豚病会報

No.44

2004

1

精液供給における PRRS ウイルス感染雄豚のクリアランスと新しい人工授精技術の展望
中根崇（千葉県畜産総合研究センター
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生産技術部

生物工学研究室）

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現在、わが国では、豚繁殖・呼吸障害症侯群（PRRS）
が広く浸潤し、その対処に長年苦慮しているのが現状され、血清学的性状および遺伝子配列からアメリカ型に類似することが報告されている。

である。これまでのところ、PRRS ウイルスに有効な

一方、アメリカにおいて１
９９４年６月より認可されて対策は見出せず、感染を受けた生産者は、ウイルスのいる PRRS 生ワクチンは１９９８年１月より日本においてコントロールと排除のみが実行可能な手段である。

も使用され、本病の防圧と清浄化が期待された。しかPRRS ウイルスの汚染源は繁殖母豚群であり、離乳

し、ワクチンウイルスの弱毒化に関与する遺伝子およ舎や育成豚舎でウイルスコントロールを実現する前に、びアミノ酸領域は解明されつつあったが十分明らかでまず、繁殖母豚群でウイルス排除が必要と考えられてなく、培養細胞中で異なるワクチンウイルス株間の遺いる。一部の汚染農場では、感染母豚群をオールアウ

伝子組換えが報告され、ワクチンを使用することにトし、SPF 豚導入による入れ替えや汚染豚を分娩前によって野外ウイルスの動向に影饗を及ぼすことが推測

排除するなどにより清浄農場へ転換を図っている。そされていた。実際に野外において、ワクチンウイルスのため、清浄農家では、PRRS ウイルスの農場への侵入が変異を起こし病原性を持ったことによると考えられを防止するため、適切に管理された種雄豚の導入や人る被害も報告されるなどワクチン使用の危険性が提起

工授精（artificial insemination ; AI）用の清浄な精液されていた。また、デンマーク王立大学の Mortensenが求められている。

S らは、生ワクチンウイルス株の伝播から PRRS ウイ

そこで、アメリカのサウスダコタ大学の Christo-

ルスの感染様式を疫学的に調査し、デンマークの AI セpher H らの PRRS ウイルスの感染メカニズムの研究

ンターで１
９９
５年末から候補雄豚に使用したところ、ワから、PRRS ウイルス感染雄豚のクリアランス法を紹

クチン接種豚から他の雄豚に感染し、精液を介して他介する。

の農場でワクチン株による PRRS が多発したことを報また、PRRS ウイルス等の疾病防除の面からも豚の告した1)。

AI が注目されており、近年、新しい手法が報告されて生ワクチンの性質として、１）ワクチンを注射されいる。AI は、精液を子宮頚管内に注入する方法が一た豚から、ワクチンを打たれていない豚へとワクチン

般的だが、スペインのムルチア大学の Martinez らは、ウイルスが水平感染する。２）ワクチンウイルスが免

子宮角の先端に直接少量の精液を注入するシステムを

疫のない妊娠豚に感染すると、ウイルス血症を起こし、開発した。今回、我々は、本システムの有効性についまたワクチンウイルスは胎子に垂直感染し、流産を起て検討したので、その概要を紹介する。

こしうる能力がある。３）ワクチンウイルスが免疫のない種雄豚に感染するとウイルス血症を起こし、精液

１．PRRS ウイルスと生ワクチンウイルス
PRRS ウイルスは、１９
９１年に初めてヨーロッパの豚中にウイルスが出現し、精液を介する感染が起こることが、明らかとなっている。

から分離され、続いて北アメリカの豚からも分離され、なお、現在、ワクチン使用にあたり製造元のベーリ

その後世界の各地域から分離・確認が報告されている。

ンガーインゲルハイム社は、妊娠豚および種雄豚には

PRRS ウイルスは、アメリカ型とヨーロッパ型に分類

使用せず、PRRS 陰性農場では使用しない様に注意をされ、その違いは血清学的性状とシークエンスデータ

促している。

によって立証されている。また、本ウイルスは、アメ

また、野外における PRRS ウイルスは感染豚におけリカ型及びヨーロッパ型ともに遺伝的多様性が存在しる病原性が異なっているものや、生物学的、抗原的或ている。わが国においては１９９３年に本ウイルスが分離

いは遺伝学的にも異なるものが混じりあった（hetero-2

Proc Jpn Pig Vet Soc No.44 2004

geneous）集団であることが報告されている。そのため、現在のワクチンは、一つの PRRS ウイルス株に基ずくものであり、遺伝的に異なった PRRS ウイルス野外株の感染に対しての防御効果が乏しいことが推察されている。

２．Christopher らの感染試験
精液供給に必要な雄豚の維持には、ワクチンによる
PRRS の防圧は困難であり、完全な隔離飼育と定期的な抗体検査及び精液中のウイルスの確実な検出法が必表１ PRRSV 接種雄豚の血清および精液中からのウイルス分離と抗体およびウイルスゲノム検出（接種後日数）
豚 No.
１

部位 ウイルス分離 IFA 中和抗体 PCR
血清
３−７
９〜
３５〜
１−２１
精液
７−２５
２
血清
１−７
９〜
３８〜
１−２
精液
３−５６
３
血清
１−９
１１〜
３８〜
１−２５
精液
３−２５
４
血清
５−７
１１〜
３５〜
１−３１
精液
５−９２
modified ; Christopher-Hennings et al. J Vet Diagn Invest 1995

要とされていた。そこで、Christopher らが報告した

イルスゲノムが血清で１〜３１日間、精液では、３〜９２

PRRS ウイルスの感染と精液中ウイルスの動向の研究

日間、５６サンプル中１９（３４％）で検出された（表１）。

及び雄豚クリアランスのための効果的な検査方法を紹

ウイルス及びゲノムの検出時期は、IFA 検出 2 〜８日介する。

前、中和抗体検出２
８〜３５日前で、抗体検査で感染を識

１） PCR による精液中の PRRS ウイルスの検出

別する前に血液や精液中にウイルスが存在し、更に抗１９９５年、PRRS ウイルスの検出用 RT-n PCR を検査

体検出後も抗体により不活化されずに長く精液中に排法を開発し、ウイルス分離よりも感受性が高いことか

泄されていることが確認された。また、PCR 陽性の４２

ら PCR はウイルスの動性や精液の検査に有効である

日目、６７日日の精液のバイオアッセイで感染性が確認と報告している2)。PCR 法の概要は、まず、感染雄豚された。好中球増加症とリンパ球減少症を呈し、９２日

精液の濃厚部と精漿から遠心処理により、細胞塊を集目まで長く PCR で精液中にウイルスゲノムが検出さ

めウイルス RNA をフェノール抽出する。PCR プライ

れた豚について、
１
０１日目に検定殺し精密検査を実施しマーの塩基配列は、PRRS ウイルスの VR-2332 株（アたところ、尿道球腺からウイルスが分離された。

メリカ株）の基本構造遺伝子（open reading frame）
ORF-7（ヌクレオカプシド）及び Lelystad 株（ヨーロッ３） 精管切除処置感染豚の精液からの PRRS ウイルスパ株）の ORF-1b（ウイルス複製酵素）から設計されの検出た。高感度にアメリカ及びヨーロッパ株の識別が可能

１９９８年、前回の試験で精液中から長くウイルスが検であり、臨床症状を示さない回復期の雄豚を検出でき出されたことから、生殖系組織でのウイルスの潜伏増た。

殖を疑い、精管切除処置した感染豚の精液中の PRRS

この PCR 法は、PRRS ウイルスの感染が空気感染以

ウイルス検出状況について報告している4)。

外に精液による伝播が知られており、AI 用の精液を試験は、抗体陰性雄豚５頭の精管切除し、２頭を非世界的に販売する精液供給会社での雄豚の高度な衛生

切 除 対 照 と し、PRRS 分 離 株 VR-2332 を 106 TCED対策に活用された。

50/mL 鼻腔内接種し、２１日目に鑑定殺した。リンパ系組織（扁桃、腸骨リンパ、胸部、リンパ、腸間膜リ

２） 血清及び精液中の PRRS ウイルスの持続性

ンパ、胸腺、骨髄及び脾臓）、生殖系組織（精巣、精巣

１
９９５年、感 染 豚 の 血 清 及 び 精 液 中 の ウ イ ル ス の上体、精管、前立腺、尿道球腺、陰茎及び精嚢腺）、主PCR 検査から精液中に長くウイルスが存在すること

要臓器（肺、心臓、肝臓、脳及び小腸）及び精液につを報告した3)。試験は、抗体陰性の６〜７カ月齢雄豚４いて、ウイルス分離、RT-nPCR 検査を実施した。

頭を個別に隔離飼育し、PRRS 分離株 VR-2332 を 106

各組織別のウイルス検出率は、精管切除豚と非切除

FFU/mL 鼻控内接種し、接種後１００日間に渡り追跡し

豚のリンパ系祖織でそれぞれ、２７/３
５
（７
７％）、１
２/１
４

た。検査方法は、週に２〜３回血液を採取し、ウイル（８６％）、生殖系組織で２
９/３
５
（８３％）
、８/１４
（５
７％）
、主要

ス分離、蛍光抗体（IFA）、中和抗体、PCR を実施し

臓器で２
０/３
０
（６
７％）、８/１
２（６７％）、精液で１/５（２０％）、た。また、精液も同様に採取し、PCR で陽性を示した

２/２（１００％）であった（表２）。

精液を豚に接種し、感染性を調べた。
成績は、ウイルス血症が１〜９日目に認められ、ウ

この試験からウイルスは各組織で増殖し、精管切除
豚でも精液中からウイルスが検出されることから、生No.44

豚病会報

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3

表２ PRRS ウイルスの分離とゲノムの検出
（接種２
１日目）

の Swine Genetics International 社のホームページを検出部位

精管切除豚（５頭）

非切除豚（２頭）

見ると、①アメリカにおける清浄化疾病として、口蹄リンパ系組織２７／３５（７７％）

１２／１４（８６％）

疫、豚水疱性口炎、アフリカ豚コレラ、豚水疱疹、豚

生殖器系組織２９／３５（８３％）

８／１４（５７％）

日本脳炎、豚コレラ。②精液に存在してはならない疾

主要臓器

２０／３０（６７％）

８／１２（６７％）

精液

１／５（２０％）２／２（１００％）Christopher-Hennings et al. Vet Pathol 1998

病病原体として、AR、グレーサー病、パスツレラ病、
豚丹毒、豚赤痢、豚エペリスロゾーン病、伝染性胃腸炎、豚インフルエンザ、③精液を通して潜在的に伝染殖祖織以外で増殖したウイルスは脈管系を介して精液する繁殖関連疾病として、レプトスピラ症、ブルセラ中に混入することを確認している。

病、抗酸菌症、オーエスキー病、PRRS については、陰性を確認している。また、レプトスピラ症、ブルセ

４） 感染豚体内での PRRS ウイルスの持続性
２０
０１年、PRRS ウイルスの各組織での持続性について報告した5)。試験は、抗体陰性雄豚８頭に PRRS 分

ラ病、抗酸菌症は半年毎に、豚水疱疹、オーエスキー
病、PRRS は２カ月毎に血液検査を実施し、安全性を確保している。

離株 SD-23983 を 106 FFU/mL 鼻腔内接種し、４０、４７、６１、８８日目に鑑定殺し、血清、分泌物及び主要臓器に

２） AI の現状

ついて、ウイルス分離と RT-n PCR で体内でのウイル

砂川らは、日本と欧米諸国の AI の普及率について、

スの感染持続状況を調べた。ウイルス血症が１〜１
１日

１９９
９年の AI 用精液供給本数／推定種付け頭数から推目間に認められ、抗体は、ELISA で１
１〜１
４日目以降、

定し報告している（図１）。欧米諸国ではノルウェーの中和抗体で２５〜４
６日目以降に認められた。ウイルスは、９０％を筆頭に５０％以上の国が肩を並べ、養豚業の必須

４
０〜４７日目の扁桃のみ６頭中３頭から分離された。ウの技術として普及発展している。なお、日本では、日イルスゲノムの各組織の部位別検出率と時期及び頭数

本養豚協会の調査によると、種付け頭数約２百万頭にはそでぞれ、リンパ系組織で２
５/６
４
（３
９％）、４
０〜６
１日
目７頭、生殖系組織で５/５
６
（９％）
、４
０〜４７日目４頭、精液、主要臓器で４/８０（５％）、４０〜４７日目３頭であっ対して３７万５千本の精液の供給に留まり、１８．
３％と低ᣣᧄ䈫᰷☨⻉࿖䈱⽋ੱᎿ᝼♖᥉෸₸いのが現状である。
ੱᎿ᝼♖♖ᶧଏ⛎ᧄᢙ 䋯 ផቯ⒳ઃ䈔㗡ᢙ䉟䉩䊥䉴

長期間に渡りリンパ系組織で増殖し、扁桃がウイルス䊂䊮䊙䊷䉪

分離部位に適していることが、示唆された。そこで、

18.3% ; 375,304 ᧄ 䋯 2,048,640 㗡ᣣᧄた。これらの成績からウイルスは、生殖系組織よりも

䉝 䊜䊥䉦
䊐䊤䊮 䉴

PRRS ウイルス感染雄豚 ›±ÿには、雄豚の検疫期間として

䊄䉟 䉿

４５日が必要であり、抗体検査と扁桃のバイオプシー材

䉴䊕䉟䊮
䊔䊦䉩䊷

料の PCR 検査が効果的と報告している。

䉥䊤䊮䉻
䊉䊦䉡䉢䊷

３．AI の普及
１） AI のメリット

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㪉㪇

㪋㪇

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㪏㪇

㪈㪇 㪇

1999䋻VMD䋬⍾Ꮉ䋬᪀ේ ⺞ᩏ

図１

日本と欧米諸国の AI の普及率

AI は、優秀な遺伝子を容易に導入できること、種雄豚を減らせるか飼う必要がないため、飼料、施設、人

しかし、日本豚病研究会が、２００２年に実施した養豚

件費等のコストが削減できること、種雄豚の状態、雌衛生実態調査では、AI の実施率は、母豚の飼育規模の豚との体格差に関係なく交配が可能なことなど多くの増大に従って増加し、母豚数が２００頭以上の農家では、メリットがあるが、種雄豚の導入に伴う疾病の侵入機７０％が実施しており、
５００頭以上の農家では、全農家が会を少なくできることから、PRRS の防除に関しても実施していることが判った（図２）。

効果は高い。日本の AI 用供給精液施設では、毎年、種豚登録の際に PRRS とオーエスキー病の検査を実施
し、独自に幾つかの疾病の検査を追加実施している。
一方、世界中に精液を販売しているアメリカの企業では更に厳しい衛生基準を設定しいる。インターネット

4

Proc Jpn Pig Vet Soc No.44 2004
表４

人工授精後の体内からの注入精液量および精子数の流失率

AI 時後経過時間

母豚数

総精液量

総精子数

AI 精液注入時

７６

７±１．
１％

８±１．
３％

０〜０．
５時間後

１１
０

３１±１．
７％

１４±１．
０％

０．
５〜２．
５時間後

７８

３６±２．
６％

９±０．
８％

精液利用の効率化を目的として、子宮頸管よりも先端部位に少量精子を注入する手法が各種検討されて来た。
ノ ー ス カ ロ ラ イ ナ 大 学 の B. A. Belstra は、Annual
Swine Report 2002 の中で最近の豚の AI 技術の進展について、従来法との比較を紹介している9)（図３）。英国 の Watson ら は、フ ラ ン ス の IMV 社 が 開 発 し た
図２

規模別豚人工授精の実施状況

Deep Golden Pig と呼ばれる子宮頸管から１８〜２０cm 先の子宮体部に精液を注入する Intra-uterine body in-

４．新しい AI 技術の開発に向けた取り組み

semination（IUI）用カテーテルの産業レベルで実施試

豚の AI 技術は、豚精子の凍結融解後の生存などの験を行い、精子数２０億で受精率に支障の無いことを報問題から、凍結精液の利用は少なく、通常、養豚場で告した10)。更に、スペインの Martinez らは、独自に開は、希釈後液状保存した精液を子宮頸管内に注入する

発した Deep Intrauterine Insemination（DIUI）用フのが一般的である。良好な繁殖成績を得るためには、レキシブルカテーテルを開発し、５千万及び１億５千

４０〜５０億の精子数を８０〜１００ml の液状精液として発情万の精子を希釈液５ml で子宮角深部２/３に注入した群中に２回注入することが推奨されている。橋爪は、１と従来の AI カテーテルで精子数３０億を頸管内注入し回の射出精液で授精可能な雌畜の頭数を算出している6)。

た群を比較して、受胎率及び産子数に差が認められな雄豚からは通常１回の射出で１
０
０〜１，
０
０
０億の精子が採いことを報告した11§,12)。

取されるが、１回分の射精で８〜９頭の母豚にしかAI 出来ず、この方法での精液の利用効率は、牛に比べるとかなり低い現状である。なお、雄牛は、１回に約
５
０〜１００億の精子を射精し、通常２，
５
０
０〜５，
０
０
０万の精
子を１回注入するため、１００〜２００頭の雌牛に AI が可能である（表３）。
表３
家畜

３〜１
０

５０〜１００１
５０〜５
００ １００〜１，
０００

一部修正

ੱᎿ᝼♖ᴺ(AI)

１回の射出精液で授精可能な雌畜の頭数

１回の射出
１回の注入
精液量
（ml） 精子数（億） 精子数（億）牛豚

1.ሶች㗪▤ㇱ䈮♖ᶧ䉕ᵈ౉䈜䉎ᓥ᧪䈱

橋爪

2.ሶች૕ㇱ䈮♖ᶧ䉕ᵈ౉䈜䉎ᣇᴺ(IUI)
O

AI 可能
総頭数

０．
２５〜０．
５

１００〜２００

５０

８〜９

3.ሶችⷺᷓㇱ䈮♖ᶧ䉕ᵈ౉䈜䉎ᣇᴺ(DIUI)

O
B.A. Belstra 2002

図３

３種類の異なる人工授精法と精液注入部位

力；家畜人工授精講習会テキスト

また、豚は、多胎動物ゆえに子宮が約１５０cm と非常５．子宮角内深部精液注入法と子宮頸管内注入法に長いという形態的な特徴から多量の精液を必要とすの比較試験

ると思われるが、Steverink らは、従来の AI では精液

今回、我々は DIUI の有用性を確認するために、最の液量の約７０％、精子の２５％が注入後２．
５時間以内に

近発売されたフレキシブルカテーテルを用いて DIUI

子宮頸管から外部に流失し、無駄が多いことを報告しを実施し、受精及び受胎状況を観察し、作業性と繁殖7)。
ている（表４）

成績について調査し、当研究センターで通常に実施ししかし、最近、Krueger らが子宮角の先端に外科的に精液を注入した場合、約１億の精子数で十分に受精卵が得られることを報告した8)。その後、AI におけるている AI と比較、検討した。
１） 材料と方法①

DIUI

No.44

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5

DIUI は、スペインの Magapor 社製の DIUI 用ファ

試験豚は、L 経産豚 13 〜１４ヵ月齢（産暦１産）２４

イヤーフレックス（FFX）を用いて実施した（図４）。

頭と正常な発情周期を認める W 未経産豚８ヵ月齢１０

FFX は、全長が１５０cm、外径が４ mm、内径が１．
５mm、頭を用いた。まず、自然発情時に AI を実施し、妊娠

最大湾曲角度が１６０度で、カテーテル自体がかなりの柔させた後２
５〜３８日目にクロプロステノール（プラネー

軟性が有り、子宮角に挿入しても、子宮壁を傷つける

ト、住友化学工業社製）０．
１７
５mg を２４時間間隔２回投危険性が低い構造である。
↪䉦䊁䊷䊁䊦

与し、流産を誘起した。２回日のクロプロステノール
投与時に注射用妊馬血清性腺刺激ホルモン；eCG（ピーメックス、三共社製）１，０００iu を、その７２時間後に注ᄖᓘ䋺 㪋㫄㫄
㐳䈘䋺㪈㪌㪇㪺㫄
㐳䈘䋺㪈㪌㪇㪺㫄

射用ヒト絨毛性性腺刺激ホルモン；hCG（プローベン、
三共社製）５００iu をそれぞれ頸部筋肉内に投与し、発情を誘起した。DIUI は hCG 投与後に雄許容確認した
経産豚１４頭に２４時間間隔で２回、未経産豚８頭に hCG
投与後 36 時間後に片側の子宮角内に１回実施した。

Magapor␠䋨䍛䍫䍽䍐䍻䋩⵾
Magapor␠䋨䍛䍫䍽䍐䍻䋩⵾ 䋻 FIRFLEX䋨FIRFLEX䋨FFX䋩
FFX䋩 ®

AI は hCG 投与後に雄許容を確認した経産豚１０頭に２４時間間隔で２回実施した。試験豚は DIUI 及び AI 後４

図４

DIUI 用カテーテル

使用法は、まず、先端部の精液放出口を拡張するた日目にと殺し採胚した。
④

受胎試験

め切断し加工した AI 用プラスチック製スパイラル状

授精試験と同様に処理した W 未経産豚 2 頭に DIUI

注入器（従来カテーテル）を豚の外陰部より挿入して、を１回実施し、３０日目にと殺し、受胎状況を観察した。

子宮頸管部に固定し、次に、従来カテーテルの精液注⑤

入口から FFX を挿入した。更にカテーテルの精液放試験豚は、L 経産豚４５頭を用い、DIUI は３５頭、AI出口から FFX を頸管の先３０〜９０cm の子宮角内に挿入

は１０頭に実施した。それぞれ、カテーテルを膣内に挿後、その基部に注射器を装着して希釈精液１０ml を速や入してから一連の作業が終了し、抜き取るまでの時間

かに注入した（図５）。

を測定すると共に挿入の難易性を調べた。
⑥

作業性

繁殖試験

試験豚は、L 経産豚１３〜１４ケ月齢１６頭を用い、雄許容確認後、DIUI は１
０頭に２４時間間隔で２回、AI は６頭に同様に実施し、分娩まで飼養した。それぞれ、受胎数、産子数、死産子数、生時体重を調べた。
２） 結果
①
図５

DIUI 用カテーテルによる精液の注入作業

授精試験成績

授精試験で得られた成績を表５に、採取した胚を図６に示した。黄体の総数は５１０個で受精卵の総数は４８７

対照として、従来のカテーテルを用いて頸管内注入個であった。また、正常胚の総数は４２４個であった。

による AI を実施した。従来カテーテルの先端を子宮AI 区の経産豚と未経産豚及び DIUI 区の経産豚の受精

頸管部に固定し、精液が逆流しないようにゆっくりと率（受精胚数／黄体数）は、それぞれ９０％以上で、正希釈精液１００ml を注入し、２分間カテーテルを子宮頸

常胚回収率（正常胚数／黄体数）は、それぞれ８０％以管内に留置した。

上と良好な成績を示し、各区に有意差は認められな②

精液

精液は、大ヨークシャー種（W）とランドレース種（L）より採取し、モデナ液で１ ml 当たり１億個の精子を含むように希釈し用いた。
③

授精試験

かった（Ｐ＞０．
０５）。

6Proc Jpn Pig Vet Soc No.44 2004
表５
区分

授精試験成績

③

受精率
正常胚回収率（受精胚／黄体数） （正常胚／黄体数）

頭数

DIUI
未経産

８

９０．
７％（１６６/１８３）

８０．
２％（１５０/１
８３）

経産豚

１
４

９７．
５％（１５９/１６３）

８４．
０％（１３７/１
６３）

経産豚

１
０

９８．
７％（１６２/１６４）

８３．
５％（１３７/１
６４）

計

３
２

９５．
５％（４８７/５１０）

８３．
１％（４２４/５
１０）

平均 AI 作業時間は、DIUI 区で４分９秒±１分３
３秒、
対照区で３分５２秒±０分３３秒であった。また、試験した全ての豚に FFX の挿入が可能で、出血等の異常は認められなかった。
④

AI

AI 作業性

繁殖試験成績

繁殖成績は、DIUI 区と AI 区の分娩頭数、平均産子
頭数、平均死産子数及び平均生時体重は、それぞれ、
９頭、
９．
７頭、
０．
６頭１．
７kgと６頭、
９．
８頭、
０．
６頭、
１．
５kg
であった（表７）。全ての項目において、両区に有意差は認められなかった（Ｐ＞０．
０
５）。
表７

繁殖試験成績

平均死亡 平均生交配母 受胎母 分娩母 平均総区分 豚頭数 豚頭数 豚頭数
産子数＊ 産子数＊ 時体重＊
DIUI

10

9

9

9.7±3.5頭 0.6±0.9頭 1.7±0.2Kg

AI

6

6

6

9.8±3.4頭 0.6±0.9頭 1.5±0.3Kg＊；平均±標準偏差

また、DIUI で得られた産子は、AI 区の産子と相違
図６②は認められず発育した。なお、DIUI 区の不受胎母豚授精試験で得られた胚１頭については、発情が再発したので、再び DIUI を実施したが再発し、改めて頸管内注入 AI を実施した

受胎試験成績

受胎試験で得られた成績を表６に、採取した卵巣と胎子を図７に示した。DIUI 実施３
０日目の未経産豚 A、が再度再発し、最終的には繁殖障害と判断して廃用とした。

B の卵巣に１６個と１４個の黄体を認め、両側の子宮角内に、それぞれ、１６頭（７例と９例）と１０頭（６例と４

今回、FFX を用いた１及び２回の DIUI と通常のカ例）の胎子が観察された。
表６

未経産Ａ

右
７

未経産Ｂ

１
１

３

分

テーテルを用いた２回の AI における受精率、
正常胚回

受胎試験成績

黄体数
左
９

区

３） 考察

計
１６
１４

収率に有意差は認められず、同等の採卵成績を認めた。

右
７

胎子数
左
９

計
１６

６

４

１０

DIUI １回

実施後 ３０日目

DIUI は、未経産豚においても少ない精子数で同等の受精率を認め、１回の授精でも黄体数に見合う胎子が得られ、さらに片側子宮への挿入でも両側の卵が受精することを確認した。なお、FFX の作業性には特に問題は認められず、子宮を傷つけることなく従来の AI 技
術者なら容易に FFX の使用が可能と思われ、分娩した豚の繁殖成績は頸管内注入と同等であることが確認された。これらの成績は、Martinez らの報告と一致し、

㤛૕7
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DIUI の有用性を実証した。

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また、伊東らは、Watson らの報告に準じた IUI を実施し、１２億の精子数で良好な受胎性と産子数を認めることを報告しており13)、DIUI では更に効率的に精液を利用できる可能性を研究する必要があると考えられ
る。

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今回の成績から、１回分の頸管内注入量として、総図７

DIUI３０日目に採取した卵巣と胎子

精子数が約５０〜１００億である８０〜１０
０ml の流通精液を

豚病会報

No.44

2004

活用して DIUI で１
０ml 使用する場合、精液の利用効率
は、８〜１０倍に向上することが期待される。
また、深部注入法を用いることにより、輸入精液や

7６）橋爪力．人工授精の意義及び得失．家畜人工授精講習会テキスト．社団法人日本家畜人工授精師協会．
平成１０年７月：２９３−２９５優良個体の精液を効率的に利用することが可能となり、

７）Steverink, D. W. B, N. M. Soede, E. G. Bouwman,

急速な豚の育種改良や生産効率の向上が期待される。

and B. Kemp. Semen backflow after inseminationand its effect on fertilization results in sows.

４） 謝辞

Animal Reproduction Science 1998 54:109-119.

試験に用いた豚胚の採材に協力していただいた譁千８）Krueger C and Rath D. Intrauterine insemination

葉県食肉公社、光町営東陽食肉センター、東総食肉衛

in sows with reduced sperm numder. Reprod,

生検査所並びに試験豚の管理をお願いした当研究セン

Fertility and Development. 2000 12: 113-117

ター養豚施設の諸氏に深謝する。

９）Belstra B. A Review : Intrauterine (transcervical)
and fixed-time artificial insemination in swine.

６．参考文献Http://mark.asci.ncsu.edu/Swine Reports/2002/

１）Mortensen S, Stryhn H, Sogaard R, Boklund A,

belstro3.htm

Stark KD, Christensen J, Willeberg P. Risk factors１０）Watoson PF, Behan J, Decuadro-Hansen G and

for infection of sow herds with porcine reproductive

Cassou B.:Deep insemination of sows reduced

and respiratory syndrome (PRRS) virus. Prev Vet

sperm numbers does not compromise fertility. aMed. 2002 Feb 14;53(1-2): 83-101.

commercialbased field trial. Sixth International

２）Christopher-Hennings J, Nelson EA, Nelson JK,
Mines RJ, Swenson SL, Hill HT, Zimmerman JJ,

Confernce on Pig Reproduction, University ofMissouri Columbia. pp. 2001 : 135

Katz JB, Yaeger MJ, Chase CC, et al. Detection of

１１）Martinez EA, Vazquez JM, Roca J, Lucas X, Gilporcine reproductive and respiratory syndrome

MA, Parrilla I and Vazquez JL. Deep intraerine

virus in boar semen by PCR. J Clin Microbiol. 1995

insemination in sows with a low number ofJul;33(7):1730-4.

spermatozoa : a new and simple procedure.

３）Christopher-Hennings J, Nelson EA, Hines RJ,

Theriogenology 2001 55 : 248

Nelson JK, Swenson SL, Ziinmerman JJ, Chase CL,

１２）Martinez EA, Vazquez JM, Roca J, Lucas X, Gil

Yaeger MJ, Benfield DA. Persistence of porcine

MA, Parrilla I, Vazquez JL and Day BN. Minimum

reproductive and respiratory syndrome virus in

number of spermetozoa required for normal

serum and semen of adult boars. J Vet Diagn

fertility after deep intrauterine insemination in non

Invest. 1995 Oct;7(4):456-64.

sedated sows. Reproduction 2002 123 : 163-170

４）Christopher-Hennings J, Nelson EA, Nelson JK,１３）伊東正吾，石崎芳彦，岩村祥吉，保科和夫：深部Rossow KD, Shivers JL, Yaeger MJ, Chase CC,

注入型カテーテルを用いた豚の人工授精による受胎Garduno RA, Collins JE, Benfield DA. Identification

性と産子状況．
第７８回日本養豚学会講演要旨２
００２１５

of porcine reproductive and respiratory syndrome
virus in semen and tissues from vasectomized andnonvasectomized boars. Vet Pathol. 1998 Jul; 35(4):260-7.
５）Christopher-Hennings J, Holler LD, Benfield DA,
Nelson EA.Detection and duration of porcine
reproductive and respiratory syndromevirus insemen, serum, peripheral blood mononuclear cells,
and tissues from Yorkshire, Hampshire, andLandrace boars. J Vet Diagn Invest. 2001 Mar; 13(2):133-42.