12

浦 上財 団研 究 報告 書VoL10(2002)

ビ タ ミンB,の 抗 腫瘍効 果 に関 す る基礎 的 ・臨床 的研 究

岡1.はじ め に

近年,ビ タ ミンに対す る社会 の認 識 は大 きく変化 し,ビ タ ミンの欠 乏 を対 象 とした時代 か ら直 接
疾病 の予防 や治療 に応用 する時代 へ変化 して きて

2.実

験 方 法

2.1細胞 培養達三(鹿 児島大学農学部教授)

ヒ ト肝 がん細 胞 であ るHepG2細ATCC)を10%牛い る。 腫瘍 に対す る ビタ ミンの効 果 について は,な らび に100μg/mlstreptmycinを緑黄色 野菜 の摂取 とが んの リスクに関 する研究 が培 地 で培 養 した。

報告 されて以 来,多 くの疫 学的研 究や 介入試験 に

2.2SDS‑PAGEと基 づいて抗 酸化作 用を示 すカ ロテノイ ド,ビ タ ミッ ト分析

ンCな らびに ビタ ミンEな どにがんの リス クと強HepG2細胞(HB8065,胎児血 清,1001U/mlpenicillin
含 むMEMアル ブ ミンの イ ム ノブ ロ胞 か ら分 泌 され るア ルブ ミンに及 ぼい負 の相関 があ るこ とが 示 されて きた 。世界 中かすB6の 効果 を検 討 す る 目的 でSDSポリア ク リ

ら得 られ た こ れ ら の 結 果 は,1997年 にWorldル ア ミドゲル電 気 泳動(SDS‑PAGE)とイム ノ

CancerResearchFundかブ ロ ッ ト分 析 を行 った。50μ1の培 養液 をSDS‑ら発行 された"Food,NutritionandthePreventionofCancer:aPAGEでglobalperspective"にま とめ られてい る。
一方,ビ タ ミンB6(B6)は,動物の成 長や 発生で染色 した。一 方,5μ1の 培 養液 をSDS‑PAGEに必須な水 溶性 ビタ ミンで あ り,活 性 型で ある ピ

ヒ ト血清 アルブ ミン抗体 を用い てイム ノブロ ッ ト

リ ドキ サー ル リン酸(PLP)が分析 を行 った。

ア ミノ酸代 謝 に関展開 した後,Coomassiebrilliantblueで展 開 した後,ニトロセ ルロー ス膜 に転 写 し,抗与 する酵 素の補酵 素 と して機 能 して いる。我 々 は,

2.3ノこれ までB、の補 酵素 として の機能 以 外 に,活 性細 胞か らTRIzol試型 で あるPLPが転写 調節 因子 と相 互作 用 して遺ーザ ン プロッ ト分析て全RNAを薬(GIBCOBRL)を用い

抽 出 した 。ア ガロー スゲル で電気 泳伝 子発現 を抑制 する こ とを明 らか に して きたト9)。

動後 ニ トロセ ルロ ース膜 に転写 し,32Pで 標識 し

一 方,が ん細 胞や がん 患者 の血 清で はB、濃 度がた ヒ トア ルブ ミンcDNAお

減 少 して い る ことが 報告 され てい る1°‑12)。
本研を用い てノー ザ ンプ ロ ッ トを行 った。mRNA発究 で は,以 上の 結果 に基 づ いて,が ん 細胞 へB6

現量 は レーザー デン シ トメー ターに よって定量 化を添加す る と細 胞増殖 性の がん遺伝 子の発 現を抑した。

制 し,ひ いて はがん細 胞の増 殖 を抑制 す るので は2.4培

ないか との考 えに至 り,が ん細胞 の増殖 に及ぼす

MEMO.1m1当B6の 効 果 を検 討 した。

よびGAPDHcDNA

養細 胞の タンパ ク質合成能た り1×104個 の 細胞 を96ウ エ

ル のプ レー ト上 で24時 間培 養 した後,MEMのあるい は種 々の濃 度の ピ リドキシ ンを含 むMEM

みビタ ミンB6の13

抗 腫瘍 効果 に関 する 基礎 的 ・臨床 的 研究と培 地 を 交換 し更 に3時 間培 養 した。 その後,0.5μCiの[14C]leucine(比活性56mCi/mmol)を加 えて16時 間 インキ ュベー トした。 イ ンキュベー ト後細 胞 をPBSで洗 い,マ イク ロチ ュー ブへ移 し た。遠 心 後,細 胞 に10%ト(TCA)を加 え,TCA不リ ク ロ ロ酢 酸

溶 性 の沈 殿物 の放 射 活

性 を液体 シ ンチレー ションカ ウンター にて測定 した。
2.5形態 学的解析

HepG2細胞 をピ リ ドキ シ ン存 在下 あ るい は非存在 下 で4日 間培 養 した後,800×gで3分

間遠心 して細 胞 を 回収 した 。得 られ た細 胞 を2.5%
glutaraldehyde/0.1Mphosphatebuffer(pH7.4)で3時間固定 した。1%osmiumtetroxideで再 固定後,脱 水 してEpon812で抱埋 した。超薄 切 片 をuranylacetateとleadcitrateでし,JEM‑1200EXLL電2.6invivoで胞 の増 殖 に及 ぼ す ピ リ ド キシ ン の 効 果・:OmM,:2.5mM,D:4.OmM,O:5.OmM

ピ リ ドキ シ ン

染色子 顕微鏡 にて 観察 した。の腫瘍 増殖 に及 ぼすB6の 効 果

マ ウス 自然発症 肝 がん 由来 のMH‑134細C3H/Heマ

図1HepG2細胞 をウス の背部 皮 下 に移植 し,3日

コン トロール,0.5mg群,1.Omg群

後にに分 けて飼育 した。 コ ン トロール群 に は生理食 塩 水0.1m1/bodyを,0.5mg群

及び1.Omg群には10mg/m1の 塩 酸 ピ リ ドキ シ ン をそ れ ぞ れ0.05m1/body,0.lml/bodyず

つ腹 腔 内 に 毎 日投 与 した。投 与

1週 間後 に腫瘍 を摘出 して重量 を測定 した。
3.結果

3.1HepG2細胞 の増 殖 に 及 ぼす ピ リ ドキ シン及 びその他 のB,化 合物 の効 果
HepG2細胞 を培 養 して い る培 地 に ピ リ ドキ シ

図2HepG2細胞の増殖に及ぼすビタミンB6化 合物の効果●:無 添加,[コ:ピ リドキサ ミン,△:ピ○:ピ リドキシン

リドキサール,ンを加 える と,投 与量依 存的 に細胞 の増殖 を阻害

効果 的 であ っ た(図2)。5mMのした(図1)。

存在 下 で培 養 した 細胞 をtrypanblueで特 に5mMのピ リ ドキ シ ンを添 加

ピ リ ドキシ ン
染色すした細胞 の増殖 は完全 に抑制 された。 一方,ピ リる と96〜98%がpositiveであ り,ピ リ ドキ シ ン

ドキ シン以外 の他 のB6化 合物 に つい て,細 胞 増

非存 在の培地 に変 えて再 び培養す る と細胞 の増殖

殖抑 制 の効 果 を検 討 した結果,ピ リ ドキサ ールがが観 察 され た。

14

浦上 財 団研 究報 告書Vol.10(2002)

3.2HepG2細胞 の アル ブ ミン分 泌 に 及 ぼす

ピ リ ドキ シンの効果
ヒ ト肝 がん 由来 のHepG2細胞 は,肝 特異 的な

アル ブ ミンや αフ ェ トプロ テイ ンの よ うな血 漿
タンパ ク質 を合成 分 泌す る13・'4)。B、が細 胞 の増殖 を抑制す るの みな らず,細 胞 の機能 に も影 響 を
及 ぼすか ど うか を検討 する 目的 で,ア ル ブ ミンの分 泌に及 ぼす ピ リドキシ ンの効 果 を検 討 した。細胞 を培 養 した培 養液 を毎 日交 換 し,HepG2細胞か ら培 養 液 中 に分泌 され た アル ブ ミンをSDS‑PAGEによっ て分析 した。 その結 果 ピ リ ドキ シ

ンを含 まない コン トロールの培 地 には培養後5日目まで十分 な タンパ ク質 が観察 され たが,ピ リドキシン を含 む培地 で は培 養 した時間 に依存 してタンパ ク質 の分 泌が減 少 した(図3A)。HepG2が分泌 す る主 要な タンパ ク質 はアル ブ ミンで ある こ図3HepG2細の効果

胞の分泌タンパク質に及ぼす ピリドキシン

A:全 ての分泌 タンパク質に及ぼす ピリドキシンの効果(SDS‑PAGE),B:ア
ルブ ミンの分泌 に及ぼす ピリドキシンの効果(イ ム ノブロッ ト)

とか ら,ア ル ブ ミンの分 泌 をイム ノブロ ッ トに よる 目的 で ノーザ ンプロ ッ トを行 った。5mMのって検討 した。5mMのリ ドキ シン を培 地 に添加 後,HepG2細ピ リドキシ ンを含 む培 地

ピ胞 にお けで は,ア ル ブ ミンの分泌 が顕著 に減少 し,培 養後るア ルブ ミンmRNAレ

5日 目で はコ ン トロー ルの10%ま で低 下 した(図期で 急速 に減 少 した(図4A,B)。

3B)0

ロー ル と して のGAPDHの発 現 には何 ら影 響 を

及 ぼ さなか っ た(図4A)。

これ らの結 果 は,ピ

3.3ア

ル ブ ミン遺伝 子発 現 に及 ぼす ピ リ ドキシ ンの効果

一 方,コ ン ト

リドキシ ンが細 胞内 におい てアル ブ ミンのよ うな

ピ リドキシ ンによ るアルブ ミン分泌 の低下 がアル ブ ミンmRNAの

ベル は20時間 の代謝 半減低下 に よるか ど うか を検討 す

分泌性 タ ンパ ク質の発 現に選択 的 に影響 を及ぼすことを示唆 してい る。

図4HepG2細胞のアルブ ミン遺伝子発現に及ぼすピリ ドキシンの効果
A:ア ルブ ミンmRNAのノーザ ンプロ ット解析,GAPDHmRNAはコン トロール として示してある。
B:(A)を スキャン後,定 量化 してグラフで示 してある。
●::.,○'+B6

15ビ タ ミンB、 の 抗腫 瘍 効果 に 関す る基 礎 的 ・臨 床的 研究

3.4タ

ンパ ク質 合成 に及 ぼす ピ リ ドキシ ンの効果

5mMピリドキシンで はコ ン トロール の10%ま で低下 した(図5)。

細胞 内 タンパ ク質合成 に及ぼ すピ リ ドキ シンの効果 に つい て検討 した。HepG2細3.5細胞の形態 に及 ぼす ピリ ドキ シンの効果

胞 を種 々の 濃細胞 内 クロマチ ン構 造 は,遺 伝子 の転写活 性 に

度の ピ リ ドキ シン と3時 間イ ンキュベ ー トした後,依存 して変 化す る こ とが知 られ て いる15)。B6は標識 ロイ シンの細 胞内 タンパ ク質 への取 り込 みを

HepG2細検討 した。HepG2細ことか ら,B6に よるHepG2細胞 にお け るタ ンパ ク質合 成

能 は添 加 した ピリ ドキ シンの濃度 依存的 に減 少 し,胞 のアル ブ ミン遺伝 子発 現 を抑 制 す る胞の形 態的変 化 を

電子顕 微鏡 によ って観 察 した。 ピリ ドキ シン非存在下 で培養 したコ ン トロー ルのHepG2細胞 は,核膜 が くび れた典型 的なが ん型の細 胞核 を示す とともに複 数個 の核 小体 が 観察 された(図6A)。
一方,5mMのピ リ ドキシ ン存 在下 で培 養 した細胞 は1個 の核 小体 をもつ滑 らか な環状 の核 を示 し,
核膜 周辺 には多 くのヘテ ロクロマ チンが観 察 された(図6B)。
3.6invivoでの腫瘍増 殖 に及ぼすB、 の効果

マ ウ ス自然 発症 肝が ん由 来 のMH‑134細C3H/Heマ

胞 をウスの 背部皮 下 に移植 し,invivoでの腫 瘍増殖 に 及ぼ すB6の 効 果 を検討 した 。腫瘍細胞 を移植後,3日目か ら0.5mgと1.Omgの塩酸 ピ リドキシ ンをそれぞれ 腹腔 内に1週 間投与 し
図5HepG2細の効果

胞のタンバク質合成能に及ぼすピリドキシン

Ll4C]ロ イシンの細胞内 タンパク質への取 り込みに よりタンパク質合成能 を測定した。ピリドキシンを加えない時 のタンパ ク質合成能(81,000cpm/we11)を100%とした。

た。 その後腫 瘍組織 を摘 出 して重量 を測定 した結果,0.5mg群

で はコン トロールの60%また1.Omg群

で は50%ま で 低下 した(図7)。

図6HepG2細胞の形態学的変化 に及ぼすピ リドキシンの効果
A:ピ リ ドキシンを含まない培 地で培養 したHepG2細 胞,Bl5mMのピリ ドキシンを含む培地で培 養したHepG2細 胞で,ま一 方,16

浦 上 財団 研究 報 告書VoL10(2002)

して いた。
B6の 活性 型で あ るPLPは,アミノ酸代 謝 に関与す る酵素 の補酵素 として知 られ てい るが,補 酵
素 としての機 能以外 に もRNApolymerasel7),
Reversetranscriptasel8)ある い はDNA

polymerase19)の 活 性部位 に存 在 す る リジ ン残基の ε一NH2と シ ッフベ ース を介 して結 合 し,そ れぞれ の酵素 の活性 を阻害す る ことが知 られて いる。
またcidlowskiのグル ープ は,細 胞 内 のPLP濃度 を変 化 させ る ことに よってス テロイ ドホル モン
図7マウス自然発症 肝がん由来MH‑134細 胞 を移植 した
担がんモテルマウスのがん組織重量にの及ぼすピリドキ シンの効果

マウス自然発症肝がん由来 のMH‑13‑1細 胞をC3H/Heマ ウスの背部皮下に移植 し,3日 後にコン トロール,0,5mg群,1.Omg群 に分 けて飼育 した。 コン トロール群には生理食塩水0.1ml/bodyを,0.5mg群及び1.Omg群 には10mg/mlの 塩酸 ピ
リ ドキシンをそれぞれ0.05m1/body,O.lml/bodyずっ腹腔内に毎 日投与 した。投与1週 間後に腫瘍を摘出して重量 を測定した。 コン トロールを100%と して示 してある。

依存性 の レポー ター遺 伝子 の発現 が変化 する こ とを報 告 し,PLPはステ ロ イ ドフ ァ ミリー に よる

遺伝 子発 現のmodulatorである こ とが 示 唆 され

てい る20,21)。
一方,我 々はB6欠 乏 ラッ トの肝臓 にお いて ア

ルブ ミン遺伝 子発現 が増大 する ことを見 いだ し,マ ウスの体 重や肝 重量 には何 ら変化 は観察 されな

PLPのHNF1やC/EBPとか った。

へ の 結合 が解 除 され た 結 果,転 写調 節 因子 のDNAへ

4.考い った転 写 調節 因子の結合 が増大 し,ア ル ブ ミン遺 伝子 発現

察が増大 す るこ とを報告 して きた4)。今 回,HepG2
DiSorboらは,ラ ッ トhepatoma細胞 で ある

培 養 して いる培 地 に5mMのピ リ ドキ

ピリ ドキ シンに よって有意 に低下 したが,こ れ もシンを添加 してが ん細胞 の増殖 抑制効 果 を観 察 しPLPが 転 写調 節 因子 へ結 合 した結 果,転 写 調節た15)。この ような効果 は,肝 が ん細 胞 のみな らず

因子 のDNAへ

0.5mMのピ リドキサール を添加 した ヒ トメラノ伝子発 現が減 少 した と思わ れる。 ピ リ ドキシ ンにー マ細 胞 にお い て も観察 され て い る16)
。 しか しよ る細 胞増殖 抑制 について は,今 後 増殖性 因子 のB6に よるFu5‑5細遺伝子 発現 について も検討 する予定 であ る。

Fu5‑5を胞 や ヒトメ ラノー マ細胞 の増殖抑制 機構 につ いて は明 らか にされて いな い。
本 研究 で は,ヒ ト肝 が ん細 胞 であ るHepG2細細胞 に お ける アル ブ ミン遺 伝子 発現 も5mMのHepG2細の結合 が抑制 され,ア ル ブ ミン遺胞 を形態 的 に観察 す る と典 型的 な癌型の細 胞核が 観察 されたが,ピ リ ドキ シンの添加胞 を培 養 した培地 に ピリ ドキ シン を加 えて顕著 なに よ り,HepG2は増殖 抑制 効 果 を観 察 した。HepG2細胞 は,ア ルは1個 で核膜 周辺 には多 くのヘテ ロク ロマ チ ンが正 常 な細胞 核 を示 し,核 小体

ブミン分泌 能 を有 して いる ことか らアル ブミンの観察 され た。 これ はB6が 転写 調節 因子 の みな ら

分泌 に及 ぼす ピリ ドキ シンの効 果 を検 討 し,ア ルず細胞 増殖 に関わ るに他の様 々な細 胞内 タンパ ク

ブ ミンの分 泌 は5mMの質 とも相互作 用 した結 果で ある可能 性 を示 唆 して

ピ リ ドキ シン によ って有意 に低下 す るこ とを観察 した。 またアル ブ ミンい る。 またB,に分泌 の低下 はアル ブ ミン遺 伝子 発現 の低 下 に起 因症肝 癌 由来 のMH‑134細よる抗腫 瘍効 果 はマ ウス 自然発胞 を移 植 したC3H/He

ビ タ ミンB6のマ ウスを用 いたinvivoの抗腫 瘍 効果 に関 す る基 礎 的 ・臨床 的研 究17

実験 で も観察 され,ピ最後 に,本 研 究 を遂 行す るにあた り,多 大 な る

リドキシ ンを投与 した マウスの がん組織 重量 は,ご援助 を賜 りま した浦 上食品 ・食文化振 興財団 お

コ ン トロ ール に比 べて約50%ま で減少 した。今 後よび関 係各位 に心 より感謝 いた します とともに,がん組 織 中の がん遺 伝子 発現 に及 ぼ すB,の 効 果

貴 財 団の益々 の ご発展 をお祈 り申 し上 げ ます。

や延命 効果 を検討 し てい く予定 であ る。 ビタ ミン
B6は 水溶 性 ビタ ミン とはい う ものの 高濃 度で 長文

期間摂 取 する ことに よ り神経症 な どの 副作用 を起1)岡こす こ とが知 られて いる ことか ら,ヒ トへ応用 す献
達三

農 芸 化 学 会 誌72,1187‑1190(総2)Oka,T.,Komori,N.,Kuwahata,M.,Sassa,T.,
Suzuki,1.,Okada,M.andNatori,Y.FEBSLett.331,

る場合,慎 重な投 与量 の評価が 必須で あ ると思わ

162‑164(1993)

れ る。最 近,疫 学調 査 か らB、が 肺 がん の リスク

3)Oka,T.,Komori,N.,Kuwahata,M.,Suzuki,1.,を減 少 させ る こ とが報 告 され た22・23}。
将 来,ビ タ0kada,M.andNatori,Y.Experientia50,127‑129(1994)

ミンB,が がん の予防 に対 して有 効 とな る ことが期待 され る。

4)Oka,T.,Komori,N.,Kuwahata,M.,Okada,M.andNatori,Y.Biochem.J.309,243‑248(1995)
5)Oka,T.,Komori,N.,Kuwahata,M.,Hiroi,Y.,

5.まとめ

Shimoda,T.,Okada,M.andNatori,Y.J.Nutr.Scr'.
Vitaminol.41,363‑375(1995)

ビタ ミンB,の 抗 腫 瘍効 果 に つい てHepG2細胞 とMH‑134細胞 を移 植 した担 がん モ デル マウ

ス を用 いて 検討 した 。HepG2細パ ク質 合成 は5mMの胞 の増 殖 とタ ン

ピ リ ドキ シ ンを培 地 に加6)Sato,A.,Nishioka,M.,Awata,S.,Nakayama,K.,
Okada,M.,Horiuchi,S.,Okabe,N.,Sassa,T.,Oka,T.
andNatori,Y.Arch.Biochem.Biophys.330,409‑413(1996)
7)Oka,T.,Kuwahata,M.,Sugitatsu,H.,Tsuge,H.,

える こ とによ って完 全 に抑 制 され た。種 々のB,

Asagi,K.,Kohri,H.,Horiuchi,S.andNatori,Y.J.

化合 物 について検 討 した結果,ピ リ ドキサ ールがNutr.Biochem.8,211‑216(1997)

ピリ ドキ シ ンと同様 の効果 を示 した。 ピリ ドキ シ8)Molina,A.,Oka,T.,Munoz,S.,Chikamori‑
Aoyama,M.,Kuwahata,M.andNatori,Y.Nutr.

ンに よるHepG2細胞 の増 殖抑制 は,ア ル ブ ミン

遺伝 子発 現の抑制 とアルブ ミンの分泌 の抑制 を も伴 って いた 。HepG2細胞 を形 態的 に観 察す る とCancer28>206‑211(1997)9)Oka,T.Nutr.Res.Rev.14,257‑265(2001)
10)Thanassi,JW.,Nutter,LM.,Meisler,NT.,Com‑
mers,P.andChiu,JF.J.Biol.Chem.256,3370‑3375

典型 的な癌 型 の細 胞核 が観察 され たが,ピ リドキ
シンの添 加 に よ り,HepG2は正常 な細 胞核 を示し,核 小体 は1個 で核 膜周辺 に は多 くのヘ テロ ク
ロマチ ンが観察 され た。 またマ ウス自然発症 肝が(1981)11)Potera,C.,Rose,DP.andBrown,RR.Am.J.Clin.
Nutr.30,1677‑1679(1977)
12)Chrisley,BM.,Hendricks,TS.andDriskell,JA.
Nutr.Res.6,1023‑1029(1986)

ん由来 のMH‑134細胞 をC3H/Heマ皮下 に移植 し,invivoでウス の背部の腫 瘍増殖 に及 ぼすB,の効 果 を検 討 した。腫 瘍細胞 を移植 後,3日
ら0.5mgと1.Omgの目か塩 酸 ピ リ ドキ シン をそれ

13)Javitt,NB.FASEBJ.4,161‑168(1990)
14)Knowles,BB.,Howe>CC.andAden,DP.Science
209,497‑499(1980)
15)DiSorbo,DM.andLitwack,G.Nutr.Cancer3,216‑222(1982)

ぞれ腹腔 内 に1週 間 投与 した結果,腫 瘍組 織重量は0.5mg群
1.Omg群で はコ ン トロール の60%まで は50%ま で低下 した。

で,ま た16)DiSorbo,DM.andNathanson,L.Nutr.Cancer5,
10‑15(1983)
17)Venegas,A.,Martial,J.andValenzuela,P.Bio一説)(1998)

18

浦 上財 団研 究 報告 書Vol.10(2002)

them.Biophys.Res.Commun.55,1053‑1059(1973)
18)Basu,A.,Tirumalai,RS.andModak,MJ.J.Biol.
Chem.264,8746‑8752(1989)
19)Modak,MJ.Biochemistry15,3620‑3626(1976)20)Allgood,VE.,Powell‑Oliver,FE.andCidlowski,
JA.J.Biol.Claem.,265,12424‑12433(1990)

21)Allgood,VE.andCidlowski,J.A.J.Biol.Chem.,
267,3819‑3824(1992)
22)Hartman,T.,Woodson,K.,Stolzenberg‑Solomon,R.,Vitamo,J.,Selhub,J.,Barrett,MJ.andAlbanes,D.Am.J.Epidemiol.153,688‑693(2001)23)趙卉,岡達三

ビ タ ミ ン75,395‑396(2001)

Basicandclinicalstudyontheanti‑tumoreffectofvitaminBs

Basicandclinicalstudyontheanti‑tumoreffectofvitaminB6

TatsuzoOka(DepartmentofVeterinaryPhysiology‑,FacultyofAgriculture,KagoshimaUniversity‑)

TheeffectofvitaminB60nthegrowthofahumanhepatomacelllineHepG2in
cultureandMH‑134hepatoma‑bearedmicewerestudied.ThegrowthofHepG2cells
andproteinsynthesiswerealmostcompletelyinhibitedinmediumsupplementedwith
5mMpyridoxine.Pyridoxalwasaseffectiveaspyridoxine,butpyridoxamineshowednoinhibitoryaction.ThegrowthinhibitionofHepG2cellsbypyridoxinewasac‑
companiedbyamarkedinhibitionofsecretionofplasamproteins,particularlyalbu‑
min.NorthernblotanalysisofalbuminmRNAshowedthatpyridoxinecausedarapid
decreaseintheexpressionofalbumingene.Theelectron‑microscopicexaminationof
pyridoxine‑treatedHepG2cellsrevealedasmoothingofnuclearmembrane,adecrease
inthenumberofnucleoli,andanappearanceofaggregatedheterochromatinstructures.
Thesemorphologicalfeaturesarecompatiblewiththedepressedtranscriptionalactivity
inthepyridoxine‑treatedcells.Ontheotherhand,theweightoftumortissuewas
decreasedto50%bytheadministrationof1%pyridoxinetoMH‑134‑bearedmice.

19