Journal of Assisted Reproduction

ISSN 1881-9028

日本IVF
日本
学会雑誌
IVF学会雑誌
Vol.20 No.2

Vol.20 No.2
Vol.20 No.2I

2 017 2

2017

論文集

論 文
−原 著 −
グルタチオンエチルエステルは加齢により低下したウシ卵子の胚発生能を向上させる･･････････････････････････････

2

真方 文絵，小牧 春菜，出田 篤司
全農 ET 研究所 研究開発室

ー原 著 ー  マウス精子成熟における遺伝的背景の影響について･･････････････････････････････････････････････････････････････････

6

渡邊 仁美 1,2，竹田 理恵 1,2，廣田 圭司 1,2，近藤 玄 1,2
京都大学 ウイルス・再生医科学研究所 1 統合生体プロセス分野／ 2 附属再生実験動物施設

ー原 著 ー
精子凍結前の冷却方法についての検討････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････

9

加賀 朝子，石川 聖華，中山 順樹，向江 真璃，佐久間 友香，中村 好祐,
荒井 勇輝，毛利 汐菜，白築 章吾，原 利夫
はらメディカルクリニック

ー原 著 ー
妊娠率および流産率からみた 2 種類のヒアルロン酸含有胚移植用培養液の比較検討････････････････････････････ 11
秋吉 俊明，松尾 完，南 志穂，金子 亜絵理，古川 晋也，臼井 文,
山口 敦巳，長野 純大，岡本 純英
ART 岡本ウーマンズクリニック

日本 IVF 学会雑誌 Vol. 20，No. 2，2 - 5，2017

ー原著 ー

グルタチオンエチルエステルは加齢により低下した
ウシ卵子の胚発生能を向上させる
真方 文絵，小牧 春菜，出田 篤司
全農 ET 研究所 研究開発室〒 080-1407

北海道河東郡上士幌町字上音更西 6 線 331-11

要 旨： 本研究では，抗酸化物質であるグルタチオンエチルエステル（GSH）が老齢牛由来卵子の胚発生能に及ぼす影響について検証した．
食肉処理場にてホルスタイン種経産牛より卵巣を採取し，若齢区（50ヶ月
齢未満）および老齢区（120 ヶ月齢以上）の卵丘細胞－卵母細胞複合体を試験に供した．5mM の GSH を添加した培地を用いて体外成熟培養を行い，体外受精および体外発生培養に供した．老齢区において，GSH 添加により第二減数分裂中期に達した成熟卵子の割合が増加するとともに，正常受精率が向上した．
さらに，卵割率および胚盤胞期胚への発生率は GSH 添加区で有意に高かった．一方で，若齢区ではいずれの項目においても GSH 添加による影響は認められなかった．以上の知見から，ウシ卵子において体外成熟培地への GSH 添加は核成熟および受精を促進し，加齢による胚発生能低下を改善する可能性が示唆された．
キーワード：加齢，体外成熟培養，グルタチオンエチルエステル

緒

言

対象と方法

あらゆる生物種において，その繁殖能力は加齢とと試薬および培地類において，記載がないものについもに低下する．ヒトでは初産年齢の上昇による妊孕性てはSigma-Aldrich（St. Louis, MO, USA）
にて購入した．

の低下が問題となっているが 1），ウシにおいても同様に， 体外成熟培養，体外受精，体外発生培養については，既遺伝的能力が判明するころには加齢が進み，繁殖能力

報 7）に若干の改良を加えて実施した．

ヒトとウシではが低下するという問題が生じている ．
2）

卵胞形成にかかる期間が類似しており，さらに複数の卵胞波の後に単排卵が起こるといった共通の現象が認

食肉処理場にてホルスタイン種経産牛より個体別に卵

さらに加齢による繁殖機能減退の過程におめられる ．

巣を採取し，若齢区（50 ヶ月齢未満，39. 9±5. 4 ヶ月齢）

いて，原始卵胞数の減少やホルモン動態の変化などのおよび老齢区（120 ヶ月齢以上，135. 2 ± 14. 2 ヶ月齢）似通った現象が認められることから 4），ヒト生殖補助医の卵巣を試験に供した．18 ゲージの針を装着した療の問題解明に資するアニマルモデルとして，ウシ卵

10ml シリンジにて直径 2- 8mm 程度の小卵胞より卵丘子を活用することができる．加齢による卵子の胚発生

細胞－卵母細胞複合体（COCs）を吸引採取し，若齢区能低下機序の一つとして，ミトコンドリアの機能低下

68 頭より 2,495 個の COCs を，
老齢区 42 頭より 1,567グルによる酸化ストレスの悪影響が示唆されている 5）．

個の COCs を得た．採取した COCs は基礎培地である

タチオンエチルエステル（GSH）は，過酸化水素を分解

5%ウシ胎子血清添加TCM-199（ジャパン・バイオシー

し，活性酸素から細胞を保護するグルタチオンの前駆

ラム，
福山市および Gibco Lab., NY, USA）
のみ
（非添加体であり，抗酸化物質として用いられている．
ウシにお区）もしくは TCM 199 に 5mM の還元型 GSH を添加しいて，体外成熟培地への GSH 添加により胚盤胞の細胞た培地（添加区）を用い，38. 5℃，5%CO 2 湿度飽和気数が増加することが報告されているが ，加齢が進んだ

相下で 23 時間体外成熟培養を行った（10 個 / 100 μ l

個体から採取した卵子に及ぼす影響は明らかになってドロップ）．培養後の卵子は 0. 1% ヒアルロニダーゼ処いない．
そこで本研究では，体外成熟培地へのGSH添加

理にて卵丘細胞を剥離し，5% ウシ胎子血清を添加しが老齢牛由来卵子の胚発生能に及ぼす影響について検たリン酸緩衝液で洗浄した．卵子のホールマウント標証した．

本を作製し，固定後に 1% アセトオルセインによって核

3）

6）

受付 2017 年 5 月 11 日 / 受理 2017 年 7 月 5 日
責任著者：真方 文絵 e-mail［ haneda-fumie@zennoh.or.jp ］

2

1．体外成熟培養

の染色を行った．
第二減数分裂中期（MII 期）に達したも移した（10 個 /100μlドロップ）．培養 2日目に卵割率を，のを成熟卵子として核の成熟率を算出した．

8 日目に胚盤胞期胚への発生率を評価した．

2. 体外受精4. 統計解析

体外成熟培養後の卵子は体外受精に供した．同一の統計解析はStat View 5. 0（SAS Institute Inc., Cary,

種雄牛から採取した凍結精液を35℃の湯につけて融解

NC, USA）
を用い，カイ二乗検定により実施した．P 値

後，45% ｰ 90% パーコール層の上層に重層し，遠心分が 0. 05 未満のものを有意差ありとした．

離（1, 000rpm×30 分）後に 90% パーコール層の下部より得られた精子を用いた．最終濃度 250 万精子/mlと結なるように希釈し，IVF 100 培地（機能性ペプチド研究所，東根市）を用いて38. 5℃，5%CO 2 湿度飽和気相下で果

1．核成熟率15 時間媒精させた（10 個 /100μlドロップ）．ウシ受精

若齢区において，成熟培地への GSH 添加は核成熟率

卵は脂質を多く含むために前核の評価が困難であるこに影響を及ぼさなかった（表 1）．
老齢区では，MII 期に達とから，前核を可視化するために核染色を行った．前項とした卵子の割合は GSH 添加によって有意に増加した

同様の手法にて卵丘細胞を除去し，アセトオルセイン染 （表 2）．
色によって受精率を評価した．雌性前核とともに，精子尾部付近に位置する雄性前核がそれぞれ1個ずつ認めら

2. 正常受精率れたものを2PN，3 個以上の前核が認められたものを≧ 3PNとした．

若齢区において，GSH 添加による受精率への影響は認められなかった（表 3）．
老齢区では，GSH 添加により2PN の割合が有意に増加した（表 4）．

3. 体外発生培養
媒精後の受精卵より卵丘細胞を除去し，38. 5℃， 3. 卵割率及び胚盤胞率
5%CO 2，5%O 2 湿度飽和気相下で体外発生培養を実施

若齢区において，成熟培地への GSH 添加は良好胚盤した．CR 1aa 培地にて 5 日間培養後に USU 6 培地に胞発生率を向上させる傾向が認められたが，卵割率およ表1

表3

若齢牛由来卵子の核成熟能に及ぼすGSHの影響

GSH

卵子数

未成熟卵子数（％）

成熟卵子数１）（％）

卵子数

未成熟卵子数（％）

第２減数分裂中期像を呈した卵子数

１）

媒精数

総受精数
（％）

2PN1)
（％）

≧3PN2)（％）

１）

老齢牛由来卵子の核成熟能に及ぼすGSHの影響

GSH

GSH

２個の前核が認められた受精卵，２）３個以上の前核が認められた受精卵

第２減数分裂中期像を呈した卵子数

１）

表2

若齢牛由来卵子の受精能に及ぼすGSHの影響

表4

成熟卵子数１）（％）

老齢牛由来卵子の受精能に及ぼすGSHの影響

GSH

媒精数

総受精数
（％）

2PN1)
（％）

≧3PN2)（％）

２個の前核が認められた受精卵，２）３個以上の前核が認められた受精卵

１）3

び胚盤胞期胚への発生率に影響を及ぼさなかった（表5）． 熟を行った卵子では体内成熟卵子と比較して細胞質内
一方老齢区では，卵割率，胚盤胞期胚への発生率およびのグルタチオン濃度が低く 10），体外成熟卵子は体内成熟

良好胚盤胞発生率のいずれにおいても添加区で有意に卵子よりも酸化ストレスの影響を受けやすいと考えら

高かった
（表 6）
．

れる．
さらに，GSHによる抗酸化作用を触媒するグルタ
チオンS-転移酵素の卵胞液中濃度は加齢により減少す考ることから 11），加齢に伴うGSHの保護作用低下による察

酸化ストレスの発生が卵子の質の低下の一因となって本研究では，加齢により低下したウシ卵子の胚発生能いる可能性は高い．

を向上させるため，抗酸化物質であるGSHを体外成熟

老齢牛由来卵子において，GSHにより核成熟が促進

培地に添加し，若齢牛と老齢牛由来卵子に及ぼす影響にされることで正常受精率が向上するとともに，胚盤胞期

ついて検証した．
その結果，老齢牛から採取した卵子に胚への発生能が向上したと推察される．
本研究ではGSH

おいて，GSH添加は核成熟を促進するとともに正常受による核成熟促進機構については明らかになっていな

精率を向上させ，加齢による胚発生能低下を改善した．

いが，同様に，サル卵子において体外成熟培地へのGSH

体外成熟培地へのGSH添加に対する反応性は若齢牛

添加は卵子の細胞質内グルタチオン濃度を増加させ，核と老齢牛で異なり，GSH添加による胚発生能向上効果

成熟率および受精率を向上させたことが報告されていは老齢牛由来卵子においてのみ認められた．
ミトコンドる 12）．

リアは胚発生のためのATP産生を行うと同時に活性酸

本研究により，体外成熟培地へのGSH添加は加齢に素を発生する．
加齢が進んだ個体では，ミトコンドリア

より低下したウシ卵子の胚発生能を向上させることがこれらの知見をヒト生殖補助医療におDNAの変異が増加し，活性酸素の産生が増加することで， 明らかとなった．
ウシにおいて，老齢牛由来卵
酸化ストレスが発生する 8）．

いても応用し，高齢患者から採取した卵子の体外成熟技

子では若齢牛由来卵子と比較して細胞質内活性酸素濃術向上のための一助となることが期待される．

度が高く ，加齢による卵子の酸化ストレスの増加が示
5）

唆されている．
また，抗酸化物質であるグルタチオンの
卵子細胞質内濃度は胚発生能の指標となるが 9），体外成

表5若齢牛由来卵子の胚発生能に及ぼすGSHの影響

GSH

卵子数

卵割胚数１）
（％）

胚盤胞数
（％）

良好胚数
（％）

媒精後 48 時間に観察した２細胞期以上の胚数

１）

表6
GSH

老齢牛由来卵子の胚発生能に及ぼすGSHの影響
卵子数

卵割胚数１）
（％）

胚盤胞数
（％）

媒精後 48 時間に観察した２細胞期以上の胚数

１）

4

良好胚数
（％）

参考文献
1）   Broekmans FJ, Soules MR, Fauser BC: Ovarian aging:
Mechanisms and clinical consequences. Endocr Rev, 30:
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Bols PEJ: Bovine in vitro reproduction models cancontribute to the development of （female） fertility
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8）   Chistiakov DA, Sobenin IA, Revin V V, Orekhov AN,
Bobryshev YV: Mitochondrial aging and age-related
dysfunction of mitochondria. Biomed Res Int, 2014: 238463,
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9）
   Zuelke KA, Jeffay SC, Zucker RM, Perreault SD: Glutathione（GSH）concentrations vary with the cell cycle in maturing
hamster oocytes, zygotes, and pre-implantation stageembryos. 64: 106-112, 2003.
10）Yoshida M, Ishigaki K, Nagai T, Chikyu M, Pursel VG:
Glutathione concentration during maturation and after
fertilization in pig oocytes : Relevance to the ability ofoocytes to form male pronucleus. Biol Reprod, 94: 89-94,
1993.
11）Carbone MC, Tatone C, Monache SD, Marci R, Caserta D,
Colonna R, Amicarelli F: Antioxidant enzymatic defencesin human follicular f luid: Characterization and agedependent changes. Mol Hum Reprod, 9: 639-643, 2003.
12）Curnow EC, Ryan JP, Saunders DM, Hayes ES: Primate
model of MI oocyte in vitro maturation and the effects ofa novel glutathione donor on maturation, fertilization andblastocyst development. Fertil Steril, 144: 724-732, 2008.  

5

日本 IVF 学会雑誌 Vol. 20，No. 2，6 - 8，2017

ー原著 ー

マウス精子成熟における遺伝的背景の影響について
渡邊 仁美 1,2，竹田 理恵 1,2，廣田 圭司 1,2，近藤 玄 1,2
１

京都大学 ウイルス・再生医科学研究所
統合生体プロセス分野，2  附属再生実験動物施設 〒 606-8507 京都府京都市左京区聖護院川原町 53

要 旨： 哺乳類精子は射出直後には受精能を持たないが，数々の段階的な精子成熟過程を経ることで受精能を獲得することが知られている１）．先行研究において受精能獲得過程にある精子の膜表面ではGPI アンカ
ー型タンパク質（GPI-AP）遊離とラフトの局在変化が連動して起こり，これが受精に重要な反応であることを見出した２）．
本研究では，実験用近交系マウスで妊孕性に差があるC 57BL/ 6 系統とBALB/c 系統に着目し，2 系統間の精子受精能獲得過程における分子挙動を比較し，受精能との相関を検討した．
実験区として，EGFP-GPI 遊離・ラフト局在変化・奇形精子率・先体反応の誘導・コレステロール遊離・体外受精率・同一場での受精能の比較・雌体内での両系統精子の GPI-AP 遊離およびラフト局在の比較を行った．
結果として，両系統間でラフトの局在変化に有意な差が認められ，これが受精能の違いを反映していることが示唆された．
キーワード：マウス系統，精子，ラフト，受精率

目

的本研究では，実験用近交系マウスで妊孕性に差があ④受精の判定基準：2cellへの発生をもって判定を行った．
受精率は受精率（％）＝ 2cell 数 （/ 2cell 数＋未受精卵数）と算出した．

る C 57BL/ 6 系統とBALB/c 系統に着目し，2 系統間⑤受精卵の移植方法：発情期の雌マウスを精管結察雄の精子受精能獲得過程における分子挙動を比較し，受マウスと交配し，交配翌日にプラグチェックを行い，こ精能との相関を検討した．

れを偽妊娠 0. 5日マウスとして移植を行い19. 5日を出産予定日とした．

材料と方法⑥統計的有意差の検定：２群間の有意差検定は，すべてスチューデントt-testを行った．

①トランスジェニック（Tg）マウスの作製：GPIアンカー型
GFP 遺伝子をもつ EGFP（K 268Q）-GPI Tgマウスを実験項目作製するため，C 57BL/6 系統（日本 SLC）のマウス受
精卵にDNAマイクロインジェクション法を用いて遺伝①受精能獲得誘導によるGPI-AP 遊離の観察：精子受子導入した．このマウスは野生型 C 57BL/6 マウスと精能獲得の誘導物質であるM-β-CDを培養液に加同等の妊娠能力を示した．またBALB/c 系統のTgマえ，5 分・30 分・120 分間 Tgマウス精子の培養を行

ウスは，野生型 BALB/cマウス（日本 SLC）と15 回戻い，
蛍光顕微鏡を用いEGFP-GPI遊離の観察を行った．

し交配を行って作製した．
②精子の調整方法：10 週齢のTg 雄マウスの精巣上体記の条件で培養したTgマウス精子を蛍光標識したコ

尾部より精子を採取し，HTF-PVA培養液および0.45mM

レラトキシン Bフラグメントにより染色し，GM1の挙

Methyl-β-cyclodextrin（M-β-CD）含有 HTF-PVA

動を蛍光顕微鏡にて観察した．

培養液ドロップ内で swim up 培養を行った．
③体外受精環境：37℃ 5% CO 2 インキュベーター内で，③精子奇形率の測定：両系統の精子の形態を観察し，奇形率を測定した．

HTF-PVA 培養液で体外受精を行った．発生培地は④先体反応の観察：上記の条件で培養したTgマウス精mWM 発 生 培 地を 用 い 発 生させ た．媒 精 濃 度 は子をIzumo1の免疫染色を行い，先体反応の進行を観160, 000sperm/mlで行った．

察した．

受付 2017 年 5 月 31 日 / 受理 2017 年 7 月 12 日
責任著者：渡邊 仁美 e-mail［ watanabe@infront.kyoto-u.ac.jp ］

6②精子受精能獲得誘導に伴うラフトの動きの観察：上⑤精子膜からのコレステロール遊離の測定：コレステロー

トの動きの局在変化：先行研究では，雌卵管内で卵ル結合試薬であるfilipinで Tgマウス精子を染 色し，透明帯に接着している C 57BL/ 6 系統精子は，そのFACS（fluorescence activated cell sorting）を用い，全てが EGFP-GPI 遊離とGM 1分布が 頭部全 体 型

受精能獲得時のコレステロール遊離の観察を行った．

を示していることを報告した．そこで，BALB/c 系統⑥受精率と産仔率の測定：両系統で体外受精を行い，について同様の観察を行なったところ，４回の実験で受精率と受精卵移植後の産仔率を測定した．
⑦同一場での受精能の比較：両系統の精子を様々な比率で混合して体外受精を行い，引き続いて偽妊娠マウ

平均 90% 近くの精子で GPI-AP 遊離が見られたが，ラフト局在変化は平均 17. 9% の精子でしか認められなかった（図 1Ｄ）．

スに全ての受精卵を移植し，得られた産仔の眼色から両系統精子の優位性とその度合を測定した．
⑧体内におけるGPI-AP 遊離とラフトの動きの観察：Tg

考察

雄マウスを野生型雌マウスと交配し，卵管膨大部を採C 57BL/ 6 系統と BALB/c 系統は，実験用近交系マ取して卵を回収した．次に卵透明帯に接着した精子のウスとして汎用されているが，BALB/c 系統の産仔数

GPI-AP 遊離の有無とラフトの挙動を蛍光顕微鏡下

は，C 57BL/ 6 系統の約 80％と有意に低いことが知で観察した．

られていた（日本クレアホームページ）．実際に今回の体外受精実験でも C 57BL/ 6 系統の 50％程度の受精結果率であった．この原因としては，これまで精子の奇形率の違いで説明されてきたが，BALB/c 系統でも約① GPI-AP 遊離：両系統ともに３匹の雄マウスを用いて80％の精子は正常型である．一方，同一場での体外受３回の実験を行ったところ，GPI-AP 遊離が同じ程度

精実験では，BALB/c 精子が C 57BL/ 6 精子と同等以に見られ，有意な差はなかった．

上の受精能を示すには約９ 倍量の精子数が必要なこ②ラフトの局在変化：両系統ともに３匹の雄マウスを用とから，この低受精率は，奇形率の違いだけでは説明

いて３回の実験を行ったところ，C 57BL/6 系統では， できない．本研究で我々は新たに，両系統間で受精能ラフトの局在変化が見られたが，BALB/c 系統はほぼ獲得過程でのラフトの可動性の違いを見出した．ラフ

見られず統計学的有意差が認められた（図 1 Ａ）．

トは，長鎖疎水性脂質で構成され，そこには様々な受③奇形精子率：両系統ともに３匹の雄マウスを用いて３

容体，タンパク質リン酸化酵素，G タンパク質等の分回の実験を行ったところ，C 57BL/6 系統の奇形精子が集約し，外的シグナルを効率よく細胞内に伝える

子率は平均 3. 5%であったが，BALB/c 系統の奇形メカニズムのひとつであると考えられている３）．この精子率は平均 21%であり，統計学的有意差がみられた． ことから，精子膜上のラフトの局在変化は，受精の効④先体反応：先体反応の進行をIzumo1の局在変化で率的な進行に寄与している可能性が示唆される．今後，検出したが，両系統ともに３匹の雄マウスを用いて３

今回調べた２ 系統以外の系統についてもその受精能回の実験を行ったところ，有意な差は見られなかった．

とラフト可動性の相関を検討すれば，より確かな傍証⑤コレステロール遊離：両系統ともに３匹の雄マウスをとなるであろう４）．しかしながら，本研究で見出した結用いて３回の実験を行ったところ，両系統間でコレステ

果は，現段階では状況証拠でしかない．今後は，ラフト

ロール遊離に有意な差は見られなかった．

の動きを外から操作する方法を考案して，この現象が⑥受精率：両系統ともに３匹の雄マウスを用いて３回の直接的に受精の進行に関与しているかを検証する必実験を行ったところ，C 57BL/6 系統の受精率は平要がある．また，ラフト可動性の観察は，ヒトにも応用

均 80. 5%であったが，BALB/c 系統では平均 39. 3%

可能なので，これにより，今後新たな男性不妊症診断

であり，統計学的有意差がみられた（図 1Ｂ）．

法の確立が期待される．

⑦同一場での受精能の比較：両系統精子の受精能の違いを詳細に比較するため，同一の体外受精培養液に両系統精子を混合して体外受精を行なった．それぞれ６回の実験を行い，その結果，BALB/c 系統精子をC 57BL/6 系統に対して９ 倍量加えないと同等以上の受精が成立しないことがわかった（図 1 Ｃ）．
⑧雌体内での BALB/c 精子の GPI-AP 遊離およびラフ

7

（C）

（％）アルビノ産仔率

（A）

分離型

頭部全体型

分離型

分離型

（％）in
population（％）inthethepopulation

（D）

（B）

：GFP（＋）（％）in the population（％）体外受精率：GFP（ー）：分散型：頂端部局在型：頭部全体型

図1（A）両系統 Tg マウス精子の EGFP-GPI 遊離とラフトの挙動．代表例を示す．
（B）両系統の体外受精率．グラフ中の数値
は，独立した３回の実験結果の平均値を示す．＊は t- 検定において 0.5％の危険率で統計学的有意差があることを示す．
（C）両系統精子の同一場での受精能の比較．両系統の精子をそれぞれ独立に受精能獲得誘導を行い，図中の比率で混合して体外受精を行なった．BALB/c はアルビノ（毛色は白色，赤目）であるので，同じアルビノである ICR 卵と受精すると，産仔は全てアルビノとなる．逆に C57BL/6 精子と受精すると，産仔は全て有色（毛色は野生色，黒目）となる．BALB/c 精
子は C57BL/6 精子に対して９倍量加えないとアルビノ率が 50％を越えないことがわかる．グラフ中の数値は，独立した 6
回の実験結果の平均値を示す．＊は t- 検定において 0.5％の危険率で統計的学有意差があることを示す．
（D）雌体内での卵透明帯接着 BALB/c Tg 精子の EGFP-GPI 遊離およびラフトの挙動．グラフ中の数値は EGFP-GPI 遊離精子の比率（上）および GM1 染色が頭部全体型である精子の比率（下）を示す．データは，独立した４回の実験から得られたものである．

参考文献
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Biol Reprod, 80: 204-218, 2009.
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4）Watanabe H, Takeda R, Hirota K, Kondoh G: Lipid raft
dynamics linked to sperm competency for fertilization in
mice. Genes to Cells, 22: 493-500, 2017.

日本 IVF 学会雑誌 Vol. 20，No. 2，9 -10，2017

ー原著 ー

精子凍結前の冷却方法についての検討
加賀 朝子，石川 聖華，中山 順樹，向江 真璃，佐久間 友香，中村 好祐，
荒井 勇輝，毛利 汐菜，白築 章吾，原 利夫
はらメディカルクリニック 〒 151-0051

東京都渋谷区千駄ヶ谷 5-8-10

要 旨： 凍結精子を不妊治療に用いる際，融解後運動率・直線速度の低下が起こり，希望通りの治療ができないことがある．ウシ精子を用いた研究では，液体窒素蒸気中で精子を凍結する前に予備冷却を行う
ことで融解後運動率が上昇したという報告がある 1)．そこで本検討では，調整後の精子浮遊液と凍結液を混和させた後，直ちに液体窒素蒸気中で凍結する従来法群と，凍結前に冷蔵庫にて予備冷却を行い凍結した予備冷却群に分け，ヒト精子でも融解後運動率，高速運動率，直線速度の改善がみられるのか検討を行った．
キーワード：精子凍結，液体窒素蒸気凍結法

緒言た．また，本研究は当院の倫理委員会の承認を得た上で行った．

1953 年，Sherman 2）らが精子凍結保存の安定化に

解析には精子運動解析装置 SMAS（DITECT 社）を成功，人工授精により妊娠例を得たとの報告がある．

使 用した．最 初に，採 取された精 液を 3 . 0 m l の 8 0 %その後，凍結精子は非配偶者間人工授精（AID）や体外SpermFilter（Gynotec 社）に重層し 400 × g，15 分間遠

受精，顕微授精に用いられるようになった．現在では， 心分離した．次に，遠心後の上清を除去し，1. 0ml の悪性腫瘍の治療前や精巣腫瘍などの医学的介入によSperm Wash（In Vitro Care 社）を加え懸濁した．こる精子減少が予想される場合に精子凍結も臨床応用の懸濁液を 300 × g，6 分間遠心後，上清を除去し，0. 1

されている．凍結精子を使用することで，患者のニー～ 0. 2ml の Sperm Wash を加えて精子浮遊液を作製

ズに合わせた治療を行うことが可能となった．しかしした．精子浮遊液とSperm Freeze（Ferti Pro社）を1:1

凍結精子を融解した際，一般的に運動率・直線速度のの割合で混和させセラムチューブに半量ずつ分け，一低下が起こり，希望通りの治療をできないことがある． 方を冷蔵庫（4℃）で 3 時間冷却後凍結を行う予備冷却
融解後の運動率・直線速度の低下を抑えることが出来群，他方を調整後直ちに凍結を行う従来法群とした．

れば，治療成績の向上が期待できる．現在，ヒト精子凍

精子の融解は，37℃に保った環境に 10 分間静置した結には精子調整後，凍結液と混和させ液体窒素蒸気中

後，Sperm Wash で懸濁し 300 × g，6 分間遠心し上清で冷却，凍結を行う液体窒素蒸気凍結法が多くの施設を除去した．
その後，Sperm Wash を 0. 2ml 加え SMAS

で行われている．家畜の研究では，ウシ精子を凍結す

にて測定を行った．融解後の運動率，高速運動率，直線る際に予備冷却を 5℃，20 時間行い液体窒素蒸気上

速度を t 検定にて比較検討をした．

で凍結することで予備冷却なしの場合より，融解後運動率の上昇が確認できたという報告がある．
そこで本検討ではウシ精子の報告同様，ヒト精子でも予備冷却を行うことで，融解後運動率は改善されるのかどうか，従来法と比較した．

結果

凍結前の精子所見の平均は精子濃度 170. 1 × 106/
ml（SE ± 30. 6），運動率 74. 4%（SE ± 3. 0），高速運
動率 44. 2％（SE ± 3. 3），直線速度 29. 3µm/sec（SE

対象と方法± 1. 1）だった．融解後の予備冷却群，従来法群の運動率，高速運動率，直線速度は表 1 に表す．

対象は 2016 年 2 月から 2016 年 7 月の期間に精液融解後運動率の平均は予備冷却群 23. 00%，従来法検査を行った患者のうち研究同意を得られた 34 名とし

群 21. 53%（p= 0. 10）．高速運動率の平均は予備冷却受付 2017 年 5 月 30 日 / 受理 2017 年 7 月 13 日
責任著者：加賀 朝子 e-mail［ asa 083023@yahoo.co.jp ］

9

群 8. 91%，従来法群 7. 45%（p= 0. 03）．直線速度の平均は予備冷却群 21. 7µm/sec，従来法群 19. 5µm/sec（p= 0. 003）．運動率において，2 群間に有意差は認められなかった．高速運動率と直線速度には，有意差（p< 0. 05）が認められ予備冷却群が従来法群よりも高速運動率が高いという結果となった．
表1

融解後精子所見
検査項目

予備冷却

従来法

t 検定

運動率（％）

23.00

21.53

n.s

高速運動率（％）

8.91

7.45

＊

直線速度
（µm/sec）

21.7

19.5

＊

n.s : 非有意，＊：p ＜ 0.05

考察結果から，予備冷却群の精子では高速運動率，直線速度は従来法よりも有意に高いことがわかった．ヒト
精子でも予備冷却することで，従来法よりも融解後高速運動率，直線速度が改善される結果となった．よって，予備冷却を設けて精子凍結を行なった方が治療成績の向上に貢献できると考えられる．
今後はさらに冷却時間，温度に関して検討を行うとともに，乏精子症や精子無力症など精子数が少ない症
例に関しても予備冷却に効果があるのか検討したい．

参考文献
1）Burge RG, Sherman JK: Fertilization capacity of frozen
human spermatozoa. Nature, 172: 767-768, 1953.
2）枡田博司 : 牛精液の凍結保存技術に関する最近の研究動向と今後の問題点−1− . 畜産の研究 , 37: 485-490, 1983.

10

日本 IVF 学会雑誌 Vol. 20，No. 2，11 - 14，2017

ー原著 ー

妊娠率および流産率からみた
2 種類のヒアルロン酸含有胚移植用培養液の比較検討
秋吉 俊明，松尾 完，南 志穂，金子 亜絵理，古川 晋也，臼井 文，
山口 敦巳，長野 純大，岡本 純英
ART 岡本ウーマンズクリニック 〒 850-0861

長崎県長崎市江戸町 7-1

要 旨： ヒアルロン酸を添加した培養液は高い妊娠率が期待されている．今回，凍結融解単一胚盤胞移植の妊娠率および流産率について，ヒアルロン酸を含む 2 種類の移植用培養液の比較検討を後方視的に行った．2015 年1月から2016 年 4月までに凍結融解単一胚盤胞移植を施行した535周期を対象とした．A社（A群）とB 社（B 群）の妊娠率および流産率について比較検討した（検討１）．対象を3 つの年齢層に分け，それぞれの妊娠率，流産率についてA 群とB 群を比較検討した（検討 2）．Gardner 分類にてグレード BB 以上の群とグレード BB 未満の群に分け，それぞれの妊娠率および流産率についてA 群とB 群を比較検討した（検討 3）．
検討１, ２および 3 の結果，AB 群間に妊娠率と流産率に有意差は認められなかった．このことから，2 つのヒアルロン酸含有胚移植用培養液は同様の効果が期待できることが分かった．
キーワード：ヒアルロン酸，胚移植用培養液，培養液，妊娠，凍結融解単一胚盤胞移植

緒

胞移植は，
岡本文献の手技に従いpinpoint胚移植法で施言

妊娠は，経腟超音波検査にて胎嚢を確認でき行した 4）．

近年ヒアルロン酸を含む培養液が数社から市販された場合を妊娠陽性とした．

ている．ヒアルロン酸はその特性である粘稠性によるA 群と B 群の妊娠率および流産率について比較検討

移植時の胚の物理的保護効果と子宮内膜の接着作用のした（検討 1）．
さらに，対象を 35 歳未満，35 ～ 39 歳お促進により，妊娠率を増加させることが報告されていよび 40 歳以上の 3 群に分け，それぞれの妊娠率，流産率

る ．しかし，現在市販されているヒアルロン酸含有について A 群と B 群を比較検討した（検討 2）．次に，胚移植用培養液同士の臨床成績を比較検討した報告は少盤胞凍結時の形態評価別に分けて比較検討を行った．

ない．そこで，今回我々は，凍結融解単一胚盤胞移植

すなわち，Gardner 分類にて 5）グレード C を含まない

1）の臨床妊娠率（以後，妊娠率）および流産率について， BB 以上の群（以下 ; BB 以上）とグレード C を含む BB 未
ヒアルロン酸を含む 2 種類の移植用培養液の比較検討

満の群（以下 ; BB 未満）に分け，それぞれの妊娠率およを後方視的に行った．

び流産率について A 群と B 群を比較検討した（検討 3）．
各項目における統計処理は，カイ二乗検定あるいは t 検定を用い，P< 0. 05 を持って統計学的に有意とした．

対象と方法
対象は，2015 年 1 月から 2016 年 4 月までにホルモン補充下にて凍結融解単一保存胚盤胞移植を施行した

結果535 周期を対象とした．
使用する 2 種類のヒアルロン酸

A 群は 379 周期であり，B 群は 156 周期であった．

含有胚移植用培養液は，EmbryoGlue®（Vitrolife）を A

年齢（Mean±SD）
はA群37.5±4.3歳，B群36.2±4.3

群とし，Embryo Transfer® medium（ナカメディカル） 歳であった．
また移植回数（Mean±SD）
は，A群3.4±2.3とした．
なお，この 2 種類の胚移植用培養液を検討する

回，B 群 3. 4 ± 2. 4 であった．年齢と移植回数に有意差にあたり利益相反はない．
胚盤胞の凍結融解は，向田らは認められなかった（表 1）．

回復培養は，胚のクライオループ法 2）に準じて行った．

検 討 1：A 群 お よ び B 群 に お け る 妊 娠 率 は そ れ ぞ れ

移植時に用いる 2 種類のヒアルロン酸含有胚移植用培42. 5％，42. 9％であり，流産率はそれぞれ 27. 3％，

胚盤養液を使用し，胚移植までの 2 ～ 4 時間とした ．

31.3％であった．AB群間に有意な差は認められなかっ3）

受付 2017 年 5 月 31 日 / 受理 2017 年 7 月 13 日
責任著者：秋吉 俊明 e-mail［ t-akiyoshi@okamotoclinic.gr.jp ］

11

表1

対象の患者背景項目

表2

A群

2 種類のヒアルロン酸含有移植培養液の妊娠率・流産率
A群

表3

B群

B群

B群

表5

有意差

有意差

40 歳以上の妊娠率・流産率
A群

表6

35 歳から 39 歳までの妊娠率・流産率
A群

有意差

有意差

34 歳以下の妊娠率・流産率
A群

表4

B群

有意差

グレード BB 以上の妊娠率・流産率
A群

表7

B群

B群

有意差

グレード BB 未満の妊娠率・流産率
A群

B群

有意差

た
（表 2）
．

群に比べて高くなったが，流産率も高く，有意差は認め

検討 2：35歳 未 満 の 妊 娠 率 はA群 で50.7 ％，B群

られなかった．いずれの年齢層においてもAB群間に有55.8％であり，流産率はA群19.4％，B群27.6％であっ

意な差は認められなかった．

た（表3）．B群の妊娠率はA群に比べて高くなったものの， 検討 3：グレード BB 以上の妊娠率は，A 群 46. 7％，B
流産率も高く，有意差は認められなかった．35 ～ 39歳

群 53. 5％であり，流産率はA群25.2％，B群28.3％での妊娠率はA群44.8％，B群41.5％であり，流産率はAあった（表6）．B 群の妊娠率は A 群に比べて高くなった群34.8％，B群22.2％であった（表4）．40歳以上の妊が有意差は認められなかった．グレードBB未満の妊娠

娠率はA群24.1％， B群28.2％であり，流産率はA群率，A群33.9 ％，B 群 30. 0 ％ で あ り， 流 産 率 は A 群

30.0％，B群63.6％であった（表5）． B群の妊娠率はA

33. 3％，B 群 38. 1％であった（表 7）．B 群の流産率は A

12

群に比べて高くなったが，有意差は認められなかった． 娠率と流産率に差は認められなかった．
グレード BB 以上，BB 未満ともに有意な差は認められなかった．

現在，ヒアルロン酸を含む胚移植用培養液が数社より開発・販売されているが，培養液の組成や濃度の詳細は公表されていないことが多く，要因を特定し比較するこ考察

ヒアルロン酸は，粘稠性のある高分子多糖であり，胚とは難しい．
胚培養の選択にあたっては主成分や濃度などから，妊娠率の効果を十分に確認し，自施設の環境，患者背景などに考慮することが重要であると思われる．

への物理的保護作用が報告されている．
また，細胞間の接着を高め，子宮内膜に存在するCD44に接着することが知られており，ヒアルロン酸を含む胚移植用培養液は妊娠率の向上に寄与することが報告されている．
我々も胚移植用培養液に含まれるヒアルロン酸の有効性につ
現在では数社よりヒアルロン酸含いて報告を行った 6,7）．
有胚移植用培養液が開発，市販されている．
今回比較した2種類の胚移植用培養液のヒアルロン酸濃度は，共に0.5 mg/mLであった．
高濃度のヒアルロン酸は胚発育に悪影響を及ぼすため，至適濃度が含まれていれば十分でヒアルロン酸濃度が等しいことかあるとされている 8,9）．
ら，AB群間で妊娠率と流産率に有意差は認められなかったと考えられた．
培養液の基本組成について詳細は公表されておらず，比較検討できなかったが，2種類の移植用培養は同様の効果があったと考えられた．
検討2では，
年齢層ごとの妊娠率，流産率について比較検討を行ったが有意差は認められなかった．
ヒアルロン
酸含有胚移植用培養液は，従来のヒアルロン酸を含まな
い胚移植用培養液に比べて年齢が高い反復不成功例にしかし，今回の結果
おいて有効性が報告されている 10）．
では，B群の40歳以上の流産率は63.6％に達し，A群に比べて有意差はないものの高値となった．
これはヒア
ルロン酸含有胚移植用培養液の生産率の有意な増加は認められなかったとするCochrane Reviewを支持する
流産の大きな原因は染色体異常である
結果となった 11）．
ことが報告されており 12,13），流産率は患者背景が強く影響し，ヒアルロン酸による効果は期待できないと考えられた．
また，培養液へのヒアルロン酸の添加は，胚質の向上
や凍結融解後の回復培養の使用による妊娠率の向上が報告されているが 14,15），今回，胚盤胞までの培養はヒア
ルロン酸を含まない培養液であり，凍結融解後の回復培
養は2 ～ 4時間で，胚質の改善や妊娠率に大きく影響を与えたと考えにくい．
このため，形態評価別による妊娠率，流産率についても有意差は認められなかったと考えられた．
検討1.2および3の結果より，EmbryoGlue® とEmbryo
Transfer® mediumの2種類のヒアルロン酸含有胚移植
用培養液は，年齢層の違いや胚グレードの違いにより妊

参考文献
1） Nakagawa K, Takahashi C, Nishi Y, Jyuen H, Sugiyama R,
Kuribayashi Y, Sugiyama R, Kuribayashi Y, Sugiyama R:
Hyaluronan-enriched transfer medium improves outcome
in patients with multiple embryo transfer failures. J Assist
Reprod Genet. 29: 679-685, 2012.
2） Mukaida T, Oka C, Goto T, Takahashi K : Artificalshrinkage of blastocoles using either a micro-needle or alaser pulse prior to the cooling steps of vitrification
improves survival rate and pregnancy outcome of vitrified
human blastocysts. Hum Reprod, 21（12）: 3246-3252, 2006.
3） 秋吉俊明・南志穂・松尾完・溝部大和・山口敦巳・岡本純英：
Artifical shrinkage による vitrified-warmed 胚 盤 胞の回 復状況と臨床成績の検討．日受精着学会誌 , 30（1）: 100-14,
2013.
4） 岡本純英：経膣超音波断層誘導下 pinpoint 胚移植法の確立．
日受精着学会誌，  30（1）: 30-35, 2013.
5） Gardner DK, Schoolcraft WB, Wagley L, Schlenker T,
Stevens J, Hesla J: A prospective randomized trial of
blastocyst culture and transfer in in- vitro fertilization.
Hum Reprod, 13（12）: 3434-3440, 1998.
6） 秋吉俊明・岡本純英・松尾完・溝部大和・坂口摩姫・上田泰子・
福田裕子・松尾恵子・福嶋倫子・山口敦巳：経腟超音波断層
誘導下法（ピンポイント法）の ET－ associated air movement対策としての hyaluronan rich transfer medium：fibrin sealant（glue）の使用経験．日受精着床会誌（学会抄録），163：O-2,
2013.
7） 松尾完 ･ 秋吉俊明 ･ 南志穂 ･ 西垣みなみ ･ 松崎彰子 ･上田泰子 ･ 松尾恵子 ･ 佐藤春菜 ･ 山口敦巳 ･ 岡本純英：保存胚盤胞移植におけるヒアルロナン添加移植用培養液の使用方法に関する検 討． 第 71 回 九 州 ･ 沖 縄 生 殖 医学 会 学 術 集 会．28,
2014.
8） Miyano T, Hirooka ER, Kano K, Miyake M, kusunoki H,
Kato S: Effects of hyaluronic acid on the development of 1and 2-cell porcine embryos to the blastocyst stage in vitro.
Theriogenology, 41: 1299-1305, 1994.
9） Stojkovic M , Thompson JG , Tervit H R : Ef fects ofhyaluronic acid supplementation on in vitro developmentof bov ine embr yos in a t wo - step cu ltu re system .
Theriogenology, 51: 254, 1999.
10） Uramn B, Yakin K, Ata B, Isiklar A, Balaban B: Effect ofhyaluronan-enriched transfer medium on implantation andpregnancy rates after day3 and day5 embryo transfer:aprospective randomized study. Fertil Steril, 90: 604-12, 2008.
11） Cochrane Database Systematic Reviwes 2010, 7: CD007421.
http://www.cochranelibrary.com/cochrane-database-of-13systemat ic-reviews/table - of- contents/2 010/ Issue7/,（2017.05.25）
12）Marquez C, Sandalinas M, Bahce M, Alikani M, Munne S:
Chromosomeabnormalities in 1255 cleavage-stage humanembryos. Reprod  Biomed Online 1, 17-27, 2000.
13） Munne S, Alikani M, Tomkin G, Grifo J, Cohen J: Embryo
morphology developmental rates and maternal age arecorrelated with chromosome abnormalities. Fertil Steril,
64: 382-391, 1995.
14） 西原卓志・橋本周・井上朋子・中岡義晴：ヒアルロン酸含有
培養液は胚発生能の向上に寄与する．日受精着床会誌 , 32:
203-208, 2015.
15） 田邑結城・北野加奈子・山田（菅原）彩子・八島（槇）菜月・
櫻井宏佑・三輪淳子・加藤淳子・山本瑠伊・大野田晋・鴨下桂子・拝野貴之・杉本公平・林隆・岡本愛光・林博：ヒアルロン酸含有培養液を用いた胚培養成績と，回復培養後の胚移植成績に関する検討．日受精着床会誌，34（1）: 39-43, 2017.

14

第20 回

日本 IVF 学会学術集会
共催

日本臨床エンブリオロジスト学会／日本生殖看護学会
メインテーマChallenge to Excellent ART−ARTの聖地よりおもてなし−
会期2017 年 9 月30日（土）〜10 月1日（日）会場

ホテルメトロポリタン仙台

学術集会抄録集

理事長挨拶（一般社団法人 日本ＩＶＦ学会 理事長 / 塩谷 雅英）･･･････････････････････････････････････････････ 24
学術集会長挨拶（第20回 日本ＩＶＦ学会 学術集会長 / 吉田 仁秋）･････････････････････････････････････････ 25
Program ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 26
交通のご案内 ･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 28
フロアマップ ･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 28
お知らせ ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 29

ART Basic Lecture
座長：近畿大学 / 入谷 明

皮膚からの卵子作製～マウス知見をもとに〜 ･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 30
九州大学大学院 医学研究院 教授 / 林 克彦

卵巣機能不全患者への挑戦
座長：ローズレディースクリニック / 石塚 文平

IVA（in vitro activation）の臨床応用 ･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 31
聖マリアンナ医科大学 医学部産婦人科学 准教授 / 河村 和弘

Ovarian follicles: in vivo architecture, FSH receptor imaging, and in vitro activation･･････････････････････････ 32
Department of Ob/Gyn, Stanford University School of Medicine, Stanford, CA USA / Aaron J Hsueh

ART Frontline
座長：兵庫医科大学 / 柴原 浩章

Strategy of mild stimulation IVF combined with IVM treatment･･･････････････････････････････････････････････

33

Department of Obstetrics and Gynecology, McGill University, Montreal, Canada / Ri-Cheng Chian

採卵で未成熟だった卵子を如何に治療に用いるか････････････････････････････････････････････････････････････････････

34

浅田レディースクリニック，広島大学大学院 生物圏科学研究科 / 北坂 浩也

理事長講演
座長：山王病院 / 堤 治

Excellent ARTを目指したDr.の役割 ･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 35
日本IVF学会 理事長 / 塩谷 雅英

18日本臨床エンブリオロジスト学会 Workshop
座長：国際医療福祉大学 / 栁田 薫
三宅医院 / 沖津 摂

Lab における Excellent ART のための機器管理と災害対策･･･････････････････････････････････････････････････････････ 36
仙台ARTクリニック / 菊地 裕幸

ラボにおけるExcellent ARTとは ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 37
加藤レディスクリニック / 内山 一男

NsのExcellent ARTとは ･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 38
蔵本ウイメンズクリニック 看護師長 / 村上 貴美子

培養士の国家資格化を目指して～心理職の国家資格化の過程から～ ････････････････････････････････････････････････ 39
東京HARTクリニック 臨床心理士 / 平山 史朗

日本生殖看護学会パネルディスカッション
座長：京都橘大学 / 上澤 悦子
スズキ記念病院 / 濱田 結実

高齢出産の母親への社会的支援の実際と課題−総合周産期母子医療センターのＮＩＣＵ退院支援専従社会福祉士の立場から−･････････････････････････････････ 40
京都第一赤十字病院 医療社会事業司 / 藤原 久子

高齢母親を対象としたART治療中から治療後の妊娠までの継続的支援 ･･･････････････････････････････････････････ 41
東邦大学医療センター佐倉病院 不妊症看護認定看護師 / 勝又 由美

在宅医療が必要なハイリスク児の退院支援の実際と課題 ･･････････････････････････････････････････････････････････････ 42
高槻病院 リソースナース室長 / 橋倉 尚美

Symposium
座長：渋谷橋レディースクリニック / 久保 春海
木場公園クリニック / 吉田 淳

生殖医療におけるPGSの意義 ･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 43
IVF大阪クリニック 院長 / 福田 愛作

産科医の出生前診断の経験からみたPGS ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 44
宮城県立こども病院産科 部長，東北大学大学院 医学系研究科生育発達医学講座 胎児医学分野 教授 / 室月 淳

細胞遺伝学から見たPGS ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 45
永井マザーズホスピタル・京野アートクリニック / 笠島 道子

Effective use of Time Lapse in IVF and PGS ･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 46
the Univ. of Auckland / Dean E. Morbeck

19

学術集会抄録集

ART Frontline
座長：千葉大学 / 市川 智彦

Finding Sperm in NOA Patients: Medieval to Modern ･･･････････････････････････････････････････････････････････････ 47
Director, The Turek Clinics / Paul Turek

オーストラリア生殖医学会交換講演
座長：埼玉医科大学 / 石原 理

THE FUTURE OF IVF ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 49
Professor, Robinson Research Institute, University of Adelaide / Robert Norman

Lecture from the Legend
座長：スズキ記念病院 / 星 和彦

The beginning and future of fertilization study,  IVF and ART ････････････････････････････････････････････････････ 50
University of Hawaii Medical School / Ryuzo Yanagimachi

Lunchtime Session
座長：東北大学 / 八重樫 伸生

東日本大震災が生殖医療に及ぼした影響 ―無事出産を迎える為に― ･･････････････････････････････････････････････ 51
スズキ病院 理事長 / 星 和彦

Rising Sun Ｌecture
座長：京野アートクリニック / 京野 廣一

ARTと周産期合併症に関する課題  ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 52
愛媛大学大学院 医学系研究科産科婦人科学 教授 / 杉山 隆

ヒト therapeutic cloning への挑戦と課題  ･ ･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 53
慶應義塾大学 医学部産婦人科学教室 助教 / 山田 満稔

Current Topics
座長：国際医療福祉大学 / 髙見澤 聡

がん・生殖医療最前線 ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 54
聖マリアンナ医科大学 産婦人科学 教授 / 鈴木 直

がん・生殖医療の全国の現状 ･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 55
岐阜大学大学院 医学系研究科 産科婦人科学分野 / 古井 辰郎

20

一般演題〔口頭発表〕
O- 1    ART出生児3,223名のフォローアップ：胚凍結融解が児の身体発育に及ぼす影響 ････････････････････････････ 56
京野アートクリニック / 菊地 寿美

O- 2    卵子体積が受精・発生能ならびに出生児体重に及ぼす影響 ･ ･･････････････････････････････････････････････････ 56
浅田レディースクリニック / 辻 暖永O- 3    顕微授精後にカルシウムイオノファ処理を行った症例の出生児長期予後 ･･･････････････････････････････････････ 57
IVF大阪クリニック / 入江 真奈美

O- 4    胚移植後の胚残留による再胚植の妊娠成績 ･････････････････････････････････････････････････････････････････････ 57
ARTクリニックみらい / 﨑田 恵

O- 5    収縮/拡張中状態での胚盤胞凍結が融解後の生存率，妊娠成績に与える影響に関する検討 ･ ････････････････ 58
田園都市レディースクリニック二子玉川 / 村松 裕崇

O- 6    40歳以上の胚移植におけるAMHと累積臨床妊娠率の検討 ････････････････････････････････････････････････････ 58
ウィメンズクリニック大泉学園 / 知念 日菓利O- 7   生体内環境に近いMicrofluidic embryo culture systemの研究開発 ･ ･････････････････････････････････････････ 59
乾マタニティクリニック，乾フロンティア生殖医療不妊研究所 / 水野 仁二

O- 8   非加湿型インキュベータによる長期継続培養が胚培養環境に及ぼす影響の検討 ･ ････････････････････････････ 59
加藤レディスクリニック / 森田 博文

O- 9    当院20年間の成績からみた少数採卵症例の予後について ･･････････････････････････････････････････････････････ 60
豊橋市民病院総合生殖医療センター / 尾瀬 武志

O- 10   採卵時GV期卵子由来胚盤胞の凍結融解胚移植 ････････････････････････････････････････････････････････････････ 60
アクトタワークリニック生殖発生医科学センター / 長瀬 祐樹

O- 11  酸化ストレスがマウス体外成熟培養の成熟率とミトコンドリアクラスターに及ぼす影響 ････････････････････ 61
仙台ARTクリニック / 山田 健市

O- 12    主席卵胞はTop qualityか？ ･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 61
池袋えざきレディースクリニック / 牧野 いずみ

O- 13  患者アンケート結果から見る胚培養士説明のありかた ･･････････････････････････････････････････････････････････ 62
仙台ARTクリニック / 岸田 理英

O- 14    均衡型染色体異常症例の着床前診断での胚盤胞評価や患者背景と胚の染色体異常との関連 ･･･････････････ 62
IVFなんばクリニック / 中野 達也

O- 15    Assisted hatching法の違いが胚盤胞の接着能に及ぼす影響の検討 ･･････････････････････････････････････････ 63
加藤レディスクリニック / 江副 賢二

O- 16   当院における医学的介入による造精機能低下患者の現状 ･･････････････････････････････････････････････････････ 63
はらメディカルクリニック / 原 利夫

O- 17   精子の運動機能解析結果に基づいたARTにおける受精率予測式の樹立 ･･････････････････････････････････････ 64
英ウィメンズクリニック / 横田 梨恵

21

学術集会抄録集

O- 18   ヒト体外受精における新たな精子調整液の検討 ････････････････････････････････････････････････････････････････ 64
アイブイエフ詠田クリニック / 久原 早織

O- 19   EmbryoScope＋™ は魅力的なバージョンアップをした ･････････････････････････････････････････････････････････ 65
神奈川レディースクリニック / 菊本 晃代

O- 20   第一卵割異常由来の胚盤胞では第一有糸分裂に要する時間が長くなる ････････････････････････････････････････ 65
IVFなんばクリニック / 宮本 麻梨恵

O- 21   Rescue-ICSIにおける紡錘体観察は有用か？ ･･･････････････････････････････････････････････････････････････････ 66
神奈川レディースクリニック / 古川 悦子

O- 22   rescue ICSIの臨床的有用性 ･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 66
神奈川レディースクリニック / 長谷川 久隆

O- 23   卵胞液に暴露した精子を用いたICSI ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 67
池袋えざきレディースクリニック / 町田 遼介

O- 24   Piezo-ICSIにおける紡錘体の可視／不可視が受精及び胚発育へおよぼす影響 ･･･････････････････････････････ 67
亀田IVFクリニック幕張 / 平岡 謙一郎

一般演題〔ポスターセッション〕
P-1    2種類のSingle mediumを用いた胚培養成績の比較検討 ･･･････････････････････････････････････････････････････ 68
英ウィメンズクリニック / 阿部 礼奈

P- 2    新たな精子調整液を用いた授精方法別の胚発育の検討 ････････････････････････････････････････････････････････ 68
IVFなんばクリニック / 山下 奈緒美

P- 3    精液処理法がARTへ及ぼす影響について ･･････････････････････････････････････････････････････････････････････ 69
ウイメンズクリニック大泉学園 / 大川 莉歩

P- 4     当院における初診患者の受診1年後の転帰 ･･････････････････････････････････････････････････････････････････････ 69
IVF大阪クリニック / 饒平名 里美

P- 5    検卵時における培養液中の温度変化について ･･････････････････････････････････････････････････････････････････ 70
仙台ARTクリニック / 山田 健市

P- 6     液体窒素内で動作可能なRFIDタグを活用した卵巣組織凍結保存管理システムの開発 ･･･････････････････････ 70
聖マリアンナ医科大学産婦人科学 / 杉下 陽堂

P- 7    当院における年齢別SEET法実施妊娠成績 ･････････････････････････････････････････････････････････････････････ 71
はらメディカルクリニック / 荒井 勇輝

P-8    カラードップラを用いた胚移植モニターの試み ･･････････････････････････････････････････････････････････････････ 71
いしかわクリニック / 上田 綾香

P- 9    新鮮および凍結融解精子を用いたICSI施行後の胚発生能の比較 ･････････････････････････････････････････････ 72
加藤レディスクリニック / 小川 尚子

P-10   二重筒式遠沈管（ラピッツ）を用いた精子調整法の検討 ････････････････････････････････････････････････････････ 72
アイブイエフ詠田クリニック / 荒牧 夏美

22P- 11   2種類のSingle Culture Mediumを用いた培養成績の比較 ･････････････････････････････････････････････････････ 73
ファティリティクリニック東京 / 阿部 亜佳音

P- 12   紡錘体観察有無による受精率の変化 ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 73
東京慈恵会医科大学 / 川嵜 友貴

学術集会

共催・協賛企業・助成団体一覧 ････････････････････････････････････････････････････････････

74

日本IVF学会雑誌発行における投稿論文募集のお知らせ ･･･････････････････････････････････････

75

日本IVF学会雑誌

投稿規定 ･ ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････

76

一般社団法人 日本IVF学会 定款 ･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････

78

一般社団法人 日本IVF学会 役員 ･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････

84

編集委員会 ･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････

85

23

ごあいさつ日本 IVF 学会の前身である大阪・兵庫 IVF 懇話会が創設され，そしてこの懇話会が発展した形で開催されるようになった学術集会は今年で第20回と節目の年を迎えました．さらに昨年11月より日本 IVF 学会は「一般社団法人」として新しくスタートしております．今大会は，
このような変革の時期に仙台 ART クリニックの吉田仁秋大会長のもと，杜の都で開催される意義深い大会です．
近年の生殖医療は凄まじいスピードで進歩を続け，新しい技術，診断方法が次々に開発されております．進歩のスピードに離されない様に，またその前を進むために，我々は絶えず「Challenge」し続けることが求められているのでは無いでしょうか？ 吉田仁秋会長がテーマとして掲げられた「Challenge to Excellent ART」．まさにこのような状況を的確に捉えたものと理解しております．
翻って第20回の記念すべき今大会は，今年も２会場が用意され，日本臨床エンブリオロジ
スト学会ならびに日本生殖看護学会とも共催し，優れたOral Presentationとともに多くの Stateof-the Art のプログラムが予定され，まさにテーマである「Challenge to Excellent ART」に相応しい国際的な大会になると確信しております．また，仙台を中心とする東北地方は 2011
年 3月11日の東日本大震災で大きな被害を受けた地域であり，今は復興に向けて皆様が力を合わせて前進しておられる地域です．日本 IVF 学会の仙台での開催が東日本で被害を受けられた地域の復興の，ほんの少しでもお役に立てればと考える次第です．
IVF に関係しておられる皆様，杜の都仙台まで足を運ばれ，草創期の先生方の貴重なお話，世界最先端の講義を受けながら IVF の大きな流れを汲み取り，東日本の復興に少しでも貢献できたらと考えています．

平成29年秋一般社団法人 日本IVF学会
理事長 塩谷 雅英

24

ごあいさつART の聖地仙台へようこそ．1983年に日本で初めての体外受精（IVF-ET）が仙台の東北大学産婦人科で成功して以来，日本 IVF 学会は重責を担いつつ ART 従事者の研鑽の場として発展して参りました．このたびは記念すべき第20回日本 IVF 学会学術集会を皆さまと共にここ仙台で迎えられ，大変感慨深く光栄であります．
ART が誕生して 30年以上が経過し，近年は成熟の段階にきていると考えておりますが，高齢者の多い我が国では妊娠率や生産率は未だ満足のいくものとなっていないのが現状です．
そこで今大会のテーマは「Challenge to Excellent ART」と題し，より優れた ART の臨床や基礎研究，患者様の満足を得られるような ART の姿を目指し，皆様と論議を深めたいと思います．
シンポジウムでは多彩な最近のトピックスの中から「PGS を考える」と題しそれぞれの立場の講師よりご講演頂き，卵巣機能不全の患者の救済を考察した Professor Aaron や河村先生，オーストラリア生殖医学会からは Professor Norman を招請し「The Future of IVF」についてのご講演等々，ART の最新の話題を取り上げております．そして今回は初めて実技部門を設定し，現在注目の Piezo ICSI と不妊鍼灸のワークショップを企画しました．
さらに，今大会のサブテーマは「ART の聖地からのおもてなし」と題し，早朝マラソンや仙台名物の屋台と懇親会など，楽しい様々な企画を催し，ご参加される皆様には大いに考え，大いに楽しんで頂ける盛沢山の内容です．
このような実りの多い学術集会は，各企業の方々の多大なるご協力なしでは実現できませんでした．関係者の皆様には心から厚く御礼を申し上げます．
両日は多数の皆様にお会いできるのを楽しみにしております．

平成29年秋
第20回 日本 IVF 学会
学術集会長 吉田 仁秋

25

2017 年 9 月 30 日（土）
第１会場
時間

区分

テーマ

演者

11：45〜

レジストレーション

12：55〜13：00

開会の辞

13：00〜13：10

学術集会長挨拶

Challenge to Excellent ART

吉田仁秋（仙台ARTクリニック）

13：10〜13：40

ART Basic Lecture

皮膚からの卵子作製 ～マウス知見をもとに～

林

13：40〜14：05

卵巣機能不全患者への挑戦

IVA（in vitro activation）の臨床応用

河村和弘（聖マリアンナ医科大学）

Ovarian follicles: in vivo architecture, FSH
receptor imaging, and in vitro activation

Aaron J Hsueh（Stanford Univ.）

塩谷雅英（英ウィメンズクリニック）

14：05〜14：30

克彦（九州大学）（同時通訳）

14：30〜14：50

ポスター展示 / Coffee break

14：50〜15：40

ART Frontline

15：40〜16：00

理事長講演

16：00〜16：20

ポスター展示 / Coffee break

16：20〜17：40

日本臨床エンブリオロジスト学会
Workshop
Excellent ART への挑戦

18：45〜20：30

懇親会（意見交換会）

Strategy of mild stimulation IVF combinedwith IVM treatment（同時通訳）

Ri-Cheng Chian（McGill Univ.）

採卵で未成熟だった卵子を如何に治療に用いるか

北坂浩也（浅田レディースクリニック）

Excellent ART を目指した Dr. の役割

塩谷雅英（英ウィメンズクリニック）

Lab における Excellent ART のための機器管理と災害対策

菊地裕幸（仙台ARTクリニック）

ラボにおける Excellent ART とは

内山一男（加藤レディスクリニック）

Ns の Excellent ART とは

村上貴美子（蔵本ウイメンズクリニック）

培養士の国家資格化を目指して～心理職の国家資格化の過程から～

平山史朗（東京 HARTクリニック）

ART の聖地 仙台よりおもてなし（ホテルメトロポリタン仙台「千代の間」）

2017 年 10 月 1 日（日）第１会場
時間
8：30〜10：00

区分
Symposium
ｰ PGS を考える ｰ

10：00〜10：30

ART Frontline （同時通訳）

10：30〜11：00

ポスター展示 / Coffee break

11：00〜11：30

オーストラリア生殖医学会交換講演（同時通訳）

テーマ

演者

生殖医療における PGS の意義福田愛作（IVF大阪クリニック）

産科医の出生前診断の経験からみた PGS

室月

細胞遺伝学から見た PGS

笠島道子（永井マザーズホスピタル・京野アートクリニック）

Effective use of Time Lapse in IVF and PGS

Dean E. Morbeck（the Univ. of Auckland）

淳（宮城県立こども病院）

Finding Sperm in NOA Patients: Medieval to Paul Turek（The Turek Clinic）
ModernSession opening speech from the FSA
president

Michael Chapman

THE FUTURE OF IVF

Robert Norman（the Univ. of Adelaide）

11：30〜12：00

Lecture from the Legend

The beginning and future of fertilization
study, IVF and ART

柳町隆造（Hawaii Univ.）

12：00〜13：00

Lunchtime Session

東日本大震災が生殖医療に及ぼした影響−無事出産を迎える為に−星

13：00〜13：30

学術奨励賞表彰

13：30〜14：30

Rising Sun Lecture

ART と周産期合併症に関する課題

杉山

ヒト therapeutic cloning への挑戦と課題

山田満稔（慶應義塾大学）

がん・生殖医療最前線鈴木

がん・生殖医療の全国の現状

古井辰郎（岐阜大学）

14：30〜15：00

ポスター展示 / Coffee break

15：00〜16：00

Current Topics

16：00〜16：05

26

閉会の辞 / 次期会長挨拶

和彦（スズキ病院）

隆（愛媛大学）直（聖マリアンナ医科大学）

古井憲司（クリニックママ）

第２会場
座長

入谷

時間

区分 / テーマ / 演者

座長

13：15〜16：00

口頭発表15 題

16：00〜16：20

ポスター展示 / Coffee break

16：30〜18：30

日本生殖看護学会パネルディスカッション
上澤悦子（京都橘大学）
濱田結実（スズキ記念病院）
高年齢者の ART 治療後の次世代養育の現状と課題と日本生殖看護学会における取り組み
高齢出産の母親への社会的支援の実際と課題
藤原久子（京都第一赤十字病院）
高齢母親を対象とした ART 治療中から治療後の妊娠までの継続的支援
勝又由美（東邦大学医療センター佐倉病院）
在宅医療が必要なハイリスク児の退院支援の実際と課題
橋倉尚美（高槻病院）

浅田義正（浅田レディースクリニック）
加藤恵一（加藤レディスクリニック）
杉山力一（杉山産婦人科）
竹内一浩（竹内レディースクリニック）
矢野浩史（矢野産婦人科）

明（近畿大学）

石塚文平（ローズレディースクリニック）

柴原浩章（兵庫医科大学）

堤治（山王病院）栁田 薫（国際医療福祉大学）
沖津 摂（三宅医院）

第２会場
座長
久保春海（渋谷橋レディースクリニック）
吉田 淳（木場公園クリニック）

時間

区分 / テーマ / 演者

座長

8：30〜10：30

口頭発表9 題蔵本武志（蔵本ウイメンズクリニック）
徳永義光（空の森クリニック）
詠田由美（アイブイエフ詠田クリニック）

10：30〜11：00

Hands on Workshop （I） Piezo ICSI

向田哲規（広島 HART クリニック）
寄田朋子（広島 HART クリニック）

11：30〜12：00

Hands on Workshop（II） 不妊鍼灸

[ 進行 ] 中村一徳（京都なかむら第二針療所）[ 実技 ] 徐 大兼（アキュラ鍼灸院）
小松範明（キュアーズ長町・仙台

市川智彦（千葉大学）

石原

星理（埼玉医科大学）

和彦（スズキ病院）

ART クリニック）

八重樫伸生（東北大学）

京野廣一（京野アートクリニック）髙見澤聡（国際医療福祉大学）

27

交通のご案内／フロアマップ
交通アクセス・周辺地図

ホテルメトロポリタン仙台 ４Ｆ

住所：〒980-8477 仙台市青葉区中央1-1-1
TEL：022-268-2525

第１会場

企業展示

ＰＣ受付

受

付

企業展示

ポスター発表

第２会場

28

お知らせ
第20回 日本IVF学会 学術集会
共催：日本臨床エンブリオロジスト学会
日本生殖看護学会◦スケジュール

会期：2017年 9月 30日（土 ） 12：55 〜 10月 1日（日）16：05
会場：ホテルメトロポリタン仙台〒980-8477 仙台市青葉区中央１−1−1 TEL:022-268-2525

学術集会参加者へのお知らせ◦参加証

参加受付時に領収証兼用の参加証を受付窓口にてお渡しいたします．
会場内ではホルダーに入れて必ずご着用ください．
◦参加費
事前参加申し込み

会員
非会員

医師

21,000 円

医師以外

11,000 円

医師24,000 円

医師以外

14,000 円

懇親会

3,000 円

※事前参加申し込みの締め切り 2017 年 9 月 15 日
（金）12：00
当日参加申し込み

会員
非会員
懇親会

医師

22,000 円

医師以外

12,000 円

医師25,000 円

医師以外

15,000 円
3,000 円◦プログラム抄録集

学会雑誌が学術集会講演抄録集を兼ねておりますので，会員の方は当日ご持参ください．お忘れの方には，学会当日に 3,000 円で販売致します（数に限りがご
ざいます）
．

29

ART Basic Lecture

皮膚からの卵子作製～マウス知見をもとに〜

林 克彦
九州大学大学院 医学研究院
教授

略 歴1996 年 3月
1996 年 4月ー 2002 年 7月
2002 年 8月ー 2005 年 3月
2005 年 4月ー 2009 年 3月
2009 年 4月ー 2014 年 3月
2014 年 4月ー

体のあらゆる細胞から樹立される iPS 細胞は免疫拒絶や ES 細胞の樹立に必要な胚の破壊などの諸問題を一掃し，幹細胞を用いた再生医療や難治性疾患の原因究明，治療法の開発に扉を開いた．生殖細胞系列についても例外ではなく，iPS 細胞から生殖細胞を分化誘導する技術は不妊症の原因解明ならびに加齢に伴う不妊症や化学療法などに起因する不妊症の患者の妊孕性を回復する方法として大きな期待がかけられている．
その一方で，安全性や使用に関する倫理的問題など，様々な角度からの議論や考察が求められることから，
実験動物レベルでの同様の試みは極めて重要である．
我々は数年前からマウスの多能性幹細胞から生殖細胞を作製する試みを始め，2011 年には iPS 細胞からすべての生殖細胞のもとである始原生殖細胞（PGCs）を分化誘導できる培養系を開発した．また 2012 年には iPS 細胞
由来の PGCs を顆粒膜細胞や莢膜細胞の前駆細胞と共に卵巣に移植することにより，発生能をもつ卵子に分化させることに成功した．また近年になって，卵巣へ移植することなく体外培養のみで iPS 細胞から卵子を分化誘導する培養系を開発した．この培養系で得られる卵母細胞
系列は形態的変化や遺伝子発現などにおいて，体内での卵母細胞系列の分化過程をほぼ踏襲しており，最終的に得られた卵子は受精により個体にまで発生する．また得られた個体は正常な生殖機能をもつことが確認された．
この研究に使われた iPS 細胞は十分に成熟した成体（10週齢）の雌マウスの尻尾の細胞から樹立されており，理論上どこの細胞からも卵子を作れる可能性を示した点で意義深い．
上述のように配偶子再生技術で得られた卵子は体内と良く似た過程を経て形成され，また発生能も有していた．
しかし体外で作製された卵子の発生率は通常の受精卵と比べて 1/20-60 程度と低く，実際に減数分裂時の染色体対合の不全，染色体の不分離，初期発生の遅延などが散見される．今後は遺伝子発現やエピゲノムのみならず，
染色体の動態や細胞の代謝など様々な角度から体外培養における卵子の形成過程を評価することが必要である．

30

明治大学農学研究科修士課程修了
東京理科大学助教（理学博士取得）
大阪府立母子保健総合医療センター常勤研究員
ケンブリッジ大学ガードン研究所・研究員
京都大学医学研究科講師
九州大学大学院医学研究院教授

また同時に，多数の中から良質の卵子だけを選別する技
術開発も重要になるだろう．本会ではそれらについて議論し，これから必要となる技術や研究開発について議論
したい．

卵巣機能不全患者への挑戦

IVA（in vitro activation）の臨床応用河村 和弘
聖マリアンナ医科大学
医学部産婦人科学 准教授

略 歴1996 年 3 月
2001 年 3 月
2002 年 7 月
2003 年 2 月
2007 年 10月
2009 年 4 月
2011 年 3 月
2018 年 4 月

秋田大学医学部卒業
秋田大学医学部大学院医学研究科修了，医学博士号取得
秋田大学医学部産婦人科学講座助手
米国 Stanford 大学医学部産婦人科 Research Fellow
米国 Stanford 大学医学部産婦人科 Visiting Professor
秋田大学大学院医学系研究科産婦人科学講座講師
聖マリアンナ医科大学医学部産婦人科学准教授
国際医療福祉大学医学部産婦人科教授就任予定

卵巣内の卵胞は加齢と共に減少するが，卵巣内の卵胞が急激に減少し，40 歳未満で卵胞が発育しなくなり閉経する早発卵巣不全（POI; primary ovarian insufficiency）という疾患が存在する．POIは全女性の100人に１人に自然発生し，排卵がおこらないため，難治性の不妊となる．
これまで高齢による卵巣機能不全やPOI 患者の最も有効な治療法は提供卵子を用いた体外受精胚移植であり，自らの卵子で妊娠することは非常に困難であった．このような患者が自らの卵子で妊娠することを可能とするため，卵巣内に残存する卵胞に着目し，基礎・橋渡し・臨床研究を行ってきた．卵巣断片化によるHippoシグナルの抑制とPI3K-Aktシグナルの活性化を同時に行うことで，原始卵胞を活性化させつつ，２次卵胞の発育も誘導する方法を考案し，動物実験により，本法の安全性を十分確認した
後，倫理委員会の承認と患者の同意の下，早発卵巣不全患者に対し臨床応用を開始した．その結果，卵胞活性化療法（IVA: in vitro activation）という新たな不妊治療法を開発し，2013 年に世界初のIVAによるPOI 患者の妊娠・出産例を報告した．IVAの早発卵巣不全患者における臨床成績は，2 報目の論文を発表した時点では，37名の早発卵巣不全患者（平均年齢37.2歳，平均無月経期間5.9年）
に対しIVAを実施し，37名中 20 名で残存卵胞を認めた．
20 名中9 名で卵胞発育が認められ，7名の患者から成熟卵子が得られて体外受精を行った．5 名の患者に胚移植を実施し，3 名が妊娠した．1 名は妊娠初期に流産となったが，2 名は順調に経過し，それぞれ 3,254g の男児，2,970g の女児を出産した．現在，中国，スペイン，ポーランドでIVAの追試に成功し，妊娠例が出ている．
本講演では，臨床研究を中心に最新の成果を紹介し，今後の研究展望につき考察する．

31

卵巣機能不全患者への挑戦

Ovarian follicles: in vivo architecture,
FSH receptor imaging, and in vitro activation
Aaron J Hsueh1

Yi Feng , Yuan Cheng ,Kazuhiro Kawamura 2
1

1

1
Department of Ob/Gyn,
Stanford University School of
Medicine, Stanford, CA USA
2
Department of Ob/Gyn,
St. Mariana University Schoolof Medicine, Kawasaki, Japan

Aaron Hsueh is an ovarian physiologist and has published in the field for decades with> 380 refereed papers. His lab has investigated the hormonal regulation of granulosa
cell functions, leading to the establishment of a sensitive in vitro FSH bioassay andthe design of a long-acting FSH analog（ELONVA）now in clinical use. His lab also
contributed to the understanding of ovarian follicle growth and atresia, intraovarianmechanisms of oocyte maturation, and autocrine/paracrine regulation of early
embryonic development. His lab cloned human FSH and LH receptors together withfive related receptors（named them as LGR 4- 8）before identifying LGR 7 as the relaxin
receptor. The Hsueh lab established and maintained the Ovarian Kaleidoscope
Database（OKdb, http://ovary.stanford.edu）over 1 7 years as an online resourcefor ovarian researchers to search for ovarian literature and DNA microarray data. In
2 0 1 3, his lab established an in vitro activation（IVA）method to activate ovarianpreantral follicles for the derivation of mature oocytes in patients with primary ovarian
insufficiency and low ovarian reserve.

In vivo architecture: Optimal distribution ofheterogeneous organelles and cell types within an organ
is essential for diverse physiological processes. Using theClarity imaging approach, we performed marker staining,
digital processing, and spatial analysis to obtain 3-D
architecture of the ovary during folliculogenesis andcorpora lutea development throughout life in mice. Thisapproach transforms intact tissue into a nanoporoushydrogel-hybridized form that is optically transparent
and macromolecule-permeable. Unlike classical 2-D
sectional histological analyses, Clarity provides 3-D
mapping of interrelationships among follicles and corpora
lutea. The approach allows investigation on
developmental changes in follicle volumes, numbers,
locations, sphericity, clustering, etc. as well as previously
unappreciated associations between vasculature andfollicles（Feng et al Sci Rep. 2017）.
FSH receptor imaging: Near infrared II fluorophores
provides a powerful tool for in vivo real-time imaging oftissues. We conjugated FSH to an infrared II fluorophore
to allow live imaging of FSH receptors in granulosa cellsof ovarian follicles at different stages in mice（Feng et al
Chem. Sci. 2017）. In addition to demonstrating FSH
receptor expression in testicular tubules, we found FSH
receptor signals in preantral（secondary and primary）
follicles. Because menstrual cyclicity reflects endometrial
events regulated by circulating ovarian estrogens andprogesterone secreted by antral and preovulatory follicles,
about half of patients with primary ovarian insufficiency（POI）do not have menses but still contain preantral
follicles. The ability to monitor preantral follicles allows
the possibility to identify POI patients with residual
follicles for treatment in the future.

32

In Vitro activation of follicles: Primordial follicles canbe promoted to grow following activation of the Aktpathway. Our use of PTEN inhibitors and phosphatidyl3-kinase（PI3K）stimulators allowed the stimulation of
Akt signaling and promoted the activation of dormant
murine and human primordial follicles in vitro. Following
grafting into hosts, preovulatory mouse and humanfollicles containing mature oocytes could be generated
from activated follicles（Li et al PNAS 2010）. We further
explored the ovarian roles of the conserved Hippo
signaling pathway that serves to maintain optimal size
across organs and species. We found that fragmentationof murine ovaries promoted actin polymerization anddisrupted ovarian Hippo signaling, leading to increased
expression of downstream CCN growth factors,
promotion of the growth of secondary follicles to thepreovulatory stage, and the generation of mature oocytes（Kawamura et al PNAS 2013）. We also found additive
follicle growth when ovarian fragmentation（Hippo
signaling disruption）was combined with treatments with
Akt stimulators. Many POI patients un-responsive to thepresent gonadotropin treatment still contain preantral
follicles with the potential to develop into antral andpreovulatory follicles. We extended results in animals totreatment of infertility in POI patients using an in vitro
activation（IVA）approach, leading to follicle growth anddelivery of healthy babies（Kawamura et al PNAS 2013）（Zhai et al JCEM 2016）.

ART Frontline

Strategy of mild stimulation IVF combinedwith IVM treatment
Ri-Cheng Chian
M,Sc., Ph,D,

Dr. Chian is Associate Professor with Tenure at Department of Obstetrics andGynecology, McGill University, Montreal, Canada, and 7 other Visiting Professorships
in Chinese Universities. Dr. Chian is the key person who developed in vitro maturation
Department of Obstetrics and （IVM）of human oocytes for clinical application and responsible for cryopreservation
Gynecology, McGillof human oocytes produced live births at McGill University Health Center（MUHC）
University, Montreal, Canada
in Canada. Dr. Chian published more than 200 research papers and presentations
in refereed journals and international/regional conferences. Dr. Chian edited threebooks, and contributed many book chapters. As a guest or invited speaker, Dr. Chiandelivered numerous lectures in different societies and countries. Dr. Chian wasformer Associate Editor for the journals, Human Reproduction, Journal of Assisted
Reproduction & Genetics, and Editorial Board Member for several journals. Dr. Chian’s research interests are focused on 1）The mechanism of oocyte maturation andactivation; 2）Simplification of infertility treatment; and 3）Fertility cryopreservation.

In vitro maturation（IVM）refers to maturation in
culture of immature oocytes at different stages that may
or may not have been exposed to short courses ofgonadotropins. The source of immature oocytes is an
important feature for the subsequent embryonicdevelopment and pregnancy, but the developmental
competence of oocytes derived from the small antral
follicles seems not to be adversely affected by thepresence of a dominant follicle. The use of IVM
technology can thus be broadened to treat women
suffering from all causes of infertility with acceptablepregnancy and live birth rates. Although IVM as anefficient treatment resulted several thousands of healthy
babies born, IVM technology is still consideredexperimental by the society. Maybe, it is time toreconsider the IVM technology as efficient clinicaltreatment.

improved success rates compared with conventional IVF
in women with a history of poor ovarian response.
As the development of IVM treatment continues, anattractive possibility for increasing the successful
outcome rate is combining natural cycle IVF treatment
with immature oocyte retrieval followed by IVM of those
immature oocytes. If the treatment processes can be
simplified, especially for immature oocyte retrieval, moreinfertile women may be able to take advantage of thesetreatments. Mild stimulation IVF combined with IVM
treatment may represent a viable alternative to standard
treatment. As we accumulate more experience andoutcome data, mild stimulation IVF combined with IVM
may prove to be not just an alternative to standard
treatments, but potentially first-line treatment choices.

Today, given the efficiency of IVF and improvementsin the culture system, natural cycle IVF or mild
stimulation may be more suitable for women undergoing
IVF treatment. Several studies have shown that natural
cycle IVF treatment has advantages over standard
sti mu lation I V F treatment pa r ticu la rly i n the
management of women with low ovarian reserve. In
contrast to stimulation IVF treatment, the aim of mild
stimulation is to develop safer and patient-friendlier
protocols where the risks of the treatment are minimized.
A recent large retrospective study has found a significant
decrease in live birth rate associated with increasing FSH
dose regardless of the number of oocytes retrieved,
cautioning against high doses of FSH in IVF treatment
cycles albert falling short of recommending mild IVF
treatment. There is also evidence that mild stimulation or
modified natural cycle protocols may have equal or even33ART Frontline

採卵で未成熟だった卵子を如何に治療に用いるか

北坂 浩也 1,2）
島田 昌之 2），浅田 義正 1）
1） 浅田レディースクリニック2） 広島大学大学院
生物圏科学研究科

略 歴2004 年 3 月 北里大学獣医畜産学部卒業（現：北里大学獣医学部）
4 月 浅田レディースクリニック入職（現：浅田レディース勝川クリニック）
2010 年 8 月 浅田レディース名古屋駅前クリニック（開院に伴い所属移動）
2014 年 10月 広島大学大学院生物圏科学研究科博士課程後期入学

卵巣刺激周期においても未成熟卵子が多く混在する症例がある．このような卵胞刺激に暴露されていながら卵子が成熟していない卵胞は，卵胞発育過程で何らかの発育不全が生じたと推察される．その卵胞の不完全さは「LHに反応する顆粒膜細胞」「卵子の成熟を直接的に制御する卵丘細胞」あるいは「卵子そのもの」のいずれかに起因していることから，卵原発の異常でなければ未成熟卵であってもARTに利用可能である．
まず，採卵された卵・卵丘細胞複合体の卵丘細胞層が膨化していない時，これは未成熟であると判断でき，
FSH や EGF 様成長因子を添加した体外成熟培養を行う
事で成熟卵を得る事ができる．一方，ICSI症例では卵丘細胞層をヒアルロニダーゼにより除去する．この段階で，極体が放出されていないことが判明した時には，解糖系を行う卵丘細胞を除去しているので，卵子の代謝を活性化させるためには，直接TCAサイクルに利用されるアミノ酸類やピルビン酸類を含有する培養液を用いる必要がある．さらには，酸化ストレスを低減するグルタチオン
合成と還元に関わる因子が卵丘細胞から供給されないた
め，抗酸化作用を持つアルブミンを添加する必要もある．
上記の培養により，ヒト卵子においては，数時間には極体放出が起こり，ICSIを施行したが，採卵時に極体放出が認められた卵子のそれに比較して有意に低い値であった．では，なぜ裸化卵の追加培養により得られた成
熟卵は，正常受精率が低いのであろうか？我々は，加齢化が起こりやすい Nrg1flox/flox マウスにおいて，第二減数
分裂中期における紡錘体が不安定化する結果，受精後の第二極体放出異常や染色体分配異常により異常受精卵が誘発されることを報告している．この紡錘体形成や極体放出は，細胞骨格のリモデリングにより起こることから，それを制御しうる細胞膜貫通タンパク質インテグリンと細胞外マトリクスであるファイブロネクチン（FN）に着眼し，排卵卵胞における動態変化とそれらの役割の解明を試みた．その結果，マウス過剰排卵モデルにおいて，hCG投与6時間以降に卵丘細胞の脱接着が生じ，その細胞間と卵・卵丘細胞間に FN が浸潤し，蓄積されること34が明らかとなった．GVBD卵を回収し，卵丘細胞を除去して培養した時，FN 添加により極体放出が促進され，第二減数分裂中期での紡錘体の安定化が高められることが示された．この結果は，FN とインテグリンの結合を競合阻害するRGDペプチドにより抑制され，FN無添加条件で見られる極体放出異常と紡錘体の不安定さが再現された．
以上の結果から，極体未放出である場合，代替血清培地を用いた追加培養では，紡錘体の不安定さに起因する染色体分配異常が生じる可能性が高いことが示された．
代替血清にはFNが含まれていないことを考慮し，適切な追加培養環境とすることで受精率のみではなく臨床成績の向上が期待できると思われる．

理事長講演

Excellent ARTを目指した Dr.の役割

塩谷 雅英
英ウィメンズクリニック理事長

略 歴1985 年 3 月
1988 年 9 月
1994 年 4 月
2000 年 3 月

島根医科大学卒業，京都大学医学部婦人科学産科学教室
京都大学医学部婦人科学産婦人科学教室医員
神戸市立中央市民病院産婦人科医長
英ウィメンズクリニック開設

医学博士（京都大学），日本ＩＶＦ学会理事長，生殖バイオロジー東京シンポジウム世話人，日本
産科婦人科学会専門医･指導医，生殖医療専門医，臨床遺伝専門医，日本臨床細胞学会専門医，
日本受精着床学会評議員，日本卵子学会代議員，日本生殖心理学会理事，日本生殖発生医学会理事，日本レーザーリプロダクション学会副理事長，日本生殖医療支援システム研究会副理事長，JISART 副理事長，近畿産婦人科学会内分泌 ･ 生殖研究部会委員，兵庫県産婦人科学会学術委員，神戸 MARE 研究会代表世話人

吉田仁秋会長がテーマとして掲げられた「Challenge to
Excellent ART」は，本格的に少子高齢化時代に突入し社会構造の変革が迫られる我が国においてARTも新しい時代に即した姿を模索せざるを得ず，そのような状況下でちょうど第20回という節目を迎える日本IVF学会のテーマとしてふさわしいものと言わざるを得ない．本講演では，この「Challenge」においてDr.が果たすべき役割を次の3つの側面に分けて考えてみたい．第一は医師の知識・技術について，第二は，「Excellent ART」を実現するためのシステム構築について，そして第三はチーム医療における構成メンバーであるスタッフ一人一人が共有できる医療理念の提唱である．
第一の医師の知識・技術については，排卵誘発，採卵，
胚移植というARTの根幹をなす技術，さらには適切な黄体管理の重要性について論じたい．これらの技術の中でも特に胚移植はその成否によっては治療成績をも左右しかねない重要な手技である．そこで本講演では，当院が考える「Excellent」な胚移植について，そしてそこに至るまでの当院の「Challenge」をご紹介する．
第二の，「システム構築」についても，当院の例をご紹介したい．当院では，電子カルテとファイルメーカーで作成したデータベースを，院内に設置された120台の端末によってネットワークを構成して運用している．
「Excellent ART」においては患者一人一人にひも付けられる複雑で多くの情報を瞬時にスタッフ全員が共有できることが必須と考える．そして患者一人一人にオーダー
メイドのきめ細かい治療を実現するためには患者の現在
そして過去の情報に容易にアクセスできる環境が必要と考える．当院の場合，より優れた「システム構築」に対する「Challenge」は終わることがない．
第三の役割は，医療理念の提唱である．いうまでもなく，「Excellent ART」はDr.のみで実現できるものではなく，胚培養士，看護師，そしてその他の多くのスタッフによって構成されるチームメンバーが，有機的に連携することで初めて達成できるものであろう．そのようなチームを作るためには，スタッフが共有できる医療理念が必要であり，それを提案するのはやはりチームリーダーを担うべきDr.の役割の一つである．当院では，「患者様へのクレド」そして，「職員へのクレド」，さらには「品質方針」という3つの形で医療理念を提唱しスタッフ全員が共有している．講演の中ではこれら当院の医療理念を詳しくご紹介するとともに，
この医療理念をスタッフに浸透させるための方法についてもご紹介する予定である．

35

日本臨床エンブリオロジスト学会

Workshop

Excellent ART への挑戦

Lab におけるExcellent ARTのための機器管理と災害対策

菊地 裕幸
仙台 ARTクリニック略 歴2006 年 3 月
4月
2012 年 3 月
2016 年 1 月
3月

培養室で取り扱う機器は，各メーカーから様々なタイ
プが販売されており，施設規模，使い勝手，コスト面等から採用されている．しかし，どんなに優れた機器であっても，絶対的なものではない．その特性をよく理解し，自施設に適した運用や管理をしなければ，その性能は生かされず，万が一のトラブルや成績低下の際に，その原因が患者側にあるのか，培養士の技術にあるのか，それとも機器にあるのかの判断がつきにくい．
近年では，タイムラプスインキュベーターを使用する施設もあり，培養液交換不要なシングルメディウムを併用することで，インキュベーターから取り出さずに長期間の培養が可能となってきた．培養士として簡便な機器も増えている一方で，感覚だけでなく，よりいっそうリ
スクマネジメントが問われるようになってきている．
機器に不具合が起きても，複数台の所有や，代替手段を用意しておくことが理想的だが，全ての施設で可能とは限らないことから，インキュベーターやマニュピレー
ターなどのラボの重要な機器は，定期的な業者によるメンテナンスは惜しまず行うべきであると考える．
培養士による日常点検も，ただ確認するだけではなく，その状態をよく理解し把握する必要がある．例えば，インキュベーターは表示値や実測値だけを確認しOKではなく，測定機器の校正も行う必要がある．供給ガスの消費量や液体窒素タンクの蒸発量を把握することでトラブ
ルを未然に防ぐことも可能である．さらに，許容範囲の基準とトラブル時の対処法を定め，どのスタッフでも早急に修正などの対応ができるように，トレーニングや情報共有を行うことが望ましい．
当院（旧 吉田レディースクリニック）は，2011年3月11日の東日本大震災の際に 5 日間の長期停電を経験した．
耐震構造のため，建物への被害はさほど大きくはなかっ
たが，電気・ガス・水道・交通機関はすべて途絶え，自家発電装置が稼働したが，軽油の調達に困難を極め，培養室の電気供給を止めざるを得なかった．幸いにして事36

北里大学獣医畜産学部卒業
吉田レディースクリニック勤務
東北大学大学院農学研究科博士前期課程修了
仙台ARTクリニック勤務
東北大学大学院農学研究科博士後期課程修了

前の地震対策や備蓄，スタッフ1人1人の行動が功を奏し，震災時に保管されていた受精卵も，余震の混乱の中緊急で凍結保存を行った受精卵も，震災による影響は見られていない．
この経験から，2017年1月の移転の際にも培養器等の固定はもちろんのこと，監視システムも導入し，24時間の培養環境（温度，ガス濃度）が確認でき，異常時には培養士に通報が送られるようになっている．繊細かつ微小な命であるからなおのこと，培養士は日常点検と安全対策を怠らず，患者に安心してExcellentなART治療を受けていただけるよう努力する必要があると考える．

日本臨床エンブリオロジスト学会

Workshop

Excellent ART への挑戦

ラボにおける Excellent ART とは

内山 一男
加藤レディスクリニック

略 歴1981 年

宇都宮医学技術専門学校卒業
獨協医科大学病院勤務
1994 年 加藤レディスクリニック勤務
2008 年 みなとみらい夢クリニック出向
2010 年 加藤レディスクリニック復帰，現在に至る
臨床検査技師，2級臨床病理技術士（臨床血液学）（臨床化学）（臨床血清学），一般臨床検査士資格，1級臨床病理技術士資格（臨床血液学），生殖補助医療胚培養士資格
日本臨床エンブリオロジスト学会理事，日本生殖医学学会，日本卵子学会，日本受精着床学会

当院における採卵の特徴は自然周期を含む低刺激採卵
周期で行なうことである．低刺激周期は過排卵周期に比べ回収される卵子数が少なく，2016年当院の採卵件数は25,323周期，採卵総個数は45,025個で一人当たり約1.7個であった．少数の卵子であっても患者の負託に応え受精卵を得，良好胚を育て移植し，挙児を得るにはラボワー
クが非常に重要である．どの培養士が行っても，何時行っても同じ結果，判断の得られるラボワークを私達は目指している．
例えば精液検査において，MAKLER CHAMBER®を用いた目視法からSMAS（sperm motility analysis system）に変える事で，培養士間で生じる誤差，培養士固有の誤差が改善し飛躍的に精度が向上した．また精子形態判定においては，MAKLER CHAMBER®で同時に行っていたものを，無染色標本作製による簡便で簡易的な精子形態判別法を独自開発しKruger法と差のない判定結果が得られる様になった．
卵子においては，採卵直後に，卵丘細胞卵子複合体（COC）を倒立顕微鏡下200倍で伸展観察し第1極体の有無を調べ採れた卵子の成熟度を正確に判定している．同時に得られる客観的な卵子や透明帯の情報はテーラーメ
イドな媒精方法の選択を可能とした．ICSIにおいてはオ
リ ン パ ス と 共 同 開 発 し た IX ROBO-Polar は，DIC とpolarizationのシームレスな切り替えを可能とし，簡便かつ強拡大により正常形態精子の選別精度を上げ，紡錘体
可視化によるICSI実施タイミングの統一化，紡錘体損傷を防ぐ安全性の高いICSIを可能とした．
胚盤胞の品質評価法としてGardner分類に代表される
形態的な評価が一般的である．しかし，この評価法は培養士の主観によって左右され易い．当院では臨床妊娠率，生産率は胚の発生速度が速いほど，年齢が若いほど高くなることに着目し，患者の年齢と胚盤胞への発育速度という2つの客観的なパラメーターを指標とし，形態評価と組み合わせることで観察者による違いを起こり難くしている．
ARTラボ業務の多くはマンパワーによる手作業の為，培養士の技量が成績に大きく関係する．また同じ様に作業していても気付かないうちに変化し，時としてメンタ
ルも変動要因となり得る．当院ではラボで得られた結果を基に成績管理「Result Control」を短期（日間），中期（週間），長期（月間）で実施しその変化を常に監視している．
問題が生じた場合早期発見，早期対策を取れるよう管理基準を設け，変動の要因がラボ全体によるものなのか，
培養士個人によるものなのか，また患者要因によるもの
なのかなど原因を究明し対応に当たっている．
低刺激周期におけるラボワークでは，採卵から胚移植にいたる全ての段階で画一的な対応ではなく，患者1人1人，卵子1つ1つに対し適切な判断と確かな技術をもって対応することが必要である．人は絶えず変化するものであり，その変化に気付き修正する手段が成績管理であり，それは患者に提供する医療技術の品質保証としても重要である．ラボ業務におけるExcellent ARTとは誰が携わっても同じ結果，判断が得られる管理されたラボワークであると考える．

37日本臨床エンブリオロジスト学会

Workshop

Excellent ART への挑戦

NsのExcellent ARTとは

村上 貴美子
蔵本ウイメンズクリニック
看護師長

略 歴
1992 年
山口県立衛生看護学院助産科卒業
1992 年～ 1995 年
山口県済生会下関病院周産期母子センター勤務
1995 年～ 蔵本ウイメンズクリニック看護師長
米国ミルウォーキー Advanced Institute of Fertilityにて体外受精コーディネーター研修1996 年
2003 年
不妊症看護認定看護師教育課程修了（日本看護協会）
イギリス Bourn Hall Clinic にて不妊看護師研修2008 年
九州大学大学院医学系学府医療経営・管理学専攻（専門職大学院）修士課程修了
2015 年～ NPO 法人日本不妊カウンセリング学会理事長
体外受精コーディネーター（NPO法人日本不妊カウンセリング学会），不妊症看護認定看護師（日本看護協会認定），生殖医療コーディネーター（日本生殖医学会）

本邦の ART 児の出生が 21 人に 1 人となった．ART の発展と普及とともに看護の対象もカップル間のARTに加え，第3者が介在する卵子提供やAID，がん治療前の妊孕性温存，更には社会的適応の卵子凍結，着床前診断・スクリーニング，そこから生まれる児など広範囲に及び，倫理的な課題も含め複雑な対応が要求される．
マズローの欲求の中で，通常の医療は生きていくための基本的な欲求を満たすのに対し，生殖医療は5段階の欲求の中でも最も高次の自己実現の欲求に近い医療である．そのため，ARTでは，排卵誘発や採卵，胚の培養，凍結，移植などの安全性や質の高さだけでなく，倫理面も含め患者が安心し納得できることが特に重要である．
その中で，看護は熟達した看護技術を提供し，情報提供や相談を通して医師とともに，時には患者の代弁者となり患者の自己決定を支える役割をもつ．看護師は熟達した看護技術をもたなければ患者の信頼は得られない．
しかし高い技術をもっていても一人の人間としての患者を理解し，寄り添う気持ちや姿勢を示すことのできない
看護師も患者の信頼は得られない．両者が備わってはじ
めて看護の役割である患者の安全・安心を守り，納得した自己決定の支援が行える．
現在，少子高齢化の進行により，我が国の生産年齢人
口は1995年をピークに減少に転じている．国立社会保障・人口問題研究所の将来推計によると，生産年齢人口は2030年には6,773万人，2060年には4,418万人にまで減少すると見込まれている．今後ARTを受ける患者の人口も減少するだろうが，看護職も同じ傾向で減少するだろう．
このような状況下でExcellent ART施設であることが生き残りに求められる資質であり，その一翼を担う看護職の人材確保および育成も重要である．
本シンポジウムでは，当クリニックの看護師教育とこ

38

れまでの看護部の取り組みについて触れ，テーマとして与えられているExcellent ARTの中でのNsについて考えたい．

日本臨床エンブリオロジスト学会

Workshop

Excellent ART への挑戦

培養士の国家資格化を目指して～心理職の国家資格化の過程から～
平山 史朗
東京 HART クリニック
臨床心理士

略 歴
1993 年
1997 年
1998 年

2002 年
2003 年2013 年

広島大学教育学部心理学科卒業
広島 HART クリニックに常勤心理カウンセラーとして勤務
米国カリフォルニア州サンディエゴの The Center for Reproductive Psychologyに短期留学．Martha & David Diamond, Janet Jaffe 各博士に不妊体験者への心
理療法の個人指導を受ける
厚生科学審議会生殖補助医療部会委員
東京 HART クリニック臨床心理士（現職）
厚生労働省不妊に悩む方への特定治療支援事業等のあり方に関する検討会委員

臨床心理士，生殖心理カウンセラー，家族心理士
日本生殖心理学会（副理事長），日本家族心理学会（理事），日本心理臨床学会，日本受精着床学会，
日本生殖医学会，アメリカ生殖医学会（メンタルヘルス専門家グループ），欧州生殖医学会（心理学 &カウンセリンググループ），他

2015 年 9 月 19 日，国会で「公認心理師法」が成立し，科目免除，経過措置，講習会
2017 年9月頃に施行されることが決定しました．これに（６）質の担保：最低保証or高度専門職の指標，資格更新
より，2018年から現任者向けの国家試験が開始され，わ配偶子操作・胚培養にかかわるスペシャリストであるが国で初めて心理専門職の国家資格「公認心理師」が誕生
培養士の方々は，国家資格でないことによる様々な困難することになります．意外に知られていないことですが，を抱えてこられ，それゆえ国家資格化に向けた動きが出
実はわが国には心理職の国家資格はこれまで存在しなてくるのは理解できることです．本日は，心理職の国家かったのです．様々な学会や団体が認定資格を作ってい資格化の流れと現状について概観し，培養士の国家資格
ますが，よく耳にされる「臨床心理士」や「産業カウンセに向けた動きにおいて考えるべきことについて私見を述ラー」を含め，すべて民間資格なのです．これだけ資格がべたいと思います．培養士の国家資格化とその後の諸問乱立してしまうと，利用者に本当に有益な援助ができる題を検討する参考になればと思っております．
専門家にたどり着くことが困難になってしまい，実際に被害が多く出ています．また医療の世界では，国家資格がないということで医療保険の対象とならず，保険点数が取れないことから心理職の地位や待遇が非常に低く抑えられてきました．資格取得要件に大学院修士の学歴が必要な臨床心理士の平均年収が400 万円程度であるというと驚かれるでしょう．先進国で心理専門職の国家資格（公的資格）が存在しないのは非常に珍しいのですが，わが国でも50 年以上前から，専門職としての心理専門家の資格化は検討され続けてきました．しかしながら，主に医療界からの反対，心理学界内における対立などから資格化は紆余曲折の歴史をたどってきました．法案が成立した現在でもなお，公認心理師の位置づけや専門性，養成システムをめぐって議論は続いています．
培養士の国家資格化において検討すべき事項について，
私なりに想像してみました．
（１）監督官庁：厚生労働省（診療補助職として）or文部科
学省（ES，iPS 等の研究との関連）or 農林水産省（畜産学，家畜人工授精師等との関連）（２）資格の性質：業務独占or名称独占か（３）受験資格と要件：検査技師と農学出身者，医師の受
験は必要か（４）養成課程：大学or大学院or専門学校，カリキュラム，
教員の資格，実習（５）現任者の扱い：どこまでを現任者と認めるか，試験39

高年齢者のART治療後の次世代養育の現状と課題と日本生殖看護学会における取り組み

日本生殖看護学会パネルディスカッション

高齢出産の母親への社会的支援の実際と課題

ー総合周産期母子医療センターのＮＩＣＵ退院支援専従社会福祉士の立場からー

藤原 久子
京都第一赤十字病院
医療社会事業司

略 歴1982 年 3 月

同志社大学文学部社会学科社会福祉学専攻卒業（現在社会学部社会福祉学科に変更）
4 月 京都第一赤十字病院医療社会事業部医療社会事業司（ＭＳＷ）
2000 年 4 月 精神保健福祉士資格取得
2003 年 ４月 社会福祉士資格取得
2005 年 ３月 保健福祉分野におけるソーシャルワーカー専門研修修了認定
2013 年 9 月 京都ノートルダム女子大学大学院卒業
2013 年2017 年

認定医療社会福祉士資格取得
認定救急ソーシャルワーカー資格取得
京都府「医療的ケアが必要な児童等への支援方策検討ワーキンググループ」委員

京都第一赤十字病院は京都府唯一の総合周産期母子医療センターとして機能している．その上，京都府基幹災
害医療センターであり，救命救急センターをもつ病院である．平成27年度当院分娩数617件，うち帝王切開188件，
双胎出産 36 件，品胎１件で，NICU（9 床）入院数は，平成 27 年度 303 人・翌平成 28 年度 301 人とほぼ 300 人程度での推移．出生体重 1,500g 以下の未熟児の入院は平成
28 年度 37 人と高水準を維持している．
このような使命を担っている病院ということ，および
地域的に祇園・宮川町といった昔からの花街や観光地・繁華街，また京都駅からも近い地域にある病院であることから，あらゆる方々の利用がある．そういう中でも，助産制度が使える産科でもあり，身体的なハイリスク妊婦はもちろん社会的ハイリスク妊婦もたくさん利用される病院である．このため，当院は京都市とモデルケース
としての児童虐待未然防止のための医療機関と行政の連携事業を開始し（この事業はその後京都府全域の行政機
関と医療機関に広がることになった），診療情報提供書による連携を平成 22 年 7 月から行ってきた．その連携件数は年間 70 から 80 件に及ぶが，リスク要因として ART
治療後という項目がなかったにもかかわらず，平成 26
年，27 年，28 年の連携件数のうち，ART 治療後の出産ケースが全連携件数に占める割合が，3.8 ％→ 5.3 ％→ 7.5％と急増している．これは高齢出産にともなって様々なリスク要因が高くなること，また年々 ART 治療
によって出産される児の数が増加しているということの現れであると考えられる．
当院で経験した 40 歳以上の産後フォローの事例
1）ART 治療後 21 トリソミーと出生前診断されても出産を選択された事例
2）精神疾患がもともとあった方が ART 治療後妊娠されて，出産前からの地域全体でのフォロー事例をもとに，現状を探り，産科から新生児科・小児科との連携の中で，ご本人やご家族の抱えている問題を明らかにすることにより，今後増加していくと考えられる高齢出産妊産婦および ART 治療後出産の方々への支援体制40を構築し，子育て支援の一環として地域包括ケアへ組み入れ，すべての妊婦が安心して出産・育児に臨めるようにする一助になればと考える．

日本生殖看護学会パネルディスカッション

高年齢者のART治療後の次世代養育の現状と課題と日本生殖看護学会における取り組み

高齢母親を対象とした ART 治療中から治療後の妊娠までの継続的支援
勝又 由美
東邦大学医療センター
佐倉病院
不妊症看護認定看護師

略 歴1994 年
2006 年
2010 年2017 年

東邦大学佐倉看護専門学校卒業
東邦大学医療センター佐倉病院就職
順天堂医療短期大学専攻科助産学専攻卒業
日本看護協会不妊症看護認定看護師取得
東邦大学医療センター佐倉病院看護師長
現在に至る

はじめに
女性のキャリア形成や晩婚化により，高年妊娠から妊
娠合併症・出産リスクが増加傾向にある．そのような背景を踏まえ，不妊治療中から妊娠・出産・育児までを見据えた継続的な支援が求められる．当院は地域周産期母
子医療センターを併設していることや，病棟配属の看護師が外来も管理をするユニット制を導入しているため，高年妊娠に対し多職種で支援する体制が構築されている．
また，ユニット制を導入していることで，外来・入院を分け隔てなく信頼関係を築いた看護師が担当することができるため，継続的な支援ができる医療施設である．不妊治療が「妊娠をゴール」にするのではなく，妊娠・出産・育児など各ステージで多職種が連携し患者やその家族を協働で支援する必要がある．
A R T 治 療 中 から 妊 娠・出 産を 考え た 健 康 管 理
不妊治療を行なう患者の高年齢化は，肥満や糖尿病・高血圧など生活習慣病を抱えた患者の増加につながり，妊娠前から健康管理に留意することが必須である．また，子どもの養育者として健康状態を維持することが求められるため，妊娠を目指すだけでなく，妊娠・出産・育児を見据えた健康管理について指導をしていく必要がある．

支援者である両親も高齢者であるため育児のマンパワーが乏しい傾向にある．出産を機に支援が完結するのではなく，地域と連携を図り長期的に支えるシステムの構築が必要とされる．
出 産 後 に 次の 妊 娠 を 考え た 指 導
出産後は早期に不妊治療を再開し第２子を希望していた患者が，妊娠・出産を経て現在の育児に専念したいな
どの気持ちの変化が生じる場合がある．凍結受精卵の保存状況や次回の妊娠について確認し，意思決定が出来る
ように情報提供を行い，患者の選択を尊重し支えることも看護師の重要な役割である．
お わりに
不妊治療・妊娠・出産・育児と各ステージで完結するのではなく継続して患者を支えるシステムを構築していく必要がある．

妊 娠 前 から出 産 後 の 育 児までを 踏 まえ た
継続的な支援
不妊治療後は妊娠に喜びを感じ妊娠継続に対する使命感が高まると同時に，流産や胎児の健康状態に不安を抱いている．そのため，胎児に影響を及ぼす合併症を併発している場合には，新生児科医師やNICUスタッフとの連携が求められる．また，妊娠後も不妊症であるアイデ
ンティを抱えているため，高年妊娠をハイリスクと捉えるのではなく，個々のリスクを評価し患者が臨む看護を実践する必要がある．
高齢の患者は，様々な社会経験から妊娠の喜びや命の尊さを感じながら育児を行うことが出来る．また経済的にも安定した状態で育児を行うことが出来るが，身近な

41

日本生殖看護学会パネルディスカッション

高年齢者のART治療後の次世代養育の現状と課題と日本生殖看護学会における取り組み

在宅医療が必要なハイリスク児の退院支援の実際と課題

橋倉 尚美
高槻病院
リソースナース室室長

略 歴1992 年
2007 年2009 年
2011 年 12 月

高槻病院入職，小児病棟へ配属
科長へ就任
兵庫県立大学看護学部博士課程前期高度実践コース入学（同病院を休職）
小児看護専門看護師認定
高槻病院小児病棟看護科長として勤務
2013 年
看護部長室へ配属
現在はリソースナース室室長としてこどものケアを中心に活動

新生児医療の進歩は目覚ましく，NICU や GCU などの発展から早産児や先天性疾患を持つ多くの子どもたちの救命が可能となりました．しかしその一方で，気管切開や在宅人工呼吸器，在宅酸素，胃瘻や胃管による経管栄養など複数の医療的ケアの必要とする子どもが増加しています．実際の医療的ケアの必要な子どもの数は正確にはわかっていませんが，平成 27 年度，国立研究開発
法人国立成育医療研究センターによる，小児在宅医療地
域コア人材育成講習会では，日常に医療的ケアを必要とする 15 歳以下の子どもは，48,360 人以上と推測されています．
当院においては，在宅医療管理料を算定している中で，医療的デバイスのある子どもは 128 名います（平成 29 年
6 月現在）．
1. 当院での在宅支援の実際
当院では医療的ケアの必要なこどもの療養環境を整え，
在宅ケアを支援することを目的に「こども在宅支援チーム」を 2013 年 4 月に立ち上げ活動しています．チームメ
ンバーは医師・看護師・臨床心理士・医療ソーシャルワー
カー・理学療法士・臨床工学士などで構成しています．
具体的な活動として，医療的ケアの必要な児が在宅へ移行する際の問題抽出及び解決，地域医療及び保健機関・福祉サービス・教育機関との調整，医療的ケアの指導の改善及び標準化などを行っています．これらをスムーズに導入するために「こども在宅支援ガイド」というプロトコルを作成し，院内での標準化を行っています．ガイ
ド内では“医療的ケアの必要なこどもの在宅までのプロセス”として【入院～病状安定まで】【在宅移行決定期】【退院前調整前期】【退院前調整後期】【在宅調整期】に分類し，患者家族，院内関係者，地域関係者のそれぞれの役割を経時的に表示しています．役割や目標をさらに細分化したものとして“小児在宅生活支援シート”を作成
しています．
子どもたちは成長発達や病状により NICU から GCU，
小児病棟，PICU，小児外来など場所や関わる人は変化します．同一のツールを使用することは場所や人は変42

わっても支援が途切れなく提供できる一助になると考えます．又，退院後も在宅外来とこども在宅ケア看護外来
にて在宅を支援する取り組みを行っています．
2. 課題
在宅へ移行するまでの支援の実際として記載しましたが，実際にはこのプロセスがスムーズに進まない事例があります．その背景には，親にとってのパーフェクトベ
ビーを望み，親の希望する子ども像からの乖離がある場
合などは，子どもの受け入れが進まず，【入院（出生）～病状安定まで】【在宅移行決定期】の経過で意思決定が難渋することがあります．これらの問題を克服せず強引に在宅移行を進めた場合には子ども虐待など新たな問題へと発展することもあります．

Symposium –PGS を考える–

生殖医療におけるPGS の意義

福田 愛作
IVF大阪クリニック 院長

略 歴1978 年 関西医科大学卒業
1980 年 市立舞鶴市民病院産婦人科医長
1984 年 京都大学大学院医学研究科
1989 年 京都大学医学博士授与
1990 年 米国東テネシー州立大学医学部産婦人科准教授
1996 年 米国バイオアナリスト協会 IVF 培養室長資格（HCLD）
取得（日本人で唯一）1998 年 IVF 大阪クリニック勤務
2003 年 IVF 大阪クリニック院長
日本産科婦人科学会 /日本専門医機構産婦人科専門医，日本生殖医学会生殖医療専門医，関西医科大学非常勤講師，東テネシー州立大学客員教 授，日本産科 婦人科学会倫理委員会
PGT-Aに関する小委員会委員
日本レーザーリプロダクション学会理事長，日本受精着床学会理事，日本臨床エンブリオロジスト学会顧問，日本 IVF 学会常務理事，日本卵子学会評議員
1992 年米国不妊学会賞（ASRM），1993 年関西医科大学同窓会賞，1998 年 SIGMA 科学写
真賞，2000 年日本受精着床学会世界体外受精会議記念賞

日本では 2014 年度に年間 393,745 周期の ART が実施され 47,322 人が出生，年間総出生児の 21 人に一人はART による妊娠である．日本は世界で最多の ART を実施している．ちなみに，米国が人口（世界人口白書 2016年版）3 億 1,905 万人に対し日本は 1 億 2,706 万人と約３倍の人口を有するが，ART は 169,602 周期であり，日本が米国の 2.3 倍の ART を実施している．人口比で考えると米国の 5.8 倍となる．にもかかわらず ART による出生児数は米国が 68,791 人に対し日本が 47,322 人（68.8%）と米国の 7 割以下の出生児数しかない．日本のART 効率は米国の 8.4 分の 1 以下である．この現状を如何にとらえるべきであろうか．世界的にも不妊治療対象
女性患者年齢は高齢化が進んでいるが，わが国ではその傾向が顕著である．その証拠に 40 ～ 41 歳が治療を受けている患者の最も多い年齢層となっている．現在の不妊治療ではいずれの国においても高齢女性患者への対応に苦慮している．日本と異なり海外では高齢患者に対し様々な選択肢が用意されている．米国では 40 歳で 10％
以上，45 歳では 50％以上の ART が提供卵子による．また PGS は 通 常 検 査 と し て 行 わ れ て い る．ESHRE のPGD Consortium（2010）
では 5,732 周期の 48%（2,753）がPGD で 52%（2,979）が PGS と，PGS がやや多い程度との印象を与えるが，総症例数（2,914）で見ると PGS が70%（2,063），PGD が 30%（851）と圧倒的多数が PGS である．PGD 症例の平均年齢が 33 歳に対し PGS 症例が39 歳であることより，高年齢女性における PGS の必要性を窺わせるものである．海外では ART の 40％近くにPGS が実施されている（World IVF survey）．日本の不妊患者は自己卵子により限界まで ART を試み治療回数を重ねる．これが日本の ART 大国世界一形成に貢献している．日本の ART 件数増加の要因として次のようなことが挙げられる．画一的に単一胚移植実施が強く要求される．多胎の減少には寄与しているが，胚移植回数の増加，不妊治療の長期化，結果として高齢患者ではさらに妊娠率を低下させる．胚の選別はタイムラプスを含めすべて形態学的評価に頼っている．これは「運を天に任す」状態であり科学的選別とは言えない．このような状態を補うべく 2 段階移植や様々の日本独自の取り組みが行われている．しかし，いかなる手段を用いても染色体異常胚は着床しないか着床しても殆どが流産に終わる．
卵子提供が許されず多くの卵子提供希望患者は海を渡っている．日本において PGS を取り入れることにより，すべてではないが様々な状態が改善されると考えられる．
日本で PGS が禁じられている間に，海外では NGS による PGS が通常検査として用いられるだけではなく，モザイク胚への対処など新しい課題への取り組みが始まり，
海外のメジャー学会やジャーナルの多くの部分が PGS
関連トピックに割かれており，日本人は完全に「蚊帳の外」状態である．PGS のパイロットスタディーが本学会開催時には始まっていると思われるが，パイロットが終了してもまだ臨床研究が控えている．既に多くの患者が
NIPT を受け，異常が判明したケースには殆どが中絶手術を受けている．中絶手術は女性に肉体的精神的ダメー
ジを与えるばかりでなく，将来の不妊症の要因ともなる．
中絶を伴う技術が容認され未然に防ぐ技術が禁止されるという予防医学的にも不合理な事態が起こっている．
日々患者と向き合う生殖医療臨床に従事する医師として，
本シンポジウムでは「PGS の生殖医療における意義」を考えてみたい．

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Symposium –PGS を考える–

産科医の出生前診断の経験からみた PGS

室月 淳
宮城県立こども病院産科 部長
東北大学大学院医学系研究科
先進成育医学講座胎児医学分野
教授

略 歴1986 年 3 月 東北大学医学部医学科卒業
6 月 山形県立中央病院臨床研修医
1989 年 7 月 東北大学医学部産科婦人科学教室に入局
1993 年 7 月ー1996 年 6 月
カナダ・ウェスタンオンタリオ大学ローソン研究所
1996 年 10 月 古川市立病院産婦人科科長
1999 年 4 月 東北大学医学部助手
2000 年 8 月 東北大学附属病院講師
2002 年 1 月 国立仙台病院産婦人科医長
2004 年 7 月 岩手医科大学医学部講師
2007 年 1 月 順天堂大学大学院環境医学研究所研究員
4 月 東北大学病院准教授
2009 年 9 月 宮城県立こども病院産科部長
2010 年 4 月 東北大学大学院医学系研究科先進発達医学講座胎児医学分野教授を併任
日本産科婦人科学会代議員，日産婦周産期委員会委員，日本周産期・新生児医学会評議員，
日本人類遺伝学会評議員，日本遺伝カウンセリング学会評議員，日本妊娠高血圧学会評議員，
日本胎児治療学会幹事，日本母体医学会幹事
産婦人科専門医，周産期（母体・胎児）専門医・暫定指導医，超音波医学専門医・指導医，臨床遺伝専門医・指導医，NCPR インストラクター

子どもをもつ権利（女性の妊娠出産についての自己決定権）を擁護し，すべての女性が幸せになれるようにと着床前遺伝子スクリーニング（PGS）を推し進める立場にたいし，一部では「命の選別」であるという批判や，男女の産
み分けや遺伝子操作によるエンハンスメントに発展する可能性にたいする危惧が根強くのこっている．わたしはPGSについて否定的な立場では決してないが，固定しつつあるPGSの議論の枠組みをのりこえるために，これまでとはちがった視点からの議論を提示したい．
アメリカの社会学者ジェイン・ジェイコブズは「市場の倫理 統治の倫理」で以下のように述べている．人間が働き生きていくうえで支えとなる倫理と道徳にはふたつの根本的に異なる価値体系があって，それらはまったく矛盾していてしばしば衝突すら起こすにもかかわらず，現
実にはそのふたつとも有効であり必要とされている．そのひとつは「統治の倫理」で，勇敢，忠実，取引をしない，
規律遵守，伝統堅持，矜持をもち名誉を貴ぶ，公明正大，
公衆への奉仕などが推奨される．もうひとつは「市場の倫理」で，そこで重要とされる徳は，正直，協力，契約遵守，
勤勉や倹約による自己利益の追求，創意工夫や効率，快適さと便利さなどである．ひとはそのどちらかの倫理と価値体系のモラルにしたがって生きている．深刻な問題が生じるのは，自分自身の倫理体系を固守しないで，どちらかからでもご都合主義で道徳律を選ぶ，つまりふたつの道徳体系を一緒くたに混合する人間が現れたときである．世の中のほとんどの道徳的腐敗はこれらふたつの倫理体系を混同するところからおこってくる．
日本では医療は前者のシステムに属するものという前提で制度設計がなされている．国民がだれでも平等に医療を受ける権利を重視し，国民皆保険制のもとに公益性，

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営利の否定，混合診療の禁止，応召義務といった制限が定められる一方で，医師の業務独占や名称独占資格，一定水準以上の収入など国によって守られている．すなわ
ち医師は無私であることや公明正大，非営利，公衆への奉仕といった「統治の倫理」の道徳律を尊ばなければならない．子どもを望む夫婦の希望を尊重してPGSをおこな
うのは，協力や契約尊重，快適さや便利さなど，あきら
かに「市場の倫理」の道徳律に基づいた行為である．その契約はあくまでも医師と当事者の夫婦のみで結ばれているため，このとき「統治の倫理」のなかでおこなわれるべ
き医療が，「市場の倫理」の道徳律を恣意的につまみ食いをしていることになる．
「患者の希望」をすべて尊重することに「統治の倫理」は道徳的にも機能的にも適していないので，そのために医療自体がねじまげられることがある．医療にとっていち
ばん基本的となるのはこれらふたつの倫理価値体系をきちんと区別すること，そして「患者の希望」が絶対的ではないことを意識する必要がある．

Symposium –PGS を考える–

細胞遺伝学から見た PGS

笠島 道子
永井マザーズホスピタル
京野アートクリニック
ファティリティークリニック東京
非常勤勤務

略 歴
1971 年 3 月 群馬大学医学部附属衛生検査技師学校（群馬大学医学部保健学科）卒業
4 月 北里大学病院臨床検査部染色体検査室勤務
1980 年12 月 JAICA 派遣専門家・オラン科学技術大学病院（アルジェリア）1 年赴任
1995 年 6 月 Royal Women’s Hospital（Reproductive Biology Unit）客員研究員
1997 年 7 月 中央クリニック併設高度医療技術研究所
2008 年10 月 認定遺伝カウンセラー資格取得
臨床検査技師，臨床細胞遺伝学認定士・指導士，認定遺伝カウンセラー，認定不妊カウンセラー

ヒトの受精卵は着床する前に 40％消失し，着床後に34％が化学的流産に終わる．さらに，臨床的妊娠が認められた後の流産 3％を合わせると，受精した胚の 77％は消失してしまう 1）．流産の原因検索とした細胞遺伝学的研究は半世紀も前から実施され，今では，流産の 6070％は胎児の染色体異常に起因することが周知されてきている．
一方，着床前スクリーニング（PGS）は，発生過程の初期である胚盤胞を調べるため，従来の細胞遺伝学的検査では経験することのない，想像の域であるような染色体異常に出会うこともあり得る．PGS の結果によっては，解釈や移植に戸惑い，移植後の流産や出生児の状態など，予測できないことへの不安を抱きかねない．
本講演では，細胞遺伝学的な見地から例をあげてPGSの結果を推測してみたい．
PGSの対象者は必ずしも夫婦の染色体検査を実施しているとは限らず，PGSを実施したことで偶然にも構造異常が見つかる可能性もある．複数胚に共通して同じ染色体に部分的重複や部分的欠失が認められる場合は相互転座が疑われ，ひとつの染色体に限り認められる場合は染色体逆位も考えられる．数的異常としても高頻度にみられる13，14，15，21，22番は，複数胚に共通している場
合などロバートソン転座に由来する過剰や欠失も考えら
れ，低頻度ではあるが片親性ダイソミー（UPD）の可能性についても考慮する必要がある．さらに，一般集団より不妊群に多く認められる過剰マーカー染色体がある．
遺伝情報を含む領域由来のマーカー染色体では，微細な部分的重複として検出される可能性があり，複数胚に共通する場合には親由来か確認する必要がある．PGSの結果を判断する場合には，常に過去の結果と合わせて考えることが必要になると思われる．
最近，正倍数性（euploid）と異数性（aneuploid）が混在
するモザイク胚の扱いが問題となっている．これまでモザイク胚は廃棄されていたが，モザイク胚の41％は妊娠
2）継続するという報告もあり ，基本的には廃棄せず凍結
保存や優先順位をつけて移植される傾向にある．しかし，胎盤に限局するモザイク（CPM）でも 2，7，16，22 番が関与する妊娠では，子宮内発育不全や胎児死亡につながる妊娠合併症のリスクが高まり，7，14，15番では片親性
ダイソミーとなるリスクもあることなど，PGDIS 3）ではモザイク胚の取り扱いに関するガイドラインを公表している．PGSの結果は判断に苦慮することもあり得るため，
PGSを受ける前の情報提供のあり方について，十分に検討する必要があると考える．
参考文献
1）Edmonds DK, Lindsay KS, Miller JF et al.: Early embryonicmortality in women.Fertil Stelil, 38: 447-453, 1982.
2）Munne S, Blazek J, Large M et al.: Detailed investigation into
the cytogenetic constitution and pregnancy outcome of
replacing mosaic blastocysts detected with the use of highresolution next-generation sequencing. Fertil Steril, 108: 6271, 2017.
3）Preimplantation Genetic Diagnosis International Society.
PGDIS position statement on chromosome mosaicism andpreimplantation aneuploidy testing at the blastocyst stage.
PGDIS Newsletter, July 19, 2016 .

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Symposium –PGS を考える–

Effective use of Time Lapse in IVF and PGS

Dean E. Morbeck
Ph.D., HCLD, MBA
the Univ. of Auckland

Dr. Morbeck is currently the Scientific Director at Fertility Associates. He is based in
Auckland and oversees science in clinics throughout New Zealand and Malaysia thatannually perform 4000 OPUs.
Prior to moving to NZ in January, 2016, Dr. Morbeck spent 10 years as Laboratory
Director and Associate Professor of Obstetrics and Gynecology and Laboratory
Medicine and Pathology at the Mayo Clinic. He is a certified embryologist in NZ（NZMLS）
and the USA（AAB; HCLD）.
Dr. Morbeck has a keen interest in the quality of care provided to patients
experiencing infertility, as evidenced by his publications on quality control and media
and protein composition. He completed his MBA in 2015, which he is putting to use
at Fertility Associates and its mission to be a world-class company that is a global
leader in fertility care.

Accurate identification of viable embryos is essential
for minimizing time to pregnancy once a patient starts
fertility treatment. Today embryologists have several
tools to help select the best embryo for transfer, including
routine morphology, time-lapse morphokinetics andpreimplantation genetic screening（PGS）. The latter ofthese methods – PGS – is considered the most definitiveand powerful, largely because it helps exclude otherwise
normal appearing but aneuploid blastocysts from theselection pool. However, as many as 40-50% of euploid
blastocysts do not implant, indicating that inherent
embryo viability and a receptive uterus remain important
limits to optimizing success rates. This lecture will
present the role time-lapse imaging can play in helping to
identify the best euploid embryo to transfer in order tominimize a patient’s time to pregnancy.

46

ART Frontline

Finding Sperm in NOA Patients: Medieval to Modern

Paul Turek MD,
FACS, FRSM
Director, The Turek Clinics
Beverly Hills and
San Francisco, CA

Dr. Turek is Director of The Turek Clinics（www.TheTurekClinic.com）, men's healthclinics in Beverly Hills and San Francisco. He is a former Professor at the Universityof California San Francisco and held an Endowed Chair while there. Dr. Turek is aninternationally recognized and widely acclaimed speaker on issues of men's sexualand reproductive health.
Dr. Turek attended Yale College, followed by Stanford University Medical School.
After a urology training at the University of Pennsylvania, Dr. Turek was fellowshiptrained at Baylor College of Medicine. His 175 publications have addressed stem
cell and infertility genetics, novel surgical procedures, and the epidemiology of men's
sexual and reproductive health. He also received an NIH grant to develop an artificial
testicle. He is a consultant to several biotech and healthcare organizations, and isan advisor to the NIH and the CDC. For 9 years, he has maintained an award winningweekly blog on men's health issues（www.TurekonMensHealth.com）.
He is Past-President of the American Society of Andrology, the Society of Male
Reproduction and Urology and the Northern California Urological Society. He is afellow of the Societe Internationale d’Urologie and the Royal College of Medicine（UK）.
He recently founded a volunteer medical clinic powered by retired physicians for theworking uninsured in San Francisco（www.ClinicbytheBay.org）. His hobbies include
vintage cars and longboard surfing.

Objective: Sperm retrievals in men with nonobstructive
azoospermia（NOA）are challenging infertility cases. One
popular strategy for finding sperm is microdissection
TESE（mTESE）, which involves bivalving the testicle
under anesthesia and examining the tissue for“plump”
tubules. It is very invasive and results in postoperative
hypogonadism in 10-50% of patients. Another approach,developed in 1996, is fine needle aspiration（FNA）“mapping.”Through this less invasive, nonsurgicaldiagnostic technique, sperm are located in the testicle
through percutaneous template and extensive needle
sampling. Once sperm is confirmed, sperm retrievals are
performed coincident with IVF-ICSI and tailored to the
FNA map findings. We review the history andperformance characteristics of FNA Mapping innonobstructive azoospermic men.
Design: Retrospective, single institution study ofconsecutive male infertility patients.
Materials and Methods
Clinical records of all patients undergoing testicular
FNA mapping between 1996-2016 were reviewed.
Inclusion criteria were: Men with NOA due to any root
cause, regardless of the number of prior diagnostic andtherapeutic testicular procedures. The efficiency, sperm
retrieval rates, ability to find mapped sperm on retrieval
and complications rates were examined. Simple
descriptive statistics were used to compare findings.
Results
Among 1,800 patients undergoing FNA mapping from1996 to 2016, the technique increased in FNA sample size
from 6 to 18 sites/testicle, which corresponded to an
overall increased yield of sperm from 33% to 60% of cases.
Depending on the population under study, sperm can befound in 63% of men with varicoceles and from 67-100%of men with torsion, mumps orchitis, epididymoorchitis
and cryptorchidism. The likelihood of heterogeneity in
FNA sperm findings is 25% within individual NOA testes,and 19% between testis sides. With a 94% correlation withbiopsy findings, FNA can accurately evaluate allclassically defined histologic types. On post-procedure
follow-up, there has been no testis atrophy or
hypogonadism observed after FNA mapping.
In complex cases such as cryptozoospermia and failed
mTESE procedures, FNA mapping located sperm
pockets in 78% and 29% of cases, respectively.
Interestingly, in cases of failed mTESE procedures,
sperm tend to be found by FNA mapping in the
peripheral more than the central testis, suggesting thatmTESE procedures sample the central testis better thanthe peripheral organ.
As an aid in guiding sperm retrieval, 44% of FNA
mapped patients required only TESA, 33% needed
TESE, and only 23% used mTESE to retrieve sufficientsperm for all eggs at IVF-ICSI, demonstrating the abilityof diagnostic mapping to reduce the need for mTESE
sperm retrievals in NOA men. Future opportunities tofind or produce sperm in NOA patients include using
metabolomics assessment of testicles for sperm andcreating patient specific sperm from stem cells.

47

Conclusions
Sperm FNA“mapping”can find mature sperm for
IVF-ICSI in the majority of NOA cases and avoid theinvasiveness and complications associated with mTESE
procedures. FNA mapping can also find sperm in failed
mTESE cases. Besides finding sperm, it is also able to“archive”nonsperm testis cell types for the benefit of
future stem cell-based therapies.

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オーストラリア生殖医学会交換講演

THE FUTURE OF IVF

Robert Norman

Professor, Robinson ResearchInstitute, University of Adelaide,
South Australia
Medical Director, Fertility SA

R ober t N orman holds a personal chair as Professor for R eproductive andPericonceptual Medicine at the University of Adelaide and is a subspecialist in
reproductive medicine（C R E I）and in endocrine biochemistry（F R C PA）. H e wasDirector of the Robinson Research Institute at the University of Adelaide from 2008
to 2013, a collection of 60 Research Leaders in reproductive health and regenerative
medicine, with more than 450 members. He has been leader of two NHMRC Program
Grants and has published over 450 peer-reviewed publications and one book. He has
an h score of 83（Google Scholar）with more than 32, 000 citations. He serves on theeditorial board of major reproductive journals.
His major research contributions have been in IVF and reproductive endocrinology,
p a r ti c u la rly i n P C O S , t h e ef fe c t of life s t yl e o n re p ro d u c tive o u tc o m e s a n d
periconception medicine. He is Medical Director and an active reproductive medicine
specialist at Fertilit y SA and was formerly C EO of R epromed P t y Ltd . H e was
President of the Asia Pacific I nitiative for R eproduction S ociet y（membership
20 0 0+）, Scientific Chair of ASPIRE（2014 and 2016）and Scientific Chair of the
Fertility Society（2 012 - present）. He was awarded an Order of Australia（AO）in
2013. In 2015 he became a Fellow of the Australian Academy of Health and Medical
Sciences and in the same year was awarded an Honorary Doctor of Medicine by the
University of Adelaide. He has been given the top awards of the American Society of
Reproductive Medicine（ASRM）and the European Society of Human Reproduction
and Embryology（ESHRE）.

IVF was introduced as a scientific advance to get past
the problem of tubal blockage and allow the sperm andthe egg to interact before putting an embryo back into
the uterus. Since then IVF has been used for multiple
other purposes and is part of the reproductive revolutionthat started in 1960 with the use of old contraceptive
agents. There have been may technological and socialchanges that have led to the expansion of IVF and thesehave often out-stripped the ethical background in eachsociety, leading to tension between various groups whowish to expand or control IVF.
Much of what we do today in fertility management has
no evidence base and given the wide private nature of
IVF clinics, there is little investigation before many ofthese therapies are introduced into practice. There is aclear need for us as clinicians and scientists to sort out
when and where we can introduce new therapies. In themeantime, patients have taken matters into their own
hands and take multiple adjunct therapies, many ofwhich are unproven and some of which may be unsafe.
IVF has become commercialised to the extent thatpatients move from country to country to obtaintherapies that they cannot legally access in their own.
The growth of surrogacy and donor eggs, the use of sex
selection of embryos and other technologies has led tomany patients moving to countries that offer thesetreatments, but often with an inferior IVF backgroundand medical services. The more conservative the country,
the more patients are likely to move to other countries.
Various scandals within Asian countries have led totightening of surrogacy and the use of donor gametes, but
as some clinics are closed, new ones open.
In this talk I wish to cover issues to do with science,
politics, sociology and technology behind the future of
fertility management. I wish to emphasise how fertility
clinics must invest in research, education, quality staff
and proven technologies if they wish to remain at theforefront of science and medicine.

49

Lecture from the Legend

The beginning and future of
fertilization study, IVF and ART
Ryuzo
Yanagimachi
of their University of Hawaii
Medical School

Received his B.Sc. from Hokkaido University, Japan in 1 9 5 2 and his D. Sc. from
Hokkaido University in 1960 where he conducted research on herring fertilization
and reproduction of parasitic cirripeds. He was a postdoctoral fellow at Worcester
Foundation for Experimental Biology from 1960- 64 to begin mammalian fertilization
study and a Professor at the University of Hawaii Medical School since 1966. Yana
has been emeritus since 2004. For nearly four decades, his research has focused on
gametes and fertilization biology. His work has advanced not only basic knowledgeof mammalian fertilization, but also contributed to the development of assisted
fertilization technologies, such as in vitro fertilization and intracytoplasmic sperm
injection（ICSI）, which are widely used in human infertility clinics. He also contributed
to the field of transgenesis and cloning. In 2000, he founded and was the first Directorof the Institute for Biogenesis Research, housed in the Department of Anatomy,
Biochemistry and Physiology at the University of Hawaii. Under his leadership,
research in the institute expanded to include stem cell biology, genome structure andits role in embryogenesis, transgenesis technology, and the elucidation of molecularmechanisms during normal and abnormal embryo development. Yana was elected as amember of the National Academy of Sciences in 2001.
PROFESSIONAL EXPERIENCE
1955 – 1960 Research & Teaching Associate, Faculty of Science, Hokkaido University,
Sapporo, Japan.
1959 ｰ 1960 Lecturer of General Biology, Fuji Women’s College, Sapporo, Japan.
1960 ｰ 1964 Research Scientist, Worcester Foundation for Experimental Biology,
Shrewsbury, MA, USA.
1964 ｰ 1966 Research Associate, Faculty of Science, Hokkaido University, Sapporo,
Japan.
1966 ｰ 1974 Assistant Professor & Associate Professor of Anatomy & Reproductive
Biology, University of Hawaii Medical School, Honolulu, HI, USA.
1974 ｰ 2004 Professor of Anatomy & Reproductive Biology, University of Hawaii Medical
School, Honolulu, HI.
2000 ｰ 2004 Director, The Institute for Biogenesis Research, Dept. of Anatomy & Reproductive
Biology, University of Hawaii Medical School, Honolulu, HI.
2005 ｰ
Professor Emeritus, University of Hawaii Medical School, Honolulu, HI.

As a student majoring in biology at Hokkaido University
60 years ago, I became interested in fertilization because it
links one generation to the next. Most importantly,
fertilization creates individuals whose genomic makeups
are different from parents and all of their ancestors.
In mammals, the details of fertilization processes werelargely unknown for many years because of the difficultyin collecting and examining live eggs under the
microscope. Since C.R. Austin precisely documented themorphological details of fertilization and co-discovered thephenomenon of sperm capacitation with M.C. Chang in
1951, research into mammalian fertilization advanced
rapidly. In vitro fertilization（IVF）was not only powerful
for the analysis of fertilization processes, but it also servedin overcoming certain types of human infertility. What
we know and can do today for many infertile couples was
not foreseen in 1960 when I began to study mammalianfertilization in Dr. Chang's laboratory.
Today, more than half of infertile couples bring babies
back to their home thanks to advancements of the basic

50

knowledge of fertilization and assisted fertilization
technologies（ARTs）. It is important to note that mother
Nature is by no means perfect. In humans, surprisingly,
nearly one third of naturally fertilized eggs have genomic
aberrations. Due to stringent "maternal selection", lessthan 1% of the babies born after natural conception havecongenital aberrations. Although the same mechanism
works for embryos that start to develop after ART, weshould better understand the genetic and epigenetic risks
of ART and how to minimize them. Parents all want theirchildren be happier and healthier than themselves. ART（including genomic therapy）should be used correctly andwisely such that all offspring born after its application are
as healthy and happy as or even happier and healthierthan their parents.

Lunchtime Session

東日本大震災が生殖医療に及ぼした影響−無事出産を迎える為に−
星 和彦
スズキ病院 理事長

略 歴1971 年

東北大学医学部卒業
米沢市立病院産婦人科勤務
1973 年 東北大学医学部附属病院産婦人科入局
1979 年 アメリカ合衆国，ハワイ大学医学部生殖生物学教室留学 ( 柳町隆造教授 )1981 年 東北大学医学部附属病院講師
1982 年 仙台社会保険病院産婦人科部長
1985 年 福島県立医科大学産科婦人科学講座助教授
1996 年 山梨医科大学産婦人科学講座教授
2002 年 山梨大学医学部産婦人科学講座教授 ( 大学名変更 )2005 年 山梨大学医学部附属病院病院長
2009 年 山梨大学理事，副学長
2011 年 医療法人社団スズキ病院 スズキ記念病院病院長
2014 年 山梨大学名誉教授，名誉参与
2015 年 医療法人社団スズキ病院 理事長
日本産科婦人科学会，日本受精着床学会，日本生殖医学会，日本卵子学会，他
日本産科婦人科学会専門医，日本臨床細胞学会細胞診指導医，他

東日本大震災の被害は甚大で，岩手県・宮城県，福島県
で不妊の治療を受けている多くの方々が被災した．福島県
では放射能の影響もあり，住居を移すことを余儀なくされた方も多いと思われるが，その実態は把握されていない．
また，医療機関が大きな損傷を受け機能しなくなり，診療を受ける医療機関を変更しなければならず，治療状況に影響の出ていることも考えられる．
今回の震災に遭われた不妊治療中のご夫婦がどのような行動をされているか，さらには，その中で発生した医学的異常や治療の状況を調査することはこれからの生殖医療のあり方を考える上で極めて重要と考え，平成 24・25 年度厚生労働科学研究費補助金「震災時の妊婦・褥婦の医療・保健的課題に関する研究」（分担研究者 東北公済病院 岡村州博）の一環として，「東日本大震災が岩手県・宮城県・福島県の生殖医療に与えた影響」を調査した．
岩手県，宮城県，福島県で高度生殖医療を実施している
17医療施設に対して，東日本大震災前後の１）高度生殖医療の実施件数の変化，２）東日本大震災による施設，設備の被害状況，被害が治療に及ぼした影響，３）生殖補助医
療治療内容の変化，等についてアンケート調査を行った．
高度生殖医療を実施しているほとんどの施設および設備
が東日本大震災により一時機能不全に陥り，治療実施に大きな障害が生じた．また，この震災の前後で高度生殖医療の実施内容すなわち治療方法，治療数に変化が認められ，またその変化に地域的差異が認められた．
具体的には，東日本大震災以降，福島県において，人口減少のみならず，医療スタッフの流出，放射能の影響，避難により通院が困難になっている等，多岐にわたる理由のために，体外受精- 胚移植，顕微授精，凍結・融解胚移植といった高度生殖医療が減少していた．一方，近隣の宮城・岩手では，挙児を希望するカップルが増加してきているという印象を持ったとする意見が寄せられ，それを裏付けるように，宮城県では人工授精件数が震災後で18% 増加していた．これは宮城県に人口が流入していること，新規に不妊治療を始めようとしているご夫婦が増加したことを示唆している．
福島県ではとくに原発事故の影響が深刻であり，県民の感情また県の若年人口が回復するまで長い時間を要すると考えられる．しかし，隣接する宮城県では新たに不妊治療を始めようとする気運も高まっており，放射能に対する冷静かつ正確な報道と的確な除染作業が進められれば，福島県で行われる生殖医療が回復する日も遠くはないと思われる．
地震により，精密光学機器，培養器などの損傷・損壊，
電力・各種ガス・培養液・薬品などの供給停止などが診療続行に甚大な影響を及ぼしたが，医療スタッフの懸命な尽力により，幸いにも培養中・凍結保存中の配偶子・胚への影響は軽微であった．特に凍結配偶子・胚への影響は全くみられず，ガラス化法（vitrification）による配偶子・胚の急速凍結技術が大災害時の危機回避対応法として有用であることが確認された．この知見は今後の生殖医療における危機管理対策として重要である．

51

Rising Sun Lecture

ART と周産期合併症に関する課題

杉山 隆
愛媛大学大学院
医学系研究科産科婦人科学教授

略 歴1988 年
1993 年
1994 年
1995 年
2000 年
2002 年
2012 年2015 年

関西医科大学医学部卒業
三重大学医学部附属病院産科婦人科学研修医
三重大学大学院医学研究科博士課程修了
三重大学医学部産科婦人科学助教
米国バンダービルト大学留学
大阪府立母子保健総合医療センター産科
三重大学医学部産科婦人科学准教授
東北大学医学部産科婦人科学准教授
愛媛大学医学部産科婦人科学教授

生殖医療において生殖補助医療（assisted reproductive
technology; ART）は必須であり，今や総出生児の5％を占めるに至っている．晩産化の時代において，今後益々増加することは必至である．一方，ARTによる周産期合併症が存在することも事実である．そのひとつとして多胎妊娠があげられる．多胎妊娠は母児の予後を不良にするとともに，早産や低出生体重児の出生により周産期医療に大きなインパクトを与える．ただし，近年の単一胚移植の普及とともに，ARTによる多胎は急速に減少している．またART妊娠は，早産や妊娠高血圧症候群（PIH），
癒着胎盤等と関連することが報告されている．ARTは高齢と関連するが，その一方で高齢妊娠は，種々の周産期合併症と関連することが知られている．たとえば，高齢
妊娠そのものが独立してPIH発症と関連するが，年齢をマッチさせてもART妊娠において自然妊娠に比し，PIHの頻度が高くなることも報告されている．ただし，ART妊娠と周産期合併症に関する臨床研究では，年齢のみならず人種，ARTの適応理由，ARTの定義，ARTの種類の差等，多くのバイアスや交絡因子が存在するので，わが国発のエビデンスの発信が重要である．
またARTによる妊娠成立のみならず，順調な妊娠経過および安全な分娩まで視野に入れた対応が，ますます重要になると考えられる．さらにARTがエピジェネティク
スを介し児の長期的予後に影響を与える可能性も示唆されている．ARTと周産期合併症に関し，内外の報告を紹介しながら，課題と方向性について概説したい．

52

Rising Sun Lecture

ヒト therapeutic cloning への挑戦と課題

山田 満稔
慶應義塾大学
医学部産婦人科学教室
助教

略 歴2002 年
2006 年
2007 年2008 年
2010 年2013 年
2016 年

慶應義塾大学医学部研修医
独立行政法人国立成育医療センター研究所流動研究員
独立行政法人国立成育医療センター研究所共同研究員
慶應義塾大学研究員（文部科学省グローバル COE プログラム）
慶應義塾大学医学部専修医
慶應義塾大学医学部助教
ニューヨーク幹細胞財団研究所博士研究員
慶應義塾大学医学部助教

日本産科婦人科学会認定産婦人科専門医，日本人類遺伝学会認定臨床遺伝専門医

1960 年代，Gurdon はカエルを用いたクローニングにはじめて成功した．以来，体細胞核移植（Somatic Cell
Nuclar Transfer: SCNT）はヒトにも応用可能と期待され，患者に遺伝的にマッチした免疫拒絶されない細胞治療，Therapeutic cloningを目標に研究が行われてきた．
2006 年，Yamanaka らは４つの胚性の転写因子により分化した細胞を未分化な状態にリプログラミングすることに成功した．こうして樹立された細胞は人工多能性幹細胞（induced pluripotent stem cell: iPSCs）と名付けられた．iPSCs は通常の胚性幹細胞（ESCs）と同様の多能性を有し，韓国のグループによるヒトSCNTの捏造の発覚も相まって，再生医療研究は iPSCs に一気に集中した．
しかしながら，iPSCsはESCsと比較して，DNAメチル化異常やガン化のリスクといった問題が指摘され，
SCNT 技術の確立を目指して少数のグループで SCNT
研究が継続された．
我々のグループは，受精卵のゲノムから胚性遺伝子の転写の活性化（Zygotic Genome Activation: ZGA）が十分に起こらないこと，卵子の細胞周期が進んでしまうことがSCNT胚の発生停止の原因であることを明らかにした．こうした知見を元に，ヒストン脱アセチル化阻害剤（HDACi）による改良 SCNT プロトコルにより，核移植
した胚は胚盤胞に発生し，４株の核移植胚性幹細胞（ntESCs）の樹立に成功した．
しかしながら SCNT 技術には二つの課題が指摘される．一つにはヒト卵子を用いる倫理的問題であり，体細胞を初期化するより良い方法の開発に向けた分子基盤を整備する必要がある．もう一つの課題には，ミトコンド
リ ア 遺 伝 浮 動（mtDNA genetic drift）が 挙 げ ら れ る．
SCNT 後，核側ドナー由来の少数の持ち込みミトコンド
リアが，ntESCs において細胞質側ドナーのミトコンド
リアよりも増加する現象が観察されている．そのため変異ミトコンドリアを有するミトコンドリア病患者では，mtDNA genetic drift のメカニズムとこれを避ける方法の開発が求められている．
本講演では，ntESCsの樹立によるtherapeutic cloningへの挑戦と課題について示した．今後はヒト卵子および初期胚発生における遺伝子調節機構への理解が深まることで，ZGA型リプログラミングを介した，がん化しない，
mtDNA genetic drift を避ける，安全な多能性幹細胞の樹立による再生医療の開発が期待される．

53

Current Topics

がん・生殖医療最前線鈴木 直
聖マリアンナ医科大学
産婦人科学 教授

略 歴1990 年 3 月
4月
1993 年 4 月
1996 年 4 月
1997 年 3 月
2000 年 7 月
2005 年 8 月
2009 年 8 月
2011 年 4 月
2012 年 4 月

近年，がんの診断および集学的治療の進歩の結果，小児，
思春期・若年（AYA）がん患者における QOL（がんサバイバーシップ）の向上に関心が高まっている．これまでは，生殖可能年齢の若年がん患者にとって，｢子どもをもてない｣ また「妊孕性や生殖機能の喪失」という事実を，がん治療終了後に初めて知り，またその現実を受け入れざるを得ない状況が少なくなかった．がんによる生命の危機と妊孕性喪失の危機に直面している小児，AYAがん患者
にとって，妊孕性温存に関する正確な情報を的確なタイミングで得ることができ，さらに安全な妊孕性温存療法の実践は大きな希望となり得る．本邦においては，小児，AYAがん患者に対する「がん・生殖医療の普及と適格な医療連携構築を志向し，2012年11月に特定非営利活動法
人日本・がん生殖医療研究（現，日本・がん生殖医療学会:
JSFP）が設立された．
一方，本邦のがん対策は1984年以降，10年毎に戦略の改訂のもとに施策が実施されてきた．そして2007年4月には，がん対策をより一層推進するため，がん対策基本法が施行され，本法に基づきがん対策の推進を図る目的
として「がん対策推進基本計画」が策定された．2015年6月の，がん対策協議会による「がん対策推進基本計画に対する中間評価報告書の中の研究班患者調査では，納得のいく治療の選択ができたがん患者の割合は 84.5%，妊孕
性温存に関する情報が提供された40歳未満のがん患者は38.1%に留まっており，患者への十分な情報提供と治療選択のための体制整備が急務となっている．同時に発表された「今後のがん対策の方向性」では，今後推進が必要な事項として，「小児期，AYA世代，壮年期，高齢期等のライフステージに応じたがん対策」が挙げられており，本項では，「（前略）AYA 世代のがんの治療にあたっては，倫理面に配慮しつつ，生殖機能温存に関する正確な情報提供を患者・家族に対して行うよう，医療従事者に周知を図る必要がある」と指摘し，早急な対策を講じるとともに，次期がん対策推進基本計画作成にあたって考慮すべきであると提言している．そして，現在策定中の第3期
がん対策推進基本計画素案には，がん・生殖医療の適切54

慶應義塾大学医学部卒業
慶應義塾大学医学部産婦人科入局
慶應義塾大学大学院（医学研究科外科系専攻）入学（指導：野澤志朗教授）
米国カリフォルニア州バーナム研究所留学〜 1998 年 9 月
慶應義塾大学大学院（医学研究科外科系専攻）博士課程修了
慶應義塾大学助手（医学部産婦人科学），同産婦人科診療医長を兼ねる
聖マリアンナ医科大学講師
聖マリアンナ医科大学准教授
聖マリアンナ医科大学教授（婦人科部長）
聖マリアンナ医科大学教授（産婦人科学講座代表）〜現在に至るな体制の構築が取り組むべき施策として明記されるに至っている．本講演では，がん・生殖医療最前線と題して，本邦における本領域の取り組みや研究の最新トピックスを概説させて頂く．

Current Topics

がん・生殖医療の全国の現状

古井 辰郎
岐阜大学大学院
医学系研究科
産科婦人科学分野

略 歴1990 年1991 年
1995 年
1999 年
2002 年
2011 年2013 年
2014 年
2016 年2017 年

岐阜大学医学部卒業
岐阜大学医学部附属病院産科婦人科研修医
県立岐阜病院産婦人科研修医
岐阜大学大学院入学
岐阜大学大学院修了
米国テキサス大学 M.D. アンダーソン癌センター
岐阜大学医学部附属病院；産科婦人科医員
同助手
同併任講師
講師
准教授
岐阜大学病院がんセンター臨床研究部門長
岐阜大学医学部附属病院周産期・生殖医療センター長
岐阜大学医学部附属病院臨床教授

日本産科婦人科学会専門医，日本生殖医学会認定生殖医療専門医，母体保護法指定医，日本体育協会公認スポーツドクター
日本生殖医学会代議員，日本がん・生殖医療学会理事，日本 IVF 学会評議員，日本生殖心理カウンセリング学会理事，日本生殖内分泌学会評議員，日本婦人科乳腺医学会評議員
日本癌治療学会『小児思春期，若年がん患者の妊孕性温存に関するガイドライン』を作成ワー
キンググループ協力委員（乳腺担当・脳腫瘍担当）

生殖細胞の凍結技術の進歩は，この技術を性腺への不可逆的なダメージを伴うがん治療前の妊孕性温存への応用にその適応を広げた．欧米では2004年の悪性リンパ腫
サバイバーの卵巣組織凍結後の生児獲得，2006年の米国
臨床腫瘍学会（ASCO）が米国生殖医学会（ASRM）と共同でがん患者の妊孕性温存ガイドライン発表，同時期のFertiPROTEKT や Oncofertility Consortium などの組織の設立など，若年がん患者およびサバイバーの妊孕性温存支援がなされている．
本邦では，2004 年に日本癌治療学会が「生殖医療専門医と協力し妊孕性温存に関して十分な説明」の重要性の見解を示し，がん治療および生殖医療の双方に，この問題への意識の高まりと様々な活動が行われるようになった．
具体的には，2005年の岡山大学でのがん患者に対する卵
巣組織凍結の臨床研究の承認，2007年の日本A-PARTによる白血病患者を中心とした卵子凍結の臨床研究開始，
そして2013年には聖マリアンナ医科大学によって卵巣組
織凍結−自家移植による国内初の妊娠出産例が報告された．
一方で，がん診療の現場におけるがん・生殖医療に関する情報不足，患者に対する意思決定支援に対しては，
2012年の日本がん・生殖医療研究会（現学会）（JSFP）が設立され，翌年から岐阜や岡山を皮切りとして地域医療ネットワークの構築支援が始まった．2014年には第3次対がん総合戦略研究事業として「乳がん患者の妊娠出産と生殖医療に関する診療の手引き」が出版され，乳がん診療の現場に対する情報提供の実施や医療連携支援に関わる内容が推奨グレードとともに示された．同年，日本産科婦人科学会は医学的適応による卵子・卵巣組織凍結保存に関する見解の発表と実施施設の登録が開始された．

2015 年には日本癌治療学会が「小児思春期，若年がん患者の妊孕性温存に関するガイドライン」作成に着手し，2017年秋に発刊される予定である．
また，がん患者に対する生殖機能に関する情報提供，
妊孕性温存の意思決定には，腫瘍学，生殖医学，心理，看護，薬学，倫理など，学際的チームによる支援が理想と考えられている．この体制の実現のためにJSFPは組織
的な啓発活動，人材育成，資料の作成や地域ネットワー
ク構築支援に取り組んでいる．本講演では，国の平成28
年度がん対策推進総合研究事業「総合的な思春期・若年成人（AYA）世代のがん対策のあり方に関する研究」でJSFPメンバーによって行われた研究成果として，国内におけるがん・生殖医療ネットワークの現状とそれに伴う諸問題，がんサバイバーや専門医の意識調査を紹介し，国内のこれからのがん・生殖医療のあり方，がん患者が診断を契機として子供を持つことの意味，子供のいない
人生選択などまで深く考える機会を持つこと（吉村慶應義塾大学名誉教授）の支援のあり方についても考察したい．

55

一般演題〔口頭発表 〕
O-1

ART 出生児3,223名のフォロー
アップ：胚凍結融解が児の身体発育に及ぼす影響菊地 寿美 1），
青野 展也 1，2），
中條 友紀子 1），
服部 裕充 1），
1）
1）
1）
中村 祐介 ，高橋 瑞穂 ，戸屋 真由美 ，小泉 雅江 1），
五十嵐 秀樹 1），京野 廣一 1,2）
1）京野アートクリニック2）京野アートクリニック高輪

大児（4,000g 以上）率について，c-IVFにおける新鮮胚移植群（以下A 群とする）と凍結融解胚移植群（以下 B 群とする），ICSIにおける新鮮胚移
植群（以下C 群とする）と凍結融解胚移植群（以下 D 群とする）に分け，胚凍結融解の及ぼす影響を媒精方法別に比較検討した．
【結果】
平均在胎週数，出生時体重，出生時身長，低出生体重児率，巨大児率は c-IVF のA 群
（330名）とB 群（550名）それぞれで 38.6±2.4週 vs.
39.1±2.1週（P<0.01），2,919g vs. 3,102g（P<0.01），48.5cm vs. 49.1cm（P<0.01），16.2％ vs. 6.5％（P<0.01），0.3% vs. 1.1% で，巨大児率以外で有意差を認めた．先天異常率は3.3% vs. 3.1%と有意差を認めなかった．その後の体重と身長は生後3 か月で差が認められなくなった．ICSI

【目的】

のC群
（952名）とD 群（1388名）それぞれで 39.0±1.9週 vs. 39.2±2.2週

生殖補助医療（ART）の安全性を確認するために ART 由来出生児の（P<0.05），2,963g vs.3,083g（P<0.01），48.8cm vs. 49.4cm，12.4％ vs.

発達調査は非常に重要である．当院では 1995年よりART 由来児の身体8.4%（P<0.01），0.6% vs. 1.1%で，出生時身長と巨大児率以外で有意差と運動能力の発達調査を 6歳まで行っている．今回は調査結果をもとに，を認めた．先天異常率は 3.4% vs.2.7%と有意差を認めなかった．その媒精方法別に胚凍結融解の有無が出生児の身体発育に及ぼす影響につい後の体重は生後6 か月で差が認められなくなった．

て検討した．
【結論】【方法】

c-IVF，ICSIともに胚凍結融解により出生時体重が重くなり，低出生

1996 ～ 2016年の期間に ART にて単胎児として出生した児3,223名を体重児率が低下する可能性が示唆された．しかし，その後 c-IVF では 3対象とした．調査は両親へのアンケート形式で実施した．在胎週数，児か月以降，ICSI では 6 か月以降で有意差が無くなり，身体発育は短期間の出生時体重と身長，そして出生時から1歳までは 3 か月毎，その後，1でキャッチアップすると考えられた．先天異常率に有意差が無かったこと

歳6 か月，2歳から6歳までは 1年毎に身長，体重および先天異常の有無にから，胚凍結融解は児の先天異常に影響を及ぼさないと考えられる．

ついて調査した．以上の項目に加え低出生体重児（2,500g 未満）率，巨O-2

卵子体積が受精・発生能ならびに出生児体重に及ぼす影響

辻 暖永，吉村 友邦，香ノ木 早紀，浅野 恵美子，
福永 憲隆，浅田 義正
浅田レディースクリニック

凍結融解胚移植後，出産に至った 506症例538周期を対象とした．卵子
直径は ICSI 後 EmbryoScope® で培養を行い，最初に撮影された画像の直径を 2点取り平均化することで算出した．なお卵子体積は〔V=4/3πr 3〕にて算出した．
【結果】
0PN および≧3PNを形成した卵子は 2PNを形成した卵子と同等の体積であったが，1PNを形成した卵子の体積は 2PNを形成した卵子と比較して有意に小さかった（746935.5μm 3 vs. 777233.4μm 3: p<0.05）．2PN胚のうち胚盤胞を形成しなかった卵子は胚盤胞を形成した卵子の体積よ【目的】

り有 意 差 は な いもの の 小 さ い 傾 向 が見 ら れ た（758077.2μ m 3 vs.

実験動物を用いた研究では人為的に卵細胞質を大きくしても発生能は770888.6 μm 3: p=0.052）．更に 2PNを形成した胚を卵子体積によって改善せず，むしろ低下することが報告されている．また ART において，3区に分け胚盤胞発生率を比較したところ，体積が小さい区は中間区より凍結融解操作や移植胚の評価によって出生児体重が変動することが知ら有意に低く（55.0% vs. 66.0%: p<0.05），また有意差はないものの大きれているが，卵子の体積が発生能や出生児体重に影響するか否かは未だい区より低い傾向があった（55.0% vs. 67.3%）．しかし，卵子体積と出生不明である．そこで本研究ではヒトにおいて ICSI 時の卵子体積が受精，児体重に相関は無く（R 2 =0.038），先天性異常の発生にも影響は見られな

その後の発生能ならびに出生児体重に及ぼす影響を後方視的に検討した．

かった．

【対象・方法】【考察】

受精および胚盤胞形成に関する検討は 2017年1月～ 2月の間に ICSIをこれらの結果から1PNを形成する卵子は体積が小さい傾向があり，ま施行し採卵時の妻年齢が 30 ～ 35歳であった 55症例973個を対象とした．

た 2PNを形成した胚でも体積の小さい卵子は胚盤胞形成率が低率であ

また，出生児体重に関する検討は 2013年1月～ 2016年8月までに ICSI 施ることが示された．しかし，胚盤胞に達した胚の卵子体積は出生児体重行後 Day1まで EmbryoScope® で培養を行い，胚盤胞に到達した胚をに影響を及ぼさなかった．

56

O-3

顕 微 授 精 後 にカル シウムイオノ
ファ処理を行った症例の出生児長期予後入江 真奈美 1），樽井 幸与 1），渡邊 千裕 1），小林 亮太 1），
水野 里志 1），藤岡 聡子 1），井田 守 1），福田 愛作 1），
森本 義晴 2）
1）IVF大阪クリニック
2）HORACグランフロント大阪クリニック

児を対象とした．まず，これらの児に対して，性別，在胎週数，奇形の有無，および出生時の身長と体重を調査した．次に，継続調査に同意の得られた症例に対して，1歳半，2歳，3歳半，および 5歳での身長，体重，および生育過程で出現した奇形を調査した．
【結果】
性別の割合は男児84.6％（11児），女児15.4％（2児）であった．平均在胎日数は男児268±10日，女児274±0日であった．先天異常では1児（7.7%）にダウン症を認めた．出生時の平均身長は男児47.24±1.84 cm，女児
48.0±3.54 cm，平均体重は男児2709±40g，女児3068±80 gであった．
1歳での平均体重は男児（2名）8.58±0.88kg，女児は 1 名のみで 8.2 kg，
平均身長は，男児で 73.45±2.05cm，女児で 72.50cmであった．1歳半での平均体重は男児（4名）10.22±0.43㎏，女児（1名）9.50㎏，平均身長【目的】

は，男児で 81.43±1.50㎝，女児で 79.10cmであった．2歳での平均体重

顕微授精における受精障害症例の発生頻度は 1 ～ 3％といわれている．

は男児（3名）で 11.87±0.13㎏，女児（1名）で 11.00㎏，平均身長は男児でこのような症例に対して，顕微授精後に卵子に対してカルシウムイオノファ

87.13±2.43㎝，女児で 88.00cmであった．その後の協力の得られた児（1などの人為的活性化を付加することが有効な場合がある．これまで，体名）の3歳半では身長92.50cm，体重12.40 kg，5歳では身長103.00cm，

外受精により誕生した児について様々な予後調査が行われている．しかし，体重15.50 kgであった．後に発覚した奇形はなかった．

卵の人為的活性化処理を必要とする症例は少なく，児の予後を含めた安
全性の検証は十分とは言えない．このため，一例でも多くこの技術から誕【考察】生した児の予後情報を蓄積していくことは非常に重要である．今回我々は，身体発育について，一児に出生時の低体重を認めたが，それ以外全て

顕微授精後にカルシウムイオノファ処理を実施し妊娠出産に至った症例ので 5歳までのパーセンタイル曲線内に収まっており，今のところカルシウム

児に対して，出生から5 歳児までの調査を行ったので報告する．

イオノファ処理の影響は認められないと考えられた．また，男児の割合が
通常 IVF 比（一対一）に比べ有意に（P<0.001）高かったこと，およびダウ【対象及び方法】
2004年4月から2014年11月の間に，当院で受精障害が疑われたため顕ン症の児の発生率（7.7%）が高率であったことについては，活性化処理の影響なのか，症例数を増やし慎重に見極める必要がある．

微授精後にカルシウムイオノファ処理を実施し，妊娠出産に至った 11例13

O-4

胚移植後の胚 残留による再胚植の妊娠成績

﨑田 恵，清水 雅司，白井 美希，齋藤 可奈子，織田 文香，
古川 美穂，安田 忠頼，杉浦 百香，丸岡 沙織，村田 朋子，
村田 泰隆
ART クリニックみらい【結果】
検討①：再移植の発生率は 0.8%
（7/860）であった．再移植を行った 7周期のうち，移植胚数1個のケースが 4周期，移植胚数2個以上のケースが3周期だった．移植胚数における再移植の発生率を比較すると，1個：0.6%（4/687），2個以上：2.7%（3/115）であり，移植胚数が 2個以上での再移植の発生率が高い傾向がみられた（p=0.065）．
検討②：カテーテル内に胚が残留せず通常の移植を行った 853周期と再移植を行った 7周期の臨床妊娠率および継続妊娠率は，それぞれ通常移植では 44.9%（383/853）と35.4%（302/853），再移植では 57.1%（4/7）と57.1%（4/7）であり，有意差はなかった．
再移植での臨床妊娠および継続妊娠に至った 4周期はすべて胚盤胞1【目的】
当院では，胚移植後にカテーテル内を洗浄して胚が残留していないか個を移植して 1個残留した 4周期であった．4周期とも，移植前の胚盤胞は孵化胚盤胞であったが，胚残留後はすべて胞胚腔が収縮していた．

を確認しており，胚が残留していた場合は直ちに再移植を行っている．
ASRMによる胚移植に関するガイドラインレビュー 1）では，胚残留による【考察】

再移植について，妊娠率や流産率は低下しないと報告されている．そこ検討①より，複数胚移植では胚移植後の胚残留確認をより重点的に行で当院の胚移植後の胚残留による再移植の妊娠成績について検討した．

う必要があると考えられた．検討②より，胚移植後にカテーテルに残留した胚の再移植を直ちに行っても，臨床妊娠率および継続妊娠率は低下し【対象・方法】

ないことを確認できた．胚残留の理由として，シリンジを押しても胚がカ

2016年8月から2017年4月，ホルモン補充周期内膜に凍結融解胚を移テーテルから排出されないケース，胚が排出された後にカテーテルに逆植した 860周期を対象とした．胚移植方法は，ガラスシリンジを使用し，流するケースなどがあると言われている 2）．今後は，胚の排出がよりスムー

カテーテルにエアー 2µL，次に培養液とともに胚を約8µL，最後にエアー

ズなカテーテル製品の検討に加え，シリンジを押す速度や排出後のカテー

2µLをローディングし，経腟超音波下で移植を行った．検討①では移植テルを抜く速度など移植手技についても検討していきたい．

胚数別の再移植の発生率を比較した．検討②ではカテーテル内に胚が残留しなかった周期と胚残留による再移植を行った周期の臨床妊娠率と継参考文献

続妊娠率を比較した．

1）Penzias， A et al.，Fertil Steril. 107（4），882-96，2017.
2）
生殖補助医療 - 胚培養の倫理と実際 P183-84

57

一般演題〔口頭発表〕

O-5

収 縮 / 拡 張中状 態での胚 盤 胞 凍
結が融解後の生存率，妊娠 成績に与える影響に関する検討

村松 裕崇 1），
大原 基弘 1），
有地 あかね 2），
伊藤 かほり 1），
2）
2）
2）
大村 直輝 ，小峰 祝敏 ，工藤 祐輔 ，門前 志歩 1），
蓮井 美帆 1,2），己斐 秀樹 1,2），河村 寿宏 1,2）
1）田園都市レディースクリニック二子玉川
2）田園都市レディースクリニック

としDay5胚盤胞を融解した 5,185周期を対象とした．凍結時年齢が 34
歳以下（A 群），35歳から39歳（B 群），40歳以上（C 群）の3群に分け，それぞれ凍結観察時の胚盤胞状態（拡張・収縮 / 拡張中・完全収縮）ごとの融解後の生存率，臨床妊娠率を検討した．凍結融解方法は Cryotopを使用し，胚盤胞グレードは Gardnerらの分類で行った．生存率は融解後，移植が可能となった胚盤胞を生存胚とし，変性し移植キャンセルとなった胚を非生存胚とした．
【結果】
融解後の生存率に関しては全ての群の凍結時胚盤胞状態で差はなかった．臨床妊娠率は A 群で 58.9%（842/1429）vs56.0%（28/50）vs0%（0/6），B 群 で 46.8%（992/2120）vs45.1%（41/91）vs23.1%（3/13），C
群 で 30.4%（415/1367）vs25.6%（23/90）vs14.3%（2/14）であ った．34【目的】

歳以下群の拡張及び収縮 / 拡張中 vs 完全収縮で有意差が認められた．

胚盤胞凍結時のグレード判定の際にICM/TE 判定は可能だが収縮 / 拡

他群においては凍結時胚盤胞状態の違いによる有意差は見られなかっ張中の囲卵腔が確認できる胚盤胞やグレード判定から凍結開始の間に完全たが，完全収縮した胚盤胞において臨床妊娠率が低下する傾向が見ら収縮を起こしてしまう胚盤胞もある．そのような胚盤胞状態であってもグれた．

レード判定ができていればそのまま凍結を実施している．今回，凍結開始時にこれら収縮 / 拡張中または完全収縮してしまった状態で凍結をした胚盤胞が融解後の生存率，妊娠成績にどのような影響を与えているか検討した．

【考察】
融解後の生存率に関して凍結時胚盤胞状態の違いによる差はなかった．
しかし臨床成績においては完全収縮してしまった胚盤胞に関して低下する【方法】

可能性があり，複数の凍結胚盤胞があれば移植胚の選択の際に考慮する

2014年1月から2017年3月までに当院で凍結単一融解胚盤胞移植を目的

O-6

40歳以上の胚移植におけるAMHと累積臨床妊娠率の検討

知念 日菓利，藤田 陽子，石井 鈴奈，浅見 真依，
大川 莉歩，鈴木 望文，榎本 恵，濱田 道子，堀川 道晴，
武谷 雄二
ウィメンズクリニック大泉学園

必要があると考えられた．

に測定したものを採用した．
【結果】
累積臨床妊娠率は A 群35.2%，B 群47.7%であった．A 群においては6回目以降での妊娠例はなかった．また，A 群の妊娠例のうち約90% が 3
回目までに妊娠に至り，5回目で妊娠率が 100%に達した．一方，B 群では 5回目以降でも妊娠例があり，最大8回目での妊娠例があった．臨床妊娠率は A 群40歳 ;38.9%（7/18），41歳 ;53.1%（17/32），42歳 ;25.0%（2/8），
43歳 ;7.1%（1/14），44歳 ;40.0%（4/10），B 群は 40歳 ;64.7%（22/34），41
歳 ;53.6％（15/28），42歳 ;42.9%（9/21），43歳 ;33.3%（3/9），44歳 ;15.4%【目的】（2/13）であり，45歳以上はどちらも妊娠例がなかった．流産率は A 群40

ART 反復不成功例にとって，治療を継続するのか，終結するのか

歳 ;42.9%（3/7），41歳 ;52.9%（9/17），42歳 ;100.0%（2/2），43歳 ;100.0%を判断するということは非常に難しい問題である．そこで，当院にて（1/1），44歳 ;75.0%（3/4），B 群は 40歳 ;36.4%（8/22），41歳 ;40.0%（6/15），

新鮮胚移植，凍結融解胚移植を行った 40歳以上の症例を対象に，移植

42歳 ;55.6%（5/9），43歳 ;66.7%（2/3），44歳 ;100.0%（2/2）
であった .

回数ごとの累積臨床妊娠率および年齢別の臨床妊娠率，流産率を算出
し，ART 開始時の AMH 値別に治療終結時期の目安が求められるか
検討した．

【結論】
AMH 値1.0ng/ml 未満の症例は妊娠例の約90% が 3回目までに妊娠に至り，6回目以降には妊娠例がないことから，5回程度が治療終結の目【方法】

安の一つとなると考えられた．一方，AMH 値1.0ng/ml 以上の症例では，

2009年1月～ 2016年12月までに胚移植を行った 40歳以上195症例441

6回目以降にも妊娠例が散見されたことから，移植可能な胚が得られれば，周期を対象とした．対象はAMH値1.0ng/ml未満（A 群:88症例199周期）

移植を繰り返すことで妊娠に至る可能性があると思われた．しかし，臨と1.0ng/ml 以上（B 群 :107症例242周期）の 2群に分け，それぞれにおい

床妊娠率の検討では，AMH 値1.0ng/ml 以上でも45歳以上には妊娠例て移植回数ごとの累積臨床妊娠率と，妊娠症例（A 群 :31症例，B 群 :51

がなく，年齢が上がるごとに臨床妊娠率は低下し流産率は上昇していた．

症例）あたりの累積臨床妊娠率を求め検討した．さらに，年齢別の臨床移植を継続していく場合でも，移植回数だけではなく年齢なども考慮し妊娠率，流産率を求め検討した．AMH 値は初回採卵時の1年前後以内

ART 終結時期を考えていく必要がある．

58

O-7

生体内環境に近い Microfluidic
embryo culture system の研
究開発

水野 仁二 1），乾 裕昭 1），菊地 瑛子 1），野口 香里 1），
丹治 百合 1），濱端 美紀 1），小堤 千歩 1），込山 真貴子 1），
山崎 知登世 1），野口 幸子 2），丸本 孝太郎 3）
1）乾マタニティクリニック，乾フロンティア生殖医療不妊研究所
2）東京慈恵会医科大学
3）株式会社ナガヨシ

キュベーター対応仕様とした．
（試験1）材料2種（ABSとPC）の樹脂版を加工し削り出しによりプロトタイ
プを試作した．これらの試作 Vivo dishの操作性と構造強度を生殖補助
医療胚培養士5名により評価した．
（試験2）設計図データを基に，CPS により培養スペース内の受精卵をとりまく培養液の流体解析を行い，培養液の，栄養成分，酸素，胚発生促進
因子，老廃物等の経時的動きと濃度の変化を確認した．
【結果】（試験1）削り出し試作プロトタイプのVivo dish は，胚培養士5名による評価により，樹脂材料ABSとPC 共に操作性と構造強度は既存の35mm
ディッシュ（Falcon 社 1008，DNP 社 LinKID micro25）と同等であった．
（試験2）CPS により以下のことが明らかとなった．

【目的】（1）MT からCS に注ぐ流量は，目標値の10-30nl/minを実現できる．

ART では配偶子及び受精卵の遺伝子に epigenetic な変化が起こる（2）MT からCS に培養液が 6日間安定的に注がれるため，CS のMT 側

こ と が 懸 念 さ れ て い る． 我 々 は microfluidic embryo co-culture

からWT に向かって培養液の穏やかな流れが起こり，栄養分と酸素

system を開発し，その有効性を報告した（日本受精着床学会雑誌 26（1）:151–154 ,2009）．この度 microfluidic の機能を 35mm ディッシュに搭載した microfluidic embryo culture（Vivo）dish の完成を目指の供給，そしてアンモニア等の老廃物の除去が実現できる．
（3）卵収納ウエル間のスリットによりウエル底部でオートクライン効果が維持，上部でパラクライン効果の促進が期待できる．

し，プロトタイプ作製とコンピューターシミュレーション（CPS）により構造強度と受精卵をとりまく培養液の流体解析を行い初期性能評価を行ったので報告する．

【考察】
Vivo dish の構造評価とコンピューターシミュレーションによる流体解
析の結果，構造強度は問題無く，培養液の流れ，栄養成分，酸素，胚【方法】

発育促進因子，アンモニア等の老廃物の経時的動きと濃度が in vivo にVivo dish（国際特許，商標出願済）は 3D-CAD 設計により理想の形

近づき，目標達成に必要な機能と性能を有することが推察された．今後

態と機能を持たせ，培養液タンク（MT），培養スペース（CS），廃液タン

射出成型法により生産し，安全性と有効性をMEAにより十分に検証しク（WT）を備えるデザインとした．CS には 20個の受精卵培養ウエルを備臨床利用を目指す．
（㈶福島県産業振興センターの研究開発事業費採択）え，ウエル間にはスリットを設けた．またVivo dish はタイムラプスイン

O-8

非加湿型インキュベータによる長期継続培養が胚培養環境に及ぼす影響の検討森田 博文，田崎 秀尚，内山 一男，薮内 晶子，小林 保，
奥野 隆，加藤 恵一
加藤レディスクリニック

社および B 社のHeavy oilにおける，開封直後，培養3，5及び 7日目の過酸化物価（POV）を測定した．さらに，マウス2細胞期胚をこれらの Oilで覆った培養液内で 3日間培養（37℃ , 5%CO2 , 95% Air）し，胚盤胞への発生能を比較した．
【結果】
培養3日目における浸透圧変化は，A社 light 及び heavy 区で 13.7及び8.0 mOsmol，B 社 light 及び heavy 区で 7.4及び 5.7 mOsmol，培養7日目における浸透圧変化は，A 社 light 及び heavy 区で 32.9及び 21.2
mOsmol，B 社 light 及び heavy 区で 17.1及び 13.8 mOsmol であった．
培養日数が経過するに従い浸透圧の上昇が見られたが，Heavy oil はLight oilと比較してその上昇が抑えられた．A社及び B 社のHeavy oil【目的】のPOVは，開封直後，培養3及び 5日目では検出限界値（0.1meq/kg）以近 年 タ イ ム ラ プ ス イ ン キ ュ ベ ー タ 並 び に Single step medium

下であったが，A社の Oilについては培養7日目に 0.3±0.1meq/kgと上昇（STM）の導入がもたらす胚培養への恩恵について様々な施設で検討した．また，POVの上昇がみられたOilでは，マウス2細胞期胚の胚盤が行われている．一方で，非加湿型インキュベータ内で長期間継続培

胞発生率が有意に低下した．

養することが培養液の浸透圧や Oil の酸化などの胚培養環境の恒常性に及ぼす影響についての検討は少ない．よって本実験では，非加湿環
境下での長期間の継続培養が培養液の浸透圧変化および Oil の酸化に及ぼす影響について検討した．

【結論】
非加湿型インキュベータによる長期継続培養は胚培養環境に影響を及ぼす可能性が示唆され，それに伴う胚のクオリティの低下が懸念された．
長期継続培養による培養液の浸透圧上昇に関しては，使用するOilによ【方法】

り大きく変動することが明らかになり継続培養に用いるOilの選択は慎重

STM を用いて 30μlの drop を 9個作成し3.5mlの Oilで覆い，非加に行わなければならない．現在我々は，Dish 内を個別に加湿することに湿型インキュベータ内で培養（37.0℃，6％ CO2，5％ O2）した．Oilは A

より，非加湿環境下で継続培養を行っても培養液の浸透圧上昇を抑え，社，B 社の Light（A 社 light 区，B 社 light 区）および Heavy oil（A 社

胚培養環境の恒常性が改善できるか否かについて検討中である．また長heavy 区，B 社 heavy 区）を用いた．培養3及び 7日目に各区における培期継続培養によるOilの酸化に対する対策について考慮が必要である．

養液の浸透圧変化（培養後浸透圧－培養前浸透圧）を測定した．また，A59

一般演題〔口頭発表〕

O-9

当院20年間の成績からみた少数
採卵症例の予後について

尾瀬 武志，安藤 寿夫，鈴木 範子，皆元 裕子，甲木 聡，
藤田 啓，矢吹 淳司，梅村 康太，岡田 真由美，
河井 通泰
豊橋市民病院総合生殖医療センター【成績】
採卵数が 1個だった 553周期のうちその1個の卵子が成熟卵だったのは355周期（64.2%）であり，受精卵ありは 291周期（52.6%），受精卵が 2PNだったのは 264周期（47.7%）となった．さらに新鮮胚移植実施は 201周期（36.3%），融解胚移植（以下 T-ET）は 15周期（2.7％）となり，臨床妊娠（化
学流産を含めない）は 23周期
（4.2%，T-ET1周期含む），生産まで確認されたのは 16周期
（2.9%，T-ET1周期含む）
で，2胎1例を含む17生児のみであった．同様に採卵数が 2個だった 359周期のうち，少なくとも1個の卵
子が成熟卵だったのは 306周期（85.2%）であり，そのうち受精卵ありは269周期（74.9%）であった．臨床妊娠は 31周期
（8.6%，3周期は T-ET で臨床妊娠，1周期は新鮮胚移植・T-ET 両方臨床妊娠），生産まで確認さ【緒言】

れているのは 20周期
（5.6%，1周期は T-ET生産，1周期は新鮮胚移植・調節卵巣刺激の結果，採卵数が 1個もしくは 2個だった場合の予後は，T-ET 両方生産）で 21生児のみであった．1個採卵の場合は 2個採卵と比患者への情報提供において重要であり，今回検討した．

較して妊娠率（P<0.05）
生産率（P<0.05）ともに低率だった．

【方法】

【結論】

当院の 20年間4,192採卵周期のうち採卵数が 1個または２個だった 912

採卵数が目標に届かず２個以下だった場合の予後は予想通り不良だっ周期（21.8%）について分析した．成熟卵の定義は，MII 期を経ているこ

たが，そのような周期でも１個よりも２個の場合の方が少しは良い成績がとが確認または推定される卵子とした．

期待できることが明瞭に示された．		

O-10 採卵時GV期卵子由来胚盤胞の凍結融解胚移植長瀬 祐樹 1），友成 美希 1），和田 知久 1），山本 佑司 1），
米澤 潤一 1），勝又 綾子 1），後藤 愛架 1），田島 和弥 1），
菊池 卓 2），松浦 俊樹 2）
1）アクトタワークリニック生殖発生医科学センター
2）アクトタワークリニック様に胚盤胞まで培養し，ガードナー分類で BC 以上の胚を良好胚として，
超急速ガラス化凍結法にて凍結した．凍結融解胚移植周期は自然周期で行い，当院プロトコルに従い予測排卵日から起算して 3w5dにβhCG を測定し着床判定，5w5dに胎嚢確認を行い臨床妊娠を判断し，着床率，臨床妊娠率，流産率を検討した．
【結果】
対象期間中に IVM を施行したGV 期卵子は 739個であり，成熟率は70.1％であった．518個 ICSIを施行し，正常受精率は 73.1％（379/518）
で，良好胚凍結率は 22.5％（81/360）であった．同時期の採卵時 MⅡ卵子の成績は，正常受精率79.4％，良好胚凍結率57.1％で，正常受精率及び良【目的】

好胚凍結率ともに IVM-ICSI が有意に低下することが確認できた．凍結

当院ではクロミフェンやレトロゾールを用いた低刺激排卵誘発周期で採融解胚移植は 48周期
（平均年齢35.9歳）行い，着床率は 68.7％（33/48），

卵を行っている．採卵時は発育が不十分な卵胞も穿刺するため，獲得卵

臨床妊娠率は 50％（24/48），流産率は 8.3％（2/24）であった．同時期の子の 5 ～ 10％で GV 期卵子が得られている．我々は得られた卵子を1つ

MⅡ卵子由来胚盤胞移植結果は，着床率62.7％，臨床妊娠率59.8％，でも多く治療へ生かすため，体外成熟 - 顕微授精（IVM-ICSI）を行い，流産率17.2％で，妊娠率及び流産率に有意な差は認められなかった．ま身体への負担の少ない低刺激排卵誘発を行いつつも，採卵あたりの移植

たGV 期由来胚盤胞移植後の妊娠経過については，出産報告確認済ができる胚の数を増加させ，妊娠率を向上させてきた．今回は，採卵時12例，妊娠継続中が 8例，報告確認未が 2例あった．平均出生時体重3，GV 期卵子の成熟から胚盤胞凍結まで，さらには GV 期卵由来の胚盤胞

124g，平均在胎日数271.4日で，1例のみ 30w3d で帝王切開にて出産の移植についてまとめたので報告する.

報告があったが，その他の低体重児や早産の報告はされていない．

【方法】

【考察】

インフォームドコンセントの得られた，2013年9月から2017年5月までに採卵時 GV 期卵子では良好胚盤胞凍結率は低いが，良好胚凍結した当院で採卵を行った患者を対象とした．GV 期卵子が得られた 366症例

胚を融解胚移植した場合の妊娠率の低下や流産率の上昇は確認できな

486周期（平均年齢36.1歳）について，当院プロトコルに従いIVM-ICSI

かった．また，妊娠継続した場合の出産への影響も今のところ報告されを施行．IVM 後に極体放出が確認できたものを成熟と判断し，ICSI 翌ていないため，IVM-ICSIは妊娠成立に有効な手段であることが示唆さ日に 2PNが確認できた胚を正常受精と判断した．その後は通常の胚と同

れた．

60

O-11 酸化ストレスがマウス体外成熟培

養の成熟率とミトコンドリアクラスターに及ぼす影響

山田 健市 1,2），吉田 仁秋 1），原 健士朗 2），種村 健太郎 2）
1）仙台 ART クリニック
2）東北大学大学院 農学研究科応用生命科学専攻 動物生殖科学分野

ル区，低濃度区（7mg/kg），高濃度区（70mg/kg）とした．
【結果】
アセフェート投与によるCD 法，HD 法それぞれのMII 成熟率は，コントール区96.2%，92.4%，低濃度区85.0%，89.6%，高濃度区30.0%，
58.6%となった．高濃度区は他の区と比較しMII 成熟率が CD 法，HD 法，
共に有意に低くなった．また，CD 法とHD 法を比較した場合，高濃度区において，CD 法のMII 成熟率は有意に低下した．MII 期に達した卵子のミトコンドリアクラスター形成率は，CD 法，HD 法それぞれ，コントロー
ル区7.8%，10.1%，低濃度区5.9%，4.7%，高濃度区0%，11.8%となり，ミトコンドリアクラスター形成率に有意な差はみられなかった．

【目的】
体外成熟培養液に酸化ストレスを与えることが体外成熟培養時におけ【考察】る培養環境，すなわち共培養か単培養かで MII 成熟率に影響しているこ

生体内に強い酸化ストレスを与えることは，マウス卵子の体外成熟培養とが示唆されている．そこで本研究では，個体レベルでの酸化ストレスがにおいて MII 成熟を阻害することが明らかとなった．また，培養環境が，マウス卵子体外成熟培養において，培養環境により，MII 成熟率，細胞MII 成熟率に関与していることが考えられた．CD 法で有意に MII 成熟

質成熟のひとつの指標であるミトコンドリアについてどのように影響してい率が低下したことから，強い酸化ストレスを受けた生体内から作られた未るかを明らかにすることを目的とした．

成熟卵子に体外成熟培養を実施する場合，パラクラインによりMII 成熟が妨げられている可能性が示唆された．本研究の結果から，個体レベル【方法】
2週齢 ICR 雌マウスにアセフェートを投与し，3週齢にて PMSG 7.5IUでの酸化ストレスを受けた場合，HD 法を用いることでマウス卵子の体外成熟培養の核成熟が改善される可能性があると考えられる．

投与，48時間後に頸椎脱臼にて安楽死させ卵巣を採取，未成熟卵子（GV期）を回収した．37 ℃，5% CO2，95%Air の条件下で，12時間体外成【結論】

熟培養を行った．その後，核相の判定を実施し，MitoTracker® Red

アセフェートを高濃度（70mg/kg）マウスに投与することで，MII 成熟

CMXRosを用いて染色を行いミトコンドリアの分布を観察した． 培養方率は低下した．高濃度区において，CD 法（共培養）は HD 法（単培養）と法は，共培養は CD 法：Culture Drop，単 培養は HD 法：Hanging

比較し，MII 成熟率が低下した．ミトコンドリアクラスター形成率は，Drop にて培養を行った．また，アセフェートの投与濃度は，コントロー

CD 法とHD 法に有意な差はみられなかった．
		O-12 主席卵胞は Top quality か？
牧野 いずみ，上代 傑，貴志 真衣，町田 遼介，山根 里歩，
佐藤 善啓，菊池 芙美，江崎 敬

採卵決定時の卵胞径の大きさに順じて主席，次席，三席とした．それぞれの卵胞から得られた卵子を個別に培養し，媒精または ICSIを施行した．
各群における平均卵胞径と穿刺卵胞数あたりの回収率，未熟卵率および変性卵率について 3群間で比較した．また，正常受精数，分割胚数，胚盤胞数，良好胚盤胞数についても同様に 3群間で比較した．

池袋えざきレディースクリニック【結果】
対象患者の平均年齢は 36.2±4.4歳，平均採卵回数は 1.9±1.4回，穿【目的】

刺卵胞数は主席，次席，三席それぞれ 261個ずつ，決定時の平均卵胞径

調節卵巣刺激法では複数の卵胞を発育させ採卵個数を増やすことで，は主席18.3±1.5mm，次席16.9±1.9mm，三席15.8±2.1mmであった．

採卵あたりの成績の向上が図られている．主席卵胞が 18mm 前後に達し

穿刺卵胞数あたりの主席，次席，三席それぞれの卵回収率は 72.8％，

た時点で採卵を行うことが一般的だが，卵胞径が 18mm 前後であっても77.0％，77.4％，未熟卵率は 3.8％，2.7％，4.2％，変性卵率は 9.2％，

良好な卵子が回収できるとは限らない．一方で比較的小さな卵胞からで6.5％，5.7％と3群間で有意な差を認めなかった．また，穿刺卵胞数ああっても良好な卵子が得られることもある．調節卵巣刺激により複数の卵たりの主席，次席，三席それぞれの受精数は 110個，124個，139個と，胞が発育する場合，卵胞径にばらつきがみられることが多々あるが，主三席では主席と比較して受精数が有意に多かったものの，その後の胚発

席卵胞由来の卵子が次席以下の卵胞由来の卵子と比較して最良の卵子と生を見ると，分割胚数は 122個，134個，141個，胚盤胞数は 94個，101個，

言えるかどうか未だ明確にはなっていない．そこで我々は，調節卵巣刺激

99個，良好胚盤胞数は 61個，65個，62個であり，穿刺卵胞数あたりのを行い複数の大小不同の卵胞発育が認められた症例に対し，主席卵胞由胚発生は 3群間で有意な差を認めなかった．

来の卵子が次席以下由来の卵子と比較して良好な卵子であるのかを検討
した．

【結論】

【方法】

であっても，採卵および，その後の胚発生に差は認められなかった．調

12mm ～ 20mm の卵胞であれば，主席，次席，三席のどの卵胞由来
2016年10月～ 2017年6月までに体外受精を行い，12mm 以上の卵胞が節卵巣刺激法で複数卵の採卵をする場合に，主席卵胞から得られた卵子

3個以上確認できた症例のうち，主席卵胞径が 16mm ～ 20mmで採卵決が他の卵胞由来の卵子と比較して Top qualityとは限らないことが明らか定を行った 261周期を対象とした．調節卵巣刺激により発育した卵胞は

となった．

61

一般演題〔口頭発表〕

O-13 患者アンケート結果から見る胚培

養士説明のありかた

岸田 理英，菊地 裕幸，山田 健市，若生 麻美，菅野 弘基，
岸田 拓磨，佐藤 那美，馬場 由佳，結城 笑香，吉田 仁秋
仙台 ART クリニック

【結果】
未経験者・経験者ともに，全ての説明項目で最初のセミナー時の理解度は 50% 以下だったが，OPU 後，D3来院と繰り返し説明を実施することで約80％以上に上昇した．しかし，経験者のD3来院の理解度は OPU
後と比較し，若干低下した．胚培養士説明が自身の治療に役立ったかの設問では，未経験者・経験者ともに約90％で「役に立った」と回答した．
また経験者に対し，D3来院説明を実施していなかった以前と比較して理解度の向上があったかを質問したところ，約80％で「以前よりも理解した」との回答が得られたが，『分割期移植をするか，胚盤胞移植をするか判断する材料がもう少し欲しい』『自分の胚への具体的なアドバイスが欲し

【目的】

かった』
などの要望もあった．

当院では ARTスタート前のIVF 説明会や採卵後に，胚培養士が卵子や受精方法などについて説明を実施しており，2016年11月からは移植や【考察】

凍結胚の決定をする採卵３日後に，患者本人の胚発育状況の説明を始め繰り返し説明を実施することで理解度が上昇し，胚培養士説明が患者た．今回，採卵３日後の説明開始と同時に，患者の治療内容の理解度がの治療において有益であることが明確となった．経験者では D3来院の理どの程度あるのかをアンケート調査し，今後の胚培養士説明をどのように解度が OPU 後と比較して若干の低下が見られたが，未回答者も増加した

実施していくかを検討，考察した．

ことから，胚培養士が経験者へ説明の一部を省略する場合があることが原因として考えられた．また，D3来院で患者自身の胚について説明する【方法】

ことで，以前よりも理解度は上昇したが，質問内容が未経験者と比較して2016年11月から12月の期間，当院にて初めて採卵を経験した患者（以より専門的で，具体的な回答を求める傾向があった．このことから，マニュ

下，未経験者）51名，以前に採卵を経験したことのある患者（以下，経験者）アル通りの説明では患者の理解や納得は得られないことを十分に認識す

49名に対し，採卵3日後に移植や凍結胚の決定目的で来院した際，アンる必要があると感じた．さらに，一人の患者に長時間を費やすことは難し

ケート調査を実施した（回収率 100%）．調査内容は，IVF 説明会（以下，く，いかに分かり易く端的に説明を行えるかを考えたとき，分かり易い資セミナー），採卵後説明（以下，OPU 後），採卵3日後来院説明（以下，料の作成などが必要と考える．今回のアンケート結果から，培養３日目のD3来院）の各タイミングで，患者がどの程度理解があるのかを4段階で評

胚の細胞数別胚盤胞到達率のデータを説明に用いることで患者から高評価してもらった．さらに，胚培養士からの説明が自身の治療に役立ったか

価を得ている．

を調査した．なお移植や凍結胚の決定は，胚培養士説明の後，医師との相談で決定している．

O-14 均衡型染 色体異常症例の着床前診断での胚 盤胞評価や患者背景と胚の染色体異常との関連

中野 達也 1），庵前 美智子 1），佐藤 学 1），中岡 義晴 1），
森本 義晴 2）
1）IVFなんばクリニック
2）HORACグランフロント大阪クリニックの性別及び採卵時の母体年齢別に検討した．
【結果】
発育段階別の染色体正常率に差はなかった（BL3：22.2 ％（6/27），
BL4：23.4％（23/98），BL6：50.0％（2/4））．また，ICM グレード別でも差はなかった（A：30.0％（3/10），B：22.4％（26/116），C：66.7％（2/3））．
さらに，TEグレード別でも差はなかった（A：20.0％（2/10），B：25.6％（20/78），C：22.0％（9/41））．胚齢別では 5日目胚盤胞で 29.1％（24/86），
6日目胚盤胞で 16.3％（7/43）と差はなかった．保因者性別では差がなかった（妻：正常が 24.5％，異常①が 67.0％，異常②が 35.4％，夫：正常が28.6％，異常①が 61.9％，異常②が 52.4％）．採卵時の母体年齢別で差はなかった（34歳まで：正常が 23.2％，異常①が 69.6％，異常②が 33，9％，【目的】
当院では十分なインフォームドコンセントを行った上で日本産科婦人科

35 ～ 39歳：正常が 27.9％，異常①が 60.7％，異常②が 39.3％，40歳
以上：正常が16.7％，異常①が 83.3％，異常②が 58.3％）．

学会の承認を受け，均衡型染色体構造異常の患者を対象に着床前診断を実施している．これまでに実施した 18症例36周期のほとんどを胚盤胞か【考察】

らの栄養膜細胞生検で行っている．そこで本検討では，胚盤胞生検より胚盤胞の発育状態やグレードと染色体の正常性に関連はみられなかっ得られた診断結果と胚盤胞の評価などに関連があるかを後方視的に比較た．しかし，胚齢においては差がなかったものの 6日目胚で染色体正常率

した．

が低く，胚発育の遅延と染色体異常には関連があることが示唆された．
また，保因者の性別の違いによる転座及びその他の染色体異常率に差は【方法】

なく，性別よりは転座部位の違いの方が影響し易いと考えられた．母体

日本産科婦人科学会の承認の得られた均衡型染色体構造異常保因者

年齢において差はなかったものの加齢に伴って転座に起因した染色体異18症例を対象とした．2012年2月～ 2017年6月までに胚盤胞にて着床前常率が増加していた．このことから，加齢により転座染色体の交互分離診断を実施した 36周期129個の胚盤胞を対象とした．その後，診断した以外の分離様式が増加することが示唆された．さらに，その他の異数性

胚盤胞の染色体正常率を胚盤胞の発育段階，ICM 及び TE のグレード，

異常率も母体加齢により増加していることから，近年海外で多く報告され

胚齢別に検討した．また，診断した胚盤胞の染色体正常率及び転座が起ている結果と一致の傾向を示した．

因した異数性異常率（異常①），その他の異数性異常率
（異常②）
を保因者

62

O-15 Assisted hatching 法 の 違 いが胚 盤胞の接着能に及ぼす影響の検討

江副 賢二，上野 智，薮内 晶子，沖村 匡史，内山 一男，
小林 保，加藤 恵一
加藤レディスクリニック

したディッシュで 96時間培養し，タイムラプスシステムにより胚盤胞の孵化率，接着率および Outgrowth 面積を評価した．さらに，培養開始0，
12，18，24 時 間 後 の 胚 盤 胞よりRNAを 抽 出し，qRT-PCR によりIntegrin α5及びβ1の mRNAの発現を解析した．
【結果】
P 群の孵化率は64%であり，Intact 群（10%）と比較し有意に高率であった．P，C および Intact 群における胚盤胞のディッシュへの接着率は，それぞれ 60%，80% および 10%であり，C 群が有意に高かった．またC 群の接着に要する時間は P 群および Intact 群に比べて有意に短かった．
5m 2，C 群で 3.5×10 5μm 2，Intact
Outgrowth 面積は，P 群で 2.1×10 μ【目的】

群で 1.1×10 5μm 2 であり，C 群で有意に増加した．さらに，C 群において，Assisted hatching（AH）はレーザー照射により透明帯を部分的に除培養開始12時間後に Integrin α5 の mRNA 発現量の増加が認められ，去する手法が一般的であるが，透明帯の部分除去がAHとして適切であ

24時間後まで漸増がみられた．一方，P 群および Intact 群においてもるか否かは明白ではない．本実験では，胚盤胞の接着能を体外培養系でIntegrin α5 の mRNA 発現量の増加がみられたが，その発現量は C 群

評価することを目的として，透明帯を部分除去または完全除去した胚盤胞と比較し有意に低かった．またC 群では培養開始24時間後まで Integrinの Outgrowth 現象について比較した．また，胚盤胞の接着時にヘテロ

β1 の mRNA 発 現 量の 継 続 的な 増 加が 認 められたが，P 群 およびダイマーを形成しFibronectinと結合することが報告されているIntegrin

Intact 群においては変化がみられなかった．

α5及びβ1の mRNA 発現を解析した．
【考察】
【方法】

透明帯の部分除去後においても孵化しない胚盤胞がみられ，透明帯の研究への使用に同意が得られた患者の廃棄凍結胚盤胞（n=217）を実験

部分除去は AHの手法として不十分である可能性が示唆された．一方で，に供した．胚盤胞は融解後，レーザー照射により透明帯の 30-40%を部

透明帯の完全除去は胚盤胞におけるIntegrin α5及びβ1の発現を亢進分的に除去し，一部は次いでピペッティング処理により透明帯を完全に除し，Fibronectin 処理をしたディッシュへの接着を促進することが明らか去した（P 群，n=79，C 群，n=79）．また融解後に処置を行わない胚盤となった．これより，胚盤胞へのAH の手法として透明帯の完全除去が胞を対照群とした（Intact 群，n=59）．胚盤胞は Fibronectin 処理を施有用である可能性が示唆された．

O-16 当院における医学的介入による造精機能低下患者の現状

原 利夫，中山 順樹，石川 聖華，向江 真璃
はらメディカルクリニック【結果】
2012年から2016年末までの悪性腫瘍紹介患者数は 441症例（治療開始
前345症例，治療開始後96症例），平均年齢38.3±8.2歳（未成年17.1±2.5歳）当院初診から初回精子凍結保存までの期間・2時間～ 4日程度，紹介患者の疾患分類は上皮性悪性疾患22%，非上皮性78%，平均凍結保存
本数5.9本 /人，廃棄数16症例（本人死亡9・廃棄希望7）凍結精子使用により顕微授精2症例（妊娠に至らず）．
【考察】

【目的】

2012年から2016年末までの紹介患者は 441症例であった．紹介方法は悪性腫瘍に対する治療の進歩に伴いその治療成績が向上してきたものの原疾患の担当医師がネットで当院を検索したり，すでに紹介実績のある担

化学療法，放射線療法などにより造精機能の低下あるいは廃絶が起こりうる当医からの個人的紹介である場合がほとんどである．悪性腫瘍では，第ことも明らかである．このような悪性腫瘍治療による造精機能の低下から将一に疾患の治療が最優先されるため治療に伴う造精機能の低下という副来の挙児希望を確保する方法として各種治療開始前の精子凍結保存が有効次的問題がしばしば看過される．そのため，凍結保存の機会を逸してしである．現在，当院では首都圏の数か所の施設から治療前の精子凍結保存

まったり，治療開始後ですでに造精機能が廃絶してからの紹介も経験すを受け入れており，当院での取り組みと現状を報告する．

る．また，血液悪性腫瘍の場合，診断から治療開始までの期間が短く十分な凍結本数が確保できない，既婚者の場合には，妊娠時期の選択など【方法】
2012年から2016年末までの 5年間の紹介施設数，紹介患者数，平均
年齢，当院初診から凍結開始までの平均期間，疾患別分類，保存期間，

疾患治療（寛解期）の予後なども十分な検討を加える必要がある．原疾患の担当医・カウンセラーなどと密な連携が必要であり，このような長い時間を要する治療には公的な機関の必要性を痛感する．

廃棄数，凍結保存精子を用いた治療成績などを検討した．また，精子凍結保存に関わる諸問題に関しても考察を加えて報告する．

63

一般演題〔口頭発表〕

O-17 精子の運動機能解析結果に基づいた

ARTにおける受精率予測式の樹立

横田 梨恵 1），江夏 徳寿 2），古橋 孝祐 1），岸 加奈子 1），
松田 彩花 1），辻 優大 1），松本 由紀子 1），苔口 昭次 1），
塩谷 雅英 1）
1）英ウィメンズクリニック
2）神戸市立医療センター西市民病院

乗検定で解析した．続いて，単変量解析にて有意と考えられた因子を用
いて重回帰分析を行った．因子の選択には変数増加法を用い，得られた因子をもとに回帰係数を求め受精率予測式を作成した．同様の検討を
ICSI 症例についても行い，受精率予測式の作成を試みた．得られた予測式の正確性を検討するため，2016年11月～ 2017年3月に IVF を行った
1,013周期のデータを用いて前向き検討を行った．
【結果】
単変量解析において，直線速度，運動率，精子濃度，高速運動精子濃度，
夫年齢，頭部振動数および対数変換後の曲線速度，総運動精子数，SMV，採卵数において受精率と有意な相関を認めた．これらの因子を用いた重回【背景】

帰分析では，採卵数，SMV，曲線速度，頭部振動数が受精率を予測する

不妊治療における精液検査において，精子濃度・運動率などが評価の独立した因子と考えられ，これに回帰係数をかけ合わせ予測式 =44.65 -対象とされるが，精子の運動の質についてはあまり評価されていないのが15.56*log（eggs）+ 16.23*logSMV + 4.34*VCL + 5.0*FLHという式を得た．

現状である．今回我々は，精子の運動の質的評価ができるSMAS（Sperm

前向き検討では，予測式で得られた予測値と実際の受精率で高い相関を確

Motility Analysis System）を用い解析した精液所見と，ARTにおける認できた（P<0.001；ピアソンの相関係数検定）．ICSI 症例では，重回帰分

受精率との関係を解析することで，受精に関与する因子を同定し，それ析にて受精率と有意な相関を確認できる因子は存在せず，予測式は成立しらの因子を用いてARTの受精率を予測する予測式の樹立を目指した．

なかった．

【方法】

【考察】

当院にて 2016年 6月～ 10月に IVFを行った症例の内，SMAS にて精

IVFにおいて，受精率は精子の数だけでなく運動の質も関与する事が液検査を行った 898周期を検討対象とし，得られた精液所見と夫婦の年確認された．精液所見と採卵数より求めた受精率予測式は IVFの受精率

齢，血中AMH 値，採卵数，ART 回数を加えて解析を行った．はじめを予測する指標として有用であると考えられた．一方で ICSIの受精率は精に単変量解析にて各因子と受精率との相関を解析した．第１段階として

液所見に依らないと考えられた．このことは，IVFで受精の可能性が低い

決定係数 R ２>0.3をもって有意な因子とし，一部の因子については対数変と考えられた症例でもICSIなら受精できるという事を示唆しており，予測換後の結果を用いた．第2段階として，決定係数では有意な相関を認めな式の運用に意義を持つと考えられた．

いと考えられた因子について閾値を設定し閾値前後での受精率をカイ二O-18 ヒト体外受精における新たな精子調整液の検討

久原 早織，泊 博幸，國武 克子，内村 慶子，竹原 侑希，
下瀬 瞳，荒牧 夏美，吉永 菜都美，橘高 真央，日高 直美，
西村 佳与子，本庄 考，詠田 由美
アイブイエフ詠田クリニック

ベ ー シ ョン の 指 標 の 一 つ で あ るフ ラクタル 次 元 D 値（D=log(n)/{log(n)+log(VSL/VCL)}）を求め評価した．
【結果】
検討１：患者背景と精子調整前後の所見に有意差は無かった．IVF周期における従来群とOGS 群の正常受精率は，各68.6%, 77.6%，分割率は，各99.0%, 97.4%，Day2 良好胚率は，各37.5%, 49.8%，胚盤胞率は，各58.3%, 63.6%であり，正常受精率とDay2良好胚率が OGS 群で有意に高かった
（p < 0.05）．検討２：同一症例の精液を等量にわけ検討を行ったため，両群における精液所見に差はない．また，精子調整後の総精子【目的】

数，総運動精子数，精子運動率も両群間に有意差はなかった．精子調
整後0, 1, 2, 3, 4, 5, 6時間での精子機能を評価した結果，直線速度，曲近年，ヒト体外受精における精子調整は，運動良好精子の回収だけで線速度，平均速度，頭部振幅，頭部振動数は両群間に有意差はなかった．

はなく，精子の生理的機能に関しても注目されている．本研究は，生体

直進性は 4時間以降で OGS 群において有意に低かった（p < 0.05）．直線

内での精 子の生理的 環 境を模した ORIGIO® Gradient SystemTM

性は 5時間以降で OGS 群において有意に低かった（p < 0.05）．フラクタ(OGS)に着目し，その臨床的有用性を検討した．

ル次元 D 値は 5時間以降で OGS 群において有意に高かった（p < 0.05）．

【方法】

【考察】

検討１：2016年2月から10月までの期間に当院にて実施したconventional-

OGS 群において IVF周期の正常受精率とDay2良好胚率が有意に高IVF 87 周期を対象とした．精子調整液は，80% Percollを使用した周期（従かったことより，IVF周期の精子調整には運動良好精子の分離だけでは来群）とOGSを使用した周期（OGS 群）の2群に無作為に割り付けした．精なく精子機能を考慮した手法が有用であり，OGS の臨床的有用性が示唆

子調整方法は，密度勾配遠心法により成熟精子を回収し，その後swim-up

された．また，当院においては，ハイパーアクチベーションの指標の一つ

法により運動良好精子を回収し媒精に供した．媒精から18時間以内に受精となるフラクタル D 値が高くなる精子調整処理後4-5時間に媒精している確認を行い個別に培養した．両群の受精率と胚発生能を比較した．検討２：

ことから，媒精時の精子のハイパーアクチベーション率が受精や胚発育

精子自動分析装置（CASA）を用いて，従来群とOGS 群の精子運動機能をの改善に繋がっているのではないかと考えられた．

評価した．運動機能の評価には，CASAの評価項目に加えハイパーアクチ

64

O-19 EmbryoScope＋™は魅 力的なバージョンアップをした

菊本 晃代，渡邉 英明，長谷川 久隆，塚本 佳奈，
鈴木 亮祐，小林 充，石橋 和見，京谷 利彦，河田 真智子，
齋藤 優，小林 淳一
神奈川レディースクリニック

126周期，成熟卵1213個を対象とした．媒精後同一患者の胚を 2群に分け ES，ES+にて培養を行った．検討１）ES 群，ES+ 群とし，D3良好胚率，D5胚盤胞到達率，D5良好胚盤胞率，D6胚盤胞到達率を比較した．
検討２）ES 群，ES+ 群をそれぞれ患者年齢が 40歳以下と41歳以上に分け D3良好胚率，D5胚盤胞到達率，D5良好胚盤胞率，D6胚盤胞到達率を比較した．
【結果】
検討１）D3良好胚率，D5胚盤胞到達率，D5良好胚盤胞率，D6胚盤
胞到達率は ES 群で 69.4%，64.1%，39.8%，9.2%，ES+ 群で 70.1%，【目的】

67.6%，41.1%，6.5%でありESとES+ の培養成績に有意差は認められ

近年，タイムラプスインキュベーターの有用性数多く報告されている．当なかった．検討２）D3良好胚率，D5胚盤胞到達率，D5良好胚盤胞率，

院でも2015年よりEmbryoScopeＴＭ（ES）を 2台導入し全周期において D0

D6胚盤胞到達率は 40歳以下 ES 群，ES+ 群で各成績に有意差は認めら～ D1の期間培養することで見逃されていた早期前核消失胚も観察でき，れなかった．41歳以上 ES 群で 71.3%，56.7%，24.7%，4.0%，41歳以

受精率が向上することを報告した．2017年より新たに EmbryoScope+ＴＭ

上 ES+ 群で 73.3%，61.6%，39.4%，4.0% でありD5良 好胚 盤 胞のみ（ES+）を5台導入し，全周期全培養過程をタイムラプスインキュベーターにES+ 群が有意に高い値となった．

より培養可能とした．ES+は ESと比較して2倍以上の15症例，各16胚（最大240胚）を培養することが可能になっている．さらには扉開閉時にも必要【考察】

なディッシュのみが開口部に移動する構造になり培養スペースへの空気の

今回の検討では両タイムラプスインキュベーターの全体としての培養成流入を抑え，培養環境の変化をより軽減する設計となった．今回 ES から績に有意な差は認められないものの少なくともES+ は ESと同等もしくはES+への移行に際し両インキュベーターの培養成績を比較検討した．

同等以上の培養環境を作ることができることが示された．また，ES+ は培養可能な症例数，培養胚数ともに ESよりも増加し，培養環境を保つ【方法】

ための CO2flow，N2flowも減少していた．このことからES+ は ES に2017年1月～ 3月の間に ICSI 施行時に MⅡが 6個以上得られた症例，
または cIVFにて5時間の短時間媒精後に 2pb 胚が 6個以上得られた症例，

O-20 第一卵割異常由来の胚盤胞では第一有糸分裂に要する時間が長くなる

宮本 麻梨恵 1），中野 達也 1），佐藤 学 1），橋本 周 1），
中岡 義晴 1）， 森本義晴 2）
1）IVF なんばクリニック
2）HORAC グランフロント大阪クリニック

比較しコストパフォーマンスも向上したと考えられ，有用なバージョンアップを行ったと考えられる．

認めた正常卵割胚（cIVF:153個，ICSI:195個）と，第一卵割で 3細胞以上を認めた異常卵割胚（cIVF:47個，ICSI:50個）に分け，授精方法別に授精操作後から前核消失（tPNf）/第一卵割開始（t2s）/第一卵割終了（t2e）の時間及び，tPNf-t2s/t2s-t2e の所要時間を後方視的に解析した．
【結果】
正常および異常卵割胚を比較すると，cIVF では胚盤胞到達率（77.7%
vs. 35.9%），良好胚盤胞率（35.5% vs. 6.1%）となり，ICSI では胚盤胞到達率（62.3% vs. 21.1%），良好胚盤胞率（25.9% vs. 2.5%）となり，ともに異常卵割胚で低率であった．また，各所要時間を比較すると，cIVF【目的】

では tPNf（正常卵割胚 :23.8h vs. 異常卵割胚 :24.5h），t2s（25.4h vs.

我々はタイムラプスを用いた動的解析により，異常卵割胚は正常卵割胚26.4h），tPNf-t2s（1.7h vs. 1.9h），t2e（28.5h vs. 31.8h），t2s-t2e（3.1hに比べて発育速度が遅延し，胚盤胞到達率および臨床妊娠率が著しく低

vs. 5.4h）で差が認められた．一方，ICSI では tPNf
（22.6h vs. 22.9h），

下するが，胚盤胞形成胚の着床率は正常卵割胚と変わらないことを報告

t2s（24.3h vs. 24.6h），tPNf-t2s（1.7h vs. 1.7h）
で差がなく，t2e（27.6hした．しかし，異常卵割由来の胚盤胞は正常卵割胚に比べ，染色体異常vs. 30.5h）とt2s-t2e（3.3h vs. 5.9h）
でのみ差が認められた．

率が高いことが報告されている．そこで，染色体分配の異常の影響がより大きいと考えられる第一有糸分裂に着目し，胚盤胞まで発育した正常卵
割胚と異常卵割胚の前核消失から第一卵割終了までの各時間を比較し，第一卵割の異常が発育速度に及ぼす影響を検討した．

【考察】
採精方法の違いに関わらず，異常卵割胚では第一卵割所要時間（t2st2e）が最も延長した．胚盤胞形成を認めた異常卵割胚であっても，第一有糸分裂で何らかの障害を及ぼしていることが示唆された．このことから，【対象と方法】

異常卵割胚由来の染色体異常率の増加は，第一卵割時の染色体分配や2014年2月から2015年12月に cIVF または ICSIを施行した後，Primo

紡錘体のチェックポイントの異常が一要因ではないかと考えられた．よっ

Visionを用いて5日間培養し，胚盤胞形成を認めた 107周期を対象とした．

て，異常卵割由来の胚盤胞を移植するしかない場合は，十分な説明の上

胚盤胞形成胚445個を，第一卵割において2細胞かつ第二卵割で4細胞をで行う必要がある．						

65一般演題〔口頭発表〕

O-21 Rescue-ICSI における紡錘体観

察は有用か？

古川 悦子，小林 充，渡邉 英明，長谷川 久隆，塚本 佳奈，
鈴木 亮祐，石橋 和見，菊本 晃代，京谷 利彦，齋藤 優，
小林 淳一
神奈川レディースクリニック【結果】
r-ICSI 時における紡錘体観察の結果，可視卵子は 86.6%（246/284），
不可視卵子は 13.4%（38/284）であった．正常受精率は，可視卵子77.2%（190/246），不可視卵子44.7%（17/38）であり，可視卵子において有意に高い結果となった．一方，多前核率は，可視卵子12.2%（30/246），不可視卵子28.9%（11/38）であり不可視卵子において有意に高い結果となった．
D5胚盤胞発生率は可視卵子46.9%（83/177），不可視卵子12.5%（2/16）
であり可視卵子において有意に高い結果となった．
【考察】
今回の結果から，紡錘体不可視卵子への r-ICSIの施行は可視卵子に【目的】

比べ多前核胚作出のリスクが高く，D5胚盤胞発生率も低いが，正常受精

Rescue-ICSI（r-ICSI）は，c-IVFにおける完全受精障害を回避する率も44.7%であり，施行の可否を正確に判断するのは難しいと考えられた．

方法として有用であることが知られている．しかし，人為的な多前核胚作一方，紡錘体可視卵子への r-ICSIの施行は正常受精卵を得られる可能出のリスクを伴うため c-IVF 後の受精の兆候の確認には，第2極体のみな性が高く，D5胚盤胞発生率も良好であるが，多前核胚の人為的作出を完らず，fertilization corn や cytoplasmic flareをあわせて観察する方法

全に回避することはできなかった．以上のことから，第2極体が観察されが報告されている．当院では，第2極体の有無のみを r-ICSI 施行の指標ない卵子において紡錘体の有無は r-ICSI 施行の完全な指標にはなり得としているが，r-ICSI 施行時には同時に紡錘体の観察を行っている．本ないことが示唆され，今後はより正確で安全な r-ICSI 施行のためにさら検討では r-ICSIの成績を後方視的に解析し，紡錘体の有無が r-ICSI 施

なる検討が必要であろうと考えられた．

行の指標となり得るか否かを検討した．
【方法】
2016年1月から2017年5月までに当院にてr-ICSIを施行した 105症例を対象とした．媒精後5時間で第2極体の確認を行い，その後1時間経過ごとに最大8時間まで確認した後，第2極体が観察されない卵子が 50% 以下の症例に対してr-ICSIを施行した．その際，オリンパスIX-ROBOpolarを用いて紡錘体を観察し，紡錘体が観察できた卵子（可視卵子）と紡錘体が観察できなかった卵子（不可視卵子）における正常受精率，多前核率，
D5胚盤胞発生率の比較を行った．

O-22 rescue ICSI の臨床的有用性
長谷川 久隆，渡邉 英明，鈴木 亮祐，塚本 佳奈，
石橋 和見，菊本 晃代，京谷 利彦，小林 充，河田 真智子，
齋藤 優，小林 淳一
神奈川レディースクリニック

胚盤胞移植とconventional ICSI
（c-ICSI）由来凍結融解胚盤胞移植の妊娠率を比較検討した．
【結果】
c-IVF を施行した 161周期，総 M2卵子916個のうち 537個に対し媒精から 7 〜 8時間後に 1PB と判定し r-ICSI を施行した．r-ICSI 施行後の成 績 は， 受 精 率70.8%（380/537）， 多 前 核 率15.6%（84/537），分割率98.2%（373/380），Day3良好胚率46.1%（172/373），Day5胚盤胞率38.7%（128/331），Day5良 好 胚 盤 胞 率19.9%（66/331），Day6胚 盤 胞 率16.9%（56/331），総胚盤胞率55.6%（184/331）であった．r-ICSI 由来凍結融解【目的】
当院では，全 c-IVF 施行症例に対し，媒精後5時間で 2PB 放出の確

胚盤胞移植の妊娠率は 53.5%（23/43），c-ICSI 由来凍結融解胚盤胞移植の妊娠率は 38.1%（494/1298）
で，有意差は認められなかった．

認を行っている．その後1時間毎に再確認を行い，最終的に 8時間後まで確認を行い2PB 放出率が 50％以下の症例に対してrescue ICSI
（r-ICSI）
を施行し，低受精および完全受精障害の防止に取り組んでいる．

【考察】
多前 核形成の原因が多精 子 受 精によるものと断定はできないが，本検討では，r-ICSI 適応となった症例の胚利用率の変化と，凍結融

r-ICSI 施行後の多前核率は高率であった．また，媒精当日2PB の放出に

解胚移植における妊娠率を算出しr-ICSIの臨床的有用性を検討し報告す

より受精すると予測した卵子の 24.0%（91/379）が，翌日の観察で未受精る．

であった．これらのことから，2PBを基準とする受精予測は精度をさらに上げる必要があると考えられる．しかし，現在の精度での r-ICSIによっ【方法】ても，施行しなかった場合（未受精が予測される卵子を放置した場合）に

2015年1月から2016年12月までの c-IVF 施行症例のうち，r-ICSI 適応

対し，受精卵獲得数は 2.5倍，総胚盤胞獲得数は 2.4倍，Day5良好胚となった 161周期について，r-ICSI による受精率，多前核率，分割率，

盤胞獲得数は 1.9倍に上昇し，胚利用率の向上に寄与することは明白であ

Day3良好胚率，Day5胚盤胞率，Day5良好胚盤胞率，Day6胚盤胞率，る．また，凍結融解胚移植により，c-ICSI 由来胚盤胞と比較し同等の総胚盤胞率から，胚利用率を算出した．さらに，r-ICSI 由来凍結融解

妊娠率を得られた．以上のことから，r-ICSIは臨床上非常に有用である
ことが示唆された．

66

O-23 卵胞 液に暴露した精 子を用いた

ICSI

町田 遼介，貴志 真衣，上代 傑，山根 里歩，佐藤 善啓，
菊池 芙美，江崎 敬
池袋えざきレディースクリニック

症例を対象に卵胞液暴露前後の精子の曲線速度を SMASで測定した．
次に，成熟卵が 2個以上得られた 47周期の 281個の卵子を対象に，同一周期を暴露群と非暴露群に分けて ICSIを行い，受精率，胚発生率の比較を行った．
【結果】
精子の曲線速度は卵胞液暴露処理前112.2±28.4μm/ 秒に対して，処理後の暴露群，非暴露群はそれぞれ144.4±21.4μm/ 秒，134.5±22.6
μm/ 秒であり，処理の前後で有意な増加が認められた．さらに，暴露群，非暴露群間でも暴露群が有意に増加しており，暴露群で Hyper Activation【目的】

がより増強される結果となった．暴露群，非暴露群の正常受精率は体内の受精過程において，精子は卵胞液や卵丘細胞と接触し，これら

68.9%，77.4%，分割率は 70.4%，80.1%，胚盤胞形成率は46.7%，58.2%，に含まれるHCO ３－やAlbuminの様な成分によって受精能を獲得し，受良好胚盤胞形成率は 33.3%，34.2%であり，全てにおいて両群間に有意精へと至る．一方 ICSI では，精子は卵胞液や卵丘細胞とは接触せずにな差は認められず，ICSIの成績は向上しなかった．

受精へと至る．この点が体内とICSIの受精過程における大きな相違点である．そこで，卵胞液に精子を暴露し，ICSIの受精過程を体内の受精【考察】

過程に近づけ，体内の受精機序を再現し，精子の更なる受精能獲得を促

精子を卵胞液に暴露することで Hyper Activationの増強が確認されすことで，ICSIの成績が向上するか検討した．なお，可視化の容易なたが，卵胞液に暴露した精子を用いた ICSI では受精，胚発生の成績向Hyper Activationを受精能獲得の指標とした．

上は認められなかった．原因として，培養液自体にもHCO３－や Glucose，Albuminなどが含まれており，培養液のみである非暴露群でも十分な【方法】

Hyper Activation が惹起されたことや，そもそもHyper Activation自密度勾配遠心法とswim up 法により回収した精子を卵胞液に 30分間

体が ICSIにおける受精に必須の現象でないことなどが考えられる．この暴露した．卵胞液に暴露した精子を暴露群，暴露しなかった精子を非暴ため，精子を卵胞液に暴露してもHyper Activationを増強するのみで，

露群（対照群）とした．Hyper Activationの発現を確認するために，39

受精や胚発生の成績向上には寄与しなかったと考えられる．

O-24 Piezo-ICSI における紡錘体の可視／不可視が受精及び胚発育へおよぼす影響平岡 謙一郎 1,2,3,4），
伊林 恵美 1），
齋藤 雅人 1），
資延 優梨 1），
2）
1）
3,4）
大塚 喜人 ，川原 麻美 ，石川 智則 ，川井 清考 1,2,3,4），
原田 竜也 1）
1）亀田 IVFクリニック幕張 生殖医療科2）亀田メディカルセンター 生殖医療科
3）東京医科歯科大学 産婦人科
4）国立研究開発法人 日本医療研究開発機構

を使用した．精子の選別は倍率1,200倍下にて行い，不動化処理を行った後，Piezo-ICSIにより卵細胞質内へ精子を注入した．採卵から 4時間後に行った偏光観察による紡錘体観察の状況から下記の3群に分けた．
・紡錘体（＋）群：ICSI 時，紡錘体が可視化出来た卵子
・紡錘体
（－）→
（＋）群：ICSI 時，紡錘体が不可視で 30-90分の追加培
養後に紡錘体が可視化出来た卵子・紡錘体（－）群：ICSI 時，紡錘体が不可視で 120分の追加培養後も紡錘体が不可視であった卵子
上記3群のPiezo-ICSI後の正常受精率と3日目良好胚率を比較した．尚，
正常受精は顕微授精18時間後に 2前核を認めたもの，3日目良好胚は採卵
3日目に7細胞以上で等分割，フラグメンテーションの割合が 15% 以下の胚と定義した．
【結果】【目的】

第一極体を放出していた 366個の卵子のうち，紡錘体（＋）／（－）→（＋）

ICSI 時に偏光観察による卵子の紡錘体の状況（可視／不可視）が卵／（－）であった卵子の内訳はそれぞれ 93.8%（315/336），2.4%（8/336），子の受精，胚発育へ影響をおよぼすことが多く報告されている．しか

3.9%（13/336）であった．紡錘体（＋）／（－）→（＋）／（－）群のPiezo-

し，これらの報告は conventional-ICSI に限られており，Piezo-ICSIICSI 後の正常受精率はそれぞれ 91.4%（288/315），75.0%（6/8），23.1%

において偏光観察による紡錘体の可視／不可視が受精及び胚発育へお（3/13）であった．紡錘体（＋）／（－）→（＋）／（－）群の3日目良好胚率はよぼす影響を調べた報告はない．そこで我々は，Piezo-ICSI におい

それぞれ 64.2%（185/288），66.7%（4/6），0%
（0/3）
であった．

て偏光観察による紡錘体の可視／不可視が受精及び胚発育へおよぼす影響を調べた．

【考察】

【方法】

視／不可視は受精及び胚発育へ影響をおよぼし，紡錘体が不可視の状態

今回の検討結果より，Piezo-ICSIにおいて偏光観察による紡錘体の可2016年5月から2017年6月までの間，当クリニックにおいて Piezo-ICSI

では受精率は低く，胚発育は不良であった．また，紡錘体が不可視であっを行った 74症例89周期から採取した卵子のうち，採卵から3時間後の卵ても，紡錘体が可視化出来る状態まで待って ICSIを行うことで卵子の受丘細胞除去時に第一極体を放出していた 336個の卵子を対象とした．倒

精及び胚発育を改善出来ることが示唆された．今後，症例を追加して偏立顕微鏡は IX-73（オリンパス），紡錘体観察には IX-3-ICSI（オリンパス）

光観察が Piezo-ICSIの成績を改善するのか詳細に検討する必要がある．

67

一般演題〔ポスターセッション〕
P-1

2種類のSingle mediumを用いた胚培養成績の比較検討

阿部 礼奈，角本 知世，古橋 孝祐，辻 優大，岩﨑 利郎，
伊藤 宏一，水澤 友利，松本 由紀子，苔口 昭次，
塩谷 雅英
英ウィメンズクリニック

を受精判定以降 Origio 社の SAGE 1-StepとLife Global 社の global（1%HSA）の2種類の培養液にランダムに分けて培養し，分割率，分割期良好胚率，胚盤胞発生率，良好胚盤胞率を検討した．
【結果】
SAGE 1-Step 群（2PN=655個 ）とglobal 群（2PN=662個 ）の 分 割 率（98.6% vs 97.7%），分割期良好胚率（52.6% vs 53.0%），および胚盤胞発生率（53.9% vs 50.1%）では両群間に差は見られなかったが，継続培養胚当たりの良好胚盤胞率（26.7% vs 19.9%）と，胚盤胞当たりの良好胚盤胞率（49.5% vs 39.8%）は SAGE 1-Step 群で有意に高くなった（P<0.05）
．

【目的】

【考察】

ムコ多糖類であるヒアルロン酸を培養液に添加することで胚着床率の向ヒアルロン酸は，卵胞液，卵管分泌液そして子宮腔液にも存在すること

上が報告されているが，胚発生そのものに促進効果があるかについてはが報告されていることから，培養液に添加することでより自然に近い環境でいまだ十分な知見が無い．そこで今回，ヒアルロン酸含有を特徴とする胚を培養できる可能性がある．本検討において，ヒアルロン酸を含有する

Origio 社の SAGE 1-Stepと，ヒアルロン酸を含有しない従来の培養液

SAGE 1-Stepは，胚盤胞発生率には差がないものの，良好胚盤胞率を向の培養成績を比較検討したので報告する．

上させることが示唆された．ヒアルロン酸は粘性を有し，細胞に対して物理的保護作用を持っていることがその理由の一つと推測される．今後，培養【方法】

液に添加されたヒアルロン酸の効果メカニズムについての詳細な解析が必2016年11月から2017年2月に当院で採卵を行い，受精判定時に 2PNが要と考える．

4個以上得られた 195症例（2PN=1，317個）を対象とした．得られた 2PN

P-2

新たな精子調整 液を用いた授精
方法別の胚発育の検討

山下 奈緒美 1），永田 弓美子 1），矢田 咲子 1），佐藤 学 1），
橋本 周 1），中岡 義晴 1），森本 義晴 2）
1）IVFなんばクリニック
2）HORACグランフロント大阪クリニック

培養胚は分割期，又は胚盤胞期にて移植・凍結に用いた．まず，（1）精子調整液毎に分け，培養成績の比較を行った．更に，授精方法別
〔（2）
c-IVF
（57症例772個）（3）ICSI（66症例781個）〕での精子調整液毎に分け，それぞれの受精率・分割率・Day5胚盤胞率・Day5良好胚盤胞率（Gardner
分類3BB 以上）を比較した．
【結果】（1）精子調整液毎の成績 : 分割率では差はなかったが，受精率［Isolate
群 :77.4%（419/541）vs. Gradient 群 :73.2 ％（616/841），p ＜0.01］に
おいて Isolate 群で高く，Day5胚盤胞率［42.3%（101/239）vs. 59.0％（252/427），p ＜0.01］，Day5良好胚盤胞率［12.1%（29/239）vs. 19.2％【目的】（82/427），p ＜0.05］においてGradient 群で高くなった．
（2）c-IVF: 全

現在，当院では体外受精の精子調整に密度勾配遠心法を行っており，ての検討項目で差はなかった．
（3）ICSI: 受精率，分割率で差はなかっ

試薬にIsolate（Irvine）を用いている．生体内での精子の生理環境を模したが，Day5胚盤胞率［39.2%（58/148）vs. 61.9%（146/236），p ＜0.05］，

た Gradient SystemTM（Origio）を用 いて，conventional-IVF（ 以下

Day5良好胚盤胞率［9.5%（14/148）vs. 16.9%（40/236），p ＜0.05］におc-IVF），又は ICSIを施行し，それぞれの培養成績の比較検討を行った．

いてGradient 群で高くなった．

【方法】

【考察】

2015年10月から2016年2月に当院で体外受精を行った 123症例1,553個

Gradientの pHは精液の pHに近い為，精子処理から回収時・c-IVF・の卵子を対象とした．Isolate 又は Gradientを用いて二層法による密度

ICSI 施行時までの精子の状態を生理的に良好な状態に保つことができる

勾配遠心法で 300g ，20分実施後，ペレットを培養液に懸濁し，10分間という利点がある．その為，精子調整後に回収した精子の正常形態率が遠心洗浄処理を行った．swim-up（c-IVF:30分間，ICSI:5分間）を行い，増加した可能性がある．

精子を回収，媒精濃度150万/mLでの c-IVF，又は ICSI を実施した．

68

P-3

精液処理法がARTへ及ぼす影響について

大川 莉歩，
藤田 陽子，
鈴木 望文，
浅見 真依，
知念 日菓利，榎本 恵，石井 鈴奈，濱田 道子，堀川 道晴，武谷 雄二
ウイメンズ・クリニック大泉学園

あった．それぞれの方法にて運動精子回収し，顕微授精（以下 ICSI）もしくは通常体外受精（以下con.-IVF）に用い，精液処理法別に受精率，胚盤胞到達率，良好胚盤胞発生率を比較した．また回収した精子を 3 時
間培養後，精子 DNA 断片化率を比較した．統計はχ2乗検定，一元配
置分散分析を用い，p<0.05を有意差有りとした．
【結果】
ICSI 症例における遠心 /swim-up 法，Isolate/swim-up 法の受精率は78.4％，74.7 ％であり差は認めなかったが，胚盤胞到達率は 33.0 ％，
56.5％，良好胚盤胞到達率は 25.0％，48.2％であり，いずれもIsolate/【目的】

swim-up 法において有意に高い値となった（p<0.05）．con.-IVF 症例で高度生殖医療（assisted reproductive technology；ART）では，射は，それぞれ，受 精率は 49.6 ％，66.2 ％，胚 盤 胞到達 率は 33.1％，

出精液中から運動精子を回収して媒精に用いる．精子の質の低下は，受61.2％，良好胚盤胞到達率は 26.5％，51.4％であり，これらすべてにお精やその後の胚発生能に負の影響を及ぼすことから，良好な精子を効率

いて Isolate/swim-up 法で有意に高い値となった（p<0.05）．遠心 /swim-

的に回収して媒精に用いることが必要である．精子回収法は，一般的に，

up 法，Isolate/swim-up 法で回収した精子の 3時間培養後の TUNEL

遠心法，密度勾配遠心法（以下 Isolate 法），swim-up 法が用いられてい陽性率は，それぞれ10.3±0.05%，1.2±0.01%であり，Isolate/swim-

るが，これらの方法を組み合わせることでより質の良い精子を回収し，媒up 法において有意に低い値となった．

精に用いることができるのではないかと考えた．そこで今回の検討では，
swim-up 法 の 前 に 遠 心 を 行う遠 心 /swim-up 法と，Isolate を 行う
Isolate/swim-up 法を用いて精子を回収し，ARTへの影響について検討
を行った．

【考察】
ICSI，con-IVFともに Isolate/swim-up 法を行った症例は，胚盤胞率，
良好胚盤胞到達率が有意に高かった．Isolate 法は精子のDNA 断片化
率が低いことから，選択的に成熟精子を回収し，精漿中の死滅精子や白【対象・方法】
対象は，2010年1月から2017年3月までに，当院でARTを施行し，女性年 齢が 39歳以下，ART 施行回数3回目以下の症例とした．遠心 /血球等をより効率的に除去することができる手法であると考えられる．その結果より質の良い精子の回収が可能となり，ART の成績向上につながったと解釈される．

swim-up 法を行った症例は 150症例，Isolate/swim-up 法は 787症例でP-4

当院における初診患者の受診1年後の転帰

饒平名 里美 1），一色 納菜子 1），小林 亮太 1），水野 里志 1），
井田 守 1），福田 愛作 1），森本 義晴 2）

1）IVF大阪クリニック
2）HORACグランフロント大阪クリニック

ミング療法は，超音波検査を実施し医師の指導のもと夫婦生活を持った周期とした．
【結果】
各年齢層が占める割合は A 群：12.5%，B 群：33.0%，C 群：34.2%，
D 群：20.4%， 治 療 の 継 続 率 は A 群：78.9%，B 群：84.3%，C 群：
88.0%，D 群：81.1%であった．一般不妊治療を実施した 661組のうち138 組 が 妊 娠 卒 業し， 卒 業 率 は A 群：28.9%，B 群：24.4%，C 群：
18.3%，D 群：4.6%で D 群において有意に低かった（P<0.05）．一方，体外受精を実施した患者は 522組，胚移植を実施した453組のうち185組が妊娠卒業した．卒業率は A 群：47.2 %，B 群：50.4 %，C 群：42.3 %，【目的】

D 群：13.7 %で D 群において有意に低かった（P<0.05）．また，体外受精

近年，女性の社会進出に伴う晩婚化や生活習慣などの要因から，不妊の卒 業率（35.4%）は一 般 不 妊 治 療（15.3%）に 比べ 有 意に 高か った治療を受ける患者は年々増加している．当院の妊娠による卒業者数は年（P<0.001）． 全ての 治 療 を 合 わ せ た卒 業 率 は A 群：35.4 %，B 群：

間約800組に上るが，その治療期間や治療方法は様々である．一方で長35.7%，C 群：31.9 %，D 群：12.1 %であった．

期にわたり治療を繰り返す患者も多く，治療長期化は患者の経済的および精神的な負担を増加させている．これまで治療開始から妊娠卒業まで【考察】に要した期間を調査した報告はあるが，特定の期間内における初診患者

年齢層別患者数は B・C 群が多く，治療を継続した患者の割合は C 群の治療の転帰を調査した報告は少ない．そこで，我々は一定期間内の治において最も高いことから 35 ～ 39歳が積極的に治療に取り組む年齢層

療転帰を年齢および方法別に比較検討した．

であると考えられる．また，一般不妊治療と体外受精の卒業率はどちらもD 群において有意に低く，日本産婦人科学会のデータと同様の傾向を【方法】認めた．この結果から一般不妊治療，体外受精ともに妊娠成立は女性患

2015年4月～ 2016年3月の初診患者1,293組を調査対象とした．初診年

者年齢に依存している．一方，全ての治療をあわせた卒業率は A 群・B 群・

齢をA 群：29歳以下，B 群：30歳～ 34歳以下，C 群：35歳～ 39歳以下，

C 群では差を認めなかったことから不妊治療は 39歳までに終了すること

D 群：40歳以上の 4群に分類し初診日から一年間の治療歴を比較した．

が望ましい．またいずれの年齢においても体外受精の卒業率の方が一般

治療は一般不妊治療（タイミング療法・人工授精）および体外受精に分け，不妊治療より高率であるので，妊娠を急ぐ場合は体外受精を受けることが総来院回数が 5回未満の患者はドロップアウト症例と判断した．またタイ早道と考えられる．

69

一般演題〔ポスターセッション〕

P-5

検卵時における培養 液中の温度変化について山田 健市，菊地 裕幸，若生 麻美，菅野 弘基，岸田 拓磨，
岸田 理英，佐藤 那美，馬場 由佳，結城 笑香，吉田 仁秋
仙台 ART クリニック

ルピペットに培養液少量を吸引した場合と，プール用として 35mmディッ
シュに培養液5ml 入れ，蓋ありとなしで培養液の温度を測定した．
【結果】
検討1：測定開始直後，1，3，5，10分後の培養液における平均温度は，60mmディッシュ；5ml では，36.4，34.0，32.3，31.6，31.1℃となり，10mlでは，36.7，35.6，33.4，32.2，31.1℃となった．また，90mm ディッ
シュ；5ml では，32.7，29.8，29.4，28.5，28.4 ℃となり，10ml では，
34.2，31.9，30.2，29.6，28.3℃となった．液量に関わらず 90mmディッシュの方が温度は約2 ～ 3℃低下した．検討2：ピペット内の培養液の温【目的】

度は，27.1，25.9，25.4，26.0，26.3℃となり，35mm ディッシュ；5ml

卵子，胚における温度低下は，紡錘体の不可逆的な形状変化を起こすの蓋ありでは，36.6，36.4，36.1，35.7，35.7 ℃となり，蓋なしでは，ことが報告されており，高温下では変性を招く可能性がある．そのため，

36.9，36.2，35.0，34.2，33.2℃となった．ピペット内の培養液温度が検卵，培養時における培養液中の温度を適温に保つことは卵子，胚にとっ28℃以下と低下し，35mmディッシュで蓋をした場合，35℃以上の温度て非常に重要である．当院では検卵時，卵子をパスツールピペットでピッを保つことができた．

クアップするため，37℃の気温下で実施しない限り温度低下は免れない．
そこで，本研究では検卵時で使用される事が多い 60mm，90mmディッ【考察】

シュの温度変化について，また，ピペット内で卵子を保持した場合と，ディッシュの径に関わらず培養液10mlに対し，5mlは温度が低下した

ディッシュにプールさせた場合の温度変化に着目し，比較検討を行うことことから，放熱量が増加し，37.5℃設定のウォームプレートでは温度が低を目的とした．

下したと考えられる．さらに，底面積が広い 90mmディッシュも同様に温度の低下が認められた．ピペット内の培養液温度の低下が著しいことか【方法】

ら，ピペットでの操作は可能な限り迅速に行い，加温された培養液へ速37.5℃に設定したウォームプレート上に，対象のディッシュを置き，事やかに卵子を移動する必要があることが分かった．インキュベーターの開前に 37℃に加温していた培養液を入れ，直後，1，3，5，10分後に培養

閉頻度の増加は，庫内の温度や気相の変化もあることから，最も温度を液の温度を測定した．検討1では，60mm，90mmディッシュに培養液保つことができる35mmディッシュ蓋ありでプールすることが温度の低下

5ml および 10mlをそれぞれ入れ温度を測定した．検討2 では，パスツー防止に役立つと考えられる．

P-６

液 体 窒 素 内で 動 作 可 能 な RFID
タグを活用した卵巣組織凍結保存
管理システムの開発

杉下 陽堂 1），
佐藤 匠 1），川原 泰 1），
澤 勉 2），
小松 弘英 2），1）鈴木 直
1）聖マリアンナ医科大学産婦人科学
2）KRD コーポレーション

も検体管理可能な方法が切望されている．
【方法】
我々は卵巣組織凍結キット（Ova Cryo Sheet: Kitazato biophalma）
を開発し，また KRD コーポレーションは，液体窒素中で動作する高性
能な超小型 RFID タグを開発したため，KRD コーポレーションと共に，検体取り違えが決して起こらないシステム開発を共同で進めた．検討内容
は以下の5項目となる：1. 液体窒素対応タグを卵巣組織凍結デバイスとケーンに対応した．2. 液体窒素タンクタグとキャニスタータグを併せて使用し，手書きでの管理を不要とした．3. ICタグ運用に合わせた，ケーン，キャニスター，収納ボックスそしてラックを設計した．4. 液体窒素中にあるIC
タグを読み込み可能な PDAに取り付ける延長アンテナを設計した．5. 卵【背景】

巣，胚，卵子そして精子を全て扱える，管理ソフトを準備した．

がん・生殖医療における妊孕性温存治療では，若年がん患者が抗がん治療を受ける際，生殖細胞が抗がん治療の影響を受けないよう回避する【結果】

為，抗がん治療前に患者より生殖細胞や生殖組織を採取し，液体窒素内

超小型 RFID タグシステムにおいて上記の検討を行った結果，-196℃

で患者検体を長期間保存が必要となる．凍結検体の管理は，胚培養士がの環境下で常温と変わらない1秒以内の応答速度を持続し，100本以上のマジックにて容器表面に患者情報を記載し，目視で個体識別を行うと共RFID タグを一括で読み込む特性を生かし，安全な管理システムの確立に，その患者情報を紙台帳やコンピューターに登録する管理方法が古くに成功した．

から使われている．しかし，この管理方法ではヒューマンエラーを避ける
ことは出来ない．近年ヒューマンエラー対策として，バーコード，2次元コー【考察】

ド，RFID タグを用いて，認識可能なコードを紙やフィルムに印刷し，容RFID タグによる卵巣組織凍結検体管理システムは，液体窒素タンク

器に貼りつけるという自動認識技術が活用されている．しかし解決されな内における検体紛失の際，どの患者の何が液体窒素タンク内に落下した

い欠点が残されている．欠点としては，バーコードはラベル印刷の手間やかの検索ならびに回収が可能なシステムであり，安全で確実なシステムと液体窒素中でラベルが剥がれ，液体窒素から出すと表面に霜が付くためなる．RFID タグの設置位置およびサイズ，そして RFID タグに合わせた読み取りが不安定であり，RFID タグは -196℃の環境では動作しないた

収納器具の最適化等，実際の試行を踏まえた，ケーン，キャニスタ，収め，RFID タグを液体窒素から取り出し，RFID タグの温度が上昇し，動納ボックス，ラックの改良設計を検討することが，全ての生殖医療検体に作するまで待つ必要があることであった．そこで -196℃の液体窒素中でおける安全管理システムの構築に繋がることが期待される．

70

P-7

当院における年齢別 SEET 法実
施妊娠成績

荒井 勇輝，石川 聖華，中山 順樹，向江 真璃，
佐久間 友香，加賀 朝子，毛利 汐菜，原 利夫
はらメディカルクリニック

精後，Global Total（Life Global）を用いて 5日または 6日間培養し，Gardner 分類で胚盤胞4BC 以上のものを凍結する際に培養上清（SEET液）を約30μL 回収し，-20℃で凍結保存した．SEET 法は，胚移植を行う2-3日前に血中プロゲステロン濃度10.0ng/mL 以上あることを確認した
後，SEET 液を 37℃で融解し，GM601 Cultureと混合したものを S 群，
GM601 Culture のみを使用する群を簡易群とし，いずれも0.2mL に調整しIUI カテーテルを用い子宮内へ注入した．
【結果】
31歳までの S 群の妊娠率は 44.4%，簡易群では 22.7%であった．32【はじめに】
体外受精において，胚移植を成功に導くための条件の1つに，胚受容～ 34歳 では S 群 が 32.1%， 簡 易 群 が 27.8%，35 ～ 37 歳 では S 群 が24.0%， 簡 易 群 が 18.4%，38 ～ 40 歳 で は S 群 が 26.9%， 簡 易 群 が能を獲得した子宮内膜の存在がある．胚の着床の成功のためには，胚と25.8%，41 ～ 43歳では S 群が 14.4%，簡易群が 16.9%，44歳以上では子宮内膜のシグナル交換（クロストーク）が必要であり，それにより着床のS 群が 7.1%，簡易群が 6.9%であった．

準備が進むと考えられている．しかし，体外受精では体外で胚を培養しているため，胚移植がなされて初めて胚と子宮内膜のクロストークがスター【考察】

トする．つまり，胚移植時は子宮内膜の着床の準備が不完全な状態であ41 ～ 43歳までの妊娠率は S 群で 14.4%，簡易群では 16.9%と，簡易ると考えられる．そこで，胚受容能獲得のため胚移植の 2 ～ 3日前に胚由群の方が高くなったが，その他の年齢層では S 群の方が高い妊娠率が得

来因子が含まれている培養上清を子宮内に注入することで，子宮内膜をられた．しかし，どちらにおいても有意な差は認められなかった．現在，刺激し，着床の準備を促進させるSEET 法が開発された．当院では，胚培養上清には着床に関与するリゾホスファチジン酸が含まれているとの報

盤胞凍結時に使用していた培養上清を用いた SEET 法と，培養に使用し告があり，他にも多くの胚由来因子および内膜刺激因子が含まれているとていない培養液 GM601 Culture（GYNEMED）を用いた簡易 SEET

考えられる．今回の検討では，S 群と簡易群とで妊娠率に差がなかったこ法を実施している．今回，当院におけるSEET 法の実施別の妊娠率につとから，培養液もしくは IUI カテーテルを挿入することが子宮内膜を刺激いて比較を行ったので報告する．

し着床に有利に働いたのではないかと考えられる．今後，子宮内膜スクラッチ法等も検討を加え，子宮内膜応答と着床率の関係を明らかにしたい．

【方法】
2016年1月から12月までに胚移植を行った 1,121周期を対象とした．媒P-8

カラードップラを用いた胚移植モニターの試み上田 綾香，小野﨑 美絵，藤森 友美子，福田 久恵，
石川 慶子，石川 元春
いしかわクリニック

がフラッシュされた際のカラードップラモードでカラーエリアの動態を観察し，胚移植時のカラーエリアが爆発的に観察されたものをexplosive（E群），緩徐に観察されたものを slow
（S 群）と分類した．また，カラーエリ
アがカテーテル周囲に観察された around（A 群），カテーテル先端からその長軸に対して前方のforward（F群），先端長軸から後ろに見えたback（B群）に分類した．各群の妊娠反応陽性率と胎嚢確認された臨床妊娠率との関係を調べた．
【結果】
妊娠反応陽性率，臨床妊娠率は，それぞれ，E 群；35.0 ％（7/20），【目的】
胚移植の際に B モードの経膣超音波下でカテーテルをモニターして胚25.0 ％（5/20），S 群；45.0 ％（50/111），36.9 ％（41/111）で，両群間に有意差は認められなかったが，S 群の方が高値を示した．また，方向性

移植する方法は広く用いられているが，カラードップラ使用の報告はない．

の検討では，妊娠反応陽性率，臨床妊娠率は，それぞれ A 群；35.5％

今回，新たな試みとして胚移植時に超音波の血流分布を表示するカラー（22/62），25.8％（16/62），F 群；48.4％（30/62），40.3％（25/62），B 群；

ドップラを利用して胚移植時の培養液のカラーエリア動態を観察し，妊娠

71.4％（5/7），71.4％（5/7）で，妊娠反応陽性率は各群間で有意差は認率との関係を調査した．

められなかったが，臨床妊娠率は A 群とB 群間にのみ有意差（p=0.012）が認められた．

【方法】
対象は 2017年3月から6月に経膣超音波下で胚移植を行った 141周期と【結論】した．カテーテル先端が同定されなかった7周期，カラーエリアが観察さ胚移植時のモニター法として通常使用されているBモードよりもカラーれなかった3周期は除外した．超音波はVolson （GEヘルスケア）e，カテー

ドップラを使用した方がより培養液の動態をダイナミックにモニターするこ

テルとガイドは北里コーポレーションの ET-TUC3040SM5-22 とET-とが出来た．当初はカテーテルからフラッシュされる前方に子宮内腔にのTUG3022AMRT-30をそれぞれ使用した．胚はカテーテルにハミルト

みカラーエリアが観察する事を予想していたが，子宮内膜方向やカテー

ンシリンジ（HAMILTON80601：0.10ml）を装着後，カテーテルを培養

テルの逆方向にもカラーエリアが見られた．カラードップラモード下でカ液で洗浄し，その後3μlの培養液とともに胚を吸い上げ，カテーテル先ラーエリアのパターン動態と実際の培養液の移動動態の意義付けは不明

端から1.5μlのエアーを入れてロードした．胚移植時，胚の入った培養液

で，今後さらなる検討が必要と考える．
						

71

一般演題〔ポスターセッション〕

P-9

新鮮および凍結融解精子を用いた
ICSI 施行後の胚発生能の比較

小川 尚子，沖村 匡史，金子 繁，黒田 知子，内山 一男，
小林 保，加藤 恵一
加藤レディスクリニック

較した（2009年1月から2015年12月）．また，同精液所見で精子を凍結保存した患者において，凍結融解が及ぼす媒精方法への影響について検討した（2015年4月から2016年12月）．
【結果】
新鮮精子群，および凍結精子群の受精率，異常受精率，分割率および胚盤胞発生率はそれぞれ 87.9%（6293/7162）および 86.7%（2106/2430），
3.1%（222/7162）
および 2.4%（57/2430），98.5%（5978/6078）
および 98.5%（2018/2049），65.3%（2416/3699）
および 67.0%（798/1192）
であった．
臨床妊娠率
（GS），生産率および児の先天異常率はそれぞれ，53.9%【目的】（933/1730）および 51.4 ％（292/568），41.7%（721/1730）および 38.9 ％IVF 治療における本人確認の必要性に関する観点から，自宅採精，持（221/568），1.6%（27/1730）および 1.1%
（6/568）であり，すべてにおいてち込みの廃止が検討されつつあり，採卵当日に採精が不可能である場合

有意な差は認められなかった．また，61.6％（779/1264）の cIVF 予定患

は，事前の精子凍結を行うこととなる．WHO 基準で精液所見が正常で者が精子の凍結融解後に，ICSI 適応となり，その主な理由として凍結融あれば，凍結融解が及ぼす精子への影響は少ないと予測される．しかし

解による運動精子数の減少が挙げられた．

ながら，新鮮および凍結精子を用いた場合の臨床成績について大規模な検討を行った報告が少ないため，本研究において後方視的に比較検討を
行った．

【結論】
精液所見が正常で cIVF 適応であっても，凍結融解処理を行うことにより，運動精子数が減少しICSI 適応となるケースが多い．これは，凍結【方法】

融解処理による影響と考えられ，精子の凍結保存法の改良が必要と考え

当院を受診した 39歳以下の精液所見が正常（WHO 基準）でありICSIられる．しかし，ICSI 適応となった場合でも，臨床成績は新鮮精子と同を施行した患者で，新鮮精子（n=7162）および凍結融解精子を用いた群等であることから，cIVF 予定患者が精子を凍結する場合は，十分な説（n=2430）における受精率，異常受精率，分割率，胚盤胞発生率，単一明により同意を得る必要がある．

凍結融解胚盤胞移植後の妊娠率，生産率および児の先天異常について比P-10 二重筒式遠沈管（ラピッツ）を用いた精子調整法の検討

荒牧 夏美，泊 博幸，國武 克子，内村 慶子，竹原 侑希，
下瀬 瞳，久原 早織，吉永 菜都美，西村 佳与子，本庄 考，
詠田 由美
アイブイエフ詠田クリニック

渣液を寒天培地に播種し細菌培養を行い，従来群とラピッツ群の細菌除去能を評価した．検討３：新人スタッフおよび熟練スタッフにおいてラピッツを用いた連続密度勾配遠心法による精子調整を行い，処理後の所見を比較することで技術介入度を評価した．
【結果】
検討１：処理前の精液量は 2.8±1.3 ml，運動精子濃度は 30.3±17.3 ×
10 6/ml，精子運動率は 53.5±10.9％ であった．処理後の従来群とラピッツ群の運動精子濃度（×10 6/ml）は，各17.0±14.7, 14.3±13.1，精子運動率（%）は，各78.5±11.7, 87.2 ±11.5，処理時間（秒）は，各51.4±8.0,【目的】

37.5±5.6 であり，ラピッツ群において精子運動率と処理時間が有意にARTにおける理想的な精子調整方法の条件は，効率良く運動良好精子改善した（p<0.01）．検討２：処理後の沈渣液を播種して形成された細菌を回収することに加え手技が簡便であることが重要である．そこで本研究

コロニー数は，各16.0±2.1, 6.0±0.6 であり，ラピッツ群において有意にでは，精子調整における遠心処理後の精子ペレットの回収を容易に行うこ高い細菌除去能を示した（p<0.01）．検討３：熟練スタッフと新人スタッフとが期待される新たな遠心用デバイス（二重筒式遠沈管：ラピッツ）に着目

における精子調整後の所見は，運動精子濃度（×10 6/ml）は，各7.7±4.4,

した．ラピッツは，内筒と外筒からなる二重筒式遠沈管であり，遠心処理

5.7 ±2.7，精子運動率（%）は，各81.1±17.5, 76.8±23.6 であり，全て後に内筒を引き抜くことで内筒内の上清を一挙に除去することができる．その項目において有意差はなかった．

のため，素早い上清除去と精子ペレットの再汚染防止も期待される．本研
究は，精子調整の手技の簡易化を目的とし，ラピッツを用いた精子調整法の臨床的有用性を検討した．

【結論】
ラピッツは遠心処理後内筒を抜去するのみで容易に上清除去が可能であり，精子調整時間は有意に短縮した．また，ラピッツ群の精子運動率【方法】

および細菌除去能が従来群と比較し高かったことから，ラピッツは，上精液検査後破棄予定となった精液を，患者の同意のもと供試検体とし清除去後に管壁面の夾雑物が精子ペレットに混入することを回避できるこ

た．検討１：同一精液検体を従来の遠沈管
（従来群）
とラピッツ
（ラピッツ群）とが示唆された．さらに，新人スタッフでも容易に良好な結果を得ることに等量に分け，連続密度勾配遠心法による精子調整後の所見を比較した．

が出来たことから，ラピッツを用いた精子調整法は臨床的に有用であると検討２：菌浮遊液を作成し従来群とラピッツ群において遠心処理後，沈

考える．

72

P-11

２種類のSingle Culture Mediumを用いた培養成績の比較

阿部 亜佳音，武田 信好，鈴木 寛規，船山 麻由子，
佐藤 百合子，田中 可子，三箇島 睦美，鈴木 雅美，
小田原 靖
ファティリティクリニック東京症 例を 対 象とした．ICSI 後の 卵 子をランダムに 2 群に分け，A 群：
NAKA（78個），B 群：Geri（66個）で作製した培養用ドロップで個別にて胚盤胞培養を行い，それぞれの胚盤胞到達率，良好胚盤胞率を比較した．受精確認時に両群に正常受精卵がない症例は検討から除外し，良好胚盤胞は 3BB 以上とした．培養は 37.0℃，6.0%CO2 ，5.0%O2 の条
件下 で， ミニ イン キュベータ（COOK 社 ）もしくは EmbryoScope®
（VitroLife 社）にて行った．なお，1症例につき1枚の培養用ディッシュを使用し，培養環境は両群とも同等の状態とした．
【結果】
各群の正常受精率は，A 群：73.1%（57/78），B 群：83.3%（55/66）であっ【目的】

た．胚盤胞到達率，良好胚盤胞率は，それぞれ A 群：71.9%（41/57），

現在，培養液交換が不要な Single Culture Medium（SCM）が各社から販売されている．当院でもSequential Mediumと数種類のSCMと54.4％（31/57），B 群：69.1%（38/55），47.3%（26/55）で，各成績に有意差は認められなかった．

の培養成績の比較を行い，SCMの有用性を示してきた．しかし，SCMの中でも培養後の発生に有意差が認められるものもあり，各施設の培養【結論】環境に適した mediumを使用する必要があると思われる．本研究では，当院では，これまでに比較してきた数種類の SCMの培養成績から，

ONESTEP medium®（ナカメディカル社：以下，NAKA）と，同じく最も安定し成績が良好であった NAKAを主軸に使用してきた．今回，新SCM で あ る Geri® 1-step medium（Genea BIOMEDX 社： 以 下，

たにGeriと比較し，良好胚盤胞率では NAKA が高い傾向にあるもののGeri）を用い，培養成績を比較・検討した．

有意差は認められず，胚盤胞到達率では同等の成績となった．Geriは他の SCMに比べ 1製品あたりの容量が多く，分注後数日間使用することで【方法】

培養成績の低下が懸念されたが，特に影響なく良好な成績が得られた．

2017年6月～ 7月に採卵を行い，hCG 投与後38 ～ 39時間で裸化処理

今後，症例数を増やし，さらなる検討を行っていきたい．

を行った時点で，MⅡ卵が 2個以上得られた 30 ～ 45歳（39.6±3.5），25

P-12 紡錘体観察 有無による受精率の変化

川嵜 友貴，
拝野 貴之，
押尾 真紀子 , 石澤 亜希，
笠原 佑太，
白石 絵莉子，鴨下 桂子，岡本 愛光
東京慈恵会医科大学

を施行した 177症例310周期（747個）を対象とした . 採卵5時間後に卵丘細胞を除去し, 第一極体放出を確認し, ICSI 施行前に紡錘体が観察できた
群を紡錘体観察可能卵群（sp+ 群）, 紡錘体が観察できなかった群を紡錘体観察不可能卵群（sp- 群）とし, 受精率を比較した（検討1）. さらに , 紡
錘 体 が 観 察されず 30分の 追 加 培 養 後 ICSI を施 行した追 加 培 養 群（culture 群）
における受精率の変化を観察した（検討2）.
【結果】
検討1）紡錘体観察ができた sp+ 群と紡錘体観察ができなかった sp- 群の受精率はそれぞれ75.8%（455/600）, 56.6%（64/113）であり, sp+ 群が sp-【目的】

群と比較し有意に高率であった .

当施設では 2015年9月から新たに紡錘体可視化装置を導入し, 紡錘体

検討2）30分の追 加培養 後に ICSI を施行した culture 群の受 精率はを避けて顕微授精（ICSI）を施行するようになった . ICSI 施行直前に紡76.5%（26/34）であり, sp- 群と比し受精率の向上がみられた . また sp+ 群

錘体を観察したところ, 紡錘体が観察できる卵だけでなく紡錘体が観察と比し受精率は同等であった .

できない染色体凝集期間の卵も確認することができた . 染色体凝集期間の卵に対しては , 数時間の追加培養を行い紡錘体が形成された後 ICSIを【考察】

施行することが望ましい. 他施設において卵丘細胞除去直後に紡錘体の今回の検討では受精率のみの評価であるが, ICSI 直前に紡錘体を観有無を観察し, 紡錘体が観察できない場合1時間の追加培養を行った後察できなかった場合, 短時間の追加培養であっても成績向上が期待できに ICSIを施行することで受精率の向上がみられた . 今回我々は , 30分のると考えられた . 今後は供試卵数を増やし受精率の検討を続けると共に ,追加培養でも受精率が変化するか試みた .

胚発生率 , 妊娠率 , ICSI 直前の紡錘体観察不可能卵に対する追加培養時間の検討を行うことで, さらなる臨床成績の向上を目指したいと考えて

【方法】

いる.

2015年10月〜 2017年5月の間に当施設において紡錘体観察の後にICSI

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