食物アレルギーにおける免疫記憶の機序解明

研究課題名

食物アレルギーにおける免疫記憶の機序解明

フリガナ

アダチ

代表者名

安達タカヒロ貴弘

所属機関（機関名）東京医科歯科大学難治疾患研究所（役職名）准教授
氏

共同研究者

名（フリガナ）

戸村 道夫（トムラ ミチオ）
中村 公則（ナカムラキミノリ）
高雄 啓三（タカオ ケイゾウ）

所属機関・役職名

役割分担

大阪大谷大学・教授

免疫細胞のプロファイルイン
グ

北海道大学

腸管バリア機能の解析

富山大学准教授
教授

行動学解析

Immunoglobulin A-specific deficiency induces spontaneous inflammation
specifically in the ileum.
Nagaishi T, Watabe T, Kotake K, Kumazawa T, Aida T, Tanaka K, Ono R, Ishino
本 助 成金 によ る 発
F, Usami T, Miura T, Hirakata S, Kawasaki H, Tsugawa N, Yamada D, Hirayama
表論文，学会発表
K, Yoshikawa S, Karasuyama H, Okamoto R, Watanabe M, Blumberg RS, Adachi
T.Gut. 2021 May 7:gutjnl-2020-322873. doi: 10.1136/gutjnl-2020-322873. Online
ahead of print.PMID: 33963042
研究結果要約
食物アレルギーの原因の 1 つは腸管バリア機能の低下（leaky gut）といわれており、腸管バリア機能に重要な IL-22 および IgA に着目し、食物抗原特異的な IgE 産生機序との関連についての研究を行った。2019 年度の研究助成の成果として、IgA が食物アレルギーに深く関わっていることを示唆する結果を得ており、独自に樹立した IgA 欠損マウスを用いて、IgA の機能のさらなる解析を行った。IgA 欠損
マウスでは腸内細菌のゆがみに依存して回腸炎が起こるが、これにはグラム陽性、陰性の腸内細菌とも関与していること、また、炎症は回腸の上皮陰窩に起因していることを見出した。この微細な異常は、食物アレルギーの予防や診断をするうえで超早期の標的になると考えられる。さらに IgA 産生細胞の動態を詳細に解析するために、IgA 産生細胞可視化マウスを作製し、脾臓や小腸で検出できることを確認した。また、IgA 欠損マウスでは、野生型マウスに比べ、抗原感作によってより多くの抗原特異的 IgE抗体が誘導されることを昨年度報告したが、皮膚感作アレルギーモデルで IgE 抗体産生細胞の検出方法を確立し、リンパ節に IgE 産生細胞が存在していることをつきとめた。一方、IL-22 に関しては、IL-22欠損マウスを樹立し、腸管バリア機能の低下を確認後、食物アレルギーモデルで評価をしたが、それだけでは食物アレルギーは誘導できず、他の要因の関与が示唆された。

24

食物アレルギーにおける免疫記憶の機序解明

研究目的

制御する根本的な治療法の開発ができるのでは食物アレルギーは食物抗原に一旦感作されてないかと考える。そこで本研究では、食物アレル

免疫記憶が成立してしまうと抗原を摂取するたギーにおいて免疫記憶が成立および維持されるびにアレルギー症状が惹起されてしまう。しかし、機序を明らかにすること、それをもとにした抗原その治療方法としては、アレルギーの原因となる特異的な免疫記憶およびクラススイッチの機序食物を避けるといった対処療法が、いまだ主流でを明らかにするとともにその制御法の確立を目ある。少量の抗原を投与する減感作療法も行われ的とした。またアレルギーと発達障害の関連も指ているが、根本的な解決には至っていない。通常

摘されており、アレルギー疾患と神経性疾患とのは、食物抗原により、制御性 T 細胞が誘導されて因果関係についても多角的に調べ、アレルギーの経口免疫寛容がされるが、腸管や皮膚などのバリ治療による他の疾患の制御の可能性についてもア機能が破綻すると、食物が体内に侵入し、免疫検討することとした。このことが解明されれば、反応が惹起され、アレルギーを発症すると考えらアレルギー疾患にとどまらず、新たな医療の枠組れる。これまでの研究から、独自に腸管、皮膚のみを創生する画期的なことである。

バリア機能を低下せた食物アレルギーモデル系を複数構築し、IgA が IｇE の産生を抑制するこ研究計画及び研究手法
腸管・皮膚のバリア機能に重要な IL-22 欠損マとを、IgA あるいは IgE を制御する食品成分も見ウスにおける食物アレルギーの解析出している。また、図１に示すとおり、IgA を欠損させると免疫細胞の過剰な活性化が起こり、回CRISPR/Cas9 によるゲノム編集により IL-22

腸に炎症がみられることを明らかにしてきた 1)。

欠損マウスを作製し、正常マウスとの交配によりこれらを基盤として、食物アレルギーにおけるIL-22 欠損マウスのライン化を行い、IL-22 遺伝免疫記憶、さらには免疫グロブリンのクラススイ子部分の欠失をシークエンスにより確認した。腸ッチを標的として食物抗原特異的に免疫記憶を管および皮膚のバイア機能を、皮膚については、
経 皮 水 分 蒸 散 量 （ transepidermal water loss;

⼗⼆指腸
⼤腸B 細胞T細胞

空腸YYYYは FITC 標識したデキストランを経口投与し、小腸内細菌YYIgATEWL）により評価した 2)。また腸管バリア機能

腸内細菌叢の乱れ腸での透過性を血液中の FITC の蛍光を測定す

炎症YY盲腸ることによって評価した。

回腸

昨年度、確立した C57BL/6 マウスを用いた食炎症性サイト カイン（ I L-1 7 ， I FN -γ）

正常マウス

物アレルギーモデル系を用い、IL-22 欠損マウス

I g A⽋損マウスにニワトリオボアルブミン（OVA）50 ㎍を抗原

図１ ． I g A ⽋損によ る 回腸での炎症
⼩腸は上部から⼗⼆指腸、空腸、および回腸からなるが（左）、IgA⽋損により特に回腸での腸内細菌叢の歪みが⼤きく、それに応答してT細胞からの炎症の原因となるサイトカインの分泌が増え、炎症が起こることにより回腸の組織が損傷を受ける（右）。

として水酸化アルミニウムをアジュバンドとし25

食物アレルギーにおける免疫記憶の機序解明てゲル化したもの（OVA/Alum）を腹腔に投与しウス 1)では IgE 産生が増強される特徴を生かし、て免疫した。2 週間後に追加免疫した後、さらにOVA/Alum 感作した IgA 欠損 B6 マウスを用い、1 週間後にゾンデにより 30 ㎍の OVA を 0.3ml のフローサイトメトリーにより IgE 陽性細胞を、さリン酸化バッファーに溶解したものを投与した。

らに Enzyme-Linked ImmunoSpot （ELISPOT）投与後の体温測定を行い、アナフィラキシー反応

アッセイにより、抗原特異的 IgE 産生プラズマ細を検討した。また、IgA 欠損マウスと比較した。

胞の検出法を確立した。プラズマ細胞分化では、腸管のバリア機能に重要な IgA あるいは IL-22

B220 (あるいは CD19 など)+ 細胞表面 Ig– →を欠失したマウスの糞便より腸内細菌叢につい

B220+ 細 胞 表 面 Ig+ → B220– 細 胞 表 面 Ig+→て、DNA を抽出し、16S rRNA の次世代シークB220–細胞表面 Ig– (形質細胞)と、分化が進むにエンス解析により調べた。

つれて細胞表面 Ig が陰性となる。そこで、今年
度は、OVA/Alum 感作 KikGR 発現 IgA 欠損IgA 産生細胞の動態の可視化解析

C57BL/6 マウスを用いて、細胞内および細胞表IgA のクラススイッチを機序、さらに IgA 産生

面 IgE を分けて同時に分けて染色して検出し、細胞の動態を解明するために、CRISPR/Cas9 にIgE 産生細胞分化過程の詳細を、フローサイトメよるゲノム編集により IgA 産生細胞可視化マウトリー解析による B220–細胞表面 IgE– (形質細スの構築を行った。IgA 産生細胞で、同時に Cre胞)検出と同時に ELISPOT アッセイによる抗原リコンビナーゼを発現させ、これまでに確立して特異的 IgE 産生細胞検出により明らかにするこきた LoxP によるカルシウムバイオセンサーとにした。

YC3.60 マウス 3 , 4)との交配により IgA 産生細胞
特異的に YC3.60 を発現するマウスを用いた生体IgE 陽性細胞の生体内動態解析
昨年度に報告したように、IgA 欠損 C57BL/6

イメージングにより IgA 産生細胞の動態を明ら

マウスへの OVA/Alum 感作により、血液中 IgEかにすることにした。

上昇と OVA 特異的 IgE+形質芽細胞の誘導を確認
IgE 産生プラズマ細胞分化の詳細な検出系の確出来た。そこで、今年度は IgA 欠損マウスと立

KikGR マウスとを掛け合わせて作製した KikGR
光 変 換 蛍 光 タ ン パ ク 質 KikGR を 発 現 す る

IgA 欠損 C57BL/6 マウスに OVA/Alum 感作してKikGR マウス 5)を用い、IgE 産生プラズマ細胞、IgE+細胞を誘導し、IgE+細胞の生体内動態を検出

および抗原特異的 IgE 産生プラズマ細胞の前駆することにした。

細胞の生体内動態を明らかにすることで、IgE 産皮膚感作Ⅰ型アレルギーモデルの確立と解析

生プラズマ細胞の誘導および維持機構を明らか

小麦加水分解物を含む石鹸による小麦粉アレにすることを目指した。前年度には、IgA 欠損マ

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食物アレルギーにおける免疫記憶の機序解明

ルギーや英国の乳児へのピーナッツオイル塗布

腸管バリア機能に重要な IgA を欠失させたによるピーナッツアレルギーなどが典型的な例

IgA 欠損マウス 1)において網羅的な行動学解析をとして挙げられるが、食物アレルギーは皮膚感作行い 6)、脳について組織切片を染色し、病理解析により誘導された食物と同一抗原に対する抗を行った。

IgE 状態下における食物摂取により惹起される。
従って、皮膚感作時に誘導される IgE 産生細胞の結果と考察

誘導メカニズムの解明、特に、皮膚感作により誘腸管・皮膚のバリア機能に重要な IL-22 欠損、導された IgE 産生細胞にコミットした細胞の検

IgA 欠損マウス、IgE 過剰発現マウスにおける食出と臓器間移動、そして、皮膚からの再感作およ物アレルギーの解析

び食物アレルギー惹起時における IgE 産生細胞

CRISPR/Cas9 により IL-22 を欠損したマウスにコミットした細胞から IgE 産生細胞への分化を作製し、IL-22 を欠失した複数の系統を樹立し誘導と生体内動態の解明は、食物アレルギーの感た。そのうちの 1 系統について皮膚、腸管のバリ作機序の解明を大きく推し進める。しかし、皮膚ア機能を評価したところ、経皮での TWEL が亢感作時に IgE 産生細胞がどの臓器でコミットし、進しており、また FITC-デキストランの腸管でののその後、骨髄などに移動するのかについては、透過性の更新も見られ、それぞれの機能に低下がほとんど分かっていない。

あることが確認された。この IL-22 欠損マウス、昨年度確立した OVA/Alum 感作による食物ア

IgA 欠損マウス、IgE 過剰発現マウスを用いてレルギーモデルは、誘導された抗原特異的 IgE 産OVA で免疫後、OVA を経口投与した食物アレル生細胞と食物アレルギーの発症解析にはとてもギーモデルにおいて、OVA に対する特異抗体価有用なツールであるが、前述の生体内での IgE 産を評価したところ、IL-22 欠損マウスでは腸管の生細胞誘導過程の解明には、抗原皮膚感作 IgE 誘透過性が上がっているにもかかわらず、正常マウ導モデルが必須である。そこで本年度は、スに比べて、明らかな差異は見られなかった（図C57BL/6 系 IgA 欠損マウス、および皮膚持続感２）。IL-22 欠損マウスについて、CD4 陽性 T 細作によるアトピー性皮膚炎モデルとして用いら胞、CD8 陽性 T 細胞、NK 細胞、制御性Ｔ細胞、れる BALB/c 系マウスを用いて、腹部皮膚をテー濾胞性ヘルパーＴ細胞、Ｂ細胞などの免疫細胞にプストリッピング後、OVA 塗布感作を繰り返す、ついても、正常マウスと比較したがいずれも明ら抗原反復塗布感作アトピー性皮膚炎モデルの確かな差異はなかった。糞便による腸内細菌叢の解立を試みた。

析では、正常マウスと異なっていることが明らかとなった（図３）。

腸管バリア機能低下モデルマウスにおける行動異常の解析

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食物アレルギーにおける免疫記憶の機序解明

IgA 産生細胞可視化マウスの動態解析

腸管での IgA の機能解析

CRISPR/Cas9 の系を用いて IgA の H 鎖の遺IgA 欠損マウスの腸管の切片を調製し、HE 染伝子座に Cre リコンビナーゼ遺伝子を導入し、色したところ、小腸の陰窩の上皮細胞に異常があIgA を産生する細胞で Cre リコンビナーゼを発ることがわかった。この結果は小腸炎のモデルマ現するマウスを作製した。Cre リコンビナーゼにウスで、小腸での炎症は陰窩のパネート細胞の異より発現誘導できる細胞系譜特異的カルシウム常から始まるという結果 7)とよく一致しており、バイオセンサー（YC3.60）マウスとの交配により、食物アレルギーにおいても陰窩の小腸上皮に異IgA を産生する細胞を可視化できるマウスを樹常がある可能性が示され、食物アレルギーにおけ立した。このマウスについて生体イメージングにる下痢などの原因となっていると推測された。

より IgA 産生細胞の動態を解析したところ、脾臓
では、広く散在していたが、小腸パイエル板ではIgE 産生プラズマ細胞分化の詳細な検出系の確2 次濾胞に集積していることが明らかになった立（図４）。

28

食物アレルギーにおける免疫記憶の機序解明

IgA 欠損 C57BL/6 マウスに 1 週間感覚でプラズマ細胞分化は、B220+ 細胞表面 IgE–細胞

OVA/Alum を 4 回感作して IgE+細胞を誘導した。

→ B220+ 細胞表面 IgE+ 細胞 → B220– 細胞表面

脾臓細胞について、B220、Alexa647-OVA およIgE+→CD19–細胞表面 IgE– (形質細胞)と進行す

び細胞表面 IgE を Phycoerythrin 標識抗 IgE 抗るが、B220–細胞表面 IgE+細胞に比べて、CD19–

体 で 染 織 後 、 permeabilize し 細 胞 内 IgE を細胞表面 IgE– (形質細胞)の割合が当初想定してBrilliant Violet241 標識抗 IgE 抗体で染織していた頻度よりも低かった。これは、B220–細胞表検出した。そして、細胞内 IgE+細胞(細胞内 IgE

面 IgE+細胞のうちのごく一部の細胞が CD19–細は、細胞内および細胞表面 IgE+細胞で陽性のた

胞表面 IgE– (形質細胞)に分化していく、あるいめ)、さらに Alexa647-OVA+細胞(OVA に結合すは、CD19– 細胞表面 IgE– (形質細胞)の寿命がる抗体を産生している)に gating した。そして、

B220–細胞表面 IgE+細胞に比べてとても短いた

B220+、B220 細胞について調べてみると、いずれめである可能性を考えている。の細胞でも細胞表面 IgE 細胞は、1%程度であっ食物抗原摂取時における腸間膜リンパ節、脾臓、骨髄での B220+細胞表面 IgE+細胞、B220–細胞表た (図５)。

面 IgE+細胞、CD19–細胞表面 IgE– (形質細胞)の

B220+IgE+T細胞除去画分

頻度変化の解析は、食物抗原による IgE 産生細胞

OVA+

分化のタイミングと分化臓器、そして分化の場を細胞内IgE

細胞外IgE

B220

B220

B220

1.3%

OVA明らかにするための有用な情報となると考えて

B220–いる。

OVA
1.5%

IgE 陽性細胞の生体内動態解析

OVA

当研究の IgE 産生プラズマ細胞の生成を、その図５ ． 感作抗原特異的I g E産⽣プ ラ ズマ細胞分化過程の検出

前駆細胞の生成と維持機構を解明して制御する
また、他の染色パネルでも再現のある結果が得という目的から、 IgE+ プラズマブラスト 細胞られた。また、脾臓細胞 100 万個当たり CD19–(B220– 細胞表面 IgE+)、およびその前駆細胞で細胞表面 IgE– (形質細胞)は約 4 個であった。一

IgE+細胞にコミット直後の B220+細胞表面 IgE+

方、ELISPOT アッセイで、同じサンプルについ細胞の臓器間移行について解析した。昨年度のて解析すると、OVA 特異的 IgE 産生細胞は 100OVA/Alum 感作 IgA 欠損 B6 マウスの検討にお万個当たり約 5.5 個であった。フローサイトメト

いて、腸間膜リンパ節、脾臓、骨髄で IgE+細胞をリーと ELISPOT 評価系では検出感度の差を考検出出来ている。そこでまず、OVA 特異的 IgE+える必要もあるが、ほぼ同数との結果が得られた。

細胞の腸間膜リンパ節から脾臓、骨髄への移動を以上の結果をまとめると、当モデルでの IgE 産生解析した。KikGR 発現 IgA 欠損 B6 マウスに29

食物アレルギーにおける免疫記憶の機序解明

CD19+IgE–
4.7%

IgE+

B220+

OVA

6.5%

OVA

KikGR-Red

細胞表面IgE

OVA+

CD19

CD19

CD19

T細胞除去画分

B220–
0.12%

KikGR-Green

図６ ．

腸間膜リ ン パ節から ⾻髄への抗原特異的I g E + 細胞の移動

OVA/Alum を感作して 3 回感作して１週間日後皮膚感作Ⅰ型アレルギーモデルの確立と解析に、腸間膜リンパ節に紫色光を照射して腸間膜リC57BL/6 系 IgA 欠損マウス、および皮膚持続ンパ節に存在する細胞を赤色(KikGR-Red)にマ感作によるアトピー性皮膚炎モデルとして用いークした。24 時間後に骨髄および脾臓細胞を分られる BALB/c 系マウスを用いて、腹部皮膚をテ離して解析した。当検討では、B220 の代わりにープストリッピング後 OVA あるいは PBS を週CD19 を使用した。腸間膜リンパ節から 24 時間に 1 回塗布感作して繰り返す、抗原反復塗布感作の間に移動してきた KikGR-Red の CD19+ IgE+

アトピー性皮膚炎モデルの確立を試みた。

細胞、および IgE+プラズマブラスト(CD19–細胞

1 回/週 × 3 回実施して 3 日後、および 1 回/週 ×

表面 IgE+)は、それぞれ骨髄では 6.1%と 0.06%、5 回実施して 3 日後に、血中 IgE を測定しとこ

脾臓では 2.4%と 0.17%であった (図６)。

ろ、n=2 であるが OVA 感作群では PBS 群に比べ、血中総 IgE および抗 OVA IgE 抗体濃度が増この結果から我々は、頻度は低いが、細胞表面IgE+産生細胞は腸間膜リンパ節、脾臓、骨髄間を加していた(図７)。

移動していると考えている。IgE 産生にコミット

そこで ELISPOT アッセイにて OVA 特異的して直後の CD19+IgE+細胞が骨髄および脾臓にIgE 産生細胞の検出を試みたが皮膚感作 3 回およ移動して IgE+形質芽細胞(IgE+CD19–)に分化し、び 5 回のいずれでも骨髄細胞、脾臓細胞でも OVA

IgE+形質芽細胞に分化後は、その臓器からほとん

特異的 IgE 産生細胞を検出出来なかった。そこでど動かずにいる可能性を考えている。今後、脾臓、さらに、IgA 欠損 C57BL/6 マウスと、IgE が誘あるいは、骨髄を光照射して解析する事で、生体導されやすい BALB/c マウスを用いて、腹部皮膚内動態が明らかになると考えている。

をテープストリッピング後 OVA 塗布/1 回/週 × 3回、および 5 回で追加実験を実施した。その結果、IgA 欠損 C57BL/6 マウスでは血中抗 OVA IgE 抗30

食物アレルギーにおける免疫記憶の機序解明

体誘導は検出される個体も認められたが不確実

CD19–OVA+IgE+産生細胞は検出されなかったが、であり、誘導された濃度も低値に留まった。それ

ELISPOT アッセイでは OVA 特異的 IgE 産生細に対し、BALB/c マウスでは、総 IgE と抗 OVA胞検出されたことから、所属リンパ節では形質細IgE 抗体が有意に誘導された (図８)。ELISPOT胞のみが存在している可能性がある。以上の結果

アッセイによる OVA 特異的 IgE 産生細胞の検出から、所属リンパ節は IgE 産生細胞分化の場といにおいても IgA 欠損 C57BL/6 マウスでは誘導はうよりもむしろ産生の場として機能している可安定しなかったが BALB/c マウスでは安定して能性を我々は考えている。

検出された(図９)。以上の結果から、皮膚感作Ⅰ

皮膚感作時および経口摂取時における骨髄お型アレルギーモデルでは、IgA 欠損 C57BL/6 マ

よ び 脾 臓 に 存 在 す る B220+IgE+ 細 胞 お よ ぶ

ウスによる解析は難しく、BALB/c マウスバック

IgE+プラズマブラストの生体内動態変化と、IgEグラウンドであることが必要で有ることが分か

産生プラズマ細胞の局在の詳細の解明は、IgE 産った。そこで、皮膚感作Ⅰ型アレルギーモデルに生プラズマ細胞の誘導と維持のメカニズム解明おいて、IgE+細胞の生体内動態を解析するために、に繋がると考えている。

KikGR マウス(C57BL/6 バックグラウンド)をBALB/c マウスと交配し、現在、ほぼ BALB/c バ

腸管バリア機能低下モデルマウスにおける行動ックグラウンドに置き換わるとされる 6 世代目異常の解析の KikGR 発現 B/c マウスを作成した。今後、OVAIgA 欠損マウスにおいて網羅的な行動学解析の経口摂取により食物アレルギーの発症の有無を行い、オープンフィールドテストで不安行動のを確認する。さらに、KikGR 発現 B/c マウスに増加が見られた。腸管に炎症があると行動にも異て皮膚感作Ⅰ型アレルギーを誘導し、皮膚所属リ常が見られ、食物アレルギーを発症した状態ではンパ節、脾臓、骨髄、そして、腸間膜リンパ節間脳神経にも影響を及ぼすことが示唆された。の IgE+細胞の動態と、IgE+プラズマ細胞の局在今後の研究活動についてを明らかにしていく。

IgA 欠損マウスでは IgE 陽性細胞が増えていさらに BALB/c マウスを用いて検討を進めるることが明らかになり、IgE 抗体産生細胞の局在と、OVA 感作した皮膚の所属リンパ節では31食物アレルギーにおける免疫記憶の機序解明については一部明らかとなったが、それらの局在ては継続中であり、食物アレルギー発症時の脳の性、維持に関する機序については、まだまだ不明

炎症や海馬でのニューロン新生を調べることや、である。また、本年度の研究から、マウスのバッ腸脳相関 8)を調べることにより神経性疾患へのクグランドを BALB/ｃにした方が、実験の検出影響を明らかにすることができると考えられる。

感度が上がり、より詳細な解析が可能であることも明らかとなった。このことより IgA 欠損マウ

参考文献

ス、および IL-22 欠損マウスについても C57BL/61)

NagaishiT,

WatabeT,

KotakeK,

Kumazawa T, Aida T, Tanaka K, Ono R,のバックグランドのものを BALB/ｃに戻し交配

Ishino F, Usami T, Miura T, Hirakata S,

させ、食物アレルギーにおける IgE 陽性細胞の検Kawasaki H, Tsugawa N, Yamada D,

出感度を上げたシステムを取り入れる予定であHirayama K, Yoshikawa S, Karasuyama H,る。これらのマウスを利用して、IgE 陽性細胞のOkamoto R, Watanabe M, Blumberg RS,動態、活性化、抗体産生細胞への分化についてさAdachi

らなる解析を行い、食物アレルギー発症時の IgET.

deficiencyを継続的に供給するメカニズムの解明が必要で

Immunoglobulin
induces

A-specificspontaneous

inflammation specifically in the ileum. Gut

ある。アナフィラキシー反応の検出には C57BL/6

2021

バックグランドの IgA 欠損マウスでも十分に高2)

Kumazawa T, Kotake K, Nishimura A,

い感度で検出できるので、このマウスに IgA 抗体

Asai N, Ugajin T, Yokozeki H, Adachi T.の投与や IgA 産生細胞を移入するなどで、食物ア

Isolation of food-derived bacteria inducing

レルギーが回避できるか、確かめる必要がある。

interleukin-22 in B cells. Biosci Microbiota

また、IgA 産生細胞可視化マウスが樹立されたのFood Health 2020 39:1-9,3)で、食物アレルギー誘導時の、クラススイッチ、

Nagai T, Yamada S, Tominaga T, Ichikawa
M, Miyawaki A. Expanded dynamic range

また IgA 産生細胞への活性化・維持についての動of fluorescent indicators for Ca(2+) by

態を詳細に調べ、トレランスの誘導機序を明らか

circularly permuted yellow fluorescentにする。IgA の産生を高めるプロバイオティクス

proteins. Proc Natl Acad Sci U S A 2004などが実際に食物抗原による IgA の産生を高め、

101:10554-9,トレランスに寄与するか、またそれが食物アレル

4)

Yoshikawa S, Usami T, Kikuta J, Ishii M,

ギーの抑制効果を発揮するか、検討する。これら

Sasano T, Sugiyama K, Furukawa T,のことが検証できれば、食物アレルギーにおけるNakasho E, Takayanagi H, Tedder TF,治療の標的を突止め、具体的な治療法が確立できKarasuyama H, Miyawaki A, Adachi T.

ると考えられる。

Intravital imaging of Ca(2+) signals inlymphocytes

食物アレルギー誘導系での行動学解析につい32ofCa(2+)

biosensor

食物アレルギーにおける免疫記憶の機序解明

5)transgenic mice: indication of autoimmune

Glickmandiseases before the pathological onset. SciHartwig J, Hosomi S, Flak MB, Cusick JL,Rep 2016 6:18738,

Kohno K, Iwawaki T, Billmann-Born S,Tomura M. New Tools for Imaging ofRaine T, Bharti R, Lucius R, Kweon MN,

Immune Systems: Visualization of Cell

Marciniak SJ, Choi A, Hagen SJ, Schreiber

Cycle, Cell Death, and Cell Movement byS, Rosenstiel P, Kaser A, Blumberg RS.

Using the Mice Lines Expressing Fucci,

Paneth cells as a site of origin for intestinal

SCAT3.1, and Kaede and KikGR. Methods

inflammation. Nature 2013 503:272-6,Mol Biol 2018 1763:165-74,6)

7)

8)

JN,

Tschurtschenthaler

M,

Nishimura Y, Fukuda Y, Okonogi T,Fujii K, Koshidaka Y, Adachi M, Takao K.

Yoshikawa S, Karasuyama H, Osakabe N,

Effects of chronic fentanyl administration

Ikegaya Y, Sasaki T, Adachi T. Dual real-

on behavioral characteristics of mice.

time in vivo monitoring system of the

Neuropsychopharmacol Rep 2019 39:17-35,

brain-gut axis. Biochem Biophys ResAdolph TE, Tomczak MF, Niederreiter L,

Commun 2020 524:340-5,

Ko

HJ,

BockJ,

Martinez-NavesE,33