日本大学歯学部紀要 35，19‑28，2007

チタンイオンが骨芽細胞株（Saos‑２）の生細胞およびサイトカイン産生に及ぼす影響（第２報)
横瀬勝美

桑田文幸

Effects of titanium ions on cell viability, IL‑1α and IL‑6 production
by the human osteosarcoma cell line, Saos‑2
Katsumi Yokose and Fumiyuki Kuwata
Abstract
The present study investigated the effects of titanium ions on cell viability and interleukin
1α(IL‑1α)and interleukin 6 (IL‑6)production by the human osteosarcoma cell line,Saos‑2.
Cells were maintained in DM EM supplemented with 10% FBS and antibiotics.After culturingfor 24 h, 0.1mM of TiCl was added to cells. After incubation for 1,2,3,4,5,6,7,8,9,or 10days, cell viability was assessed by colorimetric assay using an LDH cytotoxic test. Inaddition,the production of IL‑1αand IL‑6 by these cells was examined using specific ELISAkits.
The addition of 0.1mM TiCl did not alter cell viability during the first 7 days. However,cell death was induced after incubation for more than 8 days.The addition of titanium ions
had little effect on IL‑1αand IL‑6 production.These results indicate that addition of 0.1mM
titanium ions induces osteosarcoma cell death rather than inhibition of cytokine production.
Key words: cell viability, IL‑1α production, IL‑6 production, osteosarcoma cell, titaniumions

緒間のうちに溶出されると言えられている。そのため歯科治療で使用されている金属材料は口腔内において様々な要因が複雑に絡み合い極めて近年インプラント医療が普及し，様々な金属材としての生体材料開発が進んで過酷な環境にあると言える。口腔内にはそれ以いる。歯科治療において歯が喪失した場合，歯外にも，各種の溶出要因が共存しており，歯肉科補綴修復物やインプラント治療により長期間から浸出する体液・食べかすによる電解質の存埋入され生体との接触は密接であり，局所的為在・細菌が産出する酸や硫化水素・温度や酸素害作用に加え全身的為害作用までに至っているの濃淡などの変化・咬む力が働く部分の金属にと起こる応力腐食や咬耗などがある

材料は骨補えられる。それら金属材料は口腔内で唾液。歯科用イや飲食物などが電解質として作用し，pH 変化オンプラント材料として優れた実績を有していや各種イオン等による腐食性変化を生じ，長時るチタンは，有床義歯，架橋義歯や欠損補綴材

日本大学歯学部化学教室
日本大学歯学部総合歯学研究所機能形態部門〒 101‑8310 東京都千代田区神田駿河台１‑８‑13

Department of Chemistry, Nihon University School ofDentistry
Division of Functional M orphology, Dental Research(受理：2007年９月 26日）

Center, Nihon University School of Dentistry
1‑8‑13 Kanda‑Surugadai, Chiyoda‑ku, Tokyo 101‑8310, Japan19日本大学歯学部紀要 35，19‑28，2007

料としても幅広く使用されているが，そのようU/ml ペニシリンおよび 50μg/ml ストレプトな環境下で使用されている歯科用金属の中でもマイシン（Sigma）を加えた培地を用い，37°
C，

特に，生体親和性に優れている金属の一つとし５％CO の湿潤条件下で培養を行った。てよく知られている。しかし，そのインプラン

２. 細胞障害率（経時的変化）

ト材によるアレルギーを訴える患者が近年増え，臨床報告も増加している生細胞へのチタンイオンによる経時的変化の。

影響を調べるために，24穴プレートに Saos‑２

著者らは，先に歯科用金属の金属イオンが口細胞１×10 個/cm を播種し，500μl の DMEM腔軟組織，とくに上皮組織におよぼす影響を解（10％FBS および抗生物質を含有）で培養を開明する第一ステップとして，歯科補綴物の成分始した。Saos‑２細胞播種後，24時間後にチタンであるクロムおよびニッケル，歯科修復物の合イオン（TrCl ）を含む DMEM（10％FBS およ

金中に存在する亜鉛について，ヒト口腔由来上び抗生物質を含有）に交換した。生細胞へのチ皮細胞株（Ca 9‑22）の生細胞数および DNA 合タンイオン経時的変化の影響を調べるためにそ成能に及ぼす影響について報告した。また，の作用時間をそれぞれ１，２，３，４，５，６，チタンイオン高濃度，短時間における生細胞へ７，８，９および 10日間として培養を行った。の経時的変化を調べた。チタンは歯科イン

なお，培地中のチタンイオン（TiCl ）は終末濃プラントに代表されるような深部組織内に長期度 0.1mM になるように添加した。チタンイオ埋植する生体材料である。しかし，チタンの症ンを作用させた後，無血清の DMEM と交換し例報告などから解るように，チタンインプラン24時間培養後，上清を回収する。回収した上清ト装着後数年してアレルギー症状が現れ，そのは 3000rpm，５ 分 遠 心 し，LDH‑Cytotoxic

多くが遅延型であるため，ヒト骨肉腫由来の株

Test（和光純薬）を用い細胞障害率を比色測定

化骨芽細胞（Saos‑２）を使用し，低濃度のチタした。また，実験は２連で行い，結果は平ンを５日間まで添加し，生細胞数への経時変化で示した。金属イオン経時変化を比較するため，およびサイトカイン産生に及ぼす影響についてチタンイオン無添加の場合をコントロールと検討を行った 。

し，DMEM（10％FBS および抗生物質を含有）

本研究ではチタンの影響をヒト骨肉腫由来ので 10日間培養を行った。

株化骨芽細胞（Saos‑２細胞）を使用し，更に長３. IL‑1αおよび IL‑６産生

値

時間添加し経時的変化およびインターロイキン

材料および方法の２. と同様に，24穴プレー‑1α（IL‑1α）およびインターロイキン‑６（ILトに Saos‑２細胞を播種後，24時間後，チタン‑６) の産生に及ぼすチタンイオンの経時的変イオン（TiCl ）の濃度，0.1mM を含む DMEM化もあわせて検討した。に交換し，その作用時間をそれぞれ１，２，３，４，５，６，７，８，９および 10日間として培材料および方法養を行った。その後，無血清の DMEM と交換し，24時間後それぞれの培養上清を回収後，IL１. 細胞培養
実験には骨芽細胞として理化学研究所細胞開‑1α定量用 ELISA キット（BioSource）および

発 銀 行 か ら 購 入 し た Saos‑２ 細 胞 を 使 用 い

IL‑６定量用 ELISA キット（BioSource）を用た。Saos‑２細胞は，Dullbeccoʼ
s modified

いて上清中のサイトカイン量を定量した。コン

Eagle medium（DM EM ，旭テクノグラス）に，トロールは材料および方法の２. と同様であ10％ウシ胎児血清（FBS，旭テクノグラス），50る。
20

骨芽細胞とチタンイオン

第１図では，チタンイオン（TiCl ）濃度 0.1

４. Reverse transcription ‑ polymerase chain

mM ，作用時間１日，２日，３日，４日，５日，reaction (RT‑PCR)
材料および方法の２. と同様に，６穴プレー６日，７日，８日，９日および 10日として培養

トに Saos‑２細胞を播種後，24時間後，チタンを行った。チタンイオン添加により細胞障害率イオン（TiCl ）の濃度，0.1mM を含む DM EM

は，コントロールでは 10.0％，１日では 15.3％，に交換し，その作用時間をそれぞれ１，２，３，２日では 19.6％，３日では 21.7％，４日では４，５，６，７，８，９および 10日間として培25.0％，５日では 26.0％，６日では 270.7％，養を行った。その後，それぞれ新たに無血清の７日では 27.0％，８日では 27.0％，９日ではDM EM と交換し，さらに 24時間培養後，細胞29.0％，10日では 33.0％の細胞障害率であっ層を回収し，全 RNA を抽出した。得られたた。チタンイオン添加後ではコントロールからRNA から，cDNA を作成後，IL‑６，IL‑６レ徐々に細胞障害率が増加した。チタン作用時間

セ プ ター（IL‑6R）お よ び 内 部 標 準 と し て（コントロール，１日〜10日）ごとの細胞状態をGAPDH のプライマー（表３）を用いて，サー

図２〜12に示した。

マルサイクラー（PE Applied Biosystems:Gene Amp PCR System）により，DNA の変性を 94°
C 30秒間，アニーリング 56°
C 30秒間，プライマーの伸長を 72°
C 30秒間行い，これを１サイクルとし，30〜40サイクル増幅した。増幅した PCR 産物は，1.5％アガロースゲルを用いて電気泳動後，エチジウムブロマイドで染色後，紫外線照射下で写真撮影した。

成績

１. 細胞障害率（経時変化）
Saos‑２細胞にチタンイオン（TiCl ）0.1mM

第２図 Saos‑２細胞 control形態

濃度を添加した影響を第１図（経時的変化（細胞障害率））に示した。

第１図 Saos‑２細胞の細胞障害率に及ぼすチタンイオンの影響

第３図

21

チタンイオン 0.1mM １日間作用させた
ときの細胞形態

日本大学歯学部紀要 35，19‑28，2007

第４図

チタンイオン 0.1mM ２日間作用させた
ときの細胞形態

第７図

チタンイオン 0.1mM ５日間作用させた
ときの細胞形態

第５図

チタンイオン 0.1mM ３日間作用させた
ときの細胞形態

第８図

チタンイオン 0.1mM ６日間作用させた
ときの細胞形態

第６図

チタンイオン 0.1mM ４日間作用させた
ときの細胞形態

第９図

チタンイオン 0.1mM ７日間作用させた
ときの細胞形態

22

骨芽細胞とチタンイオン

２. IL‑1α産生
コンフルエントに達した後の Saos‑２細胞のIL‑1α産生におよぼすチタンイオン（TiCl ）0.1mM 濃度の経時的変化の影響を調べた結果
を第１表，第 13図に示した。
Saos‑２細胞の IL‑1α産生におよぼすチタンイオン（TiCl ）濃度の経時的変化の影響を調
べ た 結 果，IL‑1α産 生 量 は チ タ ン イ オ ン（TiCl ）濃度 0.1mM コントロールおよび１日
第 10図〜２日間作用させ培養した場合は測定検出限界

チタンイオン 0.1mM ８日間作用させた
ときの細胞形態

以下のため測定不可であったが，３日間で 0.88pg/ml，４日間で 1.14pg/ml，５ 日 間 で 1.28
第１表 Saos‑２細胞の IL‑1αの産生に及ぼすチタンイオンの影響
IL‑1α量（pg/ml)
作用時間

第 12図

チタンイオン 0.1mM ９日間作用させた
ときの細胞形態

チタンイオン 0.1mM 10日間作用させた
ときの細胞形態

＜0.80

0.00

＜0.80
＜0.80
0.95
1.21

＜0.80
＜0.80
0.80
1.06

0.00
0.00
0.88
1.14

５day
６day
７day
８day

1.32
1.23
1.36
1.35

1.24
1.26
1.32
1.45

1.28
1.25
1.34
1.40

９day
10day

1.653
1.945

1.53
2.199

1.59
2.07

第 13図

23値

＜0.80

Cont.
１day
２day
３day
４day
第 11図

平

Saos‑２細胞の IL‑１αの 産 生 に 及 ぼ す
チタンイオンの影響日本大学歯学部紀要 35，19‑28，2007

pg/ml，６日間で 1.25pg/ml，７ 日 間 で 1.34

日間作用させ培養した場合で 4.24pg/ml，２日pg/ml，８日間で 1.40pg/ml，９ 日 間 で 1.59

間で 4.89pg/ml，３日間で 5.38pg/ml，４日間pg/ml，10日間で 2.07pg/ml になった。３日間で 5.82pg/ml，５日間で 6.62pg/ml，６日間で以降は徐々に増加した。

6.69pg/ml，７日間で 7.28pg/ml，８ 日 間 で8.95pg/ml，９日間で 11.81pg/ml，10日間で３. IL‑６産生21.60pg/ml となった。IL‑６産生量は時間と共

Saos‑２細胞の IL‑６産生におよぼすチタンイオン（TiCl ）濃度の経時的変化の影響を調べに徐々に増加がみられた。

た結果を第２表，第 14図に示した。

４. IL‑６，IL‑6R の遺伝子発現に及ぼす Tiの影響

Saos‑２細胞の IL‑６産生におよぼすチタンイオン（TiCl ）濃度の経時的変化の影響を調べ

Saos‑２細胞にチタンイオン（TiCl ）が ILた結果，IL‑６産生量はチタンイオン（TiCl ）‑６，IL‑6R の遺伝子発現に及ぼす経時的変化

濃度 0.1mM コントロールでは 3.54pg/ml，１の影響を第 15図に示 し た。内 部 標 準 と し て
GAPDH を用いた。

第２表 Saos‑２細胞の IL‑６産生に及ぼすチタンイオンの影響

チタンイオン添加後は IL‑６の遺伝子発現が見られた。また IL‑６レセプターの遺伝子発現

IL‑６量（pg/ml)
作用時間

平はチタン添加５日以降はっきりとした確認ができるようになった。

値

Cont.
１day
２day
３day
４day
５day
６day

3.31
4.31

3.77
4.17

3.54
4.24

5.33
5.77
6.31
7.57
6.65

4.44
4.99
5.32
5.67
6.72

4.89
5.38
5.82
6.62
6.69

第３表 RT‑PCR に使用したプライマーの塩基配列

７day
８day
９day
10day

7.23
8.87
12.93
21.20

7.33
9.03
10.68
22.00

7.28
8.95
11.81
21.60

IL‑６AAGCCAGAGCTGTGCAGATGAGTATGTCCTGCAGCCACTGGTTC

IL‑6R

GAGGGCTTCTGCCATTTCTGAGCCAGGTTCAGCTGACAACAAACA
ATCACCATCTTCCAGGAG
CTCATGACCACAGTCCCATName of5ʼ
primer sequencetarget gene3ʼprimer sequence

GAPDH

第 14図 Saos‑２細胞の IL‑６産生に及ぼすチタンイオンの影響

第 15図24チタンイオン 0.1mM 作用させたときの遺伝子発現

骨芽細胞とチタンイオンある。チタンインプラントを２本植立した際，察一年半後同部頰粘膜に白色病変（扁平苔癬）が金属は，生体に必須な微量金属であってもそ見られ，組織像からも表皮直下に細胞浸潤が見れ自信や環境化学物質との共存下で発癌性を示られ症状がした患者や，顎骨の再建にチタンプ

し 場 合 が あ る。そ し て 活 性 酸 素 を 生 成 さ せレートを使用し痛みを訴えた患者の組織内にはDNA を損傷させることにより発癌に関する危慢性肉芽腫性炎が観察され，インプラント周囲険性があるとえられる。その反面微量金属の特に血管周囲に多くのリンパ球とマクロファー発癌における防御的作用として，細胞の恒常性ジの浸潤があり，この症状のある患者の組織内を維持すると同時に遺伝子の損傷を修復するこには金属片沈着を見ることができるなど，生体とにより癌化の抑制にも関与している。微量金

適合性が優れているチタンでも金属アレルギー属が，癌化または癌抑制のどちらに作用するかを引き起こす患者が増えているは，その種類，量および環境化学物質との共存様々な要因が総補的に起きている可能性があるなどにより大きく異なるため，DNA 損傷を検が，そのメカニズムの一つとして，金属の一部出することにより微量金属による発癌の危険性がイオン化し，これが表皮や粘膜上皮のケラチの評価を簡易に行うことは，癌の初期予防に貢ンなどのタンパクと結合することによって異質献するだけでなく，薬理作用を検証するうえでのタンパク（抗原）となり，マクロファージなも非常に重要な研究であるといえる。

どに取り込まれ，様々な免疫反応が起こり遅延。口腔内の型アレルギーとして発症すると報告されてい本研究に使用したチタンはさまざまな医療材料に使用されており，その化合物は皮膚病の治る療薬，化粧品，食品添加物としも使用されていているとされてきたが，金属アレルギーの症例。このようにチタンは生体親和性に優れるため，安全性についての試験がいくつかなさ報告も多く，チタンが生体内で様々な作用をしれており，毒性は低いとの報告が数多く成されているとえられる。

。し か し，ラット に 二 酸 化 チ タ ン

著者らは，歯科用インプラント材として使用（TiO ）を吸入，経気道的暴露した実験結果でさ れ て い る チ タ ン に つ い て 検 討 を 行った 報は，肺癌が検出されたという報告もされてい告る 。さらに四塩化チタンについても同様な結用し，チタンの影響を検討したが，本研究では果が報告されている 。

チタンの影 響 が 遅 延 型 で あ る と い う 症 例 報ている

告では口腔由来上皮細胞株（Ca 9‑22）を使

歯科治療にも様々な歯科用金属が使用されてもあり，歯科インプラントに代表されるような深部組織内に長期埋植する生体材料でもいるが，それらの多くは合金として歯科用修復物，補綴物，矯正用材料等に使われている。歯あ る た め，ヒ ト 骨 肉 腫 由 来 の 株 化 骨 芽 細 胞科治療の技術の発展にともない歯科用金属は歯（Saos‑２）における生細胞数への経時変化およの硬組織への局所的修復だけでなく，歯科インびサイトカイン産生に及ぼす影響ついて検討をプラントに代表されるような深部組織内に長期行った。

埋植する生体材料が使用されるようになった。

生細胞数に及ぼす影響を生細胞障害率の測定

歯科においてチタンは歯科用インプラント材とに は LDH 測 定 法 を 用 い た。本 測 定 の LDHして優れた実績を有しているが，近年チタンイ‑Cytotoxic Test は細胞毒性を簡便に測定できンプラント材が原因で発症したと思われる金属るばかりでなく，細胞が細胞膜に障害を受けてアレルギーの症例報告として次のようなものが細胞から遊離した LDH（乳酸脱水素酵素）活性25

日本大学歯学部紀要 35，19‑28，2007

進するかどうか調べた。

を測定することができ，生理活性物質による細胞障害や細胞性免疫による細胞障害，補体依存

その結果，Saos‑２細胞の IL‑1α産生におよ性細胞障害，抗体依存性細胞障害の他，細胞のぼすチタンイオン（TiCl ）濃度の経時的変化の生存率にも利用できることからこの方法を用い影響を調べた結果，IL‑1α産生量は表１，第 13た。コントロールはチタン作用をしないで血清図に示したように，コントロール，１日〜３日培地で 10日間培養を行い，上清を回収する前の間作用させ培養した場合は測定検出限界以下の24時間を無血清培地と交換し上清を回収し測ため測定不可であったが，３日間以降は徐々に定を行った。チタンを作用させた細胞はチタン増加した。しかし，産生量は少なく 0.1mM の作用後同様に無血清飢餓状態 24時間行い，上清低濃度ではチタンの添加により，少量ではあるを回収し測定を行なった。チタンの症例報告なが IL‑1α産生量があったことをどから解るように，チタンインプラント装着後‑６産生量の測定を行った。IL‑６は B 細胞刺激

数年してアレルギー症状が現れるがその多くが因子として純化されたサイトカインであるが，遅延型であり，チタン作用時間を長期にして観骨芽細胞察するため，臨床例と同様の条件とえるため

PTH，などによりその産生が促進され間接的にチタンの作用濃度を低濃度とし，血清培地中で破骨細胞の活性化をも促進するため，チタンイえ併せ，ILでも産生され，IL‑1α，TNF，細胞状態を観察し測定した。細胞障害率は第１オンが Saos‑２細胞の IL‑６産生を促進するか

図に示したように，チタンイオン添加後ではコどうかを調べた。

ントロールから徐々に細胞障害率が増加した。

そ の 結 果，Saos‑２ 細 胞 の チ タ ン イ オ ン

チタン作用時間（コントロール，１日〜10日）（TiCl ）添加による，IL‑６産生量は，表２，第ごとの細胞状態（図２〜12）を観察すると，低14図に示したように IL‑６産生量は時間と共濃度では７日間以降では細胞障害率が徐々に増に徐々に増加がみられた。

加し，細胞萎縮が始まる傾向が予期される。８Saos‑２細胞の IL‑６産生量はチタンイオン日間になると細胞形態に作用し始め，10日間で低濃度（0.1mM ）添加後，３日以降，IL‑1αがはプレート内の生細胞数が減少し始め，８日間徐々に増加し，それに対処するように Saos‑２以降は細胞死が誘発され始めている。

細胞の IL‑６産生量も僅かずつ増加した。

サイトカイン産生に及ぼすチタンイオンの経以上のことからチタンイオンによるヒト骨肉時的変化にあわせて検討した。インターロイキ腫由来の株化骨芽細胞への影響は，長時間チタン‑1α（IL‑1α）は単核球が産生する歯骨細胞ンを作用させた場合サイトカイン産生を増加さ刺激因子の主成分であることが明らかにされてせ，細胞死の誘導をも左右する可能性が示唆さ以来，IL‑1αの骨代謝・骨疾患との関連が検討れた。炎症性サイトカインである IL‑1α，IL‑６されて，最も強力な骨吸収促進因子の１つであは破骨細胞性骨吸収の促進作用をもつため，骨る。IL‑1αはきわめて低濃度で，ヒト骨髄細胞吸収サイトカインともよばれていることから，より歯骨細胞を誘導する作用をもち，更に骨芽本研究により Saos‑２細胞がチタンイオンによ細胞を介して間接的に歯骨細胞の活性化を促進

り産生された IL‑1α，IL‑６が破骨細胞に影響する。一方，IL‑1αはヒト骨芽細胞の DNA 合を及ぼす可能性が成促進作用を示し，コラーゲン合成に関してはび IL‑６レセプターの遺伝子発現を確認できた

少量で促進，大量で抑制作用を示すため，チタので，レセプターの関連について詳細に検討すンイオンが Saos‑２細胞の IL‑1αの産生を促る予定である。
26

えられる。また，IL‑６およ骨芽細胞とチタンイオン

本研究の一部は平成 18，19年度日本大学歯学13) 横瀬勝美，桑田文幸（2006）チタンイオンが骨部佐藤研究費によって行われたことを付記す

芽細胞株（Saos‑２）の生細胞およびサイトカイる。

ン産生に及ぼす影響．日大歯紀 34，７‑1414) Spyrou P, Papaioannou S, Hampson G,
文献

Brandy K, Palmer RM, Mcdonald F (2002)
Cytokine release by osteoblast‑like cell１) Brune D (1986) M etal release from dental

cultuered on implant discs of varying alloy
composliions.Cline Oral Impl Res 13,623‑630

biomaterials. Biomaterials 7, 163‑167
２) 井上昌幸，山中秀夫編著（1993）歯科と金属ア

15) Fogh J, Wright WC, Loveless JD (1977)

レルギー．デンタルダイヤモンド社，東京

Absece of HeLa Vell contamination in 169３) 佐藤温重編（1997）歯科材料の副作用と安全性．

cell line derived from human tumors, J Nat
Cancer Inst 58, 209 ‑214

学健書院，東京
４) John CW (2000) Biocompatibility of dental

16) Davidovitch Z,Nicolay OF,Ngan PW,Shan-casting alloys. Areview J Prosth Dent 83 ⑵,223‑234

feld JL (1988) Neurotransmitters, cytokines,
and the control of alveolar bone remodeling５) 五島孜郎，糸川嘉則（1994）生体内金属元素．

in orthodontics, Dent Clin North Am 32, 411‑435

光生館，東京，155‑156
６) 不破敬一郎（1982）生体と重金属．講談社，東17) Lee KP, Trochimowicz HL, Reinhardt CF

京，52‑53(1985)Pulmonary response ofrats exposed to７) Bridgewater LC, M anning FC, Woo ES,titanium dioxide(TiO )byinhalation for twoPatierno SR (1994) DNA polymerase arreseyears. Toxicol Appl Pharmacol 79, 17918) Lee KP, Kelly DP, Schneider PW, Trochim-by adducted trivalent Chromium. 9(3), 122‑133８) 横瀬勝美，桑田文幸（2001）口腔由来細胞株

owicz HL (1986)Inhalation toxicity study on（Ca 9‑22）の生細胞数および DNA 合成能に及ぼす金属イオンの影響．日大歯紀 29，37‑44

rats exposed to titanium tetrachloride atmo-９) 横瀬勝美，桑田文幸（2002）亜鉛イオンが口腔

Toxicol Appl Pharmacol 83, 3019) Ahing‑Hsin K, Dominique PP, Martin B,spheric hydrolysis products for two years.

由来上皮細胞株（Ca 9‑22）の生細胞数，DNA合成能およびサイトカイン産生に及ぼす影響．

Petre JG(2002),Effect ofdifferent Ti‑6Al‑4V

日大歯紀 30，49‑58

surface treatments on osteoblasts behaviour,Biomaterials 23, 1447‑145410) 横瀬勝美，桑田文幸（2003）クロムイオンが口20) 今井敏夫，岩上徳志，白川正順（2003）骨芽細腔由来上皮細胞株（Ca 9‑22）の生細胞およびサ胞の細胞増殖機構に及ぼすチタンの影響につイトカイン産生に及ぼす影響．日大歯紀 31，９いて．Biomed Rse Trace Elements 14，374‑16‑37621) 井上孝，秦暢宏，才藤純一，下野正基（2000）

11) 横瀬勝美，桑田文幸（2004）チタンイオンが口腔由来上皮細胞株（Ca 9‑22）の生細胞およびサインプラントと金属アレルギーのイトカイン産生に及ぼす影響．日大歯紀 32，科評論

25‑34

101‑11022) 細川隆司，赤川安正（2002）チタンインプラン

12) 横瀬勝美，桑田文幸（2005）チタンイオンが口トも対する金属アレルギーのリスク．広大歯誌

腔由来上皮細胞株（Ca 9‑22）の生細胞およびサイトカイン産生に及ぼす影響

察．日本歯34，１‑５

第２報．日大歯23) 長島義之，吉永修，森永博臣，岡松加恵，山本

紀 33，19‑28

27

日本大学歯学部紀要 35，19‑28，2007

勝巳，森田雅之，城戸寛史，松浦正朗（2004）
他院で埋入後経過不良のためインプラントを

steel and titanium miniplates and screws.
Eur J Oral Sci 103, 46‑54

撤去した症例の臨床的検討および撤去後の補28) Sauder DN, Kilian PL, McLane JA, Quick

綴処置について．日口腔インプラント誌 17，TW,Jakubovic H,Davis SC,Eaglestein WH,Mertz PM (1990) Interleukin‑1 enhances

31‑3824) Katou F, Andou N, M otegi K, Nagura H(1996) Immuno‑inflammatory responses in

epidermal wound healing. Lymphokine Res
9, 465‑473

the tissue adjacent to titanium miniplates29) Kupper TS (1990) The activated ker-used in the treatment of mandibular fractures. J Cranio‑M axillofac Surg, 24,155‑162

atinocyte a model for inducible cytokineproduction bynon‑bone marrow‑derived25) Hunt JA, Williams DF (1994) The effect ofcells in cutaneous inflammatory and immune
responses. J Invest Dermatol 94, 146s‑150s

titanium debris on soft tissue response, JMater Sci 381‑383

30) Aida Y, Maeno M, Suzuki N, Nanba A,26) Ungersboek A, Geret V, Pohler O (1995)
Tissue reaction to bone plates made of puretitanium. ‑ a prospective, quantitative clinical study ‑. J M ater Sci 223‑22927) Torgersen S, M oe G, Jonsson R (1995) Immunocompetent cells adjacent to stainless28Motohasi M, Matsumoto M, Makimura M,Matsumura H (2006)The effect of IL‑1βonthe expression of inflammatory cytokines
and their receptors in human chondrocytes.
Life Sci 79, 764‑771