岩獣会報（Iwate Vet.）,Vol. 44（№ 1）, 11 － 13（2018）.

臨床レポートルモのそのの学

岩手県の動物由来 Salmonella Typhimurium 及びにその単相変異株の分子疫学解析及び薬剤感受性は

モののにのルモ

はなにし部のはにいてにのに指ルいての吉田恵美（ているはじめにすをたをしにの）ににいてはからた

した

来 ST 及び学STmv について分子疫学的に解析し，薬をの

家畜のサルモネラ症は , 様々な血清型のサルモネラに起因し，一部の血清型は家畜伝染病予防法において（ ）届出伝染病に指定されている．家畜に本症を引き起その剤耐性の状況と併せて検討した．
用いた ルルル（をルがしたは材料と方法した）ら

た

こす血清型の中でも，Salmonella enterica subspecies

供試株：2009 年～2017 年に分離された 12 戸由来

enterica serovar Typhimurium（4［5］，12：i：1，2）

ST 13 株（牛由来 8 株，豚由来 4 株，野鳥由来 1 株）

（ST）及びその単相変異株（4［5］，12：i：-）（STmv）

及び 14 戸由来 STmv 17 株（牛由来 11 株，豚由来 5 株，をのににる（）

らはをは（をいにが，近年，本県を含む全国で増加傾向にあり，多剤耐のにいて
学 1）．Ido
を ら［1］は，本県を含む
いはな性の傾向にある（図し た （ については 2003 年～2008 年に本県の家畜し，STmvにし STmv と，本県の人由来の に 学が全国の家畜由来
STmv につ）
から分離された株（既報株［1］）と比較した．ののを）にしたを野鳥由来 1 株）の計 30 株について以下の試験を実施

るをしているのST に由来
いて分子疫学解析を行い，STmv は多様な分子疫学解析：制限酵素 XbaデⅠ及び Bln Ⅰを用いた

し，人と保菌動物の間に疫学的関連があることを報告
はのにをす
がパルスフィールドゲル電気泳動（PFGE）を実施した．
デにしている．家畜由来の薬剤耐性菌は，人の健康に影響てに いてル

泳動条件は電圧 6V/cm，パルスタイム 2.2-63.8sec，を及ぼすことが懸念されており，現在，世界各国におにながてい

泳動 19 時間とした．得られた泳動像は GelCompar Ⅱ

いてワンヘルス・アプローチに基づく積極的な取組み
る
がのの学が行われているが，県内の ST 及び STmv の分子疫やののはる そにする目のにいて学てした（Applied Maths）により系統樹解析を行い，ル 既報［1］に基づき，80% 以上の相同性を示したパターンを同学的関連性や薬剤耐性の最近の状況は不明である．そ一遺伝子型と判定した（optimization 0.5%，tolerance

こで，本症の防疫対策に資する目的で，本県の動物由1.0%）．ののにしに合いてのした

薬剤感受性試験：1 濃度ディスク法（センシディス

ク：BD 社）により，アンピシリン（ABPC），セファ

学 ，セフォタキシム（CTX）を用いたゾリン（CEZ），ストレプ
はははにトマイシン（SM），カナマイシン（KM），ゲンタマ
たを 用，クロラムフェニコール（CP）
いたははイシン（GM），テトラサイクリン（TC），ナリジクス酸（NA）
はのにた ，シプロフロ
いのキサシン（CPFX）及びST 合剤（ST）の計11に いてにしては 薬剤について実施した．
がしていたにはた結を 用 い た（か果するが）の分子疫学解析：制限酵素 Xba Ⅰを用いた解析では，の図1のにける（）にST は 5 種類，STmv は 3 種類に分類された．Bln Ⅰ 手県の病性鑑定における家畜由来サルモネラの岩
血清型別分離状況の場の（）を用いた解析では，ST は 9 種類，STmv は 6 種類の遺伝子型に分類された．いずれの制限酵素において

岩手県中央家畜保健衛生所― 11 ―

（の（のを）（）（）をのの）

図2

はののした
した

なかったはなかったににるるを用用い（（Bln をⅠを用いた系統樹解析結果（左：ST,右：STmv） ） ）いたたは ,そを した①～⑥はそれぞれ 100%のの相同性を示した株は そ

3（に（））する（の）（（に）がそ場のなるのも，ST に比較してを し た STmv では遺伝子型がより近似しのの（）がそ

学のはた，Bln Ⅰを用いた．系統樹解析の結果，乳牛及び肉を に なる
してにを3 株（図 2，①），同時期に同一地域の複い牛由来のた （ に ST）
いを しのが数酪農場由来の ST 2 株（②）及び STmv 3 株（③），にに乳牛，肉牛，豚及びカラス由来の STmv 5 株（④），

をしま た はに な るを（をななるのが乳牛及び豚由来の STmv 2 株（⑤）並びに同一酪農が して のしの）のはを に なるをしてをしたのの系統樹解析には，より細かく分類することができいた（）い）のした3 に 図 3 被検場（ 株（太字）と既報株（細字）の系統樹解析及び薬剤感受性結果）（）の やにの（ の）がのなるSTmvにていた．
するにををにをに をし た （たにするし た（ に ）に）した（に場の異なる時期と肉牛に由来する STmv 3 株（⑥）

がはを（は）がをにををがするにを）がして）に）が（しし た（（ た ）（場なる用 ）するをはにがにをいるには）
図4の耐性薬剤数別の株数のるたがそれぞれ 100% の相同性を示した．既報株との解析の結果，STmv は 2013 年を境に異なるクラスターを形成していた（図 3）．
薬剤感受性試験：ST，STmv ともに ABPC，SM 及び TC に高い耐性率を示し，乳牛由来の ST 1 株が第3 世代セファロスポリン系抗生物質 CTX に耐性を示がをすした．ニューキノロン系抗生物質したはにがCPFX への耐性は 進確認されなかった．耐性薬剤別にみると，ST13株中な のやの 場に 入 す
乳牛由来の 1 株（8%）がる
す る 場11合 薬剤中が る 7 薬剤に耐性を示し，全体として，ST7 株（54％）及びにの 13 株中のなにSTmv 大 な17 株中．被 究るの 9 株（53％）が多剤耐性を示した（図がたからの 4）の― 12 ―はににのをたの意をるがしに場ら指検株及び既報株を分離された年度別に比較すると，要な抗生物質であり，第二次選択薬として他の抗菌性

STmv は 2013 年を境に多剤耐性傾向にあり，全株が物質製剤が無効となる場合にのみ使用（いわゆる「慎TC に耐性を示した（図 3）．

重使用」）するよう，畜産関係者へ注意喚起がされている．第 3 世代セファロスポリン系薬剤の耐性獲得に考

察は，染色体性遺伝子，プラスミド性遺伝子等の報告が分子疫学解析の結果，野鳥を含む異なる動物種由来ある［4］．今後，人と家畜の健康を守るため，第一選株や，同時期に同一地域の複数酪農場，または異なる択薬の適切な選択と慎重使用の徹底を促すとともに，畜種由来株が 100％の相同性を示した．ST，STmv は薬剤耐性遺伝子の調査を進め，薬剤耐性菌の出現防止

ともに宿主域が広く，牛，馬，豚，鶏などの家畜や家に努めたい．

禽以外の農場に出入りする野生動物も保菌する場合が謝ある．今回，野生動物並びに人及び車の往来等の地理

辞的な要因による菌の伝播が示唆されたことから，日頃今回，分子疫学解析を実施するにあたり，多大な御の飼養衛生管理基準の遵守とともに，本症の発生時に指導，御助言を賜った岩手県環境保健研究センターのは畜産関係者へ早急に注意喚起を促し，農場間の持込諸先生方に深謝する．

み防止対策を講じることが重要と考えられた．
ST 及び STmv は食中毒起因菌としての分離頻度が参考文献

高い血清型でもあるが，本県で分離された人由来サ［1］Noriko ID, Kaori IWABUCHI, Yusuke SATO,

ルモネラの血清型は，2012 年より前は ST が主体でet al：Molecular typing of Salmonella entericaあったのに対し，それ以降は STmv に移行している

serovar 4, ［5］,12：i：- isolates from humans,［2］．さらに，同じく 2012 年以降，本県を含み全国的

animals and river water in Japan by multilocusに STmv による家畜の本症発生が増加している［3］．

variable-number tandem repeat analysis andSTmv の遺伝子型は ST のそれと比較してより近似し，pulsed-field gel electrophoresis. J Vet Med Sci,2013 年を境に異なるクラスターを形成していた今回

77, 609-613（2015）の結果は，近年の全国的な家畜の STmv の流行や本［2］岩手県感染症情報センター：岩手県感染症月報平県の人由来 STmv の流行に関連していると推察され

成 30 年 1 月号（オンライン）, http://www2.pref.

るが，現時点では詳細な関連性は不明である．今後，iwate.jp/~hp1353/kansen/pdf/2018/i2018-m01. pdf

他県分離株や人由来株と併せて分子疫学解析を進め，（2017）

STmv の動向調査を継続する必要がある．

［3］秋庭正人：平成 29 年度獣医療提供体制整備推進

薬剤感受性試験では，ST1 株が人医療で重要な薬総合対策事業 高度獣医療講習会テキスト「家畜剤である第 3 世代セファロスポリン系抗生物質に耐性のサルモネラ症」（2017）を示し，2013 年以降に分離された STmv が多剤耐性［4］玉 村雪乃：牛由来 Salmonella enterica subsp.

傾向にあることが判明した．第 3 世代セファロスポリ

enterica serovar Typhimurium に 関 す る 分 子 疫

ン系やニューキノロン系抗生物質は，人の医療上も重学的研究，北獣会誌，60, 192-196（2016）― 13 ―