鳥取県産業技術センター研究報告 No.18 (2015)

コーヒーに含まれるポリフェノールのα-glucosidase 阻害活性の検討
Alpha-glucosidase inhibition activity of polyphenols derived from coffee

中村(杉本)優子＊・上野由美子＊・米澤恵＊＊
Yuko Nakamura-Sugimoto, Yumiko Ueno and Megumi Yonesawa＊

食品開発研究所 バイオ技術科、＊＊株式会社澤井珈琲

コーヒー中に多く含まれるポリフェノールであるクロロゲン酸は、糖尿病などヒトの血糖値調整に関与す
る酵素α-glucosidase を阻害することが知られている。このため、コーヒー飲料を試料とした酵素阻害試験を行った所、コーヒー中のクロロゲン酸濃度から想定される阻害率を遥かに上回るという現象が観察され、クロロゲン酸以外のコーヒー成分も酵素阻害に大きく関わっている可能性が示唆された。

1.

はじめに

食事により摂取された炭水化物は、小腸において

2.

実験方法

αアミラーゼにより二糖類に分解され、更に小腸粘2.1

α-glu 阻害活性の測定

膜上皮に存在する二糖分解酵素であるα酵素液として、ラット小腸アセトン粉末（Sigma）-glucosidase (α-glu)により単糖に分解され、吸収を 50 mM リン酸緩衝液(pH6.5)に溶解し、不純物をされる。このα-glu を阻害することで食後血糖の上除いたものを用いた。基質には 4-methylumbelliferyl-

昇を穏やかにする事から、α-glu 阻害薬は糖尿病患

α-D-glucopyranoside を同緩衝液で 3 mM に調整した者で食後血糖の調整のためにインスリン投与と併用ものを用いた。96 穴マイクロプレートに試料溶液をされている。糖尿病は一度発症する治癒することは20 μL、酵素液を 50 μL、基質を 50 μL、緩衝液

なく、放置すると目、腎臓、神経などに様々な合併

を 120 μL 加え、37 ℃で 30 分反応させた。0.2 M症を引き起こすだけではなく、心血管疾患の発症、

glucine-NaOH 緩衝液（pH10.2）を 50 μL 加え反応進展を促進する事で、患者の生活の質を著しく低下を停止した。プレートリーダー（Tecan）を用いて励させる。そのため、普段の食事から糖尿病予防を行起波長 350 nm、蛍光波長 450 nm で蛍光強度を測定える事のメリットは大きく、特定保健用食品の保健した。酵素活性は以下の式にて算出した。

の用途の一つとして取り入れられており、腸管から阻害活性（％）＝100－（sample-blank）/(control-blank)×100の糖の吸収を遅らせる食物繊維や、α-glu 阻害成分

Sample：試料を加えた際の蛍光強度などが成分として利用されている。

control：試料の代わりに緩衝液を加えた際のコーヒーは日本人が最も摂取する飲料であり、コーヒーの年間消費量は、
昭和 50 年に緑茶の消費量を

蛍光強度
blank：緩衝液と基質のみを加えた際の蛍光強度上回ってから現在に至るまで依然として増加傾向にある

１）。コーヒーにはクロロゲン酸やマンノオリゴ
2.2

糖など、血糖値を穏やかに降下させることが期待さORAC 法による抗酸化性測定れる成分が含まれている。本研究ではまず、コーヒ

食品機能性評価マニュアル集（日本食品科学工学

ー飲料そのものの機能性に着目し、α-glu 阻害活性会発行）に従い、測定した。即ち、親水性抽出あるについて検討を行ったので、その概要について報告

いは親油性抽出を液-液抽出にて行った試料 20 μLする。

に 94.4 ｎM Fluorescein 200 μL、ラジカル発生源と35

してして31.731.7mM
mMAAPH
AAPH7575μL
μLを加え、37を加え、37℃における℃における析に供した。
析に供した。

励起波長
励起波長485
485nm、蛍光波長nm、蛍光波長520520nm
nmの蛍光強度を、2の蛍光強度を、2分毎に分毎に4545回測定した。ORAC
回測定した。ORAC値は蛍光の減弱を標
値は蛍光の減弱を標

3.
3. 結果と考察
結果と考察

準物質となる
準物質となる6.25～50
6.25～50μM
μMTrolox
Troloxと比較し、親水と比較し、親水

3.1
3.1コーヒーのα-glu
コーヒーのα-glu活性の検討
活性の検討

性抽出液と親油性抽出液の両方より性抽出液と親油性抽出液の両方よりTrolox
Trolox当量とし当量としコーヒー中のクロロゲン酸がα-glu
コーヒー中のクロロゲン酸がα-glu阻害活性を持
阻害活性を持て求め、その和をて求め、その和をORAC
ORAC値とした。
値とした。

(2(2
つ事は、既報により報告されている。クロロゲン
つ事は、既報により報告されている。クロロゲン酸は熱で分解される事から、コーヒー豆の焙煎によ
酸は熱で分解される事から、コーヒー豆の焙煎によ2.3
2.3 コーヒー中のポリフェノールの分析
コーヒー中のポリフェノールの分析

り、その量が減少し、α-glu
り、その量が減少し、α-glu阻害活性も同様に低く阻害活性も同様に低く(株)澤井珈琲より提供を受けた通常焙煎あるいは(株)澤井珈琲より提供を受けた通常焙煎あるいはなると予想された。その事を確かめるため、通常焙なると予想された。その事を確かめるため、通常焙

低温焙煎コーヒー8g
低温焙煎コーヒー8gを、熱水でを、熱水で5 5分間抽出して、最分間抽出して、最煎と低温焙煎により加工されたコーヒー豆熱水抽出
煎と低温焙煎により加工されたコーヒー豆熱水抽出終液量
熱水抽出物とした（コ
終液量150150mLmLとしたものを、としたものを、
熱水抽出物とした（コ

物でのクロロゲン酸量とα-glu
物でのクロロゲン酸量とα-glu活性を比較した(図
活性を比較した(図ーヒーの焙煎条件等は、企業秘密の為非公開）。。
ーヒーの焙煎条件等は、企業秘密の為非公開）

1、
2)。
クロロゲン酸量は低温焙煎のもので増加して1、
2)。
クロロゲン酸量は低温焙煎のもので増加して総ポリフェノール濃度は、既報に基づきフォーリ
総ポリフェノール濃度は、既報に基づきフォーリ
3）3）

いる一方で、
α-glu
いる一方で、
α-glu阻害活性の差異は見られなかっ阻害活性の差異は見られなかっン・チオカルト法で測定した
ン・チオカルト法で測定した 。96。96穴マイクロプレ
穴マイクロプレた。また、クロロゲン酸の他、コーヒー熱水抽出物
た。また、クロロゲン酸の他、コーヒー熱水抽出物

ート上で、蒸留水で希釈した試料
ート上で、蒸留水で希釈した試料7070μL
μLと蒸留水と蒸留水中に含まれると想定される他の成分でのα-glu
中に含まれると想定される他の成分でのα-glu阻阻

でで2 2倍希釈したフォーリン・チオカルト試薬（シグ倍希釈したフォーリン・チオカルト試薬（シグ

害活性を確認した(図
害活性を確認した(図3)。クロロゲン酸以外にも、
3)。クロロゲン酸以外にも、マ）をマ）を1515μL
μL混和した。5混和した。5分後分後2％炭酸ナトリウム
2％炭酸ナトリウム

カフェー酸にα-glu
どちら
カフェー酸にα-glu阻害活性が見られたが、阻害活性が見られたが、
どちら

水溶液を
水溶液を7575μL
μL加え撹拌した後、15加え撹拌した後、15分間反応させ分間反応させのコーヒー熱水抽出物でも検出することは出来なかのコーヒー熱水抽出物でも検出することは出来なかた。吸光度
た。吸光度660
660nm
nmを測定し、没食子酸水溶液で作を測定し、没食子酸水溶液で作った（データ未掲載）。クロロゲン酸の効果についった（データ未掲載）。クロロゲン酸の効果につい成した検量線からポリフェノール含量を没食子酸相成した検量線からポリフェノール含量を没食子酸相て、
コーヒー熱水抽出物の酵素阻害濃度(低温焙煎コて、
コーヒー熱水抽出物の酵素阻害濃度(低温焙煎コ

当量（mg当量（mgGAE/mL）として算出した。
GAE/mL）として算出した。

ーヒーでは=13.6%、図１の結果よりクロロゲンーヒーではICIC=13.6%、図１の結果よりクロロゲン
5050

ポリフェノールの個別分析は、高速液体クロマト
ポリフェノールの個別分析は、高速液体クロマト

酸は酸は0.172
0.172mg/mL
mg/mLに相当)とα-gluに相当)とα-glu阻害活性を示す
阻害活性を示す

グラフィー（HPLC、島津製作所）により実施した。
グラフィー（HPLC、島津製作所）により実施した。

クロロゲン酸濃度(IC＞1クロロゲン酸濃度(IC＞1mg/mL)にかい離が見られmg/mL)にかい離が見られ
5050

熱水抽出物を
熱水抽出物を0.45
0.45μmμmフィルター（ザルトリウス）
フィルター（ザルトリウス）

た。そのため、コーヒー熱水抽出物のα-glu
た。そのため、コーヒー熱水抽出物のα-glu阻害活
阻害活

でろ過し、分析に供した。分析条件は、以下の通り
でろ過し、分析に供した。分析条件は、以下の通り

性にはクロロゲン酸以外の成分も寄与している可能性にはクロロゲン酸以外の成分も寄与している可能

である。
である。

性が示唆された。
性が示唆された。

分析カラム：：
CAPCELLPAK
分析カラム
CAPCELLPAKC18
C18MG
MGS-5
S-5(4.6(4.6mmΦ×mmΦ×150
150mm、資生堂)
mm、資生堂)
分離液：5
分離液：5mM
mMKH
KH
(7：3)
2PO
4 (pH2.5)-メタノール
2PO
4 (pH2.5)-メタノール(7：3)
カラム温度：40
カラム温度：40℃℃
検出波長：UV280nm
検出波長：UV280nm

2.4
2.4 ポリフェノールの精製
ポリフェノールの精製
ポリビニルポリピロリドン（PVPP）によるコーヒ
ポリビニルポリピロリドン（PVPP）によるコーヒ
ーポリフェノールの精製を行った。PVPP
ーポリフェノールの精製を行った。PVPPを一定のを一定の割合で混合し、4割合で混合し、4℃で一晩振とうした。その後遠心℃で一晩振とうした。その後遠心分離を行い、
非吸着成分を除き、残った分離を行い、
非吸着成分を除き、残ったPVPPPVPPにに50％
50％
メタノールを加えて吸着成分を溶出し、その後の分
メタノールを加えて吸着成分を溶出し、その後の分36

図１
図１ コーヒー熱水抽出物中のクロロゲン酸量
コーヒー熱水抽出物中のクロロゲン酸量

示すかどうかを検討した(図 6)。PVPP による処理を行った分画ではポリフェノールが減少し、また、同分画のα-glu 阻害活性が低下することが分かった。
PVPP に吸着したポリフェノールを用いて同様の試験を行うべきであるが、PVPP からの抽出に用いる溶媒そのものがα-glu の活性を低下させるため、抽出
分画にポリフェノールが含まれることと、PVPP 濃度依存性があることを確認するのみにとどまった（データ未掲載）。PVPP に吸着したポリフェノールを用いて、HPLC による解析を行ったところ、クロロゲン
図２ コーヒー熱水抽出物のα-glu 阻害活性の比較

酸を含む他の成分が複数検出された(図 7)。得られたピークは PVPP の濃度依存的であること、PVPP のみではピークは得られないことを確認している（データ未掲載）。
＊

図３ コーヒーに含まれる主な成分のα-glu 阻害活性

3.2 α-glu 阻害活性成分の精製

図 4 コーヒー熱水抽出物の抗酸化性の比較

コーヒー熱水抽出物に含まれる酵素阻害活性物質（＊：ｐ＜0.05）

が何かを推測するために、生理活性物質が概ね共通して持つ性質である抗酸化性と、最も多く含まれる
生理活性物質である総ポリフェノールについて通常
焙煎と低温焙煎のもので比較した(図 4、5)。ラジカ
ル消去活性は低温焙煎のもので優位に高かった一方で、総ポリフェノール量は差異がなくα-glu 阻害活性と同じ傾向を示した。コーヒー熱水抽出物中のポリフェノールが特異的にα-glu 阻害活性を示すかどうかを検討するために、ポリフェノールを吸着できる樹脂である PPVP を用いて、コーヒー熱水抽出物
中に含まれるポリフェノールがα-glu 阻害活性を

図５

37

コーヒー熱水抽出物の総ポリフェノール量の比較

側が負のすくい角（-10 ）となる．先端角は35 ，すくい角は0側が負のすくい角（-10 ）となる．先端角は35 ，すくい角は0
である．
である．
図10は，垂直荷重と溝深さ，幅およびアスペクト比の関係
図10は，垂直荷重と溝深さ，幅およびアスペクト比の関係である．垂直荷重の増加とともに溝深さ，幅ともに増加していである．垂直荷重の増加とともに溝深さ，幅ともに増加している．アスペクト比は，垂直荷重に係らずほぼ1.59に近い値をとる．アスペクト比は，垂直荷重に係らずほぼ1.59に近い値をとっていることから，切れ刃の形状をよく転写した加工が行われっていることから，切れ刃の形状をよく転写した加工が行われていることがわかる．すなわち，横すくい角を導入しても，横ていることがわかる．すなわち，横すくい角を導入しても，横すくい角のない切れ刃と同様に，垂直荷重に係らず一定のア
すくい角のない切れ刃と同様に，垂直荷重に係らず一定のアスペクト比を有する溝加工が可能である．
スペクト比を有する溝加工が可能である．
図11は，垂直荷重746µNで加工した加工溝のSEM観察像
図11は，垂直荷重746µNで加工した加工溝のSEM観察像である．負の横すくい角側では，盛り上がりが発生しているのである．負の横すくい角側では，盛り上がりが発生しているのに対し，正の横すくい角側では，盛り上がりの発生が抑えられに対し，正の横すくい角側では，盛り上がりの発生が抑えられていることがわかる．以上のことから，切れ刃に正の横すくいていることがわかる．以上のことから，切れ刃に正の横すくい角を設けることは，加工溝の盛り上がり低減に有用であること
角を設けることは，加工溝の盛り上がり低減に有用であることがわかった．
がわかった．

ーの成分を活かしつつ、カフェインの除去や低減が行われた製品の開発が期待される。
その一方で、本研究において、低温焙煎による加工で熱水抽出物中のクロロゲン酸が増加すること（図１）、抗酸化性が向上すること（図4）を明らか(a) 鳥瞰
(b) 断面(a) 鳥瞰

図 11 加工溝の SEM 観察像
図 11 加工溝の SEM 観察像

していると推測されるが、それ以外の抗酸化性を示す成分の保持が期待され、α-glu 阻害活性以外の機
Nanolithography, Science, 283 (1999) 661.
Nanolithography, Science, 283 (1999) 661.

3) K. Ashida, N. Morita and Y. Yoshida: Study on Nanomachining Process
能性を示すことも推測される。今後、低温焙煎コー
3) K. Ashida, N. Morita and Y. Yoshida: Study on Nanomachining Process

Using Mechanism of a Friction Force Microscope, JSME Int. J., Ser.C, 44
Using Mechanism of a Friction Force Microscope, JSME Int. J., Ser.C, 44(2001) 244.
ヒーの他の機能性に関しても検討を重ねていきたい。
(2001) 244.
4)
4)
5)
5)

T. Ono and M. Esashi: 走査型プローブ顕微鏡とナノメートル加工への応

7)

T. Sakuhara, M. Suda, K. Furuta and N. Watanabe: Micro Fabrication
Using SPM, J. Jpn. Soc. Precision Eng., 68, 2 (2002) 197 (in Japanese).

8)

H. Yoshida, A. Matsumuro, H. Iwata and M. Takagi: Nanoprocessing on
Silicon(100) Surface by Using SPM and the Study of the Structural Change,

Silicon(100) Surface by Using SPM and the Study of the Structural Change,
物質の探索を行いたいと考えている。
J. Jpn. Soc. Precision Eng., 73, 10 (2007) 1149 (in Japanese).

J. Jpn. Soc. Precision Eng., 73, 10 (2007) 1149 (in Japanese).
J. Shimizu, L. Zhou, T. Yamamoto, T. Tsumura, H. Okabe and H. Eda:
J. Shimizu, L. Zhou, T. Yamamoto, T. Tsumura, H. Okabe and H. Eda:
Analysis of diamond grinding process of silicon wafer by nano-scratching,
Analysis of diamond grinding process of silicon wafer by nano-scratching,
J. Jpn. Soc. Abras. Technol., 52, 10 (2008) 601 (in Japanese).
J. Jpn. Soc. Abras. Technol., 52, 10 (2008) 601 (in Japanese).
10) M. A. McCord and R. F. Pease: Scanning tunneling microscope as a10) M. A. McCord and R. F. Pease: Scanning tunneling microscope as a
micromechanical tool, Appl. Phys. Lett., 50 (1987) 569.
micromechanical tool, Appl. Phys. Lett., 50 (1987) 569.
11) E. J. van Loenen, D. Dijkkamp, A. J. Hoeven, J. M. Lenssinck and J.
11) E. J. van Loenen, D. Dijkkamp, A. J. Hoeven, J. M. Lenssinck and J.
Dieleman: Nanometer scale structuring of silicon by direct indentation, J.
Dieleman: Nanometer scale structuring of silicon by direct indentation, J.
Vac.日
Sci.本
Technol.,(1989)
コ ーA8ヒー 574.
協 会 、 統 計 資 料 (2015),
1) 全
Vac. Sci. Technol., A8 (1989) 574.
12) K. Komori, N. Morita, N. Takano, S. Yamada and T. Oyama: Removal of12) K. Komori, N. Morita, N. Takano, S. Yamada and T. Oyama: Removal ofSingle Layer from Multiple Layers in LSI Using Machining Cantilever in
http://coffee.ajca.or.jp/wp-content/uploads/2011/08/d
Single Layer from Multiple Layers in LSI Using Machining Cantilever in
AFM, J. Jpn. Soc. Abras. Technol., 53, 6 (2009) 385 (in Japanese).
AFM, J. Jpn. Soc. Abras. Technol., 53, 6 (2009) 385 (in Japanese).
13) ata05_2015-11.pdf
N. Takano, N. Morita, H. Hayashi, N. Kawasigi, S. Yamada, T. Ohyama, K.
13) N. Takano, N. Morita, H. Hayashi, N. Kawasigi, S. Yamada, T. Ohyama, K.
Kanda, S. Takano and T. Obata: Development and its Applications of
Kanda, S. Takano and T. Obata: Development and its Applications of
Diamond Array Tool using Silicon Mold (1st Report) - Fabrication of
Diamond Array Tool using Silicon Mold (1st Report) - Fabrication of
Diamond Array Tool using Silicon Mold-, J. Jpn. Soc. Precision Eng., 70,
DiamondTool；Caffeic
using Silicon
Mold-,J. Jpn. Soc. PrecisionEng., 70,
G.Arrayet,al.
chlorogenic
acids inhibit2) Oboh,and
11 (2004)
1402(in Japanese).
11 (2004) 1402 (in Japanese).
14) N. Kawasigi, T. Fukase, N. Takano, N. Morita, S. Yamada, T. Ohyama, K.
14)keyN. enzymes
Kawasigi, T. linked
Fukase, N.
N.diabetes
Morita, S. Yamada,
T. Ohyama,
toTakano,
type
vitro):
aand K.
Kanda, S. Takano,
T. Obata
and2 K.
Ashida: (inDevelopmentits
Kanda, S. Takano, T. Obata and K. Ashida: Development and its
Applications of Diamond Array Tool using Silicon Mold (2nd Report) Applications ofstudy.
Diamond Array
using
Silicon Mold
(2nd Report) comparative
BasicTool
Clin
Physiol
Fabrication of MachiningJCantileverwith Arbitrary
TipPharmacol.
Shape-, J. Jpn. Soc.
Fabrication of Machining Cantilever with Arbitrary Tip Shape-, J. Jpn. Soc.
Precision Eng., 72, 8 (2006) 1025 (in Japanese).
PrecisionEng., 72, 8 (2006) 1025 (in Japanese).
p.165-70(2015).
15)26(2),N. Takano,N. Morita, H. Hayashi, N. Kawasigi, S. Yamada, T. Ohyama, K.
15) N. Takano, N. Morita, H. Hayashi, N. Kawasigi, S. Yamada, T. Ohyama, K.
Kanda, S. Takano and T. Obata: A study on micromachining using diamond
Kanda, S. Takano and T. Obata: A study on micromachining using diamondarray tool -1st report : Evaluation of machining performance for precisionarray tool
-1st report : Evaluation of machining performance for precision
山梨県工業技術センター研究報告,
3) 辻ら;
辻ら; 山梨県工業技術センター研究報告, 15,machining
tool-, J. Jpn. Soc. Abras. Technol., 48, 9 (2004) 510(inmachining tool-, J. Jpn. Soc. Abras. Technol., 48, 9 (2004) 510 (inJapanese).
Japanese).
16) p.34-39(2000).
N. Takano, H. Sugihara, D. Oka, N. Morita, S. Yamada, T. Oyama and K.
16) N. Takano, H. Sugihara, D. Oka, N. Morita, S. Yamada, T. Oyama and K.
Ashida: A study on micromachining using diamond array tool Ashida: A study on micromachining using diamond array tool Development of one cubic inch size micro milling machine-, J. Jpn. Soc.
Development of one cubic inch size micro milling machine-, J. Jpn. Soc.
Abras. Technol., 48, 12 (2004) 700 (in Japanese).
Abras. Technol., 48, 12 (2004) 700 (in Japanese).
17) N．Kawasegi，N. Takano，D. Oka，N. Morita，S. Yamada，K. Kanda，S.
17) N．Kawasegi，N. Takano，D. Oka，N. Morita，S. Yamada，K. Kanda，S.
Takano，T. Obata and K. Ashida: Nanomachining of Silicon Surface Using
Takano，T. Obata and K. Ashida: Nanomachining of Silicon Surface Using
Atomic Force Microscope with Diamond Tip, ASME J. Manuf. Sci. Eng.,
Atomic Force Microscope with Diamond Tip, ASME J. Manuf. Sci. Eng.,
128 (2006) 723.
128 (2006) 723.
18) N. Kawasegi, N. Takano, D. Oka, N. Morita, S. Yamada, K. Kanda, S.
18) N. Kawasegi, N. Takano, D. Oka, N. Morita, S. Yamada, K. Kanda, S.
Takano, T. Obata and K. Ashida: Nanomachining by Cantilever with
Takano, T. Obata and K. Ashida: Nanomachining by Cantilever with
Diamond Tip Using Atomic Force Microscopy, Proc. of The 2nd
Diamond Tip Using Atomic Force Microscopy, Proc. of The 2nd
JSME/ASME Int. Conf. on Materials and Processing 2005：NTM-6 (2005).
JSME/ASME Int. Conf. on Materials and Processing 2005：NTM-6 (2005).
9)
9)

参考文献

盤研究（C）を受けて行われたことをここに記して，謝意を表し

盤研究（C）を受けて行われたことをここに記して，謝意を表し
酸のみでその活性を説明できない事を明らかにし、ます．
ます．

他のポリフェノールの関与を示唆するものである。
５．参考文献その活性は焙煎により大きく低下しないことから
５．参考文献R. D. Piner, J. Zhu, F. Xu, S. Hong and C. A. Mirkin:
R. D. Piner, J. Zhu, F. Xu, S. Hong and C. A. Mirkin:

6)

Using SPM, J. Jpn. Soc. Precision Eng., 68, 2 (2002) 197 (in Japanese).
を継続し、質量分析等により新たなα-glu
活性阻害8) H. Yoshida, A. Matsumuro, H. Iwata and M. Takagi: Nanoprocessingon

本研究の一部は，日本学術振興会科学研究費補助金基を持つ事を確認したが、既報とは異なりクロロゲン
本研究の一部は，日本学術振興会科学研究費補助金基2)2)T. Shibata: Micromachining of Diamond Thin Films, J. Surf. Finish. Soc.
T. Shibata: Micromachining of Diamond Thin Films, J. Surf. Finish. Soc.

用, Journal of SICE, 38, 12 (1999) 763 (in Japanese).
用, Journal of SICE, 38, 12 (1999) 763 (in （図７）Japanese). 。今後も研究出物に含まれることを示唆した
7) T. Sakuhara, M. Suda, K. Furuta and N. Watanabe: Micro Fabrication

本研究は、コーヒー熱水抽出物がα-glu 阻害活性

G. Binnig, C. F. Quate and Ch. Gerber: Atomic Force Microscope, Phys.

T. Ono, H. Hamanaka and M. Esashi: Micromachining and Scanning Probe
T. Ono, H. Hamanaka and M. Esashi: Micromachining and Scanning Probe

Microscope, J. Surface Sci. Soc. Jpn., 18, 4 (1997) 198 (in Japanese).
本研究において、クロロゲン酸以外のポリフェノ
Microscope, J. Surface Sci. Soc. Jpn., 18, 4 (1997) 198 (in Japanese).

Jpn., 50, 11 (1999) 961 (in Japanese).
ールでα-glu阻害活性を持つ物質がコーヒー熱水抽
Jpn., 50, 11 (1999)
961 (in Japanese).
6) T. Ono and M. Esashi: 走査型プローブ顕微鏡とナノメートル加工への応

４．結 言
４．結 言
本研究では，AFM機構と加工用AFMカンチレバーを用い本研究では，AFM機構と加工用AFMカンチレバーを用い
図６ PVPP によるポリフェノール除去の効果て，微細かつ高精細なV溝加工を行うことを目的として，集束て，微細かつ高精細なV溝加工を行うことを目的として，集束
イオンビームを用いて，ダイヤモンド切れ刃の先端角，すくい
イオンビームを用いて，ダイヤモンド切れ刃の先端角，すくい
角，横すくい角を設けた加工用AFMカンチレバーを作製し，角，横すくい角を設けた加工用AFMカンチレバーを作製し，Ni-P合金に対して溝加工実験を行い，切れ刃形状が加工溝
Ni-P合金に対して溝加工実験を行い，切れ刃形状が加工溝②
性状に及ぼす影響について検討を行った．その結果，以下性状に及ぼす影響について検討を行った．その結果，以下①クロロゲン酸①の結言を得た．
②カフェインの結言を得た．
1) FIB を用いて加工用 AFM カンチレバー切れ刃の加工を＊未確定
1) FIB を用いて加工用 AFM カンチレバー切れ刃の加工を行ったところ，先端角 35 ，切れ刃先端丸み半径 20nm
行ったところ，先端角 35 ，切れ刃先端丸み半径 20nmのダイヤモンド切れ刃を作製することができた．
のダイヤモンド切れ刃を作製することができた．
*
2) 切れ刃の先端角が 35 のカンチレバーは，すべてのすく2) 切れ刃の先端角が35 のカンチレバーは，すべてのすく** *い角において，本実験範囲内の加工距離では，摩耗やい角において，本実験範囲内の加工距離では，摩耗や欠損などの形状変化は見られず，十分な強度と耐摩耗欠損などの形状変化は見られず，十分な強度と耐摩耗性を有することを示した．
性を有することを示した．
1％PVPP 処理で
図７ 低温焙煎コーヒー熱水抽出物の
3) すくい角が0 のとき溝深さ，幅ともに最も大きくなり，切れ3) すくい角が 0 のとき溝深さ，幅ともに最も大きくなり，切れ刃の断面形状のアスペクト比に近かった．
吸着した成分のクロマトグラム
刃の断面形状のアスペクト比に近かった．
4) 正の横すくい角を設けることにより，加工溝の盛り上がり
4) 正の横すくい角を設けることにより，加工溝の盛り上がりの低減に有用であることがわかった．
の低減に有用であることがわかった．
今後は，高能率な微細加工を実現する加工用AFMカンチ
4.今後は，高能率な微細加工を実現する加工用AFMカンチ
おわりにレバーを開発し，その性能評価を行っていく．
レバーを開発し，その性能評価を行っていく．

1)1)(b) 断面にした。この抗酸化性向上にはクロロゲン酸も寄与

G. Binnig, C. F. Quate and Ch. Gerber: Atomic Force Microscope, Phys.
Rev. Lett.,
56、(1986)
930.
（図２、５）
一般に市販されているドリップタイプ
Rev. Lett., 56 (1986) 930.
Dip PenDip Penのコーヒーで同様の活性が期待出来る。そのため、コーヒーの積極的な摂取は穏やかな血糖値上昇に役立つことが期待されるが、その一方で刺激性物質であるカフェインを多く含む飲料であることから、摂取に際しては注意が必要である。そのため、コーヒ

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