アスベストモニタリング
マニュアル（第 4.1 版）

平成 29 年７月
環境省

水・大気環境局

大気環境課

はじめに
本マニュアルは、環境大気中のアスベスト濃度を測定する上の技術的指針として、昭和６０年３月に作成し、平成５年１２月、平成１９年５月及び平成２２年６月に改訂を行った。
従来のアスベストのモニタリング方法では、我が国において使用されていた石綿の大部分がクリソタイルであったことから、位相差顕微鏡法で総繊維数を計数した後、生物顕微鏡法でクリソタイ
ルを除いた繊維数を計数し、両者の差を求めることによって石綿繊維数を測定していた。
しかし、石綿製品の製造等の禁止により、アスベストの発生源としての石綿製品製造工場は全て廃止され、その後はクリソタイル以外のアスベスト繊維が使用されている可能性もある建築物等の解体現場等が主な発生源となることから、平成２２年６月の改訂時に、クリソタイルを中心とする
従来の測定方法を見直し、位相差顕微鏡法により総繊維の計数を行ったあと、比較的濃度が高い場
合には分析走査電子顕微鏡法（Ａ-ＳＥＭ法）で確認を行うこととし、場合によっては最初から分析
走査電子顕微鏡法で位相差顕微鏡法と同等のサイズのアスベストを計数することもできるように策定した。また、解体現場等は早いものではその工期が数時間で終わってしまうものもあり、飛散防止のための迅速な測定が必要とされていることから、解体現場において迅速に測定ができる方法を参考資料として紹介した。
今回の改訂においては、解体現場等からアスベストの漏えいの有無を確認する迅速な測定方法の一層の開発・普及に関して地方公共団体等からの要望も強いという事情を考慮して、従来、紹介という形で取り上げていたこれら測定方法の位置付けを見直す検討を進め、「発生源近傍及び集じん・
排気装置出口等における漏えい監視・管理のための測定方法」としてマニュアルに位置付けることとした。これら迅速な測定方法については、必ずしも十分な知見が得られていない部分もあるが、今後、さらなる知見の集積や技術の向上に向けて、得られた測定結果の評価等も含め、引き続き検討することとしている。

環境省アスベスト大気濃度調査検討会 委員名簿
（五十音順、敬称略）

貴田 晶子

愛媛大学農学部 非常勤講師

神山 宣彦
（座長）

前東洋大学経済部 教授
独立行政法人労働安全衛生総合研究所フェロー研究員

小坂 浩

元兵庫県立健康環境科学研究センター大気環境部
研究員

小西 淑人

一般社団法人日本繊維状物質研究協会 専務理事

平野 耕一郎

公益社団法人日本環境技術協会 理事

山﨑 淳司

早稲田大学理工学術院 教授

― 目

次 ―

はじめに
第１部 総論１

１．１ アスベストの測定

１

１．１．１

一般環境

１

１．１．２

解体現場等

１

１．２ 測定計画

１

１．２．１

測定の流れ

１

１．２．２

事前調査

２

１．２．３

測定計画の策定

３

第２部 一般環境におけるアスベストの測定方法

４２．１ 試料の捕集方法

４

２．１．１

測定地点及び測定箇所の設定

４

２．１．２

捕集用装置及び器具

５

２．１．３

捕集条件

７

２．１．４

捕集にあたっての注意事項

８

２．２ 繊維数濃度の算出

８２．３ 測定方法各論

９

２．３．１

測定手順

９

２．３．２

位相差顕微鏡法（ＰＣＭ法）

１１

２．３．３

分析走査電子顕微鏡法（Ａ-ＳＥＭ法）

２２（参考資料）
２．３．４

アスベスト繊維及び類似繊維のＳＥＭ像及びＥＤＸスペクトル
分析透過電子顕微鏡法（Ａ-ＴＥＭ法）

第３部 解体現場等におけるアスベストの測定方法
３．１ 施工区画周辺等における測定方法
３．１．１

試料の捕集方法

３１
３８
５０
５０
５０

３．１．１．１ 測定地点及び測定箇所の設定

５０

３．１．１．２ 捕集用装置及び器具

５１

３．１．１．３ 捕集条件

５１

３．１．１．４ 捕集にあたっての注意事項

５１

３．１．２ 繊維数濃度の算出

５１３．１．３ 測定方法各論

５２

３．１．３．１ 測定手順

５２

３．１．３．２ 位相差顕微鏡法（ＰＣＭ法）

５２

３．１．３．２．１

分析走査電子顕微鏡法（Ａ－ＳＥＭ法）

５２

３．１．３．２．２

分析透過電子顕微鏡法（Ａ－ＴＥＭ法）

５２

３．２ 発生源近傍及び集じん・排気装置排出口等における漏えい監視・管理のための測定方法
３．２．１ 漏えい監視のためのアスベスト迅速測定法

５４５４３．２．１．１ 試料の捕集方法

５４

３．２．１．２ 繊維数濃度の算出

５５３．２．１．３ 測定方法各論

５６

３．２．１．３．１

位相差顕微鏡法（ＰＣＭ法）

５６

３．２．１．３．１．１ 分析走査電子顕微鏡法（Ａ－ＳＥＭ法）

５６

３．２．１．３．１．２ 分析透過電子顕微鏡法（Ａ－ＴＥＭ法）

５６

３．２．１．３．２

位相差／偏光顕微鏡法

５８３．２．１．３．３

位相差／蛍光顕微鏡法

７０

３．２．２

自動測定機器によるリアルタイム測定

８６

３．２．２．１ 試料の捕集方法

８６

３．２．２．２ 測定方法各論

８６

３．２．２．２．１ 粉じん相対濃度計による測定

８６

３．２．２．２．２ パーティクルカウンターによる測定

８８

３．２．２．２．３ 繊維状粒子自動測定器等による測定

８９

３．２．３

留意事項

【参考資料】 解体現場等におけるその他迅速な測定方法の紹介

９２
９５

例１

可搬型等の分析走査電子顕微鏡法

９５

例２

位相差／ラマン顕微鏡法

９５

例３ 可搬型蛍光顕微鏡法

９５

第１部

総論

１．１

アスベストの測定

本マニュアルは、環境大気中のアスベスト繊維数の濃度を測定する上での技術的指針として作成されたものである。
「アスベスト繊維」とは、蛇紋石系アスベストのクリソタイル（白石綿）や角閃石系アスベストのアモサイト（茶石綿）、クロシドライト（青石綿）、ト
レモライト、アクチノライト及びアンソフィライトの６種類の繊維状鉱物で、繊維形状や屈折率等の物理的特性や化学組成や結晶構造などから識別することができる。
本マニュアルにおける基本的なアスベスト繊維数濃度の測定には、解体現場等が我が国におけるアスベスト繊維の主要な発生源であることに鑑み、解体現場等以外の測定地域（以下「一般環境」という。）と解体現場等でそれぞれ異なる方法を策定した。
１．１．１

一般環境

一般環境のアスベスト濃度は、近年、濃度レベルが低下してきており、総繊維でも概ね
0.5 f/L 以下のレベルで推移している。しかし、今後はクリソタイルのみならずアモサイ
トやクロシドライトなどのアスベストが使用されている可能性のある解体現場等が主な発生源となることから、一般環境でもクリソタイルを含めた全てのアスベストを測定対象とするために、従来の生物顕微鏡法で計数し、位相差顕微鏡法による計数値との差を求める
方法に替えて、まず、位相差顕微鏡法で総繊維を計測し、やや高い値（目安としては 1 f/L
超とする）が計測されたサンプルについては、分析走査電子顕微鏡等によりアスベストを同定して計数することとし、場合によっては最初から電子顕微鏡で位相差顕微鏡法と同等のサイズのアスベストを計数することも推奨することとした。
１．１．２

解体現場等

一般環境における測定方法に加え、解体現場等においては、迅速な測定が求められることから、更に発生源近傍及び集じん・排気装置排出口等における漏えい監視・管理のための迅速測定方法として、位相差/偏光顕微鏡法、位相差/蛍光顕微鏡法を用いたアスベストを計数する方法を記載した。また、自動測定器による漏えい監視・管理として粉じん相対濃度計、パーティクルカウンター、繊維状粒子自動測定器等による測定を記載した。
１．２

測定計画

１．２．１

測定の流れ

一般環境及び解体現場等における測定方法の概略を次ページに示した。なお、解体現場のアスベスト除去作業が数時間で終わってしまうため、今回位置付けを見直した解体現場等における迅速な測定方法は漏えい監視・管理において活用するものとする。
なお、一般環境の測定方法は第２部で、解体現場等の測定方法は第３部において記載する。

1

【一般環境】【解体現場等】１）従来の方法を踏まえたもの

１）施行区画周辺等における測定方法

位相差顕微鏡で計測

位相差顕微鏡で計測

※総繊維数

※総繊維数

総繊維数が「1 f/L」

総繊維数が「1 f/L」

を超えた場合を超えた場合電子顕微鏡で計測

電子顕微鏡で計測※アスベストを同定※アスベストを同定※ 「位相差顕微鏡→電子顕微鏡」の※ 「位相差顕微鏡→電子顕微鏡」

他に、直接、電子顕微鏡で分析しの他に、直接、電子顕微鏡で分ても良い。

析しても良い。
２）発生源近傍及び集じん排気装置排出口等における漏えい監視・管理のための測定方法
・位相差/偏光顕微鏡法
・位相差/蛍光顕微鏡法
３）集じん・排気装置排出口における自動測定機による粉じん濃度又は繊維数濃度のリアルタイム測定
・粉じん相対濃度計
・パーティクルカウンター・繊維状粒子自動測定器４）その他迅速な測定法の紹介
・可搬型等の分析走査電子顕微鏡法
・位相差/ラマン顕微鏡法
・可搬型蛍光顕微鏡法

１．２．２

事前調査

環境大気中のアスベスト繊維数濃度を測定するにあたっては、事前に次に掲げる測定地
域の周辺環境に関する情報を可能な範囲で収集し、測定計画の策定に利用する。
（１）試料の測定に関わる情報①

測定地点周辺の利用状況及び周辺のアスベスト発生源等の概況②

建築物・工作物を解体・改造・補修する作業現場（以下「建築物等の解体現場等」という。）については、建築物の築年数及び建材に含有するアスベスト繊維の種類や石膏ボードの使用の有無等
2

③

廃棄物処分場等周辺地域については、廃棄されたアスベストの種類④

住宅地域については、測定地点周辺での建築物（住宅を含む）の解体、改修等の施工状況⑤

測定地点における、過去のアスベスト測定結果（２）測定箇所及び捕集時間帯の設定に関わる情報①

測定地点の主風向：測定地点の最寄りの気象官署（気象台、測候所等）やアメダ
ス局のデータから、年間の風向頻度、風向別平均風速、及び捕集時期の１ヶ月程度の主風向を確認②

道路周辺の測定を行う場合は、時間あたりの交通量：資料または実測等で確認③

建築物等の解体現場等など、１日あたりの作業時間が限定される地点で測定を行う場合は、測定対象となる施設の作業時間：当該施設の管理者等に確認（３）その他、測定に必要な情報
１．２．３

測定計画の策定

１．２．２で確認した情報に基づき、測定箇所、捕集時間帯及び捕集方法を設定する。
測定箇所は、測定地点の区分ごとの定めと主風向のデータから、大まかな位置を設定する。
また、捕集時間は、交通量のように時間帯で変動が大きい場合や、作業時間が限定される施設周辺での測定の場合は、最もアスベスト繊維が確認される可能性のある時間帯が含まれるように設定する。

3

第２部 一般環境におけるアスベストの測定方法
２．１ 試料の捕集方法
２．１．１

測定地点及び測定箇所の設定（１）測定地点
測定地点は、表 1 のとおりとする。
表1
区

測定地点の区分

分

一般環境

一般環境
（バックグラウンド地域）

該当する施設、地域①

旧アスベスト製品製造工場・事業場周辺地域

②

蛇紋岩地域

③

旧アスベスト取扱工場・事業場散在地域④

廃棄物処分場等周辺地域⑤

高速道路沿線地域⑥

幹線道路沿線地域⑦

内陸山間地域

⑧

離島地域

⑨

住宅地域

⑩

商工業地域

⑪

農業地域

（２）測定箇所の設定
測定箇所は、次の事項を考慮して設定する。
Ａ．一般環境① 旧アスベスト製品製造工場・事業場周辺地域
特定粉じん発生施設を設置していた工場又は事業場の敷地境界線付近で、主風向の風下側の 2 箇所とする。2 箇所の間の距離は、原則として 100ｍから 200ｍとする。フィルターホル
ダーは工場又は事業場の方向に向ける。
②

蛇紋岩地域
蛇紋岩採石場から最も近い一般の住宅のある地域の 2 箇所とする。2 箇所の間の距離は、原則として 100ｍから 300ｍとする。フィルターホルダーは採石場の方向に向ける。

③

旧アスベスト取扱工場・事業場散在地域
小規模のアスベスト製品製造事業所等が散在していた地域内で主要車道路肩から約 50m 以
上離し、かつ特定の固定発生源の影響を直接受けない 2 箇所とする。

④

廃棄物処分場等周辺地域
廃棄物処分場等の敷地境界線付近で、主風向の風下側の 2 箇所とする。2 箇所の間の距離は、

原則として 100ｍから 200ｍとする。フィルターホルダーは廃棄物処分場等の方向に向ける。
なお、試料の捕集は、事業場の稼働日を考慮して行う。
4

⑤ 高速道路沿線地域⑥ 幹線道路沿線地域

路肩と、道路から垂直方向に約 20m 離れた、主風向の風下側の 2 箇所とする。なお、現場状況により垂直方向に測定箇所を設定できない場合や、風下側に設定できない場合は、測定箇所をずらしてもよい。フィルターホルダーは道路の方向に向ける。
Ｂ．一般環境（バックグラウンド地域）⑦ 内陸山間地域⑧

離島地域

地域の環境濃度を代表しうる地点で、かつ付近に障害物の少ない 2 箇所を選定する。2 箇所の間の距離は数 10m から数 100m とする。
フィルターホルダーは主風向の風上の方向に向ける。
⑨

住宅地域⑩ 商工業地域⑪

農業地域

地域の環境濃度を代表しうる地点で、主要車道路肩から 50ｍ以上離れた 2 箇所とする。2箇所の間の距離は 100ｍから 200ｍとし、かつ地域内の固定発生源の影響を受けない箇所（特定粉じん排出等作業の現場等から 50ｍ、可能なら 100ｍ以上離れた箇所）とする。フィルターホルダーは最も近い主要車道の方向に向ける。
２．１．２

捕集用装置及び器具（１）フィルター
直径 47mm、平均孔径 0.8μm の円形白色のセルロースエステル製メンブランフィルターを使用する。メンブランフィルターは、繊維の計数の妨げにならないように、格子が印刷されていないものを使用する。
なお、Ａ-ＳＥＭ法のうち、ポリカーボネートフィルター法で測定を実施する場合は、直径 47mm、
平均孔径 0.8μm のポリカーボネートフィルターを用いる。なお、フィルターは静電防止のため、原則として金又はカーボンを蒸着したものを使用する。
（２）フィルターホルダー
直径 47mm の円形ろ紙用のホルダーで有効ろ紙直径が 35mm となるオープンフェース型のものを使用する。ホルダーは、カウル付きのものを使用することが望ましい。カウルを装着することにより、水滴の付着を防止できるとともに、試料捕集面の空気の流れを安定させることができる。
カウルの長さは、有効ろ紙直径の 0.5～2.5 倍が望ましい（図１参照）。

5

フィルター取り付け部
フィルターホルダー（１）オープンフェース型フィルターホルダー
フィルター取り付け部
カウル

フィルターホルダー（２）カウル付きオープンフェース型フィルターホルダー

図１ フィルターホルダー（３）吸引ポンプ及び流量計
吸引ポンプには、フィルターをホルダーに装着した状態で、２．１．３（２）項に規定する吸引流量が得られ、かつ、同項で規定する捕集時間において脈動を生じることなく連続運転に耐えられる電動式吸引ポンプを使用する。流量計は、基準流量計によって校正されたフロート型面積流量計を用いるがマスフローコントローラーの使用が望ましい。なお、マスフローコントローラ
ーと吸引ポンプが一体となった自動測定装置を使用してもよい。
（４）連結管フィルターホルダー、流量計及び吸引ポンプを連結する管（ゴムホース）は、捕集中の吸引圧力に耐えるものを使用し、連結管の接続部に漏れがないか事前に確認する。
（５）フィルター保管容器及び収納箱
試料を捕集したフィルターの保管及び輸送に使用する。捕集した面が汚れないように、捕集面を上向きにしてケースに固定できるものが望ましい。また、保管・運搬時は静電気が生じないよ
うに、木製の収納箱にケースを保管するのが適当である。
なお、密封可能なフタ付きのフィルターホルダーは、捕集後にホルダーのフタをして輸送し、試験室でフィルターをケースに移すことができるため便利である。
（６）捕集装置の構成
捕集装置の構成の一例を図２に示す。
6

フィルターホルダー

吸引口

連結管
流量調節弁
連結管

バイパス

フィルター
圧力計
流量計

吸引ポンプ
支持具
出典：財団法人 日本規格協会「JIS K 3850-1:2006 空気中の繊維状粒子測定方法－第１部：光学顕微鏡法及び走査電子顕微鏡法」

図２

２．１．３

捕集装置の構成の一例

捕集条件（１）捕集回数
一般環境においては、捕集回数 3 回を一連の測定とする。特に理由がない限り、平日昼間（10時～16 時）の連続する 3 日間とすることが望ましい。なお、廃棄物処分場等の周辺で測定を行う
場合は、稼働日等も考慮する。
（２）吸引流量、捕集時間及び捕集空気量
有効ろ紙直径が 35mm の捕集用ろ紙を用い、吸引流量 10L/min で連続 4 時間空気を捕集（2400L）することを原則とする。なお、Ａ-ＳＥＭ法のうち、ポリカーボネートフィルター法で測定を実施する場合は、測定精度の向上のために捕集時間を粉じん量に合わせて適宜増やしてもよい。
（３）捕集高さ
原則として地上 1.5ｍ以上 2.0ｍ以内とする。なお、測定箇所周辺の障害物等の影響が考えられる場合などは、適宜捕集する高さを設定してもよい。
（４）測定箇所の決定
測定計画の際に主風向の情報から設定した大まかな位置と、風向に対する周辺の障害物等の影響等を考慮して測定箇所を決定する。なお、メンブランフィルターとポリカーボネートフィルタ
ーとを並行で捕集を行う場合は、2 台の装置の設置高さ、ホルダーの向きを同一にし、２台の装置が互いに影響を及ぼさないように設置する。
（５）気象条件
前日又は当日が強風、降雨等の場合は原則として捕集を避けること。主風向を勘案して測定箇
7

所を設定した場合には、当該主風向時に測定することが望ましい。なお、捕集開始後に降雨があった場合には、傘等の「おおい」を工夫し、フィルターや電源・吸引ポンプに雨滴が当たることがないようにする。なお、大雨や強風等により適切な捕集ができないと判断された場合には、連続ではなく、捕集可能な 3 日間としてもよい。
２．１．４

捕集にあたっての注意事項

流量計は、捕集空気量を正しく評価するため、予め校正されていることが必要である。もし、捕集量が多すぎると粒子が重なり合って、顕微鏡によるアスベスト繊維の計数が困難になる。捕集量が 0.3 mg/cm2 を超えるとアスベスト繊維の見落としがあることが認められており、この現象の影響を受けないようにするには、0.3 mg/cm2 以上の粉じんを捕集することがないように捕集時間を調整する必要がある。
環境大気中の粒径 10μm 以上の粒子を含めた総粉じん濃度は、高い時でも 0.5 mg/ｍ3 程度と考えられる。そこで総粉じん濃度を 0.5 mg/ｍ3 と仮定し、吸引流量 10 L/min で試料を捕集するとすれば、フィルター上の表面密度が 0.3 mg/cm2 になるには、9.6 時間を要することとなる。
したがって、吸引流量を 10 L/min とすると、捕集時間が 9 時間以下であれば重なりによる影響を受けることは少ないと考えられる。ただし、車道路肩等でディーゼル排気中のカーボン粒子等の影響がある場合には、これ以下でも計数不能になることがある。
試料捕集時間を 4 時間とした場合、前述のとおり、一般的には粒子の重なりによる影響はまず考えにくいが、捕集した粉じん量が多くなると思われる場合には、捕集時間を適宜分割してフィルタ
ーを交換し、合計 4 時間の捕集（2400 L の捕集）を行うこと。この場合、4 時間を均等に分割することが望ましい（2 時間×2 回、1 時間 20 分×3 回、1 時間×4 回）。また、フィルター交換の目安として、フィルターの着色が認められる場合は必ず交換を実施するものとする。但し、1 回の捕集にフィルターを 5 枚以上使用すると、フィルター交換に起因する誤差が生じると考えられるので、1 回の測定に使用するフィルターは原則として 4 枚までとする。その他、デジタル粉じん計を利用して浮遊中の粉じん量を推定して、前述の頻度で交換を実施する。
捕集中は、捕集装置にリークが発生しないように十分に注意する。捕集装置にリークが発生した
場合は、その試料を棄却しなければならない。
捕集終了後、フィルターをケースに保管する。なお、保管容器がプラスチック製の場合には、取扱いによっては静電気が起こり、フィルター上の粒子が容器表面に吸付けられることがあるので注意が必要である。このようなときには、予め保管容器に静電気防止剤を噴霧し、乾燥させたものを使用することが望ましいが、呼気を吹きかけて静電気を除去するのもひとつの方法である。
２．２ 繊維数濃度の算出
捕集した試料は速やかに前処理、繊維の計数を行う。計数後は、繊維数、フィルターの面積、計数した視野の面積、吸引量等の情報から繊維数濃度を算出する。なお、一般環境においては、3 回捕集を一連の測定としているため、各回の繊維数濃度を平均したものを、当該地域の繊維数濃度とする。なお、平均する際は、繊維数濃度が気象条件等により変動し、対数正規分布を示すことから、
幾何平均を利用する。
8

２．３ 測定方法各論
２．３．１

測定手順

一般環境で採取した試料の測定手順は図３のとおりである。電子顕微鏡法はＡ－ＳＥＭ法、Ａ－
ＴＥＭ法のいずれでも良いものとする。
位相差顕微鏡法で総繊維数を計数し、原則として総繊維数が 1 f/L を超過したものについては電子顕微鏡法により確認を行うこととし、場合によっては最初から電子顕微鏡で位相差顕微鏡法で計測できるものと同等サイズの繊維を計数することもできるように策定した。また、位相差顕微鏡で計数した総繊維数が 1 f/L を超過した場合、低温灰化を行い、有機繊維を除去してもよい。

9

第１部

１．２．２

事前調査

（１）試料の測定に関わる情報、（２）測定箇所及び捕集時間帯の設定に関わる情報（３）その他、測定に必要な情報

第１部

１．２．３ 測定計画の策定

測定箇所、捕集時間帯及び捕集方法の設定

第２部 一般環境におけるアスベストの測定方法
２．１ 試料の捕集方法
２．１．１ 測定地点及び測定箇所の設定
２．１．２ 捕集用装置及び器具
２．１．３ 捕集条件
２．１．４ 捕集にあたっての注意事項

第２部

２．３

測定方法各論
一般環境で捕集した試料①②

位相差顕微鏡法

電子顕微鏡法
※A-SEM、A-TEM
どちらでも可※総繊維数 1 f/L 以下※総繊維数 1 f/L 超過
総繊維数と
して標記

総繊維数を減らすために、低温灰化も可

電子顕微鏡法
※A-SEM、A-TEM
どちらでも可アスベストの同定
・計数

図３

アスベストの同定
・計数

一般環境における測定フロー
10２．３．２位相差顕微鏡法（ＰＣＭ法）

位相差顕微鏡は、接眼レンズの倍率 10 倍以上、対物レンズの開口数 0.65 以上及び倍率 40 倍で、アイピースグレイティクル（大円：300μm）を装着したものを用いる。透明化した試料について、位相差顕微鏡を用いて 1 視野ごとに繊維状粒子を確認、計数する。試料の透明化には、アセトンを使用し、浸液としてトリアセチンを用いる。
位相差顕微鏡法において、石膏やその他のアスベスト繊維等が混入する可能性がある場合は、測定結果の確認が必要になる。事前調査、試料捕集時の現場状況の確認及び過去のデータとの比較は、石膏やその他のアスベスト繊維等の混入の可能性を検証する上で重要である。また、細い繊維は見落とす可能性があるので、十分に注意が必要である。
（１）試料の前処理
１）標本作製の準備①

スライドガラス及びカバーガラスの洗浄
標本の作製に使用するスライドガラス※１及びカバーガラス※２は、使用する前に表面に付着している汚れを除去しておく。洗浄の方法としては、中性洗剤の溶液に浸し、超音波洗浄装置等を用いて表面に付着した汚れを除去した後よく水洗いし、次に精製水で十分すすぎ、ア
ルコールに浸してから清浄なガーゼで拭く。スライドガラスは格納箱に納め、カバーガラス
は、適当な大きさのシャーレの中へ入れておく。なお、スライドガラスやカバーガラスを拭
くガーゼは中性洗剤の溶液で煮沸してからよく水洗いし、汚れがつかないようにして乾操させたものを用いる。スライドガラスの一端に測定条件等を記入するラベルを貼っておくか片側すりガラスのものが望ましい。
※１：日本工業規格 R 3703 に定める顕微鏡用スライドガラス（標準形）※２：日本工業規格 R 3702 に定める顕微鏡用カバーガラス（厚さ：№1－S、使用する対物レンズにより指定されたもの）
２）フィルターの切断捕集したフィルターは、汚染するおそれのない清浄な室内で保管容器から取り出し、切断する。位相差顕微鏡法にはフィルターを切断した 1/4 片を利用し、残りの 3/4 は速やかに保管容器に戻す（図４参照）。フィルターの切断にはメスやカッターの刃を使うとよい。フィルターの二次汚染を防ぐためには切断の度に新しい刃を使うのがよいが、繰り返し使う場合は刃をじゅ
うぶん清浄にする必要がある（二次汚染を防ぐには新しいメスの刃を、手前に引くようにしてフィルターを切るのではなく、刃の弧に沿って先端から根元へ転がすように切るとよい）。また切断の際にフィルターが裏返って捕集面がわからなくなることがあるので、予めフィルターの端に印を付けて捕集面を確認出来るようにしておくとよい。フィルターの切断の際は、捕集した繊維が落ちたり、切り離した切片が落ちた際に裏返ったりしないよう、できる限り机や台に近い位置で、平行にして静かに、かつ割れないように注意して切断する。また、静電気が発生して、切断したフィルターが鋏に付着してしまうことがあるので、鋏を使用する場合にはセラ
11

ミック製の鋏を使用するなど、充分な注意が必要である。

・机や台に近い位置で、平行にして静かに切断する・静電気、試料の割れに注意する

位相差顕微鏡法による計数試料（1/4 円×1 片）

保管用試料（3/4 円）

図４フィルター分割方法の一例（位相差顕微鏡法）

３）透明化処理
試料をスライドガラスに載せ、アセトン・トリアセチン法により透明化処理を行う。
①

アセトンとトリアセチンを用いる方法

捕集面を下にしてメンブランフィルター（1/4 片）をスライドガラスの上にのせ、アセトン
蒸気発生装置によって発生させたアセトン蒸気にあてる。アセトン注入は出来るだけゆっく
り行ない、アセトン蒸気の急激な噴出がないようにすること。フィルターは蒸気にあたると直ちに透明になる。透明になったフィルターの中央に、マイクロシリンジなどを用いてトリ
アセチン 2～3 滴を滴下し、その上からカバーグラスを斜めにした状態からゆっくり落として固定する（図５参照）。カバーグラスを載せる際には気泡が入らないように注意しなければならない。滴下するトリアセチンの量が少ないとカバーグラスがはがれる原因になる。またト
リアセチンがカバーグラスからはみ出すほど多いと、スライドグラスを保存中に繊維が移動することがあるので注意が必要である。
常温では、標本作製後数時間以上経過すると、完全に透明になる。また、50℃程度のホットプレート上で加温すると 5～10 分で完全に透明になる。加温温度が高過ぎたり加温時間が長過ぎると気泡が生じるので注意しなければならない。なお、アセトン蒸気発生装置で使用するアセトンの量は比較的少なく、アセトン蒸気の漏れはほとんどないが、換気の良い場所で使用することが望ましい。
顕微鏡観察時にフィルターの位置を確認し易いようにスライドグラスの裏側に油性ペンでフィルターの輪郭を付ける。
顕微鏡観察をする場合は、標本作製後 24 時間経過したもののほうがより明瞭に観察をすることができる。また、本方法で作製した標本は、1 ヶ月程度保存することが可能である。

12

③マイクロピペットにアセトンを必要量（200～300μL 程度）取り、注入口から注入する。
（注入は一定の割合で、フィルターから繊維が飛散しないようにゆっくりと行う）①スイッチを入れる。
（約 1～2 分でパイロットランプが点灯し、使用可能になる）②スライドガラスの上に捕集面を下にしてフィルター（1/4 片）をのせて、ステージの所定の位置にセットする。
（フィルターがアセトン蒸気下降用ノズルの真下に来るように注意し、蒸気が前面に流出しない
よう装置前面にカバー（スライドガラス）を立てておくと良い）

注入口
ON

電源
スイッチ

OFF

パイロット
ランプ

アセトン蒸気拡散防止用カバー（スライドガラス）
アセトン蒸気下降用ノズル
フィルター（1/4 片）（側面から見た図）

スライドガラス
※捕集面を下にしてフィルター（1/4 片）をのせる
ステージ／吸着剤ケース（前面から見た図）④アセトンの蒸気の浸透によりフィルターが透明化した後、ステージからスライドガラスを取り出す。
⑤フィルターの中央にマイクロシリンジ等でトリアセチン 2～3 滴を滴下し、カバーガラス
をのせる。

図５

参考

アセトン／トリアセチンを用いる場合の標本作製の流れ

アセトン／トリアセチンで作製された試料標本よりも長期に保存が必要な場合は、ＤＭＦ-

ユーパラル法※３がある。
ＤＭＦ-ユーパラル法による顕微鏡標本の作り方a)

DMF（Dimethyl formamide）35％、水 50％、酢酸 15％の混合比で DMF 溶液を作製する（DMF
溶液は変質するので使用時に少量作製するほうがよい）。

b)

スライドグラス上にカバーグラスを置き、その上に約 1／4 にカットしたフィルターを捕集面を下向きにして置く（一辺 24mm のカバーグラスを使用する）。フィルター全面を濡らすように DMF 溶液をマイクロピペットで滴下する。
c)

フィルターを透明化するため、スライドグラスを 60℃のホットプレート上で 30 分間加温する（酢酸の臭いがしなくなるのを目安にしてもよい）。
d)フィルターが透明化したら、フィルターの 1／2 から 2／3 が覆われる程度の量のユーパ

ラルをフィルター上に滴下する。
e)

カバーグラスを持ち上げ、素早く裏返して（ユーパラルを滴下した面を下向きにする）
13

清浄なスライドグラス上にゆっくり置く。カバーグラス表面を押したりしてはいけない。
f)

ユーパラルを固めるためスライドグラスを約 60℃のホットプレート上で 30 分間加温する。

※３： Le Guen, J.M.M., et al.：Clearing and Mounting Techniques for the Evaluation ofAsbestos Fibres by Membrane Filter Method, Ann. Occup. Hyg., Vol.24, No.3, pp273-280,
1981
注）ＤＭＦは人体に有害であり、管理濃度が 10ppm となっているため、取扱いには十分注意が必要である。
（２）試料の計数
１）顕微鏡の調整
位相差顕微鏡の調整手順の一例を以下に示す。
① 調整の準備(a) 位相差顕微鏡に対物レンズ（10 倍及び 40 倍）、接眼レンズ及び位相差用ターレットコ
ンデンサーをセットする。
(b) ターレットコンデンサーを明視野観察（通常は目盛「0」）に合わせる。
(c) 対物レンズを 10 倍とし、標本をステージに載せピントを合わせる。
② 眼幅の調整(d) 双眼スリーブを動かして左右の視野が一つに重なって見えるように眼幅を調整する。
③ 視度の補正(e) アイピースグレイティクル※４が入っている接眼レンズの視度補正環を回して、アイピースグレイティクルの目盛りがはっきり見えるようにする。
(f) そのまま片眼で試料中の粒子に焦点合わせ微動ハンドルでピントを合わせる。
(g) 次に反対の眼で、焦点合わせ微動ハンドルを操作するのではなく、接眼レンズの視度
補正環を回してピントを合わせる。
④ 視野絞りの調整(h) 視野絞りを最小とする。
(i) コンデンサーを上下に調整し、視野絞り像を標本面に結像させる。
(j) コンデンサー芯出しねじにより、視野絞り像と視野を同心にする。
(k) 対物レンズ及びターレットコンデンサーを 40 倍とし、視野絞り像が視野の大きさとほぼ同じになるように調整する。
⑤ ターレットコンデンサー及び位相差用リング絞りの芯出し(l) ターレットコンデンサーの開口絞り面にランプのフィラメント像が結像するようにランプの位置を調整する。
(m) 対物レンズ及びターレットコンデンサーを 10 倍とし、接眼レンズの一方を芯出し望遠鏡に変え、ターレットコンデンサーのリングにピントを合わせる。
(n) 位相差用リング絞りの像を位相板のリングに合わせる。
(o) 40 倍対物レンズについてもリング状絞りと位相板を一致させる。
14

※４：顕微鏡の接眼レンズに装着する円形の透明ガラス板で、視野範囲や基準目盛など、観測される繊維の計数に際して必要な情報が確認できるもの。本測定では大円 300μm のものを使用する（図６参照）。
注）顕微鏡の調整方法は、社団法人 日本作業環境測定協会「作業環境測定ガイドブック１鉱物性粉じん・石綿」に詳しい記述があるので、必要に応じて参照するとよい。

出典：社団法人 日本作業環境測定協会「作業環境測定ガイドブック１

図６

鉱物性粉じん・石綿」

アイピースグレイティクルの一例

２）計数の準備
接眼レンズの中にアイピースグレイティクルを装着し、載物台に対物測微計（図７参照）をのせて検鏡する。対物レンズ×40、接眼レンズ×10 のとき、アイピースグレイティクルの最小の目盛は 5μm になるように刻まれているので、この寸法を対物測微計の目盛（10μm）によって確認する。

15

拡大図

対物測微計

出典：社団法人 日本作業環境測定協会「作業環境測定ガイドブック１

図７

鉱物性粉じん・石綿」

対物測微計

３）計数対象繊維
長さ 5μm 以上、幅（直径）3μm 未満で、かつ長さと幅の比（アスペクト比）が 3：1 以上の繊維状物質を計数の対象とする。
４）計数の手順
計数を始める前に、低倍率（100 倍程度）の位相差顕微鏡でフィルター上に粉じんがほぼ均一に捕集されていることを確認してから、倍率を 400 倍にして計数を行う。
顕微鏡視野内のアイピースグレイティクルの大円（直径 300μm）を 1 視野の範囲とし、この範囲内に存在する対象繊維を計数する。1 視野の計数が終了したら、ステージを移動させて次々と別の視野を計数する。ステージの移動は、フィルターの有効ろ過範囲の中心部分から外周部分に直線上に行い、外周部分の有効ろ過範囲の端に達しても必要な計数視野を満たしていない
場合は、それまでに計数していた範囲に重ならないように注意して、外周部分から中心部分に直線上にステージを移動させる。なお、フィルターの切断ライン付近は試料の汚染又は損失をしている可能性があるので、ラインから 2mm 程度離れたところで計数を行うこと（図８参照）。

有効ろ過範囲のうち、フィルターの切断ライン
よりも 2mm 程度内側を計数対象範囲とする。

ステージの移動は、計数対象範囲の中心部分から外周部分に直線上に行う。外周部分の端に達した場合、それまで計数していた範囲に重ならないように注意して、外周部分から中心部分に直線上にステージを移動させる。

図８

フィルターの計数対象範囲及びステージの移動方向
16繊維の計数は、検鏡した視野の数が 100 視野になるまで、あるいは繊維数が 200 本以上になるまで行う（繊維数が 200 本に達した場合、その視野は最後まで計数すること。
）。なお、計数
繊維数（200 本）は、標準誤差が約±7%となるように定めている。
５）繊維数の判定①

単繊維の場合：上記３）で定義した繊維を 1 本と数える。（ⅰ）②

単繊維でカールしている場合：繊維の直線部分を目安にしてカールに沿って真の長さをはかって判定する。（ⅰ）③

枝分かれした繊維の場合：1 本の繊維から枝分かれしている繊維は全体で 1 本と数える。

（ⅵ）④

からまっている場合：(a)

数本の繊維が交差している場合は、交差しているそれぞれの繊維を 1 本と数える。
（ⅶ）

(b)

繊維がからまって正確な数を読みとることができない場合はその繊維は数えない。

（ⅸ）
(c)

からまっている各繊維が、一本の繊維と見なせるくらい寄り集まっている場合は１本として計数する。
（ⅲ）⑤

粒子が付着している繊維の場合：粒子を無視して計数する。繊維の長さについては繊維が見える部分の長さを求め、粒子に隠れて見えない部分の長さは求めない。但し、繊維の両端が粒子に隠れず、１本につながって見える場合は、粒子に隠れている部分も含めて長さを求める。
（ⅲ）、
（ⅷ）
、
（ⅹ）
⑥

一本の繊維の幅が一定で無い場合：幅の平均が 3μm 未満ならば計数する。この場合、付着物の膨らみは無視し、平均的な幅を以て繊維の幅とする。なお、疑わしい場合は、幅は 3μm 未満とみなす。
（ⅰ）⑦

計数視野範囲の境界内に繊維状粒子の両端が入っている場合は 1 本と数え、境界内に片方の端しか入っていない場合は、1/2 本と数える。（ⅱ）（ⅳ）⑧ 繊維状粒子の両端が計数視野範囲の境界外にある場合は、計数しない。
（ⅳ）（ⅸ）
繊維数の判断に係る一例を図９に示す。

17

(ⅰ)

(ⅱ)
１本：
長さ、幅、アスペクト比の基準を満たす1 本：
全体が計数範囲内

1 本：
幅は平均となる場所をはかる

1/2 本：
片 方 の 端 だ け計 数
範囲内

(ⅲ)

(ⅳ)
1本

0 本：
両端が計数範囲外

1 本：
幅を見る場合は付着した粒子や膨らみは無視
する

(ⅴ)

１本：
両端が計数範囲内(ⅵ)
0 本：幅が大きすぎる

1 本：枝分かれ0 本：
アスペクト比が３未満

1/2 本：
枝分かれした片方だけ計数範囲内

(ⅶ)

(ⅷ)
２本
本
21 本

1本

３本

1/2 本

１
(ⅸ)

(ⅹ)
０本

２本

０本

1本

図９

繊維数の判定18６）計数にあたっての注意①

計数の対象となる粒子
計数の対象となる粒子は長さ 5μm 以上、幅 3μm 未満で、かつ長さと幅の比（アスペクト比）が 3：1 以上の繊維状物質である。計数に際し、長さの物さしとしてアイピースグレイテ
ィクルを利用して円の直径と線の長さを肉眼的に比較する場合には、錯視の関係で誤差を生ずることがあるので、この点を注意しながら計数する必要がある。
②

ピントの微調整
顕微鏡で粒子を観測する場合、視野の周辺の粒子にピントを合わせると中央の粒子はピントがずれ、逆に中央の粒子にピントを合わせると視野周辺にある粒子はピントがずれてしま
うことが普通である。このため、常に微動ハンドルを調節して、計数する部位にピントを合わせながら計数することが重要である。なお、位相差顕微鏡を用いても極めて見えにくい粒子もある。このような粒子は微動ハンドルを動かすことによって、見えたり見えなくなったりする。粒子が見えたり見えなくなったりすると計数者の注意が喚起され、比較的見落としが少なくなる。
７）フィルターブランク
測定誤差の原因となるようなフィルターブランク値が認められる場合もあるので、適宜、サ
ンブリングに使用したものと同一ロットのフィルターについて、捕集したフィルターと同様の手順で標本を作製し、同数の計数視野について計数を行い、フィルターブランク値を求め、補正を行うことが望ましい。

19

（３）繊維数濃度の計算
１）総繊維数濃度
一般環境中に浮遊している計数対象に該当する総繊維数濃度は次式から求められる。
ＦＴ＝Ａ×（ＮＰ－ＮＢ）/（a×n×Ｖ）
ＦＴ
Ａ
ＮＰ
ＮＢ
a
n
Ｖ

： 総繊維数濃度（f/Ｌ）： メンブランフィルターの有効面積（mm2）： 位相差顕微鏡で計数した繊維数（ｆ）： フィルターブランク値（ｆ）： 視野範囲（アイピースグレイティクル）の面積（mm2）： 計数した視野数： 吸引空気量（L）（例）アイピースグレイティクルの直径が 300μm の場合、1 視野の面積は 0.07065mm2 となる。
有効ろ紙直径が 35mm のとき、メンブランフィルターの有効ろ過面の面積は 961.625mm2 であるから、捕集量 2400L、位相差顕微鏡で 100 視野を計数して 30 繊維が確認された場合、フィルターブランク値を 0 とすると、総繊維数濃度は上式から 1.7f/L となる。また、同条件
で、繊維が 1 本あったと仮定した場合、総繊維数濃度は 0.056f/L となり、これが検出下限値となる。
なお、複数枚のろ紙を使用した時は、各ろ紙の計数繊維数から求められた繊維数濃度を
時間加重（捕集量加重）平均して得られた値を繊維数濃度の値とする。
２）測定値等の有効数字等
測定値及び算出した幾何平均値の有効数字は原則として 2 桁とし、3 桁目以下は切り捨てること。
３）幾何平均の算出
一般環境においては、3 回捕集を一連の測定としているため、各回の繊維数濃度を幾何平均したものを、当該地点の繊維数濃度とする。
3 回捕集の幾何平均による繊維数濃度は、次式で求められる。
ＦＧ＝（Ｆ１×Ｆ２×Ｆ３）１/３
ＦＧ
Ｆ１
Ｆ２
Ｆ３

： 3 回捕集の幾何平均による繊維数濃度（f/L）： 捕集 1 日目の繊維数濃度（f/L）： 捕集 2 日目の繊維数濃度（f/L）： 捕集 3 日目の繊維数濃度（f/L）

20なお、幾何平均による繊維数濃度は次の方法でも求められる。
ＦＧ＝ｅｘｐ｛（logＦ１＋logＦ２＋logＦ３）/ ３ ｝
この式では、各回の繊維数濃度の対数をとったもの（logＦ１、logＦ２、logＦ３）の平均値を求め、この指数を求めることによって幾何平均を算出する。
幾何平均を求める際、繊維が不検出（ＮＤ）だった試料は、100 視野を計数して繊維が 1 本確認されたと仮定して繊維数濃度を算出し（検出下限値を与えて）、幾何平均の算出を行う。また、
3 回の捕集全てで不検出だった場合は、繊維数濃度は検出下限値未満とする。

21

２．３．３

分析走査電子顕微鏡法（Ａ-ＳＥＭ法）

使用する走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）は、エネルギー分散形Ｘ線分析装置（ＥＤＸ）をもち、加速
電圧 15kV 程度を満たすものとする。また、計数対象繊維（長さ 5μm 以上、幅 0.2μm 以上 3μm 未満、アスペクト比 3 以上）の観察及び同定が可能なものとする。計数は、幅 0.2μm の繊維が確実に確認できる倍率で行う。なお、装置の長時間の安定性を考慮してフィールドエミッション型のＳＥＭを利用することが望ましい。
なお、計数する際の観察画面倍率に対するスケールの正確さは、繊維数濃度及び繊維寸法の測定
結果に直接影響するため、必要に応じて標準寸法を示す電子顕微鏡用標準試料（標準マイクロスケール）などの倍率校正用標準試料を用いて倍率校正を行う。ＳＥＭの倍率は多くのメーカーが試料とプリントアウトした紙面の比率で表していることが多い。例えば、ＳＥＭの装置が 2000 倍と表示
していても、モニターの大きさと観察画面は大きさによって実際のモニター画面上の倍率は 10000
倍となっていたりする。したがって，モニターサイズと観察画面はＳＥＭの装置によって異なっていることに考慮する必要がある。
捕集した試料の前処理方法は、次の３種類の中から選択する。
Ａ．メンブランフィルター／低温灰化法
Ｂ．メンブランフィルター／カーボンペースト含浸法
Ｃ．ポリカーボネートフィルター法
Ａ、Ｂ法は位相差顕微鏡法と同じ試料を使用することができるという利点がある。Ｃ法はメンブ
ランフィルターと並行で捕集を行う必要があるが、前処理が簡単で電子顕微鏡像も見やすい。
また、Ａ法は低温灰化により有機繊維が除去されるため、観察される繊維は無機繊維となるが、低温灰化時にメンブランフィルターが収縮し、無機物質付近が十分に灰化されないことがあるので注意が必要であり、有機繊維が非常に多い場合に用いることが望ましい。Ｂ、Ｃ法は灰化処理を行わないため、有機繊維も観察される。前処理方法の選択にあたっては、これらの特徴の他に、測定の目的及び保有する設備・機器等を考慮する必要がある。
（１）試料の前処理
１） フィルターの切断捕集したフィルターは、汚染するおそれのない清浄な室内で保管容器から取り出し、切断する。位相差顕微鏡法にはフィルターを切断した 1/4 片を利用し、残りの 3/4 は速やかに保管容器に戻す（図４参照）。フィルターの切断にはメスやカッターの刃を使うとよい。フィルターの二次汚染を防ぐためには切断の度に新しい刃を使うのがよいが、繰り返し使う場合は刃を十分清浄にする必要がある（二次汚染を防ぐには新しいメスの刃を、手前に引くようにしてフィル
ターを切るのではなく、刃の弧に沿って先端から根元へ転がすように切るとよい）。また切断の際にフィルターが裏返って捕集面がわからなくなることがあるので、予めフィルターの端に印を付けて捕集面を確認出来るようにしておくとよい。フィルターの切断の際は、捕集した繊維が落ちたり、切り離した切片が落ちた際に裏返ったりしないよう、できる限り机や台に近い位
置で、平行にして静かに、かつ割れないように注意して切断する。また、静電気が発生して、22切断したフィルターが鋏に付着してしまうことがあるので、鋏を使用する場合にはセラミック製の鋏を使用するなど、十分な注意が必要である。

・机や台に近い位置で、平行にして静かに切断する・静電気、試料の割れに注意する

位相差顕微鏡法による計数
試料（1/4 円×1 片）

保管用試料（3/4 円）

ＳＥＭ法による計数
試料（1/4 円×1 片）ＳＥＭ法による
計数試料（10mm 角程度）
保管用試料（2/4 円）

保管用試料（残りの部位）位相差顕微鏡法の測定結果を電子顕微鏡法で確認する場合①10mm 方形にカットする。

②試料台の表面に、カーボンペーストを塗り付ける。

③カーボンペーストが乾かないうちにフィルターをのせ、ピンセットで軽く押さえ貼り付ける。

④５分程度放置すると、カーボンペーストが乾き、フィルターが試料台に接着する。

最初から電子顕微鏡法で分析する場合

図１０ フィルターの分割方法及び標本作製の流れの一例

23２）標本の作製（１）の１）で切断したフィルターを、図１０のように 10 mm 角程度に切り取る。なお、フィルターの切断の際は、捕集した繊維が落ちたり、切断したフィルターが落ちた際に裏返ったりしないよう、できる限り机や台に近い位置で、平行にして静かに、かつ割れないように注意して切断する。また、静電気が発生して、切断したフィルターが鋏に付着してしまうことがある
ので、鋏を使う場合はセラミック鋏を使用するなど、十分な注意が必要である。
黄銅、アルミニウム製又はカーボン製のＳＥＭ試料台に導電性カーボン両面テープを 10 mm
角に切って接着し、その上に試料フィルターの捕集面が上になるように置き、固定する。
Ａ．メンブランフィルター／低温灰化法
１） （１）の１）で切断したフィルターを、10 mm 角程度に切り取って、金蒸着を施したスライドガラス又はニッケル板に、捕集面を下側にして載せ、これをアセトン蒸気発生装置によってアセトン蒸気を発生させて接着する。なお、フィルターの切断の際は、捕集した繊維が落ちたり、切断したフィルターが落ちた際に裏返ったりしないよう、できる限り机や台に近い位置で、平行にして静かに、かつ割れないように注意して切断する。また、静電気が発生して、切断したフィルターが鋏に付着してしまうことがあるので、鋏を使う場合
はセラミック鋏を使用するなど、十分な注意が必要である。
２）

フィルターを接着したスライドガラス又はニッケル板を低温灰化装置で灰化し、フィル

ター及びその他有機物などを除去する。
３） 黄銅、アルミニウム製又はカーボン製のＳＥＭ試料台に導電性カーボン両面テープを 10mm
角程度に切って接着し、その上に灰化処理を終えたスライドガラス又はニッケル板を、試料を接着した面が上になるように置き、固定する。
４）

固定したスライドガラス又はニッケル板と試料台の間の導電性を確保するため、板の縁にカーボンペーストを塗って導電性処理を行い、乾燥させ、カーボン蒸着又は金蒸着を施し、観察標本とする。
Ｂ．メンブランフィルター／カーボンペースト含浸法
１）

水溶性のカーボンペーストと水を１：１程度の割合で混合し、のり程度の粘度に調製する。なお、このペーストは薄めすぎると試料台にフィルターが接着されにくくなる。なお、
カーボンペーストと水の最適な割合は、メーカーや保存状態により異なるので、最初に検討しておくことが望ましい。
２）（１）の１）で切断したフィルターを、図１０のように切り取る。試料台の上にカーボ

ンペーストを竹串やヘラ等で塗布し、そこに切り取ったフィルターを捕集面が上になるよ
うに貼り付けることで、フィルターの裏側からカーボンペーストが含浸するとともに試料台に接着される。なお、フィルターが乾燥していて試料台に貼り付きにくい場合や、カーボンペーストがフィルターに含浸接着しにくい場合は、含水させた紙などの上にフィルターを置き、予めフィルターを湿らせてから試料台に貼り付ける。
３）

フィルターにカーボンペーストが十分に含浸接着した後、フィルターの四隅にカーボン
24

ペーストを付けて接着させる。なお、試料台に油分等が付着していると接着がうまくいかない時があるので、操作前にアセトン等を含浸させたガーゼなどで試料台の表面を拭くなどの配慮が必要である。なお、カーボンテープで貼り付けると、試料面に凹凸が生じて測定に影響を及ぼす可能性があるため、カーボンペーストの使用を推奨する。
４）

フィルターを接着した後、室温で３０分以上乾燥させる。フィルターの表面の導電性を確保するため、イオンスパッタリング装置などを用いて金-パラジウム蒸着、白金-パラジ
ウム蒸着、金蒸着又はカーボン蒸着を施し、観察標本とする。
Ｃ．ポリカーボネートフィルター法
１）ＳＥＭ試料台に 7～10mm 角の導電性カーボン両面テープを接着し、その上に捕集したポリ
カーボネートフィルターを図１０のように 10 mm 角に切り取って、捕集面を上にして接着する。
２）フィルターの端にカーボンペーストを塗って導電性処理を行い、乾燥させ、カーボン蒸着
又は金蒸着を施し、観察標本とする。
（２）繊維の計数
モニター画面上に見られる像から繊維形態を識別する。計数対象に該当する繊維は全て長さ・幅を記録し、さらにＥＤＸ検出装置を用いて繊維の種類を同定する。
１）計数対象繊維：次の条件に当てはまる全ての繊維状粒子を計数対象とする。
長さ： 5μm 以上

幅

： 0.2μm 以上 3μm 未満

アスペクト比： 3 以上（長さ/幅≧3）２）アスベストの同定：計数対象繊維は、全てＥＤＸ検出装置を用いて構成成分を確認し、次の 5 つの区分に識別する。
① クリソタイル
②

アモサイト

③

クロシドライト④ その他の角閃石系アスベスト（アンソフィライト、トレモライト、アクチノライト）⑤ その他の繊維（硫酸カルシウム、ロックウール、グラスウール等）
なお、アスベストの種類ごとに特徴的なＥＤＸスペクトルを示すので、ほとんどの場合、スペクトルからアスベストの種類が同定できる。アスベストのＥＤＸスペクトルの例を参考
資料に示す。

25

３）観察条件：位相差顕微鏡法で観察できる繊維と同等の大きさのものを計数する場合は、次の条件で観察を行う。
加速電圧： 15kV 程度

倍率： 幅 0.2μm の繊維が確実に計数できること※ ＥＤＸ分析時などは、必要に応じて倍率を 10000～50000 倍に適宜上げて観察を行う。

計数範囲：１視野あたりの計数範囲を、①基準格子等の標準試料を用いた方形枠または②モニター画面を利用して設定する。
※ モニター画面を利用する場合は、機器の倍率と画面上の見かけの倍率が異なる可能性があるため、標準マイクロスケール等を用いて視野範囲を正確に計測する必要がある。また、計数時の倍率は固定する必要がある。

計数視野 ：計数視野の移動は下図のように行う。なお、切断ラインかの移動

ら 2mm 程度までは、試料の汚染又は損失をしている可能性があるので、計数を行わないこと。
元の円
計数視野の移動は、
元の円の中心部分を起点とする。

４）計数の手順
計数を始める前に、低倍率（100 倍程度）のＳＥＭでフィルター上に粉じんがほぼ均一に捕集されていることを確認してから、0.2μm の繊維が確実に計測できる倍率で計数を行う。
（例）倍率 1000 倍のＳＥＭ画面を 1 視野の範囲とし、この範囲内に存在する対象繊維を計数する。1 視野の計数が終了したら、ステージを移動させて次々と別の視野を計数する。ス
テージの移動は、フィルターの有効ろ過範囲の中心部分から外周部分に直線上に行い、外周部分の有効ろ過範囲の端に達しても必要な計数視野を満たしていない場合は、それまでに計数していた範囲に重ならないように注意して、外周部分から上下に直線上にステージを移動させる。なお、フィルターの切断ライン付近は試料の汚染又は損失をしている可能性があるので、ラインから離れたところで計数を行うこと（図１１参照）。

26

有効ろ過範囲のうち、フィルターの切断ラインの内側を計数対象範囲とする。

ステージの移動は、計数対象範囲の中心部分から外周部分に直線上に行う。外周部分の端に達した場合、それまで計数していた範囲に重ならないように注意して、外周部分から中心部分に直線上にステージを移動させる。

図１１ フィルターの計数対象範囲及びステージの移動方向（例） 倍率 1000 倍においてモニター画面上の 1 視野面積が 0.010536 mm2 であるＳＥＭの場
合、繊維の計数は、検鏡した視野の数が 300 視野になるまで、あるいは繊維数が 40 本以上になるまで行う（繊維数が 40 本に達した場合、その視野は最後まで計数すること）。
ただし、アスベストが１Ｌあたり 10 本以上計数された場合は、計数視野数をその視野としてもよい。なお、300 視野を計数したときの検出下限値は、0.12 f/L となる。
５）計数視野数及び計数繊維数：設定した計数範囲の領域を 1 視野として、計数が必要な視野数を、視野範囲の面積及び要求される検出下限値から、以下の式によって計算する。なお、検出下限は、位相差顕微鏡法と同等程度であることが望ましいが、測定の目的に応じて要求される検出下限値を適宜設定してよい。
nＥ＝ Ａ /（aＥ×Ｖ×Ｓ）
nＥ
Ａ
aＥ
Ｖ
Ｓ

： 必要な計数視野数： フィルターの有効面積（mm2）： 視野範囲の面積（mm2）： 吸引空気量（L）： 要求される検出下限値（f/L）

なお、上の式を用いて決定した計数視野数によらず、アスベスト繊維を 200 本以上計数した場合は、標準誤差の観点から十分に精度が確保されると考えられるため、計数を終了してもよい（アスベスト繊維が 200 本に達した場合、その視野は最後まで計数すること。
）。
６）繊維状粒子の数の判定：
種々の形態及び集合状態で観察される繊維状粒子の数の判定は、基本的に位相差顕微鏡法と同様に行う。なお、個々の視野において、計数視野範囲からはみ出た繊維については、視野画面の右側及び底部からはみ出したもの以外の繊維は全て計数する。また、画面上で繊維
27

の両端が確認できない繊維は計数しない（図１２参照）。
モニター画面

計数視野

０
０

０

１

１

０

１
１
０
０
０

０

０

０

１：１繊維として計数する
０：計数しない

図１２ はみ出した繊維の計数方法例

７）繊維数の判定（英数字は 18 ページの図９参照）① 単繊維の場合：上記 （２）の１）で定義した繊維を 1 本と数える。（ⅰ）②

単繊維でカールしている場合：繊維の直線部分を目安にしてカールに沿って真の長さをはかって判定する。（ⅰ）③

枝分かれした繊維の場合：1 本の繊維から枝分かれしている繊維は全体で 1 本と数える。

（ⅵ）④

からまっている場合：(a)

数本の繊維が交差している場合は、交差しているそれぞれの繊維を 1 本と数える。
（ⅶ）

(b)

繊維がからまって正確な数を読みとることができない場合はその繊維は数えない。
（ⅸ）(c) からまっている各繊維が、一本の繊維と見なせるくらい寄り集まっている場合は１本として計数する。
（ⅲ）⑤

粒子が付着している繊維の場合：粒子を無視して計数する。繊維の長さについては繊維が見える部分の長さを求め、粒子に隠れて見えない部分の長さは求めない。但し、繊維の両端が粒子に隠れず、１本につながって見える場合は、粒子に隠れている部分も含めて長さを求める。
（ⅲ）、
（ⅷ）
、
（ⅹ）
⑥

一本の繊維の幅が一定で無い場合：幅の平均が 3μm 未満ならば計数する。この場合、付着物の膨らみは無視し、平均的な幅を以て繊維の幅とする。なお、疑わしい場合は、幅は 3μm 未満とみなす。
（ⅰ）⑦ 繊維状粒子の両端が計数視野範囲の境界外にある場合は、計数しない。
（ⅳ）
（ⅸ）

28

８）計数にあたっての注意①

計数の対象となる粒子
計数の対象となる粒子は長さ 5μm 以上、幅 3μm 未満で、かつ長さと幅の比（アスペクト比）が 3：1 以上の繊維状物質である。
②

焦点などの微調整
ＳＥＭで粒子を観測する場合、常に微動ハンドルを調節して、計数する部位にピントを合わせながら計数することが重要である。
９）フィルターブランク
測定誤差の原因となるようなフィルターブランク値が認められる場合もあるので、適宜、サンプリングに使用したものと同一ロットのフィルターについて、捕集したフィルターと同様の手順で標本を作製し、同数の計数視野について計数を行い、フィルターブランク値を求め、補正を行うことが望ましい。
１０）繊維数濃度の算出① 繊維数濃度次式によって繊維数濃度を算出する。
ＦＡ＝Ａ×（ＮＳ－ＮＢ）/（aＥ×n×Ｖ）
ＦＡ
Ａ
ＮＳ
ＮＢ
aＥ
n
Ｖ

： 繊維数濃度（f/L）： フィルターの有効面積（mm2）： ＳＥＭで計数した繊維数（ｆ）： ブランク値（ｆ）： 視野範囲の面積（mm2）： 計数した視野数： 吸引空気量（L）（例） 倍率 1000 倍においてモニター画面上の 1 視野面積が 0.010536 mm2 であるＳＥＭを仮定する。有効ろ紙直径が 35mm のとき、メンブランフィルターの有効ろ過面の面積は 961.625
mm2 であるから、捕集流量 2400L、ＳＥＭで 1000 視野を計数して 10 繊維が確認された場
合、フィルターブランク値を 0 とすると、繊維数濃度は上式から 0.38 f/L となる。
なお、複数枚のろ紙を使用した時は、各ろ紙の計数繊維数から求められた繊維数濃度を時間加重（捕集量加重）平均して得られた値を繊維数濃度の値とする。
（例） 上記と同様の条件で計数し、300 視野を計数してＳＥＭで 30 繊維が確認された場合、アスベストの繊維数濃度は 3.8 f/L となる。
なお、300 視野を計数して繊維が 1 本あったと仮定したときの繊維数濃度は、0.12 f/Lとなり、これが検出下限となる。
（表２参照）

29

表２
ﾌｨﾙﾀｰ直径ﾌｨﾙﾀｰの有効面積 計数した繊維数

ﾌﾞﾗﾝｸ値

本㎜2
47961.6251
47961.6251
25379.941
25
379.941
25
379.941※吸引流量：φ47 10Ｌ／min、φ25 5Ｌ／min㎜②

ＳＥＭ法 検出下限値の一例
視野範囲の面積 計数した視野数

本
0
0
0
0
0

㎜2
0.010536
0.010536
0.010536
0.010536
0.010536

ｎ
300
300
300
300
300

吸引時間

吸引空気量

min

L
240
120
240
120
30

2400
1200
1200
600
150

検出下限値

ｆ／Ｌ
0.12
0.25
0.10
0.20
0.80

測定値の有効数字等
測定値の有効数字は原則として 2 桁とし、3 桁目以下は切り捨てること。

③

幾何平均の算出

一般環境の地域においては、3 回捕集を一連の測定としているため、各回の繊維数濃度を幾何平均したものを、当該地域の繊維数濃度とする。
3 回捕集の幾何平均による繊維数濃度は、次式で求められる。
ＦＧ＝（Ｆ１×Ｆ２×Ｆ３）１/３
ＦＧ
Ｆ１
Ｆ２
Ｆ３

： 3 回捕集の幾何平均による繊維数濃度（f/L）： 捕集 1 日目の繊維数濃度（f/L）： 捕集 2 日目の繊維数濃度（f/L）： 捕集 3 日目の繊維数濃度（f/L）

なお、幾何平均による繊維数濃度は次の方法でも求められる。
ＦＧ＝ｅｘｐ｛（logＦ１＋logＦ２＋logＦ３）/ ３ ｝
この式では、各回の繊維数濃度の対数をとったもの（logＦ１、logＦ２、logＦ３）の平均値を求め、この指数を求めることによって幾何平均を算出する。
幾何平均を求める際、繊維が不検出（ＮＤ）だった試料は、繊維が 1 本確認されたと仮定して繊維数濃度を算出し（検出下限値を与えて）、幾何平均の算出を行う。また、3 回の捕集全てで不検出だった場合は、繊維数濃度は検出下限値未満とする。

30

（参考資料）アスベスト繊維及び類似繊維のＳＥＭ像及びＥＤＸスペクトル
Ａ-ＳＥＭ法によるアスベスト繊維及び類似繊維のＳＥＭ像（二次電子像）、ＢＳＥ像（反射電子像）及びＥＤＸスペクトルを示す。なお、測定条件は次のとおり。
ＥＤＸスペクトルは、Ａ-ＳＥＭ法、Ａ-ＴＥＭ法でほぼ同様のパターンを示すので、電子顕微鏡で大気環境中のアスベスト繊維数濃度を測定する際の参考とされたい。
＜測定条件＞
・反射電子像および EDX 分析：
加速電圧

15kV

倍率

×1000

真空度

30Pa

加速電圧

15kV

・二次電子像測定：
倍率

×1000

カーボン蒸着31

＜ＳＥＭ像及びＥＤＸスペクトル＞
繊維種

繊維の情報（産地等）

１．アスベスト繊維（１） クリソタイル

UICC（国際対ガン連合）試料「クリソタイルＢ」（２） アモサイト

UICC 試料（３） クロシドライト

UICC 試料（４） アンソフィライト

アフガニスタン産（５） トレモライト/アクチノライト

熊本県山鹿産２．アスベスト類似繊維

繊維状物質研究協議会配布試料（1996）（６） ロックウール（７） グラスファイバー（８） セラミック繊維（９）石膏（硫酸カルシウム）（１０）パルプ（１１）ワラストナイト（１２）塩基性硫酸マグネシウム（１３）チタン酸カリウム

32

（１）クリソタイル
SEM 像

ＥＤＸスペクトル
Mg
C
O
Si

BSE 像

Fe

（２）アモサイト
SEM 像

ＥＤＸスペクトル
O

Si

C

BSE 像

FeKα

Mg
Mn

FeK

（３）クロシドライト
SEM 像

ＥＤＸスペクトル
Si

C
O

BSE 像
Na
Mg

FeKα
FeKβ

33

（４）アンソフィライト
SEM 像

ＥＤＸスペクトル
Si

C
O
Mg

BSE 像

Fe

（５）トレモライト/アクチノライト
SEM 像

ＥＤＸスペクトル
Si

C
O

Mg

BSE 像

CaKα
CaKβ
Fe

34

（６）ロックウール
SEM 像

ＥＤＸスペクトル
Si

C
O

Ca

BSE 像

Al

Mg
Ca

（７）グラスファイバー
SEM 像

ＥＤＸスペクトル
Si
C
O

BSE 像

Na Mg
Al
Ca

（８）セラミック繊維
SEM 像

ＥＤＸスペクトル
Al
C
O

Si

BSE 像

35

（９）石膏（硫酸カルシウム）
SEM 像

ＥＤＸスペクトル
C
S
Ca

O

BSE 像

Ca

（１０）パルプ
SEM 像

ＥＤＸスペクトル

C

BSE 像
O

（１１）ワラストナイト
SEM 像

ＥＤＸスペクトル
Si
C
O
Ca

BSE 像

Ca

36

（１２）塩基性硫酸マグネシウム
SEM 像

ＥＤＸスペクトル
Mg
C
O

BSE 像

S

（１３）チタン酸カリウム
SEM 像

ＥＤＸスペクトル
Ti
C
O

BSE 像

K

Ti
K

37

２．３．４

分析透過電子顕微鏡法（Ａ－ＴＥＭ法）

Ａ－ＴＥＭ法による大気中のアスベスト測定方法は、一定容量の大気を通過させたメンブランフ
ィルターをＴＥＭ標本に変換して、そのＴＥＭ標本に存在しているアスベストをＴＥＭで計数するものである。ＴＥＭ標本の作製方法には、アスベストを含む粉じんがメンブランフィルター上に捕集されたままの状態でＴＥＭ標本に変換する方法（ＴＥＭ－１法）と、捕集したフィルター上の粉じんを別のフィルター（ニュークリポアフィルター）に移し、そのニュークリポアフィルターの一部をＴＥＭ標本に変換する方法（ＴＥＭ―２法）とがある。
ＴＥＭ－１法は、メンブランフィルターに捕集された試料状態が保持されたＴＥＭ標本となっているので、メンブランフィルターと１：１の対応がつけやすい。ＴＥＭ-2 法は、最初のメンブラン
フィルターの面積と次のニュークリポアフィルターのろ過面積の比率によって、濃縮（場合によっては希釈）が可能であり、一般大気のような低濃度アスベストをある程度濃縮した標本で計測を効率的に行えるという特徴を持つ。以下、ＴＥＭ－１法とＴＥＭ－２法の詳細を記載する。
（１）ＴＥＭ標本の作製方法
１）ＴＥＭ－１法①

試料捕集を行ったメンブランフィルターを捕集粉じん面をスライドガラス側に向けてス
ライドガラスに載せ、アセトン蒸気発生装置によってアセトン蒸気を発生させて接着する。

②

低温灰化装置でフィルターその他有機物などを灰化する。
参考：灰化は、3 個の試料管をもつ場合、約 300W③

1 時間程度で完了する。

灰化後の試料部分の周囲をセロハンテープで縁取りし、試料部分とテープの両方の上にポリビニルアルコール（以下「PVA」という。
）溶液を滴下し、楊枝の先などで広げて乾燥させる。乾燥は約 55℃の空気乾燥器中で 2～3 時間又は室温で 1 昼夜放置する。

備考 1. PVA 溶液には、重合度 2000 の PVA 粉末を約 100ml の精製ろ過水に約 8%になるように加え、約 80℃の振とう温浴で約 8 時間振とうして溶解し、さらに約 10,000 回/minの高速で 1 時間 遠心処理した上澄み液を用いる。
2．セロハンテープは、幅 13mm 程度の PVA 溶液と接着性のよいものを用いる。
④

乾燥後、PVA 膜をセロハンテープごとはぎ取り、反転して同じスライドガラスに新たなセロハンテープで固定する。

⑤

その上に、カーボン蒸着装置によってカーボン蒸着を厚めに施す。カーボン膜の厚さは、50～100nm 程度の厚めが望ましい。

⑥

替え刃メスでカーボン蒸着面に軽く 3mm の升目を入れ、セロハンテープごと 500ml ビー
力―の熱水に浮かべる。

⑦

2-3 時間放置して PVA 膜を完全に溶解・除去した後、浮いている 3mm 角のカーボン膜を試
料支持メッシュ（Ni 製がよい）で 1 枚ずつすくいあげ、乾燥してＴＥＭ標本とする。

参考

PVA 膜の溶解を完全にするためには、できるだけ高温の熱水に適切な時間浮かべておくのが望ましい。そのために、ビーカーをマントル・ヒータに入れて熱水の冷却を防ぐ程度に低電圧で熱をかけるとよい結果が得られる。マントル・ヒータがない場合は、発泡スチロールの保温ケースをつくって断熱するだけでも効果がある。
38

ＴＥＭ－１法のメンブランフィルターからＴＥＭ標本への変換方法の概念図を図１３に示す。

図１３．ＴＥＭ－１法のＴＥＭ標本の作製方法
２）ＴＥＭ－２法①

試料捕集したメンブランフィルターを、粉じん面をスライドグラスに向けて載せ、アセトン蒸気発生装置によって発生させたアセトン蒸気を吹き付けて接着する。

②

低温灰化装置で、フィルターなどを灰化する。

③

スライドガラス上に残った粉じんを、新しい片刃かみそり※５でこそぎ取り、100ml コニ
カルビーカー中に移す。移すときに、片刃かみそりにこそぎ取られた粉じんを、洗びんのイソプロピルアルコールを吹き付けてコニカルビーカー中に洗い流す。最後に、イソプロ
ピルアルコールを 50～80ml 程度になるように加える。
※５：新しい片刃かみそりは、パラフィンや油分が付着しているので、キシレンとエタノールで除去してから使用する。油分などが付着していると、かみそりにこそぎ取った39

粉じんがイソプロピルアルコールを吹き付けても落ちないことがあるので、注意を要する。
備考

イソプロピルアルコールは、あらかじめ孔径 0.45μm のメンブランフィルターでろ過しておいたものを用いる。
超音波細胞破壊器（投入棒型）又は水浴型超音波洗浄器を用いて粉じんを軽く分散させ※④
６、その液を吸引ろ過器を用いてポリカーボネートフィルター上に吸引ろ過する※７。

※６：コニカルビーカー中の粉じんの超音波分散は、1 分以内の短時間で済ますことが重要
で、長時間超音波分散を施すと、アスベスト繊維のサイズ変化や構造破壊などが生じることがあるので、できるだけ避けること。
※７：ポリカーボネートフィルター上に吸引ろ過する際、粉じんを均一にろ過するとともにろ過器からの汚染を防止するために、新しいメンブレンフィルターを下敷きにするとよい。
⑤

そのポリカーボネートフィルターの周囲を両面テープなどで固定し※８、厚めにカーボン蒸着を施す。

※８：カーボン蒸着を施すために、ポリカーボネートフィルターの周囲を両面テープで固定する。そのために、両面テープをはったろ紙（直径 100mm）にポリカーボネートフィ
ルターの直径（25mm）よりやや小さめの円形の穴をいくつか開け、それの穴にポリカ
ーボネートフィルターを均等にはり付けるとよい。
⑥

カーボン蒸着を施したポリカーボネートフィルターから 3mm 角片を切り取り、それをク
ロロホルムを満たしたシャーレ中に作ったステンレス金網で覆った台上に置いた試料支持
メッシュの上に、ポリカーボネートフィルターを下側にして 1 枚ずつ、1 試料あたリ 4～5枚置く。

⑦

そのまま数時間から 1 昼夜室温で放置して、ポリカーボネートフィルターを溶かし去り、
カーボン膜の残ったメッシュをＴＥＭ観察標本とする。

図１４にＴＥＭ－２法のＴＥＭ標本作製方法の概念図を示す。

40

図１４．ＴＥＭ－２法のＴＥＭ標本の作製方法（２）計数方法
蛍光板上に投影された像を見て、繊維の形態、構造などを判断し、必要に応じて繊維のＥＤＸ
スペクトルを調べて、それらの種類を同定しながら該当するサイズのアスベストを計数する。
１）計数繊維の決定
計数繊維の決定に当たっては、あらかじめ計数繊維の最小の大きさ(下限サイズ)を決めておき、そのサイズ以上の繊維について種類の同定を行い、アスベストであれば計数する。
①

位相差顕微鏡による繊維状粒子と同等の大きさの繊維を測定する場合は、ＳＥＭ及びＴ
ＥＭのいずれの方法によっても計数が可能である。

②

幅 3μm 未満で長さ 5μm 以下の繊維状粒子を測定に含めて繊維数濃度を求める場合は、計数繊維の下限サイズを明示する必要がある。
備考

例えば、計測繊維のサイズを“長さ 1μm 以上、幅 0.01μm 以上 3μm 未満の繊維”のように示す。
２）アスベストの同定
アスベストの同定は、（２）の１）で決定した計数サイズの繊維について、アスベストかそ41

れ以外の繊維かを判定し、もしアスベストならその種類を同定する。
①

ＥＤＸスペクトルによる判定：ＳＥＭ又はＴＥＭで電子線を細く絞って繊維に照射して発生する特性 X 線をＥＤＸ検出器で受けてＥＤＸスペクトルを得る。アスベストの種類ごとに特徴的なスペクトルを示すので、大抵はＥＤＸスペクトルからアスベストの種類を決定できる。アスベストのＥＤＸスペクトルを図１５に示す。

図１５．アスベスト 6 種のＥＤＸスペクトル図②

形態からの判定：透過電子顕微鏡で観察してアスベストの種類を繊維の形態から判定できるのは、一般にはクリソタイルが挙げられる。クリソタイルは、太さ 10～20nm の中空のストロー状繊維又はその集合した束状繊維として観察される。それ以外のアスベストは、形態のみではかなり困難である。

③

電子線回折(ED)からの同定：ＴＥＭでは、通常電子線回折が行える。この電子線回折を蛍光板上で観察して、クリソタイルか角閃石アスベストかの判定ができる。しかし、角閃石の中のどのアスベストかの判定は、電子線回折パターンのみからはかなり難しい。

図１６－１、１６－２にクリソタイルと角閃石アスベスト（アモサイト）の電子線回折パターンの例を示す。

42

図１６－１．クリソタイルの電子線回折パターン

図１６－２．角閃石アスベスト（アモサイト）の電子線回折パターン
３）観察条件①

位相差顕微鏡で観察する繊維と同等の大きさ（幅 3μm 未満、長さ 5μm 以上、アスペク
ト比 3 以上）のアスベストを計数する場合：加速電圧 80～120kV、倍率 1000～2000 で行う。
ただし、同定のために行うＥＤＸ分析時には、必要に応じて倍率を 10000～20000 に上げて43

観察を行う。
②

幅 3μm 未満で長さ 5μm 以下、アスペクト比 3 以上の繊維を含めて計数する場合：加速
電圧 80～120kV、倍率 10000～40000 倍で行い、観察できる繊維幅の最小値を、0.1mm とか
0.5μm というように明記しておく。

４）計数視野数及び計数繊維数①

位相差顕微鏡で観察できる同等の大きさの繊維を計数する場合：観察標本に用いた 200
メッシュの試料支持メッシュの 1 網目面積は、約 100×100μm であり、同様に 100 メッシ
ュは約 225×225μm である。そのような面積をもつ網目を計数視野の一単位として、何網目計数するか、又は計数繊維総数を何本にするかを、試料捕集フィルターの面積や総吸引空気量、必要とする定量下限値などを考慮して決定する。
一般には計数視野数は、式(1)によって決定する。

②

幅 3μm 未満で長さ 5μm 以下、アスペクト比３以上の繊維を含めて計数する場合：観察標本の 1 網目を計数視野の単位として、何網目計数するか、又は計数繊維総数を何本にするかを、試料捕集フィルターの面積や総吸引空気量、必要とする定量下眼値などを考慮して決定する。
一般には計数視野数は、式(1)によって決定する。

n

A
a Q S

式(1)

ここに、n：必要な計数網目数
A：フィルター有効ろ過面積(mm2)a：1 網目の面積 (mm2)
Q：総吸引空気量(L)S：必要な定量下限値(f/L 又は f/cm3)
備考

ただし、これは一応の目安であって、必要とする繊維数濃度の定量下限及び標準誤差によって、必要な計数網目数又は計数繊維数を設定することが重要である。
５）繊維状粒子の数の判定
種々の形態や集合状態で観察される繊維状粒子の数の判定は、基本的には位相差顕微鏡法の規定と同様に行う。
６）繊維数濃度の算出
繊維数濃度は、式(2)によって算出する。
CF

A (N Nb )
a n Q

式(2)

ここに、CF：繊維数濃度(f/L 又は f/cm3)

N：計数総繊維数(f)Nb：ブランク値(f)44７）定量下限値①

定量下限値：定量下限値は、計数網目数又は観察視野数と総吸引空気量に反比例して小さくなる。その関係式は、式(3)で表される。

S

2.645

参考

A
a n Q

式(3)

有効径 36mm のフィルターに吸引空気量 300L、600L 及び 1200L を捕集した場合についての計数網目数(200 メッシュの場合)の定量下限値の関係を図１７に示す。この図から、例えば、10L／分で 1 時間空気捕集を行った場含に、観察試料の 10 網目を計数したとすると、その定量下限値は約 16f/L (0.016f/cm3)と求めることができる。

図１７.計測網目数と定量下限値の関係図
８）標本作製の要点①

カーボン蒸着カーボン蒸着膜の特性は、「機械的強度や耐電子線強度が高い」、「耐熱性、耐酸性、耐ア

ルカリ性」、「蒸着膜の表面及び内部には特異な構造をもたない」、などである。
カーボン蒸着膜を作製するための市販のカーボン棒は、直径 5mm でカーボンの一端を細く削り、電流が流れるとき局部的に抵抗をもたせ、この抵抗によって発生する熱でカーボンを蒸着させる。真空中で蒸着膜を作製した後は、1 回 1 回先端を削る必要がある。
また,蒸着膜の膜厚は、脇に白いタイルを置き、その上に DP オイルを一滴置いておき、オイルの所はカーボン膜が付かないので、その部分と蒸着膜の色を比較しながら蒸着を行45

えば、ほぼ同じ厚さに蒸着できる。
②

低温灰化法
低温灰化法はＳＥＭとＴＥＭのいろいろな部分で採用されている。いずれも粉じん捕集
メンブランフィルターをアセトン蒸気によってスライドグラスに接着し、酸素プラズマを発生する低温灰化装置に入れてメンブランフィルターそのものと捕集粉じん中の有機物などを 100℃程度の低温で除去するもので、灰化後のスライドグラスにはアスベスト繊維など無機物質が残される。
この場合、フィルター灰化中に粒子が飛散しないようにフィルター上の粒子をスライドグラスにしっかりと接着させることが重要である。そのため、フィルターの粒子面をスラ
イドグラス側に向けて接着することが重要である。
供給パワー(ワット数)と試料の灰化温度の関係は、ほぼ比例するので、あまり温度を上昇させないためには酸素量を十分供給し、なるべく低いワット数で灰化時間を長くとるとよい。ただし、灰化時間はクリソタイルなど試料の損傷・変質を最小限に抑えるために、
必要最小限にすることも要求される。通常、30 分から 1 時間程度で終了させるのがよい。
低温灰化装置の試料管は、灰化中の試料への汚染(コンタミネーション)を防ぐために常に清浄に保つことが肝要である。試料処理の前後にブロアーで清浄ガスを吹き付けて試料管内部の粉じんを吹き飛ばしてクリーニングする。また、灰化後に空気を試料管に導入す
るとき、室内の粉じんを試料管に導入させないためにリークバルブの前にろ過フィルターを装着しておくことも必要な汚染防止策である。灰化後のスライドグラスは、表面が活性化していて空気中の粉じんを吸着しやすい状態になっているので、素早くガラス製シャーレに保管し、そのまま運搬するようにする。プラスチック製シャーレは、静電気などの影
響で粉じんを引き寄せやすいので、なるべく使用を避けたほうがよい。

９）計数の要領①

計数繊維の決定
測定対象の繊維(計数繊維)の「種類」及び「サイズ」の範囲の二つを最初に決めなくてはならない。電子顕微鏡法では、走査型電子顕微鏡(ＳＥＭ)でも透過型電子顕微鏡(ＴＥＭ)
でも、繊維の長さと幅はかなり正確に測定することができる。位相差顕微鏡法では、ある一定の試料作製法と観察倍率を規定すれば、見える繊維の最小サイズはほぼ一様に決まってしまうので、“長さ 5μm 以上で幅 3μm 未満、アスペクト比が 3 以上”というのが、一般的な測定対象繊維の定義である。電子顕微鏡法においては、その定義と同様にして繊維を計数すると、観察倍率によっては繊維の最小サイズ(特に幅)が位相差顕微鏡よりずっと細いものまで見えることになり、計数すべき最小サイズをあらかじめ決めておかないと、観察倍率に依存して観察可能な繊維を全部計数することになり、どこまで細い繊維が見える
状態で計数したのかによって繊維数の測定結果に不正確さが生じてしまう。場合によっては、不必要な計数努力をすることにもなりかねない。
電子顕微鏡法では、一般に位相差顕微鏡よりもかなり細いものまで観察できる。例えば、アスペクト比 3 以上の条件を満たしている長さ 5μm で 0.1μm の繊維も 0.05μm の繊維も共に数千倍の観察倍率のＴＥＭで蛍光板の上で確認できるサイズである。このサイズの繊46

維は位相差顕微鏡法では全く観察できない細さの繊維である。そのため、電子顕微鏡では、位相差顕微鏡とは別に計数繊維の幅(特に最小計数繊維幅)の規定が必要である。
(a)

位相差顕微鏡と同等サイズの繊維の計数：電子顕微鏡法でも位相差顕微鏡で計数している繊維サイズと同等の繊維を計数することがある。従来の種々の研究報告から、最近の優れた分解能をもつ位相差顕微鏡及び試料処理方法の下では、幅約 0.2μm 程度までの繊維は観察できるようになっていると考えられている。
一方、実際に位相差顕微鏡と電子顕微鏡の両方法による測定結果を比較してみると、
位相差顕微鏡はたかだか 0.3～0.4μm 程度の繊維幅のアスベストまでしか検出していないという報告もある。
現在、位相差顕微鏡による測定値と完全に一致させることは難しいが、一応、電子顕
微鏡では長さ 5μm 以上、幅 3μm 未満で 0.2μm 以上の繊維を測定すると、その計数結果
は位相差顕微鏡の結果とほぼ同じ程度の値になると考えられる。
走査型電子顕微鏡法でも、この“位相差顕微鏡で観察できる同等の大きさの繊維”のアスベスト繊維数濃度を測定することは十分可能である。しかし、走査型電子顕微鏡法
でこれ以下の細さの繊維を含む計数を日常的に行うにはかなり困難な作業となるので、それ以下の繊維を含む測定は、透過型電子顕微鏡によるほうがよい。
(b)

位相差顕微鏡で検出できない細い繊維を含む計数：上記のように長さ 5μm 以上、幅 3μm 未満で 0.2μm 以上の繊維を“位相差顕微鏡と同等サイズの繊維”として、それ以下のサイズの繊維を測定に含めて繊維数濃度を求める場合がある。その場合は、“長さ 1μm以上、幅 3μm 未満で 0.01μm 以上の繊維”のように、計数繊維のサイズ下限値を明示しなくてはならない。サイズ下限値を明示しないと、どこまで短い又は細い繊維を計数に含めたのか不明で、測定値の相互比較や特定のサイズの割合を求めることなどができな
くなる。

②

アスベストの同定(a) ＥＤＸスペクトルによる判定：ＥＤＸ検出器を装着した分析透過電子顕微鏡（Ａ－Ｔ
ＥＭ法）によってアスベスト 1 本 1 本の元素組成を知ることができる。現在では、種々の補正計算のプログラムも開発され、1 本 1 本のアスベストのＥＤＸスペクトルから化学組成の定量分析もできるようになっている。しかし、アスベストの種類の識別・同定が目的の場合は、その定性分析すなわちＥＤＸスペクトルを得るだけで十分である。
ＥＤＸスペクトルのピーク強度は、同一の繊維でも若干変化することがあるが、アス
ベストの構成元素はあまり変わらないので、スペクトル全体のパターンはアスベストの種類ごとに図１５とほぼ同様なパターンを示す。すなわち、Si と Mg のピークだけが検出された場合、クリソタイルとアンソフィライトの可能性が高い。Mg の強度が Si の強度に比べて半分以下の場合、アンソフィライトの可能性が高い。この情報と次項の形態と電子線回折の情報を合わせると、完全に両者が同定できる。また、Si、Fe 及び Mg の組合せがアモサイト、それに弱い Na のピークが付加されたものがクロシドライト、Si、
Mg 及び Ca の組合せがトレモライトで、それに Fe が付加されたものがアクチノライトである。
47

アモサイトやクロシドライトなど角閃石系アスベストの識別は、形態と電子線回折だ
けからは難しいが、このようにＥＤＸスペクトルからは容易に識別判定できる。さらに、ＥＤＸスペクトルは、電子線を細く絞って試料に照射しているので、直径 10～20nm 程度の極めて狭い領域の元素組成を検出している。したがって、繊維が何本か重なって集合していても、それらの 1 本 1 本からＥＤＸスペクトルを得て識別することができる。
(b)

形態からの判定：アスベスト繊維をＴＥＭで詳細に観察すると、まずクリソタイルと角閃石系アスベストのアモサイトやクロシドライトとは同じ繊維状形態でも大きく異なることが分かる。クリソタイルは、1 万倍以上の観察で繊維の中心部が繊維方向に沿ってやや明るいコントラストを示すのを蛍光板上ではっきり認めることができる。このコントラストは、クリソタイルが中空管状の結晶形態をもっていることに起因している。したがって、透過型電子顕微鏡の数万倍程度の倍率で中空状繊維が観察された場含、クリソタイルである可能性が高いといえる。
また、一般にクリソタイルの繊維は、角閃石系アスベストより細く、直径 0.05μm 以下の繊維であることが多い。クリソタイルの太いものは、ＴＥＭでよく見ると必ず細い繊維の集合体の束であることが分かる。この性質も形態によるクリソタイル同定の重要な情報である。ただし、クリソタイルと似た繊維形態をもつものに、粘土鉱物の 1 種の管状ハロイサイトがあるので、場合によっては、ＥＤＸスペクトルを見て決めなくてはならない。管状ハロイサイトはアスベストではなく、花こう岩の風化地帯や関東地方に分布する火山灰層(関東ローム層)などに一般的よく見られる。クリソタイルの形態的特徴である中空管状形態を目印に同定した場合、唯一誤認するおそれのある鉱物がこのハ
ロイサイトである。ＥＤＸスペクトルによる同定を組み合わせれば、この誤認は防げる。
すなわち、両者のＥＤＸスペクトルは、クリソタイルが Si と Mg のピークを示すのに対して、ハロイサイトは Si と Al のピークの組合せを示す。したがって、Mg 又は Al のピー
クが Si とともに出現することを目印に識別できる。
③ 観察条件(a)

ＴＥＭで位相差顕微鏡と同等の大きさの繊維を計数する場合：ＴＥＭで繊維状粒子の計数を行うとき、加速電圧は 100kV 前後が適当である。一般にＴＥＭの場合、加速電圧の上昇に伴って像コントラストは同一の対物絞りを使用した場合は低下する。加速電圧が高いほど電子線の試料透過能力は増すので、やや厚い試料も観察できるという有利さがでてくるが、反対に像のコントラストが低下するという不利も生じる。像コントラス
トの低下は、ある程度対物絞りの穴径の小さいものを使用することで防げる。しかし、あまり小さい絞りを使うと観察視野がカットされるので、そうした対策にも限界がある。
このような理由から、加速電圧の設定は 100kV 程度が適当であるが、150kV や 200kV では
いけないというものではない。加速電圧と像コントラスト及び試料透過能の関係をよく理解して、コントラストの低い細い繊維も見落とすことのないように観察・計数することが重要である。
加速電圧が決まると次に観察倍率の設定であるが、まず表記の位相差顕微鏡と同等のサイズの繊維を計数する場合は、1000～2000 倍のＴＥＭでの低倍率で行うと能率的であ48

る。ＴＥＭの 1000～2000 倍程度の像は、十分なコントラストをもっている。1000 倍で観察したとき蛍光板の上では、5μm の長さの試料が 5mm の長さ、幅 0.2μm の繊維は 0.2mmの幅でそれぞれ見えることになり、ともにルーチンワークでも十分検出できるサイズである。もちろん、これより高い倍率で計数を行うのもよいが、倍率が高いほど視野面積が小さくなるので、必要な観察視野面積を観察するのに労力がかかり過ぎることになり、目的と労力の関係から選択すべきである。
(b)

ＴＥＭで幅 3μm 未満で長さ 5μm 以下の繊維を含めて計数する場合：この場合は、どこまで細かい繊維を計数に含めるかをまず明記しなくてはならない。観察倍率と蛍光板
上での大きさの関係は図１８に示すようになる。すなわち、ルーチンワークで蛍光板上の像の存在を確認できるのが 0.5mm 程度とすると、0.1μm の大きさの試料が 0.5mm に見える倍率は、5000 倍である。クリソタイルの単繊維は、普通 0.02～0.04μm 程度である。
その大きさを蛍光板上で直接見るためには、数万倍以上の倍率が必要であることが図１８からも分かる。1000～5000 倍の倍率にして、蛍光板上の像を電子顕微鏡に付属しているルーぺ(通常、数倍～10 倍程度)を使用して観察する方法でも、これら 0.02～0.04μm
径のクリソタイル単繊維の計数が可能である。いずれにしても、表記の幅 3μm 未満で長さ 5μm 以下の細かい繊維を計数に含める場合は、どこまで細い繊維又は細かい粒子が蛍光板上で観察できるかを、あらかじめ確認しておき、その必要な倍率以上の倍率で計数することが重要である。

図１８．観察倍率と蛍光板上での大きさの関係

49

第３部 解体現場等におけるアスベストの測定方法
３．１ 施工区画周辺等における測定方法
３．１．１

試料の捕集方法

３．１．１．１ 測定地点及び測定箇所の設定（１）測定地点
測定地点は表３及び図１９のとおりとする。
表３ 測定地点の区分
地点

区 分

解体現場等

該当する施設、地域①②

特定建築材料が使用されている建築物等の解体現場等
石綿含有成形板等を扱う建築物等の解体現場等（２）測定箇所の設定
測定箇所は、次の事項を考慮して設定する。
解体現場等① 特定建築材料が使用されている建築物等の解体現場等② 石綿含有成形板等を扱う建築物等の解体現場等
施工区画周辺（作業が実施される施設（排出源）の直近で、多数の人の通行等がある場所）の 4 箇所（排出源をはさんで、主風向の風上・風下の 2 箇所と主風向に垂直な 2 箇所）とす
る。測定箇所は、排出源からできる限り等距離で、排出源から遮る障害物の少ない箇所を選定することを原則とし、敷地の形状、敷地内の排出源の位置等を考慮して、作業現場から一般環境への負荷の状況を把握するのに適した場所を選定することが望ましい。なお、ホルダーは、排出源の方向に向ける。
エレベーター内等の吹き付けアスベスト除去等、除去区域が建築物等の一部であり、養生の外で不特定多数の人が活動している場合には、施設の外部で測定することが望ましくないため、養生の外で不特定多数の人が往来する場所に測定点を設定する。

解体現場

風向き

石綿除去作業場

前室

集じん・排気装置

施工区画周辺：測定地点
敷地境界

図１９ 測定箇所イメージ図
50

３．１．１．２ 捕集用装置及び器具※「２．１．２ 捕集用装置及び器具」に準ずる。
３．１．１．３ 捕集条件
（１）捕集回数
捕集回数はその作業が実施される 1 回（1 日間）とする。
（２）吸引流量、捕集時間及び捕集空気量
有効ろ紙直径が 35mm の捕集用ろ紙を用い、吸引流量 10L/min で連続 4 時間空気を捕集（2400L）することを原則とするが、作業が捕集時間より短かい時間で終了する場合は、捕集時間をアスベ
ストの飛散が最も多いと考えられる作業を含む２時間連続としてもよい。但し、作業開始前点検
実施後に捕集を開始するものとする。なお、作業が行われるのであれば土日の捕集も可とする。
（３）捕集高さ
原則として地上 1.5ｍ以上 2.0ｍ以内とする。測定箇所周辺の障害物等の影響が考えられる場合などは、適宜捕集する高さを設定してもよい。
（４）測定箇所の決定
測定計画の際に主風向の情報から設定した大まかな位置と、風向に対する周辺の障害物等の影響等を考慮して測定箇所を決定する。なお、メンブランフィルターとポリカーボネートフィルタ
ーとを並行で捕集を行う場合は、２台の装置の設置高さ、ホルダーの向きを同一にし、２台の装置が互いに影響を及ぼさないように設置する。
３．１．１．４ 捕集にあたっての注意事項
測定箇所が屋外の場合、降雨に備えてカウルを使用する事が望ましい。なお、フィルターホル
ダーとカウルは使用前に清掃する。フィルター上への粒子沈着量が多過ぎると顕微鏡観察が難しくなるので、粉じん濃度が高くなる可能性がある測定箇所では粒子沈着量に注意すること。
なお、測定開始前に除去対象アスベストの種類を確認すること。また、除去対象のバルク試料等を事前に位相差及び偏光顕微鏡等で観察しておくことが望ましい。
３．１．２ 繊維数濃度の算出※「２．２

繊維数濃度の算出」に準ずる。

51

３．１．３ 測定方法各論
３．１．３．１ 測定手順
解体現場等で採取した試料の測定手順は図２０にあるとおりであり、測定手順そのものは一般環
境のそれとほぼ同様である。電子顕微鏡法はＡ－ＳＥＭ法、Ａ－ＴＥＭ法のいずれも良いものとする。
位相差顕微鏡法で総繊維数を計数し、原則として総繊維数が 1 f/L を超過したものについては電子顕微鏡法により確認を行うこととし、場合によっては最初から電子顕微鏡を用いて、位相差顕微鏡法で計測できるものと同等サイズの繊維を計数することもできるように策定した。また、位相差顕微鏡で計数した総繊維数が 1 f/L を超過した場合、低温灰化を行い有機繊維を除去してもよい。

３．１．３．２ 位相差顕微鏡法（ＰＣＭ法）
３．１．３．２．１ 分析走査電子顕微鏡法（Ａ-ＳＥＭ法）
３．１．３．２．２ 分析透過電子顕微鏡法（Ａ-ＴＥＭ法）※「２．３．２

位相差顕微鏡法（ＰＣＭ法）」、「２．３．３ 分析走査電子顕微鏡法（Ａ-ＳＥＭ法）」、「２．３．４

分析透過電子顕微鏡法（Ａ-ＴＥＭ法）」に準ずる。

52

第１部

１．２．２

事前調査

（１）試料の測定に関わる情報、（２）測定箇所及び捕集時間帯の設定に関わる情報（３）その他、測定に必要な情報

第１部

１．２．３

測定計画の策定

測定箇所、捕集時間帯及び捕集方法の設定

第３部 解体現場等におけるアスベストの測定方法
３．１ 施工区画周辺等における測定方法
３．１．１試料の捕集方法
３．１．１．１ 測定地点及び測定箇所の設定
３．１．１．２ 捕集用装置及び器具
３．１．１．３ 捕集条件
３．１．１．４ 捕集にあたっての注意事項

第３部

３．１．３ 測定方法各論
解体現場等で捕集した試料①②

電子顕微鏡法

位相差顕微鏡法※A-SEM、A-TEM
どちらでも可※総繊維数 1 f/L 以下※総繊維数 1 f/L を超過
総繊維数として標記

総繊維数を減らすために、低温灰化も可

電子顕微鏡法
※A-SEM、A-TEM
どちらでも可アスベストの同定
・計数

アスベストの同定
・計数

図２０ 解体現場における通常の測定フロー53

３．２ 発生源近傍及び集じん・排気装置排出口等における漏えい監視・管理のための測定方法
３．２．１

漏えい監視のためのアスベスト迅速測定法

３．１では解体現場等における施工区画周辺の測定方法について述べたが、この方法は試料の捕集時間が４時間又は２時間であるうえに、採取した検体を持ち帰って分析する方法であり、結果が出るまでにかなりの時間を要する。
一方、解体現場等は工期が数時間から数日間で終了してしまう場合も多いことから、飛散防止の観点から、短時間で結果がわかる測定方法が望ましい。
そこで発生源近傍及び集じん・排気装置排出口等における測定方法として、図２２のとおり、施工区画周辺等における測定方法のほかに、「位相差／偏光顕微鏡法」及び「位相差／蛍光顕微鏡法」の方法と、参考法として「可搬型等の分析走査電子顕微鏡法」、「位相差／ラマン顕微鏡法」、「可搬型蛍光顕微鏡法」を記載した。
解体現場等に測定機器を持ち込み、その場で測定を行うことでアスベストの漏えいの有無を確認することが望ましい。
しかし、解体現場等において測定できる場所が確保できない場合、又は解体現場の近くに研究所等の設備が整った施設がある場合など様々な状況が想定されるため、実際の測定は、現場の状況を勘案し、柔軟に対応する。
３．２．１．１ 試料の捕集方法
３．２．１．１．１ 測定地点及び測定箇所の設定（１）測定地点
測定地点は表４のとおりとする。
表４ 測定地点の区分
地点

区 分
①
②

解体現場等

該当する施設、地域
特定建築材料が使用されている建築物等の解体現場等
石綿含有成形板等を扱う建築物等の解体現場等（２）測定箇所の設定
前室（セキュリティゾーン）の入口の近傍及び集じん・排気装置の排気口のダクト内部とする。
なお、前室や集じん・排気装置を使用しない解体現場（レベル３のみの解体現場等）については、作業環境周辺１箇所とする。
前室

作業現場

隔離養生内
集じん・
排気装置

：採取場所

【前室及び集じん・排気装置を設置している現場】

発生源近傍

：採取場所

【前室及び集じん・排気装置を必要としない現場】

図２１ 測定箇所イメージ図
54

３．２．１．１．２ 捕集用装置及び器具※「２．１．２ 捕集用装置及び器具」に準ずる。
３．２．１．１．３ 捕集条件
（１）捕集回数
捕集回数はその作業が実施される 1 回（1 日間）とする。
（２）吸引流量、捕集時間及び捕集空気量３．１の試料の捕集方法に準ずる。
「測定箇所の設定」に関しては、前室及び排出口を重視するものとし、「吸引流量、捕集時間及び捕集空気量」に関しては、原則として捕集時間は除去作業開始直後から 120 分間、吸引流量は 10L／min とする（吸引空気量：1200L）。
特に、迅速性が求められる場合は、直径 25mm の円形ろ紙（平均孔径 0.8µm の白色セルロースエス
テル製メンブランフィルター）で有効ろ紙直径が 22 ㎜となるオープンフェース型のホルダーを使用
し、捕集時間 30 分間、吸引流量 5Ｌ／min（吸引空気量：150Ｌ）としてもよい。
（３）捕集高さ
地上 1.5ｍ以上２ｍ以内を原則とするが、測定点周辺の障害物等の影響が考えられる場合などは、適宜捕集する高さを設定してもよい。また、前室の出入口や排気口からの気流がその高さにない場
合は、出入口高さあるいは排気口からの気流の高さ等を優先する。
（４）測定箇所の決定
測定計画の際に主風向の情報から設定した大まかな位置と、風向に対する周辺の障害物等の影響等を考慮して測定箇所を決定する。集じん・排気装置の排出口といった一定方向への気流がある場
所では、排気口内に気流が捕捉できる状態にチューブ配管を設置しそれに捕集器具を接続して測定するが、排気口から少し離れた場所で測定する場合は、気流の流速が吸引ノズルで吸引される速さとほぼ等しい場所を簡易な風速計を用いて選定する 。
なお、メンブランフィルターとポリカーボネートフィルターとを並行で捕集を行う場合は、２台の装置の設置高さ、ホルダーの向きを同一にし、２台の装置が互いに影響を及ぼさないように設置する。
３．２．１．１．４ 捕集にあたっての注意事項
フィルター上への粒子沈着量が多過ぎると顕微鏡観察が難しくなるので、粉じん濃度が高くなる可能性がある前室の入口の外側の測定箇所では粒子沈着量に注意すること。
なお、測定開始前に除去対象アスベストの種類を確認すること。また、除去対象のバルク試料等を事前に位相差及び偏光顕微鏡等で観察しておくことが望ましい。
３．２．１．２ 繊維数濃度の算出※「２．２

繊維数濃度の算出」に準ずる。
55

３．２．１．３ 測定方法各論
３．２．１．３．１ 位相差顕微鏡法（ＰＣＭ法）※「２．３．２ 位相差顕微鏡法（ＰＣＭ法）」に準ずる。
（１）検出下限値
発生源近傍や集じん・排気装置排出口等に浮遊している計数対象に該当する総繊維数濃度は次式から求められる。
ＦＣ ＝ Ａ × Ｎｆ /（a×n×Ｖ）
ＦＣ： アスベスト繊維数濃度（f/Ｌ）
Ａ ： メンブランフィルターの有効面積（mm2）Ｎｆ： 蛍光顕微鏡法で計数した繊維数（ｆ）
a ： 視野範囲（アイピースグレイティクル）の面積（mm2）n ： 計数した視野数
Ｖ ： 吸引空気量（L）
120 分間捕集、100 視野計数した時 1 本のアスベスト繊維が検出された場合を濃度の検出下限とす
ると、検出下限値 E は(ⅰ)式に A＝961.625mm2、a＝0.07065mm2、n＝100、V＝1200L、Nas＝1 を代入して得られる；E＝0.11ｆ／L。（表５参照）
表5
ﾌｨﾙﾀｰ直径

位相差顕微鏡法 検出下限値一例

ﾌｨﾙﾀｰの有効面積 計数した繊維数

本㎜2
47961.6251
47961.6251
25379.941
25
379.941
25
379.941※吸引流量：φ47 10Ｌ／min、φ25 5Ｌ／min㎜

ﾌﾞﾗﾝｸ値

視野範囲の面積 計数した視野数㎜2
0.070650.070650.070650.070650.07065

本
0
0
0
0
0

ｎ
100
100
100
100
100

吸引時間

吸引空気量

min

L
240
120
240
120
30

2400
1200
1200
600
150

検出下限値

ｆ／Ｌ
0.056
0.11
0.044
0.089
0.35

３．２．１．３．１．１ 分析走査電子顕微鏡法（Ａ-ＳＥＭ法）
３．２．１．３．１．２ 分析透過電子顕微鏡法（Ａ-ＴＥＭ法）※「２．３．３ 分析走査電子顕微鏡法（Ａ-ＳＥＭ法）」、「２．３．４ 分析透過電子顕微鏡法（Ａ-ＴＥＭ法）」に準ずる。

56

第１部

１．２．２

事前調査

（１）試料の測定に関わる情報、（２）測定箇所及び捕集時間帯の設定に関わる情報（３）その他、測定に必要な情報

第１部

１．２．３

測定計画の策定

測定箇所、捕集時間帯及び捕集方法の設定

第３部 解体現場等におけるアスベストの測定方法
３．２ 発生源近傍及び集じん・排気装置排出口等における漏えい監視・管理のための測定方法
３．２．１ 漏えい監視のためのアスベスト迅速測定法
３．２．１．１ 試料の捕集方法
３．２．１．１．１ 測定地点及び測定箇所の設定
３．２．１．１．２ 捕集用装置及び器具
３．２．１．１．３ 捕集条件
３．２．１．１．４ 捕集にあたっての注意事項

３．２．２
自動測定機器による漏えい監視及び管理
集じん・排気装置排出口で捕集・粉じん相対濃度計
・パーティクルカウンター・繊維状粒子自動測定器等

３．２．１．３

測定方法各論

発生源近傍及び集じん・排気装
置排出口等で捕集した 試料

位相差／
偏光顕微
鏡法

位相差／
蛍光顕微
鏡法

電子顕微鏡法

位相差※A-SEM、A-TEM
どちらでも可顕微鏡法※総繊維数濃度１f／L を超過

アスベストの同定・計数(参考資料)
・可搬型等の分析走査電子顕微鏡法
・位相差／ラマン
顕微鏡法
・可搬型蛍光顕微鏡法

アスベストの同定・計数

図２２ 解体現場における迅速な測定フロー57

３．２．１．３．２

位相差／偏光顕微鏡法

偏光顕微鏡は物質の光学的性質を観測するための諸装置を備えた顕微鏡で、鉱物学の分野
では鉱物の識別・同定のための有力な手段の一つとなっている。本測定法は、位相差顕微鏡
によって計数された繊維状粒子について偏光顕微鏡による観測でアスベストと非アスベストに分別し空気中アスベスト濃度を測定する手法である。分析には位相差顕微鏡用コンデンサを装着した偏光顕微鏡を使う。同顕微鏡のレボルバに位相差用と偏光用の対物レンズを装着すると、ターレットと対物レンズの切り替えだけで視野を変えることなく位相差観察と偏光観察を同時に行うことが出来る。本マニュアルではこの顕微鏡を「位相差／偏光顕微鏡」と呼ぶ。偏光顕微鏡には分解能の限界があり観測対象は 1μm 以上の径の繊維とされているが、対物レンズや光源強度の改良、さらにはコンペンセーターの使用など観察条件によっては 1
μm 以下の径の繊維についてもその光学的性質の観測が可能な場合がある ※ ９ 。
※９位相差観察に比べて偏光観察での視認性が下回るのは、位相差観察が光の干渉を利用してコントラストを向上させているのに対して、偏光観察は試料のレターデーションによる光の強度で検知しているため、照明の明るさと偏光の消光比に依存しているためである。このため開口絞りの開閉操作やピント調節の上下によるベッケ線の出入りの影響を大きく受けることを理解して、観察する必要がある。

解体現場等では周辺環境へのアスベスト飛散防止のために迅速なアスベスト濃度測定が求められる。現場での分析（オンサイト分析）が可能で、サンプリング開始から 1 時間前後で飛散の有無を判定出来る本測定法は飛散防止対策に有効な手法となる。また解体現場における測定では除去工事前の建材中アスベスト含有検査によって除去対象アスベストの種類についての情報が得られるので、分析者は飛散の可能性のあるアスベストの種類を予め知ることが出来、それは分析精度の向上に資するものとなる。
なお、本測定法には偏光顕微鏡による観測のための基礎知識（複屈折、多色性、消光と消光角、伸長性の正負の観測）と分析のためのトレーニングが必要である。また、測定結果の精度維持のためには継続的な精度管理の実施が必要である。
（１）試料の捕集及び前処理
試料の捕集については、「３．２．１．１
は「２．３．２

試料の捕集方法」また試料の前処理について（１）試料の前処理」に準ずる。

（２）繊維の計数
１）アスベスト分析用の位相差／偏光顕微鏡の仕様
透過ケーラー照明が可能な偏光顕微鏡であって、下記の条件を満たすもの。
① JIS B7251 に規定する偏光顕微鏡の基準系を備えている。
② 透過照明光源（ハロゲン 100Ｗ相当以上）と昼光色フィルターを備えている。
③ 対物レンズは、偏光観察用 10 倍（開口数 0.25 以上）と 40 倍（開口数 0.75 以上）、及
び位相差用 10 倍及び 40 倍（開口数 0.75）を備えている。さらに、位相差用 40 倍対物
58

レンズはコントラストの異なるものを用意しておくことが有効である。
④ 接眼レンズは 10 倍、または 15 倍を備え、十字線を刻んだ計測用のアイピースグレー
ティクルを備えている。
⑤ レボルバは、各対物レンズの光軸中心を、アイピースグレーティクルの十字線の中心に調整できる芯だし調整機構を備えている。
⑥ ステージ（載物台）は 360°回転でき、JIS R3703 に規定するスライドガラス（標準形）
が 1 枚以上装着でき、移動できる。また、回転の角度が測れる。
⑦ コンデンサは、使用する対物レンズのいずれよりも開口数が大きく、開口絞りを備えている。かつ、位相差用の対物レンズに対応でき、芯だし調整可能なリング絞りが組み込まれている。
⑧ 照明側にポラライザ（偏光子）を、観察側に挿脱可能なアナライザ（検光子）を備え、振動方向を互いに 90°に調整可能で、アイピースグレーティクル上の十字線の方向に合わせる事ができる。また、位相差観察用にグリーンフィルターを備えている。
⑨ 遅軸方向が表示され、挿脱可能でリターデーションが 530nm ないし 550nm の位相板（鋭敏色検板）を備えている。
⑩ セナルモンコンペンセーターを備えている。

２）顕微鏡の調整（偏光顕微鏡）
顕微鏡の調整のうち「位相差顕微鏡」については「２．３．２ （２）試料の計数 １）
顕微鏡の調整」に準ずる。
①

眼幅および接眼レンズの視度補正については位相差顕微鏡と同じ。

②

視野絞りの調整(a) プレパラートを載せ対物レンズを 10 倍にして試料にピントを合わせる。視野絞りを最小にしてコンデンサを上下調整し視野絞り像のピントを合わせる。
(b) コンデンサ芯出しネジで視野絞り像と視野を同心にする。
(c) 対物レンズを 40 倍に変えて、(a)・(b)の操作を繰り返し次に視野絞りを視野に外接するように調節する。

③

対物レンズの芯出し
偏光顕微鏡ではステージを回転させて繊維状粒子を観測することに重要な意味がある。回転させた時回転の中心が変動すると観測に支障が生じるので、対物レンズ用の芯出しネジでステージの回転中心の調整を行う。迅速な観測を行うためには、ステー
ジを回転しても視野の中心（十字線上）の粒子が移動しないように調整することが必須である。
(a) 対物レンズを 10 倍にする。視野の中心（十字線上）に任意の粒子 A を持ってきてステージを回転させる。中心調整が出来ていれば粒子は中心から動かない。回転につれて粒子 A が中心から離れる場合、180 度回転させる間にもっとも離れる
位置で回転を止める。対物レンズ用の芯出しネジ（2 本ある）を廻して粒子 A を最も離れた距離（直径）の半分（半径）の位置まで移動させ、残りの半分（半径）をステージの X/Y 移動装置で十字線の中心まで移動させる。再度ステージを回転59

させて粒子の動きを調べる、中心から離れる場合は上記の操作を繰り返して、粒子 A が中心から動かなくなるまでこの操作を続ける。
(b) 次に対物レンズを 40 倍にして同じ操作を行う。
(c) 芯だし機構付きの回転ステージが付属している顕微鏡の場合は、上記(a)の調整
を回転ステージの芯だし調整で行い、(b)の調整を対物レンズ芯だしネジで行う。
④

偏光板の直交ニコル（クロスニコル）調整（対物レンズは 40 倍のまま行う）(a)通常ポラライザは、偏光の振動方向が視野内の十字線の水平線に平行になるように取り付けられている。従って、アナライザの角度目盛を「0」に合わせておけばアナライザによる偏光の振動方向は十字線の垂直線と平行になり直交ニコル観察が出来る。
(b)ポラライザが可動の場合は、 アナライザを光路に入れ角度目盛を「0」に合わせる。次に対物レンズを 40 倍にし、プレパラートをブランク位置（試料が何もない位置）にし、開口絞りを開放にし、明るさ（電圧）を最大にして、さらに接眼レンズをスリーブから抜き、対物レンズの瞳面を見てアイソジャイアの十字が交点
が瞳面の中心にあることを確認する。
⑤

グレイティクルについて
通常、位相差／偏光顕微鏡には接眼レンズに偏光顕微鏡観察用の十字線が固定されている。位相差顕微鏡での繊維計数には 300μm の円のあるグレイティクル（位相差顕微鏡用グレイティクル）が必要なので同グレイティクルをあらかじめ装着調整した接眼レンズを用意して繊維計数を行なう。この接眼レンズは、ポラライザ/アナライザの振動方向に合致するように十字線が設定されているので、方位ピンや落とし込み切り
欠きに合わせて右側の鏡筒に挿入することで、眼幅調整をしても十字の方位が水平/垂直に維持されるようになっている。
位相差顕微鏡用グレイティクルの十字線を水平・垂直の方位に合わせるには、直消光であることが既知の結晶（例えばアモサイト繊維）を水平または垂直の消光位に置きその繊維の伸長方向にグレイティクルの十字線を合わせるとよい。接眼レンズが固定出来ず回転しやすい場合は十字線の方位を合わせたあと粘着テープで本体に固定する。
３）位相差法による繊維の計数と偏光法による同定
本項は、まず位相差顕微鏡で繊維を確認した後、偏光顕微鏡で同定を行うという操作を繰り返すことで繊維の計数と同定を行う一連の手法を解説したものである。
①

計数手順（図 ２３ の位相差／偏光顕微鏡概略図を参照）

60

❼530nm 鋭敏色検板❻アナライザ❺偏光用 40 倍対物レンズ❸回転式ステージ❷位相差偏光用コンデン❹位相差用 40 倍対物レンズ

サ（ターレット付）❶ポラライザ
図.２３(a)偏光顕微鏡をベースにした位相差／偏光顕微鏡の概略図

アナライザ（図２３の❻）を光路からはずしステージ（ ❸ ）に標本を載せて、まず位相差法で繊維を計数する。対物レンズを位相差用 40 倍（❹）にしてコンデ
ンサターレット（❷）を 40 倍対物レンズに対応する位置（通常「Ph2」）にする。焦点を捕集面に合わせて繊維の計数を始める。なお、グリーンフィルターを使用するのが望

2

1
3

ましい。
(b)

繊維計数ルールは、(1)長さ：≧5μm、(2)径：＜3μm、(3)アスペクト比：≧3、を満たす繊維を計数することとする。また事前に確認した除去対象アスベストの種類に関する情報（「３．２．１．
１．４ 捕集にあたっての注意事項」参照）をもとに繊維の形態についても留意しながら計数する。

(c)

グレイティクルの 300μm の円内の繊維を計数する。なお、計数は前頁の図のような視野の移動によって行う。フィルター切断線及び粒子付着領域の外縁から 1mm以内は計数しないこととする。図のような視野の移動を行うためにはスライドグ
ラスの側面またはフィルター切断線を東西方向に方位させなければならない。
視野内で切断線を東西方向に方位させた状態にしてステージ（❸）外縁の目盛で角度を確認しておくと、ステージを回転させた時でもスライドグラスの方位を元の状態に戻すことが出来る。

(d)

計数視野数は 100 視野とする。なお、100 視野を計数したときの検出下限値は、吸引空気量 1200L の場合、0.11 f/L となる。

②

繊維の種類の同定
位相差法で計数すべき繊維をみつける度に偏光法によってその繊維についてアス

ベスト・非アスベストの判別を行う。偏光法によって観測出来る繊維の光学的性質については別添 1 に示す。アスベストの種類については、形態と光学的性質の観測からクリソタイルと角閃石系アスベストの分別が可能で、光学的性質の観測からク
ロシドライトを他の角閃石と分別することが可能である。

61

(a) 位相差法で計数すべき繊維がみつかると繊維の位置を記録紙（別添 2 の 1 に例示）に書き込む。次に視野はそのままで、角閃石系アスベストのような直線状の繊維の場合は斜め 45 度の方位（右上がり・左上がりのどちらでもよい。この方位を対角
位 ※ 10 という）になるようにステージ（❸）を回転させる。クリソタイルのように曲率を持っている繊維は繊維の一部が斜めになるように方位させる。対物レンズの芯出しが正確に出来ていれば繊維を視野の中心に移動させなくても偏光法の観察が可能である。
※10

正確な対角位に試料をおくためには、まず測定対象の繊維状粒子が最も暗くなる方位（消光位）に置いて、ここからクリックストップ機構などを使って
45 度回転させると良い。

❻
写真 1.
(b)

アモサイトの位相差像

写真 2.

クリソタイルの位相差像

続いて偏光法による観測を行うためターレット（❷）を明視野の状態（目盛「0」）にして対物レンズを偏光用 40 倍（❺）に変え、角度目盛を「0」に合わせたアナライ
ザ（❻）を光路に入れて直交ニコルにする。「(a)」における対象繊維がアスベストまたは結晶性粒子なら繊維は灰色～白の干渉色を示す。ステージを回転させて繊維の明
暗の変化を観察する。ロックウールやグラスウール等の非結晶質なら繊維は明るくならないが、結晶性の付着粒子により一部が明るくなる場合があるので注意が必要である。また高分子繊維も非結晶質であるが複屈折の性質があるため明るくなるので注意が必要である。なお、直交ニコルにした時視野が暗すぎると繊維が判別出来ないので
開口絞り（❷の下部にある）を調節するとコントラストが変化して繊維が見 やすい状態になる。
「繊維が見やすい状態」には個人差があるので背景と繊維とのコントラストを分析者がもっとも見やすい状態にしたのちに繊維にピントを合わせる。

62

写真 3.
(c)「写真 1.」の直交ニコル像

写真 4.

「写真 2.」の直交ニコル像

直交ニコルの状態で鋭敏色検板（❼）を光路に入れると、先に直消光を確認した
繊維の伸長性の正負（「別添 1」参照）が確認出来る。バルク状では 6 種のアスベストのうちクロシドライトは伸長性が負でそれ以外は伸長性が正であるが、フィル
ター上ではクロシドライトも伸長性が正になることがあるので注意が必要である。

(d)

クロシドライトを他の角閃石系アスベストと分別する方法として、直交ニコルの状態からアナライザを反時計方向に 5 度ずらせて繊維の多色性を調べるという方法がある（別添 1 参照）。

写真 5.

クロシドライトの多色性。右上がりの対角位では明るくなるが、左上がりの対角位では暗青色になる。

(e)

微細繊維の同定：空気中サンプルには極めて細いアスベスト繊維が存在する。それらの繊維は位相差法では確認出来ても、偏光法では像が暗すぎて消光位や伸張性の正負の判定が出来ない場合がある。このような場合、視野の明暗を調節出来る「コンペンセーター」を使用すると細い繊維も見えやすくなり、消光角や伸長性の評価が出来る。以下にセナルモンコンペンセーターとブレースケーラコンペンセーターによる観察事例を示す。

63

(ⅰ)

解体現場の飛散クリソタイルの位相差像(ⅱ) 直交ニコルでセナルモンコンペンセーターを挿入
セナルモンコンペンセーターのダイヤルを時計回りに回転。
伸長性：正では、右上がりの繊維は背景より明るくなり、左上がりの繊維は暗くなる（矢印の繊維）。右上がりの繊維では位相差像で見えていない部分が確認出来ている（点線矢印の位置）※11。

写真 6.
※11

セナルモンコンペンセーターによるクリソタイルの伸長性正負の確認
セナルモンコンペンセーターはメーカーによって、Z’又はγの方位 90 度異なるため、アナライザの回転方向または繊維の方位が逆転して明暗が逆になることに注意が必要である。

64

セナルモンコンペンセーターによる消光角の測定例

セナルモンコンペンセーターによる消光角測定

65

(ⅳ)ステージを回転させて(a)と逆の対角位。

(ⅲ) ダイヤルを反時計回りに回転させると繊維は白くなる※11。

伸長性：正では繊維は暗くなる※11。

(ⅴ) ステージを回転させて繊維を垂直に方位させると、繊維がアスベストの場合
背景色と同じになる。この特性によって直消光を判定する。同様の操作によって色が黒または背景より明るいコントラストになる伸長性の粒子は斜消光である。
斜消光の場合、ステージをθ度回転させて粒子のコントラストが背景色と同じになれば消光角はθ度である。
（繊維は実線矢印の先にあるが、写真（ⅲ）
・（ⅳ）の黒い粒子を目印に位置を推定出来る）

写真 7.

(f)

ブレースケーラコンペンセーターによるアモサイトの消光角の判定

アスベスト・非アスベストの判別は、上記に示した繊維の光学的特性の観測及び繊維の形態観察から総合的に判定する。

(g)

繊維を計数した視野番号、その視野の計数繊維数及びそれぞれの繊維の分別判定の根拠となった光学的性質と判定結果（アスベストと判定した場合は「1 本」と記入し、種類 についても記入）を記録シート（別添 2 の 2 に例示）に記入する。

(h)

偏光法による繊維の観測のためステージの回転や繊維の視野中心への移動を行った場合は、視野を元の状態に戻さなければならない。

(i) 「(a)」の視野の繊維の種類の同定が終わるとアナライザ(❻)を光路からはずし66コンデンサターレット(❷)を「Ph2」にし対物レンズを位相差用 40 倍(❹)にする。
繊維の位置を書き込んだ記録紙を見て視野を元の状態に戻し、位相差顕微鏡による繊維の計数を次の視野について行う。
（３）アスベスト繊維数濃度の算出
アスベスト繊維数濃度は次式によって求める。
F as ＝A×N as ／a×n×V・・・・・(ⅰ)
上式においてF as ：アスベスト繊維数濃度（ｆ／L）
A：メンブランフィルターの有効面積（mm 2 ）N as：位相差法で計数した繊維のうち偏光法でアスベストと判定した
繊維数（本）
a：計数視野（グレイティクルの円）の面積（mm 2 ）n：計数した視野数
V：吸引空気量（L）（４）検出下限値①（ⅰ）式から計算した検出下限値
吸引量 1200L 捕集、100 視野計数した時 1 本のアスベスト繊維が検出された場合を濃度の検出下限とすると、検出下限値 E は(ⅰ)式に A＝961.625mm 2 、a＝0.07065mm 2 、n＝100、V＝1200L、N as ＝1 を代入して得られる；E＝0.11ｆ／L。（表６参照）
表６
ﾌｨﾙﾀｰ直径

位相差／偏光顕微鏡法

ﾌｨﾙﾀｰの有効面積 計数した繊維数

本㎜2
47961.6251
47961.6251
25379.941
25
379.941
25
379.941※吸引流量：φ47 10Ｌ／min、φ25 5Ｌ／min㎜

ﾌﾞﾗﾝｸ値

検出下限値一例

視野範囲の面積 計数した視野数

本
0
0
0
0
0

㎜2
0.070650.070650.070650.070650.07065

67

ｎ
100
100
100
100
100

吸引時間

吸引空気量

min

L
240
120
240
120
30

2400
1200
1200
600
150

検出下限値

ｆ／Ｌ
0.056
0.11
0.044
0.089
0.35

別添 1.

偏光顕微鏡によって観測出来る繊維の光学的性質

偏光顕微鏡によって観察出来るアスベストと非アスベスト繊維の性状について以下に示す。
・多色性（Pleochroism）
アスベストのうちクリソタイル、アモサイト、トレモライト及びアンソフィライトはポララ
イザ（下方の偏光板）だけでの偏光による観察（単ニコル観察）ではほとんど無色である。ク
ロシドライトは本来強い光吸収特性を持っており、試料台を回転させて繊維を視野中で水平方向に方位させると暗い青色（dark blue）を呈し、垂直方向に方位させると淡い青灰色（paleblue-grey）を呈する。アクチノライトは水平方向に方位させると淡い緑色（pale green）を呈する。しかし、フィルター中のアスベスト（空気サンプル）は繊維径が数ミクロン以下のものが多いためそれらの特性を観察することは困難である。但しクロシドライトに対してはもっと感度の良い検査法がある。アナライザ（上方の偏光板）を挿入して、さらにアナライザの角度
を垂直方向から反時計回りに 5 度ずらす。その状態でステージを回転させて繊維を右上がりの対角位（視野中の方位を、上を北として表わすと「北東―南西」の方位）にすると繊維は黄色を呈する。次に繊維を左上がりの対角位（「北西―南東」の方位）に回転させると繊維は暗い青色を呈する。このような色の変化を示す繊維を「多色性がある」という。アモサイト・トレモ
ライトはどちらの対角位でも黄色のままで多色性は示さないのでクロシドライトとアモサイ
ト・トレモライトとの分別が可能である。

・複屈折性
物質内の光学的性質が方向にかかわらず同じである場合その物質は光学的に等方であるという。ロックウール・グラスウール等の非結晶質の物質は光学的等方体である。一方、方向によって光の速度、屈折率、吸収等の光学的性質が違う物質もあり、これらは光学的異方体と呼ぶ。
アスベストは光学的異方体である。光学的異方体の中に光が入ると速度の異なる 2 つの偏光に分かれて進む。この現象を複屈折という。2 つの光には速度の差があるので物質を通過する際に光路差が生じる。これをレターデーションと呼ぶ。レターデーションの大きさは光学的異方体の厚さと 2 つの屈折率の差の大きさの積によって決まり、長さの単位（通常 nm）で表わされる。また 2 つの光によって生じる干渉もレターデーションの大きさによって決まる。ミシェルレヴィ干渉色図表はレターデーションの大きさと干渉色の関係を示している。光学的異方体の干渉色は直交ニコル（ポラライザとアナライザを光路に入れた状態）での観察でわかる。空気中のアスベスト繊維や他の鉱物繊維は径が細いため干渉波は灰色～白を呈する。ステージを 360
度回転させて繊維の方向を変えると繊維は 4 回明暗の変化を繰り返して灰色～白の色合いを呈する。
光学的等方体のロックウールやグラスウールでは、ポラライザによって一方向に偏光された入射光（視野の水平方向に振動する光）は物体内でも同じ振動をするだけである。顕微鏡上部のアナライザでは視野の垂直方向に振動する光だけが通過するので、光学的等方体を通過した
光はカットされ物体がどの方向を向いていても暗いままである。この性質を利用してロックウ
ール・グラスウールの判別が可能である。

68

・消光角
クリソタイル、アモサイト、クロシドライト及びアンソフィライトは直消光で、トレモライ
ト及びアクチノライトは直消光もしくは直消光に近い（直消光から 5 度以内）。繊維状でない蛇紋石または角閃石のへき開繊維は斜消光を示す。5 度以上の斜消光を示す繊維はアスベスト様繊維ではない ※ 12 。但し、アモサイト、クロシドライト、トレモライト、アクチノライト等単斜晶系のへき開繊維はある特定の結晶面（{100}面）を下にして方位した場合直消光を示すので注意が必要である。また斜方晶系のアンソフィライトはアスベスト様繊維もへき開繊維も直消光を示す。石膏とワラストナイトは斜消光である。

・伸長性の正負
繊維の伸長方向の屈折率が径方向の屈折率より大きい場合「伸長性が正」という（その逆は「伸長性が負」）。クロシドライトは伸長性：負で、それ以外のアスベストは伸長性：正である※ 13。伸長性の正負は試料の方位を対角位に置いて、顕微鏡上部の「鋭敏色検板」を挿入して相減/相加の減少を観測して判定する。
アスベスト代替品であるワラストナイトは方位によって伸長性が変わるので、ワラストナイ
トが多く捕集されたフィルターでは類似の形態の繊維状粒子が正と負の伸長性を示すことが観察される。その現象をもとに分別判定が可能になる。
※12: アスベストの消光角について McCrone は、クリ ソタイル・アンソフィライトについては 0 度、アモサ イト・
ト レ モ ラ イ ト ・ ア ク チ ノ ラ イ ト に つ い て は 0～ 4 度 、 ク ロ シ ド ラ イ ト に つ い て は 0～ 5 度 と し て い る 。
（W.C.McCrone 著「ASBESTOS IDENTIFICATION」(1988)等より）※13：クロシドライトはフィルター上では伸長性が正となることがあるので注意が必要である。なお、その理由は明らかでない。

別添 2.

記録紙の例

1. 繊維の位置の記録紙の一例

2. 記録シートの一例
測定現場名：
測定点：
視野
番号

測定日時：
吹付け材の種類：

視野毎の 偏光分析し判定の根拠となった性状
繊維数
た本数

2

1

1 針状、光学的等方

5

2

1

針状、直消光、伸張：正、多色性：変化なし

1 針状、光学的等方

合計

7

1

11

1

15

2

21
35
50
50

針状、直消光、伸張：正、多1
色性：変化あり
針状、直消光、伸張：正、多1
色性：変化なし

アスベスト アスベストの本数
種類
0 (ロックウール）
1 アモサイト
0 (ロックウール）
1 クロシドライト
1 アモサイト
0 （ワラストナイト）
0 (ロックウール）

1111 針状、斜消光、伸張：正1 針状、光学的等方・・・・・・・・・・・・・・・・・
1 細い曲線状、直消光、伸張：正
1 短冊状、斜消光
1 針状、光学的等方

10

10

4

1 クリソタイル
0 (石膏）
0 （ロックウール）

注：視野番号 7 のクロシドライトの「判定の根拠」の欄で伸長性：正となっていることについては別添 1 の※13 を参照の こと

69

３．２．１．３．３ 位相差／蛍光顕微鏡法
蛍光顕微鏡とは励起光を対象物に照射して発生する蛍光を観察する顕微鏡である。蛍光物質で修飾したアスベスト結合タンパク質を用いて、アスベスト繊維（クリソタイル及び角閃石アスベスト）を検出する手法が近年開発されており、ロックウールなどの非アスベスト繊維と識別することが可能である。
本測定法（位相差／蛍光顕微鏡法）は、位相差顕微鏡用コンデンサを装着した蛍光顕微鏡を使う。
対物レンズに位相差用の対物レンズを使うことにより、光源の切り替えだけで位相差観察と蛍光観察を行うことができる。すなわち、本手法では位相差顕微鏡法にそって繊維の形状の観察を行い、長さ 5μm 以上、幅 3μm 未満で、かつアスペクト比 3 以上の繊維が検出された場合、蛍光観察に切り替え、当該繊維がアスベストであるかどうかの判定を行うことができる。光源の切り替えは機種
によっては１つのレバーで操作できるので、当該繊維を見ながら位相差観察から蛍光観察へ切り替
えて、アスベスト／非アスベストの判定が可能である。
試料捕集には位相差顕微鏡法と共通のフィルターを利用することができるが、観察前に蛍光試薬による前処理（アスベスト繊維の染色）が必要となる。また、蛍光タンパク質の特異性は近年改良されているが、非アスベストに関しては炭化ケイ素ウィスカーに結合するので注意が必要である。
また一部の有機繊維が蛍光を持つことがあるので、単一の励起光では区別が難しい場合がある。現場でのアスベスト以外の蛍光繊維の出現頻度として、現在 5％程度と見積もられている。
本手法は、アスベストと非アスベストの区別のための複雑な顕微鏡操作が不要であり現場での迅
速な測定に有効であるが、観察のための基礎知識（蛍光繊維の判定の仕方）やフィルターの前処理手法の習得、位相差顕微鏡法の習得などが必要である。精度管理のために、リロケータブルスライ
ドを用いた熟練者との比較は有効となる。
（１） 試料の捕集及びフィルターの前処理
１）試料の捕集
フィルターを使った試料の捕集については、「３．２．１．１

試料の捕集方法」に準ずる。

２）試料の前処理（蛍光染色とフィルターの透明化）捕集したメンブランフィルターを切り取り（約 60 mm2、あるいは直径 25mm フィルターでは 1/8片使用）。切り取ったフィルター片（またはフィルター全体）に蛍光タンパク質液を滴下した後、アセトン蒸気による透明化処理を行い調製する。蛍光染色とフィルターの透明化処理の手順を図２４に示す。
①

吸収パッドの上に、切断したフィルターの捕集面を上向きにしてのせ、Wash 液を１滴滴下し、完全に吸収させる。

②

続いてアスベスト蛍光染色試薬を２滴、滴下位置を変えながら滴下し、完全に吸収させる。

③

再び Wash 液を 1 滴滴下し、完全に吸収させる。

④

続いて調整液を４滴滴下し、完全に吸収させる。

⑤

捕集面を上にしてスライドガラスに乗せよく乾燥させる。
（80℃のホットプレート上に 15 分
70

間静置。）⑥

捕集面を上にしてアセトン蒸気をあてフィルターを透明化する。

⑦

カバーガラスに封入液を 1 滴滴下する。

⑧

空気が入らないように注意しながら、カバーガラスをフィルター片に被せる。

※スライドグラス及びカバーグラスは無蛍光のものが推奨される。

出典
図２４「環境省環境研究総合推進費(5-1401)終了報告書」より

試料前処理（蛍光染色）の手順（２）測定方法
１）顕微鏡の仕様
顕微鏡は、位相差顕微鏡用コンデンサを装着し、蛍光フィルターユニットを装備した位相差／蛍光顕微鏡を用いる（位相差顕微鏡としての仕様は、位相差顕微鏡法に準ずる）。蛍光観察用の励起光
光源は、LED、あるいは水銀ランプ(100W 超高圧水銀ランプ仕様)のものを用いる。接眼レンズは倍率 10 倍、対物レンズは開口数 0.65 以上で倍率 40 倍とし、目視計数ではアイピースグレイティクル（大円：300μm）を装着したものを用いる。位相差／蛍光顕微鏡の概略を図２５に示す。

71

図２５ 位相差／蛍光顕微鏡の概略図
上段：一般的な位相差／蛍光顕微鏡の概略図
下段：位相差用透過照明と蛍光励起用照明の切り換え、並びに蛍光フィルターの脱着がレバー（光路切り換えレバー）の操作で同時に行える位相差／蛍光顕微鏡の概略図

２）顕微鏡の調整
個々の調整手順については、各々使用する顕微鏡の取扱説明書などに従い、適切に行うこと。こ
こでは一般的な位相差／蛍光顕微鏡の調整について記載する。
① 位相差顕微鏡法（「２．３．２（２）試料の計数 １）顕微鏡の調整」）に従い、位相差顕微鏡の調整（眼幅、視度補正、視野絞り、コンデンサ・位相差リングの芯出し）を行う。
② 蛍光検出試薬の蛍光波長に合わせ、フィルターユニットを顕微鏡にセットする。蛍光顕微鏡観察においては、フィルターユニットの仕様（励起波長、観察波長）が観察対象に対応していることが必須であるので、よく確認すること。
③ 落射照明用光路（蛍光励起光用）の視野絞りの芯出し・調整を行う。
72

（a） 落射照明装置の視野絞りレバーを操作し、視野絞り径を少し絞る。
（b） 視野絞り像が視野と同心になるように調整する。
（c） 視野絞りを視野に内接するまで開き、偏心がないか確認する。偏心している場合は再度調整する。
（d） 絞り像が視野に外接するまで視野絞りを開く。
④ 落射照明用光路（蛍光励起光用）の開口絞りの芯出し・調整を行う。
（a） 接眼レンズを抜き取り、鏡筒内を覗きながら、開口絞りを調整し約 70%程度に絞る。
（b） 開口絞りの中心がずれていないか確認する。偏心している場合は調整する。
（c） 開口絞りを対物レンズの開口数の 70～80％に絞る。
※水銀ランプを使用した顕微鏡の場合、点灯後明るさが安定するまで５～10 分必要な場合がある。
３）測定手順測定手順の概要を図２６に示す。
位相差／蛍光顕微鏡において位相差用の光源で観察することを「位相差モード」、蛍光用の励起光源で観察することを「蛍光モード」と呼ぶ。視野毎にまず位相差モードで繊維を観察する。位相差顕微鏡法の計測ルー
ルに沿って、長さ 5µm 以上、幅（直径）3µm 未満で、かつ長さと幅の比（ア図２６スペクト比）が 3:1 以上の繊維状物

測定手順概要質を当該繊維とする。当該繊維が見つかった場合、蛍光モードに切り替えて当該繊維の蛍光の有無（アスベスト／非アスベスト）の判別を行う。この操作を繰り返すことにより繊維の計数と同定を行う。
以下、光路の切り換えレバーが装着された位相差／蛍光顕微鏡での実際の手順を示す。
（光路の切り換え方法などは顕微鏡により異なる。取扱説明書に従うこと。
）① （位相差顕微鏡観察）①‐1

位相差スライダーをスライドさせ、位相差対物レンズに対応したスリットを光路に入れる。（40 倍の場合「Ph２」）（図２７）。
①‐2

サンプルをステージにのせ、光路切り換えレバーを透過光側へ倒し、透過光光量調節

つまみで、視野の明るさを調節する（図２８）
。

73

図２７

①‐3

顕微鏡照明装置電源ユニット

図２８

透過光光量の調節

アイピースグレイティクルの大円（直径 300μm）を 1 視野の範囲とし、この範囲内に存在する対象繊維を計数する。視野上の繊維の位置を視野記録紙に記録し、計数表の総繊維の欄に本数を記録する（図２９）。
該当繊維が無い場合は、計数表に繊維数「０」と記録し、次の視野へ移動する。
（手順③へ）

図２９

視野記録紙（左）と計数表（右）の記入例１

図３０蛍光顕微鏡への切り換え② （蛍光顕微鏡観察）位相差モードにより計数すべき繊維が見つかった場合、視野を動かさず、
光路切り換えレバーを蛍光側に倒し蛍光モードに切り換える（図３０）。
検出した繊維の蛍光を確認し、結果を視野記録紙と計数表に記録する（図３１）74図３１、視野記録紙（左）と計数表（右）の記入例２③

光路切り換えレバーを透過光側に倒し、位相差モードに切り換え（手順①-2 参照）、ステージ
を次の視野へ移動させ、再度対象繊維を計数する。

④

目的の視野数、上限の繊維数（例えば 50 視野、あるいは 100 本）に達するまで①～③の操作を繰り返し、計測を行う。

測定にあたっての注意
I.

蛍光の退色を最小限に留めるため、
1 視野あたりの計数は 1 分程度で終了することが望ましい。
また蛍光モード終了後は位相差モードに戻し、視野を移動させる際は標本に励起光を当てないこと。

II. アスベスト結合タンパク質の結合特異性を参考資料１に示す。シリコンカーバイド微細結晶等に結合性を示すことが分かっているので注意を要する。
III. 参考資料２に、観察例を示す。ロックウールは通常結合性を示さないが、一部に周縁だけ蛍光を示す場合があるので、注意を要する（参考資料２、⑥）
IV. その他、自家蛍光を示す有機繊維などが存在することが分かっている。ただし、励起光を変えることで、自家蛍光かどうかが判定可能である（参考資料３）。例えば、自家蛍光の場合、540nmの励起光下で赤色の蛍光を示すが、アスベスト繊維の場合、蛍光は示さない。
V.

シリコンカーバイドや有機繊維等の注意が必要ではあるが、現場での偽陽性の出現頻度は、約5％程度であることが報告されている。位相差蛍光顕微鏡法による解体現場サンプルのアスベス
ト濃度計測数値と電子顕微鏡法による数値を比較したグラフを参考資料 4 に示す。解体現場サンプルで見られた蛍光法陽性判定繊維（34 カ所の現場、各サンプルから 10 本、計 340 本）を
電子顕微鏡による分析を行った結果、陽性判定繊維 340 本の内 322 本がアスベスト（角閃石アスベスト 262 本、クリソタイル 60 本）であった（作業環境、35 巻 1 号、p. 57-62）

VI. 透過光により観察する位相差モードと試料の蛍光シグナルを観察する蛍光モードとでは、視野全体の光量が異なるため、注意が必要である。具体的には、位相差モードから蛍光モードに切75

り替えた際に、背景が暗くなるので、蛍光が見える様になるのに目の順応が必要となる。順応力は観察者によって異なるので、顕微鏡に CCD カメラ等を設置し、モニター上で判定することが有効である（参考資料５）。予め、蛍光モードでのカメラの露光時間と感度を登録しておくことで、一定の感度で画像を表示させることができるため、判定が容易になる。ただし、感度を上げ過ぎると、バックグラウンドが上昇し誤判定の原因となる可能性があるので、参考資料２の観察例を参考に標準サンプルを用いて感度を設定すると良い。また、順応に問題がなくとも、
明るい室内環境では蛍光が見えづらい場合もあるので、この方法は有効である。

（３）繊維数濃度の算出
計数したアスベスト繊維数をもとに、浮遊しているアスベストの繊維数濃度を次式で求める。
ＦＣ ＝ Ａ × Ｎｆ /（a×n×Ｖ）
ＦＣ： アスベスト繊維数濃度（f/Ｌ）
Ａ ： メンブランフィルターの有効面積（mm2）Ｎｆ： 蛍光顕微鏡法で計数した繊維数（ｆ）
a ： 視野範囲（アイピースグレイティクル）の面積（mm2）n ： 計数した視野数
Ｖ ： 吸引空気量（L）（４）検出下限値
120 分間捕集、100 視野計数した時 1 本のアスベスト繊維が検出された場合を濃度の検出下限とすると、検出下限値 E は(ⅰ)式に A＝961.625mm2、a＝0.07065mm2、n＝100、V＝1200L、Nas＝1 を代入して得られる；E＝0.11ｆ／L。（表７参照）
表７
ﾌｨﾙﾀｰ直径㎜

位相差／蛍光顕微鏡法

ﾌｨﾙﾀｰの有効面積 計数した繊維数
2

本
㎜
47
961.6251
47961.6251
25379.941
25
379.941
25
379.941※吸引流量：φ47 10Ｌ／min、φ25 5Ｌ／min

ﾌﾞﾗﾝｸ値

検出下限値一例

視野範囲の面積 計数した視野数
2

本
0
0
0
0
0

㎜
0.070650.070650.070650.070650.07065

76

ｎ
100
100
100
100
100

吸引時間

吸引空気量

min

L
240
120
240
120
30

2400
1200
1200
600
150

検出下限値

ｆ／Ｌ
0.056
0.11
0.044
0.089
0.35

（参考資料）
参考資料１． アスベスト結合タンパク質の結合特異性と繊維の蛍光色
繊維の種類／由来
アスベスト繊維
アスベスト以外の繊維

Type1

Type２

色調

クリソタイル／蛇紋石

＋

－

緑

クロシドライト／角閃石

－

＋

緑

アモサイト／角閃石－＋

緑アンソフィライト／角閃石

－

＋

緑

トレモライト／角閃石

－

＋

緑

アクチノライト／角閃石

－

＋

緑

ガラスウール－－－

微細ガラス繊維－－－

ロックウール－－－

耐火性繊維（セラミック、アモルファス）

－

－

－

耐火性繊維（セラミック、アモルファス）

－

－

－

RF3／ケイ酸アルミ繊維（結晶）

－

－

－

チタン酸カリウム微細結晶、ウィスカー

－

－

－

シリコンカーバイド微細結晶

＋

＋

緑

チタン酸微細結晶ウィスカー

－

－

－

－

－

－

ケ イ 酸 カ ル シ ウ ム 自 然 結 晶（Wollastonite）※ アスベスト結合タンパク質はクリソタイルに特異的に結合する Type１と、角閃石アスベストに結合する Type２がある。アスベスト蛍光試薬にはこの２種類のタンパク質が緑色の蛍光物質で修飾されたものが含まれている。
※ 蛍光フィルターや光源の種類によって、若干色調が変わってくるため、測定前に標準物質を用いて蛍光色を確認しておくことが有効である。
出典 「環境省環境研究総合推進費(5-1401)終了報告書」より

77

１，標準繊維の画像
１） アスベスト繊維① クリソタイル② クロシドライト③ アモサイト④ アンソフィライト⑤ トレモライト78

２） アスベスト以外の繊維① ガラスウール② 極細ガラス繊維③ ロックウール④ 耐火性繊維（ RF1:セラミック、非晶質）⑤ 耐火性繊維（ RF2:セラミック、非晶質）⑥ ケイ酸アルミ繊維（ RF3：セラミック、結晶質）

79

⑦ チタン酸カリウムウィスカー⑧ 炭化ケイ素ウィスカー⑨ 酸化チタンウィスカー⑩ ワラストナイト80

２，蛍光顕微鏡法と光学顕微鏡法の感度比較（標準繊維）
表８に蛍光顕微鏡法と光学顕微鏡法との感度の比較の一例を示す。微細なクリソタイルに関して、光学顕微鏡法による計測よりも感度が高いことが分かる。
表 8 蛍光顕微鏡法と光学顕微鏡法の感度比較(a) クリソタイル※JAWE 111
サンプル 1
サンプル 2(b) アモサイト※JAWE 211
サンプル 1
サンプル 2(c) クロシドライト※JAWE 311
サンプル 1
サンプル 2蛍光 (DksA-Cy3) ※14
視野数
繊維数(本)
17
206
14
201.5
15
205
19
210.5

光学
視野数
繊維数(本)
50
73
50
112
50
94.5
50
82

蛍光(GatZ-FITC)
視野数
繊維数(本)
40
202
37
205
37
205
29
203

光学
繊維数(本)
202
202
202
203

蛍光/ 光学

視野数
38
36
35
30

蛍光(GatZ-FITC)
視野数
繊維数(本)
30
205.5
29
202
29
201.5
30
210

光学
視野数
繊維数(本)
29
206
30
204
30
200.5
31
205

蛍光/ 光学※14： 電子顕微鏡法との比較から約 80nm のクリソタイル繊維が検出できている。
※15： 鉱物の産地（太さ分布）の違いによって、比較の数値は異なると考えられる。

81

蛍光/ 光学※15
7.03
6.92

0.96
0.99

0.99
1.05

参考資料２．位相差／蛍光顕微鏡法による観察例82

出典 「広島大黒田研究室」より提供

83参考資料３、自家蛍光を持つ繊維の区別

出典 Annals of Occupational Hygiene, 60 (9), 1104-1115

84

参考資料４、位相差顕微鏡法と電子顕微鏡法の相関について

出典 「環境省環境研究総合推進費(5-1401)終了報告書」より

参考資料５、顕微鏡モニターシステムの一例

顕微鏡のカメラポートにカメラを取り付けて観察用モニターと接続することにより、観察視野の映像をモニター上に表示させ確認することができる（左）。カメラの感度をモニター上で設定することで、外部環境（明るさ）によらず一定の判定ができる。また、順応の問題を解決できる。

85

３．２．２

自動測定機器によるリアルタイム測定

３．２．２．１ 試料の捕集方法
３．２．２．１．１ 測定地点及び測定箇所の設定（１）測定箇所
発生源近傍及び集じん・排気装置の排出口のダクト内部とする。
（２）測定方法
使用する測定機器は、吸引ポンプを内蔵し、計測データのロギング（テキストファイルへの書き出し）機能を有しているものを使用する。
①

測定の前に、較正する必要がある機器はそれぞれの機種が規定している方法で較正する（繊維状粒子自動測定器には、バックアップフィルタを取り付ける）。
②

集じん・排気装置の排出口では、ダクトの先端から 40 ㎝の位置でダクト内の排気を直接又は導電性のシリコンチューブ配管等によって（２）の機器に連結し、測定することとする。

③

除去作業開始前に、集じん・排気装置の稼働前・中（集じん・排気装置を使用しない解体現場については除去作業前１回のみ）において、（１）の測定箇所で 10 分程度測定を実施し、計測値を記録する。

④

除去作業の開始にあわせて、（１）の測定箇所において 120 分間連続測定を実施し、計測値を記録する。

（３）記録の作成・保存
各測定機器の測定結果及び集じん排気装置稼働後に実施した対策等があった場合は、内容を記録し、作業記録とともに保存する。
（４）アスベストの漏えいが疑われた場合の対応除去作業中に、前室の出入口や集じん・排気装置の排出口からのアスベストの漏えい（前室や集じん・排気装置を使用しない解体現場については、作業環境周辺でアスベスト除去作業現場からアスベストの飛散）が疑われた場合には、直ちに現場作業責任者等に連絡する。
現場作業責任者等への連絡の結果、作業を一時停止した場合には、その作業の再開後においても、しばらくの時間、計測値が正常な値で維持されていることを各測定箇所にて注意深く確認する。
また、繊維状粒子自動測定器を使用した場合は、計測された総繊維数濃度がアスベストかど
うかの判定のために、機器に取り付けているバックアップフィルタについて、電子顕微鏡法等のアスベストを同定できる方法で確認分析をする。

３．２．２．２ 測定方法各論
３．２．２．２．１ 粉じん相対濃度計による測定
粉じん相対濃度計は繊維状粒子のみを計測する機器ではないが、作業場の漏えいがあれば、「繊86

維状粒子」と「非繊維状粒子」の両方が漏えいすると考えられるため、集じん・排気装置の排出口内部での計測において、作業開始前に確認した粉じんカウント数に対して、粉じんカウント数が増加した時には、集じん・排気装置からの漏えいがあると判断することができる。
異常が確認された場合には、速やかに現場へ情報をフィードバックして作業を中断し、原因を確かめ、補修し、飛散拡大を防ぐことができる。
粉じん相対濃度計の概観と構造図の例を図３２、図３３ に示す。なお、集じん・排気装置の排出口内部での計測は、吸引ポンプ内蔵の粉じん相対濃度計を使用する。
測定は作業中に定期的に実施するが、リアルタイム連続監視機能に設定して測定を行うことが望ましい。
具体的な操作方法、点検等については、粉じん相対濃度計の取扱説明書に基づき行うとともに、
労働安全衛生法及びこれに基づく命令に係る登録及び指定に関する省令第 19 条の 24 の 4 により登録を受けたものによる較正を定期的に受けた機器を使用することが望ましい。

図３２

吸引ポンプ内蔵の粉じん相対濃度①採気口 ②散乱板 ③発光部

計の例

④受光部 ⑤フィルタ ⑥吸引ポンプ
図３３ 粉じん相対濃度計の構造の例（１）粉じん相対濃度計の原理
粉じん相対濃度計と呼ばれる測定器の原理は、「光散乱方式」、「光吸収方式」など数種類がある。このうちの「光散乱方式」の粉じん相対濃度計は、高感度で扱い方も簡便で比較的小型軽量にできることから、粉じん相対濃度計としては多用途で最も使用されている。
空気中に浮遊している粉じんに光を当てると光が四方八方に散乱する。この散乱光は、同一粒子系であれば再現性が良く、なおかつその粉じん濃度が倍になれば散乱光量も倍になり、さらに敏感に反応する特徴を持つ。この粉じん濃度と散乱光量が直線的に敏感に比例することを利用して、空気中に浮遊している粉じんの質量濃度を散乱光の強弱として測定しているのが「光散乱式」の粉じん相対濃度計である。そしてこのような原理を「光散乱方式」と表現している。
K 値は、「光散乱方式」の粉じん相対濃度計で求められた測定値(単位：cpm)を質量濃度(単位：mg/m3)に変換する際の係数である。 作業環境、室内環境等の粉じん濃度は一般的には mg/m3 と87

いう質量濃度で評価されるが、「光散乱方式」の粉じん相対濃度計は、直接粉じんの質量を量っている訳ではなく、それと比例している散乱光の強弱を測って cpm という単位に換算している。
そのため「光散乱方式」の粉じん相対濃度計は相対濃度計とも呼ばれている。ある粉じん質の散乱光量(cpm 値)と、それが何 mg/m3 の粉じん濃度に相当するかは、同一粒子系であれば直線的に比例することが分かっており、測定現場で比例直線の傾きを求めれば、粉じん相対濃度計によって求められた測定結果を mg/m3(粉じん濃度)に置き換えることができる。
この傾きが K 値(質量濃度変換係数)になる。
３．２．２．２．２ パーティクルカウンターによる測定
パーティクルカウンターは、空気中にある埃や微粒子などを計数する計測器である（図３４）。
微粒子からの光の散乱の強さを測り、その粒子の大きさに比例した光強度を電気信号として取り出すことで測定を行う。
主な使用用途は、半導体のクリーンルームや製薬工場、食品工場並びに病院の手術室等の汚染源を特定するための機器として使用されている。一般的に濃度範囲は 0～7,000 万個／m3 までである。クリーンルーム内の清浄度指標は ISO14644-1 で定められており、0.1μm の 1m3 当たりの個数を基準とし、ISO クラス 1～ISO クラス 9 で分類される。半導体工場は ISO1～ISO3 に該当し、粒径を 0.3μm とした場合、1020 個/m3 以下(ISO クラス 4)になるように管理されている。また、管理粒径を 0.5μm とした場合、352 個/m3 以下(ISO クラス 4)になるように管理されている。
この方法で、集じん・排気装置の排出口内部の測定場所で簡易に粒子数を確認することができる。集じん・排気装置の HEPA フィルタを通過した排気中には粉じん粒子が殆ど含まれないが、フィルタの破損や、集じん・排気装置本体のビス等の緩み、歪みによる隙間、HEPA フィルタと本体の間のパッキンの劣化等による漏えいがあった場合には粉じん粒子数が増加し、短時間で漏えいの有無の判断が可能である。異常が確認された場合には、速やかに現場へ情報をフィードバック
し、作業を中断の後、原因を確かめ、補修することで、飛散拡大を防ぐことが出来る。
測定は作業中に定期的に実施する事とし、可能であれば、リアルタイム連続監視測定を行うことが望ましい。
具体的な操作方法、点検等については、パーティクルカウンターの取扱説明書に基づき行うと伴に、定期的に較正を受けた機器を使用することが望ましい。

図 ３４ パーティクルカウンターの例
88

３．２．２．２．３ 繊維状粒子自動測定器等による測定
繊維状粒子自動測定器は、フィルタなどに浮遊状粒子を捕集して計数する方法と異なり、現場の測定場所で簡単に浮遊繊維状粒子の繊維数濃度を知ることができ、石綿を使用した建築物等の解体、改造、補修の工事に伴うアスベスト飛散防止のためのリアルタイム計測や長時間連続監視計測などが可能である（図３５）。
（１）繊維状粒子自動測定器の原理
１）ＦＡＭ－１方式
ＦＡＭ－１は、浮遊粒子の中から繊維状粒子だけを識別して、それらの繊維数濃度を算出する計測器として、米国で 1970 年代後半に開発されたものである。試料空気は吸引ポンプで採気
口から内部に導入される。検出部内を通過してサンプリングホルダー、流量センサを通り筐体
外部に排気される。検出器には 4 つの電極からなる高圧部があり、高電圧の直流電圧と交流電圧を重ねて加えた電場の中を繊維状粒子が通過すると振動する。繊維状粒子は、検出部内に照射された半導体レーザー光により散乱光を発し、散乱光は光センサで検出される。繊維状粒子が振動しながら検出部内を通過すると、散乱光強度がパルス状に変化する。一方、非繊維状粒子は検出部内を通過しても電場の振動による散乱光強度の変化はほとんど現れない。散乱光のパルスは繊維状粒子の繊維が長く太いほどピークが高く、パルス面積は繊維の長さが長いほど大きくなる。散乱光パルスとピーク面積の比により、繊維のアスペクト比（長さ/幅）と長さを設定することで、位相差顕微鏡法による計数分析値と一致する繊維を選別して測定できる。
選別された繊維状粒子はリアルタイムに計測され、カウント数として表示される。また、同時にカウント数の積算値と吸引流量の積算流量から総繊維数濃度が算出される。
計測された濃度は位相差顕微鏡法により得られる繊維数濃度と同様に総繊維数濃度であり、必ずしもアスベスト濃度とは一致しない。そのため、計測器にバックアップフィルタが内蔵されている装置であれば、必要に応じて他の分析方法による確認が可能となる。
２）二偏光（ＤＡＥＣＯＭ）方式
二偏光方式は我国で 1990 年代に新方式として開発されたものである。空気を流すフロー管に垂直にレーザー光を通す枝管を設置し、更に双方に垂直になるように２極の電極を設け、浮遊する繊維状粒子を配列させ、レーザービームを粒子の長さ方向に垂直に当て、散乱光の強度と偏光の変化を測定する。
レーザー光は粒子の長さ方向とそれに垂直な径方向の 2 つの偏光の散乱が生じるように偏光方向を 45 度に傾ける。
ミー散乱の理論にもとづいて、レーザービームの入射に対し後方散乱に近い約 170 度の方向で散乱光の 2 つの偏光を測定し、強度と偏光の違いにより粒子の大きさと繊維状か否かを識別し、計数する（測定される偏光は、微小な繊維状粒子はプラス、繊維状でない微粒子ではマイナス）。計数された粒子数から、繊維状粒子数と総粒子数およびそれぞれの濃度の時間変化がリ
アルタイムに表示され、測定終了後、測定開始からの繊維状粒子数、総粒子数のそれぞれの積算値および総繊維数濃度と総粒子数濃度が出力される。
計測された濃度は位相差顕微鏡法により得られる繊維数濃度と同様に総繊維数濃度であり、89

必ずしもアスベスト濃度とは一致しない。そのため、計測器にバックアップフィルタが内蔵されている装置であれば、必要に応じて他の分析方法による確認が可能となる。
（２）バックアップフィルタが内蔵されている繊維状粒子自動測定器
現在、わが国で市販されている繊維状粒子自動測定器のうち、バックアップフィルタが内蔵されているものには４機種があることが確認されている（機種Ａ～Ｄとする）。これら４機種の共通項目に対する性能の比較表を表９に示しておく。
（３）繊維状粒子自動測定器の較正方法
表９に示す各機種の較正方法は位相差顕微鏡法（ＰＣＭ法）の計数値を基準に較正を行っている。
１）機種Ａの較正方法
本装置は、平成３～４年度にかけて当時の環境庁が導入を検討していた米国の MIE 社から市販されていたＦＭ－7400 と同様に、クリソタイルとアモサイトの２系統の較正チャンネルを有している。
クリソタイルの１次較正には、当時の環境庁の検討会でダストチャンバーに発生させたク
リソタイル繊維の長さや太さの分布や形態が、環境大気中に存在するアスベスト繊維に近似できるとして選定された、ジンバブエ共和国産のクリソタイルを粉砕処理したものを使用している。このクリソタイル繊維を内容積約 400Ｌの専用ダストチャンバーに発生させ、０ ～5000 ｆ/L の範囲で濃度の異なる 35 ～ 50 点の範囲でＰＣＭ法との併行測定を３ ～ ５回実施し、表示濃度とＰＣＭ法によるクリソタイル繊維数濃度の比較から回帰式を計算し、その傾きから係数を求めＰＣＭ法の濃度と 1 対 1 になるように補正した機器を基準器としている。
２次較正も同様のクリソタイルを使用して１次較正と同様に発生させ、基準器と被検器の併行測定を行い、被検器の表示濃度が基準器の表示濃度と一致するように補正している。
アモサイトの 1 次較正には南アフリカ共和国 Transvaal 州産のアモサイトを粉砕処理したものを使用して、クリソタイルと同様の方法で１次較正、２次較正を行っている。
基準器は日本で保有しており、米国での機器生産に当たっては、日本からの基準器を使用して調整し、日本国内で基準器との１次、２次較正を行っている。
２）機種Ｂの較正方法
1 次較正用繊維としてアモサイト(JAWE231）を使用し、ダストチャンバーに発生させ、基準器とＰＣＭ法との併行測定を行う。
濃度段階は 400ｆ/L 付近を目安に１点測定し、その前後 2 点ずつ計 5 点をＰＣＭ法と併行測定して比較する。そこで得られた表示濃度とＰＣＭ法によるアモサイト繊維数濃度の比較から回帰式を計算し、その傾きから係数を求めＰＣＭ法の濃度と１対 1 になるように補正した機器を基準器とする。
次に 2 次較正用繊維として人造鉱物繊維を発生させ、基準器と被検器を同時に併行測定し、そこで得られた基準器の表示濃度と被検器の表示濃度から回帰式を計算し、その傾きから係90

数を求め基準器の濃度と１対 1 になるように補正している。
３）機種Ｃの較正方法
1 次較正用繊維としてアモサイト（測定機関から提供された現場試料を使用している。アス
ベスト濃度は 100％ではなく、他の繊維も混入している可能性あり。
）を使用し、ダストチャ
ンバーに発生させ、800f/L 以下の濃度において 30 点～50 点程度、ＰＣＭ法と表示値の比較測定を行う。そこで得られた表示濃度とＰＣＭ法によるアモサイト繊維数濃度の比較から回帰式を計算し、その傾きから係数を求めＰＣＭ法の濃度と１対 1 になるように補正した機器を基準器とする。
次に 2 次較正用繊維としてチタン酸カリウム（製品名：ティスモ D）をチャンバーに発生させ、500f/L 以下の濃度で 5 点基準器と被検器を同時に併行測定し、そこで得られた基準器の表示濃度と被検器の表示濃度から回帰式を計算し、その傾きから係数を求め基準器の濃度と１対 1 になるように補正している。
４）機種Ｄの較正方法
1 次較正用繊維として南アフリカ産アモサイト（JAWE221）とジンバブエ産クリソタイルを使用し、チャンバ－内に別々に発生させ、較正用機器を用いて、それぞれ数点の濃度で測定し、較正用機器の表示値とバックアップフィルタのＰＣＭ法の測定値との比較を行う。そこで得られた表示濃度とＰＣＭ法によるアモサイトおよびクリソタイル繊維数濃度の比較から回帰式を計算し、その傾きから係数を求めＰＣＭ法の濃度と１対 1 になるように表示値を補正した機器を基準器とする。
次に 2 次較正用繊維としてグラスウールを使用し、チャンバー内にグラスウールを発生させ、基準器と被検器を用いて同時に測定し、基準器の表示値に被検器の表示値を合わせるよ
うに被検器の反射光受信強度を調整する。
最後に、有機繊維除去装置を付けて、一般大気環境を基準器と被検器を同時に測定し、基準器の表示値に被検器の表示値が合うように、更に反射光の受信強度を微調整する。
（４）サンプリング（計測）方法
１）捕集時間及び捕集空気量等
集じん・排気装置（負圧除塵装置）の排気口内部の測定の場合には排気口内に設置した導電性シリコンチューブ等に直接測定機器を接続する。排気口外部の測定の場合には、排気口からの風速と繊維状粒子自動測定器の捕集口の面速（cm/sec）が等速となる位置で測定を実施する。
（各測定器の捕集口の面速は機種Ａ、機種Ｂがそれぞれ 236.2 cm/sec、42.4 cm/sec、
機種Ｃが 38.8 cm/sec、機種Ｄが 58.8 cm/sec である。
）
各測定器で 30 分間（60L）捕集した場合の検出下限濃度は、機種Ａが 1.7 f／L、機種Ｂが1.3 f／L、機種Ｃが 3.3 f／L、機種Ｄが 0.5 f／L である。

91

（５）測定結果の取り扱い測定された繊維状粒子濃度測定結果は次のように記載する。
１）作業開始前の繊維状粒子濃度測定結果：Ａ f／L
２）作業中の繊維状粒子濃度測定結果：Ｂ f／L
３）作業により増加した繊維状粒子濃度：（Ｂ－Ａ）f／L
繊維状粒子自動測定器で測定された濃度（f／L）は総繊維数濃度であり、位相差顕微鏡（ＰＣＭ法）と同様に、当該繊維状粒子がアスベスト繊維であるか否かの判別は出来ない。そこで、作業による繊維状粒子濃度が目立った増加傾向を示した場合には、繊維状粒子自動測定器のバックアップフィルタを使用して、電子顕微鏡法（Ａ－ＳＥＭ,Ａ－ＴＥＭ）等によって当該繊維がアスベスト繊維か否かの確認分析を実施する。
（６）繊維状粒子自動測定器による測定の留意点
繊維状粒子自動測定器による測定は過去の経験から、位相差顕微鏡法による総繊維数濃度よりもやや高い濃度として計測される場合が多い。これは、位相差顕微鏡の場合には繊維の形態
を１繊維ごとに確認して計数しているのに対して、繊維状粒子自動測定器の場合は繊維の形態によって発生するパルスの取り扱いにより計測対象の繊維を選別するために、安全側にシフトするような調整が行われているためである。
繊維状粒子自動測定器による測定はリアルタイムで繊維状粒子濃度が把握できるという利点があり、解体現場での隔離シートやセキュリティゾーン、負圧除塵装置の排気口からの飛散・漏洩の監視、隔離シート撤去前等の測定に関して管理を迅速に実施可能となるメリットを有する。
繊維状粒子自動測定器の使用にあたっては、少なくとも年１回のメーカーによる整備・校正を受けたものを使用すること。
３．２．３

留意事項

粉じん相対濃度計及びパーティクルカウンターに関しては、水蒸気に関しても計測値として表示してしまう場合があるので、天候について霧等の状況も記録票に記録する他、測定器付近でのスモークテスターなど煙を用いた気流の確認は、計数値に影響を与える可能性があることから使用に際しては留意すること。
各測定機器の計測値は顕微鏡法との相関性等について課題があるものの、アスベスト除去等作業現場から高濃度の粉じんの排気が確認されれば、集じん・排気装置本体を含めた排気経路等に何らかの異常が生じていると推測できるため、高濃度の計測値を確認した場合は、アスベスト粉
じんが飛散している可能性が高いものとして３．２．２．１．１（４）の対応をとること。
ただし、パーティクルカウンターに関しては、飛散抑制剤等の噴霧に伴い、集じん･排気装置を通過したミストが計測された事例や、発電機やエンジンからの排出ガス中の有機化合物が凝結した粒子等が計測された事例が報告されていることから、計測値の変動とアスベスト除去作業の状況を併せて判断する必要がある。
92

図 ３５ 繊維状粒子自動測定器の例

93

表９

繊維状粒子自動計測器仕様一覧

製造

Ａ社

Ｂ社

Ｃ社

Ｄ社

型式

機種Ａ
光散乱方式を使用しファイバーを一列に並べさらに振幅させる動作の組み合わせを誘発させる電場を発生させ、粒子の中から単独に個々のファイバーを検出する。

機種Ｂ

機種Ｃ

機種Ｄ

高電場での粒子振動による繊維状粒子の散乱光検
出FAM-1 の基本原理を使用、ﾌｧｲﾊﾞｰを高電圧で振動させ、ﾚｰｻﾞｰの散乱ﾊﾟﾙｽ波形を解析

He-Ne レーザビーム内を通過する粒子の 170 度後方散乱光を捉え、偏光角度の変化の差で繊維と粒子を識別

繊維状粒子のみを選別して測定可能

繊維状粒子のみを選別して測定可能

繊維状粒子のみを選別して測定可能
総粉じん個数濃度表示可能

原理

繊維状粒子のみを選別して測定可能 キャリブレーションはクリソタイル、アモサイトの２系統設定
されている

長所
欠点

取り込み試料の一部を検出、流量比で濃度を算出

高温多湿、水厳禁（雨天時屋外等）

精度の高い光学系を使用しているため重量が重い

2μm

5μm

5μm（長さ）以上

0.1μm（直径）×１μm（長さ）

捕集時間 10 分

5 本/L

3.9 本/L

10 本/L

1.50 本/L

捕集時間 30 分

1.7 本/L

1.3 本/L

3.3 本/L

0.50 本/L

捕集時間 60 分

0.8 本/L

0.7 本/L

1.7 本/L

0.25 本/L

捕集時間 120 分

0.4 本/L

0.3 本/L

0.8 本/L－

捕集時間 240 分

0.2 本/L

0.2 本/L

0.4 本/L

捕集時間 480 分

0.1 本/L

0.1 本/L

0.2 本/L

0.0625 本/ L－

最大繊維数濃度5000 本/L1000 本/L

1000f/L（9999 ｶｳﾝﾄ）

10000 本/Ｌ

捕集流量

2 L/min2 L/min2 L/min2 L/min

検知可能な最小流量

0.02 L/min

0.1 L/min

設定可能な運転時間

1 分～24 時間または連続

9999 時間

分単位で連続まで自由に設定可能

積分時間 1～90 分で設定可能、連続測定回数 1～500 回記録可能な運転時間

1 分～24 時間

9999 時間

1 件につき 40 時間
99 件まで記録可能

ﾌﾟﾘﾝﾀｰ出力の場合 同上
ｺﾝﾋﾟｭｰﾀ-出力の場合 無制限

設定時間内での記録項目

年・月・日・時・分、最新繊維数濃度、総繊維数（運転開始から）、平均繊維数濃度（運転開始から）、捕集経過時間、最高繊維数濃度（選択された捕集間隔
内での）、繊維濃度又は繊維数のｸﾞﾗﾌは時間関数として表示

ｶｳﾝﾄ数、繊維状粒子濃度換算値（f/L）、時間（現在時刻、設定・経過・残時間）、吸引流量、各種異常表示

年・月・日・時・分、測定開始時間測定経過時間

測定開始時刻、設定測定時間、測定回数、繊維状粒子計測数、全粒子計測数、繊維状粒子濃度換算値（本/L）、全粒子濃度換算値（本/L）

測定中の繊維数濃度の表示

直近の繊維数濃度

ｶｳﾝﾄ数
繊維状粒子濃度換算値（f/L）

10 分毎の繊維数及び濃度、直近 100 分単位のﾄｰﾀﾙ
濃度、総繊維数 総ﾄｰﾀﾙ濃度（実稼動時間中）

現在値を２回/秒の更新で液晶に表示

データの出力方法

USB（ﾃｷｽﾄﾌｧｲﾙ形式）

USB、PS-232C、ﾌﾟﾘﾝﾀｰ、ｱﾗｰﾑ

USB ﾎﾟｰﾄ、RS-232C、ﾌﾟﾘﾝﾀｰ付きプリンター紙に印字または RS-232C 接続でコンピューターに記録 ※別途専用ソフトウエアーが必要

バックアップフィルター

φ25mm ﾒﾝﾌﾞﾗﾝﾌｨﾙﾀｰ

φ25mm ﾒﾝﾌﾞﾗﾝﾌｨﾙﾀｰ

φ25mm ﾒﾝﾌﾞﾗﾝﾌｨﾙﾀｰ

φ25mm ﾒﾝﾌﾞﾗﾝﾌｨﾙﾀｰ電源

100-240VAC、50-60Hz

AC100V

100-240VAC、50-60Hz

AC100V

蓄電池（バッテリー）

持続性 4 時間（以上）充電式ﾊﾞｯﾃﾘｰ 5～10Ah

ニッケル水素蓄電池（約４時間）

DC12V（約 10 時間稼動）

無寸法

W36.5cm×D28.2cm×H22.4cm

W38cm×D23cm×H24cm

W446mm×D250mm×H222.8mm

W55cm×D41cm×H18.5cm

重量7.5Kg（ﾊﾞｯﾃﾘｰ含まず）

約 5.2kg

8.0kg（ﾊｰﾄﾞｹｰｽ 6.5kg／W512mm×D318mm×H331mm）

約 13Kg

設定可能な平均値の間隔

1～60 分

1 分または積算時間

設定不可

データ記録の間隔

1～60 分

1～999 分1 分から自由に設定可

1～90 分

アラーム設定有無

有

無

有

無

設定可能なアラーム範囲

TWAPEL（8 時間中）及び STEL(0.5 時間中)

0.1～999.9 f/L (ｵｰﾌﾟﾝｺﾚｸﾀ出力)

自由に設定可無

アラーム音の大きさ設定

90db（機器から 1ｍ離れた距離からの測定）

設定不可

内蔵ブザーは変更不可 外部出力端子有り

設定不可

ディスプレイスクリーン

16.3cmタッチパネル式液晶ディスプレー（バックライト付）

タッチバネル式 TFT5 型ｶﾗｰ液晶ディスプレー

液晶

コンピューター

WindowsXP 内蔵、500MHz のﾌﾟﾛｾｯｻｰ付き工業用 PC

通信機能ありUSB 及び RS232 により外部接続 内部専用ｿﾌﾄ

オプション（ソフト込み）

データ記憶容量2GB（コンパクトフラッシュ）

データ数 5450

1MB

測定結果 500 件

ＵＳＢポートUSB2.0（×2 ヶ所）

有有無（RS232C から変換可能）

捕集口の面速236.2cm/sec

42.4cm/sec

38.8cm/sec

58.8cm/sec

検出最小長さ

最少測定濃度94

TFTLCD、ｶﾗｰﾀｯﾁｽｸﾘｰﾝ

NiMH

NEMA4/IP65 規格

2 L/min に固定

1 分単位

＜参考＞
例１

解体現場等におけるその他迅速な測定方法の紹介

可搬型等の分析走査電子顕微鏡法

解体現場等でサンプリングしたサンプルを１～２時間内にアスベストの有無の判定可能な測定ができる可搬型等の分析走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）の条件は、エネルギー分散型Ｘ線分
析装置（ＥＤＸ）を装着し、加速電圧 15kV 程度を満たし、１～２時間程度で位相差顕微鏡で確認ができる繊維と同程度の繊維（概ね長さ 5μm 以上、幅 0.2μm 以上 3μm 未満、アスペク
ト比 3 以上）の観察及び同定が可能であることとする。
試料の前処理及び試料の計数に関しては、２．３．３の（１）及び（２）に準ずるものとする。
例２

位相差／ラマン顕微鏡法

位相差・ラマン顕微鏡法は、レーザーラマン分光法を位相差顕微鏡に応用した手法で、サブミクロンオーダーまでの対象繊維を分析することができる。ラマン分光法をアスベストの識別に応用すると、OH 基に帰属されるピークの波数位置や形状から個々の繊維の種類を識別することが可能である。
分析に必要な前提条件として、ラマン顕微鏡による測定対象の６種類のアスベストのラマンスペクトルデータ（ライブラリー）を確認しておく必要があり、位相差顕微鏡法による総繊維の計測と同じプレパラートを使用し、同一視野内の繊維のラマンスペクトル測定結果とライブラリーを比較してアスベスト繊維を同定することが可能である。
事前にサンプリングされる可能性のあるアスベストの種類を確認する必要はないが、アモ
サイトとクロシドライト、トレモライトとアクチノライトのラマンスペクトルが類似しているため、区別ができない。
例３

可搬型蛍光顕微鏡法

蛍光顕微鏡法は、位相差／蛍光顕微鏡法（３．２．１．３．３）の位相差モードでの繊維の観察を行わず、直接、蛍光繊維の形状と蛍光でアスベストを判定、計測する方法である。
方法の概要は、旧アスベストモニタリングマニュアル（第 4.0 版）に記載されている。
最近、コンパクトな可搬型の蛍光顕微鏡が開発されている。装置は箱型にまとめられており、上部のガラス窓に映像が投影される。本蛍光顕微鏡は、タブレットの通信機能を使い遠隔地で画像を共有することができる他、タブレット上で拡大や計測ができるため明るい野外での計測が容易になっている。また、改良型サンプリング装置により、大気捕集とフィルタ
ーの蛍光染色を同時に行うことができる。可搬型蛍光顕微鏡法は、解体現場でのサンプリン
グからアスベスト繊維の計測まで１時間以内で終了することが可能である。蛍光タンパク質の特異性は近年改良されているが、非アスベスト繊維としては、炭化ケイ素ウィスカーに結合するので注意が必要である。また一部の有機繊維が蛍光を持つことがある。これらの不確
かさを含めて解体現場でのアスベスト以外の蛍光繊維の出現頻度として、約 5％程度と報告されていることから、蛍光繊維（長さ 5µm 以上、幅 3µm 未満で、かつアスペクト比が 3:1 以上）を数えることで漏洩等を迅速に検知することができる。

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