北海道さけ・ますふ化場
研究報告第 25 号 63‑70 頁

サケ Onco ，ゆ % 。ん "$ 比 ta (Walbaum)

卵の発生におよぼす塩水処理の 影響― 皿発生過程におげる 処理の時期にっいて橋本進

The Effect 0f Treatment with Salt Water On the Development
Of Chum Salmon, Oncorhynchus keta(Walbaum), Eggs‑.....II1.

The MOst SuitableTime Of the Treatment
OTI the Eyed Stage
Susumu HASHIMOTO

The purposeOf this work is to clar'rfy
the influence Of the salt water treatment
On thedevelopment from the relation between the suitable time Of treatment and the time Of ap‑pearanceof the hatching enzyme
gland following the previous report.
1. It is considered that the degree Of abnormal hatching phenomena
which occurred 0w‑
ing to the salt water treatment is closely related with the appearance
and the growth Of thehatching enzyme
gland.
2. The hatching enzyme
wasclearly present ln an embryo which was allowed LO develop
for 47 days after fertilization when the incubation period was 62 days.
The hatching en‑
zyme
gland was considered to appear
during this period.
3. Dead eggs and abnormal hatching did not occur, regardless 0f in what stage Of de‑egglopment
utes.

theeggs

weretreated, when

the treatment

period did not extend

morethanfivemin‑

4. The increase tn the period from the first hatching until the last hatching Of treated
w&s unrelated tU the period Of treatment.
This period saw a remarkable increase in
the progress Uf the development 0f eggs which were treated On the 53rd day after fertiliza‑tion.
5. When the eggs were treated within 35 to 53 days after fertilization, the nuber Of days
after fertilization until the last hatching increased according t0 the progress
0f egg develop‑eggsment.

This

increase

wasunrelated to the treatmentperiod.

6. If we consider the feeding 0f fry, the removing 0f the worthless eggs with salt water
should be deine immediately after eye spots appear
0r just before hatching.
北梅道さけ，ますふ化場研究業績 第 224 号

63Oncorhynchus

keta(Walbaum)

・@V‑'r

ま卵の発生におよほす塩水処理の影響―川カ; ' きえ

死卵および発/:.不良卵の防去に塩水処理法が用いられる場合には，塩水の濃度，浸漬時間などの処理条川の如
何によってはその後の発生過程において異常ふイヒ 現象に起囚 するふ化率の低下が生じ， ふ化事業の大ぎな障吉になる恐れのあることが前報の結果から知られた。
なお，塩水処理の影料については斎藤・佐野 (1933) hr‑ よっても知られ， 発眼時 (水温 8r で受精後30H)に最大に達した抵抗力が， 同じく45 日以後急速に低下し， 同じく50n 以後に処理された卵にあってはふ化開始日が促進されることなどが観祭されている。このことは，処理によるふ化率の低下および異常ふ化の発生が， 処即時期と胚体の発生度合とが密接に関係していることを示唆しているように思われる。またこのことから，その原因は先の報告において推察されたように胚休におげる酵素線の出現時期と密接な関係にあることがうかがわれる。

したがって本報では，発生度台の異なる卵を用いて塩水処理後に発生する異常ふ化現象の違いを観察し，胚休の発止過程におけるふ化酵素作用の発現時期を推定しあ わせて検卵に塩水処理法が適用されるための卵発生上の処理適期を検討した。ここにこれらの結果を報告し 今後の人エふ化市業にいくらかでも参考になれば幸いであ る。

材料および方・ 法工]・千歳川において
昭和37 年11 月 26 口 ，供試卵11H30日， 12 月 8 日および12 月 19 日に採卵された受精卵を前報の夫験と同様に8 。C の 湧水で発育させた発眼卵を各試験E について100 粒あ て用いた。
2・塩水澁度 :卵への障害の度合ならびに塩水で検卵が行なわれる場含 を考慮し溶液 1 0.中に食塩 (柑塩)を 130H 溶かしたものを川いだ。
3・

実検区分 :

第 I 表に示したよ5 に供試卵を採卯月口順にA・B・C

D の 4 つに大別し，その人々につい・て浸漬時が 5 分間，l(@分および¥y 分の 3 つの試験区を設けた。

第]表 実採卯月分
卜4・方法 :

間 (分)区分55
HH26
58 iiJ!30a

12 月 8 日

十採卵から処理までの日数
浸 漬 時

験I2@19835□

51015510 ．

15 ，

5．

1015510155 A

10A

15A

5 B

10B

15B

5C

10C

15C

5D

10D

15D

供試卵を規定の時間塩水に浸潰したのち清水に戻し，その後の発生過程における卵の姥死，異状三化， ふ化後に発上した仔色の弊死などを観察した。

Hl．

結果

死卵ならひに異常ふ化の発生と処理時期との関係

叩の発生度合によって塩水処理の影響がどのように違うかを知るため，処理後に出現した死卵数，異常ふ化数およびふ化数を集計し第2 表 および第 I 図―第 3 図に示した。
すなわち，第2 表および第 I 図に示したように， 死卵は受精後VI 日以上経過した卵を10 分間以上浸潰した場台に主に出現L，， 泣漬時間が1.@分になると急・倣に増加することが知られた。壬 たこの死卯は受精後47口に処理した場合に最も多く，それ以上発生の進んだ卵を処叩‑r ると再び減少した。
異常ふ化およびそれにと七なう 弊死については， 死卯と同様に受精後口47 以上経過した卵を処理した場合に出現 L た ，この場合兵常ふ化は，処理時期の違いに比例して急激に増加した(第 2 図)。 またその傾向については，先の報告から七知られたとおり浸墳時問が長いほど著しかった。特に受精後58 口の 卯を15 分浸漬L た場合には死爪の状態でふ化する七のがみられた。
なお，これらの塩水処理により出現した死卵と異常ふ化の合計数は，受精64

Jヒ海道さけ・ますふイヒ場 : 研究報告 第 25 号
第2 表 発生段階の異なる卵を塩水処理した場合に出現した死卵数，異常ふ化数の比較
受精から処理まての日数

58

浸 墳時間 (分)1015(尾)22592893151018429951063

注lII
2264(6)61(3)59(1) @ 58(3)58(3)62(15)62(15)62(15) @@

計0斗

1367・

3

異常ふイヒ
出現日注2155334

異'活 ふ化数

3547551015‑

注l は異常ふ化の途中およびふ化直後に弊死するものも含め，海 は採卵 しより起算したものである。 表中C 、) 内の数字は処理から異常ふ化が出現するまでの期間を表わしたものである，ノ卜
O

4・ノ卜︑

O/
八ノノノ斗

卒T‑‑X";， 処 耳までの日

士 楕か

第 7 図 死卵出現率と塩水処理の時期および浸墳時間との関係
図 内の記号は浸漬時間を去わす;●，x,10 分 ; 0,故第2 国 異常ふ化率と塩水処理の時期および泣漬時
問との関係。
図 内の記号は第I 図参照。

5 分;

15 分。

寸ノ/‑@/

比卯及0/ノノ‑A‑‑

2ノ︐ノ，ガ」

4b処理

第 3 図 死卵および異常ふ化の出現と 塩水処理の時期および浸漬時間との関係

H
イ妾

1l@

O@

1i

l4

口数

図 内の記号は第I 図参照。

第 4 図 異常ふ化率の経時袈化と処理時期との関係
I および2 はそれぞれ受精後55 日および5S 口に処理された卵の異常ふ化率の経時的変化を示したものである。 図内の記号は第I 図参照。
65

サケ OWO/

ゆれ 。A75 &寸 & (walbaumD

卵の発/‑におよばす塩水処理の影響―皿後55 口に処W した 卵まで，処理時期との間にほほ直線的な関係で増加することが知られた (第 3 図 )。
なお異常ふ化は，第2 表および第4 図に示したように受精後58 日の卵を処理した場合には処理した次の日に，同じく55 口では3 日後に出現した。
この現像は浸墳時間が15 分の場合には， 55 口 およびFi8日に処理した卵とも極めて短時日で完了し・所報での結果 (受精後53 日の卵使用) より著しいことが知られた (第4 図)。 屯 たこのために弊死する仔魚は，受精後55 日に処理した卵では，泣漬時問が10分および15 分の場合ともそれぞれ処理後 a 口日に現われ。
またた同じく58 口の 卵では浸墳時間が5 分， W0 分および15 分の場合それぞれ6 日後， 3 口俊および

廿
1F11上1I 日後に弊死魚が出現した。

卜卜卜
卜八卜安枯かV, 卜卜L"卜o □r,処 埋まで @?)日数

第 5 図 ふ化率と処理時期との関係
図内の記号は第I 図参照。

処坤ま第 6 図 ふ化率の経時変化と処理時期との関係
I ， 2 ， 3 および4 はそれぞれ受精
後35""日， 47H

第 Z 図 ふ化開始口の促進と処理時期との関係
図内の記号は第I 図参照。

， 55 日および58 日に処理された卵のふ化率の経時変化を示したものである 。 図 内の記号は第I 図参照。

第 3 安発生段踏の 異なる卵を塩水処理した培合のふ化率ならびにふ化斗輯日の比較
受精から処理までの日数

5855

4735

浸 墳時間

庄

採 即日より起算したもの。

これらの結果ふ化率については，第3 去 および第5 日に示L たように受精後37 口に処理された
卯ては，塩水処

牌に起因するふ化p の低下はほとんと甜められなかった。
しかし受精
後47 口口上経過して処理された卵のふイヒ率は ，処理時期の遅れに比例して減少した。ことに15 分浸債された卯ては，処理時期の遅れに対するふ化率の減少傾向か著しく，受精後55 口 および58 日に処理された
場合には大部分の卯か弊死した (第 5@D)0

2

ふ化開始日の促進およびふ化期間の増加と処理時期との関係
66

北侮適さけ・ますふ
化場 : 研究報告 第 25 号
影響するかを調べ，その結果を第 3 衷および第6 図 ―第処理時期の違いがふ化開始口 やふ化期間にどのように9 図に示した。

すなわちふ化開始日は，受精役35 口に処理された場台には浸漬時間の長短にかかわらずその影響が認められな受精後 47 日以上経過した卵才処理した場合には．所報の結果と同かった (第 6 図― 1 ，第7 図)。 しかしながら様に著しいふ化の促進現像が認められた。二の場含浸漬時間 5 分では，前報の結果を考慮ずると受精後53 日の処理卵 までのふ化の促進現象が認められなかった(第 6 凶 ― 2‑4，第7 図)。

ふ化期間については受精後35 口に処理された場合には，ふ化促進と同様にその影響がほとんど認められなかった (第 6 図― 1 ，第8 図 )。

しかしながらふ化期間は， ふ化促進の場合と異なり，所報の結果を考慮すると受精処理時期の遅れに比例して直線的に著しく増 n しその後は後5a 口の処理卵まで， 浸漬時間の長短にかかわらず；再び減少することが知られた (第 8 図)。 この場合，W0 分および15 分浸潰された卵のふ化期間の増加は同じ，傾向を示し泣 漬時間 5 分のものより著しかった。

L

そ粘 か L 処碑 までの日数

第 8 図 ふ化期間と処理時期との関係
図 内の記号は第I 図参照。

第 9 図 ふ化の阻害と処理時期との関係
図内の記号は第I 図参照。

また受精からふ 完了までの日数にっいては，第9 図に示したようにふ化期間の増； n現像と同様に受精後53 日イヒに処理された卵まで直線的に増加し，その後は急激に減少した。
この場合，処理によるふ化完了日の遅れは， 浸漬時間の長短にかかわらず処理時期 (卵の発生度合) に応じて―定していた(第 9 図)。
なお，塩水処理
卵は，第6 図に示したように受精役47 日経過した卵を処理した場合にはS 字曲線的なふ化経過を示し， 同じくFi5日以上経過した卵では始めから急激にふ化し， 同じく58 口経過した卵では受精後35 日に処理した卵のふ化傾向に近づくことがナ口 られた。
乙 ・正常ふ化と異常ふ化との関係
異常ふ化とふ化開始日の促進現象は， 先に述べたように受精後 47 日以上経過した卵を処理したときにみられた。そしてこれらの現象がみられた
卵の中で発生の最も遅れていた受精後47 口の 卵では，受精後異常ふ化が始まるまでの日数は同じく正常ふ化の開始までの口数と考えられる処理時期が受精後35 日の卵のふ化開始までの日数と同じであった。また異常ふ化の出現数は極めて僅かであった (第 4 図― 1 ，第6 図― D) 。

しかし受精役
F55 日および58a に処理された卵では，異常ふ化と促迎された正常ふ化が同じ頃に観察された。なお，ふ化の促進は浸潰時間が5 分および10 分の卵に著しくみられたが，異常ふ化は同じく15 分のものに著しく出現した (第4凶‑2 ， 3，第 6 図七 3, 4')>4・（、イヒ 後の仔魚Q 楚死

ふ化後の仔魚の弊死の5 ち ふイ口 時に発生するものは，卵黄部が不透明になり，明らかに異常ふ化にともなう機械的損障埠起因することが考えられた。このためこれらの姥死魚は，ふ化の途中で 弊死するものも含めて異常6ア

Oncorhynchus

@‑'r

ふイヒtC
こ よる 幣死とした (第 2 表)。

keta(Walbaum)

卵の発生におよpます塩水処理の影響―m

したがって塩水処理がふ化後の仔仔の健康に及ぼす影響については， ふ化巾

後の七のを除いた浮上までの姥死率から倹詞した。

ふ化後の姥死率の第4 表
受精から処理までの日数

58

浸漬 時間

101522

弊死率23547F>510比較

15101510155その結果，弊死魚は第4 表に示したように受精役47 ロ以上経過した卵を処理した場合に発生した。しかしながらこれらの姥死魚は，受精後47 日に処理L た卵ではふ化期間内に， 同じく55H および58 日の 卵ではふ化完了後3‑4口円に現われただげであった。

H察考

斎藤・佐野 (1933) は， 発眼卵の塩水に対する抵抗力は受精役
32 口前後に最大になり，その後は卵の発生が世むにつれて減少すること，また受精後50 口の卵ではふ化の促進が認められたことなどを観察している。また異常
ふ化ならびにふ化の促進現象は， 前報で述べたようにほぼふ化酵素の作用によることが考えられる。したがって塩水浸漬による検卵は，卵の発生に障害をもたらさない，またふ化率を低下させないような時期に行なわれなければならない。
本実験では，死叩は浸漬時間 5 分のものを除いて受精後47 口に処理された卵から出現し 異常ふ化も同時期のものから現われた。
したがつてこれらの結果を考慮すれば，塩水検卵の時期にっいては出来うるかぎり受精役47ロ以前(水温」 8 L)に行われる必要がある。

さて． さけ卵のふ化は前報に述べたように森脇(1910)， 犬飼 ・国弘・相同(1938) らにより，ふ化酵素腺 より，分泌される酵素の作用により卵殻の内 層が消化されて薄くなり，このための内部の仔魚の運動により卵殻が破れることによって行われていることが明らかにされている。
この酵素線はふ化前10‑12日(受精後40 日 ) に現進むにつれて数を増し， ふ化後に消失することが知られている。またこの酵素線
丸亡ら・ いては，われ，卵の発生が内容物がふ化時 (同じく52 口 ) に特異な染色反応を呈するものが多くなることが知られている。なお田中u943)によれば; さげ卵の耐圧力はふ化開始前13 時間になんらの変化が認められないのに11 時間前から低下し， 3 時間前に急に減少することがW られている。したがつて， ふ化酵素線の成熟および酵素の分泌ほふ化前I邪午間頃より始まると推定されている。
47 日 (ふ化前約 2 週間) 頃に出現し，これはふ化酵素線の出現時期と二致す
本実験における異常ふ化は受精役る 。 また異常ふ化は卵の発生の進みにつれて増加し，その様態にっいては前報に述べたように全て頭部周辺の部分より起ることが知られている。したがつて異常ふ化は，明らかにふ化酵素線の出現ならびに酵素服の成熟に起因する七のと考えられる。なお，塩水に浸漬された卵は時間の経過と共に受精直後卵のように軟弱となり次第に卵表面に別が生じてくる。
このことから，塩水処理卵における異常ふ化の発生機構については，塩水と卵の穆透，卵膜が辞素腰に接触して酵素による卵膜の局部的な消化が起るためと推察
圧の関係から囲卵腔の水が脱水されされる。
酵素の分泌は通常ふ化開始前I地ト 問頃と推定されているが，本実験では受精後47 日のもとの異常ふ化が生じている二とからこの頃から酵素作用の働いていることが推察される。この場合，酵素作用の発現機構にっいては．
脱水作用による卵膜の萎縮が酵素線を圧迫して酵素を分泌させたのか或いは酵素が僅かではあるが分泌されていで卵膜が局部的に接触して伯 用を受げにのか推察の域を出ない。しかしながら，酵素線の出現時期(水温8Cで受精後47H) には卵膜を消化する能力のある酵素が胚体に有在することが明らかに推察される。
以上のように塩水処理による異祥 ふ化はふ化酵素の作用によることが明らかであるが，また異常ふ化以外のすべてのふ化の異常，例えばふ化促進，ふ化期間の増加，浸漬時間とふ化開始後の仔魚の出現経過との関係ふ化直6S

ゴヒ

海道さけ・ますふ
化場 : 研究報告 第 2R 号用ならびに酵素脇の前に処理された場台に死魚の状態でふ化することなどは，卵の発生にともなうふ化酵素の¥'@;発達との関係において説明される。
卵においてその後の卵の発生にしたがい異常ふ化の増加すること(第 2すなわち受精後47 日以後に処理された図) は ，酵素線の発達にともなう酵素量の増力 n と考えられる。
また浸済時間の増加による異常ふ化の増； nは，卯， 膵素作用を受ける時間が増
膜が酵素線により長く接触するかあるいは酵素線をより強く圧迫することなどから考えられる。ふ化直前の卵を処理した場合に浸漬L5 分の卵で死年、加するかあるいほ 酵素分泌量が増加するためとの状態でふ化するものがみられたが，それは次のよ5 に説明される。
すなわちこの時期の卯には卜 常なふ化が行なわれるだけの酵素が内在され，塩水に長時間浸潰されることによりそれが卵膜を消化し，同@@.'f@
こ 卵殻は萎縮して破壊される。
そしてこのような状態の卵が清水に戻されたときあたかも死魚がふ化するような状態を示したものと考えられる。
異常ふ化とふ化促進との関係については次のように考えられる。
すなわち受精役
47 日の処理卵では，ふ化酵素線の出現時期であるため内在する酵素量が少ない。したがって，この頃の酵素線は異常ふ化を起させるだげの作用能力がなく，僅かな卵にふ化のり巳 進をおこさせるにとどまったものと考えられる C第 2 表，第 9 凶― 3) 。

L，かしながら受精後55 日以後の胚体の酵素線はかなりの昆の酵素を包蔵していて，浸漬時間が増加した
場合相対的に作用時間も増加し，大部分の卵が異常ふ化を起すに至ったも0@ と考えられる(第 4 図― 1 ， 2) 。 すなわち，この頃の 胚休は，10 分以上おもに15 分の作用時間で異常ふ化をおこさせるほどの卵膜消化能力のある酵素を包蔵することが推察される。
この結果，ふ化の促進現象は， 浸漬時間15 分では酵素の作用が強すぎて大半が異常ふ化をおこすため，浸漬時間lo 分および5 分の卵にそれが現われたものと考えられる。そしてこのような浸漬時間では酵素腹の発達が著しいことから
第 9 図― 1 ，2 に示したようにふ化促進卵が急激に生じたものと考えられる。

次に処理によって生じたふ化期間の増加については，ふ化の促進が生じなかった浸墳時間5 分の卵でふ化期間の著しい増加現象が認められたことから，単なるふ化促進にもとづく補償的現象に起因するものとは考えられない (第 6 図，第7 図 )。 したがって塩水は， 胚体の酵素線の成軌を阻害ずる作用のあることが推祭 される。
しかしながら， 浸墳時間10 分および15 分の卵のふ化時間は， 同じく5 分の卯 より多く，この差は第9 図からふ化開始H の促進に起因することが朋 らかである。 したがって塩水の影響については，ある 浸墳時間内では酵素線の成熟を阻害し， 浸漬時間が―定(7@)限界を越すと前に述べたように酵素腺を圧迫し， ふ化を促進させることが推察される。
このような現象が生じる原因にっいては，卵の発生にともな
5 酵素腺の 発迂が，同じ発生段階の卵でも個々 の卵によづ て異なることが考えられ，このため塩水の影習は展も発達の遅れた卵には阻苫作用として倒ぎ ， 浸造l咋

問が―定時間以上になると酵素線が発達した卵には促進作用として働くためと考えられる。
なお受精後58 日の 卯
ではふイ邸月始日 やふイヒ 期間ならびにふ化の仕方が止常ふ化の状態に近づいたが，これはこの頃 の酵素腺が全卯ともふ化を起こさせるに充分な酵素量を包蔵するようになり，第9 図― 1 に示したかうに0 次反応的なふ化が行なわれたようになったものと考えられる。
なお，ふ化酵素線の出現時期は，受精後47 日に処理された卵で著しくふ化の促進がみも@iたことから，
犬飼・

国弘・相同らによって知られているとおり，水温8C‑@・

ふ化までのH 数が62 日前後の場合，受精
伎47 口前後と推察される。
いずれにしても，塩水処理のふ化率に対する影料は， 浸漬時間5 分以内では処理時期の如何にかかわらずな、ものと考えられる。
しかしながら，塩水処理の発限後のある時期 (水温 8 C で受精後53hl)までの間に行な
3・， れる場合には，胚体の発生にともなってふ化期間が著しく増加し特に浸 漬時間が5 分以上になるとふ化が促進されただげ増加することが明らかにされた。
塩；く 処理が行なわれる
場合には，少なくと七 卜体に刈 する塩水の影L・たがって，通常のふ化事業体制において響を 5 分以内にとどめる二とが出来るように行なわれなければならないものと考えられる。しかしながら， 仔煎
非常に困雑が浮上したのち飼育事業が行なわれる場台には，塩水処理によるふ化期問の増加は， 餌川時の作業をなものにし飼育成績を低下させる恐れがある。 した小ってこのような場台には，塩水処理ば允眼かも酵素線の行なわれなければならないものと考えられる。
出現時期までの間，特に発眼直後に，あるいはふ化面川に69

サケ Oncor ゆnr ， hifi 比ぬ (Walbaum)

卵の発生におよほす塩水処理の影響―皿約要
I．
ナ

前 報に引続き， 卵の発生に対する塩水処理の影響を，処理時期とふ化酵素脇の出現時期との関係から考察し"@02．

塩水処理による異常ふ化現象およびその程度は．酵素腺の出現，および発辻と密接な関係にあることが推察された。
3．

ふイヒ

酵素は， ふ化日数62a (水温 8@C) の 場合，受精役47H の 胚体に明らかに存在し酵素 腺の出現時期はこの頃と推察ざれたO
4．

死卵および異常ふ化は，どんな発生段階の卵 (但し発眼以後) を処理しても， 浸漬時間F>分では出現しなかつた。
5．

塩水で処理された卵のふ化期間は， 浸潰時間の長短にかかわらず，増加した。この現象は卯発生の進みに応じて受精役
53 日 (水温 8L)
6．の処理卵まで著しく増加した。

受精役35 口から53 日の間に塩水で処理された卵の受精からふ化完了までの日数は，胚体の発生度合に応じて増加した。しかし，その口数は浸墳時間に血関係であった。
7．

塩水による検卵は， 仔魚期の餌付を考慮すると， 発眼直後またはふ化直前に行なわれなければならない。

献文

石田藷老 1948 ． 瞬化酵素．日本生物学業績
V ， 北隆館，東京
2．

斎藤光雄・佐野誠三 1933 ． 瞬化槽に発生する水生菌と食塩水に依 ， 鮭及び虹鱒卵の水生菌被害防止に就りいて．北海道庁千歳鮭鱒燗化場試験報告第―冊，

高安三次・武田麻之輔 ・大野 磯吉 1934
橋本 進

1970 ．

サケ Onco ， ゆnchus

西別鮭鱒
婚化 場鮭卵被自調査・水産調査報告第37 冊 61‑79
keta (Wal も aaum) pWe@D発生におよばす
塩水処理の影響―I ・北海道
・・3．
4．

1 ―は勺

さけ・ますふ
化揚研究報告，25. 45‑51.
5．

橋本 進

1970 ．

サケ Oncorhyn。加 s keta(Walbaum)

さけ・ますふ
化場研究報告，25‑ 53‑61.

70

卵の発生におよぼす
塩水処理の影習― nノ掘迫