No.82 2016 October

CONTENTS●巻頭言
食品安全に関する新たなリスク評価方法の開発と実用化に向けて〜内閣府食品安全委員会における取組み〜
内閣府 食品安全委員会事務局
評価技術企画推進室長
橘 薫子

̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶
●業務紹介
（定量的）
構造活性相関（(Q)SAR）
モデル等による予測手法
摩擦係数の測定̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶
●技術情報
ガスクロマトグラフ-タンデム質量分析計（GC-MS/MS）
による
メタボロミクス
ゼブラフィッシュ胚を用いた発生毒性試験‒胚への化学物質取込量の測定及び速度論的解析-̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶
●本機構の活動から第21回化学物質評価研究機構研究発表会開催報告
化学物質管理ミーティング2016出展
JASIS 2016 出展
CERI賞表彰報告
・日本分析化学会 先端分析技術賞/CERI評価技術賞
・日本ゴム協会 CERI若手奨励賞及び最優秀発表論文賞
・日本環境毒性学会 CERI学会賞

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●お知らせ
平成28年度CERI寄付講座
平成29年度CERI公募型研究助成の募集

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●編集後記

巻 頭 言食品安全に関する
新たなリスク評価方法の開発と実用化に向けて〜内閣府食品安全委員会における取組み〜
内閣府食品安全委員会事務局
評価技術企画推進室長 橘 薫子
化学物質や汚染物質などの毒性評価は、従来、動物実験等のデータに基づいて行われておりますが、評価の対象となる物質によってはデータが十分にはなくリスク評価が難しいことや、動物実験には多大な時間や費用が必要であること、加えて動物福祉の観点から動物実験の削減・廃止の流れも国際的に進んできていることなどから、新たな評価方法の開発と導入が課題となっています。
諸外国では OECD（経済協力開発機構）、EFSA（欧州食品安全機関）等をはじめとして、様々な国
際機関や政府機関、大学・研究機関など多くの関係機関において、（定量的）構造活性相関（(Q)SAR）などの in silico 評価方法の開発や実用化の取り組みが進んでいます。また、日本国内でも化学物質の審査及び製造等の規制に関する法律（化審法）のデータを活用した in silico 評価方法の開発プロジェクトが実施され、成果の一部が化審法の運用に活用されているほか、医薬品や環境の分野でも活用・検討がなされています。
食品安全委員会は食品中に含まれる可能性のある化学物質や微生物などがヒトの健康に与えるリス
クを科学的知見に基づいて評価していますが、このような背景も踏まえ、より迅速かつ信頼性の高い
新しい評価手法について、様々なハザードへの横断的な適用も念頭に置いて検討する必要性が高まっています。さらに、例えば食品中のアレルギー物質などの新たなハザードに対するリスク評価系の確立も必要となっています。こうした状況に対応するため、2015 年 4 月に食品安全委員会事務局内に評
価技術企画室を設置しました。
さらに、2016 年 4 月には、食品安全委員会に評価技術企画ワーキンググループを設置して、遺伝毒性あるいは反復投与毒性を予測する (Q)SAR や毒性学的懸念の閾値（TTC）、定量的確率論的評価方
法の活用可能性等について、公開での審議を進めています。過去２回のワーキンググループ会合では、(Q)SAR やその他の評価法の活用に向けての現状と課題についての整理や、米国 FDA（食品医薬品局）
および日本国内でのデータベース構築・活用状況などについての情報提供と質疑などが行われました。
また、平成 29 年度食品健康影響評価技術研究課題として、「in silico 手法を用いた評価方法の確立に関する研究」や「確率論的評価手法に関する研究」の公募も行っており、有用な研究成果が得られることを期待しているところです。
今後は、これらの研究成果や、関係省庁との情報交換、欧米の関係機関との連携協力なども進めながら、評価技術企画ワーキンググループでの審議を深め、(Q)SAR 等をはじめとする in silico 評価方法のためのデータベースや指針の整備を行う等、食品安全分野のリスク評価への応用・実用化に向けた取組みを進めていきたいと考えています。

2

業 務 紹 介（定量的）構造活性相関（(Q)SAR）モデル等による予測手法
安全性評価技術研究所 赤堀 有美
1. はじめに（定量的）構造活性相関（(Q)SAR）モデル等は、試験を実施することなく、化学物質の物理化学的性
状、環境中運命あるいはヒトへの健康影響や生態に与える影響等を「予測」することができます。この予測法には、大きく分けて、（定量的）構造活性相関（(Q)SAR）モデルと read-across（リード・アクロス）の 2 つの手法があります。これらの手法は、創薬分野におけるスクリーニング、農薬や一般化学物質等における毒性の評価等に広く用いられています。例えば、欧州の化学品規制である REACH 規則や米国における TSCA では (Q)SAR モデルや read-across により取得した予測結果を登録や申請に使用することができます。また、GHS 分類の一部の項目において、(Q)SAR モデルの予測結果を活用することができます。本機構では (Q)SAR モデル等を用いた予測や予測結果を用いた申請等に用いる文書の作成等を実施しています。今回は、このような業務で使用している 2 つの手法、(Q)SAR モデルと read-across について概説します。
2.(Q)SAR モデルを用いる手法(Q)SAR モ デ ル に は、 図 1 に 示 す
2 つのタイプがあります。ひとつは、化学構造や物性等の定量的なパラメータを用いて統計的に得られる定量的構造
活性相関（QSAR）モデル（定量的な予測式）であり、LC50 や分類結果等を予測できます。もう一方は、専門家判断（Expert judgment）等によるアラート構造（毒性等の発現に寄与する部分構造）に基づき構築される構造活性相

図1(Q)SAR モデルの種類

関（SAR）モデルであり、変異原性や感作性の有無等の定性的な予測ができます。
(Q)SAR モデルは、物性や毒性等の活性を予測したい物質の構造に関する情報を入力するだけで、その物質の特性に関する知見が得られる非常に便利なツールです。しかし、どんな物質にも適用できるわけではなく、予測が行えない物質もあります。このような、(Q)SAR モデルの限界性や信頼性を考慮する際に留意すべき事項について、「OECD(Q)SAR モデル検証の原則（図 2）」を OECD が 2007 年に公表しています 1。この原則は、行政が (Q)SAR モデルを用いる際に参考にすべきものとして作成されていますが、企業等における (Q)SAR モデルの結果の適切な評価、活用におけるヒントにもなります。
OECD(Q)SAR モデル検証の原則における原則 1 では、その (Q)SAR モデルがどのエンドポイント（試験法、対象とする毒性エンドポイント等、生物種、性別等）を予測するかを明らかにする必要性を示しています。原則 2 では、(Q)SAR モデル構築に用いられたアルゴリズムの明確さが求められています。
原則 3 は、当該 (Q)SAR モデルを適用してよい物質の範囲（適用範囲）に関するもので、予測結果の信CERI NEWS 82

3

頼性に係る項目であるため重要な原則です。原則 4は、当該モデルがどのような予測精度で予測が行えるのか、といった評価に関する項目になります。(Q)SAR モデルについては、一般的には「適合性（モデル構築に用いたデータセットに対してどの程度予測できるかの評価）」及び「予測性（モデル構築に用いていないデータセットに対してどの程度予測で

図2

OECD(Q)SAR モデル検証の原則

1

きるかの評価）」への関心が高い傾向にありますが、原則 3 で定義される (Q)SAR モデルの「適用範囲」の中で実施した適合性や予測性の評価でなければ、意味のある評価にならないことを理解しておくことも重要です。最後に原則 5 のメカニズムに関する解釈については、「可能であれば」との表現が加えられていますが、これはメカニズムに関する解釈を必ずしも行えないケースがあるためと考えられます。
(Q)SAR モデルにおけるメカニズムの解釈は結果の信頼性を担保する上で重要な要素となるため、可能な限りメカニズムの解釈が行えることが望ましいと考えられます。
(Q)SAR モデル検証の原則について大まかにまとめましたが、これらの原則はあくまで行政が (Q)SAR
モデルを用いることが前提の原則であり、企業で使用する場合において、全てを満たす必要はないかもしれません。企業における (Q)SAR モデル利用では、その企業の利用目的に応じた信頼性等に対する考え方を整理した上で、求める信頼性を担保するためにこれらの原則を柔軟に活用できると考えられます。
(Q)SAR モデルを用いた結果の導出は、化学構造が描画できる程度の知識があれば実施可能ですが、導いた予測結果の妥当性を評価するには専門的な知識に基づく判断が必要となります。しかし、現在ではOECD のガイダンス等 1, 2 に、どのような評価が必要か、ということが明確になってきたこと等により(Q)SAR モデルの利用がさらに進むことが期待されます。
3. read-across を用いる手法
read-across では、予測したいエンドポイントについて、類似性に基づき形成されたグループの中にある、当該エンドポイントの「データがある物質（ソース物質）」の情報を用いて、同一グループ内にある「データがない物質（ターゲット物質）」の情報を予測する方法です。
図 3 では、化学物質の変異原性を評価する in vitro 試験である Ames 試験の結果を read-across で予測するイメージを模式的に示しています。図 3 では、構造的に類似性のある物質 A 及び物質 C の結果に基づく read-across により、データがない物質 B 及び物質 D の Ames 試験の結果を予測しています。物

図3
4

read-across のイメージ

質 B の場合、物質 A と C による挟み込みで予測が行えており、これを内挿といいます。内挿による予測は一般的には信頼性が高いものとなります。一方、物質 D は物質 C の結果に基づく read-across を行っていますが、これは外挿になり、物質 D よりも炭素鎖が長い物質の場合どのような結果になるか分からない点等から不確実性があるため、内挿による予測に比べ、信頼性は劣ります。なお、図 3 の例ではAmes 試験の結果という定性的な予測をしていますが、定量的な予測を行うことも可能です。
read-across による予測を実施する上で重要なポイントは、いかに「類似性」のある物質グループを形成するか、ということです。これは、類似性があるからこそ、類似の活性を示すと考えられるためです。read-across のためのグループの形成は、図 4 に示すような類似性の考え方に基づいて行います。他にも、「データがある物質」のデータに十分な信頼性があるか、不純物等による評価結果への影響の可能性、グループ化した物質群の中で毒性等の性状に影響を与えるような物理化学的性状の違いがないか

図4

類似性の考え方（例、対水溶解度、蒸気圧）、トキシコキネティクスの違い等を考慮する必要があります。このような、
read-across を行う上で考慮すべき観点については、2015 年に欧州化学品庁が公表した「Read-AcrossAssessment Framework」にも記載されおり、企業等で read-across を実施する際の参考になります。
read-across を行うためのツールとして最もよく知られているのは OECD QSAR toolbox です。OECD
のサイトから無償でダウンロードできるツールであり、様々な規制当局等においても利用されています。
OECD QSAR Toolbox は図 5 に示す要素で構成されており、read-across を行うためのグループ形成やソース物質の情報収集をサポートするためのツールが整備されています。

図5OECD QSAR Toolbox を構成する要素

4. おわりに(Q)SAR モデル等により得られた予測結果をどのように解釈すべきか悩むことが多いのではないでしょうか。本機構では、(Q)SAR モデル開発だけでなく、(Q)SAR モデルや read-across に基づく毒性評
価を行ってきた豊富な経験から、データギャップの穴埋め、予測に基づく毒性のスクリーニングによる優先順位付け、医薬品不純物の遺伝毒性評価（ICH-M7）への対応、(Q)SAR モデルの結果を用いた登録用文書の作成業務、(Q)SAR モデル等に関するインハウスミナーの開催等を実施しています。毒性の予測法等に関するご相談等ございましたら、お気軽にお問い合わせください。
1 OECD（2007）Guidance document on the validation of（quantitative）structure-activity relationships［(Q)SAR］
models.
2 NAFTA（North American Free Trade Agreement）（2012）Technical working group on pesticides（TWG）（Quantitative）structure activity relationship［(Q)SAR］guidance document
CERI NEWS 82

5摩擦係数の測定
理事・高分子技術センター長 近藤 武志

摩擦とは、物体どうしが接触した

物体重量
（W）

まま相対的に移動することをいい、

F´＝μN

物体の動きに逆らうように働く力をF´：摩擦力

摩擦力といいます。ステンレス板のμ：摩擦係数上に置いてある物体を押すと、物体

N：垂直抗力

押す力
（F）

摩擦力
（F´）

と板の接触面に摩擦力が発生します
が、摩擦力は物体を押した方向と反

図1

対方向に働きます。また、物体はそ

摩擦力

垂直抗力（N）の重量によって板を押す力と反対向きに垂直抗力を受けます。この関係を図 1 に示します。
摩擦特性を評価するには、摩擦係数（μ）がよく使われます。摩擦係数には、動き始めるときに測定される静摩擦係数（μS）と動いているときに測定される動摩擦係数（μD）に分けられ、μS ＞ μD の関係があります。
代表的な測定方法には、水平法と傾斜法があります。
（1）水平法
ロードセル

JIS K 7125『プラスチック−フィルム及びシート−摩擦係数試験方法』に規定されている方法であり、多くの試験機が市販されていますが、万能試験機をワイヤ利用する方法（図 2）がよく使われます。

滑車

測定は、すべり試験片（63×63mm：40cm2）の重すべり試験片量を 200g（1.96N）に調整して、相手材の上に載せ、100mm/min の試験速度で滑らせたときの力を測定します。得られるチャートは、
図 3 のようになります。
動き始めの最大荷重が静摩擦力であり、動いている

図2

万能試験機を使った摩擦係数測定

状況で発生する力の平均値が動摩擦力となります。
静摩擦係数（μS）＝静摩擦力（FS）/ 物体重量（W）
動摩擦係数（μD）＝動摩擦力（FD）/ 物体重量（W）

FS

F︶
´

となります。

摩擦力︵

摩擦係数の計算は、

FD0
移動距離 L

図36

摩擦係数測定チャート

（2）傾斜法
JIS P 8147『紙及び板紙−静及び動摩擦係数の測定方法』に規定されている方法で、斜面と物体の間に生じる静止摩擦係数を求める方法です。物体を斜面に置くと、図 4 のような力関係になります。ここで、α を傾斜角度、W を物
体の重量とすると、
Wsinα が斜面に平行な力（す
べり降りる力）であり、Wcosα が垂直抗力と
図4なります。これらから、静摩擦力は μWcosα

傾斜法の力関係となります。
試験片が傾斜によりすべり始める瞬間は、斜面に平行な力と静摩擦力の平衡が崩れる瞬間であるため、Wsinα ＝ μWcosα で表されます。
こ れ よ り、 静 摩 擦 係 数 は μ ＝ Wsinα /Wcosα ＝ tanα となります。
測定は図 5 のような装置があり、すべり試験
片は 60×100mm、1000g とします。角度は、毎秒 3°以下の速度で上昇し、試験片のすべり始めの角度を求めます。
このように摩擦係数の測定は比較的簡単にできますが、摩擦面が均一であるという条件が必要です。そのため、製品形状で測定する方法もよく使われます。

図5

摩擦係数測定装置（傾斜法）

JIS T 8101『安全靴』では、図 6 のように靴を足型に履かせ、500N の垂直力で摩擦係数を測定します。

図6

靴のすべり試験機

摩擦の基本法則に、アモントン−クーロン法則があり、次の 3 つの法則に従います。
第一法則：摩擦力は荷重に比例する（摩擦係数は、荷重によらない。
）。
第二法則：摩擦力は見かけの接触面積によらない。
第三法則：動摩擦は滑り速度によらない。
高分子技術センターには、他にも床すべり試験機や摩擦現象で発生する摩耗を計測する試験装置も数多く設置していますので、詳細は HP からお問い合わせください。
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7

技 術 情 報
ガスクロマトグラフ - タンデム質量分析計（GC-MS/MS）によるメタボロミクス
東京事業所環境技術部 瀨戸 遼也
1. はじめに
メタボロミクスとはアミノ酸、核酸、糖類、アミン等の生体内における代謝物総体（メタボローム）を対象とした網羅的な解析（オミクス解析）のことをいいます。
オミクス解析にはメタボロミクスのほかに遺伝子を対象としたゲノミクス、タンパク質を対象とした
プロテオミクス等があります。メタボロミクスはこれらに比べ、対象となる物質が少なく網羅的な解析が行いやすい、ゲノム情報に依存しない等の利点があり、これまで困難であった生体反応の解明に有効であると期待され、近年盛んに研究が行われています。
メタボロミクスの解析対象はヒト、動物、食品、微生物、植物等多岐にわたり、生体試料中の代謝物について定性的及び定量的な情報を得ることにより、医薬品の副作用のメカニズムの解明、疾患バイオマーカーの発見、代謝酵素の機能解明、食材の品質予測のモデル作成、発酵生産分野における発酵の効率化等様々な分野に応用することができます。具体的な例としては、健常者とがん患者の血漿中の代謝物を比較することによるがん診断に利用できる代謝物の特定、高級茶と低級茶に含まれる代謝物の比較
による品質予測モデルの作成等が挙げられます。
このようにメタボロミクスは試料中に存在する代謝物を一斉に分析することにより生体内の情報を包括的に捕えるため、代謝物を一斉に分析するにはそれらを高度に分離し同定及び定量する分析機器が必要となります。現在では主に液体クロマトグラフ - 質量分析計（LC-MS）、キャピラリー電気泳動 - 質量分析計（CE-MS）等の機器が用いられていますが、ここでは本機構が早くから注目し、分析を行ってきたガスクロマトグラフ - タンデム質量分析計（GC-MS/MS）を用いたメタボロミクスを紹介します。
2. GC-MS/MS を用いた親水性代謝物ターゲット分析
GC-MS/MS は、通常、比較的揮発性の高い物質を分析するのに適しており、揮発性の低い物質を分析する場合は誘導体化を行い、分析対象物質を気化しやすい物質に変換する必要があります。親水性の代謝物の多く、例えば糖等は揮発性が低いため、GC-MS/MS で分析を行うにはこの誘導体化を行う必要があり、親水性代謝物の分析では試料から親水性代謝物を抽出後、誘導体化を行い、分析を行います。
試料が血漿であった場合は、次に示す手順で GC-MS/MS で分析可能な試料を調製します。
①クロロホルム、メタノール、水を用いた代謝物の抽出（Bligh-Dyer 法）②上澄み（水層）を分取③凍結乾燥④メトキシアミン塩酸塩（CH3ONH2・HCl）を用いたオキシム化⑤トリメチルシリルジアゾメタン［（CH3）
3SiCHN2］を用いたトリメチルシリル化（TMS 化）
この際、④及び⑤においてオキシム化及び TMS 化という誘導体化をそれぞれ行いますが、④のオキ
シム化は、カルボニル基とヒドロキシルアミンからイミンが生成する反応で、溶液中で鎖状構造及び環状構造（α-、β- フラノース型及び α-、β- ピラノース型）が存在する平衡状態にある糖を、いずれも鎖状構造を持つオキシム誘導体にすることで、分析において一つの糖から多数のピークが検出されるこ8とを防ぎ、解析を容易にするために行います（図 1）。⑤のTMS 化は誘導体化を受ける化
ǂ-D-ࢢࣝࢥࣆࣛࣀ࣮ࢫ

合 物 の -OH、-COOH、=NH、

CH3ONH2࣭HCl

ǃ-D-ࢢࣝࢥࣆࣛࣀ࣮ࢫ

-NH2 及び -SH 基中の活性水素࢜࢟ࢩ࣒໬

H が TMS 基［Si
（CH3）
3］ に
置 換 さ れ る 求 核 置 換 反 応 で、D-ࢢࣝࢥ࣮ࢫ

TMS 化された物質は極性が低ǂ-D-ࢢࣝࢥࣇࣛࣀ࣮ࢫ

ǃ-D-ࢢࣝࢥࣇࣛࣀ࣮ࢫくなり、熱に安定で気化しや
すくなります（図 1）。このようにオキシム化及び TMS 化(CH3)3SiCHN2をそれぞれ行うことで、生体試料中の代謝物の正確な同定、TMS ໬

定量及びそれらの一斉分析が可能となります（図 2）。
このように GC-MS/MS にお

D-ࢢࣝࢥ࣮ࢫ࢜࢟ࢩ࣒ㄏᑟయ

図1

ける代謝物分析では親水性代

D-ࢢࣝࢥ࣮ࢫ TMS ㄏᑟయ

D- グルコースのオキシム化及び TMS 化反応

謝物の誘導体化が必要となりますが、GC-MS には LC-MS や CE-MS に比べて次の利点があります。
①保持時間の再現性がよい②化合物の分離能がよい③検出されるマススペクトルの装置間差が少なく、分析対象物質のライブラリーが充実しているため同定を行いやすい
結果として、信頼性の高いデータを提供することができます。このため GC-MS/MS は親水性代謝物分析において大変有効なツールであるといえます。

㻔㼤㻝㻘㻜㻜㻜㻘㻜㻜㻜㻕

本 機 構 は GC-MS/MS

㻥㻚㻜によるメタボロミクスを

㻤㻚㻜

HCNOCH3行っており、血漿、動物
組織、細胞等の中のグル㻣㻚㻜

コース等の糖、糖アルコー

㻢㻚㻜ル、アスパラギン等のア㻡㻚㻜

ミノ酸、乳酸等の有機酸、カテキン類等を含め約 400㻟㻚㻜

です。お客さまの目的に

㻞㻚㻜

定方法の組合せ等のご提案もしていますので、おங㓟 TMS ㄏᑟయ

O

O

H

Si

H

O Si

H

O

Si

O
Si

㻠㻚㻜

種類の代謝物を測定可能合わせた前処理方法・測SiHD-ࢢࣝࢥ࣮ࢫ TMS ㄏᑟయ

㻝㻚㻜
㻜㻚㻜
㻣㻚㻡

気軽にご相談ください。

㻝㻜㻚㻜

㻝㻞㻚㻡

㻝㻡㻚㻜

㻝㻣㻚㻡

㻞㻜㻚㻜

ಖᣢ᫬㛫 (min)

図2

GC-MS/MS で検出された血漿中の親水性代謝物のクロマトグラム
CERI NEWS 82

9ゼブラフィッシュ胚を用いた発生毒性試験−胚への化学物質取込量の測定及び速度論的解析−
久留米事業所 縄司 奨
1. はじめに
近年、動物愛護の観点から哺乳動物を用いる既存の発生毒性試験の代替法として、in vitro による評価法の開発が進められてきていますが、生物全体で生じる複雑な発生毒性の再現は困難であるのが実状です。そのため、EU
諸国で非動物として認識され、遺伝学的にヒトと類似性が高い等の多くのメリットを有するゼブラフィッシュ

左：受精 24 時間後（hpf）
右：受精 5 日後（dpf）
図 1 ゼブラフィッシュ胚（ZF、図 1）胚を用いた発生毒性スクリーニング法が注目されています。発生毒性は一般的に主要な器官が形成される器官形成期に最も高い感受性を示すことが知られており、山下氏ら（J. Toxicol. Sci., 2014）によって報告された試験系に代表される多くの ZF 胚発生毒性試験では、この器官形成期を十分にカバーするようにばく露期間が設計されています。しかし、これらの試験ではばく露する化学物質の水溶液濃度での評価がほとんどであり、実際に化学物質が胚本体にどれくらいの量が、どれくらいの速度で取り込まれているか、という点についてはあまり議論されておらず、胚への化学物質の取込量や取込速度を実際に測定した例はほとんどありません。
そこで我々は、発生毒性物質の ZF 胚への取込量及び取込速度を測定し、それらの毒性との関係性を調査しました。
2. 実験方法
本研究で用いた化学物質はカフ ェ イ ン（CA） 及 び バ ル プ ロ 酸
ナ ト リ ウ ム（VA） で、 こ れ ら は
ZF 及びげっ歯類あるいはヒトに対して発生毒性を引き起こすことが報告されています（図 2）。これらを各設定濃度［CA：621 〜 2.43
mg/L（公比 4）、5 濃度、VA：166

図2

試験の流れと使用した化学物質
表1

試験条件

〜 5.19 mg/L（公比 2）、6 濃度］になるよう試験用水にそれぞれ溶解させ、ZF（NIES-R 株）の受精卵を約 6 日間ばく露し、24 時間ごとに顕微鏡下で症状観察を行いました（表 1）。具体的には図 3 に示す観察
項目について個体ごとに症状を観察し、各項目の重篤度を独自に設定した基準に基づいて A、B、C の3 段階で評価することで、各濃度区における合計スコアを算出しました。
さらに、CA の 155 mg/L 区、VA の 41.5 mg/L 区については、24 hpf から 24 時間ごとに個体を取り10

上げ、図 4 に示す手順で前処理を行い、HPLC 又は LC-MS を用いて胚への取込量を測定しました。測定した取込量のプロットに対しては、ZF

図3

観察項目及びスコアリング

胚を一つのコンパートメ
ントとして仮定した 1- コンパートメントモデル（図 5）におけるフィッティング解析を実施し、速度論的パラメータを算出しました。

図4

取込量測定における胚の前処理

（a）

図5

1- コンパートメントモデル

（b）

図6

CA 及び VA の各濃度の合計スコアの時間推移（a:CA、b:VA）

3. 実験結果及び考察
各濃度区における合計スコアを算出した結果、CA、VA 両方において、発生毒性が顕著に発現している（死亡は除く）濃度では、各濃度の 96 hpf 以降の合計スコアが横ばいになりました（図 6、赤線部）
。
（a）

（b）

図 7 CA 及び VA の胚中濃度の時間推移（a:CA、b:VA、赤点線はばく露した水溶液濃度の幾何平均値を示す）
CERI NEWS 82 11このことから、最短で 96 hpf で毒性をほぼ見積もるこ

表2算出した速度論的パラメータとが可能であることが分かりました。
また、24 時間ごとに ZF 胚への CA 及び VA の取込量を測定したところ、CA、VA ともに 24 hpf から取り込みが確認され、経時的に取込量が増加して 96 hpf
前後で横ばいになる結果となりました（図 7）。さらに、
1- コンパートメントモデルと仮定した速度論的解析を実施した結果、定常状態になるまでに約 100 時間を要*SS95：BCF ss の 95%（定常状態と定義）に達する時間することが明らかとなりました（表 2）。
以上の結果を踏まえると、器官形成期である 5 〜 48 hpf から化学物質が胚に取り込まれており、最短で 96 hpf で毒性をほぼ見積もることができることから、発生毒性試験におけるばく露時間は 96 hpf
が適当であることが示されました。
4. まとめ本研究では、哺乳動物を用いた発生毒性試験の代替スクリーニング法として注目されている ZF 胚発
生毒性試験において、胚への化学物質の取込量及び取込速度を測定・解析しました。この ZF 胚への化
学物質の取込量及び取込速度に関する知見を得たのは本機構が初めてであり、この知見は ZF 胚を用いた発生毒性試験を実施する上で重要な基礎データであると考えています。
今後は、今回の 2 物質の他に脂溶性の高い化合物群の取り込みに関するデータを取得し、Kow の違い
によって取り込みの挙動の差異を調査する予定です。
なお、本研究で実施した胚の取込量測定に関する技術は、発生毒性物質のみならず広範な化学物質についても適用でき、さらに、ゼブラフィッシュ以外の水生生物種にも適用可能であると考えられます。
水溶液濃度による毒性評価ではなく、生物への正味のばく露量に基づく毒性評価が可能となり、汎用性に富む技術であると考えています。

本機構の活動から第 21 回化学物質評価研究機構研究発表会開催報告
平成 28 年 6 月 10 日、第 21 回化学物質評価研究機構研究発表会を経団連会館において開催しました。
発表会は、本機構理事長細川幹夫の挨拶で始まり、基調講演として経済産業省化学物質管理課長 山内輝暢様に「化学物質の安全管理政策 経済産業省の取組について」という題目でご講演いただきました。
その後、本機構職員による研究発表を 3 題、昨年度
CERI 公募型研究助成の研究成果発表を 2 題、最後に、本12

機構の各部門の技術報告 7 題を発表しました。
発表会に引き続き行われた懇親会では、日頃のご質問等にお答えできる場を設け、発表会の限られた時間で討議できなかった内容や本機構の業務に関連した話題について熱心な議論が交わされました。今後も皆様にとりまして有意義な研究発表会にしたいと考えています。

化学物質管理ミーティング 2016 出展
化学工業日報社主催の第 2 回「化学物質管理ミーティ
ング 2016」が 8 月 25 日、26 日にパシフィコ横浜にて開催されました。本展示会は化学物質管理に関しては国内唯一の展示会であり、2 日間で延べ 8,000 人を超える来場者（主催者発表）がありました。
本機構の展示ブースでは、GHS 分類に基づく SDS
やラベルの作成、改正安衛法化学物質リスクアセスメ
ント義務化への対応支援、化審法対応試験及び申請対応等について紹介を行いました。また、出展社プレゼ
ンテーションでは、「CERI の GHS 対応 SDS 作成支援
メニュー〜商品価値を高める！効果的な GHS 分類とSDS 作成の実例〜」及び「改正労働安全衛生法対応のポイント〜コントロール・バンディングから個人ばく
露測定まで〜」と題して発表を行い、いずれも定員以上のお客様にご来場いただきました。プレゼンテーショ
ンでご紹介した内容はブースでも多数のお問合せをいただき、関心の高さを実感しました。また、お客様のニー
ズを直接お伺いできる貴重な機会となりました。
大変暑い中、遠方からも多数のお客様に足をお運び
いただきました。プレゼンテーション及び本機構ブースにお立ち寄りいただきました皆様に心よりお礼申し上げます。

JASIS 2016 出展
一般社団法人日本分析機器工業会（JAIMA）、一般社団法人日本科学機器協会（JSIA）主催の合同展「JASIS 2016」が、9 月 7 日から 9 日までの 3 日間、幕張メッセ国際展示場で開催されました。
本機構から、化学標準部が「研究機関コーナー」で標準ガスの基幹比較及び水道法関連の分析に使用できる標準物質等について、
クロマト技術部が「一般展示コーナー」で本機構のカラム製品全般について、それぞれの展示ブースにて紹介を行いました。
また、同時開催の JAIMA セミナーで、化学標準部の山澤職員が「これであなたも専門家−不確かさ編」の中で「不確かさ評価の基本的な考え方と化学分析において不確かさ評価に便利なツール」について講演しました。
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さらに、クロマト技術部は、併催された新技術説明会において、「ワンランク上の逆相 HPLC 分析のために− LC から LC/MS まで−」という演題でセミナーを行い、長年のカラム事業で培ってきたノウ
ハウなどを紹介しました。
今回の出展では、多くの方々に本機構を知っていただくよい機会になりました。この場をお借りして、各セミナーへの聴講及び本機構ブースにお立ち寄りいただきました方々に心からお礼申し上げます。

CERI 賞表彰報告
本機構の研究表彰事業である公益社団法人日本分析化学会の先端分析技術賞 /CERI 評価技術賞、一般社団法人日本ゴム協会の CERI 若手奨励賞及び最優秀発表論文賞、日本環境毒性学会の CERI 学会
賞の 2016 年度受賞者（敬称略）は次のとおりです。
公益社団法人日本分析化学会
第 9 回先端分析技術賞 /CERI 評価技術賞（2016 年 9 月）
受賞者：佐藤 浩昭（国立研究開発法人産業技術総合研究所環境管理研究部門）
研究名称：「高分解能質量分析を用いた機能性ポリマー材料の構造解析法の開発」
一般社団法人日本ゴム協会
第 9 回 CERI 若手奨励賞（2016 年 5 月）
受賞者：澤田 大輔（株式会社アシックス）
研究名称：「架橋樹脂粉砕物複合ゴムの補強メカニズムに関する研究」
第 18 回 CERI 最優秀発表論文賞（2016 年 5 月）
受賞者：赤坂 修一（東京工業大学大学院） ほか
研究名称：「EHD 対流を用いたナノダイヤネットワーク形成における作成条件の影響」
第 19 回 CERI 最優秀発表論文賞（2017 年 5 月表彰予定）
受賞者：宗野 雅代（京都工芸繊維大学大学院） ほか
研究名称：「スピントラップ法によるポリブチレンテレフタレートの熱劣化反応の解析」
日本環境毒性学会
第 3 回 CERI 学会賞（2016 年 9 月）
受賞者：坂本 正樹（富山県立大学）
研究名称：「食物網を考慮した化学物質の生態影響評価」
14お 知 ら せ平成 28 年度 CERI 寄付講座
本機構では、化学物質等、製品の評価、管理技術の発展に貢献できる人材を育成することを目的に寄付講座を開設しています。本年度前期に開講した九州大学、東京工業大学及び明治大学と淑徳大学共催の寄付講座が終了いたしました。多くの方にご参加いただきましてありがとうございました。後期は、九州大学、東京工業大学の寄付講座及び早稲田大学の CERI 連携プログラムを開設いたします。詳細は本機構ホームページをご覧ください。
☆ 九州大学
九州大学大学院工学研究院応用化学部門主催の平成 28 年度 CERI 寄付講座
「先端分子材料化学 〜設計、構造、物性、機能化からデバイスまで〜 ｣ の前期講義が、
7 月 30 日をもちまして無事に終了いたしました。
後期は 11 月 5 日に開講いたします。講義ごとの参加が可能ですので、興味のある方は、是非この機会にご受講ください。
☆ 東京工業大学
東京工業大学 物質理工学院 応化系・材料系主催の平成 28 年度 CERI 寄附講座「ゴム・プラスチックの安全、安心 −身の回りから先端材料まで−」の前期講義が 7 月 30 日をもちまして無事に終了いたしました。
後期は 9 月 28 日に開講いたしました。講義ごとの参加が可能ですので、興味のある方は、是非この機会にご受講ください。
☆ 明治大学／淑徳大学
明治大学及び淑徳大学共催の平成 28 年度 CERI 寄付講座「安全文化論 〜化学物質のリスク評価〜」
が 7 月 16 日をもちまして無事に終了いたしました。
☆ 早稲田大学
早稲田大学主催の CERI 連携プログラムが 10 月 1 日に開講いたしました。今回は、「生活の安全を科学する」と題して、生活の安全・安心について、なぜ問題が起こるのか、その検査・検出方法や問題のありかを科学的に考え、社会や生活のなかにどのように安全を担保していくのかを、さまざまな材料から自分自身で判断できる力を養うことを目的として学びます。
受講の受付は、9 月 28 日をもちまして締め切らせていただきました。多くのお申込みをいただきましてありがとうございました。

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平成 29 年度 CERI 公募型研究助成の募集
本機構では、平成 29 年度 CERI 公募型研究助成のテーマを以下の要領で募集いたします。
4. 研究期間

1. 研究助成の趣旨

原則として契約日から平成 30 年 3 月 31 日まで

化学物質の評価・管理技術の発展に資する研究を、大学又は公的研究機関の若手研究者から

5. 助成金額

募集し、研究費の一部を助成します。

1 件当たり 100 万円以内
2. 対象分野
6. 助成対象費用

次の分野の研究を対象とします。

助成の対象となる費用は、研究の直接経費と①ゴム、プラスチック等の高分子材料の評価技術②環境分析、モニタリング技術

し、研究実施者の人件費及び設備費は原則とし③標準物質の開発、評価技術て対象外とします。

④化学物質の有害性評価、暴露評価及びリスク
7. 応募期間

評価技術

平成 28 年 12 月 1 日〜平成 29 年 1 月 31 日
（必着）

⑤その他、化学物質の評価、管理に関連する技術

8. 応募方法

3. 応募資格
3.1

詳細は、近日中に本機構ホームページに掲載

研究者

します。

原則として、
40 歳以下（平成 29 年 4 月 1 日時点）
で、日本国内の大学又は公的研究機関に所属す

9. お問合せ、応募書類提出先る研究者とします。

〒 112-0004
3.2

東京都文京区後楽 1-4-25 日教販ビル 7 階

研究テーマ

一般財団法人化学物質評価研究機構

申請する研究者が独自に行う研究であり、他の機関からの委託研究や助成を受けている研究

企画部企画課等と重複するものは対象外となります。

Tel. 03-5804-6132

後Fax. 03-5804-6139

各事業所連絡先編●東京事業所
Tel：0480-37-2601 Fax：0480-37-2521（高分子、環境、標準、クロマト、評価研）●名古屋事業所
Tel：052-761-1185 Fax：052-762-6055●大阪事業所
Tel：06-6744-2022 Fax：06-6744-2052●化学物質安全センター
Tel：03-5804-6134 Fax：03-5804-6140●久留米事業所
Tel：0942-34-1500 Fax：0942-39-6804●日田事業所
Tel：0973-24-7211 Fax：0973-23-9800●安全性評価技術研究所
Tel：03-5804-6135 Fax：03-5804-6139

CERI NEWS 第 82 号をお届けします。巻頭言は、「食品安全に関する新たなリスク評価
方法の開発と実用化に向けて 〜内閣府食品安全委員会における取組み〜」と題して、内閣府食品安全委員会事務局 評価技術企画推進室長の橘 薫子様に執筆していただきました。
誠にありがとうございました。
また、「化学物質管理ミーティング 2016」「JASIS2016」の本機構ブース及びセミナーへ多くの方にご来場いただき、ありがとうございました。
（企画部 宮田良太）

16

集

担当：渡邉

記

http ://www.ceri
http://w w w.cerijj.or.jp.or.jp
CERI NEWS編集発行

発行日 平成 28 年 10 月
一般財団法人化学物質評価研究機構 企画部〒 112-0004 東京都文京区後楽 1-4-25 日教販ビル 7F
Tel:03-5804-6132 Fax:03-5804-6139

E-mail : cerinews@ceri.jp

この印刷物は、印刷用の紙へリサイクルできます。