Aug. 2009

THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

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当院における小児の臨床材料から分離された ampicillin 耐性

Haemophilus inﬂuenzae の 10 年間の変動
坂田宏

旭川厚生病院小児科（2009 年 5 月 14 日受付）

1999 年 7 月から 2008 年 12 月までの 9 年 6 か月間に当院小児科で治療した生後 1 か月から 12 歳までの小児から分離された 3784 株の Haemophilus inﬂuenzae の ampicillin (ABPC)
耐性の頻度を検討した。薬剤感受性は Etest で測定し，耐性は Clinical and Laboratory

Standards Institute の基準で判定した。1999 年には 87.1% が MIC 2 m g/ml 未満の感受性菌であったが，年々減少し 2008 年には 28.7% まで有意に低下した (p⬍0.001)。MIC 4 m g/ml以上の b -lactamase negative ABPC resistant (BLNAR) 株は 1999 年には 2.9% であったが，2008 年には 43.3% に有意に増加した (p⬍0.001)。 MIC90 は， 1999 年が 2 m g/ml であったが，2008 年には 16 m g/ml に上昇した。

1990 年代から， Haemophilus inﬂuenzae におい

実際にその疾患の原因菌かどうかは不明である。て b -lactamase negative ampicillin (ABPC) resist-同一の児から，複数回検出されている場合には，ant (BLNAR) 株の増加が大きな問題となってきてその年の最初に採取した株を採用した。株数はいる。 耐性の機序としては penicillin 結合蛋白1999 年 140 株， 2000 年 369 株， 2001 年 398 株，(penicillin binding protein, PBP) 遺伝子の変異が原

2002 年 437 株， 2003 年 449 株， 2004 年 411 株，

1)

因とされている 。本菌はただ単に ABPC に耐性2005 年 396 株， 2006 年 434 株， 2007 年 332 株，を有するだけでなく cephem 系抗菌薬にも感受性2008 年 418 株の計 3784 株である。

2)が低下していることが明らかになっている 。今検出された株について Etest を用いて，ABPC に回，最近 10 年間における当院の小児の臨床材料対する最小発育阻止濃度 (Minimal inhibitory con-から分離された H. inﬂuenzae について ABPC 耐性centration, MIC) を測定した。Etest の方法 は分離菌の頻度の推移を検討したので報告する。

された菌をコロニーからかきとり，滅菌生理食塩水で撹拌し，McFarland No.0.5 に調整した。この対象と方法

菌液を滅菌綿棒で，ミューラーヒントンチョコ
レート寒天培地に均一に塗抹した。 ampicillin

1999 年 7 月から 2008 年 12 月までの 9 年 6 か月(ABPC) の Etest ス ト リ ッ プ （ ABBIODISK， ス

間に当院小児科で治療した生後 1 か月から 12 歳まウェーデン）を平板上においた。35°C にて 18 時

での呼吸器感染症患者の喀痰，上咽頭から分離さ間培養を行い，阻止円の目盛りから MIC を求めれた H. inﬂuenzae を対象とした。検出された菌がた 。 H. inﬂuenzae の b -lactamase 産 生 能 は nitro-

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図 1.

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Haemophilus inﬂuenzae の耐性頻度の変動

ceﬁn を 基 質 と し た chromogenic disc method (セ成績

フィナーゼ，Bekton Dickinson Microbiology Sys-tems)を用いて測定した。

図 1 に BLNAS， BLNAI， BLNAR， BLPAR の

H. inﬂuenzae の 分 類 は Clinical Laboratory and推移を示した。 1999 年 ⬃2000 年には約 90% が3)の分類にしたがって，

BLNAS で あ っ た が ， 年 々 減 少 し 2008 年 に は

b -lactamase 陰性で ABPC の MIC が 2 m g/ml 未満28.7% まで低下した。 一方， BLNAR は 1999⬃

を BLNAS (b -lactamase negative ABPC suscepti-

2000 年には 3% 以下であったが，2002 年に 15.3%，ble) 株， ABPC の MIC が 2 m g/ml 以上 4 m g/ml 未2007 年に 35.2% で BLNAS の頻度を上回り，2008

満 を BLNAI (b -lactamase negative ABPC inter-

年には 43.3% に達した。 BLNAI は， 2002 年以降

mediate resistant) 株， 4 m g/ml 以上を BLNAR (b -は 20⬃30% で推移していた。BLPAR は 1.3⬃3.6%

lactamase negative ABPC resistant) 株 ， b -lacta-で，ほぼ一定していた。1999 年の BLNAS の頻度

mase 陽 性 の 株 を BLPAR (b -lactamase positiveと各年の BLNAS の頻度を比較すると，2002 年以ABPC resistant) 株とした。

降は有意に BLNAS が減少した (p⬍0.001)。

Standards Institute (CLSI)

有意差の検定は StatMate III for Macintosh（ア図 2 には ABPC の MIC 分布を示した。 1999 年トムス）によりカイ二乗検定を行い， p⬍0.05 をには 0.25 m g/ml が 32.9%， 1 m g/ml が 10.7% と二有意差ありとした。

峰性であったが，しだいに 0.25 m g/ml のピークが低くなりながら 0.38 m g/ml に移行していた。2004
年以降は 3 m g/ml の BLNAI にピークを認め，2008

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図 2. Haemophilus inﬂuenzae に対する ABPC の MIC 分布

表 1.

Haemophilus inﬂuenzae に対する ABPC の MIC50 と MIC90 の変動

年では 12 m g/ml にも小さなピークが出現してきても高くなっていることが判明した。この成績は，いる。

自動機器では得られず，Etest の有用性を認めた。

表 1 には ABPC の MIC50 と MIC90 の推移を示し

全国の小児科施設により構成されている，小児

たが，1999 年には MIC50 が 0.25 m g/ml，MIC90 が科領域耐性菌研究会が，それぞれの施設から収集

2 m g/ml で あ っ た の が ， 2003 年 に は MIC 50 がし た H. inﬂuenzae 菌 株 2001 年 448 株 ， 2004 年

2 m g/ml， MIC90 が 12 m g/ml， 2008 年には MIC50376 株， 2007 年 386 株の耐性頻度を報告 4)していが 3 m g/ml，MIC90 が 16 m g/ml まで上昇した。

る。その成績では， 2001 年には BLNAS 62.9%，

BLNAI 17.6%， BLNAR 11.2%， BLPAR 8.3%

考案であったが， 2003 年に BLNAS 34.3%， BLNAI16.0%， BLNAR 43.4%， BLPAR 6.4%， 2007 年
当院では，通常の感受性試験は自動薬剤感受性に BLNAS 34.5% ， BLNAI 22.8% ， BLNAR

測定機を用いているが，H. inﬂuenzae に関しては，38.3%， BLPAR 4.4% と BLNAS が著しく低下し4 m g/ml 以上の値が測定できず，臨床的に有用性ていた。この結果は著者の成績と同様であり，が充分でないと考え，Etest で感受性を 1999 年か

BLNAS の減少は全国的なレベルで起こっているら実施しており，その 10 年間をまとめた。そのと考えられる。

結果，この 10 年間で BLPAR は大きな変動はな

2004 年 ⬃2005 年におけるヨーロッパ各国のかったが，BLNAR が著しく増加し，しかも MIC

BLNAR と BLPAR の頻度はスペイン 33.9% と344 (76)

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5.4%，ドイツ 11.8% と 0%，トルコ 11% と 2.4%， していると考えられ，初期治療薬には適さず，
オーストリア 10% と 5% ， ポルトガル 9.6% とCTRX や MEPM が推奨されている。肺炎に関し15.4%，ポーランド 8.6% と 11.4%，アイルランドては，黒崎 8)は BLNAR が原因菌の場合，経口薬

8% と 8%，イタリア 3.3% と 7.5%，英国 1.5% とでは cefditoren pivoxil， cefcapene pivoxil などの13.2%，フランス 0% と 17.6%，オランダ 0% とセフェム系抗菌薬か azithromycin，注射剤では0% と国によって大きな差が認められた 5)。全体でPIPC，CTX，CTRX，MEPM を推奨している。

は 8.8% と 7.6% であったが， 1997⬃1998 年には

この 10 年間で，H. inﬂuenzae の感受性は抗菌薬8.8 と 11% であり， BLNAR の頻度に大きな変化耐性の傾向を強めていることが確認された。この5)を認めなかった 。 米国では 1994⬃1995 年に現象はこれまでの抗菌薬の投与方法にその一因が

BLPAR 36.4% ， BLNAR 1.3% で あ っ た が ， あることと考えられる。今後は，耐性菌を増加さ
2002⬃2003 年には 26.3%， 0.1% と両者とも減少
6)

していた 。

せることなく，患者により有効な抗菌薬による治療を考慮しなければならない。その上で，耐性のこのように，本邦で顕著に BLNAR が増加して動向を追跡していく必要性を感じる。

1)

いる原因として， UBUKATA ら は本邦において市中呼吸器感染症に対する経口の第一選択薬がcephem 系薬の使用頻度が高いことをあげている。
H. inﬂuenzae に 対 す る cephem 系 薬 の 抗 菌 力 はPBP3 との親和性が関連しているので，血中濃度が低く，菌を殺菌しえない経口 cephem 系薬が投与されることによって生じる選択圧によって，PBP3 との親和性が低下した遺伝子変異を有する株が選択されると推測している。
著者は以前に当院の小児の臨床材料から分離された H. inﬂuenzae の ABPC 以外の注射用抗菌薬に対する感受性を 2002⬃2003 年と 2007⬃2008
年を比較して報告した 7)。 2007⬃2008 年分離株
で 最 も 優 れ た 感 受 性 を 示 し た の は ceftriaxone(CTRX) に対してで， MIC90 が 0.38 m g/ml であった。次いで piperacillin (PIPC) MIC90 が 0.5 m g/ml，meropenem (MEPM) が 1.5 m g/ml， cefotaxime(CTX) が 2 m g/ml で あ っ た 。 2002⬃2003 年 で はMEPM の MIC90 が 0.5 m g/ml，CTRX と PIPC はともに 0.25 m g/ml であったので，抗菌活性の低下が確認された。

BLNAR が増加することにより，抗菌薬の使用は従来と異ならざるを得なくなっている。特に髄膜炎の時には，ABPC が有効な例が明らかに減少

文献
1) UBUKATA, K.; Y. SHIBASAKI, K. YAMAMOTO, etal.: Association of amino acid substitutions
in penicillin-binding protein 3 with beta-lactam resistance in beta-lactamase-negative
ampicillin-resistant Haemophilus inﬂuenzae.
Antimicrob. Agents Chemother. 45: 1693⬃
1697, 2001
2) 生方公子：市中感染症 3 年間のまとめ。肺炎球菌とインフルエンザ菌についての疫学的考察。Jpn. J. Antibiotics 54 (Suppl. B): 72⬃79,

20013) Clinical and Laboratory Standards Institute.
Performance standards for antimicrobial susceptibility testing: 15th Information Supplement Document M100⬃S15, 2005
4) 星野 直，佐藤吉壮，豊永義清，他：小児科領域における薬剤耐性化の 2007 年全国調査―インフルエンザ菌の薬剤感受性―。日本化学療法学会雑誌 56 (Suppl. A): 154, 2008

5) JANSEN, W. T.; A. VEREL, M. BEITSMA, et al.:Longitudinal European surveillance study ofantibiotic resistance of Haemophilus inﬂuenzae. J. Antimicrob. Chemother. 58: 873⬃877,
2006
6) HEILMANN, K. P; C. L. RICE, A. L. MILLER, etal.: Decreasing prevalence of beta-lactamase
production among respiratory tract isolates ofAug. 2009

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Haemophilus inﬂuenzae in the United States.
Antimicrob. Agents Chemother. 49: 2561⬃
2564, 2005
7) 坂田 宏：小児の臨床材料から分離された
Haemophilus inﬂuenzae の静注用抗菌薬に対62—64

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する薬剤感受性。日本化学療法学会雑誌 57:

101⬃105, 20098) 黒崎知道：インフルエンザ菌。化学療法の領域 25（増刊）： 1014⬃1021, 2009

Changes over 10 years of ampicillin-resistant Haemophilus
inﬂuenzae isolated from children
HIROSHI SAKATA
Department of Pediatrics, Asahikawa Kosei Hospital
We examined the frequency of ampicillin (ABPC) resistance of 3784 strains of Haemophilus
inﬂuenzae isolated from the infants aged from 1 month after birth to 12 years who had been treated in thePediatric Department of our hospital for 9 years and 6 months from July 1999 to December 2008. We
determined the drug susceptibility by Etest, and judged the resistance by the standard of Clinical andLaboratory Standard Institute. The rate of strains of MIC of less than 2 m g/ml to ABPC was 87.1% in
1999, but the ratio was decreasing year after year signiﬁcantly up to 28.7% in 2008 (p⬍0.001). b -lactamase negative ABPC resistant (BLNAR) strains whose MIC to ABPC was more than 4 m g/ml was 2.9%in 1999, but increased signiﬁcantly to 43.3% in 2008 (p⬍0.001). MIC90 was 2 m g/ml in 1999, butincreased to 16 m g/ml in 2008.