DG2018-38
LBAにおけるパラレリズム

Parallelism in ligand binding assay

10th JBF Symposium, DG2018-38

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Japan Bioanalysis Forum1

Japan Bioanalysis Forum

Name

Company

清水 浩之
Hiroyuki Shimizu

田辺三菱製薬株式会社
Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation

羽原 広
Hiromi Habara

第一三共株式会社
DAIICHI SANKYO CO., LTD.

前田 健一
Kenichi Maeda

積水メディカル株式会社
SEKISUI MEDICAL CO., LTD.

高木 秀行
Hideyuki Takagi

科研製薬株式会社
KAKEN PHARMACEUTICAL CO., LTD.

横田 喜信
Yoshinobu Yokota

Altasciences Preclinical Seattle LLC

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DG members(2018.10.1～，SNBL USAより派遣）

10th JBF Symposium, DG2018-38

2

Japan Bioanalysis Forum

活動の内容（Contents of our activity）
 DGサポーターからDGメンバー募集
Member recruitment

 2018年7月12日 Jul 12, 2018
 キックオフ会議 Kick off meeting 2018年8月～12月 Aug to Dec 2018
 Web会議（平均月1回）及びメールによる議論
Monthly teleconferences and e-mail conversations

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 2018年5月 May 2018

 2018年12月～2019年1月 Dec 2018 to Jan 2019
 議論のまとめ及びシンポジウム発表準備
Summary of discussion and poster preparation
10th JBF Symposium, DG2018-38

3

Japan Bioanalysis Forum Ligand binding assay (LBA) におけるパラレリズムは，実試料の希釈系列における用量反応曲線と検量線系列の用量反
応曲線が平行であり，実試料の数段階の希釈における換
算値に希釈倍率による差が認められないとき，平行性が成立していると定義される*．
 必ずしもすべての分析についてパラレリズムを評価する必要はないが，平行性が問題になる可能性が疑われる際には，可能な範囲で科学的に妥当な評価を行い定量値への影響を考察すべきであろう．
*: 医薬品開発における生体試料中薬物濃度分析法（リガンド結合法）のバリデーションに関するガイドライン質疑応答集（Ｑ＆Ａ）

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背景及び目的4

Japan Bioanalysis Forum 一方で，バイオマーカー分析における平行性については，
いくつかの規制文書（例えばC-PathのPoints to Consider
Document*）でパラレリズムの重要性が説かれている．これ
らの文書には具体的な実施方法の記載があるものの，各社それぞれのポリシーで実施方法や基準が設定されていると推測する．
 本DGでは，PK (TK) とBiomarker に分けて，平行性についての実施時期や実施方法，基準の設定を議論した．本発表ではDGの議論内容の概要を紹介し，LBAにおけるパラレリズ
ムの議論の一助としたい．

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背景及び目的*: Points to Consider Document: Scientific and Regulatory Considerations
for the Analytical Validation of Assays Used in the Qualification of
Biomarkers in Biological Matrices issued by C-Path
10th JBF Symposium, DG2018-38

5

Japan Bioanalysis Forum Parallelism in ligand binding assays (LBAs) is defined as anestablished parallel relationship between a dose-response curvefrom a study sample dilution series and a curve from a calibration
standard series, with no difference among back-calculated
concentrations for multiple dilutions of a study sample*.
 Evaluation of parallelism is not necessarily required for all
analytical methods. However, if parallelism is an intrinsic issue for
an LBA-based bioanalytical method, scientifically valid evaluation
and assessment of the impact on measured concentrations should
be considered to the extent possible.
*: Q&A for the Guideline on Bioanalytical Method (LBA) Validation in
Pharmaceutical Development issued by MHLW

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Background and Objective

6

Japan Bioanalysis Forum On the other hand, some regulatory articles (e.g., Points toConsider Document: Scientific and Regulatory Considerations for
the Analytical Validation of Assays Used in the Qualification of
Biomarkers in Biological Matrices issued by C-Path) emphasize theimportance of parallelism. Although the details of parallelism
implementation are described in those articles, it seems to the DG
members that parallelism is performed based on various policies.
 Therefore, this DG mainly focused on when or how parallelism
should be performed as well as the acceptance criteria ofparallelism for both PK (TK) and biomarker studies. The anticipatedissues and approaches for resolution were discussed. This
presentation provides an overview of our discussion to facilitate
an efficient parallelism analysis by LBAs.
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Background and Objective

7

Japan Bioanalysis Forum

議論の内容-1（Contents of discussion）
 パラレリズム評価の目的及び方法（概略） パラレリズムの定義，規制文書から見たパラレリズム
 以下の相違点での議論• PKとBiomarker（BM）• シングルプレックスとマルチプレックス• Dilutional LinearityとDilutional Parallelism パラレリズムの評価方法及び基準（Evaluation andCriteria of Parallelism）

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 パラレリズムの概念（Concept of Parallelism）

 基本方法，使用マトリックス，希釈公比，段階希釈数及び各段階希釈におけるn数，評価基準の設定
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8

Japan Bioanalysis Forum

議論の内容-2（Contents of discussion）

 BM分析の場合
 PKの場合

 パラレリズムの具体的事例（Examples ofParallelism）
 パラレリズム評価の成立事例
 パラレリズム評価の不成立事例
 パラレリズムが不成立となる場合の仮説

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 パラレリズムの推奨プロセス（Recommended
Process of Parallelism）

 アンケート結果（Results of a Questionnaire Survey）
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9

Japan Bioanalysis Forum

Concept of Parallelism
10th JBF Symposium, DG2018-38

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パラレリズムの概念

10Japan Bioanalysis Forum

Biomarker (BM)PK（薬物が内因性たんぱく質）

内因性物質と標準物質（Recombinant protein）の重要試薬に対する反応性が同等であるか確認することにある．副次的な目的として，Matrix効果
確認によるMRD設定，希釈妥
当性評価も含まれる．

最適化したアッセイ系において個体別ブランク試料中に内因性濃度が残っているかどうかで状況は異なる．
ブランク試料中に内因性濃度が検出される場合のPKにおいては，①内因性に起因したシグナル②投与した薬剤に起因したシグナルを分けて考える必要がある．つまり，これらの濃度を足し算や引き算を用いて補正していく場合，①のシグナルが②のシグナルと比べてParallelであるかどうか確認しておく必要がある．その上で，パラレリズムが確認された希釈倍率を使用した場合，補正してもよい．
一方，ブランク試料に内因性濃度が検出されない
場合のPKにおいては(例：MRDを上げて検出されないレベルとした場合），PK（薬物が非内因性たんぱく質）と扱ってよい．

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パラレリズム評価の目的

11Japan Bioanalysis Forum

パラレリズム評価の方法（概略）PK

バッファーで調製した検量線試料と実 通常はEMAのガイドラインに則って精試料を段階希釈したものをそれぞれ 度のみの評価（%CVが30%以内）として測定して評価する．
いるが，実際には精度，真度の両方が必要な場合もある．その場合の理概念的には，実試料濃度（シグナル） 論濃度の定義はBMに順ずる．
が希釈によって減弱する割合が，検量線試料の希釈によって減弱する割合と比べてどうなのかを見る．この割合が異なる場合，パラレリズムは無いと結論付ける．

10th JBF Symposium, DG2018-38

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Biomarker (BM)12

Japan Bioanalysis Forum

パラレリズムの定義
 「実試料の希釈系列における用量反応曲線と検量線系列の用量反
応曲線が平行であり，実試料の数段階の希釈における換算値に希釈倍率による差が認められないとき，平行性が成立している」

 FDAガイダンス2018の定義
 「Parallelism demonstrates that the serially diluted incurred sample
response curve is parallel to the calibration curve. Parallelism is a
performance characteristic that can detect potential matrix effects
and interactions between critical reagents in an assay」

 C-Path（Points to Consider Document）2017の定義
 「Parallelism is the extent to which the dose-response relationshipbetween two materials (i.e., calibrator versus unknown specimens) isconstant for the examined range of concentrations.」
 「Parallelism is the demonstration that the sample dilution response
curve is parallel to the standard concentration response curve」
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 MHLWガイドライン2014のQ&Aの定義

13

Japan Bioanalysis Forum

規制文書から見たパラレリズム（MHLW）
 実試料の希釈系列における用量反応曲線と検量線系列の用量反応曲線が平行であり，実試料の数段階の希釈における換
算値に希釈倍率による差が認められないとき，平行性が成立していると定義される．本ガイドライン発出の時点では，平行性が成立しなかった事例，平行性不成立の原因，平行性の不成立が医薬品開発に与えうる影響の程度等について，国内外ともに十分な知見が蓄積され議論が成熟している状況ではないことから，必ずしもすべての分析について平行性を評価する必要はない．ただし，分析対象物質や分析法の特性，あるいは，医薬品開発の過程で集積されたデータから，平行性が問題になる可能性が疑われる際には，可能な範囲で科学的に妥
当な評価を行い定量値への影響を考察すべきである．

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 MHLWガイドライン201414

Japan Bioanalysis Forum

規制文書から見たパラレリズム（FDA）
 Parallelism demonstrates that the serially diluted incurred
sample response curve is parallel to the calibration curve.
Parallelism is a performance characteristic that can detect
potential matrix effects and interactions between criticalreagents in an assay.
 Parallelism should be evaluated for assays for endogenous
compounds.
 Matrix effects evaluation involves comparing calibration
curves in multiple sources of the biological matrix against
a calibration curve in the matrix for parallelism (serial
dilution of incurred samples) and nonspecific binding.
10th JBF Symposium, DG2018-38

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 FDAガイダンス201815

Japan Bioanalysis Forum

規制文書から見たパラレリズム（EMA）
 If study samples are available, parallelism between thecalibration standard curve and serially diluted study samples
should be assessed to detect possible matrix effect or differingaffinities for metabolites.
 A high concentration study sample (preferably close to Cmax)
should be diluted to at least three concentrations with blankmatrix. The precision between samples in a dilution series
should not exceed 30%.
 In case the sample does not dilute linearly (i.e. in a non parallelmanner), a procedure for reporting a result should be defined apriori. If study samples are not available during the validation of
the method, parallelism should be evaluated as soon as study
samples become available.
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 EMAガイドライン201216

Japan Bioanalysis Forum

各論①PKとBMで違いは？（DGメンバーの意見）

BMは様々なPaperで言及されているとおり，パラレリズムは評価すべきパラメーターである．PKについては，具体的な必要性は感じないが，ガイドラインに記載があるため仕方なく実施している状況である．
パラレリズム実施の目的は色々とあるが，PMDAやFDAのガイダンスでは検量線と実試料（内因性物質）の反応性が平行であるかどうかを検証することと定義しているので，それを目的とするとPKの場合，実施する必要がないのではないか．

＜PKでパラレリズムを評価する意義＞
代謝物が影響する事例は聞いたことが無い．しかし，干渉物質（抗体医薬のターゲッ
トやADA）の場合は影響することがある．仮にADAが薬物濃度を下げているケースでは，
パラレリズムの実験をすると，希釈倍率が高いほど検量線とパラレルになる．

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測定しているバイオマーカーと標準物質として用いているRecombinant proteinが異なる前提であるのがBM．同一なのがPK．

抗原（ターゲット）が血液中にあり, 抗体と抗原とこれらの複合体が共存している場合，希釈に伴って遊離型抗体の濃度が変化するケースがあった．
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17

Japan Bioanalysis Forum

各論②シングルプレックスとマルチプレックスで違いは？
（DGメンバーの意見）基本的にはバリデーションをマルチプレックスでは取らないことにしている．バリ
デーションを取ったとしても内容は再現性（真度と精度）で評価している．その際の適用基準は厳しくしていない．
何アナライト以上の測定が厳しいというよりは，各アナライトごとの定量範囲がどれだけ異なるかが影響するのではないか．
マルチプレックスでも要求水準は単一のバイオマーカー測定と同じはずであるが，アナライト間の定量範囲の差が起因して望まれる基準を達成できないことがほとんどである．パラレリズムの評価を実施する場合は予備検討でバラツキを検討し, バリ
デーションでは評価基準を緩めて実施する.

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マルチプレックスの場合，全てのアナライトでパラレリズムが基準を満たすことは難しいため，感度とパラレリズムのバランスを取る必要がある．

バリデーションをする場合としない場合がある．バリデーションをしたとしても基準を満たせない場合がある．
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18

Japan Bioanalysis Forum【Dilutional linearity】＜PKの場合＞
試料に添加する標準物質：Recombinant protein
試料を希釈する溶液：血清などのマトリックス，その後MRD希釈で測定＜BMの場合＞
試料に添加する標準物質：Recombinant protein（パラレリズムを実施する内因性高濃度試料がない場合）
試料を希釈する溶液：バッファー（血清などのマトリックスでも良いが，そうすると実試料分析時も内因性フリーのマトリックスが必要となるため，避けたい）【Dilutional parallelism】＜PKの場合＞
試料：実試料
試料を希釈する溶液：血清などのマトリックス，その後MRD希釈で測定＜BMの場合＞
試料：実試料
試料を希釈する溶液：バッファー→内因性高濃度の実試料が無い場合は，Dilution linearityを代替法とする．
10th JBF Symposium, DG2018-38

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各論③Dilutional LinearityとDilutional Parallelismの違いは？
（DGメンバーの意見）19

パラレリズムの評価方法及び基準

Evaluation and Criteria of Parallelism

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Japan Bioanalysis Forum

20

Japan Bioanalysis Forum

基本方法
 実試料をバッファーで数段階希釈して，測定し，希釈倍率による差が無い
ことを確認する．
 個体別実試料（検量線のULOQを超える）を段階希釈（PKの場合：マトリック
ス，BMの場合：バッファー）する．傾きが検量線とパラレルであることを確認する．
 実試料(ULOQを超える濃度，Cmax付近）をバッファーで数段階希釈し，測定値に対して希釈倍率を戻したときの値が希釈倍率によって大きく変わらないかを評価する．
 定量可能濃度（段階希釈後）を示す個体別実試料について，公比1.5または2(C-path)で段階希釈を行い，各希釈倍率における濃度を得る（複数段階）．それらの濃度の傾きが検量線の傾きと平行であるかどうかを確認す
る．
 個体別実試料を段階希釈（少なくとも3点）し，検量線と平行である範囲を確認する．
10th JBF Symposium, DG2018-38

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DG内の意見21

Japan Bioanalysis Forum

使用マトリックス
使用するマトリックスはプールかあるいは個体別か？
個体別マトリックスの場合何個体で実施するか？
 個体別マトリックス．少なくとも3個体．内因性濃度は個体によって異なり，高い個体，低い個体があるため．また，数段階の希釈を実施するために内因性濃度の高い個体が必要となるため．
 個体別マトリックス．少なくとも3個体（内因性LQC, MQC, HQC）の実施が必要．その準備のために6個体以上のスクリーニングは行いたい．
 内因性物質の濃度の高い個体別マトリックスが必要．ガイドラインや論文を見ていると，少なくとも3～4例あればよい？
 個体別マトリックス．10個体をスクリーニングし，定量範囲内で最大濃度の試料，最低濃度の試料，中間点の試料（LQC, MQC, HQCのように）を選択する．（予備検討で300程度のスクリーニングを行った．）
 個体別マトリックスを使用する必要がある．内因性濃度の高い数個体（少なくとも3例）の平行性を確認．LQC,MQC,HQCのサンプルの準備．
10th JBF Symposium, DG2018-38

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DG内の意見22

Japan Bioanalysis Forum

希釈公比
希釈の公比はどの程度か？
 検量線の範囲と用いるマトリックスの内因性濃度にもよる
が公比は2．
 公比1.5，2又は4（定量範囲に合わせて予備検討で決定）
 C-pathに1.5-2 fold serial dilutionsと記載
 公比2
 公比1.5，2又は4．公比と平行範囲のバランスを考える．

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DG内の意見23

Japan Bioanalysis Forum

段階希釈数及び各段階希釈におけるn数
段階希釈数はいくつ必要か？
 3段階は必要ではないか．
 少なくとも3段階，可能な限り4段階にチャレンジ．定量範囲にもよるが，ELISAだと測定レンジをカバーできるのではないか．
 段階数としては3～6段階くらい．
 段階数は7～8段階での経験があるが，実際には4段階程度．
 段階数としては低，中，高の3段階くらい．

各希釈段階におけるn数はいくつ必要か？

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DG内の意見DG内の意見 n数は少なくとも3．
 FDAガイダンス2018の希釈直線性ではn=5と記載．
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24

Japan Bioanalysis Forum

評価基準の設定評価の方法及び基準の設定は？
 真度100±20%，各希釈段階でのCV20%以下
 論文では4パラまたは5パラメータ回帰した時のパラメータB(Hill slope)で比較したものも挙げられている．
 MRDにおける測定値を理論値として各希釈段階試料の平均値の真度を算出（基準は100±20～30%．理想は100±20%），各希釈段階試料（n＝3）のCVを算出（基準は20%以下）．
 各希釈段階(3段階希釈の場合)試料に希釈倍率を乗じた濃度（希釈前濃度，100%マトリックス中濃度）の9個の濃度値のCVを算出（基準は30%以下←EMAガイドライン2012）．
10th JBF Symposium, DG2018-38

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DG内の意見25

Japan Bioanalysis Forum

評価基準の設定
 いずれかの希釈倍率における濃度を理論値と規定し，真度を算出（MRDにおける測定濃度を理論値と設定）. その後，真度が100±20%であることを確認．また，希釈倍率換算後の濃度のCVが20%以下であることを確認．
 同一個体において，希釈倍率換算後の濃度のCVが20%以内

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DG内の意見26

Japan Bioanalysis Forum

評価基準の設定
真度で評価する場合の理論値の設定は？
 MRDにおける測定値を理論値とする．
 MRDもしくは定量範囲内で最も高濃度の試料における測定値を理論値とする．
 ①MRDにおける濃度，②LLOQを上回る最大希釈サンプルの濃度，③パラレリズムが認められる各希釈段階サンプルの平均値の3パターンを提唱する文献もある．（Jing Tu & Patrick
Bennett. Parallelism experiments to evaluate matrix effects, selectivity
and sensitivity in ligand-binding assay method development: pros andcons. Bioanalysis (2017) 9(14), 1107-1122）

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DG内の意見27

Japan Bioanalysis Forum

Recommended Process ofParallelism
10th JBF Symposium, DG2018-38

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パラレリズムの推奨プロセス

28

Japan Bioanalysis Forum

パラレリズムの推奨プロセス（BM分析）①個体別マトリックス（10例程度）のスクリーニング
 内因性濃度の確認②高，中，低濃度（最少で3例）の個体なし②´プールもしくは個体別マトリックスにRecombinant protein添加③バッファーで段階希釈 公比：1.5, 2, 4のいずれか（定量範囲による） 段階希釈数：3～8（定量範囲による） 各段階希釈の繰り返し数：n=3④理論値の設定
 MRDもしくは定量範囲内で最も高濃度の試料における測定値

http://bioanalysisforum.jp/②高，中，低濃度（最少で3例）の個体あり
 Recombinant protein添加が必要か判断⑤評価
真度評価が必要な場合
 各段階希釈試料全ての希釈前濃度の精度：30%以下
 各段階希釈試料の希釈前濃度の理論値からの真度：100±20～30%
10th JBF Symposium, DG2018-38

29

Japan Bioanalysis Forum

パラレリズムの推奨プロセス（PK）【薬物が内因性タンパクの場合】【薬物が非内因性タンパクの場合】②内因性濃度が検出される場合②内因性濃度が検出されない場合③以下がパラレルであることを検証
 内因性たんぱく質に起因するシグナル 投与した薬剤に起因するシグナル④評価
 各段階希釈試料全ての希釈前濃度の精度：30%以下*（FDAガイダンス2018，
EMAガイドライン2012）⑤評価基準を満たさない場合
 可能な範囲で科学的に妥当な評価を行い定量値への影響を考察

FDAガイダンス2018，EMAガイドライン
2012に従い，必要に応じて評価

http://bioanalysisforum.jp/①個体別ブランク試料中の内因性濃度の確認*: 精度の具体的基準はEMAガイドライン2012にのみ記載

10th JBF Symposium, DG2018-38

30

Japan Bioanalysis Forum

Examples of Parallelism
10th JBF Symposium, DG2018-38

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パラレリズムの具体的事例

31

Japan Bioanalysis Forum

条件

内容

対象

BM分析

評価の位置付け

申請レベル

実施時期

分析法開発中サンプル数

3例（個体別）*サンプルの希釈溶液

代替マトリックス（Buffer）

段階
希釈：

ポイント数

6点

公比

2

濃度範囲

LQC付近、MQC付近、HQC付近

ポイント内での繰り返し
分析回数

n=3

理論濃度設定MRDサンプルの濃度

評価基準設定各測定値の真度 100±20%
希釈前理論濃度の精度** ≦30%
10th JBF Symposium, DG2018-38

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パラレリズム評価の成立事例-1

32

Japan Bioanalysis Forum

パラレリズム評価の成立事例-1

ブランクマトリックス中BM濃度は定量範囲上限以上で，実サンプル中
BM濃度は定量下限以下であった．つまり，BM分析の用途が薬物投与により減少することを意図したものであったため，正常ないしは患者試料の使用でパラレリズムを実施するに足りる十分な内因性濃度が検出されたことが成立要因と考えられた．

☆前頁の補足* 実際には，数十例の個体別血漿中BM濃度を定量し，その中から低濃度，中濃度，高濃度の血漿サンプルを選択した．
** 希釈前理論濃度の精度：各希釈倍率サンプルから得られた濃度値を希釈倍率で補正した値の精度．

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成立要因

33

Japan Bioanalysis Forum

条件

内容

対象

BM分析

評価の位置付け

社内意思決定レベル

実施時期

実試料分析中サンプル数

3例（個体別）サンプルの希釈溶液

代替マトリックス（Buffer）

ポイント数

3 – 5点公比

2

段階
希釈： 濃度範囲
ポイント内での繰り返し
分析回数

低濃度、中濃度、高濃度
n=3

理論濃度設定MRDサンプルの濃度

評価基準設定

各希釈倍率内の平均真度 100±20%
各希釈倍率内の精度 ≦20%
希釈前理論濃度の精度 ≦30%
10th JBF Symposium, DG2018-38

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パラレリズム評価の成立事例-2

34

Japan Bioanalysis Forum

パラレリズム評価の成立事例-2
 個体別血清中のBM濃度がパラレリズムに適したものであり，MRDに設定した希釈サンプル～検量線の低濃度付近までの希釈サンプ
ルで，特にレスポンスに問題はなかった．

10th JBF Symposium, DG2018-38

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成立要因

35

Japan Bioanalysis Forum

条件

内容

対象

BM分析

評価の位置付け

探索・検討レベル

実施時期

実試料分析中サンプル数

8例（個体別）サンプルの希釈溶液

代替マトリックス（Buffer）

ポイント数

4点

公比

2

段階
希釈： 濃度範囲

低 – 中濃度（マトリックス中濃度が低 – 中濃度のため）ポイント内での繰り返し
分析回数

n=1

理論濃度設定MRDサンプルの濃度

評価基準設定

各希釈倍率内の真度 100±20%
10th JBF Symposium, DG2018-38

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パラレリズム評価の成立事例-336

Japan Bioanalysis Forum

パラレリズム評価の成立事例-3
 入手したマトリックス中に存在するアナライトが検量線の定量範囲内であったため，パラレリズムの評価ができ，パラレリズムも成立した．

10th JBF Symposium, DG2018-38

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成立要因

37

Japan Bioanalysis Forum

条件

内容

対象

BM分析

評価の位置付け

探索・検討レベル

実施時期

分析法開発前（市販キット）

サンプル数

6例（個体別）サンプルの希釈溶液

代替マトリックス（Buffer）

ポイント数

3点

公比

2

段階
希釈： 濃度範囲

低濃度（マトリックス中濃度が低濃度のため）ポイント内での繰り返し
分析回数

n=1

理論濃度設定MRDサンプルの濃度

評価基準設定

各希釈倍率内の平均真度 100±20%
10th JBF Symposium, DG2018-38

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パラレリズム評価の不成立事例-1

38

Japan Bioanalysis Forum

パラレリズム評価の不成立事例-1

 入手したブランクマトリックス中に存在するBM濃度がほぼ検量線の定量下限未満であり，パラレリズムの評価ができなかった.
 実サンプル中BM濃度は定量範囲内と考えられるが，サンプルが貴重なため検討レベルでは使用できなかった.

対応策
 代替として，検量線に使用するリコンビナントの標品を添加して希釈直線性を行った.

10th JBF Symposium, DG2018-38

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不成立要因39

Japan Bioanalysis Forum

条件

内容

対象

BM分析

評価の位置付け

探索・検討レベル

実施時期

分析法開発中サンプル数

2 – 3例（個体別）

サンプルの希釈溶液

代替マトリックス（Buffer）

ポイント数

3 – 5点公比

1.5 – 6

段階
希釈： 濃度範囲
ポイント内での繰り返し
分析回数

LQC – HQC付近の濃度
n=2–3

理論濃度設定MRDサンプルの濃度

評価基準設定

各希釈倍率内の精度 ≦20%

10th JBF Symposium, DG2018-38

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パラレリズム評価の不成立事例-240

Japan Bioanalysis Forum

パラレリズム評価の不成立事例-2

 本BMは薬物の標的抗原であり，血液中に存在する．このとき，血漿中には遊離型抗原，抗原/薬物複合体，遊離型薬物が混在することになる．Ligand Binding Assayで薬物を重要試薬として用いて抗原濃度測定を行うと，原理的には遊離型抗原を定量することになると考えられる．しかし，Bufferによる希釈によって上記3者のバランスが崩れ，遊離型抗原濃度が変動し，パラレリズムが成立しなかったと推測される．

対応策

http://bioanalysisforum.jp/

不成立要因 希釈倍率を最小限に設定して測定した．

10th JBF Symposium, DG2018-38

41

Japan Bioanalysis Forum

条件

内容

対象

PK（薬物が非内因性たんぱく質）

評価の位置付け

探索・検討レベル

実施時期

分析法開発中サンプル数

2 – 3例（個体別）

サンプルの希釈溶液

代替マトリックス（Buffer）

ポイント数

3 – 5点公比

1.5 – 6

段階
希釈： 濃度範囲
ポイント内での繰り返し
分析回数

LQC – HQC付近の濃度
n=2–3

理論濃度設定MRDサンプルの濃度

評価基準設定

各希釈倍率内の精度 ≦20%

10th JBF Symposium, DG2018-38

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パラレリズム評価の不成立事例-342

Japan Bioanalysis Forum

パラレリズム評価の不成立事例-3

 不成立事例2の薬物からの視点．本薬物の標的抗原は血液中に存在する．このとき，血漿中には遊離型抗原，抗原/薬物複合体，遊離型薬物が混在することになる．Ligand Binding Assayで抗原を重要試薬として用いて薬物濃度測定を行うと，原理的には遊離型
薬物を定量することになると考えられる．しかし，Bufferによる希釈
によって上記3者のバランスが崩れ，遊離型薬物濃度が変動し，パラレリズムが成立しなかったと推測される．

対応策

http://bioanalysisforum.jp/

不成立要因 希釈倍率を最小限に設定して測定した．

10th JBF Symposium, DG2018-38

43

Japan Bioanalysis Forum

パラレリズムが不成立となる場合の仮説-1
不成立の要因の考察

確認方法案

ADAが存在する場合，定量値として得られる薬物濃度は実濃度よりも低 パラレリズムが不成立の場合
PK：
くなることがある．このサンプルを希 はADA評価を実施する．ADAポ
ADAが存在す 釈することで，薬物とADAの結合が ジティブであれば，ADAネガ
る場合
一部解離し薬物濃度の定量値が高 ティブサンプルでパラレリズム
くなり，パラレリズムが成立しない可 を評価する．
能性が考えられる．

KD

Complex

KD =

𝐷𝑟𝑢𝑔

× ADA
[𝐶𝑜𝑚𝑝𝑙𝑒𝑥]Drugfree
10th JBF Symposium, DG2018-38

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具体的事例（PK or BM）

ADAfree44

Japan Bioanalysis Forum

具体的事例
不成立の要因の考察
確認方法案（PK or BM）
PK及びBM：
事前の対策は難しく，なるべく実患者マトリックス
サンプルに近い代替マトリックス
事前の評価ができず，実試料でを事前に使用でを用意する．
パラレリズムを行ない不成立のきない場合不成立だったとしても，全サンプ
場合．
（稀少マトリクス
ルで希釈倍率を同じにする，ななど）
どの対策を取る．

10th JBF Symposium, DG2018-38

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パラレリズムが不成立となる場合の仮説-245

Japan Bioanalysis Forum

パラレリズムが不成立となる場合の仮説-3
不成立の要因の考察

確認方法案

重要試薬類のロット変更により，
PK及びBM： パーシャルバリデーションを実施し ロット変更のパーシャルバリ
重要試薬の たところ，前のロットでは成立して デーションでパラレリズムが必
ロット変更
いたパラレリズムが成立しなくなっ 要か否かの議論をしたい．
た．

10th JBF Symposium, DG2018-38

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具体的事例（PK or BM）

46

Japan Bioanalysis Forum

パラレリズムが不成立となる場合の仮説-4
不成立の要因の考察

確認方法案

膜たんぱく質（A）と抗体のFc部分を■AとBを測り分ける場合融合させたFusion proteinが薬物・抗Fc抗体でBを抜き取って，A結（B）の場合．このときにBMとして合抗体でAを定量する．
Soluble Aの濃度を測定したい場合，・B特異的に検出可能な重要試
BM：
投与前サンプルではSoluble Aのみ薬に変更してBを定量する．
BMの改変体 を定量できるが，投与後のサンプ
・A+BからA（Pre）を差し引く．
を投与する場 ルでは投与薬剤であるBが多量に
ただし，アフィニティの違い，内合
存在し，Souble Aの定量に影響しう
因性濃度変動に注意が必要．
る．また，固相抗体や検出抗体に■AとBをまとめて測定する場合
対する反応性がAとBで異なる場合，・AとBのアフィニティの違いに注
パラレリズム評価にも影響が出る
意．
と考えられる．

10th JBF Symposium, DG2018-38

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具体的事例（PK or BM）

47

Japan Bioanalysis Forum パラレリズムの目的，実施方法はバイオマーカー
分析とPK（TK）で異なる．それぞれの目的に合わせた評価基準が重要と考える．
 バイオマーカー分析におけるパラレリズム評価は，分析法が持つ相対的な真度を特徴づけるのに有用であろう．
 PK （TK）におけるパラレリズム評価は，マトリックスに含まれる因子などによる希釈直線性阻害の影響の考察に有用であろう．

10th JBF Symposium, DG2018-38

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まとめ

48

Japan Bioanalysis Forum The objectives and methods of parallelism forbiomarker analysis and PK (TK) are different fromeach other. We think that acceptance criteria in
consideration of each objective are important.
 Evaluation of parallelism for biomarker analysis isconsidered useful to characterize relative accuracy
for a developed method.
 Evaluation of parallelism for PK (TK) is considered
useful to assess the effect for the interference ofdilutional linearity caused by a matrix component
and so on.
10th JBF Symposium, DG2018-38

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Summary49

Japan Bioanalysis Forum

Results of a Questionnaire Survey

10th JBF Symposium, DG2018-38

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アンケート結果

50

Japan Bioanalysis Forum 実施期間 設問数：2018年11月28日～12月11日：20問

 収集回答数 ：17件

10th JBF Symposium, DG2018-38

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アンケート概要

51

選択式Japan Bioanalysis Forum

①製薬企業
②CRO

②
35%
(6件)

10th JBF Symposium, DG2018-38

①
65%
(11件)

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Q1 所属について

52

選択式

Japan Bioanalysis ForumQ2 パラレリズム評価の経験について

②
47%
(8件)

10th JBF Symposium, DG2018-38

①
53%
(9件)

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①経験あり
②経験なし

53

選択式

Japan Bioanalysis Forum①PK（薬物が非内因性タンパク質）②PK（薬物が内因性物質のリコンビナントタンパク質
もしくはその改変体）①③バイオマーカー分析

③
58%
(7件)
*複数経験のある方のご回答は項目ごとにカウント・PK（非内因性）とBMの経験がある方：2名
・PK（内因性）とBMの経験がある方：1名
10th JBF Symposium, DG2018-38

34%
(4件)

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Q3 評価経験のあるものについて②
8%(1件) 54

選択式

Japan Bioanalysis Forum①1回② 2 ～ 5回
③6回以上

③
8%
(1件)

回答者背景

PK

PK

（非内因性） （内因性）

①

2

②

2

③

BM
1

1

②
67%
(8件)

①
25%
(3件)

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Q4 評価の経験数について

5
1
10th JBF Symposium, DG2018-38

55

選択式

Japan Bioanalysis Forum①探索・検討レベル②社内意思決定レベル③申請資料レベル④その他：0% (0件)

③
36%
(5件)

回答者背景

PK

PK

（非内因性） （内因性）

①

1

④

6
1

②
③

1

BM

3

2

②
7%
(1件)

10th JBF Symposium, DG2018-38

①
57%
(8件)

http://bioanalysisforum.jp/

Q5 評価の位置づけについて

56

選択式

Japan Bioanalysis Forum

Q5 評価の位置づけについて
複数の位置づけで評価を活用される方の回答は項目ごとにカウント
・「探索・検討レベル」と「社内意思決定レベル」の両方に使用する方：1名（BMで評価経験のある方）
・「探索・検討レベル」と「申請資料レベル」の両方に使用する方：1名（BMで評価経験のある方）

10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/【補足事項】

57

選択式

Japan Bioanalysis Forum①分析法開発中②分析法バリデーション中③実試料分析中
④その他：0% (0件)
回答者背景

PK

PK

（非内因性） （内因性）

①

1

5
2

②
③

BM

3

1

③
33%
(4件)
②
17%
(2件)

①
50%
(6件)

http://bioanalysisforum.jp/

Q6 評価の実施時期について④
10th JBF Symposium, DG2018-38

58

選択式

Japan Bioanalysis ForumQ6 評価の実施時期について（「探索・検討レベル」と「申請資料レベル」で分けて評価をされる方（BMで評価経験のある方）から）探索・検討レベルなら実試料分析中に, 申請資料レベルなら分析法開発中～バリデーション中に評価を実施する.

10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/【コメント】

59

選択式

Japan Bioanalysis Forum①1個体：0% (0件) ②2～3個体 ③4～6個体④7個体以上：0% (0件)
⑤プールマトリックス
⑥
⑥その他
⑤
回答者背景
8%
17%
PK
PK
BM
(1件)
②
（非内因性） （内因性）
(2件)
①
50%
②
3
3
③
(6件)
③
1
2
25%
④
(3件)
⑤
2
⑥

http://bioanalysisforum.jp/

Q7 用いるサンプル数（個体数）について

1
10th JBF Symposium, DG2018-38

60

選択式

Japan Bioanalysis Forum【コメント】（プールマトリックスを使用されている方（BMで評価経験のある方）2名から）内因性濃度が低く, リコンビナントタンパク質を添加する
場合はプールマトリックスを使用している. （通常は2～3個体で実施）

http://bioanalysisforum.jp/

Q7 用いるサンプル数（個体数）について（その他を選択された方から）いくつか試料を測定していたら, 平行性がなかった.
10th JBF Symposium, DG2018-38

61

選択式

Japan Bioanalysis Forum①マトリックス（血清など）②代替マトリックス（バッファーなど）③その他：0% (0件)
回答者背景

PK

PK

（非内因性） （内因性）

①

3

②

1

BM
6

②
70%
(7件)

①
30%
(3件)

http://bioanalysisforum.jp/

Q8 サンプルの希釈溶液について③

10th JBF Symposium, DG2018-38

62

選択式

Japan Bioanalysis Forum【コメント】（代替マトリックスを使用されている方（BMで評価経験のある方）2名から）・実試料分析時に血清などのマトリックスを使用した
くないため.
・低濃度のマトリックスが得られれば, マトリックスによる希釈も考える.

10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

Q8 サンプルの希釈溶液について

63

記述式

Japan Bioanalysis Forum①3ポイント（最低3ポイント, 3ポイント以上も含む）②2～4ポイント④③3～5ポイント③ 10%④4ポイント20% (1件)

(2件)

回答者背景

PK

PK

（非内因性） （内因性）

①

2

BM
4
1

②
③

1

④

1

1

②
10%
(1件)

10th JBF Symposium, DG2018-38

①
60%
(6件)

http://bioanalysisforum.jp/

Q9 段階希釈のポイント数について

64

記述式

Japan Bioanalysis Forum【コメント】（3ポイントと回答された方（BMで評価経験のある方）
2名から）・検量線のLLOQ～ULOQの範囲内で少なくとも3ポイント設定する. 多い分には問題ないと考える. もし結果が良くなければ，良くない結果を除外する.
・定量範囲とサンプルの濃度に依存するが（特にバイオマーカーの場合）, 最低3点程度は必要と思う.

10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

Q9 段階希釈のポイント数について

65

記述式

Japan Bioanalysis Forum①検量線の低濃度（LQC）付近～高濃度（HQC）付近②検量線の低濃度付近～中濃度付近③検量線の範囲内④できるだけ幅広くなるように希釈 ④
回答者背景

PK

PK

（非内因性） （内因性）

①

2

BM
4
1

②
③

1

1

④

1

1

③
18%
(2件)

18%
(2件)

②
9%
(1件)

10th JBF Symposium, DG2018-38

①
55%
(6件)

http://bioanalysisforum.jp/

Q10 段階希釈の濃度範囲について

66

記述式

Japan Bioanalysis Forum【コメント】
・定量範囲を外れた場合の解釈に困るので, 極端にLLOQ, ULOQに近い濃度は避けたほうが無難ではな
いかと考える.
・定量範囲が狭い場合は, 濃度範囲が検量線のLLOQ～ULOQになることもやむを得ないが, LLOQとULOQのバッファーQCの真度が危うい場合は, 極力, 低濃度付
近～高濃度付近としたい.

10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

Q10 段階希釈の濃度範囲について

67

記述式

Japan Bioanalysis Forum

①1回
②1～3回
③2～3回
④3回
回答者背景

PK

PK

（非内因性） （内因性）

BM

①

2

1

②

1

1

③

1

1

④

④
30%
(3件)

①
30%
(3件)

③
20%
(2件)

②
20%
(2件)

http://bioanalysisforum.jp/

Q11 繰り返し分析の回数について

3
10th JBF Symposium, DG2018-38

68

記述式

Japan Bioanalysis Forum【コメント】
バラつきが大きい場合は最大で6回までの繰り返し分析を行うべきと考える.

10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

Q11 繰り返し分析の回数について

69

選択式

Japan Bioanalysis ForumQ12 理論濃度の設定について③パラレリズム評価をしたすべての希釈サンプルの濃度の
平均値
④
④その他
33%
回答者背景

PK

PK

（非内因性） （内因性）

BM

1

3

③

1

1

④

2

1

①
②

(3件)

③
22%
(2件)

10th JBF Symposium, DG2018-38

①
45%
(4件)

http://bioanalysisforum.jp/①定量上限以下の最小希釈倍率（MRD）サンプルの濃度②定量下限以上の最大希釈倍率サンプルの濃度：0% (0件)

70

選択式

Japan Bioanalysis ForumQ12 理論濃度の設定について【コメント】
http://bioanalysisforum.jp/「パラレリズム評価をしたすべての希釈サンプルの濃度の平均値」について・平均値を出す意味はないのではないか？

10th JBF Symposium, DG2018-38

71

選択式

Japan Bioanalysis ForumQ12 理論濃度の設定について【コメント】
その他の意見
http://bioanalysisforum.jp/

・実試料測定時に得られた濃度値（定量範囲内）を理論濃度とした. （この試料を2, 4, 8倍希釈しても検量線の範囲内に入るため, 希釈前濃度を理論濃度とした.）・臨床のPKであれば, 症例報告書（CSR）に記載する初回測
定時の測定値を設定する. バイオマーカーであれば, 精
度のみを評価するが, 測定法開発時の目安としては定量
上限以下のMRDサンプルの濃度に対する値も確認する.
・検討の結果次第でいずれの選択肢を採用しても問題ないと思う．
10th JBF Symposium, DG2018-38

72

記述式

Japan Bioanalysis Forum①真度のみ, 評価基準なし②真度のみ, 理論濃度の±20%以内③精度のみ,各希釈倍率で30%以下④精度のみ, 各希釈倍率で20%以下⑤真度及び精度：各希釈倍率のサンプルの真度は±20%又は±30%以内, 精度は20%以下又は30%以下（検討の結果で決定）. 希釈倍率を乗じた濃度の精度は30%以下.
⑥真度及び精度：定量範囲に入った測定値について, 真
度：理論濃度の±20%以内、精度：20％以下. これに加え希釈倍率を乗じた濃度の精度：30%以下を評価する場合もあり.
10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

Q13 評価基準の設定について

73

記述式

Japan Bioanalysis Forum

回答者背景

PK

PK

（非内因性） （内因性）

BM
1

①
②

1

③

1

1

④

2

2

⑤

1

⑥

1

⑥
①
②
⑤ 10% 10%
10% (1件) (1件) 10%
(1件)
(1件)
④
40%
(4件)

10th JBF Symposium, DG2018-38

③
20%
(2件)

http://bioanalysisforum.jp/

Q13 評価基準の設定について

74

記述式

Japan Bioanalysis Forum

回答者背景

PK

PK

（非内因性） （内因性）

BM

A

1

1

B

3

3

C

2
*評価基準の設定について
A：真度及び精度
B：真度のみC：精度のみの3つに大まかに分類

AB
真度及び精度 真度のみ
20% (2件)
20% (2件)
C
精度のみ
60% (6件)

10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

Q13 評価基準の設定について

75

記述式

Japan Bioanalysis Forum

①成立
②不成立

②
50%
(4件)

回答者背景

PK

PK

（非内因性） （内因性）

BM

①

2

2

②

1

3

10th JBF Symposium, DG2018-38

①
50%
(4件)

http://bioanalysisforum.jp/

Q14 実施した評価の成立/不成立について

76

記述式

Japan Bioanalysis Forum

不成立の場合の原因及び対策について〈PK〉【原因】抗原が血液中に存在し, 薬物と抗原の複合体の割合が希釈によって変動したため,
パラレリズムが不成立になった.
【対策】段階希釈倍率をなるべく小さくする.

10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

Q14 実施した評価の成立/不成立について

77

記述式

Japan Bioanalysis Forum

不成立の場合の原因及び対策について〈BM〉【原因】標準品と内因性物質の物性が完全には同じではないために不成立となった.
【対策】抜本的な対策は困難. 半定量的な測定系として使用する, といった対応をとる.

10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

Q14 実施した評価の成立/不成立について

78

記述式

Japan Bioanalysis Forum

経験ありの方：2名・マルチプレックスのうち, 1つのマーカーだけ内因性物
質濃度が高く, リコンビナント非添加で実施. その他のマーカーは内因性濃度が低く, リコンビナントを添加した. そのため, マルチプレックスとはいいながらサンプル
調製を2パターンで行う必要があり, マルチプレックスの利点が損なわれた.

http://bioanalysisforum.jp/

Q15 マルチプレックスでの評価経験について・バイオマーカーでは, 各バイオマーカーの濃度が異なるため, 適切な希釈倍率を設定することが困難だった.
10th JBF Symposium, DG2018-38

79

記述式

Japan Bioanalysis Forum〈PK〉【原因】ADAが生成していて, 高希釈倍率でADAが薬物から解離し検量線とパラレルになる.
【対策】ADAを測定しているタイムポイントではパラレリ
ズム不成立の考察ができる. 可能な限りパラレ
リズムサンプルはADAを測定することが望ましい.

10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

Q16 パラレリズム不成立と想定される事例

80

記述式

Japan Bioanalysis Forum〈BM〉【原因】バリデーションではパラレリズムは問題なく成立したのに，実試料を用いると不成立となる．
【対策】バイオマーカー（タンパク質）には，薬物やその受容体が結合している可能性があり，希釈倍率を上げると検量線とパラレルになってくる可能性があるかもしれない．できるだけバリデー
ション時にこれらの干渉物質の影響を考えておくのが望ましい．
10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

Q16 パラレリズム不成立と想定される事例

81

記述式

Japan Bioanalysis Forum〈BM〉【原因】標準品と内因性物質が完全には同じでない.
【対策】マトリックス効果が原因の場合には, MRDを変更する.
【原因】標準物質と内因性物質の反応性がものによって違う.
【対策】標準物質や抗体を変更する.
10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

Q16 パラレリズム不成立と想定される事例

82

記述式

Japan Bioanalysis Forum〈BM〉【原因】患者血清における内因性物質の影響【対策】（回答なし）【原因】原因は不明な場合が多い.
【対策】現実的にはMRDを上げるくらいと考える.

10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

Q16 パラレリズム不成立と想定される事例

83

記述式

Japan Bioanalysis Forum〈PK及びBM〉【原因】測定対象の分析に影響するもの（併用薬，内因性リガンド，ADA等）が試料中にある場合【対策】重要試薬の種類や添加量を検討し, これらの影
響を最小限にする.

10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

Q16 パラレリズム不成立と想定される事例

84

記述式

Japan Bioanalysis Forum

Q17 代謝物が原因でパラレリズム不成立と想定される事例(PK)・LBAで代謝物の反応性が未変化体と異なる場
合に可能性があると考えられるが, 具体的な経験はない.

http://bioanalysisforum.jp/

・ADCの場合などは特別な不成立要因が出てくるのかもしれない.

10th JBF Symposium, DG2018-38

85

選択式

Japan Bioanalysis Forum

①必要
②不必要
③その他

③
24%
(4件)

回答者背景

PK

PK

（非内因性） （内因性）

BM
5

①
②

3

③

2

②
29%
(5件)

①
47%
(8件)

http://bioanalysisforum.jp/

Q18 パラレリズム評価の必要性について

1

10th JBF Symposium, DG2018-38

86

選択式

Japan Bioanalysis Forum「その他」を選択された方からのご意見・ケースバイケース
・測定項目によって必要な場合と不必要な場合がある・希釈による影響が疑われる場合は必要
・申請時におけるガイドラインに従う. 国内では不必要, 海外では必要
10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

Q18 パラレリズム評価の必要性について

87

記述式

Japan Bioanalysis ForumQ19 Q18の回答理由について・パラレリズム不成立が科学的に考えられる場合は分析法開発の段階で対策を講じた上で評価すべきと考える.
・MRDの設定，再現性の代わりなど有益な情報が得られるため.
・BMは実施した方がよいと思うが, 基準設定については難しく, 詳細な議論が必要. また, パラレリズムが成立しなくても, その結果に応じて適切な対応を実施することでOKとして欲しい（例えば, パラレリズムが成立した範囲で段階希釈する, 希釈倍率を全サンプルで一定にする, など）.
10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

BMでパラレリズム評価が必要な理由

88

記述式

Japan Bioanalysis ForumQ19 Q18の回答理由について・リコンビナントタンパク質と内因性物質で反応性が異なる可能性があることから, 適切に測定を実施できる濃度範囲について確認する必要があると考えられるため.
・標準物質と内因性のマーカーは別のものと考えられる
ため.
・実試料と検量線試料とでは, マトリックスだけではなく,検出される物質に違いがある. この違いを明らかにしておく必要があると思われるため.
10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

BMでパラレリズム評価が必要な理由

89

記述式

Japan Bioanalysis Forum

BMでパラレリズム評価が必要な理由
・試料によって検量線と平行性がないものがあるため.
・標準品との反応性の違いなどを把握し, 測定法の性能を理解する上でも重要性が高いため.

10th JBF Symposium, DG2018-38

http://bioanalysisforum.jp/

Q19 Q18の回答理由について

90

記述式

Japan Bioanalysis ForumQ19 Q18の回答理由について・パラレリズム不成立が科学的に考えられない場合は必須と捉えていないため．
・パラレリズム不成立が強く懸念される場合のみ実施す
れば十分であると思うため.
・ガイドラインに必須と明記されていないため.
・非内因性タンパク質のPKでは, 希釈直線性が成立していればパラレリズムが不成立になる事例の想定ができないため.
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PKでパラレリズム評価が不必要な理由

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記述式

Japan Bioanalysis ForumQ19 Q18の回答理由について

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PKでパラレリズム評価が不必要な理由
・標準物質と薬物は同一であることから, 抗体への反応性が異なると考えにくいため.
・PKのように外因性の物質を測定している場合, パラレリ
ズム不成立の可能性は非常に低く, ルーチンでの評価は不要と考えるため.

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記述式

Japan Bioanalysis ForumQ19 Q18の回答理由について・希釈倍率による報告値への影響は測定時に発生する誤差と思われるので, できれば避けたい. ただ, 通常の対応としては，希釈直線性などの評価で十分ではないかと考える．
・CROであるので, 委託者からの要望で対応するが, 申請時におけるガイドラインに従い, 国内では不必要, 海外では必要といった対応をとる傾向がある.

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http://bioanalysisforum.jp/「その他」を選択された方からのご意見

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記述式

Japan Bioanalysis Forum

困ったこと・パラレリズムが不成立となる原因が結局不明であり, 対応としてMRDを上げるのが現実的になっている. 重要試
薬の変更で解決しなかったりする.
・パラレリズムが実際に問題となった事例につい情報が欲しい．特にTKにおける事例が知りたい．
・バリデーション試験でのパラレリズムの必要性（TK, PK
測定時またはPD測定時）について.

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Q20 困ったこと, 議論したいことなど

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議論したいこと・C-path文書が重要であるなら, これをベースにBMVガイ
ドラインに基準を記載してはどうか.
・パラレリズムが不成立となり, 分析法の改善の余地がない場合, 実試料測定データをどのように使うことが許容されるのか.
・PKについて, 原則パラレリズム評価は不要であるといった公式見解が欲しい.

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Q20 困ったこと, 議論したいことなど

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Japan Bioanalysis Forum

その他（情報共有）
・実試料を使用するので, 治験のインフォームドコンセントに測定系の検討に試料を使用することを盛り込む必要があった.

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Q20 困ったこと, 議論したいことなど

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