that of Ogawa type was 50/0'
Concerning to Meningitis, bacterial meningitis were caused by Streptococcus
pneumoniae. Haemophilus and Neisseria meningitidis.

37 EGG‑LAYING, HATCHING AND SEX COMPOSITIONOF HABUHIROSHI KIHARA1, MITSUKI YOSHIOKA2, YOSHIHIRO HAYASH13
AND EIICHI NAKAMOT04
Department of Physiology, Faculty of Medicine, Kagoshima Universityi, Department ofHygiene, Faculty of Medicine, Kagoshima University2, Department of
Parasitology, Institute of Medical Science, The University of

Toky03 and Amami Kanko Habu Center4

A significant difference in sex composition of Habu snakes collected at islands

ofAmamiohshima and Tokunoshima has been observed. It has been believed thatthe difference is due to the fact that the male snakes are usually more active than
famale snakes. To study the native sex ratio of Habu snakes, we have observed thehatching of Habu.
The parent snakes of38 Iaid 240 eggs, and 218 of them were hatched (hatchingrate; about 900/0)' The sex composition was 151 males and 67 females. The sex
ratio was about 7 : 3, and it agreed with the sex ratio of captured Habu snakes.

The number of laid eggs of each snake had a crose relation with one's bodylength, and the relation can be expressed by the following equation ; Y= ‑16.3+

0.16X (X;body length, cm) . The average body length of juvenile snakes was
41.6 3.0 cm and male snakes were usually longer than female snakes.
The hatching days closely related to temperature and they were 42.5 I . 7 days

under the un‑controled room temperature, 51.9 2.0 days under 25'C and 48.0
1 .2 days under 28'C. The egg‑layings were observed during the period from July
5 to August 6 and the most were in two weeks from July 14 to 27.

38 SNAKEBITES ON THE AMAMI ISLANDS IN 1981
YOSHIHARU KAWAMURA AND YOSHIO SAWAIThe Japan Snake InstituteIn 1 981, 1 53 cases of Habu ( Trimeresurus flavoviridis) bites were reported in the

Amami Islands, in which 97 cases (630/0) from the Tokunoshima and 56 (370/0) were
frQm the Atnam̲ i Main Islands.

1 96

In the warmer months from March to October, 136 or 89 per cent of the total
bites occurred. Snakebites in males were two times as frequent as those in females.
During daylight hours from 6 a.m. to 6 p.m., almost 720/0 of the total bites werereported and 280/0 were between 6 p.m. to 6 a.m. Most bites occurred on theextremities. More than 500/0 of the bites occurred in fingers and hands, whereas
180/0 of the bites occurred in lower legs. Fifty‑three per cent of the bites occurredin agricultural field, 220/0 in residences and 7 o/o on road.

In 153 cases, two (1.30/0) were fatal and local necrosis occurred in 1 7 cases inwhich 6 (3.90/0) Ieft some motor disturbances after the wound had healed.

39 DECREASE OF SNAKE‑BITES (BITES OF HABU,

Trimeresurus fiavoviridis) IN OKINAWA PREFECTURE
YASUTETSU ARAK11, MASAHIKO NISHIMURAI AND KANZEN TERUYA2
Okinawa Prcfectural Institute of Public Healthl and Department of Public Health,
Faculty of Medicine, University of the Ryukyus2

Data of Habu‑bites during 1962‑1981 in Okinawa Prefecture were analyzed.
Number of bites has decreased from 350 to 250 in these 20 years.
There were few changes in the distribution of causes of bites, except decrease in
number of bites during stool. There were no changes in both diurnal and seasonal
distribution of bites, and selecting the bites caused by Habu's activity, i.e., for example,

the bites that occurred while sleeping or walking, these distributions revealed diurnaland seasonal activities of Habu.

From the point of view of environments and rates of Habu‑bite, Okinawa
Prefecture can be devided into four areas, l) mountainous areas, 2) rural areas withlimestone, 3) rural areas with little limestone and 4) urban areas. Decrease ofbites during past 20 years was most distinct in areas l) and 2), where the rates ofHabu‑bite were high. In these areas, frequencies of bites at the farmland have notdecreased but bites inside the house and on the road have decreased much, whichmight be brought by modernization of the village life.

197

40

STUDIESON

PROPHYLAXISAGAINST（Tr㎞erθsr鵬釦 o痂掘お）BITE

lN

THE

AMAMl

WITH

HABU

HABU

SNAKE

TOXOIDSISLANDS，KAGOSHIMA PREFECTURE，
JAPAN（9）HIDEo

FuKusHIMA1，KoREBuMI MINAKAMI1，YosHITERuYoKo

ToRIIRE1，

SAMEsHIMA1フSHIGEKI KoGA1，KATsuMI HIGAsHI1，
HIDEKI KAwABATA1，SHosAKu YAMAsHITA1，YAsuFuMI KATsuKI1，MuNEHARu SAKAMoTo1，
RYosuKE MuRATA2，CHoKu MATsuBAsHI2，
TooRu KoNDo2，SEIJI SADAHIRo2，
KIYosHI OHI3AND HIsAsHI KoNDo3
Faculty

ofMedicine，Kagoshima University1，The2nd Department ofBacteriology，Institute ofHealth，Tokyo2and Chiba Serum Institute3

National

Good production of serum antitoxin was observed aftcr O．5m！basic immu−
nization and booster immunization（vaccinations3，4and5）with Habu mixed toxoid
lotc−2（HR1：5．471Mu／mJ，H！R2：3．871Mu／ml）・Further，nosevereside reactions
were observed at the time of basic immunization（2vaccinations）and booster
immunization（3−6vaccinations）in2，185persons．From these results lot C．2was
fbund

to

be

a

suitable

toxoidfbr

vaccinationinhumans．

Habu toxoid fbr intradermal reaction（protein：0．01mg／mJ）was irjected
intradermally into the repeatedly vaccinated group（228persons were vaccinatedfive times），As a result，afしer15minutes l6．2％of the persons showed positive
reactions（diameter of redness was more than15mm）．As the result，the amountof i可ection was a両usted in thc repeatedly vaccinated group．

Amongl9cases

bitten by Habu

andimmunized

withHabu toxoid

bctweenJuly1980andJunc1981，3hadnecr・sisandn・ndeve1・pedsh・ck・rsequelae・and
their prognosis

wa，s

good・

41STUDYOF

ANTISWE肌ING（Trl㎞ere8鵜r鵬ヲα

MAsANoBu

YAMAKAwA

Division ofVenomous Snakes，Okinawa

the

o

AND

POTENCIES

OF

HABU

か掘お）ANTIVENOM

MAsATosHI

Pre琵ctural

NozAKI

Institute of

PublicHealthDetermination ofantiswelling potencies ofHabu antivenoms was perfbrmed using
method of mouse pads ir ection reported previously（Yamakawa6砲1．，1973）．

The test toxins（HR1，HR2＆H2−o）were prepared by gel filtration（Sephadex
G−100）and Amberlite CG−50column chromatography and represented main partofswelling eHセct in a

crude

Habu

venom、

198

Serial dilutions of an antivenom were made with each test toxin, graded at I .6

fold intervals. The venom‑antivenom mixture was kept at room temperature forabout one hour, centrifuged at 3,200 rpm for 10 minutes, and 20 pl of the supernatantfluid were injected into the right foot pads of each mouse. Two hours after the in‑jection, the swelling ratio was estimated.
It was proved that there is linearity and parallelism between the log dose of anti‑
venom and swelling ratio. Using these results, the antiswelling units of each Habu

antivenom were determined by employing parallel line assay method.

42 RENAL INJURY CAUSED HABU SNAKE ( Trimeresurus
fiavoviridis) VENOM REPORT Il
RYUJI HARADA, AKIRA NAKASHIMA HIROAKI UEDA KOICHI YOKOYAMATOSHIHISA MIZUTA AND YOSHIHITO OTSUJI
The 2nd Department of Internal Medicine, Faculty of Medicine, Kagoshima University

We have studied the glomerular changes caused by intravenous injection of asingle dose of each fraction (FI, FIla, FIlb, FIII) collected by gelfiltration methodfrom the crude Habu snake venom to individual outbred Japanese rabbits.
The following results have been obtained.
1 ) Cystic lesions were observable 24 hours after FI administration in a single doseof 0.5 mg/kg B. W. . Fibrin strands, erythrocytes and polymorphonuclear
leukocytes were present within the cystic lesions. Observations made in series
for 8 days after intravenous administration of the venom revealed decreasingchanges as well as disappearance of fibrin strands.

2) Neither cystic lesions nor proliferative changes were observable in the glom‑eruli of FIla. FIlb and FIII administered rabbits, respectively.
3) Enhanced phagocytosis was seen in the proliferative cells as a result of fraction
FI administration.

4) When observed under a fluorescent microscope, fluorescence substances could
not be recognized in the damaged glomeruli by means of fluorescent antibody

technique using anti‑rabbit r‑globulin antiserum conjugated FITC after
fraction FI administration.

199

43SEROLOGIC REACTION OF HABU VENOM WITHPERSIMMON EXTRACTS−PASSIVE HEMAGGLU・TINATION一

JuN．IcHIRo

FuKusHIGE，zENpAcHIRo
AND

Biological

TAKAsHIHATToRI，KANAKo

FuRuKAwA

OKoNoGI

Research Laboratories，Sankyo Company

Ltd．

1｝assive Hemagglutination（PHA）was fbund to be a sensitive method fbr quan．
tification ofHabu snake venom As reagents fbr PHA reaction，we uscd persimmon

extracts（P−EX）andpharmacopoeia

tannicsensitivity

ascomparedtheP−EX，which

was prepared

in

our

Jp−T

reaction．

superior in
in

its

this

44

Japan

with

add（JP−T）．This

neutralizationlaboratories，gave

a

more

test

methodwasofvcnom−antivenin．

clear−cut

resultthan

PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF
HEMORRHAGIC AND LETHAL ACTIVITY IN
THE

VENOM OFSAKISHIMA．HABU（T7カηere鋤配sθ君egαηs）

MAsATosHI

NozAKI AND

Division ofVenomous Snakes，Okinawa

MAsANoBu

Pre色ctural

YAMAKAwA

Instituteof Public

Health

Sakishima−Habu（T7吻6r65麗r鰐8♂6g㈱5）venom was chromatographed on Sephadex
G−150，DEAE−Sephadex A−50，Amberlite CG−50，Sephadex G−200supe面ne andSephadex

IEF，then R》110wing results were obtained、

1）

three

The

Habu

toxic

fヒactionsvenom．The飴ction

toxicity，those
toxicityof

S3−f

S2，S3−f

and

S3−g

were

separatedfヒomSakishima−

ofS2containcd both hemorrhagic activity andlethalandlethalS3−gcontained

thehemorrhagic

activity

andrespectively．

2）The molecular weight（M．W．）ofS2，the lst hemorrhagic丘action ofthe Saki−shima−Habu venom，was approximately58コ000，isoelectric point（pl）was about
4．3，and S2was closely resemble to the HR．一1purified fヒom the Habu
（Tr伽郷麗欄伽∂o翻4琶3）venom．
3）The M．W．of S3−f，2nd hemorrhagic肱ction of the Sakishima−Habu venom，
was approximately24，500，pl was about82，and S3−f was closely rcsemble
to

4）The

the

HR−2purified

fヒom

the

was approximately14，000，pl was

tion

Habu

M．W、ofS3−g，themainlethal
lackcdvenom、

toxic倉actionofthe

Sakishima−Habu

about9．8，and the corresponding to thisin the venom ofHabu，

venom，fねc−

200

45 THE EFFECT OF AN INHIBITORY SUBSTANCE

ISOLATED FROM MICROORGANISM ON
HEMORRHAGIC ACTION OF VENOMS
JUNG‑WHUN SEU
Kyung‑Pook National University, Taegu, Korea

This report concerns with the inhibitory effect of a substance separated from aculture of Aspergillus species upon hemorrhagic action of some venoms. The filtrateof the culture was treated by organic solvents and proved to be uniform by gel filtra‑tion.

Measurement of edema‑forming effect ofvenom was tested by mouse pad method.
The amputated legs of envenornated mice as above were homogenized in water, andthe total hemoglobin contained in the supernatant was measured photomerically.
The result indicated that inhibitory effect of the substance on hemorrhage induced

by crude Habu venom and purified HRI and HR2 was marked. The substancealso inhibited the hemorrhagic effect due to venoms of Korean Mamushi ofA. blomhqffi
brevicaudus and A. saxatilis. The edema due to the Habu venom was inhibited by thesubstance. It was heat‑stable and tolerated against heating at 90'C for one hour.

46 A NONEL PROTEINASE IN THE VENOM OF
Trimeresurus fiavoviridis

TAMOTSU OMORI‑SATOH AND SEIJI SADAHIROThe 2nd Department of Bacteriology, National Institute of Health, Tokyo

A proteinase which muddies substrate casein during the course of enzymatic
reaction was isolated from the venom of Habu ( Trimeresurusflavoviridis) , and enzymatic
properties were investigated.
The following results were obtained;1)
it has a molecular weight of about 25,000 dalton,2)
it prefers to have alkaline milieus for enzymatic reaction (optimum pH is 9),3)4)

it is inactivated by EDTA, cysteine and DFP but not by NEM,
it hydrolyzes various protein substrates except azocollagen but not Z‑Gly‑Pro‑
Leu‑Gly‑Pro‑OH which is a good substrate for H2‑proteinase. Analyses of thesites hydrolyzed by the proteinase in oxidized insulin A‑ and B‑chains indicatethat it has a different substrate speciflcity being compared with H2‑proteinase.

201

47ENZYMOCHEMICALSTUDIESON SNAKE

ARGININE

ESTERASESIN

PROPERTIES AND THEIRVENOM（29）CHARACTERISTICS
THE

VENOM

OF

OF

Trε㎜lere肌配8η砒cro891乱α隅αf麗

HIsAYosHI

SuGIHARA，TosHIAKI NIKAI，ATsuKo NIMuRA
AND

Department

R．EIKoKITO

ofMicrobiology，Faculty ofPhamacy，Meijo University

Four arginine ester hydrolases were isolated fヒom the venom of Tr吻6郷μ欄
吻雌05g襯η2磁5by a combination ofgel filtration on Sephadex G−100and ion exchange

columnchromatographies．These enzymes were desigmted ME−1，ME−2，ME−3

and ME−4．Their molecular weights were determined to be27，000，29ラ800，33，000
and28，500and their isoelectric points were fbund to be pH5．95，5．62，6．93and5．31

respecdvely．
The

purified

L．arginine
notbyenzymcs

methylfbr

lysineThe

estcrolytic

were

specific

ester（TAME）or

ester，tyrosine

activities

fbr

synthetic

arginine

N．benzoyl−L−arginine

ester，argininamide，casein

of

the

enzymes

were

or

estcr

such

ethyl

ester（BAEE），but

asN−tosy1−

dimethylcasein．

inhibitedbybenzamidine

but not

trasylo1，SBTI，LBTI，EWTI，heparin，cysteine，EDTA or PCMB、ME−3andME−4were also inhibited by diisopropylHuorophosphate（DFP）or p−tosy1−L−phenyl−
alanine−chloromethyl ketone（TPCK），but ME−1and ME−2did not inhibit by them。
These enzymes were stable to heat treatment，and between pH5and9．All of the
enzymes had capillary permeability−increasing activity．Moreover，ME−2and ME−4
had kinin−releasing activity．However，these enzymes did not possess clotting
activity．

JAPANESE JOURNALOF
TROPICAL MEDICINE AND HYGIENE
Vol. Il No. 2

June, 1983

CONTENTS
Proceedings of XXIV Annual Meeting of Japanese Society of Tropical Medicine
Contents . , . , , .

. . 139‑141

Symposium Behavior and Control of Habu, Trimeresurusflavoviridis,. . 142‑147

Basic Research in Malaria . . . . . .

. . 148‑154

Panel discussion Diseases Contracted by Japanese Overseas Residents . . . . . . . . . . . . .

. . 155‑162

Round table discussion Biological Activities of Toxic Factors in Habu Venom. . 163‑167

General presentation . . . . . . .

. . 168‑20 1

Published byJAPANESE SOCIETY OF TROPICAL MEDIClNE
c/o Institute for Tropical Medicine, Nagasaki University

12

Sakamoto‑machi, Nagasaki, 852, Japan