岩獣会報 (Iwate Vet.), Vol. 36 (№ 4), 139−157 (2010).

総説

マレック病ウイルスと鶏貧血ウイルスの混合感染鶏における病理学的および免疫組織化学的研究

モヘイ・ハリディ１,２)

要

御領政信２)

佐々木淳２)

岡田幸助２)

約

鶏貧血ウイルス (CAV) は, マレック病 (MD) においてその病態を悪化させる最も重要な病原体である. 初生ヒナに強毒MDウイルス(MDV) (vMDV, KS株) または超強毒MDV (vv
MDV, Md/5株) を接種し, ４週齢時にCAVを混合感染させた影響を, 病理学的および免疫
組織化学的に検索した. CAVは, vMDVまたはvvMDV群における致死率を増加させ, ヘマト
クリット値は, vMDV-CAV群において有意に減少したが, vMDV群では有意な減少は認められなかった. 骨髄低形成はCAV混合感染と関連していたが, vMDVまたはvvMDV群では低形成はみられなかった. 胸腺およびファブリキウス (F) 嚢の重度萎縮が, vvMDV-CAVおよび
vvMDV群で認められた. vMDV群では胸腺皮質とF嚢における完全な再生が認められたが,対照的にvMDV-CAV群ではCAV接種後にリンパ球の連続的な減少がみられた. 脾臓では, 再生, リンパ球減少またはリンパ増殖性病変のいずれかがみられた. 脾臓におけるリンパ球減少
は, vMDV群では認められなかったが, vMDV-CAVおよびvvMDV-CAV群ではCAV接種後の最初の２週間において顕著であった. 実験期間において, CAV封入体およびCAV抗原がvMDV-CAVとvvMDV-CAV群の胸腺皮質と脾臓で検出された. 脾臓と胸腺では, CD８陽性T細胞の重度の減少が認められた. 脾臓の小動脈および小静脈周囲における腫瘍性結節は, 主にCD４抗体に陽性を示したが, CD８陽性T細胞は個々に散在するか, 集塊を形成していた.
MDVとCAVの混合感染において, CAVは骨髄低形成, 重度貧血およびリンパ系器官における再生障害の原因であると結論づけられるだろう.
キーワード：鶏, 鶏貧血ウイルス, 混合感染, マレック病ウイルス

マレック病 (MD) は, αヘルペスウイルス

る. MDVでは他に, 野外では非腫瘍原性株

亜科に属する血清型１の腫瘍原性マレック病ウ(血清型２) と七面鳥ヘルペスウイルス (血清イルス (MDV) によるリンパ増殖性疾患であ型３) の二つがある [39]. 腫瘍原性MDV感染

１)

岐阜大学大学院連合獣医学研究科病態獣医学連合講座

２)

岩大支会

岩手大学農学部獣医学課程獣医病理学研究室― 139 ―

症は, 早期細胞溶解期 (感染後２から７日),

たはRB-1B株を接種した初生ヒナにおける, 骨

潜伏期 (感染後７から10日以降), 持続的免疫髄低形成を伴わない髄外性溶血性貧血について抑制および後期細胞溶解期 (感染後18日以降)

記述している. Payne [26] は, 移行抗体を持および腫瘍形成を伴うTリンパ球の増殖ならびたないヒナでは,にトランスフォーメーション期 (３から４週以し, 骨髄無形成と重度の貧血を引き起こすと述降) を引き起こす [7].

べている. PCVと骨髄病変におけるMDVおよ

鶏貧血ウイルス (CAV) 感染は, 鶏における貧血, リンパ球減少, 出血および免疫抑制の

MDVは５日後に骨髄に感染

びCAV混合感染の影響については, さらに解明する必要がある.

原因であり, ３週齢までの移行抗体を持たない

MDVは感受性のある鶏に対して, 早期およヒナに感染する [34]. 鶏産業界では, ３週齢

び後期 (二次細胞溶解期) において二相性の細以降のヒナに感染しても有害な影響はほとんど

胞溶解性感染を示す. 二次細胞溶解期は, 感染ないと考えられているが, 多くのMDの発症に後２から３週後に始まり, 腎臓, 副腎, 前胃,はCAVの混合感染が関連している. 全ての鶏食道およびその他, 胸腺やF嚢におけるリンパ群にMDVワクチンを接種していたにもかかわ球と同じく, 羽包上皮における限局性の上皮細らず, 日本, アメリカ, オランダ, イタリア,

胞壊死に特徴づけられる. MDV病原型と鶏のドイツ, イスラエルなどで発生した重度のMD

遺伝的特性に依存し, 持続性免疫抑制および後発生例からCAVが分離されている [12-14,25,期細胞溶解期は出現したりしなかったりする

47]. さらに, オーストラリアおよびEUの８カ[6]. F嚢摘出やシクロホスファミド (cy) 処

国では, 11/49件および11/15件で, MD発生事

置によってMD抵抗性が上昇するが[36], 放射

例においてCAVが分離された [24,35].

線照射またはcy処理によるさらなるT細胞の減孵化後２週までのヒナにおけるMDVおよび少を伴う胸腺摘出では感受性が高まる [8].

CAVの混合感染は, 早期致死症候群 (EMS)MDVの病理発生の様々なステージにおけるTを引き起こす [16,25,44,47]. EMSは, 体重細胞減少の影響は研究されたことがない. MDV減少, ファブリキウス (F) 嚢と胸腺の萎縮,の二次細胞溶解期におけるCAVの混合感染に

MDリンパ腫や神経の腫大がみられない死亡な関する研究は, 非常に重要である.

どが特徴である [5,40]. 同じ状況が, 超強毒MDV-CAV混合感染の野外例のほとんどは４

MDV (vvMDV, vvプラスMDV) 株で引き起週齢以降のものであるが [12,46], 最近のすべこされる [5,40]. ２週齢までのvvMDVとMDV-ての研究は, 初生ヒナを用いて行われている.

CAV混合感染におけるEMSでは, 病理組織学

本研究の目的は, 初生時にMDV (vMDV) ま

的な相違は認められない.

たはvvMDVを接種し, ４週齢時にCAVを混合

MDの経過における血液と骨髄の変化に関す

感染させ, PCV, 骨髄病変およびリンパ系器

る研究では, いくつかの矛盾した結果が示され官への影響を病理学的に検索することである.

ている. MDVのConn-A分離株では, ヘマトク
リット値 (PCV) の16％に至る減少と骨髄低材料および方法

形成が接種後２から３週でそれぞれ認められた

鶏：すべての鶏と有精卵は, ホワイトレグホ

が [21,41], CAVによる汚染が数年後に示さ

ンP２系SPF鶏に由来し, アデノウイルス, 伝

れた [35]. Purchase＆Biggs [30] は, MDV

染性気管支炎ウイルス, CAV, IBDV, MDV,

感染鶏の骨髄において肉眼的な病変を認めなかっ

ニューカッスルウイルス, レオウイルスおよび

たが, Glika＆Spencer [15] はMDVのAC-1まJ亜群トリ白血病ウイルスなどの抗体は陰性で― 140 ―

あり, 当研究室にて孵化させたものである. ヒ群, vMDV群, vMDV-CAV群, vvMDV群おナは無菌室内において小型の箱に隔離し, 自由

よびvvMDV-CAV群の６群に設定した. vvMD

給水・給餌とした.

V-CAV群は死亡率が高かったため, 30羽の初CAV：CAVは, 感染鶏から分離後, MDCC-

生ヒナを追加した. ７群は表１の通りに接種し,MSB1細胞にて10回継代したMSB1-TK5803株

サンプルを収集した. すべてのウイルスは, 筋を用いた [17].

肉内接種した. 接種量は, MDV株は3,000PFU

MDV：vMDVのKS株 [32] およびvvMDV/0 . 1ml , CAV の MSB1-TK-5803 株 は , 107.5 /のMd/5株 [40] を, ２から３回SPFヒナで継0.1mlに調整して用いた. すべての鶏は, 人道

代した.

的に安楽殺された.

MDVを接種したそれぞれのヒナからヘパリ

ヘマトクリット値：採血前にヒナに番号を付

ン加血液サンプルを採取し, リンパ球を分離しけ, 翼静脈からヘパリン化ヘマトクリット毛細た. 収集したリンパ球はジメチルスルホキシド

管へ安楽殺直前に採血した. PCVは, 12,000×を加え−80℃で凍結し, その後, −196℃の液gで５分間遠心分離を行った後に測定した. ヒ

体窒素にて使用時まで保存した. 実験直前に,ナは貧血と骨髄病変の関連を組織学的に検索す６

保存していたリンパ球液0.2ml (0.5×10 cells)

るために用い (表１), さらにvMDV群におけを鶏胚線維芽細胞に接種した. ウイルス価は

る７および８週齢では, 残存したそれぞれ４おVillegas and Purchase [42] に従い算出した.

よび５例のヒナより採血を行った (表３).
組織病理学的検査：すべての鶏から胸腺, F嚢,

実験設定：205羽の初生ヒナを, 対照群, CAV
表１

実験設定

群

初生時
接種ウイルス株

初生時ヒナ数４週齢時
接種ウイルス株

４週齢時ヒナ数

採材鶏数ａ

未接種対照
CAV
vMDV
vMDV-CAV
vvMDV
vvMDV-CAV
vvMDV-CAVb――
KS株MDV
KS株MDV
Md/5
Md/5
Md/5

33
32
50
25
65

―
MSB1-TK5803―
MSB1-TK5803―
MSB1-TK5803
MSB1-TK5803

30
30
37
18
19
20

5
5
5
5
5
5
8

30

ａ

採材は５,６,７および８週齢時にそれぞれ行った.
他の群 (30例) にMd/5株を初生時に接種し, ８羽のみが４週齢時に生残した.

ｂ

表２
群

５週
対照
5 (0)b
CAV
5 (0)
vMDV
5 (2)
vMDV-CAV
3 (3)
vvMDV
5 (5)
vvMDV-CAV 5(3),1(7)d

実験群におけるCAV接種後の経時的死亡率
日
６週
5 (0)
5 (0)
5 (3)
3 (1)
4 (5)
4 (8),−

齢
７週
5 (0)
3 (0)
5 (2)
3 (3)
−
−,−

a

８週
5 (0)
5 (0)
5 (1)
2 (0)
−
−,−

平均
死亡日齢a
死亡なし
56 (実験終了時)
死亡なし
56 (実験終了時)
21.6％ (8/37)c
41.5
38.9％ (7/18)
39.2
52.6％ (10/19)
32
64.3％ (18/28)
30
致死率

死亡ヒナの合計日齢を死亡ヒナ数で割った.
殺処分ヒナ数 (死亡ヒナ数)c
死亡率 (死亡ヒナ数／実験ヒナ数)d
他の群 (30例) にMd/5株を初生時に接種し, ８羽のみが４週齢時に生残した.
b― 141 ―

脾臓, 皮膚および坐骨神経を採材, 組織学的検

よ び CD ８ モ ノ ク ロ ー ナ ル 抗 体 ( Southern

索のため10％ホルマリン液で固定した (表１).

Biotechnology Associates Inc., バーミンガ

大腿骨は, 骨髄を検索するために長軸方向で割ム, アラバマ, アメリカ) をCD４およびCD８断した. 固定後, 大腿骨は５％蟻酸にて２週間

αとの相同性を確認するためにそれぞれ用いた.

脱灰を行った. サンプルは脱水後, 常法に従い(２) 免疫組織化学：アセトン固定を施したパラフィン包埋し, ４μmに薄切, ヘマトキシ

切片を, 内因性ペルオキシダーゼ活性を阻害す

リン・エオジン (HE) にて染色した.

るため, 0.03％H２O２中性緩衝液で室温にて10

免疫組織化学的検査：vvMDV, vvMDV-CAV,

分間処理した. スライドは, PBSにて５分間,

vMDV, vMDV-CAVおよび対照群の胸腺およ３回洗浄した. モノクローナル抗体は, DAKO

び脾臓は, OCTコンパウンドを用いて液体窒

REALTM 抗体希釈液 (S2022, DAKO, 東京)

素中で凍結包埋し, クライオスタットにて８μmを用いて最適な希釈倍率に希釈した. CAV抗に薄切した. 切片は４℃にてアセトンで10分間

原検出のため, 免疫ペルオキシダーゼ染色によ固定し, 風乾を90分間行った.

るアビジン・ビオチン・ペルオキシダーゼ (ABC)(１) 抗体：MSB1-TK-5803株を107.5 平均組織法を実施した [38]. CD４およびCD８T細胞

培養感染量/0.1ml含むMDCC-MSB１培養上清の染色のため, DAKO LSABTM ＋キット−ユ

を初生ヒナに筋肉内接種し, CAVに対する血ニバーサル (K0679, DAKO, 東京) をマニュ

清中の抗体価を上昇させた. 接種したヒナに同

アル通りに用いた. 病変部におけるCAV検出

様のサンプルを40日後に追加投与し, ５日後にのための免疫組織化学的ラベルには, 市販のキッ採血した. 血清は−20℃で保存した. CD４おト (Vector Lab., イギリス) を用いた. CAV

表３
群
対照

実験群におけるPCV値および貧血ヒナの状況

PCV値評価

平均PCV値PCV値範囲貧血羽数／実験羽数b
CAV
平均PCV値PCV値範囲貧血羽数／実験羽数vMDV
平均PCV値PCV値範囲貧血羽数／実験羽数
vMDV-CAV 平均PCV値
PCV値範囲貧血羽数／実験羽数
vvMDV
平均PCV値PCV値範囲貧血羽数／実験羽数
vvMDV-CAV 平均PCV値
PCV値範囲貧血羽数／実験羽数

５週
32.6±2.30a
30-35
0/5
35.4±2.30
32-38
0/5
30.4±2.1
27-330/5
31.0±1.00
30-320/3
24.0±2.64＊
21-26
2/3
26.3±4.93＊
23-32
2/3

日
齢
６週
７週
30.2±2.86
30.2±1.48
27-34
28-32
0/5
0/5
33.8±3.70
30.3±4.50
29-38
26-35
0/5
0/3
29.8±0.8
27.88±2.30
29-31
22-35
0/5
2/9cB
28.0±2.64 16.6±3.78＊A
25-30
12 to 211/3
3/3b26.75±2.21
25-30
1/4
31.0±5.59
23-36
1/4
-

ａ

貧血発症率
(貧血ヒナ数／実験数)８週30.2±1.48
0 (0/15)28-32
0/5
31.6±2.07
0 (0/18)30-35
0/5
25.8±9.03
20.7％ (6/29)
14-33
4/10c
ND
44.4％ (4/9)
ND
ND
42.9％ (3/7)
42.9％ (3/7)-

平均PCV値±標準偏差.
HCT値が25％以下の羽数／実験羽数.
ｃ
５羽のみを病理組織学的に検索し, それらのPCV値は骨髄病変と関連していた.
＊有意水準0.05における対照と比較した平均有意差.
Ａ
平均PCV値は有意水準0.05においてvMDV群と比較すると有意に低い.
Ｂ
フィッシャーの正確確率検定における有意差 (p＜0.05).
ｂ― 142 ―

抗血清 (１：100) を, 湿潤チャンバー内で４℃

均死亡日数を減少させたが, 致死率の増加およで一晩反応させた. ブロック試薬 (正常ヤギ血

び平均死亡日数に有意差は認められなかった.

清), 二次抗体 (ビオチン化ヤギ抗ニワトリ

肉眼所見：CAV群では, 対照群と比較してIgG抗体) およびビオチン標識化HRP巨大分子

軽度の発育不良が認められた. CAV群では,複合体がキット内に含まれていた. ペルオキシ

臨床症状や肉眼病変はみられなかった. vvMD

ダーゼ活性は, 3,3'-ジアミノベンジジン四塩酸

VおよびvvMDV-CAV群のヒナは, 発育不良を

塩水和物 (DAB, Sigma Chemicals Co., セン示した. 肉眼的に, リンパ腫様病変が心臓, 腎トルイス, アメリカ) およびH２O２により発現

臓および脾臓などの内臓において小さな白色結させた. 切片は, ヘマトキシリンにて対比染色節として認められた. vMDV-CAV群では, 発した.

育不良, 羽・脚麻痺および腎臓, 肝臓と性腺に統計解析：有意差検定はCAV, vMDV, vM

おいて腫瘍がみられた. しかしながら, vMD

DV-CAV, vvMDVおよびvvMDV-CAV群と対V群では, ほとんどの鶏がわずかな臨床症状を照群との間およびMDV群とMDV-CAV群との示し, vMDV-CAV群と比較して良好な発育を間で比較した. 所見は, 平均値±標準偏差によっ示した. vMDV-CAVおよびvvMDV-CAV群のて表現した. 統計的解析は, 一元配置分散分析

数羽では, 羽の皮下, 大腿部および胸部皮下にを用いて行われた. 平均差は, p＜0.05で有意おいて暗赤色出血巣が認められた (図１a).

差があるとした. 解析は, Statistical Package

PCV値：PCV値の範囲, 平均値および全群

for the Social Sciences for Windows (SPSS,

における貧血を示す鶏の状況は, 表３に示してversion 15.0, シカゴ, アメリカ) を用いて行ある. 対照群とCAV群におけるPCV値の範囲われた. MDV群とMDV-CAV群における病変は27〜38％で, CAV群では平均PCV値の減少の頻度の比較にフィッシャーの正確確率検定はみられなかった. vvMDVおよびvvMDV-CA(Frequency procedure；SAS, version8.02)

Vの両群では, ５週齢時においてPCV値の有意を用いた. P＞0.05は有意ではないと考えたが,な減少が認められたが, ６週齢時では有意差はP＜0.05は有意, P＜0.01は非常に有意, P＜なかった. vMDV-CAV群およびvvMDV-CAV

0.001はかなり有意であると考えた.

群の間では, 有意差は認められなかった. vM
DV群では, 実験期間中に有意なPCV値の減少

結果はみられなかったが, vMDV-CAV群の７週齢死亡率：対照群とCAV群では, 実験鶏の死時に有意な減少が認められた. vMDV群の平亡は認められなかった (表２). vvMDVおよ

均PCV値は, vMDV-CAV群の７週齢時よりもびvvMDV-CAV群のCAV接種後２週以内にお高かった. PCV値が25％以下であれば, 貧血

ける死亡率は, それぞれ52.6％ (10/19) と鶏と判断した [31].

64.3％ (18/28) であった. vMDVおよびvMD

vMDVとvvMDV群における貧血鶏のPCV値

V-CAV群のCAV接種後４週以内における死亡は21〜25％であるが, vMDV群の２例は８週

率は, それぞれ21.6％ (8/37) と38.9％ (7/18)

齢時にそれぞれ15％と17％を示した. vMDVであった. CAV接種後の平均死亡日数は, vMとvvMDV-CAV群における貧血鶏のPCV値は,DV, vMDV-CAV, vvMDVおよびvvMDV-C

12〜25％であった. 対照群とCAV群では貧血

AV群においてそれぞれ41.5, 39.2, 32および

鶏はみられなかった. vMDVおよびvMDV-CA

30日であった. CAVはvMDV-CAVおよびvvM

V群では, 6/29 (20.7％), 4/9 (44.4％) の鶏

DV-CAV群において死亡羽数を増加させ, 平でそれぞれ貧血が認められた. しかしながら,― 143 ―

図１
A：46日齢の死亡鶏. 大腿部皮下出血および水腫. (vMDV-CAV群), HE.
B：６週齢鶏の赤色骨髄. 造血幹細胞におけるCAV核内封入体 (矢印). (vMDV-CAV群), HE.
C：７週齢鶏の骨髄低形成. 造血幹細胞におけるCAV核内封入体 (矢印). (vMDV-CAV群), HE.

vvMDVおよびvvMDV-CAV群の両群では, そける分化した赤血球と髄洞外における分化

れぞれ3/7 (42.8％) が貧血であった.

した顆粒球により構成されていた. 脂肪髄は対照群およびCAV群の全例で認められ病理組織学的変化
１

た.

骨髄：すべての群における骨髄の病理組織(b) 造血 (赤色) 骨髄：骨髄はわずかな脂像は下記に従って分類し, 表４に示した.

肪組織と豊富な分化した赤血球と顆粒球に(a) 脂肪髄：骨髄はわずかな造血領域を伴っよって構成されていた. リンパ腫はみられた脂肪であった. 造血領域は, 髄洞内におなかった. 貧血のボーダーライン上であっ表４

実験群におけるCAV接種後の経時的死亡率

群

脂肪髄

赤色髄
(29〜33％)

対照
CAV
vMDV
vMDV-CAV
vvMDV
vvMDV-CAV

20/20
20/20
0/20
0/11
0/7
0/9

0/20
0/20
7/20
4/11b,c3/7
4/9b

限局性／び漫性リンパ球増殖性
低形成と過形成の両方病変を伴う造血性骨髄あるいはいずれか一方を低形成(12〜17％) 伴ったリンパ増殖性病変
非貧血
貧血(20〜24％)(26〜34％)(22〜25％)
0/20
0/20
0/20
0/20
0/20
0/20
0/20
0/20
9/20
4/20a
0/20A
0/20B
3/11
0/11
2/11A
2/11b,B
1/7
3/7
0/7
0/7
1/9
2/9
1/9b
1/9

a

２羽はPCV値が15％と17％.
１羽ではPCV値が未検査.
c
１羽では貧血の境界 (25％).
A,B
フィッシャーの正確確率検定における有意差 (p＜0.05).
b― 144 ―

た vMDV-CAV 群 の １ 例 を 除 き , 罹 患 鶏

一つまたは複数のそれらの病変を有していた.

(n＝18) は非貧血であった.

vMDVおよびvvMDV群のすべてで, 造血骨髄(c) 軽度の多発性リンパ増殖性病変から重度とリンパ増殖性病変がみられたが, 低形成あるのリンパ腫に至る造血骨髄における限局性

いは過形成ではなかった. vMDV群では７かまたはび漫性リンパ球増殖：造血細胞の減ら８週齢の４例で, 造血が抑制された顕著な骨少は, リンパ増殖性病変の程度と相関して髄におけるリンパ腫が認められた. それらの４いた. 骨髄はリンパ増殖性病変のため高い例のみが貧血であった (表４). vvMDV群で細胞性, または造血性を示していた. これは, ３例の貧血鶏で骨髄におけるリンパ腫がみ

らはMDVおよびMDV-CAV群で認められられた. vMDV-CAV群では, ５から６週齢時た.

の造血骨髄 (図１b) に始まり, ７週齢時の低(d) 骨髄低形成：造血芽球細胞は重度に減形成 (図１c) に続き, ７から８週齢時の再生

少し, いくつかの腫大した細胞がみられた.

性過形成がそれぞれ認められた (表５). vvM

髄洞内, 髄洞外における赤血球系, 顆粒球

DV-CAV 群 で は , 貧 血 鶏 は 造 血 骨 髄 を 有 し系細胞の重度の減少はそれぞれ顕著であっ(２例), 限局性リンパ増殖性病変を伴った低形

た. 髄洞内には分化した赤血球がわずかに成が１例でみられた. 表５には, 両群の実験期あるか, ほとんど細胞は認められなかった.

間中における骨髄病変の概略を示した. 特徴的

無定形血漿様成分とわずかな線維細胞が骨な好酸性核内封入体は, vMDV-CAVおよびvv

髄組織を置換していた. 低形成では, 髄洞

MDV-CAV群の造血組織および低形成骨髄にお内と髄洞外において赤血球系造血および顆

ける造血細胞でしばしば認められた (図１b,

粒球系細胞活性がそれぞれ続発してみられc).

た (過形成結節). 低形成性骨髄は, vMD

骨髄の病理組織学的病変は, PCV値およびV-CAVおよびvvMDV-CAV群における３

罹患鶏の臨床症状と関連していた (表４). 対

例で認められた.

照群およびCAV群のすべては, PCV値が27か(e) 低形成と過形成, またはいずれか一方

ら38％を示す脂肪髄であった. 造血骨髄は, Mと関連したリンパ増殖性病変：骨髄は細胞

DVおよびMDV-CAV群のPCV値が29から33％減少を示し, ほとんどの組織はいくつかのを示す非貧血鶏で認められた. MDVおよびM

リンパ増殖性病変の結節を伴った骨髄低形

DV-CAV群では, 限局性またはび漫性のリン成を呈していた. 髄洞内における未分化のパ増殖性病変を伴った造血骨髄がみられた. 罹

大型赤芽球系, 髄洞外における顆粒球系細患鶏は広範囲のPCV値を示し, 骨髄における胞による過形成結節は, 低形成性骨髄に散リンパ増殖性病変の程度に従って臨床的変化が在し, ８週齢時に最も強く認められた (回みられた. 14/23例では非貧血 (26〜34％), 7/

復期鶏). vMDV-CAVおよびvvMDV-CAV

23例では貧血 (22〜25％) および2/23例では重群における貧血鶏の３例がこれに分類され度の貧血 (15および17％) を示した. 骨髄の低た.

形成は, vMDV-CAVおよびvvMDV-CAV群で対照群およびCAV群では, 骨髄は脂肪髄でのみ認められた. 罹患鶏は, PCV値が12からあった. CAV群の骨髄では, 病変やCAV封入

17％の重度の貧血を呈していた. 低形成および体は認められなかった. MDVおよびMDV-CA

過形成, またはいずれか一方と関連したリンパV群における骨髄病変は, 造血, 低形成, 過形

増殖性病変が, vMDV-CAVとvvMDV-CAV群

成およびリンパ腫などであった. １例あたり,で認められた. 罹患鶏は, PCV値が20から24― 145 ―

表５
組織

骨髄

胸腺

F嚢

脾臓

病

実験群における骨髄, 胸腺, F嚢および脾臓の病理組織学的所見
変

造血骨髄
低形成
過形成
リンパ腫
変性性変化c髄質におけるリンパ球増殖性病変
胸腺皮質における再増殖
変性性変化c
間質におけるリンパ球増殖性病変
リンパ濾胞の再増殖
変性性病変c
リンパ球増殖性病変
脾臓の再生

5Wa
5/5b
0/5
0/5
2/5
0/5B
0/5
5/5E
0/5H
0/5
5/5J
0/5L
1/5
5/5M

vMDV
6W
7W
5/5
3/5
0/5
0/5
0/5 0/5A
3/5
4/5
0/5C 0/5D
0/5
2/5
5/5F 5/5G
0/5I 2/5e
0/5
1/5
5/5K 3/5
0/5
0/5
2/5
4/5
4/5N 1/5

8W
3/5
0/5
0/5
4/5
0/5
2/5
5/5
0/5
3/5
3/5
0/5
3/5
2/5

5W
3/3●
0/3
0/3
1/3
3/3B
0/3
0/3E
3/3H
0/3
0/3J
3/3L
0/3
0/3M

vMDV-CAV
6W
7W
3/3● 0/3
0/3 1/3●
0/3 3/3A
1/3
1/3
3/3C 3/3D
0/3
0/3
0/3F 0/3G
3/3I 3/3
0/3
0/3
0/3K 0/3
1/3
1/3
2/3
3/3
0/3N 0/3

8W
2/2
0/2
1/2
2/2
1/2
1/2
1/2
2/2
1/2
1/2
0/2
1/2
1/2

vvMDV vvMDV-CAV
5W
6W
5W
6W
3/3
4/4 5/5● 3/4●
0/3
0/4
0/5 1/4●
0/3
0/4
0/5
0/4
2/3
2/4
3/5
1/4
4/4
4/4
3/3
3/3
0/4
0/4
0/3
0/3
2/4d 1/4d 1/3d 0/3
4/4
4/4
3/3
3/3
2/4
1/4
2/3
1/3
0/4
0/4
0/3
0/3
1/5
1/4
2/5
3/4
3/5
3/4
4/5
2/4
1/5
1/4
0/5
0/4

a

鶏の週齢.
罹患鶏数／実験羽数.
c
胸腺皮質, F嚢の濾胞および脾臓におけるリンパ組織減少および壊死.
d
胸腺皮質の軽度再増殖.
e
生理的組織変性を伴ったF嚢の濾胞における再生.
f
白脾髄の小動脈および小静脈周囲におけるリンパ組織増殖性病変. 重度の症例ではエリプソイド周囲まで進展していた.
●
CAV封入体が認められた.
A to M
フィッシャーの正確確率検定における有意差 (p＜0.01).
N
フィッシャーの正確確率検定における有意差 (p＜0.05).
b％の貧血を示していた. 低形成および過形成,満していた. ほとんどの鶏の皮質はリンパ球

またはいずれか一方を伴う骨髄低形成とリンパによって厚くなっていた (18/20) (p＜0.001).

増殖性病変は, vMDV群よりもvMDV-CAV群

リンパ球浸潤による髄質の重度な過形成がで有意 (p＜0.05) にみられた.

2/20例でみられ, 皮質では中等度の再増殖を

２ 胸腺：vvMDVおよびvvMDV-CAV群では,示していた. 他の2/20例では, 一つまたは複胸腺は重度に萎縮していた. 皮質における重数の小葉におけるリンパ腫がみられた.

度のリンパ球減少によって, 変性した髄質周

vMDV-CAV群では, 再増殖性胸腺皮質に囲における崩壊した間質が残存していた. 皮

おいて連続的なリンパ組織減少が認められた.

質の構造は, 血管と細網上皮細胞以外は消失

CAV接種１週目では, 皮質に軽度のリンパしていた. 変性したリンパ様細胞, 上皮性細球消失がみられ, 星空像が認められた. リン胞と筋様細胞, ハッサル小体などが髄質で認

パ芽球のほとんどは腫大し, CAV封入体をめられた. 胸腺の小葉全体は, 変性および壊有していた (図２c). CAV接種２週目では,死したリンパ組織の集合としてみられた (図皮質の菲薄化を伴ったリンパ組織減少が重度

２a). 数羽の鶏では, 胸腺の小葉が一つある化していた. 接種後３および４週では, 皮質

いは複数消失していた (1/9 vvMDV群, 3/9は完全に減少し, 取り残された胸腺皮質では

vvMDV-CAV群). vvMDV群では, 3/9例にわずかな細胞退廃物と上皮性細胞の過形成がおいて皮質の軽度の再増殖がみられた.

みられた (図２f). 一方,

CAV接種後４週

vMDV群では, すべての鶏は胸腺の完全目の１例では, 胸腺皮質において完全な再増な再生を示していた (図２e). 胸腺皮質は,殖がみられた (p＜0.001). CAV接種後１,

好塩基性の小型リンパ球の再増殖によって充２, ３週におけるほとんどの鶏の皮質外層で― 146 ―

図２
Ａ：６週齢鶏の胸腺皮質. 重度のリンパ組織減少. (vvMDV-CAV群), HE.
Ｂ：６週齢鶏の胸腺皮質. 多数のリンパ球にCAV抗原陽性像. (vvMDV-CAV群), ABC法.
Ｃ：６週齢鶏の胸腺皮質. 中等度のリンパ組織減少. 多くの細胞の核はCAVの好酸性核内封入体 (矢印)を伴って巨大核を呈している. (vMDV-CAV群), HE.
Ｄ：５週齢鶏の胸腺皮質. リンパ球の核内におけるCAV抗原陽性像 (矢印). (vMDV-CAV群), ABC法.
Ｅ：６週齢鶏の胸腺皮質. リンパ球による再生像. (vMDV群), HE.
Ｆ：６週齢鶏の胸腺皮質. 重度のび漫性リンパ組織減少. リンパ球の欠落と細網組織の過形成. (vMDVCAV群), HE.
Ｇ：５週齢鶏のF嚢. リンパ球によるリンパ濾胞の再生. (vMDV群), HE.
Ｈ：５週齢鶏のF嚢. 濾胞萎縮と嚢胞形成を伴うび漫性リンパ球減少. (vMDV-CAV群), HE.
― 147 ―

は, リンパ芽球や細網細胞において多数のC破壊が重度であり, 壊死細胞退廃物を充満しAV封入体がみられた. 封入体は, 重度の減た嚢胞様構造がみられた. 濾胞間結合組織は少例よりも軽度の減少例で多数認められた過形成を示し, 単核細胞の浸潤が１例で認め(接種後１および２週). 接種後４週では, 封られ (８週齢), それは粘膜ヒダにおけるリ入体はわずかにみられた.

ンパ腫であった. 他の鶏 (８週齢) の濾胞は,リンパ球により完全に再増殖していた (p＜vMDV-CAV群よりもvMDV群において胸0.001).

腺の再生例が有意 (p＜0.001) に多く認め

F嚢において再生のみられた鶏は, vMDV-られた (表６). MDVおよびMDV-CAV群に

CAV群よりもvMDV群の方が有意に多かっおける胸腺病変は, 表５に示した.
３

F嚢：vvMDVおよびvvMDV-CAV群では,た (p＜0.001) (表６). MDVおよびMDV-

F嚢は重度に萎縮し, 多数の上皮性陰窩を伴CAV群におけるF嚢病変は, 表５に示してあう薄い粘膜ヒダが認められた. 粘膜ヒダのリる.

ンパ濾胞は, いくつかは減少し, ほとんどは

４

脾臓：脾臓の病理組織学的検索により３つ破壊されていた. 濾胞は重度に壊死, 減少をの病変が明らかとなり, それらを以下にまと呈しており, 細網細胞や上皮細胞によって置めた (表５).

換され, 最後には嚢胞が形成された. vvMDV(a) 再生性脾臓：脾臓はほとんど正常の大およびvvMDV-CAV群では, それぞれリン

きさと形状を保っていた. 脾臓組織は, 大型

パ球の浸潤を伴った濾胞内における線維増生

リンパ球によるエリプソイド周囲のリンパが１例ずつでみられた. vvMDVおよびvvMDV-

鞘 (PELS) およびリンパ濾胞 (胚中心)CAV群では, リンパ増殖性病変がそれぞれの再増殖を示した. ２〜３例では胚中心は3/8, 3/6例で認められた.

肥大し, 多数みられた. 動脈周囲リンパ鞘

vMDV群では, ほとんどの鶏でF嚢の完全(PALS) における再増殖も明瞭であった.

な再生がみられた. 粘膜ヒダはリンパ濾胞がPELSとPALSは, 赤脾髄を分画していた.

充満し, 円柱上皮が覆っていた (図２g).

vMDV群のおよそ半数 (12/20) の脾臓は濾胞の皮質は, 小型リンパ球とリンパ芽球に再生性であり, ２例では一つまたは二つのより充実性を呈し, 髄質はリンパ球, 上皮性リンパ腫病巣を伴っていた. vMDV-CAV

細胞およびマクロファージが充満していた.

群 (p＜0.05) の８週齢の１例では, 脾臓

16/20 (p＜0.001) の鶏が, 十分にF嚢の再の再生がみられた. vvMDV-CAV群では,生を示していた. 他の4/20例は, 間質におけ２例が脾臓の再生を示していた. 一方,るリンパ増殖性病変を伴い, 中等度の再生を

vvMDV-CAV群では１例も再生を示さな呈していた.

かった.

vMDV-CAV群における病変は, 主に濾胞(b) 変性性病変：Bリンパ球依存域 (PELS

リンパ球の減少であった. CAV接種後の最およびリンパ濾胞) のリンパ組織減少, フィ

初の週では, 濾胞のリンパ球がび漫性に脱落

ブリン様物質の沈着を伴うエリプソイド血した (図２h). 接種後２週では, リンパ組管の明瞭化, わずかな大型リンパ球を伴う織減少によって髄質のリンパ様細胞は欠落しリンパ濾胞の消失または萎縮, 被膜の弛緩

たままであった. 髄質は細網細胞を呈するのなどが特徴であった. PALSの減少およびみであったが, 皮質では塩基性の変性細胞が萎縮のため, 白脾髄は減数, 相互に離開し,みられた. 接種後３および４週では, 濾胞の脾臓組織のほとんどは赤脾髄であった.

― 148 ―

vMDV群では脾臓においてリンパ組織減

びMDV-CAV群における脾臓病変について,少は認められなかったが, 一方, vMDV-

表５に示してある.

CAV群のおよそ半数の鶏 (5/11) (p＜0.001)

５坐骨神経：病変はPayne＆Biggs (1967)

ではリンパ組織減少がみられた. vMDV-に従い, A, BおよびC型に分類した. A型は,CAV群では, 接種後１から２週後にリン脱髄を伴う小型, 中型および大型リンパ球,

パ組織減少がみられたが, ２, ３および４

細網細胞, マクロファージなどの混在によっ

週目ではリンパ増殖性病変が認められた.

て構成される. B型は, 間質の水腫, 小型リ

vvMDVおよびvvMDV-CAV群では, 2/9

ンパ球と形質細胞の浸潤, 脱髄などが特徴で

および5/9例でそれぞれリンパ組織減少がある. C型は, わずかな領域における小型リ

みられた.

ンパ球と形質細胞浸潤に特徴づけられる. 混(c) リンパ球増殖性病変：これにはPALSの合型は, 部分的にA型 (ほとんどは根部) で,わずかな過形成の始まりから, PALS, PE

他の神経の一部ではBあるいはC型を示す.

LSおよび小静脈周囲組織などにおける重MDVおよびMDV-CAV群において, それぞ度のリンパ腫, 圧迫された赤脾髄の残存なれの型における細胞構成成分は同一であった.

ど様々な変化があった. 時折, 脾臓の再生

しかしながら, それぞれの型の発生頻度は群と関連したわずかなリンパ腫の結節がみら間において異なっていた (表６, ７). Aおれた. 脾臓におけるリンパ増殖性病変は,よびB型では, 主にワーラー変性, 軸索の断MDVおよびMDV-CAV群において同等に片化, 脱髄などが認められた. 最も著しい変分布していた. リンパ増殖性病変は, vM

化は, A型で認められた. vvMDV, vvMDV-

DV, vMDV-CAV, vvMDV-CAV群におCAVおよびvMDV-CAV群において, A型はいてそれぞれ50％ (10/20), 54.5％ (5/11)

3/15, 5/17および8/18例でそれぞれみられた.

および66.6％ (6/9) で認められた.

vMDV群では, A型の病変は認められなかっ脾臓における再生は, vMDV群よりもvM

た. 混合型は, vvMDV-CAV, vMDVおよ

DV-CAV群において有意 (p＜0.05) に多く

び vMDV-CAV 群 に お い て そ れ ぞ れ 2/17 ,認められた. しかし, 脾臓におけるリンパ組

3/20および1/18例でみられた. vvMDV, vv

織減少を示す鶏数は, vMDV-CAV群で有意

MDV-CAV, vMDVおよびvMDV-CAV群に(p＜0.001) に多かった (表６). MDVおよ

おいて, B型は5/15, 1/17, 5/20および2/18

表６
組

織

坐骨神経

皮膚および
羽髄

病

変

実験群における坐骨神経および皮膚の病理組織学的病変

5Wa
A型
0/5A
B型
1/5
C型
4/5C
混合型
0/5
炎症型
5/5
リンパ腫型
0/5
皮下出血および水腫 0/5

6W
0/5
2/5
3/5
0/5
5/5
0/5
0/5

vMDV
7W 8W D
0/5 0/5B NDb
2/5 0/5 ND
2/5 3/5 ND
1/5 2/5 ND
4/5 3/5 ND
1/5 2/5 ND
0/5 0/5 ND

5W
2/3A
1/3
0/3C
0/3
3/3
0/3
0/3

a

鶏の週齢.
死亡例なし.
A,C,D,E
フィッシャーの正確確率検定における有意差 (p＜0.05).
B
フィッシャーの正確確率検定における有意差 (p＜0.01).
b― 149 ―

vMDV-CAV6W 7W 8W
1/3 0/3 2/2B
0/3 1/3 0/2
2/3 2/3 0/2
0/3 0/3 0/2
3/3 2/3 1/2
0/3 1/3 1/2
0/3 1/3 0/2

D
3/7
0/7
2/7
1/7
2/7
0/7
2/7

vvMDV
5W 6W D
2/5 0/4 1/6
1/5 1/4 3/6D
2/5 3/4 2/6E
0/5 0/4 0/6
3/5 1/4 1/1
1/5 2/4 0/1
0/5 0/4 0/1

vvMDV-CAV
5W 6W D
2/5 2/4 1/8
0/5 1/4 0/8D
1/5 1/4 7/8E
2/5 0/4 0/8
2/5 2/4 2/6
3/5 2/4 0/6
0/5 0/4 4/6

例でそれぞれみられた. C型は, vvMDV,うCAVの発症例は有意 (p＜0.05) に減少し,

vvMDV-CAV, vMDVおよびvMDV-CAV群

vMDV-CAV群では腫瘍病変を伴う発症例がにおいて7/15, 9/17, 12/20および6/18例で有意 (p＜0.05) に増加した.

それぞれ認められた. 全体として, 坐骨神経

６

皮膚：皮膚病変は, 炎症性およびリンパ腫

におけるリンパ増殖性病変と非増殖性病変は,であった. 炎症性病変は, リンパ球, マクロ

vvMDV 群 で は 3/15 ( 20 ％ ) お よ び 12/15

ファージおよびわずかな形質細胞により構成( 80 ％ ) , vvMDV-CAV 群 で は 群 で は 7/17

され, 一方, リンパ腫は濾胞周囲性リンパ増(41.2％) および10/17 (58.8％) でそれぞれ

殖性反応としてリンパ球とリンパ芽球により認められた. vMDV群では, 3/20 (15％)

構成されていた (表６および７).

および12/15 (85％) でリンパ増殖性病変とほとんどの皮膚病変は炎症性であり, 血管

非増殖性病変がそれぞれみられたが, それら周囲におけるび漫性リンパ球浸潤により構成の病変はvMDV-CAV群の9/18 (50％) でもされていた. Choら (1996) によって見出さ示された.

れた再生像と類似した, 表皮と関連するまたA型の病変は, vMDV群よりもvMDV-CAV

は羽包周囲におけるリンパ球の結節が, vM群で有意 (p＜0.05) にみられた. しかしな

DV群で認められた. ほとんどの鶏の羽髄でがら, B型はvvMDV-CAV群よりもvvMDV

は, リンパ増殖性病変はみられなかった. 炎群で有意 (p＜0.05) に認められた. Bおよ症性病変は, vvMDV, vvMDV-CAV, vM

びC型の両方では, 非増殖性の神経病変を伴DVおよびvMDV-CAV群の5/10, 6/15, 17/

表７

MDVおよびMDV-CAV群における主な病変の相違点

MDV群
vvMDV
・致死率 (52.6％) および平均死亡日数 (32日)・リンパ腫を伴う骨髄における貧血・ファブリキウス嚢および胸腺における重度の萎縮 (いくつかの症例では, 軽度の増殖がみられた)・坐骨神経 (20％ A型, 33％ B型A, 47％ C型)
・皮膚 (30％ リンパ腫性, 50％ 炎症性, 20％ 病変なし)

vMDV
・死亡率 (21.6％) および平均死亡日数 (41.5日)
・PCV値(21-25％)を示す骨髄に重度のリンパ腫を伴う貧血(20.7％)・胸腺(18/20) Cおよびファブリキウス嚢 (16/20)D におけるリンパ球の完全な再増殖および再生, 50％の鶏における再生性脾臓
・坐骨神経 (15％ A型F, 25％ B型, 60％ C型)
・皮膚 (15％ リンパ腫性, 85％ 炎症性)

MDV-CAV群
vvMDV-CAV・死亡率 (64.3％) および平均死亡日数 (30日)
・骨髄における低形成および, またはリンパ腫を伴う重度の貧血・胸腺, ファブリキウス嚢および脾臓における重度の萎縮・坐骨神経 (41％ A型, 6％ B型A, 53％ C型)
・皮膚 (33％ リンパ腫性, 40％ 炎症性)・皮下出血および水腫 (26.6％)
vMDV-CAV・死亡率 (38.9％) および平均死亡日数 (39.2日)
・PCV値 (12-25％) を示す骨髄低形成とリンパ腫を伴う貧血(44.4％) (4/11)B
・軽度の減少ではじまり重度の減少となる胸腺 (10/11)C, ファ
ブリキウス嚢 (10/11)D および脾臓 (5/11)E の再生性リンパ組織におけるリンパ組織減少
・坐骨神経 (50％F A型, 11％ B型, 33％ C型)
・皮膚 (11％ リンパ腫性, 61％ 炎症性)・皮下出血および水腫 (16.6％)
vMDVおよびvvMDV-CAV
・様々な内臓におけるMD腫瘍細胞と同様にリンパ組織におけるCAV封入体・CAV抗原陽性・CAVによる皮下出血および水腫

A,F

フィッシャーの正確確率検定における有意差 (p＜0.05).
フィッシャーの正確確率検定における有意差 (p＜0.01).
C,D,E
フィッシャーの正確確率検定における有意差 (p＜0.001).
B― 150 ―

20および11/18例でそれぞれ認められた. リ

陽性T細胞がび漫性に認められる一方で, CD

ン パ 腫 病 変 は , vvMDV , vvMDV-CAV ,４陽性T細胞は皮質と髄質で認められた. 皮質vMDVおよびvMDV-CAV群の3/10, 5/15,

におけるCD４陽性T細胞の染色程度は, CD８

3/20および2/18例でそれぞれ認められた.

陽性T細胞よりも弱かった.

CAV封入体は, vMDV-CAV群の羽髄におけ

脾臓におけるCD４とCD８の染色性は, 脾臓るリンパ腫の腫瘍細胞においてしばしばみらの病理組織像と一致していた. リンパ増殖性病

れた.

変では, 腫瘍性病巣は小動脈および小静脈周囲

vMDV-CAV群 (3/18例) およびvvMDV-でみられ, PELSにまで拡大していた. 腫瘍性CAV群 (4/15) において, いくつかの症例

病巣は主にCD４に陽性を示したが (図３a),では壊死に発展する皮下水腫および出血 (表CD８陽性細胞も脾臓組織に散在するか, 集塊

６および７) が認められた. 皮下出血およびとしてみられた. CD８陽性細胞は, 腫瘍性病

皮下水腫は, 骨髄低形成と関連していた (図巣内においては集塊状にみられた (図３d).

１a).

リンパ組織過形成では, CD４およびCD８陽性

免疫組織化学的検査：CAV抗原は, vvMDV-細胞は, およそ同等の染色性を示した. それら

CAV群 (図２b) とvMDV-CAV群 (図２d) のは脾臓ではび漫性に散在していたが, CD４陽

主に胸腺皮質および髄質におけるいくつかの大性細胞は対照群と比較して中心動脈周囲で軽度型細胞で認められた. 脾臓ではCAV抗原は明に増加していた. リンパ組織が減少している

確な分布を示さず, PALSおよびPELS, 赤脾

PALS (白脾髄) では, 細胞はわずかでそれぞ髄におけるリンパ増殖性病変 (図３g) とリンれが離れており, 中心動脈は薄いCD４陽性細パ組織減少 (図３h) の両方の病変部でみられ胞層によって囲まれているようにみえた (図３た. CAV抗原は, 核内において通常は微細顆

b). 一方, CD８陽性細胞は赤脾髄に散在して粒状に染色されていたが, 時折強く染色される

おり, PELSの染色されない広い部分を伴って大型の核内封入体も認められた. 腫大したいくいた (図３e). CD４陽性細胞は, 再生およびつかの核では, 核内封入体とともに核辺縁部が細胞の減少した脾臓において対照群よりやや多顆粒状に強く染色されていた. CAV抗原は,く染色された. 対照群では, CD４陽性細胞は５および６週齢のvvMDV-CAV群, ５, ６お

主に白脾髄に分布していた. CD８陽性細胞はよび７週齢のvMDV-CAV群の胸腺皮質と脾臓

PALT, 静脈周囲リンパ組織, エリプソイド周において検出された. ８週齢においては脾臓で囲および赤脾髄においてび漫性に分布していた.

は検出されたが, vMDV-CAV群の１例では前CD８陽性細胞の染色性は, CD４陽性細胞より

胃および坐骨神経の腫瘍細胞では検出されたもも強かった (図３c, f).

のの, 再生された胸腺では検出されなかった.
考

CD４およびCD８陽性細胞が, 免疫染色によっ察て検出された. CD４およびCD８陽性T細胞は,MDの発生における十分に解明されていない

vMDV-CAVおよびvvMDV-CAV群の胸腺皮質一つの問題として, 免疫抑制と関連した, 特にでは減少していた. CD４陽性T細胞は, 特にCAVをはじめとする他の病原体の影響があげ

血管周囲に小さな集団として出現していた.

られる. MDVに対するCAV混合感染の病原性

CD８陽性T細胞は, vMDV-CAV群 (５週齢)については, 初生ヒナにおける混合感染と比較の軽度に減少した胸腺皮質に散在していた. しして成鶏では十分に研究されていなかった. 我々

かし, vMDV群では皮質の全層にわたりCD８は本研究において, ４週齢でのMDVとCAV混― 151 ―

図３
Ａ：７週齢鶏の脾臓. CD４陽性T細胞性腫瘍細胞の多発性集簇巣. (vMDV-CAV群), LSAB法.
Ｂ：６週齢鶏の脾臓. 小動脈周囲のCD４陽性T細胞. リンパ球減少を示す赤脾髄に軽度に広がっている.
(vMDV-CAV群), LSAB法.
Ｃ：７週齢鶏の脾臓. 赤脾髄の動脈周囲におけるCD４陽性T細胞の正常像. (対照群), LSAB法.
Ｄ：７週齢鶏の脾臓. CD８陽性T細胞が赤脾髄および小動脈のリンパ球増殖性病変部の周囲にび漫性に分布.
(vMDV-CAV群), LSAB法.
Ｅ：６週齢鶏の脾臓. CD８陽性T細胞が赤脾髄において軽度にみられる. (vMDV-CAV群), LSAB法.
Ｆ：７週齢鶏の脾臓. CD８陽性T細胞が赤脾髄および小動脈周囲で強陽性. (対照群), LSAB法.
Ｇ：７週齢鶏の脾臓におけるリンパ球増殖性病変. リンパ球の核内にCAV抗原陽性所見. (vvMDV-CAV群),ABC法.
Ｈ：６週齢鶏の脾臓におけるリンパ球減少. 多数のリンパ球の核内にCAV抗原陽性所見. (vvMDV-CAV群),ABC法.
― 152 ―

合感染がPCV値および骨髄の病理に与える影

した６週齢鶏１例を除いて, それらすべては骨

響と, 骨髄病変と臨床像との相関性について検

髄低形成または過形成を有していなかった.

討した. また, MDV-CAV混合感染によるリン

vvMDVとvvMDV-CAV群の間には, PCV値にパ組織, 坐骨神経および皮膚病変への影響につ有意な差は認められなかった. 初生ヒナにおけいても記述した. MDVとMDV-CAV混合感染

る高病原性MDV株 (AC1とRB-1B) の接種は,における主な病変の相違については, 表６に示接種後14および19日目にPCV値の有意な減少した.

を示した. さらに, RB-1B株の接触感染も, 接CAV感染のMDとの同時発生は, 多くの国々

種後26および34日目にPCV値を有意に減少さにおける３週齢以上のコマーシャルブロイラー

せた [15]. vMDV群では, 実験期間中にPCV

群や産卵開始前, または直前の産卵鶏農場で深値の有意な減少は認められなかった. これに対刻な問題となっている [12,24,25,47]. 野外のして, vMDV-CAV群では７週齢時にPCV値が状況に近づけるため, 我々は初生ヒナにMDV

有意に減少した. PCV値の有意な減少は, vMを接種した後, ４週齢時においてCAVを接種

DV-CAV群におけるCAV誘発性の低形成と相した.

関していた. 一方, vMDV群では, 低形成やCAVはMDV株によって引き起こされる死亡

過形成は認められなかった. しかし, ２例にお率を上昇させ, 平均死亡日数を減少させた. 死

ける重度のPCV値の減少 (15および17％) は,

亡数はCAV接種後における死亡のことである

骨髄におけるリンパ腫の発生と関連していた.

が (４週齢以降), 特にvvMDV-CAVおよびvv

Glika＆Spencer [15] は, MDVのAC-1株接種

MDV群では高い死亡率を示した. vvMDV-CAV

後19日目のPCV値は６および９％であったが,およびvvMDV群における死亡率は, それぞれ

骨髄低形成の証拠はなかったと報告している.

64.3％および52.6％で, 平均死亡日数はそれぞ

Goryo＆Okada [16] は, vMDVとvvMDVをれ30日および32日であった. これは, vvMDV

様々な日齢 (初生, １週, ２週, ３週および４

およびCAVを混合感染させた４週齢ヒナにお週) で接種したが, 骨髄低形成は発生しなかっ

いて高い死亡率を示した初めての報告である.

たと報告している. MDVのConn-A分離株接種

高い死亡率は, おそらく二次的な免疫抑制の増後３週間以内における骨髄低形成とPCV値の強と内臓におけるリンパ腫の発症によるものと減少を記述したものが, Jakowskiら [21] に思われる. さらに, CAVはCAV接種後４週以よって報告されている. しかし, このウイルス

内 の 死 亡 率 を vMDV 群 の 21 . 6 ％ か ら vMDV-

株にはCAVの汚染があったことが後に判明しCAV群の38.8％へ上昇させた. CAVとMDV,た (34において引用). 我々の研究における骨IBDVまたは細網内皮症ウイルスなどとの混合髄低形成とCAV封入体の出現との関連から,感染は, 罹患率と死亡率を増加させた [43-45].

CAVが骨髄造血前駆細胞に対して直接的な細PCV値と骨髄病変との相関性は, 一貫して胞傷害性を持つことが確認された [18]. vMDV-

いた. vvMDVおよびvvMDV-CAV群における

CAVおよびvvMDV-CAV群における羽の皮下

貧血鶏では, 平均PCV値は５週齢時に有意にまたは胸部, 大腿部筋肉の出血斑は, CAV感減少したが, ６週齢時には有意に減少せず, 貧染の特徴として記述されている [46]. 本研究

血鶏の数と一致していた. vvMDVおよびvvM

では, 皮下水腫および出血は, 骨髄低形成と関

DV-CAV群の貧血鶏では, PCV値の範囲は21連しており, ７週齢で安楽殺した鶏と死亡鶏でから25％で, vvMDV-CAV群で骨髄にリンパ認められた. Pope [29] は, それらの出血は増殖性病変と低形成を有し, PCV値23％を示

CAVが引き起こした血小板減少症に関連して― 153 ―

いると述べている. 貧血による酸素欠乏は, 血

接 種 後 14 日 目 に 有 意 な 再 生 を 示 し た [ 9 ] .

管維持の不良により出血を悪化させる.

HPRS-16株 (vMDV) を接種した脾臓の再生は,

vvMDV-CAVの混合感染により病原性が増

接種後15日目に始まり, 接種後30から50日まで

すと, 死亡率の上昇とリンパ組織減少の憎悪を継続したが, そこには腫瘍性病巣がみとめられ

招く. vvMDV-CAV群では, 胸腺とF嚢が重度た [2]. それに対して, vMDV-CAV群では,に萎縮していた. 同様の病変がPope [28] に胸腺皮質およびF嚢における連続したリンパ球

よって報告されている. 彼らは病原性MDVと減少が認められた. また, 脾臓はCAV接種後

CAVの両方の免疫を欠くヒナでは, 両ウイルの初めの２週間では, リンパ球減少を示していスの暴露により, コレステロール裂隙形成を伴た. リンパ球減少は, 胸腺皮質での腫大したリうウイルス性萎縮を招くと報告している. 次な

ンパ球における核内封入体とCAV抗原の検出る変化である細胞溶解および免疫抑制の始まり

からも明らかなように, CAVに起因していた.

は, MDV接種２から３週後であり, それらはCAV封入体および抗原は, 実験期間中を通し長期間継続する [33]. 二次細胞溶解期は永久て胸腺, 脾臓および様々な内臓臓器の腫瘍細胞的な免疫抑制を伴い, リンパ腫への発展と関連

で 認 め ら れ た . CAV 封 入 体 お よ び 抗 原 は ,している. Calnek [6] は, これらの組織におvMDV-CAV群では持続して多数みられたが,いてウイルスが潜伏感染した細胞が, 二次的な１例の再生した胸腺ではCAV抗原は陰性であっ免疫抑制の高まりによって再活性化することをた. さらに, CAV封入体は内臓臓器における示唆している. Morimuraら [23] は,MDV

MD腫瘍細胞で持続的に認められたことから,(Md/5) がCD４陽性T細胞のアポトーシスとMDはCAVの増殖および播種の機会を与えていCD８発現のダウンレギュレーションを誘発し,ることが示唆された. CAV抗原は26日齢の再二次的な免疫抑制のメカニズムとなることを示

生した胸腺では免疫組織化学的に検出されなかっ唆している. vvMDVを接種されたほとんどのた [38]. しかし, 実験期間中でのリンパ組織

鶏では胸腺およびF嚢の重度萎縮がみられ, 二におけるCAVの持続感染はImaiら [20] と一次的な免疫抑制の原因となりうるが, いくつか致していた.

の例では胸腺皮質における軽度の再生がみられ(５週齢鶏) において, 接種後７から28日までた. しかし, vvMDV-CAV群における重度のの血球からCAVを, そしてCAVの単独接種よリンパ組織減少は, 二次的な免疫抑制およびりも高い抗体価を検出している.

彼らはIBDV-CAV混合感染鶏

CAVによる直接的な影響, またはいずれか一

CAV抗原は, 胸腺皮質の他に脾臓のPALS,

方によるものであろう. 本研究では, vvMDV-PELSおよび赤脾髄に分布している [38]. vM

CAV群の胸腺とF嚢でのリンパ球減少におけるDV-CAVおよびvvMDV-CAV群におけるCD４

CAVの役割については, vMDV-CAV群よりもおよびCD８陽性T細胞の減少は, 双方のウイ

明確ではなかった. これはおそらく, vvMDVルスが同時に複製するとき, CAVはMDに対す株と関連した早期および遅発性の二次細胞溶解

る細胞傷害性T細胞 (CTL) 反応を阻害する可期の結果として, CAVに対する標的細胞が欠能 性 が あ る と い う Markowski-Grimsrud ＆

落したことによるものかも知れない.

Schat [22] による研究結果により支持される.

vMDV群では, 胸腺皮質およびF嚢のリンパ移行抗体が陰性であった鶏がCAVに感染した濾胞における完全な再生がほとんどすべての鶏とき, 細網内皮症ウイルス特異的CTLを発達でみられ, 半数 (12/20) では脾臓の再生もみさせることができない. さらに, 移行抗体が減られた. 同様に, 胸腺とF嚢は, JM16 (vMDV)

弱した後の45日齢におけるCAVの感染により,― 154 ―

細網内皮症ウイルス特異的CTL反応の減少が羽軸における主要な浸潤細胞である.

生じた [22]. CAVによるCTLの減少は, MD

本研究では, 神経の非増殖性病変を有するわ

V特異的CTLが存在する場合, MDV感染の制

ずかな鶏が, Sharmaら [37] によって記述さ御に深刻な影響を与える [35]. 腫瘍性の脾臓

れた限局性リンパ球集簇による再生性病変と類では, CD４陽性T細胞の分布は, 小動脈と小似していた. CAVは, 非増殖性病変の見られ静脈周囲, そして重度の腫瘍性病変ではPELSる鶏の数を有意に減少させ, および腫瘍性病変中にも広がっていた. 腫瘍性病巣のほとんどはを有する鶏の数を有意に増加させた. それらは,ＣＤ４陽性Ｔ細胞で構成されていたが, CD８

CAVによるリンパ組織, 特にCD８陽性T細胞

陽性T細胞も単一に, または集団で, さらにはの減少が, 他の内臓型リンパ腫と同様に坐骨神

赤脾髄に拡散して出現していた. これらの所見

経や皮膚の病変の退縮を干渉しているのであろは, Ichijoら [19] およびBaigent＆Davison

う.

[2] の報告と一致している. 再生とリンパ組織

本実験では, MDV-CAV混合感染における骨減少のみられる鶏では, CD４陽性細胞の染色

髄低形成が, CAV感染と関連していることが性は, 対照群と比較してやや強くみられた. 前

確認され, MDV非接種鶏では低形成はみられ者では軽度のリンパ増殖性反応を有しており,なかった. さらに, CAVは高病原性MDVと関

そこではMDVからの完全な回復がないという連して二次的な細胞融解期を高め, vMDV感ことを示唆している. リンパ組織減少の鶏では,染からの回復に影響を及ぼした. CAVに誘発

CD４陽性T細胞よりもCD８陽性T細胞の方がされる潜在性の免疫抑制は, いくつかの面で非より影響を受けていることは明らかであった.

常に重要である. 第一に, MD, 敗血症, 細菌

さらに, 内臓臓器におけるリンパ腫病変中よりおよび真菌感染症などによるブロイラーの廃棄も, 胸腺や脾臓で多数の封入体がみられた. こに, 最も重要な要素となっている. 第二には,の所見は, CD４陽性細胞に比較してCD８陽性

ブロイラーのワクチンブレークによってワクチ細胞の方がCAVの感染率が高いという報告とン効果が損なわれ, 次々にMDが発症すること一致する [1,3]. その上, MD培養細胞系に対である. 第三に, ワクチン接種によって細胞性するCAV感受性は, CD４陰性・CD８陽性細免疫とのバランスがくずれ, 野外, 特に採卵鶏

胞とCD４陰性・CD８陰性細胞では異なり,や種鶏におけるMD発生が頻発するようになる.

CD４陽性・CD８陰性細胞ではさらに影響を受最終的には, MDに関する我々の所見のように,けやすいのかも知れない [10].

細胞性免疫が回復に対し重要になった時に病気

特に末梢神経におけるMDリンパ腫の退縮は,を悪化させてしまうのかもしれない.

Payne＆Biggs [27] およびBurgessら [4] によって認められている. 腫瘍性から炎症性への

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おいて認められ, それは末梢神経病変の退縮とCDG, McNulty MS：Avian Dis, 37,

一致している [4,27]. Choら [11] は, MDに943-950 (1993)

よる皮膚病変の退行を記述しており, それはリ

[ ２ ] Baigent SJ , Davison TF ： Avian

ンパ球集簇の初期増加によって特徴付けられ

Pathol, 28, 287-300 (1999)(接種後１から３週目, Md/5株), その後 (４[３] Bounous DI, Goodwin MA, Brooks R

から９週後) に内臓型リンパ腫への進行を伴っ

L, Lamichhane CM, Campagnoli RP,

たリンパ組織集簇がみられる. 小型リンパ球は,Brown J, Synder DB：Avian Dis, 39,― 155 ―

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