鳥取県産農産物における有用成分の探索とそれを用いた評価法の確立

鳥取県産農産物における有用成分の探索とそれを用いた評価法の確立
山本敦

史

山 本 敦 史１．はじめに１． はじめに１．１．食品の表示を巡る状況

１．１． 食品の表示を巡る状況

昨今の健康食品ブームによって、非常に多くの健康食品が市場に昨今の健康食品ブームによって、非常に多くの健康食品が市場に溢れている。一部の製品は科学的根拠を示さず、著名人が製品を用溢れている。一部の製品は科学的根拠を示さず、著名人が製品を用いたことによる感想のみを広告として用いるものもある。製品の有いたことによる感想のみを広告として用いるものもある。製品の有効性はその広告において強調表示されることが多く、一般消費者に効性はその広告において強調表示されることが多く、一般消費者に無条件、無制約に当てはまるものと受け取られることがある。その無条件、無制約に当てはまるものと受け取られることがある。そのため、仮に例外があるときはその旨を適切に表示しなければ景品表ため、仮に例外があるときはその旨を適切に表示しなければ景品表示法の不当表示となるおそれがある。消費者庁はこれらの広告を実示法の不当表示となるおそれがある。消費者庁はこれらの広告を実態調査し、問題点をまとめた報告書（2018 年）を公表しており、態調査し、問題点をまとめた報告書（2018年）を公表しており、数

図１ 機能性表示食品の登録件数から取り
図１ 下げ件数を除いた正味の累積登録数
機 能性表示食品の登録件数から取り下げ件数を除いた正味る。食品の表示については、2015 年に食品表示法が施行され、それ食品の表示については、2015年に食品表示法が施行され、それまでの累積登録数数値の伴う根拠の表示を求めることも視野に入れているようであ値の伴う根拠の表示を求めることも視野に入れているようである。

まで JAS 法、食品衛生法、健康増進法にまたがっていた食品表示に関する規定が一元化された。 また同JAS法、食品衛生法、健康増進法にまたがっていた食品表示に関す

年、機能性表示食品の制度が始まっている。機能性表示食品は国が審査する特定保健用食品とは異なり、る規定が一元化された。また同年、機能性表示食品の制度が始まっている。機能性表示食品は国が審事業者の責任において科学的根拠に基づき機能性を表示したものである。機能性の評価は最終製品を用い査する特定保健用食品とは異なり、事業者の責任において科学的根拠に基づき機能性を表示したものた臨床試験を行うか、機能性に関与する成分に関する文献調査によって行われる。文献調査による方法はである。機能性の評価は最終製品を用いた臨床試験を行うか、機能性に関与する成分に関する文献調
比較的事業者の負担の少ない方法であるが、それでも機能性に関与する成分の分析を行う必要がある。図査によって行われる。文献調査による方法は比較的事業者の負担の少ない方法であるが、それでも機
1 に示すように制度開始から登録件数は増加し 2019 年 6 月時点で、2000 件以上の食品が登録されている。機能性表示食品制度は食品業界にとって食品の PR 手段として受け入れられたといえる。しかしなが能性に関与する成分の分析を行う必要がある。図１に示すように制度開始から登録件数は増加し2019ら、機能性表示食品については広告表示のあり方から登録が取り下げられるケースもあり、県内事業者に年６月時点で、2000件以上の食品が登録されている。機能性表示食品制度は食品業界にとって食品のおいてもその登録を取り下げるケースがあった（流通産業新聞 2016）。健康食品等の有効性に対して、十PR手段として受け入れられたといえる。しかしながら、機能性表示食品については広告表示のあり分な根拠を示すことが今まで以上に求められていると言える。

方から登録が取り下げられるケースもあり、県内事業者においてもその登録を取り下げるケースがあった（流通産業新聞2016）。健康食品等の有効性に対して、十分な根拠を示すことが今まで以上に１．２．鳥取県の農産物求められていると言える。

2015 年 10 月にまとめられた「鳥取県元気づくり総合戦略」では、高品質な農産物を高付加価値化し農林水産業を活性化していくことが謳われている。産業技術センター食品開発研究所でもこの戦略に基づき、１．２．鳥取県の農産物「健康維持・増進」につながる機能性食品の開発を進めようとしている。

2015年10月にまとめられた「鳥取県元気づくり総合戦略」では、高品質な農産物を高付加価値化し東京オリンピックを見据え、アスリートからの注目も高まるブロッコリーや日本きのこセンターが開発し農林水産業を活性化していくことが謳われている。産業技術センター食品開発研究所でもこの戦略にた「鳥取茸王」等多くの食材が県内には存在している。本研究ではこれらの食材に含まれる栄養成分の分基づき、「健康維持・増進」につながる機能性食品の開発を進めようとしている。
析及び探索を行い、信頼性の高い根拠とすることのできる評価法を確立することを目的とする。例えば、
西部ではエビスグサを用いた薬草茶の製造や、東部では薬用きのこやハタケシメジの新品種が栽培されて東京オリンピックを見据え、アスリートからの注目も高まるブロッコリーや日本きのこセンターが開発した「鳥取茸王」等多くの食材が県内には存在している。本研究ではこれらの食材に含まれる栄8

養成分の分析及び探索を行い、信頼性の高い根拠とすることのできる評価法を確立することを目的とする。例えば、西部ではエビスグサを用いた薬草茶の製造や、東部では薬用きのこやハタケシメジの新品種が栽培されている。江戸時代、西部ではエビスグサを用いた薬草茶を生産していた伝統があっいる。江戸時代、西部ではエビスグサを用いた薬草茶を生産していた伝統があったが、その伝統はしばらたが、その伝統はしばらく失われていた。近年、その薬草茶を復活させることで地方創生に貢献するく失われていた。近年、その薬草茶を復活させることで地方創生に貢献するプロジェクトが始動している。
プロジェクトが始動している。エビスグサの種子であるケツメイシから作る茶には整腸作用などの効
エビスグサの種子であるケツメイシから作る茶には整腸作用などの効能があるとされている。その有効成能があるとされている。その有効成分にアントラキノンとその誘導体があると考えられているが、詳分にアントラキノンとその誘導体があると考えられているが、詳細は解明されていない。また、日本きの細は解明されていない。また、日本きのこセンター菌蕈研究所では生薬ブクリョウの栽培実用化を検こセンター菌蕈研究所では生薬ブクリョウの栽培実用化を検討している。国内での需要のほとんどは中国からの輸入に頼っており、中国国内の需要増もあり、将来的なブクリョウの安定供給が課題となっている。
討している。国内での需要のほとんどは中国からの輸入に頼っており、中国国内の需要増もあり、将これもまた含有成分等に未解明の点がありその有効性の根拠を示す必要がある。本研究では県産ブクリョ
来的なブクリョウの安定供給が課題となっている。これもまた含有成分等に未解明の点がありその有ウに含まれる成分を分析し、中国産ブクリョウとの比較を行い、栽培実用化を支援する。新規の食用きの効性の根拠を示す必要がある。本研究では県産ブクリョウに含まれる成分を分析し、中国産ブクリョこの開発に関しても、有効成分の探索を行う。

ウとの比較を行い、栽培実用化を支援する。新規の食用きのこの開発に関しても、有効成分の探索を行う。

１．３．ブクリョウ
ブクリョウとはマツホドの菌核であり、通例外層をほとんど取り除１．３．ブクリョウいたものをいう。中国では古くから中医（漢方）として薬用に供されてブクリョウとはマツホドの菌核であり、通例外層をほとんど取り除いきた。ブクリョウの含有成分には図 2 に示すような成分が多く含またものをいう。中国では古くから中医（漢方）として薬用に供されてきれ，中でもパキマ酸のようなラノスタン型トリテルペン酸が薬理作用た。ブクリョウの含有成分には図２に示すような成分が多く含まれ、中を示す成分の一つと考えられている(田中ら 1984、Ríos 2012)。ブクリ

でもパキマ酸のようなラノスタン型トリテルペン酸が薬理作用を示す成ョウは国内で年間 1,500 トン以上使用されているが、国内での生産量は 1 % 未満であり中国からの輸入品が市場を独占している。菌蕈研究分の一つと考えられている（田中ら1984、Ríos2012）。ブクリョウは国所では国産品の生産を目指し，すでにブクリョウの菌核を作ることに内で年間1,500トン以上使用されているが、国内での生産量は１%未満では成功しているが、その有効成分の評価がまだ十分ではない。
あり中国からの輸入品が市場を独占している。菌蕈研究所では国産品の1.4 農産物の評価に用いる分析法

生産を目指し、すでにブクリョウの菌核を作ることには成功しているが、本研究では分析機器の一つである質量分析計を用いて、食品の機能その有効成分の評価がまだ十分ではない。

性成分の分析を行う。質量分析法は、食の安全や環境分析において現在
図 ２ ブクリョウ含有成分最も用いられている手法であり、残留農薬等の微量成分を検出できる。 図２
ブクリョウ含有成分
食の安全に関して、残留農薬等では 2016 年にポジティブリスト制度が始まり、現在では約 800 種類の1．4．農産物の評価に用いる分析法

本研究では分析機器の一つである質量分析計を用いて、食品の機能性成分の分析を行う。質量分析
農薬等が設定されている。質量分析法はこれらの膨大な分析対象に対応が可能なほぼ唯一の方法である。
法は、食の安全や環境分析において現在最も用いられている手法であり、残留農薬等の微量成分を検
近年の質量分析計は非常に精密な分析が可能となっており、一度の測定により含まれる成分の質量を詳細出できる。食の安全に関して、残留農薬等では2006年にポジティブリスト制度が始まり、現在では約に決定することができる。このような質量分析計は高分解能質量分析計 (HRMS) と呼ばれ、その精密な質量を解析することで含有成分の分子式を決定できる。HRMS を用いると 800 種類と言わず、無数の成分の800種類の農薬等が設定されている。質量分析法はこれらの膨大な分析対象に対応が可能なほぼ唯一分析が可能となる。このような手法をノンターゲット分析という。本報告では、ブクリョウのトリテルペの方法である。近年の質量分析計は非常に精密な分析が可能となっており、一度の測定により含まれン酸を評価するための分析法開発について述べる。
る成分の質量を詳細に決定することができる。このような質量分析計は高分解能質量分析計（HRMS）と呼ばれ、その精密な質量を解析することで含有成分の分子式を決定できる。HRMSを用いると800２．実験種類と言わず、無数の成分の分析が可能となる。このような手法をノンターゲット分析という。本報

分析機器にはサイエックス社の液体クロマトグラフ ExionLC AD と質量分析計 X500R を用いた。液体ク告では、ブクリョウのトリテルペン酸を評価するための分析法開発について述べる。

ロマトグラフィーのカラムは化学物質評価機構の L-Column2 を用いた。菌蕈研究所にて中国産、および条件を変更して栽培したブクリョウの粉末各 1 g をクロロホルム／メタノール (1:1) 10 mL に分散させ、9２．実験
分析機器にはサイエックス社の液体クロマトグラフExionLC ADと質量分析計X500Rを用いた。液体クロマトグラフィーのカラムは化学物質評価機構のL-Column2を用いた。菌蕈研究所にて中国産、60°C で 6 時間 170 rpm で振とうし抽出した。一晩静置の後、吸引ろ過し残渣を再び同じ抽出溶媒で抽および条件を変更して栽培したブクリョウの粉末各1gをクロロホルム／メタノール（１: １）10mLに出した。ろ液を合わせ乾固させたものをメタノールに溶解し、希釈して機器分析用の試料とした。ブクリョ

分散させ、60℃で６時間170rpmで振とうし抽出した。一晩静置の後、吸引ろ過し残渣を再び同じ抽ウ含まれるトリテルペン酸の比較を行うための機器分析条件の検討を行った。トリテルペン酸標準試薬（パ出溶媒で抽出した。ろ液を合わせ乾固させたものをメタノールに溶解し、希釈して機器分析用の試料
キマ酸、エブリコ酸、デヒドロエブリコ酸、トラメテノール酸、ポリポレン酸、ポリコ酸 A, B、アセチルとした。ブクリョウ含まれるトリテルペン酸の比較を行うための機器分析条件の検討を行った。トリヒドロキシトラメテノール酸、アセチルヒドロキシデヒドロトラメテノール酸）は長良サイエンスから購入
テルペン酸標準試薬（パキマ酸、エブリコ酸、デヒドロエブリコ酸、トラメテノール酸、ポリポレンした。
酸、ポリコ酸A,B、アセチルヒドロキシトラメテノール酸、アセチルヒドロキシデヒドロトラメテノー
３．結果と考察ル酸）は長良サイエンスから購入した。
機器分析の例を図 3 に示す。左は中国産のブクリョウ、右は鳥取県産のブクリョウの一例である。緑に明るく色付けされているところは物質が検出されているところであり、パキマ酸などの物質が検出されて３．結果と考察いるのがわかる。C30H44O5 （分子量 484.668）と C31H48O4 （分子量 484.712）では分子量の差が僅か 0.044

機器分析の例を図３に示す。左は中国産のブクリョウ、右は鳥取県産のブクリョウの一例である。
であるが X500R は質量分解能が高く、これらを十分に分離できた。図 4 に示すように C31H48O4 のデータ

緑に明るく色付けされているところは物質が検出されているところであり、パキマ酸などの物質がにはいくつかのピークが観測されており、デヒドロトラメテノール酸のほか、いくつかの未報告の同一分子検出されているのがわかる。C30H44O5（分子量484.668）とC31H48O4（分子量484.712）では分子量の式のトリテルペン酸が検出されていると考えられた。L-Column2 は分子の立体構造の識別能が高いカラム差が僅か0.044であるがX500Rは質量分解能が高く、これらを十分に分離できた。図４に示すようにであり、本検討においても僅かな構造の違いしかないトリテルペン酸を良好に分離できていると考えられ

C31H48O4のデータにはいくつかのピークが観測されており、デヒドロトラメテノール酸のほか、いくた。標準試薬が入手可能であった 9 種類のトリテルペン酸について定量分析法を検討し良好な検量線を得た（図 5）。検討した定量分析法を用いてトリテルペン酸の含有量を鳥取県産と中国産で比較するとパキマ

図３

図３ ブクリョウ抽出液のノンターゲット分析例（左：中国産、右：県内産、図中の数値は実測の分子量）

ブクリョウ抽出液のノンターゲット分析例（左：中国産、右：県内産、図中の数値は実測の分子量）10

つかの未報告の同一分子式のトリテルペン酸が検出さ酸の含有量はほぼ同等であったが、一部ポリコ酸 A,B やトラメテノール酸の含有量に差が見られた。まれていると考えられた。L-Column2は分子の立体構造の酸の含有量はほぼ同等であったが、一部ポリコ酸 A,た，栽培条件によってもトリテルペン酸の含有量に差識別能が高いカラムであり、本検討においても僅かなB やトラメテノール酸の含有量に差が見られた。まポリ コ 酸 B

C31 H 48 O4

C30 H 44 O5

分子量 484.710

分子量ポリ コ484.667
酸Bが見られた。クロロホルム／メタノールによる抽出物構造の違いしかないトリテルペン酸を良好に分離できた，栽培条件によってもトリテルペン酸の含有量に差

C31 H 48 O4

C30 H 44 O5

分子量 484.710

分子量 484.667の質量の 10-20% が今回定量分析の対象とした 9 種ていると考えられた。標準試薬が入手可能であった９が見られた。クロロホルム／メタノールによる抽出物類のトリテルペン酸となり、それ以外の成分も多く含の質量の 10-20% が今回定量分析の対象とした 9 種種類のトリテルペン酸について定量分析法を検討し良まれることが示唆される結果となった。現時点で、ブ類のトリテルペン酸となり、それ以外の成分も多く含好な検量線を得た（図５）。検討した定量分析法を用いクリョウの菌核形成は菌株自体に依存している。ま 図４ ノンターゲット分析データから取り出した C30H44O5,C31H48Oノ4 のデータ
ンターゲット分析データから取りまれることが示唆される結果となった。現時点で、ブ 図４てトリテルペン酸の含有量を鳥取県産と中国産で比較すた，
菌核は表面の皮や内部に入り込んだ不純物を除か出した
C30H44O5, C31H48O4 のデータ
C30H44O5,
クリョウの菌核形成は菌株自体に依存している。ま 図４ ノンターゲット分析データから取り出したるとパキマ酸の含有量はほぼ同等であったが、一部ポリ
C31H48O4 のデータなくてはならず、廃棄する部分が多い。今回検討した機器分析
た，
菌核は表面の皮や内部に入り込んだ不純物を除かコ酸A,Bやトラメテノール酸の含有量に差が見られた。また、栽法を用いて、収量・不純物量・有効成分量を評価することができなくてはならず、廃棄する部分が多い。今回検討した機器分析
培条件によってもトリテルペン酸の含有量に差が見られた。クロるようになるため、新たなブクリョウ品種の開発に繋げられる法を用いて、収量・不純物量・有効成分量を評価することができロホルム／メタノールによる抽出物の質量の10-20%が今回定量分ようになると期待される。
るようになるため、新たなブクリョウ品種の開発に繋げられる

析の対象とした９種類のトリテルペン酸となり、それ以外の成分ようになると期待される。

参考文献も多く含まれることが示唆される結果となった。現時点で、ブク〔1〕消費者庁：広告表示に接する消費者の視線に関する実態調査
リョウの菌核形成は菌株自体に依存している。また、菌核は表面
参考文献
報告書、2018の皮や内部に入り込んだ不純物を除かなくてはならず、廃棄する〔1〕消費者庁：広告表示に接する消費者の視線に関する実態調査〔2〕流通産業新聞 2016 年 12 月 1 日・8 日合併号

報告書、2018
部分が多い。今回検討した機器分析法を用いて、収量・不純物量・

図５ パキマ酸の検量線〔3〕田中昭子、入江貴美子：サルノコシカケ類の化学成分および薬理作用について、相愛大学相愛女子短期大パキマ酸の検量線
図５図５パキマ酸の検量線〔2〕流通産業新聞 2016 年 12 月 1 日・8 日合併号
有効成分量を評価することができるようになるため、新たなブクリョ
学研究論集、31：25-36、1984〔3〕田中昭子、入江貴美子：サルノコシカケ類の化学成分および薬理作用について、相愛大学相愛女子短期大ウ品種の開発に繋げられるようになると期待される。

参考文献〔4〕Ríos J. L., Andújar I., Recio M. C., Giner R. M.: Lanostanoids from Fungi: A Group of Potential
学研究論集、31：25-36、1984
Anticancer Compounds, J Nat Prod, 75:2016–2044, 2012.
〔4〕Ríos J. L., Andújar I., Recio M. C., Giner R. M.: Lanostanoids from Fungi: A Group of Potential
Anticancer Compounds, J Nat Prod, 75:2016–2044, 2012.

〔1〕消費者庁：広告表示に接する消費者の視線に関する実態調査報告書、2018〔2〕流通産業新聞2016年12月１日・８日合併号〔3〕田中昭子、入江貴美子：サルノコシカケ類の化学成分および薬理作用について、相愛大学相愛女子短期大学研究論集、31：25-36、1984〔4〕Ríos J. L., Andújar I., Recio M. C., Giner R. M. : Lanostanoids from Fungi: A Group of Potential
Anticancer Compounds, J Nat Prod, 75 : 2016–2044, 2012.
本研究は、公立鳥取環境大学特別研究費の助成を受けたものです。

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