導入キット

Luc siRNA＋AteloGene®

Luc siRNA 単独

8642投与前投与 1 日後投与前

投与 1 日後(×10 6 photon/ sec)

10

組織 1mg あたりの siRNA 量 (ng)

局所投与用/全身投与用

AteloGene®は核酸を各臓器に効率よくデリバリーします
Luciferase siRNA投与によるルシフェラーゼ発現抑制

Luc siRNA 単独
Luc siRNA +AteloGene®

肝臓

肺脾臓

腎臓

各組織中から検出された siRNA 量AteloGene®
全身投与事例

ルシフェラーゼを安定発現する前立腺がん細胞の全身転移モデルへLuciferase siRNA (Luc siRNA)＋AteloGene®を尾静脈投与し、1日後にイメージング装置（IVIS）を用いて、siRNAのデリバリー効果を確認した。
また、各組織中のsiRNA量を測定したところ、
AteloGene® 使用群ではsiRNA単独投与と比較してsiRNAが各臓器に効率よくデリバリーされることが確認された。
（データ提供：国立がんセンター 竹下文隆部門長、東京医科大学 落谷孝広教授・参考文献 1 参照）

AteloGene®は毒性による遺伝子発現変動が少なく、核酸導入効果が明確です
マイクロアレイを用いた肝毒性比較

相対発現量

AteloGene®
Liposome

AteloGene®
全身投与事例
AteloGene®またはLiposomeをマウス尾静脈投与した後、24時間後に肝臓における各種遺伝子発現量の変動をマイクロアレイにて解析した。
AteloGene®投与群：Liposome投与群に比べて発現量が変動している
in vivo 核酸導入に適している
遺伝子数やその変動幅は明らかに少なく、ことが示された。
Liposome投与群：Cdkn1A やCcl2 などのアポトーシス関連遺伝子や、生体刺激反応／防御反応／ウイルス応答／ストレス応答／免疫応答／創主要なアポトーシス関連遺伝子の発現量傷反応などに関連する遺伝子の発現量が変動し、高毒性が示唆された。
（社内データ・参考文献 2 参照）

siRNA/miRNA 導入キット AteloGene® 局所投与用 / 全身投与用
AteloGene®の特徴● 核酸と複合体を形成し、核酸を分解から保護● 二本鎖RNAに対する免疫応答を抑制● 毒性による遺伝子発現変動が少なく、核酸導入効果が明確● ゲルから核酸を徐放する「Local Use “Quick Gelation”」、ゲルを作らず全身に送達する「Systemic Use」
を選択可

AteloGene® の主成分であるアテロコラーゲンは、核酸と適切な濃度や割合で混合することにより、生体内への導入に適した複合体をin vivo で効率よく組織の細胞内に導入されます。
形成します。複合化により核酸分解酵素による核酸の分解を抑え、局所投与用の AteloGene® Local Use “Quick Gelation”（QG）
は、生体内でゲル化する性質を持っているため、核酸が投与部位に留まり徐放効果が得られます。一方、全身投与用のAteloGene® Systemic Use は、ゲルを形成しないように調整されているため、尾静脈投与により血流にのせて全身に効率よく核酸をデリバリーします。

アテロコラーゲンによる核酸導入の機序
未処理群

FTS添加群

スフェロイドサイズの相対値

1.2*

1.0

スフェロイド培養した後、PLK1 siRNA 添加をする増殖抑制試験系を作製した。各種エンドサイトーシスの阻害剤

1.00.80.80.60.60.40.40.20.20.00.0

非添加

In vitroモデル系として、非小細胞肺がん（H1299）細胞を1.2*P<0.05

PLK1 siRNAで前処理する実験の結果、左記のマクロピノサイトーシスの阻害剤 Farnesyl thiosalicylic acid（FTS）添加群では、未処理群と比べて PLK1 siRNA の効果が抑制された。
このことから、アテロコラーゲンと核酸の複合体はマクロピノサイトーシスを介して細胞に取り込まれていると示唆された。

アテロコラーゲン（社内データ）PLK1 siRNA/アテロコラーゲン

使用方法
AteloGene® の調製方法はとても簡単です。核酸溶液を1投与あたり、局所投与では0.5-1.0nmol、全身投与では2.0-4.0 nmolとなるようにAteloGene® 溶液と穏やかに混合するだけで、すぐに投与が可能です。

1. 混和

2. 遠心脱泡

3. 投与

QG Buﬀer
核酸溶液
AteloGene®
＜使用キット＞
Systemic Use OR＜使用キット＞
Local Use
“Quick Gelation”

核酸+AteloGene®混合溶液

AteloGene® は核酸を保護し、局所投与用はすばやくゲル化し核酸を徐放します
核酸分解酵素からの保護効果およびマウス皮下でのゲル形成
アガロースゲル電気泳動
0siRNA 単独

5153045siRNA 単独群と siRNA+AteloGene®

投与 10 分後のゲル60分後

従来品

AteloGene® QG

QG群 に そ れ ぞ れRNaseを 添 加 後、37℃下で経時的に核酸分解度を確認した。その結果、AteloGene® QG 混合群では RNase による分解が顕著に抑制された（左図）。また、AteloGene®

siRNA+AteloGene® QG

QG は、従来品に比べてマウス皮下投与後すみやかにゲルを形成した。
（右図）（社内データ）AteloGene®はがん研究にも広く使用されていますAteloGene®
局所投与事例

miR-107 局所投与による腫瘍増殖抑制

20**P<0.05

80000714

膵 臓 がんモデル の皮 下 腫 瘍 周 囲 へ*P<0.05

N. S.

miR-107＋AteloGene® を 投 与（週1回×15合計4回）したところ、投与後14、21日目*

10

miR-107＋AteloGene®

*400

Control miRNA＋AteloGene®

腫瘍サイズ（mm3)Control miRNA＋AteloGene®

血漿中のmiR-107発現量

miR-107 ＋AteloGene®

1200に約60%の腫瘍増殖抑制が認められた（左図）。
さらに、
膵臓がん患者やマウス

5では発現が抑制されているmiR-107が、通常マウスと同程度の発現量に上昇し021

通常マウスた（右図）。

miR-107 Control miRNA＋AteloGene® ＋AteloGene®

（データ提供：京都府立医科大学 / 京都第一赤十字病院 小松周平准教授 , 今村泰輔先生・参考文献 3 参照）

投与後日数（日）AteloGene®は関節への核酸導入にも適していますAteloGene®
局所投与事例RasGRP-4 siRNA 局所投与による関節炎の改善
Control siRNA
AteloGene®

RasGRP-4 siRNA＋AteloGene®
Control siRNA ＋AteloGene®

RasGRP-4 siRNA＋AteloGene®

5Control siRNA+AteloGene ®
*P<0.01

4*P<0.01

関節炎スコアRasGRP-4発現量60

RasGRP-4 siRNA
AteloGene®

*40

足首関節内へ RasGRP-4 siRNA＋AteloGene® を投与（関節炎誘導後14日3* * *2*目に1回）したところ、誘 導 後35日目に*120ControlsiRNA＋AteloGene® ＋AteloGene®

0

関節炎誘導後35日目における関節のμCT画像（上図）、HE染色像（下図）

RasGRP-4タンパク質発現が約80%抑制された（左図）。
さらに、関節破壊の進行が抑制され（中央図）、関節炎スコアな00

コラーゲン誘導関節炎モデルのラット

7 14 17 21 24 28 31 35

誘導後日数（日）どが大幅に改善された（右図）。

（データ提供：北海道大学

AteloGene®は皮膚への核酸導入にも有効です

AteloGene®
全身投与事例

let-7a miRNA腹腔内投与によるブレオマイシン誘導皮膚線維化の抑制

相対発現量3

let-7a miRNA + AteloGene ®
Control miRNA + AteloGene ®
let-7a miRNA + PBS*

2

Control miRNA+AteloGene ®

let-7a miRNA+AteloGene ®

let-7a miRNA＋AteloGene® をマウス腹腔内へ投与した
ところ、3日後まで背部皮膚でのlet-7a miRNAの発現量が有意に増加した。
また、
ブレオマイシン誘導性強皮症*P<0.05*

モデルのマウス腹 腔内へlet-7a miRNA＋AteloGene®を投与（週1回×合計4回）したところ、投与後28日目に皮膚1投与後28日目におけるマウス背部皮膚のMassonʼs trichrome 染色像0135

投与後日数（日）7の肥厚とコラーゲン線維の増生が抑制され（右図）、高い核酸導入効果が示された。

[ データ提供：熊本大学 牧野雄成特任准教授、神人正寿准教授（現 和歌山県立医科大学教授）・参考文献 5 参照 ]AteloGene®は消化器への核酸導入にも有用です

AteloGene®
全身投与事例CHST15 siRNA腹腔内投与による大腸炎の改善

1.5CHST15***

2.5**

2***

***

1.5
110.5

00.5

DSS 非投与DSSDSS+ Control siRNA + CHST15 siRNA+ AteloGene® + AteloGene®

0DSS + CHST15 siRNA+AteloGene®

** P<0.01*** P<0.001

α-SMA

12DSS
DSS+ Control siRNA + CHST15 siRNA+ AteloGene® + AteloGene®

DSS非投与

デキストラン硫酸ナトリウム（DSS）
誘導性大腸炎モデルへ CHST15 siRNA＋AteloGene® を腹腔内投与（誘導後6日8目から4日毎×合計4回）
したところ、誘6

導後19日目に CHST15及びα-SMA の発

4

現がDSS非投与群と同程度にまで抑制

2

され（左図、中央図）
、病態
（DAI）
スコア

0DSS 非投与

DSS + Control siRNA+AteloGene®

10DAIスコア2相対発現量河野 通仁助教・参考文献 4 参照）が半減した（右図）。
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18

投与後日数（日）（データ提供：新潟医療福祉大学／新潟大学 鈴木健司教授・参考文献 6 参照）

参考文献
1. Takeshita F, et al. Efficient delivery of small interfering RNA to bone-metastatic tumors by using atelocollagen in vivo. (2005) Proc Natl Acad Sci U S A.
102(34):12177-12182.
2. Ogawa S, et al. Influence of systemic administration of atelocollagen on mouse livers: an ideal biomaterial for systemic drug delivery.
(2011) J Toxicol Sci. 36(6):751-762.
3. Imamura T, et al. Depleted tumor suppressor miR-107 in plasma relates to tumor progression and is a novel therapeutic target in pancreatic cancer. (2017)
Scientific reports. 7(1):5708.
4. Kono M, et al. RasGRP4 is Aberrantly Expressed in the Fibroblast-like Synoviocytes of Patients with Rheumatoid Arthritis and Controls their Proliferation. (2015)
Arthritis Rheumatol. 67(2):396-407.
5. Makino K, et al. The Downregulation of microRNA let-7a Contributes to the Excessive Expression of Type I Collagen in Systemic and Localized Scleroderma.
(2013) J Immunol. 190(8):3905-3915.
6. Suzuki K et al. Pivotal Role of Carbohydrate Sulfotransferase 15 in Fibrosis and Mucosal Healing in Mouse Colitis. (2016) PLoS One. 11(7):e0158967.

アテロコラーゲンを用いたDDS関連の報告一覧（疾患モデルごとに複数の投与例を統合）

プラスミドDNA・アンチセンス
ODN※1デコイ・アプタマー等

、
歯槽骨欠損

、緑内障

末梢神経障害、てんかん発作重積
中皮腫、
肺線維症

低アディポネクチン血症

、心筋梗塞

黒色腫

、
胆嚢がん、過活動膀胱、
糖尿病性腎症

骨肉腫

骨再生、
骨代謝

グルコース恒常性、

骨肉腫 横紋筋肉腫、筋損傷、
皮膚恒常性/毛周期、
褥瘡

神経内分泌腫瘍
炎症性疾患、敗血症

乳がん、脂肪蓄積、肥満
肥満誘発糖尿病

AteloGene® 製品の比較表
製品番号

製品名

核酸との複合体形成

投与
方法

ゲル形成
時間

核酸濃度の目安

投与間隔

包装

#1490

AteloGene®
Local Use
“Quick Gelation”

有局所

約10分

0.5-1.0
nmol / 投与

1週間前後(15回投与※2)#1391

AteloGene®
Systemic Use

有尾静脈
腹腔内

ゲル化せず

2.0-4.0
nmol / 投与

3日前後(10回投与※2)#1390 Local Use従来品は販売終了しました。

1キット

1キット価格（税込）
82,500円

66,000円※2

本キット及びコラーゲンを用いて核酸成分を導入する技術に関しては、独立行政法人国立がん研究センター、住友ファーマ株式会社および株式会社高研が共同研究を基に開発しました。（日本国特許 第4081436号/米国特許 第8742091号）。本キット及びコラーゲンを用いて薬剤を徐放する技術に関しては、株式会社高研が日本にて特許を保有しています（特許第 6186572 号）。使用方法は試験研究に限り、それ以外の使用については抵触の危険性がありますのでご注意ください。

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