64

Bu11etinoftheJapaneseSocietyof

ScientificFisheries

Vo1．32，No．1，1966

酸化脂肪によるコイのセコケ病の発生とビタミ智）予防効果＊

橋本芳郎・岡市友利・渡辺
古川武

厚・梅津武司（1965年10月22日受理）

MUSCLEDYSTROPHY
TEE

YoshiroThediseaseofOF

CARP

PREVENTIVE

DUE

EFFECTTOOFOXIDIZEDVITAMIN

OIL

AND

E＊

HAs田MoTo，Tomotoshi OKAIGHI，Takeshi WATANABE＊＊，
Atushi FuRuKAwA and Takeshi UMEzu＊＊＊
carp，whichischaracterized

byamarked

IQssofflesh

intheback（Fig．

1）and called
Sekoke disease，has been a serious problem for carp culturists in Japan・Be−sides muscle dystrophy，loss of appetite，poor growth and high mortality have been observed
as symptoms．As the disease was suspected to be a dietary one due to oxidized oil in dried
silk・worm pupae used as a main ingredient of feedstuff，the relation between the disease andoxidized

oilwasexamined．

Carp fingerlings were kept for about120days on the diet containing10％of the oxidized
saury oi1（peroxide value120〜150），with or without DL一α一tocopheryl acetate（Table1）・ In、60days，typicalsigns

DL一α一tocopherylofthedisease

appearedacetateand

theofrateinill丘shthegroup

receivingamomte（1to56％atthetheoxidize（lendof

theoi！withoutexperiment、The pathological exami且ation revealed that the symptoms are quite identical with those ob−served on the fish in carp farms． The disease was effectively prevented by the a（1dition ofDレα一tocopheryl acetate（50mg／100g diet）．Some results of chemical analyses on the test ani−malsareInsummerized

connection

As

seeninthemuscle．

inTables2〜4．

withtheFig．2，it

isfeeding test，the tumover of vitamin E in carp was also examined．
very rapid and marked in hepatopancreas，while far less distinct in

コイのセコケ病とは，魚が痩せて背鰭下縁に沿つて帯状の凹みが生じ，背が尖つたようになる病気で，食欲不振，成長不良をぎたし，死亡率もかなり高くなる。横手1》の調査によればこの病気は全国的に発生し，セボソ，セオチ，セウスまたはカミソリなどと呼ばれている。

従来この病気の原因に，遺伝，ウィルス，細菌，寄生虫，水質，底質，餌料（酸化脂肪やアミノ酸不足）などがあげられたが，最近は栄養性疾患の疑いが濃くなつていた。すなわち発生例すべてにサナギを投与している点は注意を要するところで，冨永2｝は病魚を天然餌料の豊富な場所へ移すと回復する場合があることや，HALVERの組成に準じたビタミン類を与えるとセコケが発現せず，またセコケにかかつたコイが治癒する傾向のあることを認めている。その後，村上ら3）はコイにサナギを多量に与えるとセコケ病が発生し，ビタミンEの投与によりその発生率を低下させることができたと報告している。

＊内海水産研究所業績第112号

Contribution from the Naikai Regional Fisherles Research Laboratory，No．112．
＊＊東京大学農学部水産化学研究室（Laboratory of Fisheries Chemistry，Faculty of Agricμlture享
The University of Tokyo）
料＊内海区本産研窒所（Na取ai Region司F均h￠ri邸Res￠arc夏Laboratory）

65
これらの報告から，筆者らはコイのセコケ病はサナギに含まれる酸化脂肪によつて生じ，ウシやウサギで知られている筋萎縮類似のものではないかと考えた。そこでコイ稚魚に空気吹込みで酸化したサンマ油を与えて餌育し，セコケ発生の有無と，同時にビタミソEの予防効果を検討した。その結果，酸化脂肪により，コイではセコケが起こり，ビタミンEで効果的に予防できることを確かめたが，これに関連してコイのビタミンE蓄積に関する実験を行なつたので，これらの結果をあわせて報告する。

1．酸化サンマ油によるセコケ病の発生とビタミンEの予防効果
1．

飼育法と飼料組成

広島県北部淡水指導所より入手した平均体重約59のコイ稚魚を内海区水産研究所大野分室の室外に設置した2×2xO．5mのコンクリート製水槽で8月上旬より12月上旬まで約120日間飼育した。飼育水は井戸水で，1．2〃分の割合で通水し，水温は25。C（8月）〜150C（12月）の範囲にあつた。

各群330尾の5群を設け，Table1に示す飼料で飼育した。なお各群とも飼料No．1により試験前一週間予備飼育を行なつた。投餌量は10月初旬までは1日当り乾物として体重の5勉とし，それ以後はコィの摂餌状態によつて調節した。試験飼料100に対して水80を加えよく練つて投与した。
Tab夏e1．Composition

Diet

Defatted

No．

丘shmea1

α一Starchof

experimental

diets。（g）

CornSauryVitamin

Mineraloiloi1

mix亡ure†mixture廿

1236030603010（P＊）

0．2603010（0＊＊）

0。24603010（0＊＊）

0．25603010（0＊＊）

0．20．210＊

DL一α一Tocopheryl
ace亡ate（mg）

22222CMC1．51。51．525

1．550

1．5

＊Purifiedoi1 ＊＊Oxidize（loi1（P。0．V120〜150）†Thiamine nitrate10，Riboflavin80，Pyridox玉n hy（lrochloride20，Cobalamine O．02，Ascorbic

acid300，Nicotinamide

l50少Ca−pantothenate100，Biotin2，Folic1000，Inosito1400，p・Aminobenzoic

acid6，Choline

acid80，Menadione8mg，A14000andchloride

D33601U

perkg（1iet。

††USPX

salt

mixture100g，A1α315，ZnSO4300，CuC1210，MnSO480，K115andCoα2100mg．

試験餌料のうち魚粉はn一ヘキサンで脱脂したホワイトフィシュミール（粗蛋白69・2％・粗脂肪2・0％）である。サンマ油は白土精製した過酸化物価3以下のもので，飼料No。2にはそのまま，飼料No，3〜5には40。C〜60。Cで8〜24時間空気吹き込みを行ない，過酸化物価が120〜150になるように酸化させたものを使用した。トーモロコシ油は市販品である。

ビタミン混合物はマスについてのHALVERらの処方からビタミンEを除き，二，三の修正を加えたもので，ビタミンEとしてDL一α一tocopherylacetateを使用した。飼料原料には多少ビタミンEが含まれており，各々1009中，飼料No．1よりトーモロコシ油を除いたものに0・86mg，トーモロコシ油に22・9mg，酸化しないサンマ油には6・6mg，酸化させたサンマ油には2mgのビタミンEがそれぞれ測定された。無機塩混合はHALVERの処方通りである。
2・

試験魚の処理および分析法

30日毎に各試験群から2040尾をとり，体重と体長を測定後ドライアイスで凍結して，東京へ運び，分析に供した。ただ，TBA値は凍結保存しても増加する傾向があるので，試験池より取り上げた直後に測定した。

TBA値の測定は，Z真LKIN郭よびT4P理L4》の方法を多少修疋して行なつた9ドライアイスを加え乳鉢

66

中でよく磨砕した筋肉5gに蒸溜水10m乙を加え，10分聞撹絆してから10弘三塩化酢酸10m君を添加し，遠心分離により沈澱を除去した。ついで上澄液3m乙に40％エタノール1m3および0。75％thio・barbituric acid（TBA）水溶液L25miを加えて，100℃で10分聞加熱した後，冷却して530mμで比色定量した。TBA値はSINNHuBERおよびYu5）にしたがつて試料10009当りのmalonaldehydeのmg数で表わしてある。

水分は常法により，粗脂肪はA．0．A，C法により測定し，ビタミンEはBIERIら6）の方法によつた。
この他，全魚体を磨砕してクロ・ホルム・メタノールで魚体油を抽出し7〕，その特数を常法により測定するとともに，METcALFらの方法8）でメチルエステルに導き，脂肪酸組成をdietkylene

glycolsuccinateを20％含む充填剤（Wilkens社製）を使用したガスクロマトグラフィーで分析した。

3・飼育結果ならびにセコケの発生状況
ビビタミンEを添加しないで酸化油を与えた第3群の成長，飼料効率は他の群にくらべてかなり悪く，飼育開始後60日頃からこの群の魚にセコケが発生しはじめ，約90日後にはほとんどすべての魚が外見上セコケ症状を呈した。その後多少減少し実験終了時には外見的にセコケと認められるものは56％であつた（Fig．1，Table2）。このように最後に外観的に病魚と認められるものが減少したのは水温低下に伴う摂餌馨

F量9。1Transections

end（3）of

Bottomtheat

dorsalrow＝normal

Table2。

anterior

fin

Final

Percent

Initialweightweight99

feeding

9αin

row：diseasedand

posteriorfish（LotNo．3）．

No。5）。

ofNo．

end（1），middle（2），base．Top

Hsh（LotResults

Diet

1234
5

theexperimentfor120days．

Food
e伍ciency

Mortal三ty％

Apparent
muscledystrophy
％

26．0

420

0．54

2．3

24．7
18．0

400

0．49

0．6

00

254

0．37

33，856

〃

28．5

0．62

0．6

〃

31．7

464
540

0．69

5．8

5
〃

〃

00

67
歴able3．衰esuits・fchemicalanalyses・ntestanimals，
Diet

Moisture

Crude鎚

No．
A＊

12
34
5

Hepato−Muscle

B

TBA
B
A

fat％

A

B＊Bodypancreas
Vitamin E

Io（1ineμ9／9AB

oi1Peroxidevalue

value

AB

AB
5．680。3 78，8

1．9

1，7

1．0

0．8

3．52。386．5

110．1

1．3

80．4 79．5

2．2

1．8

1．8

1．4

11．1

2．5

100．3

122．0

3．3

6．6

80．3 80．7
80．0 78。52．0

2．2

3．5

2．0

2．3

1．0

107．4

121．7

6．5

10．1

2．0

2．0

3．0

1．3

9．4

5．9103．9123。66．1

5．3

80．2 78．4

2．1

1．7

1，10．724．9 18．5

109．4

121．6

3．6

4．7

＊A…30days，

B…120days。

量の減少によるものと考えられるが，後述するように組織学的な検査では最後取り上げ時すべてが病魚と判断され，決して治癒していたわけではない。病魚は非常にやぜており，全体重に対する筋肉部の割合が，健康な他の群では54〜56％であるのに対して49％にすぎなかつた。
一方，ビタミソEを添加した第4群および第5群では外見的なセコケは認められず，成長その他も酸化油を投与しない第1群，第2群とほとんど差がなかつた。第5群はかえつて他の群より良い成長を示し，成長率は第3群の2倍以上に達している。
なお，実験終了時に横手ら9）に組織学的な調査を依頼したが，第3群のすべての魚に筋肉の変性と壊死がみられ，かつこれが川津10）の観察例や，一般養魚場で発生するセコケと全く同様の症状であることが明らかにされている。第4群のコイにも一部組織学的な病Table4，Fatty変が認められ，本実験の条件下では飼料1009当り25mgのDL一α一tocopherylacetateの投与では必ずしも完全な予防ができないことがわかつた。第5群は組織学的にも全く異常がなく，DL一α一tocophe−rylacetateがセコケ病の予防に有効であることが認められた。

of

Fatty
acidacid

carp

Dietcomposition

rearedNo．1

forDietofbody

oil

120days。

No．3

Diet

No，5

14：0

1．1

3．94。115：0

trace

0．7

0．7

16：016。720．5

19．04・、試験魚の分析結果

16：16。210．6

11．6

飼育開始後30日および120日後のコイについて

17：0

trace

0．9

1．0

17：1

〃

1．01．0

第3群の肝臓のビタミソE含量は飼育期間中極18＝O

3．8

3．9

3．8

めて低い値を示し，一方，ビタミンEを飼料中

ll：l

40．6

34．0

35．7

21．3

4．73．6trace

1．4

1，27．88．7

1．5・1，3の分析結果をTable3に示す。

0・05％添加した第5群では20μg／g程度の値を維持しつづけた。

TBA値は脂肪の酸化の程度を示すものであるが，ll：llll：1｝第3群および第4群では比較的高い値を示している。
体油の過酸化物価についてもほぼ同様の傾向が認め粥3．3

られ，ビタミンEの体内における抗酸化作用がうかがわれる。

器：l0．9群とも沃素価が次第に添加油の値に近づく傾向を示

し，過酸化物価が，実験終了時に第3群でとくに大3。12．7

trace

0．80．82．7

3．0

1．5

3．3

3．01．6

筋肉の水分含量は第3群でやや高いが・粗脂肪量にはほとんど差がない。体油の特数については，各1．0

l象10thers68きかつた。脂肪酸組成にも沃素価と同様添加油の組成に近づく傾向があるが，とくにビタミソE添加の影響はないようである。Table4は，第1群，第3群および第5群の主な脂肪酸の組成を示したものである。
1亘．コイ体内におけるビタミンEの蓄積

平均体重299のコイを1群22尾とし，60δの循環水槽（水温璽。C）で飼育し，これにさきの実験で使用した飼料No．1とほぼ同じ組成の基本飼料にDL一α一tocopherylacetateを0．1％添加して投与し，肝臓および筋肉におけるビタミンEの蓄積と響蕊1減少の状態を調べた。ただし，基本飼料の油は大豆油とした。

100

Fig．2に示すように，試験群には7日問，＼

基本飼料とビタミンEを与えた後，2群に分け，一方には基本飼料を，他方には基本飼80

ノ料の大豆油を酸化サンマ油（過酸化物価120）にかえた飼料を与えてビタミンEの減少を比較した。対照群にはビタミソEを添加しない基本飼料を20日間継続して与えた。

翫…鐸現1

ゆ遍60

Hepa七〇pancreas

瀬国目

肝臓ではビタミンEがかなり速やかに蓄咽積し，100μ9／g程度に達するが，それ以後とρ目

40OJ

O・H卜

くに増加することはないようである。次いで20

ビタミンEの投与を止めた場合の肝臓からの消失速度もかなり大ぎく，減少率は肝臓Q

NUSCle＼

一一…一か一罵器＝＝＝＝＝コ魁＝＝：＝二＝19当り4・6μ9／日である。この減少の割合は本実験の限りでは飼料中の油の酸化の程度とは関係がないようであつた。これに対して筋肉のビタミンE濃度はビタミソEの投与に影響されず，ビタミンE投与群においても対照群とほぼ同じように低い値を保ち続け＿＿＿

5

一一一一つ一一一一一一一漣＿＿○』＿＿＿＿＿一714201）ay8Pig。2 Vitamin E in the hepatopancreas andた。

muscle of carp．
The basal diet was composed of defatted

この結果は，コイではビタミンEの筋肉における蓄積が円滑に行なわれず，そのためwhite fish mea160，α一starch30，vitaminmixture O．2，minerals2and CMC1．5．に，酸化脂肪の毒性が筋肉の変性として現われやすいことを裏付けるもののようで，興味深い。

IIL考察

以上のように，コイのセコケ病が明らかに酸化脂肪の投与により生じ，、ビタミンEを同時に添加すれば効果的に予防できることが確認された。

これまでニジマスにおける酸化油の害はかなり詳しく研究され，成長阻害，膵臓組織の変性，貧血，肝臓障害などが認められ1ω〜13）ている。しかし，コイのセコケに特微的な筋肉の変性はニジマスでは観察されていない。この点・コイはニジマスとは明らかに異なり，ビタミンE欠乏により筋萎縮を起こすマウスやモルモットにむしろ似ているようである。魚でもこのような種特異性がうかがわれるのは興味深1，・。また，コイでは摂取したビタミンEが筋肉に比較的移行しにくいことが観察されたが，これが筋萎縮を起こしやすい原因とも思われる。

6§

轡00DALLら主き）はニシン油を飼料に5％加えてニジマスに与えた場合のビタミンE要求量は，飼料100g当り3mg以下としているが，本実験では餌料1009当り25m9の添加でも完全に正常な状態を維持することができなかつた。比較的酸化のすすんだ油をかなり多量に与えたためと思われるが，この場合にもビタミンEは明らかに体内で抗酸化的に働き，Table2に示したように第4群の体油の過酸化物価を対照群と同じ程度までに下げるのに役立つている。

今後，コイのビタミンE要求量を脂肪の性質と関連してさらに詳しく検討する必要があるが，ビタミンblueが有効であることも報告14）されているので，コイのE欠乏による筋萎縮その他の障害にmethylene

セコケ病を還元性物質や他の抗酸化剤によつて防ぐことができるかどうか，さらに実験を進める予定である。

IV．要

約

コイのセコケ病の病因を明らかにし，またビタミンEの効果を検討するために，コイ稚魚に，過酸化物

価120〜150の酸化サンマ油を魚粉を主とする配合飼料に混合して与えたところ，約2ヵ月でセコケが発生し，4ヵ月後には罹病率56％に達した。一方，同じ飼料にビタミンEを1009当り25mg添加した場
合には組織学的には多少セコケ病の症状を呈したが，成長その他外見的には対照群と差がなく，50mg添
加では全く異常を認めなかつた。

なお投与したビタミンEは肝臓には蓄積されるが，筋肉ではほとんど蓄積されないことが判明した。

終わりに，本実験を行なうにあたり，飼料原料およびビタミンEを提供して頂いた， 日本農産工業株式会社，日本水産株式会社中央研究所およびエーザイ株式会社に厚く感謝の意を表する。

文

献

横手：淡水区水産研究所 パンフレット，（1961）。
冨永：長野県水産指導所佐久支所 パンフレット，（1958），
村上・古川・川上： 広島県北部淡水指導所，内海区水産研究所共同報告

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ZALKIN，H，and

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METcALF，L．P。and A．A。SGH班ITz： A郷乙。Cんθ鵬．，32，363（1961）。
横手・目比谷・橋本： 目本水産学会年会講演，（1965），

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