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混合酸化剤溶液の Cryptosporidium parvum
オーシスト感染性に対する不活化効果1）

北里大学医学部微生物学，3）実験動物センター，2）北里環境科学センター

笹原 武志1）
佐藤 義則1）

青木 正人2）
北里 英郎1）

関口 朋子1）
井上 松久1）

高橋晃3）（平成 14 年 7 月 31 日受付）
（平成 14 年 10 月 30 日受理）

Key words：

Cryptosporidium parvum, mixed-oxidant solution, disinfectant

要

旨

強酸性電解水の一つである混合酸化剤溶液（Miox 溶液と称す）の Cryptosporidium parvum オーシストの感染性におよぼす不活化効果について乳飲みマウス感染モデルを使って検討した．その結果，Miox溶液（滅菌 PBS 希釈）は残留塩素濃度および処理時間依存的にオーシストの感染性に対して不活化効果を発揮し，腸管から検出されるオーシスト数は，無処理対照群と比較して残留塩素濃度 5mg!
l ，2 時間処理で 0.5log10，4 時間処理で 1.5〜2.1log10 の有意な減少を認めた．一方，次亜塩素酸ナトリウム溶液（滅菌
PBS 希釈）では残留塩素濃度 5mg!
l ，4 時間同様に処理した場合でも腸管から検出されるオーシスト数の減少を全く認めなかった．また，両者の不活化効果の違いは形態観察によって，Miox 溶液処理群にのみ変性オーシストが散見されたことからも確認された．さらに，オーシストを含む生物処理下水に残留塩素濃度 5mg!
l の Miox 溶液を加えて 4 時間処理し，オーシスト感染性の不活効果を比較した．その結果，腸管から検出されるオーシスト数は，無処理対照群に比較して PBS 希釈 Miox 溶液で処理した場合に 2.1log10，生物処理下水希釈 Miox 溶液で処理した場合に 0.8log10 の有意な減少を示した．以上の成績
から，Miox 溶液は浄水や下水などの水環境を汚染する可能性のある C. parvum オーシストの感染性に対して優れた不活化効果を発揮することが示唆された．
〔感染症誌

77：75〜82，2003〕

はじめにて糞便中にスポロゾイトを包蔵する成熟したオー

Cryptosporidium parvum はヒトを含む哺乳類のシストを排出する2）．このオーシストの感染力は腸管に寄生する原虫であり，ヒトや家畜が感染す

非常に強く，塩素耐性で環境抵抗性が強いためにると激しい下痢を起こすことが知られている1）．

次亜塩素酸ナトリウムなどの塩素系消毒剤による

当該原虫オーシストは腸管粘膜上皮細胞の微絨毛

十分な不活化効果が期待出来ない．その為，河川に定着後スポロゾイトを脱!させてその細胞膜内

水や水道水やミネラルウオーターそして下水道水に感染し寄生胞を形成する．その後，その中で有などの水環境或いは食品がこのオーシストに汚染

性生殖と無性生殖を繰り返しながら活発に増殖しされると大規模な集団感染が発生し，地域社会に別刷請求先：（〒228―8555）相模原市北里 1―15―1
北里大学医学部微生物学
笹原 武志
平成15年 2 月20日

多大なる影響が起こることが懸念される．
C. parvum オーシストに汚染された水環境から

76

笹原

武志 他

のオーシスト除去対策としては，濾過法と塩素消

ml の割に浮遊され，4℃ で暗所
菌 PBS に 107 個!

毒或いは加熱処理による不活化法とがあるにすぎ保存された．

ない．近年，精製水に少量の食塩を添加し隔膜を2．Miox 溶液の調整

介した電気分解によって陽極側から生成される強Miox 溶 液 は Miox Water Disinfection Unit，

酸性電解水と呼ばれる機能水が，種々の病原微生type BPS（Miox Corp.，Albuquerque，NM，USA，物に対して優れた殺菌効果を発揮することが報告

日本販売代理店：エコマスコーポレーション，福されており様々な分野における殺菌にその利用が

岡）を用いて流水式にて生成され，その性状は pH期待されている3）〜5）．塩素耐性を示す C. parvum

3，
酸 化 還 元 電 位 は 1,400mV，残 留 塩 素 濃 度 はオーシストに対しても強酸性電解水の一つである

200〜300mg!
l であった．この溶液の構成成分と混合酸化剤溶液（以降 Miox 溶液と称す）が in vi-

しては 90.6％ 遊離塩素，5％ オゾン，2.3％ 二酸化

tro 及び in vivo で不活化効果を示すという報告が

塩素，2.1％ 過酸化水素が含まれていた．なお，実6）
7）

なされている ．しかし，Miox 溶液処理による験に使用する Miox 溶液は要時調整し，所定の残C. parvum オーシストの感染性不活化効果を形態

留塩素濃度になるように滅菌 PBS 或いは生物処

学的変化として観察したり，或いは生活排水の生理下水（A 処理施設由来）にて適宜希釈した．比物処理下水中のオーシストに対する感染性不活化

較対照として塩素系消毒剤である次亜塩素酸ナト

効果といった応用面に関する検証はまだ十分行わリウム（和光純薬工業，大阪）も同様に滅菌 PBS

れていない．そこで，今回我々は既に報告されてで要時調整して使用した．

いる C. parvum オーシストの乳飲みマウス感染モ

今回使用した生物処理下水は，生活排水を活性

デ ル8）を 用 い て Miox 溶 液 処 理 に よ る C. parvum

汚泥にて曝気処理後さらに沈殿処理したものであ

オーシストの感染性不活化効果の再評価を行い，り，その性状は濁度 1.2 度，pH 6.34，生物酸素要求

さらにそれに伴う形態学的変化そして生物処理下度（BOD）0.1mg!
l ，浮遊粒子状物質 1.1mg!
l で水中のオーシストに対する Miox 溶液の感染性不あった．

活化効果について検討した．
材料および方法

3．残留塩素濃度および pH の測定
Miox 溶液或いは次亜塩素酸ナトリウム溶液の1．オーシストの調整

残留塩素濃度は，オルトトリジン法により比色定

C. parvum HNJ-1 株 は 北 里 大 学 バ イ オ セ イ フ

量され mg!
l で表現された10）．

ティ安全管理規程に基づき北里大学医学部実験動物センターの感染実験エリア（レベル 2）内で無菌

pH はパーソナル pH メータ（D-21，
ホリバ，東京）を用いて測定した．

的にビニールアイソレター内で飼育されている

4．C. parvum オーシストの Miox 溶液処理

SCID マウス（C. B-17!
Icr-scidjcl，10 週齢の雄，日Miox 溶液或いは次亜塩素酸ナトリウム溶液の本クレア，東京）に経口感染させ継代維持した．

残留塩素濃度を 1，
2，
5，
10mg!
l の各濃度になるよ

オーシストは糞便から井関らの方法9）に準じて

うに滅菌 PBS で希釈した．一部の実験では Miox

76.29g!
dl ショ糖液（比重＝1.20）を用いたショ糖溶液を生物処理下水にて残留塩素濃度が 5mg!
l

密度勾配遠心法（25℃ で 2,000rpm,10 分間）によになるように調整した．所定の残留塩素濃度に調り粗精製し，さらに 16％sodium metrizoate（Ny-

整された各溶液は，1ml ずつ滅菌済みポリプロピ

comed As，Norway）含有 phosphate-buffered sa-

レン製 2ml マイクロチューブ（アシスト，東京）にline（pH 7.2，
PBS）に 溶 解 さ せ た 0.5％ お よ び 1

入れ，さらに保存していた C. parvum オーシスト％ Ficoll 400（Pharmacia，Sweden）を用いた Fi-

ml の割に加え密栓した．被検マイクロ
を 106 個!

coll 密度勾配遠心法（25℃ で 2,500rpm，15 分間）

チューブは低速振盪機（SHK03，
イワキ，東京）ににより精製した．最終的にオーシストは gentamy-

水平になるように固定し，25℃ にて一定時間ゆっcin（Sigma, St. Louis, NO, USA）200µg!
ml 含有滅くりと振盪（35rpm）させた．その後，オーシスト
感染症学雑誌第77巻第2号

混合酸化剤溶液の C. parvum オーシスト感染性に対する不活化効果

は PBS にて 3 回遠心（4℃ で 3,000rpm，10 分間）
洗浄され，一定量の滅菌 PBS に再浮遊された．なお，Miox 溶液処理によってオーシスト数が著明に減少することはなかった．

77

Fig. 1 Optimal dose of the oocysts inoculation in aneonatal mouse. The mice were orally challenged
with 102, 103, 104, or 105 of oocysts and sacrificed on
day 7. Results were expressed as the mean numbers of oocysts（n＝10）±standard deviation（SD）.

5．感染性不活化効果の評価試験
オーシストの感染には乳飲みマウス（ddy 系，
5〜6 日齢，日本 SLC，静岡）を使用し，動物は北里大学バイオセイフティ安全管理規程に基づき実験動物センターの感染実験エリア（レベル 2）内のアイソラックにて SPF 環境下で飼育した．
1 群 10 匹の乳飲みマウスに処理したオーシス
ト浮遊液 50µl を経口的に接種し，7 日目に炭酸ガスにて窒息死させた後，小腸から大腸に至る腸管（腸管内容物を含む）を取り出し，個体毎に 10％ホルマリン水溶液 7ml を入れたガラス製ホモジ
ナイザー（Wheaton，エア・ブラウン，東京）にてホモジナイズした．ホモジネート中のオーシス

当たりの変性オーシスト数の割合に 100 を乗じて

トはショ糖密度勾配遠心法により粗精製され，算出された．なお，変性オーシストとしては明ら

FITC 標 識 マ ウ ス 抗 C. parvum oocyst モ ノ ク ロ

かに形態学的異常（オーシスト壁の傷害やスポロ

ナール抗体（クリプトスポリジウム検出キット，

ゾイトの形態変化など）を示すものをそれに充て

和光純薬工業）を用いた直接蛍光抗体法により蛍た．

光染色され，最終的に 50µl の PBS に浮遊された．
オーシスト数は落射型蛍光顕微鏡（BH-2，
オリン

7．統計処理2 群間の有意差検定は t 検定にて行い，危険率

パス，東京）を用いて倍率×400 倍で被検体 0.5µl

p＜0.05 を有意とした．

当たりの蛍光染色されたオーシストを計測するこ成績とにより算出された．その結果は各計測値に 100

1．オーシストの至適接種量の検討

を乗じ，腸管当たりのオーシスト数（Number of

乳飲みマウスに 50µl 当たり 102，103，104，105

oocysts!
intestine）
として表現された．なお，非感個のオーシスト浮遊液をそれぞれ経口接種し，7

染乳飲みマウスの腸管ホモジネートについても粗日目における腸管内オーシスト数を計測して至適精製の操作後同様の免疫染色を行ったが，非特異接種量を検討した．その結果，接種量に比例して的に染色される腸管組織由来のオーシスト様構造

腸管から検出されるオーシスト数は増加し，104

物は全く検出されなかった．

個接種群において最高値（8×105 個）を示した

6．微分干渉顕微鏡による形態観察（Fig. 1）
．従って，以降の感染実験では 104 個のMiox 溶液或いは次亜塩素酸ナトリウム溶液

オーシストを至適接種量とした．

（残留塩素濃度 5mg!
l ）で 4 時間処理したオーシ

2．Miox 溶液による感染性不活化効果

ストはノマルスキー微分干渉装置付き顕微鏡（BX

Venczell ら6）が動物実験にて C. parvum オーシ

60，
オリンパス）を用いて倍率×1,000 倍で形態観スト感染性の不活化効果を認めた残留塩素濃度（5

察された．

mg!
l ）と同じ濃度の Miox 溶液を用いてオーシス

Miox 溶液或いは次亜塩素酸ナトリウム溶液処トを処理し，その感染性不活化効果に及ぼす処理

理オーシスト中の変性オーシスト数の出現率（％）

時間の影響を検討した．その結果，無処理対照群

は，各溶液処理後に計測されたオーシスト 100 個では 8.9×104 個のオーシストが検出されたのに対

平成15年 2 月20日

78

笹原

Fig. 2 Effect of contact times of the mixed-oxidant
solution on inactivation of infectivity of oocysts. The
oocysts were exposed to 5 mg !l （ residual chlorine）of the mixed-oxidant solution in PBS for contact times up to 4 h（a）and 8 h（b）.The neonatal
mice were orally challenged with 104 of oocysts obtained at the indicated times after exposure andsacrificed on day 7. Results were expressed as themean numbers of oocysts（n＝10）±SD. ＊, Values
are significant different（P＜0.05）.

武志 他
Fig. 3 Comparison of the inactivation of oocysts exposed to sodium hypochlorite or the mixed-oxidant
solution. The oocysts were exposed to 1,2 or 5 mg!l（residual chlorine）of sodium hypochlorite（a）or themixed-oxidant solution（b）in PBS for 4 h. In someexperiments, the oocysts were exposed to 5 mg!l（residual chlorine）of the mixed-oxidant solution in
biologically treated wastewater（indicated as 5 ＋W）.The neonatal mice were orally challenged with104 of the exposed oocysts and sacrificed on day 7.
Results were expressed as the mean numbers of oocysts（n＝10）±SD. ＊, Values are significant different（P＜0.05）.

して Miox 溶液処理群では処理時間に比例して腸管から検出されるオーシスト数は減少する傾向を，示し， 特に， 120 分間処理で 3×104 個（0.5log10）
240 分間処理で 2.8×103 個（1.5log10）の有意な減少

mg!
l に上げて 4 時間処理しても腸管から検出さが認められた（Fig. 2a）．さらに，同じ残留塩素濃れるオーシスト数の減少の程度は，残留塩素濃度

度の Miox 溶液で最大 8 時間まで処理を行った場

5mg!
l で処理した場合と同じ位の 2log10 であった

合におけるオーシスト感染性の不活化効果を検討（データ示さず）．従って，以降の実験におけるオー

した．その結果は Fig. 2b に示す如くであり，検出

シストの処理時間は 4 時間に固定して実施した．

されるオーシスト数は 4 時間目で 1.9×103 個（1.83．Miox 溶液および次亜塩素酸ナトリウム溶

2，8 時間目で 4.8×10 個（2.4log10）というよ
log10）

液の感染性不活化効果の比較

うに処理時間の延長によりさらに顕著な減少を示

Miox 溶液および次亜塩素酸ナトリウム溶液のした．一方，Miox 溶液の残留塩素濃度を 2 倍の 10

1,2,5mg!
l の各残留塩素濃度におけるオーシスト
感染症学雑誌第77巻第2号

混合酸化剤溶液の C. parvum オーシスト感染性に対する不活化効果

Fig. 4 Morphological changes of oocysts exposed tothe mixed-oxidant solution. The oocysts exposed to
5 mg!l （residual chlorine）of the mixed-oxidant solution（a）or sodium hypochlorite（b）in PBS for 4
h . The oocysts not exposed to the disinfectants
served as a control（c）. The morphologically degeneration of oocysts were observed under Nomarski
differential interference contrast microscopy. Original magnification：1,000×の感染性不活化効果を比較検討した．その結果，Miox 溶液で処理した場合，2,5mg!
l の残留塩素濃度において濃度依存的に腸管から検出されるオーシスト数の有意な減少が認められた（Fig. 3b）．一方，次亜塩素酸ナトリウム溶液で処理した場合，5mg!
l の残留塩素濃度でも腸管から検出されるオーシスト数の減少は全く 認 め ら れ な か っ た（Fig. 3a）．

79

a

循環型の再利用水や下水道水などの水環境処理
への Miox 溶液の応用の可能性について検討する目的でオーシストを生物処理下水にて残留塩素濃度を 5mg!
l に希釈した Miox 溶液で処理し，そのオーシストに対する感染性 の 不 活 効 果 を 滅 菌
PBS で希釈した Miox 溶液のそれと比較検討した．その結果，腸管から検出されるオーシスト数
は，無処理対照群に比較して PBS 希釈 Miox 溶液
で 処 理 し た 場 合 に 2.1log10，生 物 処 理 下 水 希 釈Miox 溶液で処理した場合に 0.8log10 のそれぞれb

有意な減少を示した（Fig. 3b）．なお，4 時間処理後における PBS 希釈 Miox 溶液，或いは生物処理
下水希釈 Miox 溶液中の残留塩素濃度の減少は検出感度（0.5mg!
l ）以下であった．また，各溶液中の pH の変化（前者で pH 7.2，
後者で pH 6.28）もほとんど認められなかった．
4．Miox 溶液および次亜塩素酸ナトリウム溶液処理したオーシストの形態観察
オーシストを 5mg!
l の残留塩素濃度の Miox溶液および次亜塩素酸ナトリウム溶液で処理し，c

微分干渉顕微鏡を用いてオーシストの形態学的変化を観察した．その結果，無処理対照群ではオー
シストの輪郭がはっきりとし，その内部には規則的に配列したスポロゾイトが確認されるのに対して，Miox 溶液で処理した場合，オーシスト壁の一部が傷害され，その内部のスポロゾイトは膨化して一部が球状を呈した状態でドーナツ状に配列したように見られる変性オーシストが散見された．
一方，次亜塩素酸ナトリウム溶液で処理したオーシストにはスポロゾイトの規則的な配列がやや乱れているものも存在したが，その形態は無処理対照群のそれとほとんど同じ状態で維持されていた

率は，無処理対照群で 0.17％，Miox 溶液処理で（Fig. 4）
．なお，その際の変性オーシスト数の出現35.5％，次亜塩素酸ナトリウム溶液処理で 0.3％ で

平成15年 2 月20日

80

笹原

武志 他

ではないかと推察される．実際に，C. parvum 分離

あった．
考

察

株の違いによって乳飲みマウスへの感染性が異な

C. parvum の水系感染の原因としては，ヒト生ることを指摘する報告もある14）．また，Miox 溶液

活環境からの下水や処理水の流入，或いは感染家を用いて残留塩素濃度 5mg!
l ，4 時間処理した畜や野生動物の糞便の混入による水道水原水（表オーシストの感染性不活化効果に関する 3 回の実

流水や伏流水など）の汚染が挙げられている．最験において有意に減少したオーシスト数に 1.5〜

近の本邦における河川水の Cryptosporidium 汚染

2.1log10 の変動が認められた背景には，今回使用しに関する疫学調査によれば 69％ の河川，55％〜75

た乳飲みマウス発育上の個体差或いはオーシスト％の採水地点から C. parvum オーシストが検出さ検出方法が係わっていた可能性があるかもしれな

れ，特に，ウシ飼育施設が河川流域にある場所でい．

高頻度に見つかると報告されている11）．この様な従来の報告6）7）15）にあるように塩素系消毒剤であ

背景から，下水や浄水処理場における C. parvum

る次亜塩素酸ナトリウム溶液に比較して Miox 溶

オーシスト汚染対策は重要な課題である．オーシ

液は C. parvum オーシストに対して著明な感染性

ストに汚染された水環境からのオーシスト除去対

不活化効果を発揮することが今回明らかにされ，策としては，濾過法と塩素系消毒剤或いは加熱処

さらにオーシストの形態観察からも Miox 溶液と理による不活化法とがあるにすぎない．しかし，次亜塩素酸ナトリウム溶液による不活化効果の差

大量の水，特に様々な懸濁物が混在している下水異を裏付ける変性所見が得られた．次亜塩素酸ナ

を塩素系消毒剤による不活化以外の方法で処理すトリウムは水中で解離して 次 亜 塩 素 酸 イ オ ン

ることは，経済性或いは汎用性の面からみて困難（ClO−）と次亜塩素酸（HOCl）になり，pH 酸性側を極めるものと考えられ，次亜塩素酸ナトリウムから中性付近で主に生成するものは後者である．

に代わる実効性のある消毒剤による不活化法の開一方，生成された Miox 溶液には先に述べたよう発が待たれている．

に次亜塩素酸を主成分とする塩素関連物質の以外

塩素耐性を示す C. parvum オーシストの感染性にオゾンや過酸化水素など殺菌作用を持つ複数の不活化には，近年，オゾンや遊離塩素とクロラミ

酸素系酸化物質が含まれている．従って，Miox

12）
13）

などの他に，強酸性電解水

溶液による C. parvum オーシストに対する形態変である Miox 溶液を用いた処理による不活化法が性を伴う著明な感染性不活化効果は，次亜塩素酸

有効であると報告されている6）7）．今回，残留塩素を主とする塩素関連物質と酸素系酸化物質による

濃 度 5mg!
l の Miox 溶 液 に つ い て C. parvum

相乗的或いは相加的酸化作用によってもたらされオーシストの感染性不活効果について検討したとたものと考えられる．また，酸性電解水による殺ころ，無処理対照群に比較して 4 時間処理で腸管菌効果には pH が関係しており，より安定した殺から検出されたオーシスト数は 1.5〜2.1log10 の減菌効果を得るには生成した次亜塩素酸などの酸化少を示し，既に報告されている Miox 溶液による物質が安定状態にある pH 6 前後が重要であるとンを併用した消毒法

6）
7）

C. parvum オーシストの感染性不活化効果 が同言われている4）．今回使用した各溶液の pH は pH

じ条件下で起こることが確認された．しかし，そ6.28〜pH7.2 の範囲であったことから，次亜塩素酸の感染性の不活化効果による腸管から検出されるを含む一連の酸化物質が比較的長時間にわたり安

6）

オーシスト数の減少値は Venczel ら が報告した

定して存在 し て い た こ と が，今 回 の C. parvum

3.5log10 より劣るものであった．かかる報告と今回オーシストに対する著明な感染性不活化効果をもの実験において使用された乳飲みマウス系統，C.

たらした要因になったものと考えられた．実際，parvum の菌株の種類，およびオーシスト検出方法

処理前後における残留塩素濃度はほとんど減少しに違いがあることから，これらの相違がオーシスなかったことからも次亜塩素酸を主とする一連のト数の減少値の違いをもたらした原因になったの

酸化物質が安定した状態で存在していたことを裏
感染症学雑誌第77巻第2号

混合酸化剤溶液の C. parvum オーシスト感染性に対する不活化効果

付けるものと考えられた．
今回，微分干渉顕微鏡を使用して Miox 溶液および次亜塩素酸ナトリウム溶液処理後のオーシス
トの形態変化を観察したところ，同濃度の次亜塩
素酸ナトリウム溶液の効果と比較して Miox 溶液
はオーシスト壁の一部を傷害し，内部のスポロゾ
イトまでも効率よく傷害していることが観察されたことから，Miox 溶液による C. parvum オーシス
トに対する感染性不活化効果は，上記の酸化物質
がオーシスト壁に対して強力な細胞傷害作用を及ぼした結果スポロゾイトが変性したことによるものと推測される．なお，形態的に変性したオーシストの出現率は，Miox 溶液の残留塩素濃度に比例して認められた（データ示さず）．
有機物を多く含む下水においても Miox 溶液による C. parvum オーシストの感染性不活化効果が期待される．今回，Casteel らの報告7）と同様に，
PBS の代わりに生物処理 下 水 に 浮 遊 さ せ た C.
parvum オーシストに対する感染性不活化効果が次亜塩素酸ナトリウム溶液より Miox 溶液において顕著に認められたことから，浄水および下水処
理施設における C. parvum オーシストの不活化にMiox 溶液が優れた効果を発揮するものと考えられる．しかし，その不活化効果は，オーシスト数を指標として見た場合，PBS 希釈 Miox 溶液の場
合のそれの約 10 分の 1 であった．この理由として
は，使用した生物処理下水に含まれる有機物がこれらの酸化物質を一部失活させた為に起こったものと考えられる．一方，予備実験において著者らはこれまでに C. parvum オーシストの保存温度環
境がその感染性にどの様に影響するか検討し，45℃前後の温度で数時間処理することによって完全に感染性を不活化することを確認しており，Miox溶液による処理にこの加温処理法を併用すること
で残留塩素濃度をあまり濃くすることなく Miox溶液による C. parvum オーシストの感染性不活化をさらに優れたものにすることができるものと考えている．
謝辞：実験遂行に当たり卓越した技術をもって実験補助をしていただいた北里環境科学センター佐藤真弓技師に深謝いたします．
平成15年 2 月20日

文

81
献

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武志 他
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15）Barbee SL, Weber DJ, Sorbsey MD：Inactivationof Cryptosporidium parvum oocyst infectivity by
disinfection and sterilization . Gasstrointestinal
Endoscopy 1999；49：605―11.

Effect of the Mixed-Oxidant Solution on Infectivity of Cryptosporidium parvum
Oocysts in a Neonatal Mouse Model
Takeshi SASAHARA1）, Masahito AOKI2）, Tomoko SEKIGUCHI1）, Akira TAKAHASHI3）,
Yoshinori SATOH1）, Hidero KITASATO1）& Matsuhisa INOUE1）
1）

Department of Microbiology, School of Medicine, Kitasato University
2）
Kitasato Research Center of Environmental Sciences
3）
Laboratory Animal Center for Medical Science, School of Medicine, Kitasato University

Cryptosporidium parvum oocysts were exposed to the mixed-oxidant solution, which was electrochemically generated by Miox Water Disinfection Unit, and sodium hypochlorite in phosphate buffered saline（PBS, pH 7.2）or biologically treated wastewater at 25℃ by using concentrations of residual chlorine of up to 5 mg!
l and contact times of up to 8 h. The effect of two disinfectants on infectivity of the oocysts in a neonatal murine model was comparatively evaluated by determining the total
number of oocysts recovered from the intestine. Exposure to the mixed-oxidant solution at 2 and 5mg!
l（residual chlorine）yielded a significant inactivation of infectivity in the dose-and exposure timedependent manner, while exposure to 5 mg!
l （residual chlorine）of sodium hypochlorite for contact
times of up to 4 h produced no measurable inactivation of infectivity. Morphological examination also
revealed a picture of degenerating oocysts after exposure to 5 mg!
l（residual chlorine）of the mixedoxidant solution, but not with sodium hypochlorite. When the oocysts were exposed to either biologically treated wastewater−or PBS-diluted the mixed-oxidant solution at 5 mg!
l（residual chlorine）for
4 h, the disinfectants produced a significant inactivation of infectious oocysts. The decrease numberof the oocysts was 0.8 log10 in the former and 2.1 log10 in the latter. These results demonstrate that themixed-oxidant solution may be a useful disinfectant against Cryptosporidium oocysts, but appropriate
applications need to be validated.

感染症学雑誌

第77巻第2号