6.2 低線量放射線の生体防御機能に与える影響調査
6.2.1 低線量率ガンマ線連続照射マウスの移植腫瘍細胞に対する応答に関わる因子の解析
Response of Mice Continuously Irradiated with Low Dose-rate Gamma-rays toTransplanted Tumor Cells
高井 大策, 一戸 一晃, 田中 聡, 小村 潤一郎
生物影響研究部

Daisaku TAKAI, Kazuaki ICHINOHE, Satoshi TANAKA, Junichirou KOMURA
Department of Radiobiology
Abstract
We have previously shown that the transplantability of a murine ovary granulosa cell tumor cell line
was significantly enhanced in syngeneic B6C3F1 mice continuously irradiated with low dose-rate (20mGy/22h/day) gamma-rays to a total accumulated high dose of 8000 mGy. In the present study, thetransplantabilities were compared in mice continuously irradiated with low dose-rate gamma-rays at 1.0 and
0.05 mGy/22h/day to total accumulated doses of 400 mGy (mid-level) and 20 mGy (low level), respectively.
The transplantability was partially enhanced in mice irradiated with 1.0 mGy/22h/day, but not in mice
irradiated with 0.05 mGy/22h/day. In addition, transplantabilities in mice co-transplanted with dendritic cells
were also compared using the same irradiation regimens. The enhanced transplantability after low dose-rateirradiation at 20 mGy/22h/day was decreased when co-transplanted with dendritic cells.
1．目的

約 400 日間連続照射（集積線量 20、400、8000 mGy）

低線量率（20 mGy/22h/day）ガンマ線長期連続照した。照射終了直後のマウスの末梢血から RNA を射マウスで観察された移植腫瘍細胞生着率の違いを抽出し、ケモカインレセプター遺伝子について逆転もたらす要因が、ケモカイン—ケモカインレセプター

写定量リアルタイム PCR を行い、その発現量を非照系にあると仮定し、照射マウスにおけるケモカイン射群と比較した。移植腫瘍細胞株として B6C3F1 マ

レセプター発現の変化が移植腫瘍に対する応答（生ウスに自然発生した卵巣顆粒膜細胞腫由来の培養細着率）の差に及ぼす影響を明らかにすることを目的胞株（OV3121）を使用した。健康な同系統マウス脾とする。

臓由来の樹状細胞を同数共移植（樹状細胞共移植）した。以後毎週 2 回観察を行い、触診により腫瘤形

2．方法成が確認された場合に腫瘍が生着したと判断した。

平成 7 年度〜平成 15 年度に実施した低線量放射線生物影響実験調査（寿命試験）で用いられたマウスと同系統の SPF B6C3F1 メスマウスを使用した。
連続照射室に設置された

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3．成果の概要
昨年度までに、低線量率（20 mGy/22h/day）ガン

Cs-ガンマ線源を用い、マ線を長期連続照射（集積線量 8000 mGy）したマウ

低線量率（0.05、1.0、20 mGy/22h/day）ガンマ線を

スの免疫細胞ではケモカインレセプターCcr5 の遺伝子発現が抑制されていることが分かっている。ま

連続照射したマウスと同日齢非照射マウスに 1 x 105

た、腫瘍細胞が発現・分泌しているケモカインリガ個の OV3121 細胞及び健康な同系マウスから単離しンド CCL8 がケモカインレセプターCCR5 のリガンた 1 x 105 個の樹状細胞とを同時に移植し、OV3121ドであることは知られており、この CCR5―CCL8細胞の生着率を観察した。Fig. 2 に示すように、照の応答系の攪乱が照射マウスにおける移植腫瘍生着射マウス（実線）及び OV3121 細胞のみを移植した率亢進に寄与していること、及び照射マウスおける場合（△）と比べて、樹状細胞を同時に移植した場

Ccr5 遺伝子の発現低下が樹状細胞で起こっている合（〇）では移植腫瘍生着率の抑制傾向が観察され可能性が示唆された。

た。さらに非照射マウス（点線）においても同様に、そこで、今年度は昨年度までに明らかになった移植腫瘍生着率の亢進が、より低い線量率で観察され樹状細胞を同時に移植したマウス（〇）では移植腫瘍生着率の抑制傾向が観察された。

るかどうかを調べるために、8 週齢の B6C3F1 メス

これらの結果から、腫瘍細胞移植実験系においてマウスに、20、1.0 及び 0.05 mGy/22h/day のガンマは、寿命試験の結果と同様に、低線量率（1.0 及び線を約 400 日間連続照射した。照射の終了したマウ

0.05 mGy/22h/day）ガンマ線の長期連続照射による5ス及び同日齢非照射対照マウスに 1 x 10 個の影響を明瞭には観察することはできなかった。今回

OV3121 細胞を背部皮下移植し、その生着を観察しの結果は移植腫瘍の生着率亢進にケモカインレセプた。Fig. 1 に示すように、低線量率（20 mGy/22h/day）

ターCcr5 遺伝子の発現低下が関わっている可能性

ガンマ線で連続照射されたマウス（◇）では昨年度を 支 持 す る も の で あ っ た こ と か ら 、 今 後 は 20までに報告した結果と同様に、非照射対照（〇）にmGy/22h/day 照射群をターゲットに、照射マウスに比べて移植腫瘍生着率の亢進が観察された。更に低みられる腫瘍細胞が生き残りやすい環境が何かを明い低線量率(1.0 mGy/22h/day) ガンマ線で連続照射らかにする研究を行う必要があると考えられる。更されたマウス（△）では、細胞移植後早い段階ではに 、 樹 状 細 胞 共 移 植 に よ り 、 低 線 量 率 （ 20

移植腫瘍生着率が亢進していたが、最終的には非照mGy/22h/day）ガンマ線長期連続照射の影響が一部緩射対照と有意差のない結果となった。また、更に低和された事から、低線量率放射線長期連続照射によい低線量率（0.05 mGy/22h/day）ガンマ線で連続照る免疫細胞のケモカインレセプターCcr5 遺伝子の射されたマウス（□）では終始に渡り非照射対照と発現低下に樹状細胞における Ccr5 遺伝子発現低下有意差のない結果となった。

が関与する可能性が示唆された。今後は樹状細胞のまた、照射マウスにおいて Ccr5 遺伝子の発現低中和実験や CCR5 発現細胞の共移植実験などについ下によって損なわれた免疫機能を樹状細胞の共移植て更に研究を進めることで、低線量率放射線によるによって補うことができるかどうかを観察するため移植腫瘍生着率亢進の機構を明らかにする事ができに、腫瘍細胞移植時に樹状細胞の共移植を試みた。

ると考える。

低線量率（20 mGy/22h/day）ガンマ線を約 400 日間Fig. 1Comparison of tumor transplantability. 1.0 x 105

Fig. 2Comparison of tumor transplantability. AgeOV3121 cells inoculated in mice - non-irradiatedmatched mice, non-irradiated control (dotted lines)

control (◇) and irradiated with 0.05 (□), 1.0 (△),

and low dose-rate (20mGy/22h/day)or 20 (〇) mGy/22h/day. The numbers ofgamma-irradiated (solid lines) inoculated with 1.0

tumor-bearing mice, in which a palpable tumor

x 105 OV3121 cells with (〇) or without (△)

was detected, were counted to assess transplanted

dendritic cell (DC) co-transplantation. The

tumor formation.

numbers of mice with palpable tumors werecounted to assess transplanted tumor formation.