細胞生存促進効果を有する糖内包化リポソームのアンチエージング化粧品への応用
千里金蘭大学生活科学部食物栄養学科

日沼

州司

In this study, we examined the effect of maltose-encapsulated liposomes (ML) on cell survival of mouse fibroblast cellline L 929 sub-clone (L 929 -S) in culture with glucose-deficient media. Under our experimental conditions, almost all ofcells died within two days in culture without the addition of glucose, when cell viability was determined by trypan blue
dye exclusion test. Even in the presence of 50 µg/ml glucose or empty liposomes, almost all of cells died within a similar
range of time. Intriguingly, the combination of 50 µg/ml glucose and empty liposomes (G + L) prolonged the cell survival
one day or so, suggesting that low concentration of glucose and liposomes synergistically act on cells to promote thesurvival. However, ML promoted the cell survival evidently more than G + L. In assays using WST- 8 , ML showed greater
formazan formation in cells than the others including G + L. Therefore, the action mechanism of ML on the cell survival
was considered to differ from that of G + L. To elucidate the mechanism of ML for promoting the cell survival, we examinedby WST- 8 assays whether ML separated by a dialysis membrane (ML/cup) could influence on the cell survival. ML/cup
promoted the survival than maltose by the same treatment, suggesting that maltose consistently released from ML promoted
the cell survival. However, the cell survival-promoting activity of ML/cup was apparently less than that of ML administereddirectly to cells, suggesting that ML acted on cells by not only the sustained release of maltose but also direct incorporationof liposomes into cells. Consequently, our results suggest that saccharide-encapsulated liposomes would be applicable fordeveloping one of ingredients useful for cosmetics to activate skin cells whose metabolism lowered by such as aging.

1. 緒

取り込まれ、代謝されて ATP の産生などに働くことが知言られている。糖をリポソームに内包化して、細胞に投与

リポソームは、細胞膜や生体膜の構成成分であるリン脂

し、通常の糖の培地への添加と比較すれば、糖の投与形態

質を利用して人工的に作成するナノメーターサイズの粒子の違いによる細胞への影響の違いを明らかにすることがでである。リン脂質は、両親媒性分子のため、水中では親水きるのではないかと着想し、実験によりそれを確認するこ

基同士と疎水基同士がそれぞれ集合する性質があり、二重とにした。そこで本研究ではマルトースを内包化した直径。リポソームは内部に薬約 100 nm のリポソームを作製し、培養した L929-S 細胞

物やタンパク質などを内包化することができるため、ドラに加えた場合に、細胞の生存にどのような影響を及ぼすのッグデリバリーシステム（DDS）の搬送体として利用が期かを検討した。その結果、糖を枯渇した培地で培養すると、待されている。細胞膜は基本的にタンパク質や遺伝子は透

ML は、同等量の糖や空のリポソームを単独で加えた場合

過できないが、リポソームは細胞にエンドサイトーシスによりも細胞を長期に生存させることができることを見出し

よって取り込まれる性質を持つので、タンパク質や遺伝子た。老化によって糖の利用の効率は低下することが知られなどの目的とする物質をリポソームに内包化して細胞内にている 6）。本研究で作製した ML は、アンチエージング化

搬送することが可能である 3）。また物質を内包化したリポ

粧品の開発に利用できる可能があると考えられる。

膜構造を持つ粒子を形成する

1, 2）

ソームは徐々に分解されて、内容物を放出することから、目的物質の長期間の徐放の手段としても有用である。研究
代表者らは、リポソームの機能調節に食品成分の内包化が有用であることを見出している

2. 試料および実験方法
2. 1. リポソームの作製
リポソーム作製のための脂質としては、1, 2 - dipalmitoyl-

4, 5）

。

しかし、これまでリポソームについては、糖の細胞への

sn-glycero-3-phosphocholine（DPPC；NOF Co.）、1,2-dioleoyl

送達にリポソームを利用した報告はあまり見当たらない。グ-sn-glycero -3 -phosphocholine（DOPC；NOFCo.）、1, 2 - dioleoyl

ルコースはグルコーストランスポーターを介して細胞に-sn-glycero- 3 -phosphoethanolamine（DOPE；NOF Co.）を用いた。MLは次のように作製した。DOPC（6 mg）とApplication of saccharide-encapsulated
liposomes providing activities to promote
cell survival for anti-aging cosmetics
Shuji Hinuma
Senri Kinran University, Faculty of Human
Life Science, Department of Food andNutrition

DOPE（6 mg）の 計12 mgのDOPC/DOPEを4 mLの ク ロロホルムに溶解し、500 mLのナス型フラスコに入れて、エバポレーター（N 1000；EYELA）を使って有機溶媒を蒸発させて、5 ～ 10分フラスコを回転させながら脂質フィル
ムを形成させた。次にマルトース（和光）あるいはスクロース（2 g）を溶解したTAPSバッファー（4 mL）を加えて、− 107 −

コスメトロジー研究報告 Vol.26, 2018

ボルテックス処理し、さらにスターラーで45℃、1時間撹

アンスロン試薬 1 mL に重層した。重層後、ボルテックス

拌した。空のリポソームを作製する場合は、リン酸緩衝液

により混和し、100 ℃、10 分処理した後、直ちに冷却した。

（PBS）を加えて、同様の処理をした。攪拌後、リポソー糖によるアンスロン試薬の発色は、分光光度計により 620

ム懸濁液をガラス試験管に入れて、超音波水槽（Ultrasonic

nm の吸光度を測定した。既知濃度の糖水溶液を標準検体

Cleaner VS- 100 III； ASONE）で28、45、100 Hzのサイクにして検量線を作成し、検体中の糖濃度を決定した。

ルで超音波処理を3時間行った。超音波処理後、100 nmのフィルターを装着したエクストルーダー（Avanti polar

2. 4. L929-S 細胞の培養

Lipids）による処理を行い、直径約100 nmのリポソームを

リポソームの影響を調べるための細胞としては、マ得た。その後、リポソーム懸濁液を透析膜チューブ（排除ウス線維芽細胞株の L929（JCB 細胞バンク）を当研究室

分子量1 , 000 , 000；Millipore）に入れてPBSで、4 ～ 5日間で長期培養し、糖飢餓に感受性が高くなった L929-S 細透析処理を行った。透析終了後、0 . 22 µm（Millipore）の胞を使用した。L929 - S 細胞は、グルタミンと HEPES 含フィルター処理をして滅菌し、実験に使用した。調整後

有 RPMI1640 培地（Gibco）に非働化した 10% ウシ胎児血のリポソームの粒子サイズとゼータ電位はZetasizer nano

清（FCS；Biowest）にペニシリンとストレプトマイシン

ZSP（Malvern）を使って測定した。

（Gibco）を加えた培地で、組織培養用フラスコ（Corning）
を使って継代したものを使用した。リポソーム添加実験の2. 2. リポソーム懸濁液の脂質の定量

ときは、0.25% Trypsin - EDTA（Gibco）を用いて L929-S 細作製した DOPC/DOPE リポソーム懸濁液の脂質量は、胞を剥離し、PBS（Wako）で 2 回遠心洗浄して、glucose-

sulfo-phospho - vanillin 法（7）で定量した。リポソーム懸濁

free RPMI1640 培地（Gibco）に非働化した 10% dialyzed

液からの脂質の抽出は、リポソーム懸濁液 75 µL をマイク

FCS（Gibco）とペニシリンとストレプトマイシンを加えた

ロチューブにとり、等量のクロロホルム 75 µL を加えて培地で、4 × 105 / mL に浮遊し、等量のリポソーム液（PBS

ボルテックスで 2 分攪拌した。攪拌後、遠心機（Hitachi）

で希釈）と 1：1 で混合した。必要な場合には、PBS に溶解

で 4,000 rpm、5 分遠心した。クロロホルム層をマイクロした糖を加えた。組織培養用マイクロプレート（Corning）

ピペットで別のマイクロチューブに移した。その後、得に加えて、炭酸ガス培養器で５％ CO2、37 ℃で培養した。

られたクロロホルム溶液を小型スピッツガラス試験管に半透膜で仕切った状態での ML の投与には、底面に半10 µL とり、遠心エバポレーター（CVE-200；EYELA）で透膜が張られた微量透析装置（EasyStep; Tomy）にリポ

40 ℃、10 分処理し、有機溶媒を除去した。標準検体としソーム懸濁液（100 µL）を加え、24 穴マイクロプレートてはエタノールに溶解した DOPC/DOPE 溶液を使用した。 （Corning）で培養した細胞の培養液（400 µL）に半透膜が接リポソームの脂質の定量は、次のように行った。試料にするように微量透析装置を設置して培養を行った。

200 µL の硫酸を加えて、ボルテックスで攪拌し、100 ℃
で 10 分処理後、冷水中で 5 分冷却した。1mL の Phospho -2. 5. トリパンブルー色素排除試験

vanillin reagent を加えて、ボルテックスで攪拌し、37 ℃

培養細胞の生存を確認するためにトリパンブルー色素排で 15 分処理した後、分光光度計（U5110；Hitachi）を使用

除試験を行った。培養液を除去し、細胞培養液量の 1/25

して波長 530 nm の吸光度を測定した。標準検体の検量線の 0.4 ％トリパンブルー溶液（Sigma - Aldrich）を加えたから検体中の脂質濃度を決定した。

後、倒立顕微鏡（CKX41；Olympus）で画像を CCD カメラ（Visualix - Pro2；Visualix）で撮影した。画像からトリパン

2. 3. リポソーム懸濁液の糖の定量

ブルーで染色されていない細胞の割合を、画像解析ソフト

リポソーム懸濁液の糖含量はアンスロン法により行った（画像内カウントツール４；Nihon system developer Co.）

（8）
。リポソーム懸濁液 50 µL をマイクロチューブに入れ、により解析し、細胞生存率として求めた。細胞数としては

クロロホルム 100 µL を加えてボルテックス処理した後、蒸1 画像当たり 100 個以上になるようにカウントした。

留水 300 µL を加え、さらにボルテックスで撹拌した。撹拌
後、遠心機（himac CT 13R；Hitachi）で 4 ℃、10,000 rpm、2. 6. フォルマザン生成試験

5 分間遠心し、水層を検体として使用した。リポソーム

細 胞 の 生 存 を 示 す 活 性 の 指 標 と し て、WST-8（Cellに内包されていない糖量は、リポソーム懸濁液を限外濾過

counting kit - 8；Dojindo）を利用したフォルマザン生成試

フィルター付チューブ（分子量 300,000 カット； Sartorius）

験を行った 4）。L929 -S 細胞を前述の培養条件で 96 穴マイで、4 ℃、4,000 rpm、30 分遠心し（2700；Kubota）、濾液のクロプレート（Corning）を使って、100 µL/well で培養した。

糖量から求めた。検体とアンスロン試薬との反応は、検体

24 穴マイクロプレートで培養する場合には 500 µL/well

250 µL を、小型スピッツガラス試験管に入れた冷却したで培養した。WST -8 による発色反応は、細胞培養液の− 108 −

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450 nmの吸光度で、マイクロプレートリーダー（Maltiskan

3. 2. グルコース枯渇培地で培養した L929-S 細胞の生存に対するMLの影響

Ascent plate reader；Labsystems）
を使って測定した。

ML の細胞の生存への影響を調べる目的で、グルコー

1/10 量の WST- 8 液を加えて、4 時間培養後、発色反応を

3. 結

スを含有しない基礎培地で L929 - S 細胞を培養し、ML を果添加したときの影響を調べた。ML を添加すると培養 3 ～3. 1. 調製したリポソームの性状

4 日目でも細胞の生存率は 90 ％以上であった（図 3、ML）。

調製したリポソームについて性状解析した結果を表 1 に一方、何も添加しなかった場合には、3 ～ 4 日間の培養で、示した。空の DOPC/DOPE リポソームと ML のいずれも生存率は 10 ％以下に低下した（図 3、None）。興味深いこ約 100 nm のリポソームが得られた（図 1）。Z-potential はとに ML と同等量のマルトースを添加した場合（図 2、M）

マイナスの値を示したことから調製したリポソームはマイやグルコースを添加した場合（図 3、Ｇ）では、3 日目ではナスの電荷を持っていることがわかった。１回のリポソー

まだ生細胞はある程度認められたが、4 日目では生存率

ムの調製で、約 2.4 mL 程度の懸濁液を得ることができた。

は 10 ％以下に低下した。同じ培養条件で、L929-S 細胞

したがって、脂質の回収量は約 90 ％と推定された。一方、は、グルコース 1,000 µg/mL の添加では、1 週間以上、細リポソーム内包化のために投入したマルトースの回収率は胞の生存率の顕著な低下は認められなかった（未発表デー

約 50 ％と推定された。ML 懸濁液については、リポソータ）。したがって、低濃度（50 µg/mL）のマルトースやグルムに内包化されているマルトースの量は 90 ％以上と推定

コースでは L929 - S 細胞は 3 ～ 4 日でほぼ死滅することがされた。

わかった。ML と同等量の脂質量の空のリポソームを加え

本研究では、リポソームに内包化する糖として、グルコた場合には、顕著な細胞の生存促進効果は認められなかっースではなくマルトースを利用したが、グルコースは脂質た（図 3、L）。しかし低濃度のグルコースに空リポソーム

二重膜の透過性が高く、グルコースを内包化したリポソーを加えた場合（図３、G+L）には、糖や空リポソームを単独

ムの作製が困難であった。そのため糖内包リポソームを作で加えた場合と比較して、3 日目で明らかに生存を促進し製するための糖としてマルトースを使った。ML は 4 ℃でている傾向が認められた。L929 -S 細胞は、生存と増殖には安定であったが（未発表データ）、図 2 に示すように 37

十分量のグルコースが存在することが必須であるが、マル℃ではマルトースが経日的に徐々に放出されることがわか

トースでもグルコースよりも若干効率は低下するが、代替った。したがって ML は、細胞培養液中でマルトースの徐できることがわかっているので（未発表データ）、L929-S

放効果を発揮していることが示唆された。

細胞はマルトースを分解して、グルコースとして利用できると考えられる。低濃度のグルコースに空リポソームの組

表 1 調製したリポソームの性状
リポソーム

直径（nm）

Z-potential

脂質濃度（mg/mL）

マルトース濃度（µg/mL）

n

DOPC/DOPE

107.1 ± 11.6

-12.7 ± 7.4

4.6 ± 0.9

0

16

ML

99.9 ± 27.6

-16.7 ± 3.9

4.2 ± 1.8

450.4 ± 244.58

図 1 調製したリポソームの粒子径の分布
ML および空の DOPC/DOPE リポソームの粒子径を測定した結果の代表例を示した。

− 109 −

コスメトロジー研究報告 Vol.26, 2018

図 2 ML からのマルトースの徐放ML（マルトースとして 1mg/mL）を PBS（1mL）に懸濁してエッペンドルフチューブに、37 ℃で処理後、リポソームの外に放出されたマルトース量を限外濾過処理により測定した。放出量（％）
は37℃処理する前のマルトース濃度を100％として求めた。

み合わせがそれぞれ単独で添加した場合に比較して、細胞の生存を延長する傾向が見られたことは、両者が L929 - S

図 3 グルコース枯渇培地で培養した L929-S 細胞に対する MLの生存促進作用
ML：マルトース（50µg/mL）含有リポソーム（106µg/mL）
添加；M+L：マルトース（50µg/mL）と空リポソーム（106µg/
mL）
添加；G+L：グルコース（50µg/mL）と空リポソーム（106µg/mL）
添加；M：マルトース（50µg/mL）
添加；G：グルコース（50µg/mL）
添加；L：空リポソーム（106µg/mL）
添加；None：無添加。
細胞の生存率はトリパンブルー試験により測定し、データは平均値と SD で示した
（n ＝ 3）。

細胞に対して生存延長に相乗的な働きをしていることが示唆された。しかし ML は糖と空リポソームの組み合わせよ
りもはるかに強い細胞生存促進作用を示した。これらの結果は、ML は空リポソームの組み合わせとは異なる作用機
序で L929-S 細胞の生存を延長させていることを示しているものと考えられた。

3. 3. グルコース枯渇培地で培養した L929-S 細胞のフォルマザン生成活性に対するMLの影響
WST - 8 は細胞内脱水素酵素により還元されて、フォルマザンを形成して発色することが知られているが、生細胞の指標として、一般的に使われている。そこでグルコース枯渇培地で培養した L929-S 細胞のフォルマザン生成活性に対する ML の影響の影響を調べた。複数回実験を行ったが、その結果の代表例を図 4 に示す。ML は培養 1 日目で

図 4 グルコース枯渇培地で培養した L929-S 細胞のフォルマザ
ン生成に対する ML の効果
ML、M+L、G+L、M、G、None の表記は図 3 と同じ。フォルマザン生成試験は WST-8 を用いて行った。データ（n ＝ 2）は培地のみの吸光度を測定値から引いた値の平均値を示した。誤差は平均値の 10 ％以内であった。

フォルマザン生成活性が最大に達し、培養 4 日目まで、徐々に活性は低下していったが、4 日目でもフォルマザン生成
活性が認められた（図 4、ML）。無添加（図 4、None）と空した細胞のフォルマザン生成活性に比較すると 1 ～ 4 日目

リポソームのみの添加（図 4、L）では、培養開始時点（培養ではるかに低かった。フォルマザン形成活性として見ると、

0 日目）でもほとんど検出されなかったことより、フォル

ML>M+L、G+L>M、G の強さの順になっていたが、これマザン生成は糖の代謝と密接に関連していることが示唆さ

らの結果は、トリパンブルー試験の結果とおおよそ一致しれた。低濃度（50 µg / mL）のマルトース（図 4、M）やグルていた。

コース（図 4、G）では培養 1 日目までは明確なフォルマザ
ン生成活性が認められたが、2 日目ではほとんど検出され3. 4. MLの作用機序の検討なくなった。低濃度の糖と空リポソームの組み合わせ（図ML の L929 -S 細胞に対する生存促進効果の作用機序を4、M+L、G+L）では、糖単独よりは 0 日目と 1 日目でよ明らかにする目的で、ML を培地中に直接投与した場合（図り強いフォルマザン生成活性を示したが、2 ～ 4 日目では

5、ML）と、半透膜で仕切られたカップに入れて投与した

ほとんどフォルマザン生成活性は認められなかった。し場合（図 4、ML / cup）の細胞のフォルマザン生成活性に与かし低濃度の糖と空リポソームの組み合わせは、ML 処理

える影響を比較検討した。この実験では、ML を投与した− 110 −

細胞生存促進効果を有する糖内包化リポソームのアンチエージング化粧品への応用

図 5 ML を半透膜で仕切って L929-S 細胞に投与したときの効果
ML、M、None の表記は図２、３と同じ。ML / cup は半透膜で仕切ったカップに入れて ML を投与、M/cup はマルトースを半透膜で仕切ったカップに入れて投与したことを示す。フォルマザン生成試験は WST -8 を用いて行った。データ（n = 2）は培地のみの吸光度を測定値から引いた値の平均値で示した。誤差は縦線で示した。

場合には、7 日後でも明確なフォルマザン生成活性が認め包化したリポソームも作製して、ML と同様の細胞生存延られた（図 5、ML）。半透膜で仕切られた ML を投与した

長試験を行ってみたが、スクロース内包リポソームにはグ場合（図 5、ML / cup）は、ML 粒子は半透膜を透過できな

ルコース欠乏培地で培養した L929 -S 細胞に対する細胞生

いので、ML は直接細胞に接触することはできないが、7存促進作用は全く認められなかった（未発表データ）。これ日後でもフォルマザン形成活性が検出された。この結果は、は L929 -S 細胞にはマルトースを分解してグルコースとし

半透膜を透過できるマルトースが ML から持続的に遊離し、て利用するためのグリコシダーゼが存在するが、スクロー

半透膜と透過して作用したマルトースが L929-S 細胞のフスを分解して利用するサッカラーゼが存在しないためではォルマザン形成活性の維持に働いていたことを示していないかと考えられた。どのような糖をリポソームに内包化るものと考えられた。しかし ML と比較すると ML/ cup のするとより細胞生存延長効果に有効かについては、さらにフォルマザン形成活性は半分から 1/4 程度であった。この検討する余地があると考えている。ML は、グルコース飢

ことは、ML はマルトースの徐放以外に直接細胞に接触し、餓条件下で培養した L929-S に対して、同等量のグルコー取り込まれることによって、細胞の生存延長効果を発揮しスやマルトースを添加した場合や、同等量の空のリポソーている部分もあることを示唆しているものと考えられた。

ムを添加したよりも強力な細胞生存延長効果を示した（図3、4）。興味深いことに、低濃度の糖や空リポソームをそ4. 考察および総括

れぞれ単独で加えた場合よりも、低濃度の糖と空リポソー

本研究では、L929 細胞株の sub-clone である L929 - S 株

ムを組み合わせて投与した場合の方が、単独よりも若干生を実験に使用した。L929 -S は糖飢餓に対する感受性が高存を促進する効果が認められた（図 3、4）。これらの結果は、

く、グルコース飢餓培養条件下では、約 2 日以内にほぼ死

空リポソームも糖の存在下で、細胞の生存に何らかの生存滅する性質を持つので、ML の細胞生存延長効果の判定が促進作用を有していることを示唆している。我々は、ML

やり易いので使用した。親株の L929 細胞は、グルコースに蛍光物質のカルセインを取り込ませたものを作製し、細飢餓条件下でも 1 週間近く生存が認められた（未発表デー

胞に投与すると、細胞に取り込まれることを確認しているタ）。リポソームに内包化する糖としてはマルトースを利（未発表データ）。したがって、細胞培養系に投与したリ用した（表 1）
。DOPC/DOPE リポソームに内包化するとポソームの少なくとも一部は、細胞内に取り込まれること

4 ℃では数週間安定だが、37 ℃ではマルトースが徐々に放によって、細胞生存の促進作用に関与しているものと考え出されることがわかった（図 2）。しかしグルコースを内包ている。リポソームは、リン脂質からできていているので、化した DOPC / DOPE リポソームは非常に不安定で 37 ℃処

それ自体が細胞の代謝によるエネルギー産生の原料となる理では、1 日以内にほとんどが放出されてしまった（未発とは考えにくいが、糖の存在下で細胞に取り込まれたリン

表データ）。グルコースは脂質二重層の膜を透過しやすい

脂質が代謝されて脂質代謝による脂肪酸の β 酸化の系路のので、内包化するための糖としては、グルコースよりもマ促進に働いている可能性が想像されるが、この点の検証に

ルトースの方が適当だと考えている。またスクロースを内

ついては今後の課題である。

− 111 −

コスメトロジー研究報告 Vol.26, 2018

ML の細胞生存促進作用の機序を調べるためにリポソー（引用文献）

ムが透過できない半透膜で仕切った状態で細胞に投与した

１）Sessa G, Weissmann G. Phospholipid spherules

ところ、その状態でもある程度、細胞生存の延長効果を示（liposomes）as a model for biological membranes. J Lipid

した（図 5）。この結果は、ML からマルトースが徐放されRes. 1968 May;9（3）:310-8.

遊離した微量のマルトースが、細胞の長期的な生存維持に

２）Alipour E, Halverson D, McWhirter S, Walker GC.

働いている重要な機序の一つであることを強く示唆していPhospholipid bilayers: stability and encapsulation

る。この結果は、図 2 に示したように、ML が 37 ℃においof nanoparticles. Annu Rev Phys Chem. 2 0 1 7 Mayて（おそらくリポソームの分解や膜構造の不安定化により）

5;68:261-283. Deciphering the Functional Composition of

マルトースの徐放効果を示したという結果と一致していFusogenic Liposomes. Kolašinac R, Kleusch C, Braun T,

るように思われた。しかし半透膜で仕切られた ML のフォ

Merkel R, Csiszár A. Int J Mol Sci. 2018 Jan 24;19（2）．

ルマザン形成活性は、ML を直接細胞に投与した場合に比３）Amano C, Minematsu H, Fujita K, Iwashita S, Adachi

較して、明らかに低かった。この結果は ML が細胞に取りM, Igarashi K, Hinuma S. Nanoparticles containing

込まれることが、ML が十分な細胞生存促進効果を発揮す

curcumin useful for suppressing macrophages in vivo in

るためには重要であること示唆している。上述したような、

mice. PLoS One. 2015 Sep 11;10（9）J Clin Invest. 1986

リン脂質の取り込みによる糖の存在下での脂質代謝を介しJun;77（6）:2034-41.

たエネルギー産生系の亢進が ML の効果の発揮には必要な４）Fujita K, Hiramatsu Y, Minematsu H, Somiya M, Kurodaのではないかと考えている。これらの点の確認は今後さらS, Seno M, and Hinuma S. Release of siRNA from liposomesに検討が必要である。

induced by curcumin. Journal of Nanotechnology Volume
2016（2016），Article ID 7051523, 6 pages

本研究では、糖内包化リポソームの ML を調製し、糖欠乏培地で培養した繊維芽細胞に対して、強力な細胞生存促

５）Fink RI, Wallace P, Olefsky JM. Effects of aging

進効果を示すことを見出し、その機序についても一部解明

on glucose-mediated glucose disposal and glucose

することができた。糖内包化リポソームは老齢化に伴い代transport. J Clin Invest. 1986 Jun;77（6）:2034-41.

謝が低下した化粧品成分として利用できる可能性があるの

６）Frings CS, Fendley TW, Dunn RT, Qeen CA. Improved
determination of total serum lipids by the sulfo-phospho-

ではないかと期待している。

vanillin method. Clinical Chemistry vol. 18, No. 7, 1972
謝 辞７）Morris DL. Quantitative determination of carbohydrates

本研究にご協力、ご助言いただいた千里金蘭大学、藤田with Dreywood's Anthrone Reagent. Science. 1948 Mar

和代助教および大阪大学、黒田俊一教授に深謝いたします。

− 112 −

5;107（2775）:254-5.