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研究報告

ASC-USと判定された標本におけるハイリスク
HPV感染陽性と陰性間での細胞所見の比較―ASC-US判定の減少を目指して―藏菅木本原
村博
昭行＊1＊2隆＊1
裕＊2

坂 野 みどり＊1
加 藤 ちづ代＊1

はじめに杉堀本直 子＊1真須子＊1

1 ．材料と方法

日本産婦人科医会では、子宮頸部細胞診の報告様式（1） 材料をこれまでのパパニコロー・クラス分類からベセス

神奈川県予防医学協会で実施された子宮頸がん一次ダ・システムに2008年から変更した。 また、わが国検診を受診した女性は、2010年 ４ 月と2013年 ３ 月の期の 国 民 医 療 保 険 で は、子 宮 頸 が ん 検 診 でASC-US間 で ７ 万3,011人 だ っ た。こ れ ら の 中 でASC-US、（abnormal squamous cells with undetermined sig-

ASC-Ｈならびに≧LSIL判定を受けた症例は、それぞnificance、重要度不明の異常扁平上皮細胞）と判定され905（1.24％）、24（0.03％）ならびに523（0.72％）だっれた患者に、2010年から補助的検査としてハイリスクた。検診プログラムは市町村あるいは事業所の基準まHPV（Human Papilloma Virus）検 査 に 保 険 適 用 を つたは個人の応募によっている。ASC-US判定を受けたで採用されたASC-USカ

婦人のうち、本論文の筆頭著者の二次検診外来を受診

テゴリーは、必ずしもすべての人間の同意を得るとはし、インフォームドコンセントを受けてHPV検査をいい難いユニークであいまいな基準である。 ベセス受けたのは157人で、うちHPV陽性と陰性者はそれぞダ・システムでは、ASCカテゴリーは個々の細胞でれ67人（42.68％）ならびに90人だった。これらの中で、はなく、標本全体を理解することによって選定するよさらにコルポスコピー検査を受けたものは、それぞれうに開発されたと述べられている。 ASC-USと判定

56人と65人だった。

１）

けた。Bethesda system

１ ）２ ）

３）４）

される頻度は、全細胞診検体中の ５ ％以内とされ、ここれらの症例に、標本保存状態が良好だった11人のの基準は1992年に開催されたアメリカNCIでのワーク

HPV陰性だがコルポ診を受けなかった者を加えたHPVで合意された頻度に基づいている。また、陽性者と陰性者、それぞれ56人と76人を ２ 群に分け

ASC-US検体の中で、ハイリスクHPV感染陽性の頻て、細胞所見を再検討した。それぞれの平均年齢と標したがって、準偏差（Ｍ±SD）は38.4±11.4ならびに44.3±12.8歳

ショップ

５）

度は約40～50％と報告されている。

６ ）－ ８ ）ASC-USカテゴリーはHPV陽性を示す基準である可能である。

性が高い。換言すれば、ASC-US判定の半分はHPV①細胞診陽性ではないところから、HPV検査に間違って誘導されているといえないだろうか。

細胞採取は綿棒（岡崎アプリケイター、岡崎メディカ ル（株）、 名 古 屋）とCytobrush（Medscand Medical

本論文の目的は、ASC-USと判定された細胞標本中

and Cooper Surgical Company, Trumbull, USA）をにハイリスクHPV感染を示す特異的シグナチャーが併用した。子宮膣部をあらかじめ生理的食塩水で湿ら存在するか否かを明らかにし、また不必要なHPV補せた綿棒で擦過し、頸管ではCytobrushを回転させて、助検査を受ける患者を減らすことにある。

細胞採取した。採取した細胞は、それぞれを回転させながら、スライドグラスのそれぞれ半分に塗抹し、素＊１＊２

神奈川県予防医学協会
神奈川県予防医学協会

細胞診センター
婦人検診部

早く95％エチール・アルコールに浸漬した。スライド
標本は細胞診センターでルーチンにしたがって、パパ予防医学52

第 61 号（2020：1）

ニコロー染色し細胞診断業務に供した。

はそれぞれ96.43％（n＝54）ならびに88.16％（n＝67）

細胞診断に当たっては、ベセスダ準拠日本産婦人科

で、互いに有意な差はなかった。しかし、萎縮性背景

医会分類を用いた。

ではそれぞれ3.57％（n＝2）ならびに11.84％（n＝9）を②再検討した細胞所見示し、頻度は少ないもののHPV陰性例で有意に高かっ

１ ）２ ）

再検討した所見は、成熟あるいは萎縮性背景、炎症た（P＝0.0498, 1-sided Fisher’s exact test、図－1）。

性（細菌感染）背景、核異型を有するまたは有しない

細菌感染については、それぞれ21.43％（n＝12）な

koilocytes、核異型を伴うまたは伴わない錯角化細胞、らびに25％（n＝19）で、有意な差を示さなかった。

核異型を伴うまたは伴わない表層（SFT）／中層（IMT）（2） 異型未熟化生細胞細胞、異型未熟扁平上皮化生細胞、泥状核を有する細胞さらに核腫大を呈する多核細胞の有無である。

核異型を伴った未熟化生細胞は、過染性を伴う腫大③HPV検査した円形核と少ない細胞質で高いN/C（核・細胞質）比ASC-US判定されてから ３ ヵ月以内にHPV検査をを呈する小型細胞と表現される。多くは核小体明瞭で受けた者に限って登録した。

ある。この細胞は通常円形であるが、たまに変形してHPV検査法としてHybrid Capture Ⅱ法を用いた。

いることがある。しばしば集塊として出現する（図－2）。

Index score≧ １ を陽性と判定した。検査の実施はLSI

両者間の異型未熟化生細胞の出現頻度は、それぞれラボラトリー（東京）に依頼し、検査手順は同ラボの基73.21％（n＝41）
ならびに13.16％（n＝10）で、HPV陽性準に従った。

者に有意に高頻度だった（P＝0.0000, 2-sided Fisher’④統計解析

s exact test、図－3）。一方、核異型を伴わない未熟化統計解析はExel Statistics 2010 software for Win-

生細胞の出現頻度は、それぞれ ０ ％ならびに46.05％

dows®を 用 い た。HPV陽 性 者 と 陰 性 者 の 年 齢 は、（n＝35）を示し、有意にHPV陰性群に多かった（P＝t-testを用いて計算し、平均値（Ｍ）±標準偏差（SD）で0.0000, 2-sided Fisher’s exact test）。

表示した。両群の細胞所見の出現頻度については、（3） SFT/IMT異型細胞

Fisher’s exact testを用いて比較し、Ｐ値＜0.05を統計学的に有意と判定した。

核異型を伴うSFT/IMT細胞は扁平上皮内病変（SIL）の基準を質的・量的に十分に満たさないものである（図－4）。

2 ．結果

これらの出現頻度は、それぞれ41.07％（n＝23）なら（1） 背景びに13.16％（n＝10）で、HPV陽性者に有意に高かっ

SFTとIMTの出現頻度は、HPV陽性群と陰性群とで図－1た（P＝0.0004, 2-sided Fisher’s exact test、図－5）。

萎縮性背景の出現頻度：HPV感染陽性と陰性の比較
1412＊

10％

11. 84％864203. 57％
HPV（+）（n=2/56）

HPV（-）（n=9/76）*P=0.0498, 1-sided Fisher’s exact test.

研究報告

53

図－2

Pap stain, Objective x40.
異型未熟化生細胞は過染した腫大円形核、乏しい細胞質と高いN/C比を有する細胞で、核小体明瞭である。細胞はしばしば密集した集塊として出現（ａ、ｂ）し、時にシート状（ｃ）あるいは疎な結合（ｄ）を呈する。

図－3

異型未熟化生細胞の出現頻度：HPV感染陽性と陰性の比較
80706050％＊

73. 21％40302010013. 16％
HPV（+）（n=41/56）

HPV（-）（n=10/76）*P=0.0000, 2-sided Fisher’s exact test.

予防医学

54

第 61 号（2020：1）

図－4

Pap stain, Objective x40.

核腫大を伴ったSFT核異型細胞（ａ）とIMT核異型細胞（ｂ）。

図－5

SFT/IMT核異型細胞の出現頻度：HPV感染陽性と陰性の比較
454035＊

41. 07％3025％

20151013. 16％

50HPV（+）（n=23/56）

HPV（-）（n=10/76）*P=0.0004 2-sided Fisher’s exact test.

一方、核異型の伴わない中等度成熟の扁平上皮化生細胞では、 ０ ％ならびに36.84％（n＝28）を示し、HPV陰性者に有意に高かった（P＝0.0000, Fisher’s exacttest）。

泥状核を有する細胞は暗く泥状に汚れた核を有するものである（図－8）。
HPV陽性と陰性両者の出現頻度の比較では、それぞれ8.93％（n＝5）ならびに ０ ％で、HPV陽性群に有意に高かった（P＝0.0123 2-sided Fisher’s exact test、（4） 異型錯角化細胞

図－9）。しかし、出現するのは稀である。

異型角化細胞は中等度あるいは核異型を伴った小型の角化細胞である（図－6）。
その出現頻度は、それぞれ26.79％（n＝15）ならびに1.32％（n＝1）
で、HPV陽性群に有意に高かった（P＝0.0000, 2-sided Fisher’s exact test、図－7）。

（6） 多核細胞多核細胞では、しばしば核が腫大を呈している（図－10）。
両者間の本所見の出現頻度は、それぞれ21.43％（n＝12）ならびに5.26％（n＝4）と、前者に有意に高かっ（5） 泥状核た（P＝0.0066, 2-sided Fisher’s exact test、図－11）。

研究報告

55

図－6

Pap stain, Objective x40.

核異型を伴った小型の錯角化細胞が混んだ集塊（ａ、ｂ）を成している。

図－7異型錯角化細胞の出現頻度：HPV感染陽性と陰性の比較
30＊

2520％

26. 79％1510501. 32％
HPV（+）（n=15/56）

HPV（-）（n=1/76）*P=0.0000, 2-sided Fisher’s exact test.

図－8

未熟化生細胞（ａ）と増大し変形した成熟化生細胞（ｂ）の強く染められた“泥状”核。

Pap stain, Objective x40.

予防医学

56

図－9第 61 号（2020：1）

泥状核を有する細胞の出現頻度：HPV感染陽性と陰性の比較
10987＊8. 93％

6％ 5432
100％
HPV（+）（n=5/56）

HPV（-）（n=0/76）*P=0.0123 2-sided Fisher’s exact test.

図－10

Pap stain, Objective x40.

角化細胞（ａ）と未熟化生細胞群（ｂ）中の核腫大を伴った多核細胞。

（7） Koilocytes
コイロサイトーシスを呈する細胞は淡明な細胞質と3 ．考案分厚い細胞辺縁を有する細胞である。これらは核異型

ASC-USの判定頻度は、当施設での同時期の全症例を伴う場合と伴わないで出現することがある（図－12、の中では1.24％だった。そのうち今回のHPV陽性頻13）

度は42.68％だった。

核 異 型 を 伴 うkoilocytesの 出 現 頻 度 は、そ れ ぞ れ

本研究によって、ハイリスクHPV感染を予測する17.86％（n＝10）
ならびに10.53％（n＝8）で、HPV陽性

シグナチャーは、異型未熟化生細胞、SFT/IMTの核群に高い傾向にあったが、両者で有意な差は認められ異型細胞、異型錯角化細胞、泥状核ならびに多核細胞なかった（図－14）。核異型を伴わないkoilocytesの場合であることが明らかになった。一方、HPV陰性に多では、それぞれの出現頻度は、28.57％（n＝16）ならびく出現する細胞は、核異型を伴わない未熟化生細胞、に18.42％（n＝14）で、HPV陽性群に高い傾向があっ核異型を伴わない中等度に成熟した化生細胞ならびにたものの、同様に有意な差異を示さなかった（図－15）。

萎縮性背景だった。しかし、成熟したSFT/IMT背景、細菌感染、またkoilocytesでは核異型を有するものと研究報告

図－1157多核細胞の出現頻度：HPV感染陽性と陰性の比較

25
＊

20％

21. 43％1510505. 26％
HPV（+）（n=12/56）

HPV（-）（n=4/76）*P=0.0066, 2-sided Fisher’s exact test.

図－12

Pap stain, Objective x40.

核異型を伴ったkoilocytesの集塊（ａ、ｂ）。

図－13

Pap stain, Objective x40.
核異型を伴わないkoilocytes（ａ、ｂ）。核は幾分腫大傾向にあるが、クロマチンの増量は伴っていない（ｂ）。

58

予防医学

図－14

核異型を伴ったkoilocytesの出現頻度：
HPV感染陽性と陰性の比較

2018161412％
1086420

第 61 号（2020：1）

図－15

核異型を伴わないkoilocytesの出現頻度：
HPV感染陽性と陰性の比較

30
＊ns25

17. 86％

28. 57％＊ns

20％
10. 53％1518. 42％105

HPV（+）（n=10/56）

HPV（-）（n=8/76）*ns（有意差無し）, Fisher’s exact test.

有さないものともに、差異がなかった。
核異型を有する未熟化生細胞は、腫大し過染した円

0HPV（+）（n=16/56）

HPV（-）（n=14/76）*ns（有意差無し）, Fisher’s exact test.

細胞が質的・量的に採取されていれば、これに判定されたであろうと思われる。

形核に多くは核小体を有し、N/C比上昇して、しばし泥状核はHPV感染のシグナチャーであるが、出現ば集塊をなして出現する（図－2）。本細胞は、HPVウイ頻度は8.97％と少なかった。泥状核を有する典型的なルスの格好の攻撃標的と思われる。これらの細胞中に異型細胞はSILに判定されているものと思われる。

HPVウイルスが存在するかどうかについてはこれか

核異型を有するものを含むコイロサイトーシスは、らの格好の研究テーマであろう。組織標本を用いてのHPV感染の典型的な印として定着しているが、今回の同 様 の 細 胞 がAIM
（atypical immature metaplastic

われわれの成績では有意なハイリスクHPV感染のシグAIMは円柱上ナチャーとはいえなかった。おそらく、異型koilocytes

皮に隣接する移行帯域に薄い組織病変を構成し、11）inはローリスクHPV感染でも発生するのではなかろう

situ hybridization（ISH）法で陽性で、核内にびまん性か。われわれは質的・量的に典型的なkoilocytesと判に局在する（episomal pattern）。一方、これに比べ、断された症例で、コルポ診上で異常を認めないことを

CIN3病 変 で は 点 状 に 陽 性 を 示 す と い う（integrated時々経験している。しかし、このよく普及している所pattern）。 Iaconisら

はハイリスクとローリスク

見をASC－US基準から外すべきではないと考える。

HPVの陽性頻度は37例中それぞれ54％、 ３ ％と報告

そうでなければ、ASC-US中のHPV感染例のいくつし、またパラフィン包埋組織での検討では43％は陰性かを見落としてしまう恐れが高いのではなかろうか。

は118例での経験から、一方、核異型を伴わないkoilocytesは無視すべきであHPV陽性頻度は86.4％と報告している。AIMの形態

ろう。そうでなければ、HPV感染に関係しない非特はわれわれの細胞診上で見つけたものと少し所見を異異的変化を取り上げてしまうであろう。

cells）と表記して報告されている。

９）
－12）

12）

10）

だったとしている。古田ら

12）

組織標本中でのこれらのハイリスクHPV感染シグナチャーはSILやAIMは、koilocytosisとは異なって、泥状核、不規則な悪性病変の進行を示すシグナルとはいえない。HPV核辺縁、多核形成、異常分裂像を呈する。そこで、彼

感染陽性者がどのように推移するかについては、次の女らはこれらの所見を一言でVDA（viro-degenerative段階の研究テーマであろう。にしているようである。彼女らは11）12）

atypia）と表現している。われわれの細胞診標本で見核異型の伴わない、未熟や中等度に成熟した化生細つけた異型未熟化生細胞はAIMよりは一層限局した胞さらにはkoilocytesは、ハイリスクHPV感染シグナ所見を呈していると思われる。

チャーではない。これらの結果は無用な補助的HPV

SFT/IMT異型細胞はすでに発生しているLSIL（軽度扁平上皮内病変）に由来するもので、もし典型的な検査を減らすために有用であろう。

研究報告

結語
（要旨に代えて）
目的：ASC-US判定された標本でハイリスクHPV感染を示す特異的シグナチャーを明らかにせんとした。
対象と方法：ASC-USと細胞診断された132例の細胞診標本を用いた。内訳はHPV陽性と陰性、それぞれ陽性56例、陰性76例である。これら ２ 群の細胞像を比較した。
結果：核異型を有する未熟化生細胞、異型SFT/IMT細胞、異型錯角化細胞、泥状核ならびに腫大多核がハ イ リ ス クHPV陽 性 の 特 異 的 シ グ ナ チ ャ ー で ある。一方、HPV（－）
群では、異型の伴わない未熟や中等度に成熟した化生細胞ならびに委縮性背景が優位に高かった。細菌感染を有する炎症性背景、ならびに核異型を有するあるいは有しないkoilocytes
ではともに、両者間で差を認めなかった。
結論：ハイリスクHPV感染が確認される特異的細胞所見が明らかとなった。これらの結果はASC-USカテゴリーを少なくし、ひいては不必要なHPV検査の減少に寄与するであろう。
（本著は論文：Kuramoto H, et al. Comparison of cytologic findings between specimens with and withouthigh-risk HPV infection in those with ASC-US judgement 13）の日本語訳である）
Compliance of Ethical Standards
Disclosure statement
The authors have no conflict of interests to declare.
Ethical approval
Written approvals were obtained from the screening
recipients following national guidelines for privacy
preservation and medical research using human materials.
Funding Sources
There was no funding.

59〔 参 考 文 献 〕１ ）ベセスダシステム2001準拠子宮頸部細胞診報告様式の理解のために 日本産婦人科医会 平成20年12月
２ ）The Bethesda system for reporting cervicalcytology, Definitions, Criteria, and Explanatory
Notes. 2nd ed. Solomon D, Nayar R, editors. NewYork, Springer, 2004
３ ）Stoler MH, Schiffman M, ALTS Group.
Interobserver reproducibility of cervical cytologic
and histologic interpretations: realistic estimatesfrom ASCUS LSIL Triage Study. JAMA, 2001;
285: 1500-5.
４ ）The Bethesda system for reporting cervicalcytology, Definitions, Criteria, and Explanatory
Notes. 3rd ed. Nayar R, Wilbur DC, editors.
Switzerland, Springer, 2015; p105.
５ ）Kurman J, Henson DE, Herbst AL, Nolier KL,Schiffman MH. The 1992 National Cancer Instituteworkshop. Interim guidelines for management ofabnormal cervical cytology. JAMA, 1994; 271:
1866-1869.
６ ）The ALTS Group. Results of a randomized trial
on the management of cytology interpretations ofatypical squamous cells of undeterminedsignificance. Am J Obstet Gynecol, 2003; 188(6):1383-92.
７ ）Nayar R, Wilbur DC. The Bethesda system forreporting cervical cytology. In: Bibbo M, Wilbur
DC, editors. Comprehensive cytopathology. 4 th ed.
London: Elsevier; 2015.
８ ）Ho GY, Bierman R, Beardsley L, Chang CJ, BurkRD. Natural history of cervicovaginal
papillomavirus infection in young women. N EnglJ Med, 1998; 338: 423-8.
９ ）Crum CP, Egawa K, Fu YS, et al. Atypicalimmature metaplasia(AIM). A subset of humanpapilloma virus infection of the cervix. Cancer;
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and Ki-67 immunostaining in atypical immaturesquamous metaplasia of the uterine cervix:
correlation with human papillomavirus detection.
Arch Pathol Lab Med, 2007; 131(9): 1343-1349.
11）古 田 玲 子、秋 山 太、平 井 康 夫、吉 川 裕 之、北 川 知
之：日病理会誌 2010; 99: 205.
12）古田玲子、山田麻里沙、池端浩一ほか：日臨細胞誌
2016; 55(3): 180-188.
13）Kuramoto h, Bannno M, Sugimoto N, et al.
Comparison of cytologic findings between
specimens with and without high-risk HPV
infections in those with ASC-US judgement,
Human Cell, (accepted)