日本組織適合性学会誌
第 31 巻第 2 号

目2024 年 8 月 7 日発行

次2024 年度認定 HLA 検査技術者講習会テキスト

基礎知識：認定制度筆記試験の解説とポイント整理 ─初⼼に還って基礎の基礎から─ ..................... 成瀬
NGS 法による HLA タイピング 〜その基礎から最新の知見まで〜...................................................... 尾崎
我が国の臍帯血バンクと臍帯血移植.. . . . . . . . . . . . . . . . . . .................................................................................. 森島

第 23 回
第7回
第7回

妙子.. . . . 53
有紀.. . . . 62
泰雄.. . . . 69

日本組織適合性学会近畿地方会 抄録集.................................................................................................... . . . . 78
関東 HLA 研究会記録.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ..................................................................................................... . . . 92
東海北陸 HLA 研究会.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ..................................................................................................... . . . 100

日本組織適合性学会誌 MHC 投稿・執筆規定.. . . . . . . .................................................................................................... . . . . 108
Instructions to Authors.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .................................................................................................... . . . . 114
編集後記............... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .................................................................................................... . . . . 118

Major Histocompatibility Complex
Official Journal of Japanese Society for Histocompatibility and Immunogenetics
JSHI

Major Histocompatibility Complex

2024; 31 (2): 53-61

2024 年度認定 HLA 検査技術者講習会テキスト

基礎知識：認定制度筆記試験の解説とポイント整理
─初⼼に還って基礎の基礎から─
成瀬

妙子 1）

1）

長崎大学熱帯医学研究所

原虫学分野

�������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������
1．はじめに学習の機会遺失や集会参加などの情報収集の機会の減少

日本組織適合性学会が主催する HLA 検査技術者・組にあるように思われた。さらに，最近では，移植におけ

織適合性指導者認定制度は，組織適合性検査の技術，知る抗体検査のみに従事し，遺伝子型や抗原型タイピング

識の向上，維持を目的とし，毎年大会時に認定のためを経験していない実務者が増加傾向にある。そこで本の筆記試験を実施している。併せて教育講演として開稿では，基礎の基礎に立ち戻り，19 題の難問の中から催される技術者講習会では，大会参加者の任意参加に

HLA に関する基礎問題 7 問を取り上げ，出題の意図やよる模擬試験での「難問」とされる低正答率問題を取正解を導くためのポイントについて解説する。

り上げ解説してきた。ここ数年は新型コロナウイルス（COVID-19）感染拡大の影響により模擬試験は中止を

3．2023 年度模擬試験

低正答率問題解説

余儀なくされたが，2023 年度は 3 年ぶりの模擬試験を

1）HLA 研究の歴史（2 題）開催した。そこで第 32 回大会での本講習会では，従来問題 50．HLA に関連する以下の出来事のうち，誤って型に戻って模擬試験での低正答率問題について解説したい。

いるものを a ～ e のうちから一つ選べ。
a．リンパ球細胞傷害性試験（LCT）法の発明

2．2023 年度認定制度模擬試験

低正答率問題の傾向

b．第 6 回国際 HLA ワークショップでの HLA-D 特異

さて，2023 年度の全試験問題と正解は，学会ホーム
ページ

1）

性同定

に，また難問とされた 19 題については，本誌

c．マウス H2 領域の発見

2）に試験報告として解説を掲載している 。模擬試験の受

d．G. D. Snell, D.B. Amos らがノーベル医学生理学賞を

験者は従前より減少傾向であったものの，得点分布や平受賞

均点については前述の試験報告に掲載の通り，大差のな

e．PCR を用いた DNA タイピング法の普及

い結果となっている。ただし，低正答率問題の傾向はこ
正解：d 正答率

れまでと大きく異なり，従来は免疫学や統計学，倫理学

25.5％ （代表的な誤答：b）

系の問題が多かったが，今回は「HLA 学」の基礎事項
で多くを占めていたことである。その原因の一つには，【解説】毎年問題をチェックしている会員には本問は記将来認定取得を志す，比較的実務経験の浅い会員が多い

憶にあるかもしれない。なぜなら本問はここ数年に出ことも考えられたが，今回は従前よりも有資格者の受験

題した過去問題を改変したものである。各選択肢は，が多かったことから，コロナ禍における「HLA 学」の

MHC の発見から DNA タイピング法の普及までという，

受付日：2024 年 6 月 6 日，受理日：2024 年 6 月 6 日
代表者連絡先：成瀬 妙子 〒 852-8523 長崎市坂本 1-12-4
TEL: 095-819-7838 E-mail: t-naruse@nagasaki-u.ac.jp

長崎大学熱帯医学研究所

53

原虫学分野

MHC

2024; 31 (2)

基礎知識：認定制度筆記試験の解説とポイント整理

図1

HLA 研究の歴史と過程

HLA 研究の発展における重要なキーポイントを列挙しc．皮膚移植の適合，不適合の解析によって HLA が発ている（図 1）。

見された。

この様に，ヒトの MHC である HLA 発見の歴史は，

d．HLA を発見したのは Jean Dausset 博士である。

マウスの MHC である H2 の研究とも深く結びついてい

e．細胞学的 HLA 検査方法を確立したのは Paul Ichiroる。

Terasaki 博士である。

図中に赤字で示した，マウス H2 領域の発見に関わっ
正解：dた G. D. Snell, B. Benacerraf，そして HLA を発見した

正答率

29.8％ （代表的な誤答：e）

J. Dausset の 3 博士は，「免疫反応を調節する細胞表面の遺伝的構造に関する研究」の功績により，1980 年に【解説】先の問題 50 で示した，スイスの免疫学者である

ノーベル医学・生理学賞を受賞したが，この中に D.B.

Jean Dausset 博士（図 2）は，輸血歴のある患者血清

Amos 博士は含まれていない。よって選択肢 d は誤りで中に白血球を凝集させる抗体の存在を見出し，1952 年ある。D.B. Amos 博士は図示の通り，1964 年に世界でに発表したことから，この論文を以て HLA 研究の始ま初めて開かれた国際組織適合性ワークショップを主催りとされている。 Dausset 博士が「HLA の父」と呼ばし，このワークショップでは Hu-1, LA, Four と呼ばれれる所以である。よって選択肢 d が正しい。代表的なる 3 つの特異性が同定された。これが HLA 多様性同定

誤答である選択肢 e の Paul Ichiro Terasaki 博士の偉業の始まりである。国際 HLA ワークショップはその後数は，図 1 にも示されている通り，血清学的検査法である

年おきに開催され，1975 年にはデンマークで第 6 回ワー

リンパ球細胞傷害試験 （Lymphocyte cytotoxicity test:

クショップが開催され，D 特異性が主なテーマとして扱LCT）（最近では補体依存性細胞傷害検査（complement

われた。なお，国際 HLA ワークショップの概要等につdependent cytotoxicity: CDC）ともいわれる）を発明し

いては過去の解説（参考文献 3）の表 2 を参照されたい。

たことであり，本法は通称「テラサキ法」 とも呼ばれている。本法の登場により，わずか 1 ～ 2ul の HLA 抗

問題 1．HLA の発見について，もっとも適切な記述を血清を使用して被検者リンパ球の抗原特異性を同定する

a ～ e のうちから一つ選べ。

ことが可能になり，HLA 多様性研究が発展した。しかa．腎臓移植を受けた患者血清と他人の白血球の凝集反し選択肢 e で示されているのは細胞学的検査法であり，応により HLA が発見された。

両者は全く異なる検査法である。本問は各選択肢の語句

b．最初に命名された HLA 抗原は HLA-A24 である。

の使われ方に注目すると間違いに気づくが，HLA 発見
54

基礎知識：認定制度筆記試験の解説とポイント整理

MHCの背景を知っていれば容易に正解を導くことができる，

2024; 31 (2)c．PLT 検査は，MLR により増殖した被検者由来 B 細

いわばボーナス問題である。

胞の反応で識別される。
d．HLA-DP 抗原特異性を検出するアロ抗血清は存在しない。
e．PLT 検査は手技が煩雑であるため，現在では DNA
タイピングが主流である。
正解：c

正答率

14.9％ （代表的な誤答：d）【解説】本問は今回の模擬試験で最も正答率が低かったので詳述しておきたい。HLA 検査法は，その原理に基づいて図 3 のように大別される。このうち 1．血清学
図2的検査法と , 2．遺伝子検査法がよく知られているが，J. Dausset 博士（文献 4 より抜粋）

PLT は 3．細胞学的検査法に分類される。PLT は，この細胞学的検査法の一つであり , HLA-DP 抗原のタイピ

2）HLA 検査法（1 題）

ングに用いられていた検査法である。
細胞学的検査法には，図 4 に示すように，混合リン問題 38．Primed lymphocyte test
（PLT）について，
誤っ

パ 球 培 養 反 応（mixed lymphocyte culture

testing:

MLC）と Primed lymphocyte test（PLT）があり，両ている記述を a ～ e のうちから一つ選べ。

者ともa．PLT 検査により検出できるのは HLA-DP 抗原の相1．刺激細胞と反応細胞を用いる違である。

2．細胞幼若化の際の増殖の有無によって判定を行う

b．PLT 検査は刺激細胞，反応細胞ともにリンパ球を使という共通点があるが，MLC は HLA-D 特異性の同定，用する。

図 3 主な HLA 検査法の分類と対象

55

MHC

2024; 31 (2)

基礎知識：認定制度筆記試験の解説とポイント整理

PLT は HLA-DP 抗原特異性の同定に用いられる。PLT

胞応答の有無で HLA-DP 抗原の多型を検出できる。すの原理を理解するには MLC の理解が必須であるので，

なわち，抗 DP-PLT 細胞は被検リンパ球の DP 抗原が

ここではまず MLC について解説したい。

一次 MLC での刺激抗原と同一の時のみ急速に増殖する

MLC 検査（図 4 左）は，異なる 2 種類のリンパ球をため，混合培養時のチミジンの取り込みを測定して判定混合して培養すると，非自己 HLA 抗原を認識したリンする。

パ球が培養から 6 ～ 8 日目をピークに幼若化して増殖

HLA-D 特異性は，WHO 命名員会により現在までにする性質を利用したものである。検査には既知 HLA-D

26 種が公認されているが，これらはすべて MLC により

ホ モ 接 合 体 細 胞（HLA-D homozygous typing cells；

同定され，かつてはクラス II 抗原多型のタイピング法

HLA-DTHC）が必要で，放射線やマイトマイシン処理として活用されていた。しかし，最初 HLA-D 抗原と呼で増殖抑制した後に，刺激細胞として用いる。この刺激

んでいたその特異性が，後に主に HLA-DR と HLA-DQ細胞に反応細胞である被検リンパ球を加えて混合培養

分子を中心とする複数のクラス II 分子による総合的なし，その際に放射性同位元素で標識されたチミジンを細胞反応性であり，D という単独抗原座は存在しないこ

加えることで，反応細胞の増殖（DNA 合成）の有無をとが明らかとなり，さらには HLA 遺伝子検査法の普及確認する。反応細胞（被検リンパ球）の HLA-D 特異性

により，多型検出，同定検査としての MLC は現在ほとが刺激細胞と同一の場合には増殖は起こらず，異なるんど行われていない。

HLA-D 特異性であれば増殖する。

PLT についても，HLA-DP 抗原を認識する特異的ア

これに対して PLT 検査（図 4 右）は，HLA-D 特異

ロ抗血清が存在しなかったことから，以前は DP タイピ

性が一致し，かつ HLA-DP 特異性が異なるアロリンパ

ングには本法が用いられていたが，手技が煩雑であるた球の混合リンパ球培養反応（mix lymphocyte reaction:

め現在は DNA タイピングがほとんどを占める。

MLR）により生じた，アロ HLA-DP 感作 T 細胞（抗DP-PLT 細胞と呼ばれる）に，増殖抑制処理した被検細胞を加えて二次刺激を与えることにより発生する T 細

図4

細胞学的検査法56

基礎知識：認定制度筆記試験の解説とポイント整理

MHC

3）HLA 遺伝子・分子の構造（3 題）2024; 31 (2)で，20S サブユニットタンパクをコードしている。本遺伝子は HLA クラス II 遺伝子領域にマップされるが，当問題 5．HLA 領域上の次の遺伝子のうち，古典的 HLA

該分子は細胞内プロテアソームにおける内因性タンパク

クラス I 分子による抗原提示と直接関係しない遺伝子のプロセッシングを担い，TAP 分子と共に HLA クラ

を a ～ e のうちから一つ選べ。

ス I 分子による抗原提示に関わっている（図 5）。

a．TAP1b．TNXB問題 14．古典的 HLA 分子による抗原提示に関して誤っ

c．PSMB9ている記述の組合せを a ～ e のうちから一つ選べ。

d．TAP21．細胞質内のウイルスやある種の細菌などの非自己タ

e．TAPBP

ンパク質に由来するペプチドは，主にエンドソームに運ばれて HLA クラスⅡ分子により細胞表面に提

正解 b

正答率

21.3％ （代表的な誤答：c）

示される。
2．樹状細胞は非自己タンパク質を取り込んで，これに【解説】TNXB は HLA クラス III

遺伝子領域にマッ由来するペプチドを，クラスⅠ，クラスⅡのいずれプされる遺伝子で，テネイシンファミリーメンバータ
ンパクの一つであるの HLA 分子にも提示することができる。

Tenascin XB をコードしている

3．細胞外のタンパク質を取り込み，これがプロセスさが，この分子は細胞外マトリックス糖タンパクであり，れて生じたペプチドを HLA クラスⅠに結合して，HLA 分子の抗原提示には関与していない。HLA 遺伝子

細胞傷害性 T 細胞に提示することを交差抗原提示と領域では進化の過程で遺伝子重複が起こり，TNXB はいう。

そのような遺伝子クラスター内の 4 つのコピーのうちの4．自己のタンパク質よりプロセスされて生じるペプチ一つである。この様に，特に HLA クラス III 遺伝子領

ドは，HLA クラスⅠ，クラスⅡのいずれにも結合し域内には，HLA の機能には無関係な遺伝子も多く存在

ない。

している。

5．細胞質内のタンパク質の一部は，プロテアソームで一方，代表的な誤答である選択肢 c の PSMB9 は，以分解され，生じたペプチドは TAP により小胞体内

前は LMP2 と呼ばれていたプロテアソーム関連遺伝子に輸送される。

図 5 古典的 HLA クラス I 分子の抗原提示と TAP, LMP 分子の役割

57

MHC

2024; 31 (2)

基礎知識：認定制度筆記試験の解説とポイント整理

a 1, 2b 1, 4c 2, 3

正解：b

正答率

17.0％ （代表的な誤答：d）

d 3, 4e 4, 5を抑制する。
正解：d

正答率

23.4％ （代表的な誤答：c）【解説】前述の問題 5 とも関連するので取り上げるが，【解説】非古典的 HLA クラス I 分子である HLA-G には，

図 5 を参照されたい。細胞内に存在する自己のタンパク

膜結合型以外に可溶型が存在する。可溶型 HLA-G 分子質や，細胞質内で増殖するウイルスや細胞内寄生するあは，妊娠初期～中期の胎盤に発現し，CD8 陽性 T 細胞

る種の細菌由来のタンパク質はプロテアソームで分解のアポトーシスや CD4 陽性 T 細胞の増殖抑制を誘導すされ（内在性ペプチド），TAP トランスポーター分子にることで，母児免疫寛容維持の役割を担っている。しかより粗面小胞体に運ばれて HLA クラス I 分子と結合ししこれらの反応が TCR を介したものであるという報告て細胞表面に提示される（図 6）。従って，選択肢 1 とは現時点では見られない。よって選択肢 d は誤り（正解）

4 は誤りである。その他の選択肢は正しい。代表的な誤である。HLA-G 分子をはじめとする非古典的クラス I

答である d に含まれている選択肢 3 の交差抗原提示は，分子も古典的クラス I 分子と同様にホモダイマーを形成

cross-presentation ともよばれ，主に樹状細胞が有するし，クラス I 遺伝子由来のα鎖とβ 2 ミクログロブリン

抗原提示能力である。抗血清などの交差反応とは語句は（問題文では発音上の問題でマイクログロブリンと記載似ているが意味は全く異なるので留意されたい。

しているが，日本ではミクログロブリンの表記が一般的である）が会合しており（図 7），ペプチド収容溝に内在性ペプチドを結合できる。

図6 H
 LA クラス I，クラス II 抗原（分子）の役割。P：提示されるペプチド

図7 H
 LA-G 分子の立体構造。青で示された部分がβ2ミクログロブリン分子。

問題 10．HLA-G の機能に関して，誤っている記述を a～ e のうちから一つ選べ。
a．ホモダイマーを形成する。

4）HLA の多様性，統計解析（1 題）

b．自己ペプチドを提示する。
c．β2 マイクログロブリンと会合している。

問題 42．下の表は日本人集団に多く観察される HLA-d．可溶性 HLA-G 分子は，TCR を介して CD8 陽性 T細胞を抑制する。

A-B-DRB1 ハプロタイプである。高頻度の 1 ～ 5 位

e．膜結合性 HLA-G 分子は LILR-B2 を介して NK 細胞のハプロタイプのうち，誤っているものを a ～ e の58

基礎知識：認定制度筆記試験の解説とポイント整理

MHC

2024; 31 (2)日本人集団に多く観察される HLA-A-B-DRB1 ハプロタイプと頻度

うちから一つ選べ。

【解説】本問は HLA の基本的な特徴についての出題である。HLA が示す遺伝子多様性の主な特徴として，人

a．1 位

種，民族に特徴的な HLA タイプの存在が挙げられる。

b．2 位

HLA 各遺伝子座における多型（遺伝子型＝アレル）は，c．3 位

遺伝子座が近傍にあるアレルは連鎖不平衡によりハプ

d．4 位

ロタイプ（ブロック）を形成し，遺伝を繰り返すこと

e．5 位

で人種や民族に特徴的なハプロタイプが観察される。
問題中に示したハプロタイプはいずれも日本人集団に

正解：d

正答率

23.4％ （代表的な誤答：c）

多く観察される HLA ハプロタイプとして知られているが，4 位に示されている頻度は，正しくは A*24:02-

図 8 HLA ハプロタイプの遺伝様式

59

MHC

2024; 31 (2)

基礎知識：認定制度筆記試験の解説とポイント整理

B*54:01-DRB1*04:05 ハ プ ロ タ イ プ の も の で あ る。

ながっていると考えられることから，ポイント整理で一

HLA-B*54:01 と -DRB1*04:05 ア レ ル は 強 い 連 鎖 不

層深く理解して頂けると幸いである。これまで解説して平衡の関係にあるが，これに HLA-A を加えた HLA-

きた免疫学や統計学，倫理学の基礎については専門書もA-B-DRB1 の 3 遺伝子座間のハプロタイプ構成をみる

多く，独学も可能であるが，「HLA 学」を学びたい皆様と，HLA-A*24:02 の他に -A*11:01 においても連鎖不には，ぜひ MHC 誌に掲載されている過去の解説や総説

平衡が存在する。ちなみに 選択肢 d に示した A*11:01-

をご一読頂きたい。また，専門用語についての用語集 6）

B*54:01-DRB1*04:05 ハプロタイプは正しくは 9 位であも是非ご活用頂きたい。

り，ハプロタイプ頻度は 0.8~0.9％である。代表的な誤答である選択肢 c は日本人集団の代表的なハプロタイプ

参考文献

としてよく知られており，3 位に相当する。この様な統

1）2023 年度認定制度試験問題（解答付き）https://jshi.smoosy.
atlas.jp/ja/ninteikakomon）

計データは国内の数機関から公式に報告されているが，

2）成瀬妙子，一戸辰夫，王寺典子，大橋

頻度，順位とも概ね同様である。代表的なハプロタイプ

名

頻度についての知識があれば，遺伝子型タイピングを行う際の一助となる場合がある。参考として HLA-C,隆，土屋尚之，西村泰治，村田順，木村彰方，椎誠，湯沢賢治：令和

5 年度 認定 HLA 検査技術者認定制度試験問題に関する

お報告．MHC 30: 133-139, 2023.
3）成瀬妙子：基礎知識：認定制度試験問題─解説とポイント

よび HLA-DQB1 を加えた 5 座ハプロタイプ（図 8）を

整理─．MHC 28: 77-82, 2021.

挙げておくので参照されたい。

4）Carosella, E. Jean Dausset 1916-2009. Nat Immunol 10, 797,
2009.

4．終わりに5）Craig S. Clements, et al: Crystal structure of HLA-G: A
nonclassical MHC class I molecule expressed at the fetal-

以上，2023 年度はタイトル通り基礎の基礎について

maternal interface. PNAS 102, 3360-3365, 2005

解説を行った。普段 HLA 関連業務に携わっておられる

6）高山智美，
金本人美，
黒田ゆかり，
木村彰方．HLA 用語集（入

方々には少々物足りなく感じられたかもしれないが，今門編）Ver.1.4. MHC 30: 78-91, 2023.

回の模擬試験でも，やはり「なんとなく知っている事
柄」の読み間違いや，あいまいな部分の解釈が誤答につ60

基礎知識：認定制度筆記試験の解説とポイント整理

MHC

2024; 31 (2)Commentary on the JSHI Certification Paper Test 2023
Taeko K Naruse1）1）

Dept. of Protozoology, Institute of Tropical Medicine, Nagasaki University

The Japanese Society for Histocompatibility and Immunogenetics (JSHI) has implemented a certification system
for HLA technologists and histocompatibility directors to enhance and maintain their skills and knowledge inhistocompatibility testing. The society holds an annual written examination for certification during its conference.
Although practice examinations were cancelled in recent years due to the COVID-19 pandemic, they were held
again in 2023, we returned to its approach of explaining low correct-response rate questions from the practice
examination, and the society plans to continue this important opportunity.
The distribution of average scores has not significantly changed; however, this year's trend of low-correct-responserate questions differs from previous years, as they were dominated by basic HLA studies rather than conventional
immunology, statistics, and ethics-fields questions. One reason for this is the increase in members with relatively
little practical experience aspiring to obtain certification in the future. Another reason is the missed opportunities tolearn about HLA studies and gather information by attending meetings during the Corona disaster. In the present
time, I focus on the basics and describe seven typical HLA questions among the 19 difficult questions, explaining theintention of the questions and the key points to derive the correct answers.


©2024

日本組織適合性学会

61

Major Histocompatibility Complex

2024; 31 (2): 62-68

2024 年度認定 HLA 検査技術者講習会テキスト

NGS 法による HLA タイピング〜その基礎から最新の知見まで〜
有紀1）

尾崎
1）

大阪大学微生物病研究所ゲノム解析室

膨大な数の HLA 遺伝子型を判定する DNA タイピング（HLA-DNA タイピング）は，移植時の組織適合性の一致や自己免疫疾患などとの関連解析に欠かせない検査技術法である。現在，主流である PCR-SSO 法や PCR-SBT 法に比べ，次世代シーケンサーを用いた HLA DNA タイピング法（NGS-HLA 法）はより正確なアリル情報が得られ，HLA 遺伝子全領域の新規多型や変異を効率よくかつ染色体ごとに分けて検出できるなどの利点を有する。本講習会では，次世代シーケ
ンシングの基本的な仕組みから，次世代シーケンサーを用いた DNA-HLA タイピングの具体的な方法，さらに新しい知見についてなどを概説する。
キーワード：ヒト白血球抗原（HLA），次世代シーケンス（NGS），DNA タイピング

�������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������
1．はじめにり更に高解像度のタイピング法として，2010 年代より

ヒ ト 白 血 球 抗 原（human leukocyte antigen: HLA）

次世代シーケンシング（Next Generation Sequencing;

アリルを判定する HLA DNA タイピング法は，移植のNGS）法を用いた HLA-DNA タイピング法（NGS-HLA

際にドナーとレシピエントの組織適合性の一致，自己免法）が開発され，徐々に臨床検査現場でも導入されつつ疫疾患との関連，造血幹細胞移植に伴う移植片対宿主病ある。

（GVHD），感染症の防御と重症化などとの関連解析に不本講習会では，次世代シーケンシングの基礎的な解説

可欠な検査技術法である。

から HLA-DNA タイピングへの応用，さらに今後の新1980 年 代 よ り HLA 遺 伝 子 の 多 型 性 を 指 標 と し た

たな展開について詳しく解説する。

種々のより正確で簡便な HLA DNA タイピング方法
2．次世代シーケンスとは？

がその当時の最新技術を駆使しながら開発され，検査現場で実用化されてきた。特にポリメラーゼ連鎖反次世代シーケンシング（NGS）法は，2005 年頃より応（polymerase chain reaction, PCR）法に基づく PCR

出てきた比較的新しい技術であり，サンガー法（ジデオ

sequence specific oligonucleotide probe （PCR-SSO）キシ法）の「次の」世代という意味で「次世代」シーケ

法，PCR sequence specific primer（PCR-SSP）法およンシング法と呼ばれている。

び PCR Sequence based typing（PCR-SBT）法などの次世代シーケンシング法の解説の前に，サンガー法

HLA DNA タイピング法は，それ以前の検査技術より（ジデオキシ法）について簡単に解説する。サンガー法

もタイピング結果の精度が飛躍的に向上したことから，は，1977 年にフレデリック・サンガーによって開発さ現在も臨床検査現場で主に使用されている。これらよれた革命的な DNA シークエンシングの技術であり，特受付日：2024 年 6 月 11 日，受理日：2024 年 6 月 11 日
代表者連絡先：尾崎 有紀 〒 565-0871 大阪府吹田市山田丘 3-1
TEL: 06-6879-8323 E-mail: yozaki@gen-info.osaka-u.ac.jp

62

大阪大学微生物病研究所ゲノム解析室

NGS 法による HLA タイピング 〜その基礎から最新の知見まで〜

MHC

2024; 31 (2)定の DNA 領域の塩基配列を決定するために広く使用さ多く，現在多くの研究現場や臨床検査現場で使用されれている。具体的には，次のような 3 ステップで解析すている。続いて，第 3 世代の主流機器は，PacBio 社のる。1. 特定の DNA 領域を PCR 法により増幅させる。2．

Sequel SystemII などであり，第 4 世代の主流機器としシーケンス反応により途中で伸長反応を停止し，3’ 末端ては Nanopore 社の MinION などのシーケンサーが当てが各塩基を識別する蛍光で標識された，1 塩基違いの断はまる。この第 3 世代，第 4 世代のシーケンサーは「ロ片を合成する。3. シーケンサーでのキャピラリー電気泳

ングリードシーケンサー」と呼ばれ，1kb 以上の領域を動で，1 塩基違いの断片を分離し，流れてきた順に 3’ 末

一度にシーケンスできるものである。

端の蛍光を検出することで，塩基配列を決定する。つ次世代シーケンシング法は，テンプレート DNA より，まり，サンガー法では特定の DNA 領域を 1 回のシーケ「ライブラリ」と呼ばれる次世代シーケンシング用のサ

ンスで 1 通りしか塩基決定できない。また，塩基決定

ンプル調製を行う。その後，それぞれの機器により調製長は最長で 1,000bp 程度まで可能である。サンガー法でしたライブラリを並列的にシーケンスを行い，塩基配列使用する機器は，ThormoFisher Scientific 社の Appliedを決定する。つまり，次世代シーケンシング法では，1Biosystems SeqStudio Genetic Analyzer をはじめとす

回で複数の配列を一度に決定できることが特徴である。

る Applied Biosystems シリーズが主流である。

まずは，次世代シーケンス技術の解説に，よく出てくる

次に，次世代シーケンシング法で使用する機器，次用語を説明する。
1）ライブラリ（Library）

世代シーケンサーは原理によっていくつかのグループに 分 け ら れ「 第 2 世 代 」「 第 3 世 代 」「 第 4 世 代 」 とシーケンスを行うターゲット領域の両側にアダプター呼ばれている。第 2 世代の主流機器は，illumina 社の配列やインデックス配列などをライゲーションにより付

NovaseqX シ リ ー ズ，Miseq，iSeq な ど や MGI 社 の加し，次世代シーケンサーでランできる状態の配列のこ

DNBSEQ-G400，DNBSEQ-T7 などである。この世代のと。アダプター配列やインデックス配列は約 100bp あり，

シーケンサーは「ショートリードシーケンサー」と呼ば完成したライブラリのサイズはシーケンスしたい（ターれ，100 ～ 400 塩基程度のリード長のシーケンスを行うゲット）領域のサイズより 100 ～ 130bp ほど大きくなものである。この世代のシーケンサーは，大変種類がる（図 1・A）。

図 1 次世代シーケンシング法の（A）ライブラリ構造および（B,C,D）リード長（A）Target 領域（シーケンスを行いたい領域）の両端に，index 配列（青・緑）と adaptor 配列（赤・黄）を付加させる。両端に付加する index 配列 6 ～ 10 塩基で構成されており，組み合わせによって区別ができる。（B）シングルリードとは片側からのみシーケンスすること。シーケンス可能な領域はアダプター配列を含めるので，実際のターゲット領域はそれよりも短くなる。（C,D）ペアリードとは両側からシーケンスすること。Read1 と Read2 が完全に重なるようにも，一部重なるようにも実験計画を立てることが可能である。

63

MHC

2024; 31 (2)NGS 法による HLA タイピング 〜その基礎から最新の知見まで〜

2）アダプター（adaptor）配列

8）デプス（depth）

シーケンス配列の両端に付加された次世代シーケン

カバレッジともいう。Read depth of coverage の意味

サー特異的な配列のこと。

で使用されることが多い。各塩基が読まれた回数。例え

3）インデックス（index）配列

ば，HLA 領域 6Gb を 60Gb シーケンスしたとすると平複数サンプル由来の DNA 配列を同時に次世代シーケ

均カバレッジは x10 となる。

ンサーでランした場合にサンプル同士を識別するために
3．現行の高解像度 DNA タイピング法の問題点付加された 6 ～ 10bp 程度の配列のこと。バーコード配
列，タグ配列とも呼ばれる。

欧州バイオインフォマティクス研究所（European

4）リード長Bioinformatics Institute : EBI）に設置されている IPD-

シ ー ケ ン ス で 何 bp を 解 読 す る か， と い う こ と。

IMGT/HLA デ ー タ ベ ー ス に は 世 界 中 で 収 集 さ れ た

100bp シ ン グ ル リ ー ド，100bp ペ ア エ ン ド リ ー ド，

HLA ア レ ル 情 報 が 掲 載 さ れ て い る。1998 年 12 月 に150bp ペ ア エ ン ド リ ー ド，250bp ペ ア エ ン ド リ ー ド，

公 開 さ れ た Release1.0 で は わ ず か 964 種 類 の HLA ア

300bp ペアエンドリード，などがある。シーケンスの目

レルが公開されていたが，年々増加しており，最新の的により，長さやシングルリードかペアリードかを決め

Release3.56（2024 年 4 月公開）では 38,975 種類（HLAる事が多い。例えば，150bp ペアエンドリードであると

クラス I アレル：27,301 種類，HLA クラス II アレル：

アダプター配列込で約 250bp の領域をシーケンスする

11,674 種類）ものアレルが公開されている。

ことが可能であり，約 150bp のターゲット領域のシー

現行法の高解像度 HLA タイピング法は，PCR-SSO

ケンスが可能になる（図 1・B,C,D）。

法（ 主 と し て Luminex 法 ） や PCR-SBT 法 で あ る が，

5）シングルリード

これらの方法の問題点として，遺伝子全領域ではなく配列の片側だけからシーケンスすること。

特定のエクソン周辺の多型のみでタイピングしている

6）ペアエンドリード

こと，2 個の多型部位が同一の染色体上（cis）か異な配列の両端からシーケンスすること。

る染色体上（trans）に位置するのかの位置情報が得ら

7）リード数れないいわゆる phase ambiguity が生じること，また

1 回のシーケンスで，複数ライブラリの配列を同時にLuminex 法などの PCR-SSO 法では年々増加している新読むことができ，その数のこと。シーケンサーや使用す規 HLA アリルに対応するためのオリゴヌクレオチドプ

る試薬キットによって数は変わるが，100 万～ 260 億リー

ローブが不足していることが挙げられる。よってこれら

ドと幅がある。

の方法による HLA-DNA タイピングの多くはいくつか

図 2 DRB1 遺伝子における phase ambiguity の例
上部が PCR-SBT 法でのシーケンス波形，下部が NGS-HLA 法でのタイピング結果を示す。

64

NGS 法による HLA タイピング 〜その基礎から最新の知見まで〜

MHC

2024; 31 (2)の候補アリルが存在し，単一の HLA アリルに絞り込む

リード 1 では DRB1*04:05 と一致する塩基配列，リードことができないため，日本人における HLA 遺伝子頻度

2 では DRB1*15:01 に一致する塩基配列と確認できるのを参照して頻度の高いアリルを最も可能性の高いアリル

で，この場合は DRB1*04:05 と DRB1*15:01 の遺伝子型と判定する推定（みなし）タイピングをおこなっているである，と導くことが可能である。

のが現状である。しかし，次世代シーケンシング法を用

ショートリードシーケンサーでは，最大でも 400 塩

いた NGS-HLA 法であるとこれらの問題については解消

基程度のリード長しかないため，エクソンを跨ぐ多型する。

の検出は困難を示すことが多かった。例として，HLA-

1）phase ambiguity 問題

DPB1 遺伝子における phase ambiguity を示す（図 3）。

現行法では，2 個の多型部位が同一の染色体上（cis）

エクソン 2 の配列は DPB1*05:01:01 と DPB1*135:01:01 が，か異なる染色体上（trans）に位置するのかを明確にす

DPB1*09:01:01 と DPB1*1149:01 が同一，エクソン 3 の配ることが不可能である。例えば，PCR-SBT 法により

列はすべて同一，エクソン 4 の配列は DPB1*05:01:01 とHLA 遺伝子由来の PCR 産物をサンガー法により塩基配DPB1*1149:01 が，DPB1*09:01:01 と DPB1*135:01:01 が同列を決定する場合，両アレル間の塩基配列の違いはヘテ一である。ショートリードシーケンサーでは 6,000 塩基

ロピークとして確認できる。例として，HLA-DRB1 遺以上離れているエクソン 2 とエクソン 4 の組み合わせは伝子における phase ambiguity を示す（図 2）。このサ確定することが難しく，DPB1*05:01:01 と DPB1*09:01:01

ンガーシーケンス結果の一部を見ると連続した 4 塩基対もしくは DPB1*135:01:01 と DPB1*1149:01 のどちらか，とその約 90 塩基下流の 2 塩基対にヘテロピークが確認というアレル判定になる。しかし，ロングリードシー

できる。これをアレル判定ソフトウェアにより解析する

ケンサーはエクソン領域をまたいで一本のライブラリと，DRB1*04:05 と DRB1*15:01， も し く は DRB1*04:10

をシーケンスすることが可能であるので，例の場合はと DRB1*15:02 の組み合わせが候補に上がり，どちらかDPB1*05:01:01 と DPB1*09:01:01 と確定できる。

確定することは難しい。これに対して，次世代シーケン

2）特定のエクソン周辺の多型のみでのタイピング

シング法を用いた NGS-HLA 法ではそれぞれの染色体上現行法では，抗原提示領域をコードするエクソン，の塩基配列を大量並列的に解読する特徴から，どちらの具体的には HLA クラス I 遺伝子（HLA-A, -B, -C）で染色体上にある変異かの確定が可能になる。先の例では，は エ ク ソ ン 2 と エ ク ソ ン 3，HLA ク ラ ス II 遺 伝 子 座

図3

DPB1 遺伝子における phase ambiguity の例

同色が同じ配列を示す。ショートリードの場合は，短いリードのため，エクソ
ンをまたいで 1 本のリードでつながることはない。ロングリードの場合はエクソンをまたいでリードがつながる。

65

MHC

2024; 31 (2)NGS 法による HLA タイピング 〜その基礎から最新の知見まで〜
4．具体的な NGS-DNA タイピング（HLA-DRB1, -DRB3/4/5, -DQA1, -DQB1, -DPA1,-DPB1）ではエクソン 2 を中心にタイピングが行われて

HLA-NGS 法の DNA タイピングには，特定の HLAきた（図 4）。よって，現行法では遺伝子全領域（プロ遺伝子を PCR 法で増幅し次世代シーケンサーでシーケ

モーター / エンハンサー領域から 3’UTR 領域）の HLAンスをするもの，ターゲットキャプチャー法によって多型が検出できないことにより HLA 分子構造や発現に

HLA 領域の主要遺伝子を回収し次世代シーケンサーで直接関与する異常な多型や変異を見逃している可能性がシーケンスするもの，などがある。その中で，現在主流あるという問題点がある。特にプロモーターやエンハンとなっているのは，各社から試薬キットとして発売さサー領域，スプライシング部位などの変異は遺伝子発現れている PCR 法を用いた DNA タイピング方法である。

に影響を及ぼす可能性がある。これらを HLA-NGS 法で市販の試薬キットとして発売されているものを表 1 およ

行うと，遺伝子全領域についての変異を確認することがび表 2 にまとめた。それぞれの試薬キットについて差はでき，上記の問題で解決することができる。

あるものの，イントロン領域を含めた遺伝子のほぼ全域

図 4 HLA 遺伝子の HLA タイピング領域
各遺伝子のエクソンを四角で，ピンクがプロモーター / エンハンサー領域，黄色が多型に富むエクソンを示す。緑矢印が PCR-SSO 法や PCR-SBT 法での解析対象領域，
赤矢印が HLA-NGS 法での解析対象領域を示す。

表1

各社から発売されている試薬キットの解析領域

66

NGS 法による HLA タイピング 〜その基礎から最新の知見まで〜
表2

MHC

2024; 31 (2)

各社から発売されている試薬キットの実験方法

図5

次世代シーケンシング法の流れが解析対象となっており，さらに，HLA 遺伝子 11 座をり，1 ～ 2 本のチューブ内で，HLA 遺伝子 11 座（HLA-A,

同時に DNA タイピングすることができるようになって-B, -C, HLA-DRB1, -DRB3/4/5, -DQA1, -DQB1,いる。これらに次世代シーケンサーを用いて行う一般的-DPA1, -DPB1）のほぼ全領域を増幅させることが可能な実験の流れは図 5 のような流れである。使用する試薬である。使用するゲノム DNA は 25ng 程度であること

キットによって少しずつ異なるが，一般的な流れについが多く，ハンドリング時間は約 15 ～ 30 分程度，PCRて具体的に説明する。

時間は約 2 ～ 3 時間であることが多い。

1）ゲノム DNA 抽出3）ライブラリ作製

NGS-HLA 法に使用する検体は，血液やスワブからゲライブラリ作製は，①酵素での断片化，②アダプター

ノム DNA 抽出を行うことをお勧めする。抽出方法は/ インデックス付加，③サイズセレクション，④ PCR

DNA 抽出用の試薬キットを使用した方法が簡便である

増幅という 4 ステップである。

が特に指定はなく，純度の高い DNA が抽出できればよ①酵素での断片化い。純度は吸光度によって測ることが多く，よく使われ

37℃ 10 分の後，72℃ 2 分をサーマルサイクラーで反ているのは Thermo Fisher Scientific 社の NanoDrop で応させる。これにより様々なサイズの DNA 断片ができある。吸光度 A260/A280 の値が 1.8 ～ 2.0 にあると純度る。

の高い DNA であると言える。また，DNA 濃度は蛍光②アダプター / インデックス付加定量装置で測ることが推奨されており，よく使われていシーケンサー特有の配列（アダプター配列）とインデッ

るのは Thermo Fisher Scientific 社 Qubit フルオロメー

クス配列を付加させる。インデックス配列は 2 ヶ所に付ターである。NanoDrop でも DNA 濃度を測定すること

加することができ，この組み合わせによって 384 種類のもできるが，2 本鎖のゲノム DNA 以外の不純物も一緒

区別が可能である。このインデックス配列を付加させたに測定してしまう。正確に 2 本鎖 DNA のみを測定する

あとは，複数のサンプルを混合しても区別可能になる。

ためには，蛍光定量装置を推奨する。

③サイズセレクション

2）HLA 遺伝子特異的な PCR 反応

ここまでの操作では様々なサイズ（長さ）の DNA 断

抽出されたゲノム DNA から HLA 遺伝子に特異的な片があるため，サンプルの精製と同時にサイズセレク

プライマーを使用して PCR 法で増幅させる。各社の試ションを行う。磁性ビーズ（多くの試薬キットで採用さ薬キットは少しずつ異なるが，基本的に PCR は 1 ～ 2

れているのはベックマン・コールター社の Ampure XP

本のチューブで実験可能なように設計されている。つまビーズである）で行う。
67

MHC

2024; 31 (2)NGS 法による HLA タイピング 〜その基礎から最新の知見まで〜④ PCR 増幅方法も順次開発されており，試薬キット化されていくと両端に 2 種類のアダプターが付加されているものが正予想される。

しいライブラリである。そのライブラリのみを PCR 法

さらに，試薬キットのランニングコストも高価である

で 8 ～ 15cycles ほど増幅させ，ライブラリが完成する。

ため，ある一定の検体数が収集できるまで解析を開始しこの時点で，ライブラリのクオリティチェック（濃づらいという点もある。特に移植関連検査などで検査結度測定と電気泳動）を行う。ライブラリの濃度測定に果を迅速に提供する必要がある場合に対応が難しい可能は，1）ゲノム DNA 抽出でも使用した Qubit フルオロ性もある。この問題を解決するには少数検体でも HLA-

メーターの使用が推奨される。電気泳動は自動電気泳動

NGS タイピングを開始できる体制を整える必要がある

装置での測定が推奨され，Agilent 社の TapeStation やと考えられる。

Bioanalyzer を使われることが多い。
5．おわりに4）シーケンシング
シーケンスを行う前に，同じシーケンスにいれるライ本講習会では，次世代シーケンスの概要，NGS-HLA

ブラリを均等に混合する。そのライブラリ混合物をリア法の原理，現行法との相違，今後の課題について解説しルタイム PCR にて定量する。その後は各機器のプロトた。HLA-NGS 法 は PCR-SSO 法 や PCR-SBT 法 な ど のコルに準じてシーケンスを行う。

現行法より，より高精度にタイピングできるため，今後

5）データ解析

徐々に臨床検査現場に広がっていくだろう。また，次世

シーケンサーからは fastq と呼ばれる配列ファイルが代シーケンス技術もまだ発展途上の技術であるため，さ取得できる。これをそれぞれの試薬キットに対応する解らに新しい HLA タイピング方法が開発されていくかも析ソフトウェアにアップロードすると HLA タイピングしれない。

結果の候補リストが上がってくる。

今後，さらなる次世代シーケンス技術の発展に伴い，より安価でより高精度な HLA タイピング方法が開発さ4．今後の課題

れ，検査現場に導入されていくことを期待したい。

次世代シーケンサーによる HLA-NGS 法は万能である
ように思えるが，問題点も多く残っている。一番大きな

引用文献

問題は，配列データベースの不足である。IPD-IMGT/

1）IPD-IMGT/HLA デ ー タ ベ ー ス : https://www.ebi.ac.uk/
ipd/imgt/hla/

HLA データベースは，主要エクソン（エクソン 2 やエ2）豊田敦，藤山秋佐夫 : 次世代シークエンサーのシークエン

クソン 3）のみ登録のアリルが多数ある。HLA-NGS 法

シング原理．次世代シークエンサー目的別アドバンストメの利点を活かすためには，少なくとも全エクソンの登録

ソッド（細胞工学別冊），学研メディカル秀潤社，2012.

をされないと確実なアリル判定が難しい。現在，イント

3）椎名隆 : 次世代シークエンサーに基づく HLA ゲノム・遺伝子解析．MHC 22（2）:84-94, 2015.

ロン領域を含む遺伝子全領域の登録が進んでいるが，ま4）椎名隆，鈴木進悟，尾崎有紀，光永滋樹，猪子英俊 : 次世

だ時間がかかるといえるだろう。

代シークエンサーは HLA ジェノタイピング法を変えるの

また，現在主流の方法は PCR 法であるので，最初のか？，分子リウマチ治療，vol.8（no.3）,131-135, 2015

HLA 領域特異的 PCR の際，増幅できないアレルがある5）椎名隆 : 次世代シークエンシングに基づく HLA DNA タイ

可能性がある。PCR の原理上 PCR 増幅時のエラーが入ピング法の特徴と移植医療への応用．日本造血・免疫細胞療法学会雑誌，第 12 巻（第 3 号），133-140, 2023.

る可能性もある。これらの課題を解決するために，PCR
法を使用せずキャプチャー法で HLA タイピングを行う

68

Major Histocompatibility Complex

2024; 31 (2): 69-77

2024 年度認定 HLA 検査技術者講習会テキスト

我が国の臍帯血バンクと臍帯血移植
森島 泰雄1）
1）

中部さい帯血バンク我が国の臍帯血移植成績は著しく向上している。同種移植のあゆみと臍帯血移植の位置づけ，臍帯血バンクを介して臍
帯血ユニットがどのように作成され患者さんに届けられるのか，また患者にとって最適な移植ユニットをどのように選択したらよいのかにつき具体的に記したい。
キーワード：臍帯血バンク，臍帯血移植，CD34 陽性細胞数，HLA アレル適合度�������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������
1．我が国における同種移植とバンクのあゆみ

九州さい帯血バンク）と一般社団法人中部さい帯血バン

我が国における近代的な同種造血細胞移植は 1974 年

ク，特定非営利活動法人兵庫さい帯血バンクの 6 バンクに HLA 適合同胞間移植が開始されてからほぼ 50 年とが稼働している。臍帯血移植数は年々増加しており，近なる。1991 年には日本骨髄移植推進財団（現在の日本

年は年間約 1400 症例実施されている。

骨髄バンク）が設立され非血縁者間骨髄移植が全国展開
2．臍帯血移植の特徴

され，引き続いて 1999 年から日本さい帯血バンクネッ
トワークが組織され，非血縁者間臍帯血移植が開始され臍帯血移植の大きな特徴は移植適応時にドナーのコー

た。また，1990 年代には血縁者間末梢血幹細胞移植がディネートが必要なく，臍帯血バンクから凍結保存され実施されるようになり，様々な移植治療法が確立され，た臍帯血ユニットを迅速に提供することが可能で，他の移植適応のある患者にとって移植ができる可能性が高ま移植法のドナーコーディネートと採取でのドナーの精神り，より適切な治療法を選択できるようになった。最近

的，身体的な負担がないことである。また，臍帯血移植

では HLA ハプロタイプが不適合な血縁者からの移植法

は患者と臍帯血ユニットの HLA 不適合度が大きくなっも開発されて臨床応用されるようになってきた。これらても移植合併症の頻度は増加せず，HLA 不適合が許容の移植方法の我が国における推移を図 1 に示すが，現在され，移植後の GVHD の頻度・重症度が低く，良好なでは血縁者間移植，骨髄バンクを介した非血縁者間移植，白血病の再発抑制効果があり，長期生存例の QOL も良臍帯血バンクを介した臍帯血移植がほぼ 3 分の 1 づつのいことである。臍帯血移植で最も課題とされた生着不全

割合となっている。

は最近では適切に臍帯血ユニットを選択すれば 90％以上の良好な生着率が得られている1, 3, 4）。

2012 年に成立し，2014 年に施行された「移植に用いる造血幹細胞の適切な提供の推進に関する法律」により近年，移植後 cyclophosphamide 投与による免疫抑制

移植病院への供給が認可された公的臍帯血バンクとし法（PT-CY）をもちいた HLA ハプロタイプ不適合血縁て，日本赤十字社に属する 4 バンク（北海道さい帯血バ者間移植（PT-CY ハプロ移植）が開発され，欧米ではンク，関東甲信越さい帯血バンク，近畿さい帯血バンク，

臍帯血移植を凌駕しようとしている。わが国では臍帯血

受付日：2024 年 6 月 7 日，受理日：2024 年 6 月 7 日
代表者連絡先：森島 泰雄 〒 489-8555 愛知県瀬戸市南山口町 539-3
TEL: 0561-85-5222 E-mail: morishimayasuo5050@gmail.com

69

愛知県赤十字血液センター 4 階

中部さい帯血バンク

MHC2024; 31 (2)

我が国の臍帯血バンクと臍帯血移植

図1

日本造血細胞移植データセンター

ホームページから引用

移植で良好な移植成績が得られており，両移植法ともにに赤血球沈降促進剤（HES）を加え，赤血球を沈降さ積極的に実施されている。

せた後，上清を回収する。この上清を遠心分離にかけ，細胞層を回収（濃縮）し，ここに凍害保護液（DMSO）

3．臍帯血ユニットはどのように採取・調製され，患者を添加し，フローズバッグへ移し替える。フローズバッ

さんに届けられるのか

グを保護カセットに入れ，プログラムフリーザーを用い

1）採取病院での採取て−90℃まで凍結した後，液体窒素タンク内にて−196℃

採取病院では，あらかじめ妊婦さんに臍帯血採取につで保存する。2023 年度に仮保存できた臍帯血ユニット

き説明・同意を得ている。分娩後の胎盤から臍帯血を採は 920 本であった。保存期間は 10 年間としている。

取する手技と安全性，さらに採取された臍帯血は臍帯血③ 保存前の臍帯血の一部を用いて品質検査を行ってバンクに輸送され，後述するように臍帯血ユニットが調いる。検査項目は総有核細胞数，細菌・真菌培養検査，製・凍結保存され，希望した移植病院の患者さんに届け

CD34 陽性細胞数，コロニー形成細胞数，細菌・真菌培られ，移植されることなどである。中部さい帯血バンク

養検査，感染症検査等である。

では愛知県，岐阜県，三重県，石川県の 17 病院で採取④ 臍帯血ユニットの HLA 検査を行う。2024 年 1 月が実施され，臍帯血量（60ml 以上）や凝固が認められか ら 中 部 さ い 帯 血 バ ン ク で は NGS（next generation

ないなど臍帯血の品質基準を満たした臍帯血が愛知県瀬sequence）HLA タ イ ピ ン グ 法（long range 法 ）2） で戸市にある中部さい帯血バンクに運搬される。

HLA-A, B, C, DRB1, DRB3,4,5, DQA1, DQB1, DPA1,

2）臍帯血バンクでの調製と保存

DPB1 の 11 座を第 3-4 領域までタイピングしている（外① 到着した臍帯血バックは受け入れ検査を実施する。

注 ）。2023 年 以 前 の HLA タ イ ピ ン グ は luminex 法 で2023 年度には臍帯血の液量（60mL 以上）・外観試験・

HLA-A, B, C, DRB1 の高頻度アレル（第 2 領域まで）

書類審査（問診票等）を通過した 3357 本の臍帯血につき，を同定している。

8

最初に有核細胞数（TNC）を測定し，11.4×10 個以上⑤ 保存 4 カ月以降に，母児のアンケート調査を実施ある場合に CD34 陽性細胞数をフローサイトメトリーでし，臍帯血の安全性が確認されたら，生後 9 ヶ月を待っ6

測定して，3.0×10 個以上あれば調製に進む。

て保存した臍帯血ユニットを公開し，造血幹細胞提供支② 調製はクリーンルーム内で，開放作業は安全キャ

援機関（日本赤十字社）の臍帯血情報公開システムに登ビネット内で行う。調製の手順を示すと，臍帯血バッグ

録する。
70

我が国の臍帯血バンクと臍帯血移植

MHC3）主治医により選択された臍帯血ユニットの出庫

2024; 31 (2)（−140℃）内で移植まで保管される。移植病院での保管

主治医は造血幹細胞適合検索サービスにより臍帯血ユ

手順書の作成とその遵守による安全な保管が重要であニットを検索し，患者に適した臍帯血ユニットでの移植る。

実施の方針を決定したら，当該臍帯血ユニットがある臍5）臍帯血ユニットの移植と移植関連有害事象の報告

帯血バンクに選択臍帯血ユニットを申し込む。臍帯血バ

移植時は移植病院の手順書に従い，解凍し経静脈的に輸ンクにおけるこの患者のための保管期間は最長 3 か月で注するが，輸注時間とアナフィラキシーショックなどのある。

副作用に注意する。小児への臍帯血液の投与速度は 1 ～中部さい帯血バンクでは臍帯血バンクに送付された

2mL/kg（体重）/h が目安とされており，成人の場合は，患者の血液を用いて患者の NGS-HLA タイピングを実最初の 10 ～ 15 分間は 1mL/min での投与が推奨されて施するとともに，臍帯血ユニットの確認検査を臍帯血いる。米国の臍帯血バンクでは低速度（成人 100mL/h，ユニットがすでに NGS-HLA タイピング済の場合には，

小児 1mL/kg/h）からの投与開始を勧めているところも

luminex 法で HLA-A, B, C, DRB1 の高頻度アレル（第 2ある。臍帯血輸注の間は患者さんの状態変化に注意する。

領域まで）を同定し，同一臍帯血であることを確認する。

有害事象が認められたら，Web にて有害事象を臍帯血さらに患者の HLA 抗体検査を行い，患者にドナー特異バンクに報告する。重篤な有害事象は直ちに厚労省に報的 HLA 抗体がないことを確認する。

告される。

4）移植病院での保存
4．最新の移植成績

臍帯血ユニットは液体窒素を充填した容器で搬送業者により移植病院に運搬される。移植病院では厚労省ガイ

全国臍帯血バンクを介して届けられた臍帯血ユニット

ドラインに従い液体窒素タンクまたは超低温フリーザーを用いた臍帯血移植の最新の解析結果につき以下に記載

図2

 ：年代別移植後生存曲線。B：スタンダードリスク急性骨髄性白血病年齢別生存曲線（2015 -2019）。C：ハイリス
A
ク急性骨髄性白血病年齢別生存曲線（2015-2019）。D：CD34 陽性細胞（×105）/ 体重（kg）別生存曲線 （参考文献
1 を引用）

71MHC

2024; 31 (2)

我が国の臍帯血バンクと臍帯血移植
表1

する1）。

疾患・病期別生存率（2015-2919）（参考文献 1 を引用）

症例は 1996 年～ 2019 年に全国の臍帯血バンクを介して初回単一臍帯血移植が実施された 13,502 症例で，移植登録一元管理プログラムデータベース（TRUMP）を用いた解析である。移植後の全症例の生存率は年度毎に向上している（図 1A）。近年（2015 年～ 2019 年）の急性骨髄性白血病の年令別累積 5 年生存率は，第 1，2 完
全寛解時 15－39 才で 78％，40－59 才で 64％，60 才以上
でも 49％と良好な成績であった（図 2B）。疾患別・リスク別の移植後 1 年，3 年，5 年の生存率を表 1 に示す。
これら成績は骨髄バンクからの HLA 適合非血縁者間移植の成績と比べ遜色ないものと考えられる。
5．臍帯血移植成績に関与する因子1）移植後生存，生着，白血病再発，急性 GVHD（Ⅲ-Ⅳ度）
及び慢性 GVHD 発症に関与する因子。
表 2 に示した。基準とする群に比べ有意（P ＜ 0.01）
な因子を◎とした。生存では有意な因子として患者年
令，前移植の有無，白血病病期，HCTC index score，
GDHD 予 防 法 と と も に 臍 帯 血 ユ ニ ッ ト の CD34 細 胞
数 /kg が認められた。好中球生着，白血病再発，重症
GVHD 発症，慢性 GVHD 発症率についても各々のリス
クが有意に高い又は低い因子についても◎で記載した。
2）好中球生着に及ぼす有核細胞数（TNC）/kg，CD34
陽性細胞数（CD34＋）/kg，CFU-GM 数（CFU-GM）/kg の効果
生着曲線と生着のリスクを各々 6 群の細胞数に分けて解析した。どの細胞成分も細胞数が増すにつれて良好な生着が得られたが，TNC/kg に比べ CD34＋/kg とCFU-GM/kg はより 6 群の生着率の幅が広く，とくに高い生着群を検索するのに有用であった。TNC/kg，
CD34＋/kg，CFU-GM/kg の 関 連 を 明 ら か に す る た めinteraction（交互作用）解析を実施した。TNC/kg とCD34＋/kg と の 間 な ら び に TNC/kg と CFU-GM/kg との間の interacton の p 値はそれぞれ 0.013 と 0.019 と交互作用が認められた。CD34＋/kg と CFU-GM/kg との間は P ＝ 0314 と独立した変数であった。これら結果から，良好な生着を得るための選択には TNC/kg よりも CD34＋/kg と CFU-GM/kg を用いることが良いと考えられた。
最近の症例を用いた解析では CD34＋/kg が 1.0 × 105 以
上では 90％以上の生着率が得られている。0.5 から 1.0×72

我が国の臍帯血バンクと臍帯血移植

MHC

2024; 31 (2)表 2 生存，生着，GVHD，白血病再発にかかわる因子（多変量解析）（参考文献 1 を改変）

105 では 85％の生着率であるが，この群を CFU-GM/kg
で見てみると CFU-GM/kg が 20 から 50×103（この群の66.5％を占めている）ではおよそ 90％の生着率が得られている（図 3）
。血小板の生着ではこのような CFU-GM/
kg の効果は認められていない。また，CD34＋/kg の増加
は生存率の向上に寄与している（図 1D）。CD34＋/kg の効果は海外も含め数多く報告されているが，CFU-GM/
kg の報告はない。
6．HLA の適合性
1）患 者 と 臍 帯 血 間 の HLA 不 適 合 数（HLA-A, B, C,
DRB1 アレルレベル）と生存（死亡）および移植免
疫反応との関連解析
現在まで HLA-A,-B,-DR の 2 抗原不適合までの臍帯血ユニットの選択が認められている。この条件で HLA 不
適合数（HLA-A, B, C, DRB1 アレルレベル）を解析した（表 3）。
不適合数を 5 群に層別化した場合，0-1 不適合数の症例は，より不適合数が多い症例に比べ良好な生着（HVG 方向），白血病の再発（GVH 方向）が高率，急性GVHD が低率，慢性 GVHD が低率であり，生存（死亡）リスクは 5 群間に有意差はなかった。
不適合数が 2 以上の症例では生着，白血病再発，急性
図3

GVHD，慢性 GVHD ともに不適合数が増えても悪化す
ることはなかった。
73

 CD34＋/kg（×105）と生着曲線 B CD34＋/kg が 0.5
A～ 1.0 での CFU-GM/kg（×103）別生着曲線 （参考文献
1 を引用）

MHC

2024; 31 (2)

我が国の臍帯血バンクと臍帯血移植

表 3 HLA アレル不適合数別の生存（死亡），好中球生着，白血病再発，GVHD 発症リスク（参考文献 1 を改変）

重症 GVHD の発症曲線を図 4 に示した。HLA アレ
ル不適合数が 2 以上でも重症 GVHD の頻度は 10％前後と低率であった。また，白血病再発は HLA アレル適合群が不適合群に比べ高率であり graft-versus-leukemia
effect（GVL 効果）が認められた。
2）患者と臍帯血間のHLA座ごとのHLA不適合数（HLA-A,
B, C, DRB1 アレルレベル）と生存（死亡）および移植免疫反応との関連解析

図4

HLA 座の適合度解析では有意なリスクのある HLA

HLA アレル不適合数別の重症急性 GVHD 発症曲線座が認められた。HLA-B 座では生着リスクは適合に
比 べ 1 ア レ ル 不 適 合 で は HR 0.93（p=0.004），2 ア レが多いため，HLA アレル単一不適合（他の HLA 座はル不適合では HR 0.81（p<0.001）と不良であり，重症適合）の効果を検証した。

GVHD（III-IV 度）リスクは適合に比べ 1 アレル不適合

急性 GVHD（ll-lV 度）では HLA-C 不適合で低率，急では HR 1.53（p<0.001），2 アレル不適合では HR 1.34

性 GVHD（lll-lV 度）で HLA-B 不適合が HR2.59（p=0.005）（p=0.044）と高かった。

と高率であった。慢性 GVHD では HLA-C 不適合で低HLA-DRB1 座では適合に比べ不適合は有意に生着が率であった。白血病再発は HLA-A と HLA-DRB1 不適

不良，急性 GVHD が高率，慢性 GVHD が高率，白血病合で低率であった（文献 1 Table 7 参照）。

再発が低率であった。

4）小児，成人別 HLA 不適合数の生存（死亡率）への影響

死亡のリスクは適合と不適合間にすべての HLA 座に

小児では HLA アレル不適合数が 5 から 7 の場合に少おいて有意差はなかった（HLA-B 座の 2 座不適合 HR

数例ではあるが，有意に死亡のリスクが高くなった。一

1.14（P=0.048）を除く）。

方，成人例では各群有意差はなかった（表 5）。

3）患者と臍帯血間のHLA座ごとのHLA不適合数（HLA-A,5）臍帯血移植と HLA に関する国内海外からの報告

B, C, DRB1 アレルレベル）と生存（死亡）および移Atsuta らの 2013 年の報告では我が国の成人臍帯血

植免疫反応との関連解析：HLA アレル単一不適合（他移植では HLA 抗原型適合度は生存率と関連が認められの HLA 座は適合）の場合ないとされた。これ以降 HLA の適合度の重要性は軽

上記 2）の解析ではアレルの不適合数が 3 以上の症例視される傾向にあったが，Yokoyama ら5） は 2020 年に74我が国の臍帯血バンクと臍帯血移植

MHC

2024; 31 (2)

表 4 HLA アレル不適合数別の生存（死亡），好中球生着，白血病再発，GVHD 発症リスク（参考文献 1 を改変）

表5

小児と成人別生存（死亡）リスク（参考文献 1 を引用）

HLA-A,-B,-C,-DRB1 のアレル適合度の重要性の報告している。さらに，2023 年の論文1）により HLA 適合度は移1．ドナー特異的 HLA 抗体に対する抗原を有する

植免疫反応に様々な程度に影響を与えており，骨髄バン

臍帯血ユニットは選択の対象にならない。

クの非血縁者間造血細胞移植とは異なる形で機能してい2．体 重あたりの有核細胞数（TNC/kg）よりも6）ることが確認された。海外では Eapen ら は HLA アレ

CD34+/kg と GM-CFU/kg を優先して選択する。

ル適合度の重要性を報告している。

先 ず CD34+/kg の多いユニットを選択した中Yabe ら7） は HLA-A,B,C,DRB1,DQB1,DPB1 の ア レ ル

で，CFU-GM/kg が多いユニットがあれば選択

タイピングを後方視的に実施し，HLA-DPB1 アレル不する。

適合が GVL 効果を生じさせることを報告している。
0.5×105 以上の CD34+/kg のユニットが選択

臍帯血移植における HLA 抗体の検討では Takanashi
ら8）の donor specific antibody（DSA）の影響や Jo ら9）可能である。

の HLA-DP/-DQ に対する抗体の影響が報告されている。

CD34+/kg, が 0.5 ～ 1.0×105 の 場 合 は CFUGM/kg が 30×103 以上であれば 90％前後の7．患者にとって最適な移植ユニットをどのように選択

好中球生着率が予測される。1.0×105 CD34+/

したらよいか。

kg 以上のユニットでは 90% 以上の好中球生

上記解析結果に基づき HLA-A, -B, -C, -DRB1 アレル

着率が予測される。

に基づく臍帯血ユニット選択アルゴリズムを以下のように構築した。
75MHC

2024; 31 (2)

我が国の臍帯血バンクと臍帯血移植する必要がある。さらに，臍帯血を用いた再生医療とし
5

1.0 から 1.5, 1.5 から 2.0, 2.0 から 15.0（×10 ）て造血幹細胞移植だけでなく数多くの臨床的な試み（例+CD34 /kg のユニットでは同様な好中球生着率が得られるが，血小板の生着率は 1.5×10

えば脳性麻痺）がなされており，近い将来に実臨床に導5入されることが期待される。

+

CD34 /kg 以上で高い生着率が得られる。
参考文献
1）Y. Morishima,N.Watanabe-Okochi,S.Kai et al.Selection of

3．上 記の選択基準で適切なユニットが得られた

Cord Blood Unit by CD34+ Cell and GM-CFU Numbers

ら，HLA アレル適合度に基づき選択する。

and Allele-Level HLA Matching in Single Cord Blood1）良好な好中球生着を得るためには HLA アレ

Transplantation Transplant Cell Ther. 29(10): 622-631.

ル 0-1 ミスマッチ（HVG 方向）ユニットを

2023.

HLA アレル 2 ミスマッチ以上ユニットに優2）椎名 隆次世代シークエンシングに基づく HLA DNA タ

イピング法の特徴と移植医療への応用。日本造血・免疫細先して選択する。

胞療法学会雑誌 12(3) 133-140 2023.

2）白血病の再発予防など個々の症例の病状を優3）内田 直之

先する場合には 2-6 アレルミスマッチユニッ

臍帯血移植の合併症の現状と未来。日本造血・免疫細胞療法学会雑誌

トの選択が可能である。

4）小 沼貴晶

11(2): 81-89, 2022.

本法における成人に対する単一ユニットを用 い た 臍 帯 血 移 植． 日 本 造 血・ 免 疫 細 胞 療 法 学 会 雑 誌

3）15 才以上の成人では 2-6 アレルミスマッチの12(2):83-93,2023

ユニットの選択が可能である。（7 アレルミ5）T Yabe, F Azuma, K K Kashiwase,et al.Japanese Cord

スマッチ症例はほとんどないため除外した）

Blood Transplantation Histocompatibility Research4）14 才以下の小児では 2-4 アレルミスマッチのGroup.HLA-DPB1 mismatch induces a graft-versusleukemia effect without severe acute GVHD after single-

ユニットの選択が可能である。

unit umbilical cord blood transplantation. Leukemia 325）HLA-DRB1 または HLA-B アレルミスマッチ

168-175. 2018.

のユニットの選択順位は低い可能性がある。

6）M Eapen, JP Klein, A Ruggeri, et al.Center forInternational Blood and Marrow Transplant Research,
Netcord, Eurocord, and the European Group for Bloodand Marrow Transplantation. Impact of allele-level HLA

上記手順により選択された臍帯血ユニットの臍帯血移matching on outcomes after myeloablative single unit

植の成績を予測し，他の移植源の成績の予測，各移植法

umbilical cord blood transplantation for hematologicの適応，ドナーが得られる可能性，移植可能な時期など

malignancy. Blood, 123, 133-140. 2014.
7）H Yokoyama, Y Morishima, S Fuji,et al. HLA Working

を考慮して最適な移植法を選択する。

Group of the Japan Society for Hematopoietic Cell
Transplantation. Impact of HLA allele mismatch

8．おわりにat HLA-A, -B, -C, and -DRB1 in single cord blood

我が国における単一の臍帯血移植は HLA 適合非血縁

transplantation. Biol Blood Marrow Transplant, 26, 519528. 2020.

者間移植と少なくとも同等の成績が示されており，移植

8）M Takanashi, Y Atsuta, K Fujiwara, et al.The impact

適応のアルゴリズムは改訂が必要である。臍帯血バンクof anti-HLA antibodies on unrelated cord bloodの一部では NGS-HLA typing の導入が始められており，

transplantations. Blood, 116, 2839-2846. 2010.

より品質の高い（CD34 陽性細胞数の多い）臍帯血ユニッ

9）T Jo, Y Arai, K Hatanaka, et al. Adverse effect of donor-

トの提供と合わせて，今後のさらなる移植成績の向上がspecific anti-human leukocyte antigen (HLA) antibodies
directed at HLA-DP/-DQ on engraftment in cord blood

期待される。また，日本で得られている臍帯血移植の知transplantation. Cytotherapy, 25, 407-414. 2023.

見は人種を超えた普遍的なものと考えられるが，欧米での double 臍帯血移植も含めた成績との違いを今後検証76我が国の臍帯血バンクと臍帯血移植

MHC

2024; 31 (2)Cord blood bank and cord blood transplantation
Yasuo Morishima1）
1）

Central Japan Cord Blood Bank

Recent progress of single cord blood transplantation in Japan is remarkable. More than 90% of engraftment, low
incidence of severe acute GVHD, chronic GVHD and intensive graft versus leukemia effect were observed. CBT isconsidered one of choice, when HLA identical sibling donor is not available. This paper reports that how to cord
blood units are collected and processed in 6 public cord blood banks in Japan, how to select suitable cord blood unit
by CD34 positive cell number/kg, CFU-GM colony cell number/kg and HLA compatibility.
Key Words: cord blood transplantation, cord blood bank, CD34 positive cell, HLA compatibility.


©2024

日本組織適合性学会

77

Major Histocompatibility Complex

2024; 31 (2): 78-91

抄録集

第 23 回日本組織適合性学会近畿地方会抄録集
会期：2024 年 7 月 6 日（土）会

場：大阪府赤十字血液センター 7 階会議室
大阪市城東区森之宮 2 丁目 4 番 43 号
TEL 06-6962-7001

当番世話人：王寺典子

奈良県立医科大学免疫学講座〒 634-8521

奈良県橿原市四条町 840

TEL：0744-22-3051（2016）/ FAX：0744-29-7503
事務

局：日本赤十字社近畿ブロック血液センター
代表世話人

木村

事務局担当

高

貴文
陽淑

〒 567-0085 茨木市彩都あさぎ 7-5-17【開催方法】
ハイブリッド開催（現地開催と Zoom によるオンライン配信）【参加費】
1．正会員：2,000 円
2．学生 ：1,000 円
3．世話人：3,000 円

78

第 23 回日本組織適合性学会近畿地方会

抄録集

MHC

2024; 31 (2)プログラム
HLA 基礎講習会（事前登録者対象）

8 時 50 分～ 10 時 20 分

1）HLA の基礎知識
HLA 抗原（Serogram）から HLA エピトープ (Epigram）へ」
講師：橋本 光男（兵庫県立西宮病院腎移植センター）
2）HLA 検査にかかるワークショップ
DNA タイピングについて
講師：東史啓（日本赤十字社血液事業本部

技術部

造血幹細胞事業管理課）

抗 HLA 抗体検査について
講師：栗田絵美（広島大学病院

診療支援部臨床検査部門）

開会の挨拶
オープニングセミナー

10 時 30 分～ 11 時 30 分

座長

木村貴文（日本赤十字社近畿ブロック血液センター）

演者

徳永

勝士（国立国際医療研究センター

ゲノム医科学プロジェクト戸山プロジェクト長）「HLA のこれから」
一般演題
座長

11 時 30 分～ 12 時 00 分

石谷昭子（奈良県立医科大学

未来基礎医学教室）

1）FCXM 測定中にリンパ球の減少を認めた一例〇高山智美 1），蔦原宏一 2），川村正隆 2），山田直美 1），三好由真 1），小野原健一 1）， 野田智恵子 1），高尾徹也 2）（大阪急性期・総合医療センター移植支援検査センター 1），大阪急性期・総合医療センター泌尿器科 2））
2）肝移植における DSA の意義〇奥村晋也，伊藤孝司，波多野悦朗（京都大学肝胆膵・移植外科 / 小児外科）

3）脊髄性筋萎縮症の修飾遺伝子である SMN2 遺伝子のスクリーニング法開発と日本人における SMN2 遺伝子欠失の推定頻度について
〇﨑間誠 1），西尾久英 2），坊池義浩 3）（神戸学院大学大学院栄養学研究科 1），神戸学院大学総合リハビリテー

ション学部 2），神戸学大学栄養学部臨床検査学専攻 3））
ランチョンセミナー
座長

谷

12 時 00 分～ 13 時 00 分

慶彦（日本赤十字社血液事業本部中央血液研究所）「免疫原性血栓性血小板減少性紫斑病の病態解明における免疫学的アプローチ」
酒井

和哉（奈良県立医科大学

輸血部）

近畿地方会世話人会

13 時 00 分～ 13 時 20 分

総会

13 時 20 分～ 13 時 30 分

79

MHC

2024; 31 (2)

第 23 回日本組織適合性学会近畿地方会

Topic discussion

抄録集

13 時 30 分～ 14 時 00 分

「脳血管病変の治療に用いる X 線照射済み臍帯血の品質試験とは？」
木村
特別講演
座長

貴文（日本赤十字社近畿ブロック血液センター）

王寺Ⅰ

14 時 00 分～ 15 時 00 分

典子（奈良県立医科大学

免疫学講座）「動く細胞からみる生体防御システム」
戸村

道夫（大阪大谷大学薬学部・免疫学講座）

ワークショップ

15 時 00 分～ 16 時 00 分

テーマ：検査技術と報告方法のスキルアップ
座長

進藤
高

岳郎（広島大学病院

血液内科）

陽淑（日本赤十字社近畿ブロック血液センター検査三課）

1）「医師とのコミュニケーションで心がけていること～臨床検査技師の立場から～」
今西唯（京都府立医科大学附属病院

輸血・細胞医療部）

2）「兵庫さい帯血バンクにおける DSA の取り組み」
川岸

万佑子（兵庫さい帯血バンク）3）「当研究所の検査結果報告書と適合性評価の実態と課題」
木野
特別講演
座長

佑亮（公益財団法人 HLA 研究所 技術部検査課）

池亀Ⅱ

16 時 00 分～ 17 時 00 分

和博（愛知医科大学造血細胞移植センター）「新型コロナウイルス感染症（COVID-19）研究―単科医科大学からの発信―」伊藤利洋 （奈良県立医科大学 免疫学講座 /MBT 研究所）

閉会の挨拶

80

第 23 回日本組織適合性学会近畿地方会

抄録集

MHC

2024; 31 (2)オープニングセミナー

HLA のこれから
徳永勝士
国立国際医療研究センター

ゲノム医科学プロジェクト戸山プロジェクト長移植，輸血などの臨床分野における HLA の重要性は

年 5 月，沼津市）について紹介する。提案されたプロジェ

言うまでもないが，自己免疫疾患，アレルギー，がん，

クトの中から参加したいプロジェクトを選んで，自分達感染症などの多様な疾患との関連や，薬剤やワクチンが収集した検体について行った解析結果を持ち寄って発への応答性との関わりにおいても HLA は重要な要因と表し，活発な議論を行う，合宿のような楽しい催しであなっている。また，HLA 遺伝子群はヒトゲノムの中でる。造血幹細胞移植などの重要なプロジェクトは引き続

最高度の多様性を示すことから進化学などの基礎分野にき実施されるとともに，日本チームからも上述の LILR

おいても注目されている。

遺伝子群の構造と多型に関する新しいプロジェクトを提これらについて近年私達が行ってきた研究の中から，案している。

感染症と HLA の関連について対照的な姿を示す B 型肝この国際ワークショップで行われる 20 余りのプロ炎ウイルスと新型コロナウイルスを紹介する。また，19

ジェクトを概観すると，HLA 関連研究の最近の潮流を番染色体上で KIR 遺伝子群の隣に位置する LILR 遺伝

知ることができる。私が参加してきた ASHI や EFI か

子群の遺伝子コピー数の多型について，ショートリード

ら受けた印象なども交えて，eplet 解析・登録，新しいシークエンサによる全ゲノム解析およびロングリード

血清学解析，HLA 11 座の NGS 解析や KIR 解析の移植

シークエンサ解析に基づく興味深い結果を紹介する。

における意義，造血幹細胞移植後の HLA 欠失による再次に，世界各国の先導的な臨床および基礎研究者が集発などの話題にも触れたい。

う第 19 回国際 HLA・免疫遺伝学ワークショップ（2026

81

MHC

2024; 31 (2)

第 23 回日本組織適合性学会近畿地方会

抄録集

一般演題

FCXM 測定中にリンパ球の減少を認めた一例〇高山智美 1），蔦原宏一 2），川村正隆 2），山田直美 1），三好由真 1），小野原健一 1），野田智恵子 1），高尾徹也 2）
大阪急性期・総合医療センター移植支援検査センター 1），大阪急性期・総合医療センター泌尿器科 2）【はじめに】リンパ球クロスマッチはドナーに特異的なト血清，陰性コントロール血清，陽性コントロール血抗体を検出することを目的とした検査であり，当検査

清をそれぞれ混和し室温で 30 分反応させた。洗浄後に室では LCT（Lymphocyte Cytotoxicity Test），FCXM

FITC-Anti-Human IgG，PC5-CD3，PE-CD19 を添加し，（Flowcytometry Crossmatch） の 2 法 を 行 っ て い る。

4℃で 30 分反応させた。洗浄後にフローサイトメーター

これまで FCXM が強陽性の場合にレシピエント血清中にて測定し，Ratio を算出して判定した。

の補体の働きにより細胞傷害が起こり目的のリンパ球が③抗 HLA 抗体検査

減少することはあったが，今回 FCXM が陰性にも関わLABScreen Single AntigenTM を用いて測定を行った。

らずリンパ球が減少した症例を経験したので報告する。

【結果と考察】通常のプロトコールで測定した FCXM

【方法】

では B リンパ球の減少を認めた。EDTA 処理，非働化①血清処理方法

処理をした血清を用いた FCXM では B リンパ球の減少

レシピエント血清は凍結保存後に解凍し，15,000rpm

は認めず，Ratio は陰性であった。また，抗 HLA 抗体

で 10 分遠心したものを用いた。また，EDTA 処理，非検査は陰性であった。

働化処理は以下のように行った。

補体を不活化する EDTA 処理，非働化処理によりリ・EDTA 処理：EDTA の終濃度が約 10mM となるよう

ンパ球の減少が解消したことから，リンパ球の減少にはに血清に EDTA を添加した。

補体の関与が考えられる。FCXM，抗 HLA 抗体検査は・非働化処理：血清を 56℃で 30 分インキュベートした。

二次抗体に Anti-Human IgG を用いており，IgG 以外の② FCXM

抗体は検出できない。このため，リンパ球の減少を引き

プロテアーゼ処理したドナーリンパ球にレシピエン起こしたのは IgG 以外の抗体であることが示唆された。

82

第 23 回日本組織適合性学会近畿地方会

抄録集

MHC

2024; 31 (2)

肝移植における DSA の意義〇奥村晋也，伊藤孝司，波多野悦朗
京都大学

肝胆膵・移植外科 / 小児外科

【はじめに】肝移植における preformed DSA と de novo

因子は，MFI 高値，複数の DSA 陽性などであった。

DSA の意義について検討する。

一方，抗体関連型拒絶反応の有無は，患者生存には【方法】

影響を与えなかった。

1）Preformed DSA 陽性症例について，患者背景・拒絶

2）de novo DSA は移植後経時的に発生し，特に小児に反応および患者生存への影響を検討した。

多い傾向を認めた。de novo DSA の有無は患者生存・

2）移植後 de novo DSA 発生率と，肝線維化・拒絶反応

グラフト生存に影響を認めなかったが，晩期 T 細胞および患者生存への影響ついて検討した。

性拒絶およびグラフト肝線維化に相関を認めた。

【結果】【結語】Preformed DSA については，High-titer 症例に

1）Preformed DSA High titer（MFI ＞ 10000）症例でついて現行の Rituximab プロトコールを継続する。まは，ABO 血液型不適合に準じて，術前に Rituximab

た de novo DSA は患者生存には影響を与えないものの，

投 与・ 血 漿 交 換・ 免 疫 抑 制 剤 投 与 を 行 っ て い る。

長期的にグラフト肝の線維化に影響を及ぼすため，特にPreformed DSA 陽性例は女性に多く，特に多産婦

若年者において，術後の定期的な DSA の測定と，定期に多い傾向にあった。 抗体関連型拒絶反応のリスク

肝生検でのフォローアップを行っていく方針である。

83

MHC

2024; 31 (2)

第 23 回日本組織適合性学会近畿地方会

抄録集

脊髄性筋萎縮症の修飾遺伝子である SMN2 遺伝子のスクリーニング法開発と日本人における SMN2 遺伝子欠失の推定頻度について〇﨑間

誠 1），西尾久英 2），坊池義浩 3）

神戸学院大学大学院栄養学研究科 1），神戸学院大学総合リハビリテーション学部 2），
神戸学院大学栄養学部臨床検査学専攻 3）【 目 的 】 脊 髄 性 筋 萎 縮 症（spinal muscular atrophy:

上かつ 2SD 未満の検体（グループ B）は 27 検体，2SD

SMA）は，常染色体劣性遺伝形式をとる下位運動ニュー以上の検体（グループ C）は 29 検体であった。グルー

ロン疾患である。原因遺伝子である SMN1 遺伝子のプ B と C を対象に行った PCR-RFLP での確認検査で近傍には相同遺伝子である SMN2 遺伝子が存在する。

は，56 検体中 28 検体に SMN2 遺伝子欠失が認められ

SMN2 遺伝子のコピー数は多いほど SMA が軽症化するた。SMN2 遺伝子の欠失頻度は合計 500 検体中 28 検体傾向にある。一方，SMN2 遺伝子欠失が他の筋疾患の発で 5.6％であった。グループ B と C の残り 28 検体につ症について関連するとの報告もあり，SMN2 遺伝子のいては，PCR-RFLP とシーケンス解析の結果で SMN2

役割はいまだ十分に解明されていない。そこで，我々は遺伝子を保有していた。

SMN2 遺伝子のスクリーニング法を開発し，日本人に【考察】今回の研究では，増幅効率の高い DNA ポリメ

おける SMN2 遺伝子の欠失頻度を推定することで，今ラーゼを使用し，最適な PCR 条件を設定することで，後の研究に寄与したいと考える。

リアルタイム PCR での SMN2 遺伝子スクリーニング法【方法】検体は，SMN1 遺伝子を保有した日本人新生児を開発することができた。SMN2 遺伝子は SMA 患者にの乾燥濾紙血（Dried blood spots: DBS）500 検体を使必ず存在するが，SMN1 遺伝子を保有した日本人にお用した。SMN2 遺伝子欠失を検出するスクリーニング

ける SMN2 遺伝子欠失頻度は報告されていない。我々

法はリアルタイム PCR で検討を行い，確認検査としては簡便かつ大量検体の解析を可能とするリアルタイム

PCR-RFLP を行った。さらに，SMN2 遺伝子欠失の確PCR を用いた SMN2 遺伝子スクリーニング法により，定については，サンガー法を用いてシーケンス解析を

今回はじめて日本人の SMN2 遺伝子欠失が 5.6％である行った。

ことを推定した。今後，他の筋疾患における，SMN2 遺【結果】リアルタイム PCR の解析結果は，Ct 値が平均

伝子欠失の集団解析を行うことで，SMN2 遺伝子の役+1SD 未満の検体（グループ A）は 444 検体，1SD 以割の解明につながることが期待できると考えられた。

84

第 23 回日本組織適合性学会近畿地方会

抄録集

MHC

2024; 31 (2)ランチョンセミナー

免疫原性血栓性血小板減少性紫斑病の病態解明における免疫学的アプローチ酒井和哉
奈良県立医科大学

輸血部

血栓性血小板減少性紫斑病（thrombotic

ける疾患感受性 HLA であることを示した。ヨーロッthrombocytopenic purpura: TTP） は 血 小 板 減 少， 溶

パ 系 白 人 に お け る 基 礎 解 析 結 果 よ り，DRB1*11 分 子

血性貧血，虚血性臓器障害で特徴づけられる致死的血は ADAMTS13 の CUB ドメイン内に存在するペプチ栓症である。TTP の病態は血中の止血因子である vonドと結合し，自己反応性 CD4 陽性 T 細胞の刺激を行

Willebrand 因子（VWF）の機能亢進による病的な血小うことが報告されている。我々は抗原提示細胞におけ

板血栓の形成と理解されている。VWF が生体内で適切る HLA 分子と抗原提示ペプチドの親和性が細胞表面のな止血能を維持するためには，ADAMTS13 による切断

HLA- ペプチド複合体の発現量と相関する原理を利用しを受けた，適切な重合度の重合体として血中に存在する

た MHC density assay を筑波大学遺伝医学と共同で実必要がある。しかしながら，TTP の大部分を占める免施 し，DRB1*11:01 分 子 お よ び DRB1*08:03 分 子 は 6 つ

疫原性 TTP 患者においては ADAMTS13 酵素活性が抗の共通する ADAMTS13 由来ペプチドについて強い親

ADAMTS13 自己抗体によって後天的に著減している。

和性を示した。この結果はヨーロッパ系白人と日本人に免疫原性 TTP は抗体産生伴う自己免疫性疾患であり，おいて異なる疾患感受性 HLA を有しながら，同様に抗血漿交換療法による抗 ADAMTS13 自己抗体の除去お

原提示を行うことを示唆する。一方，免疫原性 TTP 患

よび免疫抑制剤による加療が標準治療として実施され者において自己反応性 B 細胞から分化した形質細胞はる。近年，急性期の血栓イベント抑制のため VWF A1

ADAMTS13 に対する自己抗体を産生・血中に分泌を行ドメイン抗体薬であるカプラシズマブが上市され，免疫う。この自己抗体が認識する ADAMTS13 エピトープ

原性 TTP の治療は新たなフェーズに入った。しかしなについてもヨーロッパ系白人においては積極的に解析

がら，免疫原性 TTP においては治療後の再発率が 3 割がなされており，Cysteine-rich および Spacer（CS）ド程度と報告され，また明確な抗体産生のメカニズムが解メインに対する抗体の保有頻度が高いと報告されてい

明されていない。

る。我々はベルギー KU Leuven と共同研究として，日自己免疫性疾患における発症の背景リスクとして疾本人急性期免疫原性 TTP における自己抗体のエピトー

患感受性 HLA が認知されている。免疫原性 TTP におプマッピングを行った。ヨーロッパ系白人および日本人

いてもヨーロッパ系白人集団を対象とした解析から，は CS ドメインに対する抗体保有率が 7 割であり，またDRB1*11（DRB1*11:01 お よ び DRB1*11：04） が 疾

約 3 割の患者が CS ドメインのみに対する抗体を保有す

患感受性 HLA として同定されている。我々は日本人ることが示されたこのように，異なる人種・異なる遺伝

免 疫 原 性 TTP を 対 象 と し た HLA タ イ ピ ン グ 研 究 を的背景にもかからず，免疫原性 TTP 患者は類似した免行い，東アジアに局在する DRB1*08:03 が日本人にお疫プロファイルを有する。

85

MHC

2024; 31 (2)

第 23 回日本組織適合性学会近畿地方会

抄録集

Topic discussion

脳血管病変の治療に用いる X 線照射済み臍帯血の品質試験とは？
木村貴文
日本赤十字社近畿ブロック血液センター
国内で実施される同種造血幹細胞移植の約 1/3 は臍帯2020）。

血移植ですが，これは日本に特有の状況で，欧米では骨そこで私たちは，臍帯血の CD34+ 細胞が極短時間で髄・末梢血幹細胞移植が主流です。海外でも臍帯血バン

血管修復効果を発揮するには，従来の増殖・分化能力がク事業は盛んですが，供給目的は造血器疾患や代謝疾患

まったく不要ではないかという仮説をたてました。15ではなく，神経疾患や血管病変が大半です。虚血性脳障

Gy という高線量の X 線を照射して幹細胞の増殖・分化

害の新生児あるいは脳卒中など虚血性神経疾患の成人患能を完全に奪った臍帯血から精製した単核球分画を脳梗者を対象とする同種臍帯血輸注療法に関する初期臨床試

塞モデルマウスに動脈内投与すると，未照射臍帯血由来

験が実施され，その安全性だけでなく有効性の可能性を細胞と同様に顕著な神経学的改善が得られました。また，示唆する報告もされています。新生児や高齢者は免疫・照射済み臍帯血細胞は凍結融解後も同じ治療効果を示し代謝系に問題を抱えている可能性が高く，同種臍帯血輸ました。さらに，これらの効果が梗塞巣での血管新生促注療法の症例が今後累積されるにしたがって移植片対宿進によるものだけでなく，投与臍帯血細胞が血液脳関門

主反応（GVHD）への配慮が求められると予想されます。

のバリアを超えて星状細胞など血管周辺の神経細胞にも私たちは，海外での虚血性神経疾患を対象とする臨床

小物質を供与することで神経再生を直接促進することに試験が，臍帯血の治療メカニズムが明らかにされないまよる可能性も発見できました。これら一連の研究を通しま実施されていることに疑問を持ち，それを解明するて，虚血性脳疾患に対する同種臍帯血輸注療法の治療メ研究に着手しました。2004 年に田口らが脳梗塞モデル

カニズムの主要な部分が明らかになったと考えられます+

マウスでの臍帯血 CD34 陽性（CD34 ）細胞の血管新生（Sci Rep, 2004）。

+

を介する治療効果を証明したことを基盤として，CD34

しかし，これらの Proof of Concept をベッドサイド細胞が虚血性障害を受けた部位の血管内皮細胞に gapに展開するには，practical use に必要な品質の確保が不junction を介して直接グルコースなどの小分子エネル可欠です。X 線照射で GVHD への対応は「ほぼ」問題

ギー源を供給することで血管新生を促進することを見出ないと考えられますが，この領域の専門家のみなさんにしました。しかも，その受け渡しが臍帯血投与後極めては，どのように品質管理のシステムを構築すべきかご議

短時間（約 10 分）で起こることも発見しました（Stroke,

論いただければ幸いです。

86

第 23 回日本組織適合性学会近畿地方会

抄録集

MHC

2024; 31 (2)

特別講演Ⅰ

動く細胞からみる生体防御システム
戸村道夫
大阪大谷大学薬学部
私達は，テキストのイラストに描かれた細胞同士の相物現象を目で見て理解できる。それに対し，近年開発が互作用を見ながら勉強し，生体内で起こっている生理現進んだ組織透明化法は，固定化された組織ではあるが数象をイメージしてきた。しかし，現実の生体内では，沢mm 単位を超え，ヒト検体やマウスなどの個体レベルで山の種類の免疫細胞が，組織内，臓器間を移動して働いの蛍光イメージングによる単細胞レベルの 3D 可視化観ている。組織内では免疫応答の場を形成する間質系の細察を可能にした。また，我々は，紫色の光照射で緑から胞，あるいは神経系とも相互作用している。そして，こ赤色に変色する光蛍光タンパク質 Kaede/KikGR を発現

れらを健常時から病態時において変化させることで生体するマウスを用い，生きたマウスでの in situ 光ラベリ

恒常性を維持している。

ング系を確立し，全身レベルで定常時および病態時におSeeing is Believing，「百聞は一見にしかず」，蛍光タ

ける臓器間の免疫細胞動態の解明を可能にした。

ンパク質そして生体内 2 光子レーザー顕微鏡観察技術の本講演では，免疫応答の開始から病態まで，上記の可発達により，生体内での細胞の動態，相互作用に加え機視化技術によって得られた映像をお見せしながら，生体能発現の可視化が実現している。生体内 2 光子レーザー

防御機構を担っている個々の細胞のダイナミックな働き

顕微鏡観察は一般的に数 100μm 立方の中で起こる生命を紹介します。

現象を直接観察し，生きている体の中で起こっている生

87

MHC

2024; 31 (2)

第 23 回日本組織適合性学会近畿地方会

抄録集

ワークショップ「検査技術と報告方法のスキルアップ」

1）医師とのコミュニケーションで心がけていること～臨床検査技師の立場から～
今西唯

京都府立医科大学附属病院

輸血・細胞医療部

臨床検査技師は，検査結果に関して医師とのコミュニ解釈について教えていただくこと，各試薬メーカーの学

ケーションを取る際にすれ違いが起こることを経験す

術担当者から情報を得ることなどを積み重ねて少しずつる。原因として，1）臨床検査技師と医師が各々で電子知識・技術を磨くとともに，院内では移植一般外科主催

カルテ上のデータや短いコメントを確認するのみで，直のカンファレンスに参加し検査結果について対面で話を接対話をする機会が少ないこと，2）医師が多忙でありすることを心掛けた。コミュニケーションの機会が増え

連絡のタイミングが難しいこと，3）臨床検査技師と医るに従い，徐々に医師から信頼を得ることができるよう師で有する知識が異なること，3）臨床検査技師と医師になり，検査に関する質問や相談を受けることも多く

でデータ解釈についてギャップがあること，などが挙げなった。2 回目は，初めて HLA 検査データを目にするられる。

腎臓内科医と仕事をする機会が増え，「医師との知識共

私が組織適合性検査に携わり 7 年が経過したが，その有」について考えることとなった。検査結果について医間に医師とのコミュニケーションについて試行錯誤する師へ個別に補足説明を実施するほかに，新体制で移植医ことを 2 回経験した。1 回目がベテランの前任技師が退療に参加した腎臓内科医に対し各メーカー主催のオンラ

職するにあたり初心者の私に検査が引き継がれた時，2イン講演会について案内したり，他施設の先生にお力添回目が院内の腎移植体制を再構築するにあたり，今までえいただいて講演会を開催したりすることで，多忙な医移植医療に携わっていなかった腎臓内科医に対して検査師が効率的に知識を得やすいように工夫した。腎臓内科

結果報告を行うようになった時である。1 回目は，ベテ医に電話や対面でなるべく直接結果説明をする機会を設

ラン技師から急に初心者の私に担当者が交代になったこ

けるようにした。現在では医師と検査データの解釈につとで，当時の移植外科医が不安や不信感を抱いているこ

いて有意義なディスカッションができるようになってきとが分かり，「自らの検査技術・知識の向上」「医師やた。当院で実施してきたコミュニケーション向上への取チームからの信頼獲得」が課題となった。そこで，日本り組みが，各施設での医師とのコミュニケーションにつ

組織適合性学会の初心者向け講習会に繰り返し参加する

いて参考になれば幸いである。

こと，学会で他施設・他病院の先生や先輩方に検査法や88

第 23 回日本組織適合性学会近畿地方会

抄録集

MHC

2024; 31 (2)2）「兵庫さい帯血バンクにおける DSA の取り組み」
川岸万佑子
兵庫さい帯血バンク
臍帯血移植は 2 座までの HLA 不適合移植が可能なた

医療機関には説明を行い，DSA 判断の対応を実施してめ，患者が臍帯血の有する HLA 抗原に対する抗 HLAいる。

抗体（DSA）を持つと生着不全の頻度が高いことを移次に，患者が抗 DP，抗 DQ 抗体を有する場合は，現植医は認識している。しかし，抗体特異性同定試薬の在では，臍帯血の DP，DQ タイプが未実施のため，移SingleLambda 社 は，

植医療機関より DP，DQ タイピング実施に必要な当該陽性カットオフ値を明確に規定しておらず，nMFI 値

臍帯血の DNA の依頼があれば提供し，移植医療機関で（Test

Details の Normal 値）が抗 HLA 抗体価を示す

臍帯血の DP,DQ タイピングを実施し，DSA の判断をし目安の数値であり，5,000 以上を強陽性，1,000-3,000 をてもらっている。そこで，当バンクでは，本年 1 月分

弱陽性の程度の目安としている。一般的な認識では，試から臍帯血登録時 HLA 検査を NGS 法（AllType NGS

薬の cutoff 値が 1,000 であるが，日赤では，独自の陽11-Loci Amplification Kit ） に 切 り 替 え， ジ ェ ノ ダ イ

性基準（Rxn を指標とし 4 以上を陽性）を決めており，

ブファーマに委託している。このことは，見なし HLAnMFI 値 100 位の低値であっても陽性と判定される。移タ イ プ で は な い HLA-A，B，C，DRB1，DRB3/4/5，

植医はそれに基づき DSA 陽性と判定し，当該臍帯血DQA1，DQB1，DPA1，DPB1 での登録となり，本件は，を移植しない決定をされることがある。当バンクでは，

抗 DP，DQ 抗体の DSA の判定のみならず，移植成績

Singleの向上にも有効となるものと考える。

Antigen 製 造・ 販 売 元 の One

antigen のデータについての相談があった移植

89

MHC

2024; 31 (2)

第 23 回日本組織適合性学会近畿地方会

抄録集3）当研究所の検査結果報告書と適合性評価の実態と課題
木野佑亮
公益財団法人 HLA 研究所 技術部検査課
当研究所の公益業務のひとつとしてコンサルティンの選定に関する相談が 19％であった。

グがあり，その一環として検査結果報告書に適合性に関現状のコンサルティング業務の課題としては，報告書するコメントを記載している。HLA 遺伝子型タイピン

上の適合性コメントが，主に造血幹細胞移植を対象としグの検査結果報告書には，血縁者での適合性や重症急性ており，事例によっては臓器移植に対応したコメントへ

GVHD ハイリスクと相関する HLA 型の組み合わせ情報の対応が必要である。また，これまでのコンサルティンを提供している。また，抗 HLA 抗体検査結果報告書でグ事例をホームページで公開し共有することで，迅速なはドナー HLA タイプによるバーチャルクロスマッチ結適合性評価に対応することが出来る体制の構築が望まれ

果や，DSA 陰性となるドナー選択の情報を提供している。

る。

また，当研究所のホームページには，「問い合わせ窓

HLA 検査結果は，各臨床分野でのバックグラウンド口（コンサルティング）」を設けており，各種移植検査が異なること，その解釈が難しい事例が多いことから，に関連する相談を受け付けている。2021 年 9 月～ 2024

知識や情報を積極的に広めていくことが必要不可欠であ

年 5 月の間のコンサルティング内容について集計を行っる。本ワークショップでは，各種報告書でのコメントのたところ，臨床分野では造血幹細胞移植関連が 82％と内容について示すともに，現状，問い合わせ窓口から寄多く，一方，臓器移植関連は 8％と少なかったが，近年，せられたコンサルティング内容について紹介する。これ増加傾向にある。相談内容では，レアアレルや新規アレからの移植関連医療に関し，より有益な情報を提供でき

ルでの適合性の解釈が最も多く 26％，次いで抗体検査るように努め，効率的かつ，効果的な手法について議論

における DSA の解釈が 19％，各バンクでの適合ドナーできることを期待したい。

90

第 23 回日本組織適合性学会近畿地方会

抄録集

MHC

2024; 31 (2)

特別講演Ⅱ

新型コロナウイルス感染症（COVID-19）研究 ―単科医科大学からの発信―伊藤利洋
奈良県立医科大学 免疫学講座 /MBT 研究所

教授

2020 年からの新型コロナウイルス感染症（COVID-19）

細胞超突然変異の機構によって，多様な TCR が創出さの蔓延は，我が国が経験したことのない医療崩壊を引きれる。そこで我々は個々に異なる特異性を持った TCR

起こし，社会経済活動にも大きな弊害を与えた。今後によって特徴づけられた T 細胞のコレクションである

COVID-19 をはじめとする新興感染症対策は日本をはじ

TCR レパトア解析をワクチン接種前から経時的に行っめ世界共通の喫緊な課題である。奈良県立医科大学ではた。TCR レパトアならびに HLA の解析から新型コロ

国内で新型コロナウイルス (SARS-CoV-2）に感染した日

ナワクチン接種による免疫記憶機構の解明に迫った。

本人の 1 例目を本学附属病院にて確定診断したこと，研（2）身 近に存在する抗 SARS-CoV-2 物質の探索―産学究施設としても SARS-CoV-2 を取り扱うことのできる

連携への取り組み

BSL (Biosafety level）3 対応施設を有していることから，

特に日本で初めての緊急事態宣言が発令された 2020

本学では COVID-19 研究を積極的に進めてきた。

年は，COVID-19 に対する明らかな予防法がなく，非常本講演では，特に COVID-19 パンデミック当初からに不安な時代であった。COVID-19 の主な感染経路は飛取り組んできた COVID-19 研究の成果ならびに今後の沫・エアロゾル感染であり，無症状・軽症の感染者にも発展性につき，紹介したい。

感染性があること，また，会食・発声などによって飛（1）新型コロナワクチン接種による免疫記憶機構の解明

散する感染者の唾液中にも多くのウイルスが存在する

COVID-19 のパンデミックを契機に 2021 年春より新ことが，SARS-CoV-2 の強い感染性の一因と考えられてしいタイプのワクチンである mRNA ワクチンの接種がいる。そこで我々は早期に安全かつ簡便な予防法を探索始まった。mRNA ワクチンはほぼ同時期に人類が初めし，唾液における SARS-CoV-2 不活化研究に取り組んて接種するワクチンであり，人における免疫記憶のメカだ。そしてその研究成果は産学連携を推進する本学独自ニズムを解明する絶好の機会ともなった。なかでも獲の MBT (Medicine-Based Town）コンソーシアムの参得免疫の中枢を担う T 細胞は，抗原を認識する受容体画により，商品化にまで至った。このような本学独自の分子である T 細胞受容体（TCR）を有しており，TCR

MBT 構想で挑戦する新たな産学連携の取り組みについは多様な抗原と反応できるように，遺伝子再構成や体ても紹介していく。

91

Major Histocompatibility Complex

2024; 31 (2): 92-99

抄録集

第7回

関東 HLA 研究会記録会期：2024 年 5 月 18 日（土曜日）

会

場：東京大学医科学研究所 1 号館・講堂

開催方法：ハイブリッド形式
担当幹事：椎名隆

東海大学医学部 基礎医学系分子生命科学領域

造血細胞移植特別講演～臍帯血移植の成績向上，および適応拡大に向けた研究～高橋聡

東京大学医科学研究所 臨床精密研究基盤社会連携研究部門
分子標的薬や遺伝子・免疫療法の臨床開発に伴い，多臍帯血移植は，ドナーへの負担がほぼ皆無であり，慢くの造血器悪性疾患は現在，治癒可能な疾患となってい性 GvHD のリスクが低いことによる移植後 QOL が良好

るが，そのためには最終的に造血幹細胞移植が必要となである点，GvL 反応がより強化されることに起因される患者がいまだに多いのも現状である。一方で移植可能

ると思われる移植後再発のリスクが低いなどの利点があ

な患者年齢の上限が徐々に高くなるとともに，移植ド

り，すぐに入手できることにより最適な時期での移植がナー・細胞ソースの多様化により，近年は移植が必要な可能であることと相まって良好な移植成績の要因となっ患者のほとんどが移植を受けることが可能となっていている。一方で，他の移植法に比べて造血・免疫系の移る。依然として，HLA 一致同胞が最善ドナーいうこと

植後回復の遅延が以前から問題になっており，その改善になっているが，それ以外のいわゆる代替ドナーからのがなされれば全ての中で最善な移植法となりえる。本講

移植成績の向上が著しく，全体の生存率向上の大きな要

演では造血幹細胞の増幅，抗原特異的免疫細胞による細因の一つとなっている。その中で臍帯血は現在わが国で胞療法などの臨床開発に加え，機械学習法を用いた大規は HLA 一致・不一致血縁ドナーを含めても最も多く使

模コホートの解析による移植後好中球の回復に関与する

用されているドナーソースとなっており，その移植成績

因子の解析など，最近取り組んできた研究成果も含めたの向上も著しい。

概説を予定する。

92

第7回

関東 HLA 研究会記録

MHC

2024; 31 (2)教育講演

子宮移植は新しい医療技術となり得るか？
木須伊織
慶応義塾大学医学部 産婦人科学教室
近年，生殖補助医療技術の発展により多くの不妊夫婦れた子の福祉の尊重，ドナー・レシピエント・児のリスに福音がもたらされているが，先天性もしくは後天性のク，生命に関わらない臓器の移植の許容，養子制度や代子宮性不妊女性の挙児は困難である。最近，これらの子

理懐胎などの他の代替手段との対比，臓器売買やその斡

宮性不妊女性が児を得るための 1 つの選択肢として「子旋などが主な論点として挙げられる。社会的課題は，子宮移植」という新たな生殖補助ならびに移植医療技術が宮性不妊患者が児を得るための手段として，子宮移植が考えられている。海外では既に臨床応用がなされ，これ社会のニーズとして真に求められているか，社会的価値までに 100 例以上の子宮移植が実施され，60 名以上のを検証せねばならない。

児が誕生し，急速に臨床展開されてきている。

子宮移植にはこれまでの医療技術にはない新たな臨床

子宮移植には医学的，倫理的，社会的課題が内包され倫理的課題が多く存在するが，その実施を望む子宮性不る。医学的課題は，生体ドナー手術の侵襲性をはじめと妊女性からの声も多く，国内での臨床展開が大いに期待して，周術期合併症や拒絶反応の回避，免疫抑制薬によされている。本講演では子宮移植の現状や課題に触れなる感染症対策，ハイリスク妊娠管理，新生児のフォロー

がら，本技術の将来の可能性について議論したい。

など多岐にわたる課題も存在する。倫理的課題は，生まワークショップ「ケーススタディ」
造血移植・輸血分野から 前島理恵子（帝京大学医学部附属病院 輸血・細胞治療センター）
臓器移植分野から 祖父江晃基（東邦大学医療センター大森病院 輸血部）
本ワークショップでは，造血幹細胞移植，輸血，臓器す。各パネリストから提示される設問に，ご参加の皆様

移植の各分野において，日常の検査現場でしばしば遭遇

は PC またはスマートフォンから回答入力フォームにア

しうるであろう「取りこぼしてはいけない」あるいは「判クセスいただき，回答を入力してください。皆様の回答

断に悩む」症例を選択肢形式の設問とともに提示します。

の集計結果をリアルタイムで公表し，座長・パネリスト

その設問に対してご参加の皆様とともに対応を考え，パとディスカッションします。

ネリストが解説するというケーススタディ方式で進めま

93

MHC

2024; 31 (2)

第7回

関東 HLA 研究会記録

シンポジウム「NGS-HLA タイピングの新たな展開」

1．ハイブリッドキャプチャー法による HLA タイピングとその応用
細道一善
東京薬科大学生命科学部 ゲノム情報医科学研究室
ハイブリッドキャプチャー法はゲノム上のターゲッ

られること，多検体検査の実施のために自動分注機に適ト領域に特異的なビオチン化プローブとサンプル DNA

用することが容易であることなど，多くの優位性を有とのハイブリダイゼーションにより，ゲノム関心領域する。本講演ではハイブリッドキャプチャー法によるを捕捉し，磁気プルダウンにより分離する手法である。

HLA タイピング手法を実際の解析データとともに紹介

HLA 遺伝子群をターゲットとして本手法を適用するこする。さらに，その応用例として，セルフリー DNA，とで遺伝子網羅的に HLA タイピングすることが可能と

FFPE 由来 DNA，古代人骨 DNA，1 細胞 RNA などのなる。本手法における NGS を用いた一般的な HLA タ

質的または量的に特殊なサンプルへの適用と研究におけ

イピング手法との違いは HLA 遺伝子の特異的増幅ス

る解析例についても紹介したい。また，ハイブリッド

テップを用いないことであり，PCR 増幅が困難であっキャプチャー法の精度管理のための取り組みとしてすすたサンプルの解析が可能であること，構造多型を有する

めている機械学習による精度評価方法についても議論し遺伝子についてコピー数を反映したタイピング結果が得たい。

2．NGS-HLA タイピング法の有用性評価プロジェクト〜その背景と研究計画〜
椎名隆

東海大学医学部 基礎医学系分子生命科学領域
NGS に基づく HLA DNA タイピング法（NGS-HLA

ルが同定されるか，②どの程度の移植予後のリスクにな法）は，HLA 11 座のアレルを遺伝子全長レベルで高精りうる新規アレルが含まれるか，③それらが移植成績に度に判定する検査技術であり，従来の PCR-SBT 法やどのような影響を与えるか，等についてはその基礎とな

PCR-rSSO 法などの短所を補うことから，移植成績の向る解析結果が未だ存在しない。そこで演者らグループで上が期待される標準 HLA タイピング法として国際的には，NGS-HLA 法の有用性を評価し，移植成績と直結す普及しつつある。わが国においても，2016 年 11 月 15

る有益な情報を見出す計画を，日本骨髄バンクを介する

日以降，NGS-HLA 法検査結果をもって JMDP に登録さ非血縁者間造血細胞移植症例を用いて進めており，そのれた患者は，登録後の PCR-SBT 法による患者確認検査

情報をドナー選択アルゴリズムの提案や移植成績の向上が不要になった。その後，2020 年 3 月 3 日より JMDPにフィードバックすることに重要な意義を有するものとを介した骨髄・末梢血幹細胞移植における患者 HLA 確

考える。本シンポジウムでは，この有用性評価プロジェ

認検査やドナー HLA オプション検査が PCR-SBT 法かクトの計画に至った経緯からその計画について，海外から NGS-HLA 法に変更された。ところが，NGS-HLA 法らの最新情報を含めて紹介したい。

の導入により，従来法と比して，①どの程度の新規アレ

94

第7回

関東 HLA 研究会記録

MHC

2024; 31 (2)

一般演題 1

HLA 適合血小板献血者における SSO 法と NGS 法の判定結果の比較検討
内田みゆき 1，清水まり恵 1，鎌田裕美 1，阿部和眞 1，中野 学 2，鈴木友菜 3，小原琢巳 4，小林洋紀 5,
竹内奈由美 6，高 陽淑 7，谷川桃子 8，首藤笑里 9，髙橋大輔 1，宮田茂樹 1，谷 慶彦 1，佐竹正博 1
1
3

日本赤十字社 血液事業本部中央血液研究所，2 日本赤十字社 北海道ブロック血液センター ,日本赤十字社 東北ブロック血液センター，4 日本赤十字社 関東甲信越ブロック血液センター埼玉製造所 ,5

日本赤十字社 関東甲信越ブロック血液センター，6 日本赤十字社 東海北陸ブロック血液センター ,7日本赤十字社 近畿ブロック血液センター，8 日本赤十字社 中四国ブロック血液センター ,9日本赤十字社 九州ブロック血液センター【目的】SSO 法は，簡便で処理能力が高い検査法であるが，【結果】420 検体中 79（18.8％）で不一致を認めた。ア

判定結果にはアンビギュイティが数多く存在する。今回，レル毎の集計では 83 アレル（A:18, B:28, C:37）に不一

SSO 法で判定困難であった検体について，解像度の高い

致を認めた。SSO 法における保留理由の内訳は，低頻NGS 法との比較を行ったので報告する。

度アレルが 51 アレル，No Pattern が 32 アレルであった。

【方法】
SSO 法は WAKFlow HLA タイピング（湧永製薬）

NGS 法との不一致理由は，2 法で異なる低頻度アレルのを用い，専用のソフトウェアによる自動判定結果を使用

検出例（22）が最も多く，次いで新規アレル（20），プロー

した。NGS 法は AllType NGS（One Lambda）を用い，ブの反応不良による誤判定（12），イントロン変異によ

判定には TSV（TypeStream Visual Software）を使用しる増幅不良（10），その他（19）の順であった。

た。HLA 適合血小板献血者 83,451 検体について SSO 法【考察】SSO 法による自動判定では，正しい HLA 型をを実施し，No Pattern や低頻度アレルを理由として判同定することは難しい場合がある。特に SSO 法で低定保留となった 420 検体（0.5％）を対象とし，その中で頻度アレルあるいは No Pattern と判定された場合は，NGS 法と不一致を認めた検体について詳細に解析を行っ

NGS 法など他法での確認が望ましいと考える。

た。対象はクラスⅠとし，第 2 区域までを比較した。

95

MHC

2024; 31 (2)

第7回

関東 HLA 研究会記録

一般演題 2

PC-HLA 供給検査の依頼状況と HLA 抗体の関連性續𣘺雅子，田原綾乃，増田英敏，石本裕子，安藤 萌，山口陽平，吉田芳生，新国小林洋紀，津野寛和，室井一男

駿，礪波

薫,

日本赤十字社 関東甲信越ブロック血液センター【背景・目的】HLA 適合血小板（PC-HLA）は血小板輸

では 66.7％と高値を示した。HLA 抗体陽性率は，女性

血不応（PTR）の患者に HLA 抗体が検出された際に適は 30 代から 90 代までが 60％程度と高く，男性は 90 代

応となる血液製剤である。当施設では，医療機関から免（50％）に次いで 20 代（35％）が高かった。10 代以下

疫学的機序による PTR が疑われた患者の HLA 抗体検は 7％と低かった。疾患別では血液疾患が 85.4％を占め，査依頼を受ける際，検体と共に検査依頼書の提出を要請

リンパ系の血液悪性疾患群の陽性率は 22％と低かった。

している。今回，検査依頼書における患者情報の記載項

その他の記載項目は HLA 抗体陽性群と陰性群で差がな

目を集計し HLA 抗体の関連性を調査した。

かった。輸血効果については記入率が 6 割程度だったが，【方法】2021 年 4 月から 2023 年 3 月の期間に当施設が実際に CCI 値を算出できる症例は 2 割程度だった。

依頼を受けた 1043 件（135 施設）を対象に，妊娠歴や【考察】今回の結果から，女性の HLA 抗体陽性率と妊臨床症状等の患者情報と HLA 抗体陽性率を集計した。

娠歴の関連性は強く，リンパ系の血液悪性疾患では男女【結果】対象の 1043 件中 432 件（41％）が HLA 抗体陽性で，ともに HLA 抗体陽性率が低い特徴があることが示唆さ

陽性率は男性より女性に有意に高く，妊娠歴がある女性れた。

一般演題 3

抗 HLA 抗体に関する血清凍結融解の影響について
細羽恵美子 1，石塚
1

敏 1，笹野まゆ 1，小林悠梨 1，安尾美年子 1，石田英樹 2

東京女子医科大学 中央検査部移植関連検査室，2 東京女子医科大学 移植管理科【背景】臓器移植において術前のリンパ球細胞傷害試験院された患者のうち，抗 HLA 抗体陽性の 2 症例を対象（CDC-XM）は，術後早期の液性拒絶を回避する有用なとした。

検出法の一つである。公益社団法人 日本臓器移植ネッ【方法】LABScreen single antigen および C1qScreen をトワークでは，CDC-XM Tcell が陰性であればレシピエ

測定し，HLA Class Ⅰ抗体について蛍光強度（normalized

ント候補に成り得る選定基準である。しかし，待機患者MFI）を確認した。そして，被検血清を 10 回まで凍結

によっては複数回レシピエント候補に選定され，マイナ

融解を繰り返し，それぞれ 2 倍連続希釈系列を作成した。

ス 80℃保存血清はその都度凍結融解を繰り返すことに

CDC-XM は，C1qScreen 陽性の HLA 特異性が一致すなる。今回われわれは，レシピエント血清の凍結融解がる第三者リンパ球（Tcell）を用いた。

抗 HLA 抗体の力価にどの程度影響を及ぼすか基礎的検【結果】本研究の結果より，LABScreen single antigen，討を行ったので報告する。

C1qScreen および CDC-XM の 3 法において凍結融解に【対象】東京女子医科大学 移植管理科に腎移植目的で来よる影響が少ないことを確認した。

96

第7回

関東 HLA 研究会記録

MHC

2024; 31 (2)

一般演題 4

フローサイトクロスマッチと抗 HLA 抗体検査の比較分析
大菅貴寛 1，祖父江晃基 1，石橋瑞樹 1，齋藤光平 1，佐瀬千佳 1，奥田
酒井 謙 2, 髙橋 浩之 1
1

誠 1，村松真樹 2，

東邦大学医療センター大森病院 輸血部，2 東邦大学医学部 腎臓学講座【はじめに】腎移植前の組織適合性検査として実施され【結果】55 例のうち陰性 25 例，陽性 9 例，偽陰性 6 例，

るフローサイトクロスマッチ（FCXM）および Single

偽陽性 15 例であった。偽陰性群のうち 4 例は DSA のAntigen Beads（SAB）を用いた抗 HLA 抗体特異性同nMFI>2000 であった。2 例は DSA の nMFI:3741（Cw14）

定検査は，検査の特性上の違いから結果に乖離が見られの腎移植歴がある症例と，nMFI:5048（A2）の妊娠歴

ることがある。今回，FCXM と SAB の結果を後方視的のある症例であった。

に比較分析したので報告する。

【考察】偽陽性群の原因として SAB で検出できない【対象および方法】2022 年 6 月～ 2023 年 12 月に FCXM

nonHLA 抗体や非特異反応が考えられた。また偽陰性と SAB を実施した 55 例を対象とした。SAB は nMFI ≧群の原因として FCXM と SAB の検出感度差が考えら

1000，FCXM は患者血清と陰性コントロールの中央値のれた。

比が T cell ≧ 1.4，B cell ≧ 1.7 を陽性とした。SAB の結【結語】FCXM と SAB の一致率は約 60％であった。そ果を基準として FCXM の結果を，陰性・陽性・偽陰性・れぞれの検査特性を十分に理解し，複数の検査結果を総

偽陽性に分類した。さらに結果が乖離した症例のうち偽合的に考慮して判断することが重要である。

陰性群について分析した。

一般演題 5

HLA エピトープ不一致が臍帯血移植の治療成績に与える影響の解析
岩田紫乃 1，吉川枝里 1，重成敦子 2，白岩佐和子 1，豊﨑誠子 1，町田真一郎 1，椎名
1

隆 2，鬼塚真仁 1

東海大学医学部 内科学系血液腫瘍内科，2 東海大学医学部 基礎医学系分子生命科学領域【目的】実臨床では造血幹細胞移植におけるドナー検索

トープ数を HLA matchmaker により解析した。

で HLA-A, B, C, DRB1 の 8 抗原を利用する。HLA ミス【結果および考察】HLA Class I では HGV 方向のエピマッチが許容される臍帯血移植ではミスマッチ HLA 由

トープ数が多い群で慢性 GVHD の発症率が有意に高来のエピトープの存在が治療成績に影響する可能性が高率であった。また Class II の解析では DPA1, DRB1 でい。すでに，一般臨床で測定する 8 抗原 HLA のミスマッ

HVG 方向のエピトープ数が多い群で再発率が有意に低チに由来するエピトープ数が臍帯血移植成績に影響を与率であった。さらに DPA1 のエピトープ数が多い群でえることが報告されている。そこで，我々は一般臨床では慢性 GVHD の発症率が有意に高率であった。これらは測定しない HLA-DPA1, DPB1, DQA1, DQB1 をタイに対して，生存，急性 GVHD とエピトープ数の関連はピングし，合計 18 抗原の HLA ミスマッチ由来エピトー

認めなかった。今回の解析から，実臨床ではタイピング

プ数が臍帯血移植成績に与える影響を解析した。

を行わない DPA1 のミスマッチ由来のエピトープ数が【方法】対象は当院で行われた血液悪性疾患に対する臍

臍帯血移植の成績に関連すること，また予後予測因子と帯血移植 110 症例とし，各 HLA ミスマッチ由来のエピ

してエピトープ数が有用である可能性が示唆された。

97

MHC

2024; 31 (2)

第7回

関東 HLA 研究会記録

一般演題 6

同種移植におけるドナー選定と免疫学的背景についての考察
─症例からみた適合性指標の有用性─
竹下昌孝 1, 2，小玉信之 1, 2，比島智子 1, 2，鈴木大志 1，阿部尚美 1，平井理泉 1，谷村
工藤大輔 1，三輪哲義 1, 2
1

聡 1，

東京北医療センター 血液内科，2 国際骨髄腫先端治療研究センター【背景と目的】血液悪性疾患に対する同種造血幹細胞移細胞ドナーとレシピエントは HLA（A,B,C,DRB1）が完

植は再発リスクの高い疾患に対する根治的治療として選全一致であったが，ドナーの KIR は 2DS1 を含む tB01

択されるが，予後を左右する移植後 GVHD の抑制が課

ハプロを有していた。一方，2 名の臓器ドナーは HLA題である。我々は HLA 適合性に基づき最適と思われる

ミスマッチ（2/8, 6/8 一致）を認めたが，HLA-C の他

ドナーを選択してきたものの GVHD を発症する症例はに抑制性 KIR のリガンドとして HLA-B*46 を両者とも少なくない。そこで，造血幹細胞移植後 GVHD に対し有していた。

臓器移植を行うことでレスキューした一例について治療【考察】本症例における 2 度の移植において以下の可能経過と移植時の免疫学的背景を後方視的に解析すること性が考察された。

を目的とした。

・幹 細 胞 移 植 時 KIR ス テ ー タ ス 変 化 に よ り NK 活 性【症例】18 歳男性。Ph 陽性急性リンパ性白血病に対し，化を誘導しやすい状態へ遷移し，GVL のみならず

HLA8/8 座一致の非血縁バンクドナーより造血幹細胞

GVHD も惹起された。

移植を施行。白血病は分子生物学的寛解を得るも慢性・臓 器移植時偶然有した HLA-B*46 により抑制性 KIR

GVHD として閉塞性細気管支炎を発症。血縁者より生に対するシグナルが増強され移植の拒絶から逃れた。

体間肺移植を施行した。

【結語】幹細胞移植ドナー選択時，HLA だけでなく KIR【方法と結果】ドナー・レシピエントの免疫学的背景とステータスを加味することが有用となる可能性がある。

して HLA，KIR についてタイピングを行った。造血幹

98

第7回

関東 HLA 研究会記録

MHC

2024; 31 (2)国際 HLA ワークショップ（IHIWS19）の概要

IHIWS19 の進捗状況
徳永勝士 1，椎名

1

隆2

国立国際医療研究センター研究所，ゲノム医科学プロジェクト，2 東海大学医学部 基礎医学系分子生命科学領域

第 19 回 国 際 HLA・ 免 疫 遺 伝 学 ワ ー ク シ ョ ッ プ

る。IHIWS は世界の熱心な臨床および基礎研究者が各（The 19th International HLA and Immunogenetics

プロジェクトでの解析結果を持ち寄って発表し，活発なWorkshop: IHIWS）を日本において徳永と椎名が Co-議論を行う，いわば「合宿」のような心踊る催しであ

Chairs と し て 開 催 す る こ と に な っ た。 場 所 や 時 期 をる。今回もおよそ 20 のプロジェクトが実施されること

検 討 し た 結 果， 静 岡 県 沼 津 市 の JR 沼 津 駅 に 隣 接 すが決まっており（https://ihiw19.org/），その中には日る Plaza Verde で 2026 年 5 月 19 日 か ら 24 日 ま で と本から提案された新しいプロジェクト「LRC structure決定した。なお，一日おいて 5 月 26 日から 28 日まで

and polymorphism」も含まれている。日本の方々が積ア ジ ア・ パ シ フ ィ ッ ク 組 織 適 合 性・ 免 疫 遺 伝 学連合

極的に参加し，HLA・免疫遺伝学の先端に触れ，海外会議（The 2026 Asia-Pacific Histocompatibility andの HLA 関係者と親しく交流するまたとない機会を活か

Immunogenetics Association Conference）も開催されしていただきたいと強く願っている。

99

Major Histocompatibility Complex

2024; 31 (2): 100-107

抄録集

第7回

東海北陸 HLA 研究会

日

時 ：2024 年 7 月 6 日（土）12：55 〜 17：15

会

場：日本赤十字社愛知医療センター名古屋第一病院

当番世話人／研究会会長：西田内ケ島講堂

徹也（日本赤十字社愛知医療センター

名古屋第一病院（血液内科／造血細胞移植センター））

100

第7回

東海北陸 HLA 研究会

MHC

2024; 31 (2)

特別講演 1

同種造血幹細胞移植における HLA エピトープ適合度の臨床的意義
諫田淳也
京都大学大学院

医学研究科

血液内科学

同種造血幹細胞移植は，白血病やリンパ腫などの難治性の造血器腫瘍に対する根治的治療となり得る免疫療法である。
しかしながら，移植後の移植片対宿主病（GVHD）など免疫学的合併症を中心とした合併症のため移植関連死亡率は 2割前後と高率であり，その克服が課題である。免疫学的合併症のリスクを軽減するため，HLA-A, -B, -C, -DRB1 座を適合させたドナーが第一選択となる。しかしながら，近年，移植前の抗胸腺細胞免疫グロブリン投与や移植後のエンドキサン投与などの GVHD 予防法により GVHD 発症リスクは軽減され，HLA 不適合ドナーを用いた移植数が増加している。しかしながら，HLA 不適合ドナーの選択に関して主に HLA 不適合数や HLA 不適合座による選択が行われているが，どのような HLA 不適合であれば許容されるかなどに関しては議論の余地があるところである。
HLA 抗原の中で，T 細胞受容体や免疫グロブリン抗体が認識する部位は HLA エピトープと呼ばれている。この抗原決定基である HLA エピトープを推定する様々な手法が開発されてきている。Duquesnoy らが in silico で推定されたエピトープ部位を in vitro での抗原抗体反応で検証したデータを基に，HLAMatchmaker アルゴリズムを開発している。また，T 細胞が認識するエピトープを推定するプログラムとしては，Spierings らが開発した Predicted Indirectly
ReCognizable HLA-Epitopes（PIRCHE）がある。これらのアルゴリズムによる HLA 不適合ドナー選択の有用性を明らかとするため，我々は，京都造血幹細胞移植グループや⽇本造血細胞移植データセンターの移植登録一元管理プログラム（TRUMP）に登録されている移植症例を対象に，その臨床的意義に関する検討を行っている。
本講演では，HLA 不適合非血縁者間骨髄移植および臍帯血移植を対象にした HLAMatchmaker アルゴリズムの意義
および抗胸腺細胞免疫グロブリンあるいは移植後エンドキサンによる GVHD 予防法を受けた HLA 不適合血縁者間末梢血幹細胞移植を対象した PIRCHE の意義に関して我々の研究結果を示すとともに，HLA エピトープ適合度を含む HLA
適合度の臨床的意義に関して議論したい。

101

MHC

2024; 31 (2)第7回

東海北陸 HLA 研究会

特別講演 2

腫瘍免疫と HLA
⾚塚美樹
名古屋大学

医学系研究科・分子細胞免疫学

折しも最初の免疫チェックポイント阻害剤（Immune Checkpoint Blocker, ICB）であるニボルマブが切除不能の悪性黒色腫に対して国内で承認されてから 2024 年 7 月でちょうど 10 年が経過する。この間，複数の ICB が承認され，対象となるがん種も拡大し，さらにネオアジュバント療法への展開も進みつつある。しかしながら ICB が著効を示す患者の割合は 2 － 3 割にとどまっており，効果を阻む機序の解明と，バイオマーカーの開発は重要な課題である。
がん細胞は腫瘍免疫微小環境（Tumor Immune Microenvironment，TiME）の中で宿主免疫細胞からの攻撃を受けると同時に，がん免疫編集を経て攻撃から回避する新たな機能を次々と獲得している。T 細胞による HLA に提示されたがん抗原の認識は抗腫瘍免疫の中心であり，進行がんはしばしば HLA の発現を喪失させている。全ての HLA コーディ
ング領域が欠損することもあれば，抗原性の強いエピトープを提示する HLA アリルのみ欠損する場合も報告されている。HLA リガンド欠失を探知する NK 細胞に対しては HLA-G 等の異所性発現で対応している。他方，TiME の構成細胞の中には HLA クラス II 分子を介して腫瘍抗原を提示し，腫瘍の排除に関わっていることも報告されており，HLA
は腫瘍免疫のキープレーヤーでと言える。
細胞性免疫だけでなく，抗体を中心とした液性免疫も重要である。TiME には形質細胞が存在し，また慢性炎症巣や移植後臓器において認められる三次リンパ組織（Tertiary Lymphoid Structures：TLS）はがんにおいては局所免疫や抗体の産生を介して腫瘍免疫に関わっているとされる。抗体は HLA を介さずに細胞表面の抗原を認識出来ることから，
キメラ抗原受容体遺伝子改変 T ／ NK 細胞への開発が進み，CAR-T 細胞療法として新たなパラダイムシフトをもたらした。
本講演では，腫瘍免疫微小環境の解説，腫瘍免疫における HLA の関わり，HLA を介さない CAR-T 細胞療法などの最前線について情報提供したい。

102

第7回

東海北陸 HLA 研究会

MHC

2024; 31 (2)教育講演

移植医療における NGS-HLA タイピングとその展望
中島文明
ジェノダイブファーマ株式会社
移植医療に欠かせない HLA タイピングは，近年，Luminex 法によって HLA-A, B, C, DRB1 の 4 座の情報を得てHLA 適合の指標としてきた。このような DNA タイピングの普及が，旧来の抗原型マッチングからアレル型マッチン
グへの進展をもたらした。一方，最近では，エピトープ・マッチングで移植成績のさらなる向上を目指す動きや，HLA
抗体の特異性解析において，エピトープ・レベルによる正確な DSA 判定を求めるようになってきた。さらに，造血幹細胞移植では HLA-B Leader mismatch や DPB1 遺伝子の tag SNP に GVHD リスクが見出され，Luminex 法で情報を得られない HLA 領域の重要性が注目されている。あるいは，HLA 抗体検査において単一抗原試薬の普及により，DRB345，DQ，DP に対する抗体の検出も可能となり，これらの DSA 監視のために従来より広範囲の HLA タイピング
結果も求められている。
NGS（next-generation sequencing）は，このような新たな要求に対応可能な HLA タイピング法である。その利点は，複数の HLA 座（HLA-A, B, C, DRB1,DRB345, DQA1, DQB1, DPA1, DPB1）のほぼ全領域を同時に測定できることに加え，第 3，第 4 区域までの高解像度タイピングが可能である。これまで問題となっていた，いわゆる ambiguity も完全とはいえないが概ね解消される。Luminex 法では，新規 HLA アレルの登録数増加とともにプローブを追加，改良する必要があるが，NGS 法は DNA 塩基配列を直接測定するため，登録アレルの増加にともなう試薬の改良は必要ない。これら
塩基配列情報の取得が，正確なエピトープ・レベルのマッチングや解析も可能としている。さらに，Luminex と同様に大量検体処理も可能である。敢えてデメリットを述べるなら，少数検体ではコスト高になること，測定に数⽇を要することにある。
移植や輸血などの人為的な行為は，自然界とは異なる免疫応答のイベントを扱う分野と考えられ，同じ同種免疫であっても妊娠と輸血と移植では異なるであろう。NGS 法で精度の高い HLA データを蓄積しながら臨床データとの解析を積み重ねることで，各分野の臨床上における重要なエピトープや SNP だけを検査する未来があるかもしれない。その先には，HLA を起点として KIR（killer cell immunoglobulin-like receptors）など自然免疫系との相互作用の解明に繋がっていくことも期待が持てる。本講演ではそのようなトピックを紹介しつつ進めていく。

103

MHC

2024; 31 (2)

第7回

一般演題 1-1

東海北陸 HLA 研究会

一般演題 1-2

空間解析を用いたびまん性大細胞型 B
細胞性リンパ腫（DLBCL）の新たな免疫バイオマーカー同定の試み

至適細胞数の臍帯血移植と非血縁者
間骨髄移植の比較検討

鐘 心 1），河野 奬 2），岡本昌隆 3），島田和之 4），
尾関和貴 5），河野彰夫 5），冨田章裕 6），⾚塚美樹 1）

石際康平 1, 2），森下喬允 3），宇野友梨 1），久保篤史 4），
中谷記衣 1），内藤知希 1），土門洋祐 2, 5），福岡 翔 1），
加賀谷裕介 1），後藤辰徳 1），西田徹也 1）

名古屋大学大学院 医学系研究科 分子細胞免疫学分野 1），

⽇本⾚⼗字社愛知医療センター 名古屋第一病院 血液内科 1），
名古屋大学大学院 医学系研究科 血液腫瘍内科学 2），

JA 愛知厚生連江南厚生病院 病理診断科 2），藤田医科大学病院 医学部医学科 造血細胞移植・細胞療法学 3），

藤田医科大学岡崎医療センター 血液・腫瘍内科 3），

豊橋市民病院 血液・腫瘍内科 4），

名古屋大学大学院 医学系研究科 血液・腫瘍内科学 4），

岐阜県立多治見病院 血液内科 5）

JA 愛知厚生連江南厚生病院 血液・腫瘍内科 5），藤田医科大学 血液内科 6）

背景・目的：臍帯血移植（CBT）においてはその他【背景】DLBCL は臨床的，生物学的に不均一な疾患でのドナーソースと比較して HLA のミスマッチが許容さあり，様々な遺伝学的異常が発症に関わっている。予後れ代替ドナーとして貴重なドナーソースとなっている。

予測モデルとしては IPI や NCCN-IPI が用いられる他，

有核細胞数を多く含む臍帯血を用いて同種造血幹細胞移

遺伝子異常プロファイルによる新たな病型分類も試みら植を行った場合に転帰が改善する可能性が考えられる。

れている。最近では，腫瘍免疫微小環境のシングルセル

対象・方法：当院で 2013 年 1 月 1 ⽇から 2023 年 5

解析や空間分析が行われつつある。今回我々は空間分析

月 31 ⽇の期間に CBT または非血縁者間骨髄移植（UR-による層別化の可能性について検討したので報告する。

BMT）を行った患者を対象に後方視的に解析した。臍

【方法】2007 年から 2021 までの間に初発 DLBCL に対帯血に含まれる有核細胞数が中央値より大きい例をして R-CHOP 療法を行った 106 名の患者につき，臨床

hCBT 群として UR-BMT と比較した。

データとパラフィン包埋ブロックないしは薄切標本を結果：CBT139 例，UR-BMT177 例を含む 316 例が対収集した。薄切標本は CD4, CD8, CD20, CD163, HLA-象となった。臍帯血中の有核細胞数中央値は 2.71（range,

DR, PDGFR, FOXP3, CTLA4, α SMA, FAP 等に対す

0.027-6.42）× 10^7/kg であり，hCBT 群 69 例についる抗体で 6 抗原同時染色を行い，撮像を Halo ソフトにて解析を行った。hCBT 群の 2 年 OS は UR-BMT と同

よって最近傍分析を行い，予後との相関を解析した。

等であり（hCBT： 53.6%, UR-BMT： 58.9%, p=0.56），2【結果・考察】⼗分な標本サイズと良好な染色が得れた

年 NRM も有意差は認めなかった（hCBT： 24.9%, UR-

57 名について「トレーニングコホート」と「バリデーショ

BMT： 25.4%, p=0.87）。 急 性 GVHD の 累 積 発 生 率 はンコホート」に二分し，解析した。前者にてある T 細hCBT 群で低い傾向にあり（hCBT： 18.2%, UR-BMT：

胞サブセットとある非血液細胞の距離が近い場合に全生

33.6% at 100 days, p=0.067），慢性 GVHD の累積発生

存期間，無増悪生存期間とも有意に良好であった。残り率 は hCBT 群 で 有 意 に 低 か っ た（hCBT： 4.7%, UR-のバリデーションコホートでも同様な結果が得られた。

BMT： 48.3%, p<0.001）。続いて背景因子の影響を低減

免疫細胞との距離によって DLBCL 微小環境の抗腫瘍免するため傾向スコアマッチングを行った。2 年 NRM は疫状態が異なり，予後に影響を与えている可能性が示さ

hCBT 群で低い傾向にあるものの有意差は認めなかっれた。今後各細胞をレーザーマイクロダイセクションでた（hCBT： 19.1%, UR-BMT： 30.1%, p=0.21）。2 年 OS，採取し遺伝子発現解析を元にサブセットの特定と機序のGVHD の累積発生率に関しては同様の結果だった。

解明を行う予定である。

考察：本研究の結果から，細胞数が⼗分に含まれる臍帯
血が確保できる場合は同種造血幹細胞移植のドナーソー
スとしてより優先的に使用できる可能性が示唆された。
104

第7回

東海北陸 HLA 研究会

MHC

一般演題 1-3

一般演題 1-4

妊娠歴を利用した Eplet の
免疫原性の評価小児期移植患者における HLA
エピトープミスマッチとドナー特異的抗体と拒絶反応の検討

西川晃平 1），西川武友 1），加藤桃子 1），東 真一郎 1），
佐々木 豪 1），舛井 覚 1），丸山美津子 2），
金本人美 3），橋口裕樹 3），井上貴博 1）

田中一樹 1），川向永記 1），寺野千香子 1），
藤田直也 1），小林孝彰 2）

三重大学大学院 医学系研究科 腎泌尿器外科学 1），

あいち小児保健医療総合センター 腎臓科 1），

2）

三重大学医学部附属病院 輸血・細胞治療部 ，
福岡⾚⼗字病院 移植センター 移植細胞研究課

2024; 31 (2)愛知医科大学医学部 腎移植外科 2）

3）【緒言】成人において HLA エピトープ解析は de novo

【目的】Eplet 解析の手法を用い，妊娠において免疫原

ドナー特異的抗体（dnDSA）の産生や抗体関連拒絶反となり得る HLA-Class1 Eplet の探索を行うこと。

応の予測に有用であるとされているが小児腎移植患者に【方法】対象は 2010 年 3 月から 2022 年 10 月に，夫かおいては症例数も少ないため解析は困難である。今回小らの腎提供による生体腎移植を希望し当科を受診した患

児期に腎移植を施行し移植後の経過を当科でフォローし者のうち，移植歴や輸血歴がなく，夫との間のみに妊た 23 症例（男児 13 例）を対象とし解析を行った。

娠歴を有する患者 25 例。患者及びその夫の WAKFlow【方法】HLA エピトープミスマッチ（eplet MM）数HLA Typing（A・B-Locus）を行い，ミスマッチとなっは HLA matchmaker（ver. 3.1） に よ り，dnDSA はている antibody-veriﬁed Eplet（Abv-Eplet）を抽出した。

LABScreen Single Antigen Beads（MFI ≧ 1000 を陽さらに，患者に対し抗 HLA 抗体 Screening 検査を行性）で判定した。

い，陽性であった場合には，Labscreen Single Antigen【結果】移植時年齢の中央値は 8.77 歳，観察期間の中央検査（LSSA）を施行した。LSSA の data を元に Eplet

値は 5.44 年であった。原疾患は低形成・異形成腎が解析を行うことで免疫原となり得る Abv-Eplet を抽出

最多で 13 例であった。先行的腎移植は 8 例，血液型不し，Abv-Eplet 毎の抗体産生率（抗体産生症例 / ミスマッ

適合は 4 例，ドナーは父または母が 20 例，祖母が 3

チ症例 x100%）を算出した。

例であった。

【結果 ･ 考察】nMFI>1000 を陽性 Cutoff とした場合，dnDSA を認めた症例は 5 例（21.7%）で class I，class

6 例（24.0%）で夫の HLA に対する抗体が陽性であっII ともに認めた症例は 1 例，class I，Ⅱのみが各々 2た。Eplet 解析時の陽性 Cutoff を nMFI>100 としたと例であった。dnDSA 陰性例の eplet MM 数の中央値はころ，抗体産生率が高かった Abv-Eplet は，80K（1/2：

Cass I が 8，Class Ⅱが 4.5 であったのに対して dnDSA50%），82LR（3/8： 37.5%），62EE（2/6： 33.3%），

陽性例ではそれぞれ Class Ⅰ（11,13,2），Class Ⅱ（9,5,6）

65GK（2/6： 33.3%），80I（2/7： 28.6%），163LS/G（2/7：であった。

28.6%）であった。特に 82LR は抽出された全 3 例にお拒絶反応は 4 例で 2 例は慢性抗体関連拒（CAAMR），

いて，LSSA のほぼ全ての陽性 Beads の反応を説明可

1 例は急性抗体関連拒絶，1 例は T 細胞性急性拒絶を能であった。妊娠によってもこれらの Eplet は腎移植認めたのちに CAAMR を認めた。拒絶反応を認めな後の抗体産生に関わる免疫原ともなり得るため，今後腎かった症例の eplet MM 数は中央値が Class Ⅰで 11，

移植後レシピエントにおいても，これらの Eplet に対Class Ⅱで 5 であったのに対して拒絶反応を認めた症例

する抗体の出現に注目していきたい。

の eplet MM 数は Class Ⅰ（4,8,5,10），Class Ⅱ（0,5,6,9）であった。
【まとめ】小児においてもエピトープ解析は dnDSA の産生や抗体関連拒絶反応の予測に有用な可能性がある。

105

MHC

2024; 31 (2)

第7回

一般演題 2-1

一般演題 2-2

Ligandome 解析による
immunogenic peptide の同定
河田

東海北陸 HLA 研究会

膵腎同時移植における epitope
mismatch と de novo DSA 産生賢 1），岩﨑研太 2），伴野 勤 3），雫 真人 1），
三輪祐子 2），安次嶺聡 1），石山宏平 1），
高村祥子 3），小林孝彰 1）
愛知医科大学医学部 腎移植外科 1），

長谷川雄基 1），鳴海俊治 1），姫野智紀 1），島本侑樹 2），
児玉卓也 2），西川涼馬 1），青木太郎 2），二村健太 2），岡田 学 1），平光高久 1），中島萌夏 3），
坂本慎太郎 3），小林孝彰 4），渡井至彦 1）

同 腎疾患・移植免疫学寄附講座 2），

⽇本⾚⼗字社愛知医療センター 名古屋第二病院 移植外科 1），

同 免疫 3）

同 移植内科 2），
同 医療技術部臨床検査科 3），【背景 / 目的】長期生着の課題の一つとして，移植後

愛知医科大学 腎移植外科 4）のドナー特異的 HLA 抗体（de novo DSA）による抗体関連型拒絶反応が上げられる。Predicted Indirectly【目的】本邦の膵臓移植は 550 件を超えた。その中でもReCognizable HLA Epitopes（PIRCHE） を 用 い て

膵腎同時移植（SPK）の 5 年生着率は 83.2% と非常にHLA 情報からレシピエント HLA に提示されうるド良好である。一方で移植臓器の長期生着のためには抗ド

ナー HLA 由来 peptide を推定可能であるが，実際に抗ナー特異的抗体（de novo DSA）産生の制御が非常に

原提示細胞が提示している peptide は定かではない。本

重要である。レシピエント選択基準の 1 つに DR の一研究では，DSA 陽性の腎移植患者に提示されたドナー致が優先条件とされており，多くの症例で DR アレル 2

HLA 由来ペプチドの同定と，in silico での推定異種抗桁での一致を認める。しかしエピトープレベルでのミス原同定との比較検討を行った。

マッチについては世界的に見ても報告が少なく，膵移植【 方 法 】 レ シ ピ エ ン ト 末 梢 血 か ら CD14+monocyte

におけるエピトープミスマッチと de novo DSA との関を 精 製 し， 放 射 線 照 射 し た ド ナ ー の PBMC 存 在 下連については一定の見解を得ていない。

で IL-4/GM-CSF/IL-1 β /TNF αを 加 え 樹 状 細 胞 へ【方法】2010 年から 2023 年に当院で行われた SPK 症例と 分 化 さ せ た。anti-HLA-DR 抗 体 で 免 疫 沈 降 を 行の内，ドナーとレシピエント双方の A，B，DR の HLA

い Liquid Chromatograph-Mass Spectrometry/Mass

アレル 4 桁が判明している症例 16 例を後方視的に調査

Spectrometry（LC-MS/MS）により提示された peptide

した。DQB1，DRB3/4/5，DQA1 は⽇本人に多く見らを測定した（ligandome 解析）。

れるアレルパターンから推定した。エピトープミスマッ【結果】いくつかの抗原とともに，HLA 由来の peptide

チは HLAMatchmaker を使用して算出した。

が 同 定 さ れ た。 そ れ ら の 配 列 は PIRCHE Matching【結果】16 例のうち de novo DSA が発生した症例（DSA

Service において提示された中にも認められた。

群）は 16 例中 2 例（12.5%）で 2 例共に Class Ⅰに対【考察】High PIRCHE score と de novo DSA の産出にする DSA であった。エピトープミスマッチ数は DSA

は相関があるとされている。本研究で検出されたドナー群と非 DSA 群で 12.0 ± 9.9 と 7.6 ± 6.4，p=0.397 で差HLA 由来 peptide 候補の情報をもとに合成ペプチドをを認めなかった。Class2 のエピトープミスマッチは 2.5

作成し，T 細胞の反応性を解析する。そして，実際に± 0.7vs11.4 ± 5.2，p=0.035 だった。生存群と死亡群に

T-B communication を通して DSA 産生に関与しているはエピトープミスマッチ数や術前患者背景などリスク因か検討する。DSA 産出にかかわる抗原特異的 T 細胞の子は認めなかった。

検出と制御方法の開発が最終目標である。

【考察】今回 Class1 の DSA 産生に関しては SPK 患者においてエピトープミスマッチ数に差を認めなかったが，今後症例を増やしてさらなる研究が必要だと考えて
いる。
106

第7回

東海北陸 HLA 研究会

MHC

一般演題 2-3

一般演題 2-4

臍帯血移植における FluMelTBI
レジメンと FluCyTBI レジメンの比較
堺

2024; 31 (2)NGS-HLA タイピングによる臍帯血
HLA 型判定不能検体の検討

寿保，野々山海斗

大矢健一，畑 佐鎮代，吉村美千子，鈴木艶枝，
松本加代子，加藤剛二，森島泰雄

安城更生病院 血液・腫瘍内科

中部さい帯血バンク

目的：臍帯血移植における FluMelTBI レジメン（FMT）と FluCyTBI レジメン（FCT）は強度減弱型前処置と【 目 的 】 当 バ ン ク に お け る 臍 帯 血 の HLA 型 検 査 は，して使用されているが，治療成績を直接比較した報告は

PCR-SSO 法にて実施しているが，HLA の ambiguity

少ない。二つのレジメンの治療成績の差異を明らかにす等による判定不能検体が発生し，調製保存後の臍帯血でることを目的とする。

公開できないものがある。このため，これらの判定不対象・方法：2009 年 5 月から 2022 年 10 月までの間に能の検体を用いた NGS 法による HLA タイピング結果

安城更生病院，血液・腫瘍内科において FMT またはと PCR-SSO 法の結果を比較し，さい帯血バンクおける

FCT を移植前処置として選択し AML，ALL，MDS いNGS-HLA タイピンの有用性を検証する。

ずれかの疾患に対し初回の同種臍帯血移植を行った患者【方法】2019 年 1 月～ 2022 年 12 月の 4 年間で HLAを後方視的に解析した。

検査（HLA-A, B, C, DRB1 第 2 領域まで PCR-SSO 法）

結果：対象となった患者は FMT 群 32 症例，FCT 群

が 2,537 件実施され，HLA 型判定不能とされた臍帯

35 症例であった。移植時年齢，性別，原疾患，移植時血が 24 件発生した。これらのうち，HLA 型の確定で疾患状態，PS は両群に有意差は認めなかった。移植年

公開可能な臍帯血 19 件につき NGS-HLA タイピング

代は FMT 群が有意に近年の移植が多かった。3 年 OS

（HLA11 座，第 4 領域までロングレンジ法 外注）を実は FMT 群 39.8%，FCT 群 38.9% と有意な差を認めず，施し，アレルタイピング結果を比較した。

PFS，累積再発率，非再発死亡率いずれも有意差を認め【結果】19 件の臍帯血については，PCR-SSO 法にて Aなかった。移植前病期が非寛解の症例のみでサブグルー

ローカス 7，B ローカス 10，C ローカス 5，DR ローカ

プ解析を行った場合，1 年累積再発率は FMT 群 44%，ス 3 の延べ 50 アレルの判定不能が含まれるが，NGS-FCT 群 100% であり，有意に FMT 群で良好であった

HLA タイピングにて全て結果を得ることができた。50（P=0.02）。

アレル中 26 アレルで，0.004% 以下の稀なアレルタイプ

考察：両レジメンの全生存，非再発生存，累積再発，非を含んでいた。また，この中で二つの New アレルがタ

再発死亡いずれも差は認めず，大きな優劣は認めなかっイプされた。

た。移植前の疾患状態が不良な患者群では FCT の再発

すでに PCR-SSO 法で判定できている HLA タイプは率が有意に高く，FMT を選択すべきと考える。

NGS 法のタイピング結果と全て一致した。
【 結 論 】 今 回 の 結 果 よ り，NGS-HLA タ イ ピ ン グ は，
PCR-SSO 法判定不能の低頻度の検体もタイプすること が で き た。 ま た，DRB3/4/5, DQA1, DQB1, DPA1,
DPB1 の結果も得ることができるため，移植時の臍帯血
選択肢に加えることや，患者の DSA の有無が迅速に確認できるメリットもあり，さい帯血バンクの HLA タイ
ピングに有用な方法であることが確認できた。

107

Major Histocompatibility Complex

2024; 31 (2): 108-113【投稿・執筆規定】（2022 年 11 月 29 日改訂）
I. 概要
内容 : MHC に関する基礎研究から臨床研究まで全てを対象にし，未発表の論文，

他誌に投稿中（もしくは掲載予定）でないものに限る。
資格 : 筆頭著者および責任著者は本学会会員であり，その他の共著者も，原則として，本学会会員に限る。ただし，編集広報委員会が非会員に執筆を依頼した
総説については，その限りでない。
倫理 : ヒトおよびヒトの試料を用いた臨床研究・基礎研究の場合，ヘルシンキ宣言（「ヒトを対象とする医学研究の倫理的原則」，1964 年第 18 回世界医師会ヘルシンキ総会採択，2013 年フォルタレザ総会修正)に基づき，文部科学省等が定める関連倫理指針（「人を対象とする生命科学・医学系研究に関する倫理指針」，「ヒト ES 細胞の分配及び使用に関する指針」，「ヒト iPS 細胞又はヒト組織幹細胞からの生殖細胞の作成を行う研究に関する指針」等）に従うと共に，所属施設
等の倫理委員会の審査を経て，施設長による承認を得たものでなければならない。また，遺伝子組換え実験は「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律（いわゆるカルタヘナ法）」，動物を用いた研究については動物愛護管理法に基づく「実験動物の飼育及び保管等に関する基準」(2006 年環境省告示)などを遵守し，それぞれ所属施設における関連委員会等にて所定の手続きによる審査・承認のもとに行われた研究でなければならない。
種類 : 原著，総説，シリーズ，短報(研究速報，技術速報などを含む)，症例報

告などとし，日本語，英語を問わない。
利益相反の開示：MHC に原著論文もしくは総説を掲載する場合には，本学会が指定する様式を用いて、利益相反事項について開示しなければならない。下記、「6.
利益相反事項の開示」参照のこと。
審査 : 投稿論文掲載の採否は編集広報委員会において決定し，審査は複数の査読制で行う。審査の結果を踏まえ修正，削除，加筆などを求める場合がある。
著作権 : 本誌に掲載された論文などの著作権は日本組織適合性学会が有し，イ

ンターネットを通じて電子配信されることがある。とくに，原著，総説について
は，原則として科学技術振興機構（JST）が運営する電子ジャーナル配信サイト（J-STAGE）にて配信される。
掲載料 : 掲載は無料であるが，特殊な加工を必要とする図等を掲載する場合に

108

MHC

2024; 31 (2)は、著者の実費負担とする(特殊加工を希望の場合には，投稿原稿にその旨を明記すること)。
別刷 : 別刷は作成しない。

※論文の構成や形式等について疑問や不安等がある場合には，編集広報委員会
がアドバイス等に対処可能であるため，投稿規定の末尾にある連絡先まで連絡されたい。
Ⅱ. 原著執筆書式

1. 執筆要項
12,000 字 (刷り上がり 12 頁程度)以内とする。ただし，図，表，写真は，1 点につき概ね 400 字に該当するものとし，それぞれに表題を記載し，挿入箇所
を本文に明記する。また，図説は本文の最後に記載する。本文は Microsoft
Word で作成し，表は Microsoft Word もしくは Microsoft PowerPoint，図，写真は Microsoft PowerPoint を使用する。原稿は Email 添付で，投稿レターを添えて広報編集委員会委員長に送付する（送付先は投稿・執筆規定の末尾を参照）。
2. 第 1 頁目
表紙とし「原著」を明記し，日本語と英語でタイトル，著者全員の氏名と所属に加えて，責任著者（連絡責任者）の住所，氏名，電話番号，FAX 番号，Email アドレスを記載する。なお，タイトル，著者名，所属の記載は下記の形式に従う。
Susceptibility gene for non-obstructive azoospermia in the HLA classII

region:correlations

with

Y

chromosome

microdeletionandspermatogenesis. Tetsuya Takao1), Akira Tsujimura1), Masaharu Sada2),
Reiko Goto2), Minoru Koga3), Yasushi Miyagawa1), Kiyomi Matsumiya1),
Kazuhiko Yamada2), Shiro Takahara1)
1) Department of Urology, Osaka University Graduate School of Medicine,
Suita, Osaka, Japan

109

MHC

2024; 31 (2)2) Department of Regenerative Medicine, National Cardiovascular Center,
Suita, Osaka, Japan
3) Department of Urology, Osaka Central Hospital, Osaka, Japan
心移植における FlowPRA 法を用いた HLA 抗体検出の意義
山本賢 1)，佐藤 清 1)，佐田

正晴 2)，永谷

憲歳 2)，中谷

武嗣 3)1) 国立循環器病センター臨床検査部
2) 国立循環器病センター再生医療部
3) 国立循環器病センター臓器移植部
3. 本文-1 : 日本語での投稿
・2 頁目から，和文要旨（400 字以内）および 250 words 以内の英文要旨，キーワード（日本語および英語，それぞれ 5 語以内)を記載する。なお，英文要旨について，著者グループのみでは作成が難しい場合には，編集広報委員会
による対応も可能であるので，投稿レターにその旨を明記すること。
・ページ替えして，「はじめに」，「材料と方法」，「結果」，「考察」，「謝辞」，「利益相反事項の開示」，「引用文献」，「図説」の順に記載する。
① 専門用語以外は常用漢字，新かな遣いに従い記述する。
② 本文中の英単語は固有名詞を除き全て小文字で統一する。
③ 地名，人名，学名は原語のまま用い，薬品名は一般名を用い商品名は括弧内に記す。
④ 単位，数量は国際単位(cm, ml, g, Kg, pg,μl, ％,℃など)を，数字はア
ラビア文字を用いる。単位と数字の間には半角スペースを入れる。
⑤ 遺伝子名（シンボル）はイタリックで表記する。例えば，HLA-DRB1（タンパク名として用いる場合はイタリックにしない）
4. 本文-2 : 英語での投稿
・2 頁目に 250 words 以内の要旨，キーワード(5 語以内)を記載する。
・3 頁目より，「Introduction」，「Materials and Methods」，「Results」，「Discussion」，「Acknowledgements」，「Disclosures」，「References」，「Legendto Figures」の順に記載する。

110

MHC

2024; 31 (2)① 地名，人名，学名は原語のまま用い，薬品名は一般名を用い商品名は括弧内に記す。
② 単位，数量は国際単位(cm, ml, g, Kg, pg,μl, ％,℃など)を，数字はア
ラビア文字を用いる。単位と数字の間には半角スペースを入れる。
③ 遺伝子名（シンボル）はイタリックで表記する。例えば，HLA-DRB1（タンパク名として用いる場合はイタリックにしない）
5．本文-3：略語一覧の作成【作成要項】① 略語はアルファベット順に並べる。
② 略語の後に「：」を入れ，フルスペル（先頭のみ大文字とし，他は小文字とする）を記載する。
例）LCT：Lymphocyte cytotoxicity test
③ 商品名は略語一覧に入れない
6. 利益相反事項の開示（日本語，英語いずれの場合とも）
学会 HP にある取り扱い（https://jshi.smoosy.atlas.jp/ja/coi）に掲載
されている「COI があるとして申告する範囲に関する規則（JSHI_COI 規則（2022.3.20 制定）」を必ず参照し，申告すべき利益相反事項がある場合には，
COI 申告_様式２を用いて申告することとし、原稿とともに編集広報委員会委
員長に送付すること（送付先は投稿・執筆規定の末尾を参照）。
また，論文等では、本文の末尾で引用文献の前に，以下を明記すること。
＊申告すべき利益相反事項がない場合（和文）利益相反：申告すべき事項なし（英文）Disclosures: none to declare＊申告すべき利益相反事項がある場合（事項に応じて記載する。以下は例示）（和文）利益相反：以下の利益相反事項があります。
本論文の内容に関連して，著者○○が△△社より受けた講演料（□円）
本論文に記載した研究は，○○社から受けた研究費（□円）による。
（英文）Disclosures:

111

MHC

2024; 31 (2)○○（著者名）received a reward for lecture from （営利企業名）
This study was conducted by a research fund from （営利企業名）
7. 引用文献
引用文献は本文中の引用箇所の右肩に片カッコ付きで番号を付し，引用順に一括して，以下の例に従って，著者名，論文名，雑誌（もしくは書）名（英文の場合はイタリック表記），巻（号），最初と最後のページ，発表年を記載する。著者名，編集者名は筆頭者から 3 名まで列記し，４名以上は他または etal.とする。なお，引用論文の（号）については，原則として記載するものとするが，存在しないあるいは不明な場合には不記載を可とする。
1. Shi Y, Yoshihara F, Nakahama H, et al.: A novel immunosuppressant
FTY720 ameliorates proteinuria and alterations of intrarenal
adrenomedullin

in

rats

with

autoimmune

glomerulonephritis.

Regulatory Peptides 127(1-3): 233-238, 2005.
2. Tongio M, Abbal M, Bignon JD, et al.: ASH#18: HLA-DPB1. Genetic

diversity of HLA Functional and Medical Implication (ed. Charron
D), Medical and Scientific International Publisher, p.134-136, 1997.
3. 難波行臣，今尾哲也，石黒伸 他 : 既存抗体陽性生体腎移植後に生じた抗体関連型拒絶反応に対して血漿交換および免疫グロブリン大量療法（IVIG）が奏効した１例.

血管外科 17(1): 36-40, 2005

4. 佐田正晴，高原史郎 : 腎移植-組織適合と拒絶反応. 新図説泌尿器科学講座 6「腎疾患，神経泌尿器科，老年泌尿器科」(吉田修 監修)，Medical View
社，p.120-125，2000.
Ⅲ. 短報 (研究速報，技術速報などを含む)，症例報告執筆書式

1. 執筆要項
6,000 字 (刷り上がり 6 頁程度)以内とする。ただし，図，表，写真は，1 点につき概ね 400 字に該当するものとし，それぞれに表題を記載し，挿入箇所
を本文に明記する。また，図説は本文の最後に記載する。本文は Microsoft
Word で作成し，表は Microsoft Word もしくは Microsoft PowerPoint，図，写真は Microsoft PowerPoint を使用する。原稿は Email 添付で投稿レターを

112

MHC

2024; 31 (2)

添えて編集広報委員会委員長に送付する（送付先は投稿・執筆規定の末尾を参照）。
2. 第 1 頁目
表紙とし「短報」「症例報告」を明記し，日本語と英語でタイトル，著者全員の氏名と所属，連絡責任者の住所，氏名，電話番号，FAX 番号，E-mail アドレ
スを記載する。タイトル，著者名，所属等の記載は「原著」の形式に従う。
3.本文(日本語および英語での投稿)・２頁目に，英文要旨（200 words 以内），キーワード（3 語以内）を記載。
・３頁目以降は，原著執筆書式 3.の 3 頁目以降に準じる。
Ⅳ. 総説，シリーズその他

日本語，英語のいずれも可とする。概ね 6,000～12,000 字（刷り上がり 6～８頁）
程度とし，利益相反事項の開示を含めて，上記の原著執筆書式に準じるが，本文構成の一部（「材料と方法」，「結果」，「考察」等）については，適宜変更することも可とする。
Ⅴ. 原稿送付先

日本組織適合性学会 編集広報委員会
委員長

黒田 ゆかりE-mail: mhc.edit.office@soubun.org

113

Major Histocompatibility Complex

2024; 31 (2): 114-117

Instructions to Authors (updated on November 29, 2022)
Submission
MHC is the official journal of the Japanese Society for Histocompatibility and Immunogenetics(JSHI). The aim of this journal is to serve as a forum for the scientific information in the formof original and high quality papers in the field of major histocompatibility complex (MHC) andimmunogenetics. Manuscripts, from basic to clinical research relating to MHC or
immunogenetics, are accepted with the understanding that they are original unpublished workand are not being submitted elsewhere. Manuscripts should be written in Japanese or English.
First author and corresponding author must be members of JSHI, while it is preferable for theother co-authors also to be JSHI members.
Ethics: Clinical and basic studies using human subjects and specimens obtained from humans
must adhere to the 1980 Helsinki Declaration (adapted by the 18th World Medical Assembly)
and must be approved by the ethics review board of each participating institution. Furthermore,animal studies must adhere to such guidelines.
Conflict of interest: All the authors must clearly declare any conflicts of interest according to
the guideline of JSHI (https://jshi.smoosy.atlas.jp/ja/coi). Further information is available uponrequest.
Types of papers published: Original articles, reviews, series, short communications (including
research and technical bulletins) and case reports are acceptable.
Review: The editorial board is responsible for the acceptance of all submitted papers based ona review by multiple referees. Based on the outcome of the review, the board may request
corrections, omissions, or additions for publication in MHC.
Copyright: Papers that are accepted for publication become copyright of JSHI and will be madeavailable electronically via the J-Stage platform (https://www.jstage.jst.go.jp/).
Fees: There is no fee for publication. However, authors will be responsible for the costs incurred
for special processing (please specify at submission if special processing is required).
Reprints: Reprints are not prepared, but pdf files could be obtained via the J-Stage platform(https://www.jstage.jst.go.jp/)..
Manuscript (in English)
1. Original articles
-114
1-

MHC

2024; 31 (2)Summary
Articles are limited to 4,000 words. Each figure, table, and photograph must be included on
separate manuscript pages and must include a title. The location of tables and figures in the
manuscript must be clearly stated in the main text. The main text must be submitted as a
Microsoft Word file, tables as a Microsoft Word, Excel, or PowerPoint files, and figures andphotographs as PowerPoint files. All files must be electronically sent as attached files via email
to the editor-in-chief at the editorial office. If the authors would like to submit large size files(over 100 MB), the large size files may be submitted via a high volume file transfer service. Inthat case, the authors must contact the editorial office (indicated on the last page of this
instruction) before submission.
First pageThe first page is the title page, which must clearly state that the submitted article is an "Originalarticle" and include titles, and the name and affiliation of each author. Include the address, name,telephone number, fax number, and email address of corresponding author at the bottom of thetitle page. Follow the example shown below for the title, author names, and affiliations:Susceptibility gene for non-obstructive azoospermia in the HLA class II region:
correlations with Y chromosome microdeletion and spermatogenesis.
Tetsuya Takao1), Akira Tsujimura1), Masaharu Sada2), Reiko Goto2), Minoru Koga3), Yasushi
Miyagawa1), Kiyomi Matsumiya1), Kazuhiko Yamada2), Shiro Takahara1)
1) Department of Urology, Osaka University Graduate School of Medicine, Suita, Osaka, Japan
2) Department of Regenerative Medicine, National Cardiovascular Center, Suita, Osaka, Japan
3) Department of Urology, Osaka Central Hospital, Osaka, Japan
Main text- The second page must contain an "Abstract" no more than 250 words in length, followed by
key words (no more than five).
- Starting on the third page, the main text begins with the "Introduction" and is followed by the"Materials and Methods", "Results", "Discussion", “Acknowledgments”, “Conflict ofInterest”, and "References" sections, in this order.

-115
2-

MHC

2024; 31 (2)- Geographic, human, and scientific names are listed in their original languages. Use genericnames for drugs with commercial names in parentheses.
- Indicate units and quantities using Arabic numbers followed by international units (cm, ml, g,
kg, pg, l, %, ˚C, etc.).
References
References should include names of authors (last names first); title of article; title of journal(abbreviate according to the style of Index Medicus) or book; volume number; location andname of publishing company (book only); first page, year of publication. For references withmore than three authors, list the first three, followed by "et al.". See the examples below:
Journal.
Shi Y, Yoshihara F, Nakahama H, et al.: A novel immunosuppressant FTY720 ameliorates
proteinuria and aiterations of intrarenal adrenomedullin in rats with autoimune
glomerulonephritis. Regulatory Peptides 127: 233-238, 2005.
Book.
Katz DH: Lymphocyte Differentiation, Recognition, and Regulation. New York, Academic
Press, 1997
Chapter in a book.
Tongio M, Abbal M, Bignon JD, et al. ASH#18 : HLA-DPB1.
Charron D (ed): Genetic diversity of HLA Functional and Medical Implication. Paris,
EDK, 1997
2. Short communications (including research and technical bulletins) and Case reports
Summary
Short communications are limited to 1,500 words. For other information, please see “Summary”
section of “Original articles” described before.
First pageThe first page is the title page, which must clearly state that the submitted article is a "Short
Communication" or "Case report" and include titles and the name and affiliation of each author.
-116
3-

MHC

2024; 31 (2)Include the address, name, telephone number, fax number, and e-mail address of thecorresponding author at the bottom of the title page. Follow the example shown below for thetitle, author names, and affiliations:
Main text- Short communications and case reports do not require an abstract.
- After the second page, follow the same guidelines for the third and subsequent pages oforiginal articles as described.
3. Reviews, Series, and Others
As a general rule, reviews and series are written by invitation from the editorial board; however,submission by JSHI members is strongly encouraged. The editorial board determines the total
number of pages, but in general a manuscript of no more than 3,000 words is preferable. As ageneral rule, reviews and series follow the format for original articles.
Editorial Office and Mailing Address
Manuscripts should be submitted to the Editor-in-Chief at the Editorial office:
Editor-in-Chief: Yukari Kuroda
Editorial office:E-mail: mhc.edit.office@soubun.org

-117
4-

MHC

2224; 31 (2)

編集後記

日本組織適合性学会ホームページが新しくなりまし「のぼせもん」…博多弁で，何かに夢中になる人やすた。

ぐに熱くなる人を指す言葉。

学会活動に関する情報や HLA 遺伝子の塩基配列情報

この記事の起稿をおこなっている 7 月は，福岡（博が利用できます。

多）の夏の風物詩である博多祇園山笠が 7 月 1 日からhttps://jshi.smoosy.atlas.jp/ja

15 日間かけて開催され，300 万以上の観光客が訪れる
学会事務局からのお知らせ

祭りとして，1 年で最も町が賑やかで活気付く時期である。そんな祭りの中，学会の ”お祭り” である学術大会を，

本会では会員管理システムを変更いたしました。入退1995 年第 4 回日本組織適合性学会大会（福岡大学 内藤

会手続等の会員管理，登録情報の変更および会費納入に

説也大会長）は 13 日（集団山笠見せ）から 15 日（追いついては，会員管理システム（SMOOSY）を用いて行っ山笠）のフィナーレに照準を合わせた企画で開催され，ております。

地域文化とアカデミアが融合し参加者を魅了する大会でその他の学会運営事項については，ホームページに Q

あったであろう。勿論，当時運営に携われた大会事務局&A ページを設けていますので，ご参照ください。

はご苦労も多かったと思うが，ここ数年のパンデミック

https://jshi.smoosy.atlas.jp/ja/FAQ2022

による制約の中での大会運営に比べると，それは楽しい
苦労であった事だと推察する。さて昨日のニュースを見事務所：

ると，新たな変異株「KP.3」が全国に先駆けて福岡で一般社団法人は猛威を振るっている。実は福岡での感染拡大はある程〒 601-8323

度予想されており，山笠「のぼせもん」が原因のひとつであることは，ほぼ間違いない。地元民は誰も口には出さないが…。
今 回 の 第 31 巻 2 号 MHC は， 我 々 の ”お 祭 り” で ある近畿地方会抄録，関東 HLA 研究会抄録，東海北陸
HLA 研究会抄録，認定 HLA 検査技術者講習会テキス
ト等が掲載されています。お祭りに参加出来なかった皆様，是非ご一読頂き「のぼせもん」になって頂ければ幸いに存じます。
橋口 裕樹

118

日本組織適合性学会
京都市南区吉祥院春日町 21-11