紫外線の皮膚慢性毒性に対するサンスクリーン剤の防御効果を高速・高感度に評価する方法の開発
東北大学大学院医学系研究科ゲノム生物学分野

池 畑

広 伸

Sunscreens are widely used to protect our skin from harmful chronic effects of the sunlight such as photoaging andcancer induction, which are known to result from oxidative and genotoxic effects of the ultraviolet light (UV) included in
the sunlight. The ability of sunscreens to prevent those chronic UV toxicities has been assessed using their capacities tosuppress sunburn (erythema) after sunlight or UV irradiation, and is evaluated by indices such as sun protection factor (SPF).
However, any direct correlation has not been established between the skin inflammation (erythema) and those chronic UVskin toxicities. We developed a rapid and sensitive method to evaluate the protecting ability of sunscreens for those chronic
UV effects by assaying mutation and/or DNA damage induction in the skin after UV irradiation, using a transgenic mouseline, Muta Mouse, developed specifically for mutation analysis. Here, we show that the newly developed method is highly
useful to evaluate the protection ability of sunscreens against the skin genotoxicity of UV by assaying mutation induction,and can assess their capacity to prevent the photoaging by quantifying oxidative DNA damage. Moreover, we found aninconsistency between the SPF and the mutation-suppressing ability for some of the sunscreens we tested, and thosesunscreens had formulations that UV scatterers, instead of absorbers, were main components of their UV protectors. Thesefindings indicate that SPF is not the index appropriate to evaluate the ability of sunscreens to prevent the genotoxicity of UV.
We introduced a new index of mutation protection factor (MPF), which can be determined by the method developed here, forthe appropriate evaluation of sunscreen’s protecting ability against the UV skin genotoxicity.

１．緒

DNA を傷つけ突然変異を高頻度で誘発することが多くの言生物で証明されている。そこでこの突然変異を指標として

日光紫外線の有害作用を防ぐためにサンスクリーン剤は

紫外線の皮膚慢性毒性を高感度で検出できるアッセイ系を日常的に一般に広く使用されているが、その性能は主にマウスで開発し、その有効性を実際のサンスクリーン剤を

皮膚の日焼け（紅斑反応 burning と黒化反応 tanning）に用いて検証した。通常、慢性毒性の検証には長い試験期間基づく SPF や PA といった指数によって評価されている。

を必要とするが、突然変異を指標とすることにより短期間

SPF や PA が高いほど日焼けを防ぐ効果が高いわけだが、に検出することが可能となる。また評価用の検体に突然変紫外線の有害作用には日焼けのような急性のものの他に、異検出用トランスジェニックマウスを用いることにより検皮膚癌（ゲノム毒性）やシミ・しわ（光老化）のような慢出法そのものも効率化・迅速化を図った。

性のものもあり、こちらの方が不可逆的で美容・医学的に

２．実

より深刻な影響を皮膚に与える。紅斑・黒化反応と皮膚の癌化・光老化の間には直接的因果関係は認められておらず、

2・1

験

紫外線源

SPF や PA が高いからといって、そのサンスクリーン剤

紫外線源としてナローバンド UVB（NB-UVB; Philipsが皮膚癌や光老化の予防にも有効と判断できる科学的根拠

TL/01, 308-313 nm, 312 nm peak）と UVA1 レーザ（364は乏しい。本研究では個々のサンスクリーン剤についてこnm）を利用した。それぞれ約 25-28 W/㎡ , 300 W/ ㎡の線のような紫外線の皮膚への慢性毒性に対する抑止性能を直量率で照射した。UVA1 レーザは自然科学研究機構基礎接評価できる指数の開発を試みた。

生物学研究所に設置されている装置を利用した。線量計と皮膚癌や光老化は紫外線の皮膚のゲノムや構造に対するし て NB-UVB に は UVP 社（ 米 国 ） の UVX Radiometer

直接的（生体高分子の光化学反応）
・間接的（活性酸素生と UVX-31 Sensor を、UVA1 レーザにはシリコンフォト

成を介した反応）な毒性によることが多くの研究から示

ダイオード（浜松ホトニクス）を使用した。

されている。紫外線のこうした直接・間接作用はゲノム
Development of a rapid and sensitive
met ho d t o eva lu at e t he abi l it y ofsunscreens for protection of the chronicskin genotoxicity by ultraviolet lights.
Hironobu Ikehata
Department of Cell Biology, Graduate
School of Medicine, Tohoku University

2・2

トランスジェニックマウスによる紫外線誘発突

然変異頻度の解析
突然変異検出用トランスジェニックマウスとして Muta
１）

マウスを用いた 。このマウスはトランスジーンとして大腸菌 lacZ 遺伝子を有し、この遺伝子を突然変異検出マー
カとして利用する。lacZ トランスジーンは λ ファージベク
タに組み込まれているので、容易にゲノム DNA からファ− 85 −

コスメトロジー研究報告 Vol.17, 2009

2・3

ージ粒子として回収できる。
Muta マウスを用いた皮膚における紫外線誘発突然変異の解析法は既に発表済みである

２，３）。簡単に紹介すると、サンスクリーン剤

３社（甲・乙・丙）から発売されている５種のサンスク
リーン剤（A 〜 E）を使用した。甲社からは SPF 値の異Muta マウスの背中をバリカンと脱毛クリームを用いて麻なる３種類のサンスクリーン剤（A, D, E）を選んだ。各

酔下で除毛する（除毛範囲：約 3 × 6 ㎠）
。３日後、麻酔サンスクリーン剤の性能及び成分表示を表１に示す。
サンスクリーン剤は照射 15 分前に、皮膚脱毛部にマウ

下で除毛部皮膚に紫外線照射する。皮膚の突然変異を十分発現させるため照射マウスの飼育を４週間続けた後、照ス１頭あたり約 0.2 ㎖を均一に塗布した。

射部皮膚を採取する。酵素処理により表皮と真皮に分離後、各組織からゲノム DNA を抽出する。ゲノム DNA か

2・4

DNA 損傷の検出・定量

ら lacZ トランスジーンをファージ粒子として回収し、大紫外線により誘発される DNA 損傷の検出・定量法は既腸菌に感染させて、lacZ 遺伝子の突然変異を検出する。総

に発表済み 。簡単に説明すると、マウスに紫外線を照射

ファージ数と変異ファージ数より突然変異頻度を計算する。

後、直ちに照射部皮膚を採取する。組織内の酵素反応を

表１

４）

使用サンスクリーン剤

サンスクリーン

A

B

C

D

E

メーカー

甲

乙

丙

甲

甲

SPF

23

24

32

35

50+

PA

++

++

++

++

+++

剤型

クリーム

乳液

乳液（2 層型）

乳液

乳液（2 層型）

水，エタノール , メ 水，メトキシケイヒ 水，エチルヘキサン 水，シクロメチコン， シクロメチコン，酸
トキシケイヒ酸エチ 酸エチルヘキシル， 酸セチル，イソノナ 酸化亜鉛，ジメチコ 化亜鉛，水，メトキ
ル ヘ キ シ ル，DPG， BG，エ チ ル ヘ キ シ ン 酸 エ チ ル ヘ キ シ ン，酸化チタン，エ シケイヒ酸エチルヘイソノナン酸イソト ルトリアゾン，シク ル，酸 化 亜 鉛， タ ノ ー ル，DPG， キシル，セチルジメ
リ デ シ ル，BG，オ ロ メ チ コ ン， DPG，シ ク ロ ペ ン PEG-9 ポ リ ジ メ チ チコン，ジメチコン，
クチルトリアゾン， PEG-60 水添ひまし タシロキサン，ミリ ルシロキシエチルジ エタノール，ミネラ
セテアリルアルコー 油，ヒ ア ル ロ ン 酸 スチン酸オクチルド メチコン，セイヨウ ルオイル，セスキイ
ル，シクロペンタシ Na，加水分解コラー デシル，メトキシケ ハッカ葉エキス，ハ ソステアリン酸ソル
ロキサン，トリメチ ゲ ン，ア ル ギ ニ ン， イヒ酸エチルヘキシ トムギエキス，BG， ビタン，ポリメチル
ルシロキシケイ酸， スクワラン，ポリク ル，セ テ ス リ ン 酸 PEG/PPG-19/19 シ ル セ ス キ オ キ サ
セイヨウハッカ葉エ オタニウム -51，ト Na，ベ ヘ ニ ル ア ル ジ メ チ コ ン，
（ジ メ ン，エチルヘキサン
キス，ハトムギエキ リエチルヘキサノイ コール，テトラヘキ チコン／メチコン） 酸セチル，フェニル
ス，ブドウ葉エキス， ン，1,2- ヘキサンジ シルデカン酸アスコ コポリマー，シリカ， ベンズイミダゾール
BHT，（ア ク リ ル 酸 オール，セタノール， ルビル，カンゾウ根 ステアリン酸，塩化 スルホン酸，イソノ／アクリル酸アルキ （アクリレーツ／ア エキス，ペンタステ Na，メ チ ル パ ラ ベ ナン酸イソトリデシ
表示配合成分
）コポ ク リ ル 酸 ア ル キ ル アリン酸ポリグリセ ン，香 料，酸 化 ル，TEA，オウゴン（下線は紫外線吸収剤、 ル（C10-30）
太字は紫外線散乱剤を リマー，カルボマー，（C10-30））ク ロ ス リル -10，ジメチコ （Ca/ セ リ ウ ム）
， エ キ ス，ト コ フ ェ示す。
）
ジエチルアミノヒド ポリマー，キサンタ ン，PPG-8 セ テ ス 水酸化 Al
ロール，白金，BG，ロキシベンゾイル安 ンガム，ジエチルア -20，ス テ ア ロ イ ル
BHT，グ リ セ リ ン，
息香酸ヘキシル，ジ ミノヒドロキシベン 乳酸 Na，ポリシリポリアクリル酸 Na，
メチコン，ステアロ ゾイル安息香酸ヘキ コーン -14，酢酸ト
メチコン，ラウリル
イルメチルタウリン シル，フェノキシエ コフェロール，キサ
ポ リ グ リ セ リ ル -3
Na，セ テ ア リ ル グ タ ノ ー ル，TEA, ンタンガム，セテア
ポリジメチルシロキ
ルコシド，ヒドロキ EDTA-2Na, プ ロ ピ リルアルコール，ミシエチルジメチコ
シプロピルメチルセ ルパラベン，メチル リ ス チ ン 酸，BG，ン，メチルパラベン，
ルロース，ポリイソ パラベン
エ チ ド ロ ン 酸，
香 料，酸 化（Ca/プ レ ン，ポ リ ソ ル
BHT，メチルパラベ
セリウム）
ベート 80，メタク
ン，プロピルパラベ
リル酸メチルクロス
ン，フェノキシエタ
ポ リ マ ー，水 酸 化
ノール，香料
Na，メ チ ル パ ラ ベン，香料− 86 −

紫外線の皮膚慢性毒性に対するサンスクリーン剤の防御効果を高速・高感度に評価する方法の開発止めるため 55℃で５分間熱処理した後、表皮・真皮に分る変異誘発の影響は認められなかった（図２、黒棒）。

離してそれぞれからゲノム DNA を抽出する。この DNA

次に NB-UVB 10 kJ/㎡照射に対する効果（照射時間はについて、シクロブタン型ピリミジンダイマー（CPD）

約６分）を調べた。まず皮膚の急性反応であるが、サンスと 6-4 型光産物（64PP）はモノクローナル抗体を利用しクリーン未塗布のものでは照射２日後より皮膚全体の発赤

た ELISA 法により、８ヒドロキシグアニン（8OHdG）はが出現し、３日目には炎症・むくみが強く現れ、痒みによHPLC/ECD 法により検出・定量する。

る掻き傷と思われるものが局所的に認められた。傷の一部

３．結
3・1

は後に潰瘍化し、完治するのに３週間程度を要した。一方、

果

サンスクリーン塗布群では E を除き、炎症などの変化は

NB-UVB による突然変異の誘発動態

照射後４週目まで全く認められなかった。E では照射後３サンスクリーン剤の紫外線慢性毒性に対する防御効果の評価を突然変異検出用トランスジェニックマウス実験系

日目に皮膚の一部分で軽い炎症が認められたが、照射４日後には消えた。

（Muta マウス）で試みる前に、紫外線誘発突然変異に対突然変異誘発に対するサンスクリーンの抑制効果を図２するこの実験系の感度を確認した。サンスクリーン剤の評（白棒）に示す。サンスクリーン未塗布のものでは非照射価に使用する紫外線としては UVB を利用したが、自然の群と比較して表皮で 34 倍、真皮で 20 倍の変異誘発が認め

日光には含まれない短波長 UVB 成分を出さない NB-UVBられた。塗布群ではいずれのサンスクリーン剤でも UVB

ランプを光源として用いることにし、NB-UVB ランプにによる変異誘発の抑制効果が表皮・真皮ともに認められた。

よってマウス皮膚に誘発される突然変異頻度の線量依存性

しかしその結果は必ずしも表示 SPF 値とは対応しなかっを解析した。結果は図１に示すとおりになり、真皮では調た。最も SPF 値の高いサンスクリーン E（SPF50+）ではべた範囲の紫外線量に対しほぼ直線的に突然変異頻度が上表皮・真皮ともにほぼバックグラウンドレベルまで変異誘昇した。表皮では低線量域（3 kJ/㎡まで）では線量依存発が抑制された。
SPF 値の低いサンスクリーン A, B
（SPF23的に直線的な変異頻度増加が見られ、その傾きは真皮の４〜 24）でも表皮で 80 〜 90% の抑制効果を示し、真皮では倍程度を示したが、それより大きい線量域では変異頻度のほぼバックグラウンドレベルまで抑制された。ところが中上昇が止まり一定値を示した。こうした表皮・真皮各々に程度の SPF 値を持つサンスクリーン C, D（SPF32 〜 35）

特有の変異誘発動態はブロードバンド UVB ランプでも既では A, B よりも成績が悪く、表皮で 70 〜 80％、真皮でに報告している 。また 3 kJ/㎡以上では皮膚に炎症の誘80 〜 90％程度の抑制効果であった。特にサンスクリーン発が見られ、3 kJ/㎡が NB-UVB に対するマウス皮膚の最C の成績の悪さが目立った。また同じメーカの製品である

小紅斑線量（minimal erythema dose, MED）と見積もら

A と D の間でも SPF が低い方の変異抑制効果が高いといれた。

う逆転現象が認められた。

２）

誘発変異頻度を見ると、3 kJ/㎡で表皮では非照射群（約-4サンスクリーン剤の突然変異誘発に対する抑制効果を

1.2×10 ）の 30 倍以上、真皮で７倍以上の変異誘発が見られた。10 kJ/㎡では真皮でも 20 倍以上の誘発が見られた。以上の結果より、我々の使用する実験系はサンスクリーンの性能評価に十分な感度を有すると判断し、最小紅斑
線量よりも大きく真皮でも十分な変異誘発の見られる 10
kJ/㎡（約３MED）でサンスクリーン剤の評価を行うことにした。

3・2 サンスクリーン剤の紫外線誘発突然変異の抑制
効果
SPF 表示の異なる３社（甲、乙、丙）５種（A, B, C, D,
E）のサンスクリーン剤（詳細は表１参照）について、紫外線による皮膚突然変異誘発に対する防御効果を、Muta
マウスを用いて評価した。結果を図２に示す。サンスクリーン剤は SPF の低いもの２種（A, SPF23; B, 同 24）、中程度のもの２種（C, 同 32; D, 同 35）、高いもの１種（E,
同 50+）を選んだ。まずサンスクリーン単独の影響について調べたところ、いずれのサンスクリーン剤も皮膚に対す

図１ ナローバンド UVB によるマウス皮膚における突然変異
誘発動態：
NB-UVB によってマウス皮膚表皮（●）及び真皮（○）で誘発される突然変異頻度の紫外線量依存性を示す。各データポイ
ントはマウス２〜３個体の平均。但し 15 kJ/ ㎡のポイントは１個体からのデータ。

− 87 −

コスメトロジー研究報告 Vol.17, 2009

図２ NB-UVB による皮膚突然変異誘発に対するサンスクリーンの抑制効果：
サンスクリーンを塗布したマウス皮膚に NB-UVB 10 kJ/ ㎡を照射し、誘発される突然変異の頻度を表皮⒜と真皮⒝で調べた。各
サンスクリーンの紫外線非照射（黒棒）・照射（白棒）のデータはそれぞれマウス１個体に由来する。サンスクリーンを塗布しない
対照群は３個体のデータの平均。
表2

使用サンスクリーン剤の MPF（突然変異防御係数）の見積もり

Sunscreen

SPF

A
B
C
D
E

23
24
32
35
50+

Epidermis
Repressed Eﬀective
UV doseMFa（×10-4） （kJ/ ㎡）

4.18
7.68
13.33
7.03
1.65

0.26
0.55
1.04
0.50
0.04

Dermis
MPFb

39
18
10
20
250

Repressed Eﬀective
UV doseMFa（×10-4） （kJ/ ㎡）

2.22
1.85
6.17
3.52
2.22

0.29
0.16
1.66
0.74
0.29

MPFb

34
61
6
13
34

a）MF, mutant frequency.
b）MPF, mutation protection factor; MPF =（Irradiated UV dose）/（Eﬀective UV dose ）.
The irradiated UV dose in the present study is 10 kJ/㎡ .

数値化するため、突然変異防御係数（mutation protection

線非照射群とあまり差のない表皮のサンスクリーン E、真factor, MPF）という新たな指数を導入した。MPF の定義

皮のサンスクリーン A, B, E の MPF 値は「極めて大きい」は以下のとおり。

という程度に解釈し、計算値を使用しての相互比較はあまり意味がないと思われる。この点に注意して表２の MPF

MPF =（照射紫外線量）/（実効紫外線量）

値を比較しても、やはりサンスクリーン C, D の変異抑制

定義により計算した MPF 値を表２に示す。ここで「照射紫外線量」
は本実験では 10 kJ/㎡になる。
「実効紫外線量」

に関する成績がその表示 SPF 値の割に低いことが、表皮・真皮ともに明らかに看て取れる。

（effective UV dose, 表２）は紫外線照射したサンスクリー
ン剤塗布群で観測された突然変異頻度を未塗布群で誘発す

3・3

酸化ストレスによる影響の検出法の検討るのに必要な紫外線量のことで、図２の白棒で示される

我々が今回使用したトランスジェニックマウスの検出系

塗布群の変異頻度（repressed MF, 表２）と同じ変異頻度

で紫外線による酸化ストレスの影響を検出できるか確認すを誘発するのに必要な紫外線量を図１の線量効果曲線を用るため、主に酸化ストレスを誘発すると思われる UVA1

いて求める。MPF 値が大きいほどサンスクリーン剤の突を Muta マウス皮膚に照射し、誘発される突然変異を解析

然変異防御能が高いことになるが、今回の実験は各観測値した。UVA1 光源として 364 nm レーザを用い、最大 2.56

がマウス１個体からのデータであるので、統計的ばらつき

MJ/㎡まで照射した。図３c に示すように、表皮・真皮との影響に注意する必要がある。図２の結果から考えて紫外もにバックグランドレベルの最大３〜４倍程度の変異誘発− 88 −

紫外線の皮膚慢性毒性に対するサンスクリーン剤の防御効果を高速・高感度に評価する方法の開発が認められた。回収された変異トランスジーンの DNA 塩
基配列変化を解析したところ、誘発された突然変異はほとんどが紫外線型の突然変異で、ピリミジン塩基が連続して並ぶ配列中でのシトシンからチミンへの塩基置換が主であった。酸化ストレスで誘発されるといわれるグアニンからチミンへの塩基置換の誘発は認められず、Muta マウスによる突然変異アッセイ法では紫外線による酸化ストレスの影響を評価するのは困難であることが明らかとなった。
そこで代替法として UVA1 照射により皮膚ゲノム DNAに生成する酸化型 DNA 損傷の検出・定量を試みた。その結果、図３a に示すとおり代表的酸化型 DNA 損傷である
8OHdG の照射線量に応じた直線的な生成量増加が表皮・真皮の両方で認められた。生成量に表皮と真皮で差は認められなかった。比較として CPD, 64PP の生成も解析した
ところ、CPD のみ照射線量に依存した生成の誘発が表皮・真皮で認められた。この結果より、DNA 損傷誘発量を指標とすることにより、紫外線による酸化ストレスに対するサンスクリーン剤の防護効果を評価することが可能である
ことが示唆された。

４．考
4・1

察

皮膚癌防止効果の評価法の開発

突然変異を指標として、紫外線の慢性毒性のひとつである皮膚癌誘発に対するサンスクリーン剤の防護効果を評価するアッセイ法の開発を、トランスジェニックマウスを利用して行った。その結果、図２のとおり高い感度でサンス
クリーンの効果を検出・評価できるアッセイ系であることが確認できた。しかもここで開発した方法で得られた各サ
ンスクリーンの紫外線突然変異誘発の防御能（MPF 値で示される）は、表示 SPF 値とは必ずしも対応しない場合があることが明らかとなった（サンスクリーン C, D）。この結果はサンスクリーンの皮膚癌防御能を正しく評価するには、従来の紅斑反応に基づく方法では不十分であり、今回開発したような方法で直接ゲノム毒性をアッセイする必要があることを示唆している。紫外線の皮膚慢性毒性、特にそのゲノム毒性に対するサンスクリーン剤の防御能を示す新たな評価指数として、突然変異アッセイ法に基づくMPF の導入を提案したい。

4・2

光老化防止効果の評価法の開発

図３ UVA1 レーザによる DNA 損傷及び突然変異の誘発動態：
364 nm レーザ光によりマウス皮膚表皮（●▲）及び真皮（○△）に生成する DNA 損傷の誘発動態（a, b）と突然変異誘発動態（c）の線量依存性を示す。a: ８ヒドロキシグアニンの誘発動態。b: シクロブタン型ピリミジンダイマー（●○）と 6-4型光産物（▲△）の誘発動態。DNA 損傷誘発動態の各データ
ポイントはマウス２個体の平均値、突然変異誘発動態の各デー
タポイントはマウス１個体からの実測値を示す。

紫外線のもうひとつの慢性毒性である光老化は酸化ストレスの誘発にあるとされているが、今回の研究で突然変異修復されて突然変異になりにくいことなどが影響しているを指標にしてこの酸化ストレスを直接皮膚で検出する試みと推測される。しかしながら本研究により紫外線で酸化型

は成功しなかった。これには、紫外線による突然変異誘発

DNA 損傷が生成することは確認された（図３a 参照）。こでは CPD などの紫外線特異的 DNA 損傷によるものの影のことは突然変異ではなく、DNA 損傷を指標とすること

響が大き過ぎて酸化ストレスによるものはマスクされ検出により、紫外線の酸化ストレスを評価することが可能であされにくいこと、酸化ストレスによる DNA 損傷はすぐにることを示している。紫外線照射直後の皮膚 DNA 中の酸− 89 −

コスメトロジー研究報告 Vol.17, 2009

化型 DNA 損傷を検出・定量することにより、サンスクリ

直接評価できるアッセイ系の開発を試みた。紫外線の慢性

ーンの酸化ストレス防御能、即ち光老化防御能をマウス皮

毒性のうち、将来の皮膚癌発生につながる突然変異の抑制

膚で評価することが可能と考えられる。

効果については、本研究で検討した方法で鋭敏に評価できることを明らかにした。一方もうひとつの慢性毒性である

4・3 紫 外 線 の 皮 膚 慢 性 毒 性 防 御 能 指 数 と し て の
SPF 表示の限界

光老化については、酸化ストレスの検出を意図して突然変今回使用したサンスクリーン剤の表示 SPF 値から、突はほとんど誘発されず、うまく行かなかった。しかしなが然変異誘発抑制能は、（数値的には必ずしも一致しないと

ら照射直後の皮膚ゲノム DNA を利用することにより酸化しても）少なくとも A, B, C, D, E の順番で高くなると予型 DNA 損傷を検出・定量できることが明らかとなり、こ想していた。しかし実際には SPF 値の低いものの方（サれを指標にすれば光老化抑制効果の評価が可能であること

ンスクリーン A, B）が、それより高い SPF 値を有するもを示した。

異の解析を行ったが、酸化ストレスによると思われる変異の（サンスクリーン C）より高い変異誘発防御能を示した。

サンスクリーン剤の有する SPF 値と本研究で開発したこうした逆転は同じメーカの製品間でも認められた（甲社

アッセイ法で得られる突然変異誘発防御係数（MPF）はA, D）。成績の悪かった中程度の SPF 値を持つサンスクリ

必ずしも対応しないことを明らかにした。実際に各サンーン C, D は、紫外線防御剤として散乱剤を主とした組成

スクリーンは表示どおりに紫外線誘発炎症（紅斑）に対となっており、他のサンスクリーン剤に比べ紫外線吸収剤

する抑制効果を示したが、完全な炎症防御を示していてもの配合が少ない（表１参照）。散乱剤は凝集を起こしやすく、

SPF50+ のもの以外は突然変異を完全に抑え込むことはでサンスクリーン皮膜内で紫外線防御効果のムラができやすきなかった。このように紫外線の皮膚慢性毒性に対する防いと言われており、これらのサンスクリーン剤が期待どお御能を評価するには、少なくとも皮膚癌防御能に関しては、りの成績を示さなかったことに影響しているかもしれない。

従来の紅斑反応を指標とした方法では不十分であり、本研

またサンスクリーン C は散乱剤として酸化亜鉛の１種類

究で開発したような皮膚ゲノム毒性（突然変異、DNA 損

しか配合されておらず、吸収剤はメトキシケイヒ酸エチル

傷など）を直接指標とする評価法が必要であることが示さ

ヘキシルの１種類だけでしかもカプセルコーティングされれた。またサンスクリーン剤の配合成分によっては、SPFて配合されており、こうした点が特に悪かった実験成績に値と MPF 値のあいだで紫外線毒性防御能の評価に逆転が影響している可能性がある。

起こる可能性があり、特に散乱剤中心の配合の場合は注意

その一方で、これら C, D を含む今回テストしたサンスする必要があることも示唆された。紫外線の皮膚慢性毒性、クリーン剤のいずれも、UVB による皮膚炎症の誘発はほ特にそのゲノム毒性に対するサンスクリーン剤の防御能をぼ完全に抑え込んでおり、突然変異抑制効果の評価結果

示す新たな評価指数として、突然変異アッセイ法に基づくとは必ずしも一致しなかった。照射した UVB 量はほぼ３

MPF の導入を提案したい。

MED に相当するので、炎症抑制効果の結果は使用したサンスクリーン剤の表示 SPF 値（23 〜 50+）とよく一致し（参考文献）ている。しかし突然変異について完全に抑えることができ

１）Gossen JA, De Leeuw WJF, Tan CHT, et al. Efficient

たのはサンスクリーン E だけであり、A 〜 D のサンスク

rescue of integrated shuttle vectors from transgenic

リーンは表皮で多少の変異誘発が認められた。紅斑反応を

mice: a model for studying mutations in vivo. Proc Natl

誘発する紫外線量には閾値があり、それが一般には MED

Acad Sci USA 86: 7971-7975, 1989.

として知られている訳だが、突然変異や癌などの誘発に必２）Ikehata H, Ono T. Mutation induction with UVB in

要な紫外線量には閾値はないと考えられている。こうしたmouse skin epidermis is suppressed in acute high-dose

違いが今回の評価結果の不一致の背後にあると考えられる。

exposure. Mutat Res 508: 41-47, 2002.

皮膚炎症と突然変異に対する防御効果が必ずしも一致しな

３）Ikehata H, Saito Y, Yanase F, et al. Frequent

いという結果は、ひとつの重要な事実を明らかにしている。

recovery of triplet mutations in UVB-exposed skin

即ち皮膚に炎症（紅斑）は認められなくても、突然変異のepidermis of Xpc-knockout mice. DNA Repair 6: 82-93,

誘発は起きていること、即ち将来の皮膚癌発生への変化が2007.
４）Ikehata H, Kawai K, Komura J, et al. UVA1

蓄積されているということである。

５．総

genotoxicity is mediated not by oxidative damage but

括by cyclobutane pyrimidine dimers in normal mouse

紫外線の皮膚慢性毒性に対するサンスクリーン剤の防御効果を評価するため、突然変異を指標にし、マウス皮膚で− 90 −

skin. J Invest Dermatol 128: 2289-2296, 2008.