藻類 Jpn.J.Phyco
l.4
0:287‑
288，September20，1992

加藤季夫:プロピオン力一ミン染色によるピレノイド・センターの 2つの型の識別
SueoKato: Discriminationoftwotypesofpyrenoidcentresbystaining
withpropionocarmine.

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SueoKaω"LaboratoryofNaturalScience，KokugakuinUnivers
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10‑28，Shibuya‑ku，To勿10，
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ミドリムシ類の葉緑体の 5種類の型の 1つに，ピレugleruz
結 果 と 考 察 : 光 学 顕 微 鏡 で の 観 察 で は ，E

ノイド・センター (pyrenoidcentre)あるいはパラミロ

viridisの築縁体はパラミロン粒で固まれたピレノイド

ぽ amyloncentre)から多くのりボン状ン・センター (p.センター (Fig.1)とそれから放射状に拡がる多くのの葉緑体片が放射状に拡がる型がある (Leedale1967)。

リボン状の葉緑体片からできており，ピレノイド・セ

この型の葉縁体の徴細構造は電子顕微鏡を用いてンターはプロピオンカーミンで染色すると 1つの暗紫

EuglenaE耐 'disEhr.で調べられ (Leedale1982)，そのピレ色の塊となっていた (Fig.2)。 一 方 ，Eutゆtiellaノイド・センターは 1つのピレノイドからできている

eupharyngeaの業縁体もパラミロン粒で固まれたピレノと報告されている。ところが， Walneetal.(1986)はイド・センターとそれから放射状に拡がる多くのリボEut坤t白llaeupharyngeaWalneetal.の葉緑体を電子顕微ン状の葉緑体片からできており ，Eug帥， aVl・ridisの葉縁鏡で観察し，そのピレノイド・センターは Euglena体と同様のっくりをしているようにみえるが，そのピ

viridisのものとは異なり，多くのリボン状の葉緑体片

レノイド・センターはプロピオンカーミンで染色するの先端にあるピレノイドが集まって出来ていると報告と多くの小さい暗紫色の粒に分れていた (Fig.4)。

している。このことカミら， ピレノイド・センターには

Eut坤tiella雌 thary噌帽をノマルスキー式微分干渉装置2つの型があることが明らかになった。ピレノイド・を用いて観察すると，ピレノイド・センターは徴かにセンターがどちらのっくりをしているかは電子顕微鏡分れているようにもみえる (Fig.
3)。しかし，このよによる観察でしか識別できないと考えられてきたが，

uglenaviridisにおいてもみられることがあうな像は E

今回，ピレノイドの染色に用いられるプロピオンカーることから，染色なしにはピレノイド・センターがどミン (Rosowski阻 dHoshaw1970)でピレノイド・センちらの型かは判断が困難である。

ターを染色することにより，光学顕微鏡による観察で今回のピレノイド・センターの染色による観察結果も両者を容易に識別できることが判明したので，ここは，電子顕微鏡での Eug.
加 a抑制:r(Leedale1982)とで報告する。

Eut坤tiellaeupha
ゆぜmσValneetal.1986)の観察結果と帥， aviridisの Fローン培
材料と方法:実験には Eug一致しており，ピレノイド・センターが 1つのピレノ

991年養株 E‑1164 (神奈川県横浜市緑区の早淵川， 1イドからできているか，それとも，多くのピレノイド2月初日採集)と Eutrlψtiella雌 tha
明Igeaのクローン培が集まってできているかは，プロピオンカーミンでピ養株 M E・64 (神奈川県横須賀市佐島港， 1991年 4月

レノイド・センターを染色することにより光学顕微鏡24日採集)の 2株を用いた。培養は温度 20C，照度でも容易に判断できることがわかった。ミドリムシ類

030001ux，12時間現期・ 12時間暗期の明暗周期の条件のうち ，Eutrept
ia属，Eut:
坤 tiella属および E叫glena属の下で行い， E‑
1164株には AF・6培地(加藤1982)を，Radiatae直属のものはピレノイド・センターから多数

ME・64株には PES培地 (Provasoli1966)をそれぞれ用のリボン状の葉緑体片が放射状に拡がる葉緑体をもっいた。ピレノイド・センターの染色は対数増殖期の藻ているが，そのピレノイド・センターがどちらの型か体を用い，プロピオ γ カーミン(固定時間10分， 1/10ugleruzviridisとEutrep‑について明確になっているのは E

濃度の媒染液で媒染時間10分，染色時間 5分)で行っ

tiellaeuphaり咽I!
leaの他には Eutr
ψ，tiapertyiPringsheimた。

(DawsonandWalne1991)に限られていると思われる。

K ato，S288'¥p‑‑・・・・・圃
・・・園
田園
・・・・
圃
・・‑

Figs.1‑
2. Euglenav
iridis. 1.A cel notstai
ned. 2.A c
el stai
nedwithpro
pio
nocarmine. A pyrenoidcentrei
scomposedo
fonepyrenoidFigs. 3‑4. Eutr
ψtiellaeutharyngea. 3.A celnotstai
ned. 4.A celstai
nedwithpropionocarmine. Twopyrenoi
dcentresar
ecomposedo
fmanysmalpyrenoi
ds.p:pyr
enoi
dc
ent
re. Scalebars:10μm

上記の 3種のミドリムシ類以外のものについても，そのピレノ イド・セン ターがど ちらかのっくりをしているかについて今後調べる 必要があり ，それに関して，このプロピオンカーミンによる染色法は処理が簡単 で確実に識別できることから，有効な手段の 1っと考えられる。

文 献
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