紫外線ダメージ抑制作用を有する熱帯植物の探索と作用メカニズムの解析
信州大学大学院農学研究科

水品

善之

Many naturally occurring agents are believed to protect against ultraviolet (UV)-induced skin damage. I established an
in vitro assay to measure cellular DNA polymerase (Pol) activity in cultured normal human epidermal keratinocytes (NHEK)
by modifying Pol inhibitor activity, and screened 10 tropical plant extracts for Pol activity enhancement. I found that the fruitof Rose Myrtle (Rhodomyrtus tomentosa) was the strongest enhancer of Pol activity in UVB-irradiated NHEK. I next sought
to examine the effect of the Rose Myrtle extract active component, piceatannol, on UVB-induced damage and inflammationin cultured NHEK. The protective effect of rose myrtle extract and the two key components, piceatannol and piceatannol‑4'‑O‑β‑D‑glucopyranoside, on UVB‑induced damage and inflammation in cultured NHEK was investigated. The 80% ethanol
extract from rose myrtle fruit with piceatannol exhibited protection of UVB‑induced cytotoxicity in NHEK; however, piceatannol‑4'‑O‑β‑D‑glucopyranoside exhibited no protection, as determined by a 3‑(4,5‑dimethylthiazol‑2‑yl)‑2,5‑diphenyltetrazol
ium bromide assay. This extract and piceatannol reduced the production of UVB‑induced cyclobutane pyrimidine dimers andenhanced the cellular enzyme activity of the DNA polymerases in UVB‑irradiated NHEK, suggesting that UVB‑stimulated
DNA damage was repaired by the polymerases. In addition, the secretion of prostaglandin E2, which is an inflammatory
mediator, was decreased. These results indicated that rose myrtle fruit extract and its key constituent, piceatannol, arepotential photoprotective candidates for UV‑induced skin damage.

1．緒

Pol は、ヒトをはじめとする高等真核生物ではゲノム解言析などによって、数多くの分子種が近年に次々と発見されUVB（290 - 320 nm）は紫外線の中でも皮膚に対する影て、2015 年現在では、15 種類の Pol 分子種が報告されて響が大きいとされており、直接 DNA に作用して損傷を引

4-7）いる（Table 1）。Polの機能は、主にDNAの複製（コピー）、

き起こすとともに、他の光吸収物質を介して活性酸素種を

損傷 DNA の修復、DNA の組換えの 3 つであり、各 Pol 分発生させることで、紅斑や色素沈着などさまざまな影響を子種がこれらの機能を分業していると考えられている 4, 5）。

及ぼすことが知られている。また、紫外線の長期暴露は光ミトコンドリアの DNA 合成（複製と修復）は Polγ が担当し、老化を引き起こし、シミ、シワ、たるみ、乾燥の原因とな

残りの 14 種類の Pol は細胞核の DNA 合成を行う。15 種類

1）の Pol 分子種は、このような機能の類似性やアミノ酸配列

このような紫外線の皮膚に対する有害作用は一般的にの相同性からＡ、Ｂ、Ｘ、Ｙの 4 つのファミリーに分類さ広く認識されており、サンスクリーン剤（すなわち物理的れている 4, 5, 8）。さらに、in vitroにおける酵素反応は塩（KCl）遮蔽剤）の使用が普及している。しかし、この方法だけでによって阻害されるPol分子種（＝DNA複製型のPolα、δ、ε）

は紫外線による損傷を完全に防ぐことはできないと考えらと、塩の存在で活性に影響を受けないか、むしろ活性化す

れており、紫外線による DNA 損傷などは最少紅斑量の 10

る Pol 分子種（上記の 3 つ以外）に分かれる。

る 。

分の 1 でも起こること

2）やサンスクリーン剤を使用して紅

これまでに私は、各 Pol 分子種の活性がある精製酵素を斑が現れていなくても、免疫抑制やマトリックスメタロプ

準備し、in vitro 系の Pol 阻害活性測定法を開発して 9-11）特ロテアーゼの活性化が起こることが示されている 3）。そこ許を取得した 12）。この測定法を応用して、Pol 精製酵素ので、紫外線を物理的に遮蔽する方法だけでなく、皮膚本来代わりに皮膚上皮系の角化細胞（ケラチノサイト）
を用いて、がもつ防御能力を上げる防御法を開発できないかと考えた。

紫外線を照射した細胞の抽出液を調製し、細胞内の Pol 活

生体（細胞）に内在する損傷 DNA を修復する酵素群のひと性を測定する技術を立ち上げた。そして、UVB 照射によつである DNA 修復型 DNA 合成酵素（DNA ポリメラーゼ、ってヒト皮膚角化細胞内の Pol 活性が上昇することを確認

Pol と略す）に注目した。

した。さらに、この細胞内 Pol 活性を上昇させる天然物があるか探索（スクリーニング）した。その際の探索源は熱帯

Screening for suppression of inflammatory
responses against UVB-induced DNA
damage in skin cells from natural plant
extract, and analysis of its suppressive
mechanism
Yoshiyuki Mizushina
Graduate School of Agriculture, Shinshu
University

植物抽出物とした。なぜならば、熱帯地方は日々強い紫外線に暴露されており、そこに生息する植物は常に DNA 損
傷が起こっている。熱帯植物には、内在性の損傷 DNA 修
復系、すなわち修復型 Pol を活性化させる物質が存在すると考えられるからである。
本研究では、熱帯植物抽出物から正常ヒト新生児表皮角− 141 −

コスメトロジー研究報告 Vol.24, 2016

化細胞
（Normal Human Epidermal Keratinocytes, NHEK）

UVB（0 ～150 mJ/cm2）を照射して、KGM に戻して 2～24

内の DNA 修復型 Pol を活性化する成分の単離・精製、化時間培養した。

学構造の決定、紫外線ダメージ抑制メカニズムの解析を実

2. 2. NHEK 内の Pol 活性測定

施した。

２．実

培養した NHEK をスクレイパーで回収して、プロテ験ア ー ゼ 阻 害 剤 を 含 む 細 胞 溶 解 緩 衝 液（50 mM Tris–HCl

2. 1. NHEKの細胞培養（pH 7.5），1 mM EDTA, 5 mM 2-mercaptoethanol, 1 5 %NHEK と増殖添加剤を含む Epilife-KG2 培地（KGM）は2

glycerol）に溶解させた。遠心上清を回収してタンパク定

クラボウから購入した。NHEK を 75cm シャーレに 3×量したものを細胞抽出液として Pol 活性測定に使用した。

105 個 /5 mL KGM を播種して、37 ℃、5 ％ CO2 条件下でPol 反応には、基質として鋳型 DNA とデオキシリボヌ

75% コンフルエントになるまで培養した。MDSO に溶かクレオチド（dNTP）の２つを必要とするが、in vitro 系のした被験試料を最終 0.05 % になるように添加後、24 時間

本測定における Pol の基質は、鋳型 DNA として合成 DNA培養した（Fig. 1）。培地を Hank’s 緩衝液に交換してからの poly（dA）/oligo（dT）18、 デ オ キ シ リ ボ ヌ ク レ オ チ ド とTable 1

Human Pol species− 142 −

紫外線ダメージ抑制作用を有する熱帯植物の探索と作用メカニズムの解析

して放射性同位元素のトリチウムで標識した［3H］-dTTP
3

トになるまで培養後、KGM で溶解した被験試料を各シャを用いた（Fig. 1）。そして、Pol によって重合された［ H］

ーレに添加し 24 時間培養した。培地を Hank’ s 液へ交換し、-dTTP の放射活性を液体シンチレーションカウンターで50mJ/cm2 の UVB を照射した。KGM で溶解した被験試料

定量することで Pol 活性とした 10, 11）。

に交換し、4 時間培養後、細胞をセルスクレーパーにより回収した。

2. 3. 細胞死抑制作用の評価

回収した細胞より QIAamp Blood Kit（QIAGEN）を用

NHEK を 48 穴プレートに播種し、サブコンフルエント

いて DNA の抽出、精製後、同濃度になるよう希釈した

2になるまで培養後、培地を Hank’s 液に交換し、50mJ/cm

DNA 中の CPD 量を抗 CPD モノクローナル抗体（コスモバの UVB を照射した。KGM で溶解した被験試料（溶解のたイオ）を用いた ELISA 法により定量した。

め終濃度 0.5% DMSO を含む、以降の実験についても同様に含む）に交換し、24 時間培養後の生存率を MTT アッセ

2. 5. プロスタグランジン E2（PGE2）の評価

イにより測定し、UVB 非照射を 100%、UVB 照射被験試

NHEK を 48 穴プレートに播種し、サブコンフルエン

料無添加を 0% となるように細胞死抑制率を計算した。

ト に な る ま で 培 養 し た の ち、KGM-hyd に 交 換 し、 さら に 1 日 培 養 し た。 培 地 を Hank’ s 液 へ 交 換 し、50 mJ/

2. 4. DNA 中のシクロブタン型ピリミジンダイマー
（CPD）
の評価
NHEK を 60 mm シャーレに播種し、サブコンフルエン

Fig. 1cm2 の UVB を照射した後、KGM-hyd で溶解した被験試料に交換し、24 時間培養した。培養上清中の PGE2 量を
PGE2EIAKit（Cavman Chemical）を用いて定量した。

In vitro cellular Pol activity assay using cell extract from UVB-exposed NHEK

− 143 −

コスメトロジー研究報告 Vol.24, 2016

2. 6. 統計学的検定

出物を用いた。

実験結果は平均値 ± 標準誤差により示した。また、統計学的有意差検定には、Student’s t-test を用い、p< 0.05の場合を有意差ありと判断した。

３．結

3. 3. テンニンカ抽出物とピセアタンノールの NHEK
内 Pol 活性化
Fig. 1 に示した UVB 照射 NHEK 内 Pol 活性測定系を用果

いて、テンニンカ抽出物とピセアタンノールのPol活性化を調

3. 1. NHEK 内の Pol 活性測定の条件検討査した。測定系の条件は、UVB（50 mJ/cm2）照射し 4 時

NHEK 内の Pol 活性測定系を立ち上げるにあたり、UVB
照射量と照射後の培養時間の検討を行った。NHEK の細胞抽出液には塩が含まれていない。塩が無い細胞抽出液と120 mM KCl を添加した場合の Pol 活性を比較した。前者は DNA 複製型の Polα、δ、ε を含む全ての Pol 分子種（DNA
複製＋ DNA 修復）の活性値であり、後者は Polα、δ、ε を除いた DNA 修復型 Pol 分子種のみの活性値であると考えられる（Table 1）。
まず UVB 照射後の培養時間を 1 時間に固定して、UVB
照射量を 0 ～ 150 mJ/cm2 の範囲で振った。UVB 照射量が12.5 mJ/cm2 と 50 mJ/cm2 では Pol 活性の増加は見られなかったが、50 mJ/cm2 以上では Pol 活性化が見られた（Fig.
2A）。この UVB 照射による Pol 活性化は、120 mM KCl 有
りの方が 1.2 倍以上高くなった。
次 に UVB 照 射 量 を 100 mJ/cm2 に 固 定 し て、UVB 照
射後の培養時間を 2 ～ 24 時間の範囲で振った。その結果、4 時間培養で最も高い Pol 活性の増加を見出した（Fig. 2B）。
Fig. 2A では UVB 照射量と Pol 活性化は相関しているよ
うに見えるが、150 mJ/cm2 照射では細胞死（アポトーシ
ス）を誘発するため不適であると考えた。そこで、2 番目に Pol 活性化させた 50 mJ/cm2 が至適であると考察した。
Fig. 2B から UVB 照射後は 4 時間培養が至適であることが分かった。これらの条件で Pol 活性化する熱帯植物の探索を行った。

3. 2. NHEK 内の Polを活性する熱帯植物の探索と活性成分の精製と同定
10 種類の熱帯植物果実の抽出物（凍結乾燥後の 80 ％エ
タノール抽出物）は、丸善製薬㈱から提供していただいた。
UVB 照射した NHEK の Pol を最も活性化したのはテンニンカ（Rhodomyrtus tomentosa）であった。そこで、テンニ
ンカ果実の乾燥物 100 g を 1 L の 80 ％エタノールで大量に抽出した。得られた抽出物（6.6 g）を疎水カラムクロマトグ
ラフィー（Diaion HP-20）、シリカゲルカラムクロマトグ
ラフィー、および HPLC にかけることにより、Pol 活性化成分（1.14 mg）の完全精製に成功した。そして、NMR および MS で構造解析した結果、既知物質のピセアタンノール（Fig. 3）であった。
以降の実験は、市販試薬のピセアタンノールとピセアタ
ンノールを含有しているテンニンカの 80 ％エタノール抽

Fig. 2 Examination of cellular Pol activity in UVB-exposed
NHEK.（A）Cellular Pol activity was dependent upon thelevel of UVB irradiation（0–150 mJ/cm 2）．NHEK were
cultured for 1 h after UVB irradiation.（B）Pol activity isdependent upon incubation time（2–24 h）above 100 mJ/
cm2 UVB-exposed NHEK. Gray bars and black bars are all
human Pol species and DNA repair-related Pol species,
respectively（the standard reaction conditions without orwith 120 mM KCl, respectively）．The Pol activity of vehicle
control without UVB irradiation was taken as 100%. Alldata are expressed as mean ± SEM（n = 3）．*P < 0.05
compared with the UVB（−）vehicle control.

− 144 −

紫外線ダメージ抑制作用を有する熱帯植物の探索と作用メカニズムの解析

Fig. 3 Structure of purified compound1（piceatannol）from Rose Myrtle fruit（Rhodomyrtus tomentosa）

間培養した（Fig. 2）。塩（120 mM KCl）無しの全 Pol 分子種の活性を Fig. 4A、塩有りの DNA 修復型 Pol 分子種の活性を Fig. 4B に示す。Fig. 4A, B は同じ傾向であり、テンニ
ンカ抽出物（10 μg/mL）、ピセアタンノール（ 2 μg/mL）ともに Pol 活性を 1.1 ～ 1.2 倍上昇させた。UVB 照射と併用す
ると 1.6 ～ 2 倍近くまで Pol 活性が増加した。この増加は
UVB 照射と被験試料の添加の相加効果ではなく相乗効果であった。ピセアタンノールはテンニンカ抽出物の 5 分の1 の添加濃度であったが Pol 活性化が大きかった。ピセア
タンノールの配糖体である piceatannol‑4'‑O‑β‑D‑glucopyra
nosideにはPol活性化作用は見られなかった（データ示さず）。

3. 4. テンニンカ抽出物とピセアタンノールの UVB 照
射 NHEKの細胞毒性
50 mJ/cm2 の UVB 照射による NHEK への影響を調査した。NHEK は、UVB 照射によって細胞生存率が若干低下した。しかし、アポトーシスは誘導していなかった（データ示さず）。そこへテンニンカ抽出物とピセアタンノールを添加すると濃度依存的に細胞生存率が高くなった（Fig. 5）。

3. 5. テンニンカ抽出物とピセアタンノールの UVB 照
射 NHEKの DNA 修復能UVB による直接的な DNA 損傷に対する作用を検討する
ために、主要な DNA 損傷である CPD に着目し、NHEK を
用いて UVB によって生成する CPD の低下作用を検討した。
その結果、Fig. 6 のようにピセアタンノールとテンニンカ
抽出物には UVB 照射 4 時間後における CPD 量の低下作用が観察された。その強さはピセアタンノールの方が顕著であった。

Fig. 4 Effect of Rose Myrtle extract and piceatannol on
NHEK Pol activity with or without UVB irradiation.（A）Pol
activity of all human Pol species using standard reaction
conditions without KCl.（B）Pol activity of DNA repairrelated Pol species using standard reaction conditions with
120 mM KCl. NHEK were incubated for 24 h with orwithout each compound（10μg/mL Rose Myrtle extract
and 2μg/mL piceatannol）before UVB（5 0 mJ/cm 2 ）irradiation. Pol activity of vehicle control without UVB
irradiation was taken as 100%. All data are expressed asmean ± SEM（n = 3）．**P < 0.01 compared with the UVB（−）vehicle control.

3. 6. テンニンカ抽出物とピセアタンノールの UVB 照
射 NHEKのプロスタグランジン E2（PGE2）産生へ
の影響

４．考

察

紫外線による皮膚の炎症に対する作用検討のため、炎症

テンニンカ果実エキスの NHEK に対する UVB 誘導細胞性メディエーターとして PGE2 に着目し、NHEK を用いて死抑制作用について、エキスより単離した成分について同UVB 照射による PGE2 産生に対するテンニンカ抽出物およ様の作用が認められるか試験したところ、ピセアタンノー

びピセアタンノールの効果を検討した。その結果、Fig. 7

ルに抑制作用が確認されたことから活性成分のうちの一のように抑制作用を示した。その効果は、1.0 μg/mL のピつであると考えられる。テンニンカ抽出物 50 μg/mL 中にセアタンノールで顕著であった。

含まれるピセアタンノールの濃度は、その含量から約 0.1− 145 −

コスメトロジー研究報告 Vol.24, 2016

Fig. 5 Effect of Rose Myrtle extract and piceatannol on cell
viability of UVB-exposed NHEK. NHEK were irradiatedwith UVB（50 mJ/cm2），and treated with each compoundat the indicated concentrations. MTT assays were used toevaluate living cells 24 h after treatment. The cell viabilityof vehicle control with or without UVB irradiation was taken
as 0% or 100%, respectively. All data are expressed asmean ± SEM（n=6）．*P < 0.05 and **P < 0.01 comparedwith the UVB（−）vehicle control.

Fig. 6 Effect of Rose Myrtle extract and piceatannol on
UVB-induced CPD production in NHEK. NHEK werei n c u b a te d wit h e a c h c o m p o u n d a t t h e i n d ic a te dconcentrations before a nd af ter U V B（5 0 m J/cm 2 ）irradiation. CPD was quantitatively evaluated by DNAELISA. CPD production by vehicle control with or without
UVB irradiation was taken as 100% or 0%, respectively.
All data are expressed as mean ± SEM（n = 6）．*P < 0.05
and **P < 0.01 compared with the UVB（+）vehicle
control.

Fig. 7. Effect of Rose Myrtle extract and piceatannol on UVBinduced PGE 2 production in NHEK. NHEK were incubatedwith each compound at the indicated concentrations after
U V B（5 0 mJ/cm 2 ）irradiation. Supernatant PG E 2 wasquantitatively evaluated by ELISA. PGE 2 production by
vehicle control with or without UVB irradiation was taken as
100% or 0%, respectively. All data are expressed as mean ±SEM（n = 5）．**P < 0.01 compared with the UVB（+）vehicle
control.

− 146 −

紫外線ダメージ抑制作用を有する熱帯植物の探索と作用メカニズムの解析

μg/mL と考えられる。実際にピセアタンノールについて

５．総

0.1μg/mL では試験していないが、その上下の濃度におけ括る試験結果より、ピセアタンノールのみがテンニンカ抽出

本研究では、紫外線防御を単なるサンスクリーン剤で物の活性を担っているとは考えられないが、主要な成分で行うという従来の考えだけでなく、DNA 修復型 Pol 活性はあると考えられる。テンニンカ抽出物中には、その他の化という生物化学的なアプローチによって防御する「non-単離できていない成分が含まれると考えられ、ピセアタン

sunscreen photoprotection」という新しい観点を取り入れ、ノールをはじめ、多種の活性成分が相乗 • 相加効果を発揮

植物エキスの紫外線による肌への影響を抑える作用と肌本し、成分単独では得られない高い作用を示すであろう。

来が持つ防御作用を高める作用について、その有効成分の

我々の皮膚は常に外界からの物理的刺激、化学的刺激、探索とともに検討した。

温度変化、そして紫外線曝露など様々な刺激に晒されてい熱帯植物のうち、テンニンカ果実の 80 ％エタノール抽る。その一つである紫外線曝露はシミ・シワ・たるみとい出物に含まれるピセアタンノールは、ヒト表皮角化細胞にった皮膚の形態的変化（光老化）、炎症及び皮膚ダメージのおいて Pol 活性化と UVB ダメージ抑制作用を有し、その長期蓄積による皮膚がん前駆症を誘因し放置すると皮膚が作用メカニズムとして CPD の減少作用といった DNA ダメ

んなどの病気を引き起こす原因となる。細胞は環境要

ージ抑制作用が示唆された。また、PGE2 のような炎症要因による刺激で生じた DNA 損傷の増大に対して DNA 修

因を抑制する作用も認められた。これより、テンニンカ抽復を行うが、DNA 修復が追いつかなくなった細胞はがん

出物やピセアタンノールの CPD のような DNA 損傷の抑制化するかアポトーシス（プログラム細胞死）により除去されに基づいた抗炎症作用のメカニズムの可能性について考察る。光老化や発がんの直接的原因は、紫外線によって引きできた（Fig. 8）。

13）

起こされる CPD の生成による DNA 損傷と活性酸素種によ以上の結果から、テンニンカ抽出物は、その成分である

る DNA 塩基の酸化損傷（8-oxo-dG）であり、ともに Pol（特ピセアタンノールの働きにより、DNA 修復型 Pol 活性化に DNA 修復型 Pol 分子種）の塩基の取り込みエラーによりに伴う DNA 損傷作用というアプロ一チにより、紫外線に突然変異を誘発する原因となり得る。従って、光老化や発よる細胞へのダメージを抑制することで紅斑のような短期がんを未然に防ぐためには、これらの DNA 損傷の発生を的な症状や光老化のような長期的な症状を抑制する植物素抑えること、すなわち DNA 損傷修復作用を促進させるこ材であると考えられ、日常的に使用する基礎化粧品への応とが非常に有効であると考える。皮膚細胞内の DNA 修復用が期待される。さらに本研究の成果として、紫外線防御型 Pol 活性を増大（活性化）させることができれば紫外線暴を単なるサンスクリーン（紫外線遮蔽）剤で対処するという露による DNA 損傷は直ちに修復されて正常な状態を維持

従来の概念とは異なった皮膚細胞本来が持つ紫外線防御能できる。

力を高める『ノン・サンスクリーン剤』の開発が期待できる。

色素性乾皮症（XP）は重篤な光過敏症と Polη 欠損に伴う DNA 修復異常に関連した発がんを特徴とする常染色体謝辞

劣勢遺伝疾患である。XP はさまざまな DNA 修復に関連

本研究を実施するにあたり、研究助成を賜りました公益した遺伝子の変異により 8 つのグループに分けられる（A

財団法人コスメトロジー研究振興財団に心から感謝を申し～ G とバリアント体）。この XP 原因遺伝子である Polη は、上げます。特に、本助成期間中に大学を異動しましたが、ヌクレオチド除去修復（NER）遺伝子に属しているためスムーズな手続きに携わってくださいました財団事務局の（Table 1）、XP 患者の傷害を受けた細胞は CPD を取り除

川端徹様に深謝いたします。

くことができず、高頻度な発がんに繋がる

14）。また、XP

患者では紫外線照射により、光過敏反応として重篤な炎症を起こすことは有名である。これらのことから、XP 患者

本研究の一部は、すでに次の学術論文として公表している。

では CPD のような DNA 損傷の修復ができないことによっ

Shiratake S, Nakahara T, Iwahashi H, Onodera T,て、炎症が悪化することを示している。つまり CPD が炎*Mizushina Y, : Rose myrtle（Rhodomyrtus tomentosa）症の引き金である可能性が考えられる。また、XPA 患者

extract and its component, piceatannol, enhanceにおいて UV 照射後の重篤な炎症部位で高濃度の PGE2 がthe activity of DNA polymerase and suppress the15）

inflammatory response elicited by UVB-induced DNA

観察されるという報告から、CPD は PGE2 産生を誘導する可能性が示唆された。よって CPD の減少は抗炎症につdamage in skin cells, Mol. Med. Rep., 12, 5857-5864, 2015.

ながると考えられ、今回の試験におけるテンニンカ抽出物（*Corresponding author）とピセアタンノールの PGE2 産生抑制作用のメカニズムの一序として、CPD 量の減少が考えられる。

− 147 −

コスメトロジー研究報告 Vol.24, 2016

Fig. 8 The relationship between enhanced DNA repair-related Pol
activity and suppression of inflammation in UVB-irradiated skin cells
treated with plant extract.

（引用文献）

microorganisms, J. Antibiot. (Tokyo), 49, 491-492, 1996.

1） 武田克之 , 原田昭太郎 , 安藤正典 , 監修 , : 化粧品の有10）Mizushina Y, Tanaka N, Yagi H, Kurosawa T, Onoue

用性評価技術の進歩と将来展望 , 薬事日報社 , 125-143,

M, Seto H, Horie T, Aoyagi N, Yamaoka M, Matsukage

2001.

A, Yoshida S, Sakaguchi K, : Fatty acids selectively2） 栗原浩司 , : フレグランスジャーナル , 9, 83-88 2002.

inhibit eukaryotic DNA polymerase activities in vitro,

3） Matsui MS, : 第 9 回 光 老 化 研 究 会 講 演 要 旨 集 , 34,

Biochim. Biophys. Acta, 1308, 256-262, 1996.
11）Mizushina Y, Yoshida S, Matsukage A, Sakaguchi

2008.
4） Hubscher U, Maga G, Spadari S, : Eukaryotic DNA

K, : The inhibitory action of fatty acids on DNA

polymerases, Annu. Rev. Biochem., 71, 133-163, 2002.

polymerase beta, Biochim. Biophys. Acta, 1 3 3 6, 5 0 9521, 1997.

5） Bebenek K, Kunkel TA, In: DNA Repair andReplication Advances in Protein Chem., (Yang W, eds),

12）特許 第 3821867 号 , 発明の名称：DNA ポリメラーゼ
活性阻害剤 , 出願日：1995 年 7 月 4 日 , 登録日：2006 年

Elsevier, San Diego, 69, 137-165, 2004.

6 月 30 日 , 特許権者：坂口謙吾 , 東洋水産㈱ , 発明者：

6） Takata K, Shimizu T, Iwai S, Wood RD, : Human
DNA polymerase N (POLN) is a low fidelity enzyme
capable of error-free bypass of 5S-thymine glycol, J.

田中伸和 , 北村晃利 , 坂口謙吾 , 水品善之 , 松原行雄
13）Scharffetter-Kochanek K, Wlaschek M, BrenneisenP, Schauen M, Blaudschun R, Wenk J, : UV-induced

Biol. Chem., 281, 23445-23455, 2006.
7） Yamtich J, Sweasy JB, : DNA polymerase family X:
function, structure, and cellular roles, Biochim. Biophys.

reactive oxygen species in photocarcinogenesis andphotoaging, Biol. Chem., 378, 1247-1257, 1997.
14）Robbins JH, Kraemer KH, Lutzner MA, Festoff BW,

Acta, 1804, 1136-1150, 2010.
8） Friedberg EC, Feaver WJ, Gerlach VL, : The many

Coon HG, : Xeroderma pigmentosum. An inherited

faces of DNA polymerases: strategies for mutagenesis

diseases with sun sensitivity, multiple cutaneousand for mutational avoidance, Proc. Natl. Acad. Sci.

neoplasms, and abnormal DNA repair, Ann. Intern.
Med., 80, 221-248, 1974.

USA, 97, 5681-3, 2000.
9） Mizushina Y, Yagi H, Tanaka N, Kurosawa T,15）Kuwamoto K, Miyauchi-Hashimoto H, Tanaka

Seto H, Katsumi K, Onoue M, Ishida H, Iseki A, Nara

K, Eguchi N, Inui T, Urade Y, Horio T, : Possible

T, Morohashi K, Horie T, Onomura Y, Narusawa

involvement of enhanced prostaglandin E2 production

M, Aoyagi N, Takami K, Yamaoka M, Inoue Y,

in the photosensitivity in xeroderma pigmentosum

Matsukage A, Yoshida S, Sakaguchi K, : Screening ofgroup A model mice, J. Invest. Dermatol., 114, 241-246,

inhibitor of eukaryotic DNA polymerases produced by

2000.

− 148 −