自生ハマナス（Rosa rugosa）の精油成分とその抗菌活性〜コスメトロジーへの有効利用を目的とした基礎的研究〜
弘前大学大学院長 岐

理工学研究科正 彦

The essential oils and distilled-water extracts of Rosa rugosa flower, leaf, and fruit were analyzed by flame ionization
detector-gas chromatography and mass spectrometer-gas chromatography. The principle components in the flower oil andwater were citronellyl acetate, citronellol, and geranyl acetate, and citronellol and geraniol, respectively. For the leaf oil
and water, it was γ-muurolene and geraniol and linalool, respectively. The main component in fruit water was terpinen-4-ol.
Fruit oil, on the other hand, could not be extracted. Additionally, combining the Rosa rugosa distilled-water with one of theisoprenoids geraniol, farnesol, or citral showed higher antibacterial activity than the isoprenoid alone.

１. ２. ２

1．ハマナスの成分分析
１.１

緒

成分抽出

植物からの成分の抽出には水蒸気蒸留法を使用した。蒸言留は６時間行い精油を分取した。ハマナスの花 2.5 kg から

isoprenoid は植物や昆虫、菌類など多くの生物の生体内は精油が 0.15 g（蒸留量に対し 0.0058 %）得られた。また、

で isoprene（C5）から合成される生体物質である。また、ハマナスの葉 634 g からは精油が 0.39 g（0.062 %）得られた

isoprenoid は植物から発散される香り成分としても知られが、実からは精油は得られなかった。

ており、森林浴やアロマテラピー等の分野で注目されてい水蒸気蒸留により得られた蒸留湯は、それぞれ 1L に対る。アロマテラピーにおいて、バラの精油は古くから人気して hexane を用いて 4 回（100 ml、80 ml、60 ml、60ml、全の高いが、現在その殆どはトルコなどで栽培されるダマス量 300 ml）抽出を行い、無水硫酸マグネシウムを用いた乾クローズ（Rosa damascena）から精製されている

1−1）

。ハ

マナス（Rosa rugosa）は東アジアに広く分布するバラの原

燥の後、溶媒を留去した。
１. ２. ３

分析

種の一つであり、日本に於いては北海道から山陰地方まで

精油、及び蒸留湯からの抽出物の成分分析はGas chromatographyの日本海沿岸に広く分布する。青森県では、青森市や鰺ヶ-Flame ionization detector（GC-FID）及 びGas chromatography-

沢町がハマナスの花を市町村の花に指定しており、県民に

Mass spectrometer（GC-MS）により行った。GC-FID分析は

広く親しまれている。ハマナスの花の成分に関しては、中Hitachi Gas Chromatograph G - 5000A により行い、carrier

国産のものを中心に幾つか報告されているが1−2 〜 1−6）、葉やgas は N2 を 60 ml/min で使用した。カラムは poly（alkylene

実等その他の部位に関する研究は少ない。我々は、県産ハ

glycol）カラム（Sigma-Aldrich, 30 m×0.25 mm i.d.）を用い、マナスが含有する有用成分を検索するため、花や葉、実に昇温プログラムは 40℃（5min）− 10℃ /min − 200℃で行い、ついて成分を分析し、部位による成分の違いを調査した。

Injector、及び Detector はそれぞれ 150℃、250℃で使用しま た、 ハ マ ナ ス の 花 の 香 り に つ い て 研 究 す る 目 的 で、た。GC-MS 分 析 は JEOL Q1000 GC - Mk - II を 使 用 し て

Head-Space 法（HS 法）GC-MS 測定による香気成分の分析

HP - 5 カラム（Agilent, 30 m×0.32 mm i.d.）により分離した。

も行った。

carrier He ガスは 1 ml/min で用い、温度プログラムは 50℃（4.7min） −15 ℃ /min − 280 ℃（2min） で 行 っ た。

１. ２

実

１. ２.１験

injector と GC-transfer line は共に 200℃に設定した。

植物原料

HS法GC-MS測定は、JEOL12031 Headspace auto sampler

ハマナスの花及び葉は青森県西津軽郡鰺ヶ沢町で 2009と結合させた JEOL Q1000GC-Mk-II により行い、カラムは
ACUATIC（Agilent, 60 m×0.32 mm i.d.）を 使 用 し た。

年の 6 月に採取し、実は同年 9 月に採取した。

carrier He は圧力 15psi で使用し、昇温プログラムは 40℃
Composition and antimicrobial activity ofthe essential oil and water extract fromJapanese wild Rosa rugosa 〜Fundamental
study on the effective use to cosmetology〜
Masahiko Nagaki
Graduate School of Science and Technology,
Hirosaki University（3 min）− 10℃/min − 170℃− 20℃/min − 200℃（12.5min）で行った。Sample Loop モード、sample 加熱は 68℃により 香 気 成 分 をGC部 へ 導 入 し、HS-transfer line及 びGCtransfer lineはそれぞれ150℃、200℃で使用した。
成分の同定には、GC-MS により得られたマススペクト
ルと NIST MS スペクトルライブラリデータ（http://www.

− 31 −

コスメトロジー研究報告 Vol.20, 2012

nist.gov/srd/nist1a.cfm）との比較、
GC retention time（RT）

しており、全体的に精油より alcohol 体の成分比が高く、の比較により行った。保持時間の一致は、標品との co-acetate 体の成分比が低く見られた。geraniol や citronellol

injection 測定、n-alkane（C7 − C40）のピーク時間から算出

はその甘い香りにより香料等に広く用いられており、ハマされる Retention Index（RI）の文献値との比較により行

ナスの蒸留湯に含まれる成分も香水などへの応用に有用でった。また、各成分の割合は GC ピーク面積比から算出した。

はないかと考えている。
１. ３. ２

１. ３

結果と考察

１. ３.１

ハマナスの葉葉の精油及び蒸留湯に含まれる成分を Table 1−2 に示しハマナスの花た。葉の精油に最も多く見られた成分は g-muurolene（10.4%）

ハマナスの花から得られた精油、及び蒸留湯からの抽出であるが、この化合物は蒸留湯抽出物では全く見られなか物成分を Table 1−1 に示す。精油からは全体の 85.2％に相った。ハマナスは葉に於いても、geraniol、linalool の成分

当する 37 成分が同定され、citronellyl acetate を 12.1% と比が精油の 0.4 %、0.2 % に比べて蒸留湯では 4.2 %、3.9 % と最も多く含有していた。Babu らの報告によれば、バラの高く見られた。青臭い香りにもかかわらず、ハマナスの葉精油生産に世界的に用いられているダマスクローズ（Rosaが バ ラ や ラ ベ ン ダ ー の 花 の 香 り 成 分 で あ る geraniol やdamascena）の精油は、citronellol と nerol の 2 成分で 35％を

linalool を含有していると言う事実は興味深い結果である。

構成しており、geraniol も 21% と高い含有率で見られる

1−7）

。

１. ３. ３

ハマナスの実こ れ に 対 し て、 ハ マ ナ ス の 花 か ら 得 ら れ た 精 油 はハマナスの実から得られた蒸留湯に含まれる成分は全体citronellol が 7.7%、nerol が 1.4% と、その合計 9.1％はダマの 92.3％に相当する 52 成分が同定された（Table 1−3）。実

スクローズの精油と比較して 3 分の 1 以下であり、geraniolの成分は樟脳様の香りを持つ terpinen-4-ol とラベンダー様もハマナスの花の精油には 1.5% しか見られなかった。まの香りを持つ linalool がそれぞれ 19.1 %、15.6 % と非常に多た、ダマスクローズでは、ハマナスの花の精油の最多成分く見られた。また、花・葉の蒸留湯では何れの acetate 化

1−7）

。この

合物も 1％未満の含有率だったのに対し、実の蒸留湯では事から、ハマナスはダマスクローズよりも acetate 体を生lavandulyl acetate（6.6 %）、linalyl acetate（3.4 %）、成しやすいのではないかと考えられる。ハマナスの花の蒸

geranyl acetate（3.2 %）など比較的多く見られた。

留湯から抽出された成分は精油とは異なり citronellol を

１. ３. ４である citronellyl acetate は殆ど見られていない

31.4%、geraniol を 13.4%、nerol を 11.1 ％ 含 有 と 多 く 含 有Table1-1

ハマナスの花の香気成分

HS 法 GC-MS 測 定 に よ る ハ マ ナ ス の 花 の 香 気 成 分 をハマナスの花に含まれる成分

EO：essenntial oil
DW ex. distilled water extract− 32 −

自生ハマナス（Rosa rugosa）の精油成分とその抗菌活性〜コスメトロジーへの有効利用を目的とした基礎的研究〜

Table1- 2

ハマナスの葉に含まれる成分

Table1- 3

ハマナスの実に含まれる成分

tr：trace<0.1%− 33 −

コスメトロジー研究報告 Vol.20, 2012

Table1- 4

ハマナスの花の香気成分

Table1- 4 に示す。ハマナスの花の香気成分は 35 成分が見（References）

られ、中でも 2-phenylethanol（37.6%）と citronellol（37.5%）

1 - 1）N. G. Baydar, H. Baydar, T. Debener, Analysis ofの 2 成分で 75％以上を構成していた。この事から、ハマナ

genetic relationships among Rosa damascena plants

スの花の香りにはこの 2 成分が大きく寄与していると考え

grown in turkev by using AFLP and microsatelliteられる。また、花の蒸留湯抽出物にのみ、0.1％と微量にmakers. J. Biotechnol., 111, 263-267 (2004).

含まれていた rose oxide の割合が合計 7％と高く見られた。

1 - 2）Y. Wensheng, S. Lihua, Z. Dezhi, et al., Study on theChemical Constituents of Essential Oil from Flower of

1．4

総

括

Rosa rugosa Thunb. Var. alba Warb. J. jilin For. Inst.,
2, 7-11 (1992).

ハマナスの花、葉からは蒸留重量に対してそれぞれ
0.0058%、0.062% の精油が得られたが、実からは精油は得

1 - 3）L. Zhaolin, Z. Fanxzhi, C. Nengyu, et. al., Study

られなかった。ハマナスの花の精油は、一般的なダマスク

on Chemical Constituents of Fragrance Volatiles andロ ー ズ オ イ ル に は 殆 ど 見 ら れ な い citronellyl acetate を

Essential Oil of Lanzhou Rose (Rosa rugosa Thunb.).

12.1％と多く含有していた。この結果から、ハマナスの花

Chin. J. Chromatogr., 1, 18-23 (1988).

の精油はダマスクローズとは異なる香気特性を持つ香料と1 - 4）P. Yan-li, Z. Bing-zhen, M. Zong-hui, et al., Study on

しての応用が期待される。また、花の蒸留湯から得られた

Constituents of Volatile Oils from Flos Rosae Rugosa

成分は精油と比べ citronellol（31.4%）等の flower like な香

in Different Areas by Gas Chromatography-Mass

りを有するアルコール成分の含有率が高く見られ、化粧品

Spectrometry. Food and Drug, 2, 2009.

などへの有用性が示された。また、ハマナスの葉はその青

1-5）Y. Ueyama, S. Hashimoto, H. Nii, et al., The essential

臭い香りにもかかわらず、geraniol や linalool といった花

oil from the flowers of Rosa rugosa Thunb. Var. plemaの香り成分を含有していた。ハマナスの実は、樟脳様のRegel. Flavor Fragr. J., 5 (2), 219-222 (1990).

terpinen-4-ol を 19.1%、ラベンダー様の linalool を 15.6% と、

1 - 6）Y. Hashidoko, THE PHYTOCHEMISTRY OF ROSARUGOSA. Phytomedhicine, 43 (3), 535-549 (1996).

香りの大きく異なる 2 つの成分を非常に多く含有している事が分かった。ハマナスの香気成分分析を行い、ハマナス

1 - 7）K. G. D. Babu, B. Singh, V. P. Joshi, et al., Essentialの花の香りは 2-phenylethanol（37.6%）と citronellol（37.5%）

oil composition of Damask rose (Rosa damascena Mill.)の 2 成分でその 7 割以上を構成していることが分かった。

distilled under different pressures and temperatures.
Fravor Fragr. J., 17, 136-140 (2002).

− 34 −

自生ハマナス（Rosa rugosa）の精油成分とその抗菌活性

２．２

２．抗菌活性試験
２．
１

緒〜コスメトロジーへの有効利用を目的とした基礎的研究〜

実

験

試験は日本化学療法学会で推奨する寒天平板希釈法に従言って行い、最小発育阻止濃度（MIC）を測定した。寒天培

現代は地球のグローバル化が進む中、世界の小さな村な

地には Müeller-Hinton Agar 培地（MHA 培地）を使用し、どで発生した感染症もすぐに全世界へと蔓延してしまう可界面活性剤として５%HCO - 50 で濃度調整した被試験薬の能性が高いといえる。また、その世界の中でちょうど日本

イソプレノイド類を加えておく。その培地に植菌する菌類

は歴史上類を見ないほどの少子高齢化を迎えている。そしは OD550 値を測定し、１×106 CFU/ml に濃度を調整してて、最近ニュースでも話題になった多剤耐性菌の出現によ播種する。また「MIC の値が 800 mg/ml 以下で抗菌活性がる院内感染なども報告されるようになってきている。このあると判断する」という日本化学療法学会の判定基準に従ような状況の中で 21 世紀は感染症の時代と言われている。

って、イソプレノイド類の抗菌活性の有無を判断する（Fig.

NDM-1 遺伝子を持った毒性の強い細菌による感染症や、2−1）。

鳥や豚からによる新型インフルエンザや SARS などの新興・グラム陽性菌とグラム陰性菌について感染症や黄色ブドウ球菌感染症、麻疹や結核などの再興感染症などが危惧されている

使用した菌類はグラム陽性菌とグラム陰性菌、真菌を用

2−1）

。

いた。そのグラム陽性菌とグラム陰性菌の違いは細胞壁の植物にはロシア語で「樹木から放散されて周囲の微生物構造にある。グラム陽性菌は細胞膜の外側に分厚いペプチなどを殺すはたらきをもつ物質」を意味するフィトンチッ

ドグリカン層のみを持っている。一方、グラム陰性菌は薄ドと呼ばれる森林浴の効果の元が含まれている。1930 年

いペプチドグリカン層の外側にさらに外膜を有している。

頃、旧ソ連の B. P. トーキン博士は、この植物の不思議な

この構造の違いをグラム染色法によって判断される。グラ力を発見し、フィトン（植物が）チッド（殺す）と名付けた。

ム染色によりペプチドグリカン層と外膜が青紫色になる。

そのフィトンチッドとは植物が発する揮発性のイソプレノ

しかし、アルコールなどで処理すると、グラム陰性菌の染イド類のことである。そのイソプレノイド類には植物自ら色された外膜は容易に壊れ流れ落ち、脱色される。グラムが大きく成長して繁栄するために、他の植物に対する成長陽性菌ではペプチドグリカンの層が厚いため脱色されず色阻害や自己防衛、アリやダニなどの小動物に対する摂食阻害、素が残り、青紫色が保持される。そのような染色の違いか

蛾や蝶などの昆虫に対する忌避・誘引、そしてカビなどにらグラム陽性菌とグラム陰性菌を区別することができる

2 −2）

。

（Fig. 2−2）2−3, 2−4）。

その中で、本研究ではイソプレノイド類の殺菌効果に着目

・真菌類について対する殺菌効果という働きを示すことが知られている

し、院内感染の予防や公衆衛生に利用できる消臭・除菌剤

真菌は微生物の中で、核が核膜に包まれた真核細胞で、の開発を目指している。さまざまな菌類に対してのイソプ

細菌より大きく真核生物中もっとも原始的な生物であり、レノイド類の抗菌活性を明確にすることを目的とし、さらミトコンドリアや小胞体などの細胞器官を持っている。まに天然の植物から抽出した精油や蒸留湯を使用した商品のた細菌と異なり、細胞壁は主に多糖類（グルカン、マンナン、開発を最終的な目標としている。

キチン）で構成され、蛋白質や脂肪が存在する（Fig. 2−3）。

寒天培地＋
イソプレノイド

インキュベート（37℃、18〜20時間）

抗菌活性あり抗菌活性なしFig. 2-1

寒天平板希釈法− 35 −

コスメトロジー研究報告 Vol.20, 2012

・使用した菌株：カンジダ菌（C. albicans）
2−5 〜 2−7）

・Trichophyton sp.

グラム陽性菌（Gram-positive bacteria）：白癬菌・Staphylococcus aureus 209P

・Malassezia furfur：黄色ブドウ球菌（S.aureus）：マラセチアフルフル真菌 2−10）・Staphylococcus aureus 834

・被試験薬：メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（MRSA）
・Listeria monocytogenes 1b-1684

ハマナスの花の蒸留湯のヘキサン抽出物に含まれる：リステリア・モノサイトゲネス（L.monocytogenes）
2−8, 2−9）

geraniol、citronellol やラベンダーの精油成分に含まれてグラム陰性菌（Gram-）

いる linalool、terpinen-4-ol など、本抗菌・抗真菌試験に用・Escherichia coli IFO-3806

いた被試験薬のイソプレノイド類を構造式とともに Fig.
2 - 4 に記載する 2−11）。

：大腸菌（E.coli）
・Salmonella enterica serovar Typhimurium χ3306

・寒天培地：サルモネラ・ネズミチフス菌（S.Typhimurium）
・Pseudomonas aeruginosa ATCC7853

Müeller-Hinton Agar 寒天培地（MHA 培地）は蒸留水に対して培地を 21g/L、寒天 15g/L の割合で加える。加熱攪：緑膿菌（P.eruginosa）

拌して溶解させ、ピペットで試験管に 12 mL/ 本の割合で・Serratia marcescens

分注し、121℃、15 分間オートクレーブにて滅菌する。

：セラチア・マルセッセンス（S.marcescens）

Müeller-Hinton Broth の成分（1L 分）

・Shigella sonnei

Beef Extract Powder
Acid Digest of Casein
Soluble Starch		

：赤痢菌（S.sonnei）
・Proteus mirabilis（pH7.3±0.1）：プロテウス・ミラビリス（P.mirabilis）
真菌（fungus/（複）fungi）
・Candida albicans

Fig. 2 - 2

グラム陽性菌とグラム陰性菌の違い

リソソーム

細胞壁
細胞膜

核

リボソーム

ミ
トコンドリアFig. 2 - 3

2.0g
17.5g
1.5g

真菌類の細胞構造

Fig. 2 - 4− 36 −

自生ハマナス（Rosa rugosa）の精油成分とその抗菌活性

・界面活性剤〜コスメトロジーへの有効利用を目的とした基礎的研究〜

は全く抗菌活性を示さなかった。そして注目すべき点は、被試験薬の親油性であるイソプレノイド類を寒天培地とその farnesol とは逆にグラム陽性菌に対して抗菌活性を示

円 滑 に 混 合 さ せ る た め に、 界 面 活 性 剤 で あ る HCO-50

さなかった linalool と terpinen-4-ol が大腸菌と赤痢菌に対2−12 〜 2−16）。HCO-50 はポリオキシエ

して抗菌活性を示した。一般的にグラム陽性菌よりグラム

チレン硬化ヒマシ油で白色〜微黄色のワセリン様又はろう陰性菌の方が抗菌活性を示しにくいといわれていることか状物質で、わずかに特異なにおいが特徴の界面活性剤であらも、linalool と terpinen-4-ol の結果は興味深い結果と思る。また、皮膚に対する刺激や溶血性がほとんどなく、脂われる。

（NIKKOL）を使用した

溶性物質の水への可溶化剤として優れている。実験に用い
Table 2- 3

るときは蒸留水で 5 % に濃度にした状態の 5%HCO-50 にしてイソプレノイド類と混合させて使用した。
２．
３

結

果

geraniol
geranic acidfarnesol
citronellol
citronellal
linalool
terpinen-4-ol
hinokitiol

・単一試験
Table 2-1

geraniol
geranic acidcitralfarnesol
farnesal
citronellol
linalool
terpinen-4-ol
hinokitiol

グラム陽性菌に対する単一試験の MIC
MIC（mg/ml）
Gram-positive bacteria
S.aureus
MRSA
L.monocytogenes
534
534
378
1900
1900
970
720
720
720
184
184
133
40
40
n.t.
279
321
321
1310
1310
n.t.
1400
1400
n.a.
40
1.25
0.68

水虫の原因で知られる白癬菌に対して、ファルネソール
ソプレノイド類も高い抗菌活性を示した。
・併用試験
Table 2- 4 geraniol と farnesol を併用させ MRSA に対しての抗菌試験る。バラの香りの成分である geraniol は黄色ブドウ球菌とAgainstMRSAMRSA に 対 し て 534 mg/ml で 抗 菌 活 性 を 示 し た。 ま た
farnesol は geraniol よりもグラム陽性菌に対して高い抗菌活性を示した。しかし、ラベンダーに含まれる linalool と
terpinen- 4 - ol はグラム陽性菌に対して抗菌活性を示さなかった。

geraniol
445
geranic acid 1900
citral1800
farnesol−
farnesal−
citronellol−
linalool
656
terpinen-4-ol 676
hinokitiol
34

880
88
70
farnesol（mg/ml） 35
18
8.8

MIC（mg/ml）
Gram-negative bacteria

S.Typhimurium

400
1900
1800
−
n.t.
−
n.t.
n.t.
34

S.marcesens

700
7800
7200
−
n.t.
−
n.t.
793
n.t.

farnesol は 180 mg/ml で抗菌活性を示すのに対し、併用すP.mirabilis S.sonnei

540
1900
720
−
n.t.
−
n.t.
n.t.
n.t.

geraniol（mg/ml） 単一の MIC
geraniol：700 mg/ml
880
88
8.8
farnesol：180 mg/ml
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
−
−

MRSA に 対 し て 単 一 の 場 合 で geraniol は 700 mg/ml、グラム陰性菌に対する単一試験の MIC

E.coli

MIC（mg/ml）
Fungi
C.albicans
Trichophyton sp.
378
88
750
18
−
3.5
340
34
340
180
523
830
467
438
n.t.
17

は 3.5 mg/ml と非常に高い抗菌活性を示し、そのほかのイ

800 mg/ml 以下で抗菌活性があるものは太字で示していTable 2-2

真菌に対する単一試験の MIC

445
1900
900
−
n.t.
471
656
700
25

geraniol は大腸菌、赤痢菌に対して 445mg/ml で抗菌活ると geraniol は 8.8 mg/ml、farnesol は 18 mg/ml で抗菌活性を示した。単一に比べ 10 倍以上高い抗菌活性を示すことがわかった。
Table 2- 5 farnesol と hinokitiol を併用させ Trichophyton sp.
に対しての抗菌試験
Againstfarnesol（mg/ml） 単一の MIC
farnesol：3.5 mg/ml
Trichophyton sp.
8.8
0.88
hinokitiol：17
mg/ml
8.4
＋
＋
hinokitiol（mg/ml）性を示し、他のグラム陰性菌にも抗菌活性があることがわ

6.8
3.4
1.7
0.84

＋
＋
＋
＋

＋
−
−
−

かった。しかし、グラム陽性菌に対して geraniol よりも高Trichophyton sp. に 対 し て 単 一 の 場 合 で farnesol はい抗菌活性を示していた farnesol はグラム陰性菌に対して3.5mg/ml、hinokitiol は 17 mg/ml で抗菌活性を示すのに対− 37 −

コスメトロジー研究報告 Vol.20, 2012

し、併用すると farnesol は 0.88 mg/ml、hinokitiol は 6.8mg/

1.2ml で抗菌活性を示した。これは単一の結果と比較すると

1

飛躍的に高い抗菌活性を示した。

0.8

Ⅲ

citral と farnesol を併用させ MRSA に対しての抗菌

Against
MRSA
880
88
70
farnesol（mg/ml） 35
18
8.8

citral（mg/ml）
850
90
9.0
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋
−
−

単一の MIC
citral：720 mg/ml
farnesol：180 mg/ml

試薬 b

Table 2 - 6
試験

0.6

Ⅱ

0.4

Ⅰ
0.2
0

Fig. 2 - 5

は 180 mg/ml で抗菌活性を示すのに対し、併用すると citral
これは単一の結果と比較すると非常に高い抗菌活性を示している。
Table 2 - 7 citronellol と farnesol を併用させ S. aureus に対しての抗菌試験
citronellol（mg/ml）単一の MIC
citronellol：279 mg/ml
257 214 171 150
farnesol：184 mg/ml
133 ＋ ＋ ＋ ＋
farnesol
111 ＋ ＋ ＋ −（mg/ml）
89 ＋ ＋ − −AgainstS. aureus

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

試薬 a

MRSA に対して単一の場合で citral は 720mg/ml、farnesol
は 9.0 mg/ml、farnesol は 180mg/ml で 抗 菌 活 性 を 示 し た。

0

試薬 a と試薬 b の併用の場合

Table 2 - 8 S.aureus に対して geraniol と farnesol 併用での抗菌試験のアイソボログラム
FIC
FICindexgeraniol farnesol
0.00
1.00
1.00
0.08
0.60
0.69
0.25
0.48
0.73
0.42
0.24
0.66
1.00
0.00
1.00

S.aureus に対して単一の場合で citronellol は 279mg/ml、
farnesol は 184 mg/ml で抗菌活性を示すのに対し、併用すS.aureus に対して geraniol と farnesol 併用での抗菌試験

る と citronellol は 171mg/ml、farnesol は 111mg/ml で 抗 菌

で、FICindex が 0.66 〜 0.73 で 0.5 以上であった。相乗効果活性を示した。これは単一の結果と比較すると高い抗菌活は確認できなかったものの、相乗効果に近い相加効果が働性を示している。

いていることが今回初めて判明した。

・相加・相乗効果の検討

Table 2 - 9 MRSA に対して geraniol と farnesol 併用での抗菌試験のアイソボログラム

単一時より併用させた方が抗菌活性が高まることが明らかになったが、その併用時に働いている効果が相加効果であるのか、相乗効果であるのかを明らかにするためにアイ
ソボログラム（Isobologram）を用いて実験を試みた。
アイソボログラムについて
薬物の相乗作用について検討するためによく用いられる

FIC
FICindex
GOH FOH
0.00 1.00
1.00
0.17 0.60
0.77
0.25 0.48
0.73
0.42 0.36
0.78
0.46 0.24
0.70
1.00 0.00
1.00

方法であり、ここでは併用発育阻止濃度指数（Fractional
Inhibitory Concentration index：FIC index）を測定する。
FICindex が 0.5 以下（Fig. 2−5 の Ⅰ の エリア）では相乗効果を示し、FICindex が 0.5 〜１（Fig. 2−5 の Ⅱ のエリア）
MRSA に対して geraniol と farnesol 併用での抗菌試験で、では相加作用を、FICindex が１以上（Fig. 2−5 の Ⅲ のエリア）では拮抗作用を示す。
FICindex=MICa（併用） MICb（併用）＋MICa（単一） MICb（単一）FICindex が 0.70 〜 0.78 で 0.5 以上であった。相乗効果は確認できなかったものの、相乗効果に近い相加効果が働いていることが判明した。

− 38 −

自生ハマナス（Rosa rugosa）の精油成分とその抗菌活性

Table 2-10

〜コスメトロジーへの有効利用を目的とした基礎的研究〜

ハマナス蒸留湯 MHA 培地に geraniol を添加した結果

geraniol（mg/ml）
Gram-positive bacteria（+Floral water of rosa rugosa） S. aureus
MRSA
467
＋
＋
445
＋
＋
423
＋
＋
400
−
−
378
−
−
Each of MIC（mg/ml）
534
534
Table 2-11

Gram-negative bacteria
E. coli
S. sonnei
＋
＋
＋
＋
＋
＋
−
−
−
−
445
445

ハマナス蒸留湯 MHA 培地に farnasol を添加した結果

farnesol（mg/ml）
Gram-positive bacteria（+Floral water of rosa rugosa） S. aureus
MRSA
155
＋
＋
133
＋
＋
111
＋
＋
89
−
−
67
−
−
Each of MIC（mg/ml）
184184

抗菌活性のあるイソプレノイド類を併用すると抗菌効果が高まることから、蒸留湯を使用した培地にイソプレノイ

Gram-negative bacteria
E. coli
S. sonnei
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−

（References）
2-1）Po-Ren Hsueh J Formos Med Assoc 109 (10) (2010)
685-687.

ドを添加した抗菌試験を行った。
ハ マ ナ ス 蒸 留 湯 MHA 培 地 に geraniol を 添 加 す る と、

2-2）S. Limsuwan, E. N. Trip, T. R. H. M. Kouwen, et al.,Phytomedicine 16 (2009) 645-651.

Table 2−10 のように geraniol 単一 MIC の値よりグラム陽性 菌 の S.aureus と MRSA に 対 し て は 534 mg/ml か ら 423

2-3）東匡伸、小熊惠二編 『シンプル微生物学（改訂第３版）』 南江堂

mg/ml までに MIC が減少し、抗菌活性が高まった。また
グラム陰性菌の E. coli と S. sonnei に対しては 445mg/ml か(2000)

2-4）C. M. Mann, S. D. Cox, J. L. Markham, Lett Appl
Microbiol 30 (2000) 294-297.

ら 423mg/ml と抗菌活性のわずかであるが高められた。
ハマナス蒸留湯MHA培地にfarnesolを添加すると、Table2-5）I. Kubo, K. Fujita, K. Nihei, Bioorg. Med. Chem.,11(2003) 4255-4262.

2−11 のように farnesol 単一 MIC の値よりグラム陽性菌のS. aureus と MRSA に対しては 184 mg/ml から 111 mg/ml ま2-6）A. Tanitame, Y. Oyamada, K. Ofuji, et al., Bioorg.
Med. Chem., 12 (2004) 5515-5524.

でに MIC が減少し、抗菌活性が高まった。

2-7 ）Stuart B. Levy, Adv. Drug Deliv. Rev., 57 (2005) 1446-1450.
２．
４

考

察

2-8）E. John Threlfall, FEMS Microbiol. Rev., 26 (2002) 141-148.

ハマナスの花に含まれる geraniol や farnesol、citronellol2-9）P. L. Winokur, D. L. Vonsterin, L. J. Hoffman, et al.,などのイソプレノイド類には抗菌活性があることが明らか

Antimicrob. Agents Chemother., Vol. 45 No. 10 (2001)になり、その作用機序についてはわかってはいないが併用

2716-2722.

して用いるとその抗菌作用は高まる。そして geraniol と2-10）V. Nalamothu, A. L. O’
Leary, S. Kandavilli,et al.,MD Clinics in Dermatology 27 (2009) S41-S43.

farnesol を併用し、S.aureus と MRSA に対しては FICindexの値が 0.66 〜 0.78 と相乗効果に近い相加効果が働いている

2-11）弘前大学と考えられる。そして、その効果で geraniol、farnesol の『青森県産植物（ハマナス）の精油・香気成分について』

どちらかの試薬に対しての濃度依存などはあまりしていな

2-12）「Nikko Chemicals」サイト内

卒業論文

後藤嘉文

html >（2010/03/11 アクセス）

グラム陽性菌とグラム陰性菌に対して抗菌活性は全くない

2-13）Harihara M. Mehendale: Int. J. Toxicology, 16 (3),269 (1964).

ソプレノイド類の抗菌作用が高まることから、ハマナス蒸
留湯には抗菌作用を補助する作用があると考えられる。

理工学部< http://www.nikkol.co.jp/jp/nikkol/nikkol_hco-50.

いと考えられる。さらに、蒸留湯を使用した培地だけでは、にも関わらず、イソプレノイド類を添加することでそのイ

21 年度

2-14）小西宏明：信州医誌 , 25 (3), 246 (1977).
2-15）美間博之ほか：薬学雑誌 , 77 (1), 1201 (1957).
2-16）鈴木守ほか：表面 , 6 (6), 392 (1968).

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