人工授精におけるサケ 卵の吸水所要時間について "On

広井the Water‑WashingTime

修料Of ChumSalmon

Eggs

so0nafter

the Artificial Fertilization*
Os 抑 u HIROI**

AbstractOptimum water‑washing time of fertilizedeggs so0n after the artificialfertilization, tn order tobe progressed a restraint of early mortality and a technical development 0f mass production fn theartificialpropagation of chum salmon, Oncorhynchus keta, was investigated tn the Chitose Hatcheryand the Nijibetsu Hatchery.
Eggs and sperm used in the Chitose Hatchery were obtained from 10female andused

6 malemature fish run

in the Nijibetsu

Hatcherythe Chitose RiveruPtaken out fromwereOD

7th of December,T2 female and6 male1977.

fish runuPThegametes

the Nishibetsu

River 0n 15th of December, 1977, which were holded over ? days up to full maturation in the holding
pond Of the Hatchery.
Each Of fertilized eggs was treated by tw0‑hour suspension 0f water supply,
respectively,from

5 minutes till 45 minutes at intervals Of every

5 minutes after being inseminatedand washed into Atkins trough full 0f running springwaters Of 8oCwithof fertilized

acurrent 0f T0 liters

non‑sperm

peraminute.

eggs, a stillborn egg

and

an

MOrtality

unfertilized egg, was(Chitose)eggs

and 9@C (Nijibetsu)

as wellasoccurrence

ofobserved autoptically and hist0‑anatomicallytillnon‑fed liberation period of fry.
There

wasa

significant

differenceinoccurrenceof stillborn

egg

among

thenon‑sperm

eggs

between bro0ds from mature fish so0n after the catch in the Chitose (1.6%) and those from holded
fish over ? days after the catch fn the Nijibetsu (4.5%'). High stillborn egg contents 0f the bro0ds
ln the Nijibetsu resulted tn not only the increase in mortality Of fertilizedeggs but also the decreasein fry‑1iberation rates, suggesting possible influences due to the artificialholding 0f fish up to fullmaturation.

Fertilized eggs treated by tw0‑hour suspension of water supply a[ 5'to 45 minutes after thefertilization died more Or less, mainly ;n early egg‑developing stage, 0 to 200oC fn daily cumulative
water temperature
after the fertilization. The eggs treated by the suspension after 5 minutes ofwater‑washing tn both the Chitose and Nijibetsu Hatchery showed mortality over 6% fn early egg‑
developing stage, which were higher than those 0f control eggs, 0. 09% tn the Chitose and 0. 56% ;n

北海道さけ・ますふ化場研究業績第 267号
*木研究は農林水産省「湖河性さけ・ますの大量培養技術の開発に関する総令研究」の―部でもる。 (ThiS"Synthetic studieS On a techniCaI dev 司 Opment Of maSS produCtion in theanadromouS
Salmonid hShe ， " in the M@nistry Of Agriculture ． FOrestry and EiSherieS ， Japan)

report iS a partof

・料

水産庁北海道さけ・ますふ化場調査課(HOkkaidoSalmon Hatchery,FisheryAgency, 2‑2 Nakknoshima, TOyohiraku, Sappor0,HOkkaid0,
Japan 062)
115

北海道さけ・ますふ
化場研究報告 第 34 号
the NiJibetsu, immersed
treatment,

successively into

the mortality

stable to 0 13‑0.34%

of theover

Nijibetsu. Liberated chumwashedeggs

25 minutes

without the suspension.

watersintorunningwaters,in the Chitose andsalmon fry fromtoeggswerebefore theIO minutes

declined

0.93‑1.53%

lot of treatedeveryOver

gradually,
overnot30andbecamein theminutes

differentfrom

thecontrol fish tn growth, body color and feeding activity.
From

the result Of thepresent

artificial fertilization neededtransporting themwitht0wash

observation, It wasover

30 minutes

suspension 0f watershownthat chumrunningintowaters

salmonwitheggs

so0n

after theadequate current, forsupply

まえがき

サケ受精卵は接水村活後，速やかに囲卵腔を形成し，その後胚盤形成期 (受精後 8 時間まで) を経て卵分割を開始し初期発生が 進行する (瓜井他， 1973) 。 この問に受精卵に生じる重要な生理的変化は卵への水の取込み，いわゆる吸水とい5 現象てある。 勿論，天然産卵の条件ては，受精卵の吸水は水中て徐々 に連続して進行する。
―方， 人エふ化放流事業の場台ては，吸水途上の受精直後卵を―時断水して運搬し， ふ化器に収容して再吸水させる方法が―般に用いられている。
従って，人エ管理の中では受精卵は吸水途上てかなり長い時間断水されることになる。これら吸水途上サケ受精卵の―時的断水による影響については末だ明らかな研究がなされていない，
これらの観点から，サケ卵の人エ授精時における断水の影響について調へ，適正な吸水所要時間を検討した，材料および方法
サケの精液および熱卵は1977 年の 12 月
乃 7 日に北悔道さけ・ます増殖事業協会西越捕獲場で得られた石狩川水系千歳川の湖上親魚CB 口口 採卵) 並びに 1977 年の I2 月 15 日に同協会ェ A 線捕獲場て得られた西別州サケ親魚を活魚運搬し ，水産庁北海道さけ・ますふ化場虹別事業場の蓄養池て7 日間 蓄養後の催熟親魚から採取した。
熟卵
ほ 親魚撲殺後，切開法にて採取し。体腔液は余剰の分を流し 卵に付着しているもののみの湿式保存法て，千歳I 尾毎凹尾分 (同腹卵) を，そして虹別薔養親魚でほ6 尾毎12 尾分 (混合卵) をヒ二―ル
川の親魚については袋に収容した。
精液は両者共，搾出法により2 尾毎6 尾分をビ二―ル 袋に採取し 尿又は血液等の混入精液は搾山時に注意深く観察しながら取除き，可能な限り，純粋なもののみを用いた。熟卵と精液は千歳の群てはいずれもピ二―ル袋に酸素を詰めて封入し，避九条件て約20 分間自動車運搬して， 水産庁北侮道さけ・ますふイヒ場 千歳支場のふ化室に運び，又， 虹別の群ては空気封入して， 世北条件て同事業場の第―ふ化窒まで3 分間運搬して，夫々 8 。C (千歳) 並びに 9。C (虹SU) の 湧水て授精させた。
受精卵は増収型ふ化槽に侵績したプラスチハク寵に静置し，毎分10f の流量て， 8 。C (千歳) 並び@‑i9 。C (虹Slj) の 湧水の湧昇流の中て ，洗糠，吸水させた。受精・ 接水させた実験卵は5 分から45 分まで5 分間隔て夫々の時間，吸水させた
後， 水から取り揚げて湿0 た咽に入れ，運搬時間を考慮して2 時間室温 (10‑14 。 C) 放置の方法により断水処理を与え，その後再吸水させた。
対照卵は断水処理せずに運続して同じ条件て 吸水させた。卵はいずれも2 時間再吸水させた後，アトキンス式ふ化器にI 盆当 L 刃刀 ―2， 500 粒の割合て収容した。

白濁死卵は淘汰検卵時 (積算水温約 4山。 c) とふ出直後(同 約 5叩 。 C) に 摘出し， ファリ液て 1‑2日間固定， 70 老アルコール液に置換，保存した
後，肉眼叉は解剖顕微鏡下て体内死卵 (Stillborn egg) ， 不愛情卵 (Un‑fertllizedegg)，受精前期死卵 (積算水温約2凹。C まての発眼期以前の死卵) および受精後期死卵 (発眼期以後山 ―2， 500 粒の割合て収容の死卵) に分別，計数した。
淘汰検卵後，生卵は計数し ， 改良型ふ化寵KLI 寵当 I． 5
し 以後無給餌放流期 (積算水温約960 。 C) まて観察を続けた。
崎型魚，発育不全魚および膀のう異常魚 等の異常稚魚は主として浮上期 (同 約 850 。 C)

および無給餌放流期 (同 960 。 C)

116に 摘出計数した。

人エ授精におけるサケ卵の吸水所要時間について結I

果

断水処理卯の 稚魚産生率と 無精卵の発現割合

・

千歳川産サケ親魚の即日採卵群では，対照卵の稚魚産生率(無給餌放流率 ; 無給餌放流稚魚数/採卵数xI 凹)
は叩 2% であった (表 D 。

断水処理卵の稚魚産生率は対照卵のそれに比べるといずれも悪いが，吸水5 分卵で・

Tabled 1

MOrtality of fertilized egg and fry‑1iberation rates ;n the Chitose Hatchery* Fry‑1iberation rate: a percentage
of non‑fed liberated fry to taken eggs
表 I 受精卵の減耗と 稚魚産生率 (千歳)
" 稚魚産生率; 無給餌放流数/採卵数xi 山司

Stil1‑Unfertiof takenborn

lizedegg

egg

egg

94.8
95.4

(3,972)(3,673)1.19
1.06(49)(46)

97.0
96.6(4,066)(4,313)%%M

0.86
0.87(32)(33)

96.9 (3, 捌 )96.7 (3,759)

0． 76

(以)

96 ． 0 ( ， 126)

口以 乃

fry.1iberation

rates

Of non‑fed, 93. 5 (3,549)

(113)
(80)

凹

止

凹

乃and

4.13 (153)(N)

ガ

田.5 (4,559)

2.77
2.13

工egg

F ，y‑@iberation rate: a percentage

rate*

M2化

山
似朋朋
川研的り刀

MOrtality of fertilized"

Fry‑1iberation

凹

00000000%

乃孔乱仙 吐血367639443
493454243
00000000

柵冊僻

工工工工工工﹁noCo

Table 2

I 0.63 (29) ￨ 97.2 (4,548)

in the Nijibetsu

liberatedHatchery

fry to taken eggs

受 M吸 w wt 川

表 2 受精卵の減耗と 稚魚産生率 (肛gl)* 稚魚産生率: 無給餌放流数/採卵数xI 山

稚魚産生率。

Fry‑1iberation
late*

ぬ1,8291,966

4 ． 7020

乃2 M330

2, 332

35

1,666
2.174
1,932

6． H
4． 67
4． 68

・

40450 ガoc
此 此の別別
LLw
工工工 000000

T似 北北几

5， 154 L m

稚魚産生率"︶7ん
不受精卵

Number減 耗 率ed(Minute)

体内
死卵eggS

寸F止け岬%% %time

受 精 卵 のM

washing

Sperm

期卵山塊 m %畔ガ咄 LMお HMmo工c 工 000000
前死 L ︒ 寸
3Water‑・I

COntrol ! 16,295

4. 69

I． 26
.12
I Z@
I 24
I 26
1. 刀

4. fi6

1. 以

1,567
2,045
1,818.35.01

15,420.51

・・・

"― "

1,720

5.70

1.63

2. 叩

1,875

3.04

1.07

1.65

2,078

2.84

0.58

1.30

9.83 (l69)5.76 (I08)

老 (N) ―
83.0 (1,337)
84.8 (1,551)

89.9 (1,767)

4.72
3.37(98)(74)

88, 3 (1,980)
90. 9 (2,120)

2 194

1． 山

I． 32

ェ

1. 53
0.93
1.04

0. 96
0.64
1.60

1.15
0.73
1.43

3． 64
2 ． 30(57)
(47)

90,6
91.9(1.510)(1,998)4.07(74)90.3(1,744)

0.56

0.78

1. 胡

2.92 C45n)・・吸水︵無精卵の割合

Percenta 咋 0f

採卵数 non117． 0591.9(14,969)

北海道さけ・ますふ化場研究報告第 34 号
)O%O

LT@l(O?
5)5C︵工山v
トaトV山NT
口O
I00
糾刊
世磯蝉のに方卵表と上4でし
月力分増
肚に

5 と久徐で士児ガ4O 刃u@分卵p 9 で九︐ 2 0

工分

後範っ西@gガ

比べると極めて低い値を示した(図 D)。 虹別の断水処理卵の産生率は千歳の場合と同群のじく対照卵のそれに比べて悪く，吸水時間

0 5 IOI5 2O 25 30 35 40 45CONTの 延長に伴0 て対照卵の値に近ずくが，千歳の場合に上とべるとその上昇傾向は弱く

WATER‑WASHlNG

TIME (MlNUTES)

吸水時間

15 分卵でも84 ． 4ガで， 5 分卵の83 ． 0ガから 僅かな上昇がみられるのみであり，対照、 Text 市g・I

ChangeSinfry(分)

小berationr

対 eofChumSalmon

卵の オガ 前後の違いとなるのは
30 分 卵 ueggs

by tw0‑hour suspension of water supply

降であった (表 2， 図 I) 。

so0n

after the fertilization in the Chitose f)

and NlllbetSu (O) HatChery
図I

千歳の即日採卵群における無精卵の発現

吸水時間による
稚魚産生率の変化 (千歳● ; 虹別0)

5ガ，平均工 6ガ， 不受精卵で0 6‑1・，平均0 8ガとな・・・腹卵の問で有意な差はみられず，林内苑卵で I 3‑2・割合は対照卵と，断水処理卵群の去々の同・り，千歳川産サケ卵における無精卵の―般的発現割合と略―致していた(表 D 。 虹別蓄養採卵群の無精卵の発現割合は，千歳の即日採卵群に比べるとはるかに大きく，体内死卵で3 5〜6 Iガ，平均4 5九， 不受精卵でI 0‑・1． 3% ， ．平均I． Iガとなった(表 2) 。

・・・

しかしながら， この虹別の蓄養採卵群における無精卵の発現割合は同じ
西

g@州産サケ親魚の14線菩養池並ぴに活魚運搬した
伊茶仁薔養池の同時期の事業採卵群 C2Jョ 22 採卵)， U4 線
日・蓄養採卵群で体内死卵9． 2ガ， 不受精卵ュ 3 4% ，そして伊茶仁蓄養採卵群
で体内死卵14 3% ，木受精卵16 5ガ・・に比べるとはるかに少なか0 だ。又，千歳の即日採卵群と虹別蓄養採卵群の無精卵，特に体内死卵の発現割合の饗し，違いは受精卵の減耗K も大きく影

その減耗率は千歳対照卵の0 63% に対して虹別の対照卵では2 92%・・とはるかに大きくなった(表 I， 2)o

無精卵の吸水については， 体内死卵ど不受精卵の場合で本質的に異なっていた。
体内死卵では卵の接人付活の機構が不完全なため，浸透圧調節ができず，卵内への水の浸込み通過による卵黄白濁が先行する。
―方，不受精卵では受精卵と同様に接水村活，吸水，胚盤形成等の―連の初期発生過程を経るが，無精卵である故に，卵分割が進行せず，胚盤形成の段階で卵発生が停止する。
しかしながら， 不受精卵では接水付活に統 卵膜による浸透く圧調節はそのまま保たれ，卵黄も白濁せずに生卵様相を維持する。

2 ．断水処理による受精卵の波 耗
連続して吸水させた対照区の受精卵の減耗率は，千歳即日採卵群および虹別蓄養採卵群で夫々 ， 0 63% および・2． 92 ガと極めて少なく，その中でも受精前期死卵ではO． 09 ガおよび0 56%% ，受精後期死卵で0 33 および0 700/'0%0,・・・

そして異常稚魚で0． 22% およびI． 胡おの減耗であった (表 I， 2，図2) 。

断水処理卵群でほ千歳および虹別共に全般に減耗率は高くなり，吸水5 分卵でその受精卵の減耗 率 は夫 々，9． 47% およびI1.75 おと最大となり，特に受精前期死卵の剖台が8． l8% および8． 32%と果常に高く，対照卵のそれの約90 倍 (千歳) @0‑よび約15 倍 (虹S@) となった。
受精卵の減耗卒は，吸水時問が長くなるにつれて徐々 に減少 (図 2)

し，対照群の値に近づくが，いずれの場合も，受精前期死 卵の割令が対照群のそわよりも高かった。
・―方，断水処理群におげる受精後期死卵，および異常稚魚の割合は対照群のそれに比べると，それ程有意な差が認められないことから，受精前期死卯としてcri減耗が，吸水途上卵の断水による影響といえる。
さらに断水処理J18

率人エ授精におけるサケ卵の吸水所要時間について群は異常惟魚の中でも種々の移行型を示す(%)

双体崎型稚魚の出現が顕著であった。の千歳の即日採卵群と虹別の蓄養採卵群では，吸水時間の延長による受精卵の減耗

日の，特に受精前期差がみられ，虹死別の方が断水の卵の減少傾向にかなり影響が強くでていた， 2)。
( I

前期 死 卵としての減耗率は表千歳における吸水 5 分卵の受情併ば踵

卜二」
ヒC0 5山佃夫口可」」

8． tR ガから 1o> 分卵で半分以下の3． 38 九，

15 分卵で I/4 以下のt． 49 九，そして25 分以降の卵で l/20 以下の0 13‑0.34

O

虹ガ iにおげる受精前期
死卵

三・定した。―方，

ヰトガに安としての減耗率は，・・

そして30 分以降
・でも l/3 以上の2 84 ガ，53 ガを示し

2O

2530354045 CONTTIME (MINUTES)

吸水時間 (分)Text‑fig. 2Changes

in mortality Of fertilized chum salmon
by tw0‑hour suspension 0f watersupply
so0n
after the fertilization in the Chitose (@)
and N 川betSu (O) HatChe ，yeggs

明らかに千歳の場合よりも断水の影響が強くでており，対照卵に対する近似，安定時間も千歳の25 分に対して虹別では30 分と15WATER‑WASHINGから 15 分卵でも半分以上の5． 70 ガ， 25 分の卵でも I/10 以上の0 93‑1

IO

5

吸水5 分卵の 8． 32 ガ

図2

吸水時間による受精卵の減耗率の変化 (千歳● ; 肛別O)

吸水所要時間が延びていた，この吸水所要時間の差は水温では千歳の 8。 C K二 対して，9。 Cと虹別の方が高く，その他の水量，方法は殆んど同じであることから，水温よりもむしろ無精卵，特に体内死卵の混合割合の差トこよるものと考えられる。
これらの結果は吸水途上の受精卵が断水処理により，明らかに減耗が生し， 特に受精前期死卵としての発生停止並びに双体碕型としての後遺症が特徴であることを示している。

考察

サケ卯におげる受精・接水後の受精卵の吸水の進行度合を知るために，千歳の即日採卵群について間接的に卵王 (耐圧力) を測定した結果では，受精前の熟卵で約 4e であ0 た平均卵圧は受精・接水後t0 分から30 分まで急激に上昇し，約 430e 前後になった。受精役30 分から40 分までは卵圧は―時増加せず，45 分以降からまた徐々に増加し， 時間後で約700e ，そして8 時間後で約2， 500ag の最初のピークに達した。卵割が始まると共上に 卵王は変動しながらさらに徐々に増加し，2 日後に3． 500e 前後の最大値となり，以後は多少の変動の中でほほ似た値で推移する(広井， 1979a)。 卵圧ほ不愛情卵についても受精卵に類似した変化を示すが，体内死卵の場合では全く規則性が認められなかった。
これらの卵圧の変化は卵の吸水が受精・接水後ほば2 日間で最大となることを示唆しており，この問でほ受精卵はいずれも吸水途上にあると考えられる。
本研究の結果，吸水途上の受精直後卵を2 時間断水処理することによって，愛情卵が多かれ少なかれ減耗し特に積算水温約2凹。C までの発生初期での発生停止 (受精前期比卵， 広井， 1979h 参照) としての減耗が著しいことが明らかとなった。
従って，吸水途上の受精直後卵は出来得る限り，連続して吸水でぎる管理方法をとることが望ましいといえる。
しかしながら
，現在，本邦における人エふ化放流事業の中の採卵からふ化器までの卵の 収容行程では，捕獲・採卵場とふ化場の位置関係等から吸水途上の受精直後卵を断水，梱包後， 採卵場からふ化窒まで運搬して収容せねばならない条件となつている。
父 ．即発生初期の受精卵の人為取扱い可能限界時間ほそれらの衝撃等に対する抵抗性から
第―分割直前の8@@@間以内であることが知られている(広井， 1979c) ，従って，受精直後卵の運搬・収容に際しては，この8 時間以内の条件で， 出釆得る限り， 長く吸水させた方が良いが， 逓搬する時間 (距離) 並びに大量卵の扱い等との関係から，吸水だけにそれ程長く時問をとることは望めな
779

北海道さけ・ますふ
化場研究報告 第 34 号
い 。 それ故，減耗を最小限に抑えうる吸水所要時間を考えねばならないことになる。
木研究の結果から，断水処理までに千歳の即日採卵群では25 分以上，そして肛別の蓄養採卵群では 30 分以上吸水すると対照群の連続吸水卵の減耗率ど Iガ以内の差の範囲で安定し，叉，・無情卵，特に体内死卵の混合割合が高い場台には吸水所要時間が長くなることが示唆された。体内苑卵の吸水に対する影響としては，吸水洗糠悟における直接的不均―水流の発生要因並びに潰卵として，体腔液および精液を吸着・凝縮させるため，卵と卵の間に粘着浮遊歴濁物質が付着して，卵表への水流を妨害することによるものと考えられる。これら断水処理まで，吸水の吸水時間と減耗率の安定との関係，父， 卵圧の変化ではso 分から40 分まではそれ程増加がみられなくの初動変化が30 分までで―時静止時期を迎えること，さらに人の手による触感では20 分以降から卵の緊張を感じる(広井， 1979a) ようになることから，吸水途上の受精直後卵を断水運搬するための最低の吸水所要時間は ，充分な湧昇流の条件で30 分であるといえる。

要約

石狩川水系千歳川産サケ
親魚の即日採卵群，並びに西Si 州産サケ親魚の薔養採卵群における受精直後卵の断水処理の影響と 吸水所要時間について試験．検討した。
I．

人工授精したサケの5 分から45 分までの吸水途上
卵に夫々 ，2 時間の断水処理後，再吸水させ，放流期まで観察したところ，受精卵は多かれ少なかれ減耗し， 特に受精前期死卵 (積算水温 200 。 C までの卵の発生異構; 停止) 並びに双体崎型として減耗することが明らかとなった。
2．

即日採卵群 (千歳) に比べ，蓄養採卵群(虹BU) では無精卵，特に体内死卵が極めて多く発生し，相乗的に受精卵の減耗も大きくなると共に，吸水所要時間も長くなった。
3．受精直後卵を断水，梱包して運搬する場合の吸水所要時間は充分な湧昇流の条件で，最低限，.30分必要であ る。

文

広井修，安川雅夫 末武敏夫・佐々木正三，富田竹雄 ・佐藤幸男1973・・献8。 Cの渓水に於げる
サケ (Oncor

ゆ%CA5 efd)卵の発生について(予報)・さけ・ますふ 所報，(万): 乃‑30ん

広井修 1979a ．

サケ卵の初期発生時の卵圧の変化・昭和53 年度別枠研究「湖阿性さけ・ますの大量培養技術の開発に関する総合研究」推進会議資料(B).

12‑l9 ・農林技術会議，昭和54 年@‑2 月，東京・修 1979b ・減耗卵の成因・同上 12H9

広井 修 1979c

・広井

サケ資源の初期減耗―特に人工ふ化放流におげる卵から稚魚放流までの減耗要因について―，

第 17 回漁業資源研究会議シソポジウム，漁業資源の初期減耗をめぐる諸問題―卵から加入までの減耗機構について―講演要旨，漁業資源研究会議，
15‑27 ，昭和54 年 H 刀 ，広島120