岩獣会報 (Iwate Vet.), Vol. 35 (№ 3), 88−91 (2009).

原著

鶏の幼雛における実験的緑膿菌感染症

關茉莉絵要御領政信

佐々木淳

岡田幸助

約

野外採卵鶏の眼窩下洞が腫脹し, 化膿性肉芽腫が認められた成鶏より緑膿菌が分離され, 幼雛に対する病原性を病理学的に検索した. 10９接種群では接種日齢にかかわらず接種後３日以内にほぼ全例が死亡したが, 10８接種群では接種日齢が高いほど死亡数が減少した. 10９接種群
では接種12時間後で沈うつ, 頭部下垂を示し, 接種４日後の一部のひなでは遊泳運動, ふらつきなどの神経症状, 片側眼瞼の閉鎖が認められた. 肉眼的に死亡例では接種部位を中心とする胸腹部, 大腿部などにおける重度の皮下水腫, 組織学的にはほぼすべての死亡例で化膿性筋炎,細菌塊を伴う血管周囲炎がみられたが, 生残例では病変がほとんど認められなかった.
キ−ワ−ド：鶏, ひな, 緑膿菌感染症, 敗血症, 脳病変

緑膿菌 (Pseudomonas aerginosa) は, 土壌,材料および方法

水中など自然環境中に広く存在するグラム陰性

接種菌株：ある農場の採卵鶏の成鶏群で, 眼窩偏性好気性桿菌で, 易感染性宿主に病原性を発下洞が高度に腫脹し, 化膿性肉芽腫を示す疾病

現する日和見感染症の原因菌のひとつである.

が発生した. 発病鶏16症例の病巣部から, セト

鶏の緑膿菌感染症は, 主に幼雛における敗血症

リミド寒天培地 (ニッスイ) およびApi20E テが知られており, 発病雛は下痢を呈し, 元気・スト (bioMerieux) により緑膿菌２株 (Ａ株,食欲の消失がみられる [1,2]. わが国では関節Ｂ株) が分離・同定された.

炎, 角膜炎, 脳病変を伴う緑膿菌感染症が報告

実験１ (分離緑膿菌株の病原性の検討) ：Ｐ２されている [3-7].

系白色レグホン種１日齢ひなを用いた. 緑膿菌

今回, 野外採卵鶏で眼窩下洞が腫脹し化膿性２株 (Ａ株, Ｂ株) をそれぞれ10９ /0.1mlに調肉芽腫が認められた成鶏より緑膿菌が分離され,整し, 各６羽の右側大腿部にそれぞれ筋肉内接

幼雛に対する病原性を病理学的に検索したので種した. 死亡例は随時, 生残したものは７日後報告する.に剖検, 主要臓器ならびに病変部を採材し, 病理組織学的に検索した.
実験２ (日齢別ひな感受性の検討) ：市販系由来ひなを用いた. Ａ株, Ｂ株をそれぞれ10８,岩手大学支会

岩手大学農学部獣医病理学研究室― 88 ―

10９ /0.1mlに調整し, １, ７, 14, および21日
齢ひなの右側大腿部に筋肉内接種した. 死亡例
は随時, 生残したものは接種７日後に剖検, 主要臓器ならびに病変部を採材し, 病理組織学的に検索した.
病理組織学的検査：接種部位と五大臓器などを採材した後, 10％ホルマリン液にて固定し, 常法に従いパラフィン包埋ブロックを作製した.
これを４μmに薄切した後, ヘマトキシリン・エオジン (HE) 染色を施し, 光学顕微鏡にて病理組織学的に検索した.
成

図１ 実験１, １日齢ひな.
接種後24時間以内の死亡例. 重度の皮下水腫が広範に認められる.

績実験１ (分離緑膿菌株の病原性の検討)：
臨床症状：臨床症状および死亡数は表１に示す

実験２ (日齢別ひな感受性の検討)：通りである. Ａ株接種群では, 接種３日後を中臨床症状：死亡率は表２に示す通りである.

心に, Ｂ株接種群では接種５日後を中心に死亡

10９接種群では, 接種12時間後で沈うつ, 頭部例が認められた. 観察期間中, 一部のひなにふ下垂の症状を示した. 死亡例は接種24時間後をらつき, 遊泳運動などの神経症状が認められた.

ピ−クにしてみられ, ３日以内にほとんど全て肉眼所見：死亡例では, 右側大腿部を中心とす死亡した. 10８接種群において, 接種２日後頃る皮下と筋肉の水腫性変化が共通してみられ,から沈うつ症状を示したひなでは, 接種４〜５

高度なものでは両側体幹にわたって広範に認め日後に回復した. 10８接種群の死亡羽数はＡ株られた (図１). 接種７日後に剖検したひなで

およびＢ株合わせて１日齢接種群で13/20羽

は, 接種部位に限局的な黄色退廃物を伴った壊(65％), ７日齢接種群で４/18羽 (22％), 14日死が認められた. その他の臓器では著変は認め

齢接種群で２/12羽 (16％), 21日齢接種群ではられなかった.

０/18羽であった. 実験２では接種５日後頃よ

組織学的所見：死亡例では, 真皮領域から半腱・り, Ｂ株の14日齢10９接種群ひなとＢ株の21日半膜様筋, 大腿四頭筋などの筋組織に多数の偽齢10８接種群ひなの２羽で片側眼瞼を閉鎖した

好酸球を中心とした炎症性細胞浸潤と水腫が認ままの個体が認められた.

められ, 筋線維は広範に萎縮および消失してい肉眼所見：死亡例で皮下と筋肉の広範な水腫性た. 筋束間の血管では, 細菌塊が取り囲む特徴変化が認められた. 10８接種群死亡例では水腫的な炎症像が多数で認められた. この特徴的なが接種部周囲に留まった比較的軽度な個体も存

血管周囲炎はまれに心筋筋束間, 肺動脈にも認められた. 剖検例では, 筋間の肉芽腫形成が認められたものの, 水腫や血管周囲炎はみられなかった. 神経症状を示したひなでは, 大脳に多発性の膿瘍が形成されていた (図２).

表１ １日齢Ｐ２系ヒナに対する緑膿菌株の病原性 (実験１)
Ａ株
Ｂ株

接種羽数６６

死 亡 数５３

神経症状
１３

図２ 実験１, １日齢ひな, HE染色.
大脳の低倍像で, 多発性の膿瘍形成が認められる.
― 89 ―

表２菌株

Ａ株菌量

接種羽数

接種日齢

10９

1110101096911111110969

１日齢
７日齢
14日齢
１日齢
７日齢
14日齢
21日齢
１日齢
７日齢
14日齢
１日齢
７日齢
14日齢
21日齢

10８

10９
Ｂ株ａ)

市販鶏由来ヒナに対する緑膿菌株の病原性 (実験２)

10８

1
118
3
7
4−
−
11
87
1−
−
−

2−
1
6
1−
1−
−
1
3
2−
−
−

接種後日数
3
4
5−
−
−
−
−
−
−
−
−
1
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
2−
−
−
−
−
−
1
−
−
−
−−
−
1−
−−ａ)

6−
−
−
−
−
−
−
−
−
1ａ)
−
−
−
−

7−−−−−−−−−−−−−−

死亡数119994101111114010

死亡率(%)
10090919044170100100100400170

片側眼瞼閉鎖在した. 接種７日後に剖検したひなでは, 接種を含む血管周囲炎が認められた (図３, ４).

部位に限局的な黄色退廃物を伴った壊死が認め

菌塊を含む血管周囲炎は, 肺や心臓の静脈にもられた以外は, 著変は認められなかった.

存在した. 片側眼瞼を閉鎖した個体では眼球結組織学的所見：ほぼ全ての死亡例で筋炎, 菌塊膜, 角膜, 前眼房, 毛様体, 脈絡膜にかけて偽好酸球を中心とした炎症細胞浸潤と水腫がみられ, 眼内炎を呈していた (図５).
考察

分離された緑膿菌株は今回の実験で, 幼雛において致死的な病原性があることが示された.
特に初生ひなで感受性が高く, 10９接種ではＡ,Ｂ両株でほぼ全例が死亡した. 死亡例のほとんどは接種24時間以内に死亡しており, これら死
実験２, Ａ株, ７日齢10９接種群ひな,HE染色.
右側大腿部の中拡大像, 坐骨動脈の血管周囲炎.

図３

亡例はおそらく敗血症性ショックに陥ったものと考えられた. 日本における鶏ひなの緑膿菌感実験２, Ｂ株, 14日齢10９接種群ひな,HE染色.
眼球炎と診断した症例. 毛様体付近の中拡大像.
眼球内外における広範な偽好酸球浸潤と線維素の析出が認められる.

図５
図４

９

実験２, Ａ株, ７日齢10 接種群ひな,HE染色.
図３の組織写真の高倍像. 血管壁を取り巻くように細菌塊が認められる.

― 90 ―

染症は報告数が少ないものの死亡・淘汰率は高裏付ける結果となった. 今回の実験では, 同じ

く [1,2], 初生ひなの感染が多いことも今回の菌株で実験ごとに眼球と脳という異なった部位実験結果と類似していた.

で病変形成がみられた. 眼球と脳から同一緑膿
８

日齢別ひなの感受性の検討では, 10 接種群菌が分離された文献は多かったが, 眼球炎と脳において, 日齢の進行に従い死亡数の減少およ病変が同時に存在する報告はほとんどなされてび症状の短期化がみられ, 鶏ひなの緑膿菌に対いない [6]. 今回は由来の異なるヒナを用いてする感受性は日齢によって差があることが明ら実験しており, 今後さらに鶏種による感受性のかとなった. 家禽の緑膿菌に対する日齢抵抗性差を検討する必要があるのではないかと思われは従来の報告にも示されている [1,4]. これらた.

報告例や今回の実験から, 鶏の緑膿菌感染症の自然発生は宿主側の要因が強いであろうことが引用文献示唆された. また, 今回は筋肉注射により明確[１] Barnes HJ：Miscellaneous and Sporadic

８な病変作出を試みたが, 10 接種群でさえも死Bacterial Infections, Diseases of Poultry,亡率に大きなばらつきがみられ, 緑膿菌感染にAmericanおいて菌数も重要な要因であることが推察されPathologists , 11th ed , 852 − 854 ,た.

Blackwell Publishing, Iowa (2003)

ひなの死亡例は, 肉眼的には接種部位を中心[２] 清水AssociatedofAvian

健：家畜・家禽の緑膿菌感染症ととする皮下に広範な水腫が, 組織学的には偽好その対策, 畜産の研究, 28, 1045−1052

酸球を中心とする炎症細胞浸潤と血管を取り囲(1973)むような菌塊が特徴的であった. Pseudomonas[３] 吉田眞一他：緑膿菌および関連するグラ

感染において血管を取り巻く菌塊は多くの組織

ム陰性桿菌, 戸田新細菌学, 改訂32版,でみられる典型像であるとされ [1], 従来の報500−503, 南山堂, 東京 (2003)[４] 高瀬公三, 丸山智之, 西川比呂志：脳病

告と一致していた.

変をともなう鶏ひなの緑膿菌感染症の発実験１では大脳に膿瘍形成, 実験２では片側に眼球炎が散発的に認められた. 鶏ひなで眼球生, 日獣会誌, 36, 656−658 (1983)炎や関節炎を伴った報告はいくつかあり, 多く[５] 高瀬公三, 西川比呂志, 山田信二：鶏ひが５〜９日齢頃から眼球白濁, 脚弱といった症

なの脳病巣から分離した緑膿菌に対する状を示している [6-8]. 脳病変を伴った鶏ひな

ひなの感受性, 日獣会誌, 36, 717−720の緑膿菌感染症は高瀬ら [4,5] によってはじ(1983)めて報告され, 病変は２日齢をピークとした死[６] 萩野博明, 中林大, 清野哲三：片側性亡野外鶏群 (死亡率14.8％) と, 発症ひな７日の眼疾病を主徴としたヒナの緑膿菌感染

齢剖検時 (４/７羽) に認められていた. 高瀬症, 鶏病研報, 24, 116−123 (1988)

らは２日齢をピークとした死亡の直接原因は敗[７] 遠藤恭介, 尾田進, 本間穂積：緑膿菌血症死であり, 脳病変はこれにともなって形成よるブロイラ−の関節炎, 鶏病研報, 14,されてきたものと考察している. 今回の実験で135−141 (1978)

もひなの死亡は接種１〜３日後がピ−クであっ[８] 白川ひとみ, 長野正弘, 羽田長生：ヒナたのに対し, 脳炎, 眼球炎はどちらも接種４〜に発生した眼球炎を主徴とする緑膿菌感６日後にかけて発生しており, これらの考えを染症, 鶏病研報, 26, 31−36 (1990)― 91 ―