資料１－１

カルミン 指定のための検討報告書

2011 年７月１日
厚生労働省食品安全部基準審査課

目

次

１．

カルミン指定の必要性

1２．

起源又は発見の経緯及び外国における使用状況

2

１）

起源又は発見の経緯

2

２）

外国における使用状況2

３．

物理化学的性質及び成分規格案

7１）

物理化学的性質等

7

（１）

名称、定義

7

（２）

化学式、構造式、分子量

7

（３）

性状

8

（４）

性質

8

（５）

製造方法

8

２）

成分規格案・他の成分規格との対比表及び成分規格案の設定根拠

9

（１）

成分規格案

9

（２）

他の成分規格との対比表

10

（３）

成分規格案の設定根拠

11

３）

安定性

11

４）

食品中の分析

11４.

有効性及び必要性

12１）

食品添加物としての有効性及び他の同種の添加物との効果の比較

12

（１）

基礎的知見

12

（２）

食品への利用12２）

食品中での安定性

12３）

食品中の栄養成分に及ぼす影響

12５.

体内動態（吸収・分布・代謝・排泄）

12

６.

安全性

12

１）

単回投与毒性試験

12２）

反復投与毒性試験

13３）

変異原性試験

15４）

発がん性試験

19５）生殖発生毒性試験

20６）

一般薬理試験

24

７）

ヒトについての知見

25

７.

国際委員会などにおける安全性評価

31

１）

FAO/WHO 合同食品添加物専門家会議（JECFA）における評価

31２）

米国 FDA における評価

31３）

欧州連合における評価

3２

８.

検討委員会における安全性評価と ADI の試算

32

９.

推定摂取量

33

１０.

使用基準案

33

（参考１）

カルミン、カルミン関連物質の名称・定義について

引用文献一覧

1

1. カルミン指定の必要性

23

カルミン（Carmine）はエンジムシ（Dactylopius coccus Costa）の雌の乾燥虫体（コチニ4ール）から得られる赤色色素（主たる染色素はカルミン酸）のアルミニウムレーキ化合物若し

5

くはアルミニウム・カルシウムレーキ化合物を主成分としたものであり(文献 11)、欧米諸国

6などにおいて食品の着色料として広く使用されている添加物である(文献 1、2、15)。

7

FAO／WHO 合同食品添加物専門家会議（JECFA）では、第 18 回会合（1974 年）、第 21 回会合

8

（1978 年）において評価されたが、ADI の設定には至らなかった(文献 3、4、7)。第 25 回会

9合（1981 年）でカルミンのアンモニウム塩及び同じ当量のカルシウム、カリウム、ナトリウ

10

ム塩について暫定 ADI：0－2.5mg/kg 体重が設定された(文献 5、8)。次いで第 26 回会合（198211年）において引き続き評価を行い、ADI：0－5.0 mg/kg 体重/日が設定されている(文献 6、9)。

12

その後、第 55 回会合（2000 年）には、コチニール抽出物及びカルミンについてアレルギー13

誘発の可能性について検討を行い、これらは特定の個人に対しアレルギー反応を惹き起こすと

14

結論し、これらが含まれる食品と飲料について注意を喚起する必要があるとし、また、成分規15格の改正が行われている(文献 2)。

1617

一方、米国においては、コチニール抽出物及びカルミンは GMP 管理のもとで食品一般への着色料として使用が認められている(文献 12)。

18

また、欧州連合では、EC 委員会指令によって食品に使用できる添加物(E120)として認めら19れており(文献 14)、安全性についても上記 JECFA と同様に ADI：0－5.0 mg/kg 体重/日を設定20している(文献 37)。

21
22
23
24

一方、わが国においては、同種の着色料としてコチニール色素が既存添加物として使用が認められているが(文献 21)、上記のカルミンについては未指定の添加物である。
従って、わが国では、カルミンの食品の製造加工への使用並びにこれらを使用した食品の輸入は禁止されている。

25

また、厚生労働省としては、平成 14 年７月、薬事・食品衛生審議会において国際的に安全26性が確認され、かつ広く使用されている食品添加物については、企業からの指定要請を待つこ27となく、国が主体となって安全性評価等を行い、指定の方向で検討していく方針を示している

28

ところである。

29

カルミン（Carmine）は前述のように国際的に安全性が評価され、かつ海外においても広く30使用されている食品添加物であることから、平成 14 年 12 月 19 日に開催された薬事・食品衛31

生審議会食品衛生分科会毒性・添加物合同部会において、上記の方針に従い指定対象の品目と

32

された。

33
34

以上のことからカルミン（Carmine）について国際的整合性を図る目的で、食品添加物として指定することについて検討を行う必要がある。

35

1

1

２．起源又は発見の経緯及び外国における使用状況

23１）起源又は発見の経緯

4

カルミンは、サボテンに寄生するエンジムシ（Dactylopius coccus Costa）の雌の乾燥虫体5であるコチニールから得られる赤色色素（主たる染色素はカルミン酸）のアルミニウムレーキ

6

化合物若しくはアルミニウム・カルシウムレーキ化合物で、古くは南米のマヤ文明において染7料として利用、また 16 世紀にスペイン人が南米からヨーロッパに持ち込んだことに由来する

8と言われる。その後安価な合成染料、着色料の開発に伴い、カルミンの利用は落ち込んだが、91980 年以降天然系着色料の普及に伴いカルミンの利用も息を吹き返した。

10

米国では 1960 年代から食品、医薬品、化粧品の着色料として使用されている。わが国にお11いて、カルミン自体は未指定の食品添加物であるが、コチニールから水又はエタノールで抽出12物して得られるカルミン酸を主成分とする「コチニール色素」は既存添加物の１つであって、

13

成分規格が定められている(文献 21)。なお、カルミンはわが国において医薬品、化粧品用色14

素として使用されている（文献 17）
。

15
16

２）外国における使用状況

17（１）JECFA における評価

18

カルミン関連物質は FAO／WHO 合同食品添加物専門家会議（JECFA）、第 18 回会合（1974 年）、

19

第 21 回会合（1978 年）において評価されたが、一日摂取許容量（ADI）設定には至らなかっ20

た(文献 3、4、7)。第 25 回会合（1981 年）においてカルミンのアンモニウム塩及び同じ当量21のカルシウム、カリウム、ナトリウム塩について暫定 ADI：0‐2.5mg/kg 体重/日が設定された

22(文献 5、8)。次いで、第 26 回会合（1982 年）において引き続き評価を行い、ADI：0‐5.0 mg/kg

23

体重/日並びに成分規格が確定した(文献 6、9)。

24

その後、第 55 回会合（2000 年）では、FAO／WHO 合同食品添加物・汚染物質部会（CCFAC）

25の要請によりコチニール抽出物及びカルミンの共存蛋白質によるアレルギー誘発性の検討を26行った結果、これらは特定の人にアレルギーを惹き起こす可能性があると結論し、成分規格を27

改定するとともに食品中での表示（含有表示）を求めた。但し、ADI：0‐5.0 mg/kg 体重/日

28は維持された(文献 2)。更に、第 59 回会合（2002 年）では、重金属規格改訂の JECFA 方針に

29

沿い見直しがなされ、鉛、ヒ素の規格について改訂がなされた(文献 52)。

3031（２）米国における使用32

一方、米国においては、コチニール抽出物（水-アルコール抽出物）及びカルミン（コチニ33ールの水抽出物から得られるカルミン酸のアルミニウム若しくはアルミニウム-カルシウムレ

34ーキ）は、連邦規則（21CFR-§73.100）で検定不要の（成分規格への適合性を国として試験・35

検査し確認する必要はないとされている）着色料の１つとして、食品一般に一般的な適正製造36

規範(GMP)のもとでの使用が認められている(文献 12、59)。また、成分規格も連邦規則連邦規2

1

則（21CFR-§73.100）として設定されている(文献 12)。一般的な適正製造規範は、連邦規則

2（21CFR-§182.1）に以下のように規定されている(文献 40)。

3
4
5
6
7
8

適正製造規範(GMP)に係る規定① 食品への添加量は、物理的、栄養的若しくは技術的に食品に効果を与えるのに適正な使用量以下とする。
② 食品自体の物理的、技術的効果を目的とせず、製造、加工、包装に使用した結果、食品の成分になった物質の量は最小限に抑える。

9③ 使用物質は適切な食品グレードであって、食品成分として調製・処理されること。食品10

医薬品庁長官は要請がある場合、成分規格と用途に関して、特定の等級若しくはロットが11

食品の使用目的に合致する純度があるか、また、意図した目的に使用した場合、一般に安12全であると有資格専門家が認めるか、について見解を示す。

13

また、2006 年１月 30 日 FDA は、カルミン摂取は人によりアレルギー症状を誘発することか

14

ら、全ての食品の原材料表示欄にコチニール抽出物又はカルミンを含むことを表示することを15

提案していたが(文献 16)、2009 年 1 月 5 日付けで表示義務規定が公布され、2011 年 1 月 5 日

16から施行されることとなった（文献 54）。

17

コチニール抽出物及びカルミンの食品への生産出荷量は、NAS/NRC による GRAS 物質等の全18

米生産出荷量調査（1987 年）
において、1976 年、1987 年それぞれについて、
1,600 ポンド
（725kg）、

19

1,900 ポンド（860kg）と報告されている(文献 33)。

20
21
22
23

（３）欧州連合における使用
欧州連合でカルミンは、カルミン酸、コチニール抽出物と共に特定の食品に使用できる着色料(E120)として認められている[表 2－1]及び[表 2－2] (文献 14)。

24

欧州連合において、カルミン関連物質は食品科学委員会において着色料として評価され、上25述の JECFA 評価同様一日摂取許容量（ADI）5mg/kg 体重が設定された(文献 37)。成分規格も26定められている(文献 15)。

27

[表 2－1]（Annex III 抜粋）
食

品

最高濃度

アメリカーノ（アルコール飲料の一種）

100 mg/l（単独若しくは他の着色料と複合で）

苦味ソーダ、苦味ワイン（EU 規則 No 1601/91）

同上

果実風味の朝食用シリアル200 mg/kg（単独若しく
は他の着色料と複合で）ジャム、ゼリー、マーマレード（EU 規則 No 79/693 及び低カロリー製品を含め他の100 mg/kg（単独若しく

同様の果実調製品）

は他の着色料と複合で）

3

ソーセージ、パテ、テリーヌ

100 mg/kg

少量（最低 4%）の野菜及び/又はシリアル）を含む肉バーガー

100 mg/kg「チョリソ」ソーセージ、「サルチコン」

200 mg/kg「パストｳルマ」（外皮が食べられるもの）

必要量

1
2

[表 2－2]（Annex V 抜粋）
食品

最高濃度（単独、若しく
は他の着色料と複合で）非アルコール着香飲料

100 mg/l

果実及び野菜の砂糖漬け、Mostarda di fruta

200 mg/kg

レッドフルーツのプリザーブ1

200 mg/kg

菓子

300 mg/kg

デコレーション及びコーティング

500 mg/kg

高級ベーカリー（例 ビスケット、ウエハース）

200 mg/kg

食用氷

150 mg/kg

フレーバー入りプロセスチーズ

100 mg/kg

フレーバー入り乳製品などのデザート

150 mg/kg

ソース、調味料（カレー粉、タンドーリなど）、漬物、薬味、チャツネ、ピッカリーニ

500 mg/kg

マスタード

300 mg/kg

魚類、甲殻類ペースト

100 mg/kg

調理した甲殻類

250 mg/kg

鮭代用品

500 mg/kg

すりみ

500 mg/kg

魚卵

300 mg/kg

燻製魚

100 mg/kg

スナック：乾燥、セイボリーポテト2、シリアル、若しくはでん粉を主成分とするスナッ
ク

200 mg/kg－エクストルーダー3若しくは膨化処理したセイボリースナック製品4

100 mg/kg－その他のセイボリースナック製品、被覆ナッツ

1

一般にプリザーブとは「保存食」のことで、ピクルス、ジャム、塩漬け、乾燥品など素材の原型を残しているものが該当する。日本では濃度の高い糖液で煮た果物の原形を留めているジャムが知られている。

2

セイボリーとは「塩味の効いた」を意味しており、セイボリーポテトといった場合、「塩味の効いたポテト」を意味する。例：フライドポテトなど

3

増粒、整粒され、練り出されたものを加工処理したものを意味する。

4

塩味の効いたスナック製品を意味する。

4

可食チーズ皮、可食ケーシング

必要量

体重抑制の為の食事代替え用完全調合食

50 mg/kg

医療用の完全調合食若しくは栄養補助食品

50 mg/kg

5

液状の補助食品、dietary integrators

100 mg/L

固形の補助食品、dietary integrators

300 mg/kg

スープ類

50 mg/kg

植物たん白主体の肉・魚類似品

100 mg/kg

スピリッツ（アルコール容積濃度 15%以下の製品を含む、200 mg/L

但し、Annex II, III で掲げたものを除く）
芳香ワイン、芳香ワイン主体飲料、芳香ワインカクテル（規則(EEC)No 1601/91 に記

200 mg/L

したもの、但し Annex II, III で掲げたものを除く）
果実ワイン（非発泡、発泡）、シードル（cidre bouche 以外）、ペリー酒、及び上記の200 mg/L

芳香付け製品1

英国における食品添加物の摂取量調査において（英国政府農林水産食糧省、1984－1986 年

2

調査）、カルミン関連物質の摂取量は合計量として 0.1mg/人/日、と報告されている(文献 38)。

3

また、欧州連合各国が最近実施した食品添加物の摂取量調査において、カルミン関連物質の4

合計摂取量（使用対象食品を含む食品群喫食量に許容最高濃度を組み合わせて算出した理論最5高摂取量）は、成人、幼児それぞれ、ADI(5mg/kg 体重)の 3－22% (デンマーク、スペイン、イ6

タリア、英国、ノルウエー）、80%(英国）とされている(文献 39)。

78（４）オーストラリアにおける使用

9

オーストラリア、ニュージーランド両国は 1995 年に締結された合意に基づいて食品規格基10

準制度の統合化を進め、2002 年７月より FSANZ (Food Standards Australia New Zealand) の11

名称・組織で統一食品規格基準（The Australia New Zealand Food Standards Code）を公布・12

施行している。カルミンとコチニール抽出物は、この規格基準のもと指定されている食品添加13物に含まれ、食品一般に必要量使用することが認められている。

14

FSANZ は 2006 年以来、食品添加物として使用を認めている着色料のうち、タール系合成色

15

素（14 品目）及びカルミン・コチニール抽出物及びアナトー色素,2 種類の天然系色素につい16て食事由来摂取量の調査を実施し（オーストラリア国内）、結果を 2008 年に公表した（文献1732）。同調査では、市場で販売されている加工食品・飲料（合計 1000 点以上）中の上記着色料

18

濃度を測定し、測定値より着色料それぞれの食品群別平均濃度及び最大濃度を算出した。次に

19

各濃度データについて、別に調査した年齢層別食品群別摂取量データ（1995 年）と組み合わ

20

せて、国民１人一日当たりの平均摂取量及び 90 パーセンタイル摂取量を算定すると共に、そ21

れぞれの着色料について JECFA が設定した一日摂取許容量（ADI）と比較検討した。カルミン・
5

健康食品（日本で言うダイエット食品）の原料を指す。

5

1

コチニール抽出物の摂取量は、食品群別平均濃度で算定した場合、国民全体の平均、90 パー

2

センタイル摂取者での摂取量は、いずれでも約 0.25mg/人/日（ADI の約 0.1%）であった。2－

3

5 歳児、6－12 歳児についても同様であった。カルミン、コチニール抽出物の摂取に寄与が大4

きい食品は、調味ソース類（savoury sauces）、ヨーグルト、アルコール飲料（Cordial）など

5であった。なお、カルミン、コチニール抽出物以外の着色料に関しても、幼児の摂取量を含め、6

懸念すべき結果は認められなかったと報告されている。

78（５）カルミン関連物質の国際機関における取扱い範囲、名称

9

カルミン、カルミン酸及びコチニール抽出物の JECFA、米国、欧州連合の規格における取扱10の有無を以下に記す。なお、カルミンの英名は、JECFA/欧州連合では Carmines と複数扱い、

11

米国の規格は Carmine と単数扱いである。和名として“カルミン類”が考えられるが、カルミ

12ン酸、コチニール抽出物との混同を避けるため、本報告書では米国と同様に“カルミン”と単13数扱いとした（但し、JECFA/欧州連合の規格品を記述する場合は複数扱い）。JECFA 規格のコ

14

チニール抽出物ではメタノールによる抽出も認めており、日本のコチニール色素とは製法上に15若干の違いもある。そこで、本報告では日本の添加物を指す場合はコチニール色素、JECFA な

16

ど欧米製品を指す場合はコチニール抽出物と記した。
〔（参考１） カルミン、カルミン関連物

17

質の名称、定義について 参照〕

18

添加物名称

19

JECFA

カルミン

カルミン酸

コチニール抽出物

20

Carmines（ADI 5.0mg/kg）

○

×

×

21

Cochineal Extract

×

×

○

○

×

○

○

×

×

○

○

○

22

(ADI 未だ設定されていない)

23

米国

24

FDA（21CFR§73.100）：

25

Cochineal Extract; Carmine

26

FCC：

27

Carmine

28

欧州連合

29

Cochineal, Carminic acid,30

Carmines

31

日本

32

コチニール色素（既存添加物）

×

○

○

33

カルミン（今回検討対象）

○

×

×

34

○ 含まれる； × 含まれない

35

6

1

３．物理化学的性質及び成分規格案

23１）物理化学的性質等

4（１）名称・定義

5

カルミン（Carmine）はエンジムシ（Dactylopius coccus Costa(Coccus cacti Linnaeus))

6の雌の乾燥虫体（コチニール）から得られるカルミン酸のアルミニウムレーキ化合物若しくは

7

アルミニウム・カルシウムレーキ化合物を主成分とするものである。JECFA 及び欧州連合の成8分規格では、主色素はカルミン酸の水酸化アルミニウムレーキ（アルミニウムとカルミン酸の9

推定比率 1：2）であって、市販製品は着色本体成分とアンモニウム、カルシウム、カリウム

10

若しくはナトリウムカチオンの単独もしくは複合塩として存在すると記されている（文献 11、

11

15）。一方、米国の成分規格（FDA 規格及び FCC 規格）では、水酸化アルミニウムを基質とし、12カルミン酸を主色素とするアルミニウムレーキ若しくはアルミニウム・カルシウムレーキと定13

義されている（文献 12、13）。原料虫由来のたん白質が含まれる。ほか、カルミン酸、少量の14

遊離アルミニウム塩を含むことがある（文献 11、15）
。

15
16
17

（２）化学式、構造式、分子量(文献 11、13、15)○ カルミン酸（carminic acid）

18

3,5,6,8-tetrahydroxy-1-methyl-9,10-dioxo-7-[(2R,3R,4R,5S,6R)-

19

3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]anthracene-20

2-carboxylic acid( IUPAC)

21

化学式：C22H20O13 ; 分子量（式量）492.39；

22

CAS 番号 1260-17-9（carminic acid)（文献 84）231390-65-4（carmine）（文献 83）

24

25
26
27
28
29

7

1

○ カルミン（Carmine）

2

カルミン酸のアルミニウムレーキ化合物の推定構造式

34M+: 陽イオン 1/2 Ca++, Na+, K+, NH4+567

カルミン酸のアルミニウム・カルシウムレーキ化合物は、上記化学構造式の「Al」が「Ca」で置き換えられている。

8
9
10

（３）性状
赤～暗赤色のもろい固体又は粉末である（文献 11、13、15）
。

11
12

（４）性質

13

本品は、においはないか又はわずかに特異なにおいがある。水又はエタノール(99.5％)、希14

酸にほとんど溶けないがアンモニア水又は水酸化ナトリウム液などアルカリに溶ける（文献

15

11、13）。

1617（５）製造方法18

サボテンに寄生するエンジムシの雌の乾燥体より、温～熱水で、若しくは温時含水アルコー

19

ルで抽出し、アルコールを留去しコチニール抽出物を得る。コチニール抽出物は必要な場合、

20

たん白分解酵素等の処理によりエンジムシ由来のたん白質を除去するなど精製処理される。精21

製処理品の清澄液に、カリミョウバンと酒石酸、カリミョウバンと塩化スズ、石灰乳などの沈22

殿剤等を加え、アルミニウム若しくはアルミニウム・カルシウムレーキ化合物を生成させ、沈23

殿物を分離・乾燥し製品とする。(文献 11、15、51、57、58)。

24

8

1

２） 成分規格案・他の成分規格との対比表及び成分規格案の設定根拠

2（１）成分規格案

3

カルミン

4

Carmine56

定義 エンジムシ（Dactylopius coccus Costa (Coccus cacti Linnaeus)）の雌乾燥虫体から7得られたカルミン酸のアルミニウムレーキ化合物若しくはアルミニウム・カルシウムレーキ

8

化合物を主成分とするものである。

9

性状 本品は，赤～暗赤色のもろい固体又は粉末である。

10

含量 本品を乾燥したものは，カルミン酸（C22H20O13＝492.39）として 50%以上を含む。

11

確認試験 (1) 本品に水と水酸化ナトリウム試液１滴を加えて溶かした液は，紫～赤紫色を

12

呈する。

13

(2) 本品に 0.1mol/L 塩酸を加えて溶かし，遠心分離して得られる上澄液は，だいだい色を14

呈し，490～497nm に極大吸収部がある。

15

純度試験 (1) 乾燥減量 20.0%以下（135℃，3 時間）

16(2) 灰分 12.0%以下

17(3) たん白質 25.0%以下

18ール法により試験を行う。

19
20

本品約 0.2g を精密に量り，窒素定量法中のセミミクロケルダ

0.05mol/L 硫酸 1 ml= 8.754 mg たん白質(4) アンモニア水不溶物 １％以下

21

本品を乾燥したもの約 0.25g を精密に量り，アンモニア試液 2.5ml を加えて溶かし，水を22

加えて 100ml とする。ガラスろ過器（1G3）でろ過し，ろ過器を 105℃で恒量になるまで乾

23

燥する。

24

(5) 鉛 Pb として 2μg/g 以下

25

定量法 本品約 0.10g を精密に量り，沸騰した塩酸（2mol/L）30ml に溶かし，冷後，水を加26

えて正確に 1,000ml とし検液とする。波長 494nm 付近の極大吸収部における検液の吸光度Ａ27を測定し，次式により含量を求める。

28

カルミン酸（C22H20O13）の含量 ＝

29

0.1  A
×100(%)
1.39  W

ただし，Ｗ：試料の採取量(g)30吸光度Ａの値が 0.650～0.750 の範囲に入らないときは，試料の採取量を変えて，再び試験を

31

行う。

32

9

（２）他の成分規格との対比表
日本(文献 21)
コチニール色素
カルミン酸を主成分

JECFA(文献 11)

FCC(文献 13)

FDA(文献 12)

EU(15 文献)

カルミン(Carmines)

カルミン(Carmine)

カルミン（carmine）

カルミン(Carmines)

カルミン酸のアルミニ
ウム・アルミニウム/
カルシウムレーキ
カルミン酸として50.0%以上
光沢のある赤色のもろい固体又は 暗赤色の
粉末
20%以下

カルミン酸のアルミニウム・アルミニウム/カルシウムレーキ
カルミン酸として 50%
以上
レーキ

カルミン酸及びその塩

乾燥減量

カルミン酸の水酸
化アルミニウムキ
レート（１：２）カルミン酸 50% 色価の規定
カルミン酸として以上
50%以上
赤～暗赤色のも 赤～暗赤色の粉末， 赤～暗赤色のもろ
ろい固体又は粉 塊，液体，ペースト い固体又は粉末
末
20.0%以下
規格無し
20%以下

20%以下

規格無し

灰分

12%以下

規格無し

12%以下

12.0%以下

12%以下

規格無し

たん白質

25%以下

2.2%以下＊

25%以下

25%以下

規格なし

規格無し

アンモニア 1%以下
水不溶物
重金属
規格無し

規格無し

1%以下

規格無し

規格無し

規格無し

40μg/g 以下

規格無し

規格無し

規格無し

40mg/kg 以下

鉛

2μg/g 以下

10μg/g 以下

2mg/kg 以下

2mg/kg 以下

Pb として 10ppm 以下

10mg/kg 以下

カドミウム

規格無し

規格無し

規格無し

規格無し

規格無し

1mg/kg 以下

水銀

規格無し

規格無し

規格無し

規格無し

規格無し

1mg/kg 以下

ヒ素

規格無し

規格無し

1mg/kg 以下

As として 1ppm 以下

3mg/kg 以下

サルモネラ

規格無し

As2O3 として4μg/g 以下
規格無し

認めない

認めない

認めない

規格無し

本規格案
定義

含量
性状

カルミン酸の塩＊カルミン酸濃度 50％換算では 16.2％以下

10

カルミン酸として
50%以上
赤～暗赤色のもろい
固体又は粉末（３）成分規格案の設定根拠
ほぼ，JECFA の規格に倣ったが、定義はカルミン酸のアルミニウムレーキ化合物のほか米国
FDA/FCC 規格はアルミニウム・カルシウムレーキ化合物も含むので国際整合の観点から後者も含むこととした。また、英名は JECFA/EU は Carmines と複数扱いであるが、内容が明確でない

5ので米国規格同様単数扱いとした〔（参考１）カルミン、カルミン関連物質の名称、定義について 参照〕確認試験法は，食品添加物公定書「コチニール色素」に倣った。
FCC の規格も JECFA の規格にほぼ同じであるが，JECFA 規格にある「アンモニア水不溶物」の規格はなく，ヒ素及びサルモネラに関する規格がある。本規格では，JECFA に倣い「アンモニア水不溶物」に関する規格を設定し，ヒ素に関する規格は設定しなかった。

10

たん白質は本規格では 25%以下であるが，「コチニール色素」では，2.2%以下となっている。
コチニール色素の含量は色価で定められており、10%溶液で 80 以上となっている。この色価を「コ
カルミン酸の濃度に換算すると（ε=5,800，0.02N 塩酸中）
，6.79%6以上となる。すなわち，
チニール色素」はカルミンよりもカルミン酸濃度がかなり低いものである。
「コチニール色素」のたん白質規格（2.2%以下）をカルミン酸 50%の濃度に換算すると，たん白質の規格は 16.2%

15以下に相当することになるが、今回の規格は JECFA 及び FCC の規格に合わせることとした。
JECFA，FCC 双方にある，「サルモネラを認めない」という規格は設定していない。これはカルミンの製造にはアルカリ水溶液中で加熱する工程があるので、サルモネラの生残は考えにくいことによる。
EU の規格は，かなり異なっているので参考にしなかった。

20
３）安定性
カルミンの色調は熱や光に対して安定である（文献 18）。
なお、カルミンの色調以外の安定性及びその分解物に係る知見ついては、PubMed 及びJ-DreamII で検索を実施したものの、見当たらなかった。

25
４）食品中の分析(文献 22)
カルミンの食品中からの分析法は、食品より水又はアルカリ性にした水で抽出し、Sep-pack
C18 で精製し、移動相に塩化セチルトリメチルアンモニウムを加えたイオンペアクロマトグラ
フィーで分離定量する。

30

6カルミン酸濃度換算値 6.79%について
分子吸光度係数ε=5,800 は、1mol/L のとき吸光度（Abs）=5,800 である。10％溶液で色価 80 のときの吸光度は800 なので、この時のモル濃度は 800/5,800=0.138 mol/L である。カルミン酸の分子量は492.39 であることから、計算すると 0.138×492.39=67.9g/L、よって 6.79%となる。

11

４． 有効性及び必要性
１）食品添加物としての有効性及び他の同種の添加物との効果の比較（１）基礎的知見（文献 11、18、19）

5

コチニール抽出物及びカルミンは国際的に最も広く使用されている天然系着色料の一つである。コチニール色素の色調は使用される食品の酸性度により橙色～赤色～紫色に変化するが、カルミンの色調は赤色で安定している。但し、カルミン酸含量が高くなるに従い明るい赤色から暗赤色を呈する。水溶性は低いが、赤色を呈する。強酸性若しくは強アルカリ性では水溶性が高くなる。

10（２）食品への利用 (文献 14、18、19)
カルミンはリキュール・イチゴミルクなどのアルコール及び非アルコール飲料、アイスキャ
ンデー・アイスクリーム・チョコレート・キャンデーなどの冷菓、菓子類、フルーツカクテル、
ジャム・ケチャップなどの農産加工品、チーズ、畜肉・魚肉加工品に巾広く使用できる。

15

カルミンは食品のほか、化粧品（口紅、アイシャドー、ヘアーカラーなど）、医薬品添加剤、絵の具、染色などの用途にも使える。
２）食品中での安定性(文献 18、19)
カルミンは安定性が優れており直接光に当たる包装形態の食品を含めて、酸性食品からアル20

カリ性食品まで広く使用できる。なお、PubMed 及び J-DreamII で検索を実施したが、該当する文献は見あたらなかった。
３）食品中の栄養成分に及ぼす影響
糖質、たんぱく質、脂質、ビタミン、ミネラル類、いずれとも特段の反応性は知られていな

25

い。

５．体内動態（吸収、分布、代謝、排泄）
コチニール色素、カルミンについては、消化管から吸収されにくいとしている報告（文献60、61）があるが、一方、コチニール色素をラットに経口投与した急性毒性試験で、尿に着色30が見られたとの報告（文献 36)もある。

６．安全性
１) 単回投与毒性試験
カルミンの急性毒性に関する試験成績を確認することは出来なかったが、コチニール色素を35

ラットに経口投与した試験成績が報告されていることから、この試験成績はカルミンの安全性を推察する上で有用であると考え参考資料とした。

12

コチニール色素の急性毒性に関しては 2 社の製品（組成：天然抽出粉末 10％含有あるいは不明）について実施されており、それぞれ各10 匹の雄性Wistar ラットに5.0、7.5 及び11.25ml/kg
体重の用量で色素原液を単回経口投与した結果、両製品とも最高用量とした 11.25ml/kg 群においても死亡例は認められず、本試験条件下におけるコチニール色素の LD50 値はそれぞれ

5

11.25ml/kg 体重以上と報告されている(文献 36)。また、詳細は不明であるがコチニール（カルミン酸）をマウスに経口投与した時の LD50 値は 8,890mg/kg 体重と報告されている（文献55）。
２) 反復投与毒性試験(１)まとめ10

カルミンに関しては短期試験としてカルシウムカルミン（カルミン酸含量不明）を雌雄のラットに 50、250、500mg/kg 体重/日となるように飼料に混合し 90 日間投与した試験が実施されており被験物質投与による影響は認められなかったと報告されている(文献 9)。
長期試験としてはダヴィデ・カンパリ社より供与されたカルミン（カルミン酸含量：約 50％）を経胎盤的に暴露した各群の児ラット雌雄各 54 匹に親ラットと同様 50、150 及び 500mg/kg 体

15

重/日となるように混合した飼料、また、親ラットに基礎飼料を投与した児ラット雌雄各 90 匹には引続き対照群として基礎飼料を最長で 109 週まで投与した試験が実施されており、生存率、体重、摂餌量ならびに摂水量、血液ならびに血液生化学的検査及び臓器重量において被験物質投与による影響は認められず、組織学的検査においても被験物質投与に起因した意義のある変化は認められなかったとして無毒性量を 500 mg/kg 体重/日と評価している(文献 9、35)。

20

JECFA は上記長期試験の無毒性量 500mg/kg 体重/日及び 3 世代繁殖試験の無毒性量 500
mg/kg 体重/日〔5）生殖発生毒性試験の項参照〕を総合的に評価し、カルミンの許容 1 日摂取量（ADI）を 0-5mg/kg と設定している(文献 5、6、9)。
また、コチニール色素をラットに 13 週間あるいはマウスに 104 週間経口投与した試験成績が報告されていることから、これらの試験成績もカルミンの安全性を推察する上で有用である

25と考えて参考資料とした。
短期試験としては 1.5％コチニール色素（組成不明）と 1.5％硫酸アルミニウムカリウム（ミョウバン）の混合物（3.0％AC 群）、0.75％コチニール色素と 0.75％ミョウバンの混合物（1.5％AC 群）及び 3.0％コチニール色素（3.0％C 群）あるいは 3.0％ミョウバン（3.0％A 群）を飼料に混合し雌雄のラットに 13 週間投与した試験が実施されており、一般状態では被験物質投30

与による影響は認められず、体重では雄の 3.0％A 群で増加抑制がみられたが、摂餌量は雌雄の各群ともに明らかな差は認められなかったと報告されている。一方、4 週及び 13 週の剖検時に実施した血液及び血液生化学的検査では、4 週と 13 週の両時期において 3.0％AC 群で雌雄とも平均赤血球容積及び平均赤血球ヘモグロビン量、雄で平均赤血球ヘモグロビン濃度が僅かではあるが統計学的に有意に減少、雌でγ-グルタミルトランスペプチターゼの有意な増加、

35

13 週において雌雄の 3.0％A 群及び 3.0％C 群、雌の 3.0％AC 群でトリグリセリドが有意に減少、臓器重量では 13 週において雌の3.0％C 群で脾臓ならびに副腎重量の減少が認められたが、13

組織学的検査では被験物質投与による影響は認められなかったと報告されている(文献 28)。
長期試験としてはコチニール色素（カルミン酸含量：29.8％）を 3 及び 6％の濃度で雌雄のマウスに 104 週間混餌投与した試験が実施されており、雌雄とも対照群に比べ用量に相関して体重増加量ならびに摂餌量の減少が認められたが、死亡率や血液ならびに血液生化学的検査、

5

臓器重量及び腫瘍の発生率において被験物質投与による明らかな影響は認められなかったと報告されている(文献 34)。しかし、非腫瘍性病変に関する記載はみられなかった。
(２)個別データ①短期投与毒性試験

10

1 群雌雄各 20 匹のラットにアンモニアで処理したカルミン（カルミン酸含量不明）を 0.4%の寒天溶液に混合して 0（対照群）、2.5、5.0 および 10.0 g/kg 体重/日で週 5 日、13 週間経口投与した試験が実施されており、2 週に 1 回実施した体重測定において 5.0 および 10.0 g/kg
体重/日投与群で体重増加抑制がみられた。試験期間中投与群の尿と糞は着色し、5.0 および10.0 g/kg 体重/日投与群では用量相関的に組織への色素沈着が観察されたほか、肉眼的及び15

組織学的検査において明らかな変化は観察されなかった。また、試験期間中に 3 回実施された血液学的検査においても被験物質投与による明らかな影響は認められなかった（文献 9）。しかしながら、この引用でいうところの「アンモニアで処理したカルミン」の詳細が不明であり、カルミン酸をアンモニア水中で加熱することで合成される 4-アミノカルミン酸（文献 85）が生成していることが否定できないと考える。

20

1 群雌雄各 25 匹の離乳ラットに、カルシウムカルミン（カルミン酸含量不明）を 0（対照群）、
50、250、500mg/kg 体重/日の用量となるように混合した飼料を 90 日間投与した試験が実施されており、体重や試験期間中に 3 回実施した血球数、血中グルコースならびに尿素窒素測定及び尿検査において被験物質投与による影響は認められず、肉眼的及び組織学的検査においても明らかな変化は認められなかった(文献 9)。

25

1 群雌雄各 15 匹の Wistar 系ラットに 1.5％コチニール色素（カルミン酸含量不明）と 1.5％
硫酸アルミニウムカリウム（ミョウバン）の混合物（3.0％AC 群）、0.75％コチニール色素と0.75％ミョウバンの混合物（1.5％AC 群）及び 3.0％コチニール色素（3.0％C 群）あるいは 3.0％
ミョウバン（3.0％A 群）を飼料に混合し 13 週間投与した試験が実施されており、一般状態では被験物質投与による影響は認められず、体重では雄の 3.0％A 群で増加抑制がみられたが、30

摂餌量では雌雄の各群とも明らかな差は認められなかった。4 及び 13 週の剖検時に実施した血液及び血液生化学的検査では 4 週と 13 週の両時期において 3.0％AC 群で雌雄とも平均赤血球容積（MCV）及び平均赤血球ヘモグロビン量（MCH）、雄で平均赤血球ヘモグロビン濃度（MCHC）
が僅かではあるが統計学的に有意に減少、雌でγ-グルタミルトランスペプチターゼ（γ-GTP）が有意に増加、13 週のみにおいて雌雄の 3.0％A 群及び 3.0％C 群、雌の 3.0％AC 群でトリグ

35

リセリド（TG）の有意な減少が認められた。臓器重量では 13 週において雌の 3.0％C 群で脾臓及び副腎重量の減少が認められた。4 及び 13 週に剖検し実施された組織学的検査では対照群

14

を含む各群で散発的に変化が観察されたが、一般的に観察される変化であり、被験物質投与による影響は認められなかった(文献 28)。
②長期投与毒性試験
1 群雌雄各 66 匹の Wistar 系ラットにダヴィデ・カンパリ社より供与されたカルミン（カル5

ミン酸含量：約 50％）を 50、150、500mg/kg 体重/日の用量となるように混合した飼料、あるいは雌雄各 114 匹のラットには対照群として基礎飼料を 60 日間投与した後、同一群内で雌雄を各 1 対 1 で交配し、妊娠期間、さらに新生児ラットへの授乳期間を通して、母動物に継続して各群の飼料を投与した。その後、長期試験として各群の同腹児から雌雄各 1 匹を選び、被験物質投与群は各群雌雄それぞれ 54 匹とし、母動物と同群の添加飼料、また、対照群には雌雄10それぞれ 90 匹を選び基礎飼料を雄で 107 週間及び雌で 108 週間投与した試験が実施されており、試験期間中一般状態、体重、摂餌量及び飲水量に被験物質投与による影響は認められず、
総死亡数や死亡率においても群間に差は認められなかった。試験期間中の 3、6、12、18 ヶ月
及び試験終了時に実施した血液学的検査、試験期間中の 3、6、9、12 及び 18 ヶ月に実施した尿検査及び試験終了時に実施した血液生化学的検査においても被験物質投与による如何なる15

変化も認められず、剖検時に測定した臓器重量でも被験物質投与による影響は認められなかった。
組織学的検査では雌雄とも対照群を含む各群で非腫瘍性病変が散見されており、雄で肝類洞の拡張及び雌で膣炎、リンパ節の水腫、軽度な胃炎及び尿路結石症が用量に関連して僅かに増加したが、筆者らはこれらの病変は一般的に認められる加齢性変化で、偶発的であり、投与の20

影響を完全に否定することは出来ないが、生物学的に意義のある変化ではないと考察している。
また、被験物質投与に起因した腫瘍の誘発も認められていないことから、本試験における無毒性量を 500mg/kg 体重/日と評価している(文献 9、35)。
雌雄各 50～55 匹の B6C3F1 マウスにコチニール色素（カルミン酸含量：29.8％）を 0（対照群）
、3 及び 6％の濃度（4.5 及び 9g/kg 体重/日相当：JECFA で用いられている換算値を用いて25推定した摂取量）で 104 週間混餌投与した試験が実施されている。
雌雄とも用量に相関して体重増加量ならびに摂餌量の減少が認められたが、死亡率や試験終了時に雌雄各群 5 匹について実施した血液学的検査や血液生化学的検査では被験物質投与による明らかな影響は認められず、臓器重量においても対照群との間に有意な差は認められなかった。なお、組織学的検査において被験物質投与に起因した腫瘍の誘発は認められなかったと30記載されているが、非腫瘍性病変に関する記載はみられなかった(文献 34)。
３）変異原性試験（１）まとめカルミン(Carmine)については極めて限られた変異原性試験が実施されているにすぎない。

35

カルミンはカルミン酸(Carminic acid)のアルミニウム等のキレート化合物であることから、
カルミン酸についての変異原性試験成績を合わせて記載することとした。また、カルミンはコ15チニール抽出物と同じ原料（コチニール）から得られるものであることから、コチニール抽出物又はコチニール色素に関する変異原性試験成績も参照し、それらを含めて総合的にカルミンの変異原性について評価を行った。
カルミンについては Bacillus subtilis 17A (Rec+)株及び 14T (Rec-)株を用いた DNA 修復

5

試験（Rec-assay）が 2 試験行われ、いずれも判定不能の結果が得られている(文献 45、56)。
また、Salmonella typhimurium TA100 を用いた、主に化合物の吸着に関する文献であるが、TA100 株/＋S9/１用量のみの結果だけが記述されており、用量相関性や-S9 での結果等確認できない。なお、吸着の実験が-S9 の条件で行われているのに、Ames 試験が+S9 での結果のみを述べているのは矛盾していると考える（文献 82）。したがって、結果の信頼性に関しては疑問

10

である。
カルミン酸は Salmonella typhimurium TA98、TA100、TA1535、TA1537 又は TA1538,及びEscherichia coli WP2 uvrA を用いた復帰変異試験で、ラット又はマウス肝由来 S9 mix の有無にかかわらず陰性の結果が得られている(文献 44、46、47、48)。Escherichia coli WP2 uvrA、WP67 uvrA polA 及び WP100 uvrA recA を用いた DNA 修復試験(rec-assay 及び pol-assay)では、15

ラット肝由来 S9 mix 存在下で陰性の結果が得られている(文献 48)。
Shizosaccharomyces pombeを用いた突然変異試験で、マウス肝由来 S9 mix の有無にかかわらず陰性の結果が得られ、マウスを用いた宿主経由法でも陰性の結果が得られている(文献 46)。Saccharomyces cerevisiae
D4 を用いた遺伝子変換試験で、ラット及びマウス肝由来 S9 mix 有無にかかわらず陰性の結果が得られている(文献 46)。チャイニーズ・ハムスター由来培養細胞株(CHO)を用いた染色体異20常試験並びに姉妹染色分体交換(SCE)試験で、ラット肝由来 S9 mix の有無にかかわらず陰性の結果が得られている(文献 44)。ラット肝初代培養細胞を用いた不定期 DNA 合成(UDS)試験並びにラット単回経口投与による不定期 DNA 合成(UDS)試験で、共に陰性の結果が得られている(文献 49、50)。マウス骨髄小核試験では、1250、2500、5000 mg/kg の経口投与で陰性の結果が得られている(文献 44)。

25

コチニール色素は Salmonella typhimurium TA92、TA94、TA98、TA100、TA1535 及び TA1537を用いた復帰変異試験で、ラット肝由来 S9 mix の有無にかかわらず陰性の結果が得られている(文献 42)。チャイニーズ・ハムスター由来培養細胞株(CHL/IU)を用いた染色体異常試験では、非代謝活性化法の 24 及び 48 時間連続処理の最高用量 12.0 mg/mL で陽性、24 時間処理の6.0 mg/mL で疑陽性の結果が得られている(文献 41、42)。ラット肝初代培養細胞を用いる不定

30

期 DNA 合成(UDS)試験では、1、10、100 μg/mL の用量で陰性の結果が得られている(文献 49)。
マウス骨髄小核試験では、2000 mg/kg の単回腹腔内投与及び 500 mg/kg の 24 時間間隔の 4 回
腹腔内投与で陰性の結果が得られている(文献 43)。
カルミンについては Bacillus subtilis を用いた DNA 修復試験（Rec-assay）において判定不能の結果が得られている。

35

一方、カルミン酸については、Salmonella typhimurium 及び Escherichia coli を用いた復帰変異試験においていずれも陰性の結果が得られ、酵母を用いた試験においても陰性の結果が16

得られている。チャイニーズ・ハムスター由来培養細胞株(CHO)を用いた染色体異常試験並びに姉妹染色分体交換(SCE)試験において陰性の結果が得られ、in vitro 及び in vivo 不定期 DNA
合成(UDS)試験においても陰性の結果が得られている。さらに、マウス骨髄小核試験では 5000
mg/kg の用量まで試験が行われ、陰性の結果が得られている。

5

コチニール色素については、Salmonella typhimurium を用いた復帰変異試験において陰性の結果が得られている。一方、チャイニーズ・ハムスター由来培養細胞株(CHL/IU)を用いた染色体異常試験で陽性の結果が得られているが、現在のガイドラインの限界用量（5.0 mg/mL）を超える用量での結果である。ラット肝初代培養細胞を用いた不定期 DNA 合成(UDS)試験では陰性の結果が得られており、マウス骨髄小核試験では限界用量である 2000 mg/kg まで試験が10行われ、陰性の結果が得られており、生体内で染色体異常が誘発される可能性はないものと考えられる。
これらの情報を基にすると、カルミンについて変異原性の面から安全性を懸念すべき点は見出されていないと判断される。

15（２）個別データ①カルミン

Bacillus subtilis 17A (Rec+)株及び 14T (Rec-)株を用いた DNA 修復試験（Rec-assay）は、
ストリーク法を用いて 1000 μg/mL 又は 2000 μg/ろ紙の用量で試験が行われ、いずれも両菌株に共に阻止帯がみられず、判定不能の結果が得られている(文献 45、56)。

20

なお、Yamaguchi（1988）によりカルミンについての TA100 を用いた復帰突然変異試験において、代謝活性化系存在下で陽性の結果との報告があるが、その内容を確認したところ、TA100
株/＋S9/１用量のみの結果だけが記述されており、用量相関性や-S9 での結果等確認できない点がある。本報告は、主に化合物の DNA への吸着に関する論文であるが、吸着の実験が-S9 の条件で行われている一方、Ames 試験が+S9 での結果のみを述べているのは矛盾する。本報告に25

おいて、DNA に吸着性のある 9 化合物が+S9 の TA100 で全て陽性の結果とされていることに疑問がもたれたことから、当該 9 物質について調べたところ、そのうちの一つ「Fichsin basic」
について、元労働省の委託研究報告書で TA１00、TA98、WP2 uvrA を用い、-S9 で 1,000 ug/plateの用量まで試験が行われ、陰性の結果が得られていることが判明した。
+S9 のデータはないが、-S9 での吸着性の結果とは一致していない。Fijita ら（1976）では、Bismark brown が Rec-assay

30

で陰性結果を示し、Fuchsin（basic との記載はないが）が TA100 と TA98 の±S9 で陰性の結果を示し、Yamaguchi の論文とは異なっており、情報が不備なことと結果の信頼性に疑問がもたれることから、本文献については添付するにとどめることとする。
（文献 82）②カルミン酸35

Salmonella typhimurium TA98、TA100、TA1535 及び TA1537 を用いた復帰変異試験では、ラット肝由来の S9 mix 存在下（10%と 30%）及び非存在下で、カルミン酸を 87.5%含んでいるサ17

ンプル(Campari)について 125～2000 μg/plate の用量範囲で 2 回試験が行われ、いずれも陰性の結果が得られている(文献 44)。カルミン酸を 53.13%含んでいるサンプル(Aldrich)については、TA100 のみを用い、ラット肝由来の S9 mix 存在下（10%のみ）及び非存在下で、125～
2000 μg/plate の用量範囲で試験が行われ、いずれも陰性の結果が得られている(文献 44)。

5

Salmonella typhimurium TA98、TA100、TA1535 及び TA1537 を用いた復帰変異試験では、マ
ウス肝由来の S9 mix 存在下及び非存在下で、50、250、500 μg/plate の用量で試験が行われ、いずれも陰性の結果が得られている(文献 46)。

Salmonella typhimurium TA98、TA100、TA1535、TA1537 及び TA1538 を用いた復帰変異試験
では、ラット肝由来の S9 mix 存在下及び非存在下で試験が行われ（用量の記載なし）
、いずれ

10

も陰性の結果が得られている(文献 47)。

Escherichia coli WP2 uvrA、WP67 uvrA polA 及び WP100 uvrA recA を用いた DNA 修復試験
(rec-assay 及び pol-assay)では、ラット肝由来の S9 mix 存在下で 10% (v/v)の用量で試験が行われ、Salmonella typhimurium TA1538 及び Escherichia coli WP2 uvrA を用いたフラクチュエーション法による復帰変異試験では、ラット肝由来の S9 mix 存在下及び非存在下で 10%15(v/v)の用量で試験が行われ、いずれも陰性の結果が得られている(文献 48)。

Shizosaccharomyces pombe を用いた突然変異試験においては、非代謝活性化法では 100 mMの用量を用い、pH 4.4、5.4、6.4、7.4 の各条件下で 4 及び 16 時間処理で試験が行われ、マウス肝由来の S9 mix 存在下では 20、50、100 mM の 3 用量を用い、1 及び 4 時間処理で試験が行われ、マウスを用いた宿主経由法では 1000 mg/kg の用量を経口投与し、3、6、16 時間後に20

試験菌を回収して試験が行われ、いずれも陰性の結果が得られている(文献 46)。

Saccharomyces cerevisiae D4 を用いた遺伝子変換試験においては、非代謝活性化法では 100
mM の用量を用い、pH 4.4、5.4、6.4、7.4 の各条件下で 4 及び 16 時間処理で試験が行われ、ラット及びマウス肝由来の S9 mix 存在下では 20、50、100 mM の 3 用量を用い、1 及び 4 時間処理で試験が行われ、いずれも陰性の結果が得られている(文献 46)。

25

チャイニーズ・ハムスター由来培養細胞株(CHO)を用いた染色体異常試験では、2 つのサンプル(Campari と Aldrich)を用いて、20、63、200 μg/mL の用量で、ラット肝由来の S9 mix
存在下では 3 時間処理後 12 時間と 24 時間に、S9 mix 非存在下では 24 時間処理後にそれぞれ標本作製して試験が行われ、
1 サンプル(Campari)ではいずれも陰性の結果が得られている(44)。
他のサンプル(Aldrich)では S9 mix 存在下の 24 時間後の低用量(20 μg/mL)のみで染色体異常

30をもつ細胞が幾分増加したが、用量依存性もなく、陰性と判断されている(文献 44)。
チャイニーズ・ハムスター由来培養細胞株(CHO)を用いた姉妹染色分体交換(SCE)試験では、
2 つのサンプル(Campari と Aldrich)を用いて、20、63、200 μg/mL の用量で、ラット肝由来の S9 mix 存在下及び非存在下で試験が行われ、いずれも陰性の結果が得られている。尚、S9 mix
存在下では 2 サンプル共に SCE が陰性対照より低下する傾向がみられている(文献 44)。

35

ラット肝初代培養細胞を用いた不定期 DNA 合成(UDS)試験では、1、10、100 μM の 3 用量を用い、20 時間処理で試験が行われ、陰性の結果が得られている(文献 49)。

18

ラット肝初代培養細胞を用いた不定期 DNA 合成(UDS)試験では、1、10、100 μM の 3 用量を用いて 4 時間処理で試験が行われ、さらにラットに 500 mg/kg の用量で単回経口投与し、2 及
び 12 時間後に肝臓を摘出して、in vitro 試験と同様に試験が行われ、いずれも陰性の結果が得られている(文献 50)。

5

マウス骨髄小核試験では、各群雌雄 5 匹の CD-1 マウスを用いて、カルミン酸を 87.5%含んでいるサンプル(Campari)について 1250、2500、5000 mg/kg の用量（それぞれ LD50 の 20%、40%、80%）で、経口投与後 24 時間及び 48 時間にそれぞれ標本作製して試験が行われ、いずれも陰性の結果が得られている。尚、24 時間及び 48 時間で共に幼弱赤血球の割合が用量に依存して低下しており、骨髄赤血球に対する細胞毒性の兆候がみられている(文献 44)。

10

③コチニール色素

Salmonella typhimurium TA92、TA94、TA98、TA100、TA1535 及び TA1537 を用いた復帰変異試験では、ラット肝由来 S9 mix の存在下及び非存在下で、20 mg/plate の用量まで試験が行
われ、いずれも陰性の結果が得られている(文献 42)。
チャイニーズ・ハムスター由来培養細胞株(CHL/IU)を用いた染色体異常試験では、非代謝活

15性化法で 3.0、6.0、12.0 mg/mL の用量を用いて 24 及び 48 時間の連続処理が行われ、両連続処理の最高用量 12.0 mg/mL において構造異常を有する細胞の出現頻度が明らかに増加し、陽性の結果が得られているが、倍数体の誘発はみられていない。尚、24 時間処理の 6.0 mg/mL
では構造異常について疑陽性(8%)の結果が得られている(文献 41、42)。
ラット肝初代培養細胞を用いる不定期 DNA 合成(UDS)試験では、1、10、100 μg/mL の 3 用

20量を用い、20 時間処理で試験が行われ、陰性の結果が得られている(文献 49)。
マウス骨髄小核試験では、2000 mg/kg の単回腹腔内投与後 24 時間後及び 500 mg/kg の用量で 24 時間間隔の 4 回腹腔内投与後 24 時間に標本を作製して試験が行われ、いずれも陰性の結果が得られている。尚、単回投与及び 4 回連続投与で共に幼弱赤血球の割合の低下がみられ、骨髄赤血球に対する細胞毒性の兆候がみられている(文献 43)。

25４） 発がん性試験（１）まとめカルミンに関してはダヴィデ・カンパリ社より供給されたカルミン（カルミン酸含量：約50％）を経胎盤的に暴露した雌雄の児ラットに親動物と同様 50、150 及び 500mg/kg 体重/日と30なるように混合した飼料、また、対照群として基礎飼料を最長で 109 週まで投与した試験が実施されており、対照群を含む各群で散発的に腫瘍が観察されたが、被験物質投与に起因した腫瘍の誘発は認められなかったと報告されている(文献 9、35)。
また、コチニール色素をマウスに 104 週間投与した試験が実施されていることから、これらの試験成績もカルミンの発がん性を推察する上で有用であると考え、参考資料とした。

35、
コチニール色素（カルミン酸含量：29.8％）に関しては雌雄の B6C3F1 マウスに 0（対照群）
3 及び 6％の濃度で 104 週間混餌投与した試験が実施され、被験物質投与に起因した腫瘍の誘19

発は観察されなかったと報告されている(文献 34)。
上記のラット及びマウスの試験成績からカルミン酸を主成分とするカルミンが腫瘍を誘発する可能性は極めて低いと考えられる。

5（２）個別データ
1 群雌雄各 66 匹の Wistar 系ラットにダヴィデ・カンパリ社より供給されカルミン（カルミ
ン酸含量：約 50％）を 50、150、500mg/kg 体重/日の用量となるように混合した飼料、あるいは雄雌各 114 匹のラットには対照群として基礎飼料を 60 日間投与した後、同一群内で雌雄を各 1 対 1 で交配し、妊娠期間、さらに児ラットへの授乳期間を通して、母動物には継続して各10群の飼料を投与した。その後、長期試験実施にあたり、各群の同腹児から雌雄各 1 匹を選び、被験物質投与群は各群雌雄それぞれ 54 匹とし、母動物と同群の添加飼料、また、対照群としては雌雄それぞれ 90 匹を選び基礎飼料を雄で 107 週間及び雌で 108 週間投与した結果、一般
状態、体重及び死亡率において群間に差は認められず、組織学的検査では雌で乳腺腺房の過形
成や導管拡張が全投与群で観察されたが、用量依存性が認められないことから、被験物質投与

15との関連はないものと考えられた。また、雌雄とも対照群を含む各群で腫瘍が散見されたが、被験物質投与に起因した腫瘍の誘発は観察されなかった(文献 35)。
1 群雌雄各 50～55 匹の B6C3F1 マウスにコチニール色素（カルミン酸含量：29.8％）を 0（対照群）、3 及び 6％の濃度（4.5 及び 9g/kg 体重/日相当：JECFA で用いられている換算値を用いて推定した摂取量）で 104 週間混餌投与した結果、被験物質投与群で用量に相関して体重増加

20

量ならびに摂餌量の減少が見られたが、死亡率では被験物質投与による影響は認められず、被験物質投与に起因した腫瘍の誘発も観察されなかった(文献 34)。
５）生殖発生毒性試験（１）まとめ25

カルミンの生殖発生毒性については、JECFA における ADI 設定のために実施された、ラットにおける繁殖試験及びラットにおける催奇形性試験の成績が公表されている(文献 26、27)。
また、コチニール色素を、Crj:CD1 雌雄マウスに混餌投与した二世代繁殖試験が行われ、親動
物及び出生児の神経行動学的指標ならびに出生児の行動発達に及ぼす影響が検討されている（文献 53）。ADI 設定のための繁殖試験(文献 26)では、Wistar 系ラットに、カルミンを、kg

30

体重当たり 50、150、500 mg/日摂取するように飼料に混ぜて摂食させ、F3 世代まで観察している。得られた結果から、500 mg/kg 体重/day までのカルミンは、3 世代のラットの交配期間
中、妊娠期間中、哺育期間中、離乳期ならびに成熟後に至るまでの全期間にわたり、持続的に摂食させても、投与動物の成長、成熟後の繁殖性、それらの児の出生前及び出生後の発達に悪影響を及ぼさないとの結論が得られている。二世代繁殖試験（文献 53）では、カルミン酸を

35

約 10%含むコチニール色素を、各群雌雄各 10 匹の Crj:CD1 マウスに、
5 週齢から （0 基礎飼料）、
0.5、1.0、2.0%の濃度で混餌投与して試験が行われている。9 週齢で同群内の雌雄を交配させ20

て出生児を得ているが、親動物の体重増加、摂餌量ならびに生殖能力に投与の影響は認められていない。一方、出生児については、投与に起因すると考えられる外表奇形は認められず、生下時の体重及び生存率にも投与の影響は認められていないが、1%以上の投与群の雌雄において生後 14 日から体重増加抑制が認められている。しかし、4 週齢で離乳した後は、9 週齢に至る

5まで親動物と同様の飼料を摂取させても体重増加抑制は認められないと報告されている。神経
行動学検査ならびに行動発達検査では、複数の観察指標に対照群との間で有意差が認められ、著者は投与による影響と評価している。
催奇形性試験(文献 27)では、0、200、500 あるいは 1000 mg/kg 体重のカルミンを、各用量30 匹の Wistar 系雌ラットに、妊娠 0 日から 19 日まで、毎日、強制経口投与し、妊娠 20 日に10帝王切開して胚胎児の生存、発育、ならび外表、骨格及び軟部組織の形態を観察しているが、1000 mg/kg 体重までのカルミンを妊娠期間中毎日経口投与しても、胚の発生に悪影響を及ぼさないとの結論が得られている。
一方、カルミンを 150 mg/kg 体重の用量で、妊娠 8 日のマウスに単回皮下投与した実験では、胚死亡率の増加、発育遅延胎児ならびに外脳あるいは椎骨及び肋骨の奇形を認める胎児の増加

15が報告されている (文献 23)。これには、溶媒として投与された炭酸リチウムの影響も疑われることから、さらに、異なる濃度の炭酸リチウム溶液に溶解したカルミンを 100 mg/kg 体重の用量で、妊娠 8 日のマウスに単回腹腔内投与して、炭酸リチウム溶液のみあるいは生理食塩液を腹腔内投与した動物と比較する実験が行われ、発育遅延ならびに奇形の増加はカルミン自身の影響によるものである可能性が示唆されている(文献 24)。また、リチウムカルミンをカル

20

ミンの用量が 150 mg/kg 体重になるように、妊娠 6、8、10、12 あるいは 14 日のいずれかに単回投与（経路不明）して胎児を観察した結果、胎児毒性は投与時期に関わらず認められるが、奇形は、絨毛尿膜胎盤形成前の妊娠 6 日から 10 日の間の投与に限定して増加していることが報告されている (文献 25)。
以上のように、カルミンを皮下あるいは腹腔内に単回投与した実験では胎児毒性あるいは奇25

形誘発が示唆されているが、喫食を通じて摂取するカルミンの生殖発生毒性を評価できる報告(文献 26、27)には、胎児毒性も催奇形性を示唆する影響も認められなかった。
（２）個別データ①カルミンのラットにおける混餌投与による繁殖試験(文献 26)

30

Wistar 系ラットに、カルミンを、1 日に、kg 体重当たり 50、150、500 mg 摂取するように飼料に混ぜて摂食させて試験が行われた。試験に用いたカルミンのカルミン酸含有率は、20日間だけ使用した 1 ロット（含有率 46%以上）を除き、いずれも 50%以上であった。投与は F0世代（対照群、雌雄各 60 匹及びカルミン各投与群雌雄各 36 匹）が 3 週齢の時期に開始し、成育後、交配して次世代を得るという操作を繰り返し、F3 世代が成熟するまで継続した。この35

間、各世代の雌雄動物の体重、飼料摂取量、飲水量を測定するとともに繁殖性を調べた。また、
F2 世代までの各世代において２回の交配を行い、２回目の交配によって得られた妊娠動物を21

用いて帝王切開による胎児観察あるいは出生児の生後発達の観察を行い、催奇形性の有無を調べた。各世代の親動物は剖検し、肉眼観察、器官重量測定ならびに病理組織学検査に供した〔 2）反復投与毒性試験の項参照 〕。
その結果、切歯萌出の僅かな遅延が 150 及び 500 mg/kg 体重投与群の F1 及び F2 世代に認め5られたが、眼瞼開裂、耳介の開展、毛生及び正向反射の完成時期に遅促は認められなかった。
また、F3 世代では切歯萌出時期に差は認められなかった。F3 世代では、アリザリン染色による胎児骨格検査を行ったが、カルミン投与による異常は認められず、すべてのカルミン投与群において、胎児の発育過程で認められる軟骨の骨化が僅かに進んでいた。
これらのことから、500 mg/kg 体重/日までのカルミンを、3 世代のラットの交配期間中、妊10

娠期間中、哺育期間中、離乳期ならびに成熟後に至るまでの全期間にわたり、飼料に混ぜて持続的に摂食させても、投与動物の成長、成熟後の繁殖性、それらの児の出生前及び出生後の発達に悪影響を及ぼさないと結論されている。
②マウスにおける混餌投与によるコチニール色素の一世代繁殖試験（文献 53）

15

カルミン酸を約 10%含むコチニール色素を、雌雄各群 10 匹の Crj:CD1 マウスに、5 週齢から0（基礎飼料）、0.5、1.0、2.0%の濃度で混餌投与して二世代繁殖試験が行われている。9 週齢で同群内の雌雄を交配させているが、親動物の体重増加、ならびに生殖能力に影響は認められていない。また、投与に起因した外表奇形は観察されず、いずれの投与群においても、リッター重量あるいはリッターサイズに対照群との間で統計学的有意差は認められていない。哺育期

20

間中は、1.0%以上の投与群において、生後 14-21 日の雌雄出生児に、体重増加抑制が認められ、雄及び 2%投与群の雌で対照群との間に統計学的有意差が認められている。これらの動物も、4週齢で離乳した後は、親動物と同じ飼料を 9 週齢まで与えているが、体重増加抑制は認められなくなっている。全ての投与群において、生後 21 日における雌出生児の生存率が、対照群と比較して有意な低下を示していたが、低下の程度は対照群 100%に対して、2.0%投与群 93.0%

25と軽微であり、用量依存性にも乏しかった。本試験では親動物及び出生児の神経行動学的検査
ならびに出生児の行動発達検査が行われ、行動発達検査では、生後 4 日に検査した正向反射に、反射完成までの所要時間を区分して評点をつけると、所要時間が長い区分に入る動物の割合が、0.5 及び 2.0%投与群において有意に増加し、有意な用量依存の関係が認められると報告されている。神経行動学的検査については、雌親動物において 8 週齢において測定した運動活性のい30

くつかのパラメーターに低下傾向が認められているが、1.0%における低下が最も顕著であると報告されている。同様の測定が出生児に対しても 3 及び 8 週齢で行われているが、8 週齢では雌雄ともに対照群との間に有意差は認められない一方で、3 週齢では、雌においてのみ運動活性の促進が認められている。また、出生児を対象とした T 型複合水迷路学習試験では、3 日間の試行中 2 日目の試行において、雌に成績の有意な低下が認められているが前後の施行日には35

有意差は認められていない。また、雄はいずれの試行も対照群との間に有意差は認められていない。著者はこれらの有意差が認められた変化を投与による影響と評価している。

22

③ラットにおけるカルミンの経口投与による催奇形性試験(文献 27)
Wistar 系妊娠ラット（30 匹／群）に、0、200、500 あるいは 1000 mg/kg 体重のカルミンを、妊娠 0 日から 19 日まで、毎日、強制経口投与して試験がおこなわれた。投与には、カルミン

5酸が 50%以上含まれる可溶性カルミン酸を用いた。これには、陽イオンとしてナトリウム、カリウム、アンモニウム及びカルシウムが含まれていることから、上記の 4 用量群に加えて、これら陽イオンを、最高用量の投与検体に含まれるのと同濃度含む塩化物の水溶液を投与する塩投与群を設定した。投与動物は、妊娠 20 日に帝王切開し、胚胎児の生存、発育、ならび外表、骨格及び軟部組織の形態を観察した。

10

その結果、母動物にカルミン投与の影響は認められなかった。最高用量投与群及び塩投与群
において、着床後死亡が増加したが、これは、投与開始前に既に数が決まっている黄体数が、これらの投与群において多かったため、着床数がやや増加（有意差は塩投与群のみ）したこと
による変化と考えられる。一腹当たりの生存胎児数は、有意差はないものの、対照群よりむしろ多い傾向を示していた。塩投与群では胎児体重がやや低下したが、カルミン投与群では体重15に影響は認められなかった。奇形は観察されず、軟部組織の形態にも異常は認められなかった。
アリザリン染色による胎児骨格の観察でもカルミン投与群に異常は観察されず、軟骨の骨化はやや進んでいた。これらの結果から、1000 mg/kg 体重までのカルミンを妊娠期間中毎日経口投与しても、胚の発生に悪影響を及ぼさないと結論されている。

20④マウスにおける単回皮下投与によるカルミンの催奇形性に関する研究（文献 23）
妊娠 8 日の NMRI/Han 系妊娠マウス（8-10 匹／群）に、カルミンを 1%炭酸リチウム溶液に溶
解あるいは 2.5%ナトリウムカルミン溶液を調整して、カルミンを 150 mg/kg 体重の用量で皮下投与した。対照群には生理食塩液を 0.5 mL 皮下投与した。妊娠 19 日に帝王切開を行って、胎児の生存、発育ならびに外表、骨格及び内臓の形態を観察した結果、溶媒の種類にかかわら25ず、カルミンを投与した群では胚死亡率が対照群を上回っていた。形態異常に関しては、リチ
ウムカルミン投与群において、主として、脳ヘルニアならびに肋骨及び椎骨の奇形を有する胎児の割合が増加していたが、化骨遅延は認められていない。一方、ナトリウムカルミン投与群
では、奇形を有する胎児数は少ないものの、化骨遅延の認められた胎児の割合が増加していた。
著者は、カルミンには胎児毒性の可能性があるものの、胎児奇形の増加についてはリチウムが30

関与している可能性を指摘している。
⑤マウスにおける単回腹腔内投与によるカルミン及び炭酸リチウムの催奇形性に関する研究（文献 24）
リチウムカルミンの単回皮下投与で認められた胎児毒性ならびに奇形胎児の増加に対する

35

炭酸リチウム溶液（溶媒）の関与について検討するために、NMRI/Han 系妊娠マウス（9-11 匹／群）の妊娠 8 日に、カルミン 100 mg/kg 体重を、1%炭酸リチウム溶液又は 4%炭酸リチウム

23

溶液に溶解して腹腔内投与した。また、リチウムの用量が 40 mg/kg 体重になるように 1%炭酸
リチウム溶液を腹腔内投与した。対照群には生理食塩液 0.2 mL を腹腔内投与した。妊娠 19 日に帝王切開を行って、胎児の生存、発育ならびに外表、骨格及び内臓の形態を観察したところ、胚死亡率は、カルミン投与の有無にかかわらず、炭酸リチウムを投与した群において対照群と5比較して有意に増加していた。一方、発育遅延を示す胎児ならびに奇形胎児は、リチウム濃度にかかわらずカルミン投与群で増加した。奇形のタイプについて個別の出現頻度は示されていなかったが、外表奇形は脳に限局して認められ、主として外脳であった。また、肋骨ならびに脊椎に骨格奇形が認められていた。著者は、ナトリウムカルミンを妊娠８日に皮下投与しても奇形を有する胎児は増加しないという著者自身の実験成績（文献 23）とは矛盾するものの、10

今回の実験において炭酸リチウムの濃度にかかわらず、カルミンを投与した群で奇形を有する胎児が増加したことは、リチウムカルミンの投与で認められた奇形がカルミン自身によるもの
であることを示唆していると結論している。
⑥マウスにおける単回投与によるカルミンの催奇形性に関する研究（文献 25）

15

NMRI/Han 系妊娠マウス（7-10 匹／群）に、2.5%リチウムカルミン溶液を、カルミンの用量が 150 mg/kg 体重になるように、妊娠 6、8、10、12 あるいは 14 日のいずれかに単回投与（経路不明）した。いずれの動物も妊娠 19 日に帝王切開して、胎児の生存、発育ならびに外表、骨格及び内臓の形態を観察し、対照群（詳細不明）と比較した。その結果、カルミン投与群の胚死亡率ならびに発育抑制胎児は、投与時期にかかわりなく対照群と比較して有意に増加して20いたが、脊椎ならびに肋骨などの奇形の増加が認められたのは、絨毛尿膜胎盤形成前の妊娠 6日から 10 日の間の投与群に限られていた。著者は、絨毛尿膜胎盤形成後の投与によってカルミンの催奇形性が減弱したことは、カルミンがトリパンブルーと同様に、卵黄嚢上皮の臓側板へ蓄積して卵黄嚢胎盤におけるリソゾーム機能を抑制するとの考え方を支持するものであると考察している。

25
６）一般薬理試験
一般薬理試験に関する直接的データを見出すことが出来なかった。
ラットにおける 3％単独経口投与試験で、コチニール色素による体重増加，摂餌量，臓器増加などに変化は無く、血清生化学的検査でも 4 週間では著明な変化は認められなかったが、1330

週間で TG（Triglycerides）の減少がみられている(文献 28)。
ヒトに関しては、有害作用に関する若干の報告が知られている。飲食物に含まれるコチニー
ル抽出物やカルミン、カルミン酸は、時として強いアレルギー性の有害作用を引き起こすことがあるので、警告のために含有の表示が必要であるとの報告がある(文献 2)。同様に、症例報
告により、コチニール色素類の職業的暴露，皮膚接触，食品や飲料物経由の摂取によって、蕁

35

麻疹，鼻炎，下痢，アナフィラキシーが惹起されるとされ、警告の表示が必要であるとされている(文献 10)。

24

アトピー性皮膚炎，アレルギー性鼻炎，蕁麻疹などの既往症のある患者（複数）による検討
から、コチニール色素中の 39～45kDa のたんぱく質がアレルゲンであると報告されている(文献 20、62)。カルミンアレルギーは IgE 介在性であると報告されている(文献 29、30、31)。

5７）ヒトについての知見
コチニール抽出物による有害作用として、皮膚曝露，職業曝露，ならびに食品あるいは飲料からの摂取に伴う蕁麻疹，鼻炎，下痢，アナフィラキシー症状の発現についての報告がある。
JECFA は食物アレルギー特別検討会からの報告に基づいて、コチニール抽出物は高感受性の個体に免疫機序による異常反応を誘発すると判断している(文献 2、10)。
作用メカニズムとして、

10

コチニール抽出物中のタンパク質がアレルゲンになっていると予想されるが、アレルギー反応の惹起に関与するたんぱく質は確認されていない。
次に WHO の報告（文献 10）とその引用文献ならびにわが国で刊行された論文を中心にカル
ミンあるいはコチニール抽出物の関与が考えられるヒトのアレルギー症例についての知見を
まとめた。

15
（１）職業性曝露の症例
昆虫からのカルミン抽出に従事していた 36 歳の男性 1 名及び化粧品の色素として 15 年間に亘ってカルミンを扱っていた 54 歳の男性 1 名について職業性曝露による喘息の発症が報告されている。これら 2 名の患者はいずれもカルミンを用いた皮膚プリックテストでは陰性であっ20

たが、コチニール抽出物による気管支誘発テスト（Bronchial provocation test）では陽性であったと述べられている。両患者の病状はいずれもカルミンを回避することにより改善されたと報告されている（文献 63）。
チョリソ（ソーセージの一種）の製造でカルミンを 3 ヶ月間使用していた 30 歳の男性が重篤な喘息発作を起こして入院した。患者は血中の好酸球の増加と血清 IgE 濃度の上昇が認めら25れた。喘息の症状は仕事を再開すると起こり、仕事を中止すると止まったと報告されている（Lenz et al. 1983、文献 10 より引用）。
食品工場に雇用された 36－54 歳の女性 1 名と男性 2 名がカルミンを扱う仕事を始めてから
2－10 ヶ月の間で呼吸障害をおこした。いずれの患者にもアトピー及び呼吸器疾患の病歴はなかった。女性患者は喘息，鼻炎，咳及び労作性呼吸困難の症状を示した。これらの症状はカル30ミンを扱うと増悪し、入院により改善した。1 名の男性患者では、喘息の発作がカルミンを扱うと引き起こされ、仕事場から離れると治った。この患者では、カルミン粉末を用いた皮膚ス
クラッチテストで陽性の結果がみられている。もう 1 名の男性患者はカルミンを用いる仕事に就いて僅か 2 ヶ月で気管支痙攣をくり返し、カルミン粉末を用いた皮膚スクラッチテストで陽性反応がみられたと述べられている（Tenabane et al. 1987、文献 10 より引用）。

35

カルミン製造会社の 33 歳の販売支配人が痙攣性の咳嗽を起こし、2－4 時間後にインフルエ
ンザ様の症状を示した。この症状はカルミンを用いた時にだけ認められた。この症例ではカル25

ミン粉末を用いた皮膚スクラッチテストは陰性であった。乳糖にカルミン粉末を 25％の割で混じて誘発試験を実施したところ、即時反応は起きなかったが、2 時間後に咳と呼吸機能の低下がみられたと報告されている。免疫拡散法でカルミンに対する 2 本の沈降帯がみられている。
この報告の著者はこの患者のアレルギー性肺胞炎の原因にカルミンが強くかかわっていると5

推定している（文献 64）。
カルミン，アナトー及びクルクミンの製造に従事している作業者について、色素に対するア
レルギーの調査が実施された。調査対象者には 9 名の現役作業者（男性 4 名，女性 5 名）と 1
名の以前の作業者が含まれていた。調査の対象物質にはコチニール抽出物（52％のカルミン酸を含む）の他に、調製したカルミン及び市販カルミン酸が含まれていた。アンケート調査への10

回答から、工場での現役労働者の 2 名に作業と関連した鼻炎の症状がみられ、1 名に喘息が認められたとされている。かつてカルミン誘発性の喘息と鼻炎にかかっていた以前の労働者については作業要員から外されてから無症状となったと述べられている。調査したこれら雇用者のすべてにコチニールとカルミンに特異的な IgG 抗体がみられたが、コチニールとカルミンに特異的なIgE は作業に関係のある喘息症状を示した現役の作業者1 名にみられたのみであったと

15

述べられている（文献 65、66）。
化粧品工場でカルミンのバッチ計量の作業に 1 年間従事していた 18 歳の男性が職業性の喘息について検査をうけた。その男性は非喫煙者で、アトピーもなかった。3％のカルミンを混じた乳糖粉末のチャンバーで誘発試験を実施した所、肺機能の変化とヒスタミンに対する気道反応が増強した。なお、この試験では対照として Amaranth で着色した乳糖粉末が用いられて20いる（文献 67、68）。
香辛料の倉庫で 4 年間作業をしていた37 歳の男性が鼻結膜炎と呼吸促迫の症状で受診した。
患者はアトピーの病歴と家族歴を持たない非喫煙者であった。受診前 5－6 ヶ月の間、患者はたまたま仕事中カルミンに曝露されると鼻結膜炎と呼吸促迫を起こすようになったという。症状はカルミンを扱うと直ちに起こったが、夜間に悪化し、1 日中持続することもあった。受診25の 15 日前、患者は自宅でカルミン色素（E120）を含んだストロベリースウィート（苺風味の甘い菓子）を食べたところ、数分以内に鼻結膜炎と呼吸困難を伴った全身性反応を起こした。
症状はブデソニドと気管支拡張剤の吸入で改善した。患者は仕事をしていない時には無症状であった。皮膚プリックテストではコチニール昆虫抽出物（Cochineal insect extract）とカルミンに対して陽性であった。コチニール抽出物を用いた特異的気管誘発試験の結果は陽性，カ30

ルミンについての経口誘発試験も陽性であった。この患者の血清について Immunoblotting を実施した所、コチニール抽出物からの様々なタンパク質に対する特異的な IgE がみられた（文献 29）。
（２）皮膚曝露の症例

35

口唇の表面が乾燥して亀裂し、ヒリヒリするとの訴えをもった 32－59 歳の 3 名の女性について、本人が使っている口唇化粧品を用いて皮膚パッチテストを実施し陽性反応がみられた。

26

そのうちの 2 名は油溶性カルミン製品に対しても陽性反応を示した（Sarkany et al. 1961、
文献 10 より引用）。
19 歳の男性兵士がカルミン赤（Carmine red）の入った化粧品を躯幹の皮膚に使用した所、アナフィラキシー反応を起こして救急医療施設に運ばれた。患者は錯乱状態で、頻脈，計測で5きない程の著しい血圧低下を示していた。患者は回復したが追跡調査はできなかった（Park
1981、文献 10 より引用）。
カルミンによるアレルギー性接触皮膚炎に関する興味深い症例が報告されている。28 歳のフィリピン系の女性がカルミンを含んだアイシャドーと口紅による皮膚炎の発症を繰返した。
皮膚炎は化粧品を使ってから 6－24 時間以内に起こった。患者はこれらの化粧品を 10 歳代か

10ら使っていたが、症状があらわれたのは 20 歳代の半ば頃からであったという。患者には衣服や装身具による接触皮膚炎の病歴はあったが、喘息，アトピー性皮膚炎はなかった。患者の背部皮膚について北米接触皮膚炎グループ（North American Contact Dermatitis Group）で標準的に使われている 65 種のアレルゲンが検査された。カルミンは 2.5％の濃度で鉱油（Petrolatum, Pet）に混じて適用された。検査は閉鎖系で実施され、48 時間及び 120 時間目

15に皮膚反応が判定された。カルミン 2.5％Pet，コバルト 1％Pet 及び硫酸ニッケル 5％Pet の適用部位に紅斑と硬結が 48 時間及び 120 時間目の検査で認められ、他の被験物質の適用部位には反応は見られなかった。次いで、前腕の肘窩（Cubital fosso）の皮膚にカルミン 2.5％
Pet を 1 日 2 回連日，開放系で適用した。適用 12 日目に数個の丘疹が生じ、16 日目には融合した丘疹に進展した。患者はパッチテストの後 3 年間、12 種類のカルミンの入っていないア

20

イシャドーと口紅を使っているが皮膚炎の発症はなかったと報告されている（文献 75）。
（３）食品と飲料による経口曝露の症例
チューリッヒ大学病院皮膚科アレルギー研究グループがカルミン（E120）の摂取による即時型アレルギー（アナフィラキシー）の発生を報告した。34 歳のアトピー性の女性がオレンジ

25

ジュースを混じたカンパリを飲んでから 15 分後に重篤なアナフィラキシー症状を起こした。
くしゃみ，鼻炎，結膜炎に始まり、痒疹，蕁麻疹，Quincke’s oedema(血管神経性浮腫)，呼吸困難，気管支痙攣，悪感，悪心，嘔吐，下痢が起こり、緊急治療を必要とした。カンパリを用いた皮膚プリックテストで陽性反応を示し、カンパリに用いられたカルミン色素（E120）及び
市販されているカルミン製品にも陽性であった。患者は以前にもカルミンが含まれている口紅，

30

マスカラ，アイシャドー等の化粧品の使用により眼のかゆみや皮膚のほてりなどの反応を示したことがあり、その際にもこれらの物質に対して皮膚プリックテストで陽性反応を示したと述べられている（文献 69、70)。
上記の研究グループはその後 2 年の間でカンパリを摂取した後、急性蕁麻疹，血管浮腫，ア
ナフィラキシー反応を起こし緊急治療を受けた新しい 4 名の患者を報告している。4 例中の 2

35

例はアトピー性疾患の病歴をもっていた。4 例のすべてがカンパリもしくは製造者が使用していたカルミンによる皮膚プリックテストで陽性反応を示した（文献 71）。

27

ミシガン大学の研究グループもカルミンの摂取によるアナフィラキシーの症例を報告している。27 歳の女性がカルミンが含まれているアイスキャンディーを食べてアナフィラキシー
症状を示し、治療を受けた。症状は悪心に始まり、次いで痒疹，蕁麻疹がみられ、3 時間後には、頻脈を伴った低血圧が起こった。患者はアレルギー性鼻炎の病歴をもち、空気中の様々な

5

アレルゲンを用いた皮膚プリックテストで陽性反応を示したとの記載がある他、カルミンを含んだ化粧品で痒疹，紅斑を起こしたことがあると報告されている。アイスキャンディー及び製造者が用いているカルミン製品に対する皮膚プリックテストは陽性であった。夫を受容者(Recipient)とした被動性転嫁テスト(Passive Sensitization, Prausnitz-Kustner Test)が実施され、患者血清中にカルミン特異的 IgE が存在する可能性が示された（文献 72）。

10

上記の研究グループは非アトピー性の 2 例の女性がカルミンを含んだヨーグルトとカンパ
リの摂取によりアナフィラキシー反応を起こしたとの症例を報告している。
症例 1：27 歳女性が苺とバナナ風味のヨーグルト（カルミン混入の表示あり）を食べてアナフィラキシー症状を起こした。患者は過去 3 年の間に、眼の周りの血管性浮腫，悪心，下痢及
び腹部の仙痛を伴った全身の蕁麻疹を 6 回繰り返している。いずれの場合においてもカルミン

15で着色した食品摂取後 30 分から 2 時間目に症状が発現し、重篤な場合には、頻脈（心拍数125bpm）と低血圧（86mmHg）がみられ、エピネフリンの皮下注射，輸液，ジフェンヒドラミン
及びステロイドによる治療がおこなわれた。症例 2：42 歳の女性看護士、これまでに食後 30分から 2 時間目に顔面の血管性浮腫と鼻粘膜のうっ血の症状を複数回経験していた。記憶によると最初の症状発現は 28 歳の頃、人造のカニ肉を食べた後であったという。患者は過去 10 年

20

間に 3 回、緊急外来を訪れる必要があるほどの重篤な症状を経験した。第 1 回目は、カルミンで着色したカンパリの摂取後 30 分目頃に悪心，嘔吐，下痢，手掌のかゆみ，顔面の血管性浮腫とくしゃみ，心拍数の増加（120bpm）が起きたためであった。他の 2 回の症状発現についての状況は確認できなかった。この患者はくるみ，ピーナッツ，苺，トマトに対する食品アレル
ギーも疑われている。その他、カルミンが成分として表示されているアイシャドーを使用した

25

後 5 分以内に眼瞼腫脹，顔面蕁麻疹と鼻漏を経験したとの記載もある。
両症例ともカルミンに対する皮膚プリックテストは陽性であった。症例 2 についてはピーナ
ッツ，くるみ，トマトに対する皮膚プリックテストも実施されたが、いずれのテストも陰性の結果が得られたと報告されている（文献 30）。
ミシガン大学の研究グループは、更に、カルミンが混入した食品摂取 3－5 時間後に蕁麻疹，30

顔面の血管性浮腫，呼吸困難等の症状を示した 3 症例についての知見を基にカルミン摂取とアレルギー症状発現の関連性を解析している。症例 1：32 歳女性、少量の人造カニ肉もしくはル
ビー赤色のグレープフルーツジュースの摂取後に症状発現；症例 2：27 歳女性、カルミンで着色したアイスキャンディーの摂取後に症状発現（文献 72 と同一症例）；症例 3：30 歳女性、カルミンで着色した人造カニ肉を 1/2 ポンド摂取後に症状発現（文献 30 と類似症例）。3 症例は35

いずれもカルミンに対する皮膚プリックテストが陽性を示した。症例 1 と 3 について、カルミンの経口摂取によるアレルギー誘発試験を実施し、陽性の結果が得られている。3 症例の血清28を用いてコチニール抽出物とカルミンレーキについて SDS-PAGE を実施した所、コチニール抽出物については 80kDa と 46kDa の数本の弱いバンドが検出された。カルミンレーキについては
これらのバンドはみられなかった。著者らは、SDS-PAGE ，Immunoblotting 試験及びImmunoblotting 抑制試験の結果から、市販カルミンには昆虫由来のタンパク質が残存し、こ5

れらのタンパク質（多分、カルミン酸と復号体を形成している）が IgE を介するアレルギー症状の発現に関与していると考察している（文献 76）。
わが国でもコチニール色素の経口摂取によるアナフィラキシーについての症例が報告されている。23 歳の女性で 1 年前から計 4 回にわたり、膨疹，顔面腫脹の症状をくり返した。その後カンパリオレンジを摂取した所、全身の膨疹，眼瞼と口唇の腫脹と呼吸困難の症状で救急10

病院に搬送され、治療後に専門施設で精密検査を受けた。その結果、コチニール色素による負荷試験でアナフィラキシー症状の誘発されることがわかった。患者血清を用いた
Wenstern-blotting 法ではコチニール色素に含まれる約 40kDa の 4 つのバンドに反応する IgE抗体が認められたと述べられている。なお、この論文では、参考資料としてコチニール色素による有害事象についての 34 症例とそれらの検査所見が表示されている（文献 73）。

15

寿らも食品中のコチニール色素による蕁麻疹の 1 症例を報告している。症例は 33 歳の女性
で、赤い食品を摂取した後に顔面を中心とする膨疹，嘔吐，下痢，呼吸困難の症状で来院した。
紅白かまぼこの負荷試験で膨疹の出現が認められ、コチニール色素及びカルミン酸の皮膚プリックテストも陽性であった（文献 74）。
山川もコチニール色素による即時型アレルギーの 3 症例を報告している（文献 20、62）。第20

1 例はアトピー性皮膚炎の病歴をもつ 35 歳の女性でカンパリを含んだ飲料で痒疹，
顔面腫脹，
全身紅斑等の症状を起こしている。第 2 例はアレルギー性鼻炎の病歴をもつ 44 歳の女性で、カンパリ入りカクテル飲酒後 10 分目頃より気分不快感があり、翌日に顔面腫脹と上肢の紅斑が起こって受診した。第 3 例は蕁麻疹の病歴をもつ 52 歳の女性で、コチニール色素の入った
イチゴ色の缶ジュースを飲んでから 10 分後に手掌の掻痒感，咽頭違和感，全身の掻痒感，顔25

面の腫脹が出現し、副腎皮質ホルモンで軽快した。これら患者は皮膚プリックテスト及び血清
IgE の測定により不純物としてコチニールに含まれるタンパク質に対する即時型アレルギーと診断され、さらに Western-blotting 法により、コチニールに含まれるタンパク質のうち 39－
45kDa のタンパク質がアレルゲンであると推定されている（文献 20、62）。
カルミンに感作された患者の中で、臨床症状を発現しない例は少なくない。ダニ（House dust

30mite）に対する感作の有無がカルミンによるアレルギー症状の発現/進展に関与しているのではないか？この問題についてフィンランドの Turku 大学病院皮膚科では、過去 10 年間（1997年 1 月から 2007 年 5 月）でこの大学で実施された 6,464 例の皮膚プリックテストの結果に基づいた調査がおこなわれた。食品もしくは食品添加物と関連のある皮膚症状もしくは胃腸症状を発現した 3,164 症例の中で、94 例にカルミンの皮膚プリックテストで陽性反応がみられた。

35

カルミンに対して陽性反応を示した 94 例について、ダニ（House dust mite）に対する反応を調査した所、70 症例は少なく共一種のダニに対して陽性反応を示した。一方、残りの 24 例

29

（25％）は 3 種のダニ（Acarus siro, Lepidoglyphus destructor, Tyrophagus putrescentiae）
を混合したアレルゲンに対して反応を示さなかった。これらの知見から、カルミンによるアレ
ルギー症状は、ダニに対する感作とは関係なく発現/進展すると結論されている。なお、カルミンに対して感作された患者の約 50％が臨床症状を発現することから、皮膚プリックテスト

5はカルミンによる食品アレルギーの検出に有用である（文献 77）。
（４）評価
FAO/WHO 専門委員会は、これらの情報に基づいて、食品及び飲料に含まれるコチニール抽出物，カルミン，及びカルミン酸は一部の個体にアレルギー反応を誘発することがあると結論づ10け、この反応が重篤な経過を示すことがあることから、これらの物質に対してアレルギー反応を起こしやすい人々に対して適切な情報を提供すべきであると述べている。一方、これまでのデータは症例報告であり、一般ヒト集団におけるコチニール抽出物，コチニール色素に対するアレルギー反応の罹患率，有病率を評価するために企画された研究のデータではないことも指摘している（文献 10）。

15
補：コチニール色素中のアレルゲンタンパク質に関する研究の現状
コチニール色素は安全性が高く、耐熱・耐光性に優れていることから、食品の着色料として国際的に広く使用されている。一方、2000 年の第 55 回 FAO/WHO 合同食品添加物専門家会議（JECFA）においてコチニール色素によるアレルギー誘発の可能性が示唆された（文献 2、10）。

20

アレルゲンについては、症例研究において個別的に検討されているが、これまでの知見を総合して、アレルゲンは色素本来であるカルミン酸ではなく、原料由来のタンパク質であると推定されているが（文献 20、26、76）アレルゲンとなるタンパク質の同定には至っていない。これら症例研究と並行して、アレルゲンの探索と同定を目的とする系統的研究が国立医薬品食品衛生研究所代謝研究部を中心に進められている（文献 78、79）。

251）コチニール抽出物中に「335 個のアミノ酸から構成され、分子質量が 38kDa のタンパク質（CC38K タンパクと命名）の存在が確認された。
2）CC38K タンパクをコードする cDNA が単離された。
3）CC38K を酵母に発現させ、生成された組換体 CC38K タンパクが患者血清の IgE と反応する

30

知見が得られた。
4）CC38K タンパクのアミノ酸配列とフォスフォリパーゼのアミノ酸配列の間に相同性がみられた。なお、昆虫由来のフォスフォリパーゼは昆虫によるアレルギー症状発現に関与していることが知られている。
以上の知見に基づき、CC38K タンパクがカルミンの主要夾雑アレルゲンタンパク質と判断さ

35

れている。

30

７．国際委員会などにおける安全性評価
１）FAO/WHO 合同食品添加物専門家会議（JECFA）における評価
JECFA は 21 回会合（1978）においてカルミンを扱っているが、毒性データが不十分であっ5たため ADI を設定していない(文献 4)。1981 年 25 回会合において、JECFA は添加物として使用されているコチニール抽出物が主として食品に用いられているアンモニウムカルミンと飲料に用いられているカルシウムカルミンであることから、アンモニウムカルミンについて実施
されたラット多世代試験での無影響量 500mg/kg/day に安全係数 200 を適用して、アンモニウ
ムカルミン，カルシウムカルミン，カリウムカルミン及びナトリウムカルミンに暫定 ADI とし

10て 0－2.5mg/kg/day（アンモニウムカルミン換算）を設定している(文献 5)。引き続き JECFAは 1982 年の 26 回会合において、ラット長期毒性試験の結果に特記すべき影響がなく、発がん性もみられないと判断し、アンモニウムカルミン，カルシウムカルミン，カリウムカルミンの
ADI を 0－5mg/kg/day に設定している(文献 2、9)。この ADI は 2000 年の 55 回会合においてもそのまま維持されている（文献 2、10）。

15

なお、JECFA は 55 回会合において、コチニール抽出物，カルミンの摂取もしくは職業曝露との関連が疑われるアレルギー症例について調査に基づいて食品又は飲料に含まれるコチニール抽出物及びカルミンが一部の個体に対しアレルギー反応の原因になるとの結論を下し、これらの物質が含まれる食品もしくは飲料についてはその情報を表示などの手段で提供すべきであるとしている(文献 2、10)。

20２）米国 FDA における評価
米国 FDA は、カルミンは 1967 年、コチニール抽出物は 1968 年、検定不要の（成分規格への適合性を国として試験・検査し確認する必要はないとされている）食用着色料としての使用を認めた(文献 12、16)。検定不要の着色料は、物質名若しくは慣用名に代えて、着色料である25

旨の表記（Artificial Color, Artificial Color Added）も認められ、コチニール抽出物、カ
ルミンについても同様であった。その後 FDA はカルミン、コチニール抽出物を含む食品、化粧品、また、カルミン、コチニール抽出物自身によるアレルギー発症報告（科学誌掲載分及びFDA への直接報告を含め合計 34 報告、2004 年 2 時点）を調査した結果、カルミン、コチニー
ル抽出物は主要な食品アレルゲン物質ではないが、少数のヒトにアレルギー反応を起こすこと、

30

反応は IgE 関与で、アナフィラキシーなどの重篤な反応を起こすことがあると判断し、コチニール抽出物及びカルミンが使用されているすべての食品及び化粧品について、用途名（着色料）に加え物質名を表示することを義務付ける連邦規則改正案を 2006 年 1 月に公示し意見を募った (文献 16)。 FDA は寄せられた情報、意見を評価の上、2009 年 1 月、改正案とどおりの最終規則を公布し、2011 年 1 月から施行されることとなった（文献 54）。上記規制により、カル

35

ミン、コチニール抽出物感受性者は食品ラベルを確認し、表示されている場合は当該食品の摂取を控え、アレルギー発症を抑えることが出来る、と FDA は述べている（文献 54）。

31３）欧州連合における評価
欧州連合では、カルミン関連物質は食品科学委員会において評価が行なわれ、1983 年にJECFA 評価と同じく一日摂取許容量（ADI）：5mg/kg 体重/日が設定された(文献 37)。この評価

5に基き、コチニール（Cochineal），カルミン酸（Carminic acid）及びカルミン（Carmines）
は欧州議会と EC 委員会指令によって特定の食品に使用しうる色素（E 120）として認められている(文献 14、15)。

８．安全性評価と ADI の試算
10
カルミンはエンジムシの乾燥物（コチニール）から得られるカルミン酸のアルミニウムレー
キ化合物若しくはアルミニウム・カルシウムレーキ化合物を主成分とするものである〔3. 1)(1)及び 3. 1) (6)参照〕。アンモニウムカルミン、コチニール色素、カルミン酸について実施された各種毒性試験データに基づいてカルミンの安全性を評価した。

15

コチニール色素の単回投与試験、カルミン及びコチニール色素の反復投与試験においてラット及びマウスに対する毒性は極めて低いとされている。ちなみに Wistar ラットに 500mg/kg 体
重の用量を 109 週連日投与しても特記すべき有害影響がみられていない。
生殖発生毒性試験も Wistar ラットを用いて実施され、飼料添加による 3 世代試験において500mg/kg 体重の投与でも母体に影響はなく、児の出生前及び出生後の発達にも影響はなかっ20たと報告されている。催奇形性試験においても 1000mg/kg 体重の投与で胚の発達に影響はなかったと述べられている。
変異原性についても、復帰変異試験，哺乳類培養細胞による染色体異常試験及び姉妹染色分体交換試験，小核試験ならびに不定期 DNA 合成試験が実施され、いずれも陰性の結果が得られている。これらの知見からカルミンについては変異原性による安全性の懸念は見出されないと25判断される。
発がん性についてもコチニール色素の 6％添加飼料によるマウスの 104 週間投与試験及びアンモニウムカルミン（50，150 及び 500mg/kg 体重）によるラットの長期投与試験（109 週間まで）が実施され、いずれも陰性の結果が得られている。
ヒトについての知見として、コチニール色素によると考えられる蕁麻疹，鼻炎，下痢，アナ30

フィラキシー等のアレルギー反応に関する多くの症例報告があり、原因についてはコチニール
抽出物中のたんぱく質がアレルゲンとなっていると考察されているが確定的な結論は得られていない〔6. 6) (7)参照〕。
以上の知見から、ラットの長期経口投与試験において 500mg/kg 体重の用量で特記すべき有
害影響がみられなかったとのデータを基礎に、安全係数 100 を適用して、カルミンについて

35

5mg/kg/day の ADI を設定するのが適切と考える。なお、コチニール色素によるアレルギー反応の惹起についての報告があることから、JECFA での評価に準じて、カルミンが含まれる食品

32

もしくは飲料についてはその情報を表示などの方法で提供する必要があると考える。

９．推定摂取量5

カルミンの欧米における摂取量関連報告はコチニール色素、カルミン酸を含めた合計量で報告されており、カルミン単独での報告は不明である。また、医薬品、化粧品等食品以外の用途への使用量に関するデータを入手することはできなかった。そこで、本報告では、カルミンの使用量は国内における現在のコチニール色素使用量と同程度（カルミン酸当たり）であると仮定し、推定することする。

10

コチニール色素の国内使用量は、既存添加物の生産流通調査方式（食品添加物として１年の間に出荷され、人に摂取された量。査定量）による直近の平成 19 年度調査報告（平成 19 年度
厚生労働科学研究報告、調査年 平成 17 年）において、71,363kg（製造量 56,777kg, 輸入量
14,586kg の合計量）と報告されている。
前述のようにコチニール色素のカルミン酸濃度は 6.79%以上と規定されている。従って、コ15

チニール色素のカルミン酸換算人摂取量は、4,845kg であり、カルミンに換算すると 9,690kgに相当し、国民１人一日カルミン摂取量は 0.207mg/人/日(人口 127.8 百万人として（平成 17年））である。このカルミン推定摂取量の対 ADI （体重 50kg として 250mg/人/日)比は 0.083%と算定される。

20

１０．使用基準案
本品については既存添加物であるコチニール色素と同様の使用基準とすることが適切であると思われる。

25

使用基準案：
こんぶ類、食肉、鮮魚介類（鯨肉を含む）、茶、のり類、豆類、野菜及びわかめ類に使用してはならない。

30

本評価資料の取扱いについて

35

本評価資料及び引用文献については、全て開示して差し支えない旨申し添える。

33

（参考 1）
カルミン、カルミン関連物質の名称・定義について
カルミン、カルミン関連物質の名称・定義は、薬事食品衛生審議会における審議の中で検討・決定すべき事項ですが、本報告では以下の取り扱いで報告書を作成しました。
まず、カルミンの定義の記述内容は、第２章１）物理化学的性質、(1) 名称・定義の項にも記したように、JECFA/欧州連合の規格と米国規格（FDA 規格およびFCC 規格）とでは若干の違いがある。例えば、前者の規格では、主成分はカルミン
酸のアルミニウムキレート化合物としているが、後者では、カルミン酸のアルミニウム若しくはアルミニウム・カルシウムキレート化合物を主成分とするものと定義している。これら生成物の化学構造を科学的に解明した報告は見出し得ず、報告書で記したカルミンの化学構造は JECFA 規格において、「Possible structural
formula」と推定に留まっている。複数のキレート化剤が使用されていることと関連している可能性があるが、違いの正確な理由不明である。そこで、本報告書では国際汎用添加物として両者を含むものとして定義した。次に、JECFA/欧州連合の規格では、カルミン酸のアルミニウムキレート化合物のカルミン酸とアルミニ
ウム比のモル比が、１：２と記されているが、米国規格では、アルミニウムキレート、アルミニウム・カルシウムキレート化合物双方ともモル比は規定されていないことから、モル比の規定は設けないこととした。また、JECFA/欧州連合の規格では、カルミン市販製品がアンモニウム、カルシウム、カリウム等複数の陽イオンの塩として存在するとされているが、この規定は米国の規格にはない。キレート化及びその後の精製工程で使用される物質の違いにより塩として存在する場合も考えられるが、塩の実態を科学的に解明した知見は見出し得なかったことか
ら、定義には含めないこととした。

但し、純度試験で「灰分12.0%以下」としているように、製品中にミネラルが一定量含まれることは想定している。一方、不純物としてたん白質が含まれる点は、両規格とも共通しており、製品のアレル
ギー誘発性とも関連することから、１）物理化学的性質、(1) 名称・定義の項に説明を加えた。
カルミンは、米国では Carmine と単数扱いであるが、JECFA/欧州連合の規格では Carmines と複数扱いになっている。カルミン製造のキレート化工程及びその後の精製工程で使用する物質の違いにより、アンモニウム、カルシウム、カリウム
等複数の陽イオンの塩として存在し得ることを反映するものと思われる。一方上
述のようにこれら塩の詳細は明らかでなく、また、複数扱いは、天然添加物であるコチニール色素及びカルミン酸も含まれるのか、との誤解を生む可能性もある。
1

これらのことから本報告書では、和名、英名とも単数の扱いで統一することにした。但し、純度試験で「灰分12.0%以下」としているように、製品中に複数のミネラルが含まれることは想定している。
次に、コチニール抽出物（コチニール色素）は、我が国において天然由来の着色料として、古くより「コチニール抽出色素」の名称で知られ（文献 80）、平成 8
年 4 月に公示された既存添加物名簿でコチニール色素として収載されている。同
名簿において、「コチニール色素はエンジムシから得られたカルミン酸を主成分とするものをいう。」と定義され、この定義は、平成 11 年 4 月に公示された第 7 版
公定書規格においても継承された。また、コチニール色素の基原・製法・本質は
既 存 添 加 物 名 簿 に お い て 「 カ イ ガ ラ ム シ 科 エ ン ジ ム シ （ Coccus cacti
Linne(Dactylopius coccus COSTA)）の乾燥体より、温時～熱時水で、又は温時含水エタノールで抽出して得られたものである。主色素はカルミン酸である。橙色～赤紫色を呈する。」と記されている。一方、Cochineal extract の JECFA 規格（文献 81）ではコチニールの抽出溶剤として、水、エチルアルコールのほかメチルア
ルコールの使用も含めている点で、日本の公定書規格と異なっている。また、米国 FDA 及び欧州連合の成分規格では抽出溶剤は、含水アルコール若しくはアルコールと記され、エチルアルコールに特定されていない。そこで、本報告書では、
Cochineal extract は、原則として、日本の既存添加物を指す場合はコチニール色
素、欧米品の場合はコチニール抽出物、と区別して記した。
なお、コチニールの用語は、本来はエンジ虫虫体の用語であるが、欧米では着色料として使用されるコチニール抽出物も簡略的にコチニールと呼ばれることがある（例えば欧州連合の成分規格のタイトル）。

文献 80：コチニール抽出色素、日本食品添加物団体連合会制定天然添加物規格、食添連合会ニュース、第 12 号、p25 - 26、昭和 49 年 3 月 9 日
文献 81：Cochineal extract, Online Edition “Combined Compendium Food
Additive Specifications, Monograph 1 (2006),

Additive-137,

http://www.fao.org/ag/agn/jecfa-additives/details.html?id=803

2

引用文献一覧 ［カルミン］
No.

著 者 等

タイトル

出典・研究施設等

1

JECFA

Carmines

IPCS INCHEM
http://www.inchem.org/documents/jecfa/jece
val/jec_344.htm 【11.03.14現在】

2

Fifty-fifth Report of the JECFA, 2000

Evaluation of Certain Food Additives andContaminants （抜粋）

WHO Technical Report Series 901, pp.10-12,
83-99, 2001

3

Eighteenth Report of the JECFA

Evaluation of Certain Food Additives （抜粋）

WHO Technical Report Series 557, pp.17, 3334, 1974

4

Twenty-first Report of the JECFA

Evaluation of Certain Food Additives （抜粋）

WHO Technical Report Series 617, pp.18-19,
1978

5

Twenty-fifth Report of the JECFA

Evaluation of Certain Food Additives （抜粋）

WHO Technical Report Series 669, pp.19, 41,
43-44, 1981

6

Twenty-sixth Report of the JECFA

Evaluation of Certain Food Additives andContaminants （抜粋）

WHO Technical Report Series 683, pp.22, 3744, 1982

7

JECFA

Toxicological Evaluation of Some Food Colours,
Enzymes, Flavour Enhancers, Thickening Agents,
and Certain Food Additives [371.Cochineal andCarminic Acid]

WHO Food Additives Series 6 (1974)
IPCS INCHEM
http://www.inchem.org/documents/jecfa/jec
mono/v06je18.htm【11.03.14現在】

8

JECFA

WHO Food Additives Series 16 (1981)
503. Carmines [Formerly Cochineal, Carmine and IPCS INCHEM
Carminic acid]
http://www.inchem.org/documents/jecfa/jec
mono/v16je09.htm 【11.03.14現在】

9

JECFA

527. Carmines

WHO Food Additives Series 17 (1982)
IPCS INCHEM
http://www.inchem.org/documents/jecfa/jec
mono/v17je07.htm【11.03.14現在】

10

First Draft Prepared by Greig,J.B. (FoodStandards Agency, UK )WHO Food Additives Series 46 : Cochineal
Extract, Carmine, and Carminic Acid

WHO Food Additives Series 46 (2001)
IPCS INCHEM
http://www.inchem.org/documents/jecfa/jec
mono/v46je03.htm【11.03.14現在】

11

JECFA

Carmines

Online Edition: "Combined Compendium ofFood Additive Specifications″
http://www.fao.org/ag/agn/jecfaadditives/details.html?id=801 【11.03.14現在】

12

Food and Drug Administration, HHS§73.100 Cochineal extract ; Carmine

21 CFR Ch. §73.100 (4-1-04 Edition)

13

Institute of Medicine of the National
Academies

CarmineFood Chemical Codex Fifth Edition, pp.98-99,
2004

14

The European Parliament and the Council of
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定4