Journal of Assisted Reproduction

Vol.23 No.1

2020

Vol.23 No.1

w w w . j s a r. o r. j p

日本IVF学会雑誌 Journal of Assisted Reproduction（JAR）

日本 IVF 学会会員の皆様へ･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････
一般社団法人 日本 IVF 学会

4理事長 塩谷 雅英，副理事長 古井 憲司，名誉理事長 森本 義晴

論 文−原 著 −
睡眠の質は受精率に影響する････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････

6

赤松 里美，藤井 美喜，江夏 徳寿，大月 純子，岩崎 利郎，苔口 昭次，塩谷 雅英
英ウィメンズクリニック

ー原 著 ー
高齢患者における Piezo-ICSI の有用性について･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 12
古橋 孝祐，岸 加奈子，岩﨑 利郎，江夏 徳寿，伊藤 宏一，水澤 友利，松本 由紀子，苔口 昭次，塩谷 雅英
英ウィメンズクリニック

ー原 著 ー
卵管液組成に基づくシングルメディウムを用いた受精卵培養の検討･･･････････････････････････････････････････････････ 16
白岩 優綺，佐東 春香，田中 里美，古橋 孝祐，岩﨑 利郎，伊藤 宏一，水澤 友利，松本 由紀子，苔口 昭次，塩谷 雅英
英ウィメンズクリニック

ー原 著 ー
選択的単一胚盤胞移植においてどの評価因子を優先して胚選択するべきか？
･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････

21

大浦 朝美１，冨田 和尚２，佐藤 学１，中岡 義晴１，森本 義晴２
IVF なんばクリニック／２HORAC グランフロント大阪クリニック

１

ー 短 報ー
採卵決定日に LH サージが開始された採卵周期におけるレルゴリクスの排卵抑制効果･･･････････････････････････ 24
中尾 佳月，髙見澤 聡，板倉 彰子，森山 梓，壽圓 裕康，堀川 隆，黒田 恵司，小代 裕子，中川 浩次，杉山 力一
杉山産婦人科 新宿ー症例報告ー
絨毛染色体検査を契機に診断された均衡型相互転座の一例･･････････････････････････････････････････････････････････ 27
松山 毅彦，石橋 めぐみ，中澤 留美，河戸 朋子，勝木 康博，菊池 咲希，三宅 君果，横田 智，真鍋 有香，北岡 美幸
厚仁病院 産婦人科

第23 回 日本 IVF 学会学術集会 開催概要････････････････････････････････････････････････････････････････････

31

日本 IVF 学会雑誌発行における投稿論文募集のお知らせ･･････････････････････････････････････････････

32

日本 IVF 学会雑誌 投稿規定･ ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････

33

一般社団法人 日本 IVF 学会 定款･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････

35

一般社団法人 日本 IVF 学会 役員･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････

41

編集委員会･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････

42

日本 IVF 学会会員の皆様へ

5 月 31 日まで，緊急事態宣言の延長が決定されました．新型コロナウイルス（COVID-19）
感染症との戦いが長期化する中で，安倍総理大臣は 5 月 4 日の記者会見にて「まん延防止対策と社会経済活動との両立を図ることが課題」と述べましたが，生殖補助医療に従事する私達にとりましても，まさに，「コロナ対策と生殖補助医療との両立を図ることが課題」と言えるでしょう．
さて，「コロナ対策と生殖補助医療との両立」を考えるとき，次の 3 点が重要と考えます．
第一に，患者の皆様のみならずスタッフの健康を守ること，第二に，治療の結果生まれてくる児の健康を守ること，第三に，今回の教訓を記録し分析することで将来に備えること，です．
皆様の健康を守るために挙児を望むものの受診を控え「Stay home」しておられる患者の皆様も少なくありません．
その一方で，挙児に対して切実な思いを抱えて通院を続ける皆様も少なくないのが現状でしょう．その多くは年齢因子などにより治療を延期し難い方々です．生殖補助医療に従事す
る私達にとり，このような強い思いを持って治療の継続を望む皆様に，リスクについて十分な説明をした上で，より良い医療を提供したいと考えるのは自然なことです．
しかしながら，治療を継続する以上，人から人へ感染するリスクをゼロにすることはできません．従いまして，施設を利用する皆様とスタッフの健康を守るためには様々な感染抑止対策が必要となります．すでに，会員施設ではオンライン診療を取り入れるなど，それぞれに工夫を凝らしていることと存じます．日本 IVF 学会では，より安全な生殖補助医療を広く提供できるよう，会員施設間で情報共有できるような仕組みを構築したいと考えています．
皆様の叡智の結集を期待します．
治療の結果生まれてくる児の健康を守るために治療にあたっては，COVID-19 が胎児に及ぼす影響は未だ明らかになっていないこと，妊婦における重症化の可能性が否定できないこと，さらには妊娠中に使用できる安全な治療薬が無い現状，等を十分に説明する必要があります．

4日本生殖医学会は，4 月 1 日に，「不妊治療の延期という選択肢を提示するよう推奨」との見解を発表しました．しかしながら，厚生労働省（ 4 月 1 日）は，COVID-19 が胎児の異常や死産，流産を起こしやすいという報告は無く，妊娠中でも過度な心配は不要との見解を出しています．同様に，日本産婦人科学会（ 4 月 7 日）は，妊婦が特別にこのウイルスにかか
りやすい，という報告は無く，妊娠中の重症化率も一般の方と同じかむしろ低い値が報告されている，との見解を公表しています．以上を受けて，日本生殖補助医療標準化機関（JISART）
は 4 月 10 日に，「現在の状況を十分に説明の上で治療を適切に行っていきたい」との声明を出しています．日本 IVF 学会の会員の皆様におかれましては，これらの関連学会の見解を尊重しながら，地域性も鑑みつつ患者の皆様に十分に説明を行っていただきたいと思います．
今回の教訓を記録し分析することで将来に備える
今回の新型コロナウイルス感染症はペストやコレラ同様人類が直面した未曾有の災害の一つと言えるでしょう．会員の皆様にも多大な影響が及んでいます．戦いはまだ道半ばですが，この間に得た知見や教訓を記録に残し，かつ分析することで将来に起こりうる同様の災害に備えなければなりません．日本 IVF 学会ではなんらかの形で情報を共有できる場を設けた
いと思います．その時は皆様のご協力をお願い申し上げます．
最後になりますが，会員の皆様，叡智を結集し一丸となってこの難局を乗り越えていきましょう．

一般社団法人 日本IVF学会
理事長

塩谷 雅英

副理事長

古井 憲司

名誉理事長

森本 義晴

5

日本 IVF 学会雑誌 Vol. 23，No. 1，6 -11，2020

ー原著 ー

睡眠の質は受精率に影響する
赤松 里美，藤井 美喜，江夏 徳寿，大月 純子，岩崎 利郎，苔口 昭次，塩谷 雅英
英ウィメンズクリニック 〒 650-0021

兵庫県神戸市中央区三宮町 1-1-2

三宮セントラルビル

要 旨： 妊娠を望む女性の睡眠障害は，妊孕性の低下や不妊治療に対する反応にも及ぶと推察されているが，その報告は十分ではない．
そこで，当院の不妊症患者 208 名を対象に，Pittsburgh Sleep Quality
Index（PSQI）を用いて睡眠の状況を調査した．PSQI 総合得点 5 点以下を“good”，6- 8 点を“fair”，9 点
以上を“poor”とし，各群と受精率，胚盤胞発生率と比較した．
その結果，受精率において 3 群間に有意な差が見られ，特に“poor”
群で有意に受精率が低かった（ｐ < 0. 05）．
胚盤胞発生率と良好胚盤胞（≧ G 3BB）率
ではいずれの群間にも有意差はなかったが，睡眠の質が上昇するに従い上昇傾向にあった．
また，受精率をエンドポイントとした多変量解析では，
アルコールの摂取と睡眠の質が受精率と関連する独立した因子と考えられた（p< 0. 05）．
これらのことにより，睡眠の質や生活環境は受精率に影響するものと考えられた．
キーワード：受精率，睡眠の質，妊孕性，ピッツバーグ睡眠質問票 Pittsburgh Sleep Quality Index（PSQI），
不妊治療

緒

言

睡眠に関する研究は進歩し，国内外に関わらず睡眠障番目に，女性によく見受けられる足の冷え，運動不足か
らの血行不良や疾患を起因とした自律神経不安定などの医学的因子が考えられる．

害に対するケアへの注目が高まっている．
女性の睡眠に睡眠は，体温，自律神経，脳やホルモンバランスを整え

ついては，月経周期や妊娠，閉経における健康状態と睡る役割がある 5）．ゆえに，女性における睡眠障害は月経眠の関係を示唆する報告がみられ，妊娠を望む女性にお不順や排卵障害などをもたらし，不妊の原因となるおそいては，内分泌環境，高血圧，糖尿病，うつ，自律神経障害

れを推察するが，睡眠と妊孕性に関する研究報告は少ななど様々な症状が不妊の原因となり，不眠や睡眠障害をい．
そこで，こうした日本女性の睡眠の現状を踏まえ，不引き起こす，
もしくは促進するといわれている 1）．

妊の背景に睡眠障害が関与する可能性の考究を目的とOECD（経済協力開発機構）加盟国における実態調査によれば，全加盟国の 1 日の平均睡眠時間を比較したとし，当院の不妊症患者を対象に，睡眠の質についてアン
ケート調査し，その結果を分析および検討した．

ころ，日本女性の睡眠時間は世界で最も短く，女性の睡眠時間が男性よりも短い国は 28 か国中合計 5 か国あり，
日本はその中に該当している 2）．また，厚生労働省の調査３）では，成人の１ 日の平均睡眠時間は，6 時間未満の2016 年 6 月 17 日から同年 7 月 25 日の間に，当院を者の割合が平成 19 年以降有意に増加しており，女性の外来受診した患者の中で，過去１ 年間に体外受精（一般

睡眠については，20- 69 歳各年代の約 70- 80% が 7 時

体外受精または顕微受精）を実施した不妊症患者を対象間未満であること，
また，睡眠の質に関する項目では，6として外来でアンケート用紙を配布した．回答方法は，時間未満の者が，男女とも全ての項目において有意に高用紙に印刷された QR コードの読み取りを介して Web

いことがわかっている．

経由で回答するものとした．
調査に対しては，対象者に妊娠を望む女性にとって，次の主な 4 つの睡眠障害因

目的および方法，協力は自由意志であること，調査協力があげられる．
最初に日常生活の疲労やストレスをの有無によって何ら不利益を受けないこと，個人を特定

子

4）

指す社会学的因子，２ 番目に通院中で ART 経験がある

されないことを口頭で説明し同意を得た．

など治療に対する不安やストレスなどの心理的因子，３睡眠の状況を判断するものとして，これまで最も使わ番目に就寝前の携帯電話およびパソコンの使用やカれてきたのは睡眠時間であるが 6），年齢や環境など様々

フェイン，アルコール摂取などによる生活習慣因子，４な因子による睡眠障害の可能性が考慮される．そこで，受付 2019 年 7 月 6 日 / 受理 2019 年 10 月 3 日
責任著者：赤松 里美 e-mail［satomi 761122@gmail.com ］

6

対象と方法

睡眠時間と生活習慣の関係を考慮した上で睡眠の質をその合計を 0- 21 点とし，点数が高いほど睡眠の質が低測 定 す る こ と が で き る， ピ ッ ツ バ ー グ 睡 眠 質 問 票

いと評価した．
→「表 1」

Pittsburg Sleep Quality Index（PSQI）の日本語版 を本研究においては，総合得点が 5 点以下を睡眠障害な用いた（表 1）．PSQI は，最近 1 か月間における睡眠習

し，以下“good”，6- 8 点を軽度障害，以下“fair”
，9 点

7）

慣や睡眠の質に関する 7 つの要素（主観的睡眠の評価， 以上を高度障害，以下“poor”の群とした．
また，主な女
入眠時間，睡眠時間，有効睡眠時間，睡眠困難，睡眠薬の性の睡眠障害の影響因子と考えられる生活習慣に関す

使用，日中に感じる過度の眠気）で構成され，18 の質問

る項目（運動習慣，寝るまでの足の冷えの実感，勤務体制，

項目がある．
就寝時間，入眠時間，睡眠時間に関する質問

就寝前のアルコール摂取，就寝前の携帯電話・パソコン

項目について該当する数字を記入し，それ以外の数字での利用，サプリメントの服用，就寝時に夢を見るか）を加回答する質問については，4 段階（0. 非常によい 1. かえ，
その程度を尋ねた．

なり良い 2. かなり悪い 3. 非常に悪い）で評価した．

表1

不妊治療と睡眠の質の相関を検証する目的で，患者のピッツバーグ睡眠質問票 Pittsburg Sleep Quality Index（PSQI）の日本語版
過去 1 か月間の夜間の睡眠の状態や環境についてお聞きします。
1. 通常何時ごろ寝床につきましたか？
（）時（）分
2. 寝床について眠るまでどれくらい睡眠時間を要しましたか？
(）分
3. 何時頃起床しましたか？
（）時（）分4. 実際の睡眠時間は何時間くらいでしたか？
（寝床にいた時間とは異なります）
１日平均 約（）時間（）分くらい
5. どれくらいの頻度で、以下の理由のために睡眠が困難でしたか？
a) 寝床についてから 30 分以内に眠ることができなかったから
a. なし
b.1 週間に 1 回未満
c.1 週間に 1-2 回
d.1 週間に 3 回以上b) 夜間、または早朝に目が覚めたから
a. なし
b.1 週間に 1 回未満
c.1 週間に 1-2 回
d.1 週間に 3 回以上c) トイレに起きたから
a. なし
b.1 週間に 1 回未満
c.1 週間に 1-2 回
d.1 週間に 3 回以上d) 息苦しかったから
a. なし
b.1 週間に 1 回未満
c.1 週間に 1-2 回
d.1 週間に 3 回以上e) 咳が出たり、大きないびきをかいたから
a. なし
b.1 週間に 1 回未満
c.1 週間に 1-2 回
d.1 週間に 3 回以上f) ひどく寒く感じたから
a. なし
b.1 週間に 1 回未満
c.1 週間に 1-2 回
d.1 週間に 3 回以上g) ひどく暑く感じたから
a. なし
b.1 週間に 1 回未満
c.1 週間に 1-2 回
d.1 週間に 3 回以上h) 悪い（怖い）夢を見たから
a. なし
b.1 週間に 1 回未満
c.1 週間に 1-2 回
d.1 週間に 3 回以上i) 痛みがあったから
a. なし
b.1 週間に 1 回未満
c.1 週間に 1-2 回
d.1 週間に 3 回以上j) 上記以外（a ～ i 以外）の理由があったから
6. ご自分の睡眠の質がどうでしたか？
a. 非常によい
b. かなり良い
c. かなり悪い
d. 非常に悪い
7. 眠るために薬をどのくらいの頻度で使用しましたか？
a. なし
b.1 週間に 1 回未満
c.1 週間に 1-2 回
d.1 週間に 3 回以上
8. 車の運転中や食事中、社会活動中など、眠ってはいけない時 に睡眠困難により、起き上がっていられなくなり困ったことがどれくらいの頻度でありましたか？
a. なし
b.1 週間に 1 回未満
c.1 週間に 1-2 回
d.1 週間に 3 回以上
9. 睡眠困難により、物事をやりとげるのに必要な意欲を持続するうえで、どのくらい問題がありましたか？
a. なし
b.1 週間に 1 回未満
c.1 週間に 1-2 回
d.1 週間に 3 回以上

7受精率，胚盤胞発生率，良好胚盤胞発生率（ガードナー

答率は 20. 8％，平均年齢は 37. 0 ± 5. 0 歳（17- 47 歳）
で分類 G 3BB 以上）を PSQI から得られた睡眠の質別にあった．208人中140人が過去１年間に採卵されていた．

比較した．
患者の受精率は 2PN の受精率とし，IVF また

回答者全体における PSQI 総合得点の分布を図 1 に示し

8）

はICSI後18時間から22時間の間に受精判定を行なった． た．
全体での PSQI 総合得点の平均は 5. 1 点であり，最も
ま た， 胚 盤 胞 発 生 率 は day 5 お よ び day 6 に お け る

多く回答した総合点数は 4 点（43 人）で，17 点以上のに基づいて G 3BB 以上とした．2 群

回答者はなかった（図 1）．
睡眠の質別の割合は，“good”

間における比較は chi-square test，３ 群間の比較は65. 1%（135/ 208），
“fair”26. 8%（56/ 208），
“poor”

Kruskal -Wallis test ならびに Bonferroni の調整を加え

8. 1%（17/ 208）であった（図 2）．
平均睡眠時間は 6 時間

た t 検定を用いて，睡眠障害が受精卵に与える影響を検

28分であり，
睡眠の質別では，“good”
6時間42分，“fair”

討した．
睡眠と生活習慣項目の関連については，多重解

6 時間 6 分，“poor”5 時間 18 分であり，いずれの群間析 法（Multivariate logistic regression analysis ofにも 1％以下水準で有意差が見られた．年齢別において

several parameters）
を用いた．

は，26- 30 歳が 6 時間 6 分と最も短かったが，年齢と平Gardner の分類

８）

均睡眠時間の間に一定の傾向はなかった
（図 3）
．

結

睡眠の質に影響する因子について，就労と睡眠の質で果は全体の就労率は 57. 7%（120/ 208）
であり，仕事あり

アンケート配布数は計 1000 人，回答数は 208 人，回群の中で特に夜勤を伴う群では，睡眠の質がやや良くな

（人）

50
43

45

38

40
33

35

30

30

22

25
18

20
15
10
5

1

2

0

1

4

6

4

1

3

0

図1

2

3

4

5

6

7

8

good（0-5点） fair（6-8点）

1

0

2

0

0

poor（9点以上）

PSQI 総合得点の分布

good PSQI(PSQ5I or
5点
以下)
good:
less
fair PSQI(P SQ
I 6-8点)fair:
6-8
poor PSQI(PSQ9I or
9点
以上)
poor:
more

8.1%

(17/208)

fair

26.8%
(56/208)

good
65.1%

(135/208)

図2

0

0

0

9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21

poor

8

0

睡眠の質における回答者の割合（PSQI）

睡眠の質別
8
7

年齢別

(時間)

7

6時間42分

6.8

6時間6分

6

5時間18分5

6.4

6時間24分
6時間30分

6時間18分6.2

3

6時間48分

6時間42分

6.6

4

6時間6分

6

2

5.8

1

5.6

0

good

fair

(n=135)

図3

(時間)

poor

(n=56)(n=17)

17-25歳(n=3)

26-30歳(n=18)

31-35歳(n=55)

36-40歳(n=54)

41-45歳 46-47歳(n=74)(n=4)

平均睡眠時間

good

全体
3.6%

(4/111)

fair
22.2%
(2/9)

28.8%

42.3%

33.3%

53.4%

(111/208)

4.3%(21/88)

(3/9)

67.6%

63.6%

(75/111)(9/208)12.5%(11/88)23.9%(32/111)(88/208)

poor

44.4%

(56/88)(4/9)

仕事あり（夜勤無）仕事なし

図4

仕事あり（夜勤有）

仕事あり（夜勤無）仕事あり（夜勤有）

仕事なし

就労と睡眠の質

い傾向にあった（図４）．
また，睡眠薬を服用していたの不明であるが，3 群間に差が認められた（p< 0. 01）．
そは，“good”0％（0/ 135）“
，fair”1. 8％（1/ 56）“，poor” れぞれの群における受精率は，“good”では 67. 1%
17. 6％（3/ 17）であり，飲酒習慣があったのは，“good” （4 0 8/ 6 0 8），“fair”6 3. 1%（1 4 0/ 2 2 2），“poor”
29. 4％（40/ 135），
“fair”32. 1％（18/ 56），“poor” 48. 6%（52/ 107）
であり，次に 2 群ごとにカイ自乗検定
23. 5％（4/ 17）であった．
また，何らかのサプリメントを行なったところ“good”と“fair”
間は差がなく，“good”を服用している人は 54. 3%（113/ 208）
，運動していると“fair”の群間および“fair”と“poor”の間には有意差が人は 25. 0%（52/ 208），布団に入って寝るまでに足の冷みられ（ｐ < 0. 05），“poor”群で有意に受精率が低いとえを感じる人は 34. 1%（71/ 208），就寝 1 時間前にパソ考えられた（図 5）．
また，同じく各群における胚盤胞発

コ ン や ス マ ー ト フ ォ ン を 使 用 す る 人 は 89. 9%

生 率 は“good”63. 2%（189/ 299），
“fair”57. 1%（186/ 207）
， 寝 て い る 間 に 夢 を 見 た 人 は 81. 3% （60/ 105），
“poor”48. 4%（15/ 31）であり，良好胚盤（173/ 208）であった．
それらの睡眠の質に影響する因胞発生率（≧ G 3BB）“，good”26. 1％（78/ 299）“
，fair”

子の中では，PSQI 総合得点について睡眠の質との相関21. 9％（23/ 105），
“poor”12. 9％（4/ 31）であった．

を検討した結果，アルコール摂取の習慣に有意な相関差

いずれの群間においても差はなかった
（図 6）
．

がみられた
（ｐ＜ 0. 05）．
睡眠の質別に受精率を比較するため，Kruskal-Wallisの多重検定を行なったところ，どの群間に差があるかは受精率をエンドポイントとして多変量解析を行った
ところ，アルコールの摂取と PSIQ が独立した予測因子
として受精率に関与していることが確認された．

9

ており
（図 5）
，睡眠状態の悪い群では受精率が悪くなる

P<0.05NS
80(Chi-square test，Bonferroniの調整)

P<0.05（％）(408/608)
67.1％

70

盤胞発生率の関係は，有意な差はなかったが，睡眠の質が上昇するに従い，胚盤胞発生率および，良好胚盤胞発(140/222)
63.1％

60

P<0.01(Kruskal-Wallis
test)(52/107)
48.6％

50
40

生率は上昇傾向にあった（図 6）．
かつて，田村らの研究においては，マウスへ長期的にメラトニンを投与したところ，排卵に至る卵子の数が増え，受精率も上昇した 11）3020と報告しており，動物やヒトでの受精率や胚盤胞発生率

10は，メラトニンの分泌を通じて高度睡眠障害と関連して

0good(n=135)

fair

poor

(n=56)

いるのかもしれない．したがって，妊娠を望む女性に(n=17)

とって，睡眠の質の向上は，妊娠しやすい身体づくりに*受精率= 2PN数 / 受精卵数 NS=not significant

図5

可能性が示唆されている．
また，睡眠の質と受精後の胚つながる可能性がある．

睡眠の質と受精率

しかしながら，当院へ通院する女性の睡眠の質に対する評価では，全体の 34. 9%（73/ 208 人）（図 2）が良好ではなく，同様に，厚生労働省の調査においても，睡眠で休養が十分にとれていないと感じる女性は，20 歳から■ 胚盤胞発生率（Day5・Day6）: p=0.19■ 良好胚盤胞発生(≧G3BB)率: p=0.22 (Kruskal-Wallis test)
（％）

70

63.2%
(189/299)60■ 胚盤胞発生率■ 良好胚盤胞発生率57.1%(60/105)
48.4%(15/31)50

したがって，
睡眠を実感することが難しい状況にある12）．
睡眠に対する評価は，当院における通院女性と日本女性
全体で，ほぼ同じ状況であることが分かった．
また，同調

40
26.1%
(78/299)30

査の睡眠時間では，日本女性（35- 39 歳）の平均時間が 7

21.9%(23/105)20

12.9%(4/31)

10
0
good

図6

59 歳まで増加傾向にあり，各年齢層の約 25％が十分な

fair

poor

睡眠の質と胚盤胞率・良好胚盤胞率

時間 36 分であることに対し，本研究対象者（平均 37 歳）
は 6 時間 28 分であり，日本女性の平均より約 1 時間短かった．
睡眠の質別では，睡眠障害の程度が高くなるにつれ，睡眠時間も短くなっていることも明らかである．
通院する女性の睡眠においては，家庭・仕事・通院など生活に対してのストレスによる社会的因子に，不妊治療に対する不安や思いといった心理的因子が加わった可能性が考考えられる．

察

また，就労と睡眠の関係においては，仕事をしている

睡眠とは，生体の恒常性維持に不可欠の行動・現象で女性の方が睡眠の質を保たれる傾向にあったことから，あり，内分泌系に大きな影響を及ぼし，その各々の内分仕事をしていることで生活に規則性が生まれる可能性

泌指標が睡眠・覚醒と連動して変化する ことより，睡があると考えられた．
ただし，夜勤のある仕事に就く女

眠は卵巣機能とホルモン産生能に影響を与え，不妊治療

性は，夜勤のない仕事に就く女性に比べ，睡眠障害をも9）に対する反応にも及ぶと推察される．
そこで，本研究は， つ女性の比率が高かった．
これは，日没前後より労働す
妊娠を望む女性における睡眠の現状を把握するため， ることで体内時計周期と明暗環境周期のズレが，睡眠のPSQI を用いて睡眠の質を評価した．PSQI は，睡眠障

質を下げていると考えられる．
夜勤のある看護師を対象

害の有無や程度を客観的に評価して比較することがでとした調査では，月経周期，生殖機能の加齢の変化はきる自記式質問票であり，日本語版においては，土井ら

サーカディアンリズムに強く依存している 1）とされてによって信頼性，妥当性が十分に議論されている尺度で

いる．

ある

．
個体間や群間での比較が可能で過去 1 か月間の10）

睡眠評価として広く使用されている．

生活習慣における睡眠障害の影響因子を解析すると，就寝前のアルコール摂取との関係において有意差が見その調査結果と当院の外来患者における治療との関受けられた．
この結果は興味深いが症例数が少ないため係を検討した結果，睡眠の質と受精率の間に正の相関がにアルコールと睡眠の関係についてはさらに検討する認められ，特に，“fair”と“poor”の間で有意な差を認め必要がある．
また，生活習慣に着目する上で，長期的な睡10眠の質も調査する必要性があると考えられる．
しかしな

5） 西野精治 : スタンフォード式最高の睡眠．サンマーク出版 : 8-13, 2017.
がら，本研究では PSQI が短期の睡眠の質に対する調査 6） 西村美八・檀上和真・松坂方士・津谷亮佑・倉内静香・古川
照美・高橋一平・ 梅田孝・兼板佳孝・大井田隆・中路重之：であるために，長期的な睡眠の質に対する影響は調査し一般住民における睡眠障害と生活習慣の関連について．弘前ていない．
長期的な睡眠の質が受精率にどのような影響
医学，62: 34-43, 2011.
を与えるかは今後の研究課題である．
また，本研究では 7） 土井由利子・蓑輪眞澄・大川匡子・内山真：ピッツバーグ睡眠質問票日本語版の作成．精神科治療，13: 755-769, 1998.
男性因子に関する調査は夫の年齢のみであったため，男
8） Gardner DK et al.: Towards Reproductive Certainty:
性側の因子が受精率に与えた影響については推測でき
Fertility and Genetics beyond 1999, pp.378-388, Parthenon
なかった．
長期的な睡眠の質の評価とともに今後の課題
Press, Carnforth, 1999.
9） 田ケ谷浩邦：睡眠 関連ホルモンの計 測． 生体 医 工学，46:
である．
169-176, 2008.
睡眠の質の良さに伴って受精率は有意に上昇すると10） Doi Y, Minowa M, Uchiyama M, Okawa M, Kim K, Shibui
いう結果が得られたことから，自身のこれまでの生活習
K, Kamei Y. Psychometric assessment of subjective sleep
慣を見直し，サーカディアンリズムに沿った規則正しい
quality using the Japanese version of the Pittsburgh Sleep
Quality Index（PSQI-J）in psychiatric disordered and生活を送ることで，妊孕性は向上すると考えられる．
control subjects. Psychiatry Res, 97: 165-172, 2000.
Nishihara らはメラトニン 3mg を 2 週間以上投与する
11） Tamura H, Takasaki A, Taketani T, Tanabe M, Kizuka F,
ことによって，受精率ならびに胚の質が向上したと報告
Lee L, Tamaru I, Maekawa R, Asada H, Yamagata Y,
している 13）．メラトニンは一般的に睡眠の質の向上に
Sugino N. Melatonin as a free radical scavenger in theovarian follicle. Endocr J, 60: 1-13, 2013.
役立つと考えられているが，Nishihara らは抗酸化作
12）厚生労働省編．国民健康・栄養調査結果の概要 平成 28 年
用による可能性を指摘しているため，メラトニンの睡眠度．2018. https://www.mhlw.go.jp/bunya/kenkou/eiyou/
に対する作用と受精率の関連については，さらに検討がdl/h28-houkoku.pdf（2019.02.01）
必要であろう．
本研究では，睡眠の質と胚盤胞発生率お 13） Nishihara T, Hashimoto S, Ito K, Nakaoka Y, Matsumoto
K, Hosoi Y, Morimoto Y. Oral melatonin supplementation
よび良好胚盤胞発生率の関係は，いずれも睡眠の質に比
improves oocyte and embryo quality in women undergoing
例して上昇傾向にあり，ある程度関連が見受けられたが，
in vitro fertilization-embryo transfer. Gynecol Endocrinol,
統計学的解析な有意差は認められなかった．
このことに
30: 359-362, 2014.

関しては，母集団の大きさにも問題があると考えられ，今後，症例数を増やして検討する必要があると考えられた．
また，この度のアンケート回答率が 20％強と低い数字となった原因の 1 つとして，これまでは直接用紙に回答を記入していたが，今回は印刷された QR コードの読み取りを介して Web 経由で回答を実施したため，当院外来患者における，PC への登録などの手間をはじめ，
Web 経由の操作に対する煩雑さが回答率に影響したと考えられた．

参考文献
1）   Kloss JD, Perlis ML, Zamzow JA, Culnan EJ, Gracia CR:
Sleep, sleep disturbance and fertility in women. Sleep Med
Rev, 22: 78-87, 2015.
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3） 厚生労働省編．国民健康・栄養調査結果の概要．平成 27 年度．
2017. https://www.mhlw.go.jp/file/04-Houdouhappyou10904750 -Kenkoukyoku-Gantaisakukenkouzoushinka/
kekkagaiyou.pdf27（2019.02.01）
4） Matsuda H, Ogawa N, Tsukada R, Kodama Y, Yamazaki
A, Kosako Y, Miyamoto H, Morimoto M: Factors that
affect quality of sleep in female university student. Jpn J
Nurs Sci, 35: 48-55, 2012.

11

日本 IVF 学会雑誌 Vol. 23，No. 1，12 -15，2020

ー原著 ー

高齢患者における Piezo-ICSI の有用性について
古橋 孝祐，岸 加奈子，岩﨑 利郎，江夏 徳寿，伊藤 宏一，水澤 友利，松本 由紀子，
苔口 昭次，塩谷 雅英
英ウィメンズクリニック 〒 650-0021

兵庫県神戸市中央区三宮町 1-1-2

三宮セントラルビル

要 旨： ART において必須の技術である ICSI は，透明帯を押し破り卵細胞質膜を破膜するが，この破膜には卵細胞質を吸引する conventional-ICSI（c-ICSI）と Piezo パルスを使用する Piezo-ICSI（P-ICSI）とがある．P-ICSI はヒト卵子において有用性が散見されるため，40 歳以上の患者を対象とし，2018
年 1 ～ 8 月に c-ICSI を行った 521 周期，2019 年 1 ～ 8 月に P-ICSI を行った 730 周期を後方視的に検討した．比較結果は 2PN 率（71. 3% vs 78. 3% p ＜ 0. 001），胚盤胞発生率（31. 9% vs 43. 2% p ＜ 0. 01）
で Piezo-ICSI 群が有意に高率となった．本結果より，Piezo-ICSI の有用性が確認出来，Piezo-ICSI は加齢に伴う脆弱な卵子において，少ないダメージで ICSI が可能となり培養成績の向上に寄与出来ることが示唆された．
キーワード：ICSI，Piezo-ICSI，胚盤胞発生率
ランニングヘッド : Piezo-ICSI の有用性について緒て非常に良好な結果を与えると報告している．その後，

言

Yanagida ら 6）がヒト卵子においても Piezo-ICSI が有生 殖 補 助 医 療 に お い て， 卵 細 胞 質 内 精 子 注 入 法

効であることを報告している．c-ICSI ではインジェ（intracytoplasmic sperm injection; ICSI）は必須の技

クションニードルを卵細胞質内へ穿刺し，ニードル内術である．
本邦において ICSI の適応は「男性不妊や受精へ陰圧をかけることで卵細胞質が吸引される．この障害など，本法以外の治療によっては妊娠の見込みがニードル内へ陰圧をかけた際の流入速度の違いで卵極めて低いと判断される夫婦のみを対象」 としてい細胞膜が破れたと判断した上で，精子を卵細胞質内へたが，現在では不妊原因に関わらず年齢条件などにも注入するが，この一連の動作は胚培養士の習熟度によその適応が広がり，全例 ICSI を施行する施設も報告さる違いがあると推察できる．そのため，胚培養士のれている ．

ICSI 技術の熟練度によっては卵細胞質をニードル内

1）

2）

ICSI の際に精子を卵細胞質内へ注入するためには， に過剰に吸引してしまうことが c-ICSI では危惧されインジェクションニードルで透明帯を押し破った上る．Dumoulin ら 7）は，c-ICSI による膜穿破時，ニーで，卵細胞質膜の穿破が必須である．この卵細胞質膜

ドル内へ吸引した卵細胞質量は受精率に影響しないを破膜するためにはインジェクションニードル内へものの，吸引量が増えると胚盤胞発生率が低くなるこ

卵 細 胞 質 を 吸 引 し て 破 膜 す る 方 法（conventional-とを報告している．一方，Piezo-ICSI は Piezo パルス

ICSI: 以下 c-ICSI），又は Piezo パルスを使用して破膜を使用し，卵細胞膜を破膜するためニードル内へ卵細する方法（Piezo-ICSI）がある．Rybouchkin らはマ胞質を吸引する必要がない．そのため Piezo-ICSI は卵

ウス卵子の原形質膜は高い伸長性，卵細胞質は低い粘子に与えるダメージが軽減され，受精率が上昇し，変度を有し，c-ICSI 後の生存率が 50％未満となること性率が低下するということが Hiraoka ら 8）により報告を報告している ．Yanagimachi ら は，マウス卵子されている．また，我々は 35 歳以上の女性に対し，の c-ICSI 後の生存率を改善する目的でマウス卵子に

Piezo-ICSI が有効であることを報告した 9）．今回，さPiezo-ICSI を用い，Piezo-ICSI が有効であることをらに 40 歳以上の症例について Piezo-ICSI が培養成績3）報告した．また，Yoshida4）5）

らは，その改善に関して

Piezo-ICSI はマウス卵子の原形質膜の損傷を軽減するため，卵母細胞，特に繊細な原形質膜の破膜に対し受付 2019 年 10 月 9 日 / 受理 2019 年 12 月 31 日
責任著者：古橋 孝祐 e-mail［ furuhashi@hanabusaclinic.com ］

12の向上に有用であるかどうかを検討した．

対象と方法
1. 対象
2018 年 1 月 か ら 8 月 に c-ICSI を 実 施 し た 40 歳 以
上 : 521 周期（M Ⅱ卵 : 1247 個）を c-ICSI 群（平均年齢42. 6 ± 2. 0 歳）とし，2019 年 1 月から 8 月に PiezoICSI（以下 P-ICSI）を実施した 40 歳以上 : 730 周期（MⅡ卵:1939個）
をP-ICSI群（平均年齢42.7±2.0歳）とし，後方視的に比較検討を行った．
2. 採卵，
精子調整，ICSI 及び培養方法
卵 巣 刺 激 法 は，原 則としてlong protocol，shortprotocolま た はantagonist protocolを 用 い，poor
responder 症例やmild stimulationを希望する症例には，

図1

本検討に使用した Piezo ドライブ
（PiezoXpert：Eppendorf 社）

自然周期またはレトロゾールあるいはクロミフェンを使用した．精子調整方法は 2 層パーコール法にて良好とは決めずに，囲卵腔の広い場所から穿刺することを念

精子を回収した．前培養後にリコンビナントヒアルロ

頭 に 置 き 挿 入 場 所 を 選 択 し た．ピ エ ゾ パ ル ス はニダーゼ（ICSI Cumulase , Origio , Denmark）を使

Speed3.0 Intensity5.0で原則使用し透明帯を穿破した．

用し顆粒膜細胞を除去し，形態正常な運動精子を用いこの際，透明帯の穿破が難しいようであれば，Intensityて c-ICSI，P-ICSI をそれぞれ行った．その後，SAGE

を徐々に引き上げ，Intensity 10. 0 を MAX とした．
次に1 Step Medium（Origio , Denmark）を用いて胚培養

精子をニードル先端部に移動させ，卵細胞膜をピエゾパ

を行った．
また卵子，
胚の培養は37℃，
5.5%CO₂，
5.0%

ルス（Speed 1. 0，Intensity 5. 0）にて破膜し，精子を卵O ₂，89. 5% N ₂ の気相条件下で行った．

子内に注入した．

3. Conventional-ICSI 方法

5. 分割期胚及び胚盤胞の形態学的評価Ⓡ

c-ICSI の方法は，OLYMPUS 倒立顕微鏡（IX- 73）に分割期胚の評価は Veeck の分類 10） を用いて行い，マ イク ロ マ ニピ ュレ ーターシ ス テ ム（MTK- 1- 03

Day 2 時，Grade 1, 2 の 4 cell 及び Grade 3 の 5 cell 以

NARISHIGE Inc., Japan） と，Injection needle

上の胚を良好分割期胚とした．また，胚盤胞の評価は（K-MPIP- 3130 COOK., USA）を装 着し，7%PVP

Gardner の分類 11）を用いて，Grade 3BB 以上を良好胚（7% PVP Solution, Irvine Scientific., USA）中で形盤胞とした．

態が正常な運動精子を不動化させ，卵子の第一極体が 12
時 か6 時 の 方 向 と な る よ う に，holding pipette

6. 統計学的解析（KITAZATO, CORPRATION., Japan）を用いて保持

統計学的解析には数的データには対応のない t 検定を後，3 時の方向から，injection needleを挿入し，精子を用い，質的データにはχ2 検定を用い，p< 0. 05 を有意卵子内に穿刺注入した．

差ありとした．

4. Piezo-ICSI 方法
極 薄 ニ ー ド ル（PINU 06- 20FT : Primetech Ltd.,結果Japan.）
内に，慣性体としてオペレーションリキッドを

c-ICSI 群の平均年齢は 42. 7 ± 2. 1 歳，P-ICSI 群 の注入し ICSI に供した．また，本検討には PiezoXpert Ⓡ

平均年齢は 42. 8 ± 2. 1 歳であり，両群において患者背（Eppendorf Ltd.,Germany）
を使用した（図1）．
インジェ景に有意差は認められなかった．C-ICSI 群及び P-ICSI

クションニードルにて形態が正常な運動精子を群の培養成績は順に受精率（2PN，1PN，3PN の合算）

7%PVP（7% PVP Solution, Irvine Scientific., USA） 83. 0%（556/ 670）
，86. 6%（1103/ 1274）であった．
中においてまず精子を極薄ニードルを用いて圧座し運2PN 率 は 71. 3%（478/ 670）
，78. 3%（998/ 1274），

動性を失くし，その後 Piezo パルスをかけ不動化を完了

1PN 率は 8. 1%（54/ 670）
，5. 6%（71/ 1274）
，3PN

させた．
その後，卵子の第一極体を 12 時又は 6 時の方向率は3.6%（24/670），
2.7%（34/1274），
変性率は5.4%

13

（36/ 670）
，5. 4%（69/ 1274）であった．
良好分割率はKatayose らはウシ卵子において Piezo-ICSI は効率的

52. 1%（266/ 511）
，53. 6%（548/ 1022），継続培養に卵子を活性化することを報告している 13）．Salgado

胚 当 た り の D 5 胚 盤 胞 発 生 率 は 31. 9%（89/ 279）
， らはウマ卵子において，c-ICSI よりも Piezo-ICSI は良
43. 2%（240/ 556）
，継続培養胚当たりの D 5 良好胚盤

好胚盤胞発生率が高かったと報告している．
これは胚の胞率は 11. 1%（31/ 279），18. 0%（100/ 556）
，継続培

発生において，Piezo--ICSI は c-ICSI と比較し，精子注

養 胚 当 た り の D 5, D 6 胚 盤 胞 発 生 率 は 40. 5%

入後より迅速に精子構成リモデリング及び卵母細胞の（113/ 279）
，49. 3%（274/ 556）であり，受精率，2PN

減数分裂の再開を惹起するため，より高い良好胚盤胞率

率，1PN 率，D 5 胚 盤 胞 発 生 率，D 5 良 好 胚 盤 胞 率， になると考えられると報告している 14）．
D 5, D 6 胚盤胞発生率において P-ICSI 群が有意に高い

ヒト卵子の報告では Yanagida 6）らも我々の結果と同様に Piezo-ICSI は，c-ICSI に比べて有意に高い受精値となった（表 1）．

率となったことを報告している 4）．また，Takeuchi ら

考は精子を注入する際に，Piezo-ICSI は卵子をほとん察

ど変形させることなく精子を注入することが可能なた

本検討に用いたピエゾマイクロマニピュレーター（以下め，c-ICSI と比較し Piezo-ICSI はヒト卵子においてPMM）は，
ピエゾ（圧電素子 ; piezo electric elements） 受精率・分割率を改善するために効果的であるとも報を伸縮させることによって得られる慣性力を動力とし告している 15）．Hiraoka らは，より少ないダメージでたステップ状の駆動原理に基づき，0. 1 μ m 以下の超ICSI 可能な Piezo-ICSI が普及することで，一般不妊患

微動域の動作を可能とさせる装置である．
そのため，卵者の受精率が広く改善されることはもとより，従来の子や胚の弾性のある透明帯や進展性の高い細胞膜でもICSI では耐えられない細胞膜の弱い卵子しか採取出来

極細ピペットがスムースに挿入可能となり，顕微操作ない患者をも新たに救済できることが期待されると報による細胞の損傷を最小限にすることが可能となる．

告している 8）．

Piezo-ICSI のヒト卵子以外の報告として，マウス卵子においてその有効性が報告されている

表114

加齢に伴う細胞膜の変化が，ヒトや哺乳動物の胚にど．また， のような変化を与えるかは著者らの知る限り報告をみ3, 12）

両群における培養成績の比較

ないが，赤血球，リンパ球のような細胞では加齢に関連して変化することが報告されており，ヒト赤血球の16）

低浸透圧に対する抵抗性は年齢とともに低下する 17）．
同じように卵細胞膜も加齢により変化していることが推察される．本検討結果より，Piezo-ICSI の有用性が40 歳以上症例で認められたことから，Piezo-ICSI を実施することで卵子の染色体異常は克服出来ないが，卵細胞質の脆弱性は克服出来る可能性があり，PiezoICSI は高齢などに起因される脆弱な卵子において有用性があることが示唆された．
今回，受精率及び胚盤胞発生率の向上は認めたが，変性率に関しては差を認めなかった．
以前，当院において単独の胚培養士が行った Piezo-ICSI の有用性の検討
では，変性率の低下を認めた 9）．しかしながら 2019 年
より 40 歳以上症例を全例 Piezo-ICSI を実施するという方針に変更し，施行者を増やした結果，変性率の低下を認めなかったことから，Piezo-ICSI 導入後間もな
いこともあり，技術者間の技量の差が生じている可能性が示唆された．また，Piezo-ICSI の変性率が 5. 4%と他の Piezo-ICSI における報告よりも高率となった
理由として，対象を 40 歳以上と限定したことが起因している可能性が考えられた．今後は Piezo-ICSI の臨床妊娠成績において，どのような影響を与えるか解析を行っていきたい．

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15

日本 IVF 学会雑誌 Vol. 23，No. 1，16 -20，2020

ー原著 ー

卵管液組成に基づくシングルメディウムを用いた受精卵培養の検討
白岩 優綺，佐東 春香，田中 里美，古橋 孝祐，岩﨑 利郎，伊藤 宏一，水澤 友利，
松本 由紀子，苔口 昭次，塩谷 雅英
英ウィメンズクリニック 〒 650-0021

兵庫県神戸市中央区三宮町 1-1-2

三宮セントラルビル

要 旨： HiGROW OVIT PLUS（以下 OVIT）は日本卵子学会と扶桑薬品工業の共同開発で作られたシン
グルメディウムである．特徴として卵管液組成に基づき，既存の培養液に比べ必須アミノ酸濃度は低く，
非必須アミノ酸濃度は高く設定され，タウリンを高濃度に配合している．
今回，既存の一般的な A 社のシン
グルメディウムと，OVIT の培養・妊娠成績を比較検討した．2018 年 8 ～ 12 月までに ART を行い，受精判定時に 2PN が 4 個以上得られた 161 周期を培養成績の対象とした．同一患者から得られた胚を A 社
群と，OVIT 群に分け split 培養を行った．
また凍結融解胚盤胞 1 個を移植した 155 周期の妊娠成績についても比較を行った．本検討結果より培養・妊娠成績の全ての項目で両群間に有意差を認めなかったことから，OVIT は既存の一般的なシングルメディウムと同等であることが示された．
キーワード：培養液，必須アミノ酸，非必須アミノ酸，卵管液
ランニングヘッド：卵管液組成メディウムによる受精卵培養

緒液に比べ必須アミノ酸濃度は低く，非必須アミノ酸濃度

言は高く設定され，タウリンを高濃度に配合している．
初生殖補助医療（ART）において，妊娠率の高い良好胚期発生には非必須アミノ酸，後期発生には必須アミノ酸を得るために，これまで様々な研究が行われてきた．
良が重要な役割を果たしていると言われている 4）．タウリ

好胚を得るための要因の１ つとして培養液が挙げられ， ンは抗酸化作用を有し，マウスでは胚のステージによらこの数十年間の開発によって培養液の品質は飛躍的にず発生を促進するという報告がある 5）．OVIT は既存の向上している．
卵管液組成を基に Quinn らによって作ら培養液と比較し移植後の流産率，妊娠率において OVIT

胚の発育段階によれた Human Tubal Fluid（HTF） や，群で有意に上昇したという報告がある 6）．しかし，これる栄養要求性の変化に合わせて培養液を変更すべきとまで OVIT を用いた胚の培養成績と妊娠成績についていう考えを基に Gardner ら 2）によって作られたシーケ検討された論文はまだ発表されていない。
今回，我々はンシャルメディウム，胚自身が栄養を選択して成長する

この OVIT に着目し，その有用性を確認するため，既存

1）

ため培養液の変更は必要ないという考えに基づき， の一般的なアミノ酸組成である A 社のシングルメディ
KSOMAA をベースに Bigger ら 3）によって作られたシン

ウムと OVIT を用いて
（表 1）
，受精卵培養を行い，培養・

グルメディウムなど，胚培養における培養液の選択肢が妊娠成績が改善するかどうかを比較検討した．

広がっている．
このように様々な培養液の中でどれを選択するかは，培養液交換の必要性や，成分の違い，培養成

対象と方法

績や妊娠成績の報告などを基に，各 ART 施設において検討されている．
これまで，ヒト卵管液のアミノ酸濃度を詳細に解析し，

1. 対象
本研究を実施するにあたり，研究対象者へのインフォー

また，開示すべき利益相反状
その組成を模倣した培養液は報告されていなかったが， ムドコンセントを得て行った．
今回，日本卵子学会と扶桑薬品工業の共同開発により，態はない．2018 年 8月～ 12月までに ARTを行い，受精初めてヒト卵管液のアミノ酸濃度を模倣した培養液で判定時に2PNが 4 個以上得られた161 周期（1157 個）

さらに 2018 年 8月～
ある HiGROW OVIT PLUS（以下 OVIT）が開発された． を培 養 成 績 の 比 較 対 象とした．
OVIT の特徴として卵管液の組成に基づき，既存の培養受付 2019 年 12 月 4 日 / 受理 2019 年 12 月 22 日
責任著者：白岩 優綺 e-mail［shiraiwa@hanabusaclinic.com ］

162019 年 6月までに，A 社 のシングルメディウムまたは

表1

A 社 1-step medium と OVIT のアミノ酸組成

表 1 （µmol/L）
A社1-step medium と OVIT のアミノ酸組成 (µmol/L)

A社

OVIT

バリン

200

108

ロイシン

200

81

イソロイシン

200

36

リジン

200

176

スレオニン

200

109

メチオニン

50

22

ヒスチジン

100

53

フェニルアラニン

100

45

トリプトファン

25

18

アルギニン

300

108

シスチン

50

48

チロシン

100

48

グルタミン誘導体

1000

398

グリシン

50

979

アラニン

50

297

グルタミン酸50550

アスパラギン酸

50

120

アスパラギン

50

15

プロリン

50

105

セリン

50

176

゜

タウリン

1412

が正常で不動化された運動精子を，顆粒膜細胞を除去したMⅡ卵子に穿刺注入した．
受精の確認はC-IVFまたはICSI 施行から 18 ～ 20 時間後に行った．同一患者の同一周期から得られた 2PN 胚を，A 社のシングルメディ
ウムあるいは OVIT で split 培養した．
胚培養は 60mm の
Nunc™ IVF Petri Dishes（Thermo Fisher Scientific、150270、Japan）に，A 社または OVIT いずれかの培養液 20µl を 滴 下 し，Oil for Embryo Culture（Irvine、Japan）で被覆した．
得られた胚を，37℃，5. 5%CO 2，
5. 0% O 2，89. 5% N 2 の気相条件下で培養した 8）．
3. 分割期胚及び胚盤胞の形態学的評価
採分割期胚の評価は Veeck の分類 9）を用いて行った．
卵日を Day 0 とし，Day 2 時に Grade 1, 2 の 4 cell 及び Grade 3 の 5 cell 以上の胚を良好分割期胚とした．
また， 胚 盤 胞 の 評 価 は Gardner の 分 類 10） を 用 い て，Grade 3BB 以上を良好胚盤胞とした．
4. 胚盤胞凍結・融解胚移植
得られた胚盤胞は急速ガラス化法により凍結保存し，融解後，培養に使用した A 社のシングルメディウムまたはOVITいずれかの培養液で5 ～ 6時間回復培養した後，
経膣超音波下で単一凍結融解胚盤胞移植を行った．検討対象は全胚凍結を行い，出産歴が無く，移植回数が 1〜 3 回の周期を対象とした．
妊娠の判定は血中 hCG，経膣超音波検査における胎嚢（GS）に基づいて行った．
5. 評価項目及び統計学的解析について
Day 2 分割率，Day 2 良好分割率，継続培養胚あたりの Day 5 胚盤胞発生率，胚盤胞あたりの Day 5 良好胚盤胞率を比較検討した．また，C-IVF 周期，ICSI 周期の群に分け，媒精方法で培養成績に差が無いか比較を行った．
移植後の妊娠成績については，採卵を行った翌周期以降に単一凍結融解胚盤胞移植を行った症例につOVITで培養した胚盤胞を用いて単一凍結融解胚盤胞

いて，化学妊娠率，臨床妊娠率，流産率を比較検討した．

移植を行った155 周期を妊娠成績の比較対象とした．

統計学的解析にはχ 2 検定を用い，P< 0. 05 を有意差ありとした．

2. 採卵，
精子調整，媒精，培養
採 卵 し た 卵 子 は Universal IVF Medium（Origio，Denmark）を用いて，採卵後 3 ～ 5 時間の前培養を行っ

結

果

た．
精子は横田らの方法 7）に従い，2 層パーコール法で培養成績を検討した患者の平均年齢は 34. 8 ± 4. 6 歳，

遠心分離を行い，運動良好精子を回収した．
精子は濃度

当院平均採卵回数は 1. 8 ± 1. 7 回であった．培養成績は，

を 8 × 10 /ml に調整して C-IVF の媒精に供した．ICSI

Day 2 分割率では A 社群が 98. 8%（563/ 570）
，OVIT

で は， 前 培 養 後 に マ イ ク ロ マ ニ ュ ピ レ ー タ ー

群が 98. 0%（575/ 587）
，Day 2 良好分割率はそれぞ（OLYMPUS，ON 2- 99D- 3，Japan）を装着した倒立

れ 51. 3%（289/ 563）
，54. 3%（312/ 575）
，Day 5 胚顕微鏡（OLYMPUS，IX- 73，Japan）を用いて，形態

盤胞発生率が 57. 7%（287/ 497）
，57. 7%（286/ 496）
，

4

17

表2

表2

A社I-step mediumとOVITにおける培養成績

A 社 1-step medium と OVIT における培養成績
P value

Day2良好分割率

51.3%(289/563)

54.3%(312/575)

継続培養胚あたりのDays胚盤胞発生率

57.7%(287/497)

57.7%(286/496)

胚盤胞あたりのDay5良好胚盤胞率

48.8%(140/287)

54.5%(156/286)

継続培養胚あたりのDay5·Day6胚盤胞発生率

66.6%(331/497)

67.3%(334/496)

胚盤胞あたりのDay5·Day6良好胚盤胞率

44.7%(148/331)

50.6%(169/334)

表3

表3

N

98.0%(575/587)

N

98.8%(563/570)

N

Day2分割率

N

587

N

570

2PN数

N

OVIT

s s s s s s

A社

A社1-step mediumとOVITにおける培蓑成績(C-IVF群）

A 社 1-step medium と OVIT における培養成績（C-IVF 群）
P value

A社

OVIT

376

382

Day2分割率

98 9%(372/376)

98 4%(376/382)

NS

Day2良好分割率

54 3%(202/372)

58 5%(220/376)

NS

継続培養胚あたりのDays胚盤胞発生率

61 8%(202/327)

60 5%(199/329)

NS

胚盤胞あたりDays良好胚盤胞率

49 5%(100/202)

58 3%(116/199)

NS

継続培養胚あたりのDay5·Day6胚盤胞発生率

71 6%(234/327)

72 0%(237/329)

NS

胚盤胞あたりDay5·Day6良好胚盤胞率

44.4%(104/234)

52.7%(125/237)

NS

2PN数

D a y 5 良 好 胚 盤 胞 率 48. 8% （140/ 287），54. 5%ては，患者の平均年齢はA 社群では33. 6±3. 9 歳（73 周（156/ 286）であり，全ての項目において両群間に有期），OVIT 群は33. 2±4. 2 歳（55 周期）であり，それぞれ

意差を認めなかった（表 2）．

の群の平均年齢はt検定により，有意な差は認められなかった

また，受精方法別にC-IVF 周期とICSI 周期に分けて比 （両側検定 P= 0. 5332、片側検定 P= 0. 2666）．
化学妊娠
較を行った結果，C-IVF 周期（103 周期）では，Day 2 分

率は64. 4%（47/ 73）と70. 9%（39/ 55）であり，臨床割率はA 社群が 98. 9%（372/ 376）
，OVIT 群が 98. 4%

妊娠率は52. 1%（38/ 73）と47. 3%（26/ 55），流産率（376/ 382）
，Day 2 良 好 分 割 率 は そ れ ぞ れ54. 3%は13. 2%（5/ 38）と26. 9%（7/ 26）であり
（表 5）
，両群

（202/ 372）
，58. 5%（220/ 376）
，Day 5 胚 盤 胞 発 生間に有意な差は認められなかった．

率は61. 8%（202/ 327）
，60. 5%（199/ 329）
，Day 5良好胚盤胞率 49. 5%（100/ 202）
，58. 3%（116/ 199）

考といずれの項目にも2 群間の差はなかった（表 3）．
ICSI 周期（58 周期）では，A 社群の Day 2 分割率は察

生殖補助医療分野において胚培養液の選択肢は多98. 5%（191/ 194），OVIT 群は97. 0%（199/ 205）
， 岐にわたっているため，培養液の選定には，定期的に培Day 2 良 好 分 割 率 は そ れ ぞ れ45. 5%（87/ 191）
， 養液ごとの成績を比較検討した上で，胚の培養成績の46. 2%（92/ 199）
，Day 5 胚 盤 胞 発 生 率 は50. 0%

みならず，胚移植後の妊娠率にまで影響を及ぼす可能（85/ 170），52. 1%（87/ 167）
，Day 5 良好胚盤胞率は性があることを念頭に置き，培養液を選択することが肝47. 1%（40/ 85），46. 0%（40/ 87）であり（表 4），受精要である．

方法別に比較しても両群間に有意な差は認められなかった．

既存のシングルメディウムと，アミノ酸濃度及びタウリ

単一凍結融解胚盤胞移植 128 周期の妊娠成績においン濃度に特徴をもつ OVITを比較検討した結果，OVIT

18

表3

A社1-step mediumとOVITにおける培蓑成績(C-IVF群）

表4 A社1-step mediumとOVITにおける培養成績(ICSI群）

表4

A 社 1-step medium と OVIT における培養成績（ICSI 群）
OVIT
OVIT

376
194

382
205

Day2分割率
Day2分割率

98 9%(372/376)
98.5%(191/194)

98 4%(376/382)
97.0%(199/205)

Day2良好分割率
Day2良好分割率
継続培養胚あたりのDays胚盤胞発生率
継続培養胚あたりのDays胚盤胞発生率
胚盤胞あたりDays良好胚盤胞率
胚盤胞あたりDays良好胚盤胞率
継続培養胚あたりのDay5·Day6胚盤胞発生率

54 3%(202/372)
45.5%(87 /191)
61 8%(202/327)
50.0%(85/170)
49 5%(100/202)
47.1%(40/85)
71 6%(234/327)
57.1%(97/170)
44.4%(104/234)

58 5%(220/376)
46.2%(92/199)
60 5%(199/329)
52.1%(87/167)
58 3%(116/199)
46.0%(40/87)
72 0%(237/329)
58.1%(97/167)
52.7%(125/237)

45.4%(44/97)

45.4%(44/97)

2PN数

2PN数

継続培養胚あたりのDay5·Day6胚盤胞発生率
胚盤胞あたりDay5·Day6良好胚盤胞率
胚盤胞あたりDay5·Day6良好胚盤胞率

表5

P value
P valuesN sN sN sN sN sN

A社
A社

NS

NS
NS

NS
NS

NS

表5 A社1-step mediumとOVITにおける妊娠成績

A 社 1-step medium と OVIT における妊娠成績
A社

OVIT

91

64

採卵時年齢土SD

34.1土3.9歳

33.7土4.7歳

化学妊娠率

61.5%(56/91)

68.8%(44/64)

NS

臨床妊娠率

49.5%(45/91)

48.4%(31/64)

NS

流産率

17.8%(8/45)

22.6%(7/31)

NS

周期数

P valueの方が培養・妊娠成績が良好であった 11- 14） という報を行わないため，非必須アミノ酸とアミノ酸がそれぞれ告が散見される．しかし，これまで OVIT を用いた胚不足しないよう，また過剰でないようにバランスよく配の培養成績について検討された論文はまだ発表され合されている．今回検討に用いた OVIT は，既存の培養ていない．そこで我々もこの OVIT に注目し，既存の液と比較して，より生体内つまり卵管液のアミノ酸濃度

シングルメディウムと比較検討を行った．その結果を模倣して配合されている．
しかし，結果としては既存と し て，Day 2 時 の 分 割 率 お よ び 良 好 分 割 率， の培養液と OVIT の間に有意な差は見られなかった．こDay 5 時の継続培養胚当たりの胚盤胞発生率および， れは，胚発生に必要な基本的な成分は，Eagle らによる，
胚盤胞あたりの良好胚盤胞発生率，凍結融解胚盤胞 1

胚のアミノ酸に対する用量応答研究 3）15）16）などから導個を移植した時の化学妊娠率，臨床妊娠率，流産率いき出された結果と同じく，培養液中の濃度に関わらず，

ずれにおいても A 社製の既存のシングルメディウム

ある程度は胚自身で選択し，利用しているのではないかと OVIT の両群間に有意な差は見られず，同等な培養という考えに至った．

成績，妊娠成績が得られた．

OVIT は国内製の培養液の選択肢の１ つとして，既存アミノ酸は基質としてだけではなく，浸透圧や pH のの培養液と比較して同等の成績をもたらしたことから

調節，抗酸化作用など，様々な働きに関与している．
胚の有用であると考えられ，また国内 ART 施設の多くが培初期発生には非必須アミノ酸が必要であり，発生の後期

養液の供給を海外からの輸入に頼っている状況を鑑みには必須アミノ酸が必要であり，胚発生の段階によってると，国内製培養液である OVIT は培養液供給におけるアミノ酸の要求性が異なり，良好な胚を得るにはこれら

リスク分散に寄与するものと考えた．

の種類だけではなく濃度も重要である．
シングルメディウムでは胚発生のステージの違いによって培養液交換

19

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日本 IVF 学会雑誌 Vol. 23，No. 1，21 - 23，2020

ー原著 ー

選択的単一胚盤胞移植においてどの評価因子を優先して胚選択するべきか？
大浦 朝美 1，冨田 和尚 2，佐藤 学 1，中岡 義晴 1，森本 義晴 21  IVF なんばクリニック 〒 550-0015 大阪府大阪市西区南堀江 1-17-28
HORAC グランフロント大阪クリニック 〒 530-0011 大阪府大阪市北区大深町 3-1 グランフロント大阪タワー B15F

2  

要 旨： 胚盤胞移植は分割期胚移植と比べ臨床成績が高く，良好胚選別の方法として普及した．一方で，選択的単一胚盤胞移植の場合にどの評価因子を優先して選択すべきかが課題であった．そこで 2009 年
1 月から 2012 年 12 月の凍結融解単一胚盤胞移植を行なった 1750 症例を対象にロジスティック回帰分
析を用いて生産に影響を及ぼす評価因子を解析した．影響する因子はオッズ比順に培養日数，TE，拡張
ステージであることを明らかにし，形態よりも胚盤胞形成の早さを優先することが重要と考えられた．
この結果を踏まえ胚選択の基準を変更した 2015 年 1 月から 2017 年 2 月の臨床成績を変更前のデータと比較した結果，臨床的妊娠率，流産率に有意差はみられなかった．評価因子をさらに増やして再検討することで，より精度の高い胚盤胞選択を行う検討をしていく必要がある．
キーワード：胚評価，選択的単一胚盤胞移植，Gardner 分類，培養日数
ランニングヘッド : 選択的単一胚盤胞移植における胚選択基準

緒言（目的，背景）Surgical, USA）
を用いて培養を行った．D 5 または D 6に Gardner 分類 3） で BL 3BC 以上の胚盤胞を CryoTop

胚盤胞移植は分割期胚移植と比較して生産率が高 （Kitazato, Japan）にてプロトコールに従ってガラス化
く 1. 2），単一胚移植の有効な手段となった．選択的単一

凍結後，ホルモン補充周期にて単一胚盤胞移植した．
生

胚盤胞移植（e-SBT）の場合，多くは胚盤胞の形態評価

産の有無を従属変数，
培養日数（D5 or D6），
拡張ステーを選択基準にしている．胚盤胞の形態評価は Gardner

ジ（BL3 ～ 6），内細胞塊（ICM：A or B）
，
栄養外胚葉
（TE：

分類 3）が普及しており，栄養外胚葉が不良では流産率

A ～ C）ならびに，既報 8）に従って算出した Blastocystが高い 4. 5）ことや 5 日目胚盤胞は 6 日目よりも妊娠率がQuality Score（BQS）の胚盤胞評価に加え，女性因子とどれを優先す高い ので発育速度も加味するべきだが，して妻年齢と ET 既往回数，さらに男性因子として原精べきなのか検討の余地がある ．本検討では，ロジス液の総精子濃度（× 106/ml）の計 8 項目を交絡因子としティック回帰分析を用い統計学的に胚盤胞の評価因子てロジスティック回帰分析を行い，オッズ比順に交絡の選択順位付けを試みた．
また，その解析結果に基づい因子を順位付けし，
胚盤胞の選択基準を設定した．

6）7）て胚盤胞の選択基準を設定し，臨床成績を選択基準設
定前と比較し有効性を評価した．

（検討 2）検討 1 で得た選択基準をもとに，2015 年 1 月
から 2017 年 2 月に複数の凍結胚盤胞を所有し，初回対象と方法

e-SBT を行った 243 症例（基準設定後）と，比較対象として 2013 年 1 月から 2014 年 12 月に複数の凍結胚盤（検討 1）2009 年 1 月から 2012 年 12 月に同意を得て胞を所有し，初回 e-SBT を行った基準設定前 173 症例移植を行った妻年齢 39 歳以下の 1750 症例を対象としの臨床的妊娠率と流産率を比較した．妻年齢はともにた．GnRH antagonist 法，GnRH agonist 法，あるいは

39 歳以下を対象とし，検討 1 と同様に採卵し，IVF もクエン酸クロミフェン法を用いた調節卵巣刺激にて採しくは ICSI で受精後，ドライインキュベーター（EC 6,卵を行った．IVF または ICSI 後，マルチガスインキュ

ASTEC, Japan）を用い 6. 0% CO 2，5. 0% O 2 条件下

ベ ー タ ー（AP 30, ASTEC, Japan） を 用 い，5. 0%

で Continuous Single Culture Complete with HSA

CO 2，5. 0% O 2 条 件 下 で grobal medium（Cooper （Irvine, USA）
を用いて培養，
胚盤胞凍結を行った．
受付 2020 年 3 月 30 日 / 受理 2020 年 5 月 22 日
責任著者：大浦 朝美 e-mail［ sumida@ivfnamba.com ］

21

統計学的解析は StatView 5. 0 を用いて Fisher の正確考

検定あるいは t 検定を用い，P< 0. 05 を統計学的に有意察

胚盤胞の評価項目の中で，どの部分を重視して胚選択しとした．

移植していくかを決定することは，妊娠成立までの期間短縮

結や患者負担を減らす意味でも重要な意義がある．

果

検討１ で評価優先項目は培養日数，TE，拡張ステー（検討 1）解析結果を表 1 にまとめた．
生産に影響を及ぼジの順であることが明らかとなった．
この選択基準を設す上位3因子はオッズ比順に，
培養日数，
TE，
拡張ステー

けると例えば，培養日数が早い胚盤胞を選択するが，複ジであった．

数あれば 2 番目は TE なので TE 評価の高い胚盤胞を選（検討 2）基準設定前と基準設定後の妻年齢（mean ±択する．
さらに同じTE評価の胚盤胞がある場合は，
拡張SD）に差はなく（33. 9 ± 3. 27 vs. 34. 0 ± 3. 31），初回ステージのグレードの順に選択するシステムとなり，選e-SBT の臨床的妊娠率（56. 6 vs. 63. 4），流産率（16. 3

び方は明確となった．
本検討から形態評価よりも胚盤胞

vs. 23. 4）
共に有意差はなかった（図 1）．

形成の早さが重要であると考えられる．Sunkara らは，
D 6 胚盤胞と D 5 胚盤胞の妊娠率および流産率に差がな
いと報告 9）しているが，本検討では Bruce らの報告 6）と

表1

同様，
生産に一番影響を及ぼした．
次にTEが大きく影響

生産に影響を及ぼす胚盤胞の因子を及ぼしており，同様の報告 4. 5）も踏まえ TE の細胞数は着床とその継続に重要な因子であると考えられる．
一方で，オッズ比の低かった BQS は発育ステージ，ICM お
よびTE評価を平等に係数にするため評価因子にならなかった可能性がある．同様に ICM は本検討ではグレー
ド C の胚盤胞は除外され，細胞数が比較的十分にある胚盤胞に限ったため選択基準に含まれなかった可能性が考えられた．
e-SBT 症例の初回移植に可能性の高い胚盤胞が選ばれていれば成績が設定前よりも向上するのではないかと仮定
し検討 2を行ったが差はなかった．
これは胚盤胞移植が元から比較的臨床成績が良好であり，成績を有意に上昇させるこ

図1

22

初回 e-SBT を行った症例の妊娠率，流産率

とが難しい可能性が考えられる．
本検討では評価因子の順位

pregnancy than early cleavage in intracytoplasmic sperm
injection and in vitro fertilization cycles with blastocystを統計学的に設定することで培養日数，TE，
拡張ステージのstage transfer. Fertil Steril, 87（5）: 1041-1052, 2007.
順に重要であることを明らかにし，選択方法が明確になったこ 9） 	 Sunkara SK, Siozos A, Bolton VN, Khalaf Y, Braude PR,とはメリットであった．
最近では，タイムラプスインキュベーターのEl-Toukhy T: The influence of delayed blastocyst formationon the outcome of frozen-thawed blastocyst transfer: a
普及により経時的変化を踏まえた胚評価が可能 10. 11）となり，
systematic review and meta-analysis. Hum Reprod. 25（8）初期卵割異常でも良好胚盤胞に発生し，正常卵割由来の: 1906-1915, 2010.
胚盤胞と比べても妊娠率に差はない 12）ことや胚盤胞の胞 10） Kovacs P: Embryo selection: the role of time-lapse
胚腔収縮を起こす回数の影響 13）など検討した因子以外のmonitoring. Reprod Biol Endocrinol. 12 : 124, 2014.
評価因子も含めることでより可能性の高い胚盤胞選択につ 11）中野達也・佐藤学・橋本周・中岡義晴・森本義晴：第一卵割における早期正常分割の確認が発育予測に重要．第 59 回日
ながるものと期待される．
本生殖医学会雑誌，192, 2014.
本検討では特にe-SBTにおける胚盤胞選択における評12） 	Zhan Q, Ye Z, Clarke R, Rosenwaks Z, Zaninovic N: Direct
価因子の順位付けを統計学的に行い，その結果に基づき選Unequal Cleavages: Embryo Developmental Competence,
Genetic Constitution and Clinical Outcome. PLoS One, 11
択を行ったものの臨床成績での有効性は見出すことができ（12）: e0166398, 2016.
なかったが培養日数，TE，拡張ステージの順に生産に重要
13） 渡辺真一・上畑みな子・永川恵介・見田渉・三浦恵・小林勇毅・であることを明らかにした．
評価因子をさらに増やして再検討す宮田佳苗・田中豊美・松永利恵・山中菜保子・与那覇斉，桑ることでより精度の高い胚盤胞選択を行う検討をしていく必
波田暁子，越智正憲，堀内俊孝：ヒト胚盤胞の収縮が凍結融
解胚移植成績に及ぼす影響：タイムラプス動画を用いた解析．
要がある．
日受精着床会誌，32（1）: 45-48, 2015.

参考文献
1） 	 Gardner DK, Vella P, Lane M, Wagley L, Schlenker T,
S cho olcra f t W B : Cu ltu re a nd Tra nsfer of Hu ma n
Blastocysts Increases Implantation Rates and Reduces the
Need for Multiple Embryo Transfers. Fertil Steril. 69（1）:84-88, 1998.
2） 	 Gardner DK, Schoolcraft WB, Wagley L, Schlenker T,
Stevens J, Hesla J: A prospective randomized trial of
blastocyst culture and transfer in in-vitro fertilization.
Hum Reprod. 13（12）: 3434-3440, 1998.
3） 	 Gardner DK, Schoolcraft WB. In vitro culture of humanblastocysts. In: Towards Reproductive Certainty: Infertility
and Genetics Beyond 1999（eds. Jansen R, Mortimer D）.
Carnforth: Parthenon Press, 378-388, 1999.
4） 	 Hill MJ, Richter KS, Heitmann RJ, Graham JR, Tucker MJ,
DeCherney AH, Browne PE, Levens ED: Trophectoderm
grade predicts outcomes of single-blastocyst transfers.
Fertil Steril., 99（5）: 1283-1289, 2013.
5） 橘直之・鈴木達也・廣瀬典子，吉田智香子，昇千穂美，今井賢，
内田真一郎，池田伴衣，松原茂樹：内細胞塊グレード良好例
は妊娠率が高く，栄養外胚葉グレード不良例は流産率が高い：
当院の凍結融解単一胚盤胞での検討．日受精着床会誌 33（1）: 16-20, 2016.
6） Shapiro BS, Richter KS, Harris DC, Daneshmand ST: A
comparison of day 5 and day 6 blastocyst transfers. Fertil
Steril., 75（6）: 1126-1130, 2001.
7） 	 Ahlström A, Westin C, Reismer E, Wikland M, Hardarson
T: Trophectoderm morphology: an important parameterfor predicting live birth after single blastocyst transfer.
Hum Reprod. 26（12）: 3289-3296, 2011.
8） 	 Rehman KS, Bukulmez O, Langley M, Carr BR, Nackley
AC, Doody K M , Doody KJ: Late stages of embryo
progression are a much better predictor of clinical23

日本 IVF 学会雑誌 Vol. 23，No. 1，24 -26，2020

ー短報 ー

採卵決定日に LH サージが開始された採卵周期におけるレルゴリクスの排卵抑制効果
中尾 佳月，髙見澤 聡，板倉 彰子，森山 梓，壽圓 裕康，堀川 隆，黒田 恵司，
小代 裕子，中川 浩次，杉山 力一
杉山産婦人科 新宿 〒 160-0023

東京都新宿区西新宿 1-19-6

山手新宿ビル

要 旨： ART 採卵決定日に LH サージが開始された低刺激採卵周期（162 周期）で，排卵抑制目的で
GnRH アンタゴニスト注射薬を投与した周期（G 群），レルゴリクスを内服した周期（R 群），NSAIDs（メロキシカム）を内服した周期（M 群），レルゴリクスとメロキシカムを内服した周期（R+M 群）の 4 群で検討した．採卵時の既排卵率は，R 群で G 群，M 群と比較して有意に高かった．LH サージ開始後の排卵抑制にレルゴニクスは適さないと考える．
キーワード：ART，排卵抑制，レルゴリクス

緒

言

方

法

2019 年 3月に発売された経口 GnRH アンタゴニスト

排卵抑制のため採卵 2 日前に GnRH アンタゴニスト

製剤（レルゴリクス）は，国内初の 1日1 回経口投与の注射薬（ガニレスト ®/ セトロタイド ® 0. 25mg）を投与

GnRH アンタゴニスト製剤である．
従来の GnRH アンタゴ

した 10 周期（G 群）
，採卵 2 日前にレルゴリクス（レルミ

ニスト製剤と同様に下垂体 GnRH 受容体に競合的に結，採卵 1 日前に
ナ ® 40mg）を投与した 26 周期（R 群）

合し，下垂体抑制を介して卵巣からの E 2 産生を抑制してNSAIDs（メロキシカム：モービック ® 10- 20mg）を内レル
子宮筋腫に基づく諸症状を改善する治療薬である 1）．

服した 102 周期（M 群），採卵 2 日前にレルゴリクスと採ゴリクスは注射薬より安価で投与が容易であり，その利便

卵 1 日前にメロキシカムを内服した 24 周期（R+M 群）

性から，ART 卵巣刺激においても今後使用の増加が予の 4 群に分け，後方視的に比較検討した．3 群間以上の想される．

統計学的な比較は Kruskal-wallis 検定を行い，P< 0. 05
を統計学的有意差ありとした．

目

的結

下垂体抑制を併用しない卵巣低刺激法の採卵周期で果は，採卵決定日に LH サージが開始している症例に遭遇

G 群，R 群，M 群，R+M 群の年齢，AMH 値，採卵 2することがある．
その際，排卵抑制を目的に，GnRH ア

日前の LH 値，E 2 値，P 4 値は，4 群間において採卵

ンタゴニスト製剤や NSAIDs 製剤を投与することがあ

時排卵の有無に関わらず有意差はなかった（表 1）．一

経口 GnRH アンタゴニスト製剤であるレルゴリク
る 2）．

方，採卵時の既排卵率は，0％（0/ 10 周期），46. 2％スの排卵抑制効果を検討した．

（12/ 26 周期），14. 7％（15/ 102 周期），20. 8％（5/ 24周期）であり，R群はG群，M群と比較して有意に高かっ対象2018 年 12 月から 2019 年 5 月の間，卵巣低刺激法による採卵周期において，採卵 2 日前の LH 値が 10mIU/た（図 1）．

考察

mL以上に上昇した症例から，基礎LH値が高値の卵巣予

採卵決定日に LH サージが開始している採卵周期にお備能低下症例と多嚢胞性卵巣症候群を除外した 162 周ける排卵率は，GnRH アンタゴニスト注射薬や NSAIDs

期を対象とした．

製剤に比べて，レルゴリクスが有意に高かったことが分

受付 2019 年 11 月 1 日 / 受理 2019 年 12 月 4 日
責任著者：中尾 佳月 e-mail［ kazuki.nakao@sugiyama.or.jp ］

24

表1

4 群間における採卵可能周期および排卵済み周期の比較

図14 群間の採卵時既排卵率かった．
理由として，レルゴリクスの薬物動態から，吸収

レルゴリクスの血中濃度上昇は注射薬同様，比較的速やは速やかであるが効果発現の遅延が考えられる．

かであるが，作用発現は緩やかで遅延する．
また，食事のレルゴリクスの単回投与での血中濃度は，内服約 1. 5

影響が大きく，食後の内服では顕著に吸収低下・血中濃時間後に最高値に達した後は低下し，約 8 時間後には低度の上昇不良がみられる 3）．GnRH アンタゴニストを値（最高値の＜ 1/ 4）になるが，その後の血中濃度低下は用いた早急な LH サージ抑制には，作用発現が速やかか遷延するため，血中半減期は 45 時間と長時間になる ． つ食事の影響がない注射薬が適している．
3）

作用発現として血中 E 2 値は，内服約 8 時間後に半減値カニクイザに達し，内服 24 時間後まで減少を続ける 3）．
ルへの投与では，血中 LH 値は内服薬約 8 時間後に最低

結

論

一方，
値（投与前の＜ 1/ 4）に達し，24 時間持続する 4）．

レルゴニクスは，採卵決定日 LH サージ開始症例でのの血中GnRH アンタゴニスト製剤注射薬（ガニレスト ）排卵抑制には適さない．LH サージを抑制する目的で濃度は，投与 1 時間で最高値となり，速やかに低下，半減GnRH アンタゴニスト製剤を投与する場合は，速やかか

期は約 12 時間である．
血中 LH 値は，投与約 4 時間後につ安定した効果が期待できるという観点から，経口剤®

最低値となり，投与終了24時間で投与前値に回復する ． よりも注射薬が適している．
5）

25

参考文献
1） 	レルミナ錠 40㎎．あすか製薬株式会社．https://www.askapharma.co.jp/iryouiyaku/lp/prd_relumina,（2019.10.20）
2）Kawachiya S, Matsumoto T, et al： Short-term, low-dose,non - st er o id a l a nt i - i n f l a m m at or y d r ug appl ic at ion
diminishes premature ovulation in natural-cycle IVF．
Reprod Biomed Online, 24：308-13, 2012.
3）レルミナ錠 40㎎．あすか製薬株式会社．https://www.askapharma.co.jp/iryouiyaku/news/filedownload.php?name=45323490d025b8d3df65aa5c4316ec8f.pdf,（2019.10.20）
4）Kazuhiro Miwa, Takenori Hitaka, et al：Discovery of 1-{4-[1（2 , 6 -Di f luorobenzyl）- 5 - （[ d i met hyla m ino）met hyl] - 3 （ 6 - m e t h o x y p y r i d a z i n - 3 - y l ）- 2 , 4 - d i o x o - 1 , 2 , 3 , 4 t et r a hyd r o t h i e n o [ 2 , 3 - d ] p y r i m i d i n - 6 - y l ] p h e ny l } - 3 methoxyurea（TAK-385）as a Potent, Orally Active, NonPeptide Antagonist of the Human Gonadotropin-Releasing
Hormone Receptor. J Med Chem, 54：4998-5012, 2011.
5）ガニレスト．MSDConnect. https://www.msdconnect.jp/static/
mcijapan/images/pi_ganirest_st025s.pdf,（2019.10.20）

26

日本 IVF 学会雑誌 Vol. 23，No. 1，27-30，2020

ー症例報告 ー

絨毛染色体検査を契機に診断された均衡型相互転座の一例
松山 毅彦，石橋 めぐみ，中澤 留美，河戸 朋子，勝木 康博，菊池 咲希，三宅 君果，
横田 智，真鍋 有香，北岡 美幸
厚仁病院 産婦人科 〒 763-0043

香川県丸亀市通町 133

要 旨： 絨毛染色体検査を契機に診断された均衡型相互転座の症例を経験した．
31 歳，1 妊０ 産，ヒューナーテストやや不良にて AIH 施行．8 回目の AIH で妊娠成立するも妊娠 8 週
で心拍停止となり D&C を施行，絨毛染色体は正常核型［46, XX］であった．その後 2 回 AIH 施行するも妊娠に至らず IVF を行い，６ 個採卵，３ 個胚盤胞凍結した．１ 回目の凍結融解胚盤胞移植では妊娠せず．２
回目の移植で妊娠が成立した．胎児心拍確認もされるも，その後消失し D&C を施行，絨毛染色体は均衡型相互転座［46, XX, （3;t22）（p 21; q 13）］であった．そこで夫婦の染色体検査を行い，本人は均衡型相互転座［46, XX, （3;t22）（p 21; q 13）］，夫は正常核型［46, XY］と判明した．
絨毛染色体検査の結果がなければ本人の均衡型相互転座は見つかっていなかった可能性が高い．
キーワード：絨毛染色体検査，均衡型相互転座，着床前胚染色体異数性検査

はじめに均衡型相互転座は先天異常を有する子で不均衡型転座が判明し，その両親の検査で明らかになる場合や，不育症検査としての染色体検査で判明する場合がある 1）.
今回は初期流産時の絨毛染色体検査を契機に診断された均衡型相互転座の症例を経験したので報告する．

症例

31 歳女性，1 妊０ 産（１ 妊の転帰は人工中絶）
，X 年

表1

抗リン脂質抗体の異常は認めなかった
検査項目

検査結果

単位

基準値

第 12 凝固因子55％

50-150

ループスアンチコアグラント

0.9

プロテイン C 活性

81％

64-146

プロテイン S 活性

86％56-126

抗ＰＥ IgG 抗体********

1.3 未満キニノーゲン (+)

0.132

0.3 未満キニノーゲン (-)

0.222

0.3 未満

抗 PEIgM 抗体********

7 月初診．月経周期 28 ～ 32 日型，子宮卵管造影検査

キニノーゲン (+)

0.147

0.45 未満（hysterosalphingography: HSG）
：両側卵管通過良好，

キニノーゲン (-)

0.206

0.45 未満

LH-RH テ ス ト： 視 床 下 部 型， 精 液 検 査 は 正 常

抗核抗体（Normozoospermia），ヒューナーテスト：やや不良，抗********

抗体価

40

リン脂質抗体の異常は認めなかった（表 1）．

HOMOGENEOUS(+)

SPECKLED(-)

NUCLEOLAR(-)

CENTROMERE(-)

PERIPHERAL(-)

GRANULAR

(+)

核膜型

(-)

カルジオ抗体 IgM

経過タイミング指導を数回行ったが，ヒューナーテスト
がやや不良のため AIH の方針とした．
X+ 1 年 10 月，8 回目の AIH で妊娠成立，胎嚢，
卵黄嚢の確認の後，胎児心拍確認するも妊娠 8 週で心拍停止となり X+ 1 年 12 月子宮内清掃術（D&C）を施行した．
絨毛染色体は正常核型［46, XX]（写真 1）であった．
その後
2 回 AIH を施行するも妊娠に至らず，原因不明不妊の診

倍

40 未満

5 以下

Ｕ／ ml

8 未満

抗 CLB2GPI 抗体

0.7 未満Ｕ／ ml

3.5 以下カルジオ抗体 IgG

8 以下

Ｕ／ ml

10 未満

受付 2019 年 9 月 27 日 / 受理 2019 年 11 月 3 日
責任著者：松山 毅彦 e-mail［ tmatsuya@mac.com ］

27

断の元に IVF の方向とした．
X+2年6月，clomiphene-HMG周期にてIVFを行った．

なり凍結した．
X+ 2 年 8 月，ホルモン補充周期にて周期管理を行い，

月経３ 日目の血中 E 2 20. 3 pg/ml ，P 4 0. 48 ng/ml， 3AA 胚盤胞（移植時シュリンク）移植を行うも妊娠せず．
FSH 8. 3 mIU/ml，LH 4. 7 mIU/ml，AMH 4. 87ng/ml

X+ 2 年 10 月，ホルモン補充周期にて管理，4AB 胚盤であった．
同日より clomiphene 内服（50mg/day）開始， 胞（移植時 4AA）移植を行い妊娠が成立した．
胎嚢，卵黄7 日目と 10 日目に HMG（FSH: LH ≒ 1: 1）150IU 筋注， 嚢の確認ができたが胎児心拍の出現は遅く，妊娠７ 週
13 日目の血中 E 2 1355. 3pg/ml，LH 6. 2mIU/ml を確で一時的に発現するもその後消失し，稽留流産の診断認し 14 日目の夜に GnRHa スプレー噴霧を行い 16 日

にて X+ 2 年 11 月子宮内清掃術（D&C）
を施行した．

目に採卵を行った．６ 個採卵，conventional IVF にて

絨毛染色体は均衡型相互転座［46, XX, t（3; 22）

3 個正常受精，残りの２ 個は 3PN，1 個は MI にて受精 （p 21; q 13）
］
（写真２）
であった．
せず．
正常受精の３ 個が胚盤胞（3AA，3BB，4AB）と以上の結果から，夫婦のどちらかに均衡型相互転座

写真 1 8 回目の AIH で妊娠成立，胎嚢，卵黄嚢の確認の後，胎児心拍確認するも妊娠 8 週で心拍停止となり X+1 年 12 月 D&C を施行した．絨毛染
色体は正常核型［46, XX］であった．

写真 2 ホルモン補充周期にて管理，4AB 胚盤胞（移植時 4AA）移植を行い妊娠が成立した．胎嚢，卵黄嚢の確認ができたが胎児心拍の出現は遅く，妊娠７週で一時的に発現するもその後消失し，稽留流産の診断にてX+2 年 11月D&Cを施行した．
絨毛染色体は均衡型相互転座［46, XX, t（3; 22）（p21; q13）］であった．

写真 3 本人の核型は均衡型相互転座［46, XX, （t 3; 22） 写真 4
（p21; q13）
］であった

28

夫は正常核型［46, XY］であった

がある可能性も考えられたため，X+ 3 年 1 月夫婦の染同年 9 月ホルモン補充周期にて管理，3BA 胚盤胞（移色体検査を行った所，本人の核型は均衡型相互転座［46， 植時 6BA）の移植を行ったが妊娠に至らず．
XX，
（3;
t
22）
（p 21; q 13）
］
（写真３）
，
夫は正常核型［46，

X+ 3 年現在も IVF を中心とした管理を行っている．

XY］
（写真４）
であった．
本人の核型について説明し，現時点では当院では着考

床前診断などができないことを話した．着床前診断を察御希望される場合は他院に紹介できることも説明した

均衡型相互転座とは染色体間で染色体の一部分が交が，本人は当院での管理，治療を希望したため，今後も換されたものである．表現型は基本的には正常である当院にて IVF を行っていくこととした．

が，その子に不均衡型の染色体異常を発生することが2 回目の流産後の X+ ３ 年 2 月にホルモン補充周期にて管理，3BB 胚盤胞（移植時 5BB）移植を行うも妊娠に至らず．
X+ 3 年 3 月 clomiphene（+letrozole）-HMG 周期にてある．
一般的な頻度は 400 人に 1 人とされている．
成因は別々の染色体の 2 か所で切断が起こり，断片を交換するために生じたもので，切断の原因は一般には不明とされている．

IVF を行った．月経 3 日目の血中 E 2 33. 0 pg/ml ，P4

第一減数分裂中期において，2 本の派生染色体と 20. 35 ng/ml，FSH 8. 2mIU/ml，LH 5. 3mIU/ml，AMH

本の正常染色体の相同部分はペアリングし，四価染色6. 35ng/ml であった．AMH 値やや高めと判断し，同日体を形成する．
四価染色体の分離様式は 2：2 分離，3：

よりletrozole 2.5mgを2日間内服，同時にclomiphene

1 分離，4：0 分離があり，2：2 分離はさらに交互分離，を50mg/dayで内服開始，
8日目と10日目にHMG（FSH:

隣接 1 型分離，隣接 2 型分離に分離される．形成された

LH ≒ 1: 1）150IU 筋注，12 日目の血中 E 2 671. 6pg/

配偶子が正常配偶子と受精した時，遺伝的均衡となる

ml，LH 11. 6mIU/ml を確認し HMG（FSH: LH ≒ 1: 1） のは交互分離のみである．
75IU 筋注，同日の夜に GnRHa スプレー噴霧を行い 14日目に採卵を行った．5 個採卵，conventional IVF にて 1 個のみ正常受精（残りの 4 個は受精せず），分割するも胚盤胞にならず．

親が均衡型転座をもち，それが子に伝わる場合と，新しくできる場合（de novo）がある．
均衡型転座では染色体の過不足はないと考えられ，多くの場合保因者の表現型は正常である 1）.

同年 4 月 clomiphene-HMG 周期にて IVF を行った．

保因者が妊娠した場合は，不均衡型相互転座を有す

月経 3 日目の血中 E 2 <L（測定限界以下）pg/ml，P 4

る子を出生する可能性が高くなる場合があり，遺伝カ

0. 3 4ng/ml，FSH 6. 6 mIU/ml，LH 8. 3 mIU/ml， ウンセリング上の留意が必要である 2）.
AMH 4. 64ng/ml であった．
前回，前々回の採卵状況を当院では，夫婦の染色体検査はルチンでは行ってふまえ，
同日よりclomipheneの内服（100mg/day）
開始， おらず，不育症の可能性がある場合などにのみ行っ
7 日目と 10 日目に HMG（FSH: LH ≒ 1: 1）150IU 筋注， ていた．
12 日目の血中 E 2 2368. 1pg/ml，LH 12. 2mIU/ml を

今回のケースではタイミング法，AIH などの一般不確認し同日夜に GnRHa スプレー噴霧を行い 14 日目に妊治療を行っていた期間が長かったため，1 回目の初採卵を行った．7 個採卵，conventional IVF にて５ 個

期流産と診断された際に医療サイドからの絨毛染色体

正常受精，1 個は 3PN，1 個は MI にて受精せず．正常検査の提案に対して了解していただき検査を施行する

受精の 5 個は分割するも胚盤胞にならず．

ことができた．
結果は正常核型であり，抗リン脂質抗体

同年 7 月 clomiphene-HMG 周期にて IVF を行った．

検査なども行ったが，正常範囲であった．

月経 2 日目の血中 E 2 37. 4 pg/ml ，P 4 0. 57 ng/ml，

その後 IVF に移行し，2 回目の移植で妊娠成立する

FSH 6. 2mIU/ml，LH 5. 5mIU/ml，AMH 5. 49ng/ml

も初期流産となり，絨毛染色体検査を本人が強く希望であった．過去歴を考え 3 日目より clomiphene 内服

し，検査を施行した．その結果は均衡型相互転座で（150mg/day）開始，7 日目と 10 日目に HMG（FSH:あった．

LH ≒ 1: 1）150IU 筋注，13 日目の血中 E 2 2996. 4pg/

その結果からは流産した側の de novo かまたは夫婦

ml，LH 14.3mIU/mlを確認し同日夜にGnRHaスプレーのどちらかの均衡型相互転座が推測されることとなり，

噴 霧 を 行 い 15 日 目 に 採 卵 を 行 っ た．7 個 採 卵， 改めて血液染色体検査をお願いした結果，本人の均衡
conventional IVF にて６ 個正常受精，1 個は MI にて受型相互転座が判明した．今回の場合は流産の回数から精せず．
正常受精の 6 個が分割，1 個のみ胚盤胞（3BA） 不育症と診断することはできず，2 回目の流産時の絨となり凍結した．

毛染色体検査の結果がなければ，いまだに本人の染色29

体異常は見つかっていなかった可能性が高い．夫婦のが非常に限られているため，当院で IVF を行う場合は，染色体検査を勧めるタイミングを再考しなければなら

採卵 1 回あたりの卵子回収個数を増やす，採卵回数を増ないだろう．

やす，胚（胚盤胞）移植の回数を増やすなどの方法しかこの夫婦の今後の不妊治療を提案する場合，過去歴ないと思われる．

（AIH 無効）から考えても IVF を治療の中心としていく

今回のような症例では着床前診断の必要性が高い

ことに異論は無いと思われるが，その際の排卵誘発法

ことを痛感したが，同時に現時点では少なくとも当院などの再考も必要と思われる．

で着床前診断を行うためのハードルが高いことも実

女性が転座保因者の場合は卵巣刺激による反応性が感した．

悪いことも報告されているが 3），本症例の場合は，排卵着床前診断を行うためにはまず IVF の基本的なレベ誘発剤に対する反応性は良く，むしろ OHSS のリスク

ルが高いことが必要である．さらに検体採取のテク回避を考えながらの排卵誘発とならざるを得なかった． ニックの習得，検査そのもののクオリティが高いこと，
胚盤胞到達率がやや低めであるが，同時期の他症例の専門家による遺伝カウンセリングなどが必要となり，胚盤胞到達率は決して悪くないため，培養液をはじめそれらをクリアして初めて精度の高い着床前診断が成とする培養環境などに問題があったとは考えにくい．

立すると考えている．また着床前診断に関する実施施したがって，今後は排卵誘発法として HMG- アンタゴ

設認可を受ける必要もある．着床前診断が世の中に受ニスト法なども考えていく必要があると思われる．

け入れられていくためにはそのような高いハードルもまた，本人の均衡型相互転座に対する対策も避けて通ることはできないと考えられる．着床前診断などを止むを得ないであろう．
今回経験した様な症例に出会う可能性は今後も高い提案していくことも必要となってくると考えられるが， と思われる．当院においても精度の高い着床前診断が当院では現在のところ着床前診断に関する実施施設認可能となる体制作りが早急に必要と思われた．

可を受けていないため，当院で IVF を行う場合は着床前診断などを行うことができない．
また，今回の症例は AIH 妊娠流産が 1 回，胚盤胞移植

参考文献

妊娠の流産が 1 回で合計 2 回の稽留流産歴のみである． 1） 	 清水健司 : 染色体異常．日本人類遺伝学会編，臨床遺伝学テしたがって，反復流産ではあるが習慣流産の定義に当てはまらないため，着床前診断（習慣流産の場合）の症例には該当しない．本人の染色体構成が均衡型相互転座であるため，着床前胚染色体異数性検査の対象にはなりそうである . 4）この症例の場合は，受精卵が正常核型か均衡型相互転座であることが望ましいので，着床
前胚染色体異数性検査の必要度は高いと考えられる．
習慣性流産（均衡型相互転座保因者）の場合は，最終的に生児を得る期待値は着床前診断を行った場合と行わなかった場合で同等である 5）とも言われているが，本症例の場合は過去の治療歴から考えてもむしろ不妊症として管理をする必要があると思われる．
したがって，今後の管理方針を本人と相談する際には，最終的な生児を得る期待値の話はせず，IVF に着床前診断を併用した場合には流産率を低下させる可能性があることや生児を得るまでの期間の短縮が期待できることを話したが，本人は通院の都合なども考慮した上で，着床前診断を併用せずに当院にての IVF を希望した．
この様な場合，流産率の低下や生児を得るまでの期間の短縮が期待できるため着床前診断を行う価値はあると思われるが，現時点では着床前診断ができる施設

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キストノート，pp54-67，診断と治療社，2018．
2） 佐村修：均衡型相互転座．関沢明彦・佐村修・四元淳子編，周産期遺伝カウンセリングマニュアル，pp39-42，中外医学社，
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3） Chen,S.H., Escudero,T., Cekleniak,N.A., Sable, D.B., Garrisi,
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translocation. Fertil. Steril., 83, 1504-1509.
4） 着床前診断に関する見解．公益社団法人日本産科婦人科学会．
ht t p : //w w w. js og . o r. jp/m o du l e s /st at ement / i nde x .
php?content_id=31（2019.09.15）
5） 杉 浦真弓 : 習慣 流 産の 着床 前 診 断． 現代 医学，54: 39-44,
2006．