RI-Labeled Nucleic Acid Therapeutics Imaging
核酸医薬の体内動態研究のための、部位および塩基特異的な放射標識法
CTO 佐々木茂貴

会社概要
会社名

RINAT Imaging

代表取締役

田中 義紀（CEO)取締役

佐々木 茂貴（CTO)

本社

福岡県久留米市百年公園1番1号

設立日

令和元年7月1日• 核酸の所望の位置をラジオアイソトープを含め様々な官能基で化学修飾できる画期的な技術のビジネス展開を目的にした、九大発のベンチャー企業です。
• 核酸医薬の特定の部位の、グアノシン、アデノシン、シトシンを塩基選択的にラジオアイソトープ標識化できる技術を通じて、核酸医薬候補の正確な薬物動態の追跡を可能にします。

• 開発初期段階から動態解析を行うことで、核酸医薬開発のスピードアップ、低コスト化に貢献することを、目的にしています。

• 現在、SPECTおよびPETによるin vivo imaging 技術への展開を検討中です。
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核酸医薬の特徴
細胞DNA

核転写DDSDeliverysystem

核酸医薬

mRNA precursor

スプライシング

アンチジーンexon

デコイintron

アンチセンスribosome

翻訳mRNA

アンチセンス

細胞外受容体siRNA
miRNA

アプタマー

• バイオ医薬品である抗体医薬品とは異なり化学合成品• 細胞膜を通過し細胞内核酸をターゲットにする点が特徴• 遺伝子に直接作用して治療効果を発揮する

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臨床試験中および実用化された核酸医薬（2020年９月） 国内外で活発な臨床開発
Classification

Antisense

Name (trade mark)Mipomersen (Kynamro)targetApoB

Clinical trial

対象疾患

2013 US

家族性高コレステロール血症

Eteplirsen (Exondys 51)

DMD exon 51

2016 US

デュシェンヌ型筋ジストロフィー（DMD）

Nusinersen (Spinraza)

SMN2 intron 7

脊髄性筋萎縮症

Inotersen (Tegsedi)

TTR

2016 US2017 EU, JP
2018 EU
2018 US

Volanesorsen (Waylivra)

ApoCIII2019 EU

Volanesorsen (Waylivra)
Golodirsen (Vyondys 53)
RG6042/IONIS-HTTRx
Sepofarsen/QR-110
Custirsen/OGX-011
Viltolarsen (Viltepso)

ApoC-IIIDMD exon 53
mHTT
CEP290 Pre-mRNAclusterin

2019 EU
2019 US
Phase III
Phase III
Phase III2020 JP
2020 US(日本新薬)

DS-5141

DMD exon 53

トランスサイレチン型
家族性アミロイドーシス
家族性高カイロミクロン血症
高トリグリセライド血症
デュシェンヌ型筋ジストロフィー（DMD）
ハンチントン病
レーバー先天性黒内障タイプ10
転移前立腺がんデュシェンヌ型筋ジストロフィー（DMD）

DMD exon 45

Phase 1/2

デュシェンヌ型筋ジストロフィー（DMD）

Patisiran (Ontattro)

TTR

トランスサイレチン型
家族性アミロイドーシス

Givosiran

ALAS1Lumasiran
Inclisiran
QPI-1007

glycolate oxidase
PCSK9
caspase 2

2018 US, EU
2019 JP2019 US
2020 EU
Phase III
Phase III
Phase III

原発性高シュウ酸尿症I型
高コレステロール血症
非動脈炎性前部虚血性視神経症

Tivanisiran (SYL1001)

TRPV1

Phase III

ドライアイ

Aptamer

Pegaptanib (Macugen)2019 販売停止

VEGF

Decoy
CpG oligo

AMG0101
CpG1018(Helplisav-B)

NF-κB
TLR9 agonist(第一三共)

siRNA

2004 US2006 EU
2009 JP
Phase III2017 US

肝性ポルフィリン症

加齢黄斑変性症
アトピー性皮膚炎
B型肝炎（株）RINAT Imaging社調査による

4核酸医薬の課題：代謝・分布・薬物動態
疾患ニーズ

現在
遺伝性疾患
核酸医薬が分布しやすい肝臓癌など、より一般的な疾患
送達の困難な臓器、癌・脳など

核酸医薬 DNA,RNA類似化学構造

治療目的臓器

体内での代
謝分解

代謝分解物は広く分布

目的以外の臓器への分布は副作用の原因となる
核酸医薬そのものの高感度な追跡技術が必要
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RINAT Imaging社の目指すところ

ラジオアイソトープ標識核酸による核酸医薬動態解析
siRNA
センス鎖
アンチセンス鎖
センス鎖

酵素切断

標識位置の違う核酸のそれぞれ断片を追跡

アンチセンス鎖

活性化RISC

センス鎖とアンチセンス鎖の動態を区別して追跡6

トリチウムラベル化実施例
基礎技術：配列特異的シトシン、アデニンの化学修飾

特徴➢ 核酸医薬の候補そのものを標識化できる➢ 位置の違う標識体の合成容易➢ 狙った位置のアデニン、シトシン、グアニンを特異的に化学修飾➢ 迅速な反応・精製
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トリチウムラベル化実施例
RNA 内部の配列・塩基選択的な放射ラベル化① 標的RNAとハイブリダイゼーション
NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN
5' NNNNNNNNNNXNNNNN② 官能基転移によるrC および rAの選択的化学修飾
NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN③ NaBT4 還元によるRNAのトリチウムラベル化
NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN

7トリチウムラベル化実施例

Confidential

アンチセンス鎖修飾siRNAのin vitro阻害効果
ループ有り

アンチセンス鎖中央Ｃラベル化
Control1.21

アンチセンス鎖中央Aラベル化
Control0.80.9

Modified0.4

Native0.20.01

0.111010.40.20.01

0.1

アンチセンス鎖中央Aラベル化
Control

Modified0.6

Native0(nM) 0.0001 0.001

1.20.8

Modified0.60.4-0.10.0001 0.001

NNNNNNNNNNNNCNNNNNNNNNN
NNNNANNNNNNANCNNNNNNNNNNN

NNNNNNNNNNNNCNNNNNNNNNN
NNNNANNNNNNANCNNNNNNNNNNN

NNNNNNNNNNNNCNNNNNNNNNN
NNNNANNNNNNANCNNNNNNNNNNN

1.4

ループ無し

1Native010 (nM) 0.0001 0.001

0.010.1

110 (nM)

アンチセンス鎖のラベル化構造はsiRNAの阻害効果に影響を与えない。

siRNA 核酸医薬の特異的トリチウムラベル化例
アンチセンスC鎖ラベル
NNNNNNACNNNNCNNNNANNNNN
NNNNANNNNNNANCNNNNNNNCNNN
センス鎖Cラベル化
NNNNNNACNNNNCNNNNANNNNN
NNNNANNNNNNANCNNNNNNNCNNN

アンチセンス鎖3'側Aラベル化
NNNNNNACNNNNCNNNNANNNNN
NNNNANNNNNNANCNNNNNNNCNNN
アンチセンス鎖中央Aラベル化
NNNNNNACNNNNCNNNNANNNNN
NNNNANNNNNNANCNNNNNNNCNNN
8マウス体内動態実験実施例

Confidential

アンチセンス鎖ラベル化ボナック核酸の眼球内投与後の放射能経時変化
レンズ +硝子体

放射活性

網膜

放射活性(標的遺伝子無し)(標的あり)

1400

免疫沈降により単離した
RISC成分の放射能

眼球組織別経時変化

100806040200網膜
900400-100 0レンズ・硝子体
3060

90120

活性化RISC

H-DPM(Bq)

H activity concentration(Bq/mg)

NNNNNNACNNNNCNNNNANNNNN
NNNNANNNNNNANCNNNNNNNCNNN

150(min)180

レンズ・硝子体網膜

9マウス体内動態実験実施例

Confidential+

sense
antisense

H activity concentration(Bq/mg)

H activity concentration(Bq/mg)

競合

アンチセンス鎖rC

網膜
Retina

網膜
Retinaレンズ・硝子体Lens +

Lens+
レンズ・硝子体
Vitreous body

Vitreous body(min)

センス鎖rC

網膜
Retinaレンズ・硝子体Lens +

Vitreous body

(min)

(min)

アンチセンス鎖内側rA

ループ構造のない核酸医薬rC

網膜
Retina

網膜
RetinaLens +
レンズ・硝子体Lens +
レンズ・硝子体Vitreous body

Vitreous body(min)アンチセンス鎖 外側rA

RetinaLens +Vitreous body(min)siRNAの選択的トリチウムラベル化位置の違いによる組織別分布の違い

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（株）RINAT Imaging
核酸医薬ラベル化技術概要

1. RNAの所望の内部位置をトリチウムラベル化
2. 1本鎖ＲＮＡのみならず、ヘヤピン構造のRNAもラベル化可能
3. DNA鎖のラベル化
4. 長鎖の１本鎖RNAの内部位置のラベル化
5. 2'-OMe、2'-F 修飾ＲＮＡのラベル化
6. ホスホロチオエート修飾ＲＮＡのラベル化
特徴
1. 合成済みの、化学修飾核酸医薬リードのラベル化
2. 迅速で低コストのラベル化
3. 長鎖のmRNAの内部位置のラベル化
拡張中
SPECTおよびPETイメージング用短半減期の放射性核種によるラベル化
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