産業廃水の魚類に及ぼす影響に関する研究（第報）（血清蛋白の濾紙電気泳動像に依る影響の判定に就いて。）

Studyon（Onthemethod

藤谷

theeffects

ofindustrial

determinationof

theirof

超・千Thoughthethestudeies

lethalmore玉nnecessary

take

theIn

in

for

paper

rece亘tofthis且eldorminimum

there

were

dose

detail，but

be

the

years，paper

clinica三medicine，andpresent

but

parts

someμ＝0．05）

andsolution，and
thereseparate
andmethodelectric

1）

The2）

The3）We

theof

serum

as

ong

of

electrophoretic

methodhad

methodappliedon｝usuallysuitablyforeurcase．The

wereusedon

madeof出edish，wasbloodcompletely、A

thus

taken

physiological

them

the

ecologithewerechemistry

methodinveronalwould

attempted
inthebufferinvestigat−

medicalstudy・

solution（pH＝8、6elcctrolysi）solution

and

the

dyeingofa且sh，As

from

ampitaled

anal

part

two

parts，the

serum

was

centrifuged

of

the

serum（0・02m1・）was

put

onof

the

paper

the

curveswas

given

representing

tothis且eld，science，especiallyof丘sheries

takenfactorapproachanimals・We

medicalconcemedalintopipetteandtheco11ected

divided

O．5mA．／cm，wid thpaper

in

the

glassofdevelopこdassolutionofphysiologicaltheacurrent

theaquatictowas

for5hrs＿The

theto

paper

e工ectrophor−

them

were

showninngure．

affected

upon

the

paper

elec−

iu

malnu−

say＝・・

pattems

and
for

Hnd

fish，

one、Physiological

same

t虹e

serum

the

discussきdupon

almostclot

people・most

had

on

also

the

manye鉦ects

wason

by

their

acid

pattern

could

the

Shir6CHIKUNI．

treatiseconcentrations（dosages）of

trophoretic

paper

of

was

alone

and

physiologicalfew

aceticonelectrophoretic

nsh，TheyB

could

wetheforP

pattems

byreported

B

themeffec㌻sdose

modiHed

etic

upon

been

were

From

chemicals

had

themfromandactiveof

theblood，1eft

郎

waste

FUJIYA

investigationelectrophoreticion・The史serum）

Masaru

with

国

hurt

of

the

suffocated且shsomedi鉦erences

acid

and

alkalinegilltissues

which

had

equaL

werealmost

differed

from

the

one

betweenthepattems

waste

could

befor

for

norma1丘sh，norma1且sh

and

for

ash

trition．

4）

The且shenta11yandobtainedmilla鉦ected

also

for

by

there

the6shpulp

wasa

sustainedmill

notabledifference

insea

the

discriminatedbetweenthefor12hrs．underfactory，

畳内海区水産研究所業績第69号

一41一

from

the

normalpattemfornorma1負shtheinnuence

of

one

waste

experim−andthatfrompulp5）By

thisbeaconcentrationl

6）

Therefore

toed，evenifmethod，t喚e

in

their

ourof

physiologicalasL

estimations，theconcentration

e耳ective

low、as30−50mぎ／L

in

sea

dose
inof

pulp

mill

waste

for

nsh

wasestimated

C．0．D，value．

effect

of

water

might

the

be

wastes

upon

as

as

low

the丘shshould

not

be

ignor−

thewhich

had

not

been

one

noticedpractically・緒

産業廃水の魚類に及ぼす影響に関しては，古くから多くの研究者に依って検討が行われて来た。古くは，魚類の致死量に始り，嫌忌量，反応量，不好量と，研究の発展と共に微量な廃水及び薬品に依る影響を知り得るようになったが，この研究経過は当初魚類の廃水に依る死を研究対象とし，順次死に致る以前の段階を対象にして来ている点が明に示されている。すなわちこの種の問題の性質上特定の場合を除いて、は魚類の死を間題にすることは余り意味がなく，致死以前においての影響を把握することが必要であることを示すものである。生物生活へ影響する限界濃度を検討した方法は主として魚類の生態的な面に集約されたものであって，今後この面での研究の発展することは充分期待し得るが，筆者等はこれと併せて，魚類の生理的な面からの検討も必要と考え，その一つとして血清蛋白に現われる、廃水の影響を検討した。近年医学は血清蛋白に現われる諸種の現象を用いて臨床的診断の面に大きな成果を上げており，その応用面もまた大きい。最近

水産動物についても幾つかのこの種の研究が行われており，魚類血液の生化学的研究での成果は大きい。筆者等は医家が行う臨床的利用の面における分野において，これを魚類に応用することを試みたものである。

実

験方法1）濾紙電気泳動像を求める方法。
濾紙電気泳動法は濾紙を電解液の保持体として，その上に試料を付け，その両端に直流電圧を与えて試料中の物質を移動させるものであり，移動の仕方が物質に依って異る場合，試料中の数種の物質を分離し得ることになる。本邦では長い間，通電クロマトグラフイーと呼ばれて来たが近年この方法がTiseliusの電気泳動法と対比されるに至って，濾紙電気泳動法と呼ばれるようになった。従って基本的な面においては通電クロマトグラフイーの原理と何ら異る所はないが，この方法の応用される分野に依って，電解液その他に若干の特徴がある。

装置は直流電圧を与える電源部分と泳動を一定あ条件の下で行わさせる泳動函とからなり，電源としては安定した直流が得られるものであれぱ差支えない所から，0〜500V程度の電圧の得られるものを自作して使用した。また泳動箱は初期の実験にお■てはアクザル板で自作したものを用いたが，後，市販品を一部改進したものを使用した。電解液は血清蛋白の分離にはベロナール緩衝液が通常用いられるが，この場合電解液めpH，イオン強度などの違いに依って良否があり，この点に関する若干の検討を試みたが，この結果に関2）※）

しては，斉藤の詳細な報告が有るので省略する。使用した電解液はベロナール緩衝液のpH＝8，6μ漏0．05※※）のものを使用し，呈色にはB，P．B酪酸液を用いた。

以上のような装置に依って血清蛋白の分離を行ったが使用した血清は供試魚の尾部を切断して，ここから流出する血液を時計皿に集め，これを乾燥しないように留意しながら約2時間放置すると血液が凝固し，血餅と血清が分離する。この血清を小試験管に取り，遠心分離機に依ってゆるく廻転し，少量残存する血清以※※）※）一Veronal．Na：10．3gr．
Verona1：1．84gr．

水で14とする。

Bromphenol

blue

O．05gr．

昇示 1，0gr．
氷酷酸
2c．・C．

水で100c，c、とする。

一42一

外のもあを分離し，この血清を濾紙に添付した。添付する血清の量は可成り結果を左右するが，『種畏検討の結果0，02cc程度が良好であった。これは市販の採血凧ピペット（メラソジ三一ル）を用いで正確に採取し得る。血清を添付した濾紙に与える直流電圧は，これも可成り結果を左右するが，一般に濾紙中1cm当りの電流で示されている。この点も種た検討の結果，濾紙（東洋濾紙No，5！）は4cm巾のものを使用し，0．5mA／cmの電流を用いて5時間泳動を行わせることとした。与える電流と泳動時間には逆相関の関係があり，高電流を使用すれぱ泳動時間を短縮し得るが，泳動像の鮮明さが失われる儂れがあり，結果としては低電流で長時間泳動させた方が良好なものが得られる。筆老等はこ．の方法を応用するに当って，大量に試料を処理する必要上，像に余り大きな影響を与えない範囲で，短時間，高電流を用いることとし，結果として上記の条件で行うこととした。0，5mA／cm，5時間の泳動は結果の検討その他に支障はない。比較は泳動像の比較及ぴそのデンシトメーターを用いて求められたグラフ（Paperelectrophoreticcurve）に依って行った。

2）実施した実験の方法。
実験は実験室内において種々の条伴を与えて，その影響を検討し，その後実際に産業廃水の波及する水域に生筆を用いて供試魚を入れて検討を行った。
イ）実験室内における実験。

屋外に痴ける実験の予備的意味をも含めて次のような条件を与えて実験を行った。
与えた条件
アルカリ

供試魚（NaOH）

酸（H2SO4）

窒
自息然

死

時期

第一図

コイ

Nov，

56．

コイ

Nov．

56．

タイ

May

57，

コイ

Nov，

56．

実験生簑設置位置

雛＆■口

2口

5□．4彰

酸は5ppm，20ppmの濃度について，またアルカ
リは40PPm，60PPm，90PPmの液中に，窒息させたものは，止水中に放置して，何れも横倒しの状態に5□致ったものの血液を取り前述の方法を用いて泳動を行った。自然死のものは夏期養魚池内で蜷死寸前に庚あるものを同様に処理を行った。
ロ）屋外における実験。

屋外における実験は，室内実験に依り得られた結27□

果と経験を基として行い，2回に亘り広島県下呉市広町のパルプ工場（クラフト・パルプ）廃水の波及
ノρ〃する水域において実施した。今回の実験は屋外におけるこの方法の利用の適否について主として検討す2〃rる目的であるために，海水の分析その他についての細部に亘る環境条件は測定していないが，第1回実5〃験における生簑の位置の関係は第1図のようである。廃水口のニカ所の中，湾奥部のもの（図上B）が主廃水口であり，外側（図上A）のものに比して廃水の濃度は高く，この近辺の水域に与える影響は主としてこの口からのものである。使用した生餐は，縦，横L

Fig．1

Thestationset

thecrawls

inourarstinvesti息atione鉦luence

pipeofthe￡sh
O：The

Om高さ0。5mのものを用い，供試魚としてThe

stationはタイ（平均体長約25cm）キューセソ（平均体長contro1，as約15cm），アイナメ

by（平均体長約20cm）を用いた

一43一

thewaste．

hadsustain

waste，No。7wasittodesigned

not

been

for

the

influenced

が，供試した魚種については入手の関係で上記の三種を使用したもので特別の意味はない。海中への放置時間は何れも12時間としたが，これは干満潮何れにも遭遇し得るようにしたためである。
ここで生貧の位置と廃水の関係は次のようなものである。

廃水口よりの距離与えられた条件

12時間後の供試魚の状態

A廃水口

直前

常に濃い廃水が波及

3種共麗死

2

B廃水口

直前

3

A廃水口より100m4B廃水口よりIOOm

生管番号

5

廃水口より200m

6廃水口より300m

7廃水口より800nエ

実施時期

June，

同

同

上

3種共生存

常に薄い廃水が波及

タイのみ麗死上

同廃水が波及する時としない時がある

3種共生存
生箸破損のため流失

上

同上

3種共生存廃水は全く波及しない

57

第二回

以上のような条件下に沿いて実験を行ったが，実験生箸設置位置

β遜砺・

表中に示したように，第1回の実験は，生簑番号1〜4迄のものは，麗死しているものが多く，従って艶死魚について実験は行っている場合が多い。今回行ったこの炉紙電気泳動法を利用する方法は，目的として魚類の麗死以前における影響をノロ

2□

ノz検討するものである所から，麗死に致らない魚に／／ついて検討する必要があり，そこで第2回目の実験を行うこととした。
5口

第2回の実験は，クロダイ（平均体長約20cm）

4□1を用い，第2図のような位置に生簑を入れ，各生篶中に各々3尾宛の供試魚を入れその中の生存魚5□のみを用いて行った。海中への浸漬時間その他の6口／〃条件は前回と同様である。第2回実験の生箸位置と廃水の関係は次のようーなものである。

〃〃2〃〃

5〃〃

7□
Fig，2．

The

stationset

thetheash

oursecondpipeofwaste．

No・7wasdesigned

aind

in

○：Th6efHuenceThethenced一44一statiQn

contro1，bytheasitwaste。

crawlstosust−invesセi窪atior，

had−not

been

forinflue−生簑番号

廃水口よりの距離与えられた条件

12時間後の状態

A廃水口より100m

常に薄い廃水が波及

1尾雛死

2

B廃水口より100m

3

A廃水口より300m

4

B廃水口より300m

5A廃水口より500m

6B廃水口より500m

7

廃水口より1200m

実施時期：Avgast、2尾驚死

上

同廃水が波及する時としない時がある

1尾襲死

礎死なし

上同

3，4・と同様であるが波1尾弊死及する時は極く短い

麗死なし

上同

麗死なし

全く廃水は波及しない
57，

以上のような条件において，屋外の実験を行った。

実験結果
イ）

室内における実験の結果

室内においてコイに種々の条件を与えて行った実験結果をデソシトメーターで求めた炉紙電気泳動曲線（Paperelectrophoreticcurve）を第3図〜第8図に示す。

第3図に示したものは対照として選んだ正常鯉の泳動曲線であるが，コイの場合後述する他の魚（海産魚）に比較して，正常と認められる状態のものでも泳動曲線に相異が有る場合が認められる。これは飼育中におEig．

Fig、

3Fig．

3−8．

Fig4〜6The

paper

electrophoretic

whichwascultured

incurvevariousof

Carp一

conditions．

Thepaperelectr・ph・reticcurve・fCarp
normalThepaper

culturedFig．3，

in

4condition．

一45一

in

electrophoretic
Alkaline

curveofsolution（NaOH）．

Fig．4、Cultured

in40ppm

solutiQn．

Fig．5，Cultured

in60ppm

solution．

Fig，6．Cultured

in90ppm

solution．

carp

Fig．

5．

Fig

7．

Fig．6．

Fig．

Fig・7・The

paper

culturedin8，Fig．8．
electrophoretic
acid

solutioncurveofcarp（H2SO4：20ppm）．

The

electrophoretic

curveofcarp

inmalnutrition，ける栄養状態などに起因されるものと考えるが，多数の正常と認められるコイについて検討を行った結果，第β図に示した泳動曲線を示すものが多い所から，これを対照として選んだ。

歪常鯉の場合，曲線の山は第3図の通り4つ認められるが，これがそれぞれ通常血清中に含まれる，Alb−min及びGlobulingroupの中の何れに相当するものであるかは明らかではないが，これを仮に名付けて1〜lvの山として表現するごととした。

第4図〜第6図に示したものは，アルカリ性の液に浸漬したものの泳動曲線であり，各図それぞれ苛性ソーグの濃度が異る。これを対照と比較すると，苛性ソーダの濃度が，40ppmに達すると，4つの山は形が崩れ始め∫．60ppm及び90ppmに達すると，山は3つに変るのが見られ，対照との間に明に相違が認められる。

一方酸性液に浸漬したものは硫酸20ppmの濃度の場合の泳動曲線を第7図に示したが，これも4つの山が崩れ始めて硲るのが見られる。図示はしていないが5ppmの濃度では山の型に変化は見られなかった。
第8図に示したものは，前述のように養魚池内で自然に蝶死したものであるが，外見上これは他の魚に比して痩せており，栄養不良と考えられるもので，夏季の気候に耐え兼ねて弊死したものと思われるが，このコイの泳動曲線が第8図のようなものであり，山の型は2つになり，対照との相異は顕著である。
マダイを用いて行った窒息死の場合の実験結果を，図版！に示す。この実験で対照として用いたものは，入手後海中の生餐に飼育したもので採取後2日を経たものである。海産魚の場合はコイと異って，正常な海一46

Plate．1．

水中に飼育したものの泳動像は殆んど薪庭してお撃一・・，懸雲

襲幸霰

1

難走錨燃

Plate

I〜V．

The

comparision

pattemPlateofof

paper

electrophoretic

serum

2I．

The

paper

MADA正．

1：

Normal2：

The丘sh3：

Ditto．

elecもrophoretic

patternofash．
su任ocated in the dead water．

鱗死したものの差の現われと考えられるが判然と34したことは明らカ・にし得なカ・った。

以上のように魚類に何らかの悪条件をその環境に与えると，血清蛋白の炉紙軍気泳動像に変化が生ずることが略明らかとなったので，これを実際の産業廃水が波及する水域に就いて，応用実施す5るこ．とを試みた。

ロ）

屋外におけるパルブ工場を対称とした実6

験結果

前述のような室内に器ける実験結果に基づいて，この方法を実際に産業廃水の波及する水域へ応用した結果は次のようなものである。

i）7

第1回実験の結果

前に示したような方法に従って行った第1回の実験結果は図版E−1Vに示すようなものであり，Plate］工一V
The paper electrophoretic pattern6f Bsh P

生箸が廃水口直前に位置しているものでは，対照

sustained in the sea under infiuenced of thepulp mill waste in our盒rst investigation．の泳動像と著しい相違があり，泳動像は対照の4つに分離された型に比して，3つの分離にしか出て海らず，生箸が廃水口から沖合へ遠ざかるに従Plate

II，

The pattern of6 MADAI ．
1；Normal Gsh．
2＝The且sh sustained at st．1．って順次対照の型に近づいて行くのが見られる。

3：The

特にタイにおいてはその傾向が顕著であるが，他の2種すなわち，キュウセソ，アイナメについて

4：The￡sh sustained at st．3．
5：The fis血susiained at st．4．

も同様の傾向が見られる。このように廃水の中に

fish

sustained

atst．2．

6：The

fish

sustainedatst．5，7；Theash

sustainedatst．7．

7・47r

Plate，皿。

遊泳していたものの泳動像は明に正常なものと異・襲1鶏った型を示すが，この場合廃水口直前のものは驚齪二撫、死魚を用いているために，この違いが死後生じた

雛蕪鱗、ものかも知れぬ懸念がある。そこで第2回の実験は，この懸念を明白にする目的の下に行った。
Plate．

N。

3妻

睾

藝

Plate皿．

The

pattemofAINAME，

1＝The且shsustained

atst．1．

2＝The

snstained

atst．2、fish

4

3：The倉sh sustained at st．4・4：The丘sh sustained at st．5，5：ii）

The

fish

sustained

atst．

7．

（Control）

5

第2回実験の結果

第2回実験はすでに述べたように，クロダイを6用い，これを各生篭に3尾宛入れたが，一部の廃水口近くの生簑には弊死魚が出たが，今回は生存して晒るもののみを使用して検討した。

Plate

第2回実験の結果を図版Vに示す。この場合もTheW．

pattemofKYUSEN

第1回実験同様廃水口近くのものの泳動像は対照

1：The

Hsh

sustained

atst．1，と異った型を示してわり，漸時沖合へ出るに及ん

2；The

fish

sustained

atst．2．

で対照の型に近付いて行くのが認められる。この3；The負sh sustained at st．3．
4；The￡sh sustained at st．4．

ように幾死以前の生存中の魚類に就いても，パル

5：The6sh

snstained

atst，6．

ブ廃水中において遊泳させたものは血清蛋白の炉

6：The

sustained

atst．7． （Contro1）

紙泳動像に可成り大きな変化が生ずることが認められた。

一48一

fish

Pla頓．

V．

Plate．V．

The

paper

sustainedpU夏pinmill

丁血e考1）

electrophoretic
thesea

under

WaSte

inr

OUr

pattempatterninfluenced

SeCOndofももKURODAI

ofof6shtheinVeStigatiQn。

．

1．The丘shsustained

atst．1．

2。The血shsustained

atst．2，atst．3．

3。丁虹e

fish

sustained

4．The

fish

sustained

atst。4．

5．The

fish

sヒstained

atst。5．

6．The負shsustained

atst．6。

7．The且shsustained＆t

st．7．

（Contro1）

察

実験条件の吟味

これ迄に述べたように血清蛋白の炉紙電気泳動陳は，その魚類が与えられた環魔の悪条件に対して，比較的良ζ反応し，その悪条件の程度をも可成り明確に表現するように思われるが，なお技術的な面及び生物学的な面での検討を行う必要が有る。

イ）

技術的な面での検討

技術的な面においては，こ（D実験の場合その殆んどの条件は医家が臨床的に用いる定法に従ってっている
2）
が，使用する緩衝液，電流などは大きく結果を左右する。これらの条件に関しては斉藤の詳細な基礎的研究があり，筆者等の検討結果と合致しているので，ここには省略するが，極端に定法から外れない限り，一定した条件下において行えば余り大きな支障は生じない。ただ問題となるのは血清採取後の時間と結果の再現性の点であるが，血清採取後時間の経過と共に泳動像は鮮明さを欠き，また泳動像の型にも変化を生ずる場合が有る。こ．の点に関して検討を行ったが，採取後氷室内（約50C）に保存して5日以内で有れば結果を左右する程の違いはなく殆んど同一の泳動像が得られ支障はないが，7日を経ると泳動像は鮮明さが失われ，10日以上を経過すると，泳動像の型に変化が生ずるものが一部認められた。従って採取後氷室内に保存し，5日以内に処理を行えば問題は先づないものと考え実験はこの点を吟味して行った。

ロ）

生物学的な面での検討

一49一

生物学的な面での最大の間題は個体差の点である。この種の実験のように生理学的な検討に陳して，個体差の問題は常に生ずることではあるが，現在迄実施した実験に使用した魚類に就いては，コイに関しては可成り個体差が認められたが，他の海産魚に関しては，可成り安定した同一の泳動像の型が得られている。

この場合使用したコイは生後供試する迄人工的に飼育したものであり，従ってその成育，栄養状態について全で卿飾岬π条件賄るものとは断じ莫臥このよう鯨の漸から個体差が生ずるものと考筋れる．極端な場合外見上は全く差異のないコイに就いての泳動像に可成りの差異が見られる場合を経験した。

一方海産魚については，

き『こめような個体差は殆んど認められない。斉藤は海産魚について同一魚種の泳動像に関して季節的な変化があることを報告しているが，この点に関して筆者などは未だ知見がない。海産魚に関して個体差が認められないと言うP点では，海産魚のように自然界に生存するものは，生存者の生活条件に殆ど差がないのに反し，飼育魚は可成り生活乃至栄養条件のまちまちのものが混在することを示すものであろうと考える。

飼育魚の個体差が可成り大きく現われることから，筆者などは，海産魚のアナゴを用い，これを45日間飼育し，5日毎にその血清蛋白の泳動像を求めたが，何れも明瞭な差位はなかった。この実験は冬期に行ったものではあるが，、飼育したものについても可成りの長時日に亘るものでない限り泳動像の差はないものと考えられる。コイのように，卵の時代から飼育されるような場合には，この点の留意が必要であると考える。

その他の間題として，供試魚の前歴が問題となる場合が有り，特に環境条件の前歴が間題である。採取から供試に至る間に，その置かれた環境に悪条件が与えられると，それが実験結果を左右する場合があり，特に海産魚においては降雨に依る塩分の低下などが結果を左右することを経験した。以上のように特に屋外における実験の場合，不偏性のある結果が得られない場合が生ずる条件が多た有るが，今回の実験は上記のような諸点に関しては充分留意して行った。

2）

結果の考察

求められた血清蛋白の炉紙電気泳動像は，泳動像の肉眼的比較及ぴデンヅトメーターで求められた泳動曲線に依って比較を行っているが，泳動像に大きな変化が現われている場合は，泳動曲線を求めなくとも検討を行うことは可能である。筆者などは主として泳動像の型に依って比較検討を行っており，各々の分離された成分の濃度比については現在の所比較の資料として具体的に取扱ってはおらず，型の分類上役立たせる程度である。しかしながら，現在迄に行った実験での検討方法としては支障はないものと考えている。

イ）

室内における実験

室内に滋ける実験はアルカ旦，酸，窒息死，自然死について行っているが，苛性ソーダを用いてアルカリ性とした水で冠イを飼育したものでは，苛性ソーダ濃度40ppmでは異状はなく，60ppmに至って異状が認められた。従って40〜60ppmの間で血清に異状が生ずるものと思われるが，これは筆者などが行った，血液5）

学的性状及び鱈の組織学的性状に影響を与える濃度と略一一致する。すなわち血色素量，赤血球抵抗，などの血液学的性状及び鯛の組織学的性状に就いては，前者は苛性ソーダ濃度70ppm以上になると影響が現われ，また後者に関しては逢れより低い60ppmで一部に損傷が認められる・血液学的性状に関しては鯉の損傷が原因とな6て影響が現われるものと考えられたが，今回行った血溝蛋白に及ぼす影響も向様の原因に依るものと考えられる。

酸性液中に置いたもめについても，アルガリと同様のことが認められ，鰍の損傷が原因となっているようで泌る。アルカリ及ぴ酸のような急性灘については、このように泳動像に変化が生ずるのに何らかの外部的に認められる原因があるが，窒息死，自然死についてはそれがない。この場合泳動像に変化が現われるのにジ酸アルカリーでは比較的時間が短かいが，窒息死及び自然死ではこれに比較して長いのが認められた。これは前者の場合外部損傷が生ずると，血清に直ちに影響が与えられるためであろうと考える。

窒息死の場合についても，長時間で徐汝に窒息させた場合の方が，短時間で急激に窒息させた場合よりも泳動像の変化は大きいように思われる。従って短時間で魚類葬影響を与える廃水若くは薬品の場合は酸・ア一50一

ルカリのように直接鱈、などの器官に損傷を与えるような場合の外は顕著な泳動像の変化は生じないものと考えられるが，漫性的に影響を及ぼすものでは可成り良く影響を表現するように考える。これは医家が臨床的に応用する場合にも，急性疾患よりは慢性疾患における方が，診断上の効果は大きいといわれていることと，一致するようである。

、，自然死の場合は，前述した様に外見上も明らかに栄聲不良と判る魚体で喬って，この泳動像は山が2つの型になり，可成り変化は大きく現われ〜いるようであるが，恐らくこの場合これが最終的な泳動像であって，これに至る迄の段階については知見がない5前にも述べたがコイの場合外見上正常と認められるものでも，泳動像に異状の見られるものがあるが，これが或いは栄養不良の初段階の泳動像かも知れない。この点の知見が得られれば，産業廃水の問題とは別に，水産業上応用し得る面も多々有ろうと考える。
ロ）

屋外にお・けるパルプ工場を対称とした実験。

第1回及ぴ第2回の実験共，廃水目近くに置いた魚の融動像け対照とした正常魚の泳動像に比較して，その型の相違は顕著であるが，漸時沖合に出るに及んで泳動像の型が正常に近づいて行くのが認ゆ顔れる。生箸の置かれた環境条件と併せ考えて，魚が与えられた影響の程度を郊或る程度表現し得るものと考える。しかしながら，この泳動像に影響を与える程度のものが魚類にどのような影響を与えているかについては判然のドとしないが，杉本に依れぱ前述した生簑の置かれた条件の中で第1回及び第2回共，「廃水が波及する時と，しない時がある」と言う所では，C，0，D，で30〜50ppm程度の廃水が，波及したり，しなかったりする所であり，このような条件の所のものの泳動像にも異状が見られる所から，この場合従来廃水の魚類に及ぼす影響を検討している方法の中では，可成り微量な廃水の影響を知ることが出来る点有利な方法である。

泳動像に及ぼす廃水の影響と，魚体が受ける影響の関連は，血清蛋白の受ける影響が如何なるものであるかと言う点すら判明していない現在，これを明確にすることは困難であるが，血液学的な面での生化学的研究が進み，また他の生理学的見地からの研究が併行して進歩することに依って明にされて行くであろう。しかしながら，泳動像に現わされた変化が，魚体の受けた影響に依って生じたものであることは，人間，その他の動物に，この種の方法を応用した結果から推しても明確であるし，泳動像の異状が魚体の生理的な異状であることは事実と認めて差支えないものと考える。

一方，今回行ったような種々の悪条件を与えた場合の泳動像を比較すると，タイの場合パルプ工場廃水の廃水口近くに置いたものの像が，窒息したものの像に非常に類似している。このような像の類似の意味するものが何であるかについては全く知見はないが，パルプ工場廃水の性質をも併せ考えて，この廃水に依る影響が呼吸困難な状態を魚体に与えている疑いが濃厚であるようにも思われる。

以上述べたような結果から，パルプ工場（クラフトパルブ）廃水の海産魚に及ぼす生理的な面での影響は
3）
可成り薄い濃度で現われるものと考えられ，杉本の研究結果と対比して，C・0・D・で30〜50ppmのものが波及する水域に置かれた魚類は影響を受けているものと考えられ，しかもその受けている影響は呼吸困難に依るものである疑が濃厚である。

要

約

1）

血清蛋白の炉紙電気泳動像に依って，魚類に及ぼす産業廃水の影響を検討する方法を実験，考察した。
2） 酸，アルカリなどの影響も，この方法で示し得るが，この場合泳動像に影響が現われる濃度は，鯉の組織に損傷が生ず奇濃度と略一致する所から，泳動像に現われる影響は，鰍の損傷に起因するものと考える。

3）

窒息の状態の魚の泳動像にも異状が見られるが1窒息死したものの中には泳動像に余り変化のないものもあった。これは酸素欠乏の度合及び死に致る迄の時間の差異などに起因するものと思われるが判然としたことは知り得なかった。

一51一

、4）

5）

栄養不良と認められる自然死の魚の泳動像は，その異状が極めて顕著である。

パルプ工場廃水の波及する水域に置かれた魚類の影響はその泳動像から明確に判定することが出釆

その置かれた条件の程度をも併せて知ることが出来る。

6）

泳動像の変化から求められる，パルブ工場廃水の魚類生理に及ぼす影響は可成り低濃度のものであり，C、O、D．で30〜50ppmの濃度ではすでに影響が認められる。

7）

パルプ廃水の影響を受けた魚体の泳動像は，窒息死の場合の像に類似してわり，パルプ廃水の魚類に及ぼす影響は，魚体に呼吸困難の状態を与えている疑いが濃厚である。

文

献

1）

森・小林：炉紙電気泳動の実際（1956，）南江堂

2）

Vo122， 12．P．752−777（1957）

斉藤＝魚類血液の生化学的研究IX：．X．日水誌

3）

杉本：未発表4）

村地

5）

藤谷・千国：産業廃水に依る魚類の死因判定に関する研究

日本水産学会・1956年秋季大会講演

一52一

内水研報告第10号P・66−71（1957）