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カブラハバチにおける性分化遺伝子ホモログの単離
畠山正統・山本大介・炭谷めぐみ・李載政

MasatsuguHATAKEYAMA九DaisukeS.YAMAMOT02)，MegumiSUMITANI3) and4JaeMinLEE): CloningoftheSex‑determiningGeneHomologintheSawfly，Athalia rosaerl{βcornis (Hymenoptera)*DωelopmentalMechanismsLaboratory，DevelopmentalBiologyDepartment，Nationallnstitute01Ag
robiologicalSciences，Tsukuba，Ibaraki305‑8634，
Japan2)Depart削 ent01Biology，GraduateSchool01ScienceandTechnology，KobeUniv
ersit，y M似お，Kobe，
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みカフゃラハパチ Athal
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icornisは、他の多くの膜麹目昆虫と同様に雄産生単為発生を行ない、受精卵は二倍体の雌に、未受精卵は半数体の雄になる。カブラハパチでは、単一遺伝子座・複対立遺伝子によって性が決定され、同系交配によって二倍体の雄、三倍体の雌雄を得ることが可能である。二倍体、三倍体の雄は、半数体の雄と同様に非減数的な成熟分裂を行ない、それぞ、れ二倍体、三倍体の精子を生じる。一方、三倍体の雌は、減数NaitoandSuzuki，1991)。このように的な成熟分裂を行なって異数体の卵を生じ、これらは正常に発生しない (カブラハパチの配偶子形成過程では、倍数性に関係なく、雄は減数分裂を行なわず、雌は減数分裂を行なうことから、性と減数分裂の有無が密接に関連していると考えられる (Oishieta，.
l 1998)。
昆虫の性決定に関する分子機構はキイロショウジョウバエで詳細に調べられているが、他の昆虫との共通性は見いだされていなかった。しかしながら、最近になってキイロショウジョウパエの性分化遺伝子、 doublesex(dsx) の相同遺伝子が昆虫だけでなく他の動物にも存在し、その構造や機能が保存されていることが明らかになってきた (Raymondetal.，1998;MarinandBaker，1998;Z訂 kower，2001)。とくに、この遺伝子産物の DNA結合ドメイン (DMドメイン)は保存性が高いことがわかっている (Zhueta，.
l 2000)。そこで、カフゃラハノ fチの性決定機構と減数分裂との関連を明らかにするために、性決定に関わる遺伝子の単離と同定を試みた。
まず、昆虫、センチュウ、および脊椎動物で得られている、 dsx相同遺伝子産物の D Mドメインを比較した。
とくによく保存されている部分に対する縮重ブライマーを作成し、カフ守ラハバチ雌雄成虫から得たゲノム DNAをそれぞ、れ鋳型にして PCRを行なった。雌雄いずれにおいても期待された長さ(約 100bp) の DNA断片が増幅され、塩基配列を決定してアミノ酸配列を推測した結果、 DM ドメインの一部であると考えられた。つぎに、踊前期の雌雄を用いて cDNAライブラリーを作成し、先に得られた DNA断片の塩基配列をもとに設定した配列特異的プライマーをイ吏って、 5'‑RACE(rapidamplificationofcDNAends) PCRおよび 3'‑RACEPCRを行なった。その結果、雌雄で転写産物が異なると予想、される cDNAを得た。いずれの転写産物にも、既知の D Mドメインと非常に保存性の高い領域が存在し (Fig.
1)、dsxのホモログと結論した。

*Abstractofpaperreadatthe37thAnnualMeetingofArt
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