厚生

省

神経疾患研究委託費

筋ジストロフィー症動物の生産・開発に関する研究野村班

昭和54年度研究報告書

昭和 55 年 3 月

研究報告書の作成にあたり去る昭和43年、厚生省心身障害研究助成金「筋ジストロフィー症の成因と治療に関する研究」
・枠中丑が結成されて以来、その班員として「筋ジストPフィーマウスの飼育管理および生産」を分担させて頂きました。さらに昭和53年度からは、厚生省神経疾患研究委託費訂ジストPフィー症研究班の第一斑、「肪ジストロフィー症の基礎的研究」班（江橋証長）のうち、「筋ジストロフ
ィー症動物の生産・供給およびモデル動物の開発」を分担課題として担当してきました0また昭和
54年度より、筋ジストロフィー症研究班の第五班として、「肪ジストロフィー症動物の生産・開発に関する研究」班として独立し、私がその班長としてお世話をさせて頂いております0
この班の目的は、1）各班の諸先生方がこの研究に用いられる筋ジストロフィー症モデル動物の大量生産・供給、2）新しい筋ジストPフィー症モデル動物の開発・改良、3）筋ジストロフィー
症動物の飼育管理方法の検討、であります○これらの目的を達成するために・私ども第五班の努力は当然のことながら、同時に、動物を使う側からの情報（例えば供給動物の評価、問題提起、新しいモデル動物の要望等）の7イードバックが是非とも必要であります。この点に閑し、この筋ジス
トロフィー症研究班員の諸先生方には、常々御協力頂き感謝しておりますが、なお今後一層の御協力をお麒い申しあげる次第であります。
こゝに昭和54年度研究報告書の作成にあたり、厚生省当局者、国立神経センター、日本筋ジストロフィー協会ならびに立見、協力者各位の御努力、御協力に対し深く感謝いたします。

昭和55年3月
班長

野

村

達

次

目

次

Ⅰ．筋ジストロフィー症に関する文献調査
1．筋ジストロフィー症に関する文献

1

野

村

達

次

2．筋ジストロフィー症の疾患モデル動物

8−ヒトの神経・筋疾患のモデルとなる可能性をもつマウスの突然変異形質−

江 崎 孝三郎
Ⅱ．筋ジストロフィー症動物の生産と飼育管理方法の研究
15

1．筋ジストロフィーニワトリの生産と飼育管理に関する研究
水谷誠

2．筋ジストロフィーニワトリ飼育用アイソレータの開発

24

斉

藤

宗

雄

Ⅲ．筋ジストロフィー症モデル動物の開発

1．鳥類における筋ジストロフィー症研究用疾患モデル系統の開発
近

31

藤

恭

司

2．ニワトリ筋ジストロフィー症の遺伝分析

41−特にキャリア鶏浅胸筋の組織学的、酵素組織化学的研究−
菊 池 建 機3．鳥類における神経・筋疾患モデル動物の開発

52

水

谷

誠

4．遺伝性前外側下腿筋萎縮マウス

62

江 崎 孝三郎Ⅰ．筋ジストロフィー症に関する文献調査
1・筋ジストロフィー症に関する文献調査（1978）
野

村

達

次暮

筋ジストロフィー症モデル動物の開発研究の一環として「疾患モデル動物」「哺乳類・トリ莱削こおける筋ジストロフィーとその近縁筋疾患」ならびに「筋ジストロフィーとその近縁筋疾患に関する動物実験」について玖文献調査をおこなっている。それらの中、筋ジストロフィーに関する文献（1978）を以下に紹介する。
Hice
Montgomery．A．＆

Swenarchuk．L．：Further observations on

mYeiinated axon numbersin normai and dYStrOPhic mice．

J・NeuroL Sci．，38，77−82，1978．
RasminskYr

M・t

KearneYt

R．E．′

et

al．：Conductionofnervous

impuisesin spinal r00tS andperipheral nerves ofdystrophic
mice・Brain Res・r143171−85，1978．
Burch，T・G・＆Law′
and

motor

end

P・K・：Nomal development of muscle fibers

piatesindYStrOPhic

mice・Exp．Neuroi．′

58′

570−4，1978．

HarristJ・B・＆Ribchester，R．R．：Neuromuscular transmission

is adequateinidentified abnomai dYStrOPhic muscie fibers・Nature，271（5643），362−4．1978．
Mrak′R・E・＆Baskin，R・J・：Caiciumtransport

andphosphoenzyme

fomtionin dystrophic mouse sarcoplasmic reticulum．Biochem．
Hed．．19，47−70，1978．
Okada，E・′Mizuhirarv・r

KubtatT．＆Nakamura，H．：Abnomalities

Of the sciatic nerves of dYStrOPhic mice with reference tO thelarge

U−aXOnS・J・Neuroi・Sci．r

35，1−14′1978．

Moncktdn・G・＆MarusYk′H・：Theincorporation

ofisotopesinto

PrOteins of nomai and dYStrOPhic mouse heart and skeietal
muscle・J・NeuroL

Sci．r

35′135−46，1978．

●（財）実験動物中央研究所−1−souweine′G．．Roiiand′M・0・′et

ai・：ErythrocYte

ghost（NA＋K＋）

ATPase activityinmice with hereditarY TnuSCuiar dYStrOPhY（Strain C57BL／64J／dY）．J．Neuroi・217，183−9，1978・
Daniei，P．M．t

PratttO・E・＆Spargo′E・：Storage

andhomoeostatic

functions of the skeietai musclesin muscuiar dYStrOPhY・J・
physiol．（ond）．275，41−42′1978・

Siater，C．R．＆W01ft A・F・：Abnormal reinnervation of muscies
in dYStrOPhic mice・J・Physi01・（IJOnd）・275・73−74・1978・
Stephenst

H・R・t

Nadeaur

D・＆Sandborn′E・B・：Absorption

anddistribution of sodiun（2−14C）barbitaiin tissues of nomai
anddYStrOPhicmice・Can・J・PhYSioi・Pharmacoi・，56，76−82，

Dju，M．Y・＆Yeu，T・F・：Uric acidmetabolisminhomozYgOuS andheterozYgOuSmuSCular

dystrophic

mice・Am・J・Physioi・′234，

E241−5．1978．

Rayburnt H・B・・＆Peterson，A・C・：Naked axoninmYOdystrophicmice・Brain Resり146．380−4，1978．

Grouse．L．D．t
sionintissues

Neison′P・G・tofnormaiandetai・：MeasurementSdYStrOPhic

Of

gene

expres−mice・Exp・Neuroi・′

59．470−8．1978．
McHanwe11，S．：Abnormai transport of horseradishperoxidasefrom the mediai gastrocnemium musclein dYStrOPhic mice・
J．phys土01．

Mrak′（10nd）．277′

R．E．＆Baskint

81−82′1978・

R・J・：Uitrastructureofdystrophic

mous・esarcoplasmic reticuiun・Biochen・Med・，19，277−93，1978・
Law′P．K．：Reduced
mouse

regenerativemuscles．Exp・Neuroi・r

Atwood，H．Lこ＆Kwan′

60′

capabiiitYOf

minceddYStrOPhic

231−43，1978・

二・：DYStrOPhic and normal mice show age−dependent divergence of muscle sodiumCOnCentrations・Exp・
Neuro1．．60．386−92，1978．
EnomtO，A．＆Bradiey′W・G・：Therapeutic

triaisinmusculardystrophy．1・馳1din murine dYStrOPhy・J・NeuroL Neurosurg・
Psychiatry′41′404−7′1978・

Katyare′S．S．′Chalibergt

M・D・′etal・：Energy

COuPlinginiiver

mitochondria fromdystrophic mice：Differentiai sensitivity of−2−

0Ⅹidative phosphorYlation and CA2＋uptake to K＋・Meta七01ism′
27，761−9．1978．

Raminsky′M・：Ectopic

spinai

nerve

roots

generationofimpulsesof一■dystrophic．T

andcross−taikin

mice・Ann・Neurol・，3，351−

7．1978．
waxmn，S．G．t Bradley′W・G・＆Hartwiegr E・A・：Organi21ation of

the axoiemmain amYelinated axons：A cYtOChemicai studyin
dy／dY

dystrophicnice・Proc・‥R・Soc・I・Ond・（Beri・）・201（1144）・

301−8．1978．
Kagawar

T・T

Chikatar

E・rTani．J・＆Tsutwune′T・：Znvitro

mYOgeneSisof themononucieate celis derived fromregenerating
mlユSCles

of

adult

dYStrOPhicmice・Dev・Biol・，65′526−30，1978・

JarosJ E．＆BradieYIW・G・：Deveiopment of the amyeiinatediesionin the Ventral root of the dystrophic mouse・Ultrastructurai，
qpantitative and autoradiographic study・J・Neuroi・Sci・，36，
317−39．1978．
Libeiius，R．，Jirmanovar Z・t Lundquistr Z・＆Thesleff，S・＝＝ncreaSed endocytosis withiYSOSOmal activationin skeietai

muscleofdystrophicmouse・J・Neuropathol・Exp・Neurol・・・17，
387−400，1978．
sungr s・C・：Soiubie cholinesteraseofmuscle fromdystrophic
andnormalmice．Life

Sci．′

Beitner，R．′Habemanr

S・r

23r

69−73r1978・

etal・：The

LeveisofcyclicGMP

andglucosel．6−diphosphate，andtheactivitYOf由OSPhof血ctokinase・
inmuscle from norTnal and dystrobhic mice・Biochim・BiophYS・
Acta′

542′

537−41′1978・

wigginS′R・C・＆Moreli，P・：MYeiinof

theperipheralnerveof

the dYStrOPhicmouse・J・Neurochem・，31，1101−5，1978・
Stirlingr C・A・：A siTnPlemethod formaintaining reiative
positionsof separate tissue eiementsduringprocessing forelectronmicroscopY．J・Microsc・′114・107−9・1978・

schorr，E．E．t Arnasonr B・G・r etai・：TreatmentOfmousemuSCulardYStrOPhYWiththeproteaseinhibitorpepstatin・J・NeurOPathoi・
Exp・Neurol・′371263−8′1978・

一3−

Chickens

Ciark′

S・W・′Peckhamr

R・W・＆RudoIpht

F・B・：EnzYmeS

Of

the

Purine nucleotide cYCieinmuscles from normai and dYStrOPhic
Chickens・Proc・Soc・Exp・BioL

Med・′158′406−9′1978．

Thakar，J．H．：Studies onisoiated mitochondria from musclesOfnormaianddYStrOPhic

chickens・Biochem・Med・′19′108−17，

1978．

Stracher，A・′McGowan，E・B・＆Shafiq，S・A・：Muscuiar

dYStrOPhY：

Znhibition of degenerationin vivo with proteaseinl1ibitors．
Science，200（4337），50−1，1978．
Hanna，S・D・＆Baskin，R．J．：Comparison of the（CA2＋＋MG2）−ATPase
PrOteins from norTnai and dYStrOPhic chicken sarcoplasmic
reticuium・Biochem・BiophYS・Actat

540t144−50′1978．

Crowe，L．H．＆Baskin．R．J．：Freeze−fracture ofintact sarcotubuiar
membranes・J・Ultrastruct・Res・r

62r147−54′1978．

Missiriis′Y・F・′Kohn′1・L・′et

ai・：Alterationsin

erythrocYte

membrane materiai properties：A marker of the meInbrane abnormality

in human and chicken muscuiar dystrophy・Prog・Ciin．Bi01．：Res．，
20．189−203．1978．

Ashmore，C・R・．Vigneront p・r et ai・：Simuitaneous cYtOChemiCal
demonstration of muscie fiber tYPeS and acetYIchoiinesteraseinmusclefibersofdYStrOPhic

chickens．Exp．Neuroi．′

60′

68−82，1978．
Wiison′F・J・rCamiscoii，D．′

etai．：Zmmunohistochemicai

anduitrastructural distとibution of antibodies to troponin−C・and
troponin−Zin normal and dYStrOPhic chicken skeietai muscle．
J・Histochem・Cytochem．r36t258−6611978．

Butterfieid，D・A・＆Leung，P・K・：ErYthrocYte membrane fiuiditY
in chickenmuscuiar▲dYStてOPhY・Life Sci・122，1783−8，1978．

Bains′B・S・＆Watson，A・R・‥NutritionalmyopathY−−A cause of

ataxiain broiier chickens・Nz・Vet・J・r

26t31−2，1978．

Jensen，L・S・，Page′R・KりWilson，S・P・＆Hustont T．M．：Muscuiar

dYStrOPhyinbroilerbreederhens：Effectoftemperature．
poult・Sciり75′729−34′1978．

−4−

Sketeij，J．，McNameee．M．G．＆Wilson，B．W．：Effect of denervation

On the m01ecular forms acetyicholinesterasein nomal anddystrophic chicken muscles． Exp．Neuro1．，60，624−9，1978．
Hudecki，M．S．，Po11ina，C．，et ai．：Effect of exercise on
Chickens with hereditary muscular dYStrOPhy．Exp．Neuro1．，
61，65−73．1978．
Havia，P．，Shaffer，R．H．．Peterson，D．W．G Clifford，A．J．：
Hepatic purine enzyme profiies and uric acid overproduction
in muscuiar dystrophY andininherited tophaceous gout．Proc．
Soc．Exp．Biol．Hedり158．332−6，1978．
Beringer，T．：Stereoiogic analysis of normal and dYStrOPhic
avian alphaw mYOfibers．Exp．Neuro1．，61，380−94，1978．
Entrikin，R．K．，Patterson，G．T．，et al．：Righting，ability andSkeietal muscle properties of phenYtOin−treated dystrophic
Chickens． Exp．Neuro1．．61，650−63．1978．
Rabbits

Dahlin，K．J．，Chan，A．C．，etal．：Rehabiiitating

effectofVitamine E therapY On the uitrastructurai changesin skeletai
muscies of Vitamin E deficient rabbits． Am．J／Clin．Nutr．，
31．94−9，1978．
Takamori，M．，Hazama，R．，et al．：Active state properties of
denervated andimmobilized muscle：Comparison with dYStrOPhic
muscle．Neuroiogy（か止nneap．）．28，603−8，1978．
Chou，A．C．．Broun，G．0．Jr．，et al．：Abnormaiities ofiron
metaboiism and erYthrop01eSisin vitamin E deficient、rabbits・
Bl00d．52．187−95．1978．
Parry′

D．J．＆Montpetitr

V・J・：Histochemicaichangesinfast

and siow muscles of nutritionallY dYStrOPhic rabbits．J．
Neuropath01．Exp．Neuro1．，37，231−43，1978．

Heffron，J．J．，Chan．A．C．．et ai．：Decreasedが10SPhorYlative
CaPaCitY and respiratory rate of rabbit skeletal muscle
mitochondriain Vitamin E dYStrOPhY．
539−43．1978．

−5−

Znt．J．Biochem．，9，

Hamsters

B00th，F．W．：ZnabilitY Of myogiobin toincreasein dystrophic
Skeletai muscle during daiiy exercise． Pfluegers．Arch．，373，
175−8．1978．

Nakatsut

K・′

Morison，J・＆Edmonds′J・：ProteoIYSisin

hamster diaphragTn and abdominai muscle．
1978．

dystrophic

Experientia，34．318−9，

Guinea pigS

Schorr，E．E．．Arnason，B．G．，et ai．；Treatment of mouse muscuiar
dYStrOPhY With the proteaseinhibitor pepstatin．J．Neuropath01．
Exp．Neur01り37′

263−8．1978．

Rats

LibbY，P．＆G01dberg，A．L．：I．eupeptin，a PrOteaSeinhibitor，

decreases protein degradationin nomi and diseased muscles．
Science，199（4328）．534−6，1978．
Monkeys

Adornato．B．T．，Engel，W．K．＆

Foidart−Desa11e，M．：Eievations

Of hemopexinieveisin neuromuscuiar disease．
35．577−80．1978．

Arch．Neuro1．．

Sheep
Cheema，A．H．＆Giiani，S．H．：Cardiac myopathiesin neonatai

LaI血S：Histologicai and histochemicai studies．Biol．Neonate．
34．84−91．1978．
Geary．M．R．．Done．S．H．＆Drew．R．A．：White muscie diseasein

the differential diagnosis of clinical pneumOnia（Letter）．
Vet．Recり102，535．1978．
HorsesCaple，Z．W．，Edwards，S．J．．et ai．：Biood giutathione peroxidase
activitYin horsesin reiation to muscuiar dystrophY and
Selenium nutrition． Aust．Vet．J．，54− 57−60，1978．

−6−

二種以上の動物
Blosser，J．C．＆Appel．S．H．：Properties and distribution ofmarrmaiian skeletal muscie guanYiate cYCiase．Aiterationsin
denervated and dYStrOPhic muscie．J．Bi01．Chem．，253，3088−
93．1978．
Barnard，E．A．＆Barnard，P．J．：Therapeutic effect of5−Hydroxy−tryptamine antagonists oninherited muscular dystrophyin the
Chicken and hamster．J．PhYSioi．（IJOnd），278．29−30，1978．
Bradiey．W．G．＆Fulthorpe，J．J．：Studies of sarc01ernmalintegritY
in myopathic muscle．NeurologY（Hirmeap．），28．670−7．1978．
Siiman，Z．，LYies，J．朗．＆：Barnard，E．A．：Zntrinsic forms ofacetYIcholinesterasein skeietai muscle．Febs．Lett・．94．166−
70．1978．
Borun，P．R．，Park，J．H．，1aw．P．K．＆

Roeiops，R．Z．：Altered

tissue carnitinelevelsin animals with hereditarY muSCulardYStrOPhy．J．Neuroi．Sci．，38，113−21．1978・
Steinschneidar，A．：Glucosein vertebrate skeletai muscle
PrOteins．Biochem．Biophys．Acta．536，64−9．1978・−7−

2・筋ジストロフィー症の疾患モデル動物−ヒトの神経・筋疾患のモデルとなる可能性をもつマウスの突然変異形質一
江
研究協力着

崎

孝三郎●

水岡吾郎：庄司陽子●

ヒト疾患の病因の解明と治療方法の研究には、それらの疾患のモデルとなる実験動物が必須である0しかし、このようなモデル動物はきわめて限られた疾患について見出され、利用されているにすぎない○たとえば、モデル動物の開発が比較的進んでいる筋ジストロフィー症についてみても、
マウス・ゴールデンハムスター、ニワトリに発見されたある種の神経、筋異常動物が注目され、利用されているにすぎない。
一方、マウスにおいては、350をこえる突然変異形質が発見されているにもかゝわらず、これらの異常動物の多くは遺伝学的あるいは生物学的興味のもとに報告されているにすぎず、医学研究のためのモデル動物としての検討はほとんどされていない。
こゝでは、マウスに見出されている突然変異形質のうち、神経・筋異常に関するものについての要約を紹介し、筋ジストロ■フィー症のモデルとしての評価がなされることを期待する。
なお、見出しの英語はそれぞれの異常の遺伝子名を、（）内は遺伝子記号を示している。遺伝
子名は異常の発見された時にその外見的症状などから命名されたものが多いため、かならずLも異常の種頬、内容を適確に表現していない場合があるので注意する必要がある。
Active avoidancelearning（Aal）：01ivero，A・，et aZ．（1973）PhysioI．
＆Behav・，11，：497
Absence of corpus callosum（ac）：常染色体上の劣性遺伝子支配、脳梁が部分的あるいは全く欠損している0しかし、通常のマウスではみられない線経路一艇脳梁索が存在する。
遺伝的に同一と考えられる頸似の異常がBALB／Cおよび129／J系統にみられる。King，LS．
（1936）J・Comp．Neuro1．，64：337

Andiogenic sezure prone（asp）：Collins，R・L，et aZ・（1968）Science，
Ataxia（8㍍r）：常染色体上の劣性遺伝子支配0ホモでは生存力は低く、両性とも生殖不能である。生後2遇までは運動過剰で、3遇齢頃から3ケ月齢頃にかけて麻痺が進む。特徴としては、
振せん、運動失調、四肢の衰弱がある0中枢神経系では、脊銃後角の自質に変性、神経膠症、巣状壊死が認められる0脳梁、海馬、前交連および脳幹は小さい。Lyon，池F．

■（財）実験動物中央研究所
ー8−（1955）J・Hered・，

46：77

80unCyりe）：常染色体上の劣性遺伝子支配。致死性はなく、ホモの少数は生殖可能である。
ホモでは体型が小さく、10日今頃から運動開始時にはげしい振せんを起す。歩行、走行は可能であるが、後肢の運動失調が前肢よりひどい。Lane，P・W・（1969）Mouse News Letter，
40：30
Chlorpromazin

avoidance（Cpz）：Castellano，C・，etαZ・Psychopharm．，

34：309Cribriform degeneration（Cri）：Green，E．L，et aZ・（1972）Science，
176：800

I）ancer（Dc）： 常染色体上の半優性遺伝子支配。ホモは口蓋裂、口眉裂のために出生時に死亡する。ヘテロは生存力、生殖能力ともに正常である。回転運動、顔つき行動などの異状を皇す
るが、表現度は不完全である。つんぽではない。前庭部の骨・膜迷箱の障害にともなう、卵形のう斑の欠損が認められる。 Deol，M．S．，・t aZ・（1966）J・Embryol．exp．Morpho1．，
16：543

Disoriented（Do）：常染色体上の半優性遺伝子支配。ホモでは行動および平衡性が非走向的で、離乳時までに死亡する。ヘテロは軽症のものでは歩行時の迷い行動から重症？ものでは苦しそうな動作、hand−Standingをおこなうものまで種々の症状を示す。Dickie，M．M．
（1968）Mouse News Letter，39：27
Distonia musculorum（dt）：L常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモは生後7−10日に尾をもって持ち上げた時に後肢をにざる動作をする。肢の過度の伸長、屈曲を交互にくり返す運動
失調がみられる。麻痺は明らかでない。ホモの多くのものは離乳時までに死亡するが、数ヶ月生存するものもある。組織学的には神経系の広範囲な退行性変性が認められる。Duchen，L．軋
4才．（1964）Brain，87：367

Ducky（血）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモは正常のものより体型がやゝ小さく、生存力も劣る。性成熟まで生存したオスは生殖可能であるが、能力は低い。メスはほとんど生殖不能。
よたよた、よろめき歩きをし、倒方へたおれる傾向がある。時折発作を起す。Snell，G．D．
（1955）J．Hered‥

46：27

Tropid（duLd）：Duckyと同じ遺伝子座の異なる突然変異。ホモはきわめて緩慢な動きをする。あおむけになって、口や肢をふるわせる。立位の時には片足をあげたり、ふるわせることがある。生存可能で、生殖能力もある。Dickie，LM．M．（1965）Mouse News Letter，
32：45

Dystrophia muscularis（dy）‥

常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモは生後3遇頃より後肢の筋の進行性の弱化と麻痔を発症する。ヒトの進行性筋ジストロフィーのモデルとして広く使用されている。Michelson，A．M．，et al．（1955）Proc・Nat・Acad・Sci・，
41：1079−9−Exploratry activity（Eaa）：01iverio，A．，el aZ．（1973）Physiol．＆
Behav．，10：893
Falter（／α）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモは生後10日頃より発症し、左右にゆれるように歩く。症状はしだいに重くなり、20日齢までに全例死亡する。Yoshida．T．H．
（1960）Ann・Rept・Nat・Inst・Genetics，Japan，10：27
Hotfoot（ん○）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモのオスは生殖能力をもつが、メスは生殖不能。肢を急激にはたくような行動を示す。水中を泳がせると、胸を拡げ、体躯をまるめて肢を急速に動かす。Dickie，M・M・（1966）Mouse News Letter，34：30

Hydrocephalic polydactyl（hpy）：Hollander，W・F・（1966）Amer．Zoo1．，
6：588

Hydrocephalus−1（h9−1）：絶滅したと思われる。
Hydrocephalus−2（h9−2）‥

絶滅したと思われる。

Hydrocephalus−3（h9−3）‥常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモになっても表現度は不完全。重度の水頭症を示す個体は生後4−5遇で死亡する。ほとんど症状を現わさず、生存し、生殖能力をもつ個体もある。発症した個体の側脳室、第3脳室は拡張し、中脳水道、第4脳室にもわずかに障害が認められる。水頭症はクモ膜下と軟膜の分化の異常によって、クモ膜下領域に障害が起ることによるものと考えられる。Berry，R．J．（1961）J．Pathol．Bacterio1．，
81：157Jittery（ji）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモは生後10−16日に筋の運動失調を、続いて数日以内にてんかん様の発作を起す。運動失調と発作がひどくなると、採食不能となり、通常4週給までに死亡する。脳自質の多のう胞性変性が報告されている。Harman，nJ．（1950）
Anat．Rec．，106：304（Abster．）
Jimpy（ノi）：性染色体上の劣性遺伝子支配。へミのオスは生後20−40日で死亡する。
従って、ホモのメスを作出することはできない。異常オスは静止している時には症状を現わさないが、動こうとする時にふるえを起す。この症状は生後2遇頃よりみられる。中枢神経ではミェリンが著しく欠乏し、自質の細胞は無極性の脂質を、スダン親和性の強い原形質額粒のかたちで含んでいる。Sidman，R．L．．et az．（1964）Science．144：309
Myelin synthesis deficiency（jpZBSd）：Jimpyと同じ遺伝子座の異なる突然変異。
Meier，H．（1970）Exp．Brain Res．，10：512
Lucher（エロ）：常染色体上の半優性遺伝子支配。ヘテロでは後姫を左右にたおれるようにする独特なゆれがみられる。ふるえはみられないが、体躯を上下に動かす。症状は生後12−14日からみられ、加齢とともに顕著になるこホモは生後間もなく死亡するが、著明な異常は認めえな
い。Phillips，R・J・S・（1960）J．Genetics，57：35
Lrthargic（lh）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモは動きの間に休息をとり、背をまるめて、最初は前肢を、次いで後肢を上げる動作をする。前肢をちぢめてじっとしていることもある。
−10−両性とも生殖能力はあるが、寿命は短い。Dickie，M・M・（1964）Mouse News Letter，
30：30

Lizard（JZ）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモでは生後14日頃より症状が現れ、後肢の部分的麻痺と全身の筋組織の振せんがみられる。これらの異常は神経原性ではなく、筋原性であろうと考えられている。ホモのメスの少数は妊娠し、分娩もすることもあるが、哺乳はしない0ホモのオスは生殖不能であるが、精子形成は正常である。Mossis，T．（1966）Mouse News
Letter．34：27

Muscule deficient（7ndf）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモは縫工筋、外側広筋、大腿直筋の筋線経の著しい退行性変性および前肢筋群の軽度の萎縮がみられる。組織学的、組織化
学的観察および血清CPKの測定値からみて、この筋萎縮は、慢性的な末梢神経病の2次的影響にょるものと考えられる。Womsck，A．，et aZ・（1977）Mouse News Letter，56：40
Muscular dysgenesis（7nd9）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモでは骨格筋の正常な発達はみられず、生存して生れてくることはない。最初の障害は胎生13日に認められる0この時期に浮腫が起り、横紋筋の筋原細胞の異常分化が起る。続いて、すべての骨格筋細胞の退行性変性が起る。出生時に胸郭、四肢には筋がほとんど認められない。心筋、平滑筋、神経組織は正常である。Gluechshon−Waelsh，S．（1963）Science，142：1269・Pai，A・C．・（1965）
Develop．Bio1．，11：82
Moterend−plate disease（7ned）：常染色体上の劣性遺伝子支配0ホモは生後10日頃より発症し、歩行の不安定、左右へのゆれ、覇を上下へ動かすなどの症状を望する0その後2−3日で筋の弱化は顕著になり、後肢を体躯の後にひきずるようにして動く0症状はしだいに進行し、重症のものでは生後19−23日に、通常は26−29日に死亡する。この異常は神経・筋伝達の進行性の退行によって起るものと考えられるo Duchem，L・W・（1970）J・Neurol・Neuro−
Surg．Psychiat．33：写38

Myodystrophy（7d）：Lane．P・W・，et ai・（1976）J・Hered・67：135

NervousくれHr）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモは正常の同腹子と比較して体型が小さい。生後3．5遇頃より活動がやゝ活発になり、よろめき歩きをし・飼育ケージの壁面に立った時に倒れやすくなる。症状は数週間やゝ進行し、その後変化がみられなくなる0生存力ははゞ正常であり、両性とも生殖力があるけれども、その能力は低いo Green，M・C・（1967）MouseNews
Letter，37：33
0bstructive hydrocephalus（oh）：Borit（1972）Acta Nturopath・，21：316
0pisthotonus（opt）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモは生後10日頃に、立時および歩行時に平衡を失なうようになる。15−10日掛こは側方への転倒、著るしい反弓緊張などの症状がみられ、離乳時までにすべてのものが死亡するo Lane，P・W・（1972）Mouse News
Letter，47：36
Purkinje

celldegeneration（ped）‥Mullen，R・J・，et

一11−

al・（1976）Proc・

Nat．Acad．Sci．，73：208
Quaking（9り‥

常染色体上の劣性遺伝子支配0ホモは生後10−12日頃より、歩行時に振せんを起す。この振せんは後半身において顕著にみられる。成体では発作を起すこともある。オス、メスともに生殖可能であるが、オスの能力は低い。中枢神経系にはミェリンの著しい障害が認められる0軸索や灰白質の細胞は正常である。Sidman，R・L・，et aZ．（1964）Science，

Quivering（qv）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモの離乳までの生存率は正常であるが、寿命は短かく、多くのものは5ケ月齢以前に死亡する。オスは生殖不能であるが、メスは分娩・哺育する0ホモは運動失調、後肢の麻痺を塁する。尾を持ってもち上げた時に、後肢を握る症状がみられオスでは陰茎の菰直が起る。脳、脊鎚、神経根には組織学的な異常は認められず、尿中アミノ酸も正常である。血清タン白、血清コリンエステラーゼについても症状と関連した変化は明らかでない。Yoon，G・H．（1962）NeuroIogy，12：423
Reeler（rZ）：常染色体上の劣性遺伝子支配0ホモは後半身を真直に保つことができず、歩行時や走行時にはしばしば横転する。生存率は低く、オスは生殖不能で、メスもほとんど生殖不能である○知的にも異常があると思われる。大脳皮質、小脳皮質および海馬の組織、成層が破壊されている○小脳は正常のものより小さいが、単位重量当りのコリンエステラーゼ活性は正常の約2倍である。Hamburgh，M・（1963）Develop．Bio1．，8：165
Staggerer（sg）：常染色体上の劣性遺伝子支配0ホモは通常生後4遇までに死亡するが、成熟時まで生存するものもある。ホモはよろめき歩き、中程度の振せん、低血圧を呈し、体型は小さい0小脳皮質は未発達で、顆粒細胞は著しく少ない。Purkinje細胞は不整一になっている。
Sidman，R・L・，ei al．（1962）Science，137：．610
Shambling（J＞hm）：Green，E．L．（1967）J．Hered．58：64
Swaying（♂W）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモは起立不能で、まっすぐに前方へ歩くことができない。動こうとする時には、左右にゆれながら、後肢を中心に右まわり、左まわりと回転する0小箱に入れた時には、壁にもたれるようにして、壁にそって前進する。Lane，EW．
（1967）Mouse NeⅥるLetter，36：38

Sprawling（szuZ）：Duchen，L．W．（1975）Neuropath．Appl．Neurobiol．1：89
Tumbler（tb）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモはカニのような歩行をする。前方に進もうとするときには、とんぼ返り、ひっくり返り、飛びあがりをする。泳ぐことはできるが、ロー
プにつかまることはできない。ホモでも多くのものは生存し、生殖可能である。Dichie，M．M．
（1965）Mouse News Letter，32：43
Tottering（tg）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモの生存加ま正常で、オス、メスともに生殖可能であるが、能力は低い。生後2遇頃より問歓的な急発作を起す。後半身に障害があり、よろよろした歩行をする。Green，M・C．．et az．（1962）J．Hered．，53：233
Leaner（fgJ）：fgと同じ遺伝子座の異なる突然変異。ホモの多くのものは生存し、生殖−12−能力をもつ。症状は生後10日頃より現われ、成体では体躯の不安定と、体躯、四肢の筋の異常な緊張がみられる。小脳虫部皮質ではニューFZソの退行性変性がみられる。Sidman，R．L．（1965）
Mouse News Letter，32：37
Rolling−Nagoya（t9TOL）：tgと同じ遺伝子座の異なる突然変異。ホモは後肢の安定性にとぽしく、前進する時に体躯の動路をくり返す。症状は生後10−14日に発現し、その後数週間進行する。小脳の低形成がみられる。Oda，S．，et al．（1976）Ann．Rept．Envir．Med、
Nagoya Univ．，27：193
Tipsy（ii）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモは生存し、生殖能力もある。生後1遇頃よりウサギ様の歩行をする。その後、前姫を左右に動かす動作をみせ、よろめいたり、つまずいたりする。老齢になると症状の程度に差がみられるようになり、多少回復するものもみられる。Searlq
A．G．（1961）Genet．Res．2：122
Tremulous（tmL）：常染色体上の劣性遺伝子支配∩ホモの最も顕著な症状は振せんである。
けいれんを起すことはない。オス、メスとも生殖不能である。脳抽出の上澄液中のリン酸クレアチ
ンおよびリポースの濃度が正常のものより高い。血清コリンエステラーゼ、血清βグロブリン濃度は正常より低く、血清アルブミン濃度は高い。Yoon，C．H．，eL aZ．（1963）J．Hered．，
54：202Tee【ering（tn）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモは生後25−30日頃より、ぎこちない、かん鰻で不安定な動作をする。死亡直前にはやせおとろえ、四肢を広げて横たわる。生後5−6遇で死亡する。Lane．P．W（1962）Mouse News Letter，27：38
Trembler（Tr）：常染色体上の優性遺伝子支配。ホモとへテt］は区別できない。3−4週齢時に死亡率が高くなるが、水分の多い飼料を与えると死亡率が低くなる。生後3遇頃より、けいれん性の麻痺が発現し、刺敦を与えるとけいれんを起す。1−2遇後になるとけいれんは無くなり、頭部の振せんが現われる。成体になると麻痺がみられるが顕著ではない。脳、脊故の組織学的異常は認められない，．Falconer，D．S．（1951）J．Genetics．50：192
Twirler（Tzu）：常染色体上の半優性遺伝子支配。へテPは頭を振り、回転運動をするが、聴覚には異常が認められない。生存率、生殖能力は正常である。半規管の外形異常および耳石の減少や欠損をともなう内耳の形態異常がみられる。ホモでは、口眉裂、口蓋裂をともない、出生時に死亡する。Lyon，M．F．（1958）J．Embryol．exp．Morpho1．．6：105
Vibrator（Z，b）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモでは生後10日頃より全身の連続的なふるえが発現し、離乳時までに全例死亡する。Lane，P・W・（1965）Mouse News Letter，
32：47

Vacillance（叩）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモは生後14日頃より歩行時または後
躯を動かす時にはげしい振せんを起す。加齢とともに、振せんおよび不安定性は消失し、カモの様な歩行をする。正常なものより体躯は小さく、おとなしい。筋力は正常のものよりかなり弱い。中枢神経系に組織学的異常は認められない。Sirlin，J．L．（1956）J．Genet．54：42−13−

Waddler（zud）：常染色体の劣性遺伝子支配0ホモは生後14日頃より後腹を左右に動かし、腎部を床におろすことが多い。症状の進行はみられず、振せんや麻痺もみられないoYoon，C・軋
tal．（1963）J．Hered．，54：202

Writher（zuh）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモは生後12日頃から四肢で起立することが不能となり、その後鋼削こけいれんが現われる。発症したものは離乳前に死亡する。Kelly，
E・M・（1953）Mouse News Letter，8（CzAPPZ・）：15
Wabbler−lethal（◆zoZ）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモは生後12日頃から不安定な歩行をし、歩行時には振せんを起す。通常4適齢までに死亡する。鼠秩学的には、中枢神経系にミエリンの変性がみられる0ミェリンの異常な神経管では維管束間のクリアに萎縮がみられる。
Dickie一肌M・，et aZ・（1952）J・Hered・，43：283・Anderson，F．D．，el aZ．
（1961）NetlrOlogy，11：676
Wobbler（wr）：常染色体上の劣性遺伝子支配。ホモは生後3−4週より発症し、振せんおよび前肢の提力低下がみられる。障害は前肢および頚の筋で顕著である。組成学的には、頭部、・頸臥
前肢の筋萎縮が後肢より著明で、進行性の運動神経支配除去がみられる。大脳皮質の細胞には異常はみられないoDuchen，L・W・（1966）J・Physiol・，．183：53p
Weaver（Wp）：常染色体上の劣性遺伝子支払ホモの症状は吋やrgマウスに頸似しているが、対立形質ではない。性成熟まで生存することはなく、脳の形態では小脳の低形成がみられる。
Lane，P・W（1964）Mouse

News

Letter，30‥32

参 考 資 料
1）Biology of the LaboratoryMouse，E・L・Green（edt．）1966，Mc Graw−
Hill Book Company，New York2）Mouse News Letter．No．60，1979−14−Ⅰ．筋ジストロフィー症動物の生産と飼育管理方法の研究
1．筋ジストロフィーニワトリの生産と飼育管理に関する研栗
水谷 誠：江橋節郎●●研究協力者布谷鉄夫●
前年度に引き続き筋ジストロフィーニワトリ（NH−413）および対照正常ニワトリ（NⅡ二412）の種卵の生産をおこなうとともに、ふ卵および雛の飼育についての標準および実敦手技について検討した。

1．NH−412およびⅢ−415の維持と種卵の生産
種卵の生産コロニーとしてはNH−412系雄10、雌20合計30羽、NH−413系雄10、堆40
合計50羽をそれぞれ維持している。本年度は約10，000個の種卵を生産し、生産コロニーの更新を1回行なった。
当所における現在および導入時の受精率・ふ化率を表1に示した。導入時と現在の受精率・ふ化
表1．現在および導入時の受精率・ふ化率の比較
ライン名

NH−412NH−413

現

在

受精率

ふ化率

84
65

導

入

時

受精率

ふ化率

83

78

59

58

90

61

率を比較すると、NH−412系においては受精率・ふ化率ともに向上しているが、NH−413系においては受精率・ふ化率ともに低下がみられ、特に受精率における低下が著るしい0これらは調査した時点のニワトリの月齢が導入時のものは若く（7−8カ月齢）、現在のものは老齢（12−13カ月齢）のためかもしれない。また、NIト413系はNH−412系よりも老齢による受精率の低下が著しいのかもしれない。今後調査する必要があると思われる。
NH−412・NH−413両系には老齢に伴ない痛風を発症する個体がある（図1）。痛風の発症には性差がみられ、雌にくらべて雄に多発する。NH−412系の雄には痛風を発症する個体がかなり出現する。このため、種雄は少し多めに維持せねばならない。なぜならば、痛風を発症した雄は射精能力が悪くなるからである。NH−413系の雄においても痛風はみられるが、NH−412系より発症

・（財）日本生物科学研究所‥東京大学医学部薬理学教室−15−

個体の頻度は低い。NH−412系の雌においても痛風個体の出現することがあるが、雄に比較して低頻度である。これには雌における産卵生理の関与が考えられる。

2．人卵から中・大雛までの飼育管理
ニワトリを実験に使う場合、次の事項は大切となる。
（1）ふ卵器の管理（2）貯卵および入卵（3）検卵（4）ハッチャーおろし

151駆出し（6）幼・中・大雛の飼育管理（7）個別識別（8）日常の飼育管理における動物観察の要点（9）ニワトリのつかみ方（1q）ニワトリの麻酔・殺処分

図1．NH−413系における痛風（雄）以下、順次項目別に説明する0（1）ふ卵器の管理
大切な業務の1つである。朝・夕ふ卵器内の温度（37・8℃）、湿度（60界内外）、水盤の水量、転卵（4−6回／日）の有無を観察し、ふ卵日誌に記録する0ふ化後、ヒナの綿毛・殻で水針床が汚れるのでその都度清掃し、水盤の水をとりかえる。ふ卵器内の消毒は定期的にホルマリンくん蒸する（ホルマリン：過マンガン酸カリは2：1でよい）0水盤に入れる薬品（エソビロン：三共化成工業）も市販されている。
（2）貯卵および入卵i）貯卵：13−15℃に保たれた、冷暗所に貯蔵する0貯卵期間は2週間以内とする0ii）入卵：入卵とは種卵をふ卵器に入れることをいうの卵台には卵の鈍端を上にして、系統・ラィン別に置く。ふ卵（入卵）記壕を必らずつける0ふ卵記録の1例を表2に示す0人卵日は1週間の特定の曜日を決めておくとよい。
（3）検 卵図2に示したようなニワトリ用検卵器を用い、入卵後5日と12日の2回行なう0検卵器で卵をみると、受精卵は胚および血管がすけてみえるが・無精卵は卵黄の形がぼんやりみえるだけである0
−16−

表2．

ふ卵記銀の例系 統・ ケージ番号 交配個体 入卵数 第1回 第2回 受精卵数 異帯番号 備 考

ライン名敷 艶華中卵

誉号♀

0

1

ニ

ワトリ

〜

2

1
8

13

3
7

311001×1008

︑

5

︑

5

0
4

30

100

4
7

〝

1
4

6

l

4

0
1

413
GSN／2

20

0
6

Closed colony lOO

0
7

412

丼無精卵 嫉発育中止卵

図2．

用

検卵韓

中止卵は血管が切れていたり、異常な黒い線あるいは点がみえる。
（41ハッチャーおろし
入卵後18日にふ化棚（ハッチャー）に受精卵を卵台より移す作業をいう。この時、図3に示したような仕切りをつけたハッチャーを用い、ケージ別あるいは系統・ライン別に置く。
（5）雛出し雛がほとんどふ化する入卵22日目に行なう。ふ化した雛を個体識別し、育雛器へ移す。
1週間単位で行なうふ卵業務内容例を示すとつぎのとおりである。
月…‥リ、ッチャーおろし

木……入

卵

火……検卵（第1回目・第2回目）

金……雛出し

水……なし

土……なし

（6）幼・中・大雛の飼育管理i）幼雛（1−28日齢）の飼育管理：市販の運動場付育雛器がよい。育雛器を設置する部屋の
−17−

図3．

ニワトリ系統別ふ化棚（ハッチヤー）

室温は15−20℃に保ち、育雛器の熱源
室は32℃に保つ。初生雛の餌づけは熱源
室内および遅場動の熱源室に近いところの1部に新聞紙をしき、その上に餌をまく○
飲水器は市販の飲水器を熱源室と運動場にひとつずつ置く。同時に、育難詰付属の餌トヨ、水トヨにも給餌・給水する○ふつう
は3−4日後には、餌トヨの餌を錐がつついた形跡がみられるが、1週間くらいは水・餌ともに育雛器内にも置く。給餌・給水は
朝夕2回行なう。朝の給水時には給水器を洗瀬する。
ii）中・大雛（29−140日齢）の飼
育管理：市腹の中・大雛ケージ（図4）を用いる。ケージを設置する都星の室温は10℃以下にならないよう注意する。給餌・給水は幼雛と同様、朝・夕2回行なう0とくに朝の給水時には水トヨを洗滞する0（7）個体識別
図5に示したような市販のニワトリ用巽

図4．中・大難用ケージの例

帯あるいは脚帯を用いる。巽帯は初生鮮か
−18−

図5．

ニワトリ用巽帯および脚帯らの個体識別に用い、脚帯は中好以上のニワトリの個体識別に用いる。成急用の果しェうなどもあるが現在あまり使われていない。
個別識別の実際
i）初生雛：巽帯を左右どちらか一方の脚にまきつけ、1、2適齢時に脚からとりはずし左右ど
ちらか一方の巽につけかえる（図6）。脚にまきつける時、注意することはできる限り丸くまくことである。角のついたまき方をすると雛が大きくなった時、脚に巽帯がくいこみ血行障害をおこすことがある。また、翼につけかえる際もできる限り丸い輪をつくるようにする。輪がつぶれて異膜を圧迫すると血行障害をおこし巽帯がとれてしまうことがある。
ii）中・大雛：脚帯を左右どちらか一方の脚につける。雛が小さい時、脚帯がぬけ落ちないように調節する。雛の成長につれ脚帯が脚にくいこまないよう時々調節する。
（8）日常の飼育管理における動物観察の要点
動物観察の主限は異常鶏の早期発見にある。このため、ニワトリの主な感染病については一通りの知識を身につけておく必要がある。病鶏の外見による一般的症状としては、じっと立ったまま眼を閉じ、巽羽・尾羽をたれ、肛門付近がよごれていることが多く、異常な呼吸をするなどがある。
観察時期は給餌・給水の時がよい。健康鶉は先を争って食べるが病鶏はじっと動かずにいるか、動いても動作がにぷい。
動物観察の実際i）朝・夕の給餌・給水量の確認：食餌量・飲水量が低下した場合はその原田を早急に調査する。
原因としては次のことが考えられる。
a．水トヨ・餌トヨへ雛がくびを出すためのすき間がせまい。

−19−

b．動物を新しいケージに移動した時、この場合は1時的なものである。しかし、2日も3日も続くようであれば、他に原因があるはずであるから調査する。よくある
原因はウォーークーカップなどを使用している時、水の場所がわからず、体力を消耗してしまうことである。こんな時は朝・タウォーターカップから水をあふれさすようにしてニワトリに教えればよい。
ii）系統別あるいはライン別の飼育：系
統あるいはラインが2系統以上の場合は少なくとも中雛時期から系統別に飼育すべきである。系統によって活力、食餌量、飲水量が異なり、一緒に飼育すれば弱い系統の維持はますます困難になる。
異常鶏出現時には系統差などがわかりや
すく遺伝性か否かの判断あるいは病気に対する感受性・抵抗性の判断のめやすとなるoHi）年齢別に注意する具体例
a．幼雛：ふ化後1週間は毎日観察する。
a．脚にまきつけたもの

b．巽につけかえたもの
図6， 巽帯のつけ方（初生雛）ー20−ケージの金7ミに足をひっかけて、ひどい時は餓死するものもあるので注意を要する。糞が肛門の周囲にくっついて糞づまりをおこしている個体をみつけたら脱糞してやる。下痢をおこしているものはすぐ病気の専門家にみてもらう。
b）中・大雛：密飼い（定数以上のトリを一ケージで飼育すること）すると尾羽のつけ板や巽羽のつけ板をつつかれ出血している個体が出現することがある（カニバリズム）。このような個体をみつけしだい隔離し、単飼い（1羽のみ飼うこと）し回復させる。
（9）ニワトリのつかみ方
i）一羽のつかみ方
ニワトリの年齢によってつかみ方は次の2つにわかれる。
a）初生雛から2−3週給まで：図7のように異を体にぴったりつけて背からわしづかみにする。

図7．
初生雛から2、3
適齢までのニワト
リのつかみ方図8．
4適齢から成鶏までのつかみ方−21−b）4遇齢から成鶏まで：図8のように左手の平を上にしてニ■ヮトリの前方から腹側に入れ、ひとさし指と中指の間にニワトリの両脚を固定し、左腕に体を支える0右手はトリの背に軽くおき両翼を固定する。
ii）2羽以上のつかみ方
鶏群の移動の時などに使うつかみ方である。
右手でニワトリの片脚をつかみ、左手に移す。
左手にはつかめるだけつかむ。短距離移動する場合は右手でニワト
リの体を下から支えるようにして運べばよい。
多数羽を長距離移動する場合は輸送用ケージ（図9）に入れて移動
図9．ニワトリの輪送用ケージする。
図10のように、両翼をかさねるようにしてつかむと、幼・中・大雛の骨はやわらかく、
おれることがよくあるのでこのような持ち方はやめるべきである。ましてや、片異のみでっりさげるような持ち方はもってのほかであるハ

最後に、NH−413系のニワトリのケージからの出し方についてのべる。筋ジストロフ
ィーを発症し、翼があがらないため脚をつかんでケージから出すと異がケージにかかり出すことができない。そこで、NH−413系に限り、頭部をつかんで頭から出す方法がよいと思われる0
仕切 ニワトリの麻酔・殺処分i）麻酔：ベントパルビタールを用いて行なった麻酔テストの結果を表3に示す。適量
図10．ニワトリの悪いつかみ方一22−

は静脈注射で15−25呼／鞄と思われる。しかし、個体差があるため注射後眠らなければ追注する。この時、追注量は5巧以内にする。
表3． ベントパルビタールによる麻酔試験（静江）
供試鶏GSN／2系

ベントパルビタール量 検査数 死亡数 生存数 非睡眠数 睡眠率（界）死亡率（界）∬7呼／RF
0

0
8

0
2

0
0
1

0

0
0
0
0
0
0
1
1
1

0

0

0

0

0
0
4
0
1

3

40

4

35

5

30

4

25

2

5

0
2

2

5

0

1

5

0

0

5

1

1

5

4

0

5

5

5

15
20

ii）殺処分：ベントパルビタールの深麻酔による。表3に示したごとく、ニワトリの致死量は静江で40叩／鞄である。

−23−

2・筋ジストロフィーニワトリ飼育用
アイソレータの開発
斉

藤

宗

雄■

最近、肪ジストロフィーマウスと併行して筋ジストpフィーチキンを使う研究者が増えてきている。
筋ジストロフィーチキンは、胸筋が弱いために倒れると起きあがれない、また感染症に弱く、動物実験の場ではコクシジウム症と思われる病気によって詫死する場合が多い。このことは、筋ジス
トロフィーチキンを用いた動物実験の障害となるばかりでなく、その成績をしばしば狂わせる。このような状況にかんがみ、われわれは筋ジストロフィーチキンを安全に飼育する管理方式と、その装置について検討する。
本年度は、筋ジストロフィーチキンの飼育状況と問題点、ならびにその対策、特にニワトリ用ア
イソレータについて検討を加えた。

1．飼育管理の現状
筋ジスチキンの飼育管理は、維持繁殖と動物実験を目的としたものに大別される。
（1）繁殖、生産施設の現状
現在、筋ジスチキンの維持生産は、山梨県小渕沢の八ツ岳高原にある、財団法人日本生物科学研
究所実験動物研究所でおこなわれている。ここの筋ジスチキンの飼育舎は木造トタン屋根で、感染防御施設（例えばSPF動物舎）としては充分とはいえない0しかしながら、i）周臥こ人家は少なく、ii）ニワトリの飼育場がない、iii）外来者が極めて少ない、iv）搬入物品の汚染に注意を払っているのが現状である。筋ジスチキンはこのような飼育環境で、5年にわたって維持繁殖が事故なくおこなわれている。このように、飼育室周辺の環境は疾病感染の予防に、かなりの効果を持つ
ことが明らかである。
なお、同研究所においては、同上実験動物研究所で白血病フリーチキンの多量生産もおこなわれている。

（2）動物実験施設での現状
筋ジスチキンの動物実験は、各地の研究室でいろいろな飼育管理がおこなわれている。現状調査
は筋ジスチキンを比較的多数用い、飼育管理状況の記録が比較的明確な研究所を対象に、その状態を調査した。
飼育室は、通常白色レクホン種を用いた実験がおこなわれているニワトリ用飼育実験室で、昭和54年10月より筋ジスチキン用にその1角と洗肱室をあてている。飼育室は空調撥付きで温度、湿度ともにコントロールされている。（図1）飼育器材は筋ジス専用とし、他のニワトリとの共■（財）実験動物中央研究所−24−

用を避けた。飼育管理者はニワトリ用の専任者をあてた。
筋ジスチキンの実験は、供給された筋ジ
スチキン卵を僻卵器で僻化させ、飼育室内の育紙器で育成する。実験用ケージには10
遇で移し実験に供する。
数回にわたっておこなわれた実験では、僻化率の著しい低下、幼鶏の死亡、成鶏の血便が多発する。このような現象はコクシジウム症に典型的である。
数週間にわたるこの研究所の飼育管理状
況を表1に示す。
日生研水谷らによれば、日本の産業用ニ
ワトリのほとんどがコクシジウAに汚染されており、動物実験に使用されるニワトリも、その流用であることから例外とはいえない。この研究所のコクシジウム汚染は濃厚で、使用前に部屋の消毒、器材の隔離などに留意してもコクシジウム症の発生は抑えられなかった。
全ての動物実験室が、この例と同様とは

図1．動物実験用飼育室の一例

いえないが、多くの筋ジスチキン飼育室は、

表1．動物実験室における、筋ジスチキンの飼育経過の1例
飼

育

経

過

0
1
2
3
4

飼育室の消毒但し白レグとの同居は避けられず検卵（受精率dy／dy94．2界，＋／dy80・2％）
辟化（僻化率dy／dy33界，十／dy867b）
育すう器に移す

5
7
8

幼ニワトリの死亡が続き、成ニワトリの血便も続く

6

自レタに血便が発生
幼ニワトリが多数死亡

901

実験を再スタートするため、全ニワトリの処分を指示

飼育者の週報を参考にした。

−25−

1979．10−−1979．12

ニワトリ用飼育室があてられ、過去ニワトリを飼育したとか、隣室や同室にニワトリが飼育されている場合、産業用ニワトリの汚染状況から玩推して、動物実験室のコクシジウム汚染は極めて濃厚である。筋ジスチキンを用いた動物実験の現場では、コクシジウム症が大きな障害となっていると推察される。
繁殖場でコクシジウムフリーに維持されている事実が存在することから考えると、動物実験の場でのコクシジウム症も解決できないことではないと信ずる。
なお、産業用ニワトリのコクシジウム症対策は、市販飼料中に抗コクシジウム剤が混入され●ているので問題になっていない。

2．実験動物の微生物自勺飼育管理
実験動物の感染防御は、日生研でおこなわれている繁殖場のように、汚染のない区域で飼育する
か、感染経路を断った飼育が必要である。
動物飼育において、予想される感染経路は、①動物それ自身、㊥飼育器具器材、㊥作業者および実験者、㊥空気の流れ、にまとめられる。
実験動物界で広く普及しているSPF動物施設（Barrier systemと呼ぶこともある、図2）「十−「図2．SPF動物舎の一例 （財）実験動物中央研究所・野川生育所平面図（野村，1962）（注）A 自動ケージ洗浄扱
8 両扉オートクレーブ
1．入口 2．オフィス 3．ロッカー室 4．洗浄室 5．準備室 6．動物飼育室 7．出荷重
8．オイラー室 9．倉庫10．変電室11．シャワー室12．更衣室13．飼育勒先浄室14．ポンプ室−26一

では、SPFとして信痕のおける動物を、感染のない経路で搬入する。飼育器材はすべて雨扉のオートクレーブを用いる。その方法は外側（汚染側）の扉を開け器材を入れ、高圧蒸気滅菌後、内側（活浄側）の扉を開け滅菌済器材を搬入する。作業者ならびに実験者は、外更衣室で全裸となり、シャワーを浴び、内更衣室で滅菌済作業衣を着用する。空気は高性能フィルターを通して空調した
空気が送られる。飼育室の床、壁、天井、扉などは、消毒が確実におこなえる構造とする。
このようなSPF動物舎は、マウス・ラットを始めとする感染防御飼育室として広く利用され、その効果が確認されている。しかしながら、SPF動物舎は建物全体を清浄とするため、施設は新設するか大改造が必要である。これには莫大な費用を要する。また少量多目的の実験に使用する場
合、実験者や器材の出入が頻繁となり、清浄度の維持が困難である。したがって、SPF動物舎は、繁殖あるいは多量の動物を用いる毒性実験などに用いられている。
無菌動物飼育装置ビニールアイソレータは、感染を確実に絶つことのできる簡易飼育装置である。
この装置は1956年P・C・Trexlerの考案によるものである。（図3）その概要は、動物

図3．無菌動物（マウス・ラット用）飼育用アイソレータ
間口1，200mm，を1，200佃×600mmX600mm

奥行600m一

高さ600悦はどの大きさの袋に収容する。空気は細菌を完全にロ過できるフィルターでロ過し、送気する。排気は同じ性能のフィルターを通す。飼料その他飼育器材は特殊滅菌缶に入れて高圧蒸気滅菌し、2重扉の物品搬入口より搬入する。飼育操作はビニール袋に密着したゴム手袋を通しておこなう。通常動物収容匹数は、マウス30匹、ラット10匹種である。ニワ
トリの収容匹数は未検討であるが、本体が軟質ビニールフィルムであるので、いろいろな型のものを製作することは比較的容易である。
このように、ビニールアイソレータは微生物感染を確実に絶つことができる。小数の動物を対象

一27−

とする実験には、大きさも適当で、その目的に合わせて特別な寸法を加工することも容易であり、価格も比較的安価である。実験台サイドに置くことも可能である0以上のようなことから、筋ジス
チキン動物実験用飼育装置としては、ビニールアイソレータ方式が適当と考える0

5．ニワトリ用ビニールアイソレータ
ニワトリは、マウス・ラットに比べ体型が大きく、飼料や水の摂取量も多い、これに伴ない排泄量も著しく多い。また、羽が抜け換わる時期には、多量の羽が抜け落ちる0通常ニワトリの飼育は、全面金網ケージで、その側面に自動給餌給水装置を付け、排泄物は下に落とし、集めるか流すよう

そこで、ニワトリ用ビニールアイソレータは、次のような条件が具備されなければならない0①
ニワトリの収容できる大きさであること、㊤飼料や水の搬入が容易であること、㊥排泄物の処理が容易であること、④送気及排気量が充分であること、などである0ゎれわれは、過去SPFニワトリ育成研究に協力し・いくつかのニワトリ用アイソレータを設計し製作した、その例を紹介する0

図4．

ニワトリ用大型アイソレータ

図4に最初設計製作したアイソレータを示した0これは・ニワトリの大きさを考慮しビニール本
体を2，000mX600仰×800mm、物品搬入口を直径450†肌と大きくした0これに伴ない、フィルターを2個、排気トラップを2個、手袋を2双取付けたいニワトリはアイソレータ内でケージ飼育し、飼料や水の搬入、ならびに汚物の搬出はマウス・ラットと同様におこなった0このアイソレータは、従来のマウス・ラット用を大型にしたのみであったため、水の供給と排泄物処理が困難−28−

であり、充分な効果は発揮されなかった。
NI札

USAにおいて使用している、白血病フリー卵採取用アイソレータを図5に示す。

図5・白血病フリー卵採取用アイソレータ（NIH，U．S．A．）

ビニール本体の大きさは約1，800mXl，200mmXl，別Ommで、ニワトリはビニールや手袋を破かないよ
う噂や爪を切って、アイソレータ内に放飼いする。アイソレータの中央には育雛と卵卵両用のケージを置く、給水ならびに洗散水は外部よりホースで滅菌された水を送る。排泄物は多量の洗献水と共に逆流を防止したトラップによって排出する。送風量はビニール本体に取付けた圧力計によってコントロールされる。飼育操作は、他のアイソレータ同様手袋を通しておこない、物品の搬出入も他のアイソレータ同様におこなう。この飼育方法は、喝と爪を切り、ニワトリをアイソレータ内で放飼いできることが特徴である。また、滅菌水の給水、排泄物の流水トラップによる搬出など合理化が画られている。
NIH．USAの7イソレ一夕を参考にして、近年製作したSPFニワトリ用アイソレータを図6に示した。
ビニール本体はマウス・ラット用のものを使い、その底に直径約10仇の塩ビパイプを取付け、その先端をU字形に曲げ流水トラップとした、台とスノコは木製である。水は別途に滅菌したものをアイソレ一一タ内に送るようにした。飼料は2重蓋付きの給餌器をアクリルで製作した。物品搬入口は、マウス・ラットと同じである。ニワトリは喝と爪を切って放飼いすることによって3−5羽の飼育が可能となり、現在SPFニワトリ飼育実験に用いられている。
このように、ニワトリ用アイソレータは、各地でいろいろなものが製作使用されている。しかしながら、維持繁殖を目的とするものが多く、動物実験を目的としたものは少ない。そこで、筋ジス
ー29−チキン用アイソレータは、過去のものを参考にし、コクシジウム感染防御し実験に使い易いニワトリ用アイソレー
タを設計製作し、その実用化を画りた
い、このことによって、筋ジスチキン
飼育管理は確立するものと思う0

図6．SPFニワトリ用アイソレータ−30−

Ⅰ．筋ジストロフィー症モデル動物の開発
1．鳥類における筋ジス．．．トロフィー症
研究用疾患モデル系統の開発
近

藤

恭

司●

1．実験動物としての鳥類
実験動物は、 研究に重要であるとして飼いならされ、合目的に育成・繁殖・生産された動物と定義されているが、この定義の中にある 研究 という言葉は極めて漠然とした概念であり、また 動物 という言葉も広い範囲を含んでいてまとめにくいことである。こゝで表題に掲げたように、動物を鳥顆ということに限定し、研究ということは、 筋ジストロフィー症研究用〝に定めると、極めて具体性のあることとなる。しかし、どのような鳥がこの研究に有用かという問に対しては、答は容易ではないであろう。ヒトと鳥との類似性、あるいは鳥類という動物における研究をもって、ヒトという一種頬の動物の生物現象を解析してゆくことの意味合、これらはどのように整理されるべきか。この問題は、動物実験からヒトへの外拝という基本問題でもあり、後に 広義の育種−比較生物学的実験動物の開発〝として論ずる。
tt筋ジストロフィー症研究用 という方は一般論としては 疾患モデル動物育成〝となる。その疾患モデル動物〝を討議してみると、 ヒトの疾患に類似の症状を示す動物 ということではあるが、実際には必ずしも症状をあらわさなくとも、その疾患の研究に役立つようなものを包含した方が庚利である。そう考えると、筋ジストロフィーという疾患をやゝ広く解釈し、神経筋疾患、およびそれに関連すると推定される代謝異常の鳥、特にそのような症状を自然発症的にあらわす鳥顆系統を育成するという考えにまとめられるであろう。このような考えは 狭義の育種−遺伝的統御￣と呼んでおく。
111）広義の育種−比較生物学的実験動物の開発
こゝで哺乳頬の実験動物をはなれて、鳥規をとりあげたということは、鶏で常染色体性劣性の遺伝子am（abnormalmuscling）が発見さtJ〜筋ジストP7イTの疾患モデル動物として役立っているという歴史的経過による面が大きいが、基本にもどって、医学研究における鳥現実験動物の意味を論じておく必要があろう。
動物分頸学からみると表1のように、爬虫類・鳥現・哺乳類は有羊膜類（Amniota）に入り、以下に示すような共通性をもっている。
（i）先生が羊膜・羊水の中で行われ、尿質の排泄や呼吸は尿膜によって行われる。
（ii）箆裂を生ずるが、既呼吸を営まない。
畑）辟化あるいは出産後は、肺で呼吸し、泌尿の働きは後腎による。
●名古屋大学農学部

ー31−

衰1．

脊椎動物の分類脊椎動物門

晰鮎網i芸中霊獣態上綱

哺乳綱

動物実験での研究結果をヒトへ外挿するには、動物学的共通点と相違点を整理して論をすゝめな
ければならないが、その意味からは上記の有羊膜頬という共通点は重要であろう。
一方実験動物の意義は、 発生から成長段階、性成臥老化というような動物の一生すべてが観察できること〝であり、われわれの手もとで繁殖できることが基本条件である。上記の有羊膜猿の中の共通点も発生学的に論じられているが、実験動物技術からみれば、 繁殖なくして発生学なし−
である∩
動物の本質は発生を知ることによってはじめて理解できる所が多い。ところで発生をしらべるという立場をとると、哺乳類と鳥類では、その研究効率は非常に差が大きく、鳥叛の方が有利である。
例えば、致死遺伝子による現象を観察する場合に、マウスやラットならば、その遺伝子についてへ
テロの98を交配して、その？すなわち母体を剖検する為、常にへテPの個体を育成する

増殖群〝を用意しておかなければ研究を進行させ憩い。このような増殖群を維持することは容易ではなく、かなり実験動物生産の専門的知識が必要となる。ニワトリならば、ヘテロの98が用意できれば、その卵を僻卵器に入れて発生をしらべてゆけばよいのであって、個体（卵）ごとに観察ができ、母鶏が卵を生みうる年月そのまゝに仕事を続けることができる。鳥頸実験動物は発生学的にみるのに有利ということは特筆すべきであろう。
次に神経・筋の働きに焦点をあてると、鳥煩の飛翔という運動は特徴的である。鳥煩といっても、その飛翔能力には種掛こよる差が著しい。どのような鳥を実験動物として選ぶべきか、また実際に選びうるか、ということはむつかしい議論となる。唯、こゝで注意を払いたいのは、産業的に用いられている鶏の飛翔能力は極度に退化させられている、・ということである。しかし後に述べるように、鶏の中にも飛翔能力・運動能力の正常な系統を育成することは可能である。
112）狭義の育種−遺伝的統御・系統育成
産業的に使用されている鶏種は、正常の運動能力を持っているか否か疑問であると述べた。これは筋ジストロフィー症研究の上からは重要な問題であろう。このような問題を整理してゆくことは、同一種の中の退伝子組成（広義の遺伝子型）の差〝を取扱うことで、まさに狭義の育種である。
鳥類の実験動物としての系統育成という立場をとるとき、第一に注意しなければならないことは、−32−

マウス●ラットなどのように、兄妹交配を20世代以上継続させて遺伝子組成からみてホモ性の高い系統（近交系）を育成することは極めて困難（不可能？）で、鳥煩で兄妹交配を代々続けると数世代で絶滅する。従って、鳥頬で近交系と呼ぶ場合には、マウスのように厳密なものではなく、かなりへテP性が残っているものである。
次に注意すべきことは、血液型の研究についてである。鶏では同種免疫によって、A，E，B，C，D，L，N．H，Ⅰ，J，K，PおよびRといったシステムが分析されていて、BがMajor
Histocompatibility Systemとして重要である2とこのBシステム抗原性について、表2のような特異性が示されたりしていて、マウスのH−2やヒトのHLAに対比されるものではあるが、これらの記号は国際的に共通なものではなく、表3のように国（研究者）によってやゝずれがある。日本では岡田（広島大学）を親準としている聖
表2・

Anti−

Chart of B（MHS）Specificities

Individual Antigenic Factors

genS l2345678910111213141516171819加2123公益訪㌘乃
81

5

8

2

8

9

810

12

3

6

7

8

4

2

9

4
3

9

7

4

8

121314

21

1314

21

101112131415

18

8

813

4

817

5

6
6

7

8

15

9？？？？？？

17

5■

㌘

Ⅱ）21

15161718
111213

別∴5262日診

21

別

訪㌘

19ⅩI Zと？？2

茄㌘・

AfterI沌la et aI．（1974）and unpublished results（K．Hよ1a）2）
研究上、臓器移植を行う場合、同じ型の鶏がえにくゝ不便が多い（表4参照）。他の家畜（牛、馬、豚）では、抗血清の国際同定試験が行われているし、マウスのH−2なども勿論国際的にはっきりしているわけであるが、鳥類の中で一番進んでいる鶏でも、このような欠点を持つ。ウズラを始として他の家禽でも国際間の同定は行われていない。
m遺伝子をもつ鶏のNH−413系なども、Bシステム等についてこれから整理してゆかなければならない。しかし、そのような精密なことではなく、実験動物としての鶏の系統ということを一般的立場からもう少し整理しておく必要があろう。
マウス・ラットなどでは、品種という分類段階は用いられていないが、鶏では家禽化されるに伴って、卵用、肉用、卵肉兼用というような使用目的に従う大分類が生じ、さらにそれぞれの大分類の中に、 人間の利用できる性能について、ある程度の整一性をもつ動物群で世代を重ねてもその整一性を維持できるもの がつくられ、それぞれ品種名がつけられている4と鶏の系統という場合には、品種内のさらに小さな繁殖集団をいうが、マウスなどのように厳密な−33一

表3・ニワトリ血液型遺伝子記号の比較（岡田1971）のくAシステム1

岡田（日本）Ar AH Af

McDermid（英国）A3A2AO
Briles（米国）Aa A2 A．

岡甲

B▲BB

BC

McDermid Bll B2
Briles B4

80

87

B‡

80

8

824

80

Bも

8

B

BB B14BT BO B38B13BI B14B12BlOBI B2

810B2283

82

D

B8

B2

（Dシステム）岡田

Dqが00Sterlee（オランダ）D3
Briles

D3

D2

D2（Eシステム）

岡

田

E8E。

00Sterlee E2

E2

Briles

E2

E2

表4．
Line

Chicken Lines for the MHS（B）

Charact．

Bsystem

CA Inbred．WL

Bl

CC

〝

B2

IA

〝

888，8叫

IB

〝

813

Place

CitationHa言ek et al．

1964．Prague

1938．Reaseheath

Gilmour

1964．Prague

Hala et al．

WA InbredCudkmLeg B84，BR5

1938．Reaseheath

Gilmour

WB

B10

1964．Prague

Hala et al．

F Inbred Silky Leg B17

1963．Prague

Ⅹ

Thornbers

Mc Dermid

81，82

Iowa State Un．

Schierman＆
Nordskog

9

広

from

WA

Closdflo止WL

812，82182，814

G Par彗豊。。
Closed．WL

allels島大BM−C Black Minorca

B▲

NG−N NagoyaBB〝

WL−G W．L．

BO，BM

〝

名

Hよla（1977）2）ぉよび 近藤（1972）4）より作成。
−34−

大・日

生

研

近親交配を行っているものではない。従っていずれの系統もその起源となっている品種を重要祝しておく必要がある。

2．比較生物学的意味での鳥類の実験動物化一広義の育種一
有羊膜頬としての共通性とi卵生、飛翔というような特色からみて鳥類実験動物は、筋ジストロ
フィー症研究の場として有用なものと考えられる。
しかし、鳥類の中からどの種を選ぶのが妥当かということは議論のあるところであろう。哺乳類について論ずる時には、ヒトとの類似性という分類学上の筋道がたてられるが、表1のように、哺乳類（とりと鳥類とは系統樹的にみて別の枝となり、基本的に比較の立場をとるならば、爬虫頬までも含めて考えなければ意味が乏しくなる。従って現段階では鳥類の中から実験動物としての種を選ぶならば、なるべく分類学的に離れた数種の鳥を選定することと、次に論ずる 狭義の育種〝の可能な鳥という配慮によってきめざるをえない。そうなると、入手可能な家禽の範囲から手をつけることになる5乞 家禽ということは、生産可能という意味も含むわけである。
1）ガンカモ目、ガンカモ科（アヒルおよびガチョウ）
水禽と呼ばれている家禽で、日本での産業的基盤は低いが入手可能であり、卵で入手し附ヒすることもできる0特にアヒルには、品種も多いし、常時僻卵しているところでは、ミュ「タントも発見されていると推定される。鶏よりもリンパ系の発達がよく、免疫学的には注目すべき鳥規である。
飛翔能力は退化著しい。
バリケンと呼ばれる鳥は、多くの書物に、アヒルの一品種のように記されているが、アヒルとは近縁・別種の鳥である。日本では家禽としては用いられてはいない。
2）キ ジ 目
この目には家禽および家禽に類した飼鳥が多い。キジ科に屈するものに、鷲、ウズラの他に、キジ、コウライキジ、キンケィ、インドクジャクなど広く飼育されている。負、ウズヲについては後述する。
ミフウズラという鳥は、ウズラと混同され易いが、これはツル目であって分頬学上はかなり異なる鳥である。
この目のホロホPチョウ科のホPホロチョウ、シチノンチョウ科のシチメソチョウも共に産業的に用いられている家禽である。
3）ハト日、ハト科、ドバト（ジュズカケバト）

ドノミトは、伝書鳩と同一種の動物で、各地に野生化している。飛翔にかけては完全な鳥であり、P素養乳をもって子を育てるという特徴がある。人工育紅は容易ではない。
ジュズカケバトは、野生のキジノミトと同一種の動物で、手品師の用いるギンバトがこれに属する。
共に筋肉の働きという意味からは重視すべき鳥であろう。
4）オウム日、オウム科（セキセイインコ）
極めてポピュラーな飼鳥で、飼育も容易であり、羽色の変異も多い。
−35−

5）スズメ目、キン′ミラ科（プソチョウ、ジュウシマツ）、アトリ科（カナリヤ）
これらは、いずれもポピラーな飼鳥で、飼育も容易である。特にプンチョウは、原産地はインド
ネシャであるが、日本で広く飼育されていて、自文鳥の毛色変異も日本で生じた突然変異である。
常染色体性、優性白で劣性致死を伴う。また地域的には野生化しているプソチョウもある。

以上の鳥掛ま、家禽や飼鳥として日本にあって、入手可能なものである。しかし、実験動物としての整備はされていない。今後、神経・筋の働きという観点から、飛翔能力の完全な鳥、退化している鳥など相互に比較しつゝ、桂現を選定して、次の 狭義の育種〝によって、疾患モデル動物育成に進む必要があろう。

5．鶏、ウズラにおける疾患モデル系統の育成一狭義の育種一疾患モデル系統育成の方式は、マウス・ラットのように完成されている実験動物では、表5のような手法で行う。すなわち、ポリジーン的体質を扱う場合には、1の方式となる。何の適応試験ならば、 該当の疾患を診断する規準〝をきめて、維持されている種々の近交系についてテストして、系統間差が明瞭か否かしらべてゆく。差が明らかで特徴のある系統が発見されゝば、疾患モデルたりうるわけである。
また、これらの適応試験の結果から、必要に応じて種々の交雑群をつくり、育種素材として、目的の方向に淘汰選抜を行って、新たな疾患モデル系統育成をはかる（表5の1叫叫）のが常法である○

表5．

疾患モデル系統の育種方式

1．・ポリジーン的遺伝体質を基本とする手法（叫 適応試験法目的とする疾患をしらべる方法を定め、既存の多くの近交系について特性や系統問差異をしらべる。
掴 淘汰選抜法
上記の系統間差異をもとに、種々の交雑群をつくり、それらを育種素材として、淘汰選抜を代々継続し、目的の系統をつくる。
2・主遺伝子を基盤とする手法㈹ ミュータント系育成
遺伝子記号をもって示しうるような遺伝子（主遺伝子）が特徴ある症状を示す場合である。最初の主退転子は偶然な発見による所が多い。
掴 遺伝子導入法
上記のような主遺伝子を既存の近交系に導入して、遺伝的背景の異なる系統を育成する0−36−

3−（11鶏における種々の品種・内種の検討
鶏では、上記の適応試験を実施するような実験動物としての系統は用意されていないし、前にも述べたように近交系と呼ばれているものも、マウスなどとは多少意味を異にする。また筋ジストロ
フィーというような疾患は、生存上著しく不利なものであるから一般には存在しない筈である。しかし、前節で論じたように、神経・筋等の働きを考える上で検討すべき鶏種はかなり多い。特に日本には、日本鶏と呼ばれる品種が多く、独特の体質をもつ鶏種にはめぐまれている06）
現在鶏肉を生産しているのはブロイラーと総称される一群の鶏種で、これは品種ではなく、交雑群に属する。これらの鶏は入手し易いが、生産する会社によって鶏瞳は異なり、研究用には不適当である。両も異常な程成育を早くし体重が増加するように育種された鶏で、筋肉そのものが正常の働きをなしているか否か疑問である。ブロイラー生産を行う種鶏の種々の系統について、筋ジスト
ロフィー症研究の立場から適応試験をしてみることは意味があるかもしれないが、産業的問題が加わるので困難であろう。
こゝで正常な神経・筋の働きとは何か、という設問が出されるであろう。その答は恐らく野鶏を中心に考えなければならないであろうが、野覧（赤色野鶏、灰色野鶏など）は動物園等に飼育されてはいるが、家禽と異なり飼育しにくゝ動物実鼓にはむかない鶏である。しかし、日本には家禽から逃げて半野生化している鶏がいる。特に山口県の徳地地鶏は長年月野生状態で生息しているものであるが、これを捕獲して飼育している人々もいるようである。これらは正常の神経筋をもつ系統の候補であろう。
そのような地鶏とは別に、闘鶏用の鶏は、はげしい闘争に耐えるように改良されている鶏で、神経・筋の能力はすぐれている筈である。闘鶏の方式には、脚に闘具（小刀など）を付ける方式と、そのような闘具を付けないで闘わせる方式と2種頬があり、前著の代表の品種が薩摩鶏で、後者の代表が軍鶏（シャモ）である。闘具をつける闘鶏は刀で切る形なので本来の鶏の動きとはやゝ異なると思われる。正常の神経・筋の働きをしらべようとする立場や、スポーツ医学研究用実験動物という意味からはシャそのように閲兵をつけない品種の方が研究目的にかなっているであろう○この方式の闘鶏は、地方々々で多少の差があるようであるが、特別の土俵の中で1時間以上にわたって
闘い続ける。従って、この間鄭こ用いられるシャモは平常訓練をうけているわけで、訓練の効果等に対してもしらべうる形である。今後研究に利用すべき品種である○
筋肉に特性があると推定される鄭こ烏骨鶏がある。これは中胚糞性の組織にメラニン色素が沈着する為、筋肉や骨膜等が黒色を帯びる鶏で、烏骨鶏という名称もその特色からきている。欧米では羽毛の特色からSilky（桐毛、羽軸の形成が悪い）と呼ばれているが、烏骨鶏の原産地は中国と考えられていて、欧米では珍らしい品種である。日本には徳川時代から入っていて、各地で趣味人に飼われている。この品種には、羽毛の上で黒色、白色などの別があり、それぞれ内種（品種の中の細分類）をなしている。この烏骨鶏は、筋肉の生理、色素発現などの点から検討すべき品種であろう。
チャボの顆も日本独特の品種で、多くの内種にわかれている。明らかに賃性の奇形で、骨格や筋ー37−の発育が異常に早くとまるものと思われるが、研究はあまりなされていないし、未知のところが多い。
このように、日本独特の品種は30種をこえるし、特色のある鶏が多い。Biomedicalの立場から検討すれば、種々の疾患モデルとして利用できるものと思われる∩
表5の1両の考えに従えば上記のような品種をもととして、淘汰選抜によって系統育成をはかる手法に入るわけであるが、筋ジストロフィー症研究用系統をこの方式によって育成することは、現段階では、論じないでよいであろう。
3−（2）主遺伝子amを基盤とする手法
鶏が、筋ジストロフイ症の疾患モデルとして用いられるようになった主な理由は、前述したように筋ジストロフィー症類似の症状を示すam遺伝子が発見されたからであり、このことはよく知られていることである。このような主遺伝子のある場合の育種は、表5の2にあたるわけで、実験動物育種としては定まった方式がある。
すなわち、主遺伝子による症状の発現といっても、常にその遺伝子以外の多くの遺伝子の作用をうけているものであり、1系統のみの観察から症状総べての論議をすることは危険である。従って、主遺伝子を種々の異なる近交系に導入して、遺伝的背景をかえた数系統を育成して、平行的に研究に用いる、という方式をとるものである（表5の2桐）。
以上のことは、実験動物で実施される方式であるが、この鶏ではどのようにすべきか、ということになる。am遺伝子は、ニューハムプシャ一種の中で発見され、NH−413系として研究に用いられている。前節でのべたように鷲では、マウス・ラットのように育成された近交系はないが、品種はそれぞれに特色をもっているから、異なる品種（品種をもとゝした系統）にam遺伝子を導入して、症状の発現がどのように変化するかをみる必要がある。
NH−413系は、ニューハムプシャ一種の中の系統であるから、卵内兼用種としての遺伝的体質をもつ○（すなわちam遺伝子は、ニューハムプシャ一種の遺伝的背景のもとで発現する。）まず卵用種の白色レクホーンが候補としてあげられる。白色レクホーンは多産であり、生産も容易となる筈であり、体質もニューハムシャーとはかなり異なる。この遺伝子導入の育種は菊池のが担当している。
またもう一つの特殊な系統として、エジプトの77イオミ種に起源をもつGSN系に導入を行っているた この系統は、マレック病に対して耐性がある等の特色によって、産業的な意味よりも、研究的な目的で輸入された品種で、輸入当初から実験動物としての取扱いをうけているものである。
これらのam遺伝子導入鶏は、順次年度進行と共に研究に用いられるであろう。同様の育種的意
味から、筋骨の発達のよい闘鶏用のシャモに導入することや、肉用の品種（系統）にam遺伝子を導入しておくことも考えるべきである。
am遺伝子以外に、新たな突然変異遺伝子の発見も必要であるが、このような神経・筋異常の疾
患をもつ個体は、自然的にも人為的にも淘汰される運命にあり、産業の場で発見されたとしでも、．
それが維持され、研究用に分析されるチャンスは極めて少いものである。特に、発見後の遺伝子分
ー38−折や、それを維持する研究は、人と設備と飼育費等に問題が多く、系統育成を行うのは容易なことではない。そのような、ミュータント発見とその後の飼育の面からみるとき、ウズラの実験動物としての価値は注目に値する。
3−（3）疾患モデルとしてのウズラの利用
ウズラは、 広義の育種 のところで述べたように、キジ目、キジ科に属する鳥で、鶏に近い種
頬で両者の間には雑種（但しFlのみ）ができる。また鶏と異なる点として、日本にも野生種が分布していて、この野生のウズラは鶏のように留鳥ではなく一種の渡鳥で、南北に移動する。この野生種を描獲してケージ内にとじこめ、家禽化することも可能であり、また逆に健全な飼いウズラを野外にならして野生化することも可能である。完全に野生化できると、移動してゆく。
ウズラの家禽としての使用は、日本が独自の地位をしめていて、豊橋市はウズラ産業の中心をなし、専業のウズラ飼育業者（卵と肉）も多く、ウズラ専門の僻卵業者、影の雌雄鑑別師も存在する。
従って膵化した雛の大量の観察も可能である。産業の場では、異常のみられる個体は淘汰されるわけであるが、鄭こ比べて、飼育場所は小さくてよく、また飼料費なども少くてすむので、ミュータ
ント発見後の研究は可能である。
ウズラには、鄭こみられるような種々の品種はなく、今のところ一品種とみなしうる。今までに種々のミュータント（主として羽色について）が分析されているが9）、産業的に用いられるものではなく、実験動物としての探訪遺伝子として利用されている。（表6参照）
表6．ニホンウズヲの突然変異遺伝子（若杉1978）の14．贋小首曲がり 川

Ⅰ．伴性劣性遺伝子
1．伴性白、不完全アルビノαJ（川）2．シナモン、赤目ブラウン′e（γ〜ム）W

加．黄色致死遺伝子

γ 淡色羽色8．白色卵︵19．白色羽装tレル

18．シルバーB

p ▲

フ

♂

6．一パ

17．黒色羽毛

p ．

5．パンダ

9．スターゲイジング

V．複数の遺伝子によって支配されている形質り

2．首曲がりⅢ．常染色体性劣性致死遺伝子

23．Wry neckJ〃

2乱11．完全アルビノ α

12．白色初毛Y

21．黒色初毛致死遺伝子 Bh以′810．先天性pッコ

eん

Ⅳ．常染色体性優性遺伝子および不完全優性遺伝子16．赤色卵Ⅱ．常染色体性劣性遺伝子
4．斑入り自コンドPディストロブイ

Rで 釘

3．ブラウン〜（ム）15．

e13．ミクロメリア（短肢）

m

−39−

DoⅥlless

行動異常の個体や、致死遺伝子も種々知られているし、新たに見出されることも多い。これらが、筋ジストロフィー症の研究にどのように役立つかは、今後の問題である。疾病を研究する側からの協力と評価が望まれるところである。

4．ま

と

め

実験動物としての鳥掛は、卵生という点と飛翔という運動性に特色がある。従って比較生物学的立場から巾ひろく鳥短をしらべる必要があろう。具体的に使用可能なものは、水禽、キジ目の家禽類、ハト莱引こ、飼い鳥の小鳥猿である。
狭義の筋ジストロフィー症の疾患モデル系統育成の立場からは、特殊な性質をもつ日本鶏の種々の品種の検討に手をつけるべきであろうし、主遺伝子amの利用としては、遺伝子導入の方式による遺伝的背景の異なる系統の育成を急ぐべきである。
またam遺伝子以外の新しいミュータントを発見し、系統化してゆく立場からは、ウズラを注目すべきである。

文

献1）Asmundson，V・S・，and L・M・Julian：Inherited MuscIe Abnormality
in theI）omestic Fowl．J．Hered．47．p248−252．1956．
2）Hala，K・‥

The

Maior

Histocompatibility

SystemoftheChicken．

The Major Histocompatibility Systemin Man and Animals．
EditorDietrich

GBtze．New

York．p291〜312．19771

3）菊池建機：筋ジストロフィー籍新株の開発一白色レクホーン種とのF‥Bl鶏について、
筋ジストロフィー症の基礎的研究：江橋立昭53年度報告書、p82−87、1979．
4）近藤恭司：実験動物としてのニワトリ。実験動物学各論、田嶋嘉雄編集、朝倉書店、
p286−■309．1972．

5）近藤恭司；免疫学研究と実験動物。実験動物の開発、田嶋嘉堆編集、医歯薬出版、p27−
51．1978．

6）三井高速監修，小山七郎編集：日本鶏大鑑、ベットライフ社、1979．
7）野村達次：モデル動物の生産と開発。筋ジストロフィー症の基礎的研究：江橋斑昭53年度
研究報告書、p79−81．1979．
8）岡田育穂：鶏の血液型。家畜の血液型とその応用、佐々木活綱編集、養賢堂、p203−221．
1971．

9）若杉

昇：ニホンウズラの突然変異遺伝子保存，遺伝、32、p40−44．1978．

−40−

2．ニワトリ筋ジストロフィー症の遺伝分析
一特にキャリア鶏浅胸筋の組織学的、酵素組織化学的研究一一
菊 池 建 俵●研究協力者大和田修一：秋葉敏夫●
石浦章一：●埜中征故事●
研

究

目

的

昨年度は筋ジストロフィー鶏（以下Dys鶏と略）413ラインと自レク鶏との雑種1代（Fl）、
Fl鶏と白レク鶏との戻し交配1代（以下81と略）掛こおいてDys鶏の有する筋ジストロフィー
遺伝子（以下Dys遺伝子と略）の導入する過程を、flip test、体各部位の測定、浅胸筋の組織病変を指標として解析した1之その結果Bl鶏でのbiopsy testと体尺測定の結果から、異常鶏と正常鶏の分離比が雌雄に関係なくほぼ1：1に分離した。またへテロタイプのFlでほぼ全例に浅胸筋組織に病変を認めた。Fl鶏、Bl掛こ出現する異常鶏は稀にflip test

陽性となる場

合があるが、大部分は陰性であり、浅胸筋組織病変の進行もホモタイプのDys鄭こ比して軽度である点から、これらの交配においてDys遺伝子のキャリア焉（以下Car鶏と略）が介在していることが予想された。本年度はこれらCar鶏の種々の交配における出現率を再吟味すると同時に、Car
焉浅胸筋組織の病変を組織学、酵素組織化学的に検討しホモタイプのDys鶏のそれらと比較した。

実験材料および方法
実験鶏はライン413Dys鶏、Fl（8）×WL（？）より作出したBl鶏、Bl鷲のキャリ7同志の交配（BlCxBIC）による鶏群を用いた。少数ではあるがF2掛こついても検討した。僻卵、育雛条件は前年度と同様であり、雛の育成に用いた幼雛用、中雛用の飼料は、市販の完全配合飼料を用いた。
Bl鶏群は僻化後37（17羽）、51（12羽）、70（9羽）、86（17羽）、98（3羽）日令で
BlCxBIC鶏群は79（9羽）、93（6羽）、112（7羽）、126（9羽）、140（4羽）日令で、F2鶏は79（13羽）、93（10羽）日令で放血屠殺した。
浅胸筋は上腕骨稜に近い部位から組織を採取、ブアン固定後′ミラフィン句埋し、7β切片を作製した。切片はhematoxylin−eOSin（H−E）染色で病理阻級標本を作製し、前回同様正常および異常鶏を判定した。Dys鷲は僻化後4（4羽）、30（2羽）、51（2羽）、4ケ月（5羽）、1年（2羽）令を供試した。またBIC，Dys鶏の1年鶏は国立神経センターで病理標本作製を協力していただいた。
今回酵素組織化学的検索を加えるため、筋組織をドライアイスアセトンにて急速凍結、10J ク● 東北大学農学部
・●国立武蔵療養所神経センター疾病研究第一部
ー41−リオスタート切片を作製し、H−E，SuCCinic dehydrogenase（SDH），NADH−TR，acetylcholin esterase（AchE）．myosin ATPase（pH4・2，PHlO．3前処理）を行った。
血清CPK活性の測定のため、前述のB凋群、当大学で抽出されたDys鶏とB．正常鶏間交配（BINxBIN）で作出された鶏群が、放血屠殺直前に、巽下静脈より採血し、血清が分離された。
血清は国立神経センターへ凍結搬送され、測定の御協力をいただいた。分析はADPを測定する
NAD＋法によった2）。

実

験

結

果

1．Car為浅胸筋の組織学的所見とDy8鶏のそれとの比較
Dys鶏の浅胸筋組織所見は51日令にみられるように筋線雄の大小不同が目立ち、小径線経も多く、大径から小径への変動が大である（図1−C）。巨大線経ともいえる線経の顕著な肥大は4ケ
月令で目立つ。4ケ月、1年令では結合成増生や脂肪化が著しく、線維間の間隙も大となる（図2−a）。51日令ではこの間隙は狭く、線経は密に配列している。線維胞体内の空胞形成、筋線維崩壊等はこの日令でしばしば出現するが、Splitting fiberやring fiberはその後の日令で一層顕著となる0線維核の増加もDys鶏の特徴であるが、中心核の増加に先立ち、初期には線維周辺核の増殖が目立つ。51日令では特にこの傾向がある。しかし4ケ月、1年鶏では線雄内中心
核の多核化が題著である（図2−a）。
種々の交配で得られるヘテロタイプのCar鶏浅胸筋の組織病変はホモタイプのDys鶏とは多くの類似点や相異点を指摘できる。この特徴は今回の実験では世代間に差を認めなかった。
（1）肥大線経が周辺の多数の小径線経の中に散在する。小径から大径への中間サイズの線雄がDys鶏に比して極めて少ない。
（2）肥大線経の核は初期には周辺に、加齢とともに中心核が出現するが、この出現時期はDys鶏に比して遅延を認める（図2−C）。
（3）肥大線雄周辺の小径線経の多核化はDys鶏と同様急激に進行する。1年鶏では異常な中心核の増加を認める（図1−e，図2−C）。
伸 筋線経の崩壊像、空胞形成は個体により差はあるが、一般に稀である。
（5）ring fiber、核の同心円配列が1年鶏でしばしば認められる（図2−C）。
以上の浅胸筋病変像を下にCar鶏は正常鶏やDys鶏から比較的早期（37日令）で判定できる。

2．Car為浅胸筋の酵素組較化学的所見とDy8鶏のそれとの比較
Dys鶏浅胸筋でSDH，NADH−TR反応を観察すると、僻化後早期に高活性の筋線雄が多数出現する。線経の肥大化も同時に進行し、まずこれらの活性が高まる。散在する小径線経は低活性を維持する（図1−d）。これら酸化還元酵素はミトコンドリアの酵素活性や局在性をよく反映す
るが、Dys鷲の肥大線経の胞体内diformazan顆粒のサイズや配列は加齢とともに不規則にな−42−図1・醇化後51日令Car烏（a，b）、Dys条（C，d）、126日令Car鶏（e，f）、
正常鶏（g，h）の浅胸筋組織像、Ⅹ150
51日令のCar鶏浅胸筋にはSDH高活性と低活性の筋線経が混在する。高活性の線経は肥大する傾向がある（a，b）。51日令のDys鶏では線維大小不同が目立笥
大径線経のSDH活性は高く、diformazan顆粒の配列は不親則（C，d）。126
日令でのSDH高活性線経は肥大が著しく、線経の多核化が進行（e，f）。126日
令正常鶏には病変をみとめないo a，C，e，g‥H−E染色、b，d，f，h：SDH染
色。

ー43−

図2．僻化後1年令Dys鶏（a，b）、Car鶏（C，d）の浅胸筋組織像、Ⅹ150
1年令のDys鶏には線経の崩壊、Splitting・大小不同がみられ、ring fiberもしばしば出現嘲。NADH−TR反応は全体的に高括憧tDoCar鶏で結線経の肥大と多核化が目立・jc）。NADH−TR反応はDys鶏に比して活性が抵いが、difor−
mazan顆粒の大きさや配列は不規則d）o a，C＝H−E染色・b，d＝NADH−TR
染色。
り、それらの数も増加している〇一万へテロタイプのCar鳥では卿ヒ後早期（37日令）に散在する大径線経を認めるが・それらのSDH活性は、まわりの小径線経に比して顕著に高いomyOSinATPase反応に異常がないので、いわゆるdR型線維3）に近い酵素反応を有する0大径線経の肥大は加齢とともに進行するが、線維胞体内diformazan顆粒のサイズや配列が高活性の割には規則的で・と。わけ異常を認めない。4ケ月（126日）令のCar鶏のSDH活性を図1−fに示した0ここでは肥大線経の一部で胞体内diformazan額粒のサイズや配列に異常を認める0しかしSDI王佐活性の小径線経に加えて・
非常に高活性であるが正常レベルのαR型線経に似た大径線経も示されている0ここで興味のあるのは線維核の局在性とSDH反応の関係であるo SDR活性異常の肥大線経は中心核の増加をみる（図1−f）0囲いhは同日令の同じ鶏群から抽出された正常鶏浅胸筋を示しているoH−E染−44−

色（図1−g）、SDH染色（図1−h）ともにCar鶏に比して組織像に異常を認めない0
1年令のDys鶏浅胸筋にはさらにSDH，NADH−TR活性の高い筋線経が出現する0

しかしdiformazan顆粒の大きさや、不規則配列は顕著で、しばしばmoth eaten fiberの形態を呈する。ring fiberは強い反応を示す傾向がある（図2−b）。
1年令のCar鶏浅胸筋はDys鶏に比してこれらの線維内活性は全体的に低い。小径、肥大線経
とも酵素活性が高い場合も、低い場合もあり、線維径と酸化還元酵素活性の間にあった一定の慣向はみられなくなる。小径線経は角ぼっており、肥大線維周辺で群を形成する場合が多く、いわゆるangular fiberの形態に似ている。他には線維内核の著しい増加で、Dys鶏とほぼ同程度の変化が肥大線経でみられる。また小径線経の多核化はDys鶏のそれをはるかに凌駕している（図2−
C，d）。この小径線経の多核化はすでに4ケ月令で認められる（図1−e，f）。

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図3．僻化後93日令正常鶏側、79日令Car鞠胸と51日令Dys鞄：C）、Car為伸の浅胸筋AchE反応、Ⅹ100
正常鶏のAchE活性は神経筋終板（MEP）で高いが（恥Dys鶏ではMEP部に加えて線維胞体内にdiffuseしたAchE活性をみる（C）。Car鶏は小径、肥大線維
ともにMEP都に強い活性をみるが、肥大線維周辺の小径線維胞体内にAchEがdiffuseして高活性をみる（b，d）。
図3−aは93日令BICxBIC鶏群から抽出された正常鶏の浅胸筋組織のAchE反応である。

一45−

AchE活性は神経筋終板（MEP）に限局しており、線維内にdiffuse（拡散）した酵素反応を示さない079日令のCar鶏では肥大線経と周辺に多数の小径線経を認めるが、両者ではAchE
活性部位に著しい相異がある0特に小径線経のMEP以外の線維胞体内にdiffuseL高活性のAchE反応はCar鶏浅胸筋線経の特徴としてあげられる0このAchE活性はCar鶏群の個体により若干の強弱はあるが憤向は変わらない（図3−b）0今回51日令のCar鷲浅胸筋でこの煩向をみとめた（図3−d）0小径線経の胞体内AchEは肥大線経に比して高活性となっている。同日令のI）ys鶏のAchE活性を図3−Cに示した0この時期の殆んどの大、小径線掛こAchE活性が胞体内にdiffuseして反応している。

5．血清CPX活性の測定
Dys鶏を育種改良するためにはCar鶏を正常鶏やDys鶏から容易に識別分離する方法が必要で

37

51

70

86

AGEtdQyS）AFTER HATCHING

図4・Dys鶏（BICxBIC鶏群より抽出）と正常鶏（BINxBIN）（A），Car鶏（8牒群より抽出）と正常鶏（81憩群より抽出）（B）における血清CPK活
性値の経日的変化−46−

98

ある。このスクリーニングのため前回は浅胸筋のbiopsy testや体尺測定を用いたが前者は確実であるが手間がかかり、後者は変動が大きすぎる欠点がある。今回筋ジストロフィー症にともなう
筋細胞膜の破損または疾患に特異的な膜透過性を示す指標とされる血清CPK活性の測定を試みた。
図4−AはBICxBIC鶏群から抽出したI）ys鶏（WL）と正常鶏同志BINxBIN鶏群から抽出した正常曳くWL）との間で加齢にともなう血清CPK活性を比較したものである。正常勤ま平
均値が37日齢（0・1406）、51日範（0・1176）、7n日野（0・1637）で加鱒による値の変化がみられない。Dys鶏（WL）では数値に大きな変動を示すが、加齢とともに原著に上昇する。雄雌では平均して雄の活性値が高く、数値の変動の原因となっている。
Car鶏の血清CPK活性値を正常鶏のそれと比較したのが図4−8である。各日令での数値の分布を両者で比較すると、今回測定した僻化後日令では明瞭な分離をみとめない。しかし日令によっては一羽しか測定していない場合があり、さらに詳しく検討したい。

4．ニワトリ筋ジストロフィー症の遺伝分析
表現塾の記号は従来用いられているDys遺伝子amを用いている。しかしDys鶏の判定はfliptestでは識別不可能（特に早期には）な場合が多いので我々は浅胸筋の組織病変を零現型の指標として判定している。表−1の81鶏群での成績は前回の成境を追加している。その結果、80羽のうち正常鶏（＋／＋）は43羽、Car鶏（十／am）は37羽が得られた。r2（Chi−Square）検定により分離比を推定したところ、P＝0．5となり、1：1の分離は適合していた。Car鶏同志（BICxBIC）の交配では67羽のうち正常鶏（＋／＋）18羽、Car鶏（Vam）33羽、Dys
鶏（a小爪）16羽に分離していた。同様にヱ2検定で1：2：1の分離は適合していた。
OFFSPRING FROM

VaIuesObserved
Expected＋／am x＋／十MATINGS

Number of Number ofNormal Carrier Total
（＋／1）
43
40

（＋／am）
37
40∫2

0FFSPRING FROM＋／am x

80
80
＝0．45

＋／am MATINGS

Number of Number of Number ofValues Normal Carrier Dystrophic Total（＋／＋）（＋／am）（am／am）

Observed
Expected

18
16．75

33
33．50

16
16．75
ヱ2

67
67

＝0．134

表1．Dys遺伝様式の適合性と分離比の検定。 Bl鶏群（上表）．BICxBIC鶏群（下表）−47−前述したように、Car鶏の浅胸筋組織病変はホモタイプのDys鶏とは本質的に異なる進行を示し、臨床的にflip test陰性の場合が多く、病変として筋線経の崩壊像が稀である点から、Dys鶏と正常鶏の中間的症状を示すので、Dys遺伝子は不完全優性遺伝と解釈される。
考

察

鶏の骨格筋は浅胸筋、後広背筋（PLD）、上腕二頭筋等に代表されるfast twitch筋と頭部、脚部に局在する骨格筋のSlow twitch筋に大きく分類される。それ以外に前広背筋（ALD）に代表されるSIow tonic筋がある。筋線経は7ルカリ側前処理のmyOSin ATPaseで高活性のa型と、低活性で酸側前処理のmyosin ATPaseに高活性のP型線経である。この反応はALD
筋のSIcw tonic筋線経にはあてはまらない。a型線経は酸化還元酵素（SDH．NADH−TR）に高活性のαR型と低活性のdW型に細分される。′型線経は一般に′R型線経とされ、この酸化還元酵素は高活性である4）。
鶏の浅胸筋はdWとdR型の2種筋線経で構成されているが、後者は3−4遇令で大部分のもの
がdW型線経へ移行する。浅胸筋の表層部はdW型が大部分で、深部へゆくほどdR型を含んでいる。Dys鶏浅胸筋ではdR型線経のカテゴリーに入る線経が僻化後おそくまで多数観察される点が正常鶏の場合とちがう点である。またDys鶏の場合、これらdR型線経は加齢にともない肥大を示す。
一方Car籍浅胸筋で観察された肥大線経はDys鶏のそれと酸化還元酵素反応において敷似している。しかしDys鶏にみられるdiformazan顆粒の大小不同、一部消失、配列の不整等はCar
鶏の場合かなり遅れて現われる。また肥大を示すが比較的正常な酵素反応を示す線経と、異常を示す肥大線経が混在する傍向があり、段階的発症過程を示すことが多い。
線維径の分布はI）ys鶏とCar鶏では相異がある。Dys鶏では小径から大径線経へ連続した分布を示し、径の変動巾が大である。しかしCar鶏では大径線維群と小径線維群が2つのグループに分離する0この点はMcMurtryet al（1972）5）が6遇令のDys乳へテPFl臥正常鶏の浅胸筋で線維径の出現状態を描いており、その分布に2頂点（bimodality）のあることを指摘しており、我々の観察とよく一致している。
酸化還元酵素と筋線結核の局在性との関連は興味がある。線維内中心核の異常増殖の原因や核の由来については未だ明瞭ではないが、線維基底投下に局在する衛星細胞（Satelite cell）の増殖と分化、それに付随する再生反応と密接な関係にあるとされている6とDys親の多核化は醇化後
加齢とともに進行するが、正常鶏は33、40日令でPlateauに達する6三筋線経の肥大現象は多核化に並行して顕著となるが、同時にミトコンドリア依存の酸化還元酵素の活性や反応部位に不整が出現する傾向がある。
Car鶏の肥大線経が多核化するのは酵素反応に異常を示す時期と同様、Dys鷲のそれに比して遅れる。そして肥大した大径線経でも核が周辺にのみ位置するものが混在する。この種の肥大線経はSDH，NADH−TR活性が高いが、その反応性は正常Slow twitch筋に多く含まれるaR型
ー48−

線経の形態をよく維持している。
Dys鶏ではfast twitch筋の中でもaW塑線経がaR型線経より早期に、しかも選択的に発症する4）。前述したように正常浅胸筋では早期に胚期のdR型から成熟分化にともないdW型へ移行
するが、Dys浅胸筋ではこの移行がスムーズに起らない。Ashmore et al（1971）はこれを筋の成熟分化過程の障害と考えているの○今回我々も酸化環元酵素活性と核の局在性から筋線雄がdW型へ移行した時の発症を観察している。
肥大線維周辺の小径線経はDys鷲と同様に酸化還元酵素活性は低いが、AchE活性は逆に高い。
特に神経筋終板（MEP）以外の線維胸体内へのdiffuseが既著であるaこれらは散在する肥大線経の間で押し込められたように角ぼった形態を有する。Car鶏浅胸筋の小径線経のこの特徴は加齢にともない頗著となるが、これらがDys鶏浅胸筋にみられるAchE高活性で線維胞体内にdiffuse
反応を示す肥大線経と質的に同じか、差があるかは今回明らかにできなかった。
憩胚発生初期（10日令以前）ではmyOtubeと神経終末との連結が不充分で、myOtube胞体
内にAchE活性がdiffuseして認められる。しかし僻卵12日令頃からMEP形成が進み、同時にAchE活性はMEP部へ限局するようになる：）8）好化後2週令の間に、AchE活性は胚期の約1／30に減ずる。このAchEの量的変化や付随する質的（isozyme pattern）変化の異常がDys掛こみられることから、ニワトリ肪ジストロフィー症に神経原性の要因が指摘されている9）。
また脊臨前角細胞の変化からDys鶏の神経原性を主張する報告もある聖十方Dys鶏と正常鶏の筋を交叉移植すると、たとえ宿主が正常でもDys移植筋の再生過程でp汚病変を認めることが多いことから11ミまた同じ移植で、一本の再生筋線経にDys筋由来の細胞と正常筋由来の細胞を細胞融合によりとりこませSDH活性を指標にDys病変をみると、正常宿主の神経により支配された再生筋線経にモザイク状の酵素活性が認められたことから、肪細胞自身に潜在的異常があるとする報告もある12）。
今回Car鶏でみられた小径線維（angular fiber）はAchE活性が胞体内にdiffuseしている点で異常であるが、酸化還元酵素活性は逆に低く、正常なdW型線経の形態を有しているため、Dys創巴大線経とは質的に異っている可能性がある。特に発症後期（4ケ月、1年令）でみられる異常とも思われる小径線経の多核化は前述した再生反応の一つと思われるが、今後酵素反応との関係を明らかにしてゆきたい。
今回行なったDys退転子の退転分析は昨年度の結果を裏づけるものであった。Chung et al（1960）13）はDys鶏と自レク宅間で種々の交配実験を実施し、Car鶏の介在を示唆しているOま
た最近カリフオルニ7大Dr．B．W．Wilsonの報告でもヘテロタイプの鄭こ筋ジスト。7イー症を認めるので、Dys退伝は相互優生（COdominant）遺伝と解釈した方が正確であるとしている142
これらの報告は、今回我々が得た結果を支持するものである。しかしCar鶏をflip testで完全に把握できない現状では、ホモタイプDys鶏が常染色体性劣性遺伝子により発症するという解釈も誤りではない。
1959年江橋等151こよってはじめられた進行性筋ジストロフィー症患者の血清CPK活性の測−49−定による患者の早期診断、保因者発見に関する一連の研究は、D汚染の遺伝分析にも応用できる。
今回我々は正常自レク遺伝子導入の過程で抽出されたホモタイプDys鶏と正常鶏、およびCar鷲の血清CPK活性を僻化後比較的早期に経口的に測定した。
その結果恥S鶏は早期に活性値は正常域をはるかに越えた値を示すことがわかった。ライン413
鶏と412籍の血清CPK活性値は江揺らによって経目的に測定されている16）が、今回のNAが法で得た数値を無税リン酸法で得た前者と比較（5，500倍）すると極めてよく一致している。ライン
413D鰐勤ま血清CPK値の大きな変動が指摘されている17）がこの点も頸似している。この変動は
主に堆鶏の活性値が異常に高い場合が多いので起るのであり、雌雄別々に測定するとその変動はかなり改善される。
ヘテロタイプのCar鶏の血清CPK活性の測定はHolliday et al（1965）18）の報告がある。
彼等は10，16ケ月令Car鶏の血椿で測定し、Car鶏の活性値は有意に正常鶏に比して高値を示すと報告している。その活性値は変動が大きく、ある場合は正常値、ある場合は恥S鶏の値に達する。また活性値と筋組織病変の進行とは密に閑適し、高い活性値の場合、時にはCar鶏と恥S鶏の組織像を識別できないと報告している。Car鶏の血清aldolase，glutamate−0Ⅹaloacetatetransaminase活性も正常鶏より高いとする報告もある13t
今回我々は僻化後早期にCar鶏をスクリーニングし退転分析の一助とする目的で、およそ1から3ケ月令でCar鶏の血清CPK活性を測定したが、活性値を正常域から明瞭に分離できなかった。
この鱒因はCar鶏浅胸筋の組綴病変がこの時期では軽度であり、特に筋線維崩壊像が殆んどみられず、肥大線経、小径線維ともに膜系の異常による肉疑酵素の血中へのleakageが起っていなかったことや、浅胸筋以外の筋組粒に異常がなかったことなどが推定される。

引

用

文

献

1）菊池建段：筋ジストロフィー鶏新株の開発−白色レクホン種とのFl，81掛こついて（江橋立）53年度研究報告書、pp．82−87。
2）Traner，M・L・＆・Gilvarg．C．：Creatine and creatine kinase measure−ment，J．Biol，Chem・．234：3201．1959．
3）Ashmore．C．R．＆Doerr，L．：Comparative aspects of muscle fiber
typesin different species，Exp・Neurol・，31：408．1971．
4）Ashmore，C．R．＆Doerr，L．：Postnatal development of fiber types
in normal and dystrophic skeletal muscIe of the chick，Exp・Neurol．
30：431，1971・

5）McMurtry，S・L．，LM．Julian＆Asmundson，V．S．：Hereditary mus−Cular

dystrophyofthechicken，Arch・Path・，94‥217，1972・

6）中村暗臣：筋ジストロフィー骨格筋の再生反応く三好班）53年度研究報告書、pp．25−29．
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11）Linkhart，T．A．，G．W．Yee．．P．S．Nieberg＆Wilson，B．Wこ：Myogenic
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the

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phosphokinase activity of sera of progressive muscular dystrophy，
J．Biochem．，46：103，1959．
16）江橋節郎他：ジストロフィーチキンについての予備的観察、筋ジストロフィー症の病因の究明に関する研究（沖中班）51年度研究報告書、pp．9−14・17）萩原康子、小沢鋲二郎：筋ジストt］フィー症チキンにおける血清Creatine kinase活性の経日変動、医学のあゆみ、107：629，1978．
18）Holliday，T．A．，V．S．Asmundson＆Julian，．LL・M・：Plasma creatine

phosphokinase activity of chickens with hereditary muscuIar dystro−phy，EnzymoI．biol，Clin．，5：209，1965・−51−

3．鳥類における神経・筋疾患モデル動物の開発
水

谷

誠●

研究協力若 布 谷 鉄 夫●
近年マウス・ラットにおいては多くの疾患モデル動物が開発され、いろいろな分野で多くの新しい知見が得られている。しかし、ニワトリ・ニホンウズラを含む鳥類における疾患モデルとしては
アメリカにおいて開発された筋ジストロフィー鶏および最近わが国において開発された特発性側琴症モデル動物としてのニホンウズラがある程度である。
鳥類はマウス・ラットのような哺乳規と異なり、胎児期の観察が容易であるばかりでなく、多数の個体を同時に実験に供試できるという利点をもっている。
本研究はNH−413の筋ジストロフィー遺伝子

am〝を遺伝的背景の異なる他の系統に導入するとともにニワトリあるいはニホンウズラにおいで神経・筋疾患モデル動物となる可能性のあると思われる異常について検討し、遺伝的形質についてはそれを固定することを目的として実施された。

1．筋ジストロフィー遺伝子（am）のGSN／2系（7アヨウミ種）への導入
ニューハンプシャー種のam遺伝子を他の品種のGSN／2系に導入すること、すなわち遺伝的背景をかえることは筋ジストロ■7イー症の発症週給あるいは症状の程度に変化のおこることが期待さ詣詣

れる。NE−413系のam遺伝子をGSN／2系に導入する方法としてはクロスバッククロスあるいはクロスインタークロスの2つの交配方法がある。
G
′
−

×IFl析

X GSN／2
ヽ
ノ

′lヽ

a

（十／り
（十／H，（a叫′ぺ−）X GSN／2（＋／∴ト）（1ノ与）．（aITレ⊥ト）×

図1．

GSN／2

クロスバッククロス方式※遺伝子型●（財）日本生物科学研究所−52−※※野生型（正常遺伝子型）

クロス／｛ッククPス方式とは図1に示したように、NH−413（遺伝子型aJTVam）×GSN／2（遺伝子型1−／十）のFl（遺伝子型azTVq）をGSN／2系にもどし交配（back cross）して得られた子（＋／／与とaITレ与が1：1の比率に出現する）のヘテロ（am／＋）個体を選抜し、再びGSN／2系にもどし交配する方式である（東北大・員・菊池建摸班員）。この方式ではヘテロ￣（a叫／＋）個体の選抜をする際、フリップテストでは七′トとaIll／トの区別ができないため、a叫／
am個体との交配を行ない、その子に筋ジスト。7イー驚くa叫／am）が出現するか香かにより判断する（後代検定）必要がある。そこで、著者は第2の方式であるクロスインタークロス方式（図2）を用いた。すなわち、NH−413（雄・遺伝子型a叫／am）XGSN／2（雌・遺伝子型十／1−）のFl（遺伝子型amへ−）を作出し、FlXFlの交配を行ないF2をとる。F2においては遺伝子型
七′I，a叫／＋．anl／amの各個体が1：2：1の比で出現する。このF2のなかのan／am個体（筋ジストロフィー症鶏）の雄とGSN／2系の雌を交配し、再びF．くa叫へ）を作出する0このFl同士の交配を再び行ないF2を作出し、F2のなかのホモ個体（azTthm）の雄をGSN／2に交配する。このような交配をくりかえし行ない、NH−413系のAm遺伝子をGSN／2系に導入するoNH一413

X

GSN／2（a叫／am）

（十／十）

Fl

（a町へ）

X

Fl

（a叫／り

（」レ与），（aIIl／へ），（a∬／am）× GSM／2

日十川ふ‖（an州（＋／H，（a叫／＋），（a叫／am）×GSN／2
（1ソ与）

図2．

クロスインタークロス方式

現在、クロスインタークロスを4回行ない、ヘテロ同士の交配からa巾m個体を作出しているo
GSN／2am系（GSN／2系にam遺伝子を導入している系統）の羽装に関しては黄色型（GSN／2型）と茶色型（NH−413型）が分離している。この茶色の羽裳を支配する遺伝子はNH−413
系由来で、性染色体性の劣性遺伝子である。この遺伝子を用いれば、初生時に雛の羽装により雌雄鑑別（autOSeXing）が可能となや。すなわち、茶色型と黄色型の2系統をGSN／2am系において確立後、茶色型（8）×黄色型（9）の交配を行なえば、初生雛は雄がすべて黄色型、雌はすべて茶色型になる。

−53−

GSN／2am系はいまだ作出途上であるため、体重曲線については未調査であるが、成鷲時の体重の比較を表1に示した。表からも明らかなように、GSN／2am系はコントt］−ル系であるGSN／
2系とほぼ同じ体重であり、NH−412系あ

表1・NH−413，NH−412，GSN／2，
GSN／2am各系の成鶏体重の比較（晦）

るいはNH−413系の約iとかなり小型のため取り扱いが容易である。
GSN／2am系のフリップテストによる筋系

ジストーpフィーの発症遇齢は7−10遇齢で

統

雄

雌

NH−4123．5

413系の2−5遇齢に比較して遅くなって

3．0∴

NH−4133．0

2．4

いる。今後、クロスインタークPスをひきつ

GSN／2

1．6

1．2

づき行ない、肪ジストロフィーの発症遇齢のGSN／2am l．6

1．2変化を調査する予定である。

最後にGSN／2系の特性についてのべる。
（1）GSN／2系はNH−412あるいはNH−413に比較してかなり小型であるので飼育管理および取り扱いが容易である。
（2）血液型に関しては当所において作製した19の抗血清に対する反応性が固定しており、ニワトリの主組織適合性遺伝子でもある、Bシステムに関しても単一の血液型に固定している。
（3）正常ニワトリの細胞中に存在するニワトリ白血病ウイルスのgrOup SpeCific antigen（gs抗原）が陰性に固定している。
仰

ニワトリ白血病ウイルスのサブグループA−Eに対する感受性はBに抵抗性（C／B）であり、AとEには部分的に抵抗性である。
157

ベータ型欠損ラウス肉腫ウイルスに感染性を与える宿主細胞因子Chf（Chick helper

factor）活性は陽性に固定している。
（6）■マレック病に対して抵抗性である。
けI

ジャガイモの植物性凝集素（PHA）により段別される血液型に関して固定している．

は）同種自然凝集索により識別される血液型に関して固定している。
このような特性からGSN／2系を選び

am遺伝子の導入を行なっている。

2．中枢神経系、とくに大脳における血管変性ならびに頚部菅髄神経の変性・脱落により特徴づけられるニワトリの系統（AN系）
臨床的にこれら異常鶏（AN系）はいずれも突然、頭部および頚部を前内方に螺旋状に折り曲げてうずくまる（重症の個体は同時に後ずさりする）発作をくり返す。このような発作は外的の聴覚および視覚刺激などを与えることにより容易に発現し、普通15−30秒間継続するが回復すれば、頚部が少し前内方にまがっている程度で一見正常に戻る。異常鶏のほとんどのものは6週齢頃に発症するが、ふ化時すでに発症している個体もある。発作は加齢とともに軽減するが完治することはないようである。増体率、産卵率、受精率に異常は認められず、正常に自然交配も可能である。し−54−

かし、水を多く飲むためか、水を飲むのに頚が曲がっているので飲みにくいのか、ウォーターカッ
プの水をこぼす程度が他の系統のニワトリに比較してひどい煩向がある。
1974年8月、当所で維持しているPNP系において、上述の臨床症状を示す個体が3例出現した。その後の出現状況を観察した結果、この形質が遺伝的と思われた。そこで、1975年2月
この形質を固定する目的でPNP系およびFs系（Full sib matingを行なっている系統）を起源としてくびまがり系（AN系）の作出を開始した。AN系の作出には図3に示したような3pairのローテーションシステムを用い、異常鶏同士の交配で継代を行なった。1975年2月より1979年12月までに9世代の継代を行なった。継代当初は異常鶏同士の交配から異常鶏の出現する頻度は低く、60界程度であった（4カ月齢までの調査結果）。しかし、最近の調査によると、異常鶏の出現頻度は90界とかなり高く、症状もひどいものが出現している。発症月齢はほとんどの個体が1．5カ月齢（6遇齢）であるが、ふ化時すでに発症しているものからふ化後3カ月齢で発症するものまでいろいろである。上述の異常鶏の出現頻度調査において正常鶏としてみなされた個体は5カ月齢以後発症するものであったかもしれない。今後、AN系の実験供試鶏が3−4カ
月齢になった時点で1発症鶏・未発症鶏を問わずすべて病理学的検索を行ない、以下にのべる組綴学的変化が認められるか否かを調査したいと思っている。

本疾患の詳細な病理学的検索車こ関しては、
本稿では省略し、主要な組織学的変化についてのみのべる。本疾患は中枢神経系、とくに大脳における血管変性ならびに頚部青竜神経の変性・脱落により特教づけられ、
8

9

8

9

8

それらはいずれも特教的な臨床症状に密接

9に関連する所見と考えられ牢0このうち、大脳で認められた血管変化は全例に共通し
図3．3pairによるローテーショ：／システムて認められ、発作を起す直接的基困になんらかの関連性があるものと推察された。また、脊舐神経病変は病歴の古いものに多発し、強い慣向があり、それら変化が頚部脊鎚神経に集中していることなどから、発作のくり返しに伴なう二次的変化とみな、された。
本疾患の遺伝性に関しては、AN系が確立された事実から遺伝的であると思われる。そこで、この形質の遺伝様式を調査するため、BM−C系くる）XAN系（軍）の交配を行なったところ，Flは6カ月齢までの観察では正常であった。この結果は本疾患を支配している遺伝子が劣性退転子であることを示している。なお、BM−C系は当所における10年間の維持期間中、1例も本疾患を発症しなかった系統である。今後、AN系（8）×BM−C系（？）、Fl（BM−CxAN）×AN系（？）、AN系（8）XFl（？）、FlX Flの各交配を行ない、詳細な遺伝子分析を行なう予定である。
疾患モデルとしての可能性についても検討を加えたいと思っている0−5

5−

5．植原病モデル動物としての二ホンウズラの系統の育種
1976年4月当所において維持しているニホンウズラの一系統PNN系に両翼が体にロックされているかのように、上にあがらない雄（発見時月齢＝6カ月齢）1羽を発見した（図4）0この

図4．

塘原病ウズラ（推）特徴は筋ジストロフィー病ニワトリのそれと似ていた。この形質が遺伝的か香かを検索するため、正常な雌を交配し、Flを8羽作出した。この8羽はすべて正常であった0つぎに、Fl同士の交配
ぁるいはもどし交配を行ない、合計53羽の子を得た。この53羽は6適齢時に調査したが・すべて正常であり、異常ウズラは出限しなかった0そこで、これらの子を起源としてRWクローズドコ
ロニーを作出し、異常ウズラの発見時月齢の6カ月齢まで観察するとともにクローズドコPニ￣を継代し、異常ウズラが出現するか否かを検索することにした0筋ジストロフィーニワトリあるいは
異常ウズラとも両翼のあがり方も悪いが、巽膜の開き方も悪い0正常なニホンウズラあるいはニワ
トリにおいても図5に示したように異膜の開き方が長い個体と悪い個体が存在することを見出した。
そこで、RWクローズドコロニーにおいて、1977年2月より巽膜の悪い方向への選抜を開始した。一方、異常ウズラの授精能力が不能となったため、東京大学医学部江橋研究室へ病理学的検索を依頼したところ、この検体が都の臨床研に委託された○そこにおいて・この異常ウズラが筋ジス
トロフィーであると判定され、CPKの値も他の正常ウズラより高いことがわかった○

しかし・その後この異常ウズラは榛原病であることが判明したoRWクロ＿ズドコロニーにおいて、1977年2月から1979年12月までに雄4・雌1合計5羽の糖原病ウズラを得ることができたが、発見時の月掛こ関しては雄4羽はそれぞれ6カ月齢・8カ月齢、9カ月齢、6カ月齢であり、雌1羽は一番若齢で3カ月齢であった0このように、梼原病を発症するウズラには雄が多く雌が少ないようである0このことは、ニワトリにおいて痛風を発−56−

a． 悪い も の

b． よ い も の図5．異膜の開き方のよいもの悪いもの（ウズラ）症する個体に雄が多く雌が少ないという現象と同様、槍原病ウズラにおいても雄に多く発症することは附こおける産卵生理が関係しているのかもしれない。すなわち、雌においては糖尿病になる遺臣的要田を保持していても、体内に蓄若されるはずのグリコーゲンが卵に蓄積され、産卵により体外に出されるため雄に比較して発症例が少ないのかもしれない。しかし、1羽のみ発症した雌が3
カ月齢と一番若齢であったことは興味深いことである。今後、雌の槙原病ウズラの発症月齢を検索

−57−

したい。
糖原病の発症月齢が雄において6−9カ月齢とウズラの繁殖可能な年齢の後期であるため、発症後に子をとることはかなり困難である。そこで、RWクローズドコロニーを継代するには、あらか
じめ若齢時にすべてのpairからの子をとり、親が老齢になるまで観察し老齢時糖原病を発症した
ウズラのpairからの子を重点的に後代に残すようにせざるをえない。この方法は時間と手間がかかりかならずLもよい方法とはいえない。若い時期に梼原病となるウズラを判別できるならば、子を多くとることができ遺伝的分析も容易になる。そこで、糖原病ウズラのCPK値が高いことに着眼し、まだ糖原病を発症していない3カ月齢時のRWクローズドコロニーの雄14、雌11合計25羽の血清を採取し、CPK値の測定を国立武蔵療養所神経センターへ依板した。結果は表2に示したように、コントロール系（PSP系：現在まで栃原病ウズラが出現せず、巽膜の開きもよい系統）
およびRWクローズドコロニーともに雄の値より雌の値が高い傾向がみられた。これは雌の産卵と表2．

RWクローズドコロニーおよびコントロール系のCPK値（無操り巧竣測定法）（単位：Kuby単位）

コントロール

脚帯番号

脚帯番号
37二d二4琴

19．3

18．4

5
7

日

4
5
6

ー58−

8

7

0

※糖原病個体

4

3

4

369

2

8

5

3147
3274

6

2卑・4

0

18．7

3276
3014

2

3195

8

49J6

8

3・1′01

一0．4

93．0．1￣63148

94 2 6 8 6 0 2 2 5 3
3T 5 5 7 9 0 0 0 2 6．2 2 2 2
2 3 3 3 3 3

281二9

8

R W

8

9

42．6
16．5
3．9
28．4
15．1
1．2
9．2
7．9
13．0
9．8
23．6
19．1

3698

24．6

3700

5．4

2940

45．6

3124

61．6

3163

47．0

3172

7．9

3288

190．5

3290

48．7

3297

34．3

3424

99．4

3559

46．5

3731

125．7

6924

9．4

関係があるものと思われる0雄のCPK値はコントトル系がRWより高く、雌のCPK値は逆に
RWがコントトル系よ帽い煩向がみられる0今後、測定例数を増加すれば興味深い結果が得られるかもしれないoRWクローズドコロニーの雄でCPK値が長滝高かった個体（個体番号：3704）
が9カ月齢において楷原病を発症しはじめ、12カ月齢で完全に異があがらなくなった。コントロール系においても1例CPK値の高い個体がみられたが、CPK値による若齢時の槙原病ウズラの選抜は有望であると思われる。
その後、同様の試験をRWクローズドコロニーの堆41、雌29合計70羽において神経センターで調査していただいた結果、表3に示したごとく、前回の結果と異なり雄と掛こおいて明瞭な
CPK値の差は観察されなかった0また、この調査個体のなかで1個体の雄（個体番号‥9280）
表3・RWクP−ズドコロニーのCPK値（NAD法）（単位：インターナショナル単位）
雄

脚帯番号

CPK値

雌

脚帯番号

CPK値

脚帯番号

CPK値

4881

0．047

9356

0．013

9426

0．057

4893

0，032

9357

0．036

9408

0．066

4840

0．041

9361

0．021

9414

0．035

4960

0．021

9332

0．021

4834

0．038

4904

0．032

9377

0．017

4871

0．036

4999

0．021

9306

0．035

4873

0．039

4377

0．035

9356

0．049

4874

0．042

4957

0．042

9311

0．042

0．039

9323

0．030

4978
4958

0．064

4906
4950

0．030

9325

0．036

4978

0．050

4975

0．056

9434

0．019

4955

0．036

7321

0．014

9424

0．026

4939

0．039

9185

0．036

9410

0．056

5000

0．045

9145

0．038

6186

0．021

9193

0．026

0．089

9141

0．020

9138
9147

9080

0．042

9187

0．032

9009

0．054

9084

0．059

9273

0．055

9235

0．018

9265

0．053

9255

0．023

9241

0．024

9280※

9279

0．026

0．041

、9226

0．034

9231

0．042

9214

0．034

9225

0．030

9247

0．041

9245

0．087

9260

0．041

9221

0．056

9237

0．047

9281

0．036

9278

0．039

9225

0．030

9331

0．024

9307

0．065

※糖原病個体

∴「59−

0．070

0．035

が6カ月齢において糖原症を発症した。しかし、今回のCPK値は他の梼原病を発症しないウズヲとの間にCPKの差がみられなかった0これは、前回のCPK値の測定法（無校リン酸を測定する方法）と今回の測定法（NAD法）が異なるためかもしれない0今後は無扱リン酸を測定する方法
で糖原病ウズラの選抜を行なうとともに糖原病において欠損していると思われる酵素の調査を神経センターの協力を得て行ない、できる限りの選抜手段を駆使して糖原病ウズラの系統化を行ないた

最後に糖原病を発症する形質が遺伝的であるか否かということであるが・著者は遺臣的であると確信している。遺伝様式はニワトリの筋ジストロフィー遺伝子amのように単一の遺伝子によるものと異なり、複雑な遺伝様式をとるものと思われる0その基礎となる観察結果としては、これまで
RWク。＿ズドコロニーにおいてのみ糖原病ウズラが出現し、他の系統においては出現していない
ことおよびRWクP−ズドコPニー内のlpairから糖原病ウズラ2羽が出現したことなどである04．特発性側攣症の疾患モデルとして可能性のある二ホンウズラCN系について
図6に示したごとく、頚部が掛こ曲がっているウズヲが時々出現していた。そこで、1976年

図6．特発性側琶症モデルとして可能性のあるCN系ウズラ
6月これら異常ウズラの系統化を開始した01977年3月異常ウズラ同士の交配が可能となり、cN系と命名した。その後、異常ウズラ同士の交配で現在（1979年12月）まで維持されているがその間に得られた若干の知見について以下にのべる0
ふ化時、肉眼的に異常ウズラと正常ウズラの区別はかなりむずかしい∩しかし・2〜3適齢時では容易に判別可能となる○
頚部が右に曲がるか左に曲がるかの形質が遺伝的か否かを検索するため、右に曲がっているもの

一60−

同士の交配を行ない、子の頚部の曲がり方を観察した結果、子には右に曲がっているものと左に曲がっているものとの両方が出現し、遺伝的か否かは不明であった。今後、左に曲がっているもの同士の交配を行なう予定である。
CN系の産卵率・受精率・ふ化率および異常ウズラの出現率を1978年1月−3月まで調査した。結果は表4に示したごとく、受精率が正常系（WE系）にくらべて少し悪いようである。
表4．CN系の産卵率、受精率、ふ化率および異常ウズラの出現率
系 統

産卵率

受精率

ふ化率

出現率

CN

60．3

45．8

51．5

32．7

WE

66．5

82．4

53．6

＜1

CN系の病理学的検索を行なったが、病因と思われるような異常は認められず、疾患モデルとしての有用性もわからず、ただ維持しているのみであった。
1979年10月慶大整形外科の土方らが実験動物に報告した「特発性側琴症の疾患モデルとしての日本ウズラSQOHM」はその臨床症状および遺伝様式がCN系と全く同様であった。この報告により、CN系が特発性側雪症のモデル動物として可能性のあることがはじめて判明し、今後のCN系の維持に勇気づけられたしだいである。

文献1）土方貞久・市原真仁・中井定明・鵜飼茂：特発性側琴症の疾患モデルとしての日本ウズラS
QOHM−その作出と検討−．実験動物，28（4），581−584，1979・
2）水谷誠：わが国における筋萎縮症ニワトリの繁殖，実験動軌 26（3），288−289，
1977．

3）小田良助：鶏の僻化と育成，養賢堂，1966・
4）鶏友社編集部編：養鶏養豚用施設・枚枕器具要覧。
5）田嶋嘉雄編：実験動物学．技術編・朝倉書店
6）菊池建摸：筋ジストロフィー鶏新株の開発−白色レクホン種とのFl．F2鶏について−
昭和53年度厚生省委託研究「筋ジストロフィー症の基礎的研究」報告書。
7）石浦章一：CPK．日本臨床．37巻・夏季増刊号．500−502。
8）松井高峯：ウズラにおける糖原病頬似疾患について1，全身臓器における組織所見 第88回日本獣医学会講演要旨集．146，1979・
9）黒田静夫ら：ウズラにおける糖原病煩似疾患について2，筋組織における電顔的観察
第88回日本獣医学会講演要旨集，147，1979・

一61−

遺伝性前外側下腿筋群萎縮マウス
江 崎 孝三郎

研究協力者 安田幸戒）中村昌宏2）
林 宏≡）小野啓郎2）
遠山正弥

マウスの遺伝性筋異常としては、dystrophiamuscuIaris（遺伝子記号dyおよびdy2J）1：2）
musculer degenesis（mdg）3）．myodystrophy（myd）4・5〜muscledefect（mif）6）

およびmotor endi）1ate disease（med）7）などが報告されている。
I）ystrophyamuscularis（dy）は1955年にMichelsonら1）によって報告されたもので、この遺伝子をホモにもつマウスは生後2遇頃より後肢のけいれん性麻痺と進行性筋萎縮を発症することから、ヒトの進行性筋ジストPフィー症のモデルとして広く利用されている。また、この遺伝子座に軋1970年にMeierら2）Lによって新しい突然変異が発見され、dy2Jと命名されている。
Muscular dysgenesis（mdg）は1963年にGlueckson−Waelsch3）によって報告されたもので、この遺伝子をホモにもつマウスは、胎生期の13日頃から骨格筋に障害が現れ、出生時には全身が浮腫になっている。しかし、心筋および平滑筋に異常はみられない。
Myodystrophy（myd）は1969年froggy（fg）として報告された4）突然変異であるが、1976年にLane5）によってmyodystrophyと改名された。この異常は生後12−15日に体格が小さいこと、尾を持ってもち上げた時に後肢の位置が異常であることによって判別できる点ではdyマウスと疑似している。しかし、dyマウスの筋異常が後肢に認められるのに対し、mydマ
ウスでは全身の骨格筋に巣性病変が認められる点でdyマウスとは異なっている。
Muscle defect（mdf）は1977年にWomartら6）によって報告されたもので、縫工筋、外側広筋および大腿直筋の著明な萎縮を示すものである。
筆者らはCF♯1マウスを近親交配している過程で、筋疾患に起因すると推定された歩様異常を示す個体を発見し、この異常の遺伝的支配ならびに解剖、組戚学的検索をおこなったのでその成苗を報告する。

Ⅰ．異常マウス発見の経過起源となった動物は、実験動物中央研究所が1967年にCarworthlnc．，U．S．A．より導入し、クローズドコロニーで維持していたCF♯1マウスである。1968年に卵白アルブミン投
与によるアナ7イラキシーに感受性の高い系統（CAS）を育成するために兄妹交配が開始された。
1976年兄妹交配第21代の1腹の産仔6匹（94、82）のうちメス2匹に歩様異常が発見さ

1）（財）実験動物中央研究所，2）大阪大学医学部整形外札 3）大阪大学高次神経研究所−62−

れた。これらのメス2匹を同腹の正常オスと交配したところ、一方の交配の組から生れたオス3匹、メス2匹のうち、オス、メス各1匹がメス親と同様な異常を示した。そこで以後は同腹の異常メス
×正常オスまたは正常メス×異常オスの交配の組合せによってこの異常を保存している。

Ⅰ．異常マウスの外見的症状
出生時には、異常仔の後肢は棒状で、内側に回転し、いわゆる内反共足を呈している。成長にともない、足関節の背面への自動的屈折と足指の伸展が困難になり、後肢をひきずるように下垂足歩行をおこなう（写真1）。 しかし、関節の拘鮪は認められない。
異常マウスの成長は同腹の正常マウスと比較してやゝ遅く、抵体重である。加齢にともない症状は次第に悪化するが顕著ではない。
また、症状の発現程度には個体差がみられる。
繁殖はメス・オスともに可能で

写真1．断食筋萎縮マウス

あるが、オスの生殖能力は比較的早期に低下する債向がみられる。これは、加齢にともなう症状の悪化によって、オスの交尾行動が困難になるためと推測される。

Ⅲ．解剖ならびに組織学的特徴
i 骨 格 系
内臓を除去し、剣皮した後95界エタノールで固定した体躯を2界KOHで透明化し、骨格をalizarin red Sで染色した後水洗、夙乾して骨格標本を作製した。
骨格の異常は後肢にのみ認められた。異常マウスにおいては、俳骨および脛骨の発育が正常マウ
スより悪く、距骨の排骨関節面の角度に異常がみられた。すなわち、正常動物の距骨・俳骨関節面
は中線に対しほゞ直角であるのに対し、異常動物では約600の角となり、址面が内反している。また、一部の個体では足板骨の癒合がみられた。
しかし、これらの異常はいずれも一次的なものではなく、後述の前外側下腿筋群の萎縮に起因す
る2次的変化であると考えられる。
ii 骨格筋の異常
解剖学的に軋．餅骨前外側に存在する前外側下腿薪群すなわち、前脛骨筋、長母址伸筋、長址伸筋、長俳骨薪、短排骨筋、第4址俳骨筋および第5址俳骨筋の発達が極めて悪い。Hematoxilin−
Eosin染色によって組織学的にみると、前外側下腿筋群は中経の筋線経で構成され、著明な萎縮および高度の脂肪変性が認められる（写真2）。

−6

3−

iii 末梢神経の異常
解剖学的に坐骨神経の走行をみると、縁排骨神経に異常がみられる。外見的に軽症の個体では総排骨神経が細くなっているのが認められ、重症の個体ではそれが欠損している。しかし、
脛骨神経および俳腹神経は正常である。外見的に重症の個体を、オスミウム酸固定、トルイジン
ブルー染色によって組織学的に観察すると、大転子の位置、大腿末梢部のいずれにおいても総俳骨神経は認められない。
一方、前外側下腿筋群をコリ

写真2．マウスの下腿筋群

ンエステラーゼ染色によって検左：正常．右；俳骨筋萎縮

索したところ、脂肪変性をまぬがれた筋線経にはコリンエステラーゼ染色陽性を示す神経筋終板が認められた0Ⅳ．遺伝的支配についての検索
i 同系内での交配実験
異常マウスどうしの交配からは異常マウスのみが得られた。前述の系統維持のための交配、すな
わち同腹の異常マウスと正常マウスの交配から軋異常マウスと正常マウスがほぼ1：1の割合で得られた。
ii 近縁の系統との交配実験
異常マウスをそれと同一血縁の正常マウスの系統（CAS）と交配し、Fl，F2およびFlと異常マウスとのもどし交配における異常発現を観察した。その結果、Fl世代においては正常マウスのみが得られた。F2世代においては79匹中18匹に異常が観察された0また、Flと異常マウスのもどし交配で得られた仔においては、18匹中9匹に異常がみられた。これらの異常マウスの発現
頻度軋

この異常が常染色体上の1個の劣性遺伝子によって支配されていると仮定した時の理論的

分離比、すなわち、F2においては3：1、もどし交配においては1‥1に良く一致しているoiii 他系統との交配実験
異常マウスとC3H／Heマウスとの交配をおこない、Fl，F2，Flと異常マウスとのもどし交
配およびF，とC3H／Heとのもどし交配における異常マウスの発現を観察したo Fl世代およびFlとC3H／Heとのもどし交配で得られた仔においては異常マウスは発現しなかったo F2世代およ−64￣

ぴFlと異常マウスのもどし交配で得られた仔では、正常個体と異常個体が分離して出現した0 しかし、異常個体の発現頻度は、この異常が1個の劣性遺伝子による支配と仮定した時の理論的発現
頻度より低かった。また、異常個体においても、異常の程度が極めて軽症のもの、片側性のものな
ど表現に種々のバラツキがみられた。

V．考察CF♯1マウスを近親交配している過程で発見された歩様異常を示すマウスについて、解剖、組織学的検索をおこなったところ、この異常は総排骨神経の退縮または欠損による前外側下腿筋群の神経原性の萎縮によることが明らかになった。これらのことから、この異常はヒトのCharcoトMarie Tooth型筋萎縮症あるいはWarding−Hoffmann病のモデル動物となる可能性が考えられる。
一方、前外側下腿筋群は萎縮しているけれども明らかに存在していること、脂肪変性をまぬがれた筋においては神経筋終板が認められる点から考えると、総排骨神経が発生の過程で退桁を起した可能性、あるいはこの筋群の一部が総俳骨神経以外の神経、例えば経骨神経の分枝によって代行的に支配されている可能性などが考えられる。これらの点に関してはさらに詳細な検索をする必要がある。
また、遺伝的支配を分析するための交配実験によって、この異常は常染色体上の1個の劣性遺伝子によって強く支配されているけれども、その表現度は他の遺伝子、すなわち遺伝的背景に影響されるものと推定された。この主遺伝子をperoneal museule atrophy、遺伝子記号pmaと命名する。
なお、この遺伝子の表現度が遺伝的背景によって影響されることは、この異常をヒト疾患のモデ
ルとして利用するときに、種々の程度の症状を示す動物を作出できる可能性をもつものと考えられ
る○

文

献

1）Michelson，AM．et al．，Proc．Not．Acad．Sci．，41：1079（1955）
2）Meier，H．et al．，Life Sci．，9：137（1970）
3）Gluechshon−Waelsh．S．，Science，142‥1269（1963）

4）Lane，P．W．，Mouse News Letter，40：30（1969）
5）Lane，P．W，et al．，J．Hered．，667：135（1976）
6）Womsck，A．，et al．，Mouse News Letter，56：40（1977）
7）Duchem，L．W．，J．Neurol．Neurosurg．Psychiat．，33：238（1970）ー65−

昭和54年度第五班（野村班）名簿
分

班

長

野

村

達

次

幹

事

近 藤

恭

司

江

崎

孝 三郎

江

橋

節

郎

菊

池

建

機

水

谷

E

員

運営幹事

氏

所
所

区

名

誠

斉 藤

宗

堆

中

博

文

尾

財 団法人

属

機
在

関

名
地

電 話 番 号

実験動物中央研究所〒 2 13 川崎市高津区野川 1 4 3 0

04 4 −7 5 5 −5 4 4 1

名首足 大学農学部家畜育種苧
〒 4 64 名古屋 市千種区不老町
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0 5 2 −7 8 1 −5 1 1 1

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0 4 4 −7 5 5 −5 4 4 1

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0 4 4 −7 5 5 −5 4 4 1