東京農総研研報 10：33-37，2015

研究資料

凍結精液によるトウキョウ X 遺伝資源保存と効率的子豚生産に向けた検討
鈴木亜由美*・上原由史 a

東京都農林総合研究センター

摘要

凍結融解後の精子活力が高いブタ凍結精液の作製方法が，大分県と広島大学により共同開発された（「受胎率および産子数向上豚凍結精液およびその製法」，特許 2007-325313）。この方法に従ってトウキョウ X 種雄豚 19 頭の凍結精液を作製し，遺伝資源として保存した。このうち 10 頭については人工授精により子豚生産能力を確認し，一部は子宮角深部注入法による１発情中１回の人工授精でも受胎・分娩に至った。いずれも自然交配時に近い産子数が得られたことから，作製した凍結精液は生産現場における種豚生産への活用が期待できる。

キーワード：トウキョウ X，ブタ凍結精液，人工授精，子宮角深部注入法
東京都農林総合研究センター研究報告 10: 33-37, 20152014 年 10 月 15 日受付，2015 年 1 月 14 日受理ためには，より実用性の高い精液保存技術が求められる。
緒 言

近年，凍結融解後の精子活力が高いブタ凍結精液作製方法が，大分県農林水産研究指導センターと広島大学にブタ精液の凍結保存技術の歴史は古く，様々な改良がよって共同開発され，特許が取得された。東京都農林総

なされてきたが，融解後の精子活力が低いため受胎率が合研究センターでは，両者と特許技術使用許諾契約を締

低く，産子数も自然交配に比べて少ないことから，一部結してこの製法を導入し，トウキョウ X の凍結精液を作の種畜生産などで利用されるにとどまっており，生産現製した。従来のストロー法（豚凍結精液利用技術マニュ場ではほとんど利用されていない。東京都で育種改良しアル，一部改変）
で同じ精液を用いて凍結精液を作製し，た銘柄豚・トウキョウ X においても，これまで維持群の融解後に比較したところ，特許製法では運動精子率が高凍結精液を作製・保存しているが，資質改良を目的に若く推移し，精子生存指数の低下が緩やかで，高い精子活干の利用実績はあるものの，生産効率の問題などから，力が長時間維持されることが示され（上原・太田，2011），あまり活用されていない。しかし，凍結精液は優秀な種種豚生産など実用性が高いと推察した。

雄豚の能力を後世でも利用するための有効な手段であり，これまで凍結精液による人工授精は，融解後の精子活また古い世代の精液を利用して，維持群の近交係数の上力が低いことから，１発情期間中に２～３回繰り返して昇を抑えることができる。凍結精液を単なる遺伝資源の実施することが推奨されてきた。しかし，既に廃用され保存だけ留まらず，優良種豚の生産などに活用していく

た種雄豚などの精液は数量に限りがあることから，使用*著者連絡先 鈴木亜由美 Ｅmail a-suzuki@tdfaff.coma
現・東京都農業振興事務所－ 33 －

東京都農林総合研究センター研究報告第 10 号（2015 年）

量は最小限に抑える必要がある。今回特許製法により作子注入器は一般的な頚管カテーテルなど数種を用いた。

製した凍結精液は，融解後の高い精子活力が維持される

受胎はノーリターン法により鑑定し，青梅畜産センターことから，１発情期間中の人工授精回数を減じたときのにおける通常の母豚管理方法に従い分娩させた。

受胎の可能性について検討した。
今回，遺伝資源として作製・保存した凍結精液による

3. 人工授精回数の低減化の検討

生産性を確認するため，種雌豚に人工授精して受胎・分ブタの発情はおよそ21日周期で回帰し，約２～２日半娩率および産子数を調査し，また希少な種雄豚の凍結精持続する。排卵は発情開始から25～40時間後に起こると液を効率的に利用するため，人工授精回数の低減を試みされ，発情後半の交配および人工授精が有効であるとさたので報告する。

れている（岩村，2005)。また山口・村上（2007）は，性腺刺激ホルモンの投与により排卵の同期化を施すことで，材料および方法凍結精液による１回の人工授精での受胎を報告している。
今回作製した凍結精液は，融解後の高い精子活力が長く

1. 凍結精液の作製維持されることから，排卵のタイミングに近いと推測さ青梅畜産センターで飼養している，トウキョウX維持れる，種雌豚の発情の中～後期に１回または２回人工授群の種雄豚20頭から精液を採取した。種雄豚を偽牝台ま精して，受胎を検証した。太田・川手（2009）は凍結精

たは発情した種雌豚に乗駕させ，膠様物をガーゼで除き液の人工授精において深部注入カテーテル（ファイア・ながら手圧法で濃厚部精液のみ40から50ml採取し，特許フレックス）を用いて高い受胎成績を得ていることから，製法に従って処理した。処理した精液はストロー精液管

今回も同タイプの子宮深部注入用カテーテル「TAKUMI」（富士平工業）に0.5mlずつ封入し，液体窒素上で20分間（富士平工業，図１。以下，深部注入カテーテル）を用予備凍結した後，液体窒素中に投下して凍結した。

いた。種雌豚の外陰部よりガイドカテーテルを子宮頚管まで挿入してから，インナーカテーテルを子宮深部へ挿2. 人工授精による凍結精液の子豚生産能力確認

入し，40～60cm挿入したところで精液をゆっくりと注入作製した凍結精液による受胎・分娩を確認するため，した。人工授精に用いる種雌豚は，雌側の不受胎要因をトウキョウＸ種雌豚（未経産～13産）に人工授精した。

除外するため，本試験における人工授精の前後に自然交１回の人工授精には0.5mlストロー10本（精子数約50億）配によって受胎・分娩の実績があるものとした（未経産を使用し，37℃の温水に１分間浸して融解し，pHを7.0豚を除く）。また，カテーテル挿入時に出血または精液の～7.1に調整した融解液（モデナ液）45mlに懸濁した。こ

逆流が認められた場合は，例数から除いた。平均産子数

れを50ml注射筒に充填して精子注入器に装着し，自然発は一元配置による分散分析で解析した。

情した種雌豚に１発情期間中１～３回人工授精した。精ガイドカテーテル

インナーカテーテル

図１ 深部注入カテーテル－ 34 －

トウキョウ X 凍結精液の繁殖能評価

結果と考察

群の中では高齢な種雄豚を中心に，種雄豚１頭につき100本以上の保存を目標にしたが，精液採取が困難な個体

1. 遺伝資源保存としての凍結精液があり，すべての種雄豚で十分な本数を保存できず，血トウキョウＸ維持群の10の血統グループから各血統１統ごとの保存数にも偏りが生じた。今後，作製・保存数頭以上，のべ20頭の種雄豚から合計65回採精し，凍結処が少ない血統については，次世代の種雄豚精液を凍結保理を行った。このうち，融解時の精子運動率が50⧻（活発存し，遺伝資源として補完していく必要があるが，そのに運動している精子が50％存在する）未満だったものは前提として，精液の採取は種雄豚に早期から偽牝台への夏季を中心に５例（４頭）あったが，他はすべて50⧻以上乗駕トレーニングを施し，精液採取に馴致させることがだった。最終的に，19頭の種雄豚の凍結精液2,850本を遺肝要である。

伝資源として保存した（表１）。今回は世代が古く，維持表１

凍結保存したトウキョウＸ種雄豚精液

種雄豚№

世 代

血 統

6644
7943
9177
6229
3003
6751
3645
3258
3857
3682
5179
7393
7795
2923
6844
7988
7311
9418
6127

8
9788888899999910899A
A
A
B
C
C
D
E
E
F
F
G
G
H
H
H
I
I
J

保存数 a)(0.5ml，本)
39
196
48
56
55
43
231
83
9412
8145
199
178
129
495
247
92
165

融解後
活 力 b)
70⧻
50⧻
60⧻
50⧻
50⧻
60⧻
80⧻
70⧻
50⧻
50⧻
60⧻
65⧻
70⧻
75⧻
70⧻
60⧻
70⧻
60⧻
70⧻a)2014年8月現在.
b)100+++(すべての精子が活発に運動する)を最高値とした，各作製ロットの最高値
⧻

2. 人工授精による凍結精液の子豚生産能力確認

80⧻から最も低いもので50⧻だった。産子数は平均7.0頭

種雌豚への人工授精の結果，のべ18頭が受胎・分娩に（死産・黒子を含む）であり，トウキョウＸ維持群の平至り，種雄豚10頭の凍結精液が子豚生産能力を有するこ

均産子数（2012～2013年196頭の実績）8.8頭より1.8頭少とが確認された（表２）。受胎が未確認の種雄豚９頭のうなかった。しかし，受胎した種雌豚はすべて分娩に至っ

ち，７頭は既にへい死しているかまたは精液採取が非常ていることから，子豚生産能力は十分にあると言える。に困難な個体であり，保存数が十分でないため，今回の以上の結果から，今回作製・保存した凍結精液は，人工試験では確認を断念した。また，種雄豚№2923と№7943

授精により自然交配に近い頭数の産子を得ることが可能については，人工授精を複数回実施したが，今回は受胎であり，トウキョウＸの遺伝資源保存として有効な手段を確認できなかった。と言える。

受胎・分娩に至った凍結精液の融解時の精子活力は，－ 35 －

東京都農林総合研究センター研究報告第 10 号（2015 年）

表２

受胎・分娩に至った凍結精液（種雄豚）

種雄豚№

世 代

血 統

融解後
精子活力

受胎頭数

産子数 *（頭）

3003
3645
3258
3682
7795
7393
7988
6844
7311
6127

88899910989C
D
EFGGHHI
J60⧻
60⧻～80⧻70⧻
50⧻
60⧻
60⧻～70⧻
50⧻
60⧻
70⧻
50⧻

15112312112.0
8.4
3.0
3.0
7.5
7.711.06.5
8.06.0*複数例あるものは平均値，黒子を含む

3. 人工授精回数の低減化の検討

る頚管カテーテルを用いて人工授精を実施していたが，種雌豚16頭の発情確認後６から29時間後に，深部注入精液の逆流が多発したため受胎率が低く，また受胎してカテーテルで１回人工授精した結果，７頭が受胎・分娩も産子数が少なかった（表４）。深部注入カテーテルは精に至った（表３）。受胎した精液は種雄豚５頭のもので，液の逆流が起こらず，未経産豚にも使用できることから，特定の種雄豚精液ではないことから，１回の人工授精にトウキョウＸに適した人工授精器として今回の試験に用よる受胎の可否は，精液の能力差である可能性は低いといたが，人工授精の方法をさらに検討し，受胎率を向上考える。また受胎率は，上記期間中に２回人工授精したさせる必要がある。

群と同等の結果だった（表３）。しかし，いずれも同様タ

一方，産子数は受胎した種雌豚が直近に自然交配で分イプの深部注入カテーテルを使用した太田らの報告より娩した時と比較して，有意な差が見られなかったことかも受胎率・産子数ともに低い結果だった。この原因としら（図２），今回作製した凍結精液は人工授精の１回またて，試験期間中のトウキョウＸ維持群の，自然交配によは２回の実施で，自然交配時と近い産子が得られると期る受胎率が59.4％と低下しており，群としての繁殖性が待される。

低下していることが一因にあると考えられる。また，深

今後は受胎率の向上が課題であるが，岡崎ら（2011）

部注入カテーテルを挿入した際に出血のあった個体が散は融解液に精漿を加えることにより，液状精液と同等の見されたことから，出血は見られなくてもインナーカ受胎成績を得ており，これらの知見を参考に成績向上をテーテル挿入時に子宮内を損傷させ，受胎に影響したこ目指していきたい。とも推察される。試験開始当初，一般的に使用されてい表３

深部注入カテーテルを用いたときの受胎成績

人工授精
回数

実施種雌豚
受胎種雌豚
凍結精液
（のべ頭数）（頭）(種雄豚頭数)

1

172

13

受胎率（％）

産子数 *
（頭）

7

5*

41.2

7.1±3.2

6

**

46.2

7.5±3.35*平均値±標準偏差，黒子を含む

表４

異なる人工授精器による産子数の比較

母豚№

4483

凍結精液
種雄豚№

作製日

3645

2011.8.5

人工授精

産次

産子数*
（頭) *
4(1)

回数

カテーテル

3

頚管

101

深部注入

1111(1)*()内は黒子－ 36 －

トウキョウ X 凍結精液の繁殖能評価（頭）
14121086
420
1 回(n=7)
深注１回(n=6)

2 回(n=6)
深注2回(n=6)

自然交配(n=22)

図２ 人工授精回数の違いによる産子数の比較(エラーバーは標準偏差，ｎは例数を表す｡)

近年，トウキョウＸの肉質にばらつきが多く見られ，引用文献

長年の維持による開発当初からの種豚の資質変化が指摘されている。これに対し，古い世代の凍結精液を種豚生

岩村祥吉（2005）豚の繁殖生理と繁殖障害（１）．All About

産に利用することで，種豚の斉一性を高め，トウキョウ

Swine 26：13-17．

Ｘの品質安定を図ることができる。また夏季など精液性上原由史・太田久由（2011）凍結精液作製法の違いによ状が低下する時期や，種雄豚の乗駕欲不振の際でも，凍る精子の生存性へ及ぼす効果．平成 23 年度東京都農

結精液の人工授精により生産性の低下を抑制できる。今

総研研究速報：61-62．

後，多様な種雄豚の凍結精液を作製・保存し，トウキョ

太田久由・川手秀一（2009）豚精液の凍結技術開発～トウＸの優良資質の活用を進め，生産拡大に役立てていく。

ウキョウＸの凍結精液利用による種豚の近交係数維
持～．平成 20 年度東京都農総研成果情報：193-196．

謝 辞

岡崎哲司・秋好禎一・管 正和・手島久智・島田雅之（2011）
精漿含有融解液を用いた豚凍結精液による人工授精

本研究を実施するにあたり，凍結精液の作製方法についてご指導・ご助言いただいた大分県農林水産研究指導

試験．日豚会誌 48：164-168．
丹羽太左衛門監修（1989）豚凍結精液利用技術マニュアセンター岡崎哲司氏，トウキョウＸの精液採取や種雌豚の繁殖管理にご協力いただいた当センター豚班職員に厚ル．日本家畜人工授精師協会発行：34-38．
山口昇一郎・村上徹哉（2007）豚の排卵同期化・定時１く御礼申し上げます。

回人工授精における凍結融解精子の活力および人工授精実施時間の違いが繁殖成績に及ぼす影響．福岡
県農業総合試験場研究報告 26：65-68．

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