日本IVF学会雑誌 Journal of Assisted Reproduction（JAR）

論 文
ー原 著 ー
加湿型培養器と比較した無加湿型培養器の有用性の検討･･･････････････････････････････････････････････････････････････

2

山上 一樹，古橋 孝祐，岩﨑 利郎，伊藤 宏一，水澤 友利，松本 由紀子，苔口 昭次，塩谷 雅英
英ウィメンズクリニック

ー症例報告ー
反復する hatching 障害に対して AHA が有効であった一例･････････････････････････････････････････････････････････････
眞田（ダハール）佐知子 ，中山 貴弘 ，小濱 奈美 ，澤田 守男 ，畑山 博
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2

足立病院生殖内分泌医療センター／ 2 足立病院産婦人科

1

日本 IVF 学会雑誌 Vol. 22，No. 2，2 - 6，2019

ー原著 ー

加湿型培養器と比較した無加湿型培養器の有用性の検討
山上 一樹，古橋 孝祐，岩﨑 利郎，伊藤 宏一，水澤 友利，松本 由紀子，
苔口 昭次，塩谷 雅英
英ウィメンズクリニック 〒 650-0021

兵庫県神戸市中央区三宮町 1 丁目 1-2

三宮セントラルビル

要 旨： 培養器には加湿型と無加湿型が存在するが，それぞれの特性や実際の成績を比較した報告は多くはない．本研究では始めに加湿型および無加湿型培養器における培養成績および妊娠成績を比較した．
加湿群（2PN= 268 個）と無加湿群（2PN= 265 個）の間で，分割率，良好分割率，継続培養胚当たりの胚盤
胞発生率，胚盤胞当たりの良好胚盤胞率，化学妊娠率，臨床妊娠率および流産率に有意な差は認められなかった．続いて，2 群における経日的浸透圧変動を比較した．加湿群の浸透圧は分注後 0 日目から 6 日目
まで有意な変動は認められなかった一方で，無加湿群では分注後 4 日目，5 日目にかけて経日的な浸透圧の上昇が認められた．以上のことから，無加湿型培養器では培養液浸透圧の上昇が認められたものの，培養成績および妊娠成績に影響せず，加湿型同様に培養に使用可能であることが示唆された．
キーワード：加湿型培養器，無加湿型培養器，浸透圧緒

言定を行うことによって，無加湿型培養器の有用性を評価することを目的とした．

培養器には加湿型と無加湿型がある．加湿型培養器
は湿度を維持することによって培養液蒸発を防止す

対象と方法

ることができるため細胞培養等に広く普及している
ものの，湿気による菌類の発生や，清掃および給水な
どの維持管理が煩雑であるといったデメリットを抱1．
対象2017 年 4 月から 7 月に当院で採卵を行い，受精判定
時に 2PN が 4 個以上得られた 73 症例（2PN= 533 個）をえている．
これに対し，無加湿型培養器は加湿型に比較すると菌検討対象とした．

類の発生を防止することができる上，給水や清掃の手間を省略でき，維持管理が容易である．
加えて，加湿水のス

2．
採卵，
精子調整，
媒精，
移植

ペースが不要なことから，省スペースである場合が多い．

採 卵 し た 卵 子 は Universal IVF Medium（Origio，

これらの特長から，受精卵培養における無加湿型培養器

Denmark）中で採卵から 3 ～ 5 時間の前培養を行った．

の使用も考慮に入れる必要がある．

精子は横田ら 2）の方法に従い，2 層パーコール法で遠過去の報告によると，無加湿型培養器では，加湿型培

心分離を行い，良好な精子を回収した．IVF は精子濃度

養器と比較して培養液の浸透圧が上昇することが知らを 10 × 104/ml に調整して媒精に供した．ICSI は前培れている．これに対し，Hadi らによって，浸透圧 310

養後に顆粒膜細胞を除去した卵子に，形態が正常な運動

mmol/kg の培養液におけるマウス受精卵の 4 細胞以降精子を不動化してマイクロマニュピレーター

への発生率は，浸透圧 250 mmol/kg 程度の培養液と比 （OLYMPUS，ON 2- 99D- 3, Tokyo）を装着した倒立
較して有意に低下することが報告されており，ヒトにお顕微鏡（OLYMPUS，IX- 73）を用いて穿刺注入した．

いても培養液の浸透圧の上昇が受精卵の発生に影響す

受精確認は媒精および ICSI 後 18 ～ 20 時間に行った．

る可能性が示唆されている ．
1）

しかしながら，実際に加湿型および無加湿型培養器のに 分 け， 加 湿 型 培 養 器（CPO­­2- 2301, HIRASAWA,

浸透圧変化や，ヒト受精卵培養成績および妊娠成績につTokyo） お よ び 無 加 湿 培 養 器（Miri®Multi, Esco,

いて比較した報告は少ない．
そこで本研究では加湿群おSingapore）でそれぞれ培養した．2PN 胚が奇数個得

よび無加湿群における受精卵培養成績および妊娠成績られた症例は，患者診察券番号の下 1 桁が偶数であればを比較するとともに，2 群の培養液浸透圧の経日的測加湿群へ，奇数であれば無加湿群へ多く振り分けた．
同

受付 2019 年 5 月 10 日 / 受理 2019 年 6 月 27 日
責任著者：山上 一樹 e-mail［ yamagami@hanabusaclinic.com ］

2

偶数個の 2PN 胚が得られた症例では，2PN 胚を半数

一症例から得られた 2PN 胚を半数ずつ 2 群に分配して盤胞率（48. 2% vs 52. 9%; P= 0. 47）に有意な差は認め検討を行ったため，加湿群および無加湿群の間に患者背られなかった（図 1，図 2）．
また，両群間において化学妊

景 の 差 は 無 い も の と 考 え て い る．培 養 に は SAGE娠率（57. 7% vs 59. 2%； P= 0. 88），
臨床妊娠率（46. 2%

1-step medium を用い，受精から 2 日目に培養液交換

vs 40. 8%; P= 0. 59）および流産率（33. 3% vs 25. 0%，を行った．卵子，胚の培養は 37℃，5. 5%CO 2，5. 0%

P= 0. 79）に有意な差は認められなかった（図 3）．

O 2，89. 5% N 2 の気相条件下で培養を行った

3）．

加湿群の浸透圧は Day 0 からDay 6 まで，264. 0± 6. 2，261. 0 ± 6.1，257. 2 ±1. 8，260. 5 ± 6.1，

3．
分割期胚および胚盤胞の形態学的評価および統計学
的解析について分割期胚の評価は Veeck の分類 4）を用いて行い，採卵日を Day 0 とし，Day 2 時，Grade 1, 2 の 4 cell およびGrade 3以上の5 cell以上の胚を良好分割期胚とした．
ま た， 胚 盤 胞 の 評 価 は Gardner の 分 類 5） を 用 い て，Grade 3BB 以上を良好胚盤胞とした．Day 2 時の分割率および良好分割率（4cellG 2≤），Day 5 時の継続培養胚当たりの胚盤胞発生率および，胚盤胞当たりの良好
また，得られ
胚盤胞発生率（G 3BB≤）を比較検討した．
た受精卵は急速ガラス化法により凍結保存し，単一凍結
融解胚盤胞移植となった症例について，化学妊娠率，臨床妊娠率，流産率を比較検討した．
統計学的解析にはχ 2検定を用い，P< 0. 05 を有意差ありとした．

図1

Day 2 における分割率および良好分割率

図2

Day 5 における胚盤胞発生率および良好胚盤胞率

図3

妊娠成績

4．
浸透圧測定について
60mmディッシュ（Thermo Fisher Scientific,Tokyo）に®
Denmark）50µlを6スポッ
SAGE 1-step medium（Origio，

ト分注し，7ml のミネラルオイル（Irvine scientific,USA）で被覆した．
分注 1 時間後（Day 0）から 24 時間おきに Day 6 までの 7 点を測定日とした．1 日当たり 2 枚のディッシュを使用するため，計 28 枚のディッシュを作成し，加湿型，無加湿型培養器それぞれに 14 枚ずつ静置した．
測定時に各培養器から 2 枚ずつディッシュを取り出し，ディッシュ 1 枚当たり 3 スポット，計 6 スポットを無作為に選択，蒸気圧測定機（蒸気圧オズモメー
タ ー WESCOR 5600 型， フ ェ ニ ッ ク サ イ エ ン ス ,Tokyo）を用いて浸透圧を測定し，平均値を算出した（n= 6/day/ 培養器）
．統計学的解析には ANOVA 解析お
よび Tukey-Kramer の多群比較を行い，P< 0. 05 を有意差ありとした．

結

果

加湿群（2PN= 268 個）と無加湿群（2PN= 265 個）の間 で，Day 2 時 で の 分 割 率（96. 3% vs 98. 1%;
P= 0. 31）
，良好分割率（50. 4% vs 49. 6%; P= 0. 86），
Day 5 における 継続培養胚当たりの胚盤胞発生率（55. 1% vs 57. 2%; P= 0. 66），胚盤胞当たりの良好胚3

2 6 5. 7±4. 8，2 5 7. 3 ± 2. 7，2 5 8. 7± 6. 6 mmol/

盤胞発生率，化学妊娠率および臨床妊娠率が有意に低kgであり，有意な変動は認められなかった．一方で，無加下したと報告している 9）．この報告では，詳細な数値は記

湿群では 262. 5 ± 6. 7，270. 8 ±15. 3，262. 3 ±1. 8， 載されていないものの，無加湿群における培養液浸透圧
2 6 5. 0 ±1. 6，2 7 7. 7±4.1，2 81. 5 ±7. 9，2 7 6. 0

が培養 14日目まで上昇し続けたと記述されている．実際± 5. 4 mmol/kgとなり，Day 0，Day 2と比 較してに，本研究においても，培養成績および妊娠成績が同等

Day 4 および Day 5 に，また，Day 3と比較して Day

である一方で，無加湿群の浸透圧は分注後経日的に上5 に有意な浸透圧の上昇が認められた（図 4）．

昇することが明らかになり，過去の無加湿型培養器中の培養液浸透圧が経日的に上昇するとの報告と一致する

考察

本研究では，培養成績，妊娠成績において加湿型およマウスの知見によると，マウス受精卵は浸ものである10）．
透 圧 約 290 mmol/kgであ るM 16 培 養 液 に お いて
2-cell block が発生し，4cell 以降への発生が阻害さ

び無加湿型の間に有意な差は認められなかった．また， れる一方で，浸透圧が約 230 ～ 275 mmol/kgである
体外受精および顕微授精における媒精方法ごとの成績

Sim plex- o ptimize d m e dia（S O M）や S O M wit hにも差は認められなかった．

increased K+（KSOM） 等 の 培 養 液において2-cell

これまでに，加湿型および無加湿型培養器の間で培

blockは回避されることが知られている11）．加えて，通常の養成績に有意な差は見られなかったとする報告がなされ浸透圧では 2-cell blockを回避しうるKSOM の浸透圧

．一方で，無加湿群は加湿群と比較して受精卵を 約 300 mmol/kgまで上 昇させた 場 合 には 2-cell

当たりの胚盤胞発生率および良好胚盤胞発生率が有block が引き起こされることから，培養液の浸透圧の上意に高い値を示した との報告も見られることから，ヒト

昇は哺乳類の初期胚発生に影響すると考えられている1）．

受精卵培養における無加湿型培養器の使用は加湿型

マウスの卵管液の浸透圧は血清と同程度である約 290-

培養器と同等かそれ以上の成績が得られるものと考え

310 mmol/kg 12）であるため，M 16 培養液（浸透圧約られてきた．本研究の結果においても，無加湿型の培養

290 mmol/kg）は生理的な条件に近い浸透圧であるに成績および妊娠成績は加湿型と有意な差が認められなも関わらず，受精卵の初期発生を阻害することになる．こかったことから，無加湿型培養器は加湿型培養器と同のことから，生体外での初期胚発生において，培養液の

ている

6,7）

8）

等の有用性があると考えられる．しかしながら，近年， 浸透圧は卵管液よりも低い条件である必要があると考え
Fawzyらは無加湿条件においては良好分割率，良好胚

図4

4

浸透圧の経日的変動られる．これに対し，培養液交換を必要としない single

step medium の場合，経日的な浸透圧の上昇を考慮しはないかと考えられる．
本検討では培養液交換を行わなて製品の浸透圧は低く設定されている．実際に，ヒト卵い場合での成績を検討しておらず，今後の検討が必要で管液の浸透圧は 280 ～ 290 mmol/kgであることが知あるが，少なくとも本検討において，無加湿型培養器はられている一方で ，本研究に用いたSAGE 1-STEP

加湿型培養器と同等の培養成績および妊娠成績が得ら

medium の 浸 透 圧 の 品 質 保 証 範 囲 は 257 ～ 273

れることが明らかになった．

13）mmol/kgである．本研究において，無加湿群における浸以上の結果および過去の報告から，培養液量や培養

透圧は分注後 4日目（277. 7±4.1 mmol/kg）に 0 日目

液交換などの培養条件について慎重に選択することと比較して有意に上昇したものの，生理的な浸透圧よりが重要であるものの，ヒト受精卵培養において，無加

低いか同程度の状態にあり，初期胚発生に影響を及ぼさ湿型培養器は加湿型培養器同様の有用性があることなかったものと考えられる．加えて，これまでに，浸透圧のが示唆された．

上昇はスポットの液量に相関することが報告されている ．
7）

本研究では 50μlにて浸透圧の測定を実施したが，より低容量で培養した場合，更に大きく浸透圧が上昇すると考えられる．前述の Fawzyらのグループは15µl のドロップで受精卵を培養しており，本研究における測定結果以上に浸透圧が上昇したものと考えられ，その結果胚発生
およびその後の妊娠成績に影響した可能性が示唆される．これらの結果および過去の報告から，培養条件を検討する際には，培養液の容量および実際の浸透圧の上昇を考慮する必要があると考えられる．
また，本検討では規格の異なる 2 社の培養器を検討に使用した．
当院の培養方法において，加湿型培養器 1 台
当たり 2 名の受精卵を培養している．
本検討に用いた加湿型培養器は庫内一体型であるため，1 名のディッシュを出し入れする際に生じる庫内の培養環境変化がもう一方の受精卵に影響を及ぼす可能性が考えられる．
一方で，検討に用いた無加湿型培養器はチャンバーが分割されており，1 チャンバーに 1 件の受精卵のみ培養可能であるため，加湿型と異なりドアの開閉が他の検体に与える影響が最小限となる．
さらに，無加湿型培養器では加湿型と比較してドア開閉後のガスの回復が早いとされているため，培養環境の安定化において，加湿できないという点を除けば加湿型培養器よりも無加湿型培養器の方が構造的に優れているとする見方もある．
本検討の結果に機器ごとの特性の違いが影響した可能性は否定できない．
今後，培養器の構造的特徴を考慮したさらなる検討が必要であると考えている．
さらに，当院では，分注後 3 日目に相当する受精 2 日
目に培養液交換を行っており，無加湿型において浸透圧が有意に上昇する以前のタイミングで培養液が交換されるため，培養成績に影響しなかった可能性が考えられる．
また，ヒト受精卵の胚盤胞発生における浸透圧の許容範囲に関しては明らかにされていないものの，無加湿型で最も高い値を示した分注後 5 日目においてもその値は 281. 5 ± 7. 9 mmol/kg と生理的な値を大きく逸脱するものではなく，胚発生に影響するには至らないので

参考文献
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Similar effects of osmolarity, glucose, and phosphate on
cleavage past the 2-cell stage in mouse embryos fromoutbred and F1 hybrid females. Biol Reprod, 72: 179-187, 2005.
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3） 角本知世・後藤栄・橋本洋美・泉陽子・江口素子・古橋孝祐・
水田真平・田中里美・稲飯健太 郎・片田雄也・宮田ちさと・
米山雅子・黒田泰史・岸加奈子・松浦まき・後藤優介・東山
龍一・成松美彩・松本由紀子・苔口昭次・塩谷雅英：2 種類の培養液を用いた培養成績の検討．日本臨床エンブリオロジスト学会講演抄録集・実技書，15: 24, 2009.
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7） 濱井晴喜・小野光樹子・寺村聡子・高田玲子・千川愛・中平理恵・岩橋和裕・早川ひとみ・大濱尚子・寺西明子・繁田実 :無加湿培養器の導入とその有効性について．日本生殖医学会
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8） 山本裕子・ 森本藍・大城章子・志田有加・榊原由佳・藤田智久・
山口和香佐・俵史子：胚培養において無加湿型インキュベー
ターは有効か ? ～無加湿型と加湿型インキュベーターの培養成績の比較検討から～ . 日本卵子学会誌，31: S65, 2014.
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Abdelghafar H, Al-Inany H, Bedaiwy MA : Humid versus
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Fertil Steril, 108: 277-283, 2017.
10）湯本啓太郎・杉嶋美奈子・岩田京子・甲斐義輝・溝口千鶴・
的場由佳・山内至朗・田中藍・岡田直緒・宮崎翔・經遠智一・
中岡実乃里・松本郁美・森脇瞳・見尾保幸 : 無加湿型インキ
ュベータ使用時におけるミネラルオイル被覆培養液内の浸透圧
変化 . 日本生殖医学会誌，62: S105-106, 2017.

511） Baltz JM, Tartia AP : Cell volume regulation in oocytes
and early embryos : connecting physiology to successful
culture media. Hum Reprod Update, 16: 166-176, 2010.
12）Baltz JM : Connections between preimplantation embryo
physiology and culture. J Assist Reprod Genet, 30: 10011007, 2013.
13） Sunde A, Brison D, Dumoulin J, Harper J, Lundin K, Magli
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6日本 IVF 学会雑誌 Vol. 22，No. 2，7 - 9，2019

ー症例報告 ー

反復する hatching 障害に対して AHA が有効であった一例
眞田（ダハール）佐知子 1，中山 貴弘 1，小濱 奈美 1，澤田 守男 2，畑山 博 2
1

足立病院生殖内分泌医療センター 〒 604-0837 京都市中京区間之町通押小路上る鍵屋町 481
2
足立病院産婦人科 〒 604-0837 京都市中京区間之町通押小路上る鍵屋町 481

要 旨： Assisted hatching（AHA）は，着床障害に対する治療法として，多くの施設で施行されている．
ガイドラインが示されたものの，治療の有効性や適応については意見の分かれるところであり，各施設の判断に任せられているのが現状である．今回，融解した胚盤胞の hatcting 障害を認め，ET 前に急遽，
AHA を行い妊娠に至った症例を経験したのでこれを報告する．38 歳，0 経妊．黄体化未破裂卵胞を繰り返すため，IVF を施行．5 個の胚盤胞を Day 5 で凍結保存．凍結融解胚移植を施行する際，融解６ 時間後も hatching 開始しておらず急遽 AHA を行い ET した．臨床的妊娠は成立したが，妊娠８ 週で自然流産となった．その後，2 回目の凍結融解胚移植を行った．AHA を予定していなかったが，前回同様，hatching
開始していなかったため AHA を行い ET した．その後，妊娠成立し生児を得た．
キーワード： Assisted hatching（AHA）, 凍結融解胚移植，透明帯硬化，hatching 障害，着床障害

緒言

LUFによる排卵障害の適応のため，IVFを施行し，ショー
ト法で 10 個の卵子を回収した．
媒精法にて 7 個受精し，Assisted hatching（AHA）は，1990 年に Cohen ら

このうち 5 個が胚盤胞（Gardner 分類３AB ～４BB）にが発表して以来，着床障害に対する治療法として，多く発生したため Day ５ で全て凍結保存した．
この際，拡張1, 2），高年齢症例や胚移植反復

胚 盤 胞 の 直 径 は 320 μ m と 巨 大 で あ っ た が 全 て不成功例，凍結融解胚において有効性が評価されていhatching を開始していなかった（図 1）．
凍結胚移植を行．しかし，現在のところ本治療法の明確な適応基うために４BB 胚を解凍し，6 時間経過観察したところ

準が無く，各施設での判断に任せられているのが現状

透明帯の伸展により hatching 開始が期待できない状態の施設で施行されており
る

3- 5）

である．
手技としても，zona thinning と zona drilling （図 2）であったため，急遽患者の同意を得て，Laserが提唱されており 6），それぞれに利点と欠点が指摘され

AHA を 行 い 移 植 し た．Laser AHA は OCTAX Laserている．
このように，AHA の有効性や適応，方法についShort System（Medical Technology; Germany）
を用い，ては現在のところ一定の見解が得られていない状況である 7）．
この要因として，AHA が有効な症例の出現頻度が低い可能性があり，症例ごとに AHA が必要であるか否かの検討が重要であると考えられる．今回，融解した拡張胚盤胞が透明帯の過伸展による hatching 障害を起こしている状態に遭遇し，移植前に急遽，rescue 的な AHA を行い妊娠に至った症例を経験したので報告
する．

症

例

38 歳，０ 経妊０ 経産．
結婚後 3 年間の不妊のため当院を受診し 1 年間不妊治療を行ったが，ほとんどの周期で黄体化未破裂卵胞（Luteinized Unruptured Follicle
Syndrome, LUF）を繰り返し妊娠には至らなかった．

99x71mm（300 x 300 DPI）

図1

Day5 における凍結保存前の胚盤胞．拡張胚盤胞の直径は 260 ～ 320 μｍと巨大であり，透明帯の菲薄化も著明であるが全てhatching を開始
していない．

受付 2019 年 8 月 6 日 / 受理 2019 年 8 月 12 日
責任著者：眞田（ダハール）佐知子 e-mail［ sachiko 45sanada@yahoo.co.jp ］

7

59x57mm（300 x 300 DPI）

図2

59x56mm（300 x 300 DPI）

第 1 回目解凍後の胚盤胞．透明帯は過伸展のため不整形である．この後，６時間観察するも胚盤胞実質の拡大にもかかわらず，透明帯は過伸展を続け hatching を開始できなかった．

図3

第 2 回目解凍後の胚盤胞．前回同様，解凍６時
間経過後も透明帯の伸展により hatching 開始が認められなかった．

1 回照射時間を 2. 6msec として４～ 5 回照射により孔胚移植例 14），胚移植反復不成功例 15），高齢症例である．

径約 20 μ m の zona drilling を行った．臨床的妊娠が成

特に高齢者や凍結胚で，内分泌的変化，周辺組織から立したものの妊娠 8 週で自然流産となった．その後 2 回の溶解酵素の欠如が生じ，それによる hatching 障害が目の凍結胚盤胞移植を行った．AHA を予定していな

引き起こされている可能性がある 12）．また，AHA が有

かったが前回同様，解凍 6 時間経過後も胚盤胞直径 360

効であると考えられる透明帯の変化として，肥厚（17μ m にもかかわらず hatching 開始が認められなかったμｍ以上），色調変化，変形，硬化が挙げられる．硬化以ため（図 3）急遽 Laser AHA を行い移植したところ妊娠外の変化は判定しやすいが，質的異常とされる硬化に成立し，その後の経過良好で妊娠 41 週で 3, 324g の男

ついての評価は困難である．
AHA の 有 効 性 に 関 し て は 様 々 な 議 論 が あ る が，児を正常分娩した．

American Society for Reproductive Medicine より

考察

AHAに関するガイドライン 16）が2014年に発表された．
そこでも，反復不成功例においては，臨床的妊娠率の透明帯とは，13 ～ 15 μ m の厚さをもつ糖タンパ

改善傾向が見られるとされている．しかし，AHA と多クで，受精から着床までの間で種々の重要な役割を果胎妊娠との関連性も示唆されており，全症例に施行すたしている ．哺乳類の hatching 現象は 1929 年に初べきではないと警告されている 17）．当院では，主に形めて観察された 9）．胚の発育に伴う内部圧の上昇や胚態良好胚盤胞を用いた凍結融解胚移植が反復不成功

8）より分泌される酵素などの作用により透明帯が伸展， であった症例を AHA 適応としている．今回の症例は年非薄化・軟化され，一部に亀裂が生じて孵化する 10）．

齢や既往回数，透明帯肥厚などの適応ではなかったが，そして 2014 年に Time-Lapse による観察で，AHA に

凍結時の胚盤胞がかなりの拡張発生を行っていたによって胚盤胞が hatching するまでの時間が短縮するもかかわらず hatching 開始していなかった点と，融解ことや収縮回数が減少することがわかった 11）．

6 時間後も透明帯過伸展のため胚盤胞が hatching 不ART 操作における媒精や胚培養環境，凍結融解操作

可能な状態となっていることを考慮し，hatching 障が透明帯の硬化や肥厚の発生要因となることが報告

害 の 診 断 で 急 遽 rescue 的 な AHA を 行 っ た．こ の．さらに透明帯の硬化や肥厚により引き

hatching 障害の原因としては，透明帯の異常な過伸展起こされる hatching 障害が形態良好胚盤胞移植時の性と胚盤胞側の透明帯融解酵素の分泌不全が推測さ

着床不全の原因の一つになっていることも推測されれる 18）．本症例が LUF を繰り返していたことも留意すている 13）．AHA が適応とされている症例は，凍結融解

べき点ではある．種々のサイトカインが排卵のメカニ

されている

8

12）

ズムに関与し，血管透過性の亢進やコラゲナーゼなどの蛋白分解酵素の産生を刺激するとされている

．そ

19）

こで LUF を繰り返す症例に，一連の排卵ネットワークに関与するサイトカインの異常がみられ，そのことがhatching 障害にも影響している可能性も考えたが，LUF と hatching 障害との関連性を示唆した報告は今のところない．
本症例では hatching 障害が 2 度にわたり観察されたことより，明らかに胚側の要因による hatching 障害が発生していたものと考えられた．また，AHA が妊娠成立に有効であったものと推測された．拡張胚盤胞が透明帯の過伸展により hatching を開始できない症例が認められたことにより，今後拡張胚盤胞の hatching
開始の有無を移植前に評価することが重要である可能性が示された．そして，このような症例には rescue
的な AHA が有効であると考えられる．

参考文献
1） Cohen J, Elsner C, Kort H, Malter H, Massey J, Mayer
MP, Wiemer K.: Impairment of the hatching process
following IVF in the human and improvement of implantation
by assisting hatching using micromanipulation. Hum Reprod,
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2） Cohen J, Malter H, Fehilly C, Wright G, Elsner C, Kort H.:
Implantation of embryos after partial opening of oocyte zona
pellucida to facilitate sperm penetration. Lancet, 332: 162,
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3） Jelinkova L, Pavelokova J, Strehler E, Paulus W, Zivny J,
Sterzik K.: Improved implantation rate after chemical
removal of zona pellucida. Fertil Steril, 79（6）: 1299-1303, 2003.
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comparison between quarter, partial and total laser assisted
hatching in selected infertility patients. Hum Reprod, 16（10）:2182-2186, 2001.
5） Petersen CG, Mauri AL, Baruffi RL, Oliveira JB, Massaro
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assisted hatching with quarter-laser zona thinning. Reprod
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6） Yano K, Kubo T, Ohashi I, Yano C.: Assisted hatching using
a 1.48-μm diode laser: Evaluation of zona opening and zonathinning techniques in human embryos. Reproductive
medicine and biology, 5: 221-226, 2006.
7） Nishino E, Moriwaki T, Yoshii K, Udagawa Y.: Chemical
removal of zona pellucida versus laser assisted hatching after
repeated failures of assisted reproductive technology. Reprod
Med Biol, 5: 263-267, 2006.
8） Mohamad Eid Hammadeh, Constanze Fisher-Hammadeh
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developing rabbit-eggs. Science, 69（1782）: 226-229, 1921.

10） De Vos A, Van Steirteghem A.: Zona Hardening, Zona
Dorling and Assisted Hatching: New Achievements in
Assisted Reproduction. Cells Tissues Organs, 166: 220-227,
2000.
11） Goto M, Iwase A, Furusawa N, Kobayashi H, Kato N, Saito
A, Mori M, Osuka S, Kondo M, Nakamura T, Nakahara T,
Matsumoto H, Kikkawa F.: Time-lapse observations toanalyze the effects of assisted hatching. Reprod Med Biol, 13:
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12） Lulu A. Al-Nuaim, Julian M. Jenkins. Assisted hatching in
Assisted reproduction. Obstet Gynecol Int J, 109: 856-862,
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13） Cohen J.: Assisted hatching of human embryos. J In Vitro
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14） Vanderzwalmen P, Bertin G, Debauche Ch, Standaert
V, Bollen N, van Roosendaal E, Vandervorst M, Schoysman
R, Zech N.: Vitrification of human blastocysts with the HemiStraw carrier: application of assisted hatching after thawing.
Hum Reprod, 18（7）: 1504-1511, 2003.
15） Magli MC , Gianaroli L, Ferraretti AP, Fortini D, Aicardi
G, Montanaro N.: Rescue of implantation potential inembryos with poor prognosis by assisted zona hatching. Hum
Reprod, 13: 1331-1335, 1998.
16） Pract ice C omm it tee of t he A mer ica n S ociet y f or
Reproductive Medicine and Practice Committee of theSociety for Assisted Reproductive Technology: Role ofassisted hatching in vitro fertilization: a guideline.
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NM, Wilcox LS.: Does assisted hatching pose a risk formonozygotic twinning in pregnancies conceived through invitro fertilization? Fertil Steril, 74（2）: 288-94, 2000.
18） Polani B.Seshagiri, Venkatappa Vani, Pathak Madhulika:
Cytokines and Blastocyst Hatching. Am J Reprod Immunol,
75: 208-217, 2016.
19） Shimada M, Umehara T, Hoshino Y.: Roles of epidermal
growth factor（EGF）-like factor in the ovulation process.
Reprod Med Biol, 15: 201-216, 2016.

9第22 回

日本 IVF 学会学術集会
共催

日本臨床エンブリオロジスト学会
メインテーマSeek for quality ART〜上質な ART の探求〜
会期2019 年 10 月5日（土）
〜6（日）
会場

JR 九州ホール及び会議室

学術集会抄録集

理事長挨拶（一般社団法人 日本ＩＶＦ学会 理事長 / 塩谷 雅英）･･･････････････････････････････････････････････ 20
学術集会長挨拶（第22回 日本ＩＶＦ学会 学術集会長 / 蔵本 武志）･ ････････････････････････････････････････ 21
Program ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 22
会場アクセス ･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 24
フロアマップ ･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 25
お知らせ ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 26
Symposium１「ART を行うための理想的な培養液とは」
座長：IVF 大阪クリニック / 福田 愛作
近畿大学 / 三谷 匡

体外培養着床前胚の発生に及ぼす脱イオン化血清アルブミンの効果 ････････････････････････････････････････････････ 28株式会社 日本医化器械製作所 顧問開発研究員 / 山田 雅保

ARTと培養液：培養は安全ではない ･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 29
蔵本ウイメンズクリニック 研究室主任 / 村上 正夫

ART Basic Lecture
座長：九州大学 / 山内 伸彦

生殖研究から探る生命の「始まり」と「終わり」･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 30
国立成育医療研究センター 生殖細胞医療研究部 室長 / 宮戸 健二

生殖再生医療の進歩と今後の発展
座長：兵庫医科大学 / 柴原 浩章
セントマザー産婦人科医院 / 田中 温

ヒト生殖細胞試験管内誘導研究の現状と展望･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 31
京都大学 ヒト生物学高等研究拠点 拠点長/医学研究科・機能微細形態学 教授/ iPS細胞研究所連携併任研究者 / 斎藤 通紀

生殖細胞誘導システムを構築するための動物細胞を用いた前衛的研究 ･･････････････････････････････････････ 32
九州大学医学研究院 ヒトゲノム幹細胞医学分野 教授 / 林 克彦

日本臨床エンブリオロジスト学会「よくわかる！精巣内精子（細胞）の採取と選別 ～工夫、コツ、こだわり～」
座長：三宅医院 / 沖津 摂
加藤レディスクリニック / 上野 智

患者適応および精細管の状態からTESE の精細管処理を考える･ ･･･････････････････････････････････････････････････ 33
リプロダクションクリニック大阪 培養部 部長 / 水田 真平

14当院におけるMD-TESEおよびROSIの実際･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 34
セントマザー産婦人科医院 / 竹本 洋一

つじクリニックのTESE：精子回収予測と精子処理の実際 ･･････････････････････････････････････････････････････････････ 35
天神つじクリニック / 成吉 昌一

顕微授精の成功率を上げるために ～実験動物における顕微授精の視点から～ ･･････････････････････････････････ 36
理化学研究所 / 越後貫 成美

我が国の生殖医療の課題と今後の方向性
座長：大分大学 / 楢原 久司
九州大学 / 加藤 聖子

着床前遺伝子診断の日産婦臨床研究の方向性 ･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 37
徳島大学大学院 医歯薬学研究部長 / 苛原 稔

生殖医療の未来を考える −生殖医学の進歩の中で−･･････････････････････････････････････････････････････････････････ 38
内閣官房参与／慶應義塾大学 名誉教授／福島県立医科大学 副学長 / 吉村 泰典

反復着床不全への対応（同時通訳）
座長：山口大学 / 杉野 法広
広島HARTクリニック / 向田 哲規

The maternal factor in the embryonic implantation process: the microbiome and endometrial receptivity ･･･ 39
The University of Valencia / Carlos Simón

Time-lapse technology to improve the chances for poor-prognosis patients ･･････････････････････････････････････ 41
ilabcomm GmbH創設者・CEO / Markus Montag

Luncheon Seminar
座長：福岡大学 / 宮本 新吾

新時代の ART はどこへ向かうのか？･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 43
埼玉医科大学産科婦人科 教授 / 石原 理

オーストラリア生殖医学会 交換講演（同時通訳）
座長：HORACグランフロント大阪クリニック / 森本 義晴

Polarised light microscopy of Meiotic Spindles in ICSI ･ ･･････････････････････････････････････････････････････････････ 44
FSA President / Michael Chapman

がんと生殖医療
座長：久留米大学 / 牛嶋 公生

がん・生殖医療の今後の展望 ･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 46
聖マリアンナ医科大学 産婦人科学 教授 / 鈴木 直

15

学術集会抄録集

Symposium 2「ART を受ける現代女性が抱える問題点とその解決策」①働く女性のための解決策 ②卵巣予備能低下（DOR）に対する解決策
座長：アイブイエフ詠田クリニック / 詠田 由美
松田ウイメンズクリニック / 松田 和洋

Random start ovarian stimulation の新しい展開 〜 medical indication から social indication へ 〜･･･････････ 47
フェニックス アート クリニック 院長 / 藤原 敏博

クロミフェン低刺激周期での診療の工夫 ～個々の症例に対してどう対応していくか～･････････････････ 48
加藤レディスクリニック 院長 / 加藤 恵一

卵巣予備能低下症例に対する回収卵子数を増やす工夫 ････････････････････････････････････････････････････････････････ 49
杉山産婦人科 理事長 / 杉山 力一

一般演題〔口頭発表〕
O- 1 （当演題は取り下げとなりました）･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 50
O- 2

メラトニンの卵巣加齢に対する予防効果および投与開始時期の検討 ･･･････････････････････････････････････････ 50O- 3胞胚腔形成時の遊離割球及びフラグメント除去（Embryo Plasty）の有効性 ･･････････････････････････････････ 51

O- 4

ヒト胚では8-16分割になる際に1-4番目に分裂を開始した細胞がICMになる ･･･････････････････････････････････ 51

O- 5

多核胚とDirect Cleavage胚の臨床成績 ･････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 52

O- 6

タイムラプスを用いたヒト1前核胚および2.1前核胚の解析 ･･･････････････････････････････････････････････････････ 52

O- 7

発光ダイオード（LED）光源がICSI成績に及ぼす影響について ･ ･･･････････････････････････････････････････････ 53

O- 8

体外受精における精液酸化還元電位を用いた受精予測 ････････････････････････････････････････････････････････ 53

O- 9

患者は必ずしも治療継続のために凍結胚を保管している訳ではない ･･･････････････････････････････････････････ 54

山口大学大学院医学系研究科産科婦人科学 / 田村 博史

広島HARTクリニック / 寄田 朋子

英ウィメンズクリニック，岡山大学 / 大月 純子

蔵本ウイメンズクリニック / 渡辺 瞳

小牧市民病院 生殖医療センター / 糸井 史陽

英ウィメンズクリニック / 山上 一樹

神奈川レディースクリニック / 長谷川 久隆

松田ウイメンズクリニック / 末永 めぐみ

O- 10 不妊治療を受けた妊婦の「妊娠リスクスコア」による周産期予後 ･･･････････････････････････････････････････････ 54
英ウィメンズクリニック / 藤井 美喜

O- 11 挙児希望女性における亜鉛不足の現状とプレコンセプションケアにおける課題 ･････････････････････････････ 55
豊橋市民病院産婦人科 / 宮本 絵美里

16

O- 12 プラセンタエキス含有サプリメント摂取は胚培養成績を改善するか？ ･･･････････････････････････････････････････ 55
仙台ARTクリニック / 山田 健市

O- 13 液体窒素タンクが破損した際に生じる外観・液体窒素量・内部温度の変化 ････････････････････････････････････ 56
IVF大阪クリニック / 小橋 朱里

O- 14 凍結直前の収縮胚盤胞が臨床成績へ与える影響 ･･･････････････････････････････････････････････････････････････ 56
浅田レディースクリニック / 村上 加奈

O- 15 拡張した孵化胚盤胞をガラス化凍結する際に行う至適収縮処理法の考察 ･････････････････････････････････････ 57
新橋夢クリニック / 大久保 毅

O- 16 当院における分割胚の融解時期による臨床妊娠率への影響 ･･･････････････････････････････････････････････････ 57
園田桃代ARTクリニック / 小林 正知

O- 17 精巣内精子と射出精子を用いたICSIの臨床成績の比較 ･････････････････････････････････････････････････････････ 58
醍醐渡辺クリニック / 川辺 美里

O- 18 ICSI時の紡錘体観察は培養成績を向上させるのか ･････････････････････････････････････････････････････････････ 58
英ウィメンズクリニック / 井頭 千明

O- 19 細胞膜が低伸展性だった卵の発育能は低い ･････････････････････････････････････････････････････････････････････ 59
岡山二人クリニック / 花谷 美香

O- 20 40歳以上患者におけるPiezo-ICSIの有用性について ･･･････････････････････････････････････････････････････････ 59
英ウィメンズクリニック / 岸 加奈子

O- 21 電気刺激法とカルシウムイオノファーによる卵子活性化に関する研究 ･･････････････････････････････････････････ 60
セントベビークリニック / 藤江 周一朗

O- 22 高プロラクチン血症の治療後にIVF成績は改善するのか？ ･ ････････････････････････････････････････････････････ 60
IVFなんばクリニック / 村井 未来

O- 23 採卵決定日にLHサージ開始した採卵周期におけるレルゴリクスの排卵抑制効果の検討･･･････････････････････ 61
杉山産婦人科 新宿 / 中尾 佳月

O- 24 増加する就労女性患者に対する当院の取り組み〜ランダムスタート法による調節卵巣刺激法の活用〜 ･･･････ 61
蔵本ウイメンズクリニック / 加藤 裕之

O- 25 反復着床障害症例に対する子宮内膜受容能診断 日付診からEndometrial Receptivity Analysis（ERA®）へ 当院での検討････ 62
ソフィアレディースクリニック水道町 / 平井 佐和子

O- 26 プロゲステロン膣坐薬別のHRT-ET周期での血中プロゲステロン濃度測定の必要性 ･･････････････････････ 62
後藤レディースクリニック / 藤岡 美苑

O- 27 凍結胚移植時の各種黄体ホルモン製剤による血中プロゲステロン値と妊娠成績の検討 ･･･････････････････････ 63
仙台ARTクリニック / 品川 真澄

O- 28 自動タイムラプスインキュベーターにタイムラプス歴10年の培養士スキルは活かせるか ･････････････････････････ 63
豊橋市民病院総合生殖医療センター / 古井 憲作

17

学術集会抄録集

O- 29

Direct Cleavage由来胚でも形態良好胚盤胞であれば妊娠率は低下しない ･･･････････････････････････････････ 64

O- 30

Day4胚盤胞は第一選択か？～融解胚移植における胚盤胞の選択順位～ ･････････････････････････････････････ 64

つばきウイメンズクリニック / 坂井 和貴

ARTクリニックみらい / 安田 忠頼

O- 31 （当演題は取り下げとなりました） ･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 65
O- 32

次世代シークエンサー（NGS）を用いた流産絨毛組織の解析の検討 ･･････････････････････････････････････････ 65
広島HARTクリニック / 後藤 優介

O- 33 胞胚腔内残存割球における臨床成績と予後の検討 ･････････････････････････････････････････････････････････････ 66
高橋ウイメンズクリニック / 小島 勝志

O- 34

0PN由来胚盤胞の臨床成績についての検討･････････････････････････････････････････････････････････････････････ 66
高橋ウイメンズクリニック / 渡辺 慶

O- 35 C-IVF由来の1PN胚だけではなくICSI由来の1PN胚も臨床的に有用である ･･･････････････････････････････････ 67
浅田レディースクリニック / 辻 暖永

O- 36

当クリニックにおける10年間の人工授精（21,606周期）の検討 ･････････････････････････････････････････････････ 67

O- 37

運動精子選別装置「ミグリス」と従来法における精子調整法の比較 ･･･････････････････････････････････････････ 68

髙橋ウイメンズクリニック / 前島 澪

英ウィメンズクリニック / 鈴木 理恵

O- 38 受精予測式を用いたIVF，ICSIの受精方法選択と実際の臨床成績 ････････････････････････････････････････････ 68
英ウィメンズクリニック / 江夏 徳寿

O- 39

自宅から精液持参する場合，受精方法変更リスクが冬季で上昇する ･･････････････････････････････････････････ 69

O- 40

培養液開封後の経過日数が胚の培養成績に及ぼす影響 ･･･････････････････････････････････････････････････････ 69

IVFなんばクリニック / 佐藤 学

九州大学産婦人科 / 遠藤 祐子

O- 41 反復ART症例における抗酸化物質添加培養液の有効性についての比較検討 ･ ･･･････････････････････････････ 70
つばきウイメンズクリニック / 笹峯 梢

O- 42

18

初期胚培養のGM-CSF使用は，凍結融解胚移植周期において妊娠率向上に寄与する ･･･････････････････････ 70
聖マリアンナ医科大学 産婦人科学 / 古山 紗也子

学術集会

共催・協賛企業・後援一覧 ････････････････････････････････････････････････････････････････････

71

日本IVF学会雑誌発行における投稿論文募集のお知らせ ･･･････････････････････････････････････

72

日本IVF学会雑誌

投稿規定 ･ ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････

73

一般社団法人 日本IVF学会 定款 ･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････

75

一般社団法人 日本IVF学会 役員 ･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････

81

編集委員会 ･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････

82

19ごあいさつ
第 22 回日本 IVF 学会学術集会は蔵本武志大会長のもと，福岡で開催されます．本学会は，
ART を取り扱う唯一の学会として，長年にわたって親しまれて参りました．本学会の歴史の長さそして影響力の大きさを顧みますとそれは本邦の ART の歴史そのものであったと言っても過言ではありません．蔵本大会長は，第 22 回のテーマとして「Seek for Quality ART」を掲げられました．生殖医療が凄まじいスピードで進歩を続け，新しい技術，診断方法が次々に開発される中，
原点に立ち返って「Quality」の大切さを再確認することは，我が国の「ART」の状況を的確に捉えたものと言えます．
今年も２会場が用意され，日本臨床エンブリオロジスト学会との共催，そして 40 演題を越す
Oral Presentation とともに国内のみならず海外演者による State-of-the Art のプログラムが予定されています．まさにテーマである「Seek for Quality ART」に相応しい国際的な大会になるものと確信しております．
いまさら言うまでもなく，福岡は観光，ショッピング，グルメと，どれをとっても素晴らしい所です．そして 10 月の福岡は一年を通じて最高のシーズンを迎えます．IVF に関係しておられる皆様，どうか福岡まで足を運ばれ，基礎から臨床の先生方の貴重なお話，そして世界最先端の講義を受けながら IVF の大きな流れを汲み取り，ともに「Seek for Quality ART」
について語り合いましょう．プログラムを見ていただけるとお分かりいただけますが，どれも聞き逃したくないものばかりです．多くの方のご参加を切にお待ちしております．

令和元年秋
一般社団法人 日本IVF学会
理事長 塩谷 雅英

20

ごあいさつ日本 IVF 学会は，ART の有効性と安全性の向上を目的に，国内外の最新の知見を共有し，活発な議論のもと生殖医療従事者の研鑽に 20 年来努めてまいりました．そして今回平成から
令和に元号が変わった記念すべき年に第 22 回日本 IVF 学会学術集会を福岡で開催する運びとなり，大会長を務めさせていただくことをたいへん光栄に存じます．
わが国の ART 治療周期数は年々増加の一途をたどり約 45 万件に達し，ART による出生児数も累計で 50 万人を超え，今や年間約 18 人に 1 人が ART によって生まれています．治療件数ならびに技術水準においてもわが国は，世界をリードする立場にあると言っても過言ではありません．しかしその一方で，少子高齢化，晩婚化・晩産化の傾向は否めず，その結果難治症例が増えており，技術の進歩に反して ART の妊娠率が低下しているのが現状です．
生殖医療の治療の対象が単に患者だけではなく，その子孫や家族にまで及ぶものであることを考えるときに，我々医療従事者は改めて責任の重さを痛感するとともに，常に現状に満足することなく，より安全で質の高い治療を追求しなければならないと常々感じております．
そこで今回の本学術集会のテーマは『Seek for quality ART ～上質な ART の探求～』と題して，
ART 全般を網羅し，臨床・研究・患者サイドからより満足のいく ART について考えたいと思います．
内容は，1 日目に培養液に関するシンポジウム，また共生細菌やエキソソームが生殖に関わる役割について、ES/iPS 細胞を用いた生殖細胞作出など、最新の研究結果についてご講演いただきます．2 日目は，日本及び世界の ART の最新の情勢，日本が今後進むべき方向性や課題について，がんと生殖医療について，着床不全の対策についての講演や，働く女性に優しい
生殖医療について 3 施設からの発表によるシンポジウムを予定してます．またオーストラリア
生殖医学会からの交換講演として Michael Chapman 先生に Poloscope を用いた ICSI について
ご講演頂きます．
10 月 5 日（土）の懇親会では会場近くのホテル日航福岡におきまして，博多屋台風に九州一円の名物料理と美味しいお酒を取り揃えての歌姫による素晴らしいコンサートをお楽しみください．限られた時間ではございますが，どうぞ博多の夜も満喫してください．
会場のある JR 博多シティは JR 博多駅直結で鉄道の便もよく，さらに福岡空港から地下鉄で約 5 分と全国各地からのアクセスも非常に恵まれております．一人でも多くの皆様のご参加を心よりお待ち申し上げます．

令和元年秋
第22回 日本 IVF 学会
学術集会長 蔵本 武志

21

2019 年 10 月 5 日（土）第１会場 ９階 JR 九州ホール
時間
11:45～

区分／テーマ

演題

演者

レジストレーション

12：55～13：00 開会の辞

塩谷雅英 （英ウィメンズクリニック）

13：00～13：10 学術集会会長挨拶

Seek for quality ART

蔵本武志 （蔵本ウイメンズクリニック）

13：10～13：50 Symposium１
体外培養着床前胚の発生に及ぼす脱イオン化血清アルブミンの効果 山田雅保 （株式会社 日本医化器械製作所）「ARTを行うための理想的な培養液とは」ARTと培養液：培養は安全ではない
村上正夫 （蔵本ウイメンズクリニック）
生殖研究から探る生命の「始まり」と「終わり」宮戸健二 （国立成育医療研究センター）

14：40～15：10 生殖再生医療の進歩と今後の発展

ヒト生殖細胞試験管内誘導研究の現状と展望

斎藤通紀 （京都大学）

15：10～15：40

生殖細胞誘導システムを構築するための動物細胞を用いた前衛的研究 林13：50～14：20 ART Basic Lecture
14：20～14：40 Coffee

15：40～16：00 Coffee

break

克彦 （九州大学）

break

16：00～18：00 日本臨床エンブリオロジスト学会「よくわかる！精巣内精子（細胞）の採取と選別 ～工夫、コツ、こだわり～」

18：30～20：30 懇親会

患者適応および精細管の状態からTESEの精細管処理を考える

水田真平 （リプロダクションクリニック大阪）

当院におけるMD-TESEおよびROSIの実際

竹本洋一 （セントマザー産婦人科医院）

つじクリニックのTESE：精子回収予測と精子処理の実際

成吉昌一 （天神つじクリニック）

顕微授精の成功率を上げるために～実験動物における顕微授精の視点から～

越後貫成美 （理化学研究所）

ホテル日航福岡「都久志の間」～九州各地の名物料理をご堪能ください～2019 年 10 月 6 日（日）第１会場 ９階 JR 九州ホール
時間区分／テーマ

9：00～9：30

我が国の生殖医療の課題と今後の方向性

9：30～10：00
10：00～10：20 Coffee

演題

演者

着床前遺伝子診断の日産婦臨床研究の方向性

苛原稔 （徳島大学）

生殖医療の未来を考える ー生殖医学の進歩の中でー

吉村泰典 （内閣官房参与／慶應義塾大学名誉教授／福島県立医科大学副学長）

break

10：20～11：00 反復着床不全への対応（同時通訳）

The maternal factor in the embryonic implantation
Carlos Simón（The University of Valencia）
process: the microbiome and endometrial receptivity

11：00～11：30

Time-lapse technology to improve the chances forpoor-prognosis patients

Markus Montag（ilabcomm GmbH）

11：40～12：40 Luncheon Seminar

新時代のARTはどこへ向かうのか？

石原

13：30～14：00 オーストラリア生殖医学会 交換講演
（同時通訳）

Polarised light microscopy of Meiotic Spindles in ICSI

Michael Chapman（FSA President）

14：00～14：30 がんと生殖医療

がん・生殖医療の今後の展望

鈴木

12：40～13：00 Coffee

理 （埼玉医科大学）

break

13：00～13：30 年次総会および優秀演題表彰

14：30～14：50 Coffee

break

Random start ovarian stimulation の新しい展開
14：50～15：55 Symposium2
ARTを受ける現代女性が抱える問題点と 〜medical indicationからsocial indicationへ〜
クロミフェン低刺激周期での診療の工夫
その解決策～個々の症例に対してどう対応していくか～①働く女性のための解決策②卵巣予備能低下（DOR）に対する解決策
卵巣予備能低下症例に対する回収卵子数を増やす工夫
15：55～16：00 閉会の辞／次期会長挨拶

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直 （聖マリアンナ医科大学）

藤原敏博 （フェニックス アート クリニック）
加藤恵一 （加藤レディスクリニック）
杉山力一 （杉山産婦人科）
向田哲規 （広島HARTクリニック）

座長

専門医機構
領域講習受講単位

福田愛作 （IVF大阪クリニック）
三谷

時間

区分／演者

座長

13:20～13：56

口頭演題発表 A

4 題（O-1 〜 4）

浅田義正（浅田レディースクリニック）

13:56～14：32

口頭演題発表 B

4 題（O-5 〜 8）吉田仁秋（仙台 ART クリニック）

14:32～15：08

口頭演題発表 C

4 題（O-9 〜 12）

田村博史（山口大学）

匡 （近畿大学）

山内伸彦 （九州大学）

柴原浩章 （兵庫医科大学）
田中

第 2 会場 10 階 会議室

温 （セントマザー産婦人科医院）

沖津

摂 （三宅医院）上野

智 （加藤レディスクリニック）○

15：08〜15：44 口頭演題発表 D 4 題（O-13 〜 16）

吉田淳（木場公園クリニック）

15：44〜16：29 口頭演題発表 E

5 題（O-17 〜 21）

渡邊良嗣（福岡山王病院）

16：29〜16：56 口頭演題発表 F

3 題（O-22 〜 24） 江頭活子（九州大学）

16：56〜17：23 口頭演題発表 G 3 題（O-25 〜 27） 三田尾拡（久留米大学）

16：00〜17：00 理事会（９階 会議室 2）

座長

専門医機構
領域講習受講単位

楢原久司 （大分大学）
加藤聖子 （九州大学）○

杉野法広 （山口大学）

第 2 会場 10 階 会議室
時間

区分／演者

座長

9：00～9：27

口頭演題発表 H 3 題（O-28 〜 30） 神谷博文（神谷レディースクリニック）

9：27～9：45

口頭演題発表 I

2 題（O-31 〜 32） 矢野浩史（矢野産婦人科）

9：45～10：12

口頭演題発表 J

3 題（O-33 〜 35） 古賀文敏（古賀文敏ウイメンズクリニック）

10：12～10：48 口頭演題発表 K 4 題（O-36 〜 39） 井上善仁（井上善レディースクリニック）○

向田哲規 （広島HARTクリニック）
宮本新吾 （福岡大学）

10：48～11：15 口頭演題発表 L

3 題（O-40 〜 42） 竹内一浩（竹内レディースクリニック）○

森本義晴 （HORACグランフロント大阪クリニック）
牛嶋公生 （久留米大学）

詠田由美 （アイブイエフ詠田クリニック）
松田和洋 （松田ウイメンズクリニック）○

23

会場アクセス
JR 博多駅 構内図
筑紫口（新幹線側）
きっぷうりば

新幹線 中央改札口

博多デイトスアミュエストアミュプラザ博多
いっぴん通りＪＲ線

総合案内所

ＪＲ線 中央改札口

北改札口

マイング
きっぷ
うりば

きっぷ
うりば

博多阪急

アミュプラザ博多
アミュプラザ博多
東急ハンズ

中央エレベーター
博多口
駅前広場
タクシーのりば

阪急百貨店側（博多口）エレベーター

会場は JR 博多シティ（博多阪急側）の９階・10 階です

JR 九州ホール及び会議室（JR 博多駅より直結）
住所：〒812-0012 福岡市博多区博多駅中央街1番1号
TEL：092-292-9258■JR 博多駅◦ 飛行機をご利用の場合
福 岡 市 地 下 鉄 空 港 線 福 岡 空 港 駅 から 姪 浜・唐 津 方 面 行 き、地 下 鉄
博多駅下車徒歩3分■ 学会受付（JR 博多シティ 10F）
博多駅の【博多口側】から会場へお越し下さい。

◦『中央エレベーター』もしくは『博多阪急百貨店側（博多口）エレベーター』
をご利用下さい。
「博多阪急百貨店」内のエスカレーターも併せてご利◦「アミュプラザ博多」
用下さい。
※2日目、10月6日（日）の朝は、阪急百貨店側（博多口）
エレベーターと中央
エレベーターが 8：00 よりご利用いただけます。

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フロアマップ
JR 九州ホール及び会議室

9階

控室
B

控室
C

第 1 会場（JR 九州ホール）

ティ・ジョイ運営
事務局（シネコン）

控室

中央エレベーター（個室）

阪急百貨店側
エレベーター

企業展示

控室
A

企業展示

10 階

クローク

第 2 会場
（会議室）

PCデータ
受付
演者・座長
受付

受付

中央エレベーター
レストランゾーン

阪急百貨店側
エレベーター25

お知らせ
第22回 日本IVF学会 学術集会
共催：日本臨床エンブリオロジスト学会◦概 要

会期：2019年 10月 5日（土 ） 12：55 〜 6日（日）16：00
会場：JR 九州ホール及び会議室〒812-0012 福岡市博多区博多駅中央街1番1号 TEL: 092-292-9258

学術集会参加者へのお知らせ◦参加証

参加受付時に領収証兼用の参加証を受付窓口にてお渡しいたします．
会場内ではホルダーに入れて必ずご着用ください．
◦参加費

会員
大会参加費
非会員

事前参加登録割引（2,000 円割引）

当日

医師20,000 円

22,000 円

医師以外

10,000 円

12,000 円

医師23,000 円

25,000 円

医師以外

13,000 円

15,000 円

懇親会

一律

3,000 円

※事前参加登録割引は 2019 年 9 月 14 日（土）12：00 までのお申込みに適用されます．
◦プログラム抄録集

学会雑誌が学術集会講演抄録集を兼ねておりますので，会員の方は当日ご持参ください．お忘れの方には学会当日に 3,000 円で販売いたします（数に限りがございます）．
◦専門医などの出席証明について

1）日本産科婦人科学会専門医研修出席証明「e 医学会カード」による専門医研修出席証明を行いますので、会員の皆様は、「e 医学会カード」をご持参ください。
2）日本産婦人科医会研修参加証
研修参加証シールを発行いたします。（1 日 1 枚）
3）日本生殖医学会生殖医療専門医
日本生殖医学会生殖医療専門医更新ポイント5 点が加算されます。当日受付にて芳名帳を用意いたします。会員カードをご提示のうえご記名をお願いいたします。

264）日本専門医機構単位付与講習「e 医学会カード」による講習受講証明を行いますので、「e 医学会カード」
をご持参ください。日本専門医機構学術集会参加単位 3 ポイントが付与されます。また、プログラム「専門医機構領域講習受講単位」に〇印がついているセッション（2 日間合計５セッション）については、それぞれ１セッ
ションごとに１ポイントの日本専門医機構産婦人科領域講習受講単位が付与されます。

◦懇親会

日時：10 月 5 日（土）18：30 より
会場：ホテル日航福岡 3 階「都久志の間」
懇親会会場アクセス（JR 博多駅博多口より徒歩3分）

JR 九州
ホール

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Symposium1「ART を行うための理想的な培養液とは」体外培養着床前胚の発生に及ぼす脱イオン化
血清アルブミンの効果
山田 雅保（株）日本医化器械製作所
顧問開発研究員

略 歴1978 年 3 月 岡山大学大学院農学研究科畜産学専攻修了
4 月 創和会重井医学研究所研究員
1979 年 9 月 岡山大学医学部第一病理学研究生
1987 年 9 月 岡山大学医学博士を取得
1990 年 5 月 米国カリフォルニア大学ロサンゼルス校分子生物学研究所研究員
1992 年 6 月 京都大学農学部畜産学科助教授
2000 年 4 月 京都大学大学院農学研究科応用生物科学専攻准教授
2019 年 4 月 （株）日本医化器械製作所顧問開発研究員

血清アルブミンは，膠質浸透圧調節や，微量成分のキャリアーとしての働き，そしてアミノ酸の供給源など，多様な作用を持っている．近年，血清アルブミンがそのレセプターに結合することで細胞内シグナル伝達因子や転写因子を特異的に活性化させることから，細胞の増殖，分化への関与が示唆されている．ところが，血清アルブミンは胚発生の場である卵管液の主要タンパク質であるにもかかわらず，胚発生におけるその役割については未だに不明な点が残されている．この原因の一つに，市販の血清アルブ ミ ン に は 胚 の 着 床 前 発 生 に と っ て 有 害 な Zn2 ＋ やCu2 ＋ などの重金属イオンのような物質がごく微量混入していることが原因の一つと考えられる．実際これまでに，このような混入物質を除去するために，イオン交換樹脂による脱イオン化処理が試みられており，脱イオン化ウシ血清アルブミン（deionized BSA,
dBSA）にヒト骨髄細胞のコロニー形成やヒト ES 細胞の分化誘導を促進する活性が認められている．本講
演では，体外培養での受精胚および体細胞核移植胚の発生に及ぼす脱イオン化血清アルブミンの促進効
果について述べる．
マウス受精胚の体外培養では，金属キレート剤である EDTA と合成ポリマーである PVP を含む KSOM 培地（KSOM ＋）が一般に使用されている．EDTA 不含
KSOM 培地（KSOM −）では，ICR や ddY 系マウスの受精胚は２細胞期で発生を停止する．また，AKR 系
マウスでは，KSOM ＋培地でも２細胞期での発生停止現象が起こり，その解除には培地からリン酸を除去する必要がある．しかし，KSOM −培地においてもdBSA の添加によって，上記のいずれの系統のマウス
受精胚も２細胞期を超えて高率に胚盤胞期へ発生する．
マウス体細胞核移植胚の発生も dBSA によって促進される．ホノルル法では，ドナー体細胞（卵丘細胞）を高濃度の PVP を含むインジェクション液とともに除核卵母細胞内に注入することによって再構築胚が作成される．PVP は細胞内で分解されないことから，

28

その発生に悪影響を及ぼす懸念が持たれる．そこで，
PVP の代わりに dBSA を注入したところ，再構築胚の前核期および２細胞期でのヒストン H3K9 およびH4K12 のアセチル化レベルの増強とともに、着床前発生のみならず着床後のクローン産仔への発生が促進された．以上述べた dBSA の受精胚および体細胞核移植胚の発生を促進する活性は，脱イオン化ヒト血清アルブミンに存在し，無処理血清アルブミンや脱イオン化処理γグロブリンには認められない．従って，脱イオン化血清アルブミンの胚発生促進メカニ
ズムは明らかではないが，体細胞核移植胚に注入された場合，それは胚性ゲノム活性化時期における遺伝子発現のエピジェネティック制御を介して胚発生を促進することが示唆される．

Symposium1「ART を行うための理想的な培養液とは」ART と培養液：培養は安全ではない

村上 正夫
蔵本ウイメンズクリニック
研究室主任

略 歴
1999 年
山口大学大学院連合獣医学研究科終了
1999 〜 2002 年 米国ルイジアナ州立大学アニマルサイエンス学部ポスドク
2002 〜 2004 年 山口大学大学院ベンチャービジネスラボラトリーポスドク
2004 〜 2006 年 大阪大学微生物病研究所実験動物施設助手
2007 〜 2009 年 中国青島農業大学研究員
2009 年〜
蔵本ウイメンズクリニック研究室主任

当院では，ヒト IVF のモデルに主にウシ胚を用い，より安全で効果的な培養液の検討を行っている．私がウシ IVF の実験を始めた 1995 年当時，IVF は，広く人々の貴重なタンパク源になるウシを効率よく増やす，あるいは遺伝子導入（や後の体細胞クローン）技術と組み合わせ，ミルクから医薬品（血液凝固因子
等）を大量生産するなど，新しく実用的な仕事に感じた．しかし，当時の技術では，IVF 胚は体内由来胚と形態や発育動態が大きく異なる（発育異常が起こる）のが文献や現場体験ですぐに分かった．これには
桑実胚〜胞胚腔形成の異常（premature blastulation），
胚質（耐凍能）低下，過大仔などがあり，大きな原因の一つに，胚盤胞形成を促すため培養液に加える全血清が挙げられた．その後の研究蓄積で，低酸素培
養やアミノ酸添加も普及し，現在ヒト IVF では，品質管理された血清不在の市販液で良好胚が培養できる．しかし，血清アルブミンや代替血清などの血清由来成分は依然添加されており，上述に関連する危険性は否めない．また，いくら培養環境が改善されても，健康な体内環境には遠く及ばず，胚にとって不自然な環境なのに変わりはない．ここでは，過去の経緯を基に，今我々が取り組んでいる培養液の検討の意義と概略も一部紹介したい．

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ART Basic Lecture

生殖研究から探る生命の「始まり」と「終わり」宮戸 健二
国立成育医療研究センター
生殖細胞医療研究部室長

略 歴1990 年 4 月〜 1994 年 3 月 九州大学医学研究科分子生命科学専攻（理学博士）
1994 年 4 月〜 1997 年 3 月 東海大学医学部研究員
1997 年 4 月〜 2000 年 3 月 久留米大学分子生命科学研究所研究員
2000 年 4 月〜 2003 年 8 月 大阪大学微生物病研究所助手
2002 年 11月～ 2006 年 3 月 JST さきがけ 21 研究員兼任
2003 年 9 月〜 2010 年 3 月 国立成育医療センター研究所生殖医療研究部室長
2010 年 4 月〜 現在
国立成育医療研究センター生殖細胞医療研究部室長
2015 年〜現在 連携大学院教授（東京農業大学農学研究科）
2016 年～現在 非常勤講師（筑波大学グローバル教育院）
2019 年〜現在 連携大学院准教授（埼玉大学理学研究科）

卵は有限な細胞である．一方，精子は卵に比べて体内で大量に作ることができるが，運動できない精子は自分の力では卵にたどり着くことはできない．しかしながら，生殖補助医療（ART）では運動できなくても，1 個の精子があれば，細胞質内精子注入法（ICSI法）を用いて子供が誕生することが可能である．さらに，受精卵を凍結し，融解して施術に用いることが，ART の分野でも一般的になってきた．しかしその結果，いくつかの問題点が出てきた．
日本産婦人科学会に登録された不妊治療ビッグデータの解析から，凍結融解胚を用いた場合，自然分娩に比べて新生児の体重が 50 グラム，新鮮胚を用いた ART で産まれた新生児に比べて 100 グラム体重が重くなることがわかった．出産時の体重増加は，低体重に比べて発育の点からは良いとも考えられるが，その後の体重や健康に問題がないか今のところ不明
である．また，50 グラムや 100 グラムといった一定の体重差が存在することから，特定の臓器に凍結融解の影響が出ていることも危惧される．特に，脳に障害が出た場合，発達障害や発達遅延につながる危険性がある．そのため，現在の技術の安全性を向上させるために，さらなる改善，または全く異なる原理に基づいた ART の確立が必要になるかもしれない．
こうした状況の中，生殖研究を出発点として，様々な研究開発の芽が産まれている．例えば，精子を「女性の腫瘍をダーゲットにした抗がん剤の運び屋」といった研究も行われている．精子の本来の目的は，DNA を特定の目標（すなわち卵）に届け，卵と融合してその中身を注ぎ込むことにある．鞭毛をもつ精子は，これを自律的に行っている．さらに精子は，生殖器官内部の敵対的な状況（免疫系の攻撃による破壊）に抵抗するための装備ももっている．一方，腟内
には Lactobacillus 属などの乳酸菌が共生細菌として存在することが知られている．さらに，反復着床不全においては有意に子宮内膜炎の発症が見られ，抗生剤投与によって，移植あたり 10% 程度の妊娠率が30改善するとの報告がある．こうした結果から，正常な共生細菌が妊娠の成立に重要であると推測される．
つまり，共生細菌が産生する D- アミノ酸が生殖機能におよぼす役割が注目されるようになってきている．
さらには，近年注目されている細胞外微粒子である
エクソソーム（特にマイクロエクソソーム）の研究も生殖分野で進んでいる．今回は，生殖の基礎研究について，「精漿，共生細菌，ミトコンドリア，エクソ
ソーム」の役割に絞って紹介し，今後の生殖研究の動向について議論したい．

生殖再生医療の進歩と今後の発展

ヒト生殖細胞試験管内誘導研究の現状と展望

斎藤 通紀

略 歴
1995 年
1999 年
1999 〜 2003 年

京都大学医学部卒業
京都大学
京都大学大学院医学研究科修了［博士（医学）（月田承一郎教授）］
ヒト生物学高等研究拠点
Gordon Institute, Travelling Research Fellow/Senior Research
拠点長
Associate（Azim Surani 教授）
医学研究科・機能微細形態学
2003 〜 2009 年 理化学研究所発生・再生科学総合研究センターチームリーダー
教授
京都大学大学院医学研究科教授
iPS 細胞研究所連携併任研究者 2009 年〜
2011 〜 2018 年 科学技術振興機構戦略的創造研究推進事業 ERATO 研究総括
2018 年〜
京都大学 iPS 細胞研究所連携併任研究者
京都大学高等研究院教授／ヒト生物学高等研究拠点拠点長

生殖細胞は，精子・卵子に分化し，その融合により新しい個体を形成，我々の遺伝情報やエピゲノム
情報を次世代に継承する細胞である．生殖細胞の発生機構の解明は，遺伝情報継承機構・エピゲノム制
御機構の解明や幹細胞の増殖・分化制御技術の開発，
不妊や遺伝病発症機序の解明につながる．
我々は，培養ディッシュ上で，マウス ES 細胞 /iPS細胞から，精子・卵子、さらには健常な産仔に貢献する能力を有する始原生殖細胞様細胞を誘導する技術を開発した．また本培養系を用いて，始原生殖細胞を誘導する転写・シグナル機構の解明，エピゲノ
ムリプログラミングの本態の解明，始原生殖細胞の増殖法の開発，始原生殖細胞から精子幹細胞の試験
管内誘導，卵母細胞分化・減数分裂誘導機構の解明などに成功した．また，これら成果を基盤に，ヒトiPS 細胞からヒト始原生殖細胞様細胞を誘導する技術を開発した．また，ヒト生殖細胞の試験管内誘導技術を発展させるため，実験動物として使用しうる霊長類の中でヒトに最も近縁のカニクイザルを用いた研究を推進し，マウス・サル・ヒトにおける多能性
スペクトラムの発生座標を解明，霊長類生殖細胞系
譜が初期羊膜を起源とすることを見出した．さらに，
最近，ヒト始原生殖細胞様細胞を卵原細胞に成熟させ，エピゲノムリプログラミングを誘導することに成功した．
本講演では，ヒト生殖細胞試験管内誘導研究に関する我々の最新の研究成果と今後の展望を議論したい．

31

生殖再生医療の進歩と今後の発展

生殖細胞誘導システムを構築するための動物細胞を用いた前衛的研究
林 克彦
九州大学大学院
医学研究院
ヒトゲノム幹細胞医学分野
教授

略 歴2004 年
理学博士（東京理科大学）
2004 〜 2005 年 大阪府立母子保健総合医療センター常勤研究員
2005 〜 2009 年 ケンブリッジ大学ガードン研究所研究員
2009 〜 2014 年 京都大学医学研究科講師（2012 年より准教授）
2011 〜 2014 年 京都大学 iPS 細胞研究所特任講師（兼任）2011 〜 2015 年 科学技術振興機構さきがけ研究員（兼任）2014 年〜
九州大学大学院医学研究院教授

体外培養下で ES 細胞や iPS 細胞から精子や卵子を作り出すことができれば，配偶子形成メカニズムの解明や，個体の作製に貢献する．我々はこれまでにマウスの ES/iPS 細胞から機能的な卵子を分化誘導する体外培養法を開発した．この培養系では ES/iPS 細胞を始原生殖細胞（生殖細胞系列の起源）に一旦分化させたのちに，胎仔卵巣の体細胞と再凝集して疑似卵巣を作製する．これらの疑似卵巣を培養膜上に保持することにより，ES/iPS 細胞由来の始原生殖細胞
は卵母細胞へ分化し，最終的には第二極体を放出した成熟卵子へと分化する．これらの卵子のいくつかは，野生型の精子と受精したのちに，個体にまで発生する．一方で，ES/iPS 細胞から分化させた始原生
殖細胞は胎仔精巣と再凝集すると精原細胞となることが知られている．それらの精原細胞は成体の精巣への移植により，受精可能な精子に分化する．
これまで述べたように，ES/iPS 細胞から誘導される配偶子をヒトにおいて利用することは近い将来のように思われるが，実際には倫理的な課題はもとより，技術的な課題が多く存在する．技術的な課題は二つに大別され，ひとつは種間（マウスとヒト）の違いをどう埋めるかという課題，もうひとつは配偶子分化培養システムそのものの問題をどう解決するかという課題である．後者について具体的な問題点を挙げると，胎仔卵巣・精巣を必要としていること，培養下における配偶子の分化過程が生体内のものと異なること，発生率が極めて低いこと，などが挙げられる．これらはまず動物実験をもって解決すべき課題であり，我々はこれらの課題に取り組んでいる．
本会では卵母細胞系列の体外再構築の紹介や，それらをより確立されたシステムにする試み，培養系を用いた卵母細胞分化メカニズムの解明について最近の知見をもとに紹介したい．

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日本臨床エンブリオロジスト学会「よくわかる！精巣内精子（細胞）の採取と選別〜工夫，コツ，こだわり〜」

患者適応および精細管の状態から
TESEの精細管処理を考える水田 真平
リプロダクションクリニック大阪
培養部部長

略 歴
2003 年 3 月 藤田保健衛生大学衛生学部卒業
4 月 藤田保健衛生大学大学院保健学研究科（修士課程）分子遺伝学専攻入学
2005 年 3 月 藤田保健衛生大学大学院保健学研究科（修士課程）修了
4 月 英ウィメンズクリニック入職
2010 年 1 月 英ウィメンズクリニック培養部門リーダー
2012 年 2 月 英ウィメンズクリニック退職
2012 年 2 〜 5 月 英国 IVF Hammersmith にて研修
2013 年 1 月 リプロダクションクリニック大阪入職，開設担当部長
9 月 リプロダクションクリニック大阪胚培養室室長
2017 年 2 月 リプロダクションクリニック大阪，東京培養部部長兼任（現在に至る）
2019 年 4 月 兵庫医科大学大学院医科学専攻（博士課程）産科学婦人科学教室入学

男性の 100 人に 1 人は無精子症と言われており，その原因は大きく分けて 2 つある．精路が閉塞しているか精管が無い閉塞性無精子症（OA），およびクライン
フェルター症候群，Y 染色体微小欠失（AZF 欠失），抗ガン化学療法後や停留精巣固定術後，原因不明で造精機能が著しく低下している場合などの非閉塞性無精子症（NOA）である．無精子症患者が挙児を得るには，精巣内精子採取術（TESE）が有用となる．日
本では 2016 年に，TESE-ICSI が 2,799 周期実施されており，TESE 件数は不明で，患者適応や ICSI 後の成績，出生児数も集積されていない．本発表では，
TESE および TESE-ICSI の治療成績を患者の原因別に示し，症例別の精細管の状態や精子調整や探索方
法，成績改善に向けた対処方法を，精子および卵子へのアプローチも含めお話したい．
当院は 2013 年 9 月に開院し，2019 年 4 月までの間に
1,532 件の TESE を実施し，患者適応別に精子回収率
およびその後の治療成績は大きく異なっていた．例
えば，OA の精子回収率は 100% で，培養成績は良好，
症例あたりの臨床妊娠率は 85%を越える．一方，NOAのうち，クラインフェルター症候群および AZFc 欠失の症例では回収率 53%と82%と高率だが，培養成績は不良で，症例あたりの臨床妊娠率は 61% および 64% と低率であった．成績が異なる理由は，得られる精子の数とその質によるものであると考えられる．精子を数多く回収できた場合，質の良い運動精子を選別することが可能だが，精子数が非常に少ない場合では，非運動精子を使用せざるを得ないこともある．そのため，選別し得る数の精子を効率よく探索することが重要である．OA の場合，精巣のどの部位から精細管を採取しても均一であり，精細管の一部をランダムに採取する conventional TESE によって多数の精子を回収できる．NOA の場合は，精細管が均一の場合と不均一の場合があるため，顕微鏡下で白く太く屈曲している精細管を狙って採取する micro TESE
が有用で，不均一症例の方が精子回収率は高く，胚培養士による精子探索も容易である．不均一な症例
では，太い精細管のみを採取することで，精子の割合が多い懸濁液となり，精子の探索も容易になり，良好精子の選別も比較的可能となる．それに対して精細管が均一な症例は maturation arrest 傾向で，精子を認めないか，精細胞に対して精子の割合が極めて少ないことが多く，精子の探索は極めて困難で時間を要する．
我々はこれまでの経験から，TESE の方法や精子の調整方法は，上記の様な精細管の状態に応じて適切に対応する必要があると考えている．精子数が多い
場合は精子に負荷をかけないシンプルな遠心処理，精子数が少ない場合は精子のロスを減らした処理，精細胞が多く精子の相対量が少ない場合は，フィルト
レーションなどにより精子を抽出する，などである．
また，質が良くない精子であっても，いかに精子を選別し，成績を向上させるかも考えなければいけない．非運動精子を使用した場合の成績は非常に不良であるが，妊娠に至る症例も存在する．精子の選別はペントキシフィリンを使用した精子の賦活化，HOST や形態による選別法が主流であり，カルシウ
ムイオノフォアなどを使用した卵子活性化も併用される．当院でのこれらの使用方法や，治療成績の比較もお示ししたい．

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日本臨床エンブリオロジスト学会「よくわかる！精巣内精子（細胞）の採取と選別〜工夫，コツ，こだわり〜」

当院における MD-TESE および ROSI の実際

竹本 洋一
セントマザー産婦人科医院

略 歴1984 年 3 月 美萩野臨床医学専門学校卒業
4 月 芳野病院勤務
1985 年 5 月 九州臨床検査センター勤務
1988 年 1 月 安田循環器科医院勤務
1990 年 5 月 セントマザー産婦人科医院勤務
臨床検査技師（1984 年 4 月），胚培養士（2006 年 5 月）

MD-TESE における培養士の役割は非常に重要と思われる．採取された精細管を処理していかに早く精子を見つけることが出来るか，回収された精子をどのようにして凍結保存するか，精子が見つからな
ければ次に何をすべきかなど迅速な対応が要求される．今回，当院における MD-TESE，MESA，ROSIの実際について，また ROSI に関する取り組みについて発表する．
1．MD-TESE，MESA
閉塞性無精子症症例の場合，精巣上体精子回収法（MESA）を行う．MESA によって回収された精子は精子数も運動性も TESE とは比較にならないほど良好で，凍結方法も射出精子と同様に行うことが可能
で簡便である．自家製のガラス製の極細針で怒張した精巣上体管を穿刺し精子を回収し凍結保存する．
非閉塞性無精子症症例の場合，MD-TESE を行う．
術者により手術用顕微鏡下で太く蛇行があり良好な精細管を片側または両側の精巣から 10 ～ 15 か所採取し，直ちに 10%SPS-HTF 培養液ドロップ内にて 27G
針で精細管をほぐし倒立顕微鏡下で精子を検索する．
精子が見つかった場合，運動性及び形態，精子数を確認し受精可能な精子を回収の後，クライオトッ
プを用いた極少数精子凍結法にて凍結保存を行う．
精子が見つからなかった場合，コラゲナーゼおよびトリプシンドロップにて精細管をほぐし精子細胞の検索を行う．
ここで重要な事は，精子細胞と他の細胞，特に精祖細胞との鑑別である．十分なトレーニングを積むことで精子細胞の鑑別は可能となるので MD-TESEに携わる培養士は鑑別技術を身に着けていただきた
いと思う．
採取した組織は酵素処理を施し，精細管内細胞を分離回収し細胞浮遊液を作製する．処理後の細胞の状態を確認し，エチレングリコールとスクロースを主成分とした凍結媒液を加えてプログラムフリー
ザーにて緩慢凍結法により凍結する．

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2．ROSI
凍結しておいた精子細胞を 33℃の温湯で急速融解し洗浄後 ROSI ドロップにペレットを注入し精子細胞を回収して ROSI を行う．
精子細胞の成熟度により，Sa ～ Sb2 であれば ROSIの際に卵子活性化が必要である．成熟度が Sc ～ Sdと進んでいる場合は活性化を必要としない．卵子活性化法には種々の方法があるが当院では電気刺激による卵子活性化を行っている．活性化装置は NEPAGENE 社の LF-201を用いて，AC5V10secDC120V/mm99 μ secの条件下でマニトールを主成分とする活性化液にて電気パルスを 1 回行う．現在 ROSI 後の受精率，胚発生率向上のための検討を行っているのでその結果についても報告したい．
3．まとめ
1）閉塞性無精子症が疑われる場合は MESA を優先すべきと考えている．TESE によって回収された精子と比べ精子数，運動性，成熟度共に射出精子と同等レベルの精子であると考えられるからである．
2）TESE によって回収された精子の凍結保存はその凍結法により融解後の精子回収率，運動性が大きく異なるので重要と考えられる．
3）精 子 が 見 つ か ら な く て も 精 子 細 胞 が 見 つ か れ ば
ROSI の技術により子供を授かることができるが，妊娠率は低く流産率が高い傾向があるので更なる技術向上に取り組んでいる．

日本臨床エンブリオロジスト学会「よくわかる！精巣内精子（細胞）の採取と選別〜工夫，コツ，こだわり〜」

つじクリニックの TESE： 精子回収予測と精子処理の実際

成吉 昌一
天神つじクリニック

略 歴1992 年 3 月
岐阜医療技術短期大学（現：岐阜医療科学大学）卒業
1993 年 4 ～ 11 月 臨床病態医学研究所病理組織診断部門
1993 年 12 月～ 2003 年 6 月 西村泌尿器科病院
2003 年 7 月～
天神つじクリニック
臨床検査技師，日本超音波医学会超音波検査士（泌尿器領域）
日本超音波医学会 Young Investigators Award 最優秀演題賞（2005）
米国生殖医学会（ASRM）年次総会ポスター部門 Second Prize（2017）

無精子症は，一般男性の 1％，不妊男性の 15％にみられるとされ，閉塞性無精子症（OA）と非閉塞性無精子症（NOA）に大別される．両者は精子の回収率に大きな差があるため，その鑑別は極めて重要である．
OA は精路の閉塞や欠損により精液中に精子を認めない状態で，造精機能には問題がないと考えられるが，その診断は精巣容積が正常で FSH 値の上昇がな
ければ OA というような単純なものではない．OA の診断には超音波検査（US）が不可欠であり，われわれは初診時に陰嚢 US で精巣網−精巣上体−陰嚢部精管の中枢側精路を，経直腸的 US で精管膨大部−精嚢−
射精管の尿道側精路を詳細に観察し，両側精路に通過障害の所見を認めれば OA と診断している．当然ながら精路通過障害に造精機能障害を合併している症例はありうるが，US で両側の精路閉塞が明らかで，
FSH の上昇もなければ，精子回収率はこれまでのところ 100％である．
術前診断で OA とされれば，生検で精細管を採取す
る．採取された精細管は 10% 血清加 HTF 溶液 0.3mlを入れたディッシュに浮遊し，手術場に隣接した検査室のクリーンベンチへ運ばれる．精細管を滅菌フ
ロストスライドガラスですり合わせて mince 液を作成し，倒立顕微鏡（400 倍）で観察し，精子の運動性やおおよその数，形態を直ちに執刀医に報告し，その情報はスタッフや患者に共有される．精巣内精子の存在が確認されれば，次に精巣上体の穿刺・吸引を試みる．採取された精子を含む mince 液に 10% 血清
加 HTF 溶液を追加して 0.5ml に調整し，同量の Extra
TM
Sperm Freeze と合わせてヌンクチューブに分注し，
室温で 15 分間静置してから凍結する．OA 精子については，エオジン Y 染色により凍結前および凍結融解
後の精子生存率を確認している．
NOA は造精機能障害による無精子症である．US
で両側の精路に通過障害の所見がなければ，低ゴナ
ドトロピン性性腺機能低下症を除き，microdissection
TESE（micro-TESE）による精巣内精子回収を計画す

るが，US で NOA と診断されても造精機能が正常な症 例 が ま れ に 存 在 す る（ 例 え ば 精 巣 内 精 路 閉 塞 ）．
Micro-TESE による NOA の精巣内精子回収率は一般に 30-40％で，これまで精巣容積や FSH，インヒビン
B などの値から，精子回収の予測が試みられてきたが，単独でもそれらを組み合わせたスコアでも信頼に足る予測因子はなかった．われわれは US 画像の明るさとコントラストを調整する独自の方法で精細管径を評価してきた．精細管径を 0μm/100μm/200μm/250μm/300μmに分類すると，全体の精子回収率が 30%であるのに対し，径 250μm 以上の精細管が描出される症例の精子回収率は 63%であり，術前の精子回収予測因子として非常に有用と考えられる．
NOA では，精子回収率にこだわらず，顕微授精に向けて質の高い精子を提供することを第一に迅速な精子処理を心がけており，精子へのダメージを最小限に留めるため，遠心分離や酵素処理などは行っていない．精細管を眼科用セーレで細切し，OA と同様に滅菌フロストスライドガラスですり合わせて mince
液を作成，顕微鏡下に観察し，精子や細胞の有無，精子があれば，その数，運動性や形態を直ちに執刀医に報告し，OA同様に凍結する．精子がなければディッ
シュ内の mince 液を見直し，それでも見つからない
場合は mince 液を集めて再度時間をかけて検鏡する．
本講演では，US による無精子症の精子回収予測とTESE 時の精子処理の実際について報告したい．

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日本臨床エンブリオロジスト学会「よくわかる！精巣内精子（細胞）の採取と選別〜工夫，コツ，こだわり〜」

顕微授精の成功率を上げるために～実験動物における顕微授精の視点から～
越後貫 成美略 歴1995 〜 2002 年 国立予防衛生研究所（現：国立感染症研究所）入所
理研バイオリソース研究センター
1999 年 筑波大学大学院修士課程医科学研究科修了
遺伝工学基盤技術室
2002 年 理化学研究所バイオリソース研究センター入所
現在に至る

ヒトの生殖補助医療に精子を用いた顕微授精技術（ICSI）が導入されてから 30 年近くが経過した．一般
的に ICSI は体外受精（IVF）が困難な場合に適用されることが多い．一方，実験動物において顕微授精技術が適用される場面は，ヒトと同様に自然交配や IVF
による産仔獲得が望めないケースに加え，発生学研究の一手法としても利用されている．特にマウスにおいては，ICSI 以外にも伸張精子細胞（ELSI），円形
精子細胞を用いた顕微授精（ROSI），一次精母細胞を用いた顕微授精での産仔獲得が報告されている．卵子の安定した品質により，マウス顕微授精法は他の動物種に比べて高い産仔率が期待できるが，用いる
雄の繁殖状況や精細胞の状態によって顕微授精に用いる精子・精細胞をその都度選択している．例えば，
精巣上体尾部に精子が存在していても一定期間繁殖が成立していない個体であれば，その精子は細胞学的に死滅している可能性が高い．この場合，実験には精巣内精子または精細胞を選択する．また，凍結保存された精子・精細胞に加え，2-3 日低温にて保存された精巣上体および精巣由来の精子・精細胞でも顕微授精により産仔が得られている．凍結精子を利用する場合，K ＋ -rich な細胞浮遊液を用いることでNa＋の流入を防いで細胞へのダメージを極力抑えることが重要である．また，精細胞を用いる場合は，細胞採取時の温度や培養液等に配慮している．このよ
うに，用いる精子や精細胞の状態に応じた細胞処理法や顕微授精法をその都度的確に判断することで受精率の向上が期待できる．
しかしベストの条件下においても，産仔を得る効率は一般的に，IVF ＞ ICSI ＞ ELSI ＞ ROSI ＞一次精母細胞を用いた顕微授精の順となる．その理由として genetic な原因と epigenetic な原因が考えられる．
たとえば，ROSI 胚においては DNA メチル化状態がIVF や ICSI 胚と異なること，一次精母細胞由来胚では卵子内で生じる減数分裂時に染色体分裂異常が発生しやすいことなどが報告されている．また，正常36に生まれても何らかの顕微授精の影響が残る可能性がある．ヒトの生殖補助医療においては，自然妊娠との相違が調べられることが多いので，IVF と ICSIの比較はあまり行われていない．一方，マウスでは，両者の比較が多く行われている．例えば，ICSI 胚では、発生過程から出生時に至るまで 5％程度の遺伝子に発現変化が誘導されること，成体マウスの行動量に有意な減少が認められることなどが明らかにされている．以上のような知見は，実験動物を用いた顕微授精技術の詳細な研究が進むことで得られるものであり，生殖補助医療分野の発展にも貢献すると考えられる．特に精細胞由来胚の低産仔率の解明および改善が進むことは，今後ヒトにおいても症例数の増加が予想される精細胞を用いた顕微授精への応用に役立つと思われる．本発表では，げっ歯類以外でも，小型霊長類マーモセットの ELSI･ROSI および補助的な卵子活性化法についても知見が得られたので，併せて報告したい．

我が国の生殖医療の課題と今後の方向性

着床前遺伝子診断の日産婦臨床研究の方向性

苛原 稔
徳島大学大学院
医歯薬学研究部長

略 歴1979 年 3 月
1991 年 10 月
1995 年 8 月
2001 年 4 月
7月
2010 年 4 月
2013 年 4 月

1998 年，日本産科婦人科学会（日産婦）は「着床前診断に関する見解」を公表し，着床前遺伝子診断（PGT）
を臨床研究（研究的要素の強い医療行為で有用性が明確でない医療）として実施することにした．対象を，①重篤な遺伝性疾患を出産する可能性のある遺伝子な
らびに染色体異常を保因する場合と，②均衡型染色体
構造異常に起因すると考えられる習慣流産，に限定し，
日産婦倫理委員会内に審査小委員会を設置して 1 症例毎に妥当性の審査を行い，いわゆる PGT-M を実施してきた．一方，特に優生学的な課題に配慮してスクリーニング行為は禁止としてきた．
20 年間の PGT-M では約 700 症例が認可されているが，臨床研究で行う見解を定め，1 症例毎に審査を行う体制を維持するなど，倫理に配慮してきた日産婦の姿勢は，本邦での PGT の定着に重要なステップであったと考えている．しかし，開始から 20 年が経過し，高年齢の挙児希望女性が増加し異数性染色体異常を原因とする流産が増加し，習慣流産や高年齢女性で ARTが反復不成功である例などで，染色体異数性のチェックを目的とした PGT-A への期待が高まっている．
PGT-A を臨床応用するには，この医療技術が日本社会に広く理解される環境整備が肝要である．そのためには，まず臨床的有用性を示すこと，また PGT-A
を行う上での医療体制の整備を検討すること，さらに，技術に内在する倫理や社会的問題の議論を行うことが必要である．
そこで，臨床的有用性の検証と医療体制の整備を検討するため，日産婦は PGT-A 特別研究を行ってきた．
すなわち，反復 ART 不成功例と原因不明習慣流産症
例を対象として，アレイ CGH による PGT-A を，比較対象試験により，妊娠予後を改善するかを検討項目にして，特別臨床試験を実施した．2019 年 3 月には試験が終了し，現在成績をまとめて論文化中である．
パイロット的な RCT 試験が終了したので，日産婦は次のステップの臨床試験を計画している．対象は，① ART 反復不成功例，②反復流産例，③構造異常や徳島大学医学部医学科卒業
徳島大学講師（医学部附属病院産科婦人科）
講師休職にて米国メリーランド大学医学部産婦人科研究員（～ 1996 年 7 月）
徳島大学助教授（医学部産科婦人科学講座）
徳島大学教授（医学部産科婦人科学講座）
徳島大学病院長（～ 2011 年 3 月）
徳島大学医学部長（～ 2017 年 3 月）
徳島大学大学院医歯薬学研究部長（現在に至る）

異数性による流産の既往例とし，3 ～ 5 年程度を目安にして基本的にオープン試験で実施することにしている．早急に研究参加施設を選択するとともに，今回は，結果の標準化を図るため検査受託施設も選択する予定
である．検査施設には，内部精度管理とともに外部精度管理を定期的に行って，結果の標準化を担保することを考えている．

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我が国の生殖医療の課題と今後の方向性

生殖医療の未来を考える―生殖医学の進歩の中で―

吉村 泰典
内閣官房参与慶應義塾大学名誉教授
福島県立医科大学副学長

略 歴1975 年
1983 年
1984 年
1995 年2013 年
2014 年2015 年

慶應義塾大学医学部卒業
米国ペンシルバニア病院 research fellow
米国ジョンズホプキンス大学 instructor
慶應義塾大学医学部産婦人科教授
内閣官房参与（少子化対策・子育て支援担当）
慶應義塾大学名誉教授
福島県立医科大学副学長（業務担当）

2007年日本産科婦人科学会理事長（〜 2011年），2010年日本生殖医学会理事長（〜 2014年）
2011 年日本産科婦人科内視鏡学会理事長（〜 2015 年）
松本賞，日本産科婦人科学会栄誉賞，福澤賞

近年の生殖医学の進歩には目覚ましいものがあり，生殖現象の解明のみならず，ヒトの生殖現象を操作する新しい技術も開発されている．現代の生殖医学の発展は遺伝学の進歩に負うところが大きい．遺伝学は生命情報の継承と個体間の多様性を研究する生物学の中心的な学問分野であり，人類遺伝学は人間の理解を基本理念として，遺伝学の立場から科学，医療，社会への貢献を通して，より良い人類の未来を目指す学問分野である．
遺伝子改変動物を用いれば，培養細胞や試験管内ではみられないダイナミックな高次生命現象を個体レベ
ルで観察・解析することができる．特にヒトと同じ哺乳類に属するマウスは，体外受精や胚移植などの生殖補助技術が早くから確立されたこともあり，古くから遺伝子改変マウスがつくられている．これらは，遺伝子機能解析ツールとしてだけでなく，ヒト疾患の病態モデルとして生命科学や医学研究の礎を担っている．
ゲノム編集は遺伝情報の書き換えを容易にしてきた．
受精卵を使えば，体ができていく過程で起きる遺伝情報の異常と病気との関係などを解明するのに有用であり，不妊症や遺伝性難病の予防・治療に道を開くとの期待は大きいものがある．
再生医学の生殖医療への応用を考えた場合，無精子症や早発月経のような絶対不妊などの生殖機能障害を持つ個人から，ヒト胚性幹細胞（ヒト ES 細胞），iPS細胞（induced Puripotent Stem cell）を樹立し，配偶子へ分化させることが可能となれば，精子や卵子の提供を受けることなく，子どもを持てる時代が到来するかもしれない．しかし，生殖医療は，他臓器の再生医療と異なり世代の継承に関与しており，個体にとどまらないという特殊性をもっていることを忘れてはならない．
今後，生殖医療をどのように発展させていくかは，
人間の智慧が問われるところである．

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反復着床不全への対応

The maternal factor in the embryonic implantation
process: the microbiome and endometrial receptivity
Carlos Simón
Department of Obstetrics andGynecology, Valencia University;
IGENOMIX foundation/INCLIVA,
Valencia, Spain
Department of Obstetrics andGynecology, School of Medicine,
Baylor College, TX, USA

Biography
Board Certified and Professor of Ob/Gyn at the University of Valencia, Spain;
Adjunct Clinical Professor, Department of Ob/Gyn, Stanford University Schoolof Medicine, USA; and Baylor College of Medicine, USA & Scientific Director of
Igenomix.
As a clinician-scientist his main interest is the understanding of the humanembryonic implantation process, considering as key elements the embryo, thematernal endometrium, and the cross-communication between them using different
scientific perspectives. He is author of 445 publications in international peer-review
journals, adding up to an accumulated impact factor of 2, 146. 37. His papers havereceived a total of 18, 732 cites with an average of 42 cites/paper. His H-Index
is 7 4 and he is editor of 1 9 books (one best seller and one awarded as Highly
Commended, BMA Book Awards 2018). He has been Director of 38 PhD Thesis.
The quality of his work has been recognized by the American Society of
Reproductive Medicine, the Society for Gynecological Investigation, the Spanish
Society of Obstetrics & Gynecology, and the Spanish Fertility Society. He received
the Prize Jaime I in Medical Investigation in 2011, and the ASRM Distinguished
Research Award in 2016.
Pubmed Publication List: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/myncbi/simon_cResearchID: G- 2186- 2014. http://www.researcherid.com/rid/G- 2186- 2014
Google Scholar: https://scholar.google.es/citations?user=nA_MhRMAAAAJ&hl=es
Personal Website: www.carlos-simon.com

The endometrium is a hormonally regulated organthat is non-adhesive to embryos throughout most of
the menstrual cycle in humans. Endometrial
receptivity refers to a hormone-limited period inwhich the endometrial tissue acquires a functional
and transient ovarian steroid-dependent statusallowing blastocyst adhesion. Functional genomic
studies of human endometrium in natural cycles
have demonstrated that endometrial receptivity is anactive process involving up- and down-regulation of
hundreds of genes.
Personalized medicine is a well-accepted concept
in reproductive medicine except for the endometrial
factor that is still neglected. Our group has developed
the endometrial receptivity analysis （ERA）,
composed by the transcriptomic signature of 238
genes using Next Generation Sequencing（NGS）
coupled to a computational predictor capable ofdiagnosing the window of endometrial receptivity
regardless of its histological appearance.
The discovery of microbial communities inhabiting
the whole female reproductive tract has challenged
the traditional view of human fetal development in asterile environment. Technical advances havefacilitated the study of the bacterial microbiome inthe upper and lower genital tract, as well as the roleof such bacteria in women’s health and fertility. The
microbiota in the urogenital tract of healthy
reproductive age women is mainly composed ofbacteria from the Lactobacillus genus; however,structural or compositional variations of thismicrobiota, that could occur throughout a women’slife in response to intrinsic and extrinsic factors may
impact the function of reproductive organs.
In this presentation we will update the diagnostic
and therapeutic efficiency of ERA in patients withimplantation failure （IF）, through personalization of
the day of embryo transfer （pET） as well as theresults of our international RCT to investigate thereproductive outcome of infertile women under 38
year （BMI of 18.5-30 and AFC ＞ 8） s in their first
IVF/ICSI cycle with elective blastocyst transfer
randomly allocated to be performed in a fresh cycle,
after freezing all embryos or after identification of thepersonalized WOI with the ERA test（pET）.
Finally, the investigation of endometrial bacterial
communities has revealed that the endometrial cavity
is not sterile. The presence of a Non-Lactobacillusdominated microbiota（NLD）（＜ 90% Lactobacilli）or
pathogens responsible for chronic endometritis ininfertile patients are associated with decrease39

reproductive outcome in terms of implantation,
pregnancy and live birth rates.
This work was supported by the EU FP7PEOPLE-2012-IAPP grant SARM, No. 324509.
The discovery of microbial communities inhabiting
the whole female reproductive tract has challenged
the traditional view of human fetal development in asterile environment. Technical advances havefacilitated the study of the bacterial microbiome inthe upper and lower genital tract, as well as the roleof such bacteria in women’s health and fertility. The
microbiota in the urogenital tract of healthy
reproductive age women is mainly composed ofbacteria from the Lactobacillus genus; however,structural or compositional variations of thismicrobiota, that could occur throughout a women’slife in response to intrinsic and extrinsic factors may
impact the function of reproductive organs. Nonlactobacilli dominant microbiome in the uterine
cavity has been associated with poor reproductive
IVF outcomes, by increasing implantation failure andmiscarriage. For this reason, assessment of theendometrial microbiome has been proposed to beconsidered in infertile patients with implantation
failure to improve our understanding and develop
personalized strategies to improve clinical results.
This presentation will focus on the current
knowledge of the endometrial microbiome and theirfunctional relevance in the reproductive process.

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反復着床不全への対応

Time-lapse technology to improve the chances
for poor-prognosis patients
Markus Montag
ilabcomm GmbH
創設者 / CEO略 歴
Ruprecht-Karls 大学（ドイツ・ハイデルベルグ）生物学卒業
1991 〜 1992 年 シンガポール国立大学病院 リサーチフェロー
1993 〜 1995 年 Würzburg IVF センター（ドイツ）研究室長
1995 〜 2011 年 ボン大学（ドイツ）IVF 研究室長
2011 〜 2013 年 ハイデルベルグ大学 IVF 研究室長
2011 年〜
ilabcomm GmbH 創設者 / CEO（ilabcomm 社は生殖医療および生物学の分野のコンサルティング会社）
学術的専門分野
受胎能の保護ー卵巣組織バンキング，着床前遺伝子スクリーニング（ＰＧＳ）極体生検，Time-lapse Imaging，偏光顕微鏡，生殖補助医療技術におけるレーザーの応用

背景
予後不良の患者は，一般的に授かる可能性が低いな
いしは非常に低い－ 自然もしくは生殖医療後であっても．根本的な理由は多岐にわたる可能性があり，免
疫学的，子宮内膜および発生学的な問題が含まれる．
実際のところ，妊娠に至らない原因を常に特定することは不可能であり，そのため，特定の治療アプローチ
を定めることが困難な場合もある．
健康な子宮内膜に加えて，その胚も同様に重要であり，様々なファクターが implantation potential に影響を与えている可能性がある．これらのファクターのいくつかは，例えば配偶子形成中の染色体分離エラー
によって引き起こされる aneuploidy といった様に簡
単に相伝される．一部の患者は，着床し健児になる可能性がある染色体的に正常な胚を得られる可能性が劇的に減少する均衡転座を生じる．関与する染色体によっては，このグループの患者は一般的な自然の周期において，繰り返しの着床不全を経験する可能性がある．最後に，卵巣予備機能が乏しいもしくは，低卵巣反応のために非常に少数の卵母細胞を有する女性は，予後不良患者の大きな割合を構成している．
タイムラプスはどのように機能するか ?
予後不良の患者では，発生胚に最大の可能性を与えるため，すべてのステップを最適化しなければならな
い．そして妊娠までの時間を短縮するために，患者コ
ホート内で各胚の implantation potential を定量化することを目指すべきである．これは，体外培養コンセ
プトとして Time-lapse テクノロジーがどのように有用であるかを示している．すなわち，可能な限り最良な胚発生環境状態にするための安定化およびコント
ロールを実現し，同時にこの最良な培養環境を妨げずにできる限りの胚に関する情報の収集が可能となる．
Time-lapse と PGT-A の相乗効果高い割合で異数性胚が得られる患者は，予後が悪いと考えられる．PGT-A は正倍数性胚の診断に使用する こ と が で き る が， す べ て の 正 倍 数 性 胚 が 同 じ
implantation potential を持っているわけではない．それ故，Time-lapse から得られる更なる情報を基にした選択基準を正倍数性胚に適用することで PGT-A プロ
グラムをより有効なものにすることが可能である（Lee et al., 2019; Lim et al., 2019）．このような情報は，動態的（kinetic）や形態的な（morphological）クライテ
リアで構成されており，特定のアルゴリズム（Gibbons
et al., 2019）に よ っ て 評 価 さ れ る． さ ら に 近 年 で はディープラーニングモデルを適用する完全に自動化されたシステムさえも寄与している（ran et al., 2019）．
言 う ま で も な く， こ れ ら の 新 し い 技 術 の 恩 恵 は，
PGT-A を凌ぎほぼすべての患者に適用する．
Time-lapse は卵母細胞が少ない低反応患者に有益か？
Time-lapse テクノロジーの利点は多くの場合，胚の選択にあるため，単一の患者から多くの卵母細胞および胚が得られるかどうかに依存すると考えられている．
それでは非常に少ない卵母細胞しか得られない低反応
患者のような予後不良患者への Time-lapse の使用はどうなのだろうか？ このような患者では，培養後に胚が 1 つしか残っていないために移植胚を選択することが不可能な場合がしばしばあることは明らかである．
しかしながら，Time-lapse が統合されたスタンドア
ローンシステムは，非常に安定した，妨げられない培養条件と同義語である．この培養効果から得られる利点は，近年，低刺激周期（低反応患者のように，時には 1 つの胚だけが利用可能な場合もある）においても報告されている．興味深いことに，標準的な培養シス
テムと比較して Time-lapse による利益は，胚盤胞形
成率には現れず，胚盤胞の利用率および，さらに重要な の は， 継 続 妊 娠 率 が 有 意 に 高 か っ た こ と で あ る（Ueno et al., 2019）．
Time-lapse テクノロジーは，一部の予後不良患者の41

可能性を改善し，一般的には胚の発生をサポートすると結論付けることができる．さらなる改善としては，様々な技術を組み合わせることであり，その良い例として Time-lapse と PGT-A の相乗効果が期待される．
Gibbons et al., Hum Reprod 2019; 34 Supp 1: i237-i238.
Lee et al., Hum Reprod 2019; 34 Supp: i208-i209.
Lim et al., Hum Reprod 2019; 34 Supp: i87-i88.
Tran et al., Hum Reprod 2019; 34: 1011-1018.
Ueno et al., Reprod Biol 2019; doi: 10.1016/ j.repbio.
2019.03.004.［Epub ahead of print］.

42

Luncheon Seminar

新時代の ART はどこへ向かうのか？

石原 理
埼玉医科大学産科婦人科教授

略 歴1980 年 3 月
6月
1985 年 9 月
1988 年 12 月
1989 年 10 月
1991 年 6 月
1999 年 2 月
2002 年 5 月

ルイーズ・ブラウン誕生から 40 年が過ぎ，新技術であった顕微授精やガラス化法による胚凍結なども含
め，生殖医療（ART）は，世界的に日常化・一般化したといえる．今日に視座をおく時，新時代の ART は，これから先どこへ向かうのだろうか？
地球規模で ART を見るならば，治療周期数など「数的拡大」は，当面継続することが常識的には予想できる．なぜなら世界最大の人口を持つアジア地域，そして急速な経済発展を実現しつつあるアフリカ地域において，これまで ART へのアクセスを持たなかった人々が多数存在するからだ．
一方，アジア・アフリカ地域を含め，「数的拡大」について懸念せねばならない最大の課題は，実はそれぞれの国における国内経済格差である．北中南米諸国において低所得層が ART へ十分なアクセスを持たない
現状は，アジア・アフリカの多くの国において，何もしなければ同様な未来を招いてしまう潜在的危険性を示唆している．そして，この課題は，振り返ってみれば，私たちの住んでいる日本にも，かなり当てはまっているという現実がある．
それでは，ART の「質的拡大」，すなわち画期的な技術革新や治療パラダイムを根本的に変えてしまう薬
剤，機器などの出現は，今後あるのだろうか．これを予測することは難しい，というより，とてもできるはずがないというべきだ．そして，「質的拡大」＝「ARTの成功」に結び付く可能性をもつ技術として，今日も っ と も 注 目 さ れ て い る の は， 胚 の「 遺 伝 情 報 」にフ ォ ー カ ス し た PGT と 胚 発 育 の「 形 態 と 時 間 」にフォーカスしたタイムラプスである．これらは，いわばひとつひとつの胚についての，「静的背景」と「動的背景」情報の取得であると，ほぼ言い換えることができる．しかし，さらに言うならば，いずれも方法論としては，「情報量の拡大」→「確率と統計に基づくアルゴリズム」に基づく展開にすぎないとして，まとめる
ことも可能なのだ．
本講演では，これらの認識を前提として，ART の群馬大学医学部医学科卒業
東京大学医学部付属病院研修医（産婦人科）
東京大学医学部産婦人科助手（文部教官）
埼玉医科大学総合医療センター産婦人科助手
英国ロンドン大学王立医学大学院ハマースミス病院客員研究員
埼玉医科大学総合医療センター講師（産婦人科）
同上助教授（産婦人科）
埼玉医科大学産科婦人科学教室教授（埼玉医大総合医療センター兼担）

安全性と有効性・有用性の評価，そして継続的モニタ
リングの重要性をご理解いただくために必要な，最新情報をお知らせする予定である．

43

オーストラリア生殖医学会 交換講演

Exchange Lecture of The Fertility Society of Australia（FSA）

Polarized light microscopy of Meiotic Spindles in ICSI

Michael Chapman
FSA President

Professor Michael Chapman is one of Australia’s most highly profiled and respected
fertility specialists. He is a busy clinician who has personally been involved in
fertility care resulting in over 3000 pregnancies. His academic position enables him
to be at the forefront of new advances in treatment which he applies in his practiceat the earliest opportunity.  
He has a high public profile due to his tireless efforts to ensure access to Assisted
Reproductive Technology（ART）for all Australians, as a vocal patient advocate andsenior medical academic training practitioners of the future.  
When Chair of the IVF Directors Group he was instrumental, working closely with
the Federal Government, to ensure access to ART treatment remained clinicallyprotected as a doctor-patient medical decision. Today he is one of the country’sleading media commentators on reproductive health.  
Michael graduated from the University of Adelaide, after which he specialisedin obstetrics and gynaecology. He then moved to the UK, developing extensive
experience in infertility, hormonal disorders and assisted reproductive technology（ART）. Michael became a Fellow of the Royal College of Obstetricians andGynaecologists. He gained his Doctorate of Medicine at the University of London,
where he was appointed Professor of Obstetrics and Gynaecology at Guy's
Hospital.  
After 15 years abroad, Michael returned to Australia as Professor in the Schoolof Women’s and Children’s Health at the University of New South Wales, andSt George Public Hospital, Kogarah – a role he continues today. He is heavily
involved in training and education at all levels and is an examiner for the Certificate
in Reproductive Endocrinology and Infertility for the Royal Australian and New
Zealand College of Obstetricians and Gynaecologists, of which he is a Fellow.  
Michael’s depth of experience comes from extensive international roles having
established and run IVF services in London, Naples, Jeddah and Sydney. He
lectures regularly at national and international meetings, has over 190 scientificpublications and many book chapters. His particular interests are in IVF, polycystic
ovarian syndrome（PCOS）, recurrent miscarriage and menstrual problems.  
Michael currently holds the following posts, Clinical Director for Women’s andChildren’s Health, St George Hospital President of the Fertility Society of Australia
Immediate Past President, Australian and New Zealand Society of Reproductive
Endocrinology and Infertility Clinical Director IVFAustralia Southern Sydney.

The Meiotic Spindle
The meiotic spindle as a marker of embryo viability
is gaining traction in the field of ART. The spindle is ahighly dynamic cytoskeletal structure comprised of
microfilaments and microtubules（Kim et al.1998）.
Continual polymerisation and depolymerisation of its
microtubule constituents render it morphologicallyfluctuant depending on the stage of meiosis. At
metaphase II it is normally described as a barrelshaped, symmetrical structure with pointed, anastralpoles, radially oriented at the periphery of the oocyte）.
Ploidy is, to a large degree, contingent on the
dynamic forces of the meiotic spindle. However, theassembly of tubulin units which constitutemicrotubules are highly sensitive to physical changes
such as temperature and pH, as well as physiological

44

changes such as ageing. These changes result in thedisassembly of the spindle, corrupting normal spindle
dynamics and chromosomal organisation. It is therefore
unsurprising that oocyte meiosis is a highly errorprone process, with up to 20% of oocytes displaying
aneuploidy due to chromosomal nondisjunction andpremature sister chromatid separation Segregation
errors give rise to aneuploid embryos, which in turnare predisposed to unsuccessful fertilisation, maturationarrest, spontaneous abortion, developmental
anomalies, and genetic diseases. These findings havethus established the premise for the meiotic spindle asa marker for an oocyte’s developmental potential.
The Spindle Under Polarised Light Microscopy
Conventional light microscopy, while non-invasive
and capable of sustaining oocyte viability, fails to

provide sufficient contrast to accurately differentiate
the meiotic spindle from the translucent cytoplasm.
Polarised light microscopy offers a non-invasive
method of spindle visualisation by exploiting therefractive properties of its molecular architecture.
The meiotic spindle is an anisotropic structure that,when subjected to polarised light, diverges the beam
into two orthogonal planes. This occurs as the spindle
microtubules, arranged in parallel arrays, cause thebeam’
s optical path to traverse at varying speeds, inturn shifting the plane of light. The specimen under
scrutiny appears dark, except for its anisotropic
structures, allowing them to be visualised . This
intrinsic optical property is coined birefringence andcan be quantified and known as retardance. Higher
retardance values correlate with greater levels ofmacromolecular compactness and structuralorganisation, which in turn suggest higher orderalignment and better organised structures. Evenlydistributed birefringence is also a positive indicator ofspindle health.

achieved a clinical pregnancy, relative to those
without spindles Moreover, we found that, amongst
the oocytes which resulted in a clinical pregnancy,
spindle density was significantly higher（30±1.23nm）
compared to those that did not（2.5 ± 0.7nm）（p=0.02）.

The Meiotic Spindle as a Predictor of Fertility
Outcomes

Although there exists no definitive consensus,
current data suggests that the presence of the spindle
apparatus with good morphological features is anindicator for more favourable fertility outcomes.

Many studies have supported the role of the meiotic
spindle in appropriately distributing genetic material.
As such, it follows that the visualisation of the meiotic
spindle at the time of intracytoplasmic sperm injection（ICSI） correlates with improved fertility outcomes.
A number of studies have demonstrated a significant
increase in fertilisation rates amongst present-spindled
oocytes relative to absent-spindled oocytes .

Few studies have investigated the difference infertility outcomes between spindles based onmorphology as opposed to presence. We developed aclassification system and found that 90% of normalspindled oocytes were successfully fertilised compared
to 72% of oocytes with morphologically abnormal
spindles（p<0.001）. Our more recent prospective cohort
study also observed the ploidy of embryos with normal
and abnormal spindles. The abnormal class was
further stratified into dysmorphic, translucent,telophase and non-visible spindles. Translucent andnon-visible spindles yielded significantly lower
proportions of euploid embryos of 9.9%（OR 0.25, 95%
CI 0.13-0.46）and 13.5% respectively（OR 0.35, 95% CI
0.19-0.63）relative to the other two groups（p£0.001）.

Our other area of interest has been the potential to
improve fertilisation rates with ICSI. In our data
fertilisation rates were improved by the use of PLM
because it ensures spindle damage can be avoided at
the time of sperm injection.

These results were in contradiction with otherstudies which found no statistically significant
difference in fertilisation rates.
Of the reviewed studies investigating blastulation
rates as an outcome, all purported a statisticallysignificant correlation between meiotic spindlepresence and increased blastocyst formation.
Two of the three studies comparing the effect ofspindle presence on embryo quality found asignificantly increased proportion of high-quality
embryos derived from spindle present oocytes relative
to those that were absent. Conversely, Others havefound this increase in the formation of high-quality
embryos to be statistically insignificant.
Three of the four reviewed studies found that asignificantly higher proportion of oocytes with spindles

45がんと生殖医療

がん・生殖医療の今後の展望

鈴木 直
聖マリアンナ医科大学
産婦人科学 教授

略 歴1990 年 3 月 慶應義塾大学医学部卒業
1996 年 4 月〜 1998 年 9 月 米国カリフォルニア州バーナム研究所留学
1997 年 3 月 慶應義塾大学大学院（医学研究科外科系専攻）博士課程修了
2005 年 8 月 聖マリアンナ医科大学講師
2011 年 4 月 聖マリアンナ医科大学教授
日本産科婦人科学会専門医・指導医，日本がん治療認定医，日本婦人科腫瘍学会専門医・指導医，
日本臨床細胞学会細胞診専門医，緩和ケアの基本教育に関する指導者（日本緩和医療学会）
日本産科婦人科学会代議員，日本婦人科腫瘍学会常務理事（教育），日本産科婦人科遺伝子診療学会理事，日本緩和医療学会代議員，婦人科腫瘍の緩和医療を考える会副理事長，AYA
がんの医療と支援のあり方研究会理事，日本生殖医学会代議員，日本受精着床学会常務
理事（編集），日本生殖心理学会理事，日本がん・生殖医療学会（JSFP）理事長，厚生労働省 がん診療提供体制のあり方に関する検討会構成員（令和元年（2019）6 月〜），AsianSociety for Fertility Preservation（ASFP）President，International Society for Fertility
Preservation（ISFP）Board Member，Journal of Adolescent and Young Adult Oncology
誌 Editorial Board Member，Journal of Assisted Reproduction and Genetics 誌 Editorial
Board Member，Reproductive Endocrinology 誌 Editorial Board Member

がん・生殖医療とは，小児，思春期・若年（AYA）
がん患者に対する妊孕能温存（生殖機能温存）を目指した医療がその定義となる．アルキル化剤などを含む
化学療法レジメンや放射線照射による性腺毒性により，残存する原始卵胞や精子の数が減少し，最終的にがん患者の妊孕能（生殖機能）が喪失する場合がある．医療の進歩と共にがん患者の生存率が改善された現状において，がんサバイバーシップ向上のためがん治療開始前に妊孕能温存（生殖機能温存）に関する情報を，がん患者とその家族に提供することが重要である．しかしながら一般不妊治療と異なり，がん・生殖医療はその対象が「がん患者」となることから，何よりもがん治療を優先とする中で患者や家族の自己決定をいかに促すことができるか（子どもをもたない選択に関しても），慎重な対応が必要となる．本邦においては，
2017 年 7 月に日本癌治療学会によって，「小児，思春期・
若年がん患者の妊孕性温存に関する診療ガイドライン
2017 年度版」が刊行された．本邦初の本領域に関するガイドラインは 1 つの総論と 8 つの領域に渡って CQに対する推奨を示した世界初の本領域に関する内容となっている．
がん・生殖医療の今後の課題として，以下の 6 つを掲げる；①がん・生殖医療におけるインフォームドア
セント（小児，思春期）ならびにインフォームドコン
セントの指針など治療選択のための体制整備，②妊孕
性温存を希望しなかった患者や妊孕性温存療法の適応外となった患者に対する配慮，2012 年頃以前にがん治療を受療したがんサバイバーの QOL 維持と向上を目指した医療介入，③がん・生殖医療のさらなる啓発と情報発信の促進（がんサバイバーによるピアサポートを含む），④妊孕性温存療法に対する公的助成金補助制度の検討，⑤がん・生殖医療に関わる専門医療従事46者の育成，⑥がん・生殖医療の技術革新．さらに，がん患者に対する生殖医療に関する情報を提供する「がん・生殖医療連携ネットワーク」が全国各地に存在していないこと（地域格差），がん治療医と生殖医療を専門とする医師との密な連携が十分でない，また十分できない施設もあること（施設間格差），さらに生殖医療が保険診療ではないことから生殖医療を選択する際のがん患者の経済的負担など解決すべき課題も明確化されている．本講演では，がん・生殖医療の今後の展望に関して概説させて頂く．

Symposium2「ARTを受ける現代女性が抱える問題点とその解決策」①働く女性のための解決策 ②卵巣予備能低下（DOR）に対する解決策

Random start ovarian stimulation の新しい展開〜 medical indication から social indication へ〜
藤原 敏博
フェニックス アート クリニック院長

略 歴1985 年
2005 年
2006 年2008 年
2018 年

東京大学医学部卒業
東京大学講師
東京大学医学部附属病院周産母子診療部 IVF センター長
山王病院リプロダクション・婦人科内視鏡治療センターセンター長
及び国際医療福祉大学大学院教授
フェニックス アート クリニック院長

日本産科婦人科学会専門医・指導医 , 日本生殖医学会生殖医療専門医 , 日本産科婦人科内視鏡学会技術認定医〔腹腔鏡・子宮鏡〕, 日本内視鏡外科学会技術認定医
日本生殖医学会代議員 , 日本受精着床学会理事 , 日本 IVF 学会理事 , 日本産科婦人科内視鏡学会評議員 , 日本卵子学会評議員 , 日本不妊カウンセリング学会理事長

ART に お け る 最 初 の ス テ ッ プ は， 調 節 卵 巣 刺 激（controlled ovarian stimulation : COS）となる．これ
は卵胞の多発性かつ同調性発育を促して，成熟卵数を増加することにより治療周期あたりの妊娠率増加を図ることが目的である．従来（そして現在も多くの場合は），COS は月経や消退出血開始直後からスタートするのが通例であった．これはこの時期では卵胞及びホルモン（FSH，LH，E2，P4）の状態がリセッ
トされており，感覚的にもスタートを切るのに適していると考えられたからにほかならない．実際に幾つかのプロトコールが考案されているが，複数個の成熟卵を獲得するという当初の目的は十分に達成できているといえる．
一方，近年では悪性腫瘍を患った生殖年齢女性に対して，卵子にダメージを与える化学療法や放射線療法を開始する前に卵子あるいは卵巣組織を採取・凍結保存して，原疾患の寛解後にこれらを利用して妊娠を図る，いわゆる癌生殖医療が広く用いられるようになってきている．この際，原疾患の治療開始まで時間的猶予の少ない血液ガン（白血病や悪性リンパ腫）では，次の月経を待ったり消退出血を起こしたりすることなく直ちに採卵へ向かってスタートを切ることが求められる．これを可能としたのが排卵周期における時期にかかわらず COS を開始する random
start ovarian stimulation（RSOS）である．本法が画期的であるのは，既に発育卵胞があったり排卵後で黄体ホルモン分泌があったりする状態でも，十分にCOS ならびに成熟卵子獲得が可能である点である．
こうして癌生殖医療領域で応用されてきた RSOS であるが，これを通常不妊患者の ART において適用することも可能である．適応として考えられるのが，仕事を持ち時間的に融通がききづらい患者である．受診して ART の適応があると診断されその施行に同意し，即座に COS 開始を希望されるケースがある．この場合，RSOS を用いることにより患者のモチベーションを損なうことなく即座に採卵へ向けてのス
タートを切ることができ，また少しでも早期に治療を開始できる点からも，年齢が高い患者群においても効率的であると考えられる．
このように RSOS の medical indication から social
indication への適応拡大により，時間的猶予の少ない
働く女性においても効率の良い治療の提供が可能となると期待される．

47

Symposium2「ART を受ける現代女性が抱える問題点とその解決策」①働く女性のための解決策 ②卵巣予備能低下（DOR）に対する解決策

クロミフェン低刺激周期での診療の工夫～個々の症例に対してどう対応していくか～
加藤 恵一
加藤レディスクリニック
院長

略 歴2000 年		 金沢大学医学部医学科卒業
		 金沢大学医学部付属病院
2001 年		 国立金沢病院
2002 年		 国立病院東京災害医療センター
2004 年		 金沢大学医学部付属病院
		 NEW HOPE FERTILITY CENTER（ニューヨーク）
2005 年		 金沢大学医学部付属病院
2009 年		 加藤レディスクリニック
2013 年		 加藤レディスクリニック院長，現在に至る

クロミフェンクエン酸塩（CC）は，内因性のホルモン分泌を抑制せず間接的に卵巣刺激を行う薬剤である．安価であり，比較的緩徐に刺激することができるため，低卵巣刺激法では第一選択薬となることが多い．多くの症例では CC 単独で排卵誘発を行うことになるが，症例によっては，少量のゴナドトロピン
製剤（Gn）を併用する場合もある．プロトコールのポイントとして，月経 3 日目にホルモン測定や超音波検査を行い，治療に適した周期であることを確認の上
CC 投薬を開始する．Gn を併用する場合には月経 8 日
目にホルモン測定および卵胞計測を行い，必要に応じて投与を行うが，その場合でも通常 75 ～ 150 単位を隔日投与するのみで十分である．次回以降の診察で十分な卵胞発育を確認した時点で採卵日を決定する．CC による LH サージ抑制効果のため通常は 2 日後に採卵することとなるが，LH サージの発来状況によっては翌日の採卵が必要となることがある．近年
は胚盤胞全胚凍結が増えてきているため，採卵後は翌周期まで来院は不要となるが，適応に応じて，子宮内膜厚や卵巣腫大などの状態を確認の上，新鮮分
割期胚移植も一定数行っている．胚移植後 7 日目または 10 日目に全例血清β-hCG の測定を行い，微量でもβ-hCG が検出された症例については，子宮外妊娠の鑑別のため再検査を行っている．
プロトコールに挙げた来院指定日はどれも重要であるため省略しづらく，また患者それぞれの月経周期も異なるため融通をきかせづらい面もある．今回のテーマの一つである“働く女性のための解決策”という意味では，診療時間の延長や土日祝日を含めた治療施設の体制を充実させることがまず重要であり，
その上で来院不可能日の診察を省略した場合に起こりうるデメリットを医師および患者双方が理解して進めることが大事である．
次に“DOR”に対しては特効薬的な治療法は乏しい
ことが現実である．このような症例には低卵巣刺激法が選択されることが多いが，その点ではフレキシ

48

ブルな対応が可能である．CC を使用するのか完全自然周期で行うのか，またホルモン補充を行って FSHを抑制する必要があるのか，これらを組み合わせて行うのかなど，個々の症例や治療周期，その時々の状況に応じて多様な選択肢が生まれうる．DOR については画一的な対応は困難なため，症例提示の上，解説させていただく予定である．

Symposium2「ART を受ける現代女性が抱える問題点とその解決策」①働く女性のための解決策 ②卵巣予備能低下（DOR）に対する解決策

卵巣予備能低下症例に対する回収卵子数を増やす工夫

杉山 力一
杉山産婦人科理事長

略 歴1994 年
1999 年
2001 年〜2007 年
2011 年2017 年〜
2018 年

東京医科大学卒業
当時より生殖医療に従事，北九州セントマザーに国内留学し体外受精の基礎を学ぶ
杉四会理事長
不妊治療専門杉山レディスクリニック開院（実家の分娩施設，杉山産婦人科併設）
杉山産婦人科世田谷開院（分娩，生殖医療，内視鏡手術を行う総合施設）
杉山産婦人科丸の内開院
杉一会理事長杉山産婦人科新宿開院

ART の成功を左右する因子は，染色体正常の胚盤胞を獲得することである．染色体正常胚が得られる
確率は女性の年齢に依存しており，我々が想像しているよりは低率である．つまり，ART で上記の正常胚を得るためには多くの卵子を確保することが必要と な っ て く る． 卵 巣 予 備 能 低 下（DOR；diminishedovarian reserve) 症例とは，卵巣予備能が低下した状態の女性のことをさし，通常，卵巣刺激には低反応である．女性の年齢が進むと DOR となるが，40 歳未満の女性でも DOR 症例が存在する．DOR 症例の特徴としては低 AMH 値，月経中の FSH 値高値，胞状
卵胞数が少ない等を挙げることができる．このような症例は通常，卵巣刺激をしても低反応を示し ART
治療そのものが難治性となってくる．また，DOR 症
例の一部に卵巣刺激に対して不均一な卵胞発育を示すことがある．本講演では，月経中の高 FSH 症例に対する対策として，エストロゲン補充下クロミッド
刺激法（E2 ＋ CC）と，不均一な卵胞発育となった場
合の 2 段階採卵法について，我々の施設で行っている方法を紹介する．
採卵を行う周期の月経 3 日目の FSH 値≧ 20IU/L の場合，通常の卵巣刺激を行っても低反応が予測され，この原因は高 FSH 状態である．よってまず E2 製剤を使用して FSH 値を低下させ，その後 E2 製剤を併用しながらクロミフェンで卵巣刺激を行う方法である．この方法のメリットは注射の排卵誘発剤を使用しないので患者様の経済的・身体的負担が低いことであり，デメリットとしては採卵に至るまで時間を要する（≧14 日）こと，クロミフェンを長く使用するため新鮮胚移植は行えないこと，である．経済的・身体的負担が低いため，低反応となった場合でも患者様の徒労感は少なくはなると考えられる．
大小不同の不均一な卵胞発育を示す症例に遭遇することは珍しくない．通常，大きい卵胞に基準を合わせて採卵が組まれる．この場合，小さいほうの卵胞が13㎜以下の場合，穿刺をしても成熟卵が得られる

可能性は極めて低い．しかしながら，DOR 症例にしてみれば，とても貴重な卵胞である．それで，このような場合は，小さい方は穿刺せず残し，大きい方の卵胞のみを採卵し，採卵日から刺激を追加し，卵胞を発育させてから 2 回目の採卵を行う方法である．
本方法を行うことで，回収卵子数の増加が期待できる．
上記の 2 通りの方法は，DOR 症例に対するとして有効であると考えられ，本講演では日々の診療に役立つような具体的な方法を概説する．

49

一般演題〔口頭発表 〕
O-1

当演題は取り下げとなりました

O-2

メラトニンの卵巣加齢に対する予防効果および投与開始時期の検討

田村 博史，城﨑 舞，田村 功，竹谷 俊明，杉野 法広
山口大学大学院医学系研究科産科婦人科学②投与開始時期の影響を見るため 23週（M23群）または 33週（M33群）から 43週までメラトニンを投与して同様の検討を行った．
【結果】① M 群では，排卵数は加齢に伴い減少したが，M 群では低下が軽減していた．受精率，胚盤胞到達率も加齢に伴う低下が M 群では軽減していた．卵巣の各発育段階の卵胞（原始，一次，二次，胞状）数は C 群に比し，M 群で高値を示した．また，加齢に伴い発現が低下し，かつメラトニン投与でその低下が阻止される遺伝子群の解【目的】
卵胞数の減少や卵の質の低下に起因する卵巣の加齢は，不妊領域
最大の課題であるが有効な対処法はない．我々は松果体ホルモンのメラトニンが卵胞液中に存在し，その抗酸化作用で卵子を保護していることを報告してきた．近年メラトニンは，その抗酸化作用からアンチエ

析では，リボゾームのタンパク合成，抗酸化機構，DNA 修復，オー
トファジーに関与するものが抽出された．長寿遺伝子（sirtuin1,3）の発現およびテロメア長は M 群で増加していた．
② M23群では排卵数，受精卵数，胚盤胞数は C 群に比較し多かった．
一方，M33群では C 群と差は認めなかった．

イジングホルモンとして注目されており，メラトニンの長期投与で卵巣の加齢を予防できるかどうか，またメラトニンの投与開始時期の違いによる効果を検討した．

【考察】
メラトニンの長期投与によって，加齢に伴う卵胞数，排卵数の減少，胚発育の低下が防止できた．抗酸化作用，リボゾーム機能維持，DNA【方法】

修復機構，sirtuin，テロメア，オートファジーなどの多様な機序がメラ①13週齢雌 ICR マウスをメラトニン投与群（M 群）とコントロール群（Cトニンの卵巣加齢予防に関与している可能性がある．また，卵巣加齢群）の２群に分け，43週までメラトニン水（100μg/ml）または水を飲の予防効果は 23週から開始では認めたが，33週から開始では認めず，水させ飼育し，排卵数，体外受精の受精卵数，胚盤胞数，卵巣組生殖期後半からのメラトニン投与では卵巣加齢予防効果に乏しいと思織の卵胞数を計測した．卵巣組織より抽出した RNAを用いて，各われる．

遺伝子発現をマイクロアレイ法，PCR 法にて検討した．

50

O-3

胞胚腔形成時の遊離割球及びフラグメント除去（Embryo Plasty）の有効性

寄田 朋子，後藤 優介，渡邉 華，戸水 桐子，田口 新，原田 祐紀，近藤 希衣，向田 哲規
広島 HART クリニック【対象・方法】
2017年7月～ 2019年5月に遊 離 割 球による胞 胚 腔 形成 時の圧 迫やfrag が全割球容積の 30 ～ 50% に見られた胚に EPを施行した 141周期
262個の胚を EP 施行群とし，2017年1 ～ 6月に同様な所見があるが EPを施行しなかった 38周期64個の胚を対照群とし後方視的に解析した．
EP は Day4 で 施 行し，Day5 で の 胚 盤 胞 発 達 率，Gardner 分 類 で3BB 以上の良好胚盤胞率，Hatching/Hatched 率を比較検討した．
【結果】
胚盤 胞発達率，良好胚盤 胞率，Hatching/Hatched 率は EP 施行
群 83.2%（218/262），54.6%（119/218），59.9%（157/262）で， 対 照 群

【目的】

67.2%
（43/64），18.6%（8/43），0.0%（0/64）であり，胚盤胞発達率，良当院では現在，全ての胚を Time Lapse Cinematography（TLC；

好胚盤胞率で有意に EP 施行群が高い結果となった．

Primo VisionTM，Embryo Scope+TM；Vitrolife）で観察している．従来の定点観察では判明し難い胚発達過程の現象の一つに，胞胚腔形【考察】成に関係しない遊離割球や細胞割球間の fragmentation（frag）が多く

遊離割球や frag によって胞胚腔形成阻害や細胞割球同士の融合阻害存在する場合，胞胚腔形成時の細胞割球同士の融合阻害現象や圧迫が起こり胚盤胞の収縮・拡張後の生存性が低下していた胚が，EPを施所見がある．それらの胚盤胞（BL）は形態学的評価による胚質低下や，行することで胚盤胞発達率や Hatching/Hatched 率が有意に上昇した．

胞胚腔が拡張収縮する経過で変性に至る所見が多く認められる．このそれにより形態学的に低評価となり治療に供されなかった胚が Hatched

ため胚質低下を改善する目的で，遊離割球や frag が接する部分の透明の段階の胚盤胞に至り新鮮胚盤胞移植やガラス化保存が可能になり結帯を LAH（Laser Assisted Hatching）により大きく開口することを果的に臨床成績の改善に寄与することが示唆された．また EP の適応とEmbryo Plasty（EP）と定義した．EP の施行により胞胚腔拡大に伴っなる遊離割球や frag の把握，その施行時期の決定は従来の定点観察でて遊離割球や frag が胚外に押し出されることによる胚盤胞発達に対すは不可能であり，TLC による胚発達の全過程の連続的な観察が必要不る改善効果について検討した．

可欠でありTLCを用いて胚観察することの有用性も示された．

O-4

ヒト胚では 8-16分割になる際に1-4番目に分裂を開始した細胞がICMになる

大月 純子 1,2），岩崎 利郎 1），江夏 徳寿 1），片田 雄也 1），
古橋 孝祐１），塩谷 雅英１）
1）英ウィメンズクリニック
2）岡山大学生殖補助医療技術教育研究センター

胞に到達した胚のうち，直径5μm 以上の大きな RB を有し，2-4-8-16（morula）の正常分割後に胚盤胞になった胚のうち，胚盤胞まで RB の挙動を追うことが出来た 201個の胚を対象とし，分割順序と位置に関す
る解析を行った．
【結果】
2-4細胞時の1番目，2番目に分割した割球内に存在した RB が ICMに行く確率はそれぞれ，20.0%（20/100）, 18.6%（19/101），4-8細胞時の1-4番目ではそれぞれ，24.1%（13/54）, 28.1%（16/57）, 10.3%（4/39）,
11.8%（6/51），8-16細 胞 時 の 1-8番目ではそれ ぞれ，35.1%（13/37）,
39.8%（8/26）, 26.9%（7/26）, 30.4%（7/23）, 5.3%（1/19）, 4.8%（1/21）,
4.0%（1/25）, 0%（0/24）であった．クラスター分析にて，早く細胞分裂【背景】が始まったクラスターが ICM になりやすく，分裂期によって有意な差がヒト胚は受精から 5日目に胎児になる内細胞塊と主に胎盤となる栄養あった．また，早く分裂を開始した上位50％が有意に ICM に到達する

外胚葉に分かれるが，4日目までの分割球の運命は全く分かっていない．

ことが判明した（p<0.001）．ICM をエンドポイントとした単変量ロジス

Refractile body（RB）は，ヒト卵細胞質内に出現する異常形態の一つ

ティック回帰分析では 4-8cell 分割時，8-16cell 分割時ともに有意にであり，脂質を含む顆粒様物質の複合体であり，リポフスチンの自家蛍

ICM を予測する因子であったのに対し，多変量ロジスティック回帰分析

光を有し，大きなものは周囲に膜形成があることが透過型電子顕微鏡

では 4-8cell 分割時が交絡因子として除外され，8-16cell 分割時のみが観察により判明している（Otsuki et al., JARG, 2007）．また，RB は胚予測因子（オッズ比 :16, CI: 4.1-63, p<0.001）となった．

発生過程で消失することなく，大きさの変化も殆ど見られない．今回我々は，タイムラプス観察を行った受精卵のうち，大きな RBを含む割球を後方視的に追跡し，ICMに至る細胞の定義を発見したので報告する．

【結論】
本研究の結果から，ICM になる細胞は 8-16分割時に決まり，8-16細胞時に分割の早いものから順番に 1-4番目までに分裂した細胞が ICM【方法】に辿り着くことができる能力を獲得することが明らかとなった．

2013年6月から2018年12月までの期間にタイムラプス観察を行い胚盤

51

一般演題〔口頭発表〕

O-5

多核胚とDirect Cleavage 胚の臨床成績

渡辺 瞳，水本 茂利，田中 啓子，戸野本 知子，長尾 洋三，
仲宗根 巧真，奥田 紗矢香，後藤 美緒，一木 巴恵，
大坪 可奈子，蔵本 武志
蔵本ウイメンズクリニック

661周 期， ② 多 核 の みを 認 めた 胚（MNB ＋ 群 ）28周 期， ③ Direct
Cleavage のみを認めた胚（DC＋群）7周期，④多核とDirect Cleavage
を共に認めた胚（MNB＋DC＋群）5周期とした．なお，凍結胚盤胞が複数個ある場合の移植胚の選択は，ガードナー分類で上位の胚とした．
【結果】
各 群の 平 均 年 齢は Control 群，MNB+ 群，DC+ 群，MNB+DC+
群でそれぞれ 35.6±3.8歳，37.3±4.4歳，38.3±2.1歳，34.0±2.6歳となり，Control 群に比べ MNB+ 群が有意に高かった（P=0.03）．
総採卵回数は，Control 群，MNB＋群，DC＋群，MNB＋DC＋
群 で そ れ ぞ れ 1.4±1.0 回，2.2±1.7回，3.0±3.3 回，3.0±1.8 回 で，【目的】

Control 群に比べ MNB＋群（P=0.03）と MNB＋DC+ 群（P=0.0006）

近年タイムラプスの普及により，これまでの定点観察ではあまり観察されることのなかった多核胚や異常卵割についての知見が多く報告されで有意に多かった．
臨床的妊娠率は Control 群，MNB＋群，DC＋群，MNB＋DC＋群それぞれ 373/661（56.4%），16/28（57.1%），3/7（42.9%），3/5（60.0%）ている．
当院では以前より多核胚（MNB）とDirect Cleavage（DC）について検討を行っており，MNBと DC を共に認めた胚の胚盤胞発生率は低とな り， 流 産 率 は 83/373（22.3%），7/16（43.8%），2/3（66.7%），1/3（33.3%）であった．

率であり，また MNB が認められた症例において DC が起こりやすいことを報告した（2018年日本生殖医学会）．
今回はそれらの臨床成績を比較し，MNBと DC に対する明確な胚評価基準を定めることを目的とした．

【考察】
臨床的妊娠率はすべての群で差はなかったが，流産率は Control 群に 比 べ MNB ＋ 群（P=0.09），DC ＋ 群（P=0.25），MNB ＋ DC ＋ 群（P=0.81）が高い傾向にあった．しかし，この結果は患者の年齢と採卵【対象および方法】

回数に差があったことによるものと考えられる．

2018年1月から 2019年3月に当院で採卵し胚盤胞凍結を行い，2019

今回の検討では DC＋群，MNB＋DC＋群の移植症例数が少なく，

年4月までに単一融解胚盤胞移植を行った 701周期（平均年齢35.6歳）

MNBとDC に対する明確な胚評価基準を定めることはできなかった．

を対象とした．対象を以下の 4群に分け，臨床的妊娠率および流産率

今後さらに症例数を増やし患者背景の偏りを調整し，引き続き比較検を比較した．①多核もDirect Cleavageも認めなかった胚（Control 群）

討を継続していく．

O-6

タイムラプスを用いたヒト1前核胚および2.1前核胚の解析

糸井 史陽，藤田 京子，山口 桂子，関友 望，秋田 寛佳，
藤井 詩子，池田 沙矢子，佐野 美保
小牧市民病院 生殖医療センター【結果】
1PN の発生頻度は 2.4%で，受精方法別では，cIVF で 5.9%とICSI（0.6%）よりも有意に高かった（P<0.01）．1PN の平均サイズは，面積729μm 2，直径31μmであった．1PN の胚発生率は，2PNと比べて低い傾向であったが，その中で胚盤胞に成長した 1PN の平均サイズは，
面積836μm 2，直径34μm であった．次いで，2.1PNの発生頻度は，2.4%（体外受精1.8%，顕微授精2.8%）で，1PN や多前核（4.6%）と同程度であった．2.1PN の小さい核の平均サイズは，面積155μm 2，直径14μm，2.1PN の通常様の前核は，面積，直径ともに正常受精卵のそれと同等であった． また，2.1PN が 観 察された周 期の女 性年 齢は 40.5歳で，【目的】

2.1PN のなかった周期（37.7歳）よりも有意に高かった（P<0.05）．2.1PN

体外受精や顕微授精後に，前核が 1個のみの胚（1PN）や通常サイの胚 発 生率は， 胚 盤 胞 形成 率54.5%， 良 好 胚 盤 胞 率9.1% で，2PNズの前核2個と小さい核1個が観察される胚（2.1PN）が散見され，そ（69.8%，36.0%）と比べて有意差はなかったものの低い傾向であった．

れらの胚盤胞の中には正常な胚が含まれており，妊娠および出産例が報告されている（Capalbo et al., 2017）．当院でも1PNと 2.1PN 由来【考察】

胚はタイムラプスにて，前核サイズの測定や胚盤胞までの胚発生状況

1PN の発生は受精方法が影響し，2.1PN は女性年齢が影響していの観察を行っている．今回，1PNと 2.1PN の発生頻度および胚発生る可能性が示唆された．また，最近1PN 由来胚に関する大規模なデー率などを解析したので報告する．

タが報告され胚盤胞を移植すると 2PN 由来の胚盤胞と同等の臨床成績であることが報告されていること（Si et al., 2019），本邦では臨床で【対象と方法】の着床前検査などの解析は原則禁止されているため，1PN 胚や 2.1PN

2018 年6 月から2019年7月に当院で採卵および体外受精（cIVF）ま

胚の選別方法として前核サイズの測定や，胚盤胞まで培養することがたは顕微授精（ICSI）を行った 129周期496個を解析対象とした．まず，有効である可能性が考えられる．しかし，まだ報告例が少ないことから，受精操作後，タイムラプス画像にて受精判定を行い，1PNと2.1PN のこれらの胚を移植する場合には患者に対してしっかりと説明をしたうえ

前核サイズを測定し，その発生頻度や胚発生率を解析した．

で 2PN 由来胚よりも優先順位を下げるなど慎重に扱う必要がある．

52

O-7

発光ダイオード（LED）光源がICSI 成績に及ぼす影響について

山上 一樹，古橋 孝祐，岩﨑 利郎，伊藤 宏一，水澤 友利，
松本 由紀子，苔口 昭次，塩谷 雅英
英ウィメンズクリニック

の群も倒立顕微鏡は OLYMPUS 社；IX73，インジェクションシステム；
TAKANOME（NARISHIGE）を使用し，光源以外は同一の機材を用い，受精率，変性率，分割率，良好分割率（4cellG2≤），継続培養
胚当たりの D5，D6胚盤胞発生率，D5良好胚盤胞率（G3BB≤）を比較
検討した．
【結果】
ハロゲン群:242周期（778個）の平均年齢は39.2±4.6歳，LED群:305
周期（859個）の平均年齢は 40.0±4.6歳であった．培養成績は順に受
精 率（83.0% vs 87.0% p=0.026）， 変 性 率（6.4% vs 5.7% p=0.540），【目的】

分 割 率（91.5% vs 95.2% p=0.005）， 良 好 分 割 率（53.0% vs 50.4%

卵子に対する光暴露はアポトーシス頻度を増加させるため，体外でp=0.348），D5，D6胚盤胞発生率（47.0% vs 50.9% p=0.227）D5良好の胚操作時には光暴露の影響を最小限に留めることが望ましい．近年，

胚盤胞率（45.8% vs 40.1% p=0.260）であり，受精率，分割率において発光ダイオード（LED）の普及により，顕微鏡の光源にもLED を選択す

LED 群が有意に高い値となった．

ることが可能になっている．LED は消費電力が少なく長寿命であるといった特徴から様々な分野で使用されているが，ヒト卵子を LED 光源【考察】に曝露した場合の影響についての報告はほとんどない．そこで本検討

今回の検討により，顕微授精におけるLED の使用は受精および初では，LED 灯あるいはハロゲン灯を接続した同型の倒立顕微鏡を用い期発生に影響を与えることが示唆され，顕微授精の成績向上の一助とて，光源の違いが顕微授精（ICSI）成績に与える影響について前方視なる可能性が考えられた．光源メーカーによると顕微鏡に使用される的に比較検討を行った．

LED はフィルタ制御によってハロゲン灯に近い分光特性を持つとのことであり，本検討における成績の差は各光源の波長の違いによるもので【方法】

はないと考えられる．また，一般的に LED は発熱が抑えられるとされ2018年5月～ 12月に顕微授精を実施した 547 周期（1,637個）を対象とし，患者毎に無作為にハロゲン灯の倒立顕微鏡（ハロゲン群），又はているため，今回の成績の改善と熱の関連について，更なる検討が必要であると考えている．

LED 灯の倒立顕微鏡（LED 群）に振り分けて ICSI を施行した．どちら

O-8

体外受精における精液酸 化還 元電位を用いた受精予測

長谷川 久隆１），鈴木 亮祐１），塚本 佳奈１），菊本 晃代１），
小林 充１），京谷 利彦１），西尾 愛美１），湯村 寧 2），
櫻井 友義１），齋藤 優１），小林 淳一１）1）神奈川レディースクリニック
2）横浜市立大学付属市民総合医療センター 生殖医療センター

受精率について解析した．
【結果】
平均年齢は 35.7±4.3歳であった．平均 sORP 値は 2.1±2.0 mV/106
sperm/ml で あ っ た． 受 精 率 は cIVF 67.0%（75/112），ICSI 91.6%（141/154）であり，cIVF で 有意に低 率であった． 相関 解 析の 結果，
sORP 値は精液所見の各種パラメーターのうち，精液量，頭部振動数に対し正の相関を示し，総精子数，総運動精子数，精子濃度，運動精子
濃度，運動率に対して負の相関を示した．多変量解析の結果，sORP 値
はオッズ比0.42（P=0.001）
であった．cIVFの受精におけるsORP値のカッ
トオフは 2.23 mV/106 sperm/mlであり，AUC は 0.69であった．cIVF【目的】

における受精率は，sORPカットオフ値未満の症例（79.2%）に比較し，カッ

酸化ストレスは，精子の細胞膜や DNA の損傷を引き起こし男性不妊の原因の一つとなることが報告されている．MioxsysTMsystem は

精液中の酸化ストレスを酸化還元電位（ORP; mV）として数値化し，酸化力と抗酸化力を総合的に評価できる．本研究では，採卵初回でsplit 媒精を選択した周期において，ORP 値を用いた受精予測が可能
か後方視的に検討した．

トオフ値以上の症例（40.0%）で有意に低率であった．ICSIにおける受精率は，カットオフ値未満の症例（94.1%）と，カットオフ値以上の症例（86.8%）
で有意な差は認められなかった．
【考察】
sORP 値は精子数，運動率と負の相関を示し，cIVFにおける受精の予測因子となり得ることが示唆され，男性不妊症に関する指標として有用【方法】

であると考えられた．sORPカットオフ値を 2.23 mV/106 sperm/mlとし2019年4-7月の split 施行19周期，成熟卵266個を対象とした．精液た場 合，cIVF ではカットオフ以上の症例で受 精率が有意に低下し，ORP 値を測定し，精子濃度で割った値を標準化 ORP（sORP; mV/106

ICSI では受精率に有意な差は認められなかった．初回 split 適応症例のsperm/ml）とし，①精液所見の各種パラメーターとsORP 値の相関，②

うち sORP 値が 2.23 mV/106 sperm/ml 以上の症例では，ICSIを選択

cIVF受精予測因子探索の為の多変量解析および ROC曲線によるsORPすることで受精率を大きく向上させる可能性が示唆された．

カットオフ値の算出，③ sORP カットオフ値前後の cIVF および ICSIの53

一般演題〔口頭発表〕

O-9

患者は必ずしも治療継続のために凍結胚を保管している訳ではない

末永 めぐみ，篠原 真理子，山口 弓穂，上拾石 富士代，
岩下 夢美，永光 理紗，伊藤 正信，松田 和洋
松田ウイメンズクリニック【結果】
患者の凍結時年齢は平均34.5±3.8歳（25-43），保管胚数は平均3.7±3.4個（1-25），養育中の子供数は平均1.2±0.6人（0-3），更新回数は
平均1.9±0.9回（1-4），更新時年齢は平均36.4±3.8歳（26-44）であった．
更新理由の内訳としては継続・再開73％，決断できず 23％，妊娠中2％，
その他2％であった．次に，今後の治療を継続・再開希望群と決断できないまま保管継続とした群において患者背景の比較を行った．凍結時年齢は有意差を認めないものの，継続再開群と比較して決断できな
い群で 35歳以上の割合が増加傾向であった．保管個数は 2群間に違いを認めなかった．養育中の子供数は 2人以上になると決断できない群【目的】

が有意に増加した．更新回数は 4回目で決断できない群が有意に増加

これまで医療者側は患者が将来の産子希望のために凍結胚の保管した．更新時年齢は 30-34歳では継続・再開群が有意に多く，年齢の期限を更新していると考えてきた．しかし，凍結胚の保管を数年継続上昇ととともに決断できない群が増加傾向であった．また自由記述の項

してきたにもかかわらず，胚移植を行うこと無く，治療終結を迎える症

目では「色々な思いを乗り越えてきたので破棄できない」「自分の精神的例が往々にある．そこで，継続保管の更新理由と患者背景の関係を明な面からなかなか再開できない」「気持ちの整理をしたい」などの意見がらかにすることで，凍結胚を保管中の患者支援のあり方への再考の一見られた．

助とすることを目的としてアンケート調査を実施した．
【結論】
【方法】

治療再開や継続に迷いをもちつつ，凍結胚の保管継続を更新してい2018年6月から2019年5月の期間に凍結胚の期限更新手続きのためにる患者が一定数いることが明らかとなった．迷いを持つ傾向のある患妻が来院した 194症例を対象に無記名式アンケートを実施し，回収ボッ

者は更新時に年齢・子供数・更新回数を重ねた症例であり，前子の出クスにて回収した（回収率96.9%）．アンケート内容は患者自身の現在産などにより通院から遠のいていることが考えられる．そのため治療期の状況（年齢・保管胚数・養育中の子供数・更新回数），今回の更新理間外であっても今後の方針に関して相談できるサポート体制を周知する

由（治療の継続または再開を考えている・継続か破棄の決断ができなことが患者自身の自己決定を促すと思われる．

かった・妊娠中のため出産まで保管したい・その他の 4択式），自由記
述欄の構成とした．

O-10 不 妊 治療を受けた妊 婦の「 妊 娠

リスクスコア」による周産期予後藤井 美喜，江夏 徳寿，苔口 昭次，塩谷 雅英
英ウィメンズクリニックの返書より，周産期予後と妊娠リスク評価を比較検討した．
【結果】
妊娠初期アンケート回収は 392例に対し，出産報告は 244例（62.2％）であった．妊娠リスクスコアは高リスク群80.7％，中リスク群14.4％，低リスク群4.9％であった．出産時年齢は平均36.8歳，出産週数は平均
38.9週， 出生 児体 重は平 均3,051g であった． 分娩 様 式は 経 腟 分娩
59.0％，帝王切開40.6％，IUFD0.4％であった．出産施設別に高リス
ク群の割合をみると，病院（NICUあり）では 84.8％（56/66），病院
（NICU

【目的】

なし）79.8％（79/99），産科クリニック78.5%（62/79）と高次機能病院で出産施設を併設していない当クリニックは，妊娠7 ～ 10週頃に産科

高リスク群が高かった．帝王切開の割合は高リスク群44.2％（87/197）のある出産施設に妊婦を紹介している．リスクがある場合には緊急時が最も多く，中リスク群25.7％（9/35），低リスク群25.0％（3/12）であった．

に対応できる出産施設を選択することが必要であるが，どのようなリス

妊娠リスクスコア項目のうち周産期予後（帝王切開，早産，低出生体

クが周産期予後に影響を及ぼすか明確でない．そこで，出産された方重児）に関連する独立した因子を求めるために多重解析を行った結果，がどのような周産期予後になったのか調査し，妊娠リスクスコアと比較

高齢妊娠，体外受精，前回出産時合併症が帝王切開のリスクを上昇さ検討し，出産施設選択の参考とする．

せる独立した因子と考えられた．オッズ比，95％信頼 CI はそれぞれ，
高齢妊娠（1.12，1.04-1.20），体外受精（1.71，1.10-2.66），前回出産【方法】
2014年2月～ 2015年3月に当クリニックで実施している妊娠初期セミ時合併症（1.74，1.09-2.79）であった．早産，低出生体重児については独立した予測因子はみられなかった．

ナーを受講し，出産施設を決めている妊婦を対象にアンケートを実施
した．2004年に厚生労働省研究班が作成した「初期妊娠リスク自己評【考察】価」を含めたアンケート用紙を配布回収し，リスク評価した．妊娠リス

高リスク群に属するほど帝王切開が多くみられたこと，高齢妊娠，体クスコアは 18項目について妊婦自身が項目をチェック，点数化する．そ

外受精，前回出産時合併症は帝王切開のリスクを上げることから，妊娠の評価は，高リスク群4点以上，中リスク群2 ～ 3点，低リスク群0 ～ 1

リスクスコアは出産施設を考慮する際の一つの指標となると考えられた．

点である．その後追跡調査として，患者からの出産後報告や出産施設

54

O-11 挙児希望 女 性における亜 鉛不足の現状とプレコンセプションケア
における課題宮本 絵美里 1），安藤 寿夫 2），古井 憲作 1），山田 友梨花 1），
1）
1）
植草 良輔 ，國島 温志 ，長尾 有佳里 1），矢吹 淳司 1），
梅村 康太 1），岡田 真由美 1），河井 通泰 1）1）豊橋市民病院産婦人科
2）豊橋市民病院総合生殖医療センター

96名全員の説明同意を得て自費採血した．採血7日以内の亜鉛製剤内服と採血当日の亜鉛含有サプリメント摂取を避けて採血を実施し，80
μg/mL 未満の女性に対しては結果の説明（日本臨床栄養学会診療指針2018 に基づき 60μg/mL 未満を亜 鉛欠乏（A），60 〜 80μg/mL を潜在性亜鉛欠乏（B）とし，欠乏による症状と妊娠時の需用増，薬剤内服の必要性，改善後の食生活のあり方等）を行った．生殖医療は続行
しつつ亜鉛製剤100mg/日を 60日（A）もしくは 30 〜 45日（B）連日内服させ，改善評価を行なった．
【結果】
スクリーニング検査にて血清亜鉛を測定した 96名のうち，正常である80μg/mL 以上であったのは9名（9.4%）のみで，60 〜 80μg/mLの
（B）
が 64名
（66.7%），60μg/mL 未満の（A）が 23名（24.0%）であった．年齢，【目的】

BMI，サプリメント摂取の有無との関連は明らかでなかった．
（A）と
（B）

食材の選択肢が豊富で少人数世帯の増加した現代社会は，偏ったを合わせた 87名の中で，上述の説明の結果亜鉛製剤を実際に処方した

食生活に陥りやすく，晩婚晩産化や長時間労働や間違ったダイエッのは 39名であり，そのうち 22名で処方後の血清亜鉛再検が施行済みでトにより慢性的かつ特定の栄養素不足が是正されないまま不妊治療あった．再検結果では正常10名，（B）9名，（A）3名であり，（A）から正やARTを受療する女性が増加していると想定される．亜鉛は 300余

常への改善が 5名，（B）から正常への改善が 5名，（A）から（B）への改種の酵素の活性中心元素として働いている必須微量元素であり，生善が 4名，改善を認めなかった者が 8名であった．

殖機能全般にも影響することは自明ともいえるが，プレコンセプショ
ンケアにおける栄養管理の盲点となっているのではと考えた．亜鉛欠【考察】

乏が食事やサプリメントでは短期間に改善困難なことから亜鉛製剤

亜鉛は今回スクリーニング検査を行なったほとんどの患者に充足してが 2017年に保険適用となり，今や有効な治療手段となったことから，おらず，妊娠を目指すにあたっての不足のみならず，ARTをはじめとし亜鉛欠乏の実態を調査し治療により短期是正することを研究の初期

た生殖医療の成績にも悪影響を及ぼしている可能性が示唆された．

目的とした．
【方法】【結論】
亜鉛欠乏をプレコンセプションケアに組み入れ，挙児を望む女性に

当院生殖外来初診女性のスクリーニング検査項目ならびに ART 受

は亜鉛製剤を用いて速やかに改善を図る必要がある．

療女性に６ヶ月毎におこなう“術前検査”項目に血清亜鉛を追加し，O-12 プラセンタエキス含有サプリメント

摂取は胚培養成績を改善するか？

山田 健市，菊地 裕幸，岸田 拓磨，菅野 弘基，岸田 理英，
佐藤 那美，結城 笑香，吉津 葵，佐々木 郁弥，
片桐 未希子，吉田 仁秋
仙台 ART クリニック

Day5/6良好胚盤胞発生率の比較検討を行った．次に，40歳以上患者のプラリエ摂取前30周期（平均年齢41.7歳），摂取後258周期（平均年
齢41.9歳）について，同様に検討を行った．Day3良好胚は，6cell 以
上かつフラグメンテーション 30% 以下，Day5/6良好胚盤胞は，ガード
ナー分類3BB 以上とした．
【結果】
プラリエ摂取前後における正常受精率は 69.7%，73.3％，Day3良好
胚 率 は 66.5 ％，64.1%，Day5/6 胚 盤 胞 発 生 率 は 53.2 ％，55.0%，
Day5/6良好胚盤胞発生率は 22.3%，27.3%であった．摂取前後に有意差を認めなかった．次に，40歳以上患者のプラリエ摂取前後における【目的】

正 常 受 精 率 は 67.4%，74.1%，Day3 良 好 胚 率 は 73.8%，71.6%，

ART において，体質，卵質改善の為，サプリメントや鍼灸等の統合

Day5/6胚盤胞発生率は 39.4%，45.2%，Day5/6良好胚盤胞発生率は医療を利用している患者は多くなってきている．特に高齢患者は，サ15.2%，20.5%であった．40歳以上でも有意差を認めなかったが，摂プリメント利用が顕著である．プラセンタエキス含有サプリメントのプラ取後に正常受精率，Day5/6胚盤胞発生率，Day5/6良好胚盤胞発生率

リエ（メニコン社）は，L-カルニチン，α-リポ酸，コエンザイム Q10，が上昇する傾向があった．

レスベラトロール，葉酸も配合しており，抗酸化成分による体質改善が期待できる．しかしながら，サプリメントは食品の一つであり，その有【考察】

効性には懐疑的な面もある．そこで本研究では，プラリエ摂取の有効

プラリエ摂取により，特に 40歳以上患者では，有意差は認められな性を評価する為，摂取前後における胚培養成績を比較検討することをいものの正常受精率，胚盤胞発生率，良好胚盤胞発生率が上昇する傾目的とした．また，40歳以上患者では，サプリメント摂取率が比較的向があった．これらの上昇傾向は，プラリエの成分に含まれている種々

高いことから，40歳以上患者について同様に検討を行った．

の抗酸化物質の働きによると判断される．プラリエ摂取は，卵質低下を最小限に抑え，胚培養成績の維持向上，ひいては児の獲得に繋がる【方法】
2016年5月から2019年2月，当院にて ART（ICSI）を実施したプラリ
エ摂取前104周期（平均年齢37.6歳），摂取後481周期（平均年齢39.0歳）

可能性があると考えられる．しかし，今回の検討は摂取前後での胚培養成績の比較であり，摂取期間や客観的なバイオマーカーの測定等，
より詳細な検討が今後必要である．

につ いて， 正 常 受 精 率，Day3良 好 胚 率，Day5/6 胚 盤 胞 発 生 率，55

一般演題〔口頭発表〕

O-13 液体窒素タンクが破損した際に生じる外観・液体窒素量・内部温度の変化

小橋 朱里 1），入江 真奈美1），水野 里志 1），明角 一平 2），
福田 愛作 1），森本 義晴 3）
1）IVF 大阪クリニック
2）株式会社アステック
3）HORAC グランフロント大阪クリニックおよびタンク中の温度を経時的に測定した．測定は，断熱解除から温度が，保存胚に脱ガラス化が起きるとされる -80℃に上昇するまで 1時間毎に行った．ただし，最初の一時間及び温度が -196℃から上昇し始めてからは 15分毎に測定した．コントロールは，破損前のタンクで 24時間毎に7日間同様の測定を行った結果を用いた．
【結果】
外観は，全てのタンクで観察開始から15分以内に蓋に霜，本体表面に結露が認められ，この状態は測定終了まで保たれていた．LN2 は，破損箇所間で最初の 60分のみ減少量に差がみられたが，それ以降枯渇するまでは全てのタンクで約4ｃｍ /ｈで減少した．温度は，LN2 の残量がタンクの底から約1cmになるまで-196℃を保っていたが，そこから上昇が始まり，上昇開始から45 ～ 80分で-80℃に達した．測定開始から温度が -80℃に【目的】

達するのに要した時間は，真空弁を破損した場合では 7時間54分，溶接

胚の凍結保存は，生殖補助医療に欠くことのできない技術の一つであ部では 9時間23分，入口部では 8時間3分であった．コントロールは，7日

る．凍結保存には保存タンクが必須であるが，その重要性に関わらずタン

間で満タン時より2cm，LN2 の液面が低下したが，外観と温度に変化は

ク管理について明確な情報はない．タンクに事故が起きれば，被害は重なかった．

大である．2018年にアメリカで 2件のタンク事故が報道され，オハイオ州の事故では約950人の 4,000個の凍結胚が影響を受けたとされている．当【考察】院でも，補充用タンクであったが，タンクが破損し液体窒素（LN2）が枯

今回測定開始から温度が -80℃まで上昇するまでの時間は，破損箇所

渇したことを経験しているため，タンクに破損が起きないとは言い切れなの違いにより最大1時間30分ほどの差があった．しかし，この差によりタい．今回我々は LN2 を満たしたタンクを破損させ，起きた変化を観察す

ンク破損発見後の対応に違いはないと考えている．今回の検討より，タンることで，どのようにタンクを管理すべきか考察した．

クの破損を発見した場合胚救出まで数時間以内の猶予があることが示唆された．さらにタンクに破損が起こった場合，破損直後から外観に兆候が【方法】

現れるため容易に気付くことができる．破損はタンクに動きのある業務中検討には，廃棄予定の10L 保存タンク3台を使用した．これらに LN2に起きる可能性が高いと考えられるため，業務中は定期的にタンクの外観を満タンにし，タンク中で実際に胚が保存される位置に温度計を設置しを確認することが重要である．さらに，損傷の兆候を見つけた時のため，た．タンクの真空弁，溶接部，あるいは入口部に，それぞれ直径2mmの保存胚の移動先や予備のLN2 を確保しておくことも必要である．

穴を開けることでタンクの真空断熱を解除し，外観の観察，LN2 の残量

O-14 凍結直前の収縮胚盤胞が臨床成績へ与える影響

村上 加奈 1），北坂 浩也 1），吉村 友邦 1），福永 憲隆 1, 2），
浅田 義正 1, 2）
1）浅田レディースクリニック
2）浅田生殖医療研究所の 2群に分け臨床成績を比較した．
検討2：S 群とN 群において融解後4時間の培養後に体積が回復した胚盤胞の割合を算出し, 体積が回復および収縮していた胚盤胞における臨床妊娠率，流産率の比較を行った．
【結果】
検 討 1：S 群 の 妊 娠 率 は 36.3%（53/146）に 対 し N 群 で は 45.8%（5055/11034）と有意に高かった（p ＜0.05）．流産率は 35.8%（19/53）に対し21.9%（1106/5055）となり，N 群は有意に低かった（p＜0.05）．
検討2：融解後の体積回復胚盤胞の割合は S 群79.5%（116/146），N 群

【目的】

91.9%
（10142/11034）となりS 群で有意に低かった（p ＜0.05）．体積回

胚盤胞凍結は胞胚腔の収縮・拡張を確認しながら行うが，凍結直前

復 胚 盤 胞の妊 娠 率は S 群 44.0%（51/116），N 群 47.8%（4848/10142），に収縮していた胚盤胞は体積回復の見極めが難しく，最適な平衡液浸

流産率は S 群35.3%（18/51），N 群21.8%（1057/4848）と差はなかった．

漬時間を超過している可能性がある．事実，マウスにおいては，平衡

体積非回復胚盤胞の妊娠率は S 群6.7%（2/30），N 群23.2%（207/892）

液浸漬時間が 長くなるほど胚盤 胞生存率は低下するとの報告もあるとなりS 群で有意に低く（p ＜0.05），流産率は S 群50.0%（1/2），N 群（Valdez CA et.al, J Reprod Fertil, 1992）．そこで，本研究では凍結

23.7%（49/207）と差はなかった．

直前に収縮していた胚盤胞の凍結方法を改善させるために臨床妊娠率，流産率を解析した．

【考察】

【方法】

においては融解後の体積回復の割合は有意に低く，流産率が高かった

両群共に，融解後の体積非回復胚盤胞の妊娠率は低値であり，S 群
2013 年 1 月 ～ 2018 年 12 月 に 培 養 5日 目 or 6日目 で 良 好 胚 盤 胞ことから，平衡液浸漬時間が最適ではなく耐凍剤による負の影響が（Gardner’s Score の ≥3BB）の凍結を行い，単一融解胚移植を施行しあったと考えられる．今後は，全症例タイムラプス運用を活用し胚盤胞

た 6,046症例11,247周期を対象とした．凍結は推奨されるプロトコールの体積が回復してから凍結を開始できる臨床業務体制の構築，またはに従い，平衡液で一度収縮を確認し胚の体積が回復した時点（最大15

非収縮胚盤胞（N 群）の平均的な平衡液浸漬時間を基準とした凍結方分）でガラス化液へ投入後，1分でガラス化を完了させる方法とした．

法を検討していきたい．

検討1：凍結直前に収縮していた胚盤胞（S 群），非収縮胚盤胞（N 群）56

O-15 拡 張した孵 化 胚 盤 胞をガラス化

凍結する際に行う至適収縮処理法の考察

大久保 毅，林 輝明，恩田 知幸，松尾 涼子，田口 智美，
大見 健二，瀬川 智也
新橋夢クリニック

た．良好胚盤胞（TE 数12個以上）まで発育した拡張期胚盤胞1,598個は全てレーザーによる人工的孵化処理を行った後にPASを施行し，cryo top 法によるガラス化凍結を施行した．PAS 前の胚盤胞径が平均以上（200µm 以上）の孵化胚盤胞739個のうち，PAS 後に胞胚腔が完全収縮した群（完全PAS）と胞胚腔が完全に収縮していない群（不完全PAS）
についてTEダメー
ジ率と移植あたりの妊娠成績を比較した．
【結果】
胚盤胞径が200μm 以上の拡張期孵化胚盤胞に PASを施行した結果，完全 PAS 群が 610個，不完全 PAS 群が129個であった．完全 PAS 群および不完全 PAS 群における凍結前の TEダメージは 42.8%（261/610）および

【目的】

20.2%
（26/129）であり，完全 PAS 群で有意に高いTEダメージが認められ

胚盤胞のガラス化において，胞胚腔内液は氷晶形成によるダメージ要因た（P＜0.001）．

になるため，胞胚腔内外において凍結液との効率的な置換が胚の生存率お同様に融解後生存率は 99.2%（605/610）
および 99.2%（128/129），妊娠率

よび妊娠率の向上に繋がる．そのため胚盤胞をガラス化凍結する直前に，は43.0%（260/605）および 54.7%（70/128）であり，妊娠率は不完全 PAS 群

ピペッティングによる人工的な収縮（PAS）処理を施して胞胚腔内容積を小さが有意に高かった（P＜0.05）．

くすることが融解後の高い生存率，妊娠率を得るために重要である．しかしPAS 処理による栄養外胚葉細胞（TE）のダメージは胚盤胞径が大きくな【考察】るほど有意に高くなることが分かったため，TEダメージを出来るだけ少なく

PASを行うことは融解後の高い生存率を得るために必須の前処理であるするためには胚盤胞径が大きいほど慎重なPAS 処理が要求される．そこでことは間違いないが，数回のPASを行っても胞胚腔が完全に収縮しない例

我々はより妊孕性の高い胚を得るためのPAS 法について検証するために，も少なからず見られる．しかしながら，今回のような特に胚盤胞径の大き

拡張期の孵化胚盤胞をPAS 処理した際の収縮形態とダメージ率および妊い胚では，過度のPAS 処理によって TEに不必要なダメージを与えている

娠成績に関する関連性を後方視的に解析した．

可能性が考えられた．従って，胚盤胞径に合わせた適切な内径のピペットによる穏やかな操作はもちろんのこと，不完全 PASであってもTEダメージ【方法】

を最小限に止めることの方が妊娠率のさらなる向上に繋がると示唆された．

2017年3月より2019年2月にかけて採卵を施行した1,341周期を対象としO-16 当院における分割胚の融解時期による臨床妊娠率への影響

小林 正知，関和 瞳，髭 友希，山下 千波，石嵜 健奨，
森中 美友，川本 真，佐々木 真紀，小柳 良子，園田 桃代
園田桃代 ART クリニック

分割胚と当日融解した 7分割以上胚に分けて単一融解分割胚移植を行なった 649周期について前日融解と当日融解の臨床妊娠率を比較した．
【結果】
検 討1 に おいて 前日融 解と当日融 解 の 妊 娠 率 はそ れ ぞ れ 30.2%（71/235），29.7%（93/313）と有意差はなかった．5分割胚，6分割胚，7
分 割 以 上 胚 の 前日融 解 の 妊 娠 率 はそ れ ぞ れ 16.7%（2/12），22.2%（6/27），32.1%（63/196），当日融解の妊娠率はそれぞれ 13.0%（3/23），
18.4%（7/38），32.9%（83/252）と融解時期に関わらず 7分割以上胚で高い傾向を示した．また 5分割，6分割胚はともに当日融解よりも前日融【目的】

解の方が妊娠率が高い傾向を示した．検討2 において前日融解した 5

近年 ART において分割胚よりも胚盤胞移植の方が妊娠率が高いこ

分割，6分割胚と当日融解した 7分割以上胚の妊娠率はそれぞれ 10.0%とから，凍結融解胚盤胞移植が増加している．しかし，胚盤胞に発生（2/20），10.2%（6/59），27.0%（154/570）と当日融解の方が有意に高くしなかった場合や，施設の凍結基準に満たず凍結キャンセルとなり胚なった（P ＜0.01）．前日融解した胚について，移植当日までに割球数が移植に至らない場合もあるため，分割胚移植の方が有用であることも増加した群と前日と同じ割球数のままであった群の妊娠率は 5分割，6多い．以前我々は凍結融解胚移植における融解から胚移植までの時間

分割ともに移植当日までに割球数が増加した群の方が高い傾向を示しの違いによる妊娠率への影響について報告したが，分割胚の割球数別た．

での検討はしていなかった．今回我々は分割胚について割球数別に融解時期による臨床妊娠率への影響について検討した．

【考察】

【方法】

響はなかった．5分割，6分割胚の妊娠率は低調であったものの，妊娠

検討1

5分割，6分割胚の融解日を移植前日にすることによる妊娠率への影
2013年1月以降に当院にて凍結保存した Day3分割胚 Veeck 分に至った胚に関しては移植当日までに割球数が増加している傾向がみ

類5分割 G3以上の胚を用いて，2015年9月から2017年7月までに胚融解られた．そこで当院ではすでに 5分割胚に関しては Day3 での凍結を見を移植前日あるいは当日に無作為に分けて単一融解分割胚移植を行送り良好胚盤胞に発生したら移植の対象としているが，今後は 6分割胚なった 548周期について割球数別の臨床妊娠率（胎嚢確認）を検討した．

についても同様に検討していきたい．

検討2 2017年7月から2019年5月までに前日融解した 5分割胚および 6

57

一般演題〔口頭発表〕

O-17 精巣内精子と射出精子を用いた

ICSI の臨床成績の比較

川 辺 美 里， 野 々 口 耕 介， 人 見 裕 子， 小 川 優 紀，
藤川 恵理，久保田 健，山口 剛史，田村 出，渡邉 由美子，
石川 弘伸，渡邉 浩彦
醍醐渡辺クリニック

胞到達率，臨床妊娠率，流産率を比較して検討することにした．
【結果】
10症例で患者年齢は 29歳から 45歳．総周期数は 31周期で TESE 群
16周期，射出精子群17周期であった（同一周期で TESE, 射出精子両方使用した症例が 2周期あり）．TESE 群では全ての症例で運動精子は確認できずペントキシフェリンで運動性を示した精子を用い射出精子群では運動精子が確認できたので出来るだけ形態良好な精子を用いて ICSIを 行った． 授 精 率， 胚 盤 胞 到 達 率 は TESE 群 で 64.6 ％（64/99），
32.8％（21/64）であったのに対し射出精子群は 75.0％（81/108），74.1％（60/81）であった．臨床妊娠率と流産率は TESE 群で 75.0 ％（6/8），【目的】

33.3％（2/6）であり射出精子群では 43.8％（7/16），42.9％（3/7）であっ

ICSIには正常形態の精子を選別することが重要であるが，症例によっては運動精子が少なく，また形態不良精子が多いとICSIでの精子選別に苦た．最終的に生児を獲得したのは TESE 群4症例，射出精子群3症例であった．

慮することがある．精巣内精子は射出精子と比べるとDNA損傷や酸化ストレスなど少ないが運動精子も少ないので不動精子の中から生存精子を探さ【考察】

なくてはならない．このように射出精子，精巣内精子には長所もあるが欠授精率，胚盤 胞到達率は射出精子群が高かったが臨床妊娠率は点もあり特に精巣内精子回収法は侵襲性が強いことが挙げられる．しかしTESE 群の方が高く，流産率は TESE 群が低い結果になった．このこ

当院では無精子症以外でも精液所見が不良で射出精子でのICSIで結果がとは TESE 群では精子の障害が少なかったということと逆に射出精子群

出ない場合に精巣内精子回収法（TESE）も視野に入れている．そこで当院と比べて精子探索に時間がかかっていることが関係しているかもしれなにおいて同一患者で射出精子，TESE 精子を用いた ICSIの臨床成績につい．TESE 群と射出精子群との比較で優劣はつけがたいが TESE 群はいて検討することにした．

射出精子での ICSI を 2周期程行い着床しないか流産に終わったため
TESE に切り替えて成功している．このように射出精子や TESE にこだ【方法】

わらず数周期行っても結果が出ない場合，精子回収法を変更してみるこ

2014年7月から 2019年6月までの 5年間で TESE と射出精 子によるとも必要と考えられた．しかし今回生児を獲得した症例は 37歳以下で

ICSI を受けた 10症例について TESE 群と射出精子群の授精率，胚盤あったことから母体年齢も考慮して治療を進めることも重要である．

O-18 ICSI 時の紡錘体観察は培養成績

た 169周期914個の卵．650個に紡錘体観察を実施したところ（観察群），を向上させるのか

井頭 千明，古橋 孝祐，岩﨑 利郎，松本 由紀子，
苔口 昭次，塩谷 雅英
英ウィメンズクリニック

600個に MⅡスピンドルを認め（MⅡ群），50個には MⅡスピンドルを認めなかった（非 MⅡ群）．264個は紡錘体観察を実施せず 従来通り
ICSI を実施した（非観察群）．非 MⅡ群のうち 35個は 2時間の追加培
養後に ICSI を行い（培養群），15個に対しては，培養を行わず ICSI を行った（非培養群）．培養群は 2時間の追加培養後に，MⅡスピンドルの有無にかかわらず ICSI を実施した．紡錘体の観察は位相差顕微鏡
Nikon ECLIPSE Ti2-U を用い，maturation trigger から 38 ～ 41時
間後に実施した．
【結果】

【目的】

観察群，MⅡ群，非 MⅡ群，培養群，非培養群，非観察群の成績は，卵子の第一減数分裂において，第一極体は anaphaseⅠに放出がは

そ れ ぞ れ 正 常 受 精 率：74.3%，74.5%，72.0%，62.9%，93.3%，

じまりtelophaseⅠに至って完全に放出される．しかし，この時点では79.9%，D5胚 盤 胞 発 生 率：56.2%，57.5%，41.4%，42.1%，40.0%，

まだ MⅡスピンドルの形成はなく，prophaseⅡを経て初めて MⅡ卵と51.0%であった．観察群と非観察群の比較では，両群に有意な差は認なる．一般的に ICSI は，第一極体の放出を確認できた卵を MⅡ期としめなかった．さらに，培養群と非培養群の比較でも，有意な差は認めて実施するが，第一極体の観察だけでは，anaphaseⅠ～ prophaseⅡなかった．

の卵を MⅡ卵と鑑別することは容易ではない．従って，ICSI に先立って MⅡスピンドルの有無を観察し，観察できない卵は数時間の培養を【考察】

行い MⅡスピンドルの出現を待ってからICSI を行うことで成績の向上

ICSI 時の紡錘体観察の有用性に関して否定的な結果を得た．そのを期待できるとの考えがある．そこで今回我々は ICSI 時の紡錘体観察

理由の第一は，紡錘体可視化率が 92%と高かったこと，第二として，の有用性について検討したので報告する．

MⅡスピンドルの形成を認めない卵でも遜色の無い受精率および胚盤胞 発 生 率 が 得 ら れ たことをあ げ ること が で きる．anaphaseⅠ～【方法】
検討期間：2018年8月～ 2019年5月．検討対象：初回 ICSI を施行し

58

prophaseⅡの卵は MⅡスピンドルの出現を待ってからICSI をするべきという考えには再検討の余地がある．

O-19 細胞膜が低伸展性だった卵の発育能は低い花谷 美香，高橋 浩美，井上 聖子，田口 可奈，川原 結貴，
新藤 知里，川上 典子，平田 麗，小坂 由紀子，羽原 俊宏，
林 伸旨
岡山二人クリニックて比較した．また，不良卵を含まない周期の膜正常卵を A 群，不良卵を含むが 30% 未満であった周期の膜正常卵を B 群，不良卵が 30% 以上であった周期の膜正常卵を C 群とし，それぞれの培養成績および妊娠率について比較した．
【結果】
不良 群， 中間 群， 正常 群 のそれ ぞれ の 2PN 率 は 42.2%, 68.8%,
81.4%，変性率は 46.2%, 14.9%, 2.8% だった．不良群の 2PN 率は他群と比 較して低 率であり（P<0.05）， 変 性 率 は 高 率だった（P<0.05）．
Day5胚 盤 胞 到 達 率は 44.9%, 51.6%, 56.7%， 良 好胚 盤 胞 到 達 率は15.7%, 21.7%, 25.4%であり，不良群の Day5胚盤胞到達率および良好【目的】

胚盤胞到達率は正常群と比較して低率だった（P<0.05）．また単一融

ICSI 実施時に，細胞膜にピペットを挿入すると同時に破膜が起こる

解胚盤胞移植での妊娠率（妊娠継続中含む）および流産率に各群間の低伸展性の卵子はその後の変性率が高いことが知られている．しかし

差 は み ら れ な か った．A 群，B 群，C 群 の そ れ ぞ れ の 2PN 率 は胚発育に関しての報告は多くない．また，低伸展卵が多い周期が見ら

81.9%, 81.2%, 68.9%，良好分割率は 70.3%, 69.0%, 58.1%であり，Cれるが，同時に採卵された膜正常卵の胚発育についての詳細は不明で群の 2PN 率は他群と比較して，良好分割率は A 群と比較して低率だっある．そこで今回は，卵細胞膜の伸展性による胚発育，および低伸展た（P<0.05）．Day5胚盤胞到達率，良好胚盤胞到達率，単一融解胚

卵と同時に採卵された膜正常卵の培養成績を検討した．

盤胞移植での妊娠率（妊娠継続中含む）および流産率に差はみられな
かった．累積生産率は 59.5%, 61.2%, 32.3%でありC 群は他群と比較【方法】

して低率だった（P<0.05）．

2014年 6月から 2017年 6月まで に当 院 で GnRH agonist 法 また は
GnRH antagonist 法による調節卵巣刺激を行った症例のうち，採卵【結論】

回数3回以下，ICSI 実施数が 5個以上の 771症例903周期を対象とした．

細胞膜が低伸展性だった卵子は正常卵と比較し，受精率だけでなくICSI 実施時にピペットを細胞質に挿入したと同時に破膜が見られた卵

胚盤胞到達率も低かったが，融解胚盤胞移植後の妊娠率は正常卵と子を不良群，卵細胞質にピペットを挿入し，押し進めている時に破膜が同等であった．また低伸展卵が多かった周期の累積生産率は低く，同おきた卵子を中間群，十分な伸展の後，吸引をかけることにより破膜

一採卵周期の膜正常卵の受精率も低かった．細胞膜の伸展性は胚発育がおきた卵子を正常群とし，それぞれの培養成績および妊娠率についと関連していることが示唆された．

O-20 40歳 以 上 患 者における Piezo-

ICSIの有用性について

岸 加奈子，古橋 孝祐，片田 雄也，角本 知世，角 知英，
岩﨑 利郎，松本 由紀子，苔口 昭次，塩谷 雅英
英ウィメンズクリニック

し，2019 年1月～ 3月に Piezo-ICSI を 実 施した 288周 期（773 個 ）を
Piezo 群 とし， 後 方 視 的 に 検 討 を 行 っ た． ま た， 本 検 討 に は
Eppendorf 社製の Piezoドライブ（PiezoXpert）を用いた．検討項目は
受精率，2PN 率，変性率，良好分割率（4cellG2以上），D5胚盤胞発生率，D5良好胚盤胞率（G3BB 以上），D5・D6胚盤胞発生率とし，それぞれ比較検討を行った．
【結果】
c-ICSI 群の平均年齢は 42.7±2.1歳，Piezo 群 の平均年齢は 42.9±
2.1歳であり，両群において患者背景に有意差は認められなかった．培【目的】

養 成 績は 順に受 精率（82.0% vs 85.1% p=0.134），2PN 率（72.0% vs生殖補助医療において，卵細胞質内精子注入法（intracytoplasmic

77.6% p=0.020），変性率（5.3% vs 6.1% p=0.56），良好分割率（54.4%

sperm injection; ICSI）は必須の技術である．ICSIの際には精子を卵vs 53.2% p=0.72），D5胚盤胞発生率（25.2% vs 36.6 p=0.0011），D5

細胞質内へ注入する為に，インジェクションニードルで透明帯を押し良好胚盤胞率（33.8% vs 32.3% p=0.82），D5・D6胚盤胞発生率（39.2%

破った上で，卵細胞質膜の破膜が必須である．この卵細胞質膜を破膜

vs 45.8% p=0.078）であり，2PN 率，D5胚盤胞発生率において Piezo

するため に は， ニードル 内 へ 卵 細 胞 質 を 吸 引して 破 膜 する方 法

群が有意に高い値となった．

（conventional-ICSI: 以下 c-ICSI），又は Piezo パルスを使用して破膜する方法（Piezo-ICSI）がある．近年ヒト卵子において Piezo-ICSI【考察】の有用性が報告され，我々も過去に高齢患者におけるPiezo-ICSIの有本検討結果より，40歳以上患者におけるPiezo-ICSI の有用性が確

用性について報告した（2015年日本卵子学会，2018年日本 IVF 学会）．

認出来たことから，Piezo-ICSI は加齢に伴う脆弱な卵子において，よ

今回，2019年1月より40歳以上患者において Piezo-ICSI を実施するより少ないダメージで ICSI が可能となり培養成績の向上に寄与出来るこう治療方針を変更した結果，培養成績の向上に寄与したかどうか前年とが示唆された．今後は Piezo-ICSI が妊娠率の向上に寄与出来ていと比較したのでここに報告する．

るかどうかの検討も行っていきたい．

【方法】
2018年1月～ 3月に c-ICSI を実施した 218周期（528個）を c-ICSI 群と59

一般演題〔口頭発表〕

O-21 電 気 刺 激 法とカル シウムイオノ

ファーによる卵子活性化に関する研究

The oocytes activation by electricpulse stimulation versus Calcium
ionophore after Intracytoplasmic
sperm injection.
藤江 周一朗，庄司 圭佑，三上 勇人，佐々木 雅弘
セントベビークリニック

Oocytes, suspended in a phosphate-buffered saline were placed
between two parallel electrodes in an electric chamber, and were
subjected to a single, square DC pulse. Stimulated oocytes wereimmediately transferred back to HTF medium.
The oocytes were exposed to A23187 for 30 min immediatelytransferred back to HTF medium.
【Results】
Seven hundred forty-one ICSI cycles were included in the
study. The fertilization rate by was statistically significantly
higher in the electro activated group as compared with in thethe calcium ionophore（71% vs 48%）. The oocyte degeneration
rate was not statistically significantly different between the twogroups（17% vs 28%）.

【Purpose】【Conclusion】

The present study was conducted to examine differences in

The electric pulse activation seems to be more useful method

the activation of human oocytes by electrical pulse versus thethan Calcium ionophore in cases of repeated failed fertilization

calcium ionophore.

after ICSI.

【Methods】
The oocytes were activated electrically 30 min after ICSl.

O-22 高プロラクチン血 症の 治療 後にIVF成績は改善するのか？

村井 未来 1），佐藤 学 1），中岡 義晴 1），森本 義晴 2）
１）IVF なんばクリニック
２）HORAC グランフロント大阪クリニック

それぞれ移植後の妊娠反応陽性率と化学流産，GS 率，FHB 率を比
較した．
【結果】
ICSI を行った高 P 群で正常群に比べ成熟率が低下した（77.8％ vs.
74.1％ , P<0.05）．c-IVFを行った患者で成熟率に差はなかった（84.3％
vs. 85.4 ％）． また高 P 群と正常 群で受 精率に差はなかった（ICSI：
80.0％ vs. 78.6％ , c-IVF：81.1％ vs. 79.3％）．移植可能胚率は MSの 高 P 群 で 低下した
（ICSI：82.6 ％ vs. 57.7 ％ , c-IVF：75.9 ％ vs.

【背景】

43.2 ％ , P<0.05）．STと MS の移植可能胚率に差はなかった（ICSI：高プロラクチン（PRL）血症は，排卵障害，月経異常，黄体機能不全

76.3％ vs. 78.2％ , c-IVF：69.9％ vs. 67.9％）．高 P 群の妊娠反応陽

や流産の原因になり，PRL 正常な患者に比べ胚質が低下する．当院で性率は正常群に比べ ST（57.6％ vs. 44.0％ , P<0.05），MS（41.7％ vs.

は高 PRL 血症患者にはカバサールまたはテルロンを処方し PRL の分

36.8％ , P<0.05）ともに低下した．化学流産，GS 率，FHB 率に差は泌を抑え体外受精を行っている．今回，高 PRL 血症治療後の患者のなかった．

体外受精成績を調べた．
【考察】
【方法】

高 P 群の受精方法によって成熟率に差がありICSI で低かったことか

高PRL血症投薬治療中の患者と過去に診断され現在正常化しているら，高 PRL 血症では採卵当日の卵成熟が遅れることが示唆された．

患者を高 P 群とし，当院で 2017年1月から2018年12月に体外受精を行っ

c-IVF では翌日に成熟確認するため成熟率の差が埋まったと考えられた 39歳以下の高 P 群109人と PRL 正常な患者（正常群）1,014人を対象

る．本検討では，高 PRL 血症治療後であっても胚発生や妊娠に影響に 刺 激 周 期 採 卵（ST）と 低 刺 激 周 期 採 卵（MS）の ICSI，があり，特に MS の胚で差は顕著に見られた．高 PRL 血症の患者でConventional-IVF（c-IVF）で分け，それぞれ成熟率，正常受精率，

妊娠反応陽性率は低下したものの，妊娠後の経過に差はなかったこと

移植可能胚率を比較した．また同期間に移植を行った 39歳以下の高 Pから可能であれば刺激周期で多くの卵子を獲得し，治療を進めること

群124人の患者と正常群1,264人を ST の胚移植とMS の胚移植で分け，が望ましいと考えられる．

60

O-23 採卵決定日にLH サージ開始した

採卵周期におけるレルゴリクスの排卵抑制効果の検討

中尾 佳月，黒田 恵司，月花 瑶子，板倉 彰子，森山 梓，
壽圓 裕康，堀川 隆，小代 裕子，高見澤 聡，中川 浩次，
杉山 力一
杉山産婦人科 新宿

採卵2日前の LH 値が 10mIU/mL 以上に上昇した 183周期のうち，基礎LH 値が高値の卵巣予備能低下症例と多嚢胞性卵巣症候群の 20周期を除外した 163周期を対象とした．採卵2日前にレルゴリクスを投与した27周期（R 群），2日前に GnRH アンタゴニスト注射薬を投与した 10周期
（G 群），1日前に NSAIDs（メロキシカム）を内服した 102周期（M 群），
2日前にレルゴリクスと1日前にメロキシカムを内服した 24周期
（R+M 群）の 4群を後方視的に比較検討した．
【結果】
R 群，G 群，M 群，R+M 群 の 年 齢 は，36.9 ± 4.3，36.2 ± 4.5，39.3±5.0，38.6±5.0歳，採卵2日前の LH 値は，18.1±6.0，15.2±2.5，
18.5±7.1，20.4±6.6mIU/mLであり，4群間において有意差はなかった．

【目的】

一方，採卵時の既排 卵率は，40.7 ％（11/27周期），0 ％（0/10周期），

クロミフェン等を用いた卵巣低刺激法など，排卵抑制を併用しない
卵巣刺激では，採卵前に LH サージ・排卵が起こり採卵キャンセルとな

14.7 ％（15/102周期），20.8 ％（5/24周期）であり，R 群は G 群，M 群と比較して有意に高かった（p=0.016，0.0027）．

ることがある．そのため，排卵抑制を目的として，上昇した LH を抑制する GnRH アンタゴニスト製剤や，プロスタグランジン産生を阻害する【考察】

NSAIDs を投与することがある．2019年3月発売の経口 GnRH アンタ

採卵決定日に LH サージを認めた場合，レルゴリクスによる排卵抑制

ゴニスト製剤（レルゴリクス）は，従来の GnRH アンタゴニスト注射薬よ効果はあまり期待できない．経口剤による吸収および血中濃度上昇のり安価で投与が容易である．その利便性から，今後使用増加が予想さ

遅延が考えられる．LH サージを抑制する目的で GnRH アンタゴニスト

れるレルゴリクスの排卵抑制効果を検証した．

製剤を投与する場合は，速やかな効果が期待できる注射製剤が適して
いる．

【方法】
2018年12月から2019年5月，卵巣低刺激法による採卵周期において，O-24 増加する就労女性 患者に対する当院の取り組み〜ランダムスタート法による調節卵巣刺激法の活用〜

加藤 裕之，吉岡 尚美，小川 尚子，大塚 未砂子，
村上 貴美子，水本 茂利，大坪 瞳，蔵本 武志
蔵本ウイメンズクリニック

卵した 252症例を対象とし，月経1 ～ 3日目よりスタートした 189症例（C群）と，月経6日目以降の卵胞期よりスタートしたランダム法15症例（F群），黄体期よりスタートしたランダム法48症例（L 群）の臨床成績を検
討した．
【成績】
両立支援外来の受診患者30名のうち計画 ARTを行った 18周期の内訳は，ランダム法4周期，前周期ホルモン補充による月経調整14周期であった．計画 ARTを施行した 70% の患者が通常治療に比較してストレスや負担が減り，80% の患者が計画 ART なら仕事との両立可能との【目的】
共働き世帯の増加により，不妊患者における就労女性の割合が増加

回答を得た．
C 群，F 群，L 群において，年齢，AMH 値，BMI に有意差はなく，している．当院の患者の 80％は就労女性であり，50％は常勤のフルタ

採卵数は，15.8，13.6，11.7個と，L 群のみ有意に少なかった．スター

イムで仕事を行っている．このような現代患者のニーズに合わせて治療

ト時の胞状卵胞数も同様に，15.2，18.3，12.2個と，L 群のみ有意にを行うには，通院日数を減らすなどの配慮が必要となる．当院では就少なかった．採卵率，成熟率，受精率に有意差は認めなかった．ゴナ

労女性患者へのサポート体制を整備するため，両立支援外来を開設しドトロピン投与日数及び総投与量は，9.8，9.9，11.1日，2321，2823，ている．同外来経由後の診療現場においては，月経開始時期を問わず

3091 IUとL 群のみが有意に多かった．単一胚盤胞移植当たりの臨床スタートできるランダムスタート法（以下ランダム法）などを活用して，患的妊娠率は，55.1，70.0，69.1％であり有意差は認めなかった．

者個別のニーズに合わせて計画 ART を行なっている．今回，これらの計画 ART が就労女性のストレス軽減に寄与するかを検討した．また
計画 ART の選択肢であるランダム法の臨床成績を通常の GnRH アン
タゴニスト法（以下アンタゴニスト法）と比較検討した．

【結論】
計画 ART は，不妊治療と仕事の両立を必要とする患者のストレスを軽減する有効な支援であると思われた．アンタゴニスト法においては，
スタート時期は臨床的妊娠率に影響を与えなかった．採卵数の有意差【方法】

は，スタート時の胞状卵胞数に由来すると思われた．計画 ART におけ2018年5月1日〜 2019年2月28日において，当院両立相談外来経由でるランダム法は患者個別のニーズに対応し易く，臨床的結果に影響を与計画 ARTを行った 30名を対象とし，計画 ART のストレスへの有効性えない有効な調節卵巣刺激法であり，増加する就労女性のストレス軽について質問紙調査を行った．

減にも寄与すると思われた．

次に 2018年1月1日〜 2019年1月31日において，アンタゴニスト法で採61

一般演題〔口頭発表〕

O-25 反復着床障害症例に対する子宮内膜受容能診断日 付 診 から Endometrial Receptivity
Analysis（ERA®）
へ 当院での検討

平井 佐和子，隈本 正太郎，森下 眞依子，岩瀬 あい，
西川 由華里，邑上 沙瑶子，佐多 良章，遊木 靖人，
津野 晃寿，岩政 仁
ソフィアレディースクリニック水道町

を受容期（Receptive）とし，それ以外を非受容期（Non Receptive）とした．
【結果】
日付診群の年齢は 38.2
（ ±3.3）歳で検査前移植回数は 4.6（ ±3.1）回であった．受容期が 9.1%
（1/11症例），非受容期が 90.9%（10/11症例）で内訳が POD3：7例，POD2-3：1例，POD2：3例であった．移植日を 遅らせて 胚 盤 胞 移 植を 行った 10症 例26周 期で 臨 床 的 妊 娠 率 は26.9%と検査前の 6.5%と比較し有意に改善した（p=0.016）．ERA 群の年齢は 37.8（ ±5.2）歳で検査前移植回数は 2.9（ ±0.3）回であった．
受容 期29.4%（5/17症例）， 非受容 期70.6%（12/17症例）で内訳は 12h
E a rly Re c ept ive：4 例，2 4 h P re Re c ept ive：4 例，4 8h P re
Receptive：2例，12h Late Receptive:1例，24h Post Receptive:1例【目的】

であった．至適移植時期に胚盤胞移植を行った 7症例8周期で臨床的反復着床障害症例では，子宮内膜受容可能期間（IW:implantation

妊娠率は 50.0%と検査前の 6.1%と比較し有意に改善した（p=0.0005）．

window）のずれがある可能性が指摘されている．IWの評価として当院では 2012年から2017年まで子宮内膜日付診を行っており，2018年よりERA（ERA®︎ Igenomix, Valencia, Spain）を導入した．両者の臨床成績を後方視的に検討し，考察する．

【考察】
反復着床障害対策として日付診は有意差を持って臨床妊娠率を向上させた．しかし，当院の 2013 〜 2016年の 35-42歳のART1058周期の臨床妊娠率38.1%と比較し，満足のいくものではなかった．ERA は症【方法】

例数が少ないものの，良好な結果が得られている．当院では非受容期

2012年2月〜 2017年3月に日付診を行った 11症例と2018年9月〜 2019

が 7割と諸々の報告よりも割合が高かった．これは ERA 検査前の臨床

年5月に ERAを行った 17症例の妊娠成績について検討を行った．日付

的妊娠率が 6.12%（3/49周期）で biochemical pregnancy 率が 36.73%

診は HRT 周期で黄体ホルモン開始日を 0日目として 5日目の内膜を採取（18/49周期）であったことと併せて考えると興味深い．更なる症例の蓄し，病理学的に排卵後（POD）何日目か診断した．POD5 を受容期とし，積は必要だが，ERA は反復着床障害症例に有用な検査であると考えそれ以外を非受容期とした．ERA は HRT 周期で黄体ホルモン投与開られた．

始後120時間の子宮内膜を採取した．120時間での胚盤胞移植推奨群

O-26 プロゲステロン膣坐薬別の HRT-ET 周期での血中プロゲステロン
濃度測定の必要性

藤岡 美苑，泉 陽子，清水 純代，石橋 里恵，田口 美里，
林 綾乃，植松 亜也佳，平田 貴美子，中西 桂子，後藤 栄
後藤レディースクリニック〈検討1〉 2012年1月～ 2019年4月に，USP（1200mg/日）を使用した 794
周 期のうち，SEET 日と ET 日に P 値 <9ng/ml だった 41周 期（A 群），
SEET日にP値＜9ng/mlかつET日にP値≧9ng/mlだった72周期（B群），
SEET日に P 値≧9ng/ml かつ ET日P 値 <9ng/ml だった 48周期（C 群），
SEET日とET日に P 値≧9ng/ml だった 633周期（D 群）に分け比較した．
〈検討2〉 2015年9月～ 2019年4月に LSP（300mg/日）を使用した 108周期のうち，SEET日に P 値＜9ng/ml かつ ET日に P 値≧9ng/ml だった
12周期（E 群），SEET日と ET日に P 値≧9ng/ml だった 96周期（F 群）に分け比較した．
【結果】

【目的】

〈検討1〉 A，B，C，D 群間で平均年齢に有意差はなかった．臨床妊近年，HRT-ET 周期（HRT 周期）にプロゲステロン（P）の膣坐薬を娠率は A 群39.0％（16/41），B 群58.3％（42/72），C 群56.3％（27/48），

用いる場合には血中 P 値（P 値）の測定は不要という報告があるが，当D 群61.0％（386/633）で D 群がA 群に比べ高率（P<0.01）であった．流院は HRT 周期に P 値を測定し膣坐薬の適量を再決定することは有用

産率は 12.5％，9.5％，18.5％，20.2％で4群間に有意差はなかった．

であると報告し，SEET日（D2又は D3）とET日（D5又は D6）に P 値を〈検討2〉 E，F 群間で平均年齢に有意差はなかった．臨床妊娠率は E

測定し，膣坐薬の増量を決定している．

群25.0％（3/12），F 群40.6群（39/96）で有意差はなかった．流産率は

本研究では P 膣坐薬の種類が違う場合でも同様の結果となるのか，

0.0％，23.1％で有意差は認められなかった．

ウトロゲスタン膣用カプセル（USP）とルティナス膣錠（LSP）を用いて，各使用 HRT 周期での P 値と妊娠成績の関連性を後方視的に検討した．

【考察】

【方法】

P 値が＜9ng/ml だった群より臨床妊娠率が有意に高かったことより，

USP 周期では SEETとET 両日に P 値が≧9ng/ml だった群が両日に当院初回 ET かつ SEET 法を併用し，良好胚盤胞を凍結融解胚移

USPを使用した HRT 周期の妊娠率と P 値は関連性があり，SEET日

植した HRT 周期を対象とした．HRT 周期は月経開始2日目よりエストおよび ET日に P 値を測定することは有用であると示唆された．LSP 周

ラジオールを開始し，15日目よりP 補 充を開始した．良 好胚 盤 胞は期では SEET日および ET日に P 値による妊娠成績の有意差は認めら

day5 で Gardner 分類 G3AAまたは G4以上とした．

れなかったが，さらに症例数を増やして検討をする必要がある．

62

O-27 凍結胚移植時の各種黄体ホルモン製剤による血中プロゲステロン値と妊娠成績の検討

品川 真澄，片桐 未希子，吉田 仁秋
仙台 ART クリニック

妊娠継続率（10週以上まで妊娠継続したもの）と，胚移植1週間後と2週間後の血中プロゲステロン値とした．また，全群における妊娠者と非妊娠者の血中プロゲステロン値についても検討した．
【結果】
4群の妊娠率，流産率，妊娠継続率は，プロゲステロン腟坐剤群で55.1 %，24.1 %，79.2 %，ルテウム群で46.4 %，17.2 %，82.8 %，ルティ
ナス群で41.8 %，17.4 %，87.0 %，ウトロゲスタン群で49.5 %，31.3 %，75.0 %で，各群間に有意差は認めなかった．また，胚移植1週間後と2週間後の血中プロゲステロン値は，プロゲステロン腟坐剤群で 16.8 ng/【目的】

mL，16.1 ng/mL，ルテウム群で 18.4 ng/mL，16.5 ng/mL，ルティナ

ホルモン補充周期下の凍結融解胚移植時の経腟黄体ホルモン製剤

ス 群 で 13.4 ng/mL，12.3 ng/mL， ウトロゲスタン 群 で 11.8 ng/mL，には，剤形や投与回数の異なる製剤が複数ある．当院では以前の院内10.9 ng/mLであった．各群内での1週間後と2週間後の値に有意差は認製剤のプロゲステロン腟坐剤のほか，ルテウム，ルティナス，ウトロゲ

めなかったが，プロゲステロン腟坐剤とルテウムがルティナスとウトロ

スタンを使用している．患者のライフスタイルや希望に合わせ薬剤を選ゲスタンに比べ有意に高値であった．妊娠者と非妊娠者の血中プロゲス択しているが，これらの製剤間での妊娠率や血中プロゲステロン値を比

テロン値は，それぞれ 1週間後が 17.1 ng/mL，15.2 ng/mL，2週間後較した報告を認めていない．そこで当院での各種使用成績を比較検討

が 16.1 ng/mL，14.5 ng/mLであり，妊娠者のほうが両者共に有意にした．

高値であった．

【方法】

【結語】

2017年1月から2019年4月，当院にてホルモン補充周期下に凍結融解

本検討では，プロゲステロン腟坐剤群とルテウム群，また妊娠者で胚移植を行った周期のうち，単一良好胚盤胞移植（Gardner 分類3BB

有意に血中プロゲステロン値が高値であったが，製剤間で妊娠成績に以上），患者年齢40歳未満，内膜厚8mm 以上の 827周期に限定して比有意な差を認めなかった．ホルモン補充周期下に凍結融解胚移植を行

較検討を行った．プロゲステロン腟坐剤（800mg/日）群550周期，ルテ

う際，経腟黄体ホルモン製剤の選択は，妊娠成績に影響を及ぼさない

ウム（800mg/日）群125周期，ルティナス（300mg/日）群55周期，ウトロ

ことが判明した．

ゲスタン（600mg/日）群97周期であった．検討項目は妊娠率，流産率，O-28 自動タイムラプスインキュベーター

にタイムラプス歴10年の培養士
スキルは活かせるか

古井 憲作，安藤 寿夫，鈴木 範子
豊橋市民病院総合生殖医療センター

ムラプス経験を有する胚培養士1名が，Eeva スコアを知らない状態で各胚に対して同様の 5段階スコアをつけた．胚盤胞期まで発生させた胚について，両スコアを比較した．
【結果】
Eevaと胚培養士の両方が最も良いスコア 1をつけた分割 期胚では94.8%（55/58）が胚盤胞に到達した．Eava スコアが 1 だったが胚培養
士スコアが 2・3・4・5 だった場 合の胚 盤 胞発生は，それぞれ 66.7%（8/12）・75.0%（9/12）・0%（0/1）・0%（0/1）だった．逆に胚培養士ス
コアが 1 だったが Eava スコアが 2・3・4・5 だった場合の胚盤胞発生は，【目的】

それぞれ 79.2%（19/24）・63.6%（7/11）・40.0%（2/5）・該当胚0 だった．

タイムラプスインキュベーターは日常臨床への応用開始後約10年が経両方のスコアが 1 だった場合の胚盤胞到達率94.8%（55/58）は，片方の過し，画質等の向上を実現し自動分析化による人工知能的能力を搭載

みスコア 1 だった場合の 68.2%（45/66）と比較して有意に（P= 0.00018）

した次世代型が発売された．今回，この新しいテクノロジーの革新的高かった．

要素とされる分割期胚段階での胚盤胞発生予測の妥当性と発展性をタ
イムラプス経験を重ねてきた胚培養士による同様の予測と比較検討した．

【考察】

【方法】

培養士による評価と一致することが多かった一方で，評価が分かれるこ

Eeva による評価はタイムラプス画像を見慣れていて経験が豊富な胚
胚 診 断機 能を備えた自動 化タイムラプスインキュベーター Geri+/とも一部にあった．どちらが優れているということよりも，評価が一致

Geri Assess® 2.0・EevaＴＭ3.0 software（ メルクバイオファーマ社）をした場合の発生予測が確度を大幅に高めたことから，現段階で有用な用いた．各胚の第1胚分割から 68時間経過後の細胞数を入力すること

情報をすでに提供しているEeva が今後さらに進化可能であることが示により74項目の特性分析より5段階の Eeva スコアがアウトプットされた．

唆された．Eeva スコアの有用性がタイムラプス経験を積んだ胚培養士

これとは独立して 68時間後までのタイムラプス画像により10年間のタイによる独立した評価を加えるとさらに向上した．

63

一般演題〔口頭発表〕

O-29 Direct Cleavage 由 来 胚 で も形態良好胚 盤胞であれば妊娠率は低下しない坂井 和貴，伊木 朱有美，野手 健造，久保 敏子，
笹峯 梢，長谷川 麻理，佐々木 容子，須賀 真美，
鵜久森 夏世，兵頭 慎治，鍋田 基生
つばきウイメンズクリニック

充周期または自然周期で行い，胚が胚盤胞に至った日数にかかわらず
黄体ホルモン投与開始日から 5日後に行なった．また，融解した胚盤胞は Laser Assisted Hatchingを併用し，透明帯を約40% 開孔して移植した．形態良好胚盤胞は 3BB 以上と定義した．
【結果】
移植した形態良好胚盤胞103個のうち23個（22.3%）が DC 胚であった．
臨床妊娠率は DC 群39.1%（9/23），NC 群55.0%（44/80）であり両群間に有 意 差はなかった．Day4胚 盤 胞では DC 群30.0%（3/10），NC 群
58.5%（24/41）であり両 群間に有意差はなかった．Day5胚 盤 胞ではDC 群46.2%（6/13），NC 群51.3%（20/39）であり両群間に有意差はな
かった．

【目的】
タイムラプス装置の普及により，従来の形態学的評価に加え，胚の【考察】

分割様式や発生速度などの動的観察が可能となった．一連の動的観察

DC 胚であっても形態良好胚盤胞であれば NC 胚の胚盤胞と同程度を行うことによって，1個の割 球 が 3個以 上に分割するような Directの妊娠率が期待できることが分かった．発育速度を考慮した妊娠率もCleavage（DC）胚がある程度の割合で見られることが明らかとなってき

Day4胚盤胞，Day5胚盤胞どちらを移植した場合も DC 胚由来と NC

た．DC 胚はその後の胚発生が不良ともいわれるが，形態良好胚盤胞胚由来で同程度の妊娠率であった．DC 胚は胚盤胞到達率が低下するになることもあり不明な点も多い．今回は DC 胚由来の形態良好胚盤ともいわれているが，それが何故なのか不明な点も多い．DC 胚由来で胞の妊娠率について正常分割（Normal Cleavage: NC）胚由来の形態あっても胚盤胞であれば着床前診断による正常胚の割合は NC 胚と同良好胚盤胞と比較検討した．

程度であるという報告もあり（Zhan Q et al.,2016），本結果はそれに矛盾しないものであった．今回の検討では，DC 胚由来胚であっても，形【方法】

態良好胚盤胞であれば妊娠率は低下しないことが分かった．今後はそ

患者同意のもと，2018年9月から2019年1月までに当院で形態良好胚の後の妊娠経過を追跡する予定である．

盤胞を単一凍結胚移植した 103周期を対象とした．移植はホルモン補O-30 Day4胚盤胞は第一選択か？     ～融解胚移植における胚盤胞の選択順位～

安田 忠頼，坂本 朱華利，杉浦 百香，丸岡 沙織，古川 美穂，
白井 美希，清水 雅司，村田 朋子，村田 泰隆
ART クリニックみらい

4TE-B 群（92周期），5TE-A 群（583周期），5TE-B 群（413周期）に分類し，臨床妊娠率，継続妊娠率を比較した．
【結果】
検 討 ① で は， 臨 床 妊 娠 率 は，4ICM-A 群 52.8 ％，4ICM-B 群
51.1％，5ICM-A 群49.3％，5ICM-B 群43.3％だった．継続妊娠率は，
4ICM-A 群36.0％，4ICM-B 群37.8％，5ICM-A 群37.4％，5ICM-B
群29.4％で 5ICM-A 群と5ICM-B 群間（P<0.05）に有意差が見られた．
検討②では，臨床妊娠率は，4TE-A 群59.6％，4TE-B 群43.5％，
5TE-A 群52.7％，5TE-B 群40.0％で4TE-A 群と4TE-B 群間（P<0.05），【目的】

4TE-A 群と5TE-B 群間（P＜0.01），5TE-A 群と5TE-B 群間（P＜0.01）

当院ではこれまで従来型インキュベーターで胚盤胞形成を確認し，5に有意差が見られた．継 続 妊 娠率は，4TE-A 群40.4％，4TE-B 群～ 6日目以降に凍結保存を行ってきた．2018年1月より，タイムラプスイ

27.2 ％，5TE-A 群40.3 ％，5TE-B 群28.6 ％で 4TE-A 群と5TE-B 群

ンキュベーターを導入してからDay4 で完全胚盤胞に至った胚盤胞を凍間（P<0.05），4TE-A 群と4TE-B 群間（P<0.05），4TE-B 群と 5TE-A

結するようになった．Day4胚盤胞は高い妊娠成績が得られると報告も群間（P<0.05），5TE-A 群と5TE-B 群間（P<0.01）にそれぞれ有意差があり，Gardner 分類3BB 以上の良好胚盤胞は優先的に移植胚として選見られた．

択した．今回，良好胚盤胞におけるDay4及び Day5胚盤胞の移植成績について後方視的に比較，移植胚の選択順位を検討した．

【考察】

【方法】

妊娠継続率に差はなかった．しかし，TE の評価では，凍結日数に関ICM の評価においてday4とday5 の凍結日数の違いで，臨床妊娠率，
2018年1月～ 2019年3月に，Day4及び Day5 で凍 結した Gardner 分

わらず TE が Bよりも Aの方で継続妊娠率が有意に高かった．Day4及

類3BB以上の良好胚盤胞を単一融解胚移植した1,202周期を対象とした．

び Day5 の良好胚盤胞では，凍結日数に関係なくTE 評価が Aの胚盤検討①では，対象を凍結日数とICM の評価で，4ICM-A 群（161周胞から移植することで，挙児獲得までの期間を短縮できる可能性があ期），4ICM-B 群（45周期），5ICM-A 群（765周期），5ICM-B 群（231る．また，Day4 で TE 評 価が B 以下の場合，Day5 まで延長培養し，周期）に分類した．

TE 評価を向上させることで，移植成績が改善するか，今後検討してい検 討 ② で は， 凍 結 日 数と TE の 評 価 で，4TE-A 群（114 周 期 ），

64

きたい．

O-31

当演題は取り下げとなりました

O-32 次世代シークエンサー（NGS）を【対象と方法】
2018年10月～ 2019年6月に流産手術を行い，流産絨毛組織が確認で用いた流産絨毛組織の解析の検討きた 9症例について NGS により解析を行った．このうち1症例は 2段階

後藤 優介１），寄田 朋子１），渡邉 華１），戸水 桐子１），
田口 新１），原田 祐紀１），近藤 希衣１），森田 幸孝 2），
向田 哲規１）2 つの絨毛組織を解析した．採取した組織は絨毛組織の確認後，血液1）広島 HART クリニック
2）ジーンリサーチ

胚移植後，胎嚢が 2個確認できたがその後2個とも発生停止となった為成分等を除去したのちに組織の一部を解析に使用した．NGS の解析
は外部解析機関に委託した．
【結果】
平均年齢は 39.3歳だった．NGS による解析の結果，Normal が 40％（4/10），Abnormal が 60%（6/10）であり，解 析不能症例はなかった．

【目的】
初期流産の原因のうち約60％が染色体の数的異常が原因と言われて各染色体の異常頻度は 2番染色体の Trisomy が 1例，13番染色体のTrisomy（partial）が 1例，16番染色体の Trisomy が 3例，20番染色体

おり，年齢の上昇に伴いその割合も増加していく．現在，流産絨毛組の Trisomy が 1例だった．性 染 色体は XX が 80%（8/10），XY が 20%

織 の 染 色 体 解 析 は G-BAND 法 が 一 般 的 に もち い ら れて い る．

（2/10）だった．

G-BAND 法では解析時に細胞の培養が必要となり，結果が得られるまで一般的に 2 ～ 3週間かかり，細胞の培養が不成功の場合は解析が【結論と考察】できない可能性がある．一方で近年 PGT などに用いられる次世代シー

今回の結果からNGS で流産絨毛組織の解析が問題なく行えること

クエンサー（NGS）による流産絨毛組織の解 析が可能となっている．

が示唆された．NGS では G-BAND 法で行う細胞培養が必要なく，よNGS では G-BAND 法で必要な細胞培養は必要なく，より迅速な解

り迅速な解析結果が得られると考えられる．また，顕微鏡下で絨毛組析が可能である．今回当院における流産絨毛組織の NGS 解析を行っ織を確認し，その一部の細胞のみで解析が行える為，母体由来細胞のたので報告する．

混入を減らせることができ，より正確な解析が可能であると考えられる．

65

一般演題〔口頭発表〕

O-33 胞胚腔内残存割球における         臨床成績と予後の検討

小島 勝志，岡部 美紀，中野 俊，明石 佐奈子，
山内 久美子，塩谷 仁之，東野 志保，杉浦 朝治，渡辺 慶，
藤田 真紀，高橋 敬一
高橋ウイメンズクリニック

群：コントロール群（4,597周期，平均年齢36.0±4.2歳）に分けて検討した． それ ぞれ の群で 年 齢 別（30歳 未 満，30 〜 34歳，35 〜 39歳，40歳以上）の妊娠率，流産率，移植あたりの継続妊娠率の比較検討を行った．統計解析は X²検定で行い，P ＜0.05 を有意差ありとした．
【結果】
割球 群 VS コントロール群の年齢別の結果は，30歳未満の妊娠率（83.3％ VS 68.7％），流産率（0％ VS 16.0％），継続妊娠率（83.3％
VS 57.7％），30 〜 34歳の妊娠率（60.5 ％ VS 61.0％），流産率（15.4％ VS 13.8％），継続妊娠率（49.3％ VS 52.6％），35 〜 39歳の妊娠率（48.9％ VS 50.0％），流産率（10.9％ VS 19.8％），継続妊娠率（43.5％【目的】

VS 40.1％），40歳以上の妊娠率（26.7％ VS 32.5％），流産率（55.0％

胚盤胞まで発育した胚の腔内に割球が残っていることがしばし見られる．割球が残る原因は明らかとなっていないが，妊娠率・流産率にVS 34.0％），継続妊娠率（12.0％ VS 21.5％）であった．すべての項目
で有意な差は得られなかった．

影響があるという報告もある．そこで当院において残存割球の有無による臨床成績とその予後を検討した．

【考察】

【方法】

およぼさないことが示唆された．治療期間を短くし，早く結果を得る為

今回の検討において，胚盤胞の残存割球による臨床成績には影響を2009年1月から2018年12月までの10年間に当院で単一凍結胚移植をにはよりよい胚を移植時に選択する必要がある．今回の結果より移植行い，Gardner 分類３BB 以上であった 4,882周期を対象に，凍結時に胚を選択する上で，残存割球の存在は考慮すべき優先項目ではないと割球を認める群：割球群（285周期，平均年齢37.0±3.9歳）と認めない考えられる．

O-34 0PN 由 来 胚 盤 胞 の 臨 床 成 績 についての検討渡辺 慶，岡部 美紀，中野 俊，山内 久美子，明石 佐奈子，
塩谷 仁之，東野 志保，杉浦 朝治，前島 澪，藤田 真紀，
高橋 敬一
高橋ウイメンズクリニック

由来胚213周期（平均年齢37.6歳±3.88）を対象に妊娠率，流産率，継続妊娠率（移植あたり），継続妊娠あたりの出産率の比較検討を行った．
検討に用いた 0PN 由来胚はタイムラプスを使用せず，翌日の受精確認
時に 0PN であったものを用いた．
統計解析はΧ2 検定で行い，P ＜0.05 を有意差ありとした．
【結果】
妊娠率，流産率，継続妊娠率は，2PN 由来胚で45.0%（3179/7065）､
20.0%（636/3179）､ 36.0%（2543/7065），0PN 由来胚で 43.7%（93/213）､
26.9%（25/93）､ 31.9%（68/213）で あ った． 出 産 率 は 2PN 由 来 胚 で
55.9%（1422/2543），0PN 由来胚で 63.2%（43/68）であった．妊娠率，【目的】
0PN 由来胚の臨床利用については今現在も様々な議論が続いている．

流産率，継続妊娠率，出産率の全ての項目で 2PN 由来胚と0PN 由来
胚の間に有意差は認められなかった．出産結果を確認できた 0PN 由

培養をするにあたり前核が確認できない胚は染色体異常が疑われるた来胚43例中「声帯麻痺」が 1例あった．染色体異常児，奇形児は認めな

め優先的に移植には用いられていない．だが 0PN 由来の胚であってもかった．

正常受精胚であるという報告も複数見られる．
当院では受精確認時に 0PN 胚であった場合続けて培養を行い，胚【考察】

盤胞に至ったものを凍結保存している．その後移植胚を選択する時，以上の結果より，0PN 由来胚であっても胚盤胞まで到達した胚であ凍結胚が 0PN 由来胚のみ残っている場合に，患者のインフォームドコ

れば受精確認時に PN の存在を確認出来なかっただけで正常な受精をンセントを得た上で 0PN 由来胚の移植を行っている．

していると考えられる．また，妊娠率，流産率，出産率は 2PN 由来胚

今回，0PN 由来胚を用いた当院での臨床成績について検討した．

と同等の結果となった．当院で確認出来た出産に至った例でも0PN 由
来胚で染色体異常児，奇形児は認められなかった．このことから胚盤【方法】
2009年1月から2018年12月までの10年間に当院で単一凍結融解胚盤
胞移植を行った 2PN 由来胚7,065周期（平均年齢36.3歳±3.90）と0PN66

胞に至った 0PN 由来胚は正常受精胚であるとして，凍結胚移植する際の胚の選択枝の一つとなり得ると考えられる．

O-35 C-IVF由来の1PN 胚だけではなくICSI 由 来 の1PN 胚 も 臨 床 的 に有用である

辻 暖永 1），北坂 浩也 1），野老 美紀子 1），福永 憲隆 1, 2），
浅田 義正 1, 2）
1）浅田レディースクリニック
2）浅田生殖医療研究所

3,618個を対象とし胚盤胞形成率を算出した．また Gardner 分類で 3以上（CC を含まない）の胚はガラス化凍結を行い，移植周期に 1PNICSI 胚盤胞の単一胚移植を行った 217周期を対象とし，臨床妊娠率，流産率および産児数を算出することで臨床的有用性を評価した．なお
同 期 間 に ICSI/C-IVF 後 に 得 ら れ た 2PN 胚 お よ び C-IVF 後1PN
（1PN-cIVF）を形成した胚を対照区とした．
【結果】
1PN-ICSI の出現率は 2.8%（3618/127728）であり1PN-cIVFより有意に低かった（4.6%：1044/22799）．1PN-ICSI における胚盤胞形成率は 14.8%（525/3547）で あ り 1PN-cIVF の 26.5%（274/1035），2PN の

【目的】

62.0%
（22420/36189）と比べそれぞれ有意に低かった．また臨床妊娠

ART において低率ではあるが 1前核（1PN）胚が形成される．その発率 は 24.4%（53/217）で あ り 1PN-cIVF の 36.6%（41/112），2PN の生機構は未だ不明な点が多く，また臨床的に有用であるか否か統一し

40.2%（4802/11947）と比べそれぞれ有意に低かった．しかしながら流た見解がないのが現状である．当院ではこれまでに Live cell imaging

産 率 に お い て は 30.2%（16/53）で あ り 1PN-cIVF の 34.1%（14/41），技術を用いることで，マウスおよびヒトにおいて 1PN の中には雌雄両ゲ

2PN の 23.3%（1119/4801）と比べて差はなかった．また，1PN-ICSI 胚

ノムを含む胚が存在することを明らかにしてきた．またそれら雌雄両ゲの移植において現在までに 21名の産児が確認できている．

ノムを含む胚の中には胚盤胞まで発生する胚が一定数存在する．しかしながら近年，ICSI 由来の1PN（1PN-ICSI）胚は移植しても挙児が得【考察】られないという報告や 1PN-ICSI 胚の全ては染色体異常であり移植の

1PN-ICSI 胚の胚盤胞形成率は低いが，それは染色体異常を含む胚対象とすべきではないという報告が散見される．そこで本研究では胚の多くが胚盤胞までの発生過程で淘汰され，雌雄両ゲノムを含む1PN

盤 胞形成率，臨床妊娠率，流産率および産児の有無を指標に 1PN-胚が胚盤胞に達した可能性がある．その結果，流産率には差がなく，

ICSI 胚の臨床的有用性を再評価した．

これまでに複数症例において挙児が確認されている．故に ICSI-1PN胚の全てが異常な胚とは言えず，胚盤胞まで培養することで臨床的に【方法】

有用であると言える．

2013年1月～ 2018年12月までに採 卵を 行い 1PN-ICSI を 形成した

O-36 当クリニックにおける10年間の人工授精（21,606周期）の検討

前島 澪，岡部 美紀，中野 俊，明石 佐奈子，山内 久美子，
塩谷 仁之，東野 志保，杉浦 朝治，小島 勝志，藤田 真紀，
髙橋 敬一
髙橋ウイメンズクリニック

層密度勾配遠心法を用いた．統計解析には t 検定で行い，p ＜0.05 を有意差ありとした．
【結果】
妊娠例は 1,425例あり，妊娠率は周期あたり6.6％であった．妻の年
齢別の妊娠率は 30歳未満では 9.5％（150/1579），30 〜 35歳未満では
8.8%（560/6346），35 〜 40歳未満では 6.7%
（86/8702），40歳以上では
2.5%（125/4934）となった．妊娠例の周期の平均回数は 2.8±2.8回であり，累積妊娠率は 2回目で 57.6％，3回目で 73.0％，4回目で 83.1％，5
回目で 90.0％，6回目で 94.7%となった．
妊娠例と非妊娠例において精液所見での検討では，精液量・処理後【目的】
人工授精（AIH）は，不妊治療において比較的低コスト・低リスクで回収率については有意な差は認められなかった．精子濃度・精子運動
率・総運動精子数では非妊娠群と比べ妊娠群が有意な差が認められた．

実施することが可能である為，体外受精へ移行する前段階に多くの不妊カップルに選択される治療法であるが，AIH の必要性や実施回数に【結論】

ついては多くの議論がされている．今回当院で施行した 10年間のAIH

妻年齢が高齢になるにつれ AIH による妊娠率は低くなり40歳以上で症例の成績をまとめ，妊娠例と非妊娠例について妻年齢・AIH 施行回

は 2.5％となった．また，これまでの報告にあるように累積妊娠率は 5

数・精液所見の視点から検討を行った．

〜 6回目には大きな変化が見られなくなった．妊娠例と非妊娠例では精子濃度・精子運動率・総運動精子数において有意な差が認められた．

【方法】
2009年1月から2018年12月までの10年間に，当院で人工授精を行った 21,606周期（平均年齢36.1±4.4歳）を対象とした．精子調整には複以上のことから，妻年齢が高い症例や精液所見が悪い症例には AIH
よりも高い妊娠率が獲得できる体外受精への早めのステップアップを勧めることが推奨される．		

67

一般演題〔口頭発表〕

O-37 運動精子選別装置「ミグリス」と従来法における精子調整法の比較

鈴木 理恵，岸 加奈子，山上 一樹，古橋 孝祐，江夏 徳寿，
岩﨑 利郎，松本 由紀子，苔口 昭次，塩谷 雅英
英ウィメンズクリニック対象とした．精子調整に使用した培養液は，Universal IVF Medium（以下:UIM，Origio Denmark）を用いた．まず，検体を1.6ml 採取し，2倍希釈後，液量を 3.2ml に統一した．そのうち 0.2mlを原精液群とし，残り3.0mlを従来法とMS 法に，それぞれ半量に分けて調整を行った．
従 来 法 で は，PercollR（Sigma Aldrich Japan）を 用 いて 2層（90%，45%）密度勾配遠心分離法を施行し，上清除去後 UIM を用いて調整液を回収した．更に 10検体の原精液を従来法とMS 法に分け，精子 DFIの評価を行った．精子 DFI の評価には，HalospermRG2（Halotech
DNA）を使用した．染色後，光学顕微鏡にて 300個の精子を観察し【目的】

DFI を測定した．

ART における精子調整方法には，密度勾配遠心分離法，洗浄濃縮法及び swim up 法などが用いられている．一方で，これらを伴う調整
方法では遠心分離を行うため精子に対して物理的ダメージを与えることや DNA fragmentation の増加が懸念されている．

【結果】
調整後の平均運動精子濃度は，従来法1,050万/ml，MS 法510万/mlとなり，MS 法は従来法よりも有意に低かった．しかしながら，調そこで本検討では，Migration-Gravity Sedimentation Method（以

整後の平均精子運動率は従来法79.5%，MS 法89.7%と MS 法におい下:MS）原理を利用した遠心分離を行わない運動良好精子を選別するて有意に高かった．また DFI は，原精液23.6% に対し，従来法10.8%，

装置「ミグリス」（株式会社メニコン）に着目した．これは，外筒と内管MS 法1.8%となり，両群とも原精液より有意に低率となった．また MSの 2重構造を有しており，精液の上に調整液を充填することにより運動法は従来法と比較し，DFI が低い傾向にあった．

精子のみが調整液に移動することを利用し，内側の管の底に運動精子を集めることができる装置である．このミグリス（以下:MS 法）で調整【結論】した精子，密度勾配遠心分離法（以下: 従来法）で調整した精子におい平均運動精子濃度は，従来法の方が高いが平均精子運動率は MSて，各調整方法の精子濃度，精子運動率及び DNA fragmentation法の方が高かった．また，DFI は，MS 法のみならず，従来法でも原

index（以下:DFI）を比較検討したので報告する．

精液より有意に低率となった．一方で MS 法は，従来法と比較し低率な傾向となった．以上のことから，遠心分離を行わない MS 法は，従【方法】

来法より運動精子を選別し，精子へのダメージが少ない調整法である

液量1.6ml 以上，運動精子濃度1000万/ml 以上の廃棄精液30検体をO-38 受精予測式を用いたIVF，ICSIの受精方法選択と実際の臨床成績

江夏 徳寿，岸 加奈子，古橋 孝祐，江夏 宜シェン，
岡本 恵理，水澤 友里，山田 聡，松本 由紀子，苔口 昭次，
塩谷 雅英
英ウィメンズクリニック

ことが示された．

既往 IVF の成績や患者希望で受精方法を変更した症例も除外した．
【結果】対象となった ART周期および回収卵は 2018年4 ～ 6月576周期2,895
個と2019年4 ～ 6月552周期2,902個であった．2018年群と2019年群における平均年齢，ART 回数はそれぞれ 38.3±4.8歳 vs39.6±4.8歳，2±5.6回 vs2±3.3回と両群間に差を認めなかった．IVF，ICSI，Splitの 内 訳 はそ れ ぞ れ 388 例（67.4%），114 例（19.8%），74 例（12.8%）vs
126例（22.8%），220例（39.9%），206例（37.3%）と 2019年群においてIVF が 減 少し ICSI，Split が 増えて いた． 受 精 率， 正常 受 精 率 は86.3% vs 89.0% p ＜0.01，73.5% vs 79.3% p＜0.01と2019年群で有意【目的】に 高 か った． 受 精 卵 中の 分 割 率， 良 好 分 割 率 は 89.6% vs 90.8%

近年の精子運動解析システム（CASA）は精子数や運動率以外にも

p=0.15，51.5% vs 54.0% p=0.10と両群に差を認めなかったが，継続運動速度や頭部振幅など，精子運動の質についても計測する事が可能

培養卵中の胚盤胞率は 56.5% vs 62.5% p ＜0.01と2019年群で有意にとなっている．しかしながら，これらの値が臨床上どのように活用でき高かった． また， 移 植もしくは凍 結できた卵の割 合（ 胚 利用率）もるのかについての明確な基準はない．当院では以前より精液所見や年60.7% vs 64.9% p＜0.01と2019年群において有意に高かった．

齢などのデータを蓄積，解析しIVF，ICSIの受精率を予測する受精予測式を作成してきた．2019年4月より，この受精予測式を基にした受精
方法選択を臨床に導入しており，その臨床成績について検討した【考察】
受精予測式を基に受精方法を決定した 2019年群において有意に受精率が向上していた．この事は IVF で受精率の低い事が見込まれる症【方法】

例を ICSI へと誘導した結果と考えられる．では全例 ICSI にしても良い

受精予測式（精子運動指数，曲線速度，頭部振幅，採卵個数を基のかと考えると，各群の中で 2019年の IVF 施行群が最も受精率，胚に算出）を用いて受精方法を決定した 2109年4 ～ 6月におけるART 成

利用率が高くなっており，IVF の方が良好な成績を見込める症例があ績と精子濃度，運動率，運動精子濃度，精子運動指数を用いて受精る事を示唆する．今回の検討では受精率だけでなく胚盤胞率，胚利用

方 法を決定していた 2018年4 ～ 6月のART 成 績を比較した．IVM-

率も向上しており適切な受精方法の選択が受精後の胚形成にも好影響

CISI，TESE-ICSI，レスキュー ICSI の成績は除いて検討した．またを与える可能性が示唆された．

68

O-39 自宅から精液持参する場合，受精方法変更リスクが冬季で上昇する

佐藤 学 1），中岡 義晴 1），森本 義晴 2）
1）IVF なんばクリニック
2）HORAC グランフロント大阪クリニック

た． 本 検 討では 1 ヶ月単位または 季 節（ 春：3-5月， 夏：6-8月， 秋：
9-11月，冬：12-2月）に分けの ICSI 変更率の推移を調査しその際の精液所見パラメーターを比較した．
【結果】
検討期間の大阪の冬の月平均最低気温は 1.3−11,1℃であった．月ごとのICSI 変更率は，25.0-56.9%と変動があり，季節ごとのICSI 変更率は
冬の変更率は 52.4%と最も高く他の季節（32.8-36.7%）に比べ有意に上昇
した（P ＜0.01）．冬の原精液の総精子数（51.1×10 6/ml）は，他の季節（44.5-56.4×10 6/ml）に比べ変化がなかったが，運動率は他の季節に比【目的】

べ有意に低下した（38.5 vs. 44.9-50.6, P＜0.05）．また，冬の精子運動

体外受精を行う上で夫婦の協力が必要であるが仕事の関係上，夫の指数 SMI は夏に比べ有意に低下した（94.3 vs. 127.4, P ＜0.05）．冬の来院は困難な場合には自宅から精液を持参して治療を行うケースも多ICSI 変更になった場合の正常受精率は元々 ICSIの症例と比較して差はい．その場合，季節的条件が持参精液に与える影響は最小限にとどめなかった（83.6 vs. 81.2）．院内採取の精液の場合，ICSI 変更率は季節

たい．とくに体外受精（c-IVF）の場合，精子運動性低下や十分な精子の差はなかった（25.4-28.8%）．

回収ができないなどの要因により顕微授精変更の影響が懸念される．
そこで本検討では，c-IVF 予定で自宅から精液持参の場合の各季節の気温が与える影響について調べた．

【考察】
外気温が低下する冬場には特に精子運動率が低下していた．運動性が低下することで密度勾配遠心の際に分離精製される精子が減少し【方法】

ICSI に変更になっているものと考えられる．患者要因ではない不必要2017年から2018年に c-IVFを行った 1,630周期を対象にした．精液な ICSI を回避すること，患者負担を増やさないためにも冬場の自宅か持参の場 合は朝8−10時頃に自宅から持ち込まれた後に精液調整をらの精液輸送に対する工夫や患者への注意喚起が必要であると考えら行った．精液は密度勾配遠心とSwim-up 法によって分離精製し，調整れた．

後に運動精子が 7.5×10 6/mlを下回る際には顕微授精（ICSI）に変更しO-40 培養液開封後の経過日数が胚の培養成績に及ぼす影響

遠藤 祐子，水本 真夕，井上 令子，磯邉 明子，江頭 活子，
加藤 聖子
九州大学産婦人科

製当日に培養液を開封した周期（0日群），開封後1-7日経過した周期（1-7日群），開封後8-13日経過した周期（8-13日群）での Day2 または Day3
での良 好胚 率を比 較した． 分割 期胚 凍 結 後， 継 続 培 養 胚当たりのDay5 または Day6 の良好胚盤胞率を比較した．また，それぞれの新鮮胚移植もしくは凍結融解胚移植における臨床妊娠率を検討した．有（臨床妊娠率）
意差検定は，t 検定（良好分割率・良好胚盤胞率）とχ2 検定
を用いた．
【結果】
Day2 または Day3 での良好胚率は，0日群95.1%（77/81）と比較して，【目的】

1-7日群84.2%（101/120）および 8-13日群76.0%（19/25）で有意に低下しART で使用されている市販の培養液は，未開封かつ有効期限内でた．Day5 または Day6 で の良 好 胚 盤 胞 率 は，0日群 48.4%（15/31），あればメーカー基準の品質が保証されている．当院では ART 症例数

1-7日群35.9%（14/39），8-13日群42.9%（3/7）となり各群間での有意なが少ないため，一度開封した培養液を複数回に分けて使用しており，差は得られなかった．分割期胚移植における臨床妊娠率は，0日群

その使用期限を開封後14日以内としている．しかし，一度開封した培

10.5%（2/19），1-7日群12.0%（3/25），8-13日群33.3%（1/3），胚盤 胞移

養液は，コンタミネーションの危険性や培養液組成が変化する可能性

植では，0日群16.7%（1/6），1-7日群14.3%（1/7），8-13日群50%（1/2）でがある．今回これまでの培養液管理を見直すため，培養液開封後の経あり，それぞれ差はなかった．

過日数が胚の培養成績に影響を及ぼすか後方視的に検討した．
【考察】
【方法】

良好胚盤胞率と臨床妊娠率に差は認められなかったが，Day2 また2016年9月から 2019年6月までに当院にて IVF を施行し，2PN が得は Day3 での良好胚率は 0日群と比較して 1-7日群および 8-13日群で有ら れ た 59 周 期 を 対 象 とし た． 受 精 確 認 後，Continuous Single

意に低下したことから，開封後の日数経過とともに培養成績に影響をCulture Complete with HAS また は Continuous Single Culture-

及ぼすことが示唆された．今回の検討により，これまで開封後14日とし

NX Complete（FUJIFILM Irvine Scientific）で 作 製 し た 培 養 用ていた使用期限を今後開封後7日として培養液を管理していくことが，ディッシュで分割期または胚盤胞期まで培養した．培養用ディッシュ作

より多くの移植可能胚を得るために妥当であると考えられる．

69

一般演題〔口頭発表〕

O-41 反 復 ART 症 例における 抗 酸 化

物質添 加培養液の有効性についての比較検討笹峯 梢，伊木 朱有美，久保 敏子，野手 健造，
長谷川 麻理，坂井 和貴，佐々木 容子，須賀 真美，
鵜久森 夏世，兵頭 慎治，鍋田 基生
つばきウイメンズクリニック

プメディウム（B 群：198周期）をそれぞれ用いて，split 法または ICSIのみを行い，Day7 まで胚培養を行った．2群間における，2PN 率，胚盤胞到達率，良好胚盤胞到達率について培養成績の比較検討を行った．
【結果】
各群における採卵時の平均年齢は，A 群および B 群で各々 38.6±4.0
歳，40.0±4.0歳であった．split 症例におけるｃIVF 実施卵あたりの2PN 率は，A 群および B 群で各々 42.9%，46.6%，胚盤胞到達率は各々49.1%，56.6%，良好胚盤胞到達率は各々 28.3%，48.3%で，いずれも B 群が高い傾向が示され，良好胚盤胞到達率においては有意に高かった（P ＜0.05）．split 症例におけるICSI 実施卵あたりの 2PN 率は，
A 群および B 群で各々 77.2%，75.7%，胚盤 胞到達率は各々 47.6%，【目的】

69.9%，良好胚盤胞到達率は各々 28.6%，44.3%であり，胚盤胞到達

近年，酸化ストレスによる胚のフラグメンテーションの増加・分割遅率および良好胚盤胞到達率において有意差はないものの，B 群が高い

延など，胚発生への悪影響が指摘されている．その対策の１つとして，傾向であった．ICSI のみの症例においての２PN 率は，A 群および B

抗酸化物質を添加した培養液を使用することにより，マウスの胚発生群で各々 67.3%，68.5%，胚盤胞到達率は各々 52.5%，34.4%，良好改善が報告されているが，ヒト胚での培養に関する報告は少ない．そ胚盤胞到達率は各々 29.0%，40.6%であり，良好胚盤胞到達率においこで当院では，１回目の採卵で妊娠に至らなかった症例に対して，採て有意差はないものの B 群が高い傾向であった．

卵2回目以降の培養方法の選択肢の１つとして，抗酸化物質添加培養液が有効かどうか比較検討を行った．

【考察】【対象・方法】

養液よりも良好胚盤胞になりやすい傾向が示された．このことから抗採卵時の培養における抗酸化物質添加培養液の使用は，非添加培
2015年10月から2019年6月まで当院にて採卵を行った症例のうち，2回以上採卵を行った 123症例321周期を対象とした．
採卵1回目の培養では抗酸化物質非添加のシングルステップメディウム

酸化物質添加培養液を用いることで周期あたりの良好胚盤胞をより多く獲得でき，良好胚を移植できる可能性が高まるのではないかと考えられた．

（A 群：123周期），採卵2回目以降は抗酸化物質添加のシングルステッO-42 初期 胚 培 養 の GM-CSF 使 用は，

凍結融解胚移植周期において妊娠率向上に寄与する

古山 紗也子，杉下 陽堂，洞下 由記，柏木 恵，松山 夏美，
中嶋 真理子，鈴木 由妃，澤田 紫乃，岩端 秀之，
高江 正道，鈴木 直
聖マリアンナ医科大学 産婦人科学

胚移植時の培養液に EmbryoGen は使用していない．統計処理はカイ二乗検定を用いた．
【結果】
EmbryoGen 使用（以下 Gen）群および非使用群における良好胚到達率は，初期胚において各41.8%（173/414），45.2%（322/713），胚盤 胞において各11.4%（31/299），10.3%（56/543）であり，両群に有意差は認められなかった．新鮮胚移植における妊娠率は，各18.2%（4/22），9.8%（4/41）であり，Gen 群において有意差は認められないものの，高い傾向にあった．凍結融解胚移植における妊娠率は，各28.4%（19/67），9.6%（11/114）であり，Gen 群において有意に高率であった（p ＜0.01）．また媒 精方 法 別の検討したところ，cIVF の妊 娠 率は， 各20.0%（6/30），【目的】
近年着床不全や流産の原因の一つとして，顆粒球マクロファージコロ
ニー刺激因子（GM-CSF）濃 度が低値であることが報告されている．

12.0%（6/50）であり有意差は認められなかったが，ICSI における妊娠率は，各33.3%（13/39），10.6%（7/66）となり，Gen 群において有意に高い結果となった（p ＜0.01）．

GM-CSF 含有培養液を胚移植周期に用いることで妊娠率向上に寄与することが知られているが，採卵周期における GM-CSF の使用が妊娠率に与える影響については報告がなく，今回後方視的検討を行った．

【考察】
生体内では GM-CSF は，腟内射精の免疫応答により卵管内での濃度が上昇することがわかっている．そのため，生体内では初期胚の時【対象・方法】

期に GM-CSF 高濃度環境にあることが予測される．今回の検討では2013年1月～ 2018年12月に当院にて 採 卵を 行なった 症 例のうち，良好胚到達率には有意な差は認められなかったが，胚移植あたりの臨

GM-CSF 含有培養液（EmbryoGen/Oligio 社）の使用に同意が得られ

床妊娠率が有意に上昇した．また，その傾向は ICSI において顕著でた，374周期，82症例，1,127個の胚を対象とした．cIVF または ICSIあり，初期胚培養においてGM-CSF 含有培養液は妊娠率の上昇に寄を行い，Day1 からDay3 までの初期胚培養期間において EmbryoGen

与する可能性が示唆された．

を使用し，新鮮胚移植または凍結融解胚移植を行なった．当院では70