田畑：アカメガシワ葉の抗酸化活性及び活性成分の解析とヒト効果試験

総説

アカメガシワ葉の抗酸化活性及び活性成分の解析とヒト効果試験
Evaluation of antioxidative properties of Mallotus japonicus
leaves and their components, and efficacy test in human

田畑

光正＊

日本人の死因上位を占める悪性新生物, 心疾患, 脳血管疾患の発症や生体の老化には, 生体酸化ストレスによる生体分子, 生体組織の酸化的障害, 酸化的修飾が深く関与していることが近年の研究により明らかになってきた. さらに, 健康志向食品市場及びスキンケア, ボディケア等の機能性化粧品市場が消費者意識を刺激し台頭したため, 生体酸化ストレスを中和, 無毒化する抗酸化活性を有する食品・成分に関する研究が盛んに行われている. 抗酸化活性を有する素材に関する報告は多数存在するが, 詳細な研究が進められている緑茶, 赤
ワインと比較して遜色ない, あるいはそれ以上の抗酸化活性を有する食品素材に関する報告はほとんどない.
そこで, 優れた抗酸化素材を探索した結果, アカメガシワ葉に高い抗酸化活性を見出した.
アカメガシワ ( Mallotus japonicus) は, トウダイグサ科 (Euphorbiaceae) の落葉高木であり, 日本の本州, 四国, 九州に広く自生している. 樹皮は健胃薬として胃酸過多, 胃潰瘍に用いられる他, 整腸作用にも利用されている. 日本薬局方 (第14改正) は樹皮エキスを収載し, 単離成分のベルゲニンを指標成分としている.
また, 種子については抗腫瘍活性, 抗ウイルス活性が報告されている. 一方, 葉は吹き出物に対する民間療法として用いられている程度で未利用資源となっているのが現状であり, 生理活性に関する学術的な報告は少な
い. 葉の抗酸化活性に関しても詳細に検証した報告はないため, 抗酸化活性成分の解析等, 未解明の点が多数存在する.
本総説では, アカメガシワ葉抗酸化活性の評価, 活性本体の単離, 同定及び抗酸化プロファイルについて詳述するとともに, ヒト摂取による効果試験について解説する.
一方, 死因については明治, 大正, 昭和初期にかけては

１. はじめに結核, 肺炎, 胃腸炎あるいはインフルエンザの大流行等の

国連開発計画(United Nations Development Programme,１)

感染症が主であったが, 昭和20年代後半以降は, 悪性新生

UNDP) の人間開発報告書2007/2008によると , 2005年

物, 心疾患, 脳血管疾患が主な死因に変化してきている.

時の出生平均余命, いわゆる平均寿命は2002年時と比較す

感染症に関しては, インフラの整備, 医療技術の進歩によると, 177カ国の調査でサハラ以南の南アフリカで30歳代り多くの感染症が致死に直結するものではなくなったこと,がなくなり (177位ザンビア40.5歳), 欧米では80歳代が増あるいは感染自体が抑制されたことによる. 逆に, 悪性新加している. また, 人口一人当たりGDPと平均寿命デー

生物, 心疾患, 脳血管疾患に関しては, 高齢化に伴い発症タより, 所得水準と平均寿命に高い相関があることが分か

確率が高まるが, 現在の医学は早期治療による治癒あるいる. 経済活動の格差は, 平均寿命に40年もの差を生じさせは症状改善, 身体機能回復技術向上等, 一定の進歩はあるているが, 同時に人類の平均寿命は延びていると考えられものの完全に制圧するまでには至っていない. 今後, 完全る. この中で日本は, 人口一人当たりGDPが世界17位で治癒に向けて医学の進歩が期待されるが, それと同時に疾ありながら, 平均寿命は男女計が82.3歳で１位, 男性が病しない, あるいは遺伝情報等により個々の食生活を含む

78.7歳で３位 (１位は, アイスランドの79.9歳), 女性が生活習慣を改善する, いわゆる未病時の対応が重要である

85.7歳で１位である. 人口１億人を超える国でありながら,と考えられる２). 世界を代表する長寿社会にあって, 単に

平均寿命が長いということは, 社会格差が少なく, 食生活,

寿命が長いだけでなく, 健康長寿であることが求められる.

医療体制の水準が高く, 平均的に維持されていることが要

健康長寿は, 国民の年齢構成が急速に上昇し, いわゆる高因の一つと考えられる. 厚生労働省の報告によると, 日本

齢化社会が現実のものとなり, 医療費の高騰が国家予算に人の平均寿命は1950年が男性58.0歳, 女性61.5歳, 1970年

大きな負担となっていることからも早急な実現が必要な課

が男性69.3歳, 女性74.7歳, 2000年が男性77.7歳, 女性84.6

題である.
このような状況の下, 日本では1980年代に世界に先駆け歳であるから, 日本は戦後の経済発展により所得水準向上
とともに, 平均寿命を延長させてきたといえる.

て食品の ｢栄養｣, ｢味覚｣ に続く第３次機能, いわゆる機＊能性食品の研究が展開されてきた. 現在ではアメリカ, ヨー

機能性食品産業化プロジェクトチーム―1―島根県産業技術センター研究報告第48号(2012)

ロッパをはじめ, 世界各国で食品成分の生理生体調節機能たものであり, 同共同研究で行った抗酸化活性, 抗アレルが研究され, 実用化, 産業化されている. 日本では平成３

ギー活性, 抗高血圧活性, 抗腫瘍活性等の素材の機能性評

年より特定保健用食品制度が誕生し, 認可された食品は医価結果から有望なものを選択して, 生理生体調節機能の正薬品でなくても生理生体に対する効果効能が表記できるこ

確な科学的根拠を付加させるため基礎検証を行っている.

ととなった. 本制度はこれまでに改正, 条件緩和がなされ本研究は, 課題素材のひとつであるアカメガシワ葉の抗酸ているが, 食品であるために誰でも容易に入手できること

化機能に着目し, 詳細な検証を行ったものである９-11).

から, 消費者を誤解や虚偽による事故等の不利益から保護

２. アカメガシワ葉の抗酸化活性するため, 安全性, 機能メカニズム解析等の高いハードルが課せられている. しかし, 特定保健用食品制度により認

抗酸化活性を有する素材をスクリーニングすることを目可された食品だけでなく, 生理生体調節機能が科学的に裏的とした評価試験により, アカメガシワ葉に最も強い抗酸付けられた安心安全な素材・商品であれば, 充分に商品価化活性を見出した３). さらに, 既存抗酸化素材 (商材) で値を見出すことができる. 具体的には, 機能性成分の特定,あり, 抗酸化活性に関する報告が多数存在する緑茶, ルイ

動物およびヒトでの効果試験データ, あるいは有機栽培に

ボスティー, 赤ワインとの比較を行った10). 総ポリフェノーよる差別化等が挙げられる. 実際, 健康志向食品市場は

ル濃度, 抗酸化活性, 総抽出成分量を表１にまとめた. 総

1990年代後半から急成長を遂げている. また, 単に健康志

ポリフェノール濃度はフォーリンチオカルトー法により測向というだけでなく, 体型, 美肌等, 外面的な生体調節機定し, 没食子酸相当量で示した. 抗酸化活性はDPPHラジ能にも需要は高まっているのが実情である. インターネッ

カル消去活性を評価し, トロロックス相当量で示した. 総ト販売の普及, 地産地消の考え方, 地方発の物語性, ニッ

ポリフェノール濃度は, アカメガシワ葉が最も高い値を示

チ的な需要等を考慮すれば, より魅力的な商品, 素材の提した. 総抽出成分量はアカメガシワ葉7.5±0.3mg/mL, 緑

供により地方の中小零細企業であっても, 販路のある大手

茶7.6±0.3mg/mL, ルイボスティー3.8±0.3mg/mLであっ企業と対等に競争が可能になると考えられる. よって, 地たのに対し, 赤ワインは32.5±4.7mg/mLであった. 赤ワ

方で機能性食品産業群を立ち上げるには生理生体調節機能インの総ポリフェノール濃度は他の試料と近い値であったの正確な科学的根拠に基づく (Evidence-Based) 評価がが, 総抽出成分量が他の4.3〜8.6倍であることから, 単位必須であり, スタートであると考えられる.

抽出成分量あたりの総ポリフェノール濃度は他の試料を大島根県は産業振興のため, 平成15年度より新産業創出プ

きく下回る結果となった. 抗酸化活性は, 総ポリフェノー

ロジェクトを立ち上げた. この中の一つの柱である健康食

ル濃度と高い相関を示し, アカメガシワ葉の抗酸化活性は品産業化プロジェクトは, ｢安心安全｣, そして ｢科学的根緑茶より高く, ルイボスティーと比較すると3.9倍, 赤ワ

拠｣ を担保した健康食品産業群の集積を目的に組織された.

インと比較すると2.2倍高かった. 各試料の総ポリフェノー

本プロジェクトは, 島根県の独自性を担保できる素材につル含量と抗酸化活性の相関関係から, 植物が原料である各

３-７)

, 商品開

素材の抗酸化活性はいずれもポリフェノールに起因するこ発及び販路開拓を行っている. 平成20年度より機能性食品とが示唆された. 抗酸化活性を有する素材に関しては多く

産業化プロジェクトに名称変更し, 既存素材の商品化, ブの報告が存在するが, 緑茶を上回る抗酸化活性が報告されラッシュアップ, そして継続的な商品開発システム構築

た例はほとんどないことから, アカメガシワ葉は天然抗酸(素材評価, 加工工程等技術支援, 販路, および流通構築

化素材としての利用価値が極めて高いと考えられた.

いて, 企業主導型, 県主導型により研究開発支援) を行っている. この中で, ｢山野草を用いた健康食

３. アカメガシワ葉抗酸化活性成分の単離及び同定品の開発｣ は県主導型課題の一つである. これは島根県が平成12年度から平成14年度まで県立試験研究機関連携推進

緑茶を上回るアカメガシワ葉抗酸化活性の由来物質を探事業として共同研究を行った, ｢薬草等栽培技術の確立と索するため, 活性成分の単離精製及び同定を行った. 主要

利用技術の開発｣ で得られた成果８)をもとにスタートさせ成分としてポリフェノールが強く示唆されたことから, ア

表１

各種素材の総ポリフェノール含量, 抗酸化活性, 総抽出成分量の比較―2―

田畑：アカメガシワ葉の抗酸化活性及び活性成分の解析とヒト効果試験

図１

アカメガシワ葉エキスをHPLCにより分画したフラクションのポリフェノール含量と抗酸化活性(a)各フラクションのポリフェノール含量と抗酸化活性, (b)供与した試料に対する各フラクションのポリフェノール含量と抗酸化活性の回収率

カメガシワ葉１㎎相当の熱水抽出液を, ODSカラムを用らかになった (図２, 図３). これらのことから, アカメ

いた分取クロマトグラフィーに供与し, ０〜50%アセトニ

ガシワ葉抗酸化成分としてルチンとエラグ酸を同定した.

トリルグラジエントにより溶出させ, ポリフェノール画分

また, エラグ酸が没食子酸の２量体であることから, 没食と抗酸化活性画分が一致するか否かを検討した. フラボノ子酸の標品を用いて同様に溶出パターンを比較したところ,

イドは植物由来ポリフェノールの代表でありフラボン及び溶出時間が一致するピークを見出し, これらは重ね打ちでフラボノールは340〜370nmに, フラバン, フラバノンはも単一ピークとなった (図４). アカメガシワ葉が没食子

270〜295nmに極大吸収波長を持つこと, また奥田らのア酸を含有するという報告はないが, ガロイル基をもつマロ

12,13)

を参考

チン酸, マロツシン酸を含有することが報告されているこにし, 254nm, 276nm, 370nmにおける吸光度を測定した.

とから, これらの結果はアカメガシワ葉が没食子酸を含有

その結果, 254nmと276nmのクロマトグラムはほぼ一致しすることを支持する実験結果と考えられた.

カメガシワ葉ポリフェノールに関する報告文献

たが, 370nmのクロマトグラムは吸光度が低く, ほとんどのピークが検出できなかったことから, クロマトグラフィーによる分離は254nmで検出することとした.
回収した27フラクションのポリフェノール濃度と抗酸化活性を測定したところ, 各フラクション別の両者の挙動は良く一致するとともに, 254nmにおける吸光度のピークフ
ラクション (フラクション№11) が最大のポリフェノール
含量と抗酸化活性を示した (図１). また, 供与した抗酸化活性に対して回収された27フラクションの抗酸化活性の総和が100%に近いことから, アカメガシワ葉抗酸化成分
は抗酸化活性画分に含まれるポリフェノールであると判断し, 次の段階としてこれらの成分を単離精製し, 同定することとした10).
奥田らは, アカメガシワ葉ポリフェノールとしてベルゲ
ニン, マロチン酸, マロツシン酸, コリラジン, ゲラニイ
ン, ルチン, エラグ酸を報告している12,13). このうち, 標品が入手可能なベルゲニン, ルチン, エラグ酸とアカメガ
シワ葉熱水抽出エキスのクロマトグラムを比較した結果,
ベルゲニンと溶出時間が同一のピークは検出できなかったが, 抗酸化活性画分にルチンとエラグ酸と一致するピークが検出された. 各標品とアカメガシワ葉熱水エキスを重ね打ちして溶出させるとピークは完全に一致し, さらに

図２

ルチンの同定LC-MS解析を行い得られたmassスペクトルの結果より,(a)熱水抽出液のHPLCクロマトグラム, (b)熱水抽出液と標品のm/z値がルチン及びエラグ酸の質量数と一致することが明

重ね打ちクロマトグラム, (c)ピーク成分のLC-MS解析結果―3―島根県産業技術センター研究報告第48号(2012)

図４

没食子酸の同定(a)熱水抽出液のHPLCクロマトグラム, (b)熱水抽出液と標品の重ね打ちクロマトグラム
一方, 標品で同定できないピークに関しては, 熱水抽出
エキスを小スケール検討と同様にODSカラムに供与し,分取クロマトグラフィーを行った. 254nmにおける吸光度測定によるピークフラクションの抗酸化活性を測定し, 複数の活性画分を得た. 各フラクションをODSカラムに供
図３

与し分取クロマトグラフィーを行い, 単一ピークになるま

エラグ酸の同定(a)熱水抽出液のHPLCクロマトグラム, (b)熱水抽出液とでリクロマトし, ４つの成分C１〜C４を精製した (図５).

標品の重ね打ちクロマトグラム, (c)ピーク成分のLC-MS

C１〜C４をLC-MS解析した結果, これらのm/z値がマロ

解析結果

チン酸, マロツシン酸, コリラジン, ゲラニインの質量数

図５

アカメガシワ葉抗酸化成分の精製結果 (HPLC クロマトグラム )(a)熱水抽出液, (b)C１, (c)C２, (d)C３, (e)C４―4―

田畑：アカメガシワ葉の抗酸化活性及び活性成分の解析とヒト効果試験

図６

精製成分のLC-MS解析結果(a)C１, (b)C２, (c)C３, (d)C４と一致した. またプレカーサーイオンから生じたプロダク

葉に特徴的な抗酸化成分であると考えられた. また, アカ

トイオンのm/z値は脱炭酸, 脱水, 脱ガロイル基等, 想定

メガシワ葉は抗酸化活性の他に血管強化作用のあるルチン

される脱離で生じるm/z値と一致した (図６). さらに,を354mg/100g 生鮮重量 (表２) 含有することが示された.

マロツシン酸とゲラニインを主要ポリフェノールとする構
成 (表２) が既報13)と一致したことから, C１〜C４を各々,マロチン酸, マロツシン酸, コリラジン, ゲラニインと同定した (図７). アカメガシワ葉抗酸化成分として７つのポリフェノールが同定されたことから, 各成分の構成, および主要に寄与する成分の特定を行った. 採取した時期,
場所の異なるアカメガシワ葉試料について検討した結果,
抗酸化活性はアカメガシワ葉抗酸化成分の中でマロツシン酸, ゲラニインと高い相関を示した. また, 抗酸化活性が高い時期のアカメガシワ葉では, マロツシン酸とゲラニイ
ンがポリフェノールの主要構成成分 (表２) であることからも, アカメガシワ葉抗酸化活性に主要に寄与している成分はマロツシン酸とゲラニインであると考えられた. マロ
ツシン酸は, 他のトウダイグサ科植物にも含有されていることが確認されているが含有量は少なく14), アカメガシワ
表２

アカメガシワ葉のポリフェノール構成

図７

アカメガシワ葉抗酸化成分の構造(a)没食子酸, (b)エラグ酸, (c)ルチン, (d)マロツシン酸, (e)ゲラニイン, (f)マロチン酸, (g)コリラジン―5―島根県産業技術センター研究報告第48号(2012)

これはルチンの含有量が多いとされる韃靼ソバ (日本ソバ

スーパーオキシドラジカルとヒドロキシルラジカルは生の100倍程度) に近い含有量である. ソバでは, 茹でると体内で生成するが, 前者は生体内での酸化反応の最初に生

茹汁にルチンが移行してしまうことや, 実よりも殻に多く成し, 細胞傷害を引き起こす種々のラジカルを産生する.

ルチンが含まれることを考慮に入れると, アカメガシワ葉

一方後者は, 生体傷害性の最も高いラジカルであり, 鉄,

はルチンの摂取源としても期待できることが明らかになっ

銅等の金属イオンの存在下でスーパーオキシドラジカルよ

た.

り生成する19). スーパーオキシドラジカルに対する消去活性を評価した結果, アカメガシワ葉タンニンがEGCGと同

４. アカメガシワ葉抗酸化成分の解析

等の活性を示し, その他の物質と比較して強い活性を有す

前述のとおり, アカメガシワ葉抗酸化活性の主要成分とることが明らかになった (表３). DPPHラジカル消去活

してポリフェノールであるマロチン酸, マロツシン酸, コ

性評価ではマロツシン酸が最大であり, クエルセチンに対リラジン, ゲラニイン, 没食子酸, ルチン, エラグ酸を同して3.4倍の活性を示したのに対し, スーパーオキシドラ

定した. アカメガシワ葉の抗酸化活性を解析するためには,ジカル消去活性評価ではマロツシン酸の活性はクエルセチ

主要成分個々の抗酸化能力を既存の抗酸化物質と比較する

ンの16.6倍であった (表３). DPPHに対する活性とスーパーことが重要であると考えられる. 事実, 抗酸化素材としてオキシドラジカルに対する活性で差が生じた原因としては報告が多い緑茶に関しては, 主要成分であるカテキン類のラジカルの大きさ, ラジカル中心に対する抗酸化物質の接同定とともに, 各成分の詳細な抗酸化プロファイルについ触頻度等による影響が考えられた20). ルチン, クロロゲンても多くの報告がある15-18). そこで, アカメガシワ葉抗酸

酸のラジカル消去活性が著しく低い理由としてはグルコシ

化成分のラジカル消去活性及び酸化ストレスに対する生体ル化, エステル化等による影響が考えられた18). ヒドロキ

10,11).

シルラジカルに対する消去活性については, アカメガシワ

比較するポリフェノール物質としては, 緑茶の主要カテキ

葉タンニンとEGCGを比較した結果, 明確な有意差はみらンである(−)−エピガロカテキンガレート (以下, EGCG),

れなかったもののアカメガシワ葉タンニンの方が高い傾向

コーヒー等に含まれるクロロゲン酸, タマネギ, 桑等に含を示した (表３). DPPHラジカル, スーパーオキシドラ

まれるクエルセチンとした. ラジカル消去活性を測定する

ジカル, ヒドロキシルラジカルに対する消去活性の検討結

ラジカル種としては, 抗酸化活性のスクリーニングに広く果より, アカメガシワ葉はEGCGを含有する緑茶同様に,使用されている合成ラジカルであるDPPHラジカルと生体高い抗酸化ポリフェノールを有する優れた天然の抗酸化素内で生成する代表的な活性酸素種であるスーパーオキシド

材であると考えられた.

成分保護活性を, 既存の抗酸化物質と比較し検討したラジカル及びヒドロキシルラジカルを選択した.

アカメガシワ葉抗酸化成分のうち, ４つのタンニンであ

DPPHラジカルに対する消去活性は, マロツシン酸が最るマロチン酸, マロツシン酸, コリラジン, ゲラニインが大となりEGCGより有意に高い活性を示した. マロチン酸,

高いラジカル消去活性を有することが確認されたことから,

コリラジン, ゲラニインはEGCGと同等の活性を示した

次に酸化ストレスに対する生体成分保護活性を検討した.

(表３). EGCGとアカメガシワ葉ポリフェノールのうち,生体成分としてタンパク質, 脂質, ヒト血清由来LDLを用

タンニンであるマロチン酸, マロツシン酸, コリラジン,

い, ４つのタンニンを含有するアカメガシワ葉抽出物及びゲラニインの４成分の持つ高いDPPHラジカル消去活性は,各精製タンニンの保護活性を評価した.

各々が含有する多数の水酸基に起因するものと考えられた.
表３

活性酸素である次亜塩素酸によるタンパク質分解に対す

アカメガシワ葉成分のラジカル消去活性評価結果―6―

田畑：アカメガシワ葉の抗酸化活性及び活性成分の解析とヒト効果試験

図８

アカメガシワ葉抗酸化成分の酸化ストレスに対する生体成分保護活性評価結果(a)次亜塩素酸ラジカルによるタンパク質分解に対する保護活性 (各試料の終濃度０, 50, 200, 800μM)(b)脂質過酸化に対する保護活性 (各試料の終濃度10, 30, 100, 300μM)
T１；マロチン酸, T２；マロツシン酸, T３；コリラジン, T４；ゲラニイン, *：p＜0.05, **：p＜0.01
る保護活性を, 牛血清アルブミン (BSA) をモデルタン

する保護活性は生体防御効果とみなすことができる22). ア

パク質として評価した. 次亜塩素酸は, 活性化好中球によカメガシワ葉の４つのタンニンが, 次亜塩素酸によるBSA

り産生されるミエロペルオキシダーゼ (MPO) によって酸化修飾 (分解) に対し保護効果を示したことから (図８

過酸化水素より生成する. 好中球等の活性化食細胞の(a)), これらアカメガシワ葉タンニンが, 活性酸素種によMPO系は宿主の主要防御システムであり, MPO系に不具るタンパク質分解に対して保護活性を示すことを確認でき

21)

合が生じると感染症等の疾病の原因となるため , 生体中

た.

での次亜塩素酸生成は避けることはできない. しかし, タ

脂質過酸化は, フリーラジカルを介して生じ細胞に傷害

ンパク質の酸化ストレスによる修飾は疾病, 老化を促進すを与える23). 抗酸化物質であるEGCGについては, 脂質過ることから, この酸化ストレスによるタンパク質分解に対酸化を抑制するという報告24)があることから, アカメガシ
ワ葉タンニンについて, 脂質過酸化に対する阻害活性を
EGCGと比較し評価した. その結果, 各タンニンはEGCGに匹敵する阻害活性を示した (図８(b)). このことから,アカメガシワ葉タンニンは, 生体の脂質成分を保護する活性を有することが示された.

図９

アカメガシワ葉抽出物及びタンニンのLDL酸化に対する保護活性(a)EGCG, (b)マロチン酸, (c)マロツシン酸, (d)コリラジン, (e)ゲラニイン, (f)熱水抽出物, (g)70%エタノール抽出物―7―島根県産業技術センター研究報告
表４

第48号

(2012)

アカメガシワ葉抽出物及びタンニンのLDL酸化に対する保護活性

LDL酸化修飾は動脈硬化進行過程において観察され膚の急性炎症, 真皮成分の変性等の組織障害や老化を引き

25,26). アカメガシワ葉抗酸化成分について, 酸化ストレ起こすと考えられている31-33). 実際, 化粧品などの外用にスに対してタンパク質及び脂質を保護する活性を有するこよる体の外側からの改善に加え食品成分, 医薬品等の摂取とが確認できたので, 次にLDL酸化修飾に対する阻害活性による体の内側からの肌改善効果が注目され, ポリフェノーを評価した. 酸化ストレスによりLDL酸化が始まるまでのルの経口摂取による効果も報告されている34). また, 日本

遅延時間と濃度をプロットすると抽出物, タンニン,

人の食生活は過去数十年の間に欧米化し, 脂肪摂取量が増

EGCGは全て濃度依存的な阻害活性を示した (図９).

大しメタボリックシンドロームの危険因子のひとつである

図９で得られた回帰式の傾きの比によりLDL保護活性を算

肥満人口が急速に増加している. 脂肪過多は生体酸化スト

出すると表４のとおり, ４つのタンニンはEGCGを上回る

レスマーカーを増大させることも報告されている35). ポリ活性を示し, 特にマロツシン酸はEGCGに対して1.92倍のフェノールに抗肥満効果があることが報告されているこ

高い活性を示した. 構造式 (図７) から分かるように, 各と36-38), アカメガシワ葉はα-グルコシダーゼ阻害活性を有タンニンはEGCGより多数の水酸基を有している. ラジカするとの報告があること39)から, アカメガシワ葉は抗肥満

ル消去活性の場合と同様に, この水酸基の存在が酸化修飾効果も期待できると考えられる. 一方, アカメガシワ葉のに対する阻害活性を示す原因と考えられる. ポリフェノー

ような消費者の認知度が低い素材を産業化するためには,ルを摂取した際, 生体内に到達するポリフェノール濃度は安全性とヒトに対する効果を実験的に実証することが重要る

27)

数μM以下であると推定されるが , 本評価結果によれば,となる. そこで本章では, 安全性試験及び摂取による肌改

1μM以下の低濃度域であってもLDL酸化の遅延が認めら

善効果と体型改善効果を検討した９).
急性経口毒性試験は, 2,000mg/kg用量のアカメガシワ

れ, アカメガシワ葉タンニンが生理条件下において酸化ス

葉凍結乾燥粉末を雌ラットに単回投与した結果, 観察期間

トレスから生体成分を保護し得ることを示した.
本章で得られた結果より, ４つのアカメガシワ葉タンニ

中の異常及び死亡は認められず, LD50は2,000mg/kg以上

ンは生体を酸化ストレス関連の疾患から保護する天然機能と考えられた. 単純に体重50㎏のヒトであれば100gに相性食品素材として期待できると考えられた. 特に, 主要ポ

当し, 急性毒性の危険はないと考えられた. また, ５菌株

リフェノールであるマロツシン酸 (2.3% 生鮮重量) とゲを用いた細菌における復帰突然変異試験では, 全ての株でラニイン (1.2%生鮮重量) はこの活性に大きく寄与するとコロニー数が陰性対照の２倍未満であったことから, 変異考えられた.

原性は陰性と確認できた. 試験を行った安全性試験で毒性が確認できなかったことに加え, 過去にある程度の食経験

５. アカメガシワ葉摂取によるヒト効果試験があることから, ヒト効果試験に対する安全性は問題ない

植物由来ポリフェノールに関する研究は近年精力的に進と判断した.

められており, その生理活性, いわゆる機能性に対する注

安全性が確認されたアカメガシワ葉について, 肌改善効

目度は高い. ポリフェノールが有する抗酸化活性を癌, 心果, 体型改善効果の検討と, 血液成分分析及びアンケート疾患等の酸化ストレスが関与する疾患等に対する予防に応によるヒト継続摂取での安全性を評価するため, BMI25以

28,29). また, 生体酸化が老化を促進

上, 体脂肪率25％以上で肌の弾力が低めの成人女性を対象することから, 抗酸化素材は疾患に対してのみでなく, 老に, １回３カプセル (１g) を１日２回, 朝食および夕食化防止や美容に対する機能性素材としても注目を集めてい前に連続８週間摂取させるオープンラベル試験を行なった.

用した報告も存在する

30)

る . 紫外線は直接的に生体にストレスを与えるとともに,その結果, 図10のとおり体重とBMIは低下しなかったもの

活性酸素を発生し皮膚に大きな影響を与える. 紫外線によの, 筋肉量, 骨量, 除脂肪量, 基礎代謝量は, 試験品摂取り発生した活性酸素は, 脂質過酸化, 遺伝子損傷, タンパ

前に比べて, 摂取８週後で有意に高値を示し, 体脂肪率,

ク質変性, 酵素阻害等の酸化傷害を誘導し, 結果として皮腹部脂肪率は試験品摂取前と比較して, 摂取８週後で有意―8―田畑：アカメガシワ葉の抗酸化活性及び活性成分の解析とヒト効果試験

図10

身体計測値の推移 (摂取前と８週間摂取後についてDunnettの検定, N＝11, *：p＜0.05)

図11

肌に対するアカメガシワ葉の効果(a)キメの推移 (摂取前と８週間摂取後についての対応あるt検定, N＝11, **：p＜0.01), (b)肌アンケートの推移 (摂取前と８週間摂取後についてのWilcoxonの符号付順位検定, N＝11, *：p＜0.05), アンケートスコアは１：非常に気になる,
２：少し気になる, ３：どちらとも言えない, ４：あまり気にならない, ５：まったく気にならない
項目はS/F：シミ・ソバカス, FL：小ジワ, FD：顔全体のかさつき, DEM：目元・口元のかさつき, LMC：洗顔後のつっぱり感, LS：たるみ, R/P：吹き出物・にきび, DCE：目元のくま, MS：顔全体のくすみ, HBPM：化粧ノリの悪さ,
UM：化粧崩れに低値を示した. 大野40)は, ダイエットのみで減量すると摂取後に有意な変化をした項目もあったが, 全ての検査項

体脂肪だけでなく除脂肪量も若干減少すると述べており,

目はいずれも標準値の範囲内で問題はなかった. 自覚症状

今回の場合, 測定値の変動は小さいもののカロリー制限等

アンケート結果についても試験品の摂取前後でほとんど差の環境制限を加えていない条件でありながら, 体脂肪の低がなく, アカメガシワ葉の安全性についても確認できたと下と同時に除脂肪量, 筋肉量が増加し, 基礎代謝量も増加考えられた.

するというダイエットとして理想的な成績であった. エネ

以上のことから, アカメガシワ葉は, 肌改善効果と体質

ルギー及び栄養成分摂取量は試験品摂取前, 摂取４週後,改善効果を有する安全性の高い機能性食品素材であると考摂取８週後でほとんど差がなく, 今回の結果は食事の影響えられた.

によるものでないことは明らかであった. また, 図11のと６. おわりにおり, 肌に関しては機器測定でキメ体積率, キメ個数について有意な改善が, アンケートで ｢シミ・ソバカス｣ と食品及び食品素材の生理生体調節機能に関する研究は多｢顔全体のくすみ｣ について有意な改善が示され, アカメ

岐にわたっているが, 種々の疾病, 老化に関与すると考えガシワ葉にはキメの改善と美白効果があることが示唆されられている生体酸化を抑制する抗酸化機能に関する研究もた. アカメガシワ葉が含有するエラグ酸については, 美白

そのひとつである. 本研究により, アカメガシワ葉が豊富効果の報告32)があり, 本結果を裏付けるものと考えられた.

なポリフェノールを含有し, 既存素材を上回る高い抗酸化一方, 血液検査についてはアカメガシワ葉摂取前と比べて機能性を有する食品素材であることが確認でき, 有効な生―9―

島根県産業技術センター研究報告
理調節機能を示唆するデータが得られた. 効果試験におい点的科学技術開発事業研究成果報告書. 島根県, 2003.
９) 小池田崇史,田畑光正, 杉中克昭, 冨川康之, 斎藤安弘. アカメ
ガシワ葉乾燥粉末のダイエットおよび肌改善効果と安全性.

題である. 遺伝子解析は遺伝子発現の変動を網羅的に評価することにより詳細なメカニズム情報が得られる他に, 想(2012)

草等の栽培技術の確立と利用技術の開発. 平成12〜14年度重て示唆された有効性を裏付けるために, 動物試験による皮膚組織成分の増減, あるいは遺伝子発現の解析が今後の課

第48号

診療と新薬. 2007, Vol.44, No.10, p1207-1213.
10) Tabata H; Katsube T; Tsuma T; Ohta Y; Imawaka N;

定していない発現変動の情報から新しい機能が見出される

Utsumi T. Isolation and evaluation of the radical scaveng-

可能性もある.

ing activity of the antioxidants in the leaves of an edible
plant, Mallotus japonicus. Food Chemistry. 2008, Vol.109,

また, アカメガシワ葉を機能性食品素材として産業化す

No.1, p64-71.

るためには, 一定品質の原料を安定供給する必要があるため, 栽培技術についても検討を進めている. 現段階では自11) Tabata H; Katsube T; Moriya K; Utsumi T; Yamasaki Y.
Protective activity of components of an edible plant,

生種を原料とせざるを得ない状況であるが, アカメガシワ

Mallotus japonicus, against oxidation modification of pro-

葉を主原料とした健康茶が商品化されたことにより, 民間

teins and lipids. Food Chemistry. 2010, Vol.118, p548-553.

での栽培がスタートした. アカメガシワ葉の栽培は, 休耕

12) Okuda, T.; Mori, K.; Seno, K.; Hatano, T. Constituents of

田の有効利用や中山間地域での収入源として期待できるこ

Geranium Thunbergii Sieb. et Zucc. : VII. High-performanceとから, 安定した需要が見込めるよう, より多くの商品化,

reversed-phase liquid chromatography of hydrolysable tan-

企業参入が望まれる. 今後は, アカメガシワ葉の産業化に

nins and related polyphenols. Journal of Chromatography.

伴って研究が進み, より多くの知見が得られことを期待している.

1979, Vol.171, p.313-320.
13) Okuda, T.; Seno, K. Tannins of leaf of Mallotus japonicus.
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謝14) Okuda, T.; Mori, K.; Hatano, T. The distribution of geraniin

辞

and

in

the

order

eraniales.

15) Cabrera C; Gimenez R; Lopes C M. Determination of tea
components

各位に深甚なる謝意を表します.

文

acid

Phytochemistry. 1980, Vol.19, no.4, p.547-551.

本研究を遂行するにあたりご指導とご鞭撻を賜りました
山口大学医学系研究科教授 内海 俊彦 博士をはじめ関係

mallotusinicwithantioxidant

activity.

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