Oct. 2013

THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

66―5

265（ 23 ）岐阜及び愛知県内で分離された肺炎球菌の各種抗菌薬に対する感受性サーベイランス（2010 年〜2011 年）
富山化学工業株式会社綜合研究所，
富山化学工業株式会社臨床開発室，
東海アンチバイオグラム研究会ワーキンググループ
江藤麻希，水永真吾，福田淑子，

松川洋子

野村伸彦

岐阜県立多治見病院臨床検査部

富山化学工業株式会社綜合研究所

松原茂規
満山順一

松原耳鼻いんこう科医院

富山化学工業株式会社臨床開発室

渡邉邦友
山岡一清

岐阜大学生命科学総合研究支援センター

岐阜医療科学大学衛生技術学科

嫌気性菌研究分野

浅野裕子

末松寛之，澤村治樹

大垣市民病院医療技術部

愛知医科大学病院感染制御部

橋渡彦典

山岸由佳，三鴨廣繁

高山赤十字病院検査部

愛知医科大学臨床感染症学（2013 年 8 月 7 日受付）

2010 年 1 月〜2011 年 3 月にかけて岐阜及び愛知県内の医療関連施設から分離された肺炎球菌（Streptococcus pneumoniae）258 株のペニシリン結合蛋白質（penicillin-binding protein: PBP）遺伝子変異，マクロライド耐性遺伝子の有無，血清型及び各種抗菌薬に対する感受性を調査し，2008 年〜2009 年に分離された S. pneumoniae 377 株のサーベイランス結果と比較した。

2010 年〜2011 年に分離された 258 株中，pbp 遺伝子に変異を有さない genotype
penicillin-susceptible S. pneumoniae（gPSSP）は 11 株（4.3%），pbp1a，pbp2b，pbp2x の
3 つ の 遺 伝 子 の う ち，少 な く と も 1 箇 所 に 変 異 を 有 す る genotype penicillinintermediate S. pneumoniae（gPISP）は 135 株（52.3%）， 3 箇 所 全 て に 変 異 を 有 す る
genotype penicillin-resistant S. pneumoniae（gPRSP）は 112 株（43.4%）で あ り， 2008

266（ 24 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

66―5

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年〜2009 年の結果と比較すると，gPRSP は僅かな減少傾向を示した。マクロライド
耐性遺伝子を有さない株は 17 株（6.6%），mefA のみを有する株は 65 株（25.2%），

ermB のみを有する株は 143 株（55.4%），両方の遺伝子を有する株は 33 株（12.8%）であった。高度耐性に寄与する ermB 保有株の分離頻度は 2008 年〜2009 年の結果と比較をすると経年的な増加傾向を示した。
小児における各血清型の分離頻度は 19F 型（18.2%），6A 型及び 15 型（11.7%）が高
く，7 価肺炎球菌結合型ワクチン（PCV7）によるカバー率は 43.8% であった。成人における分離頻度は型別不能であった 17.9% を除くと，19F 型（12.8%），6A 型，3 型，

11 型（10.3%）が高く，高齢者では，6B 型（23.2%），3 型（13.4%）が高かった。
各 種 抗 菌 薬 の MIC90 は， garenoxacin; 0.0625 ȝg/mL, panipenem; 0.125 ȝg/mL,

LPLSHQHP GRULSHQHP WRVXÀR[DFLQ ȝJP/ FHIGLWRUHQ PHURSHQHP PR[LÀR[DFLQ
0.5 ȝg/mL, amoxicillin, clavulanic acid/amoxicillin, cefteram, cefcapene, ceftriaxone;
1 ȝg/mL, benzylpenicillin, piperacillin, tazobactam/piperacillin, pazufloxacin,
levofloxacin; 2 ȝg/mL, cefdinir, flomoxef; 4 ȝg/mL, minocycline; 16 ȝg/mL,clarithromycin, azithromycin; ＞64 ȝg/mL であり，いずれの薬剤の MIC90 も 2008 年〜
2009 年の結果と同程度であった。
肺炎球菌（Streptococcus pneumoniae）は呼吸器

血清型及び各種抗菌薬に対する薬剤感受性を調査

感染症及び中耳炎や髄膜炎等の主要起因菌であした。また，同地域における過去の調査結果と比る。近年，治療に使用されるȕ- ラクタム系抗菌薬

較を行い，それら動向を検討したので報告する。

及びマクロライド系抗菌薬に対する耐性化が問題

I. 材料及び方法となっており 1〜3），さらに分離頻度は低いものの，キノロン耐性株の出現も報告されていることから 3, 4），薬剤感受性動向に留意する必要がある。 1. 使用菌株
また，2010 年より 2 歳未満の小児に対しても接種2010 年 1 月〜2011 年 3 月に，岐阜大学医学部附

可能な 7 価肺炎球菌結合型ワクチン（PCV7）が導属病院，東海中央病院（岐阜地区），中濃厚生病

入されたことにより，その広範な使用に伴い小児院，松原耳鼻いんこう科医院（中濃地区），岐阜県由来株の各血清型の分離頻度や，薬剤感受性が変

立多治見病院（東濃地区），大垣市民病院（西濃地化すると考えられる。

区），高山赤十字病院（飛騨地区），愛知医科大学

これまで，東海アンチバイオグラム研究会で病 院（愛 知 地 区）
か ら 分 離 さ れ た S. pneumoniae

は，1999 年より S. pneumoniae の分離状況及び各258 株を用いた。各施設でマイクロバンクに一時

種抗菌薬に対する薬剤感受性について報告してき保存した菌株は，5% 緬羊脱繊維血液を添加した

た

5〜7）

。今回，2010 年〜2011 年に岐阜及び愛知県

Mueller Hinton agar（ Becton, Dickin son and内で分離された S. pneumoniae について分離状況， Company）上で純粋培養後，同寒天平板上で増菌

ȕ- ラクタム系抗菌薬に対する耐性に寄与するペニ

し，3 代継代以内の単一コロニーを試験に使用しシ リ ン 結 合 蛋 白（penicillin binding protein; PBP） た。なお，これらの試験菌株については日本臨床をコードする pbp 遺伝子変異の有無，マクロライ

微生物学会 “ 疫学研究に関する倫理指針 ”8）を遵守

ド耐性に寄与する mefA 及び ermB 遺伝子の有無， し，連結不可能匿名化された情報のみを用い，菌Oct. 2013

THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

株のみを試験に使用した。

66―5267（ 25 ）PR[LÀR[DFLQ（MFLX）OHYRÀR[DFLQ（LVFX）を，その 他 の 系 統 と し て clarithromycin（CAM）,

2. ペニシリン結合蛋白質遺伝子及びマクロライ

azithromycin（AZM）及び minocycline（MINO）をド耐性遺伝子の検討使用した。なお，いずれの薬剤も濃度は活性本体

pbp 遺伝子変異及びマクロライド耐性遺伝子の値として示した。

（mefA, ermB）の検出には，ペニシリン耐性肺炎球

Minimum inhibitory concentration（ MIC ）は，菌（PRSP）遺伝子検出試薬 ver. 2.0（湧永製薬）をオーダーメイドのドライプレート（栄研化学）
を用い，PCR 法にて行った。pbp 遺伝子変異につい

用 い て Clinical and Laboratory Standards Instituteて は，生 方 ら の 基 準 に 従 い， pbp1a， pbp2b， （CLSI）10）の方法を参考に行った。
9）

pbp2x の 3 つの遺伝子のうち，いずれの遺伝子に

なお，1999 年，2004 年及び 2008 年〜2009 年のも 変 異 を 有 さ な い 株 を genotype penicillin-

薬剤感受性は 100 ȝg/mL 基準で測定されているた

susceptible S. pneumoniae（gPSSP），少 な く と もめ 5〜7），本検討の結果と比較を行う際は，それら

1 つ 変 異 を 有 す る 株 を genotype penicillin-を 1 ȝg/mL 基準に相当する濃度に変換した。変換intermediate S. pneumoniae（gPISP），3 つ全てに変方法として 100 ȝg/mL 基準での MIC が 100 ȝg/mL

異 を 有 す る 株 を genotype penicillin-resistantの場合，1 ȝg/mL 基準では 128 ȝg/mL とし，高い濃S. pneumoniae（gPRSP）とした。

度側へ変換した。

3. 血清型別試験

5. キノロン耐性決定領域（QRDR）のアミノ酸変

血清型は，肺炎球菌莢膜型別用免疫血清 ｢生研｣（デンカ生研）を用いて決定した。血清型が 6 型，

異部位の特定LVFX 耐性株について gyrA，gyrB，parC 及び18 型， 19 型， 23 型 及 び 9 型 の サ ブ タ イ プ は， parE のキノロン耐性決定領域（QRDR）におけるpneumococcal antisera（Statens serum institut） を

塩基配列を以下に示すプライマー 11）を用いて用いて莢膜膨化試験を実施し決定した。

direct sequence 法 12）により決定し，GyrA, GyrB,
ParC 及 び ParE の ア ミ ノ 酸 変 異 部 位 を 特 定

4. 薬剤感受性測定し た。プ ラ イ マ ー は gyrA に 対 し て VGA3（5ƍ-

ペ ニ シ リ ン 系 抗 菌 薬 と し て benzylpenicillin

C C G T C G C AT T C T T TA C G - 3 ƍ ）, V G A 4 （ 5 ƍ -（ PCG ）, amoxicillin（ AMPC ）, clavulanic acid/

AGTTGCTCCATTAACCA-3ƍ）, gyrB に 対 し て

amoxicillin（ 1:14; CVA/AMPC ）, piperacillin

H4025（5ƍ-TTCTCCGATTTCCTCATG-3ƍ）, H4026（PIPC）, tazobactam/piperacillin（TAZ/PIPC; TAZ （5ƍ-AGAAGGGTACGAATGTGG-3ƍ）, parC に対

4 ȝg/mL 固 定）を，セ フ ェ ム 系 抗 菌 薬 と し て,し て M0363（5ƍ-TGGGTTGAAGCCGGTTCA-3ƍ）cefteram（CFTM）, cefditoren（CDTR）, cefcapene

M4271（5ƍ-TGCTGGCAAGACCGTTGG-3ƍ）, parE

（CFPN）, cefdinir（CFDN）, ceftriaxone（CTRX）,

に対して S6398（5ƍ-AAGGCGCGTGATGAGAGC-

ÀRPR[HI（FMOX）を，カルバペネム系抗菌薬とし

3ƍ）, S6399（5ƍ-TCTGCTCCAACACCCGCA-3ƍ）を, m e r o p e n e m（ M E P M ）,て i m i p e n e m（ I P M ）用いた。

panipenem（PAPM）, doripenem（DRPM）を，キ ノ
ロ ン 系 抗 菌 薬 と し て garenoxacin（GRNX）,

tosufloxacin（ TFLX ）, pazufloxacin（ PZFX ）,268（ 26 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

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2. pbp 遺伝子変異

II. 結果分離年代別における pbp 遺伝子変異株の分離頻度を Fig. 1 に示す。2010 年〜2011 年に分離された

1. 被験菌株の施設構成と検体の背景

S. pneumoniae 258 株 の う ち， gPSSP は 11 株

S. pneumoniae 258 株の分離施設別内訳は，岐阜 （4.3%），gPISP は 135 株（52.3%），gPRSP は 112
大学医学部附属病院 25 株，東海中央病院 11 株， 株（43.4%）であった。2004 年及び 2008 年〜2009
中濃厚生病院 25 株，松原耳鼻いんこう科医院 50

年の gPSSP はそれぞれ 5.6%6）及び 6.1%7）であり，

株，岐阜県立多治見病院 49 株，大垣市民病院 49

本検討の結果と同等程度であった。また，gPRSP

株，高山赤十字病院 25 株，愛知医科大学病院 24の分離頻度はそれぞれ 50.6% 及び 48.0% であり，株であった。

本検討の結果と比較し経年的に減少傾向を示し

材料別分離株数は，鼻腔 101 株（39.1%），喀痰

た。なお，pbp1a，pbp2b, pbp2x に変異を有する株

87 株（33.7%），咽 頭 33 株（12.8%），血 液 13 株の分離頻度はそれぞれ 57.4%，49.6%，95.7％で（5.0%），耳漏 8 株（3.1%），その他（膿，膿瘍，髄あった。

16 株（6.2%）であっ
液，呼吸器系，子宮及び膣）患者年代別の pbp 遺伝子変異株の分離頻度においては，小児由来株からの gPRSP の分離頻度はた。
本報では患者年齢別に 0 歳〜15 歳を小児，16

46.7% と最も高く，次いで高齢者由来株（42.7%），

歳〜64 歳を成人，65 歳以上を高齢者として分類

成人由来株（33.3%）であった。なお，小児分離株

し，患 者 年 代 別 の 分 離 株 数 は そ れ ぞ れ 137 株

137 株のうち 0〜2 歳の小児由来株 61 株の gPRSP（53.1%）， 39 株（15.1%）， 82 株（31.8%）で あ っの分離頻度は 55.7% であった。gPSSP は成人由来

た。

株からの分離頻度が最も高く（12.8%），次いで高齢者由来株（3.7%），小児由来株（2.2%）であっ

Fig. 1. 各分離年代別の pbp 遺伝子変異株の分離頻度

Oct. 2013

THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

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269（ 27 ）る ermB 保有株の 2004 年及び 2008 年〜2009 年のた。
分離材料別の pbp 遺伝子変異株の分離頻度にお分離頻度は 57.5%6）及び 55.9%7）であり，本検討

いては，鼻腔分離株からの gPRSP の分離頻度はの結果（68.2%）と比較をすると経年的な増加傾向

48.5% と最も高く，次いで喀痰（46.0%），耳漏及を示した。

びその他（37.5%），血液（30.8%），咽頭（30.3%）

患者年代別のマクロライド耐性遺伝子保有株ので あ っ た。血 液 か ら 分 離 さ れ た 株 は い ず れ も分離頻度においては，ermB を保有する株は，小児

gPISP 若しくは gPRSP であった。

由来株，成人由来株，高齢者由来株でそれぞれ

地域別の pbp 遺伝子変異株の分離頻度において66.4%，69.2%，70.7% であり，年代間で大きな差は，gPRSP の分離頻度は岐阜地区が 61.1% と最もは認められなかった。マクロライド耐性遺伝子を高 く，次 い で 中 濃 地 区（49.3%），西 濃 地 区

保有していなかった株は小児由来株及び高齢者由（46.9%），愛知地区（37.5%），東濃地区（30.6%）， 来株でそれぞれ 7.3% 及び 8.5% であり，成人由来
飛騨地区（24.0%）であった。

株からは全て耐性遺伝子が検出された。
分離材料別のマクロライド耐性遺伝子保有株の3. マクロライド耐性遺伝子

分離頻度においては，ermB を保有する株は，耳漏分離年代別におけるマクロライド耐性遺伝子保で 87.5% と最も高く，次いで喀痰（75.9%），その有株の分離頻度を Fig. 2 に示す。2010 年〜2011 年

他（68.8%），鼻腔（66.3%），咽頭（54.5%），血液に分離された S. pneumoniae 258 株のうち mefA 及 （53.8%）であった。
び ermB のいずれも有さない株は 17 株（6.6%），

地域別のマクロライド耐性遺伝子保有株の分離

mefA のみを有する株は 65 株（25.2%），ermB のみ

頻度においては，ermB を保有する株の分離頻度を有する株は 143 株（55.4%），両遺伝子を有するはいずれの地域でも 60% 以上と高く，特に西濃地

株は 33 株（12.8%）であった。高度耐性に寄与す

区においては 77.5% と最も高かった。2008 年〜

Fig. 2. 各分離年代別のマクロライド耐性遺伝子保有株の分離頻度

270（ 28 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

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Oct. 20132009 年の結果 7）と比較すると，ermB を保有する

5.0%），14 型（13 株；5.0%），22 型（11 株；4.3%），

株の分離頻度は，岐阜地区では 52.2% から 75.0%11 型（9 株；3.5%），35 型（7 株；2.7%），9 V 型及に，中濃地区では 62.0% から 65.3% に，西濃地区

び 23A 型（4 株；1.6%），4 型，18C 型，20 型，31では 60.4% から 77.5% に，東濃地区では 50.8% か型，33 型，34 型（1 株；0.4%）であり，いずれにもら 61.2% に，飛騨地区では 54.9% から 64.0% に， 分 類 さ れ な か っ た 株（型 別 不 能；NT）は 35 株
愛知地区では 50.0% から 66.7% に上昇していた。

（13.6%）であった。なお，血液由来 13 株では，6B

マクロライド耐性遺伝子を保有しない 17 株の型が 5 株，22 型が 2 株，6A 型，15 型，23F 型が 1

うち gPSSP の分離率は 29.4% であり，gPRSP は検株，NT が 3 株であり，髄液由来 1 株は 22 型であっ

出されなかった。一方，mefA 及び ermB 両遺伝子た。

を保有する 33 株においては gPRSP が 81.8% を占

gPRSP の分離頻度は各血清型間で異なり，19F

め，この成績は全株中の分離頻度と比較し高頻度型，6A 型及び 23F 型においては，明らかに他の血であった。なお，mefA 及び ermB 両遺伝子を保有

清型からの分離頻度より高く，それぞれ 97.1%，

す る gPRSP か ら キ ノ ロ ン 耐 性 菌 は 検 出 さ れ な

92.0% 及び 85.0% であった。なお，ermB 遺伝子保かった。

有率は，14 型，6A 型及び 15 型で 100%，23F 型及び 3 型で 95.0% 及び 91.3% と高く，19F で 23.5%，

4. 血清型

22 型で 36.4% と比較的低かった。

各血清型の分離分布並びに各血清型別の患者年代別の血清型の分離頻度を Table 1 に示gPSSP, gPISP, gPRSP の分離分布を Fig. 3 に示す。 す。小児においては 19F 型が最も高く（18.2%），
S. pneumoniae 258 株のうち血清亜型の分離頻度

次いで 6A 型及び 15 型（11.7%）であった。PCV7は 6B 型（36 株；14.0%）が最も高く，以下分離率

及び 13 価肺炎球菌結合型ワクチン（PCV13）によの高い順に 19F 型（34 株；13.2%），6A 型（25 株；

るカバー率はそれぞれ 43.8% 及び 67.2% であっ9.7%）， 3 型 （23 株；8.9%）， 23F 型 （20 株；た。成人においては，型別不能の 17.9% を除くと，7.8%）， 15 型 （18 株；7.0%）， 19A 型 （13 株；

19F 型（12.8%）が最も高く，次いで 6A 型，3 型，

Fig. 3. 各血清型別の gPSSP，gPISP，gPRSP の分離分布

THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

Table 1. 各患者年代別における血清型の分離頻度

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271（ 29 ）272（ 30 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

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11 型（10.3%）であった。高齢者においては小児及認められなかった。CLSI が定める基準 13）を参考

び成人と異なり，6B 型が 23.2% と最も高く，次いにすると LVFX 耐性株は 4 株（1.6%）検出された。

で 3 型（13.4%）であった。

これら LVFX 耐性株の血清型はそれぞれ 3 型，6B
型，22 型，34 型であった。

5. 薬剤感受性マ ク ロ ラ イ ド 系 抗 菌 薬 で あ る CAM, AZM のS. pneumoniae 258 株及びそれら pbp 遺伝子変異

MIC90 は，いずれも＞64 ȝg/mL であった。テトラ

別（gPSSP, gPISP, gPRSP）の薬剤感受性分布及び

サ イ ク リ ン 系 抗 菌 薬 で あ る MINO の MIC90 はMIC50, MIC90 を Table 2〜5 に示す。

16 ȝg/mL であった（Table 5）。

CLSI が定める髄膜炎以外の感染症に対する注
射用 PCG の感受性基準

13）

小児，成人並びに高齢者由来別に分類した際のを参考にすると，全測

各 薬 剤 の MIC range, MIC50 及 び MIC90 を Table 6

定株中，PCG に対して中程度耐性を示す株が 1 株に示す。いずれの薬剤においても MIC90 に患者別

（0.4%）認められたものの，耐性株は検出されず， 年代の差は認められなかったが，PCG, AMPC,
感性率は 99.6% と高かった。

CVA/AMPC, PIPC 及び TAZ/PIPC では，小児由来

ペ ニ シリン 系 抗 菌 薬 で は，AMPC 及 び CVA/

株に対する MIC50 が成人由来株に比べて 2〜8 倍

AMPC の MIC90 が 1 ȝg/mL と 低 く，次 い で PCG,高かった。他系統の薬剤においては MIC50 にも差PIPC 及び TAZ/PIPC の 2 ȝg/mL であった（Table 2）。 は認められなかったものの，セフェム系抗菌薬に
PCG の MIC50 及び MIC90 は gPSSP では 0.0156 ȝg/

対する小児由来株及び高齢者由来株の感受性は成mL 及び 0.0313 ȝg/mL, gPISP では 0.0625 ȝg/mL 及人由来株に比べて高濃度側に分布した。一方，キび 0.5 ȝg/mL, gPRSP で は 1 ȝg/mL 及 び 2 ȝg/mL でノロン系抗菌薬に対する成人及び高齢者由来株のあり，pbp 遺伝子変異に伴う抗菌活性の低下が認

感受性は小児由来株に比べて高濃度側に分布し

め ら れ た。 gPRSP に 対 す る ペ ニ シ リ ン 系 薬 のた。

MIC90 は gPSSP の 32〜64 倍であった。
セ フ ェ ム 系 抗 菌 薬 で は， CDTR の MIC90 が6. キノロン耐性決定領域（QRDR）のアミノ酸変0.5 ȝg/mL と最も低く，次いで CFTM, CTRX 及び異部位の特定CFPN の 1 ȝg/mL, CFDN 及び FMOX の 4 ȝg/mL で今回分離された LVFX 耐性 4 株について QRDR

あった（Table 3）。gPRSP に対するセフェム系薬を調査した結果，ParC（S79F）に変異を有する株の MIC90 は，gPSSP の 16〜64 倍であった。

は 2 株， GyrA（S81F）に 3 株， ParE（I460 V）に 3

カルバペネム系抗菌薬では，PAPM の MIC90 が株， ParE（D435N）に 1 株， GyrB（E474K）に 1 株

0.125 ȝg/mL と最も低く，次いで IPM 及び DRPM認められた。ParC 及び GyrA の両アミノ酸に変異の 0.25 ȝg/mL, MEPM の 0.5 ȝg/mL であった（Tableを有する株は 2 株であった。

4）。gPRSP に 対 す る カ ル バ ペ ネ ム 系 抗 菌 薬 のMIC90 は，gPSSP の 8〜64 倍であった。

III. 考察

キ ノ ロ ン 系 抗 菌 薬 で は， GRNX の MIC90 が0.0625 ȝg/mL と最も低く，次いで TFLX の 0.25 ȝg/

我々はこれまでに岐阜及び愛知県内で分離され

mL, MFLX の 0.5 ȝg/mL, PZFX 及 び LVFX の 2 ȝg/た各種病原細菌についてサーベイランスを実施しmL であり（Table 5），いずれの薬剤においても， て お り 5〜7, 14〜17），特 に 耐 性 化 が 懸 念 さ れ る S.
gPSSP, gPISP 及 び gPRSP に 対 す る MIC90 に 差 は

pneumoniae に関しては 1999 年よりこれまで継続

Table 2. 各種抗菌薬に対する Streptococcus pneumoniae 258 株の感受性分布及び MIC50, MIC90（ペニシリン系抗菌薬）

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273（ 31 ）Table 3. 各種抗菌薬に対する Streptococcus pneumoniae 258 株の感受性分布及び MIC50, MIC90（セフェム系抗菌薬）

274（ 32 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS
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Oct. 2013Table 4. 各種抗菌薬に対する Streptococcus pneumoniae 258 株の感受性分布及び MIC50, MIC90（カルバペネム系抗菌薬）

Oct. 2013
THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS
66―5275（ 33 ）Table 5. 各種抗菌薬に対する Streptococcus pneumoniae 258 株の感受性分布及び MIC50, MIC90（キノロン系及びその他系統抗菌薬）

276（ 34 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS
66―5
Oct. 2013Table 6. 各患者年代における各種抗菌薬の Streptococcus pneumoniae 258 株に対する MIC range 及び MIC50, MIC90
Oct. 2013
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66―5
277（ 35 ）278（ 36 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

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的に行ってきた 5〜7）。今回，2010 年〜2011 年に同かった。この要因の一つとして，gPRSP の分離頻地域で分離された S. pneumoniae 258 株の pbp 遺度が高い 0〜2 歳の小児由来株が今回調査の小児

伝子変異，マクロライド耐性遺伝子の有無，血清由来株の約半数を占めたことが要因の一つとして型及び各種抗菌薬に対する感受性を調査し，過去考えられる。他サーベイランスの報告においての成績と比較した。今回の PCG の成績においても，0〜2 歳の小児由来株においては，3〜15 歳のは，2012 年に発行された CLSI が定める髄膜炎以

小児由来株と比較して PCG の MIC が 2 ȝg/mL 以外の感染症に対する PCG の感受性基準

13）

を参考

上である株の分離頻度が高いことが報告されていにすると，耐性株は検出されず，感性率は 99.6%

る 20）。また，この遺伝子的背景に伴い，小児由来と高かった。

株のペニシリン系抗菌薬及びセフェム系抗菌薬に2008 年以前に発行された CLSI が定める PCG
の耐性基準

18）

対する感受性が成人由来株より低下したと考えら

は，本検討にて用いた基準と異なれる。各地域における gPRSP の分離頻度は 2008

り，過去のサーベイランスとの比較のため，今回年〜2009 年のサーベイランスの結果 7）と比較し，の成績を 2008 年以前の耐性基準を参考に感性率

岐阜地区では増加傾向，東濃及び飛騨地区では減を算出した。1999 年，2004 年，2008 年〜2009 年， 少傾向が認められた。地域全体としての gPRSP の2010 年〜2011 年 の 感 性 率 は そ れ ぞ れ 36.7%
5）6）（ 4 7 / 1 2 8 株 ） ， 3 0 . 0 %（4 8 / 1 6 0 株 ） ， 3 7 . 9 %7）

分離頻度は減少傾向が認められたが，各地域で分離頻度及び経年変化に違いが認められることか（143/377 株） ，39.1%（101/258 株）であった。2004

ら，今後の耐性化動向を知るためにも地域限定的

年では一時，感性率の低下が認められたが，2008

なサーベイランスを実施することは必要であると

年〜2009 年以降において PCG に対する感性率の考えられる。
マクロライド系抗菌薬である CAM 若しくは上昇が認められた。

ȕ- ラクタム系抗菌薬の耐性機序は pbp 遺伝子がAZM の高度耐性に寄与する ermB を保有する株のコードする PBP 酵素が変異し作用点に結合でき分離頻度は各分離年代間で大きな差は認められな

なくなることが関与しており，ペニシリン系抗菌

かったが，小児及び高齢者と異なり，全ての成人薬に対する感受性は pbp2b に，経口セフェム系抗由来株は ermB 又は mefA を保有していた。成人由菌薬に対する感受性は pbp2x に変異を有する株で来株の CAM 及び AZM に対する感受性は小児及19）。今回の成績におび高齢者由来株より低く，1 ȝg/mL 以上であり，

いて pbp2b に変異を有する株の分離頻度は 49.6%

遺伝子的な背景と一致するものと考えられた。

低下することが知られているであり，2004 年の 59.4% に比べて低下していた

ermB 保有株の分離状況はいずれの地区においてことから，PCG に対する感受性の回復傾向はこのも 2008 年〜2009 年の結果と比較して増加してお遺伝子的な背景と一致するものと考えられた。一り 7），この遺伝子的背景と一致して CAM の MIC50

方で pbp2x に変異を有する株の分離頻度は今回及も 2 ȝg/mL から＞64 ȝg/mL に上昇した。全国的なび 2004 年の成績のいずれも約 95% であり経年変

サーベイランスにおいても S. pneumoniae のマク化は認められなかった。今回測定した経口セフェ

ロライド系抗菌薬に対する耐性化については増加

ム系抗菌薬のうち CLSI により感受性基準が定め傾向が報告されている 3）。今回の成績においてはられている薬剤は CFDN のみであり 13），その感性

mefA 及 び ermB の 両 遺 伝 子 を 保 有 す る 株 は，率に変動は認められなかった。小児由来株からのgPRSP の分離頻度も高かったため，今後，多剤耐

gPRSP の 分 離 頻 度 は 成 人 由 来 株 と 比 較 し て 高性株の分離動向に注視すべきと考えられた。

6）

Oct. 2013

THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

66―5

279（ 37 ）小児から分離される血清型は，19F 型，6A 型， 異を有していた。LVFX 耐性株は高齢者からの検15 型及び 6B 型が多く，19F 及び 6A 型においては出率が高いことが報告されており 27），今回分離さ

gPRSP の占める割合が他の血清型と比べて明られた LVFX 耐性株についても 4 株中 3 株が高齢者かに高く，23F 型，6A 型及び 15 型は ermB 保有率

由来であった。小児からのキノロン耐性株は検出も高いことより小児においては経口抗菌剤を用いされなかったが，2010 年に小児用キノロン系抗菌

た治療に難渋する恐れがある。これらの血清型を薬として TFLX 細粒が上市され，gPRSP の分離率カバーできるワクチンの有用性が期待されるが， の高い小児に対してはキノロン系抗菌薬の使用機
その広範な使用に伴い分離される血清型の変動が会は増加していることから，高齢者だけでなく小報告されている。小児を対象に実施された全国的児に対するキノロン耐性菌の動向にも注意が必要

なサーベイランスの結果では，PCV7 でカバーさと考えられた。

れる血清型の分離頻度を PCV7 導入前後の年代で以上，2010 年〜2011 年に岐阜及び愛知県内で比較した結果，導入後の年代においてはカバーさ分離された肺炎球菌の各種抗菌薬に対する感受性れる血清型の分離頻度が 18C 型を除いて低い傾向

サーベイランスを行った結果，gPRSP の分離頻度

で あ っ た 21）。こ の 様 に ワ ク チ ン の 使 用 に よ りの減少並びに PCG に対する感性率は経年的に回gPRSP の分離頻度の減少が期待される一方，国外復傾向を示したが，マクロライド系抗菌薬の耐性においては，PCV7 導入後，ペニシリン及びマク化は依然進行していた。今後，ワクチンや使用薬

ロライド耐性菌検出率は一時的に減少したが， 剤の変遷により薬剤に対する耐性化の動向は変化

PCV7 によってカバーされない 19A 型のペニシリすることが予想され，それらを把握するためにもン及びマクロライド低感受性株が増加したことが継続的なサーベイランスが必要であろう。

報告されている22〜25）。本検討では 19A 型における gPRSP の割合は少なかったものの，PCV7 の今

利益相反自己申告：著者

江藤麻希，水永真後の広範な使用により 19A 型の増加と耐性遺伝

吾，福田淑子，野村伸彦，満山順一は富山化学工

子の保有状況に変化が懸念されるため，今後も薬業株式会社の社員であり，本研究は富山化学工業

剤感受性と血清型を含めた調査が必要であろう。

株式会社

綜合研究所で行われたものである。

今回のサーベイランスにおいて LVFX 耐性株は

4 株（1.6%）分離され，その分離頻度は全国的なサーベイランスの中等度耐性を含めた成績（1.5%）3）と同程度であった。キノロン系抗菌薬の耐 性 は DNA ジ ャ イ レ ー ス（GyrA 及 び GyrB）及び DNA トポイソメラーゼ IV（ParC 及び ParE）のキノロン耐性決定領域（QRDR）におけるアミノ酸変異が知られており，特に ParC 単独変異株と比べて ParC 並びに GyrA に変異を有する株は感受性が低下することが報告されている 26）。LVFX 耐性株の MIC は 2 株で 8 ȝg/mL，2 株で 16 ȝg/mL であり，MIC が 16 ȝg/mL であった 2 株はいずれもParC（S79F）及 び GyrA（S81F）両 ア ミ ノ 酸 に 変

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THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

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Sensitivity surveillance of Streptococcus pneumoniae
isolates for several antibacterial agentsin Gifu and Aichi prefecture（2010-2011）
Research Laboratories, Toyama Chemical Co., Ltd.,
Development Division, Toyama Chemical Co., Ltd.,
Working Group of Tokai Anti-biogram Study Group

MAKI ETO, SHINGO MIZUNAGA,YOSHIKO FUKUDA and NOBUHIKO NOMURA
Research Laboratories,
Toyama Chemical Co., Ltd.
JUNICHI MITSUYAMA
Development Division,
Toyama Chemical Co., Ltd.

KAZUKIYO YAMAOKA
Gifu University of Medical Science
YUKO ASANO
Department of Clinical Laboratory
Medicine, Ogaki Municipal Hospital
HIKONORI HASHIDO
Clinical Laboratories,
Takayama Red Cross Hospital

YOKO MATSUKAWA
Clinical Laboratories,
Gifu Prefectural Tajimi Hospital
SHIGENORI MATSUBARA
Matsubara Otorhinolaryngology Clinic
KUNITOMO WATANABE
Division of Anaerobe Research, Life Science
Research Center, Gifu University
HIROYUKI SUEMATSU andHARUKI SAWAMURA
Department of Infection Control andPrevention, Aichi Medical University Hospital
YUKA YAMAGISHI and
HIROSHIGE MIKAMO
Department of Clinical Infectious Diseases,
Aichi Medical University

We investigated genotype of penicillin-binding protein（PBP）genes and macrolide resistantgenes, the serotypes and the susceptibility to antibacterial agents against 258 strains ofStreptococcus pneumoniae isolated from medical facilities in Gifu and Aichi prefectures between

282（ 40 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

66―5

Oct. 2013

January 2010 and March 2011. These results were compared with those against 377 strains of S.
pneumoniae isolated in 2008-2009.
The number of genotype penicillin-susceptible S. pneumoniae（gPSSP）with 3 normal PBP
genes, genotype penicillin-intermediate S. pneumoniae（gPISP）with 1 or 2 normal PBP genes
and genotype penicillin-resistant S. pneumoniae（gPRSP）with 3 abnormal genes was 11（4.3%）,
135（52.3%）and 112（43.4%）strains, respectively. The isolates with no macrolide-resistant gene,
only mefA, only ermB, and both mefA and ermB were 17（6.6%）, 65（25.2%）, 143（55.4%）and33（12.8%）.
The prevalent pneumococcal serotypes isolated from children were type 19F（18.2%）,
following by type 6A and 15（11.7%）. The potential coverage of pneumococcal conjugate
vaccine（PCV7）was 43.8%. The prevalent pneumococcal serotypes isolated from adults werehigh in order of type 19F（12.8%）, type 6A, 3 and 11（10.3%）, excepting non-typable strains（17.9%）, and from elderly persons were type 6B（23.2%）and type 3（13.4%）.
The MIC90 of each antibacterial agents was as follows; 0.0625 ȝg/mL for garenoxacin,0.125 ȝg/mL for panipenem, 0.25 ȝJP/ IRU LPLSHQHP GRULSHQHP WRVXÀR[DFLQ ȝg/mL forcefditoren, meropenem, moxifloxacin, 1 ȝg/mL for amoxicillin, clavulanic acid/amoxicillin,
cefteram, cefcapene, ceftriaxone, 2 ȝg/mL for benzylpenicillin, piperacillin, tazobactam/
piperacillin, pazufloxacin, levofloxacin, 4 ȝg/mL for cefdinir, flomoxef, 16 ȝg/mL for
minocycline, ＞64 ȝg/mL for clarithromycin, azithromycin and these MIC90s were about the sameas those in 2008-2009.