学位研究紹介

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学 位 研 究 紹 介
物を抽出し，このフラグメントに対して，exon４特異日本人歯周炎患者におけるFcγRIIB遺伝子多型
FcγRIIB gene polymorphisms inJapanese periodontitis patients

的PCRとexon5特異的PCRを行った。ダイレクトシーク
エンシングにてこれらのPCR産物の塩基配列を決定し遺伝子型を検索した。またFcγRIIA-131R/H, FcγRIIIA158V/F, FcγRIIIB-NA1/NA2の遺伝子型もアレル特異的PCR法にて同定した。FcγRIIIB，FcγRIIA，FcγRIIIA，

新潟大学大学院医歯学総合研究科 摂食環境制御学講座

11個のFcγRIIBの遺伝子多型とAGP及びCPの関連性についてχ2検定，またはフィッシャーの直接確率法にて統歯周診断・再建学分野

計学的に解析し，併せてハプロタイプ頻度の推定，連鎖安田桂子

不平衡解析も行った。

Division of Periodontology, Department ofOral Biological Science,【結果】

Niigata University Graduate School of
Medical and Dental Sciences

FcγRIIBには遺伝子多型が合計11個認められた。膜貫Keiko Yasuda

通領域であるexon5に存在するFcγRIIB-232 I/T（nt 695）におけるアレル頻度及び232Tアレル保有率はAGPと【目的】

HC，AGPとCPとの間で統計学的有意差を示した。
Intron 4のnt 646-184A/Gにおけるアレル頻度及び646-

FcγRIIBは，細胞外に２個のイムノグロブリン様ドメ

184Aアレル保有率はCPとHCとの間で統計学的有意差

インを，細胞内には抑制シグナル伝達に関連するITIMを示した。FcγRIIIB-NA2におけるアレル頻度はAGPと（immunoreceptor tyrosine-based inhibition motif）を有HC，AGPとCPとの間で統計学的有意差が認められたが，する。B細胞レセプター（BCR）に抗原が結合するとFcγRIIA，FcγRIIIA遺伝子型，アレルは３つの対象群

BCRは活性化し抗体産生細胞となるが，FcγRIIBがIgGにおいて統計学的有意差が認められなかった。 Fcγ

免疫複合体などにより架橋されるとBCRからのシグナ

RIIB-232 I/TとFcγRIIIB- NA1/NA2，nt 645+7A/Cとル伝達が開始されると同時にFcγRIIBのITIM領域のチ

nt 645+26G/A，232 I/Tとnt 646-86C/T間に連鎖不平衡ロシンがリン酸化され，B細胞の活性化が抑制される。

が認められた。

歯周炎は口腔内細菌による感染症であり，細菌の病原AGPにおいてFcγRIIBとFcγRIIIBの２座位解析を行っ因子と生体の防御機能との相互作用の結果として表現さたところ，232 TとNA2の保有の組み合わせによりオッれ，侵襲性歯周炎（AGP）と慢性歯周炎（CP）の大きズ比の増加（9.5）が認められた。

く２種類に分類される。歯周病原菌は歯周炎の発症に必【考察とまとめ】

要であるが，疾患感受性の個人差は宿主免疫応答における遺伝学的な相違と関連する可能性がある。歯周炎病巣ではFcγRIIを発現するB細胞が多く存在し，歯周病原菌に対する特異的IgG抗体産生が著しい。

本研究によりFcγRIIB遺伝子多型は歯周炎の感受性に関与する可能性があることが示唆された。FcγRIIB-232

ヒトFcγRIIBには幾つかの遺伝子多型が存在すること

TアレルはAGPにおいて多く見られ，AGP感受性と関連を著者らは報告したが，今回は同遺伝子多型が歯周炎感していることを示唆している。NA2アレルがAGPの発受性と関連するか否かについて検討した。

症と関連している事を我々は既に報告しており，複合遺伝子型（232 T plus NA2）はAGPの感受性において強【方法】

い関連性を示した。
一方，NA2遺伝子型の好中球はNA1好中球 と比べて，インフォームドコンセントが得られた日本人AGP患

貪食レベルが低い事が分かっているが，FcγRIIb 232

者32名，CP患者 72名，健常者（HC）72名を対象に，I/Tアレルに基づいた機能的な違いについては未だ不明

末梢血からゲノムDNAを抽出し，類似塩基配列を有すである。FcγRIIb1はB細胞での負のシグナル調節を担っるFcγRIICと区別するためFcγRIIB特異的primerを設定ており，また膜貫通領域はB細胞のアポトーシスに必須しPCRを行った。電気泳動後，ゲルを切り出し，PCR産である。232 I/T多型は，FcγRIIb1の機能低下によりB

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新潟歯学会誌34（2）：2004

細胞の過剰な活性化を導くために，結果としてAGPをプライシングに影響を与える可能性があり，今後は発症させているのかもしれない。

cDNAを調べていく必要がある。

nt 646-184AアレルはCP患者において多く見られた。

本研究結果によりFcγRIIB遺伝子多型が日本人においFcγRIIIA-158VとFcγRIIIB-NA2はCPの重症度因子であて歯周炎に関連する事が示された。遺伝的感受性因子のると以前報告されているが，本研究においてnt 646-確定は，歯周炎の分類，診断，治療において貢献できる

184A/G多型とIIA，IIIA，IIIB多型とは連鎖不平衡が認と思われるが，今後は，異なる民族における調査とFcγ

められなかったことはnt 646-184A/G多型がCPの感受性

RIIB遺伝子多型の機能的解析が必要であろう。

因子であることを示唆している。この多型はmRNAス

表１

侵襲性歯周炎，慢性歯周炎，健常者におけるFcγRIIBアレル分布

塩基

アミノ酸多型領域

アレル

nt 608（C→T）

Thr 203→Met

Exon 4nt 609（G→A）

Thr 203→Thr

Exon 4nt 612（G→A）

Leu 204→Leu

Exon 4nt 614（A→T）

Tyr 205→PheExon 4nt 619（T→G）

Ser 207→AlaExon 4nt 695（T→C）

Ile 232→Thr

Exon 5

CTG
AGAA
TT
GTC
AC
GAA
GCTT
G

nt 645+7（A→C）

Intron 4

nt 645+26（G→A）

Intron 4

nt 646-184（A→G）

Intron 4

nt 646-86（C→T）

Intron 4

nt 759+27（T→G）

Intron 5

侵襲性歯周炎（n=32）
64 （100）0（0）64 （100）0（0）64 （100）0（0）64 （100）0（0）64 （100）0（0）53* （82.8）
11 （17.2）
4 （6.2）60 （93.7）
27 （42.2）
37 （57.8）
60 （93.8）
4 （6.2）62 （96.9）
2 （3.1）52 （81.3）
12 （18.7）

慢性歯周炎（n=72）

健 常 者（n=72）

144 （100）0（0）142 （98.6）
2 （1.4）143 （99.3）
1 （0.7）139 （96.5）
5 （3.5）144 （100）0（0）133 （92.4）
11 （7.6）
15 （10.4）
129 （89.6）
63 （43.7）
81 （56.3）
142**（98.6）
2 （1.4）142 （98.6）
2 （1.4）110 （76.4）
34 （23.6）

143 （99.3）
1 （0.7）142 （98.6）
2 （1.4）142 （98.6）
2 （1.4）142 （98.6）
2 （1.4）143 （99.3）
1 （0.7）137 （95.1）
7 （4.9）16 （11.1）
128 （88.9）
70 （48.6）
74 （51.4）
132 （91.7）
12 （8.3）
142 （98.6）
2 （1.4）114 （79.2）
30 （20.8）

数値はアレル分布の数（％）を表す* アレル頻度: 2x2 分割表（侵襲性歯周炎vs. 健常者)
オッズ比 4.06, 95% 信頼区間 1.37-12.36, χ2=8.52, P=0.006.
アレル頻度: 2x2 分割表（侵襲性歯周炎vs. 慢性歯周炎)
オッズ比2.51, 95% 信頼区間 0.94-6.69, χ2=4.27, P=0.039.
**アレル頻度: 2x2 分割表（慢性歯周炎vs. 健常者)
OR 6.46, 95% CI 1.34 -∞, χ2=7.51, P=0.011.

表２．侵襲性歯周炎，慢性歯周炎，健常者におけるFcγRIIA，FcγRIIIA，FcγRIIIBアレル分布

FcγRIIAFcγRIIIA
FcγRIIIB

アレル

侵襲性歯周炎（n=32）

R131
H131
158V
158F
NA1
NA2

18 （28.1）
46 （71.9）
21 （32.8）
43 （67.2）
29* （45.3）
35 （54.7）

数値はアレル分布の数（％）を表す* アレル頻度: 2x2 分割表（侵襲性歯周炎vs. 健常者）
オッズ比2.07, 95% 信頼区間1.09-3.94, χ2=5.81, P=0.016.
アレル頻度: 2x2 分割表（侵襲性歯周炎vs. 慢性歯周炎）
オッズ比2.84, 95% 信頼区間1.48-5.46, χ2=11.65, P=0.001.

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慢性歯周炎
（n=72）

健 常 者（n=72）

27 （18.7）
117 （81.3）
43 （29.9）101 （70.1）
101 （70.1）
43 （29.9）30 （20.8）
114 （79.2）
35 （24.3）
109 （75.7）
91 （63.2）
53 （36.8）