学位研究紹介

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学 位 研 究 紹 介

インタ−ロイキン 6（IL 6）− 373 A9T11
アリルは日本人における慢性歯周炎の感受性低下および血清 IL 6 レベル低下に関連するInterleukin-6 (IL 6)-373 A9T11
allele is associated with reduced
susceptibility to chronic periodontitis
in Japanese subjects and decreased
serum IL 6 level.

子多型の頻度を検索し，慢性歯周炎との関連性について検討した。

【材料と方法】
インフォームドコンセントを得た日本人慢性歯周炎患者（CP）112 名（うち５年以内の喫煙歴がある者は対象から除外）と年齢マッチした健常者（Non CP）77 名の末梢血よりゲノム DNA を抽出した。被験者グループの基準は mPPD，mCAL ≦３mm かつ BL<20％を満たすものを Non-CP 群，それ以外を CP 群とした。IL- ６597， 572， 190， 174 SNPs（一塩基多型）は PCR-

新潟大学大学院医歯学総合研究科 口腔生命科学専攻

RFLP（制限酵素切断断片長多型）法， 373AnTm は摂食環境制御学講座 歯周診断・再建学分野

PCR-SSCP（一本差 DNA 高次構造多型）法とダイレク

小松康高

Division of Periodontology,
Department of Oral Biological Science,
Niigata University Graduate School of
Medical and Dental Sciences.

Yasutaka KOMATSU

トシークエンス法の併用により遺伝子型を同定し，統計学的解析を行った。また，Non-CP 群 77 名から無作為に 34 名を抽出し，末梢血を遠心分離して得られた血清中 IL ６濃度を高感度 ELISA 法にて測定し，遺伝子型ごとに解析した。

【結【目的】果】

今回検索した日本人では 572， 373 のみに遺伝子多型を認め，その頻度は白人とは大きく異なっていた。

歯周炎は成人の約 80％が罹患する common disease572， 373 遺 伝 子 多 型 は 連 鎖 不 平 衡 に あ り（Dの一つであり，歯を喪失する最たるものである。この事＝ 0.98， χ² ＝ 344.5，p<0.0001），

は，高齢者の QOL の低下を招くことにつながり，現在

A10T10 お よ びの日本における深刻な社会問題 の一つである。歯周炎

アリル間に強い連鎖が見られた。

572/G と572/C と

373/

373/A10T11，A ９T11

は，『慢性炎症の持続』と『骨破壊』を特徴とし，IL- ６

373 A ９T11 アリル頻度及び保有率は Non CP 群は双方の病状に深く関与する重要な分子である。歯周炎で CP 群に比較し，有意に高かった（カイ２乗検定，病態形成における IL ６の関与は明白で，歯周炎患者でNon-CP 群 vs. CP 群 ; アリル頻度 11.1％ vs. 4.0％，pの局所（歯肉溝滲出液，歯肉組織）および末梢血中 IL-＝ 0.008， オ ッ ズ 比 ＝ 2.96 Table １， ア リ ル 保 有 率６濃度の上昇をみる。IL ６の生理活性作用は非常に広20.8％ vs. 8.0％，p ＝ 0.011，オッズ比＝ 3.0）。

範に及び，制御機構の破綻が慢性関節リウマチ，SLE

血清 IL ６レベルは 572， 373 のディプロタイプなどの炎症性疾患，自己免疫疾患に深く関与する事が近で 比 較 し た と こ ろ，C[A10T10]/ C[A10T10] 群 で年の報告で明らかになりつつある。このような背景から

C[A10T10]/ G[A10T11]，C[A10T10]/ G[A ９ T11] 群

シグナル伝達鎖 gp130 の機能的解析やそのシグナル経に比較して有意に高かった（Wilcoxon signed rank

路をブロックする新薬の開発は後をたたず，多様な生理

test，順に１.38 ± 0.11，0.90 ± 0.07，0.88 ± 0.13 pg/

活性を有する IL ６の研究は歯周炎のみならず，非常にml，各方面で注目されている。

C [A10T10] / C [A10T10] vs. C [A10T10] / G [A10T11]

一方，歯周炎は多因子性疾患であり，遺伝的要因の関与が示唆されており，我々は既に，IL １ファミリー，TNF α，TNF レセプター遺伝子多型について解析を重ねてきた。そこで，今回は IL ６プロモーター領域遺伝− 101 −: p ＝ 0.007，C [A10T10] / C [A10T10] vs.
C [A10T10] / G [A ９T11] : p ＝ 0.008 Fig １）。

102

新潟歯学会誌
Table １

Distribution of IL-6 promoter -572 and -373 polymorphisms in Non-CP and CP subjects.

Position
572

Genotype frequency

Allele frequency*
373

36（1）：2006

Genotype frequency

Allele frequency

C/C
C/G
G/GCG
A10T10/A10T10
A10T10/A10T11
A10T10/A9T11
A10T11/A10T11
A10T11/A9T11
A9T11/A9T11
A10T10
A10T11
A9T11

Non-CP subjects％（n ＝ 77）
53.2**（41）
41.6**
（32）
5.2**
（4）
74.0**（114）
26.0**（40）

CP subjects％（n ＝ 112）
63.4
（71）
32.1
（36）
4.5（5）
79.5
（178）
20.5
（46）

54.5**
23.4**
18.2**
1.3**
1.3**
1.3**
75.3**
13.6**
11.1**

64.3
24.1
8.0
3.6
0.0
0.0
80.4
15.6
4.0

（42）
（18）
（14）
（1）
（1）
（1）
（116）
（21）
（17）

（72）
（27）
（9）
（4）
（0）
（0）
（180）
（35）
（9）

p-value

0.37

0.22

0.14

0.03

*Total number of alleles: Non-CP 2n ＝ 154, CP ＝ 224**Signi cantly higher when compared to CP with Bonferroni' s correction（OR ＝ 2.96, 95％ CI ＝ 1.21-7.43, 2 ＝ 7.02, p＝ 0.008）.

【考察】

Case-control study では遺伝子多型の人種差や研究デザインなどの違いにより，しばしば矛盾した結果が導き出される事がある。しかし，今回有意差の認められた，
373 A ９T11 アリルは比較的人種差が少なかったため，共通の genetic factor となる可能性があると思われた。
また，遺伝子多型の機能解析の一つとして，血清 IL ６レベルへの影響を可能な限り修飾因子（歯周炎，年齢，性，エストロゲン）を除外して検討した結果， 373 A
９T11 アリルが血清レベルの低下に関連した。よって，
373 A ９T11 アリルが転写活性に影響し，IL ６産生の低下に関連している可能性が示唆された。以上のように，統計学的および in-vivo での機能解析により，ILFigure 1 Influences of the common IL 6-572 and 373
diplotypes on serum IL 6 level in Japanese Non
CP subjects.
Bars represent the mean ± standard error.
*p<0.01
Peripheral blood serum IL 6 level were
determined in duplicate using commerciallyavailable QuantikineTM
ELISA kits (R&D) Systems, WiesbadenNordenstadt, Germany) according to themanufacture's instructions.
The sensitivity of the assay was 0.039 pg/ml.

６373 A ９T11 アリルが日本人における慢性歯周炎の抵抗性ならびに血清 IL ６レベルの低下に関連する事が示唆された。しかしながら，一つのプロモーター領域遺伝子多型のみで転写活性は制御されるものではなく，今後ハプロタイプを考慮した in-vitro での機能解析の必要性があると思われる。

【参考文献】Y Komatsu, H Tai, JC Galicia, Y Shimada, M Endo,K Akazawa, K Yamazaki and H Yoshie. Interleukin
６（IL６） 373 A ９ T11 allele is associated with

reduced susceptibility to chronic periodontitis inJapanese subjects and decreased serum IL
Tissue Antigens 2005: 65; 110-114.
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６ level.