Online publication; available at: http://jats-truffles.org/truffology/

Truffology 4 (1): 9–16 (2021)

Original peer-reviewed article （原著論文 ； 査読有）

国立科学博物館の黒色系トリュフ （セイヨウショウロ属） 標本の見直しと形態識別ガイド
Re-examination for black truffle collections (Tuber spp.) of National Museum of
Nature and Science, Japan and a brief guide for the morphological classification
木下 晃彦 1*, 佐々木 廣海 2Akihiko Kinoshita1*, Hiromi Sasaki2
1

国立研究開発法人森林研究 ・ 整備機構 森林総合研究所九州支所， 〒 860-0862 熊本県熊本市中央区黒髪4-11-16
Kyushu Research Center, Forestry and Forest Products Research Institute, 4-11-16 Kurokami, Kumamoto-shi Chuoku, Kumamoto 860-0862, Japan2

神奈川県藤沢市
Fujisawa-shi, Kanagawa Prefecture, Japan* Corresponding author （主著者）

E-mail: akinoshita@aﬀrc.go.jp

要旨
日本国内で発生する黒色系のセイヨウショウロ属は、 分子系統解析および形態解析によって、 Tuber himalayense、 T.
longispinosum、 Tuber sp. 5 （Kinoshita et al., 2011, Mycologia 103: 779–794） の 3 種が知られており、 形態識別が可能なことが示されている。 しかしそれらの発表以前に同定され、 博物間に収蔵された標本は、 学名、 和名が錯綜しており、 整理が必要な状態にある。 そこで本研究では、 国内の博物館に収蔵されている黒色系のセイヨウショウロ属の標本を対象に、 先ず国立科学博物館の標本について形態による分類が可能かを再検証し、 学名と和名の経緯を明らかにしたのち、 分類学的整理を行った。 26 点の標本について、1 から 8 胞子性子嚢の観察頻度をカウントするとともに、胞子装飾のタイプを特定し、4 胞子性子嚢の胞子の装飾の高さを計測した。Tuber himalayense、T. longispinosum のいずれかと判断された標本については、
装飾タイプおよびその高さに基づき、 先行研究で記載した学名の明らかな標本の同データとともに主成分分析を行った。 また、各標本から全 DNA を抽出して核リボソーム DNA の Internal Transcribed Spacer 領域をシーケンシングし、国際 DNA デー
タバンクに対して相同性検索を行った。 その結果、 最初に子嚢内の胞子数と胞子の装飾の特徴から Tuber sp. 5 に該当する
標本 6 点を選別した。 その他の標本について、胞子の装飾タイプとその高さ、およびそれらの情報に基づく主成分分析から、
T. longispinosum を 16 点、 T. himalayense を 4 点識別した。 DNA 解析の結果、 26 点中 6 点で塩基配列の解読に成功し、 全てで形態による判定と一致する分子同定結果が得られた。 標本の学名と和名の経緯を調査した結果、 T. longispinosum には
イボセイヨウショウロを、 T. himalayense にはアジアクロセイヨウショウロを、 そして Tuber sp. 5 にはウロイボセイヨウショウロをそれぞれ使用することが適切であると考えた。 最後に、 形態特徴により国内の黒色系のセイヨウショウロ属 3 種に対して識別が可能なことが改めて示されたため、 種同定のための検索表を記した。

Abstract
Three black truffle species, Tuber sp. 5 (Kinoshita et al., 2011, Mycologia 103: 779–794), T. himalayense and T. longispinosum,
have been known in Japan. These three species are distinguishable by morphological characteristics. However, manyof the black truffle specimens deposited in Japanese herbaria have not been correctly re-identified so far. The purpose© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2021

9

Truffology - Volume 4, Issue 1, 2021

木下 ・ 佐々木 ： 科博の黒トリュフ標本の再検討

of this study is to re-identify the specimens in the National Museum of Nature and Science, Japan. For each of the 26
specimens, we examined the observed frequency of 1- to 8-spored asci and height of the spore ornamentation. For thosespecimens identified either as T. longispinosum or as T. himalayense, a principal component analysis (PCA) against theirauthentic specimens was conducted based on the spore ornamental types and its height. Of those 26 specimens, six wereidentified as Tuber sp. 5 based on the frequency of 1- to 8-spored asci and of spore ornamentation. The other specimens
were identified as T. longispinosum (16 specimens) and T. himalayense (4 specimens) based on spore morphologies andthe results of PCA. With regard to correspondence between Japanese names and scientific names, we confirmed that it
was appropriate to assign “Ibo-seiyoshoro” for T. longispinosum, “Ajia-kuro-seiyoshoro” for T. himalayense, and “Uro-iboseiyoshoro” for Tuber sp. 5. We also provide diagnostic keys to the Japanese black truffle species.
Article Info: Submitted: 23 December 2020

Accepted: 4 March 2021

Published: 31 March 2021

序論

ウロ属標本には、 学名の改訂のみならず、 学名と和名間の関セイヨウショウロ属 （Tuber spp.） は子囊菌門チャワンタケ目セ連の解明などの整理が必要な状態であると考えられた。 そこで

イヨウショウロ科に属し、 その子実体は 「トリュフ」 として名高

本研究では、 日本国内の博物館に収蔵されている黒色系のセく知られる。 このうち、 子実体の外観が黒色を呈し、 全体にイイヨウショウロ属の標本を整理することを目的とし、 まず、 国立科

ボ状突起を有する種は、 分子系統学的な見解により Aestivum

学博物館に収蔵された標本を対象に、 1) 形態による分類が可lineage あるいは Melanosporum lineage に属することが明らかに能かを再検証し、 2) 命名の経緯を明らかにするとともに、 標本されている （Bonito et al., 2013 ； Bonito & Smith, 2016）。

の分類学的整理を行った。

日本国内で発生する黒色系のセイヨウショウロ属は、 1977 年に初めて報告された （𠮷見 2008a）。 京都府長岡京市で採取さ材料および手法

れたその子実体は、 外部形態や胞子の形態的特徴に基づき、国立科学博物館に収蔵されている 1977 年から 2015 年までのインドのヒマラヤの麓で発見され、 1892 年に報告された Tuber

間に日本国内で採取された 26 点の標本 （TNS-F-19005, 32715,

indicum Cooke & Massee と同定され、 イボセイヨウショウロと命

42634, 42796, 42797, 42899, 42923, 42924, 42925, 42930, 42936,

名された。 他にも、 𠮷見 （1998, 2008b） による、 胞子表面が42963, 42982, 43330, 44092, 44093, 44138, 44140, 44426, 53913,

網目を呈する Tuber aestivum Vittad. （クロアミメセイヨウショウロ

64101, 64165, 64166, 70254, 71838, 243771） を対象に、 以下の= アミメクロセイヨウショウロ） や、 大久保 （2013） による Tuber

解析を行った。

pseudoexcavatum Y. Wang, G. Moreno, L. J. Riousset, J. L. Manjón& G. Riousset （ウロイボセイヨウショウロ） が知られる。

DNA 抽出、 PCR、 シーケンシング

その後、著者らは国内の黒色系のセイヨウショウロ属を対象に、各標本から 1 mm3 の組織片をメスで切り出し、 1.5 ml チュー

分子系統解析による分類学的検討を行い、 国内で発生する黒ブ内でホモジナイザーペッスルを用いて破砕した後、 DNeasy

色系のセイヨウショウロ属菌は、 Melanosporum lineage に属する

Plant Mini Kit （Qiagen, Valencia, California, USA） で 全 DNA

アジアクロセイヨウショウロ （Tuber himalayense Zhang & Minter）

を 抽 出 し た。 PCR 増 幅 に は、 核 リ ボ ソ ー ム DNA Internalとイボセイヨウショウロ （Tuber longispinosum A.Kinosh.）、 そしてTranscribed Spacer (ITS) 領域および、 5.8S リボソーム RNA の中 国 産 の Tuber pseudohimalayense G. Moreno, Manjón, J. Díez

全長を対象とし、 ユニバーサルプライマーの ITS1F (Gardes && García-Mont (= T. pseudoexcavatum) と形態的特徴が似るが、Bruns, 1993) および ITS4 (White et al., 1990) を用いた。 PCR 増

系統的には独立する可能性のある Tuber sp. 5 の 3 種からなるこ幅酵素には TaKaRa Multiplex PCR kit ver.2 (Takara Otsu, Japan)とを明らかにした （Kinoshita et al., 2011, 2018）。

を使用し、 反応濃度は製造会社の推奨に従った。 PCR 条件

東アジアで発生する黒色系セイヨウショウロ属は、 形態特徴

は、 94 ℃ ・ 60 秒 の 初 期 変 性、 94 ℃ ・ 60 秒、 57 ℃ ・ 60 秒、が互いに類似しており識別が困難なことから、 DNA 解析が必

72℃ ・ 90 秒を 30 サイクル、 72℃ ・ 10 分間の最終延長を行っ須であると考えられてきた （例えば、 Chen et al., 2011 ； Wangた。 その後アガロースゲル電気泳動で標的 DNA 増幅の有無

et al., 2006）。 しかし日本国内の種に対しては、 胞子の特徴をを確認した後、 PCR 産物を ExoSAP-IT (Aﬀymetrix, Santa Clara,

精査することにより、 形態から分類が可能であることが示された

CA, USA) で精製した。 シーケンシングは、 ABI3500 (Applied（Kinoshita et al., 2018 ； 大久保、 2013）。 こうした背景により、Biosystems, Foster, California, USA) と BigDye Terminator 3.1

2018 年以前に国内の博物館に収蔵された黒色系のセイヨウショ

Cycle Sequencing kit (Applied Biosystems, Foster, California,

10© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2021

Truffology - Volume 4, Issue 1, 2021

木下 ・ 佐々木 ： 科博の黒トリュフ標本の再検討
USA) を用いて製造会社の指示に従い、 PCR 増幅に使用したの記載に用いた森林総合研究所の収蔵標本 （T. himalayense:

同じプライマーを用いて行なった。 得られた塩基配列データは、

TFM:S17011, S17012, S17013, S17014, S17015, S17016, S17018,

ATGC ver.7.1 (Genetyx Co., Tokyo, Japan) を用いてクロマトグラ

S17019, S17020; T. longispinosum: S17001, S17003, S17004,

ムデータと比較してベースコールを調整した後、 双方向の配列

S17006, S17002, S17007, S17008） のデータと照合するために、をアセンブルして ITS 領域の完全長を得た。 修正した塩基配標本ごとに胞子の装飾タイプ （1 ： 棘のみ、 2 ： 部分的網目、列は NCBI の DNA データバンクに対して BLAST 検索を行い、3：有棘網目）、 その高さの平均値を入力したマトリクスを作表し、ITS 領域全長で最上位にランクした同定の確かな情報を参照しEasy PCA （https://hoxom-hist.appspot.com/pca.html） で主成分た。 配列決定したデータは、 国際塩基配列データベースに登分析を行った。 主成分分析は多変量解析の一つで、 要因と考録した （表 1）。

えられる複数の形質データを低次元に縮約して散布図で示すことができる。 類似データは近くに、 相違データは遠くに分布す

胞子の形態観察および主成分分析

るため、 マトリクスデータに基づいてサンプル間の関係を評価す
3胞子形態を観察するために、 各標本のグレバから 0.5 mm 程ることが可能である。

度の菌体をメスで切り出し、 3% 水酸化カリウム溶液、 もしくは水を滴下したスライドグラス上で解してカバーグラスでマウントした。

結果

その後、 10–100 倍の対物レンズを装着した光学顕微鏡で観察

分子同定

した。

rDNA の ITS 領域を PCR 増幅した結果、 26 点のうち 13 点胞子の形態特徴に基づく国内の黒色系セイヨウショウロ属 3 種

で DNA が増幅した。 DNA 増幅したサンプルをシーケンスし（T. himalayense, T. longispinosum, Tuber sp. 5） の識別は、 先行研た結果、 10 点で明瞭な波形が得られた。 これらの ITS 配列を究の知見に基づき次の手順で行なった。 Tuber sp. 5 は 1 子囊内BLAST 解析した結果、4 点はコンタミと思われる菌類（Aspergillusに 8 個までの胞子を形成し、 胞子表面の装飾は有棘網目であspp.） が検出され、 残りの 6 点で子実体由来の配列が得られる （大久保、 2013 ； 佐々木ら、 2016）。 しかし他の 2 種は最大た （表 1）。 すなわち TNS-F-19005, 42925 の配列は Tuber sp. 5で 6 個までのため（Kinoshita et al., 2018）、これら 2 つの特徴から、の配列と 98% 以上で一致し、 64165, 64166 は T. himalayense と最初に Tuber sp. 5 を選別した。 残りの標本に対しては、 胞子97% 以上、 64101, 70254 は T. longispunosum の配列と 98% 以

表面の装飾が棘のみで、 かつその高さ平均が 4 μm 以上の場上で一致した。

合、 T. longispinosum と判断し、 それ以下ならば T. himalayenseと判断した （Kinoshita et al., 2018）。

胞子の形態解析と主成分分析

以上の手順に基づき、 まずは全標本の中から Tuber sp. 5 を

26 点の標本のうち、 7 個以上の胞子を含む子嚢が観察された

選別するため、 各標本に対して 20 個の子嚢をランダムに選び、標本は 6 点 （TNS-F-19005, 42797, 42925, 42982, 53913, 71838）

1 から 8 胞子性までの子嚢の個数をカウントした。 さらに 1 標本

で （図 1）、それらの胞子の装飾は全て有棘網目だった （表 1）。

あたり 10 個の胞子を対象に、 個々の標本の胞子の装飾タイプ

一方、 6 胞子性子嚢までしか確認されなかった標本は 20 点で（棘のみ、 部分的網目、 有棘網目） を特定した。 そして、 胞（図 1）、 胞子の装飾タイプは、 棘のみ、 有棘網目、 部分的網子の装飾の高さを計測した。 装飾の高さは 1 子囊内の胞子数目の 3 タイプだった。 このうち、 装飾の高さ平均が 4 μm 以上のに比例して変化するため比較条件を揃える必要があり （未発表

標本は 16 点で、 装飾タイプは全て棘のみだった （表 1）。 それデータ）、 また先行研究で 4 胞子性子嚢が最も観察頻度が高以下の標本は 4 点で、 装飾タイプは有棘網目が 1 点で、 部分かったことから （Kinoshita et al., 2018）、 4 胞子性子嚢の胞子を的網目は 3 点だった （表 1）。 これら 20 点の標本の胞子の装計測対象とした。 3 個の 4 胞子性子囊について、 4 個の胞子の飾タイプとその高さの計測データに基づき、 T. himalayense と T.

装飾の高さを各 3 点ランダムに計測した （1 標本あたり計 12 個

longispinosum の記載に用いた標本データも加えて主成分分析の胞子、 36 点の装飾の高さ）。 これら胞子の装飾タイプ、 装飾を行った結果、 3 つの主要グループが形成された （図 2）。 この高さ （4 μm 以上もしくは未満） を基準に、 T. longispinosum とのうち 16 点は、 T. longispinosum の記載標本群と同じグループ

T. himalayense を識別した。 ただし後者の種には、 装飾の高さがを形成し、 残り 4 点のうち、 3 点は部分的網目群と、 1 点は T.

4 μm 以上の標本が観察されることがあり、 装飾タイプは 1 標本

himalayense の記載標本の有棘網目群とそれぞれグループを形

内でも棘のみ、 有棘網目、 部分的網目が混在することがあるた成した。

め、 いずれか一方の形態特徴だけでは判断が困難な場合がある（Kinoshita et al., 2018）。 そこで、 Tuber sp. 5 以外の標本については、 Kinoshita et al. (2018) で T. himalayense、 T. longispinosum© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2021

標本ラベルの和名
国立科学博物館に収蔵される黒色系セイヨウショウロ属の標
11

12

Tuber
Tuber
Tuber

Tuber indicum

44093 *
44138 *
44140 *

44426

–

–

–
イボセイヨウショウロ

–

–

–

–

–

–

–
–
–

イボセイヨウショウロ

イボセイヨウショウロ

イボセイヨウショウロ

クロアミメセイヨウショウロ

イボセイヨウショウロ–
No.6585

–

–

–

–

–

–

仮No.78
仮No.123
仮No.125

仮No.77

No.8611

No.10295

No.10506

No.10255

2014年10月19日
1979年10月6日

2015年9月26日

2015年11月15日

2015年11月23日

2015年10月16日

2014年9月20日

2011年9月23日

1997年1月7日
1998年10月
1995年11月

1977年

1993年10月8日

1999年12月1日

2001年11月25日

1999年9月26日

1998年2月24日

1997年12月1日

1997年12月

1993年9月28日
1993年10月8日
1996年11月23日
1997年8月7日

1979年10月6日

2008年4月10日

2008年10月12日

採取年月日
Collection date

埼玉県比企郡滑川町
大分県由布市京都府長岡京市

千葉県習志野市

千葉県習志野市

神奈川県厚木市

宮城県仙台市

大分県由布市

神奈川県厚木市
神奈川県厚木市–b–

京都府京都市

大分県由布市

山口県美祢市

大分県由布市

神奈川県厚木市

福岡県北九州市

神奈川県厚木市

京都府京都市京都府京都市京都府京都市
神奈川県厚木市

京都府長岡京市

山梨県山中湖村

福島県いわき市

採取地b
Collection location

調査時点（2019年1月）でラベルに記載されていた学名を転記した．
採取地名は現在の市町村名に倣った．
c
胞子装飾の高さは4胞子性子嚢3個を対象に，1胞子あたり3点の高さを計測し（計36点），平均値を求めた．
d
括弧内はBLAST検索で最上位にヒットした配列のアクセッション番号とITS全長の一致率（%）

a

No.9759

No.8598
No.8612
No.9633
No.9759

No.5878––

標本番号
Vouchernumber by
S. Yoshimi

クロアミメセイヨウショウロ
No.9766（アミメノクロセイヨウショウロ）
No.9844
イボセイヨウショウロ

イボセイヨウショウロ

クロアミメセイヨウショウロ
チャセイヨウショウロ
イボセイヨウショウロ
イボセイヨウショウロ

イボセイヨウショウロ

和名Japanese name* は𠮷𠮷見昭一氏の標本を示し，和名は標本ラベルを転記した．

Tuber indicum

Tuber indicum

44092 *

Tuber formosanum

Tuber indicum

43330 *

71838
243771 *Tuber indicum

42982 *

70254

Tuber aestivum

42963 *

Tuber formosanum

Tuber indicum

42936 *

64166

Tuber indicum

Tuber formosanum

Tuber aestivum

42925 *

42930 *

64165

Tuber indicum

42924 *

Tuber

Tuber aestivum
Tuber borchii
Tuber indicum
Tuber indicum

42796 *
42797 *
42899 *
42923 *

Tuber pseudoexcavatum

Tuber indicum

42634 *

64101

Tuber

32715

53913

Tuber

19005

標本番号 標本ラベルの学名aVoucher no. Scientific name on(TNS-F-)
specimen label

有棘網目
棘のみ

棘のみ

部分的網目

部分的網目

棘のみ

有棘網目

棘のみ

棘のみ
棘のみ
部分的網目

棘のみ

棘のみ

有棘網目

有棘網目

棘のみ

棘のみ

有棘網目

棘のみ

棘のみ
有棘網目
棘のみ
棘のみ

棘のみ

棘のみ

有棘網目

4.1
6.5

5.7

3.6

3.1

8.0

3.5

4.8

6.2
5.8
3.1

6.0

5.8

2.9

3.3

7.5

4.4

2.7

5.3

5.9
3.8
4.7
5.6

5.7

4.6

3.4

Tuber sp.5
T. longispinosum

T. longispinosum

T. himalayense

T. himalayense

T. longispinosum

Tuber sp. 5

T. longispinosum

T. longispinosum
T. longispinosum
T. himalayense

T. longispinosum

T. longispinosum

Tuber sp. 5

T. himalayense

T. longispinosum

T. longispinosum

Tuber sp. 5

T. longispinosum

T. longispinosum
Tuber sp. 5
T. longispinosum
T. longispinosum

T. longispinosum

T. longispinosum

Tuber sp. 5

装飾の高さ平均本研究の同定結果
胞子表面の模様（μm）
Identification in thisOrnamentation on
Average height of
study
spore surface
ornamentation (μm)

LC606029

LC606028

LC606027

LC606026

LC606025

LC606024–
T. longispinosum(AB553420, 98.6%)
T. himalayense(LC508584, 97.3%)
T. himalayense(LC312200, 99.5%)
T. longispinosum(LC410177, 100%)

–

–
–
–

–

–

–

–

–

Tuber sp. 5(AB553381, 98.0%)
–

–

–
–
–
–

–

Tuber sp. 5(AB553382, 98.3%)–

国際塩基配列の rDNA ITS領域の登録番号
BLAST解析の結果d
Genbank
BLAST results ofaccession number rDNA ITS sequences
備考
Note

子実体が未熟で成熟した胞子がなかった（胞子が全て透明）．
Kinoshita et al. (2018) のTFM: S17013と同地点．
Kinoshita et al. (2018) のTFM: S17013と同地点．

子実体が未熟で成熟した胞子がなかった（胞子が全て透明）．

𠮷𠮷見（2008b）の464ページに掲載．子実体が未熟で成熟した胞子がなかった（胞子が全て透明）．
𠮷𠮷見（2008b）の467〜470ページと同一標本の可能性が高い．

子実体が未熟で成熟した胞子がなかった（胞子が全て透明）．
Kinoshita et al. (2011)のK403と同地点から採取された可能性が高い．

子嚢が消失していたため1子嚢内の胞子数は不明．主成分分析には用いなかった．

𠮷𠮷見（2008b）の475ページに掲載．

𠮷𠮷見（2008b）の461ページに掲載．
No.5878だが日付等は文献と標本ラベルで異なる．

Table. 1. The list of black truffle (Tuber spp.) collections deposited in National Museum of Nature and Science examined in this study, their morphological characters and the results of re-identification

表 1． 観察に供試した国立科学博物館の標本およびそれらの形態特徴と本研究による同定結果

木下 ・ 佐々木 ： 科博の黒トリュフ標本の再検討
Truffology - Volume 4, Issue 1, 2021

© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2021

Truffology - Volume 4, Issue 1, 2021

観察個数
Number of observations

木下 ・ 佐々木 ： 科博の黒トリュフ標本の再検討

子嚢内の胞子数
Number of spores per ascus
図 1． 各標本の 1 から 8 胞子性子嚢までの観察個数． 各グラフの上部の番号は国立科学博物館の標本番号 （TNS-F） を示す。
Fig. 1. Observed number of asci with one to eight ascospores per specimen. The number at the top column of each histogram indicatesthe voucher number of National Museum of Nature and Science (TNS-F).

図 2． 胞子表面の装飾タイプおよびその高さに基づく主成分分析． 塗り潰しと白抜きのシンボルは， それぞれ国立科学博物館の標本と， 先行研究で記載された森林総合研究所の標本である． 丸はイボセイヨウショウロ， 三角はアジアクロセイヨウショウロの標本である． 点線の囲みはアジアクロセイヨウショウロの胞子装飾が部分的網目のグループ，実線の囲みは有棘網目のグループである．
Fig. 2. Principal component analysis based on ascospore ornamentation and the height. The closed and open symbols are the National
Museum of Nature and Science collections and specimens described in our previous study (Forestry and Forest Products Research Institutecollections). The circles and triangles are the specimens of T. longispinosum and T. himalayense, respectively. The dotted and solid enclosures
represent groups of T. himalayense specimens with partially reticulated ascospores and with spiny reticulate ascospore, respectively.
© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2021

13

Truffology - Volume 4, Issue 1, 2021

木下 ・ 佐々木 ： 科博の黒トリュフ標本の再検討
本 26 点の中に、 𠮷見昭一氏により標本番号が記載されたもの
が 17 点確認された （表 1）。 一方、 標本ラベルに記載された和同定が可能であることが改めて示された。
胞子の形態から日本の黒色系セイヨウショウロ属 3 種を同定

名に着目すると、 イボセイヨウショウロと記載された標本は 10 点、する際の注意点を以下にまとめる。

クロアミメセイヨウショウロと記載された標本は 3 点、 チャセイヨウ

1) 4 胞子性子嚢の胞子と特定できない胞子の装飾の高さは計

ショウロと記載された標本は 1 点だった。 和名の記載がなかった

測しない ： 先述したように、 装飾の高さは子嚢内の胞子数に

標本は 3 点だった。 なお TNS-F-44092 （吉見仮 77） は採集日比例して変わるため、 老熟した子実体や状態の悪い標本でや採集場所等が不明であったが、 日本きのこ図版 No.1028 イボ

は、 子のうが裂開して 4 胞子性を特定できない場合がある。

セイヨウショウロのタイトルの切りぬきが同封されていた。

1–2 胞子性の場合、 T. himalayense においても装飾が高い胞子があるため、 T. longisponosum と誤同定する恐れがあり注意

考察
黒色系セイヨウショウロ属は形態で判別が可能かが必要である。
2) 装飾の明瞭な胞子を対象にする ： 子嚢内で装飾の先端が胞子の形態特徴に基づく Tuber sp. 5 の同定基準は、 子嚢内

折れ曲って計測が困難な胞子もあるが、 そのような胞子はの胞子数が最大 8 個まで観察されることと、 胞子の装飾タイプ

避けて装飾の明瞭な胞子を対象とする。 特に T. himalayenseが有棘網目であることの 2 点である。 この基準から Tuber sp. 5 とでは棘の基部が広がり、 棘の間が連結するため、 網目状の判断された 6 点の標本のうち 2 点は、 DNA 解析に成功した 2構造をなしており、 注意深く観察する必要がある。 また、 T.

点の結果と一致した （表 1）。 8 胞子性子嚢まで観察される黒longispinosum では棘の基部が狭いため明瞭に見えるが、 折色系のセイヨウショウロ属は海外でもいくつかが知られているがれ曲った棘が影となって線のように見え、 近接する棘と繋がり、（例えば T. pseudohimalayense、 T. malenconii Donadini, Riousset,

部分的網目のように見えることがある。 このため、 顕微鏡の焦G. Riousset & G. Chev. [Donadini et al., 1978] など）、 日本国内

点深度を変えながら注意深く観察する。

では現在までのところ、Tuber sp. 5 しか確認されていない （図 1）。

3) 未熟な子実体から得た胞子の取り扱い ： 未熟な胞子は透明、したがって、上記 2 つの胞子の形態特徴に基づき、他の 2 種 （T.

あるいは薄黄色をしており、 装飾の発達が不十分なため、 形

himalayense、 T. longispinosum） から Tuber sp. 5 を区別し、 同

態からの同定が困難である。 この場合、 1–2 週間程度冷蔵

定しても差し支えないと考えられる。

庫で追熟させた後、 再度胞子を観察すると良い。 乾燥標本

一方、 T. longispinosum の同定基準は、 4 μm 以上の棘によっの場合、 なるべく着色化の進んだ胞子を計測する。

て装飾された胞子を形成することである。 この基準で見分けられた 16 点の標本のうち、 2 点については分子同定が行われ、 い

標本の見直しにより明らかになった学名と和名の関係

ずれも形態による同定結果と一致した。 計 26 点の供試標本の国内で発生する黒色系セイヨウショウロ属の和名として、 𠮷見

うち、 残りの 4 点の標本は T. himalayense と判断され、 これらの（2008a） によるイボセイヨウショウロ、 𠮷見 （1998, 2008b） によ

うち分子同定が行われた 2 点において同定結果が一致した （表るクロアミメセイヨウショウロ （= アミメクロセイヨウショウロ）、 大久

1）。 このように、 DNA 解析に成功した標本数が全体として少な

保 （2013） によるウロイボセイヨウショウロ、 Kinoshita et al. (2018)

かったものの、 T. longispinosum と T. himalayense においても形によるアジアクロセイヨウショウロがそれぞれ提唱されている。

態と分子同定の結果が一致することが示された。 さらに胞子形

𠮷見昭一氏の標本番号が記載され、 イボセイヨウショウロの態で識別した T. longispinosum の 16 点、 および T. himalayense

和名が記載された標本 10 点中 9 点が、 T. longispinosum での 4 点が、 主成分分析によって各種の記載標本グループに帰あった。 このうちの一つ TNS-F-44092 （𠮷見仮 77） は、 𠮷見属したことを考慮しても （図 2）、 本研究の形態判別法は有効（1979） の日本きのこ図版 No.1028 イボセイヨウショウロのタイトであるといえるだろう。 同様のアプローチは、 T. brumale Vittad.

ルの切りぬきが同封されており、 この図版記載の基となった標の隠蔽種とされていた T. cryptobrumale Merényi, T. Varga & Z.

本の可能性がある。これらのことから、Kinoshita et al. (2018) が、Bratek を区別する際にも用いられていることから （Merényi et al.,

この図版に記載された胞子の棘が長く、 基部が狭いことを根2017）、 単一の形態形質からでは判断が困難な種に対して、 形

拠に、 T. longispinosum の和名をイボセイヨウショウロとしたこと

態の計測値やタイプ区分などの複数の形質情報に基づく多変は適切であったと考えられるため、 TNS-F-44092 （𠮷見仮 77）

量解析は分類学的にも有効なツールといえるだろう。 以上の結を和名 「イボセイヨウショウロ」 の基礎としたい。

果をまとめると、 本研究で調査した標本は Tuber sp. 5 が 6 点、 T.

同様に、 𠮷見昭一氏の標本番号が記載され、 ラベルにク

longispinosum が 16 点、 T. himalayense が 4 点ということが明らか

ロアミメセイヨウショウロと記載された標本は 3 点あり、 本研究になり、 日本国内で発生する黒色系セイヨウショウロ属は、 子嚢に よ る 再 同 定 の 結 果、 T. longispinosum、 T. himalayense お よ内の胞子数、胞子表面の装飾、その高さが求められれば、識別・び Tuber sp. 5 と同定された標本がそれぞれ 1 点ずつだった。

14© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2021

Truffology - Volume 4, Issue 1, 2021

木下 ・ 佐々木 ： 科博の黒トリュフ標本の再検討
Tuber longispinosum と同定した TNS-F-42634（𠮷見 No.5878）は、謝辞

𠮷見 （2008） ではイボセイヨウショウロと改められ、チャセイヨウショ

本研究を行うにあたり、 国立科学博物館植物研究部の細矢 剛

ウロとしてラベルに記載された TNS-F-42797 （𠮷見 No.8612） は、博士には、 標本借用に際して多大なるご協力をいただいた。 ま𠮷見 （2008） ではクロアミメセイヨウショウロと改められていたことた長目尚子氏、 月足いずみ氏には DNA 解析でご尽力いただから、 クロアミメセイヨウショウロには T. himalayense と Tuber sp. 5

いた。 ここに感謝申し上げる。 最後に、 本論文の改訂に有益が混在していることが判明した。 おそらく𠮷見は T. himalayense

なご助言をいただいた編集者ならびに査読者の皆様に感謝申と Tuber sp. 5 の 2 種を区別せずに、胞子に網目のあるものを 「クし上げる。 本研究は JSPS 科学研究費補助金 （19K06137） のロアミメセイヨウショウロ （アミメクロセイヨウショウロ）」 としていた助成を受けて行った。

のであろう。
大久保 （2013） により命名されたウロイボセイヨウショウロは、

引用文献

形態の記載内容および Kinoshita et al. (2011) が分子系統解析

Bonito G.M., Smith M.E. (2016) General systematic position of theに用いた標本と同日、 同地点で採取された標本が含まれること

truﬄes: evolutionary theories. In: Zambonelli A., Iotti M., Murat, C.

から （KPM-NC 11647: 大久保， 2013） （K403: Kinoshita et al.,(eds.) True truﬄe (Tuber spp.) in the world, Soil Biology Series 47,2011）、 Kinoshita et al. (2011) の Tuber sp. 5 と同種と判断される。

Springer, Switzerland, pp. 3–18.

また、 アジアクロセイヨウショウロは、 T. himalayense （Kinoshita

Bonito G., Smith M.E., Nowak M., Healy R.A., Guevara G., Cazares E.,

et al., 2011 の Tuber sp.6） の和名として提唱されたものである

Kinoshita A., Nouhra E.R., Dominguez L.S., Tedersoo L., Murat C.,（Kinoshita et al., 2018）。

Wang Y., Moreno B.A., Pﬁster D.H., Nara K., Zambonelli A., Trappe

このように、 𠮷見によるクロアミメセイヨウショウロ （= アミメクロ
セイヨウショウロ） は 2 種が混在する一方で、 大久保 （2013）
によるウロイボセイヨウショウロおよび Kinoshita et al. (2018) によるアジアクロセイヨウショウロはそれぞれ明確に 1 種のみで構成されることから、 同定の混乱を避けるため T. himalayense の和名としてはアジアクロセイヨウショウロ、 および Tuber sp. 5 の和名としてはウロイボセイヨウショウロの使用を提案したい。

J.M., Vilgalys R. (2013) Historical biogeography and diversificationof truffles in the Tuberaceae and their newly identified southernhemisphere sister lineage. PLoS ONE 8: e52765.
Chen J., Guo S.-X., Liu P.-G. (2011) Species recognition and cryptic
species in the Tuber indicum complex. PLoS ONE 6: e14625.
Donadini J.C., Riousset, L.J., Chevalier G. (1978) Tuber malençonii nov.
sp. Bulletin de la Société Mycologique de France 94: 351–358.
Gardes M., Bruns T.D. (1993) ITS primers with enhanced speciﬁcity forbasidiomycetes–application to the identification of mycorrhizae and日本産セイヨウショウロ属 Melanosporum lineage の種への検索表
3 種を形態から同定するための検索表を以下に示す。

rusts. Molecular Ecology 2: 113–118.
Kinoshita A., Nara K., Sasaki H., Feng B., Obase K., Yang Z.L.,
Yamanaka T. (2018) Using mating-type loci to improve taxonomyof the Tuber indicum complex, and discovery of a new species, T.

1 子実体は黒色～茶褐色、 ピラミッド状の顕著なイボで覆われる .................................................................................................. 2
1’ 子実体は上記のようではない.........................................................
..........................Melanosporum lineage 以外のセイヨウショウロ属
2 7 個以上の胞子が入った子嚢がある。 胞子の装飾は有棘網目 ......................................ウロイボセイヨウショウロ Tuber sp. 5
2’ 子嚢内の胞子は 6 個以下。 胞子の装飾は棘～有棘網目 ...
..................................................................................................3
3 子嚢内の胞子は 6 個以下。 胞子の装飾は棘で、 子嚢内胞
子数が 4 個の胞子の装飾の平均的な高さは 4 μm 以上 ..........
........................................... イボセイヨウショウロ T. longispinosum
3’ 子嚢内の胞子は 5 個以下。 胞子の装飾は棘、 部分的網目
または有棘網目で、 子嚢内胞子数が 4 個の胞子の装飾の平均的な高さは 4.5 μ m 以下 ...........................................................
................................... アジアクロセイヨウショウロ T. himalayense© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2021

longispinosum. PLoS ONE 13: e0193745.
Kinoshita A., Sasaki H., Nara K. (2011) Phylogeny and diversity ofJapanese truﬄes (Tuber spp.) inferred from sequences of four nuclear
loci. Mycologia 103: 779–794.
Merényi Z., Varga T., Hubai A.G., Pitlik P., Erös Á., Trappe J.M., Bratek
Z. (2017) Challenges in the delimitation of morphologically similar
species: a case study of Tuber brumale agg. (Ascomycota, Pezizales).
Mycological Progress 16: 613–624.
大久保彦 （2013） 黒トリュフの日本新産種． 埼玉きのこ研究会会誌
いっぽん 26: 19–23.
佐々木廣海 ・ 木下晃彦 ・ 奈良一秀 （2016） 地下生菌識別図鑑．
誠文堂新光社， 東京．
𠮷見昭一（1998）日本産セイヨウショウロ属について． 日本菌学会 編．
日本菌学会第 42 回大会講演要旨集 , p. 26. 日本菌学会， 東京．
𠮷見昭一（2008a）イボセイヨウショウロ Tuber indicum． 名部みち代 編．
日本きのこ図版 第 6 巻 . 日本きのこ同好会 2, 神戸 , pp. 137–140.

𠮷見昭一 （親族 編） （2008） 地下生菌図版集 ミクロの世界へ第一15木下 ・ 佐々木 ： 科博の黒トリュフ標本の再検討

Truffology - Volume 4, Issue 1, 2021

歩． 𠮷見一子， 京都．
Wang Y.J., Tan Z.M., Zhang D.C., Murat C., Jeandroz S., Le Tacon F.
(2006) Phylogenetic and populational study of the Tuber indicum
complex. Mycological Research 110: 1034–1045.
White T.J., Bruns T., Lee S., Taylor J.W. (1990) Ampliﬁcation and direct
sequencing of fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics. In:
Gelfand M.A., Sninsky D.H., White T.J. (eds.) In PCR protocols. A guideto methods and applications, Academic Press, SanDiego, pp. 315–322.

16© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2021