さけ・ます
ふ研報， scl ． Rep HOkkaidoSalnlonHatchery， (42) :75‑79(l988)

人エ 授精におけるサケ 卵の受精水の 週水温― 1

高水温の影響試験
広井Optimum

修 " ・浦和茂彦 "Water Temperature

SalmonEggs

倉本・勉 "2

Of Fertilized Water 0f Chum

fn the Artificial Fertilization ‑ 1

An Influence Of High Water Temperature
Osamu HiBoi*1,Shigehiko URAWA*1, and Tsutomu KuRAMoTo*2

Abstract
Optimumwater temperature

0f fertilized

ture, at the artificial fertilization wasandmortality

awater, especially0nthe influence Of high water tempera‑

investigated, in order t0 be progressed

technical development

Of mass

production

ain the artificial

restraint Of early

propagation 0f chumsalmon, Oncarhvnchus keta.
Eggs
15thandsperms

wereobtainedfrom

5 female and0f December, 1987. Each 0f the gametes was

6 malefish runthe Yurappu

upRiver,

onshut tight ln a vinyl sack full 0f air gass. storedaL about 5"C Of temperature in a keeping co0l box, andtransported 6 hours by

cart0 Sapporo

upsatellite Hatchery 0f HOkkaido Salmon Hatchery.
Each 0f eggs inseminated byadrymethod at TO@C

Of ro0m

temperature, waswashedtwohours

by each 0f the fertilized water with various water temperatures, i.e., I0@, I4@, t6@, I8@ and Z0'C.
Thefertilized

10@C

ln water temperature. MOrtality 0f fertilized

stillbornegg

after washing treats

eggs

and

an

unfertilized

eggs

treated by twoegg,

waswereput in Atkins tray
eggs

full of running spring water ofwell as occurrence

asof non‑ sperm

eggs,

aobserved autoptically and histo ‑ anatomically till hatch ‑0f eggs.

0utFertilized

water temperatures (14@‑20@C)

number0f deadeggs‑ hourso0nin earlyeggwashing ln each

0f the fertilized

after their insemination, died‑ developing stage,

more

0@ LO 200@Cln

water withOr

various highless, mainly as a great

daily

cumulative watertemperature after insemination.
0ccurrences

Of embryonic malformation in the treated eggs resulted in, mainly, twin malformation

北海道さけ・ますふ化場研究業績第3H 号

川水産庁北海道さけ・ますふ 化場 (HOkkaldo・SalmonHatche「y ． Fishe ies A 叩nCy
「Of Japan ．

22 NakanoShima，0621APAN)

L 北海道石狩南高等学校 W0kkaido

IShlkarl SOllth High Sch0M ， 143JAPAN)

75

I Hanakawa． lShlkarl Cho・・TO) ， Oh ra ， sapporo

HOkkaido

061 32・広井 ・浦和・台本

embryo ln I4@ and I6@C treated groups

andgroups, such

not observed in control group (10@C).

Fromusemalformations 0f whichwerespiral malformation embryo

the result Of the present observations, it was

the fertilizedwater

under I3@Cin waterまin I8@ andemphasized that chumsalmon

20@Ctreatedeggs neededtotemperature.

えがき

サケ受精卵は接水村活して卵門閉鎖後，速やかに囲卵腔 を形成し，その後胚盤形成期 (受精役 8 時間まで )を経て卵分割を開始し，初期発生が進行する 庇井他 1973L ， 前報冶本他

198引において報告したように，接水から初期発生の初期に比較的高い水温のふ化用水で発生・させると双体奇形を中心とする異常胚 が多発する。双体奇形の発生にっいては 受精初期に吸水途上卵を―時的に 断水させた場合にも 観察される (広井iQan) 。

―方，近年秋サケの優良系群である銀モ来遊魚の造成が盛んになるにつれて，前期群が著しくmg 加し， 甲期には河川l水温も極めて高く，これらを受精水として用いざるを得ない場所も多く見られるようになった。
このため，高水温の河川水を受精用水として用い得るかどうかについての検討が是非ともL 要となった。 これらの受精用水の水温によるサケ受精卵の影響については末だ明らかな研究がされていない。尚 ， 執卵を腹腔 にもった完熟雌親魚が河川そ 上の途中で高水温環境に曝 されると大量の体内死卵 (広井 1980,1988) が発生することが観察されている(広井 未発表)。
これらの観点からサケ卵の人工受精時における高水温の受精用水の影響について調べ，受精卵の通水温と減耗要素について検討した。

稿を進めるに先だち，木研究に 用いたサケ卵および精子の採取に多大の御協方を戴いた水産庁北海道さけ・ますふ化場渡島支場の皆様に惇く御礼申し上げます。

材料および方法
サケの精液および執卵は1987 年12 月乃 15 日に遊楽部川捕獲場で得られた遊楽部川の湖上親甘 、 叩 nidf采 り円から午前10 時に採取した。熟卵は親魚撲殺後，切開法にて採取し，体腔液は余剰の分を流し，卵に付着しているもののみの湿式保存法で， ー尾毎 5 尾分の同腹卵をビ二― ル 袋に無接水条件で収容した。精液は搾 出法により2 尾毎 6 尾分をビ二― ル 袋に無接水条件で採取し，尿又は 血液等の混入精液は搾山時に注意深く観察しながら取り除き，可能な限り，純粋なもののみを用いた。熟卵と精液はいずれもビ二― ル 袋に空気を詰めて封人し，遮光と保冷 (5@C 以下) の状態で約6 時問自動車運搬して，水産庁北海道さけ・ますふ化場本場の隔離ふ化室に運び実験に供した。運搬後の卵温は3 ． 9C であ った。

熟卵と精液は無接水媒精により室温 lo@o)で撹伴混合した。精液は 6 尾分を混合して用いた。媒精後の熟卵 は予め ヒーターにより水温を，14C, 16C, I8@C 及び20C に ―定に調整しておいた水槽に，夫々プラスチック寵を置き，その中に浸潰して， 接水 ・洗浄・吸水を2 時間実施した。実験用水はエ アレーションにより曝気した。村昭区として， 増I@x型ふイヒ 槽に浸潰したプラスチック寵 を用いて，10c のふ化用水(湧水) の湧昇流の中で接水 ・洗浄・吸水させた。受精卵はいずれも 2 時間，温水で吸水させた後，アトキンスふ化盆に I 盆
当 I， ROn‑2 ， O0O 粒の割合で発服期まで収容 し ， io@cIo ． 5‑10.7) のふ化用水で発生させた。
白濁死卵は淘汰検卵時 (積算水温約400 。C) とふ出直後(同 約500@C) に 摘出し ，ブアン液で 1‑2日間固定，70% アルコール液 に置換，保存した後，肉眼又 は解剖顕微鏡下で体内死卵，不受精卵，受精前期死卵 (積算水温約200@Cまでの発眼期以前の死卵)および受精後期化 卵 (発眼期以後の 死りリ ) に分gU( 広井 1980,BB) ，計数した。
淘汰検卵後，生卵は計数 し ，改良型ふ化寵に I 寵当 I ， 500‑2
ふ出直後(枯算水温約500@C) まで観察を続けた。

76

1988 参， O0O 粒の割合で収容 し ，以後

人 T 授キ 方におけるサケ卵の受精水の通水温―l

結果l ．処理水温と無精卵の発現割合
媒精後， 接水から洗浄・吸水まで 2 時間処理した 試験区の水温は運搬時の卵温が3 ． 9C ， 媒精時の室温が10 0でと低かったため ，いずれも開始直後に 約 ic 程低下するが， 5 分後にはほぼ 安定し， 14CE・]3 ・げ ― 13.7C,

16 亡の 凶では16 ．ドー
16.2C
対a'"IK10@C)範囲に保たれた。尚 ，

そして20 で区では 19 ． 8。 ― 19.9L

18@C 区では18 ．ドー
18.2C

，

ではのは 10 ． 午 ― 10.7 での水温範囲であった。

実験に用いたサケ 同腹卵 における虹精卵の発現割合はいずれもかなり高く， 5‑25%にも達していた (表]) 。 才寸 WUOj) 同腹卵 における無精卵の混合割合が7 90% であ ったのに?寸 して， 16@C 区の同腹卵 で最も混合・

表@

処理水温と魍惰卯の発現刮台
無;式 ．験 E

精 卵の割合受精卵(粒)

体内死卵

不受精卵

‑"
―口 十‑の 割合

2 ， 533

3 47

4 43

7.90

92.10・・t4@C

13.6‑13.7

2,656

7.68

12.84

20.52

79.84

I6@C

16.1‑16.2

3,794

9.28

15.68

24.96

75.04

T8@C

18.1‑18.2

2,898

2.48

7.84

10.32

89.68

9.8‑19.9

3,852

1 40

3.25

4.65

95.35

上・

割合が24 96%と多く，次いで 14C

区の20.52%.

・

I8@じ 区の10.32%

そして20 で区が4 ． 65%と最も混合割合が少なかった。これらの皿精卵の混合割合の変動は河川水温の低下する後期 12 月中旬) に河Jll湖上する親化には多く見られ， 丈験処理とは直接的関連がないと考えられる。しかし，高水温処理(18@C@@ と 20r 区) により，林内死卵および不受精卵の様相が若干異なることが観察された。 18@C 区と20 で区の体内死卵および不受精卵は長円形の卵型の卵が多く認められ，囲卵腔形成が卵全体に均― に進まずに，表層胞の消失および卵膜分離も動物極に集合するように‥部分で生じる傾向が見られた。

2 ．高水温受精による受精卵の減耗

10L のふ化用水で受精，吸水させた
対照区におけるふ出 期までの受精卵の減耗率は2 ． 23% と極めて少なく，その中でも受精前期死卵ではI 33%
・，受精後期化卵で0 47%
・

そしてふ出 異常稚魚で0 ． 43%2) 。

さらに双休奇形は対照E では全く認められず，受精卵のふ出率は97.8%

表2受精卵の減耗

E

異常稚魚、の減耗であった(表となった。

ふ出期迄の受精

ふ出率10@CnEE 2,333

2.2397.8

14@C

2,111

28.43

71‑62,599

9 46

試験

受精卵(粒)数

受精前期化卵受精後期死卵文仝

ふ出16@CI8@C・13.7Z (504)?.46(274)

77

22・II

温水処理群では全般にふ出 期までの減耗率 はいずれも対照E よりもはるかに高くなり，14CE(寸寸尺R 区の約]3 倍)， 16LE

で29・79%( 同約13 倍)， 18LE

で9 ． 46%(同 約 4 ィ吉 ) そして20L

で 28 ． 43%

はでは22 ． H%

小J

約 10 ィ吉 ) となった(表 2) 。 特に妥精前期化卵の 割合が温水処理区で極めて多く，14 で区で23 ． 3H 対照 E の約184 音 )， ]6L 区で25 47%( 同約]9 倍)， 18L 区で7 50%( 同 約 6 倍) そして20L・・受精後期化卵 では20C 区で7 ． 46%Wょ寸区で13 ． 72%(同 #り l04 告 ) となった。

M 区の約1f 倍) と最も多かった，

温水処理区の受精前期化卵の様相は対P.
耳 @Z, I4@CE および16CEのそれらと18CEおよび20C区のそれらの間にかなり違いが見られた。前者は卵の形 も球型で，胚休 はほぼ卵全体に均― に伸長発達して，発生停止に至るが，後者のIycR

および20C 区ではいずれも卵が長円形の卵型で，胚体 は卵の動物極側の・部分で伸長屈曲して，発生停止に至るものが極めて多かった。これらの様相は高水温区では不受精卵に見られた様に，囲卵腔形成が卵全体に均・ に進んでいないことによるものと考えられた。20@c 区では受精後期化卵 でも同様の様相をとる死卵が多く見られた。
川昭E で全く観察されなかった双体奇形卵は帯水温処理E14@C‑2O@CE)で多かれ少なかれ出現した。 しかし処理温度により双体奇形胚の様相は異なっていた。I4C 区では双体奇形がほぼ同じ二つの胚休で発達する場合が極めて多く，16@C 区から20C 区では片方の胚 のみが胚休まで発達し，もう片方の胚は胚体形成まで至らず，早くに発生停止するものが多かった。
ふ出後，無給餌放流期までの減耗については供試卵群が通常よりも無精卵の割合が高かったため，明確にしえなかった。ふ出異席椎仏の中では高水温E18@C と 20@cnで，螺旋形の奇形化が多く観察された。さらに，
村昭区では殆ビが正常に発育したが， 14@C,16C 区では若十発育の遅れが目立ち， 18C 区及び20@C 区ではかなり減耗が見られると共に， 明らかに発育の遅れた椎仏 が多くなり，健康な椎血の割合が極めて少なかった。

これらo) 結果は媒精後のサケ卵をI4@C 以上の比較的商い水温の受精用水で，接水，吸ノ< させると多かれ少なかれ受精卵の減耗が生じ， 特に受精前期化卵としての発生停止で多く減耗 し ，さらに双体奇形 u4― 16@C) 又は螺旋型奇型 □ 8‑20@C)としての後遺症が特徴であ ることを示している。

考察

秋 サケの双休奇形稚魚は通常の人工ふ化管理の中でも観察されるが，その出現頻度は極めて少なく，又，いずれも双体稚魚は―対が正常に発育して，卵黄を共有した正常双体稚魚、 となる。双体奇形の異常胚は媒精・直後から第 I 分割を開始する 受精後 9 ‑10 時間 (広井他 1973) までに，吸水途上卵の ，時断水処理(広井1980) および物理的衝撃処理 拡井

未発表) によって多く発生し，卵分割が進む受精後11‑12 時間以降にいかなる条件を与えても発生しない。媒精後の影響による双体奇形胚 は河川l@i上期の完熟サケ親魚が高水温環境水口8‑23@C)に曝さられる場合にも発生する仏 井末発表)。 さらに媒精役無接水で長時間 (2 時間以上)置いてから接水させた場合にも双体異常胚 が多く観察される(広井未発表)。 これらの双体異常胚が発生する場合にはいずれもさらに多くの前期化卵としての減耗が認められる。
さて，双体異常胚が前報 (倉本他1988) で報告した様に，受精役45 時間まで15@C(14.2@C‑16.0@C)で受精から洗浄，吸水，発生まで処理した場合に多く発生したが，木研究においても同様にU4C から20@C.までの高水温処理 (2 時間) により多かれ少なかれ，双体異常胚が観察された。 これらの結果は発生初期に高水温処埋を与えると明らかに双休打形胚が発生することを示しているが，木研究の結果では双休奇形服の出現よりもむしろ，前期化卵としての減耗， さらにはより高水温 (18‑20@C) 処理で観察された，

囲卵腔形成小全に基因 すると考えられる，後期化卵の高率出現および椎仏期まで影響する発生異常の方がより重大な減耗であ ることが知られた。
これらの高水温の受精水による異常胚 の発生並びに生産稚魚の健苗，性については供試卵群の血精卵の割合が通常よりもはるかに多かったことから，これらの影響も血視しえないため，

78

さらに詳細の検討を行う予定

人工授精におけゐ サケ卵の受精水の通水温―Iである "約

要

サケ卵の人 r．授精時における受精用水の影響にっいて試験・検討した。
I・媒精後のサケ卵をI4@C ，

上6C,18 でおよび20C の 旧 水温槽で 2 時間，接水洗浄・吸水させた後， 対侶区と同じIO@c のふ化用水でふ化させ，受精卵の減耗と異常胚について観察したところ，受精卵は多かれ少なかれ減耗 し， 特に受精前期

タヒ月l@(寸責負 ・水温 200@C までの卵の発生異常と発生停止) として減耗することが明らかとなった。
2．

局水温処理による異常胚の出現はu4 で―16C 区では双体奇形・18‑20C

区では螺旋型奇形が特徴的で

あ った，水温の違いによる異常胚 の出現状況から，受精初期の囲卵腔形成から表層胞の崩壊に至る過程で卵内の浸透圧調節機構が高水温条件で何らかの影響を受けることが暗示された，
3．

これらの結果から， 人エ授精時におけるサケ卵の受精用水はi3r以下の水温条件とする必要があ ることが小された。

献文

さけ・ますふ 所報， (34) ， H5‑120

広井修 れ 980)

: 人エ授精におけるサケ卵の吸水所要時間にっいて．

広井修 1981): さけ資源の初期減耗―特に人エふ化放流における卵から椎魚放流までの減耗要因にっ ぃ

広井修は 988)

広井修・安川雅人・ 未武敏 丈て―．漁業資源研究会議報，(2幻 ， 53‑fifi.

: 卵発生と人工ふ化管理．日本のさけます―その生物学と増殖事業 (久保達郎編)， p

・58‑ 66 ，たくぎん総合研究所，札幌(0WOr 九 VWhMS&gf0)

・佐々木正三・富田竹 雄 ・佐藤幸男 (1973) : 8 での湧水に於ける サケ卵の発生について (予報)・さけ・ますふ所報， (2乃 ， 25‑ 30

倉不 勉・有馬健―，川上伸 ‥ 清水直人・中波章夫・長谷川麻里・平問伸―・寺山健―，世継―恵 ・安田
冬季・安田美智代・ 広井

修 u988)" : サケ卵の発生と 双体 奇形の出現． さけ・ます ふ 所報，(42), 59‑ 73.

79