岩獣会報 (Iwate Vet.), Vol. 39 (№ 1), 20−24 (2013).

原著

頚曲がり鶏群における神経系病変の病理学的検索

辻要

まりこ

江幡麻代

佐々木淳

倉持好御領政信

約孵化直後から頚の背後方屈曲 (頚曲がり) を一過性に示す鶏群における脊髄灰白質背角領域の縮小化に着目し, この病変が頚曲がりに共通して認められるものか, あるいはこの個体特有のものなのかを, ５代目雛を用いて評価した.
実験鶏として, 発症鶏由来, 未発症鶏由来およびP２系１日齢雛の各５羽３群を設定し, それぞれ臨床症状の観察と剖検を行い, 脊髄５カ所 (第二〜三頚髄, 第七〜八頚髄, 頚膨大部, 第三〜四胸髄, 腰膨大部) および錯綜筋のヘマトキシリン・エオジン (HE) 染色標本を病理組織学的に観察した. 脊髄はさらにクリューバー・バレラ (KB) 染色標本を作製し, 脊髄全体, 灰白質全体および背角の横断面積を, 画像解析ソフトウェアを用いてそれぞれ測定した.
剖検所見では, 発症鶏由来および未発症鶏由来のすべての個体において頚部骨格筋における黄色水腫が顕著であったが, 未発症の個体は発症個体に比べてやや軽度であり, 病理組織学的検索では, 筋束間の水腫, 筋線維の硝子様変性, 筋線維の壊死・貪食像, 筋管形成などの再生性変化などが認められた.
発症および未発症由来雛の第二〜三頚髄の灰白質における背角の割合はどちらも対照群より有意に低かったが, 脊髄全体における灰白質の割合は, いずれの部位においても各群の間に有意差は認められなかった.
キーワード：頚曲がり, 固有知覚, 遺伝性疾患, 脊髄灰白質背角遺伝性疾患とは, 遺伝子の作用が少なくとも病因の反応性病変であることを報告した. 有藤ら [5],金谷一部となる疾患の総称である [1]. 病因遺伝子は, 近ら [6] は, 一部の発症雛由来の雛に頚曲がりの発症親交配を重ねることで保因個体が増加し, その遺伝子および同一の組織病変が認められたことから, これらによる遺伝性疾患の発現が高頻度になると考えられての病態が遺伝性疾患である可能性を述べている.

いる [2]. 鶏は, ヒトの遺伝性疾患である伴性遺伝性

この採卵鶏群の継代４代目の個体において重度の症小人症, 筋ジストロフィーなどのモデル動物として重状を示した成鶏を病理学的に検索した結果, 脊髄灰白要であり [3, 4], 鶏において, 遺伝性疾患を発見し,

質, 特に背角領域の縮小化, 神経節周囲および坐骨神確立することは非常に有用であると考えられる.

経周囲の膠原線維増生による肥厚, 神経節細胞数の減

有藤ら [5] は, 孵化直後から一過性に頚の背後方少などの病変が認められた. 今回, 上記の病変の内,屈曲 (頚曲がり), 後弓反張様姿勢を示し, 重度の個灰白質背角領域の縮小化および神経節細胞数の減少に体のほとんどが, 強制給餌・飲水を行わなければ致死着目し, この病変が頚曲がりに共通して認められるも的経過をたどる採卵鶏雛群を報告した. 金谷ら [6]のか, あるいはこの個体特有のものなのか, またこのは, これらの雛群を継代・飼育, さらに病理学的に検頚曲がりの発症と組織病変の発現が遺伝性疾患である

索し, この群における頚曲がり発症雛の主な組織病変可能性について検討を行った.

は, 頚部背側の錯綜筋に限局した筋線維の硝子様変性や筋貪食といった筋融解壊死性およびそれらに対する
岩手大学支会

岩手大学農学部獣医病理学研究室― 20 ―

材料及び方法た個体が認められた. すべての未発症由来の雛, およ

実験鶏：実験鶏は, 同一系統の発症鶏および未発症鶏

びP２系の雛は臨床的に無症状であった.に由来した継代５代目１日齢雛と, それとは別系統の剖検所見：発症鶏由来および未発症鶏由来雛ではいず

P２系白色レグホン種１日齢雛を各５羽用いた.

れの個体においても, 頚部骨格筋における黄色水腫

病理組織学的検索：すべての群は安楽殺後, 脊髄５カ(写真２) が顕著であったが, 未発症の個体は発症個所 (第二〜三頚髄, 第七〜八頚髄, 頚膨大部, 第三〜体に比べてやや軽度であった. その他, 全身諸臓器に四胸髄, 腰膨大部) および錯綜筋を採材後, 材料をギ著変は認められなかった.

酸・ホルマリン液にて固定・脱灰, あるいは10％ホルP２系雛ではすべての個体において頚部骨格筋の水マリン液にて固定し, 定法に従いパラフィン包埋ブロッ腫性腫脹は認められず, 全身諸臓器にも著変はみられクを作製した. これをミクロトームにて４μmに薄切なかった.

した後, ヘマトキシリン・エオジン (HE) 染色を施

病理組織学的検索：発症鶏由来および未発症鶏由来雛し, 光学顕微鏡にて病理組織学的に検索した.の錯綜筋における組織病変として, 筋束間の水腫 (写脊髄灰白質面積の測定：脊髄は上記に加えてパラフィ真３), 筋線維の大小不同, 筋線維の硝子様変性, 筋ン包埋ブロックを８μmに薄切した後, クリューバー・線維の絮状変性, 筋線維の壊死・貪食像および筋線維バレラ (KB) 染色を施した. すべての個体においての修復 (写真４), 筋管形成などの再生像が認められ脊髄組織の画像を光学顕微鏡デジタルカメラ (OLYた. なお, このような筋病変は頚曲がりの臨床症状のMPUS, DP12) にて撮影し, 画像解析ソフトウェア有無にかかわらず高率に認められ, 程度の差はあるが(Image J；National Institutes of Health) を使用しほぼすべての個体で発現が認められた.て脊髄全体, 灰白質全体および背角の面積をそれぞれ測定した. これらの結果から灰白質における背角領域

P２系雛では錯綜筋の筋束間水腫をはじめとする種々の筋病変は認められず, 正常骨格筋組織であった.の割合および脊髄における灰白質の割合を算出した.
背角は, 中間質上縁より背正中溝と垂直に交わる様に

脊髄灰白質面積の測定

直線を引き, その直線から背角部分を背角領域とした

背角／灰白質：灰白質における背角の割合は図２に示(図１).

してある. 第二〜三頚髄の背角/灰白質比は対照群よ成績

臨床所見：発症鶏由来の雛の症状は無症状から重度のものまで様々であった. 軽度の個体では, わずかに上方を向き頚をかしげるような症状を示し, 重度の個体
では脚を突っ張る様な後弓反張様姿勢を示し, 起立・歩行が不可能であった. また, 頚部のみが背後方へ屈曲する典型的な症状を示す個体の中でも, その程度が顕著な個体 (写真１) や, 両足を開いたまま座り込み,脚弱を呈し起立・歩行が不可能な個体や頚を下垂させ
写真１

図１ 背角領域の設定 (KB染色)
中間質上縁より背正中溝と垂直に交わる様に直線を引き, その直線から背角部分を背角領域とした.
― 21 ―

写真２

孵化直後の発症雛. 頚の背後方屈曲.

発症雛の頚部骨格筋. 顕著な錯綜筋の黄色水腫 (矢印) および出血.

写真４ 頚曲がり系統の錯綜筋, １日齢, HE染色.
筋線維の修復性変化を示す, 一部における好塩基性の筋線維の存在. バー＝50μm

写真３ 頚曲がり系統の錯綜筋, １日齢, HE染色.
筋束間の水腫. バー＝50μm

図２

灰白質における背角の割合①第二〜三頚髄②第七〜八頚髄④第三〜四胸髄

⑤腰膨大部

③頚膨大部

考

りも発症および未発症由来雛の方が有意に低かった.

察発症および未発症由来雛の間には有意差は認められな錯綜筋の検索では, 頚曲がりの系統の一日齢雛すべかったが, 発症雛の方が低い傾向を示した. その他のての個体において程度に差はあるものの, 筋束間の水部位では有意差は認められないものの, 発症鶏由来雛腫, 筋線維の大小不同, 筋線維の硝子様変性, 筋線維が対照群よりも低い値を示す傾向が認められた.の絮状変性などの筋病変が認められ, これまでの検灰白質／脊髄全体：脊髄全体における灰白質の割合は

索 [6] と同様に, 継代４代目および5代目にも頚曲が図３に示してある. どの部位においても有意差は認めりの遺伝子が継代され, 発現していることが確認されられなかったが, 発症鶏由来雛および未発症由来雛がた.

対照群よりも低い値を示す傾向が認められた.

金谷ら [6] は, 頚曲がりの筋病変は孵化前の鶏胚― 22 ―

図３

脊髄全体における灰白質の割合①第二〜三頚髄②第七〜八頚髄④第三〜四胸髄

⑤腰膨大部

③頚膨大部

においても認められることを報告しており, 本系統が経過観察では, 症状が次第に軽度となり, 18日齢では筋の変性に関して何らかの素因あるいは疾患を抱えて全ての個体で起立不能が解消され, 組織学的にも筋変いることが強く示唆される. 筋線維の変性を示す遺伝性の回復が認められることを報告している. これらの性の先天性疾患として先天性筋ジストロフィー [7]ことから, 今回の病変は筋ジストロフィーとは異なるが存在し, 鳥類の遺伝性疾患としては, ヒトの疾患モ一過性の障害に起因するものであり, 進行性病変としデルとしても重要な市販ニューハンプシャー系の鶏にて捉えるべきではないと思われる.

おける遺伝性筋ジストロフィーがよく知られている

脊髄灰白質の面積の検索により, 頚曲がり系統で頚[4, 8-10]. 一般的に, 筋ジストロフィーはヒトおよび部の灰白質背角領域における有意な縮小化が認められ,動物において, 骨格筋の進行性, 変性性変化による筋頚部以外の部位においても発症鶏由来の個体が対照群線維消失を特徴とする遺伝性疾患とされる [11]. 病よりも低い値を示した. 灰白質の脊髄における割合は理組織学的には, 筋線維の変性・壊死・再生を主体とどの部位においても群間で有意差は認められなかった

し, 核数の増加, 筋線維の大小不同, 空胞化, 筋線維が, 灰白質の縮小化は背角に限定されたものであり,の破壊とそれに対する細胞反応, 筋線維の脂肪置換,灰白質背角領域の縮小化と頚曲がりの病態との関連性

輪状筋線維など様々な変性性・壊死性・再生性病変がをどのように考えるのかが注目されることとなった.

認められるが [7-9, 11-13], どれも筋ジストロフィー

脊髄灰白質の背角には背根神経の束が侵入し, そのに特異的なものではないとされ [14], 今回の組織学内側部には識別的圧触覚と, 筋, 腱, 関節からの固有的病変と必ずしも一致するものではなかった. 一方,知覚を, 外側部には温痛覚, 内臓知覚を伝える線維が筋ジストロフィーの病態の進行過程としては, 再生速走行している [16]. 一方腹角は, 運動機能を主体と度を上回って壊死が発生することにより, 筋組織は順した遠心性の線維や神経細胞が分布しており [17],次脂肪組織や結合組織に置換されてゆき, 罹患期間が頚曲がりの症状は, 運動性伝導路由来というよりもむ長いほど正常筋組織が失われるとされているが [15],しろ感覚性伝導路が関与している可能性が考えられる.

今回の実験鶏群では孵化直後での病変程度が最も重度

感覚性伝導路には皮膚知覚, 味覚, 聴覚, 視覚, 嗅であり, 有籐ら [5] の頚曲がりの症状を示した雛の覚, 深部知覚, 平衡覚などの伝導路がある [18]. 重― 23 ―度の頚曲がりの個体では, 頚が背後方に屈曲している[６] 金谷俊平, 御領政信, 佐々木淳, 岡田幸助：頸だけでなく, 起立は可能だが, とても不安定で, 長時部背後方屈曲を示す鶏群の交配成績と孵化直後間の起立は困難であり, 歩行を行う様子は見受けられの筋病変, 日獣会誌, 63, 119-124 (2010)なかった. また, 強く押されると転倒し, そこから自[７] 三池輝久：先天性筋ジストロフィー, 筋病理学,力で起き上がるなどの体位変換をすることはできなかっ檜澤一夫ら編, 149-160, 文光堂, 東京 (1989)

た. これらを考慮すると, 上記の内, 頚曲がりの症状[８] Julian LM：Animal model：Hereditary muscularには深部知覚および平衡覚が関与している可能性があ

Dystrophy of chickens, Am J Pathol, 70, 273-

ると思われる.

276 (1973)

深部知覚 (固有知覚) の伝導路は, 筋, 腱などにあ[９] 大島寛一：筋肉の病気, 鳥の病気, 鶏病研究会

る伸展受容器 (筋紡錘, 腱紡錘など) から体の位置,編, 第４版, 134-136, 鶏病研究会, 東京 (1995)

姿勢と運動に関する情報を運ぶ. 深部知覚に関与する[10] Wilson BW, Randall WR, Patterson GT, Entrikin

伝導路は, 大きく分けて識別性の深部感覚の上行路でRK ： Major physiologic and histochemical

ある後索系の経路と, 意識されない深部感覚の上行路

characteristics of inherited dystrophy of theである脊髄小脳路の２つがある. 脊髄小脳路には腹側chicken, Ann NY Aced Sci, 317, 224-246 (1976)

脊髄小脳路, 背側脊髄小脳路および副楔状側核小脳路[11] 小野威：筋肉変性を主病変とする家畜疾病の文の３つの伝導路が含まれる. 上記以外にも, 脊髄オリー

献展望, 日獣会誌, 28, 401-405 (1975)

ブ路, 脊髄網様帯路および網様帯小脳路も深部痛覚を[12] Ohwada S, Kikuchi T：A microphotometric伝えるものと考えられている. 平衡覚は, 広義の固有

study on the proliferation pattern of muscle

知覚の一種と考えられ, 頭の位置および運動に関する

cell nuclei in chickens with hereditary muscular

情報を脊髄前庭路などの前庭覚伝導路によって小脳にdystrophy, Tohoku J Agri Res, 36, 63-68 (1985)

伝える [18]. この内, 頭頚部の深部感覚あるいは平[13] 若山吉弘：進行性筋ジストロフィー, 病因, 病衡覚に関与し, かつ背角を経由する伝導路には, 脊髄態, 筋病理学, 檜澤一夫ら編, 132-137,文光社,オリーブ路, 脊髄網様体路および脊髄前庭路等が存在

東京 (1989)

する [18]. したがってこれらの内, １つないし複数[14] Hulland TJ：Muscular dystrophy, Pathology ofの神経路が頚曲がりの病態に何かしら関与している可Domestic Animals 4th, vol 1, 204-210, Academic能性が考えられる. しかし, 有意差があるとはいえ,Press, Inc., San Diego (1991)

７％程度の違いしかない縮小化でこのような症状を示[15] 檜澤一夫：進行性筋ジストロフィー, 現代病理

すのか, 孵化直後に認められる筋病変との関連など検学体系 (21A) , 143-162, 中山書店, 東京 (1992)

討要因は多分に残されており, 今後の課題となるので[16] 柴田秀史：脊髄, 獣医組織学, 日本獣医解剖学会編, 第３版, 85-86, 学窓社, 東京 (2005)

はないかと思われる.

[17] 伊藤洋二：中枢神経組織, 脊髄, よくわかる立
引用文献

体組織学, 医学生物学電子顕微鏡技術学会編,408-409, 学際企画, 東京 (1999)[１] 井上英二：遺伝学総論, 現代病理学体系 (10A),[18] 新見嘉兵衛：感覚性伝導路, 神経解剖学, 166-

17-24, 中山書店, 東京 (1988)[２] 藤木典夫：遺伝病の診断・治療と予防, 現代病理学体系 (10A), 289-296, 中山書店, 東京(1988)[３] Dodgson JB, Romanov MN：Use of chickenmodels for the analysis of human disease, Curr
Protoc Hum Genet, Chapter15, Unit 15.5 (2004)[４] Sugita H, Nonaka I：Animal models utilizedin research on muscular diseases in Japan,
Prog Clin Biol Res, 229, 271-286 (1987)[５] 有藤翔平, 御領政信, 佐々木淳, 斎藤文也, 山中綾子, 岡田幸助：孵化時にみられた採卵鶏雛の背後方屈曲 (頚曲がり), 鶏病研報, 44, 9-14(2008)― 24 ―

181, 朝倉書店, 東京 (1974)