第 26 回

奈良県医学検査学会
抄録集

期日 平成 21 年 5 月 17 日

会場 奈良県立医科大学

（日曜日）

巌橿会館

(社）奈良県臨床衛生検査技師会

第 26 回奈良県医学検査学会プログラム
総合司会 今田周二――――――― 9：30 ～ 13：20

会長挨拶――――――(社)奈良県臨床衛生検査技師会会長

一般演題（9：35 ～ 10：30）

山本 慶和（発表 6 分 質疑 3 分）

座長（猪田 猛久）
○ ノロウイルス・検査の種類と進め方
公立学校法人奈良県立医科大学付属病院 中央臨床検査部○ 当院における輸血副作用状況報告
県立奈良病院 中央臨床検査部○ 酵素法による HbA1c 測定試薬「ノルディア N HbA1c」の基礎的検討
県立奈良病院 中央臨床検査部座長（土屋 直道）
○ CoaguChek XS の有用性について
公立学校法人奈良県立医科大学付属病院 中央臨床検査部○ 止血採血管の順序の検討―― 凝固促進剤が止血採血管に及ぼす影響について ――
県立奈良病院 中央臨床検査部○ 成人 T 細胞性白血病/リンパ腫の表面形質の特徴
天理よろづ相談所 医学研究所

奈良学会公開セミナー（10：30 ～ 12：00）

藪内 博史
高木 豊雅
三浦 沙智代

谷口恵理

山田 浩二
北田 佳代

（司会進行 小泉 章）

テーマ『グラム染色』○○

トピックス：新型インフルエンザ＜講演 - アンケート調査より - グラム染色を取り巻く環境と現状、Q&A＞
公立学校法人奈良県立医科大学付属病院 中央臨床検査部
小泉 章
グラム染色の重要性とその意義臨床医から見たグラム染色 済生会中和病院 内科・感染制御科
米川 真輔

ランチョンセミナー（12：00 ～ 13：20）（司会 梅木 弥生）

テーマ『こころ元気に！』
こころ元気研究所

鎌田 敏

閉会の辞
(社）奈良県臨床衛生検査技師会 学術担当副会長 今田 周二

ノロウイルス・検査の種類と進め方
藪内 博史
ノロウイルスは 12～3 月をピークに流行する急性胃腸炎の原因ウイルスの１つです。

奈良県立医科大学附属病院

ノロウイルスは細胞培養や実験動物への感染による増殖系がなく、今のところヒトの腸管内でのみ増殖すると言2006 年度の厚生労働省食中毒統計によれば、食中毒総発 われています。そのため、ノロウイルスの基礎的研究は遅ウイルスゲノムの全塩基配列が決定され、生件数 1,491 件のうち、499 件（35.5%）がノロウイルスに れていましたが、よるものでした。また食中毒総患者数 30,926 名中 27,616 その詳細な分析がなされたことにより、新しい検出方法が名（70.8%）であり、いずれも第 1 位となっています。この 開発されています。
ように他の食中毒原因物質と比べ食中毒事件 1 事例におけ

現在は、主に RT-PCR 法によりノロウイルスの遺伝子をる患者数が非常に多いのも特徴であり、また本ウイルスに 検出する方法が使用されています。ウイルスの RNA を逆転よる患者数は増加の傾向にあります。

写し、得られた cDNA を PCR により増幅、電気泳動により検ノロウイルスはカリシウイルス科(Caliciviridae) に 出を行い、ハイブリダイゼーションにより確認を行います
属するウイルスです。その内部には遺伝子として約 7,500 が、操作が煩雑かつ時間がかかるという難点があります。の塩基からなるプラス１本鎖の RNA を持っています。
現在、また、ノロウイルスと同様の抗原性を有する中空ウイル

ノロウイルスは Genogroup I（GI）と Genogroup II （GII） ス粒子の作製が可能になったことにより、ELISA 法、イムの 2 つの遺伝子群に大別され、さらにそれぞれは 14 と 17 ノクロマト法などの免疫検出系も開発されており、体外診の遺伝子型（genotype）に分類されています。

断用医薬品として臨床の現場で使用されています（デンカ。しかしながら簡便である半面、十分な検出
感染後 1-2 日の潜伏期間を経て、急性胃腸炎の症状が現 生研より発売）れます（主症状は嘔気、嘔吐、下痢）。一般には症状は軽症 感度が得られていないのが現状です。
で、治療を必要とせずに軽快しますが、まれに重症化する

RT-PCR 以外の遺伝子検査法も、様々な改良がされたもの例もあり、老人や免疫力の低下した乳児では死亡例も報告 が各社から発売されています。糞便からの RNA 抽出を簡易されています。ウイルスは、症状が消失した後も 3～7 日間 化した Ampdirect RT-PCR 法(島津製作所)、反応時間を 30、2 つのヒートブロックのみ
長いときには 1 ヶ月ほど患者の便中に排出され、また感染 分と短縮した TRC 法（東ソー）、H5N1 にしても発症しないまま終わる場合（不顕性感染）もあるた で検査可能な NASBA-核酸クロマト法（カイノス）
め、2 次感染には注意が必要です。

代表される新型インフルエンザ検査にも応用され PCR に次（栄研化学）など、ノロウイルスによる感染は、これまで本ウイルスに汚染 いで各分野で広く汎用されている LAMP 法された魚介類（特にカキに代表される 2 枚貝）を十分に加 特徴ある遺伝子の増幅・検出法により、PCR の感度に匹敵熱せずに喫食したために起こると考えられていましたが、 する性能の検査が、これまで以上に簡便・迅速に行うこと
最近ではノロウイルスに感染している食品従事者を介して が可能になっています。
起こる食中毒事例や、患者の吐物、便などから直接感染す院内でのノロウイルス感染の制御を効率的に行うためにるヒト‐ヒト間の 2 次感染による感染性胃腸炎も報告され は、免疫系迅速キットと遺伝子検査キットの特徴を理解しています。
また、不顕性感染者も認められていることから、 た上で、使い分けを考えていく事が必要です。
施設や従業員の衛生管理など、院内感染対策の必要性も指摘されています。

当院における輸血副作用状況報告
県立奈良病院 中央臨床検査部
高木豊雅、永井眞美、川越善子、宗川 義嗣
平 康二（輸血部）
はじめに考察2004 年（H16 年）3 月に輸血システム BLAD（富士通）を導輸血システムの導入に伴い、全製剤の副作用報告を実施

入し、同年 6 月より輸血副作用報告を開始し調査を行ってすることでその実態を把握できた。今回は白血球除去製剤きたので報告する。

（LR 製）による副作用の減少は認められなかったが今後も副作用報告を分析し臨床側へ情報を提供することにより輸対象及び方法
2004 年 6 月 1 日から 2008 年 12 月 31 日までに使用された輸血用血液製剤 11409 本を対象とした。
副作用の有無は製剤払い出し時に貼付する「製剤ラベル」（輸血副作用報告と輸血実施報告を兼ねる）に輸血実施者が記入し、返却されたものを解析した。

結果
全体では11409本中226本、1.98％に副作用がみられた。
製剤別では赤血球製剤7001本中100本1.43％（発熱40.0％、じんましん 17.4％、悪心・嘔吐 9.6％、頭・腹・腰・胸痛2.6％）、濃厚血小板 821 本中 45 本 5.48％（発熱 8.2％、じんましん67.3％、悪心・嘔吐2.0％、頭・腹・腰・胸痛2.0％）、
新鮮凍結血漿 3587 本中 81 本 2.26％（発熱 18.2％、じんましん 22.6％悪心・嘔吐 24.8％、頭・腹・腰・胸痛 5.8％）であった。さらに白血球未除去製剤と白血球除去製剤（LR製剤）を比べるとMAP及びRCC では4574 本中64本1.40％、
RCC-LR では 2427 本中 36 本 1.49％。FFP1 及び 2 では 2511
本中 44 本 1.75％、FFP-LR657 本中 17 本 2.59％、FF5 419
本中 20 本 4.77％であった。
この間に血液センターに副作用報告を行ない、検査を依頼したのは 12 症例で抗血漿蛋白抗体・抗 HLA 抗体を認めたものが各 2 症例あった。

血療法の安全性を高めるよう努めたい。

酵素法による HbA1c 測定試薬「ノルディア N HbA1c」の基礎的検討○ 三浦 沙智代、上野 真佑、吉田 雅紀、中本 和男、草尾 恵、宗川 義嗣
奈良県立奈良病院

中央臨床検査部【はじめに】HbA1c の測定には HPLC 法や免疫法、酵素

Y=0.9869X-0.0982、HbF 含有率 2%以上群(n=14)では、法が用いられている。当院では日常検査に専用機器を用い

r=0.937、Y=0.9071X+0.2136⑤トレーサビリティ：単日反て HPLC 法で測定しているが、今回そのダウン対策として復測定（10 重測定）した平均値は、レベル１（認証値 4.57

汎用自動分析装置で測定可能な酵素法試薬について検討し±0.18）では 4.61、レベル 2（5.19±0.16）では 5.18、レたので報告する。

ベル 3（6.91±0.16）では 6.95、レベル 4（9.19±0.20）【使用試薬・機器】
検討法は、酵素法「ノルディア N HbA1c」

では 9.28、レベル 5（11.65±0.24）では 12.02 であった。

（積水メディカル）を使用し、日立 LAbOSPECT008 で測⑥希釈直線性：HPLC 法で 4.6％と 13.2％の検体を用いて定した。

段階希釈し、測定した結果、良好な直線性が確認できた。

【方法】①同時再現性：ノルディア N HbA1c コントロー⑦Hb 濃度：患者検体 2 濃度について、メーカー推奨の前ル 2 濃度を 20 回連続測定した。②日差再現性：初日にキ処理試料中 Hb 濃度 90～310μmol/L において HbA1c 値ャリブレーションした後、試薬を開封したまま機器に搭載に影響が無いことを確認した。⑧血球の採取部位によってし、ノンキャリブレーションでノルディア N HbA1c コン影響が見られた。⑨異常 Hb は当日スライドで表示する。

トロール 2 濃度（日毎に調製）を 28 日間測定した。③コ【まとめ】本検討の結果、酵素法を原理とした「ノルディントロールの安定性：初日にキャリブレーションした後、

ア N HbA1c」は、再現性、HPLC 法との相関も良好であ

初日に調製したノルディア N HbA1c コントロール 2 濃度

り、試薬開封後もノンキャリブレーションで 28 日間の使を 5 日間測定した。④相関：比較対照に、HPLC 法の用に耐え得ることから日常検査法として有用であり、健診HLC-723G8（東ソー）を用い、当院における外来及び入など多検体を同時処理するような場合に役立つと考えられ院患者の NaF/EDTA-2K 加血液を用いて検討を行った。
⑤る。HPLC 法はヘモグロビンに変異がある場合、クロマト

トレーサビリティ：HbA1c 測定用常用参照標準物質グラムが種々のパターンを呈し、HbA1c 値だけでなく他のJCCRM411-2(JDS Lot4)を測定した。⑥希釈直線性、⑦糖尿病マーカー測定値との乖離がないか合わせて判断する

Hb 濃度の影響、⑧血球の採取部位の影響：血球の上層、必要がある。HPLC 法のダウン時の対応としてばかりでは中層、下層から採取し、HbA1c 値を比較した。⑨異常 Hb

なく、変異ヘモグロビンが疑われる場合にも酵素法によるを確認できている検体について比較した。

確認が有用と考えられる。

【結果】①同時再現性：コントロール L（参考中央値=5.1）

ＨＰＬＣ法 対 ノルディアＮ ＨｂＡ１ｃ――ール H（9.2）のX=9.36、CV=0.88％と良好であった。②―

日差再現性：コントロール L（4.6）のX=4.76、CV=1.85％、―コントロール H（9.3）のX=9.41、CV=0.90％と良好であった。③コントロールの安定性：コントロール L（4.6）の――X=4.72、CV=2.28％、コントロール H（9.3）のX=9.37、CV=1.12％であった。④相関：HPLC 法(X)と酵素法(Y)でn=152、相関係数 r=0.993、回帰式 Y=0.9894X-0.1326(図)参照)、HbF 含有率 2%未満群(n=138)では、r=0.994、ノルディアＮ ＨｂＡ１ｃ ％の平均値X=5.18 であり、変動係数(CV)=1.21％、コントロ

y = 0.9894x - 0.1326

14.0
13.0
12.0
11.0
10.0
9.0
8.0
7.0
6.0
5.0
4.0
3.0
3.0

4.0

5.0

6.0

7.0

8.0

9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0

ＨＰＬＣ法 ％図）酵素法と HPLC 法の相関

CoaguChek XS の有用性について
谷口 恵理 白土 美佳 長谷川 真弓 山口 直子
片岡 美香 倉本 智津子 波賀 義正 岡本 康幸（公立学校法人奈良県立医科大学付属病院 中央臨床検査部）【はじめに】

PT-% r=0.9841・PT-INR r=0.9809、静脈血と指先血の

近年、健康成人における心房細動有病率は加齢ととも 相関は PT-SECｒ=0.9864・PT-% r=0.9946・PT-INRに増加し、その人数は推定で 100 万人以上と言われてお r=0.9845 といずれも良好な相関を得た。
り、特に 70 歳以上で急激に合併症が上昇している。弁 【まとめ】
膜症、心房細動等で抗凝血薬を服用する患者が年々増加

POCT 製品の CoaguChek XS は血液凝固分析装置をすると思われる。また、2008 年に改訂された心房細動治 使用するクエン酸血と同様な測定結果が得られ、小型で療（薬物）ガイドラインでは、例外を除き抗凝固療法（ワ 軽量なので診察現場・処置室等で測定可能、微量検体、ルファリン療法）を必要としているため、これら薬剤の 約 1 分間で測定結果が得られる迅速測定、簡単操作で精服用者の更なる増加が伺える。これらの患者は PT-INR 度管理に OBIS を用いるため安心など、PT-INR 測定を測定によるモニタリングが必要となり医療機関を訪れる アウトソーシングしている施設等でも安心して使用できが、PT-INR 測定をアウトソーシングしている施設では ると思われる。又、いずれの医療機関でも PT-INR 測定
後日再来院するか医療機関から連絡するなど患者等の負 が行える事で地域連携の医療が可能である。さらに今後担が大きくなるばかりでなく、緊急時の対応が遅れる可 は、微量検体測定が可能なため、NICU などでの使用も能性がある。今回、毛細管血（以下指先血）を点着する 検討したい。
だけで RT-INR・SEC・％が測定できる POCT 製品のCoaguChek XS（販売元 三光純薬・提携 エーザイ株式

PT-INR会社）を検討する機会を得たので報告する。
4【測定原理】
テストストリップ中の組織トロンボプラスチンにて検子量は凝固活性に比例する。
【対象及び方法】

CP2000体の外因凝固系が活性化し、生成されたトロンビンが基質に作用。その結果放出された電子を電極にて測定、電y = 0.9612x
R = 0.9809

321

当院循環器内科でワルファリン療法中の入院外来患者
様 73 名で、クエン酸血、抗凝固剤未添加静脈血（以下静脈血）、指先血を用いた。測定機器は CoaguChek XS、
CP2000（セキスイメディカル社）で、CP-2000 での測定試薬は、Thromborel S を用いた。
【結果】
静脈血とクエン酸血の相関は PT-SECｒ=0.9864・

00123
CoaguChek(静脈血）4――○山田 浩二*止血採血管の順序の検討
凝固促進剤が止血採血管に及ぼす影響について ――
川村 文*
柳田 裕起*
胡内 久美子*
梅木 弥生** 宗川 義嗣**奈良県立奈良病院 中央臨床検査部 **奈良県立三室病院 中央臨床検査部[はじめに] 2006 年に作成された標準採血法のガイ測定機器 CA6000（シスメックス）

ドラインでは PT・APTT の基本的凝固検査項目では

試薬 PT：トロンボレル S

1 本目に採取しても検査値には影響ないとされ、凝APTT：トロンボチェック APTT

固検査用検体は 1 本目に採血することが望ましいとされている。その理由として、血清用採血管には凝[結果]固促進剤が含まれている場合が多く、この後に凝固１）①と③の凝固検査の測定値の差はみられなかっ

検査用の採血を行うと、血液中に混入した凝固促進た 。 PT ： y=0.956x+0.485 R2=0.915

剤がゴムスリーブに付着し、血液中に混入した凝固

y=1.007x-0.274

促進剤が凝固検査値に影響を与える可能性があるたられた。

APTT ：

R2=0.903 と良好な相関関係がみめとしている。しかし、それに関する文献はなく当施設では統一見解に至っていない。

図１①PT①[目的] 今回われわれは、凝固促進剤入り血清用採血11.540.0

管の直後に採取した凝固用検体が、どの程度凝固促11.035.010.5

進剤の影響を受けるか、検討を行ったので、若干の30.010.025.09.5

考察を加え報告する。

APTT

45.012.09.09.09.5

10.010.5

11.011.512.020.0③③20.025.030.035.040.045.0[方法]方法１） 2008 年当院、職員健康診断時に中検で採２）表１のように方法 2）のような実験を試みたが血可能であった健常人職員 98 名（男性 43 名 女性

凝固促進剤が凝固検査値に影響を与えないことがわ

45 名

平均年齢 43.6 歳）を対象として、①止血採かった。

血管②凝固促進剤入り血清用採血管③止血採血管の手順で採血を行い①,③それぞれの PT・APTT測定をし、③に凝固促進剤の及ぼす影響をみた。
方法２）

凝固促進剤入り血清用採血管に生理食塩

表１
容器番号

ⅠⅡⅢⅣⅤ

混和数（回）

01

2

34

Ⅵ
5PT（秒）

109.8

9.99.99.9

10APTT（秒）

29.5

29.1

30.1

28.8

29.3

29.2を入れた●容器を用意する。健常人職員 1 人に止血採血管をⅠ～Ⅵ本採取し、Ⅰは通常とおり PT、APTT[考察]測定を行った。Ⅱ～Ⅵは、●容器をホルダーに装着は 1 本目に採血することが望ましいとされているが、し 1 回転倒混和したあとⅡの止血採血官に入れかえ

今回われわれが検討を行った結果、凝固促進剤入り混和、再び●容器をホルダーに装着し 2 回転倒混和の血清用採血管の影響を受けないことがわかった。

したあとⅢの止血採血官に入れかえ混和、と 1 回づ

ただし、本検討は職員健康診断時におこなったため、つ回数を増やし 5 回転倒混和までを それぞれⅣ、正常範囲での検討のみとなった。凝固検査異常値でⅤ、Ⅵの止血採血管について行った後、PT、APTTの検討を行う必要があると思われる。

を測定し凝固促進剤入り血清用採血管が止血検査におよぼす影響をみた。

標準採血法のガイドラインでは凝固用採血

成人 T 細胞性白血病/リンパ腫の表面形質の特徴
北田佳代 林田雅彦 竹岡加陽 天理よろづ相談所 医学研究所

成人T細胞性白血病/リンパ腫（ATL）は，HTLV-Iを原因ウ18/19 例，CD4 19/19 例，CD5 17/18 例，CD7 1/18 例，CD8 3/19

イルスとして発症する難治性のリンパ増殖性疾患であり，例で認められた. CD3 においては 17/18 例が減弱していた病期および病態からくすぶり型，慢性型，急性型およびリ（CD3+w）．
対照症例は CD3+w を認めず，
CD7 欠損細胞（CD7-Tンパ腫型の4病型に分類され，予後は病型によって著しく細胞）もほぼ認めなかったことから（10％以下），腫瘍細異なる．急性型では末梢血中に出現する花弁状細胞を特徴

胞量の把握には，CD4+,CD7-T 細胞および CD3+w,CD4+細胞のとするが，形態のみで腫瘍細胞量を把握することは難しく，検出が有効と考えられた．

腫瘍細胞量が少ない場合やくすぶり型などでは腫瘍細胞活性化抗原においては、CD25 が 18/18 例，CD45RO 17/17の存在を判断することは極めて困難である．一般にATLの例，HLA-DR 14/19 例に認め，大部分の症例は活性化 T 細

細 胞 表 面 形 質 は CD2+,CD3+,CD4+,CD7-,CD8- で あ り ,胞であった．CD25+T 細胞の割合は，腫瘍細胞量の把握がCD25+,HLA-DR+の活性化されたT細胞の表面形質を示すのが可能である CD4+,CD7-T 細胞および CD3+w,CD4+細胞の陽性特徴とされている．

率にほぼ一致する症例が多かった．ただし，一部の症例

そこでATLにおける細胞表面形質の発現状況を調べ，細では CD25 の発現が弱く，陽性率が低くなる症例も存在し胞表面形質の検索が腫瘍細胞量の把握に有効であるか否た．

かを検討した．

また，陽性率が CD25＞HLA-DR の関係を示す症例が 18/18＜対象および方法＞

例存在した．正常 T 細胞の活性化は，HLA-DR の発現に遅1995 年 6 月から 2008 年 6 月までに当院にて ATL と確定れて CD25 が発現することから，陽性率は HLA-DR の方が高診断された19症例（内訳は急性型8例，リンパ腫型7例，値を示す．対照症例においても HLA-DR＞CD25 の関係を示

慢性型 4 例）の末梢血およびリンパ節生検材料を対象としたことから，この逆転現象は腫瘍性の判断に有用と考した．なお，確定診断はサザンブロット法による HTLV-えられた．

Ⅰプロウイルスの組み込み検査にて行った．細胞表面形その他に，活性化 T 細胞の抗原である CD30 の発現は 3/7

質の解析は，FITC および PE 標識抗体の二重染色を行い，例と高頻度に認めたが，発現は弱く，かつ一部の腫瘍細T 細胞抗原である CD2,CD3,CD4,CD5,CD7,CD8 の発現動態お胞のみであったことから，腫瘍細胞量の把握には適さなよび活性化抗原である CD25,HLA-DR の発現をフローサイ

かった．DNA-ploidy の検索では，4/14 例に DNA-aneuploidy

トメーター（EPICS XL;Beckman Coulter）を用いて検索しを認め，腫瘍性および腫瘍細胞量の把握に有用であった．

た．なお，対照症例として，健常人末梢リンパ球および病型別における細胞表面形質は差を認めなかった．

同期間にリンパ節生検した反応性リンパ節細胞を用い発＜結語＞

現動態を比較した．

ATL 細胞の表面形質は，CD4+T 細胞で，CD7-T 細胞，CD3+w，＜結果および考察＞

さらに CD25+T 細胞＞HLA-DR+T 細胞の逆転現象を特徴とし

ATL の腫瘍細胞における細胞表面形質の発現状況をた．腫瘍細胞量の把握には，CD4+,CD7-T 細胞,CD3+w 細

表 1 に示した．T 細胞抗原の発現は，CD2 が 19/19 例，CD3胞,CD4+,CD25+細胞の検索が有用と考えられた．

表１ ATL症例における細胞表面形質の発現状況（ｎ=19）

ATL全症例CD2

CD3 (weak)

CD4

CD8CD5CD7

HLA-DR

CD25

CD45RO

CD30

DNA-aneuploidy

19/19

18/19（17）

19/19

3/19

17/18

1/18

14/19

18/18

17/17

3/7

4/14

8/8
7/7
4/4

7/8（7）
7/7（6）
4/4（4）

8/8
7/7
4/4

1/8
2/7
0/4

7/7
6/7
4/4

1/7
0/7
0/4

6/8
4/7
4/4

8/8
6/6
4/4

7/7
7/7
3/3

0/1
3/6
0/0

2/5
2/7
0/2

病型別

急性リンパ腫慢性