２版様式

Ｃ−１９、Ｆ−１９−１、Ｚ−１９ （共通）

科学研究費助成事業

研究成果報告書
令和２ 年

５ 月 １４ 日現在

機関番号： １４１０１
研究種目： 若手研究
研究期間： 2018 〜 2019
課題番号： １８Ｋ１８２１８
研究課題名（和文）クロストリジウム属細菌のセルロース系バイオマス分解酵素生産の調節機構

研究課題名（英文）Regulation of CAZyme genes expression in a cellulolytic Clostridium bacterium

研究代表者
市川俊輔（Ichikawa, Shunsuke）

三重大学・教育学部・講師

研究者番号：５０７８１１１８
交付決定額（研究期間全体）：（直接経費）

3,300,000 円

研究成果の概要（和文）：細菌Clostridium thermocellumはセルロース系バイオマスの構造や構成成分を認識し、遺伝子発現調節因子（σ因子）を介して、その分解に適した多種の分解酵素を分泌する。C. thermocellumのσ因子（sigI7）遺伝子構成的発現株では、47つの糖質関連酵素遺伝子の発現が促進、８つの糖質関連酵素遺伝子の発現が抑制されていることを、トランスクリプトーム解析によって明らかにした。sigI7発現株の培養液のセルロース系バイオマス分解活性は、野生株のものより小さかった。この株の培養液中の分子量約75kDaおよび約50kDaのキシラナーゼが減少していることを確認した。

研究成果の学術的意義や社会的意義
未利用資源であるセルロース系バイオマスからの原油代替化合物生産（バイオリファイナリー）を実現するために、セルロース系バイオマスの効率的分解を達成する必要がある。バイオリファイナリーの候補微生物である
Clostridium thermocellumはセルロース系バイオマスの構造や構成成分を認識し、遺伝子発現調節因子（σ因子）を介して、その分解に適した多種の分解酵素を分泌する。本研究では、σ因子の機能を明らかにすることでC. thermocellumのバイオマス分解酵素生産の調節メカニズムの一端を明らかにした。

研究成果の概要（英文）：The cellulytic bacterium Clostridium thermocellum recognizes the structure
and constituents of cellulosic biomass and secretes multiple degradative enzymes suitable for its
degradation via gene expression regulators (σ‑factors). Transcriptome analysis revealed that theexpression of 47 carbohydrate‑active enzyme genes were promoted and eight were repressed in C.
thermocellum sigI7 expression strain. The cellulosic biomass degradation activity of the cultures ofthe sigI7 strain was lower than that of the wild‑type stain. Xylanases with molecular weight ofapproximately 75 kDa and 50 kDa were reduced in the culture of the sigI7 strain.

研究分野： 応用微生物学、生化学
キーワード： セルロース系バイオマス

セルロース分解細菌

糖質関連酵素※科研費による研究は、研究者の自覚と責任において実施するものです。そのため、研究の実施や研究成果の公表等については、国の要請等に基づくものではなく、その研究成果に関する見解や責任は、研究者個人に帰属されます。

様 式 Ｃ－１９、Ｆ－１９－１、Ｚ－１９（共通）１．研究開始当初の背景
合成生物工学の発展にともない、糖液から液体燃料・プラスチック原料・化成品など、あらゆる原油の代替化合物が生産できるようになりつつある（バイオリファイナリー）。糖液は、地球上に膨大に存在し再生可能で未利用な資源であるセルロース系バイオマスから得ることが求められている。しかしながら、セルロース系バイオマスの分解酵素は高価でありその分解効率も低いことが課題である 1)。セルロース系バイオマスからの物質生産プロセスの抜本的簡略化を達成するために、分解酵素の添加を省き、細菌を培養することでセルロース系バイオマスから糖液を生産する技術（Biological simultaneous enzyme-production and saccharification: BSES）2)や、燃料化合物を生産する技術（Consolidated bioprocessing: CBP）3)が提案されている。グラム陽性好熱性嫌気性土壌細菌 Clostridium thermocellum は、セルロース系バイオマス分解活性が高いために、BSESと CBP の候補微生物と位置付けられている 4)。
C. thermocellum は 4.4g/L の精製セルロースを 1 日で完全に分解する 5)。また、5g/L のスイッチグラスを 5 日で 65％、10g/L のトウモロコシ葉を 7 日で 70％分解する能力を持つ 6,7)。C.
thermocellum を含むいくつかのセルロース分解細菌は、セルロソームと呼ばれる糖質関連酵素複合体を形成する 8)。セルロソームは、骨格タンパク質に複数の糖質関連酵素が結合することによって形成される 4)。C. thermocellum ゲノムは 130 以上の糖質関連酵素遺伝子をコードしており、そのうち 70 以上の糖質関連酵素（exo-1,4-glucanase、endo-1,4-glucanase、endo-1,4-xylanase、acetylxylan esterase、xyloglucanase、endo-1,4-mannanase、lichenase、chitinase など）がセルロースソームを構成している。C. thermocellum は 0.5%の微結晶セルロース（Avicel）を 45 時間で分解するが、骨格タンパク質（CipA）欠損株では分解に 500 時間近くかかることから、C. thermocellumの迅速なセルロース分解能力にはセルロソームが重要であることがわかっている 9)。また、精製セルロソームと比較して、C. thermocellum を培養した方がセルロース分解が進むこともわかっている 10)。したがって、C. thermocellum のセルロース分解活性をセルロソームのみでは説明できず、例えばセルロソームを構成する糖質関連酵素の生産調節などの要素が、C. thermocellum のセルロース分解活性で重要であるものと予想される。
C. thermocellum の糖質関連酵素遺伝子の発現パターンは、セルロース分解の初期と後期で変化する 11)。また、培養する際に用いる基質によって、糖質関連酵素遺伝子の発現パターンが異なる 12,13)。Kahel-Raifer らは、C. thermocellum がセルロース系バイオマス中の多糖類の存在を複数の抗シグマ因子（RsgIs）で感知し、シグマ因子（SigIs）を介して適切な糖質関連酵素遺伝子の発現を誘導することを報告している 14)（図 1）。RsgIs の細胞外ドメインの構造は、糖質結合モジュール（Carbohydrate-binding module: CBM）または糖質加水分解酵素（Glycosyl hydrolase: GH）に類似しており、それぞれ異なる多糖類を認識する。例えば、RsgI1_CBM3 および RsgI4_CBM3はセルロースに結合し、RsgI6_GH10 はセルロースおよびキシランに結合し、RsgI3_PA14 はペクチンに結合することがわかっている 14)。
C. thermocellum におけるシグマ因子を介した糖質加水分解酵素遺伝子発現調節機構に関する研究の多くは、C. thermocellum の遺伝子改変の非効率さから、in vitro または異種宿主において実施されてきた。Nataf らは run-off assay により、シグマ因子 SigI1 が糖質関連酵素遺伝子 cel48S の転写を誘導する能力を示した 15)。他の研究では、C. thermocellum ゲノム中の SigI3 や SigI6 の標的となる糖質加水分解酵素遺伝子候補のプロモーター配列をバイオインフォマティクス解析により検索し、異種宿主として Bacillus subtilis を用いてプロモーター活性を評価している 16,17)。

図１：C. thermocellum の糖質関連酵素生産の調節機構 14)
C. thermocellum は複数の RsgI を、セルロース系バイオマスの存在を感知するセンサーとして備えている。例えば RsgI1 はセルロースを、RsgI3 はペクチンを、RsgI6 はアラビノキシランを感知できる。多糖と結合した RsgI は、シグマ因子（SigI）を細胞内に放出する。SigI は RNA ポリメラーゼと結合し遺伝子発現を促進する。９つある SigI それぞれが異なる分解酵素遺伝子の発現を促進する。以上の機構により C. thermocellum は細胞外に存在する多糖に合わせた分解酵素を生産する。

２．研究の目的
本研究では、C. thermocellum シグマ因子遺伝子発現株を作製し、その機能を in vivo で解析することによって、C. thermocellum の糖質関連酵素生産調節機構を明らかにする。加えて、C.
thermocellum シグマ因子遺伝子発現株が生産する分解酵素を解析することによって、セルロース系バイオマス分解活性にとって重要な分解酵素の探索を行うことを目的とする。

３．研究の方法(1) C. thermocellum の形質転換と、sigI 遺伝子の発現確認
C. thermocellum DSM1313 の sigI 遺伝子を PCR で増幅し、発現プラスミドに挿入した 3)。C.
thermocellum を CTFUD 培地（3 g/L sodium citrate tribasic dihydrate, 1.3 g/L (NH4)2SO4, 1.5 g/L KH2PO4,130 mg/L CaCl2 2H2O, 500 mg/L L-cysteine-HCl, 11.56 g/L 3-morpholinopropanesulfonic acid, 2.6 g/L
MgCl2 6H2O, 1 mg/L FeSO4 7H2O, 4.5 g/L yeast extract, 1 mg/L resazurin, 5g/L cellobiose, pH 7.0）に接種し、窒素ガスによる嫌気性条件下で 60℃で培養した 18)。C. thermocellum 細胞懸濁液 20µL とプ
ラスミド 1µg を 1mm エレクトロポレーションキュベット内で混合し、ジーンパルサーXcell エレクトロポレーションシステム（Bio-Rad）を用いて、電圧 1500V、パルス長 1.5ms で、方形波電気パルスを印加した。回収した細胞を、6 µg/mL thiamphenicol を含む CTFUD 固体培地上にプレートし、55℃で 3 日間培養した。形成されたコロニーを単離し、thiamphenicol を含むCTUFD 培地で培養した。培養液中の細胞がプラスミドを保持していることを、PCR によって確認した。形質転換体における sigI 遺伝子の発現は、ウエスタンブロッティングによって解析した。
(2)トランスクリプトーム解析
C. thermocellum を CTFUD 培地で培養し、細胞を回収してトータル RNA を抽出した。リボソーム RNA を、Ribo-Zero Bacteria rRNA Removal Kit（Illumina, CA, USA）を用いて除去した。TruSeq
Stranded Total RNA Sample Prep Kit（Illumina, CA, USA）を用いて、シークエンシングライブラリーを調製した。ライブラリーのシークエンスを、NovaSeq 6000 システム 2×100 bp ペアリードで決定した。出力されたシークエンスを、Trimmomatic プログラムでトリミングし、Bowtie プログ
ラムを用いて C. thermocellum リファレンスゲノム [GenBank: CP002416.1] にマッピングした。
マッピング後、HTseq プログラムを用いて発現プロファイリングを行った。遺伝子領域内の転写産物の量を、マップされたリード数を用いて測定した。発現プロファイルを、転写産物の長さとカバレッジの深さを基準として正規化した値（Reads Per Kilobase of transcript per Million mapped
reads: RPKM）で算出した。
(3) C. thermocellum セクレトームの調製
C. thermocellum 培養液を遠心分離し、上清を 0.22µm シリンジフィルターで濾過して、細胞を除去した。ろ液を Vivaspin 20-100K（GE Healthcare, IL, USA）で濃縮することにより、セクレトームを調製した 9)。
(4)リコンビナントタンパク質の調製
糖質関連酵素遺伝子を C. thermocellum ゲノム DNA から PCR により増幅し、大腸菌 iVEC3 を用いて、プラスミド pET16b に挿入した。得られたプラスミド DNA を、大腸菌 BL21(DE3)の形質転換に用いた。大腸菌で発現させた目的タンパク質を、Profinia IMAC タンパク質精製システム（Bio-Rad, Hercules, CA, USA）を用いて精製した。
(5)酵素活性測定
多糖の分解活性測定の基質として、微結晶セルロース（Avicel: Sigma-Aldrich, MO, USA）
、キシラン（oat spelt xylan: Fluka, Switzerland）、およびアルカリ処理稲わらを使用した。アルカリ処理
稲わらは、稲わらを室温で 1% NaOH に 24 時間浸漬し、その後純水でよく洗浄して天日で乾燥させ、ナイフミル粉砕することで調製した。0.1%基質溶液に C. thermocellum セクレトームを添加し、60℃で反応させた。放出された還元糖量を、DNS 法によって決定した 19)。
オリゴ糖の分解活性測定の基質として、p-nitrophenyl b-D-glucopyranoside: pNPG（TCI, Japan）、
p-nitrophenyl b-D-xylopyranoside: pNPX（TCI, Japan）、p-nitrophenyl b-D-arabinofuranoside: pNPA
（Sigma-Aldrich, MO, USA）
、coniferin（ChemFaces, China）、xyloglucan oligosahccharides（Megazyme,Ireland）を用いた。coniferin と xyloglucan oligosahccharide の分解活性測定は、DNS 法によって行った。pNPG、pNPX、pNPA の分解活性は、p-nitrophenol 放出量に基づいて決定した。毎分 1 µmolの分解産物を生産する酵素量を１U と定義した。

４．研究成果(1) C. thermocellum sigI7 が発現調節する糖質関連酵素遺伝子の探索
C. thermocellum は９つの sigI 遺伝子をもつ。sigI 遺伝子を構成的に発現させるためのプラスミドを調製し、エレクトロポレーション法によって C. thermocellum に導入した。遺伝子導入株を単離し、液体培地にて培養した。９つの sigI 遺伝子のうち、sigI7 遺伝子を C. thermocellum 細胞内で構成的に発現させられることを、ウエスタンブロッティング法によって確認した。
C. thermocellum は、多様な糖質関連酵素を含む複合体（セルロソーム）を構成することで、セルロース系バイオマスを効率よく分解する。シグマ因子が機能していれば、糖質関連酵素の分泌が促進されているはずである。sigI7 遺伝子導入株とベクターコントロール株について、RPKMを用いて Differentially Expressed Genes 解析を行った。その結果、sigI7 遺伝子導入株では、49 つの糖質関連酵素遺伝子の発現が 2 倍以上の変化で増加していることがわかった（図２）。xyn11A（Clo1313_0521）、xgh74A（Clo1313_0851）、cel5E（Clo1313_1425）、cel9V（Clo1313_0349）、cel944J（Clo1313_1604）、cel9P（Clo1313_1955）、rgae12A（Clo1313_0693）、rgl11A（Clo1313_1983）、cel9W（Clo1313_1477）、cel48S（Clo1313_2747）。lic16B（Clo1313_2022）、cel5O（Clo1313_2805）、
xyn5A（Clo1313_2856）、xyn10Y（Clo1313_1305）、cel5G（Clo1313_0413）、chi18A（Clo1313_1959）、
cbh9A（Clo1313_1808）。cel8A（Clo1313_1960）、xyn30A（Clo1313_0563）など主要なセルロソー
ム糖質関連酵素遺伝子、また cipA（Clo1313_0627）、olpB（Clo1313_0628）といったセルロソー
ム骨格遺伝子の発現量増加が確認された。そのほか、sigI7 遺伝子導入株において endo-1,4-bxyllanase 遺伝子（Clo1313_0522）の発現が 23 倍、CBM-containing protein 遺伝子（Clo1313_1494）の発現が 22 倍に増加しており、顕著であった。一方、８つの糖質関連酵素遺伝子の発現が sigI7遺伝子導入株で２倍以上の変化を伴って低下していることも確認した。セルロソーム構成酵素遺伝子の一つである cel5-26H（Clo1313_2234）の発現量は、sigI7 遺伝子導入株で 4.5 倍減少していた。sigI7 遺伝子導入株では、sigI2 の発現が 2.2 倍、sigI8 の発現が 3.8 倍に増加し、sigI3 の発現が 2.1 倍に減少しており、糖質関連酵素遺伝子の発現調節経路のクロストークが存在するものと予想された。

図２：C. thermocellum sigI7 遺伝子導入株のトランスクリプトーム解析(2) C. thermocellum sigI7 遺伝子導入株のセルロース系バイオマス分解活性C. thermocellum sigI7 遺伝子導入株培養液からセクレトームを回収し、そのセルロース系バイオマス分解活性を測定した。アルカリ処理稲わらに対する sigI7 遺伝子導入株の活性は 1.00 mg
reducing sugar/mg-protein である一方、ベクターコントロール株の活性は 0.74 mg reducing sugar/mgprotein だった（図３）。セルロース分解活性は、sigI7 遺伝子導入株とベクター株との間で類似していた。sigI7 遺伝子導入株およびベクター株のキシラン分解活性は、それぞれ 4.4 reducingsugar/mg-protein、7.5 reducing sugar/mg-protein であった。これらの結果より、sigI7 遺伝子株セクレトームのセルロースの分解活性に変化はなかったが、キシランの分解活性が低下していることがわかった。sigI7 遺伝子導入株セクレトームに存在する糖質関連酵素を活性染色法にて解析したところ、分子量約 75kDa および約 50kDa のキシラナーゼが減少していることを確認できた。

セルロース系バイオマス
分解活性mg reducing sugar / mg protein

1.00.80.60.40.20.0vector

mg reducing sugar / mg protein

0.61.2mg reducing sugar / mg protein

キシラン分解活性

セルロース分解活性0.50.40.30.2
0.10.0

sigI7vector

9.08.0
7.0
6.0
5.0
4.0
3.0
2.0
1.00.0vector

sigI7

sigI7

図３：C. thermocellum sigI7 遺伝子導入株セクレトームのセルロース系バイオマス分解活性C. thermocellum 培養液を、10 kDa molecular cut-off フィルターを用いて限外濾過して濃縮し、酵素溶液とした。酵素溶液を 0.1%基質溶液（粉砕アルカリ処理稲わら、Avicel、オートスペルトキシラン）と混合し、反応後に生産された還元糖量を定量した。エラーバーは標準誤差を表す。

hydorolytic activities (U/㎎ protein)

mg reducing sugar / mg protein(3) C. thermocellum のセルロース分解活性に重要な糖質関連酵素の探索
C. thermocellum は 100 以上の糖質関連酵素を用いて効率よくセルロース系バイオマスを分解する。糖質関連酵素の多様性がセルロース系バイオマス分解活性に重要であることがわかっているが 20)、どの糖質関連酵素の活性が全体の活性に寄与しているのか明らかでない。
ここまでのトランスクリプトームや活性染色による結果を踏まえて、sigI7 遺伝子導入株で減少している糖質関連酵素を推定した。糖質関連酵素遺伝子 Clo1313_2234 のリコンビナントタン
パク質は、セルラーゼ活性とキシラナーゼ活性を持つことがわかっているが（図２）、sigI7 遺伝
子導入株セクレトームに添加してもアルカリ処理稲わらの分解活性に変化はなかった。一方で、Clo1313_1002 から調製したリコンビナントタンパク質は、アルカリ処理稲わら分解活性をほとんど示さなかったが、sigI7 遺伝子導入株セクレトームの活性を復帰できることがわかった（図４）。Clo1313_1002 は、β-glucosidase (EC 3.2.1.21)、β-xylosidase (EC 3.2.1.37)、coniferin β-glucosidase(EC 3.2.1.126)、α-L-arabinofuranosidase (EC 3.2.1.55)活性を示す GH3 糖質関連酵素であり（図５）、これらの活性が C. thermocellum のセルロース系バイオマス分解活性に重要であることが示唆された。
1.00.80.60.4
0.20.0vector

sigI71002

sigI7 + 1002

図４：C. thermocellum sigI7 遺伝子導入株のアルカリ処理稲わら分解活性C. thermocellum セクレトームを酵素溶液として、0.1%粉砕アルカリ処理稲わらと混合し、反応後に生産された還元糖量を定量した。エラーバーは標準誤差を表す。

50403020100
β-glucosidase

β-xylosidase

coniferin
α-L-arabino- oligoxyloglucan
β-glucosidase furanosidasehydrolase

図５：Clo1313_1002 の分解活性
Clo1313_1002 の精製リコンビナントタンパク質を調製し、その pNPG、pNPX、pNPA、coniferin、xyloglucan oligosahccharides の分解活性を測定した。
エラーバーは標準誤差を表す。

≪参考文献≫
11) Raman et al. BMC Microbiol. 11: 134. 2011.
1) Himmel et al. Science. 315: 804. 2007.
12) Raman et al. PLoS One. 4: e5271. 2009.
2) Prawitwong et al. Biotechnol. Biofuels. 6: 184. 2013.
13) Zverlov et al. Ann N Y Acad Sci 1125: 298. 2008.
3) Ichikawa et al. FEMS Microbiol. Lett. 362: fnv202. 2015.
14) Kahel-Raifer et al. FEMS Microbiol. Lett. 308: 84. 2010.
4) Doi et al. Nat. Rev. Microbiol. 2: 541. 2004.
15) Nataf et al. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 107: 18646. 2010.
5) Izquierdo et al. Biotechnol. Biofuels. 7: 136. 2014.
16) Muñoz-Gutiérrez I et al. PLoS One. 11: e0146316. 2016.
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7) Ichikawa et al. Biosci. Biotechnol. Biochem. 81: 2028. 2017. 17) Ortiz de Ora et al. Sci. Rep. 8: 11036. 2018.
18) Mori. Appl. Environ. Microbiol. 56: 37. 1990.
8) White et al. Annu. Rev. Microbiol. 68: 279. 2014.
19) Sumner. J. Biol. Chem. 47: 5. 1921.
9) Xu et al. Sci Adv 2: e1501254. 2016.
20) Hirano et al. Sci Rep. 6: 35709. 2016.
10) Lu et al. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 103: 16165. 2006.

５．主な発表論文等〔雑誌論文〕 計3件（うち査読付論文 3件／うち国際共著 0件／うちオープンアクセス 0件）
１．著者名Ichikawa Shunsuke、Ichihara Maiko、Ito Toshiyuki、Isozaki Kazuho、Kosugi Akihiko、KaritaShuichi
２．論文標題Glucose production from cellulose through biological simultaneous enzyme production andsaccharification using recombinant bacteria expressing the β‑glucosidase gene
３．雑誌名Journal of Bioscience and Bioengineering

４．巻
127

５．発行年
2019年
６．最初と最後の頁
340〜344

掲載論文のDOI（デジタルオブジェクト識別子）
doi: 10.1016/j.jbiosc.2018.08.008

査読の有無

オープンアクセス

国際共著

有オープンアクセスではない、又はオープンアクセスが困難−

１．著者名
Ichikawa Shunsuke、Ogawa Satoru、Nishida Ayami、Kobayashi Yuzuki、Kurosawa Toshihito、KaritaShuichi
２．論文標題Cellulosomes localise on the surface of membrane vesicles from the cellulolytic bacterium
Clostridium thermocellum
３．雑誌名
FEMS Microbiology Letters４．巻

掲載論文のDOI（デジタルオブジェクト識別子）
doi: 10.1093/femsle/fnz145

査読の有無

オープンアクセス

国際共著

366

５．発行年
2019年
６．最初と最後の頁
fnz145

有

オープンアクセスではない、又はオープンアクセスが困難

−

１．著者名
Ishikawa Masaki、Morishita Mio、Higuchi Yohei、Ichikawa Shunsuke、Ishikawa Takaaki、Nishiyama
Tomoaki、Kabeya Yukiko、Hiwatashi Yuji、Kurata Tetsuya、Kubo Minoru、Shigenobu Shuji、TamadaYosuke、Sato Yoshikatsu、Hasebe Mitsuyasu

４．巻5

２．論文標題Physcomitrella STEMIN transcription factor induces stem cell formation with epigenetic
reprogramming
３．雑誌名
Nature Plants

５．発行年
2019年

掲載論文のDOI（デジタルオブジェクト識別子）
doi: 10.1038/s41477‑019‑0464‑2

査読の有無

オープンアクセス

国際共著

有オープンアクセスではない、又はオープンアクセスが困難〔学会発表〕 計7件（うち招待講演
１．発表者名市川俊輔

1件／うち国際学会0件）

２．発表標題細菌 Clostridium thermocellum のセルロース分解メカニズム３．学会等名
第33回セルラーゼ研究会（招待講演）
４．発表年
2019年

６．最初と最後の頁
681〜690−

１．発表者名
市川俊輔 小川覚 西田郁美 黒澤俊人 苅田修一

２．発表標題Clostridium thermocellumのメンブランベシクル形成とセルロソームの局在

３．学会等名
第32回セルラーゼ研究会
４．発表年
2018年
１．発表者名伊藤敏之 市川俊輔 市原舞子 磯崎一歩 苅田修一

２．発表標題BGL発現細菌とClostridium thermocellumを用いたグルコース生産

３．学会等名
第32回セルラーゼ研究会
４．発表年
2018年
１．発表者名木下玄太 市川俊輔 西田郁美 岡﨑文美 中山寛子 増田裕一 西村訓弘 島田康人

２．発表標題土壌微生物叢からの抗大腸がん作用物質の探索

３．学会等名第82回生化学会中部支部例会
４．発表年
2018年
１．発表者名木下玄太 市川俊輔 西田郁美 岡﨑文美 中山寛子 増田裕一 西村訓弘 島田康人

２．発表標題土壌微生物叢からの抗大腸癌作用物質の探索

３．学会等名第133回薬理学会近畿部会
４．発表年
2018年

１．発表者名
市川俊輔 西田郁美 岡﨑文美 増田裕一 黒柳淳哉 中山寛子 西村訓弘 島田康人

２．発表標題大腸ガン増殖抑制作用を持つ土壌微生物叢の探索研究

３．学会等名
第41回日本分子生物学会年会
４．発表年
2018年
１．発表者名市川 俊輔 小川 覚 西田 郁美 小林 柚姫 黒澤 俊人 苅田 修一

２．発表標題細菌 Clostridium thermocellum のメンブランベシクル生産とセルロース分解能への寄与

３．学会等名日本農芸化学会2019年度大会
４．発表年
2019年
〔図書〕

計0件

〔産業財産権〕〔その他〕−
６．研究組織氏名（ローマ字氏名）（研究者番号）

苅田修一

所属研究機関・部局・職（機関番号）
三重大学・生物資源学研究科・教授

研
究協 (Karita Shuichi)
力者(90233999)(14101)

備考