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Conference on Fluorescent
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Frontiers in Genome
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第３０回 加藤記念研究助成 贈呈式

松田 譲 理事長

東原 和成 選考委員長

花井 陳雄
協和発酵キリン（株）
代表取締役会長（現 協和キリン（株）取締役会長）

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者と財団関係者
第 30 回 加藤記念研究助成受領者と財団関係者

特別講演

松田 良一
東京理科大学 教授

宮廻 正明
東京藝術大学 名誉教授

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クローン文化財

法隆寺金堂壁画

バーミヤン東大仏天井壁画

笛を吹く少年

笛を吹く少年（立体）͘!34!͘

東京藝術大学の許可を得て転載

ポスターセッションと祝賀会

宮本 昌志
協和発酵キリン（株）
代表取締役社長（現 協和キリン（株））

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渡部 文子 選考委員

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■M1

研究題目

GPCR 作動機構の原子レベルでの解明―高親和性型ヒスタミン受容体の構造解析から

氏名

白石 充典

所属

東京理科大学基礎工学部生物工学科 ・ 准教授

本研究では高親和性型ヒスタミン受容体の 1 つであるヒスタミン H3 受容体（H3R）について、
その構造および機能を解明することを目標にしている。チトクロム b562RIL（BRIL）を H3R の細胞内第 3 ループへ融合した改変体と、Pyrococcus glycogen synthase（PGS）を、細胞内第3 ループへ融合した改変体について、出芽酵母の発現系を構築し結晶化に十分な量の受容体タンパク質を得た。界面活性剤の種類、精製方法、結合リガンドの種類を変えながら結晶化を試みたが、構造解析可能な結晶を得ることはできなかった。そこで結晶化バインダーとなる抗体の作製を行った。リポソームに包埋した受容体タンパク質を抗原にマウス免疫を行い、ハイブリドーマから結合性の高いクローン 5 つを選び産生される抗体を評価したが、受容体を安定化する抗体は得られなかった。引き続き受容体の安定性を指標とした抗体のスクリーニングを進め、結晶構造解析を試みる。

■M2

研究題目

「リポペプチド」免疫の学術基盤構築

氏名

森田 大輔

所属

京都大学 ウイルス・再生医科学研究所 細胞制御分野・ 助教

ウイルス蛋白質への N 末端ミリスチン酸（C14 脂肪酸）修飾反応は、その蛋白質の機能、及びウイルスの病原性に深く関わっている。研究代表者はサルエイズモデルを活用した詳細な免疫解析から、このミリスチン酸修飾を受けたウイルスペプチド、すな
わち新たな抗原レパートリーである「リポペプチド」が MHC クラス 1 分子サブセット（LP1 分子）によってキラーT 細胞へと提示される新しい獲得免疫応答の存在を先駆けて明らかにしてきた。
本研究課題では、まず、サル LP1 分子の構造情報を手掛かりとして、高いリポペプチ
ド結合活性を有する複数のヒト MHC クラス 1 アリルを同定することに成功した。さらに、その高解像度 X 線結晶構造解析より、リポペプチドとの結合様式を明かにした。
次いで、サル LP1 分子の内在性リガンドとして自己脂質群を同定し、リポペプチド抗原提示経路の全容解明に向け、重要な示唆を得た。

■M3

研究題目

細胞外マトリックスを介した PCP 制御機構の解明

氏名

鮎川 友紀

所属

秋田大学大学院医学系研究科・ 助教

上皮組織は、細胞の頂部‑基部軸に直交した極性を有する。これは、平面内細胞極性（planar cell polarity, PCP）と呼ばれ、進化的に保存された現象である。PCP の主要制御因子はその機能的な違いから 2 つのグループには分類されている。我々は、細胞外マトリックス（extracellular matrix; ECM）分子 Dumpy を含む複数の因子から構成され、既知の PCP 制御グループとは機能の異なる第三の PCP 制御グループ（以下、第三の PCP グループと略記）を見出した。しかしながら、第三の PCP グループが PCPを制御する分子機構は不明である。本研究では、ECM という新たな視点から、第三のPCP グループの機能を解明する。
我々は種々の解析を進めた結果、ショウジョウバエ背板における Dumpy の発現パター
ンが、腱細胞の分布とよく一致することを見出し、Dumpy や第三の PCP グループ分子の機能が、正常組織において筋肉による牽引に拮抗することで背板の頑強性維持に重要な役割をはたすことを見出した。さらに、第三の PCP グループ分子の機能が低下す
ると筋肉の牽引に抗うことが困難となり、組織に陥没構造が形成され、その結果 PCPが異常になると考えられる。
■M4

研究題目

活性化型受容体が認識する真菌構成脂質の同定と生理的意義の解明

氏名

伊沢 久未

所属

順天堂大学大学院アトピー疾患研究センター・ 助教

免疫受容体 CD300b 欠損マウスは真菌成分である zymosan に対する好中球の集積が著しく低下する。このメカニズムとして、炎症性樹状細胞の免疫受容体 CD300b が真菌に含まれる脂質成分フィトスフィンゴシンを認識し、NO（一酸化窒素）を産生して好中球を局所に集積させて炎症が促進されることを明かにした。真菌感染時には早期の好中球集積は真菌排除に役立つが、一方、感染収束後の過剰な好中球集積は炎症を悪化・遷延化させて組織障害（関節炎など）を引き起こすなどの慢性炎症につながる。今後、CD300b に着目して真菌が関与する疾患の病態メカニズムの解明と治療法開発を目指したいと考えている。本研究はScience 系列誌の Science Signaling 電子版に 2019 年 1 月 15 日付けで発表された。

■M5

研究題目

精巣特異的ヒストンバリアント H3t の減数分裂進行過程での役割解明

氏名

上田 潤

所属

旭川医科大学・教育研究推進センター・准教授

私たちヒトを含む多くの真核生物は、精子や卵子などの配偶子を形成する過程で減数分裂を行い、遺伝的多様性を獲得する。我々は以前に精巣に特異的に発現するヒスト
ン H3 バリアントである H3t が精子形成過程に必須であることを明らかにした。
即ち、

H3t 遺伝子を欠損すると雄マウスは完全に不妊となり、無精子症を呈することが判明した。しかし、H3t は成熟精子からは最終的になくなる。このことから H3t は精子を作るためだけに必要なヒストンであると言えるが、H3t が精子形成過程でどのような役割を担っているかはまだ不明な点が多い。本研究では、 H3t がどのようなメカニズ
ムでゲノム中に取り込まれ、ゲノム中でどのような分子と相互作用することで染色体の高次構造や機能を制御しているのか？

を明らかにすることを目的として行った。

またクリニックとの共同研究で、ヒト精子中に環状染色体が含まれているか否かを検査する臨床研究も行った。

■M6

研究題目

脳障害による運動神経回路の変容と動作原理の解明

氏名

上野 将紀

所属

新潟大学脳研究所・ テニュアトラック教授

脳の障害は、重篤な機能不全をもたらすが、有効な治療法は未だ確立されていない。障害からのがれた神経回路を再編し機能を代償できれば、機能を回復させられる可能性がある。
これらの方法論を見いだすため、本研究では、自発・巧緻運動に重要な皮質脊髄路を対象に、まず健常時においてどのような接続と機能を有し、障害時にその接続がどのように変化
し機能の回復へ影響するのか、明らかにすることを目的とした。その第１ステップとして、マウスをモデルに、健常時の皮質脊髄路の接続様式と運動中の機能を詳細に調べたところ、この回路は、多様な運動の制御機能をもった内在回路の集合体であることが明らかになった。本研究から、複雑な動作を可能とする神経基盤が明らかになり、また脳障害時に、どのような運動回路の再建が必要であるか理解することが可能となった。本成果は、機能回復をもたらす運動回路を再構築する方法論の研究に貢献すると期待される。

■M7

研究題目

分化後神経細胞における遺伝子置換技術の開発

氏名

生沼 泉

所属

兵庫県立大学大学院生命理学研究科・教授

近年、損傷した脳神経組織に幹細胞から作出した神経細胞を移植するというアプロー
チからの再生医療研究が精力的に進められているが、損傷部位の繊維性瘢痕で誘導される伸長阻害分子の生理活性が存在する環境下では、神経繊維の伸長が妨げられ、結局再生ができず、作出した神経細胞を物理的に移植するだけでは、機能的神経回路の再生には不十分である。我々は、損傷中枢神経細胞が受傷後一定期間は生存をすることに着目し、神経細胞神経細胞に備わっている内在性の神経伸長能力を賦活化させることで、損傷神経細胞が新たな神経回路を構築することを目指し、本研究において、神経細胞
内在性の神経伸長因子の人為的活性操作をするための遺伝子ノックインシステムの効率の至適化を行った。具体的には、分化後の神経細胞における相同組み換えと蛋白質標識の至適化、および従来から行われている C 末端以外にも N 末側へのノックイン技術の確立に成功した。

■M8

研究題目

拡張型心筋症に関連する糖鎖変化の同定と新規血液マーカーへの応用

氏名

岡谷（永井） 千晶

所属

産業技術総合研究所 創薬基盤研究部門・研究員

難治性心筋疾患である拡張型心筋症（DCM）の治療法開発には、心筋の病態や生理的状態を反映し重症度を評価できるバイオマーカーが必須である。本研究では、新規 DCM
マーカーの開発を目的として、DCM 関連糖鎖変化およびその糖鎖変化を示すタンパク質を探索した。DCM モデルマウスと正常マウスの心臓組織切片の比較糖鎖プロファイ
リングにより、DCM マウス心臓に特徴的な糖鎖を認識するレクチンを同定した。当該レクチンは、コラーゲン線維自体ではなく、線維化に関与する細胞外マトリックスタ
ンパク質群の糖鎖を認識することにより、線維化部位を特異的に染色することが判った。また、DCM マウス血漿では当該レクチン結合糖タンパク質量が増加し、その量は心筋リモデリングおよび心機能の程度と高い相関を示した。今後、当該レクチン結合
糖鎖を有する心臓由来分泌性糖タンパク質の新規 DCM マーカーとしての有用性を検証する予定である。

■M9

研究題目

革新的光イメージングと１ 細胞光操作法を用いた睡眠創薬研究への展開

氏名

小野 大輔

所属

名古屋大学 環境医学研究所 助教

哺乳類における概日時計の中枢は、視床下部視交叉上核に位置する。視交叉上核からの概日リズムは、睡眠・覚醒、体温、ホルモン分泌など様々な生理的現象に時間的な秩序を与える。しかしながら、どの神経経路がこれらの時間調節に関わっているかは依然明らかにされていない。本研究では、光操作と併用可能な新しい光計測ツールの開発を行い、概日時計から睡眠・覚醒調節至る新たな神経回路を探索した。視交叉上核特異的に蛍光タンパク質を発現させ、その軸索終末を確認した所、室傍核に多くの軸索終末が確認された。次に ChR2 を室傍核の神経細胞に発現させ 10Hz での光刺激を行ったところ、マウスの覚醒状態が増加した。これらの結果は視交叉上核から室傍核を介した睡眠覚醒調節機構の存在を示唆する。今後は、経路選択的な光操作・光計測を行い、睡眠・覚醒の概日時計による調節メカニズムの全貌を明らかにしてく。

■M10

研究題目

DNA リン酸化脱リン酸化酵素 PNKP の DNA 複製における分子機構の解析

氏名

島田 幹男

所属

東京工業大学 科学技術創成研究院 先導原子力研究所・ 助教

Polynucleotide phosphatase kinase (PNKP)は、DNA 末端を直接リン酸化および脱リン酸化する活性を持つ酵素で、DNA 損傷が生じた際に末端部分を修飾しその後の DNA ポリメラー
ゼや DNA リガーゼによる修復を円滑に進める上で重要な DNA 修復酵素である。本研究では PNKP の DNA 複製における活性の変化と他の DNA 修復因子との相互作用を、細胞生物学的手法を用いて解析した。その結果、PNKP の阻害は DNA 複製ストレスの応答因子である RPA32 や CHK1 のリン酸化を減少させることから DNA 複製ストレス応答経路に関与することが示唆された。また、3 次元培養法による細胞スフィアを用いた阻害剤投与実験の結果、PNKP 阻害剤を投与することにより効率的に細胞増殖を抑制することが明らかとなった。

■M11

研究題目

インフラマソーム制御因子を標的とした新規免疫賦活剤開発のための基
礎研究

氏名

鈴木 志穂

所属

東京医科歯科大学 大学院医歯学総合研究科
細菌感染制御学分野・助教

本研究では、Yeast 2-hybrid/GST‑pulldown 法によるスクリーニング、cIAPs‑siRNA ノック
ダウン解析、CRISPR‑Cas9 システムにより作出した cIAPs‑KO マクロファージを用いた解析を行い、その結果 GLMN と相互作用してインフラマソームの活性化を制御する新規レギュレーター分子として cIAP1 と cIAP2 を特定した。マクロファージ内では GLMNと cIAP が共局在しており、さらに GST‑pulldown 法では、GLMN が cIAP1 と cIAP2 のRING domain に特異的に結合することを証明した。加えて、cIAP1 の 580 番目およびcIAP2 の 566 番目に位置するセリン残基が、cIAPs と GLMN との相互作用に重要である
ことを見出した。また、GLMN が結合することにより cIAP の自己ユビキチン化が阻害され、cIAP がもつ E3 ubiquitin ligase 活性が著しく抑制されることを明らかにした。

■M12

研究題目

神経変性疾患原因タンパク質のプリオン様伝播の制御因子の同定と解析

氏名

鈴木 元治郎所属

東京都医学総合研究所 認知症プロジェクト・主席研究員

神経変性疾患の発症・進行を遅らせるためには、原因となるタンパク質凝集体のプリオン様伝播を阻害することが有効であると考えられる。そこで、本研究では、まずタンパク質凝集体のプリオン様伝播の酵母プリオンモデルを試みた。酵母プリオン[PSI+]の原因タンパク質であり、翻訳終結因子である Sup35 タンパク質の N 末側に存在するプリオンドメインを神経変性
疾患病因タンパク質と組み替えた Sup35 キメラタンパク質を発現する酵母を作成した。試験管内で合成した原因タンパク質凝集体や患者脳由来抽出物を導入したところ、プリオン化した酵母が単離された。プリオン化した酵母にヒトｃDNA ライブラリーを導入し、プリオン化の維持に必要な因子の同定を試みたが、現在のところそのような因子を同定することはできておらず、さらなる研究によりプリオン化の維持に必要な因子の同定を試みたい。

■M13

研究題目

病原微生物による免疫逃避を検出する宿主免疫システムの解明

氏名

平安 恒幸

所属

金沢大学 先進予防医学研究センター・ 特任准教授

病原微生物は、プロテアーゼによる抗体の切断や抑制化レセプターを利用した免疫制御により免疫から逃れる免疫逃避機構を進化させてきた。その一方で宿主は、活性化レセプターによって、病原微生物によって切断された抗体を認識し、病原微生物の抗体免疫逃避に対して感染防御を行っているという免疫システムが存在することが明らかとなってきている。そこで本研究では、このような病原微生物による免疫逃避機
構を検出する免疫システムの全貌を明らかにすることを目的とする。
本研究において、タンパク質実験や免疫応答実験により、活性化レセプターが補体抑制因子や血液凝固因子を認識することを明らかにすることができた。本研究により、宿主側は、病原微生物の補体免疫抑制機構やオプソニン化阻害機構といった免疫逃避機構に対抗する手段として、活性化レセプターを進化させて感染防御に働いている可能性が示唆される。

■M14

研究題目

転写因子 Runx2 を中心とする in vivo 骨形成ネットワークの解明

氏名

北條 宏徳

所属

東京大学大学院医学系研究科・助教

細胞の運命決定と分化制御機構の解明は発生学の中心命題であり、個体発生、組織再生および疾患の分子病態機構の理解に有用である。骨格発生のマスター転写因子 Runx2 は骨芽細胞の分化決定と軟骨細胞の成熟化に必須であることが知られているが、その転写制御機構は十分に明らかにはなっていない。そこで本研究では、Runx2 により制御される骨形成転写ネッ
トワークの解明を目指した。まず、骨芽細胞・軟骨細胞における Runx2 ゲノム結合領域を同定する目的で、Runx2 に対するクロマチン免疫沈降―シーケンス法（ChIP‑seq）解析を行った。その結果 Runx2 は、主に転写開始点から遠位のゲノム領域に作用し、各細胞種特異的な標的遺伝子群を制御する可能性が示唆された。現在、骨格系細胞におけるトランスクリプトーム解析とエピゲノム解析を進めており、将来的にはこれらのプロファイルとの統合解析に
より骨形成における転写制御機構の全貌（骨のゲノム設計図）の解明を目指す予定である。

■M15

研究題目

骨髄性腫瘍における難治性関連遺伝子 ASXL1 の機能解明

氏名

正本 庸介

所属

東京大学医学部附属病院 血液・腫瘍内科 ・ 講師

ポリコーム関連因子 ASXL1(additional sex comb like 1)の変異ノックインマウスを解析し、生理的発現量のヘテロ ASXL1 変異はマウスにおいて経時的に白血球減少及び骨髄球系統の血球形態異常を来たし、造血幹・前駆細胞分画の枯渇・アポトーシスの亢進・細胞周期の異常、さらには骨髄球系統への分化の偏りを起こし、低リスク MDS のような造血不全に類似した病態を起こすこと、長期のフォローアップによりその一部が MDS/MPN 様の病態を起こすことを明らかにした。また上記の造血幹細胞の枯渇をはじめとした表現型は、野生型
ASXL1 において保たれていた BMI1 との相互作用が変異型 ASXL1 では失われ、その結果
p16Ink4a のプロモーター領域への BMI1 のリクルートが起こらなくなり、ヒストン修飾
H2AK119ub のレベルが低下して p16Ink4a の発現量が異常に上昇することによってもたらされることが示唆された。

■M16

研究題目

微小核からの細胞競合制御シグナルの解明

氏名

丸山 剛

所属

早稲田大学 高等研究所・講師

上皮細胞層に生じたがん変異細胞（超早期がん細胞）は正常上皮細胞によって排除されるという細胞競合現象に着目した。この機構を対象とすることで、がん変異細胞を「予防的に除去する」治療薬の創出を目指してきた。これまで、20 万化合物の中から細胞競合現象を効率的に促進する化合物群を見出した。同定した化合物の一つに注目し、ターゲット解析
およびターゲット遺伝子のノックアウト解析より、同化合物はキナーゼ ZAKα をターゲットとすることを見出した。変異細胞内での ZAKαの局在を解析したところ、ZAKαは微小核に周辺に局在していることを見出した。また逸脱している変異細胞と微小核の相関を解析したところ、微小核を有する変異細胞が逸脱していることを見出した。集積した ZAKαは Myosin IIの集積を負に制御することで、変異から正常細胞へのシグナルを負に制御する。すなわち、正常細胞への細胞非自律的シグナルの上流に位置していることが示唆された。同定した化合物は、ZAKαの活性化を負に制御することで、正常細胞の変異細胞に対する排除能を亢進させたと考えられる。

■M17

研究題目

中枢神経系における「サイレント・マジョリティ」が情報表現に果たす
役割の解析

氏名

宮脇 寛行

所属

大阪市立大学大学院医学研究科・ 助教

中枢神経系を構成する神経細胞の活動には 100 倍以上もの大きなばらつきがあり、高い活動度を示すアクティブ細胞はごく少数のみである。しかし、中枢神経系で大多数を占める活動の低いサイレント細胞がどのような機能を担っており、どのような活動制御を受けているのかは明らかではない。そこで本研究では自由に行動しているラットの海馬および大脳皮質の神経細胞の活動を解析し、神経細胞の活動が脳状態の変化によってどのように制御されているかをアクティブ細胞とサイレント細胞で比較した。哺乳類の睡眠では、ノンレム睡眠とレ
ム睡眠という２つの脳状態が交互に現れる。サイレント細胞とアクティブ細胞はこの２つの脳状態が移行する際に異なる活動制御を受け、結果として神経活動のばらつきが変化することが明らかとなった。睡眠は記憶機能への関与が指摘されており、サイレント細胞とアクティ
ブ細胞が睡眠時に異なる活動制御を受けていることは、これらの細胞が異なる形で記憶機能に関わっている可能性を示唆している。

■M18

研究題目

プロテアーゼ誘導性皮膚炎のメカニズム解析

氏名

森田 英明

所属

国立成育医療研究センター研究所

免疫アレルギー・感染研究部アレ

ルギー研究室室長
古くからアトピー性皮膚炎患者の湿疹部位に黄色ブドウ球菌が特に多く存在する事
実は知られていたが、黄色ブドウ球菌の具体的な皮膚炎を惹起機構は不明な点が多い。
そこで本研究では、アトピー性皮膚炎の湿疹部位で、黄色ブドウ球菌の中でもプロテアーゼを産生する型のブドウ球菌が多く検出される事実に着目し、このブドウ球菌が産生するプロテアーゼによる皮膚炎発症・病態形成機構の解明を行うことを目的とした。その結果、黄色ブドウ球菌が持つプロテアーゼ活性が、皮膚のバリア機能を破壊するのみならず、獲得免疫系を介さない機序で、皮膚炎症を惹起することが判明した。このプロ
テアーゼによる皮膚炎には、近年新たに同定された 3 型自然リンパ球の関与が示唆された。
プロテアーゼによる皮膚炎症惹起機構は、アトピー性皮膚炎の病態に寄与している可能性
がある。

■M19

研究題目

心房性ナトリウム利尿ペプチドの血管制御による革新的癌治療法の開発

氏名

野尻 崇

所属

市立東大阪医療センター 呼吸器外科 ・ 副部長（旧所属：国立循環器病研究センター研究所 生化学部・ペプチド創薬研究室長）
固形癌を完治することは極めて困難である。早期癌では手術可能であるが、手術に伴う合併症のリスクを伴い、完全切除後であっても、術後再発のリスクを抱えることになる。進行癌では、多量の抗癌剤に伴う重篤な副作用に悩まされ、かつ完治できる確率は非常に低いのが現状である。これらの問題点を解決できれば、癌治療成績の飛躍的向上が期待できる。
心房性ナトリウム利尿ペプチド(ANP) は、現在急性心不全治療薬として臨床応用されている心臓ホルモンであり、様々な心血管保護作用を有することが明らかになっている。我々はこれまでに、肺癌手術周術期に ANP を投与することにより、急性期合併症だけでなく術後早期再発を抑制することを報告した。本メカニズムとして、ANP の血管保護作用により、癌細胞の血管への接着を抑制し、様々な癌腫の転移を防ぐことができることを明らかにしており、ANP の血管制御作用に注目している。今回、ANP の血管制御による新しい癌治療戦略について検討した。

■B1
研究題目

VIP1 を中心とした植物の機械刺激応答制御因子の統合的解析

氏名

津釜 大侑

所属

東京大学アジア生物資源環境研究センター・ 准教授

VIP1 は、モデル植物・シロイヌナズナの bZIP 型転写因子である。細胞が機械刺激を受容すると、VIP1 は一過的に核に蓄積し、根の接触屈性（根が物体に触れた際にそれを避けるように屈曲する性質）を抑制する。機械刺激受容時の VIP1 の核‑細胞質往復の制御にはリン酸化とカルシウム信号伝達が関与するが、これに関わる具体的な因子は不明である。また、VIP1 の上流で機能する機械刺激受容体も不明である。本研究においては、免疫沈降法により新規の VIP1 相互作用因子の候補を得た。また、幾つかの VIP1 相互作用因子や機械刺激受容体の候補に関して詳細な解析を行った。この
結果、カルモジュリンとプロテインホスファターゼ 2A B

ファミリーサブユニットがVIP1 と相互作用すること、LATS 様プロテインキナーゼが VIP1 をリン酸化すること、既知の機械刺激受容体の候補でなく未知のストレプトマイシン感受性の因子が VIP1の上流で機能することが示唆された。

■B2
研究題目

膜交通制御因子の機能改変による高機能作物の生産

氏名

伊藤 瑛海

所属

国際基督教大学 アーツ・サイエンス学科 自然科学・特任助教

真核細胞のなかは、さまざまな機能をもったオルガネラに区画化されており、オルガネラ間では活発にタンパク質や脂質のやりとりが行われている。この仕組みは膜交通とよばれ、Rab GTPase をはじめとした分子群により厳密に制御されている。本研究
課題は、世界主要農作物であるトマト（Solanum lycopersicum）の果実形成や品質維
持における膜交通の役割を明らかにすることで、新しい品種改良や生産技術の開発への展開を目指した。まず、トマトゲノム情報データベースを参照し系統解析を行った
ところ、トマトゲノムには 55 個の Rab GTPase が存在し、液胞への膜交通を制御する
RAB のひとつが果実で特に高い発現を示すことを示した。現在までに優性阻害型や恒常活性型 RAB を発現する形質転換トマトを確立し、今後、表現解析に取り組む。

■B3
研究題目

化学合成タンパク質を利用した天然物の鏡像体からの医薬品探索

氏名

大石 真也

所属

京都大学大学院薬学研究科・ 准教授

鏡の中に投影される天然物・天然資源から医薬品のリード化合物を効率的に見出す
ための新しい探索技術の開発研究の一環として、細胞増殖のシグナル伝達に関与する
Src SH2 ドメイン阻害剤の新規探索技術を確立した。まず、107 残基からなる Src SH2
ドメインを固相合成法と native chemical ligation により化学合成するプロセスを確立し、これを用いて Src SH2 ドメインの鏡像タンパク質と各種修飾基を施したプローブを合成した。適切なフォールディング条件に付した Src SH2 ドメインは、リン酸
化チロシン含有ペプチドとの結合活性を示すとともに、Src SH2 ドメインに作用する化合物の探索に利用可能であることを実証した。本手法は、キラルな天然物・天然資
源の創薬リソースとしての価値を高めることを可能にするものであり、抗がん剤の新たなシーズ探索のための新たなアプローチとして応用が期待される。

■B4
研究題目

統計熱力学計算法を用いた耐熱化セロトニン 2A 受容体の作製と構造解析

氏名

鈴木 七緒

所属

千葉大学大学院理学研究科 ・ 特任研究員

本研究では、不活性型 5-HT2AR の高分解能 X 線構造解析を目指し、我々が開発した統計熱力学計算法を用いた熱安定化変異体の選出、熱安定性評価、リガンド結合評価、大量発現・精製ならびに結晶化を行った。統計熱力学計算から選出した 15 種の安定化予測変異のうち最も可溶化効率が良かった mutN について熱安定性ならびにリガンド結合を調べた
ところ、mutN は wt より見かけの変性中点温度（Tm）が約 7 度高く、フォールド率も約 10 倍増加していた。さらに、拮抗薬の Ketanserin と Aripiprazole の添加で Tm が約 3 度上昇し、他の拮抗薬である Spiperon への結合能も有していた。以上より mutN は拮抗薬が結合可能な熱ing 電子版に2019年1月15日付けで発表さ mutN は高濃度まで濃縮可能で結晶化を行ったが、回折点が得られる結晶は得られていない。今後はそれぞれのリガンドで結晶化スクリー
ニングを行う予定である。

■B5
研究題目

Fat カドヘリンによる軸索形成メカニズムの解析

氏名

竹内 未紀

所属

名古屋大学 生物機能開発利用研究センター 博士研究員

神経回路ネットワークは、神経軸索‑標的細胞間の正確なシナプス形成により構築される。小脳が機能する上で重要な役割をもつ顆粒細胞は、多様な情報を標的のプルキンエ細胞へ効率良く伝達するために、各々の軸索が平行に走行する特殊な形態をもつことが知られている。軸索同士が互いに重なり合わない形態を作り出すには、何らかの相互作用が必要と予想されるが、その分子機構は不明であった。我々は、
RNA‑sequencing による小脳ニューロンのトランスクリプトーム解析を行い、軸索形成に関わると予想される遺伝子の CRISPR/Cas9 法による変異体作製を行った。本研究では、Fat2 カドヘリンに着目し、その変異体の表現型観察を行った。fat2 変異体の解析から、顆粒細胞上に存在する膜タンパク質が、軸索の正常な束化と、標的細胞への投射を制御する因子であることが明らかになった。

■B6
研究題目

顧みられない熱帯病；アフリカ睡眠病治療薬創製を指向した
12 員環マクロライド類の合成

氏名

野口 吉彦

所属

北里大学北里生命科学研究所 天然物創薬推進プロジェクト 特任助教

申請者は顧みられない熱帯病の一つである抗トリパノソーマ原虫に強力な活性を示す新規12員環マクロライド、アクチノアロライドAの収束的全合成研究を進め、次の結果を得た。先ず、アクチノアロライドAの骨格構築に必要な全ての部分骨格の合成並びにC‑C結合連結による鎖状中間体の合成を達成し、論文に報告した。
更にマクロフェノールエーテルの合成やβ‑ケトラクトンへの変換法の確立を行った。様々な環化法の検討を行った結果、光延反応を用いることでマクロフェノールエ
ーテルを合成できた。次いでβ‑ケトラクトンへの変換法の確立を行った。芳香環のバーチ還元並びに生じたエノールエーテルの化学選択的酸化解裂の条件検討、基質の最適化を行い、望むβ‑ケトラクトンを得られる条件を見出した。得られた知見をもとに全合成を進めるとともに、簡略化した誘導体の創製に寄与するため中間体に設定したフェノールエーテル等を活性試験に供給し、評価を行う。

■B7
研究題目

ドパミンニューロンの分化誘導核内受容体Nurr1の制御分子を用いたパーキン
ソン病改善薬の創製

氏名

松島 綾美

所属

九州大学大学院理学研究院・ 准教授

本研究の最終目標はパーキンソン病治療薬を開発ことであり、そのために本研究課
題では、脳神経系に発現するヒト核内受容体 Nurr1 の結合化合物を、既存と異なる原理でスクリーニングできる方法の開発を目的とする。Nurr1 は神経細胞の分化誘導に重要であると考えられ、これを自在に制御できれば、そのメカニズムを利用した新規
パーキンソン病治療薬の開発研究が大きく前進すると強く期待される。
本研究では、Nurr１に結合する新規な化合物を得るための新しい試験法を構築することを目的として、Biacore T100 を用いた、コアクチベータペプチドとの生体相互作用解析試験を実施した。その結果、SMRT と NCoR に由来するペプチドは結合し、SRC1 に由来するペプ
チドは結合しなかった。そこで、新規試験法を構築するために、その構造要因解明を行なった。その結果、SRC１では、ヒスチジン側鎖と Nurr1 との衝突が予想され、そのために結合できないと考えられた。

■B8
研究題目

ビタミン D レセプター遺伝子変異に起因する骨疾患治療薬の開発

氏名

安田 佳織

所属

富山県立大学 工学部 医薬品工学科 ・ 助教

ビタミン D 依存性くる病は、難病指定されている骨疾患であり、ビタミン D 代謝酵素もしくはビタミン D レセプター（VDR）の遺伝子変異が原因で起こる。VDR が原因の場合（Ⅱ型）には、既存の活性型ビタミン D 製剤では十分な効果が得られず、有用な治療法が確立されていないのが現状である。本研究では、Ⅱ型くる病患者に対する有効な治療薬を目指し、変異型 VDR（R274L）に焦点を当て、有用なビタミン D 誘導体の探索、評価を行った。その結果、2 位にアゾール基を有する AH‑1 が、天然の活性型ビ
タミン D3 に比べて変異型 VDR と高い結合能を示すこと、また、代謝酵素による不活性化を受けにくいことがわかり、Ⅱ型くる病に対して有効性を示す可能性が高いと考えている。in vivo で効能を証明することを目的とし、CRISPR/Cas9 システムを用いて、VDR 変異型ラットを作出した。本ラットは骨形成不全を示しており、今後、Ⅱ型
くる病に対する候補化合物の治療効果を調べる上で有用である。

■B9
研究題目

脂質による膜蛋白質の機能調節機構の溶液 NMR 解析手法の開発

氏名

横川 真梨子所属

慶應義塾大学 薬学部 生命機能物理学講座・専任講師

本研究では、脂質との直接の相互作用による膜蛋白質の機能調節機構を解明するための、溶液 NMR 解析手法の開発を目的とした。解析対象には、異物の侵入に対する迅速な
生体防御応答に関わる、電位依存性プロトンチャネル（Hv1）とアラキドン酸（AA）の相互作用を用いた。まず、溶液 NMR 解析に適した生理的な膜環境を再現するため、37 残基のペプチドを用いた汎用的なナノディスク調製法の確立を目指したが、このペプチドは大腸菌発
現系での収量が少なく、水溶性が低いことが分かった。また、脂質二重膜中での解析法確立に先立ち、界面活性剤中での相互作用解析を行った。等温滴定型カロリメトリーによりHv1 と AA の結合親和性とストイキオメトリーを算出し、AA と Hv1 の分子間 NOE 測定を行う
ことで、Hv1 上のどこに AA が結合するかを原子レベルで解析した。今後、ナノディスク中のHv1 を対象にして同様の解析を進める。

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Toxicology and Chemistry(SETAC) North America 39th
Annual Meeting

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TEL̢ 042-725-2576! ! FAX̢ 042-729-4009
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