2018.6

No.

58

SHRSP/Izmを用いたACE阻害活性を有する味噌の降圧特性に関する研究
共 立 女 子 大 学 家政学部臨床栄養学

上原誉志夫、 マルコメ㈱

研究開発課

北川学

はじめに
血圧の調節には体液量と血管抵抗が重要であり、各種降圧薬の作用機序もこれらの調節器官に働き血圧を安定化させる。体液量の調節には腎臓機能と心臓機能が関係し、特に腎臓尿細管での Na 再吸収抑制は体液量を減らし、心拍出量を低下させて高血圧の抑制に働く。この面を強調した高血圧モデルとして Dahl 食塩感受性ラットがある。一方、血管の収縮・弛緩性や血管壁肥厚などの解剖学的変化は血管抵抗を調節し、それには交感神経系やレニン・アンジオテンシン系（RAS）、視床下部ホルモン系や血管内皮関連血管作動性因子など多くの調節ホルモンが関係する。この血管壁環境が強調された高血圧モデルとしては SHR/Izm 及び SHRSP/Izm を挙げることができる。したがって、未知なる降圧因子の作用機序を解明するには、これらの実験高血圧モデルを用いて降圧特性を比較することが重要である。われわれも、味噌の降圧機序の解明を進めているが、その過程で SHRSP/Izm を用いて有用な知見を得ることができた。今回の経験をもとに、SHRSP/Izm の可能性について紹介する。

味噌の降圧作用
日常使用される味噌は、大豆、麹、食塩を原料とし、通常味噌には 12% ほどの食塩が含有されることから、味噌汁 1 杯分にはおおよそ 1〜2 グラムの食塩がふくまれる。一日 2 杯飲むとすると 2〜4 グラムの食塩増になり、血圧への影響が懸念されてきた 1.2.3）。しかし、前向き観察研究からはみそ汁の摂取回数と血圧値との間には関連性がみられず、4 グラムの食塩増では収縮期血圧で 7mmHg 程度の上昇が予想されるが、長期味噌摂取では血圧に影響がみられない 4）。この点はヒト介入試験でも明確に実証され、3 か月間の一日 2 杯の味噌汁摂取は血圧に影響しないことが報告されている 5）。
このことは、味噌中には食塩摂取による血圧上昇ドライブをキャンセルするようなメカニズム、おそらく機能性物質が含まれることが予想される。作用機序が未知の物質については、その特性を臨床的に詰めるのには困難があり、まず実験動物を用いた検討が必要になる。Dahl 食塩感受性ラットを用いた検討からは、腎臓での Na 排泄が増加すること、血管拡張物質が存在することなどが分かっている 6.7.8）。Dahl 食塩感受性ラットは摂取した食塩量に依存した血圧上昇を示すことから、食塩による負荷量の判定に適している。食塩による血圧反応性を食塩水と味噌水で厳密に比較することで、味噌中に含まれる Na 利尿物質の存在を推測するこSHRSP/Izm の特徴
ところで、SHRSP/Izm を用いた降圧機能性食品の探査における有用性について、最近の経験を紹介する。SHRSP/Izm は自然発症高血圧のモデル動物であるとともに、食塩感受性の特徴も有する。さらに、SHRSP/Izm では高血圧の発症に交感神経系、神経内分泌系、RAS 系が関与する。したがって、健康食品による血圧低下にこのような神経内分泌系の機序が関係しているかを検証するには適したモデルといえる。
われわれは、製造方法を改良し ACE 阻害活性を強化した味噌（新規味噌）を開発した。新規味噌は
通常市販味噌と比較して IC50 が 10 倍強化されてい

200

180

通常味噌①
新規味噌②
通常味噌と新規味噌③
食塩水④

p<0.05① vs ③p<0.005① vs ④収縮期血圧(mmHg)とができる。

160140p<0.025③ vs ④120100p<0.090① vs ②

前値

2週間後

4週間後

実験期間
（週）

図1

味噌が Dahl 食塩感受性ラットにおける血圧に及ぼす影響る。Dahl 食塩感受性高血圧ラットを（1）5% 通常味噌水（通常味噌）、（2）5%ACE 阻害活性強化味噌水（新規味噌）、（3）2.5% 通常味噌と 2.5% 新規味噌及び（4）0.6% 食塩水（食塩水）（味噌水中の食塩濃度に一致）
下に 4 週間飼育した。その時の血圧変化を図 1 に示した。味噌群では食塩水群に比較して有意に血圧の低下または低下傾向がみられた。しかし、通常味噌投与群と ACE 阻害活性強化味噌群との間で降圧には差がみられず、両味噌の違いを検出することができていない。Dahl 食塩感受性ラットでは体液量の増加があり、RAS は抑制方向に向かっていることが ACE 阻害活性を強化した新規味噌の特性を明確にすることができなかった原因と考える。
したがって、両味噌の降圧への特性を明確にするには、

240
235

RAS の関与が強い SHRSP/Izm ラットを用いる必要があ*噌）、（2）5%ACE 阻害活性強化味噌水（新規味噌）及び0.6% 食塩水（食塩水）の 3 群について降圧と腎 Na 排泄に及ぼす効果を検討した 。4 週後の血圧値を図 2 に示した。
9）

食塩水群に比較して通常味噌群、新規味噌群のいずれも収縮期血圧(mmHg)230ると考えた。実際、同様に（1）5% 通常味噌水（通常味225� *220215210205200

有意に血圧が低下したが、Dahl ラットの結果とは異なり、195

ACE 阻害活性強化味噌では通常味噌に比して有意に血圧190が低値であった。つまり、Dahl ラットでは通常味噌と新食塩水

通常味噌

新規味噌

実験群

規味噌間の差を検出できなかったが、SHRSP/Izm に変更*p<0.05 vs 食塩水 , †p<0.05 vs 通常味噌することで RAS 抑制効果を検出することが可能になった。

図2

味噌が SHRsp/Izm ラットにおける血圧に及ぼす影響

SHRSP/Izm と食塩感受性
さらに、SHRSP/Izm は若干の食塩感受性を示すことから、これを利用し通常味噌と ACE 阻害活性強化味
噌の降圧機序の違いを検出することが可能となる。表には腎臓での Na・水代謝を示した。これからも明らかなように、ACE 阻害活性強化味噌では強い降圧活性がみられたにも関わらず、尿中 Na 排泄量や自由水クリアランスには食塩水群との間で差がみられなかったが、通常味噌では尿中 Na 排泄量の増加と自由水クリアランスの増加があり、Na/ 水利尿が生じていることが分かる。このように、Dahl 食塩感受性ラットでは分離できなかった ACE 阻害活性強化味噌と通常味噌の降圧特性が SHRSP/Izm を使用することで分けて論じることが可能となった。

おわりに
SHRSP/Izm の昇圧機序の特徴を利用することで、食品に含まれる降圧機能性の機序に関して有力な情報を得ることができる 10）。SHRSP/Izm には RAS/ 交感神経系による昇圧を主にし、さらに一部食塩感受性という特徴がある。食塩依存性を主体と群す る Dahl ラ ッ ト と は、必 然 的 に

UV

UNaV

CNa

Cosm

CH2O

降圧機能性探査上の解釈に違いが食塩水

6.68±5.55

1.77±0.85

12.2±5.831.9±11.4-25.2±7.1生じる。現在、食品の降圧機能性

通常味噌

7.96±3.77

2.27±0.58*

15.7±4.0

40.4±9.5*-32.4±6.8*に多くの注目が集まっている。未新規味噌

7.22±4.48

1.90±0.55

13.1±3.832.2±7.1-25.0±7.5

知なる降圧物質の降圧特性を評価する上で SHPSP/Izm ラットの有用性は高いと考える。

UV, 尿量 (mL/100gBW/day); UNaV, 尿中Na排泄量 (mEq/100gBW/day); CNa, 腎Naクリアランス(mL/100gBW/day); Cosm, 腎浸透圧クリアランス (mL/100gBW/day); CH2O, 自由水クリアランス(mL/100gBW/day). 値は平均±標準偏差. *p<0.05 vs saline.
表参考1).Du D, 他．日本醸造協会誌 2014;109(3):128-136.
2).上原誉志夫、他．中央味噌研究所研究報告 2014;Vol35 (平成26年3月、No.35 March 2014):46-53.
3).上原誉志夫.中央味噌研究所研究報告 2012;33(March):95-111.
4).作山裕恵 他．機能性食品と薬理栄養 2017;10(6):361-381.
5).北川学, 他．薬理と臨床 2016;44(11):1601-1612.

文

腎におけるNa水代謝献6).Yoshinaga M, et al. Nutrition 2012;28(9):924-931.
7).Du D, et al. Clin Exp Hypertens 2014;36(5):359-366.
8).Shimizu N, et al. Food and Nutrition Sciences 2015;6(8):693-702.
9).内川実紗, 他．第39回日本高血圧学会総会. 2016年10月1日仙台国際センター.
10).山川称子, 他．機能性食品と薬理栄養 2017 ;11(4):1299-307.

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