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助成番号 133263
研 究 成 果 報 告 書（国立情報学研究所の民間助成研究成果概要データベース・登録原稿）
研究テーマ（和文） ＡＢ

寄生蜂をベクターとする昆虫ウイルス－アスコウイルスの野外における発生動態の解明

研究テーマ（欧文） ＡＺ

Emergence dynamics in field of the recently discovered Ascoviruses

研究氏
代表名
者

ｶﾀｶﾅ ＣＣ姓）イノウエ名）マキ

研究期間 Ｂ

２０１３ ～ ２０１５ 年

漢字 ＣＢ

井上真紀

報告年度 ＹR

２０１５ 年

ﾛｰﾏ字 ＣＺ InoueMaki

研究機関名

東京農工大学研究代表者 ＣＤ
所属機関・職名

東京農工大学・講師

概要 ＥＡ (600 字～800 字程度にまとめてください。)

1. ハスモンヨトウにおけるアスコウイルスの感染(1) 病原性
ハスモンヨトウ 4 齡幼虫の血体腔に注射接種を行ったところ、PBS 接種した対照区の幼虫は全て蛹化
したが、アスコウイルス分離株 SlAV を接種した幼虫は全て致死した。感染虫の体サイズは健全虫と比較して非常に小さく、また体液の白濁にともなって体色がやや白味がかっていた。
致死時間は、ウイルス粒子数 6.1×10、6.1×102、6.1×103 いずれも 13 日から 14 日であり、ウイルス接種濃度による致死時間には有意差はなかった。
(2) 感染組織
ハスモンヨトウ 4 齡幼虫に SlAV を注射接種し、光学顕微鏡で観察したところ、体液には肥大化した細胞や細胞の細分化によって生じたベシクル構造がみられた。分轄された細胞のサイズは直径 3.7±0.2 μmであった。電子顕微鏡で観察したところ、脂肪体細胞において桿状から楕円のウイルス粒子がみられた。ウイルス粒子がベシクル構造を形成している様子も観察された。一方、気管上皮や中腸においてはウイルス粒子がまったく観察されなかった。
2.寄生蜂による伝搬と SlAV の宿主範囲
SｌAV を分離した埼玉県の圃場において、ハスモンヨトウの天敵ギンケハラボソコマユバチが多く発生していた。実験室内でギンケハラボソコマユバチ雌成虫を、SlAV に感染させたハスモンヨトウ幼虫 1 頭と健全幼虫 2 頭に連続して寄生させたところ、伝播率は 84.2%であった。
そこで、ギンケハラボソコマユバチの寄主であるハスモンヨトウと同じヤガ科に属するイチジクキンウ
ワバ、ドクガ科マイマイガ、ギンケハラボソコマユバチが寄生しないハマキガ科チャノコカクモンハ
マキを用いて SlAV の感染と病徴を観察した。その結果、イチジクキンウワバの感染虫の体サイズは小さく、体液が白濁していた。またベシクル形成の病徴がみられたが、細胞サイズは直径 1.6±0.2 μm であり、ハスモンヨトウより小さい傾向にあった。一方、マイマイガでは細胞の肥大化はみられず、わずかに細分化された細胞（直径 1.3±0.1 μm）が観察された。チャノコカクモンハマキにおいては、感染虫と健全虫に違いが見られなかった。
以上のことから、埼玉県でハスモンヨトウから分離したアスコウイルス SlAV は、他種に比べ、ハスモンヨトウに対して微量でも非常に強い病原性を示すことが示された。
キーワード ＦＡ

ウイルス

ベクター

寄生蜂

（以下は記入しないでください。）
助成財団ｺｰﾄﾞ ＴＡ

研究課題番号 ＡＡ

研究機関番号 ＡＣ

シート番号- 1 -ベシクル構造

発表文献（この研究を発表した雑誌・図書について記入してください。）
論文標題ＧＢ
雑誌

著者名 ＧＡ
ページ ＧＦ

雑誌名 ＧＣ～発行年 ＧＥ

巻号 ＧＤ

論文標題ＧＢ
雑誌

著者名 ＧＡ
ページ ＧＦ

雑誌名 ＧＣ～発行年 ＧＥ

巻号 ＧＤ

論文標題ＧＢ
雑誌

著者名 ＧＡ
ページ ＧＦ

雑誌名 ＧＣ～発行年 ＧＥ

巻号 ＧＤ

発行年 ＨＤ

総ﾍﾟｰｼﾞ ＨＥ

発行年 ＨＤ

総ﾍﾟｰｼﾞ ＨＥ

著者名 ＨＡ
図書

書名 ＨＣ
出版者 ＨＢ
著者名 ＨＡ

図書

書名 ＨＣ
出版者 ＨＢ

欧文概要 ＥＺ
1. Tissue tropism
Purified virions of SlAV were inoculated into fourth instar of Spodoptera litura. All S. litura larvae were
killed by hemocoelic injection of SlAV virions. Sixty-one virions were enough to kill all larvae. Fourth instarof S. litura larvae were inoculated with 6.1x10 3 SlAV virions per larva with a microinjector. Fat body cells
were readily infected by SlAV, showing many propagated virions. In contrast, tracheal cells and midgut
cells did not show any virions, suggesting that they were not infected. Infected cells formedvirion-containing vesicles.
2. Viral transmission by parasitoid and host range
Meteorus pulchricornis (Hymenoptera, Braconidae) was dominant parasitoid species of S. litura in thefields. M. pulchricornis is a generalist with the nature of polytelic, which seems to facilitateascovirus-transmission. A S. litura 3rd larva and two healthy larvae were exposed to a female adult of M.
pulchricornis that previously stung a SlAV-infected larva. Transmission rate was 84.2%.
To determine the host range of SlAV, five species of insects, S. litura (original host of SlAV), M. separata
and C. eriosoma (Noctuid hosts of M. pulchricornis), L. dispar (non-Noctuid host of M. pulchricornis), andA. honmai (non-noctuid and not parasitized by M. pulchricornis), were inoculated with 6.1x10 3 virions ofSlAV per a larva. Noctuid larvae, S. litura and C. eriosoma, showed significant vesicle-formation in theirhemolymph. Enlarged cells and dissociated vesicles seen in their hemolymph were typical ascoviralcytopathology. L. dispar did not show cell-enlargement, but some small cell particles. Another non-Noctuid
insect, A. honmai larva did not show any cytopathology in hemolymph.

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