2024 年 8 月改訂

この電子使用説明書をよく読んでから使用してください。

（研究用）HISCLTM PEDF 試薬【全般的な注意】
1. 本品は研究用試薬です。この製品で得られた結果の臨床的有用性については確立されていないため、診断等の目的では使用しないでください。
2. 本電子使用説明書以外の使用方法については保証をいたしかねます。
3. 各試薬の使用説明書、測定に使用する装置の電子添文及び取扱説明書をよく読んでから使用してください。

ALP 標識抗ヒト PEDF
ポリクローナル抗体

CDP-StarTM

ヒト PEDF 抗原
発光
抗ヒト PEDF
ポリクローナル
抗体固定化磁性粒子洗浄洗浄【形状・構造等（キットの構成）】
本キットは、次の試薬により構成されています。
1. HISCL PEDF Assay Kit for Research Use（（研究用）HISCL PEDF 試薬）(1) HISCL PEDF Assay Kit for Research Use R1（以下、R1試薬）(2) HISCL PEDF Assay Kit for Research Use R2（以下、R2試薬）
抗ヒトPEDFポリクローナル抗体固定化磁性粒子(3) HISCL PEDF Assay Kit for Research Use R3（以下、R3試薬）
ALP標識抗ヒトPEDFポリクローナル抗体
2. HISCL発光基質セット(1) HISCL R4試薬（以下、R4試薬）(2) HISCL R5試薬（以下、R5試薬）
CDP-Star TM
3. HISCL洗浄液（以下、洗浄液）
4. HISCL PEDF Calibrator for Research Use（（研究用）HISCL PEDF キャリブレータ（以下、キャリブレータ））(1) HISCL PEDF Calibrator for Research Use C0(2) HISCL PEDF Calibrator for Research Use C1(3) HISCL PEDF Calibrator for Research Use C2(4) HISCL PEDF Calibrator for Research Use C3(5) HISCL PEDF Calibrator for Research Use C4(6) HISCL PEDF Calibrator for Research Use C5
ALP：アルカリホスファターゼ
CDP-Star TM： Disodium 2-chloro-5-(4-methoxyspiro{1,2-dioxetane3,2'- (5'-chloro)-tricyclo[3.3.1.1 3,7]decan}-4-yl)-1-phenylphosphate【使用目的】
培養上清中のヒトPEDF（以下、PEDF）の測定【測定原理】
本法は、2ステップサンドイッチ法を用いた化学発光酵素免疫測定法です。
1. R1試薬と試料を混合します。
2. 試料中のPEDFとR2試薬中の抗ヒトPEDFポリクローナル抗体固定化磁性粒子が特異的に反応します。
3. 未反応液を除去後、R3試薬を添加すると、ALP標識抗ヒトPEDF
ポリクローナル抗体が磁性粒子上のPEDFと特異的に反応します。
4. 未反応液を除去後、R4試薬及びR5試薬を添加すると、発光基質
CDP-Star TMが磁性粒子上のALPにより分解され、生じた発光の強度を測定します。
試料中のPEDF濃度に応じて発光強度が増加しますので、あらかじ
め既知濃度のPEDFを含む試料（（研究用）HISCL PEDF キャリブレータ）を測定して検量線を作成しておくことにより、試料中のPEDF濃度を求めることができます。

【操作上の注意】
測定試料の性質
1. 検体に細胞などの粒子状物質が含まれている場合、遠心操作等により取り除いてから測定してください。
2. 保存された検体は測定前によく混合してください。
3. 検体に気泡が発生している場合、検体吸引が正常に行われない場合があるため、必ず気泡を取り除いてから測定してください。
妨害物質・妨害薬剤
1. 下表に示す物質が本品の測定に与える影響を確認したところ、下表の各濃度までは測定に与える値の変動は10 %以下でした。
物質濃度
ビオチン（ビタミンB7）3,500 ng/mL
2. 下表に示す添加物質の交差反応性を確認したところ、下表の各濃度までは測定に与える値の変動は10 %以下でした。
添加物質濃度
VEGF
100 ng/mL
VEGF R1
100 ng/mL
VEGF R2
100 ng/mL
PLOD2
100 ng/mL
COL1A
100 ng/mL
PEDFR
100 ng/mL
LRP-5
100 ng/mL
LRP-6
100 ng/mL
その他
1. 本品は「全自動免疫測定装置 HISCL-5000」（シスメックス株式会社）又は同等の性能を有する専用機器の専用試薬であり、他の装置には使用できません。
2. 必ず本電子使用説明書で指定された試薬（R1〜R5試薬・キャリブレータ・洗浄液等）を使用してください。
3. R1〜R3試薬容器は、後述の測定（操作）法に従って正しく組み立ててから使用してください。組立が不完全な場合、装置のエラーや試薬の蒸発が起こり、正しく測定が行えない恐れがあります。
4. 体液中に広く含まれるアルカリホスファターゼの試薬及び検体への混入を防ぐため、手指の接触や唾液の飛散等に注意して取り扱ってください。
5. R5試薬はアルカリ性であり、空気中の二酸化炭素によるpH変動を避けるため、セット後は交換時まで取り外さないでください。
6. 試料をサンプルカップ等に分注する場合は、蒸発の影響を考慮して速やかに測定してください。なお、最低分注量については、各装置の取扱説明書をご確認ください。

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【用法・用量（操作方法）】
試薬の調製方法
本キットの各構成試薬は調製済みですので、そのまま使用してください。
必要な器具・器材・試料等
・ マイクロピペット、サンプリングチップ及びサンプルカップ
・ HISCL-5000又は同等品
・ HISCL反応キュベット又は同等品
・ HISCLチップ
測定（操作）法1. 準備(1) R2試薬容器を取り出し、気泡が生じないようゆるやかに手振りかくはんし、磁性粒子が分散されたことを目視で確認してください（転倒混和は避けてください）。

4. 検体の測定(1) 使用する装置の取扱説明書に従って検体をセットします。
(2) 2.標準操作法に準じて測定を行い、発光強度を測定します。
(3) 発光強度を検量線に当てはめ、検体中のPEDF濃度を求めま※１す。
5. 精度管理(1) （研究用）HISCL PEDF コントロール Level1〜3をサンプルカップに分注します。最低分注量については、各装置の取扱説明書をご確認ください。溶解方法およびその他の取扱方法に関しては、使用するコントロールの使用説明書をご確認ください。
(2) 2.標準操作法に準じて測定を行い、発光強度を測定します。
※１(3) 発光強度を検量線に当てはめ、PEDF濃度を求めます。
(4) (3)の測定値が許容範囲内にあることを確認します。
※ 精度管理は少なくとも24時間に1回の実施を推奨しています。コントロールの測定値が許容範囲内にあることを確認してから、検体測定を行ってください。
※1： 装置ではこれらの操作を自動で行います。

【性能】(2) 初回のみ、試薬容器前部の爪を押しながら容器ケースを完全に押し下げてください（アルミシールが破れて開栓されます）。
容器ケースを押し下げる

容器ケースを押し下げる

前部の爪を押しながら前部の爪を押しながら(3) 使用する装置の取扱説明書に従い、試薬容器を装置にセットしてください。
※１
2. 標準操作法(1) 反応キュベットにR1試薬100 μLと試料10 μLを分注し、42 ℃で3分間反応させます。
(2) R2試薬30 μLを分注し、42 ℃で2分間反応させた後、磁気分離（反応キュベットに磁石を近づけ、液体部分を吸引除去）します。
(3) 洗浄液200〜900 μLの分注と磁気分離を組み合わせ洗浄します。この操作を計4回行います。
(4) R3試薬100 μLを分注し、42 ℃で3分間反応させた後、磁気分離します。
(5) 洗浄液200〜900 μLの分注と磁気分離を組み合わせ洗浄します。この操作を計4回行います。
(6) R4試薬50 μLを分注して混合かくはんした後、R5試薬100 μLを分注して混合かくはんし、42 ℃で5.5分間反応させ、発光強度を測定します。
3. 検量線の作成(1) HISCL PEDF Calibrator for Research Use C0〜C5のそれぞれをサンプルカップに分注します。最低分注量については、各装置の取扱説明書をご確認ください。溶解方法およびその他の取扱方法に関しては、使用するキャリブレータの使用説明書をご確認ください。
(2) 2.標準操作法に準じて測定を行い、発光強度を測定します。
(3) 各キャリブレータの発光強度を縦軸に、濃度を横軸にとり、※１
検量線を作成します。
※ 検量線作成後は、精度管理を行ってください。

性能
1. 感度
(1) HISCL PEDF Calibrator for Research Use C0(C0)を試料として※２測定した場合の発光強度は、4,500カウント 以下です。
(2) C0及びHISCL PEDF Calibrator for Research Use C1(C1)を試料として測定した場合の0.500 ng/mLあたりの発光強度の比は、2.0以上です。
※0.500 ng/mLあたりの発光強度の比 =（（C1の発光強度 - C0の発光強度）÷ C1の表示濃度 × 0.500+ C0の発光強度） ÷ C0の発光強度
2. 正確性※３
PEDF管理用試料 を測定するとき、測定値はそれぞれ既知濃度の 100±20 %の範囲内です。
3. 同時再現性※３
PEDF管理用試料 をそれぞれ10回同時に測定するとき、測定値のCV値は、10 %以下です。
4. 測定範囲
0.500〜4,200 ng/mL
5. 検出限界・定量限界
CLSIガイドラインEP17-A2(1)を参考に、ブランク限界(LoB)、検出限界(LoD)及び定量限界(LoQ)を算出しました。
ng/mL
LoB
0.015
LoD
0.034
LoQ
0.300

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6. 精度CLSIガイドラインEP05-A2(2)を参考に、併行精度(CVr)、室内再現精度(CVT)を求めました。
併行精度
平均値
標本
N(ng/mL)
SD
CVr
PEDF
80
3.26
0.084
2.6 %
低値管理用試料
PEDF
中値管理用試料

80

64.2

1.49

2.3 %

PEDF
高値管理用試料

80

3,455

139.8

4.0 %

標本

N

平均値
(ng/mL)

PEDF
低値管理用試料

80

3.26

0.111

3.4 %

PEDF
中値管理用試料

80

64.2

1.69

2.6 %

PEDF
高値管理用試料

80

3,455

166.1

4.8 %

室内再現精度SD
CVT

7. 較正用基準物質に関する情報
社内較正用基準物質※2：カウント：HISCL専用装置の発光強度の単位※3：管理用試料：
PEDF低値管理用試料
1.8〜4.2 ng/mL
PEDF中値管理用試料
33〜77 ng/mL
PEDF高値管理用試料1,800〜4,200 ng/mL【使用上又は取扱い上の注意】

修理を実施した場合
7. 新しいLot No.のR4/R5試薬を使用する場合は、検量線を補正するか、もしくは検量線を作成し直してください。
廃棄上の注意1. 試薬及び容器等を廃棄する場合は、廃棄物に関する規定に従って、医療廃棄物又は産業廃棄物等区別して処理してください。
2. アジ化ナトリウムは、鉛、銅などと反応して爆発性の化合物を生成する危険性がありますので、廃棄の際には、大量の水と共に流してください。
3. 廃棄にあたっては水質汚濁防止法等の規制及び各都道府県の条例等に留意して処理してください。
4. 測定により生じた廃液については、検体などと同様に滅菌又は消毒の処理を行ってください。また、これらを廃棄する場合には、各都道府県によって定められた規定に従ってください。
5. 検体に接触した器具を滅菌する場合は、次のいずれかの方法で処理してください。
・ 0.05 %ホルマリン溶液に37 ℃、72時間以上浸す。
・ 2 %グルタルアルデヒド溶液に1時間以上浸す。
・ 次亜塩素酸ナトリウムを0.1 %以上含む溶液に1時間以上浸す。
・ 121 ℃で少なくとも1時間以上オートクレーブにかける。
6. 検体、廃液等が飛散した場合は、2 %グルタルアルデヒド溶液、又は次亜塩素酸ナトリウムを0.1 %以上含む溶液等によるふき取りと消毒を行ってください。
その他の注意1. 定期的な精度管理を実施してください。
2. 試薬の容器等は他の目的に転用しないでください。

【貯蔵方法・有効期間】
1. 貯蔵方法HISCL 洗浄液：2〜30 ℃で保存
上記以外の構成試薬：2〜8 ℃で保存（凍結禁止）
2. 有効期間12カ月（使用期限は、外箱に表示しています。）

取扱い上（危険防止）の注意
1. 検体は、感染の恐れがあるものとして、取扱いには厳重な注意をしてください。誤って目や口に入ったり、皮膚に付着した場合は、水で十分に洗い流す等の応急処置を行い、必要があれば医師の手当て等を受けてください。感染対策マニュアル等があ 【包装単位】
る場合はその指示に従ってください。
製品名構成試薬名
包装
2. 検査にあたっては感染の危険を避けるため使い捨て手袋、マスHISCL PEDF Assay Kit
10 mL × 1
ク等を着用してください。
for Research Use R1※４
EN: HISCL PEDF Assay Kit for3. 感染を避けるために口によるピペッティングを行わないでくResearch Use 100 tests
HISCL PEDF Assay Kit
3 mL × 1
ださい。
JP: （研究用）HISCL PEDF
for Research Use R2
4. R2試薬及びR4試薬には、アジ化ナトリウムが含有されています
試薬 100テスト
HISCL PEDF Assay Kit
10 mL × 1
が、法的には毒物として取り扱われません。また、R5試薬はア
for Research Use R3※４
ルカリ性(pH9.6)です。これらの試薬が誤って目や口に入ったり
EN: HISCL PEDF Calibrator
HISCL PEDF Calibrator
皮膚に付着した場合は、水で十分に洗い流す等の応急処置を行for Research Use
6濃度for Research Use C0〜
い、必要があれば医師の手当て等を受けてください。
JP: （研究用） HISCL PEDF
1 mL分 × 1
C5
使用上の注意キャリブレータ※５
1. 各試薬は、気泡が生じないように、ていねいに扱ってください。
HISCL R4試薬
40 mL × 1
HISCL 発光基質セット※５
気泡が生じると、測定が正常に行われないことがあります。こHISCL R5試薬
70 mL × 1の場合には、気泡が消えるのを待ってからご使用ください。
HISCL 洗浄液※５※６
HISCL 洗浄液
10 L × 1
2. Lot No.が異なるR1〜R3試薬を組み合わせて使用しないでください。また、Lot No.が同じであっても試薬をつぎ足して使用し関連製品ないでください。使用期限を過ぎた試薬は使用しないでくださ
製品名
構成試薬名
包装い。開封後の有効期間は30日です。
HISCL PEDF Control
3. R1〜R3試薬を装置から取り出した場合は2〜8 ℃で保存してくfor Research Use
2 mL分 × 2ださい。装置に戻す場合はR2試薬容器を【用法・用量（操作方Level 1法）】に従ってかくはんしてからセットしてください。
EN: HISCL PEDF Control for
HISCL PEDF Control
4. 誤って凍結させた試薬は品質が変化して正しい結果が得られResearch Use
for Research Use
2 mL分 × 2ないことがありますので使用しないでください。
JP: （研究用） HISCL PEDF
Level 2※５
5. 各キャリブレータ及びコントロールは必要量を分注した後、速コントロール
HISCL PEDF Control
やかにふたをして2〜8 ℃で保存してください。放置したまま
for Research Use
2 mL分 × 2
ですと蒸発等の影響で濃度変化が起こり、キャリブレーション
Level 3または精度管理が正常に行えなくなります。
※4：R1試薬とR3試薬は一体型の容器で提供されます。
6. 検量線の有効期間は作成から30日です。ただし期間内でも、以※5：これらの製品は別売品となります。
下の場合には作成し直してください。
※6：本製品には別容量の包装があります。弊社までお問い合わせ・ 新しいLot No.のR1〜R3試薬を使用する場合ください。
・ 精度管理で異常が生じた場合
・ 装置の取扱説明書に記載されている特定のメンテナンス・
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【主要文献】(1) Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Evaluation ofDetection Capability for Clinical Laboratory Measurement
Procedures; Approved Guideline―Second Edition. CLSI Document
EP17-A2. Wayne, PA: CLSI; 2012.
(2) Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Evaluation ofPrecision Performance of Quantitative Measurement Methods;
Approved Guideline―Second Edition. CLSI Document EP05-A2.
Wayne, PA: CLSI; 2004.

【問合せ先】
シスメックス株式会社 カスタマーサポートセンター
神戸市西区室谷1丁目3番地の2 〒651-2241
Tel 0120-413-034

カタログ番号

使用期限

添付の文書参照

ロット番号

保存温度

テスト数

溶解時の容量上製造販売元神戸市中央区脇浜海岸通1丁目5番1号
Tel 078-265-0500〒651-0073
4BS250783A