平成 19 年度経済産業省委託事業

平成１９年度戦略的技術開発委託費
医療機器開発ガイドライン策定事業（医療機器に関する技術ガイドライン作成のための支援事業）

医療機器評価指標ガイドライン
再生医療（細胞シート）
開発ＷＧ報告書

平成２０年３月
独立行政法人

産業技術総合研究所ౣ↢ක≮㧔⚦⢩ࠪ࡯࠻㧕㐿⊒㨃㧳ᆔຬฬ★                                     㧔ᢘ⒓⇛㧕ᵻ㊁ ⨃㓉㧔ᐳ㐳㧕

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21

１．当該技術分野の概要
再生医療は、不可逆的臓器不全や欠損に対するテーラーメイド医療を提供し、生物学的な機能再建を目指す先端医療である。この目的を達成するためには、採取された自己または非自己細胞を invitro で標的である臓器に適合する形に組織化する技術の開発が必要である。その基本技術の一つが細胞シート化技術であり、特に我が国で開発された温度感受性高分子を利用した細胞シート作製
技術は、その独創性、実用性で大きな比較優位を有している。この技術は既に角膜再生において臨床的に有用であることが自己細胞を用いて確認されており、また、最近、心臓疾患の治療にも有効であることが自己骨格筋細胞シートを用いた臨床研究で示された。肺手術や食道手術に組み合わせて用いることにより、従来法にくらべ術後の状態が大幅に改善される可能性が高いとの報告もある。
この技術はさらに進歩して、重層した細胞シートも作製可能になり、重層した細胞に毛細血管を誘導する技術の研究も進んでいる。
前年度の活動により、この分野の一層の発展のためには、細胞培養加工の過程を臨床医療実施機
関内のみで調製するのではなく、外部機関での調製を可能にし分業体制にすることが重要であることが指摘され、そのための考え方を報告した。この考え方をさらに進めるためには、安全性、倫理性、性能の確保のみならず、細胞構造体（例えば細胞シート）のコストや製品品質の安定性も重要な要因になる。これを達成するには、製造プロセスの機械化・自動化が必須であり、すでにそれに資する機器開発がいくつかの企業で進められている。このような機器開発のポテンシャルは世界の中でも我が国産業界が抜きんでており、これを有効に製品化にむすびつけるためには機器開発のプ
ラットフォームの確立が重要である。そのためには、企業が個々別々に製品を開発するのではなく、開発ガイドラインに基づいた共通認識の上で性能を競い合うような製品開発環境が不可欠である。
このことが製品の安全性や信頼性を増し、関係する産業分野の発展に寄与するものと考えられる。
今年度は、このような考え方に基づいて、ヒト細胞の培養加工装置の一般的な開発指針に関わる
課題について検討を行った。

1

２．ガイドライン作成の意義
２.１ 背景種々の疾患や傷害に対し、従来の薬剤投与や人工素材を用いた機能代替による対症療法に代わって、細胞の増殖・分化・代謝などの潜在能力を利用し、細胞を増殖・分化・組織化させて移植する
再生医療が急速に普及しつつある。下図に示すように、培養細胞・組織を対象とした生産においては、細胞採取、細胞増殖、継代培養、さらには分化誘導など、培養を基本とした細胞加工（セルプ
ロセッシング）が不可欠となる。これを実施する場合には、細胞を安全に操作して品質を確保するための施設であるセルプロセッシングセンター（CPC）を整備し、熟練オペレータが煩雑な一連の作業を遂行している。この場合、操作の安定性、多大な労力（人件費コスト）やクロスコンタミネーション・作業ミスの予防など、安全を担保するために様々な課題がある。したがって、細胞加工を基本とした再生医療をより普及させるには、培養操作の簡略化や自動化がキーテクノロジｰ―である。
このような状況に鑑み、移植に供する細胞・組織の培養に使用する培養加工装置設計に関する基
本的要求事項をガイドラインとして明確にすることは、先端的な医療を提供・享受する医師および患者に対して作業の品質保証と信頼性向上を保証することになるとともに、我が国がリードする新
たな産業分野の創出にも直結する。今年度検討した細胞培養加工装置の設計に関するガイドラインを作成するにあたり、再生医療への将来的な要求ならびに機器開発技術の進歩を考慮し、長期的に有効な提言となるように留意した。

患者
培養組織
自家組織移植移植

同種組織移植
ドナー
組織片

組織培養
細胞

細胞分離
培養容器

継代培養

初代培養

セルプロセッシングの手順

2

自己組織化
（分化）

２.２ 培養細胞・組織の製造工程の特徴
前ページの図に示すように、培養細胞・組織の生産では、それぞれ、必要最小量の細胞または組織片を採取し、CPC 内にて目的とする細胞を分離する。得られた細胞を培養容器に播種し、初代培養を行う。足場依存性細胞においては、培養容器内で、接着、増殖、分化などの細胞挙動が起こる。
浮遊系細胞においても、接着を除いた同様の挙動が認められる。足場依存性細胞は、容器内において単層状態で増殖し、容器内で局所細胞密度上昇が起こり、接触阻害による増殖低下が生じる。細胞が培養器底面をほぼ全面を覆った時点で培養面から細胞を剥離して再懸濁し、他の複数の培養容器に再播種する。細胞は再び培養面に接着し単層状で増殖するが、この一連の継代培養においては細胞寿命や脱分化のような細胞特性劣化による継代の限界が存在する。適切な回数の継代培養の後、必要に応じ三次元組織培養を行う。組織培養においては、コラーゲンスポンジなどのスキャフォー
ド（足場）に細胞を播種し、自己組織化（分化）を誘導し組織再構築をさせることが多い。目的の培養組織に応じて、力学的あるいは生理的な機能の発現を確認し、患部に移植して治癒を目指す。
現状の培養細胞・組織の生産法のほとんどは熟練オペレータによる手作業であり、その操作基準
はオペレータの経験に大きく依存している。また、生産工程の特徴として下の表に示すように、原料は、その品質が個々に異なり、供給量も少量である。そのため以下のような特徴がある；(1)細胞の活性や寿命にバラツキがある、すなわち採取した細胞集団（原料）は不均質である（細胞集団における不均質性）、(2) 培養容器内では細胞の局在化が見られ、細胞増殖の抑制（接触阻害）が見られる（培養器内における不均一性）、(3)細胞の剥離、接着、伸展増殖、多層化などの操作を含み、これらは細胞の状態を把握しながら実施される（再現性に乏しい複数回の継代操作の必須性）、(4) 評価のために原料である細胞あるいは培養後の細胞を消費することは、生産原理および原料の希少性から避ける必要がある（サンプル採取、センシングに対する制約）、(5) 患部の大きさが個々で変わるため、個々の患者に対応した生産スケジュールを立てる必要がある（生産スケール（生産量と生産時間）の変動）、(6)全ての工程でクロスコンタミネーションや取り違えなどのヒューマン
エラーは許されない（コンタミネ－ション、ヒューマンエラーの絶対回避）、(7)通常の医薬品や医療機器のように滅菌することが難しい。これらの特徴は、微生物培養とは多くの点で異なったテーラーメイド的な生産工程であり、培養中の細胞に対する非破壊的、非侵襲的な定量的評価に基づく情報（指標パラメータ）による安定した工程設計が望まれる。

細胞／組織培養において考慮すべき特徴（１）細胞集団における不均質性（２）培養容器内における不均一性（３）再現性に乏しい繰り返し培養（４）サンプル採取，センシングに対する制約（５）生産スケールの変動（６）コンタミネ－ション，ヒューマンエラー（７）原料，製品の滅菌性3ၭ㙃⚦⢩࡮⚵❱ߩ↢↥Ꮏ⒟ߣൻቇຠ‫ޔ‬ක⮎ຠ╬ߩ↢↥Ꮏ⒟ߩᚻ㗅ߣࠍᲧセߔࠆߣ‫ޔ‬ਅ࿑ߩࠃ߁ߦ
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4

あるが柔軟に設定せざるを得ない。その際、製品の安全性に関する品質評価に対しては、製剤と同様に一般的な固定された基準により評価されるべきであり、有効性に関しては、患者背景や治療手技を踏まえた幅を持たせた基準（柔軟な基準）で医師により評価されることが望ましいと考えられる。有効性に関する品質評価には、採取細胞（原料）や培養細胞・組織（製品）に対する指標の探索･設定、指標測定ツールの開発、解析手法の構築なども必要となり、実際の製造時においてそれらの機能を組み込んだ培養装置は、今後有用となるであろう。
また、無菌製剤製造における CPC 設計では、下表に示すような種々の管理区分を設定し、無菌性を担保している。自家細胞・組織生産では、コンタミネーションリスクの高い自己細胞採取による原料調製、ヒューマンエラーを引き起こしやすい手作業に依存した工程、プロダクションスケール
が小さく患部サイズにより製品サイズが変動する、などの理由から、製剤生産での大型ロット製造で採用されるクリーンルームスケールで CPC（クリーンルーム型 CPC）での一貫管理とは異なり、重要な部分のみ無菌環境を実現し、作業者が無菌環境内に立ち入る必要がなく外部からの作業ある
いはロボットによる作業のみで完了するボックススケールでの CPC（アイソレータ型 CPC）による個別管理が、設備投資および管理コストの低減につながる。
２.３

培養加工装置の役割と期待

培養工学的観点から見ると、現状のセルプロセッシングは手技および観察力に長けた熟練オペレ
ータの手作業による工程が多く、産業規模での生産を実現するには課題が多い。培養加工装置は作業者が装置外部から培養工程を実施するもので、次ページ上段の図に示すように、容器密閉型培養加工装置と筺体密閉型培養加工装置、および両者の統合型に類別できる。
装置の役目は、次ページ図下段に示すように、培養工程におけるボックススケールでの培養環境の無菌化および調整・操作の自動化、情報の取得である。また、人手ではできない操作（周期的加圧など）が実現する。本操作により人体に近い培養環境を実現することができ、より質の高い培養
細胞・組織を生み出す可能性を有する。さらに、種々の先端的な細胞評価技術および予測・規格化
技術と統合したハード・ソフト両面からのシステム構築は、オペレータによる観察および予測する能力を含む洞察力を代替あるいは補助することを意味する。その結果、アウトプットとして操作の清浄区域の分類
ゾーン区分
無菌管理区域グレード A
直接支援区域グレード B
その他の支援区域
グレード Cその他の支援区域
グレード D

清浄度（0.5μm）
ISO

慣習呼称

備考

クラス 5

クラス 100

クリーンベンチ、セーフティーキャ
ビネット、クリーンブースなど

クラス 7

クラス 10,000

非作業時でクラス 100 の清浄度作業時でクラス 10,000 の清浄度

クラス 8

クラス 100,000

非作業時でクラス 10,000 の清浄度作業時でクラス 100,000 の清浄度

クラス 100,000

非作業時でクラス 100,000 の清浄度

5

自動化、省力化・安定化を導くだけではなく、品質評価系の構築や品質の安定化などのアウトカムが得られ、手工業的に生産している培養細胞・組織製品の高品質かつ計画的生産を可能にするものである。
クリーンルーム型 CPC 内における培養装置に対する要求事項は、無菌性、小型化、機械化、解析
機能、連続性、自律化、保証機能が挙げられ、雑菌汚染に対するリスク軽減およびコストの観点か
ら、容器や送液ラインなどのディスポーザブル化や無菌操作簡略化が要求されてきた。これらの要求を踏まえた培養装置開発には、温調、ガス調、滅菌、送液、ハンドリング、観察、モニタリング、
情報解析、制御、工程管理などの技術の統合が必要となる。さらに、今後、培養加工装置自体がア

筐体密閉型培養装置

容器密閉型培養装置

培養系3
培養系1

培養系2

培養容器1

培養系1

培養系2
培養容器2
培養容器
培養系3
パスボックス

培養容器3
パスボックス
装置系

装置系

培養加工装置の分類

情報（ソフト）

箱もの（ハード）
培養情報
取得
培養装置の開発(Reactor design)
環境の調整
操作の自動化
情報の取得

解析
測る技術
観る技術

細胞診断技術の開発(Diagnostic design)
予測する技術
記録する技術

環境因子
制御

判断
操る技術

Output:操作の自動化，省力化，安定化

予測・規格化技術の開発(Simulator design)

Outcome:
品質評価指針の構築，品質の安定化

組織工学製品の品質向上を目指した培養加工装置の設計
イソレータ型 CPC として設計されると、製造における設営コストや工程管理コストの圧縮に貢献できる。ここで培養加工装置に望まれる技術は、CPC 外部から内部に物資が移送される際の供給方法
ならびに移送時の無菌性の担保に関わるものである。この技術は、培養加工装置運転時における容器間や送液チューブ間のジョイント接続にも適用でき、培養により製造される製品の品質担保に重6ⷐߥᛛⴚߣߥࠆ‫ޕ‬৻⥸⊛ߦᎿ⒟ߩ⥄േൻߪ‫ޔ‬ਅ࿑ߦ␜ߔࠃ߁ߦຠ⾰ะ਄߅ࠃ߮ല₸ൻࠍ⋡⊛ߣߒ‫ޔ‬ኻ⽎ᠲ૞ߩㆬᛯ‫ޔ‬ฦᠲ૞ߩᯏ᪾ൻ‫࡞࡯ࠤࠬ࠴࡞ࡑޔ‬ൻ‫ޔ‬ᯏ᭴ߩᄙ᭽ൻ‫ޔ‬ㅪ⛯ൻ‫⥄ޔ‬ᓞൻߣ޿߁㗅ߢ㆐ᚑߐࠇࠆ‫⥄ޕ‬േ⊛ߦၭ㙃ᠲ૞ࠍታᣉߢ߈ࠆ೙ᓮၭ㙃ടᎿⵝ⟎ߪ‫ޔ‬ၭ㙃ᠲ૞ߩⅣႺࠍታ⃻ߔࠆࠕࠗ࠰࡟࡯࠲ဳ %2% ߥߤߩ๟ㄝᛛⴚߣߣ߽ߦ⒳‫ޘ‬ឭ᩺ߐࠇߡ߈ߚ‫ޔߦ․ޕ‬࿖ౝߦ߅޿ߡߪ‫⚦ޔ‬⢩᠞⒳߿ၭ࿾੤឵╬ߩᠲ૞ߦߟ޿ߡᯏ᪾⊛⥄േൻ߇ߥߐࠇ‫ޔ‬ၭ㙃ࠬࠤ࡯࡞߽ᄙጘߦࠊߚߞߡ޿ࠆ㧔⥄േၭ㙃ടᎿⵝ⟎ߩ᭴▽㧕‫ޕ‬߹ߚ‫⿷ޔ‬႐ଐሽᕈ⚦⢩ࠍ↪޿ߚ⥄ኅ⚦⢩ၭ㙃⒖ᬀࠍኻ⽎ߣߔࠆ႐ว‫ޔ‬ធ⸅㒖ኂ╬ߩ⚦⢩․ᕈࠃࠅ ࿁ߩ⛮ઍၭ㙃ߦ߅޿ߡㆡᐲߥ᠞⒳ኒᐲߣ೔㆐ኒᐲ߇ⷐ᳞ߐࠇ‫⚦ޔ‬⢩Ⴧ᏷ߦߪኈེࠍ⒖ߒᦧ߃ߥ߇ࠄ
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３．ガイドライン検討過程
合同検討委員会での提言を勘案し、再生医療（細胞シート）に関わる方針を開発ＷＧにおいて検討し、また、審査ＷＧとの分担を前年度以上に明確にし、体制を整備した。また、前年度の細胞シートや心筋シートに特化した検討とはことなり、培養加工装置ガイドラインの検討である点を考慮し、この分野に造詣の深い関係者を委員として加えた。今年度は、企業等の実情や開発を進める上での課題を調査し、委員会（開発ワーキンググループ、ＷＧ）に諮る形で検討を進めた。
３回の開発ワーキンググループを開催し、各会議では、以下の点の検討および議論を行った。
３.１ 第１回委員会概要(1)開催日時 平成１９年１１月２７日（火）１８：００～２０：００(2)開催場所 オフィス東京会議室（東京都中央区京橋）(3)参加者
委員：浅野茂隆（座長）、牛田多加志、梅澤明弘、紀ノ岡正博、小寺良尚、
高木睦、菊池明彦、稲見雅晴、水谷学
オブザーバー：木村雅英、小関英一
経済産業省：竹廣克、根岸喜代春、島真一朗
審査ＷＧ：加藤玲子
事務局：田口隆久(4)内容・細胞・組織バンクの世界の現状、並びに培養装置のガイドラインの考え方について議論した。
・本年度の検討方針の確認と細胞培養装置ガイドライン素案に関して議論した。
・細胞シート作製に寄与する装置が主眼であるが、細胞培養全般に使える装置のガイドラインを作製していくことが確認した。
・今後の広範な展開を見据え、包含的なガイドラインを作っておくことが重要である。
・有効な再生医療を早期に展開するためには、安全性、有効性、倫理性についても議論することが大切である。
・再生医療における移植を前提とした細胞・組織を培養する装置のガイドラインを検討する。
・すでに提案された指針や基準は、必要に応じて引用する。
・業の中で活用する培養装置に求められる事柄について検討する。
・バリデーションを簡単に行える機械であることも大切である。
・機械化、自動化することによる安全性の向上を視点とする。
３.２ 第２回委員会概要(1)開催日時(2)開催場所(3)参加者

平成２０年１月２９日（火）１８：００～２０：００
オフィス東京会議室（東京都中央区京橋）
委員：浅野茂隆（座長）、牛田多加志、梅澤明弘、紀ノ岡正博、小寺良尚、
高木睦、菊池明彦、稲見雅晴、水谷学
経済産業省：根岸喜代春、島真一朗
審査ＷＧ：加藤玲子
事務局：田口隆久、廣瀬志弘(4)内容
・本年度の検討方針の確認と細胞培養装置ガイドライン素案に関して議論した。
・原料の無菌性には触れず、工程の無菌性に重点をおくこととする。

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・検討機器では自家と同種との両方を扱う。
・厚生労働省から１３１４号の新しい通達が出る予定なので、それを参考にする。
・設置場所、設置基準を考慮する。
・パスボックスの滅菌についての考え方、外部への汚染防止、またメンテナンスについても言及すべきである。
・輸送、容器の部分も重要であり、今後検討することになった。
・医療現場との連携をとりつつ産業化を進めることが重要であり、そのための各プロセスや細胞の種類などに応じたミニマムリクワイアメントを整理しておくことが重要である。
３.３ 第３回委員会概要(1)開催日時(2)開催場所(3)参加者

平成２０年２月１９日（火）１８：００～２０：００
オフィス東京会議室（東京都中央区京橋）
委員：浅野茂隆（座長）、梅澤明弘、菊池明彦、紀ノ岡正博、小寺良尚、
稲見雅晴、水谷学
経済産業省：清丸勝正、長町英彦、根岸喜代春、島真一朗
審査ＷＧ：土屋利江、 事務局：田口隆久、廣瀬志弘(4)内容・細胞培養加工装置ガイドライン案について議論した。
・アイソレーター、CPC 等の用語の定義、指示範囲等について検討した。
・培養加工装置の現場のニーズ、細胞組織バンクの制度整備について検討した。
・分化培養と増殖培養の違い、材質等について、今後検討することになった。

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（４）出荷先施設情報
製造業者等は、製品について、製品ごとに、製品の移植等を受ける患者へ当該製品が確実に提供されるよう、当該患者が移植等を受ける医療機関等の出荷先施設名、診療科名、主治医の氏名等（以下「出荷先施設情報」という。）の必要な情報を把握するとともに、その記録を作成すること。
（５）直接の容器・被包への表示
製造所から出荷された製品について、医療機関等への到着後における混同の発生を防止するために、製品の直接の容器・被包に患者情報及び出荷先情報を適正に表示すること。直接の容器にこれらすべての情報を表示することが技術的に困難な場合
においては、これに代えて混同の発生を防止するために必要な措置を採ること。
３．汚染防止のための管理（１）構造設備等の管理製品の製造所の構造設備については、製品に係る一連の製造工程において作業が完了するごとに、細菌、真菌及びウイルスの不活化又は除去を行う等、不活化又は除去が行われていない製品等による汚染を防止するために必要な措置（以下「汚染防止措置」という。）を採ること。

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（２）原料・工程の管理
製品又はその原料の特性により、除去（濾過滅菌等）又は不活化（最終滅菌等）のいずれも行うことが出来ない場合には、原料の管理又は製造工程に係る管理において、以下の点に留意し、汚染防止措置を採ること。
・ 培地添加成分等の原料については、微生物等又は他の細胞・組織の混入がないことを確認する等、製造工程における汚染等の発生を防止するために、必要な措置を採ること。
・ 細胞・組織の混同及び交叉汚染を防止する観点から、原則として、同一培養装置内で同時に複数の異なるドナーから採取した細胞・組織を取り扱わないこと。
・ 製造施設は、研究施設と兼用しないこと。ただし、細胞・組織加工治験製品を製造する製造施設については、十分な汚染防止対策及び混同防止対策が講じられていることを文書等の記録により客観的に証明できる場合は、
この限りでない。
・ 医療機関から製造所への細胞・組織の受入れに当たっては、細胞・組織の混同及び交叉汚染を防止するために必要な措置が適切に講じられるよう、ドナーの病原体検査その他の必要な措置を採ること。なお、細胞・組織の検査結果判定前に、ドナーの病原体検査の結果等に基づき細胞・組織の加工を行う場合においては、細胞・組織を取り扱う者がその事実を判別できるよう適切な措置を採ること。
・ 製造作業に従事する職員以外の者による感染性因子の持ち込みにより製品が汚染されることを防止するため、製造所については、製造作業に従事する職員以外の者の立入りを制限する構造を有し、かつ、空調、洗浄・消毒設備等を備えていること。
４．適切な加工等（１）適切な加工に必要な構造・設備
細胞・組織の生存能力を保ちつつ無菌的に培養、加工又は製造できる構造及び設備を有すること。また、使用する設備等について、必要に応じて、事前に適格性評
価を行うとともに、運転が適切に行われていることの確認をすること。異常発生時には、加工又は製造に影響が生じないよう、速やかな対処を行うために必要な措置を採ること。
（２）適切な加工条件・期間
細胞・組織の種類等に応じ、適切な管理条件の下で培養又は加工を行うこと。また、加工は、細胞・組織の寿命、特質等にかんがみ、損傷、劣化又は死滅しない期間で行うこと。

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（３）工程管理、試験検査等
ロットを構成しない製品の場合については、一般的な製造管理及び品質管理の手法において製品のロットごとに行うこととされる事項について、製品ごとに行うことをもってこれに代えても差し支えないこと。
製品及び原料の試験検査、その記録並びに参考品の保管について、ドナーへの侵襲性が高く採取可能な検体が少ない場合その他必要な検体採取が困難な場合においては、採取した検体の増殖を行うこと、又は、検体の試験検査に代えて工程管理での確認によることとして差し支えないこと。また、このとき代替する工程管理手法の妥当性が、バリデーション等の適切な方法により確認されている場合には、製品の規格試験以外の品質管理の工程においても適用して差し支えないこと。
（４） 搬送容器搬送に使用する容器、車両等は、目的地に到着するまで製品の品質保持を担保するために、必要な性能を備えていること。
５．その他
・ 製品標準書の製造手順及び生物由来医薬品等に係る規格について、ドナーの年齢、性別、既往歴、体質等の個人差により、逸脱が予測される場合、あらか
じめ逸脱事例に関する対応を定めておくこと。
・ 既に移植された製品の回収については、患者のリスクとベネフィットを十分検討し、回収が適切であると判断される場合には行うこと。
・ 個人情報の漏洩を防ぐため、関係法令を遵守するとともに、コンピューターのパスワード管理やネットワーク管理を十分行うなどの措置を採ること。

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69

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