藻 類 第11巻 第 1号 昭 和 28年 4月

30には agar.agar"のほか almaciga"，"gumcopal"， seaweed"とも書かれ，価格は1.80ペソ /kg と記しである。標本の解剖図を示しておく (Figs.6‑14)。
鈴木達三氏からは，今年 4月 2日付の手紙で次の乙とを知らせて頂いた。
a.Santana; b.LingayenBay; c.
シマテングサの主産地は Jレソン島各地 (Sambareso; d.Carmarinesnorte(Fig.15)で，採取は人力により年中行なわれ，一例をあげると 38人が 7時から 12時までと13時から 16時まで働いて 1，814kgの採取量であった。 lカ月 40 トンの産額がある。晒法は日光によると 1週間を要するが塩素によると 1日で足りしかも悪影響はない。圏内
価格は輸出より高く 2.
80ぺソ jkg，輸出は 550 ドル /tonである。輸出先は日本とデンマ

Fクで，用途は食用，寒天等である。

Summarv
Inthi
spaperaregiv
enagener
alaccountoftheagarophytesinIndonesi
aac・cor
dingchie/lytotherepor
tbyEISSES(1952)anda
ninformationaboutthebleachedspecimensofagar.
agar"fromManilawhichhav
eprov
edtobe Gelidiellaacerosa(Figs.1‑2，6‑14).
文 献

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Science100

海藻の細胞学的研究法(I)*西林長朗州・猪野俊平州
T.NISHIBAYASHIandS.INOH: Methodsi
ncytologicalstudiesofm
arinealgae(1)種子植物の核の構造，特に染色体の研究は多くの研究者によって精査さ*岡山大学理学部生物学教室積物形態学研究業績 No.91.
玉野臨海実験所業績 No.
97.
料岡山大学理学部生物学教室‑30ー西林・猪野: 海話題の細胞学的研究法 (1)31

れているが，海藻類になるとそのような研究は非常に少なし現在までに染色体数の判明したものは，その一郊に過ぎない。近年，海藻の生活史を究明するのに，細胞学的な裏付けの必要な乙とが力説されて，諸外国でもいろいろな方法を用いて研究している。乙のような現況にあるので，海藻類の細胞学的な研究方法を，従来用いられてきた方法から最近の方法にいたるまで，筆者らの経験もおり交えて記していくととにする。
海藻類をとり扱う場合，その生育環境が海水であるという乙とを常に心得ていなければならない。固定液の作製においても，固定後の処理のときも浸透圧の変化を熟慮した方法を選ばなければならない。また粘液などの細胞間物質を多量に含んでいるので，固定時間も材料によって変える必要がある。
アルコールやクロロホルムに浸すと材料は固くなりやすいので，乙れらの薬品で処理.する時にも工夫を要する。海藻類の核や染色体は一般に小さいのでl注意して行なわねばならない。プレパプレパラートの作成にあたっては特ζ
こ染色・ラートの作成は固定後，パラフィンに埋没して切片を作り，その後 l脱水してカナダパルサムで封じた永久プレパラートとするのが最もよい方法であるが，酢酸カ戸ミンやフオイ Jレグン染色による押しつぶし法も近年盛んに用いられて，かなりの成果をあげている。パラフィン切片法と押しつぶし法とに分けてその方法を示し，まず固定液の種類から述べていく。

(A) 固定液の種類
藻類の細胞内の構造や核分裂などを観察するには，生の材料をそのまま検鏡したのでは詳しく細かい構造を見る ζ とができないので，どうしても材C使ってみ料を固定し，染色しなければならない。固定液として，どの藻類 Iても，うまく固定できるというようなものは知られていないので，研究者自身が材料に適した固定液を選び出さなければならない。
褐藻類のなかでも最も体制の簡単な E
ctocarpusなどでは， 70%アルコールまたは 10%ホルマリンで固定し，ハイデンハイン氏鉄明書撃ヘマトキシリンで染色を行なえば核の構造が観察される。Sc
HUSSNIGandKOTHBAUER(1934)は，

ζ の方法でEctocarpussiliculosusの染色体の観察ζ
l成功している。しかし，休の構造が少し複雑な藻類ではクロム酸，ピクリン酸，酢酸，オスミック酸，尿素，ホ Jレマリン，アルコー Jレなどの種々の薬品を適当な割合で混合した液で固定しなければならない。
今までに用いられてきた固定液を，年代を追って列挙すると次のような‑31ー

滋類第11巻 第 1号 昭 和 38年 4月

担ものがある。
(1) Flemming'sstrongersolution
1% chromicacid2% osmica
cidGlacialaceticacid45cc12cc3ccとの液は STRASBURGER(1897)が F
ucusI
乙用いてよい結果を得たもので，海水で適当な濃度に稀釈して用いるとよい。国枝氏 (1928)は，との液を 1‑4倍量の海水で薄めて S
argassumhorneriの生卵器および造精器を固定している。 KYLIN(1918) は稀釈しないで Chordafilumを回定している。またEnteromo
ゆ halinzaの固定 lとも用いられている。
(2) Strasburger(1897)使用の液

1g
1cc
100cc

ChromicacidG
lacialaceticacid
Seawater

Fucus，Hesperophycus，Eiseniaarboreaなどの固定 lとよい。
(3) Simons(1906)使用の液

1% chromicacid
1% aceticacid
Seawater25cc
10cc
65cc

Sargassumの固定ζl適す。
(4) Flemming'sweakers
olution(海水で調製)
1% chromicacid%glacia
laceticacid
1
Seawater
1% osmicacid25cc
10cc
55cc
10cc

Dict
yopterisdiv
m'icataの四分胞子の発芽体の固定 lとよい。 3‑4時間の固定で Ulvapertusa もよく固定される。乙の液のオスミック酸の量をいろいろに変えて，山内繁雄氏 (1909)は Fucusの立派な分裂像を得ている。
(5) Nienburg(1910)使用の液50%chromica
cid98% aceticacidSeawater0.
5cc1cc
100cc

Cystoseira，Sargassumの固定 lと用いる。
‑ 32‑

西林・猪野:海藻の細胞学的研究法 (1)(6) Flemming'sweakers
olution1% chromica
cid1% glacialaceticacid
Water
1% osmicacid

招25cc10cc55cc10ccKYLIN(1918)が Chordafilumの固定 ζl用いた液である。

(7) I
shikawa'sfluid2%osmicacid2%aceticacid11

石川光春氏 (1921)が POゅhyrateneraの固定 ζl 用いた液で，固定時間は1β‑1時間である。
(8) C
hamberlain'sfluid
ChromicacidGlacialaceticacidSeawater

1g
0.
4cc400ccDictyotaなど体構造のやや複雑な褐藻の固定 ζl適し，組織細胞の観察であれば乙の液を用いるのが安価で，しかも取り扱いが簡単である。固定時間は 24‑48時間で比較的長い。
(9) Flemming'sstrongersolution(海水で調製)
1% chromica
cid2%osmica
cidGlacialaceticacid45cc
12cc3cc

固定時聞は 6時間。 Dictyopterisdiv
aricataの四分胞子護および Fucus
l成功している。 CARTER(1927)は P
adinapavoniaevanescensの生卵器の固定 ζの四分胞子褒をきれいに固定している。
(10) F
lemming'sweakersolution(50%の海水で調製)
1% chromicacid25cc
1%glacialaceticacid
10cc50% seawater
55cc
1% osmica
cid
10cc

MYERS(1928)が E
gregiamenziesii1[.試みた液である。
(11) Tahar
a'sf
luid

Stoc
ksolu
tio
nofchromica
cid*Seawater
2%osmica
cidGlacialaceticacid70cc
30cc5cc2.
5cc* Stocksolutiono
fchromicacid=Seawater98cc+saturatedwatersolutionofchromicacid2cc.
‑ 33ー

組

藻 類 第1
1巻 第 1号 昭 和 3
8年 4月

固定時聞は 6‑8時間で， Coccophor
alangsdo
ヴ誌の卵母細胞の核分裂像がよく固定される。
(12) Okabe'ssolutionA
StocksolutionofchromicacidSeawater
2%osmicacidGlacialaceticacid65cc35cc5cc2.
5cc1929)は S
argassumhorneriの卵母細胞を4‑7時間の固定で，岡部氏 (くわしく観察している。
(13) Okabe'ssolu
tionB
S
toc
ksolu
tionofc
hromi
cacid
Seawater
2%osmica
cidGlacia
laceticacidcc
50cc
5cc2.
5cc印

岡部氏 (1930)の考案になる液で， 5時間の固定で S
argassumhorneriの幼匹における核分裂像が固定され，阿部氏 (1932)は Coccophoralangsdo
叱声の幼臨を ζ の液に 3時間浸して固定している。 Sargassumpatensの幼匹固定
では固定時聞は 4‑6時間である。 Cystophyllumhakodatenseの幼匹の固定にも適する。一般にフ戸クス目植物の幼匹の固定に適した固定液である。
(14) Higgins(1931)使用の液
1% chromicacid
1% aceticacidSeawater25cc20cc55ccStypocaulonscopariumI
乙用いてよい結果を得ている。
(15) Bouin'sfiuid(海水で調製)

Formalin25ccc
Saturatedseawate
rsolutiono
fpicr
icacid 75c
Glacialaceticacid5cc

乙の液を用いて， HEINE(193劫は X
iphophoraの固定 ζl 成功している。
(16) ModifiedF
lemming'ssolution

ChromicacidGlacialaceticacid1% osmicacidSeawater1g2cc3cc100cc‑ 34‑

西林・猪野: 海縫の細胞学的研究法(I)35オスミック酸は使用の際 ζl 添加する。 McKAY (1933) は乙の液で，Pter
ygophoracalifornicaを 24‑48時間固定している。
(17) Abe'sf!uidA) StocksolutionofchromicacidSeawater2%~mk~hl

50cc50cc5cr
2.
5ccGlacialacetkacid(Okabe'ssolutionB)B) Saturatedseawatersolu
tiono
fpicricaci
d 50ccGlacia
laceticaci
d5cc
Chromicacid1gC) Saturatedse
aw
ate
rsolu
tio
no
fp
icricaci
d 25cc
40%formalin25cc
Urea
0.
5g
A，B，C の 3液は使用直前 lζ2:1:1の割合で混合して用いる。 ζ の固定液の適用範囲は広く，フークス目植物の精子母細胞，コンブ目植物の遊走子護細胞，アミジグサ目植物の四分胞子母細胞，民'lerochordaria，Desmarestia，Dictyosiphonなどの胞子裂の固定 ζl適している。一般に，乙のような軟かいものの固定には乙の液がよいようである。固定時聞は1.5‑2時聞から 45時間ぐらいで，材料によって異なる。 A，B，C の各液を 3:1:1の割合に混合した液 l
乙2‑5時間浸す乙とによって ，Ptilotapectinataの四分胞子謹がうまく固定される。
(18) Drew(1934)使用の液40%formaldehyde70%alcoho
l6cc
100ccDREW はとの液を用いて S
permothamnion turneri，Spermothamnion

snyderae，Plumariae
legansを固定し，その後で Brazilinで染色を行なって成功している。近年 RAO(1956)がこの方法を Polyidescaprinusに適用している。
(19) lnoh'sfluidAStockso
lutionofchromicacid
Seawater
2% osmicacidGlacialaceticaci
d25cc

25cc
2.
5cc2.
5cc

固定時聞は 5時間で ，Pelvetiawrightiiの生卵器，Sargassump
ilulφrum‑35ー議 類 第11巻 第 1号 昭 和 38年 4月

部の幼睦の固定によい結果が得られる。

(20) Ramanathan(1939)使用の液Satu
ratedseaw
ate
rsolu
tionofp
icricaci
d 75ccFormalin
15ccG
lacialaceti
caci
d
10cc
Urea
1g

Enteromorphaconψressaの固定によい。固定時間は長くても悪い影響を与えない。
(21) Inoh'sf1uidBA) Stocksolutionofchromicacid
Seawater
2% osmica
cidG
lacialaceticacidB) 1% chromica
cid
1% glacialaceticacid
Seawater
1% osmica
cidA，Bの 2液 を 等 量 lと混合して用い
crassiPesの幼怪が固定される。

50cc50cc5cc2.
5cc25cc10cc
55cc
10cc

3時間の固定で Cystophyllum(22) Farmer'sf
1uidAbsolutealcohol
Aceticacid

31，との液は押しつぶし法の固定ζl用いられている。 Porphy‑
idium，Por‑
Batracho
宅termum，Antithamnion，Antithamnionella，Griffithsiaなphyra，
どの紅藻や ，Stictyosiphon，Laminaria，Halidrysなどの禍藻の固定ζ
l用いられ国定時聞は簡単な構造の軟かい藻体の場合は 10分 数時間 ，Laminariaの配偶休の固定では 24時間以上の長時間固定する。

(23) YabuandImai(1957)使用の液2%osmicacid1% chromica
cid0.
1% glacialaceticacidWater

1cc5cc2cc
12cc

Fucusev
anescensおよび Pelv
etiawrightiiの造精器の固定 i乙用いる。
‑ 36ー

西林・猪野: 海最高の細胞学的研究法 (1)37(24) AJ
len‑Bouin'sf
1uid
5ccSaturatedseawatersolutionofp
icricaci
d 7Formalin
15cc5ccG
lacialaceticacid1g
UreaEnteromorphalinzaの固定に用いる。
(25) Navashin'ssolution(海水で調製)
1% chromicacid
16% formalin
Glacialaceticacid
Seawater

15cc3cc1cc
17cc

3‑4時間の固定で Ulvapertusa1乙よい。
以上，海藻の細胞特 ζl 核の固定 l乙用いられている固定液を列記してきたが，種類の十J異によって固定液が異なるのは勿論のこと，同ーの種であっても栄養細胞であるか生殖細胞であるかにより，またフークス目植物の場合には，同じ生殖細胞でも卵母細胞と精子母細胞とで，それに適合した固定液は異なっている。
減数分裂の観察を試みる時には，植物体の成熟度が大切であるから1年のうちいつ頃が成熟期か事前 l
乙よく調査しておく必要がある。採集のときには多数の個体を採集して，その中から適当なものを選び出すようにする。
成熟した植物体が選び出されると，その生殖器托や胞子霊長:群を安全カミソリの刃を用いて薄片とし，乙れを酢酸カ{ミンまたは酢酸オ Jレセインで固定染色して，あらかじめ母細胞の成熟度を確認しておく。成熟度が適当と判断した部分だけを切り取って固定する。
固定にあたっては，材料を 1‑3mm程度!と小さく刻んで固定液に浸す。
小さく刻めば，液が早く一様に材料の中へ入り，その結果がよい。固定する材料が多量の水分や粘液を含んでいる場合 l
乙は，糖、紙で余分の水分を吸い取って，これらを除去してから固定液に入れるようにする。水分や粘液が材料
l 入ると，固定液の作用 ζ[ 変化をきたす。藻休はとともに多量に固定液の中 ζ

一般!こいたみ易く，また過度 l
乙乾燥すると細胞に変化を生じるので，採集を行なったならば海水 l乙浸しておくとともに，できるだけ早く固定にとりかからなければならない。夏季，外界の温度が高い時は，固定の結果は悪くなる。
乙のような時には固定液へ材料を入れた後，法いシャーレ ζl 海水をみたし，‑ 37ー

38

藻 類 第11巻 第 1号 昭 和 38年 4月

乙の中 l乙固定瓶を並べて瓶の下部が海水 l乙浸るようにする。なおオスミック
酸を含む固定液を使用した場合には，材料の入った固定瓶は密閉した箱の中へ入れて，暗所で固定が行なわれるようにしなければ効果がない。
分裂像を得るための固定時刻は，一般に深夜から夜明けがよいとされているが，筆者のコンブ目植物についての実験では，正午の固定でも分裂像を得ている。しかし午前中の固定では分裂像を得ていない。分裂頻度の多いのは，午後 7時頃から深夜にかけてのようであり，乙の頃 ζl固定を行なうのがよいように思われる。

ノリの着生種について
近江彦栄養
H. OHMI; OnepiphyticspeciesofPOゆhyraandtheirhosts

ノリの多くは岩，介殻，木片，土木工事物などに着生する性質があり，穫の特徴のーっともなる場合がある。乙の性質を利用して古くから組染類を用いてノリのひび建て養殖が行なわれ，文セメントを天然の岩礁に塗ってコンクリ戸ト礁を造り，人工的に岩ノリの養殖を図ることも行なわれて来た。
更に近年は合成繊維によるノリの採苗が大規模に行なわれるようになった。
ノリの附着性について福原 (1958a)は，石ζl は着くが海藻 ζi は着かないもの(クロノリ)，海藻 l
乙は着くが石ζl は着かないもの(オオノノリ，フイリタサ)，及び石と海環の両方に着くもの(アサクサノリ，スサピノリ)とに分け，乙のような差異の生ずるのは附着器官の構造と附着方法そのものにある乙とを観察し，スサピノリでは根様糸細胞の下部が束状に集ってクロパギンナン
ソウの表面に円盤状の附着器官を形成しているのに対し，オオノノリではクロパギンナンソウの組織を貫通して根様糸細胞の先端が裏面まで達している
乙と，更にウップルイノりではフクロフノリのような hostplantを附着器官で包囲しているととなどを報告している。
さて，最近手もとにあるノリの膳葉標本を整理していたところ，他の海藻類及び海草花着生しているものがかなり見られたので，文献で調べたもの*北大水産学部‑38ー