30
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gVetSocNo.
65 2015
料PED侵入農場における継続的調査報告
小池郁子（エス・エム・シー株式会社）

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gVet.Soc.65,3033.

キーワード：PED、デルタコロナウイルス、検査による飼料中 PEDウイルス（PEDV）核酸の有無、PED

はじめに潤状況調査、母豚の血清抗体価と発症状況調査、環境発生農場での PEDV浸潤状況調査、母豚の PEDV浸エス・エム・シー株式会社（SMC㈱）では、豚の疾病診断ラボとして検査を行っているなかで、平成２６年中の PEDV核酸有無確認について調査を行った。農場数および検体数は表１に示した。

１月頃より豚流行性下痢（Porcineepidemicdiarrhea;
PED）関連の検査数が増加した。特に全国的に PED初結果および考察発生農場が爆発的に増加した平成２６年４月以降は、そ１．下痢原因検索の検査農場数および各農場からの検体数の増加だけでPED未発生農場８２農場３１２検体、PED発生農場６２農なく、各農場での、PED鎮静化に向けた継続的な PED

場２５６検体の下痢症状を示した豚の腸管内容物および関連調査依頼が多くあった。そこで、平成２６年１月以下痢便からの消化器系疾病の病原体検出率は、未発生降の PED関連検査状況および、４月以降 PED感染が農場ではクロストリジウムの検出率は７．
４％（２３/３１２）、確認された農場で、発生直後から鎮静化、そして現時ロタウイルスの検出率は４．
２％（１３/３１２）だったのに対点までの約５か月間の PEDV核酸の検出状況の変化し、PED発生農場ではそれぞれ１９．
１％（４８/２５６）およや抗体検査状況を継続的に調査した事例について報告

び５．
１％（１３/２５６）であった。また、PEDVによる下する。

痢と類似の水様下痢便の中には、PEDVは検出されず
デルタコロナウイルスやクロストリジウムとロタウイ

調査概要

ルスの感染が認められたものや、クロストリジウムと期間ロタウイルスと同時に PEDV感染が認められたもの

平成２６年１月６日～９月１４日

検査数および検査材料も多くあった。
（図１）

調査期間中、PED関連調査依頼として SMC㈱にてPED 発 生 農 場 で の PEDV の 検 出 率 が１３．
７％

検査を行った検体について、下痢原因検索を目的とし（３５/２５６）と低かった。この理由として、PED発生初期た材料からの消化器系病原体（図１）の検出率、PCR法の材料は少なく、PEDでの下痢や死亡が収まった後の⾲  ᳨ᰝ┠ⓗࡈ࡜ࡢ㎰ሙᩘ࠾ࡼࡧ᳨యᩘ 㹼 ࡣ 3(' Ⓨ⏕㎰ሙ ᳨ᰝᮦᩱ䚷᳨ᰝ┠ⓗ㎰ሙᩘ ᳨యᩘୗ⑩ཎᅉ᳨⣴㻝㻤㻞㎰ሙ 㻟㻝㻞᳨య ୗ⑩⑕≧䛾⭠⟶䛚䜘䜃౽䠄㻼㻱㻰ᮍⓎ⏕㎰ሙ䠅ୗ⑩ཎᅉ᳨⣴㻢㻞㎰ሙ 㻞㻡㻢᳨య ୗ⑩⑕≧䛾⭠⟶䛚䜘䜃౽䠄㻼㻱㻰Ⓨ⏕㎰ሙ䠅㻞 㣫ᩱởᰁ≧ἣ☜ㄆ㻝㻠㎰ሙ 㻥㻡᳨య 㣫ᩱ㻟 㻼㻱㻰䜴䜲䝹䝇ᾐ₶≧ἣㄪᰝ 㻝㻢㎰ሙ 㻠㻡㻤᳨య ⣅౽䚸౽䝇䝽䝤䚸ၚᾮ㻠 ẕ㇜㻼㻱㻰䜴䜲䝹䝇ᾐ₶≧ἣㄪᰝ 㻞㎰ሙ 㻟㻞᳨య ィ⏬ⓗ⮬↛ឤᰁẕ㇜䛾⣅౽䛚䜘䜃౽䝇䝽䝤䚸㻡 ⾑Ύᢠయ౯䛸Ⓨ⑕≧ἣ☜ㄆ 㻞㎰ሙ 㻥㻞᳨య ⾑ᾮ䠄㻥㻞᳨య䠅䚸⾑ᾮ᳨య䛸ྠ୍ಶయ䛾⣅౽䠄㻟㻜᳨య䠅䛸ஙỒ䠄㻠᳨య䠅㻢 ⎔ቃ୰ởᰁ≧ἣ☜ㄆ㻝㻟㎰ሙ 㻟㻞㻝᳨య ㇜⯋ෆᣔྲྀ䜚䝨䞊䝟䞊䚸䝢䝑䝖ഃ㠃ᣔྲྀ䜚䝨䞊䝟䞊䚸䝢䝑䝖Ỉ䚸⁀䜑㎸䜏ᵴ䚸ởἾฎ⌮Ỉ

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下痢原因検索として、PED再発生の確認を目的としたれた事例もあり、判定には留意する必要があった（図材料が多かったためと考えられた。

２）。

２．飼料中からの PEDV核酸検出

３．PEDV浸潤状況調査

PED発生があった１４農場の飼料９５検体中１１検体でPED発生農場における PED発生から約２か月間のPEDV核酸が PCR陽性となった。検体の多くは開封

１６農場４５８検体の下痢から軟便、正常便について、日齢された袋から採取したものが多く、農場内でのウイルにより区分して PEDV核酸量を比較した。陽性検体

ス汚染の可能性も否定できないが、未開封飼料６検体の各豚舎飼育豚の平均ウイルス核酸量を図３に呈した。

中２検体が陽性であった。

生後２－５日齢の下痢便は平均で１０7copy/ul（糞便１今回陽性となった１
１検体はシークエンス解析によりg換算値：１０億個≦）のウイルス核酸が検出され、死PEDV核酸と判断したが、飼料中からの抽出物には植亡豚の腸管内容物と１０日齢以降の生存豚の平均値は、物由来や、植物に付着したダニなど多くの核酸が含まその１００分の１の量であった。また、
１０日齢以降での生れるため、複数のバンドが認められることが多く、陽存豚の多くは５日齢以降母豚から離した仔豚で、母豚性対照と同一位置で増幅産物が認められてもシークエと離さなかった仔豚は死亡していたとの稟告であった。

ンス解析により PEDVの核酸ではないことが確認さ

PED発生から２か月間で、各哺乳豚個体中のウイルス排泄量に違いはみられなかった。

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PED発生直後の日齢によるウイルス量と生存状況

8から、生後すぐに感染し、ウイルスが増加し排泄されていく過程は非常に急速であり、生存している離乳豚
では離乳前に発症が見られても、その排泄量は急激に減少していることが予想された。
また、肥育豚で PEDV核酸の排泄が認められた便は、

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軟便から正常のもので、便性状から PEDV排泄の有無

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ら肥育舎に侵入していたとしても、すぐには発見されは通常の PCR法2)での検出限界を示しており、外部かない可能性が十分にあることが示された。

32

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４．計画的自然感染（馴致）後の母豚糞便からの５．母豚中和抗体価と発症状況の推移

PEDV保有状況調査

５月末に分娩舎にて PEDが確認された２農場にお管理獣医師の指示のもと、PED発生確認後２～３日いて、６月～９月までの４か月間の分娩舎での母豚各後より、水様下痢便がみられた哺乳仔豚の腸管ミンチ

５頭の血液からの PEDVの中和抗体価、糞便および一３頭分の水溶液を１l/５０頭の割合で、分娩前２週から部乳汁中の PEDV核酸の有無を確認した（表２）。分

授乳中の母豚を除く全母豚の鼻腔および口腔への噴霧娩舎で発症がみられた２週間後（採材月６月）の母豚を１日おきに３回実施することで、母豚への計画的自抗体価は高かったが、全分娩母豚の哺乳豚で下痢が認然感染が行われた２農場について、臨床症状が記されめられた。その翌月の分娩７～９日前の母豚の中和抗た糞便およびその母豚血液３２検体について調査した。

体価は個体による差が見られ、下痢発症は１割程度の給与された母豚の便性状は水様下痢便から正常のもの

分娩母豚の哺乳豚で認められた。８月、９月の中和抗があり、食滞の状況も個体により違いが認められた。

体価はすべて陽性（抗体価１６～１２８）であり、哺乳豚で母豚の便からの PEDV排泄量は、排泄されない豚かの下痢発症は認められなかった。

25ら１０ copy/µl～１０copy/µlまでと差があった。また、６月の母豚では糞便および乳汁中からもウイルスの給与後１か月から２か月後の母豚の血清中和抗体価も、排泄が確認され、高い抗体価があっても、母豚でウイ２倍～２５６倍以上と差が認められた。ウイルス核酸のルス排泄が見られ、哺乳豚では下痢発症と死亡が認め検出量と抗体価は、食滞と軟便が認められた母豚では、られた。

食滞と軟便が認められない母豚より高い傾向があった。

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豚病会報

No.
65 2015

６．環境サンプルからの PEDV核酸汚染状況調査
１３農場３２１検体の環境サンプルからは、PED発生か

33
引用文献
１）Ki
m SH,etal.(2007)Mul
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ら約３か月後、PEDによる哺乳豚の下痢および死亡がforthesimultaneousdetectiona
ndquant
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ほぼ認められなくなり、哺乳豚での PEDVの排泄もみ

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られなくなった後も、分娩舎床の洗浄がしにくい給餌

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器の裏底や豚舎隅から PEDV核酸が確認された。さ

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172
177.

らに便や豚舎床面からウイルス核酸が検出されなく２）Kim SY,etal.(
2001)Differentialdetectionof

なった後も、１３農場中４農場での調査で、３か月以上tr
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複数の豚舎のピット２２検体中８検体、溜め込み槽２０検epi
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ex RTPCR.J

体中１６検体、汚水２０検体中４検体から PEDV核酸が検Ve
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agnInvest,
13:516520.

出された。尚この時期、１農場では、母豚約１００頭中２３）WooPCY,etal.(2012)Discover
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頭から PEDV核酸が検出されている。

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農場状況と検査結果より、発生初期に分娩舎でのウr
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イルス量をいかに減らすことができるかが、重要であsourceo
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JVirol,86:39954008.

PEDV核酸量は平均で便１g中約１０億個存在し、下痢および死亡頭数が多い初期の時期においては発症豚の下痢便中だけでなく、母豚の便や乳からも PEDV核酸が検出され、この状況では、母豚に抗体があっても下痢と死亡は抑えられなかったと考えられる。
鎮静後は再発防止のために豚舎内の徹底的な洗浄・消毒が必要で、正常便からもウイルスが確認されたこと、分娩舎の床表面からはウイルス核酸が確認されなくなった後も、床下などから PEDV核酸が検出されたことから、洗浄不足や洗浄時の跳ね返りにより再感染を起こす可能性が示唆された。このため、洗浄・消毒の目視確認だけでなく、ウイルス核酸の排泄が母豚糞便中でなくなり豚舎内に存在していないことを、拭取り検査による PEDV検査で確認してから豚を導入することが予防の重要点と考えられた。
そして、PEDVが数か月に亘り豚および環境サンプ
ルから検出されることから、再侵入および未発生農場での PED侵入防止のためには、
バイオセキュリティーの 見 直 し が 必 要 で あ る と と も に、万 が 一 農 場 内 にPEDVが侵入した場合の対応を、計画的自然感染の有無を含め、知識と経験の十分ある管理獣医師とともにしておくことが必要である。
今後も継続的な検査を行っていき、PED発生から鎮静化、清浄化への対策の一助となるような検査データを積み重ねていきたい。