ニジマス 雌 親魚の 探卵 後の姥死について II―

Aer 。川。乃ぱ s salmonictぬの 検出 率野村哲

Pathological Studies On the Bro0d Rainbow―Trout Died

Occurrence Of Aeromonas
Tetsuichi

after Egg‑Stripping‑1Isalmonicida

NOMURA

Abstract
In the previous paper 0f this series, it was recorded that boils due to furunculosis were ohseved
examples 0f rainbow trout bro0d fish died after egg‑stripping at KOide Branch, Niigata
Prefectural Freshwater Fisheries Experimental Station.
In this report, the incidence Of Aeromonas
salmonicida, which is causative agents 0f furunculosis, in kidney after egg‑stripping rainbow trout wasstudied, and also number Of viable micro0rganisms
fn kidney, liver and spleen Of the moribund trouts
to somewasdetermined

ID tota1, 557 fish were1974 t0 1976. The
15.9%

employed

incidence

to examine

forpresenceof fish with A. salmonicida was

0f A. salmonicida

in kidney during

18.6% fn 1974, 42.6% in 1975 andin 1976

In experiment‑1, the number Of viable micro0rganisms
in kidney 0f the trout was determined byplate count method.
It varied from 2.08 X 102 to 1.00 X 10s per gram of them.
A. solmonicida
wasisolated to 9 outof I9 samples

tn experiment‑2, the number 0f viable micro0rganisms in kidney, spleen and liver was determinedhy surface smear plate method. It was higher tn kidney and spleen than that of liver. A. salmonicida
wasisolated fromkidney

to4 outof 14 samples.

前轍 (野村・ 関 1977) において著者他は新潟県内水面水産試験場小出支場における採卵後の二ジマス親魚の蝉死状況とその症状について観察し，症状から判断して姥死原因の―つとしてせっそう病が考えられる事を報告した。 せっそう病はサケ科魚類に大きな被害を与える細菌性疾病として古くから知られているが (McCRAw
1952 HERMAN,

1968 SNIESZK0,，1972) ， ―般に二ジマスはサケ科魚類の内で最も本病に感染しにくいとされている。しかし採卵後の親魚のように，取り扱による物理的障害，成熟に伴う生理的変化等により体力の低下した個体では本病の発生が考えられ，これら採卵後の親魚の姥死との関連において充分検討する必要があると考えられる。本報告では前報にひき続きニジマス親魚の採卵後の姥死の原因に関する―連の研究として，新潟県内水面水産試験場小出土場におげる
採卵後の二ジマス雌親魚について Aeromonas
生菌数を観察した結果を報告する。

北海道さけ・ますふ化場研究業績第 2Rf号
HOkkaido

SalmonHatchery, Nakanoshima,

TOyohiraku,
43

Sappor0, Japansalm 。 戒ctda の検出率と臓器中の北悔道さけ・ますふ化場研究報告第 卍号

材料および方法
挟卵方法および採卵後の親魚の飼育条件は前報 (野村・装死点からのA・salmonicidaに報告したとおりである。

関 1977)の検出法 採卵後姥死した死後12 時間以内の親魚の腎中央部を滅菌白金斗

向線塗抹後 20 。C で培養して，出現した褐色々 素を産生する集落を純粋分離し，で穿刺し，普通寒天培地とにHUCKER
トク変法によるグラム染色性険性，STM培地における運動性険性，チト
ク p ―ムデイスク(栄研)によるチp ―ム オキシダ□ ゼ 試験陽性，普通ブイヨソ中での 37 。C における発育険性を示した場合 A・Mfm。 乃 fcfdd検出陽性と判定した。
さらに1975 年の試料から分離された90 株， 1976 年に分離された38 株の計 128 株の分離
菌株については坂崎 (1974)，木村 (1970) BUCHANAN,を調べ既往のA

and GIBBONS,(1974) に従ってより詳しく各種性状

salm 。 市。 ida の記載性状と比較検討した。
供試尾数 茉験期間についてはTaHe‑l・に示した。

・耳肝および肝庶， 脾肪における生菌数 19 乃年 I 月に採卵後の瀕死の親魚19 尾について緒臓中の生菌数を測定した突験‑1 においては，取り出した腎中央部を秤量後ホモジナイズし普通寒天培地を用いて混釈平板法により生菌数を求めた。
比較のため同様の方法で体表に水生菌の着生の見られない外見上健康と考えられる採卵後の親魚、 10 尾について腎臓中の生菌数を求めた。
ところで，混釈平板法では培地の温度により生菌数が減少することが考えられたので， 197f 年 12 月に行なった実験‑2 では上記と同様にホモジナイズした試料を滅菌コ ソラージ棒で培地上に―様に瓜げ生菌数を求めた。

測定は14 尾の瀕死の親魚の腎臓，肝臓，脾臓について行なった。

‑? において褐色々 素を産生する集落が出現した13 個体の腎臓について痒 生菌数測定後の実験イ および実験
求め
寒天平板中央部から30 集落を任意に釣菌し，前記の力法でA ． salmomct 血を検出し， その占める割合を九"@L結韮死点からのA・salmonicidft

果の検出率 腎臓からのA ． salmomctda

られたが; 供試した 557 尾の 27 ． 6ガにあたる 154 尾から A ． 5Mmの検出率は年度により大きな差が見。ぬ卜九 が検出された。
最も高い検出率は 1975

年の2 年魚に見らn ， 供試魚の44 ． 6ガから A. salm 。 ぬ。 ifina が倹出された。同 ―年度における親魚の年齢とA W ぬ。 柘。 M0
・の検出率との関係ではわずかではあるが2 年魚におげる検出率が高い傾向を示した(Table‑1) 。

供試魚中工 975 年には2 尾，197f 年には3 尾の2 年魚に体表の膨降した定型的せっそう病患部が認められた。

前述の128 株の分離菌についてさらに詳しく性状を検査した結果はTable‑2 に示すごとくで， 分離菌は全てサッカp ―スの分解陽性を示した以外は主要な
多くの性状で坂崎 (1974) BUCHANAN

AgeOf fish

NumberAeromonas

1975
1976

TOtal

Dec/74‑Jun/75
Dec/75‑Jun/76
Dec/76

2‑3Incidence Of
A. satmonicida

0f fishExamined Aisolated
5sfil
伽れac@dd in kidney
乃・・・

1974

salmonicida

102130

a 6

wereMOrtality
老I9

上58

44. 64240

T9I6

17.

23. 0I10

14.

45.8

557

15427105
110

44・・06I4035 225・Datewhich・YearPercentage 0f fish within samples fromisolated・Table‑1(1974) ， 丹治 (1972) のニジマス
雌親魚の採卵後の麓死について―
IICharacteristics Of Aeromonas salmonicida isolatedfrom bro0d rainbow trout
after egg‑stripping in 1975 and 1976

Table‑2

Strains isolated ;nCharacter1975"―
GramiW

stain

MOtility
I． P AH9S production
・0/F

・test

Cytochrome oxidase
Catalasewater soluble pigment

Growthat

6%7%Growthat 37 C

production

NaCl
NaCl

IndoleNitrate reduction

Gelatin liquefaction
Starch hydrolysis
VP testMR test

Citrate utilization

Argine hydrolysis
Lysine decarboxylase reaction
KCN
browthGas from glucose

glycerolAcidfrommannitol
inositollactosesaccharose

galactose
AminoacidsaSsole souce

Of carbon

L‑Arginine
L‑Asparagine
L‑Glutamicacids

L‑Serine
L‑Alanine* NOt

examined
4‑ POsitive reaction
1) 90 strains 2) 38 strains

示した A ． salmno乃わ ida の性状と―致し@Negative reaction

これらはいずれもA. salmomfc@血と同定して 差しつかえないものと考えられた。
音瞭および肝位牌
腱の生菌数芙鹸 ‑l，2 08xto 。 個から I 凹 x10 ，個を示し内9 尾の腎臓から A. salm 。 柘。ida が検出された。
・・腎臓 い@ 当り

供試した頻死の 19尾の腎臓全てから生菌が検出され，その生菌数は

A ． salm 。市。tda の検出の有無と生菌数の関連ではA salmmonicidaの検出された個体の生菌数が―般に高い煩・供試魚には全て水生菌の着生が認められた。
向を示した(Fig‑1)。 なお本実験の4S

北海道さけ・ますふ化場研究報告第 32 号

Fish.
0ccurance

Fig

10f AprnmfmaR

Knimonicida@n kidney

Viable counts of micro0rganisms
inkidney 0f moribund
bro0d fish after
egg‑stripping tn January 1976. Viablecounts were measured by plate countmethod@ Kidney
I Spleen.

Fish.
N0.¥234s@ 6?

8Pungalinfection0nbody

9 '@ nl2 "nsurface

Occurance 0f @ (" fint')'(,‑.
,‑,f,'/f@f))@<'?n'n ln kidnev.

Fig

2

Viable counts Of micro0rganisms
in kidney, liver andspleen Of moribund
rainbow trout after egg‑stripping in・

December
smear

1976.

Viable counts

measured by surface

wereplate method

比較のため行なった
外見上健康と考えられる10 尾の生菌数の測定結果では， ―尾の腎臓に 6． 8xio'@

旧,/1ぽの生菌数が測定されたが他の 9 尾からは全く菌は検出されなかった。
・

実験‑22，本実験の供試魚の腎臓の生菌数は多い個体でI． tx10 。 個を示したが， 供試した14 尾中体去に水生菌の着生のみられなかった
3 尾の供試魚からは生菌は検出されなかった。
同 ―個体の腎臓・脾臓における生菌数はほぼ同じ値を示したが肝臓では前二者に比較して―般に少なく， またT4 尾中2 尾では腎臓からのみ生菌が倹出された。供試魚14 尾中4 尾の腎臓からA・5nalinnmnfCtda が検出された(Fie‑2) 。

実験‑l および実験‑Z において台舌ト 34 尾の供試魚中I3 尾から A試魚の腎臓における生菌中に占めるA・・salmomfctdaが検出されたが，それらの供5a/ 川 。 市。tda の割合を前述の方法で求めた結果は 13.() ―100% と個体により大きな差が認められた。13 個体中 3 個体からはほぱ純粋に A4. salm 。血。ida が検出された (F@g‑3) 。

如ニジマス雌親魚の採卵後の弊死について‑H

考―――コBULLOCKan 』

察
SNJESZKO(1969),

康と考えられる
体長 18‑25cm

は外見上健の二ジマス・ヵ

ワ マス・ブラウンマスの腎臓および血液中から，―細菌の検出を試み，供試焦、 244 尾巾 3 尾から Asal@wonic.i 血が検出された 事を報告し，さらに

BULLOCKandSTUCKEY(1975)
94尾の腎臓からのA ． salmomfcfda

Lカ

ワ

は二ジマス

マス 引の 検出を試み，腎臓の―部を直接培地に塗抹する―

力法では A ． fs0lmm。 柘。 ida は検出されなかった"L車を報告している。
それらの報告に比べると本報
告におげる腎臓からのA ． 5力monfci 血の検出 率□log. viablecounts /Rate OfA

FT

3は高く，採卵後の二ジマス
蝉死魚では A ． salm 。

・'gramwicf ぱ 0 を保菌している個体の多いことが推定さ

Uf tissue.

Salm 。 nlc;da @n vlable m 血 00 ， ganiSmSれた。

・RClation
betweennumberOf Viablemicro0rganisms
in kidney and rate Of
incidence Of 4. salmonicida
in viable
micro0rganisms

畑井 (197 めは ウナギにA げ0m0wo5

fiqMg/0

nfenr.ieY‑62 株を致死量接種した
場合，弊死期の腎臓，肝臓および血液中の生菌放は約‑10 。 個れgを示し，肝臓での生菌数は腎臓での生菌数より低かった車を報告している。
本報告における結果では，臓器による十菌数の多少は
畑井 (1972) の報告と― 致したが(Flg‑2) ，生菌数では腎臓 IR体も認められた(Fie‑ 1) ，このことはANDERSON

当りto8 個ときわめて多い個(1972) の示しているようにA. salmomfcida

自体の病原性や，ニジマスがせっそう病に対して感受性が低い事に起因するものと考えられる。
前 報で観察した症状と本報において認められたようにA salm 。 心。tda が腎臓中にほぼ純砕に近い状態で検出・される個休が存在することなどから考えると，採卵後の二ジマス親魚の内にせっそう病による弊死魚がかなり存在することは容易に推察できる。
しかしA salm れ onicida
・が検出されない個体や，検出されても生菌数に占める刮台の低い個体が存在することから弊死が全てせっそう病によるものとは考えられない。
また採卵後の姥死率と・A salmnnjr.idaの検出率には直接的な関連性を認められず(Table‑L
そう病によるものとは考えられない。
Tahle‑1
高かったのはBULLOCK

and STUCKEY(1975)

この点からも，これら塊死の全てがせっに示した
供試魚の腎臓からのA.safmomnfcf

血の検出率が―般にがストI@7%、 によりA ． salmonir.fd"'の 検出率が増加することを

報缶 して L、 るように，採卵作業や成熟に伴う生理変化等により親魚の体力が低下し，保菌の状態にあった個体の体 内の悶が増殖し 高い検出率を示したものと考えるのが妥当であろう。
本報告の供試魚には前報 (野村，関 1977)が多かった。
EGUSAで報告したと同様に体表および鯛に水生菌の若生が見られるもの(1965)， (1965)b はウナギのソタカ ブリ病がAerom。nas

lfauefacienceがあることを報告しているが，同様に採卵後の二ジマス親魚においてもA.salmontr.@

血の感染により。
水 カビの着生が促進されることも考えられる，今後この点についても詳細に検討する必要があろう。

47の感染と強い関連

北海道さけ・ますふ化場研究報告第 32

約要I．

弓

採卵後の雌親魚について
衿臓からの A ． sfIJm 。れ icidaの 倹出率ならびに臓器中の生菌数について検討しナ，@o

供試 557 尾中27.f おにあたる 154 尾から AI ． ssalmonicida が検出された。

3

臓器中の生菌数は高いものでは 10 ， 個/K におよぶものがあり， A・・

2．

salm 。心。 ida が純粋に検出された個体も存在した。

辞謝

木研究に対し御助言をいただき，原稿の御校閲をいただいた
北海道大学木村喬久教授，御助言をいただいた
淡
水区水産研究所川津浩嗣病理室長に深謝いたします。

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