FAST NEWS 1

特集

よくわかる食物アレルゲン検査・食物アレルギーとは？
・アレルギー表示制度の概要
・食物アレルゲン検査
・食物アレルゲン検査キット「FASTKIT®エライザVer.Ⅲシリーズ」

最 新 NEWS
NEWS ①

食品表示法で変わるアレルギー表示制度
食品表示法が2013年6月28日に公布され、2015年４月1日より施行されました。この食品表
示法により、アレルギー表示制度が見直される方向にあります。現在消費者庁が示しているアレ
ルギー表示の見直し案（引用１）によると、従来の表示制度から大きく変わる点は、「特定加工食品等の廃止」と「個別表示、一括表示の見直し」の２つになります。

●特定加工食品等の廃止
現行のアレルギー表示制度では特定原材料等の記載に替わるものとして「代替表記」と「特定加工食品」が定められています。
食品表示法では、代替表記は引き続き使用可能ですが、特定加工食品は廃止となります。

代替表記

表記方法や言葉が違うが、特定原材料等と同一であるということが理解できる表記【例】 ○「卵」の場合
・玉子・たまご・タマゴ・エッグ・鶏卵・あひる卵・うずら卵○「小麦」の場合・こむぎ・コムギ

特定加工食品①特定原材料名又は代替表記を含んでいるため、これらを用いた食品であると理解できる表記②特定原材料名又は代替表記を含まないが、一般的に特定原材料を使った食品であることが予測できる表記またはそれらを含む表記

特定原材料

卵黄と卵白の完全分離が困難なため廃止
特定原材料に準ずるもの

マヨネーズに卵が入っていることを知らない例がある。

卵・卵黄、卵白・マヨネーズ、オムレツ、目玉焼き、かに玉、オムライス、親子丼

小麦・パン、うどん

乳・生クリーム、ヨーグルト、アイスミルク、ラクトアイス、ミルク※1、乳糖※2

いか・するめ、スルメ

大豆・醤油、味噌、豆腐、油揚げ、厚揚げ、豆乳、納豆

豚肉

・とんかつ、トンカツ

やまいも・とろろ、ながいも※1ミルクは特定加工食品から代替表記へ※2乳糖は「乳」を含んでいるため、これを用いた食品であると理解できる表記となる

食品表示法では廃止
1

引用1：食品表示部会第５回加工食品の表示に関する調査会資料（平成26年4月17日消費者庁食品表示企画課）

最 新 NEWS●個別表示、一括表示の見直し
現行のアレルギー表示制度では、特定原材料等の表示は「個別表示」と「一括表示」が認められています。
食品表示法では、原則「個別表示」となります。ただし、使用している原材料が多く、表示可能面積の制約がある場合や、表示量が多いために、かえって消費者に分かりにくい表示となる場
合は、例外的に「一括表示」は可能となります。

現行制度の表示例

改正後の表示例

原材料名

食用植物油脂（なたね油、ごま油）、ゴマ、砂糖、醸造酢、醤油（小麦を含む）、マヨネーズ、調味料（アミノ酸等）、たん白加水分解物、卵黄、食塩、発酵調味料、酵母エキス、増粘剤（キサンタンガム）、甘味料（ステビア）、香辛料抽出物

消費期限27.5.31午前10時

保存方法
製造者

原材料名

食用植物油脂（なたね油、ごま油）、ゴマ、砂糖、醸造酢、醤油（大豆、小麦を含む）、マヨネーズ（大豆、卵、小麦を含む）、調味料（アミノ酸等）、たん白加水分解物（大豆を含む）、 卵黄（卵を含む）、 食塩、発酵調味料（大豆をむ）、酵母エキス（小麦を含む）、増粘剤（キサンタンガム）、甘味料（ステビア）、香辛料抽出物（大豆由来）

消費期限

27.5.31午前10時

要冷蔵（10℃以下で保存）

保存方法

要冷蔵（10℃以下で保存）㈱△△食品
千葉市△△区△△町△－△

製造者

㈱△△食品
千葉市△△区△△町△－△※大豆の特定加工食品である｢醤油｣により、マヨネーズ・たん白加水分解物・発酵調味料・香辛料抽出物の｢大豆を含む｣を省略※醤油の｢小麦を含む｣により、マヨネーズ・酵母エキスの｢小麦を含む｣を省略※実際の表示は、赤字ではありません。

NEWS ②

日本ハムが「ニッポンハム食の未来財団」を設立
日本ハム株式会社は、食物アレルギーの研究・啓発活動を公益性の高い社会貢献活動として推進するため、平成27年1月27日に「一般財団法人ニッポンハム食の未来財団」を茨城県つくば市に設立しました。＊平成29年4月１日より「公益財団法人」として認定を受けました。
ニッポンハム食の未来財団は、日本ハムのキット事業収益の一部を財団の運営費として活用し、食物アレルギーに関する情報をインターネットで提供するほか、食物アレルギーに関する研究やアレルギー対応食品を研究開発する企業や大学への資金助成も行います。
財団法人の概要
法人名公益財団法人ニッポンハム食の未来財団

設立日2015年1月27日

所在地

茨城県つくば市千現2-1-6

電話

029-893-4466

主な活動

食物アレルギー領域への研究助成、食物アレルギーに関わる方のQOL(quality of life)向上を目指したイベント及び啓発活動、食物アレルギー対応力の向上を目指した食従事者への講演及び情報提供、専用ホームページによる情報発信など。

つくば研究支援センター A-24

ホームページURL : http://www.miraizaidan.or.jp2

特集
よくわかる食物アレルゲン検査

食物アレルギーとは？
「食物アレルギー」という言葉を最近よく耳にするようになりました。新聞やニュース、雑誌、インターネットなど様々なメディアで取り上げられています。一昔前はあまり耳にしなかったのに、なぜ最近耳にするようになったのか？その理由の一つに食物アレルギーの患者数が近年増えてきているということも関係しています。そもそも食物アレルギーとはどういった症状を示すのか？そしてそれを取り巻く環境や食品の管理方法などについて、特集「よくわかるシリーズ」の第一弾として紹介したいと思います。

食物アレルギーとは、「食物を摂取した際、身体が食物に含まれるタンパク質（アレルゲン）を異物として認識し、自分の身体を防御するために過敏な反応を起こすこと」と消費者庁のアレルギー物質を含む加工食品の表示ハンドブックには書かれています（引用２）。人間にはウイルスや細菌といった身体に害を及ぼす物質を排除する免疫機能があります。この免疫機能が、本来身体には害のない物質、つまり食物や花粉といったものにも反応してしまうことをアレルギーと言います。その中で、食物に対してアレルギー反応を示すことを食物アレルギーと呼んでいます。

症状としては、主にかゆみ・蕁麻疹といった皮膚症状、咳・喘息といった呼吸器症状、下痢・嘔吐といった消化器症状などがあり、重症に至った場合には血圧低下・意識低下・心肺停止といったショック症状を起こす場合もあります。ショック症状が起きてしまうと生命の危険にも関わってくる

3

ため、迅速にアドレナリン注射等の処置を行う必要があります。ち
なみに食物アレルギーを発症した患者の10%がショック症状を引き起こすことも知られています（引用３）。発症した約10人に1人がショック症状を引き起こすと考えると、いかに食物アレルギーが怖いものかがわかります。

引用２：アレルギー物質を含む加工食品の表示ハンドブック（平成26年3月改訂、消費者庁）
引用３：即時型食物アレルギーによる健康被害の全国実態調査（消費者庁調査、平成23～24年度）

そんな怖い食物アレルギーですが、その患者数は年々増加傾向にあります。東京都の調査では平成11年度から10年間で3歳児の食物アレルギー患者数が約2倍になっていると報告されています(引用４)。また全年齢でみると、約1%～2%が食物アレルギーを持っていると言われており、日本の人口を約1億人と仮定
すると約100万人～200万人の方に相当します。非常に多くの方が食物アレルギーで困っているということがわかります。食物アレルギーの重篤性や患者数の多さから、社会的な関心も高まり最近メディアでよく取り上げられているという背景に繋がります。

3歳児におけるアレルギー疾患のり患状況の推移%
1614121014.4%

868.5%
7.1%

420

平成11年度

平成16年度

平成21年度

さて、現在食物アレルギーの治療法はというと、根本的な治療法はまだ見つかっていません。先進的な病院では経口免疫療法と呼ばれる治療法を進めているところもありますが、食物アレルギー症状を引き起こさないためには、正しい診断に基づいた必要最小限の原因食物の除去が一番の予防法となっています。しかし、正しい食品を選択するためには、正しい情報を知る必要があります。そこで日本では加工食品および原材料への食物アレルギー表示制度が定められています。

アレルギー表示制度の概要
食物アレルギー表示制度は、厚生労働省の通知により平成13年から始まりました (引用５)。
特に重篤度・症例数の多い7品目（卵、乳、小麦、そば、落花
生、えび、かに）を「特定原材料」と定めて省令で表示を義務付けています。また過去に一定の頻度で健康被害が見られた20品目（あわび、いか、いくら、オレンジ、キウイフルーツ、牛肉、くるみ、さけ、さば、大豆、鶏肉、バナナ、豚肉、まつたけ、もも、やまいも、りんご、ゼラチン、ごま、カシューナッツ）については「特定原材料に準ずるもの」として、通知により表示が推奨されています。本記事では、「特定原材料」、「特定原材料に準ずるもの」をまとめて「食物アレルゲン」と呼ぶことにします。

特定原材料
卵

乳

小麦

そば

落花生

えび

かに

あわび

いかいくら

オレンジ

特定原材料に準ずるもの

キウイフルーツ

牛肉

くるみ

さけ

さば大豆

鶏肉

豚肉

まつたけ

桃

やまいも

りんご

ゼラチン

バナナ

ごま

カシューナッツ

引用４：保育所等を対象とした児童施設調査及び3歳児全都調査（東京都福祉保健局、平成22年度調査）
引用５：アレルギー物質を含む食品に関する表示について(平成25年９月20日付け消食表第257号)

4食物アレルゲンの表示対象となるのは、容器包装された加工食品になります。ただし酒類等の表示が免除されており、また中食、外食については対面販売、量り売り販売をするため、その場で食物アレルゲンの有無を確認できることから免除となっています。しかし最近では、中食・外食等における食物アレルギー事故発生の頻度が高いことから、中食・外食等における表示義務化を検討する動きもあります。2014年に開かれた「外食等におけるアレルゲン情報の提供の在り方検討会」では、表示義務化は一旦見送られましたが、近い将来表示対象となる可能性もあるかもしれません。

ちなみに表示違反をした場合には食品表示法違反となります。当該食品の販売停止や事業所の営業停止、罰金等の措置が行われます。表示違反した食品を食物アレルギーの方が食べてしまった場合、健康被害が発生する可能性があるため、迅速な製品回収を行う必要があります。回収費用や社告等を出す費用など企業の負担も大き
く、取引先や消費者からの信用を失墜させてしまう場合もありま

食物アレルゲンがどれくらい入っていれば表示をしなければいけないのでしょうか。日本のアレルギー表示制度には世界で唯一、食物アレルゲン濃度の基準値が設定されています。最終加工品において特定原材料等の総タンパク質量が数μg/mL（＝数ppm）の濃度レベル以上存在する場合には表示が必要になります。これは1mL（または1g）中に100万分の数ｇ含まれている場合の濃度になります。例えるならば、お湯で満たしたお風呂の浴槽に小さじ１杯程度の牛乳等の食物アレルゲンを入れた濃度に相当します。非常に薄い濃度ですので、当然目で見てもわからず、味や匂いでも判別できるかどうかわからない濃度です。この濃度でのアレルゲン管理を日本では求められていることから、きちんと管理するためには検査によって正確に濃度を把握することが重要になってきます。

5

す。1件の事故が会社の存続に大きく影響してしまう可能性を考えると、食物アレルゲン管理がどれほど重要なものかがわかります。

ppm=1/1,000,000

食物アレルゲン検査
食物アレルゲンの検査方法は、通知法として示されています（引用６）。この通知に記載されている方法は、食物アレルギー表示制度を行政が科学的に検証することを目的として開発されたものであり、現時点で最も信頼性が高いと考えられている方法になります。

原材料表示のアレルギー表示
内容が正しいかどうかを確認するための方法は、大きく3つのステップに分かれます。まず始めにエライザ法と呼ばれる検査法を用いて「スクリーニング検査」を行います。エライザ法は複数のキットメーカーから販売されており、検査特性の異なる2種類のキットを用いて測定します。検査特性の違いについて後ほど詳しく説明します。
検査特性の異なる2種類のキットのどちらか一方、または両方で陽性を示した場合、次に「製造記録と使用原材料の整合性」を確認します。原材料中の食物アレルゲンの有無や配合表、製造記録の記載内容により、製造時のミスや意図しない食物アレルゲンの混入（＝コンタミネーション）が生じていないかを確認します。スクリーニング
検査と製造記録の内容が一致しない場合は、「確認検査」を行います。

特集

確認検査は、卵、乳の場合はウエスタンブロット法、小麦、そば、落花生、えび、かにの場
合はPCR法と呼ばれる検査法で確認します。その結果によって最終的な原材料表示の必要性を検証します。
検査方法の流れについては、通知法の判断樹をまとめた「通知法における原材料表示の確認手順」を示していますのでご覧ください（右上図）。

●通知法における原材料表示の確認手順
スクリーニング検査：エライザ法

自主検査：イムノクロマト法
中間製品の抜き取り検査
ライン検査

検査特性の異なる2種類のキットで検査
どちらか一方でタンパク質濃度が8～12μg/g以上検出された場合両方の検査で8～12μg/g未満を示した場合製造記録の確認表示義務なし「製造記録と使用原材料の整合性」を確認一致しない

確認検査

一致する

ウエスタンブロット法：卵、乳PCR法：小麦、そば、落花生、えび、かに

表示義務あり陽性

陰性表示義務あり

表示義務なしまた上記方法に加えてイムノクロマト法と呼ばれる簡易検査キットを用いて自主管理をする企業が増えています。簡易検査
キットは、エライザ法と比べるとコストが安く、その場ですぐに結果がわかるため、製造ラインの洗浄後の清浄度チェックや中間製品の抜き取り検査などを手軽に行うことができます。この簡易検査キットとスクリーニ
ング検査をうまく組み合わせることが食物アレルゲン管理の一つのポイントになります。

スクリーニング検査法：エライザ法
メーカー

日本ハム㈱

商品名（検査項目）
FASTKITエライザVer.Ⅲシリーズ（卵、牛乳、小麦、そば、落花生、大豆、ごま）㈱森永生科学研究所

モリナガFASPEKエライザⅡ（卵白アルブミン、カゼイン、小麦グリアジン、そば、落花生）

プリマハム㈱アレルゲンアイ ELISAⅡシリーズ（卵（オボアルブミン）、牛乳（β-ラクトグロブリン）、日水製薬㈱FAテスト EIA-甲殻類 Ⅱ「ニッスイ」㈱マルハニチロ食品

小麦、そば、落花生）

甲殻類キット Ⅱ「マルハ」

確認検査法：ウエスタンブロット法、PCR法
メーカー㈱森永生科学研究所
オリエンタル酵母工業㈱㈱ファスマック

商品名（検査項目）
モリナガFASPEKウエスタンブロットキット（卵白アルブミン、オボムコイド、カゼイン、β-ラクトグロブリン）

そば検出用プライマ－対、小麦検出用プライマ－対、落花生検出用プライマー対
えび検出用プライマ－対、かに検出用プライマ－対

引用６：「アレルギー物質を含む食品の検査方法について」（消食表第286 号消費者庁次長通知）

6

食物アレルゲン検査キット「FASTKIT®シリーズ」

日本ハム㈱では食物アレルゲン検査キットを販売しています。エライザ法を原理とした定量検査法の「FASTKITエライザVer.Ⅲシリーズ」とイムノクロマト法を原理とした簡易検査法の「FASTKITスリムシリーズ」の2種類があります。

どちらの検査キットも抗原抗体反応を利用しています。抗原抗体反応はよく鍵と鍵穴の関係で例えられます。ある特定のタンパク質を「鍵穴」とすると、「鍵」はそのタンパク質にだけ結合する性質を持つ抗体のことを指します。抗体は対象のタンパク質以外には結見逃しにくい「複合抗原系」

合しないので、対象のタンパク質が存在しているかどうかを調べるときに利用できます。食物アレルゲン検査では「鍵穴」が食物アレルゲンのタンパク質であり、それらと反応する抗体が「鍵」になります。「FASTKITシリーズ」はどちらも食物アレルゲンのみに反ELISA法

イムノクロマト法

FASTKITエライザVer.Ⅲシリーズ

FASTKITスリムシリーズ

食物アレルゲン検査では、まず初めにスクリーニング検査を行うことが示されています。その際には「検査特性の異なる2種類のキットを使用すること」が通知法で推奨されています。いわゆるダブルスクリーニングと呼ばれる方法です。この「検査特性の違い」とはどういうことでしょうか。

高精度に定量化

7

簡易・迅速15分で検査特集

現在通知法に記載されている特定原材料７品目のうち5品目（卵、乳、小麦、そば、落花生）を検出するスクリーニング検査
キットは3種類あります。それぞれのキットの抗体のターゲットは日本ハム製キットが「複合抗原系」であるのに対して、森永生科学研究所社製キット、プリマハム社製キットは「単一抗原系」となっています。この抗体のターゲット、つまり「複合抗原系」、「単一抗原系」というのが検査特性の違いになります。

応する抗体を用いています。そして「FASTKITシリーズ」の一番の特長は、食物アレルゲン中の1種類のタンパク質だけではなく、複数種類のタンパク質に対する抗体を使用した「複合抗原系」であることにあります。

陽性
陰性

色の強度をプレート
リーダーで数値化

ラインの有無を判定

メーカー

日本ハム㈱

㈱森永生科学研究所

プリマハム㈱商品

FASTKITエライザVer.Ⅲ
FASTKITスリム

FASPEKエライザⅡ
ナノトラップⅡＲ

アレルゲンアイエライザⅡ
アレルゲンアイイムノクロマト

ターゲット

複合抗原

単一抗原

単一抗原

卵

複数の卵タンパク質（オボアルブミン、オボムコイド、他）

オボアルブミン

オボアルブミン or オボムコイド

牛乳

複数の乳タンパク質（カゼイン、β-ラクトグロブリン、他）

カゼイン or β-ラクトグロブリン

β-ラクトグロブリン

小麦

複数の小麦タンパク質（グリアジンなど）

グリアジン

グリアジン

そば複数のそばタンパク質

そば可溶性タンパク質24kDaタンパク質

落花生

複数の落花生タンパク質

落花生可溶性タンパク質

Ara h 1

それぞれどう違うのかを簡単に示すと右図のようになります。
「複合抗原系」というのは、複数の抗原、つまり複数の食物アレルゲンに対する抗体を用いて検出する測定系を指します。卵であれば、卵白アルブミンやオボムコイドといった主要なアレルゲンが複数存在しています。
乳であれば、カゼインとホエイ（＝乳清タンパク）が主要なアレルゲンになります。それらの複数の食物アレルゲンをターゲットにしているのが「複合抗原系」になります。複数の食物アレルゲンを捕まえる抗体が細かい網のように張り巡らされているため、食物アレルゲンを見逃しが少なく幅広く検出できるという特長があります。
一方で「単一抗原系」は、1種類の食物アレルゲンに対する抗体の網しかありません。卵であれば卵白アルブミンの抗体の網だけでありオボムコイドに対する抗体の網はありません。もし食品にターゲットとなる食物アレルゲンが含まれていなかったら、例えそれ以外の食物アレルゲンが含まれていたとしても検出することができません。特に食品の場合は加工において様々な処理が行われます。加

複合抗原系

単一抗原系

複数のタンパク質をターゲットにしているため見逃しが少ない

単一のタンパク質のみをターゲットにしているため特異性が高い

アレルゲン表示ミス
アレルゲンのコンタミ

FASTKIT®シリーズ

熱、加圧、酸、乾燥、発酵、分離 「単一抗原系」のどちらが優れてといった工程によって、ターゲッ いるかは言えません。確実なのは
トとなる食物アレルゲンが分解、 検査特性の異なる2種類のキット変性してしまう可能性もあります。 を併用して使用することで、食物食物アレルゲンの見逃しという観 アレルゲンの見逃しを極力抑える
点から考えると抗体の網が細かい ことができ、より正確な食物アレ方が良いことがわかります。しか ルゲン管理が可能になるというこし「単一抗原系」は抗体の網が少 とです。従って通知法でも2種類ない分、食品に含まれる成分に邪 のキットの併用、つまりダブルス魔されることなく特異的にター クリーニングを推奨しているのでゲットを検出できる特長がありま す。
す。ゆえに一概に「複合抗原系」、「FASTKIT®エライザVer.Ⅲシリーズ」と「FASTKIT スリム®シリーズ」の使い分け
FASTKIT®エライザVer.Ⅲ

特集「FASTKITエライザVer.Ⅲシリーズ」と「FASTKITスリムシリーズ」はどちらも一長一短の特長があります。それぞれのキットの特性をうまく利用し組み合わせることによって、より効率的かつ正確な食物アレルゲン管理体制を構築することが可能になります。
次のページからは「FASTKITシリーズ」の詳しい特徴や使い方等をご紹介していきます。

原料

FASTKITスリム®

・原料受入時の検査
・原料メーカーの成績書確認

製造・中間製品の抜き取り検査
・コンタミネーションの検査

ライン
洗浄・洗浄後のふき取り検査
・ライン切替え時の確認
・環境検査

最終製品

・最終製品検査・新製品登録時の整合性確認8

検査キット紹介
食物アレルゲン検査用ELISAキット

FASTKIT®エライザVer.Ⅲシリーズ
精度の高い検査が可能■通知法に収載されています■原材料から加熱加熱加工食品まで適用可能です■含有量の確認が可能です「FASTKITエライザVer.Ⅲシリーズ」は、エライザ法を原理としており、アレルゲンの含有量を定量、つまり数値化できます。ラインナップも多く、特定原材料5品目（卵、牛乳、小麦、そば、落花生）に加えて、国内メーカーで唯一推奨品目の大豆やごまも揃えているという特長があります特集
測定原理（201５年３月現在）。通知法にもスクリーニング検査法として記載されており、結果の信頼性が高く、検出感度、正確性、精度に優れています。最終製品の出荷検査や原材料の受け入れ検査といった成績書を発行する場合や、新商品の原材料表示を作成する場合での使用が最適です。

商品名

保存方法

容量

使用
期限

冷蔵(2-8℃)

96回用

6ヶ月

FASTKITエライザVer.Ⅲ卵FASTKITエライザVer.Ⅲ牛乳
FASTKITエライザVer.Ⅲ小麦

エライザ法

FASTKITエライザVer.Ⅲそば
FASTKITエライザVer.Ⅲ落花生
FASTKITエライザVer.Ⅲ大豆
FASTKITエライザVer.Ⅲごま9

食物アレルゲン検査用イムノクロマトキット

FASTKITスリム®シリーズ
誰でも簡単に検査が可能■試料溶液を滴下するだけの簡単な操作です■判定は赤紫色のラインを確認するだけです■製造現場で結果を得ることが可能です「FASTKITスリムシリー
ズ」は、イムノクロマト法を原理としており、食物アレルゲンの有無を簡単に検査することができます。ラインナップは特定原材料5品目に加えて推奨品目の大豆を揃えています。検査時間は15分と短く、結果の判定もラインの有無を確認するだけで特集

測定原理

特殊な機器を使用しません。製造現場でも手軽に使用でき、ふき取り検査にも応用できるという特長があるため、中間製品の抜き取り検査や製造設備・ライン洗浄後の清浄度チェック、製造環境の環境検査、コンタミネーションの確認検査等の製造現場での自主管理ツールとして商品名の使用が最適です。

陽性
陰性

保存方法

容量使用期限冷蔵(2-8℃)

20テスト

12ヶ月

FASTKITスリム卵
FASTKITスリム牛乳
FASTKITスリム小麦
イムノクロマト法
FASTKITスリムそば
FASTKITスリム落花生
FASTKITスリム大豆

10

FASTKIT®エライザVer.Ⅲシリーズの操作マニュアル
まず始めに取扱説明書に従って必要な試薬を調製してください。（検体抽出液、洗浄液）

１

2

食品（検体）を均一に粉砕する。

粉砕試料1gを量り取る。

3

4

5

検体抽出液19mLを加える。
(注1)

室温で一晩振とうする。
(注2)(注3)

3,000xg, 20分間, 室温で遠心分離する。

678

上清を回収もしくはろ過する。
(注4)

希釈用緩衝液で20倍希釈する。

測定溶液が完成。

１

2

プレートに標準溶液および測定溶液を100µL/ウェル添加。(注6)攪拌し、室温で1時間静置。

345

洗浄液250µL/ウェルで洗浄（5回）。(注7)

プレートにビオチン結合抗体溶液を100µL/ウェル添加。

攪拌し、室温で1時間静置。

抽出操作

１時間

測定操作
(注5)

11１時間

678

洗浄液250µL/ウェルで洗浄（5回）。

プレートに酵素-ｽﾄﾚﾌﾟﾄｱﾋﾞｼﾞﾝ溶液を100µL/ウェル添加。

攪拌し、室温で30分間静置。

9

１0１1

洗浄液250µL/ウェルで洗浄（5回）。

１2

プレートに反応停止液を100µL/ウェル添加。(注8)●

プレートに発色剤を100µL/ウェル添加。

30分20分攪拌し、室温、遮光下で20分間静置。

１3

１4

吸光度を測定する。
主波長：450nm
副波長：600～650nm

標準曲線グラフから、測定溶液中のタンパク質濃度を得る 。(注9）

抽出操作時の注意点(注1)

固形分を均等に分散してください。その際、あまり泡立たせないよう注意しながらボルテックスミキサーなどを用いて十分に分散させてください。

(注2)

振とう回数は1分間に90～110往復程度、振とう幅は3cm程度として、振とうにより液が遠沈管の両端に打ち付けられるように調整してください。また、液面に沿って付着する調製試料を分散させるため、時々遠沈管の上下を入れ替えるなどの操作をしてください。

(注3)

抽出試料のpHを確認し、必要であれば、中性付近(pH6.0～8.0)となるように調整してください。

(注4)

回収する上清の量はなるべく一定とし、可能であれば油層を除去してください。また、正確な結果を得るためにろ過を行うことを推奨します。

●

測定操作時の注意点(注5)

プレートを分割して使用する場合には、使用しないストリップを必ず乾燥剤入りのアルミパウチ袋に戻し、冷蔵保存してください。

(注6)

標準溶液および測定溶液の測定には各3ウェルずつ使用することを推奨します。また、標準溶液による標準曲線は測定毎に必ず作成してください。

(注7)

正確な測定を行うために洗浄操作は非常に重要です。プレートを逆さにしてペーパータオルなどの上で数回強く叩きつけるなどの水切りを行いウェルに残った液と気泡を完全に除去した後、速やかに次の試薬を加えてください。

(注8)

反応停止液は、0.5N硫酸を使用しています。取り扱いの際には十分に注意してください。

(注9)4-係数Logistic解析（4-パラメーター解析）を用いて標準曲線グラフを作成します。それ以外の解析方法により、標準曲線グラフを作成したとき、測定結果が異なる場合があります。

12

FASTKITスリム®シリーズの操作マニュアル
まず始めに取扱説明書に従って必要な試薬を調製してください。（抽出用緩衝液）

１2

食品（検体）を均一に粉砕する。

粉砕試料2gを量り取る。

345

抽出用緩衝液38mLを加える。

ミルサー等で30～60秒×3回抽出する。(注1)

3,000xg, 20分 4℃で遠心分離する。(注2)678

上清を回収もしくはろ過する。

希釈用緩衝液で10倍希釈する。

測定溶液が完成。

１2

抽出操作

15分

測定操作
試料滴下部に測定溶液を100μL滴下する。
(注2)(注3)(注4)(注5)●

抽出操作時の注意点(注1)

試料溶液中に脂質等の不溶物が多く含まれる場合、不溶物を可能な限り除去してください。

(注2)

遠心分離機がない場合は、冷蔵庫で30分程度静置し、浮いた油分を除いた後ろ過を行ってください。

●

1315分後に判定する。
上：陽性（ラインが2本）
下：陰性（ラインが1本）

測定操作時の注意点(注2)

吸湿を避けるために必ず室温に戻してからテストストリップをアルミ包装から取り出してください。また、使用しないテストストリップは乾燥剤とともにビニールパウチ袋に戻して冷蔵保存してください。

(注3)

テストストリップの試料滴下部および展開部には、直接手指などで触れたり、キズをつけないよう注意してください。テストストリップを持つ場合には、吸収パッドを持つようにしてください。

(注4)

試料溶液を滴下もしくは分注時に使用するチップは、必ず試料溶液ごとに交換してください。

(注5)

試料溶液100μL を滴下する際には、テストストリップから溢れないよう注意し、必要に応じ、2 回に分けて滴下するなどしてください。

日本ハム製検査キット一覧
保存方法

容量使用期限冷蔵(2-8℃)

96回用

6ヶ月

冷蔵(2-8℃)

20テスト

12ヶ月

冷蔵(2-8℃)

20テスト

12ヶ月

冷蔵(2-8℃)

25回用

24ヶ月

MycoJudgeトータルアフラトキシン

冷蔵(2-8℃)

96回用

12ヶ月

MycoCatchトータルアフラトキシン

冷蔵(2-8℃)

20本

12ヶ月

測定原理

エライザ法

商品名
FASTKITエライザVer.Ⅲ卵FASTKITエライザVer.Ⅲ牛乳

食物
アレ
ル
ゲン
検査
キット

FASTKITエライザVer.Ⅲ小麦
FASTKITエライザVer.Ⅲそば
FASTKITエライザVer.Ⅲ落花生
FASTKITエライザVer.Ⅲ大豆
FASTKITエライザVer.Ⅲごまイムノクロマト法

FASTKITスリム卵
FASTKITスリム牛乳
FASTKITスリム小麦
FASTKITスリムそば
FASTKITスリム落花生
FASTKITスリム大豆

イムノクロマト法

NHイムノクロマトＯ157
NHイムノクロマトＯ26

食中
毒菌
検査
キットNHイムノクロマトＯ111
NHイムノクロマトＯ103
NHイムノクロマトVT1/2
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1０FAST NEWS Vol.1
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発行者

2015年4月1日（初版発行）
2017年９月1日（改訂第二版発行）
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