2022/4/11更新

ウルトラミクロトーム(ULTRACUT-S)
簡易マニュアル
光電子分光分析研究室

連絡先

吉田すずか 内線6882
鈴木啓太 内線6882

装置使用の前に以下のルールを守って下さい。
• 研究室内は土足厳禁、飲食厳禁• 装置の故障、不具合を見つけたらすぐに施設職員に連絡。
緊急連絡先は研究室入口ドアの横に記載してあります• 装置を乱暴に扱わない• 研究室の物品を勝手に持ち出さない• 貴重品の管理は各自でする。休日や夜間利用の際、研究室の施錠は各自で行う• 初めて装置を使う際は事前に職員に連絡を取って講習を受ける• 本装置の利用に予約は不要です。利用に不安がある際は施設職員に相談する• 回転研磨機を使う際は、講習を受けること• ガラスナイフの刃は鋭いので、怪我をしないように取り扱いには気を付けること• ダイヤモンドナイフは落とさないように気を付けること使用者は記録簿に各項目を記入して下さい。
利用予約は必要ありません。
初めての利用の方は施設職員から装置講習を受けて下さい。

1サンプルの前処理(樹脂埋め)
10mm
2∼5mm

板状の場合、試料は10×2∼5mmくらいの大きさに切り出してください

出来る限りサンプルは歪ませず、真っすぐの状態にしてください

カプセルの蓋をちぎり、蓋の真ん中付近をカッターで貫通させます

カプセル

蓋の穴の開け過ぎ、カッターによる怪我に注意してください
クリップ

サンプルの3分の１付近で接着

クリップをペンチで棒状になるように広げて、真っすぐになっている部分を長めにニッパーで切断します
切断したクリップの棒の先(真っすぐな部分)にアロンアル
ファを付けて、試料と接着させます
接着させたクリップの棒の先を蓋の穴に差し込みます

次にエポキシ樹脂セットの4種類を使って樹脂を作ります( DDSA、812、NMA、DMP30 )樹脂を使いたいときはスタッフに教えてください

2

DMP30を入れた時に飴色になれば成功

DMP30を入れる前色が変わらない
or別の色になった
場合は固まらない

シリンジでDMP30以外の各溶液を適量入れ、最後にDMP30を入れます

出来る限り気泡が入らないように液体を出し入れする時は気を付けてください
左の写真のような色にならなかった場合は作り直してください

DMP30を入れた後全ての溶液を入れた樹脂液をカプセルの9割程度まで注入します

カプセルにある線まで入れます
ゆっくり注入すると気泡が入りにくいです

試料のついているクリップが刺さった蓋を閉めます

試料は真っすぐ、真ん中に入るよ
うに入れてください
サンプルが上から下まで真っすぐに入っているのが理想です

乾燥機

蓋がしっかり閉まったのを確認したら乾燥機の電源を入れて、乾燥機に入れます
50℃で8時間以上乾燥させます
やけどに注意固まったのを確認したらカプセルにカッターで切れ目を入れて試料を取り出します3トリミング(回転研磨機)
ミクロトームで薄片を作る
時は、出来るだけナイフの刃に触れるサンプルの面積を小さくすると刃こぼれしにくく、きれいに薄片を作成できるので前処理としてトリミングは必須です
回転研磨機

取り出したサンプルの先端を鉛筆の芯のように尖らせるために回転研磨機で四面を削ります
研磨紙は#1000または#1500がおすすめです

この時、サンプルの面が出ないように研磨に気を付けてください
回転研磨機の研磨紙は消耗品です
使用する際は回転研磨機の記録簿に記入してください

加工前

加工後

4サンプルのセッティング
ミクロトームのコントロー
ラーの電源を付け、対物レンズと接眼レンズについているカバーを外します
コントローラーのILLUMのボタンを押してライトを付けます
電源は後ろについています
あおり角調節ネジ
試料固定ネジ

回転ネジ

トリミングしたサンプルを試料を固定するセグメントに入れます
試料固定ネジを回してサンプルを固定し、最後に指でサンプルを押さえながらレンチで締めてセットします

サンプルを真っすぐ固定しないと次のトリミングと薄片を作成するときに影響します

セグメント解除

ステージの固定レバーを手前に倒して解除します
ステージをサンプルから十分引き離した状態でガラスナイフをセットします
ナイフをセットしたら、次にステージのRotationを0度、Tilt(刃角度)を6度にしてください固定レバーロック

Rotation

Tilt

次に先端にあるサンプルの面出しをするので0度にして削ります
ダイヤモンドナイフで薄片を作る時の刃角度が6度なのでそれに合わせてガラスナイフも6度にします5トリミング(ガラスナイフ)
接眼レンズで見ながらピント合わせつまみと視野調節つまみでナイフの刃にピントを合わせます

ピント合わせ
つまみ

視野調節
つまみ

倍率調節
つまみ

『7』の位置

ハンドホイール

試料固定

Tilt

Tilt固定Rotation

何回もステージを動かすので適宜、調節してください
フォーカスは常に刃側に合わせる
樹脂埋めした場合、樹脂は下側にしてサンプルを上側にすると削る時に樹脂がサンプルからはがれるリスクが減ります
トリミング以外にも薄片を作る時も同様です

ハンドホイールを『７』まで回して、サンプルの位置をナイフの刃と同じくらいの高さに合わせます
ステージの左右にある調節
つまみでステージを動かして、ナイフの刃を使用していない左端をサンプルの先端に合わせます
刃は左から使っていくのが基本

調節つまみ

横

近づけるときは上のレバーで、遠ざけるときは下のレバーで操作

横から見ながらステージをサンプルに近づけて固定します
このとき、サンプルをナイフにぶつけないように注意してください
サンプルとナイフの刃が両方見える倍率まで上げ、接眼レンズで見ながらコントロー
ラーのAPPROACHのCOARSEレ
バーでサンプルと刃が当たるぎりぎりまで近づけます6

APPROACHでステージの動く距離を設定します

APPROACH

樹脂を削るときは3~5µｍ、試料が出てきた場合(削り屑が試料の色味を含んだとき)は1~2µｍにすると削りやすいです

送り量調節
画面(SEMI)

送り量調節
画面(ULTRA)

トリミングの段階のみ数値は特に動かさずに初期値でも大丈夫です
時間をかけて丁寧にトリミングをした方が薄片の出来は良くなります

このボタンで送り量を調節

繰り返し

次にFEEDでサンプルの送り量を設定します
速く削りたい場合はSEMIのボタンを押して右側の送り量調節
画面で値を調節、丁寧に削りたい場合はULTRAのボタンを押して左側送り量調節画面で値を調節してください押す

ハンドホイールを1回転させたら、STEPのボタンを押して、またホイールを1回転させて、STEPのボタンを押す…を繰り返して先端を削っていきます

1回転するごとにサンプル側はFEEDで設定した値の分、前に動きます
速く回しすぎると刃が欠けるので注意
回す

ホイールが0~3付近にいるタイミング
でSTEPボタンを押しましょう

サンプルの面が出たのを確認したらステージを動かしてサンプルからナイフを離します
ステージを左側に30度動かしてからサンプルに近づけて先端を削ったのと同様に出来る限り細くなるように削っていきます
30度ステージを動かすときは刃がサンプルにぶつからないように気を付ける

削り終わったらステージを動かしてサンプルと刃を離します7このくらいOr
これよりも細くトリミングする

ステージを右側の30度まで動かして左側で削ったときのように削ります
右側で削られたサンプルの面と左右対称になるまで削ります
削り終えたらまたサンプルからステージを離して、セグメントの回転ネジを緩めて90度回転させてから固定します
そして先ほどと同様に左右を削ったらトリミング終了です
計4回トリミングします
大体40分から1時間半ほどかかります

トリミングが終わったらステージをサンプルから離してガラスナイフを外します
ガラスナイフは専用のごみ箱に捨ててください

8薄片作成トリミングが終わったら次はダイヤモンドナイフで薄片を作ります
ダイヤモンドナイフ

SEMのみ観察の場合はガラスナイフで作成しても良いです

サンプルが刃より下になるようにホイールで調節します
ステージのRotationを0度、Tiltを6度にして、十分にサンプルとステージを離した状態でダイヤモンドナイフをセットします
樹脂を下側に、目的のサンプルを上側にして固定すること

ビーカーに超純水を入れて用意し、ミクロトームの右側に置きます
ステージをサンプルに近づけます
サンプルを刃にぶつけないように注意
刃は使っていない左側から使用

水差し
リフレクソマート

超純水

最低倍率にし、ライトを上下または下のみ点灯させます
右横についているホースの先を水が入ったビーカーの中に入れ、逆側についている水差しの先をダイヤモンドナイ
フのポート内につけます
リフレクソマートを反時計回りに回してポート内に水を入れていきます9表面張力で膨れるくらい水を入れる

表面張力で刃先が反射するまで水を満たし、30秒ほど水が刃に馴染むまで待ちます
次にリフレクソマートを時計回りに回して、刃先部分が白く濁るまで水を少しずつ抜いていきます

この時、刃先の一部が黒ずんでいる場
合はナイフの刃にごみが付着しているか欠けている可能性があります
汚れている時は中性洗剤と超純水で洗い流す、またはプラズマクリーナーで汚れを取ります
刃先の水が凸の状態

刃先の水が凹の状態

WINDOW

試料を近づけ終えたら水差しはゆっくり取る

コントローラーのFEEDをULTRAに切り替え、左側の送り量調節画面で切片の厚さを設定します
サンプルによって変わるが、Alの場合は25~50nm設定がおすすめ

WINDOWのSTART ENDでサンプルが刃の下側に来ている状態
で下側のボタンを、ホイールを回してサンプルが刃から1mm上にある状態で上側のボタンを押して切削範囲を設定します

この設定をしないと次の自動で削る際にサンプルが削れないので注意SPEEDの値を設定します

早すぎるとサンプルが欠けるので注意
サンプルに応じて0.2~0.3mm/sまたは0.6~0.8mm/sがおすすめ

高倍率にして、全ての設定が終わったらサンプルを刃が当たらないぎりぎりまで近づけます
0距離になったらCUTボタンを押して切片を作っていきます
リボン状のように繋がって薄片が出来ていたら成功です

CUT

ある程度作製出来たらCUTをもう一度押して停止させます
10

薄片回収
サンプルが刃の下側に来るように下げます
グリットの端をピンセットでつかみ、連続した切片に合わせて真上から静かに降ろします

グリットを少しゆがませると回収しやすいです

グリットで回収

グリット

表

水

裏

すくい上げるように静かにグリットを水面から取り出して裏面からろ紙で水を吸い取ります

最低でもグリット2枚分、回収するのがおすすめです

グリットの表面に触れないように保管用の箱に入れて自然乾燥させます

ろ紙11終了手順• ステージを動かしてサンプルからダイヤモンドナイフを離します• ポート内に入っていた水を捨てて超純水で刃先を中心に薄片などの付着物を洗い流します• 未使用のビーカーに発泡スチロールを入れ、エタノールを注いで浸み込ませます• ピンセットまたは爪楊枝で発泡スチロールを取り出し、かなり小さい力で発泡スチロールを刃先に当ててスライドさせます

一度使った面はもう二度と使わないでください
面部分を回転させながら使うとやりやすいです
発泡スチロールは使い捨てなので使い終わったら自動式のごみ箱に捨ててください(※ガラスナイフ専用のごみ箱に入れないでください)• もう一度ダイヤモンドナイフに超純水をかけてすすいだ後にエアーガンで十分に乾かしてからケースにしまって下さい• RESETボタンを数秒間長押ししてセグメントを初期位置に戻します• APPROACHのCOARSEのレバーを数秒間下げてステージを下げます(下側のランプがついたらレバーを少し上げて前に動かしてください)• ライトを消して、サンプルをセグメントから回収します• 最後にミクロトーム内をブロワーなどで飛び散った薄片や屑を吹き飛ばします• コントローラーの電源を消してカバーを全て付けます• 最後に使用記録簿に必要事項を記入して終了
です12