ビタミンCを合成できない毛のないSMP30/GNL 遺伝子破壊ヘアレスマウスを用いた
皮膚におけるビタミンC の美白、抗しわ効果の科学的実証
東邦大学薬学部生化学

石神昭人

Vitamin C is said that the skin aging is prevented, and there are wrinkle prevention and whitening effectiveness.
However, scientific data that proves the effect is a little. The human cannot synthesize vitamin C in the body, however, thedog, the cat, and the mouse can synthesize vitamin C. We recently developed the SMP30/GNL gene destruction mousewithout hair that was not able to synthesize vitamin C in the body. In the present study, we examined the time course ofvitamin C distribution in the skin by using SMP30/GNL gene destruction mice. After oral vitamin C administration, vitamin
C content in the skin peaked at 6 h and then decreased. Thus SMP30/GNL gene destruction mice without hair as a humanlike is very useful whole-body animal model for investigating the movement and functions of vitamin C in the skin.

１．緒言

２．実

ビタミン C は皮膚の老化を防ぎ、しわ予防、美白効果が

2. 1

験

皮膚でのビタミン C 保持率の測定あるといわれている。しかし、その効果を実証する科学的野生型マウス（C57BL/6）およびビタミン C を合成できデータは少ない。ヒトは体内でビタミン C を合成できない。

ない SMP30/GNL 遺伝子破壊ヘアレスマウスを生後３ヵ月

しかし、犬や猫、マウスは体内でビタミン C を合成できる。

齢までマウスが必要とする１日必要量の 100 %（７mg/ 日）

我々は、ビタミン C を体内で合成できない SMP30/GNL 遺のビタミン C を与えて飼育した。また、皮膚でのビタミン伝子破壊マウスを作製し、長期的なビタミン C の不足は寿C 保持率を求めるため、生後２ヵ月齢から１ヵ月間、１日命を短くすることを明らかにした

必 要 量 の 2.5 %（0.175 mg/ 日 ）の ビ タ ミ ン C を 与 え る1−4）。即ち、ビタミン Cを体内で合成できないマウスに１日必要量の 2.5 % のビタ

SMP30/GNL 遺伝子破壊ヘアレスマウス群も用意した。

ミン C を毎日与え、マウスの生存率を調べた。その結果、ビタミン C が不足したマウスは普通のマウスに比べて早期

2. 2

ビタミン C の皮膚への移行速度、移行量の測定に死亡し、その死因は臓器全体が萎縮するヒトの老衰症状SMP30/GNL 遺伝子破壊ヘアレスマウスを生後２ヵ月齢そのものであった。ビタミン C は皮膚線維芽細胞で合成さまでマウスが必要とする１日必要量の 100 %（７mg/ 日）れるコラーゲンに含まれるアミノ酸、プロリンおよびリシのビタミン C を与えて飼育した。その後、生後２ヵ月齢かンの水酸化反応を触媒する酵素の補因子として働き、コラら１ヵ月間、１日必要量の 2.5 %（0.175 mg/ 日）のビタミンーゲン分子の重合に重要な役割を果たす。そのため、ビタC を与えた。１ヵ月後、経口ゾンデを用いて１日必要量のミン C が不足するとコラーゲン分子の重合がうまくいかず、50 %（3.5 mg/ 日）のビタミン C を投与した。経口投与後、キメの粗い肌になってしまう。我々は、最近、ビタミン C経時的（3, 6, 12, 24 時間）に皮膚を採取し、ビタミン C のの皮膚での働きを詳しく調べるため、ビタミン C を合成で皮膚移行速度を測定した。

きない毛のないヘアレスマウスの開発に成功した。このマウスは肌のシミを防ぐ美白試験や紫外線照射によるしわの形成阻害などの評価試験に用いることができる。

2. 3

ビタミン C の定量

ビタミン C の定量は HPLC、電気化学検出器を用いて行5）

本 研 究 で は、 ビ タ ミ ン C を 合 成 で き な い 毛 の な いった 。ビタミン C の分離は Atlantis dC18 5 mm カラム（4.6SMP30/GNL 遺伝子破壊ヘアレスマウスを用いて、ビタミ×150 mm）、移動相は 50 mM リン酸バッファー（pH 2.8）
、ン C の経口１回摂取による皮膚へのビタミン C の移行速度、

54 mM EDTA、２% メタノールを用いた。流速は 1.3 mL/移行量を測定した。

分であった。電気化学検出器の電極にはグラッシーカーボン電極を用い、+0.6V の電圧をかけて電気信号を記録した。

Vitamin C beautification and whiteningin the skin that used SMP30/GNL
gene destruction mouse without hairthat cannot synthesize vitamin C andscientific proof in effect of anti-wrinkle
Akihito Ishigami
Department of Biochemistry, Faculty of
Pharmaceutical Sciences, Toho University

データ解析はウォーターズ Empower 2 を用いた。

３．結3. 1

果皮膚でのビタミン C 保持率

生後３ヵ月齢の野生型マウスの皮膚中ビタミン C 量は0.27±0.02 mmol/ 皮 膚 g で あ っ た（ 図 １）。 一 方、SMP30/− 89 −

コスメトロジー研究報告 Vol.19, 2011

GNL 遺伝子破壊ヘアレスマウスに生後３ヵ月齢まで１日必要量の 100 %（７mg/ 日）および生後２ヵ月齢から１ヵ月間、１日必要量の 2.5 %（0.175 mg/ 日）のビタミン C を与えた群では、皮膚中のビタミン C 量はそれぞれ 0.32±0.04 mmol/ 皮 膚 g お よ び 0.03±0.01mmol/ 皮 膚 g で あ っ た。
このように 1 ヵ月間、1 日必要量の 2. 5 % のビタミン C を与えた SMP30/GNL 遺伝子破壊ヘアレスマウスの皮膚でのビタ ミ ン C 保 持 率 は、 野 生 型 マ ウ ス お よ び １ 日 必 要 量 の100 % のビタミン C を与えた群の皮膚中ビタミン C 量を100 % とした場合、それぞれ 10.6 % および 8.9 % であった。

3. 2

経口１回摂取による皮膚へのビタミン C の移行

経口投与後、皮膚へのビタミン C の移行速度を調べるた
め、SMP30/GNL 遺伝子破壊ヘアレスマウスに生後２ヵ月齢から１ヵ月間、１日必要量の 2.5 %（0.175 mg/ 日）のビ
タミン C を与えて、ビタミン C 不足状態にした。このマウ

図１ 生後 3 ヵ月齢の野生型マウス（WT）および SMP30/GNL
遺伝子破壊ヘアレスマウス（KO）の皮膚中ビタミン C 量
SMP30/GNL 遺 伝 子 破 壊 ヘ ア レ ス マ ウ ス に 1 日 必 要 量 の100%（S）および生後 2 ヵ月齢から 1 ヵ月間、1 日必要量の 2.5%（D）のビタミン C を与えた。*P ＜ 0.05

スに 1 日必要量の 50%（3.5 mg/ 日）のビタミン C を１回、経口投与してビタミン C の皮膚移行量を経時的に測定した。
経口投与後、皮膚中ビタミン C 量は経時的に増加し、６時間で最大となった（図２）。また、12 時間では減少し、それ以降 24 時間まで変化はなかった。

４．考察

ビタミン C を合成できない SMP30/GNL 遺伝子破壊ヘアレスマウスを用いてビタミン C の経口 1 回摂取による皮膚へのビタミン C の移行速度を調べた。経口投与後、ビタミン C は経時的に皮膚に移行し、６時間で最大となることが分かった。ヒトでもビタミン C を経口摂取後、同様に皮膚中ビタミン C 量が６時間で最大となるかは明らかではない。
本研究で用いたビタミン C を合成できない SMP30/GNL 遺伝子破壊ヘアレスマウスは皮膚でのビタミン C の解析にとても有用であると考えられる。
謝

辞

本研究を実施するにあたりご支援頂いた財団法人コスメ

図２ 経口１回摂取によるビタミン C の皮膚への移行速度
SMP30/GNL 遺伝子破壊ヘアレスマウスに生後 2 ヵ月齢から1 ヵ月間、1 日必要量の 2.5% のビタミン C を与えて、ビタミン C 不足状態にした。このマウスに 1 日必要量の 50% のビタミン C を 1 回、経口投与した。投与後、経時的に皮膚中のビタミン C 量を測定した。点線は、SMP30/GNL 遺伝子破壊ヘアレスマウスに 1 日必要量の 100% のビタミン C を与えた場合の皮膚中ビタミン C 量を示す。

トロジー研究振興財団に深く感謝致します。
（引用文献）
１）I s h i g a m i , A . a n d M a r u y a m a , N . : ( R E V I E W

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２）石神昭人、佐藤安訓、丸山直記 : 機能解明！ SMP30

５）Sato, Y., Uchiki, T., Iwama, M. et al. : Determination

はビタミン C 合成に重要な酵素．基礎老化研究 , 30, 11-of dehydroascorbic acid in mouse tissues and14, 2006.

plasma by using tris(2-carboxyethyl)phosphine３）石神昭人 : ビタミン C の不足が老化に及ぼす影響．ビ

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タミン , 81, 303-308, 2007.
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