ImmunoTox Letter
日本免疫毒性学会：The Japanese Society of Immunotoxicology

Vol. 21 No.2（通巻 42 号） 2016.12 月

テ ー マ： 『「免疫亢進」と「免疫抑制」の新たな考え方』

─ 目次 ─

アレルギーや自己免疫は、果たして「免疫亢第 24 回日本免疫毒性学会学術年会（予告 1） …1

進」によって引き起こされているのでしょうか。生

北里大学 中村和市

理的に「免疫抑制」が起きているときに、それを第 23 回日本免疫毒性学会学術年会報告 ………2

抑制する免疫毒性とは一体どのようなものでしょうか。今までの免疫毒性の考え方を少し見直し

産業医科大学 森本泰夫てみませんか。免疫毒性学の近未来を提示しま

第 5 回（2015 年度）日本免疫毒性学会奨励賞 … 3
大阪大学免疫学フロンティア研究センター 黒田悦史

第 23 回学術年会年会賞 …………………………5

す。
内

容

ジウム、ワークショップ（試験法）、一般演題（口産業医科大学 吉田安宏 他

演・ポスター）、ランチョンセミナー（チャールス・

第 23 回学術年会学生・若手優秀発表賞 ………8

リバー、エンヴィーゴ）を予定しています。

千葉大学大学院 薄田健史

賞

千葉大学大学院 藤森惣太

田辺三菱製薬株式会社 坂入鉄也

：年会において優秀な一般演題を発表した会員に対し、「年会賞」、並びに「学生・若手優秀発

新評議員より …………………………………… 10
国立医薬品食品衛生研究所 石井明子

：会長基調講演、特別講演 、教育講演、シンポ表賞（28 歳以下）」を授与する予定です。
発表形式 ：口演・ポスターを予定しています。
懇 親 会 ：小さな十和田の街で、若い先生方に免疫毒性学の未来を語ってもらいます。

試験法ワークショップ：
有害性転帰経路（AOP）と免疫毒性 ……………11
試験法委員会

演 題 募 集 期 間：2017 年 4 月 24 日（月）～ 6 月 30 日（金）年 会 長 ：中村和市
北里大学獣医学部獣医学科毒性学研究室

ImmunoTox Letter Digest ………………………15

事 務 局 ：担当 鎌田 亮
第 24 回日本免疫毒性学会学術年会事務局
北里大学獣医学部獣医学科毒性学研究室

第 24 回日本免疫毒性学会学術年会（JSIT2017）（予告 1 ）〒034-8628
青森県十和田市東二十三番町 35-1
TEL：／FAX：0176-24-9419

日本免疫毒性学会の第 24 回学術年会を下記の要領で開催

Email：secretariat@jsit2017.jp

いたしますので、ご案内申し上げます。

ホームページ：http://jsit2017.jp/

期

日 ： 2017 年 9 月 4 日（月）～5 日（火）会

場 ：北里大学獣医学部 B 棟 1 階講義室

アクセス

：北里大学 十和田キャンパス 🔍〒034-8628
青森県十和田市東二十三番町 35-1

No.2（1） 13

ImmunoTox Letter
第 23 回日本免疫毒性学会学術年会報告
森本 泰夫
産業医科大学

Identification」と題したタイトルで、吸入性ナノ粒子の免疫毒性モデル、有害性特定のアプローチなどを講演しました。カ
ーボンナノチューブや金属ナノ粒子を用いた吸入ばく露試験

皆様、このたびは、台風の直撃にもかかわらず、第 23 回日
本免疫毒性学会学術年会のご参加いただきありがとうございや気管内注入試験を行い、肺や脾臓における免疫毒性の報
告を自験例を中心に講演しました。

ました。無事、成功裏に終了し、皆様のご協力 心から御礼

教育講演に関しては、産業医科大学第 1 内科 齋藤和義

申し上げます。簡単に報告させていただきます。平成 28 年 9先生から「膠原病における免疫抑制剤の副作用（易感染性・

月 5 日（月）から 7 日（水）にかけて北九州市の国際会議場で腫瘍形成）とその機序」、産業医科大学呼吸器内科 矢寺和

開催しました。なお、過去 22 回開催されておりますが、今回博先生から「薬剤性肺障害とその機序」について実臨床でのが初めての九州開催でした。学術年会のテーマは、“社会に課題などを中心に、産業医科大学成人老年看護学 佐藤実

実践する免疫毒性学”としました。従来のテーマのように新た先生から「アジュバンドによる自己免疫」について動物モデル

な研究分野の開拓とは異なり、実社会での有用性に根差しや臨床報告など講演されました。
試験法ワークショップに関しては、あすか製薬株式会社のたテーマを選びました。
まず、年会に先立って 9 月 5 日に市民公開講座を行うこと

久田茂先生のご尽力で「有害性転帰経路（AOP）と免疫毒を企画しました。公開講座のテーマは、低炭素社会の実現に性」を企画し、国立医薬品食品衛生研究所の小島肇先生、向けた試みとして、「工業用ナノ材料の有害性評価手法の開東北大学皮膚科学分野の木村裕先生、第一三共株式会社

発」としました。これは、経済産業省のプロジェクトとして行わの伊藤志保先生、アステラス製薬株式会社の串間清司先生れており、幅広い特性により様々な用途に使用されることがから AOP の概念、事例、作成の留意点などの講演をし、AOP期待されている工業用ナノ材料の有害性評価として比較的を免疫毒性の視点でどのように展開するかを示していただき

簡易に行えるスクリーニング検査手法として気管内注入法がました。

有用であることを報告しました。この試験法は、社会において学会賞は、残留農薬研究所 試験事業部の小坂忠司先生が受賞し、「農薬の免疫毒性作用」というタイトルで講演し実践性を有する試験であることが示唆されました。
また、シンポジウムのテーマも本学会テーマに即した、「社ました。有機塩素系やリン酸系農薬が、次世代への影響を及

会還元や社会実践を目指した微細粒子の生体影響評価等

ぼすこと、呼吸器アレルギーモデルやアトピー性皮膚炎モデの研究」としました。医薬基盤・健康・栄養研究所の水口賢司

ルを介してアレルギー反応の増悪化をみいだし、農薬の様々先生から「データベース、バイオインフォマティクスから呼吸な免疫への影響が示唆されました。奨励賞は、北海道立衛器疾患へ」、川崎医科大学の西村泰光先生から「アスベスト

生研究所生活科学部の小島弘幸先生が受賞し、「環境化学曝露と悪性中皮腫に関わる免疫学的特徴の解析とスクリーニ

物質による核内受容体を介した免疫毒性作用」というタイトル

ングデバイスの開発」、大阪大学の黒田悦史先生から「微細で、IL-17 の制御に係わる核内受容体の関与を講演しまし粒子による肺の炎症とアレルギー」、産業医科大学の和泉弘た。

人先生から「工業用ナノ材料の有害性スクリーニング法の開口頭発表、ポスター発表も活発な質疑応答があり、大いに

発：気管内注入試験」と題したタイトルで講演し、これらの研盛り上がりました。口頭発表は、10 演題、学生・若手発表 2

究成果がどのように社会還元するか、または社会還元につな

演題、ポスター発表 14 演題でした。この学生・若手発表の 2

がるかも提示していただきました。

演題は、口頭とポスターの両方で発表し、学生・若手優秀発特別講演では、Burleson Research Technologies. Inc.の表賞の選考、それ以外の発表から年会賞を選考しました。年

Nanoparticles:

会賞は、産業医科大学医学部免疫学・寄生虫学の吉田安宏

Consequences of Exposure and Approaches for Hazard

先生、学生・若手優秀発表賞は、千葉大学大学院薬学研究

Dr.

VictorJ.

Johnsonが 「 Inhaled

Identification
No.2（2） 14

ImmunoTox Letter
院 生物製剤学研究室の薄田健史さん、藤森惣太さんが受賞しました。
今回は会員からのリクエストであった市民公開講座の開催と無料の無線 LAN（FreeWi-Fi）の使用にも対応させていただ
きました。特に無料の無線 LAN に関して、ご利用している会員が多く見受けられました。

第 5 回（2015 年度）日本免疫毒性学会奨励賞
免疫毒性研究とアジュバント研究のクロストーク黒田 悦史
大阪大学免疫学フロンティア研究センター
ワクチン学研究室

懇親会は、6 日夜に近隣のレストランで行い、洋食を中心にバラエティのある料理を用意させていただきました。会場では、会話も弾み、楽しんでいただけたのではないかと感じております。また、学会参加者の懇親会参加率が非常に高いことにも驚きました。
黒田 悦史先生

3 日間、特に大きな問題も生じること無く、比較的順調に進行したことに安堵しております。これも、関連する法人、企業、個

この度、第 5 回日本免疫毒性学会奨励賞を賜り、大変光

人の方々、そしてご参加いただいた多くの方々のご支援・ご栄に存じます。学会員としてまだ年月が浅い私を推薦してく協力の賜であります。この紙面をかりてお借りして、厚く御礼

ださり、選考していただきました諸先生方ならびに関係各位申し上げます。さらに、今後の学会及び学術年会の進展を祈に心より御礼申し上げます。

念して私のお礼の言葉に代えさせて頂き ます。

私が免疫毒性学会に初めて参加させていただきましたのは、第 17 回（2010 年）の藤巻先生が年会長をお務めになられた学術大会からであります。初めて参加でありましたが、私にとっては免疫毒性学会の奥深さを感じた刺激的な大会でありました。またその大会にて、初めての参加にもかかわらず
年会長賞を賜りました。その時の発表テーマが「粒子状化学
物質による自然免疫の活性化と II 型免疫反応の誘導」でした。今回の受賞は「粒子状物質により誘導される免疫応答とその誘導機構の解析 –免疫毒性とアジュバント活性−」という内容であり、お気付きのとおり私は微細粒子による免疫応答に深い興味を持ち研究を行っております。私が粒子に対する免疫応答に興味を持ったきっかけが、2008 年に相次いで報告されたアルミニウム塩（アラム）、シリカ、アスベストなどの微細粒子（繊維）状物質によるインフラマソームの活性化の論文です。これまで多くの報告から微細粒子が免疫系を活性化することが明らかにされていましたが、そのメカニズムについては不明な点が多く残されていました。私たちは普段は意識していませんが、微細粒子に対する免疫応答は我々の生活に密に関係しております。免疫毒性の分野では、大気中のディーゼル粒子、黄砂、PM2.5 などが免疫系を刺激し、アレルギ
ー性炎症を誘導することが示唆されております。またシリカや
No.2（3） 15

ImmunoTox Letter
アスベストが肺の免疫系を介して炎症を惹起することも知られ教授にお声をかけていただき、2012 年から現在の大阪大学ております。さらに医薬品の分野でも微細粒子は注目されて免疫学フロンティア研究センターにて、微細粒子と細胞死、さおり、古くからワクチンアジュバントとして使用されているアラ

らにはアジュバント活性やアレルギー性炎症のメカニズムをよムは免疫系を刺激し抗体産生を促進することが明らかにされり深く研究できるようになりました。

ております。最近では微細粒子を用いた DDS 技術による免大阪大学に異動して、次に私が行ったことは投与経路の疫応答の誘導も注目されています。このように我々の身近に検討でした。免疫学においてはアジュバント研究の多くは、ア存在するにもかかわらず、微細粒子による免疫学的メカニズ

ジュバント（微細粒子）を皮下や腹腔内へ投与する実験系でムが明らかにされていないことは驚きであります。またアラムありました。しかしながら免疫毒性学会の先生方と交流を深に関しては医療の分野で長い間使われていながら、免疫学

めるうちに、微細粒子の気管や肺への影響を見る必要がある

者 で す ら そ の メ カ ニ ズ ム を 理 解 し て いな いと い う こ と で 、ことがわかりました。またワクチンアジュバントの分野でも経鼻「Immunologist’s Dirty Little Secret」と揶揄されております。

のワクチンが注目されていたこともあり、微細粒子の肺への影

このような背景から私は微細粒子による免疫活性化メカニズ

響を中心に解析を始めました。当初は皮下や腹腔と似たようムを明らかにしてみたいと考えるようになりました。

なメカニズムで免疫応答が惹起されると浅はかに考えており微細粒子の研究を始めた時私は産業医科大学に在籍してました。しかしながら皮下や腹腔内投与では免疫応答が低下おり、そこでナノ粒子の生体影響を研究しておられる森本泰するような遺伝子欠損マウスを用いても肺での免疫応答には

夫教授と共同研究を行いご指導いただきました。これまでの全く影響せず、一方で皮下や腹腔内投与では影響が見られ報告から、アラムやシリカのような微細粒子をマクロファージ

ないような遺伝子欠損マウスで肺の免疫応答が低下するといや樹状細胞が貪食することによりインフラマソームが活性化さう結果が得られました。もちろん組織によって生体応答が異れ、IL-1βが誘導されることが報告されておりましたので、私なることは当然ではありますが、ここまで大きく違うことに驚くとも微細粒子を貪食するマクロファージに注目し、研究を行いともに、気管や肺の免疫に非常に興味が出てきました。さらなました。微細粒子によってマクロファージから誘導される液性

る解析の結果、肺胞マクロファージが他の組織マクロファージ

因子に関して調べておりましたところ、インフラマソームの活と機能が大きく異なること、微細粒子を貪食した肺胞マクロフ性化とは異なる経路で脂質メディエーターの一つであるプロ

ァ ー ジ 由 来 の 死 細 胞 因 子 （ Damage-Associated Molecular

スタグランジン E2（PGE2）が誘導されることを見出しました。さPatterns: DAMPs）が肺において三次リンパ節の一種である

らに、アラムやシリカをアジュバントとして抗原とともにマウスに誘 導 性 気 管 支 関 連 リ ン パ 組 織 （ inducible

投与（免疫）すると抗原特異的な IgE が誘導されてきますが、

Bronchus-Associated Lymphoid Tissue: iBALT）を誘導する

PGE2 合成酵素である PTGES 欠損マウスでは抗原特異的なことなどを認め、微細粒子の肺への投与により、非常にユニ

IgE の低下が認められました。この結果から微細粒子によるークな肺特異的な免疫応答が誘導されることが明らかになり

IgE の誘導には PGE2 が関与すると考えられました。さらに共ました。このように、微細粒子に対する肺での免疫応答が他

同研究を行っていた大阪大学の石井健教授のグループからの組織と大きく異なることがわかりましたが、やはり免疫応答

アラムにより一過的に細胞死が引き起こされること、さらに細のトリガーは細胞死であり、細胞死を誘導しない粒子を投与

胞死によって遊離した DNA がアジュバント活性に重要である

しても肺での免疫応答は認められませんでした。

ことが報告されました。その後我々も微細粒子と PGE2 産生に同時期に私たちは新規のワクチンアジュバント候補物質と細胞死が関するかを検討したところ、PGE2 が細胞死によってしてβシクロデキストリンを見出しました。このアジュバントは誘導されることを認めました。これらの結果は微細粒子による皮下投与や経鼻投与においてインフルエンザワクチンのアジ

免疫活性化の根本に細胞死が関与していることを示唆していュバントとして有効であることを認めています。そのメカニズムます。幸運にも、共同研究を行っていた大阪大学の石井健を解析したところ、アラムと同様に接種部位に一過的な細教授
No.2（4） 16

ImmunoTox Letter
胞死を誘導し DAMPs を遊離することがアジュバント活性に重第 23 回学術年会年会賞

要であることを認めております。βシクロデキストリンはすでにLPS を多く含む都市由来 PM10 による免疫反応の抑制医薬品の添加物として用いられており、安全性の高い物質であると考えられております。しかしながらアジュバント活性には

吉田 安宏 1、宋 媛 1、市瀬 孝道 2

一過的な細胞傷害活性が必要とされます。医薬品という観点

1
2から細胞傷害活性は忌み嫌われる傾向があると思われます

産業医科大学・医・免疫学・寄生虫学
大分県立看護科学大学

が、アラムやβシクロデキストリンのような DAMPs 誘導型のア
ジュバント（私たちは DAMPing アジュバントと呼んでいます）
に関しては細胞傷害が重要であり、現在ではアジュバント研
究の一つの大きな流れを作っています。これまで悪いものとされていた細胞死や細胞傷害活性をアジュバント開発という観点から見つめ直し、掘り起こすことにより、アジュバント開発

吉田 安宏先生の新展開が見られるかもしれません。
最後になりますが、微細粒子の研究においてご指導いただ【背景・目的】きました産業医科大学の森本泰夫先生、現在の研究室にお環境汚染物質による大気汚染が、日本をはじめ多くのアジいてアジュバント研究のノウハウをご指導いただきました石井アの国で深刻化している。中国では大都市部の死亡原因に

健先生、ならびに免疫毒性学会の諸先生方に御礼申し上げ

おける 32%が PM2.5 に関連していると報告されている（Fang

ますとともに、引き続きご指導ご鞭撻を賜りますよう、宜しくおD., et al. Sci Total Environ. 2016;569-570:1545）。私どもの願い申し上げます。

グループは、越境汚染物質である黄砂（PM10 の一つ）や
PM2.5 の生体影響について動物モデルを解析し、アレルゲ
ン誘導の肺における好酸球増加を増悪させること(Ren Y. et
al, Allergy Asthma Clin Immunol. 2014;10:30)、またその増悪機 構 に は 自 然 免 疫 に 重 要 な 細 胞 表 面 上 受 容 体 TLR2
/TLR4 が 関 与 し て い る こ と (He M et al., Toxicol Appl
Pharmacol. 2016;296:61)などを報告してきた。しかしながら肺以外の臓器への影響も報告されており(Robert D. B et al.
Circulation. 2010;121:2331)、実際、私どものグループでも脾臓において黄砂が転写因子 NF-κB の活性化を介した亜急性の免疫反応修飾を引き起こし、それは肺の炎症とは時間的 に 遅 延 し た 時 点 で 起 こ る こ と (Song Y. et al, Environ
Toxicol. 2015;30:549)を証明している。こういった背景の下、
このような汚染物質誘導による炎症反応において黄砂に含まれる粒子成分とそれに付着している物質が、どのような役割分担をしているのか、という課題に直面した。そこで本研究課題である粒子と付着成分の代表として LPS に着目し、それぞれの作用を検討した。

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ImmunoTox Letter【方法】[細胞内イベントへの影響評価] 細胞内イベントへの影響評[生体影響評価] マウス（雄、6 週齢）は BALB/c マウスを使価として細胞内タンパク質である転写因子に着目し、転写因用し、黄砂（PM10）100 μg を生理食塩水に懸濁したものを子、特に NF-κB（構成成分の一つである p65 に着目）の活100 μL、２週間おきに 4 回気管内投与し、最終投与 24 時間性化をウエスタンブロット法により評価した。粒子を気管内投後にマウスから脾臓細胞を調製した。投与する粒子は２種類与したマウスから調製した脾臓細胞の細胞溶解液を調製し、で、一つは 2011 年５月に北九州市に飛来した黄砂（ASD）

試料とした。

を、もう一つは 2013 年 11 月に中国瀋陽市で収集した都市由【結果】

来 PM10（urPM10）を準備した。また urPM10 を 360 度 30 分

1）日本飛来黄砂（ASD）と都市由来 PM10（urPM10）に含まれ加 熱 し 、 付 着物 を 取 り除 いた H-PM10 を準 備 し た 。 Cell

る LPS 量はそれぞれ 0.0614 ng/mg PM と 0.3260 ng/mg PM

viability assay system により細胞内 ATP レベル量を測定するであり、都市部由来に多くの LPS が含まれていた。2) ASD をことで増殖反応を評価した。また脾臓細胞を in vitro で培養投与されたマウス由来脾臓細胞は、対照群に比べマし、細胞分裂誘起物質である LPS、ConA 刺激に対する反応

イトジェン（ConA、LPS）に対する反応性が亢進していた。一

性を調べた。その際、影響を及ぼしている成分の探索のた方、urPM10 を投与したマウス由来脾臓細胞のマイトジェンにめ、LPS の中和物質であるポリミキシン B の同時投与を行い対する反応は、対照群に比べ有意に低いものであった（図１

同様な評価を行った。

A）。

No.2（6） 18

ImmunoTox Letter
付着成分を加熱により取り除いた H-PM10 は ASD で観察さが絶対値として高いのか低いのかは議論の余地があるのだ

れ た よ う な 細 胞 活 性 化 が 認 めら れ （ 図 １ B ） 、 サイ ト カ イ ンが）により、粒子誘導の活性化を抑制させたことは、IL-10 の（IL-2、TNF-α、MDC）産生の亢進も認められた（図１C）。

産生上昇を伴ったエンドトキシントレランスの様相を想起させ

3) 菌体成分 LPS を中和するポリミキシン B を同時投与したる。LPS の関与の観点から、これらのイベントが MyD88 依存場合、urPM10 の細胞抑制効果を回復する傾向が認められ的であったことは当然の結果であったと言えるかもしれない。

た。 4) H-PM10 により誘導される細胞活性化能は微量の

この後に続けて行っていた我々の研究で、さらに黄砂の活性

LPS の同時投与により抑制され（図２A）、抑制性サイトカイン

化機構は TLR4-MyD88 システムであることが証明されたである IL-10 の産生も認められた。5) ポリミキシン B と（Song et al., FEBS letters, in press）。特に CD4 陽性細胞で

urPM10 を同時投与されたマウスから調製した脾臓細胞でこの現象が顕著であったことを考え合わせると、粒子の貪食は、活性化 NF-κB (p65)のレベル、およびそのキナーゼであから引き起こされる一連のイベントが獲得免疫系に最終的にる IKKαの活性化レベルが充進していた（図２B）。6) p65 のは繋がっていることは非常に興味深い。今後は他の付着物

上流分子 MyD88 の KO マウスを用いた同様の実験では、

質の影響と粒子サイズの違いによる炎症誘導機構の差異に

urPM10 による抑制効果は認められなかった。以上から、都市関して更なる研鑽を重ねていきたい。

部で収集された LPS を多く含む PM10 による抑制効果には【謝辞】

LPS の関与が疑われ、NF-κB パスウェイはその効果と連動

この度は、第 23 回日本免疫毒性学会学術年会においてしていることが示唆された。

過分な年会賞を賜り、大変光栄に思っております。本年会で【考察】

は‘社会貢献’というキーワードを掲げ私も担当大学としてそ本研究では、環境汚染物質の免疫系への影響を粒子とそのの趣旨を鑑みながら、発表課題を選定いたしました。私共の付着成分の一つである LPS に分けて、リンパ器官である脾臓

研究室では、近年社会問題となっていた越境汚染物質の生でのイベントに着目し解析した。収集地の違う粒子による細体影響を動物モデルを用い、特に汚染物質が肺に取り込ま

胞影響の違いも示唆されており、まずは LPS 含量の違うれた以降のイベントに興味を持ち、解析してきました。得られPM10 を準備し比較検討を行った。飛来黄砂に関しては LPS

た結果は環境基準設定に多いに参考になる資料として、社を含むものの、その量は非常に微量である。しかしながら生会貢献できたのではないか、と自負しています。その中で、ア体内に侵入してきた際、その量は自然免疫を活性化させるにカデミアにおいてもこの取り組みが評価されたことは研究者と足るものなのかもしれないことが示唆された（これは in vitro でしても非常に喜ばしく、年会長の森本泰夫先生をはじめ選考

その量的背景を再現するのは中々難しいものと思われる）。

委員の先生方に心より感謝申し上げます。まだまだ未解明部

予想されたように、H-PM では飛来黄砂と同様な脾臓細胞の分が多々残されている環境汚染物質の生体影響に関して、活性化能を回復していた。このことは、粒子自身も生体に対研究室員一同がこの賞に恥じない今後の研究生活を約束しし影響を持ち、それは抑制的ではなく活性化させる傾向があてくれるものと思っております。末筆ではございますが、免疫ることが示唆された。しかしながらこれは PM10 で観察された毒性学研究および日本免疫毒性学会のますますの発展をおイベントで、PM2.5 の粒子自身では抑制効果を脾臓細胞にも祈りしつつ、我々も貢献できるよう努力していく所存でございたらすことを我々は観察している。すなわち、粒子サイズの違ますので、今後とも本学会の先生方のご指導ご鞭撻を賜りまいにより生体へのバランスをプラスとマイナスに振り分ける可

すようお願い申し上げます。

能性があることが考えられるわけである。黄砂が PM2.5 に比べ、喘息アレルギーを増悪させること、加えて PM2.5 は慢性炎症に伴う免疫抑制を誘導する場合もあることを鑑みると、不思議な現象ではないようだ。LPS の同時投与（今回の投与量No.2（7） 19

ImmunoTox Letter
第 23 回学術年会学生・若手優秀発表賞

年足らずの新参者でしたので、今回が初めての免疫関連のキメラ型 HLA 遺伝子導入マウスを用いた免疫の関与する特異体質薬物毒性評価モデルの構築

学術学会への参加となりました。どのような質疑応答が展開さ

薄田 健史

究の進行に関する方向性を見定めることができる有意義な機千葉大学大学院 薬学研究院 生物薬剤学研究室会となりました。恐縮ながらもこのような栄えある賞をいただく

れるか全く予想できずに戸惑うことがばかりでしたが、有益な御指導・御助言を多くの先生方より賜ることができ、今後の研ことができ、益々研鑽しなければと身が引き締まる思いです。
それでは拙文ながら、受賞を頂きました研究内容に関しましてご紹介させていただきます。

本研究は、マウス体内で機能しうるヒト白血球抗原 (HLA)
遺伝子を導入したマウス（キメラ型 HLA トランスジェニック(Tg)
薄田 健史さんマウス）を作出し、薬物と HLA 遺伝子との相互作用により免疫応答が惹起され発症する特異体質薬物毒性を評価可能

この度、第 23 回日本免疫毒性学会学術年会において、栄か検証したものです。これまで、特異体質薬物毒性の発症リ誉ある若手優秀賞に選出されたこと、大変光栄に存じます。

スクに HLA 多型が関係することはゲノムワイド関連解析より示選考委員の先生方に、心より御礼を申し上げます。

唆されていましたが、特定の薬物・組織で毒性が発現する詳私が所属している生物薬剤学研究室では、医薬品やその細なメカニズムについては未だ不明でありました。そこで本研候補化合物の体内動態と有害作用について研究をしており究では、抗 HIV 薬であるアバカビルと HLA-B*57:01 遺伝子

ます。研究室配属当初は、薬物性肝障害のメカニズム解明との相互作用により免疫応答が惹起され発症する「特異体質やスクリーニング法に関する研究がトレンドとなっており、「免性のアバカビル過敏症（皮膚毒性）」に焦点を当て、作出した

疫」というワードは一言たりも出てこないような雰囲気だったと

Tg マウスにアバカビルを曝露した後の免疫応答を評価しまし記憶しております。私自身も、学部 3 年次から修士時代を経た。その結果、HLA-B*57:01 遺伝子を導入した Tg マウスにて博士課程 1 年次までは「薬物性肝障害リスク薬物を網羅的おいて、アバカビルの曝露によってリンパ節重量の増加やリに判定可能な in vitro 毒性試験系の構築」という研究課題がンパ球の増殖といった免疫反応の亢進が認められました。そ

与えられ、薬物とトランスポーターの相互作用に伴う毒性発の一方で、リッターメイト野生型マウスや HLA-B*57:03 遺伝症メカニズムの解明や、より高精度な毒性発症予測法の構築

子（2 アミノ酸のみ異なる陰性対照）を導入した Tg マウスにおに関する研究に従事しておりました。そんな中、転機が訪れ

いては、アバカビルの曝露による免疫応答は認められません

たのが博士課程 2 年次に進級する年の 1 月 1 週目、上述のでした。これらの結果から、特異体質薬物毒性の評価におい研究内容が国際学術誌にアクセプトされ、「さて次は何をしよて、本研究で用いたキメラ型 HLA 導入 Tg マウスが有用となるう？」と思案していた時期でした。私は本学博士課程教育リー

ことが示唆されました。

ディングプログラムである「免疫システム調節治療学推進リー

本評価モデルマウスは、特異体質薬物毒性を前向きに再ダー養成プログラム」に博士課程 1 年次から所属していた縁

現できることから、詳細な発症メカニズムの解明に応用可能ともあって、「免疫」が関与する特異体質薬物毒性について興なることが特徴です。さらに、導入したキメラ型 HLA タンパク

味が湧いておりました。そして幸運なことに、今回発表した研質がマウス全身に発現していると示唆されたことから、組織特究課題に従事する機会をいただくことができました。

異的な毒性発現の原因の究明にも繋がりうると期待していま

上記の経緯の通り、免疫学に足を踏み入れてからまだ 1

す。HLA の関与する特異体質毒性に関する研究は端緒につNo.2（8） 20

ImmunoTox Letter
いたばかりでありますが、本研究が種々の HLA 多型分子にないのが現状です。私は、評価系が確立されない理由としおける特異体質毒性評価に応用する上での試金石となれるて、この種の毒性の詳細なメカニズムが不明である点が挙げ

よう、今後もより一層研究に励みたいと思います。

られると考えました。
「特定多型 HLA を発現した抗原提示細胞と T 細胞を原因

最後に本研究を遂行するにあたり、終始御懇切なる御指

薬物存在下で共培養すると、薬物抗原特異的な T 細胞応答

導・御鞭撻賜りました当研究室の伊藤晃成 教授、青木重樹が生じる」という現象は過去に多く示されており、これが毒性助教、ならびに御協力いただいた藤森惣大さん、向後晃太の直接的なメカニズムとなります。しかし、この応答は全身性郎さんをはじめとした学生の皆様にこの場を借りて深く御礼で生じうる一方、特定多型 HLA の関与する特異体質薬物毒申し上げます。

性は組織特異的に発症することが知られております。そこで
私は、「発症組織における特異的な原因薬物への応答が、組織特異的な T 細胞応答ひいては組織特異的な毒性を生じ

第 23 回学術年会学生・若手優秀発表賞

させる」という仮説の元、研究を進めることといたしました。

HLA 遺伝子導入マウス由来ケラチノサイトを用いた特異体質薬物毒性メカニズムの解析

私が研究対象とする HLA-B*57:01 多型がリスク因子となる
アバカビル薬剤性過敏症は皮膚症状が多く報告されており藤森 惣太ます。皮膚表皮の組織構成細胞であるケラチノサイトは免疫

千葉大学大学院 薬学研究院 生物薬剤学研究室

応答能が高く、皮膚免疫に強く関与することから、このケラチ
ノサイトのアバカビルに対する応答が皮膚選択的な T 細胞応
答を惹起するのではないか、という仮説を立てました。その上で、当研究室で作製した HLA-B*57:01 トランスジェニックマ
ウス(B*57:01-Tg)及び、アバカビル抗原を提示しない多型である HLA-B*57:03 トランスジェニックマウス(B*57:03-Tg)由来

藤森 惣太さん

この度、第 23 回日本免疫毒性学会学術大会において学のケラチノサイトを初代培養し、アバカビルに対する免疫応答を評価しました。

生若手優秀賞を賜り、誠に有難うございます。審査委員の先アバカビルの曝露により B*57:01-Tg 由来ケラチノサイト

生方に心より御礼申し上げますと共に、日頃よりご指導いた(B*57:01 KC)特異的に活性化マーカー(KRT16)及び、IFN-

だいております諸先生方にこの場をお借りして御礼申し上げ

γ, IL-1β等のサイトカインの mRNA の発現上昇が確認されます。拙文ではございますが、受賞を頂きました研究の内容

ま し た 。 ま た 、 こ の 細 胞 に お い て HLA 多 型 特 異 的 にに関しましてご紹介させていただきます。

HLA-B*57:01 の細胞膜発現量の上昇が確認され、さらに、この応答はアバカビルと同様の逆転写阻害型の抗 HIV 薬のジ

医薬品の安全性を考えるうえで、販売後に発覚することのドブジンにおいては確認されなかったことから、B*57:01 KC

多い特異体質薬物毒性の前臨床における予測は、医薬品のにおいて HLA 多型特異的な免疫応答が生じたことが示唆さ研究開発における重要な課題であるといえます。近年ゲノムれました。

ワイド解析の発達により、ある種の特異体質薬物毒性の発症

これらの応答が組織内で生じた場合、樹状細胞を中心ととヒト白血球抗原(HLA)の遺伝子多型との関連が数多く報告

する免疫担当細胞の機能を亢進させる可能性は大いにあるされ、先達の先生方の研究により HLA による薬物抗原の提と考えられます。今後は in vitro におけるケラチノサイトと樹状示が毒性発症の原因となることが解明されました。しかし、こ細胞の共培養実験や in vivo 実験を通し、これら細胞のインタの種の毒性の発症リスクを適切に評価できる系は存在していラクションを解析する予定であります。また、組織構成細胞のNo.2（9） 21

ImmunoTox Letter
薬物に対する HLA 多型特異的な免疫応答は、過去にあまり

国立医薬品食品衛生研究所は、本学会の設立や医薬品の例のない現象であるため、メカニズムを明らかにしたいと考え

免疫毒性試験に関する ICH S8 ガイドライン策定に関わられております。

た旧機能生化学部の澤田純一先生や手島玲子先生がご活躍されていた研究所であり、現在も、本学会の理事を務めて私は修士課程一年の身であり、本学会での発表が初めての口頭発表でありましたが、このような身に余る賞を賜り、大変光栄に存じます。今回の受賞を機に、医薬品の安全な使用に少しでも貢献できるよう、より一層精進し研究に取り込んでゆく所存でございます。最後になりますが、本研究に取り組
むにあたり、ご指導頂いております、伊藤晃成教授、関根秀
一講師、青木重樹助教、そして本学会においてご指導いた
だいた諸先生方に厚く御礼を申しあげると共に、今後ともご指導・ご鞭撻を賜りますよう何卒よろしくお願い申し上げます。

おられる斎藤嘉朗先生、評議員の中村亮介先生らにより、免疫毒性に関する研究が精力的に行われている環境にあります。私が所属しております生物薬品部は、これまで品質に関する研究が中心でしたが、最近は、ヒト細胞を用いた in vitro
評価系の開発や、生体試料中薬物濃度分析法、免疫原性評価法に関する研究等、非臨床・臨床に関する課題にも研究対象を広げております。
バイオ医薬品は、有効成分が高分子であるため、免疫原性がしばしば問題となります。欧州では、過去に、遺伝子組換
えエリスロポエチンの製剤処方変更に際して中和抗体出現による重篤な有害事象の発生を経験していること、米国で新評議員より評議員就任にあたって

は、規制当局やアカデミアにおいて、タンパク質凝集体と免疫原性に関する関心が高いこと等から、バイオ医薬品の免疫石井 明子

原性に関する研究が盛んです。EMA 及び FDA では、免疫原

国立医薬品食品衛生研究所 生物薬品部

性評価に関するガイドライン／ガイダンスの策定・改訂がなされており、最新の科学的知見を取り入れた規制環境整備が進んでいます。一方、日本では、国内企業により開発された
バイオ医薬品が少ないことや、幸いにも免疫原性が大きくクローズアップされるような有害事象を経験していないこともあり、
バイオ医薬品の免疫原性に関する研究や規制環境整備は、
石井 明子先生

欧米に比べて遅れている状況にあると思います。
バイオ医薬品の開発、承認審査、適正使用に際して、免疫

このたび日本免疫毒性学会の評議員を拝命いたしました
国立医薬品食品衛生研究所の石井明子と申します。ご推薦頂きました先生方、ならびにご承認頂きました理事及び会員の先生方に厚く御礼申し上げますとともに、本紙面をお借り致しまして、皆様にご挨拶申し上げます。

イオ医薬品開発が推進されている近年の状況からも、抗薬物
抗体評価法の開発と標準化、ならびに免疫原性に関わる品
質及び臨床的リスク因子の特定とリスク低減策の構築について、より一層、注力していく必要があると考えております。ま私は、京都大学大学院薬学研究科修士課程を修了後、3年間の製薬企業での勤務を経て、国立医薬品食品衛生研究所に入所いたしました。国立医薬品食品衛生研究所では、生物薬品部に所属し、一貫してバイオ医薬品の品質・安全性評価に関する研究を行っており、現在は、バイオ医薬品の中でも抗体医薬品を主な研究対象としております。

原性の予測・評価は、極めて重要な課題であり、日本でのバ

た、サイトカイン放出症候群等の有害事象の機序解明や評価系構築も重要な課題です。これらの研究と学術年会での発表を通じた情報発信を中心に、微力ではございますが、本学会の発展に少しでも貢献できるよう努力して参りますので、今後ともご指導ご鞭撻賜りますよう、よろしくお願い申し上げます。

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ImmunoTox Letter
新評議員より評議員就任にあたって

免疫毒性学に直接的に関わる研究業績が乏しく、まだまだ浅学の身である私にとって、非常にハードルの高い課題です

坂入 鉄也

が、研究分野として裾野が広く、興味が尽きない領域ですの

田辺三菱製薬株式会社
創薬本部 安全性研究所

で、取り組み甲斐があるとも感じております。これからも自分の専門性を生かしつつ、免疫毒性分野の研究の深化に努め、微力ながら、本学会並びに免疫毒性学の発展に尽力をいたす所存でございます。今後ともご指導ご鞭撻のほどよろしくお願い申し上げます。

坂入 鉄也先生

このたび日本免疫毒性学会の評議員を拝命いたしました

試験法ワークショップ：
有害性転帰経路（AOP）と免疫毒性

田辺三菱製薬株式会社の坂入鉄也と申します。様々な方面
試験法委員会でご活躍されている先生方が集う本学会で評議員を務めさせていただくことは、非常に光栄であり、また、身の引き締まる思いがいたします。拝命に当たり、ご推薦、ご承認を賜りま【はじめに】

した先生方に厚く御礼申し上げるとともに、本紙面をお借りし

JaCVAM（日本動物実験代替法評価センター）からの依頼をて皆様にご挨拶させていただきたく存じます。

受けて、試験法委員会内に企業所属の若手学会員を中心と私は、学生時代、東京大学農学部の獣医病理学研究室におして AOP（Adverse Outcome Pathway）検討小委員会を設け世話になって以来、現在に至るまで、病理学を基礎とした研て、免疫毒性の AOP を開発している。そこで、本年度の学術究に携わってまいりました。博士論文のテーマとして、マウス

年会における試験法ワークショップでは、AOP の概念及び免肝芽腫の生物学的特性とその由来に関する研究に取り組

疫毒性 AOP について紹介した。

み、病理学的、免疫組織化学的、分子生物学的手法を用いて、本腫瘍が未分化な細胞に由来する可能性を示してきまし【AOP の概念と OECD による AOP プロジェクト】

た。その一方で、勤務先では、非臨床安全性研究に関わる

小島肇先生（国立医薬品食品衛生研究所）によりご講演いた業務として、免疫毒性評価に携わる機会に恵まれ、免疫毒性

だいた。

試験の病理評価や試験責任者業務、免疫毒性評価プランの策定などを担当しながら現在に至っております。毒性試験に【AOP の概念】

おいて、病理検査は免疫系への影響を捉える入口であるとAOP（Adverse Outcome Pathway）は、日本語では有害性発同時に、免疫組織化学的手法と組み合わせることで、その標

現 経 路 と 呼 ば れ て お り 、 標 的 分 子 へ の 作 用 （ Molecular

的細胞や毒性発現機序を推定しうる重要なツールであり、免Initiating Event, MIE）から有害事象（Adverse Outcome, AO）

疫毒性評価とは切り離せないものですが、開発候補化合物の発現に至る経路を、生体の各階層レベルにおける Key

によって引き起こされる様々な病態を目の当たりにし、それだ

Event（KE）のつながりとして示したものである。KE は、現在のけでは明らかにできない部分が多いと痛感しております。免知見に基づき、分子レベル、細胞レベル、組織レベル、臓器疫毒性評価に携わる者として、飛躍的な発展をみせる免疫レベル、個体レベル、種レベル（環境毒性の場合）のそれぞ

学に関する知識を貪欲に蓄積し、それを基に免疫毒性研究

れの階層において重要な事象を抽出し、KE 間の関連性（KEを発展させる必要があると改めて認識しているところです。

relationship、KER：機序、確かさ、種差の有無を含む）や KEの測定法及びその妥当性に関する情報を付加したものであNo.2（11） 23

る。

ImmunoTox Letterの測定法及びその妥当性に関する情報を付加したものであジェクトが進行している。AOP の事例は、AOP Wikiる。

（https://aopwiki.org/wiki/index.php/Main_Page）を介して蓄化学物質は複数の毒性標的分子に作用することが多い。

積されており、2016 年 11 月現在で、167 の AOP が登録され加えて、一群の化学物質により誘発される有害事象に係るている。AOP 開発を通じて、有害事象に関する KE が明確化

AOP は関連する複数の MIE を含む AOP の集合となる。各々されることにより、これらのリスクを予測する新たな in silico、inの AOP に共通の KE が存在すれば、それ以降の経路は集約

chemico、in vitro 試験法の開発につながることが期待されされ、さらに別の AOP が共通の KE を介して結合してネットワる。さらに、得られた AOP による知見を総合して一般化するこークを形成するケースも想定される。

とにより、有害性リスク予測の総合的アプローチである IATA
（Integrated approaches to testing and assessment）を開発し、これらを行政的判断に利用することが OECD による AOP 開【OECD AOP プロジェクト】
OECD では、AOP の事例を集積してデータベースを構築

発の最終目的となっている。

し、最終的に行政判断に適用することを目的とした AOP プロ

図１ FKBP12-FK506 複合体形成による免疫抑制に関する AOP

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図２ IL-2 転写活性抑制を key event とする T 細胞分化異常誘導に関する AOP【免疫毒性 AOP】

写因子 NFAT の核内移行阻害によるサイトカイン（Th1 及びFKBP12-FK506 複合体形成による免疫抑制に関する AOP

Th2 タイプ）産生抑制を含む経路のみであり、 AO として

AOP 検討小委員会の成果として、同委員の伊藤志保先生
及び串間清司先生から紹介された。

GVHR の抑制、アトピー性皮膚炎の軽減、及び感染抵抗性
減弱（易感染性）が挙げられた（図１）。

AOP 検討小委員会では、免疫毒性（抑制）の AOP を作成

今後は、OECD による内部レビュー及び外部レビューを経するに当たり、作用機序の異なる数種の免疫抑制物質につて、本 AOP 事例を更新・確定するとともに、今回の経験に基いて AOP 事例を作成し、これらを総合して免疫抑制に関する

づいて、他の機序による免疫抑制の AOP 事例を作成してゆAOP や IATA を作成することとした。最初の AOP 事例として、

く。

カルシニューリン阻害剤である FK506（タクロリムス）が関わる

IL-2 転写活性抑制を key event とする T 細胞分化異常誘導

免疫抑制を選択し、有害性の有無を問わず免疫抑制事象をに関する AOPAO として調査した。具体的には、いくつかの新しい総説論文

木村 裕先生（東北大学大学院医学系研究科皮膚科学分から FK506 の免疫抑制に関する知見（事象）を網羅的に収集野）から、相場節也先生のグループにより、OECD AOP プロ

し、これらの事象から、各階層における KE を抽出して KER をジェクトに提案されている IL-2 転写活性抑制を KE とする T評価した。

細胞分化異常誘導に関する AOP についてご紹介いただいその結果、多くの免疫担当細胞に FK506 が関与する様々た。

な 事 象 が み ら れ た が 、 MIE （ FK506-binding protein12

本 AOP は、免疫毒性に関する in vitro 試験系である、（FKBP12）と FK506 の結合）から AO の誘発に至る連続したMulti-immuno Tox Assay（MITA）における、IL-2 転写因子活

経路は、T 細胞におけるカルシニューリン抑制とそれに続く転性測定の根拠とするために開発された。AOP 開発においてNo.2（13） 25

ImmunoTox Letter
編集後記

は 、 ① dimethyldithiocarbamate(DMDTC) 、 ② AG-012986（ pan-CDK inhibitor ） 、 ③ メ チ ル 水 銀 （ CH3HgCl ） , ④
Propanil(3,4-dichloropropionanilide)、及び⑤ 鉛について、

免疫毒性学会学術年会が初の九州進出を果たし、本号にIL-2 遺伝子発現に及ぼす影響を調査した。その結果、それもご寄稿いただいたように試験法委員会には AOP 検討小委

ぞれが IL-2 遺伝子の複数の転写因子を特異的に抑制する

員会、学会には将来構想委員会（仮称）が立ち会がり、ますことにより、IL-2 遺伝子発現を抑制して、各 T 細胞サブセット

ます日本免疫毒性学会の活動は活発になっていると感じま（Treg、Th1、Th2、Th17）に影響することや apoptosis を誘発

す。ImmunoTox Letter 編集委員会も小島 弘幸先生、坂入するとする AOP が提案された（図２）。

鉄也先生に加わっていただきまして、新しい体制でスタート
いたしました。先生方のお力をお借りして、より良い紙面を作終わりにっていきたいと思います。

AOP 検討小委員会は、さらに免疫抑制剤による AOP 事例のImmunoTox Letter に関する会員の皆様のご希望やご意見作成を継続し、最終的には免疫毒性の IATA を目標とし、企をお寄せいただけますようお願いいたします。2017 年もどうぞ

業に限らず幅広い分野の若い先生方を中心に実現したい。

よろしくお願いいたします。

AOP 作成に興味を持たれた学会員の方は是非ご一報いた（S・T 記）

だくようお願いする。

編集・発行：日本免疫毒性学会
編集発行責任者：吉田 貴彦
編集委員会：黒田 悦史、小島 弘幸、
坂入 鉄也、新藤 智子、
角田 正史、手島 玲子、
西村 泰光、野原 恵子、
姫野誠一郎
原稿送付先：shindo.t@fdsc.co.jp

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