タクサ

日本動物分類学会誌

2014
37: 21–27

青色系スズメダイ科魚類の標本青色還元法と色彩保存標本作製法
A restoration method of blue color in damselﬁshes (Pomacentridae), with notes on retaining
blue coloration in preserved ﬁsh specimens

岩坪洸樹・本村浩之
Hiroki Iwatsubo and Hiroyuki Motomura

Some species of damselﬁshes (Pomacentridae) have a brightblue body color. The body surface of these species has scattered iridophores, which induce changes in their blue coloration. The blue color is readily converted to blackish color
during formalin ﬁxation of fresh specimens, making it difﬁcult to take photographs of specimens of bluish damselﬁshes
representing live coloration. In this study, an innovative
method for restoring the blue coloration in formalin ﬁxed
specimens of bluish damselﬁshes is described. Chromatophore conditions before and after the blue coloration restoration are also illustrated. In addition, a glycerol penetration
method to preserve the blue coloration of glycerin immersion preserved specimens are discussed.
Key Words: Pomacentridae, chromatophores, iridophore,
glycerol penetration method

色彩が発現する（梅鉢，2000； 大島・杉本，2001）．
鮮やかな青色の色彩を呈するスズメダイ科魚類がもつ虹色素胞は，皮膚表面に存在する核領域から放射状に配列している反射小板が，平行的に一斉に移動することで間隔が増減し体色変化の主要な役割を担っている（大島・杉本，2001）．しかし，小板の間隔が変化する機構は明らかになっていない（大島・杉本，2001）．
青色の色彩をもつスズメダイ科魚類は，麻酔をかける際（藍澤，2009）や氷で絞める際，あるいはホルマリンを用いて展鰭する際に体色が黒色を帯びる．そのため，生鮮標本の撮影において生時の通常の色彩を記録することがきわめて困難である（例えはじめにば，西山，2013a： セナキルリスズメダイの写真；
西山，2013b： ソラスズメダイの写真）．青色を還元スズメダイ科（Pomacentridae）に属する一部の種する方法が開発されれば，撮影した標本について生には，ルリスズメダイ Chrysiptera cyanea (Quoy and

時の色彩の情報を残すことができるため大変有益でGaimard, 1825) や レ モ ン ス ズ メ ダ イ Chrysiptera rexある．そこで本研究では，標本処理の際に一度黒色(Snyder, 1909), ソラスズメダイ Pomacentrus coelestis

がかった個体を生時の通常の色彩に還元する方法をJordan and Starks, 1901 など，体全体または一部に鮮考案したのでここに報告する．

やかな青色の色彩を呈する種が存在する．これらの小野（2005）は乾燥やホルマリン液浸，樹脂包埋

種は色素細胞のひとつである虹色素胞をもつ（大などの生物標本作成時における脱色や変色，変形な島・杉本，2001）．虹色素胞内には主としてグアニどの問題を解決するため，グリセリンを使用した生ンから成る板状結晶（光反射小板）の重なり（小板物 標 本 作 製 法 を 開 発 し た． そ の 後， 廣 田・ 中 島堆）が存在し，屈折率の高いプリン結晶の重層で生（2014）は日本産淡水魚 16 種を用いて，小野（2005）

じる反射光の薄膜干渉現象によって鮮やかな青色のに詳細な記述がなかった固定期間とグリセリンの浸透方法について検討した．廣田・中島（2014）は脱鹿児島大学総合研究博物館〒890–0065 鹿児島市郡元 1–21–30
The Kagoshima University Museum, 1–21–30 Korimoto,Kagoshima 890–0065, Japan

水の行程を省略し，固定をした後グリセリン浸透を行う方法を開発した．さらに，廣田・中島（2014）はグリセリン浸透方法と浸透完了の確認について詳
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細に記述した．小野（2005）と廣田・中島（2014）

た．鰭が固定されたことを確認した後，原液ホルマ

は一部の分類群や色彩について検討したが，青色系リンを蒸留水で 3％ , 6％ , および 9％に薄めた 3 試験

スズメダイの色彩保存については本研究が新知見と区に標本を 1 日間固定した．その後，固定した標本なる．本研究ではグリセリン溶液浸標本での色彩保を蒸留水，水道水（鹿児島市），および濾過海水の存とグリセリン浸透法について若干の考察を行った

それぞれの液体に浸して色彩の変化を比較した．まので同時に報告する．

た，展鰭後に原液ホルマリンを蒸留水で 9％に希釈した溶液でそのまま保管した個体も比較に用いた．
すべての試験区とも，展鰭後は 7 度の恒温槽内で保材料と方法管した．時系列での色彩変化を比較するため，展鰭本研究では，Chrysiptera hemicyanea (Weber 1913),

直後，ホルマリン溶液での固定後，および固定後 1

シリキルリスズメダイ Chrysiptera parasema (Fowler,

日おきに，それぞれの試験区の標本を撮影した．本1918), レ モ ン ス ズ メ ダ イ Chrysiptera rex (Snyder,

実験で用いた標本は，すべて 70％エチルアルコー

1909), Chrysiptera springeri (Allen and Lubbock, 1976),

ルで保存した．青色還元前後で色素胞を顕微鏡下で

お よ び Pomacentrus alleni Burgess, 1981 を 用 い た．

撮影し，色素胞の変化の観察も行った．

固定条件による青色還元の比較には，シリキルリスズメダイ（産地： フィリピン）を用いた．種ごとの種ごとの青色還元の比較

青色還元の比較には，C. hemicyanea（産地不明），シリキルリスズメダイの固定条件による青色還元

レ モ ン ス ズ メ ダ イ（産 地： 鹿 児 島 県 与 論 島），C.の比較において，もっとも短期間で生時の通常の状springeri（産地不明），および P. alleni（産地不明）態の色彩に還元できた試験区で C. hemicyanea, レモを用いた．本研究で用いた標本は，すべて鹿児島大ンスズメダイ，C. springeri, および P. alleni の処理を学総合研究博物館（KAUM）に所蔵されている．

行い，それぞれの種で展鰭直後と青色還元後を撮影

また，標本写真も同館の画像データベースに登録さし記録した．なお，同期間で還元できた試験区がれ て い る． 使 用 し た 標 本 の 登 録 番 号 と 標 準 体 長

あった場合は，もっとも容易に入手できる液体にて（standard length: SL）は以下のとおり．Chrysiptera

行った．本実験で用いた標本は，すべて 70％エチ

hemicyanea: KAUM–I. 59065, 38.2 mm SL．シリキル

ルアルコールで保存した．

リスズメダイ Chrysiptera parasema: KAUM–I. 59054,
26.6 mm SL; KAUM–I. 59055, 30.4 mm SL; KAUM–I.

グリセリン保存による色彩保存

59056, 33.1 mm SL; KAUM–I. 59057, 26.5 mm SL;

シリキルリスズメダイ 1 標本を青色還元した後，KAUM–I. 59058, 33.2 mm SL; KAUM–I. 59059,

グリセリン中にて保存した．グリセリン保存は小野30.0 mm SL; KAUM–I. 59060, 28.4 mm SL; KAUM–I.

（2005）と廣田・中島（2014）のグリセリン浸透法

59061, 31.3 mm SL; KAUM–I. 59062, 28.3 mm SL;

を参考にしたが，退色を防ぐためエチルアルコール

KAUM–I. 59063, 34.3 mm SL; KAUM–I. 59064,を使用する行程を省略した．また，腐敗防止のため

25.0 mm SL; KAUM–I. 59454, 31.8 mm SL．レモンス

液全体量の 1％のチモールを加えたグリセリン溶液

ズ メ ダ イ Chrysiptera rex: KAUM–I. 59066, 37.0 mmを用いた．

SL．Chrysiptera springeri: KAUM–I. 59067, 29.0 mm
SL．Pomacentrus alleni: KAUM–I. 59068, 21.3 mm

結果と考察

SL．
固定条件による青色還元の比較
固定条件による青色還元の比較

氷を入れた海水で締めた直後に，すべての標本で生きた状態のシリキルリスズメダイを氷が入った

体色が黒色を帯びる変化がみられた．展鰭直後も黒海水で絞め，原液ホルマリンを海水で 9％に希釈し色がかった体色が変化することはなかった（図 1:た溶液を満たした食品用トレーの中で展鰭を行っStart）．その後，1 日間のホルマリン溶液での固定後

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スズメダイ科魚類の青色還元法と色彩保存

図 1. シリキルリスズメダイ Chrysiptera parasema の青色還元過程のカラー写真．F は展鰭後の固定用ホルマリンの濃度； Start は展鰭直後のカラー写真，その後右に向かって展鰭後 1 日おきのカラー写真．標本は最上行から最下行に向かって以下の通り： KAUM–I. 59054, 26.6 mm SL; KAUM–I. 59055, 30.4 mm SL;
KAUM–I. 59056, 33.1 mm SL; KAUM–I. 59057, 26.5 mm SL; KAUM–I. 59058, 33.2 mm SL; KAUM–I. 59059,
30.0 mm SL; KAUM–I. 59060, 28.4 mm SL; KAUM–I. 59061, 31.3 mm SL; KAUM–I. 59062, 28.3 mm SL;
KAUM–I. 59063, 34.3 mm SL．

はすべての試験区において，青色への変化が若干み

水，および 9％ホルマリン溶液での試験区では，すられた（図 1: 1st day）．しかし，実験開始 2 日目でべての標本で青色への変化が進行した（図 1: 2ndは，海水で保存したすべての試験区の標本で青色がday）．その後も，海水での試験区は黒色を帯びた状

消え黒色を帯びた（図 1: 2nd day）．水道水，蒸留態から変化することはなく，水道水，蒸留水，およタクサ

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図 2. シリキルリスズメダイ Chrysiptera parasema（KAUM–I. 59454, 31.8 mm SL）の青色還元前後の虹色素胞と黒色素胞のカラー写真．A, 青色還元前； B, 青色還元後．スケールバーは 0.01 mm．

び 9％ホルマリン溶液での試験区では青色への変化

し，Chrysiptera hemicyanea は，腹部から尾柄部にかが進行していった（図 1: 1st–10th days）．3％ホルマ

けての黄色域に若干の退色がみられた（図 3A–1,リンで固定した後，水道水と蒸留水で保管した標本2）．また，頭部を除く体のほぼ全体が黄色を呈する

では 3 日目でほぼ完全に鮮やかな青色に変化した

レモンスズメダイでは，黄色の退色が顕著であった( 図 1: 3rd day)．水道水と蒸留水の他の試験区およ（図 3B–1, 2）．Chrysiptera springeri と Pomacentrus al-び 9％ホルマリン溶液で保管したそれぞれの標本でleni は 1 日 で 青 色 還 元 が 認 め ら れ た（図 3C–1, 2,

は 4 日目にほぼ完全に鮮やかな青色に変化した（図D–1, 2）．Pomacentrus alleni の還元にかかる時間が1: 4th day）．以上の結果から，海水では青色の還元少なかったのは，標準体長が 21.3 mm と小さかったはできず，淡水で薄めたホルマリン溶液と淡水ではためと考えられる．また，P. alleni は還元にかかる青色の還元ができることがわかった．そして，水道時間が少なかったため，臀鰭の黄色域の退色もみら水と蒸留水では，双方に顕著な差がみられなかっれなかった（図 3C–1, 2）．Chrysiptera springeri がシた．また，展鰭後にホルマリン固定する際は，ホルリキルリスズメダイとほぼ同体長であるにもかかわ

マリン濃度の低い方が青色の還元に要する時間が少らず，還元にかかる時間が少なかったのは，種の違ないこともわかった．なお，青色還元後そのまま液いのためと考えられる．

中で保管した場合，徐々に白色を帯びる変化がみられた（図 1: 10th day）．

以上の結果から，体の色彩に黄色域があるスズメダイ科魚類では，青色を還元する間に黄色が退色す

青色還元前後の色素胞を観察した結果，還元前はることが判明した．そのため，青色の色彩還元の時全体の 90％程度の黒色素胞に色素顆粒の拡散がみ間をいかにして短縮するか，または黄色の退色を防られ，虹色素胞が透明であることに対し（図 2A），止するかが今後の検討課題である．また，体サイズ還元後は全体の 90％程度の黒色素胞に色素顆粒のや種によって還元時間が変化すると考えられるた凝集がみられ，虹色素胞が鮮青色を呈したことが確

め，それらに合わせて還元時間を調整する必要があ認された（図 2B）．

ることも明らかになった．

種ごとの青色還元の比較

グリセリン保存による色彩保存

実験に用いたすべてのスズメダイ科魚類で青色の小野（2005）は乾燥やホルマリン液浸，樹脂包埋

色彩還元が認められた（図 3）．Chrysiptera hemicya-などの生物標本作成時における脱色や変色などの問

nea とレモンスズメダイ Chrysiptera rex は展鰭後 3 日

題を解決するため，グリセリンを使用した生物標本で青色還元が認められた（図 3A–1, 2, B–1, 2）．しか作製法を開発した．その後，廣田・中島（2014）は

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スズメダイ科魚類の青色還元法と色彩保存

図 3. 青色系スズメダイ科魚類の青色還元前後のカラー写真．A, Chrysiptera hemicyanea（KAUM–I. 59065,38.2 mm SL）； B, レモンスズメダイ Chrysiptera rex（KAUM–I. 59066, 37.0 mm SL）； C, Chrysiptera springeri（KAUM–I. 59067, 29.0 mm SL）； D, Pomacentrus alleni（KAUM–I. 59068, 21.3 mm SL）．1, 青色還元前； 2,青色還元後（A, 展鰭から 3 日後； B, 3 日後； C, 1 日後； D, 1 日後）．

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岩坪洸樹・本村浩之

図 4. 青色還元したシリキルリスズメダイ Chrysiptera parasema 標本のカラー写真．A, グリセリンで 30 日間保存された標本（KAUM–I. 59064, 25.0 mm SL）； B, エチルアルコールで 30 日間保存された標本（KAUM–I.
59060, 28.4 mm SL）．

小野（2005）のグリセリン浸透方法の検討と改良を有効であるが，体型を維持する目的での保存には不行った．小野（2005）は，構造色をもつ魚類には脱適切である．色彩を保存し，かつ体型変化が少なく水工程を十分行うほうが良いとしている．しかし，することが今後の課題である．また，廣田・中島

どの分類群の魚類に対して有効なのか明記していな（2014）でも述べられているが，どれくらいの期間い．また，廣田・中島（2014）では青色の構造色をグリセリン浸透標本が保存できるのか，色彩を維持もつ魚類でのグリセリン浸透法を検証していない．

することができるのか今後観察していく必要があ

青色還元法を用いた標本をエチルアルコールに浸する．と退色するため，青色のスズメダイ科魚類に用いる
グリセリン浸透法では脱水工程を省略する必要があ

謝辞る．また，小野（2005）や廣田・中島（2014）では標本の長期保存での劣化や腐敗の有無については述

有限会社ブルーコーナーの太田竜平氏（当時）なべられていないが，本研究では腐敗防止のため液全らびに社員のみなさまには，実験に用いたシリキル体量の 1％のチモールを加えたグリセリン溶液を用

リスズメダイの収集に協力いただいた．鹿児島大学

いた．

魚類分類学研究室の目黒昌利氏，吉田朋弘氏，田代

液全体量の 1％のチモールを加えたグリセリン溶

郷国氏，畑晴隆氏，岐阜県高山市の山下真弘氏に液と 70％エチルアルコールのそれぞれに，青色還はレモンスズメダイの採集に協力いただいた．鹿児元をしたシリキルリスズメダイ 1 標本を保管した．

島市のアクア伊敷店の中島政昭氏ならびにスタッフ

そ の 後 30 日 経 過 し た 時 点 で， グ リ セ リ ン 溶 液 との方々には種ごとの色彩変化で用いたスズメダイ科

70％エチルアルコール保存下のそれぞれの標本の色魚類と色素胞の観察に用いたシリキルリスズメダイ

彩を比較した．その結果，グリセリン中での保管標の収集に協力いただいた．鹿児島大学総合研究博物

本は尾柄部の黄色域の退色と透明化がみられたが，館の内村公大博士には顕微鏡下での色素胞の撮影に青 色 域 の 退 色 は み ら れ な か っ た（図 4A）． 一 方，協力いただいた．ボルネオ海洋研究所の Bernardette

70％エチルアルコール中での保管標本は体全体の色

Mabel Manjaji Matsumoto 氏には本報告の Abstract を彩の退色が認められた（図 4B）．

校閲して頂いた．以上の方々に深く感謝の意を表す

固定後速やかにグリセリン溶液で保存した場合，る．本研究は，鹿児島大学総合研究博物館の「鹿児眼が窪むことや体幅が著しく小さくなることなど，島県産魚類の多様性調査プロジェクト」の一環とし体型が大きく変化する（廣田・中島，2014； 本研て 行 わ れ た． 本 研 究 の 一 部 は JSPS 科 研 費究）．したがって，固定後速やかにグリセリン溶液（19770067, 23580259, 24370041），JSPS ア ジ ア 研 究で保存した場合は，生鮮時の色彩を保存する点では教育拠点事業「東南アジアにおける沿岸海洋学の研

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スズメダイ科魚類の青色還元法と色彩保存

究教育ネットワーク構築」，JSPS 若手研究者インターナショナル・トレーニング・プログラム「熱帯域における生物資源の多様性保全のための国際教育プログラム」，総合地球環境学研究所「東南アジア沿岸域におけるエリアケイパビリティーの向上プロジェクト」の援助を受けた．
引用文献
藍澤正宏 2009．標本用麻酔薬．本村浩之（編），魚類標本の作成と管理マニュアル，p. 8, 鹿児島大学
総合研究博物館，鹿児島．
廣田大輔・中島経夫 2014．魚類標本におけるグリセリン浸透法の検討．Naturalistae, 18: 47–52.
西山 肇 2013a．セナキルリスズメダイ．本村浩之・出羽慎一・古田和彦・松浦啓一（編），鹿児島県三島村 硫黄島と竹島の魚類，p. 235, 鹿児島大学総合研究博物館，鹿児島・国立科学博物館，つくば．

西山 肇 2013b．ソラスズメダイ．本村浩之・出羽慎一・古田和彦・松浦啓一（編），鹿児島県三島村 硫黄島と竹島の魚類，p. 239, 鹿児島大学総合研究博物館，鹿児島・国立科学博物館，つくば．
小野榮子 2005．グリセリン浸透法による生物標本の作成．東レ科学振興会（編），東レ理科教育賞受
賞作品集 第 36 回（平成 16 年度），pp. 39–41, 公益財団法人東レ科学振興会，浦安．
大島範子・杉本雅純 2001．魚類における色素細胞と体色変化．松本二郎・溝口昌子（編），色素細胞機能と発生分化の分子機構から色素性疾患への対応を探る，pp. 161–176, 慶應義塾大学出版会，東京．
梅鉢幸重 2000．動物の色素 — 多様な色素の世界 —．
373 pp. 内田老鶴圃，東京．

（受付： 2014 年 3 月 14 日）（受理： 2014 年 6 月 22 日）

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