Bull・
TbyamaPrcfRes,
Inst・
No.
13,
33‑
38（2001）

海洋深層水で連続培養した浮遊珪藻

助αe〃Ce scem"叩0ｍｍによるアカウニ幼生の飼育小善圭一 ・梅田到２・藤田大介

Rearingofthelarvaeoftheredseaurchin,Pse"ｄｏ " 血p『 s邸S，byfeedingplankt0nicdiat0mCﾉbae ｃｅｍｓｃｅｍ 叩0ｍ"
continu0uslyculturedinpumpeddeep‑seawater
KeiichiSHOZEN1,ItamUMEDA2andDaisukeFUJITW
Abstract

Pluteuslarvaeoftheredseaurchin，ＰＳ印｡ひＣｅ""ひ畑ｓｄｅｐ花s皿ｓｗｅ1℃rearedintwo2‑litter
flasksbyfeedingplanktonicdiatom,ＣﾉZaerocaひｓｃｅｍｒｏ叩or"mculturedcontinuouslyusingclean

andnutrient‑richdeep‑seawater(2‑3℃）pumpedfromTbyamaBay・Thediatomsusedfbrfbodweretakenｆｒｏｍａｎ
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canbeusedasculturemediumfbrbothfboddiatomsandpluteuslarvae・However,higherdensities
offboddiatomsaswellasattacheddiatomsshouldbegiventoraisethesurvivalrateofthelarvae．
Kどywoﾉzis:Cﾉzaemcemscemro叩omm,deep‑seawater,planktonicdiatom,pluteus,
Pse"dbce" sdどp花ss"s,redseaurchin

海洋深層水（以下，深層水という）は，表層海水と比べて栄養塩（窒素，リンおよび珪素）が高濃度で含まれ，細菌や汚染物質が極めて少なく清浄であることから，珪藻の連続培養（Fukami

aaI,1997,1998，池田ら1998，梅田ら2000,Shozenelaﾉ.inpress）に適している。珪藻は様々な海産無脊椎動物の重要な初期飼料であり（岡内1992，梅田1997)，連続培養で得られた珪藻を餌としてメガイアワビffα"o"sgjgα"花"ｓ（ただし,Hsjeboﾉdjjとして報告）の稚貝（Fukamieraﾉ.1998）やイワガキCmssosr"α"仰O"αの浮遊幼生（池田ら1998）を育てる試みも行われている。著者らは，富山湾から取水している深層水を用いて浮遊 性珪藻の１種chaemcenos

'
富山
県
水産
試
験場
（TbyamaPrefectural
Fisherise
Resea
1℃hlnstitute,
Namerika,
Tbyama936‑8536,
Japan）

2㈱荏原製作所（EbaraCorporation,
1‑
6‑
27,
Ｋonan,
Minato,'Ibkyo,108‑
8480,
Japan）

3４

樹111県水産試験場研究報告第13号（2001）

cemrospo'．!"〃の連続培養実験を行い，120日以上にわたり高い水準(平均細胞密度3.66×101〜45.0×１０１細胞／ｍｌ）で安定的に培養することに成功している（梅田ら2000,ShozenelraI.inpress)。
本種は二枚貝（田中1982，池田ら1998）やウニ（天神・石井1984）の飼料となることが知られており，連続培養で得られた藻体の有効利用が望まれることから，著者らはこれを用いてアカウニ

Psg oce""r)ｍｓ ノゼssl1sの幼生の飼育を試みた。なお，本実験については若干の追加試験（特に，高い細胞密度の珪藻の投与試験）を行う予定であったが，諸般の事情により連続培養装置を解体することになったため，これまでに得られた知見を報告しておく。

鍾愛席

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Fig.１Photo‑bioreactoI･(EbaraCoIporation)systcmusedlbrconImuousculIureoｆＣ/7aeroﾉりｓﾉて"oﾉ･I""．

材 料 と 方法

C・Ce畑tosPorumの連続培養培養に用いたＣ,cemIro叩or!"〃は直径約５〜10/ ｍの非群体性の浮遊性珪藻で，海洋科学技術センターから分与された株を用いた。連続培養には，Fig.1に示した「藻類連続培養装置」（㈱荏原製作所製，光リアクターPBR‑18）を使用した。培養液は，富ilI県

深層水利用研究施設に汲み上げられた深届水（常山湾の水深321ｍから取水，２〜３℃）をそのまま用い，培養液と等量の収樫を行うケモスタット方式により，培養を行った。培養条件は，水温１７±１℃（装慨内の加温による)，ｐＨ7.8±０．１，通気量60Ｌ／分，撹枠50rpm，２４時間照明（光源はハロゲンランプ）とし，換水率は0.2回／Ｈから1.2回／日まで段階的に上げていった。なお，今回，アカウニ幼生の飼料として用いたＣ､ＣｅﾉｔI/O叩or,""は，Shozenerα/・（inpress）が報告した連続培養実験（1999年９月１７１１〜2000年３月21日の1951川，ただし，最初の１週間はバッチ培養）の途rl:'（12月27日〜２川6日の50日間，換水率1.0／'二lの安定期）で得られたもので，収並は小稗・梅Ｈ１・藤田：深層水培獲珪藻によるアカウニ幼生飼育3５30×101〜47×101細胞／ｍｌに達していた。これは，同じく富山湾深層水を用いて15ないし20℃でバッチ培養して得られたＣ､Ceﾉz"oJpOrl"71の細胞濃度14.4〜15.5×lOl細胞／ｍｌ（梅田ら2000）の２〜３倍に相当する。

Ａｉｒｐｕｍｐ〒,rL三！
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mtrateddeep‑seawater＋Ｃ・Ｃｅﾉ．
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Aeration:ｌＬ/ｍiｎ

Fig.2.DiagramshowingthcdesignusedfbrrearingtheI･cdseaurchinPse"〔/oce""℃"ｲｓｄ ノゼ "spluleuslarvae

アカウニ幼生の飼育方法アカウニ（親ウニ）は1999年12月27日に富山県魚津市地先で採取したものを用い，ＫＣＬ法により生殖腺に刺激を与えて卵と精子を採取し，受精卵を得た。２日後，プルテウス幼生を確認し，これを三角フラスコ（2000ml）に移し（飼育０日目)，飼育を開始した。

飼育装置の概略はFig.2に示した通りで，２０±１℃に設定した恒温器に三角フラスコを置き，グラスフィルター（GF／Ｃ，0.45,ｍ）でろ過した深層水1500mlを飼育水とした。飼育密度は83.3個体／Ｌ（125個体／1500ｍl）で，幼生が均一になるよう約ｌＬ／分の通気を行った。飼育水温は約20℃，照度はlOOOluxとし，明暗周期を１２時間ずつに調整した。換水は２口に一度行い，全量の２／３を排して，その分の新しい飼育水（ろ過した深層水）にＣｃｅﾉmoSPorI"〃を混ぜて補充した。

飼育実験では，Ｃ､ｃｅＩｗｏ oＩ．!"〃の給餌量を変えた２試験区を設け，それぞれ1.0×１．０'細胞／ｍｌ（対照区，石川・野口（1978）を参考に決定)，0.25×101細胞／ｍｌ（以下，ｌ／４給餌区という。
富山湾沿岸域の平均的な柄物プランクトン密度に相当）の密度になるように給餌した。アカウニの幼生については，飼育開始後０〜50日目まで５１ I毎に検鏡して計数したほか，形態を観察し，石川・野口（1978）を参考にして成長段階を調べた。計数結果は生存率（％）の推移としてまとめ，観察日毎に成長段階の割合を整理して成長追跡の指標とした。

結果

検鏡時におけるアカウニ幼生の各成長段階をFig.３，成長段階毎の個体数組成および生存率を富山県水産試験場研究報告第１３号（2001）

3６

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4‑armpuIteus

Fig.４.Frequencyofgrowthstagcs(a,ｃ)andsurvivalrates(b,ｄ)oflhercaredrcdseaurchin,Pseudocenlrolusdeprcssus,iedwith
fo()ddiatomsindensitiesof1.0×1.0$cells／ｍｌ（a,ｂ）and0.25×１０$cells／ｍｌ(c,。)．

小善・梅田・藤田：深層水培養珪藻によるアカウニ幼生飼育

3７Fig.4に示した。
対照区対照区では飼育５日目（受精後９日目，以下，飼育日数のみを表示）に６腕幼生が出現し，その後，飼育15日目に８腕前期幼生，２０日目に８腕後期幼生，２５日目に変態期幼生，そして30日目に稚ウニが出現した。飼育25日目の各成長段階の個体数組成（Fig4a‑b）を見ると，６腕幼生が18.4％，８腕幼生が78.4％（前期65.2％，後期13.2％）を占め，４腕幼生は見られなくなった。さらに，成長が進んだ飼育35日目には，６腕幼生は見られなくなった。生存率は，飼育２５日目まで90％以上で良好な結果であったが，３０日以降，変態期から稚ウニに移行する段階で急激に生存率が低下し，飼育50日目では9.6％（１２個体）で，稚ウニに至ったのは８個体であった。
１／４給餌区ｌ／４給餌区では飼育５日目に６腕幼生，２０日目に８腕前期幼生，２５日目に８腕後期幼生，３０日目に変態期幼生，そして35日目に稚ウニが出現した。飼育25日目の各成長段階の個体数組成(Fig.4c‑d）を見ると，４腕幼生が12.2％，６腕幼生が45.6％，８腕幼生（前期40.4％，後期1.8％）が42.2％となり，飼育１０日目以降，対照区に比べて成長の遅れが目立つようになってきた。また，成長のばらつきが大きくなり，飼育50日目まで６腕幼生が存在していた。生残率は，対照区と同様に25日目まで90％以上を保っており，飼育40日目でも78.4％と高い値を示していたが，８腕後期幼生が増加して変態期に移行する時点で急激に生残率が低下し，飼育50日目では１１．２％（１４個体）となり，稚ウニに至ったのは５個体であった。

考察

アカウニの種苗生産では，浮遊幼生の餌料としてchaemcemsgmcj"sが一般的に用いられている（川原1996)。金丸･伊東（1987）はＣｇｍｃｊ"sを用い，1.25×1.04〜１０×1.04細胞／ｍｌの範囲で給餌量別にアカウニ幼生の飼育試験（水温約20℃）を行っており，そのうちの1.25×1.04細胞／ｍｌが本実験の対照区のCcemrospor"腕濃度（１．０×1.04細胞／ｍｌ）と近い。成長は本実験の対照区の方が若干遅い程度で，生存率96％(飼育20日後）も金丸･伊東（1987）の93％（飼育１７日目）と比べて遜色がないことから，連続培養したccemrospo畑加はアカウニ幼生の餌料として十分に使用できると考えられる。本実験および金丸・伊東（1987）により，珪藻の濃度がある程度高い方がアカウニ幼生の成長も良いことは明らかであるので，今後，金丸・伊東（1987）と同じく高濃度レベルで給餌し，しかも，伊東・有吉（1987）が行っているように成長段階に応じて給餌量を引き上げるようにすれば成長は改善できるであろう。なお，金丸・伊東（1987）が述べているように，餌料珪藻の培養では，原生動物や細菌が混入するとそれに伴って珪藻の増殖速度が低下し，アカウニ幼生の成長に遅れやばらつきが生じたり生存率が低下したりすることがあるが，本実験のように清浄性の高い穂過深層水を使用すればこのような心配はなくなると考えられる。
本実験において，対照区では変態期から稚ウニへの移行時，ｌ／４給餌区では８腕後期幼生から変態期への移行時に生存率が急激に減少した。このため，飼育開始から変態期を経て最終的に稚ウニになった幼生の割合はそれぞれ6.4％と5.0％にすぎなかった｡谷･伊東(1979)や伊東(1987）
は，アカウニの八腕後期幼生の着底・変態には一定量の付着珪藻が必要で，極端な例では付着珪藻が存在する場合にのみ変態が完了するとしている。したがって，今後，八腕幼生期に達した段階で，同じく深層水を用いて容易に増殖させることができる付着珪藻を給餌することにより，安富山県水産試験場研究報告第13号（2001）

3８定したアカウニの種苗生産が可能になるであろう。

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