N考察

これまでの知見を総合するとキノホルムの主な代謝排世経路はつぎのようになる。

ホノレム一己ヱ図の実線は従来から知られていた系路であり，点線はキノホルムを投与された患者の原および抱合能を上まわる量のキノホルムを投与されたウサギの血清，尿，胆汁を用いて著者らが実証したものである。
しかしこの測定法で抱合体の一部が遊離型として測り込まれる可能性が残るので，今後キノホノレムのグルグロナイドおよひ硫酸エステノレを合成し，これらを含めて信頼性の高い分析法を確立して行く必要がある。

V

要ヒ＝，日抱合能を上まわる量のギノホノレムが消化管から吸収されると非抱合型のキノホルムが体内を廻り，胆汁や尿に排世されることがわかった。

-I 75ーる特異的な吸着および溶出を検討し た。
a吸着

キノホノレムの溶液 に ア ノレミナを加え振歯するとキノホ／レムを完全に 吸着し， 有機溶媒中でこの アルミナに紫外線をあてると黄色の蛍光 を発する（Feigl:Spot Tests）。特に ア セトン，酢酸エチル中での盛光は目による鑑別に感度がよい。 2 0～3 0 mgの ア ルミナを用いれば絶対量0. 3 µgの検出・も可能であり，スクリ ー ニンクテストとして役立つ。
b

溶 出－.§.アルミナに吸着したキノホ／レムは種々の有機溶媒で溶出されない。

アル ミナの溶解を最少限におさえ，キノホ ル ムを能率よく溶出する条件を検討した結果，NaF溶液を加え， よく振歯し た後， ベγゼン抽出を行なう方 法を見出した。
3.

生体試料からの抽出

キノホノレムは生体試料中の高分子物質に強く吸着される傾向があるO そこで抽出方法を種々検討した結果，溶離剤 としてピリジン，抽出剤としてベンゼ ンを用いる方法が最良であった 。

『G－

図1-177-pp七．

mm－一一切P+4毛NaF 1ml+benzene 3ml)(.2ssenV4y4rhcdpsaaoa七 n ro qJN－oe e －s r七 七 七ae a a ah v r lmpo o y ope 七 xe y a ue hccn rve d e laZIl－－slls・aenαd
reb

aqueous phase

Swash wi七hand acetone

S\lP·levapora七eresidue!+benzene 5mlalumina column

U111111pp七．

一eez qdιe－un e－一Z n n f－（ 一d e e －drn lzqrn O 七－－・em na V4Epb o eb 一＋ ＋ h eta－一－以上，検討の結果より図I，図2に示す分析操作法を設定し たOµ mole

µ moleµmole

50

2001／25020040／150十百1／／グ／G/J20

1 00 j？乙15030104hr

Total

C会 f ル： G50｜／F2hr

100 I

｜〆DID

？〆jl.F4hr

2 hr

Free

健常者の平均値士 2σ2hr

C4hr

onjugate

図J[結果と考察表に示すようにS MO N患者1 0 例¢殆どが他の肝機能検査で正常と見なされるにも拘らず本負荷試

験では健常者との聞に有意の差が認められた。 この実験結果からだけでは，これら のS MO N患者が先天的にグルクロ ン酸抱合能が低かったものか，キノホルムの服用によって抱合能の低下を来たした ものであるかの結論を出すことは出来ないυ また消化管の吸収異常も考慮に入れる必要もあるので，今後これらの問題点を解明してゆく計画である。

-182-

患者

性年令

GOT

GPT

A乙 －PA色

4522225.7B

色

2818165. 7C♀

3929273.2D♀

3722222.4E

♀

3430

284.4Zl

F合33

91 63.2zf

G

♀

65

1587.0H

♀

65

30

96.0I

♀

58

30

1918.8J♀

6531225.0謬質反応

一一一ZS

6 ケ月

中等症

6ケ月//

3ケ 年

やL重症

5 ヶ月

//

6129 ケ月

重4 ヶ月

人工区門

2ケ年

失6 ヶ月

重症失明

8 ヶ月

軽症

｜約 1 2 ヶ月

軽症

6zsTzsZS

3A乙 － Pく10, ZSく12, T ( Thymo I )そ の他

約734.11.14. 21.016ZST

＠中止後期 間約症

明< 4が正常表.N

要旨

早朝空腹時イソケトピン酸 3q O µmo I e を経口投与し，2時間および 4 時間までに尿中に排、准されるイソケトピン酸グノレクロナイドの量を測定すると SMO N患者 1 0 例中5 例は健常者の平均値土 2σより低値を示した。

-li33-

マウスの抗ヒツジ赤血球抗体産生に及ぼすキノホノレムの影響

松橋直，渡辺貞，芳賀邦夫，白井美津子，成内秀雄（東大医科研）

キノホルム製剤をウサギ ，イヌ等に投与することにより，S MO N類似の症状をひきおこすことが井形ら，俵らによって報告されているが ， マ ウスを用いて，我々も検討し，同時にヒツジ赤血球に対する抗体の産生におよi王す影響について検索を行った。 その結果は ，我々が用いたキノホル ム剤投与量では，SMO N様症状をうることはできなかったが，抗ヒツジ赤血球溶血禁の産生を抑制する例がかなりの高頻度に出現するので，以下に報告する。

I

実験材料と方法キノホルム製剤：腹腔内あるいは静脈注射には ， エ ンテ ロビオホルム（チノく薬品）を使用し，経l.

口投与にはキノホ／レム（岩城薬品）を使用した。
2.

マウス：表1に示すようにD D D系またはD DN系を使用し．大剖ゅは雌を使用し たO

3. 投与方訟a

腹腔内あるいは静脈注射：0. 3 m/Jの食塩水にエ ンテ ロビオホルム0 9 mg、あるいは， 0. 3 ,n{Jの食境水に エ ンテロピオホノレム 0 9 mgとアリナミン0 2 mgを含むよう に調製し ，オ ー トクレイプで15分間減菌し，体調l に近いtfi?t度に保ち，よく混和して注射を行なった 口b粍 l'J 投与：カルボキシメチ／レセルロ ー ズ心0.5悌溶液0. 2 meにキノホパム斉！Jを3 mg , 2mg,および1 mgを古むよう調製し，投与した むヒツジ赤血球つ注射：ヒツジ赤血球を無筒的に滅菌生理食塩水で洗浄し，2 0冊。浮遊液を作り，

4.

O l m（をマワス，DRU院内に注射したっtr'.[fll：採血は，2 0 bヒツジ赤lGL球浮jz'W,そ0 1 m［を腹腔内に注射後， 4日目，6日目， 8日目，

5

および，1 1日日に1部長血を行ない実験に（•と用した υ なお，第2回注射では ，抗原注射前，1口目，および， 3日Uに， 1 f;j：採mを行なったu6.

市JJIL京fl!ti心；1!1]定a

抗Jfll 7古：I O （音より倍数稀釈を行なった

b

緩衝液：G V Bを使用したdC

補体：1 0倍稀釈i夜を｛屯｝目した。
-184 ーマウスにおけるキノホルム投与法と溶血素価

表1�実
験系

l雌雄l

．
23－ー45スウ

キノ ホ ル ム 投 与 法匹mg／］匹×日，経路！日数；総計I (mg)。

DDD l雌90.9×1 5//

8////

5DDD 1雌ip（アリナミンip)0. 9×1 1iv∞αH

5DON i 雌50.9× I 11.8× I I

隔日：

1 3.5////

隔日（//////

ヒツジ赤血球注射（ 2 0 %9.9//

9.9ip

連日19.9ip//（アリナミンi V)

6////57////

5。

8onnli惟] 00.9×） 3ip ’ 連日：

11.79II//

1．04.5×l 3

ip :5 8.610l I//: 19.8。

I。

I 0。

DDN：雄] 03× 2

Po l連日｜//12//

雌82× 31×5po

13//

ρ

81×8PO I

14////

8O(CMC)』15DDDI雌雄I

22

I 6

DDN:I

30I7

D DN石tc

41I。

6//

I I1//

8

第第2回注射1 ～ 3 日・匹 数 溶lfil索師 ・匹数住射時のキ 溶凪l素価'』1ノホルム投,1 : 1 0 II 1 : 1 Q・1～～I} :4 Q孟 く1:10 lく1 :10，1 :40云与量小計’｝ : 20 II} : 10:麻痔l死亡l

。
。
。
。
。
。
。
。
。
。

’I’I

。
。
。
。
。

? 1日 I 辺? 2日l 3?2日，ー＋? 7町I)I 0

。
。

。

。

。
。

6.33

。
。
。
。
。
。
。
。

2日126]

8

6. 34//

4

5. 42

5. 4

1

6.3Q

。
。
。
。

I 2.63 l. 5｜酔首IJ10.1 me ／匹）

1回注射4 ～ 6日

解剖32I。

1( 4口．
）ICA 6日），

6. 02

4. 02.0。

I／「I/2

。
。

。
。
。
。 。
。 ‘ I
。
’5433。

。
。

。
。
。

。
。
。

。

0188Jイ

557IO10102526172'222939I14キノホ ノレ ムの毒性 K関する研究

池田良雄，戸部満寿夫，鈴木康雄， 小林和雄，鈴木幸子，川崎靖（国立衛生試験所 毒性部）

t者

I=スモン患者 で特異な緑色舌苔を呈する例のあること が井形らによって指摘され， さらに患者の尿(3)!2)

中に緑色物質が見出されスモ ンと緑色物 質と の関連が注目されるに至った。 その後田村はこの緑色物質 がキノホルム であることを同定し， さらに椿ら はこの結果に基いて疫学的調査を行い ， キノホル ムとスモン との密接な関係を指摘した のキノホルムの副作用あ るいは毒性に関しては若干の報告を見る が， それらのいづれ でもスモン病像の持徴とされ る知覚異常， 未楕神経な ら びに脊髄の変化を具備した変化を示す ものは見当らな い。
われわれはキノホルムの毒性を一層明らかにする目的でニワトリおよびそルモツトによる急性ならびに長期毒性実験を行，ているが， 現在までに得た成績について報告する nJI

ニワトリによる実験方法

倹体として局方キノホルムを用い， これをゼラチンカプセルに封入し， いづれも経口でー包および連続（毎日1回）投与を行った わ動物 は体重1. 2～1. s K9の市販のホワイトコーニツシユ種のメンドリ で， 一回投与実験では1群1 ～ 2 羽からな る 5 群を， また連続投与実験では 1 群 6 羽からなる 4 群を用いた の 一回投与実験では死亡および 一般症状を観察指標とし， 連続投与実験で は一般癒状， 体電， 死亡率， および死亡した動物と来期症状を呈した動物を殺してそれぞれの病理的倹索を観察指標としたn なお殺処分は先づ1 0 2の生理的食塩水による全身瀧流を行い， 続い て 1 0 %ホルマリンで同様に癒流した れ．

病理組織学的倹索は， 肉眼的所見を記録し臓器（脳， 脊髄， 坐骨神経，心 臓， 肺， 肝臓，腎臓，、牌臓）を秤量した後， 1 U係ホルマリンで固定し， 切片を作製し， H-E 重染色 ， Sudan E 染色を行い， 別に脊髄については L uxolTri chrome

結fastblue cresylecht

violet.,lYiassons

染色を行った。

果一回投与実験：

3 U U ～ 7 u U U m<j-/j均のキノホルムを 一 回程ロ投与した後 2 週間観察した。
-1 90-

1 o O o m<Jを盈与した例では投与後凡そ7時閉までは変化を認めないが2 0 ～ 2 4時間後，最色便の排地をみ， 両眼喰を閉じ勝で， 口腔内に粘液が充満し，殆んど自発運動がなく

a. るn

死亡

状況は表1に示すとおりである。
表1.

投与 量（吋／K9)

死 亡 率

3 0 0。／ 210 0 00/2

3 00 00/2

50 0 02/2 ( 12日，7000

1 /1 ( 7日 ）14日）

7 o o o m<Jを与えて死亡した例では， 腸粘膜の殆んど全域に亘って充血し， 操胃部に小潰場を認めるの連続投与実験：4群にll, 2 00, 50 0， および1 0 0 0 mCJ-／匂／dayのキノホルムを 経口投与し，oおよび2 o O m(j-群は現在（ 46.2.1 8日） 1 1 5日， また500 mヂ群では44 日を経過した。体重の推移図1に開始後3 5日間の体 重変化を示す。 2 o o m<;Jおよび5 o o m lj群では初期凡そ 2週間に亘ってや』減少傾向を示すがその後は対照群と差がな〈なる。 しかし 1 O o O mlj群では 3 日目頃より減少傾向が生じ， 初期体重に比べ5日目では約10%, 20 日前後では約2 0必減少を示すn－－ －－ーーーーーー・圃圃・ι’‘ヤー‘－，－；，. oo ・1．．．．ロ・ 吋， ，鴨川f

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図1

体

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