生活習慣・ストレスに起因する認知情動行動障害に対する
和漢薬の作用解明
申 請 代 表 者
所外共同研究者
所内共同研究者

岡 淳一郎
濱田 幸恵
松本 欣三

東京理科大学薬学部薬理学研究室
東京理科大学薬学部薬理学研究室
病態制御部門複合薬物薬理学分野

教授
助教
教授

【報告セミナー要旨】【目的】
申請代表者及び所外共同研究者は，幼若期発症１型糖尿病モデル (JDM) ラットの学習記憶障害発症メカニズムとその改善薬に関する研究を行っている。一方，所内共同研究者は，釣藤散が脳血管性認知症モデル動物の学習記憶障害，加齢あるいは 2 型糖尿病で発症する実験的認知障害に対して有効性を示すことを報告している。本共同研究では，JDM ラットの学習記憶障害に対する釣藤散の作用，及び認知情動障害モデルである嗅球摘出 (OBX) マウスを用いて，釣藤散の構成生薬である菊花の学
習記憶行動及びうつ様行動に対する作用を調べた。
【方法】
１）17 日齢 Wistar/ST 系雄性ラットに streptozotocine (85 mg/kg) を腹腔内投与した。静脈血を採血し，血糖値が 300 mg/dL 以上の動物をモデルとした。釣藤散 [( 株 ) ツムラから供与 ] は，脱イオン水
で 1 g/kg になるよう調製して 1 日 1 回経口投与した。釣藤散投与は 21 日齢から始め，実験で使用する
前日まで投与した。行動実験及び電気生理学的実験は 24 日齢から 28 日齢ラットを用いた。学習記憶
行動実験として Y 字迷路試験を用い，Y 字型に配置された 3 本のアームに対してラットが順番に進入する自発的交替行動を観察し，自発的交替行動率を算出した。モデル動物より急性海馬スライスを作製し，海馬 CA3 領域から CA1 領域に投射する Shaffer 側枝を刺激して，CA1 領域の集合興奮性シナ
プス後電位 (fEPSP) を記録した。シナプス伝達効率の指標として，fEPSP の入力 - 出力関係 (I-O) 及び神経伝達物質の放出確率を反映した指標である paired pulse facilitation (PPF) を測定した。
２）ddY 系雄性マウスを用い，麻酔下で嗅球を除去した (OBX)。除去せずに同様の手術を施したもの
を偽手術群とした (sham)。術後 3 日より OBX 群には水もしくは菊花エキス [KE：常盤薬品より供与 ]を 1 日 1 回経口投与し，投与開始 2 週間後より行動薬理実験を開始した。学習記憶能力は新規物体認
知試験および改変型 Y- 迷路試験で評価した。不安情動およびうつ様行動は，各々高架式十字迷路試
験および尾懸垂試験で評価した。
【結果と考察】１） 幼若期発症 1 型糖尿病モデルラットで有意に減少している自発的交替行動率が，釣藤散の慢性投与によって有意に増加し，短期記憶障害 ( 空間的作業記憶 ) が改善された。PPF は釣藤散の慢性投与で影響されなかった。しかし，I-O の異常亢進，つまりシナプス伝達効率の異常亢進は釣藤散の慢性投与によって改善された。釣藤散は，糖尿病によるシナプス伝達効率異常亢進を抑制することにより認知行動障害を改善することが示唆された。
２）Sham 群と比べ OBX 群に有意な学習記憶障害が発現した。OBX 群の障害は KE 投与により有意－ 15 －

に改善された。高架式十字迷路試験では OBX 群で open arm における滞在時間が有意に延長し，低不安様行動が観察された。OBX 群のこの行動は，KE 投与により改善された。尾懸垂試験では，KE投与により OBX 群の無動時間は有意に短縮した。これらの結果，菊花は認知行動障害および情動行
動障害の何れに対しても有効である可能性が示唆された。

■背景・目的精神神経疾患の発症には種々の環境要因や生活習慣が関わることが知られている。生活習慣病の１つである糖尿病は，三大合併症の腎症，網膜症，末梢神経障害の他に，アルツハイマー病をはじめとする認知症の重要な発症要因となることが知られている。認知症は介護する家族や社会の負担が甚大
かつ，患者の生活の質を低下させることから治療方法の開発，発症機序の解明，治療薬創出が課題となっている。近年，20 歳未満における 1 型糖尿病の患者数は 2010 年の 179,388 人から 2050 年には587,488 人へ増加する（1,000 人あたりの有病率：それぞれ 2.13 人および 5.20 人）ということが報告されている [1]。さらに，糖尿病発症における若年化が問題である。私達は過去に 1 型糖尿病モデルラッ
トの発症時期が記憶学習の指標とされる海馬神経シナプス可塑性に異なる影響を与えることを報告した [2]。したがって，糖尿病発症若年化に伴った認知症治療薬の選択が必要である。本研究では，幼若期発症 1 型糖尿病モデルラットの認知機能および海馬神経シナプス伝達障害を改善する治療薬の候補として和漢薬の作用を調べた。和漢薬として釣藤散を用いた。釣藤散は，肩こりやめまい，慢性的な頭痛に用いられる。また，釣藤散は一過性の虚血による脳血管性認知症モデルの新規物体に対する認知記憶の障害 [3]，また 2 型糖尿病 db/db マウスの空間学習記憶の障害 [4] に対して有効であることが報告されている。そこで本研究では，幼若期発症 1 型糖尿病モデルラットの認知機能障害に対する
釣藤散の有効性について検討することを目的とした。
一方，うつ病は，「ストレス社会」と言われる現代において，社会的にも大きな問題となっている疾患の１つである。WHO の疫学調査によると，国際疾患分類システム (ICD-10) に基づくすべての疾患のなかで，うつ病の有病率は７位に位置し，更に 2020 年には 2 位になると予想されている。日本
においても，うつ病の有病率は男性で約 2 ～ 3％，女性で約 5 ～ 10％であり，そのうち自殺を考えるものが 60％に及び自殺原因の中で１位と言われている。本研究では，うつ病およびアルツハイマー型認知症モデル動物として用いられている嗅球摘出マウスの認知情動行動障害を改善する治療薬の候補として菊花エキスの有効性について検討することを目的とした。菊花は釣藤散の構成生薬として用いられているほか，古くから延命長寿を目的に菊花茶として汎用されている生薬である。

■方法
(1)

幼若期発症 1 型糖尿病モデル動物の認知学習障害に対する釣藤散の作用解明

1. 方法
1-1. 幼若期発症 1 型糖尿病モデルラット作製方法
生後 17 日齢の雄性 Wistar 系ラット（日本 SLC）に PBS または streptozotocine (STZ) (85 mg/kg)
を腹腔内投与し，前者を Control ラット，後者を幼若期発症 1 型糖尿病モデル (JDM) ラットとし，生
後 21-28 日齢で実験に使用した。動物は，室温 23 ± 1 ℃，湿度 55 ± 5 ℃で 8:00 ～ 20:00 の 12 時間明暗サイクルで動物室にて飼育し，水および飼料は自由に摂取させた。

－ 16 －

1-2. 釣藤散の調製および投与方法
釣藤散 (CTZ) は，( 株 ) ツムラから供与されたものを用いた ( 釣藤散 : セッコウ 5.0 g, チョウトウコ
ウ 3.0 g, チンピ 3.0 g, バクモントウ 3.0 g, ハンゲ 3.0 g, ブクリョウ 3.0 g, キクカ 2.0 g, ニンジン 2.0
g, ボウフウ 2.0 g, カンゾウ 1.0 g, ショウキョウ 1.0 g)。
これを脱イオン水で 1 g/kg になるよう調製し，
1 g/kg を 1 日 1 回経口投与した。釣藤散投与は 21 日齢から始め，実験で使用する前日まで投与した。
行動実験及び電気生理学的実験は 24 日齢から 28 日齢ラットを用いた (Fig. 1)。

Fig. 1. Schematic drawing of experimental scheduleFig. 1. Schematic drawing of experimental
1-3. Y 字迷路試験
24-28 週齢のラットを用いた。実験装置として，黒色木製の Y 字型迷路を用いた。この迷路は，高さが 25 cm，幅が 10 cm，長さが 35 cm のアーム 3 本からなり，それぞれのアームを 120 度の Y 字型にしたものを用いた。Y 字型迷路は，実験室の床の中央に設置し，3 本のアームに A・B・C の名称を付けた。装置上部には記録用のデジタルカメラを取り付けてある。実験室および各アームの照度はDaily administration
40 ± 5 lx に調整した。
6 weeks
2 weeks
OBX/sham C のアームの端に入れ，自由に行動させ，そのラットを Y 字型迷路における
8 分間の様子をビデオカメラにより記録した。記録されたビデオから，ラットがアームを選択して移動した順に，その経路
Day 0

Day 3

OFT
ORT
MYT EPMT TSTを記録した。この際，ラット各アームに進入した回数の合計を総エントリー数（total arm entry）とし，
ORT: Object recognition test
この中で連続して異なる 3 つのアームを選択した回数を自発的交替行動率（%
alternation）求めた。
Behavioral tests
MYT: Modified Y-maze test
Elevated plus maze /test% alternation = {numberEPMT:of alternations(total arm entries － 2)} × 100
TST: Tail suspension test
OFT: Open field test

1-4. 急性海馬スライス標本の作製

Fig. 2.

Schematic drawing of experimental schedule24-28 日齢のラットを用いた。
1-5. 細胞外電位記録法
Peristaltic pump (IWAKI) により一定速度（3 mL/min）で ACSF を灌流した記録用チャンバー
内に脳スライスを移した。顕微鏡観察下で海馬 CA1 野の錐体細胞樹状突起層に 3-7 M Ωの記録電極（Tw150F-9, WPI, FL, USA, ACSF 充填），Shaffer 側枝に刺激用タングステン双極電極（WPI, FL,USA）をマニュピレーターにより刺入した。刺激は 1 分間に 1 回の頻度で行い（80 µsec duration），
誘発される集合興奮性シナプス後電位 : field excitatory postsynaptic potential (fEPSP) は増幅機
（SEZ-2400, NIHONKOHDEN）で増幅後，フィルター（FLA-01, Cygnus Technology）を通し 10
kHz 以上の波形を除外し，Power Lab 4/SP (ADI instrument, CA, USA) を介してコンピューター（Power Macintosh G4）に取り込んだ。解析は Chart 5 (ADL instrument, CA, USA) により，オフラインで fEPSP の振幅 amplitude を測定した。

－ 17 －

(2)

嗅球摘出マウスの認知情動障害に対する菊花エキスの効果とその作用特性

2.1．実験動物および嗅球摘出術
本項目での実験では ddY 系雄性マウス（9 週齢）を用いた。嗅球摘出術は Yamada ら [9] の方法に準じ，ペントバルビタール麻酔下で頭蓋を切開して嗅球を吸引除去した（OBX 群）。吸引除去せず，同様の手術を施したものを偽手術群（sham）とした。
2.2．薬物処置
OBX 処置の 3 日後より菊花エキス（Chrysanthemum flower ：CF; 0.5 – 2 g（乾燥生薬換算）/kg/
day，経口 )，参照薬タクリン (2.5 mg/kg, 腹腔内 )，および抗うつ薬イミプラミン (IMP；10 mg/kg，
腹腔内 ) を 8 週間の実験期間中投与した。尚，エキスは常盤製薬より供与されたものを用いた。

Fig. 1. Schematic drawing of experimental

2.3．行動薬理学的評価
行動薬理学実験は薬物投与開始の 2 週間後より，Fig. 2 に示すスケジュールで行った。薬物効果の評価では各動物行動を DVD に記録し，記録した画像データを SMART (PanLab, Barcerona, Spain)を用いて解析した。
Daily administration

Day 0

6 weeks

2 weeks

OBX/sham

Day 3
OFT

OFT: Open field test
ORT: Object recognition test
MYT: Modified Y-maze test
EPMT: Elevated plus maze test
TST: Tail suspension test

ORT

MYT

EPMT

TST

Behavioral tests

Schematicdrawingofofexperimental
experimentalschedule
schedule
Fig.Fig.
2. 2.Schematic
drawing

2.3.1. オープンフィールド試験
一辺が 45cm 四方のオープンフィールドにマウスを 5 分間入れ，その間の移動距離を自発運動量の指標として測定した。
2.3.2. 新規物体認知試験
本試験は Zhao らの方法 [3,4] に準じて行った。本試験は，サンプル試行とテスト試行からなり，サンプル試行では同色同形の物体 2 個を設置した観察箱内にマウスを 5 分間入れ，マウスが物体に鼻部を向けて接近する時間を物体認識の指標として測定した。その 30 分後に行ったテスト試行では 2 個の物体のうちの一つを新規の形状および色の物体に，他はサンプル試行で用いた物体と同色同形のコ
ピーを設置した。再びマウスを 5 分間入れて各物体に関心を示す時間を測定した。
2.3.3. 改変型 Y 迷路試験
実験ではマウス用 Y 字型迷路を用い，その周囲には空間情報として 3 種類の手掛かりを掲示した。
Yamada らの方法 [9] に準じ，訓練試行とテスト試行を行った。訓練試行では 3 つのアームの一つを壁で塞いだ迷路内にマウスを入れて 5 分間自由に探索させた。その 30 分後にテスト試行を行った。

－ 18 －

8

テスト試行では全てのアームを開放した迷路内に再びマウスを 5 分間入れて自由探索させ，新規アー
ム，即ち訓練施行時に塞がれていたアーム内を探索する時間の割合を短期の空間記憶の指標とした。
2.3.4. 高架式十字迷路試験
OBX マウスの不安情動行動に対する薬物投与の効果を検討するために，高架式十字迷路を用いて解析した。本試験では Zhao ら [4, 11] の方法に従い，側壁のあるクローズドアームと側壁のないオー
プンアームが十字型に交差した装置を床より 60cm の高さに設置して用いた。マウスをアームが交差するセンターに置き，5 分間の観察時間中に各アームに滞在する時間を測定した。観察時間内のオー
プンアーム滞在時間を不安行動の指標とした。
2.3.5. 尾懸垂試験
薬物の抗うつ薬様効果の評価を目的に，尾懸垂試験法を用いた。マウスの尾部をテープで固定し，床から約 50cm の位置から 8 分間，懸垂した [10]。この間のマウスの動きを DVD 記録し，SMART を用い，懸垂開始 2 分後から 6 分間の観察時間中の無動時間の割合を解析した。尚，動物体が 0.05 cm2/
sec 以下の動きである場合，無動と判定した。

■結果・考察ストレプトゾトシン誘発 1 型糖尿病モデルラットでは，Y 字迷路試験において自発的交替行動率が対照群に比べて有意に減少した (Fig. 3)。釣藤散の慢性投与により，この短期記憶障害 ( 空間的作業記憶 ) は改善した。さらに，電気生理学的検討により幼若期発症 1 型糖尿病モデルラットにおけるシナプス伝達の亢進が釣藤散投与により改善した (Fig. 4)。

Fig. 3. CTS rescued impaired working memory in JDM rats in the Y-maze test.
Fig. 3. CTS rescued impaired working memory in JDM rats in the Y-maze test.
Each data column represents the mean ± S.E.M. (n=5 - 6). ***P<0.001, ns; non-significant.

Each data column represents the mean ± S.E.M. (n=5 - 6). ***P<0.001, ns; non-significant.
釣藤散の慢性投与によって，Y 字迷路試験における空間作業記憶がラットの行動量に影響を与える
ことなく改善した。先行研究において，釣藤散は新規物体に対する認知記憶および探索行動を改善している [3]。また，モリス水迷路試験における長期的な空間学習記憶を改善している [4]。本研究では，－ 19 －

Fig. 3. CTS rescued impaired working memory in JDM rats in the Y-maze test.
Each data column represents the mean ± S.E.M. (n=5 - 6). ***P<0.001, ns; non-significant.

Fig. 4. The strengthened input-output relation was restored by CTS in JDM rats.
Eachrepresents
the mean± S.E.M.relation(n=8 - 10).
ns;CTS
non-significant.
Fig. 4.dataThestrengthened
input-output
was **P<0.01,
restored by
in JDM rats.

Each data represents the mean ± S.E.M. (n=8 - 10). **P<0.01, ns; non-significant.
Y 字迷路試験における短期的な空間認知および作業記憶を釣藤散は改善した。
さらに，電気生理学的検討より幼若期発症 1 型糖尿病モデルラットでは，釣藤散の慢性投与によってシナプス伝達の亢進が回復した。このことは，プレシナプスからのグルタミン酸の放出に対するポストシナプスの反応性，すなわち海馬神経シナプス伝達効率が減弱されたことを示している。幼若期
発症 1 型糖尿病モデルラットにおける海馬神経シナプス伝達効率の異常亢進を釣藤散は抑制し，対照
群レベルのシナプス伝達効率に戻していることが示された。シナプス伝達異常亢進は，興奮性アミノ酸受容体を過剰刺激し神経細胞死を引き起こす可能性をもつ。先行研究では，釣藤散を構成する主要な生薬である釣藤鉤は，NMDA 受容体の活性レベルを抑制することによる興奮毒性防止効果があ9ることが報告されている [5]。さらに，釣藤鉤の有効成分であるアルカロイド，リンコフィリンには大脳皮質における NMDA 受容体のサブユニットの一つである NR2B の mRNA 発現を減弱する作用がある [6]。さらに別の研究で，リンコフィリンは NMDA 受容体を非競合的に阻害する作用があることが報告されている [7]。また，当研究室の過去の報告で幼若期発症 1 型糖尿病モデルラットにおいてNMDA 受容体の活性が異常亢進していた [2, 8]。これらの事実から，釣藤散の慢性投与は NMDA 受
容体の活性化レベルを抑制する作用があると考えられる。
以上の結果，釣藤散が幼若期発症 1 型糖尿病モデルラットの認知機能障害の治療薬として有効である可能性が示された .
釣藤散の構成生薬である釣藤鈎については松本らのグループより認知行動障害改善効果における重要性が報告されている。今回は本方剤に特徴的に含まれる菊花の役割について注目し，OBX マウスの認知情動障害モデルを用いて検討を加えた。
OBX 処置の約 2 週間後に行ったオープンフィールド試験を行い，自発運動量の変化を測定した。
一般に OBX 処置により運動量が亢進することが知られており，本実験においても偽手術群に比べて（水投与）OBX 群で有意な自発運動量の亢進が認められた。一方，各薬物処置は運動量亢進を抑制す
る傾向はみられたものの，統計学的には有意ではなかった。
OBX 群では，偽手術群と同様に，新規物体認知試験サンプル試行において二つの同一物体を探索する時間の割合には何ら差が認められなかった。このことから OBX 処置はマウスの視覚若しくは視－ 20 －

覚的に物体を認識する能力に影響を与える可能性は低いと考えられた。一方，テスト試行において新規および既知物体に対して探索行動を示す時間および割合を解析したところ，偽手術群では既知物体と比べて新規物体に対する探索時間は有意に長く，正常の物体認知行動が観察されたが，OBX 群では両物体に対する探索時間に差が認められなかった (Fig. 5)。この結果，OBX 群ではサンプル試行で提示された物体を記憶する能力が低下していることが明らかとなった。OBX 処置によるこのような障害は先の結果と一致する。一方，菊花エキス投与群では参照薬 THA 投与群と同様に既知物体よりも新規物体に対する探索時間が長く，更に両物体の弁別指標も有意に増大したことから，OBX による物体認知記憶の障害は菊花投与で改善されることが明らかとなった。
Familiar

Test trial

New

sham
Time exploring object(s)

) 50
s
(
t
c 40
je
b
o
g 30
n
ri
o
l
p 20
x
e
e
10
im
T
0

30 minF

A2

A1

N
Test trial(5 min)Sample trial(5 min)

OBX

***
**
**

**

veh

veh

0.5

1

A1
0.8
0.8

Discrimination index

A2

Time exploring object(s)2

CF (g/kg)

Sample trialOBXxed ) 0.6
0.6
in TF
n +N
o
ti T
(
a )/ 0.4
ni TF0.4
im
r TN
c (
s
i
0.2
D 0.2

sham

2.5 10THA IMP

OBX

**

*

(TN-TF)/(TN+TF)) 30 sham
(s
t
c
e
j
b
o 20
g
n
ri
lo
p
x 10
e
e
im
T
0
veh
veh

*

**

00
0.5

1

2

2.5
THA

CF (g/kg)

veh

10
IMP

veh

0.5

1

CF (g/kg)2

2.5 10THA IMPFig.
object recognition
performanceperformanceof OBX-induced
Fig.5. 5.CF improved
CF improved
object recognitionof
deficits
mice.
Each
data
columnrepresents
the
mean
±
S.E.M.
(n=9 –
OBX-induced deficits mice. Each data column represents
the mean
10).
*P<0.05,
and ***P<0.001±S.E.M.
(n=9**P<0.01– 10). *P<0.05,**P<0.01 and ***P<0.001

改変型 Y 迷路試験によりマウスの記憶能に対する OBX 処置並びに薬物投与の効果について検討した。本試験はルールを学習する過程を含まず，新規性と空間記憶に基づいて特異的に作業記憶を評価できる課題として用いられている。本試験テスト試行における偽手術群の新規アーム内探索時間は，
OBX
全アーム探索時間の 50％以上であった。この値は期待値（33.3％）よりも有意に高値であったこと
80

sham

から，偽手術群では訓練試行での空間記憶に基づいて新規アームをより選択的に認識していることが
***
**
60

*

r
a
明らかとなった。一方，OBX
群では新規アームを探索する時間の割合は偽手術群と比較して有意に
m

w
e 40

n
低下し，ほぼ期待値と同程度であったことから，空間作業記憶の障害を発症していると考えられた。
nie

この作業記憶障害は菊花およびTHA 投与により有意に改善されたのに対し，IMP 投与は無効であっ
im 20
T

%
た。これらの薬物は何れもテスト試行におけるOBX 群の迷路内自発運動量には全く影響を及ぼさなかった（Fig. 6）。

0vehveh 0.512
2.5 10)THA IMPCF (g/kg)m
OBX 誘発の情動行動障害として不安情動行動とうつ様行動を解析するとともに，菊花の効果を検c( 1500

rm
討した。不安情動行動を評価する高架式十字迷路課題では偽手術群に比べ，OBX
群では 5 分間の観ae
察時間内でオープンアームに留まる時間の割合が有意に増加し，見かけ上の低不安行動が観察された。
c1000
in
n
a

ts disinhibition とも呼ばれ，認知障害を有する老化促進モデル動物 SAMP8 や一般にこのような行動は
idnoβアミロイド前駆蛋白を高発現にした遺伝子改変動物においても同様の行動が認められ，釣藤散や
ti
o 500

m
o
抑肝散投与によって改善されることが知られている[11]。本実験では，菊花および IMP を投与した
c
lo
l
a
t
o 0
T

veh

veh

0.5

1

2

2.5 10THA IMP－ 21 －CF (g/kg)

Fig. 6. CF in middle dosage and THA had significant
effects on OBX-induced spatial working memory

OBX-induced deficits mice. Each data column represents the mean
±S.E.M. (n=9 – 10). *P<0.05, **P<0.01 and ***P<0.001

sham

60
rm
a
w
e 40
n
in
e
m
i 20
T
%

***

%Time in new arm

80

OBX

**
*

0
veh

veh

0.5

Total locomotion distance in arm (cm)

)
m
1500
(c15001

2

2.5 10THA IMP2

2.5 10THA IMPCF (g/kg)

m
r
a
n
i
e
1000
c1000
n
a
ts
i
d
n
o
ti 500
o 500
m
o
c
lo
l
a
t
o 00
T

veh

veh

0.5

1
CF (g/kg)

Fig. 6. CF in middle dosage and THA had significant effects on OBXFig. 6. CF in middle dosage and THA had significant
induced spatial working memory deficit. Each data column represents
effects on OBX-induced spatial working memory
the mean ± S.E.M. (n=9 – 10 ). *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001

deficit. Each data column represents the mean ±S.E.M.
(n=9 – 10 ). *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001

sham

OBX

50

% immobility time

e 40
im
t
yit
il 30
b
o
m 20
m
i
%

10

***
*

*

1

2

*

10
0
veh

veh

0.5

CF (g/kg)

2.5 10THA IMP

7. IMP
CFbutandnot OBX-induced
THA reversedincrease in
Fig. 7. Fig.
CF andnot IMPTHA but
reversed
OBX-induced
increasein immobility
in TST.
Each ±
data
immobility
in TST. Eachdata column
represents
the mean
S.E.M. (n=8column ***P<0.001
represents the mean ± S.E.M. (n=8 – 10) .
– 10) . *P<0.05,*P<0.05, ***P<0.001

OBX 群ではこの低不安様行動が有意に改善されることが明らかとなった。
OBX 処置は認知行動障害のみならず，抗うつ薬によって改善される情動障害も誘発することが知られている。そこで尾懸垂試験における無動時間を指標にうつ様行動と菊花投与の影響を検討した。
本試験では偽手術群と比べて OBX 水投与群では有意に無動時間の割合が増加した。一方，菊花および IMP を投与した OBX 群では観察時間に占める無動時間の割合が有意に低下したのに対して，THA
投与群では有意な変化は認められなかった。本試験では菊花投与により抗うつ薬 IMP と同様の効果－ 22 －

が認められたことから，抗うつ薬様の効果を有する可能性が示唆された（Fig. 7）。

■結論
本研究では，釣藤散の慢性投与により幼若期発症 1 型糖尿病モデルラットの空間学習記憶が改善され，海馬神経シナプス伝達効率の異常亢進が抑制された。このことから釣藤散は NMDA 受容体の非競合的阻害によって興奮毒性を抑え，認知機能改善効果を示す可能性が考えられ，幼若期発症 1 型糖尿病モデルラットの治療薬として有効であることが示唆された。さらに認知情動障害モデル動物として用いた OBX マウスにおける成績から，釣藤散の構成生薬の一つである菊花エキスには短期記憶の障害ならびにうつ様行動に対する改善効果が認められたことから，本方剤の認知機能改善効果の一部を担っている可能性が推測された。

■参考論文[1] Imperatore G, Boyle JP, Thompson TJ, Case D, Dabelea D, Hamman RF, Lawrence JM,
Liese AD, Liu LL, Mayer-Davis EJ, Rodriguez BL. Projections of type 1 and type 2 diabetes
burden in the U.S. population aged <20 Years Through 2050; Dynamic modeling of incidence,mortality, and population growth. Diabetes Care. 2012; 35: 2515-2520.
[2] Sasaki-Hamada S, Sacai H, Oka JI. Diabetes onset influences hippocampal synaptic plasticity
in streptozotocin-treated rats. Neuroscience. 2012;227: 293-304.
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