博 士 （ 医 学 ） 今 関 郁 夫
学 位 論 文 題 名

Immunomodulating Effect ofVitaminD
3Deriv
ativ
esonT
ype‑lCellularImmunity（1型 細胞性免疫 に対するビタミンD
3誘導体の免疫調節効果について）

学位論文内容の要旨

要旨
最近の免疫学の進歩はめざましく、マクロファージ等各種細胞の関与とその細胞表面抗原の発現及びサイトカイン産生との関係が明らかにされてきている。例えば細胞性免疫を担うType‑l
ヘルパーT細胞(Thl）はIL‑12やIFN‑ッを産生してType‑l
細胞障害性T細胞(Tcl）を誘導し腫瘍免疫等に関与していることが明らかにされている。また、体液性免疫を担うTh2は、IL‑4やtL‑10等を産生して抗体産生に関与していることが知られている。さらに、これらThl/Th2細胞の誘導には樹状細胞(DC)と呼ばれる抗原提示細胞が関与しておりThl/Th2
バラン スを調節しているとされている。しかし、このT
hl/Th
2バランスの偏りにより尋常性乾癬や糖尿病といった多くの疾病が誘発されることも知られており、Thl/
Th2バランスが生体の恒常性維持に重要であることが明らかになっている。
一方、ビタミンD誘導体は、臨床では尋常性乾癬や骨粗鬆症に使用されており、免疫抑制作用を持つことも従来より知られていたが、その詳細な作用機序は明らかにされていない。そこで今回、生体での活性代謝産物である1，25(OH)2VD3と、そのカルシウム作用を低減した誘導体である22‑oxa‑1，25(OH)
2VD3についで、
Thl/Th2バランスヘの影響をinvitroで検討した。
まず 、1型 骨髄 樹状 細胞(BMDC1）の誘導を試みた。BALB/C
マウスの骨髄細胞を2種の条件、すなわち中性条件OL‑3、GM‑CSF)又はThl条件(IL‑3、GM‑CSF、IL‑12、IFN‑ッ）で5E
ヨ聞・培養すると、Thl条件下でのみB
MDC1が 誘導され、主要組織適合抗原複合体Cl
ass‑l、・2及び共 役刺激因子(
CD80等）等機能分子の発現も亢進していた。さらに機能的にも アロ抗原特異的な細胞障害性Tリンパ球(CTL)が誘導されることがわかった。この際、ビタミンD誘導体を添加すると、BMDC1の誘導が抑制され、機能分子の発現も抑制されるのみならず、さらにCTL誘導も消失していくことがわかった。また、Th2細胞は増加傾向を示し、全体的なThl/Th2バランスとしてはTh2優位に誘導されることがわかった。これらの作用においてビタミンD誘導体間に差は無かった。
これらの結果より、従来ビタミンD誘導体の免疫抑制作用として知られていた現象は、実はThl/Th2バランスをTh2優位に 誘導することであることが明らかになった。今後、ビタミンD誘導体が多くのThl優位型の疾病に応用されることが期待される。

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学位論文審査の要旨
主 査 教 授 小 野 江 和 則
副 査 教 授 岩永 敏 彦
副 査 教 授 西 ， 村 孝 司

学 位論 文題名
Immunomodulating EffeCtof
VitanlinD3DeriVatiVeSOnType― 1Ce11ularImmunity（ 1型 細 胞 性 免 疫 に 対 す る ビ タ ミ ン D3誘 導 体 の 免 疫 調 節効 果 に つ い て ）申 請 者 は 、 生 体 で の ビ タ ミ ンD活 性 代 謝 産 物 であ る1， 25(OH)2VD3と 、そ のカ ル シ ウ ム 作 用 を 低 減 し た 誘 導体 で あ る 22− oxa― 1，25(OH)2VD3にっ いて 、Thl/Th2バラ ンス に及 ばす 影響 をin vitroで検討した。近年，免疫バランス，特に Thl/Th2バ ラ ン ス の偏 りに より 尋常 性乾 癬や糖 尿病 とい った 多く の疾 病が 誘
発 さ れ る こ と が 知ら れて おり 、Thl/Th2バ ランス が生 体の 恒常 性維 持に 重要 で
あ る こ と が 明 ら か に な っ て い る。 一 方 、 ビ タ ミ ンD3誘導 体は 、臨 床で は尋 常性 乾癬や 骨粗 鬆症 に使 用さ れて おり 、免 疫抑 制作 用を 持つ ことも 知られていたが 、その 詳細 な作 用機 序は 明ら かに され てい なか った ので 、免疫 バランスに重要 な 役 割 を 果 た す樹 状細 胞(DC)と helperT細胞に 及ば す効 果に つい て調 べた 。
ま ず 、 1・ 型 骨 髄樹 状 細 胞 (BMDCI） の 誘 導 を 試 み た 。 BALB/Cマ ウ ス の 骨 髄細胞を2種の条件、すなわち中性条件(IL―3、GM−CSF)又はThl条件(ILー3、GM―CSF、IL‑12、 IFN‑ッ ） で 5日問 培養 した とこ ろ、 Thl条 件下 では 主要 組織 適合 抗原 複合 体 Class‑l、 − 2及 び共 役刺 激因 子(CD80等）等 機能 分子 の発 現が 上昇 して いた 。 さ ら に 機 能 的 に も ア ロ 抗 原 特 異 的 な 細 胞 傷 害 性 Tリ ン パ 球 (CTL)が 誘導
さ れ る こ と が わ か っ た 。 こ の BMDC1を 誘 導 す る 際 、 ビ タ ミ ン D3誘 導 体 を添加 す る と 、 BMDC1へ の 誘 導 が 抑 制 さ れ 、 機 能 分 子 の 発 現 も 抑 制 さ れ る の みなら ず 、 さ ら に CTL誘 導能 も消 失し てい くこ とがわ かっ た。 また 、naive CD4十 T
細 胞 を 刺 激 す る 時 に ビ タ ミ ン D3誘 導 体 を 加 える と IL‑4を 産 生 す る Th2細 胞は増 加 傾 向 を 示 す 一 方 、 IFN‑ッ を産 生 す る Thl細 胞が 減少 し， 全体 的な Thl/Th2
バ ラ ン ス と し て はTh2優 位に 誘導 され るこ とがわ かっ た。 これ らの 作用 にお いて ビタミ ンD3誘導 体（ 1， 25(OH)2VD3、22―oxa― 1，25(OH)2VD3)間に差は無か―46―

った。これらの結果より、ビタミンD3誘導体の免疫抑制作用として知られていた現象は、実はThlrT
h2バランスをTh2優位に誘導することであることが明らかになった。
発表後，副査の岩永敏彦教授から、改変型ビタミンD
3誘導体の免疫抑制作用の程度について、また、ビタミンD3が免疫抑制に働くということの生物学的意義についての質問があった。次いで副査の西村孝司教授からU
V照射によって皮膚に炎症が起こるときの生体防御機構にビタミンD3が関与している可能性について、また、ビタミンD3が乾癬の治療薬として用いられることになった経緯についての質問があった。さらに主査の小野江和則教授から乾癬が発症するメ カニズム、 ビタミンD3誘 導体添加に よって変化するDCの因子，リンパ球混 合反応のと きにC
57BL/6マウスを用いる意義、naiveT細胞刺激時の抗原量の検討について質問があった。いずれの質問に対しても，申請者は自身のデータ や関連する 論文報告な どを引用し ，滞りなく 適切な回答をした。
この論文は従来のビタミンD
3よりもカルシウム作用を低減した改変型ビタミンD3誘導 体において も従来のものと同様にThl型免疫抑制効果があり、副作用がなく免疫抑制効果を発揮するという点で、今後、ビタミンD誘導体が多くのThl優位型の疾病に応用されることが期待される点で高く評価され，今後の 有 効 な 自 己 免 疫 疾 患 の 治 療 法 の 開 発 に 貢献 す るこ と が 期待 さ れる 。
審査員一同は、これらの成果を高く評価し，申請者が博士（医学）の学位を受けるのに十分な資格を有するものと判定した。