１０

ヌメリスギタケモドキ菌糸体の培養特性

高畠幸司＊

SomeFactorsEffctingMyceIiaIGrowthofPhO伽伯ａ伽vejIa(Batsch：Ｆｒ.）Ｋｕｍｍｅｒ
Takabatake,
Koji
車SomefactorshavinganeffectonmycelialgrowthofEA0伽 α郡が"e"binculturewere
investigated・Ｔｈｅｒｅsultsaresummarizedasfollows：1）Ｔｈｅｍｉｎｉｍｕｍ,maximumandoptimumtemperaturesforthemycelialgrowthwere5℃，31.5℃ａｎｄ２３〜27℃，respectively，Thesuitablemoisturecontentofthesawdust‑ricebran

mediumformycelialgrowthwas60〜80％・ThesuitableandoptimuminitialpHwerebetween
pH5.4〜7.1ｗｉｔｈａｍｅａｎｏｆａｂｏｕｔｐＨ６､5.

2）Themycelialgrowthintheliquidcultureindicatedthatthedriedweightincreasedrapidly
afterincubationanddecreasedslowlyafteritreacheditsmaximum、ＴｈｅｐＨｂｅcameloweras

themycelialweightwasincreased．Ｔhereafter,thepHwasincreasedslightlytopH5､2〜5.4.

3）Amongthevariouscarbonsourceswhichwheretested,mannoseandglucosewereutilized
mosteffectiyelyformycelialgrowth・Peptoneandcasaminoacidastheorganicnitrogensourcesgavethebestresultsamongthenitrogensourcestested、4）TheoptimumconentractionsofK
H
2B04,
Ｍ
倉S
０４．
７H
20,
ＣａCl②・2H20forthemycelial
growthwere0.05％，0.02％ａｎｄ0.01％，respectively・TheabsenceofZn2＋ａｎｄＦｅ２＋inthe
basalmediumallowforremarkablemycelialgrowth、Anadditionofriboflabin,inositolandthiaminetothebasalmediumpromotedthemycelialgrowth．

ヌメリスギタケモドキの菌糸体生長に影響を及ぼす数種の要因について検討した。結果は次のとおりである。

1）菌糸体の生育温度は５〜31.5℃であり,適温は23〜27℃であった｡鋸屑培地の好適含水率は60〜８０％であり，液体培養の良好な初発ｐＨは5.4〜7.1で，最適な初発ｐＨは6.5前後であった。
2）液体培養（静置）の菌糸体は，培養開始後急速に増加し，培養18日目で最大量に達し，その後漸減した｡また,培養液のｐＨは,菌糸体の増加と共に低下し,菌糸体が最大量になった後,ｐＨ5.2〜5.
4に収束した。

3）菌糸体の炭素源および窒素源の利用法は，六単糖のマンノースやグルコース，有機態窒素であるペプトンやカザミノ酸で良好であった。

4）無機塩類ではKH2PO４０．０５％，MgSO4・７Ｈ200.02％，ＣａCl2.2Ｈ200.01％でそれぞれ最も良好に生長し，また，Ｚｎ2+やFe2+で顕著な生長効果が認められた。ビタミン類ではリボフラビン・イノシトール・チアミンの添加で良好な生長を示した。
本報告の一部は日本菌学会第33回大会（大阪）で発表した。

＊林業試験場

富林技研報３，９０１

２．実験方法１．はじめに

食用きのこの生産は近年飛躍的に伸び，年間生産額は2,500億円余りに達した。これにともない 消費２．｜供試菌本研究に使用したヌメリスギタケモドキは富山県者の噌好が多様化し，健康食品．天然きのこのイメ内で発生していた子実体を組織分離したもので，菌ージに基づく，より高品質で野生味のあるきのこが糸体の伸長生長及び子実体形成の良好な系統(Pav‑求められるようになってきた。

２）を供試した。

一方，健全なスギ造林木を育成するために間伐が推奨されており，間伐を推進するためにスギ間伐材２．２培地

供試した培地は表−１のとおりである。菌糸体生の有効利用が多方面で研究・検討なされている。き

長と温度に関する試験にはPDA培地,ｐＨ試験にはＭＹのこ栽培においても，ほだ木原木．菌床用鋸屑とし培地，タイムコース試験にはWaksman培地,培地水て利用可能か，検討されている。

分に関する試験には鋸屑米糠培地を使用した｡また，

このような消費者のきのこに対する動向とスギ間伐材の利用を考慮して野生の食用きのこを調査・検菌糸体生長と栄養素に関する試験には基本培地を用いた。

討したところヌメリスギタケモドキに着目した。本

液体培地及び寒天培地は15分間，鋸屑米糠培地は菌はナメコの近縁種（モエギタケ科スギタケ属）で30分間，それぞれ1.2kg/cmP,121℃で,高圧滅菌した。

あり，春〜秋各種広葉樹の立木または枯木の幹木に栄養素に関する試験のうち炭素源の利用試験では，束生し，歯ざわり良くきのこ臭のする野生味のある100℃・30分間の間欠滅菌を行った。アデニン・ビタ

優秀な食用きのこである')。また，予備実験で，本菌

ミン類は，別途にミリポアフィルターで漉過除菌しは，スギ辺・心材鋸屑培地で子実体を形成することた後,培地に添加した。培地のｐＨは，ｐＨ試験に限りlNHClあるいはｌＮＮａＯＨで培地調製時に調整しを確認した。
しかし，ヌメリスギタケモドキに関する研究は少なく，三河2》が菌糸体生長･原基形成と温度についてた。

２．３接種源報告しているのみで，基本的諸性質はいまだ不明で供試菌を保存培地(PDA培地にて12カ月間継代培ある。よって，本菌をスギ間伐材を用いて栽培する養)よりＭＹＡ培地に接種し，２週間平板培養した後，には，様々な生理的性質を解明する必要がある。
そこで，本報告では，まず，ヌメリスギタケモド

コロニーの先端部を径５mmまたは10mmのコルクボー
ラーで寒天ごと打ち抜いたディスクを接種源とした。

キの生理的特性を明らかにするため，菌糸体の栄養２．４培養及び菌糸体生長量の測定

生長に及ぼす各種外的要因，特に温度，培地水分，培養温度は，温度試験を除き25℃で行った。培養

培地の初発ＰＨ,タイムコース及び栄養素の影響につ期間は，液体培養（静置）では10日間，寒天培養でいて検討した。

は14日間，鋸屑培養では14日間及び21日間とした。
表 − １ 供 試 培 地培地

組 成 分

ＰＤＡ

ポテトデキストロース寒天培地（日水製）

Ｍ Ｙ

グルコース４９，麦芽エキス１０９，酵母エキス４９，蒸留水loooIn2グルコース１０９，ペプトン５９，ＫＨ２ＰＯ４１ｇ，ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００．５９，蒸留水１０００，２
スギ辺材：米糖＝４：１（ｗ／ｗ）
グルコース２０９，Ｌ−アスパラギン１９，ＫＨ２ＰＯ４１ｇ，Ｗａｋｓｍａｎ

鋸屑米糖
基本培地

ＭｇＳＯ４・７Ｈ200.15,9,．ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００．３９，
ＣａＣｌ２．２Ｈ２００．１９，ＺｎS０４．７Ｈ200.3mg，ＦｅＳＯ４・７Ｈ200.15,9,Ｍ､Cl２．４Ｈ200.1mg，ＣｕS０４．５Ｈ200.1mg、thiamine‑HCllOO座ｇ
蒸留水１０００，２1２菌糸体生長量は，液体培養では菌糸体乾燥重量，
平板及び鋸屑培養では菌糸体の伸長生長量を測定して求めた。菌糸体乾燥重量は，培養液中の菌糸体を秤量して求めた。平板培養の菌糸体生長量は，接種片を中心に直交する直線を任意にひき，各々の４方向で接種片を起点として直線に沿って伸長しているコロニー先端部までの長さを測定して求めた。鋸屑培養の菌糸体生長量は,供試菌を接種したのち３〜４日間培養して試験管壁に沿って伸長したコロニー先端

菌糸体伸長生長品／Ｍ日間︶

減別して蒸留水で洗浄し,80℃で２日間乾燥した後，部を起点として所定の期間培養し，伸長した菌糸体先端部までの長さを測定して求めた。

初発ＰＨ試験及びタイムコース試験では,菌糸体生長量と培養漣液のＰＨ･グルコース残量を測定した。
グルコース残量はシュガーアナライザー(ＹＳ１モデ
ル27，日本科学機製）で測定した。

温度（｡Ｃ）

図−１菌糸体生長に及ぼす温度の影響

３．結果及び考察

３．１培養温度と菌糸体生長
５〜33℃の温度条件下で培養した結果を図−１に示した。菌糸体生長は，５℃〜31.5℃で確認されたが，３３℃では確認されなかった。生長に好適な温度範囲は24〜27℃で，最適温度は27℃であった。この結果は,本菌の近縁種であるヌメリスギタケ3)と一致

菌類の好適な温度範囲とよく一致した。
３．２培地水分と菌糸体生長

鋸屑米糠培地を含水率39〜84％（湿量基準）に調

菌糸体伸長生長品︶

し，またシイタケ4)，エノキタケs)，ヒラタケ6)，ナメコ7)，マイタケ8)等，一般に栽培されている食用担子酢国司』

整して培養した結果を図−２に示した。８０％までは含水率の増加と共に生長量は増加したが，８０％を越えると急激に低下した。好適な含水率範囲は60〜８０％で，最適含水率は80％付近であった。これらのことは，本菌がナメコ9》，アラケキクラケ'｡)，ヤナギマ
ツタケ'１)と同様に高含水率を好む菌であることを示唆している。しかし，栽培にあたっては，高含水率にすると作業性が悪くなり，害菌が発生しやすくなるので65％前後の培地含水率が適当と考えられる。

３．３培地の初発ｐＨと菌糸体生長培地の初発ｐＨ3.8〜7.5で培養した結果を図−３に示した。初発ｐＨ3.8〜7.5の範囲で,菌糸体は生長可能であった。良好な生長を示す初発ｐＨ範囲は5.4〜０４０５０６０７０８０ｇＣ
含水率（％）

図−２菌糸体生長に及ぼす含水率の影響1３

富林技研報３，９０7.1で,最適初発ｐＨは6.5前後であった。

０４０３０６

また,終期ｐＨは,初発ｐＨの上昇と共に7０高くなったが,初発ｐＨ5.8以上では6.0前後に収束した。このように，良好な生長を示す初発ｐＨで培養すると,終期ｐＨが一定の値に収束する傾向がヤナギ
マツタケ'においても認められている。

３．４タイムコース

糸体乾燥重量，終期ＰＨ，グルコース残終期山

３日間〜30日間培養して３日毎に菌ｒくみ､悪量を測定した結果を図−４に示した。

菌糸体重量は，培養後15日目まで急2０速に増加し，１８日目で最大量に達したが，その後やや漸減した。

1０

終期ｐＨは,菌糸体重量の増加にとも。−。：終期ｐＨなって低下し，菌糸体重量の漸減にと０もないややｐＨが上がり２１日目以降，Ｑ

■ロ且

□｡

3.
03･(』
4０５．０６．０７．０８．f

図−３菌糸体生長に及ぼす初発pHの影響

初発ｐＨ

ｐＨ5.2〜5.4に収束した｡このことは，
橋本ら'2)力指摘しているように,菌糸体が最大量になるまで有機酸が菌体外に排出されるためｐＨが低下し，その後，菌糸体の自己消化が徐々に始まったた

め,培養液中のｐＨが上昇したものと考えられる。

グルコースは菌糸体重量が最大に達する18日目までほぼ一定の割合で消費（１）炭素源：基本培地のグルコースを２％濃度の他の炭素源11種に置き換えて，菌糸体生長に及ぼす影3Ｕ１０．も、矛響について検討した結果を表−２５０期4Ｃに示した。

ｎＦ

ヌメリスギタケモドキは，いずれの炭素源でも生長可能であった。
本菌は，単糖類のマンノース，多糖類の可溶性デンプン・デキストリン，二糖類のラクトースで，対照区のグルコースと同様の生長を示したが，糖アルコールのグリセロール,ペントースのキシロース．

培養日数（日）図−４ヌメリスギタケモドキのタイムコース

グルコース湿度︵％

３．５栄養素と菌糸体生長

菌糸体型量︵唾／フラスコされ，３０日目には，培養液中のグルコース残量は,当初のl/6位まで低下した。

1４アラピノースでは対照区より劣った。

表−２菌糸体生長に及ぼす各種炭素源の影響

ヌメリスギタケモドキがシイタケ13)，

エノキタケ'4)，マイタケ8)，ヤナギマ

炭 素 源 菌 糸 体 璽 量ツタケ'１)と同様に広範囲の炭素源を（2.0％）（､g/フラスコ）利用できるのは，本菌も木材腐朽菌であるためと考えられる。

グ リ セ ロ ー ル １ ７ ． ３ ± ０ ． ８ １ 》
ア ラ ビ ノ ー ス ２ １ ． ４ ± ０ ． ５

キ シ ロ ー ス １ ８ ． ７ ± ０ ． ７(2)窒素源：基本培地のＬ−アスパラギフラクトース２６．８±１．０
ンを0.39Ｎ/､渡度の８種類の窒素源に置き換えて菌糸体生長に及ぼす影

グ ル コ ー ス ２ ９ ． ８ ± ０ ． ５
マ ン ノ ー ス ２ ９ ． ９ ± １ ． ０

マ ン ニ ッ ト ２ ３ ． ８ ± ０ ． ３

響について検討した結果を表−３にラクトース２８．１±１．３示した。

本菌は，ペプトン・カザミノ酸でサ ッ カ ロ ー ス ２ ４ ． ９ ± ０ ． ８

マ ル ト ー ス ２ ６ ． ０ ± １ ． ３

デ キ ス ト リ ン ２ ７ ． ７ ± １ ． ３

良好な生長を示した。有機態窒素と可溶性デンプン２８．６±０．８
無機態窒素を比較すると，Ｌ−アスパ

無 添 加 ４ ． ９ ± ０ ． ２

ラギンは，生長にあまり影響を及ぼ１）平均値土標単偏差さなかったが，有機態窒素であるペプトン・カザミノ酸は，無機態窒素
表−３菌糸体生長に及ぼす各種窒素源の影響

より菌糸体の生長に有効であった。
この傾向は,シイタケ'4),エノキタケ'5)，
ヒラタケ'６)，ナメコ'7)，マイタケ8)な

窒 素 源 菌 糸 体 重 量（0.39Ｎ／Ｑ）（､g/フラスコ）

どの木材腐朽性の食用担子菌類でもＬ一アスパラギン２３．９士１．０１）
カ ザ ミ ノ 酸 ４ ２ ． ２ ± ０ ． ７

認められている。無機態窒素では，アンモニア態窒素より硝酸態窒素でペ プ ト ン ４ ７ ． ８ ± ０ ． ９

硫酸アンモニウム２５．７±１．１

良好な生長を示した。塩化アンモニウム２７．９±１．３
硝酸アンモニウム２８．９±１．８
シイタケ'3),ヒラタケ'5》,ナメコ'6)，
硝酸カリウム３０．６±０．９
マイタケ8)等,栽培されている食用担
硝酸ナトリウム３０．９士２．３
子菌類の大半は，硝酸態窒素よりア無添加２０．９±０．７

ンモニア態窒素で良好な生長を示しｌ）平均値±標辿偏差
たが,本菌は,ヤナギマツタケ'１)と同様に硝酸態窒素で良好な菌糸体の生長を示した。これらのことより，菌糸体の栄養ところ，いずれの濃度でも生長の効果が認めら生長におけるアンモニア態窒素と硝酸態窒素でれたが，0.02％で最も効果があり，0.06％以上の利用性の差は，個々の菌の種に依存しているでは添加効果に差がみられなかった。ＣａCl２．２と考えられる。Ｈ２０では，０．０１％で最も効果があったが，０．０３(3)無機塩類：無機塩類のうち多量成分である％以上の添加では無添加より極端に生長が劣っ
Ｋ+，Mg2+，Ｃａ2+を各々KH2PO ，MgSO4・７た。

Ｈ２０，ＣａCl２．２Ｈ２０として基本培地に添加し，微量成分については,Fe2+,Ｃｕ2+,Ｍｎ2+,Ｚｎ2＋
菌糸体生長に好適な捜度を検討した結果を図一の４種類全部含む培地を対照にして各々一成分５に示した。

を除いた培地で影響を検討した｡その結果を図一

KH2PO4では,０．０５％で最も有効であり0.2％６に示す。
以上では添加の効果が認められなかった。Ｚｎ2+，Fe2+，Ｃｕ2+を欠いた培地ではそれぞれMgSO4・７Ｈ２０では0.1％までの添加を検討した

対照区の約70％，８０％，９０％の生長にとどまり，

１５

富林技研報３，９０3５

菌糸体Ⅲ量︵唾／フラスコ︶

０３５Ⅲ２０２3５1５０3０2５2５2０2０1５０．１０．２o３
ＫＨ２ＰＯ４（％）

3０、

■

■

００．０５０．１

巧nＱ

■

己

０００１０．０２om

MgSO4・７ＨＯ（％）
図−５菌糸体生長に及ぼす無機塩類の影響

CaC１２．２Ｈ2０（％）

Ｉ：平均値±標準偏差ワ﹄

くと考えられる。また，Ｍｎ2+の欠いたワ﹄培地では，対照区とほぼ同程度の生長クセを示したことから,Ｍｎ2+は菌糸体の生十十十ＰＣ︾ｕｎ恥群
ＦＭ
対照各々の成分が，本菌の生長に有効に働長に影響を及ぼさないと考えられる。
(4)アデニン・ビタミン類：基本培地のチアミンをアデニン（5.0mg/､)，ニコチンアミド（0.3mg/C)，パントテン酸
菌糸体重量（mg/フラスコ）（0.3mg/､)，ピリドキシン（0.2mg/Q)，

図−６菌糸体生長に及ぼす微量無機塩類の影響

葉酸（0.03mg/Q)，ビタミンＢ１２（0.01

トＨ：平均値±標鵡偏差ｍｇ/､)，イノシトール(3.0mg/C)，ビオチン（0.01mg/4）に置き換えてアデニビオチン・葉酸はヌメリスギタケモ
ドキの菌糸体生長にほとんど影響を及ぼさなかった。しかし，アデニンや他のビタミン類は，いずれも菌糸体の生長に有効に働き，特にイノシトール，アーーバピ瞳ビイビリチある。

ニチトドミンチフミ

影響を検討した。その結果が図−７でデコンリ雌タノオボア

ン・ビタミン類の菌糸体生長に及ぼす

ＩＤＩ＝チアミン，リボフラピン，ビタミンＢ１２で有効であった。
【】Ｚ(］

チアミンは,シイタケ'3),エノキタケ, 》，

マイタケ8)，アミスギタケ'7)等，多くの菌糸体亜量（､g/フラスコ）

図−７菌糸体生長に及ぼすアデニン・ビタミン類の影騨

担子菌類の菌糸体の生長と子実体形成に対して必須成分であると報告されて院Ｈ：平均値士標地偏差16いる。しかし，イノシトールとリポフラピンは，果とほぼ同様であった。この事実よりヌメリスギ

本菌の菌糸体の生長にチアミンとほぼ同程度のタケモドキを栽培するには，従来の木材腐朽性効果を示したことから，チアミンは，ヌメリス食用担子菌類の手法が応用できると考えられる。

ギタケモドキの菌糸体の生長には，有効な一成

しかし，菌糸体の生長に及ぽす光・温度変化分ではあるが，必須成分であるとは言えない。

等の影響や子実体形成に及ぼす各種外的要因の以上，ヌメリスギタケモドキ菌糸体の栄養生影響は，個々のきのこによって異なるので，今後それらについて明らかにする必要がある。

長に及ぽす数種の要因について検討したところ，菌糸体の生育適温は 23‑27.C，鋸屑培地の好適4.謝 辞

含水率は 60‑80%，液体培養の良好な初発pHは5.4‑7.1であった。また，菌糸体の炭素源及び窒本研究を行うにあたり，ヌメリスギタケモドキの素源の利用性は，六単糖のグルコースとマンノ同定をしていただいた農林水産省森林総合研究所根ース，有機態窒素のペプトンとカザミノ酸で良回仁研究官，ヌメリスギタケモドキをはじめ野生き好であった。これらの結果は，これまで栽培さのこの採集に御協力いただいた富山県林業技術センれている木材腐朽性の食用担子菌類に関する結ター職貝各位に深〈感謝の意を表します。

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